TW202308657A

TW202308657A - 小分子cd73拮抗劑及其用途

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Publication number: TW202308657A
Application number: TW111117540A
Authority: TW
Inventors: 李瑤; 陳雷; 石宗軍; 胡剛; 耿鵬鑫; 王浩東; 史少輝; 王勇利; 唐平明; 余彥; 張晨; 嚴龐科
Original assignee: 大陸商四川海思科製藥有限公司
Priority date: 2021-05-11
Filing date: 2022-05-10
Publication date: 2023-03-01
Also published as: WO2022237747A1; EP4353732A1; CN117642411A

Abstract

本發明公開一種式(I)的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，或含它們的藥物組合物，及其作為CD73拮抗劑在製備治療相關疾病的藥物中的用途，式(I)中各基團與說明書定義一致。

Description

小分子CD73拮抗劑及其用途

本發明屬於藥物領域，尤其關於一種具有CD73抑制活性的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，及其在製備治療相關疾病的藥物中的用途。

癌症的治療方法目前主要包括放射療法、手術療法、藥物療法，靶向病灶的藥物治療已經成為當今臨床腫瘤治療的主要手段，但是由於腫瘤細胞耐藥性產生快，現階段人們對於腫瘤的轉移與復發基本仍是束手無策。

CD73是胞外5’-核苷酸酶。C端結構域中含有AMP結合位員點，通過GPI錨定連接到質膜上。細胞外中ATP和ADP或NAD+通過不同酶轉化為AMP，並通過CD73進一步水解轉化為腺苷。CD73在不同組織中有不同程度的表達，尤其在結腸、腎、腦、肝、心、肺、脾、淋巴結和骨髓中含量豐富(Trends Cancer. 2016 1;2(2):95-109.)。CD73將AMP水解成腺苷(Ado)後，胞外Ado與細胞表面的 4 種G蛋白偶聯腺苷受體AR(A1R、A2AR、A2BR以及A3R)結合後，促進抗炎反應，抑制LCK、MAPK、PKC等一系列與免疫啟動相關的信號通路，調控調節性T細胞、抑制炎症等多途徑發揮廣泛的免疫抑制活性。胞外Ado也可通過平衡的核苷轉運體(如ENTs)進入到細胞內，或進一步代謝成肌苷(如ADA/CD26)，Ado可啟動多種信號通路，如MAPK、PI3K、PLC、PKC和離子通道等。其中A2AR和A2BR信號刺激腺苷酸環化酶(AC)產生環腺苷酸環化酶(cAMP)，啟動PKA激酶。A1R和A3R信號抑制AC。來調節保內cAMP的濃度(Front Immunol. 2020 15;11:508.)。

CD73通過產生胞外腺苷，成為腫瘤微環境中的主要免疫抑制調節劑。CD73在癌細胞、DC細胞、Treg、NK細胞、MDSC、TAM等多種細胞表面均有表達。抑制免疫細胞(如效應T細胞、B細胞、NK細胞和DC細胞)的同時，維持免疫抑制細胞功能(Current Opinion in Pharmacology 2020, 53:1–11)。CD73在不同的腫瘤中高表達，包括結直腸癌、肺、胰腺、卵巢、乳腺、黑色素瘤和甲狀腺腫瘤等。與多種類型腫瘤的不良預後密切相關，可作為惡性腫瘤發展的一種關鍵因數。CD73過表達可促進腫瘤的增殖和生長，且腫瘤和宿主本身的CD73均對腫瘤生長有重要影響。體內體外實驗均證實抑制CD73表達，可抑制腫瘤細胞的生長(Am J Physiol Cell Physiol. 2019 317(6):C1079-C1092.)。

目前，CD73小分子拮抗劑研發在全球範圍內尚處在較為初步的階段，但依據已有的臨床前資料與臨床資料來看，抑制腫瘤微環境CD73生理功能的藥物具有很大的潛力，尤其是當其與其他免疫檢查點抑制劑如PD-1、PD-L1以及A2aR拮抗劑的聯用時在保證安全性的前提上均表現出了不錯的療效或活性。因此，開發新的CD73 拮抗劑，通過降低腫瘤微環境胞外腺苷來解除免疫抑制為抑制腫瘤發展和轉移提供了一種新的治療思路。

本發明提供了一種具有CD73抑制活性的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，以及其製備和用於治療CD73誘導的疾病。本發明的化合物對CD73具有良好的抑制作用，能抑制腫瘤細胞增殖，具有良好的藥代動力學特徵，高的生物利用度，安全性好，毒副作用小，對CYP酶無抑制，吸收快。

1. 本發明提供一種式(I)所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，

(I)

其中，

X ₁選自O或S；

X ₂選自CR ^x2aR ^x2b、O、S或NR ^x2c；

Y選自OR ²、-C(R ^y1R ^y2)-P(=O)(OR ²)OR ²、-C(R ^y1R ^y2)-P(=O)(OR ²)NHR ^y3、-C(R ^y1R ^y2)-P(=O)(OR ²)SR ^y3、-C(R ^y1R ^y2)-R ^y4、-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)OR ²、-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)NHR ^y3或-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)SR ^y3；

每個R ¹、R ²各自獨立地選自H、氘、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基、C _3-10環烷基、3-10員雜環烷基、C _6-10芳基、5-10員雜芳基、-C(R ^2aR ^2b)-O-C(O)-OR ^2c、-C _0-6烷基-S(O) _rR ^2c、-C _0-6烷基-C(O)R ^2c、-C _0-6烷基-C(O)OR ^2c或-C _0-6烷基-C(O)NR ^2c，所述的烷基、環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

r選自1或2；

每個R ^y1、R ^y2、R ^y3、R ^x2a、R ^x2b、R ^x2c各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、C _1-6烷基、氘代C _1-6烷基或鹵代C _1-6烷基；

R ^y4選自4-10員雜環烷基、5-10員雜芳基、C _3-10環烷基或C _6-10芳基，所述的雜環烷基、雜芳基、環烷基或芳基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

每個R ^2a、R ^2b各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、C _1-6烷基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、C _3-10環烷基、3-10員雜環烷基、C _6-10芳基或5-10員雜芳基；

每個R ^2c各自獨立選自H、氘、C _1-6烷基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、C _3-10環烷基、3-10員雜環烷基、C _6-10芳基或5-10員雜芳基，所述的烷基、環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

L ₁選自鍵、S、O、NH、N(C _1-6烷基)或C _1-6烷基，所述的烷基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

L ₂選自-(CR ^L2aR ^L2b)n-、*-Z-C _6-10芳基、*-Z-(5-10員雜芳基)-、*-C _6-10芳基-Z-、*-(5-10員雜芳基)Z-、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的烷基中碳原子任選被1個或多個選自N、O、S、S(O)或S(O) ₂替代，所述的L ₂任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；

每個R ^L2a、R ^L2b各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基、C _2-6炔基或-C _1-6烷基-O-C _1-6烷基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、5-10員雜芳基、C _6-10芳基、4-10員雜環烷基或C _3-10環烷基的基團取代；

或者，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基；

每個n各自獨立選自1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；

每個Z獨立選自鍵、-O-或C _1-6烷基，所述烷基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

R ₄、R ₅、R ^6a、R ^6b、R ^7a、R ^7b各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基或烷基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；或者R ₄、R ₅、R ^6a、R ^6b、R ^7a、R ^7b各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基或C _3-6環烷基，所述的氨基或烷基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基、氰基或C _1-6烷氧基的基團取代；

或者，R ^6a和R ^6b、或R ^7a和R ^7b一起形成C _2-6烯基、C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基，所述的烯基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基、氰基的基團取代；

或者，R ₄和R ₅、或者R ^6a和X ₂、或R ^L2a和 R ⁵、或R ⁴和R ^7a一起形成C _5-7環烷基或5-7員雜環烷基；

或者，R ⁴和R ^6a、或R ^6b和R ^7b、或R ⁴和R ^L2a、或R ⁴和X ₂一起形成C _3-7環烷基或3-7員雜環烷基；

或者，R ^x2a和R ⁴、或R ^x2a和R ⁵、或R ^6a和R ⁴、或R ^6b和R ^7b、或R ^7a和R ⁵一起形成一個化學鍵，條件是最多一組形成一個化學鍵；

Hy選自5-15員雜芳基或5-15員雜環烷基，所述的雜芳基或雜環烷基任選進一步被1個或多個選自R ^hy的基團取代；

R ³選自L ₃-R ^3a、5-10員雜環烷基、C _5-10環烷基、5-10員雜芳基或C _6-10芳基，所述的雜環烷基、環烷基、雜芳基或芳基任選進一步被1個或多個選自R ^y的基團取代；

L ₃選自**-N(R ^L3)C _1-6烷基-、-N(R ^L3)-、**-N(R ^L3)S(O)-、**-N(R ^L3)S(O) ₂-、**-N(R ^L3)S(O)-C _1-6烷基-、**-N(R ^L3)S(O) ₂-C _1-6烷基-、**-N(R ^L3)-N=CH-，或者**-N(R ^L3)-O-，**表示L ₃與Hy連接位點；

R ^3a選自H、C _1-6烷基、5-15員碳環基、5-15雜環基或者苄基，所述的烷基、苄基、碳環基或雜環基任選進一步被1個或多個選自R ^y的基團取代；

R ^L3各自獨立地選自H、氘、C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基或氘代C _1-6烷基；

或者，R ^L3和R ^hy與所連接的原子一起形成5-8員雜環烷基；

每個R ^hy、R ^x各自獨立選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、-O-C _1-6烷基-C _6-10芳基或-O-C _1-6烷基-(5-10員雜芳基)的基團取代；

R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-P(=O)(C _1-6烷基) ₂、-P(=S)(C _1-6烷基) ₂、

、

、-Si(C _1-6烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-6烷基) ₂、-C _1-6烷基-S(=O)(=N)、-C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述烷基、烷氧基、氨基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基或羥基C _1-6烷氧基的基團取代，

其餘基團如1所述。

2. 本發明所述的式I化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中

L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-(CR ^L2aR ^L2b)n’-、-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-、-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基、炔基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

每個R ^L2a、R ^L2b、R ^L2c各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基、C _2-6炔基或-C _1-6烷基-O-C _1-6烷基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、5-10員雜芳基、C _6-10芳基、4-10員雜環烷基或C _3-10環烷基的基團取代；

或者，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基、或4-6員雜環烷基；

每個m、n、n’各自獨立選自1、2、3、4或5。

進一步，本發明所提供式(I)化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中

L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-O-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基、*-Z-C _6-10芳基-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

每個m、n、n’各自獨立選自1、2或3；

每個R ^L2a、R ^L2b、R ^L2c各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-4烷基或-C _1-4烷基-O-C _1-4烷基，所述烷基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-4烷基、鹵代C _1-4烷基、羥基C _1-4烷基、C _1-4烷氧基、氘代C _1-4烷氧基、鹵代C _1-4烷氧基、羥基C _1-4烷氧基、5員雜芳基、6員雜芳基或8-10員雙環雜芳基的基團取代；

Z獨立選自鍵、-O-或C _1-4烷基，所述烷基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

或者，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基、4-6員雜環烷基。

L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-O-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-4烷基、*-Z-C _6-10芳基-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

每個m、n、n’各自獨立選自1、2或3；

Z獨立選自鍵、-O-或C _1-3烷基，所述烷基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

或者，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基。

L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-C(R ^L2aR ^L2b)-O-、-O-、*-C(R ^L2aR ^L2b)-O-C(R ^L2aR ^L2b)-、*-O-C(R ^L2aR ^L2b)-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-3烷基、*-Z-苯基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的烷基、芳基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

Z獨立選自鍵、-O-、甲基或乙基，所述甲基或乙基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；

每個R ^L2a、R ^L2b、R ^L2c各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、甲基、乙基、丙基、異丙基、-甲基-O-甲基、-甲基-O-乙基、-甲基-O-丙基、-乙基-O-甲基、-乙基-O-乙基或-乙基-O-丙基，所述甲基、乙基、丙基或異丙基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-2烷基、氟代C _1-2烷基、羥基C _1-2烷基、C _1-2烷氧基、氘代C _1-2烷氧基、鹵代C _1-2烷氧基、羥基C _1-2烷氧基、5員雜芳基、6員雜芳基或8-10員雙環雜芳基的基團取代；

或者，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成3員環烷基、4員環烷基、5員環烷基、6員環烷基、4員雜環烷基、5員雜環烷基或6員雜環烷基。

3. 本發明所述的式I化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，

R ³選自L ₃-R ^3a；

R ^3a選自H、C _1-6烷基、苄基、5-15員碳環基或者5-15雜環基，所述的烷基、苄基、碳環基或雜環基進一步被1個或多個選自R ^y的基團取代；進一步，R ^3a選自H、C _1-6烷基、5-15員碳環基或者5-15雜環基，所述的碳環基或雜環基進一步被1個或多個選自R ^y的基團取代；進一步，R ^3a選自苯基、5員雜芳基、6員雜芳基、5員單環環烷基、6員單環環烷基、5員單環雜環烷基、6員單環雜環烷基、8-10員雙環雜芳基、8-10員雙環雜環烷基、8-10員雙環芳基、8-10員雙環環烷基、11-15員三環環烷基或11-15員三環雜環烷基，所述的環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基進一步被1至3個選自R ^y的基團取代；進一步，R ^3a選自苯基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、苯並5員環烷基、苯並5員雜環烷基、苯並6員環烷基、苯並6員雜環烷基、苯並5員雜芳基、苯並6員雜芳基、吡啶並5員環烷基、吡啶並5員雜環烷基、吡啶並6員環烷基、吡啶並6員雜環烷基、吡啶並5員雜芳基、吡啶並6員雜芳基、5員環烷基並苯基、5員雜環烷基並苯基、6員環烷基並苯基、6員雜環烷基並苯基、5員雜芳基並苯基、6員雜芳基並苯基、5員環烷基並吡啶基、5員雜環烷基並吡啶基、6員環烷基並吡啶基、6員雜環烷基並吡啶基、5員雜芳基並吡啶基或6員雜芳基並吡啶基，其中“並”字左側的環表示與L ₃連結的環，所述的苯基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、環烷基、雜環烷基或雜芳基進一步被1、2或3個選自R ^y的基團取代；進一步，R ^3a選自苯基，所述的苯基進一步被1、2或3個選自R ^y的基團取代；

當R ^3a被2個或2個以上(比如3、4個)R ^y取代時，R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-P(=O)(C _1-6烷基) ₂、-P(=S)(C _1-6烷基) ₂、

、

、-Si(C _1-6烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-6烷基) ₂、-C _1-6烷基-S(=O)(=N)、-C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基、C _2-6炔基，所述烷基、烷氧基、烯基、炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基的基團取代；進一步，R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-P(=O)(C _1-3烷基) ₂、-P(=S)(C _1-3烷基) ₂、

、

、-Si(C _1-3烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-3烷基) ₂、-C _1-3烷基-S(=O)(=N)、-C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述烷基、烷氧基、烯基、炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-3烷基、鹵代C _1-3烷基、羥基C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、氘代C _1-3烷氧基、鹵代C _1-3烷氧基或羥基C _1-3烷氧基的基團取代；進一步，至少一個R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、C _2-4烯基或C _2-4炔基；條件是，當R ^3a被2個R ^y取代時，R ^y不為F和SF ₅的組合；

當R ^3a僅被一個R ^y取代時，R ^y選自疊氮基、-P(=O)(C _1-6烷基) ₂、-P(=S)(C _1-6烷基) ₂、

、

、-Si(C _1-6烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-6烷基) ₂或-C _1-6烷基-S(=O)(=N)，所述烷基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基或羥基C _1-6烷氧基的基團取代；進一步， R ^y選自疊氮基、-P(=O)(C _1-3烷基) ₂、-P(=S)(C _1-3烷基) ₂、

、

、-Si(C _1-3烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-3烷基) ₂或-C _1-3烷基-S(=O)(=N)，所述烷基任選進一步被1、2、3選自氘、F、Cl、氨基、羥基或氰基的基團取代，

其餘基團如1所述。

4. 本發明所述的式I化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中

R ₄、R ₅、R ^6a、R ^6b、R ^7a、R ^7b各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；

或者，R ^6a和R ^6b、或R ^7a和R ^7b一起形成C _2-6烯基、C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基，所述的烯基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；進一步，R ^6a和R ^6b、或R ^7a和R ^7b一起形成C _2-4烯基、C _3-4員環烷基或4-5員雜環烷基，所述的烯基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；進一步，R ^6a和R ^6b、或R ^7a和R ^7b一起形成乙烯基、丙烯基、3員環烷基、4員環烷基、含1個選自N或O原子的4員雜環烷基或含1個選自N或O原子的5員雜環烷基，所述的烯基任選進一步被1、2或3選自氘、F、Cl、羥基、氰基的基團取代；

或者，R ₄、R ₅和X ₂、或者R ⁴、R ^6a和X ₂、或R ⁴、R ^7a和X ₂一起形成C _5-7環烷基、5-7員雜環烷基；進一步，R ₄、R ₅和X ₂、或者R ⁴、R ^6a和X ₂、或R ⁴、R ^7a和X ₂一起形成5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基；進一步，R ₄、R ₅和X ₂、或者R ⁴、R ^6a和X ₂、或R ⁴、R ^7a和X ₂一起形成5員環烷基、6員環烷基或、7員環烷基；進一步，R ₄、R ₅和X ₂、或者R ⁴、R ^6a和X ₂、或R ⁴、R ^7a和X ₂一起形成5員雜環烷基、6員雜環烷基、或7員雜環烷基，進一步地，所述的雜環烷基含有1或2個氧原子；

或者，R ⁴和R ^6a、或R ^6b和R ^7b、或R ⁴和X ₂及其連接的原子一起形成C _3-7環烷基或3-7員雜環烷基；進一步，R ⁴和R ^6a、或R ^6b和R ^7b、或R ⁴和X ₂及其連接的原子一起形成3員環烷基、4員環烷基、5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、4員雜環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基，所述的雜環烷基含有1或2個氧原子；

或者，R ^x2a和R ⁴、或R ^x2a和R ⁵、或R ^6a和R ⁴、或R ^6b和R ^7b、或R ^7a和R ⁵及其連接的原子一起形成一個化學鍵，條件是最多一組形成一個化學鍵；

條件是

不選自如下結構：

，

其餘基團如1所述。

5. 本發明式I所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中

選自：

，

其餘基團如1所述。

6. 本發明式I所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中

R ^L2a、R ⁵和X ₂及其連接的原子一起形成C _5-7環烷基或5-7員雜環烷基；進一步，R ^L2a、R ⁵和X ₂及其連接的原子一起形成5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基；進一步，R ^L2a、R ⁵和X ₂及其連接的原子一起形成5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基，所述的雜環烷基含有1或2個氧原子；進一步，R ^L2a、R ⁵和X ₂及其連接的原子一起形成6員雜環烷基或7員雜環烷基，所述的雜環烷基含有1或2個氧原子；

或者，R ⁴和R ^L2a及其連接的原子一起形成C _3-7環烷基或3-7員雜環烷基；進一步，R ⁴和R ^L2a及其連接的原子一起形成3員環烷基、4員環烷基、5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、4員雜環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基，所述的雜環烷基含有1或2個氧原子；進一步，R ⁴和R ^L2a及其連接的原子一起形成3員環烷基、4員環烷基或5員環烷基，

其餘基團如1所述。

7. 本發明所述式I的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，所述化合物具有式(II)結構：

(II)

其餘基團如1所述。

8.本發明所述的式I化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，所述化合物具有式(III)、(IV)、(V)、(VI)、(III-1)、(IV-1)、(V-1)、(VI-1)結構：

(III)

(IV)

(V)

(VI)

(III-1)

(IV-1)

(V-1)

(VI-1)

L ₁選自S、O、NH、N(CH ₃)或-CH ₂-；進一步，L ₁選自-CH ₂-；進一步，L ₁選自O、NH、N(CH ₃)；進一步，L ₁選自O；進一步，L ₁選自NH、N(CH ₃)；

L _1a選自鍵、S、O、NH、N(CH ₃)或-CH ₂-；進一步，L _1a選自鍵、O、NH、N(CH ₃)或-CH ₂-；進一步，L _1a選自鍵、或-CH ₂-；

L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代；進一步，L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-C(R ^L2aR ^L2b)-O-、*-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-O-、-O-、*-O-C(R ^L2aR ^L2b)-O-C(R ^L2aR ^L2b)-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-C(R ^L2aR ^L2b)-O-C(R ^L2aR ^L2b)-、*-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-O-C(R ^L2aR ^L2b)-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-3烷基-、*-Z-苯基-、*-Z-(5員雜芳基)-、*-Z-(6員雜芳基)-、-C _2-4烯基-或-C _2-4炔基-，所述的烷基、苯基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；

L _2a選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；進一步，L _2a選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；進一步，L _2a選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-C(O)C _1-3烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1、2、3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；進一步，L _2a選自-O-CH ₂CH ₂CH ₂-O-、-O-CH ₂CH ₂-O-、-O-CH ₂CH ₂-、*-C(O)CH ₂-、苯基、*-CH ₂-苯基-、*-O-苯基-、乙烯基、丙烯基或乙炔基，所述的苯基、乙烯基、丙烯基或乙炔基任選進一步被1、2個選自F、Cl的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；

L _2b選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；進一步，L _2b選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-O-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；進一步，L _2b選自*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-；進一步，L _2b選自*-(CR ^L2aR ^L2b)-O-或*-(CR ^L2aR ^L2b)-O-(CR ^L2aR ^L2b)-；

每個R ^L2a、R ^L2b、R ^L2c各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基、C _2-6炔基或-C _1-6烷基-O-C _1-6烷基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、5-10員雜芳基、C _6-10芳基、4-10員雜環烷基或C _3-10環烷基的基團取代；進一步，每個R ^L2a、R ^L2b、R ^L2c各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-4烷基、C _1-4烷氧基、C _2-4烯基、C _2-4炔基或-C _1-4烷基-O-C _1-4烷基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-2烷基、鹵代C _1-2烷基、羥基C _1-2烷基、C _1-2烷氧基、氘代C _1-2烷氧基、鹵代C _1-2烷氧基、羥基C _1-2烷氧基、5-6員雜芳基、8-10員雙環雜芳基、苯基、C _8-10雙環芳基、4-6員單環雜環烷基、6-10員雙環雜環烷基、C _3-6單環環烷基或C _6-10雙環環烷基的基團取代；進一步，每個R ^L2a、R ^L2b、R ^L2c各自獨立選自H、氘、F、Cl、氨基、羥基、氰基、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、乙烯基、丙烯基、乙炔基、丙炔基、-甲基-O-甲基-、-甲基-O-乙基-或-乙基-O-乙基-，以上基團任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-2烷基、鹵代C _1-2烷基、羥基C _1-2烷基、C _1-2烷氧基、氘代C _1-2烷氧基、鹵代C _1-2烷氧基、羥基C _1-2烷氧基、5-6員雜芳基、苯基、4-6員單環雜環烷基、C _3-6單環環烷基或C _6-10雙環環烷基的基團取代；

或者，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基；進一步，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成3員環烷基、4員環烷基、5員環烷基、6員環烷基、4員雜環烷基、5員雜環烷基或6員雜環烷基；

X ₂選自CH ₂、O；進一步，X ₂選自CH ₂；進一步，X ₂選自O；

每個Z獨立選自鍵或-O-、C _1-6烷基，所述烷基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；進一步，每個Z獨立選自鍵、-O-、C _1-3烷基，所述烷基任選進一步被1、2、3選自R ^x的基團取代；進一步，每個Z獨立選自鍵、-O-、甲基、乙基、丙基，所述甲基、乙基、丙基任選進一步被1、2、3選自R ^x的基團取代；

每個m、n、n’獨立選自1、2或3；進一步，每個m獨立選自1或2，每個n、n’獨立選自1或2、3；

條件是，式(V)中當L _2b選自*-C(R ^L2aR ^L2b)-O-C(R ^L2aR ^L2b)-時，R ^L2a、R ^L2b不能同時為H，

其餘基團如1所述。

9. 本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，所述化合物具有式(III-2)、(III-3)、(IV-2)、(IV-3)、(V-2)、(V-3)、(VI-2)、(VI-3)結構：

(III-2)

(III-3)

(IV-2)

(IV-3)

(V-2)

(V-3)

(VI-2)

(VI-3)

p選自0、1或2；進一步，p選自0或者1，進一步，p選自0；

R ^3a選自5-6員單環環烷基、5-6員單環雜環烷基、8-10員雙環環烷基、8-10員雙環雜環烷基、11-15員三環環烷基或11-15員三環雜環烷基，所述的環烷基或雜環烷基任選進一步被1至3個選自R ^y的基團取代；進一步，R ^3a選自5員單環環烷基、6員單環環烷基、5員單環雜環烷基、6員單環雜環烷基、苯並5員環烷基、苯並5員雜環烷基、苯並6員環烷基、苯並6員雜環烷基、苯並5員雜芳基、苯並6員雜芳基、吡啶並5員環烷基、吡啶並5員雜環烷基、吡啶並6員環烷基、吡啶並6員雜環烷基、吡啶並5員雜芳基、吡啶並6員雜芳基、5員環烷基並苯基、5員雜環烷基並苯基、6員環烷基並苯基、6員雜環烷基並苯基、5員雜芳基並苯基、6員雜芳基並苯基、5員環烷基並吡啶基、5員雜環烷基並吡啶基、6員環烷基並吡啶基、6員雜環烷基並吡啶基、5員雜芳基並吡啶基或6員雜芳基並吡啶基，其中“並”字左側的環表示與氮原子連結的環，所述的苯基、吡啶基、環烷基、雜環烷基、雜芳基進一步被1、2或3個選自R ^y的基團取代；進一步，R ^3a選自5員單環環烷基、6員單環環烷基、5員單環雜環烷基、6員單環雜環烷基、5員環烷基並苯基、5員雜環烷基並苯基、6員環烷基並苯基或6員雜環烷基並苯基，其中“並”字左側的環表示與氮原子連結的環，所述的苯基、環烷基、雜環烷基、雜芳基進一步被1、2或3個選自R ^y的基團取代；

L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-O-、*-C(R ^L2aR ^L2b)-O-C(R ^L2aR ^L2b)-、*-O-C(R ^L2aR ^L2b)-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-3烷基-、*-Z-苯基-、*-Z-(5員雜芳基)-、*-Z-(6員雜芳基)-、-C _2-4烯基-或-C _2-4炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代；進一步，L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-O-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-4烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；進一步，L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-C(R ^L2aR ^L2b)-O-、-O-、*-C(R ^L2aR ^L2b)-O-C(R ^L2aR ^L2b)-、*-O-C(R ^L2aR ^L2b)-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-3烷基-、*-Z-苯基-、-C _2-4烯基-或-C _2-4炔基-，所述的烷基、芳基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；進一步，L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-C(R ^L2aR ^L2b)-O-、*-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-O-、-O-、*-O-C(R ^L2aR ^L2b)-O-C(R ^L2aR ^L2b)-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-C(R ^L2aR ^L2b)-O-C(R ^L2aR ^L2b)-、*-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-O-C(R ^L2aR ^L2b)-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-3烷基-、*-Z-苯基-、*-Z-(5員雜芳基)--、*-Z-(6員雜芳基)-、-C _2-4烯基-或-C _2-4炔基-，所述的烷基、苯基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1、2、3個選自R ^x的基團取代；

L _2a選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；進一步，L _2a選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；進一步，L _2a選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-、*-C(O)C _1-3烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1、2、3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；進一步，L _2a選自-O-CH ₂CH ₂CH ₂-O-、-O-CH ₂CH ₂-O-、-O-CH ₂CH ₂-、*-C(O)CH ₂-、苯基、*-CH ₂-苯基-、*-O-苯基-、乙烯基、丙烯基或乙炔基，所述的苯基、乙烯基、丙烯基或乙炔基任選進一步被1、2個選自F、Cl的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；

L _2b選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；進一步，L _2b選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-O-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、-C _2-6烯基-或-C _2-6炔基-，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；進一步，L _2b選自*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-(CR ^L2aR ^L2b) _n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-；進一步，L _2b選自*-(CR ^L2aR ^L2b)-O-、*-(CR ^L2aR ^L2b)-O-(CR ^L2aR ^L2b)-；

每個Z獨立選自鍵、-O-或C _1-6烷基，所述烷基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；進一步，每個Z獨立選自鍵、-O-或C _1-3烷基，所述烷基任選進一步被1、2、3選自R ^x的基團取代；進一步，每個Z獨立選自鍵、-O-、甲基、乙基或丙基，所述甲基、乙基或丙基任選進一步被1、2、3選自R ^x的基團取代；

每個m、n、n’獨立選自1、2或3；進一步，每個m各自獨立選自1、2，每個n、n’各自獨立選自1、2、3；

條件是，式(V-2)、(V-3)中當L _2b選自*-C(R ^L2aR ^L2b)-O-C(R ^L2aR ^L2b)-時，R ^L2a、R ^L2b不能同時為H。

10. 本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中

Hy選自6員雜芳基、5員雜芳基並5員雜芳基、5員雜芳基並苯基、5員雜芳基並5員雜環烷基、5員雜芳基並6員雜環烷基、5員雜環烷基並5員雜芳基、5員雜環烷基並6員雜芳基、5員雜環烷基並苯基、5員雜環烷基並5員雜環烷基、5員雜環烷基並6員雜環烷基、6員雜芳基並5員雜芳基、6員雜芳基並6員雜芳基、6員雜芳基並苯基、6員雜芳基並5員雜環烷基、6員雜芳基並6員雜環烷基、6員雜環烷基並5員雜芳基、6員雜環烷基並6員雜芳基、6員雜環烷基並苯基、6員雜環烷基並5員雜環烷基、6員雜環烷基並6員雜環烷基或者

；

A環選自5-6員雜芳基、5-6員雜環烷基或苯基；

B環選自5-6員雜芳基、4-6員雜環烷基或4-6環烷基；

C環選自5-6員雜芳基、5-6員雜環烷基或苯基；

所述的雜芳基、芳基、苯基或雜環烷基任選進一步被1個或多個選自R ^hy的基團取代；

每個R ^hy各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-6烷基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基或羥基C _1-6烷氧基的基團取代，

其餘基團如1所述。

11.本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中 Hy選自

；

每個R ^hy各自獨立選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、SF ₅、疊氮基、C _1-4烷基、C _1-4烷氧基、C _2-4烯基、C _2-4炔基，所述烷基、烷氧基、烯基、炔基任選進一步被1至3個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-4烷基、鹵代C _1-4烷基、羥基C _1-4烷基、C _1-4烷氧基、氘代C _1-4烷氧基、鹵代C _1-4烷氧基或羥基C _1-4烷氧基的基團取代，

其餘基團如1所述。

12. 本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中

Y選自-C(R ^y1R ^y2)-R ^y4、-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)OR ²、-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)NR ^y3、-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)SR ^y3；

每個R ^y1、R ^y2、R ^y3、R ^x2a、R ^x2b、R ^x2c各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、C _1-6烷基、氘代C _1-6烷基或鹵代C _1-6烷基；進一步，每個R ^y1、R ^y2、R ^y3、R ^x2a、R ^x2b、R ^x2c各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、C _1-3烷基、氘代C _1-3烷基或鹵代C _1-3烷基；進一步，每個R ^y1、R ^y2、R ^y3、R ^x2a、R ^x2b、R ^x2c各自獨立選自H、氘或羥基；

R ^y4選自4-10員雜環烷基、5-10員雜芳基、C _3-10環烷基或C _6-10芳基，所述的雜環烷基、雜芳基、環烷基或芳基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；進一步，R ^y4選自5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基，所述的雜環烷基任選進一步被1、2、3個選自R ^x的基團取代，

其餘基團如1所述。

13. 本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，其中所述化合物具有式(VII)結構：

(VII)

每個R ^L2a1、R ^L2b1、R ^L2a2、R ^L2b2各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基、C _2-6炔基、-C _1-6烷基-O-C _1-6烷基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基或羥基C _1-6烷氧基的基團取代；進一步，每個R ^L2a1、R ^L2b1、R ^L2a2、R ^L2b2各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-4烷基、C _1-4烷氧基、C _2-4烯基、C _2-4炔基、-C _1-4烷基-O-C _1-4烷基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-2烷基、鹵代C _1-2烷基、羥基C _1-2烷基、C _1-2烷氧基、氘代C _1-2烷氧基、鹵代C _1-2烷氧基或羥基C _1-2烷氧基的基團取代；

或者，同一個碳原子上的R ^L2a1和R ^L2b1與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基；進一步，同一個碳原子上的R ^L2a1和R ^L2b1與所連接的碳原子一起形成3員環烷基、4員環烷基、5員環烷基、6員環烷基、4員雜環烷基、5員雜環烷基或6員雜環烷基；

或者，同一個碳原子上的R ^L2a2和R ^L2b2與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基；進一步，同一個碳原子上的R ^L2a2和R ^L2b2與所連接的碳原子一起形成3員環烷基、4員環烷基、5員環烷基、6員環烷基、4員雜環烷基、5員雜環烷基或6員雜環烷基；

條件是，R ^L2a1、R ^L2b1、R ^L2a2和R ^L2b2其中至少3個基團不選自H；

L ₃選自**-N(R ^L3)C _1-6烷基-或-N(R ^L3)-；進一步，L ₃選自**-N(R ^L3)C _1-2烷基-或-N(H)-；

R ^3a選自5-15員碳環基或者5-15雜環基，所述的碳環基或雜環基任選進一步被1個或多個選自R ^y的基團取代；進一步，R ^3a選自5-6員單環環烷基、5-6員單環雜環烷基、8-10員雙環環烷基、8-10員雙環雜環烷基、11-15員三環環烷基、11-15員三環雜環烷基，所述的環烷基、雜環烷基任選進一步被1至3個選自R ^y的基團取代；進一步，R ^3a選自5員單環環烷基、6員單環環烷基、5員單環雜環烷基、6員單環雜環烷基、苯並5員環烷基、苯並5員雜環烷基、苯並6員環烷基、苯並6員雜環烷基、苯並5員雜芳基、苯並6員雜芳基、吡啶並5員環烷基、吡啶並5員雜環烷基、吡啶並6員環烷基、吡啶並6員雜環烷基、吡啶並5員雜芳基、吡啶並6員雜芳基、5員環烷基並苯基、5員雜環烷基並苯基、6員環烷基並苯基、6員雜環烷基並苯基、5員雜芳基並苯基、6員雜芳基並苯基、5員環烷基並吡啶基、5員雜環烷基並吡啶基、6員環烷基並吡啶基、6員雜環烷基並吡啶基、5員雜芳基並吡啶基、6員雜芳基並吡啶基，其中“並”字左側的環表示與氮原子連結的環，所述的苯基、吡啶基、環烷基、雜環烷基、雜芳基進一步被1、2或3個選自R ^y的基團取代；進一步，R ^3a選自5員單環環烷基、6員單環環烷基、5員單環雜環烷基、6員單環雜環烷基、5員環烷基並苯基、5員雜環烷基並苯基、6員環烷基並苯基或6員雜環烷基並苯基，其中“並”字左側的環表示與氮原子連結的環，所述的苯基、環烷基、雜環烷基或雜芳基進一步被1、2或3個選自R ^y的基團取代，

其餘基團如1所述。

14. 式I所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，所述化合物具有如下(VIII)結構：

(VIII)

其中，X ₃選自CH或N；

R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _3-6環烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基、烷基、環烷基或炔基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基或C _1-6烷氧基的基團取代；進一步地，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _3-6環烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基、或C _1-6烷氧基的基團取代；進一步地，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、C _1-6烷基或C _2-6炔基，所述的烷基任選進一步被1、2、3個選自鹵素、羥基的基團取代；進一步地，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、C _1-6烷基或C _2-4炔基，所述的烷基任選進一步被1、2、3個選自鹵素或羥基的基團取代；進一步地，R ₄、R ₅、R ^7a為H，R ^6a為C _1-4烷基或C _2-4炔基，所述的烷基任選進一步被1、2、3個選自鹵素、羥基的基團取代；進一步地，R ₄、R ₅、R ^7a為H，R ^6a為甲基、乙基、丙基或乙炔，任選進一步被1、2、3個選自鹵素、羥基的基團取代；

R ³選自-NH-O-R ^3a、3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-10員螺環、4-10員並環或5-9員橋環，所述的環烷基、雜環環烷基、螺環、橋環或並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ³選自-NH-O-R ^3a、3-6員單環環烷基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的7-10員雜環並環，所述環烷基和雜環並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ³選自-NH-O-R ^3a、環戊基、環己基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的8-10員雜環並環，所述環烷基和雜環並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ³選自-NH-O-R ^3a、環戊基、環己基、

、

、

或

，上述環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；

R ^3a選自C _1-6烷基、苄基、3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-12員螺環、4-10員並環或5-9員橋環，所述的環烷基、雜環烷基、螺環、橋環或並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ^3a選自C _1-6烷基、苄基、或3-6員單環環烷基，所述的烷基、苄基或環烷基任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ^3a選自C _1-4烷基、苄基、環丙基、環丁基、環戊基或環己基，所述的烷基、苄基或環烷基任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ^3a選自甲基、乙基、異丙基、丙基、苄基、環丙基、環丁基、環戊基或環己基，上述的烷基、苄基或環烷基任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；

R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基；進一步地，R ^y選自氘、鹵素、氨基或羥基；

條件是，當R ₃為取代或未取代的3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-12員螺環、4-10員並環、或5-9員橋環時，R ₄、R ₅、R ^6a或R ^7a不同時為H或氘，

其餘基團如1所述。

15. 式VIII所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _3-6環烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基或C _1-6烷氧基的基團取代，條件是，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a不同時為H或氘；進一步地，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、C _1-6烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基或烷基任選進一步被1、2、3個選自鹵素、羥基的基團取代，條件是，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a不同時為H或氘；進一步地，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、C _1-6烷基、C _2-6炔基，所述的烷基任選進一步被1、2、3個選自鹵素、羥基的基團取代，條件是，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a不同時為H或氘；

R ³選自3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-10員螺環、4-10員並環或5-9員橋環，所述的環烷基、雜環環烷基、螺環、橋環或並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ³選自3-6員單環環烷基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的7-10員雜環並環，所述環烷基和雜環並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ³選自-NH-O-R _3a、環戊基或環己基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的8-10員雜環並環，所述環烷基和雜環並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ³選自-NH-O-R _3a、環戊基、環己基、

、

或

，上述環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；

R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基；進一步地，R ^y選自氘、鹵素、氨基或羥基，

其餘基團如14所述。

16.前述15所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ₄、R ₅、R ^7a選自H；

R ^6a選自C _1-6烷基或C _2-6炔基，所述的烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基或C _1-2烷氧基的基團取代；進一步地， R ^6a為C _1-4烷基或C _2-4炔基，所述的烷基任選進一步被1、2、3個選自鹵素或羥基的基團取代；進一步地，R ^6a為甲基、乙基、丙基或乙炔，任選進一步被1、2、3個選自鹵素、羥基的基團取代；

R ³選自4-10員並環，所述的並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ³選自含有1-3個選自N、S、O雜原子的7-10員雜環並環，所述雜環並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ³選自或含有1-3個選自N、S、O雜原子的8-10員雜環並環，所述環烷基和雜環並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ³選自

、

或

，上述環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ³選自

，任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；

R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基或=O；進一步地，R ^y選自氘、鹵素或羥基，

其餘基團如15所述。

17. 前述14所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，具有如下(IX)結構：

(IX)

其中，X ₃為CH或N；

R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基的基團取代；進一步地，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、C _1-6烷基、C _2-6烯基或、C _2-6炔基，所述的烷基、烯基或炔基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基的基團取代；進一步地，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H；

R ^3a選自C _1-6烷基、苄基、3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-12員螺環、4-10員並環或5-9員橋環，所述的環烷基、雜環環烷基、螺環、橋環或並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ^3a選自C _1-4烷基、苄基、3-6員單環環烷基或4-6員單環雜環烷基，並任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ^3a選自環丙基、環戊基、環己基、苄基、甲基、乙基、丙基、異丙基、氮雜環丁基、四氫吡咯基、哌啶基或四氫呋喃基，並任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；

R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基；進一步地，R ^y選自氘、鹵素或羥基，

其餘基團如14所述。

18. 前述17所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，

其中，R ₄、R ₅、R ^6a或R ^7a選自H；

R ^3a選自C _1-6烷基、苄基或3-6員單環環烷基，所述的環烷基任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ^3a選自C _1-4烷基、苄基、環丙基、環丁基、環戊基或環己基，並任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步地，R ^3a選自甲基、乙基、丙基、異丙基、苄基、環丙基、環丁基、環戊基或環己基，並任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；

R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基或=O；進一步地，R ^y選自氘、鹵素、或羥基，

其餘基團如17所述。

19. 式I所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，具有如下(X)結構：

(X)

X ₄為CH或N；

R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基的基團取代；進一步地，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、C _1-4烷基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素或羥基的基團取代；進一步地，R ₄、R ₅、R ^7a各自獨立選自H，R ^6a選自C _1-4烷基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的烷基任選進一步被1、2、3個選自鹵素、羥基的基團取代；

R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-P(=O)(C _1-3烷基) ₂、-P(=S)(C _1-3烷基) ₂、

、

、-Si(C _1-3烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-3烷基) ₂、-C _1-3烷基-S(=O)(=N)、-C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、C _2-4烯基、C _2-4炔基，所述烷基、烷氧基、烯基、炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-3烷基、鹵代C _1-3烷基、羥基C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、氘代C _1-3烷氧基、鹵代C _1-3烷氧基或羥基C _1-3烷氧基的基團取代；進一步地，R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O或SF ₅；

p選自0、1、2；進一步地，p選自0或1；

R ^hy選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、-O-C _1-6烷基-C _6-10芳基或-O-C _1-6烷基-(5-10員雜芳基)的基團取代；進一步地，R ^hy選自氘、鹵素羥基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基或氰基的基團取代，

其餘基團如1所述。

20. 前述19所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，

其中，R ₄、R ₅、R ^7a選自H；

R ^6a選自C _1-6烷基，所述的烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基或C _1-2烷氧基的基團取代；進一步地，R ^6a選自C _1-4烷基，並任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素或羥基的基團取代；進一步地，R ^6a選自甲基、乙基、丙基或異丙基，並任選進一步被1、2、3個選自鹵素或羥基的基團取代；

p選自0；

R ^hy選自F或Cl；進一步地，R ^hy選自Cl。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，X ₁選自O，

其餘基團如19所述。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，X ₂選自CR ^x2aR ^x2b或O；進一步，X ₂選自CH ₂或O；進一步，X ₂選自O。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，Y選自OH、-CH ₂-P(=O)(OH)OH、-CH ₂-P(=O)(OH)ONH ₂、-CH ₂-P(=O)(OH)NH(OH)、-CH ₂-P(=O)(OH)SH、-CH ₂-R ^y4、-CH ₂-P(=S)(OH)OH、-CH ₂-P(=S)(OH)NH(OH)、-CH ₂-P(=S)(OH)SH；進一步，Y選自OH、-CH ₂-P(=O)(OH)OH、-CH ₂-P(=O)(OH)NH(OH)、-CH ₂-P(=O)(OH)ONH ₂、-CH ₂-P(=O)(OH)SH、-CH ₂-5員雜環烷基或-CH ₂-P(=S)(OH)SH；進一步，Y選自OH或-CH ₂-P(=O)(OH)OH；進一步，Y選自-CH ₂-P(=O)(OH)OH；進一步，Y選自OH。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，每個R ¹、R ²各自獨立地選自H、氘、氨基、C _1-4烷基、C _2-4烯基、C _2-4炔基、C _3-6環烷基、3-6員雜環烷基、苯基、C _8-10s雙環芳基、5-6員雜芳基、8-10員雙環雜芳基、-CH ₂-O-C(O)-OR ^2c、-C _0-4烷基-S(O) ₂R ^2c、-C _0-4烷基-C(O)R ^2c、-C _0-4烷基-C(O)OR ^2c或-C _0-4烷基-C(O)NR ^2c，所述的烷基、環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；進一步，每個R ¹、R ²各自獨立地選自H、氘、氨基。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，每個R ^y1、R ^y2、R ^y3、R ^x2a、R ^x2b、R ^x2c各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、C _1-4烷基、氘代C _1-4烷基或鹵代C _1-4烷基；進一步，每個R ^y1、R ^y2、R ^y3、R ^x2a、R ^x2b、R ^x2c各自獨立選自H、氘、羥基；進一步，每個R ^y1、R ^y2、R ^y3、R ^x2a、R ^x2b、R ^x2c各自獨立選自H、氘。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^y4選自4-6員雜環烷基、8-10員雙環雜環烷基、5-6員雜芳基、8-10員雙環雜芳基、C _3-6環烷基、C _8-10雙環環烷基、苯基或C _8-10雙環芳基，所述的雜環烷基、雜芳基、環烷基、芳基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；進一步，R ^y4選自4-6員雜環烷基、8-10員雙環雜環烷基，所述的雜環烷基任選進一步被1-3個選自R ^x的基團取代；進一步，R ^y4選自4員雜環烷基、5員雜環烷基或6員雜環烷基，所述的雜環烷基任選進一步被1-3個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、C _2-4烯基或C _2-4炔基的基團取代；進一步，R ^y4選自4員雜環烷基、5員雜環烷基或6員雜環烷基，所述的雜環烷基任選進一步被1-3個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、C _2-4烯基或C _2-4炔基的基團取代；進一步，R ^y4選自

