TWI302459B - - Google Patents

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1302459 五、發明說明（1) 發明之領域 本發明係關於親油藥物組成，其包含生物活性劑聯結於油 成分，製造此組成之方法以及使用此組成於藥物傳送之方 法0 發明之背景 小腸是口服性藥物主要的吸收位置。小腸中控制吸收之最 主要元素係為刷邊膜。其組成係由磷脂雙層，其中含有多 醣類與蛋白質之併入。此膜對於許多極性藥物會產生吸收 屏障。製藥工業中已發展一成功的方式，合成原型藥，其 藉由酯化代電荷之官能基使其具有膜穿透性。例如，用於 治療牛皮癬以及腫瘤疾病之6-氮雜尿苷，其係被乙醯化以 形成2’，3, ’5’-三乙醯-6-氮雜尿苷，以增加其生物有效性 (Bloch，A. 「生物活性核：¾:之設計」，發表於1 973年紐約 的學術文章）（亦請參閱Sinkula，AA，「利用原型藥製成抗 生素之應用」，發表於1975年於華盛頓美國癌症協會的 Αϋ研討會系列14中第116至153頁原型藥作為新的藥物傳 送系統，由Hi guchi, Τ·與Stella, V·所發表；1 980年紐 約的學術文章藥物設計第9冊第121頁由Yalk〇wski，SH與 M〇r〇zowich，w·所發表）。 〇 ，物動力學測量藥物自身體吸收後之命運。藥物的口服 :的ΐ !勿活性係介油藥物動力學所決定。i少有三個因數 婉=者藥物的有效性··丨）經由腸胃道的藥物吸收程度；2) 、、二肝的生物轉型機制使其變得不活化，以及3 )自身體排

第5頁 五、發明說明（2) 除的迷度。制— 藥物吸收而i樂工業通常聚焦於藥物的配方，以藉由增加 許多藥物膠=樂物的有效性。因此，近幾年來，已發展 物的傳遞二f的技術。藥物膠囊化的基礎前係要改善藥 脂囊技術作：=且增加有效性。 域。這些浐i:傳遞系統的使用，係—特別被研究的領 層中，复锢^體一般係為中性或兩性離子脂質排列於雙 習用的腊；；：：(4層難薄片)或多⑽重薄片)空間。在 長期儲存中中難包f 一南浪度的藥物。再者，在 物級的磷脂w ^曰囊中之藥物可能漏出。用於脂囊中藥 射型的成本係相當高的。所以，較佳為使用於注 D—，M 2 口 =方(請參閱1 983年紐約一61 此技藝仍需要一成本效應之方法， 與生物有效性且降低藥物毒生。 改善樂物的有效性 發明之概述 本發明提供生物活性之親油組成， 口服。本發明之親油組成具有改盖、彳係固體組成使用於 性，如同非親油的藥物化合物。二^生物有效性與降低毒 價結合至一生物活性劑，且/或膠*明係將一脂質分子共 脂質組成中。較佳為，共價結合^叢化一生物活性劑於一 分子係一非兩性脂質，例如三酸〇曼生物活性繼之該脂質 地，該膠囊化之脂質組成較佳^ 油酯或脂肪酸。同樣 中，一生物活性劑係共價結合:^兩性。在一較佳實施例 、。至―C4〜C30脂肪酸，且被膠 1302459

五、發明說明（3) 囊化於至少一三酸苷油酯與至少一脂肪酸中。該生物活性 $與该脂質間之連接，係水解性地穩定且可被酵素切割。 a適的連接例子包括峻，硫酸，硫亞氨’醯胺，^胺， 胺’ 一硫化物以及尿素。 八 4生物活性劑可為，例如，胜棘酵素，蛋白質，酵素，小 刀子藥物，染劑，核苷，寡核苷酸，寡醣，多醣，疫苗， 細胞或一病毒。在一實施例中，該生物活性劑係為已知結 構相似化合物且具有生物活性的一類之生物活性核心結ϋ 構，例如盤尼西林，f 1 ox i n，ACE抑制劑，及其相似物。 該生物活性核心結構之決定可藉由結構相似之化合物，且 選擇該結構相似之化合物所分享之結構成分，該分享之結 構成分形成該生物活性核心結構。 該生物活性劑之膠囊化可被快速完成，其係藉由溶解一第 一脂質組成（例如C4-C30脂肪酸）於一溶劑中，混合該、、容解 之脂質與該生物活性劑，具有相當之混合強度，以形成一 乳化的混合物，當繼續混合該乳化的混合物時，添加一第 二脂質組成（例如一個或多個三酸誓油酯）至該乳化的混合 物，固體化該混合物，以及乾燥該混合物以形成一乾的固 體組成。 本發明之另一方面，係提供一生物活性親油化合物，其包 含一取代的或未取代的5—硝基噻唑衍生物，其係共價結合 至一脂質分子，例如其具有之結構係為： 、

1302459 五、發明說明（4)

L—LIP1D 其中L係一連結，例如氨基化合物連結，R係氫，烷基，取 代烷基，芳香基，取代芳香基，異芳香基，取代異芳香 ^，異環，或取代異環，以及LIPIMK4-C30脂肪酸之一 部份。、上述之5_硝基噻唑衍生物，係適用於治療一哺乳動 物之感染，例如寄生蟲，細菌，病毒或真菌之感染。 發明之詳細說明 本發明經由下列敘述可得更清楚之了解。然而本發明可應 用於不同的實施例中，且不受限於這些實施例。再者，所 揭露之實施例可由熟知此技藝之人士完成且表達出本發明 之專利範圍。 一、定義 此處所指之「官能基」、「活性區」、「活化 「反 應位置」、「化學反應基」以及「化學反應區」，係一分 :之不㈣，可定義的部份與單元。這些名詞與化學領域 中的名詞有些同義，此處所使用係指分子的—部份，苴且 f某些功能或活性且可與其他分子作用。t用於結合ς ;力 能基之名詞「活性I待句含那此官宜 甘 八| v + m + 迠基，其可快速與其他 刀子上之親油性或親核性官能基作用，相對於盆 基’其需要強的催化劑或高度無用的反應條件：月匕 =「非反應性的」或「遲純的」官能基）。例如 中可被了解的是名㈣「活性醋」係指可與 二

1302459 五、發明說明（5) 如胺類反應之自旨類。與7 戋1 , 舉例活性醋包含N-幾基丁-嬌获胗妒 及苯並三唑酯。血刑α 土 J 一佈亞fe酯 與一胺類反應數分鐘，麸 /於水媒7丨中 酉曰則需要強的催化劑， ^ ^ ^ 甲基酉曰或乙基 π ^ 才可與一親核性官能某；5旛。 化詞「連接」*「連接物」，係指：般由- 生;價鍵結連接之官能基或連接物。水解 水中非常穩定且不會在有用的… m Η ίή ^ Μ ^ ^長時間甚至疋無限期的生理環境下。 二生的不穩疋或可降解的連接，指的是該連接在水 液中包括例如血液中係可降解的。酵素性的不穩定一， 2解的或可㈣的連接，㈣是該連接可被 酵素分解。 ^亥名「烷基」指的是碳水化合物鏈，典型範圍係自1至 2 4碳原子的長度，且包含直鏈與支鏈。該碳水化合物鏈可 為飽和的或不飽和的。該名詞「取代的烷基」係指一烷基 以一個或多個非干擾的取代基取代，例如不限於C3-C6環 燒’例如環炳烷，環戊烷及其相似物；乙炔；氰基；烷氧 基’例如甲氧基，乙烷基及其相似物；低烷醇基，例如醋 酸基；氫氧基；羰基；胺基；低烷胺基與雙烷胺基，例如 曱胺基；酮；鹵素，例如氯或溴，苯基；取代苯基及其相 似物。 「燒氧基」係指一0-R官能基，其中R係烷基或取代烷 基’較佳為C1-C6烷基（例如曱氧基或乙氧基）。 「芳烴」係指一個或多個芳烴環，每一個具有5或6個主要

1302459 五、發明說明（6) 碳原子。多個芳烴環亦可混合於或不混合於一個 狀碳氫化何物，異芳烴或異環狀化合物。 ^ ^ ^衣 「取代的芳烴」係指一芳烴具有一個或多個非干 作為取代基。在苯基環上之取代基可為任何位 / ^

正，對或異）。 q亦P 「異芳烴」係一芳烴其包含一至四個氮，氧或栌 組合物，其中異芳烴係選擇性地取代在碳或氮ς i A ^ 烷基，-CF3，苯基或或硫基，或一碳原子於異芳烴^，與 一氧原子形成一羰基’或其中異芳烴係選擇性地與一苯^ 環結合。異芳烴亦可與一個或多個環狀碳氫化合物，異 環’务煙或異芳煙環。異芳烴包含但是非侷限於5原子異 芳烴其具有一個異原子（例如一硫二烯伍圜（thi〇phene)， 口比洛（pyrrole)，呋喃（furan)) ;5原子異芳烴其具有兩個 異原子於1，2或1，3的位置（例如°惡唾，π比嗤，味峻，嗜 唑，嘌呤（pur ine) ); 5原子異芳烴其具有三個異原子（例 如三唑，噻唑）；5原子異芳烴其具有三個異原子；六原子 異芳烴其具有一個異原子（例如嘧啶，呤啉，異峰啉，含 菲基之生物驗，5,6-環庚醇°比唆）；六原子異芳煙其具有 兩個異原子（例如遂增，增琳，酞。秦，敗味，癌唆，考。坐 琳）；六原子異芳烴其具有三個異原子（例如L 3, 5-三 噌）；以及六原子異芳烴其具有四個異原子。 「取代的異芳烴」係異芳烴其具有一個或多個补干擾性的 官能基作為取代基。 「異環」或「異環的」係指一個或多個環具5，6或7個原

第10頁 1302459 、發明說明（7) ^ /、有或不具有未飽和或芳香族的特性，以及至少一個 % =子其不是碳原子。較佳的異原子包含硫，氧與氮。多 ，環T被融合’如吟琳qUin〇iine或benzofuran。 /取代的異環」係一異環，其具有一個或多個側鏈，其係 幵> 成自非干擾性的取代基。 「非干擾性的取代基」所指之官能基其可穩定化合物。合 適的非干擾性取代基或基部包含但不侷限於鹵，C卜C10 烧基，C2-CIO鍵烯基，Cl-CIO烷氧基，C7-C12烷芳 基，C3-C10環烷基，C3-C10環鍵烯基，苯基，取代苯 基’曱苯醯，二甲苯基，雙苯基，C2-C12烷氧基烷基， C7-C12烷氧基芳基，C7-C12芳羥烷基，C6-C12羥芳基， Cl-C6烷基亞硫醯基，Π-CIO烷基硫醯， -（CH2)m - 0-(Cl - C10烧基），其中m係自1至8，芳烴，取代 芳烴，取代烷氧基，氟烷基，異環基部，取代異環基部， 硝基烷基，-N02，-CN，-NRC(0)-(C1-C10 烷基）， -C(0)-(C1-C10 烷基），C2-CIO thio 烷基， -C(0)〇-(n-C10 烷基），-OH，-S02，=S，-C00H，-NR 羧基，-C(0)-(C1-C10 烷基）-CF3，-C(0)-CF3， -C(0)NR2，-（C1-C10 烷基）-S-(C6-C12 芳基）， -C(0)-(C6-C12 芳基），-（CH2)m-0-(CH2)m-0-（C2 + C10 烷 基）其中每一個m 係自 1 至8，-C(0)NR，-C(S)NR，-S02NR， -NRC(0)NR，-NRC(S)NR，其鹽類，及其相似物。此處所用 之每一個R係Η，烷基或取代烷基，芳烴或取代芳烴，芳烷 基或烧芳基。

