CN110448478B - 一种组合物及其在制备调节皮肤生物节律的护肤品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及护肤品技术领域,尤其涉及一种组合物及其在制备调节皮肤生物节律的护肤品中的应用。本发明提供的组合物包括腺苷、含有糖蛋白、氨基酸的皮肤调理剂A以及含有谷氨酰胺基乙基咪唑的皮肤调理剂B。各组分相互配合,相互促进,从而实现了良好的补水保湿、促进细胞能量合成。将该组合物用于制备化妆品,能够改善熬夜者肌肤的一系列问题。
Description
技术领域
本发明涉及护肤品技术领域,尤其涉及一种组合物及其在制备调节皮肤生物节律的护肤品中的应用。
背景技术
生物体由内部时钟-生物节律-24小时监管,控制昼夜节律基因周期表达。这种对昼夜节律基因周期性激活的目的是主动适应由日常环境变化带来的代谢和蛋白质合成功能改变。阳光照射是同步生物节律的活化剂之一,因此昼夜节律基因表达周期性会受到环境影响。视网膜和皮肤是阳光照射的主要感受器。
皮肤组织的生理活性由生物节律严格控制。在日间皮肤细胞主要致力于加强皮肤天然防御(抵抗UV,抗污染等),在夜间着重于再生代谢。研究发现,皮肤生物钟基因,如CLOCK和PERIOD-1与细胞(角质形成细胞、成纤维细胞和黑色素细胞)的增殖活动相关联。
老龄化、季节、阳光照射的变化、疲劳、紧张、失眠、时差等都会导致生物节律的微小变化,但是这些变化是可以累积的。这些不规律的生物节律变化使得昼夜节律基因的周期性激活被改变,导致皮肤生理代谢的变化。
无序的生物节律是诱导皮肤过早老化的原因之一,当皮肤的生理活性不适应环境条件改变时,可能导致皮肤的天然防御能力减弱,夜间细胞再生进程缓慢,维生素D生物转化效率降低(维生素D参与钙吸收,钙的水平影响皮肤的水化能力)。但目前针对皮肤生物节律调节的护肤品种类较少,且机理并不明确。
发明内容
有鉴于此,本发明要解决的技术问题在于提供一种组合物及其在制备调节皮肤生物节律的护肤品中的应用。本发明的组合物具有良好的补水保湿效果,并且能够促进细胞能量合成。
本发明提供的组合物,包括如下质量份的组分:
皮肤调理剂A 0.2~1.0份;
皮肤调理剂B 0.2~2.0份;
腺苷 0.1~2.0份;
所述皮肤调理剂A包括如下质量分数的:
所述皮肤调理剂B包括如下质量分数的:
谷氨酰胺基乙基咪唑 1%
防腐剂 0.4%
余量为水。
所述皮肤调理剂A中的防腐剂为苯氧乙醇和乙基己基甘油,其中,苯氧乙醇和乙基己基甘油的质量比为1:1;
所述皮肤调理剂A中稳定剂为焦亚硫酸钠;
皮肤调理剂B中的防腐剂为山梨酸和苯氧乙醇,其中,山梨酸和苯氧乙醇的质量比为1:3。
本发明提供的组合物,包括如下质量份的组分:
皮肤调理剂A 0.5份;
皮肤调理剂B 0.5份;
腺苷 0.2份。
本发明提供的组合物,包括如下质量份的组分:
皮肤调理剂A 0.2份;
皮肤调理剂B 0.2份;
腺苷 0.1份;
本发明提供的组合物,包括如下质量份的组分:
皮肤调理剂A 1.0份;
皮肤调理剂B 2.0份;
腺苷 2.0份;
