CN111195267A - 具有促进肠干细胞增生、抗病毒、抗发炎和抗过敏功效的乳酸菌晶体组合物及其制备方法 - Google Patents
具有促进肠干细胞增生、抗病毒、抗发炎和抗过敏功效的乳酸菌晶体组合物及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供一种具有耐酸和耐胆碱能力的藻类发酵液包覆的乳酸菌晶体组合物，其具有促进肠干细胞增生、抗病毒、抗发炎和抗过敏的功效，及其制备的方法。
Description
技术领域
本发明提供一种藻类发酵液包覆的乳酸菌晶体组合物，以纯天然方式制程，使用发酵生产的藻类发酵液作为保护菌体的胶体来源，使此组合物具有耐胃酸和耐胆汁的能力，且此组合物以多种乳酸菌作为主体，能一次提供多种益菌的好处，同时藻类发酵液胶体能协同乳酸菌作用，具有促进肠干细胞增生、抗病毒、抗发炎和抗过敏功效的乳酸菌晶体组合物及其制备方法。
背景技术
乳酸菌对人体具有正面的效益，自1961年至1998年间，国际上已完成研究并发表在知名学术期刊的乳酸菌人体临床试验共计143件，受测人数达7,526人，均未有负面的结果报导，其中主要曾被报导的正面功效包括：(1)增进食品的营养质量，(2)促进维生素合成及酵素产生，(3)稳定肠道菌相，并去除肠内病菌，(4)产生抗菌物质，增强宿主免疫力，(5)降低胆固醇含量，(6)降低大肠癌的风险，(7)抑制肿瘤等。
最常被科学家用来测试的乳酸菌为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，即俗称的A菌)，其次为凯氏乳杆菌(Lactobacillus casei，即俗称的C菌)，其他较常被测试的菌尚有双歧杆菌(Bifidobacterium sp.，即俗称的B菌，又称双叉杆菌或比菲德氏菌)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、嗜高温链球菌(Streptococcusthermophilus)，后两者即是由鲜乳制造酸奶过程中所必需添加的两株乳酸菌。
但乳酸菌产品经过肠胃道消化后容易失去活性，部分菌种能到达肠道却不具有多种功效，目前已知菌种进行改良后能具有耐酸碱能力，也具有生理活性功效，但部分科学家仍对菌种改良存在疑虑。因此乳酸菌普遍有不稳定，无法耐热耐酸的缺点，会随环境变化、保存条件不佳导致功效降低，必须低温冷藏，如何增加乳酸菌产品的安定性和耐酸碱能力来达到其功效是急需解决的问题。
依据文献The Anti-Inflammatory Effect of Algae-Derived Lipid Extractson Lipopolysaccharide(LPS)-Stimulated Human THP-1 Macrophages.Marinedrugs.Vol 13,P5402-5424，从Koozeh奶酪中分离的乳酸杆菌的抗菌，抗酸和胆汁耐受性研究中，从三组乳酸杆菌(如:植物乳杆菌，干酪乳杆菌和德氏乳杆菌)分离出二十八株的乳杆菌菌株来进行耐胆汁能力、酸耐受能力和抗菌性能，结果发现只有一种分离物即干酪乳杆菌可以耐受酸和胆汁盐并具有抗单核细胞增生的抗菌活性，可以考虑做为天然益生菌产品，但仍须额外的测试来证明，可见一般乳酸菌不具有耐胆碱能力和耐酸能力，需要发花费很多时间来筛选和测试，此严重局限了乳酸菌的应用。
另一藻类研究中藻类中的多糖及多酚物质具有抗氧化、抗癌、抗凝血、抗发炎、抗病毒、抗高血脂症等功效，为了取得这些活性物质，产业界通常使用热水、溶剂、酸水解、酵素水解等萃取法，但这些萃取方式通常伴随着一些限制因子，包括：高成本、流程复杂及溶剂残存毒性问题。另有研究发现藻类发酵过程能释放出更多的藻类活性成分，如：一般萃取法不易取得的特有海藻胜肽、氨基酸、多酚类化合物都可透过发酵过程充分释出，让产品中的营养素更丰富，且经长时间发酵作用，可将海藻中的营养素分解成小分子状态，更利于生物吸收利用，但通常藻类多糖被作为主原料，在功效上并无益生菌可改善肠道、修复黏膜组织等功效。
