經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 _B7 _ 五、發明説明（1 ) 發明範圍 本發明係關於經黏膜投服的肽藥劑，其中至少含有對 於生理活性肽於鼻黏膜或直腸黏膜上之吸收具促進作用的 吸收促進劑和具有血管擴張作用的化合物》更特定言之’ 本發明係關於在藉著經由黏膜而有效地吸收生理活性肽方 面有效之經黏膜施用的肽藥劑。 相關技藝 生理活性肽（如：胰島素和降血鈣素）常以注射方式 施用。但是，藉注射方式施用患者須忍受疼痛，而藥劑僅 須自行施用即可6 以口服方式施用生理活性肽時，因爲生理活性肽不容 易被消化道（包含以蛋白酶分解肽及通過肝臟的效應）所 吸收，所以並不實際。 最近，試圖要解決這些問題•使經黏膜施用藥劑與吸 收促進劑併用，以提高經由鼻黏膜或直腸黏膜之吸收。 報導中顯示已有人嚐試使經鼻施用藥劑與吸收促進劑 併用，這樣的經鼻施用藥劑使用具有表面活性劑作用的膽 酸鹽（如：牛磺膽酸鈉、膽酸鈉、去氧膽酸鈉、鵝去氧膽 酸鈉、賴胺酸鵝去氧膽酸鈉、甘膽酸鈉、甘去氧膽酸鈉和 賴胺酸牛擴膽酸）（Japanese Patent Unexamined Publication N0.5 9- 1 3 082 0 ' EP-A- 1 1 5,6 2 7 ' Japanese P a t e n t U n e x a m i n e d P u b 1 i c a t i ο η N o. 1 - 2 2 8 9 1 9 和 II. S. Patent 5, 1 49,537 )、陽離子界面活性劑（如：乙烯化氧 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐) · ---! I- Jn 士^^1 aa^i ^^1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 五、發明説明（2 ) A7 B7 溴： 基如 甲 ί 三劑 基性 蠛活 觫面 : 界 如子 ( 離 物陰 合 、 化 } 敍 } 級敍 四化 和溴 物基 合醯 縮碳 之二 胺十 鍵或 長銨 與化 經濟部中央標率局員工消費合作杜印製 烷基苯磺酸鹽' N -醯基-正烷基牛磺酸鹽和α —烯烴礦 酸鹽）或非離子性界面活性劑（如：聚氧伸烷基高碳醇醒 杏聚伸燒基院基酣）（Japanese Patent Unexamined Publication No.4-247034) 0 已有人提出之經黏膜施用藥劑所用之用以助於通過鼻 黏膜或直腸黏膜旳吸收促進劑如：甘草酸鹽（如：甘草酸 二銨和甘草酸鹼鹽（一鈉或二鈉或一鉀或二鉀鹽））（ Japanese Patent Unexamined. Publication No. 2-42027及No.3-5427)、環糊精（如：α-環糊精、泠一 環糊精、γ -環糊精、一或二甲基環糊精（a_、或 T — ) ) ( Japanese Patent Unexam i ned Publication No. 58- 1 8 9 1 1 8及 EP-A-No. 94157)、醯基爲〔8_18的〇一 酶基—L —肉毒驗（Japanese Patent Unexamined Publication No,6 3- 1 0 73 5 及 EP-A-No.2 1 5 6 9 7 )或螯合 劑、聚丙烯酸酯凝膠和癸酸鈉（II.S.Patent 4,476,1 1 6 ) ο 已經知道式〔1〕的氮雜環烷衍生物是優良的吸收促 進劑（Japanese Patent Unexamined Publication No. 62-2 3 826 1 )。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210 X 297公釐） _ 5 - 腊4385 9 5 A7 B7五、發明説明（3 ) C 〔 1〕 0
經濟部中央標準局員工消費合作社印製 其中，R是烷基，m是2 — 4的整數，η是1一 15的整 數，且η爲1 — 3時，R是具5_1 1個碳原子的烷基。 已經知道的吸收促進劑的例子如：膽酸和褐霉酸衍生 物（J.Japan. Diab, Soc_, 1〇_(2)，146-152，1 977; Proc. Natl. Acad. Sci., U. S. A. &2_( 2 1 ) , 74 1 9-7423, 1 9 8 5 和 Pharm Res_, 3_( 1 ), 52-57,1 992 )。但是這些藥 劑因爲會干擾吸收及引起局部過敏而不適用所以無法令人 滿意。據此，肽之優良的吸收性是實用的關鍵。 本發明欲解決的問頭 本發明係關於經黏膜施用的藥劑，此藥劑經由鼻黏膜 、口腔黏膜、肺黏膜、直腸黏膜、陰道黏膜、眼黏膜和消 化道黏膜吸收生理活性肽的效果良好，可以在不損及黏膜 的情況下達到足夠的藥效。 解決這些問題的方法 吾等致力於吸收性優良、安全且無副作用之經黏膜施 用之含生理活性肽的藥劑之研究，結果發現：已知的吸收 促進劑與血管擴張劑（如：鈣通道阻斷劑或前列腺素E 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ' -6 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印策 A7 B7五、發明説明（4 ) 、：L，4，3，6_二脫水—山梨糖醇_2，5_二硝酸 鹽（isosorbide di nitrate)、硝基甘油）併用可使吸收 性有意想不到的改善。本發明完全基於上述事實而完成》 本發明的目的是要提出一種經黏膜施用之含生理活性 肽的藥劑，此藥劑中包含生理活性肽和已知的吸收促進劑 及血管擴張劑。因爲完全不知道或者知道血管擴張劑在促 進經由黏膜吸收方面的作用極小，所以對這樣的結果感到 非常意外。 本發明所用的吸收促進劑是用以改變生物膜滲透性、 提高藥品吸收性和提高藥品之生物可利用性的一般物劑* 它有促進鼻黏膜或直腸黏膜吸收生理活性肽方面的作用。 在由鼻黏膜或直腸黏膜吸收生理活性肽胰島素方面，與不 含有此吸收促進劑者相比較|本發明所用的吸收促進劑使 吸收度提高2 0 0%以上，以5 0 0%以上爲佳。 吸收促進劑的例子是已經知道能夠促進鼻黏膜或直腸 黏膜吸收生理活性肽之能力的吸收促進劑。其例子爲具有 表面活性劑作用的化合物（如：牛磺膽酸鈉、膽酸鈉、去 氧膽酸鈉、鵝去氧膽酸鈉、賴胺酸鵝去氧膽酸鈉、甘膽酸 鈉、甘去氧膽酸鈉和賴胺酸牛磺膽酸）、陽離子界面活性 劑（如：乙烯化氧與長鏈胺之縮合物和四級銨化合物（如 :鯨蠟基三甲基溴化銨或十二碳醯基溴化銨））、陰離子 界面活性劑（如：烷基苯磺酸鹽、N -醯基-正烷基牛磺 酸鹽和α —烯烴磺酸鹽）、非離子性界面活性劑（如：聚 氧伸烷基高碳醇醚和聚伸烷基烷基酚）、甘草酸鹽（如： ^^1 ^^^1 ^n· In 1^1- I m - ^^^1 - n ml ml *一(^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） -7 - 附件二A:第8511 號專利申請案 中文說明書修正頁 A7 B7 (〇 民國87年10月修正 五、發明説明（ 甘革酸二銨和甘草酸鹼鹽（一鈉或二鈉或—鉀或二紳鹽） ) '環糊精（如-環糊精、；5 -環糊精、了一環糊精 、—或1一甲基化環糊精（at —、>5 —或了 一））'酸基爲 〇8_18的0 —醣基一 L 一肉毒鹼或蝥合劑、聚丙烯酸酯凝 膠和癸酸鈉* 其他較佳的吸收促進劑的例子有，如：一或多種化合 物’選自包括膽酸鹽、褐霉酸鹽、甘草酸鹽醯基一 L -肉毒鹸鹽、磷脂、非離子表面活性劑，環糊精、高碳 脂肪酸、1 一烷基一2 —吡咯烷酮衍生物、1 一十二碳醯 基氮雜環庚-2 -酮（Azone )、桿菌肽、莫磺酸鈉和式 〔1〕表示的氮雜環烷衍生物 ("先聞讀背面之注項再峨艿本頁) *1Τ 0
C
