NO323830B1 - Forbindelser, anvendelser derav samt inhibitor for HIV-replikasjon og farmasoytisk preparat - Google Patents
Forbindelser, anvendelser derav samt inhibitor for HIV-replikasjon og farmasoytisk preparat Download PDFInfo
- Publication number
- NO323830B1 NO323830B1 NO20025844A NO20025844A NO323830B1 NO 323830 B1 NO323830 B1 NO 323830B1 NO 20025844 A NO20025844 A NO 20025844A NO 20025844 A NO20025844 A NO 20025844A NO 323830 B1 NO323830 B1 NO 323830B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- mmol
- solution
- ethyl
- dihydro
- methyl
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims description 138
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims description 25
- 230000010076 replication Effects 0.000 title claims description 17
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title claims description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 26
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 9
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 claims description 8
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 claims description 7
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 7
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 6
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 claims description 5
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 claims description 5
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 claims description 5
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 5
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 144
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 143
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 105
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 102
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 89
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 80
- JXYPNRIYAMXJSE-UHFFFAOYSA-N 1,4-diazepin-6-one Chemical compound O=C1C=NC=CN=C1 JXYPNRIYAMXJSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 79
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 71
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 64
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 59
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 46
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 43
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 38
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 37
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 34
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 34
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 33
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 31
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 25
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 21
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- CVLAEJNQNKXNNN-UHFFFAOYSA-N diazepin-4-one Chemical compound O=C1C=CC=NN=C1 CVLAEJNQNKXNNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 16
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 16
- FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N diethyl azodicarboxylate Substances CCOC(=O)\N=N\C(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 16
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 16
- FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CCOC(=O)N=NC(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 15
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 15
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 12
- VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N propan-2-yl n-propan-2-yloxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CC(C)OC(=O)N=NC(=O)OC(C)C VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 11
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 11
- PMZDQRJGMBOQBF-UHFFFAOYSA-N quinolin-4-ol Chemical compound C1=CC=C2C(O)=CC=NC2=C1 PMZDQRJGMBOQBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 10
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 9
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 9
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 9
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 8
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- -1 polyethylene Polymers 0.000 description 7
- WRIKHQLVHPKCJU-UHFFFAOYSA-N sodium bis(trimethylsilyl)amide Chemical compound C[Si](C)(C)N([Na])[Si](C)(C)C WRIKHQLVHPKCJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- YLGRTLMDMVAFNI-UHFFFAOYSA-N tributyl(prop-2-enyl)stannane Chemical compound CCCC[Sn](CCCC)(CCCC)CC=C YLGRTLMDMVAFNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 6
- NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N palladium;triphenylphosphane Chemical compound [Pd].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 6
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- ZXLONDRTSKAJOQ-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-chloropyridine-3-carbonyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC(Br)=CN=C1Cl ZXLONDRTSKAJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 5
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 5
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 5
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 5
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 5
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 5
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PCLIMKBDDGJMGD-UHFFFAOYSA-N N-bromosuccinimide Chemical compound BrN1C(=O)CCC1=O PCLIMKBDDGJMGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 4
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 4
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 102220086195 rs11889925 Human genes 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 3-chloroperbenzoic acid Chemical compound OOC(=O)C1=CC=CC(Cl)=C1 NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GYXOTADLHQJPIP-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-oxo-1h-pyridine-3-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(Br)=CNC1=O GYXOTADLHQJPIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 3
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101100030361 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) pph-3 gene Proteins 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101150104269 RT gene Proteins 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L magnesium chloride Substances [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 3
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102200040767 rs1447458978 Human genes 0.000 description 3
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 3
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 3
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 3
- 150000003738 xylenes Chemical class 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 125000006645 (C3-C4) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- POXWDTQUDZUOGP-UHFFFAOYSA-N 1h-1,4-diazepine Chemical compound N1C=CC=NC=C1 POXWDTQUDZUOGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SHCWQWRTKPNTEM-UHFFFAOYSA-N 2,6-dichloro-3-nitropyridine Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)N=C1Cl SHCWQWRTKPNTEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AULKGEJDEAKINM-UHFFFAOYSA-N 2,6-dichloro-4-methylpyridin-3-amine Chemical compound CC1=CC(Cl)=NC(Cl)=C1N AULKGEJDEAKINM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GFDZKTFHLUFNPC-UHFFFAOYSA-N 2,6-difluoro-3-nitropyridine Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(F)N=C1F GFDZKTFHLUFNPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MBTGBRYMJKYYOE-UHFFFAOYSA-N 2,6-difluoropyridine Chemical compound FC1=CC=CC(F)=N1 MBTGBRYMJKYYOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JQJOQJQJEDRXNY-UHFFFAOYSA-N 2-n-ethyl-6-(trifluoromethyl)pyridine-2,3-diamine Chemical compound CCNC1=NC(C(F)(F)F)=CC=C1N JQJOQJQJEDRXNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HCNASHXYUPVBJL-UHFFFAOYSA-N 2-n-ethyl-6-fluoropyridine-2,3-diamine Chemical compound CCNC1=NC(F)=CC=C1N HCNASHXYUPVBJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UQXRQVGWVGDXMS-UHFFFAOYSA-N 2-n-ethylpyridine-2,3-diamine Chemical compound CCNC1=NC=CC=C1N UQXRQVGWVGDXMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004172 4-methoxyphenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(OC([H])([H])[H])=C([H])C([H])=C1* 0.000 description 2
- FYIAEAAQBSHDPC-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-n-cyclopropyl-3-nitropyridin-2-amine Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)N=C1NC1CC1 FYIAEAAQBSHDPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TXERJEKFMCQUFL-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-n-ethyl-3-nitropyridin-2-amine Chemical compound CCNC1=NC(Cl)=CC=C1[N+]([O-])=O TXERJEKFMCQUFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- HTJDQJBWANPRPF-UHFFFAOYSA-N Cyclopropylamine Chemical compound NC1CC1 HTJDQJBWANPRPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101900297506 Human immunodeficiency virus type 1 group M subtype B Reverse transcriptase/ribonuclease H Proteins 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 2
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 2
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 2
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium on carbon Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 229910006124 SOCl2 Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N UTP Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 2
- 229940121357 antivirals Drugs 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000007872 degassing Methods 0.000 description 2
- WHBIGIKBNXZKFE-UHFFFAOYSA-N delavirdine Chemical compound CC(C)NC1=CC=CN=C1N1CCN(C(=O)C=2NC3=CC=C(NS(C)(=O)=O)C=C3C=2)CC1 WHBIGIKBNXZKFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000009088 enzymatic function Effects 0.000 description 2
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 2
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 229920006158 high molecular weight polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 2
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 2
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- OTCASQFHKASSBH-UHFFFAOYSA-N n-ethyl-3-nitro-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-amine Chemical compound CCNC1=NC(C(F)(F)F)=CC=C1[N+]([O-])=O OTCASQFHKASSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DDBQQNCEHLMYGB-UHFFFAOYSA-N n-ethyl-3-nitropyridin-2-amine Chemical compound CCNC1=NC=CC=C1[N+]([O-])=O DDBQQNCEHLMYGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OPLNTLACBQACFX-UHFFFAOYSA-N n-ethyl-6-fluoro-3-nitropyridin-2-amine Chemical compound CCNC1=NC(F)=CC=C1[N+]([O-])=O OPLNTLACBQACFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQDJXKOVJZTUJA-UHFFFAOYSA-N nevirapine Chemical compound C12=NC=CC=C2C(=O)NC=2C(C)=CC=NC=2N1C1CC1 NQDJXKOVJZTUJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- NXJCBFBQEVOTOW-UHFFFAOYSA-L palladium(2+);dihydroxide Chemical compound O[Pd]O NXJCBFBQEVOTOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- GYESAYHWISMZOK-UHFFFAOYSA-N quinolin-5-ol Chemical compound C1=CC=C2C(O)=CC=CC2=N1 GYESAYHWISMZOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N uridine 5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N uridine-triphosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IDPURXSQCKYKIJ-UHFFFAOYSA-N 1-(4-methoxyphenyl)methanamine Chemical compound COC1=CC=C(CN)C=C1 IDPURXSQCKYKIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TZADVHNQABWMFZ-UHFFFAOYSA-N 11-ethyl-2,5-dimethyl-8-(2-quinolin-4-yloxyethyl)dipyrido[2,3-d:2',3'-h][1,4]diazepin-6-one Chemical compound C1=C2C(=O)N(C)C3=CC=C(C)N=C3N(CC)C2=NC=C1CCOC1=CC=NC2=CC=CC=C12 TZADVHNQABWMFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDELTXNPUXUBMU-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid boric acid Chemical compound OB(O)O.OB(O)O.OB(O)O.OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KDELTXNPUXUBMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UUOLETYDNTVQDY-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-3-nitropyridine Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CN=C1Cl UUOLETYDNTVQDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SUMSBUDMYMYTLL-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-6-methylpyridin-3-amine Chemical compound CC1=CC=C(N)C(Cl)=N1 SUMSBUDMYMYTLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RXTRRIFWCJEMEL-UHFFFAOYSA-N 2-chloropyridine-3-carbonyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CN=C1Cl RXTRRIFWCJEMEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 1
- YKYIFUROKBDHCY-UHFFFAOYSA-N 4-ethoxy-1,1,1-trifluorobut-3-en-2-one Chemical compound CCOC=CC(=O)C(F)(F)F YKYIFUROKBDHCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DZYXOPDNYWAKHQ-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(cyclopropylamino)-n-(2,6-dichloro-4-methylpyridin-3-yl)pyridine-3-carboxamide Chemical compound CC1=CC(Cl)=NC(Cl)=C1NC(=O)C1=CC(Br)=CN=C1NC1CC1 DZYXOPDNYWAKHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DRKCLEXPHFMOMA-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-chloro-n-(6-chloro-2-methylpyridin-3-yl)pyridine-3-carboxamide Chemical compound CC1=NC(Cl)=CC=C1NC(=O)C1=CC(Br)=CN=C1Cl DRKCLEXPHFMOMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KGTAABGZUYZSLW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-n-(2-chloro-6-methylpyridin-3-yl)-2-(ethylamino)pyridine-3-carboxamide Chemical compound CCNC1=NC=C(Br)C=C1C(=O)NC1=CC=C(C)N=C1Cl KGTAABGZUYZSLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YOQRXZIMSKLRCY-UHFFFAOYSA-N 5-bromonicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CN=CC(Br)=C1 YOQRXZIMSKLRCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OEPHFGKBHIZAEN-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-2-n-ethylpyridine-2,3-diamine Chemical compound CCNC1=NC(Cl)=CC=C1N OEPHFGKBHIZAEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OXMUFTJSLAMPBH-UHFFFAOYSA-N 8-bromo-2-chloro-11-ethyl-5h-dipyrido[2,4-d:2',3'-h][1,4]diazepin-6-one Chemical compound N1C(=O)C2=CC(Br)=CN=C2N(CC)C2=NC(Cl)=CC=C21 OXMUFTJSLAMPBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical class [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007989 BIS-Tris Propane buffer Substances 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 238000009010 Bradford assay Methods 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- XPOQHMRABVBWPR-UHFFFAOYSA-N Efavirenz Natural products O1C(=O)NC2=CC=C(Cl)C=C2C1(C(F)(F)F)C#CC1CC1 XPOQHMRABVBWPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010061833 Integrases Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 125000000010 L-asparaginyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C(=O)N([H])[H] 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 101100449785 Mus musculus Gsx2 gene Proteins 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019502 Orange oil Nutrition 0.000 description 1
- YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N Phosgene Chemical compound ClC(Cl)=O YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FHNINJWBTRXEBC-UHFFFAOYSA-N Sudan III Chemical compound OC1=CC=C2C=CC=CC2=C1N=NC(C=C1)=CC=C1N=NC1=CC=CC=C1 FHNINJWBTRXEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 1
- 108010017842 Telomerase Proteins 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical class [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N Uridinemonophosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KPCZJLGGXRGYIE-UHFFFAOYSA-N [C]1=CC=CN=C1 Chemical group [C]1=CC=CN=C1 KPCZJLGGXRGYIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004748 abacavir Drugs 0.000 description 1
- MCGSCOLBFJQGHM-SCZZXKLOSA-N abacavir Chemical compound C=12N=CN([C@H]3C=C[C@@H](CO)C3)C2=NC(N)=NC=1NC1CC1 MCGSCOLBFJQGHM-SCZZXKLOSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- RHLCYYRAECUNHY-UHFFFAOYSA-N azane;2-nitroacetamide Chemical compound N.NC(=O)C[N+]([O-])=O RHLCYYRAECUNHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000022 bacteriostatic agent Substances 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960004365 benzoic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- HHKZCCWKTZRCCL-UHFFFAOYSA-N bis-tris propane Chemical compound OCC(CO)(CO)NCCCNC(CO)(CO)CO HHKZCCWKTZRCCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N dGTP Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 HAAZLUGHYHWQIW-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- 229960005319 delavirdine Drugs 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 125000002576 diazepinyl group Chemical class N1N=C(C=CC=C1)* 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940095079 dicalcium phosphate anhydrous Drugs 0.000 description 1
- 229960002656 didanosine Drugs 0.000 description 1
- FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N diethyl pyrocarbonate Chemical compound CCOC(=O)OC(=O)OCC FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 229960003804 efavirenz Drugs 0.000 description 1
- XPOQHMRABVBWPR-ZDUSSCGKSA-N efavirenz Chemical compound C([C@]1(C2=CC(Cl)=CC=C2NC(=O)O1)C(F)(F)F)#CC1CC1 XPOQHMRABVBWPR-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229940071106 ethylenediaminetetraacetate Drugs 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 238000004896 high resolution mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- PKTUMXXVOLICJX-UHFFFAOYSA-N n-(2,6-dichloro-4-methylpyridin-3-yl)-2-(ethylamino)pyridine-3-carboxamide Chemical compound CCNC1=NC=CC=C1C(=O)NC1=C(C)C=C(Cl)N=C1Cl PKTUMXXVOLICJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COCAUCFPFHUGAA-MGNBDDOMSA-N n-[3-[(1s,7s)-5-amino-4-thia-6-azabicyclo[5.1.0]oct-5-en-7-yl]-4-fluorophenyl]-5-chloropyridine-2-carboxamide Chemical compound C=1C=C(F)C([C@@]23N=C(SCC[C@@H]2C3)N)=CC=1NC(=O)C1=CC=C(Cl)C=N1 COCAUCFPFHUGAA-MGNBDDOMSA-N 0.000 description 1
- 229960000689 nevirapine Drugs 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N octyl beta-D-glucopyranoside Chemical compound CCCCCCCCO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N 0.000 description 1
- 239000004533 oil dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000010502 orange oil Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N p-hydroxybenzoic acid methyl ester Natural products COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 230000005551 perinatal transmission Effects 0.000 description 1
- 229940112041 peripherally acting muscle relaxants other quaternary ammonium compound in atc Drugs 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229940067107 phenylethyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- RAIYODFGMLZUDF-UHFFFAOYSA-N piperidin-1-ium;acetate Chemical compound CC([O-])=O.C1CC[NH2+]CC1 RAIYODFGMLZUDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700004029 pol Genes Proteins 0.000 description 1
- 101150088264 pol gene Proteins 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000005060 rubber Substances 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 229940099373 sudan iii Drugs 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D487/14—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
- C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D471/14—Ortho-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Virology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
TEKNISK OMRÅDE FOR OPPFINNELSEN
Oppfinnelsen angår forbindelser, anvendelser derav samt inhibitor for HFV-replikasjon og farmasøytisk preparat.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN
Sykdommen kjent som ervervet immunsvikt syndrom (AIDS) ér forårsaket av human immunsvikt-virus (HIV), spesielt stammen kjent som HIV-1. For at HIV skal bli replikert av en vertscelle, må informasjonen av det virale genomet være integrert i vertscellens DNA: Imidlertid, er HIV et retrovirus, og det betyr at dens genetiske informasjon er i form av RNA. HIV replikasjonscyklus krever derfor et trinn av transkripsjon av det virale genomet (RNA) til DNA, som er det motsatte av den normale kjeden av hendelser. Transkripsjonen av det virale RNA til DNA blir fullført av et enzym som er dubbed revers transkriptase (RT). HIV virion omfatter en kopi av RT sammen méd det virale RNA.
Revers transkriptase har tre kjente enzymatiske funksjoner; det virker som en RNA-avhengig DNA polymerase, som en ribonuklease og som en DNA-avhengig DNA polymerase, som virker som en RNA-avhengig DNA polymerase, RT transcriberer en enkeltrådet DNA kopi av det virale RNA. Idet den virker som en ribonuklease, ødelegger RT det opprinnelige virale RNA og frigjør DNA nettopp produsert fra det opprinnelige RNA. Til slutt, når den virker som en DNA-avhengig DNA polymerase, danner RT en andre, komplementær DNA-tråd, ved anvendelse av første DNA-tråd som en templat. De to tråder danner dobbeltrådet DNA, som er integrert i vertscellen's genom av et annet enzym betegnet integrase.
