TW201408295A - （Ｒ）－１－（２，２－二氟苯并［d］［１，３］間二氧雜環戊烯－５－基）－Ｎ－（１－（２，３－二羥基丙基）－６－氟－２－（１－羥基－２－甲基丙－２－基）－１Ｈ－吲哚－５－基）環丙烷甲醯胺之醫藥組合物及其投藥 - Google Patents

Abstract

本發明係關於一種包含化合物1(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺及至少一種選自：填充劑、崩解劑、界面活性劑、助流劑及潤滑劑之賦形劑的醫藥組合物，該組合物適於向有需要之患者經口投與以治療CFTR介導之疾病，諸如囊性纖維化。亦揭露用於治療有需要之患者之方法，其包括投與具有化合物1之該醫藥組合物。

Description

( R )-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺之醫藥組合物及其投藥

本發明係關於包含(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物1)之醫藥組合物、用於製造此等組合物之方法、用於投與包含該化合物1之醫藥組合物之方法、以及包含該等醫藥組合物之治療方法。

CFTR為一種cAMP/ATP介導之陰離子通道，其表現於包括吸收性及分泌性上皮細胞之多種細胞類型中，在該等細胞類型中，其調控陰離子流跨越膜以及其他離子通道及蛋白質之活性。在上皮細胞中，CFTR正常起作用對於維持電解質在全身(包括呼吸及消化組織)轉運而言為關鍵的。CFTR係由編碼由跨膜域與核苷酸結合域之串聯重複組成之蛋白質的約1480個胺基酸構成，各跨膜域含有六個跨膜螺旋。兩個跨膜域係藉由具有調控通道活性及細胞遷移之多個磷酸化位點之較大極性調控(R)域加以連接。

編碼CFTR之基因已經鑒別並定序(參見Gregory,R.J.等人(1990)Nature 347：382-386；Rich,D.P.等人(1990)Nature 347：358-362； Riordan,J.R.等人(1989)Science 245：1066-1073)。此基因中之缺陷會導致CFTR中之突變，從而引起囊性纖維化(「CF」)，即最常見人類致命性遺傳疾病。在美國中，囊性纖維化大致影響每2,500名嬰兒中之1名。在美國總人口內，多達1000萬人攜帶單一缺陷性基因複本而無明顯疾病影響。相反，具有兩個CF相關基因複本之個體遭受CF之衰弱性及致命性影響，包括慢性肺病。

在患有囊性纖維化之患者中，內源性表現於呼吸上皮中之CFTR中之突變導致頂端陰離子分泌降低，從而導致離子轉運與流體轉運不平衡。所引起之陰離子轉運降低有助於增強黏液在肺中累積及增強最終會在CF患者中導致死亡之相伴微生物感染。除呼吸疾病之外，CF患者通常遭受若不治療則會導致死亡之胃腸問題及胰腺功能不全。此外，大多數患有囊性纖維化之男性為不育的且在患有囊性纖維化之女性之中，生育力降低。與兩個CF相關基因複本之嚴重影響不同，具有單一CF相關基因複本之個體展現對霍亂及對由腹瀉引起之脫水之抗性增加--或許說明CF基因在群體內之頻率相對較高。

對CF染色體之CFTR基因之序列分析已揭示多種致病性突變(Cutting,G.R.等人(1990)Nature 346：366-369；Dean,M.等人(1990)Cell 61：863：870；及Kerem,B-S.等人(1989)Science 245：1073-1080；Kerem,B-S等人(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87：8447-8451)。迄今為止，已鑒別CF基因中之超過1000種致病性突變，如藉由科學及醫學文獻所報導。最普遍突變為在CFTR胺基酸序列之位置508處之苯丙胺酸缺失，且通常稱為△F508-CFTR。此突變發生在約70%之囊性纖維化病例中且與嚴重疾病相關。其他突變包括R117H及G551D。

△F508-CFTR中之殘基508缺失阻止初生蛋白質恰當折疊。此導致突變蛋白質不能退出ER且遷移至質膜。因此，存在於膜中之通道數目遠小於在表現野生型CFTR之細胞中觀測之數目。除遷移受損之外，突變亦導致通道閘控有缺陷。總之，膜中之通道數目降低及缺陷性閘控導致陰離子跨越上皮之轉運降低，從而使離子及流體轉運有缺陷。(Quinton,P.M.(1990),FASEB J.4：2709-2727)。然而，研究已顯示膜中之降低數目之 △F508-CFTR具有功能性，儘管功能性小於野生型CFTR。(Dalemans等人(1991),Nature Lond.354：526-528；Denning等人，上文；Pasyk及Foskett(1995),J.Cell.Biochem.270：12347-50)。除△F508-CFTR之外，CFTR中之導致缺陷性遷移、合成及/或通道閘控之其他致病性突變可經上調或下調以改變陰離子分泌及減緩疾病進展及/或嚴重性。

儘管除陰離子之外，CFTR亦轉運多種分子，但明顯的是此作用(陰離子轉運)代表跨越上皮轉運離子及水之重要機制中之一個要素。其他要素包括上皮Na⁺通道、ENaC、Na⁺/2Cl^-/K⁺共轉運體、Na⁺-K⁺-ATP酶泵及底側膜K⁺通道，其負責將氯化物攝取入細胞中。

此等要素經由其在細胞內選擇性表現及定位來共同起作用以達成跨越上皮進行定向轉運。氯化物吸收藉由存在於頂膜上之ENaC及CFTR與在細胞之底側表面上表現之Na⁺-K⁺-ATP酶泵及Cl-通道的協調活性而發生。氯化物自腔側之次級主動轉運導致細胞內氯化物累積，該氯化物可接著經由Cl^-通道被動離開細胞，從而達成向量轉運。底側表面上之Na⁺/2Cl^-/K⁺共轉運體、Na⁺-K⁺-ATP酶泵及底側膜K⁺通道及腔側上之CFTR的排列協調氯化物經由腔側上之CFTR進行分泌。因為水本身可能永不經主動轉運，所以其跨越上皮之流動取決於藉由鈉及氯化物之整體流動產生之微小經上皮滲透梯度。

如上所論述，咸信△F508-CFTR中之殘基508缺失阻止初生蛋白質恰當折疊，從而導致此突變蛋白質不能退出ER且遷移至質膜。因此，不足量之成熟蛋白質存在於質膜處且上皮組織內之氯化物轉運顯著降低。實際上，已顯示藉由ER機制對ATP結合卡匣(ABC)轉運體之缺陷性內質網(ER)加工的此細胞現象不僅為CF疾病之潛伏基礎，而且為廣泛範圍之其他孤立及遺傳疾病之潛伏基礎。ER機制可發生功能障礙之兩種方式為喪失與導致降解之ER蛋白質排出作用之偶聯，或ER累積此等缺陷性/錯誤折疊蛋白質[Aridor M，等人，Nature Med.,5(7)，第745-751頁(1999)；Shastry,B.S.，等人，Neurochem.International,43，第1-7頁(2003)；Rutishauser,J.，等人，Swiss Med Wkly,132，第211-222頁(2002)；Morello,JP等人，TIPS,21,第466-469頁(2000)；Bross P.，等人，Human Mut.,14，第186-198頁(1999)]。

(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺作為CFTR活性之調節劑且因此作為適用於CFTR介導之疾病(諸如囊性纖維化)之治療劑揭露於國際PCT公開案WO 2010053471及WO 2010054138(該等公開案以全文引用的方式併入本文中)中。(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺之形式A及非晶形式揭露於美國臨時專利申請案第61/317,376號(2010年3月25日申請)、第61/319,953號(2010年4月1日申請)、第61/321,561號(2010年4月7日申請)及第61/321,636號(2010年4月7日申請)中，該等申請案全部以全文引用的方式併入本文中。然而，仍然需要包含易於製備且適用作治療劑之化合物1之醫藥組合物。

本發明係關於包含具有以下結構之(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物1)之醫藥組合物、醫藥製劑及固體劑型：

在一態樣中，本發明之特徵為用於經口投藥之錠劑，其包含：a)化合物1；b)填充劑；c)崩解劑；d)潤滑劑；及e)助流劑。

在一些實施例中，化合物1係呈實質上非晶形式(化合物1非晶形式)。在其他實施例中，化合物1係呈實質上結晶固體形式。在一實施例中，化合物1係呈實質上結晶形式A(化合物1形式A)。在其他實施例中，化合物1係呈固體(亦即非晶及結晶)之混合物形式。

在一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以在約1mg至約250mg之範圍內之量存在於錠劑中。在一實施例中，化合物1或化合 物1非晶形式係以在約10mg至約250mg之範圍內之量存在於錠劑中。在一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以在約25mg至約250mg之範圍內之量存在於錠劑中。在一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約50mg至約200mg之量存在於錠劑中。在一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約10 mg之量存在於錠劑中。在一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約50mg之量存在於錠劑中。在一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約100mg之量存在於錠劑中。

在一實施例中，以錠劑之重量計，化合物1或化合物1非晶形式在錠劑中之量在約1wt%至約80wt%之範圍內。在一實施例中，以錠劑之重量計，化合物1或化合物1非晶形式在錠劑中之量在約4wt%至約50wt%之範圍內。在一實施例中，以錠劑之重量計，化合物1或化合物1非晶形式在錠劑中之量在約10wt%至約50wt%之範圍內。在一實施例中，以錠劑之重量計，化合物1或化合物1非晶形式在錠劑中之量在約20wt%至約30wt%之範圍內。在一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式在錠劑中之量為錠劑之約5wt%。在一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式在錠劑中之量為錠劑之約25wt%。

在一實施例中，填充劑係選自乳糖單水合物、甘露糖醇、山梨糖醇、纖維素、磷酸鈣、澱粉、糖、纖維素、改質纖維素、羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素羥甲基纖維素、羥丙基纖維素、乙酸纖維素、微晶纖維素、磷酸氫鈣、蔗糖、乳糖、玉米澱粉、馬鈴薯澱粉或其任何組合。在一實施例中，填充劑為微晶纖維素(MCC)及乳糖單水合物且以錠劑之重量計，以在約10wt%至約90wt%之範圍內之量存在於錠劑中。在一實施例中，填充劑為微晶纖維素(MCC)及乳糖單水合物且以錠劑之重量計，以在約40wt%至約90wt%之範圍內之量存在於錠劑中。

在一實施例中，崩解劑係選自瓊脂、海藻膠、碳酸鈣、羧甲基纖維素、纖維素、羥丙基纖維素、低取代羥丙基纖維素、黏土、交聯羧甲基纖維素鈉、交聯聚維酮(crospovidone)、膠狀物、矽酸鎂鋁、甲基纖維素、波拉克林鉀(polacrilin potassium)、海藻酸鈉、澱粉乙醇酸鈉、玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、木薯澱粉或其任何組合。在一實施例中，崩解劑為交聯羧甲 基纖維素鈉且以錠劑之重量計，以6wt%或小於6wt%之濃度存在於錠劑中。

在一實施例中，潤滑劑係選自硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂酸鈉、硬脂酸、硬脂酸鋁、白胺酸、甘油二十二酸酯、氫化植物油、硬脂醯反丁烯二酸鈉或其任何組合。在一實施例中，潤滑劑為硬脂酸鎂且以錠劑之重量計，具有小於2wt%之濃度。

在一實施例中，助流劑係選自膠態二氧化矽、滑石、玉米澱粉或其組合。在一實施例中，助流劑為膠態二氧化矽且以錠劑之重量計，具有3wt%或小於3wt%之濃度。

在一實施例中，錠劑進一步包含著色劑。

在一態樣中，本發明之特徵為一種包含複數個顆粒之錠劑，組合物包含：a)以組合物之重量計，量在約10wt%至約50wt%之範圍內之化合物1非晶形式；b)以組合物之重量計，量在約10wt%至約90wt%之範圍內之填充劑；c)以組合物之重量計，量在約1wt%至約5wt%之範圍內之崩解劑；d)以組合物之重量計，量在約0.3wt%至約3wt%之範圍內之潤滑劑；及e)以組合物之重量計，量在約0.3wt%至約3wt%之範圍內之助流劑。

在一實施例中，化合物1為化合物1非晶形式且係呈噴霧乾燥分散體形式。在一實施例中，噴霧乾燥分散體包含聚合物。在一實施例中，聚合物為羥丙基甲基纖維素(HPMC)。在一實施例中，聚合物為乙酸丁二酸羥丙基甲基纖維素(HPMCAS)。

在一實施例中，聚合物係以20重量%至70重量%之量存在。在一實施例中，聚合物係以30重量%至60重量%之量存在。在一實施例中，聚合物係以約49.5重量%之量存在。

在一實施例中，錠劑進一步包含界面活性劑。在一實施例中，界面活性劑為月桂基硫酸鈉。在一實施例中，界面活性劑係以0.1重量%至5重量%之量存在。在一實施例中，界面活性劑係以約0.5重量%之量存在。

在另一態樣中，本發明之特徵為一種具有表1中所述之配方之錠劑。

在另一態樣中，本發明之特徵為一種具有表2中所述之配方之錠劑。

在另一態樣中，本發明之特徵為一種具有表3中所述之配方之錠劑。

在另一態樣中，本發明之特徵為一種具有表4中所述之配方之錠劑。

在另一態樣中，本發明之特徵為一種具有表5中所述之配方之錠劑。

在另一態樣中，本發明提供一種呈錠劑形式之醫藥組合物，該錠劑包含化合物1及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑，例如填充劑、崩解劑、界面活性劑、助流劑及潤滑劑及其任何組合，其中該錠劑在約30分鐘內溶解至少約50%。在另一實施例中，溶解速率為在約30分鐘內至少約75%。在另一實施例中，溶解速率為在約30分鐘內至少約90%。

在另一態樣中，本發明提供一種呈包含粉末摻合物或顆粒劑之錠劑形式之醫藥組合物，該錠劑包含化合物1及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑，例如填充劑、崩解劑、界面活性劑、助流劑及潤滑劑，其中該錠劑之硬度為至少約5kP(kP=公斤力；1kP=約9.8N)。在另一實施例中，在400轉之後，錠劑之目標易碎度小於1.0%。

在另一態樣中，本發明提供一種進一步包含另一治療劑之如本文所述之錠劑。在一實施例中，另一治療劑為黏液分解劑、支氣管擴張劑、抗生素、抗感染劑、消炎劑、除化合物1以外之CFTR調節劑或營養劑。在一些實施例中，the additional therapeutic agent is N-(5-羥基-2,4-二第三丁基-苯基)-4-側氧基-1H-喹啉-3-甲醯胺。

在一態樣中，本發明之特徵為一種投與錠劑之方法，其包含每天至少一次向患者經口投與包含以下之錠劑：a)約25至200mg化合物1非晶形式；b)填充劑；c)崩解劑；d)界面活性劑；e)助流劑；及f)潤滑劑。在一實施例中，錠劑包含約2.5mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約5mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約10mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約25mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約50mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約100mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約150mg化 合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約200mg化合物1非晶形式。

在一態樣中，本發明之特徵為一種用於投與錠劑之方法，其包含每天兩次向患者經口投與包含以下之錠劑：a)約2.5至200mg化合物1非晶形式；b)填充劑；c)崩解劑；d)界面活性劑；e)助流劑；及f)潤滑劑。在一實施例中，錠劑包含約2.5mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約5mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約10mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約25mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約50mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約100mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約150mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約200mg化合物1非晶形式。

在一態樣中，本發明之特徵為一種投與錠劑之方法，其包含每12小時一次向患者經口投與包含以下之錠劑：a)約2.5至200mg化合物1非晶形式；b)填充劑；c)崩解劑；d)界面活性劑；e)助流劑；及f)潤滑劑。在一實施例中，錠劑包含約2.5mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約5mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約10mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約25mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約50mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約100mg化合物1非晶形式。在一實施例中，錠劑包含約200mg化合物1非晶形式。

在一態樣中，本發明之特徵為一種治療個體之疾病或減輕個體之疾病之嚴重性的方法，其包含向該個體投與本發明之錠劑，其中該疾病係選自囊性纖維化、哮喘、抽煙誘發之COPD、慢性支氣管炎、鼻竇炎、便秘、胰腺炎、胰腺功能不全、由先天性雙側不存在輸精管(CBAVD)引起之男性不育症、輕度肺病、特發性胰腺炎、過敏性支氣管肺麴菌病(ABPA)、肝病、遺傳性氣腫、遺傳性血色素沈著症、凝血-纖維蛋白溶解缺乏症、蛋白質C缺乏症、1型遺傳性血管性水腫、脂質加工缺乏症、家族性高膽固醇血症、1型乳糜微粒血症、無β脂蛋白血症、溶酶體儲存疾病、I細胞疾病/假胡爾勒(pseudo-Hurler)病、黏多醣貯積症(mucopolysaccharidoses)、桑得霍夫/泰-薩克斯病(Sandhof/Tay-Sachs)、II型克里格勒-納賈爾病 (Crigler-Najjar type II)、多內分泌病變/高胰島素血症、糖尿病、拉倫侏儒症(Laron dwarfism)、髓過氧化酶缺乏症、原發性甲狀旁腺功能減退、黑素瘤、1型醣解CDG、先天性甲狀腺機能亢進、骨發生不全、遺傳性低纖維素原血症、ACT缺乏症、尿崩症(DI)、神經生長性DI、腎因性DI、恰克-馬利杜斯症候群(Charcot-Marie Tooth syndrome)、佩利措伊斯-梅茨巴赫病(Perlizaeus-Merzbacher disease)、神經退化性疾病、阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)、帕金森氏病(Parkinson's disease)、肌萎縮性側索硬化、進行性核上麻痺、皮克氏病(Pick's disease)、若干聚麩醯胺酸神經病症、亨廷頓氏病(Huntington's)、I型脊髓小腦性共濟失調、脊髓及延髓肌肉萎縮、齒狀核紅核蒼白球丘腦下部核萎縮(dentatorubal pallidoluysian)、肌強直性營養不良、海綿狀腦病變、遺傳性克羅伊茨費爾特-雅各布病(hereditary Creutzfeldt-Jakob disease)(歸因於普里昂蛋白(prion)加工缺陷)、法布里病(Fabry disease)、斯脫司勒-史茵克症候群(Straussler-Scheinker syndrome)、COPD、乾眼病、休格連氏病(Sjogren's disease)、骨質疏鬆、骨量減少、高哈姆氏症候群(Gorham's Syndrome)、氯化物通道病變、先天性肌強直(湯姆遜(Thomson)及貝克爾(Becker)形式)、III型巴特氏症候群(Bartter's syndrome type III)、登特氏病(Dent's disease)、過度驚嚇反射症(hyperekplexia)、癲癇症、過度驚嚇反射症、溶酶體儲存疾病、安吉爾曼症候群(Angelman syndrome)、原發性纖毛運動障礙(PCD)、遺傳性纖毛結構及/或功能病症、伴有內臟易側之PCD(亦稱為卡塔格內(Kartagener)症候群)、無內臟易側之PCD或纖毛發育不全。

在一實施例中，疾病為囊性纖維化、氣腫、COPD或骨質疏鬆。在一實施例中，疾病為囊性纖維化。

在一實施例中，個體具有含△F508突變之囊性纖維化跨膜受體(CFTR)。在一實施例中，個體具有含R117H突變之囊性纖維化跨膜受體(CFTR)。在一實施例中，個體具有含G551D突變之囊性纖維化跨膜受體(CFTR)。

在一實施例中，方法包含投與另一治療劑。在一實施例中，另一治療劑為黏液分解劑、支氣管擴張劑、抗生素、抗感染劑、消炎劑、 除化合物1以外之CFTR調節劑或營養劑。在一些實施例中，另一治療劑為N-(5-羥基-2,4-二第三丁基-苯基)-4-側氧基-1H-喹啉-3-甲醯胺。

在另一態樣中，本發明係有關一種治療就F580del-CFTR突變而言為同型接合之患者之囊性纖維化或減輕就F580del-CFTR突變而言為同型接合之患者之囊性纖維化之嚴重性的方法，其包含投與包含以下之用於經口投藥之錠劑：a. 5至250mg (R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物1)；b. 填充劑；c. 崩解劑；d. 潤滑劑；及e 助流劑，隨後以包含化合物2及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物形式共投與100至300mg N-(5-羥基-2,4-二第三丁基-苯基)-4-側氧基-1H-喹啉-3-甲醯胺(化合物2)。

在另一態樣中，本發明係有關一種用於治療患者之囊性纖維化之方法，其包含共投與：a)包含5至250mg (R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物1)及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物；及b)包含100至300mg N-(5-羥基-2,4-二第三丁基-苯基)-4-側氧基-1H-喹啉-3-甲醯胺(化合物2)及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物；其中該患者具有導致在囊性纖維化跨膜傳導調控子胺基酸序列之位置508處缺失苯丙胺酸之缺陷性基因。

在另一實施例中，部分a)中之醫藥學上可接受之載劑包含：i)填充劑；ii)崩解劑；iii)潤滑劑；及iv)助流劑。

在另一實施例中，5至250mg化合物1係在100至300mg化合物2之前投與。在另一實施例中，5至250mg化合物1係與100至300 mg化合物2同時投與。在另一實施例中，5至250mg化合物1係在100至300mg化合物2之後投與。

在另一實施例中，化合物1係呈化合物1非晶形式。

在另一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約10mg之量存在於錠劑中。在另一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約30mg之量存在於錠劑中。在另一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約100mg之量存在於錠劑中。

在另一實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在另一實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在另一實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在另一實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在另一實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在另一實施例中，化合物1係一天投與一次。在另一實施例中，投與150mg化合物2。在另一實施例中，投與250mg化合物2。在另一實施例中，化合物1係每12小時加以投與。在另一實施例中，化合物2係每12小時加以投與。

在另一實施例中，方法包含投與另一治療劑。在另一實施例中，另一治療劑為黏液分解劑、支氣管擴張劑、抗生素、抗感染劑、消炎劑、除化合物2以外之CFTR調節劑或營養劑。在另一實施例中，另一治療劑為除化合物2以外之CFTR調節劑。

在另一實施例中，就缺陷性基因而言，患者為同型接合。

圖1為藉由噴霧乾燥方法製備之化合物1非晶形式之X射線粉末繞射圖樣。

圖2為藉由噴霧乾燥方法製備之化合物1非晶形式之調節示差掃描熱析(MDSC)跡線。

圖3為化合物1非晶形式之固態¹³C NMR光譜(15.0kHz旋轉)。

圖4為化合物1非晶形式之固態¹⁹F NMR光譜(12.5kHz旋轉)。

圖5為藉由旋轉蒸發方法製備之化合物1非晶形式之X射線粉末繞射圖樣。

圖6為藉由旋轉蒸發方法製備之化合物1非晶形式之調節示差掃描熱析(MDSC)跡線。

圖7為藉由漿化技術(2週)用DCM作為溶劑製備之化合物1形式A之實際X射線粉末繞射圖樣。

圖8為由化合物1形式A之單晶體計算之X射線粉末繞射圖樣。

圖9為化合物1形式A之示差掃描熱析(DSC)跡線。

圖10為藉由自乙腈之快速蒸發方法製備之化合物1形式A的實際X射線粉末繞射圖樣。

圖11為藉由反溶劑方法，使用EtOAc及庚烷製備之化合物1形式A的實際X射線粉末繞射圖樣。

圖12為化合物1形式A之基於單晶體X射線分析之構形圖。

圖13為化合物1形式A之固態¹³C NMR光譜(15.0kHz旋轉)。

圖14為化合物1形式A之固態¹⁹F NMR光譜(12.5kHz旋轉)。

定義

如本文所用，「CFTR」代表囊性纖維化跨膜傳導調控子。

如本文所用，「△F508突變」或「F508-del突變」為CFTR蛋白質內之特定突變。該突變為缺失構成在位置508處之胺基酸苯丙胺酸之密碼子的三個核苷酸，從而使CFTR蛋白質缺乏此苯丙胺酸殘基。

