UA120843C2

UA120843C2 - Конструкція, яка містить гетерологічиий промотор, функціонально зв'язаний із нуклеотидною послідовністю, яка кодує амінокислотну послідовність, що має пестицидну активність до лускокрилих

Info

Publication number: UA120843C2
Application number: UAA201607471A
Authority: UA
Inventors: Дуан Алан Лехтінен; Дуан Алан Лехтинен; Кімберлі С. Сампсон; Кимберли С. Сампсон; Кіра Робертс; Кира Робертс; Ітан Дунн; Итан Дунн; Нана Чоугуле
Original assignee: Атенікс Корп.; Атеникс Корп.
Priority date: 2013-12-09
Filing date: 2014-12-08
Publication date: 2020-02-25
Also published as: AU2014364119A1; US20180371032A1; BR112016012643B1; AU2014364119C1; MX2019010451A; UY35866A; UA122475C2; MX367958B; AU2014364119B2; EP3080277B1; JP2021072796A; EP3800259B1; KR20210135638A; AU2021201939B2; EP3800259C0; CA2931259A1; JP2019141078A; KR20210135637A; BR112016012643A2; CN106164274A

Abstract

Винахід стосується конструкції, яка містить гетерологічиий промотор, функціонально зв'язаний із нуклеотидною послідовністю, яка кодує амінокислотну послідовність, що має пестицидну активність до лускокрилих, вектора, клітини-хазяїна, трансгенної рослини, трансгенної насінини, рекомбінантного поліпептиду, композиції, способу знищення лускокрилого шкідника, способу одержання поліпептиду, рослини або клітини рослини зі стабільно вбудованою в її геном ДНК-конструкцією.

Description

одержання поліпептиду, рослини або клітини рослини зі стабільно вбудованою в її геном ДНК- конструкцією.

Перехресне посилання на споріднені заявки

Дана заявка заявляє пріоритет відповідно до тимчасової заявки на патент США з реєстраційним Мо 61/913905, поданої 9 грудня 2013 року, і тимчасової заявки на патент США з реєстраційним Мо 61/913911, поданої 9 грудня 2013 року, вміст яких включено у даний документ за допомогою посилання у їх повному обсязі.

Посилання на перелік послідовностей, наданий у електронній формі

Офіційна копія переліку послідовностей надається у електронній формі за допомогою ЕЕ5-

МУуер як о відформатований за АБСІЇ перелік послідовностей у файлі з назвою "АРА1Т36054 5Т25їхі", створеному 14 листопада 2014 року, що має розмір 97 кілобайт і подається одночасно з даним описом. Перелік послідовностей, що міститься у цьому відформатованому за АЗСІЇ документі, є частиною даного опису і включений у даний документ за допомогою посилання у всій своїй повноті.

Галузь винаходу

Даний винахід стосується галузі молекулярної біології. Забезпечуються нові гени, які кодують пестицидні білки. Дані білки та нуклеотидні послідовності, що їх кодують, застосовуються для одержання пестицидних складів та при одержанні трансгенних рослин, стійких до сільськогосподарських шкідників.

Передумови створення винаходу

Васійи5 Шитгіпдіепзіз являє собою грампозитивну спороутворювальну грунтову бактерію, яка має здатність продукувати кристалічні включення, що проявляють специфічну токсичність щодо деяких рядів та видів комах, але є нешкідливими для рослин та інших нецільових організмів. У зв'язку з цим композиції, що містять штами Васіїййв5 Шигіпдієпвіз або їх інсектицидні білки, можуть застосовуватися як екологічно прийнятні інсектициди / для контролю сільськогосподарських комах-шкідників або комах-переносників різних захворювань людей та тварин.

Кристалічні (Сту) білки (дельта-ендотоксини) від Васіїйй5 Іигіпдіеєпвіз мають потужну інсектицидну активність щодо переважно личинок лускокрилих, напівтвердокрилих, двокрилих та твердокрилих. Дані білки також продемонстрували активність щодо шкідників рядів

Нутепорієга, Ноторіеєга, Рипігарієга, МаІорнада та Асагїгі, а також інших рядів безхребетних, таких як МетайНеїтіпіпевз, РіаїупеІтіпіне5 та Загсотазвіїдогрпога (Рейеізоп (1993) Те Васіив5

Тпишйпдієпвів Татіїу ігеє. Іп Адмапсед

Епаіпеегтєд Резіїсіде5, Магсеї! Оеккег, Іпс., Мем/ МОоїК, М.У.). Дані білки первісно класифікували як Стуі-Стум, переважно на основі їх інсектицидної активності. Основними класами були

І ер/дорієга-специфічні (І), Іерідорієга-специфічні та Оірієга-специфічні (ІІ), Соіеєорівєга- специфічні (ПІ), О/рієгта-специфічні (ІМ) та нематода-специфічні (М) ії (МІ). Додатково білки класифікували в підродини; більш спорідненим білкам у складі кожної родини надали кодові позначення, такі як СтутА, Сту1!В, СтуїС тощо. Ще більш спорідненим білкам в рамках кожної групи надали такі позначення, як Сту1!С1, Сту1С2 тощо.

Було описано нову номенклатуру для генів Сту, яка більше базується на основі гомології амінокислотних послідовностей, ніж специфічності щодо комахи-мішені (СтісКтоге еєї аї. (1998)

МісгоріоІ. Мої. Віої. НАем. 62:807-813). (1998) МісгоріоІ. Мої. Віої. Нем. 62:807-813|. У цій класифікації кожному токсину надається унікальна назва, що включає первинний ієрархічний рівень (арабська цифра), вторинний ієрархічний рівень (велика літера), третинний ієрархічний рівень (мала літера) та четвертинний ієрархічний рівень (друга арабська цифра). Римські цифри замінено арабськими цифрами у первинному ієрархічному рівні. Білки з ідентичністю послідовностей менше 45 95 мають різні первинні ієрархічні рівні, а критеріями для вторинних та третинних ієрархічних рівнів є ідентичність 78 95 та 95 95, відповідно.

Кристалічний білок не проявляє інсектицидної активності до моменту його поглинання та розчинення у середній кишці комахи. Поглинений протоксин зазнає гідролізу протеазами у травному тракті комахи з утворенням активної токсичної молекули. |НОйе апа М/нпіїеієу (1989)

Місторіої. Нем. 53:242-255|. Даний токсин зв'язується з апікальними рецепторами щіткової облямівки у середній кишці личинок-мішеней та вбудовується в апікальну мембрану, утворюючи іонні канали або пори, що у результаті призводить до загибелі личинки.

Дельта-ендотоксини загалом мають п'ять консервативних доменів послідовностей та три консервативні структурні домени |див., наприклад, де Маада єї аї. (2001) Тгтепа5 Сепеїс5 17:193-199). Перший консервативний структурний домен складається із семи альфа-спіралей та бере участь у проникненні через мембрану та пороутворенні. Домен Ії складається з трьох складчастих бета-шарів, які упорядковані у конфігурації грецького ключа, а домен ЇЇ складається з двох антипаралельних складчастих бета-шарів у структурі типу "ІеПу-гої!" (де

Маада еї а!., 2001, вище). Домени ІІ та ПІ беруть участь у розпізнаванні та зв'язуванні рецепторів і тому вважаються детермінантами специфічності токсину.

Через спустошення, яке можуть спричинити комахи, та для покращення врожайності шляхом контролю комах-шкідників, існує постійна потреба у відкритті нових форм пестицидних токсинів.

Короткий опис винаходу

Забезпечуються композиції та способи для надання пестицидної активності бактеріям, рослинам, клітинам рослин, тканинам та насінню рослин. Композиції містять молекули нуклеїнових кислот, які кодують послідовності пестицидних та інсектицидних поліпептидів, вектори, які містять дані молекули нуклеїнових кислот, та клітини-хазяїни, які містять такі вектори. Композиції також містять послідовності пестицидних поліпептидів та антитіла до даних поліпептидів. Нуклеотидні послідовності можуть застосовуватися в ДНК-конструкціях або касетах експресії для трансформації та експресії в організмах, у тому числі мікроорганізмах та рослинах. Нуклеотидні або амінокислотні послідовності можуть являти собою синтетичні послідовності, які було сконструйовано для експресії в організмі, включаючи без обмеження мікроорганізм або рослину. Композиції також містять бактерії, рослини, клітини рослин, тканини та насіння рослин, що містять нуклеотидну послідовність за даним винаходом.

Зокрема, забезпечуються виділені або рекомбінантні молекули нуклеїнових кислот, які кодують пестицидний білок. Крім того, охоплені амінокислотні послідовності, що відповідають пестицидному білку. Зокрема, даний винахід забезпечує виділену або рекомбінантну молекулу нуклеїнової кислоти, яка містить нуклеотидну послідовність, що кодує амінокислотну послідовність, показану під 5ЕО ІЮ МО:5-26, або нуклеотидну послідовність, викладену під 5ЕС

ІО МО':1-4, а також їх біологічно-активні варіанти та фрагменти. Нуклеотидні послідовності, що є комплементарними нуклеотидній послідовності за даним винаходом, або які гібридизуються з послідовністю за даним винаходом або комплементарним їй ланцюгом, також охоплюються.

Додатково забезпечуються вектори, клітини-хазяїни, рослини та насіння, які містять нуклеотидні послідовності за даним винаходом, або нуклеотидні послідовності, які кодують амінокислотні послідовності за даним винаходом, а також їх біологічно-активні варіанти та фрагменти.

Забезпечуються способи одержання поліпептидів за даним винаходом та

Зо застосування даних поліпептидів для контролю або знищення комах, що відносяться до лускокрилих, напівтвердокрилих, твердокрилих, нематод або двокрилих.

Також включено способи та набори для виявлення у зразку нуклеїнових кислот та поліпептидів за даним винаходом.

Композиції та способи за даним винаходом є застосовними для одержання організмів з підвищеною стійкістю або витривалістю до шкідника. Ці організми та композиції, що включають організми, є бажаними для сільськогосподарських цілей. Композиції за даним винаходу є також застосовними для створення змінених або покращених білків, які мають пестицидну активність, або для виявлення присутності пестицидних білків або нуклеїнових кислот у продуктах або організмах.

Детальний опис

Даний винахід відноситься до композицій та способів регулювання стійкості або витривалості до шкідників у організмів, зокрема, у рослин або клітин рослин. Під виразом "стійкість" мається на увазі, що шкідник (наприклад, комаха) гине після поглинання або при іншому контакті з поліпептидами за даним винаходом. Під виразом "витривалість" мається на увазі погіршення або зниження руху, живлення, розмноження або інших функцій шкідника.

Способи включають трансформування організмів за допомогою нуклеотидної послідовності, що кодує пестицидний білок за даним винаходом. Зокрема, нуклеотидні послідовності за даним винаходом застосовуються для одержання рослин і мікроорганізмів, які мають пестицидну активність. Таким чином, забезпечуються трансформовані бактерії, рослини, клітини рослин, тканини та насіння рослин. Композиції являють собою пестицидні нуклеїнові кислоти та білки від

Васійи5 або інших видів. Послідовності знаходять застосування в конструюванні векторів експресії для наступної трансформації в організми, що представляють інтерес, у якості зондів для виділення інших гомологічних (або частково гомологічних) генів та для створення змінених пестицидних білків із застосуванням способів, відомих з рівня техніки, таких як переміщення доменів або перестановка в ДНК, наприклад, із використанням представників родин ендотоксинів Сту!, Сту2 та Сту9. Білки знаходять застосування у здійсненні контролю або винищенні популяцій шкідників, що відносяться до лускокрилих, напівтвердокрилих, твердокрилих, двокрилих або нематод та для одержання композицій з пестицидною активністю.

Під виразом "пестицидний токсин" або "пестицидний білок" мають на увазі токсин, який має 60 токсичну активність щодо одного або декількох шкідників, включаючи без обмеження представників рядів І ерідорієга, Оірієга, Нетірієга та СоІєорієга або типу Метаїйоада, або білок, який характеризується гомологією до такого білка. Пестицидні білки було виділено з організмів, які включають, наприклад, Васійшє 5р., Сіозійдіит бБітєептепіап5 та Раепібасійй5 роріїає.

Пестицидні білки містять амінокислотні послідовності, виведені з нуклеотидних послідовностей повної довжини, розкритих у даному документі, та амінокислотні послідовності, які Є ККОРОТШИМИ за послідовності повної довжини або через застосування альтернативного сайту ініціювання транскрипції, що розташований нижче за ходом транскрипції, або через процесинг, який дає більш короткий білок, що має пестицидну активність. Процесинг може мати місце у тому організмі, у якому експресується білок, або у організмі шкідника після поглинання білка.

Таким чином, у даному документі забезпечуються нові виділені або рекомбінантні нуклеотидні послідовності, які надають пестицидної активністі. Дані нуклеотидні послідовності кодують поліпептиди з гомологією до відомих дельта-ендотоксинів або бінарних токсинів. Також забезпечуються амінокислотні послідовності пестицидних білків. Білок, синтезований у результаті трансляції даного гена, дозволяє клітинам контролювати або знищувати шкідників, які його поглинають.

Виділені молекули нуклеїнових кислот та їхні варіанти та фрагменти

Один аспект даного винаходу стосується виділених або рекомбінантних молекул нуклеїнових кислот, що містять нуклеотидні послідовності, які кодують пестицидні білки та поліпептиди або їх біологічно активні частини, а також молекул нуклеїнових кислот, які є придатними для застосування як гібридизаційні зонди для визначення молекул нуклеїнових кислот, що кодують білки з ділянками з гомологією послідовності. Також даним документом охоплені нуклеотидні послідовності, здатні до гібридизації з нуклеотидними послідовностями за даним винаходом в жорстких умовах, як визначено у іншому розділі даного документа. Як застосовується у даному документі, вираз "молекула нуклеїнової кислоти" передабачає включення в себе молекул ДНК (наприклад, рекомбінантної ДНК, кДНК або геномної ДНК) і молекул РНК (наприклад, мРНК), а також аналогів ДНК або РНК, одержаних із застосуванням нуклеотидних аналогів. Молекула нуклеїнової кислоти може бути ооднонитково або двонитковою, але переважно є двонитковою ДНК.

Вираз "ізольована" або "рекомбінантна" послідовність нуклеїнової кислоти (або ДНК)

Зо застосовується у даному документі для позначення послідовності нуклеїнової кислоти (або

ДНК), яка вже не перебуває у своєму природному оточенні, наприклад, знаходиться в умовах іп міго або в рекомбінантній бактерії або клітині рослини-хазяїні. У деяких варіантах здійснення виділена або рекомбінантна нуклеїнова кислота не містить послідовностей (переважно послідовностей, які кодують білок), що у природному стані фланкують нуклеїнову кислоту (тобто послідовності, які розташовані на 5'- та 3'-кінцях нуклеїнової кислоти) у геномній ДНК організму, з якого отримана нуклеїнова кислота. В контексті даного винаходу при застосуванні виразу "виділений" стосовно молекул нуклеїнової кислоти, він не включає виділені хромосоми.

Наприклад, в різних варіантах здійснення виділена молекула нуклеїнової кислоти, яка кодує дельта-ендотоксин, може містити менше ніж приблизно 5 т.п.о, 4 т.п.о., З т.п.о., 2 т.п.о., 1 т.п.о., 0,5 т.п.о. або 0,1 т.п.о. з нуклеотидних послідовностей, які у природному стані фланкують молекулу нуклеїнової кислоти в геномній ДНК клітини, з якої одержана нуклеїнова кислота. В різних варіантах здійснення білок дельта-ендотоксину, який практично не містить клітинний матеріал, включає в себе препарати білка, що мають менше приблизно 30 95, 20 95, 10 95 або

Б 95 (за сухою вагою) білка, який не є дельта-ендотоксином (у даному документі також позначений як "забруднюючий білок").

Нуклеотидні послідовності, що кодують білки за даним винаходом, включають в себе послідовність, викладену під 5ЕО ІЮО МО:1-4, та її варіанти, фрагменти і комплементарні ланцюги. Під "кюмплементарною" мають на увазі нуклеотидну послідовність, яка є достатньо комплементарною даній нуклеотидній послідовності, щоб вона могла гібридизуватися із заданою нуклеотидною послідовністю з утворенням стабільного дуплекса. Відповідні амінокислотні послідовності пестицидних білків, які кодуються даними нуклеотидними послідовностями, викладені під 5ЕО ІЮ МО:5-26.

Молекули нуклеїнових кислот, які є фрагментами цих нуклеотидних послідовностей, що кодують пестицидні білки, також охоплюються даним винаходом. Під виразом "фрагмент" мається на увазі частина нуклеотидної послідовності, що кодує пестицидний білок. Фрагмент нуклеотидної послідовності може кодувати біологічно активну частину пестицидного білка, або він може являти собою фрагмент, який може бути застосований як гібридизаційний зонд або

ПЛР-праймер із застосуванням способів, розкритих нижче. Залежно від передбаченого застосування молекули нуклеїнових кислот, які Є фрагментами нуклеотидної послідовності, що 60 кодує пестицидний білок, складаються із щонайменше приблизно 50, 100, 200, 300, 400, 500,

600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1350, 1400 суміжних нуклеотидів або аж до числа нуклеотидів, присутніх в нуклеотидній послідовності повної довжини, що кодує пестицидний білок, розкритий у даному документі. Під виразом "суміжні" нуклеотиди мають на увазі нуклеотидні залишки, які безпосередньо прилягають один до одного. Фрагменти нуклеотидних послідовностей за даним винаходом будуть кодувати фрагменти білка, які зберігають біологічну активність пестицидного білка і, отже, зберігають пестицидну активність. Таким чином, також охоплюються біологічно активні фрагменти поліпептидів, розкритих у даному документі. Під виразом "зберігає активність" мається на увазі, що фрагмент буде характеризуватися щонайменше приблизно 30 95, щонайменше приблизно 50 956, щонайменше приблизно 70 95, 80 У, 90 9», 95 95 або більшою пестицидною активністю пестицидного білка. У одному варіанті здійснення пестицидна активність являє собою активність, спрямовану на знищення твердокрилих комах. У іншому варіанті здійснення пестицидна активність являє собою активність, спрямовану на знищення лускокрилих комах. У іншому варіанті здійснення пестицидна активність являє собою активність, спрямовану на знищення нематод. У іншому варіанті здійснення пестицидна активність являє собою активність, спрямовану на знищення двокрилих комах. У іншому варіанті здійснення пестицидна активність являє собою активність, спрямовану на знищення напівтвердокрилих комах. Способи вимірювання пестицидної активності добре відомі в даній галузі техніки. (Див., наприклад, Сларіа апа І апа (1990) 9. Есоп.

Етотої. 83:2480-2485; Апагему5 єї а!. (1988) Віоспет. у). 252:199-206; Ма!топе еї а!. (1985) 9. ої

Есопотіс ЕпіотоЇоду 78:290-293; та патент США Мо 5743477), усі з яких включені в даний документ за допомогою посилання у всій своїй повноті.

Фрагмент нуклеотидної послідовності, що кодує пестицидний білок, який кодує біологічно активну частину білка за даним винаходом, буде кодувати щонайменше приблизно 15, 25, ЗО, 50, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1050 суміжних амінокислот або аж до загальної кількості амінокислот, присутніх у пестицидному білку повної довжини за даним винаходом. У деяких варіантах здійснення фрагмент являє собою фрагмент, одержаний внаслідок протеолітичного розщеплення.

Наприклад, фрагмент, що утворюється у результаті протеолітичного розщеплення, може мати

М-кінцеве або С-кінцеве відсікання довжиною щонайменше приблизно 30 амінокислот,

Зо щонайменше приблизно 40 амінокислот, щонайменше приблизно 50 амінокислот, щонайменше приблизно 100 амінокислот, приблизно 120, приблизно 130, приблизно 140, приблизно 150, приблизно 160, приблизно 170, приблизно 180, приблизно 190, приблизно 200, приблизно 210, приблизно 220, приблизно 230, приблизно 240, приблизно 250, приблизно 275, приблизно 300, приблизно 350, приблизно 400, приблизно 450, приблизно 500 або приблизно 550 амінокислот відносно 5ЕО ІО МО:2, 3, 4, 5, 6 або 7. У деяких варіантах здійснення фрагменти, які включено у даний документ, утворені у результаті видалення С-кінцевого домену кристалізації, наприклад, за допомогою протеолізу або за допомогою вставки стоп-кодону у кодувальну послідовність. У деяких варіантах здійснення фрагменти, які охоплені даним документом, утворені у результаті видалення М-кінцевого сигнального пептиду. М-кінцеві відсікання можуть додатково передбачати залишок метіоніну на М-кінці.

Переважні пестицидні білки за даним винаходом кодуються нуклеотидною послідовністю, яка є достатньо ідентичною нуклеотидній послідовності під 5ЕО 10 МО: 1-4, або пестицидні білки є достатньо ідентичними амінокислотній послідовності, викладеній під 5ЕО І МО: 5-26.

Під виразом "достатньо ідентичний" мається на увазі амінокислотна або нуклеотидна послідовність, яка характеризується щонайменше приблизно 6095 або 6595 ідентичністю послідовності, приблизно 70 95 або 75 95 ідентичністю послідовності, приблизно 80 95 або 85 95 ідентичністю послідовності, приблизно 90 9», 91 9, 92 95, 93 90, 94 Фо, 95 95, 96 95, 97 Фо, 98 9, 9995 або більшою ідентичністю послідовності порівняно з еталонною послідовністю із застосуванням однієї з програм вирівнювання, описаних у даному документі, із застосуванням стандартних параметрів. Фахівцю в даній галузі буде зрозуміло, що ці значення можна відповідним чином регулювати для визначення відповідної ідентичності білків, закодованих двома нуклеотидними послідовностями, з урахуванням виродженості кодонів, амінокислотної подібності, розташування рамки зчитування тощо.

Для визначення відсотка ідентичності двох амінокислотних послідовностей або двох послідовностей нуклеснових кислот 3 метою оптимального порівняння послідовності вирівнюють. Відсоток ідентичності між двома послідовностями являє собою функцію кількості ідентичних положень, що є загальними для послідовностей (тобто відсоток ідентичності - кількість ідентичних положень/загальна кількість положень (наприклад, положення, що перекриваються) х 100). У одному варіанті здійснення дві послідовності мають однакову бо довжину. У іншому варіанті здійснення відсоток ідентичності розраховують в межах усієї еталонної послідовності (тобто послідовності, розкритої у даному документі як будь-яка з БЕО

ІЮ МО:1-26). Відсоток ідентичності між двома послідовностями можна визначати із застосуванням методик, подібних до описаних нижче, з введенням гепів або без нього.

Зазвичай, під час розрахунку відсотка ідентичності враховуються точні співпадіння. Геп, тобто положення у вирівнюванні, де залишок присутній в одній послідовності, але відсутній в іншій, вважають положенням з неідентичними залишками.

Визначення відсотка ідентичності між двома послідовностями може бути досягнуто із застосуванням математичного алгоритму. Необмежувальним прикладом математичного алгоритму, що використовується для порівняння двох послідовностей, є алгоритм згідно І(Капіп апа Айвспиї! (1990) Ргос. Маї!. Асад. сі. ОБА 87: 2 264), модифікований, як у (Капіїп апа Айвсни! (1993) Ргос Маї). Асад. 5сі. ОБА 90:5873-5877|. Такий алгоритм включений в програми ІВ А5ТМ та ВІ А5ТХ з АїЇїбсниї еї а! (1990) 9. Мої. Віо!. 215:403). Нуклеотидні пошуки ВІ АТ можуть бути виконані за допомогою програми ВІ АТМ, бал - 100, довжина слова - 12, для одержання нуклеотидних послідовностей, що є гомологічними до пестицидоподібних молекул нуклеїнових кислот за даним винаходом. Білкові пошуки ВІ АТ можуть бути виконані за допомогою програми ВІ А5ТУ, бал - 50, довжина слова - 3, з одержанням амінокислотних послідовностей, що є гомологічними до молекул пестицидного білка за даним винаходом. Для одержання вирівнювань з гепами з метою порівняння може використовуватись програма Сарреа ВІ А5Т (в

ВІ АТ 2.0), як описано в |АйвепиЇ єї аї. (1997) Мисієїс Асіаз Ве. 25:3389|. Альтернативно, для виконання ітераційного пошуку, який виявляє віддалені взаємозв'язки між молекулами, може бути застосований РБІ-Віазі. Див. АйесНпш! еї аІ. (1997), вище. При використанні програм

ВІ АТ, Сарреа ВІ А5Т та РБІ-ВІ А5Т можуть бути застосовані параметри відповідних програм (наприклад, ВГАЄТХ та ВІ АБТМ) за замовчуванням. Вирівнювання також можна виконувати вручну шляхом огляду.

Іншим необмежувальним прикладом математичного алгоритму, що застосовується для порівняння послідовностей, є алгоритм СіивіаїМУ |Ніддіпзв сеї аї. (1994) Мисівїс Асіаз Вев. 22:4673- 4680). СіиетаМу порівнює послідовності, а також вирівнює всю амінокислотну послідовність або послідовність ДНК і, таким чином, може надавати дані про консервативність послідовності усієї амінокислотної послідовності. Алгоритм СіІивіаїМУ застосовується в декількох комерційно

Зо доступних пакетів програмного забезпечення аналізу ДНК/амінокислот, таких як АГІСМУХ, що є модулем комплекту програм Месіог МТІ (Іпийгодеп Согрогаїййоп, Карлсобад, Каліфорнія). Після вирівнювання амінокислотних послідовностей за допомогою СіивіаіМу можна оцінювати відсоток ідентичності амінокислотних послідовностей. Необмежувальним прикладом програмного забезпечення, застосовного для аналізу вирівнювання СіивіаїмуУ, є ОЕМЕРОС М. ЗЕМЕВОС тм (Кат! Міспоїаз) створює можливість оцінки подібності амінокислотної послідовності (або ДНК) та ідентичності між декількома білками. Іншим необмежувальним прикладом математичного алгоритму, що використовується для порівняння послідовностей, є алгоритм згідно з |Муеєг!5 апа

МіПег (1988) САВІО5 4211-17). Такий алгоритм включений в програму АГІСМ (версія 2.0), яка є частиною пакету програмного забезпечення 4ССї Муівсопвзіп Сієпеїййс5, версія 10 (доступна від

Ассеїгуз, Іпс., 9685 бстапіоп На., Сан-Дієго, Каліфорнія, США). При використанні програми

АПОМ для порівняння амінокислотних послідовностей можна застосовувати таблицю ваги заміни залишку РАМ 120, штраф за подовження гепу 12 та штраф за введення гепу 4.

Якщо не вказане інше, САР версії 10, яка застосовує алгоритм згідно з (Меедієтап апа

Муипзей (1970) У). Мої. Віої. 48 (3): 443-453), буде застосовуватись для визначення ідентичності або подібності послідовності із застосуванням наступних параметрів: 95 ідентичності та о подібності для нуклеотидної послідовності із застосуванням штрафу за введення гепу 50 і штрафу за подовження гепу 3, а також матриці замін пу/здарапа.стр; 95 ідентичності або 95 подібності амінокислотної послідовності із застосуванням штрафу за введення гепу 8 і штрафу за подовження гепу 2, а також матриці замін ВГ О5БИОМб62. Також можуть бути застосовані еквівалентні програми. Під виразом "еквівалентна програма" мається на увазі будь-яка програма порівняння послідовності, яка для будь-яких двох послідовностей, які розглядаються, створює вирівнювання, що характеризується ідентичними співпадіннями нуклеотидних залишків та ідентичним відсотком ідентичності послідовності порівняно з відповідним вирівнюванням, виконаним за допомогою САР версії 10.

Даний винахід також охоплює варіанти молекул нуклеїнових кислот. "Варіанти" нуклеотидних послідовностей, що кодують пестицидний білок, включають ті послідовності, що кодують пестицидні білки, розкриті у даному документі, але які відрізняються за консервативними замінами внаслідок виродженості генетичного коду, а також ті, які є достатньо ідентичними, як обговорюється вище. Алельні варіанти, що зустрічаються у природі, можна бо визначати із застосуванням добре відомих методик молекулярної біології, таких як полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) та методики гібридизації, як вказано нижче. Варіанти нуклеотидних послідовностей також включають одержані синтетичним шляхом нуклеотидні послідовності, які були створені, наприклад, із застосуванням сайт-спрямованого мутагенезу, але які все ще кодують пестицидні білки, розкриті в даному винаході, як обговорюється нижче. Варіанти білків, охоплених даним винаходом, є біологічно активними, тобто вони продовжують характеризуватися потрібною біологічною активністю нативного білка, тобто пестицидною активністю. Під виразом "зберігає активність" мається на увазі що варіант буде характеризуватися щонайменше приблизно 30 95, щонайменше приблизно 50 95, щонайменше приблизно 7095, щонайменше приблизно 8095 пестицидною активністю нативного білка.

Способи вимірювання пестицидної активності добре відомі в даній галузі техніки. (Див., наприклад, Сгаріа апа Гапд (1990) 9. Есоп. Епіотої. 83: 2480-2485; Апагемув єї аї. (1988)

Віоспет. 9. 252:199-206; Матопе еї аї. (1985) 9. ої Есопотіс Епіютоїіоду 78:290-293; та патент

США Мо 5743477|, усі з яких включені в даний документ за допомогою посилання у всій своїй повноті.

Крім того, фахівцеві в даній галузі буде зрозуміло, що зміни можна вводити шляхом здійснення мутацій у нуклеотидних послідовностях за даним винаходом, які, таким чином, призводять до змін у амінокислотній послідовності закодованих пестицидних білків без зміни біологічної активності білків. Таким чином, варіанти виділених молекул нуклеїнових кислот можна створювати шляхом введення однієї або декількох нуклеотидних замін, додавань або делецій у відповідну нуклеотидну послідовність, що розкрита у даному документі, таким чином, що одна або декілька амінокислотних замін, додавань або делецій вводяться у закодований білок. Мутації можна вводити за допомогою стандартних методик, таких як сайт-спрямований мутагенез та мутагенез, опосередкований ПЛР. Такі варіанти нуклеотидних послідовностей також охоплені даним винаходом.

Наприклад, консервативні амінокислотні заміни можна здійснювати за одним або декількома передбаченими несуттєвими амінокислотними залишками. Вираз "несуттєвий" амінокислотний залишок позначає залишок, який може бути змінений у послідовності пестицидного білка дикого типу без зміни біологічної активності, тоді як "суттєвий" амінокислотний залишок є необхідним для біологічної активності. Вираз "консервативна амінокислотна заміна" являє собою заміну, за якої амінокислотний залишок заміняється на амінокислотний залишок, який має подібний бічний ланцюг. Родини амінокислотних залишків, які мають подібні бічні ланцюги, були визначені в даній галузі техніки. Ці родини включають амінокислоти з основними бічними ланцюгами (наприклад, лізин, аргінін, гістидин), кислими бічними ланцюгами (наприклад, аспарагінова кислота, глутамінова кислота), незарядженими полярними бічними ланцюгами (наприклад, гліцин, аспарагін, глутамін, серин, треонін, тирозин, цистеїн), неполярними бічними ланцюгами (наприклад, аланін, валін, лейцин, ізолейцин, пролін, фенілаланін, метіонін, триптофан), бета- розгалуженими бічними ланцюгами (наприклад, треонін, валін, ізолейцин) та ароматичними бічними ланцюгами (наприклад, тирозин, фенілаланін, триптофан, гістидин).

Дельта-ендотоксини загалом мають п'ять консервативних доменів послідовностей та три консервативні структурні домени |див., наприклад, де Маада єї аї. (2001) Тгтепа5 Сепеїс5 17:193-199). Перший консервативний структурний домен складається із семи альфа-спіралей та бере участь у проникненні через мембрану та пороутворенні. Домен Ії складається з трьох складчастих бета-шарів, які упорядковані в структурі грецького ключа, а домен ЇЇЇ складається з двох антипаралельних складчастих бета-шарів у структурі типу "іеПу-гої!" (де Маада еї аї!., 2001, вище). Домени І та ІШ беруть участь у розпізнаванні та зв'язуванні рецепторів, а тому вважаються детермінантами специфічності токсину.

Амінокислотні заміни можна здійснювати у неконсервативних ділянках зі збереженням функції. Як правило, такі заміни не будуть здійснювати у консервативних амінокислотних залишках або амінокислотних залишках, розташованих у межах консервативного мотиву, де такі залишки є суттєвими для активності білка. Приклади залишків, які Є консервативними та можуть бути суттєвими для активності білка, включають, наприклад, залишки, які є ідентичними в усіх білків, що містяться у вирівнюванні подібних або споріднених токсинів з послідовностями за даним винаходом (наприклад, залишки, які є ідентичними у вирівнюванні гомологічних білків).

Приклади залишків, які є консервативними, але які можуть дозволяти консервативні амінокислотні заміни та все ще зберігати активність, включають, наприклад, залишки, які характеризуються лише консервативними замінами в усіх білках, що містяться у вирівнюванні подібних або споріднених токсинів з послідовностями за даним винаходом (наприклад, залишки, які характеризуються лише консервативними замінами в усіх білках, що включені у вирівнювання гомологічних білків). Однак, фахівцеві у даній галузі буде зрозуміло, що функціональні варіанти можуть мати незначні консервативні або неконсервативні зміни у консервативних залишках.

Альтернативно, варіанти нуклеотидних послідовностей можна одержати шляхом введення мутацій випадковим чином уздовж всієї або частини кодувальної послідовності, наприклад, шляхом насичувального мутагенезу, та одержаних мутантів можна піддавати скринінгу щодо здатності надавати пестицидну активність для визначення мутантів, які зберігають активність.

Після мутагенезу, закодований білок може експресуватися рекомбінантним шляхом та активність цього білка можна визначати із застосуванням стандартних методик аналізу.

Із застосуванням способів, таких як ПЛР, гібридизація тощо, можна визначити відповідні послідовності, що визначають пестицидну активність, при цьому такі послідовності характеризуються суттєвою ідентичністю послідовностям за даним винаходом. |(дДив., наприклад, ЗаторгооК апа Виззеї! (2001) МоїІесшаг Сіопіпд: А ІГарогаюгу Мапиаї. (Соїд Зргіпа

Нарог І арогаїогу Ргез5, Соїд Зрііпа Нагбог, МУ) апа Іппів, еї аї. (1990) РСВ Ргоюсоїв: А Сіціде

Меїпосаз апа Арріїісайопз (Асадетіс Ргевз5, МУ).

У способі гібридизації всю нуклеотидну послідовность, що визначає пестицидну активність, або її частину можна застосовувати для скринінгу кКДНК або геномних бібліотек. Способи конструювання таких кКДНК та геномних бібліотек, як правило, відомі в даній галузі техніки та розкриті у (ЗатьгооК апа Виззеї!Ї, 2001), вище. Так звані гібридизаційні зонди можуть являти собою фрагменти геномної ДНК, фрагменти кКДНК, фрагменти РНК або інші олігонуклеотиди, та їх можна мітити детектовною групою, такою як З2Р, або будь-яким іншим детектовним маркером, таким як інші радіоїзотопи, флуоресцентна сполука, фермент або кофактор ферменту. Зонди для гібридизації можна одержувати шляхом мічення синтетичних олігонуклеотидів, основаних на відомій нуклеотидній послідовності, що кодує пестицидний білок, розкритій у даному документі. Додатково можна застосовувати вироджені праймери, що розроблені на основі консервативних нуклеотидів або амінокислотних залишків у нуклеотидній послідовності або закодованій амінокислотній послідовності. Зазвичай, зонд містить ділянку нуклеотидної послідовності, яка гібридизується за жорстких умов з щонайменше приблизно 12, щонайменше приблизно 25, щонайменше приблизно 50, 75, 100, 125, 150, 175 або 200 послідовними нуклеотидами нуклеотидної послідовності, що кодує пестицидний білок за даним винаходом

Зо або його фрагмент або варіант. Способи одержання зондів для гібридизації загалом відомі з рівня техніки та розкриті в |(ЗатргооКк апа Риззеї!, 2001), вище у даному документі, включеному за допомогою посилання.

Наприклад, усю послідовність, що визначає пестицидну активність, розкриту у даному документі, або одну або декілька її частин, можна застосовувати як зонд, здатний до специфічної гібридизації з відповідними послідовностями, подібними до пестицидного білка, та з матричними РНК. Для досягнення специфічної гібридизації за різних умов такі зонди включають в себе послідовності, які є унікальними і становлять переважно щонайменше приблизно 10 нуклеотидів у довжину або щонайменше приблизно 20 нуклеотидів у довжину. Такі зонди можна застосовувати для ампліфікації відповідних послідовностей, що визначають пестицидну активність, з вибраного організму за допомогою ПЛР. Цю методику можна застосовувати для виділення додаткових кодуючих послідовностей з потрібного організму або як діагностичний аналіз для визначення наявності кодуючих послідовностей в організмі. Методики гібридизації включають в себе гібридизаційний скринінг висіяних ДНК-бібліотек (або бляшок, або колоній; див., наприклад, батргоокК єї а). (1989) МоіІеєсшаг Сіопіпд: А І арогаїогу Мапиаї! (2а єд., Соїй

Зріїпд Наотг І арогаюгу Ргезв, Соїа Зргіпуд Наїбог, Мем/ МогК)|.

Таким чином, даний винахід охоплює зонди для гібридизації, а також нуклеотидні послідовності, здатні до гібридизації з усією нуклеотидною послідовністю за даним винаходом або її частиною (наприклад, із щонайменше приблизно 300, щонайменше приблизно 400, щонайменше приблизно 500, 1000, 1200, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500 нуклеотидами або аж до нуклеотидної послідовності повної довжини, розкритої у даному документі). Гібридизацію таких послідовностей можна здійснювати за жорстких умов. Під виразом "жорсткі умови" або "жорсткі умови гібридизації" маються на увазі умови, за яких зонд буде гібридизуватися зі своєю цільовою послідовністю з помітно більш високим ступенем, ніж з іншими послідовностями (наприклад, щонайменше у 2 рази більше за фон). Жорсткі умови залежать від послідовності і будуть відрізнятися за різних обставин. Шляхом контролю жорсткості умов гібридизації та/або відмивання, можна виявляти цільові послідовності, які на 100 95 комплементарні до зонда (гомологічне зондування). Альтернативно, умови жорсткості можна регулювати для створення можливості утворення деяких неспідпадінь у послідовності, щоб виявляти більш низькі ступені подібності (гетерологічне зондування). Як правило, довжина зонда становить менше ніж бо приблизно 1000 нуклеотидів, переважно менше ніж 500 нуклеотидів.

Зазвичай, жорсткі умови будуть такими, за яких концентрація солі становить менше приблизно 1,5 М іонів Ма, зазвичай приблизно 0,01-1,0 М концентрацію іонів Ма (або інших солей) з рН від 7,0 до 8,3 та температурою щонайменше приблизно 30 "С для коротких зондів (наприклад, від 10 до 50 нуклеотидів) і щонайменше приблизно 60 С для довгих зондів (наприклад, більше 50 нуклеотидів). Жорсткі умови можуть бути також досягнуті за допомогою додавання дестабілізуючих засобів, таких як формамід. Ілюстративні умови низької жорсткості включають гібридизацію у буферному розчині, що містить 30-35 95 формаміду, 1 М Масі, 1 95

ЗО5 (додецилсульфат натрію) при 37 "С, та відмивання в 1Х - 2Х 5550 (20Х 550-3,0 М Масі/0,3

М тринатрійцитрат) при 50-557С. Ілюстративні умови помірної жорсткості включають гіоридизацію у розчині, що містить 40-45 95 формаміду, 1,0 М Масі, 195 505 при 37 "С, та відмивання в 0,5Х - 1Х 550 при 55-60 "С. Ілюстративні умови високої жорсткості включають гібридизацію у розчині, що містить 50 95 формаміду, 1 М Масі, 195 505 при 37 "С, та відмивання у 0,1Х 5502 при 60-65 "С. Необов'язково буфери для відмивання можуть містити від приблизно 0,1 95 до приблизно 1 95 505. Тривалість гібридизації, як правило, становить менше ніж приблизно 24 години, як правило, від приблизно 4 до приблизно 12 годин.