本发明以熬夜皮肤的状态为研究对象,以皮肤的生物节律机理为背景,首先以生物节律肽对皮肤的生物钟基因进行调节。当人体的生物钟出现不规律时,皮肤的屏障容易受到损伤,而表皮角质细胞是人体唯一具有维生素D完整代谢途径的细胞。当皮肤的屏障受损时,也就是表皮受损时,角质细胞就无法正常的合成维生素D。皮肤调理剂B中所含有的活性成分能够调节生物钟基因的表达,促进角质细胞的的修复及增殖,促进维生素D的合成,激活维生素D转化从而激活皮肤的屏障能力;并且,从为皮肤提供更多的能量用于皮肤修复的角度出发,通过生物节律的调节,采用富含糖蛋白、谷氨酸、缬氨酸、苏氨酸的皮肤调理剂A用于促进糖降解和线粒体呼吸,确保皮肤细胞的ATP整天处于高水平,日间有足够的能量供给细胞用于抵御外界不利因素;确保夜间皮肤细胞需要修复时,有足够的能量供给;再次额外添加腺苷,直接补充细胞所需要的能量;本发明针对熬夜皮肤的问题出发,从生物钟基因调节+细胞本身能量的激发+能量的额外补充三个维度着手,开发出具有强效熬夜皮肤护理的组合物。本发明组合物中各组分相互配合,相互促进,起到了良好的增效协同作用。
本发明所述的组合物在制备调节皮肤生物节律的护肤品中的应用。
所述护肤品的功能包括:补水保湿、促进细胞能量合成。
本发明还提供了一种调节皮肤生物节律的护肤品,包括本发明所述的组合物。
本发明所述的护肤品中,所述的组合物的质量分数为0.5%~5%。
一些具体实施例中,所述组合物的质量分数为0.5%、1.2%、5%。
本发明所述的护肤品包括:
本发明所述的护肤品中,
所述保湿剂为甘油和1,3丁二醇,所述甘油和1,3丁二醇的质量比为1:1;
所述促渗剂为戊二醇;
所述角质软化剂为羟乙基哌嗪乙烷磺酸;
所述防腐剂为PHL。
本发明所述的护肤品由如下质量分数的组分组成:
所述皮肤调理剂A包括如下质量分数的:
所述皮肤调理剂B包括如下质量分数的:
谷氨酰胺基乙基咪唑 1%
防腐剂 0.4%
余量为水。
一些实施例中,所述化妆品由如下组分组成:
一些实施例中,所述化妆品由如下组分组成:
一些实施例中,所述化妆品由如下组分组成:
本发明所述护肤品为化妆水、乳液、膏霜、面膜、精华、凝胶等。
本发明所述护肤品的制备方法,包括:
将羟乙基哌嗪乙烷磺酸、腺苷,加入去离子水加热至75℃~80℃,250~300r/min搅拌溶解20min;
加入甘油、1,3-丁二醇、戊二醇,温度控制为65~75℃,300r/min搅拌溶解15min;
加入皮肤调理剂A、皮肤调理剂B和PHL,温度控制35~45℃之间,100r/min搅拌15min,然后冷却至室温制得护肤品。
本发明提供的组合物包括腺苷、含有糖蛋白、氨基酸的皮肤调理剂A以及含有谷氨酰胺基乙基咪唑的皮肤调理剂B。各组分相互配合,相互促进,从而实现了良好的补水保湿、促进细胞能量合成。将该组合物用于制备化妆品,能够改善熬夜者肌肤的一系列问题。
附图说明
图1各样品对细胞的能量合成量的影响;
图2各样品的即时补水效果;
图3各样品的长效补水效果;
图4各样品对皮肤水分散失量的短期效果;
图5各样品对皮肤水分散失量的长期效果。
具体实施方式
本发明提供了一种组合物及其在制备调节皮肤生物节律的护肤品中的应用,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
本发明采用的试材皆为普通市售品,皆可于市场购得。
如下实施例中,所采用的皮肤调理剂A的组成为:
所采用的皮肤调理剂B的组成为:
其中谷氨酰氨基乙基咪唑的结构式为:
下面结合实施例,进一步阐述本发明:
实施例
各组配方如表1:
表1各组配方含量(%)
按照配方配比称取羟乙基哌嗪磺酸、腺苷,加入去离子水加热至75-80℃,以250-300r/min,搅拌20min,直至溶解透明;
按照配方配比加入甘油、1,3-丁二醇、戊二醇,温度控制为65-75℃,以300r/min,搅拌15min,直至所有添加物全部溶解;
按照配比称取皮肤调理剂A、皮肤调理剂B和PHL,温度控制为35-45℃,以100r/min,搅拌15min,静置恢复到室温即可。
功效评测
表皮角质细胞是人体唯一具有维生素D完整代谢途径的细胞。当皮肤的屏障受损时,也就是表皮受损的话,角质细胞就无法正常的合成维生素D。维生素D在表皮组织内由7-脱氢胆固醇转化而来,表皮同样含有线粒体CYP27A1和CYP27B1。1,2(OH)2D具有促进表皮角质细胞分化的作用,这种作用通过磷脂酶C-γ1(phospholipase C-γ1,PLC-γ1)完成。表皮角质细胞产生的1,2(OH)2D与钙共同调节细胞的分化。1,2(OH)2D增加CaR表达,使细胞对钙敏感性提升;并且升高PLC-γ1提高细胞内钙离子浓度;钙离子对表皮屏障功能的形成具有调控作用,在皮肤的表面施加负电荷会使表皮上部的镁和钙的浓度上升,增加钙离子的浓度梯度,从而增强表皮屏障功能。此外1,2(OH)2D直接刺激角质细胞内外皮蛋白的转录。1,2(OH)2D还能促进角质形成细胞内抑菌肽的表达,从而抵抗皮肤细菌感染。维生素D主要通过促进丝聚蛋白、抗菌肽等蛋白质的合成和调节角质细胞的增殖和分化,对皮肤屏障发挥重要作用。本发明从细胞能量变化、补水效果、皮肤水分散失量三个方面来衡量组合物的功效。
1)细胞能量的增加量
三磷酸腺苷(adenosine 5’-triphosphate,ATP)是生物体内能量装换最基本的载体,其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。ATP作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要的作用。ATP水平的改变会影响细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降。在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。ATP含量测定试剂盒可以用于检测细胞内的ATP水平。
实验仪器:酶标仪、水浴锅、移液枪、离心机、96孔板、ATP含量检测试剂盒
实验材料:角质形成细胞,DMEM,FBS,DPBS
实验方法:
1.将角质形成细胞消化后,利用DMEM培基分散细胞,利用Hemacytometer来计数细胞,然后利用DMEM来稀释细胞,稀释到浓度为5×104cells/ml。
2.稀释后的细胞溶液分别接种到培养皿中。
3.在37℃,5%CO2的培养箱中培养24小时。
4.待测样品准备:待测样品用DMEM培基稀释,稀释后浓度分别为0.1%,样品均准备10ml。
5.细胞培养24小时后,观察细胞是否完全贴壁生长,如果细胞完全贴壁生长的话,将原培养基移除,用DPBS洗涤。
6.将DPBS移除之后,分别加入前面准备好的含有0.1%待测样品的培养基.
