TW218881B - - Google Patents

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A6 B6 218831 五、發明説明（1 ) 本發明像關於具有改良抗腫瘤活性，和/或較低毒性 之新穎伊沙徽素A衍生物，彼之製法，含彼作為活性成份 之藥學組成物，以及使用前述組成物之治療方法。 伊沙徽素A係由培養命名為J907 — 2 1 ( ATCC 3941 7)之放射菌靥的産生伊沙徽素A菌 或其突變種而産製出的抗腫瘤性抗生素。伊沙徽素A具有 對抗需氣的革蘭氏陽性細菌及厭氣性細菌的抗菌活性。它 亦具有對抗各種老鼠之腫瘤細胞（其包括白血病P388 ,淋巴性白血病L1210,及黑變性黑瘤B16)的體 外及體内活性。Konishi.et alt伊沙徽素傜為一種和散 酒菌素相關之新穎抗腫瘤性抗生素.I.製造、分離、特 性及抗腫瘤活性，j. Antibiotics, 39 ： 784-791 ( 1986)； 美國專利 4 5 1 8 5 8 9 號，Koni shi，et al , 1985 年5月2 1日發證。 伊沙徽素A (以下通式I )之結構業經測定且證明和 散酒菌素（chartreusin,以下通式H)極其相關。Suga-wara, et al.伊沙徽素A和B ,和散酒菌素相關之新穎 抗腫瘤性抗生素.H .伊沙徽素A和B之結構。j. Qxs丄 Chem., 52:996-1001,(1987)。 ----------------{ ------裝------訂-----^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局3工消#合作社印- 本紙張尺度適用中固國家標準（CNS>甲4规格（210 X 297公釐） -3 - 218331 五、發明説明（2) A 6 B6

Ο OH

(請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁)

通式I

經濟部中央標準局英工消费合作社印製

通式I 伊沙微素A和散酒ίΜΙ素均具有相同的配基，chartar-in,但抗生素之差異在於二糖部份。Leach et al.散酒 菌素》—種由散酒菌素鍵徽素（Streptomyoes Chart reu-産生之新穎抗生素，一種新穎物質，J. Am· Che·· Soc·· 75♦4011-4012(1953)； Beisler» J.A·* Chartreu-s i n . a glycosidic antitumor antibiotic for St rept- 本纸張尺度遑用中厲厲家樣竿(CNS)甲4嫌格(210X297公*) 4 81. 5. 20.000(H) 2 8831

A6 B6 五、發明説明（3 ) omyces» In progress in Medicinal Chemistry，Ed.， G·P· Ellis and G.B. West 19 *pp.247-268» Elsevier Biomedical Press Amsterdam， （1982); Simonitsch, e_ t a 1 : Uber die Struktur des Chart reus i ns I，He 1 v · Ch i m· Acta，47 * 1459-1475♦ (1964); Eisenhuth，et a 1，Uber die Struktur des Char t reu s ins II, He 1v > C him. Acta, ϋ, 1475-1484，（ 1 964 )。二化合物之化學方 式内在轉化未嘗述及。 在伊沙徽素A之化學修飾過程中，吾人發現伊沙徽素 A之2 〃 一胺基基圍經醯化或烷化之選擇性修飾産生具改 良抗腫瘤活性和/或較低毒性之新穎衍生物。 本發明提供具有改良抗腫瘤活性和/或較低毒性之新 穎伊沙徽素A衍生物。更詳細而言，本發明說明伊沙徽素 A之2 "_N —烷基，一醯基和一甲亞胺醯基衍生物之合 成。 本發明又提供抗腫瘤組成物，其包含至少一種選自本 發明之伊沙徽素A衍生物作為活性成份。 本發明又提供使用前述抗腫瘤組成物治療癌症的方法 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 (請先聞4^面之注意事項再f本頁) τ 0 還提供的是上述伊沙徽素A衍生物之製法。 美國專利4 5 1 8 5 8 9號（Kon i sh i e t a 1 )掲示 命名為伊沙徽素A (以上通式I)之抗腫瘤試劑之製備及 分離。上述伊沙徽素A像為命名為J 907 — 2 1 ATCC 3941 7)之放射菌屬的産生伊沙徽素A菌 氏張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210 X 297公釐〉 218831 A6 B6 五、發明説明（4 ) 醱酵之主成份。 現在，依本發明發現伊沙徽素A之2 〃一胺基的醛化 或烷化作用産生具有改良抗腫瘤活性和/或較低毒性之新 穎衍生物。 本發明之伊沙徽素A衍生物具有以下通式m和IV:

通式BI 式中，R示直鐽Ci — C3烷基，其未經取代或經羧基、 胺基或酞醯亞胺基取代； ---------------^ ------裝------訂 (請先聞讀背面之注意事項再場寫本頁) 經濟部中央標準局8工消費合作社印製