(c H 2 ) M- N (CH2)„-S-R 其中，R是烷基，m是2 — 4的整數，η是1一 15的整 數，當η爲1 一 3時，R是具5 — 1 1個碳原子的烷基* 膽酸鹽的例子是選自包括牛磺膽酸納、甘膽酸鈉的一 或多種化合物· 褐霉酸鹽的例子是選自包括褐霉酸鈉和牛磺24· 2 5—二氫褐霉酸鈉旳一或多種化合物· 甘草酸鹽的例子是選自包括甘草酸鈉和3 _ 丁二 本紙浓尺度適州中國囤家標率{(:泌>以規格（2丨0乂297公嫠> A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 五、發明説明（ 6 ) 1 1 基 甘 草 酸 鈉 ( carbenoxo1 on ) 的 — 或 多 種 化 合 物 〇 1 1 I 具 C 3 - I 8 醯 基 的 0 — 醯 基 — L — 肉 毒 鹼 鹽 的 例 子 有 9 1 1 ! 如 C 8 — 1 Β 醯 基 的 0 — 醯 基 一 L — 肉 毒 鹼 以 0 一 辛 醯 基 請 1 1 I — L — 肉 毒 鹼 氯 化 氫 、 0 — 月 桂醯 基 — L — 肉 毒 鹼 氯 化 氫 先 閱 讀 1 1 和 0 — 棕 櫚 醯 基 L 一 肉 毒 驗 氯 化 氫 爲 佳 Q 背 1 1 之 1 1 磷 脂 的 例 子 是 選 白 包 括 磷 脂 醯 膽 驗 ( 卵 磷 脂 ) > 溶 血 注 意 事 磷 脂 醣 膽 鹼 ( 溶 血 卵 磷 脂 ) 和 溶 血 磷 脂 醯 甘 油 一 或 多 種化 再 1 合 物 〇 寫 本 百 装 I 非 離子 性 界 面 活 性 劑 的 例 子 是 選 白 包括 聚 氧 伸 烷 基 高 Η '— 1 1 I 碳 醇 醚 % 聚 氧 伸 烷 基 院 基 酚 和蔗糖脂 肪 酸 脂 的 —- 或 多 種 化 1 1 1 合 物 以 聚 氣 乙 烯 ( 9 ) 月 桂 醚 ( Laureth-9 ) 和 聚 氧 乙 1 1 訂 1 烯 ( 2 4 ) 膽 甾 醇 醚 ( Choi e th- 24 ) 爲 佳 0 環 糊 精 的 例 子 是 選 白 包 括 a — 環 糊 精 β — 環 jLln 糊 精 - 1 1 r — 環 糊 精 和 二 甲 基 — β — 環 糊 精 的 一 或 多 種 化 合 物 〇 1 | 高 碳 脂 肪 酸 的 例 子 是 選 白 包 括 C 8 - 1 β 脂 肪 酸 的 或 多 種 化 合 物 以 油 酸 、 亞 油 酸 和 亞 ftff* 麻 酸 之 高 碳 C 1 8 不 飽 和 酸 '1 [ 爲 佳 Q 1 1 1 一 焼 基 — 2 — 吡 咯 院 酮 衍 生 物 的 例 子 是 選 白 包 括 具 1 1 C 4 - 1 2 院 基 ( 包 括 丁 基 、 戊 基 己 基 庚 基 辛 基 壬 基 1 癸 基 十 —· 碳 烷 基 、 十 二 碳 院 基 ) 之 化 合 物 的 —- 或 多 種 i 化 合物 〇 1 I 氮 雜 環 烷 衍 生 物 C 1 中 的 R 的 例 子 是 直 鍵 或 帶 有 支 1 1 I 鏈 的 院 基 9 如 甲 基 、 乙 基 > 丙 基 丁 基 戊 基 己 基 、 1 1 庚 基 λ 辛 基 壬 基 癸 基 V 十 一 碳 院 基 、 十 二 碳 院 基 十 1 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 雕 4385 9 5 A7 A7 B7 五、發明説明（7 ) 三碳烷基、十四碳烷基、十五碳烷基、十六碳烷基、十七 碳烷基、十八碳烷基、十九碳烷基或二十碳烷基，以i -〔2 —（癸基硫代）乙基〕氮雜環戊—2 -酮（俗稱爲焦 代癸烷，油狀物）爲佳，其爲式〔1〕中之尺是（：，。烷基 ，m是2，η是2的化合物* 能夠促進黏膜之吸收能力的任何化合物皆可含括於本 發明中，不限定於前述者。 本發明所用的吸收促進劑以安全性高者爲佳，是1 -〔2 —（癸基硫代）乙基〕氮雜環戊一2 -酮、甘膽酸、 溶血卵磷脂或奠磺酸鈉。 本發明之經黏膜施用藥劑中所用之最佳的吸收促進劑 是1 _〔 2 -（癸基硫代）乙基〕氮雜環戊一 2 —酮或溶 血卵磷脂或奧磺酸鈉。這些化合物在藥劑中的量是 0. 01-5重量％ 含有式〔1〕氮雜環烷衍生物（以1 一〔 2 —（癸基 硫代）乙基〕氮雜環戊一2_酮爲佳）的乳劑中，以含有 0. 01 — 10% (重量/體積）甘草酸或其鹽類（如： 2 —鉀鹽）爲佳，其含量以0. 1 — 5% (重量/體積） 更佳。 本發明所用的血管擴張劑是分子置2 0 0 - 7 〇 〇的 化合物，如：鈣通道阻斷劑》通常，鈣通道阻斷劑有血管 擴張作用，可以藉由壓抑C a進入細胞中而延長房室導引 時間，以顯現在高血壓和節律不整方面的作用，用以治療 多種循環性疾病。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > A4規格（210X297公釐） (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 装. *11 -10 - 經濟部令央標隼局員工消費合作社印裂 A7 B7__五、發明説明（8 ) 其例子爲苯並二氮雜革衍生物（如：diltiazem hydrochloride )、苯基院基胺衍生物（如· verapamil hydrochloride 和 bepridil hydrochloride )、二氫 B 比 淀衍生物（如：nifedipine hydrochloride、 nicardipine hydrochloride 和 nimodipine hydrochloride )、哌瞭衍生物（如：cinnarizine h y d r o c h 1 o r i d e 和 f u s i d i 1 h y d r o c h 1 o r i d e )。 其他強烈的血管擴張劑是1 ，4，3 * 6_二脫水— 山梨糖醇—2，5 -二硝酸鹽、硝基甘油和前列腺素E 1 * 1 , 4，3，6 —二脫水—山梨糖醇一2，5—二硝酸 鹽和硝基甘油已以注射、經口和覆片製劑形式施用以治療 絕血心臟疾病和氣塞病》其作用的機構是直接作用，是擴 張冠狀動脈以降低冠狀阻力及擴張副通道以提高絕血心肌 中之氧的供應以改善心臟功能。前列腺素E 1有強烈的血 管擴張活性和抑制血小板凝結的活性，是臨床上用以治療 慢性動脈閉塞疾病併發的止血性潰瘍。 本發明所用的血管擴張劑不限於此處所述者，任何具 有血管擴張作用的化合物均可用於本發明中· 本發明中所用之具血管擴張活性的化合物是市面販售 用以治療循環性疾病的藥品，添加於局部施用於黏膜的藥 劑中。此處*血管擴張劑的添加量沒有限制，只要此血管 擴張劑能有效地吸收生理活性肽即可，其添加量以低於血 管擴張劑之最低有效用量的1/2量爲佳，低於1 /5量 更佳β舉例言之，diltiazem hydrochloride的常用最低 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） —1 —^n —^u- — 1^1 ^^^1 1 --i ^^^1 ^nn ^^^1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -11 - 經濟部中央樣隼局員工消費合作社印製 A7 ___B7___ 五、發明説明（9 ) 劑量是1 0毫克，則它在本發明中作爲添佳物的量以低於 此量的1/2量爲佳，低於1/5量更佳。前列腺素E1 的常用最低劑量是2 0微克，則它在本發明中作爲添佳物 的量以低於此量的1/2量（10微克）爲佳’低於1/ 5量（4微克）更佳。就劑量攝生觀點，低限量可超過 0.1微克，以超過1微克爲佳。 本發明所用的生理活性肽由3種以上的胺基酸所組成 ，其分子量約300 — 10，000❶此肽的例子包括胰 島素、降血鈣素、人類PTH(1 - 34)，與降血鈣素 基因相關的肽（CGPR)、血管緊張肽利尿抗激素 ' desmopressin acetate ' busere1i n acetate、 goserelin acetate ' naf are 1 in acetate、1 eupror e1i n acetate 、生長激素釋放的抑制因子、胰高血糖激素、催 產素、腸促胰液肽、LH — RH、ACTH、TRH、 TSH、ANP或含有其合成或半合成化合物的衍生物。 降血鈣素包括，如：天然降血鈣素（如：鰻魚降血鈣 素，鮭魚降血鈣素、人類降血鈣素、豬降血鈣素和雞降血 鈣素）和半合成的降血鈣素（如：ASU1-7饅魚降血鈣 素（el cat on in )或AS U1-7雞降血鈣素）。胰島素的 例子有人類胰島素、豬胰島素或牛胰島素。 本發明所用之較佳的肽是AS U1-7饅魚降血鈣素和 人類胰島素。 本發明之經黏膜施用之含生理活性肽的藥劑配方述於 下文中。 表紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格Y2i0X297公釐）
