TWI364281B - Pharmaceutical compositions and methods of treating dry eye disorders - Google Patents

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1364281 九、發明說明： 本申請案主張2007年7月π曰申請之美國臨時申請案第 6〇/949,216號、及2_年6月9日中請之美國臨時中請案第 6W06CM32之權利，該等巾請案全部内容係以引用方式併 入本文中。 【先前技術】 njunctivitis 乾眼亦一般通稱為乾燥性角結膜炎（kerat〇c〇

sicca)，係每年影響數百萬美國人之常見眼科疾病。乾眼 係多因素淚液及眼表病症，其可導致不適、視覺障礙等症 狀，以及對眼表具有潛在損傷之淚膜不穩定性。其常伴隨 淚膜滲透壓升高及眼表炎症。 個體受乾眼病折磨之嚴重程度各不相同。由於生育力終 止後激素改變，因此乾眼在絕經後女性中尤其普遍。在中 度情況下，患者可經歷灼燒（乾燥感）、及持續刺痛，猶如 有小物體放入眼瞼與眼表之間常導致的那樣。在嚴重病例 中，視力可受到實質損傷。其他病症（例如薛格連氏病 (Sj〇gren，S disease)及瘢痕性類天皰瘡（cicatricial pemphigoid))可表現乾眼併發症。 乾眼之病因學分類首先由國家眼科研究院/行業性乾眼 研習會（National Eye lnstitute/lndustry Dry Eye w〇rksh〇p) 在1995年提出並在2007年1月之定義中進一步更新。 〇⑶/π Ar/αα，第5卷，第2期，75-92 (2007)。乾眼主要 類別包括水性淚液缺乏性乾眼及蒸發性乾眼。水性淚液缺 132406.doc 1364281 乏性乾眼包含兩種主要亞類，即薛格連氏症候群乾眼及非 薛袼連氏症候群乾眼（主要及次要淚腺缺陷、淚腺管阻 塞、反射分泌不足、反射性運動神經阻滯卜蒸發性乾眼 係在正常淚液分泌功能存在下由於自經暴露眼表過量損失 水份所導致，其包含具有各種内在原因（瞼板腺功能障 礙、眼瞼縫及眼瞼/眼球疾病、眨眼頻率低）及外在原因（眼 表疾病及病症、配戴隱形眼鏡、過敏性結膜炎例如春季角 結膜炎（vernal keratoconjunctivitis))之亞類。 雖然表明乾眼可由許多非相關致病因素所導致，但並發 症之所有表現皆有共同效應，亦即眼前淚膜破裂，此導致 暴露的外部表面脫水及許多以上所列示之症狀（Lemp， Report of the national Eye Institute/lndustry workshop on

Clinical Triah in Dry Eyes, the CLAO Journal，第 2\ 卷， 第 4期，第 221-231頁（1995))。 執業醫師已採取若干途徑來治療乾眼。一種常用途徑係 使用所謂人工淚液全天滴注來補充並穩定眼睛淚膜。其他 途徑包括使用可提供淚液替代品或刺激内源性淚液產生之 眼睛插入物。 淚膜替代途徑之實例包括使用緩衝等滲鹽溶液、含有使 溶液黏性更大且因此更不易為眼睛去除之水溶性聚合物的 水溶液。亦藉由提供淚膜之一或多種組份（例如磷脂及油 類）來嘗試淚液再構成。已表明罐脂組份可用於治療乾 眼；參見（例如）McCulley 及Shine，：Tear/V/m Wrwciwre dr少 eye, Ccmiocio/ogio，第 20(4)卷，第 145_9 (1998)頁。吾 132406.doc 1364281 人亦已知涉及磷脂、推進劑及活性物質之磷脂藥物遞送系 統’參見美國專利案第5，174,988號。 另一途徑包括提供潤滑物質代替人工淚液。舉例而言， 美國專利申請案第4,818,537號（Guo)揭示使用以潤滑脂質 體為主之組合物’及美國專利申請案第5,800,807號（Hu等 人）揭示用於治療乾眼之含甘油及丙二醇之組合物。 雖然該等方法已取得若干成功，但治療乾眼之問題依然 存在。因為淚液替代品僅暫時有效，因此其應用一般需在 患者清醒時重複施用。在一天時間内患者必須施用人工淚 液10至20次並非罕見。該任務不僅麻煩及費時，而且亦可 能十分昂責。已報導在某些情況下，與屈光手術相關之乾 眼一過性症狀在手術後可持續6週至6個月或更長時間。 除主要減輕與乾眼相關症狀之努力外，吾人亦已研究用 於乾眼病症治療之方法及組合物。舉例而言，美國專利申 凊案第5,041，434號（Lubkin)揭示使用性類固醇（例如共軛雌 激素類）來治療絕經後婦女之乾眼病症；美國專利申請案 第5,290,572號（MacKeen)揭示使用微細鈣離子組合物來激 活產生眼前淚膜；且美國專利申請案第4,966,773號 (Gressel等人）揭示使用一或多種類視色素之微細粒子用於 眼組織正常化。 若干文獻報導表明遭受乾眼症候群折磨之患者不成比例 地在相關眼組織（例如淚腺及瞼板腺）中出現過多炎症之特 點。已揭不治療乾眼患者之多種化合物，例如類固醇類 (如美國專利申請案第5,968,912號；Marsh等人，r〇pz.ca/ 132406.doc 1364281 nonpreserved methylprednisolone therapty for keratoconjunctivitis sicca in Sjogren syndrome, Ophthalmology, 106(5): 881-816 (1999) ; Plugfelder等人，美國專利申請案第6，153,607 號）；細胞因子釋放抑制劑（Yanni，J.M.等人，WO 0003705 Al)、環抱素 A [Tauber, ·/. ν4ί/ν·五 xp. Mecf. 1998，438, (Lacrimal Gland, Tear Fiom and Dry Eye Syndromes 2)， 969]及15-HETE (Yanni等人，美國專利申請案第5,696，166 號）。 除乾眼外，Jak3抑制劑亦可用於治療其他與炎症相關之 眼科疾病，包括（但不限於）青光眼、葡萄膜炎、糖尿病性 視網膜病及年齡相關黃斑變性。由CNIB資金支助之研究 發現具有炎症生物標記物抗心磷脂之患者發展青光眼之可 能性大4倍。先前已表明Jak3抑制劑可用於治療糖尿病， 但並無可尤其用於糖尿病性視網膜病之暗示。Cetkovic-Cvrle，Μ及 Uckun，F.M·，drc/z Tmwwwo/ 77zer 52(2)，69-82 (2004)。Rodrigues發現在視網膜色素上皮 (RPE)細胞及玻璃疲中分離免疫球蛋白、補體蛋白、細胞 因子及激活的小膠質細胞為炎症在乾性年齡相關黃斑變性 中之作用提供了 證明。Rodrigues E.B·， 221(3):143-52 (2007)。 【發明内容】 本發明係關於治療乾眼之方法，其包含向哺乳動物投與 包含醫藥上可接受之載劑及醫藥有效量之詹納斯氏激酶-3 ("Jak3")抑制劑的組合物《在一態樣中，該等Jak3抑制劑 132406.doc 1364281 含有式i之化合物：

其中 R1為具有下式之基團

R

/r5 (CH2)y 其中y係0、1或2 ;

