JPH05208992A - ２位のアミノ基を化学修飾したエルサマイシンａ誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】 以下の構造式で示されるエルサマイシンＡ誘
導体及びその製造法。 （ＲがＨで、かつＲ^１がＣＯ−（Ｃ_１−_３）アルキル
基；Ｒ，Ｒ^１がＨ，Ｃ_１−_３アルキル基、アラルキル
基、ホルムイミドイル基、アセトイミドイル基、アミジ
ニル基であるか、結合した窒素原子と共にモルホリノ基
等を形成していてもよい。） 【効果】 上記誘導体は秀れた抗腫瘍活性を示す。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、よりよい水溶性、改善された抗
腫瘍活及び／又は毒性の少ない新規なエルサマイシンＡ
誘導体に関し、その生産方法、該誘導体を活性成分とし
て含む組成物及び該組成物を用いる治療方法に関する。
エルサマイシンＡはＪ９０７−２１株（ＡＴＣＣ ３９
４１７）と命名された放線菌のエルサマイシンＡ生産株
又はその変異株の培養により製造される抗生物質であ
る。エルサマイシンＡは好気性グラム陽性菌及び嫌気性
菌に対して抗菌活性を発現する。この化合物は、白血病
細胞Ｐ３８８、リンパ性白血病細胞Ｌ１２１０、メラニ
ン産生黒色腫Ｂ１６をふくむマウス腫瘍に対しても試験
管内および生体内試験に於て活性を示すものである（小
西ら、エルサマイシン、チャートリューシン（chartreu
sin)関連新規抗腫瘍抗生物質、第Ｉ報、生産、単離、性
状及び抗腫瘍活性、ジャーナル オブ アンチバイオテ
ィクス（J. Antibiotics）３９巻：７８４−７９１（１
９８６）；米国特許第4,518,589 号、小西ら、１９８５
年５月２１日発行）。エルサマイシンＡの構造（構造式
Ｉ、以下に開示）は決定されており、チャートリューシ
ン（構造式II、以下に開示）に極めて近似した構造を示
している（菅原ら、エルサマイシンＡ及びＢ、チャート
リューシン関連新規抗腫瘍抗生物質、第II報、エルサマ
イシンＡ及びＢの構造、ジャーナル オブ オルガニッ
クケミストリー（J. Org.Chem.）５２巻：９９６−１０
０１（１９８７））。

【０００２】

【化３】

【０００３】

【化４】

【０００４】エルサマイシンＡ及びチャートリューシン
の両者は、ともに同一のアグリコン、チャータリンを保
有しているが、二糖鎖部分が異なっている（リーチ(Lea
rch)ら、チャートリューシン、ストレプトマイセス チ
ャートリューシス（Streptomyces chartreusis) によっ
て生産される新規抗生物質、ジャーナル オブ アメリ
カン ケミカル ソサイエテイ（J. Am. Chem Soc.) 、
７５巻：４０１１−４０１２（１９５３）；バイスラー
（Beisler ，J. A.)、チャートリューシン、ストレプト
マイセス生産糖抗腫瘍抗生物質、プログレス イン メ
ディシナル ケミストリー(Progrers in Medicinal Che
mistry) 編集者、エリス（G. P. Ellis)及びウエスト
（G. B. West）１９巻：２４７−２６８、エルスビア
プレス社出版、アムステルダム、（１９８２）；シモニ
ッチ(Simonitsch)ら：チャートリューシンの構造（Uebe
r die Struktur des Chartreusins)第Ｉ報、ヘルベチカ
キミカ アクタ（Helv. Chim. Acta）４７巻：１４５
９−１４７５（１９６４）；アイセンフス（Eisenhuth)
ら、チャートリューシンの構造第II報、ヘルベチカキミ
カ アクタ（Helv. Chim. Acta）４７巻：１４７５−１
４８４（１９６４））。両者の化合物の化学的な相互変
換はまだ報告されていない。