Hi- n^i «^^1 ^1.^1 .......- ml ^^^1 am f^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -12 - 經濟部中央標準局舅工消費合作社印製 五、發明説明（ 10) 本 發 明 之 藥 劑 中 的 生 理 活 性肽 量 可 視肽 的 活 性 <4 所 須 劑 量 、 鼻 黏 膜 對 此 肽 的 吸 收 能 力 而 定 舉 例 言 之 經 黏 膜 施 用 之 藥 劑 中 * 生 理 活 性 肽 之 含 水 藥 劑 的 較佳 濃 度 是 0 0 0 0 0 0 1 — 5 % ( 重 量 / 體 積 ) * 0 0 0 0 1 — 1 % ( 重 量 / 體 積 ) 更 佳 9 本 發 明 之 經 黏 膜 施 用 的 製 劑 可 用 於 鼻 黏 膜 □ 腔 黏 膜 肺黏 膜 、 直 腸 黏 膜 、 陰 道 黏 膜 和 眼 黏 膜 〇 製劑 中 > 配 方 可 爲 溶 液 固 體 或 半 画 體 形 式 以 水 性 噴 霧 或 滴 液 或栓劑 製劑 爲 佳 〇 含 水 或 栓 劑 藥 劑 含有 水 溶 性 或 以 油 爲 基 礎 成 份 * 如 蒸 餾 水 \ 甘 油 丙 二 醇 、 椰 子 油 、 黃 豆 油 天 然 脂 肪 酸 三 甘 油 酯 或 聚 乙 烯 基 吡 咯 焼 酮 0 含 水 藥 劑 可 製 白 生 理 活 性肽 、 一 或 多 種 上 述 吸 收 促 進 劑 和 —. 或 多 種 上 述 的 血 管 擴 張 劑 必 要 時 可 添 加 適 量 的 P Η 調 整 劑 滲 透 壓 調 節 劑 防 腐 劑 穩 定 劑 助 溶 劑 或 乳 劑 並 以 適 量 添 加 的 蒸 餾 水 加 以 溶 解 或 乳 化 以 製 得 溶 液 或 乳 液 σ 要 求 安 定 性 時 可 藉 冷 凍 乾 m /Pt\ 或 噴 霧 乾 燥 的 方 式 製 成 固 態 藥 劑 〇 所 選 用 的 藥 劑 的 Ρ Η 必 須 要 不 會 影 響 生 理 活 性肽 的 安 定 性 且 對 於 鼻 黏 膜 的 傷 害 最 小 同 時 不 會 產 生 沉 澱 物 才 行 a 較 佳 的 Ρ Η 通 常 是 4 — 8 〇 P Η 調 整 劑 的 例 子 有 氫 氧 化 鈉 > 氫 氧 化 鉀 、 碳 酸 鈉 、 碳 酸 氫 鈉 % 鹽 酸 、 硫 酸 或 緩 衝 溶 液 ( 如 磷 酸 鹽 醋 酸 鹽 、 乳 酸 鹽 或 檸 檬 酸 鹽 Q 滲 透 壓 以 等 滲 透 爲 佳 0 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X2町公釐） -13 - H543 85 9 5 A7 B7 五、發明説明（11) 滲透壓調節劑的例子有甘油、氯化鈉、甘露糖醇和蔗 糖。可以使用藥用上可接受的防腐劑。其例子有對羥基苯 甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯 '對羥 基苯甲酸丁酯、苄烷銨氯' 氯化苄乙氧銨、苯基乙醇、氯 丁醇、酚、甲酚、對乙汞硫苯基甲酸鈉（thimersal )、 去氫醋酸和山梨酸。防腐劑的較佳濃度視所選用的防腐劑 而定*是0· 01%—2%(重量/體積）。 本發明之藥劑之產製可以習用的方式進行。含水藥劑 可製自，如：於攪拌使其溶解的情況下，將注射用水加至 胰島素、溶血卵磷脂、前列腺素E 1和前面所提到的添加 物中，添加pH調整劑（如：氫氧化鈉或氫氯酸）以調整 pH。此溶液防腐過濾通過，如：0. 22微米濾膜’裝 填於小瓶（Sanvagon Crop. U-SAVE )中以製得含水藥劑 〇 劑量視施用目的而定。可使用穩定噴霧器（每次按壓 噴出0. 05 — 0· 1毫升）將經鼻施用的藥劑噴入人的 鼻孔中，每日施用1一3次。 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 —^^1 .^ϋ· .......... ^^^1 n^— 1--^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁〕 添加必須量的Witepsol 、椰子油、聚乙二醇、丙二 醇或甘油可製得經直腸黏膜或陰道黏膜施用的藥劑。 本發明之薬劑的施用慣例通常是將其噴霧乾燥進入系 統作用的黏膜上。本發明之藥劑黏附於大範圍的黏膜上， 完全滲過黏膜以使肽有系統地分佈。據此，本發明之經黏 膜施用之含生理活性肽的藥劑不會有患者因注射而疼痛的 問題•也能夠自行施用。 本紙張尺度適用中ίϊ家標準ΐ CNS ) A4規格（210Χ297公釐） -14 - A7 B7 五、發明説明（l2 ) 也以製成用於經鼻黏膜、肺黏膜、直腸黏膜、陰道黏 膜、眼黏膜之經黏膜施用的薬劑* f 附1¾之簡單說1 圖1 :經鼻黏膜施用ASU1-7鳗魚降血鈣素之後* 血清中的ASU1-7鳗魚降血鈣索濃度圖· 圖2 :皮下注射AS U1-7鳗魚降血鈣素之後的吸收 比例（％ ) ( A U C ) · 圖3:由鼻施用人類胰島素之後•血清中的胰島素濃 度圚。 圖4 :由鼻施用人類胰島素之後，血清中的胰島素含 量圖β 圖5:由鼻施用人類LH—RH之後，血清中的LH —R Η含量圖· 本發明之實施例 下面的實例和參考例說明本發明，但不欲對本發明造 成限制*更下方的實驗例說明本發明的效用· 參考例1 , 5奄克甘膽酸鈉（SGC:Sigma Corp., U.S.A.)溶解 於等滲透壓、pH6. 0的磷酸鹽緩街溶液（1毫升）中 * 1毫升的此溶液加到40 0單位ASU1-7鳗魚降血转 素/小瓶（冷凍乾燥）中，以製得4 0 0單位A SU1-7 (誚先閱讀背面之注意事項再瑣艿本頁) 本紙悵尺度適中囡囤家標率（CNS ) Λ4規格（210X 297公嫠） * 15 - 1' /.- Αν Α7 Β7 五、發明説明（13) 饅魚降血鈣素/毫升溶液（對照例β 參考例2 1 0 毫克 diltiazera hydrochloride (DTZ:Sigraa Corp.，U,S,A.)溶解於等滲透壓、P H 6 0的磷酸鹽 緩衝溶液（2毫升）中。1毫升的此溶液加到4 0 0單位 A S U1-7鰻魚降血鈣素/小瓶（冷凍乾燥）中，以製得 4 0 0單位A SU1-7鰻魚降血鈣素/毫升溶液（對照例 2 )。 實例1
1 0 毫克 Diltiazem hydrochloride (DTZ:Sigma Corp., U.S.A.)溶解於0. 5%甘膽酸鈉水溶液（pH 6. 0的等滲透壓磷酸鹽緩衝溶液）（2毫升）中，製得 經濟部中央標準局員工消費合作社印策 . n —^ϋ -1-- 士^^^1 ml ^^^1 ^^^1 ^^^1 一 J {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 含有0. 5%SGC和〇. 5%DTZ的溶液。1毫升的 此溶液加到4 0 0單位A S U1-7鰻魚降血鈣素/小瓶（ 冷凍乾燥）中，以製得4 0 0單位A S U1-7餵魚降血鈣 素/毫升溶液。 窗例2 1 0 毫克 v e r a p a m i 1 h y d r 〇 c h 1 〇 r i d e (V P : S i g m a Corp., U.S.A.)溶解於2毫升0. 5%甘膽酸鈉溶液（ 5 0毫克N —乙儲基—2_D比咯院銅（Wako Pure Chem. Co·，Japan)和 5 毫克甘膽酸鈉（SGC:Sigma Corp.，U. f紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨OX297公嫠） ' -16 - 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（14) S.A.)