五、發明說明（8) 广名月「藥物」，「生物活性分 生物活性劑」用於此處係指 ^ ， 活性區」或 機體之任何生理的或生化性f質，其可影響生物有 菌，真菌，植物，動物以及人類偶=病毒，細 活性分子包含任何物質用於診斷，：：：二此，指生物 疾病於人類或其他動物，或辦進人：療调郎，治療或預防 健康。生物活性分=例：二t類或動物的生理或心理 畴4广分ΓΓ’染劑’核菩，寡核二寡 2劑的種類，包含但不侷限於4:=本=生物 真囷藥，抗病毒·，抗發炎藥物，二=:&素，抗 蒙，生長因子，固醇藥物，及其= 物，，該藥物或生物活性區係-小分子藥 「 /、/、有之分子置小於800道耳吞。 解：水ί 4 3 5 ί性係指分子於辛醇中較於水中更具有溶 皮：：ί ί辛醇中有相當大的溶解度。相對地，「親 7「脂質、二：於ΐ"交於辛醇中更具有溶解度。 擔辦」日SI :，脂肪與脂肪相似物質，其發生於活的有 f，if 溶於相對非極性有機溶劑(例如笨， 虱方丙酮，醚，及其相似物）且難溶於水性溶劑。 詞包，侷限於脂肪酸，脂肪酸醋，例如三二二名 長鏈知肪知與蠟，去氧膽酸（de〇xych〇lak)，呈浐 類，_脂質，磷脂質，神經鞠脂類（sphi d 2 間（烯化合物）例如固醇類。 ρΐα^、異成 1302459 發明說明（9) 月曰肪酸」係指脂肪族單碳酸。脂肪酸典型地 鏈具有4謂個碳原子且可為飽和的或不飽和的、。具要支為鍵直 ，月曰肪目文與氫氧脂肪酸亦包含於該名詞中。 「 欠^ ’由面曰」係指脂肪酸與苷油的酯類。 用以形容脂f，係指分子其不同時包含疏 水陡與親水性片段，其可於水溶液中形成雙膜。 二、親油性藥物組成 ^發明提供一種用於增加藥物分子之親油性 =不方式，、其可被分開使用或於-互補的方= 藥物分子Y1Γ方式係一脂質分子共價連接至一生物活性 ΐ。i it第二方式包含膠囊化該藥物於一脂質組成 脂f ^~々一 f旨質分子至一藥物分子或膠囊化一藥物於 ^ , 件之藥物組成變得更加親油性，其有利於該组 巴系統相對於僅通過血液血聚。對於受EMU口 •"以所苦的馬，該脂質鏈的硝基噻唑（硝基 t h i a ζ ο 1 e )可糾、去丄上―、, 淋巴輸送，達中神經系統中並殺死寄生蟲，其係由 .別、’因為大多數的藥物很難穿過血液腦屏障（bl d brain barrier) 〇 該淋巴路徑 成複雜的網 血管。這些 後變成淋巴 似主動脈。 起始為一淋 路。淋巴是 微血管與其 管。胸導管 血液和淋巴 巴微血管， 相當重要的 他微血管會 係主要的淋 係為細胞外 末端相當微 組織流其進 合，形成淋 巴管且其結 的流體，其 小的微管形 入一淋巴微 巴血管，而 構與功能類 傳送至與收

第13頁 1302459 五、發明說明（ίο) 集自組織與器官。在一次脂肪進餐之後，所吸收的脂肪至 少二分之一^皮回收至5亥胸導管。該淋巴加上組織液包含細 胞外液體的三分之二。此幾乎增加淋巴體積為血液體積的 三倍大。細菌與病毒進入組織液，且被以外來物質透過淋 巴系統傳送至淋巴結。外來物質無法輕易進入血液微血 管，然而該微淋巴管可輕易地接收外來物質。 藥物分子透過淋巴系統的傳送可提供許多重要的功效。例 如’許多藥物的急毒性作用可被排除或大量減少。該脂質 /藥物結合或混合物被認為更可被身體接受，係因為其更 似於食物。，要的是，該脂質分子的存在可裝飾該藥物， 且促使身體簡單地處理此化合物如同其他於食物中所吸收 之脂質分子。因此，該親油性接合物或混合物被處理的方 式，大不同於許多習用藥物被處理的方式。許多藥物會立 視物質，且會被病人的生化解毒機制所排斥。 樂刀子的親油化可增加藥物的吸收與生物有效 過該淋巴組織液傳送至ί = ^亥親油性藥物被認為係透 藥物受到肝臟酵匕的：：，而非僅通過肝臟。許多 第-㈣U ^ 例如已知的細胞色素Ρ450。 ;，添"油官t生= 形 苷肽，而造成藥骗从T^ ®夂鹽或谷胱 組成，例如藥物/脂質接二。滴然而，本發明之該親油藥物 巴系統，且可保持ΛΛ 係被吸收且傳送於該淋 ，、持車又長的活化態且具有較慢的釋 1302459 五、發明說明（11) 一個似油藥物，其進入該淋巴中，相較於 :長時間的循,衰’部份係因為相…液體積：=: 大。該親油藥物亦可被沉澱至該脂肪組織，直 較 存且以慢速度釋放。 ’、一可被儲 f，藥產業中，一般藥物的親油性必須被調節 太兩或太低）。在吸收速率與分割係數（1)“以衍〇11 p不要 coefficient)之間有球形關係，稱為1〇gp，於 值時（1〇gP<-2)(亦即極性化合物），該 ^益 法牙過脂質腸膜。相反地，在高的p值（1〇gp> 子…、

質可溶性，擴散過腸膜的黏膜層成為整個 私中的速率決定步驟。習知觀點係為一藥物必 值約為< 1〇gP <2(請見1 975年】.Pharmac〇i員h有之P

The r，195冊中67 - 92頁，Houston等人所著之文章）。因 =μ 一月曰貝尾巴至-藥物分子，代表與習用藥 物》又=方式大不相同。此技術之不凡本質特別明顯於當 oxazo 1 i dnone的擁擠領域啟發此處所指之藥物分脂 化’且如範例1 3所示。 、 此外’連接-月旨質「尾巴」i該藥物分子或膠囊化一藥物 ί:;質t可提供該分子更美味於病患。某些口服藥物脂 無用係受到困難服用足夠劑量藥物的困擾，其係由於該藥 物之不被係喜愛之味道。這特別係成為動物用藥的困難。 耩由合併一脂質成分至該藥物組成中，病 口味較好且口服用要可被改善。 接又 本發明之一較佳目的，兩種方式係用作為互補之使用。因

第15頁 1302459

五、發明說明（12) 此’在此一目的中，一藥物分子係共價連接至一脂質分 子’而後膠囊化於一脂質組成中。藥物脂質化之所有上述 優點’可藉由互補使用此兩種膠囊化方式而得以更加加 強。再者，在膠囊化之前連接一脂質分子至一藥物分子， 可改善該藥物分子之化學相容性與該膠囊化之脂質成分。 A· —脂質「尾巴」之共價連接。 如上所述，在一目的，本發明提供一脂質與一生物活性劑 之連接。此脂質與藥物分子係透過一聯結共價連接，如下 列所示之一般結構：

D-L-L I P I D 其中D係一藥物分子，l係一聯結區，以及L丨p丨D係一脂質 的^餘。可被了解的是該名詞「殘餘」係用以指一分子之 一部分’其係於與其他分子化學作用後所保留。當一脂肪 酸係被用作為該脂質成分，該脂質成分之殘餘係包含一長 鍵烧基’例如C 4 - C 3 0烧基官能基。較佳係為該藥物/脂質 連接物形成一同質藥物產品，其係被定義且具的 實體。

該鈿質分子較佳係為一非兩親性的脂質，其於室溫（2 5 π 1係為固體，例如三酸替油指或C4_C3〇脂肪酸。當使用 脂肪酸時，該脂肪酸較佳係為C7-C30脂肪酸，更佳係為 CIO-C30脂肪酸。因此，較佳為使用脂肪酸長、、' 少7個碳原子，更佳為具有至少1〇碳原子。 長至 ，一 ：^例中，D係-已知種類之活性化合物具生物活^ 茨一樂物活性核心結構，因而形成一新藥物實體，其係

第16頁 1302459 五、發明說明（13) 效的，較低毒性的且更美味的。首先藉由確認一生物活性 核心結構，該脂質化的藥物實艨將更具有效性，然而亦盡 可能的簡單構造以易於合成。该生物活性核心結構之確 認，可藉由分析相關已知形式之活性化合物結構，且選擇 所有該活性化合物衍生物共有之結構特徵。在下列三個表 中，介紹三類具生物活性核心結耩之藥物：f 1 ox in，血管 緊縮素轉換酵素抑制劑（血管緊縮素converting enzyme(ACE)inhibitor)，以及盤尼西林。Floxin 的生物 活性核心結構係氟呤諾酮結構。其係最小的核心藥物結 構，其使得f 1 ο X i η具有抗生素活性（請見表一）。同樣地’ 對於ACE抑制劑而言，活性核心結構係該雙胜棘酵素丙胺 酸-脯胺酸結構（請見表二）。合成一 ACE抑制劑脂質化結合 物之範例係如範例1 4中所述。對於盤尼西林而言，内醯胺 與硫偶氮烷環形成該生物活性核心結構（請見表三）。 表一、F 1 ox i ns (核心結構為氟♦諸酮）

Ciprofloxicin ηΓί Υ -----------一 Q Fleroxacin --------*------------ '0AC ---------- ο

第17貢 1302459 五、發明說明（14)

表二、A C E抑制劑 (核心結構為雙胜棘酵素丙胺酸-脯胺酸）

第18頁 1302459

五、發明說明（15) 表三、盤尼西林 (核心結構為β一内醯 ^硫偶氮烷環）

於此技藝中可被了解的是— 質，係藉由於該脂質分子上 子之反應官能基進行反應。 月桂醯胺-5-硝基thiazole

〜終端反應官能基與二越 例如，關於合成該 二物 其被更佳詳述如樂物，： 該月才i

第19頁 1302459 五、發明說明（16) 酸（lauric acid)之羰基與2 -氨基-5 -硝基thiazole的_ 基進行縮合反應，以形成該藥物分子與該脂質分子間的_ 醯胺聯結。 若為需要，該藥物分子或該脂質成分或其二者可被化學％ 飾，以形成接合所需要之反應官能基。例如，月桂酸或& 他脂肪酸可被「活化」，以形成一可反應的物質，其可快 速與一藥物分子之一胺基反應，以形成一醯胺聯結物。此 種活化的衍生物之範例，係包含脂肪酸-醯基-鹵化物與月旨 肪酸之活性酯，例如N _羥基丁二醯胺基酯。脂質亦可以碳 化咪唑或碳化亞胺被活化。相反地，該藥物分子之一取代 基，例如一羰基，可被活化且與一長鏈烷基胺類反應，例 如C4-C30烷基胺類。在另一實施例中，一雙功能聯結物， 例如溴丙酮溴化物（131：0111030 61：〇13]：011^(16)，可被用於將— 院基胺類溴丙酮化，其而後與一藥物分子之胺基反應，以 形一連接物，其具有該一般結構 [1?11)-麗-(：112-(：0-關-01^1^。在此三個範例中，產生一胜 月東酵素聯結物，其可藉由一非專一性的内切胜棘酵素而進 行酵素切割。 有許多反應官能基的例子，其可行成於一脂質分子或藥物 分子上，以與其他分子反應。舉例的官能基包含氫氧基， 活性酯（例如N-hydroxy succ i n i mi dy 1，1 -苯並三唾，p-硝 基酚（p-nitrophenyl)，或咪唑基酯（imidazolyl ester)，活性碳酸鹽（例如 N-hydroxysyccinimidyl，；1-苯 並三唾，p-硝基盼（p-nitrophenyl)，或咪嗤基碳酸鹽），