因此发展出适合一般大众使用且具有耐酸和耐胆碱能力的乳酸菌晶体组合物，且保有抗发炎、抗病毒及修复黏膜的功效是现阶段最重要急需解决的问题。
发明内容
为解决上述的问题，本发明以纯天然方式制程，以发酵生产的藻类发酵液作为保护菌体的胶体来源，使乳酸菌具有耐酸和耐胆碱的能力且没有使用上食用的安全疑虑，且本发明以多种乳酸菌作为主体，能一次提供多种益菌的好处，同时藻类发酵液胶体能协同乳酸菌作用，使功效同时具促进肠干细胞增生、抗病毒、抗发炎和抗过敏。
本发明一实施例中一种具有耐酸和耐胆碱能力的乳酸菌晶体组合物，其中，所述组合物包含：乳酸菌和藻类发酵液，藻类发酵液为胶体结构，其包覆于所述乳酸菌外，形成乳酸菌晶体外壳。
本发明一实施例中，所述的乳酸菌晶体组合物，其中，所述胶体结构包含糖分子，所述糖分子为α葡聚糖或β葡聚糖降解后产生的小分子糖，所述糖分子包覆所述乳酸菌形成所述乳酸菌晶体外壳。
本发明一实施例中，所述的乳酸菌晶体组合物，其中，所述乳酸菌包含Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus acidophilus或Lactobacillus sporogenes菌株。
本发明一实施例中，所述的乳酸菌晶体组合物，其中，所述乳酸菌的混合比例为Lactobacillus rhamnosus含量为3×108CFU/g～5×108CFU/g、Lactobacillus plantarum含量为3×108CFU/g～5×108CFU/g、Lactobacillus acidophilus含量为3×108CFU/g～5×108CFU/g、和Lactobacillus sporogenes含量为3×108CFU/g～5×108CFU/g。
本发明一实施例中，所述的乳酸菌晶体组合物，其中该藻类发酵液包含海木耳、石菜花、石莼、青丝藻、海葡萄或葛仙米藻之发酵液，在一较佳实施例中，该藻类发酵系为海木耳发酵液。
本发明一实施例中，所述的乳酸菌晶体组合物，其中，所述藻类发酵液与所述乳酸菌的混合体积比为50:1～70:1。
本发明一实施例中，所述的乳酸菌晶体组合物，其中，所述藻类发酵液与所述乳酸菌的混合体积比最佳为60:1。
本发明一实施例中一种具有耐酸和耐胆碱能力的乳酸菌晶体组合物的功效应用，其中所述功效包含促进肠干细胞增生、抗病毒、抗发炎和抗过敏等功效。
本发明一实施例中，一种用于制备所述具有耐酸和耐胆碱能力的乳酸菌晶体组合物的藻类发酵液的方法，为:
(1)初萃发酵步骤：将藻类压榨后，添加A菌进行90天初萃发酵；
(2)复合发酵步骤：添加B酵母菌和C乳酸菌，进行390天复合发酵；
(3)储存发酵步骤：加入D醋酸菌，进行30天发酵；以及
(4)螯合发酵步骤：添加镁与钙化合物，进行30天发酵，利用菌体将钙、镁元素转换为有机态；
发酵过程中菌种添加为107～108CFU/ml，接种量为体积1.5％；发酵温度控制在26-32℃。
本发明一实施例中，制备所述具有耐酸和耐胆碱能力的乳酸菌晶体组合物的藻类发酵液的方法，其中乳酸菌浓度108CFU/ml，接种量为体积1.5％，酵母菌浓度107CFU/ml，接种量为体积1.5％，菌数量必须足以成为优势菌种。
本发明一实施例中，制备所述具有耐酸和耐胆碱能力的乳酸菌晶体组合物的藻类发酵液的方法，其中于初萃发酵步骤加入的A菌为酵母菌Saccharomyces cerevisiae。