通式I V 本紙張尺度通用中國國家標準（CNS>甲4规格（210 X 297公坌） _ β - 經 央 標 準 Mj 貝 工 消 费 合 作 社 印 製 21G881 B6 五、發明説明（5) 式中，只和！^和別示H、Ci 一 C3烷基、芳烷基、甲 亞胺醯基、乙亞胺醛基或胖基，唯其先決條件為 均不同時示Η且當R和Ri與其所連接之氮原子連接一起 時可為嗎啉基、哌啶基或吡咯烷基。 如本文及申請專利範圍（除非文内另外指定）中所用 地，C, _C3烷基〃 一詞意指直鐽或具支鏈之（C, _C3)烷基，其諸如甲基、乙基、丙基和異丙基。 本發明之化合物可由，例如，表2和3中所示之合成 方法製成。如表2中所示地，伊沙徽素A像依酸酐方法而 用乙酸和琥珀酸N —醯化反應而分別産生化合物3 a和 ϋΐ_。N_甘胺醯衍生物3 d用酞基甘胺酸之經活化酯類 醛化反應且随後用肼去保護而得高産率。 如表3中所示地，使用醛或酮邇原性N —烷化伊沙徽 素A産生Ν’一烷基衍生物。在氰基氫硼化鈉存在下，伊沙 徽素Α和丙酮之反應産生Ν —異丙基伊沙徽素A ( 4 a ) 。伊沙徽素1Α·和過置甲醛及NaBHaCN之反應産生 54%産率之Ν, N —二甲基伊沙徽素A ( 4 e )。由於 使用有限數量之甲醛和Na BHaCN之N —甲基化反應 仍産生胺基、單甲胺基和二甲胺基衍生物之混合物，所以 ，伊沙徽素A之N—單甲基化反應像嘗試藉由類似N—單 甲基阿米卡辛（N-monomethylamikacin)衍生物裂備中所使 用之方法進行。因此，伊沙徽素A像用2,4—二甲«基 (請先閲讀背面之注意事項再蜞窝本頁) 裝. 訂- 線- 本纸»疋度遑用中家揉毕(CNS) 規格(210X297公复) 81. 5 . 20.000(H) -7 - A6 B6 經濟部中央標準局貝工消費全作社印製 218881 五、發明説明（6) 苯甲醛和NaBHaCN處理而得N- (2, 4 -二甲氣 基）苯甲基衍生物（4 b ),其再與甲醛和 NaBH3CN邇原性N —甲基化反應而得N— (2, 4 —二甲氧基）苯甲基_N —甲基衍生物（_4 c ) 。4 c經 催化性氫化以去苯甲基化而得N —單甲基伊沙徽素A ( 4 d )。伊沙徽素A之嗎啉基衍生物之製備亦由使用2, .2 / -連氧基二乙醛和Na BHaCN處理伊沙徽素A而 進行。 甲亞胺醯基衍生物傜依傳统方法製成，亦即，使用甲 亞胺酸乙酯氫氣酸鹽處理伊沙徽素A而得38%産率之化 合物互_。 表1示出本案化合物及其對稱编號。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度遑用中家#準((》5)甲4規格(210X297公釐) -8 - 81. 5 . 20.000(H) 218331 έΐ 五、發明説明（7) 化会物缠號 1_ 2 3a_ 3b. 3c 3d 4a 4b. 4c 4d. 4e 41 5 表1 本發明之化合物及其對應编號 名棋 伊沙徽素A 散酒_素 2"-N-乙醛基伊沙徽素A 2 "-N-( 3-羧基丙醛基）伊沙徽素A 2"-N-(酞醯亞胺基乙醯基）伊沙徽素A 2"-N-甘胺醯基伊沙徽素A 2"-N-異丙基伊沙徽素A 2”-N-(2,4-二甲氣基苯甲基）伊沙徽素A 2"-Ν-(2·4-二甲氣基苯甲基） 2"-Ν-甲基伊沙徽素A 2"-N，N-二甲基伊沙徽素A 2”-去胺基-2"-嗎啉伊沙徽素A 2”-N-甲醛亞胺醛基伊沙徽素A氫氣酸鹽 (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝. -訂- 線· 經濟部中央標準局te：工消费+作社印製 本紙張疋度遑《中属家欉準(CNS)甲4蚬格(210x297公釐） 81. 5 . 20.000(H) 9 i 8 8 8 τΗ 2

66 AB 五、發明説明（8) 表2 伊沙徽素A之N —醯化反應 -反應

〇 0H

ίΊο R· (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝. 訂- ]+ AC20 3si CH^ 線· 0 32

CH2CH2C00H 0

0 0 :nch2coo-n: C) 0 3c CHzN；

經濟 部 中 央 標 準 局员 工 消费 .合 作 社 印 製 3q * nh,nh2 3d ch2nh2 本紙張尺度遑用中家«準(CNS) Τ4規格(210X297公釐) 81. 5 . 20,000(Η) -10 - A6 B6 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 218881 五、發明説明（9) 表3 伊沙徽素A之N—烷化反應及甲亞胺化反應

〇 0H

J ♦ CH3COCH3 ♦ NaBHjCN la -NHCHCCH3)2 OCHa 2 + CHjOH^KHO + NaBH3CN db -nhch2-^^hoch3 h3co 4t2 * HCHO * NaBH3CN 1c -ncch33Ch2<^^-〇i h3co; * Hj/Pd-C ύύ -nhch3 2 4 HCHO + NaBH3CN le -ncch3〕2 ]+ 〇CCHaCH〇D2 ^ NaBH3CN £1 -N Q \t 3 4 NH=CHOEt«HCI -NHChtNH CH, 2 " — N —烷基，一醛基和一甲亞胺醯基伊沙徽素A衍生 物之抗腫瘤活性： 合成9種2 " — N —烷基，一醛基和一甲亞胺醛基伊 (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁)

