TW202019395A - 具有促進腸幹細胞增生、抗病毒、抗發炎和抗過敏功效的乳酸菌晶體組合物及其製備方法 - Google Patents

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Abstract

本發明提供一種具有耐酸和耐膽鹼能力的藻類醱酵液包覆之乳酸菌晶體組合物，其具有促進腸幹細胞增生、抗病毒、抗發炎和抗過敏的功效，及其製備的方法。

Description

具有促進腸幹細胞增生、抗病毒、抗發炎和抗過敏功效的乳 酸菌晶體組合物及其製備方法
本發明提供一種藻類醱酵液包覆之乳酸菌晶體組合物，以純天然方式製程，使用醱酵生產的藻類醱酵液作為保護菌體的膠體來源，使此組合物具有耐胃酸和耐膽汁的能力，且此組合物以多種乳酸菌作為主體，能一次提供多種益菌的好處，同時藻類醱酵液膠體能協同乳酸菌作用，具有促進腸幹細胞增生、抗病毒、抗發炎和抗過敏功效的乳酸菌晶體組合物及其製備方法。
乳酸菌對人體具有正面的效益，自1961年至1998年間，國際上已完成研究並發表在知名學術期刊的乳酸菌人體臨床試驗共計143件，受測人數達7,526人，均未有負面的結果報導，其中主要曾被報導的正面功效包括：(1)增進食品之營養品質，(2)促進維生素合成及酵素產生，(3)穩定腸道菌相，並去除腸內病菌，(4)產生抗菌物質，增強宿主免疫力，(5)降低膽固醇含量，(6)降低大腸癌之風險，(7)抑制腫瘤等。
最常被科學家用來測試的乳酸菌為嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus，即俗稱的A菌)，其次為凱氏乳桿菌(Lactobacillus casei，即俗稱的C菌)，其他較常被測試的菌尚有雙歧桿菌(Bifidobacterium sp.，即俗稱的B菌，又稱雙叉桿菌或比菲德氏菌)、保加利亞乳桿菌(Lactobacillus bulgaricus)、嗜高溫鏈球菌(Streptococcus thermophilus)，後兩者即是由鮮乳製造優酪乳過程中所必需添加的兩株乳酸菌。
但乳酸菌產品經過腸胃道消化後容易失去活性，部分菌種能到達腸道卻不具有多種功效，目前已知菌種進行改良後能具有耐酸鹼能力，也具有生理活性功效，但部分科學家仍對菌種改良存在疑慮。因此乳酸菌普遍有不穩定，無法耐熱耐酸的缺點，會隨環境變化、保存條件不佳導致功效降低，必須低溫冷藏，如何增加乳酸菌產品的安定性和耐酸鹼能力來達到其功效是急需解決的問題。
依據文獻The Anti-Inflammatory Effect of Algae-Derived Lipid Extracts on Lipopolysaccharide(LPS)-Stimulated Human THP-1 Macrophages.Marine drugs.Vol 13,P5402-5424，從Koozeh奶酪中分離的乳酸桿菌的抗菌，抗酸和膽汁耐受性研究中，從三組乳酸桿菌(如：植物乳桿菌，乾酪乳桿菌和德氏乳桿菌)分離出二十八株的乳桿菌菌株來進行耐膽汁能力、酸耐受能力和抗菌性能，結果發現只有一種分離物即乾酪乳桿菌可以耐受酸和膽汁鹽並具有抗單核細胞增生的抗菌活性，可以考慮做為天然益生菌產品，但仍須額外的測試來證明，可見一般乳酸菌不具有耐膽鹼能力和耐酸能力，需要發花費很多時間來篩選和測試，此嚴重局限了乳酸菌的應用。
另一藻類研究中藻類中的多醣及多酚物質具有抗氧化、抗癌、抗凝血、抗發炎、抗病毒、抗高血脂症等功效，為了取得這些活性物質，產業界通常使用熱水、溶劑、酸水解、酵素水解等萃取法，但這些萃取方式通常伴隨著一些限制因子，包括：高成本、流程複雜及溶劑殘存毒性問題。另有研究發現藻類醱酵過程能釋放出更多的藻類活性成分，如：一般萃取法不易取得的特有海藻胜肽、胺基酸、多酚類化合物都可透過醱酵過程充分釋出，讓產品中的營養素更豐富，且經長時間醱酵作用，可將海藻中的營養素分解成小分子狀態，更利於生物吸收利用，但通常藻類多醣被作為主原料，在功效上並無益生菌可改善腸道、修復黏膜組織等功效。
