TW202114629A - 一種組合物及其在製備調節皮膚生物節律的護膚品中的應用 - Google Patents
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Abstract
本發明涉及護膚品技術領域,尤其涉及一種組合物及其在製備調節皮膚生物節律的護膚品中的應用。本發明提供的組合物包括腺苷、含有糖蛋白、氨基酸的皮膚調理劑A以及含有穀氨醯胺基乙基咪唑的皮膚調理劑B。各組分相互配合,相互促進,從而實現了良好的補水保濕、促進細胞能量合成。將該組合物用於製備化妝品,能夠改善熬夜者肌膚的一系列問題。
Description
本發明涉及護膚品技術領域,尤其涉及一種組合物及其在製備調節皮膚生物節律的護膚品中的應用。
生物體由內部時鐘-生物節律-24小時監管,控制晝夜節律基因週期表達。這種對晝夜節律基因週期性啟動的目的是主動適應由日常環境變化帶來的代謝和蛋白質合成功能改變。陽光照射是同步生物節律的活化劑之一,因此晝夜節律基因表達週期性會受到環境影響。視網膜和皮膚是陽光照射的主要感受器。
皮膚組織的生理活性由生物節律嚴格控制。在日間皮膚細胞主要致力於加強皮膚天然防禦(抵抗UV,抗污染等),在夜間著重於再生代謝。研究發現,皮膚生物鐘基因,如CLOCK和PERIOD-1與細胞(角質形成細胞、成纖維細胞和黑色素細胞)的增殖活動相關聯。
老齡化、季節、陽光照射的變化、疲勞、緊張、失眠、時差等都會導致生物節律的微小變化,但是這些變化是可以累積的。這些不規律的生物節律變化使得晝夜節律基因的週期性啟動被改變,導致皮膚生理代謝的變化。
無序的生物節律是誘導皮膚過早老化的原因之一,當皮膚的生理活性不適應環境條件改變時,可能導致皮膚的天然防禦能力減弱,夜間細胞再生進程緩慢,維生素D生物轉化效率降低(維生素D參與鈣吸收,鈣的水準影響皮膚的水化能力)。但目前針對皮膚生物節律調節的護膚品種類較少,且機理並不明確。
有鑑於此,本發明要解決的技術問題在於提供一種組合物及其在製備調節皮膚生物節律的護膚品中的應用。本發明的組合物具有良好的補水保濕效果,並且能夠促進細胞能量合成。
本發明提供的組合物,包括如下品質份的組分:
所述皮膚調理劑A包括如下品質分數的:
餘量為水;
所述皮膚調理劑B包括如下品質分數的:
穀氨醯胺基乙基咪唑 1%
防腐劑 0.4%
餘量為水。
所述皮膚調理劑A中的防腐劑為苯氧乙醇和乙基己基甘油,其中,苯氧乙醇和乙基己基甘油的品質比為1:1;
所述皮膚調理劑A中穩定劑為焦亞硫酸鈉;
皮膚調理劑B中的防腐劑為山梨酸和苯氧乙醇,其中,山梨酸和苯氧乙醇的品質比為1:3。
本發明提供的組合物,包括如下品質份的組分:
本發明提供的組合物,包括如下品質份的組分:
本發明提供的組合物,包括如下品質份的組分:
本發明以熬夜皮膚的狀態為研究對象,以皮膚的生物節律機理為背景,首先以生物節律肽對皮膚的生物鐘基因進行調節。當人體的生物鐘出現不規律時,皮膚的屏障容易受到損傷,而表皮角質細胞是人體唯一具有維生素D完整代謝途徑的細胞。當皮膚的屏障受損時,也就是表皮受損時,角質細胞就無法正常的合成維生素D。皮膚調理劑B中所含有的活性成分能夠調節生物鐘基因的表達,促進角質細胞的的修復及增殖,促進維生素D的合成,啟動維生素D轉化從而啟動皮膚的屏障能力;並且,從為皮膚提供更多的能量用於皮膚修復的角度出發,通過生物節律的調節,採用富含糖蛋白、穀氨酸、纈氨酸、蘇氨酸的皮膚調理劑A用於促進糖降解和線粒體呼吸,確保皮膚細胞的ATP整天處於高水準,日間有足夠的能量供給細胞用於抵禦外界不利因素;確保夜間皮膚細胞需要修復時,有足夠的能量供給;再次額外添加腺苷,直接補充細胞所需要的能量;本發明針對熬夜皮膚的問題出發,從生物鐘基因調節+細胞本身能量的激發+能量的額外補充三個維度著手,開發出具有強效熬夜皮膚護理的組合物。本發明組合物中各組分相互配合,相互促進,起到了良好的增效協同作用。
本發明所述的組合物在製備調節皮膚生物節律的護膚品中的應用。
所述護膚品的功能包括:補水保濕、促進細胞能量合成。
本發明還提供了一種調節皮膚生物節律的護膚品,包括本發明所述的組合物。
本發明所述的護膚品中,所述的組合物的品質分數為0.5%~5%。
一些具體實施例中,所述組合物的品質分數為0.5%、1.2%、5%。
本發明所述的護膚品包括:
餘量為水。
本發明所述的護膚品中,
所述保濕劑為甘油和1,3丁二醇,所述甘油和1,3丁二醇的品質比為1:1;
所述促滲劑為戊二醇;
所述角質軟化劑為羥乙基哌嗪乙烷磺酸;
所述防腐劑為PHL。
本發明所述的護膚品由如下品質分數的組分組成:
餘量為水;
所述皮膚調理劑A包括如下品質分數的:
穩定劑 0.05%;
餘量為水。
所述皮膚調理劑B包括如下品質分數的:
穀氨醯胺基乙基咪唑 1%
防腐劑 0.4%
餘量為水。
一些實施例中,所述化妝品由如下組分組成:
餘量為水;
一些實施例中,所述化妝品由如下組分組成:
餘量為水;
一些實施例中,所述化妝品由如下組分組成:
餘量為水;
本發明所述護膚品為化妝水、乳液、膏霜、面膜、精華、凝膠等。
本發明所述護膚品的製備方法,包括:
將羥乙基哌嗪乙烷磺酸、腺苷,加入去離子水加熱至75℃~80℃,250~300r/min攪拌溶解20min;
加入甘油、1,3-丁二醇、戊二醇,溫度控制為65~75℃,300r/min攪拌溶解15min;
加入皮膚調理劑A、皮膚調理劑B和PHL,溫度控制35~45℃之間,100r/min攪拌15min,然後冷卻至室溫製得護膚品。
本發明提供的組合物包括腺苷、含有糖蛋白、氨基酸的皮膚調理劑A以及含有穀氨醯胺基乙基咪唑的皮膚調理劑B。各組分相互配合,相互促進,從而實現了良好的補水保濕、促進細胞能量合成。將該組合物用於製備化妝品,能夠改善熬夜者肌膚的一系列問題。
圖1各樣品對細胞的能量合成量的影響;
圖2各樣品的即時補水效果;
圖3各樣品的長效補水效果;
圖4各樣品對皮膚水分散失量的短期效果;
圖5各樣品對皮膚水分散失量的長期效果。
本發明提供了一種組合物及其在製備調節皮膚生物節律的護膚品中的應用,本領域技術人員可以借鑒本文內容,適當改進工藝參數實現。特別需要指出的是,所有類似的替換和改動對本領域技術人員來說是顯而易見的,
它們都被視為包括在本發明。本發明的方法及應用已經通過較佳實施例進行了描述,相關人員明顯能在不脫離本發明內容、精神和範圍內對本文的方法和應用進行改動或適當變更與組合,來實現和應用本發明技術。
本發明採用的試材皆為普通市售品,皆可於市場購得。
