TW202039496A - 做為腺苷受體拮抗劑之9-經取代胺基三唑喹唑啉衍生物、醫藥組合物及其用途 - Google Patents

做為腺苷受體拮抗劑之9-經取代胺基三唑喹唑啉衍生物、醫藥組合物及其用途 Download PDF

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Abstract

在本發明的諸多實施例中，本發明提供做為A2a及/或A2b受體之拮抗劑的結構式(I)之某些9-經取代胺基三唑喹唑啉化合物：
Figure 108142874-A0101-11-0003-3
及其醫藥學上可接受之鹽，其中環A、R1 及R2 如本文所定義，包含一或多種此等化合物(單獨及與一或多種其他治療活性劑組合)之醫藥組合物及其製備方法，以及單獨及與其他治療劑組合用於治療至少部分由腺苷A2a受體及/或腺苷A2b受體介導之各種疾病、病況或病症之用途。

Description

做為腺苷受體拮抗劑之9-經取代胺基三唑喹唑啉衍生物、醫藥組合物及其用途
本發明係關於抑制A2a及A2b腺苷受體中之至少一者之新穎化合物及其醫藥學上可接受之鹽以及包含此等化合物及鹽之組合物、用於合成此等化合物之方法及其用於治療至少部分由腺苷A2a受體及/或腺苷A2b受體介導之各種疾病、病況或病症之用途。此等疾病、病況及病症包括(但不限於)癌症及免疫相關病症。本發明進一步係關於組合療法，包括(但不限於)包含本發明之化合物及PD-1拮抗劑之組合。
腺苷係一種由腺嘌呤與呋喃糖(一種核糖分子)組成之嘌呤核苷化合物。腺苷天然存在於哺乳動物體內且在各種生物化學過程中具有重要作用，包括能量轉移(以三磷酸腺苷及單磷酸腺苷形式)及信號轉導(以環狀單磷酸腺苷形式)。腺苷在與血管擴張相關之過程中，包括在心臟血管擴張中亦具有誘發性作用。其亦充當神經調節物質(例如，認為在促進睡眠中有所涉及)。除其在此等生物化學過程中有所涉及以外，腺苷做為治療性抗心律不整劑用以治療室上性心動過速及其他適應症。
腺苷受體係以腺苷做為內源配位體之一類嘌呤型G蛋白偶合受體。人類中之四種類型腺苷受體稱為A1、A2a、A2b及A3。已提議調節A1尤其用以管理及治療神經障礙、哮喘以及心臟衰竭及腎衰竭。已提議調節A3用以管理及治療哮喘及慢性阻塞性肺病、青光眼、癌症、中風及其他適應症。亦咸信調節A2a及A2b受體具有潛在治療用途。
在中樞神經系統中，咸信A2a拮抗劑展示抗抑鬱特性且刺激認知功能。A2a受體以高密度存在於基底神經節中，已知對於控制運動而言係重要的。因此，咸信A2a受體拮抗劑適用於治療抑鬱症及改良由於諸如帕金森氏病(Parkinson's disease)、老年癡呆症(如在阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)中)及各種器官來源之精神病之神經退化性疾病引起之運動障礙。
在免疫系統中，已確定經由在各種免疫細胞及內皮細胞上表現之A2a受體及A2b受體之腺苷信號傳遞對於在發炎反應期間保護組織具有重要作用。以此方式(及其他方式)，已證實腫瘤藉由抑制免疫功能及促進耐受性來逃避宿主反應。(參見例如Fishman, P.等人，Handb. Exp. Pharmacol. (2009) 193:399-441)。此外，已發現A2a及A2b細胞表面腺苷受體在各種腫瘤細胞中上調。因此，A2a及/或A2b腺苷受體之拮抗劑代表新一類有前景之腫瘤治療劑。舉例而言，活化A2a腺苷受體導致抑制各種細胞類型對腫瘤之免疫反應，包括(但不限於)：抑制自然殺手細胞細胞毒性、抑制腫瘤特異性CD4+/CD8+活性、促進產生LAG-3及Foxp3+調節性T-細胞及介導對調節性T-細胞之抑制作用。腺苷A2a受體抑制作用亦已證實經由增強抗腫瘤T細胞反應增加PD-1抑制劑之功效。由於此等免疫抑制路徑之每一者均已確認為腫瘤逃避宿主反應之機制，因此包括A2a及/或A2b受體拮抗劑單獨或連同經設計用以減輕免疫抑制作用之一或多種其他治療劑一起之癌症免疫治療方案可產生增強之腫瘤免疫療法。(參見例如P. Beavis等人，Cancer Immunol. Res. DOI: 10.1158/2326-6066. CIR-14-0211, 2015年2月11日；Willingham, SB.等人，Cancer Immunol. Res., 6(10), 1136-49；及Leone RD等人，Cancer Immunol. Immunother., 2018年8月，第67卷，第8期，1271-1284)。
在以化學療法及輻射療法進行治療時，癌細胞向腫瘤微環境中釋放ATP，其隨後轉化為腺苷。(參見Martins, I.等人，Cell Cycle，第8卷，第22期，第3723至3728頁。)腺苷隨後可結合至A2a受體，且經由諸如上述機制使抗腫瘤免疫反應遲鈍。已提議在化學療法或輻射療法期間投與A2a受體拮抗劑，導致腫瘤特異性T-細胞擴增，同時防止誘發腫瘤特異性調節性T-細胞。(Young, A.等人，Cancer Discovery (2014) 4:879-888)。
咸信A2a受體拮抗劑與抗腫瘤疫苗組合基於其不同作用機制至少提供加合性治療效應。此外，A2a受體拮抗劑可適用於與檢查點阻斷劑組合。舉例而言，認為PD-1抑制劑與腺苷A2a受體抑制劑之組合減輕腫瘤抑制腫瘤特異性效應T-細胞活性之能力。(參見例如Willingham, SB.等人，Cancer Immunol. Res.; 6(10), 1136-49；Leone, RD.等人，Cancer Immunol. Immunother., 2018年8月，第67卷，第8期，第1271-1284頁；Fishman, P.等人，Handb. Exp. Pharmacol. (2009) 193:399-441；及Sitkovsky, MV.等人，(2014) Cancer Immunol. Res 2:598-605。)
A2b受體係發現於各種細胞類型中之一種G蛋白偶合受體。A2b受體與包括A2a在內之其他腺苷受體亞型相比需要更高濃度之腺苷用於活化。(Fredholm, BB.等人，Biochem. Pharmacol. (2001) 61:443-448)。例如已在觀測到低氧之腫瘤中見到使A2b活化之病況。A2b受體因此可在與大量腺苷釋放相關之病理生理學病況中發揮重要作用。儘管尚未完全理解與A2b受體介導之抑制作用相關之路徑，但咸信A2b受體抑制作用(單獨或與A2a受體一起)可阻斷腺苷在腫瘤微環境中之原致癌功能，包括抑制T細胞功能及血管生成，且因此擴大可藉由此等受體之抑制作用來治療之癌症類型。
A2b受體主要在骨髓細胞上表現。髓源性抑制細胞(MDSC)上接合A2b受體導致其活體外擴增(Ryzhov, S.等人，J. Immunol. 2011, 187:6120–6129)。MDSC抑制T細胞增殖及抗腫瘤免疫反應。A2b受體之選擇性抑制劑及A2b受體基因剔除已證實藉由增加腫瘤微環境中之MDSC來抑制小鼠模型中之腫瘤生長(Iannone, R.等人，Neoplasia 第13卷第12期，(2013) 第1400-1409頁；Ryzhov, S.等人，Neoplasia (2008) 10: 987-995)。因此，A2b受體抑制作用已成為一種用於治療涉及骨髓細胞之各種癌症的具有吸引力之生物標靶。表現A2b受體之癌症實例可易於經由分析公開可用之TCGA資料庫來獲得。此等癌症尤其包括肺癌、結腸直腸癌、頭頸癌及子宮頸癌，且在下文中進一步詳細論述。
血管生成在腫瘤生長中具有重要作用。血管生成過程由各種因子高度調節且在與低氧相關之特定環境中由腺苷觸發。A2b受體在人類微血管內皮細胞中表現，其對調節諸如血管內皮生長因子(VEGF)之血管生成因子之表現具有重要作用。在某些腫瘤類型中，已觀測到低氧導致A2b受體上調，表明A2b受體之抑制作用可藉由限制對腫瘤細胞供氧來限制腫瘤生長。此外，涵蓋腺苷酸環化酶活化作用之實驗表明A2b受體係某些腫瘤細胞中之唯一腺苷受體亞型，表明A2b受體拮抗劑可對特定腫瘤類型展示效應。(參見例如Feoktistov, I.等人，(2003) Circ. Res. 92:485-492；及P. Fishman, P.等人，Handb. Exp. Pharmacol. (2009) 193:399-441)。
鑒於其前景廣闊且多變之治療潛能，此項技術中仍需要A2a及/或A2b腺苷受體之有效且具有選擇性之抑制劑，以供單獨或與其他治療劑組合使用。本發明解決此需求及其他需求。
在一態樣中，本發明提供化合物(下文中稱作本發明之化合物)，已令人驚訝且有利地發現其係腺苷A2a受體及/或腺苷A2b受體之抑制劑。本發明之化合物具有根據結構式(I)之結構：
Figure 02_image007
， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中環A、R1 及R2 係如下文所定義。
在另一態樣中，本發明提供包含至少一種本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽於醫藥學上可接受之載劑或稀釋劑中之醫藥組合物。根據本發明之此等組合物可視情況進一步包括一或多種如本文所述之額外治療劑。
在另一態樣中，本發明提供一種在有需要之個體(例如，動物或人類)中治療或預防至少部分由腺苷A2a受體及/或腺苷A2b受體介導之疾病、病況或病症之方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之單獨或與一或多種額外治療劑組合之至少一種本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。下文中更全面描述本發明之此等及其他態樣及實施例。
對於以下每一實施例而言，實施例中未明確定義之任何變數均如式(I)中所定義。在本文所述之每一實施例中，除非另外說明，否則每一變數均與另一變數獨立選擇。
在一實施例中，本發明之化合物具有結構式(I)：
Figure 02_image009
， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R1 係選自F、Cl、(C1 -C6 )烷基及O(C1 -C6 )烷基； R2 係選自H、F、Cl、(C1 -C6 )烷基及O(C1 -C6 )烷基； 環A係選自以下之部分：
Figure 02_image011
； R3 係選自吡唑基、三唑基及吡啶基，其中該吡唑基及該三唑基經1或2個R3A 基團取代且其中該吡啶基經1、2或3個R3A 基團取代，其中： 每個R3A 係獨立地選自(C1 -C6 )烷基、O(C1 -C6 )烷基、(C1 -C6 )烷基-OH、(C1 -C6 )鹵烷基、O(C1 -C6 )鹵烷基、側氧基、(C1 -C4 )烷基C(O)(C1 -C3 )烷基、(C1 -C4 )烷基CH(OH)(C1 -C3 )烷基、(C1 -C4 )烷基S(O)2 (C1 -C3 )烷基、-(CH2 )n (C3 -C7 )環烷基及包含1或2個選自氧及氮之環雜原子之-(CH2 )n 4-7員單環雜環烷基，其中該(C3 -C7 )環烷基及該4-7員單環雜環烷基各自係未經取代或經1、2或3個獨立地選自F、Cl、OH、(C1 -C6 )烷基及(C1 -C6 )鹵烷基之基團取代； n係0、1或2； RA1 係選自H及(C1 -C4 )烷基； RA2 係選自H、F及(C1 -C4 )烷基； RA3 係選自H、F及(C1 -C4 )烷基； RA4 係選自H及OH；且 RA5 係選自H、F及(C1 -C4 )烷基。
在另一實施例中，本發明之化合物具有結構式(I.1)：
Figure 02_image013
， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中環A、R1 及R2 係如式(I)中所定義。
在另一實施例中，本發明之化合物具有結構式(I.2)：
Figure 02_image015
， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中環A、R1 及R2 係如式(I)中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： R1 係選自F、Cl及OCH3 ； R2 係選自H、F、Cl、CH3 及OCH3 。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： R1 係F；且 R2 係選自H、F、Cl、CH3 及OCH3 。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： R1 係Cl；且 R2 係選自H、F、Cl、CH3 及OCH3 。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： R1 係F；且 R2 係OCH3 。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： R1 係F；且 R2 係F。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： R1 係F；且 R2 係H。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係選自以下之部分：
Figure 02_image017
，其中R3 、RA1 、RA2 、RA3 及RA5 係如式(I)中所定義；且其中R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係選自以下之部分：
Figure 02_image019
，其中： R3 係選自
Figure 02_image021
Figure 02_image023
， 其中： 每個R3A 係如式(I)中所定義； 每個RAa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基； RA1 、RA2 、RA3 及RA5 係如式(I)中所定義；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係選自以下之部分：
Figure 02_image025
，其中： R3 係選自
Figure 02_image027
Figure 02_image029
， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
Figure 02_image031
、
Figure 02_image033
Figure 02_image035
Figure 02_image037
； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基； RA1 、RA2 、RA3 及RA5 係如式(I)中所定義；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在前一實施例之替代例中： RA1 係選自H、CH3 及CH2 CH3 ； RA2 係選自H、F、CH3 及CH2 CH3 ； RA3 係選自H及F；且 RA5 係H。
在前一實施例之另一替代例中： RA1 係選自H及CH3 ； RA2 係H； RA3 係H；且 RA5 係H。
在前一實施例之另一替代例中： RA1 係H； RA2 係H； RA3 係H；且 RA5 係H。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image039
，其中R3 及RA3 係如式(I)中所定義；且其中R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image041
，其中： R3 係選自
Figure 02_image043
Figure 02_image045
， 其中： 每個R3A 係如式(I)中所定義； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基； RA3 係如式(I)中所定義；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image047
，其中： R3 係選自
Figure 02_image049
Figure 02_image051
， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
Figure 02_image053
、
Figure 02_image055
Figure 02_image057
Figure 02_image059
； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基； RA3 係如式(I)中所定義；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在前一實施例之另一替代例中： RA3 係選自H及F。
在前一實施例之另一替代例中： RA3 係H。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image061
，其中R3 係如式(I)中所定義；且其中R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image063
，其中： R3 係選自
Figure 02_image065
Figure 02_image067
， 其中： 每個R3A 係如式(I)中所定義； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image069
，其中： R3 係選自
Figure 02_image071
Figure 02_image073
， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
Figure 02_image075
、
Figure 02_image077
Figure 02_image079
Figure 02_image081
； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image083
，其中R3 係如式(I)中所定義；且其中R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image085
，其中： R3 係選自
Figure 02_image087
Figure 02_image089
， 其中： 每個R3A 係如式(I)中所定義； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image091
，其中： R3 係選自
Figure 02_image093
Figure 02_image095
， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
Figure 02_image097
、
Figure 02_image099
Figure 02_image101
； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image103
，其中R3 、RA1 、RA2 及RA3 係如式(I)中所定義；且其中R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image105
，其中： R3 係選自
Figure 02_image107
Figure 02_image109
， 其中： 每個R3A 係如式(I)中所定義； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基； RA1 、RA2 及RA3 係如式(I)中所定義；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image111
，其中： R3 係選自
Figure 02_image113
Figure 02_image115
， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
Figure 02_image117
、
Figure 02_image119
Figure 02_image121
； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基； RA1 、RA2 及RA3 係如式(I)中所定義；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在前一實施例之另一替代例中： RA1 係選自H、CH3 及CH2 CH3 ； RA2 係選自H、F、CH3 及CH2 CH3 ；且 RA3 係選自H及F。
在前一實施例之另一替代例中： RA1 係選自H及CH3 ； RA2 係H；且 RA3 係H。
在前一實施例之另一替代例中： RA1 係H； RA2 係H；且 RA3 係H。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image123
，其中R3 、RA1 、RA2 及RA3 係如式(I)中所定義；且其中R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image125
，其中： R3 係選自
Figure 02_image127
Figure 02_image129
， 其中： 每個R3A 係如式(I)中所定義； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基； RA1 、RA2 及RA3 係如式(I)中所定義；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image131
，其中： R3 係選自
Figure 02_image133
Figure 02_image135
， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
Figure 02_image137
、
Figure 02_image139
Figure 02_image141
； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基； RA1 、RA2 及RA3 係如式(I)中所定義；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在前一實施例之另一替代例中： RA1 係選自H、CH3 及CH2 CH3 ； RA2 係選自H、F、CH3 及CH2 CH3 ；且 RA3 係選自H及F。
在前一實施例之另一替代例中： RA1 係選自H及CH3 ； RA2 係H；且 RA3 係H。
在前一實施例之另一替代例中： RA1 係H； RA2 係H；且 RA3 係H。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image143
，其中R3 、RA1 、RA2 、RA3 及RA4 係如式(I)中所定義；且其中R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image145
，其中： R3 係選自
Figure 02_image147
Figure 02_image149
， 其中： 每個R3A 係如式(I)中所定義； 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基； RA1 、RA2 、RA3 及RA4 係如式(I)中所定義；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在另一實施例中，在式(I)、(I.1)及(I.2)之每一者中： 環A係以下部分：
Figure 02_image151
，其中： R3 係選自
Figure 02_image153
Figure 02_image155
， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
Figure 02_image157
、
Figure 02_image159
Figure 02_image161
； 每個RAa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基； RA1 、RA2 、RA3 及RA4 係如式(I)中所定義；且 R1 及R2 係如式(I)中所定義或如上文所述R1 及R2 之任一替代實施例中所定義。
在前一實施例之另一替代例中： RA1 係選自H、CH3 及CH2 CH3 ； RA2 係選自H、F、CH3 及CH2 CH3 ； RA3 係選自H及F；且 RA4 係選自H及OH。
在前一實施例之另一替代例中： RA1 係H； RA2 係H； RA3 係H；且 RA4 係選自H及OH。
在另一實施例中，本發明之化合物包含本文中識別為下文表中之實例之彼等化合物及其醫藥學上可接受之鹽。
在另一態樣中，本發明提供包含醫藥學上可接受之載劑及本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之醫藥組合物。根據本發明之此等組合物可視情況進一步包括一或多種如本文所述之額外治療劑。
在另一態樣中，本發明提供一種製造可用於治療至少部分由腺苷A2a受體及/或腺苷A2b受體介導之疾病、病況或病症之藥物或組合物之方法，其包含將本發明之化合物與一或多種醫藥學上可接受之載劑組合。
在另一態樣中，本發明提供一種在有需要之個體(例如，動物或人類)中治療或預防至少部分由腺苷A2a受體及/或腺苷A2b受體介導之疾病、病況或病症之方法，該方法包含向有需要之該個體投與治療有效量之單獨或與一或多種額外治療劑組合之至少一種本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。此等疾病、病況及病症之特異性非限制性實例在本文中描述。腫瘤學
在一些實施例中，該疾病、病況或病症係癌症。一般熟習此項技術者認為PD-1拮抗劑及/或A2a及/或A2b抑制劑適用之任何癌症均涵蓋為可由此實施例以單一療法或與下文論述之其他治療劑組合之形式治療之癌症。表現高水平A2a受體或A2b受體之癌症係涵蓋為可由本發明之化合物治療之癌症。表現高水平A2a及/或A2b受體之癌症實例可由一般熟習此項技術者參考Cancer Genome Atlas (TCGA)資料庫來辨別。表現高水平A2a受體之癌症之非限制性實例包括腎癌、乳癌、肺癌及肝癌。表現高水平A2b受體之癌症之非限制性實例包括肺癌、結腸直腸癌、頭頸癌及子宮頸癌。
因此，一種實施例提供一種治療癌症之方法，其包含向需要此治療之個體投與有效量之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該癌症係表現高水平A2a受體之癌症。一種相關實施例提供一種治療癌症之方法，其包含向需要此治療之個體投與有效量之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該癌症係選自腎癌、乳癌、肺癌及肝癌。
另一實施例提供一種治療癌症之方法，其包含向需要此治療之個體投與有效量之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該癌症係表現高水平A2b受體之癌症。一種相關實施例提供一種治療癌症之方法，其包含向需要此治療之個體投與有效量之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該癌症係選自肺癌、結腸直腸癌、頭頸癌及子宮頸癌。
可藉由投與本發明之化合物(單獨或與下文所述之一或多種其他藥劑組合)治療之癌症之其他非限制性實例包括前列腺癌(包括(但不限於)轉移性去勢難治性前列腺癌)、結腸癌、直腸癌、胰臟癌、子宮頸癌、胃癌、子宮內膜癌、腦癌、肝癌、膀胱癌、卵巢癌、睾丸癌、頭癌、頸癌、皮膚癌(包括黑素瘤及基底細胞癌)、間皮內層癌、白血球癌(包括淋巴瘤及白血病)、食道癌、乳癌、肌肉癌、結締組織癌、肺癌(包括(但不限於)小細胞肺癌、非小細胞肺癌及肺腺癌)、腎上腺癌、甲狀腺癌、腎癌或骨癌。可由本發明之化合物治療之其他癌症包括神經膠母細胞瘤、間皮瘤、腎細胞癌、胃癌、肉瘤、絨膜癌、皮膚基底細胞癌及睾丸精細胞瘤及卡堡氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)。CNS 及神經障礙
在其他實施例中，疾病、病況或病症係中樞神經系統或神經障礙。此等疾病、病況或病症之非限制性實例包括運動障礙，諸如震顫、運動徐緩、步態障礙、肌張力障礙、運動困難、遲發性運動困難、其他錐體外症候群、帕金森氏病及與帕金森氏病相關之病症。本發明之化合物亦具有或咸信具有適用於預防或減輕導致此等運動障礙或使此等運動障礙惡化之藥物效應的潛能。感染
在其他實施例中，疾病、病況或病症係感染性病症。此等疾病、病況或病症之非限制性實例包括急性或慢性病毒感染、細菌感染、真菌感染或寄生蟲感染。在一實施例中，病毒感染係人類免疫缺乏病毒。在另一實施例中，病毒感染係細胞巨大病毒。免疫疾病
在其他實施例中，疾病、病況或病症係免疫相關疾病、病況或病症。免疫相關疾病、病況或病症之非限制性實例包括多發性硬化症及細菌感染。(參見例如Safarzadeh, E.等人，Inflamm Res 2016 65(7):511-20；及Antonioli, L.等人，Immunol Lett S0165-2478(18)30172-X 2018)。其他適應症
具有全部或部分藉由抑制A2a及/或A2b腺苷受體來治療或預防之潛能之其他疾病、病況及病症亦係本發明之化合物及其鹽之候選適應症。本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可適用之其他疾病、病況或病症之非限制性實例包括治療對腫瘤抗原之過敏反應及緩解與骨髓移植或末梢血液幹細胞移植相關之一或多種併發症。因此，在另一實施例中，本發明提供一種治療接受骨髓移植或末梢血液幹細胞移植之個體之方法，其係藉由向該個體投與治療有效量之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，該治療有效量足以增加對腫瘤抗原之延遲型過敏反應、足以延遲移植後惡性病之復發時間、足以增加移植後之無復發存活時間及/或足以增加長期移植後存活率。組合療法
在另一態樣中，本發明提供與一或多種其他藥劑組合使用本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽(或包含本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之醫藥學上可接受之組合物)之方法。此等其他藥劑可具有一些腺苷A2a及/或A2b受體活性，或者其可在獨特之作用機制中發揮作用。本發明之化合物可與一或多種其他藥物組合用於治療、預防、抑制或改善本發明之化合物或本文所述之其他藥物可具有效用之疾病或病況，其中該等藥物組合在一起比單獨之藥物更安全或更有效。組合療法可具有加合或協同效應。此等其他藥物因此可與本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽同時或相繼投與常用之量。當本發明之化合物與一或多種其他藥物同時使用時，醫藥組合物在特定實施例中可含有單獨劑量或單位劑型之此等其他藥物及本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。然而，組合療法亦可包括本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽與一或多種其他藥物以不同或重疊之時程相繼投與之療法。亦預期當與一或多種其他活性成分組合使用時，本發明之化合物及其他活性成分可使用比各自單獨使用時較低之劑量。因此，包含本發明化合物之醫藥組合物包括除本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽以外含有一或多種其他活性成分之彼等醫藥組合物。
本發明之化合物與第二活性成分之重量比可變化且將視每種成分之有效劑量而定。通常將使用有效劑量之每種成分。因此，例如當本發明之化合物與另一種藥劑組合使用時，本發明之化合物與另一種藥劑之重量比通常可在約1000:1至約1:1000之範圍內，在特定實施例中在約200:1至約1:200之範圍內。本發明之化合物與其他活性成分之組合通常亦將在上述範圍內，但每種情形中通常均應使用有效劑量之每種活性成分。
假定腺苷之免疫抑制作用，投與根據本發明之A2a受體拮抗劑、A2b受體拮抗劑及/或A2a/A2b受體雙重拮抗劑可增強諸如PD-1拮抗劑之免疫療法之功效。因此，在一實施例中，額外治療劑包含抗-PD-1抗體。在另一實施例中，額外治療劑係抗-PD-L1抗體。
如上所述，公認PD-1在免疫調節及維持外周耐受性中具有重要作用。PD-1在天然T-細胞、B-細胞及NKT-細胞上適度表現，且在淋巴細胞、單核細胞及骨髓細胞上由T細胞及B細胞受體信號傳遞上調(Sharpe等人，Nature Immunology (2007); 8:239-245)。
在各種組織中發生之人類癌症中表現PD-1之兩種已知配位體PD-L1 (B7-H1)及PD-L2 (B7-DC)。例如在卵巢癌、腎癌、結腸直腸癌、胰臟癌及肝癌之大樣本集以及在黑素瘤中，展示PD-L1表現與預後不良相關且減小總體存活率，而與後續治療無關。(Dong等人，Nat Med. 8(8):793-800 (2002)；Yang等人，Invest Ophthamol Vis Sci. 49: 2518-2525 (2008)；Ghebeh等人，Neoplasia 8:190-198 (2006)；Hamanishi等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 104: 3360-3365 (2007)；Thompson等人，Cancer 5: 206-211 (2006)；Nomi等人，Clin. Cancer Research 13:2151-2157 (2007)；Ohigashi等人，Clin. Cancer Research 11: 2947-2953；Inman等人，Cancer 109: 1499-1505 (2007)；Shimauchi等人，Int. J. Cancer 121:2585-2590 (2007)；Gao等人，Clin. Cancer Research 15: 971-979 (2009)；Nakanishi J., Cancer Immunol Immunother. 56: 1173- 1182 (2007)；及Hino等人，Cancer 00: 1-9 (2010))。
類似地，發現腫瘤浸潤性淋巴細胞上之PD-1表現標記乳癌及黑素瘤中之功能不良T-細胞(Ghebeh等人，BMC Cancer. 2008 8:5714-15 (2008)；及Ahmadzadeh等人，Blood 114: 1537-1544 (2009))且與腎癌中之預後不良相關(Thompson等人，Clinical Cancer Research 15: 1757-1761(2007))。因此，已建議表現PD-L1之腫瘤細胞與表現PD-1之T-細胞相互作用來減弱T細胞活化且逃避免疫監視，藉此有助於針對腫瘤之免疫反應受損。
靶向PD-1軸之免疫檢查點療法已導致對多種人類癌症中之臨床反應之突破性改良(Brahmer等人，N Engl J Med 2012, 366: 2455-65；Garon等人，N Engl J Med 2015, 372: 2018-28；Hamid等人，N Engl J Med 2013, 369: 134-44；Robert等人，Lancet 2014, 384: 1109-17；Robert等人，N Engl J Med 2015, 372: 2521-32；Robert等人，N Engl J Med 2015, 372: 320-30；Topalian等人，N Engl J Med 2012, 366: 2443-54；Topalian等人，J Clin Oncol 2014, 32: 1020-30；及Wolchok等人，N Engl J Med 2013, 369: 122-33)。
「PD-1拮抗劑」意謂阻斷在癌細胞上表現之PD-L1與在免疫細胞(T細胞、B細胞或NKT細胞)上表現之PD-1結合，且較佳亦阻斷在癌細胞上表現之PD-L2與免疫細胞表現之PD-1結合之任何化合物或生物分子。PD-1及其配位體之替代名稱或同義名包括：PD-1為PDCD1、PD1、CD279及SLEB2；PD-Ll為PDCD1L1、PDL1、B7H1、B7-4、CD274及B7-H；且PD-L2為PDCD1L2、PDL2、B7-DC、Btdc及CD273。在治療人類個體之本發明之任何治療方法、藥物及用途中，PD-1拮抗劑阻斷人類PD-Ll與人類PD-1結合，且較佳阻斷人類PD-Ll及PD-L2兩者與人類PD-1結合。人類PD-1胺基酸序列可見於NCBI基因座No.: NP 005009中。人類PD-Ll及PD-L2胺基酸序列分別可見於NCBI基因座No.: NP_054862及NP_079515中。
適用於本發明之任何治療方法、藥物及用途中之PD-1拮抗劑包括單株抗體(mAb)或其抗原結合片段，其特異性結合至PD-1或PD-Ll且較佳特異性結合至人類PD-1或人類PD-Ll。mAb可為人類抗體、人類化抗體或嵌合抗體，且可包括人類恆定區。在一些實施例中，人類恆定區係選自由IgGl、IgG2、IgG3及IgG4恆定區組成之群且在較佳實施例中，人類恆定區為IgGl或IgG4恆定區。在一些實施例中，抗原結合片段係選自由Fab、Fab'-SH、F(ab')2、scFv及Fv片段組成之群。PD-1拮抗劑之實例包括(但不限於)帕博利珠單抗(pembrolizumab)(KEYTRUDA®, Merck and Co., Inc., Kenilworth, NJ, USA)。「帕博利珠單抗」(以前稱為MK-3475、SCH 900475及拉姆布羅力珠單抗(lambrolizumab)且有時稱為「派姆博(pembro)」)係一種具有WHO Drug Information, 第27卷，第2期，第161-162頁(2013)中所述結構之人類化IgG4 mAb。PD-1拮抗劑之其他實例包括納武單抗(nivolumab)(OPDIVO®, Bristol-Myers Squibb Company, Princeton, NJ, USA)、阿特珠單抗(atezolizumab)(MPDL3280A；TECENTRIQ®, Genentech, San Francisco, CA, USA)、德瓦魯單抗(durvalumab)(IMFINZI®, Astra Zeneca Pharmaceuticals, LP, Wilmington, DE)及阿維魯單抗(avelumab)(BAVENCIO®, Merck KGaA, Darmstadt, Germany and Pfizer, Inc., New York, NY)。
結合至人類PD-1且適用於本發明之治療方法、藥物及用途之單株抗體(mAb)之實例描述於US7488802、US7521051、US8008449、US8354509、US8168757、WO2004/004771、WO2004/072286、WO2004/056875及US2011/0271358中。
結合至人類PD-Ll且適用於本發明之治療方法、藥物及用途之mAb之實例描述於WO2013/019906、W02010/077634 Al及US8383796中。在本發明之治療方法、藥物及用途中適用作PD-1拮抗劑之特異性抗人類PD-Ll mAb包括MPDL3280A、BMS-936559、MEDI4736、MSB0010718C及WO2013/019906之分別包含SEQ ID NO:24及SEQ ID NO:21之重鏈及輕鏈可變區之抗體。
適用於本發明之任何治療方法、藥物及用途之其他PD-1拮抗劑包括特異性結合至PD-1或PD-L1且較佳特異性結合至人類PD-1或人類PD-Ll之免疫黏附素，例如含有與諸如免疫球蛋白分子之Fc區之恆定區融合之PD-Ll或PD-L2之細胞外或PD-1結合部分的融合蛋白。與PD-1特異性結合之免疫黏附素分子之實例描述於WO2010/027827及WO2011/066342中。在本發明之治療方法、藥物及用途中適用作PD-1拮抗劑之特異性融合蛋白包括AMP-224 (亦稱作B7-DCIg)，其係與人類PD-1結合之PD-L2-FC融合蛋白。
因此，一種實施例提供一種治療癌症之方法，其包含向有需要之個體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在該等實施例中，本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及PD-1拮抗劑係同時或相繼投與。
根據此實施例，該等癌症之特異性非限制性實例包括黑素瘤(包括不可切除或轉移性黑素瘤)、頭頸癌(包括復發性或轉移性頭頸部鱗狀細胞癌症(HNSCC))、經典型霍奇金淋巴瘤(classical Hodgkin lymphoma，cHL)、尿道上皮癌、胃癌、子宮頸癌、原發性縱隔大B細胞淋巴瘤、高微衛星不穩定性(MSI-H)癌症、非小細胞肺癌、肝細胞癌、透明細胞腎癌、結腸直腸癌、乳癌、鱗狀細胞肺癌、基底細胞癌、肉瘤、膀胱癌、子宮內膜癌、胰臟癌、肝癌、胃腸癌、多發性骨髓瘤、腎癌、間皮瘤、卵巢癌、肛門癌、膽道癌、食道癌及唾液腺癌。
在一實施例中，提供一種治療癌症之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該癌症係選自不可切除或轉移性黑素瘤、復發性或轉移性頭頸部鱗狀細胞癌症(HNSCC)、經典型霍奇金淋巴瘤(cHL)、尿道上皮癌、胃癌、子宮頸癌、原發性縱隔大B細胞淋巴瘤、高微衛星不穩定性(MSI-H)癌症、非小細胞肺癌及肝細胞癌。在一種此實施例中，藥劑係PD-1拮抗劑。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。
帕博利珠單抗由U.S. FDA批准用於治療患有不可切除或轉移性黑素瘤之患者及用於治療患有復發性或轉移性頭頸部鱗狀細胞癌症(HNSCC)、經典型霍奇金淋巴瘤(cHL)、尿道上皮癌、胃癌、子宮頸癌、原發性縱隔大B細胞淋巴瘤、高微衛星不穩定性(MSI-H)癌症、非小細胞肺癌及肝細胞癌之某些患者，如Prescribing Information for KEYTRUDA™ (Merck & Co., Inc., Whitehouse Station, NJ USA；2014年初始獲得美國批准，2018年11月更新)中所述。在另一實施例中，提供一種治療癌症之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與帕博利珠單抗組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該癌症係選自不可切除或轉移性黑素瘤、復發性或轉移性頭頸部鱗狀細胞癌症(HNSCC)、經典型霍奇金淋巴瘤(cHL)、尿道上皮癌、胃癌、子宮頸癌、原發性縱隔大B細胞淋巴瘤、高微衛星不穩定性(MSI-H)癌症、非小細胞肺癌及肝細胞癌。
在另一實施例中，提供一種治療癌症之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該癌症係選自黑素瘤、非小細胞肺癌、頭頸部鱗狀細胞癌症(HNSCC)、霍奇金淋巴瘤、原發性縱隔大B細胞淋巴瘤、尿道上皮癌、高微衛星不穩定性癌症、胃癌、梅克爾細胞癌(Merkel cell carcinoma)、肝細胞癌、食道癌及子宮頸癌。在一種此實施例中，藥劑係PD-1拮抗劑。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係德瓦魯單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿維魯單抗。
在另一實施例中，提供一種治療癌症之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該癌症係選自黑素瘤、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部癌、膀胱癌、乳癌、胃腸癌、多發性骨髓瘤、肝細胞癌、淋巴瘤、腎癌、間皮瘤、卵巢癌、食道癌、肛門癌、膽道癌、結腸直腸癌、子宮頸癌、甲狀腺癌及唾液腺癌。在一種此實施例中，藥劑係PD-1拮抗劑。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係德瓦魯單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿維魯單抗。
在一實施例中，提供一種治療不可切除或轉移性黑素瘤之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。
在一實施例中，提供一種治療復發性或轉移性頭頸部鱗狀細胞癌症(HNSCC)之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。
在一實施例中，提供一種治療經典型霍奇金淋巴瘤(cHL)之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。
在一實施例中，提供一種治療尿道上皮癌之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。
在一實施例中，提供一種治療胃癌之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。
在一實施例中，提供一種治療子宮頸癌之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。
在一實施例中，提供一種治療原發性縱隔大B細胞淋巴瘤之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。
在一實施例中，提供一種治療高微衛星不穩定性(MSI-H)癌症之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。
在一實施例中，提供一種治療非小細胞肺癌之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。
在一實施例中，提供一種治療肝細胞癌之方法，其包含向有需要之人體投與有效量之與PD-1拮抗劑組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一種此實施例中，藥劑係帕博利珠單抗。在另一種此實施例中，藥劑係納武單抗。在另一種此實施例中，藥劑係阿特珠單抗。
在另一實施例中，額外治療劑係除A2a或A2b受體抑制劑以外之至少一種免疫調節劑。免疫調節劑之非限制性實例包括CD40L、B7、B7RP1、抗CD40、抗CD38、抗ICOS、4-IBB配位體、樹突狀細胞癌疫苗、IL2、IL12、ELC/CCL19、SLC/CCL21、MCP-1、IL-4、IL-18、TNF、IL-15、MDC、IFN-a/-13、M-CSF、IL-3、GM-CSF、IL-13、抗IL-10及吲哚胺2,3-雙加氧酶1 (IDOl)抑制劑。
在另一實施例中，額外治療劑包含輻射。該輻射包括局部輻射療法及全身輻射療法。
在另一實施例中，額外治療劑係至少一種化學治療劑。預期與本發明之化合物組合使用之化學治療劑之非限制性實例包括：培美曲塞(pemetrexed)、烷基化劑(例如，氮芥，諸如氯芥苯丁酸、環磷醯胺、異環磷醯胺、甲基二(氯乙基)胺、美法侖(melphalan)及尿嘧啶芥(uracil mustard)；氮丙啶，諸如噻替派(thiotepa)；甲烷磺酸酯，諸如白消安(busulfan)；核苷類似物(例如，吉西他濱(gemcitabine))；亞硝基脲，諸如卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)及鏈脲酶素；拓樸異構酶1抑制劑(例如，伊立替康(irinotecan))；鉑錯合物，諸如順鉑、卡鉑及奧沙利鉑(oxaliplatin)；生物還原性烷化劑，諸如絲裂黴素、丙卡巴肼(procarbazine)、達卡巴嗪(dacarbazine)及六甲蜜胺(altretamine))；蒽環黴素基療法(例如，阿黴素(doxorubicin)、道諾黴素(daunorubicin)、表柔比星(epirubicin)及艾達黴素(idarubicin))；DNA鏈斷裂劑(例如，博萊黴素(bleomycin))；拓樸異構酶II抑制劑(例如，安吖啶(amsacrine)、放線菌素D (dactinomycin)、道諾黴素、艾達黴素、米托蒽醌(mitoxantrone)、阿黴素、依託泊苷(etoposide)及替尼泊苷(teniposide))；DNA小溝區結合劑(例如，普卡黴素(plicamydin))；抗代謝物(例如，葉酸鹽拮抗劑，諸如甲胺喋呤(methotrexate)及曲美沙特(trimetrexate)；嘧啶拮抗劑，諸如氟尿嘧啶、氟脫氧尿苷、CB3717、阿紮胞苷(azacitidine)、阿糖胞苷(cytarabine)及氟尿苷(floxuridine)；嘌呤拮抗劑，諸如巰基嘌呤、6-硫鳥嘌呤、氟達拉濱(fludarabine)、噴司他丁(pentostatin)；天冬醯胺酶(asparginase)；及核糖核苷酸還原酶抑制劑，諸如羥基尿素)；微管蛋白交互活性劑(例如，長春新鹼(vincristine)、雌氮芥(estramustine)、長春鹼(vinblastine)、多烯紫杉醇(docetaxol)、埃博黴素(epothilone)衍生物及太平洋紫杉醇(paclitaxel))；激素劑(例如，雌激素；共軛雌激素；乙炔基雌二醇；己烯雌酚；氯烯雌醚(chlortrianisen)；雙烯雌酚(idenestrol)；助孕素，諸如羥助孕酮己酯、甲羥助孕酮及甲地孕酮(megestrol)；及雄激素，諸如睾固酮、丙酸睾固酮、氟羥甲基睾酮及甲基睾固酮)；腎上腺皮質類固醇(例如，潑尼松(prednisone)、地塞米松(dexamethasone)、甲潑尼龍(methylprednisolone)及潑尼松龍(prednisolone))；黃體促素釋放劑或促性腺激素-釋放激素拮抗劑(例如，醋酸亮丙瑞林及醋酸戈舍瑞林(goserelin acetate))；及抗激素抗原(例如，他莫昔芬(tamoxifen)、抗雄激素劑，諸如氟他胺(flutamide)；及抗腎上腺劑，諸如米托坦(mitotane)及胺基格魯米特(aminoglutethimide))。
在另一實施例中，額外治療劑係至少一種信號轉導抑制劑(STI)。信號轉導抑制劑之非限制性實例包括BCR/ABL激酶抑制劑、表皮生長因子(EGF)受體抑制劑、HER-2/neu受體抑制劑及法呢基轉移酶抑制劑(FTI)。
在另一實施例中，額外治療劑係至少一種抗感染劑。抗感染劑之非限制性實例包括細胞介素，其非限制性實例包括顆粒球巨噬細胞群落刺激因子(GM-CSF)及flt3-配位體。
在另一實施例中，本發明提供一種治療或預防病毒感染(例如，慢性病毒感染)之方法，該病毒感染包括(但不限於)C型肝炎病毒(HCV)、人類乳頭狀瘤病毒(HPV)、細胞巨大病毒(CMV)、埃-巴二氏病毒(Epstein-Barr virus，EBV)、水痘帶狀疱疹病毒、柯薩奇病毒(coxsackievirus)及人類免疫缺乏病毒(HIV)。
在另一實施例中，本發明提供一種感染性病症之方法，該方法包含向有需要之個體投與有效量之與疫苗組合之本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，疫苗係抗病毒疫苗，包括例如抗-HTV疫苗。預期使用之其他抗病毒劑包括抗HIV、抗HPV、抗HCV、抗HSV劑及其類似物。在其他實施例中，疫苗對結核病或瘧疾有效。又在其他實施例中，疫苗係腫瘤疫苗(例如，對黑素瘤有效之疫苗)；腫瘤疫苗可包含經遺傳修飾之腫瘤細胞或經遺傳修飾之細胞株，包括已轉染用以表現顆粒球巨噬細胞刺激因子(GM-CSF)之經遺傳修飾之腫瘤細胞或經遺傳修飾之細胞株。在另一實施例中，疫苗包括一或多種免疫原性肽及/或樹突狀細胞。
在另一實施例中，本發明提供藉由投與本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及至少一種額外治療劑來治療感染，其中在投與本發明之化合物(或其醫藥學上可接受之鹽)及額外治療劑二者後觀測到之感染症狀與單獨投與任一者後觀測到之同一感染症狀相比有所改良。在一些實施例中，觀測到之感染症狀可為病毒負荷減小、CD4+ T細胞計數增加、機會性感染減少、存活時間增加、慢性感染消除或其組合。定義
如本文所用，除非另外說明，否則以下術語具有以下含義。
本文說明書、流程、實例、結構式及任何表中之不飽和價數均假定具有足夠數量之氫原子來使價數飽和。
當變數在本發明之任何部分或任何化合物中出現一次以上時(例如，芳基、雜環、N(R)2 )，除非局部變數定義中另外規定，否則對於每次出現時定義該變數之部分的選擇與其在其他每次出現時之定義無關。
如本文所用，除非另外說明，否則術語「A2a受體拮抗劑」(等效地，A2a拮抗劑)及/或「A2b受體拮抗劑」(等效地，A2b拮抗劑)意謂在根據本文所述之程序分析時，相對於A2a及/或A2b受體而言分別展示小於約1 µM之效能(IC50 )之化合物。較佳化合物相比於任何其他腺苷受體(例如，A1或A3)而言對於拮抗A2a受體及/或A2b受體展現至少10倍之敏感性。
如本文所述，除非另外指示，否則在治療中使用化合物意謂通常以包含其他賦形劑之調配物組分呈現之化合物的量係以在劑量投藥之間之時間間隔內提供且維持至少一種醫藥學活性形式化合物之至少治療性血清水平之等分試樣量及時間間隔來投與。
關於組合物所包含之組分數量使用之片語「至少一種(個)」，例如，「至少一種醫藥賦形劑」意謂組合物中存在指定群組之一個成員且可額外存在一種以上。組合物之組分通常為添加至組合物之等分試樣之經分離之純材料，其中添加至組合物中之經分離之材料之純度水平為該類型試劑之正常可接受之純度水平。
無論關於化合物上之取代基使用或關於醫藥組合物之組分使用，片語「一或多種(個)」意謂與「至少一種(個)」相同。
「同時(concurrently)」與「同時(contemporaneously)」兩者之含義中均包括(1)在時間上同時(例如，同一時間)；及(2)不同時間，但在正常治療時程之過程期間內。
「連續」意謂一者緊接另一者。
「相繼」係指在投與每另一種藥劑之間等一段時間待效能發揮之一系列治療劑投與；即在投與一種組分後，在第一組分後之有效時間段之後投與下一組分；該有效時間段係對實現投與第一種組分之益處所給定之時間量。
「有效量」或「治療有效量」意謂描述提供一定量之對治療或抑制本文所述之疾病或病況有效之至少一種本發明之化合物或包含至少一種本發明之化合物之組合物，且因此產生所需之治療性、改善性、抑制性或防治性作用。舉例而言，在以視情況與一或多種額外藥劑組合之一或多種本發明之化合物治療如本文所述之癌症中，「有效量」(或「治療有效量」)意謂例如提供此量之至少一種本發明之化合物在罹患該疾病、病況或病症之患者中產生治療反應，包括適合管理、緩和、緩解或治療病況或緩和、緩解、減輕或消除由此病況引起之一或多種症狀及/或長期穩定病況之反應，例如藉由分析藥效學標記或臨床評估罹患該病況之患者所確定。
「患者」及「個體」意謂動物，諸如哺乳動物(例如，人類)且較佳為人類。
「前藥」意謂例如藉由在血液中水解快速活體內轉化為親體化合物之化合物，例如本發明之化合物之前藥轉化為本發明之化合物或轉化為其鹽。全面論述在T. Higuchi及V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, A.C.S. Symposium Series之第14卷及Edward B. Roche編, Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987中提供，兩者均以引用方式併入本文中；本發明之範疇包括本發明之新穎化合物之前藥。
術語「經取代」意謂對附有取代基之特定類型基質列舉為取代基之一或多個部分(或，其中未特定列舉取代基清單，而在本申請之其他處規定取代基)，其限制條件為該取代不超過基質中所呈現鍵結構型中之原子的正常價數規則，且取代最終提供穩定化合物，即該取代不提供具有彼此相偕或相鄰安置之相互具有反應性之取代基的化合物；且其中該取代提供足夠穩定以在自反應混合物分離至適用純度程度時仍保留之化合物。
在描述由某一部分任選取代時(例如「視情況經取代」)，該術語意謂若存在取代基，則在基質上通常由預設取代基佔據之鍵結位置存在一或多個列舉為規定基質之任選取代基的列舉(或預設)部分，例如烷基鏈上之氫原子可根據本文提供之「經取代」定義，經任選取代基之一取代。
「烷基」意謂可為直鏈或支鏈之包含1至10個碳原子之脂族烴基。「(C1 -C6 )烷基」意謂可為直鏈或支鏈之包含1至6個碳原子之脂族烴基。支鏈意謂直鏈烷基鏈上連接一或多個低碳數烷基，諸如甲基、乙基或丙基。烷基之非限制性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基及第三丁基。
「鹵烷基」意謂如上文定義之烷基，其中烷基上之一或多個氫原子(至多包括每個可用之氫原子)經鹵素原子置換。如熟習此項技術者所瞭解，如本文所用之「鹵基」或「鹵素」欲包括氯基(Cl)、氟基(F)、溴基(Br)及碘基(I)。氯基(Cl)及氟基(F)鹵素通常較佳。
「芳基」意謂包含6至14個碳原子、較佳6至10個碳原子之芳族單環或多環環系統。芳基可視情況經可相同或不同且如本文所定義之一或多個「環系統取代基」取代。合適芳基之非限制性實例包括苯基及萘基。「單環芳基」意謂苯基。
「雜芳基」意謂包含5至14個環原子、較佳5至10個環原子之芳族單環或多環環系統，其中一或多個環原子係除碳以外之元素，例如單獨或組合之氮、氧或硫。較佳之雜芳基含有5至6個環原子。「雜芳基」可視情況經一或多個可相同或不同之如本文所定義之取代基取代。雜芳基根名稱前之字首氮雜、氧雜或硫雜意謂至少分別存在氮、氧或硫原子作為環原子。雜芳基之氮原子可視情況經氧化為相應之N-氧化物。「雜芳基」亦可包括與如上文定義之芳基稠合之如上文定義之雜芳基。合適雜芳基之非限制性實例包括吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基(其或者可稱為苯硫基)、嘧啶基、吡啶酮(包括N-經取代吡啶酮)、異噁唑基、異噻唑基、噁唑基、噁二唑基、噻唑基、噻二唑基、吡唑基、呋呫基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1,2,4-噻二唑基、吡嗪基、噠嗪基、喹喏啉基、酞嗪基、羥吲哚基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[2,1-b]噻唑基、苯并呋呫基、吲哚基、氮雜吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、異喹啉基、苯并氮雜吲哚基、1,2,4-三嗪基、苯并噻唑基及其類似基團。術語「雜芳基」亦係指部分飽和雜芳基部分，例如四氫異喹啉基、四氫喹啉基及其類似基團。術語「單環雜芳基」係指單環形式之如上文所述之雜芳基且包括包含1至4個環雜原子之4至7員單環雜芳基，該等環雜原子係獨立地選自N、O及S及其氧化物組成之群。與親體部分之連接點係連接至任何可用之環碳或環雜原子。單環雜芳基部分之非限制性實例包括吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、噠嗪基、吡啶基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、噁二唑基、異噁唑基、吡唑基、呋呫基、吡咯基、吡唑基、三唑基、噻二唑基(例如，1,2,4-噻二唑基)、咪唑基及三嗪基(例如，1,2,4-三嗪基)及其氧化物。
「環烷基」意謂包含3至10個碳原子、較佳3至6個碳原子之非芳族完全飽和單環或多環環系統。環烷基可視情況經一或多個可相同或不同之如本文所述之取代基取代。單環環烷基係指單環形式之本文所述之環烷基部分。合適單環環烷基之非限制性實例包括環丙基、環戊基、環己基、環庚基及其類似基團。多環環烷基之非限制性實例包括[1.1.1]-雙環戊烷、1-十氫萘基、降冰片烷基、金剛烷基及其類似基團。
「雜環烷基」(或「雜環基」)意謂包含3至10個環原子、較佳5至10個環原子之非芳族飽和單環或多環環系統，其中環系統中之一或多個原子係除碳以外之元素，例如單獨或組合之氮、氧或硫。環系統中不存在相鄰之氧及/或硫原子。較佳之雜環烷基含有4、5或6個環原子。雜環基根名稱中之字首氮雜、氧雜或硫雜意謂至少分別存在氮、氧或硫原子作為環原子。雜環基環中之任何-NH可例如以-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)及其類似基團之受保護形式存在；該等保護亦認為係本發明之部分。雜環基可視情況經一或多個可相同或不同之如本文所述之取代基取代。雜環基之氮或硫原子可視情況經氧化為相應之N-氧化物、S-氧化物或S,S-二氧化物。因此，術語「氧化物」出現在本文所述通用結構中之變數定義中時係指相應之N-氧化物、S-氧化物或S,S-二氧化物。「雜環基」亦包括環，其中=O置換同一碳原子上之兩個可用氫(亦即，雜環基包括環中具有羰基之環)。該等=O基團在本文中可稱為「側氧基」。該部分之實例為吡咯啶酮(pyrrolidinone或pyrrolidone)：
Figure 02_image163
。如本文所用，術語「單環雜環烷基」係指單環形式之本文所述之雜環烷基部分且包括包含1至4個環雜原子之4至7員單環雜環烷基，該等環雜原子係獨立地選自N,N-氧化物、O,S,S-氧化物、S(O)及S(O)2 組成之群。與親體部分之連接點係連接至任何可用之環碳或環雜原子。單環雜環烷基之非限制性實例包括哌啶基、氧雜環丁烷基、吡咯基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、噻唑啶基、1,4-二氧雜環己烷基、四氫呋喃基、四氫苯硫基、β 內醯胺、γ 內醯胺、δ 內醯胺、β 內酯、γ 內酯、δ 內酯及吡咯啶酮及其氧化物。經低碳數烷基取代之氧雜環丁烷基之非限制性實例包括部分：
Figure 02_image165
。
應注意，在本發明之含雜原子環系統中，與N、O或S相鄰之碳原子上無羥基且與另一雜原子相鄰之碳上無N或S基團。
Figure 02_image167
，無-OH直接連接至標記為2及5之碳。
線
Figure 02_image169
作為鍵通常表示例如含有(R)-及(S)-立體化學之可能異構體的混合物或其任一者。舉例而言：
Figure 02_image171
意謂含有
Figure 02_image173
兩者。
如本文所用，波浪線
Figure 02_image175
表示與化合物剩餘部分之連接點。繪入環系統中之線，諸如：
Figure 02_image177
表示該指定線(鍵)可連接至任意可取代之環原子。
「側氧基」定義為在環烷基、環烯基、雜環基、雜環烯基或本文所述之其他環中與環碳雙鍵鍵結之氧原子，例如
Figure 02_image179
。
如本領域中所熟知，除非另外說明，否則由在鍵末端未描繪部分之特定原子繪製之鍵表示甲基經該鍵與該原子鍵結。舉例而言：
Figure 02_image181
表示
Figure 02_image183
。
本發明之一或多種化合物亦可存在溶劑合物或視情況轉化為溶劑合物。溶劑合物之製備通常係已知的。因此，例如M. Caira等人，J. Pharmaceutical Sci., 93(3), 601-611 (2004)描述在乙酸乙酯中以及由水來製備抗真菌氟康唑(fluconazole)之溶劑合物。溶劑合物及半溶劑合物，包括水合物(其中溶劑為水或基於水)及其類似物之類似製備由E. C. van Tonder等人，AAPS PharmSciTech., 5(1), 第12條(2004)；及A. L. Bingham等人，Chem. Commun., 603-604 (2001)描述。一種典型之非限制性方法包涵在高於周圍溫度下將本發明之化合物溶解於需要量之所需溶劑(例如，有機溶劑、水性溶劑、水或其中兩種或兩種以上之混合物)中，且在存在或不存在抗溶劑之情形下以足以形成晶體之速率冷卻溶液，隨後將形成之晶體藉由標準方法分離。諸如紅外光譜法之分析技術展示晶體中存在溶劑合物(或在向結晶形式中併入水之情形下為水合物)形式之溶劑(包括水)。
關於化合物之術語「純化」、「純化形式」或「分離且純化之形式」係指該化合物在由合成方法或天然來源或其組合分離後之物理狀態。因此，關於化合物之術語「純化」、「純化形式」或「分離且純化之形式」係指該化合物在由本文所述或熟習此項技術者熟知之純化方法且以足以由本文所述或熟習此項技術者熟知之標準分析技術表徵之純度獲得後之物理狀態。
本發明亦包括藉由常規技術獲得之經分離且純化形式之本發明之化合物。多晶型形式之本發明之化合物及其鹽、溶劑合物及前藥欲包括在本發明中。本發明之某些化合物可存在多種異構形式(例如，對映異構體、非對映異構體、滯轉異構體)。本發明之化合物包括其所有異構形式，其係純形式及兩種或兩種以上之混合物，包括外消旋混合物。
以類似方式，除非另外說明，否則呈現展示互變異構現象之化合物之任何互變異構形式的結構示意圖意謂包括化合物之所有該等互變異構形式。因此，當本發明之化合物、其鹽及其溶劑合物及前藥可存在不同互變異構形式或在該等形式之間平衡時，該化合物之所有該等形式均涵蓋且包括於本發明之範疇內。該等互變異構體之實例包括(但不限於)酮/烯醇互變異構形式、亞胺-烯胺互變異構形式及例如雜芳族形式，諸如以下部分：
Figure 02_image185
；及
Figure 02_image187
。
當實例中出現之反應流程採用具有一或多個立體中心之化合物時，立體中心以星號表示，如下所示：
Figure 02_image189
。
因此，以上描述由以下異構體對組成：(i)反式異構體((2R,7aS)-2-甲基六氫-1H-吡
Figure 108142874-12-01
-7a-基)甲胺(化合物ABC-1)與((2S,7aR)-2-甲基六氫-1H-吡
Figure 108142874-12-01
-7a-基)甲胺(化合物ABC-2)；及(ii)順式異構體((2R,7aR)-2-甲基六氫-1H-吡
Figure 108142874-12-01
-7a-基)甲胺(化合物ABC-3)與((2S,7aS)-2-甲基六氫-1H-吡
Figure 108142874-12-01
-7a-基)甲胺(化合物ABC-4)。
Figure 02_image191
本發明之化合物(包括本發明化合物之鹽及溶劑合物及其前藥)之所有立體異構體，諸如由於本發明之化合物中存在非對稱碳而可存在之彼等立體異構體，且包括對映異構體形式(甚至可在不存在非對稱碳時存在)、旋轉異構體形式、滯轉異構體及非對映異構體形式涵蓋於本發明之範疇內。本發明化合物之個別立體異構體可分離為純形式，例如實質上不含其他異構體，或可分離為兩種或兩種以上立體異構體之混合物或分離為外消旋體。如IUPAC 1974建議所定義，本發明之對掌性中心可具有S或R構型。術語「鹽」、「溶劑合物」、「前藥」及其類似術語欲同樣適用於本發明化合物之經分離對映異構體、立體異構體對或群組、旋轉異構體、互變異構體或外消旋體之鹽、溶劑合物及前藥。
當非對映異構體混合物可基於其物理化學差異藉由例如對掌性層析及/或分步結晶之已知方法分離成其個別非對映異構體時，化合物之簡單結構表示涵蓋該化合物之所有非對映異構體。眾所周知，亦可藉由與適當之光學活性化合物(例如，對掌性助劑，諸如對掌性醇或Mosher酸氯化物)反應將對映異構體混合物轉化為非對映異構體混合物、分離非對映異構體且將經個別分離之非對映異構體轉化(例如，水解)為相應之純化對映異構體來分離對映異構體。
本文中採用術語時，本發明化合物之鹽，無論由無機酸及/或有機酸形成之酸性鹽、由無機鹼及/或有機鹼形成之鹼性鹽、所形成之包括兩性離子特徵之鹽，例如其中化合物含有鹼性部分(例如，但不限於氮原子，例如胺、吡啶或咪唑)及酸性部分(例如，但不限於羧酸)均包括在本文所述本發明化合物之範疇內。由鹼性(或酸性)醫藥學化合物形成醫藥學上適用之鹽例如由S. Berge等人，Journal of Pharmaceutical Sciences (1977) 66(1) 1-19；P. Gould, International J. of Pharmaceutics (1986) 33 201-217；Anderson等人，The Practice of Medicinal Chemistry (1996), Academic Press, New York；在The Orange Book (Food & Drug Administration, Washington, D.C. on their website)中；及P. Heinrich Stahl, Camille G. Wermuth (編), Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, (2002) Int'l. Union of Pure and Applied Chemistry, 第330-331頁論述。此等揭示內容以引用方式併入本文中。
本發明涵蓋所有可用之鹽，包括通常視為安全用於製備醫藥調配物之鹽及目前由一般熟習此項技術者形成且隨後分類為「通常視為安全」用於製備醫藥調配物之彼等鹽，本文中稱為「醫藥學上可接受之鹽」。醫藥學上可接受之酸加成鹽之實例包括(但不限於)乙酸鹽(包括三氟乙酸鹽)、己二酸鹽、海藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲烷磺酸鹽、甲基硫酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過氧硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽(諸如本文中提及之彼等)、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽及其類似物。