因此發展出適合一般大眾使用且具有耐酸和耐膽鹼能力的乳酸菌晶體組合物，且保有抗發炎、抗病毒及修復黏膜的功效是現階段最重要急需解決的問題。
為解決上述的問題，本發明以純天然方式製程，以醱酵生產的藻類醱酵液作為保護菌體的膠體來源，使乳酸菌具有耐酸和耐膽鹼的能力且沒有使用上食用的安全疑慮，且本發明以多種乳酸菌作為主體，能一次提供多種益菌的好處，同時藻類醱酵液膠體能協同乳酸菌作用，使功效同時具促進腸幹細胞增生、抗病毒、抗發炎和抗過敏。
本發明一實施例中一種具有耐酸和耐膽鹼能力之乳酸菌晶體組合物，其中該組合物包含：乳酸菌和藻類醱酵液，藻類醱酵液係為膠體結構，其包覆於該乳酸菌外，形成乳酸菌晶體外殼。
本發明一實施例中，所述之乳酸菌晶體組合物，其中該膠體結構包含醣分子，該醣分子係為α葡聚醣或β葡聚醣降解後產生之小分子醣，該醣分子包覆該乳酸菌形成該乳酸菌晶體外殼。
本發明一實施例中，所述之乳酸菌晶體組合物，其中該乳酸菌包含Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus acidophilus或Lactobacillus sporogenes菌株。
本發明一實施例中，所述之乳酸菌晶體組合物，其中該乳酸菌的混合比例為Lactobacillus rhamnosus含量為3×108CFU/g~5×108CFU/g、Lactobacillus plantarum含量為3×108CFU/g~5×108CFU/g、Lactobacillus acidophilus含量為3×108CFU/g~5×108CFU/g、和Lactobacillus sporogenes含量為3×108CFU/g~5×108CFU/g。
本發明一實施例中，所述之乳酸菌晶體組合物，其中該藻類醱酵液包含海木耳、石菜花、石蓴、青絲藻、海葡萄或葛仙米藻之醱酵液，在一較佳實施例中，該藻類醱酵係為海木耳醱酵液。
本發明一實施例中，所述之乳酸菌晶體組合物，其中該藻類醱酵液與該乳酸菌的混合體積比為50：1~70：1。
本發明一實施例中，所述之乳酸菌晶體組合物，其中該藻類醱酵液與該乳酸菌的混合體積比最佳為60：1。
本發明一實施例中一種具有耐酸和耐膽鹼能力之乳酸菌晶體組合物的功效應用，其中該功效包含促進腸幹細胞增生、抗病毒、抗發炎和抗過敏等功效。
本發明一實施例中，一種用於製備該具有耐酸和耐膽鹼能力 之乳酸菌晶體組合物之藻類醱酵液的方法，為：(1)初萃醱酵步驟：將藻類壓榨後，添加A菌進行90天初萃醱酵；(2)複合醱酵步驟：添加B酵母菌和C乳酸菌，進行390天複合醱酵；(3)儲存醱酵步驟：加入D醋酸菌，進行30天醱酵；以及(4)螯合醱酵步驟：添加鎂與鈣化合物，進行30天醱酵，利用菌體將鈣、鎂元素轉換為有機態；醱酵過程中菌種添加為107~108CFU/ml，接種量為體積1.5%；醱酵溫度控制在26-32℃。
本發明一實施例中，製備該具有耐酸和耐膽鹼能力之乳酸菌晶體組合物之藻類醱酵液的方法，其中乳酸菌濃度108CFU/ml，接種量為體積1.5%，酵母菌濃度107CFU/ml，接種量為體積1.5%，菌數量必須足以成為優勢菌種。
本發明一實施例中，製備該具有耐酸和耐膽鹼能力之乳酸菌晶體組合物之藻類醱酵液的方法，其中於初萃醱酵步驟加入的A菌為酵母菌Saccharomyces cerevisiae。
本發明一實施例中，製備該具有耐酸和耐膽鹼能力之乳酸菌晶體組合物之藻類醱酵液的方法，其中於複合醱酵步驟添加之B酵母菌為Saccharomycopsisfibufigera、Pichia membramefaciens、Schizosaccharomyespombe酵母菌。