r4選自由以下組成之群：氫、（CVC6)烷基、（C丨-C6)烷基 續醯基、（cvc：6)烯基、（C2_c6)炔基，其中該烷基、烯基及 炔基視情況經氘、羥基、胺基、三氟甲基、（Ci_c4)烷氧 基、（c丨-c6)酿氧基、（Ci_c6)烷基胺基、（（Ci_C6)烷基）2胺 基、氰基、硝基、（C2-C6)烯基、C2-C6)炔基或（Ci-CJ醯胺 基取代，或R4為（C3-C1Q)環烧基，其中環烷基視情況經 氛、經基、胺基、三氟甲基、（Cl_C6;^氧基、（C|_c6)醯胺 基、（(να烷基胺基、（(Cl_C6)烷基）2胺基、氰基、氰基 (C「c6)烷基、三氟甲基（C1_C6)烷基、硝基、硝基（c丨_c6)烷 基或（¢^-0^6)醯胺基取代； R5為（Cz-C：9)雜環烷基，其中該雜環烷基須經ι_5個以下 基團取代：羧基'氰基、胺基、氘、羥基、（Ci_c6)烷基、 (Ci-C6)烷氧基、鹵素、（c〗_c6)醯基、（CVC6)烷基胺基、胺 基（Ci-C6)烧基、（C〗-C6)烧氧基-CO-NH、（Ci-C6)烧基胺基- 132406.doc -10- d ' (c2-c6)烯基、（C2_C6)炔基、（Cl_c6)烷基胺基、胺基 (Κ6)燒基、經基（C〗_C6)烧基、（c〗_c6)烧氧基（Ci_C6)院 基、（c,-c6)酿氧基（Ci_c6)烷基 '硝基 '氰基（Ci_C6)烷基、 齒代（C〗-C6)院基、硝基（Ci_c6)烷基、三氟曱基、三氟甲基 (C1-C6)燒基、（Ci_C6)醯胺基、（Ci_c6)醯胺基（C1_C6)烷 基' (CrCO烷氧基（Ci_c6)醯胺基、胺基（Cl_c6)醯基、胺基 (Ci-C6)醯基（Cl_c6)烧基、（Ci_C6)烧基胺基（Ci_c6)酿基、 ((Ci-C6)烷基）2 胺基（C1_C6)醯基、Ri5RuN_c〇_〇_、 r15r16n-c〇-(c〗-c6)烧基、（CVC6)烧基-s(o)m、 R，5R,6NS(〇)m 、 RbR^NS^mCiVQ)燒基、 R15S(0)mR16N、R^S^mRXCVC^)院基，其中 m為 〇、1 或2且R15及rM彼此獨立地選自氫或（Ci_c6)烷基，或具有 下式之基團

其中a為0、1、2、3或4; b、c、e、f及g彼此獨立地為〇或1 ; d為 0、1、2或 3 ; X為S(0)n，其中η為0、1或2;氧、羰基或-C(=N-氰基）-; Y為S(0)n，其中η為〇、1或2;或羰基；且 Ζ為羰基、C(0)0-、C(0)NR-或 S(0)n，其中 η為 〇、i 或 2 ; 132406.doc -11 - 1364281 R6、R7、R8、R9、R10及R11彼此獨立地選自由氯或（C|_ C6)烧基組成之群，該（Ci-C6)院基視情況經氘、羥基、胺 基、三氟曱基、（Ci-C6)醯氧基、（C丨-c6)醯胺基、（C丨-(：6)烷 基胺基、（(C丨-C6)院基）2胺基、氰基、氰基（C】-C6)烧基、三 氟曱基（Ci-Cs)烷基、硝基、硝基（CVC6)烷基或（CVC6)醯胺 基取代； R12為幾基、氰基 '胺基、氧代、氘、經基 '三氟曱 基、（Ci-C6)烧基 '三氟甲基（C!-C6)烧基、（c丨·ζ：6)烧氧基、 鹵素、（CVC6)醯基、（CVC6)烷基胺基、（(cvc6)烷基）2胺 基、胺基（Q-C6)烷基、（(VC6)烷氧基-CO-NH、（CVC6)烷 基胺基-CO-、（C2-C6)烯基、（C2-C6)炔基、（CVC6)烷基胺 基、經基（(^-(^6)院基、（Ci-C6)烧氧基（C^-Cg)烧基、（C!-c6)醯氧基（(VC6)烷基、硝基、氰基（CVC6)烷基、鹵代（C】-C6)烷基、硝基（C丨-C6)烷基、三氟甲基、三氟甲基（C丨-c6) 烷基、（Ci-Ce)醯胺基、（Ci-C6)醯胺基（CVC6)烷基、（cv c6)烷氧基（C丨-C6)醯胺基、胺基（C丨-C6)醯基、胺基（CVC6) 醯基（CVC6)烷基、（CVC6)烷基胺基（CVC6)醯基、（(c〗-c6) 烧基）2 胺基（CVC6)醯基、R15R16N-C0-0-、R15R16N-CO-(q-Ce)烷基、R15C(0)NH 、 R150C(0)NH 、 r15nhc(o)nh、（CVQ)烷基-s(o)m、（c丨-c6)烷基-s(o)m· (CVC6)烧基、R15R16NS(〇)m、Rl5Rl6NS(〇)m(Ci_C6)烧基、 R15S(0)mR16N、Ri5s(〇)mRl6N(Ci_C6)烷基，其中爪為^、1 或2且R15及R16彼此獨立地選自氫或（Ci_c6)烧基； R2及R3彼此獨立地選自由以下組成之群：氫、氘、胺 132406.doc -12· 基、齒素、羥基、硝基、羧基、（C2_C6)烯基、（C2_C6)炔 基、三氟甲基、三氟甲氧基、(C丨-⑸烷基、(C丨乂)二氧 基、(c3-c丨。)環烷基，其中該烷基、烷氧基或環烷基視情 況經1-3個選自以下之基團取代：齒素、羥基、綾基、胺 基（CrCd烷硫基、（Cl_c6)烷基胺基、（(CiC6)烷基h胺 基、（c5-c9)雜芳基、（C2_C9)雜環烷基、（c3_C9)環烷基或 (C6-C1())芳基；或R2及R3彼此獨立地為環烷基、 (c3-c1())環烷氧基、（c^-co烷基胺基、（（Cl_c6)貌基胺 基、（c6-c10)芳基胺基、（Cl_c6)烷硫基、（C6_Ci〇)芳硫基、 (CVC6)烷基亞磺醯基、（c6-C|〇)芳基亞磺醯基、（C|_C6)烷 基磺醯基、（C6-C1())芳基磺醯基、（CVC6)醯基、（Ci_C6)貌 氧基-CO-NH- ' (Ci-C6)烧基胺基-CO-、（C5-C9)雜芳基、 (C2_C9)雜環燒基或（C6-Ci〇)芳基，其中該雜芳基、雜環烧 基及芳基視情況經1-3個以下基團取代：鹵素、（Ci_c6)院 基、（C]-C6)烧基-CO-NH-、（Ci-C6)烧氧基-CO-NH-、（C「 C6)烧基-CO-NH-CC^-C^)炫基、（CVC6)烧氧基-CO-NH-CC!-C6)烷基、（CVCe)烷氧基-CO-NH-(Ci-C6)烷氧基、缓基、 叛基（Ci-C6)烧基、缓基（C^-C^)烧氧基、苄基氧基叛基（c,-C6)烷氧基、（CVCe)烷氧基羰基（CVC6)烷氧基、（c6-C10)芳 基、胺基、胺基（CrCd烷基、（G-C6)烷氧基羰基胺基、 (C6-C〗〇)芳基（Ci-C6)烧氧基幾基胺基、（C^-Ce)烧基胺基、 ((Ci_C6)烧基）2 胺基、（Ci-C6)烧基胺基（Ci-C6)烧基、（（Ci_ C6)烷基）2胺基（CrCe)烷基、羥基、（CVC6)烷氧基、羧基、 羧基（CVC6)烷基、（CVC6)烷氧基羰基、（CVC6)烷氧基羰基 132406.doc 1364281 ((VCO烷基、（Ci-C6)烷氧基-CO-NH-、（CVC6)烷基-CO-NH-、氰基、（C5-C9)雜環烷基、胺基-CO-NH-、（C丨-C6)烷 基胺基-CO-NH-、（(Ci-C6)烷基）2胺基-CO-NH-、（C6-CI0)芳 基胺基-CO-NH-、（C5-C9)雜芳基胺基-CO-NH-、（C丨-C6)烷 基胺基-CO-NH-CCi-Ce)烷基、（(CVC6)烷基）2 胺基-CO-NH-(C 丨-C6)烷基、（C6-Ci〇)芳基胺基丨-C6)烷基、（C5-C9)雜芳基胺基-CO-NH-^-Cd烷基、（C〗-C6)烷基磺醯 基、（G-C6)烷基磺醯基胺基、（C|_c6；)烷基磺醯基胺基（C|_ CO烷基、（C6-C10)芳基磺醯基、（c6-C1())芳基磺醯基胺基、 (cvc〗。）芳基磺醯基胺基（CrC6)烷基、（Ci-CJ烷基磺酶基 胺基、（Ci-C6)烧基續醯基胺基（CrC6)烷基、（c5-c9)雜芳基 或（〇2_(：9)雜環烷基、或其醫藥上可接受之鹽。 本發明亦係關於治療青光眼、葡萄膜炎、糖尿病性視網 膜病及年齡相關黃斑變性之方法，其包含向哺乳動物投與 包含醫藥有效量之含有式I化合物之Jak3抑制劑的組合物。 式Ϊ之特定化合物包括其中該化合物係選自由以下組成 之群之彼等： 甲基-[4-曱基-1-(丙烷-1-磺醯基）·六氫。比啶j基]_(7η·吡 咯并[2,3-d]嘧啶-4-基）-胺； 4-曱基-3-[甲基-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶·4_基）_胺基]•六 氫吡啶-1 -甲酸甲酯； 3,3,3-三氟-1-{4_甲基-3-[曱基-pH-吡咯并[2,3·ά]嘧啶·心 基）-胺基]-六氫°比咬- l-基}-丙-1-酿）； 4-甲基-3-[曱基-(7Η-吡咯并[2,3-d]嘧啶_4_基）胺基卜 132406.doc 14 ^64281 氣0比咬-I-曱酸二甲基胺； ({4-甲基-3-[甲基-(7H-吡咯并[23d]嘧啶_4_基）_胺基]_六 氫。比咬-1-戴基}-胺基）-乙酸乙g盲； 3-{4-甲基-3-[甲基-(7H-。比咯并〇d]嘧啶·4^_胺基]_ 六氫°比咬-1-基}-3-氧代-丙腈； 3,3,3-二氟-1-{4-曱基-3-[甲基 _(5_ 曱基 _7Η·吡咯并[2 3_d] 嘧啶_4_基）-胺基]-六氫吡啶·丨_基}_丙_卜酮；

