UA121345C2 - 7-(тіазол-5-іл)піролопіримідин як агоніст рецептора tlr7 - Google Patents

Abstract

Даний винахід належить до сполуки 7-(тіазол-5-іл) піролопіримідину як агоніста TLR7 і, зокрема, належить до сполуки, показаної у формулі (І), її фармацевтично прийнятної солі і способу її одержання, фармацевтичної композиції, що містить таку сполуку, і їх застосуванню у виготовленні противірусного лікарського засобу.

Description

Галузь техніки, до якої належить винахід

Представлено циклічну сполуку 7-(тіазол-5-іл/упіролопіримідину або її фармацевтично прийнятну сіль як агоніст ТІ К7, який корисний у лікуванні або попередженні вірусної інфекції, зокрема, вірусної інфекції, обумовленої вірусом гепатиту В або гепатиту С.

Рівень техніки

ТоіІ-подібний рецептор експресується різними імунними клітинами і розпізнає консервативні структурні мотиви: патоген-асоційований молекулярний патерн (РАМР), що експресується патогенами мікроорганізмів, або асоційовані з ушкодженнями молекулярні патерни (САМР), що вивільняються мертвими клітинами. РАМР або САМР стимулює ТоїІ-подібний рецептор для запуску сигнального каскаду, який індукує активування транскрипційних факторів, таких як АР-1,

МЕ-кКВ і регуляторні фактори інтерферонів (функцію відповіді на імпульс). Це призводить до різних клітинних відповідей, включаючи продукування інтерферонів, прозапальних цитокінів і ефекторних цитокінів, у результаті чого досягається імунна відповідь.

Здебільшого, у ссавця виявлено 13 типів ТоїЇІ-подібних рецепторів. ТоЇІ- подібні рецептори 1, 2, 4, 5 і 6, в основному, експресуються на поверхні клітини, тоді як ТоїІ-подібні рецептори 3, 7, 8 і 9 експресуються в ендосомі. Різні ТоїЇІ-подібні рецептори розпізнають ліганди, обумовлені різними патогенами. ТоїЇІ-подібний рецептор 7 (ТІ К7) експресується і ліганд розпізнається плазмоїдними дендритними клітинами (рос) з індукуванням секреції інтерферону а (ІЕМ-с0). ТоїІ- подібний рецептор 7 (ТІ 7) і ТоІ-подібний рецептор 8 (ТІ К8) є високо гомологічними і, таким чином, ліганд рецептора ТІК7 у багатьох випадках також є лігандом рецептора ТІК8.

Стимуляція рецептора ТІ К8, в основному, індукує продукування цитокінів, таких як фактор некрозу пухлин а (ТМЕ-0) і хемоатрактант. Інтерферон с являє собою один з основних лікарських препаратів для лікування хронічного гепатиту В або гепатиту С, тоді як ТМЕ-с являє собою прозапальний цитокін, надлишкова секреція яких буде давати в результаті серйозні побічні ефекти.

Є повідомлення про декілька агоністів рецептора ТІ К7, таких як Іміквімод (Британський журнал із дерматології (Вгйі5пй Удоигпа! ої Оептайоіоду) 2003; 149 (Зиррі. 66): 5-8), Резиквімод (Апіїмігаї Кезеагсп 64 (2004) 79-83), 1215-9620 (Гастроентерологія (Савігоепіегоіоду) (2013), 144(7), 1508-1517). Проте, бажано мати нові агоністи рецептора ТІК7 з більш високими селективністю, активністю і безпекою.

Суть винаходу

В одному аспекті представлена сполука формули (І) або її фармацевтично прийнятна сіль,

МН» м мМ в ра -й сть й

КВ

(1) де

В: і К», кожний незалежно, вибирають із групи, що складається з Н і С:.алкілу, або

Ві ії Ко» разом з атомом М, до якого вони приєднані, утворюють 4-8-членний гетероциклоалкіл, де 4-8--ленний гетероциклоалкіл необов'язково заміщено одним або більше

Аз, Аз, кожний незалежно, вибирають із групи, що складається з гідроксилу, галогену, ціаногрупи, С--«алкілу і Сі-лалкоксигрупи.

В одному варіанті здійснення 4-8--ленний гетероциклоалкіл може містити 0, 1, 2 або З додаткових гетероатома, вибраних із групи, що складається з М, О і 5.

В іншому варіанті здійснення 4-8--ленний гетероциклоалкіл може являти собою 4-членний,

Б-членний, б-членний, 7-ч-ленний або 8-членний гетероциклоалкіл.

В іншому варіанті здійснення Кз незалежно вибирають із групи, що складається з гідроксилу,

Е, СІ, Вг, СМ, метилу, етилу, пропілу, метоксилу, етоксилу і пропоксигрупи.

У конкретному варіанті здійснення групу, утворену за допомогою Кі, Р»: разом з атомом М, до якого вони приєднані, вибирають із групи, що складається 3:

є

Ой шен М ; . ешдоий ра

Як ви ! хе Я Ж ше В Шу З ; хх Ж іш х х х т т - я ІЗ ки. 8 че їх З Зушеи

ЯК см ДЯ з, як й рн пе ли ЧИ кт , щі Ми нн Вик ой , Мой Жив , шк , Хей , х , Уддееннй і

ИЙ саше: т М ЗЕМ й інн ", переважно ет,

У деякому варіанті здійснення сполука формули (І) являє собою наступну сполука:

МН

Ок у є

Сб -М 5 .

У ще одному аспекті представлена фармацевтична композиція, що містить сполуку формули (І) і/або її фармацевтично прийнятну сіль, і один або більше фармацевтично прийнятних носіїв і/або ексципієнтів. Фармацевтична композиція може, крім того, необов'язково містити один або більше додаткових терапевтичних агентів.

В іншому аспекті представлений спосіб лікування або попередження вірусної інфекції, що включає введення суб'єктові, що потребує цього, сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі, або фармацевтичної композиції згідно з винаходом у терапевтично або профілактично ефективній кількості.

У додатковому аспекті представлене застосування сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі, або фармацевтичної композиції згідно з винаходом для одержання лікарського препарату для лікування або попередження вірусної інфекції.

У ще одному аспекті представлено сполуку формули (І) або її фармацевтично прийнятну сіль, або фармацевтичну композицію згідно з винаходом для застосування в лікуванні або попередженні вірусної інфекції.

У деяких варіантах здійснення згідно з винаходом, вірусна інфекція являє собою вірусну інфекцію, що протікає як вірус лихоманки Денге, вірус жовтої лихоманки, вірус Західного Ніла, вірус японського енцефаліту, вірус кліщового енцефаліту, вірус Кунджин, вірус енцефаліту долини Муррея, вірус енцефаліту Сент-Луїс, вірус омської геморагічної лихоманки, вірус діареї великої рогатої худоби, вірус Зіка або вірус гепатиту. У переважному варіанті здійснення вірусна інфекція являє собою вірусну інфекцію гепатиту. У додатковому переважному варіанті здійснення вірусна інфекція являє собою вірусну інфекцію гепатиту В або гепатиту С.

Короткий опис креслень

Фігура 1: Результати фармакодинамічного випробування іп мімо на мишачій моделі, інфікованій ААМ-несучим вірусом гепатиту В (рівень копій поверхневого антигену вірусу

Зо гепатиту В (НВзЗАОЯ) у плазмі крові).

Фігура 2: Результати фармакодинамічного випробування іп мімо на мишачій моделі, інфікованій ААМ-несучим вірусом гепатиту В (рівень копій ДНК вірусу гепатиту В (НВМ ОМА) у плазмі крові).

Фігура 3: Результати фармакодинамічного випробування іп мімо на мишачій моделі, інфікованій ААМ-несучим вірусом гепатиту В (рівень продукування антитіл до поверхневого антигену вірусу гепатиту В (Апіі-НВ5АБ) у плазмі крові).

Докладний опис

Загальні визначення і терміни

Якщо не встановлено інше, то терміни і фрази, використовувані в даному документі, мають наступне значення. Конкретний термін або конкретну фразу не слід вважати неясною або невизначеною в тому випадку, коли він/вона конкретно не визначений(-а). Його/її слід розуміти згідно із загальноприйнятим значенням. Торговельне найменування, використовуване в даному документі, належить до відповідного продукту або активного інгредієнта.

При використанні числової змінної, термін "приблизний" або "біля" зазвичай належить до значення змінної і до всіх значень змінної в межах експериментальної помилки (наприклад, у межах довірчого інтервалу для середнього з довірчою ймовірністю 95 95) або в межах - 10 95 щодо заданого значення, або в більш широкому діапазоні.