溶解於1毫升pH 6. 0的等滲透壓磷酸鹽緩衝溶 液中而製得）中，製得含有0. 5%SGC和〇, 5 % VP的溶液》1毫升的此溶液加到400單位ASU1 - 7 觼魚降血鈣素/小瓶（冷凍乾燥）中，製得4 0 0單位 A S U1-7鰻魚降血鈣素/毫升溶液。 實例3 1 0 毫克 bepridil hydrochloride (BP:Sigma Corp.，U.S.A·)溶解於2毫升0. 5%甘膽酸鈉溶液（ 將1 0 0毫克N -乙稀基一2—0比略·院酮（Wako Pure Chei Co., Japan)和 5 毫克甘膽酸鈉（SGC:Sigma Corp., U. S.A.)溶解於1毫升pH6. 0的等滲透壓磷 酸鹽緩衝溶液中而製得）中，製得含有0. 5%SGC和 0. 5 % BP的溶液。1毫升的此溶液加到400單位 A S U 7饅魚降血鈣素/小瓶（冷凍乾燥）中，製得 4 0 0單位A S U1-7鳗魚降血鈣素/毫升溶液。 實例4 1 0 毫克 fusidil hydrochloride (FS:Asahi Chem. Co, Japan)溶解於2毫克等滲透壓、ΡΗ6· 0的磷酸 鹽緩衝溶液中，製得含有0. 5%SGC和0. 5%FS 的溶液。1毫升的此溶液加到400單位ASU1-7鰻魚 降血鈣素/小瓶（冷凍乾燥）中，以製得4 0 0單位 A S U卜7鰻魚降血鈣素/毫升溶液。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格{ 210 X 297公釐） —^1. —— - — —^1 —^1 - 士.^^^1 I. - . ^^^1 ^Jn (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -17 - »5438595 A7 B7 五、發明説明（15 ) 啻驗1 大頰鼠活體吸收A S U1-7鰻魚降血鈣素的能力： 〔活體實驗〕 雄性Wistar大頰鼠（Japan SLC，體重2 〇 0 — 2 5 0克）禁食一夜之後分成每組4隻，以戊巴比妥（ Nembutal inj. Dainippon Pharrn. Co.，Japan )麻醉。 藉由切開凸面的方式而將聚乙烯管插入氣管中。在切 開食管之後將管插入鼻後的空間。以微滴管將所製得的 2 5微升溶液倒入右鼻孔中以達到施用的目的。在施藥前 後分別由股靜脈收集2 0 0微升血液樣品。分析之前，血 液樣品離心（15，OOOrpm/lO分鐘/ 5°C)後 於_ 3 0 °C儲存。 皮下注射0 . 2 5毫升的A S U1-7鯓魚降血鈣素 2 0單位/毫升（在生理鹽水中），以比較吸收率（比較 例 1 ) < 定量方法 以RIA分析血液含量。 結果 圓1顯示血清中的A S U卜7鳗魚降血鈣素濃度與時 間的關係》 與含有AS U1-7鳗魚降血鈣素、0. 5%甘膽酸鈉 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐} n. n —ϋ I - - 1 - - n ."-5 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -18 - 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 _____B7__五、發明説明（16) 的對照例1 (-)比較，實例1的施用組（添加 ASU1-7鰻魚降血鈣素、〇. 5%甘膽酸鈉和0. 5% d i 11 i a z e m h y d r 〇 c h 1 〇 r i d e ) ( ▲ — ▲)中，血清中的 A S U1-7鰻魚降血鈣素含量顯著提高由比較實驗組和 對照例1之曲線下的區域面積（AUC)，知道經由鼻黏 膜吸收AS U1-7鰻魚降血鈣素提高約3. 6倍。在含 A SU1-7 饅魚降血與素和 diltiazem hydrochloride的 對照例2 (參-參）的施用觀察中，發現幾乎沒有經由鼻 黏膜吸收。因此，此處的diltiazem hydrochloride沒有 促進吸收的作用。總而言之，吸收促進劑甘膽酸鈉和 diltiazem hydrochloride 、阻斷耗的血管擴張劑併用， 有極佳之促進吸收的效果•此外，實例2、3和4中所施 用的 v e r a p a m i 1 h y d r 〇 c h 1 〇 r i d e (圖 1 〇—〇）、 beridilhydrochloride (圖 1 △ — △)和 fusidil hydrochloride (圓 Id — □)和 diltiazemhydrochloride—樣有促進吸收的效果。 圖2顯示各種鈣通道阻塞劑於提高促進吸收能力方面 的作用。以下面的式子由比較例1之曲線下的面積（ AUC)計算吸收率。 AUC( I. N.) 劑量（S. C.) 吸收率（％ ) = - X --- X 100 AUCtS. C.) 劑量（I. N.) -^1- ^^1 ^^1 ^^1 - I ^^1 n 女^. ^^1 ^^1 ^^1 — .^^1 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4规格（210 X 297公釐） 19 - 經濟部中央標率局員工消f合作社印製 A7 B7五、發明説明（17) 其中，I. N.:經鼻施用，S. C.:皮下施用。由圖 2可清楚地看出，就A S U1-7鰻魚降血鈣素之吸收而言 ，與吸收促進劑甘膽酸鈉和鈣通道阻塞劑一併經鼻黏膜施 用比與甘膽酸鈉施用高出2倍。 參考例3 7 ~人類胰島素（得自酵母的基因操作產物：比活性 爲 2 6 單位 / 毫克：Boehringer Mannheim Co.， Germany ) 10單位/小瓶（冷凍乾燥）溶解於1毫升等 滲透壓、PH7. 4的磷酸鹽緩衝溶液中，得到人類胰島 素溶液10單位/毫升（對照例3)- 參考例4 5 毫克 L-α —溶血卵磷脂（LPC:Sigma Crop.，U. S.A.)溶解於1毫升等滲透壓、PH7. 4的磷酸鹽緩衝 溶液中，製成含有〇. 5%LPC的溶劑。將1毫升的此 溶液加至1 0單位/小瓶（冷凍乾燥）的r 一人類胰島素 中，得到r —人類胰島素1 〇單位/毫升溶液（對照例4 ^^^1 ^^^1 —^K nn ^^^1 ^^^1 ^^^1 ^^^1 ^^^1 ^^^1 ϋ-— n^i 1OJ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 實例5 1 0 毫克 diltiazem hydrochloride (DTZ:Sigma Corp.，U.S.A.)溶解於2毫升0. 5 96L — α—溶血卵 磷脂溶液（ρΗ6. 0的等滲透壓磷酸鹽緩衝溶液）中， 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） -20 - 經濟部令失標準局員工消費合作社印製 A7 B7五、發明説明（18) 製得含有0. 5%LPC和0, 5%DTZ的溶液毫 升的此溶液加到1 0單位r 一人類胰島素/小瓶中，得到 人類胰島素10單位/毫升溶液。 眚例6 2 0微克注射用的前列腺素（前列腺素£：1:?6£: OnoPharm. Co.，Japan )溶解於 2 毫升 0· 5%L-o： —溶血卵磷脂（LPC)溶液（pH7. 4的等滲透壓憐 酸鹽緩衝溶液）中，製得含有0. 5%LPC和 0. 00 1%PGE1的溶液·1毫升的此溶液加到10 單位r 一人類胰島素/小瓶中，得到人類胰島素1〇單位 /毫升溶液。 實驗2 大頰鼠活體吸收胰島素的能力： 〔活體實驗〕 雄性Wistar大頰鼠（Japan SLC,體重2 0 0 -2 5 0克）禁食一夜之後分成每組4隻|以戊巴比妥（ Nembutal inj. Da i η ί ppon Pharm. Co. , Japan )麻醉 β 藉由切開凸面的方式而將聚乙烯管插入氣管中。在切 開食管之後將管插入鼻後的空間，插入管的邊緣以棉花塞 住以免藥品溶液由鼻孔流入食管。