如下實施例中,所採用的皮膚調理劑A的組成為:
所採用的皮膚調理劑B的組成為:
其中穀氨醯氨基乙基咪唑的結構式為:
本發明實施例中,所採用的皮膚調理劑A、皮膚調理劑B皆購自市場,商品名依次為REVITALIN® PF、CHRONOCYCLIN®。
實施例
各組配方如表1:
按照配方配比稱取羥乙基哌嗪磺酸、腺苷,加入去離子水加熱至75-80℃,以250-300r/min,攪拌20min,直至溶解透明:
按照配方配比加入甘油、1,3-丁二醇、戊二醇,溫度控制為65-75℃,以300r/min,攪拌15min,直至所有添加物全部溶解:
按照配比稱取皮膚調理劑A、皮膚調理劑B和PHL,溫度控制為35-45℃,以100r/min,攪拌15min,靜置恢復到室溫即可。
功效評測
表皮角質細胞是人體唯一具有維生素D完整代謝途徑的細胞。當皮膚的屏障受損時,也就是表皮受損的話,角質細胞就無法正常的合成維生素D。維生素D在表皮組織內由7-脫氫膽固醇轉化而來,表皮同樣含有線粒體CYP27A1和CYP27B1。1,2(OH)2D具有促進表皮角質細胞分化的作用,這種作用通過磷脂酶C-γ1(phospholipase C-γ1,PLC-γ1)完成。表皮角質細胞產生的1,2(OH)2D與鈣共同調節細胞的分化。1,2(OH)2D增加CaR表達,使細胞對鈣敏感性提升;並且升高PLC-γ1提高細胞內鈣離子濃度;鈣離子對表皮屏障功能的形成具有調控作用,在皮膚的表面施加負電荷會使表皮上部的鎂和鈣的濃度上升,增加鈣離子的濃度梯度,從而增強表皮屏障功能。此外1,2(OH)2D直接刺激角質細胞內外皮蛋白的轉錄。1,2(OH)2D還能促進角質形成細胞內抑菌肽的表達,從而抵抗皮膚細菌感染。維生素D主要通過促進絲聚蛋白、抗菌肽等蛋白質的合成和調節角質細胞的增殖和分化,對皮膚屏障發揮重要作用。本發明從細胞能量變化、補水效果、皮膚水分散失量三個方面來衡量組合物的功效。
1)細胞能量的增加量
三磷酸腺苷(adenosine 5’-triphosphate,ATP)是生物體內能量裝換最基本的載體,其含量的變化直接關係到各器官的能量代謝。ATP作為最重要的能量分子在細胞的各種生理、病理過程中起著重要的作用。ATP水準的改變會影響細胞的功能。通常細胞在凋亡、壞死或處於一些毒性狀態下,ATP水準會下降。在細胞凋亡時ATP水準的下降通常和線粒體的膜電位下降同時發生。ATP含量測定試劑盒可以用於檢測細胞內的ATP水準。
實驗儀器:酶標儀、水浴鍋、移液槍、離心機、96孔板、ATP含量檢測試劑盒
實驗材料:角質形成細胞,DMEM,FBS,DPBS
實驗方法:
1.將角質形成細胞消化後,利用DMEM培基分散細胞,利用Hemacytometer來計數細胞,然後利用DMEM來稀釋細胞,稀釋到濃度為5×104cells/ml。
2.稀釋後的細胞溶液分別接種到培養皿中。
3.在37℃,5% CO2的培養箱中培養24小時。
4.待測樣品準備:待測樣品用DMEM培基稀釋,稀釋後濃度分別為0.1%,樣品均準備10ml。
5.細胞培養24小時後,觀察細胞是否完全貼壁生長,如果細胞完全貼壁生長的話,將原培養基移除,用DPBS洗滌。
6.將DPBS移除之後,分別加入前面準備好的含有0.1%待測樣品的培養基.
