TWI729094B

TWI729094B - 內磺醯胺化合物及其使用方法

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Publication number: TWI729094B
Application number: TW106109628A
Authority: TW
Inventors: 祝力; 段小偉; 戴麗光; 楊釗; 楊艶青; 張慧; 胡遠東; 勇彭; 韓永信; 趙銳; 田心; 王善春
Original assignee: 大陸商正大天晴藥業集團股份有限公司; 大陸商連雲港潤衆製藥有限公司; 大陸商北京賽林泰醫藥技術有限公司
Priority date: 2016-03-22
Filing date: 2017-03-22
Publication date: 2021-06-01
Also published as: TW201736354A; ES2842448T3; BR112018069504B1; PT3434671T; JP6880166B2; RU2741915C2; CN109071471A; EP3434671A1; CN113666922A; AU2017239318B2; DK3434671T5; EP3434671A4; JP2019513819A; US11111240B2; RU2018136487A; BR112018069504A2; EP3434671B1; CA3018649A1; DK3434671T3; AU2017239318A1

Abstract

本發明提供內磺醯胺化合物及其使用方法，具體涉及如式I所示的新的具有異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)抑制活性的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物、其製備方法及包含其的藥物組合物。本發明還涉及所述化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物和包含其的藥物組合物治療IDH1突變誘發的癌症中的用途。

Description

內磺醯胺化合物及其使用方法

本申請涉及用於治療癌症的內磺醯胺化合物及其使用方法。

IDH(isocitrate dehydrogenase)全稱異檸檬酸脫氫酶，是細胞內三羧酸迴圈過程中最主要的關鍵酶，它們能夠催化異檸檬酸氧化脫羧生成2-氧化戊二酸(即，α-酮戊二酸)。IDH有兩個不同的亞型，其中一個亞型利用NAD(+)作為電子受體，另一個亞型利用NADP(+)作為電子受體。已經報導的IDH有五種，其中3種為NAD(+)依賴型異檸檬酸脫氫酶，它們位於線粒體基質；還有兩種為NADP(+)依賴型異檸檬酸脫氫酶，一種位於線粒體，另一種位於胞質。

研究發現多種腫瘤(如神經膠質瘤、肉瘤、急性粒細胞白血病等)存在IDH突變，突變位點是位於催化中心的精氨酸殘基(IDH1/R132H、IDH2/R140Q、IDH2/R172K)。2009年，Bleeker等對672例不同來源的腫瘤和84個不同的腫瘤細胞系進行了IDH1突變的檢測，發現這種突變特異性集中發生在腦膠質瘤中[Bleeker et al.,2009.IDH1 mutations at residue p.R132(IDH1(R132))occur frequently in high-grade gliomas but not in other solid tumers.Hum Mutat.30：7-11.]。但後續的文獻報導顯示，急性髓細胞白血病、前列腺癌、副神經節瘤等也存在IDH1的突變[Green et al.,2010,Somatic mutations of IDH1 and IDH2 in the leukemic transformation of myeloproliferative neoplasms.N Engl J Med.362：369-370.]。Bleeker等發現在IDH1突變的病例中，R132H占了86.9%。其他類型如R132C、R132G、R132L、R132V、R132S所占比例較小[Bleeker et al.,2009]。突變後的IDH獲得一種新的能力，即催化α-酮戊二酸(α-KG)轉化為2-羥基戊二酸(2-HG)。研究表明，α-酮戊二酸與2-羥基戊二酸的結構相似，2-HG與α-KG競爭，由此降低了α-KG依賴性酶的活性，導致染色質高度甲基化，這種超甲基化被認為干擾了正常的細胞分化，導致未成熟細胞過度增殖，從而引發癌症。

Agios Pharmaceuticals開發的IDH1m抑制劑AG-120(即ivosidenib)，對急性骨髓性紅細胞白血病有顯著藥效，同時針對膽管癌、軟骨肉瘤、神經膠質瘤等其他惡性固體腫瘤研究也在進行中。

一方面，本申請提供通式I所示的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物：

其中，X選自CH₂或NR⁵；R¹選自C_3-6環烷基或C_3-6雜環烷基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁶的基團取代；R²選自苯基或含有1-2個選自N、O或S的雜原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代；R³選自苯基、含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基、苯基CH₂-或者含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基CH₂-，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代；R⁴選自鹵素、氨基、羥基、鹵代C_1-3烷基或C_1-6烷基；R⁵選自氫或C_1-6烷基；R⁶選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基； R⁷選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、氧代、

、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；R⁸選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_2-6烯基或C_2-6炔基；R⁹選自H、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_3-6雜環烷基、苯基或者含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R¹⁰的基團取代；R¹⁰選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；m為0或1。

作為本申請的一個優選的實施方式，在式I所示的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物中，取代基定義如下：X選自CH₂或NR⁵；R¹選自C_3-6環烷基或C_3-6雜環烷基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁶的基團取代；R²選自苯基或含有1-2個選自N、O或S的雜原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代；R³選自苯基、含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基、苯基CH₂-或者含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基CH₂-，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代；R⁴選自鹵素、氨基、羥基、鹵代C_1-3烷基或C_1-6烷基；R⁵選自氫或C_1-6烷基；R⁶選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；R⁷選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、氨基磺醯基、N- 取代氨基磺醯基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；R⁸選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_2-6烯基或C_2-6炔基；m為0或1。

在本申請式I化合物的一個實施方案中，R⁴選自氟、氯、溴或三氟甲基。

另一方面，本申請提供通式I-1所示的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物：

其中，取代基定義如通式I化合物所述。

另一方面，本申請提供通式I-2所示的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物：

其中，取代基定義如通式I化合物所述。

作為本申請的一個實施方式，提供通式II所示的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物：

其中，X選自CH₂或NR⁵；R¹選自C_3-6環烷基或C_3-6雜環烷基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁶的基團取代；R²選自苯基或含有1-2個選自N、O或S的雜原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代；R³選自苯基、含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基、苯基CH₂-或者含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基CH₂-，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代；R⁵選自氫或C_1-6烷基；R⁶選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；R⁷選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、氧代、

、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；R⁸選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_2-6烯基或C_2-6炔基；R⁹選自H、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_3-6雜環烷基、苯基或者含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R¹⁰的基團取代；R¹⁰選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基。

作為本申請的一個優選的實施方式，在式II所示的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物中，取代基定義如下：X選自CH₂或NR⁵；R¹選自C_3-6環烷基或C_3-6雜環烷基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁶的基團取代；R²選自苯基或含有1-2個選自N、O或S的雜原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代；R³選自苯基、含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基、苯基CH₂-或者含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基CH₂-，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代；R⁵選自氫或C_1-6烷基；R⁶選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；R⁷選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、氨基磺醯基、N取代氨基磺醯基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；R⁸選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_2-6烯基或C_2-6炔基。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，X選自CH₂、NH或N(CH₃)。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R⁵選自氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基或叔丁基。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R⁵選自氫或甲基。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R¹選自環丙基、環丁基、環戊基、環己基、吡咯烷基或呱啶基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁶的基團取代。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R¹選自環丁基、環戊基、環己基、吡咯烷基或呱啶基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁶的基團取代；R⁶選自氟、氯或溴。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R⁶選自氟、氯或溴。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R¹選自環丁基或環己基，其可任選地被1或2個氟取代。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R¹選自

、

作為本申請一個優選的特定實施方式，在式II所示的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物中，R²選自苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、四唑基或三嗪基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代；R⁷選自氟、氯、溴、氰基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基、四氟乙基、五氟乙基、一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、氨基磺醯基或N取代氨基磺醯基。進一步的，R²選自苯基或吡啶基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代；R⁷選自氟、氰基、三氟甲基、-SO₂NH₂或4-氰基吡啶-2-氨基磺醯基。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R²選自苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、四唑基或三嗪基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R²選自苯基或吡啶基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R⁷選自氟、氯、溴、氰基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基、四氟乙基、五氟乙基、一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、氧代或

。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R⁷選自氟、氰基、三氯甲基、氧代、

或

。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R⁹選自H、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、四唑基或三嗪基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R¹⁰的基團取代。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R⁹選自吡啶基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R¹⁰的基團取代。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R¹⁰選自氰基。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，

選自

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R²選自

、

作為本發明一個優選的特定實施方式，在式II所示的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物中，R³選自苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、四唑基、三嗪基、苄基、呋喃基亞甲基、噻吩基亞甲基、吡咯基亞甲基、吡唑基亞甲基、咪唑基亞甲基、吡啶基亞甲基、嘧啶基亞甲基、噠嗪基亞甲基、吡嗪基亞甲基、噻唑基亞甲基、異噻唑基亞甲基、噁唑基亞甲基、異噁唑基亞甲基、四唑基亞甲基或三嗪基亞甲基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代；R⁸選自氫、氟、氯、溴、氰基、乙炔基、1-丙炔基或1-丁炔基，進一步的，R³選自吡啶基、嘧啶基或苄基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代；R⁸選自氟、氰基或乙炔基。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R³選自苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、四唑基、三嗪基、苄基、呋喃基亞甲基、噻吩基亞甲基、吡咯基亞甲基、吡唑基亞甲基、咪唑基亞甲基、吡啶基亞甲基、嘧啶基亞甲基、噠嗪基亞甲基、吡嗪基亞甲基、噻唑基亞甲基、異噻唑基亞甲基、噁唑基亞甲基、異噁唑基亞甲基、四唑基亞甲基或三嗪基亞甲基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R³選自吡啶基、嘧啶基或苄基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R⁸選自氟、氯、溴、氰基、乙炔基、1-丙炔基或1-丁炔基。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R⁸選自氟、氰基或乙炔基。

在本申請式II化合物的一個實施方案中，R³選自

、

作為本申請的一個實施方式，提供通式II-1所示的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物：

其中，取代基定義如通式II化合物所述。

作為本申請的一個實施方式，提供通式II-2所示的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物：

其中，取代基定義如通式II化合物所述。

本申請優選下述化合物及其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物：

本申請的另一方面提供了一種藥物組合物，其包含治療有效量的式I化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物和一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑。本申請的藥物組合物可以進一步含有一種或多種額外的治療劑。

本申請另一方面提供了一種治療由IDH1突變誘發的癌症的方法，所述IDH1突變具有R132X突變；在一些實施方案中，R132X突變選自R132H、R132C、R132L、R132V、R132S和R132G；在一些優選的實施方案中，R132X突變選自R132H和R132C；所述方法包括向有需要的患者給予治療有效量的式I或式II化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物或其藥物組合物。

本申請的另一方面提供了式I化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物或包含其的藥物組合物在製備用於治療由IDH1突變誘發的癌症的藥物中的用途。

本申請的另一方面提供了治療由IDH1突變誘發的癌症的式I化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物或包含其的藥物組合物。