【０００５】エルサマイシンＡの化学的な修飾の過程
で、当該発明者はエルサマイシンＡの２″位のアミノ基
をアシル化又はアルキル化によって選択的に修飾するこ
とにより、より水溶性の高い、抗腫瘍性の改良された及
び／又は毒性の少ないエルサマイシンＡが得られること
を発見した。本発明は、より高い水溶性を示し、改良さ
れた抗腫瘍活性及び／又は毒性の少ない新規なエルサマ
イシンＡ誘導体を提供するものである。特に本発明は、
エルサマイシンＡの２″−Ｎ−アルキル、−アシル及び
−ホルムイミドイル誘導体の製造法を開示するものであ
る。本発明は更に、本発明のエルサマイシンＡ誘導体か
らなる群から選ばれた少なくとも１つの誘導体を活性成
分として含む抗腫瘍組成物を提供する。本発明は、更に
上記の抗腫瘍組成物を使用する癌治療法を提供する。更
に又、上記のエルサマイシンＡ誘導体の製造法を提供す
るものである。

【０００６】小西らの米国特許第4,518,589 号にはエル
サマイシンＡ（構造Ｉ、上記）と命名された抗腫瘍剤の
製造法及び単離法が開示されている。上記に示したエル
サマイシンＡ化合物は、Ｊ９０７−２１株（ＡＴＣＣ
３９４１７）として命名された放線菌のエルサマイシン
Ａ生産株の醗酵の主たる生産物質である。本発明によっ
て、エルサマイシンＡの２″−アミノ基のアシル化又は
アルキル化によって、改善された抗腫瘍活性、より優れ
た水溶性及び／又はより少ない毒性を示す新規な誘導体
が得られることが判明した。

【０００７】本発明のエルサマイシンＡ誘導体は、一般
式III 及びIVで示す構造

【０００８】

【化５】 （式中、ＲはＣ₁ −Ｃ₃ アルキル基であり、無置換ない
しはカルボキシル基、アミノ基又はフタルイミド基で置
換されていてもよい）であり；

【０００９】

【化６】 （式中、Ｒ及びＲ¹ は独立に水素、Ｃ₁ −Ｃ₃ アルキル
基、アラルキル基、ホルムイミドイル基、アセトイミド
イル基、又はアミジニル基であり、Ｒ及びＲ¹ は同時に
水素であることはなく、Ｒ及びＲ¹ はそれらが結合した
窒素原子と共に結合してモルホリノ基、ピペリジノ基又
はピロリジノ基を形成していてもよい）である。

【００１０】本明細書及び特許請求の範囲で使用した
“Ｃ₁ −Ｃ₃ アルキル”なる語は（説明を付記しない限
り）メチル基、エチル基、プロピル基及びイソプロピル
基のような１個から３個の炭素原子よりなる分枝鎖また
は直鎖アルキル基を意味する。本発明の化合物は、例え
ば表２及び表３に示されている製造過程によって製造す
ることが出来る。表２に示されているように、酢酸及び
コハク酸を用いて酸無水物法によりエルサマイシンＡは
Ｎ−アシル化され、化合物３ａ及び３ｂがそれぞれ得ら
れた。Ｎ−グリシル誘導体３ｄはフタリルグリシンの活
性エステルによってアシル化し続いてヒドラジンを用い
て脱保護することによって好収率で得られた。

【００１１】表３に示されているように、アルデヒド又
はケトンを用いたエルサマイシンＡの還元的Ｎ−アルキ
ル化反応はＮ−アルキル誘導体を与える。ナトリウム
シアノボロハイドライド（NaBH₃CN)の存在下、エルサマ
イシンＡとアセトンとの反応はＮ−イソプロピルエルサ
マイシンＡ（４ａ）を与える。エルサマイシンＡと過剰
のホルムアルデヒド及びNaBH₃CN との反応はＮ, Ｎ−ジ
メチルエルサマイシンＡ（４ｅ）を５４％の収率で与え
る。限定した量のホルムアルデヒド及びNaBH₃CN を用い
てＮ−メチル化反応を行ってもアミノ誘導体、モノメチ
ルアミノ誘導体、ジメチルアミノ誘導体の混合物を与え
るので、Ｎ−モノメチルアミカシン誘導体の製造に用い
られる方法に類似した方法によりエルサマイシンＡのモ
ノメチル化を試みた。すなわちエルサマイシンＡを２，
４−ジメトキシベンヅアルデヒドとNaBH₃CN と反応させ
て、Ｎ−（２，４−ジメトキシ）ベンジル誘導体（４
ｂ）を得、この化合物にホルムアルデヒド及びNaBH₃CN
を用いて還元的Ｎ−メチル化反応を行うことによりＮ−
（２，４−ジメトキシ）ベンジル−Ｎ−メチル誘導体
（４ｃ）が得られた。接触水素添加による４ｃの脱ベン
ジル化反応はＮ−モノメチルエルサマイシンＡ（４ｄ）
を与えた。エルサマイシンＡのモノホリノ誘導体（４
ｆ）の製造はエルサマイシンＡと２，２′−オキシジア
セトアルデヒド及びNaBH₃CN との反応によって行った。
ホルムイミドイル誘導体は通常の方法、すなわちエルサ
マイシンＡをエチルホルムイミデート塩酸塩で処理する
ことにより化合物５が３８％の収率で得られた。表１に
本発明の化合物とそれぞれ番号を示す。