7.樣品加入之後,放入37℃,5% CO2的培養箱中培養48小時。
--角質形成細胞收集及處理:細胞收集後,離心去掉培養基,加入0.5ml雙蒸餾水,混合均勻。將細胞水溶液放置於廢水中加熱煮10分鐘,漩渦混勻1分鐘;4000rpm條件下離心10分鐘,取上清液待測。
-具體試劑及操作步驟如下:
實驗試劑:
試劑一:底物液1為粉體,使用時加10ml蒸餾水溶解,沸水中加熱溶解
試劑二:底物液2為液體,直接使用
試劑三:促進劑,使用時將稀釋液加入到粉劑中配置成溶液
試劑四:沉澱劑
試劑五:顯色劑,使用時將甲液加入到乙液中,混合均勻後待用
試劑六:終止劑
ATP標準品:用DDW配置成1mMATP標準品溶液
實驗方法:
檢測體系配製:
混合均勻,室溫中靜置反應5分鐘,分別從各待測樣管、對照管、標準管和空白管中移取200μL樣品到96孔板上,於630nm波長處測試吸光度。
因此可得到各測試樣品細胞的ATP的含量為:ATP含量(μmol)=[(A測定管-A對照管)/(A標準管-A空白)]×標準品濃度×稀釋倍數
-各測試樣品的細胞能量的增長量:
-ATP Increase(%)=(ATPn-ATP0)/ATP0×100%(其中ATPn為各測試樣品的細胞能量,ATP0為空白樣的細胞能量)
實驗結果:
實驗結果:通過細胞的能量的測試結果可知,對照樣-1幾乎沒有促進細胞能量增長的功效,實例樣1~3可以將細胞的能量提升114.77%~152.42%。細胞能量的提升有助於受損的皮膚狀態的修復。經統計學分析:
相對於對比例1實施例1~3能夠顯著的提高細胞能量,說明本發明的組合物在提高細胞能量方面存在顯著的功效;p<0.05;
相對於對比例2~4,實施例1~3在提高細胞能量方面的效果更顯著,說明本發明的組合物組成更加合理,各組分缺一不可,相互配合產生了顯著的增效協同作用;
相對於對比例5,實施例1~3在提高細胞能量方面效果更顯著,說明同等有效成分含量下,本發明組合物效果更好,說明本發明組合物的配比合理得當。
各樣品中,實施例3的效果最為顯著,說明該配比及濃度最為適宜,所得樣品的效果與其他各組皆產生了顯著差異,p<0.05。
2)皮膚的即時及長效補水效果
- 測試儀器:德國CK公司多功能皮膚測試儀,型號Corneometer CM825 MDD,
- 測試原理:採用電容法測試人體皮膚角質層的水分含量,它的原理是基於水和其他物質的介電常數差異顯著,按照皮膚含水量不同,測得皮膚的電容值不同,其觀測參數可代表皮膚水分值。
- 測試環境:測試環境溫度為22±1℃,濕度為50±5%,並且進行即時動態檢測;
- 測試志願者:有效志願者至少30人,年齡在16-65歲之間(妊
娠或哺乳期婦女除外);前臂測試區域電容法皮膚水分測定意義的基礎值在15-100之間;無嚴重系統疾病,無免疫缺陷或自身免疫性疾病者;既往對護膚類化妝品無嚴重過敏史者;近一個月內未曾使用激素類藥物及免疫抑制劑者;未參加其他臨床試驗者;按規定使用受試藥物且資料齊全;測試前所有自願者應填寫知情同意書。
- 測試步驟:
測試前準備:受試部位前2-3天不能使用任何產品(化妝品或外用藥品)。實驗前,受試者需要同意清潔雙手前臂內測,自然風乾。清潔後受試者雙手前臂內測做好測量區域標記。正式測試前應在符合標準房間內靜坐至少30min,不能喝水,前臂暴露,呈測試狀態放置,保持放鬆。
測試過程:實驗中左右手臂內側標記3×3cm2試驗區域,同一手臂可以標記多個區域,區域間隔1cm。測試產品和空白對照均隨機分佈在左右手臂上。使用探頭Corneometer CM825 MDD進行受試區域和對照區域的皮膚水分含量測量。每個區域依照平行測定15次。先測量各測試區域的空白值,然後按0.072ml樣品/cm2的用量,將樣品注入到膜布中,並敷在試驗區內,時間為20分鐘。20分鐘後揭掉面膜布,10分鐘後測試該區域皮膚水分含量,即為30分鐘時皮膚的水分含量。之後分別測量1小時,2小時,受試區域和空白對照區域的皮膚含水量(驗證時按此時間測定),同一個志願者的測試由同一個測量人員完成。
