JP2023552828A - 嚢胞性線維症の治療方法 - Google Patents

Abstract

本出願は、化合物Ｉ又はその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、嚢胞性線維症又はＣＦＴＲ介在性疾患を治療する方法を記載する。本出願はまた、化合物Ｉ又はその薬学的に許容可能な塩を含み、任意選択的に、１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節剤を含む医薬組成物を記載する。本開示の一態様は、２５０ｍｇのＣＦＴＲ増強剤化合物、Ｎ－（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）－５－ヒドロキシ－４－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニル）－４－オキソ－１，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミド（化合物Ｉ）又は相当量のその医薬的に許容可能な塩を含む医薬組成物を提供する。JPEG2023552828000095.jpg3161

Description

本出願は、２０２０年１２月１０日に出願された米国仮出願第６３／１２３，９２８号、２０２０年１２月１１日に出願された米国仮出願第６３／１２４，５７５号、及び２０２１年２月１７日に出願された米国仮出願第６３／１５０，４３４号に対する優先権の利益を主張するものであり、それらの各々の内容は、参照によりそれぞれの全体が組み込まれる。

本発明は、嚢胞性線維症を治療するための医薬組成物及び方法を提供する。

嚢胞性線維症（ＣＦ）は、世界でおよそ８３，０００人の小児及び成人が罹患している劣性遺伝性疾患である。ＣＦの治療は進歩しているにもかかわらず、それを完治する方法がない。

ＣＦを有する患者において、呼吸上皮で内因的に発現したＣＦＴＲの変異により、頂端アニオン分泌が減少し、イオン及び流体輸送の不均衡が引き起こされる。結果として生じたアニオン輸送における減少は、肺における粘液蓄積の増進及びそれに付随する微生物感染の一因となり、これは最終的にＣＦ患者に死をもたらす。呼吸器疾患に加えて、ＣＦ患者は、典型的には、治療せずに放置すると死に至る胃腸障害及び膵機能不全に罹患している。加えて、嚢胞性線維症を有する男性の大半は不妊症であり、嚢胞性線維症を有する女性では受精率が低下する。

ＣＦＴＲ遺伝子の配列分析により、疾患を引き起こす様々な変異が明らかになっている（Ｃｕｔｔｉｎｇ，Ｇ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ３４６：３６６－３６９、Ｄｅａｎ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｃｅｌｌ６１：８６３：８７０、及びＫｅｒｅｍ，Ｂ－Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ２４５：１０７３－１０８０、Ｋｅｒｅｍ，Ｂ－Ｓ ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８７：８４４７－８４５１）。現在までに、ＣＦ遺伝子中の２０００を超える変異が確認されている。ＣＦ変異は、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｅｎｅｔ．ｓｉｃｋｋｉｄｓ．ｏｎ．ｃａ／ａｐｐにある、「Ｃｙｓｔｉｃ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ Ｍｕｔａｔｉｏｎ Ｄａｔａｂａｓｅ」に列挙されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。最も一般的な疾患を引き起こす変異は、ＣＦＴＲアミノ酸配列の５０８位でのフェニルアラニンの欠失であり、一般にＦ５０８ｄｅｌ変異と称される。この変異は、嚢胞性線維症のおおよそ９０％の症例で発生し、重症疾患に関連する。

ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠失により、新生タンパク質が正しくフォールディングすることが妨げられる。これにより、変異タンパク質が小胞体（ＥＲ）を出て、原形質膜に輸送されることが不可能となる。結果として、膜内に存在するアニオン輸送のためのＣＦＴＲチャネルの数は、野生型ＣＦＴＲ、すなわち変異を有しないＣＦＴＲを発現する細胞において観察されるものよりもはるかに少なくなる。輸送障害に加えて、この変異により、チャネルゲーティングの欠陥がもたらされる。膜中のチャネル数の減少とゲーティング欠損が合わさって、上皮を横断するアニオン及び流体輸送の減少につながる。（Ｑｕｉｎｔｏｎ，Ｐ．Ｍ．（１９９０），ＦＡＳＥＢ Ｊ．４：２７０９－２７２７）。Ｆ５０８ｄｅｌ変異のために欠陥があるチャネルは、野生型ＣＦＴＲチャネルよりも機能は低いが、依然として機能的である。（Ｄａｌｅｍａｎｓ ｅｔ ａｌ．（１９９１），Ｎａｔｕｒｅ Ｌｏｎｄ．３５４：５２６－５２８、Ｐａｓｙｋ ａｎｄ Ｆｏｓｋｅｔｔ（１９９５），Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：１２３４７－５０）。Ｆ５０８ｄｅｌに加えて、欠陥のある輸送、合成、及び／又はチャネルゲーティングをもたらすＣＦＴＲの他の疾患を引き起こす変異は、上方又は下方制御されて、アニオン分泌を変化させ、疾患進行及び／又は重症度を改変させる可能性がある。

