TW201932117A

TW201932117A - 經取代三唑衍生物之前驅藥及其用途

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Publication number: TW201932117A
Application number: TW107137148A
Authority: TW
Inventors: 克勒佩林瑪莉皮耶庫林; 彼得柯爾赫夫; 湯瑪士諾伊鮑爾; 尚塔爾菲爾斯特納; 伊莉莎白波克; 馬提亞斯威特沃; 卡斯坦施梅克; 皮爾瓦奈爾; 海克舒默; 哈納契尼卡; 卡羅琳德羅班爾; 漢娜蒂內; 安嘉布赫繆勒; 湯瑪士蒙德茲克; 阿克塞克雷奇默爾; 克萊門斯盧斯蒂格; 羅伯特弗里克; 紀堯姆勒維蘭; 烏蘇拉克倫茨; 諾伯特瓦特司基
Original assignee: 德商拜耳廠股份有限公司; 德商拜耳製藥股份有限公司
Priority date: 2017-10-24
Filing date: 2018-10-22
Publication date: 2019-08-16
Also published as: EP3700913B1; CN111225921A; CU20200040A7; DK3700913T3; LT3700913T; JP2021500365A; PE20210394A1; UA126456C2; AU2018356352A1; MA50438A; ES2906305T3; MX2020004191A; WO2019081292A1; UY37948A; BR112020007983A2; AR113791A1; US20200338096A1; CO2020004945A2; PL3700913T3; PH12020550473A1

Abstract

本發明關於3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[3-(三氟甲基)-吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺、3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)-苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺及3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺之前驅藥、該等化合物之製備方法、含有該等化合物之醫藥組成物、及該等化合物或組成物用於治療及/或預防疾病，特別用於治療及/或預防腎和心血管疾病之用途。

Description

經取代三唑衍生物之前驅藥及其用途

本發明關於3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺、3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺及3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺之前驅藥、該等化合物之製備方法、含有該等化合物之醫藥組成物、及該等化合物或組成物用於治療及/或預防疾病之用途，特別用於治療及/或預防腎和心血管疾病。

前驅藥為在釋出真實的活性成分前於活體內經歷一或多個階段的酶分解及/或化學生物轉變之活性成分的衍生物。通常使用前驅藥殘留物以改進基礎的活性成分之特性態勢[P.Ettmayer等人之J.Med.Chem.47,2393(2004)]。為了達成效應的最優化輪廓，有必要為此設計前驅藥殘留物以及所欲釋出機制而非常精確地符合個別的活性成分、適應症、作用位置及投予途徑。大多數的藥係作為前驅藥投予，其與基礎的活性成分相比而展現改進的生物利用率，例如藉由改進物理化學輪廓而達成，尤其為溶解度、主動或被動吸收特性或組織特異性分布。可自關於前驅藥之廣泛的文獻提及之實例為：H.Bundgaard(Ed.),Design of Prodrugs：Bioreversible derivatives for various functional groups and chemical entities,Elsevier Science Publishers B.V.,1985。

3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑 -5-甲醯胺(實施例4A)、3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺(實施例6A)及3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺(實施例8A)為V1a受體之高效力及選擇性拮抗劑，如WO 2017/191102-A1(實施例1和2)及WO 2017/191107-A1(實施例1)中所揭示。

血管加壓素為神經內泌素，其在根本上調節水體內平衡及血管張力。其產生於第三腦室(下視丘)之壁上的上視核及側視核中的特種內分泌神經元中且自此沿著神經突運輸至腦垂體(神經性腦垂體)之後葉中。在此激素係回應不同的生理及病理生理刺激而釋放至血流中。擾亂的神經激素調節基本上本身表現在升高的交感神經張力及不當激活的腎素-血管收縮素-醛固酮系統(RAAS)。雖然一方面以β-受體阻斷劑，另一方面以ACE抑制劑或血管收縮素-受體阻斷劑來抑制該等組份現為心血管疾病之藥理治療的固有部分，但是不當升高的血管加壓素分泌目前仍不可充分治療。

血管加壓素主要經由與三種分類為V1a、V1b及V2受體且屬於G蛋白偶合受體家族之受體結合而發揮其作用。

V2受體係位於腎臟中的遠端小管上皮及集尿小管上皮中。彼等的激活使得水可透過彼等的上皮。這現象係由於水通道蛋白(特殊的水通道)併入上皮細胞的管腔膜中。因此，藥理學抑制血管加壓素對V2受體之作用導致尿液排泄增加。因此，具有V2拮抗活性之藥物似乎特別適合於治療所有與身體負荷過多的水相關聯之疾病狀況。

V1b受體(亦稱為V3受體)主要於中樞神經系統中測出。血管加壓素與釋皮質促素(CRH)一起經由V1b受體調節促腎上腺皮質激素(ACTH)的基本及應力誘發之分泌。

V1a受體主要位於血管平滑肌細胞(VSMC)上，但亦在心肌細胞纖維母細胞及特種腎細胞上，如腎絲球間質細胞或控制腎素釋放之緻密斑細胞[Wasilewski MA,Myers VD,Recchia FA,Feldman AM,Tilley DG,Cell Signal.,28(3),224-233,(2016)]。以血管加壓素激活VSMC V1a受體引起細胞內鈣釋放及相應的血管收縮。因此，刺激VSMC V1a受體引起增加的血管阻力及增加的心臟後負荷。心輸出量受到V1a-調介之血管收縮的不利影響。增加的後負荷及直接刺激在心肌細胞上的V1a受體可導致心臟肥大及包括纖維化之重塑。具有心臟特異性過度表現V1a受體的小鼠發展出心臟肥大，導致擴張及左心室功能障礙，示意V1a受體在心衰竭發展中的重要角色[Li X,Chan TO,Myers V,Chowdhury I,Zhang XQ,Song J,Zhang J,Andrel J,Funakoshi H,Robbins J,Koch WJ,Hyslop T,Cheung JY,Feldman AM,Circulation.；124,572-581(2011)]。

V1a受體亦表現在腎皮質及髓質血管系統中，其在此調介腎器官及影響整個腎血流量的血管收縮。因此，V1a受體激活可降低腎髓質血流量，誘發進一步的病理過程，如器官缺氧、減少氧氣且因此減少管狀運輸過程的能量供應以及腎小球系膜和緻密斑細胞的直接損傷。已證實腎小球系膜V1a受體激活調介TGFB傳訊且引起膠原蛋白IV的產生增加。雖然此傳訊促成腎臟中的細胞外基質積聚及重塑，但是咸信類似的傳訊路徑發生在心肌細胞中，尤其在心肌梗塞後，該傳訊強調V1a受體在回應病理生理學升高的血管加壓素含量之肥大及纖維化過程發展中的核心角色[Wasilewski MA,Myers VD,Recchia FA,Feldman AM,Tilley DG.Arginine vasopressin receptor signaling and functional outcomes in heart failure.Cell Signal.,28(3),224-233(2016)]。

因為V1a受體主要表現在VSMC上且因此參與血管功能，所以可想見與血管疾病的關係，如末梢動脈疾病(PAD)，包括跛行和危急的肢體缺血，以及冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)。

除此之外，V1a受體亦表現在人血小板上及肝臟中。血小板V1a受體的意義尚未完全理解，儘管血管加壓素在活體外經由高濃度的V1a受體誘發人血小板凝集。因此，以V1a受體拮抗劑抑制經血管加壓素誘發之血小板凝集為利用內源性表現V1a受體的人類組織之有用的藥理學活體外檢定法[Thibonnier M,Roberts JM,J Clin Invest.；76：1857-1864,(1985)]。

血管加壓素係經由肝V1a受體激活來刺激葡萄糖新生及肝糖分解。動物研究顯示血管加壓素損害葡萄糖耐量，其可以V1a受體拮抗劑抑制，由此提供血管加壓素受體V1a與糖尿病的關係。[Taveau C,Chollet C,Waeckel L,Desposito D,Bichet DG,Arthus MF,Magnan C,Philippe E,Paradis V, Foufelle F,Hainault I,Enhorning S,Velho G,Roussel R,Bankir L,Melander O,Bouby N.Vasopressin and hydration play a major role in the development of glucose intolerance and hepatic steatosis in obese rats.Diabetologia,58(5),1081-1090,(2015)]。血管加壓素顯示在動物模型中促成白蛋白尿及糖尿病誘發之腎病變的發展，其與人類的流行病學發現一致。

最近發現血管加壓素似乎亦在妊娠毒血症的發展中扮演因果的角色。在小鼠懷孕期間長期輸注血管加壓素足以誘發與人類妊娠毒血症相關聯之所有主要的母體及胎兒表型，包括妊娠特異性高血壓[Santillan MK,Santillan DA,Scroggins SM,Min JY,Sandgren JA,Pearson NA,Leslie KK,Hunter SK,Zamba GK,Gibson-Corley KN,Grobe JL.Vasopressin in preeclampsia：a novel very early human pregnancy biomarker and clinically relevant mouse model.Hypertension.64(4),852-859,(2014)]。

血管加壓素含量可在患有痛經的女性(以周期性痙攣骨盆疼痛為特徵的婦科病症)於月經期間升高，其似乎增加子宮肌層平滑肌收縮。最近發現選擇性血管加壓素V1a受體拮抗劑(瑞考伐普坦(relcovaptan)/SR-49059)可降低血管加壓素引起的子宮內收縮。

出於該等理由，抑制血管加壓素作用於V1a受體之藥劑顯然適合於治療數種心血管疾病。特別地，抑制血管加壓素選擇性作用於V1a 受體之藥劑對治療其他血容量正常的患者提供尤其理想的態勢，亦即那些不合乎藉由例如高劑量環利尿劑或V2拮抗劑進行減輕充血的患者，且其中不希望經由V2抑制誘發利水作用(aquarcsis)。

特定的4-苯基-1,2,4-三唑-3-基衍生物已說明於WO 2005/063754-A1及WO 2005/105779-A1中，其充當為血管加壓素V1a受體拮抗劑，其可用於治療婦科病症，特別是月經異常，諸如痛經。

在WO 2011/104322-A1中已揭示經雙芳基鍵結之1,2,4-三唑-3-酮的特別族群，其作為有用於治療及/或預防心血管疾病的血管加壓素V2及/或V1a受體拮抗劑，包括其5-苯基-1,2,4-三唑-3-基及1-苯基-1,2,3-三唑-4-基衍生物。然而，所說明之化合物未顯示對V1a受體足夠的選擇性且大部分顯示對血管加壓素V1a與V2受體二者的組合活性。又如上文所述，對V1a受體的高親和性以及選擇性為治療其中不希望減輕充血之疾病狀況的所欲先決條件，且可導致失調的體液體內平衡，包括降低在其他血容量正常的個體的中血漿滲透壓。

在WO 2016/071212-A1中已揭示特定的5-(羥烷基)-1-苯基-1,2,4-三唑衍生物，其充當為血管加壓素V1a及V2受體二者之高效拮抗劑，且在經口施予後另外於活體內展現顯著提高的利水效力。所述之化合物有用於治療及/或預防心血管和腎疾病。又如上文所述，對V1a受體的高親和性以及選擇性為治療其中不希望減輕充血之疾病狀況的所欲先決條件，且可導致失調的體液體內平衡，包括降低在其他血容量正常的個體的中血漿滲透壓。

在WO 2017/191107-A1和WO 2017/191102-A1中已說明特定的5-(甲醯胺)-1-苯基-1,2,4-三唑衍生物，以及在WO 2017/191114-A1中已說明特定的5-(羥基烷基)-1-雜芳基-1,2,4-三唑衍生物，其代表V1a受體之高效力及選擇性拮抗劑，且特別有用於治療及/或預防未遭受過度的流體負荷及因此不應減輕充血之個體的腎和心血管疾病。

在WO 2017/191105-A1、WO 2017/191112-A1、WO 2017/191115-A1和WO 2018/073144-A1中已揭示更多新穎的經5-(甲醯胺)取代、經5-(氟烷基)取代及經3-(羥基烷基)取代之1,2,4-三唑衍生物作為血管加壓素V2及/或V1a受體拮抗劑。

對V1a受體具有高選擇性的活性態勢具有引起偏離目標之有害的相關副作用之低潛在性，且亦可能有助於減少達成及維持所欲治療效應所需之物質量，因此限制在治療可能已處於高風險(諸如急性或慢性心和腎疾病)之患者期間潛在的不可接受之副作用及/或有害的藥物-藥物相互作用。

因此，可設想根據本發明解決的一個技術問題在於鑑定及提供充當為血管加壓素V1a受體的高效拮抗劑之新化合物。本發明之另一目的係鑑定及提供對於血管加壓素V1a受體具有高親和性及選擇性的新化合物。旨在使化合物避免經由V2抑制而誘發利水作用。與自先前技術已知的化合物相比，進一步旨在使化合物具有類似或改良的治療態勢，例如關於彼等之活體內特性，例如彼等之藥物動力學和藥效學特徵及/或彼等之代謝態勢及/或彼等之劑量-活性關係。

然而，V1a受體之高效及選擇性拮抗劑的實施例4A、實施例6A和實施例8A之化合物在水及生理介質中具有限的溶解度，造成例如經靜脈內投予實施例4A、實施例6A和實施例8A之化合物的難度。此外，應改進在經口投予化合物後的化合物生物利用率。因此，本發明之另一目的係鑑定實施例4A、實施例6A和實施例8A之化合物衍生物或前驅藥，其在所提及之介質中具有改進的生物利用率，且同時容許控制實施例4A、實施例6A和實施例8A之化合物在投予後於患者體內的釋出及/或在經口投予後具有良好的生物利用率。

現已驚訝地發現實施例4A、實施例6A和實施例8A之化合物特定的前驅物具有此特定的態勢且使得本發明化合物有用於治療及/或預防與V1a受體激活相關聯的疾病。本發明化合物特別有用於治療及/或預防未遭受過度的流體負荷及因此不應減輕充血之個體的腎和心血管疾病。

本發明提供通式(I)化合物：其中R¹ 代表下式之基團，或或其中# 代表連接1,2,4-三唑基環之點，及其醫藥上可接受之鹽、其溶劑合物和其鹽之溶劑合物。

本發明內文中所提及術語具有下列含義：術語「包含」當用於本說明書時包括「由......組成」。

在代表R¹之基團的式中，以#標記之線的終點不代表碳原子或CH₂基團，但為連接R¹至原子之鍵的部分。

通式(I)化合物有可能以同位素變體存在。本發明因此包括通式(I)化合物的一或多種同位素變體，特別為含氘之通式(I)化合物。

術語化合物或試劑之「同位素變體」定義為展現構成此化合物的同位素中之一或多者的非天然比例之化合物。

術語「通式(I)化合物之同位素變體」定義為展現構成此化合物的同位素中之一或多者的非天然比例之通式(I)化合物。

詞句「非天然比例」意指此同位素的比例高於其天然豐度。在此情況中，欲應用之同位素的天然豐度說明於“Isotopic Compositions of the Elements 1997”,Pure Appl.Chem.,70(1),217-235,1998中。

該等同位素的實例分別包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘之穩定及放射性的同位素，諸如²H(氘)、³H(氚)、¹¹C、¹³C、 ¹⁴C、¹⁵N、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³³S、³⁴S、³⁵S、³⁶S、¹⁸F、³⁶Cl、⁸²Br、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I、¹²⁹I和¹³¹I。

關於本文所指定之病症的治療及/或預防，通式(I)化合物之同位素變體較佳地含有氘(「含氘之通式(I)化合物」)。其中併入一或多種放射性同位素(諸如³H或¹⁴C)的通式(I)化合物之同位素變體有用於例如藥物及/或受質組織分布研究。該等同位素係因彼等容易併入及可檢測性而特別佳。正電子發射同位素(諸如¹⁸F或¹¹C)可併入通式(I)化合物中。通式(I)化合物之該等同位素變體有用於活體內成像應用。含氘及含¹³C之通式(I)化合物可用於臨床前或臨床研究背景中的質譜分析(H.J.Leis等人之Curr.Org.Chem.,1998,2,131)。

通式(I)化合物之同位素變體通常可以熟習此項技術領域者已知的方法(諸如那些在本文流程及/或實施例中所述之方法)藉由以該試劑之同位素變體(較佳為含氘試劑)取代試劑而製備。取決於所欲氘化位點而定，在一些情況下，來自D₂O之氘可直接併入化合物中或併入有用於合成該等化合物之試劑中(Esaki等人之Tetrahedron,2006,62,10954；Esaki等人之Chem.Eur.J.,2007,13,4052)。氘氣亦為有用於併入氘至分子中的試劑。烯鍵(H.J.Leis等人之Curr.Org.Chem.,1998,2,131；J.R.Morandi等人之J.Org.Chem.,1969,34(6),1889)及炔鍵(N.H.Khan,J.Am.Chem.Soc.,1952,74(12),3018；S.Chandrasekhar等人之Tetrahedron Letters,2011,52,3865)之催化氘化為併入氘的直接途徑。在氘氣存在下的金屬觸媒(亦即Pd、Pt及Rh)可用於以氘直接交換在含烴之官能基中的氫(J.G.Atkinson等人之美國專利3966781)。各種氘化試劑及合成建構組元(building block)可於市場上自各公司購得，諸如C/D/N Isotopes,Quebec,Canada；Cambridge Isotope Laboratories Inc.,Andover,MA,USA；及CombiPhos Catalysts,Inc.,Princeton,NJ,USA。關於氘-氫交換之最先技術的更多資訊係於例如Hanzlik等人之J.Org.Chem.55,3992-3997,1990；R.P.Hanzlik等人之Biochem.Biophys.Res.Commun.160,844,1989；P.J.Reider等人之J.Org.Chem.52,3326-3334,1987；M.Jarman等人之Carcinogenesis 16(4),683-688,1995；J.Atzrodt等人之Angew.Chem.,Int.Ed.2007,46,7744；K.Matoishi等人之Chem.Commun.2000,1519-1520；K.Kassahun等人之WO2012/112363中給出。

術語「含氘之通式(I)化合物」經定義為其中一或多個氫原子經一或多個氘原子置換且其中在通式(I)化合物的各氘化位置之氘的豐度高於氘之天然豐度(其為約0.015%)的通式(I)化合物。特別地，在含氘之通式(I)化合物中，在通式(I)化合物的各氘化位置之氘的豐度在該位置上高於10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%或80%，較佳為高於90%、95%、96%或97%，甚至更佳為高於98%或99%。應理解各氘化位置之氘的豐度係與其他的氘化位置之氘的豐度無關。

