TW514727B - Diagnostic test carrier with multi-layer test field - Google Patents

Description

514727 經濟部中央橾準局員工消費合作社印袈 A7 __ B7_五、發明説明（1 ) 本發明係關於一種使用測試載件裡所含的試劑系統從 全部血液測定分析物的診斷測試載件，該測試載件包括具 測試區的顏色產生試劑，該測試區包括一血樣品置放其上 的樣品敷置位置以及一在其上由於分析物與試劑系統發生 反應所以發生光學可偵測之變化的偵測端，並且以存在於 樣品裡之紅血球沒有到達偵測位置的方式設計。除此之外 *本發明係關於一種利用本發明診斷測試載件從全部血液 測定分析物的方法。 所謂以載件爲封的測試（carrier-bound tests)通 常用於體液，尤其是血液裡組份定質及定量分析測定。在 這些測試裡，試劑係存在於與樣品接觸之固體測試載件的 適當薄膜層之上或之內。液體樣品和試劑反應，產生可偵 測顏色變化的訊號，該顏色變化可用視覺或用儀器，通常 利用反設光度計分析。 測試載件時常爲測試長條的形式，其基本上係由塑膠 材料做成的加長負載層以及裝設在其上包括一或多偵測層 的測試區所組成。然而，也知道測試載件爲小四邊形或矩 形箔。 以載件爲封的測試以其容易處理的特性爲區別。因此 非常地遺憾，大部分先前技術之測試載件裡全部樣品液體 血液不能夠以全部血液形式直接地使用。相反地，必需將 紅血球分離以獲得無色血漿或血清。這通常利用離心沉澱 法達成。然而，這需要另外的處理步驟，該步驟需要相當 大量的血液和複雜裝置。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項 d填寫本頁) 裝·

、1T 螬 -4 - 514727 經濟部中央標準局員工消費合作社印装 A7 _B7__五、發明説明（2 ) 因此已經有許多人嘗試得到使分析測定能夠從血液直 接地實行，的測試載件。可以區別基本不同的溶液。 第一種作法裡，顔色的變化係在也塗敷樣品之測試區 同一端以視覺評估或經由裝置評估。該情況裡，測試區的 結構係爲來自樣品的分析物經由測試區表面到達試劑，然 而紅血球爲在原處。在定義的時間週期之後，將血液樣品 從測試區的表面擦走或洗掉，並且觀察顏色的變化。如此 的測試載件例子描述在美國一 A— 3，630，957和 ΕΡ-Α-0 2 1 7 246。 第二種作法裡，樣品係塗敷在測試區的一端（樣品塗 敷端），而在另一端（偵測端）上做顏色的變化。該程序 的一個主要優點係爲血液不必要擦掉或洗掉。如此的測試 載件因此也稱做非擦拭式測試載件。 省略擦拭不但除去一個沈悶的操作步驟而且除去當血 液應該擦掉的時間不正好時可能產生的錯誤。另一方面， 該作法特別地難達成。需要紅血球過濾器，一方面可靠地 保有血液的強烈著色組份，而另一方面使分析物完全地且 夠快速地通過。已經證明極難發現滿足這些需求的測試區 結構。 從EP—A—〇 045 476已知，玻璃纖維用 來隔離測試載件上的血清或血漿。該溶液可以通用，但是 必需以適當的方式將玻璃纖維層安裝在測試載件之上。這 造成測試載件的結構相當複雜，而且製造方法複雜。除此 之外，玻璃纖維層吸收之後無法供偵測層利用的液體。這 本紙張尺度遑用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ' ' (請先閲讀背面之注意事 裝丨. 寫本頁 訂 •-11^ 514727 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 _____B7_五、發明説明（3 ) 表示需要相當大的樣品體積。 EP^A - 〇 3 0 2 287顯示一種具有分層結 構的測試區，該測試區係藉由在面對樣品塗敷端的底層上 使含有顏色形成試劑的偵測層液體分層而製得。底層包含 聚合的薄膜形成體，矽藻土和顏料。偵測層包含聚合的薄 膜形成體*該聚合的薄膜形成體在液體塗覆期間部份地透 ^入底層並且形成保有紅血球的轉移區。然而從這些例子可 以看出，包含顏料的薄膜層比偵測層1 0倍厚。這對此等 測試區的體積需求上相當地衝突。因爲只有包含顏料的薄 膜層和偵測層之間的轉移區視爲紅血球滯留區，所以在偵 測層充滿液體之前（包含顏料的薄膜層）相當大的體積必 須充滿液體* 因爲分離紅血球先安裝啓用的NW測試載件無法在各 方面展現滿意的性質，所以此等商業模式的測試載件省略 完全將紅血球分離的步驟，而且利用二種不同波長測量的 測定技術來補償濃紅染色的干擾。這使儀器評估變得非常 複雜，而且顏色的變化不能夠以視覺偵測。 本發明之目的係提供一種可以容易製造而且可以容易 且快速地從全部血液測定分析物的測試載件。該測定應該 只需要最小可能體積的血液，然而是與血細胞比#無關。 —個簡蜇的測定應誃钳栝曰視郭宏分析物澹度的可能性。 該目的係藉由申請專利範圍更詳細苗述其特徵的本發 明內容達成。 本發明之目的係爲一種藉由使用含於包括顔色形成試 (請先閱讀背面之注意事

訂