第20頁 1302459 五、發明說明（17) 縮酸（acetal) ’ 駿，醛類水合物（aldehyde hydrate)，烷 基或务煙硫酸鹽’鹵化物，雙硫衍生物，例如〇 _此淀基 二硫基，鍵烯基’丙烯酸鹽（acrylate)，甲基丙烯酸鹽 (methacrylate) ’丙烯醯胺（acrylamide)，活性石風石風 (active sulfone)，胺類，醯肼，硫醇，碳酸，異氰酸 鹽’異硫氰酸鹽’馬來醯亞胺，乙烯基石風，二硫π比啶，乙 烯基毗啶，碘乙酰胺，環氧化物，乙二醛，乙酮，甲磺醯 鹽’甲苯確酸鹽或新戊基2, 2, 2 —三氟基磺化乙烷。

該聯結物，L係一種聯結，其源自於該脂質上一官能基與 該藥物分子上一官能基反應所生成，或源自反應烷基胺類 與一藥物为子之雙功能聯結物。舉例合適的聯結包含碳酸 醋，磷酯，硫酯，醚，硫醚，硫亞胺（亞胺），醯胺 (amide)，硫醯胺，硫醯胺，雙硫化物以及尿素 (carbamide)。該聯結區亦應該為可被酵素切割，例如可 被酯脾（esterase)，胜棘酵素（peptidase)，水解_ (hydrolase)及其相似物。在此方式中，該原始藥物化合 物將被釋放自該脂質尾巴，係藉由與一個或多個酵素作用 而成。醯胺與硫亞胺聯結特別較佳係為酵素可切割，水解 性穩定之聯結。在一些實施例中，可水解降解之聯結，例 如某些酯類，亦可被使用。 B·脂質成分中藥物的膠囊化 本發明之另一目的，藥物分子或藥物分子/脂質接合物之 膠囊化，係藉由一個或多個脂質成分之惰性基質以^進該

1302459 五、發明說明（18) 藥物分子之親油化，且 於-保護的疏水性環境中，：：傳送。藉由膠囊化-藥物 囊化的脂質較佳係為非兩親性二增定性。該膠 組成實質上非磷酯，醣 ：係扣膠囊化所用之脂質 臈之其他兩親性脂質。太務t，、他可於水溶液中形成雙層 包含-單二t 本發明之該膠囊化藥物產物較佳传 產體如： 例中，該膠囊化脂ΐ:成=:ί或實施 = T:;=::4_C3°脂肪酸或其混合物。該名詞體膠 因此該藥物之該大部分不再物理性暴露:周: (質:接合物被膠囊化時，該膠囊化脂質可為類 朦L的（亦即用以形成該接合物之脂質，其鏈長同於用以 ^囊化之脂晰質），同質性的（亦即相似的脂質但是鏈長不 :’或異質性的（亦即該接合之脂質與膠囊化脂質大不相 口，-個是不飽和的另一個是飽和的，或者一個是磷酯而 一個是脂肪酸）。例如若C1 2脂肪酸係連接至一生物活性 劑，而後一類質性的膠囊化脂質組成可包含，例如π2脂 肪酸與/或包含C12烷基鏈的三酸苷油酯。一同質性的膠囊 化月曰貝組成可包含脂質成分其具有烧基鏈長，例如脂質尾 巴約5個碳原子長，連接至該生物活性劑，較佳係為約三 個礙原子内。較佳係為連接該藥物至一脂質，其為化學相 容性的且構造似於該膠囊化的脂質成分，因此該脂質尾巴

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五、發明說明（19) 與該膠囊化脂質係類質性的或同質性的脂質組成。

本發明之膠囊化方法係混合該脂質成分與該藥物分子，且 為簡單與低成本。此方法之原理係基於脂肪代謝之基礎生 化知識。在高等哺乳動物中，包含人類，脂肪的代謝傳送 與沉積係一已知之生化轉變。中性脂肪或三酸答油醋係由 二個長脂肪酸鏈酯化至苷油之三氫氧基之醇類。消化的月匕 肪藉由膽鹽被乳化於小腸中，而變成膠團（micelle)或油9 滴，其可藉由淋巴微管而自小腸腔被吸收。相對大吸收的 膠團已知為乳糜微粒（chylomicrones)，由小腸透過淋巴 至血液。藉由膠囊化該藥物分子於一脂質組成中，本發曰月 模擬該脂肪膠團，以自小腸環境增進該藥物吸收。 $ 在一較佳實施例中，藥物結晶體以脂肪酸乳化，而後膠囊 化於三酸苷油酯中。一較佳的三酸苷油酯組成係為 SterotexR NF，其係一完全氫化的棉花子油，可取自於 WI， Janesville 的Albitec 公司。SterotexR NF 包含 C1 4-C22脂肪酸之苷油酯。在製藥製程中，其為熟知之職 形劑，通常被用在藥片的成粒過程以作為潤滑油。然而， 在此應用中，S t e r 〇 t e X係被用作為腸藥物傳送配方夕—丄

雖然單獨以SterotecR膠囊化已被證實於透過淋巴系統的 藥物傳送係有效的（請見範例一至三），改善的藥物傳送可 見於當一脂肪酸，例如棕櫚酸（棕櫚酸），被併入該過程 中。範例四提供一般的過程以膠囊化一藥物於一三酸替、、由 酯/脂肪酸複合物中。在一般術語中，該過程包含高修剪

1302459 五、發明說明（20) 混合該藥物或藥物/脂質接合物與一個或多個脂肪 如C 4 - C 3 0脂肪酸，於一溶劑中以形成s 例 乳化至高修剪混合時，一…酸 物，例如SterotexR，係被添加至該乳化中且以古曰^口 合而混*。而後冷卻該混合物，以形成—固體粗1γ到混 燥。重要的是將藥物與該脂質成分混人 、成且乾 強度形成乳化。該高修剪混合之完成：藉多c 合裝置或藉由超音波。此技藝中已知ί 例’係包含MicrofluidizerR處理器，攪拌機，表立辄 m機丄均質機，以及其他混合裝置。該高修剪混合曰所皮振 之混合能量造成乳化形成，因而該膠囊化 = 化的藥物或藥物/脂質接合物接合於一整齊的、，7二膠囊 構，如範例七中該冷凍EM照片中所証實。 曰 … 有許多理由要合併脂肪酸至該藥物/脂質複合物。

脂肪，滴中脂肪酸控制脂肪代謝係藉由騰臟的脂先， 脂肪代：的一般過程中，三酸*油醋被降解為 J +脂肪酸’以及二酸替油酯被降解為單酸替油酯+ =:: 脂肪酸，以及單酸苷油酯被降解為脂肪酸盥苷、、由 =的 的脂肪酸存在時，該脂肪對於三酸誓油醋的活性^自， 脂肪酸保持高度活性’該晶體藥物會被去包覆， 換三酸f油醋為答油與脂肪酸而成的。脂肪酸作為 物抑制脂肪，因而避免移除該膠囊化的藥物結晶之二， 覆。其次，有些極性藥物报難以脂肪乳化，然而脂ς ^ 理一碳酸根區可與該藥物有更好作用。最後，在 $

第24頁

、發明說明（21) 結合藥物的8 5 %顯示S t e r 〇 t e c R可被加以改進。 用於乳化一已知藥物的溶劑與脂肪酸，可被修飾以與該藥 物之化學特性相容。例如，於範例四中乙醇或水可用以取 代甲醇。範例四中所舉例之棕櫚酸（棕櫚酸）係一具有i 6 個碳原子鍵的脂肪酸。可用較長或較短鏈的脂肪酸取代， 甚至發現可用deoxycholic酸取代。較佳為，該脂肪酸係 C4 C30脂肪酸。在某些實施例中，較佳為使用— 脂肪 酸，更佳為使用CIO-C30脂肪酸。因此，較佳為所使用之 脂肪酸具有一鏈長至少為7個碳原子，更加為至少且有1〇 個碳原子。 八 較佳為，最後組成中該膠囊化脂質成分與該藥物的重量比 例，係約4 : 1至〇. 25 : 1，較佳為約2 : 1至〇. 5 :丨，更佳 為1 : 1。若三酸餐油酯與脂肪酸之結合係被用作為該膠囊 化脂質，則三酸苷油酯與脂肪酸之比例，較佳係為4 :工至 1約1丨：4，更佳為3 :1至約i :3，甚佳為2 :1至約丨’、、、：2或約 f體内發生降解之前，較佳為該結合藥物不高於50重量百 =，更佳係為不超糊重量百分比，甚佳係為不超過 ，ΐ: : m生暴露於該組成中。所謂物理性暴露係指 二樂物刀子之一部份暴露於該膠囊化脂質組成之外部環 境。 本發明之該膠囊化配方最大優點係其為口服配方。事每 上’所有的/腸藥物具有不好的味道且通常是苦的。灵 SterotexR係無氣味且無味道的，因此可被添加至食物中 1302459

且可被接受者接受。 ϋ明之膠囊化過程係簡單的且經濟的與棕櫚 ^ ^低於$〇· 〇2/g)。該膠囊化的藥物複合物係穩定的，且 ^生物有效性。對於人類與動物而言是美味的，且可促 、過消化道的吸收。其防範急促的藥物釋放且避免許多 >曰在的細胞毒性藥物之毒性。 C·生物活性劑 該生物 於淋巴 間，減 此處所 得利於 素，抗 道，抗 多醣， 端’抗 該藥物 化合物 之鹽類 之鹽類 受之鹽 應而得 含但不 硝酸， 活性區 傳送及 少毒性 指之脂 本發明 癌，抗 兩血壓 蛋白質 過敏及 可被用 之鹽類 可便於 ，且不 類之製 ，使用 偈限於 碟酸， 或藥物 上述之 等。事 質膠囊 =頭孢 憂鬱， ，利尿 ，鎮定 其相似 於藥物 應為藥 使用於 被本發 備，係 文獻中 自下列 馬來酸 1為任何生物 脂質化之優點 貝上，任何生 化/連接方法， 菌素，胜腺酵 抗組織胺，抗 割’胺基酸， 劑，麻醉，抗 物。 可接受之鹽類 理及製藥可接 製備自由活性 明之範圍所排 藉由將該藥物 所述之標準方 酸類所製備者 ，醋酸，水揚 活性化合物，其可得利 ，例如可增加循環時 物活性化合物可得利於 *特別地，下列藥物可 素’ ACE抑制劑’抗生 精神病，心血管，消化 核苷酸，核苷，疫苗， 關節炎，抗病毒，抗氣 。若被使用，則該藥物 受性，但非製藥可接受 化合物或其製藥可接受 除。此藥理與製藥可接 與一有機酸或無機酸反 法。有用之鹽類範例包 :鹽酸，硼酸，硫酸， 酸，P-曱苯磺酸，酒石