【００１２】

【表１】

【００１３】

【表２】

【００１４】

【表３】

【００１５】２″−Ｎ−アルキル、−アシル及び−ホル
ムイミドイルエルサマイシンＡ誘導体の抗腫瘍活性 ８種類の２″−Ｎ−アルキル、−アシル又は−ホルムイ
ミドイルエルサマイシンＡ誘導体を製造し、Ｂ１６黒色
腫細胞に対する試験管内細胞毒性試験及びＰ３８８白血
病及びＢ１６黒色腫に対する生体内試験を親化合物と比
較して行った。

【００１６】試験管内細胞毒性試験のために、カナマイ
シン（６０μｇ／ml）を含み熱不活性化処理した牛胎児
血清（１０％）及び非必須アミノ酸（0.６％）を補足し
たイーグルの最少必須培養液中で、マウス黒色腫Ｂ１６
−Ｆ１０細胞を３７℃にて５％炭酸ガスの加湿気流下の
培養器中で培養し維持した。指数関数的に増殖したＢ１
６−Ｆ１０細胞を採取し、細胞数を数えて細胞数が2.０
×１０⁴ 細胞／mlの濃度になるように培養液中に懸濁し
た。この細胞懸濁培養液（１８０μｌ）を９６−ウエル
マイクロタイタープレートに移植し、２４時間培養し
た。試験化合物（２０μｌ）をウエルに加え、そのプレ
ートを７２時間培養した。細胞毒性活性は、生存細胞を
ニュートラルレッド染色液で染色した後５４０nmで比色
定量して測定した。測定した全ての誘導体は、Ｂ１６−
Ｆ１０細胞に対してエルサマイシンＡと比較して緩和で
弱い試験管内細胞毒性を示した（表４）。

【００１７】試験を行った誘導体の中で強い細胞毒性を
示した６種の誘導体について、リンパ性白血病細胞Ｐ３
８８及びＢ１６黒色腫細胞系を用いて生体内抗腫瘍活性
を試験した。ＣＤＦ₁ 雌マウス（Ｐ３８８試験）及びＢ
ＤＦ₁ 雄マウス（Ｂ１６試験）にマウス１匹あたり１０
⁶ 個のＰ３８８細胞、１０％Ｂ１６細胞ブライをそれぞ
れ腹腔内注射した（０日）。試験化合物を、Ｐ３８８系
については１日目より３日目まで１日１回（Ｑ１Ｄ×
３）、又はＢ１６系の場合は１日、５日、９日目に１日
１回（Ｑ４Ｄ×３）マウスに腹腔内投与して動物を５０
日間観察した。薬剤投与しなかった対照動物に対する薬
剤投与した動物の中間生存時間（ＭＳＴ）の増加率を計
算してＴ／Ｃ％で示した。Ｔ／Ｃ％値が１２５以上の化
合物については高い抗腫瘍活性を示すものと考えた。表
４に示したように、２″−Ｎ−イソプロピルエルサマイ
シンＡ（４ａ）、２″−Ｎ−メチルエルサマイシンＡ
（４ｄ）、２″−Ｎ，Ｎ−ジメチルエルサマイシンＡ
（４ｅ）、及び２″−Ｎ−ホルムイミドイルエルサマイ
シンＡ塩酸塩（５）は、親化合物と比較して最少有効投
与量（ＭＥＤ）値について１０倍から３０倍活性が低
く、Ｐ３８８担腫瘍マウスの延命率は極めて限定された
ものであった。その他のものについては試験投与量では
活性を示さなかった。誘導体４ｄ、４ｅ、５はＢ１６系
で試験を行った場合も親化合物と比較して１０倍〜３０
倍弱い活性を示した（表５）。