以微滴管將所製得的 2 5微升溶液倒入右鼻孔中以達到施用的目的。在施藥前 後分別由股靜脈收集2 0 0微升血液樣品。分析之前，血 本紙張尺度適用"中國國家揉準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） ^^1- 1^1 m -r^^^1 m -n^SJ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -21 - 經濟部中央標準局舅工消費合作社印製 M438595 A7 _ B7_五、發明説明（19) 液樣品離心（15，000rpm/10分鐘/5°C)後 於一3 0 °C儲存。 定量方法 使用人類胰島素分析物劑（Boehringer Mannheim Co., Germany)分析血液含量，使用2種類型的單株抗體 進行單步驟三明治法之E I A » 結果 圖3顯示血清中的胰島素濃度與時間的關係。圖3中 ，施用胰島素溶液的一組，對照例3 (·—參）顯示幾乎 未由鼻黏膜吸收。與對照例4(〇-〇）（添加胰島素和 0. 5%L — α-溶血卵磷脂（LPC))相比較，添加 胰島素、0 . 5 % d i 11 i a z e m h y d r 〇 c h 1 〇 r i d e 和 0. 001%PGE1的一組之吸收顯著提高。由施用實 例 5 的藥劑（添加 0. 5 % diltiazem hydrochloride) (—)和施用實例6的薬劑（添加0· 001% PGE1) (▲ — ▲)之曲線下的面積（AUC)，其吸 收量分別比經鼻黏膜施用胰島素時提高約1. 7倍和 1 . 8 倍。 實例7 在1毫升用於經黏膜投服的藥劑中： 1. ASU1-7饅魚降血鈣素 1000單位 —^^1· ^^^^1 ^^^^1 ^^^^1 ^^^^1 ^^^^1 ^^^^1 ^^^^1 n^v (諳先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -22 - A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（ 20) 1 I 2 甘 膽 酸 鈉 5 毫 克 1 | 3 di 11 i a zem hydroc hi ΟΓ id e 5 毫 克 1 4 甘 油 2 2 毫 克 請 1 1 I 5 對 羥 基 苯 甲 酸 甲 酯 1 毫 克 先 聞 讀 1 1 6 用 以 調 整 至 P Η 5 5 的 背 1 1 之 1 | 鹽 酸 / Μ 氧 化 鈉 注 意 1 | 事 1 7 注 射 用 水 至 1 毫 升 項 再 1 填 寫 本 装 頁 1 製 得 含 上 述 者 的 藥 劑 〇 此 溶 液 經 防 腐 過 濾 ( 0 2 2 I 1 微 米 膜 濾 器 ) 將 3 毫 升 的 此 溶 液 以 防 腐 方 式 充 填 於 用 於 1 i 鼻 部 施 用 之 定 量 機 械 式 噴 霧 器 中 以 製 得 產 品 0 此 產 品 中 含 1 i •訂 ί 有 A S U 1 - 7 鰻 魚 降 血 鈣 素 1 0 0 0 單 位 / 毫 升 每 次 按 壓 噴 出 1 0 0 單 位 的 A S U 1 - 7 鰻 魚 降 血 鈣 素 0 1 1 1 m. 例 8 1 在 1 毫 升 用 於 經 黏 膜 投 服 的 藥 劑 中 1 1 1 A S U 1 — 7 觴 魚 降 血 鈣 素 1 0 0 0 單 位 1 1 2 L — a — 溶 血 卵 磷 脂 5 毫 克 1 1 3 刖 列 腺 素 Ε 1 1 0 微 克 1 1 4 甘 油 2 2 毫 克 1 1 5 對 羥 基 苯 甲 酸 甲 酯 1 毫 克 i 6 用 以 調 整 至 Ρ Η 5 5 的 i I m 酸 / 氫 氧 化 鈉 1 1 1 7 注 射 用 水 至 1 毫 升 1 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -23 - 五、發明説明（21 ) A7 B7 製得含上述者的藥劑。此溶液經防腐過濾（0. 22 微米膜濾器），將3毫升的此溶液以防腐方式充填於用於 鼻部施用之定量機械式噴霧器中以製得產品。此產品中含 有ASU1—鰻魚降血鈣素1 〇〇〇單位/毫升，每次按 壓噴出1 0 0單位的A S U1-7鰻魚降血鈣素。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 眚例9 在1毫升用於經黏膜投服的藥劑中 1. ASU1-7鳗魚降血鈣素 2. L—α—溶血卵磷脂 3. 1 ’4，3，6—二脫水一 山梨糖醇_2，5 —二硝酸鹽 4 .甘油 5 . D -山梨糖醇 6.用以調整至pH5 鹽酸/氫氧化鈉 7 .注射用水 5的 1 0 0 0單位 5毫克 0 . 1毫克 1 7 . 6毫克 1 〇毫克 至1毫升 製得含上述者的薬劑。此溶液經防腐過濾（0. 22 微米膜濾器），將3毫升的此溶液以防腐方式充填於用於 鼻部施用之定量機械式噴霧器中以製得產品。此產品中含 有ASU1-7鰻魚降血鈣素1000單位/毫升，每次按 壓噴出1 0 0單位的ASU1-7鰻魚降血鈣素。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） H' .^^^1 n^— ml In - - - It ^tn 、-=T、 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本買) -24 - Α7 Β7 五、發明説明（22) 實例1 0 在1毫升用於經黏膜投服的藥劑中： 1. r_人類胰島素 100單位 2. 甘膽酸鈉 5毫克 3 . diltiazem hydrochloride 5 毫克 4 .甘油 2 2毫克 5. 對羥基苯酸甲酯 1毫克 6. 用以調整至PH6. 0的 鹽酸/氫氧化鈉 7. 注射用水 至1毫升 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中夬標準局員工消費合作社印袋 製得含上述者的藥劑》此溶液經防腐過濾（0. 2 2 微米膜濾器），將3毫升的此溶液以防腐方式充填於用於 鼻部施用之定量機械式噴霧器中以製得產品》此產品中含 有r _人類胰島素1 0 〇單位/毫升，每次按壓噴出1 〇 單位的人類胰島素。 實例1 1 在1毫升用於經黏膜投服的藥劑中： 1. r —人類胰島素 100單位 2. L — α -溶血卵磷脂 5毫克 3 前列腺素Ε 1 1 0微克 4 ·甘油 2 2毫克 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） -25 - 把4385 95 A7 B7 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 五、發明説明（ 23) 1 1 5 .苄 焼 鉄 氯 0 1 毫 克 i I 6 .用 以 調 整 至 P Η 6 * 0 的 1 1 I 鹽 酸 / 氫 氧 化 鈉 請 1 1 I 7 .注 射 用 水 至 1 毫 升 先 鬩 1 1 Tw 背 面 1 之 1 製 得含 上 述 者 的 藥 劑 此 溶 液 經 防 腐 過 濾 ( 0 2 2 注 意 I 事 1 微 米 膜 濾器 ) 將 3 毫 升 的 此 溶 液 以 防 腐 方 式 充 填 於 用 於 項 再 t 填 装 1 鼻 部 施 用之 定 量 機 械 式 噴 霧 器 中 以 製 得 產 品 9 此 產 品 中 含 馬 本 頁 有 r — 人類 胰 島 素 1 0 0 單 位 / 毫 升 每 次 按 壓 噴 出 1 0 1 1 單 位 的 人類 胰 島 素 〇 1 1 1 訂 寅 例 1 2 1 I 在 1毫 升 用 於 經 黏 膜 投 服 的 藥 劑 中 1 1 1 • 7 — 人 類 胰 島 素 1 0 0 單 位 Ί 2 .L 一 a — 溶 血 卵 磷 脂 5 毫 克 3 .1 4 3 6 — 二 脫 水 — 1 1 山 梨 糖 醇 一 2 5 — 二 硝 酸 鹽 0 1 毫 克 1 Ι 4 •甘 油 1 7 6 毫 克 1 1 I 5 .