本纸張尺度遑用中家#準(0肪）甲4規格(210x297公釐) 81. 5 . 20.000(H) -11 - 218881 A 6 B6 經濟部中央標準局员工消費洽作社印製 五、發明説明（id 沙徽素A衍生物並和母體化合物比較測試對抗B 1 6黑瘤 細胞之體外胞毒性及對抗P 3 8 8白血病及B 1 6黑廇之 體内抗腫瘤活性。 在體外胞毒性實驗中•老鼠黑瘤B16—F10細胞 成長及維持於5% C〇2孵餐器中，37C及灞化氛圍 下之Eagle’s最小必要介質（Nissui)中，該介質含有卡那 .徽素（kanamyein) (6〇Wg/miM ,補充有經熱去活 化之胎牛血清（10%)和非必要胺基酸（〇. 6%)。 收集自然對數成長之B16—F10細胞，計數並以 2. 0X104細胞之濃度懸浮於培養液中，將細 .胞懸浮液（180/i 5)植入96分格徹量板之分格内並 孵養2 4小時。在分格中加入測試化合物（2 0 // )且 再孵餐72小時。在使用中性紅色溶液染色活細胞之後， 在540nm下比色測定胞毒性。所有測試衍生物産生適 當之小於伊沙徽素A的對B16_F10細胞的體外胞毒 性。（表4)。 在所測試之衍生物當中，産生相當潛效胞毒性之6種 衍生物之體讨班:腫瘤活性傜於淋巴球性白血性P 3 8 8和 黑瘤B16条统中測定。雌性CDF: (P388用）及 雄性BDF: (B16用）蹺鼠分別由腹膜内注射接種以 106P388細胞及0· 5m$ 1 0 % B16接® 質（第0天）。測試化合物由腹膜内投服至鼸鼠，在 P388条统為在1一3天内毎天一次（QlDx3)而 在B 16条统内為在第1、5和9天毎天一次（ Sk尺度ϋΛ + 職·议準(CMS)甲4規格(210X297公愛） ' 81. 5. 20,000(H) (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝. 訂< 線· 218881 五、發明説明（ιί Q 4 Dx 3 )並觀察動物5 0天。測定測試動物對未經治 療之對照組動物的平均存活時間（MS Τ)增加百分比並 以T/C%記載。T/C%值為125或更大之化合物據 認為具有顯著抗腫瘤活性。如表4中所示地，2 〃一 N — 異丙基伊沙徽素A , ( 4 a ) , 2 " — N —甲基伊沙徽素 A , (4 d ) ,2" — N,N —二甲基伊沙徽素A,( 4 e )和2 〃一N —甲亞胺醯基伊沙徽素A HCi,( 在最少有效劑置（MED)之活性偽10 — 30倍小 於母體化合物且在具有P388之鼸鼠中，産生相當有限 之赛命的延長。其他衍生物在所測試之劑S下無活性。在 B 1 6条統中測試時，衍生物4 d · 4 e和5_就Μ E D而 言之抗腫瘤活性亦10-30倍小於伊沙徽素Α (表5) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝- 訂- 線· 經濟部中央標準局员工消費合作社印製 *·纸張Λ度遑两+ 家榣準(CNS) T4規格(210 X297公釐） -13 - 81. 5. 20,000 (fl) 經 央 標 準 局 貝 工 消 費 .合 作 社 印 製 218831 A 6 B6 五、發明説明（1含 表4 :對B16-F10黑色素瘤之體外的胞毒性及鼸鼠中，對P388 白血病之體内抗腫瘤活性 T/C % of MST: 胞毒性 化合 物 R或- IC5〇 (U g/m 1 ) 20,2 10 3 1 0.3 0.1 3a ch3 55 Not done 3b ch2ch2cooh 56 Not done 3d ch2nh2 4.1 no no 95 4a -NHCH(CH3)2 1.5 140 120 110 4d -NHCH3 1.7 145 130 120 100 100 4e -N(CH3)2 0.36 140 130 110 4f 〇z>- 11 100 105 100 5 ** * -NHCH-NH 0.47 140 130 120 100 100 伊沙 徽素Αα) 0.07 Tox 205 170 150 137 120 *1平均存活天數 »2 劑量，mg/kg/day，QlDx3，ip 本紙張尺度遑用中《國家糅準(CNS)甲4規格(210X297公釐） -14 - 81. 5 . 20,000(1) (請先Μ讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝· 訂- 線< 2,18831 έΐ五、發明説明（1沒 袠5:鼹鼠中對B16黑色素瘤之體内抗腫瘤活性 化合物 T/C % of MST*2 10” 3 1 0.3 0.1 4d 135 115 100 106 4e 132 109 103 5 150 126 103 100 1 含282 208 168 128 115 (4/8)" (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝. 訂· 經濟部中央標準局貝工消費+作社印製 »1平均存活天數 *2 劑量 mg/kg/day，Q4Dx3 ip *3存活者數目/第50天測定 本發明範揮包含本發明伊沙徽素A衍生物之製法。 本發明之另一目的係為提供藥學组成物，其包含有效 抑制腫瘤數量之通式B或IV化合物，以及愔性藥學上可 接受載匾或稀釋劑。 依本發明之另一目的像為提供治療罹患腫瘤之動物（ 宜為哺乳類）宿主的方法，其包括投服有效抑制劑置之通 式I或IV化合物抗生素至前述宿主。 本纸張ΛΑϋ財《 B家科_T_(2U»xM7公釐) c ,ηηηη A 6 B6 218881 五、發明説明（ (請先閲讀背面之注意事項再場窝本頁) 適當組成物之實例包括口服固態組成物，其諸如片劑 、膠囊、九粒、粉末及顆粒；口服液態組成物，其諸如溶 液、懸浮液、糖漿及酊劑以及非經腸投服用製劑，諸如無 菌溶液、懸浮液或乳液。它們亦可製造為無菌固態組成物 形態，其可於使用前溶入無菌水、生理食鹽水或某些其他 無菌注射介質中。 吾人了解本發明之伊沙徽素A衍生物之實際理想劑量 將依所使用之待定化合物，所諝配之特定組成物，使用棋 式及所處理之持定位茸，宿主及疾病而變。許多調整藥物 作用之因子將為熟悉此蕤之士盧及，前述因子例如年齡、 體重、性別、膳食習惯、投服時間、分泌途徑、宿主情況 、藥物组合、反應敏感性及疾病藤重程度。投服可以連續 方式或在最大可忍受劑置内週期性進行。一定症狀之最適 當施用速率可由熟悉此藉之士使用傳統劑置測定法輕易地 確定。 本發明藉下列實例說明，但不以其為限制範圍。 經 央 標 準 局 貝 工 消 费 .合 作 社 印 製 實例 合成2 〃一 N —乙醛基伊沙徽素A ( 3 a ) 在乾燥甲醇（2m5)中之伊沙徽素A ( 65. 4ms)及乙酸酐（0. lmi)之混合物在室溫 下攪拌1小時。加入水（lmi)且於真空中蒸發混合物 而得黄色油狀物，其藉由在矽膠上管柱層析而得 70. 5mg (10 0%)所要産物。 81. 5 . 20.000(H) 本纸張足度遑用中家tt準(CHS) T4規格(210 X297公釐） 16 - A6 B6 218881 五、發明説明（ Μ P 195-196*C〇 I R v max ( K B r ) cm"7 3 4 2 0, 1725, 1690, 1615, 1510, 1 3 8 0, 1 2 5 5, 1 2 4 0, 1 1 7 0, 1 1 2 0 〇 U V k max ( M e 0 H ) n m ( e ) 2 3 6 (3 5 2 0 0) , 265 (34500), 3 3 3 (6 0 5 0) , 3 7 9 (8 0 0 0), 4 0 0 (1 3 4 0 0) , 423 (1 4 8 0 0) 〇 2 Η N M R ( C D C 1 3 ) δ 0 . 8 8 ( 3 H , s ), 1 . 3 8 ( 9 H , m ), 2 . 6 8 ( 3 H , s ), 3 . 3 2 ( 3 H , s ), 5. 3 6 ( 1 H , d , J = 7 H z ), 5. 70 (1H, d , J = 4 H z ) 〇 元素分析：理值C 3 5 H 3 7 N 0 h ♦ Η 2 O : C 58.90, H 5.51, N 1.96。 實測值：C 5 8 . 5 9 , H 5.36, N 2 . 1 〇 實例2 : 本紙張尺度遑用中鹦鼷家樣準(CHS)甲4規格(210X297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填窝本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 81. 5 . 20.000(H)