本发明一实施例中，制备所述具有耐酸和耐胆碱能力的乳酸菌晶体组合物的藻类发酵液的方法，其中于复合发酵步骤添加的B酵母菌为Saccharomycopsisfibufigera、Pichia membramefaciens、Schizosaccharomyespombe酵母菌。
本发明一实施例中，制备所述具有耐酸和耐胆碱能力的乳酸菌晶体组合物的藻类发酵液的方法，其中于复合发酵步骤添加的C乳酸菌为Lactobacillus plantarum、Lactobacillus delbrueckii、Lactococcuslactis、Lactococcusacidophillus、Bifidobacterium bifidum乳酸菌。
本发明一实施例中，制备具有耐酸和耐胆碱能力的乳酸菌晶体组合物的藻类发酵液的方法，其中于储存发酵步骤加入的D醋酸菌为Acetobacterhansenii、Acetobacterxylinum、Acetobactorsuboxydans醋酸菌。
本发明一实施例中，制备具有耐酸和耐胆碱能力的乳酸菌晶体组合物的方法，包括:
(1)提供一藻类发酵液，所述藻类发酵液按照上述制备方法制成；
(2)提供一乳酸菌，所述乳酸菌选自Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillusplantarum、Lactobacillus acidophilus或Lactobacillus sporogenes中的一种或多种；
(3)混合步骤，将所述藻类发酵液与所述乳酸菌以60:1体积比混合；以及
(4)高速乳化步骤，将步骤(3)所完成的混合溶液经高速乳化头以1000～3000rpm速度乳化后，使已完成发酵制程的藻类发酵液胶体结构包覆于所述乳酸菌外层，形成乳酸菌晶体外壳，完成所述乳酸菌晶体组合物。
藻类胶体结构以糖分子为主，糖分子来源为葡聚糖降解后产生的小分子糖，乳化阶段时，以包覆或键结方式在乳酸菌周为形成外壳，产生乳酸菌晶体；所述乳酸菌晶体组合物具有耐酸和耐胆碱能力，促进肠干细胞增生、抗病毒、抗发炎和抗过敏功效。
附图说明
图1显示藻类发酵液包覆于乳酸菌的晶体外壳组合物。
图2显示乳酸菌晶体组合物以复式显微镜成像的摄影图，放大倍率为400倍。
图3显示乳酸菌的耐酸能力试验，实验分成两组:(1)四株乳酸菌混合物组和(2)四株乳酸菌+藻类发酵液的晶体组合物组，数值表示为平均值±标准偏差，**P<0.01表示在耐酸能力试验中(2)四株乳酸菌+藻类发酵液的晶体组合物与(1)四种乳酸杆菌菌株的数值相比具有显著差异。证实乳酸菌未经处理，透过盐酸模拟胃酸破坏后，存活率大幅降低，但经藻类发酵液包覆的乳酸菌晶体组合物，即便通过胃酸破坏，仍然保有良好存活率，即透过藻类发酵液包覆结构，可提供乳酸菌抗酸蚀能力。
图4显示乳酸菌的耐胆碱能力试验，实验分成两组:(1)四株乳酸菌混合物组和(2)四株乳酸菌+藻类发酵液结晶体组合物组，数值表示为平均值±标准偏差，***P<0.001表示耐胆碱能力试验中(2)四株乳酸菌+藻类发酵液结晶体组合物与(1)四种乳酸杆菌菌株的数值相比具有显著差异。
图5显示乳酸菌的肠干细胞增生试验，实验分成五组样品，分别为:(1)Control-对照组、(2)四株乳酸菌混合物组、(3)藻类萃取物组、(4)藻类发酵液组以及(5)四株乳酸菌+藻类发酵液晶体组合物组，数值表示为平均值±标准偏差，*P<0.05、**P<0.01、***P<0.001表示肠干细胞存活率试验中和对照组数值相比具有显著差异。结果证实乳酸菌未经处理，透过Oxoid模拟胆碱破坏后，存活率大幅降低，但经藻类发酵液包覆的乳酸菌晶体组合物，即便通过胆碱破坏，仍然保有良好存活率