ＣＦＴＲは、吸収上皮細胞及び分泌上皮細胞を含む様々な細胞型で発現するｃＡＭＰ／ＡＴＰ介在性アニオンチャネルであり、ここで、ＣＦＴＲは、膜を横断するアニオンフラックス並びに、他のイオンチャネル及びタンパク質の活性を制御する。上皮細胞において、ＣＦＴＲの正常機能は、呼吸組織及び消化組織を含む全身の電解質輸送の維持に不可欠である。ＣＦＴＲは、膜貫通ドメインのタンデムリピートからなるタンパク質をコードする１４８０個のアミノ酸で構成されており、各々、６つの膜貫通ヘリックスとヌクレオチド結合ドメインを含む。２つの膜貫通ドメインが、大きい極性の制御（Ｒ）ドメインを介して、チャネル活性及び細胞輸送を制御する複数のリン酸化部位に結合している。

塩化物輸送は、頂端膜上に存在するＥＮａＣ（上皮ナトリウムチャネル）とＣＦＴＲとの協調的活性、及び細胞の側底面上で発現するＮａ^＋－Ｋ^＋－ＡＴＰａｓｅポンプとＣｌ^－チャネルとの協調的活性によって起こる。管腔側からの塩化物の二次性能動輸送により、細胞内塩化物の蓄積がもたらされ、その後、Ｃｌ^－チャネルを介して細胞から受動的に離れ、ベクトル輸送をもたらすことができる。Ｎａ^＋／２Ｃｌ^－／Ｋ^＋共輸送体、側底面上のＮａ^＋－Ｋ^＋－ＡＴＰａｓｅポンプ及び側底膜Ｋ^＋チャネル、並びに管腔側のＣＦＴＲの配置により、塩化物の分泌が調整される。恐らく水自体が積極的に輸送されることがないため、上皮を横断するその流れは、ナトリウム及び塩化物の大きな流れによって生じるわずかな経上皮浸透圧勾配に依存する。

いくつかのＣＦＴＲ調節化合物が最近同定された。しかしながら、嚢胞性線維症及び他のＣＦＴＲ介在性疾患、特にこれらの疾患のより重篤な形態を治療又は重症度を低減させることができる化合物が依然として必要とされている。

Ｃｕｔｔｉｎｇ，Ｇ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ３４６：３６６－３６９ Ｄｅａｎ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｃｅｌｌ６１：８６３：８７０ Ｋｅｒｅｍ，Ｂ－Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ２４５：１０７３－１０８０ Ｋｅｒｅｍ，Ｂ－Ｓ ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８７：８４４７－８４５１ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｅｎｅｔ．ｓｉｃｋｋｉｄｓ．ｏｎ．ｃａ／ａｐｐ Ｑｕｉｎｔｏｎ，Ｐ．Ｍ．（１９９０），ＦＡＳＥＢ Ｊ．４：２７０９－２７２７ Ｄａｌｅｍａｎｓ ｅｔ ａｌ．（１９９１），Ｎａｔｕｒｅ Ｌｏｎｄ．３５４：５２６－５２８ Ｐａｓｙｋ ａｎｄ Ｆｏｓｋｅｔｔ（１９９５），Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：１２３４７－５０

したがって、本開示の一態様は、２５０ｍｇのＣＦＴＲ増強剤化合物、Ｎ－（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）－５－ヒドロキシ－４－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニル）－４－オキソ－１，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミド（化合物Ｉ）又は相当量のその医薬的に許容可能な塩を含む医薬組成物を提供する。化合物Ｉは、以下の構造を有するものとして示され得る。

１５０ｍｇの１２時間毎のアイバカフトール（すなわち、１２時間間隔で１日２回）及び１５０ｍｇの１日１回の化合物Ｉ（すなわち、１日１回）と比較して、２５０ｍｇの化合物Ｉを１日１回投与すると、汗クロリド（ＳｗＣｌ）によって測定される治療プロファイルが改善され得ることが見出された。

いくつかの実施形態では、本開示は、２５０ｍｇの化合物Ｉ及び／又は相当量のその薬学的に許容可能な塩を含む、医薬組成物を提供し、その組成物は、少なくとも１つの追加の活性薬学的成分及び／又は少なくとも１つの担体を更に含み得る。本開示の更に他の態様は、ＣＦＴＲ介在性疾患の嚢胞性線維症を治療する方法であって、化合物Ｉ又は相当量のその薬学的に許容可能な塩を、任意選択的に、少なくとも１つの追加の成分を含む医薬組成物の一部として、治療を必要とする対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、２５０ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）、２１．２４ｍｇの化合物ＩＩ、カルシウム塩水和物形態Ｄ、及び１００ｍｇの化合物ＩＩＩ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）を含む。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、１２５ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）、１０．６２ｍｇの化合物ＩＩ、カルシウム塩水和物形態Ｄ、及び５０ｍｇの化合物ＩＩＩ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）を含む。