一或多個氘原子選擇性併入通式(I)化合物中可改變分子之物理化學特性(諸如酸性[C.L.Perrin，等人之J.Am.Chem.Soc.,2007,129,4490；A.Streitwieser等人之J.Am.Chem.Soc.,1963,85,2759；]、鹼性[C.L.Perrin等人之J.Am.Chem.Soc.,2005,127,9641；C.L.Perrin，等人之J.Am.Chem.Soc.,2003,125,15008；C.L.Perrin in Advances in Physical Organic Chemistry,44,144]、親脂性[B.Testa等人之Int.J.Pharm.,1984,19(3),271])及/或代謝態勢，且可導致母體化合物對代謝物之比或所形成之代謝物量的改變。此等改變可導致特定的治療優勢且因此在一些情況下可能較佳。曾報導降低的代謝速率及代謝轉換，其中代謝率被改變(A.E.Mutlib等人之Toxicol.Appl.Pharmacol.,2000,169,102；D.J.Kushner等人之Can.J.Physiol.Pharmacol.,1999,77,79)。該等改變的母體藥物及代謝物暴露可具有關於含氘之通式(I)化合物之藥效學、耐受性及功效的重要結果。在一些例子中，以氘取代減少或消除非所欲或毒性代謝物的形成且增強所欲代謝物的形成(例如奈韋拉平(Nevirapine)：A.M.Sharma等人之Chem.Res.Toxicol.,2013,26,410；依法韋侖(Efavirenz)：A.E.Mutlib等人之Toxicol.Appl.Pharmacol.,2000,169,102)。在其他的例子中，氘化之主要效應為降低全身性清除率。結果使化合物的生物半衰期增加。潛在的臨床效益可包括以降低的峰含量及增加的波谷含量維持類似的全身性暴露之能力。這可能導致較低的副作用及增強的功效，其係取決於特定化合物之藥物動力學/藥效學關係而定。ML-337(C.J.Wenthur等人之J.Med.Chem.,2013,56, 5208)及奧當卡替(Odanacatib)(K.Kassahun等人之WO2012/112363)為此氘化效應的實例。還曾報導其他例子，其中降低的代謝速率導致藥物的暴露增加而不改變全身性清除率(例如羅非考昔(Rofecoxib)：F.Schneider等人之Arzneim.Forsch./Drug.Res.,2006,56,295；特拉匹偉(Telaprevir)：F.Maltais等人之J.Med.Chem.,2009,52,7993)。顯示此效應之氘化藥物可具有降低之給藥需求(例如以較低的劑量數目或較低的劑量達成所欲效應)及/或可產生較低的代謝物負荷。

通式(I)化合物可具有多個用於代謝之潛在攻擊位點。為了使上述物理化學特性及代謝分布效應最優化，可選擇具有一或多個氘-氫交換之特定模式的含氘之通式(I)化合物。特別地，含氘之通式(I)化合物的氘原子係附著至碳原子及/或位於通式(I)化合物之該等位置上，該等位置為用於代謝酶(諸如細胞色素P₄₅₀)之攻擊位點。

在本文使用文字化合物、鹽、多晶型物、水合物、溶劑合物及類似者的複數形式時，則其亦意指單一化合物、鹽、多晶型物、異構物、水合物、溶劑合物或類似者。

以「穩定的化合物」或「穩定的結構」意指具有足夠的強健性而自反應混合物存活分離至有用的純度及調配成有效的治療劑之化合物。

前驅藥為活性成分之衍生物。術語「基礎的活性成分」、「基礎的個別藥物」及「個別藥物」在本發明中以同義字使用。

本發明化合物係取決於各種所欲取代基的位置及性質而視需要地含有一個不對稱中心。一個不對稱碳原子有可能以(R)或(S)組態存在，其可導致消旋性混合物。在特定情況下，不對稱性亦有可能由於限制在給出之鍵(例如與指定化合物的兩個經取代芳族環毗鄰之中心鍵)的周圍旋轉而存在。較佳的化合物為那些產生更希望的生物活性之化合物。本發明化合物的經分離之純或部分純化的異構物及立體異構物或消旋性混合物亦包括在本發明之範疇內。此等材料的純化及分離可以此項技術中已知的標準技術實現。

光學異構物可藉由根據習知的方法解析消旋性混合物而獲得，例如藉由使用光學活性酸或鹼形成非鏡像異構性鹽或形成共價非鏡像異構物。適當的酸之實例為酒石酸、二乙醯基酒石酸、二甲苯甲醯基酒石酸和樟腦磺酸。非鏡像異構物之混合物可以彼等的物理及/或化學差異為基礎而以此項技術中已知的方法分離成其個別的非鏡像異構物，例如以層析術或分段結晶。接著自分離之非鏡像異構性鹽釋出光學活性鹼或酸。用於分離光學異構物之不同的方法包含使用有或沒有習知的衍化之手性層析術(例如使用手性相之HPLC管柱)，最優化地選擇而使鏡像異構物之分離最大化。使用手性相之適合的HPLC管柱係於市場上取得，諸如那些由Daicel所製造者，例如Chiracel OD及Chiracel OJ，例如在該等之中全部皆按慣例選擇。有或沒有習知的衍化之酶催化分離亦為有用的。本發明之光學活性化合物同樣地可藉由利用光學活性起始材之手性合成而獲得。為了區分彼此不同類型的異構物，參考IUPAC Rules Section E(Pure Appl Chem 45,11-30,1976)。

本發明包括本發明化合物之所有可能的立體異構物，其係呈單一立體異構物或呈該等立體異構物(例如(R)-或(S)-異構物)以任何比之任何混合物。例如，本發明化合物之單一立體異構物(例如單一鏡像異構物或單一非鏡像異構物)的分離係藉由任何適合的現有技術方法狀態(諸如層析術，尤其為手性層析術)達成。

在本發明之上下文中，應理解術語「鏡像異構性純的」意指討論中的化合物關於手性中心之絕對組態係以超過95%，更佳為超過97%之鏡像異構物過量存在。鏡像異構物過量(ee)在此係藉由使用以下公式評估手性相的對應之HPLC層析圖來計算：ee=[E^A(面積%)-E^B(面積%)]x 100%/[E^A(面積%)+E^B(面積%)]

(E^A：主要的鏡像異構物，E^B：次要的鏡像異構物)

本發明亦涵蓋本發明化合物的有用形式，諸如代謝物、水合物、溶劑合物、鹽(特別為醫藥上可接受之鹽)及/或共沉澱物。

本發明化合物可以水合物或溶劑合物存在，其中本發明化合物含有例如極性溶劑(特別為水、甲醇或乙醇)作為化合物之晶格的結構元素。極性溶劑(特別為水)的量有可能以化學計量或非化學計量比存在。在化學計量溶劑合物(例如水合物)的例子中，有可能分別為半-(hemi-)、半-((semi-)、單-、倍半-、二-、三-、四-、五-等溶劑合物或水合物。本發明包括所有的此等水合物或溶劑合物。在本發明的上下文，水合物為較佳的溶劑合物，特別為半水合物(hemihydrate)(半水合物(semihydrate))。

另外，本發明化合物有可能以游離形式(例如游離鹼或游離酸)或兩性離子存在，或以鹽形式存在。該鹽可為有機或無機加成鹽之任何鹽，特別為任何醫藥上可接受之有機或無機加成鹽，該鹽習用於藥劑學中或用於例如分離或純化本發明化合物。

術語「醫藥上可接受之鹽」係指本發明化合物之有機或無機加成鹽。例如，參見S.M.Berge等人之“Pharmaceutical Salts,」J.Pharm.Sci.1977,66,1-19。

具有足夠酸性的本發明化合物之適合的醫藥上可接受之鹽為鹼金屬鹽(例如鈉鹽、鉀鹽或鋰鹽)、鹼土金屬鹽類(例如鈣鹽、鎂鹽或鍶鹽)、或鋁鹽或鋅鹽、或衍生自氨或具有1至20個碳原子的有機一級、二級或三級胺(諸如乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二異丙胺、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二環己胺、二甲基胺基乙醇、二乙基胺基乙醇、參(羥甲基)胺基甲烷、普魯卡因(procaine)、二苯甲胺、N-甲基嗎啉、精胺酸、賴胺酸、1,2-乙二胺、N-甲基哌啶、N-甲基-還原葡糖胺、N,N-二甲基-還原葡糖胺、N-乙基-還原葡糖胺、1,6-己二胺、葡萄胺糖、肌胺酸、絲胺醇、2-胺基-1,3-丙二醇、3-胺基-1,2-丙二醇、4-胺基-1,2,3-丁三醇)之銨鹽、或具有1至20個碳原子的四級銨離子(諸如四甲基銨、四乙基銨、四(正丙基)銨、四(正丁基)銨或N-苯甲基-N,N,N-三甲基銨、膽鹼或烷基苯甲基二甲基銨(benzalkonium))之鹽。優先選擇為鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、鈣鹽或鎂鹽，最佳為鉀鹽。

本發明之酸性化合物的鹼金屬及鹼土金屬鹽係藉由本發明化合物與適當的鹼經由各種已知的方法而製得。

本發明包括本發明化合物之所有可能的鹽，其係呈單一鹽或該等鹽以任何比之任何混合物。

在用於合成本發明之中間物及實施例的本發明內文中，特別在實驗章節中，當化合物係以與對應的鹼或酸之鹽形式提及時，則藉由各個製備及/或純化方法所獲得的該鹽形式之精確的化學計量組成在大多數的例子中為未知的。

除非另有其他規定，否則例如關於鹽之化學名稱或結構式的詞尾(諸如「鈉鹽」、「鉀鹽」或「x Na⁺」、「x K⁺」)意指未具體指明鹽形式之化學計量的鹽形式。

這類似地適用於其中合成中間物或實施例化合物或其鹽已藉由所述之製備及/或純化方法而以具有(若經定義)未知的化學計量組成之溶劑合物(諸如水合物)獲得的例子。

此外，本發明包括本發明化合物之所有可能的晶形或多晶形，其係呈單一多晶形，或呈一種以上的多晶形以任何比之混合物。

優先選擇為通式(I)化合物，其中R¹ 代表下式之基團其中# 代表連接1,2,4-三唑基環之點。

亦優先選擇為具有下式之(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽或其醫藥上可接受之鹽、其溶劑合物及其鹽之溶劑合物。

亦優先選擇為具有下式之(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽

本發明涵蓋通式(I)化合物，其揭示於本文的實施例章節中。

本發明進一步提供製備通式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽、其溶劑合物或其鹽之溶劑合物之方法，其中[A]將下式之化合物其中R¹ 具有以上文給出之通式(I)化合物所定義之意義，在第一步驟中與磷醯氯反應及在第二步驟中水解，得到通式(I)化合物，或[B]將下式之化合物其中R¹ 具有以上文給出之通式(I)化合物所定義之意義，在第一步驟中與二磷酸四苯甲酯反應及在第二步驟中於還原條件下移除苯甲基，得到通式(I)化合物，在適當時，視需要於隨後將通式(I)化合物以相應的溶劑及/或鹼處理而轉化成其各自的醫藥上可接受之鹽、其溶劑合物或其鹽之溶劑合物。

在反應[A]中的第一步驟通常係藉由將下式之化合物(II)與磷醯氯在惰性溶劑中於鹼的存在下反應來進行，視需要地在添加劑的存在下，較佳地在從-10℃至+50℃之溫度範圍內，更佳地在0℃至+30℃下。反應可在大氣壓力、升壓或減壓下進行(例如在從0.5至5巴下)；反應通常係在大氣壓力下進行。

惰性溶劑為例如鹵化烴，諸如二氯甲烷或三氯甲烷；醚，諸如二乙醚或甲基三級丁醚；烴，諸如苯或甲苯；或其他溶劑，諸如二噁烷、二甲基甲醯胺或四氫呋喃。亦有可能使用溶劑的混合物。優先選擇為四氫呋喃。

適合的鹼為例如有機鹼，諸如三烷基胺，例如三乙胺或二異丙基乙胺，或吡啶。優先選擇為三乙胺。

適合的添加劑為例如4-N,N-二甲基胺基吡啶。

在反應[A]中的第二步驟通常係藉由添加鹼或水來進行，較佳地在-10℃至+50℃之溫度範圍內，更佳地在0℃至+30℃下。反應可在大氣壓力、升壓或減壓下進行(例如在從0.5至5巴下)；反應通常係在大氣壓力下進行。

適合的鹼為例如水性鹼金屬氫氧化物溶液，諸如水性氫氧化鈉、水性氫氧化鋰或水性氫氧化鉀，或水性鹼金屬碳酸氫鹽，諸如水性碳酸氫鈉或水性碳酸氫鉀，或水性鹼金屬碳酸鹽，諸如水性碳酸鈉或水性碳酸鉀。優先選擇為水性碳酸氫鈉溶液。

在反應[B]中的第一步驟通常係藉由將下式之化合物(II)與二磷酸四苯甲酯在惰性溶劑中於鹼的存在下反應來進行，較佳地在從-10℃至+50℃之溫度範圍內，更佳地在0℃至+30℃下。反應可在大氣壓力、升壓或減壓下進行(例如在從0.5至5巴下)；反應通常係在大氣壓力下進行。

惰性溶劑為例如鹵化烴，諸如二氯甲烷或三氯甲烷；醚，諸如二乙醚或甲基三級丁醚；或其他的溶劑，諸如二噁烷、二甲基甲醯胺或四氫呋喃。亦有可能使用溶劑的混合物。優先選擇為四氫呋喃。

適合的鹼為例如三級丁醇鉀或三級丁醇鈉、氫化鈉、N-丁基鋰、二異丙基胺化鋰、雙(三甲基矽基)胺化鈉或雙(三甲基矽基)胺化鋰，優先選擇為雙(三甲基矽基)胺化鋰。

在反應[B]中的第二步驟通常係以還原劑在惰性溶劑中進行，較佳地在從-10℃至+50℃之溫度範圍內，更佳地在0℃至+30℃下。反應可在大氣壓力、升壓或減壓下進行(例如在從0.5至5巴下)；反應通常係在大氣壓力下進行。

惰性溶劑為例如乙醇、或二噁烷與水之混合物或四氫呋喃與水之混合物。優先選擇為乙醇。

還原劑為例如鈀/碳及氫、二氫氧化鈀、二氯化錫、三氯化鈦或甲酸銨。優先選擇為鈀/碳及氫。

式(II)化合物係於市場上取得、自文獻已知或可藉由改編文獻中所述之標準方法而自輕易取得的起始材料製得。用於製備起始材料之詳細程序及文獻參考可見於起始材料及中間物之製備章節中的實驗部分。

本發明涵蓋製備本發明之通式(I)化合物之方法，該方法包含如本文的實驗章節中所述之步驟。

下文所述之流程及程序例證本發明之通式(I)化合物的合成途徑且不旨在限制。

本發明化合物之製備可藉助於下列的合成流程例證：

本發明之通式(I)化合物可藉由熟習此項技術領域者已知的任何方法轉化成任何鹽，較佳為如上文所述之醫藥上可接受之鹽。同樣地，本發明之通式(I)化合物的任何鹽可藉由熟習此項技術領域者已知的任何方法轉化成游離化合物。

本發明化合物具有高價值的藥理特性且可用於預防及/或治療人類和其他哺乳動物的各種疾病及疾病誘發之狀態。本發明之通式(I)化合物例證高價值的藥理作用光譜及藥物動力學態勢。已驚訝地發現本發明化合物有效地抑制血管加壓素V1a受體且因此有可能使該化合物用於治療及/或預防人類和動物的疾病，較佳為腎和心血管疾病。

在本發明之上下文中，術語「治療(treatment)」或「治療(treating)」包括抑制、延遲、緩解、減輕、阻止、降低或引起疾病、病症、病況或狀態、其發展及/或進展、及/或其症狀的消退。術語「預防(prevention)」或「預防(preventing)」包括降低具有、感染或經歷疾病、病症、病況或狀態、其發展及/或進展、及/或其症狀的風險。術語預防包括預防療法(prophylaxis)。病症、疾病、病況或狀態的治療或預防可為部分的或完全的。

在此整篇文件中，為了簡化起見，單數語言的使用優先於複數語言，但是若没有其他的陳述，則通常意指包括複數語言。例如，詞句「治療患者的疾病之方法，其包含對患者投予有效量的通式(I)化合物」意指包括同時治療一種以上的疾病以及投予一種以上的通式(I)化合物。

本發明化合物具有高效力且特別為血管加壓素V1a受體之選擇性拮抗劑。因此，預期本發明化合物具有作為用於治療及/或預防疾病，特別用於治療及/或預防腎和心血管疾病之治療劑的高價值。

如本文所使用的術語「血管加壓素V1a受體拮抗劑」係指藉由抑制(部分或完全)或阻斷血管加壓素V1a受體而起作用之化合物，由此以血管加壓素防止受體激活。

在一個具體實例中，本文所述化合物之基礎的個別藥物在V1a受體上具有活性。在另一具體實例中，本文所述化合物之基礎的個別藥物根據在B-4中的研究展現具有IC₅₀<100nM之V1a受體抑制作用。在另一具體實例中，本文所述化合物之基礎的個別藥物根據在B-4中的研究展現具有IC₅₀<20nM之V1a受體抑制作用。在另一具體實例中，本文所述化合物之基礎的個別藥物根據在B-4中的研究展現具有IC₅₀<10nM之V1a受體抑制作用。在另一具體實例中，本文所述化合物之基礎的個別藥物根據在B-4中的研究展現具有IC₅₀<5nM之V1a受體抑制作用。

在另外的具體實例中，本文所述化合物之基礎的個別藥物在V1a受體上具有選擇性活性，而在其他的血管加壓素受體(諸如V1b及/或V2亞型)上具有較少的活性、實質上較少的活性及/或不具有活性。在另一具體實例中，本文所述化合物之基礎的個別藥物對V1a受體比對V2受體具有至少10倍的選擇性，如根據在B-4中的研究所測定。在另一具體實例中，本文所述化合物之基礎的個別藥物對V1a受體比對V2受體具有至少15倍的選擇性，如根據在B-4中的研究所測定。在另一具體實例中，本文所述化合物之基礎的個別藥物對V1a受體比對V2受體具有至少20倍的選擇性，如根據在B-4中的研究所測定。在另一具體實例中，本文所述化合物之基礎的個別藥物對V1a受體比對V2受體具有至少30倍的選擇性，如根據在B-4中的研究所測定。