第26頁 1302459 五、發明說明（23) 酸，檸檬酸，甲磺酸，甲酸，琥珀酸，苯-2-磺酸，以 及苯磺酸與其相似物。同樣地，製藥可接收的鹽類可被 製備為驗金屬或驗土鹽類’例如^基的納，钟，或舞鹽。 三、舉例的親油藥物組成 A.親油硝基嗜唑（ni trothiazole)組成 馬類原生髓腦炎（Epuine protozoal myeioencephalitis， EPM)之形成係由於細胞内原生生物肌囊蟲層感染中樞神’ 經。在臨床上受感染的馬，該原生生物感染神經且引起發 炎反應。神經疾病的臨床現象常造成不對稱協調（運動失$ 調）弱點，且/或肌肉萎縮。感染日益惡化且未治療的動物 終究衰退且死亡。該國家之某些區域包含東南部中超過 =二ί露於s. neur〇na。預議受暴露的馬具有 ：Ntz) ： ^:N:5- ^ ^-2- 生物都非當右μ 、製藥組成對於許多寄生 此藥物之缺點：在i 2:乍=::將其殺死而非停滯。 美味且造成$ & & 自由式其具有相對之毒性。其也不 人類，：以=慾、’㈣且受電或翼便失禁。對於 該藥物也有二二==子腹/寫時，已知ντζ造成腸胃不適。 唑。其構想與；：：ϊ的問題，其只要係導因於硝基噻 害。水楊酸造成内由嚴接合之本質更惡化腸胃不適與傷 與該内皮細胞之^炫細胞傷害，且使得細胞内的接合空間 之孔變寬（請參閱1 976年，腸（(；111)第17冊， 1302459 五、發明說明（24) 3 5 4至3 5 9頁）。該藥物，如阿斯匹靈，係不穩定的，溶液 潮濕降解自酯類變成去乙醯化的形式。在穩定度研究中， 大量的藥物日益增加降解。此外，硫也會'氧化為石風而後變 為硫氧化物，可由紫外光掃描中發現最大的紫外光值為 350奈米。其為紅光偏移至354奈米（颯）而後為358奈米（硫 氧化物）。當該藥物被加熱至高於5 〇 I時，該氧化反應是 最明顯的。大量的藥物保存期限為兩年。有許多專利討論 5-硝基哮嗤衍生物，包含美國專利編號3, 95〇, 35ι ; m 4,315,018 ;5,856,348 ;5,859,03 8 ;5,886,0 1 3 ;5,935, 591 ;5,965,590 ;5,968,96 1 ;6,〇2〇,353 以及 6，11 7，8 9 4，其皆被併入本篇作為參考資料。 本發明提供一安全且有效的藥物組成，其包含硝基噻唑， 用於治療被微生物侵犯的人類與動物。其克服許多安全性 的問題，且特別係硝基噻唑的穩定性問題。該新藥包含一 脂質分子，例如-脂肪酸，共價連接至一取代的或非取代 的5硝基嘻唾化合物或其衍生物，包含苯酿胺一卜破基 嗜唾化合物，其中苯醯胺基的芳烴環可被取代或非取代 ★二®ί t 。揭露於專利中任何5—碗基嗔"坐化合物f 被使用於本發明中。兮日匕@八^ 援μ *接由^ 質分子可被連接至該分子中任何 衣狀、、、口構中之任何分子。（你丨‘ 枸护、古拉々妥 c例如該嗜唾環或苯醯胺基的芳 ^ ^ ^ Α 聯、、ό，例如一醯胺聯結。 一 5-硝基嗔唾化合物地一較

所干· 知佳之直接合係如下列分子式I

1302459 五、發明說明（25)

其中L係一聯結，例如-NH-C(O)-，R係氫，烷基，取代烷 基，芳烴，取代芳烴，異芳烴，取代異芳烴，異環，或取 代異環，以及UPID係一脂質的殘基，例如C4-C30脂肪 酸。分子式I化合物的一特定實施例’ 2 -月桂酿胺-5 -石肖 基？唑，其亦如同此篇所指之BA 3540。BA 3540係化學合 成自縮合月桂酸的羰基與2-胺基-5-硝基嘍唑的胺基（請見 範例8 )。如熟知此技藝之人士所知，可用以形成該醯胺聯 結之活化劑包含許多活化中間物的月桂-醯-函化物，月桂 活化酯，例如月桂- η -經基丁二烯亞胺酯，且亦藉由與碳 化咪唑及碳化亞胺之活化。 該新藥物2-月桂醯胺-5-硝基噻唑之治療效果係非凡的。 該新藥設計必須要能夠透過小腸至中樞神經系統，且其具 有ΝΤΖ的毒殺活性以消滅寄生生物。該新藥之作用機制目 前仍屬未知。然而，鏈黴菌（Streptomycetes)所產生之天 然多噻唑環胜棘酵素抗生素，例如硫鏈絲菌肽與 micorococcin二種藥名用於此一疾病上。該抗生素之作用

第29頁 1302459 五、發明說明（26) 機制，係由於與智唑環之結人，1 GTPase活性。此結合係於直二卩制轉澤與核醣體的 單元…一揭限的與=的=質而體)；器所見之大 之區域。以確基臂唾治療隱胞子蟲 細胞對應 toxfa的效果亦可係由也= 之似質體的胞器。雖然未與任何理给生生物中所含有 ^ ^ M2- ^ ^-5- ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ 中。本案所揭露的發現以相當具有意義方式之 ΝΤΖ已被建議使用於多種寄 么瘵。哕靳鱸 生物真函’細菌與病毒之 ^7且古^ 月桂醯胺―5—硝基哮唾於ΕΡΜ之治療上盘 NJZ”有相同之效果。目此，其理由為廢相、 :類j會寄生生物，“，細菌與病毒具有效;於相二 也，本卷明的硝基噻唑/脂質接合物係有用的治療寄生生 物，細菌，病毒或真菌感染，包含線蟲，絛蟲，吸蟲，以 及格蘭氏陽性或格蘭氏陰性細菌的感染，藉由服用一有效 治療劑量的該接合物至該受感染的哺乳動物（請見範例 9-1 2)。例如，發明的硝基噻唑/脂質接合物以證明對於原 生動物寄生生物係有效的，例如造成ΕΡΜ與球蟲病的寄生 生物亦如對於病毒。 鶼 氮-（5 -硝基—2-噻唑基）柳基乙醯胺的代謝已知與 tyazoxinide —種化合物的去乙醯化。本發明之揭露中， 該活化的代謝物不能僅由於以&2〇)^11丨(16。該兩活性藥物 之共通性係該母化合物2 -胺基-5 -硝基喽唑。在體内，一 非專一性的胜棘酵素内切割可將兩分子切成2-胺基-5-硝

第30頁 1302459 五、發明說明（27) --- 基噻唑。此可提供一線索以確認兩藥物之主要代謝物。 本發明之另一目的係提供硝基噻唑，例如上述之硝基噻唑 衍生物（接合至一脂質或一自由形式），其膠囊化係藉由一 脂質組成，例如三酸脊油酯，脂肪酸或其混合物，^使用 上述之方法（請見範例3與6)。如上所述與所附之範例，膠 囊化的NTZ或其他硝基噻唑衍生物於一脂質組成中，可改/ 善效果與生物有效性且減少毒性。 B ·親油性伊維菌素I v e r m e c ^丨η組成

如範例5與6所示，i vermect in被膠囊化於一脂質組成中， 病患對其具有耐受性且該藥物具有效性。此處所指之膠囊 化方法可與阿巴汀，avermect in，moxidect in用以治療氣 囊滿瞒蟲及mi lbemycin倍脈心化合物合併使用。 C ·親油性噁唑烷_組成

如範例1 3中所示，本發明之該脂質連接與/或膠囊化方法 可與2 -嗔峻烧酮合併使用。如所附之範例所示，2 _噁唑烷 闕衍生物可被共價連接至一脂質分子，例如C4-C30脂肪 酉夂’以形成一親油衍生物。〇xaz〇 H d i zone可用作為抗細 菌藥劑。如美國專利編號3, 931，213 ; 4, 1 86, 1 29 ; 5, 643, 907 ；5,565,571 ； 5,668,286 ； 5,688,792 ； 5,700,799 ； 5，719, 1546, 166，056 ; 6, 288, 238 以及6, 337, 329 亦如EP 0316594 A1中所述之許多2一噁唑烷酮衍生物，其可併入此 處作為參考。任何2-噁唑烷酮化合物可用一脂質組成膠囊

第31頁 1302459 五、發明說明（28) 化’且/或共價連接至一脂質分子，可直接或透過一聯結 區而接合。例如，上述參考資料所指之任何2-嗔峻烷酮可 被使用於本發明中。較佳為’該2 -嚼唾燒鋼衍生物之環結 構有一個或多個原子被取代，較佳的環取代係包含氫，芳 烴，取代芳烴，烷基，取代烷基，包含烷氧基，函素， CF3，醯基，胺基，取代胺基以&RS(〇)n—，其中n係卜2且 R係烷基或取代烷基。一脂質分子可被連接至噁唑烷_ 的任何原子或連接至該噁唑烷酮環的任何芳烴環的原子义 在一較佳實施例中，該脂質/噁唑烷酮接合且有下列之° 子式11 : ^ <分

其中L係-聯結’例如一亞胺聯結’每—R係一獨 烧基，取代烧基，芳庐，显芸、防 &、 的乳， 讲里广 取代異芳烴，異環咬取 =異壤，以及LIPID係一月旨質之部份，例如C4_C3〇脂肪次取 D·親油性硝基咪唑組成 如範例14中所示，本發明亦可用於型成親油性的卜確基味

第32頁 1302459 五、發明說明（29) 唑組成。例如，日匕哲 聯 議脂質 月曰枭分子可被共價連接，亩旅 結，至5 -硝基唓^ ,仏， 1接或透過 巧丞承唑裱的任一原子。在一杏 ^ /藥物接合物係如下张—ν ^ ^ 見把例中， 1示如下所不之分子式III·· o2n

LIPID

R 其中L係一聯結 代燒基’芳煙， 以及UP id係一 取 ’例如亞胺，每一 R係獨立的氫，烷基， 異芳煙，取代異芳烴，異環或取代異環 月曰質之部份，例如C 4 - C 3 0脂肪酸。 U藥組成包含該親油藥物組成 人二較、汰 目的係提供製藥配方或組成，可用於獸醫或 人」=二使用’係包含一如上所述之一親油藥物組成，包 4製：δ共價連接至且/或膠囊化於-脂質中。 2 =方可包含一個或多個製藥可接受之載體，以及選 π $ 1 ^ =其他治療成分，穩定物，或其相似物。該載體 無衣藥可接受的與該配方之其他成分相容，且對於接 二/H具有過分毒性。本發明之組成亦可包含聚合的賦形 "、物或載體，例如聚乙烯毗咯，衍生的纖維素，例

