TW219366B - - Google Patents

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219366 A 6 B 6 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 五、發明説明（1 ) 本發明俗關於具有改良抗腫瘤活性之新穎伊沙徽素A 衍生物，彼之製法，含彼作為活性成份之藥學組成物，以 及使用前述組成物之治療方法。 伊沙徽素A傜由培養命名為J907 — 2 1 ( ATCC 39417)之放射菌羼的産生伊沙徽素A菌 種或其突變種而産製出的抗腫瘤性抗生素。伊沙徽素A具 有對抗需氣的革蘭氏陽性細胞及厭氣性細菌的抗菌活性。 它亦具有對抗各種老鼠之腫瘤細胞（其包括白血病 P388,淋巴性白血病L 1210,及黑變性黑瘤 B 1 6 )的體外及體内活性。Konishi et alt伊沙徽素 僳為一種和散酒菌素相關之新穎抗腫瘤性抗生素。I ·製 造、分離、特性及抗腫瘤活性，J. Antibiotics, 39：784 -791(1986);美國專利 45 1 8589 號，Konishi, §丄，1985年5月21日發證。 伊沙徽素A (以下通式I)之結構業經測定且證明和 散酒菌素（以下通式I)極其相關。Susawara， 伊沙徽素A和B，和散酒菌素相關之新穎抗腫瘤性抗生素 。I 伊沙徽素 A 和 B 之結構。L^-〇Jg· Chem·，52：996-1001,(1987)〇 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝. 訂· 線- 本紙張尺度通用中Β Η家橒準(CNS)甲4規格(210X297公釐) 81. 5. 20.000(H) -3 - 219366 五、發明説明（2 ) A6 B6

〇 0H

通式I

〇 0H

(請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝- 訂* 線‘ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

通式I 伊沙徽素A和散酒菌素均具有相同的配基，chartar-in,但抗生素之差異在於二糖部份。Leach et a 1 ,散酒 菌素，一種由散酒菌素鏈徽素（ St reptomyces Char t reu-sis)産生之新穎抗生素，一種新穎物質，_J· Am. Chem· Soc ·，75:4011-4012(1953)； Beisler，J.A·，Chart reu-s i n * a glycosidic antitumor antibiotic for St rept- 本紙張尺度逍用中國Η家標準(CN5)甲4規格(210X297公龙) 81. 5. 20.000(H) -4 - A 6 B6 219366 五、發明説明（3 ) omyce s , In progress in Medicinal Chemistry，Ed ·， (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) G·P· E11is and G·B· West 19 *pp.247*268» Elsevier Biomedical Press Amsterdam， (1982) ； S i mon i t s ch > e-t a 1 : Uber die Struktur des Cha r t reus i ns I，He 1 v · Ch i m· Act a，47 z1459-1475，(1964); Eisenhuth，<et a-1_* liber die Struktur des Chart reus i ns II，He 1 v · C" him. Acta, 11， 1475-1484, (1964)0 二化合物之化學方式内在轉化未嘗述及。 在伊沙徽素A之化學修飾過程中，吾人發現引入亞烷 基至3/和4/—OH基團上，或四氫吡喃基至 4/—0H基園上致使伊沙徽素A之抗腫瘤活性提高。 本發明提供具有改良抗腫瘤活性之新穎伊沙徽素A衍 生物。更詳細而言，本發明提供伊沙徽素A之3/和/或 4 < 一 0Η基園的化學修飾。 本發明又提供抗腫瘤組成物，其包含至少一種選自本 發明之伊沙徽素Α衍生物作為活性成份。 本發明又提供使用前述抗腫瘤組成物治療癌症的方法 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 Ο 還提供的是上述伊沙徽素A衍生物之製法。 美國專利4 5 1 8 5 8 9號（1(〇111311161&1)掲示 命名為伊沙徽素A (以上通式I)之抗腫瘤試劑之製備及 分離。上述伊沙徽素A像為命名為J 907 — 2 1 ATCC 39417)之放射菌屬的産生伊沙徽素A菌 醱酵之主成份。 81. 5. 20,000(H) 本紙張尺度逍用中覼國家#準(CNS)甲4規格(210x297公釐) -5 - 9 2 6

66 AB 五、發明説明（4 ) 現在，依本發明發現伊沙徽素A之3 /和4 / —0H 位置上的化學修飾産生具有改良抗腫瘤活性之新穎衍生物 〇 本發明之伊沙徽素A衍生物具有以下通式I和I V :

、 通式m 式中，z示亞烷基，亞環烷基，芳基亞烷基或烷氧基亞烷 基。 (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

通式I v 本紙张尺度逍用中家樣準(CNS)甲4規格(210x297公*) 81. 5. 20,000(H) -6 - A 6 B6 4 219366 五、發明説明（5 ) 如製程1中所示地，伊沙徽素A (丄」之3/, 一0—亞烷化反應像由使用適當酮或醛之二甲基乙缩醛， 在酸催化劑存在下處理2 〃 一 N —經保護伊沙徽素A (_2_ 或U而得中間體，旦_和，隨之，去保護而得3 < , 0 —亞烷基衍生物（6a- 6 d )。亞丙基（丘 )和亞苯甲基（6 c )亦由伊沙徽素A而無N —保護製成 。如製程2中所示地，化合物丄_和二氫吡喃在酸催化劑存 在下之反應製得全一四氫吡喃基（THP)衍生物之混合 體，其再用對一甲苯磺酸（TsOH)，在甲醇中處理而 得單一 0 — THP衍生物（_2_)。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 依照質譜決定之結構偽為4 0—THP衍生物 裝*

(8J 表1示出本案之化合物及其對稱编號 訂- 線- 經濟部中央標準局员工消費合作社印製 81. 5. 20.000(H) 私紙張尺度遑用中鼸家樣準(CNS〉甲4規格(210x297公*) 7 A6 B6 19366 五、發明説明（6 ) 表 1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明之化合物及其對應編號 化合物缠號 名稱