本發明一實施例中，製備該具有耐酸和耐膽鹼能力之乳酸菌晶體組合物之藻類醱酵液的方法，其中於複合醱酵步驟添加之C乳酸菌為Lactobacillus plantarum、Lactobacillus delbrueckii、Lactococcuslactis、 Lactococcusacidophillus、Bifidobacterium bifidum乳酸菌。
本發明一實施例中，製備具有耐酸和耐膽鹼能力之乳酸菌晶體組合物之藻類醱酵液的方法，其中於儲存醱酵步驟加入之D醋酸菌為Acetobacterhansenii、Acetobacterxylinum、Acetobactorsuboxydans醋酸菌。
本發明一實施例中，製備具有耐酸和耐膽鹼能力之乳酸菌晶體組合物的方法，包括：(1)提供一藻類醱酵液，該藻類醱酵液製造方法如先前製程所述製造；(2)提供一乳酸菌，該乳酸菌係選自由Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus acidophilus和Lactobacillus sporogenes所組成之群組；(3)混合步驟，將該藻類醱酵液與該乳酸菌以60：1體積比混合；以及(4)高速乳化步驟，將步驟(3)所完成的混合溶液經高速乳化頭以1000~3000rpm速度乳化後，使已完成醱酵製程的藻類醱酵液膠體結構包覆於該乳酸菌外層，形成乳酸菌晶體外殼，完成該乳酸菌晶體組合物。
藻類膠體結構以醣分子為主，醣分子來源為葡聚醣降解後產生之小分子醣，乳化階段時，以包覆或鍵結方式在乳酸菌周為形成外殼，產生乳酸菌晶體；該乳酸菌晶體組合物具有耐酸和耐膽鹼能力，促進腸幹細胞增生、抗病毒、抗發炎和抗過敏功效。
第1圖顯示藻類醱酵液包覆於乳酸菌之晶體外殼組合物。
第2圖顯示乳酸菌晶體組合物以複式顯微鏡成像的攝影圖，放大倍率為400倍。
第3圖顯示乳酸菌的耐酸能力試驗，實驗分成兩組：(1)四株乳酸菌混合物組和(2)四株乳酸菌+藻類醱酵液之晶體組合物，數值表示為平均值±標準差，** P<0.01表示在耐酸能力試驗中(2)四株乳酸菌+藻類醱酵液之晶體組合物與(1)四種乳酸桿菌菌株的數值相比具有顯著差異。證實乳酸菌未經處理，透過鹽酸模擬胃酸破壞後，存活率大幅降低，但經藻類醱酵液包覆之乳酸菌晶體組合物，即便通過胃酸破壞，仍然保有良好存活率，即透過藻類醱酵液包覆結構，可提供乳酸菌抗酸蝕能力。
第4圖顯示乳酸菌的耐膽鹼能力試驗，實驗分成兩組：(1)四株乳酸菌混合物組和(2)四株乳酸菌+藻類醱酵液結晶體組合物，數值表示為平均值±標準差，** *P<0.001表示耐膽鹼能力試驗中(2)四株乳酸菌+藻類醱酵液結晶體組合物與(1)四種乳酸桿菌菌株的數值相比具有顯著差異。
第5圖顯示乳酸菌的腸幹細胞增生試驗，實驗分成五組樣品，分別為：(1)Control-對照組、(2)四株乳酸菌混合物、(3)藻類萃取物、(4)藻類醱酵液以及(5)四株乳酸菌+藻類醱酵液晶體組合物，數值表示為平均值±標準差，*P<0.05、**P<0.01、***P<0.001表示腸幹細胞存活率試驗中和控制組數值相比具有顯著差異。結果證實乳酸菌未經處理，透過Oxoid模擬膽鹼破壞後，存活率大幅降低，但經藻類醱酵液包覆之乳酸菌晶體組合物，即便通過膽鹼破壞，仍然保有良好存活率。
第6圖顯示乳酸菌的抗病毒試驗，實驗分成六組樣本，分別 為：(1)Control-對照組、(2)Virus-攻毒組、(3)四株乳酸菌混合物-攻毒組、(4)藻類萃取物-攻毒組、(5)藻類醱酵液-攻毒組以及(6)四株乳酸菌+藻類醱酵液結晶體-攻毒組。數值表示為平均值±標準差，*P<0.05、**P<0.01、***P<0.001表示抗病毒功效試驗中與(2)Virus-攻毒組數值相比具有顯著差異；結果顯示一般乳酸菌經混合後，對於vero腎上皮細胞的保護力已有顯著性，可保護vero腎上皮細胞免於病毒感染；藻類萃取液經醱酵後則能提升細胞的保護力；乳酸菌以藻類醱酵液包覆後之晶體組合物則能提供最高的保護力，達到最高顯著性；對病毒抑制力也具有效果，也以(6)四株乳酸菌+藻類醱酵液結晶體-攻毒組乳酸菌經藻類醱酵液包覆後具有最高抑制效果。