根據本發明之化合物適合於治療及/或預防腎疾病，特別為急性和慢性腎疾病、糖尿病性腎疾病及急性和慢性腎衰竭。通用術語「腎疾病(renal disease)」或「腎疾病(kidney disease)」說明其中腎臟無法過濾和移除血液的廢物之病況類別。有兩種主要的腎疾病形式：急性腎疾病(急性腎損傷，AKI)和慢性腎疾病(CKD)。根據本發明之化合物可進一步用於治療及/或預防由多發性傷害引起的急性腎損傷之後遺症，諸如缺血-再灌注損傷、放射性對比劑投藥、心肺繞道手術、休克及敗血症。在本發明之意義中，術語腎衰竭或腎功能不全包含腎功能不全的急性和慢性表現二者，以及基本或相關的腎疾病，諸如腎灌注不足、透析中低血壓(intradialytic hypotension)、阻塞性尿路病變、腎小球病、IgA腎病變、腎小球性腎炎、急性腎小球性腎炎、腎小球硬化、腎小管間質疾病、腎病(諸如原發性和先天性腎疾病)、腎炎、阿爾波特(Alport)症候群、腎發炎、免疫性腎疾病(諸如腎移植排斥、免疫複合誘發之腎疾病、由毒性物質誘發之腎病變、對比介質誘發之腎病變；最小變化的腎小球性腎炎(類脂質)；膜性腎小球性腎炎；局部節段性腎絲球硬化症(focal segmental glomerulosclerosis，FSGS)；溶血性尿毒症候群(HUS)、類澱粉變性症、古巴士德氏(Goodpastute)症候群、華格納氏(Wegener)肉芽病、舍恩萊因-亨諾紫癜(Purpura Schönlein-Henoch)、糖尿病性和糖尿病性腎病變、腎盂腎炎、腎囊腫、腎硬化、高血壓性腎硬化和腎病症候群，該等疾病在診斷學上可以例如異常減少的肌酸酐及/或水排泄、異常增加的血液尿素、氮、鉀及/或肌酸酐濃度、改變的腎酵素活性(諸如麩胺醯基合成酶)、改變的尿滲透壓或尿量、增加的微白蛋白尿、巨量白蛋白尿、腎小球和小動脈病變、腎小管擴張、高磷酸鹽血症及/或需要透析為特徵。本發明亦包含根據本發明之化合物用於治療及/或預防腎功能不全後遺症之用途，例如肺水腫、心衰竭、尿毒症、貧血、電解質紊亂(例如高鉀血症、低鈉血症)及在骨骼中和碳水化合物代謝障礙。根據本發明之化合物亦適合於治療及/或預防多囊性腎疾病(PCKD)及ADH分泌不足症候群(SIADH)。

在本上下文中，可以本發明化合物治療及/或預防之心血管疾病包括但不限於下列者：急性和慢性心衰竭(包括惡化性慢性心衰竭(或因心衰竭住院)和包括鬱血性心衰竭)、動脈性高血壓、頑固性高血壓、動脈性肺高血壓、冠心病、穩定型和非穩定型心絞痛、心房和心室心律不整、心房和心室節律紊亂和傳導障礙(例如I-III度房室傳導阻斷(AVB I-III))、上心室心博過速、心房纖維顫動、心房撲動、心室纖維顫動、心室撲動、心室心博過速、尖端扭轉性(torsade-de-pointes)心動過速、心房和心室期外收縮、房室交接區性期外收縮、病竇症候群、暈厥、AV-結內折返性心動過速和吳爾夫巴金森懷特(Wolff-Parkinson-White)症候群、急性冠狀動脈症候群(ACS)、自體免疫性心臟疾病(心包炎、心內膜炎、心瓣炎、主動脈炎、心肌病變)、休克(諸如心因性休克、敗血性休克和過敏性休克)、動脈瘤、拳師心肌炎(心室早期收縮)，再者包括血栓栓塞疾病和缺血，諸如末梢灌注障礙、再灌注損傷、動脈和靜脈血栓、心肌不全症、內皮功能障礙、微血管和大血管損傷(血管炎)，及用於預防再狹窄(諸如在血栓溶解治療後)、經皮腔內動脈血管手術(PTA)、經皮腔內冠狀動脈血管手術(PTCA)、心臟移植和繞道手術、動脈硬化症、脂質代謝障礙、低脂蛋白血症、異常血脂症、高三酸甘油酯血症、高脂血症和混合性高脂血症、高膽固醇血症、β脂蛋白血症、麥固醇血症(sitosterolemia)、黃瘤病(xanthomatosis)、丹吉爾氏(Tangier)病、脂肪過多、肥胖症、代謝症候群、短暫性和缺血發作、中風、發炎性心血管疾病、末梢和心血管疾病、末梢循環病症、冠狀動脈和末梢動脈痙攣及水腫，諸如肺水腫、腦水腫、腎水腫和心衰竭相關性水腫。

在本發明之意義中，術語心衰竭亦包括更特定或相關性疾病形式，諸如右心衰竭、左心衰竭、全心閉鎖不全、缺血性心肌病變、擴張型心肌病變、先天性心臟缺陷、心瓣膜缺陷、具有心瓣膜缺陷的心衰竭、二尖瓣狹窄、二尖瓣閉鎖不全、主動脈瓣狹窄、主動脈瓣閉鎖不全、三尖瓣狹窄、三尖瓣閉鎖不全、肺動脈瓣狹窄、肺動脈瓣閉鎖不全、混合性心瓣缺陷、心肌發炎(心肌炎)、慢性心肌炎、急性心肌炎、病毒性心肌炎、糖尿病性心衰竭、酒精中毒心肌病變、心儲積症、正常收縮分率心衰竭(HFpEF或舒張性心衰竭)及低收縮分率心衰竭(HFrEF或收縮性心衰竭)。

本發明化合物可特別有用於治療及/或預防心腎症候群(CRS)及其各種亞型。此術語包含特定的心臟和腎病症，由此使一個器官中的急性或慢性功能障礙可誘發其他器官的急性和慢性功能障礙。

而且，根據本發明之化合物可用於治療及/或預防末梢動脈疾病(PAD)(包括跛行和嚴重的四胺缺血)以及冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)(包括CMD型1-4)、原發性和續發性雷諾氏(Raynaud)現象、微循環障礙、跛行、末梢和自律神經病變、糖尿病性微小血管病變、糖尿病性視網膜病變、糖尿病性四胺潰瘍、壞疽、CREST症候群、紅斑性病症、風濕病，及用於促進傷口癒合。

此外，本發明化合物適合於治療泌尿系統疾病及男性和女性泌尿生殖系統疾病，諸如良性前列腺症候群(BPS)、良性前列腺增生(BPH)、良性前列腺肥大(BPE)、膀胱出口阻塞(BOO)、下泌尿道症候群(LUTS)、神經性膀胱過動(OAB)、間質性膀胱炎(IC)、尿失禁(UI)(諸如混合性、急迫性、應力性或溢流性失禁(MUI、UUI、SUI、OUI))、骨盆疼痛、勃起功能障礙、痛經及子宮內膜異位。

根據本發明之化合物亦可用於治療及/或預防發炎疾病、氣喘病、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、急性肺損傷(ALI)、α-1-抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)、肺纖維變性、肺氣腫(例如吸煙誘發之肺氣腫)及囊性纖維變性(CF)。另外，本發明化合物可用於治療及/或預防肺動脈性高血壓(PAH)及其他形式的肺高血壓(PH)，包括與左心室疾病、HIV感染、鐮狀細胞貧血、血栓栓塞症(CTEPH)、類肉瘤病、慢性阻塞性肺疾病(COPD)或肺纖維變性相關聯的肺高血壓。

另外，根據本發明之化合物可用於治療及/或預防肝硬化、腹水、糖尿病及糖尿病性併發症，諸如神經病變和腎病變。

再者，本發明化合物適合於治療及/或預防中樞神經病症，諸如焦慮症、抑鬱症、青光眼、癌症(諸如特別為肺腫瘤)及晝夜節律失調(諸如時差和輪值作業)。

此外，根據本發明之化合物可用於治療及/或預防疼痛病況、腎上腺疾病(諸如嗜鉻細胞瘤和腎上腺中風)、腸疾病(諸如克隆氏(Crohn)病和腹瀉)、月經病症(諸如痛經、子宮內膜異位症、早產和安胎)。

由於本發明化合物的活性及選擇性態勢，咸信本發明化合物特別適合於治療及/或預防急性和慢性腎疾病，包括糖尿病性腎病變、急性和慢性心衰竭、妊娠毒血症、末梢動脈疾病(PAD)、冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)、雷諾氏症候群及痛經。

上文提及之疾病已在人類中充分予以特徵化，但亦以可比擬的病因出現在其他哺乳動物中，且彼等可以本發明化合物及方法治療。

因此，本發明進一步關於根據本發明之化合物用於治療及/或預防疾病(尤其為前述疾病)之用途。

本發明進一步關於根據本發明之化合物用於製備醫藥組成物之用途，該醫藥組成物係用於治療及/或預防疾病(尤其為前述疾病)。

本發明進一步關於根據本發明之化合物在用於治療及/或預防疾病(尤其為前述疾病)之方法中的用途。

本發明進一步關於於治療及/或預防疾病(尤其為前述疾病)之方法，其係藉由使用有效量的根據本發明之化合物中之至少一者。

依照另一態樣，本發明涵蓋醫藥組合(特別為藥物)，其包含至少一種本發明之通式(I)化合物及至少一或多種特別用於治療及/或預防疾病(尤其為前述疾病)之其他的活性成分。

特別地，本發明涵蓋醫藥組合，其包含：˙一或多種第一活性成分，特別為如前述定義之通式(I)化合物，及˙一或多種特別用於治療及/或預防疾病(尤其為前述疾病)之其他的活性成分。

在本發明中，術語「組合」係如熟習此項技術領域者已知的方式使用，該組合有可能為固定組合、非固定組合或數份之套組(kit-of-parts)。

在本發明中，「固定組合」係如熟習此項技術領域者已知的方式使用且經定義為其中例如第一活性成分(諸如一或多種本發明之通式(I)化合物)及另一活性成分一起存在於一個單位劑型或一個單一實體中的組合。「固定組合」的一個實例為其中第一活性成分及另一活性成分係存在於同時投予之混合物中(諸如調配物中)的醫藥組成物。「固定組合」的另一實例為其中第一活性成分與另一活性成分係存在於一個單元中而未摻合的醫藥組合。

在本發明中，非固定組合或數份之套組係如熟習此項技術領域者已知的方式使用且經定義為其中第一活性成分及另一活性成分係存在於超過一個單位的組合。非固定組合或數份之套組的一個實例為其中第一活性成分及另一活性成分係分開存在的組合。非固定組合或數份之套組的組分有可能分開、依序、同時、並行或按時間順序錯開地投予。

本發明化合物可以單一藥劑或與一或多種其他的醫藥活性成分組合投予，其中組合不引起不可接受之副作用。本發明亦涵蓋此等醫藥組合。例如，本發明化合物可與已知用於治療及/或預防疾病(尤其為前述疾病)之劑組合。

特別地，本發明化合物可與下列者固定或分開組合使用： ˙抗血栓形成劑，例如且較佳地來自下列群組：血小板凝集抑制劑、抗凝血劑及纖溶酶原物質；˙降血壓劑，例如且較佳地來自下列群組：鈣拮抗劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、NEP抑制劑、血管肽酶抑制劑、內皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α-阻斷劑、β-阻斷劑、礦皮質激素受體拮抗劑及利尿劑；˙抗糖尿病劑(抗低血糖劑或抗高血糖劑)，諸如且較佳為胰島素和衍生物、磺醯脲、雙胍、噻唑啶二酮、阿卡波糖、DPP4抑制劑、GLP-1類似物或SGLT抑制劑(gliflozins)；˙有機硝酸鹽及NO予體，例如硝普鈉(sodium nitropmsside)、硝化甘油、異山梨醇(isosorbide)單硝酸酯、異山梨醇二硝酸酯、嗎斯酮胺(molsidomine)或SIN-1及吸入的NO；˙抑制環單磷酸鳥苷(cGMP)降解之化合物，例如磷酸二酯酶(PDE)1、2、5及/或9之抑制劑，特別為PDE-5抑制劑，諸如西地那非(sildenafil)、伐地那非(vardenafil)、他達拉非(tadalafil)、奧地那非(udenafil)、達桑他非(dasantafil)、阿凡那非(avanafil)、米羅地那非(mirodenafil)、羅地那非(lodenafil)、CTP-499或PF-00489791；˙正性肌收縮能劑，諸如強心苷(digoxin)、β-腎上腺素能及多巴胺能促效劑，諸如異丙基腎上腺素、腎上腺素、降腎上腺素、多巴胺或多巴酚丁胺(dobutamine)；˙利尿鈉肽類，諸如心房利尿鈉肽(ANP，阿納里德(anaritide))、B-型利尿鈉肽或腦利尿鈉肽(BNP，奈西立肽(nesiritide))、C-型利尿鈉肽(CNP)或尿擴張素(urodilatin)；˙鈣增敏劑，諸如且較佳為左西孟丹(levosimendan)；˙可溶性鳥苷酸環化酶(sGC)之NO-和血基質-非依賴性活化劑，例如且優先選擇為WO 01/19355、WO 01/19776、WO 01/19778、WO 01/19780、WO 02/070462和WO 02/070510中所述之化合物；˙鳥苷酸環化酶(sGC)之NO非依賴性，但血基質依賴性刺激劑，例如且優先選擇為WO 00/06568、WO 00/06569、WO 02/42301、WO 03/095451、WO 2011/147809、WO 2012/004258、WO 2012/028647和WO 2012/059549中所述之化合物；˙刺激cGMP合成之藥劑，例如且優先選擇為sGC調節劑，例如且優先選擇為里奧加特(riociguat)、希那加特(cinaciguat)、維里加特(vericiguat)或BAY 1101042；˙人類嗜中性球彈性蛋白酶(HNE)抑制劑，諸如西維斯特(sivelestat)或DX-890(雷特蘭(reltran))；˙抑制信號傳導級聯之化合物，特別為酪胺酸及/或絲胺酸/蘇胺酸激酶抑制劑，諸如硝替尼(nintedanib)、達沙替尼(dasatinib)、尼羅替尼丁(nilotinib)、伯舒替尼(bosutinib)、雷格非尼布(regorafenib)、索拉非尼布(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、舍地拉尼布(cediranib)、阿西替尼(axitinib)、泰拉替尼(telatinib)、伊馬替尼(imatinib)、布里瓦尼(brivanib)、帕唑帕尼布(pazopanib)、瓦塔拉尼布(vatalanib)、吉非替尼(gefitinib)、艾羅替尼(erlotinib)、拉帕替尼(lapatinib)、肯奈替尼(canertinib)、萊斯替尼、派利替尼(pelitinib)、塞馬西尼(semaxanib)或坦杜替尼(tandutinib)；˙影響心臟能量代謝之化合物，諸如且較佳為乙莫克舍(etomoxir)、二氯乙酸鹽、雷諾嗪(ranolazine)或曲美他嗪(trimetazidine)、或完全或部份腺苷A1受體促效劑，如GS-9667(先前稱為CVT-3619)、卡帕諾生(capadenoson)和那拉諾生(neladenoson bialanate)(BAY 1067197)；˙影響心跳速率之化合物，諸如且較佳為伊伐布定(ivabradine)；˙心臟肌凝蛋白活化劑，諸如且較佳為奧美卡替莫卡必爾(omecamtiv mecarbil)(CK-1827452)；˙抗發炎藥物，諸如非類固醇抗發炎藥物(NSAID)，包括乙醯基水楊酸(阿司匹靈)、伊布洛芬(ibuprofen)和那普寧(naproxen)；糖皮質激素類，諸如且較佳為普賴蘇(prednisone)、普賴蘇濃(prednisolone)、甲基普賴蘇濃、特安皮質醇(triamcinolone)、地塞米松(dexamethasone)、氯地米松(beclomethasone)、貝他米松(betamethasone)、氟尼縮松(flunisolid)、布迪松奈(budesonide)或氟替卡松(fluticasone)；或5-胺基水楊酸衍生物、白三烯拮抗劑、TNF-α抑制劑及趨化因子受體拮抗劑，諸如CCR1、2及/或5抑制劑；˙脂肪代謝改變劑，例如且較佳地來自下列群組：甲狀腺受體促效劑、膽固醇合成抑制劑，諸如且較佳為HMG-CoA-還原酶或鯊烯合成抑制劑、ACAT抑制劑、CETP抑制劑、MTP抑制劑、PPAR-α、PPAR-γ及/或PPAR-δ促效劑、膽固醇吸收抑制劑、脂肪酶抑制劑、聚合性膽汁酸吸附劑、膽汁酸再吸收抑制劑及脂蛋白(a)拮抗劑。

抗血栓形成劑較佳地經理解為來自血小板凝集抑制劑、抗凝血劑類及纖溶酶原物質之化合物。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與血小板凝集抑制劑(例如且較佳為阿司匹靈、克洛平格(clopidogrel)、替克皮定(ticlopidine)或潘生汀(dipyridamole))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與凝血酶抑制劑(例如且較佳為希美加群(ximelagatran)、達比加群(dabigatran)、美拉加群(melagatran)、畢瓦魯定(bivalirudin)或依諾肝素(enoxaparin))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與GPIIb/IIIa拮抗劑(例如且較佳為替羅非班(tirofiban)或阿昔單抗(abciximab))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與因子Xa抑制劑(例如且較佳為利伐沙班(rivaroxaban)、阿皮沙班(apixaban)、歐塔沙班(otamixaban)、菲德沙班(fidexaban)、拉札沙班(razaxaban)、磺達肝素(fondaparinux)、抑達肝素(idraparinux)、DU-176b、PMD-3112、YM-150、KFA-1982、EMD-503982、MCM-17、MLN-1021、DX 9065a、DPC 906、JTV 803、SSR-126512或SSR-128428)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與肝素或低分子量(LMW)肝素衍生物組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與維生素K拮抗劑(例如且較佳為香豆素)組合投予。

