TWI270547B - Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors - Google Patents

Description

1270547 A7 ____B7 五、發明説明（】 ) 發明之技術範疇 本發明係關於一種新穎化合物及其醫藥上允許之鹽，以 及其單獨或與其他治療劑之組合在治療或預防Η丨V感染上 之用途，以及關於包含該化合物之醫藥組合物。 發明之背景 被稱為後天免疫缺乏症候群（愛滋病）之疾病由人類免疫 缺之病毒（HI V)，尤其是被稱為HI V-1之菌株引起。hi v 右要被合主細胞複製’則病毒基因組織資料必須被整合入 宿主細胞之DNA中。不過，HIV為反錄病毒，此表示基因 資料為RNA之形式。所以HIV複製週期需要病毒基因組 (RNA)轉錄為DNA之步驟，此與複製之一連串正常步驟相 反。病毒RNA轉錄成DNA藉被通稱為反錄酶（RT)之酵素 達成。HIV病毒粒子包括一套rt以及病毒尺^^八。 反錄酶具有三項已知之酵素功能··其作為RNA_依存性 DNA聚合酶、核糖核酸酶及DNA•依存性〇?^八聚合酶。基 於作為RNA-依存性DNA聚合酶，RT將病毒rNA轉錄為單 套DNA。基於作為核糖核酸酶，RT破壞原先之病毒][11^八 以及從原始之病毒RNA釋放出剛產生之dna。最後基於作 為DNA-依存性DNA聚合酶，RT以第_DNA股作為模板 製造第二互補DNA股。該二股形成雙股DNA，其藉由被稱 為整合酶之另一酵素整合入宿主細胞之基因組中。 會抑制HI V-1反錄酶之酵素功能之化合物會抑制感染細 胞中HI V-1之複製。此等化合物，如同已知之尺丁抑制劑諸 如3’-疊氮基-3，-去氧胸苷（AZT)、2，，3、二去氧肌苷（ddI) 本紙張尺度適财s a家標準(CNS) A4規格(2igx297公爱）4------ 1270547 A7 B7 五、發明説明（2 、2’，3、二去氧胞苷（ddC)、d4T、3TC、奈非拉平（Nevirapine) 、德拉佛汀(Delavirdine)、愛法佛蘭茲（Efavirenz)及阿 巴卡佛（AbaCavir)(為目前被允許用於治療愛滋病之主要 藥物）所顯示者，在預防或治療人體HIV-1感染上有用。 如同其他任何抗病毒治療一樣，將RT抑制劑用於治療愛 滋病最終將導致病毒對於給予之藥物較不敏感。對此等藥 物之杬性（敏感性減低）為在户〇 /基因之反錄酶段發生突變之 結果。曾鑑定出HI V之數個突變菌株，其對於已知治療劑 之抗性係由於在RT基因發生突變。在臨床上一些最常被觀 祭到之尖菌株為：γ 1 8 1 C突變株，其中在密碼1 § 1處之 酷胺酸（Y)被突變為半胱胺酸（C)殘基；以及K103N，其中 在位置1 0 3之離胺酸（κ)被天冬酷胺（N)取代。用已知抗病 毒劑治療期間，其他出現頻率增加之突變株包括單突變株 V106A、G190A、Y188C及P236L· ;以及雙突變株K103N/Y181C 、K103N/P225H、K103N/V108I及K103N/L100I。 由於用抗病毒劑治療及預防HIV感染一直持續，可預期 新矛頁抗性囷株之出現將增加。因此不斷需要在對抗各種突 變株上具不同效力模式之新穎RT抑制劑。 為ΗI V -1抑制劑之具三環結構之化合物被記載在美國專 利5,3 66,972號中。HIV-1反錄酶之其他抑制劑被記載在

Hargrave et al·，J. Med. Chem·，34, 223 1 (1 99 1)中。 美國專利5,70 5,499號提出為11丁抑制劑之8-芳燒基-及 8-芳基雜烷基-5，11-二氫-6//-二吡啶并[3,2-8:2，，3、£；| [1，4 ]二氮呼。被例示之化合物顯示對野生型及突變型 -5- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（3 ) HIV-1 RT，尤其是Y181C及其他單突變株諸如K103N具 一些活性，·惟效力較差。 更特定而言，本發明之化合物在抑制γ 1 8 1 C及K 1 0 3 N突 變株以及廣範圍之其他單突變株及某些常發現之雙突變株 諸如K 1 03N/Y 1 8 1 C 及κ 1 03N/P2 25H上有效。 發明之概要 本發明藉由提供HIV-1 RT之單及雙突變株之新穎強力 抑制劑而減少先前技藝之困難及缺點。 在本發明之第一態樣中，提供一種通式I之化合物或其醫 藥上允許之鹽：

R 選自 Η、F、C1、

Ci·4烷基、C3·4環烷基及cf3所組成之 族群； R4為Η或Me ; R5為Η、Me或Et，限制條件為及R5不同時為％6，以及 若R4為Me，則R5非為Et ; R11為Me、Et、環丙基、丙基、異丙基或異丁基； Q選自下列基組成之族群： -6- 1270547 A7 B7 五、發明説明（4

在第二態樣中，本發明提供一種具通式丨之⑴^^複製抑制 劑或其醫藥上允許之鹽。 在第三態樣中，本發明提供一種具通式1之111¥反錄酶抑 制劑或其醫藥上允許之鹽。 在第四怨樣中’本發明提供一種治療或預防H j v感染之 方法’其包含投與病人HIV抑制量之式；!化合物或其醫藥上 允許之鹽。 在第五怨樣中，本發明提供一種治療或預防MV感染之 醫藥組合物，其包含式丨之化合物，其醫藥上允許之鹽以及 醫藥上允許之載體。

在第六態樣中，本發明提供一種製備式丨之化合物或其醫 藥上允許鹽之方法。 V 發明之詳細說明 定義 在本又中，術語「Cl·4烷基」意指含有1至4個碳原子之 直鏈或分枝鏈烷基，其包括甲基、乙基、丙基、豈丙基、

1270547

五、發明説明（ 丁基、弟一 丁基及第三丁基。 在本文中·，術語「p t、 3 衣燒基」意指含3至4個碳原子之 飽和環狀烴基，其包括環丙基及環丁基。 較佳實施例之詳細說明 按較佳貫施例’本發明> 入 1明疋較佳化合物為式I中R2為C1 、足化合物。R2更佳為C1或Η，最佳y為H。 按照較佳貫施例，本發明> &社k人 ” 心明<較佳化合物為式I中R4為H之 化合物。 按照另-實施例，本發明之較佳化合物為式^r5為甲美 之化合物。 '、.土 本發明之化合物較佳為式I + R,u乙基或環丙基之化人 物。Ru更佳為乙基。 口 按照較佳實施例，本發明之較佳化合物為式丨中卩為選自 下列基團之化合物： '

-8- 1270547 A7

了、夕卜 之化合物本發明之較佳實施例包括選自下列者所組成群中

裝 訂

線 本發明化合物為野生型反錄酶之有效抑制劑，以及會抑 制例如單突變酶 Y181C、K103N、V106A、G190A、Y188C 及P236L。此等化合物亦會抑制雙突變酶K1〇3N/Y181c、 K103N/P225H、K103N/V108I及K103N/L100I。 式Ϊ之化合物具有對抗HI V-1反錄酶之抑制活性。當以適 當劑型投與時，其在治療愛滋病、ARC及與HI V-1感染相 關之異常上有用。所以本發明之另一態樣為治療HIV-1感 染之方法，其包含將治療有效量之上述新穎式I化合物投給 被HIV-1感染之人類。不論是被稱作治療或預防，本發明 -9 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐） 1270547 A7 B7

五、發明説明（ 化合物亦可藉由在出生之前投與母親，而防止出生期間 ΗIV - 1從母親傳染至嬰兒。 式I化合物可經由口服或腸道外途徑，以單劑或分為數劑 投與。式I化合物之適當口服劑量為每日0.5毫克至1公克。 式I化合物之較佳口服劑量，對重70公斤之病人而言，為每 曰約100¾克至800毫克。在腸道外調配物中，適當劑量單 位含有0.1至25G毫克化合物，較佳含有i亳克至剔毫克。 不過’應了解劑量因病人而異，以及對於任何特^病人之 劑量視臨床料之判斷而定，臨床㈣將考量病人之體型 及狀況以及病人對藥物之反應而處方適當的劑量。 土 當本發明之化合物經由口服途徑投與時，其可以含有該 化合物及相容性醫藥載劑物質之醫藥製劑形式之藥劑投與 。其中孩載劑物質可為適於口服之惰性有機或無機載劑物 質。此等載劑物質之例子有水、明膠、滑石n硬脂 酸鎂、P可拉伯膠、植物油、隸H油凝膠及類似: 〇 醫藥製劑可以習用方式製備以及製成之劑型可為固體劑 型，例如錠劑、糖錠、膠囊劑及類似物；或液體劑型，例 如溶液、懸浮液、乳液及類似物。醫藥製劑可接受習知之 藥劑處理諸如減菌。再者，醫藥製劑可含有習知之佐劑嗜 如保=劑、安定劑、乳劑、風味改善劑、潤濕劑、緩L劑 改夂滲透壓之鹽以及類似物。可被使用之固體載劑物質 包括，例如，澱粉、乳糖、甘露醇、甲基纖維素、微晶型 纖維素、滑石、二氧化矽、磷酸氫鈣及高分子量聚合物（諸 ---—______ Ί〇 本紙張尺度適用Ha家料(CN^規格 1270547

如聚乙二醇）。 ，供腸道外使用而言，式1化合物可以水性或非水性溶液 在醫樂允許之油或液體混合物中之懸浮液或乳液投與， ::製劑可含有抑菌劑、抗氧化劑、保存劑、緩衝劑或會 1合液,'、血液等張（其他落質、增稠劑、助懸劑或其他醫 樂允許之添加劑。該型之添加劑包括，例％，酒石酸鹽、 檸檬酸鹽及乙酸鹽缓衝劑，乙醇、丙二醇及聚乙二醇，錯 合物=成劑（諸如EDTA)，抗氧化劑（諸如亞硫酸氣鋼、偏 亞硫酸氫納及抗壞血酸），供調節黏度之高分子量聚合物 (諸如液體聚環氧乙燒）以及山梨醇奸之聚乙烯衍生物。若 需亦可加人㈣劑諸如节酸、對經基节酸甲醋或丙酿 、氯卞烷銨及其他四級銨化合物。 、本發明芡化合物亦可以供鼻用之溶液投與，以及在水性 /合剑中’除了含有本發明之化合物外，尚可含有適當的緩 衝劑、張力調整劑、抗微生物保存劑、抗氧化劑及增黏劑 被用於增加黏度 < 物質之例子有聚乙烯醇、纖維素衍生 物、聚乙缔基[I比㈣酮、聚山梨酸酉旨或甘油。可被加入之 抗微生物保存劑包括氯苄烷銨、硫柳汞、氯丁醇或苯乙醇 0 此外，本發明提供之化合物可藉由栓劑投與。 本發明之化合物可用有機化學合成技術製造。例示之反 應圖式被示於反應圖1至6中。 -11 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210父297公€^ 1270547 A7 B7 五、發明説明（9 )反應圖1 :中間物（其中R4為甲基）之製備

Br2/AcOH 或 NBS/MeCN

150〇C Cr N α〆

NaHMDS Π比啶THF

反應圖2 :中間物（其中R5為甲基）之製備

NaH, Mel DMF, 50〇C

2

本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（ 反應圖 2之順序與 J.M. Klunder et al.; J. Med. Chem 1998，41, 2960-71 以及 C.L. Cywin et a 1.; J. Med. Chem. 1998，41，2972-84 所述者類似。 反應圖3 :中間物（其中烷基）之製備 〇 0

h3c N Cl NH0

cr N MeCN

NaHCO.

反應圖4 :中間物（其中R2為CF3)之製備o 1'Q_ U 〇 〇Ac广％ +。认 h2 广N。，

H?0 、NH2 回流.3h> 2. 4NHCI.45〇C OH o/n. RT 1. NaH.DMF. 40〇C. 2. (CF,SO?)?NPh

'N〇2 NH2i 丄 ΓΎ f3c^n^nh _ f3c 入广 NH

Br

NaH. DMF Jl -^ F.C^'N 80°C ^

-13-

本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210x 297公釐） 1270547 A7 B7 五 、發明説明（ 11 反應圖5 ··堕啉核之？1進

f

反應圖6 :化合物中R4為甲基者之另一製備途徑

如上述，本發明提供之化合物會抑制RT之酵素 活性。根據下述此等化合物之測試，已知其會抑制爾“ -14- 1270547 A7 B7

RT之RNA-依存性DNA聚合物酶活性。知f U π V I-衣_示 據）其亦會抑制HIV] RT之DNA-依存性DNA聚合物酶、 性。利用下述反錄酶（RT)測定，可以測試化合物=活 HIV-1 RT之RNA-依存性DNA聚合物酶活性之能力。 下文實例中所述之某些特異性化合物被測試。該測試之择 果被示於表 2[IC5G (nM)]及表 3[EC5G (nM)]。 實例 本發明藉由下列非限定性實例更詳細地說明。所有反應 在氮氣或氬氣蒙氣中進行。溫度以攝氏度數表示。溶液之 濃度百分率或比率，除非另有陳述，係以體積對體積之關 係表示。 本文所用之簡寫或符號包括： D E A D :偶氮二叛酸二乙酯； DIAD :偶氮二羧酸二異丙酯； DIEA:二異丙基乙胺； DMAP : 4-(二甲胺基）α比啶； DMSO :二甲基亞碉； DMF :二甲基甲醯胺； ES MS:電噴霧質譜； E t :乙基；

EtOAc:乙酸乙酯； E12 0 :乙醚； HPLC :高效液相層析； / P r :異丙基； -15- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 B7

Me :甲基； M e〇Η :甲醇；

MeCN :乙腈； N B S : N -溴琥珀醯亞胺；

Ph :苯基； TBE : Uis-硼酸鹽-EDTA ; TBTU ·· 2-(1Η-苯并三唑-1-基）-N，N，N，N， ’ ，·^ ，四甲 鐺四氟硼酸鹽； TFA :三氟乙酸； T H F ··四氫呋喃； MS (ES):電噴霧質譜； MS (FAB)或FAB/MS快速原子爆炸質譜； HRMS :高解析質譜； PFU :成斑單位； D E P C :焦碳酸二乙酯； DTT :二硫蘇糖醇； E D T A ·•乙二胺四乙酸鹽； UMP :尿苷5’-單磷酸鹽； UTP :尿苷5’-三磷酸鹽； Μ E S : 2 - (N -嗎琳）乙燒績酸； S D S - P A G Ε ·十二硫酸鈉聚丙晞酿胺膠體電析作用· MWCO :分子量切段；