第7圖顯示抗發炎的人體試驗，隨機12名受測者，依照建議方式每日服用，持續5周，於每周填寫回饋問卷，統計評分，得分越高表示改善情形越佳。(N=12)
實施例1：藻類醱酵液的醱酵製程
藻類醱酵液在醱酵製程中添加鎂與鈣，經540天，由4株酵母菌、5株乳酸菌、3株醋酸菌共12株菌進行醱酵，將鎂與鈣轉換為有機態，再加入乳酸菌，使藻類醱酵液包覆於乳酸菌外層後提供生物利用。
本發明藻類醱酵液製作流程分為三階段植入菌種，共四個醱酵階段，階段1：初萃醱酵，將藻類壓榨後，添加1株酵母菌Saccharomyces cerevisiae進行90天初萃醱酵；階段2：複合醱酵階段，再添加3株酵母菌如：Saccharomycopsisfibufigera、Pichia membramefaciens、 Schizosaccharomyespombe，和5株乳酸菌如：Lactobacillus plantarum、Lactobacillus delbrueckii、Lactococcuslactis、Lactococcusacidophillus、Bifidobacterium bifidum，進行390天複合醱酵；階段3：儲存醱酵階段，加入3株醋酸菌如：Acetobacterhansenii、Acetobacterxylinum、Acetobactorsuboxydans，進行30天醱酵；階段4：螯合醱酵階段中添加鎂與鈣化合物，進行30天醱酵，利用菌體將鈣、鎂元素轉換為有機態，醱酵過程中菌種添加為107~108CFU/ml，接種量為體積1.5%，醱酵溫度控制在26-32℃，製作出藻類醱酵液。
實施例2：製備藻類醱酵液包覆於乳酸菌晶體外殼之組合物的方法
本發明製備藻類醱酵液包覆於乳酸菌晶體外殼之組合物的方法，步驟1：一混合步驟，將已完成醱酵製程的藻類醱酵液與1.5%的四種乳酸菌溶液(如：Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus acidophilus、Lactobacillus sporogenes等比例混合液)混合以及步驟2：一高速乳化步驟，將該混合溶液經高速乳化頭乳化後，使已完成醱酵製程的藻類醱酵液膠體結構包覆於該乳酸菌外層，形成乳酸菌晶體外殼，完成該乳酸菌晶體組合物。該乳酸菌晶體組合物具有耐酸和耐膽鹼能力，促進腸幹細胞增生、抗病毒、抗發炎和抗過敏功效。
實施例3：乳酸菌晶體組合物的耐酸和耐膽鹼試驗
將耐酸和耐膽鹼實驗分成兩組：(1)四株乳酸菌混合物、 (2)四株乳酸菌+藻類醱酵液結晶體組合物
1.耐酸能力試驗
將四株乳酸菌分別培養於MRS培養基中，於37℃培養48小時後各取0.1ml菌液混合，加入5N HCl調整pH值至2，培養在37℃四小時後序列稀釋並塗盤，培養24小時後計數菌落；另將四株乳酸菌+藻類醱酵液結晶組合物培養於MRS培養基中，於37℃培養48小時後取0.4ml，加入5N HCl調整pH值至2，培養在37℃四小時後序列稀釋並塗盤，培養24小時後計數菌落。存活之乳酸菌能正常行成菌落，藉此評估活菌數。
耐酸能力試驗結果如第3圖所示，顯示(2)四株乳酸菌+藻類醱酵液晶體組合物之耐酸的活菌數顯著高於(1)四株乳酸菌混合物(**P<0.01)，證實乳酸菌未經處理，透過HCl模擬胃酸破壞後，存活率大幅降低，但經藻類醱酵液包覆之乳酸菌晶體組合物，即便通過胃酸破壞，仍然保有良好存活率，即透過藻類醱酵液包覆結構，可提供乳酸菌抗酸蝕能力。