醫藥學上可接受之鹼性鹽之實例包括(但不限於)銨鹽、鹼金屬鹽(諸如鈉、鋰及鉀鹽)、鹼土金屬鹽(諸如鈣及鎂鹽)、鋁鹽、鋅鹽、有機鹼鹽(例如，有機胺)，諸如苄星青黴素(benzathine)、二乙胺、二環己胺、海卓胺(hydrabamine)(由N,N-雙(去氫樅基)乙二胺形成)、N-甲基-D-還原葡糖胺、N-甲基-D-葡糖醯胺、第三丁基胺、哌嗪、苯基環己胺、膽鹼、緩血酸胺及胺基酸(諸如精胺酸、離胺酸及其類似物)之鹽。鹼性含氮基團可轉化為銨離子或由諸如低碳數烷基鹵化物(例如，甲基、乙基、丙基及丁基氯化物、溴化物及碘化物)、二烷基硫酸鹽(例如，二甲基、二乙基、二丁基及二戊基硫酸鹽)、長鏈鹵化物(例如，癸基、月桂基、肉豆蔻基及硬脂醯基氯化物、溴化物及碘化物)、芳基烷基鹵化物(例如，苄基及苯乙基溴化物)及其他劑四級化。
所有該等酸鹽及鹼鹽均欲為本發明範疇內之醫藥學上可接受之鹽，且所有酸鹽及鹼鹽均視為與用於本發明範疇目的之游離形式之相應化合物等效。
稱為「受保護」化合物中之官能基意謂該基團係經修飾形式以在受保護化合物經受旨在修飾分子另一區域之特定反應條件時排除受保護位點之不利副反應。舉例而言，參考標準文本，例如T. W. Greene等人，Protective Groups in organic Synthesis (1991), Wiley, New York已知合適之保護基。
在本發明之化合物中，原子可展示其天然同位素豐度，或一或多種原子可人工富集具有相同原子數、但原子質量或質量數與在自然界中主要發現之原子質量或質量數不同的特定同位素。本發明欲包括本發明化合物之所有合適之同位素變化形式。舉例而言，不同同位素形式之氫(H)包括氕(1 H)及氘(2 H)。氕係自然界中發現之主要氫同位素。氘富集可提供某些治療優勢，諸如活體內半衰期增加或劑量要求減小，或可提供適用作表徵生物樣本之標準物之化合物。本發明之同位素富集化合物可無需過度實驗，藉由熟習此項技術者熟知之習知技術或藉由與本文流程及實例中所述類似之方法，使用適當之同位素富集試劑及/或中間物來製備。
本發明亦包涵經同位素標記之本發明之化合物，其結構上等同於本文所述之彼等，但事實上彼形式化合物中統計學顯著百分比之一或多個原子經具有與在自然界中通常發現之最豐富同位素之原子質量或質量數不同之原子質量或質量數的原子置換，因此改變本發明化合物中存在之彼同位素之天然存在豐度。可優先併入本發明化合物中之同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、碘、氟及氯之同位素，例如(但不限於)：2 H、3 H、11 C、13 C、14 C、13 N、15 N、15 O、17 O、18 O、31 P、32 P、35 S、18 F及36 Cl、123 I及125 I。應瞭解，亦可藉由已知方式併入其他同位素。
本發明之某些經同位素標記之化合物(例如，經3 H、11 C及14 C標記之彼等化合物)認為尤其適用於使用各種已知技術之化合物及/或受質組織分佈分析。氚化(亦即，3 H)及碳-14 (亦即，14 C)同位素就其易於製備及偵測而言尤其較佳。此外，以較重之同位素取代天然豐度之同位素，例如以氘(亦即，2 H)取代氕可提供因代謝穩定性更大而產生之某些治療優勢(例如，活體內半衰期增加或劑量要求減小)且因此在某些情形下可較佳。本發明之經同位素標記之化合物通常可根據與下文反應流程及/或實例中揭示之彼等類似之程序，藉由以適當經同位素標記之試劑取代未經同位素標記之試劑，或藉由適當製備之前驅體與為此「標記」反應特定製備之本發明化合物之熟知反應來製備。該等化合物亦包括在本發明中。
術語「組合物」欲包涵包含指定量之指定成分之產物，以及直接或間接由指定量之指定成分組合產生之任何產物。
如本文所用之術語「醫藥組合物」包涵包含一種或一種以上(例如，兩種)醫藥活性劑，諸如本發明之化合物(視情況連同如本文所述之額外藥劑一起)以及任何非醫藥活性賦形劑之整體組合物及個別劑量單位。如一般熟習此項技術者所瞭解，賦形劑係使組合物適應特定投藥途徑或有助於將組合物加工成劑型而其本身不產生活性醫藥效應之任何成分。整體組合物及每種個別劑量單位均可含有固定量之前述一種或一種以上醫藥活性劑。整體組合物係尚未形成個別劑量單位之物質。
應瞭解，本發明之醫藥調配物可包含一種以上本發明之化合物(或其醫藥學上可接受之鹽)，例如本發明之兩種或三種化合物之組合，其各自藉由以醫藥學上可接受之純形式向調配物中添加所需量之化合物而存在於該組合物中。亦應瞭解，在調配本發明之組合物中，組合物除本發明之一或多種化合物以外可包含一或多種如本文所述亦具有藥理學活性之其他藥劑。
儘管本發明之調配物可採用整體形式，但應瞭解對於大多數應用而言，本發明之調配物將併入適合投與至患者之劑型中，每種劑型包含一定量之含有有效量之本發明之一或多種化合物的選定調配物。合適劑型之實例包括(但不限於)適於以下之劑型：(i)口服，例如液體、凝膠、粉末、固體或半固體醫藥組合物，其負載於膠囊中或壓製成錠劑且可額外包含一或多種修飾其釋放特性之塗層，例如賦予延遲釋放之塗層或具有延長釋放特性之調配物；(ii)適於肌肉內投藥(IM)之劑型，例如注射溶液或懸浮液，且其可適於形成具有延長釋放特性之藥物儲槽；(iii)適於靜脈內投藥(IV)之劑型，例如溶液或懸浮液，例如IV溶液或欲注射至鹽水IV袋中之濃縮物形式；(iv)適於經口腔組織投藥之劑型，例如速溶錠劑、口含錠、溶液、凝膠、藥囊或適合提供黏膜內投藥之針陣列；(v)適合經由鼻黏膜或上呼吸道腔黏膜投藥之劑型，例如用於分散於鼻或氣道內之溶液、懸浮液或乳液調配物；(vi)適於經皮投藥之劑型，例如貼片、乳霜或凝膠；(vii)適於皮內投藥之劑型，例如微針陣列；及(viii)適於經由直腸或陰道黏膜傳遞之劑型，例如栓劑。
為製備包含本發明之化合物之醫藥組合物，本發明之化合物通常將與一或多種醫藥學上可接受之賦形劑組合。此等賦形劑賦予組合物使其更易於處理或加工之特性，例如欲製成錠劑之粉末狀藥物中之潤滑劑或助壓劑，或使調配物適合所需之投藥途徑，例如提供用於口服(例如經由胃腸道吸收)、經皮或經黏膜投藥(例如經由黏著性皮膚「貼片」或經頰投藥)或注射(例如肌肉內或靜脈內)投藥途徑之調配物之賦形劑。此等賦形劑在本文中總稱為「載劑」。調配物通常可包含至多約95%之活性成分，儘管可製備具有更大量之調配物。
醫藥組合物可為固體、半固體或液體。固體形式製劑可適合各種投藥模式，其實例包括(但不限於)粉末、分散性顆粒、微錠劑、珠粒，其例如可用於製錠、囊封或直接投藥。液體形式製劑包括(但不限於)溶液、懸浮液及乳液，其例如(但非排他性地)可用於製備欲用於非經腸注射、用於鼻內投藥或用於投與至一些其他黏膜之調配物。經製備用於投與至各種黏膜之調配物亦可包括使其適合此種投藥之額外組分，例如黏度改質劑。
例如適合經由吸入或經由鼻黏膜投藥之氣霧劑製劑可包括溶液及粉末形式之固體，其可與醫藥學上可接受之推進劑(例如惰性壓縮氣體，例如氮氣)組合。亦包括固體形式之製劑，其欲在使用前即刻轉化為懸浮液或溶液例如用於口服或非經腸投藥。該等固體形式之實例包括(但不限於)冷凍乾燥調配物及吸附至固體吸附劑介質中之液體調配物。
本發明之化合物亦可經皮或經黏膜例如以液體、栓劑、乳霜、發泡體、凝膠或速溶固體形式來傳遞。應瞭解，經皮組合物亦可採用乳霜、洗液、氣霧劑及/或乳液之形式且可以包括此項技術中任何已知之經皮貼片之單位劑型來提供，例如合併有包含醫藥學活性化合物之基質或包含固體或液體形式醫藥學活性化合物之儲集器之貼片。
醫藥學上可接受之載劑之實例及製造上文所述各種組合物之方法可見於A. Gennaro (編), Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 第20版, (2000), Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, MD中。
醫藥學製劑較佳為單位劑型。在此形式中，製劑再分為含有適當量之活性組分(例如達成所需目的之有效量)的合適大小之單位劑量。
採用之實際劑量可視患者之要求及所治療病況之嚴重性而變化。確定用於特定情形之適當劑量方案係在此項技術內。便利起見，每日總劑量可分開且視需要在一天內逐份投與。
根據本發明，藉由向需要此治療之患者投與有效量之一或多種本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽來實現腺苷A2a及/或A2b受體之拮抗作用。
在一些實施例中，化合物較佳以包含本發明之化合物或其鹽及至少一種醫藥學上可接受之載劑(本文所述)之醫藥組合物之形式來投與。應瞭解，本發明之醫藥調配物可包含一種以上本發明之化合物或其鹽，例如本發明之兩種或三種化合物或(額外或或者)諸如本文所述之另一種活性劑之組合，其各自係藉由向調配物中添加所需量之已以醫藥學上可接受之純形式分離之化合物或其鹽(或適當時為藥劑)而存在。
如上文所述，投與本發明之化合物以實現A2a及/或A2b受體之拮抗作用較佳藉由將化合物併入合併為劑型之醫藥調配物中來實現，該劑型例如為上述包含有效量之至少一種本發明之化合物(例如，1、2或3種，或1或2種，或1種，且通常為1種本發明之化合物)或其醫藥學上可接受之鹽之劑型中之一者。熟習此項技術者已知用於確定具有醫藥學活性之化合物(例如，本發明之化合物)之安全且有效投藥之方法，例如如標準文獻中所述，例如如「Physicians' Desk Reference」(PDR)，例如1996版(Medical Economics Company, Montvale, NJ 07645-1742, USA), the Physician's Desk Reference, 第56版, 2002 (由Medical Economics company, Inc. Montvale, NJ 07645-1742公開)或the Physician's Desk Reference, 第57版，2003 (由Thompson PDR, Montvale, NJ 07645-1742公開)中所述；其揭示內容以引用方式併入。本發明之化合物及/或其醫藥學上可接受之鹽之投藥量及頻率將根據主治臨床醫師考慮諸如患者之年齡、病況及體重以及所治療症狀之嚴重性等因素來調節。本發明之化合物可以至多1,000 mg之每日總劑量來投與，其可每日一次給藥投與或可分為每24小時多次給藥，例如每天給藥兩至四次。
如一般熟習此項技術者將瞭解，本發明化合物之適當劑量水平通常將為每天每公斤患者體重約0.01至500 mg，其可分為單次或多次給藥來投與。合適之劑量水平可為每天約0.01至250 mg/kg、每天約0.05至100 mg/kg或每天約0.1至50 mg/kg。在此範圍內，劑量可為每天0.05至0.5、0.5至5或5至50 mg/kg。對於口服而言，組合物可以含有1.0至1000毫克活性成分之錠劑形式來提供，尤其為1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0及1000.0毫克活性成分以用於根據症狀調節待治療患者之劑量。化合物可按每天1至4次之方案來投與，或可每天投與一次或兩次。
熟習此項技術者將瞭解，使用至少一種本發明之化合物之治療方案可根據患者需要而變化。因此，本發明方法中使用之本發明之化合物可由上述各種方案來投與。舉例而言，本發明之化合物在治療週期期間可不連續投與，而非連續投與。
一般而言，無論以何種形式投與，所投與之劑型均將含有一定量之至少一種本發明之化合物或其鹽，其將提供治療有效血清水平之某種形式化合物歷時諸如至少2小時之合適時間，更佳為至少4小時或更長時間。一般而言，如此項技術中已知，提供治療有效血清水平之本發明化合物之醫藥組合物的劑量可間隔時間以在投與治療之時間段期間提供滿足或超過連續最小治療有效血清水平之血清水平。應瞭解，投與之劑型亦可為提供醫藥活性化合物延遲釋放期之形式，其將更長時間地提供治療血清水平，使得有必要減小劑量間隔頻率。如上文所述，本發明之組合物可合併有額外之醫藥學活性組分或與如在提供治療過程中額外需要或期望之其他醫藥學活性劑同時或相繼投與。應瞭解，所投與之劑型亦可為提供醫藥活性化合物延遲釋放期之形式，其將更長時間地提供治療血清水平，使得有必要減小劑量間隔頻率。製備性實例
本發明之化合物可易於根據以下流程及特定實例或其修改形式，使用易於可得之起始材料、試劑及習知合成程序來製備。在此等反應中，亦可能利用本身為一般熟習此項技術者所知，但未詳細提及之變化形式。熟習此項技術者在查閱以下流程及描述後可易於理解及瞭解用於製備本發明所主張之化合物之通用程序。通用流程 1
Figure 02_image193
用於合成G1.6 類型化合物之一種通用策略係經由通用流程1中所示之四步驟程序，其中R4 對應於式(I)中之環A且其中R1 、R2 及環A係如式(I)中所定義。在第一步驟中，胺基苯甲腈G1.1 可在諸如二氯甲烷與吡啶組合之溶劑中經1-(異氰酸酯基甲基)-2,4-二甲氧基苯處理以形成中間物尿素G1.2 。在第二步驟中，此等尿素可在三苯基膦、四溴化碳及三乙胺之存在下在諸如二氯甲烷之溶劑中經脫水為相應碳化二亞胺G1.3 。在第三步驟中，在乙酸之存在下在諸如二氯甲烷或二噁烷之溶劑中以G1.4 類型之醯肼處理碳化二亞胺G1.3 產生G1.5 類型之產物。在第四步驟中，在酸性條件下移除G1.4 之2,4-二甲氧基苄基以提供G1.6 類型之產物，其可藉由矽膠層析、製備性逆相HPLC及/或對掌性SFC進行純化。通用流程 2
Figure 02_image195
用於合成G2.5 類型化合物之一種通用策略係經由通用流程2中所示之三步驟程序，其中RA(n) 對應於式(I)中之RA1 、RA2 、RA3 及RA5 且其中R1 、R2 、R3 及RA(n) (同RA1 、RA2 、RA3 及RA5 )係如式(I)中所定義。在第一步驟中，可經由以酸小心受控處理將受保護之環胺G2.1 轉化為不受保護之胺G2.2 。在不存在溶劑時可使用諸如甲酸之酸或在存在MeOH或DCM時可使用諸如鹽酸之酸。在第二步驟中，G2.2 類型之中間物可經由與芳基溴化物G2.3 經過渡金屬催化之C-N偶合反應而轉化為G2.4 類型之中間物。在脫氧條件下與諸如第三丁基X-Phos第三代預催化劑之鈀催化劑、諸如第三丁醇鈉之鹼及諸如THF之溶劑在適當溫度下進行反應。在第三步驟中，在酸性條件下移除G2.4 之2,4-二甲氧基苄基以提供G2.5 類型之產物，其可藉由矽膠層析、製備性逆相HPLC及/或對掌性SFC進行純化。通用流程 3
Figure 02_image197
用於合成G3.6 類型化合物之一種通用策略係經由通用流程3中所示之四步驟程序，其中R4 對應於式(I)中之環A且其中R1 、R2 及環A係如式(I)中所定義。在第一步驟中，胺基苯甲酸G3.1 可經由在HCl水溶液存在下在諸如EtOH之溶劑中以氰胺進行處理而轉化為胺基喹唑啉G3.2 。在第二步驟中，G3.2 類型之中間物可經由與1,2,4-三唑偶合、隨後在諸如乙腈之溶劑中以氧氯化磷(V)處理G3.2 而轉化為G3.3 類型之中間物。在第三步驟中，G3.3 類型之中間物可在諸如THF之溶劑中經醯肼G3.4 處理以提供G3.5 類型之產物。在第四步驟中，G3.5 類型之中間物可經在純N ,O -雙(三甲基矽烷基)乙醯胺(BSA)中加熱經歷重排以形成G3.6 類型之產物。G3.6 類型之產物可藉由矽膠層析、製備性逆相HPLC及/或對掌性SFC進行純化。通用流程 4
Figure 02_image199
用於合成G4.5 類型化合物之一種通用策略係經由通用流程4中概述之三步驟程序，其中R1 、R2 、R3 、RA1 、RA2 及RA3 係如式(I)中所定義。雜芳基環己醇G4.1 可經由以戴斯-馬丁高碘烷(Dess-Martin periodinane)氧化而轉化為相應環己酮G4.2 。在第二步驟中，G4.2 類型之中間物可在低溫下經R3 -LiG4.3 處理以提供G4.4 類型之產物。在第三步驟中，可經DDQ移除G2.4 之2,4-二甲氧基苄基以提供G4.5 類型之產物，其可藉由矽膠層析、製備性逆相HPLC及/或對掌性SFC進行純化。實驗
實驗中所用縮寫可包括(但不限於)以下：
18-冠-6 1,4,7,10,13,16-六氧雜環十八烷
℃ 攝氏度
AcOH 乙酸
aq. 水溶液
Atm 大氣壓
Boc2 O 二碳酸二第三丁酯
BSA N ,O -雙(三甲基矽烷基)乙醯胺
CD3 OD 氘化甲醇-d4
DCM 二氯甲烷
DDQ 2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌
DEA 二乙胺
DIAD 二異丙基二氮烯-1,2-二甲酸酯
DIBAL 二異丁基氫化鋁
DIPEA N ,N -二異丙基乙胺
DMAP 4-(二甲胺基)-吡啶
DMF 二甲基甲醯胺
DMP 戴斯-馬丁高碘烷
DMSO 二甲亞碸
DMSO-d6 氘化二甲亞碸
dppf 雙(二苯膦基)二茂鐵
ES 電噴霧電離
Et2 O 乙醚
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
h 小時
HPLC 高效液相層析
M 莫耳
MeCN 乙腈
MeOD-d4 氘化甲醇
MeOH 甲醇
MHz 兆赫茲
min 分鐘
mL 毫升
MS 質譜分析
MsCl 對甲苯磺醯氯
NaH 氫化鈉
NBS N -溴丁二醯亞胺
nm 奈米
NMR 核磁共振
Pd/C 鈀/碳
PPTS 對甲苯磺酸吡錠
p- TsOH 4-甲基苯磺酸
Py 吡啶
rac 外消旋
SFC 超臨界流體(CO2)層析
T3P 三丙基膦酸酐
tBuXPhos-Pd G3
Figure 02_image201
[(2-二第三丁基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲烷磺酸鈀(II) CAS# 1447963-75-8
Tf2 O 三氟甲烷磺酸酐
TFA 三氟乙酸
TFE 2,2,2-三氟乙醇
THF 四氫呋喃
THP (四氫-2H -哌喃-2-基)氧基
TLC 薄層層析
通用實驗資訊：
除非另外說明，否則所有反應均經磁性攪拌且在諸如氮氣或氬氣之惰性氣氛下進行。
除非另外說明，否則下述實驗中使用之乙醚均為Fisher ACS認證材料且經BHT穩定。
除非另外說明，否則「脫氣」係指通常藉由以出口針頭使諸如氮氣或氬氣之惰性氣體鼓泡穿過溶液歷時10至15分鐘使壓力標準化來移除氧之溶劑。
除非另外說明，否則「濃縮」意謂使用旋轉蒸發儀或真空泵自溶液或混合物蒸發溶劑。
除非另外說明，否則「蒸發」意謂使用旋轉蒸發儀或真空泵蒸發。
除非另外說明，否則在使用市售濾筒作為管柱之ISCO®、Analogix®或Biotage®自動層析系統上進行矽膠層析。管柱通常填充以矽膠作為固定相。逆相製備性HPLC條件可見於實驗部分結尾處。將水溶液在Genevac®蒸發儀上濃縮或凍乾。
除非另外說明，否則在周圍溫度下在400、500或600 MHz Bruker或Varian NMR光譜儀上記錄質子核磁共振(1 H NMR)光譜及質子解耦碳核磁共振(13 C{1 H} NMR)光譜。所有化學位移(δ)以每百萬之份數(ppm)來報導。質子共振係參考NMR溶劑中之殘餘氕，該NMR溶劑包括(但不限於)CDCl3 、DMSO-d 6 及MeOD-d 4 。碳共振係參考NMR溶劑之碳共振。資料如下表示：化學位移，多重性(br = 寬峰，br s = 寬單重峰，s = 單重峰，d = 雙重峰，dd = 雙重峰之雙重峰，ddd = 雙重峰之雙重峰之雙重峰，t = 三重峰，q = 四重峰，m = 多重峰)，耦合常數(J ) 以赫茲(Hz)計，積分。中間物 1 ：外消旋 -3-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丁 -2- 醇
Figure 02_image203
向4-溴-1H -吡唑(1.00 g，6.80 mmol)於DMF (3.40 ml)中之攪拌溶液中添加碳酸銫(2.22 g，6.80 mmol)及2,2,3-三甲基環氧乙烷(820 mg，9.52 mmol)。將混合物在90℃下攪拌且加熱4 h。將混合物冷卻至室溫、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由以己烷中5-100%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生外消旋 -3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇。LCMS (C8 H13 BrN2 O) (ES, m/z) [M+H]+ : 233, 235。
以與中間物 1 類似之方式，由適當之吡唑及環氧化物來製備下表1中之中間物。表 1
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
2
Figure 02_image205
 220, 222
1-(3-溴-1H -1,2,4-三唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
3
Figure 02_image207
 234, 236
1-(3-溴-5-甲基-1H -1,2,4-三唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
4
Figure 02_image209
 219, 221
1-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
5
Figure 02_image211
 231, 233
2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)環戊-1-醇
6
Figure 02_image213
 245, 247
2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環戊-1-醇
7
Figure 02_image215
 ND
1-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇與1-(4-溴-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇之混合物
8
Figure 02_image217
 247, 249
外消旋 - 3-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇及外消旋-3-(4-溴-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇之混合物
9
Figure 02_image219
 247, 249
3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2,3-二甲基丁-2-醇
10
Figure 02_image221
 234, 236
外消旋- 3-(3-溴-1H -1,2,4-三唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
中間物 11 ： 1-((4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇 步驟 1 ： (1- 羥基環丁基 ) 甲烷磺酸甲酯
Figure 02_image223
在0℃下向1-(羥甲基)環丁-1-醇(9.00 g，88.0 mmol)於DCM (260 mL)中之攪拌溶液中添加三乙胺(17.2 ml，123 mmol)，繼而添加甲烷磺醯氯(7.0 ml，90 mmol)。將混合物在0℃下攪拌10 min。隨後將混合物溫至室溫且攪拌15 min。隨後將混合物以水分配。分離各層且以鹽水洗滌有機層。將有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發以產生(1-羥基環丁基)甲烷磺酸甲酯。步驟 2 ： 1-((4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇
Figure 02_image225
在0℃下向4-溴-1H -吡唑(7.70 g，52.4 mmol)於DMF (60 ml)中之溶液中逐份添加NaH (60%於礦物油中，2.30 g，57.6 mmol)。將混合物在0℃下在氮氣下攪拌30 min。向混合物中添加(1-羥基環丁基)甲烷磺酸甲酯(13.1 g，72.8 mmol)於DMF (20 ml)中之溶液。將混合物在90℃下攪拌且加熱16 h。將混合物以水(70 mL)淬滅，隨後以EtOAc萃取三次。將有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由以石油醚中0-30%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生1-((4-溴-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇。LCMS (C8 H11 BrN2 O) (ES, m/z): 231, 233 [M+H]+ 。中間物 12 ： 4- 溴 -1-((3- 甲基氧雜環丁烷 -3- 基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 步驟 1 ： (3- 甲基氧雜環丁烷 -3- 基 ) 甲烷磺酸甲酯
Figure 02_image227
與合成中間物 11 之步驟1類似，由適當起始材料來進行合成中間物 12 之步驟1以產生(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)甲烷磺酸甲酯。步驟 2 ： 4- 溴 -1-((3- 甲基氧雜環丁烷 -3- 基 ) 甲基 )-1H - 吡唑
Figure 02_image229
向4-溴-1H -吡唑(5.04 g，34.3 mmol)於DMF (114 mL)中之溶液中添加(3-甲基氧雜環丁烷-3-基)甲烷磺酸甲酯(6.18 g，34.3 mmol)及碳酸銫(15.6 g，48.0 mmol)。將混合物在60℃下攪拌且加熱6 h。蒸發溶劑。向殘餘物中添加DCM (100 mL)且將混合物過濾。蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由使用己烷中0-100%之EtOAc之矽膠層析純化以產生4-溴-1-((3-甲基氧雜環丁烷-3-基)甲基)-1H -吡唑。LCMS (C8 H11 BrN2 O) (ES, m/z): 231, 233 [M+H]+ 。
以與中間物 12 類似之方式，由適當之起始材料來製備下表2中所示之中間物 13 。表 2
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
13
Figure 02_image231
 249, 251
4-溴-1-((3-(氟甲基)氧雜環丁烷-3-基)甲基)-1H-吡唑
中間物 14 ： (1s ,3s )-3-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環丁醇 步驟 1 ： 4- 溴 -1-(5,8- 二氧雜螺 [3.4] 辛 -2- 基 )-1H - 吡唑
Figure 02_image233
向8 mL小瓶中之2-溴-5,8-二氧雜螺[3.4]辛烷(0.500 g，2.59 mmol)及4-溴-1H -吡唑(0.761 g，5.18 mmol)於DMF (2.6 mL)中之溶液中添加碳酸鉀(1.07 g，7.77 mmol)及18-冠-6醚(0.137 g，0.518 mmol)。將混合物在90℃下攪拌且加熱。5 min後，將混合物冷卻至室溫且向混合物中添加額外之4-溴-1H -吡唑(400 mg，2.72 mmol)。將混合物在90℃下攪拌且加熱48 h。隨後將混合物冷卻至室溫且分配於EtOAc (25 mL)與水(25 mL)之間。分離各層且以鹽水洗滌有機層。將兩個含水層合併且以EtOAc (15 mL)萃取。將有機層合併、以鹽水洗滌兩次、經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由使用己烷中0-50%之EtOAc之矽膠層析純化以產生4-溴-1-(5,8-二氧雜螺[3.4]辛-2-基)-1H -吡唑。LCMS (C9 H12 BrN2 O2 ) (ES, m/z): 259, 261 [M+H]+ 。步驟 2 ： 3-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 環丁酮
Figure 02_image235
向4-溴-1-(5,8-二氧雜螺[3.4]辛-2-基)-1H -吡唑(270 mg，1.042 mmol)及PPTS (131 mg，0.521 mmol)於二噁烷(2.6 mL)中之溶液中添加水(2.6 mL)。將混合物在85℃下攪拌且加熱95 h。將混合物冷卻至室溫。將混合物分配於EtOAc與飽和碳酸氫鈉水溶液之間。分離各層且以EtOAc萃取含水層。將有機層合併、以鹽水洗滌、經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發溶劑。將殘餘物藉由使用己烷中0-100%之EtOAc之矽膠層析純化以產生3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)環丁酮。LCMS (C7 H8 BrN2 O) (ES, m/z): 215, 217 [M+H]+ 。步驟 3 ： (1s,3s)-3-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環丁醇
Figure 02_image237
將3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)環丁酮(129 mg，0.600 mmol)於乙醚(3.5 ml)中之溶液冷卻至0℃。向經攪拌之混合物中逐滴添加甲基溴化鎂(3 M於乙醚中，0.240 ml，0.720 mmol)。將混合物攪拌16 h，使冰浴失效。將混合物分配於EtOAc與20%檸檬酸水溶液之間且攪拌2 h。分離各層且以EtOAc萃取含水層。將有機層合併、以鹽水洗滌、經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由以己烷中0-60%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(1s ,3s )-3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環丁醇。LCMS (C8 H12 BrN2 O) (ES, m/z): 231, 233 [M+H]+ 。中間物 15 ： 4- 溴 -1-( 四氫 -2H- 哌喃 -4- 基 )-1H - 吡唑
Figure 02_image239
向反應小瓶中添加4-溴-1H -吡唑(1.50 g，10.2 mmol)、4-碘四氫-2H -哌喃(2.16 g，10.2 mmol)、碳酸鉀(1.41 g，10.2 mmol)及DMF (15 mL)。將混合物在100℃下攪拌且加熱16 h。將混合物藉由以石油醚中0-50%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生4-溴-1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H-吡唑。LCMS (C8 H11 BrN2 O) (ES, m/z): 231, 233 [M+H]+ 。中間物 16 ： 4- 溴 -5- 甲基 -1- 三苯甲基 -1H - 吡唑與 4- 溴 -3- 甲基 -1- 三苯甲基 -1H - 吡唑之混合物
Figure 02_image241
向200 mL圓底燒瓶中添加4-溴-3-甲基-1H -吡唑(1.00 g，6.21 mmol)及THF (62.1 ml)。在氮氣氛下攪拌混合物。將混合物在0℃下冷卻。向混合物中逐份添加NaH (0.311 g，7.76 mmol)。經30 min將混合物緩慢溫至室溫。隨後將混合物在0℃下冷卻且向混合物中添加三苯氯甲烷(1.90 g，6.83 mmol)。將混合物在室溫下攪拌16 h。將混合物以水(60 mL)淬滅且以EtOAc (60 mL)稀釋。分離各層且以EtOAc (2 x 50 mL)進一步萃取含水層。將經合併之有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由以己烷中0-25%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生區位異構體混合物形式之4-溴-3-甲基-1-三苯甲基-1H -吡唑及4-溴-5-甲基-1-三苯甲基-1H -吡唑。LCMS (C23 H19 BrN2 ) (ES, m/z): 425, 427 [M+Na]+ 。中間物 17 ： 4- 溴 -3-( 二氟甲基 )-1- 三苯甲基 -1H - 吡唑
Figure 02_image243
向4-溴-5-(二氟甲基)-1H -吡唑(250 mg，1.27 mmol)、三苯氯甲烷(460 mg，1.65 mmol)及吡啶(201 mg，2.54 mmol)於DCM (4 mL)中之攪拌混合物中添加DMAP (15.5 mg，0.127 mmol)。將混合物在室溫下攪拌16 h。以水(5 mL)及飽和NH4 Cl水溶液(5 mL)洗滌混合物。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由以石油醚中0-50%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生4-溴-5-(二氟甲基)-1-三苯甲基-1H -吡唑。LCMS (C23 H17 BrF2 N2 ) (ES, m/z): 461, 463 [M+Na]+ 。中間物 18 ： 4- 溴 -3-( 二氟甲基 )-1-( 四氫 -2H - 哌喃 -4- 基 )-1H - 吡唑與 4- 溴 -5-( 二氟甲基 )-1-( 四氫 -2H - 哌喃 -4- 基 )-1H - 吡唑之混合物
Figure 02_image245
向4-溴-5-(二氟甲基)-1H -吡唑(240 mg，1.218 mmol)於DMF (60 ml)中之溶液中添加碳酸銫(595 mg，1.828 mmol)及四氫-2H -哌喃-4-基甲烷磺酸酯(329 mg，1.828 mmol)。將混合物在氮氣下在80℃下攪拌且加熱3 h。將混合物冷卻至室溫且以水(100 mL)稀釋。將混合物以EtOAc萃取三次。將有機層以水洗滌、繼而以鹽水洗滌、經無水MgSO4 乾燥且過濾。蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以己烷中0-90%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生4-溴-3-(二氟甲基)-1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑與4-溴-5-(二氟甲基)-1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑之混合物。中間物 19 ： 2-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 醇 步驟 1 ： 2-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙酸甲酯
Figure 02_image247
向4-溴-1H -吡唑(2.00 g，13.6 mmol)於DMF (20 ml)中之溶液中添加2-溴-2-甲基丙酸甲酯(1.76 ml，13.6 mmol)，繼而添加碳酸銫(8.87 g，27.2 mmol)。將混合物在80℃下加熱18 h。過濾混合物且以洗滌DCM濾餅。蒸發經合併之濾液。將所得殘餘物藉由以己烷中10%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙酸甲酯。LCMS (C8 H11 BrN2 O2 ) (ES, m/z): 247, 249 [M+H]+ 。步驟 2 ： 2-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 醇
Figure 02_image249
在0℃下向2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙酸甲酯(1.74 g，7.04 mmol)於EtOH (35 ml)中之溶液中添加硼氫化鈉(0.799 g，21.1 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2 h。將混合物在DCM (50 mL)中稀釋、以水及鹽水溶液洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發濾液以產生2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇。LCMS (C7 H11 BrN2 O) (ES, m/z): 219, 221 [M+H]+ 。
以與關於合成中間物 19 所述類似之方式，由適當之起始材料來製備下表3中之中間物 20 。表 3
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
20
Figure 02_image251
 233, 235
2-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
中間物 21 ： 1-(4- 溴 -3- 環丙基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇 步驟 1 ： 1-(3- 環丙基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image253
以與用於合成中間物 1 類似之方式，由適當起始材料來進行合成中間物 21 之步驟1以產生1-(3-環丙基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇。步驟 2 ： 1-(4- 溴 -3- 環丙基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image255
向1-(3-環丙基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(1.55 g，8.60 mmol)於DCM (86 mL)中之溶液中添加1,3-二溴-5,5-二甲基內醯脲(1.23 g，4.30 mmol)。將混合物在室溫下攪拌30 min。蒸發溶劑且將所得殘餘物藉由使用己烷中10-90%之EtOAc之矽膠層析純化以產生1-(4-溴-3-環丙基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇。LCMS (C10 H15 BrN2 O) (ES, m/z): 259, 261 [M+H]+ 。中間物 22 ： 4- 溴 -1- 乙基 -3-((( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 步驟 1 ： (4- 溴 -1- 乙基 -1H - 吡唑 -3- 基 ) 甲醇
Figure 02_image257
以與合成中間物 21 之步驟2類似之方式，由適當起始材料來進行合成中間物 22 之步驟1以產生(4-溴-1-乙基-1H -吡唑-3-基)甲醇。LCMS (C6 H9 BrN2 O) (ES, m/z): 205, 207 [M+H]+ 。步驟 2 ：外消旋 -4- 溴 -1- 乙基 -3-((( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 甲基 )-1H - 吡唑
Figure 02_image259
向(4-溴-1-乙基-1H -吡唑-3-基)甲醇(570 mg，2.78 mmol)於DCM (27 mL)中之攪拌溶液中添加3,4-二氫-2H -哌喃(468 mg，5.56 mmol)，繼而添加4-甲基苯磺酸(聚合物支載)(239 mg，1.39 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2 h。過濾混合物且將濾液直接負載至矽膠管柱上並以己烷中0-60%之EtOAc作為溶離劑純化以產生外消旋-4-溴-1-乙基-3-(((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)甲基)-1H -吡唑。LCMS (C11 H17 BrN2 O2 ) (ES, m/z): 289, 291 [M+H]+ 。中間物 23 ：外消旋 -4- 溴 -1-((1-(( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環丁基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 步驟 1 ：外消旋 -(1-(( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環丁基 ) 甲烷磺酸甲酯
Figure 02_image261
在0℃下向外消旋 - (1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲醇(8.00 g，43.0 mmol)於DCM (150 mL)中之攪拌溶液中添加三乙胺(8.38 ml，60.1 mmol)，繼而添加甲烷磺醯氯(4.02 ml，51.5 mmol)。將混合物在0℃下攪拌10 min且隨後溫至室溫並攪拌40 min。隨後將混合物以水分配。分離各層且以鹽水洗滌有機層。將有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發以產生外消旋 -(1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲烷磺酸甲酯，LCMS (C11 H20 O5 S) (ES, m/z): 287 [M+Na]+ 。步驟 2 ：外消旋 -4- 溴 -1-((1-(( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環丁基 ) 甲基 )-1H - 吡唑
Figure 02_image263
在0℃下向4-溴-1H -吡唑(5.40 g，36.7 mmol)於DMF (60 ml)中之溶液中逐份添加NaH (60%於礦物油中，1.62 g，40.4 mmol)。將混合物在0℃下在氮氣下攪拌1 h。向混合物中添加外消旋 - (1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲烷磺酸甲酯(10.7 g，40.4 mmol)。將混合物在氮氣下在90℃下攪拌且加熱16 h。將混合物以水(200 mL)淬滅且以EtOAc萃取三次。將經合併之有機層以水洗滌、繼而以鹽水洗滌。將有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發。將所得殘餘物藉由以石油醚中0-30%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生外消旋 -4-溴-1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑(中間物 23 )。LCMS (C13 H19 BrN2 O2 ) (ES, m/z): 315, 317 [M+H]+ 。中間物 24 及中間物 25 ： 1-(4- 溴 -3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4- 溴 -5- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image265
將1-(4-溴-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇與1-(4-溴-5-甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇之混合物(中間物 7 )藉由SFC (Chiral Technologies IG 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)分離以產生1-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 24 ，第一溶離峰)及1-(4-溴-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 25 ，第二溶離峰)。
對於中間物 24 而言：LCMS (C13 H19 BrN2 O2 ) (ES, m/z): 233, 235 [M+H]+ 。
對於中間物 25 而言：LCMS (C8 H13 BrN2 O) (ES, m/z): 233, 235 [M+H]+ 。
以與製備中間物 24 及中間物 25 類似之方式，藉由SFC分離外消旋混合物中間物 1 來製備下表4中之中間物 26 及中間物 27 。表 4
中間物 結構 SFC 條件 觀測之m/z [M + H]+
名稱
26
Figure 02_image267
 峰1；Chiral Technologies AD-H 50 x 250 mm管柱，以35% MeOH作為共溶劑 233, 235
(S 或R )-3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
27
Figure 02_image269
 峰2；Chiral Technologies AD-H 50 x 250 mm管柱，以35% MeOH作為共溶劑 233, 235
(R 或S )-3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
中間物 28 ：外消旋 -2-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 環丁 -1- 酮
Figure 02_image271
向2-溴環丁酮(16.2 g，109 mmol)於MeCN (30 mL)中之溶液中添加4-溴-1H -吡唑(8.00 g，54.4 mmol)及碳酸鉀(30.1 g，218 mmol)。將混合物在20℃下攪拌10 h。過濾混合物且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/水(含有0.1% TFA改質劑)作為溶離劑)純化以產生外消旋-2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)環丁酮。LCMS (C7 H7 BrN2 O) (ES, m/z) [M+H]+ : 215, 217。中間物 29 ： 2-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環丁 -1- 醇
Figure 02_image273
在-78℃下將甲基溴化鎂(0.248 ml，0.744 mmol，3 M於乙醚中)添加至外消旋 - 2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)環丁酮(中間物 28 ) (80.0 mg，0.372 mmol)於THF (2 mL)中之攪拌混合物中且將混合物在此溫度下攪拌3 h。將反應以飽和NH4 Cl水溶液(2 mL)淬滅且以EtOAc (2 x 20 mL)自混合物萃取所需層。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發。將所得殘餘物藉由以石油醚中30%之EtOAc作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化以產生2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環丁醇。LCMS (C8 H11 BrN2 O) (ES, m/z) [M+H]+ : 231, 233。中間物 30 ：外消旋 -4- 溴 -1-(2,2- 二甲氧基環丁基 )-1H - 吡唑
Figure 02_image275
向三甲氧基甲烷(592 mg，5.58 mmol)及外消旋 -2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)環丁酮(中間物 28 ) (600 mg，2.79 mmol)於MeOH (5 mL)中之攪拌混合物中添加4-甲基苯磺酸水合物(53.1 mg，0.279 mmol)。將混合物在28℃下攪拌12 h。將混合物以EtOAc (50 mL)稀釋且以水(30 mL)洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以石油醚中0-10%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生外消旋 -4-溴-1-(2,2-二甲氧基環丁基)-1H -吡唑。LCMS (C9 H13 BrN2 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 261, 263。中間物 31 ：外消旋 - 4- 溴 -5- 甲基 -1-((1-(( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環丁基 ) 甲基 )-1H - 吡唑與外消旋 -4- 溴 -3- 甲基 -1-((1-(( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環丁基 ) 甲基 )-1H - 吡唑之混合物
Figure 02_image277
向外消旋 - (1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲醇(1.00 g，5.37 mmol)、4-溴-5-甲基-1H -吡唑(0.864 g，5.37 mmol)及三苯基膦(1.41 g，5.37 mmol)於THF (10.2 mL)中之攪拌溶液中添加二氮烯-1,2-二甲酸二異丙酯(1.09 g，5.37 mmol)。將混合物在60℃下攪拌且加熱16 h。蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由使用己烷中0-80%之EtOAc之矽膠層析純化以產生外消旋 - 4-溴-5-甲基-1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑與外消旋 -4-溴-3-甲基-1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑之混合物。LCMS (C14 H21 BrN2 O2 ) (ES, m/z): 329, 331 [M+H]+。中間物 32 ：外消旋 -4- 溴 -1-(2-(( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環戊基 )-1H - 吡唑
Figure 02_image279
向2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)環戊醇(中間物 5 )(3.00 g，13.0 mmol)於DCM (45 mL)中之攪拌溶液中添加3,4-二氫-2H -哌喃(2.4 ml，26 mmol)，繼而添加4-甲基苯磺酸(聚合物結合，2.0 g)。將混合物在室溫下攪拌16 h。過濾混合物且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由以水中0-100%之MeCN作為溶離劑之逆相C18層析純化以產生外消旋-4-溴-1-(2-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環戊基)-1H -吡唑。LCMS (C13 H19 BrN2 O2 ) (ES, m/z): 315, 317 [M+H]+ 。中間物 33 ： 1-(4- 胺基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇 步驟 1 ： 2- 甲基 -1-(4- 硝基 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 丙 -2- 醇
Figure 02_image281
向500 mL圓底燒瓶中添加4-硝基-1H -吡唑(15.0 g，133 mmol)、碳酸銫(64.8 g，199 mmol)及DMF (195 mL)。向混合物中添加2,2-二甲基環氧乙烷(23.6 ml，265 mmol)。將混合物在80℃下加熱16 h。將混合物冷卻至室溫。過濾混合物且以EtOAc洗滌。蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由使用己烷中0-80%之EtOAc之矽膠層析純化，產生2-甲基-1-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丙-2-醇。LCMS (C7 H11 N3 O3 ) (ES, m/z): 186 [M+H]+ 。步驟 2 ： 1-(4- 胺基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image283
向500 mL燒瓶中添加2-甲基-1-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丙-2-醇(18.8 g，102 mmol)、10%鈀/碳(1.08 g，1.01 mmol)及EtOAc (300 mL)。將混合物在真空下脫氣且以氮氣再填充三次。將混合物脫氣且由氣球再填充氫氣。將混合物在氫氣氛下攪拌21 h。經由Celite® (矽藻土)過濾混合物。蒸發濾液之溶劑，產生1-(4-胺基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇。LCMS (C7 H13 N3 O) (ES, m/z): 156 [M+H]+ 。中間物 34 ： 2-(4- 胺基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 醇 步驟 1 ： 2- 甲基 -2-(4- 硝基 -1H- 吡唑 -1- 基 ) 丙酸乙酯
Figure 02_image285
向4-硝基-1H -吡唑(3.00 g，26.5 mmol)及2-溴-2-甲基丙酸乙酯(5.69 g，29.2 mmol)於DMF (50 mL)中之攪拌混合物中添加K2 CO3 (11.00 g，80.00 mmol)。將混合物在80℃下攪拌且加熱10 h。將混合物冷卻、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以石油醚中5-20%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生2-甲基-2-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丙酸乙酯。LCMS (C9 H13 N3 O4 ) (ES, m/z): 228 [M+H]+ 。步驟 2 ： 2- 甲基 -2-(4- 硝基 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 丙 -1- 醇
Figure 02_image287
向2-甲基-2-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丙酸乙酯(3.00 g，13.2 mmol)於EtOH (50 mL)中之攪拌混合物中添加NaBH4 (0.999 g，26.4 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2 h。將混合物以水(40 mL)稀釋且以EtOAc (2 x 50 mL)萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑以產生2-甲基-2-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丙-1-醇。步驟 3 ： 2-(4- 胺基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 醇
Figure 02_image289
以與合成中間物 33 之步驟2類似之方式，使用2-甲基-2-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丙-1-醇作為起始材料來進行合成中間物 34 之步驟3，以產生2-(4-胺基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇。LCMS (C7 H13 N3 O) (ES, m/z): 156 [M+H]+ 。中間物 35 ： 2- 胺基 -5- 氟 -4- 甲氧基苯甲腈 步驟 1 ： 2- 溴 -4- 氟 -5- 甲氧基苯胺
Figure 02_image291
在0-5℃下冷卻4-氟-3-甲氧基苯胺(350.0 g，2.48 mol)於EtOAc (3.5 L)中之溶液。向混合物中逐份添加四-正丁基三溴化銨(14.0 kg, 2.90 mol)。將混合物溫至15℃且在此溫度下攪拌1 h。以飽和Na2 CO3 水溶液將混合物調整至pH 8。將混合物以EtOAc萃取且將經合併之有機層以水(2 x 1.5 L)洗滌並經無水Na2 SO4 乾燥。藉由過濾移除固體且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以石油醚中0-100%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生2-溴-4-氟-5-甲氧基苯胺。LCMS (C7 H7 BrFNO) (ES, m/z): 220, 222 [M+H]+ 。步驟 2 ： 2- 胺基 -5- 氟 -4- 甲氧基苯甲腈
Figure 02_image293
向2-溴-4-氟-5-甲氧基苯胺(300 g，1.36 mol)於DMF (2.1 L)中之溶液中添加Zn(CN)2 (327 g，2.78 mol)及Pd(PPh3 )4 (90.0 g，0.0778 mol)。將混合物在真空下脫氣且以氮氣淨化。將混合物在氮氣下在130℃下攪拌且加熱1 h。將混合物傾入冰水(4 L)中。將混合物以EtOAc (3 L、2 L、1 L)萃取且將經合併之有機層以鹽水(2 L、1.5 L)洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以石油醚中0-100%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生2-胺基-5-氟-4-甲氧基苯甲腈。LCMS (C8 H7 FN2 O) (ES, m/z): 167 [M+H]+ 。中間物 36 ： 2- 胺基 -4- 氯 -5- 氟苯甲腈
Figure 02_image295
向20 mL微波小瓶中添加2-溴-5-氯-4-氟苯胺(1.00 g，4.46 mmol)、氰化亞銅(I)(0.472 g，4.90 mmol)及NMP (8 mL)。將混合物在180℃微波中攪拌且加熱1 h。將混合物在乙醚(100 mL)中稀釋且經Celite® (矽藻土)過濾。以水(3 x 100 mL)洗滌濾液。將有機層經無水硫酸鎂乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑，以產生2-胺基-4-氯-5-氟苯甲腈(LCMS (C7 H4 ClFN2 ) (ES, m/z): 171 [M+H]+ 。中間物 37 ： 2-((((2,4- 二甲氧基苄基 ) 亞胺基 ) 亞甲基 ) 胺基 )-5- 氟 -4- 甲氧基苯甲腈 步驟 1 ： 1-(2- 氰基 -4- 氟 -5- 甲氧基苯基 )-3-(2,4- 二甲氧基苄基 ) 尿素
Figure 02_image297
向20 mL小瓶中添加2-胺基-5-氟-4-甲氧基苯甲腈(中間物 35 ) (817 mg，4.92 mmol)、DCM (6 mL)及吡啶(1 mL)。攪拌混合物。向混合物中添加1-(異氰酸酯基甲基)-2,4-二甲氧基苯(1425 mg，7.380 mmol)。將混合物在40℃下攪拌且加熱16 h。藉由過濾收集固體且以MeOH (3 x 3 mL)洗滌以產生1-(2-氰基-4-氟-5-甲氧基苯基)-3-(2,4-二甲氧基苄基)尿素。步驟 2 ： 2-((((2,4- 二甲氧基苄基 ) 亞胺基 ) 亞甲基 ) 胺基 )-5- 氟 -4- 甲氧基苯甲腈
Figure 02_image299
向100 mL圓底燒瓶中添加1-(2-氰基-4-氟-5-甲氧基苯基)-3-(2,4-二甲氧基苄基)尿素(1.16 g，3.22 mmol)、三苯基膦(1.69 g，6.44 mmol)、三乙胺(1.80 ml，12.9 mmol)及DCM (25 mL)。將混合物在0℃下攪拌並冷卻。向混合物中逐滴添加四溴化碳(2.14 g，6.44 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液。30 min後，將混合物濃縮。將所得殘餘物藉由以己烷中0-70%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-4-甲氧基苯甲腈。LCMS (C18 H16 FN3 O3 ) (ES, m/z) [M+Na]+ : 364。
以與中間物 37 類似之方式，由適當中間物及起始材料製備下表5中之中間物。表 5
中間物 結構 觀測之m/z [M + Na]+
名稱
38
Figure 02_image301
 364
2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-3-甲氧基苯甲腈
39
Figure 02_image303
 368
4-氯-2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟苯甲腈
40
Figure 02_image305
 348
2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-4-甲基苯甲腈
41
Figure 02_image307
 352
2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-3,5-二氟苯甲腈
42
Figure 02_image309
 384
3,5-二氯-2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)苯甲腈
中間物 43 ： 1-( 第三丁基 )3- 乙基 (R )- 哌啶 -1,3- 二甲酸酯
Figure 02_image311
將(R )-哌啶-3-甲酸乙酯(200.0 g，1270 mmol)、三乙胺(257.5 g，2540 mmol)及DMAP (15.5 g，130 mmol)於DCM (2 L)中之溶液在0℃下冷卻。向混合物中逐份添加二碳酸二第三丁酯(305.4 g，1400 mmol)。將混合物在室溫下攪拌3 h。隨後以飽和碳酸氫鈉水溶液(3 x 1 L)洗滌有機層。將經合併之有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑以產生1-(第三丁基)3-乙基(R )-哌啶-1,3-二甲酸酯。
以與中間物 43 類似之方式，由適當之起始材料製備下表6中之中間物 44 。表 6
中間物 結構 觀測之m/z [M + Na]+
名稱
44
Figure 02_image313
 280
1-(第三丁基)3-甲基氮𠰢-1,3-二甲酸酯
中間物 45 ： 1-( 第三丁基 )3- 甲基 5- 甲基哌啶 -1,3- 二甲酸酯 步驟 1 ： 5- 甲基哌啶 -3- 甲酸
Figure 02_image315
在20℃下向5-甲基菸鹼酸(10g, 72.9 mmol)及濃HCl水溶液(0.599 ml，7.29 mmol)於MeOH (100 mL)中之攪拌混合物中添加氧化鉑(IV) (1.67 g，7.29 mmol)。將混合物脫氣且以氮氣淨化，隨後以氫氣增壓至50 psi。將混合物攪拌10 h。過濾混合物且蒸發濾液之溶劑以產生5-甲基哌啶-3-甲酸。步驟 2 ： 1-( 第三丁氧羰基 )-5- 甲基哌啶 -3- 甲酸
Figure 02_image317
在20℃下向二碳酸二第三丁酯(5.84 ml，25.1 mmol)及5-甲基哌啶-3-甲酸(3.00 g，21.0 mmol)於MeCN (20 mL)及水(20 mL)中之攪拌混合物中添加碳酸氫鈉(7.04 g，84.0 mmol)。將混合物在20℃下攪拌5 h。將混合物以水(20 mL)稀釋、以濃HCl水溶液調整至pH 5且以EtOAc (3 x 30 mL)萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑以產生1-(第三丁氧羰基)-5-甲基哌啶-3-甲酸。LCMS (C12 H21 NO4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 244。步驟 3 ： 1-( 第三丁基 )3- 甲基 5- 甲基哌啶 -1,3- 二甲酸酯
Figure 02_image319
在0℃下向1-(第三丁氧羰基)-5-甲基哌啶-3-甲酸(5.00 g，20.5 mmol)於DCM (10 mL)及MeOH (10 mL)中之攪拌混合物中添加三甲基矽烷基-重氮甲烷(15.4 ml，30.8 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2 h。蒸發溶劑以產生1-第三丁基3-甲基5-甲基哌啶-1,3-二甲酸酯。LCMS (C13 H23 NO4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 258。中間物 46 ： 1-( 第三丁基 )3- 甲基 4- 甲基哌啶 -1,3- 二甲酸酯 步驟 1 ： 4- 甲基哌啶 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image321
以與合成中間物 45 之步驟1類似之方式，由適當起始材料來進行合成中間物 46 之步驟1以產生4-甲基哌啶-3-甲酸甲酯。LCMS (C8 H15 NO2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 158。步驟 2 ： 1-( 第三丁基 )3- 甲基 4- 甲基哌啶 -1,4- 二甲酸酯
Figure 02_image323
以與合成中間物 45 之步驟2類似之方式，由適當起始材料來進行合成中間物 46 之步驟2，除了藉由以石油醚中0-30%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化粗材料以外，以產生1-(第三丁基)3-甲基4-甲基哌啶-1,4-二甲酸酯。中間物 47 ：外消旋 , 順 -1-( 第三丁基 )3- 乙基 -5- 氟哌啶 -1,3- 二甲酸酯與外消旋 , 反 -1-( 第三丁基 )3- 乙基 -5- 氟哌啶 -1,3- 二甲酸酯之混合物
Figure 02_image325
向含有外消旋 , 順 -1-(第三丁基 )3-乙基-5-氟哌啶-1,3-二甲酸酯(2.00 g，7.26 mmol)之250 mL圓底燒瓶中添加EtOH (73 mL)。伴隨攪拌向混合物中逐滴添加第三丁醇鈉(7.26 ml，14.5 mmol) (於THF中之2 M溶液)。將混合物在室溫下攪拌3 h。將混合物濃縮至約10 mL之體積。向混合物中添加EtOAc (10 mL)。蒸發溶劑。將殘餘物溶解於EtOAc (60 mL)中且以水(3 x 20 mL)洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發溶劑以產生外消旋 , 順 -1-(第三丁基 )3-乙基-5-氟哌啶-1,3-二甲酸酯與外消旋 , 反 -1-(第三丁基 )3-乙基-5-氟哌啶-1,3-二甲酸酯之混合物。中間物 48 及 49 ： (3S ,6R )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H - 吡唑 -4- 基 )-6- 甲基哌啶 -3- 甲酸甲酯及 (3R ,6S )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H - 吡唑 -4- 基 )-6- 甲基哌啶 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image327
向100 mL燒瓶中饋入1-(4-胺基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(4.66 g，30.0 mmol)、2-亞甲基-5-側氧基己酸甲酯1 (3.12 g，20.0 mmol)及LiBF4 (1.88 g，20.0 mmol)。向燒瓶中添加TFE (31.2 mL)。燒瓶安裝有回流冷凝器，其具有氮氣入口。將混合物在回流下加熱48 h。將混合物冷卻至室溫且向混合物中添加10%鈀/碳(0.639 g，6.00 mmol)。將混合物放置於氫氣氛下且在室溫下攪拌6 h。過濾混合物且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以DCM中0-4%之MeOH作為溶離劑之矽膠層析純化，產生具有順式相對立體化學之外消旋體。藉由對掌性SFC (Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)解析外消旋混合物以產生(3S ,6R )-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-甲酸甲酯(中間物 48 ，第一溶離峰)及(3R ,6S )-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-甲酸甲酯(中間物 49 ，第二溶離峰)。