本申請的一些實施方案中，所述的由IDH1突變誘發的癌症選自：成膠質細胞瘤(神經膠質瘤)、骨髓增生異常綜合症(MDS)、骨髓組織增殖性贅生物(MPN)、急性骨髓性白血病(AML)、肉瘤(優選軟骨肉瘤、纖維肉瘤、)、黑色素瘤、非小細胞肺癌、膽管癌或血管免疫母細胞性非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)。在更具體的實施方案中，待治療的癌症是神經膠質瘤、骨髓增生異常綜合症(MDS)、骨髓組織增殖性贅生物(MPN)、急性骨髓性白血病(AML)、膽管癌、軟骨肉瘤、或血管免疫母細胞性非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)等，優選地包括急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生異常綜合症(MDS)、神經膠質瘤、膽管癌或軟骨肉瘤。

本申請提供的式I化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物具有非常好的IDH1酶的抑制活性，其活性與AG-120活性相當或更優，並且具有非常好的體內代謝水準和非常長的體內半衰期，有望成為更適合治療由IDH1突變誘發的癌症的藥物。

本申請的藥物組合物可通過將本申請的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物與適宜的藥學上可接受的載體組合而製備，例如可配製成固態、半固態、液態或氣態製劑，如片劑、丸劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、膏劑、乳劑、懸浮劑、溶液劑、栓劑、注射劑、吸入劑、凝膠劑、微球及氣溶膠等。

給予本申請的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物或包含其的藥物組合物的典型途徑包括但不限於口服、直腸、透黏膜、經腸給藥，或者局部、經皮、吸入、腸胃外、舌下、陰道內、鼻內、眼內、腹膜內、肌內、皮下、靜脈內給藥。

本申請的藥物組合物可以採用本領域眾所周知的方法製造，如常規的混合法、溶解法、製粒法、製糖衣藥丸法、磨細法、乳化法、冷凍乾燥法等等。

對於口服給藥，可以通過將活性化合物與本領域熟知的藥學上可接受的載體混合來配製藥物組合物。這些載體能使本申請的化合物被配製成片劑、丸劑、錠劑、糖衣劑、膠囊劑、液體、凝膠劑、漿劑、懸浮劑等，用於對患者進行口服給藥。

可以通過常規的混合、填充或壓片方法來製備固體口服組合物。例如，可通過下述方法獲得：將所述的活性化合物與固體賦形劑混合，任選地碾磨所得的混合物，如果需要則加入其他合適的輔劑，然後將該混合物加工成顆粒，得到了片劑或糖衣劑的核心。適合的輔料包括但不限於：粘合劑、稀釋劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑、甜味劑或矯味劑等。所述輔料例如微晶纖維素、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠溶液、蔗糖和澱粉糊；滑石、澱粉、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸；乳糖、蔗糖、澱粉、甘露糖醇、山梨糖醇或磷酸二鈣；二氧化矽；交聯羧甲基纖維素鈉、預交化澱粉、澱粉羥乙酸鈉、藻酸、玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、甲基纖維素、瓊脂、羧甲基纖維素、交聯聚乙烯吡咯烷酮等。可以根據通常藥物實踐中公知的方法任選地對糖衣劑的核心進行包衣，尤其使用腸溶包衣。

藥物組合物還可適用於腸胃外給藥，如合適的單位劑型的無菌溶液劑、混懸劑或凍乾產品。能夠使用適當的賦形劑，例如填充劑、緩衝劑或表面活性劑。

本文所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物可以通過任何適用的途徑和方法給藥，例如通過口服或腸胃外(例如，靜脈內)給藥。式I或式Ⅱ化合物的治療有效量為從約0.0001到20mg/Kg體重/天，例如從0.001到10mg/Kg體重/天。

式I化合物的給藥頻率由患者個體的需求決定，例如，每天1次或2次給藥，或每天更多次給藥。給藥可以是間歇性的，例如，其中在若干天的期間內，患者接受式I或式Ⅱ化合物的每日劑量，接著在若干天或更多天的期間，患者不接受式I或式Ⅱ化合物的每日劑量。

有關定義：除非另有說明，本文所用的下列術語和短語具有下列含義。一個特定的術語或短語在沒有特別定義的情況下不應該被認為是不確定的或不清楚的，而應該按照普通的含義去理解。當本文中出現商品名時，意在指代對應的商品或其活性成分。

術語“任選”或“任選地”是指隨後描述的事件或情況可能發生或可能不發生，該描述包括發生所述事件或情況和不發生所述事件或情況。例如，乙基“任選”被鹵素取代，指乙基可以是未被取代的(CH₂CH₃)、單取代的(如CH₂CH₂F)、多取代的(如CHFCH₂F、CH₂CHF₂等)或完全被取代的(CF₂CF₃)。本領域技術人員可理解，對於包含一個或多個取代基的任何基團，不會引入任何在空間上不可能存在和/或不能合成的取代或取代模式。

本文所用的C_m-n指該部分中具有m-n個碳原子。例如，“C_3-10環烷基”指該環烷基具有3-10個碳原子。“C_0-6亞烷基”指該亞烷基具有0-6個碳原子，當亞烷基具有0個碳原子時，該基團為鍵。

本文中的數字範圍，是指給定範圍中的各個整數。例如 “C_1-10”是指該基團可具有1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子、4個碳原子、5個碳原子、6個碳原子、7個碳原子、8個碳原子、9個碳原子或10個碳原子。

術語“被取代”是指特定原子上的任意一個或多個氫原子被取代基取代，或特定原子提供或接受電子對，與另一原子形成配位鍵，此時該特定原子則視為被另一原子取代，只要特定原子的價態是正常的並且取代後的化合物是穩定的。當取代基為酮基(即=O)時，意味著兩個氫原子被取代，酮取代不會發生在芳香基上。

當任何變數(例如R)在化合物的組成或結構中出現一次以上時，其在每一種情況下的定義都是獨立的。因此，例如，如果一個基團被0-2個R所取代，則所述基團可以任選地至多被兩個R所取代，並且每種情況下的R都有獨立的選項。此外，取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。

除非另有規定，術語“雜”表示雜原子或雜原子團(即含有雜原子的原子團)，即碳和氫以外的原子或含有這些原子的原子團，雜原子獨立地選自氧、氮、硫、磷、矽、鍺、鋁、硼。在出現兩個或更多雜原子的實施方式中，所述兩個或更多雜原子可彼此相同，或者所述兩個或更多雜原子中的部分或全部彼此不同。

術語“鹵素”或“鹵代”是指氟、氯、溴或碘的任何基團。

術語“羥基”指-OH。

術語“氰基”指-CN。

術語“氨基”指-NH₂、-NH(烷基)和-N(烷基)₂，氨基的具體例子包括但不限於-NH₂、-NHCH₃、-NHCH(CH3)₂、-N(CH3)₂、-NHC₂H₅、-N(CH₃)C₂H₅等。

術語“氧代”指C原子上的取代基為酮基(即=O)或N原子上的取代基為O(即N→O)。

術語“烷基”是指由碳原子和氫原子組成的直鏈或支鏈的飽和脂肪烴基團，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。所述特定烷基包括其所有同分異構體形式，例如丙基包括-CH₂CH₂CH₃、-CH(CH₃)₂，例如丁基包括-CH₂CH₂CH₂CH₃、-CH(CH₃)(CH₂CH₃)、-C(CH₃)₃、-CH₂CH(CH₃)₂。術語“C_1-6烷基”指具有1-6個碳原子的烷基。術語“C_1-4烷基”指具有1-4個碳原子的烷基。術語“C_1-3烷基”指具有1-3個碳原子的烷基。所述“烷基”、“C_1-8烷基”、“C_1-6烷基”或“C_1-3烷基”可以是非取代的或是被一個或多個選自羥基、鹵素或氨基的取代基取代。

術語“鹵代烷基”意在包括單鹵代烷基和多鹵代烷基；例如，術語“鹵代C_1-3烷基”意在包括但不僅限於三氟甲基、2,2,2-三氟乙基和3-溴丙基等等。鹵代烷基的實例包括但不僅限於：三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基和五氯乙基。

術語“烯基”是指含有2至12個碳原子並且具有一個或多個雙鍵的直鏈或支鏈烴鏈。烯基的實例包括但不限於烯丙基、丙烯基、2-丁烯基以及3-己烯基。雙鍵碳之一可任選地為烯基取代基的附接點。

術語“炔基”是指含有2至12個碳原子並且特徵在於具有一個或多個三鍵的直鏈或支鏈烴鏈。炔基的實例包括但不限於乙炔基、丙炔基、炔丙基以及3-己炔基。三鍵碳之一可任選地為炔基取代基的附接點。

術語“環烷基”是指由碳原子和氫原子組成的全碳單環的飽和烴基團，如C_3-20環烷基，優選為C_3-6環烷基，例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基等。所述環烷基可以是非取代的或是被取代的，所述的取代基包括但不限於烷基、烷基氧基、氰基、羧基、芳基、雜芳基、氨基、鹵素、磺醯基、亞磺醯基、磷醯基和羥基。

術語“芳基”是指具有共軛的π電子體系的全碳單環或多環稠合的芳香環基團，優選具有6-14個碳原子，更優選具有6-12個碳原子，最優選具有6個碳原子。例如單環芳香環基團，如選自苯基；雙環稠合的芳香環基團由與4-6員芳族或非芳族碳環稠合的苯基組成，包括萘基。

術語“雜芳環”是指5-12個環原子的單環或稠合環，具有5、6、7、8、9、10、11或12個環原子，其中含有1、2、3或4個選自N、O、S的環原子，其餘環原子為C，且具有完全共軛的π-電子體系。

術語“雜芳基”是指“雜芳環”分子去掉1個氫原子後餘下的基團，雜芳基可以是非取代的或取代的，所述的取代基包括但不限於烷基、烷基氧基、芳基、芳烷基、氨基、鹵素、羥基、氰基、硝基、羰基和雜脂環基。非取代的雜芳基的非限制性實例包括但不限於吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、喹啉基、異喹啉基、四唑基、三嗪基。

術語“雜脂環”是指具有3-12個環原子的單環或稠合環，具有3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個環原子，其中1或2個環原子是選自N、O、S、S(O)_n(其中n為0、1或2)的雜原子，其餘環原子為C。這樣的環可以是飽和的或不飽和的(例如具有一個或多個雙鍵)，但是不具有完全共軛的π-電子體系。3員飽和雜脂環的實例包括但不限於

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，4員飽和雜脂環的實例包括但不限於

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，5員飽和雜脂環的實例包括但不限於

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，6員飽和雜脂環的實例包括但不限於

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，7員飽和雜脂環的實例包括但不限於

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，5 員不飽和雜脂環的實例包括但不限於

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，6員不飽和雜脂環的實例包括但不限於

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術語“雜環烷基”是指“雜脂環”分子去掉1個氫原子後餘下的基團，雜環烷基可以是非取代的或者其中的氫原子任選地被取代基取代，所述的取代基包括但不限於烷基、烷氧基、=O、芳基、芳烷基、-COOH、-CN、氨基、鹵素或羥基。