Специфічність, зазвичай, залежить від відмивання після гібридизації, при цьому критичними факторами є іонна сила та температура кінцевого розчину для відмивання. Для гібридів ДНК-

ДНК Тт можна приблизно вирахувати за допомогою рівняння згідно з МеїпКоїй та У/ані (1984)

Апаї. Віоспеті|. 138:267-284: Таи-81,5 7С-16,6(І04 М)--0,41(95 (0)-0,61(95 Топт)-500 (3; де М являє собою молярність одновалентних катіонів, 95 (30 являє собою відсоткову частку нуклеотидів гуанозину та цитозину в ДНК, 95 Тогпт являє собою відсоток вмісту формаміду в розчині для гібридизації, та Ї являє собою довжину гібрида у парах основ. Тя являє собою температуру (за певної іонної сили та рН), при якій 5095 комплементарної цільової послідовності гібридизується з відмінно співпадаючим зондом. Кожне зниження Тт на приблизно 1"С веде до 1 95 неспівпадіння; таким чином, Тт, умови гібридизації та/або відмивання можна регулювати для гібридизації з послідовностями з потрібною ідентичністю. Наприклад, якщо шукають послідовності з »90 95 ідентичністю, Тт може бути знижена на 10 "С. Як правило, жорсткі умови вибирають таким чином, щоб вони були приблизно на 5 "С нижчими за точку плавлення (Тт) для конкретної послідовності та комплементарної до неї послідовності за певної

Зо іонної сили та рН. Однак гібридизацію та/або відмивання у надзвичайно жорстких умовах можна застосовувати при температурі, що на 1, 2, З або 4 "С нижча за температуру точки плавлення (Тт); гібридизацію та/"або відмивання у помірно жорстких умовах можна застосовувати при температурі, що на б, 7, 8, 9 або 10"С нижча за температуру точки плавлення (Тт); гібридизацію та/або відмивання в умовах низької жорсткості можна застосовувати при температурі, що на 11, 12, 13, 14, 15 або 20 "С нижча за температуру точки плавлення (Тт). Із застосуванням рівняння, композицій для гібридизації та відмивання та потрібної Тт фахівцям у даній області буде зрозуміло, що варіації в умовах жорсткості гібридизації та/або відмивання описані за своєю суттю. Якщо потрібний ступінь неспівпадіння призводить до Тт, меншої за 45 "С (водний розчин) або 32 "С (розчин формаміду), переважним є збільшення концентрації

З5ОС, аби можна було застосовувати більш високі температури. Докладний посібник з гібридизації нуклеїнових кислот наведений у (|Тіівбзеп (1993) Іарогаїогу Тесппіде5 іп

Віоспетівігу апа Моїіесшіаг Віоіоду-Нубгіаігайномп м/йй Мисівіс Асій Ргобез, Рай І, СНарієї 2 (Еіземівг, Мем Могк); та А!иМзибеї еї а!., єв. (1995) Степі Ргоїосоїв іп Моїесшціаг Віоіоду, СНарієї 2 (Сгеєпе Рибіїзніпуд апа УМіеу-Іпіег5сіепсе, Мем/ Могк). Див. ЗзатбгооК єї аї. (1989) Моїесшаг

Фіопіпд: А І арогаїогу Мапиаї (24 єд., Соїд 5ргіпд Нагброг І абогаїюгу Ргев55, Соїд бргіпу Нагбог,

Мем Мо).

Виділені білки та їх варіанти й фрагменти

Пестицидні білки також охоплені в межах даного винаходу. Під виразом "пестицидний білок" мають на увазі білок, що має амінокислотну послідовність, викладену під 5ЕСО 10 МО:5-26.

Також передбачені фрагменти, біологічно активні частини та їх варіанти, які можуть застосовуватися при здійсненні способів за даним винаходом на практиці. Вираз "виділений білок" або "рекомбінантний білок" застосовується для позначення білка, який більше не перебуває у своєму природному оточенні, наприклад, знаходиться в умовах іп мїто або в рекомбінантній бактеріальній або клітині рослини-хазяїні.

Вираз "фрагменти" або "біологічно активні частини" включає в себе фрагменти поліпептиду, що містять амінокислотні послідовності, які є достатньо ідентичними амінокислотній послідовності, викладеній під 5ЕО ІО МО: 5-26, та які проявляють пестицидну активність.

Біологічно активна частина пестицидного білка може являти собою поліпептид, довжина якого становить, наприклад, 10, 25, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 60 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1050, 1100, 1150, 1200, 1250, 1300, 1350 або більше амінокислот.

Такі біологічно активні частини можна одержувати за допомогою методик рекомбінації та оцінювати щодо пестицидної активності. Способи вимірювання пестицидної активності добре відомі в даній галузі техніки. (Див., наприклад, Сгаріа апа ІГапд (1990) 93. Есоп. Епіюотої. 83:2480- 2485; Апагему5 єї аі. (1988) Віоспет. 9. 252:199-206; Магтопе еї аїЇ. (1985) 9. ої Есопотіс

Етотоїіоду 78:290-293; та патент США Мо 5743477), усі з яких включені в даний документ за допомогою посилання у всій своїй повноті. Як застосовується у даному документі, фрагмент містить щонайменше 8 суміжних амінокислот з 5ЕО І МО:5-26. Проте винахід охоплює інші фрагменти, такі як будь-який фрагмент у білку, довжина якого становить більше приблизно 10, 20, ЗО, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1050, 1100, 1150, 1200, 1250, 1300, 1350 або більше амінокислот.

Під виразом "варіанти" мають на увазі білки або поліпептиди, що мають амінокислотну послідовність, яка щонайменше на приблизно 60 95, 65 96, приблизно 70 95, 75 95, приблизно 80 9, 85 95, приблизно 90 9, 91 Фо, 92 9», 93 9, 94 9», 95 90, 96 9», 97 9», 98 95 або 99 95 ідентична амінокислотній послідовності під 5ЕСО І МО:5-26. Варіанти також включають поліпептиди, закодовані молекулою нуклеїнової кислоти, яка гібридизується з молекулою нуклеїнової кислоти під 5ЕО ІО МО: 1-4 або комплементарною до неї послідовністю за жорстких умов. Варіанти включають поліпептиди, які відрізняються за амінокислотною послідовністю внаслідок мутагенезу. Варіанти білків, охоплених даним винаходом, є біологічно активними, тобто вони продовжують характеризуватися потрібною біологічною активністю нативного білка, тобто зберігають пестицидну активність. У деяких варіантах здійснення варіанти мають поліпшену активність відносно нативного білка. Способи вимірювання пестицидної активності добре відомі з рівня техніки. |Див., наприклад, Сгаріа апа Гапуд (1990) У. Есоп. Епіотої. 83:2480-2485;

Апагем/5 єї а/. (1988) Віоспет. 9. 252:199-206; Ма!топе еї а!ї. (1985) 9. ої Есопотіс Епюто!іоду 78:290-293; та патент США Мо 5743477), усі з яких включені в даний документ за допомогою посилання у всій своїй повноті.

Бактеріальні гени, такі як гени Ахіті за даним винаходом, доволі часто мають декілька метіонінових кодонів ініціації в безпосередній близькості від старт-кодону відкритої рамки зчитування. Часто ініціація трансляції з одного або декількох цих старт-кодонів веде до утворення функціонального білка. Ці старт-кодони можуть включати АТ(О-кодони. Однак

Ко) бактерії, такі як Васійив5 5р., також розпізнають кодон Тс як старт-кодон, а білки, трансляція яких ініціюється з СТ(-кодонів, містять метіонін на місці першої амінокислоти. У рідкісних випадках, трансляція в бактеріальних системах може ініціюватися з ТТО-кодону, хоча в цьому випадку ТТО кодує метіонін. Крім того, не часто визначається заздалегідь, який з цих кодонів застосовується природним чином у бактерії. Таким чином, слід розуміти, що застосування одного з альтернативних кодонів метіоніну може також призвести до одержання пестицидних білків. Ці пестицидні білки охоплені даним винаходом, і їх можна застосовувати в способах за даним винаходом. Буде зрозуміло, що при експресії в рослинах необхідно змінювати альтернативний старт-кодон на АТО для правильної трансляції.

У різних варіантах здійснення даного винаходу пестицидні білки включають в себе амінокислотні послідовності, виведені з нуклеотидних послідовностей повної довжини, розкритих у даному документі, та амінокислотні послідовності, які є коротшими за послідовності повної довжини внаслідок використання альтернативного сайту ініціації транскрипції, що розташований нижче за ходом транскрипції. Таким чином, нуклеотидна послідовність за даним винаходом та/або вектори, клітини-хазяїни та рослини, що містять нуклеотидну послідовність за даним винаходом (і способи одержання та застосування нуклеотидної послідовності за даним винаходом), можуть містити нуклеотидну послідовність, що кодує амінокислотну послідовність, яка відповідає БЕО ІЮ МО:6, 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14, 16, 17, 18, 19, 21,22, 23, 24,25126.

Також охоплюються антитіла до поліпептидів за даним винаходом або до їх варіантів або фрагментів. Способи одержання антитіл добре відомі з рівня техніки Ідив., наприклад, Нагідиу апа Гапе (1988) Апііродієв: А І арогаюгу Мапиаї, Со бргіпд Нагбог Іарогаїогу, Соїй 5ргіпд

Наїбог, МУ; патент США Мо 41962651.

Таким чином, один аспект даного винаходу стосується антитіл, молекул, що зв'язують одноланцюговий антиген, або інших білків, які специфічно зв'язуються з однією або декількома білюювими або пепгидними молекулами за даним винаходом та їх гомологами, молекулами злиття або фрагментами. В особливо переважному варіанті здійснення антитіло специфічно зв'язується з білком, який має амінокислотну послідовність, викладену під 5ЕО 1Ю МО:5-26, або з його фрагментом. У іншому варіанті здійснення антитіло специфічно зв'язується із білком злиття, що містить амінокислотну послідовність, вибрану з амінокислотної послідовності, викладеної під БЕО ІЮ МО:5-26, або його фрагментом.

Антитіла за даним винаходом можна застосовувати для кількісного або якісного виявлення білкових або пептидних молекул за даним винаходом або для виявлення посттрансляційних модифікацій білків. Як застосовується у даному документі, кажуть, що антитіло або пептид "специфічно зв'язуються" з білковою або пептидною молекулою за даним винаходом, якщо таке зв'язування конкурентно не інгібується внаслідок наявності неспоріднених молекул.

Антитіла за даним винаходом можуть входити до складу набору, застосовного для детектування білкових або пептидних молекул за даним винаходом. Даний винахід додатково охоплює спосіб детектування білкової або пептидної молекули за даним винаходом (зокрема білка, який кодується амінокислотною послідовністю, викладеною в 5ЕСО ІЮ МО:5-26, у тому числі його варіантів або фрагментів, що здатні специфічно зв'язуватися з антитілом за даним винаходом), який передбачає приведення зразка у контакт з антитілом за даним винаходом і детектування того, чи містить зразок білюову або пептгидну молекулу за даним винаходом.

Способи застосування антитіл для детектування білка або пептида, які становлять інтерес, відомі з рівня техніки.

Змінені або покращені варіанти

Необхідно відзначити, що послідовності ДНК пестицидного білка можуть бути змінені з використанням різних способів, а також, що ці зміни можуть призвести до утворення послідовностей ДНК, які кодують білки з амінокислотними послідовностями, що відрізняються від тих, які кодують пестицидні білюи за даним винаходом. Даний білок може бути змінений різними способами, у тому числі за допомогою амінокислотних замін, делецій, відсікань та вставок однієї або декількох амінокислотних послідовностей під 5ЕО ІЮ МО:5-26, включаючи до приблизно 2, приблизно 3, приблизно 4, приблизно 5, приблизно 6, приблизно 7, приблизно 8, приблизно 9, приблизно 10, приблизно 15, приблизно 20, приблизно 25, приблизно ЗО, приблизно 35, приблизно 40, приблизно 45, приблизно 50, приблизно 55, приблизно 60, приблизно 65, приблизно 70, приблизно 75, приблизно 80, приблизно 85, приблизно 90, приблизно 100, приблизно 105, приблизно 110, приблизно 115, приблизно 120, приблизно 125, приблизно 130, приблизно 135, приблизно 140, приблизно 145, приблизно 150, приблизно 155 або більшої кількості амінокислотних замін, делецій або вставок. Способи проведення таких маніпуляцій загалом відомі з рівня техніки. Наприклад, варіанти амінокислотної послідовності

Зо пестицидного білка можуть бути одержані шляхом здійснення мутацій в ДНК. Це може також бути досягнуто із застосуванням одного з декількох різновидів мутагенезу та/або шляхом спрямованої еволюції. У деяких аспектах зміни, що кодуються амінокислотними послідовностями, не будуть суттєво впливати на функцію білка. Такі варіанти будують мати необхідну пестицидну активність. Проте зрозуміло, що здатність пестицидного білка забезпечувати пестицидну активність може бути покращена шляхом застосування таких методик щодо композицій за даним винаходом. Наприклад, можна експресувати пестицидний білок у клітинах-хазяїнах, які проявляють високі рівні помилкового включення основ при реплікації ДНК, таких як ХІ-1 Вей (Зігаїадепе, Ла-Холла, Каліфорнія). Після розмноження в таких штамах можна виділити ДНК (наприклад, шляхом одержання плазмідної ДНК або шляхом ампліфікування за допомогою ПЛР та клонування отриманого у результаті ПЛР;-фрагмента у вектор), провести культивування пестицидного білка з мутаціями у немутагенному штамі та ідентифікувати мутантні гени з пестицидною активністю, наприклад, шляхом проведення аналізу для дослідження пестицидної активності. Як правило, білок змішують і застосовують в аналізах із годуванням. |Див., наприклад Ма!топе есеї а!. (1985) 9. ої Есопотіс Епіютоїіоду 78:290- 293). Такі аналізи можуть включати приведення рослини у контакт з одним або декількома шкідниками та визначення здатності рослини до виживання та/або здатності викликати загибель шкідників. Приклади мутацій, які призводять до підвищення токсичності, розглянуто в (Зсппері еїа!. (1998) Місгобріо!. Мої. Віо!. Нем. 62:775-8061.

Як альтернатива, зміни можна вносити у послідовності багатьох білків на аміно-або карбокси-кінцях, не справляючи при цьому істотного впливу на активність. Вони можуть включати вставки, делеції або зміни, введені із застосуванням сучасних способів молекулярної біології таких як ПЛР, у тому числі ПЛР-ампліфікація, які змінюють або подовжують послідовність, що кодує білок, за рахунок вставок послідовностей, що кодують амінокислоти, в олігонуклеотиди, використовувані в ПЛР-ампліфікації. Як альтернатива, додані послідовності білків можуть включати цілі послідовності, що кодують білок, такі як ті, що зазвичай застосовуються у даній галузі техніки для одержання злиття білків. Такі білки злиття часто використовують для (1) підвищення експресії білка, що представляє інтерес, (2) введення домену зв'язування, ферментативної активності або епітопу для полегшення або очищення білка, детектування білка, або для інших експериментальних застосувань, відомих у даній галузі бо техніки, (3) спрямовування секреції або трансляції білка в субклітинну органелу, таку як периплазматичний простір грамнегативних бактерій або ендоплазматичний ретикулум еукаріотичних клітин, при цьому останнє часто призводить до глікозилювання білка.

Варіанти нуклеотидних та амінокислотних послідовностей за даним винаходом також охоплюють послідовності, одержані із застосуванням процедур мутагенезу та рекомбінації, таких як перестановка в ДНК. При виконанні такої процедури можуть використовуватися одна або декілька різних ділянок, що кодують пестицидні білки, для створення нового пестицидного білка, що має необхідні властивості. Таким чином, бібліотеки рекомбінантних полінуклеотидів створюють з популяції полінуклеотидів зі спорідненими послідовностями, які містять ділянки послідовності, які характеризуються суттєвою ідентичністю та можуть гомологічно рекомбінуватися іп мйго або іп мімо. Наприклад, при застосуванні даного підходу мотиви послідовностей, що кодують домен, який становить інтерес, можуть бути піддані перестановці між пестицидним геном за даним винаходом та іншими відомими пестицидними генами для одержання нового гена, який кодує білок, що представляє інтерес, з покращеною властивістю, як, наприклад, з підвищеною інсектицидною активністю. Стратегії такої перестановки в ДНК відомі у даній галузі техніки. |Див., наприклад, біеттег (1994) Рос. Май. Асад. осі. ОБА 91:10747-10751; Зіеттег (1994) Маїште 370:389-391; Статеті єї а!. (1997) Маїшге Віоїтесп. 15:436- 438; Мооге еї аї. (1997) 9. Мої. Вісі. 272:336-347; 7Напд еї аї. (1997) Ргос. Маї). Асай. 5сі. ОБА 94:4504-4509; Статетгті єї а!. (1998) Маїшцге 391:288-291; та патенти США МоМо 5605793 і 58374581.

Переміщення або перестановка доменів є ще одним механізмом створення змінених пестицидних білків. Домени можна переміщати між пестицидними білками, що призводить до утворення гібридних або химерних токсинів з покращеними пестицидною активністю або спектром мішеней. Способи створення рекомбінантних білків та їх дослідження щодо пестицидної активності добре відомі з рівня техніки (див., наприклад, Маітом еї аї. (2001) Аррі.

Епмігоп. Містобріо!. 67:5328-5330; де Маада еї аї. (1996) Аррі. Епмігоп. Містобріо!. 62:1537-1543; Се еї а. (1991) 3. Віої. Спнет. 266:17954-17958; 5сппері вї а. (1990,) 9. Вісі. Снет. 265:20923-20930;

Вапао єї аІ. 91999) Аррі. Епмігоп. Містобіо!. 65:2918-2925).

Вектори.

Послідовність, що визначає пестицидну активність, за даним винаходом може бути передбачена в касеті експресії для експресії у рослині, що представляє інтерес. Під "рослинною

Зо касетою експресії" мають на увазі ДНК-конструкцію, яка здатна призводити до експресії білка з відкритої рамки зчитування у клітині рослини. Зазвичай ці конструкції містять промотор та кодувальну послідовність. Часто такі конструкції також будуть містити 3'-нетрансльовану ділянку. Такі конструкції можуть містити "сигнальну послідовність" або "лідерну послідовність" для полегшення котрансляційного або посттрансляційного транспорту пептиду до певних внутрішньоклітинних структур, таких як хлоропласт (або інша пластида), ендоплазматичний ретикулум або комплекс Гольджі.

Під "сигнальною послідовністю" мають на увазі послідовність, для якої відомо або передбачається, що вона призводить до котрансляційного або посттрансляційного транспорту пептидів через клітинну мембрану. У еукаріотів це зазвичай передбачає секрецію у апарат

Гольджі з одержанням деякого ступеня глікозилювання. Інсектицидні токсини бактерій часто синтезуються як протоксини, які протеолітично активуються у кишці цільового шкідника |(СНапа (1987) Меїйод5 Епгутої. 153:507-516|. У деяких варіантах здійснення за даним винаходом сигнальна послідовність локалізована у нативній послідовності, або її можна одержати із послідовності за даним винаходом. Під "лідерною послідовністю" мають на увазі будь-яку послідовність, яка під час трансляції призводить до утворення амінокислотної послідовності, достатньої для запуску котрансляційного транспорту пептидного ланцюга до субклітинної органели. Таким чином, лідерні послідовності містять у своєму складі лідерні послідовності, що спрямовують транспорт та/або глікозилювання за рахунок надходження в ендоплазматичний ретикулум, надходження у вакуолі, пластиди, у тому числі хлоропласти, мітохондрії тощо.

Під "вектором трансформації рослини" мають на увазі молекулу ДНК, яка необхідна для ефективної трансформації клітини рослини. Така молекула може містити одну або декілька рослинних касет експресії та може бути організованою у більше ніж одну "векторну" молекулу

ДНК. Наприклад, бінарні вектори являють собою вектори трансформації рослин, в яких використовують два несуміжних ДНК-вектори для кодування усіх необхідних функцій, що діють у цис- та трансо-положеннях, для трансформації клітин рослин |НеПеп5 апа Миїйпеаийх (2000)

Тгєепаз іп Ріапі бсієпсе 5:446-451). Термін "вектор" стосується конструкції нуклеїнової кислоти, розробленої для перенесення між різними клітинами-хазяїнами. Термін "вектор експресії" стосується вектора, який має здатність вбудовувати, інтегрувати та експресувати гетерологічні послідовності або фрагменти ДНК у чужорідній клітині. Касета буде мати у своєму складі 5'- бо та/або 3'-регуляторні послідовності, функціонально зв'язані з послідовністю за даним винаходом. Під "функціонально зв'язаним" мають на увазі функціональний зв'язок між послідовністю промотору та другою послідовністю, де послідовність промотору ініціює та опосередковує транскрипцію послідовності ДНК, що відповідає другій послідовності. Як правило, "функціонально зв'язаний" означає, що зв'язані послідовності нуклеїнових кислот є суміжними, і, якщо необхідно об'єднати дві ділянки, що кодують білок, вони є суміжними та перебувають в одній і тій самій рамці зчитування. Касета може додатково містити щонайменше один додатковий ген, що підлягає котрансформації у організм. Як альтернатива, додатковий ген (додаткові гени) забезпечують за допомогою декількох касет експресії.

У різних варіантах здійснення нуклеотидна послідовність за даним винаходом є функціонально зв'язаною з промотором, наприклад, рослинним промотором. "Промотором" називається послідовність нуклеїнової кислоти, функція якої полягає у керуванні транскрипцією кодувальної послідовності, розташованої нижче за ходом транскрипції. Промотор разом з іншими транскрипційними та трансляційними регуляторними послідовностями нуклеїнових кислот (які також називаються "контрольними послідовностями") є необхідними для експресії послідовності ДНК, що становить інтерес.

Таку касету експресії забезпечують численними ділянками рестрикції для вставки послідовності, що визначає пестицидну активність, яка має перебувати під транскрипційним контролем регуляторних ділянок.

Касета експресії буде мати у своєму складі, у 5'-3--напрямку транскрипції, ділянку ініціації транскрипції і трансляції (тобто промотор), послідовність ДНК за даним винаходом і ділянку термінації трансляції і транскрипції (тобто ділянку терминації), що функціонують у рослинах.

Промотор може бути нативним або аналогічним або може бути чужорідним або гетерологічним щодо рослини-хазяїна та/або щодо послідовності ДНК за даним винаходом. Крім того, промотор може являти собою природну послідовність або, як альтернатива, синтетичну послідовність.

Якщо промотор є "нативним" або "гомологічним" щодо рослини-хазяїна, то мають на увазі, що промотор міститься у нативній рослині, в яку цей промотор вводять. Якщо промотор є "чужорідним" або "гетерологічним" щодо послідовності ДНК за даним винаходом, то мають на увазі, що промотор не є нативним або таким, що зустрічається в природі, для функціонально зв'язаної послідовності ДНК за даним винаходом.

Зо Ділянка термінації може бути нативною щодо ділянки ініціації транскрипції, може бути нативною щодо функціонально зв'язаної послідовності ДНК, що представляє інтерес, може бути нативною щодо рослини-хазяїна або може бути одержана з іншого джерела (тобто, бути чужорідною або гетерологічною щодо промотору, послідовності ДНК, що представляє інтерес, рослини-хазяїна або будь-якої їх комбінації). Придатні ділянки термінації можуть бути одержані з Ті-плазміди А. Штеїгасіеп5, такі як ділянки термінації октопінсинтази та нопалінсинтази. |Див. також Спцеппеац еї аї. (1991) Мої. Сеп. Сепеї. 262:141-144; Ргоцагоої (1991) Сеї! 64:671-674; зЗапіасоп еї аї!. (1991) Сепе5 Ювєум. 5:141-149; Модеп вї а). (1990) Ріапі Сеї!І 2:1261-1272; Мипгоє еї аІ. (1990) Сепе 91:151-158; ВаїЇІаз єї аї. (1989) Мисівіс Асідє Ве. 17:7891-7903; та довні еї аї. (1987) Мисієїс Асіа Нев. 15:9627-9639)|.

У разі необхідності, ген (гени) можна оптимізувати для підвищеної експресії в трансформованій клітині-хазяїні. Таким чином, гени можуть бути синтезовані з використанням переважних для клітини-хазяїна кодонів для покращення експресії або можуть бути синтезовані з використанням кодонів з частотою використання кодонів, переважною для хазяїна. Як правило, вміст (30 у гені буде збільшено. |Див., наприклад, СатрреїЇ апа Сюомлі (1990) Ріапі

РНузіоІ. 92: 1-11| для обговорення застосування кодонів, переважних для хазяїна. З рівня техніки доступні способи синтезу генів, переважних для рослин. |Див., наприклад, патенти США

МоМо 5380831 та 5436391, публікацію заявки на патент США Мо 20090137409 та Митау 6ї аї. (1989) Мисієїс Асіаз Нев. 17: 477-498), включені в даний документ за допомогою посилання.

У одному варіанті здійснення пестицидний білок спрямовується у хлоропласт для експресії.

Таким чином, якщо пестицидний білок не вводиться безпосередньо в хлоропласт, касета експресії буде додатково містити нуклеїнову кислоту, що кодує транзитний пептид для спрямовуваня пестицидного білка до хлоропластів. Такі транзитні пептиди відомі у даній галузі техніки.(Див., наприклад, Моп Неї|пе еї аї. (1991) Ріапі Мої. Вісі. Вер. 9:104-126; СіагК евї а!. (1989) у. Вісі. Спет. 264:17544-17550; ОеПа-Сіорра евї аї. (1987) Ріапі РНузіої. 84:965-968; Вотег вї аї. (1993) Віоспет. Віорпуз. Ве5. боттип. 196:1414-1421; та 5Нан еї аї. (1986) Зсієпсе 233:478- 4811.

Ген, що визначає пестицидну активність, який підлягає спрямовуванню у хлоропласт, може бути оптимізований для експресії у хлоропласті з урахуванням відмінностей між ядром рослини і даною органелою при використанні кодону. Таким чином, нуклеїнові кислоти, що становлять інтерес, можна синтезувати з використанням кодонів, переважних для хлоропластів. |Див., наприклад, патент США Ме 5380831|, який включено у даний документ за допомогою посилання.

Трансформація рослини

Способи за даним винаходом включають введення нуклеотидної конструкції в рослину. Під "введенням" мають на увазі надання рослині нуклеотидної конструкції таким чином, щоб конструкція одержала доступ до внутрішнього простору клітини рослини. Способи за даним винаходом не потребують використання конкретного способу введення нуклеотидних конструкцій у використовувану рослину, лише тільки, щоб нуклеотидна конструкція одержала доступ до внутрішнього простору щонайменше однієї клітини рослини. Способи введення нуклеотидних конструкцій в рослини є відомими в даній галузі техніки, в тому числі без обмеження способи стабільної трансформації, способи транзієнтної трансформації і способи, опосередкованої вірусом.

Під "рослиною" мають на увазі цілі рослини, органи рослини (наприклад, листки, стебла, корені тощо), насіння, клітини рослин, паростки, зародки та потомків цих рослин. Клітини рослин можуть бути диференційованими або недиференційованими (наприклад: калюс, суспензійна культура клітин, протопласти, клітини листя, клітини кореня, клітини флоеми, пилок). "Трансгенні рослини", або "трансформовані рослини", або "стабільно трансформовані" рослини, або клітини, або тканини відносяться до рослин, які мають введені або інтегровані в клітину рослини екзогенні нуклеотидні послідовності або фрагменти ДНК. Дані послідовності нуклеїнової кислоти мають у своєму складі такі, які є екзогенними або не присутні у нетрансформованій клітині рослини, а також такі, які можуть бути ендогенними або присутніми у нетрансформованій клітині рослини. "Гетерологічний" загалом відноситься до послідовностей нуклеїнової кислоти, які не є ендогенними щодо клітини або частини нативного геному, у якому вони присутні, та які були внесені в клітину шляхом зараження, трансфекції, мікроін'єкції, електропорації, бомбардування мікрочастинками тощо.

Трансгенні рослини за даним винаходом експресують одну або декілька нових послідовностей токсину, розкритих у даному документі. У різних варіантах здійснення трансгенна рослина, крім того, містить один або декілька додаткових генів, що забезпечують стійкість до комах (наприклад, Сгу!, такий як представники родин СгутА, Сту 18, Сту1С, Стуї1о,

СтуТЕ та СтутЕ; Сту2, такий як представники родини СтугА; Сту9, такий як представники родин

СтузЗА, Сту9В, Сту9С, Сту90, Сту9Е та Сту9Е тощо). Фахівцеві у даній галузі буде зрозуміло, що трансгенна рослина може містити будь-який ген, що забезпечує агрономічну ознаку, яка становить інтерес.

Трансформації клітин рослин можна досягати за допомогою однієї з декількох методик, відомих з рівня техніки. Ген, що визначає пестицидну активність, за даним винаходом можна модифікувати для одержання або посилення експресії в клітинах рослин. Як правило, конструкція, яка експресує такий білок, буде містити промотор для керування транскрипцією гена, а також 3'-сетрансльовану ділянку для створення можливості термінації транскрипції та поліаденілювання. Структура таких конструкцій добре відома з рівня техніки. У деяких випадках доцільним може бути конструювання гена таким чином, щоб одержаний у результаті пептид секретувався або іншим чином спрямовувався у клітину рослини. Наприклад, ген може бути сконструйований таким чином, щоб він містив сигнальний пептид для полегшення переносу пептиду в ендоплазматичний ретикулум. Також переважним може бути конструювання касети експресії, що містить інтрон, таким чином, що для експресії потрібен процесинг мРНК із видаленням інтрона.

Як правило, ця "рослинна касета експресії" буде введена до "вектора трансформації рослини". Цей вектор трансформації рослини може складатися з одного або декількох векторів

ДНК, необхідних для досягнення трансформації рослини. Наприклад, використання векторів трансформації рослини, які складаються з більш ніж одного суміжного сегмента ДНК, є звичайною практикою в даній галузі. В даній галузі ці вектори часто називають "бінарними векторами". Бінарні вектори, як і вектори з хелперними плазмідами, найчастіше використовуються для опосередкованої Адгобрасієгшт трансформації, де розмір і складність сегментів ДНК, необхідних для досягнення ефективної трансформації, є досить великими та доцільним є розділення функції за окремими молекулами ДНК. Бінарні вектори, як правило, містять плазмідний вектор, що містить послідовності, які діють у цис-положенні, які є необхідними для переносу Т-ДНК (такі як розташовані на лівій межі та на правій межі), селективний маркер, який сконструйований таким чином, щоб бути здатним до експресії у клітині рослини, та "ген, що становить інтерес" (ген, сконструйований таким чином, щоб бути здатним до експресії у клітині рослини, для якої потрібне створення трансгенних рослин). Також бо у даному плазмідному векторі присутні послідовності, які необхідні для реплікації бактерій.

Послідовності, що активні у цис-положенні, організовані таким чином, щоб забезпечувати можливість ефективного переносу у клітини рослин та експресії в них. Наприклад, ген селективного маркера та ген, що визначає пестицидну активність, локалізовані між лівою та правою межами. Часто другий плазмідний вектор містить фактори, що активні у транс- положенні, які опосередковують перенесення Т-ДНК з Адгобасієгішт у клітини рослин. Ця плазміда часто містить елементи вірулентності (гени Міг), які забезпечують можливість інфікування Адгобасієтгішт клітин рослин та перенесення ДНК шляхом розщеплення граничних послідовностей та мії--опосредованого переносу ДНК, які відомі у даній галузі техніки НеПепв5 апа Мийпеаих (2000) Ттепав іп Ріапі Зсівєпсе 5:446-451). Кілька типів штамів Адгобасієгійт (наприклад, І ВА4404, (3М3101, ЕНАТОЇ, ЕНАТО5 тощо) можуть бути використані для трансформації рослин. Другий плазмідний вектор не є необхідним для трансформації рослин із застосуванням інших способів, таких як бомбардування мікрочастинками, мікроїін'єкція, електропорація, трансфекція за допомогою поліетиленгліколю тощо.

У цілому, способи трансформації рослин передбачають перенесення гетерологичної ДНК в цільові клітини рослин (наприклад, незрілі або зрілі зародки, суспензійні культури, недиференційований калюс, протопласти тощо) з подальшим застосуванням максимального порогового рівня відповідного добору (залежно від гена селектовного маркера) для виділення трансформованих клітин рослин з групи нетрансформованої клітинної маси. Як правило, експлантатів переносять у свіжу порцію такого самого середовища та культивують за стандартних умов. Згодом, після поміщення на середовище для регенерації, доповнене максимальним пороговим рівнем засобу для відбору, трансформовані клітини диференціюються в пагони. Потім пагони переносять на селективне середовище вкорінення для утворення пагона з коренями або саджанця. Потім трансгенний саджанець виростає у зрілу рослину та продукує схоже насіння Інаприклад, Нівєї єї аї. (1994) Те Ріапі УуЧоштаї 6:271-282;

Ібпіда еї а. (1996) Маїшге ВіоїесппоЇоду 14:745-750|. Як правило, експлантатів переносять на свіжу порцію такого самого середовища та культивують за стандартних умов. Загальний опис методик та способів одержання трансгенних рослин знаходиться в |Аугез апа Рагк (1994) Стйіса!

Веміємув іп Ріапі Зсівєпсе 13:219-239, та Воттіпепі апа дашНаг (1997) Мауаіса 42:107-120). Через те, що трансформований матеріал містить багато клітин, як трансформовані, так і

Зо нетрансформовані клітини присутні в будь-якій частці підданого обробці цільового калюсу, або тканини, або групи клітин. Внаслідок можливості забезпечення загибелі нетрансформованих клітин та проліферації трансформованих клітин одержують трансформовані культури рослин.

Часто можливість видалення нетрансформованих клітин представляє собою обмеження для швидкого відновлення трансформованих клітин рослин та успішного одержання трансгенних рослин.

Протоколи трансформації, а також протоколи для введення нуклеотидних послідовностей у рослини можуть змінюватися залежно від типу рослини або клітини рослини, тобто однодольних або дводольних рослин, на які спрямована трансформація. Створення трансгенних рослин можна виконувати за допомогою одного з декількох способів, у тому числі без обмеження мікроїін'єкції електропорації прямого перенесення генів, введення гетерологичної ДНК в клітини рослин за допомогою Адгобасієгішт (трансформація, опосередкована Аагорасієтійт), бомбардування клітин рослин гетерологічною чужорідною ДНК, що приєднана до частинок, балістичного прискорення частинок, трансформації із застосуванням аерозольного пучкового інжектора (опублікована заявка на патент США Мо 20010026941; патент США Мо 4945050; публікація міжнародної заявки на патент

Мо М/О 91/00915; опублікована заявка на патент США Мо 20020150661, І ес1-трансформації, а також різних інших способів прямого перенесення ДНК без застосування частинок.

Способи трансформації хлоропластів добре відомі з рівня техніки. (Див., наприклад, 5маб єї а!. (1990) Ргос. Маїй!. Асад. бсі. ОБА 87:8526-8530; 5маб апа Маїїда (1993) Ргос. Маї!. Асад. зсі.

БА 90:913-917; 5маб апа Маїїда (1993) ЕМВО 3. 12:601-606)|. Спосіб залежить від доставки

ДНК, що містить селектовний маркер, з використанням генної гармати та спрямування ДНК в геном пластиди шляхом гомологічної рекомбінації. Крім того, трансформації пластиди можна досягати шляхом трансактивації мовчазного трансгена, що міститься у пластиді, завдяки тканино-переважній експресії РНК-полімерази, яка кодується ядерною ДНК та спрямовується до пластиди. Про таку систему повідомляли |ІМеВгіде єї аї. (1994) Ргос. Май. Асад. осі. ОСОБА 91:7301-73051|.

Після інтеграції гетерологічної чужорідної ДНК в клітини рослин у середовищі застосовують максимальний пороговий рівень відповідного відбору для забезпечення загибелі нетрансформованих клітин, а також відокремлення та проліферації імовірно трансформованих 60 клітин, які виживають після цієї обробки засобом для відбору, за допомогою регулярного перенесення на свіже середовище. Шляхом безперервного пересівання та стимулювання відповідним засобом для відбору виявляють та розмножують клітини, що трансформовані плазмідним вектором. Потім для підтвердження присутності інтегрованого гетерологічного гена, що становить інтерес, в геномі трансгенної рослини можна застосовувати молекулярні та біохімічні методи.

Клітини, які були трансформовані, можна вирощувати у рослинах згідно з традиційними методиками. (Див., наприклад, МеСоптіск еї аї. (1986) Ріапі СеїЇ Верогів 5:81-84). Потім ці рослини можна вирощувати та запилювати за допомогою тієї самої трансформованої лінії або інших ліній, та одержаний гібрид матиме конститутивну експресію визначеної потрібної фенотипічної ознаки. Щоб переконатися у тому, що експресія потрібної фенотипічної ознаки стабільно підтримується та успадковується, можна вирощувати два або більше поколінь, після чого збирають насіння, щоб переконатися у тому, що експресія потрібної фенотипічної ознаки була досягнута. Таким чином, у даному винаході передбачене трансформоване насіння (яке також називають "трансгенне насіння"), що має нуклеотидну конструкцію за даним винаходом, наприклад, касету експресії за даним винаходом, яка стабільно включена в його геном.

Оцінка трансформації рослини

Після введення гетерологичної чужорідної ДНК в клітини рослин трансформацію або інтеграцію гетерологічного гена в геномі рослини підтверджують за допомогою різних способів, таких як аналіз нуклеїнових кислот, білків та метаболітів, пов'язаних з інтегрованим геном.

ПЛР-аналіз являє собою швидкий спосіб скринінгу трансформованих клітин, тканин або пагонів на присутність включеного гена на ранній стадії, до пересадки у грунт (ЗатьгоокК апа

Виззеї! (2001) МоїІесшаг Сіопіпд: А І арогаїогу Мапиа!. Соїд бргіпуд Натог І арогаюгу Ргезв, Соїй

Зргіпу Натотг, МУ). ПЛР проводять із застосуванням олігонуклеотидних праймерів, специфічних щодо гена, що становить інтерес, або векторної основи Адгорасієгійт тощо.

Трансформацію рослини можна підтверджувати за допомогою саузерн-блот аналізу геномної ДНК І(ЗатьгооК апа ВизвзеїЇ, 2001, вище). У цілому, загальну ДНК екстрагують з трансформанта, розщеплюють за допомогою відповідних рестрикційних ферментів, фракціонують в агарозному гелі та переносять на нітроцелюлозну або нейлонову мембрану.

Потім мембрану або "блот" зондують, наприклад, за допомогою цільового фрагмента ДНК з радіоактивною міткою ЗР, щоб підтвердити інтеграцію введеного гена в геном рослини згідно із стандартними методиками ІЗатрбгоок апа Виззеїї, 2001, вище|.

У нозерн-блот-аналізі РНК виділяють з конкретних тканин трансформанта, фракціонують у формальдегід-агарозному гелі та переносять на найлоновий фільтр згідно зі стандартними процедурами, які зазвичай застосовуються в даній галузі техніки (ЗатргоокК апа Виззеї!, 2001, вище!|. Потім перевіряють експресію РНК, закодованої геном, що визначає пестицидну активність, шляхом гібридизації фільтра з радіоактивним зондом, отриманим з гена, що визначає пестицидну активність, за допомогою способів, відомих в даній галузі техніки

ІЗатбгоок апа ВиззеїЇ, 2001, вище).

Вестерн-блот, біохімічні аналізи та подібне можна виконувати на трансгенних рослинах, щоб підтвердити присутність білка, який кодується геном, що визначає пестицидну активність, за допомогою стандартних процедур (ЗатбобгоокК апа ВиззеїЇ, 2001, вище) із застосуванням антитіл, які зв'язуються з одним або декількома епітопами, присутніми на пестицидному білку.

Пестицидна активність в рослинах.

В іншому аспекті даного винаходу можна одержати трансгенні рослини, що експресують пестицидний білок, який характеризується пестицидною активністю. Способи, описані вище як приклад, можна використовувати для одержання трансгенних рослин, але спосіб, в який одержують трансгенні клітини рослин, не має вирішального значення для даного винаходу. За рішенням експериментатора можуть застосовуватися відомі або описані у рівні техніки способи, такі як трансформація, опосередкована Адгобасіегит, біолістична трансформація та способи, не опосередковані застосуванням частинок. Рослини, які експресують пестицидний білок, можна виділяти за допомогою звичайних способів, описаних у рівні техніки, наприклад, шляхом трансформації калюсу, відбору трансформованого калюсу та регенерації здатних до розмноження рослин з такого трансгенного калюсу. У такому процесі будь-який ген можна застосовувати як селектовний маркер за умови, що його експресія в клітинах рослин надає можливість визначити або відібрати трансформовані клітини.

Була розроблена низка маркерів для застосування в клітинах рослин, таких, які надають стійкість до хлорамфеніколу, аміноглікозиду (1418, гігроміціну тощо. Інші гени, що кодують продукт, який бере участь у метаболізмі хлоропластів, також можна застосовувати як селектовні маркери. Наприклад, гени, що забезпечують стійкість до рослинних гербіцидів, таких як 60 гліфосат, бромоксиніл або імідазолінон, можуть бути особливо застосовними. По такі гени повідомляли ІстаіІКег єї аї. (1985) У. Віої. Спет. 263: 6310-6314 (ген нітрилази, що забезпечує стійкість до бромоксинілу); та Заїпавімап сеї аї. (1990) Мисі. Асіав Вев. 18: 2188) (ген АНА5, що забезпечує стійкість до імідазолінону). Крім того, гени, розкриті в даному документі, застосовні як маркери для оцінки трансформації клітин бактерій або рослин. Способи виявлення наявності трансгена у рослині, органі рослини (наприклад, лисках, стеблах, коренях тощо), насінні, клітині рослини, паростку, зародку або його нащадках добре відомі в даній галузі техніки. У одному варіанті здійснення наявність трансгена виявляють шляхом дослідження щодо пестицидної активності. Здатні до розмноження рослини, що експресують пестицидний білок, можна тестувати щодо пестицидної активності, та рослин, що демонструють оптимальну активність, відбирають для подальшого розведення. В даній галузі техніки є доступними способи аналізу активності проти шкідника. Як правило, білок змішують і застосовують в аналізах живлення.