Вираз "включати в склад" або його синоніми "містити", "включати", "мати" або тому подібне є необмежуючим терміном, який не виключає інші неперераховані елементи, стадії або інгредієнти. Вираз "складається з" виключає будь-які неперераховані елементи, стадії або інгредієнти. Вираз "по суті складається 3" належить до заданих елементів, стадій або інгредієнтів у межах заданого діапазону, поряд з необов'язковими елементами, стадіями або компонентами, які по суті не торкаються основної і нової ознаки заявленого предмета. Слід розуміти, що вираз "включати в склад" охоплює вираз "по суті складається з" і "складається 3".

Термін "необов'язковий" або "необов'язково" означає, що описуване явище, що йде за ним, може трапитися або може не трапитися. Цей термін охоплює випадки, коли явище може трапитися або може не трапитися. Наприклад, вираз, який стосується того, що етил "необов'язково" заміщений галогеном, означає, що етил є незаміщеним (СНеСН»з), моно- заміщеним (наприклад, СНаСН»Е), полі-заміщеним (наприклад, СНЕСНЬ»Е, СНеСНЕ:» і так далі), або є повністю заміщеним (СЕ2СЕз). Фахівцеві в даній галузі також слід враховувати той факт, що відносно до будь-якої групи, що містить один або більш замісників, заміщення або варіант заміщення, яке(ий) не може існувати в просторі і/або не може бути здійснене в результаті синтезу, не буде вводитися.

Термін Ст-ї, використовуваний у даному документі, означає, що фрагмент має т-п атомів вуглецю. Наприклад, "Сі-залкіл" означає, що згаданий алкіл має 1-4 атома вуглецю.

Діапазон числових значень у контексті даного документа належить до кожного із цілих чисел у цьому діапазоні і з піддіапазонів, складених цими цілими числами. Наприклад, "С1-«" означає, що згадана група може мати 1 атом вуглецю, 2 атома вуглецю, З атома вуглецю або 4 атома вуглецю. Відповідно до цього "Сі-4алкіл" охоплює "Сг2залкіл", "Сі-ззалкіл", "Со-алкіл", а також

Сзалкіл, Сгалкіл, Сзалкіл, Слалкіл або тому подібне.

Термін "заміщений" означає, що будь-який один або більше атомів водню на даному атомі замінений(с-ї) на замісник(-и), за умови, що валентність даного атома є нормальною, і сполука

Зо після заміщення є стабільною.

У тому випадку, коли будь-яка змінна (наприклад, К) з'являється в композиції або в структурі сполуки однократно, її визначають незалежно в кожному випадку. Так, наприклад, якщо група заміщено за допомогою 0-2 КЕ, то група може бути необов'язково заміщена якнайбільше двома

Е, і К має незалежний варіант у кожному випадку. Крім того, комбінація замісників і/або її варіанти допускаються тільки, якщо така комбінація буде давати в результаті стабільну сполуку.

Якщо не встановлене інше, то термін "гетеро" означає гетероатом або гетероатомну радикальну групу (тобто, радикальну групу, що містить гетероатом), тобто, атоми крім атомів вуглецю і водню або радикальну групу, що містить такі атоми. Переважно, гетероатом незалежно вибирають із групи, що складається з 0, М, 5 і тому подібного. У деякому варіанті здійснення, де включено два або більше гетероатомів, ці два або більше гетероатомів можуть бути однаковими або частина, або всі із цих двох або більше гетероатомів можуть відрізнятися.

Термін "галогено-" або "галоген" належить до ЕН, СІ, Вг або І.

Термін "гідроксил" належить до групи -ОН.

Термін "ціано" належить до групи -СМ.

Термін "алкіл" належить до лінійної або розгалуженої насиченої аліфатичної гідрокарбільної групі, що складається з атомів вуглецю і водню, яка зв'язана з іншою частиною молекули одинарним зв'язком. Необмежуючі приклади С:-залкілу включають метил, етил, пропіл, ізопропіл, н-бутил, ізобутил, втор-бутил і трет-бутил, але не обмежуються цим.

Термін "Сі-лалкоксигрупа" належить до "Сі-алкілу"у який з'єднаний з іншою частиною

БО молекули за допомогою "-0-", де "Сі-залкіл" визначений так само, як згадано вище.

Термін "гетероциклоалкіл" належить до насиченої групи моноциклічної або поліциклічної системи, де частина кільцевих атомів являють собою гетероатоми, вибрані із групи, що складається з М, 0, 5, а інші з кільцевих атомів є С. Відповідно до цього, термін "4-8--ленний гетероциклоалкіл" належить до гетероциклоалкілу, що містить 4-8 кільцевих атоми у системі, де один або більше кільцевих атомів являють собою гетероатоми, вибрані із групи, що складається з М, О, 5. Приклади 4-членного гетероциклогідрокарбілу включають азетидиніл, але не обмежуються цим. Приклади 5-ч-ленного гетероциклоалкілу включають піролідиніл, ізоксазолідиніл, оксазолідиніл, ізотіазолідиніл, тіазолідиніл, імідазолідиніл, але не обмежуються цим. Приклади б-членного гетероциклогідрокарбілу включають піперидиніл, морфолініл, бо піперазиніл, але не обмежуються цим. Приклади 7-членного гетероциклогідрокарбілу включають азациклогептаніл, оксаазабіцикло|2.2.1)гептил або тому подібне, але не обмежуються цим.

Термін "фармацевтично прийнятний" належить до сполуки, матеріалу, композиції і/або лікарської форми, які входять в об'єм достовірного медичного уявлення, підходять для контакту із тканинами людини і тварини, без зайвої токсичності, подразнення, алергійної реакції або інших проблем або ускладнень і мають прийнятне співвідношення користь/ризик.

Термін "фармацевтична композиція" належить до активної сполуки (наприклад, сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі), яка необов'язково комбінується з одним або більше фармацевтично прийнятними хімічними компонентами (наприклад, з носієм і/або ексципієнтом, але не обмежується цим).

Термін "фармацевтично прийнятний носій" належить до тих носіїв, які не викликають значне подразнення і не погіршують біоактивність і властивість активної сполуки. "тФармацевтично прийнятний носій" належить до інертної речовини, яку вводять разом з активним інгредієнтом і благотворно впливає на введення активного інгредієнта, і включає будь-яку з нижчеподаних речовин, схвалених Державним управлінням з контролю якості харчових продуктів і лікарських засобів для застосування на людині або тварині (наприклад, на худобі): речовина, що сприяє ковзанню, підсолоджуючий агент, розріджувач, консервант, барвник/забарвлювальна речовина, ароматизуючий (смаковий) агент, поверхнево-активна речовина, змочувальний агент, диспергуюча речовина, розпушувач, суспендуючий агент, стабілізуючий агент, ізотонічний агент, розчинник або емульгуючий агент, але не обмежується цим. Необмежуючі приклади носіїв включають карбонат кальцію, фосфат кальцію, різні цукри і крохмалі, похідне целюлози, желатин, рослинну олія і поліетиленгліколь або тому подібне. Іншу інформацію, що стосується носіїв, можна знайти в довіднику Кетіпдіоп: Те 5сіепсе апа Ргасіїсе ої Рпапгтасу, 2151 Еа.,

МПрріпсойн, УМіШате 8 УМіКіп5 (2005), вміст якого включено в даний документ за допомогою посилання. Термін "ексципієнт", як правило, належить до несучого лікарську речовину середовища, розріджувача і/або середовища, використовуваного для складання ефективної фармацевтичної композиції.

Термін "введення" або "здійснення введення" або тому подібне належить до способу, який забезпечує доставку сполуки або композиції в бажане місце біологічної дії. Такі способи

Зо включають пероральне, парентеральне (включаючи внутрішньовенну, підшкірну, інтраперитонеальну, внутрішньом'язову, внутрішньосудинну ін'єкцію або інфузію), місцеве, ректальне введення або тому подібне, але не обмежуються цим.

Щодо фармацевтичного або фармакологічного активного агента, термін "ефективна кількість", "терапевтично ефективна кількість" або "профілактично ефективна кількість" належить до кількості лікарського препарату або засобу, який не є токсичним, але є достатнім для досягнення бажаного ефекту. Щодо перорального складу в даному документі, "ефективна кількість" для активної речовини в композиції належить до кількості, яка потрібна для досягнення бажаного ефекту в комбінації з іншою активною речовиною в композиції. Ефективна кількість може бути визначена в індивідуальному порядку і залежить від віку та загального стану суб'єкта, що приймає його, а також від конкретної активної речовини. Ефективна кількість у конкретному випадку може бути визначена фахівцем у даній галузі за допомогою проведення звичайного тесту.

Термін "активний" інгредієнт", "пгерапевтичний агент", "активна речовина" або "активний агент" належить до хімічної сполуки, корисної для ефективного лікування або попередження встановленого (наміченого) розладу, захворювання або стани. "Захисна група" належить до типу замісника, який застосовується для блокування або захисту деякої функціональності (функціональної групи) при протіканні реакції з іншими функціональними групами в сполуці. Наприклад, "аміно- захисна група" являє собою замісник, приєднаний до аміногрупи, який блокує або захищає аміно-функціональність у сполуці.