1 伊沙徽素A 2 散酒菌素

3 2"-N-第三丁氣羰基伊沙徽素A

1 2"-N-苯甲氧羰基伊沙徽素A 5a 2"-貯第三丁氧羰基-3’，4’-0-亞異丙基伊

沙徽素A 5k 2 "-N-第三丁氣羰基-3 · ,4’-0-亞琛乙基伊

沙徽素A 5c. 3、4’-0-亞苯甲基_2"-1^-第三丁氣羰基伊

沙徽素A

6a. 3’，4’-0-亞異丙基伊沙徽素A

6b 3’，4 I-0-亞環己基伊沙徽素A

6c 3Ί-0-亞苯甲基伊沙徽素A

6d. 3’，4’-0-甲氣基亞甲基伊沙徽素A 經濟部中央標準局β工消費合作社印製 Ία. 2”-Ν-苯甲氛羰基-3’，4’-0-異丙基伊沙徽

素A

Zi 2”-N-苯甲氣羰基-3·，4j-0-甲氧基亞甲基

伊沙徽素A

8 4·-0-四氫吡喃基伊沙徽素A 81. 5. 20,000(H) 本紙ft尺度遑用中家樣準(CNS)甲4規格(210X297公*) -8 - 219366

66 AB 五、發明説明（7 ).製程 1伊沙徽素A之3 4 / —0 —亞烷基衍生物的合成途徑 1 -^-► 3 -2► 5Ca,b,c〕

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 3 R = =t-BOC 旦 R = t-BOC 4 R = =Cbz 6 R = Η 2 R = Cbz 81. 5. 20,000(H) 本紙張尺度遑用中覼家樣準(CNS)甲4規格(210X297公釐) -9 - c_ δ

66 AB 五、發明説明（8 )製程1 (績）

Ct-BOQs〇/NEt3 0 2-) BnOCOON ^Γ>1' NEt3 0 J3CH3 3〕Z 3 / TsOH 'OCH, 4〕 Ts〇H or TFA ,

5〕 H2/Pd-C Z:' Ca) CH, ⑻ CX CCD Q-ch； Cd) ch3〇ch (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝- ,可_ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度逍用中B國家樣準(CNS)甲4規格(210x297公龙) 81. 5. 20.000(H) _ 10 - 219366 A 6 B6 五、發明説明（9 )製程 24/一0—四氫吡喃基伊沙徽素A之製備 1

Qj/TsOH MeOH/TsOH

Ο 0H

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝- 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度逍用中B國家揉準(CHS)甲4規格(210X297公*) 81. 5. 20,000(H) -11 - 19366 五、發明説明（10) 3/和/或4/一0-經化學修飾之伊沙徽素A衍生物之 抗腫瘤活性： 合成5種3—和/或4/一0—經化學修飾之伊沙徽 素A衍生物並和母體化合物比較測試齷外及體内抗腫瘤活 性。 在髏外胞毒性實驗中，老鼠黑瘤B16—F10細胞 成長及維持於5% C〇2孵餐器中，37Ρ及濕化氛圍 下之Eagle's最小必要介質（Nissui)中，該介質含有卡那 徽素（kanamyein) (6 0 w g / m ί ),補充有經熱去活 化之胎牛血清（10%)和非必要胺基酸（0· 6%)。 收集自然對數成長之Β16_F10細胞，計數並以 2. 0X104細胞/mi之濃度懸浮於培養液中，將细 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 胞懸浮液（180«ί)植入96分格微量板之分格内並 孵養24小時。在分格中加入測試化合物（20/ζί)且 再孵養72小時。在使用中性紅色溶液染色活細胞之後， 在5 4 0 n m下比色測定胞毒性。所有測試之3 > —和/ 或4/—化學修飾之伊沙徽素Α衍生物具有極強之對 抗Β 1 6 — F 1 0細胞的胞毒性，其I C5。值為 0· 025 〜0. 07wg/mi (表 2) 〇 以上5種衍生物之體内抗腫瘤活性像於淋巴球性白血 性P388和黑瘤B16糸統中測定。雌性CDF:( P388用）及雄性BDFi (B16用）鼹鼠分別由腹 膜内注射接種以10e P388細胞及0· 5m)2 10 % B1 6接饉質（第0天）。測試化合物由腹膜内投服 81. 5 . 20.000(H) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度通用中國國家樣準(CNS)甲4規格(210x297公釐) -12 - 319366 A6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（11) 至鼹鼠，在P388条統為在1 一 3天内毎天一次（ QlDx3)而在B16条統内為在第1、 5和9天每天 一次（Q4Dx 3)並觀察動物45天。測定經治療動物 對未經治療之對照組動物的平均存活時間（MST)增加 百分比並以T/C%記載。T/C%值為125或更大之 化合物據認為具有顯著抗腫瘤活性。如表2中所示地，在 以上5種衍生物當中，4<一0—四氩吡喃基伊沙徽素A ,(_&_)傜為P388条統中最令人感趣之化合物。它産 生3倍大於伊沙徽素A之潛在最小有效劑置（MED)及 高T/C%值。就MED而言，3 / , 4 / — 0 —亞異丙 基伊沙徽素A , (6a) , 3>, 4>— Ο —亞苯甲基伊 沙徽素A ( 6 c )及3 — , 4 — Ο —甲氣基亞甲基伊沙 徽素A ( 6 d )活性和母體化合物相同。在B 1 6条統中 ，所有測試之5種衍生物對腫瘤具有優異的反應（表3) 。和P388条統中之結果相似的，化合物就Μ E D和 T/C%值而言是優於伊沙徽素Α (丄_)。某些存活者在 以3 — 2 0 mg / kg / day此一化合物測試之測試組中，在 第5 0天仍存活。化合物6 d在3和1 0 mg / kg / day下 具有較高之T/C%故亦具有極強於伊沙徽素A (丄_)之 治療活性。 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝- 訂- 線- 本紙張尺度逍用中諷國家橾毕(CNS)甲4規格(210X297公*) 81. 5. 20.000(H) -13 - 319366 A 6 B6 五、發明説明（12) 表2 對B16黑色素瘤之體外胞毒性以及鼹鼠中對P388白血 病之體内抗腫瘤活性 T/C % of MST*2 化合 物