。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，每個R ^2a、R ^2b各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、C _1-4烷基、氘代C _1-4烷基、鹵代C _1-4烷基、C _3-6環烷基、3-6員雜環烷基、苯基或5-6員雜芳基；進一步，每個R ^2a、R ^2b各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、C _1-4烷基、氘代C _1-4烷基或鹵代C _1-4烷基；進一步，每個R ^2a、R ^2b各自獨立選自H、氘或C _1-3烷基；進一步，每個R ^2a、R ^2b各自獨立選自H、氘。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，每個R ^2c各自獨立選自H、氘、C _1-4烷基、氘代C _1-4烷基、鹵代C _1-4烷基、C _3-6環烷基、3-6員雜環烷基、苯基或5-6員雜芳基，所述的烷基、環烷基、雜環烷基、苯基或雜芳基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；進一步，每個R ^2c各自獨立選自H、氘、C _1-4烷基。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，L ₁選自鍵、S、O、NH、N(C _1-2烷基)或C _1-2烷基，所述的烷基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；進一步，L ₁選自鍵、NH、N(CH ₃)或甲基；進一步，L ₁選自鍵、NH或甲基；進一步，L ₁選自鍵；進一步，L ₁選自NH；進一步，L ₁選自甲基。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，L ₂選自-(CR ^L2aR ^L2b)n-、*-Z-苯基、*-Z-C _8-10s雙環芳基、*-Z-(5-6員雜芳基)、*-Z-(8-10員雙環雜芳基)、*-苯基-Z-、*-C _8-10雙環芳基-Z-、*-(5-6員雜芳基)-Z-、*-(8-10員雙環雜芳基)-Z-、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的-(CR ^L2aR ^L2b)n-中碳原子任選被1個或多個選自N、O、S、S(O) 或S(O) ₂替代，所述的L ₂任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；進一步，L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n-O-、-(CR ^L2aR ^L2b)n-、-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基、*-Z-苯基、*-Z-C _8-10雙環芳基、*-Z-(5-6員雜芳基)、*-Z-(8-10員雙環雜芳基)、*-苯基-Z-、*-C _8-10雙環芳基-Z-、*-(5-6員雜芳基)-Z-、*-(8-10員雙環雜芳基)-Z-、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；進一步，*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n-O-、-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-Z-苯基、*-(CR ^L2aR ^L2b)n-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成3員環烷基、4員環烷基、5員環烷基、6員環烷基、4員雜環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基；進一步，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成3員環烷基、4員環烷基、4員雜環烷基。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，每個n各自獨立選自1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；進一步，每個n各自獨立選自1、2、3；進一步，每個n各自獨立選自1、2。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，每個n’各自獨立選自1、2、3、4、5、6、7、8；進一步，每個n’各自獨立選自1、2、3、4、5；進一步，每個n各自獨立選自1、2、3；進一步，每個n各自獨立選自1、2。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，每個m各自獨立選自1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；進一步，每個m各自獨立選自1、2、3；進一步，每個m各自獨立選自1、2。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，每個Z獨立選自鍵、-O-、C _1-2烷基，所述烷基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；進一步，每個Z獨立選自鍵、-O-、甲基。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^6b、R ^7a、R ^7b各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-2烷基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；進一步，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^6b、R ^7a、R ^7b各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的烷基任選進一步被1-3個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^6a和R ^6b一起形成C _2-4烯基、C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基，所述的烯基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；進一步，R ^6a和R ^6b一起形成乙烯基或乙炔基，所述的乙烯基、乙炔基任選進一步被1-3個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^7a和R ^7b一起形成C _2-4烯基、C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基，所述的烯基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；進一步，R ^7a和R ^7b一起形成乙烯基或乙炔基，所述的乙烯基或乙炔基任選進一步被1-3個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ⁴、R ⁵和X ₂一起形成5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基、7員雜環烷基；

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ⁴、R ^6a和X ₂一起形成5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基；

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^L2a、R ⁵和X ₂一起形成5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基；

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ⁴、R ^7a和X ₂一起形成5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基；

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ⁴和R ^6a一起形成3員環烷基、4員環烷基、5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、4員雜環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基；

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^6b和R ^7b一起形成3員環烷基、4員環烷基、5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、4員雜環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基；

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ⁴和R ^L2a一起形成3員環烷基、4員環烷基、5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、4員雜環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基；

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ⁴和X ₂一起形成3員環烷基、4員環烷基、5員環烷基、6員環烷基、7員環烷基、4員雜環烷基、5員雜環烷基、6員雜環烷基或7員雜環烷基；

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^x2a和R ⁴一起形成一個化學鍵，與環上的鍵一起形成了雙鍵。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^x2a和R ⁵一起形成一個化學鍵，與環上的鍵一起形成了雙鍵。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^6a和R ⁴一起形成一個化學鍵，與環上的鍵一起形成了雙鍵。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^6b和R ^7b一起形成一個化學鍵，與環上的鍵一起形成了雙鍵。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^7a和R ⁵一起形成一個化學鍵，與環上的鍵一起形成了雙鍵。

本發明R ^x2a和R ⁴、或R ^x2a和R ⁵、或R ^6a和R ⁴、或R ^6b和R ^7b、或R ^7a和R ⁵一起形成一個化學鍵，條件是最多一組形成一個化學鍵；

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ³選自L ₃-R ^3a、

；進一步，R ³選自L ₃-R ^3a。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，L ₃選自**-N(R ^L3)C _1-4烷基-、-N(R ^L3)-、**-N(R ^L3)S(O)-、**-N(R ^L3)S(O) ₂-、**-N(R ^L3)S(O)-C _1-4烷基-、**-N(R ^L3)S(O) ₂-C _1-4烷基-或**-N(R ^L3)-N=CH-，**表示L ₃與Hy連接位點；進一步，L ₃選自**-N(R ^L3)CH(CH ₃)-、-N(R ^L3)-、**-N(R ^L3)S(O) ₂-或**-N(R ^L3)-N=CH-，**表示L ₃與Hy連接位點；進一步，L ₃選自**-NHCH(CH ₃)-、-NH-、**-NHS(O) ₂-或**-NH-N=CH-，**表示L ₃與Hy連接位點；進一步，L ₃選自**-NHCH(CH ₃)-、-NH-；進一步，L ₃選自**-NHS(O) ₂-、**-NH-N=CH-。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^3a選自5-6員環烷基、5-6員雜環烷基、苯基、5-6員雜芳基、8-10員雙環雜環基、8-10員雙環環烷基、8-10員雙環雜芳基或8-10員雙環芳基，所述的碳環基或雜環基任選進一步被1個或多個選自R ^y的基團取代；進一步，R ^3a選自5-6員環烷基、5-6員雜環烷基、苯基或5-6員雜芳基，所述的碳環基或雜環基任選進一步被1個或多個選自R ^y的基團取代。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^L3各自獨立地選自H、氘、C _1-4烷基、鹵代C _1-4烷基或氘代C _1-4烷基；進一步，R ^L3各自獨立地選自H、氘、C _1-2烷基、鹵代C _1-2烷基或氘代C _1-2烷基；進一步，R ^L3各自獨立地選自H、氘、甲基。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^L3和R ^hy與所連接的原子一起形成5員雜環烷基、6員雜環烷基、7員雜環烷基、8員雜環烷基；進一步，R ^L3和R ^hy與所連接的原子一起形成5員雜環烷基、6員雜環烷基、7員雜環烷基；進一步，R ^L3和R ^hy與所連接的原子一起形成5員雜環烷基、6員雜環烷基；進一步，R ^L3和R ^hy與所連接的原子一起形成5員雜環烷基。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，每個R ^x各自獨立選自氘、F、Cl、氨基、羥基、氰基、=O、C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、-O-C _1-6烷基-C _6-10芳基或-O-C _1-6烷基-(5-10員雜芳基)的基團取代；進一步，每個R ^x各自獨立選自氘、F、Cl、氨基、羥基、氰基、=O、C _1-3烷基或C _1-3烷氧基，所述烷基或烷氧基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-2烷基、鹵代C _1-2烷基、羥基C _1-2烷基、C _1-2烷氧基、氘代C _1-2烷氧基、鹵代C _1-2烷氧基、羥基C _1-2烷氧基、-O-C _1-2烷基-C _6-10芳基或、-O-C _1-2烷基-(5-10員雜芳基)的基團取代；進一步，每個R ^x各自獨立選自氘、F、Cl、氨基、羥基、氰基、=O、C _1-3烷基或C _1-3烷氧基，所述烷基或烷氧基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基或C _1-2烷氧基、氘代C _1-2烷氧基、鹵代C _1-2烷氧基、羥基C _1-2烷氧基、-O-C _1-2烷基-苯基或-O-C _1-2烷基-(5-6員雜芳基)的基團取代。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，每個R ^hy各自獨立選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、C _1-4烷基、C _1-4烷氧基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-2烷基、鹵代C _1-2烷基、羥基C _1-2烷基、C _1-2烷氧基、氘代C _1-2烷氧基、鹵代C _1-2烷氧基、羥基C _1-2烷氧基、-O-C _1-2烷基-C _6-10芳基或-O-C _1-2烷基-(5-10員雜芳基)的基團取代；進一步，每個R ^hy各自獨立選自氘、F、Cl、甲基或乙基。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-P(=O)(C _1-2烷基) ₂、-P(=S)(C _1-2烷基) ₂、

、

、-Si(C _1-2烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-2烷基) ₂、-C _1-2烷基-S(=O)(=N)、-C _1-4烷基、C _1-4烷氧基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述烷基、烷氧基、氨基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-2烷基、鹵代C _1-2烷基、羥基C _1-2烷基、C _1-2烷氧基、氘代C _1-2烷氧基、鹵代C _1-2烷氧基或羥基C _1-2烷氧基的基團取代；進一步，R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-P(=O)(C _1-2烷基) ₂、-P(=S)(C _1-2烷基) ₂、

、

、-Si(C _1-2烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-2烷基) ₂或-C _1-2烷基-S(=O)(=N)。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，當R ^3a被一個取代基取代時，R ^y選自-P(=O)(C _1-2烷基) ₂、-P(=S)(C _1-2烷基) ₂、

、

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，當R ^3a被2個取代基取代，其中一個R ^y選自鹵素時，另一個R ^y選自疊氮基、-P(=O)(C _1-2烷基) ₂、-P(=S)(C _1-2烷基) ₂、

、

本文所述的“被1個或多個”取代基取代，包括結構中所有氫原子被取代，進一步可以為被1-6個取代基取代，進一步可以為被1-5個取代基取代，進一步可以為被1-3個取代基取代，進一步被1-2個取代基取代，進一步被1個取代基取代。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中，p選自0、1或2；進一步，p選自0、1；進一步，p選自0；進一步，p選自1。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，具有如下(VIII)結構：

(VIII)

X ₂選自CH或N；

R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _3-6環烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基或C _1-6烷氧基的基團取代，條件是，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a不同時為H或氘；

R ³選自3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-10員螺環、4-10員並環或5-9員橋環，所述的環烷基、雜環環烷基、螺環、橋環或並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；

R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅或疊氮基。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，具有如下(IX)結構：

(IX)

R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；進一步，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-4烷基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；進一步，R ₄、R ₅選自H或氘，R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-4烷基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；

R ^3a選自C _1-6烷基、苄基、3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-10員螺環、4-10員並環或5-9員橋環，所述的環烷基、雜環環烷基、螺環、橋環或並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；進一步，R ^3a選自C _1-4烷基、苄基、3員單環環烷基、4員單環環烷基、5員單環環烷基、6員單環環烷基、4員單環雜環烷基、5員單環雜環烷基、6員單環雜環烷基、5員螺環、6員螺環、7員螺環、8員螺環、9員螺環、10員螺環、11員螺環、4員並環、5員並環、6員並環、7員並環、8員並環、9員並環、10員並環、5員橋環、6員橋環、7員橋環、8員橋環或9員橋環，所述的環烷基、雜環環烷基、螺環、橋環或並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代；

R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅或疊氮基。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，具有如下(X)結構：

(X)

R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；進一步，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-4烷基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的氨基或烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；進一步，R ₄、R ₅選自H或氘，R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-4烷基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述的氨基、烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；

、

、-Si(C _1-6烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-6烷基) ₂、-C _1-6烷基-S(=O)(=N)、-C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基或羥基C _1-6烷氧基的基團取代；進一步，R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-P(=O)(C _1-3烷基) ₂、-P(=S)(C _1-3烷基) ₂、

、

、-Si(C _1-3烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-3烷基) ₂、-C _1-3烷基-S(=O)(=N)、-C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、C _2-4烯基、C _2-4炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-3烷基、鹵代C _1-3烷基、羥基C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、氘代C _1-3烷氧基、鹵代C _1-3烷氧基或羥基C _1-3烷氧基的基團取代；進一步，R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、C _2-4烯基或C _2-4炔基；

p選自0、1、2；進一步選自0或1；進一步選自0；

R ^hy選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基、C _2-6炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、-O-C _1-6烷基-C _6-10芳基或-O-C _1-6烷基-(5-10員雜芳基)的基團取代。

本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，化合物選自以下結構之一：

。

本發明還涉及一種藥物組合物，含有本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，以及藥學上可接受的輔料和/或載體。

進一步地，前述藥物組合物，還含有抗PD-1抗體。

本發明還涉及本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，或者所述的藥物組合物在製備治療CD73介導的疾病的藥物中的用途，所述CD73介導的疾病為腫瘤或自身免疫疾病。進一步地，所述用途包括聯合應用抗PD-1抗體。

本發明還涉及一種治療CD73介導的疾病的治療方法，其給藥本發明所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，或者所述的藥物組合物，所述CD73介導的疾病為腫瘤或自身免疫疾病。進一步地，所述治療方法還包括給予另一種藥物，所述藥物為抗PD-1抗體。

合成路線

WO2017120508A1、WO2019213174A1等專利文獻中介紹了CD73拮抗劑的製備方法，本領域技術人員可以結合該文獻以及已知的有機合成技術製備本發明的化合物，其起始原料為市售化學品和(或)化學文獻中所述的化合物。“市售化學品”是從正規商業來源獲得的，供應商包括：泰坦科技、安耐吉化學、上海德默、成都科龍化工、韶遠化學科技、南京藥石、藥明康得和百靈威科技等公司。

本領域的參考書和專著，詳細介紹了可用於製備本文所述化合物的反應物的合成，或提供了描述該製備方法的文章以供參考。這些參考書和專著包括：“Synthetic Organic Chemistry”, John Wiley & Sons, Inc., New York; S. R. Sandler et al., “Organic Functional Group Preparations,” 2nd Ed., Academic Press, New York, 1983; H. O. House, “Modern Synthetic Reactions”, 2nd Ed., W. A. Benjamin, Inc. Menlo Park, Calif. 1972; T. L. Gilchrist, “Heterocyclic Chemistry”, 2nd Ed., John Wiley & Sons, New York, 1992; J. March, “Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure”, 4th Ed., Wiley‑Interscience, New York, 1992 ;Fuhrhop, J. and Penzlin G. “Organic Synthesis: Concepts, Methods, Starting Materials”, Second, Revised and Enlarged Edition (1994) John Wiley & Sons ISBN: 3‑527-29074-5; Hoffman, R.V. “Organic Chemistry, An Intermediate Text” (1996) Oxford University Press, ISBN 0-19-509618-5; Larock, R. C. “Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations” 2nd Edition (1999) Wiley-VCH, ISBN: 0-471-19031-4; March, J. “Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure” 4th Edition (1992) John Wiley & Sons, ISBN: 0-471-60180-2; Otera, J. (editor) “Modern Carbonyl Chemistry” (2000) Wiley-VCH, ISBN: 3-527-29871-1; Patai, S. “Patai’s 1992 Guide to the Chemistry of Functional Groups” (1992) Interscience ISBN: 0-471-93022-9; Solomons, T. W. G. “Organic Chemistry” 7th Edition (2000) John Wiley & Sons, ISBN: 0-471-19095-0; Stowell, J.C., “Intermediate Organic Chemistry” 2nd Edition (1993) Wiley-Interscience, ISBN: 0-471-57456-2; “Industrial Organic Chemicals: Starting Materials and Intermediates: An Ullmann’s Encyclopedia” (1999) John Wiley & Sons, ISBN: 3-527-29645-X, in 8 volumes; “Organic Reactions” (1942-2000) John Wiley & Sons, in over 55 volumes; and “Chemistry of Functional Groups” John Wiley & Sons, in 73 volumes。

通過美國化學會化學文摘社製備的已知化學物質的索引，可以選擇性地識別特定和類似的反應物，這些索引可在大多數公共圖書館和大學圖書館以及線上獲得。已知但在目錄中不可商購的化學品可選地由定制化學合成工廠製備，其中許多標準化學供應工廠(例如，上面列出的那些)提供定制合成服務。製備和選擇本文所述化合物的藥用鹽的參考文獻是P. H. Stahl & C. G. Wermuth “Handbook of Pharmaceutical Salts”, Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurich, 2002。

術語

在本發明未特殊說明的情況下，本發明的術語具有以下含義：

“鹵素”在本文中是指F、Cl、Br、I、或者它們的同位素。

“鹵代”或“鹵素取代”是指被一個以上選自F、Cl、Br、I、或者它們的同位素取代，鹵素取代基數量的上限等於被取代基團可被取代的氫數之和，在未作特殊限定下，鹵素取代基數量為1至該上限之間的任意整數，當鹵素取代基數量大於1時，可以是相同或不同的鹵素進行取代。

“氘代”或“氘代物”是指烷基、環烷基、亞烷基、芳基、雜芳基、巰基、雜環烷基、烯基、炔基等基團上的氫原子被至少一個同位素氘取代的情形，氘代的數量上限等於被取代基團可被取代的氫數之和，在未作特殊限定下，氘代數量為1至該上限之間的任意整數，較佳1-20個氘原子取代，更佳為1-10個氘原子取代，更佳為1-6個氘原子取代，進一步較佳為1-3個氘原子取代。

“烷基”是指一價的直鏈或支鏈飽和脂肪族烴基，非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、新丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、新戊基、正己基及其各種支鏈異構體；所述的烷基可以進一步被任意取代基取代。

“環烷基”是指一價飽和的、不飽和的非芳香環的碳環烴基，可以是單環、雙環、螺環、橋環、並環，非限制性實施例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環戊烯基、

、

、

、

、

、

、

、

和

、

、

、

等。所述的環烷基可以任選進一步被任意取代基所取代。

“雜環烷基”是指取代或未取代、飽和或不飽和的非芳香環，未特殊限定時，包含1至5個選自N、O、P、Si或S的雜原子，進一步含有1至4個或者1至3個選自N、O、P、Si或S的雜原子，可以是單環或多環，多環可以是橋環、並環或螺環，未特殊限定時，為3至12員雜環，更佳為4-12員雜環，更佳為4-10員雜環。雜環基的環中選擇性取代的N、S、P可被氧化成各種氧化態。非限制性實施例包括氮雜環丙基、氧雜環丙基、硫雜環丙基、氮雜環丁基、氮雜環戊基、哌啶、氧雜環丁基、氧雜環戊基、氧雜環己基、硫雜環丁基、吡咯烷基、吡唑烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、氮雜金剛烷基和氧雜螺[3.3]庚烷基、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

、

等。所述的雜環烷基可以任選進一步被任意取代基所取代。

“雜環”或“雜環基”是指取代或未取代、飽和或不飽和的芳香環或者非芳香環，未特殊限定時，包含1至5個選自N、O或S的雜原子，進一步包含1至4個選自N、O或S的雜原子，更進一步包含1至3個選自N、O或S的雜原子，包括單環雜環或多環雜環，多環雜環包括雙環橋雜環、雙環並雜環和雙環螺雜環等，未特殊限定時，為3至12員雜環，更佳為4-12員雜環，更佳為4-10員雜環，進一步較佳為4-7員雜環。其定義包括雜環烷基和雜芳基。雜環基環中的N、S可被氧化成各種氧化態。雜環基可以連接在雜原子或者碳原子上，非限制性實施例包括環氧乙基、氮雜環丙基、氧雜環丁基、氮雜環丁基、1,3-二氧戊環基、1,4-二氧戊環基、1,3-二氧六環基、氮雜環庚基、吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡喃基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、咪唑基、哌啶基、哌叮基、嗎啉基、硫代嗎啉基、1,3-二噻基、二氫呋喃基、二氫吡喃基、二噻戊環基、四氫呋喃基、四氫吡咯基、四氫咪唑基、噁唑基、二氫噁唑基、四氫噁唑基、四氫噻唑基、四氫吡喃基、苯並咪唑基、苯並吡啶基、吡咯並吡啶基、苯並二氫呋喃基、氮雜二環[3.2.1]辛烷基、氮雜二環[5.2.0]壬烷基、氧雜三環[5.3.1.1]十二烷基、氮雜金剛烷基和氧雜螺[3.3]庚烷基、

、

等。

“碳環”或“碳環基”是指取代或未取代、飽和或不飽和的、芳香或非芳香的碳環基團，包括單環或多環碳環，多環碳環包括雙環橋環、雙環並環和雙環螺環等，未特殊說明時，有3至12個碳原子，較佳有3-10個碳原子，進一步較佳有3-6個碳原子。其定義包括環烷基和芳基。非限制性實施例中，單環碳環包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基或苯基、

等，雙環橋環包括

、

等，雙環並環包括

、

和

等，雙環螺環包括

、

、

和

等。

“芳基”是指取代的或未取代的5至15員具有芳香性的碳環，包括單環芳香基和稠環芳香基。較佳5至10員芳香環，進一步較佳5至8員芳香環，其非限制性實例包括苯基、萘基、蒽基和菲基等。所述芳基環可以稠合於雜芳基、雜環烷基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環，非限制性實施例包含：

所述的芳基可以任選進一步被任意取代基所取代。

“雜芳基”是指取代或未取代的5至15員的具有芳香性的環，且含有1至5個選自N、O、P、Si或S雜原子及其雜原子各種氧化形式，較佳5至10員雜芳香環，進一步較佳5至8員。雜芳基的非限制性實施例包括但不限於呋喃基、惡唑基、呋喃基、噻吩基、N-烷基吡咯基、吡嗪基、噠嗪基、哌啶基、嗎啉、硫代嗎啉、1,3-二噻烷、苯並咪唑、哌叮基、

。所述雜芳基環可以稠合於芳基、雜環烷基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，非限制性實施例包含

和

。所述的雜芳基可以任選進一步被任意取代基所取代。

“炔基”是指直鏈或支鏈的、含有一個以上碳碳三鍵的一價不飽和烴基，除非特殊說明，炔基含有2-6個碳原子，較佳含有2-4個碳原子，非限制性地的實施例為乙炔基、丙炔基、炔丙基等。

“烯基”是指直鏈或支鏈的、含有一個以上碳碳雙鍵的一價不飽和烴基，除非特殊說明，炔基含有2-6個碳原子，較佳含有2-4個碳原子，非限制性地的實施例為乙烯基、丙烯基、烯丙基、2-丁烯基、1-丁烯基等。

“烷氧基”或“烷基氧基”是指-O-烷基。未特殊限定時，為-O-C _1-8烷基，較佳為-O-C _1-6烷基，更較佳為-O-C _1-4烷基，進一步較佳為-O-C _1-2烷基。非限制性實施例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、第三丁氧基、正戊氧基、正己氧基、環丙氧基和環丁氧基等。

“鹵代烷氧基”是指-O-鹵代烷基，未特殊限定時，為-O-鹵代C _1-8烷基，較佳為-O-鹵代C _1-6烷基，更較佳為-O-鹵代C _1-4烷基，進一步較佳為-O-鹵代C _1-2烷基。非限制性實施例包括一氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、二氟乙基氧基等。

“烷基氨基”或“烷氨基”是指被單個或兩個烷基取代的氨基，也寫作-N-(烷基) ₂或-NH-烷基，後者也寫作單烷基氨基。非限制實施例包括二甲氨基、單甲基氨基、二乙氨基、單乙氨基等。

本發明中，“C ₀烷基”表示鍵。

“取代”或“取代基”在未特殊說明時，是指在化學理論允許的位置發生任意取代，取代基個數符合化學鍵規則。示例性的取代基包括但不限於：氰基、鹵素、硝基、氨基、羥基、C _1-6烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基、C _3-8雜烷基、C _5-12芳基、5-12員雜芳基、C _1-6烷氧基、C _5-12芳氧基、硫醇基、C _1-6烷硫基、C _1-6烷硫代羰基、C _1-6烷氨基甲醯基、N-氨基甲醯基、甲矽烷基、亞磺醯基、磺醯基、亞碸、鹵代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷氧基、膦酸、-CO ₂(C _1-6烷基)、-OC(=O)(C _1-6烷基)、-OCO ₂(C _1-6烷基)、-C(=O)NH ₂、-C(=O)N(C _1-6烷基) ₂、-OC(=O)NH(C _1-6烷基)、-NHC(=O)(C _1-6烷基)、-N(C _1-6烷基)C(=O)(C _1-6烷基)、-NHCO ₂(C _1-6烷基)、-NHC(=O)N(C _1-6烷基) ₂、-HC(=O)NH(C _1-6烷基)、-NHC(=O)NH ₂、-NHSO ₂(C _1-6烷基)、-SO ₂N(C _1-6烷基) ₂、-SO ₂NH(C _1-6烷基)、-SO ₂NH ₂、-SO ₂C _1-6烷基等。

“任選”或“任選地”是指隨後所描述的事件或環境可以但不必須發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生的場合。如：“任選被F取代的烷基”指烷基可以但不必須被F取代，說明包括烷基被F取代的情形和烷基不被F取代的情形。

“藥學上可接受的鹽”是指本發明化合物保持游離酸或者游離鹼的生物有效性和特性，且所述的游離酸通過與無毒的無機鹼或者有機鹼，所述的游離鹼通過與無毒的無機酸或者有機酸反應獲得的鹽。

“藥物組合物”表示一種或多種本文所述化合物或其立體異構體、溶劑化物、藥學上可接受的鹽或共晶，與其他組成成分的混合物，其中其他組分包含生理學/藥學上可接受的載體和/賦形劑。

“載體”指的是：不會對生物體產生明顯刺激且不會消除所給予化合物的生物活性和特性，並能改變藥物進入人體的方式和在體內的分佈、控制藥物的釋放速度並將藥物輸送到靶向器官的體系，非限制性的實例包括微囊與微球、奈米粒、脂質體等。

“賦形劑”指的是：其本身並非治療劑，用作稀釋劑、輔料、粘合劑和/或媒介物，用於添加至藥物組合物中以改善其處置或儲存性質或允許或促進化合物或藥物組合物形成用於給藥的單位劑型。如本領域技術人員所已知的，藥用賦形劑可提供各種功能且可描述為潤濕劑、緩衝劑、助懸劑、潤滑劑、乳化劑、崩解劑、吸收劑、防腐劑、表面活性劑、著色劑、矯味劑及甜味劑。藥用賦形劑的實例包括但不限於：(1) 糖，例如乳糖、葡萄糖及蔗糖；(2)澱粉，例如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；(3) 纖維素及其衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素、乙酸纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、微晶纖維素及交聯羧甲基纖維素(例如交聯羧甲基纖維素鈉)；(4) 黃蓍膠粉；(5) 麥芽；(6) 明膠；(7) 滑石；(8) 賦形劑，例如可哥脂及栓劑蠟；(9) 油，例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；(10) 二醇，例如丙二醇；(11) 多員醇，例如甘油、山梨醇、甘露醇及聚乙二醇；(12) 酯，例如油酸乙酯及月桂酸乙酯；(13) 瓊脂；(14) 緩衝劑，例如氫氧化鎂及氫氧化鋁；(15) 海藻酸；(16) 無熱原水；(17) 等滲鹽水；(18) 林格溶液 (Ringer’s solution)；(19)乙醇；(20) pH 緩衝溶液；(21) 聚酯、聚碳酸酯和/或聚酐；及(22) 其他用於藥物製劑中的無毒相容物質。

“立體異構體”是指由分子中原子在空間上排列方式不同所產生的異構體，包括順反異構體、對映異構體和構象異構體。

“溶劑化物”指本發明化合物或其鹽與分子間非共價力結合的化學計量或非化學計量的溶劑形成的物質。當溶劑為水時，則為水合物。

“共晶”是指活性藥物成分(API)和共晶形成物(CCF)在氫鍵或其他非共價鍵的作用下結合而成的晶體，其中API和CCF的純態在室溫下均為固體，並且各組分間存在固定的化學計量比。共晶是一種多組分晶體，既包含兩種中性固體之間形成的二員共晶，也包含中性固體與鹽或溶劑化物形成的多員共晶。

以下將通過實施例對本發明的內容進行詳細描述。實施例中未註明具體條件的，按照常規條件的實驗方法進行。所舉實施例是為了更好地對本發明的內容進行說明，但並不能理解為本發明的內容僅限於所舉實例。本領域常規技術人員根據上述發明內容對實施方案進行非本質的改進和調整，仍屬於本發明的保護範圍。

測試方法

化合物的結構是通過核磁共振 (NMR) 或 (和) 質譜 (MS) 來確定的。NMR 位移 (δ) 以10-6 (ppm) 的單位給出。NMR的測定是用 (Bruker Avance III 400和Bruker Avance 300) 核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸 (DMSO-d6)，氘代氯仿 (CDCl ₃)，氘代甲醇 (CD ₃OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)；

MS的測定用(Agilent 6120B(ESI) 和Agilent 6120B(APCI))；

HPLC的測定使用Agilent 1260DAD高壓液相色譜儀 (Zorbax SB-C18 100 × 4.6 mm, 3.5 μM)；

薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254 或青島GF254 矽膠板，薄層色譜法 (TLC) 使用的矽膠板採用的規格是0.15 mm-0.20 mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4 mm - 0.5 mm；

柱層析一般使用煙臺黃海矽膠200-300目矽膠為載體。

實施例 1 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-3,4-二羥四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物1)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-((6-chloro-4-(cyclopentylamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物1)

第一步：6-氯-N-環戊基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-胺(1a)

6-chloro-N-cyclopentyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine (1a)

將4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶(5g，26.5mmol)溶於甲醇(50ml)中，加入三乙胺(8.02g，79.4mmol)，室溫攪拌反應，反應結束後濃縮反應液，所得殘留物中加入水(25ml)和二氯甲烷(25ml)，分離有機相，水相用二氯甲烷(25ml×2)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：乙酸乙酯：石油醚=0%~50%)，得化合物1a(5.02g，80.1%)。

LCMS m/z =238.6 [M+1] ⁺。

第二步：(3aR,6R,6aR)-6-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-醇(1B)

(3aR,6R,6aR)-6-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-ol (1B)

將化合物1A(15g，150.1mmol)溶於丙酮(150 ml)中，加入硫酸(0.9 ml)，室溫攪拌過夜，反應結束後，加入碳酸氫鈉固體調節體系pH至中性，過濾，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：乙酸乙酯：石油醚=0%~30%)，得化合物1B(14.96 g，78.7%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 5.42 (s, 1H), 4.84 (d, 1H), 4.59 (d, 1H), 4.41 (t, 1H), 3.74 (dd, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.33 (s, 3H)。

第三步：(3aR,6R,6aR)-6-((第三丁基二甲基矽基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-醇(1C)

(3aR,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-ol (1C)

將化合物1B(14.96g，78.2mmol)和咪唑(6.914g，101.7mmol)溶於無水二氯甲烷(150ml)中，室溫攪拌30min，降溫至0℃，加入第三丁基二甲基氯矽烷(13.08g，86.0mmol)，升至室溫反應4h，反應結束後，加入水(150ml)，分離有機相，水相用二氯甲烷(150ml×2)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：乙酸乙酯：石油醚=0%~5%)，得化合物1C(17.57g，73.4%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 5.28 (s, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 4.35 (s, 1H), 3.75 (s, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 0.93 (s, 9H), 0.14 (d, 6H)。

第四步：((3aS,4R,6R,6aR)-6-((第三丁基二甲基矽氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(1D)

((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol (1D)

將三甲基碘化亞碸(1.10g，5.02mmol)和第三丁醇鉀(562mg，5.02mmol)加入反應瓶中，0℃下攪拌，加入無水二甲亞碸(10ml)，0℃攪拌30min，升至室溫攪拌30min。降溫至0℃，將化合物1C(1.017g，3.35mmol)溶於無水四氫呋喃(10ml)中加入反應瓶中，保持0℃攪拌30min，升至室溫攪拌過夜，反應結束後加入飽和氯化銨(5ml)，加入水(20ml)和乙酸乙酯(20ml)，分離有機相，水相用乙酸乙酯(20ml×2)萃取，合併有機相，用飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)、飽和食鹽水(20ml)和水(20ml)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：乙酸乙酯：石油醚=0%~15%)，得化合物1D(355mg，33.4%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 4.80 (dt, 2H), 4.21 (dd, 1H), 4.15 (t, 1H), 3.89 – 3.80 (m, 2H), 3.75 – 3.70 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.06 (s, 6H)。

第五步：第三丁基(((3aR,4R,6S,6aR)-6-(碘甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲氧基)二甲基矽烷 (1E)

tert-butyl(((3aR,4R,6S,6aR)-6-(iodomethyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methoxy)dimethylsilane (1E)

將化合物1D(330mg，1.04mmol)，碘(580mg，2.28mmol)，咪唑(212mg，3.11mmol)和三苯基膦(565mg，2.08mmol)溶於甲苯(10ml)中，110℃回流反應3h，反應結束後加入水(10ml)和乙酸乙酯(10ml)，分離有機相，水相用乙酸乙酯(10ml×2)萃取，合併有機相，用飽和食鹽水(20ml)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：乙酸乙酯：石油醚=0%~5%)，得化合物1E(310mg，69.6%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 4.86 (d, 1H), 4.80 – 4.72 (m, 1H), 4.42 (ddd, 1H), 4.16 – 4.08 (m, 1H), 3.78 – 3.65 (m, 2H), 3.35 – 3.18 (m, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.07 (s, 6H)。

第六步：1-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((第三丁基二甲基矽氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲基)-6-氯-N-環戊基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-胺 (1F)

1-(((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methyl)-6-chloro-N-cyclopentyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine(1F)

將化合物1E(250mg，0.58mmol)和1a(141mg，0.58mmol)溶於無水N,N-二甲基甲醯胺(5ml)中，加入碳酸銫(570mg，1.74mmol)和乾燥分子篩(2g)，110℃回流反應過夜，反應結束後濃縮，向殘留物中加入水(5ml)和乙酸乙酯(5ml)，分離有機相，水相用乙酸乙酯(5ml×2)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例乙酸乙酯：石油醚=0%~30%)，得化合物1F(150mg，48.1%)。

LCMS m/z =538.3 [M+1] ⁺。

第七步：((3aR,4R,6R,6aS)-6-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇 (1G)

((3aR,4R,6R,6aS)-6-((6-chloro-4-(cyclopentylamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol (1G)

將化合物1F(250mg，0.47mmol)溶於無水四氫呋喃(5ml)中，加入1M的四丁基氟化銨的四氫呋喃溶液(1.40ml，1.40mmol)，室溫攪拌30min，反應結束後加入水(5ml)和乙酸乙酯(5ml)，分離有機相，水相用乙酸乙酯(5ml×2)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例乙酸乙酯：石油醚=0%~100%)，得化合物1G(160mg，81.2%)。

LCMS m/z =424.1 [M+1] ⁺。

第八步：((2R,3S,4R,5R)-5-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-3,4-二羥四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物1)

將化合物1G(160mg，0.38mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中，0℃攪拌，將亞甲基雙氯化磷(285mg，1.14mmol)溶於磷酸三甲酯(1ml)中加入反應瓶中，0℃攪拌2h，底物轉化完全後，加入水(0.6ml)，室溫攪拌過夜，反應結束後濃縮，所得殘留物用液相製備柱分離提純，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%； c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間10.0min；得化合物1(80mg，36.2%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.62 (d, 1H), 8.45 (s, 1H), 4.41 (dd, 3H), 3.98 (dd, 5H), 2.21 (t, 2H), 1.99 (s, 2H), 1.72 (s, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.24 (s, 2H)。

MS M/Z (ESI) ：m/z =542.2 [M+1] ⁺。

實施例 2:

((((((2R,3S,4R,5R)-5-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基))-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物2)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物2)

第一步: (3aR,4S,6R,6aR)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-甲醛(2B)

(3aR,4S,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxole-4-carbaldehyde(2B)

化合物1D(2.0g，6.28 mmol)溶於二氯甲烷(20 ml)中，分批次加入戴斯馬丁氧化劑(7.99g，18.84mmol),加完室溫反應2小時，反應完畢反應液加入水(50ml)淬滅反應，過濾，濾餅用二氯甲烷淋洗，分液，水相用二氯甲烷(100ml×2)萃取兩次，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得化合物2B(1.9g，95%)，未純化直接下一步。

第二步：((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)(2,4-二氯吡咯烷[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲醇(2C)

((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)(2,4-dichloropyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methanol(2C)

7-溴-2,4-二氯吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪(1.92g，7.2mmol)溶於乾燥四氫呋喃(20ml)中，氮氣置換三次，用乙醇乾冰體系降溫至-78℃，控溫滴加正丁基鋰(2.64ml，6.6mmol，2.5mol/L),滴完-78℃反應10分鐘，控溫-78℃滴加化合物2B(1.9g，6.0mmol)，滴完保持-78℃反應1小時，反應完畢用冰醋酸(1.5ml)淬滅反應，加入水(30ml)後乙酸乙酯(100ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，乾燥濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 5:1)得到標題化合物2C(0.52g，17%)。

LC-MS (ESI): m/z =526.1 [M+Na] ⁺；486.1 [M+1-H ₂O] ⁺。

第三步：((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)(2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲醇(2D)

((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)(2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methanol(2D)

化合物2C(0.52g，1.03mmol)和環戊胺(0.18，2.06mmol)，溶於二氯甲烷(10ml)中，加入N,N-二異丙基乙胺(0.51g，4.12mmol)，加完室溫反應3小時，反應完畢反應液直接濃縮，殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 5:1)得到標題化合物2D(0.48g，84%)。

LC-MS (ESI): m/z =553.2 [M+H] ⁺。

第四步：((2R,3S,4R,5R)-5-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲基2,2,2-三氟乙酸酯(2E)

((2R,3S,4R,5R)-5-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl 2,2,2-trifluoroacetate(2E)

化合物2D(0.48g，0.87mmol)溶於二氯甲烷(5ml)中，加入三氟乙酸(2ml)，降溫0~5℃滴加三乙基矽烷(1.4ml，8.7mmol)，加完自然回溫反應16小時，反應完畢將直接濃縮得目標化合物2E粗產物(0.36g，86%)，直接下一步反應。

LC-MS (ESI): m/z =479.1[M+H] ⁺。

第五步：(2R,3R,4S,5R)-2-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(2F)

(2R,3R,4S,5R)-2-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(2F)

化合物2E(0.36g，0.75mmol)溶於甲醇(5ml)和水(1ml)中，加入碳酸鉀(0.1g，0.75mmol)加完室溫下反應1小時，反應完畢用加水(10ml)，二氯甲烷(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮後得目標化合物2F粗產物(0.27g，94%)，直接下一步。

LC-MS (ESI): m/z =383.1[M+H] ⁺。

第六步：((3aR,4R,6R,6aS)-6-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-2，2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(2G)

((3aR,4R,6R,6aS)-6-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(2G)

化合物2F(0.27g，0.71mmol)溶於丙酮(5ml)中，加入催化量的對甲苯磺酸，在加入2,2-二甲氧基丙烷(0.37g，3.55mmol)，加完室溫下反應2小時，反應完畢濃縮掉丙酮，加入水(100ml)，二氯甲烷(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:1)得到標題化合物2G(0.26g，94%)。

LC-MS (ESI): m/z =423.1[M+H] ⁺。

第七步: ((((2R,3S,4R,5R)-5-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基))-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物2)

化合物2G(0.12g，0.31mmol)溶於磷酸三甲酯(3ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(0.23g，0.91mmol)溶於磷酸三甲酯(0.5ml)中緩慢滴加到反應液中，加完自然回溫反應15小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(1ml)，在加入4N鹽酸(1ml)，加完攪拌5小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間8.5min，得化合物2(50mg，30%)。

LC-MS (ESI): m/z =539.0[M-H] ^-。

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.36 (d, 1H), 6.98 (d, 1H),6.50 (d, 1H), 4.46-4.43 (m, 1H), 4.24-4.20 (m,1H), 4.06-3.85 (m,5H), 3.13-2.99 (m, 2H), 2.22 (t, 2H), 1.99-1.98 (m, 2H), 1.73-1.58 (m, 6H)。

實施例 3:

((((2R,3S,4R,5R)-5-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)膦酸(化合物3)

((((2R,3S,4R,5R)-5-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)methyl)phosphonic acid(化合物3)

第一步: 二乙基((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基))-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲氧基)甲基)膦酸酯(3A)

diethyl((((3aR,4R,6R,6aS)-6-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methoxy)methyl)phosphonate(3A)

化合物2G(0.14g，0.33mmol)和(二乙氧基磷醯基)2-硝基苯磺酸甲酯(0.17g，0.49mmol)溶於乾燥N,N-二甲基甲醯胺(5ml)中，氮氣置換三次，加入第三丁醇鎂(0.17g，0.99mmol)，加完升溫至80℃反應3小時，反應完畢用冷卻至室溫後用飽和氯化銨溶液淬滅反應，然後用乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:1~1:10)得到化合物3A(0.15g，79%)。

LC-MS (ESI): m/z =573.1[M+H] ⁺。

第二步：((((2R,3S,4R,5R)-5-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)- 3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)膦酸(化合物3)

化合物3A(0.15g，0.26mmol)溶於乙腈(5ml)中，加入三乙胺(0.79g，7.8mmol)，然後緩慢滴加三甲基溴矽烷(0.8g，5.2mmol)，加完反應15小時，反應完畢後過濾，濾餅用少量乙腈洗滌，濾液濃縮後加入4N鹽酸(1ml)，加完攪拌5小時，LCMS監控反應反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法:1.儀器waters 2767製備液相色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50% c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間10.2min，得化合物3(45mg，36%)。

LC-MS (ESI): m/z =475.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.36(d, 1H), 6.97 (d, 1H), 6.48 (d, 1H), 4.48-4.43 (m, 1H), 4.20-4.17 (m,1H), 3.91-3.80 (m,3H), 3.64-3.48 (m,4H), 3.12-2.98 (m, 2H), 1.98-1.95 (m,2H), 1.73-1.54 (m,6H)。

實施例 4:

(((((2R,3S,4R,5S)-5-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基]甲基))-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物4)

(((((2R,3S,4R,5S)-5-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物4)

第一步：((3aS,4S,6R,6aR)-6-((((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(4A)

((3aS,4S,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(4A)

化合物1D (8.7g，28.32 mmol)溶於二氯甲烷(100ml)中，分批次加入戴斯馬丁氧化劑(34.76g，81.96mmol)，加完室溫反應2小時，反應完畢反應液加入水(50ml)淬滅反應，過濾，濾餅用二氯甲烷淋洗，分液，水相用二氯甲烷(150ml×2)萃取兩次，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後產物用二氯甲烷(50ml)和異丙醇(50ml)溶解，加三乙胺(8.29g，81.96mmol)，加完室溫下攪拌2天，濃縮掉溶劑後加入甲醇(50ml)，加完分批次加入硼氫化鈉(2.07g，37.83mmol)，反應完畢後加水淬滅反應，過濾。濾液用二氯甲烷(150ml×2)萃取兩次，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 10:3)得到化合物4A(2.5g，29%)。