Jm. 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央櫺準局貝工消費合作社印裝 514727 A7 __B7 _ 五、發明説明（4 ) 劑的測試載件內的試劑系統從全部血液測定分析物的診斷 測試載件，.。測試載件包括一測試區，該測試區包括一塗敷 血樣品的樣品敷置端以及一在其上由於分析物與試劑系統 發生反應所以發生光學可偵測之變化的偵測端。存在於樣 品裡之紅血球沒有到達偵測端。根據本發明，測試區包括 一第一和第二薄膜層依此順序彼此疊置頂端地敷置在其上 的透明箔。重要的是位於透明箔上的第一層散射的光比置 於其上的第二層少得多。透明箔的未塗覆端稱爲偵測端， 而與置於第一層上之第二層相反端的第二層端稱爲樣品敷 端。 除此之外，本發明係關於一種利用本發明診斷測試載 件從全部血液測定分析物的方法。因爲該血液塗敷在測試 區的樣品敷置端並觀察偵試端的顏色變化，所以顏色形成 的強度係爲一項測定血液樣品裡分析物數量的測量。 本發明診斷測試載件的薄膜層細從聚合之薄膜形成體 的分散液或乳膠製得。分散液薄膜形成體包含不能溶解於 載件液體（通常是水）的顯聚合物粒而且細微地分散在載 件液體裡。如果液體在薄膜形成期間蒸發掉*那麼那些粒 子彼此更靠近而且細微地接觸。該方法裡所發生大的力量 以及薄膜形成時伴隨而得之表面能量裡的粒子係造成顆粒 生長成幾乎完全靠近的薄膜層。二者擇其一地，也可以使 用溶於溶劑之薄膜形成體的乳膠。經溶解的聚合物係在不 能相混於溶劑的載件液體裡乳化。 聚乙烯酯，聚醋酸乙烯酯，聚丙烯酸酯，聚異丁烯酸 本紙悵尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項寫本頁) 訂 514727 經濟部中央樣準局貝工消費合作社印製 A7 B7__五、發明説明（5 ) *聚乙烯醯胺，聚醯胺和聚苯乙烯特別適合當做此等薄膜 形成體的聚合物。除此之外，混合聚合物的均 聚物也是適當的，例如丁二烯、苯乙烯或順丁烯二酸酯。 將二個所謂薄膜層置於根據本發明之診斷測試載件的 測試區裡透明箔之上。因爲如此，那些塑膠箔變成不能滲 入液體中。聚碳酸酯箔已經證明是特別地適合。 那二個薄膜層可以從包含相同聚合薄膜形成體的塗料 化合物製得，或其可以從包含不同聚合薄膜形成體的塗料 化合物製得。 然而，第一層包含泡張劑和視需要地包含弱散射光填 充劑，第二層需要泡脹劑和無論如何至少一強散射光的顏 料。除此之外，第二層也包含少量非多孔型填充劑和多孔 型填充劑（例如矽藻土）而不致於變成紅血球可浸入。顏 料對矽藻土的重量比應該爲至少2:1。 藉由加入膨脹良好的泡脹劑（也就是在溶於水中時增 加其體積的物質），不但獲得樣品液體可以相當快速穿透 而且具有良好紅血球以及另外也有血液顏料分離性質，僅 管泡脹劑有這般開孔（opening)效應。那些泡脹性質應 該是如此的好以致於測試顏色形成的測試-例如葡萄糖測 試反應-主要根據樣品液體經過薄膜層的滲透性而定，光 學可偵測反應係在最多一分鐘後可測量。特別適合的泡脹 劑已經證明是甲基乙烯醚順丁烯二酸酐共聚物、黃原膠和 甲基乙烯醚順丁烯二酸共聚物。 政藻土（kieselguhr)也就是已知的砍藻土（ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項㈣填寫本頁) 裝. 寫太 訂 4 -8 - 514727 A7 B7 經濟部中央樣率局員工消费合作社印裝 請 先 閲 讀 背 & 之 注 意 事 項 再 旁 五、發明説明（6 ) d i atomaceous earth ) ° 矽藻類型矽酸主幹所形成 具有平均粒子直徑5 - 1 Pabisch公司所賣型號7 強散射光的顏料數量係爲 層至少2 5重量％。因爲 對於薄膜層的光學性質而 膜層具有不同的填充劑和 第一薄膜層應該不是 近水之折射率的填充劑。 經證明特別地適合該目的 特別地較佳。其具有6 6 Al2〇3，7 重量 ％Na 物。特別較佳的主要粒子 米。 根據本發明，第二層 言，第二薄膜層裡顏料的 最好使用二氧化鈦。具有 米的粒子已經證明是特別 理的二氧化鈦類型係相當 藉由形成顏色來偵測 此技藝者所知。試劑系統 裡。然而，也可能將試劑 。顏色產生試劑系統係有 這些係爲已經從在各地方挖掘之 的沉積物。最好使用的矽藻土係 5微米，這些值係由德國慕尼黑 15雷射測粒器測定。第二層裡 相對於測試區之乾立即可用的雙 弱散射光填充劑和強散射光顏料 言是必要的，所以第一和第二薄 顏料。 未包含填充劑就是包含折射率接 二氧化矽酮，矽酸鹽和矽酸鋁已 。商品名Traspafill®砍酸鈉銀 重量％ Si02，26重量％ 2〇及1重量％s 03的平均組成 平均粒子大小爲大約0. 0 6微 應該非常強烈地散射光。理想而 折射率應該至少是2. 5。因此 平均直徑大約0. 2到0. 8微 地有利。銳鈦礦改良物裡容易處 尤其地較佳。 特別分析物的試劑系統係爲熟習 的所有組份可能位於一個薄膜層 系統的組份在兩薄膜層之中分離 利地至少部份地置於第一薄膜層 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標準局員工消费合作社印装 514727 A7 _B7____ 五、發明説明（7 ) 本發明的範圍裡顏色的形成應當了解的是不但從白色 變成著有顏色，而且是顏色的任何變化，如此顏色的變化 當然特別地較佳，其係與最大吸收波長（λΠ13 X)的最 大可能變化有關。 