ІДив., наприклад, Ма!ттопе еї а!. (1985) 9. ої Есопотіс Епіотоіоду 78:290-2931.

Даний винахід можна застосовувати для трансформації будь-якого виду рослин, в тому числі без обмежень однодольних та дводольних рослин. Приклади рослин, що становлять інтерес, включають без обмеження кукурудзу (маїс), сорго, пшеницю, соняшник, томат, хрестоцвіті, різновиди перцю, картоплю, бавовник, рис, сою, цукровий буряк, цукрову тростину, тютюн, ячмінь та олійний ріпак, Вгазвзіса 5р., люцерну, жито, просо, сафлор, різновиди арахісу, солодку картоплю, маніоку, каву, кокос, ананас, цитрусові дерева, какао, чай, банан, авокадо, інжир, гуаву, манго, маслину, папайю, кеш'ю, макадамію, мигдаль, овес, овочі, декоративні рослини та хвойні дерева.

Овочеві культури включають без обмеження різновиди томату, латук, зелені боби, лімські боби, різновиди гороху та представників роду Сигситів, таких як огірок, канталупа та мускусна диня. Декоративні культури включають без обмеження азалію, гортензію, гібіскус, різновиди троянди, різновиди тюльпанів, різновиди нарцисів, різновиди петунії, гвоздику, пуансетію та хризантеми. Переважно рослини за даним винаходом являють собою культурні рослини (наприклад, маїс, сорго, пшениця, соняшник, томат, хрестоцвіті, різновиди перцю, картопля, бавовник, рис, соя, цукровий буряк, цукрова тростина, тютюн, ячмінь, олійний ріпак тощо).

Застосування у контролі шкідників

З рівня техніки відомі загальні способи використання штамів, які містять нуклеотидну послідовність за даним винаходом або її варіант, у якості пестицидних засобів у контролі шкідників або у створенні інших організмів. (Дивись, наприклад, патент США Мо 5039523 та патентний документ ЕР 0480762А2|.

Штами Васіїйн5, що містять нуклеотидну послідовність за даним винаходом або її варіант, або мікроорганізми, які генетично змінювали для того, щоб вони містили ген, що визначає пестицидну активність, за даним винаходом та пестицидний білок, можна застосовувати для захисту сільськогосподарських культур та продуктів від шкідників. В одному аспекті даного винаходу цілі, тобто нелізовані клітини організму, що продукує токсин (пестицид), обробляють реагентами, які пролонгують активність токсину, що продукується у клітині, коли клітину поміщають у середовище цільового шкідника (цільових шкідників).

Як альтернатива, пестицид одержують за рахунок введення гена, що визначає пестицидну активність, у клітину-хазяїна. Експресія гена, що визначає пестицидну активність, прямо або опосередковано призводить до внутрішньоклітинного продукування та підтримання рівня пестициду. В одному аспекті даного винаходу дані клітини потім обробляють в умовах, які пролонгують активність токсину, що продукується у клітині, якщо клітину поміщають у середовище цільового шкідника (цільових шкідників). Одержаний у результаті продукт зберігає токсичність, притаманну токсину. Ці інкапсульовані природним чином пестициди можна потім складати у препарат відповідно до традиційних методик для внесення у середовище проживання цільового шкідника, наприклад, грунт, воду та листя рослин. Дивись, наприклад,

ЕРА 0192319) та посилання, які цитуються у ньому. Як альтернатива, можна скласти препарат з клітин, що експресують ген за даним винаходом, таким чином, щоб забезпечити можливість застосування отриманого у результаті матеріалу як пестициду.

Активні інгредієнти за даним винаходом зазвичай вносять у формі композицій, та їх можна застосовувати одночасно або послідовно з іншими сполуками по відношенню до посівної площі або рослини, що підлягає обробці. Цими сполуками можуть бути добрива, засоби боротьби з бур'янами, кріопротектори, поверхнево-активні речовини, детергенти, пестицидь! мила, масла, використовувані у період спокою, полімери та/або склади з носіями, що повільно вивільнюються або здатні до біологічного розкладання, які роблять можливою довгострокову дозовану обробку цільової площі після одноразового внесення складу. Вони також можуть являти собою селективні гербіциди, хімічні інсектициди, віруциди, мікробіциди, амебоциди, пестициди, 60 фунгіциди, бактеріоциди, нематоциди, молюскоциди або суміші декількох даних препаратів, за необхідності, разом з додатковими прийнятними для сільського господарства носіями, поверхнево-активними речовинами або допоміжними речовинами, що сприяють внесенню, які, зазвичай, використовують у галузі складання. Придатні носії та допоміжні речовини можуть бути твердими або рідкими та відповідають речовинам, які зазвичай використовують у технології складання, наприклад, натуральні або відновлені мінеральні речовини, розчинники, диспергувальні речовини, змочувальні засоби, засоби, що надають липкість, зв'язувальні речовини або добрива. Подібним чином склади можна приготувати у формі їстівних "принад", або їм можна надати форму "пасток" для шкідників, щоб забезпечити можливість згодовування або поглинання пестицидного складу цільовим шкідником.

Способи внесення активного інгредієнта за даним винаходом або агрохімічної композиції за даним винаходом, які містять щонайменше один пестицидний білок, що продукується бактеріальними штамами за даним винаходом, включають нанесення на листя, покриття насіння та внесення в грунт. Кількість нанесень та норма внесення залежить від інтенсивності зараження відповідним шкідником.

Композицію можна складати у вигляді порошку, дусту, пелети, гранули, спрею, емульсії, колоїду, розчину або подібних до них та можна одержувати за допомогою таких традиційних способів, як сушіння, ліофілізація, гомогенізація, екстракція, фільтрація, центрифугування, осадження або концентрування культури клітин, що містять поліпептид. У всіх таких композиціях, які містять щонайменше один такий пестицидний поліпептид, даний поліпептид може бути присутнім у концентрації від приблизно 1 95 до приблизно 99 95 за вагою.

За допомогою способів за даним винаходом на даній площі можна знищувати або зменшувати кількості лускокрилих, напівтвердокрилих, двокрилих або твердокрилих шкідників, або ці способи можна застосовувати профілактично щодо площі у навколишньому середовищі для запобігання зараженню чутливим шкідником. Переважно шкідник поглинає пестицидно ефективну кількість поліпептиду або контактує з нею. Під "пестицидно ефективною кількістю" мають на увазі кількість пестициду, що здатна призводити до загибелі щонайменше одного шкідника або помітно обмежувати ріст шкідника, харчування або нормальний фізіологічний розвиток. Дана кількість буде варіювати залежно від таких факторів, як, наприклад, конкретні цільові шкідники, що підлягають контролю, конкретне навколишнє середовище, місцезнаходження, рослина, сільскогосподарська культура або сільськогосподарська ділянка, що підлягають обробці, умови навколишнього середовища та спосіб, норма, концентрація, стабільність та кількість внесень пестицидно ефективної композиції поліпептиду. Склади можна також змінювати з урахуванням кліматичних умов, впливу на навколишнє середовище та/або частоти внесення та/або тяжкості зараження шкідниками.

Описані пестицидні композиції можна приготувати шляхом складання або бактеріальної клітини, кристала та/або суспензії спор, або виділеного білкового компонента з необхідним прийнятним для сільського господарства носієм. Композиції можна складати перед застосуванням за допомогою відповідних способів, таких як ліофілізація, висушування сублімацією, сушіння, або у водному носії, середовищі або придатному розріджувачі, такому як сольовий розчин або інший буфер. Складені композиції можуть бути у формі дусту, або гранульованого матеріалу, або суспензії в олії (рослинній або мінеральній), або водних, або масляних/водних емульсій, або у вигляді змочувального порошку, або у комбінації з будь-якою іншою речовиною-носієм, придатною для застосування у галузі сільського господарства.

Придатні для сільського господарства носії можуть бути твердими або рідкими, та вони добре відомі у даній галузі техніки. Вираз "прийнятний для сільського господарства" охоплює усі допоміжні речовини, інертні компоненти, диспергувальні речовини, поверхнево-активні речовини, засоби, що надають липкість, зв'язувальні речовини, тощо, які зазвичай застосовують у технології складання пестицидних препаратів; при цьому вони добре відомі фахівцям у галузі складання пестицидних препаратів. Дані склади можна змішувати з одним або декількома твердими або рідкими допоміжними речовинами та одержувати різними способами, наприклад, шляхом рівномірного змішування, перемішування та/або подрібнення пестицидної композиції з придатними допоміжними речовинами із застосуванням традиційних методик складання.

Придатні склади і способи внесення описано у (патенті США Мо 6468523), який включено у даний документ за допомогою посилання. "Шкідник" включає без обмеження комах, грибів, бактерій, нематод, кліщів, іксодових кліщів та їм подібних. Комахи-шкідники включають комах, вибраних із рядів Соієорієга, Оірієга,

Нутепорієга, Іерідорієга, МаїЇорнпада, Ноторієгта, Нетірієга, ОпПгоріега, Тнузапорієга,

Оептаріега, Ізоріега, Апорішига, 5ірпопаріега, Тгіспоріега і т.д., зокрема Соіеорієга, І ерідорієга та

Оіріега.

Ряд СоіІеорієга включає підряди Адерпада та Роіурпада. Підряд Адерпада включає надродини Сагароїдеа та Сугіпоіїдеа, у той час, як підряд Роїурпада включає надродини

Нуагорніосідеа, єїгарнуїїпоіїдеа, Сапінагоїдеа, СіІегоіїдеа, Еіаіегоїдеа, ОазсіПоідеа, Огуороїдеа,

Вугтоїдеа, Сисціоіїдеа, Меїоїдеа, МогаеєїІоідеа, Теперііопоіїдеа, Возіпспоіїдеа, 5сагараєоїаєа, Сегатрусоїдеа, СпгузотеЇоідеа та Сигсціопоїдеа. Надродина Сагароіїдеа включає родини

Сісіпаєїідає, Сагабідає та Оуїївсідае. Надродина Схугіподдеа включає родину аугіпідає.

Надродина Нуагорпіоіїдеа включає родину Нуагорпіїдає. Надродина 51іарнуїїпоіїдеа включає родини 5ійрнідає та еарнуїїпідає. Надродина Сапійагоїдеа включає родини Сапінагідає та

І атругідає. Надродина Сіегоїдеа включає родини Сіепдає та Оептевіїйдає. Надродина

ЕіІаіегоїдеа включає родини ЕПаїегідає та Виргевзіїдає. Надродина Сисціоїдеа включає родину

Соссіпеїйдає. Надродина Меїіоїдєа включає родину Меїоіїдає. Надродина Тепебргіопоіїдєа включає родину Тепебгіопідае. Надродина бсагараєсідеа включає родини Рабззаїїдає та

Зсагараєїдає. Надродина Сегатрусоїдеа включає родину Сегатбрусідає. Надродина

Спгузотеїрідеа включає родину СНгузотеїїдає. Надродина Сигсшціопоїдеа включає родини

Сисціопідає та 5соуїідавє.

Ряд Оірієга включає підряди Метаїйосега, Вгаспусега та Сусіоппарна. Підряд Метаїйосега включає родини Тіршиідає, Рзусподідає, Сийсідає, Сегаюродопідає, Спігопотідає, бітиіїдає,

Вібіопідае та Сесідотуїдає. Підряд Вгаспусега включає родини 5ігайотуідає, Табапідає,

ТНегемідає, Азіїдає, Муаідає, Вотрбуїїйїдає та Ооїїспородідає. Підряд СусіотНарна включає секції

Авспіга та АзсНпіга. Секція Азспіга включає родини РПогідає, 5угрпідає та Сопорідає. Секція

Азспіга включає секції Асаїурігаїає та Саїурігаіає. Секція Асаїурігаїаеє включає родини Ойідає,

Терпгіййдає, Адготугідає та Огозорпіїйдає. Секція Саїурігатає включає родини Нірроброзсідає,

Оеєзіпдає, Таспіпідає, Апіпотуїїдає, Мизсідає, СаїрНогідає та Загсорпацчідає.

Порядок Іерідорієтга включає родини Раріїопідає, Рієгідає, ІГусаєпідає, МутргпГаїідає,

Оапаїдає, Заїупдає, Незрегідає, ЗрНпіпдідає, Зайштпідає, Сеотеїйдає, Агсійдає, Мосіцідає,

Ї утапігідає, Зевіїдає та Тіпеїдає.

Нематоди включають паразитичних нематод, таких як бульбочкові, цистоутворювальні та нематоди, що ранять, які включають Неїєегодега 5рр., Меіоідодупе рр. та Спіородега 5рр.; зокрема, представників цистоутворювальних нематод, включаючи без обмеження Неїегодега

Зо діусіпе5 (соєву цистоутворювальну нематоду); Неїегодега взепаснії (бурякову цистоутворювальну нематоду); Неїегодега амепає (зернову цистоутворювальну нематоду) та

Скпіородега говіоспіепбзіз, та Сіородега раїййда (картопляні цистоутворювальні нематоди).

Нематоди, що ранять, включають Ргаїуіепспиз 5рр.

Напівтвердокрилі шкідники (що включають види, названі як Нетірієга, Ноторієга або

Неїегорієга) включають без обмеження Гудив 5рр., такі як сліпняк західний матовий (ІГудив

Пезрегив), сліпняк матовий (І удив Іпеоїагі5) та зелений сліпняк (Гудив еїїбиб); тлі, такі як тля персикова зелена (Мугив регзісає), тля бавовникова (Арпі5 дозвзурії), тля вишнева або тля черешнева (Муив5 сегавзі), тля соєва (Арпів діусіпе5 Маїзитига); цикадка бура рисова (Міарагуайга Іпдеп5) та цикадка зелена рисова (Мерпоїеніх 5рр.); а також щитники, такі як щитник зелений (Асгобієттит Піаге), щитник мармуровий (Наіуотогрпа Паїуб), щитник овочевий зелений (Мелага міпдиіа), щитник рисовий (Оебаіше ридпах), щитник червононогий (Репіаюта гиїрез), щитник європейський (АПарпідавієг першоза) та щитник деревний Тгоїи5 Ішгідив.

Комахи-шкідники за даним винаходом для основних сільськогосподарських культур включають: маїс: Овійпіа пибіїіаійв, європейського кукурудзяного метелика; Аагоїїв5 ірзіюп, совку- іпсилон; Неїїсомегра 7є6а, кукурудзяну совку; бЗродорієга тидірегда, совку трав'яну; Оіаїгаєа дгапаїозеїМа, вогнівку кукурудзяну південно-західну; ЕІазтораїриє ІІдпозеЇПй5, точильника зернового; Оіамаєа зассНагаїї5, вогнівку цукрової тростини; Оіабгоїїса мігдіїега, західного кукурудзяного кореневого жука; Оіаргоїїса Іопдісогпіє Багбе"гі, північного кукурудзяного кореневого жука; Оіаргоїїса ипаесітрипсіаїга помагаї, південного кукурудзяного кореневого жука;

Меїапоїш5 озрр., дротяників; Сусіосерпаїа бБогєаїз, хрущика північного (личинку хруща);

Сусіосерпаійа іттасишіаййа, хрущика південного (личинку хруща); РоріНа |аропіса, хрущика японського; СПаєїоспета риїїсапа, земляну кукурудзяну блішку; брпепорпоги5 таїаів, кукурудзяного довгоносика; АпПораіозірпит таїйдіх, кукурудзяну листову попелицю; Апигарнпів таїйадігадісіз, кукурудзяну кореневу попелицю; Віїз5ив5 Іеисорієги5 Іеисорієги5, клопа-черепашку пшеничного північноамериканського; Меіапоріи5 Тетитибгит, червононогу кобилку; МеЇіапоріи5 запаціпіре5, кобилку мексиканську; Нуієтуа ріаїшта, личинку паросткової мухи; Адготуа рагиісогпіз, міль-пістрянку кукурудзяну; Апарпоїйгіре об5сгиги5, трипса злакового; боіІепорвів тіїезіа, мураху-крадія; Теїгапуспи5 ипісає, звичайного павутинного кліща; сорго: Спіо рапеПив, соргового точильника; 5родоріега пиаірегаа, совку трав'яну; Неїїсомегра 7єа, кукурудзяну совку; бо Еіазтораїрив ІдпозеПйи5, маленького точильника кукурядзяного стебла; РеЦа зибієтапеа,

гусеницю озимої совки; РпуПорнада сііпіта, личинку хруща; ЕІвєоде5, Соподегив та Аєоіив 5рр., дротяників; Оцієта теїапорих, п'явицю червоногруду; СПпавїоспета риїсагпа, кукурудзяну блішку; 5рпепорпогиз таїдіє, кукурудзяного довгоносика; АПораїозірпит таїадів; кукурудзяну листову попелицю; бБірпа Пама, жовту попелицю цукрової тростини; Вії55и5 Іевисоріеги5

Іеисорієгиз, клопа--ерепашку пшеничного північноамериканського; Сопіагіпіа зогопісоїа, галицю соргову; Тейгапуспив сіппабагіпи5, червоного павутинного кліща; Теїгапуспив5 ипісає, звичайного павутинного кліща; пшениця: Рзецйдаїейа ипірипсіаїйа, гусінь совки лугової; 5родорієга Ігидірегаа, совку трав'яну; ЕІазтораїривх ІдпозеїП 5, маленького точильника кукурудзяного стебла; Аагоїі5 опподопіа, прямокутну совку; ЕІазтораїри5 ІдпозеЇПШ5, маленького точильника кукурудзяного стебла; ОйиЇета теїапори5, п'явицю червоногруду; Нурега рипсіаїа, довгоносика листового конюшинового; Оіаргоїїса ипдесітрипсіаїа помагаі, південного кукурудзяного кореневого жука; російську пшеничну попелицю; 5сНпігарніз агатіпит, звичайну злакову попелицю; Масговірпит амепає, велику злакову попелицю; Меїапоріив Тетитибгит, червононогу кобилку; МеїІапоріив5 айегепійайв, кобилку відмітну; Меїапоріиє запдиіпіре5, кобилку мексиканську; Мауеїоїа девігисіог, гесенську муху; Зйоадіріовіє тозеїйапа, помаранчеву злакову галицю; Меготуа атегісапа, личинку американської меромізи; НуІетуа соагсіаїа, озиму муху; ЕгапкКіїпівна Тиз5са, тютюнового трипса; Сернпив сіпсійи5, хлібного пильщика; Асепа Шіїррає, кліща цибулевого чотириногого; соняшник: 5цієїта НеЇйапінапа, соняшникову брунькову листовійку; Нотоєозота еІесієїшт, соняшникову вогнівку; 2удодгатта ехсіатаййопіх5, соняшникову окличну совку;

Воїпуги5 діррозив5, морквяного жука; Меоїазіорієта типедііапа, галицю соняшникового насіння; бавовник: Неїїоїйіє мігезсеп5, бавовникову листовійку; Неїїсомегра 76а, бавовникову совку;

Зродорієга ехідса, совку малу; Ресііпорпога до5зурієїа, рожевого бавовникового хробака;

Апіпопотив агапаі5, бавовникового довгоносика; Арпі5 дозвзурії, бавовникову попелицю;

Рзецдаютозсеїїзв зепайш5, бавовникового гедзя; Тгіаіейгодез5 абшіопеєа, бавовникову білокрилку;

Гудив Іппеоіагв, трав'яного клопа; Меїіапоріи5 Тетитибргит, червононогу кобилку; МеїІапоріив5 аінегепійіаійв, кобилку відмітну; ТНгір5 їабасі, цибулевого трипса; ЕгапКіїпієа тивса, тютюнового трипса; Теїгапуспив5 сіппавбагіпих, червоного павутинного кліща; Теїгапуспив5 ийісає, звичайного павутинного кліща; рис: Оіайаєа зассНагаїйв, точильника цукрової тростини; Бродорієга тидірегаа, совку трав'яну; Неїїсомегра 7еа, кукурудзяну совку; листоїда виду СоїЇазріб5 бБгиппеєа;

Зо Ііввогпорігиз огугорпійв, рисового водяного довгоносика; ЗйЙОорнпіше огулає, рисового довгоносика; МерпПоїейїх підгорісїи5, рисову цикадку; Вії55и5 Іеисорієгиб5 Іеисорієгиб5, клопа- черепашку пшеничного північноамериканського; Асгтобіетит Піїаге, зеленого клопа-щитника; соя: Рзецйдорішивіа іпсіндепв5, соєвого п'ядака; Апіісагзіа деттаїаїб5, гусеницю совки оксамитових бобів; Ріайурепа зсабга, зеленого шкідника конюшини; Овігіпіа пибііайв, європейського кукурудзяного метелика; Аагоїї5 ірвіоп, совку-іпсилон; 5родорієга ехідца, совку малу; Неїоїпів мігезсеп5, бавовникову листовійку; НеїЇїсомегра 7є6а, кукурудзяну совку; Еріїаснпа магімевіїв, мексиканську бобову зернівку; Муги5 регзісає, зелену персикову попелицю; Етроавзса Гавбавє, цикадку картопляну; Асго5ієтит Піїаге, зеленого клопа-щитника; Меїапоріи5 Тетитиргит, червононогу кобилку; Меїапоріиє айегепійайб5, кобилку відмітну, Нуіетуа ріаїшга, личинку паросткової мухи; Зегісоїйпгірбе мапабіїйв, трипса соєвого; ТНгірбе їабрасі, трипса цибулевого;

Темапуспив шШукКевіапі, туркестанського павутинного кліща; Тейапуспив иШпісає, звичайного павутинного кліща; ячмінь: Ов5ігіпіа пибііайсє, європейського кукурудзяного метелика; Адгоїї5 ірвіоп, совку-іпсилон; 5сНПігарніє агатіпит, звичайну злакову попелицю; Віїзбзи5 Ієисорієеги5

Іенисоріеги5, клопа--ерепашку пшеничного північноамериканського; Асгов5івтпит Пііаге, зеленого клопа-щитника; Еивспівїи5 5егми5, коричневого клопа-щитника; ОеєїЇйа ріаїшта, личинку паросткової мухи; МауеїйоЇа девігисіог, гесенську муху; Реїгобріа Іаїеп5, петробію багатоїдну; ріпак олійний: Вгемісогупе бБгаззісає, попелицю капустяну; РНуїоїгєїа сгисіїегає, блішку хрестоцвітну; Матевзіга сопіїдигаїа, совку латукову; Рішеїа хуїозівїІІа, капустяну совку; Овїа 55р., личинок весняної капустяної мухи.

Нематоди включають паразитичних нематод, таких як бульбочкові, цистоутворювальні та нематоди, що ранять, які включають Неїєегодега 5рр., Меіоідодупе рр. та Спіородега 5рр.; зокрема, представників цистоутворювальних нематод, включаючи без обмеження Неїегодега діусіпе5 (соєву цистоутворювальну нематоду); Неїегодега взепаснії (бурякову цистоутворювальну нематоду); Неїегодега амепає (зернову цистоутворювальну нематоду) та

Спіородега гозіоспієпвзіз, а також Сіородега раїїда (картопляні цистоутворювальні нематоди).

Способи підвищення врожайності рослини

Передбачені способи підвищення врожайності рослин. Способи включають забезпечення рослини або клітини рослини, які експресують полінуклеотид, що кодує пестицидний бо поліпептид, розкритий у даному документі, і вирощування рослини або одержаної з неї насінини у полі, ураженому (або сприйнятливому до ураження) шкідником, щодо якого зазначений поліпептид має пестицидну активність. У деяких варіантах здійснення поліпептид характеризується пестицидною активністю щодо лускокрилого, твердокрилого, двокрилого, напівтвердокрилого шкідника або нематоди-шкідника, а зазначене поле уражено лускокрилим, напівтвердокрилим, твердокрилим, двокрилим шкідником або нематодою-шкідником. Як визначено у даному документі, "врожайність" рослини відноситься до якості та/або кількості біомаси, що продукується рослиною. Під "біомасою" мають на увазі будь-який визначуваний продукт рослинного походження. Підвищення продукції біомаси являє собою будь-яке покращення визначуваного виходу продукту рослинного походження. Підвищення врожайності рослин має кілька комерційних застосувань. Наприклад, зростання біомаси листя рослин може підвищувати врожайність листових овочів для споживання людиною або твариною. Додатково зростання біомаси листя можна застосовувати для збільшення виробництва фармацевтичних або промислових продуктів рослинного походження. Підвищення врожайності може включати будь-яке статистично значуще підвищення, включаючи без обмеження підвищення щонайменше на 1 95, підвищення щонайменше на 395, підвищення щонайменше на 5 95, підвищення щонайменше на 10 95, підвищення щонайменше на 20 95, щонайменше на 30 95, щонайменше на 50 95, щонайменше на 70 95, щонайменше на 100 95 або більше підвищення врожайності у порівнянні з рослиною, в якій не експресується послідовність, що визначає пестицидну активність. При використанні конкретних способів врожайність рослин підвищується у результаті підвищення стійкості до шкідників рослини, яка експресує пестицидний білок, розкритий у даному документі. Експресія пестицидного білка приводить до зниження здатності шкідника до зараження або поїдання.

Рослини можна також обробляти одним або декількома хімічними композиціями, що містять один або декілька гербіцидів, інсектицидів або фунгіцидів. Ілюстративні хімічні композиції включають гербіциди для захисту плодових/овочевих культур: атразин, бромацил, діурон, гліфосат, лінурон, метрибузин, симазин, трифлуралін, рлуазифоп, глюфосинат, галосульфурон від Сомжап, паракват, пропізамід, сетоксидим, бутафенацил, галосульфурон, індазифлам; інсектициди для захисту плодових/овочевих культур: - альдикарб, Васійй5 Шигпепдієпвзізх, карбарил, карбофуран, хлорпірифос, циперметрин,

Зо дельтаметрин, абамектин, цифлутрин/бета-дифлутрин, есфенвалерат, лямбда-цигалотрин, ацеквіноцил, біфеназат, метоксифенозид, новалурон, хромафенозид, тіаклоприд, динотефуран, флуакрипірим, спіродиклофен, гамма-цигалотрин, спіромезифен, спіносад, ринаксипір, ціазипір, трифлумурон, спіротетрамат, імідаклоприд, флубендіамід, тіодикарб, метафлумізон, сульфоксафлор, цифлуметофен, ціанопірафен, клотіанідин, тіаметоксам, спіноторам, тіодикарб, флонікамід, метіокарб, емамектину бензоат, індоксакарб, фенаміфос, пірипроксифен, фенбутатин-оксид; фунгіциди для захисту плодових/овочевих культур: аметоктрадин, азоксистробін, бентіавалікарб, боскалід, каптан, карбендазим, хлороталоніл, мідь, ціазофамід, цифлуфенамід, цимоксаніл, ципроконазол, ципродиніл, дифеноконазол, диметоморф, дитіанон, фенамідон, фенгексамід, флуазинам, флудіоксоніл, флуопіколід, флуопірам, флуоксастробін, флуксапіроксад, фолпет, фосетил, іпродіон, іпровалікарб, ізопіразам, крезоксим-метил, манкозеб, мандипропамід, металаксил/умефеноксам, метирам, метрафенон, міклобутаніл, пенконазол, пентіопірад, пікоксистробін, пропамокарб, пропіконазол, пропінеб, проквіназид, протіоконазол, піраклостробін, піриметаніл, квіноксифен, спіроксамін, сірка, тебуконазол, тіофанат-метил, трифлоксистробін; гербіциди для захисту зернових культур: - 2,4-О0, амідосульфурон, бромоксиніл, карфентразон-Е, хлоротолурон, хлорсульфурон, клодинафоп-Р, клопіралід, дикамба, диклофоп-М, дифлуфенікан, феноксапроп, флорасулам, флукарбазон-МА, флуфенацет, флупіросульфурон-М, флуроксипір, флуртамон, гліфосат, йодосульфурон, іоксиніл, ізопротурон, МСРА, мезосульфурон, метсульфурон, пендиметалін, піноксаден, пропоксикарбазон, просульфокарб, піроксулам, сульфосульфурон, тифенсульфурон, тралкоксидим, триасульфурон, трибенурон, трифлуралін, тритосульфурон; фунгіциди для захисту зернових культур: азоксистробін, біксафен, боскалід, карбендазим, хлороталоніл, цифлуфенамід, ципроконазол, ципродиніл, димоксистробін, епоксиконазол, фенпропідин, фенпропіморф, флуопірам, флуоксастробін, флуквінконазол, флуксапіроксад, ізопіразам, крезоксим-метил, метконазол, метрафенон, пентіопірад, пікоксистробін, прохлораз, пропіконазол, проквіназид, протіоконазол, піраклостробін, квіноксифен, спіроксамін, тебуконазол, тіофанат-метил, трифлоксистробін; інсектициди для захисту зернових культур: диметоат, лямбда-цигалотрин, дельтаметрин, альфа-циперметрин, В-цифлутрин, біфентрин, імідаклоприд, клотіанідин, тіаметоксам, тіаклоприд, ацетаміприд, динетофуран, хлорпірифос, піримікарб, метіокарб, сульфоксафлор; гербіциди для захисту маїсу: атразин, алахлор, 60 бромоксиніл, ацетохлор, дикамба, клопіралід, (5)-диметенамід, глуфосинат, гліфосат,

ізоксафлутол, (5)-метолахлор, мезотріон, нікосульфурон, примісульфурон, римсульфурон, сулькотріон, форамсульфурон, топрамезон, темботріон, сафлуфенацил, тієнкарбазон, флуфенацет, піроксасульфон; інсектициди для захисту маїсу: карбофуран, хлорпірифос, біфентрин, фіпроніл, імідаклоприд, лямбда-цигалотрин, тефлутрин, тербуфос, тіаметоксам, клотіанідин, спіромезифен, флубендіамід, трифлумурон, ринаксипір, дельтаметрин, тіодикарб,

В-цифлутрин, циперметрин, біфентрин, люфенурон, тебупіримфос, етипрол, ціазипір, тіаклоприд, ацетаміприд, динетофуран, авермектин; фунгіциди для захисту маїсу: азоксистробін, біксафен, боскалід, ципроконазол, димоксистробін, епоксиконазол, фенітропан, флуопірам, флуоксастробін, флуксапіроксад, ізопіразам, метконазол, пентіопірад, пікоксистробін, пропіконазол, протіоконазол, піраклостробін, тебуконазол, трифлоксистробін; гербіциди для захисту рису: бутахлор, пропаніл, азимсульфурон, бенсульфурон, цигалофоп, даіїмурон, фентразамід, імазосульфурон, мефенацет, оксазикломефон, піразосульфурон, пірибутикарб, квінклорак, тіобенкарб, інданофан, флуфенацет, фентразамід, галосульфурон, оксазикломефон, бензобіциклон, пірифталід, пеноксулам, біспірибак, оксадіаргіл, етоксисульфурон, претілахлор, мезотріон, тефурилтріон, оксадіазон, феноксапроп, піримісульфан; інсектициди для захисту рису: діазинон, фенобукарб, бенфуракарб, бупрофезин, динотефуран, фіпроніл, імідаклоприд, ізопрокарб, тіаклоприд, хромафенозид, клотіанідин, етипрол, флубендіамід, ринаксипір, дельтаметрин, ацетаміприд, тіаметоксам, ціазипір, спіносад, спіноторам, емамектину бензоат, циперметрин, хлорпірифос, етофенпрокс, карбофуран, бенфуракарб, сульфоксафлор; фунгіциди для захисту рису: азоксистробін, карбендазим, карпропамід, диклоцимет, дифеноконазол, едифенфос, феримзон, гентаміцин, гексаконазол, гімексазол, іпробенфос (ІВР), ізопротіолан, ізотіаніл, касугаміцин, манкозеб, метоміностробін, орисастробін, пенцикурон, пробеназол, пропіконазол, пропінеб, піроквілон, тебуконазол, тіофанат-метил, тіадиніл, трициклазол, трифлоксистробін, валідаміцин; гербіциди для захисту бавовнику: діурон, флуометурон, МОМА, оксифлуорфен, прометрин, трифлуралін, карфентразон, клетодим, флуазифоп-бутил, гліфосат, норфлуразон, пендиметалін, піритіобак- натрій, трифлоксисульфурон, тепралоксидим, глуфосинат, флуміоксазин, тидіазурон; інсектициди для захисту бавовнику: ацефат, альдикарб, хлорпірифос, циперметрин, дельтаметрин, абамектин, ацетаміприд, емамектину бензоат, імідаклоприд, індоксакарб, лямбда-цигалотрин, спіносад, тіодикарб, гамма-цигалотрин, спіромезифен, піридаліл, флонікамід флубендіамід, трифлумурон, ринаксипір, бета-цифлутрин, спіротетрамат, клотіанідин, тіаметоксам, тіаклоприд, динетофуран, флубендіамід, ціазипір, спіносад, спіноторам, гамма-цигалотрин, 4-((6б-хлорпіридин-3-іл)уметил(2,2-дифторетил)аміно|фуран- 2(5Н)-он, тіодикарб, авермектин, флонікамід, піридаліл, спіромезифен, сульфоксафлор; фунгіциди для захисту бавовнику: азоксистробін, біксафен, боскалід, карбендазим, хлороталоніл, мідь, ципроконазол, дифеноконазол, димоксистробін, епоксиконазол, фенамідон, флуазинам, флуопірам, флуоксастробін, флуксапіроксад, іпродіон, |ізопіразам, ізотіаніл, манкозеб, манеб, метоміностробін, пентіопірад, пікоксистробін, пропінеб, протіоконазол, піраклостробін, квінтозен, тебуконазол, тетраконазол, тіофанат-метил, трифлоксистробін; гербіциди для захисту сої: алахлор, бентазон, трифлуралін, хлоримурон-етил, хлорансулам- метил, феноксапроп, фомесафен, флуазифоп, гліфосат, імазамокс, імазаквін, імазетапір, (5)- метолахлор, метрибузин, пендиметалін, тепралоксидим, глюфосинат; інсектициди для захисту сої: лямбда-цигалотрин, метоміл, імідаклоприд, клотіанідин, тіаметоксам, тіаклоприд, ацетаміприд, динетофуран, флубендіамід, ринаксипір, ціазипір, спіносад, спіноторам, емамектину бензоат, фіпроніл, етипрол, дельтаметрин, В-цифлутрин, гамма- та лямбда- цигалотрин,

А-І(6б-хлорпіридин-3-іл)уметил(2,2-дифторетил)аміно|фуран-2(5Н)-он, спіротетрамат, спінодиклофен, трифлумурон, флонікамід, тіодикарб, бета-дцифлутрин; фунгіциди для захисту сої: азоксистробін, біксафен, боскалід, карбендазим, хлороталоніл, мідь, ципроконазол, дифеноконазол, димоксистробін, епоксиконазол, флуазинам, флуопірам, флуоксастробін, флутриафол, флуксапіроксад, ізопіразам, іпродіон, ізотіаніл, манкозеб, манеб, метконазол, метоміностробін, міклобутаніл, пентіопірад, пікоксистробін, пропіконазол, пропінеб, протіоконазол, піраклостробін, тебуконазол, тетраконазол, тіофанат-метил, трифлоксистробін; гербіциди для захисту цукрового буряку: хлоридазон, десмедифам, етофумезат, фенмедифам, триалат, клопіралід, флуазифоп, ленацил, метамітрон, квінмерак, циклоксидим, трифлусульфурон, тепралоксидим, квізалофоп; інсектициди для захисту цукрового буряку: імідаклоприд, клотіанідин, тіаметоксам, тіаклоприд, ацетаміприд, динетофуран, дельтаметрин,

В-цифлутрин, гамма/лямбда-цигалотрин, 4-(І(6б-хлорпіридин-3-іл)метил(2,2- дифторетил)аміно|фуран-2(5Н)-он, тефлутрин, ринаксипір, ціаксипір, фіпроніл, карбофуран; бо гербіциди для захисту каноли: клопіралід, диклофоп, флуазифоп, глюфосинат, гліфосат,

метазахлор, трифлуралін, етаметсульфурон, квінмерак, квізалофоп, клетодим, тепралоксидим; фунгіциди для захисту каноли: азоксистробін, біксафен, боскалід, карбендазим, ципроконазол, дифеноконазол, димоксистробін, епоксиконазол, флуазинам, флуопірам, флуоксастробін, флусилазол, флуксапіроксад, іпродіон, ізопіразам, мепікват-хлорид, метконазол, метоміностробін, паклобутразол, пентіопірад, пікоксистробін, прохлораз, протіоконазол, піраклостробін, тебуконазол, тіофанат-метил, трифлоксистробін, вінклозолін; інсектициди для захисту каноли: карбофуран, тіаклоприд, дельтаметрин, імідаклоприд, клотіанідин, тіаметоксам, ацетаміприд, динетофуран, В-цифлутрин, гамма- та лямбда-цигалотрин, тау-флувалеріат, етипрол, спіносад, спіноторам, флубендіамід, ринаксипір, ціазипір, 4-((б-хлорпіридин-3- іл)уметил(2,2-дифторетил)аміно|фуран-2(5Н)-он.

Наступні приклади пропонуються як ілюстрація, а не як обмеження.

Експериментальні приклади.

Приклад 1. Виявлення нових генів, що визначають пестицидну активність, у Васійшв5

Іигіпдієпвів

Ідентифікували нові гени, що визначають пестицидну активність, у бактеріальних штамів

АТХ47307 і АТХ65002 із застосуванням наступних етапів. - Одержання загальної ДНК із штаму. Загальна ДНК містить як геномну ДНК, так і позахромосомну ДНК. Позахромосомна ДНК містить суміш деяких або усіх з наступних: плазміди різного розміру; фагові хромосоми; інші неописані позахромосомні молекули.

Секвенування ДНК. Загальну ДНК секвенують за допомогою способів секвенування нового покоління. - Ідентифікація передбачуваних генів токсинів за допомогою аналізів гомології та/або інших комп'ютерних аналізів. - Одержання остаточної уточненої послідовності гена, що представляє інтерес, за допомогою однієї з декількох стратегій ПЛР або клонування (наприклад, ТАЇЇ-РСРВ), якщо необхідно.

Таблиця 1

Новий ген, ідентифікований у штамі АТХ47307

Молекулярна - - Нуклеотидна | Амінокислотна

Ахті477 132 75 96 Сту9Ва!1 60 Фо 1 5

Ахті477.2 б

Ахті477.3 7

Ахті47 7 (укороч.) Сту9Ва1(укороч.) 8

Ахті477.2(укороч.) 9

Ахті477.З(укороч.) 10

Ахті477.2 та Ахті477.3 представляють собою білки, кодування яких розпочинається із сайту ініціації транскрипції, розташованого нижче по відношенню до Ахті477.

Таблиця 2

Новий ген, ідентифікований у штамі АТХ47307 маса (кДа) ЗЕОІЮ МО ЗЕО ІЮ МО

Ахті482 37 94 95 Ахіті486; 51 до МІХЗ 2 11

Ахті482.2 12

Ахті482.3 13

Ахті482.4 14

Ахті482.2, Ахті482.3 та Ахті482.4 представляють собою білки, кодування яких розпочинається із сайту ініціації транскрипції, розташованого нижче по відношенню до

Ахті482.

Коо)

Таблиця З

Новий ген, ідентифікований у штамі АТХ65002 гена маса (кДа) ЗЕО ІЮ МО ЗЕО ІЮ МО

Ахті486 38 94 95 Ахіті482; 49 95 МІХЗ З 15

Ахті486.2 16

Ахті486.3 17

Ахті486.4 18

Ахті486.5 19

Ахті486.2, Ахті486.3, Ахті486.4 та Ахті486.5 представляють собою білки, кодування яких розпочинається із сайту ініціації транскрипції, розташованого нижче по відношенню до

Ахті486.

Таблиця 4

Новий ген, ідентифікований у штамі АТХ65002 маса (кДа) ЗЕО ІЮ МО ЗЕО ІЮ МО »Ахті525 38 97 956 Ахіті486; 51 95 МІХЗ 4 20 »Ахті525.2 21 »Ахтіб525.3 22 »Ахті525.4 23 »Ахті525.5 24 »Ахті525.6 25 »Ахті525.7 26

Ахтіб25.2, Ахтіб525.3, Ахтіб25.4, Ахтіб25.5, Ахтіб25.6 та Ахтіб525.7 представляють собою білки, кодування яких розпочинається із сайту ініціації транскрипції, розташованого нижче по відношенню до Ахіті525.