1302459 五、發明說明（30) 如氫氧基甲基纖維素，氫氧基乙基纖維素，以及氫氧基丙 基纖維素’Ficolls(聚合醣），氫氧基甲基澱粉（HES)，葡 聚醣（例如環糊精，例如2 -羧基丙酯—召—環糊精以及磺酸 基二丁醚-/3-環糊精），聚乙烯乙二醇，以及果膠。該組 成更可包含稀釋劑，緩衝劑，結合劑，崩解劑，厚實劑， 潤滑劑，防腐劑（包含抗氧化劑），調味劑，味覺屏障劑， 無機鹽（例如氯化鈉）’抗菌劑（例如烷基二甲基苄基氣化 銨），甜味劑，抗穩定劑，介面活性劑（例如p〇lys〇rbate 例如「TWEEN 20」與「TWEEN 80」以及聚氧烷基烯例如得 自BASF之F 6 8與F 88)，山梨酸酯，脂質（例如磷脂例如卵 科自曰或其他碟脂醯膽驗’攝脂醯乙醇胺，脂肪酸與脂肪 酯，類固醇（例如膽固醇），以及箝合劑（例如EDTA，辞， 及其他合適之陽離子）。其他製藥賦形劑與/或其他添加物 適合用於該組成中’根據本發明係被列於丨995年％ i丨丨 & Williams所著，第19版「Remingt〇n:藥學的科學與實 務」，以及1 998年醫療經濟Montvale，NJ所著，第52版 :醫師的桌上參考」，以及2000年製藥刊物Ed.，AH. K i bbe所著，第3版「製藥賦形劑的手冊」。 本發明之該親油藥物組成可被配置於該組成中，其包含適 於口服，口頰，直腸，局部，鼻部，眼部或非口服（包含 ，膜内，靜脈内，皮下，或肌肉内注射）的服用。該親油 藥物組成亦可被使用於適合吸入的配方。口服對於本發明 你身主 Sll 右访，P 你i* ;rh、甘 η» 一 —

1302459 五 發明說明（31) 且了藉由藥物技藝中任何 包含將藥物組成帶入盘恭二1之方法製備。所有方法 加成分。一般^入體結合，，包含-個或多個附 筚物组& t 製樂組成之製備係藉由將本發明t 體結合’已形成-溶液或-懸= 選分結合，其適合形成-固體， 之傳送來々,^ Q 右馬此，該產物之形狀所欲 ==於靜脈注射時’粒子的直徑大小係約自1奈。米’至約通 該配方中該生物活性劑或藥物量之 特定藥物，其分子量，•其他因數=於2之 組成中生物活性劑之量，伟所•要::::士所決定。該 =Γ:ΐ要…，以達成至少-與該藥物相關： :1底认只務上，其變化廣泛端視該特定藥物，直活 :: 嚴重程度、病患數目’配方的穩定度，及其相 =。組成一般包含自約1%重量至約80%重量的藥物，/血 至:重量藥物，以及更典型地自約25%至顧 相：：审i亦端視於包含在該組成中賦形劑/添加物的 相對虿。更特別地，該組成典型地包含至少下 之藥物：〇. 5%，1%，2%，3%，4%，5%，6%，n，8%，$/， ，14% ’ 16%，18%，20%，25%，繼，㈣，權， 45 %或更大之重量。

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五、使用該親油藥物組成之方法 如上所述，本發明 物分子之藥效，生 果，本發明之該組 將一藥物包覆其中 酸苷油S旨或脂肪酸 動物。 之該勤油藥物組成 物有效性與吸收， 成亦可被用作藥物 ’或連接一藥物至 ，且服用一具療效 可被用以改善許多藥 且減少其毒性。結 傳送媒介，其係藉由 脂質成分，例如三 劑量的組成至一哺乳 狀況， 組成可 子於哺 一有療 成。任 變化， 建議， 在某 為7 2或 ，甚至

= ϊ組成可被用作藥物傳送媒介於任何 用連接的覆的·物分子。所以，本發明之藥物 ΐ Ϊ:於ί ί配方，用以治療任何狀況，用藥物分 乳動物，包含人類。治療方法白人执# 只/口縻万凌包含投藥至哺乳動物 篁之組成或配方，丨包含上述之該親油藥物組 何特別配方之療效劑量可因不同藥物，不同病患而 且端視因數例如病患的狀況與傳送路徑。如一般之 一劑量自0·5至約I00mg/kg體重可具有療效。例如， 些實施例中，該劑量約為1〇，約為2〇，約為5〇，約 約為100mg/kg。當與其他製藥活性劑之結合使用時 較少的藥物組成可具療效。

該藥物組成可被一天一次服用或多次服用。治療期間可為 一，一次，自二至三週，且可持續數個月甚至數年。每日 劑篁可於一單獨劑量服用或數個較小劑量單位，或藉由某 些間隔多重服用細分劑量。傳送的可能路徑包含口頰，皮 下’穿皮’肌肉下，靜脈内，口服或吸入。

第36頁 1302459 五、發明說明（33) 六、實驗 下列範例可說明本發明’但並不限制本案之發明 範例1 三酸替油酯中藥物的膠囊化 一般過程其可用於直接膠囊化藥物晶體至三酸菩油酯中 或其混合物’例如SterotexR，係如美國專利編號曰 6，153，119中所述，其併入此處作為參考导樹 此一過程之範例，10克SterotexR被稱重於1〇〇毫升螺 瓶，其中3 0毫升異辛烷或己烷被加入且加熱緩慢溶解。 溶解之SterotexR被保持於5(TC。一等重之藥物，添加°1〇“ 克至該溶解之SterotexR，且該混合物被劇烈搖動5至^分 鐘。所得之混合物於冰浴中快速冷卻，同時搖動且/或旋刀 轉。該冷卻混合物將變成熔化且緩慢固化。轉換至一容疋 器，且藉由整晚拉真空而乾燥，以移除所有易揮發之$ ^ °該產量係20克的l:lSterotexR/藥物複合物，其一般 係白色產物，其可被碎成細粉末。事實上所有的製藥藥物 可被乳化且被包覆於此方式中。 範例2 二酸苷油酯中阿斯匹靈的膠囊化 阿斯匹靈具有一活性酯功能，且容許鹼的降解。在此範例 中阿斯匹靈被膠囊化於SterotexR中’所使用之方法係

1302459 五、發明說明（34) 如範例1中所述。在阿斯匹靈中，去乙醯化之物係水揚 酸，其具有之吸光值係於296奈米。比較SterotexR/阿斯 匹靈與阿斯匹靈的藥物穩定度，係形成於0. 1 Μ NaCO3(10pH)，且該降解之動力學係藉由UV分光光度計監 測。在第一圖中，水揚酸的出現係相較於將膠囊化於 SterotexR中之阿斯匹靈與自由之阿斯匹靈。阿斯匹靈緩 恢溶解’且水解成水楊酸於一驗性溶液中，Q . 1 Μ碳酸鈉。 27小時後，約有38%水解。相對地，即使是27小時，阿斯 匹靈膠囊化於SterotexR中仍係相當穩定的，且僅有少於 2%被降解。此範例說明以一脂質成分膠囊化可增加藥物的 穩定度。 範例3 三酸苷油酯中乙醯苯酰胺硝基噻唑的膠囊化 乙醯苯醜胺硝基嘻唾，或已知之Ν τ z，係一抗生素藥物可 用於原生寄生生物之治療。乙醯苯酰胺硝基嘍唑亦具有一 活性醋功能，其可受鹼降解以形成羧基苯酰胺硝基？唑， 其在3 6 0奈米可吸光。在水中，該母藥物係相當難溶，且 該^容液為無色。在靜置過夜後，該母藥物轉換為去乙醯化 的部伤’且形成深黃色溶液。乙醯苯酰胺硝基嘻唑之膠囊 化係藉由範例1所敘述，且其為疏水性的可漂 ^於水面上。室溫置放許多小時後，可形成淡黃色液體。 精由!^分^光光度計合理預測結合的與自由的藥物，可推測 、勺8 該藥物結晶可完全包埋於sterotexR中。藉由增加

1302459 五、發明說明（35)

SterotexR對於藥物的比例，卜異 兔 ，一 α J 此暴路的藥物比例不被改 善。此咼於所設想之自由藥你a ^ t 甘冰，七人 丄山0田樂物比例，推測當SterotexR/硝 基噻唑複合物被崩解成係 s + Q 1 a , > > 禾呤有些藥物結晶可被部份 暴絡且可自水ί谷液環境中被獲得。 乙醢苯酰胺石肖基嗜嗅降解的叙酸^谷液中’ 匹靈的曲線。比較之下，該膠壹，从—仏示^ ^ r邊修曩化的藥物於3小時之光學 密度為0·1 ’然而該自由藥物的忠風 曰田罙物的先學密度係為1 · g。此範例 亦說明脂質膠囊化之穩定效應。 ^⑺ steroted膠囊化該藥物於一疏水性環境中，且其係極重 要地說明該樂物之生物有效性。在結合的複合物中乙 醜胺硝基嗜唾的體外生物有效性，可藉由溶解測試更進一 步的測試。該複合物與自由的硝基嘍唑之比較係於371 DistekR溶解裝置，使用攪拌方法（裝置nK〇1M鹽酸加 不加清潔劑（1% Triton X100)。自由的與Ster〇texR複合 藥物（SterotexR與藥物之比例係為〇· 5，2· 〇以及2· 5)之^ 解首先被比較於120分鐘1〇〇 rpm。在此狀況下，所有樣: 顯示相同程度之藥物釋放，且在溶解終點之最大〇· D為〇 2。當1% Triton XI 00被加至該溶解媒介中時，藥物溶解· 更加快速，雖然仍是未完全。溶解的速度說明Ster〇texR/ 硝基？唑係約與該自由藥物相同（請參閱第二圖）。 範例4 三酸替油酯與脂肪酸中藥物的膠囊化 如下所述之過程，該藥物首先係與自由脂肪酸，例如標搁

1302459 五、發明說明（36) 酸’高修剪混合而被乳化於一溶劑中，例如曱醇與異辛醇 之混合。所形成之複合物係以Ster〇texR二次包覆。對於 125克的藥物，加入135毫升的甲醇於可變速的waring攪拌 機中。該攪拌機以中速度操作2至3次，且於間隔停止以防 止過熱。總研磨時間係於高速進行丨〇分鐘。在此階段，加 入25克棕橺酸（C-16)與50毫升的異辛醇。該攪拌機被開至 中速度進行1 0分鐘。仔細監看乳化的形成，且若該糊狀物 太濃稠則加入更多的異辛醇。而後該攪拌機被開至最高速 3 0分鐘，且小心勿使溫度超過5 5 °C。當該乳化黏稠時，於 低速緩慢加入100克約60 °C融化的S terotexR至該攪拌機。 重複高速研磨的乳化步驟。而後該攪拌機被置於冰浴快速 冷卻。該固化的SterotexR :棕櫚酸係約為4 : 1，球其結合 重量比例對於藥物保持於1 : 1。 範例5 體外測試SterotexR/Ivermectin 以及S ter otexR/ 棕櫚酸 /Ivermectin 兩種口服SterotexR配方藥物，Ivermectin被投藥至兩匹 馬。習用配方包含Ivermectin於糊狀物中或於油潮濕中， 其可施力餵食。在一個月的基礎上，馬匹需要以 Ivermectin治療而去蟲。Ivermectin之膠囊匕係、藉由 SterotexR/Ivermectin 或SterotexR/棕櫚/ivermectin， 如上述之範例1與4。口感之測試係藉由添加 1 :lSterotexR/藥物以及SterotexR:棕櫚/藥物至一點點甜