LC-MS (ESI): m/z =318.1[M+H] ⁺。

第二步：(3aR,4R,6R,6aR)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-甲醛(4B)

(3aR,4R,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxole-4-carbaldehyde(4B)

化合物4A (2.50g，7.85mmol)溶於二氯甲烷(20ml)中，分批次加入戴斯馬丁氧化劑(9.99g，23.55mmol)，加完室溫反應2小時，反應完畢反應液加入水(50ml)淬滅反應，過濾，濾餅用二氯甲烷淋洗，分液，水相用二氯甲烷(100ml×2)萃取兩次，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得化合物4B(2.4g，96%)，直接下一步反應。

第三步：((3aS,4S,6R,6aR)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)(2,4-二氯吡咯烷[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲醇(4C)

((3aS,4S,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)(2,4-dichloropyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methanol(4C)

7-溴-2,4-二氯吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪(2.43g，9.1mmol)溶於乾燥四氫呋喃(40ml)中，氮氣置換三次，用乙醇乾冰體系降溫至-78℃，控溫滴加正丁基鋰(3.34ml，8.3mmol，2.5mol/L)，滴完-78℃反應10分鐘，控溫-78℃滴加化合物4B (2.4g，7.6mmol)，滴完保持-78℃反應1小時，反應完畢用冰醋酸(1.5ml)淬滅反應，加入水(30ml)後乙酸乙酯(100ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，乾燥濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 5:1)得到標題化合物4C(0.81g，21%)。

LC-MS (ESI): m/z =526.1 [M+Na] ⁺；486.1 [M+1-H ₂O] ⁺。

第四步：((3aS,4S,6R,6aR)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)(2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲醇(4D)

((3aS,4S,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)(2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methanol(4D)

化合物4C (0.81g，1.61mmol)和環戊胺(0.21g，2.41mmol)，溶於二氯甲烷(10ml)中，加入N,N-二異丙基乙胺(0.62g，4.83mmol)，加完室溫反應3小時，反應完畢反應液直接濃縮，殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 5:1)得到標題化合物4D (0.31g，35%)。

LC-MS (ESI): m/z =553.2 [M+H] ⁺。

第五步：((2R,3S,4R,5S)-5-(((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-3, 4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲基2,2,2-三氟乙酸酯(4E)

((2R,3S,4R,5S)-5-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl 2,2,2-trifluoroacetate(4E)

化合物4D (0.3g，0.54mmol)溶於二氯甲烷(5ml)中，加入三氟乙酸(2ml)，降溫0~5℃滴加三乙基矽烷(0.86ml，5.4mmol)，加完自然回溫反應16小時，反應完畢將直接濃縮得化合物4E粗產物(0.2g，77%)，直接下一步反應。

LC-MS (ESI): m/z =479.1[M+H] ⁺。

第六步：(2S,3R,4S,5R)-2-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(4F)

(2S,3R,4S,5R)-2-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(4F)

化合物4E(0.2g，0.42mmol)溶於甲醇(5ml)和水(1ml)中，加入碳酸鉀(58mg，0.42mmol)加完室溫下反應1小時，反應完畢用加水，二氯甲烷(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮後得化合物4F粗產物(0.15g，93%)，直接下一步反應。

LC-MS (ESI): m/z =383.1[M+H] ⁺。

第七步：((3aR,4R,6S,6aS)-6-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-2, 2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(4G)

((3aR,4R,6S,6aS)-6-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(4G)

化合物4F(0.15g，0.39mmol)溶於丙酮(5ml)中，加入催化量的對甲苯磺酸，在加入2,2-二甲氧基丙烷(0.2g，1.95mmol)，加完室溫下反應2小時，反應完畢濃縮掉丙酮，加入水(20ml)，二氯甲烷(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:1)得到標題化合物4G (0.11g，72%)。

LC-MS (ESI): m/z =423.1[M+H] ⁺。

第八步：(((((2R,3S,4R,5S)-5-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基]甲基))-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物4)

化合物4G(0.050g，0.13mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(0.098g，0.39mmol)溶於磷酸三甲酯(0.5ml)中緩慢滴加到反應液中，加完自然回溫反應15小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(1ml)，在加入4N鹽酸(1ml)，加完攪拌5小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50% ；c.流量12 mL/min；d. 沖提時間20min。滯留時間8.0min，得化合物4(17mg，24%)。

LC-MS (ESI): m/z =539.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.38(d, 1H), 6.98 (d, 1H), 6.51 (d, 1H), 4.48-4.43 (m, 1H), 4.02-3.89 (m, 3H), 3.82-3.76 (m, 2H), 3.70-3.68 (m, 1H), 3.08-2.90 (m, 2H), 2.23 (t, 2H), 1.99-1.98 (m, 2H), 1.73-1.58 (m, 6H)。

實施例 5 ：

((((2R,3S,4R,5S)-5-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)膦酸(化合物5)

((((2R,3S,4R,5S)-5-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)methyl)phosphonic acid(化合物5)

第一步：二乙基((((3aR,4R,6S,6aS)-6-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲氧基)甲基)膦酸酯(5A)

diethyl((((3aR,4R,6S,6aS)-6-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methoxy)methyl)phosphonate(5A)

化合物4G(0.057g，0.13mmol)和(二乙氧基磷醯基)2-硝基苯磺酸甲酯(0.069g，0.2mmol)溶於乾燥N,N-二甲基甲醯胺(2ml)中，氮氣置換三次，加入第三丁醇鎂(0.066g，0.39mmol)，加完升溫至80℃反應3小時，反應完畢冷卻至室溫後用飽和氯化銨溶液淬滅反應，然後用乙酸乙酯(30ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:1~1:10)得到化合物5A(0.052g，70%)。

LC-MS (ESI): m/z =573.1[M+H] ⁺。

第二步：((((2R,3S,4R,5S)-5-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)- 3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)膦酸(化合物5)

化合物5A(0.052g，0.09mmol)溶於乙腈(3ml)中，加入三乙胺(0.28g，2.76mmol)，然後緩慢滴加三甲基溴矽烷(0.28g，1.84mmol)，加完反應15小時，反應完畢後過濾，濾餅用少量乙腈洗滌，濾液濃縮後加入4N鹽酸(1ml)，加完攪拌5小時，LCMS監控反應，反應完畢後直接將反應體系送製備HPLC，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相，色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%%；c.流量12 mL/min；d. 沖提時間20min。滯留時間9.8min，得化合物5(20mg，45%)。

LC-MS (ESI): m/z =475.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.37(d, 1H), 6.97 (d, 1H), 6.49 (d, 1H), 4.48-4.43 (m, 1H), 3.98-3.94 (m, 1H), 3.73-3.48 (m, 7H), 3.07-2.91 (m, 2H), 1.99-1.98 (m, 2H), 1.73-1.58 (m, 6H)。

實施例 6

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b ]吡啶-1-基)-2-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物6)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2-ethynyl-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物6)

第一步：4-氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶7-氧化物(6A)

4-chloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridine 7-oxide(6A)

將4-氯-7-氮雜吲唑 (13.0 g, 84.65 mmol) 和N-甲基吡咯烷酮(260 ml)加入燒瓶中，加入間氯過氧苯甲酸(33.6 g, 194.69 mmol)並在50 ^oC下反應過夜，LCMC檢測有產物生成。加入甲基第三丁基醚(50ml)，冷卻，過濾得到標題化合物6A (7.9 g, 55.04%)。

LC-MS (ESI): m/z= 170.1 [M+H] ⁺。

第二步：4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶(6B)

4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridine(6B)

將6A (7.9 g, 46.59 mmol)和乙腈(160 ml)加入燒瓶中，在冰浴下滴加入三氯氧磷(8.5 ml, 93.18 mmol)並在室溫下反應2小時。LCMS 檢測原料反應完全，有產物生成。將反應液緩慢倒入冰水中，加入飽和碳酸鈉溶解調pH~9，攪拌，過濾，濾餅加入二氯甲烷溶解，洗滌，乾燥，濃縮得到標題化合物6B (8.5 g, 97.0%)。

LC-MS (ESI): m/z= 188.0 [M+H] ⁺。

第三步：(2R,3R,4R,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)四氫呋喃-3,4-二乙酸二乙酸酯(6C)

(2R,3R,4R,5R)-2-(acetoxymethyl)-5-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diyl diacetate(6C)

將四乙醯核糖(23.7 g, 74.47 mmol)加入燒瓶中，加熱到90 ^oC下攪拌10分鐘，然後加入6B (7.0 g, 37.23 mmol)和四氯化錫(0.12 ml, 1.01 mmol)，升溫至130℃在減壓下攪拌20分鐘。然後冷卻，LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。加入二氯甲烷，直接過柱(PE:EA=1:0~4:1)，得到標題化合物6C (17 g, 100%)。

LC-MS (ESI): m/z= 446.0 [M+H] ⁺。

第四步：(2R,3R,4S,5R)-2-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(6D)

(2R,3R,4S,5R)-2-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(6D)

將6C (17.0 g, 38.10 mmol)和甲醇(350 ml)加入燒瓶中，再加入碳酸鉀(15.8 g, 114.91 mmol)，在室溫下反應1小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮直接得到標題化合物6D (8.2 g, 67.2%)。

LC-MS (ESI): m/z= 320.1 [M+H] ⁺。

第五步：((3a'R,4'R,6'R,6a'R)-4'-((4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環] -6'-基)甲醇(6E)

((3a'R,4'R,6'R,6a'R)-4'-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)tetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxol]-6'-yl)methanol(6E)

將6D (8.0 g, 24.99 mmol)，環戊酮 (9.5 g, 112.45 mmol)，原甲酸三甲酯 (8.0 g, 74.97 mmol)和乙腈(100 ml)加入燒瓶中，再加入對甲苯磺酸(0.43 g, 2.5 mmol)，然後在80℃下反應2小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=3：1)得到標題化合物6E (7.2 g, 74.6%)。

LC-MS (ESI): m/z= 386.1 [M+H] ⁺。

第六步：(3a'R,4'R,6'S,6a'S)-4'-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環] -6'-甲醛(6F)

(3a'R,4'R,6'S,6a'S)-4'-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)tetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxole]-6'-carbaldehyde(6F)

將6E(7.2 g, 18.64 mmol)和二氯甲烷(200 ml)加入燒瓶中，再加入戴斯-馬丁氧化劑(9.5 g, 22.37 mmol)，然後在室溫下反應16小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=3：1)得到標題化合物6F (5.4 g, 75.4%)。

LC-MS (ESI): m/z= 384.1 [M+H] ⁺。

第七步：(3a'S,6'R,6a'R)-6'-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-4'-(羥甲基)四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環]-4'-甲醛(6G)

(3a'S,6'R,6a'R)-6'-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-4'-(hydroxymethyl)tetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxole]-4'-carbaldehyde(6G)

將6F(5.4 g, 14.05 mmol)和二氧六環(55 ml)加入燒瓶中，加入甲醛溶液(5.15 ml, 140.5 mmol)和氫氧化鈉溶液(2N, 10.5 ml)，然後在室溫下反應3 h，LCMS顯示原料反應完全，加入水，乙酸乙酯萃取，洗滌，乾燥，濃縮得到標題化合物6G(6克粗產品)。直接往下一步反應。

LC-MS (ESI): m/z= 414.2 [M+H] ⁺。

第八步：((3a'R,4'R,6a'S)-4'-((4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環] -6’,6'-二基)二甲醇(6H)

((3a'R,4'R,6a'S)-4'-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)tetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxole]-6',6'-diyl)dimethanol(6H)

將6G (6.0g, 14.48 mmol)和四氫呋喃/水(60 ml/6 ml)，在-78 ^oC下加入硼氫化鈉(0.55 g, 14.48 mmol)。讓溫度自然升至室溫下並攪拌反應2小時。LCMS 檢測原料反應完全，有產物生成。將反應液緩慢倒入水中，二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥，濃縮得到標題化合物6H (4.0 g, 66.36%)。

LC-MS (ESI): m/z= 416.1 [M+H] ⁺。

第九步：((3a'R,4'R,6'S,6a'S)-4'-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-6'-((三苯甲氧基)甲基)四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環] -6'-基)甲醇(6I)

((3a'R,4'R,6'S,6a'S)-4'-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-6'-((trityloxy)methyl)tetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxol]-6'-yl)methanol(6I)

將6H (4.0 g, 9.61 mmol)和二氯甲烷(80 ml)，吡啶(2.33 ml, 28.83 mmol)加入燒瓶中，在室溫下加入三苯基氯甲烷(4.02 g, 14.41 mmol)並攪拌反應4小時。TLC(PE:EA=3：1)檢測原料反應完全，有產物生成。將反應液緩慢倒入水中，二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥，濃縮過柱(PE:EA=1：0~3：1)得到標題化合物6I (4.1 g, 64.8%)。

第十步：1-((3a'S,4'R,6'R,6a'R)-4'-(((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-4'-((三苯氧基)甲基)四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環]-6'-基)-4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶(6J)

1-((3a'S,4'R,6'R,6a'R)-4'-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-4'-((trityloxy)methyl)tetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxol]-6'-yl)-4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridine(6J)

將6I(4.1 g, 6.23 mmol)和二氯甲烷(80 ml)，咪唑(1.27 g, 18.69 mmol)，硝酸銀(3.17 g, 18.69 mmol)加入燒瓶中，在室溫下滴加第三丁基二苯基氯矽烷(3.42 g, 12.46 mmol)並攪拌反應16小時。TLC 檢測原料反應完全，有產物生成。將反應液緩慢倒入水中，二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥，濃縮過柱(PE:EA=1：0~5：1)得到標題化合物6J (4.8 g, 85.9%)。

第十一步：((3a'S,4'R,6'R,6a'R)-4'-(((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-6'-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4- b]吡啶-1-基)四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環]-4'-基)甲醇(6K)

((3a'S,4'R,6'R,6a'R)-4'-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-6'-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)tetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxol]-4'-yl)methanol(6K)

將6J (4.0g, 4.46 mmol)和二氯甲烷(40 ml)加入燒瓶中，再加入三氟乙酸(2 ml, 26.76 mmol)和三乙基矽烷(1 ml, 6.69 mmol)，然後在室溫下反應1小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0~2：1)得到標題化合物6K (2.9g, 99.3%)。

第十二步：(3a'S,4'R,6'R,6a'R)-4'-(((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-6'-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環]-4'-甲醛(6L)

(3a'S,4'R,6'R,6a'R)-4'-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-6'-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)tetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxole]-4'-carbaldehyde(6L)

將6K(2.9 g, 4.43 mmol)和二氯甲烷(60 ml)加入燒瓶中，再加入戴斯-馬丁氧化劑(4.7 g, 11.07 mmol)，然後在室溫下反應4小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=0：1~3：1)得到標題化合物6L (2.8 g, 96.8%)。

第十三步：1-((3a'S,4'R,6'R,6a'R)-4'-(((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-4'-乙炔基四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環]-6'-基)-4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶(6M)

1-((3a'S,4'R,6'R,6a'R)-4'-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-4'-ethynyltetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxol]-6'-yl)-4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridine(6M)

將6L(1.6 g, 2.45 mmol)和甲醇(20 ml)加入燒瓶中，在冰浴下滴加入1-重氮-2-氧代丙基膦酸二甲酯(1.43 g, 7.35 mmol)的甲醇(5 ml)溶液，然後在0 ^oC下反應4小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0~3：1)得到標題化合物6M (1.1 g, 66.1%)。

第十四步：((3a'R,4'R,6'R,6a'S)-4'-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-6'-乙炔基四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環] -6'-基)甲醇(6N)

((3a'R,4'R,6'R,6a'S)-4'-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-6'-ethynyltetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxol]-6'-yl)methanol(6N)

將6M (1.0 g, 1.54 mmol)和四氫呋喃(10 ml)加入燒瓶中，再加入四丁基氟化銨 (1.2 g, 4.62 mmol)，然後在室溫下反應2小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=0：1~1：1)得到標題化合物6N (0.27 g, 42.7%)。

LC-MS (ESI): m/z= 410.1 [M+H] ⁺。

第十五步：((3a'R,4'R,6'R,6a'S)-4'-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-6'-乙炔基四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環]-6'-基)甲醇 (6O)

((3a'R,4'R,6'R,6a'S)-4'-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-6'-ethynyltetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxol]-6'-yl)methanol (6O)

將6N(0.27 g, 0.66 mmol)和N,N-二甲基乙醯胺(10 ml)加入燒瓶中，再加入(S)-1-(2-氟苯基)乙胺(0.28 g, 1.98 mmol)和三乙胺(0.33 g, 3.30 mmol)，然後在150 ^oC下反應4小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。乙酸乙酯萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0~0：1)得到標題化合物6O (0.25 g, 73.8%)。

LC-MS (ESI): m/z= 513.1 [M+H] ⁺。

第十六步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2-乙炔基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(6P)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2-ethynyl-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(6P)

將6O(0.12 g, 0.23 mmol)和二氯甲烷(10 ml)加入燒瓶中，在室溫下加入三氟乙酸(0.3 ml)和鹽酸甲醇(0.3 ml)。反應在室溫下攪拌反應2小時。LCMS 檢測原料反應完全，有產物生成。加水，加碳酸鈉溶液調pH~10，二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥，濃縮得到標題化合物6P (0.1 g, 97.3%)。

LC-MS (ESI): m/z= 447.1 [M+H] ⁺。

第十七步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物6)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2-ethynyl-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物 6)

將6P(100 mg, 0.22 mmol)和磷酸三甲酯(3ml)加入燒瓶中，在冰浴下加入亞甲基雙氯化磷(270 mg, 1.1 mmol)。讓溫度自然升至室溫下並攪拌反應3小時。LCMS 檢測原料反應完全，有產物生成。加入1ml水攪拌10分鐘，將反應液送去HPLC製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間8.5min。製備液濃縮凍乾得到化合物6 (50 mg, 37.6%)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.39 (s, 1H), 8.23 (d, 1H), 7.40 – 7.38 (m, 1H), 7.33 – 7.30 (m, 1H), 7.24 – 7.15 (m, 2H), 6.15 (d, 1H), 6.02 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.77 (t, 1H), 4.32 (d, 1H), 4.09 – 4.05 (m, 1H), 3.92 – 3.88 (m, 1H), 3.53 (s, 1H), 2.21 (t, 2H), 1.58 (d, 3H)。

LC-MS (ESI): m/z= 605.1 [M+H] ⁺。

實施例 7

(((((2R,3S,4S,5R)-4-疊氮基-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物7)

(((((2R,3S,4S,5R)-4-azido-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物 7)

第一步：(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(7A)

(2R,3R,4S,5R)-2-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(7A)

將6D (6.2 g, 19.37 mmol)和N,N-二甲基乙醯胺(80 ml)加入燒瓶中，再加入(S)-1-(2-氟苯基)乙胺(6.74 g, 48.43 mmol)和三乙胺(9.8 g, 96.85 mmol)，然後在150 ^oC下反應4小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。乙酸乙酯萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0~0：1)得到標題化合物7A (5.1 g, 61.1%)。

LC-MS (ESI): m/z = 423.2 [M+H] ⁺。

第二步：(6aR,8R,9R)-8-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃並[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧矽烷二基-9-醇(7B)

(6aR,8R,9R)-8-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2,4,4-tetraisopropyltetrahydro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-ol(7B)

將7A (5.0 g, 11.82 mmol)和吡啶(50 ml)加入燒瓶中，在室溫下滴加加入1,3二氯-1,1,3,3-四異丙基二矽氧烷(4.1 g, 13.00 mmol)，然後在室溫下反應1小時。TLC檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0~3：1)得到標題化合物7B (7.8 g, 99.2%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.90 (s, 1H), 7.31–7.24(m, 2H), 7.18–7.07(m, 2H), 6.42 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 5.08–5.04 (m, 2H), 4.62 (t, 1H), 4.09–4.00 ( m, 1H), 3.97–3.94 (m, 2H), 1.67 (d, 3H), 1.20–0.88 (m, 28H)。

第三步：(6aR,8R,9R)-8-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃並[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧矽烷二基-9-基三氟甲磺酸酯(7C)

(6aR,8R,9R)-8-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2,4,4-tetraisopropyltetrahydro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-yl trifluoromethanesulfonate(7C)

將7B (2.0 g, 3.01 mmol)，吡啶(2.14 g, 27.09 mmol)，4-二甲氨基吡啶(0.44 g, 3.61 mmol)和二氯甲烷(20 ml)加入燒瓶中，在室溫下滴加三氟甲磺酸酐(1.7 g, 6.02 mmol)，然後在室溫下反應2小時。TLC(PE:EA=10：1)檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0~5：1)得到標題化合物7C (1.5 g, 62.5%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.89 (s, 1H), 7.30–7.24(m, 2H), 7.13–7.07(m, 2H), 6.59 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.28–5.26 (m, 2H), 5.02 (t, 1H), 4.08–4.05 ( m, 1H), 3.99–3.95 (m, 2H), 1.67 (d, 3H), 1.26–0.99 (m, 28H)。

第四步：1-((6aR,8R,9S)-9-疊氮基-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧嘧啶-8- yl)-6-氯-N-((S)-1-(2-氟苯基)乙基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-4-胺(7D)

1-((6aR,8R,9S)-9-azido-2,2,4,4-tetraisopropyltetrahydro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-yl)-6-chloro-N-((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amine(7D)

將7C(1.5 g, 1.88 mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(20 ml)加入燒瓶中，再加入疊氮化鈉(0.37 g, 5.64 mmol)，然後在80 ^oC下反應8小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0~5：1)得到標題化合物7D (0.45 g, 34.7%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.93 (s, 1H), 7.31–7.24(m, 2H), 7.13–7.07(m, 2H), 6.65 (d, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.29–5.26 (m, 2H), 5.03 (t, 1H), 4.40 (t, 1H), 4.14–4.00 ( m, 1H), 3.99–3.89 (m, 2H), 1.66 (d, 3H), 1.42–0.92 (m, 28H)。

第五步：(2R,3S,4S,5R)-4-疊氮基-5-(6-氯-4-((((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b ]吡啶-1-基)-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇(7E)

(2R,3S,4S,5R)-4-azido-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3-ol (7E)

將7D(450 mg, 0.65 mmol)和四氫呋喃(10 ml)加入燒瓶中，再加入四丁基氟化銨(0.51 g, 1.95 mmol)，然後在室溫下反應4小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0~5：1)得到標題化合物7E (160 mg, 55.0%)。

LC-MS (ESI): m/z= 448.2 [M+H] ⁺。

第六步：(((((2R,3S,4S,5R)-4-疊氮基-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物7)

(((((2R,3S,4S,5R)-4-azido-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物7)

將7E (70 mg, 0.16 mmol)和磷酸三甲酯(3 ml)加入燒瓶中，在冰浴下加入亞甲基雙(二氯化膦) (200 mg, 0.8 mmol)。讓溫度自然升至室溫下並攪拌反應3小時。LCMS 檢測原料反應完全，有產物生成。加入1ml水攪拌10分鐘，將反應液送去HPLC製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間8.5min。製備液濃縮凍乾得到標題化合物7 (26 mg, 26.8%)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.39 (s, 1H), 8.24 (d, 1H), 7.44 (t, 1H), 7.43 – 7.33 (m, 1H), 7.26 – 7.18 (m, 2H), 6.51 (d, 1H), 6.02 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.70 (t, 1H), 4.58 – 4.55 (m, 1H), 4.31 – 4.20 (m, 1H), 4.07 – 3.98 (m, 2H), 2.18 (t, 2H), 1.59 (d, 3H)。

LC-MS (ESI): m/z= 606.2 [M+H] ⁺。

實施例 8

((((2R,3S,4R,5R)-5-(1-(2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)膦酸(化合物8)

((((2R,3S,4R,5R)-5-(1-(2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)ethyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)methyl)phosphonic acid (化合物8)

第一步:((3aR,4S,6R,6aR)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)(2 -氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲酮(8A)

((3aR,4S,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)(2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methanone(8A)

化合物2D (0.6g，1.08mmol)溶於二氯甲烷(10 ml)中，分批次加入戴斯馬丁氧化劑(0.69g，1.62mmol)，加完室溫反應2小時，反應完畢反應液加入水(10ml)淬滅反應，過濾，濾餅用二氯甲烷淋洗，分液，水相用二氯甲烷(50ml×2)萃取兩次，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯 (v/v)= 4:1)得到標題化合物8A(0.25g，42%)。

LC-MS (ESI): m/z =551.2 [M+H] ⁺。

第二步:1-((3aR,4S,6R,6aR)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)-1-(2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙烷-1-醇(8B)

1-((3aR,4S,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)-1-(2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)ethan-1-ol(8B)

氮氣保護下化合物8A(0.25g，0.45mmol)溶於四氫呋喃(5 ml)中，降溫至0℃緩慢滴加甲基溴化鎂溶液(0.45ml，1.35mmol，3.0mol/L)，加完室溫反應2小時，反應完畢反應液加入飽和氯化銨(10ml)淬滅反應，用二氯甲烷(50ml×2)萃取兩次，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾,濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯 (v/v)= 4:1)得到標題化合物8B(0.25g，98%)，粗產物未純化直接下一步。

LC-MS (ESI): m/z =567.2 [M+H] ⁺。

第三步：((3aR,4R,6R,6aS)-6-(1-(2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(8C)

((3aR,4R,6R,6aS)-6-(1-(2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)ethyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(8C)

化合物8B (0.21g，0.37mmol)溶於二氯甲烷(5ml)中，加入三乙基矽烷(0.43g，3.7mmol)，加完降溫至-10℃，緩慢滴加三氟乙酸(0.5ml)，加完自然回溫反應16小時。反應完畢將直接濃縮得產物溶於甲醇(5ml)和水(1ml)的混合溶劑中，再加入碳酸鉀(88mg，0.64mmol)加完室溫下反應1小時。反應完畢用加水，二氯甲烷(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮後得產物溶解於丙酮(5ml)中，加入催化量的對甲苯磺酸，再加入2,2-二甲氧基丙烷(0.15g，1.4mmol)，加完室溫下反應2小時，反應完畢濃縮掉丙酮，加入水(20ml)，二氯甲烷(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v)= 4:1~2:1)得到標題化合物8C(0.12g，74%)。

LC-MS (ESI): m/z =437.2 [M+H] ⁺。

第四步：二乙基((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(1-(2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲氧基)甲基)膦酸酯(8D)

diethyl((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(1-(2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)ethyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methoxy)methyl)phosphonate(8D)

化合物8C(0.12g，0.27mmol)和(二乙氧基磷醯基)2-硝基苯磺酸甲酯(0.29g，0.81mmol)溶於乾燥N,N-二甲基甲醯胺(5ml)中，氮氣置換三次，加入第三丁醇鎂(0.23g，1.35mmol)，加完升溫至80℃反應15小時，反應完畢用冷卻至室溫後用飽和氯化銨溶液淬滅反應，加入水(20ml)後用乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=1:1~1:9)得到標題化合物8D(0.1g，63%)。

LC-MS (ESI): m/z =587.2 [M+H] ⁺。

第五步：((((2R,3S,4R,5R)-5-(1-(2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪7 -基)乙基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)膦酸(化合物8)

((((2R,3S,4R,5R)-5-(1-(2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)ethyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)methyl)phosphonic acid(化合物8)

化合物8D(0.1g，0.17mmol)溶於乙腈(5ml)中，加入三乙胺(0.52g，5.1mmol)，然後緩慢滴加三甲基溴矽烷(0.52g，3.4mmol)，加完反應15小時，反應完畢後過濾，濾餅用少量乙腈洗滌，濾液濃縮後加入4N鹽酸(1ml)，加完攪拌5小時，LCMS監控反應反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法:1.儀器waters 2767製備液相色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間10.8min得化合物8(46mg，55%)。

LC-MS (ESI): m/z =489.1[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.30 (d, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.43 (d, 1H), 4.48-4.43 (m, 1H), 4.21-4.18 (m, 1H), 3.98-3.96 (m, 2H), 3.73-3.44 (m, 6H), 2.01-1.98 (m, 2H), 1.73-1.58 (m, 6H), 1.11 (d, 3H)。

實施例 9

(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物9)

(((((2S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物9)

第一步：((3aR,5R,6S,6aR)-6-羥基-2,2-二甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-5-基)苯甲酸甲酯(9B)

((3aR,5R,6S,6aR)-6-hydroxy-2,2-dimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (9B)

化合物9A(20g，105.16 mmol)和三乙胺(31.92g，315.48 mmol)溶於二氯甲烷(150ml)中，冰水浴下分批次加入苯甲醯氯(12.22mL，105.16 mmol)，加完室溫反應2小時，反應完畢反應液加入水(50ml)淬滅反應，水相用二氯甲烷(150ml×2)萃取兩次，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=2:1)得到化合物9B (22g，71%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.09 – 8.01 (m, 2H), 7.60 (t, 1H), 7.46 (t, 2H), 5.96 (d, 1H), 4.81 (dd, 1H), 4.60 (d, 1H), 4.42 – 4.32 (m, 2H), 4.18 (d, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.32 (s, 3H)。

第二步：((3aR,5R,6aS)-2,2-二甲基-6-氧四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧戊環-5-基)苯甲酸甲酯(9C)

((3aR,5R,6aS)-2,2-dimethyl-6-oxotetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (9C)

化合物9B (22g，74.75mmol)溶於二氯甲烷(200ml)中，分批次加入戴斯馬丁氧化劑(63.4g，149.5mmol)，加完室溫反應2小時，反應完畢反應液加入水(200ml)淬滅反應，過濾，濾餅用二氯甲烷淋洗，分液，水相用二氯甲烷(100ml×2)萃取兩次，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得化合物9C (16g，73%)，直接下一步反應。

第三步：((3aR,5S,6aR)-2,2-二甲基-6-亞甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-5-基)苯甲酸甲酯(9D)

((3aR,5S,6aR)-2,2-dimethyl-6-methylenetetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (9D)

甲基三苯基溴化膦(55g，153.96mmol)溶於乾燥四氫呋喃(500ml)中，冰水浴下加入第三戊醇鈉(16.96 g，153.96mmol)，滴完0℃反應30分鐘，0℃分批加入化合物9C (15g，7.6mmol)，加完後室溫反應2小時，反應完畢用飽和氯化銨(200ml)淬滅反應，加入水(300ml)後乙酸乙酯(300ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，乾燥濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 5:1)得到標題化合物9D (7.9g，53%)。

第四步：(3R,5S)-5-((苯甲醯氧基)甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-2,3-二乙酸二乙酸酯(9E)

(3R,5S)-5-((benzoyloxy)methyl)-4-methylenetetrahydrofuran-2,3-diyl diacetate (9E)

化合物9D (3.5g，12.06mmol)溶於三氟乙酸(10mL)和水(5mL)，加完室溫反應3小時，反應完畢後濃縮除去三氟乙酸，水相用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合併有機相濃縮，然後加入醋酸酐(5mL)，吡啶(15mL)，室溫反應過夜，反應液直接濃縮，殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 5:1)得到標題化合物9E (0.8g，20%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.07 (dd, 2H), 7.61 – 7.52 (m, 1H), 7.49 – 7.40 (m, 2H), 6.24 (s, 1H), 5.74 – 5.69 (m, 1H), 5.56 (s, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.09 (dd, 1H), 4.52 (dd, 1H), 4.43 (dd, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.01 (s, 3H)。

第五步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(9F)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (9F)

將化合物9E (0.7g，2.09mmol)加入到50mL反應瓶中，加熱到90℃後加入4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶(0.39g，2.09mmol)，加完後滴加四氯化錫兩滴，然後升溫至130℃減壓反應三十分鐘，冷卻至室溫，殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 10:1- 5:1)得到標題化合物9F (0.8g，83%)。

LC-MS (ESI): m/z =462.0[M+H] ⁺。

第六步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(9G)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (9G)

化合物9F (0.70g，1.51mmol)溶於DMF(5ml)中，加入三乙胺(0.46g，4.53mmol)和(S)-1-(2-氟苯基)乙-1-胺(0.40g，3.02mmol)加完150℃下反應1小時，反應完畢用加水，乙酸乙酯(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮後粗產物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 5:1-1:1)得到標題化合物9G (0.3g，35%)。

LC-MS (ESI): m/z =565.2[M+H] ⁺。

第七步：(2R,3R,5S)-2-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇(9H)

(2R,3R,5S)-2-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (9H)

化合物9G (0.25 g，0.44 mmol)溶於甲醇(5 ml)中，加入碳酸鉀(0.24 g，1.76 mmol)，加完室溫下反應2小時，加入水(20 ml)析出固體，過濾，濾餅用水(2 mL)洗滌一次，濾餅用甲苯帶水減壓旋乾得到標題化合物9H (0.16g，86%)。

LC-MS (ESI): m/z =419.2[M+H] ⁺。

第八步：(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物9)

化合物9H (0.080g，0.19mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(0.14g，0.57mmol)溶於磷酸三甲酯(0.5ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(1ml)，加完攪拌1小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間8.0min，得化合物9 (50mg，46%)。

LC-MS (ESI): m/z =575.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.27 (s, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.34 – 7.24 (m, 1H), 7.13 (dd, 2H), 6.14 – 6.02 (m, 2H), 5.44 (t, 1H), 5.39 – 5.28 (m, 2H), 5.07 (d, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.30 – 4.21 (m, 1H), 4.17 (dd, 1H), 2.43 (t, 2H), 1.64 (d, 3H)。

實施例 10

(((((2S,3S,4R,5R)-3-疊氮基-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-4-羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物10)

(((((2S,3S,4R,5R)-3-azido-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-4-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物10)

第一步：((3aR,5R,6S,6aR)-2,2-二甲基-6-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-5-基)苯甲酸甲酯(10A)

((3aR,5R,6S,6aR)-2,2-dimethyl-6-(((trifluoromethyl)sulfonyl)oxy)tetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (10A)

化合物9B (6.0g，20.39 mmol)，N,N-二甲基吡啶-4-胺(2.49g，20.39 mmol)和吡啶(16.46mL，203.9 mmol)溶於二氯甲烷(100ml)中，冰水浴下分批次加入三氟甲磺酸酐(5.14mL，30.59 mmol)，加完室溫反應2小時，反應完畢反應液濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 10:1-3:1)得到化合物10A (8.0g，92%)。

第二步：((3aR,5S,6R,6aR)-6-疊氮基-2,2-二甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-5-基)苯甲酸甲酯(10B)

((3aR,5S,6R,6aR)-6-azido-2,2-dimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (10B)

化合物10A(5.0g，11.73mmol)溶於乙醇(100ml)中，加入疊氮化鈉(2.29g，35.19mmol)，加完85℃反應48小時，反應完畢反應液加入水(200ml)淬滅反應，水相用乙酸乙酯(300ml×2)萃取兩次，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 3:1)得到化合物10B (1.4g，41%)。

第三步：(3R,4R,5S)-4-疊氮基-5-((苯甲醯氧基)甲基)四氫呋喃-2,3-二乙酸二乙酸酯(10C)

(3R,4R,5S)-4-azido-5-((benzoyloxy)methyl)tetrahydrofuran-2,3-diyl diacetate (10C)

化合物10B (0.55g，1.72mmol)溶於乙酸(30mL)和乙酸酐(2mL)，滴加濃硫酸(0.9mL)加完室溫反應16小時，反應完畢後加水(100mL)，水相用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合併有機相，水(100mL×2)洗滌，碳酸氫鈉水溶液洗滌，分液，有機相乾燥濃縮，得到標題化合物10C(0.4g，64%)，直接用於下一步。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.08 (dd, 2H), 7.59 (t, 1H), 7.46 (td, 2H), 6.17 (s, 1H), 5.38 (d, 1H), 4.67 (dd, 1H), 4.50 – 4.44 (m, 1H), 4.38 (dt, 1H), 4.22 (dd, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.92 (s, 3H)。

第四步：(((2S,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-3-疊氮基-5-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(10D)

((2S,3R,4R,5R)-4-acetoxy-3-azido-5-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (10D)

將化合物10C (0.5g，1.38mmol)加入到50mL反應瓶中，加熱到90℃後加入4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶(0.26g，1.38mmol)，加完後滴加四氯化錫兩滴，然後升溫至130℃減壓反應三十分鐘，冷卻至室溫，殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 10:1- 5:1)得到標題化合物10D (0.45g，66%)。

LC-MS (ESI): m/z =491.0[M+H] ⁺。

第五步：((2S,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-3-疊氮基-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[ 3,4-b]吡啶-1-基)四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(10E)

((2S,3R,4R,5R)-4-acetoxy-3-azido-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (10E)

化合物10D (0.45g，1.51mmol)溶於N,N-二乙基乙醯胺(5ml)中，加入三乙胺(0.28g，2.76mmol)和(S)-1-(2-氟苯基)乙-1-胺(0.26g，3.02mmol)加完150℃下反應1小時，反應完畢用加水，乙酸乙酯(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮後粗產物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 5:1-1:1)得到標題化合物10E (0.25g，46%)。

LC-MS (ESI): m/z =594.1[M+H] ⁺。

第六步：(2R,3R,4S,5S)-4-疊氮基-2-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b ]吡啶-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇(10F)

(2R,3R,4S,5S)-4-azido-2-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3-ol (10F)

化合物10E (0.25g，0.42mmol)溶於甲醇(5ml)中，加入碳酸鉀(0.23g，1.68mmol)，加完室溫下反應2小時，加入水(20ml)析出固體，過濾，濾餅用水(2mL)洗滌一次，濾餅用甲苯帶水減壓旋乾得到標題化合物10F (0.15g，79%)。

LC-MS (ESI): m/z =448.2[M+H] ⁺。

第七步：(((((2S,3S,4R,5R)-3-疊氮基-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-4-羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物10)

化合物10F(0.15g，0.33mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(0.25g，0.99mmol)溶於磷酸三甲酯(0.1ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(1ml)，加完攪拌1小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d.沖提時間20min。滯留時間8.0min，得化合物10(40mg，20%)。

LC-MS (ESI): m/z =604.1[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.39 (s, 1H), 8.24 (d, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.32 (dd, 1H), 7.20 (dt, 2H), 7.01 (d, 1H), 6.07 (t, 2H), 5.06 (s, 1H), 4.96 (t, 1H), 4.41 – 4.32 (m, 1H), 4.16 – 4.01 (m, 2H), 3.90 (dd, 1H), 2.13 (t, 2H), 1.58 (d, 3H)。

實施例 11:

(((((2S,3S,4R,5R)-3-氨基-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-4-羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸 (化合物11)

(((((2S,3S,4R,5R)-3-amino-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-4-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物11)

化合物10 (0.035g，0.066mmol)溶於甲醇(5ml)中，加入鄰二氯苯(1 mL)鈀碳(10 mg)，反應體系用氫氣置換三次，室溫反應15分鐘，LCMS監控反應，反應完畢後濃縮除去甲醇，加入水(5ml)，乙酸乙酯(5mL)，分液，水相直接送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間8.0min，得化合物11(10mg，26%)。

LC-MS (ESI): m/z =580.1[M+H] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.21 (s, 1H), 7.36 (dd, 1H), 7.32 – 7.24 (m, 1H), 7.13 (dd, 2H), 6.35 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 5.08-5.03 (m, 1H), 4.47 (s, 2H), 4.23-4.17 (m, 1H), 4.00-3.94 (m, 1H), 2.28 (t, 2H), 1.64 (d, 3H)。

實施例 12:

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b) ]吡啶-1-基)- 3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物12)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物12)

化合物9 (0.050g，0.087 mmol)，N-甲基嗎啉氧化物(0.030g，0.26 mmol)溶於丙酮(2ml)和水(1mL)中，室溫下滴加四氧化鋨的第三丁醇溶液(1mL，2mg/mL)，加完室溫反應16小時，反應完畢加亞硫酸鈉淬滅反應，反應液濃縮後送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間8.0min得化合物12(20mg，38%)。

LC-MS (ESI): m/z =609.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ 8.28 (s, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.31 (dd, 1H), 7.15 (dt, 2H), 6.24 – 6.16 (m, 2H), 5.11 (d, 1H), 4.93 (d, 1H), 4.32 (t, 1H), 4.11 (dd, 1H), 4.05 (dd, 1H), 3.96 (d, 1H), 3.84 (d, 1H), 2.07 (td, 2H), 1.62 (d, 3H)。

實施例 13

(((((2R,3S,4R,5R)-4-疊氮基-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3 ,4-b]吡啶-1-基)-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物13)

(((((2R,3S,4R,5R)-4-azido-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物13)

第一步：(6aR,8R)-8-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)- 2,2,4,4-四異丙基二氫-6H-呋喃[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧矽烷二基-9(8H)-酮(13A)

(6aR,8R)-8-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2,4,4-tetraisopropyldihydro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9(8H)-one(13A)

將7B (5.0 g，7.51 mmol)溶於二氯甲烷(100 ml)中，分批次加入戴斯馬丁氧化劑(7.96g，18.77mmol)，加完室溫反應16小時，反應完畢反應液加入水(50ml)淬滅反應，過濾，濾餅用二氯甲烷淋洗，分液，水相用二氯甲烷(100ml×2)萃取兩次，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮過柱(PE:EA=1：0-3：1)得到標題化合物13A (1.48 g, 29.7%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.90 (s, 1H), 7.30–7.24(m, 2H), 7.12–7.07(m, 2H), 6.18 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.21 (d, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.14–4.09 (m, 2H), 4.03–4.00 (m, 1H), 1.71–1.66 (m, 3H), 1.67 (d, 3H), 1.26–0.92 (m, 28H)。

第二步：(6AR,8R,9S)-8-(6-氯-4 -(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃[3,2-f][1,3,5,2,4] 三氧矽烷二基-9-醇(13B)

(6aR,8R,9S)-8-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2,4,4-tetraisopropyltetrahydro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-ol(13B)

將13A(1.48 g, 2.23 mmol)和四氫呋喃(20 ml)，水(2 ml)加入燒瓶中，在-78℃下加入硼氫化鈉(84 mg, 2.23 mmol)，然後在室溫下反應1小時。TLC檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0-3：1) 得到標題化合物13B (1.4 g, 94.4%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.96 (s, 1H), 7.30–7.24 (m, 2H), 7.12–7.07 (m, 2H), 6.53 (d, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.88 (t, 1H), 4.64 (t, 1H), 3.91–3.88 (m, 3H), 1.67 (d, 3H), 1.26–0.88 (m, 28H)。

第三步：(6AR,8R,9S)-8-(6-氯-4 -(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧矽烷二基-9-基三氟甲磺酸鹽(13C)

(6aR,8R,9S)-8-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2,4,4-tetraisopropyltetrahydro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-9-yltrifluoromethanesulfonate(13C)

將13B (1.4 g, 2.10 mmol)，吡啶(1.5 g, 18.90 mmol)，4-二甲氨基吡啶(0.31 g, 2.52 mmol)和二氯甲烷(20 ml)加入燒瓶中，在室溫下滴加三氟甲磺酸酐(1.7 g, 6.02 mmol)，然後在室溫下反應2小時。TLC(PE:EA=10：1)檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0-5：1)得到標題化合物13C (1.1 g, 65.7%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.95 (s, 1H), 7.30–7.26 (m, 2H), 7.12–7.08 (m, 2H), 6.77 (s, 1H), 6.14 (s, 1H), 5.63 (t, 1H), 5.49 (t, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.17–4.09 (m, 1H), 3.97–3.89 (m, 2H), 1.67 (d, 3H), 1.26–0.88 (m, 28H)。

第四步：1-((6aR,8R,9R)-9-疊氮基-2,2,4,4-四異丙基四氫-6H-呋喃[3,2-f][1,3,5,2,4]三氧嘧啶-8-基)-6-氯-N-((S)-1-(2-氟苯基)乙基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-4-胺(13D)

1-((6aR,8R,9R)-9-azido-2,2,4,4-tetraisopropyltetrahydro-6H-furo[3,2-f][1,3,5,2,4]trioxadisilocin-8-yl)-6-chloro-N-((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-amine(13D)