W4_曱基-3_[曱基_(7H_D比②并[2,3d]哺咬冬基）胺基卜 六氮°比咬-1-基}-丁-3 -快-1·酮； 1-P-K5-氣-7H-吡⑥并[2,3_d]嘧啶_4_基)_曱基-胺基]·4 曱基-六氫吡咬-1-基卜丙-1·酮； Η3-Κ5-良-7Η-㈣并[2,3,咬_4_基）_甲基_胺基]_4 曱基-六氫吡咬-l-基}-丙-1__ ; Ν氰基4曱基·3·[甲基-(7H“ttn各并[2,3_d]㈣·4.-堪 基]-N’-丙基-六氫吡啶-甲脒；及

N_氛基·4’Ν'，Ν，·三甲基·3·[甲基侦·料并[2,3姻咬 4-基）-胺基]-六氫吡啶·丨_曱脒。 在一具體實施例中，該Jak3抑制劑為3_((3R，4R)冬甲基 3_[甲基俩料并[2,3_d]0^4·基）_職]_六氫口比^ 基}-3-氧代-丙腈（CP0690550)， 其具有下式：

132406.doc ^ 15- 1364281 在本發明之一態樣中，與未治療淚液產生體積比較，在 2天内投與Jak3抑制劑可顯著增加淚液產生體積。在本發 明另一態樣中，在投與最初2天内，投與Jak3抑制劑可增 加超過起始淚液產生量至少3〇%之淚液產生體積。在另一 態樣中，在投與最初2天内，投與Jak3抑制劑可增加超過 起始淚液產生量至少50%之淚液產生體積。在本發明另一 態樣中，在投與最初2天内，投與Jak3抑制劑可增加超過 起始淚液體積至少100%之淚液產生體積。在另一實施例 中，Jak3抑制劑可將淚液產生體積增加至與正常淚液產生 體積相當之程度。在本實施例之另一態樣中’ Jak3抑制劑 可在初治8天内使淚液產生體積增加至與正常淚液產生相 當之程度。 在另一實施例中，本發明包含在哺乳動物中恢復正常淚 液產生，其包含向哺乳動物投與包含醫藥上可接受之載劑 及醫藥有效量之詹納斯氏激酶_3 (，，Jak3")抑制劑的組合 物。在該實施例之一態樣中，該JAK3抑制劑為3· {(3R，4R)-4-甲基-3-[甲基·(7Η“比略并[2,3_d]嘴咬基）胺 基]-六氫吼啶-1-基}-3-氧代-丙腈（cp〇69〇55〇)。 在本發明之另一態樣中，最多i天2次（BID)投與該Jak3 抑制劑。在另一態樣中，每天投與（QD)該“匕抑制劑。 在本發明之另一態樣中，向眼睛局部投與該組合物。 在本發明之另一態樣中，該Jak3抑制劑之醫藥有效量為 0._1%至LG% (w/w)以下。在另—態樣中，該⑽抑制劑 之量為0.0003%至(M% (w/w)以下。在本發明之另一態樣 132406.doc -16- 1364281 中，該Jak3抑制劑之量為0.0003%至0·03% (w/w)。在又一 態樣中，該Jak3抑制劑之量為〇.〇〇3%至〇 〇〇5% (w/w)e在 . 又一態樣中’該Jak3抑制劑之量為0.01%至0.03% (w/w)。 在再一實％例t ，該jak3抑制劑之量為約〇 〇〇3%、 ’ 0.005。/。、0.01。/。或 0.03% (W/W)。 - 在本發明之另一態樣中，該局部眼藥組合物進一步包含 彡透性調節劑及緩衝劑。在本發明之再—態樣令，該渗透 φ &調節劑為單糖或糖醇。在本發明之再-態樣中’該緩衝 劑選自磷酸鹽或檸檬酸鹽。 在本發明之再一態樣中，該組合物進一步包含表面活性 劑在本發明之一較佳實施例中，該表面活性劑選自 -TntonX114及泰洛沙泊（tyi〇xap〇G。在該實施例之另一態 - 樣中’該組合_—纟包含穩定聚合物。在本發明之再一 態樣中，該穩定聚合物為卡波姆（carb〇mer) 974p。 【實施方式】 • 根據本發明，向患有乾眼之哺乳動物，具體而言向患 有乾眼之人類患者投與詹納斯氏激酶-3 (滅3)抑制劑。在 匕、樣中相對於其他蛋白酪胺酸激酶（尤其密切相關之 豕族成員Jak2)，本發明之Jak3選擇性抑制劑對咖之抑制 具有選擇性。此乃由於Jak2可經由促紅細胞生成素 (EPO)、巨噬細胞集落刺激因子（M-Csf)、粒細胞·巨噬細 胞(GM)_CSF、&血小板生成素(TPO)受ϋ來控制信號傳 導。而且，由於紅細胞生成受損，因此Jak2缺乏會導致胚 月口死亡。於活體内用藥顯著抑制Jak2即可預期會導致貧 132406.doc •17- 1364281 血、血小板減少症、及白血球減少。pesu等人， Immun〇l〇gical Reviews 2〇3，127 142 (2〇〇5)。在酵素方 面，本發明之Jak3抑制劑對Jak3之作用比對Jak2之作用強 至少10倍，且相對其他激酶之特異性超過3〇〇〇倍。 本發明係關於治療乾眼之方法，其包含向哺乳動物投與 包含醫藥上可接受之載劑及醫藥有效量之具有式〗之詹納 斯氏激酶-3 ("Jak3")抑制劑及/或上文所述特定實施例之組 合物。Jak3抑制劑揭示於美國專利案第6,627,754號及第 7,〇91，208號中，料專利案之内容以引用的方式併入本 文。本發明之一具體實施例包含向患者投與醫藥有效量之 3-{(3R，4R)-4-曱基 _3·[曱基 _(7H_ 吡咯并[23d]嘧啶 _4 基）· 胺基]-六氫吡啶-1-基}_3-氧代-丙腈。 除非另有說明，否則本文所用術語"烷基"包括具有直鏈 或具支鏈部分或其組合之飽和單價烴基。 本文所用之術語，，烧氧基"包括烷基，其中"烷基"如上 文定義。 除非另有說明，否則本文所用術語，，鹵代”包括氟代、氯 代、溴代或碘代。