Підходящі аміно-захисні групи включають ацетил, трифторгрупу, трет-бутоксикарбоніл (ВОС), бензилоксикарбоніл (сВ2), флуоренілметил-хлорформіат (Етос), 2- (триметилсиліл)етоксілметил (ЗЕМ) і таке інше, але не обмежуються цим. Загальний опис захисних груп і їх застосування можна знайти в керівництві сгеепе апа уУуці5, Ргоїесіїме Сгоиреь

Іп Огдапіс зупіпезі5, УМІеу апа Зопв, 1991.

Сполука згідно з винаходом

Представлено сполуку формули (І) або її фармацевтично прийнятну сіль,

Мн.

М

М М в

Е і їн, реа, мне

В

КІ

М

(1 де кожна із груп визначена так само, як згадано вище.

Вираз "група, утворена за допомогою Кі, Н2 разом з атомом М, до якого вони приєднані" й --ї жк - у - належить до групи, утвореної фрагментом й у сполуці формули (І). Приклади включають

КЯ денній Ж є С - ж х і нн ; ви ший

Як й г Я Е Кк у ит ; с: ЧИЙ КЕ ка: Н А св є р оклади

ТМ М М -- ко --н-У ги ром ТЯ й і: з Ха з х з І о з й й з т з й -- з ех з р т, к « Й х : ни к ТА А Я У Б п Я ТИ, о КУ

ДАН ї ув ЕІ -х -- х а Й і : : й Хии дали у ша й дл х у І га й 2 м Ку -ж- щ- ж КУ У Кк

Моссоюеоі ", але не обмежуються цим.

Додатковий(-ї) гетероатом(-и) у виразі "4-8-ч-ленний гетероциклоалкіл може містити 0,1, 2 або З додаткових гетероатома, вибрані із групи, що складається з М, О і 5" належить(-ать) до

В ь я --М ех - - - - - їх м гетероатомас-ів), відмінному(-им) від атома М у фрагменті Ку, Переважно додатковий гетероатом може бути вибраний із групи, що складається з М, О і 5, і число може становити 0, 1, 2 або 3.

У переважному варіанті здійснення представлено сполуку наступної формули:

Мн

Шк й м, 3

Х Й

ІЧ

Слід розуміти, що сполука згідно з винаходом може бути присутньою у формі фармацевтично прийнятної солі. Як фармацевтично прийнятна сіль, наприклад, можуть бути згадані наступні приклади: солі металів, амонієві солі, солі, утворені органічними основами, неорганічні кислоти, органічні кислоти, основні або кислотні амінокислоти або тому подібне.

Необмежуючі приклади солей металів включають солі лужних металів, наприклад, натрієву сіль, калієву сіль або тому подібне; солі лужноземельних металів, наприклад, кальцієву сіль, магнієву сіль, барієву сіль або тому подібне; алюмінієву сіль або тому подібне, але не обмежуються цим. Необмежуючі приклади солей, утворених органічними основами, включають солі, утворені триметиламіном, триетиламіном, піридином, метилпіридином, 2,6- диметилпіридином, етаноламіном, діетаноламіном, триетаноламіном, циклогексиламіном, дициклогексиламіном або тому подібним, але не обмежуються цим. Необмежуючі приклади солей, утворених неорганічними кислотами, включають солі, утворені хлористоводневою кислотою, бромистоводневою кислотою, азотною кислотою, сірчаною кислотою, фосфорною кислотою або тому подібним, але не обмежуються цим. Необмежуючі приклади солей, утворених органічними кислотами, включають солі, утворені мурашиною кислотою, оцтовою кислотою, трифтороцтовою кислотою, фумаровою кислотою, щавлевою кислотою, яблучною кислотою, малеїновою кислотою, тартаровою кислотою, лимонною кислотою, бурштиновою кислотою, метансульфоновою кислотою, бензолсульфоновою кислотою, пара- толуолсульфоновою кислотою або тому подібним, але не обмежуються цим. Необмежуючі приклади солей, утворених основними амінокислотами, включають солі, утворені аргініном, лізином, орнітином або тому подібним, але не обмежуються цим. Необмежуючі приклади солей, утворених кислотними амінокислотами, включають солі, утворені аспарагіновою кислотою, глутаміновою кислотою або тому подібним, але не обмежуються цим.

Фармацевтично прийнятні солі згідно з винаходом можуть бути отримані з родоначальної сполуки, що містить кислотну або основну групу, із застосуванням звичайних хімічних методик.

Як правило, такі солі можуть бути отримані проведенням реакції між сполуками у формі вільної кислоти або основи зі стехіометричною кількістю відповідної основи або кислоти у воді, органічному розчиннику або їх суміші. Звичайно, переважні неводні середовища, такі як простий ефір, етилацетат, етанол, ізопропанол або ацетонітрил та інші.

Сполука згідно з винаходом може мати один або більше стехіометричних центрів, і кожний із цих центрів може існувати в конфігурації Р або 5, або в конфігурації, що представляє собою їх комбінацію. Таким чином, сполуки згідно з винаходом включають усі індивідуальні конфігураційні стереоїзомерні форми, ізомерні форми положення, діастереомерні форми, енантіомерні форми і епімерні форми, а також їх відповідні суміші. Технологія обернення конкретної конфігурації стереоїзомерного центру або збереження її незмінною, а також технологія поділу сумішей стереоізомерів добре відомі в даній галузі, і фахівець у даній галузі може вибрати конкретну методику згідно з конкретними вимогами.

Сполуки згідно з винаходом можуть існувати в несольватованих або сольватованих формах, включаючи гідратну форму. У більшості випадків, сольватовані форми еквівалентні несольватованим формам, і обидві з них входять в об'єм даного винаходу. Сполуки згідно з винаходом можуть існувати в поліморфних або аморфних модифікаціях, і такі модифікації попадають в об'єм даного винаходу.

Сполука згідно з винаходом може містити атомний ізотоп у співвідношенні, що не зустрічається в природі, на одному або декількох атомах, що складають згадану сполуку.

Наприклад, сполука може бути піддана міченню радіоїзотопом, таким як Тритій (ЗН), Йод- 125(125І) або С-14(270). Альтернування всіх радіоіїзотопів сполуки, радіоактивних або нерадіоактивних, охоплюється об'ємом даного винаходу.

Даний винахід також охоплює будь-яке фармацевтично прийнятне похідне сполук згідно з формулою (І), наприклад, складний ефір, сіль складного ефіру. Особливо переважним похідним є проліки. Після введення суб'єктові таке похідне може безпосередньо або опосередковано забезпечити сполуку згідно з винаходом або її метаболіт, або залишок з фармацевтичною активністю. Особливо переважне похідне (наприклад, проліки) являє собою сполука, яке після введення суб'єктові буде підвищувати біодоступність сполуки згідно з винаходом або поліпшувати доставку родоначальної сполуки в тканини або органи живого організму.

Введення, Фармацевтична Композиція і Набір

Представлений спосіб для лікування або попередження вірусної інфекції, що включає введення суб'єктові, що потребує цього, сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі, або фармацевтичної композиції згідно з винаходом у терапевтично або профілактично ефективній кількості. Спосіб може необов'язково включати введення одного або більше додаткових активних агентів для лікування або попередження вірусної інфекції.

Альтернативно, представлене застосування сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі, або фармацевтичної композиції згідно з винаходом для лікування або попередження вірусної інфекції. У конкретному варіанті здійснення сполука формули (І) або її фармацевтично прийнятна сіль може бути застосована у комбінації з одним або більше додатковими активними агентами для лікування або попередження вірусної інфекції.

Альтернативно, представлена сполука формули (І) або її фармацевтично прийнятна сіль, або фармацевтична композиція згідно з винаходом для застосування в лікуванні або попередженні вірусної інфекції. У конкретному варіанті здійснення, сполука формули (І) або її фармацевтично прийнятна сіль може бути застосована у комбінації з одним або більше додатковими активними агентами для лікування або попередження вірусної інфекції.

У деяких варіантах здійснення згідно з винаходом, вірусна інфекція являє собою вірус лихоманки Денге, вірус жовтої лихоманки, вірус Західного Ніла, вірус японського енцефаліту, вірус кліщового енцефаліту, вірус Кунджин, вірус енцефаліту долини Муррея, вірус енцефаліту

Сент-Луїс, вірус омської геморагічної лихоманки, вірус діареї великої рогатої худоби, вірус Зіка або вірус гепатиту. У переважному варіанті здійснення вірусна інфекція являє собою вірусну інфекцію гепатиту, зокрема, вірусну інфекцію гепатиту В або гепатиту С.

Також представлена фармацевтична композиція, що містить сполуку формули (Ії) або її фармацевтично прийнятну сіль, і один або декілька фармацевтично прийнятних носіїв і/або ексципієнтів. Фармацевтична композиція може додатково необов'язково включати до складу один або більше додаткових активних агентів.