【００１８】

【表４】

【００１９】

【表５】 本発明は本発明のエルサマイシンＡ誘導体の製造法をそ
の範囲内に含むものである。本発明の他の態様によれ
ば、腫瘍抑制に有効量の式III 及びIVの化合物を薬学的
に許容される担体または稀釈剤と組合せて含む医薬組成
物も提供される。他の態様によれば、本発明は腫瘍抑制
に有効量の式III 及びIVで示される抗生物質を腫瘍に罹
患した動物宿主、好ましくは哺乳動物に投与することを
含む化学療法を提供する。好適な組成物の例としては、
経口投与用の固型剤として錠剤、カプセル剤、丸剤、散
剤、及び顆粒剤を挙げることができ、又経口投与用の液
剤としては溶液剤、懸濁剤、シロップ剤及びエリキシル
剤を挙げることができ、非経口剤としては滅菌溶液、懸
濁溶液、乳剤を挙げることができる。該製剤は滅菌固体
製剤として製造することもでき、これらは使用直前に滅
菌水、生理食塩水或は他の滅菌された注射用媒体中に溶
解し得るものである。本発明によるエルサマイシンＡ誘
導体の実際の好適な投与量は、使用する化合物、配合さ
れた組成物の種類、投与の形式、投与部位、処置される
患者及び疾患により変動することは理解されよう。薬剤
の作用を変化させる多くの要素、例えば年齢、体重、
性、食事、投与時間、排泄の速さ、宿主の状態、薬物の
組合せ、反応の感受性及び疾患の重篤性などが当業者に
よって考慮されるであろう。薬物の投与は寛恕される最
大の投与量内で継続的に又は一時的に行うことが出来
る。与えられた状況での最良の投与速度は、当業者によ
れば通常の投与量決定法を用いることによって容易に確
認される。

【００２０】本発明を以下の実施例によって具体的に説
明するが、これらの実施例により本発明の範囲を限定す
ることを意図したものではない。 実施例１ ２″−Ｎ−アセチルエルサマイシンＡ（３ａ）の合成 乾燥メタノール（２ml）中でエルサマイシンＡ（６5.４
mg）及び無水酢酸（0.１ml）の混合物を室温で１時間攪
拌した。水（１ml）を加えて混合物を減圧下で濃縮して
黄色残留物を得、シリカゲルカラムクロマトグラフィー
により精製して目的化合物７0.５mg（１００％）を得
た。 MP 195-196℃。IRν_max （KBr)cm^-1 3420, 1725, 1690,
1615, 1510, 1380, 1255, 1240, 1170, 1120, UV λ
_max （MeOH) nm（ε）236 (35200), 265 (34500), 333
(6050), 379 (8000), 400 (13400),423 (14800) 。¹H N
MR (CDCl₃)δ 0.88 (3H,s)、1.38 (9H, m)、2.68 (3H,
s)、3.32 (3H, s)、5.36 (1H, d, J＝7 Hz) 、5.70 (1
H, d, J＝4 Hz) 。 元素分析、理論値 (C₃₅H₃₇NO₁₄・H₂O)： C 58.90, H 5.51, N 1.96 。 実測値 C 58.59, H 5.36, N 2.10 。

【００２１】実施例２ ２″−Ｎ−（３−カルボキシプロピオニル）エルサマイ
シンＡ（３ｂ）の合成 乾燥ジオキサン（6.５ml）中でエルサマイシンＡ（６5.
４mg）及び無水コハク酸（２０mg) の混合物を室温で３
時間攪拌した。メタノール（３ml）を５℃で加えて混合
物を濃縮乾固した。残留物をプレパラティブＴＬＣによ
りジクロルメタン／メタノール／酢酸＝８０／２０／２
で展開して精製し７５mgの黄色粉末を得、稀重曹水に溶
解した。この溶液をpH３に調整した後、ダイアイオンＨ
Ｐ−２０カラムにかけた。カラムを水に続き５０％アセ
トニトリル水で溶出した。目的物を含む画分を集め、濃
縮し凍結乾燥して、黄色粉末として化合物３ｂ ４４mg
（５５％）を得た。 MP 198-200℃ (dec.) IRν_max （KBr)cm^-1 3400, 1715,
1640, 1610, 1505, UV λ_max （MeOH) nm（ε）236 (3
9700), 265 (36900), 334 (6010), 380 (8350), 400 (1
3800),423 (16000) 。¹H NMR (CD₃OD)δ 2.83 (3H, s)
、3.30 (3H, s)、5.52 (1H, d, J＝8 Hz) 、5.83 (1H,
d, J＝4 Hz) 、8.15 (1H, d, J＝8 Hz)。 元素分析、理論値 (C₃₇H₃₃NO₁₆Na・3/2 H₂O)： C 55.36, H 5.15, N 1.74 。 実測値 C 55.40, H 4.87, N 1.92 。