將13C (1.4 g, 1.76 mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(20 ml)加入燒瓶中，再加入疊氮化鈉(0.34 g, 5.28 mmol)，然後在80 ^oC下反應8小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0-5：1)得到標題化合物13D (1.1 g, 90.5%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.91 (s, 1H), 7.31–7.24 (m, 2H), 7.12–7.07 (m, 2H), 6.28 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 5.34–5.30 (m, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.58 (d, 1H), 4.06–4.03 (m, 1H), 3.95 (t, 2H), 1.68 (d, 3H), 1.24–0.88 (m, 28H)。

第五步：(2R,3S,4R,5R)-4-疊氮基-5-(6-氯-4 -(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-B ]吡啶-1-基)-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇(13E)

(2R,3S,4R,5R)-4-azido-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3-ol(13E)

將13D (1.1 g, 1.59 mmol)和四氫呋喃(20 ml)加入燒瓶中，再加入四丁基氟化銨(1.25 g, 4.77 mmol)，然後在室溫下反應4小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0-0：1)得到標題化合物13E (600 mg, 84.3%)。

LC-MS (ESI): m/z= 448.2 [M+H] ⁺。

第六步：(((((2R,3S,4R,5R)-4-疊氮基-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3 ,4-b]吡啶-1-基)-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物13)

將13E (200 mg, 0.45 mmol)和磷酸三甲酯(4 ml)加入燒瓶中，在冰浴下加入亞甲基雙(二氯化膦) (340 mg, 1.35 mmol)。讓溫度自然升至室溫下並攪拌反應3小時。LCMS 檢測原料反應完全，有產物生成。加入1ml水攪拌10分鐘，將反應液送去HPLC製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間：7.56 min。製備液濃縮凍乾得到標題化合物13F (110 mg, 40.3%)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.41 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.34 – 7.30(m, 1H), 7.24 – 7.16 (m, 2H), 6.12 (d, 1H), 6.04 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.66 (t, 2H), 4.06 (d, 2H), 3.96 – 3.91 (m, 1H), 2.02 (t, 2H), 1.58 (d, 3H)。

LC-MS (ESI): m/z= 606.2 [M+H] ⁺。

實施例 14 ：

(2-(((2R,3S,4R,5R)-5-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)-1-羥基-3-甲氧基丙烷-2-基)膦酸(化合物14)

(2-(((2R,3S,4R,5R)-5-((2-chloro-4-(cyclopentylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)-1-hydroxy-3-methoxypropan-2-yl)phosphonic acid(化合物14)

第一步: 7-(((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲基)-2-氯-N-環戊基吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(14A)

7-(((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methyl)-2-chloro-N-cyclopentylpyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine(14A)

化合物2G (1.18g，2.79mmol)溶於DCM(15ml)中，加入咪唑(0.57g，8.37mmol)，加完氮氣保護下降溫0~5℃，分批次加入TBSCl (0.63g，4.19mmol)，加完自然回溫反應2小時，反應完畢後加入水淬滅反應，二氯甲烷(50ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，乾燥濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 5:1)得到標題化合物14A(1.4g，93%)。

LC-MS (ESI): m/z =537.2 [M+H] ⁺。

第二步: 第三丁基(7-(((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環)-4-基)甲基)-2-氯吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)(環戊基)氨基甲酸酯(14B)

tert-butyl(7-(((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methyl)-2-chloropyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-yl)(cyclopentyl)carbamate(14B)

化合物14A (1.4g，2.61mmol)溶於乙腈(20ml)中，加入二碳酸二第三丁酯(2.85g，13.05mmol)，三乙胺(2.64g，26.1mmol)和DMAP (0.64g，5.22mol)，加完升溫至75℃反應15小時，反應完畢後加入水淬滅反應，乙酸乙酯(100ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，乾燥濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 10:1)得到標題化合物14B (1.3g，78%)。

LC-MS (ESI): m/z =637.2 [M+H] ⁺。

第三步: 第三丁基(2-氯-7-(((3aS,4R,6R,6aR)-6-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二惡醇-4-基)甲基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)(環戊基)氨基甲酸酯(14C)

tert-butyl(2-chloro-7-(((3aS,4R,6R,6aR)-6-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methyl)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-yl)(cyclopentyl)carbamate(14C)

化合物14B (1.3g，2.04mmol)溶於四氫呋喃(15ml)中，加入四丁基氟化銨四氫呋喃溶液(2.45ml，2.45mmol,1.0mol/L)，加完室溫反應2小時，反應完畢後直接濃縮反應液。濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 2:1)得到標題化合物14C(0.90g，84%)。

LC-MS (ESI): m/z =467.2 [M-tBu+H] ⁺。

第四步：乙基2-(((3aR,4R,6R,6aS)-6-((4-((第三丁氧基羰基)(環戊基)氨基)-2-氯吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪)-7-基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲氧基)-2-(二乙氧基磷醯基)乙酸酯(14D)

ethyl2-(((3aR,4R,6R,6aS)-6-((4-((tert-butoxycarbonyl)(cyclopentyl)amino)-2-chloropyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methoxy)-2-(diethoxyphosphoryl)acetate(14D)

化合物14C (0.90g，1.72mmol)溶於甲苯(15ml)中，加入2-重氮-2-(二乙氧基磷醯基)乙酸乙酯(1.29g，5.16mmol)，二聚醋酸銠(0.076g，0.17mmol)，加完氮氣保護下升溫至100℃反應3小時，反應完畢後反應液直接濃縮，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 4:1)得到標題化合物14D (1.1g，85%)。

LC-MS (ESI): m/z =745.3 [M+H] ⁺。

第五步：乙基2-(((3aR,4R,6R,6aS)-6-((4-((第三丁氧基羰基)(環戊基)氨基)-2-氯吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪)-7-基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲氧基)-2-(二乙氧基磷醯基)-3-甲氧基丙酸酯(14E)

ethyl2-(((3aR,4R,6R,6aS)-6-((4-((tert-butoxycarbonyl)(cyclopentyl)amino)-2-chloropyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methoxy)-2-(diethoxyphosphoryl)-3-methoxypropanoate(14E)

化合物14D (1.1g，1.48mmol)溶於乾燥四氫呋喃(15ml)中，氮氣置換三次，用乙醇乾冰體系降溫至-15℃，控溫滴加雙(三甲基矽基)氨基鈉(1.48ml，2.96mmol，2.0mol/L)，滴完-15℃反應20分鐘，控溫-15℃加入四丁基碘化銨(0.27g，0.74mmol)，再緩慢滴加溴甲基甲基醚(0.55g，4.44mmol)滴完保持-15℃反應3小時，反應完畢用飽和氯化銨水溶液淬滅反應，加入水後乙酸乙酯(100ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，乾燥濃縮後得到標題化合物14E (1.0g，85%)，粗產物未純化直接用於下一步反應。

LC-MS (ESI): m/z =789.3 [M+H] ⁺。

第六步：第三丁基(2-氯-7-(((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((2-(二乙氧基磷醯基)-1-羥基-3-甲氧基丙-2-基)氧基)甲基)- 2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-基)(環戊基)氨基甲酸酯(14F)

tert-butyl(2-chloro-7-(((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((2-(diethoxyphosphoryl)-1-hydroxy-3-methoxypropan-2-yl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methyl)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-yl)(cyclopentyl)carbamate(14F)

化合物14E (1.0g，1.27mmol)溶於乙醇(15ml)中，加入無水氯化鈣(0.28g，2.54mmol)，加完氮氣保護下降溫0~5℃，分批次加入硼氫化鈉(0.1g，2.54mmol)，加完自然回溫反應3小時，反應完畢後加入水淬滅反應，二氯甲烷(50ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，乾燥濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v)=1:5)得到標題化合物14F (0.5 g，52%)。

LC-MS (ESI): m/z =747.3 [M+H] ⁺。

第七步：(2-(((2R,3S,4R,5R)-5-((2-氯-4-(環戊基氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)-1-羥基-3-甲氧基丙烷-2-基)膦酸(化合物14)

化合物14F (0.069g，0.092mmol)溶於乙腈(2ml)中，加入三乙胺(0.28g，2.76mmol)，然後緩慢滴加化合物三甲基溴矽烷(0.28g，1.84mmol)，加完反應15小時，反應完畢後過濾，濾餅用少量乙腈洗滌，濾液濃縮後加入三氟乙酸與水的混合物(2 ml，1:1混合)，加完攪拌15小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱:SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50% c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.3min，得化合物14 (20mg，39%)。

LC-MS (ESI): m/z =549.1[M-H] ^-

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.35(d, 1H), 6.97 (d, 1H), 6.49 (d, 1H), 4.48-4.43 (m, 1H), 4.20-4.18 (m, 1H), 4.00-3.95 (m, 1H), 3.86-3.60 (m, 8H), 3.25 (s, 3H), 3.11-2.98 (m, 2H), 1.99-1.98 (m, 2H), 1.73-1.58 (m, 6H)。

實施例 15:

((((2R,3S,4R,5R)-5-((2-氯-4-(甲氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)膦酸(化合物15)

((((2R,3S,4R,5R)-5-((2-chloro-4-(methylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)methyl)phosphonic acid(化合物15)

第一步：(R)-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)(2-氯-4-(甲氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲醇(15A)

(R)-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)(2-chloro-4-(methylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methanol(15A)

化合物2C (0.50g，0.99mmol)溶於異丙醇(5ml)中，然後加入甲胺醇溶液(2.0ml，1.98mmol，1.0mol/L)，加完室溫反應3小時，反應完畢後反應液直接濃縮，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 3:1)得到標題化合物15A (0.40g，81%)。

LC-MS (ESI): m/z =499.2 [M+H] ⁺。

第二步：((3aR,4R,6R,6aS)-6-((2-氯-4-(甲氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧戊環-4-基)甲醇(15B)

((3aR,4R,6R,6aS)-6-((2-chloro-4-(methylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(15B)

化合物15A (0.40g，0.80mmol)溶於二氯甲烷(5ml)中，加入三乙基矽烷(0.80g，8.0mmol)，加完緩慢滴加三氟乙酸(0.5ml)，加完室溫下反應16小時。反應完畢將直接濃縮得產物溶於甲醇(5ml)和水(1ml)的混合溶劑中，再加入碳酸鉀(0.11g，0.80mmol)加完室溫下反應1小時。反應完畢用加水，乙酸乙酯(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮後得產物溶解於丙酮(5ml)中，加入催化量的對甲苯磺酸，再加入2,2-二甲氧基丙烷(0.42g，4.0mmol)，加完室溫下反應2小時，反應完畢濃縮掉丙酮，加入水(20ml)，二氯甲烷(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾,濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 1:1~1:5)得到標題化合物15B (0.21g，77%)。

LC-MS (ESI): m/z =369.1[M+H] ⁺。

第三步：二乙基((((3aR,4R,6R,6aS)-6-((2-氯-4-(甲氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧戊環-4-基)甲氧基)甲基)膦酸鹽(15C)

diethyl((((3aR,4R,6R,6aS)-6-((2-chloro-4-(methylamino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methoxy)methyl)phosphonate(15C)

化合物15B(0.21g，0.57mmol)和(二乙氧基磷醯基)2-硝基苯磺酸甲酯(0.3g，0.85mmol)溶於乾燥N,N-二甲基甲醯胺(5ml)中，氮氣置換三次，加入化合物第三丁醇鎂(0.29g，1.7mmol)，加完升溫至80℃反應3小時，反應完畢用冷卻至室溫後用飽和氯化銨溶液淬滅反應，加入水後乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 1:5)得到標題化合物15C(0.24g，81%)。

LC-MS (ESI): m/z =519.2[M+H] ⁺。

第四步：((((2R,3S,4R,5R)-5-((2-氯-4-(甲氨基)吡咯並[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)膦酸(化合物15)

化合物15C (0.24g，0.46mmol)溶於乙腈(5ml)中，加入三乙胺(1.4g，13.8mmol)，然後緩慢滴加三甲基溴矽烷(1.4g，9.2mmol)，加完反應15小時，反應完畢後過濾，濾餅用少量乙腈洗滌，濾液濃縮後加入4N鹽酸(1ml)，加完攪拌5小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法:1.儀器waters 2767製備液相色譜柱: SunFire@ Prep C18 (19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.5min得化合物15 (110mg，56%)。

LC-MS (ESI): m/z =475.1[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.57 (d, 1H), 6.85 (d, 1H), 6.49 (d, 1H), 4.23-4.18 (m, 1H), 3.91-3.82 (m,3H), 3.85-3.48 (m,4H), 3.13-2.96 (m,5H)。

實施例 16

((((3S,4R,5R)-5-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)氧基)甲基)膦酸(化合物16)

((((3S,4R,5R)-5-((6-chloro-4-(cyclopentylamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)oxy)methyl)phosphonic acid(化合物16)

第一步：(3aS,4S,6R,6aS)-6-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃並[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-羧酸(16A)

(3aS,4S,6R,6aS)-6-((6-chloro-4-(cyclopentylamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxole-4-carboxylic acid(16A)

將((3aR,4R,6R,6aS)-6-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(1G)(1.1 g，2.5 mmol)加入到乙腈(4 mL)和水(4 mL)中，再加入二乙醯氧基碘苯(1.84 g，5.5 mmol)和TEMPO(0.1 g，0.6 mmol)，室溫攪拌16小時，加水(50mL)和EA(50mL)萃取，EA相濃縮至乾，得到1.3 g 16A粗產物，直接用於下一步反應。

LCMS m/z =438.2 [M+1] ⁺。

第二步：(3aS,6R,6aS)-6-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)乙酸酯(16B)

(3aS,6R,6aS)-6-((6-chloro-4-(cyclopentylamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl acetate(16B)

將(3aS,4S,6R,6aS)-6-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃並[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-羧酸(16A)(1.3 g，3.0 mmol)加入到無水DMF中(12 mL)，再加入四醋酸鉛(3.6 g，9.0 mmol)，氮氣保護，光照條件下反應16小時，加水(50mL)和乙酸乙酯(50 mL)萃取，乙酸乙酯相濃縮至乾，柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯=2:1)得到1.0 g 16B(兩步收率=94%)。

LCMS m/z =452.2 [M+1] ⁺。

第三步：(3S,4R,5R)-5-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)四氫呋喃-2,3,4-三醇(16C)

(3S,4R,5R)-5-((6-chloro-4-(cyclopentylamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl)tetrahydrofuran-2,3,4-triol(16C)

向(3aS,6R,6aS)-6-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)乙酸酯(16B)(0.4 g，0.88 mmol)中加入90%的TFA水溶液(4 mL)，室溫攪拌3h(有原料和中間態未反應完)，氮氣吹乾TFA，加水溶解產物過逆相柱純化(酸法：0.5%TFA in H ₂O)，(ACN ：H ₂O=15%)，直接凍乾，得到80 mg 16C(收率=25%)。

LCMS m/z =370.2 [M+1] ⁺。

第四步：(3S,4S,5R)-5-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)四氫呋喃-2,3,4-三乙酸酯(16D)

(3S,4S,5R)-5-((6-chloro-4-(cyclopentylamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl)tetrahydrofuran-2,3,4-triyl triacetate(16D)

將(3S,4R,5R)-5-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)四氫呋喃-2,3,4-三醇(16J)(80 mg, 0.217 mmol)加入到DCM中(2 mL)，再加入乙酸酐(110 mg, 1.08 mmol)，三乙胺(175 mg, 1.736 mmol)和DMAP(13 mg，0.108 mmol)。室溫攪拌過夜，加水(10 mL)和DCM(10 mL)萃取，DCM相濃縮至乾，薄層得到40 mg 16D (收率=30%)。

LCMS m/z =496.2 [M+1] ⁺。

第五步：(2R,3S,4S)-2-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-((二乙氧基磷醯基)甲氧基)四氫呋喃-3,4-二乙酸酯(16E)

(2R,3S,4S)-2-((6-chloro-4-(cyclopentylamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl)-5-((diethoxyphosphoryl)methoxy)tetrahydrofuran-3,4-diyl diacetate(16E)

將羥甲基膦酸二乙酯(100 mg， 0.59 mmol)和糖精(11 mg，0.059 mmol)加入到雙(三甲基矽)胺(2 mL)中，氮氣保護，100℃攪拌8小時，冷卻後濃縮除去多餘的溶劑，再用甲苯帶兩次，氮氣保護下，加入超乾乙腈(2 mL)，(3S,4S,5R)-5-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)四氫呋喃-2,3,4-三乙酸酯(16D) (40 mg，0.08 mmol)，再滴加四氯化錫(307 mg，1.18 mmol)，室溫攪拌1小時。加入飽和碳酸鈉淬滅反應，乙酸乙酯萃取後濃縮至乾，薄層純化得到30 mg 16E (收率=60%)。

LCMS m/z =604.2 [M+1] ⁺。

第六步：((((3S,4S,5R)-3,4-二乙醯氧基-5-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)四氫呋喃-2-基)氧基)甲基)膦酸(16F)

((((3S,4S,5R)-3,4-diacetoxy-5-((6-chloro-4-(cyclopentylamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl)tetrahydrofuran-2-yl)oxy)methyl)phosphonic acid(16F)

將(2R,3S,4S)-2-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-((二乙氧基磷醯基)甲氧基)四氫呋喃-3,4-二乙酸酯(16E)(30 mg，0.05 mmol)加入到乙腈中(2 mL)，再加入三乙胺(750 mg，7.5 mmol)和三甲基溴矽烷(760 mg，5 mmol),室溫攪拌16小時，過濾，乙腈洗，低溫濃縮至乾，過逆相柱純化得到20 mg(16F) (收率=74%)。

LCMS m/z =548.2 [M+1] ⁺。

第七步：((((3S,4R,5R)-5-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)氧基)甲基)膦酸(化合物16)

((((3S,4R,5R)-5-((6-chloro-4-(cyclopentylamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)oxy)methyl)phosphonic acid (化合物16)

將((((3S,4S,5R)-3,4-二乙醯氧基-5-((6-氯-4-(環戊基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)四氫呋喃-2-基)氧基)甲基)膦酸(16F)(15 mg，0.027 mmol)加入到甲醇(2 mL)和水(0.5 mL)中，再加入碳酸鈉(29 mg，0.27 mmol)室溫攪拌1小時，用液相製備柱分離提純(液相製備條件：C18逆相製備柱，流動相為含0.1％三氟乙酸的去離子水(A)，含0.1％三氟乙酸的乙腈 (B)，梯度沖提，B含量=5%至70%，沖提時間15min，流速12 mL/min，柱溫：30℃，滯留時間：4.25min得到4 mg(化合物16)(收率=32%)。

¹HNMR (400 MHz, MeOD and DMSO-d ₆) δ 7.17 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 5.34-5.33 (d, 1H), 4.60-4.25 (m, 7H), 3.18-3.14 (m, 1H), 2.05-1.90 (m, 4H), 1.70-1.48 (m, 4H)。

LCMS m/z =464.1 [M+1] ⁺。

實施例 17

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4 -(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-苯並[d][1,2,3]三唑-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物17)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-yl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物17)

第一步：4,6-二氯-1H-苯並[d][1,2,3]三唑( 17A)

4,6-dichloro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole( 17A)

將(2-氨基-3,5-二氯苯)胺(5.0 g, 28.6 mmol)加入燒瓶中，加入乙酸(10 ml)和水(3 ml)。然後冷卻到0℃，接著滴加亞硝酸鈉溶液(2.9 g, 42.9 mmol，6 ml水)。滴完之後在室溫繼續攪拌2小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。調鹼至pH-10，過濾，濾液用二氯甲烷萃取，洗滌，濃縮，然後和濾餅合併在一起。得到標題化合物17A (4.8 g, 90.4%)。

LC-MS (ESI): m/z= 188.0、190.0 [M+H] ⁺。

第二步：(2R,3R,4R,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(4,6-二氯-1H-苯並[d][1,2,3]三唑-1-基)四氫呋喃-3,4-雙乙酸二酯( 17B)

(2R,3R,4R,5R)-2-(acetoxymethyl)-5-(4,6-dichloro-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diyl diacetate( 17B)

將四乙醯核糖(2.71 g, 2.10 mmol)加入燒瓶中，加熱到90 ^oC下攪拌10分鐘，然後加入17A (0.8 g, 4.26 mmol)和四氯化錫(0.005 ml, 0.043 mmol)，升溫至130 ^oC在減壓下攪拌20分鐘。然後冷卻，LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。加入二氯甲烷，直接過柱(PE:EA=1:0~4:1)，得到標題化合物17B (3.6g, 粗產物)。

LC-MS (ESI): m/z = 468.1 [M+Na] ⁺。

第三步：(2R,3R,4S,5R)-2-(4,6-二氯-1H-苯並[d][1,2,3]三唑-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇( 17C)

(2R,3R,4S,5R)-2-(4,6-dichloro-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol( 17C)

將17B (3.6 g, 8.07 mmol)和甲醇(80 ml)加入燒瓶中，再加入碳酸鉀(3.35 g, 24.21 mmol)，在室溫下反應1小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥濃縮直接得到標題化合物17C (630 mg, 24.4%)。

LC-MS (ESI): m/z = 320.1 [M+H] ⁺。

第四步：(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氯-4- (((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-苯並[d][1,2,3]三唑-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇( 17D)

(2R,3R,4S,5R)-2-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol( 17D)

將17C(100 mg, 0.31 mmol)和四氫呋喃(8 ml)加入燒瓶中，再加入(S)-1-(2-氟苯基)乙胺(86 mg, 0.62 mmol)、甲磺酸(2-二環己基膦-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)(2'-氨基-1,1'-聯苯基-2-基)鈀(II) (28 mg, 0.031 mmol)、2-(二環己基膦)-3,6-二甲氧基-2'-4'-6'-三-I-丙基-11'-聯苯 (17 mg, 0.031 mmol)和雙三甲基矽基胺基鋰 (1.0 M/THF, 0.29 ml, 1.55 mmol)。然後在氮氣保護、70 ^oC下反應4小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。冷卻、加入飽和氯化銨，乙酸乙酯萃取，洗滌，乾燥濃縮過柱(PE:EA=1：0~0：1)得到標題化合物17D (96 mg, 73.2%)。

LC-MS (ESI): m/z= 423.2 [M+H] ⁺。

第五步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-苯並[d][1,2,3]三唑-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物17)

將17D(92 mg, 0.22 mmol)和磷酸三甲酯(3 ml)加入燒瓶中，在冰浴下加入亞甲基雙(二氯化膦) (160 mg, 0.66 mmol)。讓溫度自然升至室溫下並攪拌反應3小時。LCMS 檢測原料反應完全，有產物生成。加入1ml水攪拌10分鐘，將反應液送去HPLC製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min，滯留時間：7.36 min。製備液濃縮凍乾得到標題化合物17 (10 mg, 7.8%)。

¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD-d ₄) δ 7.44 (t, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.17 – 7.10(m, 2H), 7.06 (s, 1H), 6.31 (s, 1H), 6.29 – 6.25(m, 1H), 5.11 (d, 1H), 5.00 (t, 1H), 4.37 (s, 2H), 4.25– 4.16 (m, 1H), 4.05 (s, 2H), 2.25 – 2.06(m, 2H), 1.64 (d, 3H)。

LC-MS (ESI): m/z= 581.2 [M+H] ⁺。

實施例 18 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(甲氧基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物18)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(methoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物18)

第一步: (2R,3R,4R,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫呋喃-3,4-二乙酸二酯(18B)

(2R,3R,4R,5R)-2-(acetoxymethyl)-5-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diyl diacetate(18B)

1,2,3,5-四乙醯-β-D-呋喃核糖(5.56g，17.46mmol)加熱到90℃融化後，加入18A(3.0g，15.87mmol)，和四氯化錫(0.21g，0.79mmol)，減壓下加熱到130℃，反應15分鐘，反應完畢後將反應液緩慢傾倒入冰水中淬滅，二氯甲烷(100ml×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v)= 5:1)得到標題化合物18B(4.5g，63%)。

LC-MS (ESI): m/z =447.1[M+H] ⁺。

第二步：(2R,3R,4R,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(6-氯-4-(甲氧基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫呋喃-3,4-二乙酸二酯(18C)

(2R,3R,4R,5R)-2-(acetoxymethyl)-5-(6-chloro-4-(methoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diyldiacetate(18C)

化合物18B (1.0g，2.24mmol)溶於二氯甲烷(15ml)中，然後加入甲氧基胺鹽酸鹽(0.37g，4.48mmol)，三乙胺(1.16g，8.96mmol)加完室溫反應3小時，反應完畢後反應液直接濃縮，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 2:1)得到標題化合物18C(0.70g，68.1%)。

LC-MS (ESI): m/z =458.1 [M+H] ⁺。

第三步：(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氯-4-(甲氧基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(18D)

(2R,3R,4S,5R)-2-(6-chloro-4-(methoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(18D)

化合物18C (0.70g，1.53mmol)溶於甲醇(2ml)中，加入氨甲醇溶液(10ml，7.0mol/L)，加完室溫下反應15小時，反應完畢直接濃縮反應液得化合物18D(0.42g，82.7%)，產物未純化直接下一步反應。

LC-MS (ESI): m/z =330.1[M-H] ^-。

第四步：((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氯-4-(甲氧基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(18E)

((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-chloro-4-(methoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(18E)

化合物18D (0.42g，1.27mmol)溶於丙酮(5ml)中，加入催化量的對甲苯磺酸，在加入2,2-二甲氧基丙烷(0.53g，5.08mmol)，加完升室溫下反應2小時，反應完畢濃縮掉丙酮，加入水(20ml)，二氯甲烷(50ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v)= 1:1)得到標題化合物18E(0.38g，80.5%)。

LC-MS (ESI): m/z =372.1 [M+H] ⁺。

第五步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(甲氧基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物18)

化合物18E (0.10g，0.27mmol)溶於磷酸三甲酯(3ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(0.20g，0.81mmol)溶於磷酸三甲酯(0.5ml)中緩慢滴加到反應液中，加完自然回溫反應15小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(1ml)，在加入4N鹽酸(1ml)，加完攪拌5小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間4.8min得化合物18(25mg，19%)。

LC-MS (ESI): m/z =488.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.20 (s, 1H), 6.07 (d, 1H), 4.56-4.54 (m, 1H), 4.31-4.29 (m, 1H), 4.13-4.05 (m,2H), 3.94-3.90 (m,1H), 3.82(s, 3H), 2.21-2.11 (m,2H)。

實施例 19:

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((2-氟苯基)磺醯氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物19)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((2-fluorophenyl)sulfonamido)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物19)

第一步：N-(6-氯-1-((2R,3R,4S,5R)-3,4-二羥基-5-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-4-基)-2-氟代苯磺醯胺(19B）

N-(6-chloro-1-((2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-yl)-2-fluorobenzenesulfonamide(19B）

化合物19A (0.70g，4.0 mmol)和中間體6C (0.90g，2.0 mmol)，碳酸銫(3.91g，12 mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(10ml)中，100℃反應16小時，反應完畢反應液加入水(50ml)淬滅反應，水相用二氯甲烷(150ml×2)萃取兩次，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(二氯甲烷：甲醇(v/v)= 10:1)得到化合物19B(0.15 g，16%)。

LC-MS (ESI): m/z =459.10[M+H] ⁺。

第二步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((2-氟苯基)磺醯氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物19)

化合物19B (0.05g，0.11mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(0.11g，0.44mmol)溶於磷酸三甲酯(0.5ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(1ml)，加完攪拌1小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間8.0min得化合物19 (25mg，37%)。

LC-MS (ESI): m/z =615.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.54 (s, 1H), 8.06 (dd, 1H), 7.79 (dt, 2H), 7.45 (dt, 2H), 6.92 (s, 1H), 6.14 (d, 1H), 4.56 (t, 1H), 4.32 – 4.26 (m, 1H), 4.12 – 4.03 (m, 3H), 3.88 (dd, 3H), 2.18 (t, 2H)。

實施例 20:

(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-4-羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物20)

(((((2S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-4-hydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物20)

第一步：(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶 -1-基)-4-羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物20)

化合物9 (0.050g，0.087 mmol)，溶於四氫呋喃(5ml)和磷酸三甲酯(2mL)中，室溫下滴加硼烷四氫呋喃絡合物的四氫呋喃溶液(1mL，1mmol/mL)，加完室溫反應3小時，然後加入過氧化氫(1mL)和3N氫氧化鈉(1mL)加完後室溫反應3小時，反應液濃縮後送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間8.0min得化合物20(15mg，29%)。

LC-MS (ESI): m/z =593.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.38 (s, 1H), 8.21 (d, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.32 (dd, 1H), 7.19 (dt, 2H), 6.00 (dd, 2H), 5.07 (s, 1H), 4.73 – 4.63 (m, 1H), 4.49 (t, 1H), 4.38 (d, 1H), 4.31 – 4.13 (m, 2H), 4.05 – 3.94 (m, 2H), 3.87 (s, 1H), 3.75 (d, 1H), 3.68 (s, 2H), 2.39 – 1.86 (m, 3H), 1.58 (d, 3H)。

實施例 21

(((((2R,3S,4R,5R)-4-氨基-5-(6-氯-4- (((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3 ,4-b]吡啶-1-基)-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物21)

(((((2R,3S,4R,5R)-4-amino-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物21)

將化合物13 (100 mg, 0.17 mmol)和甲醇(20 ml)，Pd/C (90 mg))加入燒瓶中，在室溫下氫氣還原反應20分鐘。LCMS 檢測原料反應完全，有產物生成。將反應液過濾，濃縮，然後送去HPLC製備；製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min，滯留時間：6.75 min。製備液濃縮凍乾得到標題化合物21，白色固體(40 mg, 40.6%)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.44 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.38 – 7.27 (m, 1H), 7.24 – 7.16 (m, 2H), 6.37 (d, 1H), 6.06 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.67 (t, 1H), 4.41 (t, 1H), 4.14 (s, 2H), 3.87 – 3.83 (m, 3H), 1.99 (t, 2H), 1.59 (d, 3H)。

LC-MS (ESI): m/z= 580.0 [M+H] ⁺。

實施例 22:

((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4 -(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-B] 吡啶-1-基)-2-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)膦酸(化合物22)

((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2-ethynyl-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)methyl)phosphonic acid (化合物22)

第一步: 二乙基((((3a'R,4'R,6'R,6α'S)-4' -(6-氯-4 -(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H- 吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-6'-乙炔基四氫螺[環戊烷-1,2'-呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環]-6'-基)甲氧基) 甲基)膦酸酯(22A)

diethyl((((3a'R,4'R,6'R,6a'S)-4'-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-6'-ethynyltetrahydrospiro[cyclopentane-1,2'-furo[3,4-d][1,3]dioxol]-6'-yl)methoxy)methyl)phosphonate (22A)

化合物6O(200 mg，0.39 mmol)和(二乙氧基磷醯基)2-硝基苯磺酸甲酯(410 mg，1.17 mmol)溶於乾燥N,N-二甲基甲醯胺(8 ml)中，氮氣置換三次，加入第三丁醇鎂(350 mg，1.95 mmol)，加完升溫至80℃反應48小時，反應完畢用冷卻至室溫後用飽和氯化銨溶液淬滅反應，然後用乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:1~1:10)得到化合物22A (55 mg，21.3%)。

LC-MS (ESI): m/z =663.1[M+H] ⁺。

第二步：((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4- (((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-B] 吡啶-1-基)-2-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)膦酸(化合物22)

化合物22A(55 mg，0.083 mmol)溶於乙腈(5 ml)中，加入三乙胺(250 mg，2.49 mmol)，然後緩慢滴加三甲基溴矽烷(250 mg，1.66 mmol)，加完反應2小時。反應完畢後過濾，濾餅用少量乙腈洗滌，濾液濃縮後加入二氯甲烷(6ml)，接著加入三氟乙酸(0.2 ml)和鹽酸甲醇溶液(1ml)，加完後室溫攪拌1小時，LCMS監控反應反應完畢將反應液濃縮，然後送去HPLC製備。製備HPLC分離方法:1.儀器waters 2767製備液相色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min，滯留時間：7.47 min。製備液凍乾得到化合物22 (12mg，22.4%)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.38 (s, 1H), 8.21 (d, 1H), 7.41 – 7.38 (m, 1H), 7.35 – 7.29 (m, 1H), 7.24 – 7.15 (m, 2H), 6.13 (d, 1H), 6.02 (s, 1H), 5.33 (d, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.76 (q, 1H), 4.26 (d, 1H), 3.73 (d, 1H), 3.63 – 3.59 (m, 3H), 3.50 (s, 1H), 1.58 (d, 3H)。

LC-MS (ESI): m/z= 541.1 [M+H] ⁺。

實施例 23

(氨基氧基)((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)次膦酸(化合物23)

(aminooxy)((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)methyl)phosphinic acid(化合物23)

第一步：((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶1-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(23A)

((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(23A)

將7A(2.0 g，4.73 mmol)溶於丙酮(20 ml)中，加入2,2-二甲氧基丙烷(2.46 g，23.65 mmol)和對甲苯磺酸(0.08g，0.47 mmol)，加完室溫反應2小時，反應完畢；反應液加入飽和碳酸氫鈉溶液(20 ml)，用二氯甲烷萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮過柱(PE:EA=1：0~1：1)得到標題化合物23A (2.1 g, 95.9%)。

LC-MS (ESI): m/z = 463.2 [M+H] ⁺。

第二步：((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲氧基)甲基)膦酸二乙酯(23B)

diethyl ((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methoxy)methyl)phosphonate (23B)

將23A(2.0 g，4.32 mmol)溶於乾燥N,N-二甲基甲醯胺(40 ml)中，加入氫化鈉(390 mg，12.96 mmol)並在室溫下反應10分鐘；接著加入對甲苯磺醯氧甲基膦酸二乙酯(4.18 g，12.96 mmol)加完升溫至50℃反應16小時，反應完畢用冷卻至室溫後用乙酸乙酯(100ml×3)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 5:1~1:10)得到化合物23B (2.0 g，75.5%)。

LC-MS (ESI): m/z =613.2 [M+H] ⁺。

第三步：((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-B]吡啶-1-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲氧基)甲基)膦酸(23C)

((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methoxy)methyl)phosphonic acid(23C)

將23B (0.5 g，0.82 mmol)溶於乙腈(10 ml)中，加入三乙胺(0.83 g，8.2 mmol)，然後緩慢滴加三甲基溴矽烷(1.62 ml，12.30 mmol)，加完反應2小時。反應完畢後濃縮得到目標化合物23C (2.1 g粗產物)。

LC-MS (ESI): m/z =557.2 [M+H] ⁺。

第四步：((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲氧基)甲基)膦醯二氯(23D)

((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methoxy)methyl)phosphonic dichloride(23D)

將23C(2.0 g, 粗產物)和2滴催化量的N,N-二甲基甲醯胺加入燒瓶中。在冰浴下滴加草醯氯(0.76 ml , 8.97 mmol)，讓溫度自然升至室溫下並攪拌反應1小時。將反應液濃縮得到目標化合物23D (2.5 g粗產物)。

第五步：(((第三丁氧基羰基)氨基)氧基)((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲氧基)甲基)次膦酸(23E)

(((tert-butoxycarbonyl)amino)oxy)((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methoxy)methyl)phosphinic acid(23E)

將23D (2.5 g,粗產物)和二氯甲烷(10 ml)，N-羥基氨基甲酸第三丁酯(220 mg, 1.64 mmol)加入燒瓶中，接著加入三乙胺(250 mg, 2.46 mmol)。在室溫下攪拌2小時。LCMS 檢測原料反應完全，有產物生成。將反應液緩慢倒入水中，二氯甲烷萃取，洗滌，乾燥，濃縮得到灰色目標產物23E(300 mg,粗產物)。

LC-MS (ESI): m/z =672.2 [M+H] ⁺。

第六步：(氨基氧基)((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)甲基)次膦酸(化合物23)

將23E(300 mg, 粗產物)和二氯甲烷(10 ml)加入燒瓶中，在室溫下下加入三氟乙酸(1 ml, 13.42mmol)和鹽酸甲醇溶液(1 ml)。在室溫下攪拌反應2小時。LCMS 檢測原料反應完全。將反應液濃縮乾再送去HPLC製備。製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.6 min。製備液濃縮凍乾得到目標化合物 (25 mg, 10.45%)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ 8.37 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.32 – 7.28(m, 1H), 7.24 – 7.14 (m, 2H), 6.03 (d, 1H), 6.00 (s, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.49 (t, 1H), 4.24 (d, 1H), 4.00 – 3.95 (m, 1H), 3.65 – 3.61 (m, 1H), 3.50 – 3.46 (m, 1H), 3.37 (s, 2H), 3.34 (s, 2H), 1.58 (d, 3H)。

實施例 24 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(甲氧基氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物24)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(methoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物24)

第一步：(2R,3R,4R,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(6-氯-4-(甲氧氨基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)四氫呋喃-3,4-二基二乙酸酯 (24A)

(2R,3R,4R,5R)-2-(acetoxymethyl)-5-(6-chloro-4-(methoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diyl diacetate (24A)

化合物6C (0.5g，1.12mmol)溶於N-甲基吡咯烷酮(5ml)中，然後加入甲氧基胺鹽酸鹽(0.18g，2.24mmol)，N,N-二異丙基乙胺(0.58g，4.48mmol)加完升溫至120℃反應3小時，反應完畢後反應液冷卻至室溫加入水(20ml)，乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 4:1)得到標題化合物24A (0.30g，58.9%)。

LC-MS (ESI): m/z =457.1 [M+H] ⁺。

第二步：(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氯-4-(甲氧氨基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇 (24B)

(2R,3R,4S,5R)-2-(6-chloro-4-(methoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol (24B)

化合物24A (0.30g，0.65mmol)溶於甲醇(2ml)中，加入氨甲醇溶液(3ml，7.0mol/L)，加完室溫下反應15小時，反應完畢直接濃縮得化合物24B (0.17g，80.1%)，產物未純化直接下一步反應。

LC-MS (ESI): m/z =329.1[M-H] ^-。

第三步：((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氯-4-(甲氧基氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧六環-4-基) 甲醇(24C)

((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-chloro-4-(methoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(24C)

化合物24B (0.17g，0.52mmol)溶於丙酮(5ml)中，加入催化量的對甲苯磺酸，在加入2,2-二甲氧基丙烷(0.26g，2.54mmol)，加完升室溫下反應2小時，反應完畢濃縮掉丙酮，加入水(100ml)，二氯甲烷(25ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:1)得到標題化合物24C(0.1g，52.6%)。

LC-MS (ESI): m/z =371.1 [M+H] ⁺。

第四步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(甲氧基氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物24)

化合物24C (0.10g，0.27mmol)溶於磷酸三甲酯(3ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(0.20g，0.81mmol)溶於磷酸三甲酯(0.5ml)中緩慢滴加到反應液中，加完自然回溫反應15小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(1ml)，在加入4N鹽酸(1ml)，加完攪拌5小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間5.2min得化合物24(21mg，16.1%)。

LC-MS (ESI): m/z =487.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ 11.04 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 6.14 (d, 1H), 4.58-4.55 (m, 1H), 4.31-4.28 (m, 1H), 4.12-4.04 (m, 2H), 3.93-3.89 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 2.23-2.13 (m, 2H)。

實施例 25 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((環戊氧基)氨基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物25)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((cyclopentyloxy)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物25)

第一步：2-(環戊氧基)異吲哚啉-1,3-二酮(25A)

2-(cyclopentyloxy)isoindoline-1,3-dione(25A)

將已知化合物2-羥基異吲哚啉-1,3-二酮(3.4 g，20.8 mmol)和三苯基膦(6.55 g，25.0 mmol)加入到超乾四氫呋喃(34 mL)中，氮氣保護下，降溫至0℃，滴加偶氮二甲酸二異丙酯(5.05 g，25.0 mmol)，滴畢，攪拌30min，再滴加環戊醇(2.0 g，20.8 mmol)室溫攪拌16小時，加水(50mL)和EA(50mL)萃取，EA相濃縮至乾，柱層析純化，得到1.4 g 25A (收率=29%)。

LCMS m/z =242.1 [M+1] ⁺。

第二步：鄰環戊基羥胺(25B)

O-cyclopentylhydroxylamine(25B)

將2-(環戊氧基)異吲哚啉-1,3-二酮(25A)(1.4 g，6.0 mmol)加入到二氯甲烷中(14 mL)，再加入水合肼(0.73 g，12 mmol)，室溫攪拌16h，大量白色固體析出，過濾，二氯甲烷洗濾餅，母液加水攪拌後分液，向二氯甲烷相加入10 ml氯化氫/1,4-二氧六環溶液，攪拌5分鐘，濃縮至乾，得到0.8 g 25B (收率=96%)。

LCMS m/z =102.2 [M+1] ⁺。

第三步：(2R,3R,4R,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(6-氯-4-((環戊氧基)氨基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫呋喃-3,4-二乙酸酯(25C)

(2R,3R,4R,5R)-2-(acetoxymethyl)-5-(6-chloro-4-((cyclopentyloxy)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diyl diacetate(25C)

將18B (0.5 g，1.11 mmol)和鄰環戊基羥胺鹽酸鹽(0.14g， 1.33 mmol)加入到二氯甲烷中，再加入三乙胺(0.5 g， 4.44 mmol)，室溫攪拌16h，加水(10 mL)和二氯甲烷(10 mL)萃取，二氯甲烷相濃縮至乾，柱層析純化(PE:EA=2:1)得到0.3g 25C (收率=70%)。

LCMS m/z =512.2 [M+1] ⁺。

第四步：(2R,3R,4S,5R)-2-)6-氯-4-((環戊氧基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(25D)

(2R,3R,4S,5R)-2-(6-chloro-4-((cyclopentyloxy)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(25D)

將化合物25C (0.3 g, 0.58 mmol)加入到氨氣/甲醇溶液中(3mL)，室溫攪拌過夜，直接濃縮至乾，得到220 mg 25D (收率=100%)。

LCMS m/z =386.2 [M+1] ⁺。

第五步：((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氯-4-((環戊氧基)氨基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(25E)

((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-chloro-4-((cyclopentyloxy)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(25E)

將化合物25D (220 mg， 0.57 mmol)和2,2-二甲氧基丙烷(307 mg，2.85 mmol)加入到丙酮(4.4 mL)中，再加入催化量的對甲苯磺酸，室溫攪拌3小時。加水(20 mL)和乙酸乙酯(20 mL)萃取，乙酸乙酯萃取後濃縮至乾，柱層析純化(PE:EA=2:1)得到200 mg 25E (收率=82%)。

LCMS m/z =426.2 [M+1] ⁺。

第六步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((環戊氧基)氨基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物25)

將化合物25E (200 mg，0.47 mmol)加入到磷酸三甲酯中(2 mL)，降溫至0℃，再加入亞甲基二(二氯膦)(106 mg，1.41 mmol)，室溫攪拌2小時，向反應體系中加入1mL 6N鹽酸溶液，攪拌1h，用液相製備柱分離提純(液相製備條件：C18逆相製備柱，流動相為含0.1％三氟乙酸的去離子水(A)，含0.1％三氟乙酸的乙腈 (B)，梯度沖提，B含量=5%~70%，沖提時間15min，流速12 mL/min，柱溫：30℃，滯留時間：4.56 min，得到100 mg(化合物25)(收率=39%)。

¹HNMR (400 MHz, DMSO- d6) δ 8.08 (s, 1H), 7.00-5.50 (m, 7H), 4.56-4.50 (m, 2H), 4.30-4.28 (t, 1H), 4.14-4.06 (m, 2H), 3.95-3.90 (m, 1H), 2.24-2.14 (t, 2H), 1.95-1.88 (m, 2H), 1.81-1.70 (m, 4H), 1.58-1.54 (m, 2H)。

LCMS m/z =544.1 [M+1] ⁺。

實施例 26 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(異丙氧基氨基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3,4-二羥四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物26)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(isopropoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物26)

第一步：2-異丙基氧代異吲哚啉-1,3-二酮(26A)

2-isopropoxyisoindoline-1,3-dione(26A)

將2-羥基異吲哚啉-1,3-二酮(1g，6.13mmol)、異丙醇(0.47ml，6.13mmol)和三苯基磷(1.93g，7.36mmol)溶於無水四氫呋喃(40ml)中，冰水浴中攪拌，滴加偶氮二甲酸二異丙酯(1.487g，7.36mmol)，滴加完成後移除冰水浴，室溫攪拌過夜，反應結束後濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA：PE=0%~80%)，得產物26A(1.12g，89.0%)，無色油狀物。

¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7.87 (s, 4H), 4.48-4.43 (m, 1H), 1.30 (d, 6H)。

第二步：氧代異丙基羥胺鹽酸鹽(26B)

O-isopropylhydroxylamine hydrochloride(26B)

將化合物26A (1.12g，5.46mmol)溶於二氯甲烷(10ml)中，加入80%水合肼溶液(0.66ml，10.93mmol)，室溫攪拌過夜，反應結束後過濾，濾液用水(10ml)和飽和食鹽水(10ml)洗滌，濾液中加入4M鹽酸二氧六環溶液(1.4ml)，濃縮，得化合物26B (320mg，52.8%)，淡黃色固體。

¹H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ 11.00 (s, 3H), 4.36 (s, 1H), 1.23 (s, 6H)。

第三步：(2R,3R,4R,5R)-2-(乙醯氧甲基)-5-(6-氯-4-(異丙氧基胺)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)四氫呋喃-3,4-二基二乙酸酯(26C)

(2R,3R,4R,5R)-2-(acetoxymethyl)-5-(6-chloro-4-(isopropoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diyl diacetate(26C)

將化合物6C (500mg，1.12mmol)、化合物26B (187mg，1.68mmol)和N,N-二異丙基乙胺(434mg，3.36mmol)溶於N-甲基吡咯烷酮(8ml)中，130℃回流反應3h，反應結束後，加入水(10ml)和乙酸乙酯(20ml)，分離有機相，水相用乙酸乙酯(10ml×2)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：乙酸乙酯:石油醚=0%~50%)，得化合物26C (253mg，46.6%)，白色固體。

LCMS m/z =485.1 [M+1] ⁺。

第四步：(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氯-4-(異丙氧基胺)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(26D)

(2R,3R,4S,5R)-2-(6-chloro-4-(isopropoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(26D)

將化合物26C (253mg，1.523mmol)和碳酸鉀(220mg，1.57mmol)溶於甲醇(5ml)中，室溫攪拌1h，反應結束後，用1M鹽酸調節pH至6~7，用乙酸乙酯(10ml×4)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得化合物26D (184mg，98.6%)，淡黃色固體。

LCMS m/z =359.2 [M+1] ⁺。

第五步：((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氯-4-(異丙氧基胺)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(26E)

((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-chloro-4-(isopropoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(26E)

將化合物26D (184mg，0.514mmol)、2,2-二甲氧基丙烷(267mg，2.57mmol)和對甲苯磺酸(10mg，0.0514mmol)溶於丙酮(5ml)中，室溫攪拌過夜，反應結束後，加入飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至6~7，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：乙酸乙酯:石油醚=0%~50%)，得化合物26E(126mg，61.9%)。

LCMS m/z =399.2 [M+1] ⁺。

第六步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(異丙氧基胺)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)膦酸(化合物26)

將化合物26E (126mg，0.317mmol)溶於磷酸三甲酯(1ml)中，0℃冰水浴中攪拌，將亞甲基雙氯化磷(237mg，0.950mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中滴加入反應瓶中，滴加完成後升至室溫攪拌過夜，加入6M鹽酸(3ml)，室溫攪拌6h，反應結束後濃縮，所得殘留物用液相製備柱分離提純，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間10.0min得化合物26(20mg，12.9%)，淡黃色固體。

LCMS m/z =517.0 [M+1] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.84 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 6.13 (d, 1H), 4.57 (t, 1H), 4.29 (t, 1H), 4.08 (dt, 3H), 3.88 (d, 2H), 2.16 (t, 2H), 1.27 (d, 6H)。

實施例 27 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(異丙氧基氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物27)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(isopropoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物27)

第一步：(2R,3R,4R,5R)-2-(乙醯氧甲基)-5-(6-氯-4-(異丙氧基胺)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫呋喃-3,4-二基乙酸酯(27A)

(2R,3R,4R,5R)-2-(acetoxymethyl)-5-(6-chloro-4-(isopropoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diyl diacetate(27A)

將底物18B (600mg，1.34mmol)，化合物26B (223mg，2.01mmol)和二異丙基乙基胺(519mg，4.03mmol)溶於異丙醇(14ml)中，40℃回流5h，反應結束後濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)，得產物27A(527mg，80.9%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.14 (s, 1H), 6.52 (d, 1H), 5.94 (dd, 1H), 5.78 (t, 1H), 4.47 – 4.38 (m, 2H), 4.32 – 4.14 (m, 2H), 2.16 – 2.05 (m, 9H), 1.42 – 1.33 (m, 6H)。

第二步：(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氯-4-(異丙氧基胺)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(27B)

(2R,3R,4S,5R)-2-(6-chloro-4-(isopropoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(27B)

將化合物27A (523mg，1.08mmol)溶於7M氨甲醇溶液(10ml)中，室溫攪拌5.5h，反應結束後，濃縮，得化合物27B (380mg，100%)，黃色油狀物。

LCMS m/z =360.1[M+1] ⁺。

第三步：((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氯-4-(異丙基氧胺)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(27C)

((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-chloro-4-(isopropoxyamino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol

將化合物27B (380mg，1.08mmol)和2,2-二甲氧基丙烷(550mg，5.40mmol)和對甲苯磺酸(20mg，0.108mmol)溶於丙酮(10ml)中，室溫攪拌過夜，反應結束後，加入飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至6~7，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)，得產物27C(323mg，76.9%)。

LCMS m/z =400.1 [M+1] ⁺。

第四步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(異丙基氧基胺)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸(化合物27)

將化合物27C (323mg，0.809mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中，0℃冰水浴中攪拌，將亞甲基雙氯化磷(607mg，2.43mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中滴加入反應瓶中，滴加完成後升至室溫攪拌過夜，加入6M鹽酸(3ml)，室溫攪拌6h，反應結束後濃縮，所得殘留物用液相製備柱分離提純，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間12.0min得化合物27(162mg，38.6%)。

LCMS m/z =518.1 [M+1] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.17 (s, 1H), 6.07 (d, 1H), 4.55 (t, 1H), 4.29 (t, 1H), 4.19 (dq, 1H), 4.10 (ddd, 2H), 3.96 – 3.87 (m, 1H), 2.19 (t, 2H), 1.27 (t, 6H)。

實施例 28:

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊烷[c]吡咯-2(1H)-yl)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)膦酸 (化合物28)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物28)

第一步：((2S,4R)-4-乙醯氧基-5-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯 (28B)

((2S,4R)-4-acetoxy-5-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (28B)

化合物4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶(3.68 g，19.46 mmol)溶於六甲基二矽氮烷 (50 ml)中，添加硫酸銨(30 mg，0.2 mmol)，回流3小時，減壓濃縮除去六甲基二矽氮烷，粗產物溶於乙腈(50 ml)，添加28A(5 g，14.97 mmol)，冷卻至0 ℃，滴加三氟甲磺酸三甲基矽酯(333 mg，14.97 mmol)室溫攪拌18 h，反應結束加乙酸乙酯(50 ml)稀釋，用碳酸氫鈉水溶液(20 ml)和飽和食鹽水(20 ml)洗滌，有機相無水硫酸鈉乾燥，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)，得產物(4.5 g，65%)。

第二步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯 (28C)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (28C)

化合物28B (4.5 g，9.72 mmol)溶於甲醇(50 ml)中，加入三乙胺(2.45 g，24.3 mmol)和順式-7-氮雜雙環[3.3.0]辛烷(1.29 g，11.66 mmol)加完室溫下反應3小時，反應完畢減壓濃縮後得28C和31A混合物。

LC-MS (ESI): m/z =538.2 [M+1] ⁺。

化合物28C和31A的純化

取上述混合物用於純化，分離後得到化合物28C (滯留時間：0.794s，1.23 g)，化合物31A (滯留時間：1.366 s，0.23 g)。

純化條件：

儀器: Waters 150 MGM；柱: DAICEL CHIRALPAK AD；

流動相: A for CO ₂and B for EtOH (0.1%NH ₃•H ₂O)；梯度: B 40%；流量: 120 mL /min；背壓: 100 bar；

柱溫: 35℃；波長: 220 nm；週期: 13min；

第三步：(2R,3R,5S)-2-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡唑-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇 (28D)

(2R,3R,5S)-2-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol(28D)

化合物28C (300 mg，0.56 mmol)溶於甲醇(3 ml)中，加入碳酸鉀(309 mg，2.24 mmol)，加完室溫下反應2小時，加入水(3ml)淬滅反應，乙酸乙酯(5 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)，得產物28D (295 mg，98%)。

LC-MS (ESI): m/z =392.1 [M+1] ⁺。

第四步：(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (28E)

(((((2S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (28E)

化合物28D (295 mg，0.57 mmol)溶於磷酸三甲酯(3ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(570 mg，2.28 mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(2 ml)，加完攪拌1小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.0min得化合物28E(100 mg，32%)。

LC-MS (ESI): m/z =550.1[M-H] ^-。

第五步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊烷[c]吡咯-2(1H)-yl)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)膦酸 (化合物28)

化合物28E (100 mg，0.18 mmol)，N-甲基嗎啉氧化物(63 mg，0.54 mmol)溶於丙酮(3ml)和水(1mL)中，室溫下加入鋨酸鉀(VI)二水合物(6 mg，0.018 mmol)，加完室溫反應16小時，反應完畢加亞硫酸鈉淬滅反應，反應液濃縮後送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間6.5min得化合物28(20 mg，20%)。

LC-MS (ESI): m/z =584.0 [M+1] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ 8.07 (d, 1H), 6.12 (d, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.32 (s, 1H), 4.15 (s, 2H), 4.02 – 3.63 (m, 4H), 3.62 – 3.46 (m, 1H), 3.39 (s, 1H), 2.87 (s, 1H), 2.76 (s, 1H), 2.30 (t, 2H), 1.93 – 1.80 (m, 2H), 1.78 – 1.69 (m, 1H), 1.64 (m, 1H), 1.57 – 1.36 (m, 2H)。

實施例 29:

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-yl)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物29)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物29)

第一步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡咯[3,4-b]吡啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸酯(29A)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate(29A)

化合物9F (1.2g，2.6mmol)溶於異丙醇(20ml)中，加入三乙胺(1.05g，10.4mmol)和順式-7-氮雜雙環[3.3.0]辛烷鹽酸鹽(0.58g，5.2mmol)加完80℃下反應3小時，反應完畢減壓濃縮後粗產物29A直接用於下一步反應。

LC-MS (ESI): m/z =537.3[M+H] ⁺。

第二步：(2R,3R,5S)-2-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇 (29B)

(2R,3R,5S)-2-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (29B)

粗產物29A溶於甲醇(20ml)中，加入碳酸鉀(1.49g，10.8mmol)，加完室溫下反應2小時，加入水(20ml)析出固體，過濾，濾餅用水(2mL)洗滌一次，濾餅用甲苯帶水減壓旋乾得到標題化合物29B (0.65g，兩步收率64%)。

LC-MS (ESI): m/z =391.1[M+H] ⁺。

第三步：(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (29C)

(((((2S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (29C)

化合物29B (0.35g，0.9mmol)溶於磷酸三甲酯(3ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(0.67g，2.7mmol)溶於磷酸三甲酯(1.5ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(1ml)，加完攪拌1小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.0min得化合物29C(80mg，16%)。

LC-MS (ESI): m/z =547.0[M-H] ^-。

第四步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-yl)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物29)

化合物29C (0.080g，0.15 mmol)，N-甲基嗎啉氧化物(0.053g，0.45 mmol)溶於丙酮(3ml)和水(1mL)中，室溫下加入鋨酸鉀(VI)二水合物(0.006g，0.015mmol)，加完室溫反應16小時，反應完畢加亞硫酸鈉淬滅反應，反應液濃縮後送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間6.5min得化合物29(45mg，51%)。

LC-MS (ESI): m/z =581.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.24 (s, 1H), 6.33 (d, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.92 (d, 1H), 4.44 – 4.20 (m, 3H), 3.83 (q, 4H), 3.48 (s, 2H), 2.90 (s, 2H), 2.58-2.34 (m, 2H), 2.01-1.82 (m, 3H), 1.78 – 1.56 (m, 3H)。

實施例 30 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-((苄氧基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4 -二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物30)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-((benzyloxy)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物30)

第一步：(2R,3R,4R,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(4-((苄氧基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫呋喃- 3,4-二乙酸二酯(30A)

(2R,3R,4R,5R)-2-(acetoxymethyl)-5-(4-((benzyloxy)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diyl diacetate(30A)

將化合物18B (600 mg，1.34 mmol)溶於二氯甲烷(6 ml)中，添加鄰苄基羥胺(248 mg，2.01 mmol)和三乙胺(135 mg，2.01 mmol)室溫攪拌2 h，反應結束後濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)，得產物30A(548 mg，77%)。

LCMS m/z =534.2 [M+1] ⁺。

第二步：(2R,3R,4S,5R)-2-(4-((苄氧基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃- 3,4-二醇(30B)

(2R,3R,4S,5R)-2-(4-((benzyloxy)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(30B)

將化合物30A(548 mg，1.03mmol)溶於甲醇(6 ml)中，添加碳酸鉀(426 mg，3.09 mmol)室溫攪拌2 h，反應結束後，濃縮，得化合物30B(400 mg，95%)。

LCMS m/z =408.1 [M+1] ⁺。

第三步：((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((苄氧基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[ 3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)甲醇(30C)

((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((benzyloxy)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(30C)

將化合物30B (167 mg，0.41 mmol)和2,2-二甲氧基丙烷(213 mg，2.05 mmol)和對甲苯磺酸(7.79 mg，0.041 mmol)溶於丙酮(2 ml)中，室溫攪拌過夜，反應結束後，加入飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至6~7，濃縮，所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)，得產物30C(137 mg，75%)。

LCMS m/z =448.2 [M+1] ⁺。

第四步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-((苄氧基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物30)

將化合物30C (137 mg，0.31 mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中，0℃冰水浴中攪拌，將亞甲基雙氯化磷(77.5 mg，0.93 mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中滴加入反應瓶中，滴加完成後升至室溫攪拌過夜，加入6M鹽酸(3 ml)，室溫攪拌6 h，反應結束後濃縮，所得殘留物用液相製備柱分離提純，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間12.0min，得產物30(58 mg，33%)。

LCMS m/z =566.20 [M+1] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.10 (s, 1H), 7.49 (d, 2H), 7.41 (m, 3H), 6.05 (m, 1H), 5.02 (d, 2H), 4.54 (s, 1H), 4.29 (s, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.88 (s, 1H), 2.15 (t, 2H)。

實施例 31 ：

(((((2R,3S,4R,5S)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物31)

(((((2R,3S,4R,5S)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物31)

第一步：(2S,3R,5S)-2-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇 (31B)

(2S,3R,5S)-2-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (31B)

化合物31A (300 mg，0.56 mmol)溶於甲醇(3 ml)中，加入碳酸鉀(309 mg，2.24 mmol)，加完室溫下反應2小時，加入水(3ml)淬滅反應，乙酸乙酯(5 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)，得產物31B(290 mg，98%)。

LC-MS (ESI): m/z =392.1 [M+1] ⁺。

第二步：(((((2S,4R,5S)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (31C)

(((((2S,4R,5S)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (31C)

化合物31B (290 mg，0.57 mmol)溶於磷酸三甲酯(3ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(570 mg，2.28 mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(2 ml)，加完攪拌1小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.0min得化合物31C(80 mg，26%)。

LC-MS (ESI): m/z =550.1[M+H] ^-。

第三步：(((((2R,3S,4R,5S)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物31)

化合物31C (80 mg，0.15 mmol)，N-甲基嗎啉氧化物(53 mg，0.45 mmol)溶於丙酮(3ml)和水(1mL)中，室溫下加入鋨酸鉀(VI)二水合物(0.006g，0.015)，加完室溫反應16小時，反應完畢加亞硫酸鈉淬滅反應，反應液濃縮後送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間6.5min，得化合物31(20 mg，20%)。

LC-MS (ESI): m/z =584.0 [M+1] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O): 8.12 (d, 1H), 6.18 (d, 1H), 4.98-4.95 (m, 1H), 4.52-4.50 (m, 1H), 4.26-4.15 (m, 2H), 3.94-3.75 (m, 4H), 3.58-3.46 (m, 2H), 2.90-2.77 (m, 2H), 2.41-2.31 (m, 2H), 1.91-1.48 (m, 6H)。

實施例 32:

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-yl)-3-(二氟甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物32)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-(difluoromethyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物32)

第一步：(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-6-(二氟(苯磺醯基)甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3] 二氧戊環-6-醇(32B)

(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-6-(difluoro(phenylsulfonyl)methyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol (32B)

將32A (20 g，46.95 mmol)溶於乾燥的四氫呋喃(200 ml)中，加入[(二氟甲基)磺醯基]苯(13.52 g，70.43 mmol)和六甲基磷醯三胺(20 ml)，置換氮氣三次，將反應體系冷卻至-78 ℃，緩慢滴加雙三甲基矽基胺基鋰(80 ml，80 mmol)，在-78 ℃下反應2 h，反應結束用飽和氯化銨溶液(100 ml)淬滅，乙酸乙酯(3×100 ml)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~30%)得化合物32B (21.56 g，75%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) :7.93 (d, 2H), 7.77 – 7.70 (m, 1H), 7.66 – 7.62 (m, 4H), 7.61 – 7.55 (m, 2H), 7.41 – 7.37 (m, 3H), 7.37 – 7.31 (m, 3H), 6.06 (d, 1H), 5.23 (d, 1H), 4.36 (dd, 1H), 4.00 (s, 1H), 3.97 – 3.88 (m, 1H), 3.50 (s, 1H), 1.61 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.01 (s, 9H)。

¹⁹F NMR (376 MHz, CDCl ₃): -101.22, -101.87, -103.37, -104.03。

第二步：(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-6-(二氟甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3] 二氧戊環-6 –醇(32C)

(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-6-(difluoromethyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol (32C)

將32B (21.56 g，34.84 mmol)溶於乾燥的六甲基磷醯三胺(20 ml)，置換氮氣三次，將反應體系置於冰浴中冷卻，加入溶於四氫呋喃中的碘化釤(0.1 M)(174.2 mmol)，轉移至室溫反應10 min，反應結束用飽和氯化銨水溶液(500 ml)淬滅，乙酸乙酯(3×500 ml)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~30%)得化合物32C(13.21 g，78%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl3) :7.68 (m, 4H), 7.46 – 7.35 (m, 6H), 6.19 – 5.90 (m, 1H), 5.92 (d, 1H), 4.65 (d, 1H), 4.09 (dd, 5.1, 1H), 3.94 (d, 2H), 3.03 (s, 1H), 1.58 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 1.06 (s, 9H)。

19F NMR (376 MHz, CDCl ₃): -127.34, -128.12, -129.08, -129.86。

第三步：(3aR,5R,6R,6aR)-6-(二氟甲基)-5-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3] 二氧雜環-6-醇 (32D)

(3aR,5R,6R,6aR)-6-(difluoromethyl)-5-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol(32D)

將化合物32C (13.21 g，27.64 mmol)溶於四氫呋喃(130 ml)中，加入四丁基氟化銨(9.40 g，35.93 mmol)，室溫下反應1小時，反應完畢向反應液加入水(50 ml)淬滅反應，水相用乙酸乙酯(100 ml×3)萃取，合併有機層，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮得化合物32D (13.21 g)粗產物，直接用於下一步。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) :6.14 – 5.84 (m, 1H), 5.90 (d, 1H), 4.62 (d, 1H), 4.06 (dd, 1H), 4.00 (dd, 1H), 3.93 (dd, 1H), 3.03 (s, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.41 (s, 3H)。

¹⁹F NMR (376 MHz, CDCl ₃) : -127.56, -128.34, -128.63, -129.41。

第四步：((3aR,5R,6R,6aR)-6-(二氟甲基)-6-羥基-2,2-二甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-5-基)苯甲酸甲酯(32E)

((3aR,5R,6R,6aR)-6-(difluoromethyl)-6-hydroxy-2,2-dimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (32E)

上步化合物32D粗產物(13.21g，27.64 mmol)和三乙胺(8.39 g，82.92 mmol)溶於二氯甲烷(130 ml)中，加入苯甲醯氯(4.66 g，33.17 mmol), 加完室溫反應2小時，反應完畢反應液加入水(50 ml)淬滅反應，水相用二氯甲烷(80ml×3)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~20%)得到化合物32E(8 g，兩步收率84%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃): 8.06 (m, 2H), 7.60 – 7.54 (m, 1H), 7.44 (m, 2H), 6.10 – 5.81 (m, 1H), 5.95 (t, 1H), 4.71 (m, 1H), 4.65 (d, 1H), 4.57 (m, 1H), 4.36 – 4.28 (m, 1H), 3.19 (s, 1H), 1.62 (s, 3H), 1.42 (s, 3H)。

¹⁹F NMR (376 MHz, CDCl ₃): -127.54, -128.32, -128.88, -129.67。

第五步：((2R,3S,4R,5S)-3-(二氟甲基)-3,4,5-三羥基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯 (32F)

((2R,3S,4R,5S)-3-(difluoromethyl)-3,4,5-trihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (32F)

將化合物32E(8 g，23.23 mmol) 加入到100 mL反應瓶中，加入三氟乙酸(9 ml)/水(1 ml)，在室溫下反應1 h，反應結束用飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH=7，水相用乙酸乙酯萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)得到化合物32F(6.72 g，95%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl3) :8.08 – 7.98 (m, 2H), 7.59 (t, 1H), 7.46 (t, 2H), 5.96 (t, 1H), 5.54 (d, 1H), 4.65 (t, 1H), 4.55 – 4.46 (m, 2H), 4.35 (d, 1H)。

¹⁹F NMR (376 MHz, CDCl3): -127.38, -128.16, -128.69, -129.47。

第六步：(3R,4R,5R)-5-((苯甲醯氧基)甲基)-4-(二氟甲基)-4-羥基四氫呋喃-2,3-二乙酸二酯(32G)

(3R,4R,5R)-5-((benzoyloxy)methyl)-4-(difluoromethyl)-4-hydroxytetrahydrofuran-2,3-diyl diacetate (32G)

將化合物32F(1.0 g，3.29 mmol)溶於吡啶(10 ml)中，冰浴下降溫0℃，加入乙酸酐(840 mg，8.23 mmol)和4-二甲氨基吡啶(40 mg，0.33 mmol)，轉移至室溫反應3 h，反應結束加乙酸乙酯(50 ml)稀釋，用0.1 N的鹽酸(100 ml)洗去吡啶，減壓濃縮後快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~30%)得化合物32G (1.2 g，94%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃): 8.10 (d, 2H), 7.60 (t, 1H), 7.48 (t, 2H), 6.24 (d, 1H), 6.10 (t, 1H), 5.69 (d, 1H), 4.78 (dd, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.39 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 1.93 (s, 3H)。

¹⁹F NMR (376 MHz, CDCl ₃): -126.61, -127.40, -129.45, -130.23。

第七步：((2R,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3-(二氟甲基)-3-羥基四氫呋喃 -2-基)甲基苯甲酸酯(32H)

((2R,3R,4R,5R)-4-acetoxy-5-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-(difluoromethyl)-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (32H)

將化合物32G (0.6 g，1.55 mmol)加入到25 mL反應瓶中，加熱到90℃後加入4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶(0.38 g，2.02 mmol)，加完後滴加四氯化錫兩滴，然後升溫至130℃減壓反應三十分鐘，冷卻至室溫，殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 10:1- 5:1)得到標題化合物32H(0.6 g，75%)。

LC-MS (ESI): m/z =474.1 [M-42+H] ⁺。

第八步：((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡咯[3,4-b]吡啶-1-基)-3-(二氟甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯 (32I)

((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-(difluoromethyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (32I)

化合物32H(600 mg，1.17 mmol)溶於異丙醇(6 ml)中，加入三乙胺(355 mg，3.51 mmol)和順式-7-氮雜雙環[3.3.0]辛烷鹽酸鹽(195 mg，1.76 mmol)，在80 ℃的油浴鍋中反應3 h，反應完畢減壓濃縮後快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)得化合物32I (300 mg，47%)。

LC-MS (ESI): m/z =549.2 [M+H] ⁺。

第九步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-3-(二氟甲基)-2-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(32J)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-(difluoromethyl)-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol (32J)

化合物32I(300 mg，0.55 mmol)溶於甲醇(3 ml)中，加入碳酸鉀(228 mg，1.65 mmol)，加完室溫下反應2 h，加入水(3 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(5 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)，得產物32J(200 mg，82%)。

LC-MS (ESI): m/z =445.2 [M+H] ⁺。

第十步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-yl)-3-(二氟甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物32)

化合物32J(200 mg，0.45 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(338 mg，1.35 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3 h，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(2 ml)，加完攪拌1 h，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20 min。滯留時間7.0 min得化合物32 (162 mg，60%)。

LC-MS (ESI): m/z =603.2[M+H] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O): 8.21 (s, 1H), 6.51 – 6.08 (t, 1H), 6.17 (d, 1H), 5.24 (d, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.10 (s, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.81 (s, 2H), 2.24 (m, 2H), 1.67 (m, 6H)。

¹⁹F NMR (376 MHz, D ₂O): -125.50, -126.30, -129.85, -130.62

實施例 33 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡咯[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-(二氟甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物33)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-(difluoromethyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物33)

第一步：6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶(33A)

6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidine(33A)

4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-C]嘧啶(2.0g，10.58mmol)溶於二氯甲烷(30ml)中，然後加入順式-7-氮雜雙環[3.3.0]辛烷鹽酸鹽(1.88g，12.72mmol)，三乙胺(3.22g，31.74mmol)加完室溫反應1小時，反應完畢後加水，二氯甲烷(50ml×2)萃取兩次，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後用二氯甲烷石油醚結晶得化合物33A(2.4g，86%)。

LC-MS (ESI): m/z =264.1 [M+H] ⁺。

第二步：((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡咯[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-(二氟甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯 (33B)

((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-(difluoromethyl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (33B)

氮氣保護下，化合物32F(1.0g，3.29mmol)溶於無水乙腈(20ml)中，降溫至0℃，偶氮二甲醯二哌啶(1.24g，4.94mmol)溶於無水乙腈(5ml)中，控溫0℃緩慢滴加至反應液中，滴加完畢後攪拌10min，再將三正丁基膦(1.07g，5.26mmol)緩慢滴加至反應液中，加完升至室溫反應10min後升溫至35℃反應1小時，另取一反應瓶氮氣保護下將化合物33A(1.65g，6.25mmol)溶於無水乙腈(15ml)中，加入DBU(0.95g，6.25mmol)加完室溫攪拌30min後將此反應液緩慢滴加至另一反應液中，加完升溫至35℃反應2小時，反應完畢後冷卻至室溫加入飽和氯化銨溶液淬滅反應，乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 2:1)得到標題化合物33B(0.5g，27.6%)。

LC-MS (ESI): m/z =550.1 [M+H] ⁺。

第三步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡咯[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-(二氟甲基)-2-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇 (33C)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-(difluoromethyl)-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol (33C)

化合物33B(0.5g，0.91mmol)溶於甲醇(10ml)中，碳酸鉀(0.25g，1.82mmol)溶於水(4ml)中加入到反應液中，加完室溫攪拌1小時，反應完畢後，反應液濃縮，濃縮殘留物加入水，二氯甲烷(50ml×2)萃取兩次，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:1)得到標題化合物33C(0.27g，66.5%)。

LC-MS (ESI): m/z =446.1 [M+H] ⁺。

第四步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡咯[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-(二氟甲基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物33)

化合物33C(0.26g，0.58mmol)溶於磷酸三甲酯(3ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(0.43g，1.74mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中緩慢滴加到反應液中，加完控溫0℃反應2小時，反應完畢後加入水(1ml)後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間6.2min得化合物33(180mg，51.4%)。

LCMS m/z =602.1 [M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O): 8.13 (d, 1H), 6.34 (t, 1H), 6.13 (d, 1H), 5.24 (d, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.16 (s, 2H), 3.93-3.73 (m, 2H), 3.56-3.42 (m, 2H), 2.89-2.78 (m, 2H), 2.38-2.29 (m, 2H), 1.91-1.48 (m, 6H)。

實施例 34 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-2H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-2-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物34)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-2H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-2-yl)-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物34)

第一步：(2R,3R,4R,5R)-2-(乙醯氧基甲基)-5-(4,6-二氯-2H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-2-基)四氫呋喃-3,4-二乙酸二酯(34B)

(2R,3R,4R,5R)-2-(acetoxymethyl)-5-(4,6-dichloro-2H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-2-yl)tetrahydrofuran-3,4-diyl diacetate(34B)

將化合物4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶18A (8.0 g,42.55mmol)溶於六甲基二矽氮烷(40 mL)中，加入硫酸銨(0.8 g)，氮氣下120℃反應5小時。濃縮後加入乙腈(80mL)，(2S,3R,4R,5R)-5-(乙醯氧基甲基)四氫呋喃-2,3,4-三乙酸三酯(14.9 g, 46.81mmol)，再室溫下滴加三氟甲磺酸三甲基矽酯(14.2 g, 63.83mmol)，室溫下反應12小時，濃縮後加入飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)，乙酸乙酯萃取(100mL × 3)，飽和食鹽水洗(200mL × 1)，無水硫酸鈉乾燥濃縮後矽膠柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=100:40)得到產物34B (6.5g，產率26%)。

LCMS m/z =447.1[M+1] ⁺。

第二步：(2R,3R,4S,5R)-2-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-2H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-2 -基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(34C)

(2R,3R,4S,5R)-2-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-2H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-2-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(34C)

將化合物34B (0.8 g, 1.8mmol)溶於甲醇中(30 mL)中，加入(S)-1-(2-氟苯基)乙胺鹽酸鹽(315 mg, 1.8 mmol)，三乙胺(545 mg, 5.4 mmol)，室溫反應2小時，加入氨甲醇溶液(7N, 60mL)，室溫反應12小時，濃縮後後得到粗產物產物34C(1.6 g，產率100%)。

LCMS m/z =424.1 [M+1] ⁺。

第三步：((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-2H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-2-基)-2,2-二甲基四氫呋喃[3,4-d][1,3]二氧雜環-4-基)甲醇(34D)

((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-chloro-4-(((S)-1-(2-fluorophenyl)ethyl)amino)-2H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-2-yl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl)methanol(34D)

將化合物34C (1.6g, 1.8 mmol)加入到丙酮中(40mL)中，再加入2,2-二甲氧基丙烷(0.56 g, 5.4mmol)，對甲苯磺酸(0310 mg, 1.8 mmol)，室溫反應12小時，濃縮後矽膠柱層析純化(甲醇：二氯甲烷(v/v)=5:100)得到產物34D (400 mg，產率48%)。

LCMS m/z =464.1[M+1] ⁺。

第四步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((S)-1-(2-氟苯基)乙基)氨基)-2H-吡唑並[3,4-d ]嘧啶-2-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物34)

將化合物34D (400 mg, 0.86mmol)加入到磷酸三甲酯(3 mL)中，再加入亞甲基雙(膦醯二氯)(639 mg, 2.58mmol)，室溫下反應1h。再加鹽酸(6N, 2mL)，室溫反應0.5小時，直接用液相製備柱分離提純(液相製備條件：C18逆相製備柱，流動相為含0.1％三氟乙酸的去離子水(A)，乙腈 (B)，梯度沖提，B含量=5%~50%，沖提時間15min，流速15 mL/min，柱溫：30℃)；得到標題化合物34 (40 mg，產率8%，滯留時間約為7.2 min)。

MS M/Z (ESI)：m/z =582.1 [M+1] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.57 (d, 1H), 8.97 (s, 1H), 7.69 – 7.46 (m, 1H), 7.32 – 7.25 (m, 1H), 7.20 – 7.12 (m, 2H), 5.88 (d, 1H), 5.67 – 5.56 (m, 1H), 4.33 – 4.28 (m, 1H), 4.27 – 4.05 (m, 4H), 2.45 – 2.27 (m, 2H), 1.54 (d, 3H)。

實施例 35 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(5,5-二氟六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基) (羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物35)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(5,5-difluorohexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物35)

第一步：1,3,3a,4,7,7a-六氫-2H-異吲哚-2-碳酸第三丁酯(35B)

tert-butyl 1,3,3a,4,7,7a-hexahydro-2H-isoindole-2-carboxylate(35B)

室溫下，將化合物35A (20.0 g, 132.3 mmol)溶於四氫呋喃(200 mL)中，T＜35℃分批加入氫化鋁鋰(12.6 g, 330.8mmol)，加完後，升溫至60℃反應2小時。將反應液冷卻至室溫，T＜35℃將水(24 mL)滴加至反應液中，加入二碳酸二第三丁酯(28.9 g, 132.3 mmol)，室溫反應2小時，將反應液過濾，濾液濃縮乾，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯(v:v)=10:1-1:1)，得化合物35B(16.0 g, 54%)。

LC-MS (ESI): m/z =168.2 [M+H-tBu] ⁺。

第二步：2,2'-(1-(第三丁氧基羰基)吡咯烷-3,4-二基)二乙酸(35C)

2,2'-(1-(tert-butoxycarbonyl)pyrrolidine-3,4-diyl)diacetic acid(35C)

室溫下，將高錳酸鉀(14.2 g, 89.6mmol)溶於水(300 mL)中，將化合物35B (8.0 g, 35.8mmol)用丙酮(150 mL)溶解，於T＜30℃滴加至反應液中，室溫反應3小時。T＜30℃將反應液用3N鹽酸調節pH值約4-5，加入硫代硫酸鈉飽和溶液直至體系變為無色透明，乙酸乙酯(200 mL×2)萃取，有機相濃縮乾，得粗產物化合物35C (9.0g)，不做純化直接進行下一步。

LC-MS (ESI): m/z =286.1 [M-H] ^-。

第三步：5-氧代六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-羧酸第三丁酯(35D)

tert-butyl 5-oxohexahydrocyclopenta[c]pyrrole-2(1H)-carboxylate(35D)

室溫下，將化合物35C (9.0 g, 31.3mmol)溶於乙酸酐(100 mL)中，升溫至130℃反應1小時，加入無水乙酸鈉(3.1 g, 37.6mmol)，130℃反應2小時。將反應液濃縮乾，加入乙酸乙酯(100 mL)溶解，用水(50 mL×1)洗，有機相濃縮乾，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯(v:v)=10:1-3:1)，得化合物35D(2.5 g, 35%)。

LC-MS (ESI): m/z =170.1[M+H-tBu] ⁺。

第四步：5,5-二氟六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-羧酸第三丁酯(35E)

tert-butyl 5,5-difluorohexahydrocyclopenta[c]pyrrole-2(1H)-carboxylate (35E )

室溫下，將化合物35D (2.5 g, 11.1mmol)溶於二氯甲烷(100 mL)中，加入二乙氨基三氟化硫(8.1 g, 50.0mmol)，室溫反應16小時。將反應液倒入飽和碳酸氫鈉水溶液(100 mL)中，二氯甲烷(100 mL×1)萃取，有機相濃縮乾，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯(v:v)=10:1-5:1)，得化合物35E(0.75 g, 27%)。

LC-MS (ESI): m/z =248.2[M+H] ⁺。

第五步：5,5-二氟八氫環戊二烯[c]吡咯 (35F )

5,5-difluorooctahydrocyclopenta[c]pyrrole (35F )

化合物35E(0.75g，3.03mmol)溶於二氯甲烷(10ml)和三氟乙酸(2ml)的混合溶劑中，室溫下反應3小時，反應完畢後直接濃縮得化合物35F(0.79g，100%)。

LC-MS (ESI): m/z =148.2[M+H] ⁺。

第六步：((2S,4R,5R)-乙醯氧基-5-(6-氯-4-(5,5-二氟六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(35G)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-(5,5-difluorohexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate(35G)

化合物28B(0.7g，1.51mmol)溶於二氯甲烷(10ml)中，然後加入化合物35F(0.47，1.81mmol)，降溫至0℃，然後加入三乙胺(0.46g，4.53mmol)加完室溫反應1小時，反應完畢後反應液直接濃縮，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 1:2)得到化合物35G(0.5g，57.6%)。

LC-MS (ESI): m/z =574.2[M+H] ⁺。

第七步：((2S,4R,5R)-乙醯氧基-5-(6-氯-4-(5,5-二氟六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇(35H)

(2R,3R,5S)-2-(6-chloro-4-(5,5-difluorohexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (35H)

化合物35G(0.5g，0.87mmol)溶於甲醇(10ml)中，碳酸鉀(0.36g，2.61mmol)溶於水(4ml)中加入到反應液中，加完室溫攪拌3小時，反應完畢後，反應液濃縮，濃縮殘留物加入水，二氯甲烷(50ml×2)萃取兩次，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 1:3)得到標題化合物35H(0.34g，91.3%)。

LC-MS (ESI): m/z =428.1[M+H] ⁺。

第八步：(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(5,5-二氟六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基) (羥基)磷醯基)甲基)膦酸(35I)

(((((2S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(5,5-difluorohexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (35I)

化合物35H(0.34g，0.79mmol)溶於磷酸三甲酯(3ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙((二氯化膦))(0.59g，2.37mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中緩慢滴加到反應液中，加完控溫0℃反應2小時，反應完畢後加入水(2ml)後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱:SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間8.5min得化合物35I(0.26g，56.1%)。

LC-MS (ESI): m/z =584.1[M-H] ^-。

第九步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(5,5-二氟六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基) (羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物35)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(5,5-difluorohexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物35)

化合物35I(0.26g，0.44mmol)溶於丙酮(6ml)和水(2ml)的混合溶劑中，加入N-甲基氧化嗎啉(0.25g，2.2mmol)，加入催化量二水合鋨酸鉀(16mg)加完室溫下反應15小時，反應完畢後濃縮掉丙酮後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters2767製備液相；色譜柱:SunFire@ PrepC18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間6.4min得化合物35(0.13g，46.9%)。

LC-MS (ESI): m/z =618.1[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O): 8.09 (d, 1H), 6.12 (d, 1H), 4.95 (d, 1H), 4.33-4.31 (m, 1H), 4.18-4.11 (m, 2H), 4.07-3.15 (m, 6H), 3.14-3.02 (m, 2H), 2.53-2.11 (m, 6H)。

實施例 36 ：

(((((2R,4R,5R)-5-(6-氯-4-(四氫-1H-呋喃[3,4-c]吡咯-5(3H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 ( 化合物 36)

(((((2R,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(tetrahydro-1H-furo[3,4-c]pyrrol-5(3H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid ( 化合物 36)

第一步：5-苄基四氫-1H-呋喃[3,4-c]吡咯-1,3(3aH)-二酮 (36B)

5-benzyltetrahydro-1H-furo[3,4-c]pyrrole-1,3(3aH)-dione (36B)

室溫下，將化合物36A (10.0 g, 42.1 mmol)和順丁烯二酸酐(4.5 g, 46.3 mmol)溶於二氯甲烷(200 mL)中，加入三氟乙酸(0.5 g, 4.2 mmol)，室溫反應2小時，將反應液濃縮乾，得粗產物標題化合物(9.7 g)，直接投下一步。

第二步：(1-苄基吡咯烷-3,4-二醯基)二甲醇 (36C)

(1-benzylpyrrolidine-3,4-diyl)dimethanol (36C)

室溫下，將化合物36B (9.7 g, 42.0 mmol)溶於四氫呋喃(200 mL)中，T＜35℃分批加入氫化鋁鋰(3.5 g, 92.3 mmol)，室溫反應2小時。T＜35℃將水(6.6 mL)滴加至反應液中，過濾，固體用乙酸乙酯(200 mL×1)淋洗，有機相合併，濃縮乾，柱層析純化(二氯甲烷：甲醇(v/v)=30/1)，得到標題化合物(3.8g, 產率41%)。

LC-MS (ESI): m/z =222.3 [M+H] ⁺。

第三步：5-苄基六氫-1H-呋喃[3,4-c]吡咯 (36D)

5-benzylhexahydro-1H-furo[3,4-c]pyrrole (36D)

室溫下，將化合物36C(3.8 g, 17.2 mmol)溶於四氫呋喃(100 mL)中，加入第三丁醇鉀 (4.1 g, 36.1 mmol)，反應30分鐘，將甲基磺醯氯(2.2 g, 18.9 mmol)滴加至反應液中，反應10分鐘，加入第三丁醇鉀 (1.9 g, 17.2 mmol)，室溫反應30分鐘，升溫至60℃反應2小時，將反應液倒入飽和氯化銨水溶液(200 mL)中，乙酸乙酯(100 mL×1)萃取，有機相濃縮乾，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=1/1)，得到標題化合物(2 g，產率57%)。

LC-MS (ESI): m/z =204.3 [M+H] ⁺。

第四步：六氫-1H-呋喃[3,4-c]吡咯鹽酸鹽 (36E)

hexahydro-1H-furo[3,4-c]pyrrole hydrochloride (36E)

室溫將化合物36D (2.0 g, 9.8 mmol)溶於四氫呋喃 (20 mL)中，加入4N氯化氫二氧六環溶液(0.7 mL，28 mmol)，濃縮乾，將甲醇(40 mL)加入其中，加入10%鈀炭(0.1 g)，氫氣置換並導入，室溫反應16小時，將反應液過濾，濃縮乾，得到標題化合物(1.2 g, 產率81%)。

第五步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-(四氫-1H-呋喃[3,4-c]吡咯-5(3H)-基)-1H-吡唑並[3] ,4-d]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯 (36F)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-(tetrahydro-1H-furo[3,4-c]pyrrol-5(3H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (36F)

將28B (750mg, 1.62mmol)和36E(290mg, 1.94mmol)加入二氯甲烷中，再加入N,N-二異丙基乙胺(840mg, 6.48mmol)，室溫反應2h。TLC監測原料消失，直接將反應液加入矽膠，濃縮後色譜柱層析分離(EA:PE(v/v)=1/1)，得到標題化合物(500 mg, 57%)。

LC-MS (ESI): m/z = 540.2 [M+H] ⁺。

第六步：(2R,3R,5S)-2-(6-氯-4-(四氫-1H-呋喃[3,4-c]吡咯-5(3H)-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)- 4-亞甲基四氫呋喃-3-醇(36G)

(2R,3R,5S)-2-(6-chloro-4-(tetrahydro-1H-furo[3,4-c]pyrrol-5(3H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (36G)

將36F (500mg, 0.93mmol)，碳酸鉀(390mg, 2.79mmol)加入甲醇(10ml)中，室溫反應3h，LC-MS監測反應完全，反應液直接加入矽膠減壓濃縮後矽膠柱色譜分離純化(DCM:MeOH(v/v)=10/1)，得到標題化合物(220mg, 60%)。

LC-MS (ESI): m/z = 394.1 [M+H] ⁺。

第七步：(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(四氫-1H-呋喃[3,4-c]吡咯-5(3H)-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-羥基-3- 亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(36H)

(((((2S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(tetrahydro-1H-furo[3,4-c]pyrrol-5(3H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (36H)

將36G (220mg, 0.56mmol)加入磷酸三甲酯(4ml)中，再將亞甲基雙氯化磷(420mg, 1.68mmol)溶於磷酸三甲酯(1ml)後於冰浴下滴入反應體系中，保持0℃反應3h，LC-MS監測原料消失，冰浴下加入水(0.5ml)，繼續0℃反應5h，LC-MS監測後HPLC分離提純得到標題化合物 (100mg 32%)。製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用DMF溶解，用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至40%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。

LC-MS (ESI): m/z = 552.1 [M+H] ⁺。

第八步：(((((2R,4R,5R)-5-(6-氯-4-(四氫-1H-呋喃[3,4-c]吡咯-5(3H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物36)

(((((2R,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(tetrahydro-1H-furo[3,4-c]pyrrol-5(3H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物36)

將36H(100mg, 0.18mmol)，二水合鋨酸鉀(10mg)和N-甲嗎啉啉氧化物(110mg, 0.9mmol)加入丙酮(3ml)和水(1ml)的混合體系中。室溫反應過夜，LC-MS監測反應完全，將反應液過濾，濾液減壓濃縮掉丙酮，HPLC分離提純得到標題化合物 (18mg 17%)。製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用DMF溶解，用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至40%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。

¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.22 (s, 1H), 6.26 (d, 1H), 4.95 (d, 1H), 4.40-4.35 (m, 1H), 4.30-4.24 (m, 2H), 4.20-4.10 (m, 1H), 4.07 – 3.92 (m, 3H), 3.85-3.73 (m, 6H), 2.52 – 2.33 (m, 2H), 1.33-1.28 (m, 2H)。