“DMF”是指N,N-二甲基甲醯胺。

“DIAD”是指偶氮二甲酸二異丙酯。

“Boc-”是指叔丁氧羰基。

“TFA”是指三氟乙酸。

“DCM”是指二氯甲烷。

“PE”是指石油醚。

“EA”是指乙酸乙酯。

“DCM”是指二氯甲烷。

“0.5%MC”是指製劑處方中含0.5%甲基纖維素。

“0.2% Tween80”是指製劑處方中含0.2%失水山梨醇單油酸酯聚氧乙烯醚80。

“Pd₂(dba)₃”是指三(二亞苄基丙酮)二鈀。

“Xantphos”是指4,5-雙二苯基膦-9,9-二甲基氧雜蒽。

術語“Ugi反應”是指一分子醛或酮、一分子胺、一分子異腈以及一分子羧酸縮合生成α-醯氨基醯胺的多成分反應。

術語“Goldberg偶聯反應”是指銅催化的芳基C原子與N、 O、C原子的成鍵反應。

術語“Mitsunobu反應”是指醇羥基在偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)和三苯基膦的作用下被親核試劑取代，同時跟羥基相連的碳原子構型發生翻轉，所謂親核試劑就是一種電子對供體，即路易士鹼。

術語“藥學上可接受的”是針對如下化合物、材料、組合物和/或劑型而言，它們在可靠的醫學判斷的範圍之內，適用於與人類和動物的組織接觸使用，而沒有過多的毒性、刺激性、過敏性反應或其他問題或併發症，與合理的利益/風險比相稱。

作為藥學上可接受的鹽，例如，可以提及金屬鹽、銨鹽、與有機鹼形成的鹽、與無機酸形成的鹽、與有機酸形成的鹽、與鹼性或者酸性氨基酸形成的鹽等。

本申請的藥學上可接受的鹽可由含有酸根或鹼基的母體化合物通過常規化學方法合成。一般情況下，這樣的鹽的製備方法是：在水或有機溶劑或兩者的混合物中，經由游離酸或鹼形式的這些化合物與化學計量的適當的鹼或酸反應來製備。一般地，優選醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈等非水介質。

本申請的某些化合物可以以非溶劑化形式或者溶劑化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶劑化形式與非溶劑化的形式相當，都包含在本申請的範圍之內。本申請的某些化合物可以以多晶或無定形形式存在。

本申請的某些化合物可以具有不對稱碳原子(光學中心)或雙鍵。外消旋體、非對映異構體、幾何異構體和單個的異構體都包括在本申請的範圍之內。

本文中消旋體ambiscalemic和scalemic或者對映體純的化合物的圖示法來自Maehr,J.Chem.Ed.1985,62：114-120。除非另有說明，用楔形鍵和虛線鍵表示一個立體中心的絕對構型。當本文所述化合物含有烯屬雙鍵或其他幾何不對稱中心，除非另有規定，它們包括E、Z幾何異構體。同樣地，所有的互變異構形式均包括在本申請的範圍之內。

本申請的化合物可以存在特定的幾何或立體異構體形式。本申請設想所有的這類化合物，包括順式和反式異構體、(-)-和(+)-對映體、(R)-和(S)-對映體、非對映異構體、(D)-異構體、(L)-異構體，及其外消旋混合物和其他混合物，例如對映異構體或非對映體富集的混合物，所有這些混合物都屬於本申請的範圍之內。烷基等取代基中可存在另外的不對稱碳原子。所有這些異構體以及它們的混合物，均包括在本申請的範圍之內。

可以通過不對稱合成或掌性試劑或者其他常規技術製備光學活性的(R)-和(S)-異構體以及D和L異構體。如果想得到本申請某化合物的一種對映體，可以通過不對稱合成或者具有手性輔助劑的衍生作用來製備，其中將所得非對映體混合物分離，並且輔助基團裂開以提供純的所需對映異構體。或者，當分子中含有鹼性官能團(如氨基)或酸性官能團(如羧基)時，與適當的光學活性的酸或鹼形成非對映異構體的鹽，然後通過本領域所公知的分步結晶法或色譜法進行非對映異構體分離，然後回收得到純的對映體。此外，對映異構體和非對映異構體的分離通常是通過使用色譜法完成的，所述色譜法採用掌性固定相，並任選地與化學衍生法相結合(例如由胺生成氨基甲酸鹽)。

本申請的化合物可以在一個或多個構成該化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素標記化合物，比如氚(³H)，碘-125(¹²⁵I)或C-14(¹⁴C)。本申請的化合物的所有同位素組成的變換，無論放射性與否，都包括在本申請的範圍之內。

術語“藥學上可接受的載體”是指對攝入該載體的有機體無明顯刺激作用，而且不會損害活性化合物的生物活性及性能的那些載體。“藥學上可接受的載體”是指與活性成份一同給藥的、有利於活性成份給藥的惰性物質，包括但不限於國家食品藥品監督管理局許可的可接受的用於人或動物(例如家畜)的任何助流劑、增甜劑、稀釋劑、防腐劑、染料/著色劑、矯味增強劑、表面活性劑、潤濕劑、分散劑、崩解劑、助懸劑、穩定劑、等滲劑、溶劑或乳化劑。所述載體的非限制性實例包括碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖和各類澱粉、纖維素衍生物、明膠、植物油和聚乙二醇等。關於載體的其他資訊，可以參考Remington：The Science and Practice of Pharmacy,21st Ed.,Lippincott,Williams & Wilkins(2005)，該文獻的內容通過引用的方式併入本文。

術語“賦形劑”通常是指配製有效的藥物組合物所需要的載體、稀釋劑和/或介質。

針對藥物或藥理學活性劑而言，術語“有效量”或“治療有效量”是指無毒的但能達到預期效果的藥物或藥劑的足夠用量。對於本申請中的口服劑型，組合物中一種活性物質的“有效量”是指與該組合物中另一種活性物質聯用時為了達到預期效果所需要的用量。有效量的確定因人而異，取決於受體的年齡和一般情況，也取決於具體的活性物質，個案中合適的有效量可以由本領域技術人員根據常規試驗確定。

術語“活性成分”、“治療劑”，“活性物質”或“活性劑”是指一種化學實體，它可以有效地治療目標紊亂、疾病或病症。

本申請的化合物可以通過本領域技術人員所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及本領域技術人員所熟知的等同替換方式，優選的實施方式包括但不限於本申請的實施例。

本申請具體實施方式的化學反應是在合適的溶劑中完成的，所述的溶劑須適合於本申請的化學變化及其所需的試劑和物料。為了獲得本申請的化合物，有時需要本領域技術人員在已有實施方式的基礎上對合成步驟或者反應流程進行修改或選擇。

本申請通式II的化合物可以由有機合成領域技術人員通過如下路線用本領域的標準方法來製備：

其中，X、R¹、R²、R³的定義與上述關於式II化合物的定義相同。

異腈化合物1、鄰氯苯甲醛2、氨基化合物3和內磺醯胺羧酸4在適當的溶劑中(如甲醇等)直接進行Ugi反應，得到式II化合物。

本申請式II化合物還可由有機合成領域技術人員通過如下路線用本領域的標準方法來製備：

當R³為H時，化合物5可通過上述Ugi反應得到；化合物5與鹵代化合物6經Goldberg偶聯反應，反應條件為：合適的銅鹽(如CuI等)作催化劑，加入適當的配體(如N,N’-二甲基乙二胺等)和鹼(如碳酸銫等)，在合適的溶劑中(如1,4-二氧六環等)加熱反應，得到式II化合物。化合物5與鹵代化合物6也可經鈀催化的芳醯胺化反應，反應條件為：合適的鈀(如Pd₂(dba)₃)作催化劑，加入適當的配體(如Xantphos等)和鹼(如碳酸銫等)，在合適的溶劑(如1,4-二氧六環等)中加熱反應，得到式II化合物。

本申請中間體1-6和1-7可由有機合成領域技術人員通過如下路線用本領域的標準方法來製備：

L-高胱氨酸1-1在甲醇溶液中與二氯亞碸反應得到L-高胱氨酸二甲酯二鹽酸鹽1-2；1-2通氯氣得到(S)-2-氨基-4-氯磺醯基丁酸甲酯鹽酸鹽1-3；1-3在三乙胺作用下成環，得到(S)-異噻唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物1-4；1-4水解得到中間體(S)-異噻唑烷-3-甲酸1,1-二氧化物1-7。1-4與2-溴-4-氰基吡啶經CuI或Pd₂(dba)₃催化偶聯，得到化合物1-5；1-5水解得到中間體1-6。

本申請中間體2-6和2-10可由有機合成領域技術人員通過如下路線用本領域的標準方法來製備：

L-絲氨基酸甲酯鹽酸鹽2-1經還原胺化得到苄基保護的化合物2-2；2-2經磺醯化得到化合物2-3；2-3經Mistunobu反應，分子內環化得到化合物2-4；2-4經氫化脫苄得到化合物2-5；2-5水解得到中間體2-6。2-4脫除Boc保護基得到化合物2-7；2-7發生N-甲基化反應得到化合物2-8；2-8經氫化脫苄得到化合物2-9；2-9水解得到中間體2-10。

以上之關於本揭露內容之說明及以下之實施方式之說明係用以示範與解釋本發明之精神與原理，並且提供本發明之專利申請範圍更進一步之解釋。

圖1為實施例2的化合物與對照AG-120針對IDH1突變的HT-1080細胞內的2-HG的抑制結果。

圖2為實施例2的化合物與對照AG-120針對IDH1突變的HT-1080細胞外的2-HG的抑制結果。

圖3為實施例2的化合物與對照AG-120針對IDH1突變的U87的2-HG的抑制結果。

下面的具體實施例，其目的是使本領域的技術人員能更清楚地理解和實施本申請。它們不應該被認為是對本申請範圍的限制，而只是本申請的示例性說明和典型代表。本領域技術人員應該理解：還有形成本申請化合物的其他合成途徑，下面提供的是非限制性的實施例。

除非另有說明，溫度是攝氏溫度。試劑購自國藥集團化學試劑北京有限公司，阿法埃莎(Alfa Aesar)，或北京百靈威科技有限公司等商業供應商，並且這些試劑可直接使用無需進一步純化，除非另有說明。

除非另有說明，下列反應在無水溶劑中，氮氣或氬氣的正壓下或使用乾燥管進行；反應瓶上裝有橡膠隔膜，以便通過注射器加入底物和試劑；玻璃器皿烘乾和/或加熱乾燥。

除非另有說明，柱色譜純化使用青島海洋化工廠的200-300目矽膠；製備薄層色譜分離使用煙臺市化學工業研究所生產的薄層色譜矽膠預製板(HSGF254)；MS的測定用Thermo LCQ Fleet型(ESI)液相色譜-質譜聯用儀；旋光測定使用上海申光儀器儀錶有限公司的SGW-3自動旋光儀。