2.耐膽鹼能力試驗：
將四株乳酸菌分別培養於MRS培養基中，於37℃培養48小時後各取0.1ml菌液混合，加入Oxoid飽和溶液(Oxoid為膽汁萃取物)，添加濃度為0.3%，培養在37℃四小時後序列稀釋並塗盤，培養24小時後計數菌落；另將四株乳酸菌+藻類醱酵液結晶體培養於MRS培養基中，於37℃培養48小時後取0.4ml，加入Oxoid飽和溶液(Oxoid為膽汁萃取物)，添加濃度為0.3%，培養在37℃四小時後序列稀釋並塗盤，培養24小時後計數菌落。存活之乳酸菌能正常行成菌落，藉此評估活菌數。
耐膽鹼能力試驗結果如第4圖所示，顯示(2)四株乳酸菌+藻類醱酵液晶體組合物之耐膽鹼的活菌數顯著高於(1)四株乳酸菌混合物(***P<0.001)，證實乳酸菌未經處理，透過Oxoid模擬膽鹼破壞後，存活率大幅降低，但經藻類醱酵液包覆之乳酸菌晶體組合物，即便通過膽鹼破壞，仍然保有良好存活率，即透過藻類醱酵液包覆結構，可提供乳酸菌抗膽鹼能力。
實施例4：乳酸菌晶體組合物的腸幹細胞增生試驗
將腸幹細胞增生實驗分成五組樣本，分別為：
(1)Control-對照組
(2)四株乳酸菌混合物
(3)藻類萃取物
(4)藻類醱酵液
(5)四株乳酸菌+藻類醱酵液晶體組合物
ISCs為腸道幹細胞，分別將樣本(1)Control-對照組、(2)四株乳酸菌混合物、(3)藻類萃取物(未經藻類醱酵)、(4)藻類醱酵液和(5)四株乳酸菌+藻類醱酵液晶體組合物與SCIs腸道幹細胞共同培養，分析各樣本對腸道幹細胞增生之能力，ISCs腸道幹細胞可分化為黏膜細胞、表皮細胞，達到傷口修復、修補黏膜組織等能力。試驗將ISCs腸道幹細胞種於96孔盤中，50,000cell/well，培養24小時後更換培養基(分別含200μg/ml各樣本與不含樣本)，培養24與48小時，以MTT assay進行細胞存活率試驗。
乳酸菌晶體組合物的腸幹細胞增生試驗結果如圖5所示，顯 示在24小時及48小時共培養，乳酸菌未包覆實增生率最高達約15%，在(3)藻類萃取液與(2)乳酸菌混合物的增生率相似；但藻類經醱酵後之(4)藻類醱酵液能提升些微增生能力約50%；以及(5)乳酸菌與藻類醱酵液結合形成晶體組合物後，增生效果達到最高約75%，具有顯著差異，表示乳酸菌與藻類醱酵液有加乘效果。
實施例5：乳酸菌晶體組合物的抗病毒試驗
將乳酸菌晶體組合物的抗病毒實驗分成六組樣本，分別為：
(1)Control-對照組
(2)Virus-攻毒組
(3)四株乳酸菌混合物-攻毒組
(4)藻類萃取物-攻毒組
(5)藻類醱酵液-攻毒組
(6)四株乳酸菌+藻類醱酵液結晶體-攻毒組
使用vero腎上皮細胞作為模型，以腸病毒71型進行攻毒，實驗分兩種方式進行：
1.對vero腎上皮細胞的保護作用：
將vero腎上皮細胞種於96孔盤中，50,000cell/well，培養24小時後更換培養基(分別含200μg/ml各樣本與不含樣本)，培養4小時後加入腸病毒71型攻毒，24小時後以MTT assay進行vero腎上皮細胞存活率測定。即是分別將(1)Control-對照組、(2)Virus-攻毒組、(3)四株乳酸菌混合物-攻毒組、(4)藻類萃取物-攻毒組、(5)藻類醱酵液-攻毒組、(6)四株乳酸菌 +藻類醱酵液結晶體-攻毒組樣本與vero腎上皮細胞共培養，測試各樣本是否對vero腎上皮細胞具有保護作用，能抵抗病毒的感染。
2.對病毒的抵抗能力
將vero腎上皮細胞種於96孔盤中，50,000cell/well，培養24小時後更換培養基(不含樣本)，再加入腸病毒71型(分別與200μg/ml各樣本混合或不混合，使病毒與各樣本共培養4小時)攻毒，24小時後以MTT assay進行細胞存活率測定。將病毒與細胞共培養，測試樣本(1)Control-對照組、(2)Virus-攻毒組、(3)四株乳酸菌混合物-攻毒組、(4)藻類萃取物-攻毒組、(5)藻類醱酵液-攻毒組、(6)四株乳酸菌+藻類醱酵液結晶體-攻毒組是否對病毒具有抵抗作用，抑制病毒的感染功效。