苄 焼 敍 氯 0 1 毫 克 1 1 6 .D — 山 梨 糖 醇 1 0 毫 克 1 1 7 •用 以 ΞΕΕΙ m 整 至 P Η 6 0 的 1 i 鹽 酸 / 氫 氧 化 鈉 1 l 8 .注射 用 水 至 1 毫 升 1 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX 297公釐） -26 - 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7__五、發明説明（24) 製得含上述者的藥劑。此溶液經防腐過濾（0. 2 2 微米膜濾器），將3毫升的此溶液以防腐方式充填於用於 鼻部施用之定量機械式噴霧器中以製得產品。此產品中含 有r 一人類胰島素1 〇 〇單位/毫升，每次按壓噴出1 〇 單位的人類胰島素。 參考例5 製得含有5毫克作爲吸收促進劑之用的焦硫代癸烷， 1 _〔 2_癸基硫代）乙基〕氮雜環戊一2 —酮（ Hisamitsu Pharm. Co.，Japan ) 、1 0 毫克作爲乳化劑 之用的甘草酸二鉀、2 2毫克作爲等滲透壓劑之用的甘油 的蒸餾水溶液，並以超音波使其均質化。以1 N氫氧化鈉 調整至PH6. 0。使此液體體積爲1毫升’以製得 0. 5%焦硫代癸烷溶液。將1毫升的此溶液加至1〇單 位/小瓶（冷凍乾燥）的r 一人類胰島素中’製成人類胰 島素10單位/毫升的液體藥劑（對照例5)。 參考例6 製得含有0. 05毫克前列腺素El (PGE1 :注 射用的前列腺素R 2 0 ’ Ono Pharm. Co_，Japan )和 25. 7毫克作爲等滲透壓劑之用的甘油的蒸餾水溶液’ 並以1N氫氧化鈉調整至PH6. 0«使此液體體積爲1 毫升，以製得〇. 〇〇5%PGEl溶液。將1毫升的此 溶液加至1 0 〇單位/小瓶（冷凍乾燥）的人類胰島 - - - - HI n ^^1 _ I - I I ---{ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 經濟部中央標隼局貝工消費合作社印策 A7 _B7___ 五、發明説明（25) 素中，製成人類胰島素1 0單位/毫升的液體藥劑（對照 例6 ) 〇 眚例1 3 製得含有5毫克作爲吸收促進劑之用的焦硫代癸烷、 1 0毫克作爲乳化劑之用的甘草酸二鈉、2 2毫克作爲等 滲透壓劑之用的甘油和0. 01毫克血管擴張劑 prostaglandin El (PGE1:注射用的前列腺素R2 0 )的 蒸餾水溶液，並以超音波使其均質化。以1 N氫氧化鈉調 整至PH6. 0。使此液體體稹爲1毫升，以製得0. 5 %焦硫代癸烷和0 001%PGE1溶液。將1毫升的 此溶液加至1 0單位/小瓶（冷凍乾燥）的r 一人類胰島 素中，製成人類胰島素1 0單位/毫升的液體藥劑》 苷例1 4 製得含有5毫克作爲吸收促進劑之用的焦硫代癸烷、 1 0毫克作爲乳化劑之用的甘草酸二鈉、1 7 . 6毫克作 爲等滲透壓劑之用的甘油和〇 1毫克血管擴張劑1 ，4 ，3，6 —二脫水—山梨糖醇_2，5 —二硝酸鹽（ISDN :Nitorol inj.，Eizai Co.，Japan)的蒸餾水溶液’並 以超音波使其均質化’以1 N氫氧化鈉調整至Ρ Η 6 0 。使此液體體積爲1毫升’以製得〇· 5%焦硫代癸烷和 0. 〇l%ISDN溶液。將1毫升的此溶液加至1〇單 位/小瓶（冷凍乾燥）的r -人類胰島素中’製成人類胰 本紙張尺度適用中國國家標率（CNS)A4規格< 210x297公嫠） ^^1- - - - -- --- i I— ml ^^^1. ii - - _^n^ffJ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ： . Λ · · m. ... 广 A7 ______B7 五、發明説明（26) 島素10單位/奄升的液體藥劑· 奮例1 ί5 製得含有5毫克作爲吸收促進劑之用的焦硫代癸烷、 1 0毫克作爲乳化劑之用的甘草酸二鈉、1 3 . 2毫克作 爲等滲透懕劑之用的甘油和0. 2毫克血管擴張劑1，4 ，3，6 —二脫水一山梨糖醇一 2 · 5_二硝酸鹽（ISDN ••Nitorol ini·, Eizai Co·，Japan ))的蒸 0 水溶液 * 並以超音波使其均質化，以1 N氫氧化鈉調整至pH 6. 0·使此液體體積爲1毫升*以製得0. 5%焦硫代 癸烷和0. 0296ISDN溶液•將1毫升的此溶液加至 1 0單位/小瓶（冷凍乾燥）的1Γ —人類胰島素中，製成 人類胰島素1 0單位毫升的液體薬劑。 實例1 6 製得含有5奄克作爲吸收促進劑之用的焦硫代癸烷、 10毫克作爲乳化劑之用的甘草酸二鈉、17. 6毫克作 爲等滲透應劑之用的甘油和〇♦1毫克血管擴張劑硝化甘 油（Millisrol Inj., Nippon Kayaku Co·，Japan)的蒸 餾水溶液，並以超音波使其均質化，以1 N篚氧化鈉調整 至PH6. 0«使此液體體稂爲1毫升’以製得〇· 5% 焦硫代癸烷和0 · 〇 1 %硝基甘油溶液·將1奄升的此溶 液加至1 〇單位/小瓶（冷凍乾燥）的人類胰島素中 ，製成人類胰島素1〇單位/毫升的液體薬劑* 本紙張尺度谇用中SS家標率{ rNS > Λ4規格（210X297公釐} (詞先閱讀背面之注意事項再^寫本頁) 訂 赶汐部中次JIT;V-^M h消费合作社印t -29 - 硿43 85 9 5 |‘Πτ.”. L«iUV'.... L ...______ 五、發明説明（27 ) 寅驗-0- 大頰鼠活體吸收胰島素的能力（2): 〔活醴實驗〕 雄性fistar大頰鼠（Japan SLC *體重2 0 0 — 2 5 0克）禁食一夜之後分成毎組4隻*以戊巴比妥（ Nembutal in j. Dainippon Pharm. Co., Japan )麻醉。 藉由切開凸面的方式而將聚乙烯管插入氣管中•在切 開食管之後將管插入鼻後的空間，插入管的邊緣以棉花塞 住以免槊品溶液由鼻孔流入食管·以微滴管將所製得的 2 5微升溶液倒入右鼻孔中以達到施用的目的•在施藥前 後分別由股靜脈收集2 0 0微升血液樣品*分析之前，血 液樣品離心（15|000rpm/10分鐘/5X)後 於_ 3 0 °C儲存· 定量方法 使用人類胰島索分析物劑（Boehringer Mannheim Co., Germany)分析血液含量，使用2種類型的軍株抗體 進行單步驟三明治法之E I A · t 結果 圖4顯示血清中的胰島素滇度與時間的關係*圖4中 •施用胰島素溶液的一組（對照例3 (·-·))顯示幾 乎未由鼻黏膜吸收•類似地，施用含有胰島索和 本紙张尺度洎州中國國家棉準（CNS ) ΛΑ規格（210X297公嫠） ϊί先閱讀背面之注意事項再續寫本頁) 訂 -30 _ i 4 3 ：；： 595
經：¾部中少t,消贽含印絮 A7 B7 五、發明説明 (28 ) 1 I 0 . 0 0 5 % P G E 1 溶液 ( 對 照例 6 ) ( 〇 〇 ) 的 — 1 1 I 組也 幾 乎 沒有 吸 收· 與 對 照 例 5 之 傅 統 蕖 劑 ( 含有胰島索 1 1 和0 丨5 %焦 硫 代癸 烷 ) ( Δ 一 △ ) 相 比 較 實 例 1 3 的 1 1 1 1 藥劑 ( 添 加胰 島 索、 0 _ 5 % 焦 硫 代 癸 烷 和 0 0 0 1 % 先 閱 1 I 讀 1 1 P G E 1 )( - ) 實 例 1 4 的 薬 劑 ( 添 加 0 • 0 1 背 面 1 1 之 1 % I S D N ) C ▲- ▲ ) % 賁 例 1 5 的 薬 劑 ( 添 加 0 . 2 [ 事 1 % I S D N ) ( □- □ ) 及 賁 例 1 6 的 集 劑 ( 添加 項 再 1 磧 1 0 . 0 1 %硝化甘油 ( + _ + ) 之 鼻 黏膜 的 胰 島 索 吸收 顯 % 4- - 頁 1 著提髙 而與 對 照例 6 相 比 較 9 這 些 薬 劑投 服例 之 曲 線 下 1 方的 面 稹 (A U C ； 0 — 2 小 時 ) 分 別 顯著 地提髙約 1 1 1 . 7 倍 、1 • 9倍 2 • 0 倍和 2 . 