本發明化合物亦可含有雙鍵。當存在該等雙鍵時，本發 明化合物以順及反構型及其混合物形式存在。 X 除非另有說明，否則本文所指之該烷基及烯基、以及本 文所指其他基團(例如，烷氧基)之烷基部分可為線性或具 支鏈，且其亦可為環狀（例如環丙基、環丁基、環戊基、 核己基或環庚基）或線性或具支鏈且含有環狀部分。除非 132406.doc 18 1364281 另有說明，否則鹵素包括氟、氯、溴及碘。 s用於本文時’（CrC9)雜環烷基指吼咯啶基、四氫呋喃 基、二氫呋喃基、四氫吡喃基 '吡喃基、硫代吡喃基、氮 丙啶基、氧呒基、亞曱二氧基、苯并吡喃基、異噁唑啶 基、1，3-噁唑啶-3-基、異噻唑啶基、丨，3_噻唑啶_3_基、 1，2-吡唑啶_2_基、ι，3-吡唑啶·卜基、六氫吡啶基、硫嗎啉 基、1,2-四氫嗟嗓-2-基、ι，3_四氫嗟嗓_3_基、四氫嗟二嗪 基、嗎啉基、1,2-四氫二氮雜己烷-2-基、丨，3_四氫二氮雜 己烷-1-基、四氫氮呼基、六氫β比嗪基、苯并二氫吼喃基 等。熟習此項技術者將瞭解該等（C2_C9)雜環烷基環經由碳 或sp3雜化氮雜原子連接。 當用於本文時’（C2_C：9)雜芳基指。夫读基、嘆岭基、嘆嗤 基、°比。坐基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、吡咯基、三 «坐基、四峻基、咪唑基、i，3,5_噁二唑基、12，^噁二唑 基、1，2,3-噁二唑基、ι，3,5-噻二唑基、ι，2,3-噻二唑基、 1，2,4-嚷一吐基、〇比。定基、嘴σ定基、吼嗓基、塔嗓基、 1，2,4·二。秦基、1’2,3-二嗓基、ι，3,5-三唤基、》比唾并[3,4_ b]吡啶基、啐啉基、喋啶基、嘌呤基、6,7_二氫·5Η_[1]4_ 吡啶基、苯并[b]噻吩基、5,6,7,8_四氫_喹啉_3_基、苯并噁 吐基、苯并〇塞唾基、苯并異噻唑基、苯并異噁唑基、苯并 咪唑基、硫茚基、異硫茚基、苯并呋喃基、異苯并呋喃 基、異°5丨°木基、°引°木基、叫| σ秦基、。弓丨β坐基、異啥琳基、啥 琳基、吹嗪基、啥°惡琳基、唾。坐琳基、苯并„惡嗪基等。熟 習此項技術者將瞭解該等（CrC9)雜環烷基環經由碳原子或 132406.doc . ι〇.

1364281 sp3雜化氮雜原子連接。 當用於本文時’（C6-C10)芳基指苯基或萘基。 式I之較佳化合物包括其中a為0; b為1 ; X為羰基； 〇 ; d為0 ; e為〇 ; £為〇 ;且§為〇之彼等。式丨之其他較佳化 合物包括其中a為〇 ; b為i ; χ為羰基；40 ; ;鴿

〇，f為〇，且g為0之彼等。式1之其他較佳化合物包括其中a 為0 ; b為1 ; X為羰基；; 3為〇 ; 6為〇 ;鸪〇 ;且g為〇 之彼等。式I之其他較佳化合物包括其中&為〇;匕為丨；X 為-C(=N=氰基）_ ; c為丨；d為〇 ; 6為〇 ; f為〇 ;且_〇之彼 等。 式I之其他較佳化合物包括其中a為0 ; 13為〇 ;(；為0 ; 4為 〇 ; e為0 ; f為〇 ; §為i ;且2為_(：(〇)_〇·之彼等。式〗之其他 較佳化合物包括其中3為0; 1)為1 ; 乂為8(〇)^ n為2; 〇為 0 ; d為0 ; e為〇 ; f為〇 ;且g為〇之彼等。式〗之其他較佳化 合物包括其中3為〇 ; b為i ; X為S(〇)n ; η為2 ; ^為0 ; d為 2，e為〇 , f為1 ; g為1 ;且z為幾基。式^之其他較佳化合 物包括其中“0 ; b為1 ; X為S(0)n ; n為2 ; e為〇 ; d/%2 ; e為0 ; f為1 ;且§為〇之彼等。式！之其他較佳化合物包括其 中a為0; b為1 ; X為羰基；0為1 ; d為〇; e為t ; γ為 (〇)η，η為2，f為〇 ;且g為〇之彼等。式^之其他較佳化合 物包括其中3為〇 ; bJu ; XJ^s(〇)n ; n為2 ; c為i ; d為〇 ; 為，【為〇,且g為〇之彼等。式I之其他較佳化合物包括其 中a為1 ; b為1 ; X為羰基；0為！ ； d為〇 ; e為〇 ; £為〇 ; 為〇之彼等。式1之其他較佳化合物包括其中&為0 ; b為1 ; 1324〇64〇c -20- 1364281 X 為 S(0)n ;c為 0;d為 i;e 為 1; Y為 s(0)n ; η為 2 ; f為 Ο ; 且g為0之彼等。式I之其他較佳化合物包括其中a為〇 ; b為 1 , X為 S(0)n , c為 0 , d為 1 ; e 為 1 , Y為 S(0)n ; η為 2 ; f為 1 ;且g為0之彼等。式I之其他較佳化合物包括其中a為〇; b為1 ; X為氧；c為〇 ; 4為1 ; e為1 ; Y為S(0)n ; n為2 ; f為 1 ;且g為0之彼等。式I之其他較佳化合物包括其中a為〇; b為1 ; X為氧；c為〇; d為1 ; e為1 ; Y為S(0)n ; n為2 ; f為

0 ;且g為0之彼等。式〗之其他較佳化合物包括其中a為〇 ; b為1 ; X為碳基；0為i ; d為i ; 6為i ; 丫為s(〇)n ; f為〇 ; 且g為〇之彼等。式I之其他較佳化合物包括其中&為〇; ^^為 1;X為幾基；c為1;0為1;6為1;丫為s(〇)n ; n為2 ; f為 1，且g為0之彼等。式〗之其他較佳化合物包括其中Rlz為氰 基、三氟曱基' (c丨-C6)烷基、三氟曱基（CVC6)烷基、（(：丨_ c〇烷基胺基、（(Cl_C6)烷基h胺基、（c^cj炔基、氰基

(CVC6)烷基、（CVC6)烷基_s(〇)m，其中〇1為〇、之彼 等。 一根據本發明投與之組合物包含醫藥有效量之一或多種指 定的Jak3抑制劑。本文所用之”醫藥有效量"係足以減輕或 肖除乾眼或“間濕眼睛之其他疾病之症狀跡象之量。有效 劑量可一或多次投與。 如床範圍内所瞭解，藥物、化合物或醫藥組合物之 有效$可與或可不斑另一 使用爽 '查# ’、 樂物、化合物或醫藥組合物聯合 二^ 因此可認為，'有效量，，或"有效劑量"係在投與 -夕種樂劑之範圍内’且若與—或多種其他藥劑聯合使 132406.doc •21 · 1364281 用時可能或確能達成期望之結果，則可認為係以有效量給 予單次藥劑。 本文所用"治療（treatment或treating)”係用於達成有益或 期望結果（包括臨床結果）之方法。為本發明之目的，有益 或期望之臨床結果包括（但不限於），減輕及/或消除乾眼或 需潤濕眼睛之其他疾病之症狀迹象。 大夕數醫師僅根據症狀診斷及治療乾眼症候群（JAma

2001; 286:21 14-9)。對McMonnies & Ho乾眼問卷之反應可 用作》平彳貝乾眼症狀之工具（得分超過丨4 5即認為符合乾眼診 斷）。然而，國家眼科研究院乾眼研習會將”眼睛不適之症 狀"定義為"乾眼”之唯一態樣。對明顯淚液缺乏或可能淚 液蒸發過多及暴露之眼表受損之分析可證實"乾眼"診斷。 本文所用"顯著增加淚液產生量"意指藉由標準眼科實踐 (亦即SCMrmer，S或紅酚類線條測試（Phenol red threat

test)、螢光素破裂時間 '或下文所述之任一 淚液產生量在統計學上顯著（亦即p<〇 〇5)增 測試）所量測之 加。 用於乾眼之最常見測試係淚膜破料間、地㈣犷測試 及營光素染色，但並非僅限於該等測試。以下為用於乾眼 之已知測έ式方法及臨界值，屮 值出現該值時可認為結果為異常 並預示發生乾眼： 表1

132406.doc -22· 1364281 玫瑰紅染色 大於3分(共15分）

在Schirmer j測試中，量測眼睛產生之淚液量：收集淚 液大約5分鐘左右，以使眼科醫師測定所產生之量是否足 、維持眼睛健康。若產生淚液不多，則可診斷為淚液缺乏

ϋ乾眼。右產生足夠淚液，但患者仍有眼睛不適之症狀， 則可診斷為蒸發性乾眼。 在Schirmer I測試中，使用35 mmx5 mm尺寸之濾紙條來 量測在5分鐘時期内產生之淚液量。在周圍光下，將紙條 置於下眼瞼之中間與側面三分之一連接處。指示患者在測 試期内向前看並正常眨眼。陰性測試（在5分鐘内濾紙潤濕 超過10 mm)意指患者可產生正常淚液量。乾眼患者在5分 鐘内潤濕值小於5 mm。