Приклад 2. Аналізи пестицидної активності

Нуклеотидні послідовності згідно з даним винаходом можна досліджувати щодо їх здатності виробляти пестицидні білки. Здатність пестицидного білка чинити вплив на шкідника як пестицид часто аналізують за допомогою ряду способів. Однин спосіб, добре відомий у даній галузі, полягає у здійсненні аналізу з годуванням. У такому аналізі з годуванням шкідника піддають впливу зразка, що містить або сполуку, яку необхідно досліджувати, або контрольні зразки. Часто його здійснюють шляхом поміщення матеріалу, який необхідно досліджувати, або придатного розчину такого матеріалу на матеріал, який шкідник буде поглинати, як наприклад, штучне живильне середовище. Матеріал, який необхідно досліджувати, може складатися з рідини, твердої речовини або суспензії. Матеріал, який необхідно досліджувати, можна помістити на поверхню і потім надати йому можливість висохнути. Як альтернатива, матеріал, який необхідно досліджувати, можна змішати з розплавленим штучним живильним середовищем і потім розподілити у камері для аналізу. Камерою для аналізу може бути, наприклад, чашка, тарілка або лунка мікротитрувального планшета.

Аналізи із сисними шкідниками (наприклад, попелицями) можуть включати відділення досліджуваного матеріалу від комахи перегородкою, в ідеальному випадку секцією, яку сисна комаха може проколоти частинами сисного ротового апарату, щоб забезпечити поглинання досліджуваного матеріалу. Часто досліджуваний матеріал змішують із стимулятором поїдання, таким як сахароза, щоб сприяти поглинанню досліджуваної сполуки.

Інші типи аналізів можуть включати мікроін'єкцію досліджуваного матеріалу у ротову порожнину або кишечник шкідника, а також розробку трансгенних рослин з наступним дослідженням здатності шкідника харчуватися на трансгенній рослині. Дослідження рослин може включати ізоляцію частин рослин, які зазвичай споживають, наприклад, у невеликі камери, прикріплені до листка, або ізоляцію цілих рослин у камерах, в яких утримуються комахи.

З рівня техніки відомі інші способи та підходи до аналізу шкідників, і їх можна знайти,

Інаприклад, в Кобрегізоп апа Ргеєїзієг, єдв. (1992) Резвіїсіде Біоаззау5 мйп аппгород», СВС, Воса

Ваюп, НІ). Як альтернатива, аналізи зазвичай описані в журналах |Апнгород Мападетепі Тевів та доштаї ої Есопотіс Епіотоіоду|, або їх обговорюють з членами Ентомологічного суспільства

Америки (ЕБА).

У деяких варіантах здійснення ділянки ДНК, що кодують ділянку токсину в пестицидних білках, розкритих у даному документі, клонують у вектор експресії РМАЇ -С4х БЕ. соїї за геном та!ІЕ, що кодує мальтоза-зв'язувальний білок (МВР). Ці гібриди усередині рамки приводять у результаті до експресії білків злиття МВР-Ахті в Е. соїї.

Для експресії в Е. сої В 21"0ЕЗ трансформують окремими плазмідами. Окремі колонії інокулюють у середовище Лурія-Бертані, доповнене карбеніциліном і глюкозою, і вирощують протягом ночі при 37 "С. Наступної доби свіже середовище інокулюють 1 95 добової культури і вирощують при 37 "С до логарифмічної фази росту. Потім культури індукують 0,3 мМ ІРТОа протягом ночі при 20 "С. Кожний осад клітин суспендують в 20 мМ буфері Ттгів-СІ, рН 7,44200

ММ Масін1 мм ОТ « інгібітори протеаз і руйнують ультразвуком. Для підтвердження експресії білків злиття можна застосовувати аналіз за допомогою 505-РАСЕ.

Усі безклітинні екстракти потім пропускають через колонку з амілозою, що приєднана до хроматографа для рідинної експрес-хроматографії білків (ЕРІ С) для афінного очищення білків злиття МВР-ахті. Зв'язані білки злиття елюють зі смоли за допомогою 10 мМ розчину мальтози.

Очищені білки злиття потім розщеплюють або фактором Ха, або трипсином для видалення амінокінцевої МВР-мітки з білка Ахті. Розщеплення та розчинність білків можна визначити за допомогою 505-РАСЕ.

Приклад 3. Експресія і очищення.

Усічені варіанти Ахіті477 (який наведено у даному документі під 5ЕО ІЮО МО:8), Ахті482 (який наведено у даному документі під 5ЕО ІЮ МО:13), Ахті48б6 (який наведено у даному документі під 5ЕО ІО МО:16) та Ахіті525 (який наведено у даному документі під БЕО 10 МО:26) експресували та аналізували щодо біологічної активності. Дані гени ампліфікували з їх відповідних штамів за допомогою ПЛР, використовуючи ДНК-полімеразу НЕКСИЇ АБЕФ ІІ Ривіоп з праймерами, які вбудовують лінкер Авсі на 3'-кінці Ампліфікований ПЛР-продукт

Зо розщеплювали за допомогою Авбсі та лігували у вектор рмМаІС4Х. Клонування підтверджували шляхом секвенування і трансформували клони у компетентні клітини ВІ21. Окрему колонію кожного клону інокулювали у середовище Лурія-Бертані, вирощували при 37 "С до Іод-фази і індукували 0,5 мМ ІРТО при 20 "С протягом 18 годин. Очищений білок розщеплювали за допомогою фактора Ха при співвідношенні 1:50 при кімнатній температурі протягом ночі.

Очищені білки піддавали біологічному аналізу з вибраними шкідниками відповідно до стандартного протоколу. Результати показані у таблицях 5-8.

Таблиця 5

Показники смертності та затримки росту для Ахіті47 7

Оіанаєазасспагайв (ЗОВ) ///////177717171111111111855111111Ї1111111110с1 (Нейосомегрваггва(НІЇГ///////СС7111111111111111111111111Ї11111111125сС1С оЗродорієгайидірева(ЕАМЇГ/////177777711111111111111111Ї11111111101 оЗродорієгаехідча(ВАМ)ЇГ///////17777777711111179811111111Ї111111111101

Адгоївірвіоп(ВСММ)77777777111111111111141111111Ї1111111111101

Таблиця 6

Показники смертності та затримки росту для Ахіті482

Оіанаєазасспагайв (ЗОВ). ОО Ї77777777771111311111111 Її

Неїйошівмтевсевпе(НУ)Ї///////СЇ771111111111111111111Ї11111111101

Нейосомегеагга(НІІЇ ////////Ї7777771717111171411111 11111110 (Зродорієгайтидірева(РАМОЇГ ЇЇ 777777777717171717311111111 11111110

Таблиця 7

Показники смертності та затримки росту для Ахіті486

Неїйошівмтевсепе(НУ)///////СЇ77777171717111117855111 11111110

Нейосомегреагга(Н)Ї //////С/СЇ777777717111117131111111Ї1111111111101 (Рвешдоріивіаіпсіюденв (ЗВЮЮЇД ОЇ 77777771

Таблиця 8

Показники смертності та затримки росту для Ахіті525

Показник затримки росту 0 - відсутність активності 1 - неоднорідна затримка росту 2 - незначна однорідна затримка росту

З - сильна однорідна затримка росту 4 - надзвичайно сильна однорідна затримка росту.

Приклад 4. Перенос генів за допомогою вектора для експресії у рослині.

Кодувальні ділянки за даним винаходом з'єднують з відповідними послідовностями промоторів і термінаторів для експресії в рослинах. Такі послідовності добре відомі з рівня техніки і можуть містити актиновий промотор рису або убіквітиновий промотор маїсу для експресії в однодольних рослинах, промотор ВОЗ Агарідорзіз або промотор Самм 355 для експресії в дводольних рослинах і термінатори по5 або РіпіЇї. Методики одержання і підтвердження конструкцій промотор - ген - термінатор також добре відомі з рівня техніки.

В одному аспекті даного винаходу конструюють і створюють синтетичні послідовності ДНК.

Ці синтетичні послідовності мають змінену нуклеотидну послідовність у порівнянні з вихідною послідовністю, але кодують білки, які, по суті, є ідентичними вихідній послідовності.

В іншому аспекті даного винаходу конструюють модифіковані варіанти синтетичних генів таким чином, щоб отриманий у результаті пептид був націлений на органелу рослини, таку як ендоплазматичний ретикулум або апопласт. З рівня техніки відомі послідовності пептидів, які, як відомо, приводять до націлювання білків злиття на органели рослини. Наприклад, з рівня техніки відомо, що М-кінцева ділянка білка, який кодується геном кислої фосфатази білого люпину І иріпи5 аіриз (4ЄМВАМКФ І С1:14276838, Міїег єї а!. (2001) Ріапі Ріузіоіоду 127: 594- 606), приводить до націлювання гетерологічних білків на ендоплазматичний ретикулум. Якщо одержаний у результаті білок злиття також містить на С-кінці послідовність для утримання в ендоплазматичному ретикулумі, що містить з М-кінця пептиду лізин-аспарагінову кислоту- глутамінову кислоту-лейцин (тобто мотив "КОЕЇ", 5ЕО ІЮ МО:27), то білок злиття буде націлений на ендоплазматичний ретикулум. Якщо в білку злиття на С-кінці відсутня послідовність що націлює на ендоплазматичний ретикулум, білок буде націлений на ендоплазматичний ретикулум, але в остаточному підсумку буде зв'язаний в апопласті.

Таким чином, даний ген кодує білок злиття, який містить на М-кінці тридцять одну амінокислоту з гена кислої фосфатази білого люпину І иріпих аіриз (4ЕЄМВАМКФ ІЮ С1:14276838,

МіПег єї аї!., 2001, вище), злиті з М-кінцем амінокислотної послідовності за даним винаходом, а також послідовність КОЕЇ (5ЕО ІЮ МО:27) на С-кінці. Таким чином, передбачається, що отриманий у результаті білок націлений на ендоплазматичний ретикулум рослини при експресії у клітині рослини.

Рослинні касети експресії, описані вище, поєднують з придатним для рослини селективним маркером, щоб полегшити відбір трансформованих клітин і тканин, і лігують у вектори для трансформації рослин. Вони можуть містити бінарні вектори для опосередкованої Адгобасієгійт трансформації або прості плазмідні вектори для трансформації з використанням аерозолю або біолістичної трансформації.

Приклад 5. Трансформація клітин маїсу генами пестицидного білка, описаними в даному документі.

Качани маїсу найкраще збирати через 8-12 діб після запилення. Зародки виділяють з качанів і при трансформації переважно використовують зародки розміром 0,8-1,5 мм. Зародки висаджують щитком угору у придатне середовище для інкубації, таке як середовище ОМб2АБ55

Зо (3,98 г/л солей Мб; 1 мл/л (ЮОбОХх маточного розчину), вітаміни Мб; 800 мг/л І -аспарагіну; 100 мг/л міо-інозитолу; 1,4 г/л І-проліну; 100 мг/л казамінових кислот; 50 г/л сахарози; 1 мл/л (маточного розчину з концентрацією 1 мг/мл) 2,4-0). Проте придатними є середовища і солі, що відмінні від ОМб2АБ5 і відомі з рівня техніки. Зародки інкубують протягом ночі при 25 "С у темряві. Хоча інкубація зародків протягом ночі як така не є необхідною.

Одержані у результаті експлантати переносять у комірки сітки (30-40 на чашку), переносять на осмотичне середовище приблизно на 30-45 хвилин, потім переносять на пластину для аерозольної інжекції (див., наприклад, РСТ-публікацію М/0/0138514 і патент США Мо52408421І.

ДНК-конструкції, сконструйовані для експресії генів за даним винаходом у клітинах рослин, потрапляють за рахунок прискорення у рослинну тканину із застосуванням прискорювача пучка аерозолю, із застосуванням умов, які, по суті, описані в |РСТ-публікації Мо МУО/0138514). Після аерозольної інжекції зародки інкубують протягом приблизно 30 хвилин на осмотичному середовищі і поміщають в середовище для інкубації на ніч при 25 "С у темряві. Щоб уникнути зайвого ушкодження експлантатів, підданих аерозольній інжекції, їх інкубують протягом щонайменше 24 годин до переносу в середовище для відновлення. Зародки потім розподіляють у середовищі на період відновлення тривалістю приблизно 5 діб при 25 "С у темряві, потім переносять на селективне середовище. Експлантати інкубують у селективному середовищі протягом періоду тривалістю до восьми тижнів залежно від природи і характеристик конкретного використовуваного методу відбору. Після періоду відбору отриманий у результаті калюс переносять на середовище для дозрівання зародків і культивують доти, поки не буде спостерігатися утворення зрілих соматичних зародків. Одержані у результаті зрілі соматичні зародки потім поміщають в умови з низьким рівнем освітленості та ініціюють процес регенерації за допомогою способів, відомих з рівня техніки. Одержаним у результаті пагонам дають можливість укорінитися на середовищі для укорінення, а одержані у результаті рослини переносять у горщики для розсади і розмножують як трансгенні рослини.

Матеріали

Середовише ОМб2А5б55 (номер продукту св за Спи 3,98 г/л Рпуїоїесппоіоду І ар

Розчин вітамінів Мб за Спи (номер 1 мл/л (ЮСОХ маточного РимгоТесппоОду І аб продукту С 149) розчину) У У -Аспарагін 800 мг/л Рпуїоїесппоіоду І ар

Міо-інозитол 100 мг/л Зідта

ІЇ-Пролін 1,4 г/л Рпуюїесппоїоду І ар

Казамінові кислоти 100 мг/л Еівпег 5сіепійіс

Сахароза 50 г/л Рпуїоїесппоїоду І ар 2,4-О0 (номер продукту ОЮ-7299) 1 мл/л (1 мг/мл маточного зЗідта

Компоненти На літр Джерело розчину) рН розчину доводять до рН 5,8 за допомогою 1М КОН/1М КСІ, додають СієїЇне (Зідта) у концентрації до З г/л і середовище автоклавують. Після охолодження до 50 "С додають 2 мл/л маточного розчину нітрату срібла з концентрацією 5 мг/мл (РНуіюїесНпоіоау І арв).

Приклад 6. Трансформація генами за даним винаходом клітин рослин шляхом опосередкованої Аргобасієтіит трансформації.

Качани найкраще збирати через 8-12 діб після запилення. Зародки виділяють з качанів, і при трансформації переважно застосовують зародки розміром 0,8-1,5 мм. Зародки висаджують щитком угору у придатне середовище для інкубації та інкубують протягом ночі при 25 С у темряві. Проте інкубація зародків протягом ночі як така не є необхідною. Зародки приводять у контакт із штамом Адгобасієпйцт, що містить придатні для опосередкованого Ті-плазмідою переносу вектори, протягом приблизно 5-10 хвилин і потім поміщають у середовище для спільного культивування приблизно на З доби (25 "С у темряві). Після спільного культивування експлантати переносять у середовище на період відновлення тривалістю приблизно п'ять діб (при 25 "С у темряві). Експлантати інкубують у селективному середовищі протягом періоду тривалістю до восьми тижнів залежно від природи і характеристик конкретного використовуваного способу відбору. Після періоду відбору отриманий у результаті калюс переносять у середовище для дозрівання зародка та культивують доти, поки не спостерігається утворення зрілих соматичних зародків. Отримані у результаті зрілі соматичні зародки потім поміщають в умови з низьким рівнем освітленості та ініціюють процес регенерації, як відомо з рівня техніки.

Усі публікації і заявки на патент, згадані у даному описі, свідчать про кваліфікацію фахівців у даній галузі, до якої належить даний винахід. Усі публікації і заявки на патент включені в даний документ за допомогою посилання у тому ж об'ємі, якщо б кожна окрема публікація або заявка на патент була конкретно та індивідуально вказана як така що включена за допомогою посилання.

Хоча вищевикладений винахід був досить детально описаний з метою ілюстрації, а також як приклад для чіткості розуміння, очевидно, що при практичному здійсненні можна вносити певні

Зо зміни та модифікації у межах обсягу прикладеної формули винаходу.

ПЕРЕЛІЮ ПОСЛІДОВНОСТЕЙ

«КУТИх дтевіво Кори. павктівнен, Духи самисоим, КіМмсОерлі, С вайтржс, Кіра цУнн, їтак чозуУукудиае, Нана хіа» ГЕНИ ТОКСИНІВ АХМІ477, АХМІ4ВО, АКМІЯЗОб ТА АХМІБНО ТА СспОСОВИ ЇХ застосування «їй дЕвіЗБОа «158» БІ/ВІЗОпВ «15» 813-15-05 «150 61513911 «151: 015-12-05 «ЗО» 87 «170» Ракепсїб версії 3.5 «210 1 са1ї11ї1» Зах «12» ДНК «13» Васіїі3імЕ ЄВИОкіпаїхевпвів «Ой» зкчавкстав аідазксзазу гсазказкчавз акбвксчаса сесссвобтч ЗКУ КсЯ 53 сазчзаєзаєу бкоссвакта ссссссозчсв вчвувсссва зссчові: ссвававатд 188 застсаскаваатч атізсусЗаа засоабскзас довапассасєз есзаєссєта бзезаассоа 150 чеастсавсва лада ксздстач ачасуєчасс ствасечово бозсався соусчссавеа 248 човчччасиї газзкозвос зваскзозазе акгвоасааєто чекати сЕсксКксга 330 ззассзссчк сдодссзвиасава бчаївесзаї час озоаваа сЕЕсасооос всвавкасав Зв задебавЕсу васвасоча засзазссаз зеавусвауцча вкосасксоя бавобсавоє 20 зчзакєчоечез аккакЕкатвв ссавкасета тазове еЗа зозаобовса попвавУчосЯ 485 авпасічтсаз захствосЕк вже савї зоабесоваа сестчееавскс кове а 5ав зоестазсавчс савпокЕсаЗ сачЕччесесх чзчвафедава соакагсчсвох асвастоста БІВ асаціїтагбу сзеаваєцеє влабєкоєтаАк гг еввКає Казавпакци дапавктах й зчзазасвазто ззччЧчесссоя єзчавстоковч звеБовехкає асіссаасєуа дстасаезаає То сзкастозаа зскакєвссай їсабсовчва аскзсоквса асзвавцаче ачачдчазчава Во пуваучаасаа чссовзсавд содоккуаца сассвосвах косу азачЧа Засавиака 54о зкзвеасакЕкча зЕстаасоче вага ссса жажссзезвсо сасчазадіа гесазесузу оо зеззаксстс засббасвсу суасчсасаї асдзавосаа базу сас сс сечавча За чвачасстоачч зазосвчзачо ацайіосазча ссазкзазевав асаскссвка сабчадевс іо сао ззааоцоват ввстозвоов оовоаЕсеає сеЕЧайдевех вескааеека іа зсвзиксвіа саччсчате хазосквита зчазчтчсча чарсваккза зуовЕУчУо 11450 ччасастска Кавозавівє гсосссоза аасесзвовВЯ Вест асваву сааккаваує запо жессекуусови «каз ов вус кавЕ ссїасіваї сеча Ез осзавбеензє Ід зморачазчеаз встскасзаа свссоббазча акесостззае сеасазчебає лаз ї135о тксзотосаЗз зла чакекеа Косасбацок сасстуавчаєс свачччсаво сспасвачає 1280 твкцасксва мбсвацазеЕ восзазібсїв о часосзаакч засскз:їаз сазхвачзак 1455 ащцісатачеє сакочсасзЗ засос вак азакакаєско боссачатах азаскасоуяда іо чесвісввсї зкезовзузЕев клолватеасзя сстзозтакц ссклплааєсвсв соска 560 чассссвоба зсеспасеас сзозЗзасезв автасаєсває сСплсекказч ззазясамте ів-0 всвстасесца соч аствас коБбозквааа посссацчає сЕзсгозоазу вспатасесто 1658 сууаацааснаа скезсзчаас асеезачаса свозтогва аа скавлокс атозвкадосв 1745 свасввтако зоесовачачк бсзесЕтоасо їсвасацова акЕтозЗаве зазачавово їв счюпродачача сЕсссзксза ково сказа оса чазов сзакзавсву ваза азаах ня ствастєвсз ваксексеєує своззавзаа бЕсаАссвока сФттзУкосзк овес 125 севвоезкіка саовавосоз апавзекста йоасосзваєоз сзоззацое газове сУщЕ 58 часах зізказвказ саксзазае чеосвоасав вссечасоко ачачоасяена Ба чаччаксоказ вадчсозтчайа завзчЗочца почачи че стаозопдбао заузчасеа Ав

Тбасавцоза акзезпасвта стасбсвзавчке чЧасовзазчезсо бвзасстачЕ чеовіщеска ІВ ксевчакзчаас вакесчччса кЗзеозззваз асо таїїсс засув ая ваш чсаваа ше пусоксвес чезчевозосва севесісат забросзЗавкЕ єсвасатайх сазана ЕН чаачаваако засо аавсо авзбавсззос бгсасовеїа чезазазсза коссагістак Я звацчссзсч сок сзаск ачеваосзеа возчазевкї зоссавсовов сек ксва о заззівкакч саксвзовавЇ аваецисчсає вовосцисаєа чвссччакЗЗ зе вО 2555 зпсззисвач аїкевазває сзавБссесв сассзеовиа заассвіх соебзвааакчх пав чееслсачатва ассбвцсави сосебасетас ксезЗзасиачеє себасезсзЗ ввоузассча ЗО кЗзовоаздчайо звозо;аБачь вавеісецзсай скоззазову ававсассаїтспа тосзакаах вад каска сацсісванас зоезкозачь: ст ссвата вБізаказсзая заакствааїх а сткаачічснЗ зкозазацоеві сеча кецазалеос зчавозвосЗа КоадЕасчо яІщо щити пшезещод др зго - в НН ИН ІЧ НК «ух ее асчсказчзаа зссекавасЕ засасачикс чческаеах почав с КокваавощЕ. НО «хв р о в ни А ки иа ми я Меч хм нг єю ую й ди ее ше ЗЕ ЖЖ чавсозааучу відакчсичаз зЕЗзчазЗезоа зазосацзаа заавзазкоас взаласачаї ВВ сетей ких я гдиче ть сю пи ку ко пе ее хх сх ср у и я же Можемо запа: тс сат заавкасова звсвахсєвЕс авта ках ток азастта Козазавова За савссававкіс сазавазеача забзаозцах вЕаЕкчася сосавадеоЕ бзчесоаспаов НИ що сур вих де иа иу сит? шу с му Кн и и и на и и НК А А еще

Ес ачесо аква спав сваасшсса чавесваваств козаки 306 асвслазчсваї ссвзисоовЕ всзасаанса фібпЕдтскив вт ксвис вам ия зізи

ЕК ТЕКЄ с ЖЕЕК МАХНО Ва свавсяв секс секс ами 4 сов з в гу б ожен их пре шт дощу зр щі Кеш яви ж зчодеритии ит чию мае с що сзвавезпу вохЕсайсаз баз сказчах зЗККозазко сазозвазЗЗЯ Ядовача 31853 савовузчаУ зчовзасвсясав сесскізаво совісссвії ззчасцсасе ЗУуБккссаа 324 а де да ово й б ут би кзкчачу тм гам лу жу ав ту В п тая ох веж я шу с икут я - Ум рих ши сазкЕкткацац сспвозсеЗав сЕуказавктак ЧчеаксасЧтц сзвсазсвала павазЕваче ЗО ред инч ікри сот пода пчи пр вик че страта дк т - ти гвуч т ох мох пу вв Є її б ОК ачоеззадавсо пвкіаслочає авпісподчаї зчечсксамс зівсоззавав зссккасаїсї УЗБО с м м ок евк ко ще ттгучдрн Воріт ких в лув тихих я о пдтвам зала зацусвІчсч ассастозса авагоосвосп саслесаєстоа акавсвсоха бсхлаасвава жа про па ни пн и чо п а ан а а ча а чн о па а ха их зх уж хг жир зай пвациаови соїасїссаса басасденнас зозозаЗива зупкавззче весла ЗЯнй р де лу З ее ни на ки еВ дити Е: се б де ее яка фо фу й джут А ваїттсата сазчасвосвЕ козакксосве дававсазлава асп ватсоаззча часто аа звзсакзЕзач зізезаччав сдасвасосио каса вовЕ ксссзвзавоха адек ель ЗНО й й : ШИ чи до па а а а п п п па а а по а а п и завідцацчас ссоесжооспаа апосоаЕвовЕ чрзавазсвасва содчасствастлооа чада кх зве

Жовква су Фк еВ оку щи пу пери чажз векахзаеваа впаде чик КиКовоМаю зіска ЖЖ с Як а Аме г «вії» 1058 королю мим

ТМ КУ клени трів де фія ий сккам Я я ке13- ВзОофІ:в сВуКівпоівах - ОТ Б. хау

Е сот края ки пан по же К ку ох авжеж ит в пщовюослосвия й ух ВО хе ко аізчваївавзв звокзасваа васачтіасівй взспчзУкав козчЕвкваа ЗБЕ Еаося ВО пише кац січ аовоссзо взазавовЗва вабвакаавч васаясзаче яЗзекасаша ех я Кк ке чена скїе ки з ї пкокн ум уч я. прив и С х 5 дих хи ІЗІВ З -ккавковза заздвайаїтва засос чах чЄпасВово чаассваслщ ЯІтаетопЕ Ми до я учи Я я зу - Хрі лу й схе КАН НН КА НН НК фев спе сх ОК

Ессазозчав часте казз завезебсяче завозу сссаЗчова спас вавсч ж я ц н : г ; АД А н г пох А - - зп сидив м ще вк о Я я хх г ех хх по Др кю ле ок и ту вики ги одежу дути зу ро ДК ЕН зЧеватвеек твуазчсвнаа затока засво саатазавсс ссдачКааеВ КЕ прасок се щих рах в рута гіч фа киплять коді панни ЗЕї ацкастаюо стстЕхозое Кпосеавааце запо сзчнаа зеасавосозе овоча ЗБи уч фе дк акооех в пра а у му пи п а че ще ще сової та лк хх. пульти т - фо сриз ів йо австсктадак созсззавие баалававич пасе санососососпе ха сечим СИ! е ен и и нн и и «хм кан на п п а а а а п, кн ах авсіччасса часа зчовз заавзаосава зесчавачсЗ Зв еоспе саке а 485 суєту посух фс часов их о ом к ах аю у ф- 4-4 стей дк тет ще очі м Куди ща чопззазоцювла спасавзаднас ЄзЗзвактаєвзас пЗебвамака сповасучеси поаавойкох не ке кт

С ак а я їЗскї у їх Кофти фам ук мо ну М М срок - г ї чех и холюд Корея їх звазоуюву вусвовееес бсстестсвае Кстактавзою свесвосд»вв о баткатцоо во ве кн НН я в кача дер в доз очучд итк еве в ин о г опеок Бурі Ко счачсчасао сестакказа сукзааазава асбваваччав зчасУсакос вашей Ба

ОВ кажи в з то иа м чаї ки ен м я ше ЧК ки че чини пт акеуческа асаквчакКса соачокасозчах збУупкоассас іі їеаваз акассувоча ТО севеетазох зкокавоско зопзсзсаєта сакоавсоаваз пессаквацдеєа дчЧеласавкта КЕ чи можу? милим сек "аури гав ФО К ияшоет фін дя са сх ді ду кох сроюя ща часа стсв асетччавава сзккзизосЗ чазузаваккч вазскУвико здваайаледає 40

ПК ит ихух у итих пря Ма ел нь ке ші ШК я вч ет дк р кт пе НЯ мк уже п дж ати У завоссвасс авкксаккаси авзжеатіа зчадтсекхо авбсазчавата соцааЗоа чо - сх с о хе фата у хуй те ще Я сус кв ххх по нн а а чн гук ор сксовакажв зазкпавсв сзесвавквеє авзвосааава зувекеавай вла зво их б: с Фолуй З хо людству де су х ї ре я мч, Ше пила ле мо чех сисвохассоа вассівсаво ач зазаачассча авось їх ками й ет ях «ії із: сміх а вия «ХХ очи свои Ж уж у -- 3-5 я о жу атм ке

КА Белл івна НИК АД вен «а 7

ЦІ МУ погана аа - я з їх лю ду лю ех скуч с дл лем оо у з дк умжум слу ук туужв км реж ях ях цкззваповав авпсасссзаа хазааавцка возах сабставциях звиазниЗах 55 віавачЕчк гадсеевоКос ЖЕК ассокака зоспсзвзав сезадвавсах квадрата 192 сф се І хи В В ду фузочогх сх пусмі ду дет фе дну ше ку и ви кет етекох г їіай сззчкзакка сасвіжссва ссвовуадака вабавачіїкос січЧчаїзчтвасзз зовопдчов о тик ин НН о КОН ЧК хі сус із ше аю оц ка пазвсУучикак сксавкка Кззаввакок Егазаовава зраз сзаазч атастсскка «ай ких Ф-осуреу фе рес ех як «Жожетщом Я що ач КО в в фури г пуф ОВ состет Оч за чаксавазам савечазаси ЕС тачай чсвавачааК соікасЗчсв весна я Зо прим ж щолрек ос м р в ов емуч ух Я пуд сват т гм Ве З схил льгх В ген вуж сх У ух б ух я тку чавостоваЗ гавзквавцєвоах свзсацесосї гпапзчесоезис аавясцаеасео чзоазававЕнДсв ва шумі ек оче чин догм не ди пунк пн че ру я й вссчваїсасс васававсоо ззагтосасв здвасскавааз звассзкакоеє бавасасавов сш пн пи п чия Квіт я па аа п чан ня пе ПАК пай зписасокста сзоавзаавсозя ассевеласа зозісаазача сіла азчсав вок а Во

У де 4. их ши в НН и НА КН НКЮ ефек см їй сю ходою реж НН песеЕчусч сачавуззав зУсовосаз звазскааах акавекЕках ссесаскаах КЕН зх кох ЧЕМ скелет о дич що що з гри ких яв дод кю - Феож ж а пох КК пчзпгаспава сабо чава чіачет тат абІзососих сібазеосак пай сасов ми вит яр отри ст лм узи жІВ УЮ 0 мк ехех у ян 5 ух ух сім ов Як лі лу ие ХУ Ко Би шпИезсатаста бЕчоссзавох пасвцезвЕжа халва стозча звавайдахсав ззопзавазвка БУ порі ж. 4. пани ко крана й ж Ж лоту по че и сеюую ху В хиб: ки стае до их тру чактатайї свачаааїкзча че тавезва засо азви зоба сени зам дае оре моя еп у в уча онов ноу ож кА Ф сю кер чи че су ьстихучеі дж ик їтаснавкато зЗвоаокссвос савоакакзса апссссавозчса світаїдесв соках во зацсвцаєви апіїазчаіа бебі свзабету зчазахоЕка сепсопопвеза авібчачаєся З

Куй и м ж ж дея «ж ум у и и НН АНЯ ов В фу хз Зі чксссвваза деавалавкти спайс сга шжЖасфсвачест сачачочевк секс Зо з дикі том фе биту ту сан ях з тм су сих су су ще суч че сус іно се м В пусту спді чазсасччава зкзоаевкав кактваваачсх завивсвека всвібавсзо чаваазацвЕх яв су ІК мк сах мо и Же сю ну зни м чн ся А а а то чАалаачлаЯ ча кос зигзаг вс са - ис с ку КЕайпсеси час во НКИ зва зіву апа УК ув я «ків 4 т З . поз чкії» 1523

ФЕІ18 ДНК

Кора ее Уч и ННЯ чи р ска «813» ВакАіііфіцж КнНижівсізонів

В С сАО0 а чзічачоавов взазаїабчза бававааавасв всавадосаз сзказчзсаї черсвасчичи йо ще сон я шкалах в дя фр дк ух суч м м сем ее їх БУ та ж я ї- т и рум, ска аівачсЧиК агозвокос сЕкзпеціа вбосгсзосвазав бачазавева сайплзадааєиав їх дея юю КВ ху вт о я 2 те «чик сті са за ач сер о га тужити з бух сні ка.З. са пасачіства Стала х щоархьа киасазвчеов сочЧакзачя золи Чак МВ ня ле гр иа щ паж ві Ге Зх ее ех З ее ж сви п м кох ОК свасзсекках спозаккссв Сувззвааесе бізаасдайста вічочоаздаазо атак тай пуф ух их и соток кю щу ом -кк нео поерорІВ ек мом мом лююою зе роги що ов в отих хи За: ччксаачата бавезчачска іс ссвЗав Зкавазазеть сте вив зкЕкощзеащеч З3з3 іще ог щоки В дей ху у по иа аа а ка пи м при а а сек а ки м с Ей чавостосваз Бгвагтавиес каВивоЄтиВЕ осел йавзчяасе зсвазакоса БУ кре кс ди вАДд Ки Ж завада плавав енвааи пла ХЕ. дух їх де жи рух в кг і МН шУчасста о часвавшсиє звикла пава ЗЗмЄшеавех ЄаАВКЧКеКИЄ я весвосіссав сдлавдайзи актах чаба засаазаов сЕдавациаа випбісні а щи висавососїв савани часа счеса часове спав па жи вс ЕКтвих де пече ; ефе СЕ ся кид яд зай штшостЕкУКоЗз сзавадлава ацбовосаба ваайастізчаАзе вкадсвекав сговакзокват. 355 ни и НИ, НН КО ка сх имефря ди я сх Ж. ояж аж пу ж Сен тата нта І чеассчава свастчазао сЗкесачкав абезсовосЕе осрозавсосах бавччасов ва х пук рек щу ж вет ря счпутвсхетж в вжи щ мощі що прут прі ся еп ссозсасвеха скопоссовло засвацев'ба ссОвзашеЗв завззассвае Воплі е пай курча ни м и ни гос кичиж Ко изд О гроз р о 37 сасстасахї садеазаєкче здосккаасвав засквксчаих вечабвсзцає ЧесасвеЗх як їх Же ту їв БАЧ содого Му т при пути у еще І: ст. и: нота МН какзавквісз спасдососаїї Кзазі аа ассктвузов свв атцв спасає щи сі ее сірих сх зу дея я фе їх ких тю Же «ж аж ч опи ии т ик р ит и а ма зачсзЗззсас завеЕкацчавтва ЄЕксавіяатч задав: чЕка сассоаалача заказ аох БО иа а па а а у п п п а а п п и нн зап з сстававка зеавсвассс сазссеккз прачсзваса Засседсавк себе ов зи дк ше ому ее ся ту, ех и М и АЮ дм мож ою с ж я хі ее у че сх ту їх Ох ду юю Ку. зчзавакасчава ча їсгтай сі гади чі ззавопозека зсахктввиво зззвааатакх чо тощо кпк ви Вже мчнко ще не КК іп чаввдавйасач аовасоскквс кактсавост зравеащеки сечетаваке алея їпхо ж іп завізсаааа Зять «вій 5 «вії» 3178 пт шли

БчУНач танк

КОДкя тр щем 2 Кене - че Її межах я у «а ааиплаая КиС ІФА Я «ап 5

Меж йо» йус Ач ба бів тб ті. бок бів тів тів вдо» іа Зав те

МЕМ ДБЛ мус АЛ М КМХ СКУ кі УЖЕ їхав ла дав АВ пам осве кю

З ях ок 5 ї Не ха їх с та -ч ху Б - кн чи їх Фрі Пух ши мо сх подих Мед

СбУуз біу Су Хек ех Аве о Авротяз Уві біз Тук Бу; мч: Аїв Ак АБО хх ж - ке а с 5 ах лу ри Мк Клен а че хо чн ложі м Хуан боках Що тло Ток їх Ме вхо Аа Аів ів КпПе бів дво Меб дви тую Бе бар оКУЖК еп Му Мах че ще як

Бу х НУ чи ш Е ; но у упо нн о ткач СК г я ху че соя Тк вк Ав ошут Аве» о тТУж Уді Ав ге ЖУК Кі Дав око Бі Бе ово дл

Зо 5 Ви я. Жан Мою пог кю сл вчу ке чн виш нич лох Пон го з мая с-і во Акз пр озах СК пев; ївх бі Уві ші ТВ ОУвХ Зід їм іш же ее пе що 55 та 5 Бо как ж ж Км т шу о ин ОНИ Фодехя хх тілах хау тех хх АХ яку тих 7

Уві паж жтлюЕ Гео біу Зі хг Уаі біУу бі тів Ма) Ту бу їз) Ав пе і ах я а а п бум Кох х в жим хи хе су З - окт ант ка У и ши нен веж Бек без пев сіє їси) ев їхрв» го йех дав) Авр ди азв оУаі ТЕр тп т м ВУ ВУ

МО 15 112 зх й щі ох і- и Де оте В. хі жах Я щу у пк и Щи

Зів Аза Ве Ммеє Аза сій ті сій бій Бей їзї6 січ бій вхо Тіт дів 115 їго ії5 й: ЛЬ І ха Можу Мо Се Шо ке ж Ми у ГА ее о и НН Мо Ко

Авовобіп Маї Уві Акад Ана віз іє Авробяп Без ТвЕК обі їжи Ася вве

Ач Зк 4 135 135 155

Прехує г я с и є, Іще т хі сошки чи ух «А їж яхт ж му тТУухк Тех Азп осів ТУюХ Пем опей Віа їм о біцш біз тк біб біб Бтя Ко ки ше уеке зим ї48 їх 155 ї6БО ри вк сх Мои ст тн Мои ж ню Уричж тож их ХЬ туя си -оож мах зви одіз тві ака ех ТЕ ем бі Бе вв АхЗз Ва біб Жах Себе вів се - аж шу Ул нх 7 кн де жк В з Со дк гом у сек газу дак г ту аличу й нку век Ніж Кпе Узі ТБ озер мес бро век пе бі Бек оці ВК ща му да їз Гея по 18 155 із 14 доки Зк ве тах сх чт іду ХА пат ух З з щі мат біз вку ТУх дів УЗзЕ пів бе) обей Так Уа! Тух діа бій вів Аза АвИй роя тури А, 155 КУН шк

Жошя Ма є ХУ ку я Ж оз Же Можу ак ще ж 1 їхук є Фі сн З й пт їжа Нів без їм ба Без дк вав о дів Ар о біє ТУЮ сіу АЗаА АЖЗ ЖК тк їх зе сх 15 Я вас! ль же кох а ж ж УМ сне Му се бус 1 жЖокеч Жан М мука УЖ ххх бі» Бегз дк само ех пай тТье ше їм тшЖЕ гБае Аа Сум о дею Бій АВ тр -ш "Зх ак пд:

НІ «У 4 доки МІН аЄ бас ою о суч бу МОЇ ох з СУ Ма Тв бід тек о Ави дві Н чЕ

Зла ж: ДЕ ч ав отУю ТХ Аза Ві СУщ У вк лів ЖУК Ав о лвп шах й Ки 55

У йо ІЗ о с 2, ее дю уч тка МК зви Год янх в чне жу Мох уч жк 153

Мав опій бій Тіє аг3з пі Тахо обБек ВвкОо ліз ех тв бе) КО ТУЮ МАН

ВЕ 55 за

ВО Я 5 Ве. ях и ак ПН оду нь пи НН - і ом мчч х ня Кох дуг 1 з. З Тл

Сіп Бпє Акч о Ако біб ТБк о ТВх їжи тів Аза ем дароіїєч Уаї Аза тів ре ще те

ТБ во 85 га к Мох же ту же САУ до уж ІЧ бів их -е тп сх хх ІН Моз їж ка

ВВе оВхо Тех жуУхХ Взп Заї Бх3 біс Тух Бк їі Біу чаї Зв бе біо зе зве зав аа З З0о

Хк «а мим пк й фра уує ІЮбуає г жу ж кова жа см тУчуе дати буму їжу Тня Ага АБбоУЗІЕ ТтУХ ТВК Аве» Бо її бпіу Уві Та Вп Ака Ко зугук чкп зак -

За 3185 315 ЗЕ гля й таку Ат у: т вела її щ сини нн Он а НН сш Щире три

Бай оаво сг осім тля Бі УК зів СУ Ахо Бк тТКроУЖЮ АЩо ТВ оБКо сук зх чи

Зах ак ха у і «их сот шву 3 шля ши ль Фо щ кул дк хх

Тк Меб Щек ББе їз Ар оЇзм біз Ав о Аза фі ї1і6 вся роб ро нія лав 4 БИ хг Жан ах сад Тут дек Хол у Ж кує сом т Я у яю ки щи Фу М

Мою те бла Тв Пец вч Бех їмо ТВ ті піз ТВх бо БО ЖЕ вав

Зах зап з а по ЗБ

Тез тв ім і маше ЖУне Ж ту т ду Маму лящ З хх рі ах

Без Зах пі Бі Аза Ажоа ББе їіє бів Бі ТЕв о та3 біт ЗіБ бек Уву зе че черв

Зо ЗУБ ЗО

То с ст УА ших. Ж кеш ЩА Ан у КА СЯ -ї зе Ж ут ск гро ук ко

КпжоАві тп о АхФч їз бі Ава Беж Тв Уа Бпе Тв Вес Авю ТУЮ БУД

З В І: тер мет зге зл ке и ах 489

Гм СИ ШКО как Ша и ШО с. Я 1-5 пи че хіх ее Ше жест хім їзух її зак пень веб Бо Аз Бпа бів Уві Бпе зв) о вне Тахо дев Бе дво тя і