除非另有說明，核磁資料(1H-NMR)使用Varian設備於400MHz運行。核磁資料使用的溶劑有CDCl₃、CD₃OD、D₂O、DMSO-d₆等，以四甲基矽烷(0.00ppm)為基準或以殘留溶劑為基準(CDCl₃：7.26ppm；CD₃OD：3.31ppm；D₂O：4.79ppm；DMSO-d6：2.50ppm)。當標明峰形多樣性時，以下簡寫表示不同峰形：s(單峰)、d(雙重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、br(寬峰)、dd(雙雙重峰)、dt(雙三重峰)。如果給出了耦合常數，則以Hertz(Hz)為單位。

除非另有說明，本申請中部分實施例標題化合物未標明掌性中心的絕對構型，此部分化合物在製備過程中得到的是所有對映異構體的混合物，普通柱層析法未能將對映異構體進行分離，但並不表示該部分化合物不存在對映異構體。

實施例1：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(5-氟吡啶-3-基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：L-高胱氨酸二甲酯二鹽酸鹽

冰浴攪拌下，向L-高胱氨酸(8.0g,29.8mmol)的甲醇懸濁液中滴加二氯亞碸(10.64g,89.4mmol)，溶液逐漸澄清，加畢，攪拌10min撤去冰浴，室溫攪拌過夜，除去溶劑，得L-高胱氨酸二甲酯二鹽酸鹽(10.6g，產率100%)。

1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=8.79(s,6H),3.75(s,6H),2.95-2.80(m,4H),2.52-2.47(m,2H),2.20-2.10(m,4H)。

步驟B：(S)-2-氨基-4-氯磺醯基丁酸甲酯鹽酸鹽

冰浴攪拌下，向L-高胱氨酸二甲酯二鹽酸鹽(10.6g,29.8mmol)的乙醇(40mL)和氯仿(80mL)混合溶液中通氯氣20分鐘，有白色固體生成，過濾，氯仿洗滌，得到(S)-2-氨基-4-氯磺醯基丁酸甲酯鹽酸鹽(7.5g，產率100%)。

1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=13.46(s,1H),8.57(s,2H),3.66(s,3H),3.18-2.95(m,2H),2.52-2.45(m,1H),2.22-1.97(m, 2H)。

步驟C：(S)-異噻唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物

冰鹽浴攪拌下，向(S)-2-氨基-4-氯磺醯基丁酸甲酯鹽酸鹽(4.5g，17.85mmol)的氯仿懸濁液中，滴加三乙胺的氯仿溶液，加完撤去冰鹽浴，室溫攪拌過夜，除去溶劑，矽藻土過濾，乙酸乙酯洗滌，除去溶劑得淺黃色油狀物，即(S)-異噻唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(3.2g，產率100%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=4.98(s,1H),4.21(dd,J=8.3,4.6Hz,1H),3.84(s,3H),3.30-3.11(m,1H),3.09-2.90(m,1H),2.90-2.73(m,1H),2.60(ddd,J=18.4,8.9,4.7Hz,1H)。

步驟D：(S)-異噻唑烷-3-甲酸1,1-二氧化物

冰浴攪拌下，向S-異噻唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(2.4g，13.4mmol)的甲醇四氫呋喃溶液中，滴加氫氧化鋰的懸濁液，反應過夜，滴加1N鹽酸使pH小於5，除去溶劑，過濾，甲醇洗滌，除去溶劑得(S)-異噻唑烷-3-甲酸1,1-二氧化物(2.2g，產率100%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=3.85-3.75(m,1H),3.10-2.85(m,2H),2.55-2.30(m,2H)。

步驟E：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(5-氟吡啶-3-基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

室溫下，將3-氨基-5-氟吡啶(57mg，0.508mmol)和鄰氯苯甲醛(72mg，0.512mmol)溶於甲醇中，攪拌30分鐘，再向混合液中加入(S)-異噻唑烷-3-甲酸1,1-二氧化物(84mg，0.508mmol)，攪拌10分鐘，再加入1,1-二氟-3-異氰基環丁烷(參照專利CN103097340所述方法製備，60mg，0.508mmol)，攪拌過夜，除去溶劑，矽膠柱層析(PE：EA=1：1)分離，得目標產物(60mg，產率22%)。

m/z=517[M+H]+。

步驟F：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(5-氟吡啶-3-基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

向封管反應器中加入(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(5-氟吡啶-3-基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(60mg，0.116mmol)、2-溴-4-氰基吡啶(22mg，0.139mmol)、碘化亞銅(28mg，0.147mmol)、N,N’-二甲基乙二胺(13mg，0.147mmol)和碳酸銫(95mg，0.29mmol)，加入二氧六環(8mL)，通入氮氣5分鐘，封管，80℃反應過夜，原料反應完，除去溶劑後進行柱層析(PE：EA=1：1)，得消旋產物，再將消旋產物進行薄層層析(DCM：EA=8：1)得到(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(5-氟吡啶-3-基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(7mg，產率10%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.56(d,J=5.1Hz,1H),8.37(s,1H),7.64(s,1H),7.43(d,J=8.1Hz,1H),7.30-7.05(m,6H),6.35(s,1H),6.20(s,1H),4.65-4.55(m,1H),4.22-4.10(m,1H),3.70-3.60(m,1H),3.42-3.33(m,1H),2.95-2.75(m,2H),2.60-2.50(m,2H),2.35-2.15(m,2H)。

m/z=619[M+H]+。

HPLC條件：手性柱：CHIRALPAK®IC-3柱(25cm)；流動相：正己烷/乙醇=85/15；流速：0.8mL/min；柱温：40℃；波長/時間：210nm，20min；保留時間：實施例1標題化合物為17.60min。

實施例2：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(5-氟吡啶-3-基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

在實施例1的步驟F中，通過薄層層析分離得到(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(5-氟吡啶-3-基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.47(d,J=5.1Hz,1H),8.31(s,1H),8.08(d,J=8.1Hz,1H),7.62(s,1H),7.30-6.75(m,6H),6.56(s,1H),6.22(s,1H),4.80-4.70(m,1H),4.40-4.30(m,1H),3.75-3.65(m,1H),3.40-3.33(m,1H),3.10-2.98(m,2H),2.60-2.40(m,4H)。

m/z=619[M+H]+。

HPLC條件：手性柱：CHIRALPAK®IC-3柱(25cm)；流動相：正己烷/乙醇=85/15；流速：0.8mL/min；柱溫：40℃；波長/時間：210nm，20min；保留時間：實施例2標題化合物為17.91min。

實施例3：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3,5-二氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3,5-二氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟E，將反應原料3-氨基-5-氟吡啶替換為3,5-二氟苯胺，得到目標產物(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3,5-二氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(產率13%)。

m/z=619[M+H]+。

步驟B：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3,5-二氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟F，得到(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3,5-二氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物，產率35%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.54(d,J=5.0Hz,1H),7.67(s,1H),7.43-6.76(m,8H),6.11(s,1H),6.01(s,1H),4.80-4.72(m,1H),4.16-4.2(m,1H),3.68-3.65(m,1H),3.38-3.34(m,1H),2.80-2.98(m,2H),2.58-2.54(m,2H),2.28-2.30(m,2H)。

m/z=636[M+H]+。

實施例4：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3,5-二氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

在實施例3的步驟B中，通過薄層層析分離得到標題化合物，產率40%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.45(d,J=5.0Hz,1H),7.67(s,1H),7.35-6.66(m,8H),6.46(s,1H),5.93(d,J=6.8,1H),4.85-4.83(m,1H),4.40-4.23(m,1H),3.72-3.69(m,1H),3.37-3.34(m,1H),3.03-2.99(m,2H),2.60-2.20(m,4H)。

m/z=636[M+H]+。

實施例5：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-三氟甲基苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-三氟甲基苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟E，將反應原料3-氨基-5-氟吡啶替換為3-三氟甲基苯胺，得到目標產物(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-三氟甲基苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物，產率50%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.10 and 8.00(s,0.5 and 0.5 H),7.58-6.60(m,7H),6.55 and 6.39(s,0.5 and 0.5H),5.90(s,1H),5.23 and 5.18(d,J=7.2,0.5 and 0.5H),4.40-4.30(m,1H),4.00-3.90(m,1H),3.11-2.96(m,4H),2.59-2.26(m,4H)。

m/z=566[M+H]+。

步驟B：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-三氟甲基苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟F，得到(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-三氟甲基苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物，產率16%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.54(d,J=5.0Hz,1H),8.40(brs,1H),7.64-7.05(m,9H),6.32(m,2H),4.68-4.65(m,1H),4.22-4.04(m,1H),3.64-3.59(m,1H),3.34-3.28(m,1H),2.98-2.65(m,2H),2.60-2.43(m,2H),2.38-2.15(m,2H)。

m/z=668[M+H]+。

實施例6：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-三氟甲基苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

在實施例5的步驟B中，通過薄層層析分離得到(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-三氟甲基苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物，產率23%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.46(d,J=5.0Hz,1H),8.14(s,1H),7.69-6.81(m,9H),6.45(s,1H),5.88-5.80(m,1H),4.80-4.65(m,1H),4.40-4.25(m,1H),3.82-3.65(m,1H),3.40-3.25(m,1H),3.10-2.90(m,2H),2.70-2.40(m,4H)。

m/z=668[M+H]+。

實施例7：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氰基-5-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氰基-5-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟E，將原料3-氨基-5-氟吡啶替換為3-氟-5-氰基苯胺得到目標產物，產率17%。

m/z=541[M+H]+。

步驟B：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氰基-5-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟F，得到(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氰基-5-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物，產率15%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.83(d,J=6.0Hz,1H),8.57(d,J=5.0Hz,1H),7.66-7.12(m,8H),6.29(s,1H),6.16(s,1H),4.63-4.61(m,1H),4.21-4.10(m,1H),,3.70-3.60(m,1H),3.40-3.25(m,1H),3.30-2.82(m,2H),2.61-2.42(m,2H),2.40-2.20(m,2H)。

m/z=643[M+H]+。

實施例8：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氰基-5-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

在實施例7的步驟B中，通過薄層層析分離得到標題化合物，產率20%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.47-6.85(m,10H),6.50(d,J=9.77Hz,1H),5.97(s,1H),4.75-4.73(m,1H),4.40-4.30(m,1H),3.80-3.65(m,1H),3.42-3.27(m,1H),3.15-2.30(m,6H)。

m/z=643[M+H]+。

實施例9：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3,4-二氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3,4-二氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟E，將原料3-氨基-5-氟吡啶替換為3,4-二氟苯胺得到目標產物，產率18%。

m/z=534[M+H]+。

步驟B：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3,4-二氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟F，得到(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3,4-二氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物，產率30%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.55(s,1H),7.62(s,1H),7.40-7.15(m,8H),6.43(s,1H),6.27(s,1H),4.70-4.68(m,1H),4.15-4.11(m,1H),3.61-3.53(m,1H),3.32-3.26(m,1H),2.89-2.69(m,2H),2.57-2.53(m,2H),2.28-2.11(m,2H)。

m/z=636[M+H]+。

實施例10：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基) 氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3,4-二氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