對於長效補水的測試,受試者每天在同一區域按照上述測試方法自行進行塗抹測試樣品,並在第14、28天時在不塗抹待測樣品的情況下,測試皮膚的水分含量。
測試資料:按實驗的設計分別測得各時間段的皮膚水分含量,並計算各個時間點的皮膚水分含量的增加量。
實驗結果:
2.1)即時補水結果
結果:從即時的補水效果來看,對照樣-1為基礎配方具有一定的補水效果,水分含量增加量為108.1%。實例樣-1在30分鐘時皮膚的水分含量增加到149.3%,120分鐘時補水效果仍有151.5%左右,即時補水效果明顯,持續時間較長。
2.2)長效補水效果
結果:從長效的補水效果來看,持續的使用專利樣的話,皮膚的水分含量會有一個增長的過程,在28天時皮膚的水分含量增長約17.27%。同時也側面的反應了皮膚的屏障功能得到修復,使皮膚的水分含量得到提升。
相對於對比例1實施例1~3能夠顯著的提高補水效果(長效、即時),說明本發明的組合物在補水(長效、即時)能力方面存在顯著的功效;p<0.05;
相對於對比例2~4,實施例1~3在補水(長效、即時)方面的
效果更顯著,說明本發明的組合物組成更加合理,各組分缺一不可,相互配合產生了顯著的增效協同作用;
相對於對比例5,實施例1~3在補水(長效、即時)方面效果更顯著,說明同等有效成分含量下,本發明組合物效果更好,說明本發明組合物的配比合理得當。
各樣品中,實施例3的效果最為顯著,說明該配比及濃度最為適宜,所得樣品的效果與其他各組皆產生了顯著差異,p<0.05。
皮膚的屏障修復效果(TEWL值)
- 測試儀器:德國CK公司多功能皮膚測試儀,探頭型號Tewameter TM300,
- 測試原理:FICK菲克擴散定律:dm/dt=D.A.dp/dx。通過兩組溫度、濕度感測器測定近表皮(約1cm內)由角質層水分散失在不同亮點形成的水蒸氣壓梯度,直接測出經皮散發的水分量。TEWL值是皮膚屏障好壞的一個重要標誌,皮膚的TEWL值越低,說明皮膚的屏障功能越好,反之越差。
- 測試環境:測試環境溫度為22±1℃,濕度為50±5%,並且進行即時動態檢測;
- 測試志願者:有效志願者至少30人,年齡在16-65歲之間(妊娠或浦乳期婦女除外);無嚴重系統疾病,無免疫缺陷或自身免疫性疾病者;既往對護膚類化妝品無嚴重過敏史者;近一個月內未曾使用激素類藥物及免疫抑制劑者;未參加其他臨床試驗者;按規定使用受試藥物且資料齊全;測試前所有自願者應填寫知情同意書。
- 測試步驟:
測試前準備:受試部位前2-3天不能使用任何產品(化妝品或外用藥品)。實驗前,受試者需要同意清潔雙手前臂內測,自然風乾。清潔後受試者雙手前臂內測做好測量區域標記。正式測試前應在符合標準房間內靜坐至少30min,不能喝水,前臂暴露,呈測試狀態放置,保持放鬆。
測試過程:實驗中左右手臂內側標記3×3cm2試驗區域,同一手臂可以標記多個區域,區域間隔1cm。測試產品和空白對照均隨機分佈在左
右手臂上。使用探頭Tewameter TM300進行受試區域和對照區域的皮膚水分散失量測量。每個區域依照平行測定15次。先測量各測試區域的空白值,然後按0.072ml樣品/cm2的用量,將樣品注入到膜布中,並敷在試驗區內,時間為20分鐘。20分鐘後揭掉面膜布,10分鐘後測試該區域皮膚水分散失含量,即為30分鐘時皮膚的水分散失量。之後分別測量1小時,2小時,受試區域和空白對照區域的皮膚水分散失量,同一個志願者的測試由同一個測量人員完成。