Bis-TRis丙烷：1，3-雙{三（羥甲基）甲基胺}丙烷； GSH :還原之谷胱甘肽； -16-

本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 ______ Β7 五、發明説明（14 ) 〇BG : n-辛基-/3 - 机糖 合成 下列a例係況明本發明化合物之製法。 實例1 (2 4號，表1) 5，1卜二氫-11-乙基-5-甲基-8_{2_(4_喹啉氧）乙基卜6//· 一 D比淀并[3,2-0:2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酉同 a) 2 -(乙胺基）-3 -硝基Q比淀 在2-氯-3-硝基吡啶（5 1公克，3 2 5亳莫耳）溶於THF (6 5 0毫升）之溶液中，加入乙胺溶於thf之2 Μ溶液（365 毫升’ 73 1毫莫耳）。將反應物在室溫下攪拌一夜。然後將 反應混合物倒入（〜1 . 5公升）水中且將生成的固體過滤及於 減壓下乾燥，得到標題化合物（5 2公克）。 b) 3-胺基-2-(乙胺基μ比啶 將2 -(乙胺基）-3 -硝基吡啶（5 2公克）溶於μ e 〇 η (6 0 0毫 升）之溶夜’於室溫、氫氣（1 atm)及存在20%的Ρ(ΐ(〇Η)2 / C (1 0.4公克）之下攪拌一夜。催化劑經由矽藻土過滤而 移除。將滤液在減壓下濃縮，得到為黑色固體的標題化合 物（3 9公克，步驟a)以及b)之總產率為88%)。 c) 2 -氯- 乙胺基）-3-D比淀基-溴-3 -□比淀叛酉盏胺 在3-胺基- 2- (乙胺基）Q比淀（30.6公克，223毫莫耳）溶於

MeCN (740毫升）之冷卻溶液中，加入固體NaHC〇3 (5 6.3公克，6 6 9毫莫耳）。5分鐘後，加入粗製的5 -溴-2 -氣-31比啶羰基氯（1當量’ 22 3毫莫耳）（從5溴-2-羥基θα比淀致酸及 S0C12 製備 [如同 T.W. Gero et al. in Synth. -17- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 x 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（15

Commun· 1 989，19，5 53 -5 59(納入本文以供參考），但省去 水性處理部分]。2小時後，將反應混合物倒入冰/h2〇 (1 · 5公升）且將生成的固體過濾，用水及己烷接續清洗。在 減壓下乾燥一夜，即可獲得黑色固體的標題化合物（5 4.9公 克，產率：69%)。 d) 8 -溴-5, 1 1 二氫-U -乙基- 6//-二吡啶并[3,2讣：2，，3、 e ] [ 1，4 ]二氮呼-6 -酮 在2 -鼠-"-{2-(乙胺基）-3-口比淀基}-5 -溴-3-吼淀叛酸胺 (54.9公克，154.4毫莫耳）溶於吡啶（3 08毫升）之溶液中， 於5 0 C逐滴加入N a Η M D S (六甲基二矽氮燒鈉）溶於τ H F (355¾升’ 355¾莫耳）之1 Μ洛液。10分鐘後，將反應物 冷卻至室溫’然後倒在冰水（2公升）上。.將生成的固體過濾 ’用水及己接績清洗。將固體於減壓下乾燥，即可獲得 墨綠色固體的標題化合物（3 6公克，產率：7 5 %)。 e) 8 -溴-5，1 1 二氫-1 1-乙基-5 -甲基-6//-二吡啶并[3,2-b:2’，3’-e][l,4]二氮呼-6-酮 在8->臭-5，11二氫-11-乙基-6//-二吼。定并[3 2-13.2，3，-e][l，4]二氮呼-6-酮（36.7公克，115毫莫耳）溶於DMF ( 3 8 0毫升）之溶液中，加入NaH (3.5公克，138毫莫耳）， 且將此混合物加熱至50°C歷30分鐘。再將反應混合物冷卻 至室溫’且以Mel (14.3毫升，230毫莫耳）處理。ι5小時 後’將反應混合物倒在冰水上。將固體過遽，用水及己燒 接續清洗，乾燥後獲得為深灰色固體的標題化合物（37 ·9公 克，產率：99%)。 -18- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7

發明説明 5，1 1 -二氫-1卜乙基-5-甲基-8_(2 -丙晞基）-6//-二吡啶 并[3，2 - b : 2 ’，3 ’ - e ] [ 1，4 ]二氮呼 _ 6 -酮 將晞丙基三丁基錫（30.7毫升，99.0毫莫耳）及Pd(Ph3P)4 (5.20公克，4.50毫莫耳）於室溫下加至8-溴-5,丨丨·二氫_ U-乙基-5_ 甲基-6//-二吡啶并[3,2-b: 2，，3，-e] [1，4]二 氮呷-6-酮（30.0公克，90.0毫莫耳）溶於DMF (45〇毫升） 之除氣（將N 2通入溶液歷3 0分鐘）溶液中。將該混合物於9 〇 C攪掉1.5小時，然後冷卻至室溫以及於減壓下濃縮。殘餘 物藉急速層析純化（己燒：E t〇A c，8 : 2至7 : 3),得到標 題化合物（22.19公克，產率：84〇/。）。 g) 5, 11-二氫-11-乙基-8-(2-羥乙基）-5 -甲基-6 i/-二吡啶 并[3,2-b.2，3 e][l，4]二氮呼-6-酮 知臭氧化氧流成泡通入5，1 1 -二氫_ 1 1 •乙基_ $ -甲基-8 _ (2-丙烯基）-6片-二吡啶并[3,2-13:2，，3,4；1[1,4]二氮呼-6-酮（22.19公克，75.4毫莫耳）溶於CH2Ci2 (15〇毫升）及 M e Ο Η (1 5 0耄升）之冰冷(-7 8 °C )溶液中歷2.5小時。繼而 知氮氣说成泡通入洛液中歷1 5分鐘’然後將n a b Η 4固體 (4.9 9公克，1 3 2耄莫耳）加到溶液中。讓反應混合物溫熱 至1溫。1小時後，加入NEUC1飽和水溶液（2〇〇毫升）並將 該混合物於室溫攪掉2小時。於減壓下移除有機溶劑。將水 (3 00 ¾升）及CHC 1 3 ( 3 0 0毫升）加至殘餘物中。將各相分離 以及將水層用CHCh (3 X 3 00毫升）萃取。將合併之有機層 乾燥（MgS〇4) ’過遽及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速純化 (E t〇A c . C H C 13 ’ 4 · 1 ) ’得到為白色固體之標題化合物 -19- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公釐） 1270547

五、發明説明（17 (1 6 · 1公克，產率：7 2 %)。 h) 5，ll-二氫-ll-乙基_5-甲基-8-{2-(4-¾啉氧基）乙基}-6//-二吡啶并[3,2b:2’，3’-e][l，4]二氮呼-6-酮 將偶氮二羧酸二乙酯（DEAD)( 1 2.8毫升，8 1 .0毫莫耳） 於室溫逐滴加至5 , 11 -二氫-1 1 -乙基-8 - (2 -羥乙基）-5 -甲 基-6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮（16.1 公克，54.0毫莫耳），4-羥基喹啉（11.6公克，81.0毫莫耳） 及？113?(21.3公克，81.0毫莫耳）溶於1^^(27 0毫升）之 溶液。將該混合物於室溫攪拌1小時，然後於減壓下濃縮。 殘餘物藉急速層析（EtOAc : MeOH ; 95 : 5)純化，得到 為白色固體之標題化合物（17.7公克，產率：77%)。MS (ESI) m/z 426 (MH)+。 實例II (2號，表1) 2 -氯-5，11-二氫-11-乙基-5-甲基-8-{2-(4-堕琳氧基）乙 基}-61^ 二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 a) 6-氯-2-(乙胺基）-3-硝基吡啶 將£11^^12(49.8公克，1.10莫耳）溶於甲苯（2 00毫升）之 冰冷溶液經1 5分鐘加至2，6 -二氯-3 -硝基吡啶（1 〇 〇 . 〇公克 ，0 · 5 2莫耳）溶於甲苯（2 2 5毫升）之冰冷溶液中。將該混合 物於0 °C攪拌4 5分鐘。加入水（5 0 0毫升）及E t Ο A c ( 5 0 0毫 升）以及分離各相。將有機層用水（200毫升）及鹽水（2〇〇亳 升）接續沖洗，乾燥（M g S Ο 4 )，過濾及於減壓下濃縮。將殘 餘固體從M e Ο Η中再結晶，得到為黃色針晶之標題化合物 (8 3 · 7公克，產率：8 0 %)。 -20- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公釐） 1270547

b ) 3 -胺基_ 6 _氯_ 2气乙胺基）吼啶 將 SnCl2.H2〇（616·3 公克，2 73 莫耳）溶於 12 n HC1 水液（5 〇〇毫升）之溶液於室溫迅速加至6-氯-2·(乙胺基）-3-硝基吡啶（169.5公克，〇·84莫耳）溶於Ac〇H (1·7公升）之 '合液中。2 〇分鐘後，將該混合物冷卻至ϋ °C以及加入水 (2 5 0毫升）。然後將固體Na〇H (24〇公克）分成小部份加入 。知生成之懸浮液過濾，以移除鹽。將濾液用水（3 . 5公升） 稀釋，溶液藉添加1〇 N Na0H水溶液調成鹼性，然後用 Et〇Ac (3 X 1.7公升）萃取。將合併之有機層用鹽水（1公升） 沖洗，乾燥（MgSCU)，過濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急 速層析純化（己燒：EtOAc，3 : 2)，得到為褐色固體之標 題化合物（89.9 公克，產率：62%) : MS (ESI) m/z 172/ 174 (ΜΗ)、 c) 5 -溪-2 -氯-iV- { 2 -(乙胺基）-6 -氯-3 -吼啶基} - 3 -吡啶甲 醯:胺 將5 -溴-2 -氯-3 -吼啶羰基氯（3 〇 · 〇公克，9 7.0毫莫耳）溶 於M e C N ( 1 0 0毫升）之溶液，於室溫經由導管加至3 _胺基-6 -氯-2 -(乙胺基）□比淀（1 6 · 6公克，9 7 · 0毫莫耳）溶於含固體

NaHC〇3 (14_2公克，169毫莫耳）之MeCN (180毫升）之 溶液中。將該混合物於室溫攪拌1小時。加入水（2 〇 〇毫升） 並將該混合物攪拌1 0分鐘。將生成之懸浮液過濾。將固體 用E t2 Ο ( 5 0毫升）沖洗以及從吡啶溶液（3 X 5 0毫升）濃縮 ，得到標題化合物（2 8.4公克，產率·· 7 5 %)。 d) 8-〉臭-2-氯-5, 11-二氫-11-乙基- 6// -二吼 p定并[3,2-b : -21 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（19 2，3 ’ - e ] [ 1，4 ]二氮呼-6 -酮 將NaHMDS溶於THF (167.5毫升，167.5毫莫耳）之1 M溶液緩慢加至5 -溴-2 -氯-TV- { 2 -(乙胺基）-6 -氯-3 _ Q比啶 基}-3-吡啶甲醯胺（2 8 4公克，72.8毫莫耳）溶於吡啶（146 毫升）且加熱至50°C之溶液。將反應混合物於50°C攪拌1.5 小時。然後將該混合物倒入水與冰（1公升）之混合物中，1 小時後，將生成之懸浮液過濾。將固體用水沖洗以及於減 壓下乾燥，得到標題化合物（2 3.4公克，產率：9 1 %)。 e) 8 -溴-2 -氯-5, 1 1-二氫-1 1-乙基-5 -甲基-6/7-二吡啶并 [3,2-b : 2’，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 將固體NaH (60%油性分散液，3.46公克，86.1毫莫耳） 於5 0 °C經3 0分鐘加至8 -溴-2 -氯-5，Π -二氫-1 1 -乙基-6好-一吼咬并[3,2-b : 2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮（23.4公克， 66.3毫莫耳）溶於DMF (220毫升）之溶液中。將該混合物 於5 0 °C攪拌1小時’然後讓其冷卻至室溫。將混合物倒入 水（1公升）中並將生成之懸浮液過濾。將固體用水及己烷接 續沖洗，然後於減壓下乾燥，得到標題化合物（2 3 . 〇公克， 產率：9 4 %)。 f) 2-氯-5，11-二氫-11-乙基-5-甲基-8-(2-丙烯基）-二吼淀并[3,2-b : 2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮 將晞丙基三丁基錫（21.3毫升，68.7毫莫耳）及？(1(?113?)4 (3 ·6 1公克，3 · 1 2毫莫耳）加至8_溴氯-5,丨丨_二氫_丨卜 乙基-5-甲基-6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮（23.0公克，62.5毫莫耳）溶於DMF (312毫升）之除氣 ____-22- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公 1270547

錢中。將該混合物加熱至9(^歷2小時。將該混合物於 減壓下/辰w奴餘物藉急速層析（己烷·· Et〇Ac，7 : 3 )純 化，_題化合物(13.4公克，產率：65%)。 氯5，11-一氫-11_乙基-8，（2-經乙基）-5-甲基-6//-二吡啶并['，“^、川’”二氮呼-“同 將臭氧化氧氣？1進2-氯巧儿二氫-11-乙基-5-甲基I (2-丙晞基）抓二吼咬并[3上b : 2，，3、eni，4]^^ 6酮（13.4么克，4〇.7毫莫耳）溶於^^〇11(1〇2毫升）及 CHWl2 (102¾升）之冰冷溶液（·78〇*，直至婦完全消 失。將氮氣成泡通入溶液中以移除過多之。繼而將 N a Β Η4固(2 · 6 9公克，7 1 · 1毫莫耳）分成小部份加入並讓 反應混合物緩慢溫熱至室溫。U、時後，加入Nh4C1飽和水 浴液（1 5 0耄升）並將該混合物攪拌2 〇分鐘。於減壓下移除 有機落劑。將水（1 〇 〇毫升）加至水溶液中。將該溶液用 CHC13 (3 X200毫升）萃取。將合併之有機層乾燥（MgS〇4) ，過滤及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（Et〇Ac : C H C 13 ’ 4 : 1)，得到標題化合物（1 〇 · 4公克，產率：7 7 %) h) 2 -氯-5，11-二氫-11_乙基-5-甲基-8-{2-(4-膣啉氧）乙 基} - 6 仔·二吡啶并[3,2 - b : 2，，3，- e ] [ 1，4 ]二氮呼-6 -酮 將偶氮二羧酸二乙酯（DEAD)(4.26毫升，27.0毫莫耳） 於室溫逐滴加至2 -氯-5，1 1 -二氫-U -乙基-8 - (2 -羥乙基）-5 -甲基- 6//-二 Q比淀并[3,2-b : 2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮 (6.00公克，18.0毫莫耳），4 -羥基喹啉（3.92公克，27.0 -23- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547