LC-MS (ESI): m/z = 586.1[M+H] ⁺。

實施例 37 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(甲氧基甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物37)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(methoxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物37)

第一步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[(3,4) -d]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)乙酸甲酯(37A)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl acetate (37A)

化合物28D (2.00 g，5.10 mmol)溶於乾燥二氯甲烷(80 ml)中，加入三乙胺(1.55 g, 15.3 mmol)、4-二甲氨基吡啶(312 mg，2.55 mmol)和乙酸酐(1.04 g，10.2 mmol)，加完於室溫反應2小時，TLC監測反應完畢後加入飽和氯化銨水溶液(100ml)，以二氯甲烷(30 ml x 3)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，並過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 4:1)得到白色泡狀固體37A(2.24 g，92.4 %)。

第二步：((2R,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3] ,4-d]嘧啶-1-基)-3-羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)乙酸甲酯(37B)

((2R,3R,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-hydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl acetate (37B)

化合物37A (2.28 g，4.79 mmol)溶於丙酮：水=3：1(80 ml)中，加入N-甲基-N-氧化嗎啉(2.81 g，23.9 mmol)和鋨酸鉀四水合物(353 mg，0.958 mmol)加完於室溫下反應15小時，TLC監測反應完畢後加入飽和硫代硫酸鈉水溶液(10 mL)和水100 (mL)，以乙酸乙酯(30 ml x 8)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:2)得白色泡狀化合物37B (1.84 g，75.5%)。

LC-MS (ESI): m/z =510.2 [M+H] ⁺。

第三步：((2R,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-羥基-3-(甲氧基甲基)四氫呋喃-2-基)乙酸甲酯(37C)

((2R,3R,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-hydroxy-3-(methoxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl acetate (37C)

化合物37B (1.00 g，1.96 mmol)溶於乾燥二氯甲烷(50 ml)，於室溫下加入2,6-二第三丁基-4-甲基吡啶(1.59 g, 9.80 mmol)，10 分鐘後分批次加入三甲基氧鎓四氟硼酸鹽(580 mg，3.92 mmol)，加完於室溫下反應3小時。TLC監測反應結束後直接抽乾。粗產物經矽膠柱色譜純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:1)得白色發泡狀固體化合物37C (720 mg，70.1%)。

LC-MS (ESI): m/z =524.2 [M+H] ⁺。

第四步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(羥甲基)-3-(甲氧基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(37D)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)-3-(methoxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol (37D)

化合物37C (720 mg，1.37 mmol)溶於甲醇(30 ml)，於室溫下加入碳酸鉀(570 mg, 4.12 mmol)，加完於室溫下反應1小時。TLC監測反應結束後加入飽和氯化銨水溶液(50 mL)和水50(mL)，以乙酸乙酯(10 ml x 8)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:2 至1:10)得化合物37D (510 mg，84.2%)。

第五步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3, 4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(甲氧基甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物37)

化合物37D (260 mg，0.592 mmol)溶於磷酸三甲酯(3ml)中，冰浴下降溫至0℃，將亞甲基雙(二氯化膦)(393 mg，2.37 mmol)溶於磷酸三甲酯(0.5 ml)中緩慢滴加到反應液中，加完繼續於0℃反應3小時，LCMS監控反應完畢後加入水(1ml)，加完攪拌0.5小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters2767製備液相；色譜柱:SunFire@PrepC18(19 mm × 250 mm)；2.樣品用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A,B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1% TFA)；b. 梯度沖提，流動相A含量從5% 至 50%；c. 流量12mL/min；d. 沖提時間10 min。滯留時間3.93 min得化合物37(45 mg，12.7%)。

LC-MS (ESI): m/z =580.0 [M-OH] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.20 (s, 1H), 6.28 (d, 1H), 4.74 – 4.51 (m, 3H), 4.30 – 4.11 (m, 2H), 4.06 (dd, 2H), 4.00 – 3.90 (m, 1H), 3.68 – 3.56 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 3.03 – 2.92 (m, 1H), 2.88 – 2.78 (m, 1H), 2.71 (t, 2H), 2.04 – 1.81 (m, 3H), 1.77 – 1.52 (m, 3H)。

實施例 38:

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡咯[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物38)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-methyltetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物38)

第一步：(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2,6-三甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-6-醇(38B)

(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-2,2,6-trimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol (38B)

將32A (1 g，2.35 mmol)溶於乾燥的四氫呋喃(10 ml)中，置換氮氣三次，將反應體系冷卻至-78 ℃，緩慢滴加甲基溴化鎂(7.05 mmol)，在-78 ℃下反應2 h，反應結束用飽和氯化銨溶液(100 ml)淬滅，乙酸乙酯(3×100 ml)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~30%)得化合物38B (1 g，96%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.71 – 7.68 (m, 4H), 7.46 – 7.33 (m, 6H), 5.76 (d, 1H), 4.07 (d, 1H), 3.89 (dd, 1H), 3.83 (s, 1H), 3.82 (d, 1H), 1.56 (s, 3H), 1.34 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 1.06 (s, 9H)。

第二步：(3aR,5R,6R,6aR)-5-(羥甲基)-2,2,6-三甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-6-醇 (38C)

(3aR,5R,6R,6aR)-5-(hydroxymethyl)-2,2,6-trimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol (38C)

將化合物38B (1 g，2.26 mmol)溶於四氫呋喃(10 ml)中，加入四丁基氟化銨(0.89 g，3.39 mmol)，室溫下反應1小時，反應完畢向反應液加入水(10 ml)淬滅反應，水相用乙酸乙酯(20 ml×3)萃取，合併有機層，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮得化合物38C(1 g)粗產物，直接用於下一步。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 5.78 (d, 1H), 4.12 (d, 1H), 3.90 (dd, 1H), 3.81 (dd, 1H), 3.73 (dd, 1H), 1.59 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.16 (s, 3H)。

第三步：((3aR,5R,6R,6aR)-6-羥基-2,2,6-三甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-5-基)苯甲酸甲酯(38D)

((3aR,5R,6R,6aR)-6-hydroxy-2,2,6-trimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (38D)

上步化合物38C粗產物和三乙胺(0.7 g，6.78 mmol)溶於二氯甲烷(10 ml)中，加入苯甲醯氯(0.48 g，3.39 mmol), 加完室溫反應2小時，反應完畢反應液加入水(10 ml)淬滅反應，水相用二氯甲烷(10ml×3)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~20%)得到化合物38D (0.66 g，兩步收率95%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.14 – 7.99 (m, 2H), 7.59 – 7.48 (m, 1H), 7.43 (t, 2H), 5.83 (d, 1H), 4.57 (dd, 1H), 4.38 (dd, 1H), 4.15 (d, 1H), 4.11 (dd, 1H), 2.76 (s, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.25 (s, 3H)。

第四步：((2R,3S,4R)-3,4,5-三羥基-3-甲基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯 (38E)

((2R,3S,4R)-3,4,5-trihydroxy-3-methyltetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (38E)

將化合物38D (3 g，9.74 mmol) 加入到100 mL反應瓶中，加入三氟乙酸(9 ml)/水(1 ml)，在室溫下反應1 h，反應結束用飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH=7，水相用乙酸乙酯萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)得到化合物38E(2.45 g，94%)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.14 – 7.89 (m, 2H), 7.54 (t, 1H), 7.42 (t, 2H), 5.38 (d, 1H), 4.50 (dd, 1H), 4.37 (dd, 1H), 4.26 (dd, 1H), 3.84 (d, 1H), 1.33 (s, 3H)。

第五步：((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡咯[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-甲基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯 (38F)

((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-methyltetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (38F)

氮氣保護下，化合物化合物38E (1 g，3.73 mmol)溶於無水四氫呋喃(20 ml)中，降溫至0℃，偶氮二甲醯二哌啶(1.41 g，5.6 mmol)溶於無水乙腈(5 ml)中，控溫0℃緩慢滴加至反應液中，滴加完畢後攪拌10分鐘，再將三正丁基膦(1.13 g，5.6 mmol)緩慢滴加至反應液中，加完升至室溫反應10分鐘後升溫至35℃反應1小時，另取一反應瓶氮氣保護下將化合物33A (1.96 g，7.46 mmol)溶於無水乙腈(15ml)中，加入DBU (1.13 g，7.46 mmol)加完室溫攪拌30min後將次反應液緩慢滴加至另一反應液中，加完升溫至35℃反應2小時，反應完畢後冷卻至室溫加入飽和氯化銨溶液淬滅反應，乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 2:1)得到目標化合物38F (0.18 g，9%)。

LC-MS (ESI): m/z =514.3 [M+H] ⁺。

第六步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-yl)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(羥基甲基)-3-甲基四氫呋喃-3,4-二醇 (38G)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)-3-methyltetrahydrofuran-3,4-diol (38G)

化合物38F (180 mg，0.35 mmol)溶於甲醇(3 ml)中，加入碳酸鉀(193 mg，1.4 mmol)，加完室溫下反應2 h，加入水(3 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(5 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)，得產物38G (140 mg，98%)。

LC-MS (ESI): m/z =410.2 [M+H] ⁺。

第七步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡咯[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物38)

化合物38G (140 mg，0.45 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(338 mg，1.35 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3 h，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(2 ml)，加完攪拌1 h，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20 min。滯留時間7.0 min得化合物38(90 mg，46%)。

LC-MS (ESI): m/z =566.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.85 (s, 1H), 5.76 (d, 1H), 4.18 – 4.12 (m, 2H), 4.07 (d, 2H), 4.03 (d, 2H), 3.90 – 3.82 (m, 1H), 3.61 (dd, 1H), 3.47 (dd, 1H), 2.95 – 2.83 (m, 1H), 2.73 (dd, 1H), 2.23 (t, 2H), 1.91 – 1.79 (m, 2H), 1.78 – 1.71 (m, 1H), 1.67 – 1.56 (m, 2H), 1.55 – 1.45 (m, 1H), 1.27 (s, 3H)。

實施例 39:

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-乙烯基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物39)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-vinyltetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物39)

第一步：(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基-6-乙烯基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-6-醇(39B)

(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyl-6-vinyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol (39B)

將化合物32A (5 g，11.72 mmol)溶於乾燥的四氫呋喃(50 ml)中，置換氮氣三次，將反應體系冷卻至-78 ℃，緩慢滴加乙烯基溴化鎂(35.16 mmol)，在-78℃下反應2 h，反應結束用飽和氯化銨溶液(100 ml)淬滅，乙酸乙酯(3×100 ml)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~30%)得化合物39B (4.5 g，84%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.71 – 7.63 (m, 4H), 7.45 – 7.31 (m, 6H), 5.83 (d, 1H), 5.73 (dd, 1H), 5.47 (dd, 1H), 5.22 (dd, 1H), 4.21 (d, 1H), 4.04 (t, 1H), 3.77 – 3.72 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.05 (s, 9H)。

第二步：(3aR,5R,6R,6aR)-5-(羥甲基)-2,2-二甲基-6-乙烯基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-6-醇 (39C)

(3aR,5R,6R,6aR)-5-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyl-6-vinyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol (39 C)

將化合物39B (4.5 g，9.90 mmol)溶於四氫呋喃(50 ml)中，加入四丁基氟化銨(3.36 g，12.87 mmol)，室溫下反應1小時，反應完畢向反應液加入水(10 ml)淬滅反應，水相用乙酸乙酯(20 ml×3)萃取，合併有機層，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮得化合物39C (5.13 g)粗產物，直接用於下一步。

第三步：((3aR,5R,6R,6aR)-6-羥基-2,2-二甲基-6-乙烯基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-5-基)苯甲酸甲酯(39D)

((3aR,5R,6R,6aR)-6-hydroxy-2,2-dimethyl-6-vinyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (39D)

上步化合物39C粗產物和三乙胺(3.01 g，29.7 mmol)溶於二氯甲烷(40 ml)中，加入苯甲醯氯(2.09 g，14.85 mmol), 加完室溫反應2小時，反應完畢反應液加入水(10 ml)淬滅反應，水相用二氯甲烷(10ml×3)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~20%)得到化合物39D (2.54 g，兩步收率80%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.18 – 7.95 (m, 2H), 7.54 (d, 1H), 7.42 (t, 2H), 5.90 (d, 1H), 5.81 (dd, 1H), 5.59 (dd, 1H), 5.35 (dd, 1H), 4.45 (dd, 1H), 4.33 – 4.18 (m, 3H), 1.62 (s, 3H), 1.37 (s, 3H)。

第四步：((2R,3S,4R)-3,4,5-三羥基-3-乙烯基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(39E)

((2R,3S,4R)-3,4,5-trihydroxy-3-vinyltetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (39E)

將化合物39D (2.54 g，7.98 mmol) 加入到100 mL反應瓶中，加入三氟乙酸(9 ml)/水(1 ml)，在室溫下反應1 h，反應結束用飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH=7，水相用乙酸乙酯萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)得到化合物39E (2.1 g，95%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ8.03 – 7.97 (m, 2H), 7.57 (t, 1H), 7.48 – 7.40 (m, 2H), 5.91 (dd, 1H), 5.58 (dd, 1H), 5.45 (d, 1H), 5.37 (d, 1H), 4.50 – 4.40 (m, 2H), 4.22 (dd, 1H), 4.13 (d, 1H), 3.23 (t, 3H)。

第五步：((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-乙烯基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(39F)

((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-vinyltetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (39F)

氮氣保護下，化合物化合物39E (1 g，3.57 mmol)溶於無水四氫呋喃(20 ml)中，降溫至0℃，偶氮二甲醯二哌啶(1.80 g，7.14 mmol)溶於無水乙腈(5 ml)中，控溫0℃緩慢滴加至反應液中，滴加完畢後攪拌10min，再將三正丁基膦(1.44 g，7.14 mmol)緩慢滴加至反應液中，加完升至室溫反應10min後升溫至35℃反應1小時，另取一反應瓶氮氣保護下將化合物33A (1.41 g，5.35 mmol)溶於無水乙腈(15ml)中，加入DBU (0.82 g，5.35 mmol)加完室溫攪拌30min後將次反應液緩慢滴加至另一反應液中，加完升溫至35℃反應2小時，反應完畢後冷卻至室溫加入飽和氯化銨溶液淬滅反應，乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 2:1)得到目標化合物39F(100 mg，5%)。

LC-MS (ESI): m/z =526.2 [M+H] ⁺。

第六步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(羥基甲基)-3-乙烯基四氫呋喃-3,4-二醇(39G)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)-3-vinyltetrahydrofuran-3,4-diol (39G)

化合物39F (50 mg，0.35 mmol)溶於甲醇(3 ml)中，加入碳酸鉀(193 mg，1.4 mmol)，加完室溫下反應2 h，加入水(3 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(5 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)，得產物39G (40 mg，98%)。

LC-MS (ESI): m/z =422.1 [M+H] ⁺。

第七步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-乙烯基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物39)

化合物39G (40 mg，0.095 mmol)溶於磷酸三甲酯(0.5 ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(72 mg，0.285 mmol)溶於磷酸三甲酯(0.5 ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3 h，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(1 ml)，加完攪拌1 h，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20 min。滯留時間7.0 min得化合物39 (14 mg，25%)。

LC-MS (ESI): m/z =578.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ 8.21 (d, 1H), 6.21 (d, 1H), 6.10 (dd, 1H), 5.59 (d, 1H), 5.49 (d, 1H), 5.11 (d, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.09 – 3.90 (m, 3H), 3.83 (dd, 1H), 3.62 (s, 1H), 3.50 (d, 1H), 2.92 (s, 1H), 2.80 (s, 1H), 2.25 (t, 2H), 1.88 (dd, 2H), 1.77 (d, 1H), 1.71 – 1.61 (m, 1H), 1.51 (s, 2H)。

實施例 40:

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸(化合物40)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-ethynyl-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物40)

第一步：(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基-6-((三甲基甲矽烷基)乙炔基)四氫呋喃[2,3-d][1,3 ]二氧雜環-6-醇(40B)

(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyl-6-((trimethylsilyl)ethynyl)tetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol (40B)

將乙炔基三甲基矽烷(2.88 g，29.3 mmol)溶於乾燥的四氫呋喃(30ml)中，置換氮氣三次，將反應體系冷卻至-78 ℃，緩慢滴加正丁基鋰(25.78 ml)，在-78 ℃下反應30 min，向體系中滴加溶於四氫呋喃(10 ml)的化合物32A (5 g，11.72 mmol)，在-78℃下繼續反應2 h，反應結束用飽和氯化銨溶液(100 ml)淬滅，乙酸乙酯(3×100 ml)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~30%)得化合物40B(5.72 g，93%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.69 (m, 4H), 7.48 – 7.30 (m, 6H), 5.85 (d, 1H), 4.54 (d, 1H), 4.05 (d, 1H), 4.02 (d, 1H), 3.98 (dd, 1H), 1.59 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.08 (s, 9H), 0.11 (s, 9H)。

第二步：(3aR,5R,6R,6aR)-6-乙炔基-5-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-6-醇 (40C)

(3aR,5R,6R,6aR)-6-ethynyl-5-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol (40C)

將化合物40B (5.72 g，10.90 mmol)溶於四氫呋喃(50 ml)中，加入四丁基氟化銨(14.17 ml，14.17 mmol)，室溫下反應1小時，反應完畢向反應液加入水(10 ml)淬滅反應，水相用乙酸乙酯(20 ml×3)萃取，合併有機層，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮得化合物40C (2.3 g)粗產物，直接用於下一步。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 5.90 (d, 1H), 4.56 (d, 1H), 4.02 – 3.94 (m, 3H), 2.63 (s, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.39 (s, 3H)。

第三步：((3aR,5R,6R,6aR)-6-乙炔基-6-羥基-2,2-二甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-5-基)苯甲酸甲酯(40D)

((3aR,5R,6R,6aR)-6-ethynyl-6-hydroxy-2,2-dimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (40D)

上步化合物40C粗產物和三乙胺(3.31 g，32.7 mmol)溶於二氯甲烷(30 ml)中，加入苯甲醯氯(2.30 g，16.35 mmol), 加完室溫反應2小時，反應完畢反應液加入水(20 ml)淬滅反應，水相用二氯甲烷(20ml×3)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~20%)得到化合物40D (3.4 g)粗產物，直接用於下一步。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.13 – 8.00 (m, 2H), 7.55 (d, 1H), 7.43 (t, 2H), 5.94 (d, 1H), 4.74 (dd, 1H), 4.62 – 4.57 (m, 2H), 4.21 (dd, 1H), 2.66 (s, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.39 (s, 3H)。

第四步：((2R,3S,4R)-3-乙炔基-3,4,5-三羥基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(40E)

((2R,3S,4R)-3-ethynyl-3,4,5-trihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (40E)

將化合物40D粗產物加入到100 mL反應瓶中，加入三氟乙酸(9 ml)/水(1 ml)，在室溫下反應1 h，反應結束用飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH=7，水相用乙酸乙酯萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)得到化合物40E (2.5 g，三步收率83%)。

¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.11 – 8.00 (m, 2H), 7.62 (t, 1H), 7.48 (t, 2H), 5.40 (d, 1H), 4.58 (d, 1H), 4.50 (d, 1H), 4.43 (d, 1H), 4.15 (d, 1H), 3.09 (s, 1H)。

第五步：((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯 (40F)

((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-ethynyl-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (40F)

氮氣保護下，化合物化合物40E (1 g，3.59 mmol)溶於無水四氫呋喃(20 ml)中，降溫至0℃，偶氮二甲醯二哌啶(1.36 g，5.38 mmol)溶於無水乙腈(5 ml)中，控溫0℃緩慢滴加至反應液中，滴加完畢後攪拌10min，再將三正丁基膦(1.09 g，5.38 mmol)緩慢滴加至反應液中，加完升至室溫反應10min後升溫至35℃反應1小時，另取一反應瓶氮氣保護下將化合物33A (1.89 g，7.18 mmol)溶於無水乙腈(15ml)中，加入DBU (1.09 g，7.18 mmol)加完室溫攪拌30min後將次反應液緩慢滴加至另一反應液中，加完升溫至35℃反應2小時，反應完畢後冷卻至室溫加入飽和氯化銨溶液淬滅反應，乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 2:1)得到目標化合物40F (0.18 g，9%)。

LC-MS (ESI): m/z =524.2 [M+H] ⁺。

第六步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-乙炔基-2-(羥基甲基)四氫呋喃-3,4-二醇 (40G)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-ethynyl-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol (40G)

化合物40F (180 mg，0.35 mmol)溶於甲醇(3 ml)中，加入碳酸鉀(145 mg，1.05 mmol)，加完室溫下反應2 h，加入水(3 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(5 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)，得產物40G(140 mg，97%)。

LC-MS (ESI): m/z =420.1 [M+H] ⁺。

第七步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸(化合物40)

化合物40G (140 mg，0.36 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(270 mg，1.08 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3 h，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(2 ml)，加完攪拌1 h，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20 min。滯留時間7.0 min得化合物 40(72 mg，35%)。

LC-MS (ESI): m/z =576.0[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.88 (d, 1H), 5.80 (dd, 1H), 4.68 (dd, 2H), 4.37 – 4.28 (m, 1H), 4.27 – 4.17 (m, 2H), 4.04 (dd, 1H), 3.87 (dd, 1H), 3.66 – 3.55 (m, 2H), 3.47 (dd, 1H), 2.96 – 2.81 (m, 1H), 2.74 (d, 1H), 2.28 – 2.14 (m, 2H), 1.91 – 1.79 (m, 2H), 1.76 (dd, 1H), 1.67 – 1.56 (m, 2H), 1.53 (dd, 1H)。

實施例 41:

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(三氟甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物41)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(trifluoromethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物41)

第一步：((3aR,5R,6R,6aR)-6-羥基-2,2-二甲基-6-(三氟甲基)四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-5-基)苯甲酸甲酯(41B)

((3aR,5R,6R,6aR)-6-hydroxy-2,2-dimethyl-6-(trifluoromethyl)tetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (41B)

將41A (1 g，3.42 mmol)溶於乾燥的四氫呋喃(10 ml)中，置換氮氣三次，將反應體系冷卻至0 ℃，緩慢滴加三甲基矽基三氟甲烷(1.02 g，7.18 mmol)，和四丁基氟化銨(1.07 g，4.10 mmol)，反應結束用水(5ml)淬滅，乙酸乙酯(3×5 ml)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~30%)得化合物41B (0.8 g，65%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.16 – 8.05 (m, 2H), 7.66 – 7.55 (m, 1H), 7.51 – 7.38 (m, 2H), 5.99 (d, 1H), 4.76 (dd, 1H), 4.62 (d, 1H), 4.55 – 4.47 (m, 1H), 4.42 – 4.31 (m, 1H), 1.63 (s, 3H), 1.43 (s, 3H)。

¹⁹F NMR (376 MHz, CDCl ₃) δ -73.95。

第二步：((2R,3S,4R,5S)-3,4,5-三羥基-3-(三氟甲基)四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(41C)

((2R,3S,4R,5S)-3,4,5-trihydroxy-3-(trifluoromethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (41C)

將化合物41B (3.14 g，8.67 mmol) 加入到100 mL反應瓶中，加入三氟乙酸(9 ml)/水(1 ml)，在室溫下反應1 h，反應結束用飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH=7，水相用乙酸乙酯萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)得到化合物41C (2.65 g，95%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ8.09 – 7.97 (m, 2H), 7.57 (t, 1H), 7.44 (dd, 2H), 5.61 (d, 1H), 4.74 (dd, 1H), 4.52 (d, 2H), 4.35 (d, 1H)。

¹⁹F NMR (376 MHz, CDCl ₃) δ-74.89。

第三步：(3R,4R,5R)-5-((苯甲醯氧基)甲基)-4-羥基-4-(三氟甲基)四氫呋喃-2,3-二乙酸二酯 (41D)

(3R,4R,5R)-5-((benzoyloxy)methyl)-4-hydroxy-4-(trifluoromethyl)tetrahydrofuran-2,3-diyl diacetate (41D)

將化合物41C (500 mg，1.55 mmol)溶於吡啶(5 ml)中，冰浴下降溫0℃，加入乙酸酐(396 mg，3.88 mmol)和4-二甲氨基吡啶(19 mg，0.16 mmol)，轉移至室溫反應3 h，反應結束加乙酸乙酯(50 ml)稀釋，用0.1 N的鹽酸(20 ml)洗去吡啶，減壓濃縮後快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~30%)得化合物41D (550g，87%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.08 – 8.02 (m, 2H), 7.58 (t, 1H), 7.45 (t, 2H), 6.54 (d, 1H), 5.53 (d, 1H), 4.74 – 4.67 (m, 2H), 4.46 (dd, 1H), 3.64 (dd, 1H), 2.17 (s, 3H), 2.11 (s, 3H)。

第四步：((2R,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-羥基-3-(三氟甲基)四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(41E)

((2R,3R,4R,5R)-4-acetoxy-5-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-hydroxy-3-(trifluoromethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (41E)

將化合物41D (550 mg，1.35 mmol)加入到25 mL反應瓶中，加熱到90℃後加入4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-C]嘧啶(383 mg，2.03 mmol)，加完後滴加四氯化錫兩滴，然後升溫至130℃減壓反應三十分鐘，冷卻至室溫，殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 10:1- 5:1)得到標題化合物41E(293 mg，41%)。

LC-MS (ESI): m/z =535.0[M+H] ⁺。

第五步：((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(三氟甲基)四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯 (41F)

((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(trifluoromethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (41F)

將化合物41E (293 mg，0.55 mmol)溶於甲醇(3 ml)中，加入三乙胺(167 mg，1.65 mmol)和順式-7-氮雜雙環[3.3.0]辛烷鹽酸鹽(122 mg，1.1 mmol)，在室溫反應2 h，反應完畢減壓濃縮得化合物41F粗產物直接用於下一步。

LC-MS (ESI): m/z =568.2[M+H] ⁺。

第六步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(羥甲基)-3-(三氟甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(41G)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)-3-(trifluoromethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol (41G)

將上步化合物41F粗產物溶於甲醇(3 ml)中，加入碳酸鉀(228 mg，1.65 mmol)，加完室溫下反應2 h，加入水(3 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(5 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)，得化合物41G(158 mg，62%)。

LC-MS (ESI): m/z =464.1[M+H] ⁺。

第七步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(三氟甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物41)

化合物41G (158 mg，0.34 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(255 mg，1.02 mmol)溶於磷酸三甲酯(1 ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3 h，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(1 ml)，加完攪拌1 h，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20 min。滯留時間7.0 min得化合物41 (100 mg，47%)。

LC-MS (ESI): m/z =622.1[M+H] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ 8.15 (d, 1H), 6.14 (d, 1H), 5.30 (d, 1H), 4.44 (d, 1H), 4.26 (s, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.04 – 3.86 (m, 1H), 3.85 – 3.73 (m, 1H), 3.65 – 3.52 (m, 1H), 3.47 (d, 1H), 2.91 (s, 1H), 2.79 (s, 1H), 2.23 (t, 2H), 1.98 – 1.81 (m, 2H), 1.77 (d, 1H), 1.70 – 1.62 (m, 1H), 1.51 (dd, 2H)。

¹⁹F NMR (376 MHz, D ₂O) δ -73.67。

實施例 42:

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((1S,5R)-5-羥基金剛烷-2-基)氨基)-1H-吡唑並[3,4- d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸 (化合物42)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((1S,5R)-5-hydroxyadamantan-2-yl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物42)

第一步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-(((1S,5R)-5-羥基金剛烷-2-基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-d ]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(42B)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-(((1S,5R)-5-hydroxyadamantan-2-yl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (42B)

化合物28B (3 g，6.48 mmol)溶於二氯甲烷(30 ml)中，加入三乙胺(1.97 g，19.44 mmol)和(1R,3S)-4-氨基金剛烷-1-醇鹽酸鹽 (2.64 g，12.96 mmol)加完室溫下反應6小時，反應完畢濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)得目標化合物42B(2.32 g，58%)。

LC-MS (ESI): m/z =594.2 [M+1] ⁺。

第二步：(2R,3R,5S)-2-(6-氯-4-(((1S,5R)-5-羥基金剛烷-2-基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇(42C)

(2R,3R,5S)-2-(6-chloro-4-(((1S,5R)-5-hydroxyadamantan-2-yl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol(42C)

化合物42B (2.32 mg，3.91 mmol)溶於甲醇(25 ml)中，加入碳酸鉀(1.62 g，11.73 mmol)，加完室溫下反4小時，加入水(3ml)淬滅反應，乙酸乙酯(30 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：MeOH:EA=0%~10%)，得產物42C (1.72 g，98%)。

LC-MS (ESI): m/z =448.1 [M+1] ⁺。

第三步：(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((1S,5R)-5-羥基金剛烷-2-基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-d] 嘧啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(42D)

(((((2S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((1S,5R)-5-hydroxyadamantan-2-yl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (42D)

化合物42C (500 mg，1.12 mmol)溶於磷酸三甲酯(4 ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(840 mg，3.36 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(2 ml)，加完攪拌1小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.0min得化合物42D(400 mg，59%)。

LC-MS (ESI): m/z =604.0[M-H] ^-。

第四步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((1S,5R)-5-羥基金剛烷-2-基)氨基)-1H-吡唑並[3,4- d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸 (化合物42)

化合物42D (400 mg，0.66 mmol)，N-甲基嗎啉氧化物(232 mg，1.98 mmol)溶於丙酮(3ml)和水(1mL)中，室溫下加入鋨酸鉀(VI)二水合物(22 mg，0.066), 加完室溫反應16小時，反應完畢加亞硫酸鈉淬滅反應，反應液濃縮後送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間6.5min得化合物42(150 mg，36%)。

LC-MS (ESI): m/z =640.0 [M+1] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, D2O) δ = 8.24 (s, 1H), 6.15 (d, 1H), 4.98 (d, 1H), 4.82 (d, 1H), 4.36 – 4.29 (m, 1H), 4.13 (dd, 3H), 3.88 (t, 2H), 2.42 – 2.36 (m, 2H), 2.30 (d, 1H), 2.27 – 2.21 (m, 1H), 2.18 – 2.11 (m, 1H), 1.93 (d, 2H), 1.79 (s, 2H), 1.73 (s, 3H), 1.63 (d, 2H)。

實施例 43 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((1R,5R)-5-羥基金剛烷-2-基)氨基)-1H-吡唑並[3,4- d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸 (化合物43)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((1R,5R)-5-hydroxyadamantan-2-yl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物43)

第一步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-(((1R,5R)-5-羥基金剛烷-2-基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-d ]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(43B)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-(((1R,5R)-5-hydroxyadamantan-2-yl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (43B)

化合物28B (3 g，6.48 mmol)溶於二氯甲烷(30 ml)中，加入三乙胺(1.97 g，19.44 mmol)和(1R,3R)-4-氨基金剛烷-1-醇鹽酸鹽 (2.64 g，12.96 mmol)加完室溫下反應6小時，反應完畢濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)得目標化合物43B (2.2 g，55%)。

LC-MS (ESI): m/z =594.2 [M+1] ⁺。

第二步：(2R,3R,5S)-2-(6-氯-4-(((1R,5R)-5-羥基金剛烷-2-基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇(43C)

(2R,3R,5S)-2-(6-chloro-4-(((1R,5R)-5-hydroxyadamantan-2-yl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (43C)

化合物43B (2.2 mg，3.70 mmol)溶於甲醇(25 ml)中，加入碳酸鉀(1.54 g，11.11 mmol)，加完室溫下反4小時，加入水(3 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(20 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：MeOH:EA=0%~10%)，得產物43C(1.62 g，98%)。

LC-MS (ESI): m/z =448.1 [M+1] ⁺。

第三步：(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((1R,5R)-5-羥基金剛烷-2-基)氨基)-1H-吡唑並[3,4-d] 嘧啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(43D)

(((((2S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(((1R,5R)-5-hydroxyadamantan-2-yl)amino)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (43D)

化合物43C (500 mg，1.12 mmol)溶於磷酸三甲酯(4 ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(840 mg，3.36 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(2 ml)，加完攪拌1小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.0min得化合物43D (350 mg，52%)。

LC-MS (ESI): m/z =604.0[M-H] ^-。

第四步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(((1R,5R)-5-羥基金剛烷-2-基)氨基)-1H-吡唑並[3,4- d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸 (化合物43)

化合物43D (350 mg，0.58 mmol)，N-甲基嗎啉氧化物(204 mg，1.74 mmol)溶於丙酮(3ml)和水(1mL)中，室溫下加入鋨酸鉀(VI)二水合物(19 mg，0.058)，加完室溫反應16小時，反應完畢加亞硫酸鈉淬滅反應，反應液濃縮後送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間6.5min得化合物43(150 mg，40%)。

LC-MS (ESI): m/z =640.0 [M+1] ⁺。

1H NMR (400 MHz, D2O) δ = 8.23 (s, 1H), 6.14 (d, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.41 – 4.35 (m, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.17 – 4.08 (m, 2H), 3.88 (t, 2H), 2.29 (t, 5H), 2.14 (s, 1H), 1.91 (s, 4H), 1.77 (s, 3H), 1.55 – 1.47 (m, 2H)。

實施例 44 ：

(((((2S,3R,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物44)

(((((2S,3R,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物44)

第一步：((2S,3S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯 (44B)

((2S,3S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (44B)

將化合物28B (2 g，3.72 mmol)溶於無水四氫呋喃(20 ml)中，抽換氮氣三次，在冰浴下滴加硼烷二甲基硫醚複合物(11.15 mmol)，在室溫下攪拌16 h，在冰浴下滴加30%的雙氧水(5 ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(1 ml)加完室溫反應2小時，反應完畢加水淬滅反應，用乙酸乙酯(20 ml×3)萃取反應液，合併有機相，濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)，得目標化合物44B (0.93 g，45%)。

LC-MS (ESI): m/z =556.2 [M+1] ⁺。

第二步：((2S,3S,4R,5R)-4-乙醯氧基-3-((第三丁基二苯基氯矽)氧基)甲基)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯 (44C)

((2S,3S,4R,5R)-4-acetoxy-3-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (44C)

將化合物44B (0.93 g，1.67 mol)溶解於二氯甲烷(10 ml)中，添加咪唑(341 mg，5.02 mol)和第三丁基二苯基氯矽烷(689 mg，2.51 mol)，在室溫下反應3 h，反應結束加水(10 ml)淬滅，分離有機相，水相用二氯甲烷(10 ml ×2)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)，得目標化合物44C (648 mg，98%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.09 – 7.92 (m, 2H), 7.83 (s, 1H), 7.72-7.66 (m, 4H), 7.53 (t, 1H), 7.46 – 7.30 (m, 8H), 6.35 (d, 1H), 5.95 (t, 1H), 4.79 – 4.64 (m, 2H), 4.55 (dd, 1H), 4.10 (d, 2H), 4.02 – 3.90 (m, 2H), 3.56 (s, 2H), 2.90 (s, 1H), 2.82 (dt, 2H), 1.99 (s, 3H), 1.94 (s, 1H), 1.82 (dt, 1H), 1.74 – 1.67 (m, 1H), 1.59-1.52 (m, 2H), 1.26 (s, 1H), 1.08 (s, 9H)。

第三步：(2R,3R,4R,5S)-4-(((第三丁基二苯基氯矽基)氧基)甲基)-2-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇 (44D)

(2R,3R,4R,5S)-4-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-2-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3-ol (44D)

化合物44C (1.2 g，1.51 mmol)溶於甲醇(10 ml)中，加入碳酸鉀(626 mg，4.53 mmol)，加完室溫下反應2小時，加入水(3 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(10 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)，得目標化合物44D (648 mg，98%)。

LC-MS (ESI): m/z =648.2 [M+1] ⁺。

第四步：(((((2S,3R,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物44)

化合物44D (350 mg，0.54 mmol)溶於磷酸三甲酯(3ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(405 mg，1.62 mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入6 N HCl (2 ml)，加完攪拌8小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.0min得化合物 44(180 mg，58%)。

LC-MS (ESI): m/z =568.0[M+H] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ 8.11 (d, 1H), 6.04 (d, 1H), 4.96 (dd, 1H), 4.61 (td, 1H), 4.24 – 4.04 (m, 2H), 3.95 (dd, 2H), 3.90 – 3.70 (m, 2H), 3.62 – 3.49 (m, 1H), 3.50 – 3.36 (m, 1H), 2.94-2.87 (m, 1H), 2.37 – 2.19 (m, 2H), 1.95 – 1.81 (m, 2H), 1.76 (dt, 1H), 1.70 – 1.60 (m, 1H), 1.59 – 1.39 (m, 2H)。

實施例 45 :

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-3-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物45)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-ethynyl-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物45)

第一步：(3R,4R,5R)-5-((苯甲醯氧基)甲基)-4-乙炔基-4-羥基四氫呋喃-2,3-二乙酸二酯 (45A)

(3R,4R,5R)-5-((benzoyloxy)methyl)-4-ethynyl-4-hydroxytetrahydrofuran-2,3-diyl diacetate (45A)

將化合物(40E)(1.0 g，3.29 mmol)溶於吡啶(10 ml)中，冰浴下降溫0℃，加入乙酸酐(840 mg，8.23 mmol)和4-二甲氨基吡啶(40 mg，0.33 mmol)，轉移至室溫反應3 h，反應結束加乙酸乙酯(50 ml)稀釋，用0.1 N的鹽酸(100 ml)洗去吡啶，減壓濃縮後快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~30%)得化合物45A (1.2 g，94%)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.11 (d, 2H), 7.57 (t, 1H), 7.45 (t, 2H), 6.19 (d, 1H), 5.50 (d, 1H), 4.74 (dd, 1H), 4.57 (dd, 1H), 4.45 (dd, 1H), 2.75 (s, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.02 (s, 3H)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.05 (d, 2H), 7.57 (t, 1H), 7.45 (t, 2H), 6.51 (d, 1H), 5.44 (d, 1H), 4.65 (dd, 1H), 4.61 – 4.54 (m, 2H), 2.68 (s, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.11 (s, 3H)。

第二步：((2R,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(4,6-二氯-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-3-乙炔基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯 (45B)

((2R,3R,4R,5R)-4-acetoxy-5-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-ethynyl-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (45B)

將化合物45A (1.4 g，3.31 mmol)加入到25 mL反應瓶中，加熱到90℃後加入4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶(0.38 g，4.97 mmol)，加完後滴加四氯化錫兩滴，然後升溫至130℃減壓反應三十分鐘，冷卻至室溫，殘留物用矽膠柱色譜分離提純 (石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 10:1- 5:1)得到標題化合物45B (300 mg，15%)。

LC-MS (ESI): m/z =490.1 [M+H] ⁺。

第三步：((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-3-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯 (45C)

((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-ethynyl-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (45C)

化合物45B (300 mg，0.61 mmol)溶於異丙醇(6 ml)中，加入三乙胺(370 mg，3.66 mmol)和順式-7-氮雜雙環[3.3.0]辛烷鹽酸鹽(203 mg，1.83 mmol)，在80 ℃的油浴鍋中反應3 h，反應完畢減壓濃縮後快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)得化合物45C (167 mg，52%)。

LC-MS (ESI): m/z =523.1 [M+H] ⁺。

第四步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-3-乙炔基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇 (45D)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3-ethynyl-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol (45D)

化合物45C (167 mg，0.32 mmol)溶於甲醇(3 ml)中，加入碳酸鉀(133 mg，0.96 mmol)，加完室溫下反應2 h，加入水(3 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(5 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，過濾濃縮後殘留物柱層析快速分離純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~70%)，得產物45D (130 mg，97%)。

LC-MS (ESI): m/z =419.2 [M+H] ⁺。

第五步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-b]吡啶-1-基)-3-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物45)

化合物45D (130 mg，0.31 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(233 mg，0.93 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3 h，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(2 ml)，加完攪拌1 h，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20 min。滯留時間7.0 min得化合物45 (50 mg，28%)。

LC-MS (ESI): m/z =577.1[M+H] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ 8.81 (s, 1H), 6.35 (s, 1H), 5.96 (d, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.27 (d, 2H), 4.19 (s, 1H), 3.91 (s, 1H), 3.76 (s, 1H), 3.56 (s, 1H), 3.15 (s, 1H), 2.95 (d, 2H), 2.32-2.20 (m, 2H), 1.91 (s, 2H), 1.86 – 1.76 (m, 1H), 1.72 – 1.64 (m, 1H), 1.56 (s, 2H)。

實施例 46 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡唑-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸(化合物46)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-ethyl-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物46)

第一步：(3R,4R,5R)-5-((苯甲醯氧基)甲基)-4-乙基-4-羥基四氫呋喃-2,3-二乙酸二乙酯(46A)

(3R,4R,5R)-5-((benzoyloxy)methyl)-4-ethyl-4-hydroxytetrahydrofuran-2,3-diyldiacetate(46A)

化合物45A (700 mg，1.93 mmoL)溶於乙酸乙酯(10 mL)中，加入Pd/C (21 mg, 0.193 mmoL)，抽乾瓶中氣體後插入氫氣球，於室溫反應2小時，TLC監測反應完畢後墊上矽藻土過濾並用乙酸乙酯洗淨，有機相抽乾後所得殘留物直接投入下一步反應。

第二步：((2R,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-乙基-3-羥基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(46B)

((2R,3R,4R,5R)-4-acetoxy-5-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-ethyl-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (46B)

化合物46A (730 mg，2.17 mmoL)與4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶(452 mg, 2.39 mmoL)溶解於乾燥乙腈(30 mL)中，攪拌下滴入四氯化錫(1.13 g, 4.35 mmoL)加完升溫至80℃反應2小時，TLC監測反應完畢後加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10 mL)和水100 (mL), 以乙酸乙酯(30 mL x 8)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 2:1)得白色泡狀化合物46B (65 mg，6.7 % 2 steps)。

第三步：((2R,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-乙基-3-羥基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(46C)

((2R,3R,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-ethyl-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate(46C)

化合物46B (65 mg，0.131 mmoL)溶於乾燥二氯甲烷(50 mL)，於室溫下加入三乙胺(67 mg, 0.657 mmoL)與順式-7-氮雜雙環[3.3.0]辛烷(29 mg，0.197 mmoL)，加完於室溫下反應2小時。TLC監測反應結束後直接抽乾。粗產物經矽膠柱色譜純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 2:1)得白色發泡狀固體化合物46C (70 mg，93.5%)。

LC-MS (ESI):1.07 min, 570.2 [M+H] ⁺。

第四步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-乙基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(46D)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-ethyl-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol(46D)

化合物46C (70 mg，0.123 mmoL)溶於甲醇(3 mL)，於室溫下加入碳酸鉀(67.9 mg, 0.491 mmoL)，加完於室溫下反應1小時。TLC監測反應結束後加入飽和氯化銨水溶液(2 mL)和水(5 mL)，以乙酸乙酯(2 mL x 8)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:2 至1:10)得白色泡狀化合物46D (45 mg，86.5%)。

第五步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡唑-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-乙炔基-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸(化合物46)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-ethyl-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物46)

化合物46D (45 mg，0.106 mmoL)溶於磷酸三甲酯(0.5 mL)中，冰浴下降溫至0℃，將亞甲基雙(二氯化膦)(106 mg，0.425 mmoL)溶於磷酸三甲酯(0.5 mL)中緩慢滴加到反應液中，加完繼續於0 ℃反應3小時，LCMS監控反應完畢後加入水(0.3 mL)，加完攪拌0.5小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱:SunFire@ Prep C18(19 mm × 250 mm)；2.樣品用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1% TFA)；b. 梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c. 流量12 mL/min；d. 沖提時間10 min, 得化合物46(27 mg，43.7%)。

LC-MS (ESI): 0.64 min, 580.1 [M-H] ^-；

¹H NMR (400 MHz, Deuterium Oxide) δ 8.26 (d, 1H), 6.23 (d, 1H), 5.01 (d, 1H), 4.36 (t, 1H), 4.23 – 3.97 (m, 3H), 3.94 – 3.85 (m, 1H), 3.70 (s, 1H), 3.57 (dd, 1H), 3.00 (s, 1H), 2.88 (s, 1H), 2.32 (t, 2H), 1.95 (dt, 3H), 1.88– 1.71 (m, 3H), 1.71– 1.52 (m, 2H),, 1.12 (t, 3H)。

實施例 47 ：

(((((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-環丙基-3,4-二羥四氫呋喃-2-基)甲氧基(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物47)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-cyclopropyl-3,4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物47)