СН 419 15

Теля рт. м Моз з те Ко уч ж тре Кі их Пт ю 7 З я: чи ХУчх М ум пл т ухе

ТУК бів ті Аз» ТК вто від дво Бех ТВх піу тв Вне Акоа ті ркО й де яд

СУ 25 а лока же сич о чн и ях що ке тлі жи їз (ті пу см бе пі БВпе дів сбаі Тв Аа Вів біб Бе їїів вхо бі пі тТБх тУуК Бех 35 СУК зав ст ж Ж юю дуж саке лихо ВН зах пл є «ек уУ й ке Ж чаї віз БіБ о вахЯ Алю о вгО Сі віз Су шів ша Ав ожТук Вво зах лав 45 ще як: за ак елек ен З НшкЯ У ж о АН бу ет одн сла ен ЕК У Доки крах ху чт4іч Зі Бей Кб нах щі щи оКЕгОо АВОр об Ех Ка Аж дАжсо ЗХ ГУХ ж ех пс ЛЕ ак СКК Як за вк аг се ки 4 з ни нс Та Я в ожіки С туя їз шок У вах нів Ах ем Бех Нів Уві БВх їй ТУЮ же ТК ТЕ їн Щек Ащо як тах зважх з ізо За тою т Хбутує Й 5 т і вк іх бує АХ ше Тбжачу іх тиж жа тину ох

ТвВк оАвротУХ пі Уві Ті во) Тех ТВ Авр о їх бів дех Меє жо дід ку кас ха

Зо Зав щі два ти буку я Рі Кн Ач о ато тво вет в тати віх їтук чаї Те: ТьвЖ Ні во Бо Узі дДвройб) Теж о двп о тТВх гі таж Азії кл пз пк

ЗІ їх У і Мк хх кч -- ЧОЛ МУ шт зу,ужк с яким Ж «шк У хх Ше щх С їж "печі Її. і і: авроакч їі Тв біб ем бус ії Уді БУВ дів Бех ТВж Геч рхо дів

МУ 535 за сі тТве о отлтьх ві ві рже бі Вго бі БЬьеБ о тїТнх ПіУу пі дво тів ж вт, ХК ОЗ Х а Са Аж жа кА КБ АХ БУХ ЗУ З А ше

Зо Ух ЗБ ше гуж ТК. м пе -х ж Між тами Ву мах жен іще дя дек кт ву

Аке вх ЖБЕ Жаж АвпобіУ ТВУ Ба бі тТ»гоїецз ів Уві Акз Узі Зв

Зх ЗО вт екв ьки и не и и но о о аль на Н нена нь ОН во ШІ НИ о ана и ек орто їв бТВЕ обівр обБіп Жух Аку іч дах Уві Ак Бе дів шен о жвЕ

ЩІ мох мяч аМУ Меса зжи щі ч« дви Бе ож тіж дупа Мді їв дкх ГО м ойіс жвуУ ше Ж ух ях ще шу УК ай о-жвУ аж вх УЖ Ма ло балу їЇхАЖ БлХ ЗК За щі АБИ

ЕВ пл «п

ПЗУ БОЮ 55 ше ож Ох то та мі Мк ща фон Кі км фл дя тя Я віх сх зму

Аха дка Рів о мі беж рах Меб вавп дк піт ів бі їй ТВ о тТУХ Би ки уже пек вуз ІЗ Бай пає ів, її сову йо Го жюрі) ую ІЗ ко і ж хо дк ЗМсу ку уче ян

Бех вне Уаї тТЬЕ АгЯ сів Впе ЖАК о ТвВЕ тах Сі Вт» рев Ажи ВК ВКа пи5 йо ва 540 ьКе пи их Ум ує ую фут ше т 1. що си зт щу чи НААН

Евпе Тв о гаеотвК біз тк бів пад бів без тв Уві азп ові сала бі У

Ра во ло чх чан и ВНС НН нн у а НИ НН ші - ду Жруч

Уві Зек Тих Зі Бі пі ттк Тус ЩХіє Во Зек Жіє її бів УЮ Вко и тип арена во БУ и г «жом о Шан хо ЧНІ ча Кр - маш Точну г ЖІ ще У дак чаї взп Вхо ТВ Аха біз вів біз бій авв без бів Віа вів уз Був ке кол св 575 БО Ба ла 47А в на о Яви піч у Трне Ху т ВИХ зі тя ХВ вт вів Уві дів Бе їі ББе ЖНЕ дхч Ти Ак Ме сі їеч бай бах АВИ це емх ев вай ях ДН, зі «в деку сМауле й уч зе х М пішки В 2-1 зна ШЬ ДІ тві ТвЕ зви ек пап Мах и піт діа ліз два» бен Узі вах ув їм ще ляй як с 1 710 НЯ НК

Же Тех прю я реж хх Щі Віз токах охк Мох Тех "кззт Й вх пік пк

Беж Авробій біп о Тух бі Ніз вв Бу Був Меб Зм) їжи бі вів Уві) вк сл чк

ТЖ За 35

Мои М с міх жк щих оз ов не А ЛЬ НН НН НА в 1 щи Хр ака Віа лів Був АКжч бею век Аг Зі Ах АвБ їм Ббев бів Аве ВК а та їв ін, М их ті Тк ох о г Є рел Ч Ж ел ки є сх Же ох ФУ С йвровБа дк тв ї1е дав Бех тв щів б3а Аво бі тв ств вій ех екх пет чиє

Тк тво тво й Я ях що цю хх млин їх "Ук чт хг ду вв и НА НІ - пвх

Вал осів Уві ж ХЮе хек під бі бРфУ Вко ББс тТУух цу бі Ак ІВ та Ге тво ж 1313 т 2 ех я Жов божу і, таж Су лину Мо пла Тех сг Ех їв: бій їжи діз Бех діва вка бій дв ТУЮ Бко ТВс тех Зі теж сій тв та та5 по т тд Мат із до Ех тожаху аку Сиху Чех щяних Мкюо й мх Є Ху в»уж уві вп овуч мех їх Сец Бу кко ТК ТМЖ Яка Жег АК Ма) дво

ЗУ МІ Зі5 г тавк ки х ее Сн я лав дулі то ст СО Ж око де га Ж хі А 53іу вве Уаї БтуБ Бек Мак бій вав о беч сів жів Авробеч їі мів Мік

Мі рУуз Уві іш ву мді ба вав пі ру» дяз ав їм аї Чат без пів Був УЗа ще Юво) Уві Пув дав Уггі Ку) авр о аБп о Сец до лето ло ії пд 45 трі ян В ой х тт п сь ше о На МН и Можемо яті іх з ух же тах ЖУК веж Ав щі» дек Сув Щек б1іУу Меб Авп дк СУув бі: Біб бік

НИ рожа Я

ЗО ззУ че кашчке ск их ох зе кас ше с хх о На ки не Ж чНЯ не щи з са ж, пів Мей Уві Зав віз сій бев о бів ТВ баб чав Ніч із Руз Мек дев ак ЗТ су Ж сс й вт яВа ба йхжач 2 Зсув тих УУбкх їж ша тв ми поко чх Меорк ж ць ше хо їз тв су ча пів лів сало ж мів сіл Бе БЕХ бЗеж ТуУкК Ті Ави тик зо щ яка печі

ЕВ що М 1 мож боді Жука бом я ношу ОХ кер Ж кв бануч хр тег тон 4 .

АЖ За Бош ях важ шекх Уді Бк Божа БАХ Хе ТЕ ВБ'вА ХХ ії УЗ

Зла 4 Га

За За ЗІ

БЕ тет г ть нь и НЯ Зо туз жо ся, же о чу ге с- ше НИ Ж ка Ук уві віч Тв Так Аврволье бек вів тТвх їеч ба Ан о бев ші ма А. пзк на вх

ЗІ ща 325

ЕЛ св бля кл "рах м Ух ря ху хв ух Сан ше чи . нень ША біз чЧаь Бі Бо Бем шетї бі пеоавожекє без; біз ЗкКч зі бів БСК АБО зо ЗІБ зЗ45 х Зв о ббхми мех Сеул мі ї сову ше нок и НН а Я х ап Аза БУж Те Бех Вів бів їм) Бі АК БМшжя Ах 5ів ба так о ввр пе жу ах ж ше ХХ кеш ТУ шен лм хх МІХ сві Кіа Ха ше ах Уві ЖУК Бій АврвоАівВ Бу Біп Бек їі АБЕ Нв їеО БФ о Уде АЮ

Я щей арт з55 СНИ ау бак о тн б м чи Ж В м туту 1 Ж лу МсУю їв бла тік "Тк їФк пів Акропіпй біб без Ав о ВхОо біз їі пл Ме бі Аво тів Т1Ф г Гая т п х.

Ка леми ам

Ве ід бімш мим хх її М жук чл Фу ха І у бхяежх Схху Її лі щ авр Аїа Ба Ав) о Бен УВІ АІв Бех їі шах ав» Уві ту -ех ввр дів аа5 395 і505 яз ж ях Ялом жує Фа тт м пе ау мя и хв к вок их о

Уві пев бо лов КО БЖ тів деп оКжЕ Бі Бі дух пвжосім Те тій хх чали 16910 тп 1020

Ху й Кошти не ра ше ех буд гою аж З у Феквен о Мчах о В

Бек два Ажч Ге: іп біз та бек ЖУК ої Тух ТВх Веб вхо дав и У зви дипзиц ках їп35 іп ун уж ЛЬ косо я Зк вша У йсеур ба тик т пгт Пух Томи т ів Уві БІБ АБ о шЗУ Азю оБле Ази мех Зі Пе) Ав о БЕК ТкКВ Ана яз п ц зт щ 1559 1245 15 ді сі у пока ху вт Зими хх оз Ух фшжу й вк ех -у ще СХ дч вів ТВх зі січ їв ТВ зві бій сіз вер бі Ввп о ТаК нів ве ме АК зад 1255 іб50 1385 їж дії ТЗ щюж жі сих дих Ві ім мні дає пів ім фбінУз й зн тд мсмо ож кьЬВ ЖИ ю ві мал очі ЗеажЖ ів са ожкде КУ зла пк зап іп за 150 тт І ие ших К чи тат 2:53 ще ж омуя 128 ж хо пт: тв хі бій ко Ави був Бтя Жук Узі їж вка УК Жак вів пів пев 1485 ізо ЕК хв рт ех ому сте ут їж Ка ому ЖК іх ім Мі ш

Уві Біу щі бі дшр обі ТуУух Уві ТВ її ба Аз» бі Аза Вів 110 1105 1315

Я ше не я на Я х КУкраз ТУ: кат З о у Ши и же Тік Лог г

Чі Твж бзб СБУ Пед Тс Бипе ба о АТа СУв бо Тух БО їі Бо чкіК тів як 1315 її КУ

ВІ стр ух беж хім пе йде Мом раю сплю г реве ся з о хо іх січ ть жЖУЖх Мі Таж Азов Аве ЖЕ тТУЄ їм) ЖВжЖ їжа бХе Уахю МВА

ТЕЛ 1155 1155 ср хок Фу да см хі га - мк « З вх тя яму ле у пере

Бе тет о бек Віз Тнк біб Нів Ме Ттвр о уві бів Уєї шек біс Тех 1145 МУ іп ки ек м т М хм я Лос м Ж кох я см АД пах піз БАЖ Аз Впе Ні їі БЮ Жек Зіж бім Жве УЗА блю жи ох

Бо зіва 130

Бук суч, г «кій» в зії 1135 кіна БІЛОЮ ким, ер НИ -. до жука я как ох «віз» Васхі1чв Свиріпцівлвів «по» Б -. шт Зв т не ше проце он ві М ду ую г тя ДН жо Улу хі пок, мех вк ТУЮ Ше АБр о ТУЮ Бас Був Мет в о АжроБіт Бер отТУухХ ЗВА Ер 1 З 13 15

Жовч Тік С Фо Тулі Бл ху Сто раче и ша я ово о А хрдл св Сбокха

Зеж ТУЮ Кіш дай БРюОз Бі рем Кех Іі ПУ У Ак АЖ Авав ом ЖВХ бимі дя я в

КЕ ай 45

Ма ву їв 14 КУ 2 чи чи не че и он З КН Код яз жу й їх: сь,

Таж бі Св щі бі Уві Аза Сея Ті Уде цщіІУ ТЬЕЖ Бей бі БАХ га їх и ща

ФАО ам г ж бле хі: оса; Ж шт бе те ту «я тору Тор жах щі бух лоАаш ча Ж бат без лав зве Бе ев Ббем обу щей осей ст 5 Кк: 5 Бо р ж рук хх моль ко тост у Щ ух АТ то тя Іще у ее Сея лк хо Еко хек Зап Ав о лав Ав» Уві Тув бій Аза Бе Меї бів 015 31 ай ТВ По йо -ї. га кожи м «3 ло Ач ст кота у до тещі шия дш В

Бій бій їем бік б3м сій Ах Я іє А іа де воза очах жі ож А лів ск щих 5

Я и ЗЕ

Жди М охо кн помяро т щу; Мак їх Конт Мр й схо Чихію о щем КУ жк спхуао У суч х їй Ваш яв їжа ТВЖ сіб ем Аго Аяв оту Тк Ав був оре ев ге

Н ЧЕ їж

Іва 105 ТО нн а го и не а и г з енх ее Феш Ж до хг ож Ку ви ву хи Ст іч зів Без бій Зі їко біб бі АХУ ко БО Азів Уві Акз Бек ТВвх рен

В За зи 1К5 18и Ме тек тн боже бе иу ЖЕ 1 пи же Кщіщо ех Мі. су Беж о о НЕ чаї вне йо дез Ве о бів Тв бе) Нія Бек МіЗз Бре ха) їх Бех Щек 135 Не 140 те ШеЕго ша біб ак біб бо йівж ву пір ВкЗ Тек Вів ді піл їли жо век впа Бі Бак пі Бо ша Бек Ба АКОЗ ТУух Віа УА бАй ьвВ ча ШО зак и 145 155 155 18 токах гр міх З бфраю ут х ше щі Рош кт г. фл 15-х Ж " ч Том У їх ту

Без тпх УаО тТУюК аа бай йзід мк іа Авип їні Ні рей Їи Її їви КЗ як й з-за Зв 155 178 ї75 ще з є Х г ЩІ ши ь и Не Мо С сих в я на шо и чи КО и НН АНН ГО

Авр йіа Аве оті Тут Сі бів Без Тор бі беи Ас б ів Бек бів її хр ве ЗЕ 185 155 ее « ТУ, мое Ух ток зе ок Х ян Мік М хг ВІ яв Мія кн

ЯввоБем тТУХЄ Біне два осп10 цеб біп Аза о Ахоу ТвХ Ак о Аво ТУХ ТАК АБЛ із5 ВО З

Ма се куме їй ох В М Кк Гог дж нях Кч ся Ач Ох Юм чна нів пу Уді Тв діз ту Авподво обі їв піш біб Кі Ахщ сам тн «а зе ще

ІВ 15 РЕЖ

Ми зм -з З укх у ЯК ощчи Мои УА ще 4 ро їхіч ку з ки бля мах ДК ую

Ваг бко віз бех Тр обецй ау Тек нія бів вве Ат Аха Бі Тв тах тк й, Гео ек хх, МА

Ка 23 жа Бе ту зл СЯ Я шкі ж Качур чиї хі чат їМчрх: їх чну сбпкия МНМтх дез хі ож цевз її дів їні Ачвоїжиа Чаі вів їі ва БВЕо тУж Жує Двпочві дкЕЯ 245 Бо ро: о -- шо ж до жди лий ше дк ен вч У томи що ж чу Му піз тТуУюк Екс ї1Зіє Сіу У) Авп око іп о беєв ТВ Ве бво Уві ТУЮ Тлх ази 5 Та

ТУ г У кох ши КУ й я ще ее по ов ШО під блю Му і ки ка дв овхо їів бі бваі Тв внз АкуУу Ака Фів дво жтв бів ТВ біУ дві. ен ЕЕ "оц

ТУ й Фн5 як азу НК ШК зва пи піз ух ффрсих сббхуу Мих Со іч де доших г 1 піц Сув аа БВЖОо Тк оУуаї Авоп отВпу БкоОо ТУух МЕ Бех Кдпе Веб Аво о Бе ни зак зах о ах Зо

У сш що г Може дуети Тк мл щи ж ее ми т ху їх вів Аж візі дав да Ак жо БКкоа НівВ цей пе о бім тн оБебв ЗКя Ави 305 310 215 3260

Жах п ке о аа НН А КН п шу паче 8 Кене У я т се не іа ТВЖ Тіт нів Тахо бі вВкз ТУК Лай о Бей Уві бі біж дів Вкоз Бе

Сея з ща по о КІ зо а кл 3134 Р жк 2 жи кт Ж же БЖ Ух, ее НЕ ою са Ве Ж нки ву тех їз Бі бу ко Уві бБіУ Мі БаВхЖ УЮ ТИХ Ава ОКА Ач їжи бі дви зів 345 156 вежу Твж о ЧМаі ВБе ту Заву вим ТУ Пі ек ої; тб ркб дк; Ши» пі

НИХ ах Уж кЗе жах зе вжи ТУЖ о біт Бе Бо КІ ее в ІМ їх М о о тпщо

МЕ ау ЩЕ

Я ЩІ ге Я Може У тп я р, У іа Том -ї жк що хе току Гея ТЕ ї з о

Уві вне вче Ве отТигК о ахв вне Ах та тег оцпіз 16 дшп тнт де подій ще як дп та ТЕХ ЖЕ й джує гу ку спо й Фет Ж ож нич їх пор уч. сжх 1 мах баки МО ввор обБек ТВК обі ТК о ВБе вкУ тіж Боз бі Впе Віва ча Танго Ак вій

Мей тай КАИ я за5 зва ща 85 ге її ж че Ж ях гріє м оо и льш Ті хх ту йх ши п хг ззАп »пе їі вКко б5іУ ші їТВвкК туї Беж Уві БВ Вів АКОЯ Аво жо У хів буд 04; пПіб дет бух дав Вау Ті Мій бів Та Во бог б М зав Бу мг Ат МІ ХХ Ух бах нау ої с ба ін Ко век оМвиа дк го, яв чяа5 а ск вс Ди жк ке ОА хе Фея Кіа Ся жж же зб Ма жо хх я ди кі ко дав сів БВха ті: два о бЕо Бес ТУ бек Віз АгчобБео ех ля Уві

Ол Ж лах Се 355 ЗАВ їй т ух ї- ол на НН но В НИ На ше перу Мод сук ку ху ті-щ ще тТвк ей Ту Бевз тех тах цею Бет Аврротапх дво ТК бі Уві іє Аво дл хх ки 350 Зп МБ сажу Має Мен Чо и ху хх Маю ди, що Злажу Зт чу вк мі що ж сх

ЇУк КВх Зв ТУкгК Зі бвху Мес Бо лів Тек Хаї Тсв ТВЖ ів Ахо Авр

У Ге ох сти лі 555 то 475 зе рух дос уч пет Міях о вх г ее Є а ША та екон Ен на в ШК ток кут

Узі ав ім Тс дво» Жах діє Так дів Аве ЗІЗ іє ТВЖ баб ве бу 3 Сх жа КА

ВУ зо аз ще З о фяєу К яо йкучи туя тег Туя Ж чо їз ху Ву чия дух УК і; во чаї пу іа Бех ТВК ой Бк із ЗіУ ТвВк о тТве уаї Маї пу СУ

НІ ЗО ІЗ у а. ож ХМ ку Ії уже за. я її Кк чт. З «й з ож рих тт Усе пе іх т о

Ехо пі Бчае Тв БІ бі Ав о біє Бево дея дкс ЖвКотТаХх Ав обі ТЕ шк щен хз

Зі Заг Ж ух г. тел ях Язьях Тоху; Мік В уч ке ко їж ику Ж я тот тм є

Бпе пі Тву їси: вів Уві дхе5 хвзі Анпобеж Бо Мей ТЕ біп о бів тУх ше у ее ж пд зав 45 За лу У т щит їх пам ЖУК Со біда СП рт у плям ше каму Хот вищ

Зсз їзй Аха Уві АкЯ Ре Аза Бех ТЕЖ бі Зп ово дак 18 дкоа ді

Кк н поко вним Кок ом

Б З зва 55 жом ака сек ох п ки я сх вк Її ке ші же йлх ож Кн ках що са їйї- С я, ре:

ГПем Ах біт ОАУ Жах Мех ї315 бі АБр оАїв Ак ре сі Бех ТВх Ме 555 ЗВ За км ока й БІ че й жи лк зу бю бух м не Ух та 1 Мзкоує о баних ЕХ. ЗУ пе ож оАУу ххАТ їхав ошМЯ бл УК БАВ юЮжо глаФ УВО ХПІ вкрізАМ ув

ЗВ 85 ВО ух смію гук ех тує те Ху Мк Ка чи сао Мою СВ Кайояю і пу 1 ую їв тва тва Зіу Рхо ев о ляв го Ве не ТвЕ о Вна ТНК бів тТвХ Ем щи Ба дк а 5 Ой

Рая ж ух паз чн хх КЗ ле сь я и реч аа в нон сан НК ск

Біз їі їн ТтВк Уа. Дайповів бід бі Уві бек отв бі сіу пів: туї

ОО оч ЧИ 515 ІЗ вий те щ- як ч т ще з кл ох ж З ки «же от че пью ож ку З с

ТУукК тів Ач БФОК Бфів сів тТіє Уві БО Уві АвБпоБВКОо с пгоАко бів дід же ЗК Зх що

БА оо рек 45 тла кт х Жакет їз 1.» Ав ві тек тек Ах ані дім ше бі ви ня ча.п Бім АЮ Бей бів йівз вів ув БУ Аюв Уві ді лек їж ква бжнле гав мм же

БУ БМ ОЗ ит и ник о ТУ жк и рю ес ЧІ пою Зкбж жи ОЕЗТУ я Ух вЕЧ ЇВ Ах вав обі їа бій Уді двп о Узі ТЕ АвБоОтТУХ Піп таМ Аве веМ вх БО іч іа й ВЗ х «ха бою ол сб сзоє Ме т іх же Кл ку ЕТ сх

Бій Кіа А1із два о бйев таї бех Су деи Бек дво біз бів ТУхХ бі Ні єю осі І х

БВ 55 вий

ВМх я Гек Жов Ме їсммй їм й): бі її дет Мі х і їлим й тах щих ар ошпУжшж б що Зам ме ім вій УЮ Же АВ У ав 'Ммув ЗХ А мех кг ка -зехр аб ау ща

У ух хоче ше чом Ж уч ж Моаможх ог осях жук дегчі біз хів тузм Ж - акт піч вет Ав» ген оіїнц Бій вВшв РКО АБО Ба)е два о жах Її вже Бех ка хо дея зх та. та 118 ТІ5 ТЕЙ сіре в; тю Вк ТА нку, Е сих Я г - по же о ун Ен в ШШЬ НИ ит ШТ їпх бач Бі АБО зі їхв Був дів БК ви о бАЖ бві їх Тіє Беж Бо

ТБ ТЗ тах с жу жк тка тах р Рожик ЖЖ жі жаючи ч г пра ЧЕ з т скат М ож піт Сбіж БІГ рвав отТУухХ Був бі Аг Віз бе пів Бий вій Веє Аїа дих ах ее р

У БК 7 5 їм

Со р Трон ких, ее зе НМ ЗЛ ЕН - КУ «т діт ек ті уж х за Ж

З Зів Ваз ТуУукК ВЕС ТЕ Тек Ті ТуУук бій бує Узі вв Аза Бех бій їжи ик нок ек

ТЕ тай тва щі ложу сет ню вх тя Му кхе Моз С щи аже ле Узі а Кк ї Я дет дк б дж я їв бКеа беж Тв о Ака ТУХ ЖхЯ о бей; Мер бі Ме Маі Су бах жнеж АВ срер суч зак я ТІВ ВЕ

У Жосак БеЛЬН б аж М овх уч тис Я щі. ме ах хі ху пе вуче зт тТлуУ ве їж бін їж Авроїмец ліс МКів ВХхБ НІВ Був тв Кіш Гем Увх муУВ те Ме пох ся 85 НеХЯ ГЕ ЗО гом яр и Баня тя сокзут й ее ну тек ху ли Сич м Кук же

Авв чаї Кко вАжв АБИ Їм Уві феє АвО Тс Тех бек о дзо біт вк оСух сь оз я кох що я БІ

Межа КУ Хм. шок чер ях Я. дитя и СУ В Мих хх дра х ях З гу еко У Мат Ба БЕ ч ЖЕ Бій Зіч Біб бів Ме Уві да» дів сім іди стру: пз за ше Мао МН

Є МО яю й че Ж ях ЩЕ уко Жид Аж шк сука вмжних «е СН Аж є щ

ЗА отпх Св Нів Нів Ні бжо Ме АБО Се Ст Біо Біз віз бів тв -к гом піт вла КУН ша ше 1 іх рого он Зло а ЗНУ йо її їх: Щек 5 да о слух кА нів бій Ббве Бех Бех Туюк Тіз Ав оТнНЕе бі Аво бБео дви бек бек Уді3 йо З яв йшту ів о ті що спачзу, 34753 1231 Женя у ЩІ ках юю пу же «хви

Ав обі Сів хз Тер оУді Узі Без те Узі дка ТВх тТвк аз осі ТУх пах ше я Но

ЖОВ ую Же ги тк ЖК ошкк 5 тра хх Зах жу т гу се Ех діз ТвЕ Вер) ось дви ГПем біб їж Уві 5310 бтві бі ко ів бек Біу пах вч за їз уж ові; 0 34 форт КТ х СЛЗії«ч ем ту йдт Що сроб?Тлуд бу бе ВЕ оч ій зок беи пьмМ Ако біз о3ій Ак Аво два Алі БУуз Тхр Бех Від бін

Жду Ж дк жен Жозе о ни о на на Но ШІ тях г па т ток їей сіу вх УББ Акч ві сім Тс дв охо Уві Тбех шів АВЮ АВ БУВ зів оо 25 ж ешШЕкІ о ек пу Рок тя їн хж ост жу гг їз У жк пох Томезя Мох біз бек їі два Ні іще вне Уді вв отже біб дврощів білоба Ж ія лк сах

Зо 335 340 и жк сь ех Шк ж ож о Во Оу ве ог ке с щує ХУ хі 1225 ШЕ

Еко БА фа щаУ МЕЖ АівВ АК ів хіб вве овпіа Бай Аня МЕМ І пів

За Те У ВЖИ екну Шу жу їщ о сих Жкзю вх За хр ж бів жех пе (155 ТІ

Бак о Тієе ву вх Уді Теж Бек АвоО дів Уві їж ів ЇВ го бі Бі зЗБ55 ЗО У без У - ах 1 ко в сю НИ с хе су пет Хоккі Тех ц КО рег хх зва отух Біб ті Тег Тв о біб беб Бех Авв о вкКз демо бів біб Віз бек ее вк га зап зм за

Ку» СК : УЖ». шко Не оче Ток с - жк и хом ЩІ Мом Ук: бек г о

ТУкЖ без тТух ТЕ Беїг АкЗ вп А1з Уві іп Анни біт вав Бпе Аво дек г - яти яхти 95 ІНВ КУ

Ух з со лм ж Зсзу х між ше не з ян А піш й Аврожек Жке дав ох тв піш бі Віа ЖЕ о УВА пав оОпшАЙ

МВ 1515 10293 йодку З че тіж Щі ко Ще Кі ЖХосзру щрвує Сл У ух; р ух М Ії

АвроБі авва ожвс Ні Бе о їєи чаї Пей бек ніз тТкро Айр Аза бів дю Схоже ках ІН Ж: оку Де ях чих щош ех тст жк Тіт АН А зах т-вхш сам Оля пе лог Узі МАМ БКО ази СжЖвБ БУ ТтК Уві Сжеи лаг чтлаАк ча 1048 Ада Бі хе АХ ян щодо хХ ех хід КА їж Я и ку» КЛ хх Усю 2 ря

Аг СеДУння НЕ Дів Сі нев оУі шу шБАШМ мА ВАЖКЕ ІМ у кві ну

Саня їйда пк 1ГУХ КБУ 1155

В З КЕ, Мч Ж фу ше Є я Є я м й з щ МУ, хе г» ще - М гла У їі Ата Аво біб дів Кіа Нів ТБ Обі Буш о бем ТБж о Ве Авв лів заг зйчк чий

ХО 1875 збу зе Кк сяк да хх Му їх би сф 5 паю й фот бує лу туя ж Аж тжжЖ Ер оТІв Ап обБлу Тис Тс УВА ТВ Аа два отак о тУх зач чіпа тла 1655 аз 1095

Жди сна т нок: г МАН ІМ Хр 23 я АЖ «чут щі її еко Маму

МВ» отв о бух січ Маї бві Бе тує Зех Міш Та біз нів Меб Тк з1ва чів 5 1182 Ж 115 чне чн г кажи сь З що ну хх бух кА Ки та бій Уві Бех ба Тахо сій Стіу лід Вів Вів Ті АБ; обех Хі лаз ди ті

М15 1120 11585 не А ще ері ток

Бім о Бле Уві бав Тих іщ бух

У дяк улах хі155 5155 хаїм ек ни-ШИ ї яр «ех її р лю тост УКВ. жали БЛОК

Ко не Он а Чи ЧА не уч у емо кх їх хїї» вВасіїї10з спихаиазаевія как ту «АК 7 и ка нс Ко НИ трххує яблук Мн ті й мих бю ту ке

Ме век Бар о сіУу АБроїУх Ха» Ав Бек тус Хі Ако Ко бі Бен Бех 1 5 15 15 жо и ше «фев ймт гл тує т мая сія у м зх ти же ях т хг а зу їі Бі деч ВжЖЧч Аврохаї ТЕ їж ТАК о спіу Уукі бі тів Ма) Аіа ба трхї Сея -хї

У жо з ті М мука с волаея сь нь не НК жа т х сх тицу у то їзїєе Увь сі ТЖТВУ ва бі бі Кт Уві бі біУу бів Уві ТвЕК о біж Бей

К о В вк океани Ша ть КУ ому бух о фею Фін Мк т док ІЗ У Муха чи їле вши веж еп Бен сі їм) рен) тТжв БО щес Аа Ава вал Ар са кої ще го о во 5 пен ЕЗАШН Ж я сі хх Ми що я і их хіх ге а Его лачую

Ткр»обів іа бБве Ме бів бів їі пів біз ви їі біз бБіп Бгто Хі

З й як з 65 М їх ЕН ТВ

Вл ху її жк їх 2 дояхи ет ча точ шеж Машу божа ТМ лк тоектя пе їв вжи бі Уві Уві Ахо Авп дій їні вводу їж ТЕ о БіУ ви АКЗ

Же аку бат жує Ту піхв том тт т, У НН ВИНИ Фо й ду уми.

Хврв оте Тук йхв о бік Те без фаз Аза їеч біз 030 Тсв бів Сів Ак їх ЗК ве 105 1п5 ії руч ку я зи рот Шев ром Ж су; сук парк пак Тоня ХУ КОЛЬ пани Ши вВкє АвлоАза Уві Ако Зако ожЖвг Без Уа ббе АБО Аго Вае сіб Тк оБец т хе Я

А 15 ЕК ща ев НИ оч С ор НЯ Як ч ПТ кза У т Моск т зт пп

Міш Бек БішЖ Ба Уві ЖЕ бек Мей Бко Бех Бе бі» ббегб піт Бкго сту

Б уче мий 135 135 158 сх ее гг. - 51: хт ЧЕН х т КУ г Чі хо КОЛЬ а х хх зежш ЗАМ АЖ УЖ дів Уві бів ев вв тв хваі т КО КАВА в дів дід чяк Кк ве чек 145 155 25 160 бок: Ж шт Бл бок: Ж мі гЯ боєвіх З ШОН ОТ ж дк Ул ріж М ж г а жи пі цеб Бе Ме свв Ах ваза вів ар фле Тур БаАжЖ Аза Ах віх сх "цк зва ї7тО 175

Фа Трах Ж осв Можу ЕК с ЇХ З: хогх ча: см ТМ че а Ж ат КТ х їж сія Бе) Аха Бій мех вів їла Аве о б»и туУух Впе Авз бій Гц сах

І 5 КН їв 155 138 ск пек бюд щини Моя тку о сема ЩА паж чен ї т кота жо дввп ака ТА вт АвОо ТК Ту Ваг МішБ Се8 Мазі ТнЖЕЖ від Тех Авпо два зай зак

З У ох ЩО ФУ НІ) де тт ка тТохує «їі 4713: р жк ЕТ хв ТИВ М Шев к не 63 во Шу сту Й кру дк Мч пау іншм сім бфч із Ак бі ТБ Бек оБко дів бек о Ткроїеб ко Ту зт як руд ше кіз Ей

За ш й м й ще Ха я мом сизнм Хе м-н о я т «г те хі: і че нав осів ЕпФе Ажеа АкЯ ба жи жк бео діє пів о беб вро беб Уві вів т, а Ух зді ок і КУ ТВ х- ш М ТІ ее т хз жор сп вако см Се зт сети Й їйлузе вує шк Кк БАЧ до жк дих їі кла БО Ук сх два Уві ду ав тУХ у їі спі АЮ Ап БК зад Зк Зк 245 ке а

І Пе твху вк З и яму Б їх й ше їх о ім ха ше вне пре їх Ох пх пк вв ща УК лиМ мя ЕХ А кам УМА ЮТЬ КТ ОМ ж чик яещ ре аа В док А хижих рок и ьо У не ни жк оду ке ХУуучих сМоняу і а - рія ух кЕщ мі; Яви іш Жах бі гу чаї біч Сев КАЄ й БЕ пе вровА Бви Та: ах зи сут

Кіа що ва зе Зуху ях зх у їїкху ші Ж - х ри я а - і М дк сн чуми вує бук Ммеї їжу Бе Беж йзв гей біз лей Аза Сів і Мо бо КО по ти за

Фр: Туз Тон. ЧИ Тож Хо щуха В зу Сх - « Мп СМТ кас Уч нки тка ж

Ніж ім Ене бій тв о бво Акз о Авпопей тах їі Мів тТВвкК осі Ак тух щи з чек з: зЗп5 315 ЗКУ ЗО йцдт Те ві ЖУга ЯН 3 Мих З ех ек щу що ух

Звб пев уві біу йіу Аза Ага Клео Тіє біз бі Ткрочаії 539 Бів Бех

Ек чо лк

Кз али ха їжі ляє ке тт сфе К КЗ ду М - жо іє ха ча Упр Й М сржу

УЖЕ жЖик два тих вка Бен сі двпоБеак о Тву а вве тТву Бах Али тую че ав зах за за заз ТО з 1 я Ух «й овВВав'твг дви пе дак

Біу бзЕейк Пеб о РКО гро Ага бле опій Уді Бае о два Ве оте» зо вне А щі у чшк цей го бра АКа Бне вій Уді Бо Вл - й ще З

Кк вх ; і за зво 65 де пт ої «г чу ом чо пе се я мае зн и о НИ НИ ак ожню іш ЧК не дує Ті "ак тую біп хі Аа о ТвВу Аха Аіз дво Хек те о біу Тв Вне дЕЗз проте дей щи

З З ЯКО х Е х чт їх хо хі жін В ту з о їів ра бі З ї зе в Кожек ко бі» Ве о вів За) тв За вій Біп ве Тіз Тк сі бі» Е І:

М Ще Й й ; 7 з лу

ЗКУ, па

ЗЕ 1 хо зи 90 кас

Е й - : Ся и У су її фату беж дви й -

Хоч вч ше С Ше Не Же Ах Ку ч МУ пі З бів БНО же ДЗ бу вет чаї Біла НІВ вхо вер ко Бі Вів СУ ОХ ю жу й 5

НК ів ях 05 ІМ вій . с то іш КО дав пів ко ті дев дя хе хе ех 443 вч Живу додат хх Дю а оерь ШИЯН ко її т два дк Бе їз б бів бе БКОо Вес їм) АЮ оОвКОоа Аврослю хве :

І 25 За 32 425 138 - щі - їх тих тя бе ге З лі я Ха х ріж АН О кА анН їм бу

Тук їаех Ні Ах Кеб Бек Вів Узі Тв Бек ТУЮ Му бує тах ем ох я сок Ки 135 В я : і т тек Твху дво Тк обіу ву МЕЖ Буга гр зо отбет Пі ві їіє вап отТУкК ТЬх дво Тукобіу Вву МаБ г лвротлйк Ашр тую О1Уу Уві їзіе Ап отТук ТВх Ав ту ОТ ї 155 зво 450 ЖУХ зх " Твк нів вка ваз чаї Ар ої; ТВУ дами їх Те тс

Вів тек хо: тео в'вка і яп ож глх ви СБУК Ох

Аіа Тек Уві тТко ТК Вів са ач ді шо що виг ла ау хх що за УМ їх

Я КУ Єшвує М ух те їжу Її

І: ї ї Ве опів рес бка Бей Уві Бе діа Бек Тв бео Ко дів 5 су ті ТВ зіп Бер екз Бей Уві БУ Аза сі

Аза йвор АкУу їі ТВ оБІіВв цей Бк Та сви

М ги ж й ГА ГА КВН

Аж Се ЛьхЯ

Я т о руси Ті із, її дк ів г - ге «3 о Мсу ї Кто ім бе Тв сіу біб дав Хів й що хх сп пек ле ча бе вм жо ж пе Мп ЯКУ у КЕ

Вів біт ЖажЖ тах Уві йа3М Буш ск БХ У ох

Фтц кох у щу

З МТ зе щ

У ІЧ тк тк сим У му нів уд ї да Уві ей дкКко дкЕш Бах танк дви піє те ЕнЗа бі жк їм ув 'оУВА АХЯ УВІ

Мед Ака ака КОХ тах дв обі шаг є й Кв й с от 17 щі х З ВЗИ5 реж ЕХ й сч ч й ет Як Уві дуй тав дів яву зах Вже и таж сліпо ошфів Тек АК бе» дус Уві дещо Бе діва ві вщп о-кех БЖ їмо тиж сів обів Тех АХ ев хз у Й х ї

БЖ За а

За Ма ну пі й КВе ех Тіз Ако Узі Беб ку бі бі Твк о Зек ї1е су їпх обі АщпокКВе ех Хі Ах Уві Беб Аку бі СБК ккй : й и ХО 5) ша г по їй

Зах а

Й й -у СТЬ ША кажи Ж мкл ПИ ях пек т та их ж о Пак Мк А елжо й ті 1 ві Се: Ту у УЕ

ЗУ їз акщ те піт ви їв оМмеї Ав АЖ бу ай зх У зво Аз Ака бвВе Бі Бек ТЕ Ме Аве іх Я х м

За Б пів с. ті с уч, 1 і; ШУ тв твУ іс ру пйінчз дя же

Зі їнат ББе сеї ТЕ сф оС в пу пк тв їі шт ж АБО С бід Беж вне заї ТвВЕ Ач бі Бе тТАх лвх ТБ У се ще «еще ЗззВ

ЗО ЗВУ аж БУ яр КУ, ретре ма не к НЧАНННЕЯ юр че тр. еВ же МО см а го Жле Таж о ве Вс бів Жак піп іє їТіе бе) Твк Маі бак діз (31 кВ щи ще

Зх ВБИВ вп

Кан т гу пу й лях Учні уун ХМ хом би зх ху едЕж Уа ее дах Біт Бі ів ЖУХ ЖТУХ Же АВ веж ЖіФ оса їз ува

БІЙ віх Бо

ТЕ її а тує Н не хе па МІ бла й Хм Со т Не ГУ т таз Уві Авз о БКо Тв Ак, оса два спів січ Ази о їм Сів 5іа діа Був х х Я нер кі ше ка; жа а аа 543 тс йно ік ее ше Ач М М хи жо вм «- з ех хх

Му ід Увао вів Бек пюм спе тах дя ТЕХ Акоа де вБзУу шо бі Упі дк шк сих

БУ ВИ БУХ

В а льна ШИ у ШІ мих ВЕЖ Дячок нку у шеч ге хе зх Сб їх -ш вка Уві ТВвЕ АЮ о ТУуюк сів булі Аяр бій ві дія Або дев баї ес Сук

Я ЗА Са ве Ба Б/В жах сс фошку фло у; пах хи 215 83 вм Точки ж ку Мун ж оетя Бох її іх зе) ех Ав осім біл оту сі Нів АвоО Був був Ме лей їм ба Аїд че шо ш

ГК Зо вх сх Ме лк наш ше НЯ вм у фр Б ШК Жоачч ХХ зх й шо чаї вхч вів вів БУ Ага бе Хех вхо бів Вк Авл їж За біп дво я хх У ча

За а Тай ду у ЖУкркео бить Мою хе г гу кує 1. 23 єм МО ко ЗИ ко тії у я вко вав Бе дев) бах тів йвпойех Так Бош БК) аа Об3Уу Ткв був Аза

ТИ та ух то й с не ЧА зх сен с як го я х ве з ния о ск ще ша фі: кої Ру ті де ххк о Дега В че тлу й де