對於中間物 48 而言：LCMS (C15 H25 N3 O3 ) (ES, m/z): 296 [M+H]+ 。對於中間物 49 而言：LCMS (C15 H25 N3 O3 ) (ES, m/z): 296 [M+H]+ 。1 Bizet, V.；Lefebvre, V.；Baudoux, J.；Lasne, M.；Boulange, A.；Leleu, S.；Franck, X.；Rouden, J.Eur. J. Org. Chem. 2011 , 4170。
以與中間物 48 及中間物 49 類似之方式，由適當中間物及起始材料來製備下表7中之中間物，除了此等化合物經分離為未經SFC分離解析之非對映異構體外消旋混合物以外。表 7
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
50
Figure 02_image329
 310
1-(1-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-甲酸乙酯
51
Figure 02_image331
 310
1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-3-甲基-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-甲酸甲酯
中間物 52 ： 6- 乙基 -1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 )-2- 側氧基哌啶 -3- 甲酸乙酯 步驟 1 ： 2-(3- 側氧基戊基 ) 丙二酸二乙酯
Figure 02_image333
將丙二酸二乙酯(10.0 g，62.4 mmol)、戊-1-烯-3-酮(5.78 g，68.7 mmol)及碳酸鉀(0.863 g，6.24 mmol)之混合物在室溫下在密封管中攪拌3天。將所得混合物過濾以提供濾液，其為純2-(3-側氧基戊基)丙二酸二乙酯。LCMS (C12 H20 O5 ) (ES, m/z): 245 [M+H]+ 。粗材料不經進一步純化即使用。步驟 2 ：外消旋 -2-(3-((1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 胺基 ) 戊基 ) 丙二酸二乙酯
Figure 02_image335
向1-(4-胺基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 33 ) (2.00 g，12.9 mmol)於DCM (129 mL)中之攪拌溶液中添加2-(3-側氧基戊基)丙二酸二乙酯(6.93 g，28.4 mmol)及AcOH (0.077 ml，1.3 mmol)。將混合物在室溫下攪拌30 min。向混合物中逐份添加氰基硼氫化鈉(1.62 g，25.8 mmol)。將混合物在室溫下再攪拌30 min。將混合物以1 M HCl水溶液(150 mL)淬滅。分離有機層且將以含水層DCM萃取兩次以上。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑以產生外消旋 -2-(3-((1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)胺基)戊基)丙二酸二乙酯。LCMS (C19 H33 N3 O5 ) (ES, m/z): 384 [M+H]+ 。步驟 3 ： 6- 乙基 -1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 )-2- 側氧基哌啶 -3- 甲酸乙酯
Figure 02_image337
向外消旋 - 2-(3-((1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)胺基)戊基)丙二酸二乙酯(1.70 g，4.43 mmol)於甲苯(22 mL)中之溶液中添加AcOH (0.530 ml，8.87 mmol)。將混合物在90℃下攪拌2天。將混合物冷卻至室溫且蒸發溶劑。將殘餘物藉由以己烷中0-100%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生6-乙基-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-2-側氧基哌啶-3-甲酸乙酯。LCMS (C17 H27 N3 O4 ) (ES, m/z): 338 [M+H]+ 。中間物 53 ： 3- 羥基環己烷甲酸乙酯
Figure 02_image339
在0℃下向3-側氧基環己烷甲酸乙酯(2.00 g，11.7 mmol)於THF (20 mL)中之溶液中添加硼氫化鈉(0.889 g，23.5 mmol)於THF (10 mL)中之溶液。將混合物在0℃下攪拌2 h。向混合物中添加水(10 mL)且以EtOAc (3 x 15 mL)萃取混合物。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以石油醚中10-50%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生3-羥基環己烷甲酸乙酯。中間物 54 ： (R )-3-( 肼羰基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯
Figure 02_image341
將(R )-1-第三丁基3-乙基哌啶-1,3-二甲酸酯(320.0 g，1243 mmol)及水合肼(311.3 g，6217 mmol)於EtOH (1.6 L)中之溶液在80℃下攪拌且加熱16 h。蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以DCM溶離之矽膠層析純化以產生(R )-3-(肼羰基)哌啶-1-甲酸第三丁酯。LCMS (C11 H21 N3 O3 ) (ES, m/z): 244 [M+H]+ 。
以與中間物 54 類似之方式，由適當中間物及起始材料來製備下表8中之中間物。表 8
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
55
Figure 02_image343
 258
3-(肼羰基)氮𠰢-1-甲酸第三丁酯
56
Figure 02_image345
 258
3-(肼羰基)-5-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯
57
Figure 02_image347
 258
3-(肼羰基)-4-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯
58
Figure 02_image349
 206 [M+H-C4 H8 ]+
3-氟-5-(肼羰基)哌啶-1-甲酸第三丁酯
59
Figure 02_image351
 206 [M+H-C4 H8 ]+
(3R ,5R 及3S ,5S )-3-氟-5-(肼羰基)哌啶-1-甲酸第三丁酯與(3S ,5R 及3R ,5S )-3-氟-5-(肼羰基)哌啶-1-甲酸第三丁酯之混合物
60
Figure 02_image353
 248
3-氟-3-(肼羰基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
61
Figure 02_image355
 296
(3R ,6S )-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-卡肼
62
Figure 02_image357
 296
1-(1-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-卡肼
63
Figure 02_image359
 310
1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-3-甲基-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-卡肼
64
Figure 02_image361
 324
6-乙基-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-2-側氧基哌啶-3-卡肼
65
Figure 02_image363
 159
3-羥基環己烷-1-卡肼
66
Figure 02_image365
 258
5-(肼羰基)-2-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯
中間物 67 ： (R )-1-(1- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 卡肼 步驟 1 ： 1-(1- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 甲酸乙酯
Figure 02_image367
向40 mL反應小瓶中饋入1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-甲酸乙酯(1.00 g，6.36 mmol)及THF (15 mL)。向混合物中添加4-溴-1-甲基-1H -吡唑(4.96 ml，48.0 mmol)，繼而添加tBuXPhos-Pd G3 (2.02 g，2.54 mmol)及第三丁醇鈉(4.61 g，48.0 mmol)。使氮氣鼓泡穿過混合物歷時10 min。將小瓶密封且在65℃下加熱24 h。將混合物冷卻至室溫且以EtOAc (40 mL)稀釋。經Celite® (矽藻土)過濾混合物。蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由使用DCM中0-10%之MeOH之矽膠層析純化以產生1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-甲酸乙酯。LCMS (C12 H19 N3 O2 ) (ES, m/z): 238 [M+H]+ 。步驟 2 ： (R )-1-(1- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 卡肼
Figure 02_image369
向圓底燒瓶中饋入1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-甲酸乙酯(7.72 g，32.5 mmol)及EtOH (77 mL)。向混合物中添加水合肼(31.7 ml，651 mmol)。圓底燒瓶安裝有回流冷凝器且將混合物在80℃下加熱16 h。將混合物冷卻至室溫且蒸發溶劑以產生(R 及S )-1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼( 中間物 67 )。藉由對掌性SFC分離(Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.25% DEA改質劑)作為共溶劑)解析外消旋混合物以產生(R 或 S )-1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼作為第一溶離峰及(S 或 R )-1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼作為第二溶離峰，分別對應於中間物 67a 及中間物 67b 。LCMS (C10 H17 N5 O) (ES, m/z): 224 [M+H]+ 。
以與中間物 67 類似之方式製備下表9中之中間物 68 ，除了不進行SFC分離以外。因此，將化合物分離為異構體之混合物。表 9
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
68
Figure 02_image371
 296
1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-卡肼
中間物 69 ： (R )-3-( 肼羰基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸第三丁酯
Figure 02_image373
向100 mL圓底燒瓶中添加(R )-1-(第三丁氧羰基)吡咯啶-3-甲酸(2.00 g，9.29 mmol)及THF (18.6 mL)。向混合物中添加1,1'-羰基二咪唑(1.96 g，12.1 mmol)。將混合物在60℃下加熱30 min。將混合物冷卻至室溫且經25 min逐滴轉移至水合肼(0.447 g，13.9 mmol)於THF (10 mL)中之攪拌混合物中。將混合物在室溫下攪拌2 h。將混合物以水(50 mL)淬滅且以EtOAc (2 x 60 mL)萃取。將經合併之有機層經無水MgSO4 、乾燥過濾且蒸發濾液之溶劑以產生(R )-3-(肼羰基)吡咯啶-1-甲酸第三丁酯。LCMS (C10 H19 N3 O3 ) (ES, m/z): 230 [M+H]+ 。
以與製備中間物 60 類似之方式來製備下表9A中之中間物。表 9A
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
70
Figure 02_image375
 186 [M+H-C4 H8 ]+
1-(肼羰基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯
71
Figure 02_image377
 158
2-側氧基哌啶-3-卡肼
72
Figure 02_image379
 268 [M+Na]+
(R )-第三丁基 2-(肼羰基)嗎啉-4-甲酸酯
73
Figure 02_image381
 316 [M+Na]+
2-(肼羰基)硫代嗎啉-4-甲酸第三丁酯1,1-二氧化物
中間物 74 ： 3- 氟 -3-( 肼羰基 ) 哌啶 -1- 甲酸苄酯
Figure 02_image383
向水合肼(0.155 ml，7.11 mmol)、1-((苄氧基)羰基)-3-氟哌啶-3-甲酸(2.00 g，7.11 mmol)及DIPEA (5.02 ml，28.4 mmol)於DCM (70 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加三丙基膦酸酐(於EtOAc中之50% v/v溶液，6.38 ml，14.2 mmol)。將混合物在室溫下攪拌12 h。藉由添加飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅反應混合物。將混合物攪拌5 min、分離有機層、經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑以產生3-氟-3-(肼羰基)哌啶-1-甲酸苄酯。LCMS (C14 H18 FN3 O3 ) (ES, m/z): 296 [M+H]+ 。中間物 75 及中間物 76 ： (2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 甲酸第三丁酯及 (2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 甲酸第三丁酯
Figure 02_image385
向外消旋 , 順 -5-(肼羰基)-2-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(中間物 66 ) (5.00 g，19.4 mmol)於DCM (7 mL)中之溶液中添加AcOH (0.556 ml，9.72 mmol)。在室溫下攪拌混合物。向混合物中添加2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-4-甲氧基苯甲腈(中間物 37 )(6.63 g，19.4 mmol)。將混合物攪拌60 h。過濾混合物且將濾液直接負載至矽膠管柱上且以己烷中0-100%之EtOAc作為溶離劑純化以提供外消旋(2R ,5S 及2S ,5R )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯。藉由對掌性SFC (Chiral Technologies AD-H 50 x 250 mm管柱，以35% EtOH作為共溶劑)解析外消旋混合物以產生(2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(中間物 75 ，第一溶離峰)及(2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(中間物 76 ，第二溶離峰)。
以與中間物 75 及中間物 76 類似之方式，由適當中間物及起始材料來製備下表10中之中間物。表 10
中間物 結構 SFC 條件 觀測之m/z [M + H]+
名稱
77
Figure 02_image387
 峰1；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以50%之(IPA w/0.2% DIPA改質劑)作為共溶劑 565
(1R ,5R 或1S ,5S )-1-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯
78
Figure 02_image389
 峰2；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以50%之(IPA w/0.2% DIPA改質劑)作為共溶劑 565
(1S ,5S 或1R ,5R )-1-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯
中間物 79-81 ： (3S ,5R 或 3R ,5S )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁酯及 (3R ,5S 或 3S ,5R )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁酯及 (3R ,5R 及 3S ,5S )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁酯
Figure 02_image391
以與用於製備中間物 75 及中間物 76 類似之方式，由中間物 37 及中間物 58 來製備中間物 79-81 。藉由以己烷中0-100%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化粗殘餘物以產生(3S ,5R 及3R ,5S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(第一溶離峰，中間物 79 及中間物80 之混合物)及(3R ,5R 及3S ,5S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(第二溶離峰，中間物 81 )。對於中間物 81 而言：LCMS (C29 H34 F2 N6 O5 ) (ES, m/z): 585 [M+H]+ 。藉由對掌性SFC (Chiral Technologies AD-H 50 x 250 mm管柱，以35% MeOH作為共溶劑)解析中間物 79 與中間物 80 之混合物以產生(3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(中間物 79 ，第一溶離峰)及(3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(中間物 80 ，第二溶離峰)。對於中間物 79 而言：LCMS (C29 H34 F2 N6 O5 ) (ES, m/z): 585 [M+H]+ 。對於中間物 80 而言：LCMS (C29 H34 F2 N6 O5 ) (ES, m/z): 585 [M+H]+ 。中間物 82 ： (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-( 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺 步驟 1 ： (R )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯
Figure 02_image393
向40 mL小瓶中添加(R )-3-(肼羰基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(中間物 54 ) (596 mg，2.45 mmol)、DCM (7 mL)及AcOH (0.070 ml，1.2 mmol)。向混合物中添加2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-4-甲氧基苯甲腈(中間物 37 ) (836 mg，2.45 mmol)。將混合物攪拌16 h。將溶液負載至矽膠管柱上且以己烷中0-80%之EtOAc作為溶離劑純化以產生(R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯，LCMS (C29 H35 FN6 O5 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 567。步驟 2 ： (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-( 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image395
向20 mL小瓶中添加(R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.40 g，2.47 mmol)及甲酸(4 mL)。將溶液攪拌16 h。將混合物以DCM (50 mL)稀釋且以2 M碳酸鉀水溶液(75 mL)洗滌。將混合物以額外之DCM (50 mL)萃取。將經合併之有機層經硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑以產生(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 82 )。LCMS (C24 H27 FN6 O3 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 467。
以與用於製備中間物 82 類似之方式，由適當中間物及起始材料來合成下表11中之中間物。對於合成中間物 89 而言，無需對甲酸之去保護步驟(步驟2)。表 11
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
83
Figure 02_image397
 481
2-(氮雜環庚烷-3-基)-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
84
Figure 02_image399
 481
2-(氮雜環庚烷-3-基)-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
85
Figure 02_image401
 481
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(5-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
86
Figure 02_image403
 481
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(4-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
87
Figure 02_image405
 469
(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(嗎啉-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
88
Figure 02_image407
 517
2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)硫代嗎啉1,1-二氧化物
89
Figure 02_image409
 481
3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-2-酮
中間物 90 及中間物 91 ： (S 或 R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -2-(3- 氟哌啶 -3- 基 )-7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺及 (R 或 S )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -2-(3- 氟哌啶 -3- 基 )-7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺 步驟 1 ：外消旋 -3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸苄酯
Figure 02_image411
向外消旋 -3-氟-3-(肼羰基)哌啶-1-甲酸苄酯(中間物 74 ) (1.73 g，5.86 mmol)於DCM (25 mL)中之攪拌溶液中添加AcOH (0.201 ml，3.52 mmol)。將混合物在室溫下攪拌10 min。向混合物中添加2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-3-甲氧基苯甲腈(中間物 38 ) (2.00 g，5.86 mmol)。將混合物在40℃下攪拌且加熱16 h。將混合物冷卻至室溫。將混合物以DCM (100 mL)稀釋且隨後以飽和碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌。將有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以異己烷中之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生外消旋 -3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氟哌啶-1-甲酸苄酯。LCMS (C32 H32 F2 N6 O5 ) (ES, m/z): 619 [M+H]+ 。步驟 2 ： (S 或 R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -2-(3- 氟哌啶 -3- 基 )-7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺及 (R 或 S )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -2-(3- 氟哌啶 -3- 基 )-7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image413
向200 mL圓底燒瓶中饋入外消旋 -3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氟哌啶-1-甲酸苄酯(2.00 g，3.23 mmol)、10% Pd/C (800 mg，3.23 mmol)及MeOH (50 mL)。將混合物在氫氣氛下攪拌16 h。經Celite® (矽藻土)過濾混合物且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由以DCM中0-8%之MeOH (含有0.2% NH4 OH)作為溶離劑之矽膠層析純化以產生外消旋混合物，藉由對掌性SFC分離(Chiral Technologies, IC 20 x 250 mm管柱，以50%之(EtOH與0.2% DEA改質劑)作為共溶劑)解析外消旋混合物以產生(S 或R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-(3-氟哌啶-3-基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(第一溶離峰，中間物 90 )及(R 或S )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-(3-氟哌啶-3-基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(第二溶離峰，中間物 91 )。對於中間物 90 而言：LCMS (C24 H26 F2 N6 O3 ) (ES, m/z): 485 [M+H]+ 。對於中間物 91 而言：LCMS (C24 H26 F2 N6 O3 ) (ES, m/z): 485 [M+H]+ 。中間物 92 ： (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -7- 甲氧基 -2-( 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺 步驟 1 ： (R )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯
Figure 02_image415
向(R )-3-(肼羰基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(中間物 54 ) (1.52 g，6.25 mmol)於DCM (25 mL)中之溶液中添加AcOH (0.201 ml，3.52 mmol)。將混合物在室溫下攪拌10 min。向此混合物中添加2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-3-甲氧基苯甲腈(中間物 38 ) (2.00 g，5.86 mmol)。將混合物攪拌16 h。將混合物以DCM (100 mL)稀釋、以飽和碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌。將有機層經無水MgSO4 乾燥、藉由過濾移除固體且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由以異己烷中之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯。LCMS (C29 H35 FN6 O5 ) (ES, m/z): 567 [M+H]+ 。步驟 2 ： (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -7- 甲氧基 -2-( 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image417
向(R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.12 g，3.74 mmol)於DCM (30 mL)中之溶液中添加二噁烷中之4 M HCl (10 ml，40.0 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2 h。蒸發溶劑。將殘餘物藉由以DCM中0-8%之MeOH (含有0.2% NH4 OH)作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-7-甲氧基-2-(哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 92 )。LCMS (C24 H27 FN6 O3 ) (ES, m/z): 467 [M+H]+ 。
以與用於製備中間物 92 類似之方式，由適當中間物及起始材料來製備下表12中之中間物。表 12
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
93
Figure 02_image419
 453
(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(吡咯啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
94
Figure 02_image421
 471
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-(3-氟吡咯啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
以與製備中間物 92 之步驟2中所用類似之方式，由適當中間物及起始材料來製備下表12A中之中間物。表 12A
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
95  
Figure 02_image423
 481
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 或3S ,6R )-6-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
96  
Figure 02_image425
 481
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3S ,6R 或3R ,6S )-6-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
97
Figure 02_image427
 465
2-((1R ,5R 或1S ,5S )-3-氮雜雙環[3.1.0]己-1-基)-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
98
Figure 02_image429
 465
2-((1S ,5S 或1R ,5R )-3-氮雜雙環[3.1.0]己-1-基)-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
99  
Figure 02_image431
 485
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3R ,5S 或3S ,5R )-5-氟哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
100  
Figure 02_image433
 485
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3S ,5R 或3R ,5S )-5-氟哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
101
Figure 02_image435
 485
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3R ,5R 及3S ,5S )-5-氟哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
102  
Figure 02_image437
 485
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3R ,5S 及3S ,5R )-5-氟哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
103
Figure 02_image439
 485
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3R ,5R 及3S ,5S )-5-氟哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
中間物 104 ：外消旋 -N '-(2- 胺基 -6- 氟 -8- 甲氧基喹唑啉 -4- 基 )-1-(1- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 卡肼 步驟 1 ： 2- 胺基 -6- 氟 -8- 甲氧基喹唑啉 -4- 醇
Figure 02_image441
向2-胺基-5-氟-3-甲氧基苯甲酸(278 mg，1.50 mmol)於EtOH (1.5 mL)中之攪拌混合物中添加氰胺(158 mg，3.75 mmol)及鹽酸(325 µL，1.95 mmol) (6 M，水溶液)。將混合物在回流下加熱16 h。將混合物冷卻。藉由過濾收集沈澱物且在高真空下乾燥以產生2-胺基-6-氟-8-甲氧基喹唑啉-4-醇。LCMS (C9 H8 FN3 O2 ) (ES, m/z): 210 [M+H]+ 。步驟 2 ： 6- 氟 -8- 甲氧基 -4-(1H -1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 喹唑啉 -2- 胺
Figure 02_image443
在室溫下將POCl3 (295 µL，3.16 mmol)經15 min逐滴添加至1,2,4-三唑(524 mg，7.59 mmol)、2-胺基-6-氟-8-甲氧基喹唑啉-4-醇(264.7 mg，1.265 mmol)及DIPEA (553 µL，3.16 mmol)於乙腈(5 mL)中之攪拌混合物中。將混合物在40℃下攪拌且加熱3 h且隨後在室溫下攪拌16 h。將混合物經Celite® (矽藻土)過濾、以乙腈及乙醚洗滌以產生6-氟-8-甲氧基-4-(1H -1,2,4-三唑-1-基)喹唑啉-2-胺。LCMS (C11 H9 FN6 O) (ES, m/z): 261 [M+H]+ 。步驟 3 ：外消旋 -N '-(2- 胺基 -6- 氟 -8- 甲氧基喹唑啉 -4- 基 )-1-(1- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 卡肼
Figure 02_image445
向20 mL反應小瓶中饋入6-氟-8-甲氧基-4-(1H -1,2,4-三唑-1-基)喹唑啉-2-胺(41.1 mg，0.158 mmol)、(R 及S )-1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼(中間物 67 ) (38.8 mg，0.174 mmol)、THF (1 mL)及DIPEA (138 µL，0.790 mmol)。將混合物在50℃下攪拌且加熱4 h。將混合物以乙酸乙酯(10 mL)稀釋且以飽和碳酸氫鈉水溶液(20 mL)洗滌。將有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑以產生外消旋 -N '-(2-胺基-6-氟-8-甲氧基喹唑啉-4-基)-1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼。LCMS (C19 H23 FN8 O2 ) (ES, m/z): 415 [M+H]+ 。
以與中間物 104 類似之方式，由適當起始材料來製備下表13中之中間物，除了使用對映異構純之醯肼(中間物 67b )以外。表 13
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
105
Figure 02_image447
 403
(R 或S )-N '-(2-胺基-6,7-二氟喹唑啉-4-基)-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼
106
Figure 02_image449
 385
(R 或S )-N '-(2-胺基-6-氟喹唑啉-4-基)-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼
107
Figure 02_image451
 403
(R 或S )-N '-(2-胺基-6,8-二氟喹唑啉-4-基)-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼
108
Figure 02_image453
 403
(R 或S )-N '-(2-胺基-5,6-二氟喹唑啉-4-基)-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼
109
Figure 02_image455
 401
(R 或S )-N '-(2-胺基-6-氯喹唑啉-4-基)-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼
110
Figure 02_image457
 415
(R 或S )-N '-(2-胺基-6-氯-8-甲基喹唑啉-4-基)-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼
111
Figure 02_image459
 431
(R 或S )-N '-(2-胺基-6-氯-8-甲氧基喹唑啉-4-基)-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼
112
Figure 02_image461
 397
(R 或S )-N '-(2-胺基-6-甲氧基喹唑啉-4-基)-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼
中間物 113-116 ： 1-(4-((2R 或 2S ,5S 或 5R )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2S 或 2R ,5R 或 5S )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2S 或 2R ,5S 或 5R )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2R 或 2S ,5R 或 5S )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇 步驟 1 ： 3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-6- 乙基 -1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -2- 酮
Figure 02_image463
向6-乙基-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-2-側氧基哌啶-3-卡肼(中間物 64 ) (270 mg，0.835 mmol)於二噁烷(7 mL)中之溶液中添加AcOH (0.024 ml，0.42 mmol)。將混合物在室溫下攪拌30 min。向此混合物中添加2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-4-甲氧基苯甲腈(中間物 37 ) (285 mg，0.835 mmol)。將混合物在室溫下攪拌3天。過濾混合物且藉由以己烷中0-100%之3:1 EtOAc:EtOH作為溶離劑之矽膠層析純化濾液以產生3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-6-乙基-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)哌啶-2-酮。LCMS (C33 H39 FN8 O5 ) (ES, m/z): 647 [M+H]+ 。步驟 2 ： 1-(4-((2R 或 2S ,5S 或 5R )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2S 或 2R ,5R 或 5S )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2S 或 2R ,5S 或 5R )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2R 或 2S ,5R 或 5S )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image465
向3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-6-乙基-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-2-酮(320 mg，0.495 mmol)於THF (4.9 mL)中之溶液中添加THF中之硼烷(1.0 M，2.47 ml，2.47 mmol)。將混合物在室溫下攪拌24 h。將反應混合物以MeOH淬滅且隨後蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/水(含有0.1% TFA)作為溶離劑)純化以產生相應非對映異構體之兩種外消旋混合物。藉由對掌性SFC解析每種外消旋體。
藉由對掌性SFC分離(Chiral Technologies, AS-H, 21 x 250mm管柱，以50%之(IPA + 0.2% DIPA)作為共溶劑)解析第一溶離外消旋體以產生1-(4-((2R 或2S ,5S 或5R )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-乙基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(第一溶離峰)及1-(4-((2S 或2R ,5R 或5S )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-乙基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(第二溶離峰)，分別對應於中間物 113 及中間物 114 。對於中間物 113 而言：LCMS (C33 H41 FN8 O4 ) (ES, m/z): 634 [M+H]+ 。對於中間物 114 而言：LCMS (C33 H41 FN8 O4 ) (ES, m/z): 634 [M+H]+ 。
藉由對掌性SFC分離(AS-H，21 x 250mm管柱，以50% (IPA + 0.2% DIPA)作為共溶劑)解析第二溶離外消旋體以產生1-(4-((2S 或2R ,5S 或5R )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-乙基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(第一溶離峰)及1-(4-((2R 或2S ,5R 或5S )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-乙基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(第二溶離峰)，分別對應於中間物 115 及中間物 116 。對於中間物 115 而言：LCMS (C33 H41 FN8 O4 ) (ES, m/z): 634 [M+H]+ 。對於中間物 116 而言：LCMS (C33 H41 FN8 O4 ) (ES, m/z): 634 [M+H]+ 。中間物 117 ： (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(3- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺與 (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺之混合物 步驟 1 ： (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(5- 甲基 -1- 三苯甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺與 (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(3- 甲基 -1- 三苯甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺之混合物
Figure 02_image467
向20 mL微波小瓶中饋入(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 82 ) (500 mg，1.07 mmol)及THF (6.7 mL)。向混合物中添加4-溴-5-甲基-1-三苯甲基-1H -吡唑與4-溴-3-甲基-1-三苯甲基-1H -吡唑之混合物(中間物 16 ) (865 mg，2.14 mmol)，繼而添加tBuXPhos-Pd G3 (412 mg，4.29 mmol)及第三丁醇鈉(412 mg，4.29 mmol)。使氮氣鼓泡穿過混合物歷時10 min。將混合物在90℃下攪拌且加熱16 h。將混合物冷卻至室溫。向混合物中添加Celite® (矽藻土)及飽和NH4 Cl水溶液。將混合物劇烈攪拌5 min。將混合物經頂部覆有無水MgSO4 之Celite® (矽藻土)過濾且以DCM洗滌。蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由使用DCM中0-20%之MeOH之矽膠層析純化以產生(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(5-甲基-1-三苯甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺與(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(3-甲基-1-三苯甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺之混合物。LCMS (C47 H45 FN8 O3 ) (ES, m/z): 789 [M+H]+ 。步驟 2 ： (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(3- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺與 (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺之混合物
Figure 02_image469
向(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(3-甲基-1-三苯甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺與(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(5-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(565 mg，0.716 mmol)之混合物於MeOH (7.2 mL)中之攪拌溶液中添加HCl於二噁烷中之4 M溶液(1.79 ml，7.16 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1 h。蒸發溶劑且將殘餘物溶解於DCM (50 mL)中。向混合物中添加飽和碳酸氫鈉水溶液(50 mL)。將兩相混合物分離且以額外之DCM (50 mL)萃取含水層。將經合併之有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑以產生(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(3-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺與(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(5-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺之混合物。LCMS (C28 H31 FN8 O3 ) (ES, m/z): 547 [M+H]+ 。
以與用於製備中間物 117 類似之方式，由適當之起始材料來製備下表14中之中間物。表 14
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
118
Figure 02_image471
 533
(R )-2-(1-(1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
119
Figure 02_image473
 583
(R )-2-(1-(3-(二氟甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
中間物 120 及中間物 121 ： N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-((3R ,6S 或 3S ,6R )-6- 甲基 -1-(1-((1R ,2R 或 1S ,2S )-2-(( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環戊基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺及 N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-((3R ,6S 或 3S ,6R )-6- 甲基 -1-(1-((1S ,2S 或 1R ,2R )-2-(( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環戊基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image475
向含有N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 或3S ,6R )-6-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 95 ) (150 mg，0.312 mmol)於THF (4 mL)中之溶液之反應小瓶中添加4-溴-1-(2-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環戊基)-1H -吡唑(中間物 32 ) (177 mg，0.562 mmol)，繼而添加tBuXPhos-Pd G3 (124 mg，0.156 mmol)及第三丁醇鈉(105 mg，1.09 mmol)。向混合物中充氮氣歷時10 min。將混合物在90℃下攪拌且加熱16 h。向混合物中添加額外之4-溴-1-(2-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環戊基)-1H -吡唑(中間物 32 ) (88.5 mg，0.281 mmol)、tBuXPhos-Pd G3 (62 mg，0.078 mmol)及第三丁醇鈉(52.5 mg，0.547 mmol)。將混合物在90℃下攪拌且加熱16 h。將混合物藉由以DCM中4%之MeOH作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化以產生異構體混合物。藉由對掌性SFC分離(ID 21 x 250 mm管柱，以50% (MeOH w/ACN 1:1 +0.2% DIPA)作為共溶劑)解析混合物以產生N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 或3S ,6R )-6-甲基-1-(1-((1R ,2R 或1S ,2S )-2-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環戊基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(第一溶離峰，中間物 120 )及N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 或3S ,6R )-6-甲基-1-(1-((1S ,2S 或1R ,2R )-2-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環戊基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(第四溶離峰，中間物 121 )，分別對應於中間物 120 及中間物 121 。(註：峰2與3分離不良)。對於中間物 120 而言：LCMS (C38 H47 FN8 O5 ) (ES, m/z): 715 [M+H]+ 。對於中間物 121 而言：LCMS (C38 H47 FN8 O5 ) (ES, m/z): 715 [M+H]+ 。中間物 122 及中間物 123 ：1-(4-((3R ,5S 及 3R ,5S )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H- 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((3R ,5R 及 3S ,5S )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H- 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image477
在氮氣氛下在手套箱中向第三丁醇鈉(300 mg，3.12 mmol)、1-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 4 ) (274 mg，1.25 mmol)及N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(5-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 85 ) (300 mg，0.624 mmol)於THF (2 mL)中之攪拌混合物中添加tBuXPhos-Pd G3 (149 mg，0.187 mmol)。將混合物在100℃下攪拌且加熱14 h。將混合物藉由以DCM中10%之MeOH作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化以產生兩種非對映異構體：1-(4-((3R ,5S 及3R ,5S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇與1-(4-((3R ,5R 及3S ,5S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇，分別對應於中間物 122 及中間物 123 。對於中間物 122 而言，LCMS (C32 H39 FN8 O4 ) (ES, m/z): 619 [M+H]+ 。對於中間物 123 而言，LCMS (C32 H39 FN8 O4 ) (ES, m/z): 619 [M+H]+ 。中間物 124 ： (R )-5-(4-(3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 戊 -2- 酮
Figure 02_image479
向第三丁醇鈉(66.5 mg，0.692 mmol)、(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 82 ) (89.0 mg，0.190 mmol)、2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環丁醇(中間物 29 ) (40.0 mg，0.173 mmol)於THF (2 mL)中之攪拌混合物中添加tBuXPhos-Pd G3 (41.3 mg，0.0520 mmol)。將混合物在80℃下攪拌且加熱12 h。將混合物冷卻、以EtOAc (10 mL)稀釋且以水(10 mL)洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以EtOAc作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化，產生開環產物(R )-5-(4-(3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)戊-2-酮。LCMS (C32 H37 FN8 O4 ) (ES, m/z): 617 [M+H]+ 。中間物 125 ： 2-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 環丁 -1- 酮 步驟 1 ： N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-2-((3R )-1-(1-(2,2- 二甲氧基環丁基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image481
向第三丁醇鈉(177 mg，1.84 mmol)、(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 82 ) (236 mg，0.506 mmol)、4-溴-1-(2,2-二甲氧基環丁基)-1H -吡唑(中間物 30 ) (120 mg，0.460 mmol)於THF (4 mL)中之攪拌混合物中添加tBuXPhos-Pd G3 (110 mg，0.138 mmol)。在氮氣下將混合物在80℃下攪拌且加熱12 h。將混合物冷卻、以EtOAc (10 mL)稀釋且隨後以水(10 mL)洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。藉由以石油醚中0-100%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化殘餘物以產生N -(2,4-二甲氧基苄基)-2-((3R )-1-(1-(2,2-二甲氧基環丁基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺。LCMS (C33 H39 FN8 O5 ) (ES, m/z): 647 [M+H]+ 。步驟 2 ： 2-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 環丁 -1- 酮
Figure 02_image483
將N -(2,4-二甲氧基苄基)-2-((3R )-1-(1-(2,2-二甲氧基環丁基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(130 mg，0.201 mmol)與甲酸(2 mL)之混合物在40℃下攪拌且加熱15 h。將混合物冷卻且以飽和碳酸氫鈉水溶液調整至pH=8。將混合物以DCM (3 x 10 mL)萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由以EtOAc作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化以產生2-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)環丁-1-酮。LCMS (C22 H23 FN8 O2 ) (ES, m/z): 451 [M+H]+ 。中間物 126 及中間物 127 ：外消旋 -(1R 或 1S ,3R 或 3S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1- 乙基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇及外消旋 -(1S 或 1R ,3S 或 3R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1- 乙基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇 步驟 1 ： 3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 環己 -1- 醇
Figure 02_image485
向3-羥基環己烷卡肼(中間物 65 ) (0.556 g，3.52 mmol)於DCM (30 mL)中之攪拌混合物中添加AcOH (0.084 ml，1.5 mmol)。向溶液中添加2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-4-甲氧基苯甲腈(中間物 37 ) (1.00 g，2.93 mmol)。將混合物在35℃下攪拌且加熱10 h。將混合物濃縮。將所得殘餘物藉由以石油醚中10-50%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)環己醇。LCMS (C25 H28 FN5 O4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 482。步驟 2 ： 3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 環己 -1- 酮
Figure 02_image487
在0℃下向3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)環己醇(780 mg，1.62 mmol)於DCM (10 mL)中之攪拌溶液中添加DMP (1.37 g，3.24 mmol)。將混合物溫至室溫且攪拌3 h。將混合物以飽和碳酸氫鈉水溶液(5 mL)淬滅且過濾混合物。以EtOAc (3 x 10 mL)萃取濾液。將經合併之有機層以鹽水(30 mL)洗滌、經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由使用石油醚中10-50%之EtOAc之矽膠層析純化以產生3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)環己酮。LCMS (C25 H26 FN5 O4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 480。 步驟 3 ： 3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1- 乙基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇
Figure 02_image489
在-78℃下向4-溴-1-乙基-1H -吡唑(621 mg，3.55 mmol)於THF (3 mL)中之攪拌溶液中添加正丁基鋰(1.42 ml，3.55 mmol，2.5 M於己烷中)。將混合物在-78℃下攪拌20 min。在-78℃下向混合物中添加3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)環己酮(340 mg，0.709 mmol)於THF (3 mL)中之溶液且將混合物在此溫度下攪拌1 h。將混合物以飽和NH4 Cl水溶液(5 mL) 淬滅且以EtOAc (3 x 10 mL)萃取。將經合併之有機相以鹽水(20 mL)洗滌、經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由以石油醚中10-50%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-乙基-1H -吡唑-4-基)。LCMS (C30 H34 FN7 O4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 576。 步驟 4 ：外消旋 -(1R 或 1S ,3R 或 3S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1- 乙基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇及外消旋 -(1S 或 1R ,3S 或 3R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1- 乙基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇
Figure 02_image491
在0℃下向3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-乙基-1H -吡唑-4-基)環己醇(180 mg，0.313 mmol)於DCM (4 mL)及水(2 mL)中之溶液中逐份添加DDQ (106 mg，0.469 mmol)。將混合物在0℃下攪拌30 min。將混合物以DCM (10 mL)稀釋且以Na2 SO3 (2 M水溶液，5 mL)及鹽水(2 x 10 mL) 洗滌。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由逆相HPLC (Waters XBridge C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/水(w/10 mM NH4 HCO3 改質劑)作為溶離劑)純化以產生兩種非對映異構體外消旋 - (1R 或1S ,3R 或3S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-乙基-1H -吡唑-4-基)環己-1-醇及外消旋-(1S 或1R ,3S 或3R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-乙基-1H -吡唑-4-基)環己-1-醇，分別對應於中間物 126 及中間物 127 。對於中間物 126 而言：LCMS (C21 H24 FN7 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 426。對於中間物 127 而言：LCMS (C21 H24 FN7 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 426。中間物 128 ： (2S,3S 及 2R,3R )-3-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇
Figure 02_image493
向4-溴-1H -吡唑(2.00 g，13.6 mmol)及碳酸銫(13.3 g，40.8 mmol)於MeCN (20 mL)中之混合物中添加順 -2,3-二甲基環氧乙烷(2.38 ml，27.2 mmol)。將混合物在80℃下攪拌且加熱16 h。將混合物冷卻至室溫且藉由過濾移除固體。濃縮濾液且將殘餘物以DCM稀釋並以水及鹽水溶液洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥。將殘餘物藉由以己烷中0-100%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(2S,3S 及 2R,3R ) -3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇。LCMS (C7 H11 BrN2 O) (ES, m/z) [M+H]+ : 219, 221。
以與中間物 128 類似之方式，由適當起始材料來製備下表15中之中間物。表 15
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
129  
Figure 02_image495
 219, 221
外消旋 ,反 -3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
130  
Figure 02_image497
 233, 235
外消旋 ,順 -3-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
131  
Figure 02_image499
 233, 235
外消旋- 順 -3-(4-溴-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
132  
Figure 02_image501
 186
外消旋- 順 -3-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
133
Figure 02_image503
 202
外消旋 - 2-甲基-3-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丙烷-1,2-二醇
134
Figure 02_image505
 200
2-甲基-1-(5-甲基-4-硝基-1H -吡唑-1-基)丙-2-醇
135
Figure 02_image507
 200
2-甲基-1-(3-甲基-4-硝基-1H -吡唑-1-基)丙-2-醇
中間物 136 ： 3-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 丙酸乙酯
Figure 02_image509
向4-溴-1H -吡唑(0.500 g，3.40 mmol)於DMF (10 mL)中之攪拌混合物中添加K2 CO3 (1.18 g，8.50 mmol)及3-溴丙酸乙酯(0.924 g，5.10 mmol)。將混合物在60℃下攪拌且加熱8 h。將混合物以水(30 mL)稀釋、過濾且以EtOAc (2 x 30 mL)萃取濾液。將有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以石油醚中3-25%之EtOAc作為溶離劑之矽膠管柱層析純化以產生3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)丙酸乙酯。LCMS (C8 H11 BrN2 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 247, 249。
以與用於製備中間物 136 類似之方式，由適當吡唑及烷基鹵化物或甲磺酸酯來製備下表16中之中間物。表 16
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
137
Figure 02_image511
 231, 233
3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-酮
138
Figure 02_image513
 245, 247
3-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-酮
139
Figure 02_image515
 261, 263
2-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙酸甲酯
140
Figure 02_image517
 261, 263
2-(4-溴-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙酸甲酯
141
Figure 02_image519
 203, 205
2-(4-溴-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙酸甲酯
142
Figure 02_image521
 307 [M+Na]+
(2-甲基-1-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯
143
Figure 02_image523
 198
3-甲基-3-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丁-2-酮
144
Figure 02_image525
 -
2-甲基-2-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丙二酸二乙酯
中間物 145 ：外消旋 -1-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丁 -2- 醇
Figure 02_image527
在0℃下在氮氣氛下向1-(4-溴-1H -吡唑-1-基)丙-2-酮(中間物 141 ) (2.00 g，9.85 mmol)於Et2 O (22 mL)中之溶液中逐滴添加3 M乙基溴化鎂溶液(9.85 ml，29.6 mmol)。將溶液在0℃下攪拌1 h，隨後溫至室溫且攪拌15 h。將混合物以飽和氯化銨水溶液(50 mL)淬滅、以EtOAc (50 mL)及水(50 mL)稀釋。將含水層以EtOAc (3 x 100 mL)萃取。將經合併之有機層以鹽水(2 x 100 mL)洗滌、經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由逆相HPLC (含有0.05% TFA之MeCN/水)純化以產生外消旋 -1-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇。LCMS (C8 H13 BrN2 O) (ES, m/z) [M+H]+ : 233, 235。中間物 146 ： 1-((5- 甲基 -2- 苯基 -1,3- 二噁烷 -5- 基 ) 甲基 )-4- 硝基 -1H - 吡唑
Figure 02_image529
向(5-甲基-2-苯基-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(4.00 g，19.2 mmol)於THF (20 mL)中之溶液中添加4-硝基-1H -吡唑(2.61 g，23.1 mmol)、三苯基膦(10.1 g，38.4 mmol)。向混合物中緩慢添加於DCM (20 mL)中之DIAD (5.83 g，28.8 mmol)。將混合物在室溫下攪拌15 h。蒸發溶劑。將殘餘物藉由使用石油醚中0-30%之EtOAc之矽膠層析純化以產生1-((5-甲基-2-苯基-1,3-二噁烷-5-基)甲基)-4-硝基-1H -吡唑。LCMS (C15 H17 N3 O4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 304。
以與關於合成中間物 146 所述類似之方式，由適當吡唑及醇來製備下表17中之中間物。表 17
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
147
Figure 02_image531
 558 [2M+Na]+
4-硝基-1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丙基)甲基)-1H -吡唑
中間物 148 ：外消旋 -3-(4- 溴 -3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-3- 甲基丁 -2- 醇
Figure 02_image533
向3-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-酮(中間物 138 ) (1.27 g，5.18 mmol)於EtOH (25.9 ml)中之懸浮液中添加硼氫化鈉(0.588 g，15.5 mmol)。將混合物攪拌16 h。將混合物以EtOAc (50 mL)稀釋、以水(50 mL)及氫氧化鉀水溶液(1 M，20 mL)洗滌。將有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑以產生3-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇，其不經進一步純化即繼續進行。LCMS (C9 H15 BrN2 O) (ES, m/z) [M+H]+ : 247, 249。
以與關於製備中間物 148 所述類似之方式，由含有吡唑之適當酮或酯來製備下表18中之中間物。表 18
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
149
Figure 02_image535
 233, 235
2-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
150
Figure 02_image537
 233, 235
2-(4-溴-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
151
Figure 02_image539
 200
外消旋 - 3-甲基-3-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
152
Figure 02_image541
 202
4-硝基-1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丙基)甲基)-1H -吡唑
中間物 153 ： 4-(4- 溴 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丁 -2- 醇
Figure 02_image543
在15℃下在氮氣氛下向3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)丙酸乙酯(100 mg，0.405 mmol) (中間物 136 )於THF (4 mL)中之溶液中添加MeMgBr於乙醚中之3 M溶液(1.35 ml，4.05 mmol)。將混合物在15℃下攪拌1 h。將混合物在0℃下冷卻、以水(5 mL)稀釋、以EtOAc (2 x 5 mL)萃取。將有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以石油醚中25%之EtOAc作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化以產生4-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇。LCMS (C8 H13 BrN2 O) (ES, m/z) [M+H]+ : 233, 235。中間物 154 ： 4- 溴 -1-(( 外消旋 , 順 )-3-(( 外消旋 - 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 丁 -2- 基 )-1H - 吡唑
Figure 02_image545
向中間物 129 (9.40 g，42.9 mmol)於DCM (100 mL)中之溶液中添加3,4-二氫-2H -哌喃(19.6 ml，215 mmol)及PPTS (10.8 g，42.9 mmol)。將混合物在室溫下攪拌4 h。將混合物以DCM (15 mL)稀釋、以飽和NaHCO3 水溶液及鹽水溶液洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以己烷中0-100%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生外消旋 -4-溴-1-((2S ,3R )-3-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)丁-2-基)-1H -吡唑。LCMS (C12 H19 BrN2 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 303, 305。
以與關於合成中間物 154 所述類似之方式，由適當起始材料來製備下表19中之中間物。表 19
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
155
Figure 02_image547
 303, 305
外消旋 - 4-溴-1-(2-甲基-1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)丙-2-基)-1H -吡唑
中間物 156 ：外消旋 -3-(4- 胺基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-3- 甲基丁 -2- 醇
Figure 02_image549
向100 mL圓底燒瓶中饋入10% Pd/C (200 mg，0.188 mmol)、3-甲基-3-(4-硝基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇(中間物 151 ) (750 mg，3.76 mmol)及EtOH (31.4 mL)。藉由抽空且以氮氣回填三次使混合物脫氣。隨後將混合物抽空且由氣球回填氫氣。將混合物攪拌3 h。經Celite過濾混合物且蒸發濾液之溶劑以產生3-(4-胺基-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇。LCMS (C8 H15 N3 O) (ES, m/z) [M+H]+ : 170。
以與關於製備中間物 156 所述類似之方式，由適當硝基-吡唑來製備下表20中之中間物。表 20
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
157
Figure 02_image551
 255
(1-(4-胺基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯
158
Figure 02_image553
 -
2-(4-胺基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇
159
Figure 02_image555
 172
外消旋 - 3-(4-胺基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,2-二醇
160  
Figure 02_image557
 156
外消旋, 順 --3-(4-胺基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
161
Figure 02_image559
 238
外消旋- 1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丙基)甲基)-1H -吡唑-4-胺
162
Figure 02_image561
 274
1-((5-甲基-2-苯基-1,3-二噁烷-5-基)甲基)-1H -吡唑-4-胺
163
Figure 02_image563
 170
1-(4-胺基-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
164
Figure 02_image565
 170
1-(4-胺基-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
中間物 165 ： (1-(4-((2S ,5R 及 2R,5S )-5-( 肼羰基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯
Figure 02_image567
步驟 1 ： (3R ,6S 及 3S,6R )-1-(1-(2-(( 第三丁氧羰基 ) 胺基 )-2- 甲基丙基 )-1H - 吡唑 -4- 基 )-6- 甲基哌啶 -3- 甲酸甲酯
向20 mL小瓶中添加(1-(4-胺基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(中間物 157 ) (85.0 mg，0.334 mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(106 mg，0.501 mmol)及DCE (1.5 mL)。攪拌混合物。向混合物中添加2-亞甲基-5-側氧基己酸甲酯(0.063 ml，0.40 mmol)。20分鐘後，向混合物中添加1 M KOH水溶液(3 mL)、水(3 mL)及DCM (3 mL)。以相分離器收集有機層。蒸發溶劑。將所得殘餘物溶解於MeOH (1 mL)及水(0.4 mL)中。將混合物在室溫下攪拌72 h。向混合物中添加水(20 mL)。將混合物以DCM (2 x 20 mL)萃取。將經合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以己烷中0-100%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(3R ,6S 及 3S,6R )-1-(1-(2-((第三丁氧羰基)胺基)-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-甲酸甲酯。LCMS (C20 H34 N4 O4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 395。步驟 2 ： (1-(4-((2S ,5R 及 2R,5S )-5-( 肼羰基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯
向20 mL小瓶中添加(3R ,6S 及 3S,6R )-1-(1-(2-((第三丁氧羰基)胺基)-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-甲酸甲酯(99.1 mg，0.251 mmol)、EtOH (1 mL)及水合肼(0.175 ml，3.77 mmol)。將混合物在90℃下加熱16 h。蒸發溶劑以產生(1-(4-((2S ,5R 及 2R,5S )-5-( 肼羰基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 基 ) 胺基甲酸第三丁酯 。LCMS (C19 H34 N6 O3 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 395。
以與關於製備中間物 165 所述類似之方式，由適當胺基-吡唑來製備下表21中之中間物。表 21
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
166
Figure 02_image569
 312
1-(1-(1,3-二羥基-2-甲基丙-2-基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-卡肼
167
Figure 02_image571
 312
1-(1-(2,3-二羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-卡肼
168
Figure 02_image573
 414
6-甲基-1-(1-((5-甲基-2-苯基-1,3-二噁烷-5-基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼
169
Figure 02_image575
 378
6-甲基-1-(1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丙基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼
170
Figure 02_image577
 224
(3R ,6S 及3S,6R )-6-甲基-1-(1H -吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼
中間物 171 ： 1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 )-5- 甲基哌啶 -3- 卡肼
Figure 02_image579
步驟 1 ： 4- 甲基 -2- 亞甲基 -5- 側氧基戊酸甲酯
將2-(溴甲基)丙烯酸甲酯(6.04 ml，50.3 mmol)及DMAP (6.76 g，55.3 mmol)於DCM (201 mL)中之溶液在室溫下攪拌30分鐘。向混合物中添加丙醛(5.41 ml，75 mmol)及L-脯胺酸(5.79 g，50.3 mmol)。將混合物在23℃下攪拌48小時。將混合物以水(200 mL)、1 M HCl水溶液(100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌。將有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以DCM中0-2.5%之MeOH作為溶離劑之矽膠層析純化以產生4-甲基-2-亞甲基-5-側氧基戊酸甲酯。步驟 2 ： (3R ,5R 及 3S,5S )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 )-5- 甲基哌啶 -3- 甲酸甲酯
將1-(4-胺基-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 163 ) (1.43 g，8.45 mmol)溶解於MeOH (25.6 mL)中。向混合物中添加三乙醯氧基硼氫化鈉(6.51 g，30.7 mmol)，繼而添加4-甲基-2-亞甲基-5-側氧基戊酸甲酯(1.20 ml，7.68 mmol)。將混合物攪拌5 min (直至三乙醯氧基硼氫化鈉進入溶液)。將混合物以1 M氫氧化鈉水溶液(30.7 ml，30.7 mmol)淬滅且使其攪拌48 h。將MeOH蒸發且向混合物中添加DCM (30 mL)。分離各層且將DCM層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由使用DCM中0-10%之MeOH之矽膠層析純化以產生(3R ,5R 及 3S,5S )- 1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-5-甲基-1H -吡唑-4-基)-5-甲基哌啶-3-甲酸甲酯。LCMS (C16 H27 N3 O3 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 310。步驟 3 ： (3S ,5R 及 3R,5S )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 )-5- 甲基哌啶 -3- 甲酸甲酯與 (3R ,5R 及 3S,5S )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 )-5- 甲基哌啶 -3- 甲酸甲酯之混合物
將(3R ,5R 及 3S,5S )- 1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-5-甲基-1H -吡唑-4-基)-5-甲基哌啶-3-甲酸甲酯(1.39 g，4.49 mmol)在60℃下在含有第三丁醇鉀(1.01 g，8.98 mmol)之MeOH (35.9 ml)中攪拌18 h。將混合物冷卻至室溫且蒸發溶劑。將所得殘餘物溶解於DCM中且以飽和NH4 Cl水溶液淬滅。使用Biotage Isolute®相分離器分離各層且將DCM層濃縮。將所得殘餘物藉由使用DCM中0-10%之MeOH之矽膠層析純化以產生(3S ,5R 及 3R,5S )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 )-5- 甲基哌啶 -3- 甲酸甲酯與 (3R ,5R 及 3S,5S )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 )-5- 甲基哌啶 -3- 甲酸甲酯 之混合物。LCMS (C16 H27 N3 O3 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 310。步驟 4 ： (3R ,5S 及 3S,5R )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-5- 甲基哌啶 -3- 卡肼及 (3R ,5R 及 3S,5S )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-5- 甲基哌啶 -3- 卡肼
向步驟3之產物(1.18 g，3.81 mmol)於乙醇(15.3 mL)中之溶液中添加水合肼(1.87 ml，38.1 mmol)。將混合物在80℃下攪拌且加熱16 h。將混合物冷卻至室溫且蒸發溶劑以產生(3R ,5S 及 3S,5R )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-5- 甲基哌啶 -3- 卡肼與 (3R ,5R 及 3S,5S )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-5- 甲基哌啶 -3- 卡肼 。LCMS (C15 H27 N5 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 310。中間物 172 及中間物 173 ： N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-((3R ,5S 及 3S,5R )-5- 甲基哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺及 N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-((3S ,5S 及 3R,5R )-5- 甲基哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image581
使N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(5-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 85 ) (2.52 g，5.24 mmol)經受對掌性SFC分離(Phenomenex Lux-3 21 x 250 mm管柱，以20% MeOH (w/0.1% NH4 OH)作為共溶劑)以產生外消旋 -N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,5S )-5-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(峰2與3之組合)及外消旋 -N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3S ,5S )-5-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(峰1與4之組合)。LCMS (C25 H29 FN6 O3 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 481。中間物 174 及中間物 175 ： N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-7,9- 二氟 -2-((3R ,5S 及 3S ,5R )-5- 甲基哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺及 N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-7,9- 二氟 -2-((3S ,5S 及 3R,5R )-5- 甲基哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image583
步驟 1 ： (3R ,5S 及 3S,5R )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-7,9- 二氟 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 甲基哌啶 -1- 甲酸第三丁酯及 (3S ,5S 及 3R,5R )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-7,9- 二氟 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 甲基哌啶 -1- 甲酸第三丁酯
向100 mL圓底燒瓶中添加3-(肼羰基)-5-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(中間物 56 ) (1.56 g，6.07 mmol)、1,4-二噁烷(20 mL)及乙酸(0.174 ml，3.04 mmol)。攪拌混合物。向此攪拌混合物中添加2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-3,5-二氟苯甲腈(中間物 41 ) (2.00 g，6.07 mmol)。將混合物在75℃下攪拌16 h。將混合物藉由以己烷中0-50%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(3R ,5S 及 3S,5R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(第一溶離)及(3S ,5S 及 3R,5R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(第二溶離)。LCMS (C29 H34 F2 N6 O4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 569。步驟 2 ： N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-7,9- 二氟 -2-((3R ,5S 及 3S,5R )-5- 甲基哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺及 N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-7,9- 二氟 -2-((3S ,5S 及 3R,5R )-5- 甲基哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
以與合成中間物 82 類似之方式，以甲酸將來自步驟1之(3R ,5S 及 3S,5R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯及(3S ,5S 及 3R,5R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-甲酸第三丁基酯轉化為N -(2,4-二甲氧基苄基)-7,9-二氟-2-((3R ,5S 及 3S,5R )-5-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 174 )及4N -(2,4-二甲氧基苄基)-7,9-二氟-2-((3S ,5S 及 3R,5R )-5-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 175 ) (LCMS (C24 H26 F2 N6 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 469)。
以與關於合成中間物 174 所述類似之方式，由適當醯肼及碳化二亞胺來製備下表22中之中間物。表 22
中間物 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
176  
Figure 02_image585
 481
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-7-甲氧基-2-((3R ,5S 及3S,5R )-5-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
177  
Figure 02_image587
 547
N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 及3S,6R )-6-甲基-1-(1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
中間物 178 ： (R )-8-( 二氟甲氧基 )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -2-( 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺 步驟 1 ： 2- 胺基 -4-( 二氟甲氧基 )-5- 氟苯甲腈
Figure 02_image589
向2-溴-5-(二氟甲氧基)-4-氟苯胺(1.40 g，5.47 mmol)及氰化鋅(1.28 g，10.9 mmol)於NMP (4 mL)中之混合物中添加雙(三-第三丁基膦)鈀(0) (0.699 g，1.37 mmol)。將混合物在氮氣下在160℃微波反應器下攪拌且加熱1 h。將混合物冷卻至室溫。向混合物中添加鹽水(60 mL)且將混合物以石油醚:乙酸乙酯(3:1) (3 x 25 mL)萃取，將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由使用石油醚中25%之EtOAc之矽膠層析純化以產生2-胺基-4-(二氟甲氧基)-5-氟苯甲腈。步驟 2 ： (2- 氰基 -5-( 二氟甲氧基 )-4- 氟苯基 ) 胺基甲酸甲酯
Figure 02_image591
在氮氣氛下，將2-胺基-4-(二氟甲氧基)-5-氟苯甲腈(500 mg，2.47 mmol)於氯甲酸甲酯(3.04 g，32.2 mmol)中之溶液在75℃下攪拌且加熱15 h。將混合物冷卻、以水(10 mL)稀釋、以EtOAc (3 x 20 mL)萃取、經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由矽膠層析純化以產生(2-氰基-5-(二氟甲氧基)-4-氟苯基)胺基甲酸甲酯。步驟 3 ： (R )--3-(8-( 二氟甲氧基 )-9- 氟 -5- 羥基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯
Figure 02_image593
向(2-氰基-5-(二氟甲氧基)-4-氟苯基)胺基甲酸甲酯(400 mg，1.537 mmol)於NMP (4 mL)中之溶液中添加(R )-3-(肼羰基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(411 mg，1.691 mmol) (中間物 54 )。將混合物在170℃下攪拌且加熱30 min。將混合物冷卻、以水(30 mL)稀釋且以EtOAc (3 x 30 mL)萃取。將經合併之有機萃取物經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以己烷中0-30%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(R )-3-(8-(二氟甲氧基)-9-氟-5-羥基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯。LCMS (C20 H22 F3 N5 O4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 454。步驟 4 ： 3-(8-( 二氟甲氧基 )-5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯
Figure 02_image595
在90℃下在氮氣氛下向3-(8-(二氟甲氧基)-9-氟-5-羥基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.00 g，2.21 mmol)於MeCN (10 mL)中之溶液中添加DBU (0.831 ml，5.51 mmol)、PyBroP (1.34 g，2.87 mmol)及(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(0.553 g，3.31 mmol)。將混合物在90℃下攪拌12 h。蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以己烷中0-50%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生3-(8-(二氟甲氧基)-5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯。LCMS (C29 H33 F3 N6 O5 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 603。步驟 5 ： (R )-8-( 二氟甲氧基 )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -2-( 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image597
在15℃下在氮氣氛下向3-(8-(二氟甲氧基)-5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(700 mg，1.16 mmol)於DCM (7 mL)中之溶液中添加TFA (0.7 mL)。將混合物在15℃下攪拌2 h。將混合物冷卻、以NaHCO3 (15 mL)稀釋、以DCM (3 x 20 mL)萃取、經無水Na2 SO4 乾燥且蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以石油醚中0-50%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(R )-8-(二氟甲氧基)-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-(哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺。LCMS (C24 H25 F3 N6 O3 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 503。實例 1 ： (R )-1-(3-(3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H -1,2,4- 三唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image599
向5 mL微波小瓶中饋入(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 82 ) (100 mg，0.214 mmol)、tBuXPhos-Pd G3 (68.1 mg，0.086 mmol)及第三丁醇鈉(82 mg，0.86 mmol)。向混合物中添加於THF (1.4 mL)中之1-(3-溴-1H -1,2,4-三唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 2 ) (94 mg，0.429 mmol)。向混合物中充氮氣歷時10 min。將混合物在90℃下攪拌且加熱16 h。將混合物冷卻至室溫且藉由過濾移除固體並以DCM洗滌。蒸發濾液之溶劑。向所得殘餘物中添加TFA (0.5 mL)。將混合物在50℃下攪拌且加熱3 h。將混合物冷卻至室溫且蒸發溶劑。將殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以含有0.1% TFA之MeCN/H2 O作為溶離劑)純化以產生(R )-1-(3-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -1,2,4-三唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇。LCMS (C21 H26 FN9 O2 ) (ES, m/z): 458 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.17 (s, 1H), 7.89 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 7.81 (s, 2H), 7.19 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.97 (s, 4H), 3.91 (s, 2H), 3.15 (ddt, J = 10.9, 6.7, 3.4 Hz, 1H), 3.11 – 3.04 (m, 1H), 2.86 (td, J = 12.5, 2.7 Hz, 1H), 2.23 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 1.92 – 1.77 (m, 2H), 1.75 – 1.63 (m, 1H), 1.10 (d, J = 2.4 Hz, 6H)。
以與關於實例 1 所述類似之方式，由適當起始芳基鹵化物及胺中間物來製備下表15中之本發明之實例化合物。表 15
實例 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
2
Figure 02_image601
 397
(R )-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
3
Figure 02_image603
 439
(R )-2-(1-(1-(第三丁基 )-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
4
Figure 02_image605
 425
(R )-9-氟-2-(1-(1-異丙基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
5
Figure 02_image607
 465
(R )-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
6
Figure 02_image609
 398
(R )-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(1-甲基-1H -1,2,3-三唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
7
Figure 02_image611
 455
(R )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
8
Figure 02_image613
 469
(R )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
9
Figure 02_image615
 469
(R )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
10
Figure 02_image617
 467
(R )-1-((4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇
11
Figure 02_image619
 469
(R )-2-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
12
Figure 02_image621
 469
(S 或 R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
13
Figure 02_image623
 469
(R 或 S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
14
Figure 02_image625
 467
(1s ,3s )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環丁-1-醇
15
Figure 02_image627
 467
(R )-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(1-((3-甲基氧雜環丁烷-3-基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
16
Figure 02_image629
 481
(R )-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(5-甲基-1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
17
Figure 02_image631
 481
(R )-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(3-甲基-1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
18
Figure 02_image633
 517
(R )-2-(1-(5-(二氟甲基)-1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
19
Figure 02_image635
 517
(R )-2-(1-(3-(二氟甲基)-1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
20
Figure 02_image637
 441
(R )-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1-乙基-1H -吡唑-3-基)甲醇
21
Figure 02_image639
 495
(R )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-3-環丙基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
22
Figure 02_image641
 460
(R )-2-(1-(6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)哌啶-3-基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
23
Figure 02_image643
 452
(R )-9-氟-2-(1-(6-異丙氧基吡啶-3-基)哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
24  
Figure 02_image645
 474
(R )-2-(1-(6-(二氟甲氧基)-5-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
25
Figure 02_image647
 474
(R )-5-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1-(二氟甲基)-3-甲基吡啶-2(1H )-酮
26
Figure 02_image649
 424
(R )-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
27
Figure 02_image651
 470
(R )-1-(3-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-1H -1,2,4-三唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
28
Figure 02_image653
 455
(R )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
29
Figure 02_image655
 469
(R )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
30
Figure 02_image657
 469
(R )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
31
Figure 02_image659
 467
(R )-1-((4-(3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇
32
Figure 02_image661
 455
(R )-2-(4-(3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
33  
Figure 02_image663
 460
(R )-2-(1-(6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)哌啶-3-基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
34
Figure 02_image665
 424
(R )-9-氟-7-甲氧基-2-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
35
Figure 02_image667
 452
(R )-9-氟-2-(1-(6-異丙氧基吡啶-3-基)哌啶-3-基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
36
Figure 02_image669
 456
(R )-1-(3-(3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -1,2,4-三唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
37
Figure 02_image671
 470
(R )-1-(3-(3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-1H -1,2,4-三唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
38
Figure 02_image673
 453
(R )-1-((4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)吡咯啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇
39
Figure 02_image675
 469
外消旋 - 1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)氮雜環庚烷-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
實例 40 ： 1-((4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇 步驟 1 ： N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-((3R ,6S 或 3S,6R )-6- 甲基 -1-(1-((1-(((RS )- 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環丁基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image677
向含有N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 或3S,6R )-6-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 95 ) (600 mg，1.25 mmol)於THF (12 ml)中之溶液之反應小瓶中添加外消旋 - 4-溴-1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑(中間物 23 ) (590 mg，1.87 mmol)，繼而添加tBuXPhos-Pd G3 (298 mg，0.375 mmol)及第三丁醇鈉(420 mg，4.37 mmol)。使氮氣鼓泡穿過混合物歷時10 min。將混合物在90℃下攪拌且加熱4 h。將混合物冷卻至室溫。向混合物中添加額外之tBuXPhos-Pd G3 (149 mg，0.188 mmol)，繼而添加第三丁醇鈉(210 mg，2.19 mmol)。使氮氣鼓泡穿過混合物再歷時10 min。將混合物在90℃下攪拌且加熱18 h。將混合物冷卻至室溫且隨後蒸發溶劑。將殘餘物分配於DCM與水之間。將有機層以鹽水洗滌、經無水MgSO4 乾燥且藉由過濾移除固體。濃縮濾液。將所得殘餘物藉由以己烷中0-40%之EtOAc:EtOH (3:1)作為溶離劑之矽膠層析純化。將獲得之殘餘物藉由以DCM中4%之MeOH作為溶離劑之製備性矽膠TLC進一步純化以產生N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 或3S,6R )-6-甲基-1-(1-((1-(((RS )-四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺。LCMS (C38 H47 FN8 O5 ) (ES, m/z): 715 [M+H]+ 。步驟 2 ： 1-((4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H- 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇
Figure 02_image679
向反應小瓶中添加N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 或3S,6R )-6-甲基-1-(1-((1-(((RS )-四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(1.40 g，2.22 mmol)及TFA (1.65 ml，22.2 mmol)。將混合物在60℃下攪拌且加熱1 h。將混合物冷卻至室溫且隨後蒸發溶劑。將殘餘物藉由以DCM中6%之(7 M於MeOH中之氨溶液)作為溶離劑之矽膠層析純化以產生1-((4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇(實例 40 )。LCMS (C24 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 481 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 7.87 (d,J = 10.9 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.15 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 4.14 (s, 2H), 3.99 (s, 3H), 3.73 (d,J = 4.9 Hz, 1H), 3.47 (d,J = 9.2 Hz, 1H), 3.36 – 3.20 (m, 3H), 2.11 (d,J = 7.9 Hz, 3H), 2.02 (p,J = 10.7, 9.6 Hz, 2H), 1.89 – 1.69 (m, 2H), 1.55 (dq,J = 19.0, 9.6 Hz, 1H), 1.37 – 1.20 (m, 2H), 1.12 (d,J = 6.6 Hz, 3H), 0.96 – 0.82 (m, 2H)。
以與關於製備實例 40 所述類似之方式，由適當起始芳基鹵化物及中間物 95 來製備下表16中之本發明之實例化合物。表 16
實例 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
41  
Figure 02_image681
 483
1-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
42  
Figure 02_image683
 483
1-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
43  
Figure 02_image685
 497
3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2,3-二甲基丁-2-醇
44  
Figure 02_image687
 481
9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 或3S,6R )-6-甲基-1-(1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
45  
Figure 02_image689
 495
9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 或3S,6R )-6-甲基-1-(5-甲基-1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
46  
Figure 02_image691
 495
9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 或3S,6R )-6-甲基-1-(3-甲基-1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
47  
Figure 02_image693
 499
9-氟-2-((3R ,6S 或3S,6R )-1-(1-((3-(氟甲基)氧雜環丁烷-3-基)甲基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
實例 48 及實例 49 ： (R 或 S )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丁 -2- 醇及 (S 或 R )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丁 -2- 醇 步驟 1 ： (R 或 S )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丁 -2- 醇及 (S 或 R )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丁 -2- 醇
Figure 02_image695
以與關於合成實例 40 之步驟1所述類似之方式，由中間物 95 及中間物 1 來進行合成實例 48 及實例 49 之步驟1。將所得非對映異構體混合物藉由SFC (Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以55%之(IPA + 0.2% DIPA)作為共溶劑)純化以產生對應於(R 或S )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇與(S 或R )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇之峰1及峰2。對於峰1而言，LCMS (C33 H41 FN8 O4 ) (ES, m/z): 633 [M+H]+ 。對於峰2而言，LCMS (C33 H41 FN8 O4 ) (ES, m/z): 633 [M+H]+ 。步驟 2 ： (R 或 S )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丁 -2- 醇及 (S 或 R )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丁 -2- 醇
Figure 02_image697
以與關於實例 40 之步驟2所述類似之方式來進行合成實例 48 及實例 49 之步驟2，其中峰1轉化為(R 或S )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇(實例 48 )且峰2轉化為(S 或R )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇(實例 49 )。
對於實例 48 而言：LCMS (C24 H31 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ 7.99 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.15 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.74 (s, 2H), 4.14 (s, 1H), 4.02 (m, 1 H), 4.00 (s, 3H), 3.74 (m, 1H), 3.49 (s, 1H), 3.45 (dd, J = 11.6, 3.8 Hz, 1H), 3.32 (dd, J = 11.3, 4.0 Hz, 1H), 3.20 (t, J = 11.3 Hz, 1H), 2.18 – 2.00 (m, 3H), 1.78 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 1.52 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.14 (s, 3H), 1.11 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 1.01 (s, 3H)。
對於實例 49 而言：LCMS (C24 H31 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ 7.99 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.15 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.78 (s, 2H), 4.18 (s, 1H), 4.03 (m, 1 H), 4.00 (s, 4H), 3.74 (m, 1H), 3.49 (s, 1H), 3.44 (dd, J = 11.6, 3.9 Hz, 1H), 3.33 (dd, J = 11.0, 4.2 Hz, 1H), 3.21 (t, J = 11.3 Hz, 1H), 2.18 – 2.00 (m, 3H), 1.78 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 1.52 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.14 (s, 3 H), 1.11(m, J = 6.9 Hz, 3H), 1.02 (s, 3H)。實例 50 及實例 51 ： 1-((4-((2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇及 1-((4-((2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇 步驟 1 ： N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-((3S ,6R 或 3R ,6S )-6- 甲基 -1-(3- 甲基 -1-((1-(((RS )- 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環丁基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺及 N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-((3S ,6R 或 3R ,6S )-6- 甲基 -1-(5- 甲基 -1-((1-(((RS )- 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環丁基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image699