7.样品加入之后,放入37℃,5%CO2的培养箱中培养48小时。
-角质形成细胞收集及处理:细胞收集后,离心去掉培养基,加入0.5ml双蒸馏水,混合均匀。将细胞水溶液放置于废水中加热煮10分钟,漩涡混匀1分钟;4000rpm条件下离心10分钟,取上清液待测。
-具体试剂及操作步骤如下:
实验试剂:
试剂一:底物液1为粉体,使用时加10ml蒸馏水溶解,沸水中加热溶解
试剂二:底物液2为液体,直接使用
试剂三:促进剂,使用时将稀释液加入到粉剂中配置成溶液
试剂四:沉淀剂
试剂五:显色剂,使用时将甲液加入到乙液中,混合均匀后待用
试剂六:终止剂
ATP标准品:用DDW配置成1mMATP标准品溶液
实验方法:
检测体系配制:
表2检测体系
混合均匀,室温中静置反应5分钟,分别从各待测样管、对照管、标准管和空白管中移取200μL样品到96孔板上,于630nm波长处测试吸光度。
因此可得到各测试样品细胞的ATP的含量为:ATP含量(μmol)=[(A测定管-A对照管)/(A标准管-A空白)]×标准品浓度×稀释倍数
-各测试样品的细胞能量的增长量:
-ATP Increase(%)=(ATPn-ATP0)/ATP0×100%(其中ATPn为各测试样品的细胞能量,ATP0为空白样的细胞能量)
实验结果:
表3专利组合促进细胞的能量合成量
实验结果:通过细胞的能量的测试结果可知,对照样-1几乎没有促进细胞能量增长的功效,实施例1~3可以将细胞的能量提升114.77%~152.42%。细胞能量的提升有助于受损的皮肤状态的修复。经统计学分析:
相对于对比例1实施例1~3能够显著的提高细胞能量,说明本发明的组合物在提高细胞能量方面存在显著的功效;p<0.05;
相对于对比例2~4,实施例1~3在提高细胞能量方面的效果更显著,说明本发明的组合物组成更加合理,各组分缺一不可,相互配合产生了显著的增效协同作用;
相对于对比例5,实施例1~3在提高细胞能量方面效果更显著,说明同等有效成分含量下,本发明组合物效果更好,说明本发明组合物的配比合理得当。
各样品中,实施例3的效果最为显著,说明该配比及浓度最为适宜,所得样品的效果与其他各组皆产生了显著差异,p<0.05。
2)皮肤的即时及长效补水效果
-测试仪器:德国CK公司多功能皮肤测试仪,型号Corneometer CM825MDD,
-测试原理:采用电容法测试人体皮肤角质层的水分含量,它的原理是基于水和其他物质的介电常数差异显著,按照皮肤含水量不同,测得皮肤的电容值不同,其观测参数可代表皮肤水分值。
-测试环境:测试环境温度为22±1℃,湿度为50±5%,并且进行实时动态检测;
-测试志愿者:有效志愿者至少30人,年龄在16-65岁之间(妊娠或哺乳期妇女除外);前臂测试区域电容法皮肤水分测定意义的基础值在15-100之间;无严重系统疾病,无免疫缺陷或自身免疫性疾病者;既往对护肤类化妆品无严重过敏史者;近一个月内未曾使用激素类药物及免疫抑制剂者;未参加其他临床试验者;按规定使用受试药物且资料齐全;测试前所有自愿者应填写知情同意书。
-测试步骤:
测试前准备:受试部位前2-3天不能使用任何产品(化妆品或外用药品)。实验前,受试者需要同意清洁双手前臂内测,自然风干。清洁后受试者双手前臂内测做好测量区域标记。正式测试前应在符合标准房间内静坐至少30min,不能喝水,前臂暴露,呈测试状态放置,保持放松。
测试过程:实验中左右手臂内侧标记3×3cm2试验区域,同一手臂可以标记多个区域,区域间隔1cm。测试产品和空白对照均随机分布在左右手臂上。使用探头CorneometerCM825 MDD进行受试区域和对照区域的皮肤水分含量测量。每个区域依照平行测定15次。先测量各测试区域的空白值,然后按0.072ml样品/cm2的用量,将样品注入到膜布中,并敷在试验区内,时间为20分钟。20分钟后揭掉面膜布,10分钟后测试该区域皮肤水分含量,即为30分钟时皮肤的水分含量。之后分别测量1小时,2小时,受试区域和空白对照区域的皮肤含水量(验证时按此时间测定),同一个志愿者的测试由同一个测量人员完成。