Фармацевтична композиція згідно з винаходом може бути отримана в результаті комбінування сполуки згідно з винаходом або її сіллю з фармацевтично прийнятним носієм.

Наприклад, вона може бути отримана у вигляді твердого, м'якого, рідкого або газоподібного складу, такого як таблетка, пігулка, капсула, порошок, гранула, мазь, емульсія, суспензія, розчин, супозиторій, ін'єкційний препарат, інгаляційний препарат, гель, мікросфера, аерозоль або тому подібне.

Фармацевтична композиція згідно з винаходом може бути отримана із застосуванням добре відомих у даній галузі способів, таких як звичайне змішування, розчинення, гранулювання, нанесення оболонки на драже, розтирання в порошок у рідкій фазі або у вологому стані, емульгування, ліофільне сушіння або тому подібне.

Типові шляхи введення сполуки згідно з винаходом або її фармацевтично прийнятної солі, або її стереоїзомера, або фармацевтичної композиції на її основі включають пероральне, ректальне, трансмукозальне, ентеральне введення або місцеве, крізьшкірне, інгаляційне, парентеральне, сублінгвальне, інтравагінальне, інтраназальне, внутрішньоочне, інтраперитонеальне, внутрішньом'язове, підшкірне, внутрішньовенне введення, але не обмежуються цим.

Що стосується перорального введення, то активні сполуки можуть бути змішані з фармацевтично прийнятними носіями, добре відомими в даній галузі в приготуванні фармацевтичної композиції. Носії можуть бути використані для приготування лікарських форм, що містять сполуки згідно з винаходом, таких як таблетка, пігулка, пастилка, драже, капсула, рідина, гель, завись, суспензія або тому подібне, корисних для перорального введення пацієнтові.

Тверда пероральна композиція може бути отримана із застосуванням звичайних технологій

Зо змішування, заповнення або пресування, наприклад, із застосуванням наступних процесів: змішування активних сполук із твердими ексципієнтами, необов'язкового подрібнювання суміші, що виходить у результаті, додавання інших підходящих ад'ювантів при необхідності і потім переробки суміші в гранули з одержанням, таким чином, серцевини таблетки або драже.

Підходящі ад'юванти включають сполучне, розріджувач, розпушувач, ковзальну речовину, речовину, що сприяє ковзанню (регулятор сипкості), підсолоджувач, коригент або тому подібне, але не обмежуються цим. Додаткові приклади включають мікрокристалічну целюлозу, розчин глюкози, гель із аравійської камеді, розчин желатину, сахарозну і крохмальну пасту; тальк, крохмаль, стеарат магнію, стеарат кальцію або стеаринову кислоту; лактозу, сахарозу, крохмаль, маніт, сорбіт або дикальцій-фосфат; діоксид кремнію; кроскармелозу натрію, попередньо желатинований крохмаль, крахмалгліколят натрію, альгінову кислоту, кукурудзяний крохмаль, картопляний крохмаль, метилцелюлозу, агар, карбоксиметилцелюлозу, перехресно- зшитий полівінілліролідон або тому подібне. Серцевина драже необов'язково може бути покрита оболонкою із застосуванням добре відомих технологій у звичайній фармацевтичній практиці, зокрема, із застосуванням нанесення ентеросолюбільного покриття.

Фармацевтична композиція згідно з винаходом може бути корисною для парентерального введення, наприклад, у вигляді підходящої одиничної дозованої лікарської форми, такої як стерильний розчин, суспензія або ліофілізований продукт. Можуть бути використані підходящі ексципієнти, такі як наповнювач, буферний розчин або поверхнево-активна речовина.

Сполука формули (І) або її фармацевтично прийнятна сіль згідно з винаходом може бути введена будь-яким підходящим шляхом і способом, наприклад, шляхом перорального або парентерального введення (наприклад, шляхом внутрішньовенного введення). Терапевтично або профілактично ефективна кількість сполуки формули (І) може перебувати в діапазоні від приблизно 0,0001 до 20 мг/кг маси тіла/добу, наприклад, від 0,001 до 10 мг/кг маси тіла/добу.

Частота приймання сполуки формули (І) залежить від потреб індивідуального пацієнта, наприклад, може становити один або два, або більше раз на день. Введення може бути переривчастим, наприклад, протягом періоду декількох днів пацієнт одержує добову дозу сполуки формули (І), а потім протягом періоду декількох днів або більше тривалого періоду часу пацієнт не одержує добову дозу сполуки формули (1).

Також представлена фармацевтична комбінація, наприклад, набір, який включає а) перший бо активний агент, який являє собою сполуку, яку розкривають у даному документі; 5) один або більше додаткових активних агентів. Фармацевтична комбінація може включати, при необхідності, інструкції для її введення. При необхідності, вищезгадані а) і Б) можуть бути забезпечені в тому самому контейнері або в різних контейнерах. Фармацевтична комбінація може додатково включати агенти для сприяння введенню в тому самому контейнері або в різних контейнерах, наприклад, фармацевтично прийнятні носії і/або ексципієнти, які згадані вище. Необов'язково набір може включати блок для діагностики вірусної інфекції (наприклад, вищезгадані вірусні інфекції).

Синтез і одержання

Сполука згідно з винаходом може бути отримана із застосуванням різних способів синтезу, добре відомих фахівцеві в даній галузі, включаючи конкретні варіанти здійснення, проілюстровані нижче, варіанти здійснення з використанням комбінації таких конкретних варіантів здійснення з іншими способами синтезу хімічних сполук, а також еквіваленти, добре відомі фахівцеві в даній галузі. Переважні варіанти здійснення включають діючі Зразки, запропоновані в цьому документі, але не обмежені цим. Хімічна реакція конкретного варіанта здійснення згідно з винаходом може бути проведена у відповідному розчиннику, який повинен підходити для хімічної зміни і необхідного реагенту та матеріалу згідно з винаходом. Для одержання сполуки згідно з винаходом іноді фахівцю у даній галузі потрібно проводити модифікацію або добір стадії синтезу або реакційної методики на основі відомих варіантів здійснення.

Важливим фактором у розробці будь-якої схеми синтезу в даній галузі техніки є вибір підходящої захисної групи для реакційноздатної групи (наприклад, для аміногрупи в даному винаході). Фахівець у даній галузі може звернутися до керівництва "Ргоїесіїме СгоиМирз іп Огдапіс зупіпевзів", УМіеу апа 5оп5, 1991 ру Сгеепе апа уУуші5. Зазначені вище посилальні документи включені в дану заявку за допомогою посилання у всій повноті.

Наприклад, сполука загальної формули (І) згідно з винаходом може бути отримана фахівцем в галузі органічного синтезу з використанням стандартних процедур відповідно до наступної схеми:

Ма

Нд; З в яр о - - Я Ск в Вуд бом ь. 2УОМЕ -к ре й М 1 З 4 сі С вЕМ МН ЕМ

М МО ВЕМСЇ ІРА А м Ммнино Ж шожнн нлнлнлвонннннеФво сим Що се 7 сан І 5 6 7

МН ЕМ Мне Н пвЬоН ра | 7 рани 7

Во й й

Коди чн о 7 н МН» н й ' її, р ВоВо ТЕА, ЕВІН нь р в. яти ву пн па з І но й у й 10 Формула( і)

Одержання сполуки формули 4: сполуку формули 1 як вихідну речовину піддають реакції із

Зо сполукою формули 2 з використанням реакції конденсації, що дає сполуку формули 3, яку використовують в одержанні сполуки формули 4 під дією н-бутиллітію і ОМЕ.

Одержання сполуки формули (): сполуку формули 5, захищену 5ЕМ-групою, використовують в одержанні сполуки формули 6, яку піддають амінозаміщенню з одержанням сполуки формули 7; сполуку формули 7 піддають реакції з н-бутанолом під дією Ма з одержанням сполуки формули 8, яку піддають зняттю Бет-захисної групи під дією ТЕА з одержанням сполуки формули 9; сполуку формули 9 піддають реакції із сполукою формули 4 з одержанням сполуки формули 10, яку піддають видаленню гідроксилу з одержанням сполуки формули (1).

Використовувані тут розчинники є комерційно доступними і можуть бути використані без додаткового очищення. Реакції, як правило, проводять в інертному азоті в безводному розчиннику. Дані протонного магнітного резонансу одержують за допомогою спектрометра

ВгиКег Амапсе ПІ 400 (400 МГц), з хімічним зсувом, показаним в (м. д. (ррт)) у слабкому полі відносно тетраметилсилану. Мас-спектрометрію здійснюють на приладі Адіїепі 1200 ріиз5 6110 (21956А). Хромато-мас-спектрометр І С/М5 або бПпітайд7и М5 включає діодно-матричний детектор: 5РО-М2ОА(І С) і детектор Зпітаайи Місготавз5 2020. Мас-спектрометр оснащений електророзпилювальною іонізацією (ЕБ5І), що працює в позитивному або негативному режимі.