向反應小瓶中添加N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3S ,6R 或3R ,6S )-6-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 96 ) (240 mg，0.499 mmol，tBuXPhos-Pd G3 (119 mg，0.150 mmol)、外消旋 -4-溴-3-甲基-1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑(中間物 31 ) (329 mg，0.999 mmol)、第三丁醇鈉(288 mg，3.00 mmol)及THF (5 mL)。向混合物中充氮氣歷時5 min。將混合物在100℃下攪拌且加熱19 h。蒸發溶劑且將殘餘物藉由以DCM中4%之(7 M於MeOH中之氨)作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化以產生N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3S ,6R 或3R ,6S )-6-甲基-1-(3-甲基-1-((1-(((RS )-四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺與N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3S ,6R 或3R ,6S )-6-甲基-1-(5-甲基-1-((1-(((RS )-四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺之混合物。步驟 2 ： 1-((4-((2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇及 1-((4-((2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇
Figure 02_image701
向N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3S ,6R 或3R ,6S )-6-甲基-1-(3-甲基-1-((1-(((RS )-四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺與N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3S ,6R 或3R ,6S )-6-甲基-1-(5-甲基-1-((1-(((RS )-四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺之混合物(12.0 mg，0.0186 mmol)中添加TFA (2 mL)。將混合物在60℃下攪拌且加熱1 h。將混合物冷卻至室溫。將混合物濃縮且將殘餘物藉由以DCM中4%之(7 M於MeOH中之氨)作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化，繼而藉由逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/水w/0.1% TFA改質劑作為溶離劑)純化以產生1-((4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇(實例 50 )及1-((4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇(實例 51 )。
對於實例 50 而言：LCMS (C25 H31 FN8 O2 ) (ES, m/z): 495 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 8.02 (s, 1H), 7.95 (d,J = 10.8 Hz, 1H), 7.26 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 4.22 (s, 2H), 4.18 (d,J = 12.9 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.91 (s, 2H), 3.74 (s, 1H), 3.57 – 3.43 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.36 – 2.26 (m, 1H), 2.22 – 2.12 (m, 3H), 2.04 (q,J = 9.7 Hz, 3H), 1.84 – 1.73 (m, 1H), 1.68 – 1.58 (m, 1H), 1.27 (d,J = 6.5 Hz, 3H)。
對於實例 51 而言：LCMS (C25 H31 FN8 O2 ) (ES, m/z): 495 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 7.98 – 7.91 (m, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.26 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 4.27 (s, 2 H), 4.03 (s, 3H), 3.96 (d,J = 11.8 Hz, 2H), 3.76 (d,J = 20.2 Hz, 1H), 2.61 (s, 2H), 2.45 (d,J = 15.4 Hz, 2H), 2.40 – 2.29 (m, 2H), 2.26 (s, 1H), 2.15 (d,J = 10.4 Hz, 3H), 2.11 – 1.97 (m, 3H), 1.89 – 1.74 (m, 1H), 1.75 – 1.58 (m, 1H), 1.28 (d,J = 6.6 Hz, 3H)。
以與關於實例 50 及實例 51 所述類似之方式，由適當起始芳基鹵化物及中間物 96 來製備下表17中之本發明之實例化合物。表 17
實例 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
52  
Figure 02_image703
 483
1-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
53  
Figure 02_image705
 483
1-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
實例 54 ： 1-((4-((3R ,5S 或 3S ,5R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇 步驟 1 ： N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -2-((3R ,5S 或 3S ,5R )-5- 氟 -1-(1-((1-(( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環丁基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image707
向含有N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3R ,5S 或3S ,5R )-5-氟哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 99 ) (80.0 mg，0.165 mmol)於THF (1.5 mL)中之溶液之反應小瓶中添加4-溴-1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑(中間物 23 ) (83.0 mg，0.260 mmol)，繼而添加tBuXPhos-Pd G3 (39.3 mg，0.0500 mmol)及第三丁醇鈉(47.6 mg，0.495 mmol)。將混合物以氮氣沖洗10 min。將混合物在90℃下攪拌且加熱2 h。蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以己烷中0-40%之EtOAc:EtOH (3:1)作為溶離劑之矽膠層析純化以產生N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3R ,5S 或3S ,5R )-5-氟-1-(1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺。LCMS (C37 H44 F2 N8 O5 ) (ES, m/z): 719 [M+H]+ 。步驟 2 ： 1-((4-((3R ,5S 或 3S ,5R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇
Figure 02_image709
將N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3R ,5S 或3S ,5R )-5-氟-1-(1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(105 mg，0.146 mmol)於TFA (1.2 mL)中之混合物在60℃下攪拌且加熱1 h。將混合物濃縮。將殘餘物藉由以DCM中5%之(7 M於MeOH中之氨)作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化以產生1-((4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇。LCMS (C23 H26 F2 N8 O2 ) (ES, m/z): 485 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ 7.96 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.15 (t,J = 3.8 Hz, 2H), 5.91 (s, 2H), 4.90 (dtt,J = 48.1, 9.9, 4.7 Hz, 1H), 4.13 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.74 – 3.64 (m, 2H), 3.42 (d,J = 12.6 Hz, 1H), 2.86 (t,J = 11.4 Hz, 1H), 2.71 (dq,J = 10.3, 7.2, 5.2 Hz, 2H), 2.17 – 1.92 (m, 3H), 1.88 – 1.73 (m, 2H), 1.57 (dq,J = 18.2, 9.1 Hz, 2H)。
以與關於製備實例 54 所述類似之方式，由適當起始芳基鹵化物及中間物 99 來製備下表18中之本發明之實例化合物。表 18
實例 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
55
Figure 02_image711
 473
1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
56  
Figure 02_image713
 485
9-氟-2-((3R ,5S 或3S ,5R )-5-氟-1-(1-(四氫-2H-哌喃-4-基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
實例 57 ： 1-((4-((1R ,5R 或 1S ,5S )-1-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己 -3- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇 步驟 1 ： N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-((1R ,5R 或 1S ,5S )-3-(1-((1-(( 四氫 -2H - 哌喃 -2- 基 ) 氧基 ) 環丁基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 -4- 基 )-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己 -1- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image715
向含有2-((1R ,5R 或1S ,5S )-3-氮雜雙環[3.1.0]己-1-基)-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 97) (60.0 mg，0.129 mmol)於THF (1.5 mL)中之溶液之反應小瓶中添加4-溴-1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑(中間物 23 ) (61.1 mg，0.194 mmol)，繼而添加tBuXPhos-Pd G3 (30.8 mg，0.039 mmol)及第三丁醇鈉(43.4 mg，0.452 mmol)。使氮氣鼓泡穿過混合物歷時10 min。將混合物在90℃下攪拌且加熱18 h。將混合物冷卻至室溫。蒸發溶劑且將所得殘餘物藉由以DCM中5%之MeOH作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化以產生N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((1R ,5R 或1S ,5S )-3-(1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺。LCMS (C37 H43 FN8 O5 ) (ES, m/z): 699 [M+H]+ 。步驟 2 ： 1-((4-((1R ,5R 或 1S ,5S )-1-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己 -3- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁 -1- 醇 2,2,2- 三氟乙酸酯
Figure 02_image717
將N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((1R ,5R 或1S ,5S )-3-(1-((1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環丁基)甲基)-1H -吡唑-4-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(59 mg，0.084 mmol)與TFA (1.0 mL)之混合物在60℃下攪拌且加熱1 h。將混合物冷卻至室溫。蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以DCM中8% (7 M於MeOH中之氨)作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化。將獲得之殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以含有0.1% TFA改質劑之MeCN/H2 O作為溶離劑)進一步純化以產生1-((4-((1R ,5R 或1S ,5S )-1-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇2,2,2-三氟乙酸酯)。LCMS (C23 H25 FN8 O2 ) (ES, m/z): 465 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ 7.96 (d,J = 10.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 4.18 (s, 2H), 4.08 (s, 3H), 3.79 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 3.69 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 3.54 (d,J = 8.6 Hz, 2H), 3.35 (s, 2H), 3.20 (dd,J = 8.8, 3.8 Hz, 2H), 2.32 (s, 1H), 2.13 – 2.04 (m, 3H), 1.75 (d,J = 3.8 Hz, 2H), 1.58 (d,J = 4.9 Hz, 1H)。
以與關於製備實例 57 所述類似之方式，由中間物 97 及適當起始芳基鹵化物來製備下表19中之實例 58 。表 19
實例 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
58
Figure 02_image719
 453
1-(4-((1R ,5R 或1S ,5S )-1-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
實例 59 ： 9- 氟 -2-((3S,5R 或 3R,5S)-5- 氟 -1-(1-( 四氫 -2H- 哌喃 -4- 基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺 步驟 1 ： N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -2-((3S ,5R 或 3R ,5S )-5- 氟 -1-(1-( 四氫 -2H - 哌喃 -4- 基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image721
向反應小瓶中添加N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3S ,5R 或3R ,5S )-5-氟哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 100 ) (50.0 mg，0.103 mmol)、tBuXPhos-Pd G3 (24.6 mg，0.0310 mmol)、4-溴-1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑(中間物 15 ) (23.9 mg，0.103 mmol)、第三丁醇鈉(59.5 mg，0.619 mmol)及THF (1 mL)。將混合物以氮氣沖洗5 min。將混合物在100℃下攪拌且加熱4 h。蒸發溶劑且將所得殘餘物藉由使用己烷中0-100%之(EtOAc中30%之MeOH)之矽膠層析純化，產生N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3S ,5R 或3R ,5S )-5-氟-1-(1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺。步驟 2 ： 9- 氟 -2-((3S ,5R 或 3R ,5S )-5- 氟 -1-(1-( 四氫 -2H - 哌喃 -4- 基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image723
向反應小瓶中添加N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3S ,5R 或3R ,5S )-5-氟-1-(1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(85.0 mg，0.130 mmol)及TFA (2 mL)。將混合物在60℃下攪拌且加熱1 h。蒸發溶劑且將殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以含有0.1% TFA改質劑之MeCN/H2 O作為溶離劑)純化以產生9-氟-2-((3S ,5R 或3R ,5S )-5-氟-1-(1-(四氫-2H -哌喃-4-基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺。LCMS (C23 H26 F2 N8 O2 ) (ES, m/z): 485 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 7.93 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.23 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 4.95 (dt,J = 10.3, 5.4 Hz, 1H), 4.32 (dq,J = 11.0, 6.1, 5.6 Hz, 1H), 4.13 – 3.95 (m, 4H), 3.78 (d,J = 11.1 Hz, 2H), 3.65 – 3.52 (m, 2H), 3.46 (t,J = 11.2 Hz, 1H), 2.89 (t,J = 11.4 Hz, 1H), 2.82 – 2.59 (m, 2H), 2.12 – 1.92 (m, 4H)。實例 60 及實例 61 ： (R 或 S )-1-(4-(3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 氮雜環庚烷 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 (S 或 R )-1-(4-(3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 氮雜環庚烷 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image725
向5 mL微波小瓶中饋入外消旋 - 2-(氮雜環庚烷-3-基)-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 83 ) (100 mg，0.208 mmol)及THF (1.3 mL)。向混合物中添加1-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 4 ) (91.0 mg，0.420 mmol)，繼而添加tBuXPhos-Pd G3 (66.1 mg，0.0830 mmol)及第三丁醇鈉(80.0 mg，0.832 mmol)。使氮氣鼓泡穿過混合物歷時10 min。將混合物在90℃下攪拌且加熱12 h。將混合物冷卻至室溫且隨後藉由過濾移除固體並以DCM洗滌。蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物溶解於TFA (802 µL，10.4 mmol)中且在50℃下加熱3 h。將混合物冷卻至室溫且蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以含有0.1% TFA改質劑之MeCN/H2 O作為溶離劑)純化以產生外消旋產物。藉由對掌性SFC分離(Chiral Technologies OJ-H 21 x 250 mm管柱，以25%之(異丙醇w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)解析外消旋混合物以產生(R 或 S )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)氮雜環庚烷-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 60 ，第一溶離峰)及(S 或R )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)氮雜環庚烷-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 61 ，第二溶離峰)。
對於實例 60 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 469 [M+H]+ 。1H NMR (499 MHz, DMSO-d6) δ 7.88 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 26.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.87 (s, 2H), 3.75 (dd, J = 14.3, 3.9 Hz, 1H), 3.53 (dd, J = 14.3, 10.0 Hz, 1H), 3.45 (dq, J = 9.7, 5.0, 4.6 Hz, 1H), 3.37 (dd, J = 14.0, 6.1 Hz, 1H), 3.23 (ddd, J = 13.3, 7.6, 5.1 Hz, 1H), 2.07 – 1.82 (m, 3H), 1.71 (s, 1H), 1.58 – 1.45 (m, 2H), 1.03 (d, J = 3.5 Hz, 6H)。
對於實例 61 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 469 [M+H]+ 。1H NMR (499 MHz, DMSO-d6) δ 7.88 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 7.70 (s, 2H), 7.18 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.87 (s, 2H), 3.75 (dd, J = 14.4, 3.8 Hz, 1H), 3.53 (dd, J = 14.2, 10.2 Hz, 1H), 3.45 (dt, J = 9.5, 4.9 Hz, 1H), 3.38 (s, 1H), 3.24 (dd, J = 13.6, 5.5 Hz, 2H), 2.08 – 1.84 (m, 3H), 1.71 (s, 1H), 1.50 (d, J = 12.7 Hz, 2H), 1.03 (d, J = 3.4 Hz, 6H)。
以與關於製備實例 60 及實例 61 所述類似之方式，由適當起始胺及芳基鹵化物來製備下表20中之本發明之實例化合物，其中藉由SFC分離相應最終化合物之所得異構混合物。表 20
實例 結構 SFC 條件 觀測之m/z [M + H]+
名稱
62
Figure 02_image727
 峰1；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以50%之(IPA w/0.2% DIPA改質劑)作為共溶劑 459
(R 或S )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氟吡咯啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
63
Figure 02_image729
 峰2；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以50%之(IPA w/0.2% DIPA改質劑)作為共溶劑 459
(S 或R )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氟吡咯啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
64
Figure 02_image731
 峰1；Chiral Technologies IC 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 470
(R 或S )-3-(3-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -1,2,4-三唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
65
Figure 02_image733
 峰2；Chiral Technologies IC 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 470
(S 或R )-3-(3-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -1,2,4-三唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
66
Figure 02_image735
 峰1；Chiralcel OJ-H 4.6 x150 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 469
1-(4-((3S 或3R ,4S 或4R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-4-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
67
Figure 02_image737
 峰2；Chiralcel OJ-H 4.6 x150 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 469
1-(4-((3R 或3S ,4R 或4S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-4-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
實例 68 及實例 69 ： 1-(4-((3R ,5S 或 3S ,5R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((3S ,5R 或 3R ,5S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇 步驟 1 ：外消旋 -1-(4-((3R ,5S 或 3S ,5R )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image739
向40 mL小瓶中添加外消旋 -N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3R ,5S 或3S ,5R )-5-氟哌啶-3-基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 102 ) (736 mg，1.52 mmol), 1-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 4 ) (998 mg，4.56 mmol)、tBuXPhos-Pd G3 (965 mg，1.22 mmol)、第三丁醇鈉(876 mg，9.11 mmol)及THF (15.0 mL)。將混合物以氮氣淨化5 min。將混合物在80℃下攪拌且加熱6 h。將混合物冷卻至室溫。蒸發溶劑且將所得殘餘物藉由以己烷中0-100%之EtOAc:EtOH (3:1)作為溶離劑之矽膠層析純化以產生外消旋 -1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇。LCMS (C31 H36 F2 N8 O4 ) (ES, m/z): 623 [M+H]+ 。步驟 2 ： 1-(4-((3R ,5S 或 3S ,5R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((3S ,5R 或 3R ,5S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image741
向20 mL小瓶中添加外消旋 - 1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(550 mg，0.883 mmol)及TFA (8.83 ml，115 mmol)。將混合物在50℃下攪拌且加熱2 h。蒸發溶劑。向所得殘餘物中添加MeOH且過濾混合物。蒸發濾液之溶劑。藉由對掌性SFC分離(Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)解析外消旋混合物以產生1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 68 ，第一溶離峰)及1-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 69 ，第二溶離峰)。
對於實例 68 而言：LCMS (C22 H26 F2 N8 O2 ) (ES, m/z): 473 [M+H]+ 。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.82 (s, 2H), 7.43 (dd, J = 8.3, 2.6 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.18 (dd, J = 11.0, 2.6 Hz, 1H), 4.94 (dtt, J = 48.3, 10.3, 4.8 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.89 (s, 2H), 3.78 – 3.71 (m, 1H), 3.66 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.40 (t, J = 11.8 Hz, 1H), 2.75 (t, J = 11.5 Hz, 1H), 2.66 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 2.58 (td, J = 10.4, 5.2 Hz, 1H), 1.92 (p, J = 11.3 Hz, 1H), 1.04 (s, 6H)。
對於實例 69 而言：LCMS (C22 H26 F2 N8 O2 ) (ES, m/z): 473 [M+H]+ 。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.82 (s, 1H), 7.44 (dd, J = 8.3, 2.7 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.19 (dd, J = 11.1, 2.7 Hz, 1H), 4.95 (ddt, J = 48.3, 10.4, 5.2 Hz, 1H), 4.64 (s, 1H), 3.94 (s, 2H), 3.89 (s, 1H), 3.74 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.66 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 3.40 (t, J = 11.8 Hz, 1H), 2.74 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.65 (s, 1H), 2.58 (dt, J = 10.3, 5.2 Hz, 1H), 1.97 – 1.89 (m, 1H), 1.04 (s, 6H)。
以與關於製備實例 68 及實例 69 所述類似之方式，由中間物 102 及適當起始芳基鹵化物來製備下表21中之本發明之實例化合物，其中藉由SFC分離相應最終化合物之所得異構混合物。表 21
實例 結構 SFC 條件 觀測之m/z [M + H]+
名稱
70
Figure 02_image743
 峰1；Phenomenex Lux-2 21 x 250 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 487
1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
71
Figure 02_image745
 峰2；Phenomenex Lux-2 21 x 250 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 487
1-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
72
Figure 02_image747
 峰1；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 485
1-((4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇
73
Figure 02_image749
 峰2；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 485
1-((4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇
實例 74 及實例 75 ： 1-(4-((3R ,5R 或 3S ,5S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((3S ,5S 或 3R ,5R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇 步驟 1 ：外消旋 -1-(4-((3R ,5R 或 3S ,5S )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image751
向20 mL小瓶中添加外消旋 -N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-((3R ,5R 或3S ,5S )-5-氟哌啶-3-基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 102 ) (434 mg，0.896 mmol)、1-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 4 ) (589 mg，2.69 mmol)、tBuXPhos-Pd G3 (569 mg，0.717 mmol)、第三丁醇鈉(517 mg，5.37 mmol)及THF (9.0 mL)。將混合物以氮氣淨化5 min。將混合物在80℃下攪拌且加熱6 h。將混合物冷卻至室溫。蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以己烷中30-50%之EtOAc:EtOH (3:1)作為溶離劑之矽膠層析純化，產生外消旋 - 1-(4-((3R ,5R 或3S ,5S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇。LCMS (C31 H36 F2 N8 O4 ) (ES, m/z): 623 [M+H]+ 。步驟 2 ： 1-(4-((3R ,5R 或 3S ,5S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((3S ,5S 或 3R ,5R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image753
向含有外消旋 - 1-(4-((3R ,5R 或3S ,5S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(439 mg，0.705 mmol)之20 mL小瓶中添加TFA (7.05 ml，92.0 mmol)。將混合物在50℃下攪拌且加熱2 h。蒸發溶劑。向殘餘物中添加MeOH。過濾混合物且隨後蒸發濾液之溶劑。藉由對掌性SFC分離(Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)解析外消旋混合物，產生1-(4-((3R ,5R 或3S ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 74 ，第一溶離峰)及1-(4-((3R ,5R 或3S ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 75 ，第二溶離峰)。
對於實例 74 而言：LCMS (C22 H26 F2 N8 O2 ) (ES, m/z): 473 [M+H]+ 。1H NMR (499 MHz, DMSO-d6) δ 7.83 (s, 2H), 7.43 (dd, J = 8.4, 2.7 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.19 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 46.5 Hz, 1H), 4.64 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (s, 2H), 3.69 – 3.48 (m, 3H), 2.97 – 2.89 (m, 1H), 2.90 – 2.79 (m, 1H), 2.40 (s, 1H), 2.14 (dt, J = 40.9, 11.8 Hz, 1H), 1.04 (s, 6H)。
對於實例 75 而言：LCMS (C22 H26 F2 N8 O2 ) (ES, m/z): 473 [M+H]+ 。1H NMR (499 MHz, DMSO-d6) δ 7.83 (s, 2H), 7.43 (dd, J = 8.4, 2.7 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.19 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 47.5 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (s, 2H), 3.67 – 3.50 (m, 3H), 2.97 – 2.90 (m, 1H), 2.90 – 2.79 (m, 1H), 2.41 (s, 1H), 2.14 (dt, J = 40.8, 12.8 Hz, 1H), 1.04 (s, 6H)。
以與關於製備實例 74 及實例 75 所述類似之方式，由中間物 103 及適當起始芳基鹵化物來製備下表22中之本發明之實例化合物，其中藉由SFC分離相應最終化合物之所得異構混合物。表 22
實例 結構 SFC 條件 觀測之m/z [M + H]+
名稱
76
Figure 02_image755
 峰1；Phenomenex Lux-3 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 487
1-(4-((3R ,5R 或3S ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
77
Figure 02_image757
 峰2；Phenomenex Lux-2 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 487
1-(4-((3S ,5S 或3R ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
78
Figure 02_image759
 峰1；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 485
1-((4-((3R ,5R 或3S ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇
79
Figure 02_image761
 峰2；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 485
1-((4-((3S ,5S 或3R ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丁-1-醇
實例 80 及實例 81 ： 1-(4-((3R ,5R 或 3S ,5S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((3S ,5S 或 3R ,5R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇 步驟 1 ：外消旋 -1-(4-((3R ,5R 或 3S ,5S )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image763
以與實例 74 及實例 75 之步驟1類似之方式，由中間物 101 及中間物 4 來進行實例 80 及實例 81 之步驟1以產生外消旋 -1-(4-((3R ,5R 或3S ,5S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇。LCMS (C31 H36 F2 N8 O4 ) (ES, m/z): 623 [M+H]+ 。步驟 2 ： 1-(4-((3R ,5R 或 3S ,5S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((3S ,5S 或 3R ,5R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image765
以與實例 74 及實例 75 之步驟2類似之方式來進行實例 80 及實例 81 之步驟2，其中將外消旋 - 1-(4-((3R ,5R 或3S ,5S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇轉化為相應最終化合物之外消旋混合物。藉由對掌性SFC分離(Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.2% DIPA改質劑)作為共溶劑)解析外消旋混合物，以產生1-(4-((3R ,5R 或3S ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 80 ，第一溶離峰)及1-(4-((3S ,5S 或3R ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 81 ，第二溶離峰)。
對於實例 80 而言：LCMS (C22 H26 F2 N8 O2 ) (ES, m/z): 473 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 7.94 (d,J = 10.8 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.24 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 5.12 (d,J = 46.8 Hz, 1H), 4.02 (d,J = 3.8 Hz, 3H), 3.84 (d,J = 12.4 Hz, 1H), 3.82 – 3.74 (m, 1H), 3.74 – 3.62 (m, 1H), 3.11 (t,J = 11.0 Hz, 1H), 3.08 – 2.95 (m, 1H), 2.67 (s, 1H), 2.59 (s, 1H), 2.31 – 2.12 (m, 1H), 1.16 (s, 6H)。
對於實例 81 而言：LCMS (C22 H26 F2 N8 O2 ) (ES, m/z): 473 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 7.94 (d,J = 10.8 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.24 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 5.13 (d,J = 47.0 Hz, 1H), 4.02 (d,J = 4.8 Hz, 3H), 3.85 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 3.82 – 3.73 (m, 1H), 3.73 – 3.60 (m, 1H), 3.11 (t,J = 11.0 Hz, 1H), 3.04 (dd,J = 36.0, 12.9 Hz, 1H), 2.59 (s, 1H), 2.30 – 2.12 (m, 1H), 1.16 (s, 6H)。實例 82 及實例 83 ： (1R 或 1S ,2R 或 2S )-2-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環戊 -1- 醇及 (1S 或 1R ,2S 或 2R )-2-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環戊 -1- 醇 步驟 1 ： (1R 或 1S ,2R 或 2S )-2-(4-((R )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環戊 -1- 醇及 (1S 或 1R ,2S 或 2R )-2-(4-((R )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環戊 -1- 醇
Figure 02_image767
向含有(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 82 ) (150 mg，0.322 mmol)於THF (3.0 mL)中之溶液之反應小瓶中添加2-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環戊醇2,2,2-三氟乙酸酯(中間物 6 ) (184 mg，0.514 mmol)，繼而添加tBuXPhos-Pd G3 (77.0 mg，0.0960 mmol)及第三丁醇鈉(93.0 mg，0.965 mmol)。使氮氣鼓泡穿過混合物歷時10 min。將混合物在90℃下攪拌且加熱4 h。將混合物冷卻至室溫且隨後將所得殘餘物藉由以己烷中0-40%之EtOAc:EtOH (3:1)作為溶離劑之矽膠層析純化，產生產物之非對映異構體混合物。將混合物藉由SFC分離(Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以30%之MeOH作為共溶劑)純化，產生對應於(1R 或1S ,2R 或2S )-2-(4-((R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環戊-1-醇及(1S 或1R ,2S 或2R )-2-(4-((R )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環戊-1-醇之峰1及峰2。對於峰1而言，LCMS (C33 H39 FN8 O4 ) (ES, m/z): 631 [M+H]+ 。對於峰2而言，LCMS (C33 H39 FN8 O4 ) (ES, m/z): 631 [M+H]+ 。步驟 2 ： (1R 或 1S ,2R 或 2S )-2-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環戊 -1- 醇及 (1S 或 1R ,2S 或 2R )-2-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環戊 -1- 醇
Figure 02_image769
以與實例 40 之步驟2類似之方式來進行實例 82 及實例 83 之步驟2，其中將由步驟1獲得之峰1及峰2轉化為(1R 或1S ,2R 或2S )-2-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環戊-1-醇及(1S 或1R ,2S 或2R )-2-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環戊-1-醇，其分別為實例 82 及實例 83 之最終化合物。
對於實例 82 而言：LCMS (C24 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 481 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ 7.97 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.13 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 5.89 (s, 2H), 4.36 (t,J = 8.8 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.68 (dd,J = 11.5, 3.6 Hz, 1H), 3.38 (tt,J = 7.5, 3.8 Hz, 2H), 2.95 (t,J = 11.1 Hz, 1H), 2.67 (td,J = 11.3, 4.4 Hz, 1H), 2.40 – 2.07 (m, 3H), 1.99 – 1.73 (m, 7H), 0.88 (s, 3H)。
對於實例 83 而言：LCMS (C24 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 481 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ 7.97 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.13 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 5.88 (s, 2H), 4.35 (t,J = 8.7 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.74 – 3.64 (m, 1H), 3.43 – 3.31 (m, 2H), 2.95 (t,J = 11.1 Hz, 1H), 2.67 (td,J = 11.2, 4.5 Hz, 1H), 2.39 – 2.10 (m, 3H), 2.00 – 1.74 (m, 7H), 0.88 (s, 3H)。
以與關於製備實例 82 及實例 83 所述類似之方式，由適當中間物及起始材料來製備下表23中之本發明之實例化合物。在每種情形下，對由第一步驟形成之中間物混合物進行SFC分離。展示用於分離此等中間物之SFC條件以及由第二步驟形成之相應最終產物。表 23
實例 結構 用於步驟1 之中間物之SFC 條件 觀測之m/z [M + H]+
名稱
84
Figure 02_image771
 峰1；Whelko-1 21 x 250 mm管柱，以50%之(MeOH w/0.2% DIPA改質劑)作為共溶劑 467
(1R 或1S ,2R 或 2S )-2-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)環戊-1-醇
85
Figure 02_image773
 峰2；Whelko-1 21 x 250 mm管柱，以50%之(MeOH w/0.2% DIPA改質劑)作為共溶劑 467
(1S 或1R ,2S 或 2R )-2-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)環戊-1-醇
86
Figure 02_image775
 峰1；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以45%之(IPA 1:1 w/0.2% DIPA改質劑)作為共溶劑 483
(S 或R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
87
Figure 02_image777
 峰2；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以45%之(IPA 1:1 w/0.2% DIPA改質劑)作為共溶劑 483
(R 或S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
實例 88 ： (1R 或 1S ,2R 或 2S )-2-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 環戊 -1- 醇
Figure 02_image779
將N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 或3S ,6R )-6-甲基-1-(1-((1R 或1S ,2R 或2S )-2-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)環戊基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 120 ) (5.0 mg，7.0 μmol)於TFA (0.3 mL)中之混合物在60℃下加熱25 min。將混合物濃縮。將殘餘物藉由以DCM中5%之(7 M於MeOH中之氨)溶離之製備性矽膠TLC純化以產生(1R 或1S ,2R 或2S )-2-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)環戊-1-醇。LCMS (C24 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 481 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ 7.99 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.15 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.87 (s, 2H), 4.35 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 4.21 (d,J = 8.7 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.74 (d,J = 6.5 Hz, 1H), 3.47-3.41 (m, 1H), 3.32 (d,J =11.0 Hz, 1H), 3.23 (d,J = 11.3 Hz, 1H), 2.26 (m, 1H), 2.16 – 2.08 (m, 3H), 2.08 – 2.00 (m, 2H), 1.90 – 1.71 (m, 4H), 1.13 (d,J = 6.7 Hz, 3H)。實例 89 ： (1S 或 1R ,2S 或 2R )-2-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 環戊 -1- 醇
Figure 02_image781
以與實例 88 類似之方式，由中間物 121 來製備實例 89 以產生(1S 或1R ,2S 或2R )-2-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H-吡唑-1-基)環戊-1-醇。LCMS (C24 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 481 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d ) δ 7.99 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.15 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.81 (s, 2H), 4.36 (q,J = 7.1 Hz, 1H), 4.27 – 4.15 (m, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.79 – 3.67 (m, 1H), 3.44 (dd,J = 11.5, 4.2 Hz, 1H), 3.37 – 3.28 (m, 1H), 3.22 (t,J = 11.1 Hz, 1H), 2.34 – 2.21 (m, 1H), 2.19 – 1.96 (m, 4H), 1.94 – 1.62 (m, 6H), 1.12 (d,J = 6.7 Hz, 3H)。實例 90 及 91 ： 1-(4-((3R ,5S 或 3S ,5R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((3S ,5R 或 3R ,5S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image783
向外消旋 - 1-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 122 ) (150 mg，0.242 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將混合物在50℃下攪拌10 h。將混合物濃縮。將外消旋混合物純化且藉由對掌性SFC (Phenomenex Lux-2 4.6 x 150 mm管柱，以0-40%之(EtOH w/0.05% DEA)作為共溶劑)解析以產生1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(第一溶離峰)及1-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(第二溶離峰)，分別對應於實例 90 及實例 91 。
對於實例 90 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 469。1 H NMR (400MHz, 甲醇-d 4 ) δ = 7.66 (d,J =10.8 Hz, 1H), 7.32 (d,J =10.0 Hz, 2H), 6.94 (d,J =7.8 Hz, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.81 - 3.71 (m, 1H), 3.38 (br d,J =9.0 Hz, 1H), 3.32 - 3.22 (m, 2H), 2.69 (t,J =11.6 Hz, 1H), 2.32 - 2.13 (m, 2H), 2.02 - 1.89 (m, 1H), 1.36 (q,J =12.5 Hz, 1H), 1.14 (s, 6H), 1.00 (d,J =6.6 Hz, 3H)。
對於實例 91 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 469。1 H NMR (400MHz, 甲醇-d 4 ) δ = 7.68 (d,J =10.8 Hz, 1H), 7.37 (d,J =19.1 Hz, 2H), 6.98 (d,J =7.8 Hz, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.84 - 3.76 (m, 1H), 3.42 (br d,J =10.3 Hz, 1H), 3.34 - 3.26 (m, 2H), 2.77 (t,J =11.6 Hz, 1H), 2.32 - 2.20 (m, 2H), 1.99 (br d,J =6.6 Hz, 1H), 1.40 (q,J =12.5 Hz, 1H), 1.19 - 1.09 (m, 7H), 1.02 (d,J =6.6 Hz, 3H)。實例 92 ：外消旋 -1-(4-((3R ,5R 或 3S ,5S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image785
向1-(4-((3R ,5R 及3S ,5S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 123 ) (20 mg，0.032 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液中添加TFA (2 mL)。將混合物在45℃下攪拌且加熱5 h。將混合物濃縮。將殘餘物藉由逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/水 (w/0.1% TFA作為改質劑)作為溶離劑)純化以產生1-(4-((3R ,5R 及3S ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇。LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 469。1 H NMR (400MHz, 甲醇-d 4 ) δ = 8.02 - 7.90 (m, 2H), 7.73 (s, 1H), 7.27 - 7.15 (m, 1H), 4.22 (br d,J =11.2 Hz, 1H), 4.13 - 4.07 (m, 2H), 4.00 (s, 4H), 3.78 - 3.65 (m, 2H), 3.57 - 3.47 (m, 1H), 3.11 (t,J =11.0 Hz, 1H), 2.54 (br d,J =13.7 Hz, 1H), 2.27 - 2.14 (m, 1H), 1.90 - 1.80 (m, 1H), 1.17 (s, 6H), 1.11 (d,J =6.8 Hz, 3H)。實例 93 ： (R )-5-(4-(3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 戊 -2- 酮
Figure 02_image787
向TFA (0.5 mL)於DCM (0.5 mL)中之攪拌混合物中添加(R )-5-(4-(3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)戊-2-酮(中間物 124 ) (28.0 mg，0.0450 mmol)。將混合物在50℃下攪拌且加熱15 h。將混合物冷卻且蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/水(w/0.1% TFA作為改質劑)作為溶離劑)純化以產生(R )-5-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)戊-2-酮。LCMS (C23 H27 FN8 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 467。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ: 7.90 (d,J =10.96 Hz, 1 H), 7.36 (s, 1 H), 7.31 (s, 1 H), 7.19 (d,J =7.45 Hz, 1 H), 4.62 (br s, 1 H), 4.05 (t,J =6.80 Hz, 2 H), 3.99 (s, 3 H), 3.67 - 3.78 (m, 1 H), 3.39 (br d,J =11.84 Hz, 1 H), 2.95 (t,J =11.18 Hz, 1 H), 2.60 - 2.74 (m, 1 H), 2.44 (t,J =7.02 Hz, 2 H), 2.28 (br d,J =9.21 Hz, 1 H), 2.10 (s, 3 H), 2.02 (quin,J =7.02 Hz, 2 H), 1.81 - 1.95 (m, 3 H)。實例 94 及 95 ： (S 或 R )-5-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 戊 -2- 醇及 (R 或 S )-5-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 戊 -2- 醇
Figure 02_image789
向(R )-5-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)戊-2-酮(實例 93 ) (15.0 mg，0.0320 mmol)於THF (2 mL)中之攪拌混合物中添加NaBH4 (2.4 mg，0.064 mmol)。將混合物在25℃下攪拌3 h。將反應混合物以1 M HCl水溶液(2 mL)淬滅。以EtOAc (2 x 30 mL)萃取混合物且將有機層經硫酸鈉乾燥、過濾且隨後蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/水(w/0.1% TFA作為改質劑)作為溶離劑)純化以產生(S 或R )-5-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)戊-2-醇及(R 或S )-5-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)戊-2-醇，分別對應於實例 94 及實例 95 。
對於實例 94 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 469。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ: 7.94 (d,J =10.83 Hz, 1 H), 7.89 (s, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.25 (d,J =7.63 Hz, 1 H), 4.19 (br t,J =7.10 Hz, 2 H), 4.08 - 4.00 (m, 4 H), 3.78 - 3.66 (m, 2 H), 3.57 (br s, 2 H), 3.36 (t,J =1.68 Hz, 1 H), 2.40 (br s, 1 H), 2.16 – 1.85 (m, 5 H), 1.48 - 1.36 (m, 2 H), 1.17 (d,J =6.26 Hz, 3 H)。