Z 胞毒性 I C 5 〇 (U g/ml ) 20*2 10. 3 1. 0^3. 0j_ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 6, 0.025 210 170 140 120 6b 0.04 165 175 140 120 丁 6c 0.07 Tox 180 165 150 130 110 6d 0.05 Tox 224 167 167 137 124 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 8 伊沙 徽素A(l_) 0.04 Tox 225 190 168 145 130 0.03 Tox 190 180 155 140 123 *1平均存活天數 *2 劑置，mg/kg/day，QlDx3ip 本紙張尺度逍用中國家標华(CNS) f 4規格(210x297公*) 81. 5. 20,000(11) -14 - 219366 A 6 B6 五、發明説明（13)

Η 6~ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝- 訂_ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度逍用中Β Β家樣準(CHS)甲4規格(210x297公釐) 81. 5. 20,000(H) -15 - 219366

66 AB 五、發明説明（14)表3 鼹鼠中，對抗B16黑色素瘤之體内抗腫瘤活性 化合物 T/C % of MST" 20^2 10 3 1 0.3 0.1 6a, 82 192 166 116 105 6b. 200 175 132 111 6c 186 179 136 114 121 6d_ >333 283 167 137 120 (3/4) Ϊ 8 >370 >330 >281 248 159 113 (3/4) (2/4) (1/4) 1 >298 >216 179 139 116 (2/12) (2/12) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 *1平均存活天數 *2 劑量 mg/kg/day，Q4Dx3 ip*3存活者數目/在第50天測試 本紙張尺度通用中8國家樣毕(CNS)甲4規格(210x297公釐) 81. 5. 20,000(H) _ 16 一 219366 五、發明説明（15) 本發明範圍包含本發明伊沙徽素Α衍生物之製法。 本發明之另一目的偽為提供藥學組成物，其包含有效 抑制腫瘤數量之通式I或IV化合物，以及惰性藥學上可 接受載髏或稀釋劑。 依本發明之另一目的傜為提供治療罹患腫瘤之動物（ 宜為哺乳類）宿主的方法，其包括投服有效抑制劑量之通 式Μ或I V化合物抗生素至前述宿主。 適當组成物之實例包括口服固態组成物，其諸如片劑 、膠囊、九粒、粉末及顆粒；口服液態組成物，其諸如溶 液、懸浮液、糖漿及酊劑以及非經腸投服用製劑，諸如無 菌溶液、懸浮液或乳液。它們亦可製造為無菌固態组成物 形態，其可於使用前溶入無菌水、生理食鹽水或某些其他 無菌注射介質中。 經濟部中央標準局R工消費合作社印製 吾人了解本發明之伊沙徽素Α衍生物之實際理想劑量 將依所使用之特定化合物，所調配之特定组成物，使用模 式及所處理之特定位置，宿主及疾病而變。許多調整藥物 作用之因子將為熟悉此蕤之士廉及，前述因子例如年齡、 髏重、性別、膳食習慣、投服時間、分泌途徑、宿主情況 、藥物組合、反應敏感性及疾病嚴重程度。投服可以連缠 方式或在最大可忍受劑量内週期性進行。一定症狀之最適 當施用速率可由熟悉此蕤之士使用傳統劑置测定法軽易地 確定。 本發明藉下列實例說明，但不以其為限制範圍。 中間體3—5c, 7a和7d之特定合成實例説明如 81. 5. 20,000 (Η) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 丁 本紙張尺度逍用中國Β家樣準(CNS)甲4規格(210x297公；Jt) -17 - 219366 A 6 B6 五、發明説明（16) 下，由此等中間體並依以上方法合成本發明之化合物爲 一 6 d 和實例1 : 合成2 〃 一 N —第三丁氣羰基伊沙徽素A (_a_) 二噁烷（lOmiM中之伊沙徽素A (653mg, lmmole),重硪酸二一第三丁酯（348mg, 1. 6 mmole)和三乙胺（〇. 14m i?, 1 mmole)之混合物在室溫下攪拌過夜。反應混合物在真空中蒸發而得半結晶殘 餘物，其再以CH2Ci?2/乙醚再結晶而得768mg (1 0 0 % )化合物帶黃色晶體粉末。 (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Μ Ρ 1 8 3 一 1 8 4 V 0 I R V m a X ( K B r ) C m -J 3 4 1 0 9 1 7 0 0 * 1 5 0 5 , 1 3 7 0 f 1 2 5 5 f 1 1 2 0 $ 1 0 6 5 , 8 7 5 9 7 8 0 〇 U V λ m a X ( M e O H ) n m ( e ) 2 3 6 ( 3 8 3 0 0 ) $ 2 6 6( 3 7 8 0 0 ), 3 3 3 ( 6 1 8 0 ) 9 3 8 0 (8 7 7 0 ) t 4 0 0 ( 1 4 5 0 0 ) f 4 2 3 ( 1 5 9 0 0 )O 1 Η N M R (C D c 1 3 ) δ 0 • 7 3 ( 9 H t b r • S • ), 1 • 3 1 ( 3 H » d 9 J = 7 .0 H z ) t 1 ♦ 3 6 ( 3 H 9 s ) f 本紙張尺度遑用中B B家«準(CNS)甲4規格(210X297公*) 81. 5 . 20.000(H) -18 - 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 219368 五、發明説明（17) 1:. 39 ( 3 H , d, J = 6 Η z ), 2 . 6 8 ( 3 Η , s )， 3 · 3 5 ( 3 Η , s )， 5. 37 ( 1 Η , d , J = 8. 0 H z ), 4. 66 ( 1 H , d , J = 4 H z ), 8. 18 ( 1 H , d d , J = 8 . 0 & i. 5Hz ), 11. 59 ( 1 H , s ) 〇 元素分析：理論值C38H43NOi5· H2〇 : C 5 9 . 1 4 , H 5.88, N 1 · 8 1 0 實測值：C 5 9 . 1 2 , H 6.06, N 2.27。 實例2 :