图6显示乳酸菌的抗病毒试验，实验分成六组样本，分别为:(1)Control-对照组、(2)Virus-攻毒组、(3)四株乳酸菌混合物-攻毒组、(4)藻类萃取物-攻毒组、(5)藻类发酵液-攻毒组以及(6)四株乳酸菌+藻类发酵液结晶体-攻毒组。数值表示为平均值±标准偏差，*P<0.05、**P<0.01、***P<0.001表示抗病毒功效试验中与(2)Virus-攻毒组数值相比具有显著差异；结果显示一般乳酸菌经混合后，对于vero肾上皮细胞的保护力已有显著性，可保护vero肾上皮细胞免于病毒感染；藻类萃取液经发酵后则能提升细胞的保护力；乳酸菌以藻类发酵液包覆后的晶体组合物则能提供最高的保护力，达到最高显著性；对病毒抑制力也具有效果，也以(6)四株乳酸菌+藻类发酵液结晶体-攻毒组乳酸菌经藻类发酵液包覆后具有最高抑制效果。
图7显示抗发炎的人体试验，随机12名受测者，依照建议方式每日服用，持续5周，于每周填写回馈问卷，统计评分，得分越高表示改善情形越佳。(N＝12)
具体实施方式
实施例1：藻类发酵液的发酵制程
藻类发酵液在发酵制程中添加镁与钙，经540天，由4株酵母菌、5株乳酸菌、3株醋酸菌共12株菌进行发酵，将镁与钙转换为有机态，再加入乳酸菌，使藻类发酵液包覆于乳酸菌外层后提供生物利用。
本发明藻类发酵液制作流程分为三阶段植入菌种，共四个发酵阶段，阶段1:初萃发酵，将藻类压榨后，添加1株酵母菌Saccharomyces cerevisiae进行90天初萃发酵；阶段2:复合发酵阶段，再添加3株酵母菌如:Saccharomycopsisfibufigera、Pichiamembramefaciens、Schizosaccharomyespombe，和5株乳酸菌如:Lactobacillusplantarum、Lactobacillus delbrueckii、Lactococcuslactis、Lactococcusacidophillus、Bifidobacterium bifidum，进行390天复合发酵；阶段3:储存发酵阶段，加入3株醋酸菌如:Acetobacterhansenii、Acetobacterxylinum、Acetobactorsuboxydans，进行30天发酵；阶段4:螯合发酵阶段中添加镁与钙化合物，进行30天发酵，利用菌体将钙、镁元素转换为有机态，发酵过程中菌种添加为107～108CFU/ml，接种量为体积1.5％，发酵温度控制在26-32℃，制作出藻类发酵液。
实施例2：制备藻类发酵液包覆于乳酸菌晶体外壳之组合物的方法
本发明制备藻类发酵液包覆于乳酸菌晶体外壳的组合物的方法，步骤1:混合步骤，将已完成发酵制程的藻类发酵液与1.5％的四种乳酸菌溶液(如:Lactobacillusrhamnosus、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus acidophilus、Lactobacillussporogenes等比例混合液)混合以及步骤2:高速乳化步骤，将该混合溶液经高速乳化头乳化后，使已完成发酵制程的藻类发酵液胶体结构包覆于该乳酸菌外层，形成乳酸菌晶体外壳，完成该乳酸菌晶体组合物。该乳酸菌晶体组合物具有耐酸和耐胆碱能力，促进肠干细胞增生、抗病毒、抗发炎和抗过敏功效。
实施例3：乳酸菌晶体组合物的耐酸和耐胆碱试验
将耐酸和耐胆碱实验分成两组:
(1)四株乳酸菌混合物、
(2)四株乳酸菌+藻类发酵液结晶体组合物
1.耐酸能力试验
将四株乳酸菌分别培养于MRS培养基中，于37℃培养48小时后各取0.1ml菌液混合，加入5N HCl调整pH值至2，培养在37℃四小时后序列稀释并涂盘，培养24小时后计数菌落；另将四株乳酸菌+藻类发酵液结晶组合物培养于MRS培养基中，于37℃培养48小时后取0.4ml，加入5N HCl调整pH值至2，培养在37℃四小时后序列稀释并涂盘，培养24小时后计数菌落。存活的乳酸菌能正常行成菌落，藉此评估活菌数。