應理解降血壓劑較佳為來自下列群組之化合物：鈣拮抗劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、NEP抑制劑、血管肽酶抑制劑、內皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α-阻斷劑、β-阻斷劑、礦皮質激素受體拮抗劑及利尿劑。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與鈣拮抗劑(例如且較佳為硝苯地平(nifedipine)、氨氯地平(amlodipine)、維拉帕米(verapamil)或地爾硫卓(diltiazem))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與α-1-受體阻斷劑(例如且較佳為普拉辛(prazosin)或坦洛新(tamsulosin))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與β-阻斷劑(例如且較佳為普萘洛爾(propranolol)、阿替洛爾(atenolol)、噻嗎洛爾(timolol)、吲哚洛爾(pindolol)、阿普洛爾(alprenolol)、氧烯洛爾(oxprenolol)、噴布洛爾(penbutolol)、布拉洛爾(bupranolol)、美替洛爾(metipranolol)、納多洛爾(nadolol)、甲吲洛爾(mepindolol)、咔唑洛爾(carazolol)、索他洛爾(sotalol)、美托洛爾(metoprolol)、倍他洛爾(betaxolol)、塞利洛爾(celiprolol)、比索洛爾(bisoprolol)、卡替洛爾(carteolol)、艾司洛爾(esmolol)、拉貝洛爾(labetalol)、卡維地洛(carvedilol)、阿達洛爾(adaprolol)、蘭地洛爾(landiolol)、奈必洛爾(nebivolol)、依泮洛爾(epanolol)或布新洛爾(bucindolol))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與血管收縮素AII受體拮抗劑(例如且較佳為氯沙坦(losartan)、坎地沙坦(candesartan)、纈沙坦(valsartan)、替米沙坦(telmisartan)、伊貝沙坦(irbesartan)、奧美沙坦(olmesartan)、依普羅沙坦(eprosartan)、恩布沙坦(embusartan)或阿齊沙坦(azilsartan))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與血管肽酶抑制劑或中性肽鏈內切酶(NEP)抑制劑(諸如且較佳為沙可比曲(sacubitril)、奧馬曲拉(omapatrilat)或AVE-7688)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與雙血管收縮素AII受體拮抗劑/NEP抑制劑(ARNI)(例如且較佳為LCZ696)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與ACE抑制劑(例如且較佳為依拉普利(enalapril)、卡托普利(captopril)、賴諾普利(lisinopril)、雷米普利(ramipril)、地拉普利(delapril)、福辛普利(fosinopril)、喹那普利(quinopril)、培吲普利(perindopril)、貝那普利(benazepril)或群多普利(trandopril))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與內皮素拮抗劑(例如且較佳為波生坦(bosentan)、達盧生坦(darusentan)、安倍生坦(ambrisentan)、替唑生坦(tezosentan)、西他生坦(sitaxsentan)、阿伏生坦(avosentan)、馬西替坦(macitentan)或阿曲生坦(atrasentan))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與腎素抑制劑(例如且較佳為阿利克崙(aliskiren)、SPP-600或SPP-800)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與礦皮質激素受體拮抗劑(例如且較佳為菲利酮(finerenone)、螺內酯固醇(spironolactone)、坎利酮(canrenone)、坎利酸鉀(potassium canrenoate)、依普利酮(eplerenone)、艾沙利酮(esaxerenone)(CS-3150)或安帕利酮(apararenone)(MT-3995)、CS-3150或MT-3995)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與利尿劑(諸如且較佳為呋塞米(furosemide)、布美他尼(bumetanide)、吡咯他尼(piretanide)、托拉塞米(torsemide)、苄氟噻嗪(bendroflumethiazide)、氯噻嗪(chlorthiazide)、氫氯噻嗪(hydrochlorthiazide)、希帕胺(xipamide)、吲達帕胺(indapamide)、氫氟噻嗪(hydroflumethiazide)、甲氯噻嗪(methyclothiazide)、泊利噻嗪(polythiazide)、三氯噻嗪(trichlormethiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、美托拉宗(metolazone)、喹乙唑酮(quinethazone)、乙醯唑胺(acetazolamide)、二氯磺胺(dichlorophenamide)、醋甲唑胺(methazolamide)、甘油、伊速必得(isosorbide)、甘露醇、阿米洛利(amiloride)或氨苯喋啶(triamterene))組合投予。

應理解脂肪代謝改變劑較佳為來自下列群組之化合物：CETP抑制劑、甲狀腺受體促效劑、膽固醇合成抑制劑(諸如HMG-CoA-還原酶或鯊烯合成抑制劑)、ACAT抑制劑、MTP抑制劑、PPAR-α、PPAR-γ及/或PPAR-δ促效劑、膽固醇吸收抑制劑、聚合膽汁酸吸收劑、膽汁酸再吸收抑制劑、脂肪酶抑制劑及脂蛋白(a)拮抗劑。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與CETP抑制劑(例如且較佳為達塞曲匹(dalcetrapib)、安塞曲匹(anacetrapib)、BAY 60-5521或CETP-疫苗(Avant))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與甲狀腺受體促效劑(例如且較佳為D-甲狀腺素、3,5,3'-三碘甲腺胺酸(T3)、CGS 23425或阿昔替羅(axitirome)(CGS 26214))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與來自下列類別的HMG-CoA-還原酶抑制劑組合投予：他汀類(statins)，例如且較佳為洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、羅蘇伐他汀(rosuvastatin)或匹伐他汀(pitavastatin)。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與鯊烯合成抑制劑(例如且較佳為BMS-188494或TAK-475)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與ACAT抑制劑(例如且較佳為阿伐麥布(avasimibe)、甲亞油醯胺(melinamide)、帕替麥布(pactimibe)、依魯麥布(eflucimibe)或SMP-797)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與MTP抑制劑(例如且較佳為英普他派(implitapide)、R-103757、BMS-201038或JTT-130)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與PPAR-γ促效劑(例如且較佳為吡格列酮或羅格列酮)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與PPAR-δ促效劑(例如且較佳為GW 501516或BAY 68-5042)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與膽固醇吸收抑制劑(例如且較佳為依折麥布(ezetimibe)、替奎安(tiqueside)或帕馬苷(pamaqueside))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與脂肪酶抑制劑(例如且較佳為奧利司他(orlistat))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與聚合膽汁酸吸附劑(例如且較佳為膽苯烯胺(cholestyramine)、考來替泊(colestipol)、考來索文(colesolvam)、CholestaGel或考來替明(colestimide))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與膽汁酸再吸收抑制劑(例如且較佳為ASBT(=IBAT)抑制劑，諸如AZD-7806、S-8921、AK-105、BARI-1741、SC-435或SC-635)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與脂蛋白(a)拮抗劑(例如且較佳為吉卡賓鈣(gemcabene calcium)(CI-1027)或菸鹼酸)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與TGFβ拮抗劑(以實例方式說明且優先選擇為吡非尼酮(pirfenidone)或夫蘇木單抗(fresolimumab))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與HIF-PH抑制劑(以實例方式說明且優先選擇為莫立達特(molidustat)或羅沙達特(roxadustat))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與CCR2拮抗劑(以實例方式說明且優先選擇為CCX-140)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與TNFα拮抗劑(以實例方式說明且優先選擇為阿達木單抗(adalimumab))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與半乳糖凝集素-3抑制劑(以實例方式說明且優先選擇為GCS-100)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與BMP-7促效劑(以實例方式說明且優先選擇為THR-184)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與p53調節劑(以實例方式說明且優先選擇為QPI-1002)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與NOX1/4抑制劑(以實例方式說明且優先選擇為GKT-137831)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與影響維生素D代謝之藥(以實例方式說明且優先選擇為膽鈣化醇(cholecalciferol)或帕立骨化醇(paracalcitol))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與細胞生長抑制劑(以實例方式說明且優先選擇為環磷醯胺)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與免疫抑制劑(以實例方式說明且優先選擇為環孢素(ciclosporin))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與磷酸鹽黏合劑(以實例方式說明且優先選擇為司維拉姆(sevelamer)或碳酸鑭)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與用於治療副甲狀腺機能亢進的擬鈣劑組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與用於鐵缺乏治療之藥劑(以實例方式說明且優先選擇為鐵產品)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與用於治療高尿酸血症的藥劑(以實例方式說明且優先選擇為異嘌呤醇(allopurinol)或拉布立酶(rasburicase))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與用於治療貧血之糖蛋白激素(以實例方式說明且優先選擇為紅血球生成素)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與用於免疫治療之生物製劑(以實例方式說明且優先選擇為阿巴西普(abatacept)、利妥昔單抗(rituximab)、依庫珠單抗(eculizumab)或貝利木單抗(belimumab))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與Jak抑制劑(以實例方式說明且優先選擇為魯索替尼(ruxolitinib)、托法替尼(tofacitinib)、巴利替尼(baricitinib)、CYT387、GSK2586184、萊斯替尼(lestaurtinib)、帕利替尼(pacritinib)(SB1518)或TG101348)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與用於微血栓療法之前列環素(prostacyclin)類似物組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與鹼性療法(以實例方式說明且優先選擇為碳酸氫鈉)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與mTOR抑制劑(以實例方式說明且優先選擇為依維莫司(everolimus)或雷帕黴素(rapamycin))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與NHE3抑制劑(以實例方式說明且優先選擇為AZD1722)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與eNOS調節劑(以實例方式說明且優先選擇為賽普特林(sapropterin))組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與CTGF抑制劑(以實例方式說明且優先選擇為FG-3019)組合投予。

在本發明較佳的實施態樣中，根據本發明之化合物係與抗糖尿病劑(降血糖劑或抗高血糖劑)(諸如且較佳為胰島素和衍生物)、磺醯脲(諸如甲苯磺丁脲(tolbutamide)、胺磺丁脲(carbutamide)、乙醯苯磺醯環己脲(acetohexamide)、氯磺丙脲(chlorpropamide)、格列吡嗪(glipizide)、格列齊特(gliclazide)、格列苯脲(glibenclamide)、格列苯脲(glyburide)、格列波脲(glibornuride)、格列喹酮(gliquidone)、格列派特(glisoxepide)、格列吡脲(glyclopyramide)、格列美脲(glimepiride)、JB253和JB558)、美格列特(meglitinide)(諸如瑞格列奈(repaglinide)和那格列奈(nateglinide))、雙胍(諸如二甲雙胍(metformin)和丁雙胍(buformin))、噻唑啶二酮(諸如羅格列酮(rosiglitazone)和吡格列酮(pioglitazone))、α-葡萄糖苷酶抑制劑(諸如米格列醇(miglitol)、阿卡波糖和伏格列波糖(voglibose))、DPP4抑制劑(諸如維格列汀(vildagliptin)、西他列汀(sitagliptin)、沙克列汀(saxagliptin)、利拉利汀(linagliptin)、阿格列汀(alogliptin)、希塔格列汀(septagliptin)和替尼格列汀(teneligliptin))、GLP-1類似物(諸如艾塞那肽(exenatide)(亦為艾塞那肽(exendin)-4)、利拉魯肽(liraglutide)、利西那肽(lixisenatide)和他司魯肽(taspoglutide))、或SGLT抑制劑(格列淨類(gliflozin))(諸如卡格列淨(canagliflozin)、達格列淨(dapagliflozin)和恩格列淨(empagliflozin))組合投予。

在特別佳的實施態樣中，本發明化合物係與一或多種選自由下列所組成之群組的額外治療劑組合投予：利尿劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、β-受體阻斷劑、礦皮質激素受體拮抗劑、抗糖尿病藥、有機硝酸鹽和NO予體、可溶性鳥苷酸環化酶(sGC)之活化劑和刺激劑及正性肌收縮能劑。

在另外特別佳的實施態樣中，本發明化合物係與一或多種選自由下列所組成之群組的額外治療劑組合投予：利尿劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、β-受體阻斷劑、礦皮質激素受體拮抗劑、抗糖尿病藥、有機硝酸鹽和NO予體、可溶性鳥苷酸環化酶(sGC)之活化劑和刺激劑、正性肌收縮能劑、抗發炎劑、免疫抑制劑、磷酸鹽結合劑及/或調節維生素D代謝之化合物。

因此，在另外的具體實例中，本發明關於醫藥組成物，其包含根據本發明之化合物中之至少一者及一或多種用於治療及/或預防疾病(尤其為前述疾病)之額外治療劑。

此外，本發明化合物可以其本身或以組成物用於研究和診斷，或用作為分析參照標準物及類似者，其為此項技術所熟知的。

當本發明化合物係作為藥品投予人類和其他的哺乳動物時，彼等可經口或作為含有例如0.1%至99.5%(更佳為0.5%至90%)之活性成分與一或多種醫藥上可接受之賦形劑組合之醫藥組成物提供。

因此，在另一態樣中，本發明關於包含按慣例與一或多種惰性、無毒性、醫藥上可接受之賦形劑一起的根據本發明之化合物中之至少一者的醫藥組成物及其用於治療及/或預防疾病(尤其為前述疾病)之用途。

根據本發明之化合物有可能具有全身性及/或局部活性。出於此目的，彼等可以適合的方式投予，諸如經口、腸胃外、肺、鼻、舌下、舌、頰內、直腸、陰道、真皮、透皮、結膜、耳部途徑，或作為植入物或支架投予。

用於該等投予途徑的根據本發明之化合物有可能以適合的投予形式投予。

用於經口投予的根據本發明之化合物有可能調配成以快速及/或修飾的形式遞輸本發明化合物之此項技術中已知的劑型，諸如錠劑(未包膜或經包膜之錠劑，例如具有延遲溶解或不可溶之腸溶性或控制釋放之包膜)、經口崩解之錠劑、薄膜/薄片、薄膜/凍乾物(lyophilisate)、膠囊(例如硬或軟明膠膠囊)、糖衣錠、粒劑、丸劑、粉劑、乳液、懸浮液、氣霧劑或溶液。根據本發明之化合物有可能以結晶或/或非晶化及/或溶解形式併入該劑型中。

腸胃外投予可以避免吸收步驟(例如靜脈內、動脈內、心臟內、脊椎內或腰內)或包括吸收(例如肌肉內、皮下、皮內、經皮或腹膜內)的方式完成。適合於腸胃外投予之投予形式尤其為呈溶液、懸浮液、乳液、凍乾物或無菌粉劑形式之注射及輸注用製劑。

適合於其他的投予途徑之實例為用於吸入之醫藥形式[尤其為粉末吸入器、霧化器]、鼻滴劑、鼻溶液、鼻噴霧；用於舌、舌下或頰內投予之錠劑/薄膜/薄片/膠囊；栓劑；眼滴劑、眼軟膏、眼浴、眼插入件、耳滴劑、耳噴霧、耳粉、洗耳劑、耳用棉塞；陰道膠囊、水性懸浮液(洗劑、振盪合劑(mixturae agitandae))、親脂性懸浮液、乳液、軟膏、乳霜、透皮治療系統(諸如貼片)、乳狀物、糊劑、泡沫、散布劑、植入物或支架。

根據本發明之化合物可併入所述之投予形式中。這可藉由與醫藥上適合的賦形劑混合之本身已知的方式完成。醫藥上適合的賦形劑尤其包括˙填充劑及載劑(例如纖維素、微晶纖維素(諸如Avicel^®)、乳糖、甘露醇、澱粉、磷酸鈣(諸如Di-Cafos^®))，˙軟膏基底(例如石油膠、石蠟、三酸甘油酯、蠟、羊毛蠟、羊毛蠟醇、羊毛脂、親水性軟膏、聚乙二醇)，˙用於栓劑之基底(例如聚乙二醇、可可脂、硬脂肪)，˙溶劑(例如水、乙醇、異丙醇、甘油、丙二醇，中鏈三酸甘油酯脂肪油、液態聚乙二醇、石蠟)，˙界面活性劑、乳化劑、分散劑或潤濕劑(例如十二烷基硫酸鈉)、卵磷脂、磷脂、脂肪醇(諸如Lanette^®)、山梨糖醇脂肪酸酯(諸如Span^®)、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯(諸如Tween^®)、聚氧乙烯脂肪酸甘油酯(諸如Cremophor^®)、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚、甘油脂肪酸酯、泊洛沙姆(poloxamer)(諸如Pluronic^®)，˙緩衝劑、酸及鹼(例如磷酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸、乙酸、氫氯酸、氫氧化鈉溶液、碳酸銨、胺丁三醇、三乙醇胺)，˙等滲壓劑(例如葡萄糖、氯化鈉)，˙吸附劑(例如高分散性矽石)，˙增黏劑、凝膠形成劑、增稠劑及/或黏合劑(例如聚乙烯基吡咯啶酮、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、澱粉、卡波姆(carbomer)、聚丙烯酸(諸如Carbopol^®)、藻酸鹽、明膠)，˙崩解劑(例如改質澱粉、羧甲基纖維素鈉、澱粉乙醇酸鈉(諸如Explotab^®)、交聯聚乙烯基吡咯啶酮、交聯羧甲基纖維素鈉(諸如AcDiSol^®))，˙流動調節劑、潤滑劑、助滑劑及脫模劑(例如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、高分散性矽石(諸如Aerosil^®))，˙包膜材料(例如糖、蟲膠)及用於快速或以修改方式溶解薄膜或擴散膜的膜形成劑(例如聚乙烯基吡咯啶酮(諸如Kollidon®)、聚乙烯醇、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素酞酸酯、纖維素乙酸酯、纖維素乙酸酯酞酸酯、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯(諸如Eudragit^®))，˙膠囊材料(例如明膠、羥丙基甲基纖維素)，˙合成聚合物(例如聚交酯、聚乙交酯、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯(諸如Eudragit^®)、聚乙烯基吡咯啶酮(諸如Kollidon^®)、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯、聚環氧乙烷、聚乙二醇及彼等共聚物和嵌段共聚物)，˙塑化劑(例如聚乙二醇、丙二醇、甘油、三乙酸甘油酯(triacetine)、檸檬酸三乙醯酯、酞酸二丁酯)，˙穿透增強劑，˙穩定劑(例如抗氧化劑，諸如抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸鈉、丁基羥基苯甲醚、丁基羥基甲苯、五倍子酸丙酯)， ˙保存劑(例如對羥苯甲酸酯、山梨酸、硫柳汞(thiomersal)、殺藻胺、洛赫西定(chlorhexidine)乙酸鹽、苯甲酸鈉)，˙著色劑(例如無機顏料，諸如氧化鐵、二氧化鈦)，˙調味劑、增甜劑、味道-及/或氣味掩蔽劑。

此外，本發明關於包含按慣例與一或多種醫藥上可接受之賦形劑一起的至少一種根據本發明之化合物的醫藥組成物及其根據本發明之用途。

藉由標準的毒性試驗及藉由測定在哺乳動物中的上文鑑定之病況的治療之標準的藥理學檢定法，且藉由比較該等結果與用於治療該等病況之已知的活性成分或藥的結果以評估有用於治療心血管及腎病症的化合物之已知的標準實驗室技術為基礎，可輕易地測定本發明化合物用於治療各種所欲適應症的有效劑量。治療該等病況中之一者欲投予之活性成分的量可根據下列的考慮而廣泛地改變：諸如所使用之特定化合物和劑量單位、投予模式、治療期、所治療之患者的年齡和性別及所治療病況之性質和程度。