【００２２】実施例３ ２″−Ｎ−（フタルイミドアセチル）エルサマイシンＡ
（３ｃ）の合成 エルサマイシンＡ（６5.５mg）の乾燥ジオキサン（４m
l）溶液にフタロイルグリシンのＮ−ヒドロキシスクシ
ンイミド エステル（６0.４mg）とトリエチルアミン
（２０mg）を加えた。この混合物を室温で２日間攪拌
し、減圧下で濃縮した。残留物を水から粉末化して黄色
粉末を得、更にシリカゲルカラムクロマトグラフィーに
より精製して化合物３ｃ ７６mg（９０％）を得た。

【００２３】MP 187-189℃。 IR ν_max （KBr)cm^-1 177
0, 1715, 1250, 1140, 1110, 1065,775。 UV λ_max （M
eOH) nm（ε）220 (56700), 235 (47600), 266 (3700
0), 333 (6050), 379 (8480),399 (14200) , 422 (1570
0) 。¹H NMR (CD₃OD)δ 1.32(3H, d, J ＝6 Hz) 、1.43
(3H, d, J＝6 Hz) 、1.45 (3H, s)、2.78 (3H, s)、3.
30 (3H, s)、5.58 (1H, d, J＝8 Hz) 、5.90 (1H, d, J
＝4 Hz) 、7.08 (4H,s)。 元素分析 理論値 (C₄₃H₄₀N₂O₁₆ ・2H₂O) ： C 58.90, H 5.06, N 3.19 。 実測値 C 58.71, H 4.71, N 3.03 。

【００２４】実施例４ ２″−Ｎ−グリシルエルサマイシンＡ（３ｄ）の合成 エルサマイシンＡのフタルイミド誘導体３ｃ（６２mg）
のエタノール（0.５ml）溶液に８０％ヒドラジン水溶液
（１０μｌ）を加えて室温で６時間放置し減圧下で濃縮
した。残渣をプレパラティブＴＬＣにより２％メタノー
ル／クロロホルムで展開して５２mgの固体を得た。この
固体を更にＨＰ−２０カラムクロマトグラフィーにより
精製して化合物３ｄ４５mg（８６％）を得た。 MP 203-210℃ (dec.) 。 IR ν_max （KBr)cm^-1 1685, 1
375, 1250, 1150, 1110, 1070, 1045, 775。 UV λ_max
（MeOH) nm（ε）236 (37000), 266 (32900),332 (554
0), 379 (7530), 400 (12400),422 (13900) 。¹H NMR
(CD₃OD)δ 1.32(3H, d, J ＝6 Hz) 、1.40 (3H, s)、1.
41 (3H, d, J＝6 Hz) 、1.82 (2H, s)、2.80 (3H, s)、
3.30 (3H, s)、5.46 (1H, d, J＝8 Hz) 、5.81 (1H, d,
J＝4 Hz) 。EI-MS(in beam)：m/z ：710 (M＋) 、494,
376, 334, 217。

【００２５】実施例５ ２″−Ｎ−イソプロピルエルサマイシンＡ（４ａ）の合
成 ジオキサン（５ml）中でエルサマイシンＡ（６5.４m
g）、アセトン（0.１ml）及びナトリウム シアノボロ
ハイドライド（３０mg）の混合物を室温で１７時間攪拌
した。反応混合物を減圧下に濃縮して黄色の残留物を
得、稀塩酸に溶解してダイアイオンＨＰ−２０カラムに
付し５０％メタノール水で溶出した。目的物を含む画分
を集め濃縮して黄色粉末を得、さらにプレパラティブＴ
ＬＣにより精製して、標記化合物１９mg（２７％）を得
た。 MP 175-180℃ (dec.) 。 IR ν_max （KBr)cm^-1 3430, 1
690, 1610, 1505, 1370, 1250, 1145, 1110, 1040, 78
0。 UV λ_max （MeOH) nm（ε）237 (44000), 265 (391
00), 333 (6840), 378 (9370), 398 (14900),421 (1710
0) 。¹H NMR (CDCl₃)δ 0.28 (3H, d, J ＝7 Hz) 、0.5
2 (3H, d, J＝7 Hz) 、1.33 (9H, m)、2.64 (3H, s)、
3.41 (3H, s)、5.48 (1H, d, J＝7 Hz) 、5.58 (1H, d,
J＝4 Hz)。EI-MS(in beam)：m/z ：334, 202。