耐酸能力试验结果如图3所示，显示(2)四株乳酸菌+藻类发酵液晶体组合物的耐酸的活菌数显著高于(1)四株乳酸菌混合物(**P<0.01)，证实乳酸菌未经处理，透过HCl模拟胃酸破坏后，存活率大幅降低，但经藻类发酵液包覆的乳酸菌晶体组合物，即便通过胃酸破坏，仍然保有良好存活率，即透过藻类发酵液包覆结构，可提供乳酸菌抗酸蚀能力。
2.耐胆碱能力试验:
将四株乳酸菌分别培养于MRS培养基中，于37℃培养48小时后各取0.1ml菌液混合，加入Oxoid饱和溶液(Oxoid为胆汁萃取物)，添加浓度为0.3％，培养在37℃四小时后序列稀释并涂盘，培养24小时后计数菌落；另将四株乳酸菌+藻类发酵液结晶体培养于MRS培养基中，于37℃培养48小时后取0.4ml，加入Oxoid饱和溶液(Oxoid为胆汁萃取物)，添加浓度为0.3％，培养在37℃四小时后序列稀释并涂盘，培养24小时后计数菌落。存活的乳酸菌能正常行成菌落，藉此评估活菌数。
耐胆碱能力试验结果如图4所示，显示(2)四株乳酸菌+藻类发酵液晶体组合物的耐胆碱的活菌数显著高于(1)四株乳酸菌混合物(***P<0.001)，证实乳酸菌未经处理，透过Oxoid模拟胆碱破坏后，存活率大幅降低，但经藻类发酵液包覆的乳酸菌晶体组合物，即便通过胆碱破坏，仍然保有良好存活率，即透过藻类发酵液包覆结构，可提供乳酸菌抗胆碱能力。
实施例4：乳酸菌晶体组合物的肠干细胞增生试验
将肠干细胞增生实验分成五组样本，分别为:
(1)Control-对照组
(2)四株乳酸菌混合物组
(3)藻类萃取物组
(4)藻类发酵液组
(5)四株乳酸菌+藻类发酵液晶体组合物组
ISCs为肠道干细胞，分别将样本(1)Control-对照组、(2)四株乳酸菌混合物、(3)藻类萃取物(未经藻类发酵)、(4)藻类发酵液和(5)四株乳酸菌+藻类发酵液晶体组合物与SCIs肠道干细胞共同培养，分析各样本对肠道干细胞增生的能力，ISCs肠道干细胞可分化为黏膜细胞、表皮细胞，达到伤口修复、修补黏膜组织等能力。试验将ISCs肠道干细胞种于96孔盘中，50,000cell/well(细胞/孔)，培养24小时后更换培养基(分别含200μg/ml各样本与不含样本)，培养24与48小时，以MTT assay进行细胞存活率试验。
乳酸菌晶体组合物的肠干细胞增生试验结果如图5所示，显示在24小时及48小时共培养，乳酸菌未包覆实增生率最高达约15％，在(3)藻类萃取液与(2)乳酸菌混合物的增生率相似；但藻类经发酵后的(4)藻类发酵液能提升些微增生能力约50％；以及(5)乳酸菌与藻类发酵液结合形成晶体组合物后，增生效果达到最高约75％，具有显著差异，表示乳酸菌与藻类发酵液有加乘效果。
实施例5：乳酸菌晶体组合物的抗病毒试验
将乳酸菌晶体组合物的抗病毒实验分成六组样本，分别为:
(1)Control-对照组
(2)Virus-攻毒组
(3)四株乳酸菌混合物-攻毒组
(4)藻类萃取物-攻毒组
(5)藻类发酵液-攻毒组
(6)四株乳酸菌+藻类发酵液结晶体-攻毒组
使用vero肾上皮细胞作为模型，以肠病毒71型进行攻毒，实验分两种方式进行:
1.对vero肾上皮细胞的保护作用:
将vero肾上皮细胞种于96孔盘中，50,000cell/well(细胞/孔)，培养24小时后更换培养基(分别含200μg/ml各样本与不含样本)，培养4小时后加入肠病毒71型攻毒，24小时后以MTT assay进行vero肾上皮细胞存活率测定。即是分别将(1)Control-对照组、(2)Virus-攻毒组、(3)四株乳酸菌混合物-攻毒组、(4)藻类萃取物-攻毒组、(5)藻类发酵液-攻毒组、(6)四株乳酸菌+藻类发酵液结晶体-攻毒组样本与vero肾上皮细胞共培养，测试各样本是否对vero肾上皮细胞具有保护作用，能抵抗病毒的感染。