欲投予之活性成分的總量通常係以每天從約0.001毫克/公斤至約200毫克/公斤體重，且較佳為以每天從約從約0.01毫克/公斤至約20毫克/公斤體重之範圍內。臨床上有用的給藥時程係在一天給藥一至三次至每四週給藥一次之範圍內。另外，其中在特定的時間期限內不對患者給藥的「藥物假期」有可能有益於藥理學效應與耐受性之間的總體平衡。單位劑量有可能含有從約0.5毫克至約1500毫克活性成分且可以每天投予一或多次或少於一天一次。以注射(包括靜脈內、肌肉內、皮下或腸胃外注射)及使用輸注技術投予之平均日劑量較佳為從0.01至200毫克/公斤總體重。作為例證，本發明化合物可以約0.001毫克/公斤至約10毫克/公斤，較佳為約0.01毫克/公斤至約1毫克/公斤體重之劑量經腸胃外投予。經口投予之示例性劑量範圍為約0.01至100毫克/公斤，較佳為約0.01至20毫克/公斤，且更佳為約0.1至10毫克/公斤體重。上文引述之值的中間範圍亦意欲為本發明的一部分。

當然，用於各患者之特定的起始及持續劑量方案係根據如主治診斷醫師所確定之病況的性質和嚴重性、所使用之特定化合物的活性、患者的年齡及一般狀況、投予時間、投予途徑、藥物排泄速率、藥物組合及類似者而改變。本發明化合物或其醫藥上可接受之鹽或酯或組成物的所欲治療模式及劑量次數可由那些熟習此項技術領欲者使用習知的治療試驗來確定。

下列的示例性具體實例例證本發明。本發明不受限於該等實施例。

在下列的試驗及實施例中的百分比係以重量計，除非另有其他陳述；份係以重量計。溶劑比、稀釋比及以液體/液體溶液記述之濃度分別以體積為基礎。

實驗章節 實驗章節-一般部分

NMR峰形式係如其於光譜中所示來說明，未考慮可能的更高階效應。

化學名稱係使用來自ACD/Labs之ACD/Name軟體產生。在一些例子中，使用市場上取得的試劑之公認名稱代替ACD/Name所產生之名稱。

以下表1列示在本段落及實施例章節中所使用的縮寫，該等未於內文中說明。其他的縮寫具有就其本身為熟習此項技術領域者習知的彼等意義。

本申請案中所述的本發明之各種態樣係以下列的實施例例證，不意謂該等實施例係以任何方式限制本發明。

本文所述的實施例測試實驗適用於例證本發明且本發明不受限於所給出之實施例。

在實驗部分中未說明合成的所有試劑係於市場上取得，或為已知的化合物或可由熟習此項技術領域者已知的方法自已知的化合物形成。

根據本發明方法所製造之化合物及中間物可能需要純化。有機化合物之純化為熟習此項技術領域者所熟知且可有許多純化相同的化合物之方式。在一些例子中，可不必純化。在一些例子中，化合物可藉由結晶純化。在一些例子中，可使用適合的溶劑攪拌出雜質。在一些例子中，化合物可藉由使用例如預填充之矽膠匣(例如Biotage SNAP匣KP-Sil^®或KP-NH^®)與Biotage自動純化器系統(SP4^®或Isolera Four^®)的組合及溶析劑(諸如己烷/乙酸乙酯或DCM/甲醇之梯度)的層析術(特別為快速管柱層析術)來純化。在一些例子中，化合物可藉由使用例如配備有二極體陣列檢測器及/或連線電噴霧離子化質譜儀之Waters自動純化器與適合的預填充之反相管柱的組合及可含有添加劑(諸如三氟乙酸、甲酸或氨水)的溶析劑(諸如水及乙腈之梯度)的製備性HPLC來純化。

在一些例子中，如上述之純化方法可提供那些呈鹽形式之具有足夠的鹼或酸官能性之本發明化合物，諸如在足夠鹼性之本發明化合物的例子中，例如三氟乙酸鹽或甲酸鹽，或在足夠酸性之本發明化合物的例子中，例如銨鹽。此類型之鹽可藉由熟習此項技術領域者已知的各種方法分別轉變成其游離鹼或游離酸形式，或用作為後續生物檢定法中的鹽。應理解如本文所分離及說明之本發明化合物的特定形式(例如鹽、游離鹼等)未必為唯一的形式，其中該化合物可應用於生物檢定法以定量特異性生物活性。

在下文所述之合成中間物及運用實施例的例子中，以對應的鹼或酸之鹽形式指定的任何化合物通常為未知精確的化學計量組成之鹽，如藉由各個製備及/或純化方法所獲得者。除非另有更詳細的指定，否則名稱及結構式的增補(諸如「鹽酸鹽」、「三氟乙酸鹽」、「鈉鹽」、「鉀鹽」、"二鉀鹽"、"磷酸氫鹽"、"磷酸鹽"或「x HCl」、「x CF₃COOH」、「x Na⁺」、「x K⁺」、「x Ca²⁺」、「x Mg²⁺」)在此等鹽的例子中因此不應以化學計量的意義理解，而是僅具有關於其中存在的鹽形成組份的描述性特徵。

若合成中間物或運用實施例或其鹽係藉由所述之製備及/或純化方法而以未知的化學計量組成(若彼等具有限定的類型)之溶劑合物(例如水合物)形式獲得，則上述亦相應地適用。

HPLC及LC-MS方法：

方法1(LC-MS)：

儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC系統；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 μ 50 x 1毫米；溶析劑A：1公升水+0.25毫升99%甲酸，溶析劑B：1公升乙腈+0.25毫升99%甲酸；梯度：0.0分鐘90%A→1.2分鐘5%A→2.0分鐘5%A；烘箱：50℃；流速：0.40毫升/分鐘；UV檢測：208-400奈米：

方法2(LC-MS)：

儀器MS：Thermo Scientific FT-MS；儀器類型UHPLC+：Thermo Scientific UltiMate 3000；管柱：Waters,HSST3，2.1 x 75毫米，C18 1.8微米；溶析劑A：1公升水+0.01%甲酸；溶析劑B：1公升乙腈+0.01%甲酸；梯度：0.0分鐘10%B→2.5分鐘95%B→3.5分鐘95%B；烘箱：50℃；流速：0.90毫升/分鐘；UV檢測：210奈米/最優化積分途徑210-300奈米。

方法3(LC-MS)：

儀器：Agilent MS Quad 6150；HPLC：Agilent 1290；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 μ 50 x 2.1毫米；溶析劑A：1公升水+0.25毫升99%甲酸，溶析劑B：1公升乙腈+0.25毫升99%甲酸；梯度：0.0分鐘90% A→0.3分鐘90% A→1.7分鐘5% A→3.0分鐘5% A；烘箱：50℃；流速：1.20毫升/分鐘；UV-檢測：205-305奈米。

方法4(製備性HPLC)：

管柱：Chromatorex或Reprosil C18 10微米，125 x 30毫米；溶析劑A：水+0.1%甲酸，溶析劑B：乙腈+0.1%甲酸；梯度：3分鐘10% B，17.5分鐘95% B，19.5分鐘100% B，20分鐘10% B；流速：75毫升/分鐘；運行時間：20分鐘；在210奈米檢測。

方法5(LC-MS)：

儀器：Waters Single Quad MS系統；Instrument Waters UPLC Acquity；管柱：Waters BEH C18 1.7微米，50 x 2.1毫米；溶析劑A：1公升水+1.0毫升(氨水溶液，25%)/公升，溶析劑B：1公升乙腈；梯度：0.0分鐘92% A→0.1分鐘92% A→1.8分鐘5% A→3.5分鐘5% A；烘箱：50℃；流速：0.45毫升/分鐘；UV-檢測：210奈米(208-400奈米)。

微波

所使用的微波反應器為來自Biotage^®之具有robot sixty的Initiator⁺微波系統。

X-射線繞射法

具有PIXcel計數器(多通道)之透射繞射儀PANalytical X`Pert PRO：

輻射：銅，K α

初級單色器：聚焦X射線鏡

波長(K1)：1.5406Å

波長(K2)：1.5444Å

產生器參數：40kV，40mA

測量範圍：2-38°

室內條件：25℃，40-60%rh

熱重量法

TGA 7熱重量分析儀；製造商：Perkin-Elmer；加熱速率：10K/分鐘；沖洗氣：氮氣，20-30毫升/分鐘；坩鍋：開放式鋁坩鍋；樣品製備：無。

紅外線光譜

Bruker Tensor 37光譜儀：光譜解析度2公分^-1；個別測量的數量64；波長範圍4000-550公分^-1；樣品製備：無。

實驗章節-起始材料及中間物

實施例1A

{3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙腈

在2公升反應容器中，將100克(273毫莫耳){3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙酸(如WO 2010/105770-A1之實施例8A所述之合成)、43.3克(547毫莫耳)吡啶及33毫克(0.3毫莫耳)4-二甲基胺基吡啶溶解在300毫升THF中。將所得溶液在5℃下以52.8克(438毫莫耳)2,2-二甲基丙醯氯處理15分鐘且將所得混合物在室溫下攪拌2.5小時。在冷卻至0℃之後，經1小時添加183毫升28%氨水溶液，同時使溶液溫度保持在10℃與20℃之間且接著將所得混合物在5℃下再經1小時期間攪拌。接著添加500毫升甲基三級丁醚及300毫升20%水性檸檬酸，同時使內溫保持在10℃與20℃之間。將相分離且將有機相以300毫升20%水性檸檬酸，接著以300毫升飽和水性碳酸氫鈉溶液及最終以300毫升10%水性氯化鈉溶液清洗。將有機相在60℃下於減壓下蒸發，直到獲得油性殘餘物為止。接著添加300毫升THF且再蒸發溶液，直到獲得油性溶液為止。第二次重複此操作。將油殘餘物再溶解於360毫升THF中且在10℃與20℃之間的溫度下以172克(820毫莫耳)三氟乙酸酐處理20分鐘。接著將所得溶液在室溫下攪拌1小時。在10℃與20℃之間的溫度下添加720毫升4-甲基-2-戊酮及650毫升7.5%水性氫氧化鈉溶液。最後將pH值使用7.5%水性氫氧化鈉溶液調整至pH=9.5。在相分離之後，將有機相以450毫升10%水性氯化鈉溶液清洗兩次。將有機相在80℃之溫度下於減壓下蒸發，同時添加1200毫升正庚烷。將形成的懸浮液冷卻至20℃，且將所形成的固體過濾及以200毫升正庚烷清洗且接著在減壓下乾燥(50℃，30毫巴)，以供給成為固體的88克(93%理論值){3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙腈。

1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=7.78(d,2H),7.55(d,2H),6.91(d,1H),5.17(s,2 H),4.34-4.23(m,1 H),3.98(dd,1H),3.81(dd,1H)。

實施例2A

2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙醯亞胺酸甲酯

在4公升反應容器中，將1600毫升甲醇中的200克(576.9毫莫耳){3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙腈(實施例1A)以5.2克(28毫莫耳)甲醇鈉(30%於甲醇中)處理且將所得混合物在50℃下攪拌2.5小時。接著將溶液在50℃下於減壓下蒸發，直到獲得油性溶液為止。添加2000毫升甲基三級丁醚且將溶液濃縮，直到達成800毫升體積為止。接著添加3000毫升正庚烷且形成懸浮液。在20℃下冷卻之後，將固體過濾且以500 毫升正庚烷清洗，且接著在減壓下(50℃，30毫巴)乾燥，以供給成為固體的175克(80%理論值)2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙醯亞胺酸甲酯。

1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.01(s,1H),7.78(d,2H),7.62(d,2H),6.93(br.s,1H),4.50(s,2 H),4.35-4.23(m,1 H),3.96(dd,1H),3.81(dd,1H),3.67(s,3H)。

實施例3A

3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-5-羧酸甲酯

將20毫升1,4-二噁烷中的1.0克2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙醯亞胺酸甲酯(實施例2A，2.64毫莫耳)之溶液冷卻至10℃且接著以388毫克(3.17毫莫耳)氯側氧乙酸甲酯及0.55毫升(3.18毫莫耳)N,N-二異丙基乙胺處理。接著將所得混合物攪拌30分鐘。將10毫升1,4-二噁烷中的1.10克(3.17毫莫耳)2-肼基-3-(三氟甲基)吡啶4-甲基甲基磺酸鹽(1：1)、0.65毫升(3.72毫莫耳)N,N-二異丙基乙胺及506毫克(3.19毫莫耳)無水硫酸銅(II)之預攪拌溶液添加至反應混合物中且接著將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。添加水且將水相以乙酸乙酯萃取，將合併的有機相以水性氯化鈉溶液清洗，經硫酸鎂乾燥且在真空中蒸發，以供給成為固體的777毫克(50%理論值)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=1.00分鐘；MS(ESIpos)：m/z=592.6[M+H]⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.93(d,1H),8.60(dd,1H),7.98(dd,1H),7.75(d,2H),7.67-7.57(m,2H),6.91(d,1H),5.22(s,2H),4.37-4.22(m,1H),4.10-3.97(m,1H),3.85(dd,1H),3.77(s,3H)。

實施例4A

3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

將1.80克3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-5-羧酸甲酯(實施例3A，3.04毫莫耳)溶解在10.0毫升氨溶液(7N於甲醇中，70.0毫莫耳)中。將所得混合物在室溫下攪拌1小時。在真空中移除溶劑且將粗製產物以製備性HPLC純化(方法4)。將含有產物之部份凍乾，以供給成為固體的1.49克(85%理論值)標題化合物。

LC-MS(方法3)：R_t=1.20分鐘；MS(ESIpos)：m/z=577[M+H]⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.87(d,1H),8.51(d,1H),8.39(s,1H),7.99(s,1H),7.90(dd,1H),7.82-7.68(m,2H),7.63(d,2H),6.90(s,1H),5.22-5.07(m,2H),4.29(br s,1H),4.16-3.94(m,1H),3.85(dd,1H)。

實施例5A

3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-羧酸甲酯

在氬氣下，將3毫升無水THF中的150毫克(0.40毫莫耳)2-{3-(4- 氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙醯亞胺酸甲酯(實施例2A)之溶液在0℃下以75微升(0.44毫莫耳)N,N-二異丙基乙胺及40微升(0.44毫莫耳)氯側氧乙酸甲酯處理且接著將混合物在0℃下攪拌30分鐘。接著添加93毫克(0.44毫莫耳)[2-(三氟甲基)苯基]肼，繼而添加145微升(0.83毫莫耳)N,N-二異丙基乙胺。將所得混合物在室溫下攪拌2小時，繼而在120℃下於微波中攪拌1小時且接著蒸發。將所獲得的殘餘物以製備性HPLC純化(方法4)，以供給75毫克(32%理論值)標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=2.01分鐘；MS(ESIpos)：m/z=591.1[M+H]⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.07-7.56(m,8H),6.91(d,1H),5.17(d,2H),4.37-4.21(m,1H),4.09-3.80(m,2H),3.74(s,3H)。

實施例6A

3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

將氨溶液(7N於甲醇中，0.8毫升，5.6毫莫耳)中的55毫克(0.093毫莫耳)3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-羧酸甲酯(實施例5A)之混合物在室溫下攪拌隔夜且接著蒸發混合物。將所獲得的殘餘物以製備性HPLC純化(方法4)，以供給55毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.77分鐘；MS(ESIpos)：m/z=576.1[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.23(s,1H),8.00-7.55(m,9H),6.90(d,1H),5.22-5.01(m,2H),4.40-4.18(m,1H),4.10-3.76(m,2H)。

實施例7A

3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-羧酸甲酯

將3毫升THF中的150毫克2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙醯亞胺酸甲酯(實施例2A，26.4毫莫耳)之溶液冷卻至0℃且接著以58.2毫克(0.48毫莫耳)氯側氧乙酸甲酯及275微升(1.58毫莫耳)N,N-二異丙基乙胺處理。將所得混合物溫熱至室溫且攪拌1小時及再冷卻至0℃。接著添加62.6毫克(0.436毫莫耳)3-氯-2-肼基吡啶且將反應混合物溫熱至室溫，且接著攪拌1小時，繼而在密封的小瓶中在120℃下於微波照射下攪拌1小時。將粗製產物以製備性HPLC純化(方法4)。將含有產物之部分凍乾以供給25.3毫克(11%理論值)標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.82分鐘；MS(ESIpos)：m/z=558.1[M+H]⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.70-8.24(m,2H),7.89-7.56(m,5H),6.92(d,1H),5.22(s,2H),4.46-4.20(m,1H),3.79(s,5H)。

實施例8A

3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

將5.1克3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-羧酸甲酯(實施例7A，9.134毫莫耳)溶解在42.5毫升氨溶液(7N於甲醇中，297毫莫耳)中。將所得混合物在室溫下攪拌2小時。接著將溶液倒在冰上且將混合物攪拌10分鐘。將沉澱物濾出且以水清洗，其供給3.5克粗製產物。將水相以乙酸乙酯萃取。將有機相經硫酸鎂乾燥，過濾且在真空中移除溶劑。將粗製產物以快速層析術純化(矽膠，二氯甲烷/甲醇，97/3)，以供給成為固體的4.00克(81%理論值)標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.62分鐘；MS(ESIpos)：m/z=543.1[M+H]⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.55(dd,1H),8.39(s,1H),8.25(dd,1H),8.00(s,1H),7.76(d,2H),7.69(dd,1H),7.62(d,2H),6.90(d,1H),5.18(d,2H),4.36-4.23(m,1H),4.06-3.97(m,1H),3.85(dd,1H)。

實驗章節-實施例

實施例1

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽

在0℃下，將四氫呋喃(40毫升，490毫莫耳)中的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺(實施例4A，2.00克，3.47毫莫耳)之溶液以4-N,N-二甲基胺基吡啶(635毫克，5.20毫莫耳)及三乙胺(720微升，5.2毫莫耳)處理。接著逐滴添加磷醯氯(480微升，5.2毫莫耳)。將所得混合物在0℃下攪拌40分鐘及接著在室溫下攪拌50分鐘。隨後添加水(4.0毫升)及飽和水性碳酸氫鈉溶液(24毫升)且將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。接著在室溫下蒸發四氫呋喃。將所得溶液以水稀釋且以乙酸乙酯萃取。將水相以氫氯酸溶液(1N)達成pH=1，以飽和水性氯化鈉溶液稀釋且以乙酸乙酯萃取。將合併的有機層以飽和水性氯化鈉溶液清洗，經硫酸鎂乾燥且蒸發。將殘餘物以製備性HPLC純化(方法4)，以供給1.32克(58%理論值)標題化合物。