合成2 "_N —苯甲篱羰基伊沙徽素A (4J 於二噁烷（lOmp)中之伊沙徽素A (653mg) N E t 3 (0· 14miM之經攪拌懸浮液中加入N —苯 甲氣羰氣基一 5 —原冰Η烯一 2，3 —二甲醛亞胺（ 3 34mg)。反應混合物在室溫下攪拌過夜且於真空中蒸 發。將殘餘物溶入C H2C又2中且溶液依序用 NaHC〇3稀水溶液，水及NaC5飽和水溶液洗滌， 用Mg S〇4乾燥及在減壓下濃縮而得黃色塊睡。殘餘物 在矽膠（Wakogel c-200· 21X80ran)上層析，使用 2% 本紙張尺度通《中B B家樣罕(CNS)TM規格(210x297公^ 81. 5. 20.000(H) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) _ 線 -19 - 219366 A 6 B 6 五、發明説明（18) MeOH/CHC )標題化合物。 作為洗提液而得772mg (98% 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Μ Ρ 1 6 6 一 1 6 7 X： O I R V m a X ( K B Γ ) C m -1 1 7 3 0 t 1 6 9 5 f 1 5 1 〇 » 1 3 8 0 t 1 2 6 0 9 1 2 4 0 » 1 1 5 0 t 1 0 7 0 t 7 8 〇 U V λ m a X ( M e 〇 H ) n m ( £ ) 2 3 6 (3 8 9 0 〇 ) 9 2 6 6 ( 3 8 5 0 〇 ) » 3 3 5 ( 6 4 8 0 ) 9 3 8 1 ( 9 1 9 0 ) * 4 〇 1 ( 1 5 3 0 0 ) 9 4 2 3 ( 1 6 6 0 0 ) o 1 Η Ν M R (C D c 1 3 ) δ 1 3 2 ( 3 H 9 d t J = 6 H z ) » 1 3 8 (3 H 9 s ) 9 2 7 4 ( 3 H 9 s ) » 3 3 6 ( 3 H t s ) f 5 3 9 ( 1 H 9 d 9 J = 8 H 2 ) » 5 7 4 ( 1 H 9 d 9 J = 4 H Z ) » 8 • 0 8 ( 1 H t d d 9 J = 8 & 1 • 5 H z ) 1 1 * 4 1 ( 1 H t s ) o 分析 • • 理論值 C 4 1 H 4 I N 0 IS ♦ 1 / 2 H 2〇 ; C 6 1 • 8 0 t H 5 • 3 1 9 Ν 1 • 7 6 o (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· *ve_ 線- 私紙張尺度通用中B a家標準(CNS)甲4規格(210x297公龙） 81. 5. 20,000〇}) 20 319366 A 6 B6 五、發明説明（19) 實測值：C 61. 92, Η, 5. 14, Ν 2.23。 (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 實例3 : 合成2 〃一Ν —第三丁氣羰基3 / , 4 / — Ο —亞異丙基 伊沙徽素A (5a) 於乾燥CH2CiZ2(4miM中之化合物_2_(200 呢）和2, 2 —二甲氧基丙烷（1. 2miM溶液中加入 TsOH (5mg)並保持於室溫下過夜。加入飽和 NaHC〇3水溶液並取出有機層，用MgS〇4乾燥及 在真空中蒸發而得190mg (90%)檫題化合物，黃色 固體。 MP 168— 169ΐ：〇 1 R ν max ( K B r ) c m _i 3420, 1740, 1690, 1505, 1375, 1250, 1065, 780〇 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 U V λ »αχ ( M e Ο Η ) η m ( e ) 2 3 6 (4 0 6 0 0) . 2 6 6 (39100), 3 3 3 (6 3 7 0) , 3 8 0 ( 8 8 5 0), 3 9 9 (1 4 2 0 0) .4 2 2 (15500)。 ;Η. NMR (CDC13) δ 1. 34 ( 3 Η , d , J = 6 Η ζ ), 1. 37 ( 3 Η , d , J = 7Hz), 81. 5. 20,000 ⑻ 本紙張尺度遑用中《 Β家棵毕(CHS) Τ4規格(210X297公«) -21 - 9366 A6 B6 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 五、發明説明（20) 1 . 3 7 ( 3 Η，s )， 1 . 4 2 ( 3 Η . s )， 1 . 6 8 ( 3 Η，s )， 3 . 3 5 ( 3 Η，s )， 5. 23 ( 1 Η . d，J = 8 Η z ), 5· 8 (1Η· d· J = 4 H z ), 8 33 (lH, dd，J = 8 & 1· 5 H z )， 11. 63 ( 1 H * br) 0 元素分析：理論值CwHoNOu· H2〇 : C β 〇 . 6 6 , H 6 . 0 8, N 1 . 7 3 0 實測值：C 6 ◦ . 9 2，H 6.03， N , 2 · 〇 0 0 實例4 : 合成2 〃一 N —苯甲氣鑛基3 z，4 < 一 0 —亞異丙基伊 沙徽素A (7a) 於乾燥二氛甲烷（iOmP)中之化合物t(507 mg)及2，2 —二甲氣基丙烷（2. 溶液中加入 對一甲苯磺酸（1 〇"«)且在室溫下攪拌過夜。加入 N a H C 0 3 (10miM飽和水溶液且分離有機層，於 MgS〇4上乾燥及在減壓下蒸發。殘餘物用CH2C^2 一乙醚一正己烷碾磨而得540mg (100%)標題化合 物。 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度通用中8國家楳準(CNS)甲4規格(210X297公龙) 81. 5. 20,000(H) -22-