Назви сполук одержують вручну або з використанням програмного забезпечення

СпетОгамю. Використовують назви комерційно доступних сполук, наведені в каталозі постачальника.

Аналіз методом ефективної рідинної хроматографії проводять на системі Зпітайдги ГС20

АВ, оснащеної автоматичним пробовідбірником ЗПпійтайли І -20А і японським діодно- матричним детектором Зпітаа?7и: детектором 5РО-М20 А, на хроматографічній колонці Хійпаїе 318 (наповнювач Змкм, 2,1х300 мм). Спосіб 0-60АВ 6 хв.: застосовують лінійний градієнт, де елюювання починають із 100 95А (А являє собою водний розчин з 0,0675 95 ТЕА) і завершують із 60 958 (В являє собою розчин з 0,0625 95 ТЕА в МесмМ) (загальний час процесу становить 4,2 хв.), і потім 60 96 В використовують для елюювання протягом 1 хв. Хроматографічну колонку потім урівноважують протягом 0,8 хв. для досягнення співвідношення 100:0, і загальна тривалість циклу становить б хв. Спосіб 10-8В0АВ б хв.: застосовують лінійний градієнт, де елюювання починають із 90 95 А (А являє собою водний розчин з 0,0675 95 ТЕА) і завершують із 80 95 В (В являє собою розчин з 0,0625 95 ТЕА в ацетонітрилі) (загальний час процесу становить 4,2 хв.), і потім 80 95 У використовують для елюювання протягом 1 хв. Хроматографічну колонку потім урівноважують протягом 0,8 хв. для досягнення співвідношення 90:10, ії загальна тривалість циклу становить 6 хв. Температура колонки становить 50 "С і швидкість становить 0,8 мл/хв. Сканування діодно-матричного детектора відбувається в діапазоні довжин хвиль 200-

Зо 400 нм.

Аналіз методом тонкошарової хроматографії (ТІ С) здійснюють на силікагелі ЗЕ254 від

Запропі-дгоир. Детекцію плям здійснюють, як правило, в Уф-світлі і в деяких випадках також можуть бути використані інші способи. У цих випадках тонко-шарову пластину покривають йодом (близько 1 г йоду додають в 10 г силікагелю при повному змішуванні), ваніліновим альдегідом (близько 1 г ванілінового альдегіду розчиняють в 100 мл 10 95 Н25Ой), нінгідрином (доступний в АїЇйгісп) або конкретним проявником (повністю змішують (МНа)єМо7Ог24:4Н2О, 5 г (МНаогСе(мумМоОз)в, 450 мл НгО і 50 мл концентрованої Н25О») і здійснюють детектування сполуки. З використанням способу, подібного тому, який описаний у публікації ЇЇ, МУ. С; Канп,

М.; апа Міта, М. уЧоштаї ої Огдапіс Спетівігу, 1978, 43, 2923-2925, здійснюють колонкову флеш- хроматографію на силікагелі розміром 40-63 мкм (меш 230-400) від 5ійсусівє. Звичайні розчинники в колонковій флеш-хроматографії або тонкошаровій хроматографії включають суміш дихлорметан/метанол, етилацетат/метанол і гексан/етилацетат.

Аналіз методом препаративної хроматографії здійснюють на системі біїзоп-281 Ргер ІС 322 з детектором сіївоп ШМЛ/ІБ-156, і хроматографічна колонка являє собою колонку АдеїЇІа Меписвії

АВ Ргер С18, 5 мкм, 150х21,2 мм; Рпепотепех Сетіпі С18, 5 мкм, 150х30 мм; Во5іоп бЗуттеїйїгіх С18, 5 мкм, 150х30 мм; або Ріпепотепех бупегді 318, 4 мкм, 150х30 мм.

Використовують суміш ацетонітрил/вода з низьким градієнтом для елюювання сполуки, коли швидкість становить близько 25 мл/хв., де вода містить 0,05 95 НОСІ, 0,25 95 НСООН або 0,5 95

МНз"НегО і загальна тривалість циклу становить 8-15 хв.

У даному документі використовують наступні скорочення: п-Виїі: н-бутиллітій; ТНЕ: тетрагідрофуранп; ЗЕМ: 2-(триметилсиліл)етоксил-метил; ОІРЕА: діїзопропілетиламін; ІРА: ізопропанол; ТЕА: трифтороцтова кислота; ОМЕ: М, М-диметилформамід; п-ВиОнН: н-бутанол;

Еїз5ін: триетилсилан.

Переважний ефект

Сполуки згідно з винаходом мають високу активність зв'язування з ТоїІ-подібним рецептором 7 і низьку активність зв'язування з ТоїІ-подібним рецептором 8, показуючи більш високі селективність, активність і безпеку, а також більш слабкий побічний ефект і можуть бути застосовані для ефективного лікування і попередження вірусної, зокрема, вірусної інфекції гепатиту В або гепатиту С. 60 Приклади

Наступні Приклади представлені для фахівця в даній галузі для того, щоб ясно проілюструвати і здійснити на практиці винахід. Вони є ілюстративними і приводяться тільки як приклад і не повинні сприйматися як обмеження об'єму винаходу. Якщо не встановлене інше, співвідношення (включаючи процентні вмісти) або частини дані розраховуючи на масу.

Приклад 1: 2-бутокси-7-((2-(піролідин-1-ілметил)тіазол-5-іл)уметил)-5Н-піролої3,2-4|піримідин-4-амін (І)

Стадія 1: 2-(піролідин-1-ілметил)тіазол к 8 й у; В.

З, о я- 7 » і Ка я

ДН и ж НИ

З нос, хаголеувН ще.

ЯТНЕ, ж.т., З год,

У реакційну сулію об'ємом 500 мл додають тіазол-2-формальдегід (25,00 г, 220,90 ммоль) і тетрагідрофуран (300,0 мл), що перемішують протягом 5 хв і потім додають крижану оцтову кислоту (39,80 г, 662,90 ммоль). Систему охолоджують до 0-10 "б при перемішуванні і по краплях додають піролідин (13,80 г, 194,40 ммоль). Температуру підтримують на рівні нижче 10 під час додавання. Після додавання частинами додають триацетоксиборгідрид натрію (56,20 г, 265,10 ммоль). Реакцію проводять при 10-20 Сб протягом 12 годин і відслідковують за допомогою ТІ С до повного зникнення вихідних речовин. Після завершення реакції, у реакційну рідину повільно додають водний насичений розчин бікарбонату натрію до досягнення рН 9-10, їі реакційну рідину екстрагують за допомогою 150 мл етилацетату три рази. Органічні фази 20 поєднують, сушать над безводним сульфатом натрію і концентрують при зниженому тиску.

Залишок очищають із застосуванням колонковій хроматографії (градієнт рухомої фази: етилацетат/петролейний ефір: 3/1/-1/1), що дає 15,00 г зазначеної в заголовку сполуки у вигляді олії жовтого кольору, вихід: 40,3 Фо. "Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-а) 5 7,71 (д, 9-3,26 Гц, 1Н), 7,26-7,32 (м, 1Н), 4,02 (с, 2Н), 2,60-2,75 (м, 4Н), 1,84 (тд, У-3,20, 6,65 Гц, 4Н).

Стадія 2: 2- (піролідин-1-ілметил)тіазол-5-формальдегід ин Ії пу ее ОМ я й;

У. ЗМ ТВеС, І Гея. із І,

У тригорлу колбу об'ємом 500 мл додають 2-(піролідин-1-ілметил)тіазол (15,00 г, 89,10

Зо ммоль) і тетрагідрофуран (250,00 мл), що охолоджують до -78 "Сб ацетоном із сухим льодом.

При -78 "Сб додають повільно по краплях н-бутиллітій (2,5 М, 71,3 мл). Після додавання реакційну суміш перемішують протягом 30 хв. при -78 20. При -78 "С у реакційну рідину додають по краплях ЮОМЕ (13,00 г, 178,30 ммоль). Після додавання реакційну суміш додатково перемішують при -78 "С протягом 30 хв. Завершення реакції відслідковують за допомогою ТІ С.

Реакційну рідину гасять за допомогою 50 мл насиченого водного розчину хлориду амонію і екстрагують за допомогою 150 мл етилацетату. Об'єднані органічні фази сушать над насиченим розчином сульфату натрію, фільтрують і концентрують при зниженому тиску, що дає 15,00 г зазначеної в заголовку сполуки у вигляді олії жовтого кольору, і сирий продукт використовують безпосередньо на наступній стадії.

І"Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-аО) б 10,03 (с, 1Н), 8,32 (с, 1Н), 4,03 (с, 2Н), 2,73 (т, 9-6,02

Гу, 4Н), 1,86 (тд, 9У-3,20, 6,65 Гц, 4Н).