如本文所用，就例如△F508之特定突變而言為「同型接合」之患者在各對偶基因上具有相同突變。

如本文所用，就例如△F508之特定突變而言為「異型接合」之患者在一個對偶基因上具有此突變，而在另一對偶基因上具有不同突變。

如本文所用，術語「CFTR校正劑」係指使到達細胞表面之功能性CFTR蛋白質之量增加，從而導致離子轉運增強之化合物。

如本文所用，術語「CFTR增效劑」係指使位於細胞表面處之CFTR蛋白質之通道活性增加，從而導致離子轉運增強之化合物。

如本文所用，術語「活性醫藥成分」或「API」係指生物活 性化合物。

如本文所用，術語「非晶」係指由分子之無序排列組成且不具有可區分晶格之固體形式。

如本文所用，「結晶」係指結構單元係以固定幾何樣式或晶格排列，以使結晶固體具有剛性長程序之化合物或組合物。構成晶體結構之結構單元可為原子、分子或離子。結晶固體顯示確定熔點。

如本文所用之術語「調節」意謂使例如活性增加或降低某一可量測量。

如本文所用之術語「化學穩定」意謂化合物1之固體形式在經受規定條件(例如40℃/75%相對濕度)持續某一特定時期(例如1天、2天、3天、1週、2週或2週以上)時不分解成一或多種不同化合物。在一些實施例中，在規定條件下，小於25%的化合物1之固體形式分解，在一些實施例中，在規定條件下，小於約20%、小於約15%、小於約10%、小於約5%、小於約3%、小於約1%、小於約0.5%的化合物1之形式分解。在一些實施例中，無可偵測量的化合物1之固體形式分解。

如本文所用之術語「物理穩定」意謂化合物1之固體形式在經受特定條件(例如40℃/75%相對濕度)持續某一特定時期(例如1天、2天、3天、1週、2週或2週以上)時不變成化合物1之一或多種不同實物形式(例如如藉由XRPD、DSC等量測之不同固體形式)。在一些實施例中，當經受規定條件時，小於25%的化合物1之固體形式變成一或多種不同實物形式。在一些實施例中，當經受規定條件時，小於約20%、小於約15%、小於約10%、小於約5%、小於約3%、小於約1%、小於約0.5%的化合物1之固體形式變成化合物1之一或多種不同實物形式。在一些實施例中，無可偵測量的化合物1之固體形式變成化合物1之一或多種物理不同固體形式。

當提及化合物1之指定固體形式(例如本文所述之非晶或結晶形式)時，術語「實質上不含」(如片語「實質上不含形式X」中)意謂存在小於20%(以重量計)之指定形式或共形式(例如化合物1之結晶或非晶形式)，更佳存在小於10%(以重量計)之指定形式，更佳存在小於5%(以重量計)之指定形式，且最佳存在小於1%(以重量計)之指定形式。

如本文所用，「分散體」係指一種分散系統，其中作為分散相之一種物質以個別單元形式遍及第二物質(連續相或媒劑)加以分佈。分散相之尺寸可顯著變化(例如膠態粒子在尺寸方面具有奈米大小至數微米)。一般而言，分散相可為固體、液體或氣體。在固體分散體之情況下，分散相與連續相均為固體。在醫藥應用中，固體分散體可包括於非晶聚合物(連續相)中之結晶藥物(分散相)，或者，包括於非晶聚合物(連續相)中之非晶藥物(分散相)。在一些實施例中，非晶固體分散體包括構成分散相之聚合物及構成連續相之藥物。在一些實施例中，分散體包括非晶化合物1或實質上非晶化合物1。

術語「固體非晶分散體」通常係指具有兩種或兩種以上組分，通常為藥物及聚合物，但有可能含有諸如界面活性劑或其他醫藥賦形劑之其他組分的固體分散體，其中化合物1為非晶或實質上非晶(例如實質上不含結晶化合物1)，且非晶藥物之物理穩定性及/或溶解及/或溶解性係由其他組分來增強。

縮寫「MTBE」及「DCM」分別代表甲基第三丁基醚及二氯甲烷。

縮寫「XRPD」代表X射線粉末繞射。

縮寫「DSC」代表示差掃描熱析法。

縮寫「TGA」代表熱重分析。

如本文所用，術語「活性醫藥成分」或「API」係指生物活性化合物。示範性API包括(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物1)。

術語「固體形式」及相關術語在本文中用於代表(R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物1)時，係指包含不主要呈液態或氣態之化合物1之固體形式，例如非晶粉末或晶體及其類似物。

如本文所用，術語「實質上非晶」係指固體物質在其分子之位置中具有少許或不具有長程序。舉例而言，實質上非晶物質具有小於約 15%結晶度(例如小於約10%結晶度或小於約5%結晶度)。亦應注意術語『實質上非晶』包括係指物質不具有(0%)結晶度之描述詞『非晶』。

如本文所用，術語「實質上結晶」(如片語實質上結晶化合物1形式A中)係指固體物質在其分子之位置中主要具有長程序。舉例而言，實質上結晶物質具有大於約85%結晶度(例如大於約90%結晶度或大於約95%結晶度)。亦應注意術語『實質上結晶』包括係指物質具有100%結晶度之描述詞『結晶』。

如本文所用，術語「組合物」通常係指具有兩種或兩種以上組分，通常為一或多種藥物(例如一種藥物(例如化合物1非晶形式))及一或多種醫藥賦形劑之組合物。

如本文所用，術語「固體劑型」通常係指醫藥組合物，其在以經口投藥模式使用時包括膠囊、錠劑、丸劑、散劑及顆粒劑。在此等固體劑型中，活性化合物係與至少一種惰性醫藥學上可接受之賦形劑或載劑混合。

如本文所用，「賦形劑」包括醫藥組合物中之功能性及非功能性成分。

如本文所用，「崩解劑」為使醫藥組合物水合且有助於錠劑分散之賦形劑。如本文所用，「填充劑」為向醫藥組合物添加膨松度及更佳產品性質，包括有助於精確計量及處理，從而使組合物實用於生產且便於使用之賦形劑。

如本文所用，「界面活性劑」為賦予醫藥組合物以增強溶解性及/或可濕性之賦形劑。

如本文所用，「黏合劑」為賦予醫藥組合物以增強黏著力或拉伸強度(例如硬度)之賦形劑。

如本文所用，「助流劑」為賦予醫藥組合物以增強流動性質之賦形劑。

如本文所用，「著色劑」為賦予醫藥組合物以所要顏色之賦形劑。著色劑之實例包括市售顏料，諸如FD&C Blue # 1鋁色澱，FD&C Blue #2，其他FD&C Blue顏料、二氧化鈦、氧化鐵及/或其組合。在一實施例中， 由本發明提供之醫藥組合物為紫色。

如本文所用，「潤滑劑」為添加至經壓製成錠劑之醫藥組合物中之賦形劑。潤滑劑有助於將顆粒壓成錠劑及自模壓機擠出醫藥組合物錠劑。

如本文所用，「立方釐米」與「cc」可互換使用來表示體積單位。注意1cc=1mL。

如本文所用，「千克力」與「kP」可互換使用且係指力量度量，其中1kP=約9.8牛頓(Newton)。

如本文所用，「易碎度」係指錠劑儘管受到外部壓力卻保持完整且保留其形式之性質。易碎度可使用以方程式1提供之數學表達式來定量： 其中W ₀ 為錠劑之原始重量且W _f 為錠劑在穿過易碎度測定儀之後的最終重量。使用使實驗錠劑翻轉100或400轉之標準USP測試裝置量測易碎度。本發明之一些錠劑之易碎度小於5.0%。在另一實施例中，易碎度小於2.0%。在另一實施例中，在400轉之後，目標易碎度小於1.0%。

如本文所用，「平均粒徑」為如使用諸如雷射光散射、影像分析或篩分分析之技術量測之平均粒子直徑。在一實施例中，用於製備由本發明提供之醫藥組合物之顆粒之平均粒徑小於1.0mm。

如本文所用，「堆密度」為物質之粒子之質量除以粒子佔據之總體積。總體積包括粒子體積、粒子內空隙體積及內部孔體積。堆密度不為物質之內在性質；其可視如何加工物質而變化。在一實施例中，用於製備由本發明提供之醫藥組合物之顆粒之堆密度為約0.5-0.7g/cc。

本發明之藥物化合物之有效量或「治療有效量」可根據諸如個體之疾病病況、年齡及重量、以及本發明化合物在個體中引發所要反應之能力的因素而變化。可調整劑量方案以提供最佳治療反應。有效量亦為治療有益效應勝過本發明化合物之任何毒性或有害效應(例如副作用)所用之量。

如本文所用，冠詞「一」或「該」未必限於單一物品。舉例而言，「一填充劑」可係指一或多種填充劑，例如微晶纖維素與乳糖單水合物一起。

如本文所用，且除非另外規定，否則術語化合物之「治療有效量」及「有效量」意謂在治療或管理疾病或病症時足以提供治療益處，或使與該疾病或病症相關之一或多種症狀延遲或最小化的量。化合物之「治療有效量」及「有效量」意謂單獨或與一或多種其他藥劑組合之治療劑之量，其在治療或管理疾病或病症時提供治療益處。術語「治療有效量」及「有效量」可涵蓋改良總體療法、減輕或避免疾病或病症之症狀或病因或增強另一治療劑之治療功效的量。

如片語「實質上純淨化合物1非晶形式」中使用之「實質上純淨」意謂純度大於約90%。在另一實施例中，實質上純淨係指純度大於約95%。在另一實施例中，實質上純淨係指純度大於約98%。在另一實施例中，實質上純淨係指純度大於約99%。

如本文所用之「共投與」或「共投藥」係指在化合物1或其醫藥組合物之前、與之同時或在其之後投與一或多種其他治療劑。

關於化合物1(亦即化合物1非晶形式或化合物1形式A)，術語「約(about/approximately)」在與組合物或某一劑型之成分之劑量、量或重量百分比關聯使用時意謂由一般技藝人士所認可之提供與自規定劑量、量或重量百分比獲得之藥理學效應等效之藥理學效應的劑量、量或重量百分比。詳言之，術語「約」意謂如由一般技藝人士測定之特定值之可接受誤差，其部分取決於如何量測或測定該值。在某些實施例中，術語「約」意謂在1、2、3或4個標準偏差內。在某些實施例中，術語「約」意謂在既定值或範圍之30%、25%、20%、15%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.5%、0.1%或0.05%內。

除非另外陳述，否則本文所述之結構亦意欲包括結構之所有異構(例如鏡像異構、非鏡像異構及幾何(或構形))形式；例如各不對稱中心之R及S組態、(Z)及(E)雙鍵異構物、以及(Z)及(E)構形異構物。因此，本發明化合物之單一立體化學異構物以及鏡像異構、非鏡像異構及幾何(或構 形)混合物係在本發明之範疇內。化合物1之所有互變異構形式皆包括在本文中。舉例而言，化合物1可以其兩者均包括在本文中之互變異構物形式存在：

另外，除非另外陳述，否則本文所述之結構亦意欲包括僅因存在一或多個同位素增濃原子而不同之化合物。舉例而言，其中一或多個氫原子經氘或氚置換或一或多個碳原子經¹³C或¹⁴C增濃碳置換之化合物1係在本發明之範疇內。此等化合物例如適用作分析工具、生物分析中之探針或具有改良治療概況之化合物。

醫藥組合物

本發明提供包含化合物1非晶形式或化合物1形式A之醫藥組合物、醫藥調配物及固體劑型，諸如錠劑。在此態樣之一些實施例中，存在於醫藥組合物中之化合物1之量為2.5mg、5mg、10mg、25mg、50mg、75mg、100mg、125mg、150mg、200mg或250mg。在此態樣之一些實施例中，存在於醫藥組合物中之化合物1之重量/重量相對百分比為10%至50%。在此等及其他實施例中，化合物1係以實質上純淨化合物1非晶形式存在。「實質上純淨」意謂純度大於90%；較佳純度大於95%；更佳純度大於99.5%(亦即不與化合物1之結晶形式混合)。

因此，在一態樣中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含：a. 化合物1非晶形式；b. 填充劑；c. 崩解劑；d. 潤滑劑；及e. 助流劑。

在此態樣之一實施例中，醫藥組合物包含2.5mg化合物1非晶形式。在此態樣之一實施例中，醫藥組合物包含5mg化合物1非晶形 式。在此態樣之一實施例中，醫藥組合物包含10mg化合物1非晶形式。在此態樣之一實施例中，醫藥組合物包含25mg化合物1非晶形式。在此態樣之另一實施例中，醫藥組合物包含50mg化合物1非晶形式。在此態樣之另一實施例中，醫藥組合物包含100mg化合物1非晶形式。在此態樣之另一實施例中，醫藥組合物包含125mg化合物1非晶形式。在此態樣之另一實施例中，醫藥組合物包含150mg化合物1非晶形式。在此態樣之另一實施例中，醫藥組合物包含200mg化合物1非晶形式。在此態樣之另一實施例中，醫藥組合物包含250mg化合物1非晶形式。

在一些實施例中，醫藥組合物包含化合物1非晶形式，其中以組合物之重量計，化合物1非晶形式係以至少4wt%(例如至少5wt%、至少10wt%、至少20wt%、至少30wt%、至少40wt%、至少50wt%或至少60wt%)之量存在。

在一些實施例中，醫藥組合物包含化合物1非晶形式、填充劑、崩解劑、助流劑及潤滑劑。在此實施例中，以組合物之重量計，組合物包含約4wt%至約50wt%(例如約10-45wt%)之化合物1非晶形式，且更通常，以組合物之重量計，組合物包含20wt%至約40wt%(例如約25-30wt%)之化合物1非晶形式。

在一些實施例中，醫藥組合物包含化合物1非晶形式、填充劑、崩解劑、助流劑及潤滑劑。在此實施例中，以組合物之重量計，組合物包含約4wt%至約50wt%(例如約10-45wt%)之化合物1非晶形式，且更通常，以組合物之重量計，組合物包含20wt%至約40wt%(例如約25-30wt%)之化合物1非晶形式。

化合物1非晶形式在組合物中之濃度取決於若干因素，諸如為提供化合物1非晶形式之所要量所需之醫藥組合物之量及醫藥組合物之所要溶解概況。

在另一實施例中，醫藥組合物包含化合物1，其中呈其固體形式之化合物1之平均粒徑為0.1微米至10微米，該平均粒徑係藉由光散射(例如使用可自Malvern Instruments(England)獲得之Malvern Mastersizer)所量測。在另一實施例中，化合物1之粒度為1微米至5微米。在另一實 施例中，化合物1之粒度D50為2.0微米。

如所指示，除化合物1非晶形式之外，在本發明之一些實施例中，作為經口調配物之醫藥組合物亦包含一或多種賦形劑，諸如填充劑、崩解劑、界面活性劑、助流劑、潤滑劑、著色劑或芳香劑及其任何組合。

適於本發明之填充劑可與醫藥組合物之成分相容，亦即其不實質上降低醫藥組合物之溶解性、硬度、化學穩定性、物理穩定性或生物活性。示範性填充劑包括：糖(例如粉糖、可壓製糖、葡萄糖結合劑、糊精、右旋糖、乳糖、乳糖單水合物、甘露糖醇、山梨糖醇、纖維素及改質纖維素(例如粉末狀纖維素))、滑石、磷酸鈣、澱粉、纖維素、改質纖維素(例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素羥甲基纖維素、羥丙基纖維素)、乙酸纖維素、微晶纖維素、磷酸鈣、磷酸氫鈣、澱粉(例如玉米澱粉、馬鈴薯澱粉)、糖(例如山梨糖醇)乳糖、蔗糖或其類似物或其任何組合。

因此，在一實施例中，以組合物之重量計，醫藥組合物以至少5wt%(例如至少約20wt%、至少約30wt%或至少約40wt%)之量包含至少一種填充劑。舉例而言，以組合物之重量計，醫藥組合物包含約10wt%至約90wt%(例如約30wt%至約90wt%、約40wt%至約85wt%或約45wt%至約80wt%)之填充劑。在另一實例中，以組合物之重量計，醫藥組合物包含至少約40wt%(例如至少20wt%或至少20wt%)之微晶纖維素(例如MCC Avicel PH102)及乳糖單水合物。

適於本發明之崩解劑增強醫藥組合物之分散且可與醫藥組合物之成分相容，亦即其不實質上降低醫藥組合物之化學穩定性、物理穩定性、硬度或生物活性。示範性崩解劑包括交聯羧甲基纖維素鈉、澱粉乙醇酸鈉或其組合。

因此，在一實施例中，以組合物之重量計，醫藥組合物以約10wt%或小於10wt%(例如約7wt%或小於7wt%、約6wt%或小於6wt%或約5wt%或小於5wt%)之量包含崩解劑。舉例而言，以組合物之重量計，醫藥組合物包含約1wt%至約10wt%(例如約1.5wt%至約7.5wt%或約2.5wt%至約6wt%)之崩解劑。在一些實例中，以組合物之重量計，醫藥組合物包含約0.1%至約10wt%(例如約0.5wt%至約7.5wt%或約1.5wt%至約6 wt%)之崩解劑。在其他實例中，以組合物之重量計，醫藥組合物包含約0.5%至約10wt%(例如約1.5wt%至約7.5wt%或約2.5wt%至約6wt%)之崩解劑。

適於本發明之界面活性劑增強醫藥組合物之可濕性且可與醫藥組合物之成分相容，亦即其不實質上降低醫藥組合物之化學穩定性、物理穩定性、硬度或生物活性。示範性界面活性劑包括月桂基硫酸鈉(SLS)、硬脂醯反丁烯二酸鈉(SSF)、聚氧化乙烯20脫水山梨醇單油酸酯(例如Tween^TM)、其任何組合或其類似物。

因此，在一實施例中，以組合物之重量計，醫藥組合物以約10wt%或小於10wt%(例如約5wt%或小於5wt%、約2wt%或小於2wt%、約1wt%或小於1wt%、約0.8wt%或小於0.8wt%或約0.6wt%或小於0.6wt%)之量包含界面活性劑。舉例而言，以組合物之重量計，醫藥組合物包括約10wt%至約0.1wt%(例如約5wt%至約0.2wt%或約2wt%至約0.3wt%)之界面活性劑。在另一實例中，以組合物之重量計，醫藥組合物包含約10wt%至約0.1wt%(例如約5wt%至約0.2wt%或約2wt%至約0.3wt%)之月桂基硫酸鈉。

適於本發明之助流劑增強醫藥組合物之流動性質且可與醫藥組合物之成分相容，亦即其不實質上降低醫藥組合物之溶解性、硬度、化學穩定性、物理穩定性或生物活性。示範性助流劑包括膠態二氧化矽、滑石或其組合。

因此，在一實施例中，以組合物之重量計，醫藥組合物以2wt%或小於2wt%(例如1.75wt%、1.25wt%或小於1.25wt%或1.00wt%或小於1.00wt%)之量包含助流劑。舉例而言，以組合物之重量計，醫藥組合物包含約2wt%至約0.05wt%(例如約1.5wt%至約0.07wt%或約1.0wt%至約0.09wt%)之助流劑。在另一實例中，以組合物之重量計，醫藥組合物包含2wt%或小於2wt%(例如1.75wt%、1.25wt%或小於1.25wt%或1.00wt%或小於1.00wt%)之膠態二氧化矽。在另一實例中，以組合物之重量計，醫藥組合物包含約2wt%至約0.05wt%(例如約1.5wt%至約0.07wt%或約1.0wt%至約0.09wt%)之膠態二氧化矽。

在一些實施例中，醫藥組合物可包括可包含可防止粒化物珠粒混合物黏著於表面(例如混合缽、壓製模具及/或衝壓機之表面)之潤滑劑的經口固體醫藥劑型。潤滑劑亦可降低粒化物內之粒子間摩擦且改良壓製醫藥組合物之壓製及自模壓機之擠出。潤滑劑亦可與醫藥組合物之成分相容，亦即其不實質上降低醫藥組合物之溶解性、硬度或生物活性。示範性潤滑劑包括硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂酸鈉、硬脂酸、硬脂酸鋁、白胺酸、甘油二十二酸酯、氫化植物油或其任何組合。在一實施例中，以組合物之重量計，醫藥組合物以5wt%或小於5wt%(例如4.75wt%、4.0wt%或小於4.0wt%或3.00wt%或小於3.00wt%或2.0wt%或小於2.0wt%)之量包含潤滑劑。舉例而言，以組合物之重量計，醫藥組合物包含約5wt%至約0.10wt%(例如約4.5wt%至約0.5wt%或約3wt%至約0.5wt%)之潤滑劑。在另一實例中，以組合物之重量計，醫藥組合物包含5wt%或小於5wt%(例如4.0wt%或小於4.0wt%、3.0wt%或小於3.0wt%或2.0wt%或小於2.0wt%或1.0wt%或小於1.0wt%)之硬脂酸鎂。在另一實例中，以組合物之重量計，醫藥組合物包含約5wt%至約0.10wt%(例如約4.5wt%至約0.15wt%或約3.0wt%至約0.50wt%)之硬脂酸鎂。

本發明之醫藥組合物可視情況包含一或多種著色劑、調味劑及/或芳香劑以增強組合物之視覺吸引力、口味及/或氣味。適合著色劑、調味劑或芳香劑可與醫藥組合物之成分相容，亦即其不實質上降低醫藥組合物之溶解性、化學穩定性、物理穩定性、硬度或生物活性。在一實施例中，醫藥組合物包含著色劑、調味劑及/或芳香劑。在一實施例中，由本發明提供之醫藥組合物為紫色。

在一些實施例中，醫藥組合物包括或可製備成錠劑且錠劑可用著色劑塗佈並視情況使用適合墨水標以標識、其他影像及/或文本。在其他實施例中，醫藥組合物包括或可製備成錠劑且錠劑可用著色劑塗佈、蠟化並視情況使用適合墨水標以標識、其他影像及/或文本。適合著色劑及墨水可與醫藥組合物之成分相容，亦即其不實質上降低醫藥組合物之溶解性、化學穩定性、物理穩定性、硬度或生物活性。適合著色劑及墨水可為任何顏料且為水基或溶劑基。在一實施例中，由醫藥組合物製得之錠劑用 著色劑塗佈且接著使用適合墨水標以標識、其他影像及/或文本。舉例而言，包含如本文所述之醫藥組合物之錠劑可用約3wt%(例如小於約6wt%或小於約4wt%)之包含著色劑之薄膜塗料塗佈。著色錠劑可使用適合墨水標以標識及指示活性成分在錠劑中之濃度之文本。在另一實例中，包含如本文所述之醫藥組合物之錠劑可用約3wt%(例如小於約6wt%或小於約4wt%)之包含著色劑之薄膜塗料塗佈。