Forbindelser som hemmer de enzymatiske funksjoner av HIV-1 revers transkriptase vil hemme replikasjonen av HIV-1 i infiserte celler. Slike forbindelser er anvendelige i forebygging eller behandling av HIV-1 infeksjon i humane individer, som demonstrert ved kjente RT inhibitorer så som 3'-azido-3'-deoksytøyrnidin (AZT), 2<*>,3'-dideoksyinosin (ddl), 2',3-dideoksycytidin (ddC), d4T, 3TC, Nevirapin, Delavirdin, Efavirenz pg Abacavir, hovedmedikamenter som for tiden er godkjente for anvendelse ved behandling av AIDS. Som med hvilken som helst antiviral terapi, fører anvéndelse av RT inhibitorer ved behandling av AIDS til slutt til et virus som er mindre sensitivt for gitte medikament. Resistens (redusert sensitivitet) til disse medikamenter er resultatet av mutasjoner som forekommer i revers transkriptase segmentet av polgenet. Mange mutant stammer av HIV er karakterisert og resistens til kjente terapeutiske midler er på grunn av mutasjoner i RT genet. Noen av de mest vanlige observerte mutanter klinisk er: Y181C mutanten, hvor et tyrosin (Y), ved kodon 181, er mutert til et cystein (C) residue og K103N hvor lysin (K) i stilling 103 er erstattet av asparagin (N). Andre mutanter som fremkommer med økende frekvens i løpet av behandling med kjent antiviraler omfatter enkel mutantene V106A, G190A, Y188C og P236L; og doble mutanter K103N/Y181C, K103N/P225H, K103N/V108I og K103NÆ.100I.
Når terapi og forebygging av HIV infeksjon ved anvendelse av antiviraler fortsetter, er fremkomsten av nye resistente stammer forventet å øke. Det er derfor et pågående behov for nye inhibitorer av RT, med forskjellig mønstere av effektivitet mot de forskjellige mutanter.
Forbindelser som har tricykliske strukturer som er inhibitorer av HIV-1 er beskrevet i U.S. patent nr. 5,366,972. Andre inhibitorer av HIV-1 revers transkriptase er beskrevet i Hargrave et al., h Med Chem., 34,2231 (1991).
U.S. patent nr. 5,705,499 foreslår 8-arylalkyl- og 8-arylheteroalkyl-5,l l-dihydro-6H-dipyrido[3,2-B:2\3'-E][ 1,4]diazepiner som inhibitorer av RT. Eksemplifiserte forbindelser er vist å ha viss aktivitet mot villtypé og mutant HIV-1 RT, spesieltYl81C og andre enkel mutanter så som K103N men mindre effektivt.
Spesifikt er forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse effektive for hemming av Y181C og K103N mutanter så vel som et bredt område av andre enkel mutanter og visse vanlige funnete doble mutanter så som K103N/Y181C og K103N/P225H.
OPPSUMMERING AV OPPFINNELSEN
Oppfinnelsen reduserer vanskelighetene og ulemper til tidligere teknikk ved tilveiebringing av nye forbindelser som er kraftige inhibitorer av enkle og doble mutantstammer av HIV-1
RT.
I et første aspekt tilveiebringer oppfinnelsen en forbindelse med den generelle formel I:
hvor
R<2> er valgt fra gruppen bestående av H, F, Cl, Cm alkyl, C3-4 cykloalkyl og CF3;
R<4> er H eller Me;
R<5> er H, Me eller Et, med det forbehold at R4 og R<5> er ikke begge Me og hvis R<4> er Me kan R<5> ikke være Et;
R<11> er Me, Et, cyklopropyl, propyl, isopropyl eller cyklobutyl; og
Q er valgt fra gruppen bestående av:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Det er videre beskrevet følgende forbindelser:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
I et andre aspekt tilveiebringer oppfinnelsen en inhibitor for HIV replikasjon, kjennetegnet ved at den har den generelle formel I:
hvor
R<2> er valgt fra gruppen bestående av H, F, Cl, Cm alkyl, C3.4 cykloalkyl og CF3;
R<4> er H eller Me;
R<5> er H, Me eller Et, med det forbehold at R4 og R<5> er ikke botn Me og hvis R4 er Me kan R<5> kan ikke være Et;
R1<1> er Me, Et, cyklopropyl, propyl, isopropyl eller cyklobutyl,; og
Q er valgt fra gruppen bestående av:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
I et tredje aspekt tilveiebringer oppfinnelsen en inhibitor for HIV replikasjon, kjennetegnet ved at den har formlene:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
I et fjerde aspekt tilveiebringer oppfinnelsen anvendelse av en HIV hemmende mengde av en forbindelse med formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling eller forebygging av HIV infeksjon.
I en femte aspekt tilveiebringer oppfinnelsen et farmasøytisk preparat for behandling
eller forebygging av HIV infeksjon, omfattende en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav pg en farmasøytisk akseptabel bærer.
I et sjette aspekt tilveiebringer oppfinnelsen en fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
DETALJERT BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN
Definisjoner
Som anvendt her, skal betegnelsen "Cm alkyP* bety lineære eller forgrenede alkylrester inneholdende fra én til fire karbonatomer og som omfatter metyl, etyl, propyl, isopropyl, butyl, seJfc-butyl og tert-butyl.
Som anvendt her, skal betegnelsen "C3-4. cykloalkyl" bety mettete cykliske hydrokarbon-rester inneholdende tre til fire karbonatomer og som omfatter cyklopropyl og cyklobutyl.
Detaljert beskrivelse av foretrukne utførelsesformer
I henhold til en foretrukket utførelsesform, er forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse definert ifølge formel I hvor R2 er fortrinnsvis Cl, F eller H. Mer foretrukket, R<2> er Cl eller H. Mest foretrukket, R2 er H.
I henhold til en foretrukket utførelsesform, er forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse definert ifølge formel I hvor R<4> er fortrinnsvis H.
I henhold til en alternative utførelsesform, er forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse definert ifølge formel I hvor fortrinnsvis R5 er Me.
Fortrinnsvis, er forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse definert ifølge formel I hvor
R<11> er Et eller cyklopropyl. Mer foretrukket, er R<11> Et.
I henhold til en foretrukket utførelsesform, er forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse definert ifølge formel I hvor Q er fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av:
Mer foretrukket, er Q:
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er effektive inhibitorer av villtype revers transkriptase så vel som hemmende, for eksempel enkelt mutasjons enzymer Y181C, K103N, V106A, G190A, Y188C og P236L. Forbindelsene hemmer også doble mutasjons enzymer K103N/Y181C, K103N/P225H, K103N/V1081 og Kl03N/L100I.
Forbindelsene med formel I har hemmende aktivitet mot HIV-Trevers transkriptase. Når administrert i egnete doseformer, er de anvendelige ved behandling av AIDS, ARC og beslektete lidelser forbundet med HIV-1 infeksjon. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også anvendes for å forhindre perinatal transmisjon av HIV-1 fra mor til baby, ved administrering til mor før fødsel.
Forbindelsene med formel I kan administreres i enkel eller oppdelte doser av oral eller parenterale veier. En egnet oral dose for en forbindelse méd formel I ville være i området ca. 0,5 mg til 1 g pr. dag. En foretrukket oral dose for en forbindelse med formel I ville være i området ca. 100 mg til 800 mg pr. dag for en pasient som veier 70 kg. I parenterale preparater, kan en egnet doseenhet inneholde fra 0,1 til 250 mg av nevnte forbindelser, fortrinnsvis 1 mg til 200 mg. Det skal forstås imidlertid at dosen administrering fra pasient til pasient vil variere og dosen for hvilken som helst spesiell pasient vil avhenge av legens bedømmelse, som vil anvendelse som kriterier for fastsettelse av en riktig dosesiørrelse og tilstanden til pasienten så vel som øasienten's resoons nå medikamentet.
Når forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse skal administreres ved oralvei, kan de administreres som medikamenter i form av farmasøytiske preparater, som inneholder dem sammen med et kompatibelt farmasøytisk bærermateriale. Slike bærer materialer kan være et inert, organisk eller uorganisk bærer materiale egnet for oral administrering. Eksempler på slike bærer materialer er vann, gelatin, talk, stivelse, magnesiumstearat, gummi
arabicum, vegetabilske oljer, polyalkylen-glykoler, petroleumgel og lignende.
De farmasøytiske preparater kan fremstilles på konvensjonell måte og ferdige doseformer kan være faste doseformer, for eksempel tabletter, drageer, kapsler og lignende eller flytende doseformer, for eksempel løsninger, suspensjoner, emulsjoner og lignende. De farmasøytiske preparater kan underkastes konvensjonelle farmasøytiske operasjoner så som sterilisering. Videre kan de farmasøytiske preparater inneholde konvensjonelle tilsetningsmidler så som konserveringsmidler, stabiliseirngsmidler, emulgeringsmidlér, småksforbedrende midler, fuktemidler, buffere, salter for å variere det osmotiske trykket og lignende. Faste bærermaterialer som kan anvendes omfatter, for eksempel stivelse, laktose, mannitol, metylcellulose, mikrokrystallinsk cellulose, talk, silika, dibasisk kalsiumfosfat og polymerer med høy molekylvekt (så som polyetylenglykol).
For parenteral anvendelse, kan en forbindelse med formel I administreres i en vandig eller ikke-vandig løsning, suspensjon eller emulsjon i en farmasøytisk akseptabel olje eller en blanding av væsker, som kan inneholde bakteriostatiske midler, antioksydasjonsmidler, konserveringsmidler, buffere eller andre oppløsningsmidler for å gjøre løsningen isotonisk med blodet, fortykningsmidler, suspendeirngsmidler eller andre farmasøytisk akseptable additiver. Additiver av denne typen omfatter, for eksempel tartrat, citrat og acetat buffere, etanol, propylenglykol, polyetylenglykol, komplekse former (så som EDTA), antioksydasjonsmidler (så som natriumbisulfitt, natriummétabisulfitt bg askorbinsyre), polymerer med høy molekylvekt (så som væske polyetylenoksyder) for viskositet regulering og polyetylenderivater av sprbitolanhydrider. Konserveringsmidler kan også tilsettes hvis nødvendig, så som benzosyre, metyl eller propylparaben, benzalkoniumklorid og andre kvaternære ammoniumforbindelser.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også administreres som løsninger for nasal anvendelse og kan inneholde i tillegg til forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse egnete buffere, tonisitet justerende midler, mikrobielle konserveringsmidler, antioksydasjonsmidler og viskositetøkende midler i en vandig konstituent. Eksempler på midler anvendt for å øke viskositet er polyvinylalkohol, cellulosederivater, polyvinyl-pyrrolidon, polysorbater eller glycerin. Mikrobielle konserveringsmidler som kan tilsettes omfatter benzalkoniumklorid, thimerosal, klor-butanol eller fenyletylalkohol.
I tillegg, kan forbindelsene ifølge oppfinnelsen administreres ved suppositorium.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved anvendelse av kunnskapen til en kjemiker innen syntetisk organisk kjemi. Eksempler på reaksjonsskjema er vist i skjemaene 1 til 6.
Sekvensen i skjema 2 er analoge med den beskrevet av J.M. Klunder et al; J. Med. Chem. 1998,41,2960-71 og CL. Cywin et al. ; J. Med. Chem. 1998,41,2972-84. Som angitt før, hemmer forbindelsene ifølge oppfinnelsen den enzymatiske aktivitet til HIV-1 RT. Basert på testing av disse forbindelser, som beskrevet nedenfor, er det kjent at de hemmer RNA-avhengig DNA polymerase aktivitet til HIV-1 RT. Det er kjent (data ikke vist) at de også hemmer DNA-avhengig DNA polymerase aktivitet til HIV-1 RT. Ved å anvende Revers Transkriptase (RT) forsøk beskrevet nedenfor, kan forbindelser testes for deres evne til å hemme RNA-avhengig DNA polymerase aktivitet til HIV-1 RT. Visse spesifikke forbindelser beskrevet i eksemplene som fremkommer nedenfor, ble testet slik. Resultatene av denne testing fremkommer i Tabell 2 som IC50 (nM) og Tabell 3 som EC50 (nM).
EKSEMPLER
Foreliggende oppfinnelse er illustrert mer detaljert i de følgende eksempler. Alle reaksjoner ble utført i en nitrogen eller argonatmosfære. Temperaturer er gitt i grader Celsius. Løsningsprosentdeler eller forhold uttrykker et volum til volum forhold, hvis ikke angitt på annen måte.
Forkortelser eller symboler anvendt her omfatter:
DØDE: dietyl-azodikarboksylat;
DIAD: diisopropyl-azodikarboksylat;
DIEA: diisopropyletylamin;
DMAP; 4-(dimetylamino)pyridin;
DMSO: dimetylsulfoksyd;
DMF: dimetylformamid;
ES MS: elektron spray massespektrometri; Et: etyl;
EtOAc: etylacetat;
Et20: diétyleter;
HPLC: høy ytelse væskekromatografi; iPr: isopropyl;
Me: metyl;
MeOH: metanol;
MeCN: acetonitril;
NBS: N-bromsuccinimid;
Ph: fenyl;
TBÉ: tris-borat-EDTA;
TBTU: 2-(i//-benzotriazol-l-ylJ-N^N.N^^-tetrametyluronium tetrafluorborat; TFA: trifluoreddiksyre;
THF: tetrahydrofuran;
MS (ES): elektrospray massespektrometri; MS (FAB) eller F AB/MS: hurtig atombombardement massespektrometri; HRMS: høy spaltnings massespektrometri;
PFU: plaque dannende enheter;
DEPC: dietylpyrokarbonat;
DMSO: dimetylsulfoksyd;
DTT: ditiothreitol;
EDTA: etylendiaminetetraacetat;
UMP: uridin 5'-monofosfat;
UTP: uridin 5'-trifosfat.
SYNTESER
De følgende eksempler illustrerer metoder for fremstilling av forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse.
Eksempel I (inn ved 24, Tabell 1)
5yll- dihydro- ll- etyl- 5- metyl- 8-{ 2-( 4- kinolinyloksy) e^
[ l, 4] diazepin- 6- on
a) 2-(Etylamino)-3-nitropyridin
Til en løsning av 2-klor-3-nitropyridin (51 g, 325 mmol) i THF (650 ml) ble tilsatt en 2 M
løsning av etylamin i THF (365 ml, 731 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble hellet i vann (-1,5 L) og det resulterende faste stoffet ble filtrert og tørket under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (52 g).
b) 3-arnino-2-(etylamino)pyridin
En løsning av 2-(etylamino)-3-nitropyridin (52 g) i MeOH (600 ml) ble omrørt natten over
ved romtemperatur under hydrogen (1 atm.) i nærvær av 20% Pd(OH)2/C (10,4 g). Katalysatoren ble fjernet ved filtrering gjennom diatoméjord. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen som et sort, fast stoff (39 g, 88% utbytte over trinn a) og b).
c) 2-klor-A^-{2-(etylamino)-3-pyridinyl}-5-brom-3-pyridlnekarboksaniid Til en avkjølt løsning av 3-amino-2-(etylammo)pyridin (30,6 g, 223 mmol) i MeCN (740
ml) ble tilsatt fast stoff NaHC03 (56,3 g, 669 mmol). Etter 5 min, rå 5-brom-2-kl6r-3-pyridiriekarbonylklorid (fremstilt fra 5-brom-2-hydroksy-3-pyridinekarboksylsyre og SOCl2 [som beskrevet av T. W. Gero et al. i Synth. Commun. 1989,19,553-559 (inntatt her ved referanse) men med utelatelse av vandig opparbeidelse] ble tilsatt (1 ekv., 223 mmol). Etter 2 timer, ble reaksjonsblandingen hellet over is/H20 (1,5 L) og det resulterende faste stoffet ble filtrert, skyllet med H20 og deretter heksan. Etter tørking under redusert trykk natten over, ble tittelforbindelsen oppnådd som et sort, fast stoff (54,9 g, 69% utbytte).