2.对病毒的抵抗能力
将vero肾上皮细胞种于96孔盘中，50,000cell/well(细胞/孔)，培养24小时后更换培养基(不含样本)，再加入肠病毒71型(分别与200μg/ml各样本混合或不混合，使病毒与各样本共培养4小时)攻毒，24小时后以MTT assay进行细胞存活率测定。将病毒与细胞共培养，测试样本(1)Control-对照组、(2)Virus-攻毒组、(3)四株乳酸菌混合物-攻毒组、(4)藻类萃取物-攻毒组、(5)藻类发酵液-攻毒组、(6)四株乳酸菌+藻类发酵液结晶体-攻毒组是否对病毒具有抵抗作用，抑制病毒的感染功效。
乳酸菌晶体组合物的抗病毒试验结果如图6所示，显示(3)四株乳酸菌混合物-攻毒组(**P<0.01)、(4)藻类萃取物-攻毒组(*P<0.05)、(5)藻类发酵液-攻毒组(**P<0.01)、(6)四株乳酸菌+藻类发酵液结晶体-攻毒组(***P<0.001)和(2)Virus-攻毒组相比具有显著对vero肾上皮细胞的保护作用；结果显示一般乳酸菌经混合后，对于vero肾上皮细胞的保护力已有显著性，可保护vero肾上皮细胞免于病毒感染；藻类萃取液经发酵后则能提升细胞的保护力；乳酸菌以藻类发酵液包覆后的晶体组合物则能提供最高的保护力，达到最高显著性；对病毒抑制力也具有效果，也以乳酸菌经藻类发酵液包覆后具有最高抑制效果。
实施例6：乳酸菌晶体组合物抗发炎试验
12名受测者，依照建议用量、建议方式使用乳酸菌晶体组合物，持续5周，于每周周五进行问卷回馈，以评分方式统计改善效果。
乳酸菌晶体组合物抗发炎试验，经由问卷调查，其结果如图7所示，显示使用乳酸菌晶体5周，可改善脂漏性皮肤炎及过敏性鼻炎症状。
所述的问卷内容如下所示:
姓名：
使用产品：，本周使用天数：天
说明：本周使用产品后的身体状况，请依据实际情况与感受，在最适
当的□中打勾。
1.一般生理状况:
身高：体重：
2.皮肤状况:
3.抵抗力状况:
4.身体循环状况:
5.肠胃功能状况:
每日平均排便次数：
6.肝功能状况:
7.如有其它身体状况或想特别说明的，请论述。
Claims (23)
1.一种乳酸菌晶体组合物，其特征是，所述组合物包含：乳酸菌和藻类发酵液，所述藻类发酵液为胶体结构，所述胶体结构包覆于所述乳酸菌外，形成乳酸菌晶体外壳，所述乳酸菌晶体外壳具有耐酸或耐胆碱的特性。
2.如权利要求1所述的乳酸菌晶体组合物，其特征是，所述胶体结构包含一糖分子，所述糖分子为一多糖降解后产生的小分子糖，所述糖分子包覆所述乳酸菌形成所述乳酸菌晶体外壳。
3.如权利要求2所述的乳酸菌晶体组合物，其特征是，所述多糖为α葡聚糖或β葡聚糖。
4.如权利要求1所述的乳酸菌晶体组合物，其特征是，所述乳酸菌为Lactobacillusrhamnosus、Lactobacillus plantarum、Lactobacillus acidophilus或Lactobacillussporogenes菌株。
5.如权利要求4所述的乳酸菌晶体组合物，其特征是，所述乳酸菌的混合比例为Lactobacillus rhamnosus含量为3×108CFU/g～
5×108CFU/g、Lactobacillus plantarum含量为3×108CFU/g～
5×108CFU/g、Lactobacillus acidophilus含量为3×108CFU/g～
5×108CFU/g、Lactobacillus sporogenes含量为3×108CFU/g～
5×108CFU/g。
6.如权利要求1所述的乳酸菌晶体组合物，其特征是，所述藻类发酵液为海木耳、石菜花、石莼、青丝藻、海葡萄或葛仙米藻的发酵液。