毛莫耳）及Ph3p (7.09公克，27 〇毫莫耳）溶於THF (9〇毫 升）足落液。將該混合物於室溫攪拌丨小時，然後於減壓下 /辰备§。殘餘物藉急速層析純化（E t 〇 A c : M e〇η，9 5 : 5 ) ’待到為白色固體之標題化合物（6.2 2公克，產率：7 5 %) ，MS (ESI) m/z 460/462。 實例ΠI (6號，表i) 2 -氯-11-¾丙基。，丨丨-二氫乃-甲基-^^-㈠-膣啉氧^乙 基}-6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1,4]二氮呼-6_酮 a) 6-氯-2-(環丙胺基）_3-硝基吡啶 將％丙胺（1.25公克，22.0毫莫耳）溶於甲苯（11毫升）之 溶液經10分鐘加至2,6-二氯-3-硝基吡啶（2·00公克，10·4 耄莫耳）溶於甲苯（1 0亳升）之冰冷溶液中。將該混合物於〇 C攪拌1小時以及於室溫攪拌2小時。將水（5 〇毫升）加至混 合物中以及將各相分離。將有機層用鹽水（25毫升）沖洗， 乾爍（Mg SCU)，過濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析 純化（己烷·· EtOAc，3 : 2)，得到為黃色固體之標題化合 物（1 . 9 7公克，產率：8 9 %)。 b) 2 -氯-1 1-環丙基-5J丨_二氫-8-(2胃羥乙基）_5_甲基一 6//-二吼淀并[3,2-b : 2，，3、][1，4]二氮坪-6-酮 標題化合物用類似於實例Π中對於u •乙基類似物所述之 方法’ k 6 -鼠-2 - ( ί衣丙胺基）-3 -硝基D比嗓製備。 c) 2 -氯-11-%丙基-5，11-二氫-5_甲基-8_{2“4-喹啉氧） ι][ΐ，4]二氮口平- 6-

乙基} - 6 //•二□比啶并[3,2 - b : 2，，3， 酮 -24 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1270547 A7 _____ B7 五、發明説明（22 ) 將偶氮二羧酸二乙酯（DEad)(85.6微升，0.54毫莫耳） 於室溫逐滴加至2 -氯_ 1 1 _環丙基_ 5，丨丨_二氫· 8 _(2 _羥乙 基）-5-甲基-6//-二吡啶并[3,2讣：2，，3,4][1,4]二氮呼-6 -酬（125愛克’ 〇·36毫莫耳），仁羥基膣啉（789毫克， 0.54¾莫耳）及Ph3p (143毫克，〇54毫莫耳）溶於thf (1 · 8愛升）之溶液。將該混合物於室溫攪拌3小時，然後於 減壓下;辰縮。殘餘物藉急速層析純化（E t 〇 A c : μ e Ο Η， 9 5 ·· 5)。固體藉反相hPLC進一步純化（(：：〇11^丨1^邛入〇3- AQ 50x20 mm ’ 5 a，120 A，5-100% MeCN + 0.10%

ΤΡΑ/# + 〇·1〇% TFA ’溶離2 5分鐘），得到為白色固體之標 題化合物之三氟乙酸鹽（丨7 · 7公克，產率：7 7 %) ·· MS (ESI) m/z 472/474 (MH)+。 實例IV (4號，表1) 5，11二氫-11-乙基-2_氟-5-甲基-8-{2-(4-膣啉氧）乙基}_ 6//-二吡啶并[3,2邛：2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 a) 2，6 -二氟-3 -硝基吡啶 在冰浴（内部溫度維持在5 - 1 〇。(：）中，於濃硫酸（6 〇 〇毫升） 與發煙硝酸（9 0%，400毫升）之混合物内，逐滴加入2,6_二 氟吼4 (2 0 0公克，1 . 7 4莫耳）。將生成之混合物於室溫攪 拌整夜。將混合物緩慢倒入3公斤冰中以及用Et 2 〇 (2 X 2公 升）萃取。將合併之有機層用1·5Ν NaOH水溶液（2x1公升） 沖洗，然後用飽和NaHC〇3水溶液（4 00毫升）沖洗，或直至 pH值為約8-9。將有機層經硫酸鎂乾燥，過濾及於減壓下 濃縮直至恆重（移除未反應之2，6 -二氟吡啶：1 〇 - 1 2 %),得 -25- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） ' ---— 1270547 A7 _________Β7 ____ 五、發明説明（23 ) 到為黃色液體之標題化合物（2 〇 7.3公克’產率：7 4 % )。 b ) 2 -(乙胺基）-6 -氟-3 -硝基ΰ比淀 在2，6 -二氟-3 -硝基吡啶（4 5 · 7公克，2 8 5毫莫耳）溶於 THF (500¾升）之溶液中，於_4〇°C逐滴加入乙胺（25.7公 克，5 70毫莫耳）溶於THF (2 5 0毫升）之溶液中。30分鐘後 ’將反應混合物於減壓下濃縮以及將殘餘物溶於£ 10 A c。 將有機相用鹽水沖洗，乾燥（Mg SCU),過濾及濃縮。生成 之黃色固體藉急速層析純化（1 5 % E10 A c，溶於己；)：完），得 到為黃色固體之標題化合物（43.2公克，產率：82%)。 c) 3-胺基-2-(乙胺基）-6-氟吡啶 將2 -(乙胺基）-6 -氟-3 -硝基吡啶（4 3 · 2公克，2 3 0毫莫耳） 溶於THF (1公升）之溶液於存在2〇。/() Pd(〇H)2/C (4.35公 克）下’於室溫及氫氣（1大氣壓）攪拌整夜。觸媒經由矽藻 土過濾而移除。將濾液於減壓下濃縮，得到為黑色固體之 標題化合物（3 6 _ 3公克，產率：9 5 %)。 d) 2-氯乙胺基）-6-氟-3-吡啶基}-5-溴-3-吡啶甲 酿胺 在3 -胺基-2 -(乙胺基）-6 -氟吡啶（3 1 . 〇公克，2 0 0毫莫耳） 溶於M e C N ( 1 6 0毫升）之冷卻溶液（4)中，加入固體 ^11(：03 (5 0.4公克，600毫莫耳）。15分鐘後，加入5-溴-2-氯-3-吼啶羰基氯（1當量，2〇〇毫莫耳）溶於MeCN (155 愛升）之溶液。置於室溫下6 0分鐘後，將反應混合物倒入水 (1 . 2公升）中以及攪拌3 〇分鐘。將生成之固體過濾，於減壓 及5 0 °C下乾燥整夜。得到為黑色固體之標題化合物（7 3 . 7 -26 - 本紙張尺度適财S ®家標準(CNS) A4規格(210 X 297公董)' " 1270547 A7 __ B7 _____ 五、發明説明（24 ) 公克，產率：99%)。 e) 8 -溴-5.，1 1 -二氫-1 1 -乙基-2-氟- 6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3 ’ - e] [ 1，4]二氮呼-6-酮 在2 -氯2 -(乙胺基）-6 -氟-3 -批啶基}_ 5 -溴-3 -批啶羧 醯胺（73.5公克，2 16毫莫耳）溶於吡啶（4 3 5毫升）之溶液中 ，於50°C逐滴加入NaHMDS溶於THF (5 20毫升，520毫 莫耳）之1 Μ溶液。1 〇分鐘後，讓反應混合物冷卻至室溫， 然後倒在冰水（2公升）上。將生成之固體過濾，用水及己烷 接續清洗。將固體於減壓下乾燥，得到為墨綠色固體之標 題化合物（5 0.6公克，產率6 9 %)。 f) 8-溴-5，1 1-二氫-1 1-乙基-2·氟-5 -甲基-6好-二吡啶并 [3,2-b:2’，3’-e][l，4]二氮呼-6-酮 在8 -溴-5，1 1 -二氫-1 1 -乙基-2 -氟-6 二吡啶并[3,2-1}:2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮（44公克，130.5毫莫耳）溶於 DMF (520毫升）之溶液中，加入NaH (4·28公克，178毫 莫耳），以及將混合物加熱至5 0 °C歷3 0分鐘。將反應混合 物冷卻至室溫以及用Mel (24.4¾升，522毫莫耳）處理。 1 · 5小時後，將反應混合物倒在冰水上。將固體過濾，用水 及己:fe接績沖洗’於減壓下乾燥，得到為深灰色固體之標 題化合物（4 3.2公克，產率9 4 %)。 g) 5，11-二氫-11-乙基-2-氟-5-甲基-8-(2-丙晞基）_ 6//-二 D 比淀并[3,2-13:2’，3’-6][1，4]二氮呼_6-酉同 將晞丙基三丁基錫（32.0毫升，103.4毫莫耳)jPd(ph3p)4 (5.43公克，4·70毫莫耳）加至8-溴-5, 11-二氫4 ^乙基- -27- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（25 2-氟-5-甲基-6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼· 6-酮（33.0公克，94.0毫莫耳）溶於DMF (470毫升）之除氣 (將N 2通入溶液中歷4 5分鐘）溶液中。加入額外量之 Pd(Ph3)4(於反應1，2，3，4及5小時後加入1〇9公克 (0.94¾吴耳））’以使反應元全。將該混合物加熱至9 〇 °c拜 6小時。將該混合物於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析（己 虼：E t Ο A c，8 : 2至7 : 3 )純化，得到標題化合物（2 2.4公 克，產率：7 6 %)。 h) 5，ll-二氫-ll-乙基-2-氟-8-(2-羥乙基）·5-甲基-6片-二[3比咬并[3,2-b:2’，3’-e][l，4]二氮呼-6-酮 將臭氧化氧氣流成泡通入5，11-二氫-11_乙基-2_氣-5_ 甲基-8-(2-丙烯基）-6//-二吡啶并[3,2-b:2，，3，-e][l，4] 二氮呼-6-酮（22.38公克，71.6毫莫耳）溶於(：]9[2〇12(1〇〇 亳升）及MeOH (100毫升）之冰冷（-78。〇溶液中歷3小時。 繼而將氮氣流成泡通入溶液中歷15分鐘，然後將1^以114固 體（5.05公克，133毫莫耳）加到溶液中。讓反應混合物溫 熱至室溫。1小時後，將額外部分iNaBH4 (1·62公克， 43·0毫莫耳）加至反應混合物中。再1小時後，加、NH4C1 飽和水液（1 5 0耄升）並將該混合物於室溫攪拌3 〇分鐘。 於減壓下移除有機溶劑。加入水（200毫升）並將該混合物用 CHCI3 (3 X 300毫升）萃取。將合併之有機層乾燥（MgS〇4) ，過濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（Et〇Ae : C H C 13，4 : 1 )，得到為白色固體之標題化合物（丨9.7公克 ，產率：7 2 %)。 -28-