爲了要將本發明診斷測試載件裡的測試區最佳化，已 經證明當兩薄膜層確實包含非血紅素化（haemolyzing) 濕潤劑時爲特別有利。中性，也就是未帶電價的潤濕劑對 該目的而言爲特別較佳。N -辛醯基一 N -甲基一葡醯胺 爲最特別較佳。 爲了要製造本發明診斷測試載件的一個測試區，個別 的薄膜層每個係從製造連續地從該組份的均勻分散液製得 。爲此，透明箔當做基底以形成第一薄膜層所用的塗料化 合物。在第一薄膜層所用的塗料化合物塗覆一特定薄膜層 厚度之後，將薄膜層乾燥。然後乾燥之後，第一和第二薄 膜層的厚度應該總共僅僅0· 20毫米，較佳爲僅僅 0. 12毫米，特別最佳爲僅僅0. 08毫米。乾的第二 薄膜層最好比乾的第一薄膜層厚大約2到5倍。 以該方式製造的測試區可以裝置在負載層上而可以較 好處理，這些材料考慮爲一種無法溶入要測定之液體的這 類材料層。這是所謂的非吸收材料，塑膠箔例如聚苯乙烯 、聚氯乙烯、聚酯、聚碳酸酯或聚醯胺爲特別地較佳。然 而，在矽酮或硬脂類可以當做疏水劑而硝基纖維或纖維素 醋酸酯可以當作薄膜形成劑的情況裡，也可以用赤水劑浸 ^紙張尺度逋用中國國家標準（CNS)A4規格（210χ297公釐) " -10 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 項再填办 514727 經濟部中夬橾準局員工消费合作社印裝 A7 __B7_五、發明説明（8 ) 漬例如木材、紙或厚紙板等吸收性材料或塗上一層防水薄 膜。金屬箔或玻璃也適合當做另外的負載材料。 爲了要測定在樣品液體裡偵測的分析物雖然目前情形 最好是所有的血液，源自血漿或血清還有其他水性液體的 樣品當然也可以測定，必需的是，在本發明的測試載件裡 觀察且測量顏色形成之測試區的偵測端經由負載層應該是 看得見的。這可以藉由透明負載層達成。然而，負載層具 有被測試區的偵測端覆蓋的穿孔也是可能的。偵測端然後 經由穿孔可看得見。在診斷測試載件的一個較佳具體實施 例裡，測試區的偵測端下負載層裡有一個孔，經由測試區 的偵測端可看得見。該孔具有比測試區的最小直線尺寸稍 小的直徑，使得在孔外面的測試區可以放在負載層上而且 可以附著其上。 由於測試區的結構，尤其是二薄膜層的性質不會使紅 血球穿透到偵測端，所以只需要非常小的體積來測定分析 物。當測試區具有5 X 6毫米大小的時候，3微升全部的 血液，舉例來說，係足以測定該液體裡的葡萄糖。爲了要 可靠地進行較大樣品體積大約1 5 - 2 0微生升的測試並 且避免液體從測試載件逸出，已經證明特別適合將測試區 併入本發明的診斷測試載件內，該測試載件包括一具安置 其上之測試區的負載層而且測試區被比測試區更大並附著 到測試區外面之負載層的網路覆蓋。本發明此等特別較佳 診斷測試載件的網路係爲親水性，但是唯獨不是毛細管活 性。由不能滲透樣品液體之材料製成的惰性封皮係以面積 ΐ紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ' -11 - (請先閲讀背面之注意事項為填寫本頁) 0 裝- 訂 514727 經濟部中央橾準局員工消费合作社印製 A7 B7五、發明説明（9 ) 在位於測試區上方的網路區域裡仍未塗敷樣品的方式，置 於那些沿伸超過測試區的網路面積，也就是不放在測試區 上的網路面積上。 根據本發明該特別較佳診斷測試載件的網路應該本身 不是毛細管活性或吸收性，以致於樣品液體儘可能完全地 爲測試區利用。那些網路已經證明是適合使水能夠在垂直 浸入水裡時於網路中升高小於2毫米。親水性的粗網孔單 紡紗的織物較佳地當做網路使用。爲此，織物材料本身可 以是親水性或可以藉由例如用潤濕劑處理變成親水性。聚 酯在用濕潤劑處理後使用該材料做成之網路的情況裡特別 較佳地當做網路材料。 網路的厚度必定是使置於上的封皮和位於其下的薄膜 層液體彼此相距某距離，該距離足以使剩餘液體藉由毛細 管力量經過飽和測試區與網路的填充網目抽入封皮下的面 積並且遠離樣品敷置端。通常5 0到4 0 0微米的網路厚 度對該目的而言是有利的。 網路必須具有夠大的網孔寬度*使得液體能通過測試 區之上的網路。網路的本質係爲液體不會水平蔓延網路表 面之上，但是經過測試區之上的網路垂直流動。 在根據本發明的特別較佳診斷測試載件裡’先前描述 涵蓋測試區的網路下面測試區更大。沿伸超過測試區的網 路部份係固定到負載層。可以藉由熟習此項技藝者所知的 方法黏著在測試載件技術區域裡。舉例來說’可以藉由熱 固化黏著劑或硬化冷固化黏著劑黏著。雙端黏著的長條也 $紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項_填寫本頁) 裝· 訂 .餚 -12 - 514727 A7 B7 五、發明説明（ίο ) 已經證明是有利 網路黏著到負載 接到負載層的網 充滿液體而飽和 成的膠帶已經證 連到負載層時的 別地有利。