-17 - 0 1 P 〇 0 oool Α6 Β6 五、發明説明（id 合成2〃 一 N - (3 —羧基丙醯基）伊沙徽素A (3b) 乾燥二噁烷（6. 5miM中之伊沙徽素A ( 65. 4mi)及琥珀酸酐（20mg)混合物在室溫下 攪拌3小時。在5它下加入甲醇（3m2)且蒸發混合物 至乾。殘餘物藉由製備鈒TLC (使用CH,Ci2: MeOH AcOH = 80:20:2洗提）純化而得 75mg黃色粉末，將其溶入NaHC〇3水溶液中。溶 液經調整於Ρ Η 3且於Dianion HP-20管柱上層析。管柱 依序用HsO和50%含水CH3CN洗提。綜合包含所要 産物之部份，蒸發且低壓凍乾而得44mg (55%)化 合物3 b ,黃色粉末。 Μ Ρ 198-200¾ (dec.) I R v max (KBr) cm"i 3400, 1715, 1640, 1610, 1 5 0 5 〇 U V λ· m a x (MeOH) nm (ε) 經濟部中央標準局貝工消費+作社·^'^ (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 2 3 6 -CS 9 7 0 0) , 265 (36900), 3 3 4 (6 0 1 0) , 3 8 0 (8350), 4 0 0 (13800) ,4 2 3 (1 6 0 0 0) 〇 ΛΗ N M R ( C D C 1 3 ) δ 2 . 8 3 ( 3 H , s ) 3 . 3 0 ( 3 H , s ), 5 . 5 2 ( 1 H , d , J = 8 H z ), 本纸張尺度遑用中家#罕(CNS) f 4規格(210X297公釐） -18 - 81. 5 . 20.000(H) 經 央 標 準 Μ 貝 工 消 費 合 作 社 印 製 218881

五、發明説明（U 5 . 83 ( 1 H , d, J = 4 Η z ), 8 . 15 ( 1 Η , d , J = 8 Η ζ ) 〇 元素分析：理論值C37H33N〇HNa · 3/2ΗίΟ : C 55.36, Η 5.15, N 1 · 7 4 〇 實測值：C 55.40, Η,4. 87, Ν 1.92。 實例3 :