Schirmer測試之一重要限制係在不同時間及由不同醫生 實施之測試結果有顯著變化。實際上其主要用途係用於診 斷嚴重乾眼患者。 對Schinner !測試有若干爭議。若不使用含麻醉劑眼藥 水，則認為該測試可量測基準及反射性淚液分泌。若使用 3麻醉劑眼藥水，則認為該測試僅可量測基本淚液分泌。 有令人信服之理由相信藉由此兩種不同方法量測之淚液可 能不足以區分基本與反射性淚液產生。大多數臨床醫師使 132406.doc •23· 1364281 用含麻醉劑眼藥水使眼睛失去知覺後實施該測試。然而， 國家眼科研究院乾眼研習會推薦在實施該測試之前不要使 用含麻醉劑眼藥水。不管是否使用麻醉劑，最低檢測值係 類似的。可實施Schirmer II測試來量測反射性淚液分泌。 藉由在量測淚液產生量之前使用棉尖塗敷器刺激鼻黏膜來 實施Schirmer II測試。 若干醫師認為Schirmer I或II測試侵入過度且對輕微至中 度乾眼意義很小’作為其替代方法，可使用紅酚類線條測

s式（Quick Zone®)。使用浸透酚紅染料之棉線。酚紅對pH 敏感且當為淚液潤濕時自黃色變成紅色。將7〇 mm長線之 波紋狀末端置於下結膜穹窿中。丨5秒後，以毫米為單位量 測線上顏色變化長度-表示為淚液潤濕之線長度。正常之 潤濕長度應介於9 mm及20 mm之間。乾眼患者之潤濕值小 於 9 mm。 淚液破裂時間（BUT) 乾眼患者之淚膜不穩定且破裂迅速。因此乾眼患者之淚 液破裂時間更短。螢光素破裂時間（FBut)最常用。將一螢 光素條敷在下瞼弯窿中且隨後移去。要求患者眨眼3次且 隨後向正前看並停止眨眼。在裂隙燈顯微鏡之鈷藍過濾光 下觀察淚膜，並使用秒錶記錄最後一次眨眼與淚膜出現第 一次破裂之間流逝之時間（看見藍色背景中之黑點即為破 裂）°少於10秒或更少之螢光素BUT符合乾眼。 為克服由FBUT測試之潛在侵入所導致之限制，已發展 了非侵入性淚液破裂時間（NIBUT)方法。稱其為非侵入性 132406.doc •24· 1364281 乃因為不接觸眼睛。需要諸如角膜散光計、手持式角膜鏡 或淚液鏡等儀器來量測NIBUT^亦可用某些技術來觀察淚 膜實際破裂前之破裂前相。該破裂前相稱為淚液變薄時間 (TTT)。可藉由觀察角膜散光計梯形目標（角膜散光計網格 之反射圖像）之變形（TTT)及/或破裂來達成量測。醫師注視 並觀察易碎梯形目標’且隨後記錄梯形目標圖像變形 (TTT)及/或破裂（NIBUT)所用之時間NIBUT量測較f光素

淚液破裂時間更長。小於〗5秒之NIBU丁值符合乾眼。五人 認為TTT/NIBUT對患者更友好、可重複且較精確。 本文所用"聯合，，投與包括同時投與及/或在不同時間投 與。聯合投與亦涵蓋作為聯合調配物投與或作為分開組合 物投與。本文所用聯合投與意指涵蓋其中向個體投與“Η 抑制劑及另一藥劑（其可同時及/或分開進行）之任何環境。 如本文進一步所論及，應瞭解Jak3抑制劑及其他藥劑可以 不同投藥頻率或間隔來投與。舉例而纟，可每天投與址3 抑制劑，而可以更低頻率投與其他藥劑。應瞭解，可使用 相同投與途徑或不同投與途徑來投與JaU抑制劑及其他藥 劑。 "個體"（亦稱為"受試者"）為哺乳動物，更佳為人類。，哺 乳動物”包括（但不限於）：農業動物（例如奶牛）、運動動 物、寵物(例如描、狗及馬）、靈長類、小鼠及大鼠。 術語”恢復正常淚液產生量"指標準眼科實踐中所述乾眼 症狀之終止，例如在McM〇nnies & H〇乾眼問卷及/或測試 結果（亦即表1中所站；夕n T所边之Sch丨rmer，s '紅酚、螢光素等測試 132406.doc •25- 1364281 之…果）中反應分數低於〗4 5，該值在正常變化範圍内。 根據本發明之方法，向需要其之哺乳動物投與包含一或 多種指定Jak3抑制劑及醫藥上可接受之載劑的組合物，以 用於局部眼科投與或植入眼睛結膜囊或前房中。根據業内 已知用於具體冑望投與路線之方法調配該等組合物。 -般而言，對於意欲以眼藥水或眼膏形式向眼睛局部投 與之組合物，jak3抑制劑之總量為約〇 〇〇〇1%至丨力。

以下。Jak3抑制劑之量之較佳範圍為0.0003。/。至〇.i% (w/w) 、下而Jak3抑制劑之量之更佳範圍為〇,〇〇3-〇.〇30/〇 (W/W)。Jak3抑制劑之量之另一較佳範圍為〇 〇〇5_〇 〇5% (W/W) ’且又一較佳範圍為〇 〇丨_〇 〇3 % (w/w)。 較佳地’將根據本發明投與之組合物調配為用於局部投 與之溶液、懸浮液、乳液及其他劑型。基於調配之方便 性、及患者藉由將1-2滴溶液滴入受感染眼睛而容易地投 與該等組合物之能力’ 一般而言水溶液較佳。然而，該等 組合物亦可為懸浮液、黏性或半黏性凝膠、或其他類型固 體或半固體組合物。對微溶於水之Jak3抑制劑而言，較佳 為懸浮液。 根據本發明投與之組合物亦可包括多種其他成份，包括 、表面活性劑、穩定聚 本發明之較佳醫藥組合 抑制劑。本發明之醫藥 性劑及/或緩解藥劑及/ (但不限於）滲透性調節劑、緩衝劑 合物、防腐劑、共溶劑及增黏劑。 物包括含滲逄性調節劑及緩衝劑之 組合物可進一步視情況包括表面活 或穩定聚合物。 132406.doc -26- 1364281 較佳地，可施用多種滲透性調節劑以將組合物之滲透壓 調節至天然淚液之滲透壓以用於眼藥組合物。舉例而言， 可將氯化納、氣化卸、氯化鎂、氣化鈣、單糖（例如葡萄 糖、果糖、半乳糖）及/或簡單聚醇（例如糖醇，如甘露糖 醇、山梨醇、木糖醇 '拉克替醇（Iactit〇1)、異麥芽酮糖 醇、麥芽糖醇、及氫化澱粉水解產物）添加至組合物中以 接近生理渗透壓。該滲透性調節劑之量可根據端視所添加 之具體藥劑而變化。然而一般而言’組合物將含有足以使 最終組合物具有眼科上可接受滲透壓（一般約15〇_45〇 mOsm，較佳地250-350 mOsm且最佳在大約290 mOsm)之 罝之滲透性調節劑。一般而言，本發明之滲透性調節劑以 2 4 /〇 w/w之範圍内存在。本發明之較佳滲透性調節劑包括 單糖或糖醇。本發明之具體實施例係D_甘露糖醇。 可向組合物令添加適宜緩衝劑體系（例如磷酸鈉、乙酸 鈉、檸檬酸鈉、硼酸鈉或硼酸）以防止在儲存條件下pHs 生漂移。端視所施用之試劑不同，具體濃度亦不同。然而 較佳地應選擇緩衝劑以將目標pH維持在pH 5至8範圍内， 且更佳地維持目標1?11為1)11 5至7。 可視情況施用表面活性劑以遞送更高濃度之抑制劑。表 面活性劑之功能為增溶抑制劑並穩定膠體分散液，例如膠 束’合液、微型乳液、乳液及懸浮液。可視情況使用之表面 '舌丨生背丨之實例包括聚山梨醇酯、泊洛沙姆（poloxamer)、硬 脂酸聚烴氧（40)酯、聚氧萬麻油、泰洛沙泊、曲拉通 (‘ on)及山梨醇肝單月桂酸g旨。施用於本發明之較佳表 I32406.doc •27- 1364281 面/舌f生J具有在12.4至13.2範圍内之親水·親脂_平衡"hlb， 且為眼藥應用接受，例如Trit〇nX114及泰洛沙泊。 經調配用於治療乾眼型病症及失調症之組合物亦可包含 經設計提供立即、短期緩解乾眼型病症之水性載劑。可將 該等載劑調配為磷脂載劑或人工淚液載劑、或二者之混合 物。本文所用之"罐脂載劑"及"人工淚液載劑"指水性組合 物，其⑴包含一或多種磷脂（在磷脂載劑情況下）或其他化 合物，其可潤滑、"潤濕"、接近内源性淚液之濃度、幫助 天然淚液形成、或在向眼睛投與時暫時緩解乾眼症狀及病 症；（11)具有安全性；及（iii)為有效量之一或多種特定Jak3 抑制劑之局部投與提供適宜遞送媒劑。用作人工淚液載劑 之人工淚液組合物之實例包括（但不限於）市售產品，例如