4 倍 參 1 I 訂 實例 1 7 1 1 | 在 1 毫升用 於經黏膜投 服 的 薬剤 中 1 I 1 7 - 人 類胰 島 素 1 0 0 單 位 1 ί 2 - 焦硫代 癸烷 5 毫 克 1 3 * P G E 1 0 * 0 0 5 奄 克 1 1 4 • 甘草 酸 二鉀 1 0 毫 克 1 1 5 • 甘油 2 2 奄 克 1 6 苄烷銨 氮 0 1 毫 克 I J 7 • 用以 調 整至 P Η 6 - 0 的 i 1 鹽酸 / 氫氧 化 鈉 1 1 8 - 注射 用 水 至 1 奄 升 l 1 1 I 本紙浪尺度適用中國囡家標卑（CNS ) Λ4規格（2丨0X297公釐） -31 - A7 B7 五、發明説明（29) 製得含上述者的藥劑。此溶液經防腐過濾（〇. 22 微米膜濾器），將3毫升的此溶液以防腐方式充填於用於 鼻部施用之定量機械式噴霧器中以製得產品。此產品中含 有7 -人類胰島素1 00單位/毫升，每次按壓噴出10 單位的人類胰島素·> 實例1 8 在1毫升用於經黏膜投服的薬劑中 1 . γ _人類胰島素 2 .焦硫代癸烷 3 . P G Ε 1 4 .甘草酸二鉀 5 .甘油 6 .苄烷銨氯 7_用以調整至ΡΗ6 鹽酸/氫氧化鈉 8.注射用水 0的 ---------装-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1 0 0單位 5毫克 0. 01毫克 1 0毫克 2 2毫克 0 . 1毫克 至1毫升
,1T 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 製得含上述者的藥劑。此溶液經防腐過濾（0. 2 2 微米膜濾器），將3毫升的此溶液以防腐方式充填於用於 鼻部施用之定量機械式噴霧器中以製得產品》此產品中含 有r 一人類胰島素1 〇 〇單位/毫升，每次按壓噴出1 〇 單位的人類胰島素。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（2!〇Χ297公釐） -32 - A7 __B7五、發明説明（30 ) 眚例1 9 在 1毫 升 用 於 經 黏 膜 投 服的 3*65 藥 劑 中： 1 7 — 人 類 胰 島 素 1 0 0 單 位 2 焦 硫 代 癸 烷 5 毫 克 3 .1 > 4 > 3 6 — 一脫 水 0 1 毫 克 山 梨 糖 醇 — 2 > 5 _ 一 硝 酸 鹽 4 甘 草 酸 二 鉀 1 0 毫 克 5 .甘 油 17 6 毫 克 6 .苄烷 銨 氯 0 1 毫 克 7 • D — 山 梨 糖 醇 1 0 毫 克 8 用 以 調 整 至 Ρ Η 6 .0 的 es τπΤ. 酸 / 氫 氧 化 鈉 9 .注 射 用 水 至 1 毫 升 ^in (請先閔讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 製得含上述者的藥劑。此溶液經防腐過濾（0· 22 微米膜濾器），將3毫升的此溶液以防腐方式充填於用於 鼻部施用之定量機械式噴霧器中以製得產品。此產品中含 有γ -人類胰島素1 0 0單位/毫升，每次按壓噴出1 〇 單位的人類胰島素。 啻例2 0 在1毫升用於經黏膜投服的藥劑中： l_r —人類胰島素 100單位 _$ .焦硫代癸院__5㈣ 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨OX297公釐） -33 - «54385 95 A7 B7 五、發明説明（31) 3 1 4 > 3 1 6-1 二脫水_ 0 2 毫 克 山 梨 糖 醇 — 2 ，5 - -二硝酸鹽 4 . 甘 草 酸 二 鉀 1 0 毫 克 5 . 甘 油 13 2 毫 克 6 . 笮烷銨氯 0 1 毫 克 7 . D — 山 梨 糖 醇 2 0 毫 克 8 . 用 以 調 整 至 Ρ Η 6 . 0的 鹽 酸 / 氫 氧 化 鈉 9 . 注 射 用 水 至 1 毫 升 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作杜印褽 製得含上述者的薬劑。此溶液經防腐過濾（0 . 22 微米膜濾器），將3毫升的此溶液以防腐方式充填於用於 鼻部施用之定量機械式噴霧器中以製得產品。此產品中含 有r 一人類胰島素1 0 0單位/毫升，每次按壓噴出1 0 單位的人類胰島素。 啻例2 1 在1毫升用於經黏膜投服的藥劑中： 1. r_人類胰島素 100單位 2. 焦硫代癸烷 5毫克 3. 硝基甘油 0.1毫克 4. 甘草酸二鉀 10毫克 5 .甘油 1 7 · 6毫克 6.苄烷銨氯 0.1毫克 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） -34 - i4 3 Λ 5 經濟部中夹標準局員工消費合作社印装 Α7 Β7五、發明説明（32) 7. D-甘露糖醇 10毫克 8. 用以調整至PH6. 0的 鹽酸/氫氧化鈉 9 .注射用水 至1毫升 製得含上述者的藥劑。此溶液經防腐過濾（0. 2 2 微米膜濾器），將3毫升的此溶液以防腐方式充填於用於 鼻部麁用之定量機械式噴霧器中以製得產品。此產品中含 有r 一人類胰島素1 〇 〇單位/毫升，每次按壓噴出1 〇 單位的人類胰島素。 參考例7 製得含有0. 1毫克1，4，3，6 -二脫水—山梨 糖醇-2，5 -二硝酸鹽（ISDN:Nitorol inj., Eizai Co., Japan)和25. 7毫克作爲等滲透壓劑之用的甘油 的蒸餾水溶液，並以超音波使其均質化。以1 N氫氧化鈉 調整至PH6. 0>使此液體體稹爲1毫升，以製得 0 . 0 1%ISDN溶液。將1毫升的此溶液加至1〇〇 微克/小瓶（冷凍乾燥）的促黃體生成激素一釋出激素（ LH — RH，Sigma Corp·，U.S.A.)中’製成 LH — R Η 100微克/毫升的液體藥劑（對照例7)。 參考例8 製得含有5毫克作爲吸收促進劑之用的焦硫代癸烷、 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -35 — 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 ____B7__ 五、發明説明（33 ) 1 0毫克作爲乳化劑之用的甘草酸二鉀、2 2毫克作爲等 渗透壓劑之用的甘油的蒸餾水溶液，並以超音波使其均質 化》以11^氫氧化鈉調整至ph6. 0»使此液體體積爲 1毫升’以製得0· 5%焦硫代癸烷溶液。將1毫升的此 溶液加至1 0 0微克/小瓶（冷凍乾燥）的促黃體生成激 素-釋出激素 LH — RH’SigmaCorp.，U.S.A.)中， 製成LH_RH 1 〇 0微克/毫升的液體藥劑（對照例 8 ) » 實例2 2 製得含有5毫克作爲吸收促進劑之用的焦硫代癸烷、 10毫克作爲乳化劑之用的甘草酸二鉀、17. 6毫克作 爲等滲透壓劑之用的甘油和0. 1毫克血管擴張劑1 * 4 ，3，6 —二脫水一山梨糖醇一2，5 —二硝酸鹽（ISDN :Nitorol inj., Eizai Co·，Japan )的蒸餾水溶液，並 以超音波使其均質化。以IN氫氧化鈉調整至PH6. 0 。使此液體體積爲1毫升，以製得〇· 5%焦硫代癸烷和 0. 01%ISDN溶液*將1毫升的此溶液加至1〇〇 微克/小瓶（冷凍乾燥）的促黃體生成激素一釋出激素（ LH-RH，Sigma Corp·，U.S.A.)中，製成 LH — RH 100微克/毫升的液體藥劑。 實驗4 大頰鼠活體吸收LH—RH的能力： 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） I-------装------訂 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 B7 五、發明説明（34 ) 〔活體實驗〕 雄性fistar大頰鼠（Japan SLC，體重2 0 0 -2 5 0克）禁食一夜之後分成每組4隻，以戊巴比妥（ Nembutal inj. Dainippon Pharm. Co·, Japan )麻醉 * 藉由切開凸面的方式而將聚乙烯管插入氣管中•在切開食 管之後將管插入ft後的空間，插入管的邊緣以棉花塞住以 免藥品溶液由鼻孔流入食管•以微滴管將所製得的1 0微 克/0. 