合成2 〃 一 Ν — （酞醛亞胺基乙酵基）伊沙徽素A ( 2-SL 於二噁烷（4mi)中之伊沙徽素A (6 5· 5mg )溶液中加入酞醯基甘胺酸之N-羥基琥珀醯亞胺酯（ 60.4mg)和NEt3 (20mg)。混合物在室溫 下攪拌2天且於真空中蒸發。殘餘物用水碾磨而得黄色固 體，其再於矽膠上管柱層析纯化而得76mg (90%) 化合物3 c 〇 MP 187-189^0 1 R v max ( K B r ) c m '' 1770, 1 7 1 5, 1 2 5 0, 1 1 4 0, 1110, 1065, 775〇 U V λ·«* ( M e 0 Η ) η m ( ε ) 2 2 0 (5 6 7 0 0) . 2 3 5 (4 7 6 0 0), 本紙張足度遑用中家«準(CHS) Τ 4规格(210X297公«) 81. 5 . 20.000(H) (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁} 裝· 訂- 線· -19 218881 A 6 B6 五、發明説明（1$ 2 6 6 ( 3 7 0 0 0 ) » 3 3 3 ( 6 0 3 7 9 ( 8 4 8 0 ) t 3 9 9 ( 1 4 2 4 2 2 ( 1 5 7 0 0 ) 〇 1 Η Ν Μ R ( C D 3 0 D ) δ 1 3 2 (3 Η » d 9 J = 6 H z ) 9 1 4 3 ( 3 Η > d ， J = 6 H z ) f 1 4 5 ( 3 Η 9 s ) 9 2 7 8 ( 3 Η t s ) t 3 3 0 (3 Η t s ) t 5 5 8 ( 1 Η t d > J = 8 H z ) > 5 9 0 ( 1 Η 9 d » J = 4 H z ) > 7 0 8 ( 4 Η t s ) o (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝- 訂- 元素分析：理論值CwH〇N2〇^· 2H2〇 : C 5 8. 9 0, Η 5 . 06, N 3.19。 實測值：C 5 8 . 7 1 , Η 4.71， N，3 . 0 3 〇 η ^ 實例4 : 合成2 〃一Ν —甘胺醛基伊沙徽素A ( 3d ) 於E t Ο Η ( 0 . 5 m 中之酞醯亞胺基衍生物 3 c (6 2mg)溶液中加入80%含水NH2NH2 ( 10 /iJ?)並保持混合物於室溫下6小時且於真空中濃缩 。殘餘物藉由製備级TLC纯化用2% CHC53中之 ♦紙張尺度遠用中家樣毕(CNS)甲4規格(210X297公«) 線. 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 81. 5 . 20,000(11) -20 - Ο Ί 8881 Α6 Β6 經濟部中央標準局兵工消費合作社印製 五、發明説明（1今 0 H 洗提 ) 而得 5 2 m g 固 體 o 此固 體 再於 一 2 0 上管柱層析純化而得 4 5 m g ( 8 6 %) d 〇 Μ P 2 0 3 一 2 1 0 t： ( d e c • ) I R V m a X ( K B r ) c m -i 1 6 8 5 9 1 3 7 5 > 1 2 5 0 $ 1 1 5 0 t 1 1 1 0 f 1 0 7 0 f 1 0 4 5 t 7 7 5 0 U V λ m a X ( M e O H ) n m ( e ) 2 3 6 ( 3 7 0 0 0 ) 9 2 6 6 ( 3 2 9 0 0 ) 3 3 2 ( 5 5 4 0 ) t 3 7 9 ( 7 5 3 0 ) 4 0 0 ( 1 2 4 0 0 ) > 4 2 2 ( 1 3 9 0 0 ) I H N M R ( C D 3〇 D ) δ 1 • 3 2 (3 H 9 d t J = 6 H z ) 9 1 • 4 0 ( 3 H f s ) t 1 • 4 1 ( 3 H t d > J = 6 H z ) t 1 • 8 2 (2 H t s ) » 2 • 8 Ό· 二(. 3 H » s ) 9 3 • 3 0 (3 H 9 s ) f 5 • 4 6 ( 1 H » d 9 J = 8 H z ) t 5 • 8 1 ( 1 H 9 d » J = 4 H z ) 〇 E I 一 Μ S ( • 1 n b e a m ) • • m / z • 7 1 0 ( M + ) 9 4 9 4 3 7 6 9 3 3 4 > 2 1 7 〇 ♦紙張尺度遑用中鼷顯家«準(CNS) T4規格(210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再墦窝本頁) 裝· 訂· 線· 81. 5 . 20.000(H) -21 - 218881 it 經濟部中央標準局风工消費合作社印製 五、發明説明（2() 實例5 : 合成2，一N —異丙基伊沙徽素A ( 4 a ) 在二噁烷中之伊沙徽素Α(65· 4mg )，丙酮（0· lmiH 及 NaBHaCN (30mg) 混合物在室溫下攪拌17小時。反應混合物於真空中蒸發 .而得黃色塊體，其再溶入HCe稀水溶液中並於Dianion HP-20管柱上層析，用5 0%甲醇洗提。綜合含所要産物 部份並蒸發而得黃色粉末，其再由製備级TLC純化而得 19mg (27%)樣題化合物。 MP 175 - 180tMdec.)。 I R v max (KBr) cm_i 3430, 1690, 1610, 1505, 1 3 7 0, 1 2 5 0, 1145,1110, 1 0 4 0 , 7 8 0 〇 U V λ »>βχ ( Μ e Ο Η ) η m ( ε ) 2 3 7-(4 4 0 0 0 ) , 2 6 5 (3 9 1 0 0). 3 3 3 (6 8 4 0) , 3 7 8 (9 3 7 0), 3 7 8 (9 3 7 0) ,3 9 8 (1 4 9 0 0)， 4 2 1 (1 7 1 0 0) 〇 i Η Ν Μ R ( C D C 1 3 ) δ 0. 28 ( 3 Η , d , J = 7 Η ζ ), 0. 5 2 ( 3 Η , d , J = 7 Η ζ ), (請先閲讀背面之注意事項再填窝本真) 裝. 訂< 線. 本紙張尺度il用中家«準(CNS)甲4規格(210X297公*) 81. 5 . 20,000(1) -22- 8881