Бек Рак біу «і ТВк Тів Чех піз шу СіУу Рус Бр ТУХ Бе Бі АКФ зм с ча та 75 їх як. Ж дм І чи М де ее Ще її 31 Х Зякат ж ж хєек х. ЗЕ сраку вів Бей бів ви Аїа Бюх бів Акз сіз ВвпоТеЖ РКО ТВвХ ТК 3 ШТ

У три чо 740 тав Т5о

У и Е мо лк І; пі Ге ЗаИНЕ З н й т з ук їх роза о йчауф им щих т ву: зів тв Уві йакй Аза шеж біч гей Бе КО ду ХЛК АЖ ЖК АКО бен де рам чек ра ту 155 сію ри ее нн і Ан ВИНИ жом саше ен нн и я дви обі вве за гу Веб Беж бій АБО обей бій тів Авр ої заз Нв оч хуе чих 70 Тк 73

Уа ее и Іл ж: з жит ах чу учні шу тт т каї жалю Фін

НхвоВівз Бе Уві НІВ о Цев хі Се Ав оЗМаї РІ0 Аве оАвпбоБев ай мих сек зви дк щі: 783 хо 5 поп й Пт оує дуже бує М м вушна ни ни ШАНИ Мем дл Му тв ся г

Ави о тївк тех ех Авробі беж СУ Бех біб Меж дв оАхоч Су бів БАЗ де ще пк ап ВІВ 515

Ви м дек 12 псх Яд ех а міх 037 спід 1 ях щік те М: лег іде ік бів Меї Уві два вів пів їх під ТВ о біч нів Нів бів вк Ме щи ак ще пав Ва пла джу флеш гії 2143 с клини ЛЬ Ті М тв зі Мах рр ох т м ав 'Стув Се біб Авз ліва бів ТвЕ Нівобів Бе бек бек тТУХ т1 дав кк аг їз 4 5,

Ух МЯп З

ТПеокує ал ак о Дажує Ком Ма пу М руде т-ї дух й м Б х тях уує її Її 9 я ївпк віт АжЖи Без Ази Бек Бек Уві Аво вів Біу Її Тер обвв ді без дЕй пе пк о я во лк хи о но ох в не На З ту слиз тож «іл їв Уві Ахое Тип Тв о Ар Зі Ук діва тв бо піуУу вв обеи бі Беч пе дя пл пок ша ат МУ чо ххх т чиї ук дя бо умо г я хи Ж джу АК щ- чую тю Ми чав Ан Зах бу во Бей Бек біт бів зе бохо пі аж щшів бій вгу я зи рущ 585 за за йо ие Ул о їх пічку бив М окт У : мета Хе т жих ох. ж ях В,

Аве оАвв о Аха Буш Тр оБаек дів Бі Беб біу хо був АкяЯ дій бій Те з я зо

Кл Моазаж б Жи В о ба ЕХ хк їж чик я сс т ва: 14 хх Зм зи вво» дк Че ТУ 03 АчОо Вів БуУБ о 15 б ек гзе вва нів їеви пе тах

МЕ аа з25 хх Ту КВУ Ж ша у т Ух Фе хе пла т тв не доку Ме авооТУх пак ойжю Бій Зів бе) дао вкОо 0Іій їі біуУу Меї лід Ар Щі пола що пив

Зо За Зо

Ко й Зх С За тази уж щі сиза Те ему Її сор ую ох Мощі їі дво вла біп о ваши їжа чаї вів дек тів бех дар о таї ТуУх Щкї АВІА дак щи ок вра 85 ЗО ше ях ч Меч Кох жа сон ЛЬ ол яри я ж що бат Му ск З жо лів Уа їни бів бів Вко сі К1ів бев ТУК Са Хі Тух ЖВх січ ев и 7 пт

Зв Зо зЗі5

Шон й пе Тож «та їх т хо ин сим у у таху роз бах ас Вс пі как дви вч їм сів Бі вів Бек отек ев Тух ХВ ех АкЯ вази лів ту й СУ тих ак з За3о та й; ор ко но Ша З НОЯ Шик пет ток хів хр Хрін у жи й фу чві пів вай о льу Ар оБае дво КЖек о бі їв)» Авробих їттрро Аж Вів тТвх

ЗУ НН 1505

Кк (З Віщш ес гі де х жк сиру ІІ тм тем Ме піУу і Аз Тв остаК Біб біз взо сіу дав отак ніш Бе Без Уві чати чиї м м

МО 15 їх

У «Ха мом о баня щих Й МО КІ У Св Є А тн ця их, ї- і

Бе) жек ції Тов АвВр вів біб? Уві век о Біп о бів Епе вгз ді 3 їй 130 ї055 уже ет дов тку бохо ех АТ ох Ж не ХЕ сяє й до ра ЗА ВН

РЕОо Ази СУБ БУВ Тек Маї їй ку Уві Твж дів бр о бУв Узі БЕу з ККх та СУ

НЕО 15245 ЕНН

С ж Ж хх Кун І Ублкже х- рез Я Зоре Хода То жу УШЕКЯ ее Ше Се

Бі бі аз Біт ТУК ді Тих її Аз Ав оБ5іЖж Аїз нів нНіаз тих шо зджи пк їх па па тата пед Ту ОТ Ж лу КЗ У ж жа ту Кк бод КТ дк м

Ам ух ї-а тих ВБбе дап дів Суз Ар ТЕ Яр бів Ач Бі ТВХ вт чечу жо

Кп 11735 Не біжу чт пн Ж їй пу бах т ї Со ее Жохвкх хо жу уцї їх ку пе

Тех хАЮ о жЖНх Ако Авв тв Тек о бе; Тк о Сув біш Уаї Уві Ббе т9х лах рвана вуз Е 1055 Не іп о ен т ЕХ 1 ЖІ су Мр 0 Муєя Бе дя з ЧЕН В кое ИН АК Я цех КІВ ТЕ Бі Вів Мет те ш чаї 1 пові век кі Таж бач ша Б 1 Ка Кам хх - 1190 ЯКЕ 1119

З гу міш пе АН т чи «я соту й х пох уки вів вла Мівз Ті аз обБех т1е бі) Ре ві бід Тео біб) був 4з4х з ке 1115 132 1125 тк з «1 х кла Фо ор її 6575 хату пелет «жкїймМ БІЦОК

КЕ, вижене ШО Кк х 3 -ї дк «чеї5» вастїіча снасіпцівпвів

М ї ке й Ж Ге

М Я Ме ж «мож. с М де я о, ки ск т ач З а чом жк В м Яся

Ммек азвп ода ав АБИ бів піт ій Тухк Пій Тіє Тіз вв Аза шех жНх х е че ж 4 я НЕ 5 га У ЧИН КЗахи Ж вк о ща З г ен вч ет біжи ж Сех ге іх му Тато су Бі Ста Вес Бек Азов Ав Уві Узі бій ТУЮ ВгоО їжу лів Ага аз

Ко -к дв

КУ З 30

Ум, рот, роя Вл Із нку поле ние Масу ст м У ої Хокжоуч тілка вх ХУ З до гжо Аза ох ла Ккме бій Аа Меб аз) отук гПужш АжЖю о ЖжЖжЕ Бе о сев Мах

Кк 4 45 дк «з Ах Можу ЛИ Леді боді за Іа я ни шк Мах У а у беж Ж де век два осаоу Аве отУК Мі вБви» о жек ЖуУух ХЕ Ап Бжо блю бевосзех те

Ж За Бо гол ку Ме зе ТАМ Ж жу рак ту жа деки ж их то н-Щ 3

ФіУу Ака Ак Авроуаі ТнжЕ о Ббес Тк біт Маї бі ї1є Уві дів цем о тїі3е 4 х З КЕ 3 а тк ол її ЩО НЕ о

Со ож нн ЕН В Шу ж НИ ж ж пожеж лока ху реа ДНА КК т з

Узі бі тв їжи бі біу Вко Уві БіУ біУ тів Уві Так бі їви їЩ1е ях за З ск є -зАо СУК т - о ду ж ще ую Муки Х ще Мох чт Тс їх с рожа ЧЕ, ї вуха с, В ї - ти х оч ге Її чо щі век Зак Пе їжа бі Без бе) Тв Ко пес Авла Ар о АвО вв Оу Тер

Ух ч п о т 150 105 115 кт КАН мах буки поши пд сь Я. т ща 51 кв (7155 хх дже Ж тд іх пів вів Бе мех: Аза біл ів бів зом ви їіе Зі Бі БкКч бХаАшж Іа. 115 то 125 т МКУ ря їй : - рАЖАЧАЯ М оч склу Їх ка ж х г о кни МЕЖ Не -т фу вав бів» Єві Уві вхо дав Вів їжі АБЮ дво йев ТвУ О1у Семи вжи вве 170 135 148

Че плов ам З їв бечеж Ха: їм ідо їм) і Ів бу чуя ї З ут дю тт

ОЕЖОСУЄТ ОЕМ їх МЖК ОМ Адм а ша КЕ ОХ СА ОА ГУ їа Ах КО

Хо МІ вч Зх Са аю хх ах Ж зх ж щоки М ще оо чи тя ку

Ави Віа са) Ахо веж ТВ о беб О3ї ВВо Зап оАха рье бід так ев нів з ЗА та 185 КК а с с ІК ж т тр Я КІ яка Я КУ ЖЖ я С оч Я Ж стих СЕ ех т лу я я реж Нів Бе баії ТвЕ Бе Меб Бко Хек ББхез біж Веб Я) Бко бі Бех 185 185 185 їїтТьв Демж баки Ул Зі ФК уд Ж оуваї ока Ві ун Я тк ху В КАШ ее о піп Агб ТУк вів Уві бів Ббеч пев Тахо туаї Тух азів Зів ліз вів дах 155 аа п хо -х щі щ ж кх Хеху Тк Ж сум й ми Ви ч ен Кун м нач ШО Ч дум пе

Бей нів Мей мем їжи Бем Ак дер АХа Акроїівє Тел Бі дів ку ТКр

ЕВ тів Ме шу «З Кк «ок ж : хек Ку с нос НА ИН ШАНИ» чи «ох у чних - г - ск Моштих чпаУ Бай дич о слм Бек біз хів Аз бен тую Ен АвО бів пев шай Ай і; : Е х я ХО 435 А ле сю ж ох ку Си с Во Ше хх ее мом ВІ тптежю о й То їх

Зк тТвкг ач Ав тУЖ Жпг Аза Біз су чі вт ів о ТтУук два ак Оу зх т з ке ох НЕ і є ду сі хм ж о еле пух те СХ ск ж з Мов пек ва КІ їЯ біс бів Ті ах бі ЖйК Бех ро лів Бег ТЕв Сей АктЧотУуюХ НІВ дк ще пе ви 5 ти - то Три су Й ух ес я Ач А ЛЕ ВИЧНН Тім що х і А тік сів БВлпе кап вла піМм ТВ тв баб Хі ді о іми вв Пес Узі від лі же хау о ечя «ТЕ о а рве Без бТту тет вий Ууді й іа; бух Вже Тів піос бваі давл рт Пів виш БІ т у тУуХ лаб ча БО Б Ух КТ їе оБ5уЄ УвІ Ал ЕКС АВ «ва Ка що

У дух СТИК М ж Б я стю Ук тя ве жі гії Зх тину бах де й їв Твк о Ако Авррозаії бе ТВЕ Ар осо тів спі Маії ТВ ББе Ахсо АКЗ

КК, пу сю х, 'й запо 316 315 ки жу. моих Уж м У не не ЧК АН лм пихія датах пт Фут я они ша Ави Тк ші ТВжЖ бі Уві бів Суз Вгч БЕс ТЕроУЗі Ав олає рко тре Ки Жезу бічна басом їм Ваше хі ті ку Шут бе і щ

УЖ Ме Бах Бпе Беж АБю Її Зі Ав) діа Зі Ті АкЗз Бгто фе НуВ чо 4335 ЯЗ тот фін Ж г тв Точні и Жосюя с Чер Міс Мі лк усю Убуєст жд

Пец о Бвне Біб ТВ ба аАху АВ о Беос Тв Хіє НіБ ТВх біт Аку ТЕ Авп мя кр и и НН ЧЕ и А зо ен не ни в нн и НА НЕ:

Беи чаї Бі бі Аза дхш б тів Сів БІіУу ЖЕ оУуді бі Нів Бек ду

У Ще М ко А духу Ух їжа й ав ІМ ХМ їз; и: но бкзи Тк ШН - 1 їЇЗЕ Ави жНг о дка рем бі АБИ вес Тв Уво бле уп оБек Ава тую соку люк, ло "За иа 385 33 З зи

Фін тя Затон я я : ж В тА и Тк бич хз ЕМ шк й ек Маа Ку Ко вра влб Фів Уді Ве Ах)» ББе Жьо АБ ББе АвроУді док Ал ОЗЬШК и ЗАВ 15 ті Ж жк ж чех Ж щи Дав ою ВТ жі Че ЛУ оре Ж сх Уж

ТК сій Щі АБИ ВАХ Ат Від Ав о йеж ТВХ бі Жве вве Ага ті ВО вк як кт 385 ча режи лк Ус ЗЕ хх ср юю фон у с раль сл 2 хх сл Шо о бух вче віз Уві ТвЕк о вкз дів Біп ВБе тів Кхо бі бі фвВК оїтк Бек 435 4 ч45 17-51 ВК 245 Дж ша по: вк к тло І т 1 КН о сжіе А ие ень г чаю вів Мі Аха вво Вхо бо бів СУБ бів бів Вр» оїУк Бвробех їі бух ЩЕ СУ о 55 чо гі п см бен Зк т Туші тя Мод ех те в хх ше А лу півовБів Бей РК щВщек їв Ав; оггОо Азвобла РХО їівев АвподгаЯ Бек ту мо касти хе ях зах ат ат зви бек Тахо Жана Тояс кою Ж чання ДЯ «не Хі жу Мч бив: Ми ди зеж нів АкЗ ем веж Кі кі Та їм Тек СУБОТУ ТВх їоа йбеб Аво ще А лі

ЖИ дея пеня Упіх у й чи и тт дж ба Є баз ге джує Мих З-енея Мх ївх Азв отТук пху чаї Її ваша ТуюК ТЛУу зо ТУХ бі Бех Меї Бо Від

Зо ЗИ 19 стаж їж отче пак щі й юм по кхч сте век нн я АН ною ск є пір у

Лук тує ТЕО Тпх нів о Акз дво о узі Авробец ЖУБЕ АвбпожевЕ бів сх лів що Б вив

Ме мяч їз аг Кл Жак Темі Ми Ук Ід сн жк ху ку с

Ази все Хі ЖК біб Сев Вко бес Уві був ів бек ЖВве Бе Вко дів рих що шле по За БЕ ех ках ку хх жк х кх У лю сож неч ра кін Р, ди ду йіхм Ж их бор пі Тв о ТБх Уві баі дев бі Его бі Ббе Твх обі біт дв оТіе Тем аа во БК ЗБ

Хо меж МИ М Му Тв ЩІ Ра ббічхе Тих лях чт є н чия

Зкз ба тТвк отак дав обіу тах БВе Бі ТтТвх Без мів баі ЗЕ УЮ Авп ее ВТО ЗУ с юх тету Ж кут бунту чуби учи ще Тоусея ЗК щ-й ге ча «і поря век оБжо бею» ТВ вів бів ТУХ АК пе; оду УВЬ Ак: овва дів век СКНХ штке т с 5 58 85 За

Чаї ї Се хх ел ни че бе чу Ген тк ух ха піт вва ве его їі6 вуз Уаї їн; ага бі бі Та Бек Її б51У зво

За5 ва БО

Суше оути тік Фу ме ХИДд мх їж Мол і их що их діжі сте ч у дів КО РІж ау ех тах Ма дав ОА бу солома мам о ТЕЖ ЖЖ ОХ вла БІВ в) ок НТ я У зи, ав щу спрямо гро т 71 «х днк Зносх пошх аж уже вах Ева баб Та о Асо біз Ре тТас тнІ ТвЕк сі Рго РНя АБИ хо вКЗ о с їх дОСКю, не вих вій ії 643 бе СИМ ве бів бю іх се нн ше сії ЯН ч- С дош й що и с. -

Іл У ПЕ Вле тТЗЕх пів ТОК бів ща і Те і-ец ТпжЖ уд Її взи від дів о 1 мив хг ше

Бад вао ще ї25 Жук СТЬ утік кл КА г УбВауує гріх ЖІ пек ях нина на ее ШЕ В У чаї ек Тв Су бі спів Тух Жук Лів Ах» Бек їі сію їі Уаї бБко пев ге ши вк БЕ 5 а ді «Дій» З ле Дее шля ве іа «Мій БІНОК лету Тим ех часі ха 4 «ке хі» Ваша ЕВиЧКівціепев «ами а «ап» З

Хе Ве Єр пак у хи. одежі Х х Са ж г тах тм ва с тха ден мес Аа о Тук Бу Хвр жЖеК Гво Бу Меб пек Аво сі Аво тТух баії Авр і в 10 15

Жаеву муху Ж; В 4; Сх ша то Х і се жк; ЗУ ШУ: КУ реч Ті ох зак о тТух Тів Вжеп РКО бі вч Бек бів бі ва Ах дер уві так ей

М пр зп вав «о ке мкм зЗувж Уж Ех че ж: щі м НН шко в Не ША що и дж ІП є Хо я жи жи

ТК с Ж ха вАУ ла У вів БМ їі8 чаї БА ЖВ без Бі АЖ вЕо з5 БК й 45 хіх ул ах ух ж шк Чия їт о км щЯ - у Ж кни : р я жує Токозі ча ЗА аж Щфлж А УЛ сбАЖ ем Ав Бех Бех МеВ о цев бу Мем о йец па ке к, по АВ ай

Ух ж жрук Се Щхуєю щкеч фосохт Мох учь ня і и Ка щі іх тім тік їкор о Кко бех Ач о Аво Ав Аво о Мві Ткробів Аза Біва Межт Аза бі Тіє яд «в -к ої й 7 ТМ во

З те їм Ж и 14 зі щем гію ідо доця іт 7 гл де дет ЩІ пій шій Меч їі б сі асо тів дів дв опів Тав чаї Вч Аа АїВ

Мо м КУ

Во За ле т ВІЗУ нен Топаза Мом о й? ху Ж ех вок У Крах чи ХУ йе т - Ух: г ї їн дво ойвл іїЇзвуи жк обі во йхо дер о тТух ЖУх Ав о бів буУж їж; Се 3 ан тп 13 іп2й 105 118 хіх г я фо птячку ех їі. йжт бут дйдштм Міс м боти ев спи т

Аїз пев зім Біз Тр піп біб вхо ко вав Аза чаї вхо Бе ТВЕ Бе

ТІ5 130 їв

С ЧУ тя Ж ох божих сю ба ве Он Б х Фо 3 ка тя СОУ Кене нья склу жи гот Її чаї вра вва ка ВБе Шіч Так оїФиа нів Бет нів пе Узі Твх бак Ме те зак я

А 15У 145 тм Фо Ви У дж шк іо В ШУ лю й (фу Му ую М чу га чнНнЬ ши вкОо Бек пе пі Беж бі Без бі бек бів вк Тк Аза УВА сю ее

За і 155 ів5 томі фо її сте ся ЗЕ че ТЛО Тед Я ах її є кун боку Хоми Ж км мож зе. тп о Заб Ттух віз Зі0 вів Вів дав бе) Між Бец їм Бей; бе дкКФ 155 уо іт

Моя жкя 1 то пу ш КУМ у ут Кинь ож мує тах т полка ре х- - соч З ща

Ав оЗів Авросгіе ТУукК бі АїЗ Ака тео оБіУ ев о вкЯї піб бек пап 3 іно їв 18

Хоми Тука Тра лог: лах Ж ї2лав й Мо їз-е жук де бік пек вк ав оБеМм ЖтК глпе ав оз без ОІВ Аво АКо Тахо дку АвротСїУух ТАХ Ав зе сут зп 195 ХО км

Я зо утік тлу З жк х бут Токх ж Ер яхта ЕТ ит ах чок жі нок

Пів Сув Уві Твх Аза ТУХ Вапйп дав ці ж жен дім січ ліс; вч о бі1іУ вх 21 сі 22 « н яр М оч Мк ток з тпПюва вич и лек я кн и нах рхо лів Бех ТкКроБеч Ажо ТУус Ніз бів Рпє АкЗ Акхоа бі ТВ о тТВх ще що чт ля

Кай ЧНО «Ах Зав й т ше т г; Маму Тоитх Зк 1 Мб Хе Зо бич щеня ву йо йео хіе Акїв о бва Аввоїец баз Аіа зЗ1е па ро Тек ТеЄ вп Уві АКе га аз аа

З ре пах Ти кі хи ск ть лох шу: бат туту паї ту Урляуух 1» пі Тую Во їі б3)У Уді Ав Ббко біз Гви тТвк дк АвооУві Тую ТВ кн чкк зи «БО «й «і дом дк ТК ку іш аа і Ше йти блоки Л.Я док стен У: ляє гл ж з

Вр о БгЗ тів Бі Уві ТвкКобБе дку ду пів Аве То бів тв пі Уді

ТІК, Ти За ж и 25 ря Какао спожи ої Кожні т. х бу яру ие бори п Я т Че й Жоях

Бій Св Ак КкКОо тер о Уао дапотТву БкКкОо ТУ Меї де Бізє Бек Ав їси дня зае чАК а 295 За

М тт о кх сю же Ще Мн іно Тан Ма фі: ви Тені й Тк біз вва вів Бі лав Аа о вжО го Ві Бей рпе бі Жак о бБеб АкЯ Ав ди ; че густе зп зів 215 за то тв ть Зх т Я ко ума я Хе Хм тя пло мія ук бе» їво ТВх Те Вів Твк Зі АКо Бух Ав о Їїст Узі пі бі 3іа вх вне лек де дя

ЗЕ ха 315 як АВНШИ Ах тки ую їж т жа Ууж4 шо ся ум пт Зх удо їх ДИ я, лк

Із бів шлау ТЕКвБ о УдЮ бі НіБ Баг Улі Тпг о двоЗз отак ОВК цев о башж Аква за: зак яз 348 345 359 са 1 З роси на НН ки ШЕ ЖІН Же томи Кутя уж пути ТУ ех ТІ мевк тах чаї Ві їх Бех веб тех бі ек обва бхо хо Ага ве Бір як г тк 55 ЗО 355 ду Ко хх се тп Фе т з брату му щоехяч піч мг МОЖ чаї Ве Ащвп БВне ТБх о вавп о ЗВе дав отаї ТУК біз Ті Авлпожтнт вга Аа

Зй ТБ 150 с Ст і 0 хх заз Тв: демо тік кокер и ін Вк кс кі В лавр ошеї ТЕ буУу ТВ ве дгз Хі ско спі вве Ава Уа ТЕ вкч Ада «- - Й - Ся щи ди 185 3985 зво яму і я и се нак як. ч от, дот.ї ОТО, ки ч -йкк о же о х сів пе Тіє БВко бі сів Тв ТуУуюк бах Мак Бі Ні Вк йчо Вха бі ж; ще КІ Шк Ки

ЖАБ ях хо жк и о хе бах тк дує Же зе гак о що Фе - ще лів Су іп віп Ав; о Тух Авробех Ті» біб січ іжн Его Вех Шез Авр 7 як я ря чив 5 3 зась В п я Же жх ж 7 х Ме Кс ї ях Кажу ВЖИ КУ я Ж очам о, Ії Фо в

Бко Бо сів Бк Ті Ава Акб бек ТУК Шех Ні Або їн беж Нів Ма

Квене й как за 38 ла

Пе че Подж ж т Тр Ск ке соки ся ос Кг ож, ТИФ тією т ни ПО

Їїпкозе) Тех Пух Тук ТЕЖ Її Бек зве о тТвЕ дев о тжЕ бі Узі ті дав

ЧИ БУ ях ее и о яку їм ее Дощу) сх сом Ме Кук іх Таку хг дня зухь же ТЯ кодек Що», тУК ТИХ Ар тк бі Бек Мек Бхо вів тек Уві туз ТВ нів дКп АЮ 55 СВ) 375 зо хе ее ШЬ М Хе ля г пк ху сь ак зу я Кх жа ЕХ а Ши тУуак вАвр їжи Тк Аво Тв ів Твк о Зів аз» ау Ті тТйгхопій БТзи ВО

С: 41858 зах

Жоечат її кни М нує ває се т ки УМ у мам хуя хх Гоаткио у Кк їжа Уві же АіЗз Бех Фіг о бве вхо вів о сбіУ Твх тах Уві Уві Був БІ пп кВ гл

Ба Зп іх

Хоче тк ке ов но и нь я ж Хочу р дк Маю ЗИ Дошку Укр хе

Бжо бі Бе так осі бі Азов їів їі Аа АКч Таж ТВ Ап бі Твх ків кт ше

ПІ Ви 5 - парах вух ПОН ух ва К «хе Сх іс дз. Пр ях че 2 п й па бі тТВжх бен нія сві АкЗ Уві дяй Бех Бхо печ Те обів біз тух цій з ал за 5315 4 доле Жах Жах МЕМ ки ша: І ша но НА Не тів ен Моутах хх

Ака їйви АхФ УІ Агу виш Лія йеж ШТ 53 Авв овбе о бек тів Ахкф щі па кки вк що 45 З аа во

Хек Мет їх; її Ме дин Ті уллкх ді Ваня 23 Кз дич ТК Ме їев вкч біш Біу ТНЕ БЕХ Кі Бі Ав Аза вка Ве о біу ек жикЕ Ме для кт

ЗОЗ щі ХЕ хе р. г же мої ще па сію «1 р ну З ну тя тік ваво вка бі піп обіч бем Тв ТУжЖ бі Бех ББб5 Узі Тк Ах Ба ле 5 ва з їх хе брмюх помолу ше ще м Фу щ- з: оси и о о о ПО НС

ТтТвХ о Жнж жЖнЕ пі Бо рве Аз хз БО Ва твЕЖЕ О ВІН Так біб тв бів

Зак во во

Ух хе 51 У с25ї Зах Хжк гою Ах Та їх ГУ У о ни ж дід» ЕТ п сек біз бі Їїзва ТБЕ Уві дап вів дів бі т бХаї чаш беж бі и КУ АВ ТУХ у щ са

Бу БЕ ий

Чак КА поем жахи ть Тр о жі лях тт 1741 ух Кі Ав ож тів бід їі Уві вко ді ут щ оо

Би БУ сзали зв «вій 12 сна як хвіїм БІБ скіш БІЛОК шо Зх хе 1 1 зт ит ої орки У кіз» Васії1с;в сєБихіпсіввнів ся 5 «аоох 15

Маму ж бах Ек дя плюаму і -х Жили - т ме ан Ми Ха У ше м о хх

Мек зЗех вро о сіт Авю оту Уаі АввоВек о тек Ті Зв око бі бе; Яех й є «ех Кк

Ї 5 15 15

З хо ато Ми жом беж хх мину дах жи жу Хлї ие ЗУ АТ у окт її: пі жа Бк АвроУувЗі Тв бе) ТВ бів Фа біж Її Хі дія бе -п зх й о ж 3 ве ке: ШЕ Крах та ТУ 1 лаку ДК же ЩІ іа ке тік: їів Уві бі жог о ей З) БІ Бго Уві Бір біу їі бваії ТВх пі Бе ж дп 5

Я У їх ее т вс Я і з га й К х ї чин де ах са. Хуг аж у ку о ї х

Ії век Бек рев ев сі беб ев Тор оКуо Бех Аза Азов Ав» Ав Уві кі ке ря и 8 во чн їх хе: чи м ту Ж її ех Под З шк а сні но Ше МВ їхрбів дів Бе» меж дів зів їі 515 біз їєцв Хіє бів бік де З Ів ори тк чЕ зи

Зх М Ей ке дл ке шани ше и и хаях Віз бум блм паща пін 1 тт пут мів Ав сів УЗМ Уві дку 5вв діа Мей Аве ан Бей Тв біт Бей Ахо

Ес ЗО Зо ня Зреках Тем йду ля че то тах Ж що Ти бі іх течі КТ р я ав Тех Тк дав обБів ТУк дез іти вів Га пі піч ТтТгробібв біо Ах ще ще Іти 155 1п5 15

У да я Ух хз як. У р те куки Ек У ех ух ке ху У жи пак

Его два діз Уві вка бак Тис їз чаї Бне ав Аку рРае бів ТВк їм 115 15 125 т ма «3 сеї ж «т х, їх зн - и -, ня - з се оч ші щу Мі що іх За й Шк ие бу бухк о ЗМ чю шен фія уч 1 ів о зек нів о сбпе УВІ бах Бех МЕ КгОо Бек вза біт ех піу ЕКО 5 1 У ст вки й 130 15 135 зу божа Мк іх І ж Ж ххх 4 хіх у хи я тех хі І зек сі) Аз тує Віа УВК сій бер Сей тТбБЕ Уйао Тух із буп Аза Аза 145 158 155 ів де Є ща о т Тік 3 Жид Віа Вих Я оба і т азу

Авт оБев Бі їжа; їм Її ем жа АвО Аза Ав о ї1іе ТУЮ бі АВ оку ся їчтаА п 155 ши А рус Шия оажуг о дак їх ку о: ен Уч же бр Ух шо й я Ж ку 4 грві йез ажу зЗіб бек біб тів дв Се) тую Впе АБ о біч Бе бів 18 135 188

БУ ще о ня де Заг Учрх іх Я й жеху її Че В хм ки Ак 5, азп о вхоЯа Тис Ак аАво о ЖУЄ ТВХ вдо ні СУ ба ЖвЕ Аід тек вва АВМ т т -зау зв а оо Не и я й к і: тк З І тнє Кл кое НИХ Фккко пу Тс: - т сі Бей біз пів бів йха бьу ЖВЕ Бе Бсо Аів Бек оТкОо Ме Ака Тут ше УНК - ух

ІЙ А ек їх кв ра хе жолчу потах Мах ях жом ке я ХУ дж тк ХХ дих 3-1 що чів єп Кпе дз Ага сім Тв ТВ бПеб біє діа цем вв ої Уві Аха зе р я гай

ТЕ ЯЗ 235 В тТіщ-щ їн Фен Зчеж сту Хе «ха у те и 6я хх У гла фрахту маму Гая т їі о впа ро ТУЮ ТУК Зап оба Ва піз теж Во Тіз бі баї Ашил ро «уд Еш зе 43 ЗИ ша

То соя Чі бю те ялин МАХ Мом пюдну ее кьла хз зок трос іїій мез Жнг вКо йврочах Тух ТВ Зв о вкО ї1їе8 бі Уві тТвх без дгу

ВО ОБ ТВ о нь Машу те «зх т. аж ху їх тех Ку Тула бух хи АЖ х т вия біз ажробсв Біо ТБк обі Уві бів Суб дк рто ТЕ Уві Азот б За таз «ЕП КВ на жу с-м Миру У 2 хо НУ є Гльши ще ма чо Ш-КУ те тя ячич питан кб ТУх Меб век о Біпе о Ззех вв ра» св дай вів хі жів Ах Бк вхо зо; ур чат м т З З їду т х Люк 1 5 тв сві Можннь ст чок з Не 14 - тля --к геол нів Бем Епш бій Тс о Ббеб вка Авпоїенв ТВК Тл Ні бБкоБі Акт ту жа Зі о беж

ЗУ 310 515 КІ х Ком 3 туп Зоо бучиу Ж кажи ники ши ши ьш ши ше

Ав пви Уві Зі бі Ала дкз Бае о їів пі спі ТО Уві пі Наш Мах дек що же в 38 ЗУ»

А с чи Фоумямо ЛЬ: я лровю - г жа -к Каже а; т лька чи дксмло 0 гру т чаї тах дп Тек Ак Меб бі двлйобеу ть чді вве тв о Кех йАжт тег жд їх Защ зщ 355 55 са Фон Ж кзух Триг як дурити жд че Ки: чи ще ку же я учня р ль г пож Бех бйед Вко вБгОМ ау вве осо чі пФ два вБпе тах Аза о впе дБо тах -ж Зак

За З5О За» зи би ік ша ПИ отих ух ие Содинию спах є ку пф кі До пол

Ууви тТУхХ бій Кі Аво Тахо Ака вій АвБроБйЕу Тк Зі твх Ба» АхУ хів чі ек жив аа З ЗБ хз з ГА ау ьо Еш ї г у ФОНІ СЕ ях З що ду Ж я ДЯ у ут - вто БлаУ виш Аза УА Тве бто Віа о йімй бік її: ВвгЗз бу бе Таж жує

Зак ач з УЖЕ за З ай 3 а ЯН

Со еках М ХА ом Я ерже тя ки ММ плудую З ноу т ах треджче Мох мя і кз

Бест хаві Аза Кія Аха дво вхо Сі Аза сСух пів бів ззр о тТух Авюобех

Я Дек СЯ

З 510 Бе ті га нео ни Уч НН Ко У пи Маитуч В З жи Мр и хо:х Меч с ж їіз біз бій веб ре баг обевз вро Бо дав обім БКо Ті Акв о ата Бех хх а Сена

СУЯ Са 338 тпехуах о вує ок окт Тих: ла НН о НИ фе сао кр с бб'хж же ру юю ХМ о діхі Між ух

ЖЖ шекх Мі о БЕЯ йМец Бек бів Уа ТВ йцЕч Теж Був Жух тах йни Бех сах зд хак 3430 345 йог че хи сою ск г хх ше ва НИ У Я -Вв М й «ол Макао Ж ую азво тТВІ Авф о ЖУК бі Уві Її вва ТУЮ ТП Авюо тех бі Бет меж еко ще ще рок 45о 355 зей же Се Са на НИ ХІІ ке щ- дик їй жи - ких Жосхжу Мух у уя вів Теж Уві Тко» тах Нів Аточ аю Уугі дво беє» тв Ав ЖВе же ЖАХ пе осв ах С 65 5 435 зво х 5 и и о с в НН Я а на и НЕ Жан ВЗ о жує Ж ог ВУ рухи вів Ав Ажо Кіє Тпх оба Сем во бе Чак Був мів ак От Впх о обяц в а КЕ хи х а 185 Фо зз5 і жк сах чну худ сеї Уже Ви Увазі дж їжі ку Мік фл зу га» я вв вів сбіуУу т Тьх тТВвх Уві Уві му Буш га бі ле ХХ У пі АВ ОТМе

МК За5 ій тя х Хати ЛУ ує єю ай спі ТК Чт її и и СВІ їх Ата Ак Тв» ТВг Дав піт Тв ВВа пі тТвт оїво Вів ові дя УВІ шащ кон зи

ЗА Ж ВЕ ож о Ж ож БАЧУ ка і-ї Мі ск ю Ток Р ах Мо чл Моучет В хі шщо мух

АБп взшк вла Бе) Тих бій бій ТУшХ Ак ев ва УВІ Ах Ввпе Аів Бех ще ше кл

ПУ 255 зай стзччи 41 ця пі тв с коми Кеш т ки чна и нн и Не КО ни а ще ол їж бі адап Ре Зех Тіз Ато Уві Бей го Б1іуУу ші тагоБеї Тіє біт

Зав Бад 55 а

М охку 1 х о АВ Ша На НК НА НН о АН НИ ЧАННЯ Ух е «СК пір

АВ Аза АХхоО ле пі Беж ТЕ Меб 5зп о АХО ЗіУу біпобів їм о ЖНЕ тТУхХ жк ша ше 555 5 УЗ клю: Мк ук хіх ру бен ЕТ я Ж ох Фо ю ЗИ й кю Й фах зх ши дит КІ. му

Січ Зевс вве узі тах Ака бін Ве ЖокотТвк так між БюЗ ЕнНе бе ВКо щем цих т вис За з

Туя лю пев же Ге СКзн че Я тр ух РО у ж их се чут ко НОЯ жа

Ето Впе тВу пе тах бів тих бій бів Ті без ТВ Фві Ав Аза со как вт как ща вч вах ша хто дух мул ях ху тт ех и Мох зем ХА Ху Хе СК вт жч щу жу сіж У і вк ТтвВкК бі бі п3і0 тек о тТух їі6є Вдз Беї Хі біб (зе щі іп ік ко ма 515 шко

Хан ж

ВКа Маі 2 п ко Кк шк сю гот пе о Док ВАМ

Со ше тю сди нт фо бучя 2 жі куєакі їх сг кгій» Басііїіїцв ситі ючієлвія -й се хх «а» ЯК еко ши ни и НН нь НН НН НЕ Ви и НН в НК НН а ВІН АН хх меж Авп о Бевз був чад) ТвжЖ Бе тТВх чаї бе; Бек Уді чТвпі ме бі ру й ж 4 Ук і і. 1 їй

СФиви її Ж сх: 7 С и Пи о НЕ ОСІ МО 1. ї - спа кт ох ть век Уві їі ла беж вхо без» Віа таї Ада ів Був ТК біб зв Аж що р - га КО 5 я Шк я ух Н Т2х ше те В їі дохеотт Ти Хол дя, го пока. я.