第40頁 1302459 與紫花苜蓿。 方，且需要如 他實驗中自願 其可接受性如 評估，係藉由 一Ivermectin 樣品，且製備 第三圖中，該 分析之結果， 光。如圖所示 出在一單一劑量服用後的一正常藥 五、發明說明（37) 味飼料，其包含密· 現馬可接收之一種配 里的時間。在此或其 物’係藉由馬表露出 該體外生物有效性之 物動力學，其係以任 不同的時間採取血液 液已被收集完成。在 HPLC(高壓液相層析） 品中Ivermectin的螢 記錄攝取的時間，且發 同控制的甜味飼料約等 口服攝食該藥物複合 一腸的配方。 研究於一個體馬匹之藥 配方所治療。於服用後 血聚保持冷凍至所有血 藥物動力學之數據係 係藉由回收於該血液樣 ’該膠囊化的配方顯示 物動力學曲線。 範例6 sterotexR/ivermectin與SterotexR/乙酿笨酰胺硝基噻唑 於馬匹中的效用

SterotexR/Ivermectin配方的效用評估，係藉由於藥物治 療觔後计异出現在馬批排泄物之寄生生物的蛋。治^前的 蛋數係350顆/公升，而在治療後係為零。 '、 習用之乙酿本醜胺石肖基嗔唾糊狀物被用作為以2 &毫克/公 斤來治療馬匹6天，而後每天5 0毫克/公斤體重，共2 8次、;λ 療。在臨床試驗中，膠囊化之ΝΤΖ配方（如範例4中 口

SterotexR與棕櫚酸之配方）被用以治療4之馬匹，係以馬 類原生髓腦炎（E P Μ )的臨床症候，施以一半的劑量（亦即2 5 毫克/公斤），以及一之馬匹被施以三分之一劑量（亦即1 6

1302459 五、發明說明（38) 7毫克/公斤）。受到神經原生寄生生物感染之馬匹，可於 28次治療之後完全復原。而在其他研究中，以習用Ντζ户、 療者，僅有80%的效用。 ~ 此效用的結果說明腸胃道中藥物的吸收可藉由Ster〇texR/ 棕櫚酸之配方而改善。其可能係由於有些藥物可透過淋巴 系統被傳送，且經由組織/體液可更加有效傳送至標的神 經器官。 ^ 範例7

SterotexR/棕櫚/硝基噻唑的膠囊化複合物之冷象切割電 子顯微鏡研究 ° 對於冷束切割電子顯微鏡’樣品的冷卻係使用三明治技術 以及液％氮冷卻丙烧。該切割面的遮蔽，係利用鉑2 5 _ 3 5 度30秒，以及用碳35秒。複製品的清除係以濃縮的煙化的 硝酸處理24-36小時。第四圖的電子顯微鏡圖係放大 2 7，3 9 0倍，顯示層狀構造的延伸區域。據推測，有整齊的 月曰質層係由於橫切區域，約4 - 6奈米係可見的。有些構造 ，徵類似ΗI I脂質相與脂質管生長的開始亦可辨別。 第五圖係8.3千倍的放大。在最終的放大圖中，1微米= 1· 2公分。在電子照片中，區域標示C =藥物晶體8 X 5· 7 微米H，以及CL =晶體層於5·6，18· 7及57· 8奈米的膠 ί化脂質。第六圖係相同的放大倍數，且C =晶體於6 X 3 =米以及2· 8 X 1· 7微米；CL =晶體層於5· 8，19. 2，69· 2 不米。此及其他電子顯微圖說明晶體之邊緣長度範圍係自

第42頁 1302459 五 發明說明（39) I· 6至8微米。該 冷凍切割處理。 晶似乎包含這些 約2 0個橫切面之 最薄〜6奈米，其 厚度與寬度上限 冷凍切割EM說明 的程序，則該EM 構的層狀，因此 排列為如兩成分 晶體之實際大小可為更大，因為其以接受 許多CL晶體層可見於EM中，且事實上所有 薄層。所有測量進行於四個電子顯微圖的 約200層，可見晶體層的三個主要厚度： 餘為〜20與〜60奈米。這些晶體層無固定的 〇 該方法’其中該脂質被包覆。若其為任音 將不顯示層狀的重複。由於已見規則與結 推測有一規則，其中脂肪酸與三酸誓油酉旨 被乳化’且可聯合於該膠囊化過程中。 範例8 對脂質膠囊化設計互補的藥物之脂質尾 新藥2-月桂醯胺—5 -硝基thiazole為此處所指之BA354〇。 如上所述，其化學合成係藉由縮合月桂酸之羰基與2—胺基 一5-硝基嘻唑之胺基。如熟知此技藝之人士所知，活化劑 可被用以形成醯胺聯結，包含許多活化的中間物，如月桂 基-醯基-鹵化物，月桂活化酯，例如月桂基—n—琥珀醯亞 胺亞胺酯，且亦藉由碳化咪唑與碳化亞胺之活化。一般 的作用流程係如第七圖中所述。 一典型之範例，月桂酸之一相等莫耳比例（約為2 · 5莫耳） 係以雙環已基-碳化亞胺（DCC)活化於500毫升之甲替曱醯 胺。90分鐘後，不可溶的雙環已基urea以真空過濾移除。 而後於6 0 0毫升的亞曱基氣加入活化的月桂酸溶液，其與

第43頁 1302459 五、發明說明（40) 2 一胺基―5—硝基噻唑之胺基的比例約為l.i，6〇毫升 pyridine，且以甲替甲醯胺加至體積為3·5升。該的 進仃40-48小時，以搖動攪拌或5〇它加熱。可獲得所ς 之產物且以沉澱法純化且結晶於甲醇中或丙酮中。此'合成 T式係如，一胺基一5一硝基噻唑之胺基，1為細微針狀口微 晶f °該藥物係燕麥粥的顏色且不溶於水，難溶於甲醇且 較溶於亞曱基氯與di甲基f〇ramide。為了促使溶解，該藥 物需稍微加熱。事實上，該新化合物係非常穩定且可於有 機溶劑中加熱至60 —8(rc，如曱醇，丙酮，亞甲基氯與di 曱基foramide，且無可見之損傷。 該結構辨識係藉由（1)元素分析，（2)UV-光譜以及 (3)HPLC。辨識之結果為：C15，JJ25，N3，03，S1 ; 327， 計算的055%，117.6%112.8%，014.7%，39.8%發現 56· 28% ’ 7· 5%，12· 8%，（0-未決定）以及S 10· 02°/〇。 lambda submax = 350奈米。BA354 0的UV光譜係如第八圖 中所示。最大UV係決定於溶劑，且約為340奈米至350奈 米。對於第九圖中所示之HPLC分析，該管柱係為C 18且該 、流動相係於乙腈與水。熔點係為丨3 6乞。相對於已知之阿 斯匹靈/NTZ接合物，該藥物之熔點大幅降低約67度係 1 i P〇 i da 1 特性。 相似的合成進行於capry 1 ic酸，以形成一C-8加合物且以 水楊酸形成硝基噻唑（NTZ)。 範例9

第44頁 1302459 五、發明說明（41) 對於馬匹以BA3540治療EPM之效用 約2 公斤的BA5340，2-lauramide-5 -硝基thiazole 被合 成，純化與結晶。該新藥被膠囊化如範例4中所述，係以 2 7%的棕櫊酸與73°/。的8161'(^6乂1^。第十圖係說明該膠囊化 之B A 3 5 4 0產物。該膠囊化藥物被製成馬的糊狀物配方如 前，且測試於這些馬匹上，其係具有EPM的臨床症候。 案例1 : 「克里斯」係一隻7又四分之一歲，去勢的馬。該 馬具有運動失調且為非專一起源的跛，僅有適度的抵抗前 父叉’且對於尾巴拉扯係雙邊不穩定的。該馬匹被測試且 且以免疫點墨（西方點墨）確認為帶有EPM。克里斯每天口 服新的糊狀物配方，其係包含脂質膠囊化的 2-lauramide-5-硝基 thiazole，以 25 克 / 注射器共 28 劑。 (2 2至2 8天未投藥且於接續星期繼續服用藥物）。 於第9天臨床測試，其於跑步時向後絆倒。在第丨5天測 試，克里斯站著時稍微轉移後腿及臀部，但是小跑步時 腿會綷倒。在第22天測試，克里斯忍耐尾巴拉扯，且站著 時不再轉移後腿及臀部。其症候已獲得大幅改善。於第 天測試，其可輕鬆站立於穩固的表s，抵抗尾&拉扯，且 無明顯肌肉破壞。基於一般EPM的程度，克里斯經由談 藥糊狀物治療後由第3級變成為第〇 /】級。擁有者於 至第84天發現該馬匹進食良好，在其圍場中玩耍，且 靈活與積極的態度。克里斯顯然變得很健康。 又 案例2 :「布魯克」係一隻18歲的純種母馬。該馬 EPM檢測係西方點墨血清測試呈陽性反應。直具的

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五、發明說明（42) 前腳反應且無法忍受短暫的交又。同樣地其左後腿與臀部 具有水腫。右後腿與臀部無法忍耐兩側尾巴拉扯。其EpM 症狀相關於體重減輕，特別係在右後腿與臀部也影響後膝 關節。其他的測試（完成血液計數與血清酵素分析）^表^ 藥物治療開始時蛋白質球蛋白升高，且於治療終了時為到 正常值。同樣地，給予該馬匹以現有劑量每日口服係為典 型的1000 lb馬匹約服用50毫克/公斤體重或25毫克/每 日:该母馬在治療過程中對於食物保持良好的食慾。 在第7天測試，該母馬可忍耐雙側的前腳交叉可是仍盔法 忍耐雙方向的側尾巴拉扯。在2 —3分鐘戳刺後，其具有 ^的腳指拖行但不會綷倒。左後腿自足部至㈣節為浮 仅姓當:乂順時鐘圓形方向戳刺時，其僵硬第走著且低頭以 f第2 1天列，式’其對於側邊尾巴拉扯的反應已經改變， '可Ξ: ί: ϊ耐且左侧僅能適度的忍耐。☆第29天測試， 、广^ f=耐則腳交又。然而對於戳刺其仍會低下頭部。在 上’其開始時係為2級且保持2級。自第29天“ 】m無須添加藥物治療而可改善症狀。其持續體^ 不，其在其圍場中非常活躍且非常健康。 哥者表 Γ:三位「:醫礎所夥隹伴」係-隻22歲的騎乘用去勢的馬。其 程度，認為該馬：測試’他們基於臨床症候重複絆倒的 -、μ馬匹文到馬的原生生物感染的腦脊髓炎。該