【００２６】実施例６ ２″−Ｎ−（２，４−ジメトキシベンジル）エルサマイ
シンＡ（４ｂ）の合成 エルサマイシンＡ（６５mg）及び２，４−ジメトキシベ
ンズアルデヒド（８５mg）の７０％アセトニトリル水
（５ml) 溶液にナトリウムシアノボロハイドライド（３
０mg）を加え、混合物を室温で一晩攪拌し、１規定塩酸
で稀釈してクロロホルムで抽出した。有機層を１規定ア
ンモニア水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下
濃縮した。残留物をｔ−ブタノール水から粉末化して標
記化合物４４mg（５５％）を結晶として得た。母液を凍
結乾燥して更に３５mg（４４％）を得た。 MP 159-161℃。 IR ν_max （KBr)cm^-1 3400, 1659, 161
5, 1510, 1370, 1250,1210, 1105, 1075, 1045, 780。
UV λ_max （MeOH) nm（ε）235 (35300), 267(28900),
336 (5080), 401 (10900), 424 (12300)。¹H NMR (CDCl
₃)δ 1.33 (3H, d, J ＝6 Hz) 、1.40 (3H, d, J＝6 H
z) 、1.44 (3H, s)、2.78 (3H, s)、3.06 (3H, s)、3.3
9 (3H, s)、3.53 (3H, s)、5.28 (1H, dd, J ＝8 & 2 H
z) 、5.52 (1H, d, J＝8 Hz) 、5.64 (1H, d, J＝2 Hz)
、5.85 (1H, d, J＝4 Hz) 、6.32 (1H, d, J＝8 Hz)
。 元素分析 理論値 (C₄₂H₄₅NO₁₅・3/2H₂O) ： C 60.71, H 5.82, N 1.69 。 実測値 C 60.89, H 6.39, N 1.72 。

【００２７】実施例７ ２″−Ｎ−（２，４−ジメトキシベンジル）−２″−Ｎ
−メチルエルサマイシンＡ（４ｃ）の合成 ７０％アセトニトリル水溶液（2.４ml）中でエルサマイ
シンＡのＮ−ベンジル誘導体４ｂ（１１９mg）と３７％
ホルムアルデヒド水溶液（４７mg）の混合物にナトリウ
ム シアノボロハイドライド（４７mg）を加え、混合物
を室温で２２時間攪拌した。反応混合物を１規定塩酸で
稀釈してクロロホルムで抽出した。抽出物を１規定のア
ンモニア水で洗浄して減圧下に濃縮した。残留物をシリ
カゲルカラムクロマトグラフィーにより精製してモノメ
チル誘導体４ｃ１０５mg（８７％）を得た。 MP 141-143℃。 IR ν_max （KBr)cm^-1 3400, 1720 (s
h), 1690, 1505, 1375,1250, 1070, 1050, 780 。 UV
λ_max （MeOH) nm（ε）235 (42800), 267 (33500), 33
5 (5580), 381 (7700), 400 (12100), 422 (14100)。¹H
NMR (CDCl₃)δ 1.25 (3H, d, J ＝6 Hz) 、1.39 (3H,
d, J＝6 Hz) 、1.40 (3H, s)、2.28 (3H,s)、2.58 (3H,
s)、3.40 (3H, s)、3.47 (3H, s)、3.60 (3H, s)、5.4
0 (1H, d,J＝8 Hz) 、5.60 (1H, d, J＝4 Hz) 、5.72
(1H, dd, J ＝8 & 2 Hz) 、6.12 (1H, d, J＝2 Hz) 、
6.73 (1H, d, J＝8 Hz) 。 元素分析 理論値 (C₄₃H₄₇NO₁₅・H₂O)： C 61.79, H 5.91, N 1.68 。 実測値 C 61.75, H 5.94, N 2.40 。

【００２８】実施例８ ２″−Ｎ−メチルエルサマイシンＡ（４ｄ）の合成 化合物４ｃ（１００mg）を７０％テトラヒドロフラン水
溶液（３ml）と１規定塩酸（0.８ml）の混合物中で１０
％Ｐｄ−Ｃ（１００mg）の存在下に室温で７時間常圧水
素添加した。触媒を濾過して除き、濾液を減圧下に濃縮
した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに
より精製して標記化合物５２mg（６１％）を得た。