一実施形態は、ＣＦＴＲ介在性疾患の嚢胞性線維症を治療する方法であって、２５０ｍｇのＮ－（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）－５－ヒドロキシ－４－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニル）－４－オキソ－１，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミド（化合物Ｉ）を、単独で、又は２１．２４ｍｇの（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（化合物ＩＩ）カルシウム塩水和物形態Ｄ、及び／又は５０～１００ｍｇの（Ｒ）－１－（２，２－ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール－５－イル）－Ｎ－（１－（２，３－ジヒドロキシプロピル）－６－フルオロ－２－（１－ヒドロキシ－２－メチルプロパン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）シクロプロパンカルボキサミド（化合物ＩＩＩ）との組み合わせで投与することを含む、方法を提供する。

いくつかの実施形態では、２５０ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）は、２０ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄと、同じ組成物で投与される。いくつかの実施形態では、２５０ｍｇの化合物Ｉは、２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ及び１００ｍｇの化合物ＩＩＩ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）と、同じ組成物で投与される。いくつかの実施形態では、２５０ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）を含む組成物は、２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ及び／又は１００ｍｇの化合物ＩＩＩ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）を含む別個の組成物と同時投与される。いくつかの実施形態では、２５０ｍｇの化合物Ｉは、２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ及び１００ｍｇの化合物ＩＩＩ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）と同じ組成物で投与される。いくつかの実施形態では、２５０ｍｇの化合物Ｉ、２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び１００ｍｇの化合物ＩＩＩ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）は、２つの等用量組成物で１日１回投与される。

結晶性化合物Ｉ（遊離形態）形態ＡのＸＲＰＤパターンを提示する。 結晶性化合物Ｉ（遊離形態）形態Ａの^１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルを示す。 結晶性化合物Ｉカルシウム塩水和物形態ＡのＸＲＰＤパターンを提示する。 化合物Ｉカルシウム塩水和物形態Ａの^１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルを示す。 結晶性化合物Ｉカルシウム塩水和物形態ＤのＸＲＰＤパターンを提示する。 化合物Ｉカルシウム塩水和物形態Ｄの^１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルを示す。

定義
本開示の全体を通して使用される「化合物Ｉ」は、Ｎ－（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）－５－ヒドロキシ－４－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニル）－４－オキソ－１，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミドであり、これは、以下の構造を有するものとして示され得る。

化合物Ｉは、薬学的に許容可能な塩の形態であり得る。化合物Ｉ及びその薬学的に許容可能な塩は、米国特許第８，８６５，９０２号、同第９，１８１，１９２号、及び同第９，５１２，０７９号、並びに国際特許公開第２０１２／１５８８８５号、同第２０１４／０７８８４２号、同第２０１７／０５３４５５号、及び同第２０１８／０８０５９１号に以前に記載されており、それら各々は参照により本明細書に組み込まれる。

いくつかの実施形態では、化合物Ｉにおける各重水素の同位体濃縮係数は、変化し得る。「同位体濃縮係数」という用語は、特定の同位体の同位体存在量と天然存在量との間の比を指す。いくつかの実施形態では、化合物Ｉの各指定重水素原子の同位体濃縮係数は少なくとも３５００（各指定された重水素原子での５２．５％の重水素組み込み）、少なくとも４０００（６０％の重水素組み込み）、少なくとも４５００（６７．５％の重水素組み込み）、少なくとも５０００（７５％の重水素組み込み）、少なくとも５５００（８２．５％の重水素組み込み）、少なくとも６０００（９０％の重水素組み込み）、少なくとも６３３３．３（９５％の重水素組み込み）、少なくとも６４６６．７（９７％の重水素組み込み）、少なくとも６６００（９９％の重水素組み込み）、又は少なくとも６６３３．３（９９．５％の重水素組み込み）である。

本明細書で使用される「化合物ＩＩ」は、（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオンを指し、以下の構造で示され得る。