1270547 A7 ____B7 五、發明説明（^~' 1) 5，11-二氩-11_乙基-2-氟-5_甲基-8-{2_(4'璧啉氧）乙 基} - 6//-二吡啶并[3，2 - b : 2，，3，- e ] [ 1，4 ]二氮呼-6 -酮 將偶氮二羧酸二乙酯（DEAD)( 1 4.3毫升，9 1 .〇毫莫耳） 於室溫逐滴加至5, 1 1 -二氫-1 1-乙基_2 _氟_ 8_ (2-羥乙基卜 5-甲基二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 (19_2公克，60.7毫莫耳），4 -羥基喹啉（13.2公克，91.0 毫莫耳）及Ph3P (23.9公克，91.0毫莫耳）溶於THF (300 愛升）之溶液。將該混合物於室溫攪拌1小時，然後於減壓 下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（E t 〇 A c : M e〇Η，9 5 : 5 ) ’得到為白色固體之標題化合物（1 7 · 9公克，產率：6 7 %) ·· MS(ESI)m/z 444 (MH)+。 實例V (1號，表1) 2 -氯-5，ll二氫-ll-乙基-4-甲基-8-{2-(4-喹啉氧）乙基}- 6//-二D比咬并[3,2-b:2’，3’-e][l，4]二氮呼-6-酮 a) 2 -氯-(2，6 -二氯-4 -甲基-3 - D比淀基）-3 - Q比淀叛酿胺 將NaHC03 (2 1.72公克，2 5 8.6 毫莫耳）加至3-胺基- 2,6-二氯-4-甲基tI比啶（41·61公克，235.1毫莫耳；如K.G. Grozinger et al. J. Heterocyclic Chem. 1 9 9 5, 32, 2 5 9-2 6 3所述製備）溶於MeCN (3 5 0毫升）之溶液，以及將 生成之懸浮液攪拌1 5分鐘。然後將2 -氯菸鹼醯氯（4 3 · 4 4公 克，246.8毫莫耳）溶於MeCN ( 5 0 0毫升）之溶液經由30分 鐘引進。將生成之懸浮液於室溫攪拌。2 4小時後，發現溶 液為酸性，然後加入額外量之NaHC03 (3.00公克，35.7 毫莫耳）。然後將懸浮液於室溫再攪拌2日。將混合物倒入 ______ _ 29 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) " ~ 1270547 A7 _____ B7 五、發明説明（27 ) 水（2公升）與冰（200公克）之混合物中以及攪拌2〇分鐘。將 固體過滤以及用水（ 5 00毫升）沖洗，將生成之固體在p2〇5 上於減壓乾燥，得到為白色粉末之標題化合物（62 5 5公克 ，產率：8 4 %)。 b) iV- ( 2，6 -二氯-4 -甲基-3 - □比啶基）-2 -(乙胺基）-3 -吡啶羧 醯胺 將2 -氯(2，6 -二氯-4 -甲基-3 -吼啶基）-3 -吡啶羧醯胺 (63.17公克，194.0亳莫耳）及乙胺（28〇公克583毫莫耳） 溶於二甲苯（2 5 0毫升）之溶液在鋼製熱壓器中於1 2 〇 - 1 2 5 °C 攪拌7小時。將生成之懸浮液倒入水（丨公升）中，攪拌丨5分 鐘及過濾。將殘餘物溶於EtOAc以及用水（3 X )及鹽水接續 沖洗以及在Μ g S 04上乾燥。然後將二部分合併以及藉與苯 共蒸餾移除過多的二甲苯，而得到標題化合物（6 1 . 9 8公克 ，粉紅色固體），其為化合物之混合物之主要成分。該物質 在未經純化下被直接用於下一反應。 c) 5 -溴-TV-(2,6 -二氯-4-甲基-3 -吼啶基）-2-(乙胺基）-3-吡啶羧醯胺 將KOAc固體（22.2公克，229毫莫耳）加至粗製N-(2,6-二氯-4 -甲基-3 -吼啶基）-2 -(乙胺基）-3 -吡啶羧醯胺（6 1 . 9 8 公克，<190毫莫耳）溶於AcOH (600毫升）之溶液中。然 後經3 0分鐘加入溴溶液（9.7毫升，1 9 1毫莫耳）。攪拌3 0分 鐘後，引進額外量之KOAc及Br2，直至TLC顯示沒有原料 留下（總計1 1 .2公克KOAc及5 ·9 1毫升Br2)。然後將該溶液 倒入水（2公升）中並攪摔20分鐘。固體藉過濾移除，然後溶 -30- ^紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4规格(210x 297公茇) " 1270547 A7 ______ B7 _____ 五、發明説明（28 ) 於E t2〇（1公升）。將醚溶液用水（3 χ )，飽和碳酸氫鈉水溶 液及鹽水接續沖洗，然後乾燥（M g S〇4 )，得到以標題化合 物為主成分之混合物（7 7.7公克，黃色泡沫體）。該物質被 直接用於接下來之反應。 d) 8 -溴-2-氯-5, 1 1-二氫-1 1-乙基-4 -甲基-6//-二吡啶并 [3,2-b:2’，3’-e][l，4]二氮呼-6-酮 將粗製5 -溴(2,6 -二氯-4 -甲基-3 -吡啶基）-2 -(乙胺 基）-3 -吡啶羧醯胺（7 7 · 7公克，毫莫耳）溶於無水吡啶（1 . 〇 公升）之溶液加熱至50°C。然後逐滴加入NaHMDS溶於 THF (418毫升，418毫莫耳）之1 Μ溶液並再繼續攪拌15 分鐘。冷卻至室溫後，加入水（5 〇毫升）以及將混合物在旋 轉蒸發器上濃縮至2 / 3體積。然後將殘餘物倒入水（3公升） 中。過濾得到為茶色固體之標題化合物（23.44公克）。將滤 液用EtOAc (3 χ)萃取以及將合併之萃取液用水及鹽水接續 沖洗’然後乾餐（M g S〇4)’過〉慮及於減壓下濃縮。殘餘物 藉急速層析純化（己烷：E t〇A c，9 : 1或C H C 13)，得到額 外量之標題化合物（1 4 · 0 6公克，總量為3 7 · 5 0公克，3步驟 之產率為5 0 %)。 e) 2-氯-5, 11-二氫-1 1-乙基-4-甲基-8-(2-丙埽基）-6//-二吡啶并[3,2讣：2’，3’4；1[1，4]二氮呼-6-酮 將8 -溴-2 -氯〇, 1 1 -二氫-1 1 -乙基-4 -甲基-6 二吡咬并 [3,2-b.2 ,3 -e][l,4]二氮呼- 6-0^(12.6 公克，34·3 毫莫 耳）溶於D M F (2 5 - 0毫升）之溶液於減壓下除氣2 〇分鐘。然 後加入Pd(PPh3)4 (775¾克，0.7毫莫耳），繼而加入晞丙 -31 - 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（29 基二丁基錫（12.5亳升，41.ι毫莫耳）。於減壓下除氣1〇分 鐘後，將該混合物加熱至1〇〇它歷7小時。然後將該混合物 於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（己烷：Et〇Ac， 1 9 : 1 ) ’得到為黃色固體之標題化合物（8 · 〇 4公克，產率 :7 1 %)。 〇2-氯-5，11-一氫-11_乙基-8-(2-經乙基）-4-甲基-6好_ 二吼咬并[3，2 - b : 2 ’，3，- e ] [ 1，4 ]二氮呼-6 -酮 將〇3氣流引進2 -氯-5 , 1 1 -二氫-1 1 -乙基-甲基-8 - (2 -丙烯基）-6//-二吡啶并[3,2-b:2，，3，-e][1，4]二氮呼-6_ 酮 (8.04公克’24.4毫莫耳）及蘇丹111溶於{：^2(：12(120毫升） 及MeOH (120毫升）之冰冷溶液（-78t：)。當粉紅色溶液轉 變為褐色時，將氧成泡通入溶液中歷丨〇分鐘。然後加入 NaBH4 (1.12公克，29 _4毫莫耳）以及讓溶液溫熱至室溫 。30分鐘後，加入額外量之NaBH4 (5〇〇毫克）。i小時後 ，加入NHUCl飽和水溶液，然後將混合物攪拌2〇分鐘。將 溶液於減壓下濃縮以及用C Η2 C 12 ( 3 X )萃取。將合併之有 機萃取液用鹽水沖洗，乾燥（Mg SO d，過濾及於減壓下濃 縮。殘餘物藉急速層析（CHC13 : Et〇H，97 : 3)純化，得 到為白色固體之標題化合物（6 · 0 1公克，產率：7 4 %)。 g) 2 -氯-5，11-二氫-11-乙基-4-甲基-8-{2-(4-喹啉氧）乙 基}-6//-二吡啶并[3,2-13:2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮 將偶氮二叛酸二乙醋（DEAD)(83微升，0.53毫莫耳）於 皇溫逐滴加至2 -氯-5, 1 1-二氫-1 1-乙基輕乙基）_4_ 甲基-6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 -32- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 _ B7 _ 五、發明説明（3Q ), (125毫克，0.38毫莫耳），4-羥基喹啉（76.3毫克，0.5 3毫 莫耳）及Ph3P (138毫克，0.53毫莫耳）溶於THF (2.5毫升） 之溶液。將該混合物於室溫攪拌3小時，然後於減壓下濃縮 。將殘餘物溶於EtOAc (60毫升）以及將溶液用IN Na〇H 水溶液（3 X 1 0毫升）及鹽水（1 5毫升）接續沖洗，乾燥 (Mg S 〇4)，過濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析 - (E t〇A c : M e〇H，9 : 1)純化，得到為白色固體之標題化 合物（52 毫克，產率：30%)。MS (ESI) m/z 460/462 (MH)+。 實例VI (7號，表1) 5，11_二氫-11-乙基-2-氟-4-甲基-8-{2-(4-膣啉氧）乙基}-6//-二吡啶并[3,2-13:2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 a) 8 -溴-5，11二氫-11-乙基-2-{{(4-甲氧苯基）-甲基}胺 基}-4 -甲基-6//-二吡啶并[3,2-1):2，，3,4][1，4]二氮 呼-6 -酿1 在玻璃加壓瓶中，將8-溴-2-氯-5, 11-二氫-11-乙基-4-甲基- 6//- 一 D比淀并[3,2-b:2’，3，-e][l，4]二氮哩-6-酮 (2 · 5 0公克，6 · 8 0毫莫耳）溶於二咢烷（丨〇毫升）内，以及將 4 -甲氧基苄胺（4.0毫升，3〇.6毫莫耳）加至該溶液中。將該 混合物加熱至1 7 0 °C歷5日。讓反應混合物冷卻至室溫及於 減壓下濃縮。將殘餘物溶混在E t〇A c中，用1 〇 % N Η 4 C 1水 溶液沖洗，經M g S Ο4乾燥，過濾及於減壓下濃縮，得到褐 色油，將其在矽膠上層析（己烷：E t Ο A c，4 : 1 )。得到為 黃色固體之標題化合物（1 · 3 5公克，產率：4 2 %)。 ________— 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公爱） 1270547 A7 B7 五、發明説明（31 b) 2_胺基_8-溴-5，11-二氫-11-乙基-4-甲基·6仏二吡啶 并[3,2讣：2’，3’4][1，4]二氮呼-6_酮 將8->臭-5，11-二氫_11_乙基_2_川4_〒氧苯基）_甲基} 胺基卜心甲基^/^二吼淀扣二^^^⑴以二氮呼-6-酮（6·52公克，18.7毫莫耳）溶於三氟乙酸（1〇〇毫升）， 以及將該溶液於室溫下用磁棒攪拌18小時。將三氟乙酸於 減壓下备發以及將殘餘物倒入含水（45〇毫升）、濃ΝΗ4〇η (5 0¾升）及Et〇Ac (400毫升）之混合物中。將該混合物於 室溫下用磁棒攪拌2小時。將有機相於減壓下濃縮。將黃色 沉殺滤出，用水沖洗及於減壓下乾燥，得到7 · 5丨公克黃色 固體，將其用Eh 〇濕磨，得到為黃色固體之標題化合物 (5· 12公克，產率：1〇5%)。 c) 8 -溴-5，11-二氫-11_乙基_2-氟-4-甲基-6//_二吡啶并 [3,2-b: 2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮 將塑膠瓶饋入2 -胺基-8_溴-5, 11-二氫-11-乙基-4-甲基-6//-二吡啶并[3,2邛：2’，3,4][1，4]二氮呼-6-酮（5.10公克 ，14.6毫莫耳）。加入HF ·吡啶（1〇〇公克）以及將生成之懸 浮液冷卻至0 °C。將亞硝酸鈉（1 · 1 2公克，1 6 · 1毫莫耳）分 成數部分經3 0分鐘加入，產生紫色溶液。然後將該混合物 於室溫攪拌16小時。將反應混合物倒在冰及6 N NaOH上 。將灰褐色懸浮液用E10 A c萃取。將有機萃取液合併，經 MgS04乾燥，過濾及濃縮。將殘餘物用Et20/己烷濕磨， 得到標題化合物（4.3 0公克，產率：8 4 %)。 d) 5, 11 二氫-11-乙基-2 -氟-4 -甲基-8-(2 -丙烯基）-6//-二 -34- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1270547 A7 ___B7 五、發明説明（32 ) D 比 口定并[3，2 - b : 2，3 ’ - e ] [ 1，4 ]二氮呼-6 -酮 將缔丙基三丁基錫（7.77亳升，25.1毫莫耳）及Pd(Ph3P)4 (1·32公克，1.14¾莫耳）加至8·溴- 5，u_二氫·ι卜乙基_ 2 -氟-4 -甲基- 6//-二吡啶并[3，2 - b : 2，，3，- e] [ 1，4]二氮呼· 6-酉同（8.0公克，22.8毫莫耳）溶於dmf (114毫升）之除氣 (將N2通入溶液中歷30分鐘）溶液中。將該混合物加熱至9〇 °C歷3小時。將該混合物倒入水（25〇毫升）中及用Et〇Ac (4 X 2 5 0毫升）萃取。將合併之有機層用2〇% ΝΗ4〇ι^κ. 液（2 5 0耄升）及鹽水（2 5 0毫升）沖洗，乾燥（M g s 〇 *)，過濾 及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析（己烷：Et〇Ac，4 : 1至1 : 1)純化，得到標題化合物（3 .丨6公克，產率：5丨％) 〇 e) 5, 11-二氫-11-乙基-2 -氟-8-(2-羥乙基卜4 -甲基-6//-一 1:1比 4 并[3，2 - b _ 2 , 3 ’ - e ] [ 1，4 ]二氮吁-6 -酮 將臭氧化氧氣流成泡通入5，1 1-二氫丨_乙基氟·4-甲基-8-(2 -丙烯基二吡啶并 氮呼-6-酮（3.16公克，1〇.1毫莫耳）溶於(：1_12〇：12(25毫升） 及M e〇Η (2 5愛升）之冰冷（-7 8 °C )溶液中歷4 5分鐘。繼而 將氮氣流成泡通入溶液中歷15分鐘，然後將NaBH4固體 (669毫克，17.1毫莫耳）加到溶液中。讓反應混合物溫熱 至室溫。2小時後，加入NHqCl飽和水溶液（5〇毫升）並將 孩混合物於室溫攪拌1 5分鐘。於減壓下移除有機溶劑。將 殘餘水溶液用C H C 13 ( 3 X 3 0 0毫升）萃取。將合併之有機層 乾燥（MgS〇4)，過濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析 -35- 本紙張尺度適用巾國國家標i^(CNS) A4規格(21GX 297公羡) -------- 1270547 < A7

純化（E t 〇 A c : C H C h , 1 : 1)，得刭 a a 全 ^ ， J ；行巧為白色固體之標題化 合物（2·40公克，產率：75%)。 f) 二氫卜乙基_2_氟-4-甲基_8-{2-(4/喹啉氧）乙 基}-6// -二吡啶并[3,2_b:2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 將偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD)(U7微升，〇·59毫莫耳） 於立溫逐滴加至5，1 1 -二氫-1 1 -乙基-2 _氟-8 - (2 -羥乙基）· 4-甲基-6//-二吼啶并[3,2_b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 (125毫克，0.40毫莫耳），4_羥基堕啉（86.〇毫克，〇.59毫 莫耳）及Ph3P (156毫克，0.59毫莫耳）溶於丁 hf (1.9毫升） 之落液。將該混合物於室溫攪拌3小時，然後於減壓下濃縮 。將殘餘物溶於EtOAc (40毫升）以及溶液用3 n NaOH水 溶液（3 X 20毫升）、NH4C1飽和水溶液（1 5毫升）及鹽水（1 5 毫升）接續沖洗，然後乾燥（MgS04)，過濾及於減壓下濃縮 。殘餘物藉急速層析部分純化（EtOAc : MeOH，95 : 5) 。固體藉反相HPLC進一步純化（CombiPrep ADS-AQ 50 x20 mm，5 a，120 A, 5-100% MeCN + 0· 10% TFA/水 + 0· 1 0% TFA ’ 25分鐘），得到為白色固體之標題化合物之三 氟乙酸鹽（106毫克，產率：48%) : MS (ESI) m/z 444 (ΜΗ)、 實例VII(5號，表1) 11-(環丙基）-5，11-二氫-2-氟-4-甲基- 8- {2-(4 -喹啉氧）-乙基二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 a) 11-環丙基-5, 11-二氫-2-氟- 8-(2 -羥乙基）-4 -甲基-6//-二吡啶并[3,2-13:2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 -36- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（34 ) 使用與實例VI所述之對應η -乙基類似物相似之步驟， 從8 -溴-2 -氯-1 1 -環丙基-5，1 1 -二氫· 4 -甲基_ 6 二吼啶并 [3,2-b : 2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮製備標題化合物。 b) 11-環丙基-5，11-二氫-2-氟-4-甲基-8-{2-(4-喹啉氧） 乙基}-6丹-二□比啶并[3,2-b : 2，，3，义][1，4]二氮呼-6- 酮

將偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD)(131微升，0.66毫莫耳） 於室溫逐滴加至Π -環丙基-5，1 1 -二氫_ 2 -氟-8 - (2 - #呈乙 基）-4-甲基-6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1,4]二氮呼-6 -酮（140毫克，0.44毫莫耳），4 -羥基膣琳（96.4毫克， 0.66毫莫耳）及Ph3P (124毫克，0.66毫莫耳）溶於THF (2.2毫升）之溶液。將該混合物於室溫攪拌3小時，然後於 減壓下濃縮。將殘餘物溶於E10 A c (6 0毫升）以及將溶液用 3 N NaOH水溶液（3 X 20毫升），NH4C1飽和水溶液（20毫 升）及鹽水（20毫升）沖洗，然後乾燥（MgS〇4)，過濾及於 減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析部分純化（E10 A c : M e〇Η ，95 : 5)。固體藉反相HPLC進一步純化（CombiPrep ADS-AQ 50x20 mm，5 a，120 A，5-100% MeCN + 0 · 1 0% TF A /水+ 0 · 1 〇% TF A，25分鐘），得到為白色固 體之標題化合物之三氟乙酸鹽（1 〇 4毫克，產率：4 3 %): MS (ESI) m/z 45 6 (MH)、 實例VIII (8號，表1) 5，11-二氫-11-乙基-4-甲基-8-[2-(4-喹啉氧）乙基]-6//-二 D比啶并[3，2 - b : 2 ’，3 ’ - e ] [ 1，4 ]二氮呼-6 -酮 -37- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1270547 A7 __ 五、發明説明（35 ) a) 5, 1 1 -二氫_ i i-乙基-8_(2-羥乙基）_仁甲基·6//_二吡啶 并[3,2，b:2，，3，-e][l,4]二氮呼-6-酮 將2 -氯-5,11 —二氫-乙基-8-(2-羥乙基）-4 -甲基-6//-二吡啶并[3,2-b:2，，3，-e][l，4]二氮呼-6-酮（168 毫克， 0·51毫莫耳），甲酸銨（318毫克，5.1毫莫耳）與1〇% Pd/C (5 0毫克）在e t 〇 Η (6毫升）中之混合物於室溫攪拌。2 4小時 後’加入額外量之甲酸銨（200毫克，毫莫耳）及10 % Pd/C (5 0愛克）。再攪摔2 4小時後，將反應混合物於減壓下濃縮 。將殘餘物溶於CHC13以及將混合物用飽和NaHC03水溶 液沖洗，乾燥（Mg S04)，過濾及於減壓下濃縮，得到為黃 色油之標題化合物（122毫克，81%)。 b) 5, n -二氫-11-乙基-4-甲基- 8-(2-(4-喹啉氧）乙基}-6 丹-二吡啶并[3,2-b : 2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮

將偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD)(42微升，0.21毫莫耳） 於室溫逐滴加至5, 1 1 -二氫-1卜乙基- 8-(2-羥乙基）-4 -甲 基-6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3，^][1，4]二氮呼-6-酮（42.0 毫克，0.14毫莫耳），4 -羥基膣啉（31毫克，0.21毫莫耳） 及Ph3P (55.4毫克，0.21毫莫耳）溶於THF (0_7毫升）之 溶液。將該混合物於室溫攪拌2小時，然後於減壓下濃縮。 將殘餘物溶於EtOAc (60毫升）以及將溶液用3 N NaOH水 溶液（3X20毫升），NH4C1飽和水溶液（20毫升）及鹽水（20 毫升）接續沖洗，然後乾燥（MgS04)，過濾及於減壓下濃縮 。殘餘物藉急速層析部分純化（E t Ο A c : M e〇Η ; 9 5 ·· 5 ) 。固體藉反相HPLC進一步純化（CombiPrep ADS-AQ -38- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 x 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（36 ) 50x20 mm，5 必，120 A, 5-100% MeCN + 0.10% TFA/ 水+ 0 · 1 0 % T F A，2 5分鐘），得到為白色固體之標題化合物 之三氟乙酸鹽（14.2毫克，產率：19%) : MS (ESI) m/z 426 (MH)+。 實例IX (3號，表i) 11-(環丙基）-5,11-二氫-4-甲基- 8- {2-(4 -璧啉氧）-乙基}-6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3，-e；l[l,4]二氮呼 _6_ 酮 a) 5 -溴-2 -氯-tV-(2,6-二氯-4 -甲基-3-Q比啶基）-3-吡啶羧 醯胺 將3-胺基-2，6-二氯-4-甲基吡啶（0.5 1公克，2.8 5毫莫耳） 溶於曱苯（35毫升）以及加入吡啶（0.27毫升，3.28毫莫耳） 。然後經3 0分鐘逐滴加入5 -溴-2 -氯-3 -哦啶羰基氯（〇 . 8 0 公克’ 3 · 1 4毫莫耳）。將生成之混合物於室溫攪拌1小時， 用水稀釋及用甲苯（2 X )萃取。將合併之有機萃取液乾燥 (Mg S 〇4)，過濾及於減壓下濃縮。將生成之稠厚油與 C Η2 C 12 —起濕磨以及經由吸濾收集白色固體，得到標題化 合物（0 · 4 1公克，產率：3 6 %)。 b) 5 -溴- 2-(環丙胺基）-ΛΓ-(2，6 -二氯-4-甲基- 3-[ΐ比啶基）-3 -吡啶羧醯胺 將5 -溴-2 -氯Κ2,6-二氯-4 -甲基-3-[I比啶基）-3-吡啶羧 B蠢胺（3 _00公克，7.61毫莫耳）及環丙胺（2. 1 1毫升，30.5 毫莫耳）溶於二甲苯之溶液在密封試管中於1 2 0 °C加熱2 4小 時。讓反應混合物冷卻至〇°C，用水稀釋及用EtOAc (2 X ) 萃取。將合併之有機萃取液乾燥（M g S 0 4 )，過濾及於減壓 _ -39- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNs) A4規格(210 X 297公釐） 1270547

3:1)， • 7 5%) 下;辰、宿生成之殘餘物藉研磨純化（E t 2〇：己、丨 完， 得到為淡黃色固體之標題化合物（2.35公克，產率 〇 C) 8- /臭氯-1 b環丙基-5，1 b二氫-4 -甲基-6//-二吡啶 并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 將5-溴-2-(環丙胺基）^-(2,6•二氯_4_甲基_3_吼啶基卜 3 _吡啶羧醯胺（105毫克，0.254毫莫耳）溶於吡啶（3 〇毫升） 之溶液加熱至50°C ,同時加入NaHMDS溶於THF之1 Μ溶 液（0.53毫升，〇·53毫莫耳）。將生成之溶液於5〇。〇攪掉3 小時。反應用飽和NhCl水溶液終止，用水稀釋及用 EtOAc (3 X)萃取。將合併之有機萃取液用鹽水沖洗，乾燥 (Mg S 04)，過濾及於減壓下濃縮。將生成之殘餘物經由急 速層析純化（己烷：Et0Ac，7 : 3)，得到標題化合物（32 毫克，產率：3 3 %)。 d) 2 -氯-11·環丙基- 5，n -二氫_4 -甲基·8-(2•丙晞基）_ 6丑-二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4；][1，4]二氮呼-6-酮 8-〉臭-2-鼠-11-壤丙基_5，11-二氯-4-甲基- 6//-二□比咬 并[3,2-b : 2’，3’义][1，4]二氮呼-6-酮（0.〇46公克，〇.122 毫莫耳）溶於DMF (2.0毫升）之溶液藉用N2洗氣1 〇分鐘而 除氣。加入Pd(PPh3)4 (2.8毫克，0.003毫莫耳）及烯丙基 第三丁基錫（0.45毫升，0.146毫莫耳）以及將生成之溶液 加熱至9 0 °C歷2 · 5小時。將反應混合物用水稀釋及用 C Η 2 C 12 ( 3 X )及E t Ο A c (2 X )萃取。將合併之有機萃取液乾 燥（MgSCU)，過濾及於減壓下濃縮。將生成之殘餘物經由 -40 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（38 急速層析純化（己烷至己烷：Et〇Ac，7 : 3) 合物（0 · 0 3 3公克，產率：8 〇 %)。 e) 2 -氯-11-環丙基- 5，u -二氫_8气2_羥乙基卜仁甲基_ 6//-一 D比咬并[3,2-b : 2’，3’^][1，4]二氮呼-6-酮 將2 -氯-11-¾丙基- 5，n_二氫_4 -甲基丙晞基卜 6//-一吡哫并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6_酮（0 82 公 克，2.43耄莫耳）溶於(：112〇12(7.5毫升）及1^〇^[(7.5毫 升）之冰冷（-78C)溶液用〇3飽和，直至溶液轉變為淡藍色 。將反應混合物置於_78。〇歷1〇分鐘，然後加入NaBH4 (0.23公克，9.7 1亳莫耳）並讓該混合物經2小時緩慢溫熱 至1溫。反應用1 0 %檸檬酸水溶液終止以及用E t〇 A 〇萃取 (3x)。將有機萃取液合併，用鹽水沖洗，乾燥（MgS〇4)， 過濾及於減壓下濃縮。將生成之殘餘物經由急速層析純化 CMeOH · CH2C12，2· 1 〇%)，得到為白色固體之標題化合 物（0 · 4 1公克，產率：6 〇 %)。 f) 1 1 -環丙基-5，1 1 -二氫-8-(2 -羥乙基卜4 -甲基- 6//-二吡 啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6二酮 標題化合物用製備實例VIIIa中之u_乙基類似物之相似 方法製備。 g) 11-環丙基- 5，ll-二氫-4_甲基-8-{2-(4«璧啉氧）乙基}-6f二吼咬并[3,2-b:2，，3，-e][l，4]二氮呼i酮 將偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD)(167微升，〇·85毫莫耳） 於室溫逐滴加至1 1-(環丙基二氫-8-(2_經乙基卜4-甲基-6β-二吡啶并[3,2_b : 2，，3，-e][l 4]二氮呼酮 -41 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（39 (i75毫克，〇·57毫莫耳），4 -羥基膣啉（123毫克，〇85毫 莫耳）及Ph3P (22 3毫克，0.85毫莫耳）溶於THF (2.8毫升） 之溶液。將該混合物於室溫攪拌3小時，然後於減壓下濃縮 。將殘餘物溶於EtOAc (60毫升）以及將溶液用3 N NaOH 水溶液（3 X 20毫升），NH4C1飽和水溶液（20毫升）及鹽水 (20毫升）接續沖洗，然後乾燥（MgS〇4)，過濾及於減壓下 濃縮。殘餘物藉急速層析部分純化（E t Ο A c : M e Ο Η ; 9 5 :5 ) ’得到為白色固體之標題化合物（7 4毫克，產率：3 0 %) :MS (ESI) m/z 43 8 (MH)+ 〇 實例x (21號，表1) 5, 11- 一氲-ll -乙基-5-甲基- 8- {2-{(l -氧化物-4 -堕啉基） 氧}乙基二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6- 酬 將固體CPB A ( 8 0- 8 5 %，間-氯過苯甲酸）（2.2 1公克， 10.2毫莫耳）於室溫加至5, 11-二氫-11-乙基-5-甲基-8- {2-(4-喹啉氧）乙基卜6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3，-e][l,4] 二氮呼-6-酮（2.56公克，6.02毫莫耳）溶於CH2C12 (30毫 升）及THF (30¾升）之落液（注意反應可在單獨的ch9C12 中進行）。將該混合物於室溫攪掉1小時，然後於減壓下濃 縮。將殘餘物溶於C H C 13 (4 0 0毫升），然後將該溶液用 10% Na2S2〇3 Οχ75 毫升），NaHC03 飽和水溶液（3x75 毫升）及鹽水（7 5毫升）接續沖洗，乾燥（μ g S Ο 4),過滤及 於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（CHC 13 : MeOH， 9 : 1 )，得到為白色固體之標題化合物（2 · 〇 1公克，產率： -42- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（41 ) 實例XIII (10號，表1) 2 -氯-11-環丙基-5，ll-二氫-5-甲基_8-{2-{(l-氧化物-4-堕啉基）氧}乙基}-6//-二吡啶并[3,2-b:2，，3，-e][l，4]二 氮呼-6 -嗣 將固體〇1〇?8八（177毫克，0.82毫莫耳）於室溫加至2-氯-11-環丙基-5，11-二氫-5-甲基-8-{2-(4-喹啉氧）乙基}-6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1,4]二氮呼-6-酮（143毫 克，0.30毫莫耳）溶於CH2C12 (3毫升）及THF (3毫升）之 溶液。將該混合物於室溫攪拌i 4小時，然後於減壓下濃縮 。將殘餘物溶於EtOAc (50毫升），然後將該溶液用10% Na2S203 (3 X 1 0毫升），NaHC〇3飽和水溶液（3 X 1 0毫升） 及鹽水（10毫升）接續沖洗，乾燥（MgS〇4)，過濾及於減壓 下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（E t〇A c : M e Ο Η，9 5 : 5 至CH2C12 : MeOH，9 : 1)。不純化合物藉反相HPLC (CombiPrep ADS-AQ 5〇χ20 mm, 5 //, 120 A, 5- 100% MeCN + 0.10% TFA/水+ 0.10% TFA，25 分鐘）進 一步純化。將純部分用飽和NaHC03水溶液處理，用 EtOAc萃取，以及將溶液乾燥（MgS04)，過濾及於減壓下 濃縮，得到為白色固體之標題化合物（2 8.3毫克，產率： 19%) : MS (ESI) m/z 48 8/490 (MH)+。 實例XIV (14號，表1) 2 -氯-5，11-二氫-11-乙基_4-甲基-8-{2_{(1-氧化物-4-膣 啉基）氧}乙基二吡啶并[3,2-b : 2，，3，-eni，4]二氮 呼 - 6 -酮 -44- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) — 1270547 A7 ____ B7 ____ 五、發明説明（42 ) 將固體mCPBA (46.9毫克，0.22毫莫耳）於室溫加至2-氯-5，1!-二氫-11-乙基-5-甲基-8- {2-(4-膣啉氧）乙基}-6丹_二吡啶并[3,2-13:2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮（50.0毫 克’ 〇· 1 1毫莫耳）溶於CH2C12 (2.2毫升）之溶液。將該混 合物於室溫攪拌1小時，然後於減壓下濃縮。將殘餘物溶於 EtOAc (50毫升）。將該溶液用1〇% Na2S203水溶液 (3M0毫升），NaHC03飽和水溶液（3x10毫升）及鹽水（10 毫升）接續沖洗，乾燥（MgSO4)，過濾及於減壓下濃縮。殘 餘物藉反相 HPLC (CombiPrep ADS-AQ 5 0 x 20 mm，5 A，120 A，5-100% MeCN +0.10% TFA/ 水 +0.10% TF A，25分鐘）進一步純化。將純部分用飽和NaHC03水溶 液處理，用EtOAc萃取，以及將溶液乾燥（MgS04)，過濾 及於減壓下濃縮，得到為白色固體之標題化合物（32.5毫克 ’產率：63%) : MS (ESI) m/z 488/490 (MH)+。 實例XV (9號，表1) 5，11-二氫-11-乙基-2_氟-4_甲基-8-{2-{(1-氧化物_4-膣 啉基）氧}乙基二□比咬并[3,2-b : 2，，3，-6][1，4]二氮 呼-6 -酮 使用與實例XIV者相同之方法，從5，1 1 _二氫-丨丨_乙基- 2 -氟-4 -甲基-8-{2-(4-膣啉氧）乙基二吡啶并[3,2-b .2 ,3 -e][l，4] 一氮呼-6·酮（125毫克，0.28毫莫耳）製得 為白色固體之標題化合物（40毫克，產率：31%) : Ms (ESI) m/z 460 (ΜΗ)、 實例XVI (12號，表1) -45- 本紙張尺度適财關家料(CNS) Α4規格(210X297公董)----------- 1270547 A7 B7 五、發明説明（44 ) 二吡啶并[3,2-b : 2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮 將偶氮二羧酸二異丙酯（DEAD)(77微升，0.49亳莫耳）於 室溫逐滴加至2 -氯-5, 1 1-二氫-1 1-乙基-8-(2-幾乙基）-4-甲基二吡啶并[3,2-b : 2，，3，<][1，4]二氮呼_6_酮（125 毫克，0.38毫莫耳），5-羥基膣啉（70_9毫克，〇·49毫莫耳） 及Ph3P (128毫克，0·49毫莫耳）溶於THF (2.5亳升）之溶液 。待1.5小時後，將另外量之〇丑八〇(3 5微升，0.22毫莫耳） 及PPhs (59毫克，0.22毫莫耳）添加至混合物中。將該混合 物於室溫攪拌1小時，然後用EtOAc (50毫升）稀釋以及將溶 液用1 N NaOH水溶液（4 X 10毫升）及鹽水（15亳升）沖洗， 然後乾燥（MgSCU)，過濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速 層析純化（CH^Cl2 :丙酮，85 : 15)。將生成之固體用乙醚 濕磨’得到為白色固體之標題化合物（3 8毫克，產率：2 2 %) :MS (ESI) m/z 460/462 (MH)+。 實例XIX (20號，表1) 2 -氟-5，11_二氫-1 1-乙基-5-甲基- 8-[2-{(l-氧化物-5-喹啉 基）氧}乙基]-6/f -二吼淀并[3,2-b: 2’,3’-€][1，4]二氮口平-6-酮 將偶氮二羧酸二異丙酯（DEAD)(160微升，1.01毫莫耳 於室溫逐滴加至2 -氣-5，1 1 -二氫-1 1 -乙基-8 - (2 -經乙基）- 5 -甲基 _6//-二 D比淀并[3,2-b : 2’，3’-6][1，4]二氮呼-6-酮 (225毫克，0.68毫莫耳），5-¾基膣啉（147毫克，1.01毫 莫耳）及Ph3P (266毫克，1.01毫莫耳）溶於丁 hf (3.4毫升） 之溶液。將該混合物於室溫攪拌3小時，然後於減壓下濃縮 。殘餘物藉急速層析部分純化（E t Ο A c : M e Ο Η ; 9 5 : 5 ) 一____-47-_ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 χ 297公釐） 1270547 A7 B7 五、發明説明（45 。將含5-陸啉氧衍生物之部分濃縮，溶於（：1^(：12 (2毫升） 及THF (5毫升）以及a (80%，248毫克，1.15毫 莫耳）於室溫處理。將溶液於室溫攪拌2.5小時，然後於減 壓下濃縮。將殘餘物溶於E t〇A c ( 5 0毫升），用1 〇 % Na2S2〇3 (3><10笔升），NaHC〇3飽和水溶液（3xl〇毫升） 及鹽水（ίο毫升）接續沖洗，然後乾燥（MgS〇4)，過濾及於 減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（Et〇Ac : Me〇H， 95 : 5至CH2C12 : Me〇H，9 : 1)，得到為白色固體之標 題化合物（113毫克，2步驟之產率·· 35%) ; Ms (ESI) m/z 476/478 (MH)+ 〇 實例XX (18號，表1) 5，11-二氫-11-乙基-2-氟-5-甲基-8-{2_{(1-氧化物_5-璧 啉基）氧}乙基二吡啶并[3,2-b : 2，，3，-e][1，4]二氮 呼· - 6 -酮 使用與實例XIX者相同之方法，從5，1 1 -二氣_丨丨_乙其 2-氟-8-(2-羥乙基）-5-甲基-6//-二吡啶并[3,2_b : 2，3, e][l，4]二氮呼-6-酮（267毫克，0.84毫莫耳）製得為白色固 體之標題化合物（204毫克’ 2步驟之產率：52%) : Ms (ESI) m/z 460 (MH)+ 〇 實例XXI (19號，表1) 2-氯二氫-11-乙基-4-甲基-8_{2_{(1_氧化物_5_膣 啉基）氧}乙基}-6// -二吡啶并[3,2-b :。，。，-已川⑷二氮 呼-6 -酮 使用與實例XIX者相同之方法，並用偶氮二羧酸二異丙 -48- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7