在實施例9的步驟B中，通過薄層層析分離得到標題化合物，產率35%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.47-8.43(m,1H),7.66(s,1H),7.35-6.82(m,8H),6.44(d,J=5.78,1H),5.97(d,J=6.57,1H),4.81-4.79(m,1H),4.33-4.32(m,1H),3.73-3.69(m,1H),3.36-3.33(m,1H),3.02-2.99(m,2H),2.61-2.40(m,4H)。

m/z=636[M+H]+。

實施例11：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：(S)-2-(4-氰基吡啶-2-基)異噻唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物

向封管反應器中加入(S)-異噻唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(由實施例1步驟C製備，200mg，1.11mmol)、2-溴-4-氰基吡啶(204mg，1.11mmol)、碘化亞銅(105mg，0.55mmol)、N,N’-二甲基乙二胺(98mg，1.11mmol)和碳酸銫(723mg，2.22mmol)，加入二氧六環(8mL)，通入氮氣5分鐘，封管，80oC反應過夜，原料反應完，除去溶劑後進行柱層析(PE：EA=1：1)分離，得到目標產物(S)-2-(4-氰基吡啶-2-基)異噻唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(230mg，產率74%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.40(dd,J=5.2,0.8Hz,1H),7.69(t,J=1.0Hz,1H),7.19(dd,J=5.2,1.0Hz,1H),5.01(dd,J=8.0,3.6Hz,1H),3.78(s,3H),3.64-3.55(m,1H),3.48-3.42(m,1H),2.95-2.84(m,1H),2.65-2.52(m,1H)。

步驟B：(S)-2-(4-氰基吡啶-2-基)異噻唑烷-3-甲酸1,1-二氧化物

冰浴攪拌下，向(S)-2-(4-氰基吡啶-2-基)異噻唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(116mg，0.41mmol)的甲醇四氫呋喃溶液中滴加氫氧化鋰的懸濁液，反應過夜，反應結束後，加10mL水稀釋，乙酸乙酯萃取除雜，水相滴加1N鹽酸使pH小於5，乙酸乙酯萃取，除去溶劑得(S)-2-(4-氰基吡啶-2-基)異噻唑烷-3-甲酸1,1-二氧化物(103mg，產率94%)。

1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ=13.5(s,1H),8.54(d,J=5.0,1H),7.51(dd,J=3.74,4.76Hz,1H),7.45(s,1H),4.95-4.90(m,1H),3.75-3.60(m,2H),2.85-2.72(m,1H),2.46-2.38(m,1H)。

步驟C：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟E，將原料(S)-異噻唑烷-3-甲酸1,1-二氧化物替換成(S)-2-(4-氰基吡啶-2-基)異噻唑烷-3-甲酸1,1-二氧化物，得到目標產物(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物，產率30%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.56(d,J=5.0Hz,1H),7.62(s,1H),7.39(d,J=8.1Hz,1H),7.21-6.99(m,8H),6.43(s,1H),6.23(s,1H),4.73(dd,J=6.5,3.1Hz,1H),4.20-4.05(m,1H),3.57(dd,J=20.0,11.9Hz,1H),3.27(dd,J=11.9,3.5Hz,1H),2.84-2.72(m,2H),2.55(dd,J=14.9,9.3Hz,2H),2.28-2.13(m,2H)。

m/z=618[M+H]+。

實施例12：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

在實施例11的步驟C中，通過薄層層析分離得到標題化合物，產率33%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.46(m,1H),7.67(d,J=8.8Hz,1H),7.63(s,1H),7.22-6.84(m,8H),6.47(d,J=3.6,1H),6.08(s,1H),4.82(d,J=6.1Hz,1H),4.33(m,1H),3.68-3.60(m,1H), 3.40-3.28(m,1H),3.10-2.98(m,2H),2.68-2.38(m,4H)。

m/z=618[M+H]+。

實施例13：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(嘧啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：(S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟E，將反應原料2,2-二氟環丁基異氰和3-氨基-5-氟吡啶替換為環己基異氰和3-氟苯胺，得到目標產物，產率81%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.70-6.86(m,8H),6.50-6.25(m,1H),5.41-5.35(m,1H),5.25-5.10(m,1H),4.05-4.95(m,1H),3.90-3.80(m,1H),3.12-2.90(m,2H),2.65-1.00(m,12H)。

m/z=508[M+H]+。

步驟B：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(嘧啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟F，得到(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(嘧啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物，產率26%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.61(d,J=4.9Hz,2H),7.75(brs,1H),7.42-7.37(m,2H),7.26-7.21(m,2H),7.01-7.07(m,1H),7.02-6.96(m,2H),6.85(brs,1H)6.12(s,1H),5.71(d,J=8.4Hz,1H),4.75(d,J=5.6Hz,1H),3.76-3.68(m,2H),3.34-3.30(m,1H),2.53-2.46(m,2H),1.86-1.78(m,2H),1.52-1.62(m,4H),1.24-1.30(m,2H),1.12-0.73(m,2H)。

m/z=586[M+H]+。

實施例14：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(嘧啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

在實施例13的步驟B中，通過薄層層析分離得到標題化合物，產率30%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.57(d,J=4.9Hz,2H),7.74(s,1H),7.43-6.88(m,7H),6.49(s,1H),5.40(d,J=7.9Hz,1H),4.79(s,1H),3.84-3.75(m,2H),3.33-3.30(m,1H),2.62-2.37(m,2H),1.86-1.78(m,2H),1.52-1.62(m,4H),1.24-1.30(m,2H),1.12-0.73(m,2H)。

m/z=586[M+H]+。

實施例15：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟F，由(S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(由實施例13步驟A製備)得到目標產物，產率39%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.56(d,J=5.0Hz,1H),7.70(s,1H),7.67(s,1H),7.35-6.99(m,8H),6.12(s,1H),5.70(d,J=7.4Hz,1H),4.75-4.74(m,1H),3.76-3.56(m,2H),3.34-3.36(m,1H),2.66-2.43(m,2H),1.85-1.71(m,2H),1.62-1.56(m,4H),1.28-1.24(m,2H),1.12-0.85(m,2H)。

m/z=610[M+H]+。

實施例16：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

在實施例15的步驟B中，通過薄層層析分離得到標題化合物，產率39%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.46(d,J=5.0Hz,1H), 7.75-6.88(m,10H),6.45(s,1H),5.36-5.30(m,1H),4.82-4.81(m,1H),3.82-3.74(m,2H),3.34-3.32(m,1H),2.67-2.65(m,1H),2.45-2.40(m,1H),1.97-1.94(m,2H),1.74-1.59(m,4H),1.38-1.24(m,2H),1.17-1.01(m,2H)。

m/z=610[M+H]+。

實施例17：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氟吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟F，由(S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(由實施例13步驟A製備)與2-溴-4-氟吡啶偶聯得到目標產物，產率25%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.32(dd,J=8.4,5.9Hz,1H),7.45-6.73(m,10H),6.03(s,1H),5.73(s,1H),4.88-4.68(m,1H),3.76-3.62(m,2H),3.29(ddd,J=12.0,6.7,2.6Hz,1H),2.67-2.39(m,2H),1.85-1.75(m,2H),1.62-1.56(m,2H),1.32-1.25(m,3H),1.05-0.91(m,3H)。

m/z=603[M+H]+。

實施例18：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氟吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

在實施例17的步驟B中，通過薄層層析分離得到標題化合物，產率25%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.26(s,1H),7.37-6.72(m,10H),6.45(s,1H),5.37(d,J=8.1,1H),4.83(d,J=7.7,1H),3.83-3.70(m,2H),3.29(ddd,J=12.0,6.7,2.6Hz,1H),2.65-2.62(m,1H),2.42-2.25(m,1H),1.94-1.91(m,2H),1.68-1.56(m,2H),1.32-1.25(m,3H),1.05-0.91(m,3H)。

m/z=603[M+H]+。

實施例19：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-2-(4-炔基吡啶-2-基)異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：2-溴-4-(2,2-二溴乙烯基)吡啶

0℃下，在四溴化碳(2.68g，8.08mmol)的二氯甲烷溶液中加入三苯基膦(4.23g，16.13mmol)，攪拌5分鐘後加入處於甲醇中的2-溴-4-醛基吡啶(0.50g，2.69mmol)，升至室溫繼續攪拌30分鐘。反應完全後加水終止反應，乙酸乙酯(30mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，通過矽膠柱色譜(PE：EA=10：1)分離得到產物(140mg，產率15%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.39-8.38(m,1H),7.63-7.62(m,1H),7.40-7.38(m,2H)。

步驟B：2-溴-4-((三甲基矽基)乙炔基)吡啶

-78℃下，在2-溴-4-(2,2-二溴乙烯基)吡啶(140mg，0.41mmol)的四氫呋喃溶液中滴加2.4M的正丁基鋰(358μL，0.86mmol)，攪拌30分鐘後繼續加入三甲基氯矽烷(53μL，0.61mmol)，-78℃下攪拌1小時後升至室溫繼續攪拌30分鐘。反應完全後加水終止反應，乙酸乙酯(30mL×3)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，通過矽膠柱色譜(PE：EA=20：1)分離得到產物(30mg，產率29%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.32-8.30(m,1H),7.52-7.51(m,1H),7.27-7.24(m,1H),0.28-0.25(m,9H)。

步驟C：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-2-(4-炔基吡啶-2-基)異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

80℃下，(S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(由實施例13步驟A製備，60mg，0.12mmol)、2-溴-4-[(三甲基矽基)乙炔基]吡啶(30mg，0.12mmol)、碘化亞銅((12mg，0.06mmol)、N,N'-二甲基乙二胺(13μL，0.12mmol)和碳酸銫(77mg，0.24mmol)在1,4-二氧六環(8mL)中攪拌過夜。反應結束後，混合物過濾，濃縮母液，通過矽膠柱色譜(PE： EA=1：1)分離得到標題化合物(5mg，產率7%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.36-8.30(m,1H),7.73(m,1H),7.55(m,1H),7.46-7.30(m,2H),7.24-6.88(m,6H),6.46 and 6.03(s,1H),5.74 and 5.39(d,J=6.4Hz,1H),4.80 and 4.75(m,1H),3.81-3.66(m,3H),3.31-3.28(m,1H),2.62-2.49(m,2H),2.05-1.55(m,6H),1.15-0.84(m,4H)。

m/z=609[M+H]+。

實施例20：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-(N-(4-氰基吡啶-2-基)氨基磺醯基)苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-N-(3-氨基磺醯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟E，將原料3-氟-5-氨基吡啶替換為3-氨基苯磺醯胺得到目標產物，產率53%。

m/z=569[M+H]+。

步驟B：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-(N-(4-氰基吡啶-2-基)氨基磺醯基)苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟F，得標題化合物，產率25%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.60-6.60(m,14H),6.41-6.39(s,1H),6.18-5.56(s,1H),5.44-5.36(m,1H),4.62-4.59(m,1H),3.90-3.61(m,2H),3.40-3.33(m,1H),2.60-2.24(m,2H),2.00-0.80(m,10H)。

m/z=773[M+H]+。

實施例21：(S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(3-氰基苯乙基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：(S)-2-(3-氰基苯乙基-2-基)異噻唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物