d) 8-brom-5,ll-dihydro-ll-etyl-6i?-dipyrido[3^-b:2<*>,3'-e][l,4]diazepin-6-on Til en løsning av 2-klor-A?-{2-(etylamino)-3-pyridinyl}-5-brom-3-pyridinekarboksamid
(54,9 g, 154,4 mmol) i pyridin (308 ml) ved 50 °C ble det tilsatt dråpevis en 1 M løsning av NaHMDS (natrium heksametyldisilazid) i THF (355 ml, 355 mmol). Etter 10 min, fikk reaksjonsblandingen avkjøles til romtemperatur og deretter ble den hellet over isvann (2
L). Det resulterende faste stoffet ble filtrert, skyllet med vann og deretter heksan. Det faste stoffet ble tørket under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (36 g, 75% utbytte) som et mørke grønt fast stoff. e) 8.brom-5,ll-dihydro-ll-etyl-5-metyN6H-dipyrido[3,2-b:2',3'e][l,4]diazepin-6-on Til en løsning av S-brom-SJl-dihydro-ll-etyl-eH-dipyridoIS^-b^^S-e] [l,4]diazepin-6-6n (36,7 g, 115 mmol) i DMF (380 ml) ble tilsatt NaH (3,5 g, 138 mmol) og blandingen ble oppvarmet til 50 °C i 30 min. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og behandlet med Mel (14,3 ml, 230 mmol). Etter 1,5 timer, ble reaksjonsblandingen hellet over isvann. Det faste stoffet ble filtrert, vasket med vann og deretter heksan, hvilket gir etter tørking av tittelforbindelsen (37,9 g 99% utbytte) som et mørke grått fast stoff. f) ^ll-dihydro-ll-etyl-S-metyl-S-a-propenyO-éMipyridoP^-brr^^e]-[l,4]diazepin-6-»on
Allyltributyltin (30,7 ml, 99,0 mmol) og Pd(Ph3P)4 (5,20 g, 4,50 mmol) ble satt til en avgasset (N2 gjennom løsningen i 30 min) løsning av 8-brom-5,l 1-dihydro-l l-etyl-5-metyl-e^-dipyridoIS^-bir^^eltl^ldiazepin^-on (30,0 g, 90,0 mmol) i DMF (450 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved 90 °C i 1,5 timer og ble deretter avkjølt til romtemperatur og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksan: EtOAc, 8:2 til 7:3), hvilket gir tittelforbindelsen (22,19 g, 84% utbytte).
g) 5fll-dihydro-ll-etyl-8-(2-hydroksyetyl)-5-metyl-6//-dipyrido[3,2-b:2,,3,e]-[l,4]diazepin-6-on
En strøm av ozonisert oksygen ble boblet gjennom en kald (-78 °C) løsning av 5,11-dihydro-1 l-etyl-5-metyl-8-(2-propenyl)-6//-dipyrido[3,2-b:2\3'-e][l,4]diazepin-6-on (22,19 g, 75,4 mmol) i CH2C12 (150 ml) og MeOH (150 ml) i 2,5 timer. En strøm av N2 ble deretter boblet gjennom løsningen i 15 min og deretter ble fast stoff NaBHt (4,99 g, 132 mmol) satt til løsningen. Reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur. Etter 1 time, ble vandig mettet NH4CI (200 ml) tilsatt og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. De organiske løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk. Vann (300 ml) og CHCI3 (300 ml) ble satt til residuet. Fasene ble separert og det vandige laget ble ekstrahert med CHClj (3 x 300 ml). De samlede organiske lag ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:CHCl3,4:1), hvilket gir tittel-
forbindelsen (16,1 g, 72% utbytte) som en hvitt fast stoff.
h) 5,ll-dihydro-ll-etyl-5-metyl-8-{2-(4-kinoHn<y>loks<y>)et<y>l}.6ff-dipyrido[3^b:2,,3'-e]
[l,4]diazepin-6-on
Dietyl-azodikarboksylat (DØDE) (12,8 ml, 81,0 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 5,11-dihydro-ll-etyl-8-(2-hydroksyetyl)-5-metyl-6/f-dipyrido[3,2-b:2',3,-e] [l,4]diazepin-6-on (16,1 g, 54,0 mmol), 4-hydroksykinolin (11,6 g, 81,0 mmol) og Ph3P (21,3 g, 81,0 mmol) i THF (270 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:MeOH; 95:5), hvilket gir tittelforbindelsen (17,7 g, 77% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 426 (MH)<+>.
Eksempel II (entry 2, Tabell 1)
2' klor- 5fU- dihydro- ll- etyl- S- metyl- 8-{ 2-( 4- ttnoliny^ e] [ l, 4] diazepin- 6- on
a) 6-klor-2-(etylamino)-3-nitropyridin
En iskald løsning av EtNH2 (49,8 g, 1,10 mol) i toluen (200 ml) ble tilsatt over 15 min til
en iskald løsning av 2,6-diklor-3-nitropyridin (100,0 g, 0,52 mol) i toluen (225 ml). Blandingen ble omrørt ved 0 °C i 45 min. Vann (500 ml) og EtOAc (500 ml) ble tilsatt og fasene ble separert. Det organiske laget ble suksessivt vasket med vann (200 ml) og saltvann (200 ml), tørket (MgSCU), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Det gjenværende faste stoff ble omkrystallisert fra MeOH, hvilket gir tittelforbindelsen (83,7 g, 80% utbytte) som gule nåler.
b) 3-amino-6-kIor-2-(etyIamino)pyridin
En løsning av SnCl2.H20 (616,3 g, 2,73 mol) i vandig 12 N HC1 (500 ml) ble raskt satt til
en løsning av 6-klor-2-(etylamino)-3-nitropyridin (169,5 g, 0,84 mol) i AcOH (1,7 L) ved romtemperatur. Etter 20 min, ble blandingen avkjølt til 0 °C og vann (250 ml) ble tilsatt. Fast stoff NaOH (240 g) ble deretter tilsatt i små porsjoner. Den resulterende suspensjonen ble filtrert for å fjerne tinnsalter. Filtratet ble fortynnet med vann (3,5 L), løsningen gjort basisk ved tilsetning av vandig 10 N NaOH og deretter ekstrahert med EtOAc (3 x 1,7 L). De samlede organiske lag ble vasket med saltvann (1 L), tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksan: EtOAc, 3:2), hvilket gir tittelforbindelsen (89,9 g, 62% utbytte) som et brunt, fast stoff: MS (ESI) m/z 172/174 (MH)<+>.
c) 5-brom-2-klor-A^-{2-(etylamino)-6-klor-3-pyridinyl}-3-pyridinekarboksamid En løsning av 5-brom-2-klor-3-pyirdinekarbonylklorid (30,0 g, 97,0 mmol) i MeCN (100
ml) ble tilsatt via kanyle til en løsning av 3-amino-6-klor-2-(etylaminp)pyridin (16,6 g, 97,0 mmol) i MeCN (180 ml) inneholdende fast stoff NaHC03 (14,2 g, 169 mmol) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Vann (200 ml) ble tilsatt og blandingen ble omrørt i 10 min. Den resulterende suspensjonen ble filtrert. Det faste stoffet ble vasket med Et20 (50 ml) og konsentrert fra pyridinløsningen (3 x 50 ml), hvilket gir tittelforbindelsen (28,4 g, 75% utbytte).
d) S-brom-l-klor-Sai-dihydro-ll-etyl-eH-dipyridoP^-b^^^ejll^diazepin-é-on En 1 M løsning av NaHMDS i THF (167,5 ml, 167,5 mmol) ble langsomt satt til en løsning
av 5-brom-2-klor-A/'-{2-(etylamino)-6-ldor-3-pyridinyl}-3-pyridinekarboksamid (28,4 g, 72,8 mmol) i pyridin (146 ml) oppvarmet til 50 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 50 °C i 1,5 timer. Blandingen ble deretter hellet i en blanding av vann og is (1 L) og, etter 1 time, ble den resulterende suspensjonen filtrert. Det faste stoffet ble vasket med vann og tørket under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (23,4 g, 91% utbytte).
e) 8-brom-2-klor-5,ll-dihydro-ll.etyl-5-metyl-6//-dipyrido[3,2-b:2,,3'-e]
[l,4]diazepin-6-6n
Fast stoff NaH (60% olje dispersjon, 3,46 g, 86,1 mmol) ble tilsatt over 30 min til en løsning av 8-brom-2-klor-5,l 1-dihydro-l l-ety^6#-dipyrido[3,2-b:2',3'-e] [l,4]diazepin-6-on (23,4 g, 66,3 mmol) i DMF (220 ml) ved 50 °C. Blandingen ble omrørt ved 50 °C i 1 time deretter ble den latt avkjøle til romtemperatur. Blandingen ble hellet i vann (1L) og den resulterende suspensjonen ble filtrert. Det faste stoffet ble suksessivt vasket med vann og heksan deretter tørket under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (23,0 g, 94% utbytte).
f) 2-klor-5,ll-dihydro-ll-etyl-5-metyl-8-(2-propenyl)-6//-dipyrido[3,2-b:2'^'-e]
[l,4]diazepin-6-on
Allyltributyltin (21,3 ml, 68,7 mmol) og Pd(Ph3P)4 (3,61 g, 3,12 mmol) ble satt til en avgasset (N2 gjennom løsning i 30 min) løsning av 8-brom-2-klor-5,l 1-dihydro-l l-etyl-5-metyl-6ff-dipyrido[3,2-b:2',3,-e] [l,4]diazepin-6-on (23,0 g, 62,5 mmol) i DMF (312 ml). Blandingen ble oppvarmet til 90 °C i 2 timer. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksan:EtOAc, 7:3), hvilket gir tittelforbindelsen (13,4 g, 65% utbytte).
g) 2-klor-5,ll-dihydro-ll-etyl-8-(2-hydroksyetyl)-5-metyl-6//-dipyrido[3,2-b:2',3'-e]
[l,4]diazepin-6-on
Ozonisert oksygen ble innført i en kald (-78 °C) løsning av 2-klor-5,l 1-dihydro-l l-etyl-5-metyl-8-(2-propenyl)-6tf-dip<y>rido[3,2-b:<2>',<3>'-e] [l,4]diazepin-6-on (13,4 g, 40,7 mmol) i MeOH( 102 ml) og CH2C12( 102 ml) for å fullføre fjerning av alken. Nitrogen ble boblet gjennom løsningen for å fjerne overskudd av O3. Fast stoff NaBH4 (2,69 g, 71,1 mmol) ble deretter tilsatt i små porsjoner og blandingen fikk oppvarmes langsomt til romtemperatur. Etter 1 time, ble vandig mettet NH4CI (150 ml) tilsatt og blandingen omrørt i 20 min. De organiske løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk. Vann (100 ml) ble satt til den vandige løsningen. Løsningen ble ekstrahert med CHCI3 (3 x 200 ml). De samlede organiske lag ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:CHCl3,4:1), hvilket gir tittelforbindelsen (10,4 g, 77% utbytte).
h) 2-klor-5,ll-dihydro-ll-etyl-5-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6//-dipyrido[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-on
Dietyl-azodikarboksylat (DØDE) (4,26 ml, 27,0 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 2-klor-5,11-dihydro-l 1 -etyl-8-(2-hydroksyetyl)-5-metyl-6//-dipyrido[3,2-b:2' ,3'-e]
[l,4]diazepin-6-on (6,00 g, 18,0 mmol), 4-hydroksykinolin (3,92 g, 27,0 mmol) og Ph3P (7,09 g, 27,0 mmol) i THF (90 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time deretter ble den konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:MeOH, 95:5), hvilket gir tittelforbindelsen (6,22 g, 75% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 460/462.
Eksempel III (inngang 6, Tabell 1)
2' klor' ll- cyklopropyl' 5JI- dihydro- 5- metyl- 8-{ 2-( 4- kino^ b:2 *, 3 *- e) [ l, 4Jdiazepin- 6- on
a) 6-klor-2-(cyklopropylamino)-3-nitropyridin
En løsning av cyklopropylamin (1,25 g, 22,0 mmol) i toluen (11 ml) ble tilsatt over 10 min til en is-kald løsning av 2,6-diklor-3-nitropyridin (2,00 g, 10,4 mmol) i toluen (10 ml). Blandingen ble omrørt ved 0 °C i 1 time og ved romtemperatur i 2 timer. Vann (50 ml) ble satt til blandingen og fasene blé separert. Det organiske laget ble vasket med saltvann (25 ml), tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksan:EtOAc, 3:2), hvilket gir tittelforbindelsen (1,97 g, 89% utbytte) som et gult, fast stoff.
b) 2-kIor-ll-cyklopropyl-5,ll-dihydro-8-(2-hydroksyetyl)-5-metyl-6H-dipyrido[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-on
Tittelforbindelsen ble fremstilt fra 6-klor-2-(cyklopropylamino)-3-nitropyridin ved anvendelse av en fremgangsmåte lignende den beskrevet for 11-etylanalogen i eksempel II.
c) 2-klor-ll-cyklopropyl-5,ll-dihydro-5-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6ff-dipyrido[3,2-b:2'3'-e][l,4]diazepin-6-on
Dietyl-azodikarboksylat (DØDE) (85,6 |iL, 0,54 mmol) ble satt dråpevis til en løsning av 2-klor-l l-cyklopropyl-5,1 l-dihydro-8-(2-hyd^oksyetyi)-5-mety]-6fl^-dipyrido[3,2-b:2,,3,-e] [l,4]diazepin-6-on (125 mg, 0,36 mmol), 4-hydroksykinolin (78,9 mg, 0,54 mmol) og PI13P (143 mg, 0,54 mmol) i THF (1,8 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble delvis renset ved flash kromatografi (EtOAcrMeOH; 95:5). Det faste stoffet ble ytterligere renset ved revers fase HPLC (CombiPrep ADS-VÅNDIG 50 x 20 mm, 5 n, 120 En, 5-100% MeCN + 0,10% TFA / vann + 0,10% TFA i 25 min), hvilket gir trifluoreddiksyresalt av tittelforbindelsen (17,7 g, 77% utbytte) som ei hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 472/474 (MH)<+.>
Eksempel IV (inngang 4, Tabell 1)
5J 1- dihydro- l l- etyl' 2- fluor- 5- metyl- 8-{ 2-( 4' kinoliny e] [ l, 4] diazepin- 6- on
a) 2,6-difluor-3-nitropyridin
Til en blanding av konsentrert svovelsyre (600 ml) og rykende salpetersyre (90%, 400 ml)
i et isbad (indre temperatur holdt ved 5-10 °C) ble det tilsatt dråpevis 2,6-difluorpyridin (200 g, 1,74 mol). Den resulterende blanding ble omrørt natten over ved romtemperatur. Blandingen ble hellet langsomt inn i 3 kg av is og ekstrahert med EtjO (2x2 L). De samlede organiske lag ble vasket med vandig 1,5 N NaOH (2 x 1 L), deretter med vandig
mettet NaHCC>3 (400 ml) eller inntil pH er rundt 8-9. De organiske lag ble tørket over MgS04, filtrett og konsentrert under redusert trykk inntil konstant vekt (for å fjerne
uomsatt 2,6-difluorpyridin: 10-12%). Tittelforbindelsen ble oppnådd som en gul væske (207,3 g, 74% utbytte).
b) 2-(Etylamino)-6-fluor-3-nitropyridin
Til en løsning av 2,6-difluor-3-nitropyridin (45,7 g, 285 mmol) i THF (500 ml) ved -40 °C
ble tilsatt dråpevis en løsning av etylamin (25,7 g, 570 mmol) i THF (250 ml). Etter 30
min-, ble reaksjonsblandingen konsentrert under redusert trykk og residuet ble oppløst i EtOAc. Den organiske fasen ble vasket med saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Det resulterende, gule, faste stoff ble renset ved flash kromatografi (15% EtOAc i heksan), hvilket gir tittelforbindelsen (43,2 g, 82% utbytte) som et gult, fast stoff.
c) 3-amino-2-(etylamino)-6-f1uorpyridin
En løsning av 2-(etylamino)-6-fiuor-3-nitropyridin (43,2 g, 230 mmol) i THF (1 L) ble
omrørt natten over ved romtemperatur under hydrogen (1 atm.) i nærvær av 20% Pd(OH)2/C (4,35 g). Katalysatoren ble fjernet ved filtrering gjennom diatoméjord. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (36,3 g, 95% utbytte)
som et sort, fast stoff.
d) 2-klor-iV-{2-(etylamino)-6-f1uor-3-pyridinyl}-5-brom-3-pyridinekarboksamid Til en avkjølt løsning (4 °C) av 3-amino-2-(etylamino)-6-fluorpyridin (31,0 g, 200 mmol) i
MeCN (160 ml) ble tilsatt fast stoff NaHC03 (50,4 g, 600 mmol). Etter 15 min, ble en løsning av 5-brom-2-klor-3-pyirdinekarbonylklorid (1 ekv., 200 mmol) i MeCN (155 ml) tilsatt. Etter 60 min ved romtemperatur, ble reaksjonsblandingen hellet i vann (1,2 L) og omrørt i 30 min. Det resulterende faste stoffet ble filtrert, tørket under redusert trykk ved 50 °C natten over. Tittelforbindelsen (73,7 g, 99% utbytte) ble oppnådd som et sort, fast stoff.