在另一實施例中，由醫藥組合物製得之錠劑用著色劑塗佈、 蠟化、且接著使用適合墨水標以標識、其他影像及/或文本。舉例而言，包含如本文所述之醫藥組合物之錠劑可用約3wt%(例如小於約6wt%或小於約4wt%)之包含著色劑之薄膜塗料塗佈。著色錠劑可用以起始錠劑核心重量之約0.01% w/w之量稱出的卡那巴蠟(Carnauba wax)粉末蠟化。蠟化錠劑可使用適合墨水標以標識及指示活性成分在錠劑中之濃度之文本。在另一實例中，包含如本文所述之醫藥組合物之錠劑可用約3wt%(例如小於約6wt%或小於約4wt%)之包含著色劑之薄膜塗料塗佈。著色錠劑可用以起始錠劑核心重量之約0.01% w/w之量稱出的卡那巴蠟粉末蠟化。蠟化錠劑可使用醫藥等級墨水標以標識及指示活性成分在錠劑中之濃度之文本，該墨水諸如黑墨水(例如Opacode® S-1-17823，其為一種溶劑基墨水，可自West Point,PA.之Colorcon公司購得)。

以組合物之重量計，一種示範性醫藥組合物包含約4wt%至約70wt%(例如約10wt%至約60wt%、約15wt%至約50wt%或約25wt%至約50wt%或約20wt%至約70wt%或約30wt%至約70wt%或約40wt%至約70wt%或約50wt%至約70wt%)之化合物1非晶形式。以上提及之組合物亦可包括一或多種醫藥學上可接受之賦形劑，例如約40wt%至約90wt%之填充劑；約1wt%至約5wt%之崩解劑；約2wt%至約0.25wt%之界面活性劑；約2wt%至約0.05wt%之助流劑；及約5wt%至約0.1wt%之潤滑劑。或者，以組合物之重量計，醫藥組合物包含含有約15wt%至約70wt%(例如約20wt%至約60wt%、約25wt%至約55wt%或約30wt%至約50wt%)之化合物1非晶形式；及一或多種賦形劑，例如約40wt%至約90wt%之填充劑；約1wt%至約5wt%之崩解劑；約2wt%至約0.25wt%之界 面活性劑；約2wt%至約0.05wt%之助流劑；及約5wt%至約0.1wt%之潤滑劑的組合物。

以組合物之重量計，另一示範性醫藥組合物包含約4wt%至約70wt%(例如約10wt%至約60wt%、約15wt%至約50wt%或約25wt%至約50wt%或約20wt%至約70wt%或約30wt%至約70wt%或約40wt%至約70wt%或約50wt%至約70wt%)之化合物1非晶形式；及一或多種賦形劑，例如約40wt%至約90wt%之填充劑；約1wt%至約5wt%之崩解劑；約2wt%至約0.25wt%之界面活性劑；約2wt%至約0.05wt%之助流劑；及約2wt%至約0.1wt%之潤滑劑。

在一實施例中，本發明為一種乾燥摻合物或粒狀醫藥組合物，其包含：a. 以組合物之重量計，約25wt%之化合物1非晶形式；b. 以組合物之重量計，約22.5wt%之微晶纖維素；c. 以組合物之重量計，約22.5wt%之乳糖單水合物；d. 以組合物之重量計，約3wt%之交聯羧甲基纖維素鈉；e. 以組合物之重量計，約0.25wt%之月桂基硫酸鈉；f. 以組合物之重量計，約0.5wt%之硬脂酸鎂；及g. 以組合物之重量計，約1.25wt%之膠態二氧化矽。

在一實施例中，本發明為一種乾燥摻合物或粒狀醫藥組合物，其包含：a. 以組合物之重量計，約25wt%之化合物1非晶形式；b. 以組合物之重量計，約22.5wt%之微晶纖維素；c. 以組合物之重量計，約22.5wt%之乳糖單水合物；d. 以組合物之重量計，約3wt%之交聯羧甲基纖維素鈉；e. 以組合物之重量計，約0.25wt%之月桂基硫酸鈉；f. 以組合物之重量計，約0.5wt%之硬脂酸鎂；g. 以組合物之重量計，約1.25wt%之膠態二氧化矽；及h. 約25wt%之聚合物。

在一實施例中，本發明為一種乾燥摻合物或粒狀醫藥組合 物，其包含：a. 以組合物之重量計，約5wt%之化合物1非晶形式；b. 以組合物之重量計，約42.9wt%之微晶纖維素；c. 以組合物之重量計，約42.9wt%之乳糖單水合物；d. 以組合物之重量計，約3wt%之交聯羧甲基纖維素鈉；e. 以組合物之重量計，約0.5wt%之硬脂酸鎂；g. 以組合物之重量計，約1.25wt%之膠態二氧化矽；及h. 約5wt%之聚合物。

在另一實施例中，聚合物為HPMCAS。

本發明之醫藥組合物可加工成錠劑形式、膠囊形式、囊劑形式、口含錠形式或適於經口投藥之其他固體形式。因此，在一些實施例中，醫藥組合物係呈錠劑形式。

在本發明之另一醫藥經口調配物中，初始硬度為5-21kP±20%之成形醫藥錠劑組合物包含：約25wt%之化合物1非晶形式；以組合物之重量計，約22.5wt%之微晶纖維素；以組合物之重量計，約22.5wt%之乳糖單水合物；以組合物之重量計，約3wt%之交聯羧甲基纖維素鈉；以組合物之重量計，約0.25wt%之月桂基硫酸鈉；以組合物之重量計，約0.5wt%之硬脂酸鎂；及以組合物之重量計，約1.25wt%之膠態二氧化矽。其中化合物1非晶形式在成形醫藥錠劑中之量在每錠約25mg至約200mg之範圍內，例如50mg或75mg或100mg或150mg或200mg化合物1非晶形式。

在某些實施例中，成形醫藥錠劑含有約10mg化合物1非晶形式。在某些實施例中，成形醫藥錠劑含有約50mg化合物1非晶形式。在某些實施例中，成形醫藥錠劑含有約100mg化合物1非晶形式。

本發明之另一態樣提供一種由包括化合物1非晶形式及其他賦形劑(例如填充劑、崩解劑、界面活性劑、助流劑、著色劑、潤滑劑或其任何組合)之錠劑或膠囊組成之醫藥調配物，該化合物1非晶形式及該等賦形劑各自係在上文及在以下實例中所述，其中該錠劑在約30分鐘內溶解至少約50%(例如至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或至 少約99%)。在一個實例中，醫藥組合物由包括量在25mg至200mg之範圍內(例如25mg或50mg或75mg或100mg或150mg或200mg)之化合物1非晶形式及一或多種賦形劑(例如填充劑、崩解劑、界面活性劑、助流劑、著色劑、潤滑劑或其任何組合)的錠劑組成，該化合物1非晶形式及該一或多種賦形劑各自係在上文及在以下實例中所述，其中該錠劑在約30分鐘內溶解約50%至約100%(例如約55%至約95%或約60%至約90%)。

在一實施例中，錠劑包含含有至少約10mg(例如至少約25mg、至少約30mg、至少約40mg或至少約50mg)化合物1非晶形式；及一或多種來自：填充劑、崩解劑、界面活性劑、助流劑及潤滑劑之賦形劑的組合物。在另一實施例中，錠劑包含含有至少約10mg(例如至少約25mg、至少約30mg、至少約40mg、至少約50mg、至少約100mg或至少150mg)化合物1非晶形式及一或多種來自：填充劑、崩解劑、界面活性劑、助流劑及潤滑劑之賦形劑的組合物。

溶解可用採用溶解介質之標準USP II型裝置，在約37℃之溫度下在約50-75rpm下攪拌加以量測，該溶解介質為溶解於900mL用50mM磷酸二氫鉀在pH 6.8下緩衝之DI水中之0.1% CTAB。在裝置之各測試容器中測試單一實驗錠劑。溶解亦可用採用溶解介質之標準USP II型裝置，在約37℃之溫度下在約65rpm下攪拌加以量測，該溶解介質為溶解於900mL 50mM磷酸鈉緩衝液(pH 6.8)中之0.7%月桂基硫酸鈉。在裝置之各測試容器中測試單一實驗錠劑。溶解亦可用採用溶解介質之標準USP II型裝置，在約37℃之溫度下在約65rpm下攪拌加以量測，該溶解介質為溶解於900mL 50mM磷酸鈉緩衝液(pH 6.8)中之0.5%月桂基硫酸鈉。在裝置之各測試容器中測試單一實驗錠劑。

製備化合物1非晶形式及化合物1形式A之方法

化合物1為起始點且在一實施例中可藉由根據流程1-4使酸氯化物部分與胺部分偶合加以製備。

流程1.合成酸氯化物部分。

流程3.合成胺部分。

製備化合物1非晶形式之方法

自化合物1或甚至化合物1之結晶形式起始，可藉由旋轉蒸發或藉由噴霧乾燥方法製備化合物1非晶形式。

將化合物1溶解於如甲醇之適當溶劑中且旋轉蒸發甲醇以留下泡沫狀物來生產化合物1非晶形式。在一些實施例中，溫水浴用於加快蒸發。

亦可使用噴霧乾燥方法自化合物1製備化合物1非晶形式。噴霧乾燥為一種使液體饋料轉化成乾燥顆粒形式之製程。視情況，諸如流體化床乾燥或真空乾燥之二次乾燥製程可用於使殘餘溶劑降低至醫藥學上可接受之含量。通常，噴霧乾燥涉及使高度分散液體懸浮液或溶液與足夠體積之熱空氣接觸以產生液滴之蒸發及乾燥。欲經噴霧乾燥之製劑可為可使用所選噴霧乾燥裝置霧化之任何溶液、粗懸浮液、漿料、膠態分散體或糊狀物。在一標準程序中，將製劑噴霧進入使溶劑蒸發且將乾燥產物輸送至收集器(例如旋風器)之溫熱經過濾空氣流中。廢空氣接著與溶劑一起排出，或者將廢空氣傳送至冷凝器以捕捉並潛在再循環溶劑。市售裝置類型可用於進行噴霧乾燥。舉例而言，商品化噴霧乾燥器係由Buchi有限公司及Niro製造(例如由Niro製造之PSD系列之噴霧乾燥器)(參見US 2004/0105820；US 2003/0144257)。

噴霧乾燥通常採用固體物質裝載量約3%至約30重量%(亦即藥物及賦形劑)，例如約4%至約20重量%、較佳至少約10%。一般而言，固體裝載量之上限受所得溶液之黏度(例如泵送能力)及組分在溶液中之溶解度支配。一般而言，溶液之黏度可決定所得粉末產物中之粒子之尺寸。

噴霧乾燥之技術及方法可見於Perry’s Chemical Engineering Handbook，第6版，R.H.Perry,D.W.Green及J.O.Maloney編，McGraw-Hill圖書公司(1984)；及Marshall「Atomization and Spray-Drying」50,Chem.Eng.Prog.Monogr.系列2(1954)中。一般而言，噴霧乾燥係以進口溫度約60℃至約200℃，例如約95℃至約185℃、約110℃至約182℃、約96℃至約180℃，例如約145℃來進行。噴霧乾燥通常係以出口溫度約30℃至約90℃，例如約40℃至約80℃、約45℃至約80℃，例如約75℃來進行。霧化流速通常為約4kg/h至約12kg/h，例如約4.3kg/h至約10.5kg/h，例如約6kg/h或約10.5kg/h。饋料流速通常為約3kg/h至約10kg/h，例如約3.5kg/h至約9.0kg/h，例如約8kg/h或約7.1kg/h。霧化比率通常為約0.3至1.7，例如約0.5至1.5，例如約0.8或約1.5。

移除溶劑可需要隨後乾燥步驟，諸如盤式乾燥、流體床乾燥(例如約室溫至約100℃)、真空乾燥、微波乾燥、轉鼓乾燥或雙錐真空乾燥 (例如約室溫至約200℃)。

在一實施例中，固體分散體經流體床乾燥。

在一種方法中，溶劑包括揮發性溶劑，例如沸點小於約100℃之溶劑。在一些實施例中，溶劑包括溶劑之混合物，例如揮發性溶劑之混合物或揮發性溶劑與非揮發性溶劑之混合物。當使用溶劑之混合物時，混合物可包括一或多種非揮發性溶劑，例如其中非揮發性溶劑以小於約15%，例如小於約12%、小於約10%、小於約8%、小於約5%、小於約3%或小於約2%存在於混合物中。

較佳溶劑為化合物1在其中之溶解度為至少約10mg/ml(例如至少約15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、35mg/ml、40mg/ml、45mg/ml、50mg/ml或50mg/ml以上)之彼等溶劑。更佳溶劑包括化合物1在其中之溶解度為至少約20mg/ml之溶劑。

可測試之示範性溶劑包括丙酮、環己烷、二氯甲烷、N,N-二甲基乙醯胺(DMA)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、1,3-二甲基-2-咪唑啶酮(DMI)、二甲亞碸(DMSO)、二噁烷、乙酸乙酯、乙醚、冰乙酸(HAc)、甲基乙基酮(MEK)、N-甲基-2-吡咯啶酮(NMP)、甲基第三丁基醚(MTBE)、四氫呋喃(THF)、戊烷、乙腈、甲醇、乙醇、異丙醇、乙酸異丙酯及甲苯。示範性共溶劑包括丙酮/DMSO、丙酮/DMF、丙酮/水、MEK/水、THF/水、二噁烷/水。在一兩溶劑系統中，溶劑可以約0.1%至約99.9%存在。在一些較佳實施例中，水與丙酮為共溶劑，其中水係以約0.1%至約15%，例如約9%至約11%，例如約10%存在。在一些較佳實施例中，水與MEK為共溶劑，其中水係以約0.1%至約15%，例如約9%至約11%，例如約10%存在。在一些實施例中，溶劑溶液包括三種溶劑。舉例而言，丙酮及水可與第三溶劑，諸如DMA、DMF、DMI、DMSO或HAc混合。在非晶化合物1為固體非晶分散體之組分之情況下，較佳溶劑會溶解化合物1與聚合物兩者。適合溶劑包括上述溶劑，例如MEK、丙酮、水、甲醇及其混合物。

可修改粒度及溫度乾燥範圍以製備最佳固體分散體。如將由熟練從業者所瞭解，小粒度將導致溶劑移除改良。然而，申請人已發現較小粒子可產生在一些情況下不提供最佳用於諸如製錠之下游加工之固體分 散體的蓬鬆粒子。在較高溫度下，化合物1可發生結晶或化學降解。在較低溫度下，可能不會移除足量溶劑。本文方法提供最佳粒度及最佳乾燥溫度。

一般而言，粒度應使D10(μm)小於約5，例如小於約4.5、小於約4.0或小於約3.5，D50(μm)通常小於約17，例如小於約16、小於約15、小於約14、小於約13，且D90(μm)通常小於約175，例如小於約170、小於約170、小於約150、小於約125、小於約100、小於約90、小於約80、小於約70、小於約60或小於約小於約50。一般而言，噴霧乾燥粒子之堆密度為約0.08g/cc至約0.20g/cc，例如約0.10至約0.15g/cc，例如約0.11g/cc或約0.14g/cc。噴霧乾燥粒子之敲緊密度通常在以下範圍內：對於敲擊10次，約0.08g/cc至約0.20g/cc，例如約0.10至約0.15g/cc，例如約0.11g/cc或約0.14g/cc；對於敲擊500次，0.10g/cc至約0.25g/cc，例如約0.11至約0.21g/cc，例如約0.15g/cc、約0.19g/cc或約0.21g/cc；對於敲擊1250次，0.15g/cc至約0.27g/cc，例如約0.18至約0.24g/cc，例如約0.18g/cc、約0.19g/cc、約0.20g/cc或約0.24g/cc；且對於敲擊2500次，0.15g/cc至約0.27g/cc，例如約0.18至約0.24g/cc，例如約0.18g/cc、約0.21g/cc、約0.23g/cc或約0.24g/cc。

聚合物

包括化合物1非晶形式及聚合物(或固態載劑)之固體分散體亦包括在本文中。舉例而言，化合物1作為固體非晶分散體之組分以非晶化合物形式存在。固體非晶分散體通常包括化合物1及聚合物。示範性聚合物包括纖維素聚合物(諸如HPMC或HPMCAS)及含有吡咯啶酮之聚合物(諸如PVP/VA)。在一些實施例中，固體非晶分散體包括一或多種其他賦形劑，諸如界面活性劑。

在一實施例中，聚合物能夠溶解於水性介質中。聚合物之溶解度可不依賴於pH值或依賴於pH值。後者包括一或多種腸溶性聚合物。術語「腸溶性聚合物」係指相對於酸性更大之胃環境，可優先溶於酸性較小之腸環境中之聚合物，例如不溶於酸性水性介質中但可在pH值大於5-6時溶解之聚合物。適當聚合物應具有化學惰性及生物惰性。為改良固體分散 體之物理穩定性，聚合物之玻璃轉移溫度(T_g)應盡可能較高。舉例而言，較佳聚合物具有至少等於或大於藥物(亦即化合物1)之玻璃轉移溫度的玻璃轉移溫度。其他較佳聚合物具有在藥物(亦即化合物1)之約10至約15℃內之玻璃轉移溫度。聚合物之適合玻璃轉移溫度之實例包括至少約90℃、至少約95℃、至少約100℃、至少約105℃、至少約110℃、至少約115℃、至少約120℃、至少約125℃、至少約130℃、至少約135℃、至少約140℃、至少約145℃、至少約150℃、至少約155℃、至少約160℃、至少約165℃、至少約170℃或至少約175℃(如在乾燥條件下所量測)。在不希望受理論束縛下，咸信潛伏機制為T_g較高之聚合物通常在室溫下具有較低分子運動性，分子運動性可為穩定化非晶固體分散體之物理穩定性之關鍵因素。

另外，聚合物之吸濕度應較低，例如小於約10%。出於在本申請案中進行比較之目的，聚合物或組合物之吸濕度係在約60%相對濕度下加以表徵。在一些較佳實施例中，聚合物之吸水率小於約10%，例如吸水率小於約9%、小於約8%、小於約7%、小於約6%、小於約5%、小於約4%、小於約3%或小於約2%。吸濕度亦可影響固體分散體之物理穩定性。一般而言，聚合物中吸收之水分可極大降低聚合物以及所得固體分散體之T_g，此將進一步降低如上所述之固體分散體之物理穩定性。

在一實施例中，聚合物為一或多種水溶性聚合物或部分水溶性聚合物。水溶性或部分水溶性聚合物包括但不限於纖維素衍生物(例如羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥丙基纖維素(HPC))或乙基纖維素；聚乙烯吡咯啶酮(PVP)；聚乙二醇(PEG)；聚乙烯醇(PVA)；丙烯酸酯，諸如聚甲基丙烯酸酯(例如Eudragit® E)；環糊精(例如β-環糊精)及其共聚物及衍生物，包括例如PVP-VA(聚乙烯吡咯啶酮-乙酸乙烯酯)。

在一些實施例中，聚合物為羥丙基甲基纖維素(HPMC)，諸如HPMC E50、HPMCE15或HPMC60SH50。

如本文所論述，聚合物可為pH值依賴性腸溶性聚合物。此等pH值依賴性腸溶性聚合物包括但不限於纖維素衍生物(例如乙酸鄰苯二甲酸纖維素(CAP))、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素(HPMCP)、乙酸丁二酸羥丙基甲基纖維素(HPMCAS)、羧甲基纖維素(CMC)或其鹽(例如鈉鹽，諸 如(CMC-Na))；乙酸偏苯三甲酸纖維素(CAT)、乙酸鄰苯二甲酸羥丙基纖維素(HPCAP)、乙酸鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素(HPMCAP)及乙酸鄰苯二甲酸甲基纖維素(MCAP)或聚甲基丙烯酸酯(例如Eudragit® S)。在一些實施例中，聚合物為乙酸丁二酸羥丙基甲基纖維素(HPMCAS)。在一些實施例中，聚合物為HG等級乙酸丁二酸羥丙基甲基纖維素(HPMCAS-HG)。

在另一實施例中，聚合物為聚乙烯吡咯啶酮共聚物，例如乙烯吡咯啶酮/乙酸乙烯酯共聚物(PVP/VA)。

在化合物1與聚合物，例如與HPMC、HPMCAS或PVP/VA聚合物形成固體分散體之實施例中，相對於固體分散體之總重量之聚合物的量在約0.1%至99重量%之範圍內。除非另外規定，否則如所述之藥物、聚合物及其他賦形劑在分散體內之百分比係以重量百分比形式給出。聚合物之量通常為至少約20%，且較佳為至少約30%，例如至少約35%、至少約40%、至少約45%或約50%(例如49.5%)。量通常為約99%或小於99%，且較佳為約80%或小於80%，例如約75%或小於75%、約70%或小於70%、約65%或小於65%、約60%或小於60%或約55%或小於55%。在一實施例中，聚合物之之量多達分散體之總重量之約50%(且甚至更詳言之，在約40%與50%之間，諸如約49%、約49.5%或約50%)。HPMC及HPMCAS可以多種等級自ShinEtsu獲得，例如HPMCAS可以許多種類獲得，包括AS-LF、AS-MF、AS-HF、AS-LG、AS-MG、AS-HG。此等等級之各者在乙酸酯及丁二酸酯之取代百分比方面不同。

在一些實施例中，化合物1與聚合物以大致相等量存在，例如聚合物及藥物之各者構成分散體之約一半重量百分比。舉例而言，聚合物以約49.5%存在且藥物以約50%存在。

在一些實施例中，在噴霧乾燥之前，組合之化合物1與聚合物佔非固體分散體之總固體含量的1%至20% w/w。在一些實施例中，在噴霧乾燥之前，組合之化合物1與聚合物佔非固體分散體之總固體含量的5%至15% w/w。在一些實施例中，在噴霧乾燥之前，組合之化合物1與聚合物佔非固體分散體之總固體含量的約11% w/w。

在一些實施例中，分散體進一步包括其他次要成分，諸如界 面活性劑(例如SLS)。在一些實施例中，界面活性劑以小於分散體之約10%存在，例如小於約9%、小於約8%、小於約7%、小於約6%、小於約5%、小於約4%、小於約3%、小於約2%、約1%或約0.5%。

在包括聚合物之實施例中，聚合物應以有效穩定化固體分散體之量存在。穩定化包括抑制或防止化合物1結晶。此穩定化將抑制化合物1自非晶形式轉化成結晶形式。舉例而言，聚合物將防止至少一部分(例如約5%、約10%、約15%、約20%、約25%、約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%或75%以上)化合物1自非晶形式轉化成結晶形式。穩定化可例如藉由量測固體分散體之玻璃轉移溫度、量測非晶物質之鬆弛速率或藉由量測化合物1之溶解度或生物可用性加以量測。

適於與化合物1組合使用例如以形成固體分散體(諸如非晶固體分散體)之聚合物應具有一或多種以下性質：聚合物之玻璃轉移溫度應具有比化合物1之玻璃轉移溫度低不小於約10-15℃的溫度。較佳地，聚合物之玻璃轉移溫度大於化合物1之玻璃轉移溫度，且通常比藥物產品之所要儲存溫度高至少50℃。舉例而言，至少約100℃、至少約105℃、至少約105℃、至少約110℃、至少約120℃、至少約130℃、至少約140℃、至少約150℃、至少約160℃、至少約160℃或160℃以上。