对于长效补水的测试,受试者每天在同一区域按照上述测试方法自行进行涂抹测试样品,并在第14、28天时在不涂抹待测样品的情况下,测试皮肤的水分含量。
测试数据:按实验的设计分别测得各时间段的皮肤水分含量,并计算各个时间点的皮肤水分含量的增加量。
实验结果:
2.1)即时补水结果
表4即时补水效果
结果:从即时的补水效果来看,对照样-1为基础配方具有一定的补水效果,水分含量增加量为108.1%。实施例-1在30分钟时皮肤的水分含量增加到149.3%,120分钟时补水效果仍有151.5%左右,即时补水效果明显,持续时间较长。
2.2)长效补水效果
表5长效补水效果
结果:从长效的补水效果来看,持续的使用专利样的话,皮肤的水分含量会有一个增长的过程,在28天时皮肤的水分含量增长约17.27%。同时也侧面的反应了皮肤的屏障功能得到修复,使皮肤的水分含量得到提升。
相对于对比例1实施例1~3能够显著的提高补水效果(长效、即时),说明本发明的组合物在补水(长效、即时)能力方面存在显著的功效;p<0.05;
相对于对比例2~4,实施例1~3在补水(长效、即时)方面的效果更显著,说明本发明的组合物组成更加合理,各组分缺一不可,相互配合产生了显著的增效协同作用;
相对于对比例5,实施例1~3在补水(长效、即时)方面效果更显著,说明同等有效成分含量下,本发明组合物效果更好,说明本发明组合物的配比合理得当。
各样品中,实施例3的效果最为显著,说明该配比及浓度最为适宜,所得样品的效果与其他各组皆产生了显著差异,p<0.05。
3)皮肤的屏障修复效果(TEWL值)
-测试仪器:德国CK公司多功能皮肤测试仪,探头型号Tewameter TM300,
-测试原理:FICK菲克扩散定律:dm/dt=D.A.dp/dx。通过两组温度、湿度传感器测定近表皮(约1cm内)由角质层水分散失在不同亮点形成的水蒸气压梯度,直接测出经皮散发的水分量。TEWL值是皮肤屏障好坏的一个重要标志,皮肤的TEWL值越低,说明皮肤的屏障功能越好,反之越差。
-测试环境:测试环境温度为22±1℃,湿度为50±5%,并且进行实时动态检测;
-测试志愿者:有效志愿者至少30人,年龄在16-65岁之间(妊娠或浦乳期妇女除外);无严重系统疾病,无免疫缺陷或自身免疫性疾病者;既往对护肤类化妆品无严重过敏史者;近一个月内未曾使用激素类药物及免疫抑制剂者;未参加其他临床试验者;按规定使用受试药物且资料齐全;测试前所有自愿者应填写知情同意书。
-测试步骤:
测试前准备:受试部位前2-3天不能使用任何产品(化妆品或外用药品)。实验前,受试者需要同意清洁双手前臂内测,自然风干。清洁后受试者双手前臂内测做好测量区域标记。正式测试前应在符合标准房间内静坐至少30min,不能喝水,前臂暴露,呈测试状态放置,保持放松。
测试过程:实验中左右手臂内侧标记3×3cm2试验区域,同一手臂可以标记多个区域,区域间隔1cm。测试产品和空白对照均随机分布在左右手臂上。使用探头TewameterTM300进行受试区域和对照区域的皮肤水分散失量测量。每个区域依照平行测定15次。先测量各测试区域的空白值,然后按0.072ml样品/cm2的用量,将样品注入到膜布中,并敷在试验区内,时间为20分钟。20分钟后揭掉面膜布,10分钟后测试该区域皮肤水分散失含量,即为30分钟时皮肤的水分散失量。之后分别测量1小时,2小时,受试区域和空白对照区域的皮肤水分散失量,同一个志愿者的测试由同一个测量人员完成。