LC-MS(方法3)：R_t=0.94分鐘；MS(ESIpos)：m/z=657.0[M+H]⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.86(d,1H),8.58-8.29(m,2H),8.07-7.82(m,2H),7.79-7.45(m,4H),5.33-5.00(m,2H),4.95-4.77(br m,1H),4.29-3.89(m,2H),3.36(br s,2H，與HDO峰重疊)。

實施例1-1

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽半水合物

將446毫升甲苯中的二氫磷酸(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-酯(4.46克，6.79毫莫耳)之懸浮液在25℃下攪七天。將固體濾出且將過濾物蒸發。將自過濾物獲得的固體及殘餘物混合在一起且懸浮在二氯甲烷/正庚烷之混合物(200毫升，55：45)中。將所得混合物在40℃下攪拌八天。將固體材料濾出，以X-射線繞射法檢查且對應於成為結晶材料之標題化合物(半水合物形式)。

表2：在實施例1-1中以結晶材料獲得的化合物之X-射線粉末繞射法

以*標記之譜帶特別為游離酸。

實施例2

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}-甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸氫鉀

將水(3.0毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例1，104毫克，158微莫耳)之溶液以碳酸氫鉀(31.6毫克，316微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給124毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.67分鐘；MS(ESIpos)：m/z=657.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.87-8.80(m,1H),8.52(d,1H),7.95(dd,1H),7.72-7.57(m,4H),5.45-5.36(m,1H),5.35-5.26(m,1H),4.99-4.55(m,1H，與HDO峰重疊),4.20-4.07(m,2H)。

實施例3

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3- 基}-甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸氫鉀

將水(1.0毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例1，35.0毫克，53.3微莫耳)之溶液以碳酸氫鉀(5.33毫克，53.3微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給39.5毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.67分鐘；MS(ESIpos)：m/z=657.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.87-8.80(m,1H),8.54-8.48(m,1H),7.97-7.91(m,1H),7.71-7.57(m,4H),5.43-5.37(m,1H),5.35-5.28(m,1H),4.90-4.64(m,1H，與HDO峰重疊),4.23-4.10(m,2H)。

實施例4

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}-甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸氫鈉

將水(1.0毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例1，35.0毫克，53.3微莫耳)之溶液以碳酸二鈉(5.65毫克，53.3微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給41.2毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.68分鐘；MS(ESIpos)：m/z=657.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.86-8.82(m,1H),8.54-8.49(m,1H),7.98-7.92(m,1H),7.72-7.58(m,4H),5.43-5.37(m,1H),5.34-5.28(m,1H),4.88-4.65(m,1H，與HDO峰重疊),4.20-4.06(m,2H)。

實施例5

將水(1.0毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例1，35.0毫克，53.3微莫耳)之溶液以碳酸氫鈉(4.48毫克，53.3微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給38.6毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.68分鐘；MS(ESIpos)：m/z=657[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.86-8.81(m,1H),8.53-8.48(m,1H),7.97-7.92(m,1H),7.71-7.58(m,4H),5.42-5.36(m,1H),5.34-5.27(m,1H),4.68(s,1H，與HDO峰重疊),4.22-4.10(m,2H)。

實施例6

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}-甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸氫鋰

將水(1.0毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例1，35.0毫克，53.3微莫耳)之溶液以氫氧化鋰水合物(1：1)(4.47毫克，107微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給38.7毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.67分鐘；MS(ESIpos)：m/z=657.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.86-8.82(m,1H),8.54-8.49(m,1H),7.98-7.91(m,1H),7.72-7.58(m,4H),5.43-5.37(m,1H),5.34-5.28(m,1H),4.90-4.68(m,1H，與HDO峰重疊),4.21-4.06(m,2H)。

實施例7

將水(1.0毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例1，35.0毫克，53.3微莫耳)之溶液以氫氧化鋰水合物(1：1)(2.24毫克，53.3微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給38.3毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.67分鐘；MS(ESIpos)：m/z=657.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.83(d,1H),8.51(d,1H),7.94(dd,1H),7.71-7.58(m,4H),5.42-5.37(m,1H),5.34-5.28(m,1H),4.89-4.65(m,1H，與HDO峰重疊),4.22-4.10(m,2H)。

實施例8

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}-甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸鈣

將水(1公升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例1，100毫克，152微莫耳)之溶液以碳酸鈣(15.2毫克，152微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給93.9毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.69分鐘；MS(ESIpos)：m/z=657.1[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.86-8.82(m,1H),8.54-8.49(m,1H),7.98-7.92(m,1H),7.72-7.57(m,4H),5.45-5.37(m,1H),5.35-5.28(m,1H),4.91-4.66(m,1H，與HDO峰重疊),4.21-4.09(m,2H)。

實施例9

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}-甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸鎂

將水(1.0毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例1，35.0毫克，53.3微莫耳)之溶液以碳酸鎂(4.49毫克，53.3微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給40.1毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.68分鐘：MS(ESIpos)：m/z=657.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.87-8.81(m,1H),8.54-8.48(m,1H),7.98-7.91(m,1H),7.73-7.58(m,4H),5.43-5.37(m,1H),5.35-5.27(m,1H),4.92-4.60(m,1H，與HDO峰重疊),4.20-4.06(m,2H)。

實施例10

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽

在0℃下，將四氫呋喃(20毫升，250毫莫耳)中的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺(實施例6A，1000毫克，1.74毫莫耳)之溶液以4-N,N-二甲基胺基吡啶(318毫克，2.60毫莫耳)及三乙胺(360微升，2.6毫莫耳)處理。逐滴添加磷醯氯(240 微升，2.6毫莫耳)。將所得混合物在0℃下攪拌40分鐘及接著在室溫下攪拌50分鐘。隨後添加水(2.0毫升)及飽和水性碳酸氫鈉溶液(12毫升)且將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。接著在室溫下蒸發四氫呋喃。將所得溶液以水稀釋且以乙酸乙酯萃取。將水相以氫氯酸溶液(1N)達到pH=1，以飽和水性氯化鈉溶液稀釋且以乙酸乙酯萃取。將合併的有機層以飽和氯化鈉溶液清洗，經硫酸鎂乾燥且蒸發。將殘餘物以製備性HPLC純化(方法4)，以供給876毫克(77%理論值)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.74分鐘；MS(ESIpos)：m/z=656.0[M+H]⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.30(br s,1H),7.96-7.50(m,8H),5.25-4.96(m,2H),4.97-4.74(br m,1H),4.26-3.91(m,2H),3.57(br s,2H，與HDO峰重疊)。

實施例11

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸氫鉀

將水(1.0毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例10，35.0毫克，53.4微莫耳)之溶液以碳酸氫鉀(10.7毫克，107微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給40.4毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.73分鐘；MS(ESIpos)：m/z=656.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=7.97-7.93(m,1H),7.87-7.79(m,2H),7.73-7.59(m,5H),5.38-5.33(m,1H),5.30-5.24(m,1H),4.88-4.66(m,1H，與HDO峰重疊),4.20-4.06(m,2H)。

實施例12

將水(1.0毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例10，35.0毫克，53.4微莫耳)之溶液以碳酸氫鉀(5.34毫克，53.4微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給36.3毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.73分鐘；MS(ESIpos)：m/z=656.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=7.97-7.93(m,1H),7.88-7.79(m,2H),7.71-7.58(m,5H),5.39-5.24(m,2H),4.90-4.67(m,1H，與HDO峰重疊),4.19-4.09(m,2H)。

實施例13

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸氫鈉

將水(1.0毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫 -4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例10，35.0毫克，53.4微莫耳)之溶液以碳酸二鈉(5.66毫克，53.4微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給37.9毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.74分鐘；MS(ESIpos)：m/z=656.1[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=7.97-7.93(m,1H),7.89-7.78(m,2H),7.74-7.57(m,5H),5.40-5.22(m,2H),4.92-4.64(m,1H，與HDO峰重疊),4.22-4.04(m,2H)。

實施例14

將水(1.0毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例10，35.0毫克，53.4微莫耳)之溶液以碳酸氫鈉(4.48毫克，53.4微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給36.2毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.47分鐘；MS(ESIpos)：m/z=656.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=7.97-7.93(m,1H),7.87-7.79(m,2H),7.72-7.59(m,5H),5.39-5.24(m,2H),4.90-4.65(m,1H，與HDO峰重疊),4.20-4.09(m,2H)。

實施例15

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸鎂

將水(50毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例10，35.0毫克，53.4微莫耳)之溶液以碳酸鎂(4.50毫克，53.4微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給37.3毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.34分鐘；MS(ESIpos)：m/z=656.1[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=7.97-7.93(m,1H),7.88-7.79(m,2H),7.72-7.58(m,5H),5.39-5.24(m,2H),4.92-4.63(m,1H，與HDO峰重疊),4.20-4.09(m,2H)。

實施例16

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸鈣

將水(15毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例10，35.0毫克，53.4微莫耳)之溶液以乙酸鈣單水合物(9.40毫克，53.4微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給37.9毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.33分鐘；MS(ESIpos)：m/z=656.1[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.00-7.91(m,1H),7.89-7.77(m,2H),7.73-7.55(m,5H),5.42-5.22(m,2H),4.99-4.50(m,1H，與HDO峰重疊),4.27-3.99(m,2H)。

實施例17

(2S)-3-[1-{[5-胺磺醯基-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基]甲基}-3-(4-氯-苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽

在0℃下，將四氫呋喃(4.2毫升，52毫莫耳)中的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧基-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺(實施例8A，200毫克，368微莫耳)之溶液以4-N,N-二甲基胺基吡啶(67.5毫克，552微莫耳)及三乙胺(77微升，550微莫耳)處理。逐滴添加磷醯氯(52微升，0.55毫莫耳)。將所得混合物在0℃下攪拌40分鐘及接著在室溫下攪拌50分鐘。隨後添加水(420微升)及飽和水性碳酸氫鈉溶液(2.5毫升)且將所得混合物在室溫下攪拌隔夜。接著在室溫下蒸發四氫呋喃。將所得溶液以水稀釋且以乙酸乙酯萃取。將水相以氫氯酸溶液(1N)達到pH=1，以飽和水性氯化鈉溶液稀釋且以乙酸乙酯萃取。將合併的有機層以飽和氯化鈉溶液清洗，經硫酸鎂乾燥且蒸發。將殘餘物以製備性HPLC純化(方法4)，以供給126毫克(55%理論值)標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.22分鐘；MS(ESIneg)：m/z=621.0[M-H]^-

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.64-8.34(m,2H),8.24(dd,1H),7.96(s,1H),7.80-7.48(m,5H),5.25-5.00(m,2H),4.93-4.76(br m,1H),4.20-3.87(m,2H),3.34(br s,2H，與HDO峰重疊)。

實施例18

(2S)-3-[1-{[5-胺磺醯基-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基]甲基}-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸氫鉀

將水(2.0毫升)中的(2S)-3-[1-{[5-胺磺醯基-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基]甲基}-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例17，35.0毫克，56.2微莫耳)之溶液以碳酸氫鉀(11.2毫克，112微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給40.2毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.64分鐘；MS(ESIpos)：m/z=623.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.54(dd,1H),8.22(dd,1H),7.76-7.58(m,5H),5.42-5.29(m,2H),4.92-4.63(m,1H，與HDO峰重疊),4.20-4.07(m,2H)。

實施例19

將水(2.0毫升)中的(2S)-3-[1-{[5-胺磺醯基-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基]甲基}-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫 -4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例17，35.0毫克，56.2微莫耳)之溶液以處理碳酸氫鉀(5.62毫克，56.2微莫耳)，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給37.1毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.65分鐘；MS(ESIpos)：m/z=623.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.55-8.51(m,1H),8.23-8.18(m,1H),7.75-7.57(m,5H),5.35(q,2H),4.90-4.63(m,1H，與HDO峰重疊),4.22-4.10(m,2H)。

實施例20

(2S)-3-[1-{[5-胺磺醯基-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基]甲基}-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸氫鈉

將水(2.0毫升)中的(2S)-3-[1-{[5-胺磺醯基-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基]甲基}-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例17，35.0毫克，56.2微莫耳)之溶液以處理碳酸二鈉(5.95毫克，56.2微莫耳)，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給38.9毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.65分鐘；MS(ESIpos)：m/z=623.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.56-8.53(m,1H),8.25-8.20(m,1H),7.75-7.58(m,5H),5.42-5.28(m,2H),4.90-4.64(m,1H，與HDO峰重疊),4.21-4.06(m,2H)。

實施例21

將水(2.0毫升)中的(2S)-3-[1-{[5-胺磺醯基-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基]甲基}-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例17，35.0毫克，56.2微莫耳)之溶液以碳酸氫鈉(4.72毫克，56.2微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給36.4毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.64分鐘；MS(ESIpos)：m/z=623.1[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.56-8.51(m,1H),8.24-8.18(m,1H),7.75-7.56(m,5H),5.43-5.28(m,2H),4.92-4.59(m,1H，與HDO峰重疊),4.25-4.09(m,2H)。

實施例22

(2S)-3-[1-{[5-胺磺醯基-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基]甲基}-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸鎂

將水(53毫升)中的(2S)-3-[1-{[5-胺磺醯基-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基]甲基}-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例17，35.0毫克，56.2微莫耳)之溶液以碳酸鎂(4.74毫克，56.2微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給37.8毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.13分鐘；MS(ESIpos)：m/z=623.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.57-8.52(m,1H),8.26-8.19(m,1H),7.77-7.58(m,5H),5.43-5.28(m,2H),4.95-4.58(m,1H，與HDO峰重疊),4.07(s,2H)。

實施例23

(2S)-3-[1-{[5-胺磺醯基-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基]甲基}-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸鈣

將水(2.0毫升)中的(2S)-3-[1-{[5-胺磺醯基-1-(3-氯吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基]甲基}-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例17，35.0毫克，56.2微莫耳)之溶液以乙酸鈣單水合物(1：1)(9.89毫克，56.2微莫耳)處理，接著在室溫下攪拌15分鐘且凍乾，以供給38.5毫克(定量)標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.65分鐘；MS(ESIpos)：m/z=623.0[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D₂O)：δ[ppm]=8.56-8.52(m,1H),8.25-8.19(m,1H),7.76-7.58(m,5H),5.42-5.29(m,2H),4.68(s,1H，與HDO峰重疊),4.23-4.10(m,2H)。

實施例24

(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二鉀

在0℃下，將乙腈(12毫升)中的(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽(實施例1，400毫克，0.609毫莫耳)之溶液以碳酸氫鉀溶液(1.2毫升，1M，1.2毫莫耳)處理。將所得混合物在0℃下攪拌5分鐘，在室溫下攪拌5分鐘且凍乾。

將50毫克凍乾之化合物溶解在2-丙醇(3毫升)中。將所得溶液在室溫下於攪拌下緩慢濃縮。在3週之後，溶劑完全蒸發。所獲得的固體以X-射線繞射法檢查且對應於成為介晶型材料的標題化合物。1.9±0.2之鉀化學計量係根據下式以TGA分析(以質量計的9.9%之殘餘溶劑)及離子層析術(以質量計的9.1%之鉀)為基礎計算：化學計量=[(%_鉀)/(1-%_詞餘溶劑-%_鉀)]x[(M_游離酸)/(M_鉀)]

LC-MS(方法5)：R_t=0.67分鐘；MS(ESIpos)：m/z=657.1[M+H]⁺

¹H-NMR(500MHz,D2O)：δ[ppm]=8.84(d,1H),8.51(d,1H),7.95(dd,1H),7.74-7.56(m,4H),5.47-5.23(m,2H),4.23-4.03(m,2H)。

以*標記之譜帶特別為鉀鹽。

實驗章節-生物檢定法

縮寫及頭字語

本發明化合物之活性證明係通過此項技術中熟知的試管內、活體外及活體內檢定法實現。例如，可使用下列的檢定法證明本發明化合物之活性。

B-1.用於測定血管加壓素受體活性之細胞試管內檢定法

來自人類、大鼠和狗的V1a及V2血管加壓素受體之促效劑和拮抗劑的鑑定以及本發明化合物之活性定量係使用重組細胞株來進行。該等細胞株最初源自倉鼠卵巢上皮細胞(中國倉鼠卵巢，CHO K1，ATCC：美國菌種保存中心(American Type Culture Collection)，Manassas,VA 20108,USA)。試驗細胞株在組成上表現人類、大鼠或狗V1a或V2受體。在G_αq偶合之V1a受體的例子中，細胞亦以鈣敏感性光蛋白水母素(aequorin)(人類和大鼠V1a)或螅蛋白(obelin)(狗V1a)之修飾形式穩定地轉染，當游離鈣濃度增加時，則細胞在以共因子腔腸素(coelenterazine)重構後發光[Rizzuto R,Simpson AW,Brini M,Pozzan T,Nature 358,325-327(1992)；Illarionov BA,Bondar VS,Illarionova VA,Vysotski ES,Gene 153(2),273-274(1995)]。所得血管加壓素受體細胞係藉由細胞內釋放之鈣離子以反應重組表現之V1a受體的刺激，其可藉由所得光蛋白發光來定量。G_s偶合之V2受體係在CRE反應性啟動子的控制下穩定地轉染至表現螢火蟲螢光素酶基因之細胞株中。V2受體激活係經由增加的cAMP來誘發CRE反應性啟動子激活，由此誘發螢火蟲螢光素酶表現。由V1a細胞株的光蛋白發射之光以及由V2細胞株的螢火蟲螢光素酶發射之光係相應於各自的血管加壓素受體之激活或抑制。細胞株之生物發光係使用適合的亮度計檢測[Milligan G,Marshall F,Rees S,Trends in Pharmacological Sciences 17,235-237(1996)]。

試驗程序：

血管加壓素V1a受體細胞株：

在檢定前一天，將細胞鋪在384槽孔微量滴定盤中的培養基(DMEM/F12、2%FCS、2mM麩醯胺酸、10mM HEPES、5微克/毫升之腔腸素)上且保存於細胞培育器中(96%濕度，5%v/v CO₂，37℃)。在檢定當天，將各種濃度的試驗化合物放置在微量滴定盤的槽孔中10分鐘，然後添加EC₅₀濃度的促效劑[Arg⁸]-血管加壓素。立即以亮度計測量所得光信號。

血管加壓素V2受體細胞株：

在檢定前一天，將細胞鋪在384槽孔微量滴定盤中的培養基(DMEM/F12、2%FCS、2mM麩醯胺酸、10mM HEPES)上且保存於細胞培育器中(96%濕度，5%v/v CO₂，37℃)。在檢定當天，將各種濃度的試驗化合物及EC₅₀濃度的促效劑[Arg⁸]-血管加壓素一起添加至槽孔中，且將盤在細胞培育器中培育3小時。在添加細胞分溶解試劑Triton^TM及受質螢光素時，以亮度計測量螢火蟲螢光素酶之發光。