將(S)-異噻唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(179mg，1.0mmol)、3-氰基溴化苄(392mg，2.0mmol)、四丁基碘化銨(37mg，0.1mmol)溶於DMF(3mL)，反應液室溫下攪拌過夜，加水稀釋，乙酸乙酯萃取，乾燥過濾，濃縮，粗品經矽膠柱層析分離得目標產物(260mg，產率88%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.66(s,1H),7.65-7.59(m,2H),7.47(t,J=7.6Hz,1H),4.41(q,J=15.6Hz,2H),3.85-3.82(m,1H),3.63(s,3H)3.40-3.25(m,1H),3.23-3.16(m,1H),2.66-2.42(m,2H)。

步驟B：(S)-甲基2-(3-氰基苯乙基-2-基)異噻唑烷-3-甲酸1,1-二氧化物

參照實施例11中的步驟B，得到目標產物，產率75%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.81(s,1H),7.77-7.54(m,3H),4.35(s,2H),3.98-3.96(m,1H),3.38-3.26(m,2H),2.66-2.50(m,1H),2.49-2.26(m,1H)。

步驟C：(S)-N-{(RS)-1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基}-2-(3-氰基苯乙基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟E，得到標題化合物，產率79%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.80-6.75(m,12H),6.41 and 6.37(s,0.5 and 0.5H),5.41 and 5.35(m,0.5 and 0.5H),4.62 and 4.53(d,J=16,0.5 and 0.5H),4.15 and 4.04(d,J=15.2,16,0.5 and 0.5H),3.96-3.78(m,1H),3.65-3.60(m,1H),3.45-3.40(m,1H),3.18-3.02(m, 1H),2.40-2.20(m,2H),2.02-1.80(m,2H),1.79-1.45(m,4H),1.40-1.02(m 4H)。

m/z=623[M+H]+。

實施例22：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((4,4-二氟環己基)氨基))-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((4,4-二氟環己基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

室溫攪拌下將2-氯-苯甲醛(85mg，0.605mmol)和3-氟苯胺(67mg，0.605mmol)於MeOH(6.0mL)中混合30分鐘。添加(S)-異噻唑啉酮-3-甲酸1,1-二氧化物(150mg，0.908mmol)並攪拌反應混合物10分鐘，隨後添加1,1-二氟-4-異氰環已烷(88mg，0.605mmol)，室溫下攪拌過夜。真空除去溶劑，通過矽膠柱層析分離得到(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((4,4-二氟環己基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(114mg，產率34.7%)，直接投入下一步反應中。

m/z=544[M+H]+。

步驟B：(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((4,4-二氟環己基)氨基))-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺 1,1-二氧化物

向封管反應器中加入(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((4,4-二氟環己基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(114mg，0.210mmol)、2-溴-4-氰基吡啶(47mg，0.252mmol)、碘化亞銅(21mg，0.11mmol)、N,N’-二甲基乙二胺(19mg,0.21mmol)和碳酸銫(206mg，0.63mmol)，加入二氧六環(8mL)，通入氮氣5分鐘，封管80℃反應過夜，除去溶劑後進行柱層析(PE：EA=1：1)，得消旋產物，再將消旋物進行薄層層析(DCM：EA=8：1)得到掌性純化合物(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((4,4-二氟環己基)氨基))-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(39mg，產率28.7%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.55(d,J=4.7Hz,1H),7.67(s,1H),7.39(d,J=7.7Hz,1H),7.33-7.18(m,5H),7.07(dd,J=24.5,16.7Hz,2H),6.95-6.69(m,1H),6.10(s,1H),5.70(d,J=5.6Hz,1H),4.76(d,J=6.9Hz,1H),3.72-3.70(m,2H),3.36-3.31(m,1H),2.58-2.54(m,2H),2.07-1.64(m,5H),1.41-1.17(m,3H)。

m/z=646[M+H]+。

實施例23：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((4,4-二氟環己基)氨基))-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

在實施例22的步驟B中，經過薄層層析分離得到(S)-N-((R)-1-(2-氯苯基)-2-((4,4-二氟環己基)氨基))-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(40mg，產率29.4%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.46(s,1H),7.71-7.68(m,2H),7.33(d,J=13.3Hz,1H),7.08-7.01(m,6H),6.45(s,1H),5.43(d,J=7.6Hz,1H),4.81(d,J=7.2Hz,1H),3.98-3.93(m,1H),3.75-3.70(m,1H),3.34(s,1H),2.63(s,1H),2.46(s,1H),2.11-2.05(m,4H),1.89-1.81(m,2H),1.63-1.35(m,2H),0.88(s,1H)。

m/z=646[M+H]+。

實施例24：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2基)-N-(3-氟苯基)-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：(S)-2-(苄基氨基)-3-羥基丙酸甲酯

室溫攪拌下，向盛有L-絲氨基酸甲酯鹽酸鹽(20g，128.6mmol)和三乙胺(13g，128.6mmol)的混合物的二氯甲烷溶液的500 毫升圓底燒瓶中加入苯甲醛(13.6g，128.6mmol)和無水硫酸鈉(6.0g)，，室溫下反應攪拌過夜。反應完畢後，過濾，濃縮。向濃縮殘留物加入甲醇溶解，冰浴下小心分批次加入硼氫化鈉(4.86g，128.6mmol)，室溫下反應1小時。除去甲醇，二氯甲烷稀釋，飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，二氯甲烷萃取三次，合併的有機相用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮得到(S)-2-(苄基氨基)-3-羥基丙酸甲酯(20.6g，產率77%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.38-7.26(m,5H),4.48(d,J=12.8Hz,1H),3.8-3.72(m,6H),3.61(dd,J=10.8,10.8Hz,1H),3.54(dd,J=6.8,6.4Hz,1H)。

步驟B：(S)-2-(苄基(N-(叔丁氧羰基)磺醯基)氨基)-3-羥基丙酸甲酯

冰浴攪拌下，向盛有(S)-2-(苄基氨基)-3-羥基丙酸甲酯(10.0g，47.79mmol)的二氯甲烷溶液中加入三乙胺(7.25g，71.69mmol)和叔丁基氯磺醯氨基甲酸酯(10.3g，47.79mmol)，室溫下反應攪拌過夜。反應完畢後，加入二氯甲烷稀釋，加水淬滅，二氯甲烷萃取三次，合併的有機相用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，通過柱層析分離得到(S)-2-(苄基(N-(叔丁氧羰基)磺醯基)氨基)-3-羥基丙酸甲酯(6.43g，產率35%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.44-7.28(m,6H),4.67(dd,J=14.3,6.1Hz,2H),4.56(d,J=15.6Hz,1H),4.00(d,J=7.2Hz,2H),3.69(s,3H),2.84(s,1H),1.48(s,9H)。

步驟C：(S)-2-叔丁基-4-甲基-5-苄基-1,2,5-噻二唑烷-2,4-二羧酸酯1,1-二氧化物

冰浴攪拌下，向盛有(S)-2-(苄基(N-(叔丁氧羰基)磺醯基)氨基)-3-羥基丙酸甲酯(6.42g，16.54mmol)和三苯基膦(5.2g，19.84mmol)的二氯甲烷溶液中加入DIAD(4.0g，19.84mmol)，室溫下反應2小時。反應完畢後，加入二氯甲烷稀釋，加水淬滅，二氯甲烷萃取三次，合併的有機相用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，通過柱層析分離得到目標化合物(5.77g，產率94.3%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.43-7.28(m,5H),4.54(d,J=14.4Hz,1H),4.44(d,J=14.4Hz,1H),4.07-4.00(m,1H),3.89(t,J=2.9Hz,2H),3.72(s,3H),1.55(s,9H)。

步驟D：(S)-2-叔丁基4-甲基-1,2,5-噻二唑烷-2,4-二羧酸酯1,1-二氧化物

室溫攪拌下，向盛有(S)-2-叔丁基-4-甲基-5-苄基-1,2,5-噻二唑烷-2,4-二羧酸酯1,1-二氧化物(2.97g，8.02mmol)的二氯甲烷溶液中加入品質含量10%的鈀碳(1.0g)，迴圈水泵換氣10次，氫氣保護下室溫下反應過夜。反應完畢後，過濾，濃縮，通過柱層析分離得到(S)-2-叔丁基4-甲基-1,2,5-噻二唑烷-2,4-二羧酸酯1,1-二氧化物(1.49g，產率66%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=5.17(d,J=8.4Hz,1H),4.39(dd,J=16,7.6Hz,1H),4.18(dd,J=10.0,2.4Hz,1H),3.88-3.83(m,4H),1.52(s,9H)。

步驟E：(S)-5-(叔丁氧羰基)-1,2,5-噻二唑烷-3-羧酸1,1-二氧化物

冰浴攪拌下，向盛有(S)-2-叔丁基4-甲基-1,2,5-噻二唑烷-2,4-二羧酸酯1,1-二氧化物(800mg，2.854mmol)的10毫升甲醇/水(體積比為5/1)溶液中加入氫氧化鋰一水合物(342mg，14.27mmol)，室溫下反應過夜。反應完畢後，旋轉蒸發除去甲醇，用4N HCl調節體系pH到小於3，乙酸乙酯萃取三次，合併的有機相用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，通過柱層析分離得到(S)-5-(叔丁氧羰基)-1,2,5-噻二唑烷-3-羧酸1,1-二氧化物(759mg，產率100%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=5.39-5.33(m,1H),4.46(s,1H),4.23(dd,J=10,5.6Hz,1H),3.98(dd,J=9.6,7.6Hz,1H),1.50(s,9H)。

步驟F：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-5-叔丁氧羰基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

室溫攪拌下將2-氯-苯甲醛(400mg，2.85mmol)和3-氟苯胺(317mg,2.85mmol)於MeOH(6.0mL)中混合攪拌30分鐘。添加(S)-5-(叔丁氧羰基)-1,2,5-噻二唑烷-3-羧酸1,1-二氧化物(759mg，2.85mmol)並攪拌反應混合物10分鐘。然後添加1,1-二氟-4-異氰環丁烷(333mg，2.85mmol)並且在室溫下攪拌反應混合物過夜。真空除去溶劑，矽膠柱層析分離得到(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-5-叔丁氧羰基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(578mg，產率32.9%)。

m/z=617[M+H]+。

步驟G：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-5-叔丁氧羰基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