化合物ＩＩ及びその重水素化誘導体並びに薬学的に許容可能な塩は、国際特許公開第２０１９／１６１０７８号に（参照により本明細書に組み込まれる）最初に記載された。

いくつかの実施形態では、化合物ＩＩは、カルシウム塩水和物形態Ｄの形態である。２０ｍｇの化合物ＩＩは、２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄに相当する。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、６．１±０．２度２シータ、１６．２±０．２度２シータ、及び２２．８±０．２度２シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、（ａ）６．１±０．２度２シータ、１６．２±０．２度２シータ、及び２２．８±０．２度２シータのシグナル、並びに（ｂ）５．５±０．２度２シータ、１５．５±０．２度２シータ、１９．７±０．２度２シータ、２１．５±０．２度２シータ、２２．１±０．２度２シータ、２３．０±０．２度２シータ、及び２７．６±０．２度２シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、（ａ）６．１±０．２度２シータ、１６．２±０．２度２シータ、及び２２．８±０．２度２シータのシグナル、並びに（ｂ）５．５±０．２度２シータ、１５．５±０．２度２シータ、１９．７±０．２度２シータ、２１．５±０．２度２シータ、２２．１±０．２度２シータ、２３．０±０．２度２シータ、及び２７．６±０．２度２シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、（ａ）６．１±０．２度２シータ、１６．２±０．２度２シータ、及び２２．８±０．２度２シータのシグナル、並びに（ｂ）５．５±０．２度２シータ、１５．５±０．２度２シータ、１９．７±０．２度２シータ、２１．５±０．２度２シータ、２２．１±０．２度２シータ、２３．０±０．２度２シータ、及び２７．６±０．２度２シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、（ａ）６．１±０．２度２シータ、１６．２±０．２度２シータ、及び２２．８±０．２度２シータのシグナル、並びに（ｂ）５．５±０．２度２シータ、１５．５±０．２度２シータ、１９．７±０．２度２シータ、２１．５±０．２度２シータ、２２．１±０．２度２シータ、２３．０±０．２度２シータ、及び２７．６±０．２度２シータのうちの４つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、６．１±０．２度２シータ、１６．２±０．２度２シータ、２２．８±０．２度２シータ、及び２７．６±０．２度２シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、６．１±０．２度２シータ、１５．５±０．２度２シータ、１６．２±０．２度２シータ、１９．７±０．２度２シータ、２２．８±０．２度２シータ、及び２７．６±０．２度２シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、図５に実質的に類似するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、１７９．８±０．２ｐｐｍ、１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、１２０．９±０．２ｐｐｍ、５５．２±０．２ｐｐｍ、４４．３±０．２ｐｐｍ、３５．０±０．２ｐｐｍ、及び１．６±０．２ｐｐｍから選択される１つ以上のピークを有する、^１３Ｃ固体核磁気共鳴（^１３Ｃ ｓｓＮＭＲ）スペクトルを有するものとして特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、１７９．８±０．２ｐｐｍ、１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、１２０．９±０．２ｐｐｍ、５５．２±０．２ｐｐｍ、４４．３±０．２ｐｐｍ、３５．０±０．２ｐｐｍ、及び１．６±０．２ｐｐｍから選択される２つ以上のピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、１７９．８±０．２ｐｐｍ、１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、１２０．９±０．２ｐｐｍ、５５．２±０．２ｐｐｍ、４４．３±０．２ｐｐｍ、３５．０±０．２ｐｐｍ、及び１．６±０．２ｐｐｍから選択される３つ以上のピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、１７９．８±０．２ｐｐｍ、１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、１２０．９±０．２ｐｐｍ、５５．２±０．２ｐｐｍ、４４．３±０．２ｐｐｍ、３５．０±０．２ｐｐｍ、及び１．６±０．２ｐｐｍから選択される４つ以上のピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、１７９．８±０．２ｐｐｍ、１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、１２０．９±０．２ｐｐｍ、５５．２±０．２ｐｐｍ、４４．３±０．２ｐｐｍ、３５．０±０．２ｐｐｍ、及び１．６±０．２ｐｐｍから選択される５つ以上のピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、１７９．８±０．２ｐｐｍ、１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、１２０．９±０．２ｐｐｍ、５５．２±０．２ｐｐｍ、４４．３±０．２ｐｐｍ、３５．０±０．２ｐｐｍ、及び１．６±０．２ｐｐｍから選択される６つ以上のピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。

いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、及び３５．０±０．２ｐｐｍから選択される１つ以上のピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、及び３５．０±０．２ｐｐｍから選択される２つ以上のピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉカルシウム塩水和物形態Ｄは、１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、及び３５．０±０．２ｐｐｍでのピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。

いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、（ａ）１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、及び／又は３５．０±０．２ｐｐｍでのピーク、及び（ｂ）１７６．９±０．２ｐｐｍ、１６０．９±０．２ｐｐｍ、１４２．０±０．２ｐｐｍ、及び／又は９８．６±０．２ｐｐｍでのピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、（ａ）１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、及び／又は３５．０±０．２ｐｐｍでのピーク、及び（ｂ）１７６．９±０．２ｐｐｍ、１６０．９±０．２ｐｐｍ、１４２．０±０．２ｐｐｍ、及び９８．６±０．２ｐｐｍでのピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、（ａ）１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、及び３５．０±０．２ｐｐｍでのピーク、及び（ｂ）１７６．９±０．２ｐｐｍ、１６０．９±０．２ｐｐｍ、１４２．０±０．２ｐｐｍ、及び／又は９８．６±０．２ｐｐｍでのピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、１３０．２±０．２ｐｐｍ、１２５．６±０．２ｐｐｍ、３５．０±０．２ｐｐｍ、１７６．９±０．２ｐｐｍ、１６０．９±０．２ｐｐｍ、１４２．０±０．２ｐｐｍ、及び９８．６±０．２ｐｐｍでのピークを有する^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを有するものとして特徴付けられる。

いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、図６に実質的に類似している^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルによって特徴付けられる。

いくつかの実施形態では、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、Ｃｕ Ｋ_α線（λ＝１．５４７８Å）及び相補型金属酸化膜半導体（ＣＭＯＳ）検出器を備えたブルカー回折計で、１００Ｋで測定された、三斜晶系、Ｐ１空間群、及び以下の単位格子寸法によって特徴付けられる。

本開示全体を通して使用される「化合物ＩＩＩ」は、（Ｒ）－１－（２，２－ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール－５－イル）－Ｎ－（１－（２，３－ジヒドロキシプロピル）－６－フルオロ－２－（１－ヒドロキシ－２－メチルプロパン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）シクロプロパンカルボキサミドを指す、

いくつかの実施形態では、化合物ＩＩＩは、薬学的に許容可能な塩の形態である。化合物ＩＩＩ及びその薬学的に許容可能な塩は、国際特許公開第２０１０／０５３４７１号（参照により本明細書に組み込まれる）に以前に開示されている。

本明細書で使用される場合、「ＣＦＴＲ」とは、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子を意味する。

本明細書で使用される場合、「変異」は、ＣＦＴＲ遺伝子又はＣＦＴＲタンパク質における変異を指し得る。「ＣＦＴＲ遺伝子変異」は、ＣＦＴＲ遺伝子における変異を指し、「ＣＦＴＲタンパク質変異」は、ＣＦＴＲタンパク質における変異を指す。一般に、遺伝的欠損若しくは変異、又は遺伝子中のヌクレオチドの変化は、その遺伝子から翻訳されるＣＦＴＲタンパク質の変異、又はフレームシフトをもたらす。

「Ｆ５０８ｄｅｌ」という用語は、５０８位でアミノ酸フェニルアラニンを欠いている変異ＣＦＴＲタンパク質を指す。

本明細書で使用される場合、特定の遺伝子変異について「ホモ接合性」である患者は、各対立遺伝子に同じ変異を有する。

本明細書で使用される場合、特定の遺伝子変異について「ヘテロ接合性」である患者は、一方の対立遺伝子に特定の変異を有し、他方の対立遺伝子に異なる変異を有する。

本明細書で使用される場合、「モジュレータ」という用語は、タンパク質などの生物学的化合物又は分子の活性を増加させる化合物を指す。例えば、ＣＦＴＲモジュレータは、ＣＦＴＲの活性を増加させる化合物である。ＣＦＴＲモジュレータによってもたらされる活性の増加には、ＣＦＴＲを補正する、増強する、安定化する、及び／又は増幅する化合物が含まれるが、これらに限定されない。

本明細書で使用される場合、「ＣＦＴＲコレクター」という用語は、ＣＦＴＲの処理及び輸送を促進して細胞表面におけるＣＦＴＲの量を増加させる化合物を指す。本明細書に開示される化合物ＩＩ及びＩＩＩは、ＣＦＴＲコレクターである。

本明細書で使用される場合、「ＣＦＴＲ増強剤」という用語は、細胞表面に位置するＣＦＴＲタンパク質のチャネル活性を増加させ、イオン輸送の強化をもたらす化合物を指す。本明細書に開示される化合物Ｉは、ＣＦＴＲ増強剤である。

本明細書で使用される場合、「活性医薬成分」又は「治療剤」（「ＡＰＩ」）という用語は、生物学的に活性な化合物を指す。

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容可能な塩」という用語は、塩が非毒性である、本開示の化合物の塩形態を指す。本開示の化合物の薬学的に許容可能な塩は、好適な無機及び有機酸並びに塩基に由来するものを含む。薬学的に許容可能な塩は、当該技術分野で周知である。例えば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ ａｌ．は、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９７７，６６，１－１９に詳細に薬学的に許容可能な塩を記載する。