對於實例 95 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 469。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ: 7.95 (d,J =10.68 Hz, 1 H), 7.46 (s, 1 H), 7.37 (s, 1 H), 7.24 (d,J =7.78 Hz, 1 H), 4.11 (t,J =6.87 Hz, 3 H), 4.03 (s, 4 H), 3.84 - 3.62 (m, 3 H), 3.48 - 3.37 (m, 5 H), 3.31 (br s, 1 H), 3.19 (s, 1 H), 2.33 (s, 1 H), 2.02 – 1.77 (m, 5 H), 1.41 (br d,J =5.80 Hz, 2 H), 1.16 (d,J =6.10 Hz, 3 H)。實例 96 及實例 97 ：外消旋 -(1r ,4s 或 1r ,4r )-4-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環己 -1- 醇及外消旋 -(1r ,4r 或 1r ,4s )-4-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環己 -1- 醇 步驟 1 ： 4- 硝基 -1-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-1H - 吡唑
Figure 02_image791
在氮氣氛下向1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇(5.00 g，31.6 mmol)、PPh3 (12.4 g，47.4 mmol)及4-硝基-1H -吡唑(4.29 g，37.9 mmol)於DCM (80 mL)中之攪拌混合物中添加二-第三丁基二氮烯-1,2-二甲酸酯(18.2 g，79.0 mmol)且將混合物在25℃下攪拌10 h。將混合物濃縮且藉由以石油醚中10-25%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生4-硝基-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-1H -吡唑。LCMS (C11 H15 N3 O4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 254。步驟 2 ： 1-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-1H - 吡唑 -4- 胺
Figure 02_image793
向4-硝基-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-1H -吡唑(5.50 g，21.7 mmol)於MeOH (50 mL)及EtOAc (50 mL)中之攪拌混合物中添加10% Pd/C (0.462 g，4.34 mmol)。將混合物以氮氣淨化兩次且在氫氣氛下攪拌6 h。過濾混合物且蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以石油醚中20-50%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-1H -吡唑-4-胺。LCMS (C11 H17 N3 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 224。步驟 3 ： 1-(1-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-1H - 吡唑 -4- 基 )-6- 甲基哌啶 -3- 甲酸甲酯
Figure 02_image795
向1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-1H -吡唑-4-胺(2.14 g，9.60 mmol)及四氟硼酸鋰(0.600 g，6.40 mmol)於TFE (15 mL)中之攪拌混合物中添加2-亞甲基-5-側氧基己酸乙酯(1.00 g，5.88 mmol)。將混合物在80℃下攪拌且加熱10 h。將混合物冷卻、以水(15 mL)稀釋且以EtOAc (2 x 30 mL)萃取。將有機層乾燥(無水Na2 SO4 )、過濾且蒸發濾液之溶劑。向所得殘餘物中添加MeOH (15 mL)及10% Pd/C (0.068 g，0.64 mmol)。將混合物脫氣且以氮氣淨化兩次並在氫氣氛下攪拌10 h。過濾混合物且隨後濃縮濾液。將殘餘物藉由以石油醚中10-50%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生1-(1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-甲酸乙酯。LCMS (C20 H31 N3 O4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 378。步驟 4 ： 1-(1-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-1H - 吡唑 -4- 基 )-6- 甲基哌啶 -3- 卡肼
Figure 02_image797
向1-(1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-甲酸酯(450 mg，1.192 mmol)於EtOH (10 mL)中之攪拌混合物中添加水合肼(382 mg，11.92 mmol)。將混合物在80℃下攪拌且加熱10 h。將混合物濃縮以產生1-(1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-卡肼，其不經進一步純化即使用。LCMS (C18 H29 N5 O3 ) (ES, m/z) [M+H]+ 364。步驟 5 ：外消旋 -2-((3R ,6S 或 3S ,6R )-1-(1-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸 -8- 基 )-1H - 吡唑 -4- 基 )-6- 甲基哌啶 -3- 基 )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image799
向40 mL小瓶中饋入1-(1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-卡肼(351 mg，0.967 mmol)及DCM (2 mL)。向此混合物中添加AcOH (0.025 ml，0.44 mmol)，繼而添加2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-4-甲氧基苯甲腈(中間物 37 ) (300 mg，0.879 mmol)。將混合物在35℃下攪拌且加熱16 h。隨後將混合物濃縮。將所得殘餘物藉由以石油醚中10-50%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生順式非對映異構體2-((3R ,6S 及3S ,6R )-1-(1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-基)-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺。LCMS (C36 H43 FN8 O5 ) (ES, m/z) [M+H]+ 687。步驟 6 ： 4-(4-((2S ,5R 及 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 環己酮
Figure 02_image801
向2-((3R ,6S 及3S ,6R )-1-(1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-基)-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(40.0 mg，0.0580 mmol)於DCM (2 mL)中之攪拌混合物中添加TFA (2 mL)。將混合物攪拌10 h。將混合物濃縮。向殘餘物中添加飽和碳酸氫鈉水溶液。將混合物以EtOAc (2 x 5 mL)萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以EtOAc作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化以產生外消旋 -4-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)環己酮。LCMS (C25 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ 493。步驟 7 ： (1r ,4s 或 1r ,4r )-4-(4-((2S ,5R 及 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環己 -1- 醇及 (1r ,4r 或 1r ,4s )-4-(4-((2S ,5R 及 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環己 -1- 醇
Figure 02_image803
向外消旋 - 4-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)環己酮(18 mg，0.037 mmol)於THF (5 mL)中之攪拌混合物中添加甲基溴化鎂(0.122 ml，0.365 mmol)。將混合物在0℃下攪拌12 h。將反應混合物以NH4 Cl水溶液(5 mL)淬滅且以EtOAc (2 x 5 mL)萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/水(w/0.1% TFA改質劑)作為溶離劑)純化以產生(1r ,4s 或 1r ,4r )-4-(4-((2S ,5R 及 2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環己-1-醇及(1r ,4r 或 1r ,4s )-4-(4-((2S ,5R 及 2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環己-1-醇，對應於實例 96 及實例 97 。
對於實例 96 而言：1 H NMR (400MHz, MeOD) δ 7.98 (s, 1H), 7.92 (d, J=11.2 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.22 (d, J=7.6 Hz, 1H), 4.18 - 4.29 (m, 1H), 4.01 (s, 4H), 3.85 - 3.97 (m, 2H), 3.63 - 3.65 (m, 1H), 2.46 -2.48(m, 1H), 2.15 - 2.30 (m, 2H), 1.90 - 2.13 (m, 5H), 1.73 - 1.84 (m, 2H), 1.60- 1.72 (m, 2H), 1.31 (s, 3H), 1.20 (d, J=6.8 Hz, 3H)。LCMS (C26 H33 FN8 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ 509。
對於實例 97 而言：1 H NMR (400MHz, MeOD) δ 8.01 (s, 1H), 7.91 (d,J =11.2 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.21 (d,J =8.0 Hz, 1H), 4.06 - 4.25 (m, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.84 - 3.98 (m, 2H), 3.65 -3.68(m, 1H), 2.48 -2.50(m, 1H), 2.10 - 2.32 (m, 3H), 2.02 -2.08 (m, 2H), 1.87 - 1.96 (m, 2H), 1.80-1.82 (m, 2H), 1.56 - 1.67 (m, 2H), 1.25 (s, 3H), 1.21 (d,J =6.8 Hz, 3H)。LCMS (C26 H33 FN8 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ 509。實例 98 及 99 ： (1S 或 1R ,2S 或 2R )-2-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環丁 -1- 醇及 (1R 或 1S ,2R 或 2S )-2-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-1- 甲基環丁 -1- 醇
Figure 02_image805
將甲基溴化鎂(0.318 ml，0.955 mmol，3 M於乙醚中)於THF (1.00 ml)中之混合物在0℃下冷卻。向混合物中添加於THF (1.0 mL)中之2-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)環丁酮(中間物 125 ) (86.0 mg，0.191 mmol)。將混合物在0℃下攪拌5 h。向混合物中添加水(3 mL)且隨後將混合物以EtOAc (3 x 20 mL)萃取。將經合併之有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以DCM中10%之MeOH作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化。將異構混合物藉由SFC (OJ-3 100 x 4.6 mm管柱，以5-40%之(MeOH w/0.05% DEA)作為共溶劑)純化以產生(1S 或1R ,2S或2R )-2-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環丁-1-醇(第一溶離峰)及(1R 或1S ,2R 或2S )-2-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-1-甲基環丁-1-醇(第二溶離峰)，分別對應於實例 98 及實例 99 。
對於實例 98 而言：LCMS (C23 H27 FN8 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 467。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ = 7.98 (d,J =10.68 Hz, 1 H), 7.37 (s, 1 H), 7.15 (d,J =7.48 Hz, 1 H), 7.09 (s, 1 H), 5.78 (br s, 2 H), 4.48 - 4.34 (m, 1 H), 4.05 – 3.96 (m, 3 H), 3.81 - 3.73 (m, 1 H), 3.72 - 3.62 (m, 1 H), 3.42 - 3.31 (m, 2 H), 2.98 (t,J =11.06 Hz, 1 H), 2.76 - 2.59 (m, 1 H), 2.52 - 2.38 (m, 1 H), 2.33 - 2.15 (m, 3 H), 2.06 – 1.77 (m, 5 H), 1.42 (s, 3H)。
對於實例 99 而言：LCMS (C23 H27 FN8 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 467。1 H NMR (400 MHz, CD3 OD) δ = 7.98 (d,J =10.68 Hz, 1 H), 7.37 (s, 1 H), 7.15 (d,J =7.48 Hz, 1 H), 7.09 (s, 1 H), 5.78 (br s, 2 H), 4.48 - 4.34 (m, 1 H), 4.05 – 3.96 (m, 3 H), 3.81 - 3.73 (m, 1 H), 3.72 - 3.62 (m, 1 H), 3.42 - 3.31 (m, 2 H), 2.98 (t,J =11.06 Hz, 1 H), 2.76 - 2.59 (m, 1 H), 2.52 - 2.38 (m, 1 H), 2.33 - 2.15 (m, 3 H), 2.06 – 1.77 (m, 5 H), 1.42 (s, 3 H)。實例 100 ： (R )-9- 氟 -7- 甲氧基 -2-(1-(1- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c ] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image807
將BSA (2 ml，8.18 mmol)添加至N '-(2-胺基-6-氟-8-甲氧基喹唑啉-4-基)-1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-卡肼(中間物 104 ) (25.0 mg，0.0600 mmol)中且將混合物在120℃下攪拌2 h。隨後蒸發溶劑。將所得殘餘物以氯仿/異丙醇-3:1 (5 mL)稀釋、以碳酸氫鈉水溶液(飽和，5 mL)洗滌且使用相分離器管柱(25 mL)收集有機層並濃縮。將殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/水(含有0.1% TFA改質劑)作為溶離劑)純化。藉由對掌性SFC分離(OJ-H管柱21 x 250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.25% DMEA改質劑)作為共溶劑)解析外消旋混合物以產生(R 或 S )-9-氟-7-甲氧基-2-(1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c ]喹唑啉-5-胺(實例 100 ，第一溶離峰)。LCMS (C19 H21 FN8 O) (ES, m/z): 397 [M+H]+ 。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.79 (s, 2H), 7.42 (dd, J = 8.4, 2.7 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.21 - 7.16 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.60 (dd, J = 11.5, 3.7 Hz, 1H), 3.32 - 3.30 (m, 1H), 3.29 - 3.23 (m, 1H), 2.83 (t, J = 11.1 Hz, 1H), 2.58 - 2.52 (m, 2H), 2.20 - 2.12 (m, 1H), 1.88 - 1.81 (m, 1H), 1.80 - 1.74 (m, 2H)。
以與實例 100 類似之方式，由適當中間物來製備下表24中之本發明之實例化合物，除了起始材料為對映純的以外，因此此等實例不進行SFC分離。表 24
實例 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
101
Figure 02_image809
 385
(R 或S )-8,9-二氟-2-(1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
102
Figure 02_image811
 367
(R 或S )-9-氟-2-(1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
103
Figure 02_image813
 385
(R 或S )-7,9-二氟-2-(1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
104
Figure 02_image815
 413
(R 或S )-9-氯-7-甲氧基-2-(1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
105
Figure 02_image817
 397
(R 或S )-9-氯-7-甲基-2-(1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
106
Figure 02_image819
 383
(R 或S )-9-氯-2-(1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
107
Figure 02_image821
 385
(R 或S )-9,10-二氟-2-(1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
108
Figure 02_image823
 379
(R 或S )-9-甲氧基-2-(1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
實例 109 ： 1-(4-((2S ,5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇 步驟 1 ： 1-(4-((2S ,5R )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image825
向100 mL圓底燒瓶中添加(3R ,6S )-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-卡肼(中間物 61 ) (1.00 g，3.39 mmol)、2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)-亞甲基)胺基)-5-氟-4-甲氧基苯甲腈(中間物 37 ) (1.21 g，3.55 mmol)及DCM (10 mL)。將混合物在室溫下攪拌18 h。將混合物濃縮且將所得殘餘物藉由以己烷中0-100 %之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化，產生1-(4-((2S ,5R )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇。LCMS (C32 H39 FN8 O4 ) (ES, m/z): 619 [M+H]+ 。使用具有信賴區間之振動圓二色性(Vibrational Circular Dichroism，VCD)光譜將步驟1之產物之絕對組態指定為(2S, 5R )。進行分析，將實驗資料與具有(2S ,5R )組態之產物之經計算VCD及IR光譜進行比較。產物之實驗VCD光譜與計算之(2S ,5R )光譜在1000-1500 cm-1區域內良好匹配，導致指定為(2S ,5R )。步驟 2 ： 1-(4-((2S ,5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image827
向20 mL小瓶中添加1-(4-((2S ,5R )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(962 mg，1.56 mmol)及TFA (7 mL)。將混合物在50℃下攪拌且加熱1 h。隨後將混合物濃縮。向所得殘餘物中添加1 M HCl水溶液(50 mL)及DCM (50 mL)。將含水層以DCM (2 x 50 mL)洗滌，隨後過濾。隨後以10 M NaOH水溶液將含水層之pH調整至約pH 10。將含水層以DCM中10%之MeOH (2 x 100 mL)萃取。將有機層合併、經無水硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由使用DCM中0-10%之MeOH之矽膠層析純化，產生1-(4-((2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 109 )。LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 469 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.90 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 7.72 (s, 2H), 7.20 (s, 1H), 7.19 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 3.69 (d,J = 6.7 Hz, 1H), 3.35 (d,J = 3.9 Hz, 1H), 3.20 (dt,J = 11.1, 5.8 Hz, 1H), 3.10 (t,J = 11.5 Hz, 1H), 2.00 (d,J = 6.1 Hz, 3H), 1.70 (d,J = 9.3 Hz, 1H), 1.03 (d,J = 4.4 Hz, 9H)。
以與關於製備實例 109 所述類似之方式，由適當醯肼及碳化二亞胺中間物來製備下表25中之本發明之實例化合物。表 25
實例 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
110
Figure 02_image829
 473
1-(4-((2S ,5R )-5-(5-胺基-8-氯-9-氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
111
Figure 02_image831
 457
1-(4-((2S ,5R )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
112
Figure 02_image833
 453
1-(4-((2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
113
Figure 02_image835
 417
(R )-7,9-二氯-2-(1-(1-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
實例 114-117 ： 1-(4-((2R 或 2S ,5R 或 5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2S 或 2R ,5R 或 5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2S 或 2R ,5S 或 5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2R 或 2S ,5S 或 5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇 步驟 1 ： 1-(4-(5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )2- 甲基哌啶 -1- 基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image837
向2特拉姆(dram)小瓶中添加1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-3-甲基-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-卡肼(中間物 63 ) (133 mg，0.431 mmol)及2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-3-甲氧基苯甲腈(中間物 38 ) (140 mg，0.410 mmol)。向混合物中添加二噁烷(1.6 mL)及乙酸(24 µL，0.41 mmol)且隨後攪拌混合物且隨後在60℃下加熱2 h。隨後使混合物緩慢冷卻至室溫。將混合物以DCM (10 mL)稀釋且以飽和碳酸氫鈉水溶液(2 x 10 mL)及鹽水洗滌。將經合併之有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由使用己烷中10-100%之EtOAc之矽膠層析純化以產生1-(4-(5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇，其呈外消旋非對映異構體混合物之形式。LCMS (C33 H42 FN8 O4 ) (ES, m/z): 633 [M+H]+ 。步驟 2 ： 1-(4-((2R 或 2S ,5R 或 5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2S 或 2R ,5R 或 5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2S 或 2R ,5S 或 5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((2R 或 2S ,5S 或 5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image839
向20 mL小瓶中添加1-(4-(5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(80 mg，0.126 mmol)，繼而添加TFA (0.13 mL)。將混合物在50℃下攪拌且加熱2 h。隨後將混合物濃縮。將所得殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/水w/0.1% TFA作為溶離劑)純化以產生呈非對映異構體混合物形式之產物。藉由對掌性SFC分離(IC，21 x 250 mm管柱，以35%之(2-丙醇w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)解析四種異構體以產生1-(4-((2R 或2S ,5R 或5S )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 114 ，第一 溶離峰)及1-(4-((2S 或2R ,5R 或5S )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 115 ，第二溶離峰)及1-(4-((2S 或2R ,5S 或5R )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 116 ，第三溶離峰)及1-(4-((2R 或2S ,5S 或5R )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 117 ，第四溶離峰)。
對於實例 114 而言：LCMS (C24 H32 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.70 (br s, 2H), 7.42 (dd,J = 8.4, 2.7 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.18 (dd,J = 11.1, 2.7 Hz, 1H), 4.75 (br s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.80 (s, 2H), 3.37 - 3.31 (m, 1H), 3.23 - 3.16 (m, 1H), 2.18 - 2.15 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 2.09 - 1.94 (m, 2H), 1.70 - 1.59 (m, 1H), 1.25 - 1.10 (m, 2H), 1.04 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.95 (d,J = 12.0 Hz, 3H)。
對於實例 115 而言：LCMS (C24 H32 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.61 (br s, 2H), 7.40 (dd,J = 8.2, 2.4 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.18 (dd,J = 11.0, 2.1 Hz, 1H), 4.75 (br s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.80 (s, 2H), 3.38 - 3.30 (m, 1H), 3.19 - 3.12 (m, 1H), 2.15 - 2.10 (m, 1H), 2.07 (s, 3H), 2.09 - 1.94 (m, 2H), 1.72 - 1.65 (m, 1H), 1.25 - 1.10 (m, 2H), 1.07 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.93 (d,J = 11.8 Hz, 3H)。
對於實例 116 而言：LCMS (C24 H32 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.52 (br s, 2H), 7.41 (dd,J = 8.4, 2.7 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.15 - 7.11 (m, 1H), 4.41 (br s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.85 (s, 2H), 3.30 - 3.20 (m, 1H), 3.13 - 3.09 (m, 1H), 2.18 - 2.11 (m, 1H), 2.00 (s, 3H), 2.00 - 1.84 (m, 2H), 1.75 - 1.66 (m, 1H), 1.24 - 1.10 (m, 2H), 1.04 (m, 6H), 0.91 (d,J = 6.5 Hz, 3H)。
對於實例 117 而言：LCMS (C24 H32 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.77 (br s, 2H), 7.43 (dd,J = 8.4, 2.7 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.18 (dd,J = 11.1, 2.7 Hz, 1H), 4.60 (br s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.83 (s, 2H), 3.26 - 3.22 (m, 1H), 3.10 - 3.06 (m, 1H), 2.18 - 2.16 (m, 1H), 2.04 (s, 3H), 2.01 - 1.87 (m, 2H), 1.75 - 1.69 (m, 1H), 1.24 - 1.10 (m, 2H), 1.03 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.93 (d,J = 6.5 Hz, 3H)。
以與關於製備實例 114-117 所述類似之方式，由適當醯肼及碳化二亞胺中間物來製備下表26中之本發明之實例化合物。藉由SFC分離解析所得異構混合物。表 26
實例 結構 SFC 條件 觀測之m/z [M + H]+
名稱
118
Figure 02_image841
 峰1；Lux-4 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
1-(4-((2R 或2S ,5R 或5S )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
119
Figure 02_image843
 峰2；Lux-4 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
1-(4-((2S 或2R ,5S 或5R )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
120
Figure 02_image845
 峰3；Lux-4 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
1-(4-((2R 或2S ,5S 或5R )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
121
Figure 02_image847
 峰4；Lux-4 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
1-(4-((2S 或2R ,5R 或5S )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
122
Figure 02_image849
 峰1；IC-3 4.6 x 100 mm管柱，以40%之(IPA w/0.05 % DEA改質劑)作為共溶劑 469
2-(4-((2R 或2S ,5R 或5S )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
123
Figure 02_image851
 峰2；IC-3 4.6 x 100 mm管柱，以40%之(IPA w/0.05 % DEA改質劑)作為共溶劑 469
2-(4-((2S 或2R ,5S 或5R )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
124
Figure 02_image853
 峰3；IC-3 4.6 x 100 mm管柱，以40%之(IPA w/0.05 % DEA改質劑)作為共溶劑 469
2-(4-((2R 或2S ,5S 或5R )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
125
Figure 02_image855
 峰4；IC-3 4.6 x 100 mm管柱，以40%之(IPA w/0.05 % DEA改質劑)作為共溶劑 469
2-(4-((2S 或2R ,5R 或5S )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
126
Figure 02_image857
 峰1及2 重疊；Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(MeOH w/0.05 % DEA改質劑)作為共溶劑 469
外消旋- 2-(4-((2R 或2S ,5R 或5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
127
Figure 02_image859
 峰3；Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(MeOH w/0.05 % DEA改質劑)作為共溶劑 469
2-(4-((2R 或2S ,5S 或5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
128
Figure 02_image861
 峰4；Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(MeOH w/0.05 % DEA改質劑)作為共溶劑 469
1-(4-((2S 或2R ,5R 或5S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-4-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
實例 129 及實例 130 ： (R )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(3- 甲基 -1-(( 甲磺醯基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺及 (R )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(5- 甲基 -1-(( 甲磺醯基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺 步驟 1 ： (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(3- 甲基 -1-(( 甲硫基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺與 (R )-N -(2,4- 二甲氧基苄基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(5- 甲基 -1-(( 甲硫基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺之混合物
Figure 02_image863
向1特拉姆小瓶中饋入(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(3-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺及(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(5-甲基-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 117 ) (391 mg，0.715 mmol)與(氯甲基)(甲基)硫烷(359 µL，4.29 mmol)於二噁烷(7.0 mL)中之混合物。向混合物中添加碳酸銫(466 mg，1.43 mmol)且隨後將混合物在75℃下攪拌且加熱60 h。將混合物冷卻至室溫。將混合物以水及DCM稀釋。將混合物傾入相分離器中。收集DCM層且濃縮。將所得殘餘物藉由以DCM中0-10%之MeOH作為溶離劑之矽膠管柱層析純化以產生(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(3-甲基-1-((甲硫基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺與(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(5-甲基-1-((甲硫基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺之混合物。LCMS (C30 H35 FN8 O3 S) (ES, m/z): 607 [M+H]+ 。步驟 2 ： (R )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(3- 甲基 -1-(( 甲磺醯基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺及 (R )-9- 氟 -8- 甲氧基 -2-(1-(5- 甲基 -1-(( 甲磺醯基 ) 甲基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -3- 基 )-[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -5- 胺
Figure 02_image865
將(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(3-甲基-1-((甲硫基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺與(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(5-甲基-1-((甲硫基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(328 mg，0.541 mmol)之混合物溶解於丙酮(4 mL)及水(1.35 mL)中。向混合物中添加Oxone® (過氧單硫酸鉀，665 mg，1.08 mmol)。將混合物在室溫下攪拌10 min。將混合物濃縮移除丙酮、以水及DCM稀釋且經由相分離器收集有機層。將有機層濃縮。向所得殘餘物中添加TFA (2.08 mL，27.0 mmol)且將混合物在50℃下攪拌且加熱16 h。隨後將混合物以水及DCM稀釋且經由相分離器收集DCM層並濃縮。將所得殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，MeCN/水(w/0.1% TFA改質劑)作為溶離劑)純化以產生(R )-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(3-甲基-1-((甲磺醯基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺，TFA (實例 129 ，第一溶離峰)及(R )-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(5-甲基-1-((甲磺醯基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺，TFA (實例 130 ，第二溶離峰)。
對於實例 129 而言：LCMS (C21 H25 FN8 O3 S) (ES, m/z): 489 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.87 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.19 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.67 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.44 (m, 1H), 3.17 (s, 1H), 2.99 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.20 (m, 1H), 1.87 (m, 3H)。
對於實例 130 而言：LCMS (C21 H25 FN8 O3 S) (ES, m/z): 489 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.87 (dd, J = 10.9, 3.6 Hz, 1H), 7.78 (s, 2H), 7.58 (s, 1H), 7.19 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.52 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.48 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 3.32 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.21 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.65 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.97 – 1.71 (m, 3H)。
以與關於製備實例 129 及實例 130 所述類似之方式，由適當中間物及市售起始材料來製備下表27中之本發明之實例化合物。表 27
實例 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
131
Figure 02_image867
 475
(R )-9-氟-8-甲氧基-2-(1-(1-((甲磺醯基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
132
Figure 02_image869
 525
(R )-2-(1-(3-(二氟甲基)-1-((甲磺醯基)甲基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
實例 133 ： (S 或 R )-1-(4-(3-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-3- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇 步驟 1 ： (S 或 R )-1-(4-(3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-3- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image871
向反應小瓶中添加(S 或R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-2-(3-氟哌啶-3-基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 90 ) (78 mg，0.161 mmol)、1-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 4 ) (52.9 mg，0.241 mmol)、tBuXPhos-Pd G3 (38.4 mg，0.048 mmol)及於THF (3 mL)中之第三丁醇鈉(93 mg，0.97 mmol)。將混合物以氮氣沖洗10 min。將混合物在90℃下攪拌且加熱16 h。將混合物冷卻至室溫、過濾且蒸發濾液之溶劑。將殘餘物藉由以DCM中0-8%之MeOH (含有0.2% NH4 OH)作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(S 或R )-1-(4-(3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇。LCMS (C31 H36 F2 N8 O4 ) (ES, m/z): 623 [M+H]+ 。步驟 2 ： (S 或 R )-1-(4-(3-(5- 胺基 -9- 氟 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-3- 氟哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image873
向8 mL閃爍小瓶中饋入(S 或R )-1-(4-(3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(70.0 mg，0.112 mmol)及TFA (750 µL，9.73 mmol)。將混合物在40℃下攪拌且加熱2 h。隨後將混合物冷卻且蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以含有0.05% TFA之MeCN/H2 O作為溶離劑)純化以產生(S 或R )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2甲基丙-2-醇2,2,2-三氟乙酸酯。LCMS (C22 H26 F2 N8 O2 ) (ES, m/z): 473 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.89 (s, 2H), 7.48 (dd, J = 8.3, 2.7 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.24 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 7.21 (dd, J = 11.1, 2.8 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.88 (s, 2H), 3.68 – 3.47 (m, -1H), 3.45 – 3.42 (m, 1H), 3.22 – 3.08 (m, 1H), 2.84 – 2.65 (m, 1H), 2.45 – 2.18 (m, 2H), 1.99 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 1.80 (dd, J = 9.0, 4.0 Hz, 1H), 1.03 (d, J = 2.7 Hz, 6H)。
以與關於製備實例 133 所述類似之方式，由中間物 91 及適當起始材料來製備下表28中之實例 134 。表 28
實例 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
134
Figure 02_image875
 473
(R 或S )-1-(4-(3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-3-氟哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
實例 135 ： 1-(4-((2R 或 2S ,5S 或 5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image877
將1-(4-((2R 或2S,5S 或5R )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-乙基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 113 ) (28.0 mg，0.0440 mmol)於TFA (50.5 mg，0.443 mmol)中之混合物在60℃下加熱1 h。蒸發溶劑且將所得殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以含有0.1% TFA之MeCN/H2 O作為溶離劑)純化以產生1-(4-((2R或2S,5S或5R)-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-乙基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇。LCMS (C24 H31 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 7.97 – 7.89 (m, 2H), 7.70 (s, 1H), 7.24 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 4.12 (s, 2H), 4.08 – 3.92 (m, 5H), 3.72 – 3.57 (m, 2H), 2.52 – 2.38 (m, 1H), 2.31 – 2.14 (m, 2H), 2.09 – 1.98 (m, 1H), 1.75 – 1.56 (m, 2H), 1.18 (s, 6H), 0.94 (t,J = 7.4 Hz, 3H)。實例 136 ： 1-(4-((2S 或 2R ,5S 或 5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image879
以與關於製備實例 135 所述類似之方式由中間物 114 來製備實例 136 。LCMS (C24 H31 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 7.93 (d,J = 11.9 Hz, 2H), 7.70 (s, 1H), 7.24 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 4.12 (s, 2H), 4.07 – 3.93 (m, 5H), 3.69 – 3.58 (m, 2H), 2.51 – 2.37 (m, 1H), 2.32 – 2.15 (m, 2H), 2.10 – 1.99 (m, 1H), 1.74 – 1.58 (m, 2H), 1.17 (s, 6H), 0.94 (t,J = 7.3 Hz, 3H)。實例 137 ： 1-(4-((2S 或 2R ,5S 或 5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image881
以與關於製備實例 135 所述類似之方式，由中間物 115 來製備實例 137 。LCMS (C24 H31 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 8.11 (s, 1H), 7.90 – 7.81 (m, 2H), 7.21 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 4.14 (d,J = 20.7 Hz, 3H), 3.98 (d,J = 12.7 Hz, 4H), 3.72 – 3.54 (m, 2H), 2.56 (d,J = 16.8 Hz, 1H), 2.45 (d,J = 20.5 Hz, 1H), 2.21 – 2.07 (m, 1H), 1.98 – 1.82 (m, 1H), 1.81 – 1.69 (m, 1H), 1.56 – 1.43 (m, 1H), 1.19 (s, 6H), 0.97 (t,J = 7.3 Hz, 3H)。實例 138 ： 1-(4-((2S 或 2R ,5S 或 5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 乙基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image883
以與關於製備實例 135 所述類似之方式，由中間物 116 來製備實例 138 。LCMS (C24 H31 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 8.13 (s, 1H), 7.86 (d,J = 13.4 Hz, 2H), 7.21 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 4.15 (d,J = 13.4 Hz, 3H), 3.99 (d,J = 8.8 Hz, 4H), 3.74 – 3.54 (m, 2H), 2.57 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 2.50 – 2.39 (m, 1H), 2.24 – 2.05 (m, 1H), 1.96 – 1.83 (m, 1H), 1.82 – 1.67 (m, 1H), 1.59 – 1.42 (m, 1H), 1.18 (s, 6H), 0.97 (t,J = 7.5 Hz, 3H)。實例 139 ：外消旋 -3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -2- 酮 步驟 1 ：外消旋 -3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -2- 酮
Figure 02_image885
向20 mL小瓶中添加外消旋 - 3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-2-酮(中間物 89 ) (0.102 g，0.212 mmol)、1-(4-碘-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(0.172 g，0.646 mmol)、碘化亞銅(I)(42.7 mg，0.224 mmol)、磷酸鉀(267 mg，1.26 mmol)及無水DMF (2.1 mL)。向混合物中充氮氣歷時5 min。向混合物中添加N1 ,N2 -二甲基乙-1,2-二胺(0.046 ml，0.43 mmol)。將混合物在100℃下攪拌且加熱2 h。將混合物藉由逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/H2 O (含有0.1% TFA)作為溶離劑)純化以產生外消旋 -3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-2-酮。LCMS (C31 H35 FN8 O5 ) (ES, m/z): 619 [M+H]+ 。步驟 2 ：外消旋 -3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 哌啶 -2- 酮
Figure 02_image887
向20 mL小瓶中添加外消旋 - 3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-2-酮(11.9 mg，0.0192 mmol)及TFA (0.26 mL)。將混合物在50℃下攪拌且加熱1 h。將混合物濃縮。將殘餘物藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/H2 O (含有0.1% TFA)作為溶離劑)純化以產生外消旋 -3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)哌啶-2-酮。LCMS (C22 H25 FN8 O3 ) (ES, m/z): 469 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.05 (s, 1H), 7.88 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 7.79 (br s, 2H), 7.66 (s, 1H), 7.18 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 4.18 (t,J = 7.8 Hz, 1H), 3.99 – 3.93 (m, 5H), 3.86 – 3.76 (m, 2H), 2.28 – 2.16 (m, 3H), 2.10 – 2.00 (m, 1H), 1.03 (s, 3H), 1.03 (s, 3H)。實例 140 及實例 141 ： (R )-1-(4-(2-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )N- 嗎啉基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 (R )-1-(4-(2-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )N- 嗎啉基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇 步驟 1 ： (R )-1-(4-(2-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )N- 嗎啉基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇與 (R )-1-(4-(2-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )N- 嗎啉基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇之混合物
Figure 02_image889
向20 mL小瓶中添加(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(嗎啉-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 87 ) (49.4 mg，0.105 mmol)、1-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇與1-(4-溴-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇之混合物(中間物 7 ) (31.0 mg，0.133 mmol)、tBuXPhos-Pd G3 (33.5 mg，0.0422 mmol)、第三丁醇鈉(60.8 mg，0.633 mmol)及無水THF (1.5 mL)。向混合物充以氮氣。隨後將混合物在100℃下攪拌且加熱數分鐘，隨後冷卻至23℃且添加額外之THF (1 mL)。將混合物在80℃下攪拌且加熱14 h。添加額外量之1-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇與1-(4-溴-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇之混合物(中間物 7 ) (42.5 mg，0.182 mmol)及tBuXPhos-Pd G3 (33.5 mg，0.0422 mmol)。將混合物在80℃下攪拌且加熱8 h。將混合物以DCM及MeOH稀釋且經Celite® (矽藻土)過濾。濃縮濾液。將所得殘餘物藉由以己烷中0-100%之EtOAc:EtOH (3:1)作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(R )-1-(4-(2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)N-嗎啉基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇與(R )-1-(4-(2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)N-嗎啉基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇之混合物。LCMS (C31 H37 FN8 O5 ) (ES, m/z): 621 [M+H]+ 。步驟 2 ： (R )-1-(4-(2-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )N- 嗎啉基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 (R )-1-(4-(2-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )N- 嗎啉基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image891
向4 mL小瓶中添加(R )-1-(4-(2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)N-嗎啉基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇與(R )-1-(4-(2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)N-嗎啉基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇之混合物(4.6 mg，0.0074 mmol)及TFA (0.10 mL)。將混合物在23℃下攪拌2 h。隨後將混合物在50℃下攪拌且加熱50 min。向一單獨小瓶中添加(R )-1-(4-(2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)N-嗎啉基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇與(R )-1-(4-(2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)N-嗎啉基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇之混合物(35.6 mg，0.0574 mmol)及TFA (0.78 mL)且將此混合物在50℃下攪拌且加熱50 min。將兩反應小瓶之內容物合併且濃縮成殘餘物。將殘餘物懸浮於MeOH中且過濾。將濾液濃縮成殘餘物。使所得殘餘物經受對掌性SFC分離(Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)以產生(R )-1-(4-(2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)N-嗎啉基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 140 )作為峰1及第二峰。第二峰含有雜質且因此藉由SFC (Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)純化，產生(R )-1-(4-(2-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)N-嗎啉基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 141 )。