Стадія 3: 2,4-дихлор-5-(2-(триметилсиліл)етокси)метил)-5Н-піроло!|3,2-4|піримідин

Сн С вЕМ з в а щи Й р сис сім

2,4-дихлор-5Н-піроло|3,2-4|піримідин (4,00 кг, 21,28 моль) розчиняють в ОМЕ (20,00 л); при кімнатній температурі (25 С) додають частинами ОІРЕА (2,58 кг, 20,00 моль) і згодом реакційну суміш перемішують протягом 30 хв. Реакційну рідину охолоджують до 02С на крижаній бані і потім протягом 5 годин додають повільно по краплях зі швидкістю 1-2 краплі/секунду ЗЕМ-СІ (4,00 кг, 24,00 моль). Після додавання реакційну рідину перемішують протягом 4 годин при 0 20.

Завершення реакції відслідковують за допомогою НРІ С. Реакційну рідину гасять за допомогою 70 л води і екстрагують етилацетатом (15лх3) після розведення. Об'єднані органічні фази промивають послідовно 1М-им водним розчином хлорводневою кислоти (5лх2) і насиченим соляним розчином (7лх2), і розчинник відганяють при зниженому тиску, що дає зазначену в заголовку сполуку (6,40 кг, 20,11 моль, вихід 94,50 95).

І"Н ЯМР (400 МГц, ОМ50-ав) 6 8,24-8,35 (м, 1 Н), 6,70-6,85 (м, 1 Н), 5,77 (с, 2 Н), 3,45-3,57 (м, 2 Н), 0,74-0,86 (м, 2 Н), 0,00 (с, 9 Н).

Стадія 4: 2-хлор-5-(2-(триметилсиліл)етоксил)метил)-5Н-піроло!|З3,2-4|піримідин-4-амін

СЕ вЕМ УМ вЕМ

ХА Ж Ай ши М ге М

В автоклаві об'ємом 10 л, 2,4-дихлор-5-(2-(триметилсиліл)етоксил)метил)-5Н-піроло|3,2- дФ|Іпіримідин (1,60 кг, 5,03 моль) розчиняють в ізопропанолі (1,60 л) і додають однією порцією водний розчин аміаку (4 л) при кімнатній температурі (2520). Реакційну суміш перемішують при 95200 протягом 7 годин і відслідковують завершення реакції за допомогою НРІ С. Реакційну рідину охолоджують довільно до кімнатної температури і фільтрують за допомогою лійки

Бюхнера, що дає тверду речовину чорно-коричневого кольору. Тверду речовину послідовно суспендують за допомогою етилацетату/н-гептану (1/1, 5лх2), суспендують за допомогою етилацетату (4 л), що дає зазначену в заголовку сполуку у вигляді твердої речовини коричневого кольору (1,25 кг, 4,18 моль, вихід 83,1 95).

І"Н ЯМР (400 МГц, ОМ50О-ав) б 7,61-7,77 (м, 1 Н), 6,97-7,19 (м, 2 Н), 6,28-6,38 (м, 1 Н), 5,54- 5,67 (м, 2 Н), 3,43-3,53 (м, 2 Н), 0,76-0,91(м,2Н), 0,07 (с, 9 Н).

Стадія 5: 2-бутокси-5-(2-(триметилсиліл)уетоксилуметил)-5Н-піролої|3,2-4|піримідин-4-амін

МН ЗЕМ |: вЕМ я Й п-Ви ц А и

В умовах захисної атмосфери азоту до н-ВиОН (17,0 л) повільно додають частинами металевий натрій (525,05 г, 22,84 моль). Після додавання, систему нагрівають до 6020 і

Зо продовжують підтримувати перемішування при тій температурі до повного розчинення металевого натрію. Потім систему охолоджують до 25 20 і додають частинами 2-хлор-5-((2- (триметилсиліл)етоксил)метил)-5Н-піроло|3,2-4|Іпіримідин-4-амін (1,95 кг, 6,53 моль). Після змішання до однорідного стану при перемішуванні, реагенти перемішують протягом 8 годин при 90 го і завершення реакції відслідковують за допомогою НРІ С. Реакційну суміш охолоджують до 25 "Сб довільно і потім виливають повільно в 30 л водного розчину хлориду амонію і екстрагують етилацетатом (15 лх3). Об'єднані органічні фази промивають насиченим соляним розчином (20 лх2), сушать над безводним Маг5О»х і фільтрують. Після відгону розчинника при зниженому тиску, залишок суспендують у н-гептані (4 л). Проводять фільтрацію, що дає тверду речовину, яку суспендують в етилацетаті (5 л), що дає зазначену в заголовку сполуку у вигляді твердої речовини жовтувато-білого кольору (1,53 кг, 4,55 моль, 69,7 Об). "Н ЯМР (400 МГц, ОМ50-ав) б 7,49-7,54 (м, 1 Н), 6,54-6,62 (м, 2 Н), 6,15-6,20 (м, 1 Н), 5,54 (с, 2 Н), 4,10-4,22 (м, 2 Н), 3,42-3,55 (м, 2 Н), 1,58-1,73 (м, 2 Н), 1,35-1,47 (м, 2 Н), 0,90-0,96 (м, З Н), 0,63-0,89 (м, 2 Н), 0,05 (с, 9 Н).

Стадія 6: 2-бутокси-5Н-піроло|3,2-4|піримідин-4-амін

Чо вЕМ ен ра, що аа

2-бутокси-5-((2-(триметилсиліл)етоксил)метил)-оН-піроло|3,2-4|Іпіримідин-4-амін (1,10 кг, 3,27 моль) розчиняють в ТЕА (5,50 л) і реакційну рідину перемішують протягом 16 годин при 25 аб. Завершення реакції відслідковують за допомогою НРІ С і ТРА відганяють при зниженому тиску. Залишок розчиняють у метанолі (1,2 л) і крижаній воді (1,2 л), і рН системи доводять до 12 за допомогою концентрованого водного розчину аміаку при перемішуванні до однорідного стану і потім перемішують протягом 2 годин. Осад, як і раніше, з'являється в розчині. Після фільтрації, фільтраційний осад у вигляді твердої речовини білого кольору суспендують за допомогою 15 95-ого водного розчину аміаку (1,2 лх3) і етилацетату (4 л), що дає зазначену в заголовку сполуку у вигляді твердої речовини білого кольору (550,00 г, 2,67 моль, 81,7 Об).

ІН ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-а») 5 7,37 (й, 9-2,89 Гц, 1 Н), 6,29 (а, 9-3,01 Гц, 1 Н), 4,27 (т, 96,53 Гу, 2 Н), 1,75 (д, 9У-7,91 Гц, 2 Н), 1,44-1,61 (м, 2 Н), 1,00 (т, У-7,40 Гц, З Н).

Стадія 7: (4-аміно-2-бутокси-5Н-піролої|3,2-4|піримідин- 7 -іл)-(2- (піролідин-1-ілметил)тіазол-5- іл|метанол

Мн МН 2 р

К о; сСюневи М й М С А ше а. ран м

М не Х й

У тригорлу колбу об'ємом 500 мл додають 2-бутокси-5Н-піроло|3,2-4|Іпіримідин-4-амін (10,00 г, 48,49 ммоль), карбонат калію (7,37 г, 53,34 ммоль), воду (100 мл) і ізопропанол (100 мл), до чого додають 2-(піролідин-1-ілметил)тіазол-5-формальдегід (14,27 г, 72,74 ммоль) при перемішуванні. Реакцію проводять при 25 "С протягом 16 годин і відслідковують наявність 2- (піролідин-1-ілметил)тіазол-5-формальдегіду за допомогою ГСМ5 на предмет завершення реакції. У реакційну рідину додають 100 мл води для розведення і проводять екстракцію за допомогою 100 мл дихлорметану три рази. Об'єднані органічні фази сушать над безводним сульфатом натрію, відфільтровують тверду речовину і концентрують при зниженому тиску, що дає залишок, який очищають із використанням колонкової хроматографії (градієнт рухомої фази: дихлорметан/метанол/водний розчин аміаку/: 30/1/0,1-10/1/0),1), що дає зазначену в заголовку сполуку у вигляді твердої речовини коричневого кольору (5,20 г, 12,92 ммоль, вихід: 26,6 95). Мас-спектрометрія (М5) з іонізацією електророзпиленням (Е5І) т/7: 403,3 (М-АНЯ.