【００２９】MP 192-194℃ (dec.) 。 IR ν_max （KBr)
cm^-1 3400, 1690, 1375, 1250, 1070, 1045, 780。 UV
λ_max （MeOH) nm（ε）236 (34100), 266 (29800), 33
2 (5430), 377 (6820), 398 (10600),420 (11700) 。¹H
NMR (CDCl₃ ＋CD₃OD)δ 1.23 (3H, d, J ＝6 Hz) 、1.
28 (3H, d, J＝6 Hz) 、1.40 (3H, s)、2.36 (3H, s)、
2.82 (3H, s)、3.43 (3H, s)、5.61(1H, d, J ＝8 Hz)
、5.92 (1H, d, J＝4Hz) 。SI-MS ：m/z 668 (M＋
H)⁺ 、334, 174, 100 。

【００３０】実施例９ ２″−Ｎ，Ｎ−ジメチルエルサマイシンＡ（４ｅ） ジオキサン（４ml）中でエルサマイシンＡ（６5.５mg）
及び３７％ホルムアルデヒド水溶液（８５μｌ）の混合
物にナトリウム シアノボロハイドライド（３０mg）を
加え、混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物を減
圧濃縮して黄色の固体を得、シリカゲルカラムクロマト
グラフィーに付した。目的物を含む画分を集めて濃縮乾
固した。残留物をプレパラティブＴＬＣにより精製して
ジメチル誘導体４ｅ３6.７mg（５４％）を得た。 MP 180-185℃。 IR ν_max （KBr)cm^-1 1720, 1700, 169
0, 1505, 1375, 1235,1145, 775。 UV λ_max （MeOH) n
m（ε）236 (37200), 266 (33600), 333 (5650), 379
(7700), 399 (12500), 422 (13800)。¹H NMR (CD₃OD)δ
1.30 (3H, d,J ＝6 Hz) 、1.31 (3H, d, J＝6 Hz) 、
1.39 (3H, s)、2.05 (6H, s)、2.72 (3H, s)、3.36 (3
H, s)、5.50 (1H, d, J＝8 Hz) 、5.85 (1H, d, J＝4 H
z) 。 元素分析 理論値 (C₃₅H₃₉NO₁₃・2H₂O) ： C 58.57, H 6.04, N 1.95 。 実測値 C 58.32, H 5.79, N 2.07 。

【００３１】実施例１０ ２″−デアミノ−２″−モルホリノエルサマイシンＡ
（４ｆ） アセトニトリル（4.５ml）中でエルサマイシンＡ（９8.
５mg）及び２，２′−オキシジアセトアルデヒド（２，
５−ジヒドロフランをオゾン分解して調製）の混合物に
ナトリウム シアノボロハイドライド（４７mg）を加
え、混合物を室温で1.５時間攪拌した。有機溶媒を減圧
留去し、残った水溶液をＨＰ−２０カラムクロマトグラ
フィーに付した。目的物を含む画分を集めて減圧下に濃
縮して黄色の残留物を得、プレパラティブＴＬＣにより
精製して目的化合物３5.５mg（３３％）を得た。 MP 182-186℃(dec.)。 IR ν_max （KBr)cm^-1 1720, 169
0, 1375, 1255, 1235,1150, 1120, 1070, 780。 UV λ
_max （MeOH) nm（ε）236 (39400), 265 (38800), 334
(6440), 379 (8790), 400 (15000),423 (16800) 。¹H N
MR (CD₃OD)δ 1.28 (3H, d, J ＝6 Hz) 、1.38 (3H,
s)、1.42 (3H, d, J＝6 Hz) 、2.80 (3H,s)、3.3 (3H,
s) 、5.38 (1H, d, J＝8 Hz) 、5.78 (1H, d, J＝4 Hz)
。EI-MS(in beam) ：m/z 723 (M ⁺) 、492, 389, 334,
230。 元素分析 計算値 (C₃₇H₄₁NO₁₄・2H₂O) ： C 58.49, H 5.97, N 1.84 。 実測値 C 58.60, H 5.48, N 1.94 。