然後 連續平面裡及測 由不能滲透 的惰性封皮以覆 發明特別較佳診 稍微凸出超過測 試區的網路相當 蓋部份係稱爲樣 塑膠箔已經 網路具有不同的 可能明顯標記該 的。然而， 層係使毛細 路部份。該 時必當特別 明特別適當 試劑具有與 或多或少當 試區面積外 樣品’通常 蓋測試區外 斷測試載件 試區的面積 地部份仍是 品塗敷位置 證明當做封 顏色，例如 位置就‘是要 在所有的情況裡，重要的是將 管活性液體可能從測試區進入 毛細管活性液體傳送在測試區 是可能的。天然或合成橡膠製 該處理目的。當用來將網路接 測試區相同的厚度時係相當特 做取間隔的裝置以保持所有在 面的網路。 是不透水及不吸水之材料做成 面之網路面積的方式置放在本 的網路上。理想而言，封皮也 。然而，無論如何涵蓋那些測 未被覆蓋的。網路的這個未覆 〇 皮是特別地有利。如果封皮和 白色和黃色或白色和紅色，則 測定的樣品液體應該塗敷的位 請 先 閱 讀 背 之 注 意 事 項 再 本 頁 經濟部中央樣準局貝工消費合作社印製 利用例如封皮上的一或幾個印刷的箭號，可以清楚地 應該放置或插入測定工具內的方向，即利用本發明診斷測 試載件尾端。 樣品塗敷端可以藉由輔以二個帶狀塑膠箔的封皮特別 簡單地達到，該封皮留下一未覆蓋的帶狀網路面積。封皮 所用的箔係接連到網路並視需要地連接到負載層。如果箔 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 一 13 514727 經濟部中央橾準局員工消費合作社印製 A7 __B7 _五、發明説明（11 ) 本身不黏的話，則熱熔融黏著劑或膠帶適合用來黏著。然 而，在任何的情形裡都必須小心，網路所形成的毛細管縫 隙仍在封皮之下，毛細管縫隙裡過量的樣品液體可能從具 液體飽和的測試區吸出。樣品塗敷端較佳地設置在負載層 裡可以觀察測試區裡訊號形成的穿孔上面。 爲了要進行利用本發明診斷測試載件從全部血液測定 分析物的方法，係將血液塗到測試區的樣品塗敷端，並且 觀察偵測端的顏色形成。造成時常發生糖尿病監視測量值 錯誤，即規則性控制糖尿病患者血中葡萄糖含量的原因至 今一直是樣品體積過小所致。在根據本發明具有測試區大 小大約5 X 6毫米的診斷測試載件裡，3微升全部血液對 於進行試驗結果的視覺評估已經是足夠的。由於測試區的 第二薄膜層散射光極強，相對地第一層散射光很弱的事實 ，從偵測端觀察到所形成的顏色彩度及顏色強度相當高。 這能夠使測定精確，僅管只是小樣品體積的少量分析物所 做的測量。 當然也可以輔以診斷測試載件藉由工具從全部血液分 析物測定分析物。爲了要儘可能正確的量化結果，也適合 採用如此的方法。爲此，較佳地連續或間斷地觀察偵測位 置的反射比以觀察顏色的變化。測試區之偵測端的反射比 測量係以測量系列的形式進行。當在連續測量之間的差值 一次或數次低於某值以下，則在額外定義的反應時間之後 視需要地終止測量。然後將測量系列的最後一次反射比數 值用來數值評估分析物濃度。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 4 •項再填· 裝. 訂 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格U10X297公釐） -14 - 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 514727 A7 B7 五、發明説明〇2 ) 因爲該方法使用精確的標準結束測量系列而且不需要 樣品塗敷的時間點，所以樣品可以也塗在測定工具外面。 在該情況裡，在塗敷樣品之後足以在最大的允許時間範圍 內將長條插入工具裡。 在本發明的情況裡，測定的方法在2 0到超過6 0 % 血細胞比容值的範圍內未受影響，而且因此當使用工具根 據上述程序進行測定時稱爲血細胞比容無關性。在血細胞 比容無關性可以讀取之前，必須視覺測定2 - 3分鐘。 圖1所示經過本發明診斷測試載件的測試區（1 )的 剖面圖顯示第一薄膜層（3)敷置其上的透明箔（2)。 第一薄膜層（3 )被第二薄膜層（4)覆蓋。製造本發明 測試載件的測試區（1 )也就是將透明箔（2 )塗以第一 薄膜層（3 )所用之濕塗料化合物接著將已乾的第一薄膜 層（3 )塗以第二薄膜層（4 )所用之濕塗料化合物造成 這些薄膜層彼此完全平面地連接而且第一薄膜層（3 )在 透明箔（2 )之上。將要測定其含量的血液塗敷在本發明 測試載件之測試區（1 )的樣品塗敷端（5 )。當分析物 存在於樣品中時，可以從本發明測試載件之測試區（1 ) 的偵測端（6 )觀察顏色的形成，視樣品裡分析物數量而 的強度。 圖2所示的立體圖及圖4所示的剖面圖裡本發明特別 較佳診斷的測試載件（7 )係爲測試長條的形式。在負載 層（8)上設有被較大網路（9)覆蓋的測試區（1)。 網路（9 )經由取間隔的裝置（1 5 )連接到緊鄰測試區 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 一 15 - (請先閲讀背面之注意事項#'填寫本頁)