對於長效的屏障修復的測試,受試者每天在同一區域按照上述測試方法自行進行塗抹測試樣品,並在第14、28天時在不塗抹待測樣品的情況下,測試皮膚的水分散失量TEWL。
測試資料:按實驗的設計分別測得各時間段的皮膚水分散失量,並計算各個時間點的皮膚水分散失量的減少量。皮膚水分散失量的減少量越大,皮膚屏障修復的效果越好。
實驗結果:
3.1)即時屏障修復效果
結果:從皮膚水分散失量的減少量來看,對照樣-1為基礎樣具有一定的降低皮膚水分散失量的效果,30分鐘時,皮膚的水分散失量的減少為4.62%,專利樣的皮膚的水分散失量的減少量達到10.41%,顯著降低了皮膚的水分散失量,體現了皮膚屏障的修復的效果。
3.2)長效屏障修復效果
結果:從長效的皮膚水分散失量的減少量的結果來看,持續28天實例樣-1的使用,使得皮膚的水分散失量的減少量達到16.64%,即皮膚的水分散失量在不斷的減少,體現了皮膚的屏障功能得到了有效的修復。
相對於對比例1實施例1~3能夠顯著的提高保濕效果(長效、即時),說明本發明的組合物在保濕(長效、即時)能力方面存在顯著的功效;p<0.05;
相對於對比例2~4,實施例1~3在保濕(長效、即時)方面的效果更顯著,說明本發明的組合物組成更加合理,各組分缺一不可,相互配合產生了顯著的增效協同作用;
相對於對比例5,實施例1~3在保濕(長效、即時)方面效果更顯著,說明同等有效成分含量下,本發明組合物效果更好,說明本發明組合物的配比合理得當。
各樣品中,實施例3的效果最為顯著,說明該配比及濃度最為適宜,所得樣品的效果與其他各組皆產生了顯著差異,p<0.05。
綜上,該生物節律調節組合物可以有效的提升皮膚細胞的能量132.24%,而細胞的能量得到提升後,體現在皮膚的屏障方面得到有效地改善,使用28天後,皮膚的水分含量得到提升,提升了17.27%,皮膚的水分散失量得到下降,下降了16.64%。
以上僅是本發明的優選實施方式,應當指出,對於本技術領域的普通技術人員來說,在不脫離本發明原理的前提下,還可以做出若干改進和潤飾,這些改進和潤飾也應視為本發明的保護範圍。
Claims (10)
- 如請求項1所述的組合物,其中,所述皮膚調理劑A中的防腐劑為苯氧乙醇和乙基己基甘油,其中,苯氧乙醇和乙基己基甘油的品質比為1:1;所述皮膚調理劑A中穩定劑為焦亞硫酸鈉;皮膚調理劑B中的防腐劑為山梨酸和苯氧乙醇,其中,山梨酸和苯氧乙醇的品質比為1:3。
- 如請求項1或2所述的組合物在製備調節皮膚生物節律的護膚品中的應用。
- 如請求項3所述的應用,其中,所述護膚品的功能包括:補水保濕、促進細胞能量合成。
- 一種調節皮膚生物節律的護膚品,其特徵在於,包括如請求項1或2 所述的組合物。
- 如請求項5所述的護膚品,其中,如請求項1或2所述的組合物的品質分數為0.5%~5%。
- 如請求項7所述的護膚品,其中,所述保濕劑為甘油和1,3丁二醇,所述甘油和1,3丁二醇的品質比為1:1;所述促滲劑為戊二醇;所述角質軟化劑為羥乙基哌嗪乙烷磺酸;所述防腐劑為PHL。
- 如請求項5~9任一項所述的護膚品的製備方法,包括:將羥乙基哌嗪乙烷磺酸、腺苷,加入去離子水加熱至75℃~80℃,250~300r/min攪拌溶解20min;加入甘油、1,3-丁二醇、戊二醇,溫度控制為65~75℃,300r/min攪拌溶解15min;加入皮膚調理劑A、皮膚調理劑B和PHL,溫度控制35~45℃之間,100r/min攪拌15min,然後冷卻至室溫製得護膚品。
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