bI 五、發明説明（2i 1 .· 3 3 (9 Η 9 m ) 9 2 . 6 4 ( 3 Η 9 S ) 9 3 . 4 1 ( 3 Η $ S ) t 5 . 4 8 ( 1 Η 9 d 9 J =7 H z ) 5 . 5 8 ( 1 Η 9 d t J =4 H z ) E I 一 Μ S ( • η b e am ) • • m / Z • • 3 3 4 » 2 0 2 〇 (請先閱讀背面之注意事項再填窝本頁) 經濟部中央標準局貝工消費含作社印製 實例6 : 合成2 " — N —（2, 4 —二甲氣基苯甲基）伊沙徽素a (4 b ) 於70%含水CH3CN (5mi)中之伊沙徽素A (65mg)及2, 4 —二甲氣基苯甲醛（8 5mg)溶 液中加入NaBH3CN (30mg)且混合物在室溫下 攪拌過夜，用1N稀HCP稀釋及用CHCia萃取。有 機萃取液用1 N含水Ν Η 4〇 Η洗滌，於N a 2 S 0 4上乾 燥及在真空中蒸發。殘餘物用含水t_Bu〇H碾磨而得 44mg (5兵％)標題化合物晶醱。由低壓凍乾母液而 得另一産物（35mg, 44%)。 MP 159-161t：0 I R v max (KBr) cm-i 3 4 0 0, 1 6 5 9, 1615,1510, 1 3 7 0, 1 2 5 0, 1 2 1 0, 1105, 本纸張足度遑用中鼸國家供準(CNS)甲4规格(210x297公*) 81. 5. 20.000(H) 23 - 218881 A 6 B6 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 五、發明説明（2含 1 0 7 5 ，1 0 4 5 1 7 8 0 0 U V λ max ( Μ e 0 H ) n m ( ε ) 2 3 5 ( 3 5 3 0 0 ) t 2 6 7 ( 2 8 9 0 0) 3 3 6 ( 5 0 8 0 ) » 4 0 1 ( 1 0 9 0 0 ), 4 2 4 ( 12 3 0 0 ) o 1 Η Ν MR (C D C 1 3 ) δ 1 3 3 (3 Η > d t J = 6 H z ) f 1 4 0 (3 Η > d > J = 6 H z ) $ 1 4 4 (3 Η 9 s ) » 2 7 8 (3 Η t s ) > 3 0 6 (3 Η 9 s ) t 3 3 9 (3 Η 9 s ) t 3 5 3 (3 Η 9 s ) 5 2 8 (1 Η t d d t J = 8 & 2 H z ), 5 5 2 (1 Η t d f J = 8 H z ) > 5 6 4 (1 Η 9 d 1 J = 2 H z ) 5 8 5 (1 Η 9 d » J = 4 H z ) » 6 3 Η » d f J = 8 H z ) 〇 分析 理論值 C 43η 4 5 N 0 1 5 ♦ 3 / 2 H 2 0 ： C 6 0 • 7 1 9 H 5 • 8 2 » Ν 1 . 6 9 0 值 • • C 6 0 • 8 9 f H 6 • 3 9 » Ν t 1 . 7 2 o 表紙張尺度遑用中家«準(CNS)甲4規格(210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝- 訂- 線- 81. 5. 20,000(fl) -24 - 218881 五、發明説明（23 實例7 : 合成2办一 N — （2，4 一二甲氣基苯甲基）一 2 " — N 一甲基伊沙徽素A ( 4 c ) 於7 0%含水CHaCN中之N —苯甲基衍生物（ 4 b」(119mg)和 37% 含水 HCH0 ( 4 7 m g )之混合物中加入NaBHaCN (47mg),再於室 .溫下攪拌混合物22小時。反應混合物用IN HCi?稀 釋且用CHC)?3萃取。萃取液用IN ΝΗ,ΟΗ洗滌 且於減壓下蒸發。殘餘物於矽膠上管柱層析純化而得 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局工消費合作社印製 0 5 m s ( 8 7 % ) 單 甲 基 衍生物 4 JL. 〇 Μ P 1 4 1 一 1 4 3 V 0 I R V m α X ( K B Γ ) C m -1 3 4 0 0 t 1 7 2 0 ( s h ) 9 1 6 9 0 t 1 5 0 5 » 1 3 7 5 t 1 2 5 0 » 1 0 7 0 $ 1 0 5 0 9 7 8 0 〇 U V λ m a X ( M e 0 H ) n m ( ε ) 2 3 5 -(' .4 2 8 0 0 ) 9 2 6 7 (3 3 5 0 0 ) 3 3 5 ( 5 5 8 0 ) $ 3 8 1 ( 7 7 0 0 ) > 4 0 0 ( 1 2 1 0 0 ) 9 4 2 2 ( 1 4 1 0 0 ) I Η N M R (c D c 1 3 ) δ 1 • 2 5 ( 3 H > d t J = 6 H z ) 9 1 • 3 9 (3 H t d f J = 6 H z ) • 1 • 4 0 ( 3 H $ s ) » 裝. 訂- 線· 81. 5 . 20.000(H)