e) 8-brom-5,ll-dihydro-ll-etyl-2-nuor-6H-dipyrido[3,2-b:2,^,-e][l,4]diazepin-6-on Til en løsning av 2-Wor-W-{2-(etylamino)-6-fluor-3-pyridinyl}-5-brom-3-pyridine-karboksamid (73,5 g, 216 mmol) i pyridin (435 ml) ved 50 °C ble tilsatt dråpevis en 1 M løsning av NaHMDS i THF (520 ml, 520 mmol). Etter 10 min, reaksjonsblandingen fikk avkjøles til romtemperatur, deretter hellet over isvann (2 L). Det resulterende faste stoffet ble filtrert, skylt med vann og deretter heksan. Det faste stoffet ble tørket under redusert
trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (50,6 g, 69% utbytte) som et mørke grønt fast stoff.
f) 8-brom-541.dihydorai-etyl-2-fluo^ dlazepin-6-on
Til en løsning av 8-brom-5,l 1-dihydro-l l-etyl-2-fluor-6//-dipyrido[3,2-b:2,,3'-e][l,4]-diazepin-6-on (44 g, 130,5 mmol) i DMF (520 ml) ble tilsatt NaH (4,28 g, 178 mmol) og blandingen ble oppvarmet til 50 °C i 30 min. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og behandlet med Mel (24,4 ml, 522 mmol). Etter 1,5 timer, ble reaksjonsblandingen hellet over isvann. Det faste stoffet ble filtrert, vasket med vann og deretter heksan, tørket under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (43,2 g, 94% utbytte) som mørke grått fast stoff.
g) 5,ll-dihydro-ll-etyl-2-fluor-5-metyl-8-(2-proi>enyl)-6H-dipyrido[3^-b:2,,3,-e]-[l,4]diazepin-6-on
Allyltributyltin (32,6 ml, 103,4 mmol) og Pd(Ph3P)4 (5,43 g, 4,70 mmol) ble satt til en avgasset (N2 gjennom løsningen i 45 min) løsning av 8-brom-5,11 -dihydro-11 -etyl-2-fluor-5-metyl-6H-dipyrido[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-on (33,0 g, 94,0 mmol) i DMF (470 ml). Ytterligere mengder av Pd(Ph3)4 (1,09 g, 0,94 mmol tilsatt etter 1,2, 3,4,5 timer av reaksjon) ble tilsatt for å fullføre reaksjonen. Blandingen ble oppvarmet til 90 °C i 6 timer. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flashkromato-grafi (heksånenEtOAc, 8:2 til 7:3), hvilket gir tittelforbindelsen (22,4 g, 76% utbytte).
h) 5,ll-dihydro-ll-€tyl-2-fluor-8-(2-hydroksyetyl)-5-metyl-6ff-dipyrido[3,2-b:2,,3'-e][l,4]diazepin-6-on
En strøm av ozonisert oksygen ble boblet gjennom en kald (-78 °C) løsning av 5,1 l-dinydro-ll-etyl-2-lfuor-5-metyl-8-(2-porpenyI)-6^ (22,38 g, 71,6 mmol) i CH2C12 (100 ml) og MeOH (100 ml) i 3 timer. En strøm av N2 ble deretter boblet gjennom løsningen i 15 min og deretter ble fast stoff NaBH» (5,05 g, 133 mmol) satt til løsningen. Reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur. Etter 1 time, ble en ytterligere porsjon av NaBKU (1,62 g, 43,0 mmol) satt til reaksjonsblandingen. Etter en ytterligere time, ble vandig mettet NtUCl (150 ml) tilsatt og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 30 min. De organiske løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk. Vann (200 ml) ble tilsatt og blandingen ble ekstrahert med CHC13 (3 x 300 ml). De samlede organiske lag ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:CHCl3,4:1), hvilket gir tittelforbindelsen (19,7 g, 72%
-i
utbytte) som en hvitt fast stoff.
i)5a^dihydro-ll-etyl-2-^uor-5-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6ff-dipyr^do[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-on
Dietyl-azodikarboksylat (DØDE) (14,3 ml, 91,0 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 5,11-dihydro-l l-etyl-2-fluor-8-(2-hydroksyetyl)-5-metyl-6i/-dipyrido[3,2-b:2,,3,-e] [1,4]-diazepin-6-on (19,2 g, 60,7 mmol), 4-hydroksykinolin (13,2 g, 91,0 mmol) og Ph3P (23,9 g, 91,0 mmol) i THF (300 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:MeOH; 95:5), hvilket gir tittelforbindelsen (17,9 g, 67% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 444 (MH)<+>.
Eksempel V (inngang 1, Tabell 1)
2- klor' 5Jl- dihydro- ll- etyl- 4- metyl- 8-{ 2-( 4- kinolinyhksy) etyl^ e] [ l, 4] diazepin- 6- on a) 2-klor-Ar<->(2,6-diklor-4-metyl-3-pyridinyl)-3-pyrldinekarboksamid NaHC03 (21,72 g, 258,6 mmol) ble satt til en løsning av 3-amino-2,6-diklor-4-metyl-pyridin (41,61 g, 235,1 mmol; fremstilt som beskrevet av K. G. Grozinger et al. J. Heterocyklisk Chem. 1995, 32,259-263) i MeCN (350 ml) og den resulterende suspensjonen ble omrørt i 15 min. En løsning av 2-klornikotinylklorid (43,44 g, 246,8 mmol) i MeCN (500 ml) ble deretter innført over 30 min. Den resulterende suspensjonen ble omrørt ved romtemperatur. Etter 24 timer, ble løsningen funnet å være sur og dermed ble en ytterligere mengde av NaHC03 (3,00 g, 35,7 mmol) tilsatt. Suspensjonen ble deretter omrørt ved romtemperatur i ytterligere 2 dager. Blandingen ble deretter hellet i en blanding av vann (2 L) og is (200 g) og omrørt i 20 min. Det faste stoffet ble filtrert og vasket med vann (500 ml) og det resulterende faste stoffet ble deretter tørket over P2O5 under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (62,55 g, 84% utbytte) som et hvitt pulver. b) A^-(2,6-diklor-4-metyl-3-pyridinyl)-2-(etylamino)-3-pyridinekarboksamid En løsning av 2-klor-A/-(2,6-dildor-4-metyl-3-pyridinyl)-3-pyridinekarboksamid (63,17 g,
194,0 mmol) og etylamin (28,0 g, 583 mmol) i xylener (250 ml) ble omrørt ved 120 til 125 °C i en stålautoklav i 7 timer. Den resulterende suspensjonen ble hellet i vann (1 L), omrørt
i 15 min og filtrert. Residuet ble oppløst i EtOAc og vasket med vann (3 x), saltvann og ble tørket over MgS04. Filtratet ble ekstrahert med EtOAc og de samlede organiske ekstrakter ble vasket med vann og saltvann og tørket over MgS04. De tb fraksjoner ble deretter kombinert og overskudd av xylener fjernet ved co-destillering med benzen, hvilket gir tittelforbindelsen (61,98 g, rosa fast stoff) som hovedkomponenten av en blanding av forbindelser. Materialet, ikke renset på dette tidspunkt, ble anvendt direkte i den påfølgende reaksjonen.
c) 5-brom-Ar-(2,6-dikIor-4-metyl-3-pyridinyl)-2-(etylamino)-3-pyridinekarboksamid Fast stoff KOAc (22,2 g, 229 mmol) ble satt til en løsning av rå W-(2,6-diklor-4-metyl-3-pyridinyl)-2-(etylamino)-3Tpyridinekarboksamid (61,98 g, < 190 mmol) i AcOH (600 ml). En løsning av Br2 (9,7 ml, 191 mmol) ble deretter tilsatt over 30 min. Etter omrøring i 30 min, ble ytterligere mengder av KOAc og Br2 innført inntil TLC viste at det ikke var
gjenværende utgangsmateriale (totalt 11,2 g KOAc og 5,91 ml Br2). Løsningen ble deretter hellet i vann (2 L) og omrørt i 20 min. Det faste stoffet ble fjernet ved filtrering og deretter oppløst i Et20 (IL). Eterisk løsning ble vasket med vann (3 x), vandig mettet NaHC03, saltvann deretter tørket (MgS04), hvilket gir en blanding inneholdende, som hovedkomponenten, tittelforbindelsen (77,7 g, gult skum). Materialet ble anvendt direkte i den påfølgende reaksjon.
d) 8-brom-2-klor-5,ll-dihydro-ll-etyl-4-metyl-6//-dipyrido[3,2-b:2'^'-e][l,4]-diazepin-6-on
En løsning av rå 5-brom-JV-(2,6-dildor-4-metyl-3-pyrimnyl)-2-(etylamino)-3-pyridine-karboksamid (77,7 g, mmol) i vannfri pyridin (1,0 L) ble oppvarmet til 50 °C. En 1 M løsning av NaHMDS i THF (418 ml, 418 mmol) ble deretter tilsatt dråpevis og omrøring ble fortsatt i ytterligere 15 min. Etter avkjøling til romtemperatur, ble vann (50 ml) tilsatt og blandingen konsentrert til to-tredjedels volum på en rotasjonsinndamper. Residuet ble deretter hellet i vann (3 L). Filtrering ga tittelforbindelsen (23,44 g) som et gyldenbrunt, fast stoff. Filtratet ble ekstrahert med EtOAc (3 x) og de samlede ekstrakter ble vasket med vann og saltvann deretter tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksan:EtOAc, 9:1 eller CHCI3), hvilket gir en ytterligere mengde av tittelforbindelsen (14,06 g, totaltt 37,50 g, 50% utbytte i 3 trinn).
e) 2-klor-5,ll-dihydro-ll-et<y>l-4-met<y>]-8-(2-<p>ro<p>en<y>l)-6//-di<py>rido[3^-b:<2>'^'.e]
[l,4]diazepin-6-on
En løsning av 8-brom-2-klor-5,l 1-dihydro-l l-etyl-4-metyl-6/?-dipyrido[3,2-b:2\3'-e]
[l,4]diazepin-6-on (12,6 g, 34,3 mmol) i DMF (25-0 ml) ble avgasset under redusert trykk 1 20 min. Pd(PPh3)4 (775 mg, 0,7 mmol) ble deretter tilsatt fulgt av allyJtributyltin (12,5 ml, 41,1 mmol). Etter degassing under redusert trykk i 10 min, ble blandingen oppvarmet til 100 <*>C i 7 timer. Blandingen ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksan:EtOAc, 19:1), hvilket gir tittelforbindelsen (8,04 g, 71% utbytte) som et gult fast stoff.
f) 2-klor-5,ll-dihydro-ll-etyl-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-6//-dipyrido[3J2-b:2',3'-e]
[l,4]diazepin*6-on
En strøm av 03 ble innført i en kald (-78 °C) løsning av 2-klor-5,l 1-dihydro-l l-etyl-4-metyl-8-(2-propenyl)-6/?-dipyrido[3,2-b:2,,3,-e] [l,4]diazepin-6-on (8,04 g, 24,4 mmol) og Sudan III i CH2C12 (120 ml) og MeOH (120 ml). Når den rosa løsningen ble brun, ble 02 boblet gjennom løsningen i 10 min. NaBH4 (1,12 g, 29,4 mmol) ble deretter tilsatt og løsningen fikk oppvarmes til romtemperatur. Etter 30 min, ble en ytterligere mengde av NaBH4 (500 mg) tilsatt. Etter 1 time, ble vandig mettet NHtCl deretter tilsatt og blandingen omrørt i 20 min. Løsningen ble konsentrert under redusert trykk og ekstrahert med CH2C12 (3 x). De samlede organiske ekstrakter ble vasket med saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (CHCl3:EtOH, 97:3), hvilket gir tittelforbindelsen (6,01 g, 74% utbytte) som et hvitt, fast stoff.
g) 2-klor-5,ll-dihydro-ll-etyl-4-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-67f-dipyrido[3,2-b:2',3'-e] [l,4]diazepin-6-on
Dietyl-azodikarboksylat (DØDE) (83 pL, 0,53 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 2-klor-5,11 -dihydro-11 -etyl-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-6W-dipyrido[3,2-b:2' ,3*-e]
[l,4]diazepin-6-on (125 mg, 0,38 mmol), 4-hydroksykinolin (76,3 mg, 0,53 mmol) og Ph3P (138 mg, 0,53 mmol) i THF (2,5 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i EtOAc (60 ml) og løsningen ble suksessivt vasket med 1 N vandig NaOH (3 x 10 ml) og saltvann (15 ml) ble deretter tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAcMeOH, 9:1), hvilket gir tittel-
forbindelsen (52 mg, 30% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 460/462 (MH)<+>.
Eksempel VI (inngang 7, Tabell 1)
5Jl' dihydro- ll- etyt' 2- fluor- 4- metyl- 8-{ 2~( 4- kinoUny e] [ lt4] diazepin- 6- on
a) 8-brom-5,ll-dihydro-ll-etyl-2-{{(4-metoksyfenyl)metyl}amino}-4-metyl-6H-dipyrido[3,2-b:2<\>3'-<e>] [l,4]diazepin-6-on
8-brom-2-klor-5,l 1-dihydro-l l-etyl-4-metyl-6ff-dipyrido[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-on (2,50 g, 6,80 mmol) ble oppløst i dioksan (10 ml) i en glass trykk flaske og 4-metoksy-benzylamin (4,0 ml, 30,6 mmol) ble satt til løsningen. Blandingen ble oppvarmet til 170 "C i 5 dager. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble tatt opp i EtOAc <p>g vasket med 10% vandig NH4CI, tørket over MgS04, filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvilket gir en brun olje som ble kromatografert over silikagel (heksan:EtOAC, 4:1). Tittelforbindelsen ble oppnådd som et gult, fast stoff (1,35 g, 42% utbytte).
b) 2-amino-8-brom-5,ll-dihydro-ll-etyl-4-metyl-6H-dipyrido[3>b:2',3,-e]
[l,4]diazepin-6-on
8-brom-5,l 1-dihydro-l l-etyl-2-{ {(4-metoksyfenyl)metyl}amino}-4-metyl-6/f-dipyrido-[3,2-b:2',3<*->e] [1,4]diazepin-6-on (6,52 g, 18,7 mmol) ble oppløst i trifluoreddiksyre (100 ml) og løsningen ble omrørt magnetisk ved romtemperatur i 18 timer. Trifluoreddiksyre ble inndampet under redusert trykk og residuet ble hellet i en blanding inneholdende vann (450 ml), konsentrert NH4OH (50 ml) og EtOAc (400 ml). Blandingen ble omrørt magnetisk i 2 timer ved romtemperatur. Den organiske fasen ble konsentrert under redusert trykk. Gult presipitat ble filtrert fra og vasket med vann, tørket under redusert trykk, hvilket gir 7,51 g av et gult fast stoff som ble utgnidd i Et20, hvilket gir tittelforbindelsen (5,12 g, 105% utbytte) som et gult, fast stoff.
c) 8-brom-5,ll-dihydro-ll-etyl-2-nuor-4-metyl-6//-dipyrido[3,2-b:2,,3'-e]-[l,4]diazepin-6-on
En plastflaske ble fylt med 2-amino-8-brom-5,11 -dihydro-11 -etyl-4-metyl-6/f-dipyrido-[3,2-b:2\3<*->e] [l,4]diazepin-6-on (5,10 g, 14,6 mmol). HF pyridin (100 g) ble tilsatt og den resulterende suspensjonen ble avkjølt til 0° C. Natriumnitritt (1,12 g, 16,1 mmol) ble tilsatt i mange porsjoner over 30 min for å produsere en blårød løsning. Blandingen ble deretter omrørt i 16 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble hellet i is og 6 N NaOH. Den beige suspensjonen ble ekstrahert med EtOAc. De organiske ekstrakter ble samlet, tørket over MgS04, filtrert og konsentrert. Residuet ble utgnidd med Et20Aieksan, hvilket gir tittelforbindelsen (4,30 g, 84% utbytte).
d) 5,ll-dihydro-ll-etyl-2-fluor-4-metyl-8.(2.propenyl)-6i/.dipyrido[3^-b:2,,3'-e]
[l,4]diazepin-6-on
Allyltributyltin (7,77 ml, 25,1 mmol) og Pd(Ph3P)4 (1,32 g, 1,14 mmol) ble satt til en avgasset (N2 gjennom løsning i 30 min) løsning av 8-brom-5,l 1-dihydro-l l-etyl-2-fluor-4-metyl-6ff-dipyrido[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-on (8,0 g, 22,8 mmol) i DMF (114 ml). Blandingen ble oppvarmet til 90 °C i 3 timer. Blandingen ble hellet i vann (250 ml) og ekstrahert med EtOAc (4 x 250 ml). De samlede organiske lag ble vasket med 20% vandig NH4OH (250 ml) og saltvann (250 ml), tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksaner:EtOAc, 4:1 til 1:1), hvilket gir tittelforbindelsen (3,16 g, 51% utbytte).