本明細書で使用される場合、「非晶質」という用語は、その分子の位置において長距離秩序を有しない固体物質を指す。非晶質固体は、明確に画定された配置、例えば、分子充填が存在せず、長距離秩序も存在しないように、分子が無作為に配置されている、概ね過冷却された液体である。非晶質固体は、概ね等方的である、すなわち、全ての方向において同様の特性を呈し、明確な融点を有しない。例えば、非晶質物質は、そのＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンにおいて、鋭い特徴的な結晶性ピークを有しない（すなわち、ＸＲＰＤによって決定される結晶性ではない）固体物質である。代わりに、そのＸＲＰＤパターンにおいて１つ又はいくつかの幅広いピーク（例えば、ハロー）が見られる。幅広いピークは、非晶質固体の特徴である。非晶質物質及び結晶性物質のＸＲＰＤの比較については、ＵＳ２００４／０００６２３７を参照されたい。いくつかの実施形態では、固体物質は非晶質化合物を含むことがあり、例えば、固体物質は、そのＸＲＰＤスペクトルにおける鋭い特徴的な結晶性ピークの欠如を特徴とし得る（すなわち、固体物質は結晶性ではないが、ＸＲＰＤによって決定されるような非晶質である）。代わりに、固体物質のＸＲＰＤパターンにおいて１つ又はいくつかの幅広いピーク（例えば、ハロー）が見られ得る。非晶質物質及び結晶性物質のＸＲＰＤの比較については、ＵＳ２００４／０００６２３７を参照されたい。非晶質化合物を含む固体材料は、例えば、純粋な結晶性固体の溶融の範囲と比較して、固体材料の溶融のより幅広い温度範囲によって特徴付けられ得る。例えば、ラマン分光法、赤外分光法、及び固体ＮＭＲなどの他の技法を使用して、結晶性形態又は非晶質形態を特徴付けることができる。

いくつかの実施形態では、固体物質は、結晶性固体と非晶質固体との混合物を含み得る。非晶質化合物を含むように調製された固体物質は、例えば、最大３０％の結晶性固体を含み得る。いくつかの実施形態では、非晶質化合物を含むように調製された固体物質は、例えば、最大２５％、２０％、１５％、１０％、５％、又は２％の結晶性固体も含み得る。固体物質が結晶性固体と非晶質固体との混合物を含む実施形態では、ＸＲＰＤなどの特徴付けデータは、結晶性固体及び非晶質固体の両方の指標を含み得る。

本明細書で使用される場合、「実質的に非晶質の」という用語は、その分子の位置にほとんど又は全く長距離秩序を有しない固体物質を指す。例えば、実質的に非晶質の物質は、１５％未満の結晶化度（例えば、１０％未満の結晶化度、又は５％未満の結晶化度、又は２％未満の結晶化度）を有する。「実質的に非晶質の」という用語が、結晶化度を有しない（０％）物質を指す「非晶質」という記述語を含むことにも留意されたい。

本明細書で使用される場合、「実質的に結晶性の」という用語は、非晶質分子をほとんど又は全く有しない固体物質を指す。例えば、実質的に結晶性の物質は、１５％未満の非晶質分子（例えば、１０％未満の非晶質分子、５％未満の非晶質分子、又は２％未満の非晶質分子）を有する。「実質的に結晶性の」という用語が、１００％結晶性形態である物質を指す「結晶性」という記述語を含むことにも留意されたい。

本明細書で使用される場合、「ＸＲＰＤ」という用語は、Ｘ線粉末回折の分析的特性評価方法を指す。本明細書に開示されるＸＲＰＤパターンは、周囲条件下で回折計を使用して透過又は反射配置で記録したものである。

本明細書で使用される場合、「周囲条件」という用語は、室温、外気条件、及び制御されていない湿度条件を意味する。「室温」及び「周囲温度」という用語は、１５℃～３０℃を意味する。

本明細書で使用される場合、「Ｘ線粉末ディフラクトグラム」、「Ｘ線粉末回折パターン」、「ＸＲＰＤパターン」、「ＸＲＰＤスペクトル」という用語は、シグナル位置（横座標上）をシグナル強度（縦座標上）に対してプロットする実験的に取得されたパターンを互換的に指す。非晶質物質の場合、Ｘ線粉末ディフラクトグラムは１つ以上の幅広いシグナルを含む場合があり、結晶性物質の場合、Ｘ線粉末ディフラクトグラムは１つ以上のシグナルを含む場合があり、各々、Ｘ線粉末ディフラクトグラムの横座標上に示される、２θ度（°２θ）として測定されるその角度値によって特定され、これらは「…２シータ度のシグナル」、「…の［ａ］２シータ値のシグナル」、及び／又は「…から選択される少なくとも…の２シータ値のシグナル」として表され得る。