經濟部中央標準局β工消費全作社印製 五、發明説明（24 2 . 2 8 (3 Η 9 s ) » 2 . 5 8 (3 Η * s ) % 3 . 4 0 (3 Η s ) t 3 . 4 7 (3 Η t s ) 9 3 . 6 0 (3 Η 9 s ) f 5 . 4 0 (1 Η t d $ J = 8 H z ) 9 5 . 6 0 (1 Η f d » J = 4 H 2 ) 9 5 . 7 2 (1 Η f d d t j = 8 & 2 Hz ), 6 . 1 2 (1 Η f d » J = 2 H z ) 9 6 . 7 3 (1 Η t d » J = 8 H z ) 0 元 素 分析 • • 理論值 C 4 3 H 4 7 N 0 l 5 ♦ Η ,0 ： C 6 1 • 7 9 » H 5 • 9 1 t N 1 . 6 8 o • 實 測 值： C 6 1 • 7 5 > H 5 • 9 4 f ' N 2 . 4 0 〇 實 例 8 ： 合成 2 一 N Γ'甲 基 伊沙徽 素 A ( 生 ςΙ ) 在7 0 % 含水 Τ H F ( 3 m 9. ) 和1 N H C 义( 0 • 8 m SL ) 混合物 中之 4 _£L ( 1 0 0 m g ) 溶液在 1 0 % P d -C ( 1 0 0 m 8 ) 存在及室溫與一 大氣壓 下氩化7小時。濾除催化劑且於真空中蒸發濾液。殘餘物 於矽膠上管柱層析纯化而得52mg (6 15)揉題化合 物。 本紙張凡皮遑用中飄·家樣毕(CNS)T4規格(210X297公*) 81. 5 . 20,000(11) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 訂- 線. -26 ~ 218881 A 6 B6 五、發明説明（2$ 經濟部中央標準局兵工消費+作社印製 Μ P 1 9 2 — 1 9 4 t： ( d e c • ) 0 I R V m a X ( K B r ) c m -1 3 4 0 0 t 1 6 9 0 » 1 3 7 5 t 1 2 5 0 1 0 7 0 t 1 0 4 5 > 7 8 0 O U V λ m a X ( M e 0 H ) n m ( ε ) 2 3 6 ( 3 4 1 0 0 ) » 2 6 6 ( 2 9 8 0 3 3 2 ( 5 4 3 0 ) » 3 3 7 ( 6 8 2 0 ) 3 9 8 ( 1 0 6 0 0 ) 1 4 2 0 ( 1 1 7 0 1 H N M R ( C D c 1 3 + C D 3〇 D ) 1 • 2 3 ( 3 H f d » J = 6 H z ) t 1 2 8 ( 3 H t d > J = 6 H z ) » 1 • 4 0 ( 3 H 9 s ) 9 2 • 3 6 ( 3 H 9 s ) f 2 • 8 2 ( 3 H f s ) 1 3 ♦ 4 3 ( 3 H t s ) f 5 • 6 1 ( 1 H 9 d » J = 8 H z ) » 5 • 9 2' /-( 1 H f d 9 J = 4 H z ) 〇 S I — M S m / z 6 6 8 ( M + H ) * 9 3 3 4 9 1 7 4 y 1 0 0 〇 實例9 : 合成2 〃一 N, N —二甲基伊沙徽素A 於二噁烷（4m)M中之伊沙撤素A (65. 5mg 本紙張尺度通用中家«準(CNS)甲4規格(210X297公*) 81. 5 . 20,000(fl) (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝- -訂- 線. -27 - ^18881 A6 B6 糞 央 搮 準 局 Ά 工 消 費 合 作 社 印 製 五、發明説明（20 )和37%含水HCHO (85//j?)混合物中加入 NaBH^CN (30mg)且於室溫下攪拌混合物3小 時。反應混合物在真空中蒸發而得黃色固體，其在矽膠管 柱上層析。綜合含産物部份且濃縮至乾。殘餘物藉由製備 级TLC純化而得36. 7mg (54%)二甲基衍生物 4 e » Μ Ρ 180-185*0。 1 R v max (KBr) cm·1 1720, 1 7 0 0, 1 6 9 0, 1 5 0 5, 1375,1235,1145,7750 U V k m a x (MeOH) nm (e) 2 3 6 (3 7 2 0 0) ,2 6 6 (3 3 6 0 0). 3 33(5650),3 79(7700), 3 9 9 (1 2 5 0 0) ,4 2 2 (1 3 8 0 0) 〇 NMR (CDaOD) δ 1· 30 ( 3 H , d , J = 6 H z ), J = 6 H z )， 2 · 2 · 5 , 5 · β'Τ/Χ 3 H , d , i3 9 ( 3 H , s ) 0 5 ( 6 H，s ) 7 2 ( 3 H . s ) 3 -6 ( 3 H , s ) 5 0 ( 1 H , d , 8 5 ( 1 H，d， J = 8 H z ) J = 4 H z ) 本紙ftXAii·用卞氣家樣準(CNS) T4規格(210 x297公釐） -28 - 81. 5, 20,000(¾) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) A6 B6 218881 五、發明説明（2ί 元素分·析：理論值ChHwNOu· 2Η2〇 : (請先《讀背面之注意事項再填窝本頁) C 5 8. 5 7, Η 6.04, Ν 1.95。 實測值：C 5 8 . 3 2 , Η 5.79, Ν 2.07〇 實例1 Ο : 合成2 "—去胺基一 2 〃一嗎啉基伊沙徽素A ( 4 f ) 於伊沙徽素A (98. 5mg)和2, 2/-連氣基 二乙醛（由CH3CN中之2, 5 —二氫呋喃（ 4. 5mi?)奥氧化反應製成之混合物中加入 NaBHaCN (47mg)且於室溫下攪拌混合物 1. 5小時。有機溶劑於真空中蒸發而殘餘之水溶液在 pH—20管柱上層析。綜合含所要産物之部份且於真空 中蒸發而得黄色塊體，其再藉由製備级TLC純化而得 35. 5mg (33%)所要産物。 經濟部中央標準局具工消費合作社印製 MP ”2-1861 I R v max (KBr) cm_i 1720, 1690, 1375, 1255, 1 2 3 5, 1150, 1120, 1070, 7 8 0 〇 U V λ …（MeOH)nm(e) 2 3 6 ( 3 9 4 0 0) ，265 ( 3 8 8 0 0), 本紙張尺度遑用中家樣準(CNS) f 4規格(210X297公*) -29 - 81. 5. 20.000(H) 218881 經濟部中央標準局员工消費合作社印製. A 6 B6 五、發明説明（2$ 3 3 4 ( 6 4 4 0 ) * 3 7 9 ( 8 7 9 0 ) 9 4 0 0 ( 15 0 0 0 ) » 4 2 3 ( 1 6 8 0 0 ) O 1 Η Ν MR ( c D 3〇 D ) δ 1 • 2 8 (3 H » d > J = 6 H z ) » 1 • 3 8 (3 H $ s ) t 1 • 4 2 (3 H ， d » J = 6 H z ) » 2 • 8 0 (3 H t s ) f 3 « 3 ( 3 H t s ) > - 5 • 3 8 (1 H 9 d f J = 8 H z ) f 5 • 7 8 (1 H t d t J = 4 H z ) 〇 E I — Μ S ( • 1 n b e a m ) • • m / Ζ 7 2 3 ( M ♦ ) 9 4 9 2 ， 3 8 9 , 3 3 4 , 2 3 0 Ο 元 素 分析 ♦ 理論值 C 3 7 H 4 1 N 0 1 4 ♦ 2 H 2 〇 : C 5 8 • 4 9 f H 5 • 9 7 9 Ν 1 . 8 4 0 實 測 值 ·· C 5 8 • 6 0 9 H 5 • 4 8 * Ν - A . 9 4 o 實 例 1 1 • • 合成 2 // 一 Ν 一甲 醯亞胺 基 伊沙徽 素 A 氫氣 酸鹽 於 C Η C 9. 3 和 M e 0 H ( 9 • 1 t 4 mi )混合物 中之伊沙徽素A (13 lmg)懸浮液中，在Ot：下加入 甲亞胺酸乙酯氫氣酸鹽（66mg),再於室溫下攪拌混 本纸張尺度遑用中B «家揉毕(CNS)甲4規格(210x297公*) 81. 5 . 20.000(H) (請先閲讀背面之注意事項再填窝本耳) -30 - A 6 B6 五、發明説明（29 合物3‘9小時。將MeOH (8mi2)及乙酸（2mi) 加至反應混合物中且於室溫下攪拌澄淸溶液〇· 5小時並 於真空中蒸發。殘餘物藉由製備级TLC純化而得 52mg (38%)化合物[_。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 MP 228-2301 I R V m a X ( K B r ) 3 3 8 0 t 1 7 1 0 1 1 5 9 0 $ 1 5 0 5 O U V λ m a X ( M e 0 H 2 3 7 ( 4 0 9 0 0 ) $ 3 3 3 ( 6 6 4 0 ) $ 3 3 9 9 ( 1 4 5 0 0 ) > 1 Η Ν M R (C D c 1 1 • 0 — 1 • 6 ( 9 H 1 2 • 6 0 ( 3 H t s ) 9 3 • 3 5 ( 3 H 9 s ) t 5 • 6 5' /( .1 H t d ΐ t J 5 • 8 5 ( 1 H » b Γ s 元素分析：理論值C34H36N C 5 1. 6 9, Η Ν 3.55。 實測值：C 5 1 . 5 7 , Η Ν 3.52。 (dec. cm"' 6 3 0, 1 6 1 0, )η m ( ε ) 2 6 6 (3 7 4 0 0), 7 9 (8 9 3 0), 4 2 2 (1 6 4 0 0) 〇 3 + C D 3 Ο D ) δ m ), =8 Η ζ ),)〇2〇 i 3 · 3 Η C 1 ： 4.98, 4.74, (請先閲讀背面之注意事項再蜞窝本頁) 裝. 線· 81. 5 . 20,000(1)