Ο CJ 6

66 AB 經濟部中央標準局员工消费合作社印製 五、發明説明（21) Μ Ρ 1 6 0 一 1 6 2 V 〇 I R V jr a X ( K B r ) C m -1 1 7 3 0 f 1 6 9 0 9 1 5 0 0 t 1 3 7 5 9 1 2 5 0 f 1 1 4 〇 » 1 0 6 5 9 7 8 0 〇 U V λ m a X ( M e 0 H ) n m ( e ) 2 3 6 ( 3 9 1 0 0 ) » 2 6 7 ( 3 7 6 0 0 ) 3 3 3 ( 6 4 4 0 ) » 3 8 0 ( 9 0 2 0 ) f 4 0 0 ( 1 4 4 0 0 ) 9 4 2 2 ( 1 5 5 0 0 ) I Η Ν M R (c D 3〇 D ) δ 1 • 2 8 (3 H t d » J = 6 H z ) » 1 • 4 0 (3 H 9 d f J = 7 H z ) 9 1 • 4 1 ( 3 H t s ) 9 1 • 4 7 ( 3 H f s ) f 1 • 7 0 ( 3 H t s ) » 2 峰 8 8 ( 3 H 9 s ) 3 • 4 5 ( 3 H * s ) » 5 • 2 8 ( 1 H » d f J = 8 H z ) 9 5 • 6 6 ( 1 H » d 9 J = 4 H z ) t 8 • 3 2 ( 1 H t d d » J = 8 & 2 H z ), 1 1 • 5 3 ( 1 H 9 b r • ) 〇 元 素 分析 ♦ • 理論值 c 4 4 H 4 5 N 0 1 s ♦ C 6 3 * 8 4 t H 5 • 4 8 » N 1 6 9 0 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 本紙張尺度逍用中B B家標毕(CNS)甲4規格(210x297公釐) 81. 5. 20,000(H) -23 - 3 9 3 6 6 A6 _____B6_ 五、發明説明（22) 實測值·· C 6 3. 5 9, Η 5.64, Ν 1.63。 實例5 : 合成3 /，4 - 一 0 —亞異丙基伊沙徽素A (6a) 在80%含水四氫呋喃（2. 5mi2)中之化合物 7 a (67mg)溶液在 10% Pd-C (30mg)中氫 化1. 5小時。過濾反應混合物以移除催化爾，然後，濃 縮至乾。殘餘物藉管柱層析純化，使用5% C H C ί 3 中之MeOH作為洗提液而得47mg (83%)標題化合 物。 (請先閲讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝* 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Μ P 1 8 9 — 1 9 1 ( d e c • ) o I R V jr a X ( K B r ) c m -1 1 7 1 0 t 1 6 1 0 9 1 3 7 0 t 1 2 5 0 , 1 0 7 0 9 7 8 0 〇 U V λ m a X ( M e 0 H ) n m ( e ) 2 3 6 (3 4 5 0 0 ) f 2 6 6 ( 2 9 7 0 0) 3 3 2 ( 4 9 8 0 ) f 3 9 9 ( 1 0 6 0 0 ), 4 2 0 ( 1 1 3 0 0 ) 〇 2 H N M R (c D c 1 3 + C D 3〇 D ) δ 1 * 1 8 ( 3 H » d > J = 6 H z ) 9 1 • 2 9 ( 3 H » d f J 7 H z ) f 1 ♦ 3 9 ( 3 H f s ) t 線- 81. 5. 20.000(H) 本紙張尺度遑用中B B家樣準(CNS)甲4規格(210K297公》:) -24 - 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 21936S A6 _____B_6_ 五、發明説明（23) 1 . 4 6 ( 3 Η , S ), 1 · 6 7 ( 3 Η，s )， 2 . 8 7 ( 3 Η , s )， 3 . 5 2 ( 3 Η , s ), 5· 22 ( 1 Η , d , J = 8 Η ζ ), 6. 02 ( 1 Η , br.) 〇 元素分析：理論值CaHasNOi：»· 3/2Η2〇 : C 5 9 . 9 9, Η 5.87, N 1.94〇 實測值：C 60. 09, Η 5.76, Ν 2.13。 MS (SIMS) Μ/Ζ 695 (Μ + Η) ♦, 360，334,160ο 方法Β : 在丙酬（5miM中之化合物5 a ( 2 3 8 mg )及對 一甲苯磺酸單水合物（TsOH) (285呢）溶液在室 溫下攪拌2小時，再於真空中濃縮。將殘餘物溶入甲醇和 氛仿（1 : 10, 40miM混合物中。溶液依序用10 %含水NaHCOa ,水及食鹽水洗滌，於MsSO*上 乾燥且於真空中濃縮。殘餘物在矽膠上管柱層析而得 142mg(68%)標題化合物。MP 189 — 191 t：。此處所得化合物6 a之光譜和HPLC數據完全和方 法A中所得者相同。 (請先閱讀背面之注意事項再填窝本頁) 裝 訂_ 線< 本紙張尺度遑用中《諷家樣毕(CNS)甲4規格(210x297公*) 81. 5. 20,000(H) -25 - 19366 A6 B6 五、發明説明（24) 方法C : 在乾燥中之化合物丄_(262 mg) , TsOH (80mg)和 2, 2 —二甲氧基丙烷（1 miM之混合物在室溫下攪拌17小時。將NaHC〇3 飽和水溶液加至反應混合物中且分離有機曆，於 Na2S〇 4上乾燥及蒸發。黃色殘餘物用乙醚碾磨而得 280mg (100%) 6 a » Μ P 189-191t：〇 此當所得化合物S a之光譜及Η P L C數據完全和方法A 中所得者相同。 實例6 : 合成2々一 N —第三丁氧羰基3 / , 4 > — 0—亞環乙基 伊沙徽素A (5b) 於乾燥CH2C$2(3m)M中之化合物_2_(151 mg) , 1, 1—二甲氣基環己烷（1. 2mJ2)及無水對 一甲苯磺酸（3呢）之溶液在室溫下攪拌2小時。反應混 合物用CH2Ci?2稀釋，用飽和NaHC〇3水溶液洗條 ，在Mg S〇4上乾燥且蒸發而得晶體殘餘物，其再以乙 醚洗滌而得165mg (100%)化合物5 b 〇 MP173-175*C〇 IR v max (KBr) cm_i 2 9 1 0, 1730, 1 7 1 0, 1 6 8 0 ( s h ) 本紙張尺度逍用中國家«毕(CNS)甲4規格(210父297公龙) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝- 經濟部中央標準局员工消費合作社印製 81. 5. 20,000(H) -26 - 219366 A 6 B6 五、發明説明（25) » 1 5 0 0 Ο U V λ in a X ( Μ e 0 Η ) η m ( ε ) 2 3 6 ( 3 5 3 0 0 ) 9 2 6 6 ( 3 4 2 0 0 3 3 3 ( 4 6 6 0 ) 9 3 7 9 (7 8 2 0 ) > 3 9 9 ( 1 2 5 0 0 ) 9 4 2 2 ( 1 3 7 0 0 1 Η Ν Μ R (c D C 1 3 ) δ 0 6 9 ( 9 Η 9 S ) 9 1 1 0 — 2 ♦ 5 ( 1 9 Η t m ) f 2 9 0 ( 3 Η » S ) > 3 3 6 ( 3 Η 9 S ) 9 5 2 2 ( 1 Η 9 d * J = 8 Η ζ ) * 5 8 3 ( 1 Η 9 d » J = 4 Η ζ ) $ 1 1 • 6 9 ( 1 Η 9 S ) Ο 分析 理論值 C 4 4 Η 5 1 Ν 0 1 5 • C 6 3 • 3 8 9 Η 6 • 1 6 » Ν 1 • 6 8 ο 值 ： C 6 4 • 3 8 9 Η 6 • 6 3 9 Ν > 1 6 0 Ο (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 實例7 : 合成3 4 z — ◦一亞環乙基伊沙徽素A ( 6 b ) 在環己顚I (1. 中之化合物5 b (83.3 mg)和TsOH (95mg)溶液在室溫下攪拌過夜。加含 水 10% NaHC〇3(5miM 和 CHC^3(10 私紙張尺度逍用中國國家楳準(CNS)甲4規格(210X297公*) 81. 5. 20.000(H) -27 - 219366 A 6 B6 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 五、發明説明（26) m 5)至反應混合物中且取出有機層，用食鹽水（5m 5 )洗滌，於Mg S〇4上乾燥且於真空中蒸發。粘稠殘餘 物用異丙醚碾磨且過濾而得3 2mg (44%)化合物 0 Μ P 182-190¾ (dec. ) 〇 I R v …(K B r ) cm'1 3 4 0 0, 1 6 0 5, 1 4 4 5, 1 3 7 0, 1 1 7 0, 1 0 7 0 〇 U V λ max ( M e Ο H ) n m ( s ) 2 3 6 (3 3 0 0 0) , 2 6 6 (2 8 9 0 0), 3 3 1 (5 3 4 0) , 3 9 9 (1 0 1 0 0 )， 4 2 0 (1 0 5 0 0) 〇 1 H NMR (CDC13 + CD3〇D) δ 1 . 1-1. 2 (19H, m), 2 . 8 7 ( 3 H , s ), 3 . 4 5 ( 3 H , s ), 5. 23 (1H, d, J = 8Hz), 5 . 94 ( 1 H , d , J = 4 H z ) 〇 元素分析：理論值C^HwNO^· H2〇 : C 62.31, H 6.03, N 1.86。 實測值：C 6 2 . 2 3 , H 5.92, N 1 . 8 3 〇 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度逍用中B國家«準(CNS)甲4規格(210X297公*) 81. 5 . 20.000(H) -28 - 219366 A 6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（27) 實例8 : 合成3 — , 4 - —0 —亞苯甲基一 2 " — N —第三丁氣羰 基伊沙徽素A (5c) 於CHzCjs (2mJM中之化合物_2_(77mg)和 苯甲醛二甲基乙縮醛（〇. 5miM溶液中加入TsOH (5呢），再保持於室溫下2天。