Стадія 8: 2-бутокси-7-((2-(піролідин-1-ілметил)тіазол-5-іл)уметил)-5Н-піролоЇ3,2-4|Іпіримідин-4-амін

МН. Ме сн кн он м» а (З Грифтороцтова кислоті в» М г

ІІ , 2 ко ; Трвстнленжан А и м однак в а ПИ НН о рн ні св ; но у х к

У баклажаноподібну колбу об'ємом 100 мл завантажують (4-аміно-2-бутокси-5Н-піроло|3,2- а|піримідин-7-іл)-(2-(піролідин-1-ілметил)тіазол-5-іл|метанол (5,10 г, 12,60 ммоль), триетилсилан (10,00 мл) і трифтороцтову кислоту (40,00 мл) і реакційну суміш перемішують при 20 20 протягом 12 годин. Наявність вихідних речовин відслідковують через Ї/СМ5 на предмет завершення реакції. Розчинник видаляють концентруванням при зниженому тиску. У систему додають 100 мл етилацетату і потім додають насичений розчин карбонату натрію для доведення значення рН розчину до 9-10. Екстракцію проводять за допомогою 50 мл етилацетату три рази. Органічні фази поєднують, сушать над безводним сульфатом натрію, відфільтровують тверду речовину і концентрують при зниженому тиску, що дає залишок, який розділяють за допомогою препаративної високоефективної рідинної хроматографії, що дає 4,2 г 2-бутокси-7-((2-(піролідин-1-ілметил)тіазол-5-іл)уметил)-5 Н-піроло|3,2-4 піримідин-4-амін у вигляді олії світло-жовтого кольору (диформіат зазначеної в заголовку сполуки).

І"Н ЯМР (400 МГц, Метанол-а») б 8,30 (с, 2Н), 7,61 (с, 1Н), 7,41 (с, 1Н), 4,51 (с, 2Н), 4,44 (кв., 96,6 Гу, 2Н), 4,24 (с, 2Н), 3,33-3,28 (м, 4Н), 2,02 (с, 4Н), 1,83-1,73 (м, 2Н), 1,56-1,46 (м, 2Н), 0,99 (т, 9-72 Гу, ЗН).

Експериментальний Приклад 1: Випробування іп міїго з оцінюванням активності зв'язування з рецептором для ТоїІ-подібного рецептора 7 і ТоіІ-подібного рецептора 8

Реагенти:

Клітини НЕК-Біне ПТК? і клітини НЕК-Біце ПТІ-К8 (доступні для придбання в Іпмімосеп)

Середовище ОМЕМ

Термоінактивована фетальна бичача сироватка

Реагент для визначення антитіл до мікоплазми Могтосіп "м

Блеоміцин

Бластицидин

Використовувані 55-9620 і К848 мають наступні структури. 5855-9620 може бути отриманий згідно зі способом, розкритим у патенті 0520100143301; К848 закуповують в АВСЕМТ (Каталог:

ІМО-2208, 0,5 мг).

Її ; і

Щ ін. Шк й ха і ре я ЛХ І - ще ей ем г н Ко ьх її Ку Кая ооБоа ЯВяк Резиквімоя

Схема: 1. Підготовка 96-ямкового планшета для сполук:

Здійснюють градієнтне розведення сполук в ЮМ5О З-кратно з використанням робочої станції для рідин РОЮ, починаючи з концентрації 10 ммоль/л, і здійснюють розведення в 10 точках (2-а колонка - 11-а колонка і кожну точку дублюють). В 12-у колонку додають 1 мкл позитивної сполуки К848 у концентрації 5 мг/мл як позитивний контроль; і в 1-у колонку додають 1 мкл ОМ50О як негативний контроль. Кожна ямка містить 1 мкл ОМ5О. 2. Збирають клітини в колбі для клітинної культури і густину клітин доводять розведенням до 250000 клітин/мл. 3. 200 мкл (50000 клітин/ямка) клітинної суспензії додають у підготовлений планшет, що містить сполуки, і кінцева концентрація ОМ5О у кожній лунці становить 0,5 95. 4. Культуральні планшети, що містять клітини і сполуки, інкубують в інкубаторі з СО2 протягом 24 годин при 37 "С, в атмосфері 5 9500». 5. Після закінчення 24 годин інкубації, 20 мкл супернатанта переносять із кожної ямки планшетів для клітинних культур в 9б6-ямковий прозорий аналітичний планшет. У кожну ямку аналітичного планшета додають 180 мкл реагенту Оцапії-Вісе і планшет інкубують в інкубаторі при 37 "С, в атмосфері 5 9500» протягом 1 години. 6. Після закінчення 1 години, визначають вміст лужної фосфатази в 20 мкл супернатанта за допомогою зчитувального обладнання для мікропланшетів при ОЮвбзо. 7. ЕС5о для кожної сполуки одержують за допомогою програмного забезпечення Ргізт.

Результати показано в Таблиці 1:

Таблиця 1

Випробуваний зразок ЕС»во (нМ) у випадку ТІ А7 | ЕСрво (НМ) у випадку ТІ 88

Приклад 1 4541 29332

Відповідно до вищезгаданої таблиці, сполука згідно з винаходом показує більш високу активність зв'язування з рецептором іп міго щодо ТоїІ- подібного рецептора 7, ніж контрольний агоніст ТоЇІ-подібного рецептора 7 (35-9620, і більш низьку активність зв'язування з рецептором іп міго щодо ТоїІ-подібного рецептора 8, ніж контрольний агоніст ТоїІ- подібного рецептора 7 5- 9620. Сполука згідно з винаходом має значну відмінність у селективності для різних рецепторів, показуючи кращий ефект, ніж прототип.

Експериментальний Приклад 2: Аналіз фармакокінетики в щура 12 самців 5О0-щурів ділять на 4 групи, по З 50-щура в кожній групі. 2 групам тварин вводять шляхом внутрішньовенної ін'єкції (ІМ) 1 мг/кг контрольного агоніста ТоїІ-подібного рецептора 7 сі5-9620 і сполуку Прикладу 1 за даним винаходом у вигляді водного розчину, що містить 10 95 гідроксипропіл-В-цдциклодекстрину, (концентрація становить 0,5 мг/мл), відповідно. Іншим 2 групам вводять перорально (РО) 5 мг/кг 55-9620 і З мг/кг сполуки Прикладу 1 у вигляді суспензії, що містить 0,595 метилцелюлози/0,2 95 Туееп 80 у чистій воді (концентрація становить 1 мг/мл). Збирають зразки цільної крові кожного щура, що одержав внутрішньовенну ін'єкцію, для безперервного одержання плазми через 2, 15, 30 хвилин і 1, 2, 4, 8, 24 години після введення. Збирають зразки цільної крові кожного щура із груп перорального введення для безперервного одержання плазми через 15, 30 хвилин і 1, 2, 4, 8, 24 години після введення.

Концентрації в плазмі 55-9620 і сполуки Прикладу 1 визначають методом ІС-М5/М5 (Рідинна

Хроматографія з тандемною мас-спектрометрією).

Результати показано в Таблиці 2.

Таблиця 2 години маси тіла) маси тіла) маси тіла) маси тіла) 77700837 | 170 | ..7- | 5Ю щ(- 2 2 ющ 12768111 4л7 77711949 | 13417771 564 ШЩ- оМазв(ілюгу | 77773287 Ї11111113511111111-11 о Ст(мл/хвуко | 77717205. | .- |. ЮД758. ДЩД|( -

НМ.-год.

В еквівалентних умовах, що стосується і внутрішньовенної ін'єкції, і перорального введення (перетворена кількість введення), у порівнянні з контрольним агоністом ТоїІ-подібного рецептора 7 55-9620, сполука згідно з винаходом показує більш сильний вплив на щурів.

Експериментальний Приклад 3: аналіз фармакодинаміки іп мімо на мишачій експериментальній моделі, інфікованій ААМ(Аденоасоційований вірус)-несучим вірусом гепатиту В (НВМ)

План і методики експерименту:

Шлях введення: внутрішньошлункове введення

Період часу введення: з 26 дня після впровадження вірусу, одне введення кожні три дні,

Зо усього 6 тижнів

Групи введення: група 1: несуче лікарську речовину середовище, 10 95 НР-ВД-СО; група 2: са5-9620, 20 мг/кг; групи 3: сполука Прикладу, 20 мг/кг

Забір проби крові: з З дня після 1-ого введення, двічі на тиждень, всього 8 тижнів;

Забір проби печінки: пробу печінки забирають на день 64 після 1-ого введення.

Докладні дані показано в Таблиці З і Таблиці 4.

Таблиця З мишей в. г./200 Спосіб ін'єкції мкл 200 1. На 14 день і 21 день після впровадження вірусу мкл/тварина ін'єкцією 30 мишей ділять на 6 груп, відповідно до 30-6 1210 хвостова ' рівня в крові НВМ ОМА, НВзАа і НВеАо; вена, з 0 дня 2. Кров забирають на 26 день щодо впровадження ' вірусу як підготовленого зразка для введення. "НВ5ЗАд: поверхневий антиген вірусу гепатиту В; НВеАд: оболонковий (Е) антиген вірусу гепатиту В

Таблиця 4 те тд кількість Об'єм ; . Момент часу Момент

Група й Спосіб - |часу забору

Ши столяа | ден |еодетя ОТ, тору М введення печінки (мг/кг) (мл/кг) середовище щодо впровадження вірусу, Забір першої проводять крові проводять День 64 внутрішньо- на З день після |". 10 | після 1-ого шлункове введення, двічі введення.