聚合物應具有相對非吸濕性。舉例而言，當在標準條件下儲存時，聚合物吸收之水應小於約10%，例如小於約9%、小於約8%、小於約7%、小於約6%或小於約5%、小於約4%或小於約3%。較佳地，當在標準條件下儲存時，聚合物將實質上不含吸收水。

相對於化合物1之溶解度，聚合物在溶劑中應具有適於噴霧乾燥製程之類似或更佳溶解度。在較佳實施例中，聚合物將與化合物1溶解於一或多種相同溶劑或溶劑系統中。較佳的是聚合物可溶於至少一種不含有羥基之溶劑，諸如二氯甲烷、丙酮或其組合中。

相對於化合物1在不存在聚合物下之溶解度或相對於化合物1在與參照聚合物組合時之溶解度，聚合物在例如以固體分散體或液體 懸浮液形式與化合物1組合時應增加化合物1在水性及生理相關介質中之溶解度。舉例而言，聚合物可藉由降低自固體非晶分散體或自液體懸浮液轉化成結晶化合物1之非晶化合物1之量來增加非晶化合物1之溶解度。

聚合物應降低非晶物質之鬆弛速率。

聚合物應增加化合物1之物理及/或化學穩定性。

聚合物應改良化合物1之可製造性。

聚合物應改良化合物1之處理、投與或儲存性質之一或多者。

聚合物不應不利地與其他醫藥組分(例如賦形劑)相互作用。

可使用本文所述之噴霧乾燥法(或其他方法)測試候選聚合物(或其他組分)形成非晶組合物之適合性。候選組合物可就穩定性、形成晶體之抗性或其他性質而言進行比較，且與參照製劑，例如純非晶化合物1或結晶化合物1之製劑進行比較。舉例而言，可測試候選組合物以確定其是否與參照製劑一樣使溶劑介導之結晶的發生時間或在控制條件下在既定時間下之轉化百分比抑制至少50%、75%、100%或110%，或可測試候選組合物以確定其相對於結晶化合物1是否具有改良之生物可用性或溶解度。

界面活性劑

固體分散體或其他組合物可包括界面活性劑。界面活性劑或界面活性劑混合物將通常降低固體分散體與水性介質之間的界面張力。適當界面活性劑或界面活性劑混合物亦可增強來自固體分散體之化合物1之水溶性及生物可用性。與本發明關聯使用之界面活性劑包括但不限於脫水山梨醇脂肪酸酯(例如Spans®)、聚氧化乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯(例如Tweens®)、月桂基硫酸鈉(SLS)、十二烷基苯磺酸鈉(SDBS)磺丁二酸鈉二辛酯(多庫酯(Docusate))、二氧基膽酸鈉鹽(DOSS)、脫水山梨醇單硬脂酸酯、脫水山梨醇三硬脂酸酯、溴化十六基三甲基銨(HTAB)、N-月桂醯基肌胺酸鈉、油酸鈉、肉豆蔻酸鈉、硬脂酸鈉、棕櫚酸鈉、Gelucire 44/14、乙二胺四乙酸(EDTA)、維生素E d-α生育酚聚乙二醇1000丁二酸酯(TPGS)、卵磷脂(Lecithin)、MW 677-692、麩胺酸單鈉單水合物、Labrasol、PEG 8辛酸/癸酸甘油酯、Transcutol、二乙二醇單乙基醚、Solutol HS-15、聚乙二醇/羥 基硬脂酸酯、牛磺膽酸(Taurocholic Acid)、普洛尼克(Pluronic)F68、普洛尼克F108及普洛尼克F127(或任何其他聚氧化乙烯-聚氧化丙烯共聚物(Pluronics®)或飽和聚二醇化甘油酯(Gelucirs®))。可與本發明關聯使用之此等界面活性劑之特定實例包括但不限於斯盤(Span)65、斯盤25、吐溫(Tween)20、Capryol 90、普洛尼克F108、月桂基硫酸鈉(SLS)、維生素E TPGS、普洛尼克及共聚物。SLS係通常較佳。

相對於固體分散體之總重量，界面活性劑(例如SLS)之量可在0.1-15%之間。較佳地，其為約0.5%至約10%，更佳為約0.5至約5%，例如約0.5至4%、約0.5至3%、約0.5至2%、約0.5至1%，或約0.5%。

在某些實施例中，相對於固體分散體之總重量，界面活性劑之量為至少約0.1%，較佳約0.5%。在此等實施例中，界面活性劑將以至多約15%，且較佳至多約12%、約11%、約10%、約9%、約8%、約7%、約6%、約5%、約4%、約3%、約2%或約1%之量存在。界面活性劑之量為約0.5重量%之一實施例較佳。

可以與關於測試聚合物所述之方式類似之方式測試候選界面活性劑(或其他組分)用於本發明中之適合性。

形成化合物1形式A之方法

在一實施例中，藉由於適當溶劑中使化合物1漿化有效時間量來製備化合物1形式A。在另一實施例中，適當溶劑為乙酸乙酯、二氯甲烷、MTBE、乙酸異丙酯、各種比率之水/乙醇溶液、各種比率之水/乙腈溶液、各種比率之水/甲醇溶液或各種比率之水/異丙醇溶液。舉例而言，各種比率之水/乙醇溶液包括1：9(體積/體積)水/乙醇、1：1(體積/體積)水/乙醇及9：1(體積/體積)水/乙醇。各種比率之水/乙腈溶液包括1：9(體積/體積)水/乙腈、1：1(體積/體積)水/乙腈及9：1(體積/體積)水/乙腈。各種比率之水/甲醇溶液包括1：9(體積/體積)水/甲醇、1：1(體積/體積)水/甲醇及9：1(體積/體積)水/甲醇。各種比率之水/異丙醇溶液包括1：9(體積/體積)水/異丙醇、1：1(體積/體積)水/異丙醇及9：1(體積/體積)水/異丙醇。

一般而言，在室溫下於約1.5ml適當溶劑中使約40mg化合物1(目標濃度在26.7mg/ml下)漿化有效時間量。在一些實施例中，有效 時間量為約24小時至約2週。在一些實施例中，有效時間量為約24小時至約1週。在一些實施例中，有效時間量為約24小時至約72小時。接著收集固體。

在另一實施例中，藉由將化合物1溶解於適當溶劑中且接著蒸發溶劑來製備化合物1形式A。在一實施例中，適當溶劑為化合物1在其中之溶解度大於20mg/ml之溶劑。舉例而言，此等溶劑包括乙腈、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮及其類似物。

一般而言，將化合物1溶解於適當溶劑中，過濾且接著使其進行緩慢蒸發或快速蒸發。緩慢蒸發之一實例為用其中戳有1個孔之帕拉膜(parafilm)覆蓋包含化合物1溶液之容器，諸如小瓶。快速蒸發之一實例為使包含化合物1溶液之容器(諸如小瓶)不經覆蓋。接著收集固體。

在另一態樣中，本發明之特徵為一種製備化合物1形式A之方法，其包含將化合物1溶解於第一溶劑中及添加化合物1在其中具有不良溶解性(溶解度<1mg/ml)之第二溶劑。舉例而言，第一溶劑可為化合物1在其中之溶解度大於20mg/ml之溶劑，例如乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或丙酮。第二溶劑可為例如庚烷或水。

一般而言，將化合物1溶解於第一溶劑中且過濾以移除任何種晶。第二溶劑係在攪拌下緩慢添加。使固體沈澱並藉由過濾加以收集。

製備醫藥組合物之方法

本發明之劑量單位形式可藉由在壓力下壓緊或壓製混合物或組合物(例如粉末或顆粒)以形成穩定三維形狀(例如錠劑)來產生。如本文所用，「錠劑」包括所有形狀及尺寸之壓製醫藥劑量單位形式，無論經塗佈或未塗佈。

如本文所用之表述「劑量單位形式」係指適於欲治療患者之藥劑的物理個別單元。一般而言，壓緊混合物之密度大於壓緊之前的混合物密度。本發明之劑量單位形式可具有幾乎任何形狀，包括凹面及/或凸面、圓角或有角度角、及圓形至直線形。在一些實施例中，本發明之壓製劑型包含具有平坦面部之圓形錠劑。本發明之固體醫藥劑型可藉由為一般熟習形成壓製固體醫藥劑型之技術之人士所知的任何壓緊及壓製方法製備。在 特定實施例中，可使用如例如相關教科書中所述之為熟習醫藥調配領域者所知之習知方法製備本文提供之調配物。參見例如Remington：The Science and Practice of Pharmacy,第21版，Lippincott Williams & Wilkins,Baltimore,Md.(2003)；Ansel等人，Pharmaceutical Dosage Forms And Drug Delivery Systems，第7版，Lippincott Williams & Wilkins,(1999)；The Handbook of Pharmaceutical Excipients，第4版，Rowe等人編，American Pharmaceuticals Association(2003)；Gibson,Pharmaceutical Preformulation And Formulation,CRC Press(2001)，此等參考書目據此以全文引用的方式併入本文中。

粒化及壓製

在一些實施例中，包含活性藥劑化合物1非晶形式及所包括之醫藥學上可接受之賦形劑(例如填充劑、崩解劑、界面活性劑、助流劑、潤滑劑或其任何組合)的固體形式(包括粉末)可經受乾燥粒化製程。乾式粒化製程使粉末凝聚成尺寸適於進一步加工之較大粒子。乾式粒化可改良混合物之流動性以能夠產生符合質量變化或含量均一性要求之錠劑。

如本文所述之調配物可使用一或多個混合及乾式粒化步驟來產生。混合及粒化步驟之順序及數目似乎並不關鍵。然而，賦形劑及化合物1之至少一者可在壓製成錠劑之前經受乾式粒化或濕式高剪切粒化。驚人的是在錠劑壓製之前對化合物1非晶形式及賦形劑一起進行乾式粒化似乎為一種在本發明組合物及調配物之成分之間提供緊密物理接觸，且因此產生具有良好穩定性性質之錠劑調配物的簡單、廉價且有效方式。與亦涵蓋在本文中之濕式粒化製程不同，乾式粒化可藉由在不使用任何液體物質(呈水溶液、基於有機溶質之溶液或其混合物形式)下將能量轉移至混合物之機械製程來進行。一般而言，機械製程需要壓緊，諸如藉由輥壓提供之壓緊。用於乾式粒化之替代性方法之一實例為預壓。

在一些實施例中，輥壓為一種包含高強度機械壓緊一或多種物質之粒化製程。在一些實施例中，在2個相對旋轉軋輥之間壓製(亦即輥壓)包含粉末之混合物之醫藥組合物以製備固體片，其隨後在篩中壓碎以形成顆粒物質。在此顆粒物質中，可獲得成分之間的緊密機械接觸。輥壓設備之一實例為Minipactor®，其為來自Gerteis Maschinen+Processengineering AG之Gerteis 3W-Polygran。

在一些實施例中，本發明之錠劑壓製可在不使用任何液體物質(呈水溶液、基於有機溶質之溶液或其混合物形式)下進行，亦即使用乾式粒化製程。在一典型實施例中，所得核心或錠劑之抗壓強度在1至15kP；諸如1.5至12.5kP之範圍內，較佳在2至10kP之範圍內。

簡要製造程序

在一些實施例中，根據本文設定之配方稱重各成分。接著，篩分且充分混合全部顆粒內成分。成分可用例如硬脂酸鎂之適合潤滑劑潤滑。下一步驟可包含壓緊/預壓粉末混合物及尺寸化成分。接著，將壓緊或預壓摻合物研磨成顆粒且篩分以獲得所要尺寸。接著，顆粒可進一步用例如硬脂酸鎂潤滑。接著，本發明之粒狀組合物可在適合衝壓機上壓製成本發明之各種醫藥調配物。視情況，錠劑可用薄膜、著色劑或其他塗料塗佈。

本發明之另一態樣提供一種用於產生醫藥組合物之方法，其包含提供具有包含化合物1非晶形式及一或多種選自：填充劑、助流劑、界面活性劑、潤滑劑、崩解劑之賦形劑之組成的混合物，及將組合物壓製成在約30分鐘內溶解至少約50%之錠劑。

在另一實施例中，進行濕式粒化製程以自粉末狀成分與液體成分之混合物產生本發明之醫藥調配物。舉例而言，根據本文設定之配方稱重包含具有含有化合物1非晶形式及一或多種選自：填充劑、助流劑、界面活性劑、潤滑劑、崩解劑之賦形劑之組成之混合物的醫藥組合物。接著，篩分且使用水或含界面活性劑之水或含黏合劑之水或含界面活性劑及黏合劑之水在高剪切或低剪切粒化機中混合全部顆粒內成分以粒化粉末摻合物。除水以外之流體亦可與或不與界面活性劑及/或黏合劑一起使用來粒化粉末摻合物。接著，潮濕顆粒可視情況使用適合研磨機加以研磨。接著，可視情況藉由以任何適合方式乾燥成分來自混合物移除水。接著，乾燥顆粒可視情況研磨成所需尺寸。接著，可藉由摻合來添加額外粒狀賦形劑(例如填充劑及崩解劑)。接著，尺寸化顆粒可進一步用硬脂酸鎂及崩解劑，例如交聯羧甲基纖維素鈉潤滑。接著，本發明之粒狀組合物可經篩分足夠時間以獲得恰當尺寸且接著在適合衝壓機上壓製成本發明之各種醫藥調配 物。視情況，錠劑可用薄膜、著色劑或其他塗料塗佈。

此示範性混合物之各成分係在上文及在以下實例中所述。此外，混合物可包含視情況選用之如上文及在以下實例中所述之添加劑，諸如一或多種著色劑、一或多種調味劑及/或一或多種芳香劑。在一些實施例中，此等成分(及任何視情況選用之添加劑)之各者在混合物中之相對濃度(例如wt%)亦在上文及在以下實例中呈現。構成混合物之成分可依序或以任何添加組合形式提供；且成分或成分之組合可以任何順序提供。在一實施例中，潤滑劑為添加至混合物中之末個組分。

在另一實施例中，混合物包含化合物1非晶形式、及賦形劑(助流劑、界面活性劑、潤滑劑、崩解劑及填充劑)之任何一或多者的組合物，其中此等成分之各者係以粉末形式提供(例如以藉由光散射量測之平均直徑為250μm或小於250μm(例如150μm或小於150μm、100μm或小於100μm、50μm或小於50μm、45μm或小於45μm、40μm或小於40μm或35μm或小於35μm)之粒子形式提供)。舉例而言，混合物包含化合物1非晶形式、助流劑、界面活性劑、潤滑劑、崩解劑及填充劑之組合物，其中此等成分之各者係以粉末形式提供(例如以藉由光散射量測之平均直徑為250μm或小於250μm(例如150μm或小於150μm、100μm或小於100μm、50μm或小於50μm、45μm或小於45μm、40μm或小於40μm或35μm或小於35μm)之粒子形式提供)。在另一實例中，混合物包含化合物1非晶形式、界面活性劑、潤滑劑、崩解劑及填充劑之組合物，其中此等成分之各者係以粉末形式提供(例如以藉由光散射量測之平均直徑為250μm或小於250μm(例如150μm或小於150μm、100μm或小於100μm、50μm或小於50μm、45μm或小於45μm、40μm或小於40μm或35μm或小於35μm)之粒子形式提供)。

在另一實施例中，混合物包含化合物1非晶形式、以及助流劑、界面活性劑、潤滑劑、崩解劑及填充劑之任何組合的組合物，其中此等成分之各者實質上不含水。以成分之重量計，各成分包含小於5wt%(例如小於2wt%、小於1wt%、小於0.75wt%、小於0.5wt%或小於0.25wt%)之水。舉例而言，混合物包含化合物1非晶形式、助流劑、界面活性劑、 潤滑劑、崩解劑及填充劑之組合物，其中此等成分之各者實質上不含水。在一些實施例中，以成分之重量計，各成分包含小於5wt%(例如小於2wt%、小於1wt%、小於0.75wt%、小於0.5wt%或小於0.25wt%)之水。

在另一實施例中，將混合物壓製成錠劑係藉由用混合物填充模腔(例如模具)並對混合物施加壓力來達成。此可使用模壓機或其他類似裝置達成。在一些實施例中，化合物1非晶形式與賦形劑之混合物可首先加工成顆粒形式。接著可根據醫藥技術中之已知方法使顆粒經尺寸化並壓製成錠劑或調配以供囊封。亦應注意對模腔中之混合物施加壓力可在各次壓製期間使用相同壓力或在壓製期間使用不同壓力重複進行。在另一實例中，粉末狀成分或顆粒之混合物可使用施加足夠壓力之模壓機壓製以形成在約30分鐘下溶解約50%或50%以上(例如在約30分鐘下溶解約55%或55%以上或在約30分鐘下溶解約60%或60%以上)之錠劑。舉例而言，使用模壓機壓製混合物以產生至少約5kP(至少約5.5kP、至少約6kP、至少約7kP、至少約10kP或至少15kP)之錠劑硬度。在一些情況下，壓製混合物以產生在約5kP與20kP之間的錠劑硬度。

在一些實施例中，以錠劑之重量計，包含如本文所述之醫藥組合物之錠劑可用約3.0wt%之包含著色劑之薄膜塗料塗佈。在某些情況下，以著色劑懸浮液或溶液之重量計，用於塗佈錠劑之著色劑懸浮液或溶液包含約20% w/w之固體。在其他情況下，經塗佈錠劑可標以標識、其他影像或文本。

在另一實施例中，用於產生醫藥組合物之方法包含提供固體形式之混合物，例如粉末狀及/或液體成分之混合物，該混合物包含化合物1非晶形式及一或多種選自：助流劑、界面活性劑、潤滑劑、崩解劑及填充劑之賦形劑；混合該混合物直至該混合物實質上均質；及將該混合物壓製或壓緊成顆粒形式。接著可如上文及在以下實例中所述將包含化合物1非晶形式之粒狀組合物壓製成錠劑或調配成膠囊。或者，產生醫藥組合物之方法包含提供化合物1非晶形式及一或多種賦形劑(例如助流劑、界面活性劑、潤滑劑、崩解劑及填充劑)之混合物；混合該混合物直至該混合物實質上均質；及使用如以下實例中所述之乾式粒化組合物，利用軋輥壓緊機將 該混合物壓製/壓緊成顆粒形式，或者，使用如以下實例中所述之高剪切濕式顆粒壓緊製程壓製/壓緊成顆粒。可使用除本文所述之所選賦形劑之外亦併入化合物1非晶形式所製備之顆粒來製備醫藥調配物，例如如本文所述之錠劑。

在一些實施例中，混合物係藉由使用人工混合、混合器、摻合器、其任何組合或其類似物進行攪拌、摻合、振盪或進行類似操作加以混合。當依序添加成分或成分之組合時，混合可在連續添加之間進行，在整個成分添加期間連續進行，在添加所有成分或成分之組合之後進行，或以其任何組合形式進行。混合混合物直至其成為實質上均質組合物。

在一實施例中，本發明之醫藥組合物可根據以下流程圖加以製備：

在另一實施例中，本發明之醫藥組合物可根據以下流程圖加以製備：

在另一實施例中，化合物1非晶形式係呈與聚合物及界面活性劑之50重量%混合物形式，所用膠態二氧化矽助流劑之商標為Cabot M5P，所用交聯羧甲基纖維素鈉崩解劑之商標為AcDiSol，所用微晶纖維素填充劑之商標為Avicel PH101，且所用乳糖單水合物之商標為Foremost 310。在另一實施例中，化合物1非晶形式聚合物為羥丙基甲基纖維素(HPMC)且界面活性劑為月桂基硫酸鈉。在另一實施例中，化合物1非晶形式聚合物為乙酸丁二酸羥丙基甲基纖維素(HPMCAS)。在另一實施例中，化合物1非晶形式聚合物為高等級乙酸丁二酸羥丙基甲基纖維素(HPMCAS-HG)。

在各種實施例中，第二治療劑可與化合物1非晶形式一起調配以形成單一或單次劑型，例如錠劑或膠囊。

如上製備之劑型可根據美國藥典29(United States Pharmacopeial Convention公司，Rockville,Md.,2005)中之測試711「溶解(Dissolution)」經受活體外溶解評估以測定活性物質自劑型釋放所處之速率。活性物質之含量及雜質含量係藉由諸如高效液相層析(HPLC)之技術方便地加以量測。

在一些實施例中，本發明包括使用高密度聚乙烯(HDPE)、低密度聚乙烯(LDPE)及或聚丙烯及/或玻璃、玻璃紙箔、鋁囊及由鋁或高密度聚氯乙烯(PVC)構成之泡罩或條帶包裝材料(諸如容器及閉合物)，視情況包括乾燥劑、聚乙烯(PE)、聚偏二氯乙烯(PVDC)、PVC/PE/PVDC及其類似物。此等包裝材料可在使用通常用於醫藥技術中之化學或物理滅菌技術對包裝及其內含物進行適當滅菌之後用於以無菌方式儲存各種醫藥組合物及調配物。

投與醫藥組合物之方法

在一態樣中，本發明之醫藥組合物可每日一次或約每24小時向患者投與。或者，本發明之醫藥組合物可每日兩次或約每12小時向患者投與。此等醫藥組合物係以含有約2.5mg、5mg、10mg、25mg、50mg、100mg、125mg、150mg、200mg或250mg化合物1非晶形式之經口調配物形式投與。在此態樣中，除化合物1非晶形式之外，醫藥組合物亦包含填充劑；崩解劑；界面活性劑；助流劑；及潤滑劑。

亦應瞭解本發明之化合物及醫藥學上可接受之組合物及調配物可用於組合療法中；亦即化合物1非晶形式及其醫藥學上可接受之組合物可與一或多種其他所要治療劑或醫學程序同時、在其之前或在其之後共投與。用於組合方案中之特定療法(治療劑或程序)組合將考慮所要治療劑及/或程序之相容性及欲達成之所要治療效應。亦應瞭解所用療法可達成針對同一病症之所要效應(例如本發明化合物可與用於治療同一病症之另一藥劑同時投與)，或其可達成不同效應(例如控制任何不利效應)。如本文所用，通常投與以治療或預防特定疾病(例如CFTR介導之疾病)或病狀之其他治療劑稱為「適於所治療疾病或病狀」。

在一實施例中，另一治療劑係選自黏液分解劑、支氣管擴張劑、抗生素、抗感染劑、消炎劑、除本發明之化合物1以外之CFTR調節 劑或營養劑。

在一實施例中，另一治療劑為抗生素。適用於本文中之示範性抗生素包括妥布黴素(tobramycin)(包括妥布黴素吸入粉末(TIP))、阿奇黴素(azithromycin)、胺曲南(aztreonam)(包括噴霧化形式之胺曲南)、阿米卡星(amikacin)(包括其脂質體調配物)、環丙沙星(ciprofloxacin)(包括其適於藉由吸入投與之調配物)、左氧氟沙星(levoflaxacin)(包括其噴霧化調配物)及兩種抗生素(例如磷黴素(fosfomycin)及妥布黴素)之組合。

在另一實施例中，另一藥劑為黏液分解劑。適用於本文中之示範性黏液分解劑包括Pulmozyme®。

在另一實施例中，另一藥劑為支氣管擴張劑。示範性支氣管擴張劑包括沙丁胺醇(albuterol)、硫酸間羥異丙腎上腺素(metaprotenerol sulfate)、乙酸吡布特羅(pirbuterol acetate)、沙美特羅(salmeterol)或硫酸特布他林(tetrabuline sulfate)。