e) 5,ll-dihydro-ll-etyl-2-fluor-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-6ff-dipyrido[3,2-b:2,,3'-e]
[l,4]diazepin-6-on
En strøm av ozonisert oksygen ble boblet gjennom en kald (-78 °C) løsning av 5,11-dihydro-ll-etyl-2-fluor-4-metyl-8-(2-propenyi)-6J<[>/-dipyrido[3,2-b:2,,3'-e][l,4]diazepin-6-on (3,16 g, 10,1 mmol) i CH2CI2 (25 ml) og MeOH (25 ml) i 45 min. En strøm av N2 ble deretter boblet gjennom løsningen i 15 min og deretter ble fast stoff NaBH4 (669 mg, 17,1 mmol) satt til løsningen. Reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur. Etter 2 timer, ble vandig mettet NH4CI (50 ml) tilsatt og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 15 min. De organiske løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk. Den gjenværende vandige løsningen ble ekstrahert med CHC13 (3 x 100 ml). De samlede organiske lag ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:CHCI3,1:1), hvilket gir tittelforbindelsen (2,40 g, 75% utbytte) som et hvitt fast stoff.
f) 5,ll-dihydro-ll-etyl-2-fluor-4-metyN b:2',3'-e] [l,4]diazepin-6-on
Diisopropyl-azodikarboksylat (DIAD) (117 jiL, 0,59 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 5,11-dihydro-l l-etyl-2-fluor-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-6flr-dipyrido[3,2-b:2',3'-e] [ 1,4]diazepin-6-on (125 mg, 0,40 mmol), 4-hydroksykinolin (86,0 mg, 0,59 mmol) og Ph3P (156 mg, 0,59 mmol) i THF (1,9 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i EtOAc (40 ml) og løsningen ble suksessivt vasket med 3 N vandig NaOH (3 x 20 ml), vandig mettet NH4CI (15 ml), saltvann (15 ml) og ble deretter tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble delvis renset ved flash kromatografi (EtOAc:MeOH; 95:5). Det faste stoffet ble ytterligere renset ved revers fase HPLC (CombiPrep ADS-VANDIG 50 x 20 mm, 5 u., 120 En, 5-100% MeCN + 0,10% TFA / vann + 0,10% TFA i 25 min), hvilket gir trifluoreddiksyresalt av tittelforbindelsen (106 mg, 48% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 444 (MH)<+>.
Eksempel VII (inngang 5, Tabell 1)
ll-( Cyklopropyl)- 5Jl- dihydro~ 2- fluor. 4' metyl- 8-{ 2-( 4- to^ dipyrido[ 3, 2- b:2y, 3'- e].[ l, 4] diazepin- 6- on
a) ll-cyklopropyl-5,ll-dihydro-2-fluor-8-{2-hydroksyetyl)-4-metyl-6//-dipyrido[3^-b:2',3'-e] [l,4]diazepin-6-on
Tittelforbindelsen ble fremstilt fra 8-brom-2-klor-ll-cyklopropyl-5,l l-dihydrp-4-metyl-6//-dipyrido[3,2-b:2',3'-e] [l,4]diazepin-6-on ved anvendelse av en prosedyre lignende den til den tilsvarende 11 -etyl analogen beskrevet i eksempel VI.
b) ll-cyklopropyl-5,ll-dihydro-2-fluor-4-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6/f-dipyrido[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-on
Diisopropyl-azodikarboksylat (DIAD) (131 jxL, 0,66 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 1 l-(cyklopropyl)-5,l l-dihydro^-fluor-S^-hydroksyetylH-metyl-eW-dipyrido[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-on (140 mg, 0,44 mmol), 4-hydroksykinolin (96,4 mg, 0,66 mmol) og Ph3P (124 mg, 0,66 mmol) i THF (2,2 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i EtOAc (60 ml) og løsningen ble suksessivt vasket med 3 N vandig NaOH (3 x 20 ml), vandig mettet NH4CI (20 ml) og saltvann (20 ml) ble deretter tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble delvis renset ved flash kromatografi (EtOAc:MeOH; 95:5). Det faste stoffet ble ytterligere renset ved revers fase HPLC (CombiPrep ADS-VANDIG 50 x 20 mm, 5 n, 120 En, 5-100% MeCN + 0,10% TFA / vann + 0,10% TFA i 25 min), hvilket gir trifluoreddiksyresalt av tittelforbindelsen (104 mg, 43% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 456 (MH)<+>.
Eksempel VIII (inngang 8, Tabell 1)
5J 1- dihydro- l l- etyl- 4- metyI- 8-{ 2-( 4- kinolinyloksy) etyl}- ffl^
[ l, 4] diazepin- 6- on
a) 5,ll.dihydro-ll-etyl-8-(2-hydroksyetylH-metyl-6H-dipyirdo[3,2-b:2',3'-e]
[l,4]diazepm-6-on
En blanding av 2-klor-5,l 1-dihydro-l l-etyl-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-6/f-dipyirdo[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-oneb(168 mg, 0,51 mmol), ammoniumformiat (318 mg, 5,1 mmol) og 10% Pd/C (50 mg) i EtOH (6 ml) ble omrørt ved romtemperatur. Etter 24 timer, ble ytterligere mengder av ammoniumformiat (200 mg, mmol) og 10% Pd/C (50 mg) tilsatt. Etter omrøring i ytterligere 24 timer, ble reaksjonen konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i CHCI3 og blandingen ble vasket med vandig mettet NaHCC*3, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (122 mg, 81%) som en gul olje.
b) 5,ll-dihydro-ll-etyl-4-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyn-6ff-dipyrido[3^-b:2'^'-e]
[l,4]diazepln-6-on
Diisopropyl-azodikarboksylat (DIAD) (42 |iL, 0,21 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 5,11-dihydro-l l-etyl-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-6i/-dipyridoE3,2-b:2,,3,-e] [1,4]-diazepin-6-on (42,0 mg, 0,14 mmol), 4-hydroksykinolin (31 mg, 0,21 mmol) og Ph3P (55,4 mg, 0,21 mmol) i THF (0,7 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i EtOAc (60 ml) og løsningen ble suksessivt vasket med 3 N vandig NaOH (3 x 20 ml), vandig mettet NH4CI (20 ml) og saltvann (20 ml) ble deretter tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble delvis renset ved flash kromatografi (EtOAc:MeOH; 95:5). Det faste stoffet ble ytterligere renset ved revers fase HPLC (CombiPrep ADS-VANDIG 50 x 20 mm, 5 u, 120 En, 5-100% MeCN + 0,10% TFA / vann + 0,10% TFA i 25 min), hvilket gir trifluoreddiksyresalt av tittelforbindelsen (14,2 mg, 19% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 426 (MH)<+>.
Eksempel IX (inngang 3, Tabell 1)
ll-( Cyklopropyl)- 5Jl- dihydro- 4- metyl- 8-{ 2-( 4- kino b:2\ 3'- e] [ l, 4] diazepin- 6- on
a) 5-brom-2-klor-A^K2,6-diklor-4-metyl-3-pyridmyl)-3-pyridinekarboksamid 3-amino-2,6-diklor-4-metylpyridin (0,51 g, 2,85 mmol) ble oppløst i toluen (35 ml) og
pyridin (0,27 ml, 3,28 mmol) ble tilsatt. 5-brom-2-klor-3-pyridinekarbonylklorid (0,80 g, 3,14 mmol) ble deretter tilsatt dråpevis over 30 min. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 1 time, fortynnet med vann og ekstrahert med toluen (2 x). De samlede organiske ekstrakter ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Den resulterende tykke oljen ble utgnidd med CH2CI2 og det hvite, faste stoffet oppsamlet via sugefiltrering, hvilket gir tittelforbindelsen (0,41 g, 36% utbytte).
b) 5-brom-2-(cyklopropylamino)-N-(2,6-diklor-4-metyl-3-pyridinyl)-3-pyridine-karboksamid
En løsning av S-brom^-klor-A^^.e-dikloM-metyl-S-pyridinyO-S-pyridinekarboksamid (3,00 g, 7,61 mmol) og cyklopropylamin (2,11 ml, 30,5 mmol) i xylener ble oppvarmet i et forseglet rør ved 120 °C i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til 0 °C, fortynnet med vann og ekstrahert med EtOAc (2 x). De samlede organiske ekstrakter ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuet ble renset ved utgnidning (Et20:heksan, 3:1), hvilket gir tittelforbindelsen (2,35 g, 75% utbytte) som et blekgult, fast stoff.
c) 8-brom-2-klor-ll-cyklopropyl-541-dihydro-4-metyi-6ff-dipyrido[3,2-b:2%3,-e]
[l,4]diazepin-6-on
En løsning av 5-brom-2-(cyklopropylamino)-Ar-(2,6-diklor-4-metyl-3-pyridinyl)-3-pyridinekarboksamid (105 mg, 0,254 mmol) i pyridin (3,0 ml) ble oppvarmet til 50 °C mens en 1 M løsning av NaHMDS i THF (0,53 ml, 0,53 mmol) ble tilsatt. Den resulterende løsning ble omrørt ved 50 °C i 3 timer. Reaksjonen ble stanset med vandig mettet NH4CI, fortynnet med vann og ekstrahert med EtOAc (3 x). De samlede organiske ekstrakter ble vasket med saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuet ble renset via flash kromatografi (heksan:EtOAc, 7:3), hvilket gir tittelforbindelsen (32 mg, 33% utbytte)..
d) 2-klor-ll-cykIopropyl-5,ll-dihydro-4-metyl-8-(2-propenyI)-6ff-dipyrido[3,2-b:2<*>,3'-e] [l,4]diazepin-6-on
En løsning av 8-brom-2-klor-l l-cyklopropyl-5,1 l-dihydro-4-metyl-6//-dipyrido[3,2-b:2\3<*->e] [l,4]diazepin-6-on (0,046 g, 0,122 mmol) i DMF (2,0 ml) ble avgasset ved spyling med N2 i 10 min. Pd(PPh3)4 (2,8 mg, 0,003 mmol) og allyltributyltin (0,45 ml, 0,146 mmol) ble tilsatt og den resulterende løsning ble oppvarmet til 90 °C i 2,5 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med vann og ekstrahert med CH2CI2 (3 x) og EtOAc (2 x). De samlede organiske ekstrakter ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuet ble renset via flash kromatografi (heksan til heksan:EtOAc, 7:3), hvilket gir tittelforbindelsen (0,033 g, 80% utbytte).
e) 2-klor-ll-cyklopropyl-5,ll-dihydro-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-6H-dipyrido[3,2-b:2%3'-e] [l,4]diazepin-6-on
En kald (-78 °C) løsning av 2-klor-l l-cyklopropyl-5,1 l-dihydro-4-metyl-8-(2-prbpenyl)-eff-dipyridotf^-frr^-e] [l,4]diazepin-6-on (0,82 g, 2,43 mmol) i CH2C12 (7,5 ml) og MeOH (7,5 ml) ble mettet med O3 inntil løsningen ble blek blå. Reaksjonsblandingen ble latt stå ved -78 °C i 10 min, og deretter ble NaBH4 (0,23 g, 9,71 mmol) tilsatt og blandingen fikk oppvarmes langsomt til romtemperatur over 2 timer. Reaksjonen ble stanset med vandig 10% sitronsyreløsning og ekstrahert med EtOAc (3 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Den resulterende residuet ble renset via flash kromatografi (MeOH:CH2CI2, 2 til 10%), hvilket gir tittelforbindelsen (0,41 g, 60% utbytte) som et hvitt, fast stoff.
f) ll-cyklopropyl-5,ll-dihydro-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-6//-dipyrido[3,2-b:2,,3,-e]
[l,4]diazepin-6-on
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved anvendelse av en fremgangsmåte lignende den beskrevet for 11-etyl analog i eksempel Villa.
g) ll-cyklopropyl-5,ll-dihydro-4-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6i/-dipyrido[3,2-b:2%3'-e] [l,4]diazepin-6-on
Diisopropyl-azodikarboksylat (DIAD) (167 jjL, 0,85 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 1 l-(cyklopropyl)-5,ll-dihydro-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-6H-dipyrido[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-on (175 mg, 0,57 mmol), 4-hydroksykinolin (123 mg, 0,85 mmol) og PI13P (223 mg, 0,85 mmol) i THF (23 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i EtOAc (60 ml) og løsningen ble suksessivt vasket med 3 N vandig NaOH (3 x 20 ml), vandig mettet NH4CI (20 ml) og saltvann (20 ml) ble deretter tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:MeOH; 95:5), hvilket gir tittelforbindelsen (74 mg, 30% utbytte) som ét hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 438 (MH)<+>.
Eksempel X (inngang 21, Tabell 1)
5, ll- dihydrO' ll' etyl- 5- metyl. 8-{ 2-{( l- oksydo- 4' kinolin^^ b:2% y- e][ l, 4] diazepin- 6- on
Fast stoff mCPBA (80-85%, m-klorperbenzosyre) (2,21 g, 10,2 mmol) ble satt til en løsning av 5,11-dihydro-l l-etyl-5-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6//-dipyrido[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-on (2,56 g, 6,02 mmol) i CH2C12 (30 ml) og THF (30 ml) ved romtemperatur (merk at reaksjonen kan utføres i CH2C12 alene). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i CHCI3 (400 ml), løsningen ble suksessivt vasket med vandig 10% Na2S203 (3 x 75 ml), vandig mettet NaHC03 (3 x 75 ml) og saltvann (75 ml), tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (CHCl3:MeOH, 9:1), hvilket gir tittelforbindelsen (2,01 g, 76% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 442 (MH)<+>.
Eksempel XI (inngang 17, Tabell 1)
2- klor- 5Jl- mydro- ll- etyl- 5- metyl- 8'{ 2'{( l- oksydo- 4- kino^ ttipyrido[ 3, 2^ :2* t3'- e] [ l, 4] diazepin- 6- on
Ved anvendelse av en prosedyre identisk med deri i eksempel X, 2-klor-5,l 1-dihydro-l 1-etyl-5-metyl-8- {2-(4-kinolinyloksy)etyl} -67?-dipyrido[3,2-b:2' ,3 *-e] [ 1,4]diazepin-6-on (2,70 g, 5,87 mmol) ga tittelforbindelsen (2,05 g, 73% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 476/478 (MH)<+>.
Eksempel XII (inngang 11, Tabell 1)
SJl- dihydro- ll- etyl- 2- fluor- 5- metyl- 8-{ 2-{( l- oksydo- 4- kinolinyl) oksy^ dxpyrido[ 3, 2- b:2>, 3>- e][ l, 4] diazepin- 6- on
Fast stoff mCPBA (457 mg, 2,12 mmol) ble satt til en løsning av 5,1 l-dihydro-2-fluor-ll-etyl-5-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6/f-dipyrido[3,2-b:2*,3i-e] [l,4]diazepin-6-on (470 mg, 1,06 mmol) i CH2CI2 (10 ml). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 13 timer og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i CHCI3 (75 ml), løsningen ble suksessivt vasket med vandig 10% Na2S2C*3 (3 x 25 ml), vandig mettet NaHC03 (3 x 25 ml) og saltvann (25 ml), tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (CHCl3:MeOH, 19:1 til 9:1), hvilket gir tittelforbindelsen (250 mg, 51% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 460 (MH)<+>.
Eksempel XIII (inngang 10, Tabell 1)
2' klor- ll- cyklopropyl- 5>U- dihydro- 5- metyl- 8-{ 2-{( l- oksydo- 4-^^ dipyrido[ 3, 2' b:2\ 3'- e] [ l, 4] diazepin- 6- on
Fast stoff mCPBA (177 mg, 0,82 mmol) ble satt til en løsning av 2-klor-l l-cyklopropyl-5,11 -dihydro-5-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl }-6lf-dipyrido[3,2-b:2',3'-e] [1,4]-diazépin-6-on (143 mg, 0,30 mmol) i CH2C12 (3 ml) og THF (3 ml). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 14 timer og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i EtOAc (50 ml), løsningen ble suksessivt vasket med vandig 10% Na2S203 (3 x 10 ml), vandig mettet NaHC03 (3 x 10 ml) og saltvann (10 ml), tørket (MgS04), filtrert og
konsentrert under redusert trykk. Residuet ble delvis renset ved flash kromatografi (EtOAc:MeOH, 95:5 til CH2Cl2:MeOH, 9:1). Uren forbindelse ble ytterligere renset ved revers fase HPLC (CombiPrep ADS-VANDIG 50 x 20 mm, 5 u, 120 En, 5-100% MeCN + 0,10% TFA / vann + 0,10% TFA i 25 min). De rene fraksjoner ble behandlet med vandig mettet NaHC03, ekstrahert med EtOAc og løsningen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (28,3 mg, 19%) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 488/490 (MH)<+>.