Був біс бій бів Уві ї1їе ЖК Біл Ріє Ачп о біб йха пів АзпоБув Бре

СУ 45

Ук п зе є у ТО х; З ду я ун СК Сам Ж зма сфе 4 ох

Вко АБО Уві бі пів ді ї1іє6є біб їхо Зеб) бех бів Бе ТУ бі БУВ

За ЗВ 5О пишну ши ше пе ОХ ФЛ ву ія же мс М оує «їх Бе кож тех М

Зех Тиви Те : у ів є - дико Би тя дат Маі мав зах вен Бу Ашп АвБОЗ БА Ав бі Тук Бек їв бі Ав Аве о Ууаії МеЄ де ок ще ще ва 1 їде: ВО

Сх ска ТУ які ОКХ о ше оч Фо Стоюачи ух ку ит вах Ж щи хх тровя щех жжх Бле пев біз Уа! був зай о век теж бі бій їм Аза Бі СК

З Же хуя КЛ -е ущо пох ЛУ ую тоб ую жим ї ел була Мо 3 23 дет пог че

Куб чіп Мі їі вех ХВ ЩВкК о БКо Км Тов о від біт біп Бех дво тази уп тещ з іп 15 115 їх фе жо пн хх бал ті ух «М леує М одежа Стмуяє ЩИМ, поем уч З У січ Ачяжт дів так Аво Нів бів піл Та ГБем о джю Бег Жвкх біз Впв буз з ке вче 118 АкЕМ 125 ни щ Че стае Шезу без уручну худ су кю сх мод хм. арх тк Як че пух ТИХ Жук Зех ав ЖвВк ТвВЕ тТьх Тих Бек тТнІ біз дяй бі ве Мех їх отих я ї58 ЗУ 155 чле фія кл г є у дж тоже м нь ен ИН ен З чо НН ЧЕ ЧИ

Аж БА зап Саву блю оєсаж Був у Ж МАЄ КК ю пе Уві дів па лк тк зве че їв ї5У 155 160 виш нич: "у меш ся зи ньо шо Мох с - УК хх ог. -

Зі Був Узі ТВу їів їде тв бів Тук ваз БНеа деп Нів ЖЕ два о піу тк гув «те 185 175 17 беуєх 3 ем фею тя п еую ух єр ух аж що дкучую Фе х ї жн беду мА їчк біз жлЕ Беж біс дек уві бів ТУХ Хі від ВБкз Беж бій бек Ті ще ж ТУ Ж, тож їх,

ККУ ХУ ї55 у нина НН о в КИ НК пом чн Не НН НН Ач тА

Був Уаї вхо Бко нів о Тих їі дів асо ві ТБжх Аз без боса Авро УвА 155 ЗА яп і155 ОО З

Е: «хз т є Жду Кз що зд я ха м чо ббаюже о б зе см в БУ В ННЯ б їуУув Бу 316 Бук б іУ зУув о Меж Мів Їм: тую веж бі Ті бі бе; АВМ зей зів зад

Юм ках е КУ км

Ж; ро зо Жук г кое сю хз пе Тк ту хо Жуки сижут го ду їх їча Азов отук 5іУ тух дво Ме Уві Боз їмвц Уві тує Бук ЖК сім ліу есук зад жк за ве КК а АС

Зеник: ака ТИ - АХ товум ен ше Я ле а КН СХ зах КТ аж сажі іх

ТІб Бнае Був о тТУК УЗ) Так о беб о біж ТИЖ їх тТетї ввромів пі жух БУух зах «кт зак кі а сік віщі тя пи Урахк охм вд оч її ха щеот 3253 СКУ їж (хх 41,

Баповла бій Без вро туУкК Ззех Аз оМмеї бу вп о Уві бі хо ші б сук зкк ща «ви «ай ем

Же й ке я дея оз ун Момнуч што Кот то 14 че я ща мА су із бі; тв Уві бек Був КЖвау Зшви вяпй БкоОо два оБів їз) Зб о йій щеЖ з чад зи

ЖІ жо 5 я ЖЖ: Уа ВИ Жук КЕ КТ ки а гИдю мя ух т Як ат п Ж Жах біт пев бі тЗів Ве обра бат біб ТК сі Бех сві Бе яки ба) ув 28 285 за хв пл рвоонию т нак ши ше ЕН НН нн кв НН ННЯ -тосз чві шійш Жжух Сів АщИ тів обу ТВ БУВ Дт ів біб був ЖвЕ 51 два ще ях яв гул

ЗИ 315 315 358 отит Чим ог ях Жде Ка ай Ж ня БЖ (у У Ме сх ле Я ря зх Тих її С й вих

Ям жНЕ їі сіб Кк тТВвкКоїіе Уві йхбс Уаї бів Був ТВу о Авпо тах Бузі

Ї зщ з лах да 330 35 «кій» 15 т тугуту се За «вій БІНОМ

Я ль ту З з бум жур ую сш кжхіїй» Васі3З1і0в бохіпдцівпвів не г 5

БМ їх

Муза фік Ст Фо хх нич на НИ 51 мА 51 ях ух тр мес зі ї3іе Бах Уві Пяні діа Бех Бк Та Аза Заї Аів Вій СУБ 'ЖаЕ щ ре Оу Кк

А З 15 15 ке МІУ лІху Ту й 135 ух ух я ч проб ри - прак КТ су Ж із Авп оз о іУув біб біб бів чі їі жа бів Бе 55 бів ва бід кт ме ще у Зх М

БУ ї Зерно хг т 1 ух льше в шик жоеж че й СУЯ йвп обу Бпж ро вва Уві бі біб п1у Кі бів ото бед йеу бів вл

Ж х Я Я ї 38 ЕН В

Фк хх т ча т - т з г щ че зм а ж хо ся т кача іх 2. х

Туж піт був Бех беи Бей Ав» о вап пі біз бі тю веЕ Без біт АВ

За БЕ бок 17 п Бу бук т ух де Тож з ху ї хх й еКу кюр пих Ех т Я Ух

Анри Уві Межб Шви ТУЮ ББе Бей Бій УВА Бтш АвпоБек тю Бі біб опе ее з сук ще

ЕЕ їй ТВ о

Вк т Я я рани Фк ту КУ В. а не КУ Уч ко же ве Тож ля м ие іа її Сім рює іп чУуаї їі Бех Тв ТтТбх хо Беб о їх Аза бі бак 7 Ук о в За з5

У о М, хе Кол ому міх те Мія січ м сі у КУ ща о Щощшях Фе Зак зежх йо Пец біб леподлів тТпг о двеБ Мхів ша бал ої Ву бец вза Беж ТЕ

Ки веж В її

ПО їз 11 жд Мун Жду боки Мною Мбшулу бух аю зу я Ж умі А а Не и НЕ ШО

Сава Рів був Буж ЖпХх ЖЖЕ Зек аа ЖВг о їВЕх тво таХ меКотТАю Сам лап -зщ чих жк 113 Ав 15 с жу т хо с ех пе «А ме зум их Кк чзш ду пеки ж жк ЕК

АЖ рие Ме Тіє «Ф Му швом кл піц со Ж ву УА с 1У зе БгОо ле ха їз зай

ІЗо 55 лах т З щоку кл ояу Ж Ся тату Ж Хол їм ума Мік сік ХавНнк ки мах чаї Аіва біб біб Ст ув) Тв Бів Гу ТЕ ба. теж Ап оБВвев о дви пів 14 за З хх ЗА 155 150 185 159

МА імх шх Пл їй й НН кум ТІ ку хто Кл, пухку Мо не ин

Тах йшпосіу Теж о бБіч Тв ББег біб Бех ма) бів ТуУК жів Від БЕЗ Є ше Зча те 1555 КН КІМ

ЗУ сх прощ Й шо се Ха Же ЗХ кі п ож 1 ж х ко Хв И ля Ве бйіп Бех бів бух Уві Вжо Бгз Нік ТвВг ої1іе зіва Ак Узі Твх Віа беи зик век ї3й 150 1855 190 тТо-ая Вес уї ЗХ ї ххх б хх Тк бязі тя Мане дріт пек даху ГТ кл їжа Ар оУві Був У біє та бі бе мет нів Мебз тек дех фа ті

Вт при -и п 15 50 МУ овен и ша и не ши нн Краузе т МІУ ху де Тая 5 три у за Беб ода МУ АвротТух сі ЖУХ Ако Мет Уві Хо Сем ді тую БУ зій 71 5 ой 1 ЕЕ Же

Зм ує ж ву кат шу жах . п тн у не А н -х, я дез тат кни й 1 їУкК СІ Бі вхо Каже Був Тех Мав жпК без пі ТВК їй Тс Бар бів як суч шк зам

КІ 23 «й ЗО г п-- хв хо Є я пок 2 чу а Тс ХК м Ж Ме жі піт ВУХ був о бьп Аза біп рей Авор Жух йеу Ав оМе3 БА Бо Зі Же ери кох цк ж щи «ТТ

Фууличо ЖАХ У ач ж т уч тео Кт фа Тож їх судо соску із Ху Мгзу ЖІ ах Тож

КЗ оБІМ ім бі БР тТВЕК Уві Бех ге век БП оАВп о РКО ава Бі Бех сб тки т що Ба я

Фо ЗА фія ит оку ГЕН ті уки т т-О щоку При хе Я ха См у їж я їжа діа Бек піт Тез бі тів Бе біо бек обі; тх ші ББВХ ТуаК вде

КО жах батуті кг хи суку М о ьши то бух т хука КІ Я л» вл оМЗіІ ХК У Уа ша т У хх тів АЗпоОХ Її в У кпЕ ху У Ж хЇ ш ОАЕ ми

Зах зак прак

ЗО ЗУ ЗВ ню ях у аг Б х тери х ах ит и Жду щі ше хг К21 53 Ж лущ дУвою

Тпгобівз йвБобе) ТБХ Ті біб БкКо ТВк о Тіє ча) го Уа) ціб був тТвх зак чад чає хз

ЗИ 315 3ЗІ15 ЗО сут ду оту вва тах був а ЕІ и І «шк 510 «кій» БІЛОК ул У уні т узах йо ке ж чия пед ох хі» Ввиз1іЗци бпОКкіпчіаввія гг зл чари й

Ми тожуєю Мах КАХ т ох « и хх ГА чувм я ж Фе 49 а Б, хіх

Мак БУ ТБЖх бі дал авп о був бій бів біл отваі Хі ТБжЖ біз Вбе Авп щу Х ї З 13 15 аж шву КУ шо ваш іч че шоу цу їх те зл дя тло ех бе цу пів дк Сів два БУ Бе Во Авер оМаїф лі бів шу Бе оБів жЖЕюо Осно я І КЕ Ї З 5 у ск, у

КК: 5 33

Сеча й их уж, сбеухх меч Жодй Фу Ж вх Ж луг Мах п мч "41 жк Му шву важ бів Бвеа бек Ці б хек бе) ув два два су січ оса ЖУК Бех те до як

Зх ЗО хх се я оса З х ач «аа а Со Зеє Ж окача ит се мо йо Сожче о Убуття їни мет дв вав ов ії жЖеї Бех ТУ Ре без біб ма т.ч авп євх ЖУК що вв Бо т то ї « Мі Фів т ких, УЖ ож її т ти Р; я зе Ж де піж сів б Аза жів біз роз пів оті їЗфе беж Тв Твх Все Їжа Ткр о 75 КВ

УЗ я пі Мне ак нм» ім жу М чЧч ик Мак риття ТІ три М огі азів ші бій Бех Аво без 23ч Ажи Аза ТВХх Ави Між бій бів жк Бе че пох ще 55 з5 Зх шрот па тиж 571 Ух Жах Ж анщо Наєнко йощшіх Мою г МУ яко пу яю ще двОовет ТК бів Бе буз був ТК отбеУк Бек два ТВ о Татх ЖХВХх топ бек іп 105 118

ЧУ п Мат (Тл тНкх Ху ті тари Ел ЯЗ Елі: її фам Зі чу

ТВвЕобів АЕтп 1 У ЗНе Мей гів 3 У піп сіб їв сів о МУ Му УЗ БАІШ тік се еЕ 112 їх їх

Я ше пд у сеКку 2 3 сла САНИ голу Жду хх пеню Ті; толк у 13 бю Ах їіз вхо вве Уві Аїа біз Бі Був Узі ЖТпПх гів буз тТвкКосє1» ТУК дав ще ук йо 138 135 159

УК - Ж ке й ча печу У ха В ен кв ка а НН Но и НН а еле оАвв онівн ТНЕУ Яви біт ТеЕ пам отв бах піц важ ові січ тує ТІ ха КЕ 3 ХЕ, Уже 335 155 155 і

Ше с. ск Сх га т т хуе Фа учи Фучу І а кни ж Ше. МО Дяк лищі дів вко хек бів Беї тією Мув Заїф во Ехо Нія ТВХ Ті лів Аха ді чк 17 КЕ 155 Еш 115 ек В я тал де поту ЗЇщ т Таню що ух їх т сх Як ЩЕ шо Ти ук їв діа ей їжебех Ар о уУкЕ пух БУ їз БУ ба Бжж Ве Кі їм ТУк 3: т, їх 1585 АФ ї- са кот пон Оу Хол ен А штату бан ж жах сок т пу тд поки т: чек вій її йАжЖ Бел Ав БУ ар о тТУг бі Тк Ав о Меб Уві Ехо пев 4 тя еле із5 що 255 т хіх Ток ках Кк кілка ен; ХУЖьхм о Ток прю ді г п Во ах сту т таз ТУК Був ТУукК Сі б3іу Бго Бе був ТЖК Уві Тв бец бі ТВкК о бев щ- дк за 215 щі5 ТО

Те С МУАНН тк Яну Тк ут М ху ок Фк лу у жу шу г

ТУуюк Бвробів сів тек Був сіб дів сій без АвроТух Бйех два оМеї біх

Мч Й ее чк КК зх ЗО ау о скл пе г СИ ке нич они ще ту Му їз о Мих Мо я

Ав Зак їхев вхо бій бод Хі а Жах та Мас Був Бек Ал Адт вто заец запа хр я ЗИ ж їхї т к - чу ок чик ТУ К! Ми лу би я кун хх

Ав) Мі Тен») пев вів бек осі Тл ім хХзіе ЕНе піч Вер о бЗіч Тек БІ зай За Зла

БИ БУ ат - се КК НУ ши ІН -й сл ре ВШ Ь пк ух Оу Моз У ті Зк Ех том ям

ЕХ Уві ВнНе вяю Зі Ббов Узі біб Тек Ті два їі Був ТВХ був бух хек яв ча

МІВ во ро

Би сон я мех тя с з а у вчу шк Ма лек ЗА ку хх

Хіє с с3в буз тТВх піч Аж Без ЖНЖ о їі біб БЕО жфвк їі Ув) Бхо Уві 239 З Зп г. т пе й Ух тожекх зів ЗУ їв Ази тТпах Бук зе хх «МД У евро чу 15 «вій 145 я - "кі? «щії8 857 «війк ВІЛОК

СзачВІ ДЯ се 1 1 3 хо З кА жу діжі кій пвВоскізцЕ КВОгіпціавннів ке т в зккя Ах

Мою (дта ЇМхзїт Тк ша Ж ку; их - 2 Ж ус Ве Фу чих ау ко т ях

МЖеї зек ТУЄ біз бево бій Уві БеБ5 о Аво Жех Тек біУ бів Беб дів Те 4 Кк шк Кк 13 5 і 15 іх Ж ік хв же пана ум У пуіч ой т, я жаху ке чн кидок, піч ко біб узі 3іе зек ти ЖТВх вхо беб; Тхр Аза біт біб хек ар че як чи кА Ка ЯМ ок ЕТ бат щі тв Ва М 1 ж Пк ох МІУ сх Уфа ТА У их

Би з-3ч зви Авіа То вав нів пів Пів ТВ Бей ойал» Бек ТВвХ пів Кпє зе й ха, пої ще ве 35 т «1 Ячу пику т с о ох чуже ря чи Ж Яд бл КТК я же го Халк

Му Муз ТЛК ЖуУух вВех Ап ожВх Тлх ТпЖЕ їВЗК Бек Та бій Ахкносіу ЕпЕе п пк Кк

ЗЕ 2 ви мае т лет х паче кан з ен ян С ве Може те хи у дес Зам сю к

Мет ліє ФМ ав Є жВХ Бін ші МОЖ чУвю шк ле вко В Уві діз ще що чк пи

У 33 ТУ во т. тік х оч чу чн я чи Я хх т окт уз бе Зі рук У їай жіу БУ Уаз ТЕЖ іє БЕ Тв баз бує Б обі Бвиа Нів ТвЕ дал ка ЗО за ай скляне Шари ул ори Іі тпнуто Та ло чує шохух ГАЇ ск їїуУ ШжУж піц тн Беж біб Ббехбх Уві бів Тук о їів віз БкКо Бек ощіюй ех 12 хі Кан

КК нео) М хм Тих й жали дуг мя сих ск Зх йоюсам ху ги ье кх З Щку:

Їїїв Пух Уді Бка Бго Ні тТнж жів 538 Аку Уві тТрЕ дів Бе) ев АкоЗ 35 в сЕщ їх КУ чут т теки г ту така мак Щі б бом є бах ія жк їх Тк: чаї Був ПУБ бів був бБіу Був о Мек Бія Цей ТУхХ Бех лім ба су Сем зх си ам же їі 135 йхауї ХХ ха Мод булу рю кам чи сек и не НН и и и НО Но ЧАННЯ зни Був Аве Ту біу Тук АвроМеб Таї Бо їж Уві Тує Бум бує БІЖ ук я тк тк 155 15 155 їв гак кс Кан Ток башти ан а МК Мі ХМ уут о Сг Ват тлу ж и Ук сіу Бко кКВе без ТУЮ Зах ТаЄ їсма З3у ТНЕ Сем ТУхю Анропім пу тТух те їз уче 1652 Ки КК гожако зи наш аа. ї ях кл Крах Ух св йду ші Ж ож Ту чи же швея г їшжж біб Вів біз Се дет Ух Щек лап оМек бі ввпоЗаї їі вЕсо БІО я рик щи їв ї85 ізо

НН по ав ни ША и ВН «и их Мох ху Умка щен М шо Устуї ТТ но В ох вАш ле Бай жпх аз БЖ Бу ЩЕХ АБИ АВи о БЕОо АВ пів їжа) Бе АХ їх аа М зо ньн Сн ж З кб Дах ух би й та «ЄВ иа ад НЕ ач шви пі У мим еЗНКУ Ті ве с Беж Бі Ту т Зі щежЖ Маї пе два Уві та з ярок дм 218 15 Ка

КЗ я м 34 сту Зх, дя еще Жб;ожажми б "ж ж окжа У ех пал Жарко Му у вух таї біз ТУує Хіж Ав бі Буш ТВс був ев ї185 пів був ТВвгобів сек грат зЗзк яд ше АНІ ІВ КУ Од и кт чу єм Кк Дану Мр ЙО ятї речи з І жк сах фу при

Ази бек Жах Тіє біб Бо Тв Зі Уві во Узі біб СУБ о ТБЕ два тТВх зл щи ЗЕ

АВ 8 «ТО

ГУ ха1а»х 35 «ех КЗ

СВ сх би

БАЧ ях ее пост ил чашки БІЛОК ие ен Укга 57 тях щи і лк Фо їх «вії бзеї1іїй8 ЕВаківцієвнів сте «к «00 ІВ

У ик г: сх м ог МУ дяк лч «т ТО обі ї дя її з дж току «С дуч

Мет акта Бі був АвБроде) Ав) був був ба) Тв Бу Аів ба) їбч беж ! З 19 13 а тех 12 у кт опе чн ж не и ВНИМ та 3251 хх хе еп бів Уві бЗіу Кізі Бех Уа бен Азів бех Во і Лів УА Аза із п В КН

КН 23 ЗО хх сиває 1 й м та й пів пім їх т а міш Вид йцдт й му Тл бів ве о Авп був бів о Бів БА)» ха3і діє ТВЕ НІВ Їде Ап бів пк ще як

З ЩО і15 м Та Тести Жожках Ех те Зо єх у я пЬШИНЯ СХ КЗ З жх ШЕ; жа ох рать вк сів Звпобуа Бе бко Вр ові бу зп Зі ї1е 533 ТкЕв о бви 5еху ц ее що

За Б Бо га чі мух ЯЗ ее Ж ютх о ит Коля Хох? сотчо ба їх 3 дя УБіх и ду сечі

Сів вййе Тух бі Буш Вес Кая Був Ави Ав обі Віз сбіу Тух Бек Ка

Кк в -ї що ва НЕ 1 53 г Кі ї. 1 по. , Кк: ех нь дк ЗУ осхе Убкуєчи 3 ж піч бій авов о уві Мей Ак ТеЄ Ве Без біб Уді Був зла нах Тук сіх

У Х Ол ху і З З ще це зх

З зу

З - вч ЖЖ 4 р ЕТ є 18м1 т з пер же брухт хи; Код би іх піп іш вів Мей біз рез Зіп Узі тів бех ТВ тьх рез Без тТКр дів ще як тя 158 155 115 сх ВН ен т ше тт, К СО їж дл ШВА «ки кон и НЕК 5 лі біт біп бек дво» бе) бів йзп о діа ТБг оАво Нівз піч іп Так пев Аз ще . прик 115 1726 іх

Ху сок 3-0 т -о ї сира ЗМ че повз му ує ЖЕ ує Урує божу Й я важ тах шій ке Був Був ТЕ ТУЄ йег Авва ТВ тТВви тТвВх ТАх Бек ТВ 85 15 145 сек: й КЗ лу Як Мих Ти тіч ті т Зах 4 тк фа хр ж

БМ оАВа біу бле мех її о БьУу Біпоий тк пф бі Був Узі біу 112

ЕК «пк покою шо я 145 ї150 НЯ ї55

Йй-е те» АН М сн свя ех сх сте " дк ток Мк кт паху чє хх з вко ВВ УЗі Віз За СіУу був Таії ТБЕ їіє був Тпах біз Тух дав ре 1655 18 з ха Мак птах А ал їх оче сов Сен лю Уа 1 дав о Нів ТВ два осі бух біб Таж Беж біз бек Уві 510 тТУх їі Вів

І ку Зк 4 з

ІБ) 155 1958 ук х СУКНІ рожі нь и и НИ тА те Тучич ЩО ЗА и ДНИНИ ше Мою чи нОІчя вто век бів Ззех ска буд УВА РКО Бк нів ЖвС тів вів Ака Зв) ЕВЕ 155 Ба 95 ка т чом ; чиШЬ ще х оди ток М зр4 су Ст тра би

Віа мер їі АВроУуві Буш буд їі БУВ бі був о МеЖ нів о їв» тую БЕ киш щі З кій ії ХО 3: хіт т п в Очя о ходтюи тях си пт ода ве хз ие Хода І-ї

Із ї1а біу ізи Ап о БбеЕ Ар Бук 03 ТУуг АвроМейї Уві Бр ісп Уві я Зав Ех тав лин еВ й сту

Трах божих балу (хх тх хе Же Ж як кг х їм гає Жеміх у ях ою 0 Ж оогух Пк ук уз ЖЕК Сі бішЖж БЕо Бце Був ТуУук Ма) Тпх Бевз бу тТйас ев о Хук и зап ка

Ку ЕСЕ «ха

Мк її З жа пом ж хх М х льше ях м очі пе Улас КЗ ще М мл ке ух ввшозам баЖж ХжЕ бУв Біп лів Бій Бей давротТеЕЖ Квпе АБИ Ме БА АВ

Б ев ра т ві дуєчкх ги х ши СН БУ чНИ щі пеже їожахі (кб щі Вів Фе де т чаї їі ржЕо Бів сї) їїв о біз тах отавю Зеє груж Веб Ав Два) хо дай

ЗЕ, Заг ча

Ре аву «ах

ФЖ о Ж одука жом 3 ою т а хе ах Зх ж ШО вом я Уа мує их ях Кв нів бец гео йіз пех ау Чаз о плу Ті Ве біб пек бо ТУХ біу мех чи зак зах щи ЕЗ5 Я тя зх тя «тут -т ЖЖ г сріжач Ж я НН г ту бах їн Кг

Уві бБпе дв оУаі бу Укі сім тТУХ ТіФ АБИ Гі Ава тах Був бук бів

ТЕ і по 7Е 73

КЕН ЗО ЯЗ Ки т З оса Лу жк бшх тя З ж-жт раї сну вах Ст ха аж щої ШЕ спа МУ ЩТЛХ бів вази Бех ТБЖ бі біб БЕОо Зп діє УЗА КО УА БУВ дк но дя дм З 335 т пе о су у ния Я сх чів тах вай о жВК Бу «яз че «дам ї16 ож не АНЯ же А 425 «вій БІДОЮ на Моди п. ще х ся Ук м КО хх «813з Васі1іїцв спакіпчітвавів «О.М 16 ме ко ста г Ж Мови 25 тих ді де ие Кох З свЗзі дім 7

Мет її уві бі іє бек Уві Бей А)аз Бек вхо бе: дід Уві вів вів д їй Її я 4 шві фі бе міш Мне йо їм ї щу пі ці пот бій бів піз Мі бі ть: Міф Кпе йап о бій

Му Жах біз Авв о Авпо був бів бів біз Маї бів тик Ні Е з шо шо І - Б йо 25 за - се су х ЕЛ ж 1 ті ду у кг Її «ру Ж:

В Зіни Ав ОБУ Ве зро дхро Ма бі ціх зм МАш ах ККО Б ех

Ак сім Ав Без вре РКО йхв уві бі бів бі 3) сії ї

Й и г КК

Зк 45 жо . ще й де 1 її: (715 сх екю ом гу Бін о стек о іо за дек Ббев бУв вай дай бі бін бі Тек Бек ідм)

Зі вне Же Бі Бу дек бев бу дай дай осі бім бі б пе шт г ех ії

Зо 55 ве й з с 8. явно Узі бор: гг ЧК їх вай бек о бек іє сіу Вів Зшюе Уві меж вкуц о тТуУукК Бе пев під Зі був Аво Бек бе ху ку ша АЖ я Б що

З 72 15 во

Е ст т божі Ск Ох щі пах ух -ье бах юю и ду Хі км НО НК ге « Ку - 1 тайну 1 хг Те мах Не Мамо кКис г ХК ів ви дій меж біз Бко Біб Мах їле пах ХЕ їх ях за ЗО хх З

З ч З 54 ем ДН ті Я ахіх йо ук ще ро я ж ух Тік з ет і же

ВН гу. м З Же Ті СІ ї: хх 5 Сх т ї м со Ноя Зх » У им ік ях сіФ бін в АВК побеО сАЦ юМ Дж тих ях ОБУ х 5АЗ ХУ що шк шо І З вка 158 15 115

КН АМо х «х. син. Муз бу - х х й яру ух Му тв жтне Щек тну зу Н ї і їв ч« ЖиК о тТУК йву АвпотаХ Тео тв Тв бек отв

Бек ТтТвх ша: Бе був Був ЖнЕ тТУкК Бех Аввотах ті дек о жтве бій еВ у У у й 315 120 125 ско яко й . й тах ах т ще : се 1. геж пад) біг тів - н : і сеуу ех ів Тьву бів біб г Уж о д піс тіє

Кн хи 33 ям м тів і бів пі м тм ша НК Ма 5 пів дав щі У Жпш ом дІє Баф БАЗ їха В їх ше ше 2 чи І У 158 Рх Ії м се єичуу тс жу - трххує кт тиж бю й; Поу сип ог

Х Сех Уві ві іш бі (ев Уві ЖК ІтТв Беж пЕ БА УЮ вп окле вто рРпе Узі Вів бі БЕ бух УВІ ТВБК тів БуУуБ ТНЕ у пе зако ще Не 160 1458 150 155

А їз

У ге ми Ярі Щеат чаї пів тек тів лід пе ші іє дл пі теж бін сни ух зн 0 А ОО ЩИХ М еЯ зММмиохух АХЕ ЗМ ов із тп дай й їх йх по ба СУМ іч х ст ік 178 Е15 я же ; : у КУ жк км Мк ж че « є 4 у ми зо то Вів ТЕ їі вів да УвьЕ ТвЕ ее ак опІіт шву 15 їсшв ді жщ жк ОВ м А ТК ля

Бжо Бек Бі шЖек ї3е Був Уді ВО З КУ що чи тва ХУ

КК ОХ

КЗЗ

- хуя го с офі їв Мав піз їм) бех рик я ж вав осаї був бе тів Був біт бе Маб Ні їм) ст уко Х із беб тей два Заї ж НС охаш о МБув ах у що

М ій зва зах 135 ее «МУ і г чі су ож рожа Фо Ми 2 їжу то ті ле Е піс їівні ший еВ вве тк шіЄ тек ВВ Меїх Уві ко ївО ща 53 їі сі їши ях БУ ВяО ТУЮ БіУ ТУЮ ВЕ що 7 - рОрЕх ій ЗІ КК

ЖМ К. хі сі р АТ ше їх зт Ж ви жах Молех . х с- гот як ут Жив тях Мур дущ Тк обею 515 ТВх бем Тех

Трах т ма шк іт бі пі Вп о їежщ т ді тп ої, їУК був ТЖЖЕ АЖ А Ко пе чи АХ і т х у; зав : І з 5 БЕН

Х5 з Кк б жену ча хів тім тай ка - тегу рах КН мак п 15 да в зів бі Бо бр Пій Бі АХ в вро УХ Ел дВломеах АЖ пе вв осів сі Бтеу був бай о Аівз сій Бек де у зу я 5 х мі

Щ пи КУ тах С «їТ ее К

Еш УН Ул я ау ти т Кн. Шк 2. КУ 4 т - є

УВА і РЕ о шів їв їі лав ота а Ве Ббуз ВВ Аз АйпоБко дай тд их ск т жає ж ВТ йлщ ої шия; Не а а ЗНО г ж тя зе Ук 7331 шк кт 11 мумії дам пив ев цем дій зе бе ді ші 118 Ве біз Бек біб тТуУукК Фі Жех т 5 а ее

Кі жи ЯК

ИН везе Фо ж озуух тА В, се - З чої не шш АНННЬ с.

Узі Бпе дав та бува баї бів Тук Її Ажаи Тіз АзпоїТнНЕ Беж їв Ків

ОКУ «ек же Й Й

ЯКБИ ж ЗУ т 4 зу нот жан тс сим чоловік Ху пи ту з ст тою р ж л:х А 3 ут - см 1 хе с пи ММ. хх їх Зх їх ж хг: тож ваш мув жах сЬьМ Ашпобез ТВ тів біз Рко ТК їі тв) Бко Уві був за м БК ут зав 1 31 32

КС Ух Ух що СК; ча У же папотаЕж деп о Тиж ге

Я

-

Ох ЖЕ о ДМ Де

Кох ік ки А кіш БК ве чь еко фл Я зику ь 4 зує 3 межами їх «її» Васаліме па хКіпочатія шт я «запо 17

Моле бїену 7 о хі АВ кн нев нс в но о з Не НН НИ В в НН А ЕН

Метр б дів Уві Аза АКА ЇХ, я оЕмж БА АНЯ Ач БУВ БІБ ОХ ба ож

КУ х Хе ан

Ж хх бі Я 5 За й но Ше п хо НК А ШИК тзвачу тах ак КЗ

Їїхе ТВ пі вае Аа бів КО Біб АБп оба Бе Рез Ав Уві сум сів

ЕЕ 25 3а іш жів пів берет Тіз бек біт бе сту лу бод Ще їм їх щи йчи важ ша бай Тер Без цех БІВ кБе ТУХ Сі Буш Бех шим БжЕ АЮ аа ей КН й х.

З а 5

ТЗ ше ху ух Мам фін Ж м лях м Ві її Кіех зесх мату ШУМУ Тех: 1 піж сів шаш ЖжЖжЕ Бе Бе бі фБіп 45» Уа Ме дуб жЖУух Ейшо їм БА кг пе -т пу щі 5 чт т 2-0 Вя Млх МОду зх їі ах ВІ теж ку чи виш на ВУ га « - вх Буш зно вах ТУх Біу Біп бе) Аза Мей сій Бо сС3ю Уві бів о зех мк я -к щи

З М Гу во з но НН Не і ку сх Са Муки тах 23733 Вш ЩО ож пнях Лшк лк ожАж во вес бко пАв оБАМ шапок ЖЕ Км вам ВЕЖ БІ Ух дБ на ЗВ Ж сх сх паче Тег Ж жі оди и ач МН ее З зт Ж ляже ти3 ріж по Же сх

Ява мам бай жилах Бе) Аа Бех їпх Бій Ве був СУБ ТЛЕ ЖУЖ БЕЖ ВВ тд щ з1й 1 135 115 ск лив св сф; шеує ЯМчях жах Мн 143 ев Муюо ТЕ с НА гру ух тн ожнЕ жЖвх тВх Бек ТВ бів аз» Бі Ве меж Тіз біб біз бів ЖЕ 120 125

Гая сік Й - зл ох т Б вач Же КОН Са з ках сх му сич сем о У УЗ Уві шічУ фі ЕКО ОЕНе Уд ії вів біб п315 Був Маї Тв тів ву ЧК хат 136 їх 5

Я че Ттяуле дах Кей. же и в Ше че хо пк у що я ХВ др ух

Був Таж біз те Ав) вБе Аа Вів ТБ ва осі Тек сф ТВК Бег сій зах кг що т 1435 153 їз ІК у 3 АН Ух ж чо мшкУ З я їх є я - У св в ода Ж ах яки Ж г

Бек УЗА сів бух їі Аза Без бБет Зі Бек їів БУ Уві ркз рЕО нів "д хост хЕ ї85 ІТ 17 ке що ВК ком ж ЧУ Хе Ве У ж Ж ж з п о нн и и НН КУ тот .

ТВвК Хі ліз Ака Зах Тв діа Кец їж о йязв о Уві ев був Тіз Був Ху сах я оре 2 іно 145 1з6 й Мін Аж кое я чні в а т- ке г лк Тоажч Сх пт є 5 Ткача й Уах же

Буш ет нів т Ї УК о-х пам тієЄ ох 7 їБваи да МУЗ Ав бОкЖЖК лу т Ух оче жа 127 Жуки к-ШЧ ЗЕ х ек тоже ху хх з не 15 того ЗУ с

Яр оМек Уві ко їє-би Уді Туюк був ТУК Бі біу кто пе Ббже Тук Уві та екв зп 215 ІЗ Рая тре Жокучі жу пу чі йхюв Мох сема пає стокти р і щік их тус ж Бец сі ТВХ їжи ТуУух яв о Біч бі ЖЖ За сій А їа біб бе) дав - т -ук ЗА;

ЖЕ о 5 248 смаках ех ож кх т.з ех Ге о тах тло жі пе орі ох жЖЕ пе дв) Ме БЖ Ап о уді Кі Бгто бів са лів і: ТВ хай ех ах и зп р ік В їЗО УДАНАН

Жокух дк ох сн і в ША : кл х - неї т ху Ж Хе їв БЕК АВ) дай БЕЖ Ав) нів Без це; вза шеж ба Жах їх БУ Хе вне 7 є -к чад зл а 0 ат

ЗИ х жо п ка їбіхг у ВУ ук З их Мох «хи ж нки Тен вка льш ее

Бій зехт пли тую біб Бек Уві) ВБа о Ав5в Уві БУ УВІ бі Тук таж Аво ен та ик

Б во 5

Чл Тусхсю Уч ун ум межи пе т су теж бохо Хот, птн Жах 0131: их щі вва ТДХ мух їв Має б5АВ ьтУа ЩЇПХ мом ЖК оОмшМ п тів Бім вВко «зр де сер ов

ЗИ ВЗ зп ов вн ши Ша ши миші НЕ пн ло іа тех тах Кі Узі Бо ЗУді Ст біп тТвК дво тА ГБуж й - Ся «ж зах 315 315 «10» 18 «1 557 ха хто «іш БІЛОК оре - флоті ві кожи «З ке «ії» Вас хив вп юеМпах - А ЕЕ г кави» 1315

Му вх ах т Теща ка ЩІ 3 Жак йст тд бек Зх шк чкя . що щік

Меї дач ТуК ББе Мез біз Уві був Ав Бех тТухХ піу бвпобеб Аа ме з х К- 5

А Ту зо 5 за жах Тож ЧУ ок СИ ших ьо тю хо Же Ток М року еще талих виж ча ще

Зіп вко зій аю їіз Ббет твпк отТву Бко Їзи КО бів бі сій век дво ту -е ли

Кк 28 ЗО

Х св я у Хе Се ьо ча а кт я ж У се тех як так

Мей Осій АВп АХВ о Тлк аа мів дав ав о ТВвЕ Без Ажо Веб тик бів ЗБе з зх як

Б ЗМ ах ту щоби спек Кун й С вк ть м й ах тв кіт у; дану їх УК: му Був тик оуУх ек Авоа ЖекК о тТВкК о ТВх Тк о бе ТЕХ біц вйжг бі ре

За За БО

Ж 3 ОО (їі утіх 1 вах пал жфлкх ху їх тд Тео даму. дл

Меб хі пів біз бла жЖБЕ ів бі Буз ті БЕ У за КО ле Уа ЛАВ - х У вує -

БУ ТЕ ТА їй

Ган а я чи НН ЧИ же р сін ку он ше ен нн о Мов зав обі БУВ Уві Твх (і Пух ТАХК сів ТУЄ Же ББо Авпап Вів ТВу деп пк, їх бо:

Бо за З (лк Мамо спа оман Суху ХУ хх ху КІ о Вк Жуки дощу и гео ше ЗК ОА их Зек ем су Уа ів Еш Кі АІВ КО ЗК о БІіп о ЗЕ хат тах я я зп 185 116

Ж їв Жан їщ шк реж ен ав ее З я ук їх спьих віх те то: Хоч

Яке ьже жа БІО КО ІЗ жпІ бо: вів вк і Тв АЗЗ Веб бе» дах зх зза з:

ОК МАМ Ай що тк ХХ Ох Е ГНН ї х- лих хх ОТ - щу хи тек а у "ві б Мез їі був зі Бух Мет мні їв тех Бек зів Ті сту бе х ле Зк од ки 33 149 щит та йог уча Ж «есечахи Жак ик чт ї У жом МАЯ кат шок у авпоьув дво ої бі ТУ защрвоМмеж тах ВЖО Сей Уві СУМ Буш ТУЮ бу 4 я як чин 135 155 155 їв се 2 за - судо ду - щк чі - 4 со но

ЕЗ хо ївусим Жойжех боже бух ху хх у одтк: у ху юю Ж о ехух тах хо Яр же прлмує ві зх ето кув тую Уді та бем бу ТЕ БевотТухХ АВ ОБІЦ бУужЖ КЖЕ ду за Ук 155 ку їтУ

Же ск п «Я ях Жов щоку Мехаа Ж юв йбкзех Мово хе т хи фік дкочи ах

Ввув''ізап пам віМй АН лив В Ї ЖЕ Не дві вч щі У вчи чаї іш Бо Ко 1 Ах ж 15

ЇВ у ех хе каш з чн бле Є хх о Шви біо вх уж -у для шо Жах: Тит М х

Схва хав мій тв Уві Беж Бтв о БеЖ Ав Аа БО дав оніш їм Сни Аз ах зид гук 195 ке КВ

Ше біс ві «бі з ме її: гм Ер ее фіз бла лйщі ЖУне йєхт а

Бек Сі Узь бі Зі ре біз Бек біб Ту бі беж Уві Бне Ав Уві и «ак тей

А «ОМ ї КЗ. жу хр у сбаже Лоу боже СО жо шу аю Ж шт тяг тт, ан ше не НИ АННИ мив 'Уво бій ТУЮ Жаш Авт жа АБ ЖпК БУ о їСеУв тів бум Бе о Жпу ша з5 т зак зде

КЗ 83 Ж еВ

Мет с фоккчі са хх Зяних й х 1 щу ХУ док Кі не ми вм зво Бес ЗЕ се БА КІ пс їж УМ хо Мао Був сей Тл АВ Б

ВО тре ве «У шу «М в Ух у 7 ел т г

Б МЕ пл, «я ви ЖК влечьшачн Аж ІМ ІМ са 0 щік

ФЕЯ іме З З Ук бужи х дит З г «ій» Васіфімв КВОокгіпціепвів ей граю с ай : каз У

Му 4 Ж ГУ че Ж 3 би МИМО у си ух Же Воду пн ха У лу и ж, их щас Бзв БК Іі УщА ЩїіФ Бе Щек ТвсобкхОа Ббеб тк Аза пі бію Вах

Ж - хх т ї м АК їх пове КК тю кот що Мт Шах міг ни нь Ук хе ол Х ух Со тм зве о мев шін шип Аза ТБ оАвро Мі бій сів Тв їв Авв о Бах ТвЕ Осі

Зх та За в У ру Я

ТУЕчкУ огозжи о Жов М гато ню тік ПТМ Ум ує 0бі юю Хозуж Зах 5 ХМ й сю гл аех хи ву о в»УБо клі їх "Бек два отнЕ ТВву тТвЕОотвх ХО ВЕ бай мшЕ ОА -х їй хек 45 ся БУ

ТЕМ мук СКЗ п ке у жк п тях жу тах ту й В Фут ТУнНех йти кВ щей ха ОоБІШ атом ТАК см бі БУВ УВІХ бі дів ву кла УДУ щі хм узі тях тм хущі я Ж т хг сах и стеку тя ке ль ФЕОг хо ЖЖтр ака бі біт бух Уві тп фо Був Тис біс тек Вп бе бап бі ТНе г ст -к кг

За ко Ек що

Зеуті 411 ху суку т а кон ин аж но ЕН жи НН Ул шк ще уся Скит що вм са Ж МУК Ам пошу а ве жк біо їі давав Іа мах ів

За 25 кан ни А ня т г пе чи щі зм: со тож мом и нн вн ші Ше зі ни їі щі що я хіх У Ж хо гу ха чис Еш МУЗ УВІ жк Ко НІ Так бів Аза Ак УВІ ЖпХ Злв о Бем дн п їійпд те

ЕЕ БО їх шк З ХУ жук Ту Жорж їз тони Мкую її То куую спеух ск же ух хх вве оті БУВ о ЗзУв їла був шіу тв Мак нія Ббесв тек Зех сін її щу з 4 Чак

ААУ Ме Кк

Машу Мох Ж осв Мошеух бат б я люта док Мао їжі лених Хо сгуєт ї2 5 Яку тої іх ча АжЖи Суюв вжи жУХ лу жУЮХК ав ому УВУ РжО Бео Уа КУМ бух ТУук

ІМЕН хх йй ке За КУ їїЗ ху 13; Жееих їхМІМ фра бчує яті тах іх пом Ж зу СПочхуу Аг ту 1 хх -аАМ сбашЖ жхЕ кл КВ ОжУух У КвВХ ХАННМ САМ ле МБево ох ва йо іму зах щі у зга 335 іа ї155 150 бух їла ім ВІ у том йо Урі ух Вих хх и не ее Но НШЬ е юки

КУХ ву о щаАв вАВ СА мЕНП АВ ОХУХ Ва вам Ме сі У ЯМТЮ Мел ХЛ ха ках Рчи чек

АВ 155 175 їхЗз4 тт 15 СТ сте яку жи хо оо но А в Ко ОК и ка Трах оюя «лови Жохтхи Ж ху заз озАм ліво тпи ва шеЕ ств зак ВО оАВвАа ЕК Авт мав ми Бе сп пк лк 153 155 їз 5 Шев лах хх т» се УУкіах кт 1 бек їх паху Так ую її С дв Ж

Ліз Бех сі Уві йіУу Тіз Ре о бім бек б3б Тех бі Бек таї рве во зц та б, 155 КЗ « НІ що

ЖІ тло жк ої тика Кт тм Мом ре ни а и Ши о ач ІНЬ ШІ У ва МУ Змвл бі ЖжЖ бі Авт Хі АвпотТвх бу Су бів біб Був о твх чав так а

КАМ А М т Ки ле см ех сх - пт. у с. 11 о т ФУ: мо ГК ж жу сть у кі Ха хх жу тт Ж те "7 - оку шьи Аа ем жлЖ хе іш РЕо ТтТНпУ тів Уві хо Маї бе бій ТК дав ту д, Бен я за

У 3 ЛІ 40 ре Ме пк КУ став зх км хг «вії За «ій» БІЛОК ки тин 1 дл ння Ук тачки а дош Васіїїіч5 каекКівчісвпвіВ «а» ЗО

Ки На ах тож Ма мем сх. и НН НИ жк пік Жак М щі Ж ню нат

Ме Ахч ос був Ар оМев йво був ЗУ їі ТВ бух діа вів їжи ВЕ . К «ж щи 1 5 35 15

ЩМіазо Ж лах Мк ст Же 32 жом ху Же ж тих МК я 7 хіх цк ек їзе ме сі бле Бек Уві беб бек хек ву Бей Аза ба дів Від жу зи Кк

М я в

А Я ее п сек Фожетх ре, в т щі хи ле тло а уче кс то тв ТК обі вав дай Бев бів сам нія чі Ті ТВЖ бій Бас два бій їх г Оп

Ко зо 45

Дан їх: оту т 3 шь реж Мін ХЕ мл и ях т чої 1 паж Кок. ЩІ уУ згоз Бім Ава Сев опе ЕКО дві Уві Фу вів осі з бів ТеЮ їн) Бек