514727 A7 __ B7 五、發明説明（i3 ) (1)的負載層（8)。這些取間隔的裝置（15)可以 是熱熔融黏性區域或將網路（9 )固定在負載層上的兩面 式膠帶（8)。理想而言，那些取間隔的裝置（15)大 約與測試區（1 )相同的厚度。當做封皮（1 〇 )的這些 薄膜層係連接到負載層（8 )和網路（9 )。其係以涵蓋 沿伸超過測試區（1 )之網路（9 )區域的方式安置。那 些封皮 （10) 也些微地沿伸超過測試區（1)。然而 ，其空出覆蓋測試區（1 )之網路（9 )大部份。該區域 係爲樣品塗敷位置（12)。欲測定的樣品液體（17) 係塗敷於此。定位孔（1 8)在藉由例如反射光度計的裝 置測量的情形裡能使測試長條保持在裝置的精確的預定位 置。這可以藉由例如伸入定位孔（1 8)內因而將測試載 件（1 7)保持在預定位置的插梢達成。左封皮（1 0) 包含指示使用者測試載件（7)哪一端應放置或插入測量 裝置的印刷箭號。 經濟部中央樣準局員工消費合作社印装 圖5係顯示圖2和圖4所示本發明特別較佳診斷測試 載件的剖面圖。該圖形意欲閨明如何測定液體樣品裡分析 物，例如全部血液裡葡萄糖的方法如何進行。對此等測定 而言，血液係塗敷在網路（9 )的樣品塗敷位置（1 2 ) 。液體垂直地穿透網路（9 )到測試區（1 )之上。就血 液當做樣品液體而言’紅血球仍保持在原處’然而血漿和 血清子則到達測試區（1 )的薄膜層（3 ’ 4 )。如果已 經塗敷充份之全物血液形式的樣品液體’則血漿或血清經 過測試區（1 )全部區域散佈在第一和第二薄膜層（3， 一 16 - 本紙伕尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210χ297公釐） 514727 A7 B7 經濟部中央橾準局員工消费合作社印装 五、發明説明（η ) 4)裡的測試區（1)裡。 則測試區< 1 )可能甚至抽 ，因爲網路（9)本身不是 介質的情況裡，首先填滿在 間隙空間，接著填滿封皮（ 使這些毛細管間隙適當地作 份地與網路（9)之下的測 (1)的偵測端可以經由穿 根據圖2，4和5之診斷測 圖3。如果分析物存在於所 (1)的偵測端（6)顏色 樣品液體裡分析物數量之測 施例進一步地更詳細說明。 實施例1 根據本發明診斷測試載件的製法 根據圖 2的測試載件係藉由下列操作步驟製造： 將一個5 毫米寬兩面式膠黏帶（聚酯載件和合成橡 膠黏著劑）裝設在包含二氧化鈦的聚酯負載層之上。該合 成物在孔之間距6毫米用打洞接合，以製得那些測定的孔 。然後將兩面式膠帶的保護紙去除。 由2個薄膜層所組成的測試區係依下列各項製得： A ·將下列組份一起加入下列組成物至燒杯中當做純 物質或原料溶液並攪拌混合： 如果液體體 氣乾燥置於 毛細管活性 測式區（1 1 0 )下的 用，封皮（ 試區（1 ) 孔（1 3 ) 試載件底面 塗敷的樣品 將會改變。 量的強度。 積即使是非 其上的網路 。在大液以 )上的網路 毛細管間隙 1 0 )必需 面積重疊。 觀察。以該 的上視圖係 液體中，則 顏色形成視 本發明係以 常小，(9 ) 體積的 (9 ) 〇爲了 至少部 測試區 觀點， 顯示在 測試區 爲一項 下列實 請 先 閲 讀 背 面 之 注 意 事項， 旁 裝 訂 螬 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 17 - 514727 A7 B7 五、發明説明（15 ) 經濟部中央橾隼局員工消費合作社印裝 水： 8 2 0 .0克 檸檬酸單水合物Ζ 2 .5克 氯化鈣二水合物： 0 .5克 氫氧化鈉： 1 4克 黃原膠： 3 .4克 氯化四乙銨： 2 0克 Ν—辛酸基一Ν—甲基一葡酸胺： 2 .1克 聚乙烯基吡咯酮（MW 25 0 0 0 ) ； 3 .5克 Transpafill® (砂酸鈉銘） ； 6 2 1克 聚乙烯基丙酸酯分散液 (水中5 0重量％ ): 6 0 .8克 雙一（2 —羥乙基）一（4 一 羥基亞胺 基環己一 2，5 —二烯啶）- -氯化銨 ·· 1 .2克 2，18 —磷鉬酸六鈉鹽： 1 6 1克 吡咯瞎啉-對苯二酮： 3 2 毫克 來自不動菌屬的葡萄糖去氫 1 • 7 M U ca1 coaceticus，EC 1 . 1 · 9 9.1 7 ： (： 2 - -4克） 1 一己醇： 1 .6克 1 一甲氧基2 —丙醇： 2 0 .4克 將全體物質用N a 0H調到酸鹸值大約6，然後將 8 9克/平方公尺的面積重量塗覆在1 2 5微米厚的聚碳 酸酯箔上並且乾燥。 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項填寫本頁) 裝-