1毫克/公斤溶液倒入右鼻孔中以達到施用的目 的》在施藥前後分別由股靜脈收集2 0 0微升血液樣品· 分析之前，血液樣品離心（15，000rpm/10分 鐘/ 5°C)後於一 3 0°C儲存· 定置方法 使用 L Η — R Η 分析物劑（Peninsula Crop., U.S. A.)及競爭式E I A法分析血液含置* 結果 圖5顯示血清中的L H — RH濃度與時間的關係•圖 5中，投服對照例7(含有LH — RH和0. 01% ISDN)(♦一·）的一組顯示幾乎未由鼻黏膜吸收· 與對照例8(含有LH—RH和〇. 5%焦硫代癸烷之傳 統製劑）（▲_▲)的一組相比較，本發明之添加LH -RH、〇. 5%焦硫代癸烷和0. 01%ISDN的一組 (一 )之吸收顯著提髙•而與對照例8相比較，本發 (对先閱請背而之注意事項再填寫本頁} 4、紙浪尺度適用中国园家標冷.（CNS ) Λ4规格（2】〇Χ297公釐） -37 - ϋ43 85 9 5 Α7Β7 修ϊ 资充 五、發明説明（35 ) 明投服組之曲線下方的面積（AUC : 0 — 2小時）提髙 約1 . 5倍* ? I. 窗例2 3 在1毫升用於經黏膜投服的藥劑中： 1 . L Η - R Η 5毫克 2 . 焦硫代癸烷 5毫克 3 . 1，4 1 3，6 -二脫水一 山梨糖醇一 2，5 —二硝酸鹽 0 • 1奄克 4 . 甘草酸二鉀 1 0奄克 5 . 甘油 17 .6毫克 6 . 苄烷銨耝 0 .1毫克 7 . D —山梨糖醇 1 0毫克 8. 用以調整至pH6. 0的 鹽酸/氬氧化鈉 9. 注射用水 至1毫升 朽"·部中央標"局β Η消於合ο.71印f (对先Μ讀背面之注項再楨κ-本頁) 製得含上述者的槊劑•此溶液經防腐過濾（0. 22 微米膜濾器），將3毫升的此溶液以防腐方式充填於用於 鼻部施用之定量機械式噴霧器中以製得產品•此產品中含 有OH—RH5毫克/毫升，每次按壓噴出0. 5畜克的 L Η - R Η。 參考例9 本紙張尺度適用中國®家標卒（CNS ) Λ4規格（210X297公釐） -38 _ A7 B7 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 五、發明説明（ 36) 1 1 0 .2 毫 克 1，4， 3， 6 — —m ——a17u 水 -山 梨糖醇 一 2 1 ! ，5 — 二硝 酸 鹽 (ISDN：Nitorol i n j ·， E i za i Co·， 1 I Japan) 溶解於1 .毫升等滲透壓 P Η 7 . 4的磷酸鹽緩 請 先 1 衝溶液 中， 製 成 含有0 . 0 2 % I S D N 的溶 液。1 毫 升 聞 讀 1 的此溶 液加 至 1 0單位/ 小瓶 ( 冷 凍乾 燥 )的 r —人 類 胰 背 之 1 1 島素中 ，製 成 人 類胰島素 10 單 位 /毫 升 的液 體藥劑 ( 對 注 意 事 ί 1 照例9 )° 項 再 t 填 寫 本 裝 頁 1 音例2 4 1 I 0 .1 毫 克 1，4， 3， 6 一 二脫 水 —山 梨糖醇 一 2 1 1 I ，5 - 二硝 酸 鹽 (I SDN:N i toro 1 i n j., E i za i Co., 1 1 訂 Japan ) 溶解於] .毫升0 . 5 % L - 一 a - -溶血卵磷脂溶液 (等滲 透壓 P Η 7 . 4 的磷 酸 鹽 緩衝 溶 液） 中，製 成 含 1 1 有0 · 5 % L P C和0 . 0 1 % I S D N 的溶 液。1 毫 升 1 | 的此溶 液加 至 1 0單位/ 小瓶 ( 冷 凍乾 燥 )的 7" —人 類 胰 島素中 ，製 成 人 類胰島素 1 0 單 位 /毫 升 的液 體藥劑 〇 丨 i 1 音例2 5 1 1 1 0 .1 毫 克 硝基甘油 (Mi 11 1 S r ο 1 I η j ·， Nippon 1 1 Kayaku Co. t Ja pan )溶 解於 1 毫 升0 5 % L - α — 溶 1 j 血卵憐 脂溶 液 ( 等滲透壓 ' P Η 7 .4 的 磷酸 鹽緩衝 溶 液 I I )中， 製成 含 有 0.01 %硝 基 甘 油的 溶 液。 1毫升 的 此 1 I 溶液至 10 單 位 /小瓶（ 冷凍 乾 燥 )的 r —人 類胰島 素 中 1 1 ，製成 人類 胰 島 素1 0單 位/ 毫 升 的液 體 藥劑 〇 1 1 準 標 家 國 國 中 用 適 度 尺 張 紙 本 規 釐 公 7 9 2 9 3 經濟部中央標率局貝工消費合作社印策 A7 ___ _B7_五、發明説明（37) 實驗5 大頰鼠活體吸收胰島素的能力（3): 〔活體實驗〕 雄性W i s t a r大頼鼠（J a P a n S L C ，體重2 0 0 — 2 5 0克）禁食一夜之後分成每組4隻》以戊巴比妥（ Nembutal in j· Dainippon Pharm. Co·, Japan )麻醉。 藉由切開凸面的方式而將聚乙烯管插入氣管中。在切 開食管之後將管插入鼻後的空間，插入管的邊緣以棉花塞 住以免藥品溶液由鼻孔流入食管。以微滴管將所製得的 2 5微升溶液倒入右鼻孔中以達到施用的目的。在施藥前 後分別由股靜脈收集2 0 0微升血液樣品。分析之前，血 液樣品離心（15，000rpm/10分鐘/5°C)後 於一 3 0 °C儲存* 定量方法 使用人類胰島素分析物劑（Boehringer Mannheim Co.，Germany)分析血液含量，使用2種類型的單株抗體 進行單步驟三明治法之E I A » 結果 對照例3 (施用胰島素溶液的一組）顯示幾乎未由鼻 黏膜吸收。類似地，施用含有胰島素0. 02%1，4, 3，6 -二脫水一山梨糖醇—2，5 —二硝酸鹽（ 本紙張尺度適用中國囷家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ^^1 u In . 、? (請先閱讀背面之注項再填寫本頁) -40 - 五、發明説明（38 A7 B7 I SDN)的對照例6顯示幾乎未由鼻黏膜吸收。與目前 已知之習用的對照例4的藥劑（有胰島素和〇. 5 % L -α —溶血卵磷脂（LPC)比較，實例24的藥劑（添加 胰島素、0·5%LPC和0.01ISDN或001 %硝基甘油）和實例25的藥劑（添加〇. 01%硝基甘 油）的吸收顯著提高。與施用對照組4者相比較，這些藥 劑施用曲線下方的面積（AUC : 0 — 2小時）分別提高 約1 . 7倍和1 · 5倍》 啻例2 6 在1毫升用於經黏膜投服的藥劑中 1 . Τ 一人類胰島素 2. L — a-溶血卵磷脂 3 .硝基甘油 4 .甘油 5 .笮烷銨氯 -- . - - -- -1 I - —li ^^^1 a^l ^^^1 一ffJ (諳先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央樣隼局員工消费合作社印製 6 . D -甘露糖醇 7.用以調整至pH 鹽酸/氫氧化鈉 8 .注射用水 1 0 0單位 5毫克 0 . 1毫克 1 7 . 6毫克 0 . 1毫克 1 0毫克 .0的 至1毫升 製得含上述者的藥劑。此溶液經防腐過濾（0. 22 微米膜濾器），將3毫升的此溶液以防腐方式充填於用於 鼻部施用之定量機械式噴霧器中以製得產品。此產品中含 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -41 - 瞪 438595 A7 B7 五、發明説明（39) 有1 0 0單位/毫升7· 一人類胰島素，每次按壓噴出1 0 單位的人類胰島素。 本發明之效用 藉由使用最少量的吸收促進劑’本發明之經黏膜投服 之含生理活性肽的藥劑可以在不會對黏膜造成損害的情況· 下提高經鼻黏膜的吸收效果。 —^1 ίζ^. ^^^1 (請先閲讀背面之注意事&再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -42 -