З 5 Приклад 1 20 введення, на тиждень, однократно усього 8 тижнів. кожні три дні, усього 6 тижнів.

Докладні результати аналізу фармакодинаміки іп мімо на мишачій моделі, інфікованій ААМ- несучим вірусом гепатиту В, показано на Фігурах 1-3. Дані за числом копій ДНК НВУ у плазмі, за числом копій поверхневого антигену вірусу гепатиту В (НВ5ЗАд) у плазмі і за рівнем продукування Апіі-НВ5АБ (антитіл до поверхневого антигену вірусу гепатиту В) показують, що сполука Прикладу 1, в еквівалентних умовах, має більш високу ефективність, ніж контрольний агоніст ТоїІ- подібного рецептора 7 55-9620, показуючи переважний ефект.

Якщо не зазначене інше, то всі числа, що відображають кількості інгредієнтів, клітинної культури, умов обробки і іншого, використовувані в описі винаходу, включаючи пункти формули, слід розуміти як такі, що модифікуються у всіх випадках за допомогою терміна "приблизно".

Відповідно до цього, якщо не зазначене інше зворотне, то числові параметри являють собою наближені величини і можуть варіюватися залежно від бажаних властивостей, які намагаються одержати за допомогою даного винаходу. Якщо не зазначене інше, то термін "щонайменше", передуючий ряду елементів, слід розуміти як належний до кожного елемента в цьому ряді.

Фахівець у даній галузі розпізнає, або зможе виявити в результаті не більше ніж рутинного експериментування багато еквівалентів конкретних варіантів здійснення винаходу, описуваних у даному документі. Такі еквіваленти, як мається на увазі, охоплюються прикладеними пунктами формули винаходу.

Багато модифікацій і варіацій винаходу можуть бути зроблені без відступу від його суті і об'єму, що буде очевидно для фахівця в даній галузі. Конкретні варіанти здійснення, описувані в даному документі, запропоновані винятково для прикладу і жодним чином не призначені бути обмежуючими. Передбачається, що опис винаходу і приклади вважаються винятково ілюстративними, де даний об'єм і суть винаходу наведені в прикладених пунктах формули винаходу.

Claims (12)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

1. Сполука формули (І) або її фармацевтично прийнятна сіль ів м З, Го ев ливе а я М й ни и чо Кк ; (І) де В: і К», кожний незалежно, вибирають із групи, що складається з Н і С:.алкілу, або В: ії Кг разом з атомом М, до якого вони приєднані, утворюють 4-8-членний гетероциклоалкіл, де 4-8--ленний гетероциклоалкіл необов'язково заміщений одним або більше Кз, Нз, кожний незалежно, вибирають із групи, що складається з гідроксилу, галогену, ціаногрупи, С:-залкілу і Сі-лалкоксигрупи.

2. Сполука за п. 1 або її фармацевтично прийнятна сіль, яка відрізняється тим, що 4-8--ленний гетероциклоалкіл містить 0, 1, 2 або З додаткові гетероатоми, вибрані із групи, що складається з МО 5.

3. Сполука за п. 2 або її фармацевтично прийнятна сіль, яка відрізняється тим, що 4-8--ленний гетероциклоалкіл являє собою 4-членний, 5-ч-ленний, б-ч-ленний, 7-ч-ленний або 8-членний гетероциклоалкіл.

4. Сполука за п. 1 або її фармацевтично прийнятна сіль, яка відрізняється тим, що Кз незалежно вибирають із групи, що складається з гідроксилу, Е, СІ, Вг, СМ, метилу, етилу, пропілу, метоксилу, етоксилу і пропоксигрупи.

5. Сполука за п. 1 або її фармацевтично прийнятна сіль, яка відрізняється тим, що групу, утворену за допомогою К:, В2 разом з атомом М, до якого вони приєднані, вибирають із групи, що складається 3: ц ЖЕ й х уккккжкк че У « ї Ку КК - г ас дж о За м: ее в Ку ши Не ви ві М У і: «Ме уві «С . «ек Ї х Хжжх х ме; ОКУ Ми жи Е Кк 2 т х й г Ка т сон І рн Й о от Й Баш Н ДА я 5 Я ще й Кеш «ще і ВУ ї «ем І -х БІ де - М Е ух г) ІІ ши ши оон Той Ми АК к й У » г КЕ х Раш з Ез М Но ; рани ана х х Хоми . їй Уж У 7 І -

6. Сполука за п. 5 або її фармацевтично прийнятна сіль, яка відрізняється тим, що група, утворена за допомогою Кі, РН» разом з атомом М, до якого вони приєднані, являє собою 5 й є НКУ Мт ,

7. Сполука наступної формули або її фармацевтично прийнятна сіль ща ї В М: С: ск - КЗ в Ка шк щедру, я вес М я ШЕ; « Я ї оч що Ше йо

Зо .

8. Фармацевтична композиція, що містить сполуку за будь-яким з пп. 1-7 і/або її фармацевтично прийнятну сіль у терапевтично або профілактично ефективній кількості і один або більше фармацевтично прийнятних носіїв і/або ексципієнтів.

9. Застосування сполуки за будь-яким з пп. 1-7 або її фармацевтично прийнятної солі або фармацевтичної композиції за п. 8 для одержання лікарського препарату в лікуванні або попередженні вірусної інфекції.

10. Застосування за п. 9, яке відрізняється тим, що вірусна інфекція являє собою вірусну інфекцію, що протікає як вірус лихоманки денге, вірус жовтої лихоманки, вірус Західного Ніла, вірус японського енцефаліту, вірус кліщового енцефаліту, вірус Кунджин, вірус енцефаліту долини Муррея, вірус енцефаліту Сент-Луїс, вірус омської геморагічної лихоманки, вірус діареї великої рогатої худоби, вірус Зіка або вірус гепатиту.

11. Застосування за п. 10, яке відрізняється тим, що вірусна інфекція являє собою вірусну інфекцію гепатиту.

12. Застосування за п. 11, яке відрізняється тим, що вірусна інфекція являє собою вірусну інфекцію гепатиту В або гепатиту С. І Рівень НВ5Ав в плазмі День 36: впровадження Кінцева точка вірусу ААМ/НВМ ін'єкцією. | Введення доз | Переривання експерименту форту : д | : ів Несуче середовище : - - Щ Що Ї що їх . : ХО рев о: зва пе жк и зе 859620 ! ІЧ - ве; Ох журн Я 20 мг/кг маси тіла їв нк ді шен ж Сполука о 7 ета ни : У . шк жу І : т 1 Прикладу 7 Ж : ож, м я 0 во 20 мг/кг маси тіла хв В ша за п чн Кк а й що 3 7 «М Н У ЧУ ОТ , одн Бу ї ше: ше І В ЩЕ; : і АТХ и и кше ж Нюх : : я Її Де Ше хи : я жі Я п зм оон мими па пи ен пен вк Шен е Че: ПІНИ НИМ Є НИЗ МКУ: ЗИ ЗХ У С Після 1-го введення/день

Фіг. 1

День -26: впровадження Рівень ДНК НВУ в плазмі Кінцева точка вірусу ін'єкцією о Введеннядоз,їд у ереривання експерименту : «і І х Н й Е | : : й Несуче середовище Н ях : : БО І вкти : дко59620 : "ж 4 Що сні нд Ї, о : в ж -й 2 зале ся же янежо020 мг/кг маси тіла оо А З Божу ЖСполука ж іх : шенні щи мг/нг я лоні : Ж сяк ЯК Я Ж к ин мг/кг маси тіла ше ше Я а вв : - | Ї ав Со пе и в п п вн а «вв ЯЯ т В т 14 4 95 УК ях 45 55 ау 70 Після 1-го введення/день

Фіг. 2 День -26: впровадження Рівень Апіі-НВ5АБ в плазмі Кінцева точка вірусу ін'єкцією , Вагедення доз «Переривання експерименту Ку прееех пли пи КЛУУЮВМХ и л Тдюжжююююк чт ; піни нини нин : - | : : жо Несуче середовище і г: | : : : Е | ще : дві 559520 : о 8357 й : 00 мгукг маси тіла : рез І Ж ! : Ж і ії Ух зво Сполука : ї | ж. Ко з Арикладу З : ооо т Шо ос 20 мг/кг маси тіла шо Її ж ж : - ! ; ж и а ЗИ : що і с МНН НЕ. ши ше ни НЯ Я а : ші нн ни в п М В В - Я Я 76 33556 о Після 1-го введення/день

Фіг. З