在另一實施例中，另一藥劑有效恢復肺氣道表面液體。此等藥劑改良鹽在細胞內部及外部之運動，從而使肺氣道中之黏液經更大程度水合且因此更易於清除。示範性此等藥劑包括高張鹽水、地紐福索四鈉(denufosol tetrasodium)([[(3S,5R)-5-(4-胺基-2-側氧基嘧啶-1-基)-3-羥基氧雜環戊烷-2-基]甲氧基-羥基磷醯基][[[(2R,3S,4R,5R)-5-(2,4-二側氧基嘧啶-1-基)-3,4-二羥基氧雜環戊烷-2-基]甲氧基-羥基磷醯基]氧基-羥基磷醯基]磷酸氫鹽)或布榮啟妥(bronchitol)(吸入甘露糖醇調配物)。

在另一實施例中，另一藥劑為消炎劑，亦即可減輕肺發炎之藥劑。適用於本文中之示範性此等藥劑包括布洛芬(ibuprofen)、二十二碳六烯酸(DHA)、昔多芬(sildenafil)、吸入麩胱甘肽(glutathione)、匹格列酮(pioglitazone)、羥氯奎(hydroxychloroquine)或辛伐他汀(simavastatin)。

在另一實施例中，另一藥劑為除化合物1以外之CFTR調節劑，亦即具有調節CFTR活性之效應之藥劑。示範性此等藥劑包括阿塔魯任(「PTC124®」；3-[5-(2-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基]苯甲酸)、西那普肽(sinapultide)、蘭可夫肽(lancovutide)、地來司他(depelestat)(一種人類重組嗜中性球彈性蛋白酶抑制劑)及考前列酮(cobiprostone)(7-{(2R,4aR,5R, 7aR)-2-[(3S)-1,1-二氟-3-甲基戊基]-2-羥基-6-側氧基八氫環戊[b]哌喃-5-基}庚酸)。

在另一實施例中，另一藥劑為營養劑。示範性營養劑包括胰脂肪酶(pancrelipase)(胰酶替代物)，包括Pancrease®、Pancreacarb®、Ultrase®或Creon®、Liprotomase®(以前稱為Trizytek®)、Aquadeks®或麩胱甘肽吸入劑。在一實施例中，另一營養劑為胰脂肪酶。

在另一實施例中，另一藥劑為選自以下之化合物：慶大黴素(gentamicin)、薑黃素(curcumin)、環磷醯胺、4-苯基丁酸鹽、美格魯特(miglustat)、非洛地平(felodipine)、尼莫地平(nimodipine)、根皮紅B(Philoxin B)、金雀異黃酮(geniestein)、洋元荽黃素(Apigenin)、cAMP/cGMP調節劑(諸如諾普利蘭(rolipram)、昔多芬、米力農(milrinone)、他達拉非(tadalafil)、胺利酮(amrinone)、異丙基腎上腺素(isoproterenol)、沙丁胺醇及沙美特羅(almeterol))、去氧精胍菌素(deoxyspergualin)、HSP 90抑制劑、HSP 70抑制劑、蛋白體抑制劑(諸如環氧黴素(epoxomicin)、乳胞素(lactacystin)等)。

在另一實施例中，另一藥劑為選自以下之化合物：3-胺基-6-(4-氟-苯基)-5-三氟甲基-吡啶-2-甲酸(3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；5-胺基-6'-甲基-3-三氟甲基-[2,3]聯吡啶-6-甲酸(3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-6-環丙基-N-(3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙基)-5-(三氟甲基)吡啶甲醯胺；3-胺基-6-甲氧基-N-(3,3,3-三氟-2-羥基-2-(三氟甲基)丙基)-5-(三氟 甲基)吡啶甲醯胺；3-胺基-6-(4-氟-苯基)-5-三氟甲基-吡啶-2-甲酸((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-2-甲酸((S-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-2-甲酸((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-6-(2,4-二氯-苯基)-5-三氟甲基-吡啶-2-甲酸((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-6-(2,4-二氯-苯基)-5-三氟甲基-吡啶-2-甲酸((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-6-(4-氟-苯基)-5-三氟甲基-吡啶-2-甲酸(2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-5,6-雙-三氟甲基-吡啶-2-甲酸((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-5,6-雙-三氟甲基-吡啶-2-甲酸((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；(S)-3-胺基-6-乙氧基 -N-(3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基丙基)-5-(三氟 甲基)吡啶甲醯胺；3-胺基-6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-2-甲酸((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-6-甲氧基-5-三氟甲基-吡啶-2-甲酸((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-6-(4-氟-苯基)-5-三氟甲基-吡啶-2-甲酸(3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-5,6-雙-三氟甲基-吡啶-2-甲酸((S)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺；3-胺基-5,6-雙-三氟甲基-吡啶-2-甲酸((R)-3,3,3-三氟-2-羥基-2-甲基-丙基)-醯胺或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中，另一藥劑為美國專利第8,247,436號及國際PCT公開案WO 2011113894中揭露之化合物，該專利及該公開案以全文引用的方式併入本文中。

在其他實施例中，另一藥劑為WO 2004028480、WO 2004110352、WO 2005094374、WO 2005120497或WO 2006101740中揭露之化合物。在另一實施例中，另一藥劑為展現CFTR調節活性之苯并[c]喹嗪鎓衍生物或展現CFTR調節活性之苯并哌喃衍生物。在另一實施例中，另一藥劑為揭露於美國專利第7,202,262號、美國專利第6,992,096號、US20060148864、US20060148863、US20060035943、US20050164973、WO2006110483、WO2006044456、WO2006044682、WO2006044505、WO2006044503、WO2006044502或WO2004091502中之化合物。在另一實施例中，另一藥劑為揭露於WO2004080972、WO2004111014、WO2005035514、WO2005049018、WO2006099256、WO2006127588或WO2007044560中之化合物。在另一實施例中，另一藥劑為N-(5-羥基-2,4-二第三丁基-苯基)-4-側氧基-1H-喹啉-3-甲醯胺。

在另一實施例中，另一藥劑為Moli1901(蘭可夫肽)。在另一實施例中，另一藥劑為P-552-02。在另一實施例中，另一藥劑為埃羅替克(Aerolyitic)。在另一實施例中，另一藥劑為QAU145。在另一實施例中，另一藥劑為科斯通(Cayston)(用於吸入溶液之胺曲南)。在另一實施例中，另一藥劑為阿瑞克斯(Arikace)(脂質體阿米卡星)。在另一實施例中，另一藥劑為優曲沙(Ultresa)(胰脂肪酶)。在另一實施例中，另一藥劑為α-1-抗胰蛋白酶(A1AT或AAT-1)。

在一實施例中，5至300mg化合物1可向有需要之個體投 與，隨後共投與100至300mg N-(5-羥基-2,4-二第三丁基-苯基)-4-側氧基-1H-喹啉-3-甲醯胺(化合物2)。在此等實施例中，劑量可藉由投與一或多個本發明之錠劑來達成。化合物2可以包含化合物2及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物形式投與。投藥持續時間可延續直至達成疾病改善或直至個體之醫師建議停止，例如投藥持續時間可為小於1週、1週、2週、3週或1個月或1個月以上。僅單獨化合物1之投藥時期可先於共投藥時期。舉例而言，可持續2週投與100mg化合物1，隨後再持續1週共投與150mg或250mg化合物2。

在一實施例中，10、30、100或150mg化合物1可持續1週、2週、3週、4週(28天)或1個月或1個月以上向有需要之個體投與。

在一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向個體投與。在一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與50mg化合物2。在一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與50mg化合物2。在一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與100mg化合物2。在一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與100mg化合物2。在一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與150mg化合物2。在一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與150mg化合物2。在另一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與250mg化合物2。在另一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與250mg化合物2。在此等實施例中，劑量可藉由投與一或多個本發明之錠劑來達成。化合物2可以包含化合物2及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物形式投與。投藥持續時間可延續直至達成疾病改善或直至個體之醫師建議停止，例如投藥持續時間可為小於1週、1週、2週、3週或1個月或1個月以上。僅單獨化合物1之投藥時期可先於共投藥時期。舉例而言，可持續2週投與10mg化合物1，隨後再持續1週共投與150mg 或250mg化合物2。

在一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向個體投與。在一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與50mg化合物2。在一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與50mg化合物2。在一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與100mg化合物2。在一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與100mg化合物2。在一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與150mg化合物2。在一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與150mg化合物2。在另一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與250mg化合物2。在另一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與250mg化合物2。在此等實施例中，劑量可藉由投與一或多個本發明之錠劑來達成。化合物2可以包含化合物2及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物形式投與。投藥持續時間可延續直至達成疾病改善或直至個體之醫師建議停止，例如投藥持續時間可為小於1週、1週、2週、3週或1個月或1個月以上。僅單獨化合物1之投藥時期可先於共投藥時期。舉例而言，可持續2週投與30mg化合物1，隨後再持續1週共投與150mg或250mg化合物2。

在一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向個體投與。在一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與50mg化合物2。在一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與50mg化合物2。在一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與100mg化合物2。在一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與100mg化合物2。在一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向有需 要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與150mg化合物2。在一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與150mg化合物2。在另一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與250mg化合物2。在另一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與250mg化合物2。在此等實施例中，劑量可藉由投與一或多個本發明之錠劑來達成。化合物2可以包含化合物2及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物形式投與。投藥持續時間可延續直至達成疾病改善或直至個體之醫師建議停止，例如投藥持續時間可為小於1週、1週、2週、3週或1個月或1個月以上。僅單獨化合物1之投藥時期可先於共投藥時期。舉例而言，可持續2週投與100mg化合物1，隨後再持續1週共投與150mg或250mg化合物2。

在一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向個體投與。在一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與50mg化合物2。在一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與50mg化合物2。在一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與100mg化合物2。在一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與100mg化合物2。在一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與150mg化合物2。在一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與150mg化合物2。在另一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天一次(QD)共投與250mg化合物2。在另一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與250mg化合物2。在此等實施例中，劑量可藉由投與一或多個本發明之錠劑來達成。化合物2可以包含化合物2及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物形式投與。投藥持續時間可延續直至達成疾病改善或直至個體之醫師建議停止，例如投藥持續時間可為小於1週、1週、2週、 3週或1個月或1個月以上。僅單獨化合物1之投藥時期可先於共投藥時期。舉例而言，可持續2週投與100mg化合物1，隨後再持續1週共投與150mg或250mg化合物2。

在一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與50mg化合物2。在一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與100mg化合物2。在一實施例中，10mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與150mg化合物2。在另一實施例中，10mg化合物1可一天一次向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與250mg化合物2。

在一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與50mg化合物2。在一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與100mg化合物2。在一實施例中，30mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與150mg化合物2。在另一實施例中，30mg化合物1可一天一次向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與250mg化合物2。

在一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與50mg化合物2。在一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與100mg化合物2。在一實施例中，100mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與150mg化合物2。在另一實施例中，100mg化合物1可一天一次向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與250mg化合物2。

在一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與50mg化合物2。在一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與100mg化合物2。在一實施例中，150mg化合物1可一天一次(QD)向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與150mg化合物2。在另一實施例中，150mg 化合物1可一天一次向有需要之個體投與，隨後每12小時共投與250mg化合物2。

在以上實施例中，劑量可藉由投與一或多個本發明之錠劑來達成。化合物2可以包含化合物2及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物形式投與。投藥持續時間可延續直至達成疾病改善或直至個體之醫師建議停止，例如投藥持續時間可為小於1週、1週、2週、3週或1個月或1個月以上。僅單獨化合物1之投藥時期可先於共投藥時期。舉例而言，可持續2週投與100mg化合物1，隨後再持續1週共投與150mg或250mg化合物2。

在一實施例中，50mg化合物1可一天兩次(BID)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與50mg化合物2。在一實施例中，50mg化合物1可一天兩次(BID)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與100mg化合物2。在一實施例中，50mg化合物1可一天兩次(BID)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與150mg化合物2。在另一實施例中，50mg化合物1可一天兩次(BID)向有需要之個體投與，隨後一天兩次(BID)共投與250mg化合物2。在此等實施例中，劑量可藉由投與一或多個本發明之錠劑來達成。化合物2可以包含化合物2及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物形式投與。投藥持續時間可延續直至達成疾病改善或直至個體之醫師建議停止，例如投藥持續時間可為小於1週、1週、2週、3週或1個月或1個月以上。僅單獨化合物1之投藥時期可先於共投藥時期。舉例而言，可持續2週投與50mg化合物1，隨後再持續1週共投與50mg或100mg化合物2。

當CFTR介導之疾病為囊性纖維化時，與化合物1或化合物及化合物2之劑量及投與時程相關之所有以上實施例皆同樣適用於同型接合或異型接合患者。

此等組合適用於治療本文所述之疾病，包括囊性纖維化。此等組合亦適用於本文所述之套組中。

本發明之組合物中存在之另一治療劑的量將不超過將通常以包含彼治療劑作為唯一活性藥劑之組合物形式投與之量。較佳地，另一 治療劑在當前揭露之組合物中之量將在通常存在於包含彼藥劑作為唯一治療活性藥劑之組合物中之量的約50%至100%之範圍內。

醫藥組合物之治療用途

在一態樣中，本發明亦提供一種治療患者之疾病、減輕患者之疾病之嚴重性或症狀性治療患者之疾病的方法，該方法包含向該患者，較佳哺乳動物投與有效量之本發明之醫藥組合物或錠劑，其中該疾病係選自囊性纖維化、哮喘、抽煙誘發之COPD、慢性支氣管炎、鼻竇炎、便秘、胰腺炎、胰腺功能不全、由先天性雙側不存在輸精管(CBAVD)引起之男性不育症、輕度肺病、特發性胰腺炎、過敏性支氣管肺麴菌病(ABPA)、肝病、遺傳性氣腫、遺傳性血色素沈著症、凝血-纖維蛋白溶解缺乏症(諸如蛋白質C缺乏症)、1型遺傳性血管性水腫、脂質加工缺乏症(諸如家族性高膽固醇血症)、1型乳糜微粒血症、無β脂蛋白血症、溶酶體儲存疾病(諸如I細胞疾病/假胡爾勒病)、黏多醣貯積症、桑得霍夫/泰-薩克斯病、II型克里格勒-納賈爾病、多內分泌病變/高胰島素血症、糖尿病、拉倫侏儒症、髓過氧化酶缺乏症、原發性甲狀旁腺功能減退、黑素瘤、1型醣解CDG、先天性甲狀腺機能亢進、骨發生不全、遺傳性低纖維素原血症、ACT缺乏症、尿崩症(DI)、神經生長性DI、腎因性DI、恰克-馬利杜斯症候群、佩利措伊斯-梅茨巴赫病、神經退化性疾病(諸如阿茲海默氏病)、帕金森氏病、肌萎縮性側索硬化、進行性核上麻痺、皮克氏病、若干聚麩醯胺酸神經病症(諸如亨廷頓氏病)、I型脊髓小腦性共濟失調、脊髓及延髓肌肉萎縮、齒狀核紅核蒼白球丘腦下部核萎縮及肌強直性營養不良以及海綿狀腦病變(諸如遺傳性克羅伊茨費爾特-雅各布病(歸因於普里昂蛋白加工缺陷))、法布里病、斯脫司勒-史茵克症候群、COPD、乾眼病或休格連氏病、骨質疏鬆、骨量減少、骨癒合及骨生長(包括骨修復、骨再生、降低骨再吸收及增加骨沈積)、高哈姆氏症候群、氯化物通道病變(諸如先天性肌強直(湯姆遜及貝克爾形式))、III型巴特氏症候群、登特氏病、過度驚嚇反射症、癲癇症、溶酶體儲存疾病、安吉爾曼症候群、及原發性纖毛運動障礙(PCD)，其為表示遺傳性纖毛結構及/或功能病症之術語，包括伴有內臟易側之PCD(亦稱為卡塔格內症候群)、無內臟易側之PCD及纖毛發育不全。

在一態樣中，本發明亦提供一種治療患者之疾病、減輕患者之疾病之嚴重性或症狀性治療患者之疾病的方法，其包含向該患者，較佳哺乳動物投與有效量之本發明之醫藥組合物或錠劑，其中該疾病係選自伴有熱性癲癇發作附加症之全身性癲癇(GEFS+)、伴有熱性及無熱性癲癇發作之全身性癲癇、肌強直、先天性肌剛痙病、鉀惡化之肌強直、高鉀血週期性麻痺、LQTS、LQTS/布魯格達(Brugada)症候群、伴有耳聾之體染色體顯性LQTS、體染色體隱性LQTS、伴有畸形特徵之LQTS、先天性及獲得性LQTS、蒂莫西症候群(Timothy syndrome)、嬰幼兒持續性高胰島素血症性低血糖症(persistent hyperinsulinemic hypolglycemia of infancy)、擴張心肌病變、體染色體顯性LQTS、登特病、骨硬化病、III型巴特爾症候群、中心核疾病、惡性高熱症及兒茶酚胺性多形性心跳過速。

在一態樣中，本發明係有關一種治療患者之囊性纖維化、減輕患者之囊性纖維化之嚴重性或症狀性治療患者之囊性纖維化的方法，其包含向該患者，較佳哺乳動物投與有效量之本發明之醫藥組合物或錠劑，其中該患者具有CFTR遺傳突變N1303K、△I507或R560T。

在一態樣中，本發明係有關一種治療患者之囊性纖維化、減輕患者之囊性纖維化之嚴重性或症狀性治療患者之囊性纖維化的方法，其包含向該患者，較佳哺乳動物投與有效量之本發明之醫藥組合物或錠劑，其中該患者具有CFTR遺傳突變G551D。在另一實施例中，患者在G551D方面為同型接合。在另一實施例中，患者在G551D方面為異型接合。在另一實施例中，患者在G551D方面為異型接合，其中另一CFTR遺傳突變為以下任一者：△F508、G542X、N1303K、W1282X、R117H、R553X、1717-1G->A、621+1G->T、2789+5G->A、3849+10kbC->T、R1162X、G85E、3120+1G->A、△I507、1898+1G->A、3659delC、R347P、R560T、R334W、A455E、2184delA或711+1G->T。

在一態樣中，本發明係有關一種治療患者之囊性纖維化、減輕患者之囊性纖維化之嚴重性或症狀性治療患者之囊性纖維化的方法，其包含向該患者，較佳哺乳動物投與有效量之本發明之醫藥組合物或錠劑，其中該患者具有CFTR遺傳突變△F508。在另一實施例中，患者在△F508 方面為同型接合。在另一實施例中，患者在△F508方面為異型接合。在另一實施例中，患者在△F508方面為異型接合，其中另一CFTR遺傳突變為以下任一者：G551D、G542X、N1303K、W1282X、R117H、R553X、1717-1G->A、621+1G->T、2789+5G->A、3849+10kbC->T、R1162X、G85E、3120+1G->A、△I507、1898+1G->A、3659delC、R347P、R560T、R334W、A455E、2184delA或711+1G->T。

在某些實施例中，包含化合物1非晶形式及視情況另一藥劑 之醫藥學上可接受之組合物適用於治療在呼吸及非呼吸上皮之頂膜中展現殘餘CFTR活性之患者之囊性纖維化或減輕該等患者之囊性纖維化之嚴重性。殘餘CFTR活性在上皮表面處之存在可易於使用此項技術中已知之方法，例如標準電生理學技術、生物化學技術或組織化學技術加以偵測。此等方法使用活體內或離體電生理學技術、量測汗液或唾液Cl^-濃度或用以監測細胞表面密度之離體生物化學或組織化學技術鑒別CFTR活性。使用此等方法，可易於偵測就多種不同突變而言為異型接合或同型接合之患者中之殘餘CFTR活性，該等患者包括就最常見突變△F508以及諸如G551D突變或R117H突變之其他突變而言為同型接合或異型接合之患者。

在一實施例中，如本文所述之化合物1非晶形式或其醫藥學上可接受之組合物適用於治療在展現殘餘CFTR活性之某些基因型內之患者的囊性纖維化或減輕該等患者之囊性纖維化之嚴重性，該等基因型例如III類突變(調控或閘控受損)、IV類突變(傳導改變)或V類突變(合成降低)(Lee R.Choo-Kang,Pamela L.,Zeitlin,Type I,II,III,IV,and V cystic fibrosis Tansmembrane Conductance Regulator Defects and Opportunities of Therapy；Current Opinion in Pulmonary Medicine 6：521-529,2000)。展現殘餘CFTR活性之其他患者基因型包括就此等類別之一而言為同型接合或就任何其他突變類別(包括I類突變、II類突變或缺乏分類之突變)而言為異型接合之患者。

在一實施例中，如本文所述之化合物1非晶形式或其醫藥學上可接受之組合物適用於治療在某些臨床表型內之患者之囊性纖維化或減輕該等患者之囊性纖維化之嚴重性，該等表型例如通常與上皮頂膜中之殘 餘CFTR活性之量相關的中度至輕度臨床表型。此等表型包括展現胰腺功能不全之患者或診斷有特發性胰腺炎及先天性雙側不存在輸精管或輕度肺病之患者。

所需精確量將在個體與個體之間不同，視個體之物種、年齡及一般狀況；感染之嚴重性；特定藥劑；其投與模式及其類似因素而定。本發明化合物較佳以劑量單位形式調配以便於達成劑量之投與及均一性。如本文所用之表述「劑量單位形式」係指適於欲治療患者之藥劑的物理個別單元。然而，應瞭解本發明之化合物及組合物之總每日用量將由主治醫師在合理醫學判斷之範疇內決定。用於任何特定患者或生物體之特定有效劑量將取決於多種因素，包括所治療之病症及病症之嚴重性；所用特定化合物之活性；所用特定組合物；患者之年齡、體重、一般健康狀況、性別及膳食；所用特定化合物之投藥時間、投藥途徑及排泄速率；治療之持續時間；與所用特定化合物組合或同時使用之藥物；及醫學技術中熟知之類似因素。如本文所用之術語「患者」意謂動物，較佳為哺乳動物，且最佳為人類。

在另一態樣中，本發明提供一種用於治療患者之囊性纖維化之方法，其包含投與包含以下之組合物：a. 5至250mg (R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物1)；b. 填充劑；c. d. 崩解劑；e. 潤滑劑；及f. 助流劑，隨後以包含化合物2及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物形式共投與100至300mg N-(5-羥基-2,4-二第三丁基-苯基)-4-側氧基-1H-喹啉-3-甲醯胺(化合物2)；其中該患者具有導致在囊性纖維化跨膜傳導調控子胺基酸序列之位置 508處缺失苯丙胺酸之缺陷性基因，且其中該患者就該缺陷性基因而言為同型接合。

在此態樣之一實施例中，化合物1係呈化合物1非晶形式。

在此及其他實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約10mg之量存在於錠劑中。

在此及其他實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約30mg之量存在於錠劑中。

在此及其他實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約100mg之量存在於錠劑中。

在此及其他實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在此及其他實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在此及其他實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在此及其他實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在此及其他實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在此及其他實施例中，化合物1係一天投與一次。