Eksempel XIV (inngang 14, Tabell 1)
2- klor- 5Jl- dihydro- ll- etyl- 4- metyl- 8- f2- f( l- oksydo- 4- kinolinyl^ dipyrido[ 3£- b:2', 3'- e] [ l, 4] diazepin- 6- on
Fast stoff mCPBA (46,9 mg, 0,22 mmol) ble satt til en løsning av 2-klor-5,l 1-dihydro-l 1-etyl-5-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6//-dipyrido[3,2-b:2\3'-e] [ 1,4]diazepin-6-on (50,0 mg, 0,11 mmol) i CH2CI2 (2,2 ml). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i EtOAc (50 ml), løsningen ble suksessivt vasket med vandig 10% Na2S203 (3 x 10 ml), vandig mettet NaHC03 (3 x 10 ml) og saltvann (10 ml), tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved revers fase HPLC (CombiPrep ADS-VANDIG 50 x 20 mm, 5 u, 120 En, 5-100% MeCN + 0,10% TFA / vann + 0,10% TFA i 25 min). De rene fraksjoner ble behandlet med vandig mettet NaHC03, ekstrahert med EtOAc og løsningen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (32,5 mg, 63%) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 488/490 (MH)<+>.
Eksempel XV (inngang 9, Tabell 1)
5, ll- dihydro- ll- etyl- 2- fluor- 4- metyl- 8~{ 2-{( l- oksydo-^ pyridø[ 3£- b:2', 3*- e] [ l, 4] diazepin- 6- oh
Ved anvendelse av en prosedyre lignende den i eksempel XIV, 5,11-dihydro-l l-etyl-2-fluor-4-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6#-dipyrido[3,2-b:2',3'-e] [ 1,4]diazepin-6^on (125 mg, 0,28 mmol) ga tittelforbindelsen (40 mg, 31%) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z460(MH)<+>.
Eksempel XVI (inngang 12, Tabell 1)
5Jl' dihydro- l]- etyl- 4- metyl' 8~{ 2-{( l- oksydo- 4- kinohnyl) oksy} ety^^ b:2*, 3*- e] [ l, 4] diazepin- 6- on
Fast stoff mCPBA (163 mg, 0,75 mmol) ble satt til en løsning av 5,11-dihydro-l l-etyl-4-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6ff-dipyrido[3,2-b:2',3,-e] [l,4]diazepin-6-on (144 mg, 0,34 mmol) i CH2C12 (7,5 ml). Løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Blandingen ble fortynnet med CH2C12 (125 ml), vasket suksessivt med vandig 10% Na2S203 (2 x 25 ml), vandig méttet NaHC03 (2 x 25 ml) og saltvann (25 ml), og ble deretter tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (CH2Cl2:MeOH, 10:1), hvilket gir tittelforbindelsen (102 mg, 68% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 442 (MH).
Eksempel XVII (inngang 15, Tabell 1)
ll' CykhpropyU5Jl- dihydro- 4- metyl- 8-( 2-{( l' Oksyfo dipyrido[ 3, 2- b:2,, 3>- e] [ l, 4] diazepin- 6- on
Ved anvendelse av en prosedyre lignende den i eksempel XIV, 1 l-cyklopropyl-5,11-dihydro-4-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6fl-dipyrido[3,2-b:2,,3'-e] [l,4]diazepin-6-on (37,1 mg, 0,085 mmol) ga tittelforbindelsen (35 mg, 91%) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI)m/z454(MH)<+>.
Eksempel XVIII (inngang 25, Tabell 1)
2- klor- 5Jl- dihydro~ U- etyl- 4- metyl' 8-{ 2-( 5- kinol^ e] [ l, 4] diazepin- 6- on
Dietyl-azodikarboksylat (DØDE) (77 |tL, 0,49 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 2-Wor-5,11-dihydro-11-etyl-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyl-6//-dipyrido[3,2-b:2',3<*->e]
[l,4]diazepin-6-on (125 mg, 0,38 mmol), 5-hydroksykinolin (70,9 mg, 0,49 mmol) og Ph3P (128 mg, 0,49 mmol) i THF (2,5 ml) ved romtemperatur. Etter 1,5 timer, ble ytterligere mengder av DØDE (35 yL, 0,22 mmol) og PPh3 (59 mg, 0,22 mmol) satt til blandingen. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time og ble deretter fortynnet i EtOAc (50 ml) og løsningen ble suksessivt vasket med vandig 1 N NaOH (4 x 10 ml) og saltvann (15 ml) og ble deretter tørket (MgSO*), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (CH2Cl2:aceton, 85:15). Det resulterende faste stoffet ble utgnidd med Et20, hvilket gir tittelforbindelsen (38 mg, 22% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 460/462 (MH)<+>.
Eksempel XIX (inngang 20, Tabell 1) 2- klor- 5Jl- dihydro- n- etyl- 5- metyl- 8- f2-{( l- oksydo' 5- kinolinyl) oksy} e^^ dipyrido[ 3, 2- b:2', 3>- e] [ l, 4] diazepin- 6- on
Dietyl-azodikarboksylat (DØDE) (160 |iL, 1,01 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 2-Uor-5,l 1-dihydro-l l-etyl-8-(2^
[l,4]diazepin-6-on (225 mg, 0,68 mmol), 5-hydroksykinolin (147 mg, 1,01 mmol) og Ph3P (266 mg, 1,01 mmol) i THF (3,4 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble delvis renset ved flash kromatografi (EtOAc:MeOH; 95:5). Fraksjonene inneholdende
5-kinolinyloksy-derivat ble konsentrert, oppløst i CH2CI2 (2 ml) og THF (5 ml) og behandlet med mCPBA (80%, 248 mg, 1,15 mmol) ved romtemperatur. Løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 2,5 timer, og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i EtOAc (50 ml), vasket suksessivt med vandig 10% Na2S203 (3 x 10 ml), vandig mettet NaHC03 (3 x 10 ml) og saltvann (10 ml), og ble deretter tørket (MgSO»), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:MeOH, 95:5 til CH2Cl2:MeOH, 9:1), hvilket gir tittelforbindelsen (113 mg, 35% utbytte i 2 trinn) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 476/478 (MH)<+>.
Eksempel XX (inngang 18, Tabell 1)
5J 1- dihydro- l l- etyl- 2- Jluor- 5- metyl- 8-{ 2-{( l- oksydo- 5- kinolinyl) oksy}^^ dipyrido[ 3, 2- b:2', 3'' eJ [ l, 4] diazepin- 6- on
Ved anvendelse av en prosedyre identisk med den i eksempel XIX, 5,11-dihydro-l l-etyl-2-fluor-8-(2-hydroksyetyl)-5-metyl-6H-dipyrido[3,2-b:2,,3'-e] [l,4]diazepin-6-on (267 mg, 0,84 mmol) ga tittelforbindelsen (204 mg, 52% utbytte i 2 trinn) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI)m/z460(MH)<+>.
Eksempel XXI (inngang 19, Tabell 1)
2- khr- SJl- dihydro- ll- etyl^- metyl^ 8- f2- f( l- oksydo- 5- kinoUnyl) oksy} etyl}- 6 pyrido[ 3, 2- b:2', 3'- e][ l, 4] diazepin- 6- on Ved anvendelse av en prosedyre lignende den i eksempel XIX men ved anvendelse av diisopropyl-azodikarboksylat (DIAD) istedenfor dietyl-azodikarboksylat, 2-klor-5,l 1-dihydro-11 -etyl-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyi-6/f-dipyirdo[3,2-b:2',3'-e] [ 1,4]diazepin-6-on (223 mg, 0,67 mmol) ga tittelforbindelsen (43,4 mg, 14% utbytte i 2 trinn) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 476/478 (MH)<+>.
Eksempel XXII (inngang 23, Tabell 1)
5Jl- dihydro- ll- etyl- 2- fluor- 4- metyl- 8-{ 2-{( l- oksydo- 5- kinolinyl) oksy^ dipyriåo[ 3^- b:2ly3 '- e] [ l, 4] diazepin- 6- on
Ved anvendelse av en prosedyre lignende den i eksempel XXI, 5,11-dihydro-l 1 -etyl-2-fluor-8-(2-hydroksyetyl)-4-metyI-6fl<r->dipyrido[3,2-b:2',3,-e] [l,4]diazepin-6-on (250mg, 0,79 mmol) ga tittelforbindelsen (64,7 mg, 18% utbytte i 2 trinn) som et hvitt, fast stoff: MS(ESI)m/z460(MH)\
Eksempel XXIII, Inngang 22, Tabell 1
2- klor- 5, H- dihydro- ll- etyl- 8'{ 2-{( l- oksydo- 4- kinol^ b:2', 3'- e] [ l, 4] diazepin- 6- on MS (ESI) m/z 462/464 (MH)<+>.
Eksempel XXIV, Inngang 26, Tabell 1
5 yll'dihydro-S tll-dietyl-8-{2-(4'kinolinyloksy)etyl}-6H-dipyrido[3,2'b:2',3'-e]
[ l, 4] diazepin- 6- on
MS(ESI)m/z440(MH)<+>.
Eksempel XXV, Inngang 27, Tabell 1
5J14ihydro- S, ll- dietyl- 8-{ 2-{( l- oksydo^ kino^ e] [ l, 4] diazepin- 6- on MS (ESI) m/z 456 (MH)+.
Eksempel XXVI (Inngang 28, Tabell 1)
2, 5- dimetyl- 5tll- dihydro. ll* etyl- 8-{ 2-( l- oksydo- 4- k^ b:2*, 3*- e] [ l, 4] diazepin- 6- on
a) 5-brom-2-klor-A^-(6-klor-2-metyl-3-pyridinyl)-3-pyridinekarboksamid NaHCOs (3,9 g, 46,4 mmol) ble satt til en løsning av 3-amino-2-klor-6-metylpyridin (2,2
g, 15,4 mmol; fremstilt som beskrevet av K. G; Grozinger et al. J. Heterocyklisk Chem.. 1995,32,259-263) i MeCN (50 ml). Den resulterende suspensjonen ble omrørt i 15 min. og en løsning av rå 5-brom-2-klor-3-pyridinekarbonylklorid (fremstilt fra 5-brom-2-hydroksy-3-pyridinekarboksylsyre og SOCl2 [som beskrevet av T. W. Gero et al. i Synth. Commun. 1989,19,553-559 (inntatt her ved referanse) men med utelatelse av vandig opparbeidelse] (4 g.) i MeCN (10 ml) ble innført over 30 min. Den resulterende suspensjonen ble omrørt ved romtemperatur. Etter 24 timer, ble blandingen hellet i en blanding av vann (100 ml) og is (10 g) og omrørt i 20 min. Suspensjonen ble filtrert og det resulterende faste stoffet ble vasket med vann (50 ml) og heksan (25 ml), deretter tørket over P2Os under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen (1,8 g, 31% utbytte) som et hvitt pulver.
b) 5-brom-A/-(2-klor-6-metyl-3-pyridinyl)-2-(etylamino)-3-pyridinekarboksamid En løsning av 5-brom-2-klor-A^-(2-ldor-6-metyl-3-pyridinyl)-3-pyirdinekarboksamid (1,7 g, 4,8 mmol) og etylamin (2M i THF, 10,5 mmol, 5,2 ml) i THF (5 ml) ble omrørt ved 90 til 95 °C i en stål autoklav i 16 timer. Den resulterende blanding ble hellet i vann (100 ml), omrørt i 15 min og filtrert. Det faste stoffet ble vasket med vann fulgt av heksan, hvilket gir tittelforbindelsen som et gult, fast stoff (1,58 g, 89% utbytte).
c) 8-brom-5,ll-dihydro-2.5-dimetyMl-etyl-6H-dipyrido[3,2-b:2',3'-e] [l,4]diazepin-6-on
En løsning av rå 5-brom-A^-(2-diklor-6-metyl-3-pyridinyl)-2-(etylamino)-3-pyridine-karboksamid (0,7 g, 1,8 mmol) i vannfri pyridin (18 ml) ble oppvarmet til 50 °C. En 1 M løsning av NaHMDS i THF (7,2 ml, 7,2 mmol) og ble deretter tilsatt dråpevis og omrøring ble fortsatt i ytterligere 3 timer. Etter avkjøling til romtemperatur, metyljodid (0,6 ml, 9 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt natten over. Vann (25 ml) ble tilsatt og blandingen ble ekstrahert med EtOAc (3 x) og de samlede ekstrakter ble vasket med vann og saltvann deretter tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksan:EtOAc, 8:2), hvilket gir tittelforbindelsen (259 mg, 41% utbytte).
d) 5,ll-dihydro-2,5-dimetyl-ll-etyl-8-(2-propenyl)-6H-dipyrido[3,2-b:2'^'^]
[l,4]diazepuv6-on
En løsning av 8-brom-5,ll-dihydro-2,5-dimetyl-ll-etyl-6H-dipyridb[3,2-b:2<*>,3'-e]
[l,4]diazepin-6-on (258 mg, 0,7 mmol) i DMF (7,4 ml) ble avgasset under redusert trykk i 20 min. Pd(PPh3)4 (43 mg, 0,04 mmol) og ble deretter tilsatt fulgt av allyltributyltin (0,3
ml, 0,85 mmol). Etter avgassing under redusert trykk i 10 min, ble blandingen oppvarmet til 100 °C i 1,5 timer. Blandingen og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksan :EtOAc, 8:2), hvilket gir tittelforbindelsen (184 mg, 98% utbytte) som en gult fast stoff.
e) 5,ll-dihydro-23-dimetyl-ll-etyl-8-(2-hydroksyetyl)-6H-dipyrido[3,2-b:2'^'-e]
[l,4]diazepin-6-on
En strøm av O3 ble innført i en kald (-78 °C) løsning av 5,1 l-dihydro-2,5-dimetyl-ll-etyl-8-(2-propenyl)-6H-dipyrido[3,2-b:2',3'-e] [l,4]diazepin-6-on (187 mg, 0,6 mmol) og Sudan m i CH2C12 (3 ml) og MeOH (3 ml). Når rosa løsningen ble brun, ble 02 boblet gjennom løsningen i 10 min. NaBH4 (57 mg, 1,52 mmol) og ble deretter tilsatt og løsningen fikk oppvarmes til romtemperatur. Etter 30 min, ble en ytterligere mengde av
NaBH4 (20 mg) tilsatt. Etter 2 timer, ble vandig mettet NH4CI tilsatt og blandingen omrørt
i 20 min. Løsningen ble konsentrert under redusert trykk og ekstrahert med CH2CI2 (3x). De samlede organiske ekstrakter ble vasket med saltvann, tørket (MgS04), filtrert Og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:Heksan 6:4), hvilket gir tittelforbindelsen (111 mg, 58% utbytte) som et hvitt, fast stoff.
f) 2,5-dimetyl-5,ll-dihydro-ll-etyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6H-dipyrido[3,2-b:2',3'-e] [l,4]diazepin-6-on
Dietyl-azodikarboksylat (DØDE) (139 (IL, 0,88 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 5,ll-dihydro-2,5-dimetyTll-etyl-8-(2-hydroksyetyl)-6H-(upyrido[3,2-b:2',3'-e]
[l,4Jdiazepin-6-on (110 mg, 0,35 mmol), 4-hydroksykinolin (128 mg, 0,88 mmol) og Ph3P (231 mg, 0,88 mmol) i THF (3,5 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet i EtOAc (60 ml) og løsningen ble suksessivt vasket med 1 N vandig NaOH (3 x 10 ml) og saltvann (15 ml) og ble deretter tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc deretter EtOAc:MeOH, 9,5:0,5), hvilket gir tittelforbindelsen (57 mg, 37% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 440 (MH)<+>.
g) 5,ll-dihydro-2,5-dimetyl-ll-etyl-8-{2-{(l-oksydo-4-kinolinyl)oksy}etyl}-6//- dipyrido[3>b:2',3'-e][l,4]diazepin-6-on
Fast stoff mCPBA (80-85%, m-klorperbenzosyre) (60 mg, 0,28 mmol) ble satt til en løsning av 5,1 l-dihydro-2,5-dimetyl-l l-etyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-6H-dipyrido[3,2-b:2\3'-e] [l,4]diazepin-6-on (55 mg, 0,13 mmol) i CH2CI2 (1,3 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2,5 timer deretter fortynnet med CH2CI2. Den resulterende løsning ble suksessivt vasket med vandig 10% Na2S203, vandig mettet NaHC03 og saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (MeOH/EtOAc,2% til 5%), hvilket gir tittelforbindelsen (59 mg, 99% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 456 (MH)<+>.