醋（DIAD)取代偶氮二羧酸二乙酯， 一 117曾。 <2 -鼠- 5，ll -二氯- 1 1-乙基-8-(2-羥乙基）-4-甲基-6分 _ 9，1Γ1 ^ -〜比啶并[3,2-b : 2，3 -e][l，4]二氮呼-6-酮（223 毫克，n r 上 ^•67毫莫耳1 白色固體之標題化合物（43.4毫克，2步职、、 )軋诗為 少，弥 < 產率：1 4 % ): MS (ESI) m/z 476/478 (MH)+ 〇 貫例X X11 (2 3號，表1) 5, 11- 一氫-ll -乙基-2-氣-4-甲基U2 /,ι严 i 2 - {( 1 -氧化物-5 -喹 琳基）氧}乙基卜6// -二吡啶并[3,2讣· ？，q， Ί ，2，3 -e][l，4]二氮 呼-6 -酉同 使用與實例X XI者相似之方法，從5 η 一& 1 1 1又J’ii - 一氲-11_乙基 2 -氟- 8- (2 -#莖乙基）-4 -甲基- 6// -二 Π比喊并[3,2-b : 2，3, e] [1，4]二氮呼-6-酮（2 5 0毫克，0.79毫莫耳）製得為白色 固體之標題化合物（64.7毫克，2步驟之產率：18%) : (ESI) m/z 460 (ΜΗ)、 實例XXIII (22號，表1) 2 -氯-5，11-二氫-11-乙基-8-{2-{(1-氧化物-4-膣啉基）氧） 乙基}-6// - — D比口Λ 并[3,2-b · 2，3’-e][l，4]二氮呼-6-酮 MS (ESI) m/z 462/464 (MH)、 實例XXIV (26號，表1) 5，11-二氮-5, 11- 一 乙基- 8- {2-(4 -壁琳氧）乙基}_6// -二 吡啶并[3,2-b : 2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮 MS (ESI) m/z 440 (MH)+。 實例XXV (27號，表1) 5, 11-二氫-5,11-二乙基-8-{2-{(1-氧化物-4-喹啉基）氧} -49- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（47 ) 乙基卜6//-二吡啶并[3,2-b : 2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮 MS (ESI) m/z 4 5 6 (MH)+ 〇 實例XXVI (28號，表1) 2,5 -二甲基-5, 11-二氫-11-乙基- 8- {2-{(l -氧化物-4-堕 啉）氧}乙基}-6// -二吡啶并[3,2-b : 2’，3’^][1，4]二氮 呼-6 -酮 a) 5 -溴-2-氯- #- (6*•氯-2-甲基-3-口比淀基）-3-〇比咬幾酿胺 將NaHC03 (3.9公克，46.4毫莫耳）加至3-胺基-2-氯- 6-甲基D比淀（2.2公克’15·4¾莫耳，如K.G·Grozingeret al. J· Heterocyclic Chem. 1 995，32，259-263 所述製備）溶 於M e C N ( 5 0毫升）之溶液中。將生成之懸浮液攪拌1 5分鐘 ，以及經30分鐘引進粗製5-溴-2-氯-3-吼啶羰基氯（4公 克）（從5 -溴-2 -羥基-3 - [I比啶羧酸及S〇C 12製備）[如丁 . W . Gero et al.在 Synth. Commun. 1989，19，553-559 中所述 (納入本文以供參考），但省略水性處理步驟]溶於M e C N (1 0毫升）之溶液。將生成之懸浮液於室溫攪拌。2 4小時後 ，將混合物倒入水（100毫升）與冰（10公克）之混合物中並擾 拌2 0分鐘。將懸浮液過濾以及將生成之固體用水（5 〇毫升） 及己燒（2 5毫升）沖洗，然後於減壓下在P 2〇5上乾燥，得到 為白色粉末之標題化合物（1.8公克，產率：31%)。 b) 5->臭-//-(2 -鼠-6-甲基-3-吼淀基）-2-(乙胺基）-3 -□比咬 羧醯胺 將5 ->臭-2-氯·Ί(2 -氯-6-甲基- 3-¾淀基）-3 -□比淀叛g蠢胺 (1.7公克，4· 8毫莫耳）及乙胺（2 Μ，在THF中，10.5毫莫 -50- 、本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公釐) 1270547