、1T .讀 -18 - 514727 A7 B7 五、發明説明（16 ) B.將下列組份一起加入下列組成物至燒杯中當做純 物質或原料溶液並攪拌混合： 水： 5 7 9 · 7克 氫氧化鈉： 3 . 4克 Gantrez® (甲基乙烯醚順丁烯二酸 共聚物）： 1 3 . 8克 N —辛醯基一 N —甲基一葡醯胺： 3 氯化四乙銨： 聚乙烯基吡咯酮（MW 二氧化鈦： 矽藻土 ： 聚乙烯基丙酸酯分散液 (水中5 0重量％ ): 3 . 6克 9 · 7克 2 5 0 0 0 ) 2 0 . 2 克 17 7. 1 克 5 5. 3 克 (請先閱讀背面之注意事^^填寫本頁) 2 8 —磷鉬酸六鈉鹽： 六氛基鐵酸鉀（I I I 1 一己醇： 1 一甲氧基2 —丙醇： 經濟部中央樣準局員工消費合作社印裝 7 0 . 6 克 4 4 · 3 克 0 · 3克 1 · 6克 2 0 · 4 克 約6，然後依A 塗覆在1 2 5微 將全體物質用N a OH調到酸鹸值大 所述地將1 0 4克/平方公尺的面積重量 米厚的聚碳酸酯箔上並且乾燥。 將此方式所得之5毫米寬長條的偵測 黏在負載層之上，該負載層在已打洞的兩 箔端。 當做取間隔裝置的兩面式膠帶（P V C載件和天然橡 層正好適合並且 面式膠帶上具有 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -19 - 514727 A7 B7 五、發明説明（Π ) 膠黏著劑）黏在偵測層的兩端上並直接與偵測層接合。在 本發明的實施例裡，取間隔的裝置爲6毫米寬而其他爲9 毫米寬。接著將兩面式膠帶的保護箔去除。 用潤濕劑浸漬的黃色單絲粗網目聚酯織物Scrynel PE 280HC (瑞士魯契林 I ZUrcher Beuteltuchfabrik# Riischlikon)係放置在該化合物結構 上並施壓黏緊。 以完全覆蓋取間隔裝置並且仍然至少稍微與反應區域 重疊的方式，將二個單面式膠帶（P V C載件和天然橡膠 黏著劑）黏在當做封皮的黃色網之上。這完成膠帶材料。 將膠帶材料剪成6毫米寬的測試載件，使測定孔在測 試載件的中央。 眚施例2 根據本發明測試載件的血細胞比容無關性 得自實施例1的測試載件可以使用反射光度計測量。 視爲一項顔色強度測量的反射比值在得到校正曲線時可以 轉換成葡萄糖濃度。如果使用％相對反射比'，則係指乾 測試載件之上的反射比。 A.校正曲線係藉由測量許多不同葡萄糖濃度的靜脈 血液樣品而得。用參考方法測定這些靜脈血液樣品的反射 比值和葡萄糖濃度可以建立出校正曲線。 在校準變髖1裡，將10微升靜脈血液塗敷在根據實 施例1的測試載件並在2 1秒之後測量反射比。校正曲線 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事_ 丨 寫本頁 經濟部中央橾準局員工消费合作杜印裝 -20 - 經濟部中央橾準局員工消費合作社印装 514727 A7 B7 五、發明説明（18 ) 1(圖6)係從10個測試載件的算術平均反射比及血液 樣品的參考值藉由回歸計算而得。 在校準變體2裡，將1 0微升靜脈血液塗敷在根據實 施例1的測試載件並在3 0秒之後測量反射比。校正曲線 2 (圖7)係從10個測試載件的算術平均反射比及血液 樣品的參考值藉由回歸計算而得。 在校準變體3裡，將1 0微升靜脈血液塗敷在根據實 施例1的測試載件並在每隔3秒測量反射比。一旦反射比 差值連續兩次小於0 . 3，則終止測量並反射比值用來做 評估。校正曲線3 (圖8)係從10個測試載件的算術平 均反射比及血液樣品的參考值藉由回歸計算而得。 在校準變體4裡，也將1 0微升靜脈血液塗敷在根據 實施例1的測試載件並在每隔3秒測量反射比。一旦反射 比差值連續兩次小於0 . 9 *則終止測量並反射.比值用來 做評估。校正曲線3 (圖8)係從10個測試載件的算術 平均反射比及血液樣品的參考值藉由回歸計算而得。 B.就測量變體1而言，將10微升靜脈血液塗敷在 根據實施例1的測試載件並在21秒之後測量反射比。使 用根據圖6的對應校正曲線，將個別反射比轉換成葡萄糖 濃度。從1 0個測試載件的算術平均濃度及血液樣品的參 考值測定與精確度的偏差值，並顯示在表1。 就測量變體2而言，也將1 0微升靜脈血液塗敷在根 據實施例1的測試載件並在3 0秒之後測量反射比。使用 根據圖7的對應校正曲線，將個別反射比轉換成葡萄糖濃 I紙張尺度適用中國國家橾準（CNS ) A4规格（ 210X297公釐） ~ "" -21 - (請先閲讀背面之注意事3填寫本頁) 裝·

«I 514727 A7 _ B7 _ 五、發明説明（19 ) 度。從1 0個測試載件的算術平均濃度及血液樣品的參考 值測定與精確度的偏差值，並顯示在表2。 就本發明的測量變體3而言，也將1 0微升靜脈血液 塗敷在根據實施例1的測試載件並每隔3秒之後測量反射 比。一旦反射比差值連續兩次小於〇 . 3，則終止測量並 反射比值用來做評估。使用根據圖8的對應校正曲線，將 個別反射比轉換成葡萄糖濃度。從1 〇個測試載件的算術 平均濃度及血液樣品的參考值測定與精確度的偏差值，並 顯τκ在表3。 就本發明的測量變體4而言，也將1 〇微升靜脈血液 塗敷在根據實施例1的測試載件並每隔3秒之後測量反射 比。一旦反射比差值連續兩次小於〇 · 9，則終止測量並 反射比值用來做評估。使用根據圖9的對應校正曲線，將 個別反射比轉換成葡萄糖濃度。從1 〇個測試載件的算術 平均濃度及血液樣品的參考值測定與精確度的偏差值，並 顯示在表4。 圖式簡單說明 本發明係概要地說明於圖1 一 9。 圖1係顯示根據本發明診斷測試載件之測試區的剖面 圖。 圖2係顯示根據本發明特別較佳診斷測試載件的立體 視圖。 