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馬匹絆倒且在小跔+ 對於EPM測試，C騎馬的人一同跌倒在小牧場中。 伴以相同的藥物、二方」點墨血清測試呈陽性反應。基礎夥 候係為：（1)右下°昔8帑日口服共28天。每週測試的臨床症 時動作僵硬。 肌肉瘦瘤以及（2)當時鐘方向圓形戳刺 此馬匹對於該藥物、、Λ 非常好的食慾。在；J =有反應善在治療過程中其保持 響受控制的向ϊ移=、、丰倒變得較不明顯，且於任一侧不影 %彳纟IΑ ψ 。在第14天測試，下背痙瘤也以減輕 於ΕΡΜ等級的-般H之反其應虛^V移動變得更順暢。基 ^ ^ 叙特徵，基礎夥伴自2/3級於新藥治療第28 大變戚U級。 如上所述之測試，該脂質接合物，ΒΑ3540 (2-lauramide-5-硝基thiazole)係有效且安全的。不像 NTZ，該藥物係美味的且對於馬匹不會引起食慾不振， 鬱，發熱或糞便失禁。此三匹接受治療該配方的馬匹並無 副作用產生。在治療的第一週，幾乎所有馬匹皆體重辦 加，且於28天的治療中體重持續增加。三匹接受治療^ 具有不同的神經症候，且皆於28天的療程中皆有積極的改 善效果。即使是在藥物治療之後，在無藥物治療與補充 下，他們仍持續改善狀況。自擁有者報告表示此三匹 的E P Μ皆完全復原，且於第8 4天皆未再復發。 範例1 0 1302459 (44) ' ' ----- 子於雞隻以β A 3 5 4 0治療球蟲病的效果 二仞始試驗係關於120隻嫩雞（4週大的雞隻）的球蟲病治 ^。二個治療組係分為（1 )控制組，（2 )低劑量的丨〇毫克BA 40/』公斤治療，以及（3)高劑量5〇毫克ba 354〇/公斤治 '、’、。忒嫩雞被分為6攔，每一攔有1 〇隻雞。開始收集其排 泄物以檢測球蟲的存在。而後分配該治療且開始進行治 療。該治療被添加至混合飼料中且隨意餵食7天。在療"程 的終了時，每一治療組的排泄物收集用以分析球蟲的存壬

該嫩雞接受該藥物配方並無反作用，且於七週中該嫩雞皆 保持健康且無發生死亡。每一攔採取兩排泄物樣品且完成 檢疋印里。卵冗被#忍為可決定腸道内球蟲成蟲的存在。治 療試驗開始時的球蟲寄生量係中度的。 在七週的治療之後，該高劑量組（5〇毫克/公斤）4樣品中僅 有1個可偵測出卵。因此在高劑量組中該藥物係有效的。 在低劑量治療組（1 〇毫克/公斤），卵的量約與控制組相 同。彡卩的數目不足以區別低劑量組與控制組的差別。

一碟疋的试驗係以1 〇隻七週大的A r b 〇 r A c r e s嫩雞進行。 該嫩雞被分為兩組：控制組以及5 〇毫克/公斤治療組。兩 籠係隔著樓層以預防任何潛在的污染。監視該治療試驗四 天且測試排泄物的卵數以決定該藥效。每一籠收集兩排泄 物樣品。該控制組的排泄物具有相同的球蟲卵數，然而該 治療組無可見的卵。

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範例11 BA 3 540的抗真菌活性 NTZ已被證實具有抗真具的活性（請參閱美國專利編 5，5 7 8，6 2 1與3，9 5 0，3 5 1 0 )。這些專利推測在體外酵母# 於硝基嗜唾（氮-（5-硝基-2-嗜唑基）柳基乙醯胺）係敏辦 的。在本篇之研究中，受到黃色真菌感染的病人腳趾$ 體重3%的BA 3540膠狀配方，連續治療5天，係藉由。立、乂 用該膠狀配方於指曱角質區周圍，而後4週每週3以該^膠^使 配方治療。由真菌所造成的指曱增厚於兩週後消失，/且' 個月後健康的指甲開始出現在該厚指甲之後。 數 範例1 2 BA 3540的抗病毒活性 NTZ已被形容具有抗病毒之活性，且特別係針對皰疹病 毒，例如埃波斯坦-巴耳病毒（EBV)，維瑞賽拉羅斯特病 (VZV)，人類單純病毒（HSV)以及人類 cyt〇mal〇virus(HCMV) 〇BA 3540 的抗 HSV 與抗 HCMV 活性的 預先評估，係藉由使用NTZ作為一陽性控制。 該藥物，NTZ與BA 3540，被製成1〇毫克/毫升於 dimethylsulfoxide，而後被稀釋為5〇微克/毫升，5毫克/ 毫升’2.5微克/毫升以及丨· 5微克/毫升。人類胚胎纖$維母 細胞增生於最小必要培養基且供以〗0%胎牛血清。細胞預 先以4種特定濃度的藥物加上零控制組處理45分鐘、。細胞 各以300-400HSV或HCMV病毒顆粒感染〗小時。盔藥物的典

第49頁 1302459 五、發明說明（46) 養基被加至每一盤細胞，且持續培養3天以繁殖病毒。三 天之後’每一盤的上清液被移出以進行菌斑減少測試。 兩藥物皆為有致的抗病毒劑。其特別係針對於HCMV。相對 地’有300個菌斑。1.5微克/毫升與2.5微克/毫升的BA 3 5 4 0各自具有3個與1個菌斑，且更高的藥物濃度則無菌 斑。N T Z控制組有31 〇個菌斑，然而在四個藥物濃度皆無病 毒的菌斑。所推斷的3540用於治療HCMV濃度範圍係約 為5-10微克/笔升。在複製感染的HSV控制組中，有11〇個 菌斑，然而在1 · 5微克/毫升中其為9 0個菌斑。此數據顯示 BA 3 540，如同NTZ，對於皰疹病毒係一有效的抗病毒劑。 範例1 3 合成BA 11671，N-十二燒基-2-嗔唾烧_ (N-月桂基—。惡唾 烷酮） 2-噁唑烷酮係新一類的，抗生素，其商標名係為ZyvoxR由 Pharmacia UPJohn所推出。其係35年内首先完成新一類商 品化的抗生素。L i nezo 1 i d要騙與血管注射劑係用於治療 格蘭氏陽性細菌，以及抗methicillin肺炎鏈球菌與金黃 色葡萄球菌所造成的肺炎。噁唑烷酮的核心結構係一五角 環結構。該藥物衍生物係建構於該噁唑烷酮環中位置3的 氮。因此，不同排列與組合的苯基噁唑烷酮的類似物已被 描述於（美國專利編號6, 166, 056)。顯然地，該苯基環對 於活性係不可或缺的，因為3 -氯-2 -噁唑烧酮s已被顯示具 有抗細菌活性（美國專利編號3，9 3 1，2 1 3 )。然而，已知（ς )

第50頁 1302459 五、發明說明（47) -對映體（enantiomer)係具有製藥活性。該消旋酸混合物 係有用的，但需要兩倍的量才具有相同的抗細菌效果。此 核心結構之確認係構成發展新藥物實體的第一步於此處所 述之脂質化技術。 一化學合成方法舉例出利用此處所述之方法可產生一新的 類似物。該反應係相同莫耳濃度之月桂氯與2—噁唑烷酮於 dimethyl for amide。在縮合硫亞氨鍵中，使用毗啶 (pyridine)以中和氯化氫。在50 °C反應24小時後，該反應 物之稀釋係以兩體積的甲醇且於冷處結晶。該新藥物， N-（ laury )-2 -噁唑烷_，再次結晶以確保純度。 所得之元素分析以確定該新類似物之組成。該結構化學組 成係：C15，H27，N1，〇3分子量係為269。該理論組成 係·· C 6 7%，N 5· 2%，Η 10· 04%，0 17· 7 6% ;發現C 66.96%，Ν 5·23%，Η 1〇·〇8%，（0 未決定）。熔點為69°C， 係大幅低於2-噁唑烷_(90 °C )，係由於該藥物更似脂質。 範例1 4 合.成BA 91346 ’ N-十二烧基-2-曱基-石肖基咪唾，（N-（月桂 基）-2-曱基-硝基咪唑） 該新藥物，BA 91 346，滅滴靈（N-乙醇-2-曱基-5 -硝基咪 唑）的一相似物。該原始藥物係一抗生素用於治療厭氧細 菌，且特別係用於治療潰瘍，其係由細菌 (Hal ob actor pylori)所造成。其亦被用為一抗寄生生物之 藥物。

第51頁 1302459 五、發明說明（48) BA 91 346的化學合成係關於月桂氯與2-甲基-5 -硝基咪唑 的咪嗅（咪吐）基的反應於dimethylforamide與此症。等量 莫耳的兩反應物被混合，且該反應於50 °C進行24小時。該 溶液以曱醇稀釋兩倍，且冷卻以結晶該化合物。乾燥後， 該化合物係自甲醇再次以結晶純化。 該新化合物之結構分子式係C 16，N 3，Η 28與0 3且分子 量為310。元素分析理論組成為C 62%，Ν 13. 5%，Η 9.03%，0 15·47% ;發現 C 62.6%，Ν 13.05%，Η 9·08°/〇 且 〇(未決定）。BA 9 1 346的熔點係74 °C，然而原始化合物滅 滴靈係為1 6 1 °C。再次發現較低的熔點係由於該藥物衍生 物之脂質化。 範例1 5 合成BA 6 1 274， CH3-(CH2)11-NH-CO-CH2-S-CH2-CHCCH3)-C〇-Pro 乙醯膽驗酵素抑制劑（A C E - i n h i b i t o r )的生物活性核心 結構已被描述為雙胜棘酵素。在c a p t o p r i 1 ( —種抑制劑） 中，有一 M基-官能基，其可用以聯結脂肪酸。最簡單的 方法係與月桂酿-硫化物反應產生*硫S旨。等莫耳的 captopri 1 與 lauroyl -硫化物係反應於dimethylforamide 與此啶（pyridine)中40 °C反應6小時。反應之後，添加20 倍體積的甲醇與三倍體積的水。該接合物於冷卻中沉澱且 結晶於甲醇中。 第二個方法係利用十二烷基溴化物與⑶“叩“ 1的硫氫烷

第52頁 1302459 i、發明說明（49) ^ 1 形成硫酯聯結。在此反應中等莫耳 杜泊+ 天斗的兩反應物被添加至甲 曰甲醯胺與口比唆（pyridine)於是溫一工 .lL ^ _ 功 ^ ，皿二天。在此反應之後， 添加曱醇與水，且該產物被沉澱盥姓 〆、、、、Ό 曰曰 〇 上述兩產物行程硫酯聯結，其係可水解的或硫醚，盆不可 被酵素切割。因此，第三較佳合成選擇係關於產生_:醯胺 聯結’其係水解性穩定且不可被酵素切割。在此反應中， 係使用一雙官能基的連結物溴乙醯溴化物。首先該聯結物 被連接至該脂質區域，其係藉由溴乙醯化。在此反應中， 165克（1莫耳）的η-十二烷胺之產生係藉由於室溫下兩小時 緩慢添加222克（1 · 1莫耳）的溴乙醯-溴化物於8〇〇毫升的 dimethylfor amide 與 80 毫升的 口比啶（pyridine)中。反應 後，該沉澱的加合物係以真空過濾。該產物被懸浮於8 〇 0 毫升的乙酸乙酯（ethylacetate)與己烧（1:1)且再次過 濾。該產物，十二烷胺-乙醯-溴化物，具有之分子量為 306道耳吞，且為白色結晶。該接合反應係1.42克的十二 烧基amido-乙醯-溴化物與1克的captopril於2毫升的di甲 基foramide與0.25毫升的σ比咬（pyridine)中室溫反應三 天。反應後，添加20倍體積的甲醇與三倍體積的水。該接 合物被冷卻沉澱且於甲醇中再次沉澱。