本明細書で使用される「シグナル」又は「ピーク」とは、カウントで測定された強度が極大であるＸＲＰＤパターンにおける点を指す。当業者であれば、ＸＲＰＤパターンにおける１つ以上のシグナル（又はピーク）が重複する場合があり、例えば、肉眼では明らかではない場合があることを認識するであろう。実際に、当業者であれば、リートベルト法などのいくつかの当該技術分野で認識されている方法が、シグナルがあるパターンで存在するかを決定することができ、かつその決定に好適であることを認識するであろう。

本明細書で使用される場合、「…度２シータのシグナル」とは、Ｘ線粉末回折実験（°２θ）において測定及び観察されるＸ線反射位置を指す。

測定された角度値の再現性は、±０．２°２θの範囲内であり、すなわち、角度値は、列挙された角度値＋０．２度２シータ、角度値－０．２度２シータ、又はそれらの２つの端点間（角度値＋０．２度２シータと角度値－０．２度２シータとの間）の任意の値であり得る。

「シグナル強度」及び「ピーク強度」という用語は、所与のＸ線粉末ディフラクトグラム内の相対的シグナル強度を互換的に指す。相対的シグナル強度又はピーク強度に影響を及ぼし得る要因には、試料の厚さ及び好ましい配向が含まれる（例えば、結晶性粒子はランダムに分布しない）。

本明細書で使用される場合、Ｘ線粉末ディフラクトグラムは、２つのディフラクトグラムにおけるシグナルの少なくとも９０％、例えば、少なくとも９５％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％が重複する場合、「［特定の］図におけるものと実質的に類似している」。「実質的な類似性」を決定する際に、当業者であれば、同じ結晶性形態であってもＸＲＰＤディフラクトグラムの強度及び／又はシグナル位置に変動が存在し得ることを理解するであろう。したがって、当業者であれば、ＸＲＰＤディフラクトグラムにおける（度２シータでの）シグナル最大値が、当該技術分野で認識されている変動である報告された値の±０．２度２シータとして値が特定されることを一般に意味することを理解するであろう。

本明細書で使用される場合、^１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルは、２スペクトルにおけるシグナルの少なくとも９５％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％などの、少なくとも９０％が重複する場合、「［特定の］図のものと実質的に類似」する。「実質的な類似性」を決定する際に、当業者であれば、同じ結晶性形態であってもｓｓＮＭＲスペクトルの強度及び／又はシグナル位置に変動が存在し得ることを理解するであろう。したがって、当業者であれば、ｓｓＮＭＲスペクトルにおける化学シフト（本明細書で言及される百万分率（ｐｐｍ））が、当該技術分野で認識されている変動である報告された値の±０．２ｐｐｍとして値が特定されることを一般に意味することを理解するであろう。

本明細書で使用される場合、「．．．２シータ値でシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラム」という用語は、Ｘ線粉末回折実験において測定及び観察されるＸ線反射位置（°２シータ）を含むＸＲＰＤパターンを指す。

本明細書で使用される場合、「ＤＳＣ」という用語は、示差走査熱量測定の分析方法を指す。

本明細書で使用される場合、「溶媒」という用語は、生成物が少なくとも部分的に可溶性である（生成物の溶解度＞１ｇ／ｌ）任意の液体を指す。

本明細書で使用される場合、「分散体」という用語は、１つの物質である分散相が、第２の物質（連続相又はビヒクル）全体にわたって別個の単位で分布されている分散系を指す。分散相のサイズは、大幅に変動し得る（例えば、ナノメートル寸法から数ミクロンのサイズまでのコロイド粒子）。概して、分散相は、固体、液体、又は気体であり得る。固体分散体の場合、分散相及び連続相が両方とも固体である。薬学的用途において、固体分散体は、非晶質ポリマー（連続相）中に結晶性薬物（分散相）を含み得、又は代替的には、非晶質ポリマー（連続相）中に非晶質薬物（分散相）を含み得る。いくつかの実施形態では、固体分散体は、分散相を構成するポリマーを含み、薬物は、連続相を構成する。あるいは、固体分散体は、分散相を構成する薬物、及び連続相を構成するポリマーを含む。

「患者」及び「対象」という用語は互換的に使用され、ヒトを含む動物を指す。

本明細書で使用される場合、「治療」、「治療すること」などという用語は、概して、対象におけるＣＦ若しくはその症状の改善、又はＣＦ若しくはＣＦの症状のうちの１つ以上の重症度を軽減することを意味する。本明細書で使用される「治療」には、対象の成長の増加、体重増加の向上、肺内の粘膜の減少、膵機能及び／若しくは肝機能の改善、肺感染症の軽減、並びに／又は咳若しくは息切れの軽減が含まれるが、これらに限定されない。これらの症状のうちのいずれかの改善又はそれらの重症度の軽減は、当該技術分野で既知の標準方法及び技法に従って容易に評価することができる。