圖3係顯不根據圖2之本發明診斷測試載件底面的上 視圖。 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） "' ---- ~ 22 - 衣-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、11 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 514727 經濟部中央橾準局員工消费合作社印製 A7 __B7_五、發明説明（2〇 ) 圖4係顯示根據圖2之本發明診斷測試載件沿A-A 軸的剖面圖。 圖5係顯示圖4之剖面圖的部份放大視圖 圖6 — 9係顯示進一步闌明實施例2的校正曲線1 一4。 圖形所用的參考數字具有下列各項意義。 1 測試區 2 透明箔 3 第一層 4 第二層 5 樣品塗敷端 6 偵測端 7 診斷測試載件 8 負載層 Θ 網路 I 0 封皮 II 沿伸超過測試區的網路面積 12 樣品塗敷位置 13 穿孔 14 測試區的膠帶 1 5 取間隔的裝置 16 活性縫隙 17 樣品液體 18 定位孔 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） " -23 - (請先閲讀背面之注意事^!^填寫本頁) 裝· 訂

•I 514727

A B7 經濟部中央樣準局員工消费合作社印製 五、發明説明（21 ) 表1:測置變體1的血細胞比容相關性 具30X血細胞比容的血液 具57«血細胞比容的血液 測得的 從校正曲線 與參考 測得的 從校正曲線 與參考 相對反 1計算所得 值的偏 相對反 1計算所得 值的偏 射比[56] 的濃度 差值[%] 射比[X] 的《度 差值[%] 50. 1 88. 5 7. 3 61.6 56. 3 -31. 5 44. 2 111.0 4. 9 54. 3 75. 3 -17. 1 37. 8 143. 2 3. 9 45. 8 104. 4 -20. 4 30. 1 197. 4 2. 9 36. 6 150.6 -20. 7 21.1 294.7 4. 6 28. 3 213· 8 -20. 5 (請先閲讀背面之注意事項3寫本頁) ，項 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -24 - 514727 A7B7 經濟部中央標準局員工消费合作社印袈 五、發明説明（22 ) 表2:測量變體2的血細胞比容相關性 具30%血細胞比容的血液 具57¾血細胞比容的血液 測得的 從校正曲線 與參考 測得的 從校正曲線 與參考 相對反 1計算所得 值的偏 相對反 1計算所得 值的偏 射比[%] 的濃度 差值[X] 射比[K] 的濃度 差值[«] 45. 6 85. 8 4. 0 54. 8 60. 5 -25. 6 39. 7 107. 6 1.6 48. 3 77. 6 -24· 5 33. 6 137. 2 -0.5 39. 0 110. 4 -15.8 25. 4 193. 4 0. 9 30. 0 159. 1 -16. 2 16. 3 295. 9 5. 0 22. 0 226. 3 -15. 9 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 514727 A7 B7 五、發明説明（23 ) 表3:調補根據本發明之測量變體3的血細胞比容相關性 經濟部中央櫺準局員工消費合作社印策 具30»血細胞比容的血液 具57%血細胞比容的血液 測得的 從校正曲線 與參考 測得的 從校正曲線 與參考 相對反 1計算所得 值的偏 相對反 1計算所得 值的偏 射比[幻 的澳度 差值[%] 射比[%] 的澳度 差值[幻 43. 3 82. 3 -0· 2 46. 7 72. 4 1. 0 37. 5 102. 6 -3· 0 40. 6 91.4 0. 69 30. 6 134. 1 -2. 7 29. 6 139. 4 6.2 10. 8 274. 6 -2· 5 11. 7 265. 8 -1.2 請 先 閱 讀 背 面 之 注 意 事

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 514727 A7B7 五、發明説明（24 ) 表4:調補根據本發明之測置變髏4的血細胞比容相關性 ·. 具30Χ血細胞比容的血液 具57¾血細胞比容的血液 測得的 從校正曲線 輿參考 測得的 從校正曲線 與參考 相對反 1計算所得 值的偏 相對反 1計算所得 值的偏 射比[X] 的濃度 差值[幻 射比[%] 的濃度 差值[幻 44. 2 84. 1 1.9 48. 8 70. 3 -2. 0 38. 6 104. 6 -1.2 42. 8 88. 8 -2.2 32· 2 133. 6 - 3· 1 33. 3 128. 1 -2· 4 22. 6 195. 5 2· 0 22. 8 194. 3 2. 3 13. 5 296. 4 5. 2 15.4 269. 7 0· 3 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央橾準局員工消費合作社印裝 20%血細胞比容測量變髖3和4的情況得到類似30¾血細胞比容 測量很小的偏差值。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Μ規格（210X297公釐） -27 -