以下表1列示自人類V1a或V2受體轉染之細胞株獲得的本發明化合物(包括消旋性混合物以及分離的鏡像異構物)之個別的IC₅₀值。這意指該等IC₅₀值為前驅藥而不為基礎的個別藥物之值，因為前驅藥主要在檢定條件下具有穩定性。基礎的個別藥物之數據顯示於下文提及之實驗中。

B-2.放射性結合檢定法

IC₅₀及K_i值可以使用表現各自的人類血管加壓素V1a及V2受體之重組人類胎腎細胞株293(HEK293)或CHO-K1細胞株的膜部分之放射性結合檢定法測定。

使用標準技術使用在50mM Tris-HCl緩衝劑，pH 7.4、5mM MgCl₂、0.1%BSA中的表現於HEK293細胞中的人類重組血管加壓素V1a受體。將製備之膜的等分試樣以一式兩份不同濃度的試驗化合物及0.03nM[¹²⁵I]苯基乙醯基-D-Tyr(Me)-Phe-Gln-Asn-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH₂在25℃下培育120分鐘。非特異性結合係在1μM[Arg⁸]血管加壓素的存在下評估。將受體過濾且清洗，接著計數過濾器以測定特異性結合之[¹²⁵I]苯基乙醯基-D-Tyr(Me)-Phe-Gln-Asn-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH₂。

使用以編碼人類血管加壓素V2受體的質粒穩定地轉染之CHO-K1細胞在50mM Tris-HCl緩衝劑，pH 7.4、10mM MgCl₂、0.1%BSA中製備膜。將製備之膜的等分試樣以一式兩份不同濃度的試驗化合物及4nM[³H](Arg⁸)-血管加壓素在25℃下培育120分鐘。非特異性結合係在1mM(Arg⁸)-血管加壓素的存在下評估。將膜過濾且清洗3次，且計數過濾器以測定特異性結合之[³H](Arg₈)-血管加壓素。

IC₅₀值係使用MathIQTM(ID Business Solutions Ltd.,UK)的非線性最小平方回歸分析測定。抑制常數K_i係使用Cheng和Prusoff之方程式計算(Cheng,Y.,Prusoff,W.H.,Biochem.Pharmacol.22：3099-3108,1973)。

為了驗證前驅藥轉化成個別藥物，將前驅藥用及不用鹼性磷酸酶培育。以鹼性磷酸酶切割磷酸鹽部分使前驅藥轉化成基礎的個別藥物[Coleman J.E.,Annu.Rev.Biophys.Biomol.Struct.1992,21,441-483]。由於前驅藥及基礎的個別藥物顯示出不同的IC₅₀值，但在鹼性磷酸酶處理後，前驅藥之值類似於個別藥物之IC₅₀。

B-3.用於檢測血管加壓素V1a受體拮抗劑對調節促纖維化基因之作用的細胞試管內檢定法

自大鼠心臟組織分離之心肌細胞類型說明之細胞株H9C2(美國菌種保存中心編號CRL-1446)係以高複製數內源性表現血管加壓素V1a受體AVPR1A，而無法檢測到AVPR2表現。同樣地，自大鼠腎組織分離之細胞株NRK49F(ATCC編號CRL1570)顯示高的AVPR1A mRNA表現及降低的AVPR2表現之類似表現模式。用於檢測以受體拮抗劑抑制基因表現之AVPR1A受體依賴性調節的細胞檢定之程序係如下：

將H9C2細胞或NRK49F細胞以50 000個細胞/槽孔之細胞密度接種在用於細胞培養的6槽孔微量滴定盤之2.0毫升Opti-MEM培養基(Invitrogen Corp.，Carlsbad,CA,USA，目錄編號11058-021)中且保存在細胞培育器中(96%濕度，8% v/v CO2，37℃)。在24小時後，將媒劑溶液(負性對照照)及血管加壓素溶液([Arg8]-血管加壓素乙酸鹽，Sigma，目錄編號V9879)，或試驗化合物(溶解在媒劑中：具有20% v/v乙醇之水)及血管加壓素溶液裝入三個槽孔組中(一式三份)。在此細胞培養中，最終血管加壓素濃度為1nM。將少量的試驗化合物溶液添加至細胞培養中，使得細胞檢定中的乙醇最終濃度不超過0.03%。在5小時的培養時間後，將培養上清液在抽氣下抽出，將附著的細胞溶解在350微升RLT緩衝劑(Qiagen，目錄編號79216)中且使用RNeasy套組(Qiagen，目錄編號74104)自溶解產物分離出RNA。接著進行DNAse消化(Invitrogen，目錄編號18068-015)、cDNA合成(Promaga,ImProm-II Reverse Transcription System，目錄編號A3800)及反轉錄聚合酶鏈反應(RTPCR)(pPCR MasterMix RT-QP2X-03-075,Eurogentec,Seraing,Belgium)。所有的程序係依照試驗試劑的製造商之操作方案進行。用於RTPCR之引子組係以mRNA基因序列(NCBI GenBank Entrez Nucleotide Data Base)為基礎使用具有6-FAM TAMRA-標記之探針的Primer3Plus程式選擇。用於測定各種檢定批次之細胞中的相對mRNA表現之RTPCR係使用Applied Biosystems ABI Prism 7700 Sequence檢測器以384-槽孔微量滴定盤模式依照儀器操作指示來進行。相對基因表現係參照核糖體蛋白L-32基因(GenBank Acc.編號NM-_013226)之表現量以δ-δ Ct值呈現[Applied Biosystems,User Bulletin No.2 ABI Prism 7700 SDS,December 11,1997(更新10/2001)]，且Ct之閥值Ct=35。

B-4.用於驗證前驅藥轉化成藥物之細胞試管內檢定法

為了驗證前驅藥轉化成個別藥物，將前驅藥用及不用鹼性磷酸酶培育。以鹼性磷酸酶切割磷酸鹽部分使前驅藥轉化成基礎的個別藥物[Coleman J.E.,Annu.Rev.Biophys.Biomol.Struct.1992,21,441-483]。由於前驅藥及基礎的個別藥物顯示出不同的IC₅₀值，但在鹼性磷酸酶處理後，前驅藥之值類似於個別藥物之IC₅₀。測定本發明化合物在人類V1a受體上的IC₅₀值係使用重組細胞株進行。細胞株最初源自倉鼠卵巢上皮細胞(中國倉鼠卵巢，CHO K1，ATCC：美國菌種保存中心，Manassas,VA 20108,USA)。試驗細胞株在組成上表現人類V1a受體。細胞亦以鈣敏感性光蛋白水母之修飾形式穩定地轉染，當游離鈣濃度增加時，則細胞在以共因子腔腸素重構後發光[Rizzuto R,Simpson AW,Brini M,Pozzan T,Nature 358,325-327(1992)；Illarionov BA,Bondar VS,Illarionova VA,Vysotski ES,Gene 153(2),273-274(1995)]。所得血管加壓素受體細胞係藉由細胞內釋放之鈣離子以反應重組表現之V1a受體的刺激，其可藉由所得光蛋白發光來定量。細胞株之生物發光係使用適合的亮度計檢測[Milligan G,Marshall F,Rees S,Trends in Pharmacological Sciences 17,235-237(1996)]。

試驗程序

在檢定前一天，將細胞接種在384槽孔微量滴定盤中的培養基(DMEM/F12、2%FCS、2mM麩醯胺酸、10mM HEPES、5微克/毫升之腔腸素)中且保存於細胞培育器中(96%濕度，5%v/v CO₂，37℃)。在檢定當天，將100μM濃度的100微升試驗化合物在37℃下於泰洛(Tyrode)緩衝劑(20mM HEPES、130mM NaCl、5mM KCl、5mM NaHCO₃、2mM MgCl₂，pH 7,4)中以500單位鹼性磷酸酶培育15分鐘。在培育後，將化合物立即稀釋且在37℃下放置在先前接種之V1a細胞上。添加EC₅₀濃度的[Arg⁸]-血管加壓素且立即以亮度計測量所得光信號以檢測化合物之拮抗活性。

進行用及不用鹼性磷酸酶(AP)之化合物樣品(實施例4A和實施例1)的LC-MS。

方法6(LC-MS)：

儀器MS：Waters TOF儀器；儀器類型UPLC：Waters Acquity I-CLASS；管柱：Waters,HSST3,2.1 x 50毫米，C18 1.8微米；溶析劑A：1公升水+0.01%甲酸；溶析劑B：1公升乙腈+0.01%甲酸；梯度：0.0分鐘2%B→0.5分鐘2%B→7.5分鐘95%B→10.0分鐘95%B；烘箱：50℃；流速1.00毫升/分鐘；UV檢測：210奈米。

用AP之實施例4A

LC-MS(方法6)：R_t=3.83分鐘；MS(ESIpos)：m/z=577.1[M+H]⁺ 不用AP之實施例4A

LC-MS(方法6)：R_t=3.84分鐘；MS(ESIpos)：m/z=577.1[M+H]⁺用AP之實施例1

LC-MS(方法6)：R_t=3.83分鐘；MS(ESIpos)：m/z=577.1[M+H]⁺不用AP之實施例1

LC-MS(方法6)：R_t=3.19分鐘；MS(ESIpos)：m/z=657.1[M+H]⁺

B-5.用於驗證前驅藥轉化成藥物之血管加壓素誘發之人血小板凝集的抑制作用

人血小板內源性表現V1a受體。頃發現相對高的精胺酸血管加壓素(AVP)濃度(約50至100nM)於活體外刺激血小板凝集。因此，來自人血液之富集血小板可適合為以血管加壓素拮抗劑的藥物學研究之V1a表現組織。

為了驗證前驅藥轉化成個別藥物，將前驅藥用及不用鹼性磷酸酶培育。以鹼性磷酸酶切割磷酸鹽部分使前驅藥轉化成藥物。由於前驅藥及基礎的個別藥物顯示出不同的IC₅₀值，但在鹼性磷酸酶處理後，前驅藥之值類似於個別藥物之IC₅₀。

將100μM濃度的100微升試驗化合物在37℃下於泰洛緩衝劑(134mM NaCl、12mM NaH₂PO₄*H₂O、0.34mM NaH₂PO₄*H₂O、2.9mM KCl、5mM HEPES、5mM葡萄糖)中以500單位鹼性磷酸酶培育15分鐘且貯存在4℃，直到進一步用於血小板凝集檢定法為止。

藉由靜脈穿刺自至少1週內未服藥之不吸煙的健康志願者(n4/組)收集人血液至含有1/10體積之0.106M檸檬酸三鈉的塑膠管中。富集血小板之血漿(PRP)係在室溫下以140g離心血液樣品20分鐘而獲得。將所得沉澱物丟棄且進一步離心(11.000rpm，1分鐘)PRP以產生缺乏血小板之血漿(PPP)。血小板凝集係使用血小板凝集計(APACT 4)進行比濁測量。在37℃之持續攪拌下監測178微升PRP等分試樣相對於PPP對照組之光透射變化來追蹤反應。在添加AVP(最終濃度100nM)前5分鐘，將各種濃度的血管加壓素拮抗劑(以2微升)添加至PRP中。化合物的抑制效應係藉由測量與對照組反應之凝集曲線的最大高度來測定。IC₅₀值係基於濃度-反應抑制曲線以迭代的非線性回歸程式計算。所有的值係以平均值表示(表3A)。

B-6.對分離之大鼠血管環收縮的效應

分離之主動脈

試驗化合物可在來自外源性表現V1a受體之雄性Wistar大鼠的分離之主動脈環上進行研究。將雄性Wistar大鼠使用二氧化碳麻醉。將主動脈取出且放置在以下組成(以毫莫耳/公升計)的冰冷之克雷布斯-漢斯萊特(Krebs-Henseleit)緩衝劑中：NaCl 112、KCl 5.9、CaCl₂ 2.0、MgCl₂ 1.2、NaH₂PO₄ 1.2、NaHCO₃ 25、葡萄糖11.5。將主動脈切成3毫米環且轉移至含有在37℃下以95% O₂、5% CO₂平衡之克雷布斯- 漢斯萊特溶液的20毫升器官浴中。為了記錄等長張力，將環架設在兩個鉤之間。將靜張力調整至3g。在平衡期後，開始各實驗：將製劑暴露於K+(50mM)克雷布斯-漢斯萊特溶液。接著將主動脈環使用1毫微莫耳/公升之Arg-血管加壓素預收縮。在確立穩定的收縮後，建立試驗化合物的累積劑量反應曲線。由Arg-血管加壓素誘發之穩定收縮經定義為100%張力。鬆弛度以百分比張力表示。

分離之腎動脈

將雄性Wistar大鼠(200-250克)使用二氧化碳麻醉。將腎動脈取出且放置在以下組成(以毫莫耳/公升計)的冰冷之克雷布斯-漢斯萊特緩衝劑中：NaCl 112、KCl 5.9、CaCl₂ 2.0、MgCl₂ 1.2、NaH₂PO₄ 1.2、NaHCO₃ 25、葡萄糖11.5。將用於測量等長張力之2毫米長度的環片段使用兩個固定至架設爪的鎢絲架設在小血管室肌動計(Danish Myo Technology A/S,Denmark)中。一個架設爪附著至測微計，允許控制血管周長。另一架設爪附著至測量張力發展的力轉換器。將整個製劑與生理鹽溶液保存在37℃之室內，以氧氣起泡。在30分鐘平衡期後，將血管拉伸至其最適於主動的張力發展之管腔直徑，其係基於內圓周-壁張力之比確定。若血管暴露至相當於由100毫米Hg的跨壁壓所產生之被動張力，則內圓周經設定為血管能具有的圓周之90%。

隨後將血管以克雷布斯-漢斯萊特緩衝劑清洗三次且留置30分鐘平衡。接著二倍暴露於高K⁺溶液(50毫莫耳/公升之KCl)以測試收縮性。在以克雷布斯-漢斯萊特緩衝劑清洗後，接著將血管使用1毫微莫耳/公升之Arg-血管加壓素預收縮。在確立穩定的收縮後，建立試驗化合物的累積劑量反應曲線。由Arg-血管加壓素誘發之穩定收縮經定義為100%張力。鬆弛度以百分比張力表示。

B-7.檢測心血管效應之活體內檢定法：在麻醉之大鼠中的血壓測量(血管加壓素「挑戰」模式)

使用以K他命(ketamine)/甲苯噻(xylazine)/戊巴比妥(pentobarbital)注射麻醉下的雄性Sprague-Dawley大鼠(250-350克體重)。將以含肝素(500IU/毫升)之等滲透氯化鈉溶液預填充之聚乙烯管(PE-50，Intramedic^®)導入頸靜脈及股靜脈中且接著紮緊。在輔以注射器下經由一個靜脈入口注入Arg-血管加壓素(SIGMA)；經由第二靜脈入口投予試驗物質。將壓力導管(Millar SPR-320 2F)紮入頸動脈中以測定收縮血壓。將動脈導管連接至壓力傳導器，該傳導器饋送其信號至配備有適合的記錄軟體之記錄電腦。在典型的實驗中，以10-15分鐘間隔對實驗動物投予3-4個連續推注之等滲透氯化鈉溶液中的定量之Arg-血管加壓素(30毫微克/公斤)。當血壓再達到起初程度時，以推注投予在適合的溶劑中之試驗物質且後續連續灌注。在此之後，以指定的間隔(10-15分鐘)再投予與開始時相同量的Arg-血管加壓素。以血壓值為基礎，測定試驗物質對抗Arg-血管加壓素之高血壓效應的程度。對照動物僅接受溶劑而非試驗物質。

在靜脈內投予後，與溶劑對照組相比，本發明化合物抑制由Arg-血管加壓素所引起的血壓增加。

B-8.檢測經血管加壓素V2受體調介之效應的活體內檢定法：保持在代謝籠中的清醒大鼠之利尿研究

維持雄性Wistar大鼠(400-500克體重)自由取得食物(Altromin)及飲水。在實驗期間，維持動物個別在適合此重量類型的大鼠之代謝籠中(Tecniplast Deutschland GmbH，D-82383 Hohenpeißenberg)自由取得飲水7小時。在實驗開始時，以靜脈施予方式對動物投予在適合的溶劑(2-羥丙基-β-環糊精)中之1毫升/公斤體重的試驗物質量。對照組動物僅接受媒劑。對照組和物質試驗在同一天同時進行。對照組和物質-劑量組分別由6至8隻動物組成。在實驗期間，將動物排出的尿液持續收集在籠子底部的接受器中。個別測定各動物的尿液體積。在實驗開始前，先測定個別動物的體重。

在靜脈內投予後，與溶劑對照組的施予相比，血管加壓素V2受體阻斷化合物能造成增加的尿液排泄，其基本上係以增加的水排出(利水作用)為基礎

以下表4A顯示本發明之示例性化合物及比較用化合物以三種不同劑量相對於溶劑對照組(=100%)所觀察的尿液排泄變化：

在表4A中所示之結果證明本發明化合物在指定的劑量下於活體內不具有任何顯著的劑量依賴性V2阻斷活性。這與WO2016/071212的實施例82形成對比，其以3毫克/公斤i.v.之劑量引起劑量依賴性，相對於媒劑對照組而增加至多14倍的尿液體積。

B-9.檢測保護性腎效應之活體內檢定法：在在囓齒動物中的急性缺血/再灌注損傷

6-8週齡的實驗室繁殖之雄性C57Bl/6J小鼠係自Taconic Biosciences獲得，6-8週齡的雄性Sprague Dawley®大鼠係自Charles River獲得。大鼠及小鼠二者皆維持在標準的實驗室條件下，12小時光照-黑暗循環，任意取得正常食物及飲水。在各對照組及實驗組中以總共10-12隻大鼠或小鼠用於缺血再灌注損傷模式。

動物係以連續吸入之異氟醚(isoflurane)麻醉。在對側腎臟的缺血手術前7天，通過右側切口進行右腎切除術。以左側切口進行腎缺血。腎血管係以解剖左腎蒂而暴露。在45分鐘(大鼠)或25分鐘(小鼠)缺血期間使用非創傷性血管鉗停止血流(動脈和靜脈)。以移除血管鉗確立再灌注。以5.0聚丙烯縫合線封閉腹壁(肌肉層和皮膚)。施予Temgesic®(丁丙諾啡(Buprenorphin)，0.025毫克/公斤s.c.)作為止痛藥。