耳，5.2亳升）溶於THF (5毫升）之溶液在不銹鋼熱壓器中 糸9 0 9 5 c撥拌1 6小時。將生成之混合物倒入水（1 〇 〇毫 升）中’攪掉1 5分鐘及過濾。將固體用水及己烷接續沖洗， 得到為黃色固體之標題化合物（158公克，產率：89%)。 c) 8-溴-5，n_二氫_2,5_二甲基乙基_6丑-二吡啶并 [3,2叶：2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 將粗製5 -溴-A/"- (2 -二氯-6 -甲基-3 - □比啶基）-2 -(乙胺基）_ J α比淀S藍胺（0.7公克，1 · 8毫莫耳）溶於無水π比这（丨g毫升） 之溶液加熱至50°C。然後逐滴加入NaHMDS溶於丁HF之1 Μ溶液（7.2毫升，7.2毫莫耳）並繼續攪拌3小時。冷卻至室 溫後，加入甲基碘（0.6毫升，9毫莫耳）並將反應物攪拌整 夜。加入水（25毫升）以及將混合物用ε t〇Ac (3 X)萃取， 並將合併之萃取液用水及鹽水接續沖洗，然後乾燥 (Mg S 〇4)，過濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化 (己燒· E10 A c，8 : 2 )，得到標題化合物（2 5 9毫克，產率 :4 1 % 卜 d) 5, 11-二氫-2,5 -二甲基-11-乙基-8-(2 -丙烯基）-6好-二 吡啶并[3,2-b : 2’，3’4；1[1,4]二氮呼-6_酮 將8 -溴-5，1 1-二氫-2,5-二甲基-1 ι _乙基-6好_二吡啶并 [3,2-13:2’，3’4][1，4]二氮呼-6-酮（2 5 8 毫克，〇.7毫莫耳） 溶於DMF (7.4毫升）之溶液於減壓下除氣2〇分鐘。然後加 入Pd(PPh3)4 (43毫克，0.04毫莫耳），繼而加入晞丙基三 丁基錫（0.3毫升，0 · 8 5毫莫耳）。於減壓下除氣丨〇分鐘後 ，將該混合物加熱至1 〇 〇 °C歷1 . 5小時。然後將該混合物於 -51 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（49 減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（己烷：E t 〇 a c，8 : 2) ’得到為·黃色固體之標題化合物（184毫克，產率：98〇/〇) 〇 e) 5，11-二氫-2,5-二甲基_11-乙基-8-(2-羥乙基）-6//-二 吡哫并[3,2讣：2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 將〇 3氣泥引進5，1 1 -二氫-2,5 -二甲基-1 1 -乙基-8 - (2 -丙 烯基）-6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼_6_酮 (187毫克’ 〇.6毫莫耳）及蘇丹III溶於CH2C12(3毫升）及 Me OH (3毫升）之冰冷（_78t)溶液。當粉紅色溶液轉變為 褐色時’將〇2成泡通入溶液中歷1〇分鐘。然後加入NaBil4 (5 7愛克’ 1 , 5 2亳莫耳）以及讓該溶液溫熱至室溫。3 〇分鐘 後’加入額外量之N aB Η 4 (2 0毫克）。2小時後，加入 NhCl飽和水溶液並將該混合物攪摔2〇分鐘。將該溶液於 減壓下濃縮以及用CH2C12 (3x)萃取。將合併之有機萃取 液用鹽水沖洗，乾燥（M g S Ο4 )，過濾及於減壓下濃縮。殘 餘物藉急速層析純化（Et0Ac :己烷，6 : 4),得到為白色 固體之標題化合物（1 1 1毫克，產率：5 8 〇/〇)。 f) 2,5 - 一 甲基-5, 11-二氫-11-乙基- 8- (2-(4-堕琳氧）乙 基}-6//-二吡啶并[3,2_b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6_酮 將偶氮二羧酸二乙酯（DEAD)( 13 9微升，0.88毫莫耳）於 室溫逐滴加至5, 11-二氫- 2,5 -二甲基-11-乙基- 8- (2-羥乙 基）-6 一 □比咬并[3,2 - b : 2 ’，3 ’ - e ] [ 1，4 ]二氮呼-6 _ g同 (u〇毫克，0.35毫莫耳），4 -羥基喹啉（128毫克，0.88毫 莫耳）及Ph3P (231毫克，0.88毫莫耳）溶於THF (3.5毫升） _ - 52 - 本紙張尺度適财目时鮮(CNS) A4規格(210><297公釐) 1270547 A7 __ B7 五、發明説明（5〇 ) 之溶液。將該混合物於室溫攪拌16小時，然後用Et〇Ac (6 0耄升）稀釋以及將溶液用1 n N a Ο Η水溶液（3 X 1 0毫升） 及鹽水（15毫升）沖洗，然後乾燥（MgS04)，過濾及於減壓 下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（先用E t〇a c，然後用 EtOAc : MeOH，9·5 : 0_5)，得到為白色固體之標題化 合物（57 亳克，產率：37%) ·· MS (ESI) m/z 440 (ΜΗ) + ο g) 5，ll-二氫-2,5-二甲基-ll-乙基_8-{2-{(l-氧化物-4-喹啉基）氧}乙基}-6i7-二CI比啶并[3,2-b:2，，3，-eΠl，4] 二氮呼-6 -酮 將固體mCPBA (80-85 %，間-氯過苯甲酸）（6〇毫克， 0.28¾莫耳）於室溫加至5，ll-二氫-2,5-二甲基-ll-乙基-8-{2-(4-喹啉氧）乙基}-6//-二Π比淀并[3,2-b:2，，3，-eΠl，4]二氮呼-6-嗣（55毫克，0.l3毫莫耳）溶於cH2C1フ (1 . 3耄升）之溶液。將該混合物於室溫揽拌2 · $小時，然後 用CH^Cl2稀釋。將生成之溶液用Na2S203水溶液， NaHC〇3飽和水溶液及鹽水接續沖洗，乾燥（MgS〇4)，過 濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化 (MeOH/EtOAc，2°/〇-5%)，得到為白色固體之標題化合 物（59 爱克’產率：99%) ; MS (ESI) m/z 456 (MH)+。 實例XXVII (29號，表1) 5，11-二氫-11-乙基-5-甲基-8-{2-{(1-伸氧基_4-堕啉）氧} 乙基}-2-(二氟甲基）-6 二 α 比咬并[3,2-b : 2，，3，-e][l，4] 二氮呼-6-酮 -53- f紙張尺度適用中S @家標準(CNS) A4規格(21GX 297公爱) -- 1270547 A7 __ B7 五、發明説明（51 ) a) 2 -(乙胺基）-3 -硝基-6 -(三氟甲基）吼啶 在2-硝基乙醯胺銨鹽（4公克，33毫莫耳）溶於水（丨65毫 升）之溶液中，加入六氫吡錠乙酸鹽（3 3毫莫耳）溶於水之溶 液，繼而緩慢加入4-乙氧基三氟-3-丁晞-2一酮（61 毫升，43毫莫耳）溶於MeOH (11毫升）之溶液。將反應混 合物於室溫攪拌2小時以及回流3小時。讓反應混合物冷卻 至45 °C以及加入HC1水溶液（1 n)直至pH值為酸性。於室 溫反應1小時後，將反應混合物用C Η 2 C 12 ( 3 X)萃取。將合 併之有機層用水及鹽水接續沖洗，乾燥（M g s 〇 4 )，過遽及 於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（先用Et〇 Ac，然後 用E t Ο A c : M e 0 Η，9 : 1)，得到為黃色固體之3 _硝基_ 6 · (三氟甲基）-2 (1 i/) - D比淀g同（2 · 7公克，產率：4 0 %)。 在3-硝基-6-(三氟甲基）-2(1//)-吡啶酮（2.4公克，11.5 耄莫耳）溶於DMF (69毫升）之溶液中，加入氫化鈉（350毫 克’ 1 3 . 8毫莫耳）。將反應混合物於4 5 °C攪拌3 0分鐘，冷 卻至室溫以及加入N -苯基三氟甲烷磺醯亞胺（4 · 9公克， 13.8毫莫耳）。1小時後’加入乙胺溶於thF (13毫升，25 毫莫耳）之2 Μ溶液。將反應混合物於室溫攪拌整夜。將反 應混合物倒入水（100毫升）中以及用EtO Ac (3 X)萃取。將 合併之有機層用水及鹽水接續沖洗，乾燥（MgSO4)，過濾 及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（己烷：E t Ο A c， 9 : 1 ) ’得到為黃色油之期望化合物（1 . 1公克，產率：4 1 % ) 〇 b) 3-胺基-2-(乙胺基）-6-(三氟甲基）□比啶 -54- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) " 1270547 A7 B7 五、發明説明（52 ) 將2 -(乙胺基）-3 -硝基-6 -(三氟甲基）吼啶（i i公克，4 · 9 毫莫耳）溶於MeOH (40毫升）之溶液，於存在2〇0/〇 Pd(〇H)2/C (100毫克）下，於室溫及氫氣（1大氣壓）下擾 拌整夜。觸媒經由矽藻土過濾而移除。將濾液於減壓下濃 縮，得到為燈色油之標題化合物（1公克）。 c) 2 -氯乙胺基）-6-(三氟甲基）-吡啶基卜5-溪-3 -吡啶羧瞼胺 在3 -胺基- 2- (乙胺基）-6-(三氟甲基）α比啶（丨公克，4.9毫 莫耳）落於M e C Ν (2 4毫升）之冷卻溶液中，加入固體 NaHC03 (9 06毫克，1 1毫莫耳）。5分鐘後，加入粗製5-溴-2 -氯-3 - □比啶羰基氯（1當量，4.9毫莫耳）（從5 -溴-2 - #呈 基-3-□比啶羧酸及SOCl2製備)[如T.w· Gero et al·在Synth. Commun. 1 989，19，5 53 -5 59中所述（納入本文以供參考）， 但省略水性處理步驟]溶於MeCN (10毫升）之溶液。2小時 後’將反應）m合物倒在冰/ Η2 0 (1 · 5公升）上，以及將生成 之固體過濾、’用水及己燒沖洗。於減壓下乾燥整夜後，得 到為淡褐色固體之標題化合物（1 · 6公克，產率：7 7 %)。 d) 8-/^：- 5,11- 一氮-11-乙基- 2- (三氟甲基）-6// -二吼淀并 [3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 在2 -氯乙胺基）-6-(三氟甲基）-3-吡啶基卜％溴_ 3 -吼淀複醒胺（7 6 6毫克，1 · 8毫莫耳）溶於D M F (1 8毫升） 之溶液中，加入NaH (137毫克，5.4毫莫耳）。將反應混合 物於8 0 °C攪;拌。1小時後，讓反應混合物冷卻至室溫，然 後倒入水（20毫升）中。將生成之混合物用EtOAc (3x)萃取 -55- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（53 。將合併之有機層用水及鹽水接續沖洗，乾燥（MgS〇4)， 過濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化（己烷： EtOAc，7 : 3)，得到為黃色固體之期望化合物（2〇〇毫克 ’產率：2 8 %)。 e) 8 -溴-5，11-二氫-11- 乙基-5-甲基_2-(三 氟甲 二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮呼-6-酮 在8-溴-5, 11-二氫-11-乙基-2气三氟甲基）_6好·二吡啶 并[3,2-b · 2，3’-e][l，4]二氮呼 _6_酮（2〇〇 毫克，oh 毫 莫耳）溶於DMF (2.6毫升）之溶液中，加入NaH (2〇毫克， 〇 . 7 8耄莫耳），以及將該混合物加熱至5 〇它歷3 〇分鐘。將 反應混合物冷卻至室溫以及用M el (9 7微升，1 · 5 6毫莫耳） 處理。1 6小時後，將反應混合物用水稀釋。將生成之混合 物用EtOAc (3x)萃取。將合併之有機層用水及鹽水接續沖 洗，乾燥（MgS〇4)，過濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速 層析純化（己院：EtOAc ’ 8·5 : Μ)，得到為白色泡沫體 之標題化合物（1 1 〇毫克，產率：5 3 %)。 f) 5，11-二氫-11-乙基-5_甲基-8-(2-丙烯基）_2_(三氟甲 基）-6//-二吡啶并[3,2-b : 2，，3，^][1，4]二氮呼_6-酮 將缔丙基三丁基錫（98微升，〇·32毫莫耳）及Pd(Ph3P)4 U6毫克’ 0.02毫莫耳）於室溫加至8_溴乃，丨N二氫_丨卜乙 基-5 -甲基-2-(三氟甲基）-6//-二吡啶并[3,2-b: 2，，3,-e] f1，4]二氮呼-6-酮（11毫克，〇·27毫莫耳）溶於DMF (1.4 笔升）之除氣（將N2通入溶液中歷3 〇分鐘）溶液中。將該混合 物於9 0 C攪拌1 · 5小時，然後冷卻至室溫及於減壓下濃縮。 -56- 1270547 A7 ----^____ B7 五、發明説~) --- 殘餘物藉急速層析（己烷：Et〇Ac，8 : 2至7 : 3)純化，得 到標題化合物（101毫克，產率·· 9 9%)。 g) 5,11 一氫乙基-8_(2·經乙基甲基三氟甲 基二吡啶并[3,2_b : 2，，3,4][1，4]二氮呼_6_酮 將臭氧化氧氣流成泡通入5，π_二氫乙基甲基ία-丙烯基）-2-(三 氟甲基）-6Η-二吡啶并 [3,2-b:2，，3，-e] [丨’4] 一氮呼-6-酮（1〇〇毫克，0.27毫莫耳）溶於CH2C12 (2·7毫升）及MeOH(2·7毫升）之冰冷（-78t：)溶液中歷2·5 小時。繼而將氮氣流成泡通入溶液中歷丨5分鐘，然後將 NaBH4固體（52毫克，1.4毫莫耳）加到溶液中。讓反應混 6物/m為土 ▲溫。；[小時後’加入Ν η 4 c 1飽和水溶液（5毫升） 並將該混合物於室溫攪拌2小時。將反應混合物用ch2C12 稀釋以及水層用CH2C12再萃取。將合併之有機層用水及鹽 水接續沖洗，乾燥（MgS04)，過濾及於減壓下濃縮。殘餘 物藉急速層析純化（EtOAc :己烷，75 : 25至EtOAc 100%) ’得到為白色固體之標題化合物（6 〇毫克，產率：5 9 %)。 h) 5，1 1-二氫_u•乙基-5-甲基·8-{2_(4-堕啉氧）乙基}-2-(三氟甲基）-6H-二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二 氮呼-6 -酮

將偶氮二羧酸二乙酯（DEAD)(38微升，〇·24毫莫耳）於 室溫逐滴加至5，1 1 -二氫-1 1 -乙基-8 - (2 -經乙基）-5 -甲基-2-(三氟甲基二吡啶并[3,2-b : 2，，3,4][1，4]二氮 呼-6-酮（58毫克，〇·16毫莫耳），4 -羥基喹啉（35毫克， 0.24毫莫耳）及ph3P (62公克，0.24毫莫耳）溶於THF I_ :· 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1270547 A7 B7 五、發明説明（55 (1 · 6耄升）之溶液。將該混合物於室溫攪拌1小時，然後於 減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析（EtOAc : MeOH ; 95 : 5) 純化，得到為白色固體之標題化合物（24毫克，產率：3 1%) 0 MS (ESI) m/z 494，49 5 (MH)+。 i) 5，11- 一氫-11-乙基-5 -甲基- 8- {2-(l -氧化物-4-璧啉基） 氧}乙基}-2-(三氟甲基）-6//-二吡啶并[3,2-1):2，，3，-e ] [ 1，4 ]二氮吁-6 -酮 將固體mCPBA ( 8 0 - 8 5 %，間-氣過苯甲酸）（16毫克， 〇.〇8毫莫耳）於室溫加至5，11-二氫-11-乙基-5-甲基- 8-{2-(4 -喹啉氧）乙基}-2-(三氟甲基）-6//-二吡啶并[3,2-b :2’，3’4][1，4]二氮呻-6-酮（22毫克，〇,〇4毫莫耳）溶於 C H 2 C 12 (0 · 5毫升）之溶液中。將該混合物於室溫揽拌2 · 5 小時’然後用C Η2 C 12稀釋。將生成之溶液用1 〇 0/〇 NajsO3 ’ NaHC〇3飽和水溶液及鹽水接續沖洗，乾燥 (Mg S〇4)，過濾及於減壓下濃縮。殘餘物藉急速層析純化 (MeOH : CHC13，5%至10%)，得到為白色固體之標題化 合物（11 毫克，產率：52%) ; MS (ESI) m/z 511 (MH) + -58- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（56 ) 表1 式I之化合物

r2<

表1 編號 R2 R4 R5 R11 Q 1 C1 Me H Et 2 C1 H Me Et 3 Η Me H CycPr 4 F H Me Et 5 F Me H CycPr 6 Cl H Me CycPr 7 F Me H Et \9 \^N -59- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（57 )

表1 編號 R2 R4 R5 R11 Q 8 Η Me H Et 9 F Me H Et 0 10 Cl H Me CycPr 0 11 F H Me Et 12 Η Me H Et 14 Cl Me H Et \。一 15 Η Me H CycPr 0 -60- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 B7

1270547 A7 ________B7 五、發明説明（6〇 ) 反錄酶（RT)測定 測定理論： 在人類免疫缺乏病毒（ΗIV - 1 )編碼之酶中為反錄酶（1 )， 其所以如此命名，係因為其模板轉錄為DNA。該活 性可在無細胞酶測定中被定量，亦即在使用合成模板聚r( c) 及以生物素化寡d(G)為引子下，觀察反錄酶利用3H-dGTP 作為受質，轉錄為放射線-標記之dna股之能力。下述測 足利用野生型酶（其為在感染Ηΐν-丨病人中最常觀察到之形 式），亦在類似之測定條件下使用突變RT酶（舉例言之， Y181C ’藉部位-指引突變而製備，其中在密碼ι81處之酪 胺酸殘基被半胱胺酸殘基取代）。該測定可以評估化合物在 抑制突變酶上之效力。 材料： a)酶之製備 一些 HIV-1 IIIB 純系 BH10 RT 突變體由 Dr. C.-K. Shih (Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc.，U.S.Α·)以 載體pKK23 3 -2 (Pharmacia)之形式提供。簡言之，只含 I皆由lac操縱子/trc啟動子調節之rt p66基因之HIV R 丁純 系pKRT2得自Dr. W. Summers(耶魯大學）（2)。各種特 異性胺基酸取代藉由部位-指引突變被引進野生型RT基因 中。將RT純系再選殖入ρκΚ2 3 3 -2細菌表現載體中。提供 之純系包括野生型、Vall06Ala、Tyrl81Cys、Tyi*188Cys、 Tyrl8 8Leu、Glyl90Ala 及 Pro23 6Leu。其他藉由 pKK233-2 RT純系之部位-指引突變而製得者包括Ly si 03 As η、 __ -63- 本紙張尺度適用申國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公釐） 1270547 A7 B7 五、發明説明（61 )

Lysl03Asn/Tyrl81Cys > Lys 1 03Asn/Leu 1 OOIle > Lysl03Asn/ Pro22 5His&&Lysl03Asn/Vall0 8Ile。 b)酶之純化 重組反錄酶之純化用前述方法之組合進行（3 )。令來自經 轉形J Μ 1 0 9細胞之新鮮平皿之單一群落於3 7 °C生長一夜， 以進行預培養。將2公升之生長培養基與該預培養物一起培 育。於〇D 6 〇 〇為〜1 · 5 (於3 7 °C 5〜6小時）下，用I ρ τ G (終濃 度為1 mM)引發RT基因表現以及於3 7°C繼續發酵數小時。 離心後’丟棄上清液，同時匯集細胞小丸並貯存於_ 8 0 °C， 直至純化。將細胞於4 °C熔化整夜以及懸浮於溶裂緩衝液 (MES 50 mM pH 6，EDTA 1 mM，10% v/v甘油， 0·02% w/v OBG，0.02% w/v疊氮化鈉）中。加入溶菌酶 以及將混合物在冰上培育4 0分鐘。於存在溶菌酶下用 D ounce均質化及用超音波處理後，將細胞離心3 〇分鐘。 保留上清液（S1)以及貯存於4 °C。將離心得到之小丸再懸浮 於萃取緩衝液（MES 50 mM pH 6，ΚΡ04 50 mM pH 6 ’ KC1 100 mM，10% v/v甘油，〇.〇2〇/0 w/v 〇bg， 0 · 0 2 % w / v疊氮化鈉）並於4 °c攪:摔3 0分鐘。將該第二混合 物再次離心以及保留上清液（S 2 )。重覆上述步驟2次以上， 保存上清液S 3及S 4以及最後一次萃取進行整夜（$ 5 )。將 Polymin P(終濃度為0.005 %)加至合併之上清液中，以移 除核酸。將該落液於4 C揽掉7 5分鐘以及離心1小時。在冰 上用2 0 % w / v硫酸铵沉澱上清液（S S 1)並於4擾掉1小時 。然後將該混合物離心以及生成之上清液（S S 2 )用另外之 -64 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1270547

4〇% w/v競酸铵（全部之6Ό%)沉殿，檀掉h、時以及再次離 心。將最終㈣之小丸（P1)貯存於4t整夜，然後於次日進 行純化。除非另有陳述，所有純化步驟於4 t進行。 將小丸（Ρ1)再懸浮於緩衝液（MES 5〇 mM 6， l〇mMpH6，KC110〇mM，1〇%v/”&，〇〇2%w/v OBG ’ 0·02% w/v叠氮化鋼）。使用12-14⑽mwc〇透 析試管將懸洋液對著相同的緩衝液透析整夜。將所得之透 析液離心以及將上清液經由MiUex-PF 〇·8微米過濾單元 過濾。將濾出之樣品加載在羥基磷灰石管柱（床體積· 3 〇毫 升）上以及用相同緩衝液沖洗。結合之酶用約2 2 〇毫升之含 10至3 00 mM ΚΡ04之緩衝液梯度溶離。將含ρ66/ρ51(由 S D S -P A GE 8 %及西方氏吸潰測定）雜二聚物之部分匯集以 供下一管柱層析。將含有RT之部分用緩衝液（Bis-Tris丙 fe50 mM pH 7.0，0.02% w/v OBG，10% v/v甘油， 0.02%氮化鈉）稀釋2倍，然後加載在Hi-Trap肝素瓊脂糖 管柱（床體積為5毫升）上並用相同緩衝液沖洗。結合型rt 然後用7 5毫升含〇至1 μ硫酸銨之相同緩衝液線性梯度溶離 。根據SDS-PAGE及西方氏吸潰分析匯集含RT之部分。 該匯集物之蛋白質濃度藉布萊德福特（Bradford)法測定， 其中使用BSA作為標準。最終酶製劑在含MES 50 mM pH6，KPO4300mMpH6，KC1175 mM，10%v/v 甘油，0.0 2 % w / V疊氮化鈉之緩衝液中透析，分成等份及 於-80°C冷凍。 測定步驟： 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 65 1270547 A7 B7 63 五、發明説明（ 放射性酶測定採用96-凹穴微量滴定平皿格式以及使用抗 生蛋白鏈菌素閃爍近似珠粒。該測定被簡略說明於下。將 HIV_1 RT酶融化以及用含NaCl 60 mM，MgCl2六水合物2 mM，DTT 6 mM·，GSH 2 mM 及 0.02% w/v Chaps 之 Tris/HCl 50 mM pH 7.8稀釋，得到約3 nM酶。在3〇微 升該酶溶液中，加入10微升抑制劑溶液（5〇 至2.5 nM 抑制劑，在含1 5 % v/v DMSO之上述緩衝液中）。在進行 至下一步驟之前，將該平皿於·室溫預培育丨5分鐘。在該預 培育步驟中，最高及最低抑制劑濃度分別為丨2 · 5 a Μ及 0.62 nM ’以及DMSO之濃度為3.75% v/v。該酶反應藉 添加1 0微升受質溶液而發動。最終反應混合物含有

Tris/HCl 50 mM pH 7.8，NaCl 60 mM，MgCl2·六水 合物 2 mM，DTT 6 mM，GSH 2 mM，Chaps 0.02% w/v，DMSO 3% v/v，Poly rC 179 nM，生物素 dG15 18 nM，dGTP 2 8 8 nM 及 3H-dGTP 71 nM，及 1-2 nM 酵素。 在該培育步騾中，最高及最低抑制劑濃度分別為1 0 //M 及0 · 5 nM。添加受質後，將平皿用塑膠密封物覆蓋以及在 乾燥培育器中於3 7 °C培育1小時。反應然後藉添加7 5微升 含5毫克/毫升抗生蛋白鏈菌素閃爍近似珠粒之edTA 0.5M 終止。 將平皿以中等速度振搖2分鐘以及於室溫培育1小時。然 後加入7 5微升氯化铯7 Μ溶液，將平皿以中等速度振搖2分 鐘以及於室溫再次培育1小時。然後將平皿用塑膠密封物覆 _______266^____ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210X297公董） 1270547 A7 B7 五、發明説明（64 ) 蓋以及用TopC〇Unt_NXTw微量平皿閃爍&冷光計數器 (Packard).計數。各凹穴計數60秒。各列在其兩端含有空 白及對照凹穴。 抑制％之計算如下： 抑制％ cpm · well - cpm . blank cpm · control - cpm · blank :100 使用上述測定’測試本發明化合物對於r τ野生型（w T) 及突變酶之抑制。結果被列於表2，以IC5G (nM)表示。 為了確證此等化合物抑制HIV複製之能力，其亦在下述 人類T -細胞培養物（S y n c y t i a)中被測試。 供評估在細胞培養物中活性之E LI S A測定 在9 6 -井穴平皿測定中，測試本發明化合物在細胞培養物 中抑制HI V複製之能力。使用完全rpmi 1 640稀釋化合物 以及作為細胞生長培養基，該完全RPMI 1640由RPMI1640 + 10%牛胎血清，10微克/毫升見他黴素及10 # Μ冷-硫醇 基乙醇組成。將Τ淋巴球用編碼野生型及突變型反錄酶之病 毒，以0 ·00 1之感染倍數予以感染。然後於存在本發明化合 物之系列稀釋液下，培育細胞3日。將上清液從8個複製凹 穴中匯集以及用市售ΗIV - 1 ρ 2 4抗原測定套組⑼“!*：!!^!!-C 〇 u 11 e r ®)測定細胞外ρ 2 4之濃度。抑制度（抑制百分率）以 下列方程式計算： 抑制％ p24pg / rnL · inhibitor p2^pg / mL-control 100 •67- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1270547 A7 B7 五、發明説明（65 ) 結果被列於表3，以EC5G (nM)表示。 特異性測定 為了評估本發明化合物之酶抑制活性之特異性，用已知 方法測试:> 數化合物抑制其他病毒聚合酶（諸如肝炎c病毒 及呼吸融合病毒R N A -依存性R N A聚合酶）以及哺乳動物聚 合酶（諸如小牛胸腺RN A -依存性D N A聚合酶及人類端粒酶） 之能力。被測試之化合物無一被觀察到對於此等酶具明顯 之抑制活性。此等結果顯示本發明化合物之酶抑制活性對 於ΗIV - 1 RT頗具特異性。 參考資料（以參考資料之方式納入本文） 1. Benn，S·，et al· Science 230:949，1985. 2. D'Aquila, R. T. and Summers, W. C. J. Acq. Imm. Def. Syn. 2:579, 1989. 3 · a) Warren, T. C. et al. Protein Expression & Purification 3:479, 1992; b) Kohlstaedt, L. A. Science 256(5065): 1783, 1992. -68 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4规格(210X297公爱) 1270547 A7 B7 五、發明説明（66 ) 00 o Ό OO —1 〇\ U\ U> to 化合物編號 1 (見表1) —J 一 一 a\ IM In 1 一 v〇 bo K> (J% 16.5 U\ In 10.5 IC5〇 WTRT (nM) u\ ls> c-n ON 〇\ K) Ki Os 37.5 22.5 28.5 ic5〇 K103N (nM) g VO 226 Ki OO C>i OO 206 t 6 00 is) Ln ic5〇 Y181C (nM) oo 737 319 206 — 336 1372 ό oo 2 206 — OO u> ic5〇 V106A (nM) s c-n Os 50.5 IC5〇 P236L (nM) 3938 1167 VO 90 >10000 2298 >10000 On 1422 3395 7511 4318 2541 αι 这 3236 258 2740 IC5〇 Y188L (nM) K) U\ 14.5 ic5〇 G190A (nM) VO — 1522 2 212 Ul U\ 710 H-^ — 536 υ% 612 24.5 ic5〇 K103N/ Y181C (nM) — as N> Ui S 00 Xk 00 ίο ON 31.2 IC5〇 K103N/ P225H (nM) 00 Os b\ <1 ic5〇 Y188C (nM) Ln a\ σ\ 00 215 U\ in 255 U\ 00 〇\ u> 5; u> 00 u> ic5〇 K103N/ V108I (nM) U% OO 270 一 s 229 00 oo vo 00 00 § 124 28.5 IC50 K103N/ L100I (nM) -69- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（67 ) lN> 00 On Is) Ul lN> u> ls> HdL 一難 w溥· Lfi 00 00 VO 00 (J% b\ 〇\ H-A -4 一 1 Η π Η 含 u> a\ Φ Lh 一 5^ 〇〇 Π 00 U) a\ <1 U\ 2 Ki VO — 窆 Os Os |Sn K> i^° in H-^ c/i U) OJ cn o K> (Jl u> ON <1 in a\ H-k VO VO o u> (-Λ t Ό | S n ay U\ K> U\ K> Os lii w > cc Ό VO s> o -4 u> U) σν VO U\ 目？=； 2 22 SP a 〇 3° U\ 00 u> h-4 9；2S. i s sp d ts ?e )〇 o 'O v〇 |So u> c-n U) 00 o 悬, K) 00 念 K) 00 — ON Ό a\ 00 -70- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1270547 A7 B7 五、發明説明（68 ) ls> o 00 <1 〇\ U\ 化合物編號 (見表1) 0.37 0.34 0.34 0.67 0.26 0.34 0.92 0.93 — 0.83 0.98 t： b\ ec5〇 WTRT tnM) Hoi In bo N> ec50 K103N (nM) bo Is) <» — EC50 Y181C (nM) 1 12.4 1 1_ 00 Ln EC50 V106A (nM) U\ 00 CA K) — 00 ec50 Y188L (nM) In u» b\ Os EC5〇 K103N/ Y181C (nM) — JO o EC5〇 K103N/ P225H (nM) Ui o U) ec50 K103N/ V108I (nM) U) ec50 K103N/ L100I (nM) 71 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐） 1270547 A7 B7 五、發明説明（69 ) Ό 00 to K> Cjri a h-^ CT 11 —· 妙 w韓 ON t: K> K> O o s 9s S w H In 3s S W 呼 Jsi On 私 00 9s ^ w 雖 00 σν U\ S ^ w 〇\ (Μ 9s ί w U) In b\ H-A H-* /—s ^ 5 hrt w n 20 VO 913 £ m U\ o s ^ S W 、 C-Λ v〇 它E-W 、 -72- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)

Claims (1)

1. A8 B8 12705洚79〇113〇49號專利申請案 中文申請專利範圍替換本(92年12月)g88 申請寺，範圍 1. 一種具通式I之化合物： 2 R

   Q / 〇 其中 R2選自Η、F、Cl、Cb4烷基、C3_4環烷基及CF3所組成 之族群； R4為Η或Me ; R5為Η、Me或Et，限制條件為R4及R5不同時為Me，以 及若R4為Me，則R5非為Et ; R11為甲基、乙基、環丙基、丙基、異丙基或環丁基； 以及 Q選自下列基組成之族群：

   〇· 以及

   0' 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) l27〇547

   或其醫藥上可接受之鹽。 如申請專利範圍第丨項之化合物，其中Rli為乙基或環丙 基’或其醫藥上可接受之鹽。 項之化合物，其中Q選自下列者所組 •如申請專利範圍第1 成之族群：

   或其醫藥上可接受之鹽。 4 ·如申請專利範圍第1項之化合物，其中Q為：

   或其醫藥上可接受之鹽。 •如申請專利範圍第1項之化合物，其中R5為甲基； 或其醫藥上可接受之鹽。 •如申請專利範圍第1項之化合物，其中R11為乙基； 或其醫藥上可接受之鹽。 •如申請專利範圍第1項之化合物，其具下列結構式：

   1270547 - C8 D8 々、申請專利範圍

   或其醫藥上可接受之鹽。 8.如申請專利範圍第1項之化合物，其具下列結構式：·

   或其醫藥上可接受之鹽。 9.如申請專利範圍第1項之化合物，其具下列結構式：

   或其醫藥上可接受之鹽。 1 0 .如申請專利範圍第1至9項中任一項之化合物，係用作 HIV複製抑制劑。 -3- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1270547 - C8 , D8 六、申請專利範圍 1 1 .如申請專利範圍第1項之化合物，其係用於製造供治療或 預防HIV感染之藥劑。 12. —種用於治療或預防HIV感染之醫藥組合物，其包含如 申請專利範圍第1項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，以 及醫藥可接受之載劑。 -4- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)