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明阿斯匹靈與以碳酸鈉膠 囊化的阿斯 匹靈的降 圖式簡單說明 第一圖係說 解速率。 化的NTZ在體外的 第二圖係說明當用於溶解時，NTZ與膠囊 生物可利用性。 第三圖係伊維菌素（丨”1^6(^丨]：1)於馬的藥物動力學試驗數 據’其係S t e r 〇 t e X R膠囊化藥物。 第四圖係一冷凍裂解電子圖，其說明利用約2 7K放大的

SterotexR/pamatate所膠囊化之NTZ。 第五圖係一冷凍裂解電子圖，其說明利用約8. 3K放大的 SterotexR/pamatate所膠囊化之ΝΤΖ。 第六圖係第二冷東裂解電子圖，其說明利用約8. 3 K放大的

SterotexR/pamatate所膠囊化之NTZ。 第七圖係說明合成化合物BA 3540的方法。 第八圖係化合物BA 3540的UV光譜圖。 第九圖係化合物BA 3540的HPLC數據圖。 第十圖係說明該膠囊化的BA 3540聯合膠囊化脂肪酸與三 酸苷油酯尾端。 元件符號說明 D藥物分子\活性化合物 L聯結區

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Claims (1)

1302459 _案號 91118723 六、申請專利範圍 1. 一種生物活性組成 構係為· 修正 其包含一親油性化合

V 其中L係一聯結，R係獨立氫，烧基，取代烷基，芳烴，取 _代芳烴，異'芳烴，取代異芳烴，異環，或取代異環，以及 鳔 孃I P I D係一非兩性脂質分子之一殘基，其中該組成係一固 I形式，且用於口服。 % 厅 如申請範圍第1項之組成，其中該LIPID係為一C4-C30脂 _肪酸之該殘基。.. 衫 ；!·如申請範圍第1項之組成，其中該L I P I D係一脂肪酸，其 _具有至少1 0個碳原子長。 I I.如申請範圍第1項之組成，其中該L係選自於醚，硫醚， g硫亞氨，醯胺，磺胺，膦酸氨，二硫化物以及尿素。 5.如中請範圍第1項之組成，其中該L係-NH-CH2-C(0)-NH-。 1302459 _案號 91118723_年月日__ 六、申請專利範圍 6. 如申請範圍第1項之組成，其中該L係-NH- C(0)-。 7 ·如申請範圍第1項之組成，更包含至少一脂質膠囊化該 親油性化合物。 8. 如申請範圍第7項之組成，其中該膠囊化脂質係一非兩 性脂質。 9. 如申請範’圍第8項之組成，其中該膠囊化脂質係為至少 一三酸苷油酯與至少一脂肪酸之混合物。 1 0.如申請範圍第9項之組成，其中該膠囊化脂質組成係為 至少一C4-C22脂肪酸的苷油酯與至少一C4-C30脂肪酸之混 合物。 . 11. 一生物活性組成，其包含一親油性化合物，該親油性 化合物包括一已知結構相似化合物類的一生物活性核心結 構，其具有透過一聯結而共價連接至一 C 4 - C 3 0脂肪酸之一 共通生物功用，其中該組成係一固體形式，且適用於口 月良。 1 2.如申請範圍第1 1項之組成，其中該結構相似化合物類 係選自於a v e r m e c t i η，2 - °惡嗤烧酮，5 -石肖基。塞σ坐， f 1 ο X i η，A C Ε抑制劑以及盤尼西林。 1302459 _案號91118723 年月日 修正_ 六、申請專利範圍 13. 如申請範圍第11項之組成，更包含至少一脂質膠囊化 該親油性化合物。 14. 如申請範圍第11項之組成，其中該膠囊化脂質係一非- 兩性脂質。 . 15. 如申請範圍第14項之組成，其中該膠囊化脂質係為至 少一三酸苷油酯與至少一脂肪酸之混合物。 16. 如申請範圍第15項之組成，其中該膠囊化脂質組成係 為至少一 C4-C22.脂肪酸的苷油酯與至少一 C4-C30脂肪酸之 混合物。 17. 如申請範圍第13項之組成，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為同構體。 18. 如申請範圍第13項之組成，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為同質物。 φ 19. 如申請範圍第13項之組成，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為異質物。 20. 如申請範圍第11項之組成，其中該親油化合物具有之

第57頁 1302459 案號 91118723 年月曰 修正 六、申請專利範圍 結構係為· LIPID

R 〇2N' R-其中L係該聯結’各R係獨立氮’烧基’取代院基，芳煙， 取代芳烴，異芳烴，取代異芳烴，異環，或取代異環，以 及該LIPID备該C4-C30脂肪酸之該殘基。 2 1.如申請範圍第1 1項之組成，其中該親油化合物具有之 結構係為：

N一L—LIPID 其中L係該聯結，各R係獨立氫，烷基.，取代烷基，，芳 烴，取代芳烴，異芳烴，取代異芳烴，異環，或取代異 環，以及該L I P I D係該C 4 _ C 3 0脂肪·酸之該殘基。 2 2. —種生物活性組成，其包括i) 一親油性化合物，其包 括透過一聯結而共價連接至一第一非兩性脂質之一生物活 性劑；以及i i ) 一非兩性脂質組成膠囊化該親油性化合

第58頁 1302459 _案號91118723_年月曰 修正_ 六、申請專利範圍 物，其中該第一非兩性脂質以及該第二非兩性之脂質係選 自三酸苷油酯以及C4 - C30脂肪酸，以及其中該組成係一固 體形式，且適用於口服。 23.如申請範圍第2 2項之組成，其中該膠囊化脂質組成係 為至少一三酸苷油酯與至少一脂肪酸之混合物。 2 4.如申請範圍第2 3項之組成，其中該膠囊化脂質組成係 為至少一 C14-C22脂肪酸的苷油酯與至少一 C4-C30脂肪酸 的混合物。 2 5.如申請範圍第22項之組成，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為同構體。 26.如申請範圍第22項之組成，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為同質物。 2 7.如申請範圍第22項之組成，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為異質物。 （ 28.如申請範圍第22項之組成，其中該生物活性劑係選自 於胜苷酵素，蛋白質，酵素，小分子藥物，染劑，核苦， 寡核苷酸，寡醣，多醣，疫苗，細胞以及病毒。

Γ57 第59頁 1302459 _案號 91118723_年月日__ 六、申請專利範圍 29. —種用於形成一生物活性親油分子·之方法，其包含： 決定一已知結構相似化合物類之一生物活性核心結構， 其具有一共同生物功用，其中該決定步驟係包含選擇該化 學結構成分，其係具有一共同生物功用之該結構相似化合 物所分享，該分享的結構成分形成該生物活性核心結構； 以及 連接至少一非兩親性脂質分子至該生物活性核心結構， 以形成一生物活性親油分子。 3 0 .如申請範圍第2 9項之方法，其中該非兩親性脂質係C4-C 3 0脂肪酸。 3 1.如申請範圍第2 9項之方法，其中具有一共同生物功用 之該結構相似化合物係選自於a v e r m e c t i η，2 - σ惡唾统酮， 5 -硝基σ塞嗤，f 1 o x i η，A C Ε抑制劑，5 -硝基肼嗤以及盤尼 西林。 3 2 ·如申請範圍第2 9項之方法，更包含膠囊化該生物活性 親油分子於一非兩親性脂質組成中。 3 3.如申請範圍第3 2項之方法，其中該膠囊化步驟係包含 膠囊化該生物活性親油分子於至少一三酸苷油酯與至少一 C4一C30月旨肪酸之混合物中。 1302459 _案號 91118723_年月日__ 六、申請專利範圍 3 4.如申請範圍第32項之方法，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為同構體。 3 5.如申請範圍第3 2項之方法，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為同質物。 3 6.如申請範圍第3 2項之方法，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為異質物。 3 7. —種形成生物活性親油組成之方法，其包含： i)共價連接一C4-C30脂肪酸至一生物活性劑係透過一聯 結，以形成一生物活性親油分子；以及 i i )膠囊化該生物活性親油分子於一非兩親性脂質組成 中，其中該膠囊.化步驟係包含： a)溶解一第一非兩親性脂質組成於一溶劑中； b) 混合該溶解的脂質與該生物活性劑，係以足夠之混 合強度，以形成一乳化混合物； c) 於繼續混合該乳化混合物時，添加一第二非兩親性 脂質組成至該乳化混合物； d) 固化該混合物；以及 e) 乾燥該混合物以形成一乾固體組成。 3 8.如申請範圍第3 7項之方法，其中該膠囊化步驟係包含 .膠囊化該生物活性親油分子於至少一三·酸苷油酯與至少一

1302459 案號 9Π18723 年月曰 修正 六、申請專利範圍 C4-C30月旨肪酸之混合物中。 3 9.如申請範圍第3 7項之方法，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為同構體。 4 0.如申請範圍第3 7項之方法，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為同質物。 4 1.如申請it圍第3 7項之方法，其中該膠囊化脂質與連接 至該生物活性核心結構之該脂質，係為異質物。 4 2.如申請範圍第37項之方法，其中該連接步驟係包含連 接一脂肪酸，其具有鏈長至少1 0個碳原子至該生物活性 劑。 4 3.如申請範圍第3 7項之方法，其中該生物活性劑係選自 於胜苷酵素，蛋白質，酵素，小分子藥物，染劑，核苷， 寡核苷酸，寡，多St，疫苗，細胞以及病毒。 4 4.如申請範圍第37項之方法，其中該第一非兩親性脂質 組成係為至少一C4-C30脂肪酸，以及該第二非兩親性脂質 組成係為至少一三酸苷油酯。 4 5.如申請範圍第37項之方法，其中該聯結係水解穩定且

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第62頁 1302459 _案號 91118723_年月日__ 六、申請專利範圍 為酵素可切割。 4 6.如申請範圍第4 5項之組成，其中該聯結係選自於醚， 硫醚，硫亞氨，，醯胺，磺胺，膦酸氨，二硫化物以及尿 素。 4 7. —種用於製備一膠囊化之生物活性親油組成之方法， 其包含： 提供一生物活性劑； 溶解一第一非兩親性脂質組成於一溶劑中； 混合該溶解的脂質與該生物活性劑，係以足夠之混合 強度，以形成一乳化混合物； 於繼續混合該乳化混合物時，添加一第二非兩親性脂 質組成至該乳化混合物； 固化該混合物；以及 乾燥該混合物以形成一乾固體組成，其係包括膠囊化 於一非兩親性脂質組成中之一生物活性劑。 4 8.如申請範圍第47項之方法，其中該第一非兩親脂質組 成係為至少一C4-C30脂肪酸，以及該第二非兩親性脂質組 成係為至少一三酸苷油酯。 4 9.如申請範圍第47項之方法，其中該生物活性劑係選自 於胜苷酵素，蛋白質，酵素，小分子藥物，染劑，核苷，

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