對於實例 140 而言：LCMS (C22 H27 FN8 O3 ) (ES, m/z): 471 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.90 (d,J = 10.9 Hz, 1H), 7.80 (br s, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.18 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 4.95 (dd,J = 10.0, 2.5 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.07 – 4.00 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.88 (td,J = 11.1, 2.3 Hz, 1H), 3.83 (s, 2H), 3.07 – 2.97 (m, 2H), 2.72 (td,J = 11.5, 3.1 Hz, 1H), 2.12 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 1.02 (s, 3H)。
對於實例 141 而言：LCMS (C22 H27 FN8 O3 ) (ES, m/z): 471 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.89 (d,J = 10.9 Hz, 1H), 7.79 (br s, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.18 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 4.95 (dd,J = 9.7, 2.6 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.08 – 4.00 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.92 – 3.82 (m, 3H), 3.25 – 3.20 (m, 1H), 3.11 (dd,J = 11.5, 10.0 Hz, 1H), 2.96 – 2.90 (m, 1H), 2.87 (td,J = 11.3, 3.1 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 1.06 (s, 3H)。實例 142-145 ： (R 或 S )-2-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-4-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 硫代嗎啉 1,1- 二氧化物及 (S 或 R )-2-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-4-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 硫代嗎啉 1,1- 二氧化物及 (R 或 S )-2-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-4-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 硫代嗎啉 1,1- 二氧化物及 (S 或 R )-2-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-4-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 硫代嗎啉 1,1- 二氧化物 步驟 1 ： 2-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-4-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 硫代嗎啉 1,1- 二氧化物與 2-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-4-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 硫代嗎啉 1,1- 二氧化物之混合物
Figure 02_image893
向20 mL小瓶中添加外消旋 - 2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)硫代嗎啉1,1-二氧化物(中間物 88 ) (100 mg，0.194 mmol)、tBuXPhos-Pd G3 (154 mg，0.194 mmol)、1-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇與1-(4-溴-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇之混合物(中間物 7 ) (140 mg，0.598 mmol)及無水THF (3 mL)。向混合物中充氮氣歷時4 min。向混合物中添加第三丁醇鈉(112 mg，1.16 mmol)。將混合物在80℃下攪拌且加熱18 h。將混合物濃縮。將所得殘餘物懸浮於DCM中、與Celite® (矽藻土)混合且過濾。濃縮濾液。將所得殘餘物藉由以己烷中0-70%之EtOAc:EtOH (3:1)作為溶離劑之矽膠層析純化，產生外消旋 - 2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-4-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-3-甲基-1H -吡唑-4-基)硫代嗎啉1,1-二氧化物與外消旋 -2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-4-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-5-甲基-1H -吡唑-4-基)硫代嗎啉1,1-二氧化物之混合物。LCMS (C31 H37 FN8 O6 S) (ES, m/z): 669 [M+H]+ 。步驟 2 ： (R 或 S )-2-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-4-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 硫代嗎啉 1,1- 二氧化物及 (S 或 R )-2-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-4-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-3- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 硫代嗎啉 1,1- 二氧化物及 (R 或 S )-2-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-4-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 硫代嗎啉 1,1- 二氧化物及 (S 或 R )-2-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-4-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-5- 甲基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 硫代嗎啉 1,1- 二氧化物
Figure 02_image895
向20 mL小瓶中添加外消旋 - 2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-4-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-3-甲基-1H -吡唑-4-基)硫代嗎啉1,1-二氧化物與外消旋 -2-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-4-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-5-甲基-1H -吡唑-4-基)硫代嗎啉1,1-二氧化物之混合物(48.1 mg，0.0719 mmol)及TFA (0.96 mL)。將混合物在50℃下攪拌且加熱1 h。將混合物濃縮成殘餘物。將所得殘餘物懸浮於MeOH中且過濾。將濾液濃縮成殘餘物，將其藉由SFC (Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)純化以產生四個峰，將此四個峰濃縮。每個峰隨後藉由製備性逆相HPLC (Waters SunFire C18 OBD製備性管柱，19 mm X 100 mm，以MeCN/H2 O (含有0.1% TFA)作為溶離劑)個別地純化以產生最終化合物，(R 或S )-2-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-4-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-3-甲基-1H -吡唑-4-基)硫代嗎啉1,1-二氧化物及(S 或R )-2-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-4-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-3-甲基-1H -吡唑-4-基)硫代嗎啉1,1-二氧化物及(R 或S )-2-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-4-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-5-甲基-1H -吡唑-4-基)硫代嗎啉1,1-二氧化物及(S 或R )-2-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-4-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-5-甲基-1H -吡唑-4-基)硫代嗎啉1,1-二氧化物，分別對應於實例 142 (SFC 峰1)、實例 143 (SFC 峰2)、實例 144 (SFC 峰3)及實例 145 (SFC 峰4)。
對於實例 142 而言：LCMS (C22 H27 FN8 O4 S) (ES, m/z): 519 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.91 (d,J = 10.9 Hz, 1H), 7.88 (br s, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.21 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 4.96 (dd,J = 10.3, 3.5 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.87 – 3.76 (m, 3H), 3.72 – 3.65 (m, 1H), 3.65 – 3.53 (m, 2H), 3.53 – 3.45 (m, 1H), 3.44 – 3.34 (m, 1H), 2.06 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 1.04 (s, 3H)。
對於實例 143 而言：LCMS (C22 H27 FN8 O4 S) (ES, m/z): 519 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.91 (d,J = 10.9 Hz, 1H), 7.88 (br s, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.21 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 4.96 (dd,J = 10.3, 3.5 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.87 – 3.76 (m, 3H), 3.72 – 3.65 (m, 1H), 3.65 – 3.53 (m, 2H), 3.53 – 3.45 (m, 1H), 3.44 – 3.34 (m, 1H), 2.06 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 1.04 (s, 3H)。
對於實例 144 而言：LCMS (C22 H27 FN8 O4 S) (ES, m/z): 519 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.89 (d,J = 10.9 Hz, 1H), 7.86 (br s, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.20 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 4.96 (dd,J = 10.1, 3.4 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.87 – 3.78 (m, 3H), 3.64 – 3.54 (m, 3H), 3.51 – 3.35 (m, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 1.04 (s, 3H)。
對於實例 145 而言：LCMS (C22 H27 FN8 O4 S) (ES, m/z): 519 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.89 (d,J = 10.9 Hz, 1H), 7.86 (br s, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.20 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 4.96 (dd,J = 10.1, 3.4 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.87 – 3.78 (m, 3H), 3.64 – 3.54 (m, 3H), 3.51 – 3.35 (m, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 1.04 (s, 3H)。實例 146 及實例 147 ： (1R 或 1S ,3R 或 3S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1- 乙基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇及 (1S 或 1R ,3S 或 3R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1- 乙基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇
Figure 02_image897
藉由對掌性SFC (AD 250 x 30 mm管柱，以MeOH (0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)解析中間物 124 (70.0 mg，0.170 mmol)以產生(1R 或1S ,3R 或3S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-乙基-1H -吡唑-4-基)環己-1-醇(實例 146 ，第一溶離峰)及(1S 或1R ,3S 或3R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-乙基-1H -吡唑-4-基)環己-1-醇(實例 147 ，第二溶離峰)。
對於實例 146 而言：LCMS (C21 H24 FN7 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 426。1 H NMR (400MHz, MeOD-d 4 ) δ (ppm) 7.81 (s, 1H), 7.59-7.70 (m, 2H), 6.91 (br d,J =7.9 Hz, 1H), 4.20 (q,J =7.3 Hz, 2H), 3.88-3.99 (m, 3H), 2.89-3.01 (m, 1H), 2.75 (br d,J =13.2 Hz, 1H), 2.39 (br d,J =12.3 Hz, 1H), 1.97-2.13 (m, 2H), 1.88 (br dd,J =9.9, 3.3 Hz, 1H), 1.58-1.77 (m, 2H), 1.50-1.55 (m, 1H), 1.42-1.49 (m, 3H)。
對於實例 147 而言：LCMS (C21 H24 FN7 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 426。1 H NMR (400MHz, MeOD-d 4 ) δ (ppm) 7.71-7.87 (m, 2H), 7.64 (d,J =2.6 Hz, 1H), 6.96-7.18 (m, 1H), 4.20 (q,J =7.3 Hz, 2H), 3.97 (br d,J =13.2 Hz, 3H), 2.89-3.05 (m, 1H), 2.73 (br d,J =12.7 Hz, 1H), 2.40 (br d,J =12.7 Hz, 1H), 1.99-2.13 (m, 2H), 1.91 (br d,J =13.2 Hz, 1H), 1.62-1.79 (m, 2H), 1.52-1.59 (m, 1H), 1.47 (t,J =7.5 Hz, 3H)。實例 148 及實例 149 ： (1S 或 1R ,3R 或 3S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1- 乙基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇及 (1S 或 1R ,3R 或 3S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1- 乙基 -1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇
Figure 02_image899
藉由對掌性SFC (AD 250 x 30 mm管柱，以IPA (0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)解析中間物 125 (50.0 mg，0.120 mmol)以產生(1S 或1R ,3R 或3S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-乙基-1H -吡唑-4-基)環己-1-醇(實例 148 ，第一溶離峰)及(1S 或1R ,3R 或3S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-乙基-1H -吡唑-4-基)環己-1-醇(實例 149 ，第二溶離峰)。
對於實例 148 而言：LCMS (C21 H24 FN7 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 426。1 H NMR (400MHz, MeOD-d 4 ) δ (ppm) 7.78-7.94 (m, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.01-7.23 (m, 1H), 4.14 (q,J =7.2 Hz, 2H), 3.99 (br s, 3H), 3.46-3.56 (m, 1H), 2.38 (br d,J =14.0 Hz, 1H), 1.92-2.25 (m, 4H), 1.63-1.85 (m, 3H), 1.42 (t,J =7.2 Hz, 3H)。
對於實例 149 而言：LCMS (C21 H24 FN7 O2 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 426。1 H NMR (400MHz, MeOD-d 4 ) δ (ppm) 7.81 (br s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.11 (br s, 1H), 4.09-4.20 (m, 2H), 3.96 (br s, 3H), 3.51 (br s, 1H), 2.38 (br d,J =13.6 Hz, 1H), 1.96-2.24 (m, 4H), 1.59-1.85 (m, 3H), 1.42 (t,J =7.2 Hz, 3H)。實例 150 ： (1R ,3R 或 1S ,3S )-3-(5- 胺基 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇 步驟 1 ： 3-((( 三氟甲基 ) 磺醯基 ) 氧基 ) 環己 -3- 烯 -1- 甲酸乙酯
Figure 02_image901
向100 mL圓底燒瓶中添加2,6-二-第三丁基 吡啶(11.1 ml，49.4 mmol)、3-側氧基環己烷-1-甲酸乙酯(6.32 ml，35.3 mmol)及DCE (70.5 mL)。將混合物攪拌且在0℃下冷卻。經5 min向混合物中逐滴添加Tf2 O於THF中之1 M溶液(45.8 ml，45.8 mmol)。將混合物攪拌30 min。將混合物溫至室溫。2 h後，濃縮混合物。向所得殘餘物中添加1:1 DCM:己烷(20 mL)且使固體沈澱。藉由過濾移除固體。以1:1之DCM:己烷洗滌濾餅。蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以己烷中0-100%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化，產生3-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)環己-3-烯-1-甲酸乙酯。步驟 2 ： 3-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜硼戊環 -2- 基 ) 環己 -3- 烯 -1- 甲酸乙酯
Figure 02_image903
向100 mL圓底燒瓶中添加乙酸鉀(3.96 g，40.4 mmol)、Pd(dppf)Cl2 (0.660 g，0.808 mmol)、雙(頻哪醇根基)二硼(8.21 g，32.3 mmol)及3-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)環己-3-烯-1-甲酸乙酯(7.08 ml，26.9 mmol)。將燒瓶抽空且以氮氣回填三次。向燒瓶中添加DMA (40 mL)。將混合物在90℃下攪拌且加熱16 h。將混合物冷卻至室溫。將混合物傾入含有乙醚(150 mL)之燒瓶中。將混合物攪拌15 min。藉由過濾移除固體。將濾液以水(3 x 100 mL)洗滌。將有機層經無水硫酸鎂乾燥、過濾且蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以己烷中0-30%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)環己-3-烯-1-甲酸乙酯。LCMS (C15 H25 BO4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 281。 步驟 3 ： (R 或 S )-3-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -3- 烯 -1- 甲酸乙酯
Figure 02_image905
向100 mL燒瓶中添加Pd(dppf)Cl2 (0.708 g，0.968 mmol)、K3 PO4 (15.4 g，72.6 mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)環己-3-烯-1-甲酸乙酯(7.12 g，25.4 mmol)及1-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 4 ) (5.30 g，24.2 mmol)。向燒瓶中添加二噁烷(60 mL)及水(12 mL)。向混合物中充氮氣歷時5 min。將混合物在90℃下攪拌且加熱2 h。將混合物在EtOAc (10 mL)中稀釋且經頂部覆有無水硫酸鈉之Celite® (矽藻土)過濾。蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以己烷中0-70%之EtOAc作為溶離劑之矽膠層析純化以產生外消旋體。將外消旋體藉由對掌性SFC (ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，15% (MeOH w/NH4 OH改質劑)作為共溶劑)解析以產生(R 或S )-3-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)環己-3-烯-1-甲酸乙酯(第一溶離峰)。LCMS (C16 H24 N2 O3 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 293。步驟 4 ： (1R ,3R 或 1S ,3S )-3- 羥基 -3-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) 環己烷 -1- 甲酸乙酯
Figure 02_image907
向250 mL圓底燒瓶中添加(R 或S )-3-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)環己-3-烯-1-甲酸酯(933 mg，3.19 mmol)、乙醯基丙酮酸鈷(II)水合物(220 mg，0.798 mmol)及THF (50 mL)。向混合物中添加苯基矽烷(1.18 ml，9.57 mmol)且將混合物在室溫下暴露於空氣中攪拌5天。向混合物中添加TBAF (6.38 ml，6.38 mmol)於THF中之1 M溶液。將混合物攪拌15 min。蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以DCM中0-10%之MeOH作為溶離劑之矽膠層析純化以產生反- 非對映異構體(1R ,3R 或1S ,3S )-3-羥基-3-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)環己烷-1-甲酸乙酯。LCMS (C16 H26 N2 O4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 311。步驟 5 ： (1R ,3R 或 1S ,3S )-3- 羥基 -3-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己烷 -1- 卡肼
Figure 02_image909
向20 mL小瓶中添加(1R ,3R 或1S ,3S )-3-羥基-3-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)環己烷-1-甲酸乙酯(190 mg，0.612 mmol)、EtOH (1.5 mL)及水合肼(0.210 ml，3.67 mmol)。將混合物在90℃下加熱24 h。蒸發溶劑以產生(1R ,3R 或1S ,3S )-3-羥基-3-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)環己烷-1-卡肼。LCMS (C14 H24 N2 O4 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 297。步驟 6 ： (1R ,3R 或 1S ,3S )-3-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇
Figure 02_image911
上述流程中之星號(*)表示對掌性中心。向20 mL小瓶中添加(1R ,3R 或1S ,3S )-3-羥基-3-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)環己烷-1-卡肼(70.0 mg，0.236 mmol)、2-((((2,4-二甲氧基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-5-氟-3-甲氧基苯甲腈(105 mg，0.307 mmol)、二噁烷(0.5 mL)及AcOH (7 µL，0.12 mmol)。將混合物在65℃下攪拌且加熱2 h。蒸發溶劑。將殘餘物藉由以己烷中0-100%之EtOAc:EtOH (3:1)作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(1R ,3R 或1S ,3S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)環己-1-醇。LCMS (C32 H39 N7 O5 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 602。步驟 7 ： (1R ,3R 或 1S ,3S )-3-(5- 胺基 -7- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-1-(1-(2- 羥基 -2- 甲基丙基 )-1H - 吡唑 -4- 基 ) 環己 -1- 醇
Figure 02_image913
向20 mL小瓶中添加DDQ (30.3 mg，0.133 mmol)及DCM (1.0 mL)。將混合物在0℃下冷卻。向混合物中添加水(0.05 mL)。向混合物中添加於DCM (1 mL)中之溶液形式之(1R ,3R 或1S ,3S )-3-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)環己-1-醇(53.5 mg，0.089 mmol)。將混合物攪拌4 h。向混合物中添加1 M KOH水溶液(20 mL)且隨後以DCM (2 x 20 mL)萃取混合物。將有機層合併、經無水硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以己烷中0-100%之EtOAc:EtOH (3:1)作為溶離劑之矽膠層析純化。將產物藉由對掌性SFC (Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以20%之(MeOH，含有NH4 OH改質劑)作為共溶劑)進一步純化以產生(1R ,3R 或1S ,3S )-3-(5-胺基-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-1-(1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)環己-1-醇(實例 150) 。 LCMS (C23 H29 N7 O3 ) (ES, m/z) [M+H]+ : 452。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.73 (dd,J = 8.0, 1.2 Hz, 3H), 7.56 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.29 (t,J = 7.9 Hz, 1H), 7.24 – 7.10 (m, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.48 – 3.40 (m, 1H), 2.22 (d,J = 13.4 Hz, 1H), 2.09 (d,J = 11.9 Hz, 1H), 1.98 – 1.84 (m, 3H), 1.73 – 1.58 (m, 3H), 1.16 – 0.89 (m, 9H)。實例 151 ： (R )-2-(4-(3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -1- 醇
Figure 02_image915
向20 mL小瓶中添加(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 82 ) (400 mg，0.857 mmol)、第三丁醇鈉(330 mg，3.43 mmol)、4-溴-1-(2-甲基-1-((四氫-2H -哌喃-2-基)氧基)丙-2-基)-1H -吡唑(中間物 151 ) (520 mg，1.72 mmol)、tBuXPhos-Pd G3 (272 mg，0.343 mmol)及THF (5.7 mL)。將混合物以氮氣淨化5 min、密封且在105℃下加熱16 h。將反應混合物冷卻至室溫。向混合物中添加水(10 mL)及DCM (10 mL)。將混合物攪拌10 min且過濾。以相分離器收集有機層。蒸發溶劑。向所得殘餘物中添加TFA (3.8 ml，49 mmol)且將混合物在50℃下加熱3 h。蒸發溶劑且向所得殘餘物中添加DCM (10 mL)及氨於MeOH中之7 M溶液(1.07 ml，7.52 mmol)。將混合物攪拌1 h。將混合物以水洗滌，隨後以鹽水洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以DCM中0-40%之MeOH作為溶離劑之矽膠層析管柱純化以產生(R )-2-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇(實例 151 )。LCMS (C22 H27 FN8 O2 ) (ES, m/z): 455 [M+H]+ 。1 H NMR (600 MHz, 甲醇-d 4 ) δ 8.18 (s, 1H), 7.92 (d,J = 10.7 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.25 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 4.14 (dd,J = 12.0, 3.5 Hz, 1H), 3.84 (dd,J = 26.2, 11.7 Hz, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.66 (dt,J = 9.9, 5.9 Hz, 1H), 3.57 – 3.46 (m, 1H), 2.51 – 2.39 (m, 1H), 2.30 – 2.02 (m, 3H), 1.59 (s, 6H)。
以與關於製備實例 151 所述類似之方式，由適當起始芳基鹵化物及胺中間物來製備下表29中之本發明之實例化合物。表 29
實例 結構 觀測之m/z [M + H]+
名稱
152
Figure 02_image917
 469
(R )-4-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
153
Figure 02_image919
 491
(R )-1-(4-(3-(5-胺基-8-(二氟甲氧基)-9-氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
154
Figure 02_image921
 505
(R )-1-(4-(3-(5-胺基-8-(二氟甲氧基)-9-氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
155
Figure 02_image923
 483
外消旋 , 反 -2-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
156
Figure 02_image925
 469
外消旋 , 反 -2-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
實例 157 及實例 158 ： 1-(4-((3R ,5S 或 3S ,5R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇及 1-(4-((3S ,5R 或 3R ,5S )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-5- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙 -2- 醇
Figure 02_image927
向裝配有攪拌棒之20 mL微波小瓶中饋入外消旋 , 順 -N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(5-甲基哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 83 ) (400 mg，0.832 mmol)及THF (5.20 mL)。向混合物中添加1-(4-溴-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(中間物 24 ) (388 mg，1.67 mmol)，繼而添加tBuXPhos-Pd G3 (264 mg，0.333 mmol)及第三丁醇鈉(320 mg，3.33 mmol)。使氮氣鼓泡穿過混合物歷時10 min。隨後將小瓶以新鮮蓋子密封且在90℃下加熱16 h。將反應冷卻、以飽和氯化銨(1 mL)淬滅且添加Celite。將兩相混合物經頂部覆有無水MgSO4 之Celite過濾且濃縮濾液之溶劑。將所得殘餘物溶解於TFA (3.2 ml，42 mmol)中且在50℃下加熱3 h。將反應混合物冷卻、以DCM稀釋且以飽和NaHCO3 水溶液淬滅。將兩相混合物分離且以DCM進一步萃取含水相。將有機層合併、經無水MgSO4 乾燥、過濾且濃縮濾液之溶劑。將所得殘餘物藉由以DCM中0-20%之MeOH作為溶離劑之矽膠層析純化。隨後使經純化之產物經受對掌性SFC分離(Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以30%之(IPA w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)以產生1-(4-((3R ,5S 或 3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 157 ， 第一溶離峰)及1-(4-((3S ,5R 或 3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(實例 158 ， 第二溶離峰)。
對於實例 157 而言：LCMS (C24 H31 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.87 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 7.69 (s, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.18 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.83 (s, 2H), 3.46 (d,J = 10.9 Hz, 1H), 3.28 (d,J = 11.8 Hz, 1H), 3.13 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 2.64 (t,J = 11.3 Hz, 1H), 2.22 (d,J = 13.4 Hz, 1H), 2.16 (t,J = 11.1 Hz, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.94 (s, 1H), 1.38 (q,J = 12.3 Hz, 1H), 1.03 (d,J = 3.1 Hz, 6H), 0.97 (d,J = 6.6 Hz, 3H)。對於實例 158 而言：LCMS (C24 H31 FN8 O2 ) (ES, m/z): 483 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.87 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 7.69 (s, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.18 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.83 (s, 2H), 3.47 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 3.29 (s, 1H), 3.13 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 2.64 (t,J = 11.3 Hz, 1H), 2.22 (d,J = 12.5 Hz, 1H), 2.16 (t,J = 11.0 Hz, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.96 (s, 1H), 1.38 (q,J = 12.4 Hz, 1H), 1.03 (d,J = 3.1 Hz, 6H), 0.97 (d,J = 6.6 Hz, 3H)。
以與關於製備實例 157 及實例 158 所述類似之方式，由適當起始胺及芳基鹵化物來製備下表30中之本發明之實例化合物，其中藉由SFC分離相應最終化合物之所得異構混合物。表 30
實例 結構 SFC 條件 觀測之m/z [M + H]+
名稱
159  
Figure 02_image929
 峰1；Cellulose-2 30 x 250 mm管柱，以5-15%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 469
1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
160  
Figure 02_image931
 峰2；Cellulose-2 30 x 250 mm管柱，以5-15%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 469
1-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
161  
Figure 02_image933
 峰1；Cellulose-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-15%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 483
1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
162  
Figure 02_image935
 峰2；Cellulose-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-15%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 483
1-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
163  
Figure 02_image937
 峰1；Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 457
1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
164  
Figure 02_image939
 峰2；Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 457
1-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
165  
Figure 02_image941
 峰1；Lux-4 21 x 250 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
2-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
166  
Figure 02_image943
 峰2；Lux-4 21 x 250 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
2-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
167  
Figure 02_image945
 峰1；Lux-4 21 x 250 mm管柱，以30%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 471
1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
168  
Figure 02_image947
 峰2；Lux-4 21 x 250 mm管柱，以30%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 471
1-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
169  
Figure 02_image949
 峰1；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以0-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 483
2-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
170  
Figure 02_image951
 峰2；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以0-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 483
2-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
171  
Figure 02_image953
 峰1；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 469
2-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
172  
Figure 02_image955
 峰2；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 469
2-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
173  
Figure 02_image957
 峰1；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 483
1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
174  
Figure 02_image959
 峰2；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 483
1-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
175  
Figure 02_image961
 峰1；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 483
2-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
176  
Figure 02_image963
 峰2；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 483
2-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
177  
Figure 02_image965
 峰1；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 471
2-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
178  
Figure 02_image967
 峰2；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 471
2-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
179
Figure 02_image969
 峰1；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 457
2-(4-((3S ,5S 或3R ,5R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
180
Figure 02_image971
 峰2；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 457
2-(4-((3R ,5R 或3S ,5S )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
181
Figure 02_image973
 峰1；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 457
1-(4-((3S ,5S 或3R ,5R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
182
Figure 02_image975
 峰2；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 457
1-(4-((3R ,5R 或3S ,5S )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
183
Figure 02_image977
 峰1；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 469
(R 或S )-1-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
184
Figure 02_image979
 峰2；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 469
(S 或R )-1-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
185  
Figure 02_image981
 峰1；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以30%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 455
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
186  
Figure 02_image983
 峰2；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以30%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 455
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
187  
Figure 02_image985
 峰1；Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以30%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 455
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
188  
Figure 02_image987
 峰2；Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以30%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 455
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
189  
Figure 02_image989
 峰1；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
190  
Figure 02_image991
 峰2；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
191  
Figure 02_image993
 峰1； Chiral Technologies AD-H  21 x 250 mm管柱，以30%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 457
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
192  
Figure 02_image995
 峰2； Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以30%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 457
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
193  
Figure 02_image997
 峰1； Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
194  
Figure 02_image999
 峰2；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
195  
Figure 02_image1001
 峰1；Chiral Technologies IG 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
196  
Figure 02_image1003
 峰2；Chiral Technologies IG 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
197  
Figure 02_image1005
 峰1；Chiralpak AS-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 443
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
198  
Figure 02_image1007
 峰2；Chiralpak AS-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 443
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
199  
Figure 02_image1009
 峰1；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 455
(2R ,3S 或2S ,3R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
200  
Figure 02_image1011
 峰2；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 455
(2S ,3R 或2R ,3S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
201  
Figure 02_image1013
 峰1； Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 455
(2R ,3S 或2S ,3R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
202  
Figure 02_image1015
 峰2； Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 455
(2S ,3R 或2R ,3S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
203  
Figure 02_image1017
 峰1；Chiralpak AS-3 4.6 x 100 mm管柱，以0-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 443
(2R ,3S 或2S ,3R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
204  
Figure 02_image1019
 峰2；Chiralpak AS-3 4.6 x 100 mm管柱，以0-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 443
(2S ,3R 或2R ,3S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
205  
Figure 02_image1021
 峰1；Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。隨後為峰1；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以20%之(IPA w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 497
(R 或S )-3-(4-((3R ,5S 或 3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
206  
Figure 02_image1023
 峰1；Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。隨後為峰2；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以20%之(IPA w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 497
(S 或R )-3-(4-((3R ,5S 或 3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
207  
Figure 02_image1025
 峰2；Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 497
(R 或S )-3-(4-((3S ,5R 或 3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
208  
Figure 02_image1027
 峰1；ES Industries CC4 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。隨後為峰1；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 483
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
209  
Figure 02_image1029
 峰1；ES Industries CC4 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。隨後為峰2；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 483
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
210  
Figure 02_image1031
 峰2；ES Industries CC4 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 483
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
211  
Figure 02_image1033
 峰3；ES Industries CC4 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 483
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
212  
Figure 02_image1035
 峰1； Chiral Technologies AD-H 30 x 250 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 471
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
213  
Figure 02_image1037
 峰2； Chiral Technologies AD-H 30 x 250 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 471
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
214  
Figure 02_image1039
 峰3； Chiral Technologies AD-H 30 x 250 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 471
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
215  
Figure 02_image1041
 峰4；Chiral Technologies AD-H 30 x 250 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 471
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
216  
Figure 02_image1043
 峰1；IG 50 x 250 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 471
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
217  
Figure 02_image1045
 峰2；IG 50 x 250 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 471
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
218  
Figure 02_image1047
 峰3；IG 50 x 250 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 471
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
219  
Figure 02_image1049
 峰4；IG 50 x 250 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 471
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
220  
Figure 02_image1051
 峰1；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 483
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
221  
Figure 02_image1053
 峰2；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 483
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
222  
Figure 02_image1055
 峰3；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 483
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
223  
Figure 02_image1057
 峰4；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 483
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
224  
Figure 02_image1059
 峰1；Chiral Technologies AD-H 30 x 250 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。隨後為峰1；Chiral Technologies AD-H 30 x 250 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 483
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
225  
Figure 02_image1061
 峰1；Chiral Technologies AD-H 30 x 250 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。隨後為峰2；Chiral Technologies AD-H 30 x 250 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 483
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
226  
Figure 02_image1063
 峰2； Chiral Technologies AD-H 30 x 250 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 483
(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
227  
Figure 02_image1065
 峰3； Chiral Technologies AD-H 30 x 250 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 483
(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