第一步：(3aR,5R,6R,6aR)-5-((第三丁基二苯基矽氧基)甲基)-6-環丙基-2,2-二甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-6-醇(47A)

(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-6-cyclopropyl-2,2-dimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol(47A)

化合物32A (6.0 g，14.1 mmoL)溶於乾燥四氫呋喃(200 mL)中，冰水浴條件下滴入環丙基溴化鎂(28.1 mL, 1 M in dry THF, 28.1 mmoL)，滴加完後升溫至60℃反應約6小時。TLC監測反應完畢後，加入飽和氯化銨水溶液(100 mL)和水(300 mL)，以乙酸乙酯(100 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後所得殘留物(7 g)直接投入下一步反應。

第二步：(3aR,5R,6R,6aR)-6-環丙基-5-(羥甲基)-2,2-二甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-6-醇(47B)

(3aR,5R,6R,6aR)-6-cyclopropyl-5-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol(47B)

化合物47A (7.0 g，14.9 mmoL)溶於乾燥四氫呋喃(200 mL)中，室溫下四丁基氟化銨的四氫呋喃溶液(19.4 mL, 1 M in dry THF, 19.4 mmoL)，滴加完後於室溫下繼續反應約2小時。TLC監測反應完畢後，加入飽和氯化銨水溶液(100 mL)和水(200 mL)，以乙酸乙酯(100 mL x 5)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後所得粗產物經矽膠柱色譜純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 3:7)得無色油狀化合物47B (2.64 g，81.5% 2 steps)。

第三步：((3aR,5R,6R,6aR)-6-環丙基-6-羥基-2,2-二甲基四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-5-基)甲基苯甲酸酯(47C)

((3aR,5R,6R,6aR)-6-cyclopropyl-6-hydroxy-2,2-dimethyltetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (47C)

化合物47B (2.64 g，11.5 mmoL)溶於乾燥二氯甲烷(150 mL)，於室溫下加入三乙胺(3.49 g, 34.4 mmoL)與苯甲醯氯(2.10 g，14.9 mmoL)，加完於室溫下反應2小時。 TLC監測反應結束後加入飽和氯化銨水溶液(100 mL)和水(200 mL)，以二氯甲烷(100 mL x 5)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後所得粗產物經矽膠柱色譜純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 5:1)得白色發泡狀固體化合物47C (3.64 g，95.0%)。

第四步：((2R,3S,4R,5S)-3-環丙基-3,4,5-三羥基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(47D)

((2R,3S,4R,5S)-3-cyclopropyl-3,4,5-trihydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate(47D)

化合物47C (3.50 g，10.5 mmoL)溶於三氟乙酸(45 mL)和水(5 mL)的混合溶劑中，於室溫下反應30 分鐘。加入飽和碳酸氫鈉水溶液將pH調至中性後，以二氯甲烷(50 mL x 10)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後所得粗產物經矽膠柱色譜純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:1)得無色油狀化合物47D (2.80 g，90.9%)。

第五步：(3R,4R,5R)-5-((苯甲醯氧基)甲基)-4-環丙基-4-羥基四氫呋喃-2,3-二乙酸二乙酯(47E)

(3R,4R,5R)-5-((benzoyloxy)methyl)-4-cyclopropyl-4-hydroxytetrahydrofuran-2,3-diyl diacetate (47E)

化合物47D (2.80 g，9.51 mmoL)溶於吡啶(30 mL)，於室溫下加入4-二甲氨基吡啶(233 mg, 1.91 mmoL)與乙酸酐(2.43 g，23.8 mmoL)，加完於室溫下反應2小時。 TLC監測反應結束後加入二氯甲烷(150 mL)，有機相以1 N稀鹽酸水溶液洗滌(50 mL x 3)，除去多餘的吡啶後有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後。粗產物經矽膠柱色譜純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 4:1)得白色發泡狀固體化合物47E (2.60 g，72.2%)。

第六步：((2R,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-3-環丙基-5-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-羥基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(47F)

((2R,3R,4R,5R)-4-acetoxy-3-cyclopropyl-5-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (47F)

化合物47E (1.5 g，3.97 mmoL)與4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶(825 mg, 4.37 mmoL)溶解於乾燥乙腈(50 mL)中，攪拌下滴入四氯化錫(2.07 g, 7.94 mmoL)加完於室溫下反應4小時，TLC監測反應完畢後加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20 mL)和水100 (mL)，以乙酸乙酯(30 mL × 8)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 2:1)得白色泡狀化合物47F(140 mg，7.0 %)。

第七步：((2R,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-環丙基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(47G)

((2R,3R,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-cyclopropyl-3-hydroxytetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (47G)

化合物47F (140mg，0.276 mmoL)溶於乾燥二氯甲烷(10 mL)，於室溫下加入三乙胺(140 mg, 1.37 mmoL)與順式-7-氮雜雙環[3.3.0]辛烷(61.3 mg，0.414 mmoL)，加完於室溫下反應2小時。TLC監測反應結束後直接抽乾。粗產物經矽膠柱色譜純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 2:1)得白色發泡狀固體化合物47G(130 mg，81.1%)。

LC-MS (ESI): 582.2 [M+H] ⁺。

第八步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-環丙基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3,4-二醇(47H)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-cyclopropyl-2-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-3,4-diol (47H)

化合物47G (130 mg，0.224 mmoL)溶於甲醇(8 mL)，於室溫下加入碳酸鉀(155 mg, 1.12 mmoL)，加完於室溫下反應2小時。TLC監測反應結束後加入飽和氯化銨水溶液(2 mL)和水(5 mL)，以乙酸乙酯(2 mL x 8)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:2 至1:10)得化合物47H (89 mg，91.2%)。

LC-MS (ESI): 436.2 [M+H] ⁺。

第九步：(((((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-環丙基-3,4-二羥四氫呋喃-2-基)甲氧基(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物47)

化合物47H (89 mg，0.204 mmoL)溶於磷酸三甲酯(1 mL)中，冰浴下降溫至0℃，將亞甲基雙(二氯化膦)(153 mg，0.612 mmoL)溶於磷酸三甲酯(0.5 mL)中緩慢滴加到反應液中，加完繼續於0 ℃反應3小時，LCMS監控反應完畢後加入水(0.5 mL)，加完攪拌0.5小時，反應完畢後直接將反應體系送製備HPLC，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19 mm × 250 mm)；2.樣品用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1% TFA)；b. 梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c. 流量12 mL/min；d. 沖提時間10 min。得化合物47(40 mg，33.0%)。

LC-MS (ESI): 0.59 min, 592.1 [M-H] ^-；

¹H NMR (400 MHz, Deuterium Oxide) δ 8.25 (d, 1H), 6.20 (d, 1H), 5.03 (d, 1H), 4.42 – 4.25 (m, 3H), 4.13– 3.95 (m, 1H), 3.89 (td, 1H), 3.68 (td, 1H), 3.61 – 3.48 (m, 1H), 3.00 (s, 1H), 2.87 (d, 1H), 2.48 – 2.27 (m, 2H), 2.05 – 1.91 (m, 2H), 1.89 – 1.69 (m, 2H), 1.68 – 1.51 (m, 2H), 1.24 – 1.13 (m, 1H), 0.78 – 0.50 (m, 4H)。

實施例 48 ：

(((((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物48)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物48)

第一步：((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(48A)

((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (48A)

氮氣保護下，將化合物40F (315 mg，0.601 mmoL)、無水硫酸銅(31 mg, 0.124 mmoL)、抗壞血酸鈉(49 mg，0.247 mmoL)和疊氮基三甲基矽烷(107 mg，0.928 mmoL)溶於N,N-二甲基甲醯胺/水(4:1, v/v)的混合溶劑(20 mL)中，於100℃下反應4小時。 TLC監測反應結束後加水(50 mL), 以二氯甲烷(20 mL x 5)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮後所得粗產物經矽膠柱色譜純化(二氯甲烷：甲醇 (v/v )= 10:1)得化合物48A (300 mg，88.0%)。

LC-MS (ESI): 567.2 [M+H] ⁺。

第二步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(羥甲基)-3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)四氫呋喃-3,4-二醇(48B)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)-3-(1H-1,2,3-triazol-4-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol(48B)

化合物48A (150 mg，0.265 mmoL)溶於甲醇(6 mL)與四氫呋喃(3 mL)的混合溶劑中，於室溫下加入碳酸鉀(110 mg, 0.794 mmoL)，加完於室溫下反應5小時。TLC監測反應結束後加入飽和氯化銨水溶液(3 mL)和水(5 mL), 以乙酸乙酯(2 mL × 8)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後經柱層析純化(二氯甲烷：甲醇 (v/v )= 10:1)得棕黃色固體化合物48B (90 mg，73.5%)。

LC-MS (ESI):463.1 [M+H] ⁺。

第三步：(((((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物48)

化合物48B (90 mg，0.194 mmoL)溶於磷酸三甲酯(1 mL)中，冰浴下降溫至0℃，將亞甲基雙(二氯化膦)(146 mg，0.583 mmoL)溶於磷酸三甲酯(1 mL)中緩慢滴加到反應液中，加完繼續於0 ℃反應3小時，LCMS監控反應完畢後加入水(0.5 mL)，加完攪拌0.5小時，反應完畢後直接將反應體系送製備HPLC，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19 mm × 250 mm)；2.樣品用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1% TFA)；b. 梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c. 流量12 mL/min；d. 沖提時間10 min。得化合物48(38 mg，31.4%)。

LC-MS (ESI): 619.0 [M-H] ^-；

¹H NMR (400 MHz, D2O) δ 8.39 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 5.80 (s, 1H), 4.92 – 4.63 (m, 2H, overlapped), 4.26 – 4.05 (m, 1H), 3.99 – 3.71 (m, 4H), 3.62 (d, 1H), 3.03 (s, 1H), 2.90 (s, 1H), 2.07 – 1.57 (m, 8H)。

實施例 49

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-(2-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-2-基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基) -3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物49)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-(2-azabicyclo[2.2.2]octan-2-yl)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物49)

第一步：((2S,4R,5R)-5-(4-(2-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-2-基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基) -4-乙醯氧基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(49B)

((2S,4R,5R)-5-(4-(2-azabicyclo[2.2.2]octan-2-yl)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-acetoxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (49B)

將28B (1g, 2.16mmol)和 2-氮雜雙環[2.2.2]辛烷鹽酸鹽(410mg, 2.79mmol)加入二氯甲烷中，再加入N,N-二異丙基乙胺(1.12g, 8.64mmol)，室溫反應2h。TLC監測原料消失，直接將反應液加入矽膠,濃縮後粗產物通過矽膠柱色譜分離純化(沖提劑EA/PE=0-30%)，得到標題化合物(600mg, 51.6%)。

LC-MS (ESI): m/z = 538.2 [M+H] ⁺。

第二步：(2R,3R,5S)-2-(4-(2-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-2-基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇 (49C)

(2R,3R,5S)-2-(4-(2-azabicyclo[2.2.2]octan-2-yl)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (49C)

將49B (600mg, 1.12mmol)，碳酸鉀(460mg, 3.33mmol)加入甲醇(10ml)中，室溫反應3h，LC-MS監測反應完全，濃縮除去甲醇，加水(20 mL)和乙酸乙酯(20 mL×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後粗產物通過矽膠柱色譜分離純化(沖提劑DCM:MeOH =0-5%)，得到標題化合物(430mg, 98%)。

LC-MS (ESI): m/z = 392.1 [M+H] ⁺。

第三步：(((((2S,4R,5R)-5-(4-(2-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-2-基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基 )磷醯基)甲基)膦酸(49D)

(((((2S,4R,5R)-5-(4-(2-azabicyclo[2.2.2]octan-2-yl)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (49D)

將49C (430mg, 1.1mmol)加入磷酸三甲酯(5ml)中，再將亞甲基雙氯化磷(830mg, 3.31mmol)溶於磷酸三甲酯(1ml)後於冰浴下滴入反應體系中，保持0℃反應3h，LC-MS監測原料消失，冰浴下加入水(1ml)，繼續0℃反應1h，C18逆相柱純化，流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)，(A/B=40%/60%)分離提純得到標題化合物 (200mg 33%)。

LC-MS (ESI): m/z = 550.1 [M+H] ⁺。

第四步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-(2-氮雜雙環[2.2.2]辛烷-2-基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基) -3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物49)

將49D (200mg, 0.36mmol)，二水合鋨酸鉀(10mg)和-N-甲基嗎啉-N-氧化物(210mg, 1.79mmol)加入丙酮(6ml)和水(2ml)的混合體系中。室溫反應過夜，LC-MS監測反應完全，將反應液過濾，濾液減壓濃縮掉丙酮，HPLC分離提純得到標題化合物 (18mg 8%)。製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用DMF溶解，用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至40%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ 8.25 (s, 1H), 6.15 (d, 1H), 4.97 (d, 1H), 4.35 – 4.28 (m, 1H), 4.11 (s, 2H), 3.91 – 3.57 (m, 4H), 2.31-2.17 (m, 2H), 2.16 – 1.90 (m, 2H), 1.90-1.66 (m, , 8H)。

LC-MS (ESI): m/z = 584.1[M+H] ⁺。

實施例 50

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-(金剛烷-1-基氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基 )磷醯基)甲基)膦酸 (化合物50)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-(adamantan-1-ylamino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物50)

第一步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(4-(金剛烷-1-基氨基)-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-甲基四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯 (50B)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(4-(adamantan-1-ylamino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (50B)

將28B (1g, 2.16mmol)和金剛烷胺(650mg, 4.30mmol)加入二氯甲烷中，再加入N,N-二異丙基乙胺(0.83g, 6.46mmol)，室溫反應16h。TLC監測原料消失，直接將反應液加入矽膠，濃縮後粗產物通過矽膠柱色譜分離純化(沖提劑EA/PE=0-30%)，得到標題化合物(730mg, 58%)。

LC-MS (ESI): m/z = 612.2 [M+H] ⁺。

第二步：(2R,3R,5S)-2-(4-(金剛烷-1-基氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇 (50C)

(2R,3R,5S)-2-(4-(adamantan-1-ylamino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (50C)

將50B (730mg, 1.26mmol)，碳酸鉀(520mg, 3.76mmol)加入甲醇(10ml)中，室溫反應3h，LC-MS監測反應完全，有大量白色固體析出，加入水(20ml)，過濾，固體直接用水洗滌，減壓濃縮乾燥，得到標題化合物(500mg, 91%)。

LC-MS (ESI): m/z = 432.2 [M+H] ⁺。

第三步：(((((2S,4R,5R)-5-(4-(金剛烷-1-基氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(50D)

(((((2S,4R,5R)-5-(4-(adamantan-1-ylamino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (50D)

將50C (500mg, 1.16mmol)加入磷酸三甲酯(10ml)中，再將亞甲基雙氯化磷(870mg, 3.48mmol)溶於磷酸三甲酯(2ml)後於冰浴下滴入反應體系中，保持0℃反應3h，LC-MS監測原料消失，冰浴下加入水(0.5ml)，繼續0℃反應1h，C ₁₈逆相柱純化，流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)，(A/B=40%/60%)，分離提純得到標題化合物 (400mg 58%)。

LC-MS (ESI): m/z = 590.1 [M+H] ⁺。

第四步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-(金剛烷-1-基氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基 )磷醯基)甲基)膦酸 (化合物50)

將50D (400mg, 0.68mmol), 二水合鋨酸鉀(10mg)和-N-甲基嗎啉-N-氧化物(400mg, 3.4mmol)加入丙酮(6ml)和水(2ml)的混合體系中。室溫反應過夜，LC-MS監測反應完全，將反應液過濾，濾液減壓濃縮掉丙酮， HPLC分離提純得到標題化合物 (45mg 10.6%)。製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用DMF溶解，用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至40%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。

¹HNMR(400 MHz, DMSO) δ 8.38 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 6.00 (d, 1H), 4.75 (d, 1H), 4.27-4.22 (m, 1H), 4.07-4.04 (m, 1H), 3.99-3.92 (m 1H), 3.54 (dd, 2H), 2.22 – 2.07 (m, 11H), 1.70-1.67 (m, 6H)

LC-MS (ESI): m/z = 624.1[M+H] ⁺。

實施例 51

((((((2R,4R,5R)-5-(4-(8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)-6-氯-1H-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物51)

(((((2R,4R,5R)-5-(4-(8-azabicyclo[3.2.1]octan-8-yl)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物51)

第一步：((2S,4R,5R)-5-(4-(8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-乙醯氧基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(51A)

((2S,4R,5R)-5-(4-(8-azabicyclo[3.2.1]octan-8-yl)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-acetoxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (51A)

28B (1.0 g，2.1 mmol)溶於二氯甲烷(10 mL)中，然後加入8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷鹽酸鹽(0.41 g，2.7 mmol)，二異丙基乙胺(1.1 g，8.4 mmol)加完室溫反應2小時，反應完畢後加水，二氯甲烷(50 mL×2)萃取兩次，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 2:1)得到標題化合物51A (0.8 g，69%)。

LC-MS (ESI): m/z =538.2 [M+H] ⁺。

第二步：(2R,3R,5S)-2-(4-(8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇(51B)

(2R,3R,5S)-2-(4-(8-azabicyclo[3.2.1]octan-8-yl)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (51B)

化合物51A (0.8 g，1.49 mmol)溶於甲醇(8 mL)中，再加入碳酸鉀(0.62 g，4.47 mmol)，加完室溫攪2小時後，濃縮除去甲醇，加水(20 mL)和乙酸乙酯(20 mL×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物得到標題化合物51B (0.58 g，100%)。

LC-MS (ESI): m/z =392.1 [M+H] ⁺。

第三步：((((((2S,4R,5R)-5-(4-(8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)-6-氯-1H-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(51C)

(((((2S,4R,5R)-5-(4-(8-azabicyclo[3.2.1]octan-8-yl)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (51C)

化合物51B (0.58 g，1.48 mmol)溶於磷酸三甲酯(3 mL)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(1.15 g，4.45 mmol)溶於磷酸三甲酯(3 mL)中緩慢滴加到反應液中，加完控溫0℃反應2小時，反應完畢後加入水(1ml)後直接C18逆相柱純化，流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)，(A/B=40%/60%)，得化合物51C (140 mg，20 %)。

LC-MS (ESI): m/z =550.1 [M+H] ⁺。

第四步：((((((2R,4R,5R)-5-(4-(8-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)-6-氯-1H-吡唑基[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物51)

化合物51C (0.14 g，0.25 mmol)溶於丙酮(6ml)和水(2ml)的混合溶劑中，加入N-甲基氧化嗎啉(0.15 g，1.27 mmol)，加入催化量二水合鋨酸鉀(5 mg)加完室溫下反應15小時，反應完畢後濃縮掉丙酮後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20 min。滯留時間6.5 min得化合物51(0.04 g，27 %)。

LCMS m/z =582.0 [M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O): 8.25(s, 1H), 6.16-6.15 (d, 1H), 4.98-4.96 (d, 1H), 4.91(s, 1H), 4.70(d, 1H), 4.33-4.30 (t, 1H), 4.13-4.10 (t, 2H), 3.90-3.81 (m, 2H), 2.29-1.56 (m, 12H)。

實施例 52

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(丙-1-炔-1-基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物52)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(prop-1-yn-1-yl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物52)

第一步：(3aR,5R,6R,6aR)-5-((第三丁基二苯基矽氧基)甲基)-2,2-二甲基-6-(丙基-1-炔-1基)四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-6-醇(52B)

(3aR,5R,6R,6aR)-5-(((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyl-6-(prop-1-yn-1-yl)tetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol (52B)

32A (5.0g， 11.78mmol)溶解於無水四氫呋喃(50mL)中，氮氣保護下，乾冰乙醇降溫到-78℃，滴加1-丙炔基溴化鎂(12.96mL，12.96mmol)的四氫呋喃南溶液，滴完後在該溫度下反應3小時。反應完畢後，用氯化銨水溶液淬滅反應，用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾得到粗產物52B (5.65g，103.22%)，直接用於下一步。

第二步：(3aR,5R,6R,6aR)-5-(羥甲基)-2,2-二甲基-6-(丙基-1-炔-1基)四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-6-醇(52C)

(3aR,5R,6R,6aR)-5-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyl-6-(prop-1-yn-1-yl)tetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-6-ol (52C)

化合物52B (7.0g，15.06mmol)溶於THF (100mL)中，加入四丁基氟化銨的四氫呋喃溶液(19.58mL，19.58mmol)，室溫攪拌3小時。反應完畢後旋去四氫呋喃，加入乙酸乙酯(50mL)，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 1:1)得到52C (2.82g，82.76%)。

第三步：((3aR,5R,6R,6aR)-6-羥基-2,2-二甲基-6-(丙基-1-炔-1基)四氫呋喃[2,3-d][1,3]二氧雜環-5 -基)甲基苯甲酸酯(52D)

((3aR,5R,6R,6aR)-6-hydroxy-2,2-dimethyl-6-(prop-1-yn-1-yl)tetrahydrofuro[2,3-d][1,3]dioxol-5-yl)methyl benzoate (52D)

52C (2.82g，12.46mmol)溶解於二氯甲烷(28mL)中，氮氣保護下降溫至0℃，加入三乙胺(3.78g，37.38mmol)，滴加苯甲醯氯(2.28g，16.20mmol)，滴完該溫度下反應3小時。反應完全後，加入水淬滅反應，分液，水相用二氯甲烷(20mL)萃取一次，合併有機相，鹽水洗，乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 5:1)得到52D (3.27g，79.44%)。

第四步：((2R,3S,4R,5S)-3,4,5-三羥基-3-(丙基-1-炔-1基)四氫呋喃-2-基)甲基苯甲酸酯(52E)

((2R,3S,4R,5S)-3,4,5-trihydroxy-3-(prop-1-yn-1-yl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate(52E)

52D (3.27g，9.90mmol)放入單口瓶中，加入三氟乙酸(9mL)和水(1mL)，室溫攪拌3小時。反應完後，旋去大部分三氟乙酸，加入乙酸乙酯(20mL),用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌直到水相為鹼性，然後無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 1:1)得到52E (1.37g，47.67%)。

第五步：(2R,3R,4R,5R)-5-((苯甲醯氧基)甲基)-4-羥基-4-(丙基-1-炔-1基)四氫呋喃-2,3-二乙酸二酯(52F)

(2R,3R,4R,5R)-5-((benzoyloxy)methyl)-4-hydroxy-4-(prop-1-yn-1-yl)tetrahydrofuran-2,3-diyl diacetate (52F)

52E (1.37g，4.72mmol)溶解在吡啶(13mL)中，加入DMAP (0.058g，0.47mmol)，滴入乙酸酐(0.96g，9.44mmol)，室溫反應3小時。反應完畢後，旋除去大部分吡啶，加入乙酸乙酯(20mL),用 1M的鹽酸洗滌，直到將吡啶洗除為止，有機相再用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 2:1)得到52F (1.2g，67.91%)。

第六步：((2R,3R,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-羥基-3-(丙-1-炔-1-基)四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(52G)

((2R,3R,4R,5R)-4-acetoxy-5-(4,6-dichloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-hydroxy-3-(prop-1-yn-1-yl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (52G)

52F (1.2g，3.31mmol)加入單口瓶中，攪拌加熱到90℃呈現熔融狀態，加入4,6-二氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶(0.94g，4.96mmol)和1滴四氯化錫，然後升溫至130℃，水泵減壓下攪拌30分鐘，反應完全後，降溫至室溫，加入二氯甲烷和少量甲醇，超聲至大部分溶解，直接加入矽膠拌樣，矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 2:1)得到52G (0.5g，29.89%)。

第七步：((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基) -1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(丙-1-炔-1-基)四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(52H)

((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(prop-1-yn-1-yl)tetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (52H)

52G (0.5g，0.99mmol)用甲醇(5mL)溶解，加入三乙胺(0.30g，2.97mmol)和八氫環戊二烯[c]吡咯鹽酸鹽(0.219g，1.48mmol)，室溫攪拌3小時，反應完畢後，旋乾，矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 2:1)得到52H (0.35g，60.95%)。

第八步：(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(羥甲基)-3-(丙-1-炔-1-基)四氫呋喃-3,4-二醇(52I)

(2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)-3-(prop-1-yn-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol (52I)

52H (0.35g，0.6mmol)溶解於甲醇(5mL)中，加入碳酸鉀(0.25g，1.80mmol)，室溫攪拌3小時，反應完畢後，加入乙酸乙酯(10mL)，用水洗滌，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，旋乾，矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 1:1)得到52I (0.19g，72.98%)。

第九步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊基[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(丙-1-炔-1-基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)膦醯基)甲基)磷酸 (化合物52)

52I (0.19g，0.44mmol)用溶於磷酸三甲酯(2mL)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(0.33g，1.32mmol)溶於磷酸三甲酯(2mL)中緩慢滴加到反應液中，加完控溫在0℃下反應2小時，反應完畢後加入水(1mL)後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters2767製備液相；色譜柱:SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A,B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間6.2min得化合物52(94mg，36.09%)。

LCMS m/z =592.1 [M+H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (s, 1H), 5.98 (d, 1H), 4.82 (t, 1H), 4.28 (td, 1H), 4.13 – 4.02 (m, 2H), 4.02 – 3.93 (m, 1H), 3.91 – 3.81 (m, 1H), 3.61 (dd, 1H), 3.48 (dd, 1H), 2.93 – 2.85 (m, 1H), 2.80 – 2.69 (m, 1H), 2.25 – 2.00 (m, 2H), 1.93 – 1.70 (m, 6H), 1.67 – 1.47 (m, 3H)。

實施例 53:

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((R/S)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸 (化合物53)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((R/S)-2-(2-fluorophenyl)piperidin-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物53)

第一步：(5-(2-氟代苯基)-5-氧代戊基)碳酸第三丁酯(53B)

tert-butyl (5-(2-fluorophenyl)-5-oxopentyl)carbamate(53B)

將53A (10 g，57.14 mmol)溶於乾燥的四氫呋喃(100 ml)中，置換氮氣三次，將反應體系冷卻至-78 ℃，緩慢滴加異丙基溴化鎂(62.86 mmol)，滴加完畢溫度升至0 ℃下反應1 h。將反應體系冷卻至-78 ℃，滴加溶在四氫呋喃的2-氧代哌啶-1-羧酸第三丁酯(62.86 mmol)溶液，滴加完畢自然升溫至室溫，繼續反應2 h，應結束用飽和氯化銨溶液(100 ml)淬滅，乙酸乙酯(3×100 ml)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後得粗產物化合物53B直接用於下一步。

LC-MS (ESI): m/z =196.2 [M-100+1]。

第二步：6-(2-氟苯基)-2,3,4,5-四氫吡啶(53C)

6-(2-fluorophenyl)-2,3,4,5-tetrahydropyridine (53C)

將上步粗產物溶於甲苯(80 ml)中，補加濃鹽酸(10 ml)，將反應體系置於65 ℃的油浴鍋中攪拌16 h，反應結束將反應體系自然降溫至室溫，用2 M的氫氧化鈉水溶液調節反應體系pH=14，乙酸乙酯(3×100 ml)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮後得粗產物化合物53C直接用於下一步。

LC-MS (ESI): m/z =178.1 [M+1] ⁺。

第三步：2-(2-氟苯基)哌啶(53D)

2-(2-fluorophenyl)piperidine (53D)

將上步粗產物溶於甲醇/水=4/1 (100 ml)的混合溶液中，反應體系在冰浴下冷卻，分批加入硼氫化鈉(4.76 g，125.71 mmol)，自然升溫至室溫，在室溫下反應1 h。反應結束反應體系在0 ℃下用1 M的鹽酸水溶液淬滅反應，乙酸乙酯(100 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~50%)，得化合物53D(4.09 g，40%)。

LC-MS (ESI): m/z =180.1 [M+1] ⁺。

第四步：2-(2-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯(53E和54A)

benzyl -2-(2-fluorophenyl)piperidine-1-carboxylate(53E and 54A)

將53D (4.09 g，22.86 mmol)溶於二氯甲烷(40 ml)中，補加三乙胺(6.93 g，68.58 mmol)，反應體系置於冰浴中冷卻，滴加氯甲酸苄酯(5.85 g，34.29 mmol)，自然升溫至室溫，在室溫下攪拌2 h。反應結束加水(40 ml)淬滅反應，二氯甲烷(40 ml×2)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~20%)，得化合物53E和54A(6.80 g，95%)。

LC-MS (ESI): m/z =314.1 [M+1]。

化合物53E和54A的拆分

取2-(2-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯(化合物53E和54A)(5 g)用於拆分，分離後得到化合物53E (滯留時間：1.257s，2.31 g, ee%=100%)，化合物54A (滯留時間：1.553 s，2.34 g，ee%=100%)。拆分條件：儀器: Waters 150 MGM；柱: DAICEL CHIRALPAK AD；流動相: A for CO ₂及 B for EtOH (0.1%NH3•H2O))；梯度: B 40%；流量: 120 mL /min；背壓: 100 bar；柱溫: 35℃；波長: 220 nm；週期: 13min；

第五步：(R/S)-2-(2-氟苯基)哌啶(53F)

(R/S)-2-(2-fluorophenyl)piperidine (53F)

將化合物53E (2 g，6.48 mmol)溶於甲醇(20 ml)中，置換氮氣三次，補加Pd/C (20 mg)，置換氫氣三次，在室溫下反應過夜，反應完全後，過濾，濾餅用甲醇洗滌，濾液旋乾得到化合物53F (1.12 g，98%)。

LC-MS (ESI): m/z =180.2 [M+1] ⁺。

第六步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-((R/S)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-基)-1H-吡唑並[3,4-d ]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(53G)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-((R/S)-2-(2-fluorophenyl)piperidin-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (53G)

化合物53F (1.12 g，6.26 mmol)溶於二氯甲烷(10 ml)中，加入三乙胺(1.90 g，18.77 mmol)和化合物28B (2.42 g，5.22 mmol)加完室溫下反應6小時，反應完畢濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~30%)得目標化合物53G(1.83 g，58%)。

LC-MS (ESI): m/z =606.2 [M+1] ⁺。

第七步：(2R,3R,5S)-2-(6-氯-4-((R/S)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1- yl)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇(53H)

(2R,3R,5S)-2-(6-chloro-4-((R/S)-2-(2-fluorophenyl)piperidin-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (53H)

化合物53G (1.83 g，3.02 mmol)溶於甲醇(20 ml)中，加入碳酸鉀(1.25 g，9.06 mmol)，加完室溫下反應4小時，加入水(20 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(30 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：MeOH:EA=0%~10%)，得產物53H (1.36 g，98%)。

LC-MS (ESI): m/z =460.1 [M+1] ⁺。

第八步：(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((R/S)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-基)-1H-吡唑並[3,4-d]) 嘧啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(53I)

(((((2S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((R/S)-2-(2-fluorophenyl)piperidin-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (53I)

化合物53H (200 mg，0.43 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(435 mg，1.74 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(2 ml)，加完攪拌1小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.0min得化合物53I(156 mg，59%)。

LC-MS (ESI): m/z =618.2 [M+1] ⁺。

第九步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((R/S)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-基)-1H-吡唑並[3,4- d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物53)

化合物53I (156 mg，0.25 mmol)，N-甲基嗎啉氧化物(103 mg，0.76 mmol)溶於丙酮(3ml)和水(1mL)中，室溫下加入鋨酸鉀(VI)二水合物(10 mg)，加完室溫反應16小時，反應完畢加亞硫酸鈉淬滅反應，反應液濃縮後送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間6.5min得化合物42(60 mg，36%)。

LC-MS (ESI): m/z =652.2 [M+1] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ 7.99 (s, 1H), 7.09 (t, 4H), 6.13 (d, 1H), 5.90 (s, 1H), 4.88 (d, 1H), 4.51 (s, 1H), 4.28 (s, 1H), 4.09 (s, 2H), 3.82 (q, 2H), 3.49 (d, 1H), 2.22 (dd, 4H), 1.76 (d, 2H), 1.53 (d, , 2H)。

¹⁹F NMR (377 MHz, D ₂O) δ -114.54。

實施例 54 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((S/R)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-基)-1H-吡唑並[3,4- d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物54)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((S/R)-2-(2-fluorophenyl)piperidin-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物54)

第一步：(S/R)-2-(2-氟苯基)哌啶(54B)

(S/R)-2-(2-fluorophenyl)piperidine (54B)

將化合物54A (2 g，6.48 mmol)溶於甲醇(20 ml)中，置換氮氣三次，補加Pd/C (20 mg)，置換氫氣三次，在室溫下反應過夜，反應完全後，過濾，濾餅用甲醇洗滌，濾液旋乾得到化合物54B (1.11 g，98%)。

LC-MS (ESI): m/z =180.2 [M+1] ⁺。

第二步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-((S/R)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-基)-1H-吡唑並[3,4-d ]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(54C)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-((S/R)-2-(2-fluorophenyl)piperidin-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (54C)

化合物54B (1.11 g，6.26 mmol)溶於二氯甲烷(10 ml)中，加入三乙胺(1.90 g，18.77 mmol)和化合物28B (2.42 g，5.22 mmol)加完室溫下反應6小時，反應完畢濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：EA:PE=0%~30%)得目標化合物54C (1.81 g，48%)。

LC-MS (ESI): m/z =606.2 [M+1] ⁺。

第三步：(2R,3R,5S)-2-(6-氯-4-((S/R)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1- yl)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇(54D)

(2R,3R,5S)-2-(6-chloro-4-((S/R)-2-(2-fluorophenyl)piperidin-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (54D)

化合物54C (1.81 g，2.99 mmol)溶於甲醇(20 ml)中，加入碳酸鉀(1.25 g，9.06 mmol)，加完室溫下反應4小時，加入水(20 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(30 ml×3)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮所得殘留物矽膠柱色譜純化(沖提劑比例：MeOH:EA=0%~10%)，得產物54D (1.35 g，98%)。

LC-MS (ESI): m/z =460.1 [M+1] ⁺。

第四步：(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((S/R)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-基)-1H-吡唑並[3,4-d]) 嘧啶-1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(54E)

(((((2S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((S/R)-2-(2-fluorophenyl)piperidin-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (54E)

化合物54D (200 mg，0.43 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(435 mg，1.74 mmol)溶於磷酸三甲酯(2 ml)中緩慢滴加到反應液中，加完0℃反應3小時，LCMS監控反應，反應完畢後加入水(2 ml)，加完攪拌1小時，反應完畢後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.0min得化合物54E (155 mg，59%)。

LC-MS (ESI): m/z =618.2[M+1] ⁺。

第五步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((S/R)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-基)-1H-吡唑並[3,4- d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物54)

化合物54E (156 mg，0.25 mmol)，N-甲基嗎啉氧化物(103 mg，0.76 mmol)溶於丙酮(3ml)和水(1mL)中，室溫下加入鋨酸鉀(VI)二水合物(10 mg), 加完室溫反應16小時，反應完畢加亞硫酸鈉淬滅反應，反應液濃縮後送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間6.5min得化合物54 (57 mg，35%)。

LC-MS (ESI): m/z =652.2 [M+1] ⁺。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ 8.09 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.19 (dd, 2H), 7.10 (t, 1H), 6.16 (d, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.95 (d, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.30 (t, 1H), 4.15 – 4.00 (m, 2H), 3.85 (q, 2H), 3.62 (s, 1H), 2.25 (s, 2H), 2.19 (d, 1H), 2.15 (s, 1H), 1.90 (s, 1H), 1.78 (s, 1H), 1.66 (s, 2H)。

¹⁹F NMR (376 MHz, D ₂O) δ -114.64。

實施例 55 ：

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(4,4-二甲基-1,4-氮雜矽烷-1-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物55)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(4,4-dimethyl-1,4-azasilinan-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (化合物55)

第一步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(6-氯-4-(4,4-二甲基-1,4-氮雜矽烷-1-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(55A)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(6-chloro-4-(4,4-dimethyl-1,4-azasilinan-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methylbenzoate (55A)

化合物28B (1.5g，3.24mmol)溶於二氯甲烷(15ml)中，然後加入4,4-二甲基-[1,4]矽雜哌啶鹽酸鹽(0.64，3.86mmol)，降溫至0℃，然後加入三乙胺(0.99g，9.74mmol)加完室溫反應1小時，反應完畢後反應液直接濃縮，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 4:1)得到化合物55A (0.7g，38.8%)。

LC-MS (ESI): m/z =556.1 [M+H] ⁺。

第二步：(2R,3R,5S)-2-(6-氯-4-(4,4-二甲基-1,4-氮雜矽烷-1-基) -1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(羥甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇(55B)

(2R,3R,5S)-2-(6-chloro-4-(4,4-dimethyl-1,4-azasilinan-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(hydroxymethyl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol (55B)

化合物55A (0.7g，1.26mmol)溶於甲醇(10ml)中，加入碳酸鉀(3.78g，2.61mmol)加完室溫攪拌3小時，反應完畢後，反應液濃縮，濃縮殘留物加入水，二氯甲烷(50ml×2)萃取兩次，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 3:1)得到標題化合物55B (0.46g，89.0%)。

LC-MS (ESI): m/z =410.1 [M+H] ⁺。

第三步：(((((2S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(4,4-二甲基-1,4-氮雜矽烷-1-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶) -1-基)-4-羥基-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(55C)

(((((2S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(4,4-dimethyl-1,4-azasilinan-1-yl)-1H-pyrazolo [3,4-d]pyrimidin-1-yl)-4-hydroxy-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydr-oxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid (55C)

化合物55B (0.46g，1.12mmol)溶於磷酸三甲酯(5ml)中，冰浴下降溫0℃，亞甲基雙(二氯化膦)(0.84g，3.36mmol)溶於磷酸三甲酯(5ml)中緩慢滴加到反應液中，加完控溫0℃反應2小時，反應完畢後加入水(5ml)後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間8.9min得化合物55C (0.31g，48.7%)。

LC-MS (ESI): m/z =568.1 [M+H] ⁺。

第四步：(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-(4,4-二甲基-1,4-氮雜矽烷-1-基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷醯基)甲基)膦酸(化合物55)

(((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(4,4-dimethyl-1,4-azasilinan-1-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)(hydroxy)phosphoryl)methyl)phosphonic acid(化合物55)

化合物55C (0.31g，0.2mmol)溶於丙酮(10ml)和水(3ml)的混合溶劑中，加入N-甲基氧化嗎啉(0.19g，1.65mmol)，加入催化量二水合鋨酸鉀(6mg)加完室溫下反應15小時，LCMS監控反應，反應完畢後濃縮掉丙酮溶劑後直接將反應體系送製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間6.5min得化合物55(170mg，51.3%)。

LC-MS (ESI): m/z =600.1[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, D ₂O): 8.13 (s, 1H), 6.11 (d, 1H), 4.93 (d, 1H), 4.29-4.27 (m, 1H), 4.10-4.07 (m, 2H), 3.94-3.78 (m, 6H), 2.31-2.21 (m, 2H), 0.82 (d, 4H), 0.00 (s, 6H)。

實施例 56 ：

2-(((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)-2-(4-( 2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苄基)丙二酸(化合物56)

2-(((2R,3S,4R,5R)-5-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)-2-(4-(2-oxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)benzyl)malonic acid (化合物56)

第一步：(2R,3R,5S)-5-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-基)-1H- 吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-醇(56A)

(2R,3R,5S)-5-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydro cyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-ol(56A)

化合物29B (5.0g，12.79mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(50ml)中，加入咪唑(4.35g，63.96mmol)，加完氮氣保護下降溫0~5℃，分批次加入第三丁基二甲基氯矽烷(2.12g，14.07mmol)，加完自然回溫反應2小時，反應完畢後加入水淬滅反應，乙酸乙酯(100ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，乾燥濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 3:1)得到化合物56A (5.3g，82%)。

第二步：(2R,3R,5S)-5-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-基)-1H- 吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-乙酸酯(56B)

(2R,3R,5S)-5-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyc lopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-4-methylenetetrahydrofuran-3-yl acetate (56B)

化合物56A (5.3g，10.49mmol)溶於二氯甲烷(50ml)中，加入三乙胺(3.18g，31.47mmol)和催化量4-二甲氨基吡啶，加完氮氣保護下降溫0~5℃，加入乙酸酐(2.14g，20.98mmol)，加完自然回溫反應2小時，反應完畢後加入水淬滅反應，二氯甲烷(100ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，乾燥濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 5:1)得到化合物56B (5.6g，97%)。

第三步：(2R,3R,4R,5R)-5-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫-環戊二[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-4-羥基-4-(羥基-氧甲基)四氫呋喃-3-乙酸酯(56C)

(2R,3R,4R,5R)-5-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydro-cyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-4-hydroxy-4-(hydroxymethyl)tetrah ydrofuran-3-yl acetate (56C)

化合物56B (5.6g，10.23mmol)溶於丙酮(120ml)和水(30ml)的混合溶劑中，加入N-甲基氧化嗎啉(3.53g，30.69mmol)，加入催化量二水合鋨酸鉀(110mg)加完室溫下反應15小時，反應完畢後濃縮掉丙酮，加入水(50ml)，乙酸乙酯(100ml×2)萃取兩次，合併有機相，飽和食鹽水洗，飽和碳酸氫鈉水溶液洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 3:1)得到化合物56C (4.6g，77.3%)。

LC-MS (ESI): m/z =581.2 [M+H] ⁺。

第四步：(6R,8R,9R)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-8-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-基) -1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2-二甲基-1,3,7-三氧雜螺[4.4]壬烷-9-乙酸酯(56D)

(6R,8R,9R)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-8-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahy-drocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-9-yl acetate (56D)

化合物56C (4.6g，7.91mmol)溶於丙酮(50ml)中，加入催化量的對甲苯磺酸，再加入2,2-二甲氧基丙烷(8.24g，79.1mmol)，加完室溫下反應24小時，反應完畢濃縮掉丙酮，加入水(50ml)，乙酸乙酯(100ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 6:1)得到化合物56D (4.0g，81%)。

第五步：(6R,8R,9R)-8-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊二[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-6-(羥甲基)-2,2-二甲基-1,3,7-三氧雜螺[4.4]壬烷-9-乙酸酯(56E)

(6R,8R,9R)-8-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazo-lo[3,4-b]pyridin-1-yl)-6-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-9-yl acetate (56E)

化合物56D (4.0g，6.44mmol)溶於四氫呋喃(40ml)中，加入四丁基氟化銨(7.08ml，7.08mmol，1.0mol/L四氫呋喃溶液)，加完室溫反應2小時，反應完畢後直接濃縮反應液。濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 1:1)得到化合物56E(3.1g，95%)。

LC-MS (ESI): m/z =507.1 [M+H] ⁺。

第六步：二乙基 2-(((6R,8R,9R)-9-乙醯氧基-8-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊[c]吡咯-2(1H)-基) -1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2-二甲基-1,3,7 -三氧雜螺[4.4]壬烷-6-基)甲氧基)丙二酸酯(56F)

Diethyl 2-(((6R,8R,9R)-9-acetoxy-8-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-6-yl)methoxy)malonate (56F)

化合物56E (3.1g，6.11mmol)溶於甲苯(30ml)中，加入重氮丙二酸二乙酯(2.27g，12.2mmol)，二聚醋酸銠(0.14g，0.32mmol)，加完氮氣保護下升溫至100℃反應1小時，反應完畢後反應液直接濃縮，濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )= 3:1)得到化合物56F (3.0g，74%)。

第七步：二乙基2-(((6R,8R,9R)-9-乙醯氧基-8-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2-二甲基-1,3,7-三氧雜螺[4.4]壬烷-6-基)甲氧基)-2-(4-硝基苄基)丙二酸酯(56G)

Diethyl 2-(((6R,8R,9R)-9-acetoxy-8-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-6-yl)methoxy)-2-(4-nitrobenzyl)malonate (56G)

化合物56F (3.0g，4.51mmol)溶於乾燥N,N-二甲基甲醯胺(30ml)中，氮氣置換三次，加入碳酸鉀(1.87g，13.53mmol)，加完室溫下攪拌30min，再加入對硝基卞溴(1.95g，9.02mmol)，加完室溫下攪拌16小時，反應完畢後加入飽和氯化銨淬滅反應後乙酸乙酯(100ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 3:1)得到化合物56G (2.6g，72%)。

第八步：二乙基2-(((6R,8R,9R)-9-乙醯氧基-8-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2-二甲基-1,3,7-三氧雜螺[4.4]壬-6-基)甲氧基)-2-(4-氨基苄基)丙二酸酯(56H)