Eksempel XXVII (Inngang 29, Tabell 1)
5Jl~ dihydro- ll- etyl- 5- metyl- 8-{ 2~( l- okso- 4- kinolin^ dipyrido[ 32. b:2\ 3y- e][ l, 4] diazepin- 6- on4l3XX
a) 2-(Etylamino)-3-nitro-6-(trifluormetyl)pyridin
Til en løsning av 2-nitroacetamidammoniumsalt (4 g, 33 mmol) i vann (165 ml) ble tilsatt
piperidiniumacetat (33 mmol) i vann fulgt av langsom tilsetning av 4-etoksy-1,1,1-trifluor-3-buten-2-on (6,1 ml, 43 mmol) i MeOH (11 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 timer ved romtemperatur og ved tilbakeløp i 3 timer. Reaksjonsblandingen fikk avkjøles til 45 °C og vandig HC1 (IN) ble tilsatt inntil pH ble sur. Etter 1 time ved romtemperatur, ble reaksjonsblandingen ekstrahert med CH2C12 (3x). De samlede organiske lag ble suksessivt vasket med vann og saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc, deretter EtOAC:MeOH, 9:1), hvilket gir 3-nitro-6-(trifluormetyl)-2(l//)-pyridinon (2,7 g, 40% utbytte) som et gult, fast stoff.
Til en løsning av 3-nitro-6-(trifluormetyl)-2(l/i/)-pyridinon (2,4 g, 11,5 mmol) i DMF (69 ml) ble tilsatt natriumhydrid (350 mg, 13,8 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 min ved 45 °C, avkjølt til romtemperatur og tf-fen<y>ltriflurometansulfonimid (4,9 g, 13,8 mmol) ble tilsatt. Etter 1 time, en 2 M løsning av etylamin i THF (13 ml, 25 mmol) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble hellet i vann (100 ml) og ekstrahert med EtOAc (3x). De samlede organiske lag ble suksessivt vasket vann og saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (neksan:EtOAc, 9:1), hvilket gir de ønskede forbindelse (1,1 g, 41% utbytte) som en gul olje.
b) 3-amino-2-(etyIamino)-6-(trifluormetyI)pyridin
En løsning av 2-(etylamino)-3-nitro-6-(trifluormetyl)pyridin (1,1 g, 4,9 mmol). i MeOH (40
ml) ble omrørt natten over ved romtemperatur under hydrogen (1 atm.) i nærvær av 20% Pd(OH)2/C (100 mg). Katalysatoren ble fjernet ved filtrering gjennom diatoméjord. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk, hvilket gir tittelforbindelsen som en oransje olje (1 g).
c) 2*klor-iV-{2-(etylamino)-6-(tHfluormetyl)*3-pyridinyl}*5-brom-3-pyridine-karboksamid
Til en avkjølt løsning av 3-amino-2-(etylamino)-6-trifluormetyl pyridin (1 g, 4,9 mmol) i
MeCN (24 ml) ble tilsatt fast stoff NaHC03 (906 mg, 11 mmol). Etter 5 min, rå 5-brom-2-klor-3-p yridinekarbonylklorid (fremstilt fra 5-brom-2-hydroksy-3-pyridinekarboksylsyre og SOCl2 [som beskrevet av T. W. Gero et al. i Synth. Commun. 1989,19,553-559 (inntatt her ved referanse) men med utelatelse av vandig opparbeidelse] ble tilsatt (1 ekv., 4,9 mmol). Etter 2 timer, ble reaksjonsblandingen hellet over is/H20 (1,5 L) og det resulterende faste stoffet ble filtrert, skyllet med H20 og deretter heksan. Etter tørking under redusert trykk natten over, ble tittelforbindelsen oppnådd som et lysebrunt, fast stoff (1,6 g, 77% utbytte).
d) 8-brom-5,ll.dihydro41-etyl-2-(^ diazepin-6-on
Til en løsning av 2-klor-A^{2-(etylamino)-6-(trifluormetyl)-3-pyridinyI}-5-brom-3-pyridinekarboksamid (766 mg, 1,8 mmol) i DMF (18 ml) ble tilsatt NaH (137 mg, 5,4 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 80 °C. Etter 1 time fikk reaksjonsblandingen avkjøles til romtemperatur og ble deretter hellet i vann (20 ml). Den resulterende blanding ble ekstrahert med EtOAc (3x). De samlede organiske lag ble suksessivt vasket med vann og saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksan:EtOAc, 7:3), hvilket gir den ønskede forbindelse (200 mg, 28% utbytte) som et gult, fast stoff.
e) 8-brom-5,ll-dihydro-ll-etyl-5-metyl- 2-(trifluormetyl)-6H-dipyrido[3,2-b:2,3'-e][l,4]diazepuv6-on
Til en løsning av 8-brom-5,l 1-dihydro-l l-etyl-2-(trifluormetyl)-6Jl/-dipyrido[3,2-b:2,,3,-e]
[ 1,4]diazepin-6-on (200 mg, 0,52 mmol) i DMF (2,6 ml) ble tilsatt NaH (20 mg, 0,78 mmol) og blandingen ble oppvarmet til 50 °C i 30 min. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og behandlet med Mel (97 DL, 1,56 mmol). Etter 16 timer, ble reaksjonsblandingen fortynnet med vann. Den resulterende blanding ble ekstrahert med EtOAc (3x). De samlede organiske lag bie suksessivt vasket med vann og saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksan:EtOAc, 8,5:1,5), hvilket gir tittelforbindelsen (110 mg 53% utbytte) som et hvitt skum.
f) 5,ll-dihydro41*tyl-5-mety^^ b:2',3'-e][l,4]diazepin-6-on
Allyltributyltin (98 )iL, 0,32 mmol) og Pd(Ph3P)4 (16 mg, 0,02 mmol) ble satt til en avgasset (N2 gjennom løsning i 30 min) løsning av 8-brom-5,l 1-dihydro-l l-etyl-5-metyl-2-(trifluormetyl)-6/f-dipyrido[3,2-b:2',3'-e][l,4]diazepin-6-on (11 mg, 0,27 mmol) i DMF (1,4 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved 90 °C i 1,5 timer og ble deretter avkjølt til romtemperatur og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (heksan:EtOAc, 8:2 til 7:3), hvilket gir tittelforbindelsen (101 mg, 99% utbytte).
g) 5,ll-dihydro-ll-etyl-8-(2-hydroksyetyl)-5-metyl-2-(trifluormetyl)-6H-dipyrido[3,2-b:2\3'e][l,4]diazepin-6-on
En strøm av ozohisert oksygen ble boblet gjennom en kald (-78 °C) løsning av 5,11-dihydro-ll-etyl-5-metyl-8-(2-propenyl)-2-(triflu diazepin-6-on (100 mg, 0,27 mmol) i CH2C12 (2,7 ml) og MeOH (2,7 ml) i 2,5 timer. En strøm av N2 og ble deretter boblet gjennom løsningen i 15 min og deretter fast stoff NaBH4 (52 mg, 1,4 mmol) ble satt til løsningen. Reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur. Etter 1 time, ble vandig mettet NH4C1 (5 ml) tilsatt og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med CH2C12 og det vandige laget ble re-ekstrahert med CH2C12. De samlede organiske lag ble suksessivt vasket med vann og saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:heksan: 75:25 til EtOAc 100%), hvilket gir tittelforbindelsen (60 mg 59% utbytte) som et hvitt, fast stoff.
h) 5,ll-dihydro-ll-etyl-5-metyl-8-{2-(4-kinolinyloksy)etyl}-2-(trifluormetyl)-6//- dipyrido[3,2b:2',3'-e][l,4]diazepin-6-on
Dietyl-azodikarboksylat (DEAD) (38 uL, 0,24 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 5,11-dihydro-l l-etyl-8-(2-hyfroksye^ 3'-e] [l,4]diazepin-6-on (58 mg, 0,16 mmol), 4-hydroksykinolin (35 mg, 0,24 mmol) og Ph3P (62 g, 0,24 mmol) i THF (1,6 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time og ble deretter konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (EtOAc:MeOH; 95:5), hvilket gir tittelforbindelsen (24 mg, 31 % utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 494,495 (MH)<+>.
i) 5,ll-dihydro41-etyl-5-r^ ttrinuormetyD-åtf-dipyridot^-b^^^^e] [l,4]diazepin-6-on
Fast stoff mCPBA (80-85%, m-klorperbenzosyre) (16 mg, 0,08 mmol) ble satt til en løsning av 5,11 -dihydro-11 -etyl-5-metyl-8- {2-(4-kinolinyloksy)etyl} -2-(trifluormetyl)-6ff-dipyrido[3,2-b:2',3<*->e] [l,4]diazepin-6-on (22 mg, 0,04 mmol) i CH2C12 (0,5 ml) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2,5 timer deretter fortynnet med CH2C12. Den resulterende løsning ble suksessivt vasket med vandig 10% Na2S2C>3, vandig mettet NaHCC>3 pg saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash kromatografi (MeOH:CHCl3,5% til 10%), hvilket gir tittelforbindelsen (11 mg, 52% utbytte) som et hvitt, fast stoff: MS (ESI) m/z 511 (MH)<+>.
REVERS Transkriptase ( RT) FORSØK
FORSØKS TEORI:
Blant enzymene som Human Immunsvikt-virus (HIV-1) koder for er en revers transkriptase (1), slik betegnet fordi den transkriberer en DNA kopi fra et RNA templat. Denne aktiviteten kan bli kvantitativt målt i et cellefritt enzymforsøk og er basert på observasjonen om at revers transkriptase kan anvende en syntetisk templat poly r(C) primed med en biotinylert oligo d(G) for å transkribere en radiomerket DNA-tråd ved å anvende 3H-dGTP som et substrat. Forsøket beskrevet nedenfor anvender villtypéenzymet
(som er den dominerende formen av enzymet observert hos pasienter infisert med HIV-1)
og kan også anvendes med mutante RT enzymer (for eksempel Y181C, fremstilt ved setedirigert mutagenese hvor tyrosinresiduet ved kodon 181 er erstattet av en cysteinrest) ved analoge forsøksbetingelser. Dette forsøket tillater at forbindelser blir evaluert for deres effektivitet for hemming av mutante enzymer..
MATERIALER:
a) Fremstilling av enzymet
Noen HIV-1 HB klon BH10 RT mutanter ble gitt av Dr. C-K. Shih (Boehringer
Ingelheim Pharmaceuticals Inc., U.SJEn.) i vektoren pKK233-2 (Pharmacia). En HIV RT klon pKRT2 inneholdende bare RT p66 gen regulert av lac operon/trc promoteren ble oppnådd fra Dr. W. Summers (Yale University) (2). En rekke spesifikke aminosyre-substitusjoner ble innført i villtypen RT genet av setedirigert mutagenese. RT kloner ble subklonet inn i pKK233-2 bakterielle ekspresjonsvektor. Kloner gitt omfattet villtype, Val 106Ala, Tyri8lCys, Tyri88Cys, Tyri88Leu, Gly 190Alå og Pro236Leu. Andre ble utført internt av setedirigert mutagenese av pKK233-2 RT kloner omfattende Lys 103Asn, Lys 103 Asn/Tyr 18 lCys, Lysl03Asn/Leul00Ile, Lysl03Asn/Pro225His og Lysl03Asn/ Vall08Ile.
b) Rensning av Enzym
Rensning av rekombinant revers transkriptase ble utført ved anvendelse av en kombinasjon
av metoder tidligere beskrevet (3). En enkel koloni fra en frisk plate av transformerte JM109 celler ble anvendt for å initiere veksten av en pre-kultur dyrket o/n ved 37°C To liter vekstmediumble inokulert med denne pre-kulturen. Ved OD«» - 1.5 (5-6 timer ved 37°C), ble RT genekspresjonen fremkalt med IPTG (1 mM endelig) og fermenteringen ble fortsatt i noen få ytterligere timer ved 37 °C Etter sentrifugering, ble supernatanter kastet mens cellepelleten ble samlet og lagret ved -80 °C inntil rensning. Celler ble tint ved 4 °C natten over og suspendert i lyse buffer (MES 50mM pH 6, EDTA ImM, 10% volum/ volum glycerol, 0,02% vekt/volum n-oktyl-p-D-glucosid, 0,02% vekt/volum natriumazid). Lysozyme ble tilsatt og blandingen ble inkubert på is i 40 minutter. Etter homogenisering ved anvendelse av en Dounce i nærvær av lysozyme og ultralydbehandling, ble cellene sentrifugert i 30 minutter. Supernatant (Sl) ble spart og lagret ved 4°C Sentrifugert pellet ble resuspendert i ekstraksjonsbuffer (MES 50mM pH 6, KPO4 50 mM pH 6, KC1 lOOmM, 10% volum/volum glycerol, 0,02% vekt/volum n-oktyl-p-D-glucosid, 0,02% vekt/volum natriumazid) og omrørt i 30 minutter ved 4°C Denne andre blandingen ble sentrifugert igjen og supernatanten (S2) ble spart. Ovenfor angitte prosedyre ble gjentatt 2 ytterligere ganger ved sparing av supernatantene S3 og S4 og én siste ekstraksjon ble utført natten over (S5). Polymin P (0,005% endelig) ble satt til de samlede supernatanter for å fjerne nukleinsyrer. Denne løsningen ble omrørt i 75 minutter ved 4 °C og sentrifugert i 1 time.
Supernatanten (SS1) ble utfelt på is med 20% vekt/volum ammoniumsulfat og omrørt i 1 time ved 4 °C. Blandingen ble deretter sentrifugert og den resulterende supernatant (SS2) ble utfelt med ytterligere 40% vekt/volum ammoniumsulfat (60% total), omrørt i 1 time og sentrifugert igjen. Den endelige pellet (Pl) ble lagret natten over ved 4 °C før den gjennomgår rensning den følgende dag. Alle trinn av rensingen ble utført ved 4 °C hvis ikke annet er angitt.
Pellet (Pl) ble resuspendert inn i MES 50mM pH 6, KP04 10 mM pH 6, KC1 lOOmM, 10% volum/volum glycerol, 0,02% vekt/volum n-oktyl-D-D-glucosid, 0,02% vekt/volum natriumazid. Suspensjonen ble dialysert mot samme buffer natten over ved anvendelse av 12-14kD MWCO dialyserør. Dialysatet ble sentrifugert og supernatanten ble filtrert gjennom Millex-PF 0,8 \ im filterenheter. Filtrert prøve ble belastet på en Hydroksy Apatite kolonne (30-ml sjikt volum) og vasket med samme buffer. Bundet enzym ble eluert med -220 ml av en lineær gradient av 10 til 300mM KPO4 i ovenfor buffer. Fraksjonene inneholdende p66/p51 heterodimer (som bestemt ved SDS-PAGE 8% og Western blotting) ble samlet for neste kolonne. RT inneholdende fraksjoner ble fortynnet to-ganger med Bis-tris propan 50 mM pH 7,0, (NH4)2S04 1 M, 0,02% vekt/volum OBG, 10% volum/volum glycerol, 0,02% vekt/volum Naty og applisert på en Hi-Felle Heparin Sepharose kolonne (5-ml bed volum) og vasket med samme buffer. Bundet RT ble deretter eluert med 75 ml av en lineær gradient av 0 til 1 M ammoniumsulfat i samme buffer. RT-inneholdende fraksjoner ble samlet i henhold til SDS-PAGE og Western blotting analyser. Protein konsentrasjon av denne poolen ble bestemt ved Bradford-metoden ved anvendelse av BSA som standard; Den endelige enzymprepareringne ble dialysert i MES 50mM pH 6, KP04 300 mM pH 6, KC1175mM, 10% volum/volum glycerol, 0,02% vekt/volum natriumazid og aliquotet og frosset ved -30° C.
FORSØKSPROSEDYRE:
Radiometriske enzymforsøk er blitt tilpasset en 96-brønn mikrotiterplate format og anvender streptavidin scintillasjons nærhet kuler. Forsøket er kort beskrevet nedenfor. HIV-1 RT enzym ble tint og etter behov fortynnet inn i Tris/HCl 50 mM pH 7,8 inneholdende NaCl 60mM, MgCl2 heksahydrat 2mM, DTT 6mM, redusert glutation 2mM og 0,02% vekt/volum Chaps, hvilket gir =3 nM enzym. Til 30 \ iL av denne enzymløsning ble det tilsatt 10 uX av inhibitorløsning (50 u.M til 2,5 nM inhibitor i same forsøksbuffer som ovenfor inneholdende 15% volum/volum DMSO). Platen ble pre-inkubert i 15 minutter ved romtemperatur før forløp til neste trinn. I dette pre-inkubeirngstrinnet, var høyest og lavest inhibitorkonsentrasjoner 12,5 \ iM og 0,62 nM henholdsvis og konsentrasjonen av DMSO 3,75% volum/volum. Deretter ble den enzymatiske reaksjon initiert ved tilsetning av 10 uL substratløsning. Den endelige reaksjonsblandingen inneholdt Tris/HCl 50 mM pH 7,8, NaCl 60 mM, MgCl2»6H20 2 mM, DTT 6 mM, GSH 2 mM, Chaps 0,02% vekt/volum DMSO 3% volum/volum, Poly rC 179 nM, Biotin dG)518 nM, dGTP 288 nM og<3>H-dGTP71nM.