乳酸菌晶體組合物的抗病毒試驗結果如第6圖所示，顯示(3)四株乳酸菌混合物-攻毒組(**P<0.01)、(4)藻類萃取物-攻毒組(*P<0.05)、(5)藻類醱酵液-攻毒組(**P<0.01)、(6)四株乳酸菌+藻類醱酵液結晶體-攻毒組(***P<0.001)和(2)Virus-攻毒組相比具有顯著對vero腎上皮細胞的保護作用；結果顯示一般乳酸菌經混合後，對於vero腎上皮細胞的保護力已有顯著性，可保護vero腎上皮細胞免於病毒感染；藻類萃取液經醱酵後則能提升細胞的保護力；乳酸菌以藻類醱酵液包覆後之晶體組合物則能提供最高的保護力，達到最高顯著性；對病毒抑制力也具有效果，也以乳酸菌經藻類醱酵液包覆後具有最高抑制效果。
實施例5：乳酸菌晶體組合物抗發炎試驗
12名受測者，依照建議用量、建議方式使用乳酸菌晶體組合 物，持續5周，於每周周五進行問卷回饋，以評分方式統計改善效果。
乳酸菌晶體組合物抗發炎試驗，經由問卷調查，其結果如第7圖所示，顯示使用乳酸菌晶體5周，可改善脂漏性皮膚炎及過敏性鼻炎症狀。
所述之問卷內容如下所示：姓名：使用產品：，本週使用天數：天說明：本週使用產品後之身體狀況，請依據實際情況與感受，在最適當的□中打勾。
1.一般生理狀況：
身高：體重：
Figure 107140879-A0101-12-0014-1
2.皮膚狀況：
Figure 107140879-A0101-12-0014-2
3.抵抗力狀況：
Figure 107140879-A0101-12-0014-3
4.身體循環狀況：
Figure 107140879-A0101-12-0014-5
Figure 107140879-A0101-12-0015-8
5.腸胃功能狀況：
每日平均排便次數：
Figure 107140879-A0101-12-0015-7
6.肝功能狀況：
Figure 107140879-A0101-12-0015-6
7.如有其它身體狀況或想特別說明的，請論述：

Claims (23)

  1. 一種乳酸菌晶體組合物，其中該組合物包含：一乳酸菌和一藻類醱酵液，該藻類醱酵液係為一膠體結構，該膠體結構包覆於該乳酸菌外，形成一乳酸菌晶體外殼，該乳酸菌晶體外殼具有一耐酸或一耐膽鹼之特性。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之乳酸菌晶體組合物，其中該膠體結構包含一醣分子，該醣分子係為一多醣降解後產生之小分子醣，該醣分子包覆該乳酸菌形成該乳酸菌晶體外殼。
  3. 如申請專利範圍第2項所述之乳酸菌晶體組合物，其中該多醣係為α葡聚醣或β葡聚醣。
  4. 如申請專利範圍第1項所述之乳酸菌晶體組合物，其中該乳酸菌係為Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus acidophilus或Lactobacillus sporogenes菌株。
  5. 如申請專利範圍第4項所述之該乳酸菌晶體組合物，其中該乳酸菌的混合比例為Lactobacillus rhamnosus含量為3×108CFU/g~5×108CFU/g、Lactobacillus plantarum含量為3×108CFU/g~5×108CFU/g、Lactobacillus acidophilus含量為3×108CFU/g~5×108CFU/g、Lactobacillus sporogenes含量為3×108CFU/g~5×108CFU/g。