Diethyl 2-(((6R,8R,9R)-9-acetoxy-8-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-6-yl)methoxy)-2-(4-aminobenzyl)malonate (56H)

化合物56G (2.6g，3.25mmol)溶於乙醇(50mL)和水(10ml)的混合溶劑中，加入鐵粉(900mg，16.15mmol)和氯化銨(171mg，3.25mmol)。加完升溫至50℃反應4小時，反應完畢後過濾，濾液濃縮後殘留物柱層析分離純化(乙酸乙酯：石油醚(v/v )= 1:1)得到化合物56H (2.1g，84%)。

LC-MS (ESI): m/z =770.3 [M+H] ⁺。

第九步：二乙基2-(((6R,8R,9R)-9-乙醯氧基-8-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-2,2-二甲基-1,3,7-三氧雜螺[4.4]壬烷-6-基)甲氧基)-2-(4-(3-(3-氯丙基)脲基)苄基)丙二酸酯(56I)

Diethyl 2-(((6R,8R,9R)-9-acetoxy-8-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-6-yl)methoxy)-2-(4-(3-(3-chloropropyl)ureido)benzyl)malonate (56I)

化合物56H (2.1g，2.73mmol)溶於二氯甲烷(20ml)中，加入3-氯丙基異氰酸酯(1.31g，10.95mmol)，加完保持25℃反應24小時，反應完畢後反應液直接濃縮，濃縮後殘留物柱層析分離純化(乙酸乙酯：石油醚 (v/v )= 1:1)得到化合物56I (1.9g，78.2%)。

第十步：2-(((6R,8R,9R)-8-(6-氯-4-((3aR,6aS)-六氫環戊[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-9-乙醯氧基-2,2-二甲基-1,3,7-三氧雜螺[4.4]壬烷-6-基)甲氧基)-2-(4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苄基)丙二酸(56J)

2-(((6R,8R,9R)-8-(6-chloro-4-((3aR,6aS)-hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-9-hydroxy-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-6-yl)methoxy)-2-(4-(2-oxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)benzyl)malonic acid (56J)

化合物56I (0.12g，0.13mmol)溶於超乾四氫呋喃(3ml)中，氮氣置換三次後降溫至0℃，加入氫化鈉(10mg，60%含量，0.26mmol)加完升溫至25℃反應3小時，反應完畢後冷卻至0℃加入水(1ml)，加完室溫下攪拌4小時，反應完全後直接送製備純化。製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間15.5min得化合物56J (10mg，10%)。

LC-MS (ESI): m/z =755.2 [M+H] ⁺。

第十一步：2-(((2R,3R,4R,5R)-5-(6-氯-4-(六氫環戊二烯[c]吡咯-2(1H)-基)-1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-1-基)-3,4-二羥基-3-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)-2-(4-( 2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苄基)丙二酸(化合物56)

2-(((2R,3R,4R,5R)-5-(6-chloro-4-(hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)-2-(4-(2-oxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)benzyl)malonic acid (化合物56)

化合物56J (10mg，0.013mmol)溶於三氟乙酸(0.5ml)和水(0.5ml)的混合溶劑中，室溫下攪拌15小時，反應完畢直接製備純化。製備HPLC分離方法：1儀器：waters 2767製備液相；SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b梯度沖提，流動相A含量從5%至50%；c.流量12mL/min；d沖提時間20min。滯留時間8.6min得化合物56(5mg，53%)。

LC-MS (ESI): m/z =713.2[M-H] ^-。

¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD): 8.24 (s, 1H), 7.32 (d, 2H), 7.16 (d, 2H), 6.22 (s, 1H), 6.18 (d, 1H), 4.21-4.12 (m, 4H), 4.04-4.01 (m, 4H), 3.87-3.77 (m, 4H), 3.71-3.68 (m, 2H), 3.37-3.35 (m, 2H), 2.91-2.91 (m, 2H), 2.06-1.60 (m, 8H)。

實施例 57 ：

2-(((2R,3S/R,4R,5R)-5-(4-氨基-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3- (羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)-2-(4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苄基)丙二酸(化合物57)

2-(((2R,3S/R,4R,5R)-5-(4-amino-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)-2-(4-(2-oxotetrahydrop-yrimidin-1(2H)-yl)benzyl)malonic acid (化合物57)

2-(((2R,3R/S,4R,5R)-5-(4-氨基-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3- (羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)-2-(4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苄基)丙二酸(化合物58)

2-(((2R,3R/S,4R,5R)-5-(4-amino-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)-2-(4-(2-oxotetrahydrop-yrimidin-1(2H)-yl)benzyl)malonic acid (化合物58)

第一步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(4-氨基-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(57A)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(4-amino-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl benzoate (57A)

化合物28B (18.0g，38.85mmol)溶於二氯甲烷(100ml)和異丙醇(100ml)的混合溶劑中，室溫下加入氨水(14.60g ，116.55mmol，28%)加完室溫下反應16小時，反應完畢後濃縮掉二氯甲烷後加入水，然後乙酸乙酯(150ml×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 4:1)得到標題化合物57A (15.1g，87.5%)。

LC-MS (ESI): m/z =444.1 [M+H] ⁺。

第二步：((2S,4R,5R)-4-乙醯氧基-5-(4-(雙(第三丁氧羰基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3-亞甲基四氫呋喃-2-基)苯甲酸甲酯(57B)

((2S,4R,5R)-4-acetoxy-5-(4-(bis(tert-butoxycarbonyl)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3-methylenetetrahydrofuran-2-yl)methyl-benzoate (57B)

化合物57A (15.0g，33.80mmol)溶於四氫呋喃(150ml)中，並依次加入三乙胺(10.26g，101.43mmol)，4-二甲氨基吡啶(0.41g，3.38mmol)，二碳酸二第三丁酯(22.13g，101.43mmol)，加完室溫下反應5小時，反應完畢後直接濃縮，濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 5:1)得到標題化合物57B (19.2g，88.2%)。

第三步：第三丁基 (第三丁氧羰基)(6-氯-1-((2R,3R,5S)-3-羥基-5-(羥基-甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-2-基)-1H-吡唑並[3,4- d]嘧啶-4-基)氨基甲酸酯(57C)

Tert-butyl (tert-butoxycarbonyl)(6-chloro-1-((2R,3R,5S)-3-hydroxy-5-(hydroxyl-methyl)-4-methylenetetrahydrofuran-2-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-yl)carbam-ate (57C)

化合物57B (19.2g，29.81mmol)溶於二氯甲烷(100ml)和甲醇(190ml)的混合溶劑中，加入碳酸鉀固體(12.36g，89.43mmol)，加入當量的水，加完室溫下反應1小時，反應完畢後加入水，然後二氯甲烷(150ml×2)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物用矽膠柱色譜分離提純(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 2:1)得到標題化合物57C (3.8g，32%)。

LC-MS (ESI): m/z =498.1 [M+H] ⁺。

第四步：第三丁基(第三丁氧羰基)(1-((2R,3R,5S)-5-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)-甲基)-3-羥基-4-亞甲基四氫呋喃-2-基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-基)氨基甲酸酯(57D)

tert-butyl (tert-butoxycarbonyl)(1-((2R,3R,5S)-5-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)-methyl)-3-hydroxy-4-methylenetetrahydrofuran-2-yl)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-yl)carbamate (57D)

化合物57C (3.8g，9.55mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(38ml)中，加入咪唑(3.25g，47.75mmol)，加完氮氣保護下降溫0~5℃，分批次加入第三丁基二甲基氯矽烷(2.59g，17.19mmol)，加完0~5℃反應1小時，反應完畢後加入水淬滅反應，乙酸乙酯(100ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，乾燥濃縮後得到化合物57D粗產物(4.8g，98%)，未純化直接下一步反應。

第五步：(2R,3R,5S)-2-(4-(雙(第三丁氧羰基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-4-亞甲基四氫呋喃-3-乙酸酯(57E)

(2R,3R,5S)-2-(4-(bis(tert-butoxycarbonyl)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-4-methylenetetrahydro-furan-3-yl acetate (57E)

化合物57D (4.8g，9.37mmol)溶於二氯甲烷(50ml)中，加入三乙胺(2.84g，28.14mmol)和催化量4-二甲氨基吡啶，加完氮氣保護下降溫0~5℃，加入乙酸酐(1.91g，18.79mmol)，加完自然回溫反應2小時，反應完畢後加入水淬滅反應，二氯甲烷(100ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，乾燥濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 5:1)得到化合物57E (4.2g，80.9%)。

第六步：(2R,3R,5R)-2-(4-(雙(第三丁氧羰基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-5-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-4-羥基-4-(羥甲基)四氫呋喃-3-乙酸酯(57F)

(2R,3R,5R)-2-(4-(bis(tert-butoxycarbonyl)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-5-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-4-hydroxy-4-(hydroxyl-methyl)tetrahydrofuran-3-yl acetate (57F)

化合物57E (4.2g，7.58mmol)溶於丙酮(80ml)和水(20ml)的混合溶劑中，加入N-甲基氧化嗎啉(3.07g，22.74mmol)，加入催化量二水合鋨酸鉀(84mg)加完室溫下反應15小時，反應完畢後濃縮掉丙酮，加入水(50ml)，乙酸乙酯(100ml×2)萃取兩次，合併有機相，飽和食鹽水洗，飽和碳酸氫鈉水溶液洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 3:1)得到化合物57F (3.8g，85%)。

第七步：(5R,6R,8R,9R)-8-(4-(雙(第三丁氧羰基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-6-(((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基-1,3,7-三氧雜螺[4.4]壬烷-9-乙酸酯(57G)

(5R,6R,8R,9R)-8-(4-(bis(tert-butoxycarbonyl)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-6-(((tert-butyldimethylsilyl)oxy)methyl)-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-9-yl acetate (57G)

化合物57F (3.8g，6.46mmol)溶於丙酮(50ml)中，加入催化量的對甲苯磺酸，在加入2,2-二甲氧基丙烷(6.73g，64.6mmol)，加完升25℃下反應16小時，反應完畢濃縮掉丙酮，加入水(50ml)，乙酸乙酯(100ml×2)萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 5:1)得到化合物57G (3.4g，83%)。

第八步：(5R,6R,8R,9R)-8-(4-((第三丁氧基羰基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-6-(羥甲基)-2,2-二甲基-1,3,7-三氧雜螺[4.4]壬烷-9-乙酸酯(57H)

(5R,6R,8R,9R)-8-(4-((tert-butoxycarbonyl)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-6-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-9-yl acetate (57H)

化合物57G (3.4g，5.41mmol)溶於四氫呋喃(40ml)中，加入四丁基氟化銨(8.1ml，8.1mmol，1.0mol/L四氫呋喃溶液)，加完室溫反應2小時，反應完畢後直接濃縮反應液。濃縮後殘留物柱層析分離純化(乙酸乙酯：石油醚(v/v )= 1:1)得到化合物57H (2.2g，79%)。

LC-MS (ESI): m/z =514.1 [M+H] ⁺。

第九步：二第三丁基2-(((5R,6R,8R,9R)-9-乙醯氧基-8-(4-((第三丁氧羰基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基) -2,2-二甲基-1,3,7-三氧雜螺[4.4]壬烷-6-基)甲氧基)丙二酸酯(57I)

Di-tert-butyl 2-(((5R,6R,8R,9R)-9-acetoxy-8-(4-((tert-butoxycarbonyl)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-6-yl)methoxy)malonate (57I)

化合物57H (0.9g，1.75mmol)溶於甲苯(15ml)中，加入重氮丙二酸第三丁酯(0.85g，3.50mmol)，二聚醋酸銠(88mg，0.088mmol)，加完氮氣保護下升溫至100℃反應1小時，反應完畢後反應液直接濃縮，濃縮後殘留物柱層析分離純化(石油醚：乙酸乙酯(v/v )= 4:1)得到化合物57I (0.8g，62.7%)。

第十步：二第三丁基2-(((5R,6R,8R,9R)-9-乙醯氧基-8-(4-((第三丁氧羰基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2,2-二甲基-1,3,7-三氧雜螺[4.4]壬烷-6-基)甲氧基)-2-(4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苄基)丙二酸酯(57J)

Di-tert-butyl 2-(((5R,6R,8R,9R)-9-acetoxy-8-(4-((tert-butoxycarbonyl)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-6-yl)methoxy)-2-(4-(2-oxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)benzyl)malonate (57J)

化合物57I (0.8g，1.1mmol)溶於乾燥N,N-二甲基甲醯胺(10ml)中，氮氣置換三次，加入碳酸銫(1.06g，3.25mmol)，加完室溫下攪拌30min，再加入1-(4-(氯甲基)苯基)四氫嘧啶-2(1H)-酮(0.49g，2.2mmol)和碘化鉀(91mg，0.55mmol)，加完室溫下攪拌16小時，反應完畢後加入飽和氯化銨淬滅反應後乙酸乙酯(100ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥濃縮後殘留物柱層析分離純化(乙酸乙酯：石油醚(v/v )=10:1)得到化合物57J (0.9g，89%)。

第十一步：二第三丁基 2-(((5S,6R,8R,9R)-8-(4-((第三丁氧羰基)氨基)-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基) -9-羥甲基-2,2-二甲基-1,3,7-三氧雜螺[4.4]壬烷-6-基)甲氧基)-2-(4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苄基)丙二酸酯(57K)

Di-tert-butyl 2-(((5S,6R,8R,9R)-8-(4-((tert-butoxycarbonyl)amino)-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-9-hydroxy-2,2-dimethyl-1,3,7-trioxaspiro[4.4]nonan-6-yl)methoxy)-2-(4-(2-oxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)benzyl)malonate (57K)

化合物57J (0.9g，0.98mmol)溶於乙醇(10ml)中，加入碳酸鉀(0.41g，2.97mmol)，加完室溫下攪拌30min，反應完畢後加入飽和氯化銨淬滅反應後乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合併有機層，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥.濃縮後殘留物柱層析分離純化(二氯甲烷：甲醇(v/v )= 10:1)得到化合物57K (0.8g，93.3%)。

LC-MS (ESI): m/z =874.3[M+H] ⁺。

第十二步：2-(((2R,3S/R,4R,5R)-5-(4-氨基-6-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-3,4-二羥基-3- (羥甲基)四氫呋喃-2-基)甲氧基)-2-(4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苄基)丙二酸(化合物57和58)

2-(((2R,3S/R,4R,5R)-5-(4-amino-6-chloro-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)-2-(4-(2-oxotetrahydrop-yrimidin-1(2H)-yl)benzyl)malonic acid (化合物57和58)

化合物57K (0.80g，0.91mmol)溶於三氟乙酸(8ml)和水(8ml)的混合溶劑中，室溫下攪拌5小時，反應完畢直接製備純化。製備HPLC分離方法：1儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)；2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液；3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%TFA)；b.梯度沖提，流動相A 含量從5%至50%；c.流量12 mL/min；d沖提時間20min。滯留時間7.8min得到化合物57 (80mg，14.0%)，滯留時間8.5min得化合物58 (50mg，8.8%)。

化合物57：LC-MS (ESI): m/z =620.1[M-H] ^-。

化合物57： ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD): 8.10 (s, 1H), 7.39 (d, 2H), 7.25 (d, 2H), 6.21 (d, 1H), 4.94 (d, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.65 (s, 1H), 4.28-4.25 (m, 1H), 4.01-3.77 (m, 4H), 3.69-3.66 (m, 2H), 3.39-3.36 (m, 2H), 2.09-2.03 (m, 2H)。

化合物58：LC-MS (ESI): m/z =620.1[M-H] ^-。

化合物58： ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD): 8.09 (s, 1H), 7.39 (d, 2H), 7.25 (d, 2H), 6.19 (d, 1H), 4.75 (s, 2H), 4.67 (s, 1H), 4.18-4.17 (m, 1H), 4.07-3.84 (m, 4H), 3.69-3.66 (m, 2H), 3.39-3.36 (m, 2H), 2.09-2.03 (m, 2H)。

生物測試例

1 、體外 CD73 酶活測試方法

人重組蛋白CD73 (Acro, Cat. No. CD3-H52H7)配製成0.04 ng/μL 的蛋白溶液，底物AMP (Sigma, Cat. No. A1752-1G)配製成100 μM 的底物溶液。在384孔白色透明底板中加入5 µL不同濃度的化合物，加入5 µL 0.04 ng/μL的重組CD73酶溶液，室溫孵育15分鐘。加入10 µL 100 μM 的底物溶液，於37 °C孵育40分鐘後，加入5 µL孔雀綠試劑A (R&D, Cat. No. DY996)，室溫孵育10分鐘，最後加入5 µL孔雀綠試劑B，室溫孵育20分鐘，使用酶標儀PHERAstar FSX儀器檢測620 nm吸光值。運用origin9.2軟體計算IC ₅₀值。抑制率計算公式見式1，其中OD _樣品為化合物讀數，OD _陰性為不加底物的陰性對照讀數，OD _陽性為溶媒對照讀數。

抑制率%=(1-(OD _樣品- OD _陰性)/( OD _陽性- OD _陰性))×100% (式1)

實驗結果：本發明化合物體外CD73酶活IC ₅₀小於100nM，較優異的化合物IC ₅₀小於50nM，更優異的化合物IC ₅₀小於10nM，最優異的化合物IC ₅₀小於1nM。部分實施例的具體的IC ₅₀值見表1。表1 體外CD73酶活

化合物	IC ₅₀(nM)
12	0.4
18	1.8
24	5.3
25	0.4
26	2.9
27	1.7
28	0.7
29	2.6
30	0.2
31	0.7
32	0.9
33	1.2
38	0.3
40	0.06

結論：本發明化合物對CD73具有良好的抑制作用。

2 、體內藥效測試

B16F10體內移植瘤模型

B16F10細胞購置於ATCC，細胞培養基為DMEM + 10% FBS + 1%雙抗，培養於37 °C、5% CO ₂孵箱中。細胞生長達到接種數量後，收集細胞。含細胞的培養液轉入50 mL無菌離心管中，1500 rpm離心3分鐘，離心完畢取出，棄上清液。用預冷PBS重懸細胞後，1500 rpm離心3分鐘，離心完畢取出，棄上清液，重複2次。最後用預冷PBS重懸細胞，計數後，將細胞用預冷的PBS稀釋為1×10 ⁶個/mL。將準備好的細胞懸液置於冰上，用預冷的1 mL注射器於右側皮下腋窩處接種細胞，每只動物100 μL。接種第2天記為Day0，隨機分組後開始每天灌胃給予化合物28(溶媒為磷酸鹽緩衝液)，PD-1抗體(anti-PD-1; BioXcell, Cat. CD279)組與聯用組均腹腔注射PD-1抗體(每週2次)。用電子遊標卡尺測量腫瘤長徑與短徑，並記錄動物體重。資料分別按照式(1)、式(2)和式(3)處理，計算腫瘤體積與腫瘤生長抑制率，其中a為腫瘤長徑，b為腫瘤短徑。T為實驗結束時給藥組腫瘤體積，C為實驗結束時溶媒(vehicle)組的腫瘤體積；T ₀為實驗開始時給藥組腫瘤體積，C ₀為實驗開始時溶媒組的腫瘤體積。

腫瘤體積(mm ³)=(a × b ²)/ 2 式(1)

T/C (%) = (T - T ₀)/(C - C ₀) × 100 式(2)

腫瘤生長抑制率(TGI%)= 100 - T/C (%) 式(3)

結果：如圖1所示，與溶媒對照組相比，所有給藥組動物體重無顯著差異，動物體重未出現明顯下降，表明動物的耐受性良好，實施例化合物無明顯的毒副作用表現。如下表2與圖2所示，化合物28聯用PD-1抗體的腫瘤生長抑制率達91.61%，明顯優於AB680與PD-抗體聯用組的抗腫瘤藥效。表2 B16F10體內移植瘤腫瘤生長抑制率

組別	TGI% (day15)
Vehicle	-
AB680 30 mg/kg	57.96
化合物28 100 mg/kg	50.12
anti-PD-1 10 mg/kg	68.51
AB680 30 mg/kg+anti-PD-1 10 mg/kg	69.25
化合物28 30 mg/kg+anti-PD-1 10 mg/kg	91.61

注：AB680結構CAS號為2105904-82-1。

3 、各種屬藥代動力學測試

3.1 大鼠藥代動力學測試

實驗目的：通過單劑量靜脈給予受試物於SD大鼠，測定大鼠血漿中受試物的濃度，評價受試物在大鼠體内藥代特徵。

實驗對象：本發明實施例化合物。

試驗動物：雄性SD大鼠，220 g左右，6~8周齡，3隻/化合物。購於成都達碩實驗動物有限公司。

試驗方法：試驗當天，6隻SD大鼠按體重隨機分組。給藥前1天禁食不禁水12~14h，給藥後4h給食。按照表3給藥。表3 給藥資訊

組別	數量	給藥資訊
雄性	受試物	給藥劑量 (mg/kg)	給藥濃度 (mg/mL)	給藥體積 (mL/kg)	採集樣本	給藥方式
G1	3		1	0.2	5	血漿	靜脈

靜脈給藥溶媒：5%DMA+5%Solutol+90%Saline

於給藥前及給藥後異氟烷麻醉經眼眶取血0.1 ml，置於EDTAK2離心管中。5000rpm，4 ^oC離心10min，收集血漿。采血時間點：0, 5, 15, 30min, 1, 2, 4, 6, 8, 24 h。分析檢測前，所有樣品存於-80 ^oC。

3.2 小鼠藥代動力學測試

實驗目的：通過單劑量靜脈給予受試物於BALB/c小鼠，測定小鼠血漿中受試物的濃度，評價受試物在小鼠體內藥代特徵。

實驗物件：本發明實施例化合物。

試驗動物：雄性BALB/c小鼠，22 g左右，6~8周齡，9隻/化合物。購於成都達碩實驗動物有限公司。

試驗方法：試驗當天，9隻BALB/c小鼠按體重隨機分組。給藥前1天禁食不禁水12~14h，給藥後4h給食。按照表4給藥。表4 給藥資訊

組別	數量	給藥資訊
雄性	受試物	給藥劑量 (mg/kg)	給藥濃度 (mg/mL)	給藥體積 (mL/kg)	採集樣本	給藥方式
G1	9		1	0.2	5	血漿	靜脈

靜脈給藥溶媒：5%DMA+5%Solutol+90%Saline

於給藥前及給藥後異氟烷麻醉經眼眶取血0.06 ml，置於EDTAK2離心管中。5000rpm，4 ^oC離心10min，收集血漿。采血時間點：0, 5, 15, 30min, 1, 2, 4, 6, 8, 24 h。分析檢測前，所有樣品存於-80 ^oC。

3.3 比格犬藥代動力學測試

實驗目的：通過單劑量靜脈給予受試物於比格犬，測定比格犬血漿中受試物的濃度，評價受試物在比格犬體內藥代特徵。

試驗動物：雄性比格犬，8~11 kg左右，6隻/化合物，購於北京瑪斯生物技術有限公司。

試驗方法：試驗當天，6隻比格犬按體重隨機分組。給藥前1天禁食不禁水12~14h，給藥後4h給食。按照表5給藥。

表5 給藥資訊

組別	數量	給藥資訊
雄性	受試物	給藥劑量 (mg/kg)	給藥濃度 (mg/mL)	給藥體積 (mL/kg)	採集樣本	給藥方式
G1	3		0.5	0.5	1	血漿	靜脈

靜脈給藥溶媒：5%DMA+5%Solutol+90%Saline

於給藥前及給藥後通過四肢靜脈取血1 ml，置於EDTAK2離心管中。5000rpm，4 ℃離心10min，收集血漿。采血時間點：0, 5, 15, 30min, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 48, 72, 96 h。分析檢測前，所有樣品存於-80℃。

3.4 食蟹猴藥代動力學測試

實驗 目的：通過單劑量靜脈給予受試物於食蟹猴，測定食蟹猴血漿受試物的濃度，評價受試物在食蟹猴體内藥代特徵。

實驗對象：本發明實施例化合物。

試驗動 物：雄性食蟹猴，3~5 kg左右，6隻/化合物，購於蘇州西山中科實驗動物有限公司。

試驗 方法： 試驗當天，6隻食蟹猴按體重隨機分組。給藥前1天禁食不禁水12~14h，給藥後4h給食。按照表6給藥。表6 給藥資訊

靜脈給藥溶媒：5%DMA+5%Solutol+90%Saline

於給藥前及給藥後通過四肢靜脈取血1 ml，置於EDTAK2離心管中。5000rpm，4 ^oC離心10min，收集血漿。采血時間點：0, 5, 15, 30min, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 48, 72, 96 h分析檢測前，所有樣品存於-80 ^oC。

本發明的化合物具有優異的藥代動力學特徵。

4 、 CYP450 酶抑制測試

本試驗採用混合人肝微粒體分別與不同濃度的化合物(0.05~50 μM) 和相應的探藥共同孵育後，測定CYP酶活性的變化，計算IC ₅₀值，評價化合物對每種CYP酶的抑制潛能。

5 、 hERG 鉀離子通道作用測試

實驗平臺：電生理手動膜片鉗系統

細胞系：穩定表達hERG 鉀離子通道的中國倉鼠卵巢(CHO)細胞系

實驗方法：穩定表達hERG 鉀通道的CHO (Chinese Hamster Ovary) 細胞，在室溫下用全細胞膜片鉗技術記錄hERG 鉀通道電流。玻璃微電極由玻璃電極毛胚 (BF150-86-10，Sutter) 經拉制儀拉制而成，灌注電極內液後的尖端電阻為2-5 MΩ左右，將玻璃微電極插入放大器探頭即可連接至膜片鉗放大器。鉗制電壓和資料記錄由pClamp 10 軟體通過電腦控制和記錄，採樣頻率為10 kHz，濾波頻率為2kHz。在得到全細胞記錄後，細胞鉗制在-80 mV，誘發hERG 鉀電流( I _hERG) 的步階電壓從-80 mV 給予一個2 s 的去極化電壓到+20 mV，再複極化到-50 mV，持續1 s 後回到-80 mV。每10 s 給予此電壓刺激，確定hERG 鉀電流穩定後(至少1 分鐘) 開始給藥過程。化合物每個測試濃度至少給予 1 分鐘，每個濃度至少測試2個細胞 (n≥2)。

資料處理：資料分析處理採用pClamp 10，GraphPad Prism 5 和Excel 軟體。不同化合物濃度對hERG 鉀電流 (-50 mV 時誘發的hERG 尾電流峰值) 的抑制程度用以下公式計算：

Inhibition % = [1 – ( I/ Io)]×100%

其中，Inhibition %代表化合物對hERG鉀電流的抑制百分率， I和 Io分別表示在加藥後和加藥前hERG 鉀電流的幅度。

化合物IC ₅₀使用GraphPad Prism 5 軟體通過以下方程擬合計算得出：

Y=Bottom + (Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope))

其中，X為供試品檢測濃度的Log 值，Y為對應濃度下抑制百分率，Bottom和Top分別為最小和最大抑制百分率。

本發明的化合物毒副作用小。

無

圖1為B16F10體內移植瘤模型實驗的小鼠體重變化曲線。

圖2為 B16F10體內移植瘤模型實驗的腫瘤體積生長曲線。

Claims

一種式(I)所示的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，
(I) 其中， X ₁選自O或S； X ₂選自CR ^x2aR ^x2b、O、S或NR ^x2c； Y選自OR ²、-C(R ^y1R ^y2)-P(=O)(OR ²)OR ²、-C(R ^y1R ^y2)-P(=O)(OR ²)NHR ^y3、-C(R ^y1R ^y2)-P(=O)(OR ²)SR ^y3、-C(R ^y1R ^y2)-R ^y4、-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)OR ²、-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)NHR ^y3或-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)SR ^y3；每個R ¹、R ²各自獨立地選自H、氘、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基、C _2-6炔基、C _3-10環烷基、3-10員雜環烷基、C _6-10芳基、5-10員雜芳基、-C(R ^2aR ^2b)-O-C(O)-OR ^2c、-C _0-6烷基-S(O) _rR ^2c、-C _0-6烷基-C(O)R ^2c、-C _0-6烷基-C(O)OR ^2c或-C _0-6烷基-C(O)NR ^2c，所述的烷基、環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代； r選自1或2；每個R ^y1、R ^y2、R ^y3、R ^x2a、R ^x2b、R ^x2c各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、C _1-6烷基、氘代C _1-6烷基或鹵代C _1-6烷基； R ^y4選自4-10員雜環烷基、5-10員雜芳基、C _3-10環烷基或C _6-10芳基，所述的雜環烷基、雜芳基、環烷基或芳基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；每個R ^2a、R ^2b各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、C _1-6烷基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、C _3-10環烷基、3-10員雜環烷基、C _6-10芳基或5-10員雜芳基；每個R ^2c各自獨立選自H、氘、C _1-6烷基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、C _3-10環烷基、3-10員雜環烷基、C _6-10芳基或5-10員雜芳基，所述的烷基、環烷基、雜環烷基、芳基或雜芳基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代； L ₁選自鍵、S、O、NH、N(C _1-6烷基)或C _1-6烷基，所述的烷基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代； L ₂選自-(CR ^L2aR ^L2b)n-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、*-C _6-10芳基-Z-、*-(5-10員雜芳基)-Z-、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的-(CR ^L2aR ^L2b)n-中碳原子任選被1個或多個選自N、O、S、S(O) 或S(O) ₂替代，所述的L ₂任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；每個R ^L2a、R ^L2b各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基、C _2-6炔基、或-C _1-6烷基-O-C _1-6烷基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、5-10員雜芳基、C _6-10芳基、4-10員雜環烷基或C _3-10環烷基的基團取代；或者，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基；每個n各自獨立選自1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；每個Z獨立選自鍵、-O-或C _1-6烷基，所述烷基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代； R ₄、R ₅、R ^6a、R ^6b、R ^7a、R ^7b各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _3-6環烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基或烷基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基、氰基或C _1-6烷氧基的基團取代；或者，R ^6a和R ^6b、或R ^7a和R ^7b一起形成C _2-6烯基、C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基，所述的烯基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；或者，R ⁴、R ⁵和X ₂、或者R ⁴、R ^6a和X ₂、或R ^L2a、R ⁵和X ₂、或R ⁴、R ^7a和X ₂一起形成C _5-7環烷基或5-7員雜環烷基；或者，R ⁴和R ^6a、或R ^6b和R ^7b、或R ⁴和R ^L2a、或R ⁴和X ₂一起形成C _3-7環烷基或3-7員雜環烷基；或者，R ^x2a和R ⁴、或R ^x2a和R ⁵、或R ^6a和R ⁴、或R ^6b和R ^7b、或R ^7a和R ⁵一起形成一個化學鍵，條件是最多一組形成一個化學鍵； Hy選自5-15員雜芳基或5-15員雜環烷基，所述的雜芳基或雜環烷基任選進一步被1個或多個選自R ^hy的基團取代； R ³選自L ₃-R ^3a、5-10員雜環烷基、C _5-10環烷基、5-10員雜芳基或C _6-10芳基，所述的雜環烷基、環烷基、雜芳基或芳基任選進一步被1個或多個選自R ^y的基團取代； L ₃選自**-N(R ^L3)C _1-6烷基-、-N(R ^L3)-、**-N(R ^L3)-O-、**-N(R ^L3)S(O)-、**-N(R ^L3)S(O) ₂-、**-N(R ^L3)S(O)-C _1-6烷基-、**-N(R ^L3)S(O) ₂-C _1-6烷基-或**-N(R ^L3)-N=CH-，**表示L ₃與Hy連接位點； R ^3a選自H、C _1-6烷基、苄基、5-15員碳環基或者5-15雜環基，所述的烷基、苄基、碳環基或雜環基任選進一步被1個或多個選自R ^y的基團取代； R ^L3各自獨立地選自H、氘、C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基或氘代C _1-6烷基；或者，R ^L3和R ^hy與所連接的原子一起形成5-8員雜環烷基；每個R ^hy、R ^x各自獨立選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、-O-C _1-6烷基-C _6-10芳基或-O-C _1-6烷基-(5-10員雜芳基)的基團取代； R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-P(=O)(C _1-6烷基) ₂、-P(=S)(C _1-6烷基) ₂、
、
、-Si(C _1-6烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-6烷基) ₂、-C _1-6烷基-S(=O)(=N)、-C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述烷基、烷氧基、氨基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基或羥基C _1-6烷氧基的基團取代。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中 L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-(CR ^L2aR ^L2b)n-、-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基、*-Z-C _6-10芳基、*-Z-(5-10員雜芳基)、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自R ^x的基團取代；每個R ^L2a、R ^L2b、R ^L2c各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基、C _2-6炔基或-C _1-6烷基-O-C _1-6烷基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、5-10員雜芳基、C _6-10芳基、4-10員雜環烷基或C _3-10環烷基的基團取代；或者，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基；每個m、n、n’為各自獨立選自1、2、3、4或5。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中， R ³選自L ₃-R ^3a； R ^3a選自H、C _1-6烷基、苄基、5-15員碳環基或者5-15雜環基，所述的烷基、苄基、碳環基或雜環基進一步被1個或多個選自R ^y的基團取代；當R ^3a被2個或2個以上R ^y取代時，R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-P(=O)(C _1-6烷基) ₂、-P(=S)(C _1-6烷基) ₂、
、
、-Si(C _1-6烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-6烷基) ₂、-C _1-6烷基-S(=O)(=N)、-C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基或羥基C _1-6烷氧基的基團取代，條件是，當R ^3a被2個R ^y取代時，R ^y不為F和SF ₅的組合；當R ^3a被一個R ^y取代時，R ^y選自疊氮基、-P(=O)(C _1-6烷基) ₂、-P(=S)(C _1-6烷基) ₂、
、
、-Si(C _1-6烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-6烷基) ₂或-C _1-6烷基-S(=O)(=N)，所述烷基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基或羥基C _1-6烷氧基的基團取代。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中 R ₄、R ₅、R ^6a、R ^6b、R ^7a、R ^7b各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基或烷基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；或者，R ^6a和R ^6b、或R ^7a和R ^7b一起形成C _2-6烯基、C _3-6員環烷基或4-6員雜環烷基，所述的烯基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代；或者，R ₄、R ₅和X ₂、或者R ⁴、R ^6a和X ₂、或R ⁴、R ^7a和X ₂一起形成C _5-7環烷基或5-7員雜環烷基；或者，R ⁴和R ^6a、或R ^6b和R ^7b、或R ⁴和X ₂及其連接的原子一起形成C _3-7環烷基、或3-7員雜環烷基；或者，R ^x2a和R ⁴、或R ^x2a和R ⁵、或R ^6a和R ⁴、或R ^6b和R ^7b、或R ^7a和R ⁵一起形成一個化學鍵，條件是最多一組形成一個化學鍵；條件是
不選自如下結構：

。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中
選自

。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中 R ^L2a、R ⁵和X ₂及其連接的原子一起形成C _5-7環烷基、或5-7員雜環烷基；或者，R ⁴和R ^L2a及其連接的原子一起形成C _3-7環烷基、或3-7員雜環烷基；進一步， R ^L2a、R ⁵和X ₂及其連接的原子一起形成6員雜環烷基、或7員雜環烷基；或者，R ⁴和R ^L2a及其連接的原子一起形成3員環烷基、4員環烷基、或5員環烷基。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，所述化合物具有式(II)結構：
(II)。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，所述化合物具有式(III)、(IV)、(V)、(VI)結構：
(III)
(IV)
(V)
(VI) L ₁選自S、O、NH、N(CH ₃)或-CH ₂-； L _1a選自鍵、S、O、NH、N(CH ₃)或-CH ₂-； L ₂選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點； L _2a選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點； L _2b選自*-O-(CR ^L2aR ^L2b) ₂-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、-O-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b)m-、*-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-(CR ^L2aR ^L2b) _m-、*-O-(CR ^L2aR ^L2b)n’-O-、*-O-N(R ^L2c)-、*-C(O)C _1-6烷基-、*-Z-C _6-10芳基-、*-Z-(5-10員雜芳基)-、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的烷基、芳基、雜芳基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自R ^x的基團取代，*表示L ₂與P原子相連接的位點；每個R ^L2a、R ^L2b、R ^L2c各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基、C _2-6炔基或-C _1-6烷基-O-C _1-6烷基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、5-10員雜芳基、C _6-10芳基、4-10員雜環烷基或C _3-10環烷基的基團取代；或者，同一個碳原子上的R ^L2a和R ^L2b與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基、或4-6員雜環烷基； X ₂選自CH ₂或O；每個m、n、n’獨立選自1、2或3; 條件是，式(V)化合物中，當L _2b選自*-(CR ^L2aR ^L2b)-O-(CR ^L2aR ^L2b)-時，R ^L2a、R ^L2b不同時選自H。
根據請求項8所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，所述化合物具有式(III-2)、(III-3)、(IV-2)、(IV-3)、(V-2)、(V-3)、(VI-2)、(VI-3)結構：
(III-2)
(III-3)
(IV-2)
(IV-3)
(V-2)
(V-3)
(VI-2)
(VI-3) p選自0、1或2； R ^3a選自5-6員單環環烷基、5-6員單環雜環烷基、8-10員雙環環烷基、8-10員雙環雜環烷基、11-15員三環環烷基或11-15員三環雜環烷基，所述的環烷基或雜環烷基任選進一步被1至3個選自R ^y的基團取代。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中 Hy選自6員雜芳基、5員雜芳基並5員雜芳基、5員雜芳基並苯基、5員雜芳基並5員雜環烷基、5員雜芳基並6員雜環烷基、5員雜環烷基並5員雜芳基、5員雜環烷基並6員雜芳基、5員雜環烷基並苯基、5員雜環烷基並5員雜環烷基、5員雜環烷基並6員雜環烷基、6員雜芳基並5員雜芳基、6員雜芳基並6員雜芳基、6員雜芳基並苯基、6員雜芳基並5員雜環烷基、6員雜芳基並6員雜環烷基、6員雜環烷基並5員雜芳基、6員雜環烷基並6員雜芳基、6員雜環烷基並苯基、6員雜環烷基並5員雜環烷基、6員雜環烷基並6員雜環烷基或者
； A環選自5-6員雜芳基、5-6員雜環烷基或苯基； B環選自5-6員雜芳基、4-6員雜環烷基或4-6環烷基； C環選自5-6員雜芳基、5-6員雜環烷基或苯基；所述的雜芳基、芳基、苯基或雜環烷基任選進一步被1個或多個選自R ^hy的基團取代；每個R ^hy各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-6烷基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基或羥基C _1-6烷氧基的基團取代。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中 Hy選自：

；每個R ^hy各自獨立選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、SF ₅、疊氮基、C _1-4烷基、C _1-4烷氧基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1至3個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-4烷基、鹵代C _1-4烷基、羥基C _1-4烷基、C _1-4烷氧基、氘代C _1-4烷氧基、鹵代C _1-4烷氧基或羥基C _1-4烷氧基的基團取代。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中 Y選自-C(R ^y1R ^y2)-R ^y4、-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)OR ²、-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)NR ^y3或-C(R ^y1R ^y2)-P(=S)(OR ²)SR ^y3。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中所述化合物具有式(VII)結構：
(VII) 每個R ^L2a1、R ^L2b1、R ^L2a2、R ^L2b2各自獨立選自H、氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基、C _2-6炔基或-C _1-6烷基-O-C _1-6烷基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基或羥基C _1-6烷氧基的基團取代；或者，同一個碳原子上的R ^L2a1和R ^L2b1與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基、或4-6員雜環烷基；或者，同一個碳原子上的R ^L2a2和R ^L2b2與所連接的碳原子一起形成C _3-6員環烷基、或4-6員雜環烷基；條件是，R ^L2a1、R ^L2b1、R ^L2a2和R ^L2b2其中至少3個基團不選自H； L ₃選自**-N(R ^L3)C _1-6烷基-或-N(R ^L3)-； R ^3a選自5-15員碳環基或者5-15雜環基，所述的碳環基或雜環基任選進一步被1個或多個選自R ^y的基團取代。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，所述化合物具有如下(VIII)結構：
(VIII) X ₃選自CH或N； R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _3-6環烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基或烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基或C _1-6烷氧基的基團取代； R ³選自-NH-O-R ^3a、3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-10員螺環、4-10員並環、或5-9員橋環，所述的環烷基、雜環環烷基、螺環、橋環或並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代； R ^3a選自C _1-6烷基、苄基、3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-12員螺環、4-10員並環、或5-9員橋環，所述的環烷基、雜環烷基、螺環、橋環或並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代； R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅或疊氮基；條件是，當R ₃為取代或未取代的3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-12員螺環、4-10員並環、或5-9員橋環時，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a不同時為H或氘。
根據請求項14所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物：其中，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _3-6環烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基或烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基或C _1-6烷氧基的基團取代，條件是，R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a不同時為H或氘； R ³選自3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-10員螺環、4-10員並環或5-9員橋環，所述的環烷基、雜環環烷基、螺環、橋環或並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代； R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅或疊氮基。
根據請求項15所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中 R ₄、R ₅、R ^7a選自H； R ^6a選自C _1-6烷基或C _2-6炔基，所述的烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基或C _1-2烷氧基的基團取代； R ³選自4-10員並環，所述的並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代； R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基或=O。
根據請求項14所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，所述化合物具有如下(IX)結構：
(IX) X ₃為CH或N； R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基或烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代； R ^3a選自C _1-6烷基、苄基、3-6員單環環烷基、4-6員單環雜環烷基、5-11員螺環、4-10員並環或5-9員橋環，所述的環烷基、雜環環烷基、螺環、橋環或並環任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代； R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅或疊氮基。
根據請求項17所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中 R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a選自H；R ^3a選自C _1-6烷基、苄基或3-6員單環環烷基，所述的環烷基任選進一步被1、2、3個選自R ^y的基團取代； R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基或=O。
根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，所述化合物具有如下(X)結構：
(X) X ₄為CH或N； R ₄、R ₅、R ^6a、R ^7a各自獨立選自H、氘、羥基、氰基、鹵素、疊氮基、氨基、C _1-6烷基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述的氨基或烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基或氰基的基團取代； R ^y選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、-P(=O)(C _1-3烷基) ₂、-P(=S)(C _1-3烷基) ₂、
、
、-Si(C _1-3烷基) ₃、-N=S(=O)(C _1-3烷基) ₂、-C _1-3烷基-S(=O)(=N)、-C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、C _2-4烯基或C _2-4炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-3烷基、鹵代C _1-3烷基、羥基C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、氘代C _1-3烷氧基、鹵代C _1-3烷氧基或羥基C _1-3烷氧基的基團取代； p選自0、1、2； R ^hy選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、=O、SF ₅、疊氮基、C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、C _2-6烯基或C _2-6炔基，所述烷基、烷氧基、烯基或炔基任選進一步被1個或多個選自氘、鹵素、氨基、羥基、氰基、氘代C _1-6烷基、鹵代C _1-6烷基、羥基C _1-6烷基、C _1-6烷氧基、氘代C _1-6烷氧基、鹵代C _1-6烷氧基、羥基C _1-6烷氧基、-O-C _1-6烷基-C _6-10芳基或-O-C _1-6烷基-(5-10員雜芳基)的基團取代。
根據請求項19所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，其中 R ₄、R ₅、R ^7a選自H； R ^6a選自C _1-6烷基，所述的烷基任選進一步被1、2、3個選自氘、鹵素、羥基、氰基或C _1-2烷氧基的基團取代； p選自0； R ^hy選自F或Cl。
一種化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，所述化合物選自以下結構之一：

。
一種藥物組合物，其特徵在於，含有請求項1-21中任一項所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，以及藥學上可接受的輔料和/或載體。
一種請求項1-21中任一項所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物、共晶或氘代物，或者請求項22所述的組合物在製備治療CD73介導的疾病的藥物中的用途。
根據請求項23所述的用途，其中，所述藥物單獨使用或聯合抗PD-1抗體使用。
根據請求項23所述的用途，所述CD73介導的疾病為腫瘤或自身免疫疾病。
一種治療CD73介導的疾病的方法，所述方法包括給藥請求項1-21中任一項所述的化合物，其立體異構體、藥學上可接受的鹽、溶劑化物或共晶，或者請求項22所述的組合物。
根據請求項26所述的方法，其中，所述CD73介導的疾病為腫瘤或自身免疫疾病。