Claims (1)

1. 六、申請冬則乾固 4'‘ A7 B7 C7 D7 附件二A : 第81104189號專利申請案 中文申請專利範圍修正本 民國82年2月修正 .下式化合物： Ο OH

   式中，R示Ci _C3烷基，其傜未經取代或經羧基、胺 基或酞醯亞胺基取代。 2 .下式化合物·· {請先聞讀背面之注意事邛再蜞莴本頁) •装· 經濟部十央標準局R工消合作社印^ Ο OH

   •綠. 本纸a尺度逋用中國困家樣準(CNS)T4規格(210x297公;It) 7 7 7 7 A B c D 218881 六、申請專利範面 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 式中，R和R』各別示Η、C /_ C 3烷基、芳烷基、甲 亞胺醯基、乙亞胺醯基或胖基，唯其先決條件為R和R2 兩者不同時示Η,以及當R和R2與其所連接之氮原子接 在一起時、可示嗎啉基。 3.如申請專利範圍第i項之化合物，其傜為2 〃一 N — （3 —羧基丙醯基）伊沙徽素A (eisamicin A) ·， 2 " — N - （酞醯亞胺基乙醯基）伊沙徽素A;或者 2 〃 一 N -甘胺醯伊沙徽素A。 4 .如申請專利範圍第2項之化合物，其偽為 2 〃一 N —異丙基伊沙徽素A ; 2 〃 一 N— (2，4_二甲氣基苯甲基）伊沙徽素A > 2 " — N — （2, 4 —二甲氣基苯甲基）一2 "-N 一甲基伊沙徽素A ; 2 〃 一 N —甲基伊沙徽素A ; 2 "― N, N —二甲基伊沙徽素A ; 經濟部十央櫺準局貝工消费合作社印製 2 〃 一去胺基一 2 〃 一嗎啉基伊沙徽素A ;或者 2 〃 一 N —甲醯亞胺基伊沙徽素A氫氯酸鹽。 5 . —種製備如申請專利範圍第1項之化合物的方法 ，其包括使用琥珀酸酐來N—醯化伊沙徽素A。 6. —種製備如申請專利範圍第1項之化合物的方法 ，其包括使用酞醯基甘胺酸之經活化酯來N—醯化伊沙徽 素A,然後，再用肼去保護。 7 . —種製備如申請專利範圍第2項之化合物的方法 本紙張尺度適用中困B家樣準（CNS)甲4規格(210x297公釐） -2 - A7 B7 C7 D7 218881 六、申請專利範面 ，其包括使用醛類或_類來還原性N —烷化伊沙徽素A。 8. —種製備如申請專利範圍第2項之化合物的方法 ,其包括還原性N-烷化N—經保護之伊沙徽素A且隨之 去保護。 9. 一種製備2 〃_N —甲亞胺醯基伊沙徽素A氫氣 酸鹽之方法，其包括使用甲亞胺酸乙酯氫氣酸鹽處理伊沙 徽素A。 10. —種抗腫瘤之藥學組成物，其包含如申請專利 範圍第1一4項中任一項之化合物作為活性成份，以及一 或多種藥學上可接受載體或稀釋劑。 11. 如申請專利範圍第1一4項中任一項之化合物 ,其係充作抗腫瘤劑。 (請先«1讀背面之注意事項再填寫本页) _装. 經濟部十央標準局貝工消«·合作社印¾. 本纸張尺度適用中a Η家標準（CNS)甲4規格(210x297公釐） -3 -