於反應混合物中加入 NaHC〇3飽和水溶液而混合物用CHCi23萃取。萃 取液用水洗滌，於Na2S0 4上乾燥且在真空中蒸發而得 黃色固臁，其再藉由矽腠管柱層析純化，使用CHC^3 中之MeOH (1 — 3%)作為洗提液洗提而得70mg ( 8 1 %)標題化合物。 MP 168-170t：〇 I R v max ( K B r ) cm-2 1 7 3 5 s h , 1 6 9 5, 1 5 0 5, 1375, 1 2 5 5, 1235, 1 1 4 5, 1070, 7 8 0 o U V λ …（MeOH)nm(e) 2 3 5 (4 0 6 0 0) , 2 6 6 (3 9 3 0 0)， 3 3 2 (6 4 1 0) , 3 7 9 (8 6 9 0), 3 9 9 (1 3 9 0 0) ,4 2 1 (1 5 0 0 0) 〇 1 Η N M R ( C D C 1 3 ) δ 0 . 7 1 ( 9 H , s ), (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度遑用中覼家»準(0把）甲4規格(210x297公釐） 81. 5. 20,000(fl) -29 - 219366 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 五、發明説明（28) 1 . 3 5 (3 Η » d 9 J = 6 H Z ), 1 . 5 8 (3 Η $ s ) > 2 . 9 1 (3 Η t s ) 9 3 . 4 0 (3 Η 9 s ) » 5 . 3 2 (1 Η » d 9 J = 8 H z ), 5 . 6 9 (1 Η t d t J 4 H z ), 5 . 9 8 (1 Η 9 s ) o 分析 理論值 C 4 S H 4 7 N 0 i 5 令 H 2〇 C 6 2 • 8 6 ， H N 1 • 6 3 o 實 測值 • C 6 3 • 1 7 » H N 1 • 5 3 0 實例9 : 合成3 / 4 一〇一亞苯甲基伊沙徽素A ( 6 c ) 方法A 化合物 5 c (60mg)溶入 TFA (0. 3mi2)且 混合物立即於真空中濃縮。將殘餘物溶入NaHC〇3飽 和水溶液和CHCi?3混合物中。分離有機層，用水洗滌 且於真空中蒸發。黃色殘餘物在矽膠管柱上層析而得24 mg ( 4 5 % )化合物 6 c r, Μ Ρ 1 8 3 - 1 8 9 t： 〇 I R v max (KBr) cm_i t紙張尺度逍用中β國家槔毕(CNS)甲4規格(210x297公*) 81. 5. 20,000(H) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝. 線< -30 - 219366 A 6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（29) 1 7 1 0 $ 1 6 1 0 f 1 5 1 0 » 1 3 7 5 » 1 2 5 0 > 1 2 3 5 > 1 0 7 0 9 7 8 0 〇 U V λ m a X (M e 0 H ) n m ( ε ) 2 3 6 (4 0 7 0 0 ) 9 2 6 6 ( 3 4 4 0 0 ), 3 3 1 ( 5 8 9 0 ) f 3 7 9 ( 8 1 8 0 ) $ 3 9 8 ( 1 2 2 0 0 ) f 4 2 0 ( 1 3 0 0 0 )〇 1 Η Ν Μ R (C D c 1 3 + C D 3〇 D ) δ 〇 • 8 2 ( 1 • 5 H $ d f J = 6 H z ) t 1 • 2 2 (3 H $ d » J = 6 H z ) f 1 • 3 6 ( 1 • 5 H > d f J = 6 H z ) 9 1 • 5 8 ( 1 ♦ 5 H 9 s ) 9 1 • 6 1 ( 1 • 5 H 9 s ) t 2 • 9 2 (3 H » s ) 9 3 • 5 3 ( 3 H f s ) t 5 • 2 9 ( 1 H 9 d f J = 8 H z ) 9 5 • 9 5 ( 0 • 5 H f S ) t 6 • 0 1 ( 0 • 5 H t b r • ) t 6 • 1 1 ( 0 • 5 H » b r • ) t 6 • 2 8 ( 0 • 5 H 9 s ) o Μ S ( S I M S ) M / Z 7 4 2 (M + H ) * 9 4 0 8 t 3 3 4 f 1 6 0 o 方法B 在CH2Ci22 (5m)M中之伊沙徽素A (66呢） 本紙張尺度遑用中國國家«準(CNS)甲4規格(210x297公釐) 81. 5 . 20,000(H) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· -*νφ _ -31 - A 6 B6 19366 五、發明説明（30) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) ，苯甲蓰二甲縮醛（185mg)和TsOH (25mg)混 合物保持在室溫下2小時。將NaHC〇3飽和水溶液（ 約10mi2)及CH2CJ?2(l〇m5)加至反應混合物 中。分離有機層且於減壓下蒸發而得黃色固體，其再藉由 矽膠管柱層析純化（使用CHC)23中之MeOH作為洗 提液）而得45mg (60%) 6 c .此處所得化合物6 c 之HPLC和光譜數據和方法A中所得者相同。 實例1 0 : 合成2 " — N —苯甲氧羰基一 3 — , 4 / —〇 —甲氧基亞 甲基伊沙徽素A ( 7 d ) 在 CH2C52(3m5)中之化合物 i(62mg), 使用酸三甲酯0. 2mJ2)和對一甲苯磺酸（5ng)溶& 在室溫下攪拌2小時，反應混合物用CH2Ci2 (1〇m iM稀釋，用NaHC〇3飽和水溶液，於Na2S〇4± 乾燥且於真空中蒸發而得65mg (100%)化合物u 〇 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Μ P 139-141t：〇 1 R v «.αχ ( K B r ) cm'1 3 4 0 0, 1725, 1510, 1375, 1255, 1240, 1070〇 U V "Κ ηαχ ( M e 0 Η n m ( ε ) 2 3 6 (3 5 7 0 0) , 267 ( 3 4 0 0 〇 )， 81. 5. 20,000(H) 本紙張尺度遑用中β B家#準(0昍）甲4規格(210X297公*) -32 - 219366 A 6 B6 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 五、發明説明（31) 3 3 3 ( 5 8 0 0 ) % 3 8 0 (8 0 9 0 ), 3 9 9 ( 13 0 0 0 ) 1 4 2 2 ( 1 3 9 0 0 ) ο 1 Η Ν MR ( C D c 1 3 + D 2〇 ) δ 1 • 3 2 (3 Η % d 9 J = 6 H Z ) 9 1 « 3 9 (3 Η » d f J = 6 • 5 H z ) t 1 • 5 6 (3 Η » s ) » 2 • 8 8 (3 Η > s ) t 3 • 9 2 (3 Η % s ) 9 3 • 9 6 (3 Η ， s ) f 6 • 2 5 (1 Η 9 d » J = 8 H z ) t 5 « 6 5 (1 Η t d » J = 4 H z ) 9 5 • 9 3 (2 Η t s ) o 實例 1 1 • • 合成 3 > 4 0 一 甲 氣 基 亞 甲 基伊沙徽素 a ( ρ d 在 7 5 %含水 四 氫呋喃 ( 4 m Si ) 中之化合物7 d 5 7 mg ) 溶液在1 0 % P d 一 c ( 3 0 mg ) 存在及 室 下氫 化反應 1 .5 小 時 o 過濾反應混合物且濃縮濾液 至 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 。殘餘物在矽膠上管柱層析純化而得35. 5mg (73% )化合物6 d。 MP 209 — 211*0 (dec. ) 〇 I R v -αχ ( K B r ) c m 3 4 0 0, 1720, 1680, 1375, 本紙張尺度遑用中國國家糅準(CNS)甲4規格(210x297公;¢) 81. 5. 20,000(fl) -33 - A 6 B 6 219366 五、發明説明（32) 1 2 55, 1205, 1120, 1075〇 U V λ …(M e Ο Η η m ( e ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 2 3 6 (3 3 9 0 0) , 2 6 6 ( 3 0 8 0 〇 )， 3 3 1 (5 2 0 0) , 3 9 8 (1 0 8 0 0 )， 4 1 9 ( 1 1 2 0 0) 〇 J Η NMR (CDC13 + CD3〇D) δ 1.0-1.4(6H,m), 1 . 5 7 ( 3 Η , s ), 2 . 6 2 ( 3 Η , s ), 3 . 3 8 ( 3 Η , s ), 3 . 5 0 ( 3 Η , s ), 5.44 ( 1 Η , d, J = 8 Η ζ ), 5 . 8 7 ( 2 Η , m ) 〇 MS (SIMS) Μ/Ζ 697 (Μ+2Η) ' 363,334,202,160。 實例1 2 : 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 合成4 / 一 Ο —四氫吡喃伊沙徽素A ( _S_) 在二甲基甲醛胺（5miM中之伊沙徽素A (110 ng)和二氫吡喃（0. 5mi2)溶液由小過量莫耳當量濃 度T s 0H酸化並保持於室溫下過夜。於反應混合物中加 入NaHC〇3飽和水溶液（20miM且讓混合物在 DUion HP-20 (純lOOmJM之管柱上層析純化。管柱 用水洗滌且用含水CH3CN稀釋。混合洗出液之帶黃色 81. 5. 20.000(H) 本紙張尺度逍用中 B家«準(CNS)甲4規格(210X297公釐) -34 - A 6 B6 219366 五、發明説明（33) 部份且於真空中蒸發而得帶黃色不定形固鼷，其再溶入 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 0 . 0 5 M_ MeOH 中之 TsOH (5miM 中。1 小 時之後，加入NaHC〇3至反應混合物且過濾混合物。 濃縮濾液且殘餘物藉由製備级TLC純化而得16mg ( 1 3 %)標題化合物。