在此及其他實施例中，投與150mg化合物2。

在此及其他實施例中，投與250mg化合物2。

在此及其他實施例中，化合物2係每12小時加以投與。

在此及其他實施例中，方法包含投與另一治療劑。

在此及其他實施例中，另一治療劑為黏液分解劑、支氣管擴張劑、抗生素、抗感染劑、消炎劑、除化合物2以外之CFTR調節劑或營養劑。

在另一態樣中，本發明提供一種用於治療患者之囊性纖維化之方法，其包含投與包含以下之組合物：a. 5至250mg (R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物1)；b. 填充劑；c. 崩解劑；d. 潤滑劑；及e. 助流劑，隨後以包含化合物2及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物形式共投與100至300mg N-(5-羥基-2,4-二第三丁基-苯基)-4-側氧基-1H-喹啉-3-甲醯 胺(化合物2)；其中該患者具有導致在囊性纖維化跨膜傳導調控子胺基酸序列之位置508處缺失苯丙胺酸之缺陷性基因。

在此及其他實施例中，化合物2可與化合物1同時、在其之前或在其之後投與。

在此態樣之一實施例中，化合物1係呈化合物1非晶形式。

在另一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約10mg之量存在於錠劑中。

在另一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約30mg之量存在於錠劑中。

在另一實施例中，化合物1或化合物1非晶形式係以約100mg之量存在於錠劑中。

在另一實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在另一實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在另一實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在另一實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在另一實施例中，錠劑具有下表中所述之配方：

在另一實施例中，化合物1係一天投與一次。

在另一實施例中，投與150mg化合物2。

在另一實施例中，投與250mg化合物2。

在另一實施例中，化合物2係每12小時加以投與。

在此等及其他實施例中，就缺陷性基因而言，患者為同型接合。

在另一實施例中，方法包含投與另一治療劑。

在另一實施例中，另一治療劑為黏液分解劑、支氣管擴張劑、抗生素、抗感染劑、消炎劑、除化合物2以外之CFTR調節劑或營養劑。

實例

方法及材料

調節示差掃描熱析法(MDSC)及示差掃描熱析法(DSC)

調節示差掃描熱析法(MDSC)用於測試化合物之非晶形式及噴霧乾燥分散體之玻璃轉移溫度。示差掃描熱析法(DSC)用於測定結晶物質之熔點及在不同多晶型物之間進行辨別。使用TA DSC Q2000示差掃描熱量計(TA Instruments,New Castle,DE)收集資料。用銦校正儀器。將約1-5mg樣品稱入使用具有1個孔之蓋壓接之鋁密封盤中。對於MDSC，樣品以每 60秒調節+/-1℃在2℃/分鐘加熱速率下自-20℃至220℃進行掃描。對於DSC，樣品在10℃/分鐘之加熱速率下自25℃至220℃進行掃描。藉由Thermal Advantage Q Series^TM軟體(版本：2.7.0.380)收集資料且藉由Universal Analysis軟體(版本：4.4A，構件：4.4.0.5)(TA Instruments,New Castle,DE)加以分析。

XRPD(X射線粉末繞射)

X射線粉末繞射用於表徵迄今為止產生之批次之實物形式及表徵所鑒別之不同多晶型物。在PANalytical X’pert Pro粉末X射線繞射儀(Almelo,the Netherlands)上收集化合物之XRPD資料。在室溫下在使用銅輻射(1.54060A)下記錄XRPD圖樣。使用Cu密封管在45kV、40mA下用鎳Kβ抑制濾波器產生X射線。入射光束鏡片包含可變發散狹縫以確保在樣品及衍射光束側上之照明長度恆定；快速線性固態偵測器以用掃描模式量測之有效長度2.12度2θ加以使用。將粉末樣品壓在零本底矽夾持器之齒狀區域上且進行旋轉以得到較佳統計資料。自4-40度2θ開始以步長0.017度及掃描階躍時間15.5秒量測對稱掃描。資料收集軟體為X’pert Data Collector(第2.2e版)。資料分析軟體為X’pert Data Viewer(第1.2d版)或X’pert Highscore(版本：2.2c)。

熱重分析(TGA)

TGA用於研究殘餘溶劑在所表徵批次中之存在，及鑒別樣品發生分解所處之溫度。在TA Q500熱重分析儀(TA Instruments,New Castle,DE)上收集TGA資料。重量約2-5mg之樣品在加熱速率10℃/分鐘下自25℃至300℃進行掃描。藉由Thermal Advantage Q Series^TM軟體(第2.5.0.255版)收集資料且藉由Universal Analysis軟體(第4.4A版，構件4.4.0.5)(TA Instruments,New Castle,DE)加以分析。

化合物1形式A單晶體結構測定

在配備有密封管Cu Kα源及Apex II CCD偵測器之Bruker Apex II繞射儀上獲得繞射資料。使用SHELX程式解析並細化結構(Sheldrick,G.M.,Acta Cryst.,(2008)A64,112-122)。基於強度統計資料及系統消光，以C2空間群解析並細化結構。使用異常繞射測定絕對組態。佛雷克 (Flack)參數細化至0.00(18)指示模型代表正確鏡像異構物[(R)]。

固態NMR

在配備有Bruker-Biospin 4mm HFX探針之Bruker-Biospin 400MHz大口徑光譜儀上進行固態NMR。將樣品壓入4mm ZrO₂轉子中且在魔角旋轉(MAS)條件下以旋轉速度12.5kHz進行旋轉。首先使用¹H MAS T₁飽和回收鬆弛實驗量測質子鬆弛時間以建立¹³C交叉極化(CP)MAS實驗之適當再循環延遲時間。碳CPMAS實驗之CP接觸時間設置為2ms。採用具有線性勻變(自50%至100%)之CP質子脈衝。基於外部參照樣品(甘胺酸)使哈特曼-哈恩(Hartmann-Hahn)匹配最佳化。以質子去偶記錄氟MAS光譜。TPPM15去偶序列與約100kHz之場強度一起用於獲得¹³C資料與¹⁹F資料兩者。

試劑及化合物

Vitride®(雙(2-甲氧基乙氧基)鋁氫化鈉[或 NaAlH₂(OCH₂CH₂OCH₃)₂]，65wt%之甲苯溶液)自Aldrich Chemicals購買。 3-氟-4-硝基苯胺自Capot Chemicals購買。5-溴-2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯自Alfa Aesar購買。2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-甲酸自Saltigo(Lanxess公司之分公司)購買。

在本申請案中之任何地方，當化合物之名稱可能未正確描述該化合物之結構時，結構優先於名稱且以結構為準。

合成化合物1

酸氯化物部分

合成(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-1-乙酸乙酯-乙腈

反應器用氮氣淨化且以900mL甲苯裝料。經由氮氣噴射使溶劑脫氣不少於16小時。接著向反應器中依次裝入Na₃PO₄(155.7g，949.5mmol)及雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)(7.28g，12.66mmol)。在23℃下歷經10 分鐘自氮氣淨化之加料漏斗裝入10% w/w之第三丁基膦己烷溶液。使混合物攪拌50分鐘，此時歷經1分鐘添加5-溴-2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯(75g，316.5mmol)。在另外攪拌50分鐘之後，混合物歷經5分鐘以氰基乙酸乙酯(71.6g，633.0mmol)裝料，隨後一次性以水(4.5mL)裝料。歷經40分鐘將混合物加熱至70℃且每1-2小時藉由HPLC分析反應物至產物之轉化百分比。在觀測到完全轉化之後(通常在5-8小時之後100%轉化)，冷卻混合物至20-25℃且經矽藻土墊過濾。矽藻土墊用甲苯(2×450mL)沖洗且在60-65℃下在真空下濃縮合併之有機物至300mL。濃縮物以225mL DMSO裝料且在70-80℃下在真空下濃縮直至溶劑停止有效蒸餾。冷卻溶液至20-25℃且用DMSO稀釋至900mL以為步驟2作準備。¹H NMR(500MHz, CDCl₃)δ 7.16-7.10(m,2H),7.03(d,J=8.2Hz,1H),4.63(s,1H),4.19(m,2H), 1.23(t,J=7.1Hz,3H)。

合成(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-乙腈。

來自以上之(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-1-乙酸乙酯-乙腈之DMSO溶液歷經20分鐘在維持內部溫度<40℃下以3N HCl(617.3mL，1.85mol)裝料。接著歷經1小時加熱混合物至75℃且每1-2小時藉由HPLC分析轉化%。當觀測到轉化率>99%時(通常在5-6小時之後)，冷卻反應至20-25℃且用MTBE(2×525mL)以足以使在萃取期間達成完全相分離之時間進行萃取。合併之有機萃取物用5% NaCl(2×375mL)洗滌。接著轉移溶液至適於1.5-2.5托(Torr)真空蒸餾之配備有冷卻接受燒瓶之設備中。在<60℃下在真空下濃縮溶液以移除溶劑。接著在125-130℃(烘箱溫度)及1.5-2.0托下自所得油狀物蒸餾(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-乙腈。(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-乙腈以澄清油狀物形式以66%產率與5-溴-2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯分離(2步)且HPLC純度為91.5% AUC(對應於w/w分析95%)。¹H NMR(500MHz,DMSO)δ 7.44(br s,1H),7.43(d,J=8.4Hz,1H),7.22(dd,J=8.2,1.8Hz,1H),4.07(s,2H)。

合成(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲腈。

經由氮氣噴射使50% w/w NaOH儲備溶液脫氣不少於16小 時。以類似方式使適當量之MTBE脫氣數小時。向用氮氣淨化之反應器中依次裝入脫氣MTBE(143mL)、(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-乙腈(40.95g,207.7mmol)及溴化四丁銨(2.25g，10.38mmol)。記錄混合物體積且經由氮氣噴射使混合物脫氣30分鐘。裝入足夠脫氣MTBE以使混合物返回脫氣之前的原始體積。在23.0℃下歷經10分鐘向攪拌混合物中裝入脫氣50% w/w NaOH(143mL)，隨後歷經30分鐘裝入1-溴-2-氯乙烷(44.7g，311.6mmol)。以1小時間隔藉由HPLC分析反應之轉化%。在取樣之前，停止攪拌且使各相分離。對頂部有機相取樣以進行分析。當觀測到轉化%>99%時(通常在2.5-3小時之後)，冷卻反應混合物至10℃且在維持溫度<25℃之速率下以水(461mL)裝料。調整溫度至20-25℃且分離各相。注意：應允許有足夠時間來達成完全相分離。水相用MTBE(123mL)萃取，且合併之有機相用1N HCl(163mL)及5% NaCl(163mL)洗滌。在40-50℃下在真空下濃縮(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲腈於MTBE中之溶液至164mL。溶液以乙醇(256mL)裝料且在50-60℃下在真空下再次濃縮至164mL。裝入乙醇(256mL)且在50-60℃下在真空下濃縮混合物至164mL。冷卻所得混合物至20-25℃且用乙醇稀釋至266mL以為下一步驟作準備。¹H NMR(500MHz,DMSO)δ 7.43(d,J=8.4Hz,1H),7.40(d,J=1.9Hz,1H),7.30(dd,J=8.4,1.9Hz,1H),1.75(m,2H),1.53(m,2H)。

合成1-(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲酸。

來自先前步驟之(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲腈於乙醇中之溶液歷經20分鐘以6N NaOH(277mL)裝料且歷經45分鐘加熱至內部溫度77-78℃。在16小時之後，藉由HPLC監測反應進 展。注意：監測(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲腈與由部分水解(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲腈產生之一級醯胺兩者之消耗。當觀測到轉化%>99%時(通常在16小時之後100%轉化)，冷卻反應混合物至25℃且以乙醇(41mL)及DCM(164mL)裝料。冷卻溶液至10℃且在維持溫度<25℃之速率下以6N HCl(290mL)裝料。在升溫至20-25℃之後，使各相分離。收集底部有機相且頂部水相用DCM(164mL)反萃取。注意：水相在萃取之前及之後由於無機鹽之濃度較高而有點混濁。合併有機物且在真空下濃縮至164mL。裝入甲苯(328mL)且在70-75℃下使混合物冷凝至164mL。冷卻混合物至45℃，以MTBE(364mL)裝料且在60℃下攪拌20分鐘。冷卻溶液至25℃且拋光過濾以移除殘餘無機鹽。MTBE(123mL)用於沖洗反應器及所收集固體。轉移合併之有機物至清潔反應器中以為下一步驟作準備。

分離1-(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲酸。

在真空下濃縮來自先前步驟之1-(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲酸之溶液至164mL，以甲苯(328mL)裝料且在70-75℃下濃縮至164mL。接著加熱混合物至100-105℃以得到均質溶液。在彼溫度下攪拌30分鐘之後，歷經2小時冷卻溶液至5℃且在5℃下維持3小時。接著過濾混合物且用冷1：1甲苯/正庚烷(2×123mL)洗滌反應器及所收集固體。在55℃下在真空下乾燥物質17小時以提供呈灰白色結晶固體狀之1-(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲酸。1-(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲酸以79%產率與(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-乙腈分離(3步，包括分離)且HPLC純度為99.0% AUC。ESI-MS m/z calc.242.04,found 241.58(M+1)⁺；¹H NMR(500MHz,DMSO)δ 12.40(s,1H),7.40(d,J=1.6Hz,1H),7.30(d,J=8.3Hz,1H),7.17(dd,J=8.3,1.7Hz,1H),1.46(m,2H),1.17(m,2H)。

酸氯化物部分之替代性合成

合成(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-甲醇。

於甲苯(10體積)中使市售2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-甲酸(1.0當量)漿化。在維持溫度在15-25℃下之速率下經由加料漏斗添加Vitride®(2當量)。在加料結束時，使溫度增加至40℃持續2小時，接著在維持溫度在40-50℃下經由加料漏斗小心添加10%(w/w)NaOH水溶液(4.0當量)。在又攪拌30分鐘之後，在40℃下使各層分離。冷卻有機相至20℃，接著用水(2×1.5體積)洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且濃縮以得到粗(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-甲醇，其直接用於下一步驟中。

合成5-氯甲基-2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯.

將(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-甲醇(1.0當量)溶解於MTBE(5體積)中。添加催化量之DMAP(1mol%)且經由加料漏斗添加SOCl₂(1.2當量)。在維持反應器中之溫度在15-25℃下之速率下添加SOCl₂。使溫度增加至30℃持續1小時，接著冷卻至20℃，隨後在維持溫度在小於30℃下經由加料漏斗添加水(4體積)。在又攪拌30分鐘之後，使各層分離。攪拌有機層且添加10%(w/v)NaOH水溶液(4.4體積)。在攪拌15至20分鐘之後，使各層分離。接著乾燥(Na₂SO₄)、過濾且濃縮有機相以得到粗5-氯甲基-2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯，其直接用於下一步驟中。

合成(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-乙腈。

在維持溫度在30-40℃之間下添加5-氯甲基-2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯(1當量)於DMSO(1.25體積)中之溶液至NaCN(1.4當量)於DMSO(3體積)中之漿液中。攪拌混合物1小時，接著依次添加水(6體積)及MTBE(4體積)。在攪拌30分鐘之後，分離各層。水層用MTBE(1.8體積)萃取。合併之有機層用水(1.8體積)洗滌、乾燥(Na₂SO₄)、過濾且濃縮以得到粗(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-乙腈(95%)，其直接用於下一步驟中。

其餘步驟與以上對於酸部分之合成所述相同。

胺部分

合成2-溴-5-氟-4-硝基苯胺。

燒瓶依次以3-氟-4-硝基苯胺(1.0當量)及乙酸乙酯(10體積)裝料且攪拌以溶解所有固體。以逐份方式添加N-溴丁二醯亞胺(1.0當量)以維持內部溫度22℃。在反應結束時，在旋轉蒸發器上在真空中濃縮反應混合物。於蒸餾水(5體積)中使殘餘物漿化以溶解並移除丁二醯亞胺。(丁二醯亞胺亦可藉由水處理程序移除。)傾析水且固體於2-丙醇(5體積)中漿化隔夜。過濾所得漿液且濕濾餅用2-丙醇洗滌，在真空烘箱中在50℃下伴隨N₂排放加以乾燥隔夜直至達成恆重。分離出淺黃色褐色固體(50%產率，97.5% AUC)。其他雜質為溴區域異構物(1.4% AUC)及二溴加合物(1.1% AUC)。¹H NMR(500MHz,DMSO)

δ 8.19(1 H,d,J=8.1Hz),7.06(br.s,2 H),6.64(d,1 H,J=14.3Hz)。

合成苯甲基乙醇酸化-4-銨-2-溴-5-氟苯胺甲苯磺酸鹽。

在N₂下徹底乾燥燒瓶以以下各物裝料：活化粉末狀4A分 子篩(以2-溴-5-氟-4-硝基苯胺計，50wt%)、2-溴-5-氟-4-硝基苯胺(1.0當量)、過氯酸鋅二水合物(20mol%)及甲苯(8體積)。在室溫下攪拌混合物NMT 30分鐘。最後，以穩定流方式添加含(R)-苯甲基縮水甘油醚(2.0當量)之甲苯(2體積)。加熱反應至80℃(內部溫度)且攪拌約7小時或直至2-溴-5-氟-4-硝基苯胺<5% AUC。

冷卻反應至室溫且依次添加矽藻土(50wt%)及乙酸乙酯(10體積)。過濾所得混合物以移除矽藻土及分子篩且用乙酸乙酯(2體積)洗滌。濾液用氯化銨溶液(4體積，20% w/v)洗滌。有機層用碳酸氫鈉溶液(4體積×2.5% w/v)洗滌。在旋轉蒸發器上在真空中濃縮有機層。將所得漿液溶解於乙酸異丙酯(10體積)中且轉移此溶液至Buchi氫化器中。

氫化器以5wt% Pt(S)/C(1.5mol%)裝料且在30℃(內部溫度)下在N₂下攪拌混合物。反應依次用N₂及氫氣沖洗。調整氫化器壓力至1巴(Bar)氫氣且快速(>1200rpm)攪拌混合物。在反應結束時，催化劑經矽藻土墊過濾且用二氯甲烷(10體積)洗滌。在真空中濃縮濾液。任何剩餘乙酸異丙酯用二氯甲烷(2體積)處理且在旋轉蒸發器上濃縮至乾燥。

將所得殘餘物溶解於二氯甲烷(10體積)中。添加對甲苯磺酸單水合物(1.2當量)且攪拌隔夜。過濾產物且用二氯甲烷(2體積)洗滌並抽吸乾燥。轉移濕濾餅至乾燥盤中且置放入真空烘箱中並在45℃下伴隨N₂排放加以乾燥直至達成恆重。以灰白色固體形式分離出苯甲基乙醇酸化-4-銨-2-溴-5-氟苯胺甲苯磺酸鹽。

對掌性純度測定為>97% ee。

合成(3-氯-3-甲基丁-1-炔基)三甲基矽烷。

將炔丙醇(1.0當量)裝入容器中。添加鹽酸水溶液(37%，3.75體積)且開始攪拌。在固體醇溶解期間，觀測到適度吸熱(5-6℃)。將所得混合物攪拌隔夜(16小時)，從而所得混合物變成暗紅色。30L夾套容器以接著冷卻至10℃之水(5體積)裝料。在維持混合物之內部溫度低於25℃下藉由真空緩慢轉移反應混合物至水中。添加己烷(3體積)且攪拌所得混合物0.5 小時。使各相沈降且排放並丟棄水相(pH<1)。使用旋轉蒸發器在真空中濃縮有機相，從而提供呈紅色油狀之產物。

合成(4-(苯甲基氧基)-3,3-二甲基丁-1-炔基)三甲基矽烷。

方法A

此部分中之所有當量及體積描述詞皆基於250g反應。將鎂鏇屑(69.5g，2.86mol，2.0當量)裝入3L 4頸反應器中且在氮氣下用磁攪拌器攪拌0.5小時。將反應器浸漬於冰-水浴中。在攪拌下緩慢添加炔丙基氯化物(250g，1.43mol，1.0當量)於THF(1.8L，7.2體積)中之溶液至反應器中直至觀測到初始溫升(約10℃)。使用¹H-NMR光譜術，藉由IPC確認格里納(Grignard)試劑形成。一旦溫升減弱，即在維持批料溫度<15℃下緩慢添加溶液之其餘部分。加料需要約3.5小時。將所得暗綠色混合物傾析至2L加蓋瓶中。

此部分中之所有當量及體積描述詞皆基於500g反應。22L反應器以苯甲基氯甲基醚(95%，375g，2.31mol，0.8當量)於THF(1.5L，3體積)中之溶液裝料。於冰-水浴中冷卻反應器。合併如上所述製備之兩批格里納試劑且接著在維持批料溫度低於25℃下經由加料漏斗緩慢添加至苯甲基氯甲基醚溶液中。加料需要1.5小時。將反應混合物攪拌隔夜(16小時)。

此部分中之所有當量及體積描述詞皆基於1kg反應。於30L夾套反應器中製備15%氯化銨之溶液(1.5kg於8.5kg水中，10體積)。冷卻溶液至5℃。合併如上所述製備之兩個格里納反應混合物且接著經由集管容器轉移至氯化銨溶液中。在保持內部溫度低於25℃之速率下進行之此淬滅中觀測到溫升。一旦轉移完成，即將容器夾套溫度設置成25℃。添加己烷(8L，8體積)且攪拌混合物0.5小時。在使各相沈降之後，排放並丟棄水相(pH 9)。剩餘有機相用水(2L，2體積)洗滌。使用22L旋轉蒸發器在真空中濃縮有機相，從而提供呈橙色油狀之粗產物。

方法B

將鎂鏇屑(106g，4.35mol，1.0當量)裝入22L反應器中且 接著懸浮於THF(760mL，1體積)中。於冰-水浴中冷卻容器以使批料溫度達到2℃。緩慢添加炔丙基氯化物(760g，4.35mol，1.0當量)於THF(4.5L，6體積)中之溶液至反應器中。在添加100mL之後，停止加料且攪拌混合物直至觀測到13℃溫升，從而指示格里納試劑開始形成。一旦溫升減弱，即在維持批料溫度<20℃下緩慢添加另一500mL炔丙基氯化物溶液。使用¹H-NMR光譜術，藉由IPC確認格里納試劑形成。在維持批料溫度<20℃下緩慢添加炔丙基氯化物溶液之其餘部分。加料需要約1.5小時。攪拌所得暗綠色溶液0.5小時。使用¹H-NMR光譜術，藉由IPC確認格里納試劑形成。將純苯甲基氯甲基醚裝入反應器加料漏斗中且接著在維持批料溫度低於25℃下逐滴添加至反應器中。加料需要1.0小時。將反應混合物攪拌隔夜。使用如方法A中之相同程序及物質相對量進行水性處理及濃縮以得到呈橙色油狀之產物。

合成4-苯甲基氧基-3,3-二甲基丁-1-炔。

30L夾套反應器以接著冷卻至5℃之甲醇(6體積)裝料。添加氫氧化鉀(85%，1.3當量)至反應器中。當氫氧化鉀溶解時觀測到15-20℃溫升。將夾套溫度設置成25℃。添加4-苯甲基氧基-3,3-二甲基-1-三甲基矽烷基丁-1-炔(1.0當量)於甲醇(2體積)中之溶液且攪拌所得混合物直至如藉由HPLC監測反應完成。在25℃下之典型反應時間為3-4小時。反應混合物用水(8體積)稀釋且接著攪拌0.5小時。添加己烷(6體積)且攪拌所得混合物0.5小時。使各相沈降且接著排放並丟棄水相(pH 10-11)。有機相依次用KOH(85%，0.4當量)於水(8體積)中之溶液及水(8體積)洗滌。接著使用旋轉蒸發器濃縮有機相，從而產生呈黃色-橙色油狀之標題物質。此物質之典型純度在80%範圍內，主要存在單一雜質。¹H NMR(400MHz,C₆D₆)δ 7.28(d,2 H,J=7.4Hz),7.18(t,2 H,J=7.2Hz),7.10(d,1H,J=7.2Hz),4.35(s,2 H),3.24(s,2 H),1.91(s,1 H),1.25(s,6 H)。