I dette inkuberingstrinnet, var høyeste og laveste inhibitorkonsentrasjoner henholdsvis 10 |xM og 0,5 nM. Etter tilsetning av substrater, ble platen dekket med et plastlokk og inkubert i 1 time ved 37°C i en tørr inkubator. Deretter ble reaksjonen stanset ved tilsetning av 75 u-L av EDTA 0,5M inneholdende 5 mg/ml streptavidin scinuilasjons nærhet kuler.
Platen ble ristet i 2 minutter ved middels hastighet og inkubert i 1 time ved romtemperatur. Deretter ble 75 \ ih av cesiumklorid 7 M løsning tilsatt, platen ble ristet i 2 minutter ved medium hastighet og inkubert igjen i 1 time ved romtemperatur. Platen ble deretter dekket med et plastlokk og tellet ved anvendelse av TopCount-NXT™ Mikroplåt Scintillation Luminescens Counter, Packard. Hver brønn ble tellet i 60 sekunder. Hver rad inneholdt ved dens ekstremiteter en blank og en kontroll brønn.
Beregning for prosent hemning er som følger:
Ved anvendelse av forsøket ovenfor, ble forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse testet for hemning av RT villtype (VEKT) og mutante enzymer. Resultatene er listet opp i Tabell 2, som ICso(nM).
For å bekrefte evnen som disse forbindelser har til å hemme HIV replikasjonen, ble de også testet i humanr T-Cellekultur (Syncytia) Forsøk beskrevet nedenfor.
ELISA forsøk for vurdering av aktivitet i cellekultur
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ble testet for deres evne til å hemme HIV replikasjon i cellekultur i et 96-brønn plate forsøk. Fullstendig RPMI1640, bestående av
RPMI1640 + 10% føtalt bovint serum, 10 ug/ml gentamycin og 10 uM P-merkaptoetanoI ble anvendt for fortynning av forbindelsen så vel som cellevekst medium. T lymfocytt cellelinje C8166 ble infisert ved en multiplisitet av infeksjon på 0,001 med virus som koder for villtype og mutant revers transkriptase. Celler ble deretter inkubert i tre dager i nærvær av seriefortynninger av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse. Supernatanten ble samlet fra åtte replica brønner og konsentrasjonen av ekstracellulært p24 ble bestemt ved anvendelse av et kommersielt tilgjengelig HIV-1 p24 antigen forsøkssett (Beckman-Coulter®). Nivået av hemning (% hemning) ble beregnet med den følgende ligning:
Resultatene er listet opp i Tabell 3, som EC50 (nM).
Spesifisitetsforsøk
For å vurdere spesifisiteten av enzymhemmende aktivitet av forbindelsene gitt i oppfinnelsen, ble noen få testet, for derés evne til å hemme andre virale polymeraser (så som Hepatitt C virus og Respiratorisk Syncytial virus RNA-avhengig RNA polymeraser)
så vel som pattedyr-polymeraser (så som Kalve Tymus RNA-avhengig DNA polymerase og Human telomerase) ved anvendelse av kjente forsøksmetoder. Ingen av forbindelsene teltet slik ble observert å ha hvilken som helst betydelig hemmende aktivitet mot disse enzymer. Disse resultater indikerer at den enzym hemmende aktivitet av forbindelsene gitt av oppfinnelsen er rettet heller spesifikt mot HIV-1 RT.
REFERANSER ( INNTATT HER VED REFERANSE)
1. Benn, S., et al. Science 230:949,1985.
2. D'Akila, R. T. og Summers, W. C. J. Acq. Imm. Def. Syn. 2:579,1989.
3. a) Warren, T. C. et al. Protein Ekspresjon & Rensning 3:479,1992; b) Kohlstaedt, L. En. Science 256(5065): 1783,1992.
Claims (20)
1. Forbindelse, karakterisert ved at den har den generelle formel I:
hvor
R<2> er valgt fra gruppen bestående av H, F, Cl, Cm alkyl, C 3^ cykloalkyl og CF3; R<*> er H eller Me;
R<5> er H, Me eller Et, med det forbehold at R<4> og R5 er ikke begge Me og hvis R<4> er Me kan R<3> ikke være Et;
R<11> er Me, Et, cyklopropyl, propyl, isopropyl eller cyklobutyl; og
Q er valgt fra gruppen bestående av:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved a t R<11> erEt eller cyklopropyl eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
3. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved atQer valgt fra gruppen bestående av:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
4. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at Qer:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
(
5. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R5 er Me, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
6. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at Rn er Et eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
7. Forbindelsen, karakterisert ved at den er:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
8. Forbindelse, karakterisert ved at den er
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
9. Forbindelse, karakterisert ved at den er
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
10. Inhibitor for HIV replikasjon, karakterisert ved at den har den generelle formel I:
hvor
R<2> er valgt fra gruppen bestående av H, F, Cl, Cm alkyl, C3.4 cykloalkyl og CF3;
R<4> er Heller Me;
R<5> er H, Me eller Et, med det forbehold at R<4> og R<5> er ikke botn Me og hvis R<4> er Me kan R<5> kan ikke være Et;
R<11> er Me, Et, cyklopropyl, propyl, isopropyl.eller cyklobutyl,; og Q er valgt fra gruppen bestående av:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
11. Inhibitor for HIV replikasjon ifølge krav 10, karakterisert ved at R<11> er Et eller cyklopropyl eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
12. Inhibitor for HIV replikasjon ifølge krav 10, karakterisert ved at Q er valgt fra gruppen bestående av:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
13. Inhibitor for HIV replikasjon ifølge krav 10, karakterisert ved at Qer:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
14. Inhibitor for HIV replikasjon, ifølge krav 10, karakterisert ved at R<s>erMe.
15. inhibitor for HIV replikasjon, ifølge krav 10, karakterisert ve dat R<11> er Et.
16. Inhibitor for HIV replikasjon, karakterisert ved at den har formelen:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
17. Inhibitor for HIV replikasjon, karakterisert ved at den har formelen:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
18. Inhibitor for HTV replikasjon, karakterisert ved at den har formelen:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
19. Anvendelse av en HIV hemmende mengde av en forbindelse med formel I ifølge kravl eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling eller forebygging av HIV infeksjon.
20. Farmasøytisk preparat for behandling eller forebygging av HIV infeksjon, karakterisert ved at det omfatter forbindelse med formel I ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav og en farmasøytisk akseptabel bærer.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US21232900P | 2000-06-16 | 2000-06-16 | |
| US25663800P | 2000-12-18 | 2000-12-18 | |
| PCT/CA2001/000890 WO2001096338A1 (en) | 2000-06-16 | 2001-06-14 | Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO20025844D0 NO20025844D0 (no) | 2002-12-05 |
| NO20025844L NO20025844L (no) | 2002-12-05 |
| NO323830B1 true NO323830B1 (no) | 2007-07-09 |
Family
ID=26907019
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO20025844A NO323830B1 (no) | 2000-06-16 | 2002-12-05 | Forbindelser, anvendelser derav samt inhibitor for HIV-replikasjon og farmasoytisk preparat |
Country Status (36)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6420359B1 (no) |
| EP (1) | EP1294720B1 (no) |
| JP (1) | JP3923894B2 (no) |
| KR (1) | KR20030017540A (no) |
| CN (1) | CN1178939C (no) |
| AR (1) | AR028958A1 (no) |
| AT (1) | ATE322492T1 (no) |
| AU (2) | AU2001270370B2 (no) |
| BG (1) | BG107348A (no) |
| BR (1) | BR0102377A (no) |
| CA (1) | CA2411766C (no) |
| CZ (1) | CZ20024114A3 (no) |
| DE (1) | DE60118560T2 (no) |
| DK (1) | DK1294720T3 (no) |
| EA (1) | EA005598B1 (no) |
| EE (1) | EE200200690A (no) |
| ES (1) | ES2261433T3 (no) |
| HK (1) | HK1057558A1 (no) |
| HR (1) | HRP20021003A2 (no) |
| HU (1) | HUP0301105A2 (no) |
| IL (1) | IL152819A0 (no) |
| MX (1) | MXPA02012205A (no) |
| MY (1) | MY130375A (no) |
| NO (1) | NO323830B1 (no) |
| NZ (1) | NZ523549A (no) |
| PE (1) | PE20020083A1 (no) |
| PL (1) | PL360370A1 (no) |
| PT (1) | PT1294720E (no) |
| SA (1) | SA01220202B1 (no) |
| SK (1) | SK17722002A3 (no) |
| TW (1) | TWI270547B (no) |
| UA (1) | UA74834C2 (no) |
| UY (1) | UY26767A1 (no) |
| WO (1) | WO2001096338A1 (no) |
| YU (1) | YU94202A (no) |
| ZA (1) | ZA200209807B (no) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6716836B2 (en) | 2001-03-22 | 2004-04-06 | Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. | Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors |
| US6673791B2 (en) | 2001-07-30 | 2004-01-06 | Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. | Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors |
| US6706706B2 (en) | 2002-03-27 | 2004-03-16 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors |
| US6806265B2 (en) * | 2002-05-16 | 2004-10-19 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors |
| US6759533B2 (en) * | 2002-06-28 | 2004-07-06 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | Process and intermediates for making non-nucleoside HIV-1 reverse transcriptase inhibitors |
| US7642277B2 (en) | 2002-12-04 | 2010-01-05 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors |
| JP2006511538A (ja) * | 2002-12-16 | 2006-04-06 | ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤（ｎｎｒｔｉ）とプロテアーゼ阻害剤などのシトクロムｐ４５０の阻害剤とを含む組み合わせの使用 |
| EP1610782A1 (en) * | 2003-03-27 | 2006-01-04 | Boehringer Ingelheim International GmbH | Antiviral combination of a dipyridodiazepinone and a further antiretroviral compound |
| US7309700B2 (en) * | 2004-04-02 | 2007-12-18 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Crystalline forms of 5,11-dihydro-11-ethyl-5-methyl-8-{2-{(1-oxido-4-quinolinyl)oxy}ethyl}-6H-dipyrido[3,2-b:2′,3′-e] [1,4]diazepin-6-one |
| US20060025480A1 (en) | 2004-08-02 | 2006-02-02 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Benzoic acid derivatives as non nucleoside reverse transcriptase inhibitors |
| US7151174B2 (en) * | 2004-11-05 | 2006-12-19 | Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg | Process for making a non-nucleoside HIV-1 reverse transcriptase inhibitor |
| US7282583B2 (en) * | 2005-12-05 | 2007-10-16 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Process for making 5,11-Dihydro-11-ethyl-5-methyl-8{2-{(1-oxido-4-quinolinyl)oxy}ethyl}-6H-di pyrido[3,2-b:2′,3′-e][1,4]diazepin-6-one |
| EP2085390A1 (en) * | 2008-01-31 | 2009-08-05 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Labelled analogues of halobenzamides as multimodal radiopharmaceuticals and their precursors |
| KR20120034592A (ko) * | 2009-04-09 | 2012-04-12 | 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 | Ｈｉｖ 복제의 저해제 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5366972A (en) * | 1989-04-20 | 1994-11-22 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | 5,11-dihydro-6H-dipyrido(3,2-B:2',3'-E)(1,4)diazepines and their use in the prevention or treatment of HIV infection |
| US5705499A (en) * | 1995-10-06 | 1998-01-06 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | 8-arylalkyl- and 8-arylheteroalkyl-5,11-dihydro-6H-dipyrido 3,2-B:2',3'-e! 1!diazepines and their use in the treatment of HIV-1 infection |
-
2001
- 2001-05-30 TW TW090113049A patent/TWI270547B/zh not_active IP Right Cessation
- 2001-06-12 US US09/879,447 patent/US6420359B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-12 BR BR0102377-2A patent/BR0102377A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-06-13 UY UY26767A patent/UY26767A1/es not_active Application Discontinuation
- 2001-06-14 ES ES01949124T patent/ES2261433T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-14 AT AT01949124T patent/ATE322492T1/de active
- 2001-06-14 AU AU2001270370A patent/AU2001270370B2/en not_active Ceased
- 2001-06-14 EE EEP200200690A patent/EE200200690A/xx unknown
- 2001-06-14 IL IL15281901A patent/IL152819A0/xx unknown
- 2001-06-14 NZ NZ523549A patent/NZ523549A/en unknown
- 2001-06-14 CA CA002411766A patent/CA2411766C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-14 UA UA2003010387A patent/UA74834C2/uk unknown
- 2001-06-14 AU AU7037001A patent/AU7037001A/xx active Pending
- 2001-06-14 WO PCT/CA2001/000890 patent/WO2001096338A1/en active IP Right Grant
- 2001-06-14 EA EA200201255A patent/EA005598B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-06-14 YU YU94202A patent/YU94202A/sh unknown
- 2001-06-14 CZ CZ20024114A patent/CZ20024114A3/cs unknown
- 2001-06-14 EP EP01949124A patent/EP1294720B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-14 PL PL36037001A patent/PL360370A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2001-06-14 HU HU0301105A patent/HUP0301105A2/hu unknown
- 2001-06-14 DE DE60118560T patent/DE60118560T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-14 DK DK01949124T patent/DK1294720T3/da active
- 2001-06-14 MX MXPA02012205A patent/MXPA02012205A/es active IP Right Grant
- 2001-06-14 SK SK1772-2002A patent/SK17722002A3/sk not_active Application Discontinuation
- 2001-06-14 PT PT01949124T patent/PT1294720E/pt unknown
- 2001-06-14 CN CNB018112692A patent/CN1178939C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-14 KR KR1020027017173A patent/KR20030017540A/ko active IP Right Grant
- 2001-06-14 PE PE2001000560A patent/PE20020083A1/es not_active Application Discontinuation
- 2001-06-14 JP JP2002510480A patent/JP3923894B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-15 AR ARP010102870A patent/AR028958A1/es unknown
- 2001-06-15 MY MYPI20012820A patent/MY130375A/en unknown
- 2001-07-07 SA SA01220202A patent/SA01220202B1/ar unknown
-
2002
- 2002-12-03 ZA ZA200209807A patent/ZA200209807B/en unknown
- 2002-12-03 BG BG107348A patent/BG107348A/bg unknown
- 2002-12-05 NO NO20025844A patent/NO323830B1/no unknown
- 2002-12-13 HR HR20021003A patent/HRP20021003A2/hr not_active Application Discontinuation
-
2004
- 2004-01-21 HK HK04100468A patent/HK1057558A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO323830B1 (no) | Forbindelser, anvendelser derav samt inhibitor for HIV-replikasjon og farmasoytisk preparat | |
| US5908841A (en) | 5,11-dihydro-6H-dipyrido 3,2-b:2',3'-e!azepine-6-ones and their use in the prevention of treatment of HIV infection | |
| EP0767172B1 (en) | 8-Arylalkyl- and 8-arylheteroalkyl-5, 11-dihydro-6H-dipyrido-[3,2-b:2', 3'-e][1,4]diazepines and their use in the prevention or treatment of HIV infection | |
| EP1554276B1 (en) | Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors | |
| EP0804438A1 (en) | Tricyclic benzazepine vasopressin antagonists | |
| EP1781667B1 (en) | Benzothienopyridines for use as inhibitors of eg5 kinesin | |
| AU2001270370A1 (en) | Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors | |
| CA2412596C (en) | Cyclic gmp-specific phosphodiesterase inhibitors | |
| EP0745083B1 (en) | 2-HETEROARYL-5,11-DIHYDRO-6H-DIPYRIDO [3,2-b:2',3'-e][1,4]DIAZEPINES AND THEIR USE IN THE PREVENTION OR TREATMENT OF HIV INFECTION | |
| EP1373267B1 (en) | Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors | |
| EP1655300A1 (en) | Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors | |
| EP1495024B1 (en) | Dipyridodiazepinones as reverse transcriptase inhibitors | |
| US5837704A (en) | 2-heteroaryl-5,11-dihydro-6H-dipyrido 3,2-B:2',3'-E! 1,4!diazepines and their use in the prevention or treatment of HIV infection | |
| MXPA96003359A (en) | 2-heteroaril-5,11-dihydro-6h-dipiride [3,2-b: 2 ', 3'-e] [1-4] -diazepines and their use in the prevention or treatment of infection of |