Μ Ρ 2 0 2 一 2 0 5 *0 o I R V jr a X ( K B r ) C m -1 1 6 9 5 t 1 6 1 0 t 1 3 7 5 9 1 2 5 5 » 1 0 7 5 » 7 8 0 o U V λ m a X ( M e O H n m ( e ) 2 3 6 ( 3 4 0 0 0 ) f 2 6 6 ( 2 9 5 0 0 ), 3 3 3 ( 5 2 5 0 ) t 3 7 9 ( 6 8 5 0 ) » 3 9 9 ( 1 0 5 0 0 ) t 4 2 1 ( 1 1 3 0 0 ) O 1 Η N M R ( C D c 1 3 + c D 3〇 D ) δ 1 • 4 4 ( 3 H f s ) f 2 • 7 3 ( 3 H 9 s ) t 3 ♦ 4 8 ( 2 H t s ) 9 5 • 6 2 ( 1 H 9 d t J = 8 H z ) t 5 • 9 3 ( 1 H 9 d 9 J = 4 H z ) 〇 Μ S ( S I M S ) • M / Z 7 3 8 ( M + H ) ' 4 0 4 9 3 3 4 » 1 6 0 9 8 5 O 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 81. 5. 20,000(H) 本紙張凡度逍用中家樣準(CNS) T4規格(210X297公釐) -35 -