Visine Pure Tears ®、Visine Tears Natural Tears Formula ® (Johnson & Johnson) ' Tears Naturale ®、Tears Naturale II ®、Tears Naturale Free ®、Bion Tears ® (Alcon Laboratories公司，Forth Worth，TX.)、Refresh Tears ®、 Refresh Endura ®、Refresh Plus ® (Allergan公司）。磷脂 載劑調配物之實例包括揭示於美國專利第4,804,539號（Gu〇 等人）、第 4,883,658 號（Holly)、第 4,914,088 號（glonek)、第 5,〇75，1〇4號（Gressel等人）、第 5,278，151號（Korb等人）、第 5,294,607 號（Glonek 等人）、第 5,371，108 號（Korb 等人）、第 5,578,586號（Glonek等人）之彼等；上述專利案揭示之可用 作本發明填脂載劑之填脂組合物之範圍係以引用的方式併 入本文中。 132406.doc -28- 1364281 經設計用以潤滑、"潤濕"、接近内源性淚液之濃度、幫 助天然淚液形成、或在向眼睛投與時暫時緩解乾眼症狀及 病症之緩解化合物為業内熟知。在某些情形下該等緩解 藥劑⑼如單體多元醇(甘油、丙二醇、乙二醇))可作為滲 透I·生調U發揮雙重功能。該等緩解化合物可加強組合物 黏度，且包括(但不限於)：單體多元醇、聚合多元醇(例如 聚乙二醇）、經丙基甲基纖維素（"HPMC")、竣基甲基纖維 素納 '經基丙基纖維素C,HPC")、葡聚糖（例如葡聚糖70); 水溶性蛋白，例如明膝；及乙稀基聚合物(例如聚乙稀 醇、聚乙烯-…綱、帕維酮(povidone))、及卡波姆 (Carb〇mer)，例如卡波姆州、卡波姆940、卡波姆971p、 卡波姆974P » 可添加至本發明眼藥組合物之其他試劑係發揮穩定聚合 功此之緩和劑。穩定聚合物應係具有局部眼 :離子電荷實例，更具體而言係在其表面帶負電荷之= 气2不㈠10·50 W之物理穩定ζ電位且可在水中形成 刀月飞’、即具有水溶性）。若超過工種，則本發明之較佳穩 物可為來自於交聯聚丙稀酸醋家族之一種或多種聚 例如卡波姆及Pemulen®，具體而言為〇 二之量之卡波姆974p(聚丙稀酸）。如上所述該等卡波姆 亦可發揮緩解化合物之功能。 亦了將其他化合物添加至本發明之眼藥組 載劑之黏度。婵黏瀚夕奋1 初干以徒回 透明質… 但不限於)：多糖，例如 ^及其鹽類、硫酸軟骨素及其鹽類、葡聚糖、纖維 132406.doc -29- 1364281 素家族之多種聚合物；乙烯基聚合物；及丙烯酸聚合物。 一般而言’磷脂載劑或人工淚液載劑組合物展示1 _4〇〇厘 泊（"cps")之黏度。 局部眼藥產品通常以多劑型包裝。因此，為防止使用過 程中之細菌污染’需要加入防腐劑。適宜防腐劑包括：氣 苄烧铵（benzalkonium chloride)、氯丁醇、苯度漠敍 (benzododecinium bromide)、對羥基笨曱酸甲酯、對羥基 苯甲酸丙酯、苯乙醇、乙二胺四乙酸二鈉、山梨酸、聚四 級敍-1、或熟習此項技術者所知之其他試劑。該等防腐劑 之施用1：通常為0.001-1.0% w/v。本發明之單位劑量組合 物應係無菌，但通常無防腐劑。因此，該等組合物一般不 含有防腐劑。 本發明之較佳組合物用於向遭受乾眼或乾眼症狀折磨之 人類患者投與。較佳地’局部投與該等組合物。一般而 吕’用於上述目的之劑量不同但應使用消除或改善乾眼病 症之有效量。一般而言，每次投與丨_2滴該等組合物，每 天投與一或多次。較佳地，該等組合物每天投與一次（QD) 或兩次（BID) 〇 代表性眼用滴劑調配物提供於下文實例2中。 實例1· 1-{4·曱基_3_[曱基（了仏吡σ各并[2,3d]嘧啶_4·基）· 胺基]-六氫吡啶-1-基卜乙酮及3_{(3R，4R)_4_甲基_3 [曱基_ (7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶_4_基）胺基]_六氫吡啶·基}氧 代丙腈。方法Α· (ι_苄基_4_甲基_六氩吼啶_3•基）甲基·胺 藉由 Iorio，M.A.與 Damia，G” Tetrahedron, 26，5519 132406.doc -30- 1364281 (1970)及 Grieco 等人，J0urnai of the American Chemical