【００３２】実施例１１ ２″−Ｎ−ホルムイミドイルエルサマイシンＡ塩酸塩
（５）の合成 クロロホルムとメタノール（９：１、４ml）の混合液中
でエルサマイシンＡ（１３１mg）の懸濁液にエチル ホ
ルムイミデート塩酸塩（６６mg）を０℃で加え、混合物
を室温で３９時間攪拌した。反応混合物にメタノール
（８ml）と酢酸（２ml）を加え、この透明溶液を室温で
0.５時間攪拌し減圧下に濃縮した。残渣をプレパラティ
ブＴＬＣにより精製して化合物５ ５２mg（３８％）を
得た。 MP 228-230℃(dec.)。 IR ν_max （KBr)cm^-1 3380, 171
0, 1630, 1610, 1590,1505 。 UV λ_max （MeOH) nm
（ε）237 (40900), 266 (37400), 333 (6640),379 (89
30), 399 (14500), 422 (16400)。¹H NMR (CDCl₃ ＋CD₃
OD)δ 1.0-1.6 (9H, m)、2.60 (3H, s)、3.35 (3H,
s)、5.65 (1H, d, J＝8 Hz) 、5.85(1H, brs) 。 元素分析 計算値 (C₃₄H₃₆N₂O₁₃ ・3HCl) ： C 51.69, H 4.98, N 3.55 。 実測値 C 51.57, H 4.74, N 3.52 。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 内藤 隆之 神奈川県川崎市麻生区王禅寺2657−45 (72)発明者 西山 祐二 東京都台東区蔵前２−15−７−301

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式 【化１】 （式中、ＲはＣ₁ −Ｃ₃ アルキル基であり、無置換ない
   しはカルボキシル基、アミノ基又はフタルイミド基で置
   換されていても良い）で示される化合物。
2. 【請求項２】 式 【化２】 （式中、Ｒ及びＲ¹ は独立に水素、Ｃ₁ −Ｃ₃ アルキル
   基、アラルキル基、ホルムイミドイル基、アセトイミド
   イル基、又はアミジニル基であり、Ｒ及びＲ¹は同時に
   水素であることはなく、Ｒ及びＲ¹ はそれらが結合した
   窒素原子と共に結合してモルホリノ基、ピペリジノ基、
   又はピロリジノ基を形成していてもよい）である化合
   物。
3. 【請求項３】 ２″−Ｎ−（３−カルボキシプロピオニ
   ル）エルサマイシンＡ；２″−Ｎ−（フタルイミドアセ
   チル）エルサマイシンＡ；又は２″−Ｎ−グリシルエル
   サマイシンＡである請求項１記載の化合物。
4. 【請求項４】 ２″−Ｎ−イソプロピルエルサマイシン
   Ａ；２″−Ｎ−（２，４−ジメトキシベンジル）エルサ
   マイシンＡ；２″−Ｎ−（２，４−ジメトキシベンジ
   ル）−２″−Ｎ−メチルエルサマイシンＡ；２″−Ｎ−
   メチルエルサマイシンＡ；２″−Ｎ，Ｎ−ジメチルエル
   サマイシンＡ；２″−デアミノ−２″−モルホリノエル
   サマイシンＡ；又は２″−Ｎ−ホルムイミドイルエルサ
   マイシンＡ塩酸塩である請求項２記載の化合物。
5. 【請求項５】 コハク酸無水物を用いてエルサマイシン
   ＡをＮ−アシル化する工程を含む請求項１記載の化合物
   の製造法。
6. 【請求項６】 フタロイルグリシンの活性エステルを用
   いてエルサマイシンＡをＮ−アシル化し、つづいてヒド
   ラジンを用いて脱保護する工程を含む請求項１記載の化
   合物の製造法。
7. 【請求項７】 アルデヒド化合物又はケトン化合物を用
   いて、エルサマイシンＡを還元的Ｎ−アルキル化する工
   程を含む請求項２記載の化合物の製造法。
8. 【請求項８】 窒素を保護されたエルサマイシンＡの還
   元的Ｎ−アルキル化、つづいて脱保護する工程を含む請
   求項２記載の化合物の製造法。
9. 【請求項９】 エチル ホルムイミデート塩酸塩とエル
   サマイシンＡを反応させる工程を含む２″−Ｎ−ホルム
   イミドイルエルサマイシンＡ塩酸塩の製造法。
10. 【請求項１０】 １以上の薬学的に許容される担体又は
    稀釈剤とともに請求項１〜４のいずれか１項に記載の化
    合物を有効成分として含む医薬組成物。
11. 【請求項１１】 腫瘍の抑制に有効量の請求項１〜４の
    いずれか１項に記載の化合物を宿主に投与することを含
    む腫瘍の治療方法。