向封管反應器中加入(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-5-叔丁氧羰基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(570mg，0.924mmol)、2-溴-4-氰基吡啶(186mg，1.10mmol)、碘化亞銅(88mg，0.462mmol)、N,N’-二甲基乙二胺(82mg，0.924mmol)和碳酸銫(903mg，2.772mmol)，加入二氧六環((8mL))，通入氮氣5分鐘，封管80℃反應過夜，除去溶劑，通過柱層析(PE：EA=1：1)得到(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-5-叔丁氧羰基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(190mg，產率28.6%)。

m/z=719[M+H]+。

步驟H：(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2基)-N-(3-氟苯基)-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

冰浴攪拌下，向盛有(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氟苯基)-5-叔丁氧羰基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(190mg，0.264mmol)的二氯甲烷溶液中加入三氟乙酸(2.0mL)，氮氣保護室溫下反應過夜。反應完畢後，濃縮，通過柱層析分離得到(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2基)-N-(3-氟苯基)-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(7mg，產率4.3%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.43(t,J=5.6Hz,1H),7.63(d,J=8.1Hz,1H),7.56(s,1H),7.40-7.27(m,2H),7.18(d,J=6.1Hz,2H),7.10-6.83(m,4H),6.47(d,J=6.7Hz,1H),6.04(d,J=6.3Hz,1H),5.74(d,J=28.7Hz,1H),4.83(s,1H),4.25(d,J=39.4Hz,1H),3.77(d,J=9.7Hz,1H),3.68-3.46(m,1H),3.17-2.90(m,2H),2.45(m,2H)。

m/z=619[M+H]+。

實施例25：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2基)-N-(3-氟苯基)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

步驟A：(S)-2-苄基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物

冰浴攪拌下，向盛有(S)-2-叔丁基4-甲基-5-苄基-1,2,5-噻二唑烷-2,4-二羧酸酯1,1-二氧化物(2.8g，7.559mmol)的二氯甲烷溶液中加入三氟乙酸(15.0mL)，氮氣保護室溫下反應過夜。反應完畢後，濃縮，通過柱層析分離得到(S)-2-苄基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(1.54g，產率75.5%)。

步驟B：(S)-2-苄基-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物

室溫攪拌下，向盛有(S)-2-苄基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(600mg，2.22mmol)和碳酸鉀(920mg，6.66mmol)的DMF(6.0mL)溶液中加入碘甲烷(629mg，4.44mmol)，氮氣保護室溫下反應過夜。反應完畢後，乙酸乙酯稀釋，加水淬滅，乙酸乙酯萃取三次，合併的有機相用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，通過柱層析分離得到(S)-2-苄基-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(616mg，產率97.6%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.40-7.31(m,5H),4.48(d,J=1.2Hz,2H),3.86(dd,J=8,7.6Hz,1H),3.66(s,3H),3.54(dd,J=10,9.6Hz,1H),3.35(dd,J=10,10Hz,1H),2.77(s,3H)。

步驟C：(S)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物

室溫攪拌下，向盛有(S)-2-苄基-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(616mg，2.166mmol)的二氯甲烷溶液中加入品質含量10%的鈀碳(300mg)，迴圈水泵換氣10次，氫氣保護下室溫下反應過夜。反應完畢後，過濾，濃縮，柱層析分離得到(S)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(342mg，產率81.4%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=5.19-5.13(m,1H),4.26-4.20(m,1H),3.88(s,3H),3.63(dd,J=10.4,10.0Hz,1H),3.55(dd,J=10.0,10.0Hz,1H),2.72(s,3H)。

步驟D：(S)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-羧酸1,1-二氧化物

冰浴攪拌下，向盛有(S)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲酸甲酯1,1-二氧化物(340mg，1.751mmol)的10毫升甲醇/水(體積比為5/1)溶液中加入氫氧化鋰一水合物(210mg，8.755mmol)，室溫下反應過夜。反應完畢後，旋轉蒸發除去甲醇，用4N HCl調節體系pH到小於3，乙酸乙酯萃取三次，合併的有機相用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮，柱層析分離得到(S)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-羧酸1,1-二氧化物(315mg，產率100%)。

步驟E：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

室溫攪拌下將2-氯-苯甲醛(156mg，1.11mmol)和3-氟苯胺(124mg，1.11mmol)於MeOH(6.0mL)中混合30分鐘。添加(S)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-羧酸1,1-二氧化物(200mg，1.11mmol)並攪拌反應混合物10分鐘。然後添加1,1-二氟-4-異氰環丁烷(130mg，1.11mmol)並且在室溫下攪拌反應混合物過夜。真空除去溶劑，矽膠柱層析分離得到(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(240 mg，產率41.0%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=7.63-7.57(m,1H),7.42(d,J=8.0Hz,0.5H),7.32(d,J=7.6Hz,0.5H),7.29-7.20(m,1H),7.14-6.92(m,4H),6.78-6.6(m,1H),6.55(s,0.5H),6.34(s,0.5H),6.14(d,J=6.4Hz,0.5H),6.01(d,J=6.4Hz,0.5H),5.72-5.52(m,1H),4.35-4.29(m,1H),4.20-4.06(m,1H),3.56-3.41(m,1H),3.09-2.80(m,3H),2.66(s,3H),2.61-2.31(m,2H)。

m/z=531[M+H]+。

步驟F：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2基)-N-(3-氟苯基)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

向封管反應器中加入(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-N-(3-氟苯基)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(140mg，0.264mmol)、2-溴-4-氰基吡啶(91mg，0.291mmol)、碘化亞銅(50mg，0.132mmol)、N,N’-二甲基乙二胺(42mg,0.264mmol)和碳酸銫(441mg，0.792mmol)，加入二氧六環(8mL)，通入氮氣5分鐘，封管80℃反應過夜，除去溶劑，通過柱層析(PE：EA=1：1)得到(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2基)-N-(3-氟苯基)-5-甲基-1,2,5-噻二唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(81mg，產率48.5%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.55-8.47(m,1H),7.90-7.65(m,1H),7.51(d,J=5.2Hz,0.5H),7.34(d,J=6.4Hz,0.5H),7.29-7.16(m,4H),7.14(m,4H),6.75-6.70(m,1H),6.55(d,J=4.4Hz, 1H),6.16(d,J=12Hz,1H),4.95-4.73(m,1H),4.19-4.11(m,1H),3.53-3.44(m,1H),3.34(t,J=7.8Hz,1H),3.0-2.81(m,4H),2.41-2.31(m,2H)。

m/z=633[M+H]+。

實施例26：(3S)-N-(1-(2-氯苯基)-2-(環己基氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(3-氨基磺醯基苯基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物

參照實施例1中的步驟E，將反應原料2,2-二氟環丁基異氰、3-氨基-5-氟吡啶和(S)-異噻唑烷-3-甲酸1,1-二氧化物分別替換為環己基異氰、3-氨基苯磺醯胺和(S)-2-(4-氰基吡啶-2-基)異噻唑烷-3-甲酸1,1-二氧化物(在實施例11的步驟B中製備)，得到標題化合物，產率36%。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ=8.58(d,J=5.0Hz,1H),8.14-6.84(m,12H),6.52(s,1H),5.53(m,1H),4.76(m,1H),3.88-3.78(m,1H),3.80-3.65(m,1H),3.39-3.36(m,1H),2.69-2.63(m,1H),2.50-2.42(m,1H),1.95-1.90(m,2H),1.74-1.59(m,4H),1.38-1.24(m,2H),1.17-0.94(m,2H)。

m/z=671[M+H]+。

實施例27：3-((S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-1,1-二氧化異噻唑烷-3-甲醯氨基)-5-氟吡啶-1-氧化物

將(S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-N-(5-氟吡啶-3-基)-異噻唑烷-3-甲醯胺1,1-二氧化物(50mg，0.081mmol，在實施例2中製備)和間氯過氧苯甲酸(28mg，0.16mmol)加入到二氯甲烷(10mL)中，室溫攪拌過夜。減壓濃縮除去溶劑，殘餘物經矽膠薄層層析(EA)分離，得到3-((S)-N-((S)-1-(2-氯苯基)-2-((3,3-二氟環丁基)氨基)-2-氧代乙基)-2-(4-氰基吡啶-2-基)-1,1-二氧化異噻唑烷-3-甲醯氨基)-5-氟吡啶-1-氧化物(22mg，產率43%)。

1H-NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.72(s,0.5H),8.13(s,0.5H),8.48-8.41(m,1H),7.94(s,1H),7.80-7.68(m,1H),7.41(d,J=8.0Hz,1H),7.26-7.15(m,4H),7.05-6.95(m,1H),6.49(s,1H),6.01(s,0.5H),5.90(s,0.5H),4.86-4.82(m,1H),4.34(s,1H),3.78-3.68(m,1H),3.45-3.35(m,1H),3.10-3.00(m,2H),2.61-2.38(m,4H)。

m/z=635[M+H]+。

生物活性實驗酶測定：

刃天青是一種傳統的氧化還原染料，經過氧化還原作用，能夠從沒有螢光的藍色刃天青還原成粉紅色的螢光物質試鹵靈，試鹵靈可以用螢光光度計(Ex=530-570nm，Em=590-620nm)的相對螢光單位(RFU)來測量並量化。目前刃天青被廣泛用於細菌、細胞等的活力測定以及氧化還原酶的酶活檢測。我們通過檢測輔助因數NADPH的消減來測定化合物針對IDH1m的抑制活性，通過檢測輔助因數NADPH的生成來測定化合物針對IDH WT的抑制活性。將化合物與IDH1m和NADPH進行預孵育，然後通過添加α-KG啟動反應，線性條件下反應一定時間後，添加Diaphorase(硫辛醯胺脫氫酶)和相應的底物Resazurin(刃天青)進行檢測。硫辛醯胺脫氫酶通過消減可供使用的輔助因數NADPH而終止IDH1m反應，它將NADPH氧化成NADP，並且將刃天青還原成高螢光的試鹵靈，通過易於檢測的螢光基團來量化在特定反應時間之後剩餘的輔助因數NADPH的量。

將化合物與IDH-WT和NADP進行預孵育，然後通過添加異檸檬酸、Diaphorase(硫辛醯胺脫氫酶)和相應的底物Resazurin(刃天青)啟動反應，線性條件下反應一定時間後，檢測螢光物質的量。本實驗將NADP還原成NADPH，後者在硫辛醯胺脫氫酶的作用下將刃天青還原成高螢光的試鹵靈，通過檢測的螢光基團來量化在特定反應時間之後生成的輔助因數NADPH的量，從而來計算化合物對IDH-WT的抑制作用。