合成N-苯甲基乙醇酸化-5-胺基-2-(2-苯甲基氧基-1,1-二甲 基乙基)-6-氟吲哚。

方法A

合成苯甲基乙醇酸化4-胺基-2-(4-苯甲基氧基-3,3-二甲基丁-1-炔基)-5-氟苯胺。

藉由於EtOAc(5體積)及飽和NaHCO₃溶液(5體積)中攪拌固體直至獲得澄清有機層來使苯甲基乙醇酸化4-銨-2-溴-5-氟苯胺甲苯磺酸鹽游離鹼化。分離所得各層且有機層依次用飽和NaHCO₃溶液(5體積)及鹽水洗滌且在真空中濃縮以獲得呈油狀之苯甲基乙醇酸化4-銨-2-溴-5-氟苯胺甲苯磺酸鹽。

接著，燒瓶以苯甲基乙醇酸化4-銨-2-溴-5-氟苯胺甲苯磺酸鹽(游離鹼，1.0當量)、Pd(OAc)(4.0mol%)、dppb(6.0mol%)及粉末狀K₂CO₃(3.0當量)裝料且在室溫下與乙腈(6體積)一起攪拌。藉由伴隨排氣於N₂中鼓泡來使所得反應混合物脫氣約30分鐘。接著以快速流形式添加溶解於乙腈(2體積)中之4-苯甲基氧基-3,3-二甲基丁-1-炔(1.1當量)且加熱至80℃並攪拌直至4-銨-2-溴-5-氟苯胺甲苯磺酸鹽達成完全消耗。冷卻反應漿液至室溫且經矽藻土墊過濾並用乙腈(2體積)洗滌。在真空中濃縮濾液且將殘餘物再溶解於EtOAc(6體積)中。有機層用NH₄Cl溶液(20% w/v，4體積)及鹽水(6體積)洗滌兩次。濃縮所得有機層以產生棕色油狀物且照原樣用於下一反應中。

合成N-苯甲基乙醇酸化-5-胺基-2-(2-苯甲基氧基-1,1-二甲基乙基)-6-氟吲哚。

將苯甲基乙醇酸化4-胺基-2-(4-苯甲基氧基-3,3-二甲基丁-1-炔基)-5-氟苯胺之粗製油狀物溶解於乙腈(6體積)中且在室溫下添加(MeCN)₂PdCl₂(15mol%)。使用N₂在伴隨排氣下使所得混合物脫氣約30分鐘。接著在80℃下在N₂層下將反應混合物攪拌隔夜。冷卻反應混合物至室溫且經矽藻土墊過濾並用乙腈(1體積)洗滌濾餅。在真空中濃縮所得濾液且再溶解於EtOAc(5體積)中。添加Deloxane-II THP(以N-苯甲基乙醇酸化-5-胺基-2-(2-苯甲基氧基-1,1-二甲基乙基)-6-氟吲哚之理論產率計，5wt%)且在室溫下攪拌隔夜。混合物接著經二氧化矽墊(2.5吋深度、6吋直徑過濾器)過濾且用EtOAc(4體積)洗滌。濃縮濾液以獲得深棕色殘餘物，且照原樣用於下一反應中。

再純化粗N-苯甲基乙醇酸化-5-胺基-2-(2-苯甲基氧基-1,1-二甲基乙基)-6-氟吲哚：將粗N-苯甲基乙醇酸化-5-胺基-2-(2-苯甲基氧基-1,1-二甲基乙基)-6-氟吲哚溶解於二氯甲烷(約1.5體積)中且初始使用30% EtOAc/庚烷經二氧化矽墊過濾，其中丟棄雜質。二氧化矽墊接著用50% EtOAc/庚烷洗滌以分離N-苯甲基乙醇酸化-5-胺基-2-(2-苯甲基氧基-1,1-二甲基乙基)-6-氟吲哚直至在濾液中觀測到微弱顏色。在真空中濃縮此濾液以得到棕色油狀物，其在室溫下靜置時結晶。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ 7.38-7.34(m,4 H),7.32-7.23(m,6 H),7.21(d,1 H,J=12.8Hz),6.77(d,1H,J=9.0Hz),6.06(s,1 H),5.13(d,1H,J=4.9Hz),4.54(s,2 H),4.46(br.s,2 H),4.45(s,2 H),4.33(d,1 H,J=12.4Hz),4.09-4.04(m,2 H),3.63(d,1H,J=9.2Hz),3.56(d,1H,J=9.2Hz),3.49(dd,1H,J=9.8,4.4Hz),3.43(dd,1H,J=9.8,5.7Hz),1.40(s,6 H)。

合成N-苯甲基乙醇酸化-5-胺基-2-(2-苯甲基氧基-1,1-二甲 基乙基)-6-氟吲哚。

方法B

將乙酸鈀(33g，0.04當量)、dppb(94g，0.06當量)及碳酸鉀(1.5kg，3.0當量)裝入反應器中。將游離鹼化油狀物苯甲基乙醇酸化4-銨-2-溴-5-氟苯胺(1.5kg，1.0當量)溶解於乙腈(8.2L，4.1體積)中且接著添加至反應器中。混合物用氮氣噴射NLT 1小時。添加4-苯甲基氧基-3,3-二甲基丁-1-炔(70%，1.1kg，1.05當量)於乙腈中之溶液至混合物中，接著用氮氣噴射NLT 1小時。加熱混合物至80℃且接著攪拌隔夜。藉由HPLC進行IPC且在16小時之後確定反應完成。冷卻混合物至環境溫度且接著經矽藻土墊(228g)過濾。反應器及矽藻土墊用乙腈(2×2L，2體積)洗滌。在22L旋轉蒸發器上濃縮合併之各相直至已收集8L溶劑，從而留下含粗產物之7L(3.5體積)乙腈。

將雙-乙腈二氯鈀(144g，0.15當量)裝入反應器中。將粗溶液轉移回反應器中且旋轉蒸發球管用乙腈(4L，2體積)洗滌。合併之溶液用氮氣噴射NLT 1小時。加熱反應混合物至80℃持續NLT 16小時。藉由HPLC進行之過程中控制顯示起始物質完全消耗。反應混合物經矽藻土(300g)過濾。反應器及濾餅用乙腈(3L，1.5體積)洗滌。藉由旋轉蒸發濃縮合併之濾液以獲得油狀物。將油狀物溶解於乙酸乙酯(8.8L，4.4體積)中。溶液依次用20%氯化銨(5L，2.5體積)及5%鹽水(5L，2.5體積)洗滌。添加矽膠(3.5kg，1.8重量當量)至有機相中，且攪拌隔夜。添加Deloxan THP II金屬清除劑(358g)及庚烷(17.6L)且攪拌所得混合物NLT 3小時。混合物經燒結玻璃漏斗過濾。濾餅用含30%乙酸乙酯之庚烷(25L)洗滌。在減壓下濃縮合併之濾液以得到呈棕色糊狀之N-苯甲基乙醇酸化-5-胺基-2-(2-苯甲基氧基-1,1- 二甲基乙基)-6-氟吲哚(1.4kg)。合成化合物1

合成苯甲基保護之化合物1。

於甲苯(2.5體積，以1-(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲酸計)中使1-(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲酸(1.3當量)漿化且加熱混合物至60℃。經由加料漏斗添加SOCl₂(1.7當量)。攪拌所得混合物2小時。使用旋轉蒸發器蒸餾出甲苯及過量SOCl₂。添加額外甲苯(2.5體積，以1-(2,2-二氟-1,3-苯并間二氧雜環戊烯-5-基)-環丙烷甲酸計)且再次蒸餾。將粗酸氯化物溶解於二氯甲烷(2體積)中且在維持0-3℃(內部溫度)下經由加料漏斗添加至N-苯甲基乙醇酸化-5-胺基-2-(2-苯甲基氧基-1,1-二甲基乙基)-6-氟吲哚(1.0當量)及三乙胺(2.0當量)於二氯甲烷(7體積)中之混合物中。在0℃下攪拌所得混合物4小時且接著升溫至室溫隔夜。添加蒸餾水(5體積)至反應混合物中且攪拌NLT 30分鐘並分離各層。有機相依次用20wt% K₂CO₃(4體積×2)及鹽水洗滌液(4體積)洗滌且濃縮以得到呈稠密棕色油狀之粗苯甲基保護之化合物1，其進一步使用二氧化矽墊過濾加以純化。

矽膠墊過濾：在活性碳Darco-G(10wt%，以苯甲基保護之化合物1之理論產率計)存在下將粗苯甲基保護之化合物1溶解於乙酸乙酯 (3體積)中且在室溫下攪拌隔夜。向此混合物中添加庚烷(3體積)且經矽膠墊(粗苯甲基保護之化合物1之2倍重量)過濾。二氧化矽墊用乙酸乙酯/庚烷(1：1，6體積)洗滌或直至在濾液中偵測到少許顏色。在真空中濃縮濾液以得到呈黏稠微紅棕色油狀之苯甲基保護之化合物1，且直接用於下一步驟中。

再純化：將苯甲基保護之化合物1再溶解於二氯甲烷(1體積，以苯甲基保護之化合物1之理論產率計)中且裝載於矽膠墊(粗苯甲基保護之化合物1之2倍重量)上。二氧化矽墊用二氯甲烷(2體積，以苯甲基保護之化合物1之理論產率計)洗滌且丟棄濾液。二氧化矽墊用30%乙酸乙酯/庚烷(5體積)洗滌且在真空中濃縮濾液以得到呈黏稠微紅橙色油狀之苯甲基保護之化合物1，且直接用於下一步驟中。

合成化合物1。

方法A

20L高壓釜用氮氣沖洗3次且接著以鈀/碳(Evonik E 101 NN/W，5%Pd，60%水分，200g，0.075mol，0.04當量)裝料。接著用氮氣沖洗高壓釜3次。經由抽吸添加粗苯甲基保護之化合物1(1.3kg，約1.9mol)於THF(8L，6體積)中之溶液至高壓釜中。對容器加蓋且接著用氮氣沖洗3次。在溫和攪拌下，在藉由用氮氣稀釋抽空至大氣下，用氫氣沖洗容器3次。用氫氣將高壓釜加壓至3巴且使攪拌速率增加至800rpm。觀測到快速氫氣攝取(溶解)。一旦攝取減弱，即加熱容器至50℃。

出於安全目的，在每一工作日結束時切斷恆溫器。用氫氣將 容器加壓至4巴且接著自氫氣槽分離。

在整整2天反應之後，添加更多Pd/C(60g，0.023mol，0.01當量)至混合物中。此藉由用氮氣沖洗3次且接著經由固體加料口添加催化劑來進行。照舊恢復反應。在整整4天之後，根據HPLC，因不僅起始物質而且對應於單苯甲基化中間物之峰消失，反應被視為完成。

反應混合物經矽藻土墊過濾。容器及濾餅用THF(2L，1.5體積)洗滌。接著用水濕潤矽藻土墊且適當丟棄濾餅。使用旋轉蒸發器濃縮合併之濾液及THF洗滌液，從而產生1kg呈黑色油狀之粗產物。

以下純化中之當量及體積係基於1kg粗物質。將粗黑色油狀物溶解於1：1乙酸乙酯-庚烷中。將混合物裝入於燒結漏斗中之已用1：1乙酸乙酯-庚烷飽和之矽膠墊(1.5kg，1.5重量當量)中。二氧化矽墊首先用1：1乙酸乙酯-庚烷(6L，6體積)且接著用純乙酸乙酯(14L，14體積)沖洗。溶離物收集於4個溶離份中，該等溶離份藉由HPLC加以分析。

以下純化中之當量及體積係基於0.6kg粗物質。藉由旋轉蒸發濃縮溶離份3以得到棕色泡沫狀物(600g)且接著再溶解於MTBE(1.8L，3體積)中。在環境溫度下將深棕色溶液攪拌隔夜，在該時間期間，發生結晶。添加庚烷(55mL，0.1體積)且將混合物攪拌隔夜。使用Buchner漏斗過濾混合物且濾餅用3：1 MTBE-庚烷(900mL，1.5體積)洗滌。使濾餅風乾1小時且接著在環境溫度下真空乾燥16小時，從而提供253g呈灰白色固體狀之化合物1。

用於以下純化之當量及體積係基於1.4kg粗物質。合併且濃縮來自以上矽膠過濾之溶離份2及3以及來自先前反應之物質以得到1.4kg黑色油狀物。使混合物再經受上述矽膠過濾(1.5kg矽膠，依次用3.5L，2.3體積之1：1乙酸乙酯-庚烷及9L，6體積之純乙酸乙酯溶離)，此在濃縮後得到褐色泡沫狀固體(390g)。

用於以下純化之當量及體積係基於390g粗物質。褐色固體不溶於MTBE中，因此將其溶解於甲醇(1.2L，3體積)中。使用配備有長路徑蒸餾頭之4L Morton反應器，將混合物蒸餾至2體積。添加MTBE(1.2L，3體積)且將混合物蒸餾回2體積。添加第二份MTBE(1.6L，4體積)且將混 合物蒸餾回2體積。添加第三份MTBE(1.2L，3體積)且將混合物蒸餾回3體積。藉由GC對餾出物之分析揭示其由約6%甲醇組成。將恆溫器設置成48℃(低於MTBE-甲醇共沸物之沸騰溫度52℃)。歷經2小時冷卻混合物至20℃，在該時間期間發生相對快速結晶。在攪拌混合物2小時之後，添加庚烷(20mL，0.05體積)且將混合物攪拌隔夜(16小時)。使用Buchner漏斗過濾混合物且濾餅用3：1 MTBE-庚烷(800mL，2體積)洗滌。使濾餅風乾1小時且接著在環境溫度下真空乾燥16小時，從而提供130g呈灰白色固體狀之化合物1。

方法B

將苯甲基保護之化合物1溶解於THF(3體積)中且接著汽提至乾燥以移除任何殘餘溶劑。將苯甲基保護之化合物1再溶解於THF(4體積)中且添加至含有5wt% Pd/C(2.5mol%，60%水分，Degussa E5 E101 NN/W)之氫化器中調整反應之內部溫度至50℃，且依次用N₂(×5)及氫氣(×3)沖洗。調整氫化器壓力至3巴氫氣且快速(>1100rpm)攪拌混合物。在反應結束時，催化劑經矽藻土墊過濾且用THF(1體積)洗滌。在真空中濃縮濾液以獲得棕色泡沫狀殘餘物。將所得殘餘物溶解於MTBE(5體積)中且添加0.5N HCl溶液(2體積)及蒸餾水(1體積)。攪拌混合物NLT 30分鐘且分離所得各層。有機相依次用10wt% K₂CO₃溶液(2體積×2)及鹽水洗滌液洗滌。添加有機層至含有矽膠(25wt%)、Deloxan-THP II(5wt%，75%水分)及Na₂SO₄之燒瓶中且攪拌隔夜。所得混合物經矽藻土墊過濾且用10% THF/MTBE(3體積)洗滌。在真空中濃縮濾液以得到呈淡褐色泡沫狀之粗化合物1。

自母液回收化合物1：選項A。

矽膠墊過濾：在真空中濃縮母液以獲得棕色泡沫狀物，將其溶解於二氯甲烷(2體積)中，且經二氧化矽墊(粗化合物1之3倍重量)過濾。二氧化矽墊用乙酸乙酯/庚烷(1：1，13體積)洗滌且丟棄濾液。二氧化矽墊用10% THF/乙酸乙酯(10體積)洗滌且在真空中濃縮濾液以得到呈淡褐色泡沫狀之化合物1。遵循以上結晶程序以分離剩餘化合物1。

自母液回收化合物1：選項B。

矽膠管柱層析：在於矽膠上進行層析(50%乙酸乙酯/己烷至 100%乙酸乙酯)之後，以淡褐色泡沫狀物形式分離出所要化合物。遵循以上結晶程序以分離剩餘化合物1。

化合物1之額外再結晶

將固體化合物1(1.35kg)懸浮於IPA(5.4L，4體積)中且接著加熱至82℃。在完全溶解(目視)後，緩慢添加庚烷(540mL，0.4體積)。冷卻混合物至58℃。緩慢冷卻混合物至51℃，在該時間期間發生結晶。關閉熱源且使再結晶混合物自然冷卻隔夜。使用台式Buchner漏斗過濾混合物且濾餅用IPA(2.7L，2體積)洗滌。在空氣流下在漏斗中乾燥濾餅8小時且接著在45-50℃下在真空中烘乾隔夜以得到1.02kg再結晶化合物1。

化合物1亦可藉由美國公開專利申請案US20090131492中揭露之若干合成途徑之一來製備，該申請案以引用的方式併入本文中。

下表6敘述化合物1之分析資料。

合成化合物1非晶形式

噴霧乾燥方法

將9.95g HG等級乙酸丁二酸羥丙基甲基纖維素(HPMCAS-HG)連同50mg月桂基硫酸鈉(SLS)一起稱入500ml燒杯中。混合MeOH(200ml)與固體。使物質攪拌4小時。為確保最大溶解，在攪拌2小時之後，音波處理溶液5分鐘，接著使其繼續攪拌剩餘2小時。極細小HPMCAS懸浮物保持在溶液中。然而，在傾斜容器之後，目測確定無膠質部分保持在容器壁上或黏著於底部。

將化合物1(10g)傾入500ml燒杯中，且使系統繼續攪拌。 使用以下參數噴霧乾燥溶液：

調配物描述：化合物1形式A/HPMCAS/SLS(50/49.5/0.5)

Buchi小型噴霧乾燥器

T進口(設定點) 145℃

T出口(起始) 75℃

T出口(結束) 55℃

氮氣壓力 75psi

吸氣器 100%

泵 35%

旋轉流量計 40mm

過濾器壓力 65毫巴

冷凝器溫度 -3℃

操作時間 1小時

回收約16g化合物1非晶形式(80%產率)。藉由XRPD(圖1)及DSC(圖2)確認化合物1非晶形式。

化合物1非晶形式之固態¹³C NMR光譜顯示於圖3中。表7提供相關峰之化學位移。

化合物1非晶形式之固態¹⁹F NMR光譜顯示於圖4中。具有星號之峰表示旋轉邊帶。表8提供相關峰之化學位移。

旋轉蒸發方法

將化合物1(約10g)溶解於180ml MeOH中且於50℃浴中旋轉蒸發成泡沫狀物。XRPD(圖5)及DSC(圖6)確認化合物1之非晶形式。

合成化合物1形式A

漿化方法

對於EtOAc、MTBE、乙酸異丙酯或DCM，將約40mg化合物1連同1-2ml任一以上溶劑一起添加至小瓶中。在室溫下攪拌漿液24小時至2週且藉由離心懸浮液收集(用過濾器)化合物1形式A。圖7揭露藉由以DCM作為溶劑執行此方法獲得之化合物1形式A的實際XRPD圖樣。表9列出圖7之峰。

由化合物1形式A之單一晶體結構計算之X射線繞射圖樣顯示於圖8中。表10列出圖8之計算峰。

化合物1形式A之DSC跡線顯示於圖9中。化合物1形式A之熔點出現在約172-178℃下。

對於EtOH/水溶液，添加約40mg化合物1至3個各別小瓶中。在第一小瓶中，添加1.35ml EtOH及0.15ml水。在第二小瓶中，添加0.75ml EtOH及0.75ml水。在第三小瓶中，添加0.15ml EtOH及1.35ml水。全部3個小瓶皆在室溫下攪拌24小時。接著分別離心各懸浮液(用過濾器)以收集化合物1形式A。

對於異丙醇/水溶液，添加約40mg化合物1至3個各別小瓶中。在第一小瓶中，添加1.35ml異丙醇及0.15ml水。在第二小瓶中，添加0.75ml異丙醇及0.75ml水。在第三小瓶中，添加0.15ml異丙醇及1.35ml水。全部3個小瓶皆在室溫下攪拌24小時。接著分別離心各懸浮液(用過濾器)以收集化合物1形式A。

對於甲醇/水溶液，添加約40mg化合物1至小瓶中。添加 0.5ml甲醇及1ml水且在室溫下攪拌懸浮液24小時。離心懸浮液(用過濾器)以收集化合物1形式A。

對於乙腈，連同2.0ml乙腈一起添加約50mg化合物1至小瓶中。在室溫下攪拌懸浮液24小時且藉由離心收集化合物1形式A(用過濾器)。

對於乙腈/水溶液，將約50mg化合物1溶解於2.5ml乙腈中以在音波處理之後得到澄清溶液。過濾溶液且抽取1ml至小瓶中。添加2.25ml水以得到混濁懸浮液。在室溫下攪拌懸浮液24小時且藉由離心收集化合物1形式A(用過濾器)。

緩慢蒸發方法

將約55mg化合物1溶解於0.5ml丙酮中以在音波處理之後得到澄清溶液。過濾溶液且抽取0.2ml至小瓶中。小瓶用其中戳有1個孔之帕拉膜覆蓋且使其靜置。藉由過濾收集再結晶化合物1形式A。

快速蒸發方法

對於異丙醇，將約43mg化合物1溶解於2.1ml異丙醇中以在音波處理之後得到澄清溶液。將溶液過濾入小瓶中且在不覆蓋下使其靜置。藉由過濾收集再結晶化合物1形式A。

對於甲醇，將約58mg化合物1溶解於0.5ml甲醇中以在音波處理之後得到澄清溶液。過濾溶液且抽取0.2ml至未覆蓋小瓶中並使其靜置。藉由過濾收集再結晶化合物1形式A。

對於乙腈，將約51mg化合物1溶解於2.5ml乙腈中以在音波處理之後得到澄清溶液。過濾溶液且抽取一半溶液至未覆蓋小瓶中並使其靜置。藉由過濾收集再結晶化合物1形式A。圖10揭露藉由此方法製備之化合物1形式A之XRPD圖樣。

反溶劑方法

對於EtOAc/庚烷，將約30mg化合物1溶解於1.5ml EtOAc中以在音波處理之後得到澄清溶液。過濾溶液且在緩慢攪拌下添加2.0ml庚烷至經過濾溶液中。再攪拌溶液10分鐘且使其靜置。藉由過濾收集再結晶化合物1形式A。圖11揭露藉由此方法製備之化合物1形式A之XRPD 圖樣。

對於異丙醇/水，將約21mg化合物1溶解於1.0ml異丙醇中以在音波處理之後得到澄清溶液。過濾溶液以得到0.8ml溶液。在緩慢攪拌下添加1.8ml水。添加額外0.2ml水以得到混濁懸浮液。停止攪拌5分鐘以得到澄清溶液。再攪拌溶液2分鐘且使其靜置。藉由過濾收集再結晶化合物1形式A。

對於乙醇/水，將約40mg化合物1溶解於1.0ml乙醇中以在音波處理之後得到澄清溶液。過濾溶液且添加1.0ml水。在室溫下攪拌溶液1天。藉由過濾收集再結晶化合物1形式A。

對於丙酮/水，將約55mg化合物1溶解於0.5ml丙酮中以在音波處理之後得到澄清溶液。過濾溶液且抽取0.2ml至小瓶中。添加1.5ml水，且接著添加額外0.5ml水以得到混濁懸浮液。在室溫下攪拌懸浮液1天。藉由過濾收集化合物1形式A。