ОК аа сх

У по 5

Гая и тидхує КЛ же тоже мех -е і: де В кох Мох у худ хг є ут Ж окт, зів пе дек БА вух Вес ід Їж АшЖи Аж о бе б Бу ЖУК зи Мей

Я ух те Я

МК ТВ зе

ЕЕ. ВВ МауУ її ЩМаиеко Шви ЗМчках Ж: Ж вн ЛЬ хх лев Ве сам я їх хг зі віп Авр оУах Меж шежЖ теж Бне Бе) б; Узі Бе дв) ох ТУХ БІ ше кох п

ЕХ я з

Ічня хом оон Мас її ок З й ках ЖЖ ко кан ПІКУ аю ІМ ях вк ЧИ тр ч зай Без вів Ме ам же дів да де о хежЖ ЖЕ ЖВХл о БкОо бе о тТув Алла

Ух кШКЕЯ КУ

НАУ 15 ії хх сь кг - Ж ХХ стох льш бог 2 Тож йог ра о Ком а не А КА

АХ пів ях впвЮ ве бід АБИ лав оп Ав НІіВвОоСАВ апа Х спі Ав 14к кр НЯ

БМ їі Ми

Кржує Мія «я Мо ХХ ху Жак т ко кає Ме СБУ юю стру ру ух и зи Жжлпх Ам шу БУ Бу ЖЖ бУЖ Беж Авт ЖБвХ їБХ жЧтх жМих жзю Бу

СО т КНЛУ

От Ка) їжи бля дош: 253 ха Жемку Моз Стах у ах фімоз ік политі лк пзх са Ав омаУ Бе Меї дав пау біл дбав о тпах лечо ось БУ Уві бує хАВ зак чих чЕЕ зап за ї5О 155 ї55

Ж за МВ В ЧК І іх Ме з сли іх хи ль уУ ті; ах шує ЩУНаї

Еко ве уві дів бій пі бух Уві ТВк оті бев ТвВх бій; Тух Ава Бе ко Я суд всяк; 155 АТ У

«1 с у щщ їз обу ім же бе (11; бю уді блю тую ЖІ й йМід

Ва Вів ТВ Ав о пі ТХ бію ТВ пек біс бехп Уві бів тек ХА щк ще тав ів кчере, Кк ї у 51 «т ох К - кон ти не

ТЗ ї г Сх Ж ож яйщі й ке зе Міщ цик о щі; Аж ше с

Вко бе біз Вех Хі ГУ Уді Вже Без Мі бпх Тіб дів да в й пня гук

ЕМ МО ху

Е я ж це толк Ж какао уч чУш Мей ЩіЗ ша: бок о Зюр

Аза їжи їжи Б5розаї ЗУ Меч їі Був сбіу Був Мей Щіз Без Жук бек

Й мо ланку і За у 218 15 жи 4 : шк якщо темі хх ге К- тк тож дам То що Деех браху ах кю шт Ма зі бкоз їв а біз ті бі пбебв авап оПпув АВво о Бух піу ТуУук бар Мей Уві Бко тв1 й ер її аг жах ах й ЯМ яко ЖК ще | й т че Жощаї й аУ яю той Ббзаче

Цткудє х туди КА та я дк Зх о ше с пу ЯМ ААУ

ЖУК БУ СК ім шлу ВО Еле о рук ТУХ УВІ ЖнХ Ббецп о сеУ жТвК ої ту жа 25 й ої ко с Гм хіт шо с ем 1 у 1- (бо Ж жні ду сич Же МІ Ме» х У і

Аво»зобБів Біу тТУХ Буш Бій Аза пі їі Ал отеК Бае дей Ме зу

Й й , й вух Зп

БО БЕ ЖІ

ВО ОК - ж х - пре с ШК АЕН «Зо «у. Чім ЩЕ з 1 пі» котев За У дз У ж М вЖо а Не зва ді кксб ам ба їАє бронх УВК зЗех от Ззех во з х г зах ат во «5 -і ще пани ни ча нен Ан НН дези (ах раї діб тів йва бів щахж «3 МУ м ек півБ ієМ їжи Віз Бех слу Узі БМУу їЇХе8 паз бли Бех б3ч ЖУК ФА

Е 5 ги чех Зп ц аа ша 30 т Кк УНК г: "1-х 5 - Бів дет ТВ їв їла Ж 1 ке її БЕКОН зм : щі она о ан У НУ Ко І; їв їли Кі чві вва дви оо чув У ЗАМ Ух Х 1 Ащи зі Авт; ТИХ 5 У ігу цк зи - - (НИ 5 плед ке т З «КК

За 110 315 зі й . 4 - зхфа г аву й их х ох мук Б т : пк -е їз и. фер и Кв, Таз т ге Гу сбіч беж ТВх біз зви їн тТвх її біб Бко Тнх Кі УЗ та ув з й Очки БИ

Зх СТ ве

Я «У пої аю дух о жк В я тус іт Щфах дви три Ач ЗЕ те -х їх им отут їх т х сам Ек хіх 335 «пи 0ОБІДТУК дено доки ік рію я ек діт її «ши Басів сбнигіпчіпваВ апп 71 : зго - т со и щі 1 У ії ат Мах тт Ми іс т ії: ле тах дк т та хр є і Ж ем пе мах їх ів ФУ З меж дв; овув БУ ті Ти Гуз Від Від їси бек Мет 16 і ! і: З ! ок й в я ї 5 Її 35 ї З й . з ж ; соки ст пам лі о сх З точ Се рр пек Ж зх ХО з хг ее Не лтд лим: пі ви айви вах чаї Мец йеж вет ВвКЗ без віз Узі вів діа бме ТВК бів х а за 25 ЗО роя «з : щі х т Ех че оЛЬШе ду очи Хр ко - ах зм У хх жі б Ду ни: фохиті З ес "ій ввл їв фІне

У Біо Біп оБів Уві її тТвЕх 0320 о Бпе Аво біб Ако мЗій двплоБух

Зк ай їх а 5 45

Ше па чт тік ті КЕ кв ан ни НН аж В і Пе зи А А

ХО ав оУувВі АЖ бБаВ бІіт Дів сіп о Тїко Ббев Мек о йій» Клео ТУ бі ГУ щі ре ог

ЗЕ ка Р.

Кажу т ких Том Мам Мох жк винна нев чеше І о тах са зви мещ Уж Для вва су ба зі тТУкК ех ії о спі іп Аврвоуді Мах шо чия че тк па "В мае БЖ шуму сталу арх бохм (75 383 бод шт шиуу сум Мах га чім хі ха (12 шк ЖЖ жЖпе мем мал о Уді Буж Ав хек УК ПпПіЗу щшів їввв Вів Ме бі ве пох їв' Ж хк ба мах р ко ин Не лах У р нн

КЗ бів ві їі Беж Бу ЖВж вВгоОо Бей пр вовів бі пів Бех Ащюе Їжу

ГИНЕ тпм ШІ їз ТО 115 її: де Що бує Мом Я же її їх що сь дм Ву сла Уйух гаях Ви хх зіс Ба дів тТвапх Ах швопавБ о шУМ АВ у ЗЕ Беб ав бек ТВХх пі ЕВеЕ МУ з хщ яв «ад

АХ ех Як

Жук ик спа бум Мошу є бмью сИиВ а о во а НАННЯ Мах Ж ж ХУ фл св бжв тах тек Бех Ваши Тв ЖЕ Тахо ТтТпс дек ТВх бів АвпоБі Ба Бех мк я чи са 130 і1З5 145 жіщ тік 1 т, «уж хх дя Холм вх їз: т лоуниу «за 5 1 бів Бі Бі ів ТВК обі бі бух Уві Зі Ізз хо Бе бі ів бі ї45 15 155 іБ5 мч - : : - . гії Ж аз Ву ую от Х ОВК 3 Му де а хг Фа у зх їх пат БУВ ові ТВвх їі був Тс біз Теж Авп о вве Ава) МКів ТВ Аве бі 1 Зп ЗЕ ен до Кім ка її ж; слу Му їх ч сх а сжачи М Не Чун ру ХУ а ЗШ Є сш ОЕМ о кплоОсех йавоїах Заі біг т УК дів вав око зекКошамМ сих Ке а: фе 4

ІІ іч 10 їжаки їх Хо пе їх У тіж й дан 123 кує Газіх т вує Демі їх ов о'Уах КЕОс КК Мао глЕ з Бі го УВІ кп Вів оса о сх А УНУ т«єомх Хом Кт оех мо Ж а ЗХ хоєхо фо щі шо Ж умі Мяжух Мохом 0 ж її хе Ж охі еусх му шо зму а БУК | У Щек нів би ТУК БІ ПІ 15 ЗХ Ж ше АТХ з'щ з чу

АВ чо ваз

Ж вшя сух т х Ск ко Мвя Кіш ри ша ше и и нь ки На НН НЯ їх їж» гл їку тус х ме 5 їх х ду Мо та КЕ жая 5 ха хх їла ха їх їх їв АВ о ТжК БІіЖ ТУК Мав оМес Уві БЕс без УЗХ Кух Був ТУЮ бу ЗКУ рт, зак 75 ДЕ «ех А горе яз

Жим т Том Сет т щої пр яти ам Ку КК оучну ту Ту сх заду ех Ше ШЕ

Ехс Кл Ж ОКУЮК УВА потай шу У ЖМмх хх УЖ БІ біб У ТУ ТУ Я кт ту зак ячй ж ТУ чі З що ж ку Хо ем оз Миюже Сі як мом г кпк ді о АН Ка стіп вій Бі Бе авО тех БЕВе вай Меб пів Авп о Уві ї1Зіе вЕб Бі бо реч язкж пкт ак зх КО т зх - ся г т - Я 4 щ -т : Я хх як то ха тм А бохо х сода Що догіух Же Ж її фо дно ух їі бів бТпх ді Бех еЕж шиЖЖ АВ АНА ЄКОо ВЗ ОМ ке АВМ А шк ту, зах ак ші «щи «У

Ту ях я КУ ау хо до жк хр кум бр пі ю тт Хе тм танути 12 тт мА ді шау ЩХ1іе Влпе ім Бек обі Тек бі Бек УЗ3і гне АБо Уві БУ

ЗУ сет зр

ЗИ як ча с нано ни не НН Як НН с кі «хо піц жа ноті вх еВ МО СЕ У Ж біб Аа їбіє Ай ток М ев В АВ їі Мев їни біз дви 5015 315 35 Зо

Хода ТИМ СКЛ шк 14 жу Му я ру хх Форт т У їх я ую не їни Жак обі біз; Ббхо ХЕ Ті Мві Кко Уві бУв біб ТВх Авв Тих лиха зі Се -зк

Ли з ЗА

ТБЕ Бе » і «Бій» 33

АЛЬ тла хай дк «жі ТЛО ож орж тю труні 3 1 з -фзч у ги даті ка «ех Васьізбвв сих пцієнпвав «капа у ие жк мае Кл Ми их З є х АТ тА «а ше Мун Токтут І зі-1 З т М г

Мак Гі Має пі їі бву Уві Бей Бек бек рез Її Віа УВІ Аза ДІВ

Ії зх, 4 5 їв ї5 ке на Ху Ми тож 81: В ФТЯ шо 1751 СК шк Ів Я ТЕН ку их

БУв ТАК шЖіц вжк Ай ГУБ бі біз нів Уві Кі ТрвК біб сп два опій ук с зп «М -ї дл вк біз А їжв о ВБеа бе дви бві пі піп лі Ті бів Тк» їі беЕт пк ошащ АХ Ж пе око вп Зі іАМ іп ої і св жк мщ о оеї дк с КК

ЗУ В За сАтоуж Уч ачо сжг дм рн нн и и А НН Мосч на сел! пи сага біде Ток: іп ок тТУж бі Бе Бек о бео о цув авп о АвпосьМ шій і тує Вес Бе ше цк ке

І. За о їз: КТ 1-й 121 Музко Шекзу Сбблуюк о ХІІ Хм виш виш Щи брат (1 кіш Бій Ач Уві Жек бек о туУхХ Бе ев бла Увла був Авповнах Ту су шк тах "-чх їжи 5 ій Ка З окоую ХМ же: ки чн ОА вч чоШУ ху Ж о ема ф ж руяннуу их ля їх поп ойеч Аів Ме обібю ко бі» ві Хі бехї тв Тв Рг іЇжжи Тжро діа на ЗИ яр 3 ЗАД холу Е ля ще 1 Фе ЗК ХЕ г т кл ж 13 йох . їм Шут йо як 1: шу І дл є - міщ ті йія п щи ох сіу пів зех ДВБ бе бій Аз бів ЖАХ Ав оМНав сій бік ЖЕ бе; АВ чи ня тя їв 15 І с ря ЇМ тк: Хв Жак Ж «кт МАфяя Мобгухю їЛау З і Своє пі я їм ІМ ою іду ту

Шек ТВ піч рБе пев о БУв о ТВх Тх ВШеу Авзв отв Тв ТВУу ТвВЕ Бек тТВЕ 115 іх 155

АН хх кет ШИ Козик тка і гр во гл як Ж чує 32 13 ве зЗіз взпобіу пе век Ті бі бі оо іротвьк баз У БУВ о УЩщі міш іш 3 тк зйй 135 тав

Жук нев «Ух МІ до Зах Жлт 733 грі ХУ Ж жа м зе ши и сх г ткКО вве уУді віз бін Бі дув Уві ТвК їі Бу ТВЖ ОВО тег одяг ВВЕ у 5 У ГІ УЖЕ І Кпа чих Ва Ея Б їв ї55 АВ 16569 ха я що бе бше Тк фур о дк сф іа 23334 біхх їх 34 чеки тла М зв онів пс Ах Сів Тек біз ТВх Бек бі) Бех Уа) біз тек тТіє дів 2 тк «че 155 178 їз кат ду ЕТ м рн же нин З с НУ АН А АН Я ИЩ с 4 ох речи С ко хек сів бЗесг 3 бе Уві Бко ес бів ТВс о Їіє Бій Бса Уві ТвЕ ч-кх чук кт х

А 155 ізо

Ж люо о тум З ж Мах 1231 балуФх Ж ех сь ше х их токах Гук ітд жо ох Ач

Вів МВ о беМи ЯЗшв о МвБі БУБ бев бів У щу Мт Мет п їм УК цех

І З У В. іх М зх су «зи із ММ «ий з НИ У їж хз щокою "я й їх м зх зухуич о ме «г Ч шу хм поь обіе са Газ вва МеБ одве ЖУК Стіу Тух дав о Меї Уді БКкоОо Ге Уда

Х у Е у Х Х чик чі зм 1 15 ККУ сш Ж ока як ЕМ у У и ні ЖУК б хо їй ХК у ху фу м т рух

ТЕЖ Шв ЖУК Ба МБАМ рЖОо Бе бе у тк тах лх вшМ шу ижЖ ме АХ тухЕ ща жк ул их Каже хі ав дво» пів пі беж гу Пі із бів їв; вав бек вт дв Меж іє Ви зе оса вам о жУжЖ Юта вав ЗіБ Бей овщВЕ КЕ кгвжш М М БУ Али я за чу я ко Ку 12 ее ва о нн о и о не тлу пом ха ен ен нн НН А щодня

УщЩо іш БЕК омам Ан ТА ба гг ва шк Жщ ов ЯжХ лІМЬ КО Аді

Здки тк труд

М ха Ти міш тк жо і Фште ї7 чу 32:13 87 сх хіх дви ї7А1а: Шари ут спек 8 де

Вхв'све м) мпіщ НЕ І т ХВХ (4У ТІівожЖі біс ек бАЦ УК іа КХ ях зви зи ве ТУ «Б її схуд З ж каст якщо ту мк ххаин ж доба рн їх чл ох

Уві Ве Авп ові їв Уві бій Тег бів Авквоїіє6 Али ТВж БУВ був б щи чт пк ра тонах пу ху то: Я Мнм бік фр їн у іє Ж 151 шен 351 Же ваш Оу ВХ сеаш о амп Гм о їкпЖ жі 53 ехо Тв КІВ УА СгЗ УВА МУх

ТЕТ лу Ух ли

За5 Зо 315 пе шо ен о но у - а ШК сайти дваоївпх ав ота Бе пра: пу лк з «Вій 53 как ж

АК Зк хаїійв БІНОЖ ит щу тк де ки я т кат их

Аж лю ввгзі1іцав Би ВКЛ

ННІ Шев

Од ия чо

Сихль ші КО роя т ТЗ гу Тож Я нях Ж с ше хо Щох ох Такт У у же --е-ї біУу хів оБау Жах гтиа ЗежЖ бет Вргоа Та; Ав о Уді вів вів БУвотТлх 1 є мин «хх і З хо їй ох Фах Має точку я дн кі А жи кі дн М зах Ж хи 2-1. вай; ва пав МБежш ваш АБ ВЕБ УдУ дж КК Баг вВпе ода піп дуч ОМ за 8 за

У «З М шт цеч Бчо бу бук хг кп лу ТУ зі ях ст ач танку те а оно УК шт Буш ЕшжуФ КК ВЗ УЗА сам шал У Ав Ап ОХ Ба ЕХ сам Еге

Зх ЕЕ 35 екв тах тТррщ о Ми жо фа бор щі су ти їх хх схе Мк г ошуяи хе

ХУ іхЕу БУ З шк Мш мех ав вза сх Ж зи КУ веЕ ї-и 5 МУ сів

ГІ Кк ща жо о во йде бді МУ Ши чає бін Я щі 134 35 їж дж спжожх гі ті там ав твІ Мек хв ТУЮ Еле ем шій ді Був жи ЕчзжЖ Теж пі біт пе

Ге М КЕ ох ма ТО ЕД ща ло Жде гі Фея її я 38 1 ЖК дю ЗИ пах Яку Тосаух Теєжну 1 ху вів Ме бій кто бів ді Кі Бес Теж тТас ВкОо Бей тролів Бі ств и Зо ЗВ

Жуйка ТТ овхух їз ах я ЕЕ ре се ВЕ шо ку З стптмо Ж ока Мт ку ТЛ ух зех Бор о цев сім дви дів ТНК АЮ Ніж біз б тв жо Ав Бех ТВ й 1-х «хх

Ми 15 115 хг Ії Фозтихо М жа Мода смт ду шо Міняю сном Мою і у шу фр ую В фа ше їхлі пе Бе Ся ТАК ТУЮ БЖ Ви Те о тТвс Тех тв о беє ТЕ біб Аа 115 175 158 г дж а мае и 7 зшние ен нь о жи Є ха ел ЗИ» У рьу. лу Ве мех ї1і8 є 1 У піп піч вс о бі3Зіб Зі Ббево узі 51 У Жде Кхє Вгна я з чЕ «яп 150 1155 140

Зк т її тях туї хх що хв зи має тех ж ах Жіж ла худ Мох іх Ще Мі чо йьа бБАМ бу Буз Маї ТИХ Ті був ЖвВх бій ТтТух вав о вне ЕП НІВ 155 15 155 155

Хі жу б кн ті мо руху А ех у 03 тую ту і ве Шут тв овзвоба Ж сЖЖ А Но век щі Ззек УВІ Зав оКУх а МІЙ ГЕО БИК

Ек їстпа як 155 та 175 їх о ее ее не Ше хх у нон й нен 5 щи хх ее ль и Є сі Важ їіш Муз Уві вко Ву! Вів ТВх ів 3іїа дкч ді Ти вів Бе «за - хук хів

НЕ 155 їчи гамі Вк А тео тор Тік та 321 тс Мав мів г бух др (1 1 ша ви да зу ож ха Бук їду Кув маки пащ машМм вух сш ОА ОХ АЮ 7 х, чл зак 135 55 за її 8 оте Дом Том йщи Хуакє Ж Так Чем я хе А кет шин ВН лях

Бі» йеи Анп о ЗУ дво ТУх піуУу ТУух АдроМейї Уві ВБко Кеч Уві ТК Вуз чів зак «рек 1 я АХ ей о нан ун а НК Чолжк Учені чУщ ни Мох їх ТИ Ммче ТУ щі СИХ У Ді МІХ

ТЕЖ о сіт бі КО Бивобух Ту ді Тих їец бье ЖжЖвВЕ о їЇкі Тех дБ ша з-д жи зак тк т р 53 45 я с, бу боках з Кен ль хз бу хіх ко жі хе у ях о кт Му их ме міш ТУж Буш піб Аза Зіп ме) Ваз» ТУух Бапе Язи Ме бі як Уві Хе 785 ца та

ЗХ ЗЕ яп

Те бін сь Ттіа6 лу ть за ую бно дан хи й а в НИ

БЖжЖо ів сах Се ів КВ ча бек оїш Бех ет БАБІ бо дал Зх фу зЗди РЕЖ ЗА

КМУ шо ім їз; Дія боже бі) ця затії же вних і бух (11 плуг ух кум їв

Мови Аза сек Бі чаї бі Ті Вбв обі ек бів Тк бі бек Уді вва

В З за шк УА КЕ же чат - їх

Б: РЕК ах

Що вві бФсуєто б ах хін маш Си У Фоліо МИ же вже т я яку н ех ; у уд Е тя дк Кі ще? є чкшо тях Я сх тла

Авп Уві »в'таМ шли тужх ліс Аа бі Ав отвх ї У о цев ба буд БУ лат кіп -

Клен и» ша шо сш зо

У, у се У я тт. с-ще У се не - ч з . - --

Ту 4135 й т їх Уур лив Тих ЕТ їм ТОБ клею ха мая «т Ток хх

АТАК За давл оОвеащ маш 3 БВ ЛО ТК Ті Уві Ус Сбві БУВ бівропнє зх мчч «ек проти

За А ЗАЙ ЗУ ту Я « ен я ежи Жак два жвх Бу з -А

УК рух -54 «10 я «йіїМ 58 «Ох т ктгУю в ХК ЦО

ОК о - и «КІ Вал плакіпчіспнув хо с БАКУ лети КТК Ме

Мао в балу ща Ж ща чт І ту Яку бул (тк чну ік

Мет Мах т ук сле Бей бій УВвІ3 Бев одви)л осезх жУХ БУ баг оф пів мех я к хх С 1 о 1 15 т. Же У У КІ їх Чу. с - ЩЕ я ЛУ ж --е х я щ Я Ток Щі Кк: п

ЗМ. о Вко бБів ТВА їз Бех ТВЕ ТВх о Вхо пев» Тр іа бі пів Бек Аве

Е 3 ІВ уж зе не ех ж кі ЗМ толь й ж вогя М оя уч межу дя ко Мт Ко Мі ток: хг стяжку

Меи бів Ав дл хпПЕ АвО мав жі біп Тв ев ла» Бех їй 03 Впе 3 СВ 5 ї зок. ж сі Ь. ОВ С що ня ія ач. т. Са х хх льш КУ й

ХЕ ту Ма ах лих ем АЖ у; ше ОСТЕТ м и екон г ос 1 ее

МУ БЖ ТпЕ бек беву дав тах ТС тн тро бвкек тах бій Аза б УЖ спе ше з по

БВ 55 5 ечя ЛЬ я ка т. КІ че ень и не З НН я се Не ЛЬ ше ж А ї ж ве Бі СА БапоБаів Ттпх Бай оті Бе УА іУ Кі ВХ Ве ді ЗА 78 та во

Са хв т ж їх ває ту Ж жо ММ Ж кн шу не Же І шо Мая шия шим між їж о хва ЖВвЕ Ті Буш Та біз беж Авб Бе Аве Нзя ТвАХ Аво з ц Зк Зх по З Зх гл жо бах Я я МИ у шу і. т Ше кт, така Ж шт до жрм шт у «из

Ге Ве ГІ ї і Та: мо Ха лине теме ГК 1 щ ке хі Тк ІІ ці ТУХ бАМОЖжпК ек ба; ВХ дл зам пух КАш Аза Бхо Бех ам о яеЕ іп КУ 135 жо к си ж Та зу ож їх лу м ух ної Трос ит хх ПК ке Ух Жах Ж ух: УА

ДЕКО я те о нема ни лу Я Од сти бл З ек Тошех Мод ха шт УщА КК шо пав Тих Аж Але АЖжЯ УЗА ХОМ аа ВЕК мЖшМ ЛАБ так зв я щ

ККУ 156 Ей

ЗЕД Тужгє Жака СОТ г Я лих ях Ж б ще Ж дв бах й С АКЯ те г том

УМО Ал Її що лі Гу в'ву БУ щЕЖ Нав ге т Ж зак ван Ті пХ У ец

Ук з ак 135 ТУ 4 йо Жлік кх Чех КУ ях уд що Вб уче нь боку ач стат Кік сх дю

Ваз 'ьУв ав жжх шаеУ ТукК Авш Ме Уаїі БВео їв Маї ТУЮ ДУБ їшЕ Бі в що ШК ока ав 150 155 15 п лю т х с Кл ж окт, - які У - чк. с -х Щек . тіж ех ау ВО за а У ЕК ечки хну ТА якіх пев бак Щі 0 поши ноя хх ау бто вна ух ЕВ ЖЕ ж ЯМК маЯнх ММ КАХ зн СУ ЖЖ ЩІ мами УЖЕ их пт де хх УЧ Шанря 155 РО 175 тах ік віх мі тах щи рію Фе МУ ге ге « чу кл захую и у мВ жав АЛ Ам ОК А ві У т виз ви Мах є Му вв оУвВ Кі Вжо Обри

Ак зх, 1355 ке АЛТУЙ 133 ті тіж бла ке кі о фтли та дае шу Вже каша фін Жорж: їх їжі з Бім ТпХ Уві Щек мух вет Аа Мей о КжОо Кай Ніж Ге їж. Аїа

З5 зі ЗЕ і55 МУ «І ен ан чих ік Зк УМ ожини нь Я зош і ше Ше пюш хх вет о пау УЗ бі ів вве піз Беж бі те сі шах УаЇ вне АБО УВІ

З: ча ср дів хх ше тах пишно нини наше ши ша і нн НН На ННЯ ово ша аа ВАН

БУ Уа бу тук Зі зп 331 вжи ТиакоСув Був бів 30 ев о уВвЕ пів

ЗК лм тк их ж в роко ре ся че хи ох по - -кі ох ух - СУ мк т зум ті дея еко Мн Ж Ук Щи м хо Жрічи Х Жак Та Мах ох ух Му жи ож Же о Тбіє баб Вко ЖБК тів Узі Вко Узі Б сів ТБЕ дви ТВаХх

БЕЖ ці за ц 45 З 5

Ви ЖБпк о бев яр дя Ж «ій кВ

Кон ай

КД кі пи ния ек Хату Х

ФК пфмизі З 15153 Візу межі см п чі квасі воав о КІіпвцівавЕЗ «капи Зх хх І

Ме їі тн го м вки шк оно ко от ке но КО а ОН ПО С М М М М о НЕ в с НН Ян

Меп обЗАВ хо бів УвЕ хз век тв Св Бо їм ту Мо Мем лу ОА

ІЗ ц «й ЕЕ

Х Мо 1 їз хо т ж ух ЩІ що жиє жу Я 011, й сьо гки; шо бу ск ля ввр»осей Бін аа іа ЖАХ АЮ Мі бін сажа ЖИаЖ Бе Ав їм Жлх сій ох, ту Кк ух

ЖЕ «З ке вче ос щи на в На НН но і на НН НН НН о А о НО, уж

Бпе їж жу тТвтж ЖЖ Беж лжт: ТТЬс Че бтзЕ жтЕ бек ТСнвж Зій Аа ба т я 4,

ЕН З г3їч им кт тиху тії 7 я сп ує в. "а Х ху ж тах Хв Ту зіех Ух пе мат Зі бі біт бів Те Бій бі БУ хв) бі їі вка ел ох

З в 5 ун е наи Не у І м нн и нн З и с о НИ стаутчє о жі Ва щі 131 4 рах вла ба оЗзІУу бува ЖВУ дз Сев ТвкКоБАМ тую Авий влю Аа Нав ОжпЕ с тА ЕЕ У а дО КД и

Жоує ж З хх. вен У, лк о Ку ом -к С С - - хз ху: їжа Мн Та: МВ кан хх ки г ту чук хм жу зе ве бі Теж біб Тв обБею біз Бек Узі бів Тех їі вів Бко ех ів ве зо 35 ща хів фев чхії фут йуту Бі Св тів Аа дек ал пня кіщо рам тв ее іш Був Узі ХО ко Мів ТВ її Аза Ах Уві ТВ від бе Бе щи дк зі ме 125 115 х ще с і - тех ва чУвА бив їв ТІ їдкі бла М іш їв теє Кеш щі сво гі ах ар отУувА Був БУВ бів у ув і Буш Мей Ні феи Тук Бех пбім ї і сії У з х Гея хо т І. к 115 120 пос т х Жозе їх бах сту г я ХЕ зе гм Хтну З сб кох стру їєеш Али Буш зво ЖУК Сі ХХ АвроМеї баї Кто ів Зах ТЕЖ Був о тух зп 35 хай

УМ ОТ ке 4 . т г - ех

ГІ З дет Її Зло бек зд сті т му і зу я Стах тую Кожух (53 хх ау гони У гЕко вве ув у Кк а ХПІ ше АХ У яп май ж АЮ Ом АХ

ЗА В 55 ІК 145 155 Її АБ с -і с З з-д ж ух

ЖУК ТУ х Міг віз ім їсц да сечу Зь» дип Мав бйіш Бжшуя ба іа о ВйкоО

Ух зУуЖ май вАВ біо ес Аве бек вве два Ммаб Бі Ажиа о Ууді тів вко т й х. сек че У 1 та Ух ке Кано З т сх 3 еко нь ан в В ННЯ шо жу Вечучощеку мікс тн Хо и піз Січ жів біб тбкЕх ові бе Був Жех два дав о Вго йяв Ні беєй бео лук зтри «ши 4 гу зт їж 155 КЕ : : : : - г ке що :; и на А х Ше кт їй ях Ж іх іх бр 1 ,;фротхено тк ще ві шЖве лам

Ат бек 03 тт УВІ У Же Біб під: вес піц тТуУужЖ бі беж Уві ББе дах ср «ух їх тре 157 же ЯМ : - ма з пн и А А НЯ

Чі 3бувжш щі Щі бах тїТїє пам ті ши ная то хв іш 411435 лу ма

МУ -мЕжв УА ММ Т УКХ ЛАВ ОЗаВ ЛА вжи тнЕ АЙ АУЖИ Ті 135 У ОАЕ ух суч ц зад

ГНЕ АЙ ж у є Я зу що що з 1 тя ім тв уки їх чн есе Не МА Я дю ру их їі Бкгз Мзі їюв бій ту ди віч жа Мем ЖВХ дз Бій БЕ» ТВ її Уві БгО Маю бов обів Тих Аай як чик гриви «ту КЕ зай «ік я АХ Же жу я щодня Том Ж «у

УК Аж ЕК КЗ о гу СЬКІ «1» се

УЮ зл

У ЧЕчНня Ак

КтАККЯ тт их дх хе ди прак ет рн ни Я хе й" Вас АМшВ БвИиХхІіВвЧІевпаВ

КК пе «що ок т : «уж трат ж гуд ух зх т ствах ті па й т зу пів пів ві їі тв й1і)зЗ бе дай

Меб Буз Тв сб вав дво ев бів Піп пів Уа) Кі ТВ біб ФфБе ва: - Й г 15 ій ра

У м ММ вх пі «у з - з пу ж тт уні тоди ля Ач Жеося Жук Ж Фе дез» ЗХ поиска Уч тіж Бій у т ці маоп;оАКЧ мам да Був вів око вве ов У ай біт хі оса ОУКеВ ме

Й тах, ух сук ЕН

Ко Я 0 - - - ї х - о й ж паж ЕХ хо бук Сх ща З Кв би ба т - баму Талі Кс йди й іч Є 4х 3 Теж Не

Кек обі БЕ т Ух Меч МмМущ хмаж ел У сУВЖ ЗТ 134 ж АЛ ах ЖІ а СН У

З сот М ВЗ ба Ме ек поем бвЗшеоїами Фах ящі тнх вп о Мек тю мапу Бій вБОа Уа МБеМК оо ни ІН и мн Ка М ЦЕ МЕ С п М З ча ше нок пу кн БО

Зі (іє; їсм3і дід Мен пом ух ім іі Ті ую вва теж рим їі пе мо Ен а м у м зв За а м М ВЕ В М НЕ СО ВК Я ЗА М М Я МЖК ОоОешКс ет ух Е ох - «у тус

Кк х і 0 г в йо Ач там ТА щих срщо Жашк ірі дю фа си ско т дів Бут бБАв зех Авроїем бій дви дій Тв Авор) о нів Біб біз ЖЕ Сев пк ще вк

У ЗО а де З За М 8013 щ це тощо т джут лює спати щи док ба і о сю Мах х

ЛУ юЖшЖ КТК АВ ЕП ВМУБ Ме їй Ух мех Ат жах КЛЖ СІК Тр се 1пй чек чад

М ях АК сенаті лях а лі т хх ха ті ж «кА ті т пт ж

ВЕ обі два обіу пе Меї тів сьфУ Пюа піз Тв бів бі бже Маі біт їх - 4-5

Ах 17 125 лак бен ХхВька їз Оз о. ті зи т х пк на нн о и и НН я г

ХА шжа шле аа пАЗ Ам шоу зи Зах мих вм ПУБ о ЗмаЕ БА шУЖЕ АВ

ХУ ом бах М що сф Мк "Я у ту ня укра ух я адм дих г ИН киш шлашВ ла паб пЕ двох У ух см о твІ ЕЕ 551 ВЕБ Уді біцот ха зах кв Ех чей чн 1 вн Ах ЧК

Не ач щШка У КМ мо щуку киш шо ои Н ох н ВН е ШНМ ів ВЖжо век обі Бек її уз уві вуз БЕЗ Кі ТЬБЕ тів йіа зако Уві та5 СУК із 155 НКУ 15 юю я Ух Ж дк їв жи кт Сн Шк З хг ин ше Ж жу Мак хи о вуа ідмих Бей ВВ ХА КУ Сов оте ПУЕ бі вовк БЕ шщ їж Бу

У Я 7 ВУ Ву І; ІЗ а -Е оті їн 155 їз

Фо г 1 т г сухх дм Я У дату Устя спуєян о хм: фйию лдіМ і тки тем чек Сі Х3е Зі Без вав о був Аво ТУуК сьу Тух Авор о Ме Уві Вже Бек

Зк зи АК їв а 805

ЗЕ певне У сії срмеє б ау гі х мА ЗМ іх 7 зго плялия 38 ска тка 3 прє тож ча жиж Був ТУХ пі бішЖ руб ле МСуй тую Уві ТЬЖ Бей сі ТВ Це сю Зі ц тре ж У кА У

Тл вх бух дл сте ху ФВ з» ї 5 - би М КУ ма Тл ля їх Ав оз биФ Ку ев ІБ ів Бі ока АКроТтУХ БМ ББпо-Н су ке сту зак ад ою Ки К-Т а

Жакує ска зхУ ме т пф жа є ху Ср Х що б дуч бас Во а ут ав» отаї Її Бго 5310 310 Ті Біб тТвВх Уві ех Суб Беж Авпо Аа КО р Ме тек а «КУ ТЕ

Що 81 хм хом Ух сеиж ЖК т кущ ме Ж ху Ух сл ЕН Зк 8 хг яки Ві їм Ббево йла бах сі ві бі Зі ре бів ек хв тех БУХ дол а рух

Ви Би жа

ЩЕ хіх жах ох І Хек м ях ех НУ ха ше. То ру ще помах У «зх -;к ові вмпж дал ді МмЕЖжш жЖщ см УжК ха АБп дае ввп кл ЇВ МУ

В -ш зав жі «ВО є тії Тл им іх щі тує по Жах РУТА їЗечея Че СК ку 7 їх мух г

Хі зі б Так обі депобеб тТВх її паю вує ТВ їбіє Хві ВкоО ді за заг т и а зва пу біб ТВ Ав отак Аза отв був хеїії» « «Іі біртучна посла доенішть ся сша» Пейптид, націлечий за зидоплацвмахичзний ретихУлум «ЗОпИх 77

Claims

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

1. Конструкція, яка містить гетерологічний промотор, функціонально зв'язаний із нуклеотидною послідовністю, яка кодує амінокислотну послідовність, що має пестицидну активність до лускокрилих, де зазначена нуклеотидна послідовність вибрана з групи, яка складається з: а) нуклеотидної послідовності, зазначеної під ЗЕО ІЮ МО:1; БЮ) нуклеотидної послідовності, що кодує поліпептид, який містить амінокислотну послідовність під будь-яким одним із 5ХЕО ІЮ МО:5-10; с) нуклеотидної послідовності, що кодує поліпептид, який містить амінокислотну послідовність, яка щонайменше на 95 95 ідентична амінокислотній послідовності під будь-яким одним із ЗЕО ІЮ МО:5-10.

2. Конструкція за п. 1, де зазначена нуклеотидна послідовність являє собою: а) синтетичну послідовність, яка була сконструйована для експресії у рослині; або р) функціонально зв'язана з промотором, здатним керувати експресією зазначеної нуклеотидної послідовності у клітині рослини.

3. Вектор, що містить конструкцію за п. 1.

4. Клітина-хазяїн, що містить конструкцію за п. 1 або 2 або вектор за п. 3, яка переважно є бактеріальною клітиною-хазяїна або клітиною рослини.

5. Трансгенна рослина, що містить клітину-хазяїна за п. 4, де переважно зазначена рослина вибрана з групи, яка складається з маїсу, сорго, пшениці, капусти, соняшника, томата, хрестоцвітих, різновидів перцю, картоплі, бавовнику, рису, сої, цукрового буряка, цукрової тростини, тютюну, ячменю та олійного ріпаку.

6. Трансгенна насінина, що містить конструкцію за п. 1.

7. Рекомбінантиий поліпептид з пестицидною активністю до лускокрилих, вибраний з групи, що складається з: а) поліпептиду, що містить амінокислотну послідовність під будь-яким одним із БЕО ІЮ МО:5-10; та БЮ) поліпептиду, що містить амінокислотну послідовність, яка щонайменше на 95 95 ідентична амінокислотній послідовності під будь-яким одним із ЗЕО ІЮ МО:5-10.

8. Поліпептид за п. 7, що додатково містить гетерологічні амінокислотні послідовності.

9. Композиція, що містить поліпептид за п. 7.

10. Композиція за п. 9, де зазначена композиція: а) вибрана з групи, яка складається з порошку, дусту, пелети, гранули, спрею, емульсії, колоїду та розчину; Б) отримана за допомогою сушіння, ліофілізації, гомогенізації, екстракції, фільтрації, центрифугування, осадження або концентрування культури бактеріальних клітин; с) містить від приблизно 1 95 до приблизно 99 95 за масою зазначеного поліпептиду.

11. Спосіб знищення лускокрилого шкідника або контролю популяції лускокрилого шкідника, що включає приведення зазначеного шкідника або популяції у контакт з пестицидно-ефективною кількістю поліпептиду за п. 7 або її згодовування зазначеному шкідникові або популяції.

12. Спосіб одержання поліпептиду з пестицидною активністю до лускокрилих, що включає культивування клітини-хазяїна за п. 4 в умовах, за яких експресується конструкція, що кодує поліпептид.

13. Рослина або клітина рослини зі стабільно вбудованою в її геном ДНК-конструкцією, що містить нуклеотидну послідовність, яка кодує білок з пестицидною активністю до лускокрилих, де зазначена нуклеотидна послідовність вибрана з групи, яка складається з: а) нуклеотидної послідовності, зазначеної під ЗЕО ІЮ МО 1; БЮ) нуклеотидної послідовності, що кодує поліпептид, який містить амінокислотну послідовність під будь-яким одним із БЕО ІЮ МО:5-10; та с) нуклеотидної послідовності, що кодує поліпептид, який містить амінокислотну послідовність, яка щонайменше на 95 95 ідентична амінокислотній послідовності під будь-яким одним із ЗЕО ІЮ МО:5-10.

14. Спосіб захисту рослини від лускокрилого шкідника, який включає експресію в рослині або її клітині нуклеотидної послідовності, що кодує пестицидний поліпептид, який має пестициду активність до лускокрилого шкідника, де зазначена нуклеотидна послідовність вибрана з групи, яка складається 3: а) нуклеотидної послідовності, зазначеної під ЗЕО ІЮ МО:1; Юр) нуклеотидної послідовності, що кодує поліпептид, який містить амінокислотну послідовність під будь-яким одним із БЕО ІЮ МО:5-10; та с) нуклеотидної послідовності, що кодує поліпептид, який містить амінокислотну послідовність, яка щонайменше на 95 95 ідентична амінокислотній послідовності під будь-яким одним із ЗЕО ІЮ МО:5-10. 0 КомпютернаверсткаВ. Юкінй 00000000 0777 Міністерство розвитку економіки, торгівлітасільськогогосподарства України, 0000000 вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП "Український інститут інтелектуальної власності", вул. Глазунова, 1, м. Київ - 42, 01601