具體操作方式為：將2.5μL 3×梯度稀釋的化合物加到384孔板中，接著添加5μL含有40nM IDH1(R132H/R132C)和20μM NADPH的反應緩衝液(20mM Tris-HCl，pH7.5；150mM NaCl；10mM MgCl2；0.4mg/mL BSA(牛血清白蛋白)和2mM DTT(二硫代蘇糖醇)。然後將上述測試混合物在23℃孵育16小時，之後添加2.5μL含有4mM α-KG的反應緩衝液起始反應。室溫孵育60分鐘後，加入5μL反應緩衝液配製的終止混合物(0.4U/ml Diaphorase和20μM Resazurin)，使刃天青轉化成試鹵靈來測量剩餘的NADPH。23℃孵育10分鐘後，通過Flexstation 3在Ex535/Em595下進行螢光值測定。每個化合物分別在12個濃度下測定酶的活性，使用GraFit6.0軟體(Erithacus Software)計算資料，得到該化合物的IC50值。

2-HG測定：

磷酸甘油酸脫氫酶PHGDH在2-HG存在的情況下能夠將NAD還原成NADPH，後者可以通過硫辛醯胺脫氫酶及其底物Resazurin (刃天青)進行定量測定。

HT-1080細胞是IDH1(R132C)突變的人纖維肉瘤細胞系，U87細胞是IDH1(R132H)突變的人膠質母細胞瘤系，用補加10%胎牛血清、100units/mL青黴素、0.1mg/mL鏈黴素的RPMI-1640培養基進行培養。

細胞通過胰酶消化並以5×10⁵的密度接種於6孔板中，37℃培養箱中培養過夜。第二天加入待測化合物(DMSO終濃度為0.1%)，繼續培養24小時。吸取各樣品的培養液，1000rpm離心10分鐘後，吸取上清，並檢測其中2-HG的含量。另外，細胞經PBS(磷酸緩衝鹽溶液)清洗後，通過胰酶消化並收集細胞，PBS清洗一次後進行細胞內2-HG含量測定。

細胞內2-HG測定方法如下：用300μL反應緩衝液(40mM Tris-HCl,pH8.5；150mM NaCl)重懸細胞，通過超聲將細胞進行破碎處理。12,000rpm，4℃離心10分鐘以去除不溶物質。吸取25μL上清通過BCA試劑盒進行蛋白濃度測定，另將200μL上清轉移至一組新的離心管內，每管加入4μL的3M HCl，室溫放置5分鐘，12,000rpm室溫離心5分鐘。吸取100μL上清轉移至96孔“V”底板中，每孔加入3.6μL的2M Tris base(氨基丁三醇)，室溫放置5分鐘。12,000rpm離心2分鐘。pH試紙檢測pH約等於8.0。

2-HG標準曲線製備：將2-HG儲液用反應緩衝液稀釋至500μM，之後取200μL進行兩倍梯度稀釋，共計10個點。以下操作同上，包括酸處理與鹼中和步驟。

將上述樣品待測細胞樣品或標準品進行5×稀釋，之後取5μL加到384孔板中，每孔加入10μL檢測混合物(8μM PHGDH(磷酸甘油酸脫氫酶)；0.5mM NAD；0.1U/ml Diaphorase和10μM Resazurin)，23℃反應60分鐘，通過Flexstation 3在Ex535/Em595下進行螢光值測定。

將所測螢光值用相應樣品的蛋白質濃度進行校準後再行比較。

細胞外2-HG測定方法如下：各取500μL培養液上清，每管加入10μL的3M HCl，室溫放置5分鐘，之後每管孔加入18μL的2M Tris base，室溫放置5分鐘。12,000rpm離心2分鐘。pH試紙檢測pH約等於8.0。2-HG標準曲線製備：將2-HG儲液用完全培養基稀釋至500μM，之後取500μL進行兩倍梯度稀釋，共計10個點。以下操作同上，包括酸處理與鹼中和步驟。將上述樣品待測培養上清樣品或標準品進行5×稀釋，之後取5μL加到384孔板中，每孔加入10μL檢測混合物(8μM PHGDH；0.5mM NAD；0.1U/mL Diaphorase和10μM Resazurin)，23℃反應60分鐘，通過Flexstation 3在Ex535/Em595下進行螢光值測定。

根據本文所述的生物學方法對上述製備的所選化合物進行分析，其結果如下：

1.化合物對IDH1突變型(R132H和R132C)的抑制活性(IC50)，如表1所示。

2.實施例2化合物對表現出IDH1突變的HT-1080細胞內的2-HG的抑制結果如圖1所示。實施例2化合物對表現出IDH1突變的HT-1080細胞外的2-HG的抑制結果如圖2所示。

3.實施例2化合物對表現出IDH1突變的U87細胞的2-HG的抑制結果如圖3所示。

4.實施例2化合物對表現出IDH1突變的U87細胞的抑制活性(IC50)，如下表2所示。

藥代藥動實驗

雄性SD大鼠來源於北京維通利華實驗動物技術有限公司，將大鼠分組，每組3只，分別口服單次灌胃給予待測樣品混懸液(5mg/kg)。動物在實驗前禁食過夜，禁食時間從給藥前10小時至給藥後4小時。給藥後第0.25、0.5、1、2、4、6、8和24小時採血。使用小動物麻醉機經異氟烷麻醉後通過眼底靜脈叢採取0.3mL全血，放於肝素抗凝管中，樣品於4℃、4000rpm離心5min，血漿轉移至離心管中，並放於-80℃保存直到分析。血漿中樣品使用蛋白質沉澱法萃取，萃取液通過LC-MS/MS分析，其中HPLC條件為流速：0.4mL/min；流動相A：水/甲酸(99.9/0.1,v/v)；流動相B：乙腈/甲酸(99.9/0.1,v/v)；進樣量：5μL；柱溫：室溫；自動進樣器溫度：室溫運行時間：2.5分鐘。

實施例12化合物與AG-120的PK資料如表3所示：

由PK資料可知，同等口服劑量下，實施例12化合物的藥物血漿暴露量遠高於AG-120，半衰期達到了10.7個小時，其藥代動力學性質明顯優於AG-120。

Claims

一種式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物：
其中，X選自CH₂或NR⁵；R¹選自C_3-6環烷基或C_3-6雜環烷基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁶的基團取代；R²選自苯基或含有1-2個選自N、O或S的雜原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代；R³選自苯基、含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基、苯基CH₂-或者含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基CH₂-，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代；R⁴選自鹵素、氨基、羥基、鹵代C_1-3烷基或C1_-6烷基；R⁵選自氫或C_1-6烷基；R⁶選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基； R⁷選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、氧代、
、C_1-6烷基或C_3-6環烷基； R⁸選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_2-6烯基或C_2-6炔基；R⁹選自H、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_3-6雜環烷基、苯基或者含有1-2個選自N或O或S原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R¹⁰的基團取代；R¹⁰選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；m為0或1。
如請求項1所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中，X選自CH₂或NR⁵；R¹選自C_3-6環烷基或C_3-6雜環烷基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁶的基團取代；R²選自苯基或含有1-2個選自N、O或S的雜原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代；R³選自苯基、含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基、苯基CH₂-或者含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基CH₂-，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代；R⁴選自鹵素、氨基、羥基、鹵代C_1-3烷基或C_1-6烷基；R⁵選自氫或C_1-6烷基；R⁶選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基； R⁷選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C1_-3烷基、氨基磺醯基、N取代氨基磺醯基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；R⁸選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_2-6烯基或C_2-6炔基；m為0或1。
如請求項1所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中，所述式I化合物為式II化合物：
其中，X選自CH₂或NR⁵；R¹選自C_3-6環烷基或C3_-6雜環烷基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁶的基團取代；R²選自苯基或含有1-2個選自N、O或S的雜原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代；R³選自苯基、含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基、苯基CH₂-或者含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基CH₂-，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代；R⁵選自氫或C_1-6烷基； R⁶選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基； R⁷選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、氧代、
、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；R⁸選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_2-6烯基或C_2-6炔基；R⁹選自H、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_3-6雜環烷基、苯基或者含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R¹⁰的基團取代；R¹⁰選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基。
如請求項3所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中，X選自CH₂或NR⁵；R¹選自C_3-6環烷基或C_3-6雜環烷基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁶的基團取代；R²選自苯基或含有1-2個選自N、O或S的雜原子的5-6員雜芳基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代；R³選自苯基、含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基、苯基CH₂-或者含有1-2個選自N或O或S的雜原子的5-6員雜芳基CH₂-，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代；R⁵選自氫或C_1-6烷基； R⁶選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；R⁷選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、氨基磺醯基、N取代氨基磺醯基、C_1-6烷基或C_3-6環烷基；R⁸選自鹵素、氨基、羥基、氰基、鹵代C_1-3烷基、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、C_2-6烯基或C_2-6炔基。
如請求項1-4任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中X選自CH₂、NH或N(CH₃)。
如請求項1-4任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R⁵選自氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基或叔丁基。
如請求項1-4任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R¹選自環丙基、環丁基、環戊基、環己基、吡咯烷基或呱啶基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁶的基團取代。
如請求項7所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R¹選自
、
或
。
如請求項1-4任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R⁶選自氟、氯或溴。
如請求項1-4任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R²選自苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、四唑基或三嗪基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代。
如請求項10所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R²選自
、
、
、
、
、
、
如請求項1-4任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中，R²選自苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、四唑基或三嗪基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁷的基團取代；R⁷選自氟、氯、溴、氰基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基、四氟乙基、五氟乙基、一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、氨基磺醯基或N取代氨基磺醯基。
如請求項1-4任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R⁷選自氟、氯、溴、氰基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟乙基、二氟乙基、三氟乙基、四氟乙基、五氟乙基、一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、氧代或
。
如請求項13所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R⁷選自氟、氰基、三氯甲基、氧代、
或
。
如請求項1-4任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R⁹選自H、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、四唑基或三嗪基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R¹⁰的基團取代。
如請求項1-4任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R³選自苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、四唑基、三嗪基、苄基、呋喃基亞甲基、噻吩基亞甲基、吡咯基亞甲基、吡唑基亞甲基、咪唑基亞甲基、吡啶基亞甲基、嘧啶基亞甲基、噠嗪基亞甲基、吡嗪基亞甲基、噻唑基亞甲基、異噻唑基亞甲基、噁唑基亞甲基、異噁唑基亞甲基、四唑基亞甲基或三嗪基亞甲基，其可任選地被一個或多個獨立地選自R⁸的基團取代。
如請求項16所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R³選自
、
、
、
或
。
如請求項1-4任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中R⁸選自氟、氯、溴、氰基、乙炔基、1-丙炔基或1-丁炔基。
如請求項1-4任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物，其中，所述化合物為：
一種如請求項1-19任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物在製備用於治療由IDH1突變誘發的癌症的藥物中的用途。
如請求項20所述的用途，其中，由IDH1突變誘發的癌症選自：成膠質細胞瘤、骨髓增生異常綜合症、骨髓組織增殖性贅生物、急性骨髓性白血病、肉瘤、黑色素瘤、非小細胞肺癌、膽管癌或血管免疫母細胞性非霍奇金氏淋巴瘤。
一種藥物組合物，其包含治療有效量的如請求項1-19任一項所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物和一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑。