BG107348A - Не-нуклеозидни инхибитори на обратна транскриптаза - Google Patents

Description

НЕ-НУКЛЕОЗИДНИ ИНХИБИТОРИ НА ОБРАТНА

С ТРАНСКРИПТАЗА

ОБЛАСТ НА ТЕХНИКАТА

Изобретението се отнася до нови съединения и до техни фармацевтично приемливи соли, до тяхното използуване, или самостоятелно, или в комбинация с други терапевтични средства, при лечението, или при профилактиката на HIF инфекция, и до фармацевтични състави, съдържащи съединенията.

ПРЕДШЕСТВУВАЩО СЪСТОЯНИЕ НА ТЕХНИКАТА

Г’ ^w Заболяването, известно като синдром на придобита имунна недостатъчност (СПИН) се причинява от човешки вирус на имунодефицит (HIV), по-специално щама, известен като HIV-1. С цел HIV да се репликира от клетка гостоприемник, информацията на вирусния геном трябва да се интегрира в ДНК на клетката гостоприемник. Обаче, HIV е ретровирус, което означава, че неговата генетична информация е под формата на РНК. Поради това цикълът на HIV реплицирането изисква етап на транскрибиране на вирусния геном (РНК) в ДНК, което е обратно на нормалната верига от събития. Транскрибирането на вирусната РНК в ДНК се извършва посредством ензим, който е бил подходящо кръстен обратна транскриптаза (RT). Вириона на HIV включва копие на RT заедно с вирусната РНК.

Обратната транскриптаза има три ензимни функции; тя действува като РНК-зависима ДНК полимераза, като рибонуклеаза, и като ДНК-зависима ДНК полимераза. Действувайки като РНК-зависима ДНК полимераза, RT транскрибира едноверижна ДНК копие на вирусна РНК. Действувайки като рибонуклеаза, RT разрушава оригиналната вирусна РНК, и освобождава ДНК току-що продуцирана от оригиналната РНК. И накрая, действувайке като ДНК-зависима ДНК полимераза, RT прави втора, комплементарна верига ДНК, използувайки първата верига ДНК като матрица. Двете вериги образуват двойноверижна ДНК, която се интегрира в генома на клет-катагостоприемник посредством друг ензим, наречен интеграза.

Съединения, които инхибират ензимните функции на HIV1 обратна транскриптаза, трябва да инхибират реплици-рането на HIV-1 в инфектирани клетки. Такива съединения са полезни за предотвратяване, или лечение на HIV-1 инфекция в субекти хора, както се демонстрира от известни RT инхиби-тори, такива като 3’-азидо-3’-деокситимидин (DZT), 2’, 3’-ди-деоксинозин (ddl), 2’, 3’-дидеоксицитидин (ddC), d4T, ЗТС, Невирапин, Делавирдин, Ефавиренз и Абакавир, главните лекарства утвърдени за използуване при лечението на СПИН.

Както при всяка антивирусна терапия, използуването на RT инхибитори при лечението на СПИН евентуално води до вирус, който е по-малко чувствителен към даденото лекарство. Резистентността (намалената чувствителност) към тези лекарства е резултат на мутации, които се появяват в сегмента на обратната транскриптаза на основния ген. Няколко мутантни щамове на HIV са охарактеризирани, и резистентността към известни терапевтични средства се дължи на мутации в RT гена. Някои от най-общо наблюдаваните мутанти клинично са: мутантът Y181C, в който тирозин (Y), кодон 181, е мутирал в цистеинов (С) остатък, и K103N, където лизинът (К) на позиция 103 е заместен с аспарагин (N). Други мутанти, които се очертават с повишена честота в течение на лечението с известни антивирусни средства, включват единичните мутанти V106A, G190A, Y188C, и P236L; и двойните мутанти K103N/Y181C, K103N/P225H, Κ103ΝΛ/1031, и K103N/L100I.

Тъй като терапията и предотвратяването на HIV инфекция, използуващи антивирусни средства продължава, появата на нови резистентни щамове се очаква да нараства. Поради това съществува продължаваща нужда от нови инхибитори на RT, с различни модели на ефективност срещу различните мутанти.

Съединения, имащи трициклени структури, които са инхибитори на HIV-1 са описани в U. S. Pat. No. 5,366,972. Други инхибитори на HIV-1 обратна транскриптаза са описани в Hargrave et al., J. Med. Chem., 34, 2231 (1991).

U. S. Pat. No. 5,705,499 предлага 8-арилалкил- и 8-арилхетероалкил-5,11 -дихидро-6Н-дипиридо[3,2-В:2’,3’,-Е][1,4]диазепини като инхибитори на RT. Примерните съединения са показали, че имат известна активност срещу див тип и мутант на HIV-1 RT, по-специално Y181C и други единични мутанти, такива като K103N показват по-малка ефективност.

Специфично, съединенията съгласно настоящето изобретение са ефективни при инхибиране на мутантите Y181C и K103N, така както и на голяма редица други единични мутанти и някои най-често срещани двойни мутанти, такива като K103N/Y181C и K103N/P225H.

ТЕХНИЧЕСКА СЪЩНОСТ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Изобретението намалява трудностите и вредите в предшествуващото състояние на техниката, като осигурява нови съединения, които са мощни инхибитори на единични и двойни мутантни щамове на HIV-1 RT.

Като първи аспект, изобретението осигурява съединение с общата формула I:

където

С R² се избира от групата, състояща се от Н, F, CI, См алкил, Сз-4 циклоалкил, и CF₃;

R⁴ е Н, или Ме; или Et,

R⁵ е Н, Ме; или Et, при условие, че R⁴ и R⁵ не са и двата Ме, и ако R⁴e Ме, тогава R⁵ не може да бъде Et;

R¹¹ е Me, Et, циклопропил, пропил, изопропил, или циклобутил;и

Q се избира от групата, състояща се от

или фармацевтично приемливи техни соли.

Като втори аспект, изобретението осигурява инхибитор на HIV реплициране, с общата формула I, или или фармацевтично приемлива негова сол.

Като трети аспект, изобретението осигурява инхибитор на ензима обратна транскриптаза на HIV, с общата формула I, или фармацевтично приемлива негова сол.

Като четвърти аспект, изобретението осигурява метод за лечението, или за предотвратяването на HIV инфекция, който се състои в приложение върху пациент на инхибиращо HIV количество от съединение с формула I, или фармацевтично приемлива негова сол.

Като пети аспект, изобретението осигурява фармацевтичен състав за лечението, или за предотвратяването на HIV инфекция, съдържащ съединение с формула I, или фармацевтично приемлива негова сол, и фармацевтично приемлив но сител.

Като шести аспект, изобретението осигурява метод за получаване на съединение с формула I, или фармацевтично приемлива негова сол.

ПОДРОБНО ОПИСАНИЕ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Дефиниции

Както се използува тук, терминът “См алкил” означава радикали с права, или разклонена верига, съдържащи от един до четири въглеродни атоми, и включващи метил, етил, пропил, изопропил, бутил, сек-бутил, и трет-бутил.

Както се използува тук, терминът “С₃-4 циклоалкил” означава радикали на наситени въглеводороди, съдържащи от три до четири въглеродни атоми, и включващи циклопропил и циклобутил.

Подробно описание на предпочитани варианти на изобретението

Съгласно предпочитан вариант на изобретението, съединения съгласно изобретението се дефинират съгласно формула I, където R² за предпочитане е Cl, F, или Н. По-предпочитано, R² е CI, или Н. Най-предпочитано, R² е Н.

Съгласно предпочитан вариант на изобретението, съединения съгласно изобретението се дефинират съгласно формула I, където R⁴ за предпочитане е Н.

Съгласно предпочитан вариант на изобретението, съединения съгласно изобретението се дефинират съгласно формула I, където за предпочитане R⁵e Ме.

За предпочитане, съединения съгласно изобретението се дефинират съгласно формула I, където R¹¹ е Et, или циклопропил. По-предпочитано, R¹¹ е Et.

Съгласно предпочитан вариант на изобретението, съединения съгласно изобретението се дефинират съгласно формула I, където Q за предпочитане се избира от групата, състояща се от

По-предпочитано, Q е:

Алтернативно, предпочитан вариант на изобретението включва съединения, избрани от групата, състояща се от

Съединенията съгласно изобретението са ефективни инхибитори на див тип обратна транскриптаза, така както и инхибират, например, ензимите на единично мутиране Y181C, K103N, V106A, G190A, Y188C, и P225L. Съединенията също така инхибират ензимите на единично мутиране K103N/Y181C, K103N/P225H, K103N/V108I и K103N/L100I.

Съединенията с формула I притежават инхибиторна активност срущу HIV-1 обратна транскриптаза. Когато се прилагат в подходящи форми за еднократно дозиране, те са полезни при лечението на СПИН, ARC и свързаните с тях разстройства, асоциирани с HIV-1 инфекция. Друг аспект на изобретението, поради това, е метод за лечение на HIV-1 инфекция, който се състои в приложение върху човек, който е инфектиран с HIV, на терапевтично ефективно количество от нова съединение с формула I, както е описано по-горе. Дали то ще се нарича лечение, или профилактика, съединенията могат също така да се използуват за предотвратяване на перинатално предаване на HIV-1 от майка на бебето, чрез приложение върху майката преди раждането.

Съединенията с формула I могат да се прилагат в единични дози за еднократно приложение, или разделени на отделни приеми, по орален, или по парентерален начини. Подходяща орална доза за съединение с формула I е в границите от приблизително 0,5 mg до 1 g на ден. Предпочитана орална доза за съединение с формула I е в границите от приблизително 100 mg до 800 mg на ден за пациент с тегло 70 kg. При парентерално приложение, подходящата единична форма на дозиране може да съдържа от 0,1 до 250 mg от посочените съединения, за предпочитане 1 mg до 200 mg. Трябва да се разбере, обаче, че дозата, на приложение варира от пациент до пациент, и дозирането за който и да е отделен пациент зависи от преценката на лекаря, който използува като критерий за фиксиране на точна доза, големината и състоянието на пациента, така както и отговора на пациента спрямо лекарството.

Когато съединенията съгласно настоящето изобретение са предназначени да се приложат по орален начин, те могат да се приложат като медикаменти под формата на фармацевтични състави, които ги съдържат заедно със съвместим фармацевтичен продукт носител. Такъв продукт носител може да е инертен органичен, или минерален продукт носител, подходящ за орално приложение. Примери за такива продукти носители са вода, желатин, талк, нишесте, магнезиев стеарат, гуми арабика, растителни масла, полиалкилен-гликоли, вазелин, и други подобни.

Фармацевтичните състави могат да се получат по конвенционален начин, и крайните единични форми за еднократно дозиране могат да са под формата на твърди продукти, например, таблетки, дражета, капсули, и други подобни, или течни единични форми за еднократно дозиране, например, разтвори, суспензии, емулсии, и други подобни. Фармацевтичните състави могат да се подлагат на конвенционални фармацевтични обработки, такива като стерилизиране. Освен това, фармацевтичните състави могат да съдържат конвенционални добавки, такива като консерванти, стабилизатори, емулгатори, средства за подобряване на вкуса, овлажняващи средства, буфери, соли за изменение на осмотичното налягане, и други подобни. Твърди продукти носители, които могат да се използуват, включват, например, нишесте, лактоза, манитол, метил целулоза, микрокристална целулоза, талк, силициев диоксид, двуосновен калциев фосфат, и високо молекулни полимери (такива като полиетилен гликол).

При парентерално използуване, съединение с формула I може да се приложи във воден, или не-воден разтвор, суспензия, или емулсия във фармацевтично приемливо масло, или смес от течности, които магат да съдържат бактериостатични средства, антиоксиданти, консерванти, буфери, или други разтворени вещества, които да правят разтвора изотоничен с кръвта, уплътняващи средства, суспендиращи средства, или други фармацевтично приемливи добавки. Добавките от този вид включват, например, тартаратни, цитратни и ацетатни буфери, етанол, пропилен гликол, полиетилен гликол, комплексони (такъв като ЕДТА), антиоксиданти (такива като натриев бисулфит, натриев метабисулфит, и аскорбинова киселина), високо молекулни полимери (такива като течни полиетилен оксиди) за регулиране на вискозитета, и полиетиленови производни на анхидриди на сорбитол. Консерванти също така могат да се прибавят, ако е необходимо, такива като бензоена киселина, метил, или пропил парабен, бензалкониев хлорид, и други кватернерни амониеви съединения.

Съединенията съгласно това изобретение могат, също така, да се прилагат под кормата на разтвори за приложение в носа, и могат да съдържат като добавки към съединенията съгласно това изобретение подходящи буфери, регулатори на тоничността, микробиални консерванти, антиоксиданти, и средства за повишаване на вискозитета, във воден вехикулум. Примери за средства, използувани за повишаване на вискозитета са поливинил алкохол, производни на целулозата, поливинилпиролидон, полисорбати, или глицерин. Прибавените микробиални консерванти могат да включват бензалкониев хлорид, тимерозал, хлорбутанол, или фенилетил алкохол.

Също така, съединенията, предоставени от изобретението, могат да се прилагат като супозитории.

Съединенията съгласно изобретението могат да се получат, като се използуват уменията на химиците в синтетичната органична химия. Примерна реакционна схема е показана в схеми от 1 до 6.

Схема 1; Получаване на междинни съединения в които

R⁴eMe

W···'

Схема 2: Получаване на междинни съединения в които R⁵ е Ме

Последователността в схема 2 е аналогична на тази, описана от J. М. Klunder et al.; J. Med. Chem. 1998, 41, 2960-71, и C. L. Cywin etal.; J. Med. Chem. 1998, 41, 2972-84.

Схема 3: Получаване на междинни съединения в които R² е Cj-з алкил

Схема 4: Получаване на междинни съединения в които R² eCF₃

+

NH,*

4N HCI, 45°С o/n, RT

Н₂О обр.храдник, Зчаса

Pd(OH)₂, H₂ ----->MeOH

1. NaH.DMF, 40°С,

2. (CF,SO,),NPh

3. EtNH₂ RT, 20h

MeCN

80»C. o/n

Схема 5: Вмъкване на хинолинови ядра

Pd(Ph₃)₄ DMF, 90°C

DEAD or DIAD PPh₃, THF, 25°C

Схема 6: Алтернативен начин за съединения в които

R⁴ е Ме

NaHMDS THF, пиридин <--------

Както се посочва по-горе, съединенията, предоставени от изобретението инхибират ензимната активност на HIV-1 RT. Базирайки се изследване на тези съединения, както се описва по-долу, известно е, че те инхибират РНК-зависимата ДНК полимеразна активност на HIV-1 RT. Известно е (данни не са показани), че те също така инхибират ДНК-зависимата ДНК полимеразна активност на HIV-1 RT. Използувайки изследването за обратна транскриптаза (RT) описано по-долу, съединенията могат да се изследват за тяхната способност да инхибират РНК-зависимата ДНК полимеразна активност на HIV-1 RT. Някои специфични съединения, описани в примерите, които се появяват по-долу, са изследвани по този начин. Резултатите от това изследване се показани в таблица 2 като 1С₅о (пМ) и в таблица 3 като ECso (пМ).

ПРИМЕРИ ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Настоящето изобретение се илюстрира в някои подробности посредством следващите не-ограничаващи примери. Всички реакции са осъществени в азотна, или аргонна атмосфера. Температурите се дават в градуси Целзий. Процентите на разтворите, или съотношенията изразяват съотношения обем към обем, освен в случаите, когато се посочва друго.

Съкращенията на символите, използувани тук, включват: DEAD: диетил азодикарбоксилат;

DIAD: диизопропил азодикарбоксилат;

DIEA: диизопропилетиламин;

DMAP: 4-(диметиламино)пиридин;

DMSO: диметилсулфоксид;

DMF: диметилформамид;

ES MS: мас спектроскопия с елекронен спрей;

Et: етил;

EtOAc; етил ацетат;

Et₂O: диетилов етер;

HPLC: високо ефективна течна хроматография (ВЕТХ);

IPr; изопропил;

Ме: метил;

МЕОН; метанол;

MeCN; ацетонитрил;

NBS; N-бромсукцинимид;

Ph: фенил;

ТВЕ: трис-борат-ЕДТА;

TBTU: 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-М,М,М’, Ν’,-тетраметилурониев тетрафлуороборат;

TFA: трифлуороцетна киселина;

THF: тетрахидрофуран;

MS (ES): мас спектрометрия с електроспрей;

MS (FAB), или FAB/MS: мас спактроскопия с бомбардиране с бързи атоми;

HRMS: мас спактроскопия с висока разделителна способност;

PFU: единици образуващи плаки;

DEPC: диетилов пирокарбонат;

DMSO: диметилсулфоксид;

DTT; дитиотреитол;

EDTA: (ЕДТА) етилендиаминтетраацетат;

UMP: уридин 5’-монофосфат;

UTR: уридин 5’-трифосфат.

СИНТЕЗИ

Следващите примери илюстрират методи за получаване на съединения съгласно изобретението.

Пример I (номер 24, таблица 1)

5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’, 3’-е][1,4]диазепин-6-он

a) 2-(етиламино)-3-нитропиридин

Към разтвор на 2-хлоро-З-нитропиридин (51 д, 325 mmol) в THF (650 mL) се прибавя 2М разтвор на етиламин в THF (365 mL, 731 mmol). Реакцията се разбърква при стайна температура в продължение на една нощ. Реакционната смес се излива във вода (~ 1,5 L), и полученият твърд продукт се филтрува и се суши при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието (52 д).

b) . 3-амино-2-(етиламино)пиридин

Разтвор на 2-(етиламино)-3-нитропиридин (52 д) в МеОН (600 mL) се разбърква в продължение на една нощ при стайна температура във водородна атмосфера (1 атм.) в присъствие на 20 % Pd(OH)₂/C (10,4 g). Катализаторът се отстранява чрез филтруване през инфузорна пръст. Филтратът се концентрира при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието, под формата на черен твърд продукт (39 д, 88 % добив след етапите а) и Ь).

с) 2-хлоро-М-{2-(етиламино)-3-пиридин}-5-бромо-3пиридинкарбоксамид

Към изстуден разтвор на 3-амино-2-(етиламино)пиридин (30,6 д, 223 mmol) в MeCN (740 mL) се прибавя твърд NaHCO₃ (56,3 g, 669 mmol). След 5 минути се прибавя (1 екв., 223 mmol) суров 5-бромо-2-хлоро-3-пиридинкарбонил хлорид (получен от

5-бромо-2-хидрокси-3-пиридинкарбоксилна киселина и SOCI₂ [както е описано от Т. W. Gero et al. in Synth. Commun. 1989, 19, 553-559 (включен тук за справка) но като се изпусне третирането с вода]. След 2 часа реакционната смес се излива в лед/Н₂О (1,5 L) и полученият твърд продукт се филтрува, изплаква се с Н₂О, и след това с хексан. След като се изсуши при понижено налягане в продължение на една нощ, се получава съединението съгласно заглавието, под формата на черен твърд продукт (54,9 д, 69 % добив).

d) 8-бромо-5,11-дихидро-11-етил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е]- [1,4]диазепин-6-он

Към разтвор на 2-хлоро-М-{2-(етиламино)-3-нитропиридин}-5-бромо-3-пиридинкарбоксамид (54,9 g, 154,4 mmol) в пиридин (308 mL) при 50°С се прибавя на капки 1М разтвор на NaHMDS (нетриев хексаметилдисилазид) в THF (355 mL, 355 mmol). След 10 минути, пеакцията се оставя да се охлади до стайна температура, и след това се излива в ледена вода (2 L). Полученият твърд продукт се филтрува, изплаква се с вода, и след това с хексан. Твърдият продукт се суши при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието (36 д, 75 % добив), под формата на тъмно-зелен твърд продукт.

е) 8-бромо-5,11-дихидро-11-етил-5-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Към разтвор на 8-бромо-5,11-дихидро-11-етил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (36,7 д, 115 mmol) в DMF (380 mL) се прибавя NaH (3,5 д, 138 mmol), и свместа се нагрява до 50°С за 30 минути. Реакционната смес се охлажда до стайна температура, и й се действува с Mel (14,3 mL, 230 mmol). След 1,5 час, реакционната смес се излива в ледена вода. Твърдият продукт се филтрува, промива се с вода, и след това с хексан, и след сушене се получава съединението съгласно заглавието (37,9 д, 99 % добив), под формата на тъмно-сив твърд продукт.

f) 5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-(2-пропенил)-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Алилтребутилкалай (30,7 mL, 99,0 mmol) и Pd(Ph₃P)4 (5,20 g, 4,50 mmol) се прибавя към дегазиран (N₂ през разтвор в продължение на 30 минути) разтвор на 8-бромо-5,11-дихидро11-етил-5-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (30,0 д, 90,0 mmol) в DMF (450 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при 90°С в продължение на 1,5 час, след това се охлажда до стайна температура, и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан: ЕЮАс, 8:2 до 7:3), при което се получава съединението съгласно заглавието (22,19 д, добив 84 %).

д) 5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-(2-хидроксиетил)-5-метил6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Струя от озониран кислород барбутира през студен (-78°С) разтвор на 5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-(2-пропенил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (22,19 д,

75,4 mmol) в СН₂С1₂ (150 mL) и МеОН (150 mL) в продължение на 2,5 часа. След това струя от N₂ барбутира през разтвора в продължение на 15 минути, и след това към разтвора това се прибавя твърд NaBH₄ (4,99 g, 132 mmol). Реакционната смес се оставя да се загрее до стайна температура. След 1 час се прибавя наситен воден разтвор на NH₄CI (200 mL), и сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 2 часа. Органичните разтворители се отстраняват при понижено налягане. Към остатъка се прибавят вода (300 mL) и СНС1₃ (300 mL). Фазите де разделят, и водния слой се екстрахира с СНС1₃ (3 х 300 mL). Комбинираните органични слоеве се сушат (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc: СНС1₃, 4:1), при което се получава съединението съгласно заглавието (16,1 д, 72 % добив), под формата на твърд бял продукт.

h) 5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Диетил азодикарбоксилат (DEAD) (12,8 mL, 81,0 mmol) се прибавят на капки към разтвор на 5,11-дихидро-11-етил-8-(2хидроксиетил)-5-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е]-[1,4]-диазепин-6-он (16,1 д, 54,0 mmol), 4-хидроксихинолин (11,6 д, 81,0 mmol) и Ph₃P (21,3 д, 81,0 mmol) в THF (270 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 1 час, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc: МеОН; 95:5), при което се получава съединението съгласно заглавието (17,7 д, 77 % добив), под формата на твърд бял продукт: MS (ESI) m/z 426 (МН)⁺.

Пример II (номер 2, таблица 1)

2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Изстуден в лед разтвор на EtNH₂ (49,8 g, 1,10 mol) в толуен (200 mL) се прибавя в продължение на 15 минути към изстуден в лед разтвор на 2,6-дихлоро-З-нитропиридин (100,0 д, 0,52 mol) в толуен (225 mL). Сместа се разбърква при 0°С в продължение на 45 минути. Прибавят се вода (500 mL) и

EtOAc (500 mL), и фазите се разделят. Органичният слой се промива последователно с вода (200 mL) и със солна луга (200 mL), суши се (MgSO₄), филтрува се и се концентрира при понижено налягане. Остатъчният твърд продукт се прекристализира из МеОН, при което се получава съединението съгласно заглавието (83,7 д, 80 % добив), под формата на жълти игли.

Ь) 3-амино-6-хлоро-2-(етиламино)пиридин

Разтвор на SnCI₂.H₂O (616,3 g, 2,73 mol) в 12N воден разтвор на HCI (500 mL) бързо се прибавя към разтвор на 6-хлоро-2-(етиламин)-3-нитропиридин (169,5 д, 0,84 mol) в АсОН (1,7 L) при стойна температура. След 20 минути, сместа се охлажда до 0°С, и се прибавя вода (250 mL). След това се прибавя твърда NaOH (240 g) на малки порции. Получената суспензия се филтрува, за да се отстранят солите. Филтрата се разрежда с вода (3,5 L), разтвора се прави алкален, като му се прибави 10 N воден разтвор на NaOH, и след това се екстрахира с EtOAc (3 х 1,7 L). Комбинираните органични слоеве се промиват със солна луга (1 L), сушат се (MgSO₄), филтруват се и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан: EtOAc, 3:2), при което се получава съединението съгласно заглавието (89,9 д, 62 % добив), под формата на твърд кафяв продукт: MS (ESI) m/z 172/174 (МН)⁺.

с) 5-бромо-2-хлоро-Н-{2-(етиламино)-6-хлоро-3пиридинил}-3-пиридинкарбоксамид

Разтвор на 5-бромо-2-хлоро-3-пиридинкарбонил хлорид (30,0 д, 97,0 mmol) в MeCN (100 mL) се прибавя през канюла към разтвор на 3-амино-6-хлоро-2-(етиламино)пиридин (16,6 д, 97,0 mmol) в MeCN (180 mL), съдържащ твърд NaHCO₃ (14,2 g, 169 mmol) при стайна температура. Сместа се разлърква при стайна температура в продължение на 1 час. Прибавя се вода (200 mL), и сместа се разбърква в продължение на 10 минути. Получената суспензия се филтрува. Твърдият продукт се промива с Et₂O (50 mL), и се концентрира из пиридинов разтвор (3 х 50 mL), при което се получава съединението съгласно заглавието (28,4 д, 75 % добив).

d) 8-бромо-2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-6Н-дипиридо[3,2Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

1М разтвор на NaHMDS в THF (167,5 mL, 167,5 mmol) се прибавя бавно към разтвор на 5-бромо-2-хлоро-М-{2-(етиламино)-6хлоро-3-пиридинил}-3-пиридинкарбоксамид (28,4 д, 72,8 mmol) в пиридин (146 mL), нагрят до 50°С. Реакционната смес се разбърква при 50°С в прадължение на 1,5 час. След това сместа се излива в смес от вода и лед (1 L), и, след 1 час, получената суспензия се филтрува. Твърдият продукт се промива с вода и се суши при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието (23,4 д, 91 % добив).

е) 8-бромо-2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-5-метил-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Твърд NaH (60 % дисперсия, 3,46 д, 86,1 mmol) се прибавя за 30 минути към разтвор на 8-бромо-2-хлоро-5,11-дихидро-11етил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (23,4 д,

66,3 mmol) в DMF (220 mL) при 50°С. Сместа се разбърква при 50°С в прадължение на 1 час, след това се оставя да се охлади до стайна температура. Сместа се излива във вода (1 L), и получената суспензия се филтрува. Твърдият продукт се промива последователно с вода и с хексан, след това се суши при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието (23,0 д, 94 % добив).

f) 2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-(2-пропенил)-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Алилтрибутилкалай (21,3 mL, 68,7 mmol) и Pd(Ph₃P)₄ (3,61 g, 3,21 mmol) се прибавя към дегазиран (N₂ през разтвор в продължение на 30 минути) разтвор на 8-бромо-2-хлоро-5,11дихидро-11 -етил-5-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (23,0 д, 62,5 mmol) в DMF (312 mL). Сместа се нагрява до 90°С в продължение на 2 часа. Сместа се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан: EtOAc, 7:3), при което се получава съединението съгласно заглавието (13,4 д, 65 % добив).

д) 2-хлоро-5,11 -дихидро-11 -етил-8-(2-хид роксиетил)-5метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Озониран кислород се вкарва в студен (-78°С) разтвор на 2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-(2-пропенил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (13,4 д, 10,7 mmol) в МеОН (102 mL) и СН₂С1₂ (102 mL) до пълното изчезване на алкена. През разтвора барбутира N₂, за да отстрани излишния О₃. След това се прибавя твърд NaBH₄ (2,69 g, 71,7 mmol) на малки порции, и сместа се оставя да се загрее бавно до стайна температура. След 1 час се прибавя наситен воден разтвор на NH₄CI (150 mL), и сместа се разбърква в прадължение на 20 минути. Органичният разтворител се отстранява при понижено налягане.Към водния разтвор се прибавя вода (100 mL). Разтвора се екстрахира с СНС1₃ (3 х 200 mL). Комбинираните органични слоеве се сушат (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc: CHCI₃, 4:1), при което се получава съединението съгласно заглавието (10,4 д, 77 % добив).

h) 2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Диетил азодикарбоксилат (DEAD) (4,26 mL, 27,0 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил8-(2-хидроксиетил)-5-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (6,00 д, 18,0 mmol), 4-хидроксихинолин (3,92 д, 27,0 mmol) и Ph₃P (7,09 д, 27,0 mmol) в THF (90 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура, в прадължение на 1 час, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc: МеОН, 95:5), при което се получава съединението съгласно заглавието (6,22 д, 75 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 460/462.

Пример III (номер 6, таблица 1)

2-хлоро-11-циклопропил-5,11-дихидро-5-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

а) 6-хлоро-2-(циклопропиламино)-3-нитропиридин

Разтвор на циклопропиламин (1,25 д, 22,0 mmol) в толуен (11 mL) се прибавя за 10 минути към ледено-студен разтвор на 2,6-дихлоро-З-нитропиридин (2,00 д, 10,4 mmol) в толуен (10 mL). Сместа се разбърква при 0°С в прадължение на 1 час, и при стайна температура в прадължение на 2 часа. Към сместа се прибавя вода (50 mL), и фазите се разделят. Органичният слой се промива със солна луга (25 mL), суши се (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан: EtOAc, 3:2), при което се получава съединението съгласно заглавието (1,97 д, 89 % добив), под формата на твърд жълт продукт.

Ь) 2-хлоро-11-циклопропил-5,11-дихидро-8-(2хидроксиетил)-5-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Съединението съгласно заглавието се получава от 6-хлоро-2-(циклопропиламино)-3-нитропиридин, използувайки метод, подобен на този, описан за 11-етил-^0ВИЯ аналог на пример II.

с) 2-хлоро-11-циклопропил-5,11-дихидро-5-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-етил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Диетил азодикарбоксилат (DEAD) (85,6 μί_, 0,54 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 2-хлоро-11-циклопропил-5,11дихидро-8-(2-хидроксиетил)-5-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е]- [1,4]диазепин-6-он (125 mg, 0,36 mmol), 4-хидроксихинолин (78,9 mg, 0,54 mmol) и Ph₃P (143 mg, 0,54 mmol) в THF (1,8 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура, в прадължение на 3 часа, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства частично посредством флаш хроматография (EtOAc: МеОН, 95:5). Твърдият продукт се пречиства посредством ВЕТХ с обърната фаза (CombiPrep ADS-AQ 50 х 20 mm, 5 μ, 120 A, 5 - 100 % MeCN + 0,10 % TFA / вода + 0,10 % TFA за 25 минути), при което се получава трифлуороцетно киселата сол на съединението съгласно заглавието (1,7 д, 77 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 472/474 (МН)⁺.

Пример IV (номер 4, таблица 1)

5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-5-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

a) 2,6-дифлуоро-З-нитропиридин

Към смес от концентрирана сярна киселина (600 mL) и димяща азотна киселина (94 %, 400 mL) във вана с лед (вътрешна температура поддържана на 5 - 10°С), се прибавя на капки 2,6-дифлуорпиридин (200 д, 1,74 mol). Получената смес се разбърква в прадължение на една нощ при стайна температура. Сместа се излива бавно в 3 кд лед, и се екстрахира с Et₂O (2x2 L). Комбинираните органични слоеве се промиват с 1,5 N воден разтвор на NaOH (2x1 L), след това с наситен воден разтвор на NaHCCh (400 mL), или до pH около 8-9. Органичния слой се суши над MgSO₄, филтруват се, и се концентрират при понижено налягане (да се отстрани не-реагиралият 2,6-дифлуорпиридин: 10-12 %). Съединението съгласно заглавието се получава под формата на жълта течност (207,3 д, 74% добив).

b) 2-(етилам и но)-6-флуоро-3-н итроп и рид и н

Към разтвор на 2,6-дифлуоро-З-нитропиридин (45,7 д, 285 mmol) в THF (500 mL) при -40°С се прибавя на капки разтвор на етиламин (25,7 д, 570 mmol) в THF (250 mL). След 30 минути реакционната смес се концентрира при понижено налягане, и остатъка се разтваря в EtOAc. Органичната фаза се промива със солна луга, суши се (MgSO₄), филтрува се и се концентрира. Полученият жълт твърд продукт се пречиства посредством флаш хроматография (15 % EtOAc в хексан), при което се получава съединението съгласно заглавието (43,2 д, 82 % добив), под формата на твърд жълт продукт.

с) 3-амино-2-(етиламино)-6-флуорпиридин

Разтвор на 2-(етиламино)-6-флуоро-3-нитропиридин (43,2 д, 230 mmol) в THF (1 L) се разбърква в продължение на една нощ при стайна температура във водородна атмосфера (1 атм.) в присъствие на 20 % Pd(OH)₂/C (4,35 g). Катализаторът се отстранява посредством филтруване през инфузорна пръст . Филтрата се концентрира при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието (36,3 д, 95 % добив), под формата на твърд черен продукт.

d) 2-хлоро-М-{2-(етиламино)-6-флуоро-3-пиридинил}-

5-бромо-З-пиридинкарбоксамид

Към охладен разтвор (4°С) на 3-амино-2-(етиламино)-6флуорпиридин (31,0 д, 200 mmol) в MeCN (160 mL) се прибавя твърд NaHCO₃ (50,4 д, 600 mmol). След 15 минути се прибавя разтвор на 5-бромо-2-хлоро-3-пиридинкарбонил хлорид (1 еквив., 200 mmol) в MeCN (155 mL). След 60 минути при стайна температура, реакционната смес се излива във вода (1,2 L), и се разбърква в продължение на 30 минути. Полученият твърд продукт се филтрува, суши при понижено налягане при 50°С в продължение на една нощ. Съединението съгласно заглавието (73,7 д, 99 % добив).се получава под формата на черен твърд продукт.

e) 8-бромо-5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Към разтвор на 2-хлоро-М-{2-(етиламино)-6-флуоро-3пиридинил}-5-бромо-3-пиридинкарбоксамид (73,5 д, 216 mmol) в пиридин (435 mL) при 50°С се прибавя на капки 1 М разтвор на NaHMDS в THF (520 mL, 520 mmol). След 10 минути реакционната смес се остава да се охлади до стайна температура, и се излива в ледена вода (2 L). Полученият твърд продукт се филтрува, изплаква се с вода, а след това и с хексан. Твърдият продукт се суши при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието (50,6 д, 69 % добив), под формата на тъмно-зелен твърд продукт.

f) 8-бромо-5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-5-метил-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Към разтвор на 8-бромо-5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (44 g, 130,5 mmol) в DMF (520 mL) се прибавя NaH (4,28 д, 178 mmol), и сместа се загрява до 50°С в продължение на 30 минути. Реакционната смес се охлажда до стайна температура, и й се действува с Mel (24,4 mL, 522 mmol). След 1,5 часа реакционната смес се излива в ледена вода. Твърдият продукт се филтрува, промива се с вода, а след това и с хексан, суши се при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието (43,2 д, 94 % добив), под формата на тъмно-сив твърд продукт.

д) 5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-5-метил-8-(2пропенил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он Алилтрибутилкалай (32,0 mL, 103,4 mmol) и Pd(Ph₃P)₄ (5,43 g, 4,70 mmol) се прибавя към дегазиран (N₂ през разтвор в продължение на 45 минути) разтвор на 8-бромо-5,11-дихидро11-етил-2-флуоро-5-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (33,0 д, 94,0 mmol) в DMF (470 mL). Допълнителни количества от Pd(Ph₃P)₄ (1,09 д, 0,94 mmol), прибавени след

1,2,3,4,5 час на реакцията) се прибавят до пълното завършване на реакцията. Сместа се нагрява до 90°С в продължение на 2 часа. Сместа се нагрява до 90°С в продължение на 6 часа. Сместа се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан: EtOAc,

8:2 до 7:3), при което се получава съединението съгласно заглавието (22,4 д, 76 % добив).

h) 5,11 -дихидро-11 -етил-2-флуоро-8-(2-хидроксиетил)-5метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Струя озониран кислород барбутира през студен (-78°С) разтвор на 5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-5-метил-8-(2-пропенил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (22,38 д,

71,6 mmol) в СН₂С1₂ (100 mL) и МеОН (100 mL) в продължение на 3 часа. След това през разтвора барбутира N₂, в продължение на 15 минути, и след това към разтвора се прибавя твърд NaBH₄ (5,05 g, 133 mmol). Реакционната смес се оставя да се загрее до стайна температура. След 1 час към реакционната смес се прибавя допълнителна порция NaBH₄ (1,62 g, 43,0 mmol). След още един час, се прибавя наситен воден разтвор на NH₄CI (150 mL), и сместа се разбърква при стайна температура в прадължение на 30 минути. Органичният разтворител се отстранява при понижено налягане. Прибавя се вода (200 mL), и сместа се екстрахира с СНС1₃ (3 х 300 mL). Комбинираните органични слоеве се сушат (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc: CHCI₃, 4:1), при което се получава съединението съгласно заглавието (19,7 д, 72 % добив), под формата на бял твърд продукт.

i) 5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-5-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Диетил азодикарбоксилат (DEAD) (14,3 mL, 91,0 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 5,11 -дихидро-11-етил-2флуоро-8-(2-хидроксиетил)-5-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е]- [1,4]диазепин-6-он (19,2 mg, 60,7 mmol), 4-хидроксихинолин (13,2 mg, 91,0 mmol) и Ph₃P (23,9 mg, 91,0 mmol) в THF (300 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура, в прадължение на 1 час, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства частично посредством флаш хроматография (EtOAc: МеОН, 95:5), при което се получава съединението съгласно заглавието (17,9 д, 67 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 444 (МН)⁺.

Пример V (номер 1, таблица 1)

2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-4-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

а) 2-хлоро-М-(2,6-дихлоро-4-метил-3-пиридинил)-

3-пиридинкарбоксамид

NaHCO₃ (21,72 g, 258,6 mmol) се прибавя към разтвор на 3-амино-2,6-дихлоро-4-метилпиридин (41,61 g, 235,1 mmol; получен както е описано от К. G. Grozinger et al. J. Heterocyclic Chem. 1995, 32, 259 - 263) в MeCN (350 mL), и получената суспензия се разбърква в прадължение на 15 минути. След това в продължение на 30 минути се внася разтвор на 2-хлорникотинил хлорид (43,44 g, 246,8 mmol) в MeCN (500 mL). Получената суспензия се разбърква при стайна температура. След 24 часа, се установява, че разтворът е кисел, и се прибавя допълнително количество NaHCO₃ (3,00 g, 35,7 mmol). След това ссуспензията се разбърква при стайна температура в продължение на още 12 дни. След това сместа се излива в смес от вода (2 L) и лед (200 д), и се разбърква в продължение на 20 минути. Твърдият продукт се филтрува и се промива с вода (500 mL), и полученият твърд продукт след това се суши над Р₂О₅ при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието (62,5 д, 84 % добив), под формата на бял прахообразен продукт.

Ь) М-(2,6-дихлоро-4-метил-3-пиридинил)-2-(етиламино)-3пиридинкарбоксамид

Разтвор на 2-хлоро-М-(2,6-дихлоро-4-метил-3-пиридинил)3-пиридинкарбоксамид (63,17 g, 194,0 mmol) и етиламин (28,0 д, 583 mmol) в ксилен се разбърква при 120 до 125°С в стоманен автоклав в прадължение на 7 часа. Получената суспензия се излива във вода (1 L), разбърква се в прадължение на 15 минути, и се филтрува. Остатъкът се разтваря в EtOAc и се промива с вода (3 х), със солна луга, и се суши над MgSO₄. Филтратът се екстрахира с EtOAc, и комбинираните органични екстракти се промиват с вода и със солна луга, и се сушат над MgSO₄. Двете фракции след това се комбинират, и излишният ксилен се отстранява посредством съ-дестилиране с бензен, при което се получава съединението съгласно заглавието (61,98 д, розов твърд продукт), като главна съставна част на сместа от съединения. Продуктът, не-пречистен на този етап, се използува директно в следващата реакция.

с) 5-бромо-М-(2,6-дихлоро-4-метил-3-пиридинил)-2(етиламино)-З-пиридинкарбоксамид

Твърд КОАс (22,2 д, 229 mmol) се прибавя към разтвор на суров М-(2,6-дихлоро-4-метил-3-пиридинил)-2-(етиламино)-3-пиридинкарбоксамид (61,98 д, < 190 mmol) в АсОН (600 mL). След това се прибавя разтвор на Вг₂ (9,7 ml, 191 mmol) в продължение на 30 минути, внасят се допълнителни количества КОАс и Вг₂, докато TLC покаже, че не остава изходен продукт (общо 11,2 g от КОАс и 5,91 mL от Вг₂). След това разтвора се излива във вода (2 L), и се разбърква в прадължение на 20 минути.

Твърдият продукт се отстранява посредством филтруване, и след това се разтваря в Et₂O (1 L). Етерният разтвор се промива с вода (3 х), с наситен воден разтвор на NaHCO₃, със солна луга, след това се суши (MgSO₄), при което се получава смес, съдържаща като главна съставна част, съединението съгласно заглавието (77,7 д, жълта пяна). Продуктът се използува директно в следващата реакция.

d) 8-бромо-2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-4-метил-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Разтвор от суров 5-бромо-М-(2,6-дихлоро-4-метил-3пиридинил)-2-(етиламино)-3-пиридинкарбоксамид (77,7 g, mmol) в безводен пиридин (1,0 L) се нагрява до 50°С. След това се прибавя на капки 1 М разтвор на NaHMDS в THF (418 ml, 418 mmol), и бъркането продължава в продължение на още 15 минути. След охлаждане до стайна температура се прибавя вода (50 mL), и сместа се концентрира до две трети от обема във ротационен изпарител. След това остатъкът се излива във вода (3 L). След филтруване се получава съединението съгласно заглавието (23,44 д), под формата на червеникаво-кафяв твърд продукт. Филтратът се екстрахира с ЕЮАс (3 х), и комбинираните екстракти се промиват с вода и със солна луга, след това се сушат (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан: ЕЮАс, 9:1, или СНС1₃), при което се получава допълнително количество от съединението съгласно заглавието (10,06 д, или общо 37,5 д, 50 % добив, за 3 етапа.

е) 2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-4-метил-8-(2-пропенил)6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Разтвор на 8-бромо-2-хпоро-5,11-дихидро-11-етил-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (12,6 д,

34,3 mmol) в DMF (25 - 0 mL) се дегазира при при понижено налягане в прадължение на 20 минути. След това се прибавя Pd(PPh₃)₄ (775 mg, 0,7 mmol), а след това и алилтрибутинкалай (12,5 ml, 41,1 mmol). След дегазиране при понижено налягане в прадължение на 10 минути, сместа се нагрява до 100°С в продължение на 7 часа. След това сместа се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан: EtOAc, 9:1), при което се получава съединението съгласно заглавието (8,04 д, 71 % добив), под формата на жълт твърд продукт.

f) 2-хлоро-5,11 -дихидро-11 -етил-8-(2-хидроксиетил)-4метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Струя О₃ се вкарва в студен (-78°C) разтвор на 2-хпоро-

5,11-дихидро-11-етил-4-метил-8-(2-пропенил)-6Н-дипиридо-[3,2Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (8,04 д, 24,4 mmol) и Судан III в СН₂С1₂ (120 mL) и МеОН (120 mL). Когато розовият разтвор стане кафяв, Озбарбутира през разтвора в продължение на 10 минути. След това се прибавя NaBH₄ (1,12 g, 29,4 mmol), и . разтвора се оставя да се загрее до стайна температура. След 30 минути се прибавя допълнително количество NaBH₄ (500 mg). След 1 час, се прибавя наситен воден разтвор на NH₄CI, и сместа се разбърква в прадължение на 20 минути. Разтвора се концентрира при понижено налягане, и се екстрахира с СНС1₃ (3 х). Комбинираните органични екстракти се промиват със солна луга, сушат се (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (CHCI₃: ЕЮН 92:3), при което се получава съединението съгласно заглавието (6,01 д, 74 % добив), под формата на бял твърд продукт.

g) 2-хлоро-5,11-дихидро-11-eτил-4-мeτил-8-{2-(4xинoлинилoκcи)eτил}-6H-диπиpидo[3,2-b:2’,3’-e][1,4]диазепин-6-он

Диетил азодикарбоксилат (DEAD) (83 μΙ_, 0,53 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил8-(2-хидроксиетил)-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е]-[1,4]-диазепин-6-он (125 mg, 0,38 mmol), 4-хидроксихинолин (76,3 mg, 0,53 mmol) и Ph₃P (138 mg, 0,53 mmol) в THF (2,5 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура в прадължение на 3 часа, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се разтваря в EtOAc (60 mL), и разтвора се промива последователно с 1 N воден разтвор на NaOH (3x10 mL) и със солна луга (15 mL), след това се суши (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc: МеОН, 9:1), при което се получава съединението съгласно заглавиетс) (52 mg, 30 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 460/462 (МН)⁺.

Пример VI (номер 7, таблица 1)

5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-4-метил-8-{2-(4хинолинилокси)-етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

а) 8-бромо-5,11-дихидро-11-етил-2-{{(4-метоксифенил)метил}амино}-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

8-бромо-2-хлоро-5,11 -дихидро-11 -етил-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (2,50 д, 6,80 mmol)ce разтваря в диоксан (10 mL) в дебелостенна стъкленица за работа под налягане, и към разтвора се прибавя 4-метоксибензиламин (4,0 ml, 30,6 mmol). Сместа се загрява до 170°С в прадължение на 5 дена. Реакционната смес се охлажда до стайна температура и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се извлича с EtOAc и се промива с 10 % воден разтвор на NH₄CI, сушаи се над MgSO₄, филтрува се, и се концентрира при понижено налягане, при което се получава кафяво масло, което се хроматографира над силика гел (хексан: EtOAc, 4:1). Съединението съгласно заглавието се получава под формата на жълт твърд продукт (1,35 д, 42% добив).

b) 2-амино-8-бромо-5,11 -дихид ро-11 -етил-4-метил-6Н-

С дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

8-бромо-5,11-дихид ро-11-етил-2-{{(4-метоксифенил)метил}амино}-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин6-он (6,52 д, 18,7 mmol) се разтваря в трифлуороцетна киселина (100 mL) и разтвора се разбърква с магнитна бъркалка при стайна температура в прадължение на 18 часа. Трифлуороцетната киселина се изпарява при понижено налягане, и остатъкът се излива в смес от вода (450 mL) и EtOAc (400 mL). Сместа се разбърква с магнитна бъркалка в прадължение на 2 часа при стайна температура. Органичната фаза се концентрира при понижено налягане. Жълтата утайка се отфилтрува и се промива с вода, суши се при понижено налягане, при което се получават 7,51 g жълт твърд продукт, който се разпрашава в Et₂O, при което се получава съединението съгласно заглавието (5,12 д, 105 % добив), под формата на твърд жълт продукт.

c) 8-бромо-5,11-дихид ро-11-етил-2-флуоро-4-метил-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Пластмасова бутилка се зарежда с 2-амино-8-бромо-5,11дихидро-11 -етил-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (5,10 д, 14,6 mmol). Прибавя се HF· пиридин (100 д), и получената суспензия се охлажда до 0°С. Прибавя се натриев нитрат (1,12 д, 16,1 mmol) на няколко порции в прадължение на 30 минути, при което се получава морав разтвор. След това сместа се разбърква в прадължение на 16 часа при стайна температура. Реакционната смес се излива в лед и 6 N NaOH. Бежовата суспензия се екстрахира с EtOAc. Органичните екстракти се комбинират, сушат се над MgSO₄, филтруват се, и се концентрират. Остатъка се разпрашава с Е1₂О/хексан, при което се получава съединението съгласно заглавието (4,30 д, 84 % добив).

d) 5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-4-метил-8-(2пропенил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он Алилтрибутилкалай (7,77 mL, 25,1 mmol) и Pd(Ph₃P)₄ (1,32 g, 1,14 mmol) се прибавя към дегазиран (N₂ през разтвор в продължение на 30 минути) разтвор на 8-бромо-5,11-дихидро11 -етил-2-флуоро-5-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (8,0 д, 22,8 mmol) в DMF (114 mL). Сместа се нагрява до 90°С в продължение на 3 часа. Сместа се излива във вода (250 mL) и се екстрахира с EtOAc (4 х 250 mL). Комбинираните органични слоеве се промиват с 20 % воден разтвор на NaH₄OH (250 mg) и със солна луга (250 mL), сушат се (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан: EtOAc, 4:1 до 1:1), при което се получава съединението съгласно заглавието (3,16 д, 51 % добив).

е) 5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-8-(2-хидроксиетил)-4метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Струя озониран кислород барбутира през студен (-78°С) разтвор на 5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-5-метил-8-(2-пропенил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (3,16 д,

10,1 mmol) в CH₂CI₂ (25 mL) и МеОН (25 mL) в продължение на 45 минути. След това през разтвора барбутира N₂, в продължение на 15 минути, и след това към разтвора се прибавя твърд NaBH₄ (669 mg, 17,1 mmol). Реакционната смес се оставя да се загрее до стайна температура. След 2 часа към реакционната смес се прибавя наситен воден разтвор на NH₄CI (50 mL), и сместа се разбърква при стайна температура в прадължение на 15 минути. Органичните разтворители се отстраняват при понижено налягане. Остатъчния воден разтвор се екстрахира с СНС1₃ (3 х 100 mL). Комбинираните органични слоеве се сушат (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc: СНС1₃, 1:1), при което се получава съединението съгласно заглавието (2,40 д, 75 % добив), под формата на бял твърд продукт.

f) 5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-4-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Диизопропил азодикарбоксилат (DIAD) (117 μί, 0,59 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 5,11-дихидро-11-етил-2флуоро-8-(2-хидроксиетил)-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3^!-е]- [1,4]диазепин-6-он (125 mg, 0,40 mmol), 4-хидроксихинолин (86,0 mg, 0,59 mmol) и Ph₃P (156 mg, 0,59 mmol) в THF (1,9 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура. в прадължение на 3 часа, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се разтваря в EtOAc (40 mL), и разтвора се промива последователно с 3 N воден разтвор на NaOH (3 х 20 mL), с наситен воден разтвор на NH₄CI (15 mL), със солна луга (15 mL), след това се суши (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Оста тъка се пречиства частично посредством флаш хроматография (EtOAc: МеОН, 95:5). Твърдият продукт след това се пречиства посредством ВЕТХ с обърната фаза (CombiPrep ADS-AQ 50 х 20 mm, 5 μ, 120 A, 5 - 100 % MeCN + 0,10 % THF / вода + 0,10 % THF в продължение на 25 минути), при което се получава съединението съгласно заглавието като сол на трифлуороцетната киселина (106 mg, 48 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 444 (МН)⁺.

Пример VII (номер 5, таблица 1)

11-(циклопропил)-5,11-дихидро-2-флуоро-4-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-б-он

а)11-(циклопропил)-5,11-дихидро-2-флуоро-8-(2-хидроксиетил)-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Съединението съгласно заглавието се получава от 8бромо-2-хлоро-11-циклопропил-5,11-дихидро-4-метил-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он, използувайки метод, подобен на този, за съответния 11-етил-^ов аналог, описан в пример VI.

Ь) 11-(циклопропил)-5,11-дихидро-2-флуоро-4-метил-8-{2(4-хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Диизопропил азодикарбоксилат (DIAD) (131 μΙ_, 0,66 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 11-(циклопропил)-5,11дихидро-2-флуоро-8-(2-хидроксиетил)-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (140 mg, 0,44 mmol), 4-хидроксихинолин (96,4 mg, 0,66 mmol) и Ph₃P (124 mg, 0,66 mmol) в THF (2,2 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура, в прадължение на 3 часа, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се разтваря в

EtOAc (60 mL), и разтвора се промива последователно с 3 N воден разтвор на NaOH (3 х 20 mL), с наситен воден разтвор на NH₄CI (20 mL), със солна луга (20 mL), след това се суши (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства частично посредством флаш хроматография (EtOAc: МеОН, 95:5). Твърдият продукт след това се пречиства посредством ВЕТХ с обърната фаза (CombiPrep ADS-AQ 50 х 20 mm, 5 μ, 120 A, 5 - 100 % MeCN + 0,10 % THF / вода + 0,10 % THF в продължение на 25 минути), при което се получава съединението съгласно заглавието като сол на трифлуороцетната киселина (104 mg, 43 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 456 (МН)⁺.

Пример VIII (номер 8, таблица 1)

5,11-дихидро-11-етил-4-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

а) 5,11-дихидро-11-етил-8-(2-хидроксиетил)-4-метил-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Смес от 2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-8-(2-хидроксиетил)-

4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-онЬ (168 mg, 0,51 mmol), амониев формиат, (318 mg, 5,1 mmol), и 10 % Pd / С (50 mg) в EtOH (6 mL), се разбърква при стайна температура. След 24 часа се прибавят допълнителни количества от амониев формиат, (200 mg, mmol), и 10 % Pd / С (50 mg). След разбъркване в прадължение на още 24 часа, реакцията се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се разтваря в СНС1₃, и сместа се промива с наситен воден разтвор на NaHCO₃, суши се (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието (122 mg, 81 % добив), под формата на жълто масло.

Ь) 5,11-дихидро-11-етил-4-метил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Диизопропил азодикарбоксилат (DIAD) (42 μ!_, 0,21 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 5,11 -дихидро-11-етил-8-(2хидроксиетил)-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин6-он (42,0 mg, 0,14 mmol), 4-хидроксихинолин (31 mg, 0,21 mmol) и Ph₃P (55,4 mg, 0,21 mmol) в THF (0,7 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура, в прадължение на 2 часа, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се разтваря в EtOAc (60 mL), и разтвора се промива последователно с 3 N воден разтвор на NaOH (3 х 20 mL), с наситен воден разтвор на NH₄CI (20 mL), и със солна луга (20 mL), след това се суши (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства частично посредством флаш хроматография (EtOAc: МеОН, 95:5). Твърдият продукт след това се пречиства посредством ВЕТХ с обърната фаза (CombiPrep ADS-AQ 50 х 20 mm, 5 μ, 120 A, 5 - 100 % MeCN + 0,10 % THF / вода + 0,10 % THF в продължение на 25 минути), при което се получава съединението съгласно заглавието като сол на трифлуороцетната киселина (14,2 mg, 19 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 426 (МН)⁺.

Пример IX (номер 3, таблица 1)

11-(циклопропил)-5,11-дихидро-4-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

а) 5-бромо-2-хлоро-М-(2,6-дихлоро-4-метил-3-пиридинил)3-пиридинкарбоксамид

3-амино-2,6-дихлоро-4-метилпиридин (0,51 д, 2,85 mmol) се разтваря в толуен (35 mL) и се прибавя пиридин (0,27 ml, 3,28 mmol). След това се прибавя на капки 5-бромо-2-хлоро-3пиридинкарбонил хлорид (0,80 д, 3,14 mmol), в продължение на 30 минути. Получената смес се разбърква при стайна температура в прадължение на 1 час, разрежда се с вода, и се екстрахира с толуен (2 х). Комбинираните органични екстракти се сушат (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Полученото гъсто масло се разпрашава с СН₂С1₂, и твърдият бял продукт се събира посредством вакуум филтруване, при което се получава съединението съгласно заглавието (0,41 д, 36 % добив).

Ь) 5-бромо-2-(циклопропиламино)-М-(2,6-дихлоро-4метил-3-пиридинил)-3-пиридинкарбоксамид

Разтвор от 5-бромо-2-хлоро-М-(2,6-дихлоро-4-метил-3пиридинил)-3-пиридинкарбоксамид (3,00 д, 7,61 mmol) и циклопропиламин (2,11 ml, 30,5 mmol) в ксилен се нагрява в затворена епруветка при 120°С в прадължение на 4 часа. Реакцията се охлажда до 0°С, разрежда се с вода, и се екстрахира с EtOAc (2 х). Комбинираните органични екстракти се сушат (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства, като се разпрашава (ЕЬО:хексан, 3:1), при което се получава съединението съгласно заглавието (2,35 g, 75 % добив), под формата на светло жълт твърд продукт.

с) 8-бромо-2-хлоро-11 -циклопропил-5,11 -дихидро-4-метил6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Разтвор от 5-бромо-2-(циклопропиламино)-М-(2,6-дихлоро-4-метил-3-пиридинил)-3-пиридинкарбоксамид (105 mg, 0,254 mmol) в пиридин (3,0 mL) се нагрява до 50°С, като се прибавя 1 М разтвор на NaHMDS в THF (0,53 ml, 0,53 mmol). Полученият разтвор се разбърква при 50°С в прадължение на 3 часа. Реакцията се потушава с воден разтвор на NH₄CI, разрежда се с вода, и се екстрахира с EtOAc (3 х). Комбинираните органични екстракти се промиват със солна луга, сушат се (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Полученият остатък се пречиства посредством флаш хроматография (хексан:EtOAc, 7:3), при което се получава съединението съгласно заглавието (32 mg, 33 % добив).

d) 2-хлоро-11 -циклопропил-5,11 -дихидро-4-метил-8-(2пропенил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Разтвор от 8-бромо-2-хлоро-11 -циклопропил-5,11 -дихидро-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (0,046 g, 0,122 mmol) в DMF (2,0 mL) се дегазира, оросяване с N₂, в прадължение на 10 минути. Прибавя се Pd(PPh₃)₄ (2,8 mg, 0,003 mmol) и алилтрибутилкалай (0,45 ml, 0,146 mmol), и полученият разтвор се нагрява до 90°С в прадължение на 2,5 часа. Реакционната смес се разрежда с вода, и се екстрахира с СН₂С1₂ (3 х) и ЕЮАс (2 х). Комбинираните органични екстракти се сушат (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Полученият остатък се пречиства посредством флаш хроматография (хексан към хексан.ЕЮАс, 7:3), при което се получава съединението съгласно заглавието (0,033 д, 80 % добив).

е) 2-хлоро-11-циклопропил-5,11-дихидро-8-(2хидроксиетил)-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Студен разтвор (-78°С) на 2-хлоро-11-циклопропил-5,11дихидро-4-метил-8-(2-пропенил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (0,82 д, 2,43 mmol) в CH₂CI₂ (7,5 mL) и МеОН (7,5 mL) се насища с О₃, докато разтворът стане бледо син. Реакционната смес се оставя при -78°С в прадължение на 10 минути, след това се прибавя NaBH₄ (0,23 g, 9,71 mmol), и сместа се оставя да се загрее до стайна температура в продължение на 2 часа. Реакцията се погасява с воден разтвор на 10 % на лимонена киселина, и се екстрахира с ЕЮАс (3 х). Органичните екстракти се комбинират, промиват се със солна луга, сушат се (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (МеОН: СН₂С1₂, 2 до 10 %), при което се получава съединението съгласно заглавието (0,41 д, 60 % добив).

f) 11-циклопропил-5,11-дихидро-8-(2-хидроксиетил)-4метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Съединението съгласно заглавието се получава, като се използува метод, подобен на този, описан за 11-етил ⁰⁵ аналог в пример Villa.

g) 11-циклопропил-5,11-дихидро-4-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Диизопропил азодикарбоксилат (DIAD) (167 pL, 0,85 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 11-(циклопропил)-5,11дихидро-8-(2-хидроксиетил)-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е]44 [1,4]-диазепин-6-он (175 mg, 0,57 mmol), 4-хидроксихинолин (123 mg, 0,85 mmol) и Ph₃P (223 mg, 0,85 mmol) в THF (2,8 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура. в прадължение на 3 часа, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се разтваря в EtOAc (60 mL), и разтвора се промива последователно с 3 N воден разтвор на NaOH (3 х 20 mL), с наситен воден разтвор на NH₄CI (20 mL), и със солна луга (20 mL), след това се суши (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc:МеОН, 95:5), при което се получава съединението съгласно заглавието (74 mg, 30 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 438 (МН)⁺.

Пример X (номер 21, таблица 1)

5,11 -дихидро-11 -етил-5-метил-8-{2-{(1 -оксидо-4хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Твърд тСРВА (80 - 85 %, т-хлорпербензоена киселина) (2,21 д, 10,2 mmol) се прибавя към разтвор на 5,11 -дихидро-11етил-5-метил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (2,56 д, 6,02 mmol) в СН₂С1₂ (30 mL) и THF (30 mL) при стайна температура (да се отбележи, че реакцията може да се осъществи и само в СН₂С1₂). Сместа се разбърква при стайна температура в прадължение на 1 час, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъка се разтваря в СНС1₃ (400 mL), разтвора се промива последователно с 10 % воден разтвор на Na₂S₂O₃ (3 х 75 mL), с наситен воден разтвор на NaHCO₃ (3 х 75 mL), и със солна луга (75 mL), суши се (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства посредством флаш хроматография (СНС1₃:МеОН, 9:1), при което се получава съединението съгласно заглавието (2,01 mg, 76 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 442 (МН)⁺.

Пример XI (номер 17, таблица 1)

2-хпоро-5,11 -дихидро-11 -етил-5-метил-8-{2-{(1 -оксид о-4хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Като се използува методика, еднаква с тази на пример X, от 2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (2,70 д, 5,87 mmol), се получава съединението съгласно заглавието (2,05 mg, 73 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 476/478 (МН)⁺.

Пример XII (номер 17, таблица 1)

5,11-дихидро-11-етил-2-флуоро-5-метил-8-{2-{(1-оксидо-4хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Твърд тСРВА (457 mg, 2,12 mmol) се прибавя към разтвор на 5,11 -дихидро-2-флуоро-11 -етил-5-метил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (470 mg, 1,06 mmol) в CH₂CI₂ (10 mL). Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 13 часа, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъка се разтваря в СНС1₃ (75 mL), разтвора се промива последователно с 10 % воден разтвор на Na₂S₂O₃ (3 х 25 mL), с наситен воден разтвор на NaHCO₃ (3 х 25 mL), и със солна луга (25 mL), суши се (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено наляга не. Остатъка се пречиства посредством флаш хроматография (СНС1₃:МеОН, 19:1 до 9:1), при което се получава съединението съгласно заглавието (250 mg, 51 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 460 (МН)⁺.

Пример XIII (номер 10, таблица 1)

2-хлоро-11-циклопропил-5,11-дихидро-5-метил-8-{2-{(1оксидо-4-хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Твърд тСРВА (177 mg, 0,82 mmol) се прибавя към разтвор на 2-хлоро-11 -циклопропил-5,11 -дихидро-5-метил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин6-он (143 mg, 0,30 mmol) в CH₂CI₂ (3 mL) и THF (3 mL). Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 14 часа, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъка се разтваря в EtOAc (50 mL), разтвора се промива последователно с 10 % воден разтвор на Na₂S₂O₃ (3x10 mL), с наситен воден разтвор на NaHCO₃ (3 х 10 mL), и със солна луга (10 mL), суши се (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства частично посредством флаш хроматография (EtOAc:MeOH, 95:5 до СН₂С1₂:МеОН, 9:1). Онечистеното съединение след това се пречиства посредством ВЕТХ с обърната фаза (CombiPrep ADS-AQ 50 х 20 mm, 5 μ, 120 A, 5 - 100 % MeCN + 0,10 % THF / вода + 0,10 % THF в продължение на 25 минути). Ha чистата фракция се действува с наситен воден разтвор на NaHCO₃, екстрахира се с EtOAc, и разтвора се суши (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане, при което се получава съединението съг-ласно заглавието (28,3 mg, 19 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 488 (МН)⁺.

Пример XIV (номер 14, таблица 1)

2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-4-метил-8-{2-{(1-оксидо-4хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Твърд mCPBA (46,9 mg, 0,22 mmol) се прибавя към разтвор на 2-хлоро-5,11 -дихидро-11 -етил-5-метил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (50,0 mg, 0,11 mmol) в CH₂CI₂ (2,2 mL). Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 1 час, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъка се разтваря в EtOAc (50 mL), разтвора се промива последователно с 10 % воден разтвор на Na₂S₂O₃ (3x10 mL), с наситен воден разтвор на NaHCO₃ (3 х 10 mL), и със солна луга (10 mL), суши се (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства посредством ВЕТХ с обърната фаза (CombiPrep ADS-AQ 50 х 20 mm, 5 μ, 120 A, 5 - 100 % MeCN + 0,10 % THF / вода + 0,10 % THF в продължение на 25 минути). На чистата фракция се действува с наситен воден разтвор на NaHCO₃, екстрахира се с EtOAc, и разтвора се суши (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието (32,5 mg, 63 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 488/490 (МН)⁺.

Пример XV (номер 9, таблица 1)

5,11 -дихидро-11 -етил-2-флуоро-4-метил-8-{2-{(1 -оксидо-4хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Като се използува методика, еднаква с тази на пример

XIV, от 5,11 -дихидро-11 -етил-2-флуоро-4-метил-8-{2-(4-хиноли48 нилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (125 mg, 0,28 mmol), се получава съединението съгласно заглавието (40 mg, 31 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 460 (МН)⁺.

Пример XVI (номер 12, таблица 1)

5,11 -дихидро-11 -етил-4-метил-8-{2-{(1 -оксидо-4хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Твърд тСРВА (163 тд, 0,75 mmol) се прибавя към разтвор на 5,11 -дихидро-11 -етил-4-метил-8-{2-(4-хинолинил-окси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (144 mg,

0,34 mmol) в CH₂CI₂ (7,5 mL). Разтвора се разбърква при стайна температура в продължение на 2 часа. Сместа се разрежда с СН₂С1₂ (125 mL), промива се последователно с 10 % воден разтвор на Na₂S₂O₃ (2 х 25 mL), с наситен воден разтвор на NaHCO₃ (2 х 25 mL), и със солна луга (25 mL), след това се суши (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства посредством флаш хроматография (СН₂С1₂:МеОН, 10:1), при което се получава съединението съгласно заглавието (102 mg, 68 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 442 (МН)⁺._

Пример XVII (номер 15, таблица 1)

11-цикдопропил-5,11 -дихидро-4-метил-8-{2-{(1 -оксидо4-хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Като се използва методика, подобна на тази от пример

XIV, от 11 -циклопропил-5,11 -дихидро-4-метил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’, 3’-е][1,4]-диазепин-6-он заместваща страница (37,1 mg, 0,085 mmol), се получава съединението съгласно заглавието (35 mg, 91 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 454 (МН)⁺.

Пример XVIII (номер 25, таблица 1) 2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-4-метил-8-{2-(5хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Диетил азодикарбоксилат (DEAD) (77 μΙ_, 0,49 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 2-хлоро-5,11 -дихидро-11-етил8-(2-хидроксиетил)-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е]-[1,4]диазепин-6-он (125 mg, 0,38 mmol), 5-хидроксихинолин (70,9 mg, 0,49 mmol) и Ph₃P (128 mg, 0,49 mmol) в THF (2,5 mL) при стайна температура. След 1,5 час към сместа се прибавя допълнително количество DEAD (35 μι, 0,22 mmol) и Ph₃P (59 mg, 0,22 mmol). Сместа се разбърква при стайна температура в прадължение на 1 час, след това се разрежда с EtOAc (50 mL), и разтвора се промива последователно с 1 N воден разтвор на NaOH (4 х 10 mL), и със солна луга (15 mL), след това се суши (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматогра-фия (СН₂С1₂:ацетон, 85:15). Полученият твърд продукт се разпрашава с Et₂O, при което се получава съединението съгласно заглавието (38 mg, 22 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 460/462 (МН)⁺.

Пример XIX (номер 20, таблица 1)

2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-{2-{(1-оксидо-5хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Диетил азодикарбоксилат (DEAD) (160 μι, 1,01 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил50

8-(2-хидроксиетил)-5-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е]-[1,4]диазепин-6-он (225 mg, 0,68 mmol), 5-хидроксихинолин (147 mg, 1,01 mmol) и Ph₃P (266 mg, 1,01 mmol) в THF (3,4 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура в прадължение на 3 часа, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства частично посредством флаш хроматография (EtOAc:MeOH, 95:5). Фракцията, съдържаща производното 5-хинолинилокси се концентрира, разтваря се в CH₂CI₂ (2 mL) и THF (5 mL), и й се действува с m СРВА (80 %, 248 mg, 1,15 mmol) при стайна температура. Разтвора се разбърква при стайна температура в прадължение на 2,5 часа, след това се концентрира при понижено налягане. Остатъка се разтваря в EtOAc (50 mL), промива се последова-телно с 10 % воден разтвор на Na₂S₂O₃ (3x10 mL), с наситен воден разтвор на NaHCO₃ (3x10 mL), и със солна луга (10 mL), след това се суши (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc:MeOH, 95:5 до CH₂CI₂:MeOH, 9:1), при което се получава съединението съгласно заглавието (113 mg, 35 % добив за 2 етапа), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 476/478 (МН)⁺.

Пример XX (номер 18, таблица 1)

5,11 -дихид ро-11 -етил-2-флуоро-5-метил-8-{2-{(1 -оксидо-5хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Като се използува методика, еднаква с тази от пример XIX, от 5,11 -дихидро-11 -етил-2-флуоро-8-(2-хидроксиетил)-5метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (267 mg, 0,84 mmol), се получава съединението съгласно заглавието (204 mg, 52 % добив за 2 етапа), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 460 (МН)⁺.

Пример XXI (номер 19, таблица 1)

2-хлоро-5,11-дихидро-11-етил-4-метил-8-{2-{(1 -оксид о-5хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Като се използува методика, подобна на тази от пример XIX, но използувайки диизопропил азодикарбоксилат (DIAD), вместо диетил азодикарбоксилат, от 2-хлоро-5,11 -дихидро-11етил-8-(2-хидроксиетил)-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е]- [1,4]-диазепин-6-он (223 mg, 0,67 mmol), се получава съединението съгласно заглавието (43,4 mg, 14 % добив за 2 етапа), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 478 (МН)⁺.

Пример XXII (номер 23, таблица 1)

5,11-дихидро-11-ети л-2-флуоро-4-метил-8-{2-{(1-оксид о-5хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Като се използува методика, подобна на тази от пример XXI, от 5,11 -дихидро-11 -етил-2-флуоро-4-метил-8-(2-хид роксиетил)-4-метил-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (250 mg, 0,79 mmol), се получава съединението съгласно заглавието (64,7 mg, 18 % добив за 2 етапа), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 460 (МН)⁺.

Пример XXIII (номер 22, таблица 1)

2-хлоро-5,11 -дихидро-11 -етил-8-{2--{(1 -оксид о-4хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

MS (ESI) m/z 462 (МН)⁺.

Пример XXIV (номер 26, таблица 1)

5,11-дихидро-5,11-диетил-8-{2-(4-хинолинилокси}етил)-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]- диазепин-6-он

MS (ESI) m/z 440 (МН)⁺.

Пример XXV (номер 27, таблица 1)

5,11 -дихидро-5,11 -диетил-8-{2-{(1 -оксидо-4- хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

MS (ESI) m/z 456 (МН)⁺.

Пример XXVI (номер 28, таблица 1)

2,5-диметил-5,11-дихидро-11-етил-8-{2-(1-оксидо-4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

а) 5-бромо-2-хлоро-М-(6-хлоро-2-метил-3-пиридинил)-3пиридинсарбоксамид

NaHCO₃ (3,9 д, 46,4 mmol) се прибавя към разтвор на 3-амино-2-хлоро-6-метилпиридин (2,2 д, 15,4 mmol; получен, както е описан от К. G. Grozinger et al. J. Heterocyclic Chem. 1995, 32, 259-263) в MeCN (50 mL). Получената суспензия се разбърква в продължение на 15 минути, и в прадължение на 30 минути се внася разтвор на суров 5-бромо-2-хлоро-3-пиридинкарбонил хлорид (получен от 5-бромо-2-хидрокси-3-пиридинкарбоксилна киселина и SOCI₂ [както е описано от Т. W. Gero et al. in Synth. Commun. 1989, 19, 553-559 (включен тук за справка) но като се изпусне обработването с вода] (4 д) в MeCN (10 mL). Получената суспензия се разбърква в продължение на 15 минути при стайна температура. След 24 часа реакцията се излива в смес от вода (100 mL) и лед (10 д), и се разбърква в продължение на 20 минути. Суспензията се филтрува, и полученият твърд продукт се промива с вода (50 mL) и с хексан (25 mL), след това се суши над Р₂О₅ при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието (1,8 д, 31 % добив), под формата на бял прах.

Ь) 5-бромо-М-(2-хлоро-6-метил-3-пиридинил)-2(етиламино)-З-пиридинсарбоксамид

Разтвор на 5-бромо-2-хлоро-М-(2-хлоро-6-метил-3пиридинил)-3-пиридинсарбоксамид (1,7 д, 4,8 mmol) и етиламин (2М в THF, 10,5 mmol, 5,2 ml) в THF (5 mL) се разбърква при 90 до 95°С в стоманен автоклав в продължение на 16 часа. Получената мес се излива във вода (100 mL), разбърква се в продължение на 15 минути, и се филтрува. Твърдият продукт се промива с вода, след това и с хексан, при което се получава съединението съгласно заглавието под формата на жълт твърд продукт (1,58 д, 89 % добив).

с) 8-бромо-5,11-дихидро-2,5-диметил-11-етил-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Разтвор на суров 5-бромо-М-(2-дихлоро-6-метил-3пиридинил)-2-(етиламино)-3-пиридинсарбоксамид (0,7 д,

1,8 mmol) в безводен пиридин (18 mL) се нагрява до 50°С. След това се прибавя на капки 1 М разтвор на NaHMDS в THF (7,2 mL, 7,2 mmol), и разбъркването продължава в продължение на още 3 часа допълнително. След като се охлади до стайна температура, се прибавя метил йодид (0,6 mL, 9 mmol), и реакцията се разбърква в прадължение на една нощ. Прибавя се вода (25 mL), и сместа се екстрахира с EtOAc (3 х), и комбинираните екстракти се промиват с вода и със солна луга, след това се сушат (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан:EtOAc, 8:2), при което се получава съединението съгласно заглавието (259 mg, 41 % добив).

d) 5,11-дихидро-2,5-диметил-11-етил-8-(2-пропенил)-6Н- дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Разтвор на 8-бромо-5,11 -дихидро-2,5-диметил-11 -етил6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (258 mg, 0,7 mmol) в DMF (7,4 mL) се дегазира при понижено налягане, в продължение на 20 минути. След това се прибавя Pd(PPh₃)4 (43 mg, 0,04 mmol), след него и алилбутилкалай (0,3 mL, 0,85 mmol). След дегазиране при понижено налягане в продължение на 10 минути, сместа се нагрява до 100°С в продължение на 1,5 час. След това сместа се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан:EtOAc, 8:2), при което се получава съединението съгласно заглавието (184 mg, 98 % добив).

e) 5,11-дихидро-2,5-диметил-11-етил-8-(2-хидроксиетил)-

6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Струя О₃ барбутира през студен (-78°С) разтвор на 5,11дихидро-2,5-диметил-11 -етил-8-(2-пропенил)-6Н-дипиридо[3,2Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (187 mg, 0,6 mmol) и Судан III в СН₂С1₂ (3 mL) и МеОН (3 mL). Когато розовият разтвор стане кафяв, през разтвора барбутира О₂ в прадължение на 10 минути. След това към разтвора се прибавя твърд NaBH₄ (57 mg, 1,52 mmol), и разтвора се оставя да се загрее до стайна температура. След 30 минути се прибавя допълнително количество NaBH₄ (20 mg). След 2 часа се прибавя наситен воден разтвор на NH₄CI, и сместа се разбърква в прадължение на 20 минути. Разтвора се концентрира при понижено налягане, и се екстрахира с CH2CI2 (3 х). Комбинираните органични екстракти се про55 миват със солна луга, сушат се (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Оста-тъкът се пречиства посредством флаш хроматография (ЕЮАс:хексан, 6:4), при което се получава съединението съгласно заглавието (111 mg, 58 % добив), под формата на бял твърд продукт.

f) 2,5-диметил-5,11 -дихидро-11 -етил-8-{2-(4хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Диетил азодикарбоксилат (DEAD) (139 μΙ_, 0,88 mmol) се прибавя на капки към разтвор на 5,11-дихидро-2,5-диметил-11етил-8-(2-хидроксиетил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (110 mg, 0,35 mmol), 4-хидроксихинолин (128 mg, 0,88 mmol) и Ph₃P (231 mg, 0,88 mmol) в THF (3,5 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура, в продължение на 16 часа. Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 16 часа. Реакционната смес се разрежда с EtOAc (60 mL), и разтвора се промива последователно с 1 N воден разтвор на NaOH (3x10 mL) и със солна луга (15 mL), след това се суши (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc, след това EtOAc:МеОН, 9,5:0,5), при което се получава съединението съгласно заглавието (57 mg, 37 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 440 (МН)⁺.

g) 5,11-дихидро-2,5-диметил-11-етил-8-{2-{(1-оксидо-4хинолинил)окси}етил}-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3'-е][1,4]диазепин-6-он

Твърд тСРВА (80 - 85 %, т-хлорпербензоена киселина) (60 mg, 0,28 mmol) се прибавя към разтвор на 5,11-дихидро-2,5диметил-11 -етил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,256

Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (55 mg, 0,13 mmol) в CH₂CI₂ (1,3 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 2,5 часа, след това се разрежда с СН₂С1₂. Полученият разтвор се промива последователно с 10 % воден разтвор на Na₂S₂O₃, с наситен воден разтвор на NaHCO₃, и със солна луга, суши се (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства посредством флаш хроматография (MeOH:EtOAc, 2 % до 5 %), при което се получава съединението съгласно заглавието (59 mg, 99 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 456 (МН)⁺.

Пример XXVII (номер 29, таблица 1)

5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-{2-(1-оксо-4хинолинилокси)етил}-2-(трифлуорметил)-6Н-дипиридо[3,2Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он 41ЗХХ

а) 2-(етиламино)-3-нитро-6-(трифлуорметил)пиридин

Към разтвор на 2-нитроацетамид амониева сол (4 д, 33 mmol) във вода (165 mL) се прибавя пиперидин ацетат (33 mmol) във вода, и след това бавно се прибавя 4-етокси1,1,1-трифлуоро-3-бутен-2-он (6,1 mL, 43 mmol) в МеОН (11 mL). Реакционната смес се разбърква в прадължение на 2 часа при стайна температура, и при нагряване при температура на кипене под обратен хладник в прадължение на 3 часа. Реакционната смес се оставя да се охлади до 45°С, и се прибавя воден разтвор на HCI (1N), докато pH стане кисело. След 1 час при стайна температура, реакционната смес се екстрахира с CH₂Ch (3 х). Комбинираните органични слоеве се промиват последователно с вода и със солна луга, сушат се (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Оста тъкът се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc, след това EtOAc: МеОН, 9:1), при което се получава З-нитро-6(трифлуорметил)-2(1 Н)-пиридинон (2,7 д, 40 % до-бив), под формата на твърд жълт продукт.

Към разтвор на 3-нитро-6-(трифлуорметил)-2(1Н)-пиридинон (2,4 д, 11,5 mmol) в DMF (69 mL) се прибавя натриев хидрид (350 mg, 13,8 mmol). Реакцията се разбърква в продължение на 30 минути при 45 °C, охлажда се до стайна температура, и се прибавя N-фенилтрифлуорметансулфонимид (4,9 д,

13,8 mmol). След 1 час се прибавя 2 М разтвор на етиламин в THF (13 mL, 25 mmol). Реакцията се разбърква при стайна температура в продължение на една нощ. Реакционната смес се излива във вода (100 mL), и се екстрахира с ЕЮАс (3 х). Комбинираните органични слоеве се промиват последователно с вода и със солна луга, сушат се (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан:EtOAc, 9:1), при което се получава желаното съединение (1,1 д, 41 % добив), под формата на жълто масло.

Ь) 3-амино-2-(етиламино)-6-(трифлуорметил)пиридин

Разтвор на 2-(етиламино)-3-нитро-6-(трифлуорметил)пиридин (1,1 д, 4,9 mmol) в МеОН (40 mL) се разбърква в продължение на една нощ при стайна температура, във водородна атмосфера (1 атм.) в присъствие на 20 % Pd(OH)₂/C (100 mg). Катализаторът се отстранява посредством филтруване през инфузорна пръст. Филтрата се концентрира при понижено налягане, при което се получава съединението съгласно заглавието, под формата на оранжево масло (1 д).

с). 2-хлоро-М-{2-(етиламино)-6-(трифлуорметил)-3пиридин}-5-бромо-3-пиридинкарбоксамид

Към изстуден разтвор на 3-амино-2-(етиламино)-6-трифлуорметил пиридин (1 д, 4,9 mmol) в MeCN (24 mL) се прибавя твърд NaHCO₃ (906 mg, 11 mmol). След 5 минути се прибавя суров 5-бромо-2-хлоро-3-пиридинкарбонил хлорид (получен от

5-бромо-2-хидрокси-3-пиридинкарбоксилна кисели-на и SOCI₂ [както е описано от Т. W. Gero et al. in Synth. Commun. 1989, 19, 553-559 (включен тук за справка) но като се изпусне третирането с вода] (1 екв., 4,9 mmol). След 2 часа реакционната смес се излива в лед/Н₂О (1,5 L) и полученият твърд продукт се филтрува, изплаква се с Н₂О, и след това с хексан. След като се изсуши при понижено налягане в продъл-жение на една нощ, се получава съединението съгласно загла-вието, под формата на светло кафяв твърд продукт (1,6 д, 77 % добив).

d) 8-бромо-5,11-дихидро-11-етил-2-(трифлуорметил)-6Ндипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Към разтвор на 2-хлоро-М-{2-(етиламино)-6-(трифлуорметил)-3-пиридинил}-5-бромо-3-пиридинкарбоксамид (766 mg,

1,8 mmol) в DMF (18 mL) се прибавя NaH (137 mg, 5,4 mmol) Реакцията се разбърква при 80°С. След 1 час, реакцията се оставя да се охлади до стайна температура, и след това се излива във вода (20 mL). Получената смес се екстрахира с EtOAc (3 х). Комбинираните органични слоеве се промиват последователно с вода и със солна луга, сушат се (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан:ЕЮАс, 7:3), при което се получава желаното съединение (200 mg, 28 % добив), под формата на жълт твърд продукт.

е) 8-бромо-5,11-дихидро-11-етил-5-метил-2(трифлуорметил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он Към разтвор на 8-бромо-5,11-дихидро-11-етил-2-(трифлуорметил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (200 mg, 0,52 mmol) в DMF (2,6 mL) се прибавя NaH (20 mg, 0,78 mmol), и сместа се тагрява до 50°С в продължение на 30 минути. Реакционната смес се охлажда до стайна температура, и й се действува с Mel (97 μί, 1,56 mmol). След 1 час, реакционната смес се разрежда с вода. Получената смес се екстрахира с EtOAc (3 х). Комбинираните органични слоеве се промиват последователно с вода и със солна луга, сушат се (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан:EtOAc, 8,5:1,5), при което се получава съединението съгласно заглавието (110 mg, 53 % добив), под формата на бяла пяна.

f) 5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-(2-пропенил)-2(трифлуорметил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он Алилтребутилкалай (98 μί, 0,32 mmol) и Pd(Ph₃P)₄ (16 mg, 0,02 mmol) се прибавят към дегазиран (N₂ през разтвор в продължение на 30 минути) разтвор на 8-бромо-5,11-дихидро-11етил-5-метил-2-(трифлуорметил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (11 mg, 0,27 mmol) в DMF (1,4 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при 90°С в продължение на

1,5 час, след това се охлажда до стайна температура, и се концентрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (хексан: ЕЮАс, 8:2 до 7:3), при което се получава съединението съгласно заглавието (101 mg, 99 % добив).

g) 5,11-дихидро-11-етил-8-(2-хидроксиетил)-5-метил-2(трифлуорметил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Струя от озониран кислород барбутира през студен (-78°С) разтвор на 5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-(2пропенил)-2-(трифлуорметил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он (100 mg, 0,27 mmol) в CH₂CI₂ (2,7 mL) и МеОН (2,7 mL) в продължение на 2,5 часа. След това струя от N₂ барбутира през разтвора в продължение на 15 минути, и след към разтвора това се прибавя твърд NaBH₄ (52 gm, 1,4 mmol). Реакционната смес се оставя да се загрее до стайна температура. След 1 час се прибавя наситен воден разтвор на NH₄CI (5 mL), и сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 2 часа. Реакционната смес се разрежда с СН₂С1₂ и водния слой се екстрахира отново с СН₂С1₂. Комбинираните органични слоеве се промиват последователно с вода и със солна луга, сушат се (MgSO₄), филтруват се, и се концентрират при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хрома-тография (ЕЮАс:хексан, 75:25 до EtOAc 100 %), при което се получава съединението съгласно заглавието (60 mg, 59 % до-бив), под формата на твърд бял продукт.

h) 5,11 -дихидро-11 -етил-5-метил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-2-(трифлуорметил)-6Н-дипиридо[3,2-Ь:2’,3’-е][1,4]диазепин-6-он

Диетил азодикарбоксилат (DEAD) (38 μί, 0,24 mmol) се прибавят на капки към разтвор на 5,11 -дихидро-11-етил-8-(2хидроксиетил)-5-метил-2-(трифлуорметил)-6Н-дипиридо[3,2Ь:2’,3’-е]-[1,4]-диазепин-6-он (58 mg, 0,16 mmol), 4-хидроксихинолин (35 mg, 0,24 mmol) и Ph₃P (62 g, 0,24 mmol) в THF (1,6 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 1 час, след това се кон61 центрира при понижено налягане. Остатъкът се пречиства посредством флаш хроматография (EtOAc: МеОН; 95:5), при което се получава съединението съгласно заглавието (24 mg, 31 % добив), под формата на твърд бял продукт: MS (ESI) m/z 494, 495 (МН)⁺.

i) 5,11-дихидро-11-етил-5-метил-8-{2-{(1-оксидo-4xинoлинил)oκcи}eτил}-2-(τpиφлyopмeτил)-6H-диπиpидo[3,2Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он

Твърд тСРВА (80 - 85 %, т-хлорпербензоена киселина) (16 mg, 0,08 mmol) се прибавя към разтвор на 5,11-дихидро-11етил-5-метил-8-{2-(4-хинолинилокси)етил}-6Н-дипиридо[3,2Ь:2’,3’-е][1,4]-диазепин-6-он (22 mg, 0,04 mmol) в CH₂CI₂ (0,5 mL) при стайна температура. Сместа се разбърква при стайна температура в продължение на 2,5 часа, след това се разрежда с СН₂С1₂. Полученият разтвор се промива последователно с 10 % воден разтвор на Na₂S₂O₃, с наситен воден разтвор на NaHCO₃, и със солна луга, суши се (MgSO₄), филтрува се, и се концентрира при понижено налягане. Остатъка се пречиства посредством флаш хроматография (МеОН:СНС1₃, 5 % до 10 %), при което се получава съединението съгласно заглавието (11 mg, 52 % добив), под формата на твърд бял продукт. MS (ESI) m/z 511 (МН)⁺.

Таблица 1

Съединения с формула I

I

Табл.1 Ред# номер	R2	R4	R5	R11	Q
1	С1	Ме	Н	Et	'pp
2	С1	Н	Ме	Et	N
3	н	Ме	Н	CycPr	дР
4	F	Н	Ме	Et
5	F	Ме	Н	CycPr	ίΡΡ
6	С1	Н	Ме	CycPr	ρ^Ρ
7	F	Ме	Н	Et	xpp

Табл.1 Ред# номер	R2	R4	R5	R11	Q
8	Н	Ме	Н	Et
9	F	Ме	Н	Et	V
10	С1	Н	Ме	СусРг	G->
11	F	Н	Ме	Et	~2
12	Н	Ме	Н	Et	\^N + 4o
14	С1	Ме	Н	Et	V
15	Н	Ме	Н	СусРг
					xcT

ζ*

Табл. 1 Ред# номер	R2	R4	R5	R11	Q
17	С1	Н	Ме	Et	xo“
18	F	н	Ме	Et
					\i=SN + \ 0“
19	С1	Ме	Н	Et	\^N + --\ 0-
20	С1	Н	Ме	Et	\r^N + \ 0~
21	Н	н	Ме	Et	\ jO?
					__ 0
22	С1	н	Н	Et	4o~
23	F	Ме	Н	Et	x=^n + \ 0“

Табл.1 Ред# Номер	R2	R4	R5	R11	Q
24	Н	Н	Ме	Et
25	С1	Ме	Н	Et
26 .	н	Н	Et	Et	ί
27	н	Н	Et	Et	0
28	СНз	Н	СНз	Et	0
29	CF3	Н	сн3	Et-	V

заместваща страница

ИЗСЛЕДВАНИЯ НА ОБРАТНА ТРАНСКРИПТАЗА (RT) Теория на изследването:

Измежду ензимите, за които виирусът на човешка имунна недостатъчност (HIV-1) кодира, е обратна транскриптаза (1), наречена така, понеже тя транскрибира ДНК копие от РНК матрица. Тази активност може да се измери количествено в изследване на свободен от клетки ензим, и се базира на наблюденията, че обратната транскриптаза е в състояние да използува синтетична матрица поли г(С) с праймир с биотинилиран олиго d(G) да транскрибира белязана с радиоактивен изо-топ ДНК верига, използувайки ЗН-dGTP като субстрат. Изследването, описано по-долу използува див тип ензим (който е предоминантна форма на ензима, наблюдаван у пациенти, инфектирани с HIV-1), и също така може да се използува с мутантни RT ензими (например, Y181C, получени чрез сайт-насочена мутагенеза, при която тирозинния остатък при кодон 181 е бил заместен с цистеинов остатък) в аналогични условия на изследване. Това изследване позволява съединенията да бъдат оценени за тяхната ефективност при инхибиране на мутантните ензими.

МАТЕРИАЛИ:

а) Получаване на ензима

Някои HIV-1 IIIB клон ВН10 RT мутанти са предоставени от Dr. С.-К. Shih (Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Ins., U.S.A.) във вектор KK233-2 (Pharmacia). Накратко, HIV RT клон pKRT2, съдържащ само гена RT рбб регулиран от lac operon/trc промотор, е получен от Dr. W. Summers (Yale University) (2). Различни амино киселинни заместители са вкарани в RT гена посредством сайт-направлявана мутагенеза на дивия тип. RT клони са суб-клонирани в рКК233-2 бактериален експресиращ вектор. Предоставените клони включващи див тип, Val106Ala, Tyr181Cys, Tyr188Cys, Tyr181 Leu, Gly190Ala и Pro236Leu. Други са създадени на място, посредством сайт-направлявана мутагенеза на рКК233-2 клони RT, включващи Lys103Asn, Lys103Asn/ Tyr181Cys, Lys103Asn/Leu1 OOlle,

Lys103Asn/Pro225His, и Lys103Asn/Val108lle.

b) Пречистване на ензим

Пречистване на рекомбинантна обратна транскриптаза се осъществява, използувайки комбинация от методи, описани предварително (3). Единично клониране от свежо блюдо с трансформирани клетки JM109 се използува, за да се инициира растеж на пре-културален растеж о/η при 37°С. Два литра растежна среда се инокулират с тази пре-култура. При OD₆oo ~ 1,5 (5 - 6 h при 37°С), експресирането на RT гена се индуцира с IPTG (1 тМ крайно), и ферментацията продължава в продължение на повече часове при 37°С. След центрофугиране, супернатантите се изхвърлят, докато клетъчните пелети се събират, и се съхраняват при -80°С до пречистване. Клетки се размразяват при 4°С в продължение на една нощ, и се суспендират в лизисен буфер (MES 50 mM pH 6, EDTA 1 тМ, 10 % обем/обем глицерол, 0,02 % тегло/обем п-октил-β-Οглюкозид, 0,02 % тегло/обем натриев азид). Прибавя се лизозим, и сместа се инкубира в лез в продължение на 40 минути. След хомогенизиране, използувайки Dounce, използувайки лизозим и ултразмук, клетките се центрофугират в продължение на 30 минути. Супернатантата (S1) се запазва, и се съхранява при 4°С. Центрофугираните пелети се суспендират отново в екстракционен буфер (MES 50 mM pH 6, КРО₄ 50 тМ pH 6, KCI 100 тМ, 10 % обем/обем глицерол, 0,02 % тегло/обем п-октил-р-О-глюкозид, 0,02 % тегло/обем натриев азид) и се разбърква в продължение на 30 минути при 4°С. Тази втора смес се центрофугира отново, и супернатантата (S2) се запазва. Горната процедура се повтаря още 2 пъти, като се запазват супернатантите S3 и S4, и се извършва едно последно екстрахиране в продължение на една нощ (S5). Към комбинираните супернатанти се прибавя полимин Р (0,005 % крайно), за отстраняване на нуклеинови киселини. Този разтвор се разбърква в продължение на 75 минути при 4°С, и се центрофугира в продължение на 1 час. Супернатантата (SS1) се утаява върху лед с 20 % тегловобем амониев сулфат, и се разбърква в продължение на 1 час при 4°С. След това сместа се центрофугира, и получената супернатанта (SS2) се утаява с допълнително количество 40 % тегло/ обем амониев сулфат (60 % общо), разбърква се в продължение на 1 час, и се центрофугира отново. Крайният пелен (Р1) се съхранява в продължение на една нощ при 4 °C преди да се подложи на пречистване на следващия ден. Всички етапи на пречистването се осъществяват при 4°С, освен ако не се посочва друго.

Пелет (Р1) се суспендира отново в MES 50 mM pH 6, KCI 100 тМ, 10 % обем/обем глицерол, 0,02 % тегло/обем п-октил-р-О-глюкозид, 0,02 % тегло/обем натриев азид. Суспензията се подлага на диализа срещу същия буфер в продължение на една нощ, използувайки 12 - 14 kD MWC0 диализна тръба. Диализата се центрофугира, и супернатантата се филтрува през филтърни единици Millex-PF 0,8 цт. Филтруваната поба се поставя в Hydroxy Apatite колона (30 - т1_обем на леглото), и се промива със същия буфер. Свързаният ензим се елуира с - 220 mL линеен градиент на 10 до 300 тМ КРО₄ в горния буфер. Фракциите, съдържащи рбб / р51 хетеродимер (определен по SDS-PAGE 8 % и Western blotting) се събират за следващата колона. Фракциите, съдържащи RT се разреждат двукратно с Bis-Tris пропан 50 mM pH 7,0, (NH^SCM М, 0,02 % тегло/обем OBG, 10 % обем/обем глицерол, 0,02 % NaN₃, и се поставя в Hi-Trap Heparin Sepharose колона (5-mL обем на леглото), и се промиват със същия буфер. След това свързаната RT се елуира със 75 mL линеен градиент от 0 до 1 М амониев сулфат в същия буфер. Фракциите, съдържащи Rt се обединяват съгласно анализ по SDS-PAGE и Western blotting. Протеиновата концентрация на това обединение се определя посредством метода на Bradford, използувайки BSA като стандартен образец. Крайният ензимен състав се подлага на диализа в (MES 50 mM pH 6, КРО₄ 300 тМ pH 6, KCI 175 тМ, 10 % обем/обем глицерол, 0,02 % тегло/обем натриев азид, и се замразява при -80 °C.

Процедура на изследване:

Изследването на ензима с радиоактивен изотоп е адаптирано към формата на 96-ямково микроблюдо, и използува сцинтилирането на перлите в близост до стрептавидин. Изследването се описва накратко по-долу. HIV-1 RT ензима се размразява, и се разрежда подходящо в Tris/HCI 50 mM pH 7,8, съдържащ NaCI 60 тМ, MgCI₂ хексахидрат 2 тМ, DTT 6тМ, редуциран глутатион 2 тМ и 0,02 % тегло/обем Chaps, при което се получават ®3 пМ ензим. Към 30 pL от този ензимен разтвор се прибавят 10 pL от разтвора на инхибитора (50 рМ до 2,5 пМ инхибитор в същия буфер на изследването, както по-горе, съдържащ 15 % обем/обем DMSO). Блюдото се преинкубира в продължение на 15 минути при стайна температура, преди да се осъществи следващия етап. В този етап на пре-инкубиране, най-високата и най-ниската концентрация на инхибитора са

12,5 μΜ и 0,62 пМ съответно, а концентрацията на DMSO е

3,75 % обем/обем. След това ензимната реакция се инициира чрез прибавянето на 10 μί разтвор от субстратти. Крайната реакционна смес съдържа Tris/HCI 50 mM pH 7,8, NaCl 60 тМ, Mg₂CI₂*6H₂O 2 тМ, DTT 6 тМ, GSH 2 тМ, Chaps 0,02 % тегло/обем DMSO 3 % обем/обем, Poly гС 179 пМ, Biotin dGi₅ 18 пМ, dGTP 288 пМ, и ³H-dGTP 71 пМ.

През този инкубационен етап, най-високата и най-ниската концентрация на инхибитора са 10 μΜ и 0,5 пМ съответно. След прибавянето на субстрати, блюдото се покрива с сластмасов капак, и се инкубира в продължение на 1 час при 37°С в сух инкубатор. След това реакцията се погасява чрез прибавянето на 75 pL EDTA 0,5 М, съдържащ 5 mg/mL перли, сцинтилиращи в близост до стрептавидин.стрептавидин.

Блюдото се разклаща в продължение на 2 минути със средна скорост, и се инкубира в продължение на 1 час при стайна температура. След това се прибавят 75 μΙ_ 7 М разтвор на цезиев хлорид, блюдото се разклаща в продължение на 2 минути със средна скорост, и се инкубира отново в продължение на 1 час при стайна температура. След това блюдото се покрива с пластмасов капак, и се отчита, използувайки TopCount-NXT™ Microplate Scintillation & Luminescence Counter, Packard. Всяка ямка се отчита в продължение на 60 секунди. Всяка редица съдържа в нейните краища празна ямка и контролана ямка.

Изчислението за процент инхибитор е както следва:

%. Шхибиране =

сьед Ямка - сЬед- празна сьед · коНтроЛа - сьед · празна

Като се използува горното изследване, съединенията съгласно изобретението са изследвани за инхибиране на RT див тип (WT) и мутантни ензими. Резултатите са показани на таблица 2, като 1С₅о (пМ).

За да се потвърди способността на тези съединения да инхибират HIV реплициране, те също така са изследвани в изследването на култура от човешки Т-клетки (Syncytia), описано по-долу.

Изследване ELISA за оценяване на активността в клетъчна култура.

Съединения съгласно изобретението са изследвани за тяхната способност да инхибират реплицирането на HIV в клетъчна култура в 96 ямково блюдо за изследване. Пълна RPMI 1640, съдържаща RPMI 1640 + 10 % говежди зародишен серум, 10 pg/ml гентамицин и 10 μΜ β-меркаптоетанол, се използува за разреждане на съединението, така както и като растежна клетъчна среда. Т лимфоцитните клетки линия С8166 се инфектират при мултиплицитност на инфектиране 0,001 с вируси, кодиращи за див тип и мутант обратна транскриптаза. След това клетките се инкубират в продължение на три дни в присъствие на серийно разреждане на съединенията съгласно изобретението. Супернатантата от осем репликационни ямки се обединява, и концентрацията на екстрацелуларен р24 се определя, използувайки достъпния посредством търговската мрежа (кит) набор за изследване HIV-1 р24 антиген (BeckmanCoulter®). Нивото на инхибиране (% инхибиране) се изчислява със следващото уравнение:

%. инхибиране =

р24 pg/ml· инхибитор р24 pg/mL· коНтрсЛа

Резултатите са представени в таблица 3, като ЕС₅о (пМ).

Специфични изследвания

С цел да се изследва спецификата на инхибиторната активност към ензима на съединенията, предоставени от изобретението, няклко са изследвани за тяхната способност да инхибират други вирусни полимерази (такива като РНК-зависима РНК полимераза на вирус Hepatitis С (хепатит С) и вирус Respiratory Syncytial (дихателен Syncytial), така както и полимерази от бозайници (такива като Calf Thymus РНК-зависима ДНК с полимераза, и Нитап(човешка) теломераза), използувайки известни методи за изследване. При нито едно от изследваните по този начин съединения не се наблюдава да притежава значителна инхибиторна активност срещу тези ензими. Тези резултати показват, че ензимната инхибиторна активност на съединенията, предоставени от съединението, е насочена по-точно специфично срещу HIV-1 RT.

Литературна справка (включена тук за справка)

1. Benn, S., et al. Science 230:949,1985.

Ί3

2. D’Aquila, R. T. and Summers, W. C. J. Ack. Imm. Def. Syn. 2:579, 1989.

3. a) Warren, T. C. et al. Protein Expression & Purification

3:479, 1992; b) Kohlstaed, L. A. Science

256(5065): 1783, 1992.

W

- 2 3 ~

«Λ οό СЧ

so 'f

-4n th

00 0 TH

00 OS

00 os

in m TH

00 00

Os n П

CM © TH

’’T η ти

•4· n

0 Γη

0 4·

00 in

Γη

> H © CO ш4 ugsl “2>s

©s ГЧ

m

b4·

CM m

00 CO

tn ТГ

m so

00 in

in in n

in in

«η

OS in

in TH n

m 00

so Os

so m

8^2 ysi >1 —'

тЧ

S© SO

TH 00

® SS £?* « tn in *j Й 5 Й a a p< ~

Π τΗ <η

Γη

so m

rcm

00 m

s©

r— SO

in CM

in ЧЧ

00 m

0 m

m Ox

m n

© CM

v©

= z’-p y 2 oe *1 HH t-< J-1 ® « >

Π m

in Tf n

n th SO

n in

so m in

OS OS H

TH 0 m

in r— ^4

0 TH

in in

n TH n

v©

n n in H

00 4·

so 4· w

тЧ ©\

sS S u si ο ~

in Tf тЧ

C\ r*4

tn n

j 8 oo 5 n » e « 3

ο Г4

00 in П

SO m n m

0 n m

* ТГ tn n

00 ТЧ m тг

ТЧ in Г-

m O'. m m

CM CM 4· ^4

SO SO

0 © © © Ή Λ

00 Os n n

© 0 © © Λ

00 Os H

Г- 40 H чЧ

. 00 m Os m

a *“^ **“* ® Ό *5 U £ я СЧ c Pm

in 0 in

so m

O SO

8^54 ysi >

η ^Η

00 тг тЧ

OS t-

so © n

\o

4· Г—

0 ©S H

00 os

n r<*) TH

so m

чч CM тЧ

Γ—

SO O n

©X T-M <n

rm r-

Os 00

° 5 Q Q° »5 X т-Ч C > —

ο η

m n

<*) r-

Ю n

SO r-

00

m 4

m

SO 0 n

tn

00 <n

00 n

so n n

Os n

тГ

0 n

eZ °C 3 ysi « ~

Ο\ ι-Μ

in 00 n

in

in n n

in m

^© CM

r* m

m n

rso

00

чЧ m

©X чЧ

SO so

in CM

c* en

in n

ь _ 8« $“ аь1

•η ο ,—I

in in

in so TH

© iM ^4

CX ГЧ

in CM

00 OS

0 rH

’’T

i-M rr

tn OS

n

m чЧ

чЧ 40

rH

ЧЧ чМ

t

Съединение Номер (вижтабл.1)

τ4

ГЧ

co

ЧО

r-

00

o\

<0 1—(

r4 ι-Ч

ГЧ r-H

Tf i—H

in r4

l> т-Ч

00 w

Os r-4

F''

Ί*·»'

ω S ° S д S 3 з	тг-	00 40			04 4©	00 еч	m ч· т		00 еч
X n2®S ~S> “	ТГ 40	О еч ТЧ				00 m	Г ТГ ГН		in m
Soo g a 2 = > ~		Оч Оч							© ОЧ
sSSg' U © <4 « Д ,4 Π β	о гН	о ’’Т				еч	Ш 00		in еч
OZ W ~ v? РП *5? U © «» « hH ** Г“* Я * >	W Ш	ш 04	4© m m	'Т еч	Ο	ТГ Ό	© © еч	Оч Оч еч	тг	00
S O S' usl 0 ~		40 еч			tn еч				1Л еч
S jg 5 u « i AH Г*	O', m ч·	Гш m I4	ο O'. 04 еч	'Т гН 40 ш	геч 4©	гm ш еч	о ГЧ	ш m m m	о Оч тН	00 гш
= J = че 5 O fO « д n c Ри		©Ч еч I4
S © g ysl > ~	4© M3	ч© о т-Ч	en 04 ’’T еч	tn ο	тг тг m	Ч· 00	ш л· г-	ГЧ r* еч еч	ш © 4©	m Оч 00
»u© m *5 u 00 « X c >	ГЧ ГЧ	гН Ш				гг·^	tn
eZ S 2 5 У 2 =	40 m	’Т т				σ\ гЧ	© тг
SPi g	о	г- тН	v> Tf	40	4© tri	00	ОЧ 00	00 m	О\ ιΉ	tn m
Съединение номер (виж табл.1)	о ГЧ	г-1 еч	еч еч	m еч	тг еч	Ш еч	Ю еч	еч	00 еч	©S еч

s т ξγ rfl

I— ф

CO > T

ο Z д ω 2 ® S а 2-< = W J

гч сп

04 • гц

гч • тЧ

<ίΐϊΐ “2?а

04 сп

© 1Л

гч

г? rn En s' U о гч £ щ w еч е ь·

© гч

in ^ч

СЧ к

о Z и —> и g 3 S Й »ч Г М >*

X©

«л г~:

сп гч

»л 0\

сч сч

о <<**· 觧2 « > s

00

гч 1Л

00 «л

О< -Ч и§ S и £ 5

•л

00 гч

ГГ ГЧ тн

'’Sгч

□ и <Л F4 И и » 2 W >

w4 Tf

гч

00 гч

е Z ^-ч •η m >5 ϋ о с «35

гч

00 гч

in

ОЙ ~ <j*s

4© гч

гч сч

сп

00 04 ©

сп 00 ©

тЧ

сп С\ ©

еч 04 ©

ТТ СП ©

40 гч ©

Г 4© ©

тГ сп ©

и· СП ©

Г СП ©

Съединение номер (вижтабл.1)

тН

еч

m

ч·

«л

Г-

00

С\

О 1—(

W 1—(

см

тг

Ш гН

Г-

00 ▼Ή

©\ ГН

ο Ζ й /*» υ S ® s M Ή*·		®ϊ in
οΖ 5 1Л Й 00 μ □ 2 ® 2 L·^ ν-и ζ C		© in
ο Ζ И д. r? сп ю S U © сч «5 Й ν =		ri
οΖ U u3*S и2> -	т-И *Н	cn τί						m I>	in cn
= j^ лоо 5 U eo 2 щ *< С W >1		Γ- 40						© r-	in \e
«л Ό и о S щ s		in 40						n	cn 00
□ и ~ uSS и S		00 ’’d						\o ri
= z uSS MSS		<л СП						cn • n
$ 2 s w g S	© ТГ ό	сп in ©				rj ri	rj ri	cn r·^	ЧО v-H
Съединение Номер (вижтабл.1)	О eq	тЧ Г4	eq eq	CD eq	rt eq	>n eq	X© Г4	00 eq	C\ eq

Claims (20)

1. ПАТЕНТНИ ПРЕТЕНЦИИ

   1. Съединение с общата формула I:

   където

   R² се избира от групата, състояща се от Н, F, Cl, Ci_₄ алкил, С₃.₄ циклоалкил, и CF₃;

   R⁴e Н, или Me;

   R⁵ е Н, Ме, или Et, при условие, че R⁴ и R⁵ не са и двата Ме, и ако R⁴ е Ме, тогава R⁵ не може да бъде Et;

   R¹¹ е Me, Et, циклопропил, пропил, изопропил, или циклобутил; и

   Q се избира от групата, състояща се от и фармацевтично приемлива тяхна сол.
2. 2. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R¹¹ е Et, или циклопропил, или фармацевтично приемлива тяхна сол.
3. 3. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че Q се избира от групата, състояща се от или фармацевтично приемлива тяхна сол.
4. 4. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че Q е или фармацевтично приемлива негова сол.
5. 5. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R⁵ е Ме, или или фармацевтично приемлива негова сол.
6. 6. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R¹¹ е Et, или или фармацевтично приемлива негова сол.
7. 7. Съединението:

   С или фармацевтично приемлива негова сол.
8. 8. Съединението:

   или фармацевтично приемлива негова сол.
9. 9. Съединението:

   или фармацевтично приемлива негова сол.
10. 10. Инхибитор на HIV реплициране с общата формула I:

    където

    R² се избира от групата, състояща се от Н, F, CI, См алкил, С₃_4 циклоалкил, и CF₃;

    R⁴e Н, или Me;

    R⁵ е Н, Ме, или Et, при условие, че R⁴ и R⁵ не са и двата Ме, и ако R⁴e Ме, тогава R⁵ не може да бъде Et;

    R¹¹ е Me, Et, циклопропил, пропил, изопропил, или циклобутил; и

    Q се избира от групата, състояща се от и фармацевтично приемлива тяхна сол.
11. 11. Инхибитор на HIV реплициране съгласно претенция 10, характеризиращ се с това, че R¹¹ е Et, или циклопропил, или фармацевтично приемлива негова сол.
12. 12. Инхибитор на HIV реплициране съгласно претенция 10, характеризиращ се с това, че Q се избира от групата, състояща се от

    О или фармацевтично приемлива негова сол.
13. 13. Инхибитор на HIV реплициране съгласно претенция

    10, характеризиращ се с това, че Q е или фармацевтично приемлива негова сол.
14. 14. Инхибитор на HIV реплициране съгласно претенция 10, характеризиращ се с това, че R⁵e Ме.
15. 15. Инхибитор на HIV реплициране съгласно претенция

    10, характеризиращ се с това, че R¹¹ е Et.
16. 16. Инхибитор на HIV реплициране с формулата:

    или фармацевтично приемлива негова сол.
17. 17. Инхибитор на HIV реплициране с формулата:

    или фармацевтично приемлива негова сол.
18. 18. Инхибитор на HIV реплициране с формулата:

    или фармацевтично приемлива негова сол.
19. 19. Метод за лечение, или за предотвратяване на HIV инфекция, характеризиращ се с това, че се състои в приложение върху пациент на HIV инхибиращо количество от съединение с формула I съгласно претенция 1, или фармацевтично приемлива негова сол.
20. 20. Фармацевтичен състав за лечение, или за предотвратяване на HIV инфекция, характеризиращ се с това, че съдържа съединение с формула I съгласно претенция 1, или фармацевтично приемлива негова сол, и фармацевтично приемлив носител.