7.如权利要求1所述的乳酸菌晶体组合物，其特征是，所述藻类发酵液与所述乳酸菌的混合比例为50:1～70:1。
8.一种制备如权利要求1所述的乳酸菌晶体组合物的藻类发酵液的方法，包括:
(1)初萃发酵步骤：将藻类压榨后，添加A菌进行90天初萃发酵；
(2)复合发酵步骤：添加B酵母菌和C乳酸菌，进行390天复合发酵；
(3)储存发酵步骤：加入D醋酸菌，进行30天发酵；以及
(4)螯合发酵步骤：添加镁与钙化合物，进行30天发酵，利用菌体将钙、镁元素转换为有机态；
其中步骤(1)～(3)加入菌种为107～108CFU/ml，接种量为体积1.5％；其中步骤(1)～(4)发酵温度控制在26-32℃。
9.如权利要求8所述的制备藻类发酵液的方法，其特征是，于初萃发酵步骤加入的A菌为酵母菌Saccharomyces cerevisiae。
10.如权利要求8所述的制备藻类发酵液的方法，其特征是，于复合发酵步骤添加的B酵母菌选自Saccharomycopsisfibufigera、Pichia membramefaciens或Schizosaccharomyespombe酵母菌中的一种或多种。
11.如权利要求8所述的制备藻类发酵液的方法，其特征是，于复合发酵步骤添加的C乳酸菌选自Lactobacillus plantarum、Lactobacillus delbrueckii、Lactococcuslactis、Lactococcusacidophillus或Bifidobacterium bifidum乳酸菌中的一种或多种。
12.如权利要求8所述的制备藻类发酵液的方法，其特征是，于储存发酵步骤加入的D醋酸菌选自Acetobacterhansenii、Acetobacterxylinum或Acetobactorsuboxydans醋酸菌中的一种或多种。
13.一种制备如权利要求1所述的乳酸菌晶体组合物的方法，其特征是，包括:
(1)提供一藻类发酵液，所述藻类发酵液按照如权利要求8所述的制备方法制成；
(2)提供一乳酸菌，所述乳酸菌选自Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillusplantarum、Lactobacillus acidophilus或Lactobacillus sporogenes中的一种或多种；
(3)混合步骤，将所述藻类发酵液与所述乳酸菌以50:1～70:1体积比混合；以及
(4)高速乳化步骤，将步骤(3)所完成的混合溶液经高速乳化头以1000～3000rpm速度乳化后，使已完成发酵制程的藻类发酵液包覆于所述乳酸菌外层，形成乳酸菌晶体外壳，完成所述乳酸菌晶体组合物。
14.一种如权利要求1所述的乳酸菌晶体组合物用于制备促进肠干细胞增生的药物的用途。
15.如权利要求14所述的用途，其特征是，所述用途包含提升肠干细胞50％～85％的细胞存活率。
16.一种如权利要求1所述的乳酸菌晶体组合物用于制备抗病毒的药物的用途。
17.如权利要求16所述的用途，其特征是，所述用途为对细胞产生抵抗病毒感染的保护作用。
18.如权利要求16所述的用途，其特征是，所述用途为对病毒产生抑制病毒的感染能力的作用。
19.如权利要求16所述的用途，其特征是，所述病毒为肠病毒71型。
20.一种如权利要求1所述的乳酸菌晶体组合物用于制备抗发炎的药物的用途。
21.如权利要求20所述的用途，其特征是，所述发炎为脂漏性皮肤炎。
22.一种如权利要求1所述的乳酸菌晶体组合物用于制备抗过敏的药物的用途。
23.如权利要求22所述的用途，其特征是，所述过敏为过敏性鼻炎。
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