下表11概述形成化合物1形式A之各種技術。

獲得化合物1形式A之單晶體資料，從而提供關於晶體結構之其他詳情，包括晶格尺寸及堆砌。

晶體製備

藉由緩慢蒸發自濃縮甲醇溶液(10mg/ml)獲得化合物1形式A之晶體。選擇尺寸為0.20×0.05×0.05mm之化合物1形式A之無色晶體，使用礦物油洗淨，封裝在顯微載片上且在Bruker APEXII繞射儀上定中心。獲得3批40個以倒易空間離析之框架以提供定向矩陣及初始晶胞參數。獲得最終晶胞參數且基於整個資料集加以細化。

實驗

使用0.5°階躍在30s暴露下以解析度0.83Å獲得各框架之倒易空間之繞射資料集。在室溫[295(2)K]下收集資料。使用APEXII軟體達成強度之積分及晶胞參數之細化。在資料收集之後對晶體之觀測顯示無分解跡象。

幾何學：所有esd(除兩個l.s.平面之間的二面角之esd之外)皆使用完全協方差矩陣加以估計。在估計距離、角度及扭轉角之esd時個別地考慮晶胞esd；晶胞參數之esd之間的相關性僅在其根據晶體對稱性加以定義時使用。對晶胞esd之近似(各向同性)處理用於估計涉及l.s.平面之esd。

資料收集：Apex II；晶胞細化：Apex II；資料簡化：Apex II；用於解析結構之程式：SHELXS97(Sheldrick,1990)；用於細化結構之程式：SHELXS97(Sheldrick,1997)；分子圖解：Mercury；用於製作發表材料之軟體：publCIF。

細化：相對於全部反射細化F²。加權R因子wR及擬合優度S係基於F²，習知R因子R係基於F，其中對於負性F²，F設置成0。臨限表達式F²>2σ(F²)僅用於計算R因子(gt)等且不與對細化反射數之選擇相關。基於F²之R因子在統計上約為基於F之R因子的兩倍大，且基於全部資料之R因子 將甚至更大。

化合物1形式A之基於單晶體X射線分析之構形圖顯示於圖12中。晶體結構揭示分子之密集堆砌。化合物1形式A為單斜晶，C2空間群，具有以下單位晶胞尺寸：a=21.0952(16)Å，b=6.6287(5)Å，c=17.7917(15)Å，β=95.867(6)°，γ=90°。

化合物1形式A之固態¹³C NMR光譜顯示於圖13中。表15提供相關峰之化學位移。

化合物1形式A之固態¹⁹F NMR光譜顯示於圖14中。具有星號之峰表示旋轉邊帶。表16提供相關峰之化學位移。

包含化合物1之示範性經口醫藥調配物

用表17-21中所列之組分及量製備錠劑。

由輥壓顆粒組合物形成錠劑

設備/製程

設備

篩檢/稱重

組合呈固體噴霧乾燥分散體形式之化合物1非晶形式與Cabot M5P並經20目篩網篩檢，且在32RPM下於2-L Turbula T2F振盪混合器中摻合10分鐘。

顆粒內摻合

添加AcDiSol、Avicel PH101及Foremost 310且再摻合15分鐘。接著使摻合物穿過Quadro Comill 197(篩網：0.032”R；葉輪：1607；RPM：1000RPM)。以上述摻合物之量(體積)之2-3倍，經20目篩網手工篩檢硬脂酸鎂。在32RPM下於Turbula混合器中摻合所得混合物4分鐘。

輥壓

在Korsch XL100旋轉壓錠機(重力饋料框，其具有½”直徑、圓形、平面工具)中預壓上述摻合物以獲得約0.72-0.77固體分數。藉由量測重量、高度及使用物質之在產生期間測定之真密度計算固體分數。對於旋轉壓錠預壓製程，壓製力將隨模具之填充體積及預壓物之最終重量而變化。用研缽及杵使預壓物輕微斷裂成約¼吋斷片。使斷裂預壓物穿過Quadro Comill 197(篩網：0.079”G；葉輪：1607；RPM：1000RPM)。

顆粒外摻合

以上述摻合物之量(體積)之2-3倍，經20目篩網手工篩檢顆粒外Cabot M5P。添加此顆粒外Cabot M5P預摻合物至主要摻合物中且在32RPM下於2-L Turbula T2F振盪混合器中摻合15分鐘。以上述摻合物之量(體積)之2-3倍，經20目篩網手工篩檢顆粒外硬脂酸鎂。添加此顆粒外硬脂酸鎂預摻合物至主要摻合物中且在32RPM下於Turbular混合器中摻合4分鐘。

壓製

使用具有重力饋料框及0.289”x 0.5879”改進卵形工具之 Korsch XL 100將錠劑壓製成目標硬度14.5±3.5kp。

薄膜塗佈

使用諸如O’Hara Labcoat之盤式塗佈機對錠劑進行薄膜塗佈。

列印

經薄膜塗佈之錠劑可用例如Hartnett Delta列印機在錠劑一面或兩面上印以某一字母組合。

劑量投與時程

在另一態樣中，本發明係關於一種治療個體之CFTR介導之疾病的方法，其包含向有需要之個體投與有效量之由本發明提供之醫藥組合物。在另一實施例中，醫藥組合物係每兩週一次向個體投與。在另一實施例中，醫藥組合物係一週一次向個體投與。在另一實施例中，醫藥組合物係每三天一次向個體投與。在另一實施例中，醫藥組合物係一天一次向個體投與。在一實施例中，當醫藥組合物為根據表1、2、3、4或5之錠劑時，給藥為一天一次。

分析

偵測及量測化合物之△F508-CFTR校正性質之分析

分析化合物之△F508-CFTR調節性質之膜電位光學方法。

光學膜電位分析利用與量測螢光變化之儀器，諸如電壓/離子探針讀取器(VIPR)(參見Gonzalez,J.E.,K.Oades，等人(1999)「Cell-based assays and instrumentation for screening ion-channel targets」Drug Discov Today 4(9)：431-439)組合的由Gonzalez及Tsien所述之電壓敏感性FRET感測器(參見Gonzalez,J.E.及R.Y.Tsien(1995)「Voltage sensing by fluorescence resonance energy transfer in single cells」Biophys J 69(4)：1272-80以及Gonzalez,J.E.及R.Y.Tsien(1997)「Improved indicators of cell membrane potential that use fluorescence resonance energy transfer」Chem Biol 4(4)：269-77)。

此等電壓敏感性分析係基於膜可溶性電壓敏感性染料DiSBAC₂(3)與螢光磷脂CC2-DMPE之間的螢光共振能量傳遞(FRET)之變 化，該CC2-DMPE連接於質膜之外片層且充當FRET供體。膜電位(V_m)之變化導致帶負電荷之DiSBAC₂(3)跨越質膜再分佈且自CC2-DMPE之能量傳遞之量相應地發生變化。使用VIPR^TM II監測螢光發射之變化，該VIPR^TM II為一種經設計以在96或384孔微量滴定盤中進行細胞基篩檢之積體液體處理器及螢光偵測器。

1.鑒別校正化合物

為鑒別校正與△F508-CFTR相關之遷移缺陷之小分子；開發單一添加HTS分析形式。在37℃下在存在或不存在(陰性對照)測試化合物下於無血清培養基中培育細胞16小時。作為陽性對照，在27℃下培育塗鋪於384孔盤中之細胞16小時以「溫度校正」△F508-CFTR。隨後用克雷布斯林格氏溶液(Krebs Ringers solution)沖洗細胞3次且用電壓敏感性染料裝載。為活化△F508-CFTR，連同無Cl^-培養基一起添加10μM毛喉素(forskolin)及CFTR增效劑金雀異黃酮(genistein)(20μM)至各孔中。添加無Cl^-培養基促進Cl^-反應於△F508-CFTR活化而流出且使用FRET基電壓感測器染料光學監測所產生之膜去極化。

2.鑒別增效劑化合物

為鑒別△F508-CFTR之增效劑，開發雙重添加HTS分析形式。在第一添加期間，添加有或無測試化合物之無Cl^-培養基至各孔中。在22秒之後，添加第二添加物：含有2-10μM毛喉素之無Cl^-培養基以活化△F508-CFTR。在兩次添加之後的細胞外Cl^-濃縮為28mM，此促進Cl^-反應於△F508-CFTR活化而流出且使用FRET基電壓感測器染料光學監測所產生之膜去極化。

3.溶液

1號浴溶液：(以mM計)NaCl 160、KCl 4.5、CaCl₂ 2、MgCl₂ 1、HEPES 10，用NaOH達成pH 7.4。

無氯化物浴溶液：1號浴溶液中之氯化物鹽用葡萄糖酸鹽替代。

CC2-DMPE：以於DMSO中之10mM儲備溶液形式製備且儲存在-20℃下。

DiSBAC₂(3)：以於DMSO中之10mM儲備物形式製備且儲存在-20℃下。

4.細胞培養

穩定表現△F508-CFTR之NIH3T3小鼠纖維母細胞用於光學量測膜電位。細胞在37℃下於5% CO₂及90%濕度中維持在於175cm²培養燒瓶中之補充有2mM麩醯胺酸、10%胎牛血清、1 X NEAA、β-ME、1 X 青黴素/鏈黴素及25mM HEPES的杜貝卡氏經改良依格氏培養基(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)中。對於所有光學分析，在30,000/孔下將細胞接種於384孔基質膠塗佈盤中且在37℃下培養2小時，隨後在27℃下培養24小時以進行增效劑分析。對於校正分析，在27℃或37℃下在有及無化合物下培養細胞16-24小時。

分析化合物之△F508-CFTR調節性質之電生理學分析

1.尤斯(Ussing)腔室分析

對表現△F508-CFTR之極化上皮細胞進行尤斯腔室實驗以進一步表徵在光學分析中鑒別之△F508-CFTR調節劑。將生長在Costar Snapwell細胞培養插件上之FRT△^F508-CFTR上皮細胞安放於尤斯腔室(Physiologic Instruments公司，San Diego,CA)中，且使用電壓鉗系統(Department of Bioengineering,University of Iowa,IA及Physiologic Instruments公司，San Diego,CA)使單細胞層連續短路。藉由施加2mV脈衝量測經上皮電阻。在此等條件下，FRT上皮顯示4KΩ/cm²或4KΩ/cm²以上之電阻。使溶液維持在27℃下且用空氣鼓泡。使用無細胞插件校正電極偏移電位及流體電阻。在此等條件下，電流反映Cl^-穿過在頂膜中表現之△F508-CFTR之流動。使用MP100A-CE介面及AcqKnowledge軟體(v3.2.6；BIOPAC Systems,Santa Barbara,CA)以數位方式獲得I_SC。

2.鑒別校正化合物

典型方案利用底側至頂膜Cl^-濃度梯度。為建立此梯度，在底側膜上使用正常林格溶液，而頂端NaCl由等莫耳葡萄糖酸鈉(用NaOH滴定至pH 7.4)替換以得到跨越上皮之較大Cl^-濃度梯度。所有實驗皆用完整單細胞層進行。為完全活化△F508-CFTR，施加毛喉素(10μM)及PDE抑制劑 IBMX(100μM)，隨後添加CFTR增效劑金雀異黃酮(50μM)。

如在其他細胞類型中所觀測，在低溫下培育穩定表現△F508-CFTR之FRT細胞使質膜中之功能性CFTR之密度增加。為測定校正化合物之活性，在37℃下將細胞與10μM測試化合物一起培育24小時且隨後在記錄之前洗滌3次。經化合物處理之細胞中的cAMP及金雀異黃酮介導之I_SC相對於27℃及37℃對照進行校正且表示為活性百分比。相較於37℃對照，預培育細胞與校正化合物使cAMP及金雀異黃酮介導之I_SC顯著增加。

3.鑒別增效劑化合物

典型方案利用底側至頂膜Cl^-濃度梯度。為建立此梯度，在底側膜上使用正常林格氏溶液且用製黴菌素(nystatin)(360μg/ml)滲透化，而頂端NaCl由等莫耳葡萄糖酸鈉(用NaOH滴定至pH 7.4)替換以得到跨越上皮之較大Cl^-濃度梯度。所有實驗皆在製黴菌素滲透化之後30分鐘進行。添加毛喉素(10μM)及所有測試化合物至細胞培養插件之兩側。將推定△F508-CFTR增效劑之功效與已知增效劑金雀異黃酮之功效進行比較。

4.溶液

底側溶液(以mM計)：NaCl(135)、CaCl₂(1.2)、MgCl₂(1.2)、K₂HPO₄(2.4)、KHPO₄(0.6)、N-2-羥基乙基哌嗪-N’-2-乙烷磺酸(HEPES)(10)及右旋糖(10)。用NaOH滴定溶液至pH 7.4。

頂端溶液(以mM計)：與底側溶液相同，其中NaCl經葡萄糖酸鈉(135)替換。

5.細胞培養

表現△F508-CFTR之費雪(Fisher)大鼠上皮(FRT)細胞(FRT△^F508-CFTR)用於由吾人之光學分析鑒別之推定△F508-CFTR調節劑的尤斯腔室實驗。在Costar Snapwell細胞培養插件上培養細胞且在37℃及5% CO₂下於補充有5%胎牛血清、100U/ml青黴素及100μg/ml鏈黴素之庫恩氏經改良漢姆氏F-12培養基(Coon’s modified Ham’s F-12 medium)中培養5天。在用於表徵化合物之增效劑活性之前，在27℃下培育細胞16-48小時以校正△F508-CFTR。為測定校正化合物之活性，在27℃或37℃下在有及無化合物下培育細胞24小時。

6.全細胞記錄

使用穿孔膜片全細胞記錄來監測溫度及測試化合物校正之穩定表現△F508-CFTR之NIH3T3細胞中的宏觀△F508-CFTR電流(I_△F508)。簡言之，使用Axopatch 200B膜片鉗放大器(Axon Instruments公司，Foster City,CA)在室溫下對I_△F508進行電壓鉗記錄。所有記錄皆在取樣頻率10kHz下獲得且在1kHz下經低通濾波。吸移管在用細胞內溶液填充時具有電阻5-6MΩ。在此等記錄條件下，在室溫下之Cl^-計算逆轉電位(E_Cl)為-28mV。所有記錄皆具有密封電阻>20GΩ及串聯電阻<15MΩ。使用配備有與Clampex 8(Axon Instruments公司)連接之Digidata 1320 A/D介面之PC進行脈衝產生、資料獲取及分析。浴含有<250μl鹽水且使用重力驅動灌注系統在2毫升/分鐘之速率下連續灌注。

7.鑒別校正化合物

為測定校正化合物增加質膜中之功能性△F508-CFTR之密度的活性，吾人使用上述穿孔膜片記錄技術來量測在用校正化合物處理24小時之後的電流密度。為完全活化△F508-CFTR，添加10μM毛喉素及20μM金雀異黃酮至細胞中。在吾人之記錄條件下，在27℃下培育24小時之後的電流密度高於在37℃下培育24小時之後觀測之電流密度。此等結果與低溫培育對質膜中之△F508-CFTR之密度的已知影響一致。為測定校正化合物對CFTR電流密度之影響，在37℃下將細胞與10μM測試化合物一起培育24小時且將電流密度與27℃及37℃對照進行比較(活性%)。在記錄之前，細胞用細胞外記錄介質洗滌3次以移除任何剩餘測試化合物。相較於37℃對照，與10μM校正化合物一起預培育使cAMP及金雀異黃酮依賴性電流顯著增加。

8.鑒別增效劑化合物

亦使用穿孔膜片記錄技術研究△F508-CFTR增效劑增加穩定表現△F508-CFTR之NIH3T3細胞中之宏觀△F508-CFTR Cl^-電流(I_△F508)的能力。由光學分析鑒別之增效劑以在光學分析中觀測之類似效能及功效引起I_△F508以劑量依賴性方式增加。在檢查之所有細胞中，在增效劑施加之前及期間之逆轉電位為約-30mV，其為計算E_Cl(-28mV)。

9.溶液

細胞內溶液(以mM計)：天冬胺酸銫(90)、CsCl(50)、MgCl₂(1)、HEPES(10)及240μg/ml兩性黴素(amphotericin)-B(用CsOH調整pH值至7.35)。

細胞外溶液(以mM計)：N-甲基-D-葡糖胺(NMDG)-Cl(150)、MgCl₂(2)、CaCl₂(2)、HEPES(10)(用HCl調整pH值至7.35)。

10.細胞培養

穩定表現△F508-CFTR之NIH3T3小鼠纖維母細胞用於全細胞記錄。細胞在37℃下於5% CO₂及90%濕度中維持在於175cm²培養燒瓶中之補充有2mM麩醯胺酸、10%胎牛血清、1 X NEAA、β-ME、1 X青黴素/鏈黴素及25mM HEPES的杜貝卡氏經改良依格氏培養基中。對於全細胞記錄，將2,500-5,000個細胞接種於聚L-離胺酸塗佈之玻璃蓋玻片上且在用於測試增效劑之活性之前在27℃下培養24-48小時；並在37℃下在有或無校正化合物下培育以量測校正劑之活性。

11.單通道記錄

使用經切除之裏面朝外膜片觀測穩定表現於NIH3T3細胞中之溫度校正之△F508-CFTR的單通道活性及增效劑化合物之活性。簡言之，用Axopatch 200B膜片鉗放大器(Axon Instruments公司)在室溫下對單通道活性進行電壓鉗記錄。所有記錄皆在取樣頻率10kHz下獲得且在400Hz下經低通濾波。膜片吸移管由Corning Kovar Sealing #7052玻璃(World Precision Instruments公司，Sarasota,FL)製造且在用細胞外溶液填充時具有電阻5-8MΩ。在切除之後，藉由添加1mM Mg-ATP及75nM cAMP依賴性蛋白質激酶催化次單元(PKA；Promega公司，Madison,WI)來活化△F508-CFTR。在通道活性穩定化之後，使用重力驅動微灌注系統灌注膜片。鄰近於膜片置放入流，從而在1-2秒內達成完全溶液交換。為在快速灌注期間維持△F508-CFTR活性，添加非特異性磷酸酶抑制劑F^-(10mM NaF)至浴溶液中。在此等記錄條件下，通道活性在整個膜片記錄持續時間(多達60分鐘)期間保持恆定。藉由正電荷自細胞內溶液移動至細胞外溶液(陰離子以相反方向移動)產生之電流顯示為正電流。吸移管電位(V_p)維持在80mV下。

分析含有2個活性通道之膜片的通道活性。同時開放之最大數目決定在實驗之過程期間的活性通道數目。為測定單通道電流幅值，在100Hz下「離線」篩選120秒△F508-CFTR活性資料且接著用於構建使用Bio-Patch分析軟體(Bio-Logic公司，France)用多高斯(multigaussian)函數擬合之所有點幅值直方圖。根據120秒通道活性確定總微觀電流及開放概率(P_o)。使用Bio-Patch軟體或根據關係式P_o=I/i(N)確定P_o，其中I=平均電流，i=單通道電流幅值，且N=膜片中之活性通道數目。

12.溶液

細胞外溶液(以mM計)：NMDG(150)、天冬胺酸(150)、CaCl₂(5)、MgCl₂(2)及HEPES(10)(用Tris鹼調整pH值至7.35)。

細胞內溶液(以mM計)：NMDG-Cl(150)、MgCl₂(2)、EGTA(5)、TES(10)及Tris鹼(14)(用HCl調整pH值至7.35)。

13.細胞培養

穩定表現△F508-CFTR之NIH3T3小鼠纖維母細胞用於經切除之膜片鉗記錄。細胞在37℃下於5% CO₂及90%濕度中維持在於175cm²培養燒瓶中之補充有2mM麩醯胺酸、10%胎牛血清、1 X NEAA、β-ME、1 X青黴素/鏈黴素及25mM HEPES的杜貝卡氏經改良依格氏培養基中。對於單通道記錄，將2,500-5,000個細胞接種在聚L-離胺酸塗佈之玻璃蓋玻片上且在使用之前在27℃下培養24-48小時。

使用上述程序，化合物1之活性(亦即EC50)已經量測且顯示於表22中。

其他實施例

本揭露內容中提及之所有公開案及專利皆以引用的方式併入本文中，該引用的程度就如同已特定地及個別地將各個別公開案或專利 申請案以引用的方式併入一般。若以引用的方式併入之任何專利或公開案中之術語之含義與本揭露內容中使用之術語之含義衝突，則意欲以本揭露內容中之術語之含義為準。此外，先前論述僅揭露及描述本發明之示範性實施例。熟習此項技術者將易於由此論述及隨附圖式及申請專利範圍認識到可在不脫離本發明之如以下申請專利範圍中限定之精神及範疇下對本發明作各種變化、修改及改變。

Claims (23)

1. 一種用於治療患者之囊性纖維化之方法，其包含共投與：a)包含5至250mg (R)-1-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-N-(1-(2,3-二羥基丙基)-6-氟-2-(1-羥基-2-甲基丙-2-基)-1H-吲哚-5-基)環丙烷甲醯胺(化合物1)及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物；及b)包含100至300mg N-(5-羥基-2,4-二第三丁基-苯基)-4-側氧基-1H-喹啉-3-甲醯胺(化合物2)及醫藥學上可接受之載劑之醫藥組合物；其中該患者具有導致在囊性纖維化跨膜傳導調控子胺基酸序列之位置508處缺失苯丙胺酸之缺陷性基因。
2. 如申請專利範圍第1項之方法，其中部分a)中之該醫藥學上可接受之載劑包含：a. 填充劑；b. 崩解劑；c. 潤滑劑；及d. 助流劑。
3. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該5至250mg化合物1係在該100至300mg化合物2之前投與。
4. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該5至250mg化合物1係與該100至300mg化合物2同時投與。
5. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該5至250mg化合物1係在該100至300mg化合物2之後投與。
6. 如申請專利範圍第1項之方法，其中化合物1係呈化合物1非晶形式。
7. 如申請專利範圍第1項之方法，其中化合物1或化合物1非晶形式係以約10mg之量存在於錠劑中。
8. 如申請專利範圍第1項之方法，其中化合物1或化合物1非晶形式係以約30mg之量存在於錠劑中。
9. 如申請專利範圍第1項之方法，其中化合物1或化合物1非晶形式係以約100mg之量存在於錠劑中。
10. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該錠劑具有下表中所述之配方：
11. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該錠劑具有下表中所述之配方：
12. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該錠劑具有下表中所述之配方：
13. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該錠劑具有下表中所述之配方：
14. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該錠劑具有下表中所述之配方：
15. 如申請專利範圍第1項之方法，其中化合物1係一天投與一次。
16. 如申請專利範圍第1項之方法，其中投與150mg化合物2。
17. 如申請專利範圍第1項之方法，其中投與250mg化合物2。
18. 如申請專利範圍第1項之方法，其中化合物1係每12小時加以投與。
19. 如申請專利範圍第1項之方法，其中化合物2係每12小時加以投與。
20. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該方法包含投與另一治療劑。
21. 如申請專利範圍第20項之方法，其中該另一治療劑為黏液分解劑、支氣管擴張劑、抗生素、抗感染劑、消炎劑、除化合物2以外之CFTR調節劑或營養劑。
22. 如申請專利範圍第20項之方法，其中該另一治療劑為除化合物2以外之CFTR調節劑。
23. 如申請專利範圍第1項之方法，其中就該缺陷性基因而言，該患者為同型接合。