在缺血後24小時的犧牲前，收集經隔夜在代謝籠中的各動物之尿液。在犧牲時，在末端麻醉下獲得血液樣品。在離心血液樣品後分離出血清。經由臨床生化分析儀(Pentra 400)測量血清肌酸酐及血清尿素二者。用於評定血清及尿腎損傷生物標記物(嗜中性球明膠酶相關之載脂蛋白(lipocalin)[NGAL]、腎損傷分子-1[KIM-1]和骨橋蛋白(Osteopontin))之ELISA係根據製造商的方案進行。測量尿肌酸酐及白蛋白二者以測定白蛋白/肌酸酐之比。

自RNA分離出總RNA。在犧牲時，將左腎在液態氮中迅速冷凍。接著將腎組織勻化且獲得RNA。將總RNA轉錄成cDNA。在全腎組織中的腎NGAL、骨橋蛋白、KIM-1、腎病蛋白(Nephrin)和足突蛋白(Podocin)mRNA表現係使用TaqMan即時PCR分析。

在組別之間的差異係以多次比較之鄧奈特(Dunnett)氏校正的單因子變異數分析(One Way ANOVA)進行分析。統計顯著性經定義為p<0.05。所有的統計學分析皆使用GraphPad Prism 7進行。

B-10.檢測心血管效應之活體內檢定法：在麻醉之狗中的血液動力學研究

將重量介於10至15公斤之間的雄性米格魯狗(Beagle，Marshall BioResources)以用於手術介入及血液動力學和功能研究末端的戊巴比妥麻醉(30毫克/公斤i.v.，Narcoren®，Merial,Germany)。將泮庫溴銨(Pancuroniumbromide)(Pancuronium Inresa，Inresa,Germany，2-4毫克/動物i.v.)另外充當肌肉鬆弛劑。將狗插管且吸入約2.5-4公升/分鐘之氧/周圍空氣混合物(30/70%)。使用來自GE Healthcare(Avance,Germany)的呼吸器進行送氣且使用二氧化碳分析儀(Datex-Ohmeda)監測。以連續輸注之戊巴比妥(50微克/公斤/分鐘)維持麻醉；使用吩坦尼(fentanyl)作為止痛藥(10微克/公斤/小時)。

在準備介入時，將狗安裝上心臟起搏器。在實驗開始時，將來自Biotronik(Logos®,Germany)之心臟起搏器植入皮下皮膚袋中且經由起搏器電極(Siello S60®，Biotronik,Germany)與心臟接觸，此電極係以照射經由外頸靜脈推入右心室中。

然後移除通路且狗自麻醉中自發清醒。在另外7天後，啟動上述起搏器且以每分鐘220次搏動的頻率刺激心臟。

實際的藥物測試實驗係在起搏器刺激開始後28天使用下列儀器進行：

˙導入用於膀胱緩解的膀胱導管且測量尿液流量

˙連接心電圖(ECG)引導以ECG測量肢體

˙導入以氯化鈉溶液填充之護套導入器至股動脈中。將此管連接至血壓感測器(Braun Melsungen，Melsungen,Germany)以測量全身血壓

˙通過固定在頸動脈之接口導入Millar Tip導管(350 PC型，Millar Instruments，Houston,USA)以測量心臟血液動力學

˙經由頸靜脈導入Swan-Ganz導管(CCOmbo 7.5F，Edwards,Irvine,USA)至肺動脈以測量心輸出量、氧氣飽和度、肺動脈壓和中樞靜脈壓

˙安裝靜脈導管至頭靜脈中以灌注戊巴比妥、液體置換和血液採樣(測定物質之血漿含量或其他的臨床血液值)

˙安裝靜脈導管至隱靜脈中以灌注吩坦尼及投予物質

˙輸注劑量漸增之血管加壓素(Sigma)，至多4mU/公斤/分鐘之劑量。接著以此劑量測試藥理物質。

若必要時，將主要信號放大(ACQ7700，Data Sciences International,USA或Edwards-Vigilance-Monitor，Edwards,Irvine,USA)及隨後送入Ponemah系統(Data Sciences International,USA)進行評估。持續記錄在整個實驗期間的信號，且進一步以該軟體數位化處理，且經30秒平均。

B-11.在麻醉之大鼠中對血管加壓素調介之全身性血液動力學、腎血流量及氧合作用變化的急性效應

實驗係以雄性Sprague Dawley大鼠(Charles River,Deutschland；350-450克體重)進行。在準備手術程序時，將大鼠以異氟醚麻醉且放在加熱之臺上以維持37℃之核心體溫，其以插入的直腸溫度計確定。使用校準之蒸發器施予以異氟醚之吸入麻醉，分別以5體積%和2體積%之異氟醚誘發及維持麻醉。將PE50套管放入右股動脈中以監測平均動脈壓(MAP)。將另一PE50導管插入股靜脈以進行靜脈輸注。將左腎以側腹切口暴露且與腎週附著物分開。腎囊保持完整。在手術及後續的平衡和控制階段期間，大鼠接受以100微升/分鐘速率之靜脈內鹽水(0.9%NaCl)輸注。腎血流量(RBF)之腎測量值係使用附著且穩定在腎表面的雷射都卜勒(Doppler)血流探針(Oxford Optronix,UK)記錄。將探針插入腎皮質中的2毫米深度且將另一探針插入腎髓質中的4毫米處。腎血流量、氧及溫度係以組合式感測器探針(Oxford Optronix,UK)測量。持續記錄MAP、心跳速率(HR)、RBF、溫度及氧。在手術及平衡後，經20分鐘確定基線測量。接著對大鼠以50毫微克/公斤/分鐘之速率經20分鐘靜脈內輸注100微升/公斤之血管加壓素。在第三階段中，測定以不同濃度推注施予的組合輸注之血管加壓素與雙重血管加壓素受體拮抗劑(WO2016/071212的實施例82)或選擇性V1a拮抗劑(實施例1)或媒劑的效應。

B-12. pH穩定性

將0.15毫克試驗化合物溶解在0.1毫升二甲基亞碸及0.4毫升乙腈中。將具有溶液樣品的HPLC小瓶搖動以完全溶解且以紫外線照射處理。接著添加1.0毫升個別的緩衝劑溶液且使樣品渦旋。將樣品溶液以HPLC分析以測定在37℃下經24小時之特定時間的試驗化合物量。使用峰面積百分比定量。

緩衝劑

pH 4.0：弗盧卡(Fluka)緩衝劑，訂購編號33643(11.76克檸檬酸、2.57克氯化鈉及2.72克氫氧化鈉)。

pH 7.4：將90克氯化鈉、13.61克磷酸二氫鉀及83.35克1M氫氧化鈉溶液以Millipore水製成1公升且接著以1：10稀釋。以磷酸調整至pH=7.4。

pH 10：弗盧卡緩衝劑，訂購編號33649(4.77克硼砂、0.73克氫氧化鈉)。

將15微升部分樣品溶液在37℃下於不同的時間(0小時、1小時、2小時、4小時和24小時)以HPLC分析。使用峰面積百分比定量。

HPLC方法

溶析液：A=1毫升三氟乙酸/公升於水中；B=1毫升三氟乙酸/公升於乙腈中

管柱：Nucleodur 100 C18ec,3微米，50 x 2毫米

溫度：37℃

檢測：214奈米

注射：15微升

代表性實施例在不同時間的峰面積(F)相對於起始點的峰面積之比顯示於表8A中：

B-13.溶解度

實驗程序

將每一物質確實秤得0.5-0.5毫克。在各例子中，將足夠的培養基添加至樣品中，以此方式獲得濃度c=500微克/毫升。將此樣品溶液在室溫下及以1400rpm搖動24小時。

需要用於DMSO校準溶液的另一0.5-0.6毫克樣品重量。將此樣品以DMSO填充至濃度c=600微克/毫升。自此儲備溶液製備兩個校準溶液。將1000微升DMSO最初引入2毫升HPLC小瓶中且以吸管滴入34.4微升儲備溶液(c=20微克/毫升)。將71.4微升此溶液(c=20微克/毫升)放入另一含有500微升DMSO的2毫升HPLC小瓶中(c=2.5微克/毫升)。

在搖動試驗溶液後，將230微升上清液轉移至離心管中且以42000rpm(223 000g)離心30分鐘。接著搖動180微升上清液且分別以DMSO稀釋(1：5之樣品1；1：100之樣品2)及轉移至HPLC小瓶中。將兩個校準溶液及稀釋的樣品溶液以HPLC分析。以相應的峰面積進行定量。

溶劑

蒸餾水；三氟乙酸(Merck；1.08262.0100)；乙腈(HPLC級)；DMSO(Merck；8.02912.2500)。

介質

檸檬酸緩衝劑pH4：弗盧卡緩衝劑，訂購編號33643(11.76克檸檬酸、2.57克氯化鈉及2.72克氫氧化鈉)。

緩衝劑pH7：弗盧卡緩衝劑，訂購編號33646(3.52克磷酸二氫鉀、7.26克磷酸氫鈉)。

PBS-緩衝劑pH7.4：6.18克氯化鈉及3.96克磷酸二氫鈉於1公升蒸餾水中的溶液，以1M水性氫氧化鈉溶液調整至pH 7.4。

Tris-緩衝劑pH8.5：將0.6057克TRIS溶解在95毫升水中，以水性氫氯酸調整至pH 8.5，以水填充，直到達到100毫升體積為止。

HPLC設備

具有UV檢測之Agilent 1100或相當裝置，可變波長(z.B.二極體陣列)；超聲波浴；Vibromix von Janke & Kunkel；來自Eppendorf之恆溫振盪器(Thermomixer)

HPLC-方法

溶析劑A：1毫升三氟乙酸/公升水；溶析劑B：1毫升三氟乙酸/公升乙腈

管柱：Zorbax Extend-c18，50 x 3.0毫米，3.5微米；管柱溫度：30℃；流速1.5毫升/分鐘；檢測器：214/254奈米；注射體積：20微升。

代表性實施例之溶解度顯示於表9A中。

表9A：

B-14.測定經靜脈內及經口投予後的藥物動力學參數

根據本發明之化合物的藥物動力學參數係在雄性Wistar大鼠、雌性米格魯狗及雌性馬來猴中測定。經靜脈內投予係藉助適合於個別物種之調配媒劑進行，諸如用於大鼠的血漿/DMSO調配物或生理食鹽水(pH4或更高)或用於狗及猴子的水/PEG400/乙醇調配物或生理食鹽水(pH4或更高)。在所有的物種中，經口投予溶解之物質係使用適合的調配媒劑(諸如水/PEG400/乙醇調配物或生理食鹽水)經由灌服進行。在投予物質前，藉由將適合的導管插入右頸外靜脈內以簡化自大鼠取得血液。操作係在以異氟醚麻醉之實驗前至少一天進行及投予止痛藥(阿托品(atropin)/力莫敵(Rimadyl)(3/1)，0.1毫升s.c.)。血液係在物質投予後至少7小時至最多72小時的時窗內(包括終止時間點)採集(通常至少6個時間點)。當採集到血液時，將其送入含有適合的抗凝血劑(較佳為K-EDTA)之試管內。接著以離心獲得血漿且視需要地貯存在20℃下，直到進一步處理為止。

將內標準物(其亦可為化學上不相關的物質)添加至根據本發明之化合物的樣品、校準樣品及限定物中，且藉助於過量乙腈追蹤蛋白質沉澱。另一選擇地，將內標準物添加至乙腈中，且接著將混合物以過量添加至根據本發明之化合物的樣品、校準樣品及限定物中，使蛋白質沉澱。添加符合LC條件之緩衝劑溶液，隨後以2800g離心。將上清液使用C18或聯苯反相管柱及可變流動相混合物之LC-MS/MS分析。物質係經由來自特定選擇之離子監測實驗的萃取離子層析圖之峰高度或面積定量。

使用所測定之血漿濃度/時間圖計算藥物動力學參數，諸如AUC(曲線下面積)、Cmax(最大濃度)、t1/2(終端半衰期)、F(生物利用率)、MRT(平均滯留時間)及CL(清除率)，該計算係使用驗證之藥物動力學計算程式。

因為物質定量係在血漿中進行，所以必須測定物質的血液/血漿分布，以便能夠相應地調整藥物動力學參數。出於此目的，將限定量的物質在搖擺式滾筒混合物中於討論之物種的全血中培育20分鐘。在以2800g離心後，血漿濃度係藉由計算全血濃度對血漿濃度之比(C血液/C血漿值)來測量(藉助於使用C18或聯苯反相管柱及可變流動相混合物之LC-MS/MS)及確定。

C)醫藥組成物之運用實施例

根據本發明之物質可如以下方式轉化成醫藥製劑：

錠劑：

組成物：

實施例1的100毫克化合物、50毫克乳糖(單水合物)、50毫克玉米澱粉、10毫克聚乙烯基吡咯啶酮(PVP 25)(來自BASF，Germany)及2毫克硬脂酸鎂。

錠劑重量212毫克。直徑8毫米，曲率半徑12毫米。

製造：

將實施例1之化合物、乳糖及澱粉之混合物與PVP於水中的5%強溶液(m/m)造粒。在乾燥後，將顆粒與硬脂酸鎂混合5分鐘。將混合物在慣例的壓錠機中壓縮(參見上述關於錠劑的形式)。

經口懸浮液：

組成物：

實施例1的1000毫克化合物、1000毫克乙醇(96%)、400毫克Rhodigel(黃原膠)(來自FMC，USA)及99克水。

10毫升經口懸浮液相當於100毫克本發明化合物之單一劑量。

製造：

將Rhodigel懸浮於乙醇中，且將實施例1之化合物添加至懸浮液中。在攪拌的同時添加水。將混合物攪拌約6小時，直到Rhodigel完全膨脹為止。

無菌i.v.溶液：

將根據本發明之化合物以低於飽和溶解度的濃度溶解在生理上可接受之溶劑中(例如等滲透氯化鈉溶液、葡萄糖溶液5%及/或PEG400溶液30%)。將溶液以過濾滅菌且填充至無菌及無熱原的注射容器中。

雖然本發明已參照特定的具體實例予以揭示，但是顯然本發明之其他的具體實例及變型可由其他熟習此項技術領域者以不背離本發明之真實精神和範疇而導出。申請專利範圍旨在解釋包括所有的此等具體實例及等效變型。

Claims

一種通式(I)化合物：其中R¹ 代表下式之基團或或其中# 代表連接1,2,4-三唑基環之點，或其醫藥上可接受之鹽、其溶劑合物或其鹽之溶劑合物中之一者。
根據申請專利範圍第1項之通式(I)化合物，其中R¹ 代表下式之基團其中# 代表連接1,2,4-三唑基環之點。
根據申請專利範圍第1項的下式之(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽：或其醫藥上可接受之鹽、其溶劑合物或其鹽之溶劑合物中之一者。
根據申請專利範圍第1項的下式之(2S)-3-[1-({5-胺磺醯基-1-[3-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1H-1,2,4-三唑-3-基}甲基)-3-(4-氯苯基)-5-側氧基-1,5-二氫-4H-1,2,4-三唑-4-基]-1,1,1-三氟丙-2-基磷酸二氫鹽：
一種用於製備根據申請專利範圍第1項之通式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽、其溶劑合物或其鹽之溶劑合物中之一者之方法，其特徵在於[A]將下式之化合物其中R¹ 具有如以申請專利範圍第1項給出之通式(I)化合物所定義之意義，在第一步驟中與磷醯氯反應及在第二步驟中水解，得到通式(I)化合物，或[B]將下式之化合物其中R¹ 具有如以申請專利範圍第1項給出之通式(I)化合物所定義之意義，在第一步驟中與二磷酸四苯甲酯反應及在第二步驟中於還原條件下移除苯甲基，得到通式(I)化合物，在適當時，視需要隨後將該通式(I)化合物藉由以相應的溶劑及/或鹼處理而轉化成其各自的醫藥上可接受之鹽、其溶劑合物或其鹽之溶劑合物。
根據申請專利範圍第1至4項中任一項所定義使用之化合物，其係用於治療及/或預防疾病。
根據申請專利範圍第1至4項中任一項所定義之化合物，其係用於治療及/或預防急性和慢性腎疾病之方法，該疾病包括糖尿病腎病變、急性和慢性心衰竭、妊娠毒血症、末梢動脈疾病(PAD)、冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)、雷諾氏(Raynaud)症候群、痛經、心腎症候群、高血容量和低血容量性低鈉血症、肝硬化、腹水、水腫和ADH分泌不足症候群(SIADH)。
一種根據申請專利範圍第1至4項中任一項所定義之化合物的用途，其係用於製造供治療及/或預防急性和慢性腎疾病之醫藥組成物，該疾病包括糖尿病腎病變、急性和慢性心衰竭、妊娠毒血症、末梢動脈疾病(PAD)、冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)、雷諾氏症候群、痛經、心腎症候群、高血容量和低血容量性低鈉血症、肝硬化、腹水、水腫和ADH分泌不足症候群(SIADH)。
一種醫藥組成物，其包含根據申請專利範圍第1至4項中任一項所定義之化合物及一或多種醫藥上可接受之賦形劑。
根據申請專利範圍第9項之醫藥組成物，其包含一或多種第一活性成分，特別為根據申請專利範圍第1至4項中任一項之通式(I)化合物，及一或多種其他的活性成分，特別為一或多種選自由下列所組成之群組的額外治療劑：利尿劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、β-受體阻斷劑、礦皮質激素受體拮抗劑、有機硝酸鹽、NO予體、可溶性鳥苷酸環化酶和正性肌收縮能劑之活化劑和刺激劑、抗發炎劑、免疫抑制劑、磷酸鹽結合劑及/或調節維生素D代謝之化合物。
根據申請專利範圍第9或10項所定義之醫藥組成物，其係用於治療及/或預防急性和慢性腎疾病，該疾病包括糖尿病腎病變、急性和慢性心衰竭、妊娠毒血症、末梢動脈疾病(PAD)、冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)、雷諾氏症候群、痛經、心腎症候群、高血容量和低血容量性低鈉血症、肝硬化、腹水、水腫和ADH分泌不足症候群(SIADH)。
一種治療及/或預防人類或其他哺乳動物的急性和慢性腎疾病之方法，該疾病包括糖尿病腎病變、急性和慢性心衰竭、妊娠毒血症、末梢動脈疾病(PAD)和冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)、雷諾氏症候群痛經、心腎症候群、高血容量和低血容量性低鈉血症、肝硬化、腹水、水腫和ADH分泌不足症候群(SIADH)，該方法包含對需要其之人類或其他哺乳動物投予治療有效量的一或多種根據申請專利範圍第1至4項中任一項所定義之化合物或根據申請專利範圍第9至10項中任一項所定義之醫藥組成物。