實例 228-231 ： (2S ,3S 或 2R ,3R )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇及 (2S ,3S 或 2R ,3R )-3-(4-((2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇及 (2R ,3R 或 2S ,3S )-3-(4-((2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇及 (2R ,3R 或 2S ,3S )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇
Figure 02_image1067
步驟 1 ： (2S ,3S 及 2R ,3R )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇之非對映異構體混合物。
向N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-((3R ,6S 及 3S ,6R )-6-甲基-1-(1H -吡唑-4-基)哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 177 ) (530 mg，0.970 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液中添加順 -2,3-二甲基環氧乙烷(846 µL，9.70 mmol)及碳酸銫(1.26 g，3.88 mmol)。將混合物在125℃下攪拌且加熱5 h。將混合物冷卻至室溫且將混合物以水(20 mL)及乙酸乙酯(20 mL)稀釋。分離兩相混合物且以乙酸乙酯(20 mL)進一步萃取含水相。將經合併之有機層隨後以水(2 x 20 mL)及鹽水(1 x 20 mL)洗滌。將有機層經無水MgSO4 乾燥、過濾且蒸發溶劑。將殘餘物藉由以DCM中0-20%之MeOH作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(2S ,3S 及2R ,3R )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇之非對映異構體中間物混合物。步驟 2 ： (2S ,3S 或 2R ,3R )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇及 (2S ,3S 或 2R ,3R )-3-(4-((2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇及 (2R ,3R 或 2S ,3S )-3-(4-((2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇及 (2R ,3R 或 2S ,3S )-3-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 ) 丁 -2- 醇
向20 mL小瓶中添加3-(4-(5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇(475 mg，0.768 mmol)及TFA (1.77 mL 23.0 mmol)。將混合物在50℃下攪拌且加熱3 h。將混合物在室溫下冷卻且蒸發溶劑。將殘餘物溶解於MeOH (10 mL)中且以氨於MeOH中之7 M溶液(1.10 ml，7.68 mmol)淬滅。將混合物攪拌20分鐘。過濾混合物、以MeOH沖洗固體且濃縮濾液。將殘餘物懸浮於DCM中且過濾以移除剩餘銨鹽。將濾液直接負載至以DCM中0-15%之MeOH溶離之矽膠管柱上以產生異構體混合物。使混合物經受對掌性SFC分離(Phenomenex Lux-2 21 x 250 mm管柱，以45%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)以產生實例 228 與實例 229 之混合物(峰1)、(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇(實例 230 ，峰2)及(2R ,3R 或2S ,3S )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇(實例 231 ，峰3)。將峰1中獲得之混合物藉由SFC分離(Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)進一步純化以產生(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇(實例 228 ，峰1)及(2S ,3S 或2R ,3R )-3-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇(實例 229 ，峰2)。
對於實例 228 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 469 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.90 (d,J = 10.6 Hz, 1H), 7.73 (s, 2H), 7.22 (s, 1H), 7.19 (d,J = 7.4 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.73 (d,J = 5.0 Hz, 1H), 4.13 – 4.05 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.88 – 3.78 (m, 1H), 3.70 (s, 1H), 3.19 (s, 1H), 3.10 (t,J = 11.5 Hz, 1H), 2.01 (d,J = 21.4 Hz, 3H), 1.70 (d,J = 9.1 Hz, 1H), 1.34 (d,J = 6.9 Hz, 3H), 1.03 (d,J = 6.6 Hz, 3H), 0.92 (d,J = 6.1 Hz, 3H)。
對於實例 229 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 469 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.90 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 7.73 (s, 2H), 7.25 – 7.21 (m, 1H), 7.19 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 7.12 (d,J = 2.9 Hz, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.09 (s, 1H), 3.98 (d,J = 2.7 Hz, 3H), 3.83 (s, 1H), 3.70 (s, 1H), 3.19 (s, 1H), 3.10 (t,J = 10.5 Hz, 1H), 1.99 (s, 3H), 1.72 (s, 1H), 1.43 – 1.30 (m, 3H), 1.03 (d,J = 3.4 Hz, 3H), 0.92 (d,J = 3.0 Hz, 3H)。
對於實例 230 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 469 [M+H]+ 。H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.90 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 7.72 (s, 2H), 7.22 (s, 1H), 7.18 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.77 – 4.64 (m, 1H), 4.14 – 4.04 (m, 1H), 4.02 – 3.94 (m, 3H), 3.88 – 3.78 (m, 1H), 3.71 (d,J = 9.9 Hz, 1H), 3.18 (dd,J = 6.4, 4.4 Hz, 1H), 3.09 (t,J = 11.4 Hz, 1H), 2.01 (d,J = 22.2 Hz, 3H), 1.70 (d,J = 10.4 Hz, 1H), 1.38 – 1.31 (m, 3H), 1.03 (d,J = 6.4 Hz, 3H), 0.95 – 0.89 (m, 3H)。
對於實例 231 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 469 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.90 (d,J = 9.6 Hz, 1H), 7.73 (s, 2H), 7.22 (s, 1H), 7.19 (d,J = 6.7 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.73 (d,J = 3.3 Hz, 1H), 4.15 – 4.03 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.83 (d,J = 5.2 Hz, 1H), 3.70 (s, 1H), 3.19 (s, 1H), 3.10 (t,J = 11.0 Hz, 1H), 2.01 (d,J = 21.8 Hz, 3H), 1.70 (d,J = 9.6 Hz, 1H), 1.33 (d,J = 5.7 Hz, 3H), 1.03 (d,J = 5.4 Hz, 3H), 0.92 (d,J = 5.0 Hz, 3H)。
以與關於製備實例 228-231 所述類似之方式，由適當起始材料及中間物來製備下表31中之本發明之實例化合物，其中藉由SFC分離相應最終化合物之所得異構混合物。表 31
實例 結構 SFC 條件 觀測之m/z [M + H]+
名稱
232  
Figure 02_image1069
 峰1 (實例232 與實例 233 之混合物)；Phenomenex Lux-2 21 x 250 mm管柱，以45%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。隨後為峰1；Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 457
(2S ,3S 或 2R ,3R )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
233  
Figure 02_image1071
 峰1 (實例232 與實例 233 之混合物)；Phenomenex Lux-2 21 x 250 mm管柱，以45%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。隨後為峰2；Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以20%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 457
(2R ,3R 或 2S ,3S )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
234  
Figure 02_image1073
 峰2；Phenomenex Lux-2 21 x 250 mm管柱，以45%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 457
(2R ,3R 或 2S ,3S )-3-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
235  
Figure 02_image1075
 峰3；Phenomenex Lux-2 21 x 250 mm管柱，以45%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 457
(2S ,3S 或 2R ,3R )-3-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
236  
Figure 02_image1077
 峰1；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 469
(2S ,3R 或 2R ,3S )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
237  
Figure 02_image1079
 峰2；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 469
(2R ,3S 或 2S ,3R )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
238  
Figure 02_image1081
 峰1；Phenomenex Lux-3 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 469
(2S ,3R 或 2R ,3S )-3-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
239  
Figure 02_image1083
 峰2；Phenomenex Lux-3 21 x 250 mm管柱，以15%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 469
(2R ,3S 或 2S ,3R )-3-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丁-2-醇
240  
Figure 02_image1085
 峰1；Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 469
(R 或S )-1-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丙-2-醇
241  
Figure 02_image1087
 峰2；Chiral Technologies AS-H 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 469
(S 或R )-1-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)丙-2-醇
實例 242 及實例 243 ： (R 或 S )-3-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-3- 甲基丁 -2- 醇及 (S 或 R )-3-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-3- 甲基丁 -2- 醇
Figure 02_image1089
步驟 1 ： (R )-3-(4-(3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-3- 甲基丁 -2- 酮
向裝配有攪拌棒之5 mL微波小瓶中饋入(R )-N -(2,4-二甲氧基苄基)-9-氟-8-甲氧基-2-(哌啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺(中間物 82 ) (100 mg，0.214 mmol)及THF (1.3 mL)。向混合物中添加3-(4-溴-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-酮(中間物 137 ) (99.0 mg，0.429 mmol)，繼而添加tBuXPhos-Pd G3 (85.0 mg，0.107 mmol)及第三丁醇鈉(82.0 mg，0.857 mmol)。使氮氣鼓泡穿過混合物歷時10 min。隨後將小瓶以新鮮蓋子密封且在105℃下加熱16 h。將反應混合物冷卻至室溫且向混合物中添加水(10 mL)及DCM (10 mL)。將混合物攪拌10 min且過濾。收集且濃縮有機層。向所得殘餘物中添加TFA (826 µL，10.7 mmol)且將混合物在50℃下加熱3 h。蒸發溶劑。將所得殘餘物溶解於MeOH (5 mL)中且向混合物中添加氨於MeOH中之7 M溶液(1.53 ml，10.7 mmol)。將混合物攪拌30 min且過濾。以甲醇洗滌固體。濃縮濾液。將殘餘物溶解於DCM中且以水洗滌所得溶液。將有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以DCM中5-30%之MeOH作為溶離劑之矽膠層析純化以產生(R )-3-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-酮。LCMS (C23 H27 FN8 O2 ) (ES, m/z): 467 [M+H]+ 。步驟 2 ： (R 或 S )-3-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-3- 甲基丁 -2- 醇及 (S 或 R )-3-(4-((R )-3-(5- 胺基 -9- 氟 -8- 甲氧基 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 ) 哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-3- 甲基丁 -2- 醇
向(R )-3-(4-(3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-酮(49.0 mg，0.105 mmol)於EtOH (1 mL)中之溶液中添加NaBH4 (11.9 mg，0.315 mmol)且將混合物在室溫下攪拌1 h。蒸發溶劑。向所得殘餘物中添加DCM且以水洗滌混合物。將有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾且蒸發濾液之溶劑以產生異構體混合物。使混合物經受SFC對掌性分離(Chiral Technologies IA 21 x 250 mm管柱，以45%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑)以產生(R 或S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇(實例 242 ，峰1)及(S 或R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇(實例 243 ，峰2)。
對於實例 242 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 469 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.88 (dd,J = 10.9, 2.3 Hz, 1H), 7.71 (s, 2H), 7.42 – 7.34 (m, 1H), 7.24 – 7.07 (m, 2H), 4.80 (s, 1H), 3.97 (d,J = 2.2 Hz, 3H), 3.82 (s, 1H), 3.62 (d,J = 11.3 Hz, 1H), 3.36 (s, 1H), 3.24 (s, 1H), 2.82 (t,J = 10.2 Hz, 1H), 2.15 (s, 1H), 1.80 (d,J = 40.9 Hz, 3H), 1.48 – 1.42 (m, 3H), 1.42 – 1.34 (m, 3H), 0.73 (dd,J = 6.1, 2.3 Hz, 3H)。
對於實例 243 而言：LCMS (C23 H29 FN8 O2 ) (ES, m/z): 469 [M+H]+ 。1 H NMR (499 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.93 – 7.83 (m, 1H), 7.71 (s, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.22 – 7.10 (m, 2H), 4.81 (s, 1H), 4.01 – 3.95 (m, 3H), 3.82 (s, 1H), 3.62 (d,J = 10.8 Hz, 1H), 3.37 (s, 1H), 3.24 (s, 1H), 2.82 (t,J = 11.3 Hz, 1H), 2.55 (d,J = 9.7 Hz, 1H), 2.15 (s, 1H), 1.90 – 1.67 (m, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 0.76 – 0.67 (m, 3H)。
以與關於製備實例 242 及實例 243 所述類似之方式，由適當起始胺及芳基鹵化物來製備下表32中之本發明之實例化合物，其中藉由SFC分離相應最終化合物之所得異構混合物。表 32
實例 結構 SFC 條件 觀測之m/z [M + H]+
名稱
244
Figure 02_image1091
 峰1；Chiral Technologies IA 21 x 250 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
(R 或S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
245
Figure 02_image1093
 峰2；Chiral Technologies IA 21 x 250 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 469
(S 或R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
246
Figure 02_image1095
 峰1；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 457
(R 或S )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
247
Figure 02_image1097
 峰2；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 457
(S 或R )-3-(4-((R )-3-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
實例 248 及實例 249 ： 2-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -7,9- 二氟 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇及 2-(4-((2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5- 胺基 -7,9- 二氟 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇
Figure 02_image1099
步驟 1 ： 2-(4-(5-(5-((2,4- 二甲氧基苄基 ) 胺基 )-7,9- 二氟 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇
在50℃下，在氮氣氛下向1-(1-(1,3-二羥基-2-甲基丙-2-基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-卡肼(105 mg，0.336 mmol) (中間物 166 )於DMF (1 mL)中之溶液中添加AcOH (9.63 µL，0.168 mmol)、2-((((3,4-二甲基苄基)亞胺基)亞甲基)胺基)-3,5-二氟苯甲腈(中間物 37 ) (100 mg，0.336 mmol)。將混合物在50℃下攪拌且加熱16 h。將混合物冷卻、以水(20 mL)稀釋且以EtOAc (2 x 20 mL)萃取。將有機層經無水Na2 SO4 乾燥、過濾且蒸發溶劑。將所得殘餘物藉由以DCM中10%之MeOH作為溶離劑之製備性矽膠TLC純化以產生2-(4-(5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇。LCMS (C31 H36 F2 N8 O4 ) (ES, m/z): 623 [M+H]+ 。步驟 2 ： 2-(4-(5-(5- 胺基 -7,9- 二氟 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-3- 羥基 -2- 甲基丙基 2,2,2- 三氟乙酸酯
在10℃下，在氮氣氛下向2-(4-(5-(5-((2,4-二甲氧基苄基)胺基)-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇(60 mg，0.096 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液中添加TFA (2.0 ml，26 mmol)。將混合物在10℃下攪拌16 h。蒸發溶劑以產生粗產物2-(4-(5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-羥基-2-甲基丙基2,2,2-三氟乙酸酯，其不經任何進一步純化即用於下一步驟中。LCMS (C24 H25 F5 N8 O3 ) (ES, m/z): 569 [M+H]+ 。步驟 3 ： 2-(4-((2S ,5R 或 2R ,5S )-5-(5- 胺基 -7,9- 二氟 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇及 2-(4-((2R ,5S 或 2S ,5R )-5-(5- 胺基 -7,9- 二氟 -[1,2,4] 三唑并 [1,5-c] 喹唑啉 -2- 基 )-2- 甲基哌啶 -1- 基 )-1H - 吡唑 -1- 基 )-2- 甲基丙烷 -1,3- 二醇
在10℃下，在氮氣氛下向2-(4-(5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-羥基-2-甲基丙基2,2,2-三氟乙酸酯(40 mg，0.070 mmol)於MeOH (2 mL)中之溶液中添加Na2 CO3 (7.5 mg，0.070 mmol)。將混合物在10℃下攪拌1h。蒸發溶劑以產生異構體混合物。使混合物經受SFC對掌性分離(Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑)以產生2-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇(實例 248 ，峰1)及2-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇(實例 249 ，峰2)。
對於實例 248 而言：LCMS (C22 H26 F2 N8 O2 ) (ES, m/z): 473 [M+H]+ 。1 H NMR (500MHz, 甲醇-d4 ) δ = 7.71 (br dd,J =1.3, 6.8 Hz, 1H), 7.38 - 7.26 (m, 2H), 7.22 (s, 1H), 3.78 - 3.68 (m, 4H), 3.64 (br dd,J =3.8, 6.1 Hz, 1H), 3.41 (br d,J =8.2 Hz, 1H), 2.96 (s, 1H), 2.82 (s, 1H), 2.06 - 1.99 (m, 2H), 1.98 (s, 1H), 1.73 (br dd,J =3.1, 12.7 Hz, 1H), 1.42 (s, 3H), 1.03 (d,J =6.7 Hz, 3H)。
對於實例 249 而言：LCMS (C22 H26 F2 N8 O2 ) (ES, m/z): 473 [M+H]+ 。1 H NMR (500MHz, 甲醇-d4 ) δ = 7.84 (br s, 1H), 7.53 - 7.41 (m, 2H), 7.36 (br s, 1H), 3.93 - 3.79 (m, 4H), 3.78 (br s, 1H), 3.55 (br s, 1H), 2.22 (br s, 1H), 2.18 - 2.09 (m, 2H), 1.87 (br d,J =10.1 Hz, 1H), 1.54 (s, 3H), 1.31 (s, 2H), 1.16 (d,J =6.6 Hz, 3H)。
以與關於製備實例 248 及實例 249 所述類似之方式，由適當起始醯肼來製備下表33中之本發明之實例化合物，其中藉由SFC分離相應最終化合物之所得異構混合物。表 33
實例 結構 SFC 條件 觀測之m/z [M + H]+
名稱
250  
Figure 02_image1101
 峰1；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 485
2-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇
251  
Figure 02_image1103
 峰2；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑 485
2-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,3-二醇
252  
Figure 02_image1105
 峰2；Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。隨後為峰1；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 485
(R 或S )-2-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,2-二醇
253  
Figure 02_image1107
 峰2；Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。隨後為峰2；Chiralpak AD-3 4.6 x 150 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 485
(S 或R )-2-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,2-二醇
254  
Figure 02_image1109
 峰3；Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 485
(R 或S )-2-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,2-二醇
255  
Figure 02_image1111
 峰4；Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 485
(S 或R )-2-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,2-二醇
256  
Figure 02_image1113
 峰3；Cellulose 2 4.6 x 100 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。隨後為峰1；Chiralpak AS-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 473
(R 或S )-2-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,2-二醇
257  
Figure 02_image1115
 峰3；Cellulose 2 4.6 x 100 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。隨後為峰2；Chiralpak AS-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(IPA w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 473
(S 或R )-2-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,2-二醇
258  
Figure 02_image1117
 峰4；Cellulose 2 4.6 x 100 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 473
(R 或S )-2-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,2-二醇
259  
Figure 02_image1119
 峰5；Cellulose 2 4.6 x 100 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 473
(S 或R )-2-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,2-二醇
260  
Figure 02_image1121
 峰1；Chiralpak AS-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 487
(R 或S )-2-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,2-二醇
261  
Figure 02_image1123
 峰2；Chiralpak AS-3 4.6 x 100 mm管柱，以5-40%之(MeOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 487
(S 或R )-2-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-7,9-二氟-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙烷-1,2-二醇
262  
Figure 02_image1125
 峰1；ES Industries CC4 21 x 250 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 468
2-((3R ,6S 或3S ,6R )-1-(1-(2-胺基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
263  
Figure 02_image1127
 峰2；ES Industries CC4 21 x 250 mm管柱，以40%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 468
2-((3S ,6R 或3R ,6S )-1-(1-(2-胺基-2-甲基丙基)-1H -吡唑-4-基)-6-甲基哌啶-3-基)-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-5-胺
264  
Figure 02_image1129
 峰1；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 483
(R 或S )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
265  
Figure 02_image1131
 峰2 (實例265 與實例 266 之混合物)；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。隨後為峰1；Lux-4 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑) 483
(S 或R )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
266  
Figure 02_image1133
 峰2 (實例265 與實例 266 之混合物)；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。隨後為峰2；Lux-4 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑) 483
(R 或S )-3-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
267  
Figure 02_image1135
 峰3；ES Industries CCA 21 x 250 mm管柱，以25%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑 483
(S 或R )-3-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
268  
Figure 02_image1137
 峰1 (實例268 與實例 269 之混合物)；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以10%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。隨後為峰1；ID 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 483
(R 或S )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
269  
Figure 02_image1139
 峰1 (實例268 與實例 269 之混合物)；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以10%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。隨後為峰2；ID 21 x 250 mm管柱，以35%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 483
(S 或R )-3-(4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
270  
Figure 02_image1141
 峰2；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以10%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 483
(R 或S )-3-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
271  
Figure 02_image1143
 峰3；Chiral Technologies OJ-H 21 x250 mm管柱，以10%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 483
(S 或R )-3-(4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-7-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)-3-甲基丁-2-醇
272  
Figure 02_image1145
 峰1；Chiralpak AS-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 467
1-((4-((2S ,5R 或2R ,5S )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丙-1-醇
273  
Figure 02_image1147
 峰2；Chiralpak AS-3 4.6 x 150 mm管柱，以5-40%之(EtOH w/0.05% DEA改質劑)作為共溶劑。 467
1-((4-((2R ,5S 或2S ,5R )-5-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-2-甲基哌啶-1-基)-1H -吡唑-1-基)甲基)環丙-1-醇
274  
Figure 02_image1149
 峰2；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以30%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 483
1-(4-((3R ,5S 或3S ,5R )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
275  
Figure 02_image1151
 峰3；Chiral Technologies AD-H 21 x 250 mm管柱，以30%之(MeOH w/0.1% NH4 OH改質劑)作為共溶劑。 483
1-(4-((3S ,5R 或3R ,5S )-3-(5-胺基-9-氟-8-甲氧基-[1,2,4]三唑并[1,5-c]喹唑啉-2-基)-5-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-1H -吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
生物分析
根據下述方法量測下表中所示本發明之每種化合物所報導之IC50 值。
A2a受體親和力結合分析量測對A2a腺苷受體具有高親和力之氚化配位體與由重組表現人類A2a腺苷受體之HEK293或CHO細胞製得之膜在不同濃度之本發明化合物存在下之結合量。在每次分析中，將所測試之本發明之化合物溶解於100%之DMSO中且在100%之DMSO中進一步稀釋以產生通常間隔半個對數(log)之10點滴定，以便最終分析濃度不超過10 μM化合物或1% DMSO。使用放射性配位體結合量測 A2a 結合親和力
將148 μL (5 μg/mL)膜(Perkin Elmer，目錄號RBHA2aM400UA)及2 μL待測試之本發明化合物(測試化合物)轉移至96孔聚丙烯分析盤之個別孔中且在室溫下培育15至30分鐘。將[3 H] SCH58261 ((7-(2-苯基乙基)-5-胺基-2-(2-呋喃基)-吡唑并-[4,3-e]-1,2,4-三唑并[1,5-c]嘧啶))在分析緩衝液(50 mM Tris pH 7.4，10 mM MgCl2 ，0.005%吐溫20)中稀釋至4 nM之濃度且將50 μL轉移至分析盤之每孔中。為定義總體且非特異性之結合，亦包括分別含有1% DMSO及1 μM ZM241385之孔(Tocris Bioscience，目錄號1036)。將分析盤在室溫下伴隨攪拌培育60分鐘。使用FilterMate Harvester® (Perkin Elmer)，經UniFilter-96® PEI塗佈盤(Perkin Elmer，目錄號6005274或6005277)過濾分析盤之內容物。藉由抽吸分析盤之內容物歷時5秒鐘，隨後以冰冷之洗滌緩衝液(50 mM Tris-HCl pH 7.4，150 mM NaCl)洗滌且抽吸內容物三次，且由真空歧管乾燥培養盤歷時30秒鐘來達成過濾。將過濾盤在55℃下培育至少1小時且使其乾燥。將過濾盤之底部用襯帶密封。向過濾盤之每個孔中添加40 μL Ultima Gold™ (Perkin Elmer，目錄號6013329)且將培養盤頂部用TopSeal-A PLUS®透明培養盤密封條(Perkin Elmer，目錄號6050185)密封。將培養盤培育至少20分鐘且隨後使用TopCount® (Perkin Elmer)閃爍計數器測定每個孔中剩餘之放射活性量。在標準化為總體且非特異性之結合後，計算每種化合物濃度時之效應百分比。使用基於Levenberg-Marquardt演算法之4參數對數擬合電子分析效應百分比相對於化合物濃度對數(log)之曲線以產生IC50 值。量測 A2b 結合親和力
使用放射性配位體過濾結合分析藉由實驗來測定本發明之化合物對人類A2b腺苷受體所報導之親和力。此分析量測氚化專有A2b受體拮抗劑在存在及不存在本發明之化合物時與由重組表現人類A2b腺苷受體(Perkin Elmer，目錄號ES-013-C)之HEK293細胞製得之膜的結合量。
為進行分析，首先將待測試之本發明化合物溶解於100%之DMSO中且在100% DMSO中進一步稀釋以產生通常間隔半個對數(log)之10點滴定，以便最終分析濃度不超過10 μM化合物或1% DMSO。將148 μL (135 μg/mL)膜及2 μL測試化合物轉移至96孔聚丙烯分析盤之個別孔中且在室溫下伴隨攪拌培育15至30分鐘。將氚化放射性配位體在分析緩衝液(不含鎂及鈣之磷酸鹽緩衝鹽水，pH 7.4；GE Healthcare Life Sciences，目錄號SH30256.01)中稀釋至14 nM之濃度且隨後向分析盤之每孔中轉移50 μL溶液。為定義總體且非特異性之結合，亦包括分別含有1% DMSO及20 μM N-乙基甲醯胺基腺苷(Tocris Bioscience，目錄號1691)之孔。將分析盤之孔在室溫下伴隨攪拌培育60分鐘，隨後使用FilterMate Harvester® (Perkin Elmer)或類似設備經UniFilter-96® PEI塗佈盤(Perkin Elmer，目錄號6005274或6005277)過濾。藉由抽吸分析盤之內容物歷時5秒鐘，隨後以冰冷之洗滌緩衝液(補充有0.0025% Brij58之分析緩衝液)洗滌且抽吸內容物三次，且由真空歧管乾燥培養盤歷時30秒鐘來達成過濾。將過濾盤在55℃下培育至少1小時且使其乾燥。隨後將過濾盤之底部用襯帶密封。向過濾盤之每個孔中添加40 μL Ultima Gold™ (Perkin Elmer，目錄號6013329)且將培養盤頂部用TopSeal-A PLUS®透明培養盤密封條(Perkin Elmer，目錄號6050185)密封。隨後將培養盤培育至少20分鐘且隨後使用TopCount® (Perkin Elmer)閃爍計數器測定每個孔中剩餘之放射活性量。在標準化為總體且非特異性之結合後，計算每種化合物濃度時之效應百分比。使用基於Levenberg-Marquardt演算法之4參數對數擬合電子分析效應百分比相對於化合物濃度對數(log)之曲線以產生IC50 值。
實例 A2A IC50 結合(nM) A2B IC50 結合(nM)
1 7.5 554.2
2 3.7 9.4
3 1.5 180.4
4 4.6 2.6
5 3.3 1.6
6 2.0 85.9
7 3.7 104.1
8 4.5 149.3
9 0.5 136.0
10 3.5 63.4
11 0.5 56.0
12 1.7 75.0
13 0.7 72.6
14 3.0 224.9
15 38.4 905.2
16 0.8 426.0
17 1.7 433.9
18 0.7 13.5
19 0.7 87.3
20 5.8 163
21 0.3 514.6
22 8.6 27.6
23 2.0 15.9
24 13.8 480.5
25 0.6 61.7
26 3.9 48.7
27 1.8 860.8
28 2.8 76.3
29 1.5 301.1
30 0.4 97.9
31 1.7 94.8
32 0.5 6.9
33 3.6 17.5
34 1.4 29.7
35 0.6 12.2
36 1.6 93.0
37 1.1 468.1
38 16.9 182.4
39 1.1 43.3
40 1.2 9.2
41 1.2 42.8
42 4.3 475.7
43 0.7 3.4
44 1.3 20.4
45 1.8 150.4
46 0.6 86.4
47 8.2 284.2
48 0.6 17.6
49 0.3 2.7
50 18.3 1889
51 21.0 2079
52 18.3 3006
53 44.1 4239
54 3.3 194.6
55 10.6 500.2
56 1.8 846.5
57 48.3 85.6
58 13.6 136.2
59 67.0 4744
60 31.4 5862
61 5.0 99.0
62 146.1 382.8
63 242.2 2431
64 1.0 555.3
65 1.2 227.9
66 0.6 957.1
67 44%抑制 在1000 nM下 31%抑制 在10000 nM下
68 181.4 31%抑制 在10000 nM下
69 2.6 561.4
70 0.6 786.5
71 35.6 43%抑制 在10000 nM下
72 2.0 484
73 436.0 5124
74 0.9 153.3
75 56.9 54%抑制 在10000 nM下
76 256.4 34%抑制 在10000 nM下
77 0.4 107.9
78 0.9 233.7
79 16.0 3141
80 11.6 404.5
81 121.1 6582
82 4.9 63.0
83 2.7 113.0
84 2.3 116.6
85 5.2 192.1
86 0.3 164.7
87 0.4 133.8
88 0.1 1.8
89 0.2 3.4
90 1.2 29.0
91 44.7 4624
92 10.9 602.3
93 5.8 314.6
94 7.8 752.0
95 205 5041
96 0.7 24.6
97 0.6 33.3
98 0.9 116.4
99 4.4 230.9
100 1.4 4.8
101 32.7 390.0
102 103.5 538.7
103 0.5 136.7
104 17.7 766.1
105 328.6 743.0
106 316.4 429.6
107 126.9 1522
108 36%抑制 在1000 nM下 8474
109 0.7 7.8
110 0.2 1.8
111 0.7 16.5
112 0.4 7.9
113 58.1 470.5
114 50.6 2905
115 2.9 895.1
116 207.4 35%抑制 在10000 nM下
117 0.2 13.0
118 1.9 386.7
119 51.6 1302
120 0.6 7.8
121 55.4 5344
122 368.7 2058
123 0.3 422.2
124 0.3 1.7
125 86.4 2501
126 2.6 2158
127 120.5 1158
128 0.3 2.4
129 4.1 469.9
130 1.2 78.7
131 11.8 66.0
132 6.7 242.6
133 4.3 558.5
134 123.6 4288
135 14.1 583.3
136 1.0 7.9
137 79.3 924.5
138 13.2 2257
139 16.8 2824
140 0.8 2723
141 24.1 1756
142 32%抑制 在1000 nM下 7937
143 984.1 7557
144 30%抑制 在1000 nM下 7143
145 32%抑制 在1000 nM下 8046
146 2.1 137.1
147 870.2 6333
148 385.1 4429
149 1.8 96.6
150 1.4 180.6
經 cAMP 細胞基分析量測 A2A 及 A2B 拮抗作用
使用量測細胞內環狀AMP含量變化之套組(LANCE cAMP 384 Kit, Perkin Elmer，目錄號AD0264)來測定化合物拮抗人類A2A 及A2B 腺苷受體之能力。將先前冷凍於恢復培養基(Life Technologies，目錄號12648-010)中之重組表現人類A2A 或A2B 受體之HEK293細胞解凍且稀釋於刺激緩衝液(HBSS (Hyclone SH 30268.01)、5 mM HEPES (Gibco 15630-106)、200 nM咯利普蘭(rolipram)(Tocris，目錄號0905)及1.5 %(V/v) BSA穩定劑(套組組分)中。將細胞懸浮液以200 x g離心10 min且隨後再懸浮於補充有以1:10000稀釋之Alexa Fluor 647抗cAMP抗體之刺激緩衝液中至6.0 x105 個細胞/mL之密度。使用Labcyte Echo 550聲學施配器將至多25 nL溶解於DMSO中之測試化合物轉移至乾燥Optiplate-384培養盤(Perkin Elmer，目錄號6008289)之孔中。所有後續液體添加均使用多道移液器來進行。接著，將5 µL細胞懸浮液添加至Optiplate-384之孔中且在37℃及5% CO2 下在潮濕環境中培育30 min。此時間之後，對於A2A 及A2B 而言分別添加5 µL之300 nM或600 nM腺苷(Sigma目錄號A9251)且在37℃及5% CO2 下在潮濕環境中培育30分鐘。此時，根據製造商方案藉由將經LANCE Eu-W8044標記之抗生蛋白鏈菌素與生物素-cAMP合併於偵測緩衝液中來製備偵測混合物。向覆蓋有培養盤封條之Optiplate-384之每個孔中添加10 µL偵測混合物且在周圍條件下培育2小時，之後使用Envision (Perkin Elmer, Waltham, MA)多模培養盤閱讀器讀取培養盤。藉由將最小效應定義為在0.25% (v/v) DMSO存在下之刺激且將最大效應定義為在1 μM ZM241385 (Cayman，目錄號1036)存在下之刺激來將資料標準化。效應百分比資料相對於化合物濃度對數之曲線擬合使用4參數濃度反應曲線擬合演算法來計算IC50 值。所測試之化合物濃度為10,000、3,333、1,111、370.4、123.4、41.2、13.7、4.6、1.5及0.5 nM，剩餘0.25%為DMSO。
實例 A2A IC50 cAMP (nM) A2B IC50 cAMP (nM)
151 3.8 56.9
152 5.9 371
153 7.4 719.8
154 1.2 974.1
155 23.9 1436
156 9.5 358.1
157 33.4 4481
158 1.1 32.9
159 1.0 29.3
160 8.7 647.8
161 38.9 3268
162 0.7 20.7
163 36.0 5306
164 1.9 47.7
165 0.8 6.4
166 20.0 2769
167 0.6 46.0
168 23.9 4723
169 96.5 3382
170 0.8 14.1
171 1.2 11.3
172 60.5 14%抑制 在10000 nM下
173 20.7 2022
174 0.6 30.7
175 30.2 2004
176 0.9 10.2
177 154 3957
178 0.6 11.5
179 4.0 335.5
180 54.0 5342
181 16.0 5099
182 361.9 ＞10000
183 2.0 90.6
184 4.9 345.5
185 1.1 49.8
186 1.0 25.8
187 2.6 95.8
188 1.5 53.1
189 0.5 53.4
190 0.8 55.9
191 0.9 92.4
192 0.8 72.4
193 1.3 250.7
194 1.7 318.4
195 3.4 389.5
196 3.7 474.9
197 6.4 93.0
198 4.3 52.4
199 2.5 97.5
200 2.5 102.5
201 1.9 38.4
202 1.4 62.4
203 7.7 53.2
204 7.8 87.7
205 7.0 1146
206 13.0 4314
207 0.9 10.37
208 0.7 2799
209 0.7 634.9
210 16.2 35%抑制 在10000 nM下
211 89.3 ＞10000
212 121.7 27%抑制 在10000 nM下
213 330.8 ＞10000
214 0.5 34.09
215 0.4 27.5
216 1.0 159.7
217 1.1 161.3
218 235.8 5775
219 246.7 27%抑制 在10000 nM下
220 20.4 30%抑制 在10000 nM下
221 0.5 63
222 34.6 3277
223 0.7 46
224 0.4 13.1
225 0.4 12.1
226 17.6 1611
227 40.2 5071
228 0.8 16.1
229 1.0 6.6
230 32.9 723.7
231 121.5 3845
232 1.3 12.7
233 0.7 5.6
234 46.8 1195
235 438.8 4450
236 1.0 5.1
237 0.8 8.7
238 21.8 2438
239 75.1 10%抑制 在10000 nM下
240 1.2 22.6
241 1.3 21.7
242 2.0 34.9
243 2.6 50.7
244 0.9 18.8
245 2.0 25.8
246 3.2 21.3
247 4.5 21.8
248 1.4 8.4
249 26.9 197.1
250 0.7 4.9
251 39.5 387.1
252 95.0 8157
253 123.1 ＞10000
254 1.5 10.
255 2.6 28.8
256 240.7 3892
257 540.6 25%抑制 在10000 nM下
258 2.3 8.1
259 2.3 11.8
260 1.7 10.0
261 86.6 1473
262 2.2 23.9
263 26.0 510.8
264 3.0 14.3
265 1.3 4.5
266 64.2 579.6
267 175.1 1215
268 0.7 4.7
269 1.2 6.4
270 5.2 30.3
271 21.4 241.8
272 43.6 5800
273 1.2 26.7
274 0.7 70.5
275 15.6 2468
Figure 108142874-A0101-11-0003-3

Claims (17)

  1. 一種化合物，其具有結構式(I)：
    Figure 03_image1153
    ， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R1 係選自F、Cl、(C1 -C6 )烷基及O(C1 -C6 )烷基； R2 係選自H、F、Cl、(C1 -C6 )烷基及O(C1 -C6 )烷基； 環A係選自以下之部分：
    Figure 03_image1155
    ； R3 係選自吡唑基、三唑基及吡啶基，其中該吡唑基及該三唑基係經1或2個R3A 基團取代且其中該吡啶基係經1、2或3個R3A 基團取代，其中： 每個R3A 係獨立地選自(C1 -C6 )烷基、O(C1 -C6 )烷基、(C1 -C6 )烷基-OH、(C1 -C6 )鹵烷基、O(C1 -C6 )鹵烷基、側氧基、(C1 -C4 )烷基C(O)(C1 -C3 )烷基、(C1 -C4 )烷基CH(OH)(C1 -C3 )烷基、(C1 -C4 )烷基S(O)2 (C1 -C3 )烷基、-(CH2 )n (C3 -C7 )環烷基及包含1或2個選自氧及氮之環雜原子之-(CH2 )n 4-7員單環雜環烷基，其中該(C3 -C7 )環烷基及該4-7員單環雜環烷基各自係未經取代或經1、2或3個獨立選自F、Cl、OH、(C1 -C6 )烷基及(C1 -C6 )鹵烷基之基團取代； n為0、1或2； RA1 係選自H及(C1 -C4 )烷基； RA2 係選自H、F及(C1 -C4 )烷基； RA3 係選自H、F及(C1 -C4 )烷基； RA4 係選自H及OH；且 RA5 係選自H、F及(C1 -C4 )烷基。
  2. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 R1 係選自F、Cl及OCH3 ；且 R2 係選自H、F、Cl、CH3 及OCH3 。
  3. 如請求項1或2中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： 環A係選自以下之部分：
    Figure 03_image1157
    ，其中： R3 係選自
    Figure 03_image1159
    Figure 03_image1161
    ， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
    Figure 03_image1163
    、
    Figure 03_image1165
    Figure 03_image1167
    ；且 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基。
  4. 如請求項1或2中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 環A係以下部分：
    Figure 03_image1169
    ，其中： R3 係選自
    Figure 03_image1171
    Figure 03_image1173
    ， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
    Figure 03_image1175
    、
    Figure 03_image1177
    Figure 03_image1179
    ；且 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基。
  5. 如請求項1或2中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： 環A係以下部分：
    Figure 03_image1181
    ，其中： R3 係選自
    Figure 03_image1183
    Figure 03_image1185
    ， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
    Figure 03_image1187
    、
    Figure 03_image1189
    Figure 03_image1191
    ；且 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基。
  6. 如請求項1或2中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： 環A係以下部分：
    Figure 03_image1193
    ，其中： R3 係選自
    Figure 03_image1195
    Figure 03_image1197
    ， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
    Figure 03_image1199
    、
    Figure 03_image1201
    Figure 03_image1203
    ；且 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基。
  7. 如請求項1或2中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： 環A係以下部分：
    Figure 03_image1205
    ，其中： R3 係選自
    Figure 03_image1207
    Figure 03_image1209
    ， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
    Figure 03_image1211
    、
    Figure 03_image1213
    Figure 03_image1215
    ；且 每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基。
  8. 如請求項1或2中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： 環A係以下部分：
    Figure 03_image1217
    ，其中： R3 係選自
    Figure 03_image1219
    Figure 03_image1221
    ， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
    Figure 03_image1223
    、
    Figure 03_image1225
    Figure 03_image1227
    ； 且每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基。
  9. 如請求項1或2中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： 環A係以下部分：
    Figure 03_image1229
    ，其中： R3 係選自
    Figure 03_image1231
    Figure 03_image1233
    ， 其中： 每個R3A 係選自以下之部分： CH3 、
    Figure 03_image1235
    、
    Figure 03_image1237
    Figure 03_image1239
    ； 且每個R3Aa 係獨立地選自(C1 -C4 )烷基、O(C1 -C4 )烷基、(C1 -C4 )鹵烷基及O(C1 -C4 )鹵烷基。
  10. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物係選自：
    Figure 03_image1241
    Figure 03_image1243
    Figure 03_image1245
    Figure 03_image1247
    Figure 03_image1249
    Figure 03_image1251
    Figure 03_image1253
    Figure 03_image1255
    Figure 03_image1257
    Figure 03_image1259
    Figure 03_image1261
    Figure 03_image1263
    Figure 03_image1265
    Figure 03_image1267
    Figure 03_image1269
    Figure 03_image1271
    Figure 03_image1273
    Figure 03_image1275
    Figure 03_image1277
    Figure 03_image1279
    Figure 03_image1281
    Figure 03_image1283
    Figure 03_image1285
    Figure 03_image1287
    Figure 03_image1289
    Figure 03_image1291
    Figure 03_image1293
    Figure 03_image1295
    Figure 03_image1297
    Figure 03_image1299
    。
  11. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至10中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑。
  12. 一種如請求項1至10中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽在製造用於治療癌症之藥物中之用途。
  13. 如請求項12之用途，其中該癌症係選自黑素瘤、頭頸癌、經典型霍奇金淋巴瘤(classical Hodgkin lymphoma)、尿道上皮癌、胃癌、子宮頸癌、原發性縱隔大B細胞淋巴瘤、高微衛星不穩定性癌症、非小細胞肺癌、肝細胞癌、透明細胞腎癌、結腸直腸癌、乳癌、鱗狀細胞肺癌、基底細胞癌、肉瘤、膀胱癌、子宮內膜癌、胰臟癌、肝癌、胃腸癌、多發性骨髓瘤、腎癌、間皮瘤、卵巢癌、肛門癌、膽道癌、食道癌、唾液腺癌及前列腺癌及轉移性去勢難治性前列腺癌。
  14. 如請求項13之用途，其中該藥物進一步包含另一種治療劑或用於與另一種治療劑組合投藥。
  15. 如請求項14之用途，其中該另一種治療劑係PD-1拮抗劑。
  16. 如請求項15之用途，其中該另一種治療劑係選自帕博利珠單抗(pembrolizumab)、納武單抗(nivolumab)、阿特珠單抗(atezolizumab)、德瓦魯單抗(dunvalumab)及阿維魯單抗(avelumab)。
  17. 如請求項15之用途，其中該另一種治療劑係帕博利珠單抗。
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