  6. 如申請專利範圍第1項所述之乳酸菌晶體組合物，其中該藻類醱酵液係為海木耳、石菜花、石蓴、青絲藻、海葡萄或葛仙米藻之醱酵液。
  7. 如申請專利範圍第1項所述之乳酸菌晶體組合物，其中該藻類醱酵液與該乳酸菌的混合比例為50：1~70：1。
  8. 一種製備如專利範圍1之乳酸菌晶體組合物之藻類醱酵液的方法，包括：(1)初萃醱酵步驟：將藻類壓榨後，添加A菌進行90天初萃醱酵；(2)複合醱酵步驟：添加B酵母菌和C乳酸菌，進行390天複合醱酵；(3)儲存醱酵步驟：加入D醋酸菌，進行30天醱酵；以及(4)螯合醱酵步驟：添加鎂與鈣化合物，進行30天醱酵，利用菌體將鈣、鎂元素轉換為有機態；其中步驟(1)~(3)加入菌種為107~108CFU/ml，接種量為體積1.5%；其中步驟(1)~(4)醱酵溫度控制在26-32℃。
  9. 如申請專利範圍第8項所述製備藻類醱酵液的方法，其中於初萃醱酵步驟加入的A菌為酵母菌Saccharomyces cerevisiae。
  10. 如申請專利範圍第8項所述製備藻類醱酵液的方法，其中於複合醱酵步驟添加之B酵母菌係選自由Saccharomycopsisfibufigera、Pichia membramefaciens和Schizosaccharomyespombe酵母菌所組成之群組。
  11. 如申請專利範圍第8項所述製備藻類醱酵液的方法，其中於複合醱酵步驟添加之C乳酸菌係選自由Lactobacillus plantarum、Lactobacillus delbrueckii、Lactococcuslactis、Lactococcusacidophillus 和Bifidobacterium bifidum乳酸菌所組成之群組。
  12. 如申請專利範圍第8項所述製備藻類醱酵液的方法，其中於儲存醱酵步驟加入之D醋酸菌係選自由Acetobacterhansenii、 Acetobacterxylinum和Acetobactorsuboxydans醋酸菌所組成之群組。
  13. 一種製備如申請專利範圍第1項所述之乳酸菌晶體組合物的方法，包括：(1)提供一藻類醱酵液，該藻類醱酵液製造方法如專利範圍第8項製程所製造；(2)提供一乳酸菌，該乳酸菌係選自由Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus acidophilus和Lactobacillus sporogenes所組成之群組；(3)混合步驟，將該藻類醱酵液與該乳酸菌以50：1~70：1體積比混合；以及(4)高速乳化步驟，將步驟(3)所完成的混合溶液經高速乳化頭以1000~3000rpm速度乳化後，使已完成醱酵製程的藻類醱酵液之包覆於該乳酸菌外層，形成乳酸菌晶體外殼，完成該乳酸菌晶體組合物。
  14. 一種如專利範圍1之乳酸菌晶體組合物用於製備促進腸幹細胞增生之藥物的用途。
  15. 如專利範圍14所述之用途，其中該用途包含提升腸幹細胞50%~85%之細胞存活率。
  16. 一種如專利範圍1之乳酸菌晶體組合物用於製備抗病毒之藥物的用途。
  17. 如專利範圍16所述之用途，其中該用途係為對細胞產生抵抗病毒的感染之保護作用。
  18. 如專利範圍16所述之用途，其中該用途係為對病毒產生抑制病毒的感染能力之作用。
  19. 如專利範圍16所述之用途，其中該病毒係為腸病毒71型。
  20. 一種如專利範圍1之乳酸菌晶體組合物用於製備抗發炎之藥物的用途。
  21. 如專利範圍20所述之用途，其中該發炎係為脂漏性皮膚炎。
  22. 一種如專利範圍1之乳酸菌晶體組合物用於製備抗過敏之藥物的用途。
  23. 如專利範圍22所述之用途，其中該過敏係為過敏性鼻炎。
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