Claims (1)

1. 514727 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 附件一（A ): 第8 6 1 1 G 0 7 9號專利申請案 中文申請專利範圍修正本 公

   (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 民國90年10月修正 .一種使用測試載件裡所含的試劑系統從全部血液 測定分析物的診斷測試載件’該 '測試載件包括具測試區的 顏色產生試劑’該測試區包括一血樣品置放其上的樣品敷 置位置以及一在其上由於分析物與試劑系統發生反應所以 發生光學可偵測之變化的偵測端，並且使存在於樣品裡之 紅血球沒有到達偵測位置，其中測試區包括一第一和第二 薄膜層依此順序彼此疊置頂端地敷置在其上的透明箔，其 中該第一和第二薄膜層皆含有泡脹劑，以及其中位於透明 箔上的第一薄膜層散射的光比置於其上的第二薄膜層少得 多，而且其中透明箔的未塗覆端稱爲偵測端，而與置於第 一薄膜層上之第二薄膜層相反端的第二薄膜層端稱爲樣品 敷置端。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2 ·如申請專利範圍第1項之診斷測試載件，其中第 二層包含一具折射率至少2 . 5，濃度至少是相對於已乾 雙薄膜層25重量％的顏料。 3 ·如申請專利範圍第1或2項之診斷測試載件，其 中薄膜層兩者皆從聚合薄膜形成體的分散液或乳膠形成， 該分散液或乳膠包括均勻分散液裡有聚合薄膜形成體和泡 脹劑，其中泡脹劑的膨脹能力是如此地高以致於光學可偵 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公着） 1 -1 _ 514727 A8 B8 C8 D8 _ 六、申請專利範圍 測的變化可以在最多1分鐘後於偵測端上測得。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 4 ·如申請專利範圍第1或2項之診斷測試載件，其 中第一薄膜層包含一矽酸鈉鋁而第二薄膜層包含二氧化鈦 當做顏料。 5 .如申請專利範圍第1或2項之診斷測試載件，其 中薄膜層兩者皆適合用來分離紅血球。 6 .如申請專利範圍第1或2項之診斷測試載件，其 中乾狀態的第一及第二薄膜層厚度總共的最大值爲〇. 2 毫米，較佳最大值爲0.12毫米而特別較佳最大值爲 〇 . 0 8毫米。 7 .如申請專利範圍第6項之診斷測試載件，其中第 二薄膜層約爲第一薄膜層2 - 5倍厚。 8 .如申請專利範圍第1或2項之診斷測試載件，其 中顏色形成試劑係置於第一薄膜層裡。 9 .如申請專利範圍第1或2項之診斷測試載件，其 中試劑系統的組份分佈在兩薄膜層之間。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1 〇 .如申請專利範圍第1或2項之診斷測試載件， 其中薄膜層不包含血紅素化潤濕劑。 1 1 .如申請專利範圍第1 〇項之診斷測試載件，其 中至少一薄膜層包含N -辛醯基一 N —甲基一蔔醯胺以充 作潤濕劑。 1 2 .如申請專利範圍第1或2項之診斷測試載件’ 其係用於測定得自 全部血液之分析物’其中將血液塗到 測試區的樣品塗敷端並且觀察偵測端的顏色形成’其中顏 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） " 一 一 2 一 514727 A8 B8 C8 _ D8 _ 六、申請專利範圍 色形成的強度係爲一項血液中分析物數量的測量。 1 3 .如申請專利範圍第1 2項之診斷測試載件，其 中連續地觀察或間隔地觀察偵測端的顏色形成。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1 4 .如申請專利範圍第1 3項之診斷測試載件，其 中係經由裝置以一系列測量顏色形成的測定來進行觀察， 而時間點係由連續測量顏色形成而一次低於預定絕對值或 差值來決定。 1 5 .如申請專利範圍第1 3項之診斷測試載件’其 中係經由裝置以一系列測量顏色形成的測定來進行觀察’ 而時間點係由連續測量顏色形成而數次低於預定絕對值或 差值來決定。 1 6 .如申請專利範圍第1 4項之診斷測試載件’其 中顏色的形成係以反射光度計測量，而測量系列的最後一 個測量值係用來數學評估分析物濃度。 1 7 .如申請專利範圍第1 5項之診斷測試載件’其 中顏色的形成係以反射光度計測量，而測量系列的® @ 個測量值係用來數學評估分析物濃度。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 一 3 -