Society, 107，1768 (1985)(二參考文獻之全文係以引用方式 併入本文中）中之方法（修改為使用5%甲醇作為共溶劑）製 備1-苄基-4-甲基-六氫吡啶_3·酮（2 3克，u 5 mm〇丨），向其 溶解於23 mL存於四氫呋喃中之2M甲基胺中之經攪拌溶液 中添加1 ·4 mL(23 mmol)乙酸，並於室溫下在密封試管中攪 拌所得混合物達16小時。添加三乙醯氧基硼氫化鈉（4 9 克，23 mmol)並於室溫下在密封試管中攪拌該新混合物達 24 h，此時添加1 N氫氧化鈉（50 mL)來終止反應。隨後用 醚萃取反應混合物（3x80 mL)，在硫酸鈉（Na2S04)上乾燥合 併的醚層並在真空中濃縮至乾，得到1 7克（69%)呈白色固 體形式之標題化合物。LRMS: 219.1 (M+1)。方法B : (1-苄基-4-甲基-六氫吡啶基）_甲基_(711_吡咯并丨2 3 d]嘧啶_ 4-基）-胺 將藉由 Davoll ’ J. Am. Chem. Soc，82，131 (1960)(其全 文以引用的方式併入本文中）中之方法製備之4_氣代吡咯并 [2,3-d]嘧啶（2.4克，15.9 mmol)及來自方法a之產物（1.7 克，7.95 mmol)溶解於2倍當量三乙胺之溶液在密封試管中 於1 〇〇°C下加熱3天。冷卻至室溫並在減壓下濃縮後，藉由 急驟層析法（二氧化矽；存於二氣曱烷中之3%甲醇）純化殘 餘物，得到I·3克（50%)無色油狀標題化合物。LRMS: 336.1 (M+1)。 方法C :甲基-(4·甲基-六氫〇比啶_3·基）_(711_吡咯并丨2,3 d】 嘧啶-4-基）-胺 132406.doc •31 - 1364281 向來自方法B之產物（0.7克，2.19 mmol)溶解於1 5 mL乙 醇之溶液中添加1.5 mL 2 N鹽酸並藉由氮氣吹掃對反應混 合物實施除氣。隨後向反應混合物中添加〇 5克2〇%碳載氫 氧化把（50%水）(Aldrich)且在50 psi氫氣氛中在室溫下將所 付混合物震蕩（帕爾授拌器（parr_Shaker))2天。在真空中將 經石夕藻土過濾之反應混合物濃縮至乾並藉由急驟層析法 (二氧化石夕；存於二氧甲烷之5〇/〇曱醇）純化殘餘物，得到 0.48 克（90%)標題化合物。LRMS: 246」（M+1)。 方法D: 1 -{4-甲基_3_[甲基_(7H_吡咯并[2,3_d】嘧啶_4•基）_ 胺基】-六氫吡啶-1·基卜乙輞 向來自方法C之產物（〇.〇3克，0.Π4 mmol)溶解於5 mL 10:1二氧甲院/。比啶中之經攪拌溶液中添加（〇 〇18克，〇 228 mmol)乙醯氣並在室溫下攪拌所得混合物達18小時。隨後 使反應混合物分配於二氧甲烷與飽和碳酸氫鈉之間。用飽 和NaHC〇3再次洗滌有機層，以硫酸鈉乾燥並在真空中濃 縮至乾。藉由製備型薄層層析法（PTLCX二氧化矽；存於 一氧甲烧之40/〇甲醇）純化殘餘物，得到〇 〇〇5 mg(i5%)無色 油狀標題化合物。LRMS: 28 8.1 (M+1)。 方法E · 3-{(3R，4R)-4-甲基-3·【甲基-(7H-吡咯并[2,3-dJ嘧 啶-4-基）-胺基]-六氫吼啶小基卜3_氧代_丙腈（cp〇69〇55〇) 之合成 使用上述方法A-D之常規修改方式製備標題化合物3· {(3R，4R)-4-曱基-3-[甲基-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶基）-胺 基]-六氫°比啶-1-基}-3·氧代-丙腈（cp〇690550)。 132406.doc -32- 1364281 方法 F : 3-{(3R，4R)-4-甲基-3-[甲基-(7H-nt 洛并[2,3-d]鳴 咬-4-基）-胺基】-六氫咬-1-基}-3-氧代-丙腈檸檬酸鹽之製備 使用闡述於WO 2007/012953中之方法製備檸檬酸鹽。向 經氮氣吹掃的500毫升潔淨乾燥反應器中填充曱基_(4曱 基-六氫°比咬-3-基）-(711-1>比洛并[2,3-(^]哺咬-4-基）-胺（25.〇 g ’ 0.102 mol)及二氯甲烷（2 50 ml)。於室溫下將該混合物 攪拌至少2.5小時。向經氮氣吹掃的1 L潔淨乾燥反應器中 填充氰基乙酸（18.2 g，0.214 mol)、二氣曱院（3 75 ml)及三 乙胺（30.1 ml ’ 0_214 mol)。經1小時使混合物冷卻至·ΐ5.〇_ 5.0°C並以使溫度維持在0°C以下之速度添加三曱基乙酿氣 (25.6 ml ’ 0.204 mol)。維持反應至少2.5小時，然後以使 溫度維持在0°C以下之速度添加胺溶液。攪拌1小時後，使 混合物升溫至室溫並加入1 Μ氫氧化鈉（125 ml)。用水（125 ml)洗滌有機層。以丙酮替換二氯甲烷溶液直至達成5〇〇 ml之體積及55-65°C之溫度。向混合物中填充水（75 ml)， 同時使溫度維持在55-65°C。填充檸檬酸（20.76 g，0.107 mol)之水溶液（25·0)並使混合物冷卻至室溫。攪拌反應器 至少5小時且然後藉由過濾分離所得固體並用加至過濾器 上之丙酮（2x75 ml)洗滌。將該鹽和2Β乙醇（190 ml)及水 (190 ml)—起填充至經氮氣吹掃的1 L潔淨乾燥反應器中。 在75-85 °C下將漿液加熱至少4小時。使混合物冷卻至20-30°C並再攪拌4小時。藉由過濾分離固體並用2B乙醇（190 ml)洗滌。於50°C真空爐中使用輕微氮氣吹送乾燥後，分 離出34·6 g(67.3〇/〇)標題化合物。 132406.doc -33· 1364281 !H NMR (500 MHz, d6-DMSO): δ 8.14 (s, 1H, 7.11 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.57 (d, J=3.6 Hz, 1H), 4.96 (q, J=6.0 Hz, 1H), 4.00-3.90 (m, 2H), 3.80 (m, 2H), 3.51 (m, 1H), 3.32 (s, 3H), 2.80 (Abq, J=15.6 Hz, 2H), 2.71 (Abq, J=15.6 Hz, 2H), 2.52-2.50 (m, qH), 2.45-2.41 (m, 1H), 1.81 (m, 1H), 1.69- 1.65 (m，1H)，1_04 (d，J=6.9 Hz，3H)。 方法G :游離鹼3-{(3R，4R)-4-甲基-3-[甲基-(7H-吡咯并 [2.3-d】°^咬-4-基）-胺基]-六氮®it咬-1-基}-3 -氧代-丙猜之製備

以存於二氧甲烷中之1 Μ氫氧化鈉處理上述方法F中製備 之3-{(311，411)-4-甲基-3-[甲基-(711-吡咯并[2,3-引嘧啶-4-基）-胺基]-六氫°比啶-1-基}-3-氧代-丙腈擰檬酸鹽，得到對 應游離鹼。隨後自甲醇與水中結晶該游離鹼以提供結晶形 式之游離驗。 實例2 :醫藥調配物 實例2a :調配物 以下表2顯示多種包含抑制劑CP0690550之醫藥調配物。