对于长效的屏障修复的测试,受试者每天在同一区域按照上述测试方法自行进行涂抹测试样品,并在第14、28天时在不涂抹待测样品的情况下,测试皮肤的水分散失量TEWL。
测试数据:按实验的设计分别测得各时间段的皮肤水分散失量,并计算各个时间点的皮肤水分散失量的减少量。皮肤水分散失量的减少量越大,皮肤屏障修复的效果越好。
实验结果:
3.1)即时屏障修复效果
表6即时皮肤水分散失量的减少量
结果:从皮肤水分散失量的减少量来看,对照样-1为基础样具有一定的降低皮肤水分散失量的效果,30分钟时,皮肤的水分散失量的减少为4.62%,专利样的皮肤的水分散失量的减少量达到10.41%,显著降低了皮肤的水分散失量,体现了皮肤屏障的修复的效果。
3.2)长效屏障修复效果
表7长效皮肤水分散失量的减少量
结果:从长效的皮肤水分散失量的减少量的结果来看,持续28天实施例-1的使用,使得皮肤的水分散失量的减少量达到16.64%,即皮肤的水分散失量在不断的减少,体现了皮肤的屏障功能得到了有效的修复。
相对于对比例1实施例1~3能够显著的提高保湿效果(长效、即时),说明本发明的组合物在保湿(长效、即时)能力方面存在显著的功效;p<0.05;
相对于对比例2~4,实施例1~3在保湿(长效、即时)方面的效果更显著,说明本发明的组合物组成更加合理,各组分缺一不可,相互配合产生了显著的增效协同作用;
相对于对比例5,实施例1~3在保湿(长效、即时)方面效果更显著,说明同等有效成分含量下,本发明组合物效果更好,说明本发明组合物的配比合理得当。
各样品中,实施例3的效果最为显著,说明该配比及浓度最为适宜,所得样品的效果与其他各组皆产生了显著差异,p<0.05。
综上,该生物节律调节组合物可以有效的提升皮肤细胞的能量132.24%,而细胞的能量得到提升后,体现在皮肤的屏障方面得到有效地改善,使用28天后,皮肤的水分含量得到提升,提升了17.27%,皮肤的水分散失量得到下降,下降了16.64%。
以上仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,
所述皮肤调理剂A中的防腐剂为苯氧乙醇和乙基己基甘油,其中,苯氧乙醇和乙基己基甘油的质量比为1:1;
所述皮肤调理剂A中稳定剂为焦亚硫酸钠;
皮肤调理剂B中的防腐剂为山梨酸和苯氧乙醇,其中,山梨酸和苯氧乙醇的质量比为1:3。
3.权利要求1或2所述的组合物在制备调节皮肤生物节律的护肤品中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述护肤品的功能包括:补水保湿、促进细胞能量合成。
5.一种调节皮肤生物节律的护肤品,其特征在于,包括权利要求1或2所述的组合物。
6.根据权利要求5所述的护肤品,其特征在于,权利要求1或2所述的组合物的质量分数为0.5%~5%。
8.根据权利要求7所述的护肤品,其特征在于,
所述保湿剂为甘油和1,3丁二醇,所述甘油和1,3丁二醇的质量比为1:1;
所述促渗剂为戊二醇;
所述角质软化剂为羟乙基哌嗪乙烷磺酸;
所述防腐剂为PHL。
10.权利要求5~9任一项所述的护肤品的制备方法,包括:
将羟乙基哌嗪乙烷磺酸、腺苷,加入去离子水加热至75℃~80℃,250~300r/min搅拌溶解20min;
加入甘油、1,3-丁二醇、戊二醇,温度控制为65~75℃,300r/min搅拌溶解15min;
加入皮肤调理剂A、皮肤调理剂B和PHL,温度控制35~45℃之间,100r/min搅拌15min,然后冷却至室温制得护肤品。
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