Claims (1)

1. 么、告本

   7 7 7 7 A B c D 附件1U): 第81104186號專利申請案 中文申請專利範圍修正本 民國82年3月修正 1 .下式化合物： 〇 OH

   式中，Z示亞C』-5烷基，亞環C3-e烷基，亞苯甲基或 Cl-5烷氧基亞甲基。 2 .下式化合物： (-先聞讀背而之注意事邛再填"本頁) Μ浙部中央捣苹局β工消贽合作社印製 Ο OH

   本纸張尺度適用中S國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐） 一 1 一 7 7 7 7 A B c D 219366 六'申ifr專利範面 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本百) 3. 如申請專利範圍第1項之化合物，其像為3 一， 4 - 一 0 -亞異丙基伊沙徽素A ; 3>,4<—〇—璟己基伊沙徽素a; 3/，4·* 一 〇 —亞苯甲基伊沙徽素A;或 3 —，4 — 0 —甲氣基亞甲基伊沙徽素A。 4. 一種製備如申請專利範圍第1項之化合物的方法 ，其包括使用二甲基乙縮醛，在酸催化劑存在下處理2 〃 一 N -經保護之伊沙徽素A,隨之，再去保護。 5. —種製備如申請專利範圍第1項之化合物的方法 ，其包括使用二甲基乙縮醛，在酸催化劑存在下處理伊沙 徽素A。 6. —種製備如申請專利範圍第2項之化合物的方法 ,其包括使用二氫吡喃，在酸催化劑存在下處理伊沙徽素 A,再用甲醇中之對一甲苯磺酸處理。 7. —種用於治療腫瘤之藥學組成物，其包含如申n 專利範圍第1一3項中任一項之化合物作為活性成份，以 及一或多種藥學上可接受之載體或稀釋劑。 經消部屮央標準局貞工消费合作社印91 8. 如申請專利範圍第1—3項中任一項之化合物， 其傺用作抗腫瘤劑之用途。 本紙張尺度適用中B B家徉準（CNS)甲4規格（210X297公釐） -2 -