表2 調配物編號 調配物說明 調配物1 50 mM pH 7.4磷酸鹽緩衝劑、0.05% Tween 80、0.5% NaCl 調配物2 50 mM pH 7.4磷酸鹽緩衝劑、0.36% HPMC、0.2% 甘油、1% PEG400 ' 0.35% NaCl 調配物3 5 mM pH 7.4磷酸鹽緩衝劑、0.36% HPMC、0.2%甘油、1% PEG400、5%CremophorELP、4.3%甘露糖醇 調配物4 10 mM pH 5.8檸檬酸鹽缓衝劑、4.5%甘露糖醇 調配物5 10 mM pH 5.8擰檬酸鹽緩衝劑、4.2%甘露糖醇、0.36% HPMC、0.2%甘油 132406.doc •34- 調配物6 0.3/。泰洛》、泊(表面活性劑，非離子型）、〇 5%卡波普(Carb〇 974P(聚合物穩定劑’陰離子型）、2.25% 甘露糖醇、濃产 50 mM、230 mOsm/kg之pH 6,5磷酸鹽緩衝劑 又 調配物7 0.3%泰洛沙泊(表面活性劑’非離子型）、〇 1%卡波旅97 物穩定劑，陰離子型）、2.25%D-甘露糖醇、濃产/ σ 230 mOsm/kg之pH 6.5填酸鹽緩衝劑 又 實例2b :製備 1364281 製備上述以三種劑量（0.001%、0.003%及〇 01% w/w)包 含Jak3抑制劑CP0690550之調配物1至5。亦製備以〇 〇〇5% w/w之量含Jak3抑制劑CP9690550的調配物5(參見圖8)。製 備以0.03% w/w之量包含Jak3抑制劑之調配物6及7。 藉由向燒瓶中添加所需量之滲透性調節劑（若存在，則 為經丙甲纖維素（hypromellose)、或甘露糠醇）、在緩衝劑 (如所示為磷酸鹽或檸檬酸鹽缓衝劑）一半終體積中加熱至 約50C來製備上述調配物。加熱批量抑制劑cp69〇55〇後， 稱量並溶解額外賦形劑（如指明，則為甘油、聚乙二醇 400) °量測並添加呈儲備溶液形式之批量Jak3抑制劑游離 鹼。添加純水適量至100%。攪拌該混合物5分鐘以均質化 且然後經由無菌過濾膜過濾至無菌容器中。若必要，則藉 由混合1.0 NaOH來調節pH值。 調配物6及7表示其中抑制劑CP690550以更大量存在 (0.03% w/w)之眼藥組合物。除滲透性調節劑及緩衝劑 外，該等更高濃度調配物亦可包括表面活性劑及視情況包 含穩定聚合物。本發明之較佳表面活性劑包括THt〇nXi Μ 及泰洛沙泊。較佳穩定聚合物包括卡波姆974p。 藉由以其10倍終濃度（例如，pH 6.5之存於5〇 mM磷酸鹽 132406.doc -35- 1364281 緩衝劑中之3%泰洛沙泊與2.5% D_甘露糖醇及5%卡波姆 974P)料波姆首先分散於包含表面活性劑之緩衝劑中來 製備調配物6及7之製劑。亦以其終濃度之1〇倍濃度將Η。 抑制劑CP690550分散於預濃縮物中。隨後對混合物進行均 質化，藉由以匹配緩衝劑將經過濾預濃縮物稀釋1〇倍來獲 得最終調配物。 實例3 :在MRL/lpr(乾眼）小鼠中，選擇性Jak3抑制劑對淚 液產生量之效應 為研究淚液產生量隨時間變化之程度，自Jacks〇n實驗 室（Bar Harbor，ME，USA)購得 1〇 只 MRL/lpr 小鼠及 5只8週 齡之年齡匹配的C57 Black/6對照小鼠。小鼠株河尺以丨^具 有使其易患類似於薛格連氏症候群之乾眼的突變。 藉由在1遇内4次量測淚液體積來確定基線淚液體積從 而證實MRL/lpr小鼠相對於C57小鼠發生乾眼之情況。使用 鑷子握持的棉線（Quick Zone®)搽拭側面眼角處之眼表15_ 30秒來量測淚液產生量。量測棉線潤濕程度並以毫米表 示》MRL/lpr小鼠相對於C57對照小鼠之淚液產生量測值展 示於圖1中。 以2 μΐ媒劑（磷酸鹽緩衝鹽水PBS，包含〇 〇5% Tween 8〇) 或0.1%卜&)。？-690550治療動物（5-1〇只小鼠/組），1天2 次’進行2週。C 5 7小鼠亦接受媒劑。在第2、3、及6天量 測淚液體積。在MRL/lpr小鼠中，CP-690550對淚液產生量 之效應展示於圖2中。 如圖2所示’在施用最初2天内，CP0690550可顯著增加 132406.doc -36- 淚液產生體積°值得注意的是’在施用最初2天内’ CP690550可使淚液產生體積較乾眼小鼠之初始淚液產生量 增加超過丨00°/〇。 實例4 :比較CP-69〇55〇與Restasis®之比較數據 使用浸透酚紅之線（Quick Zone®)量測淚液並在各藥物 施用之前實施基線量測。以2 μΐ施用藥物或媒劑，1天2 次。 媒劑治療之正常C57black/6與MRL/lpr乾眼小鼠分別用 作正常對照與乾眼對照。CP690550之媒劑係包含0.05% Tween 80之磷酸鹽缓衝鹽水（PBS)。 1天2次使用Restasis®(環孢素0.05%)與0.01%之CP-690550達30天來實施CP690550與Restasis®之功效比較試 驗。對照動物包括以PBS媒劑治療之正常C57Black/6小 鼠、及MRL/lpr小鼠及以Refresh Endura®(Restasis之媒劑） 治療之MRL/lpr小鼠（5-10只小鼠/組）。CP-690550與 Restasis®之比較淚液產生量展示於圖3中。 如圖3所示，與Restasis®相比，CP690550之反應速率快 得多並較Restasis®展示顯著提高之淚液產生體積。 而且，圖3及4均表明投與CP690550最終可使淚液產生體 積增加至與正常淚液產生體積相當之程度（"正常"C57小鼠 淚液產生量之5-10%範圍内）。 實例5 :在MRL/lpr小鼠中CP690550之劑量反應速率 如上文實例4，經媒劑治療之正常C57black/6與MRL/lpr 乾眼小鼠（5-1 0只小鼠/組）分別用作正常對照及乾眼對照。 132406.doc -37· 1364281 CP6905 5 0之媒劑係上文實例2中所述之調配物1、3及4。以 0.003% (w/w)、0.01% (w/w)及 0.03% (w/w)之濃度（以游離 鹼濃度計算）施用Jak3抑制劑CP690550。1天2次以2 μΐ實施 調配物1之治療達2週。1天1次以1 μΐ實施調配物3及4之治 療達2週，。 圖4表示在8天内，1天2次投與存於調配物1媒劑中之 0.01°/。（w/w)之CP690550可將淚液產生量增加至與正常淚 液產生量相當之程度（在C57正常小鼠之淚液產生量之5· 1 0%範圍内）。類似地’圖5及6表示存於調配物3及4媒劑中 之CP690550劑量反應速率。在所有比較中，展示治療2天 後淚液產生量之顯著提高。 實例6 :經誘導乾眼小鼠模型 製備在注射鹽水中包含2.5 mg/ml東策菪驗（sigma)之注 射劑（1-1.5 ml/動物）。在正常C57小鼠中，每2.5小時向後 肢父替注射（200-250) μΐ東莨菪驗，共注射4次。將該等小 鼠置於特殊籠具（在前面和背面有孔）中並置於護罩内。將 風扇置於各籠具前面，並過夜打開丨6小時持續5天。 每天進行量測。5天結束時，所有動物視為已誘導發生 乾眼。 如上述實施4及5 ’以1 μΐ藥物或媒劑1天1次治療動物達2 週。以上文實例2中製備之調配物3及5治療經媒劑治療之 CM black/6及誘導乾眼小鼠（5_1〇只小鼠/組）。圖7及8表示 在~療2天時淚液產生量顯著增加。治療4天後，調配物3 中包含0.01% (w/w)之CP0690550抑制劑及調配物5中包含 132406.doc

-38. ο·003°/。之CP690550抑制劑之調配物接近正常淚液產生值。 藉由參考特定較佳實施例對本發明進行闡述；然而，應 理解其可以其他具體形式或其變形實施而不背離其特定或 基本特徵。因此，上文所述實施例在每一方面均應視為說 明性而非限制性，且本發明之範疇由隨附申請專利範圍而 非上文闡述指出。 【圖式簡單說明】 圖1展示上述實例1中所述之MRL/lpr小鼠（"乾眼小鼠，，）相 對於對照C57小鼠之淚液產生量。 圖2展示當投與選擇性Jak3抑制劑3_{(3r，4R)_4•甲基_3_ [曱基-(7H-。比咯并[2,3-d]嘧啶-4-基）-胺基]-六氫nt啶- 基}-3-氧代-丙腈（CP0690550)時乾眼小鼠相對於C57小鼠之 淚液產生量。 圖3展示與主要乾眼治療劑Restasis®比較，Jak3抑制劑 CP0690550之淚液產生量。 圖4展示與正常及乾眼對照相比，以〇 〇〇3%、〇 〇1%、及 0.03% (w/w)存於調配物1媒劑中之CP690550之劑量反應效 應。 圖5展示與正常及乾眼對照相比，以〇 〇1%及〇 03〇/〇 (w/w)存於調配物3媒劑中之CP690550之劑量反應效應。 圖6展示與正常及乾眼對照相比，以〇 〇〇1%、〇 003。/〇及 0.01% (w/w)存於調配物4媒劑中之CP690550之劑量反應效 應。 圖7展示在誘導乾眼小鼠模型中，與正常眼睛及安慰劑 132406.doc -39- 1364281

媒劑對照相比，以0.003%及0.01% (w/w)存於調配物3媒劑 中之CP690550的劑量反應效應。 圖8展示在誘導乾眼小鼠模型中，與正常眼睛及安慰劑 媒劑對照相比，以0.003%及0.005% (w/w)存於調配物3媒 劑中之CP690550的劑量反應效應。 132406.doc 40-

Claims (1)

1. 本 第097126126號專利申請案 中文申請專利範圍替換本(100年llUi 、申請專翁蕙冒1 八有以下、.·〇構之詹納斯氏激酶(janus kjnase_3， "Jak3")抑制劑之用途：

   ’其用於製造治療乾眼之藥劑。 .如吻求項1之用途’其中與未經治療之淚液產生體積比 較，在2天内該藥劑可顯著增加淚液產生體積。 如。月求項1之用途’其令在2天内該藥劑可將淚液產生體 積增加至超過初始淚液產生量至少50%。 4. 如凊求項丨之用途，其中該藥劑可將淚液產生體積增加 至與正常淚液產生量相當之程度。 5. 如睛求項〗之用途，其中該藥劑丨天最多投與2次⑺ 6. 如凊求項1之用途，其中該藥劑係每天（QD)投與。 月求項1至6中任一項之用途，其中該jak3抑制劑在 0.0001 /〇至〇 1〇/(( (w/w)以下之醫藥有效量範圍内。 月求項1至6中任一項之用途，其中該jak3抑制劑在 〇·〇〇3»〇.〇3% (w/w)之醫藥有效量範圍内。 9. 如明求項1至6中任一項之用途其中該以让3抑制劑在 0.01-0.03% (w/w)之醫藥有效量範圍内。 10. —種局部眼藥组合物，其包含醫藥有效量之具有以下結 構之Jak3抑制劑： 132406-1001123.doc U64281

   δ 、及醫樂上可接受之載劑。 如咕求項10之眼藥組合物，其中該jak3抑制劑在〇 〇〇〇1〇/〇 至0.1%(w/w)以下之醫藥有效量範圍内。 2.如吻求項1〇之眼藥組合物，其中該jak3抑制劑在〇 〇〇3_ 0.03% (w/w)之醫藥有效量範圍内。 13. 如請求項10之眼藥組合物，其中該Jak3抑制劑在〇 〇ι_ 0.03% (w/w)之醫藥有效量範圍内。 14. 如請求項1〇之眼藥組合物，其進一步包含滲透性調節劑 及選自填酸鹽或檸檬酸鹽之緩衝劑。 15. 如請求項14之眼藥組合物，其進一步包含表面活性劑。 16. 如請求項15之眼藥組合物，其中該表面活性劑係泰洛沙 泊（tyloxapol) 〇 S 132406-1001123.doc