本明細書で使用される場合、「と組み合わせて」という用語は、２つ以上の化合物、薬剤、又は追加の活性医薬成分を指す場合、２つ以上の化合物、薬剤、又は活性医薬成分が互いに前後して又は互いに同時に患者に投与されることを意味する。

「約」及び「およそ」という用語は、組成物又は剤形の成分の用量、量、若しくは重量パーセントと関連して使用される場合、指定された用量、量、若しくは重量パーセントの値、又は指定された用量、量、若しくは重量パーセントから得られるものと同等の薬理学的効果を提供することが当業者によって認識されている用量、量、若しくは重量パーセントの範囲を含む。「約」及び「およそ」という用語は、当業者によって決定される特定の値に対する許容可能な誤差を指し得、これは、その値がどのように測定又は決定されるかに部分的に依存する。いくつかの実施形態では、「約」及び「およそ」という用語は、所与の値又は範囲の２０％、１５％、１０％、５％、４％、３％、２％、１％、又は０．５％以内を意味する。

当業者であれば、「化合物又はその薬学的に許容可能な塩」の量が開示されるとき、その化合物の薬学的に許容可能な塩形態の量がその化合物の遊離塩基の濃度に相当する量であることを認識するであろう。本明細書における化合物又はそれらの薬学的に許容可能な塩の開示される量が、それらの遊離塩基形態に基づくことに留意されたい。例えば、「１００ｍｇの化合物Ｉ及びその薬学的に許容可能な塩から選択される少なくとも１つの化合物」は、１００ｍｇの化合物Ｉ及び１００ｍｇの化合物Ｉに相当する化合物Ｉの薬学的に許容可能な塩の濃度を含む。

好適な薬学的に許容可能な塩は、例えば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９７７，６６，１－１９に開示されるものである。例えば、その論文の表１は、以下の薬学的に許容可能な塩を提供する。

薬学的に許容可能な酸付加塩の非限定的な例には、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、又は過塩素酸などの無機酸で形成される塩、酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、又はマロン酸などの有機酸で形成される塩、及びイオン交換などの当該技術分野で使用されている他の方法を使用して形成される塩が挙げられる。薬学的に許容可能な塩の非限定的な例には、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、カンファー酸塩（ｃａｍｐｈｏｒａｔｅ）、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシ－エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、及び吉草酸塩が挙げられる。適切な塩基に由来する薬学的に許容可能な塩には、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、及びＮ^＋（Ｃ_１－４アルキル）_４塩が含まれる。本開示は、本明細書に開示される化合物の任意の塩基性窒素含有基の四級化も想定する。アルカリ金属塩及びアルカリ土類金属塩の好適な非限定的な例には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、及びマグネシウムが挙げられる。薬学的に許容可能な塩の更なる非限定的な例には、ハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、低級アルキルスルホン酸塩、及びアリールスルホン酸塩などの対イオンを使用して形成されるアンモニウム、四級アンモニウム、及びアミンカチオンが挙げられる。薬学的に許容可能な塩の他の好適な非限定的な例には、ベシル酸塩及びグルコサミン塩が挙げられる。

治療方法
ＣＦＴＲ変異は、ＣＦＴＲ量、すなわち、細胞表面におけるＣＦＴＲチャネルの数に影響を及ぼし得るか、又はＣＦＴＲ機能、すなわち、各チャネルが開いてイオンを輸送する機能的能力に影響を及ぼし得る。ＣＦＴＲ量に影響を及ぼす変異には、合成欠損を引き起こす変異（クラスＩ欠損）、プロセシング及び輸送欠損を引き起こす変異（クラスＩＩ欠損）、ＣＦＴＲの合成の低下を引き起こす変異（クラスＶ欠損）、並びにＣＦＴＲの表面安定性を低下させる変異（クラスＶＩ欠損）が含まれる。ＣＦＴＲ機能に影響を及ぼす変異には、ゲーティング欠損を引き起こす変異（クラスＩＩＩ欠損）及びコンダクタンス欠損を引き起こす変異（クラスＩＶ欠損）が含まれる。いくつかのＣＦＴＲ変異は、複数のクラスの特徴を呈する。

いくつかの実施形態では、患者における嚢胞性線維症を治療する方法であって、有効量の、本開示の化合物、その薬学的に許容可能な塩、又は前述のいずれかの重水素化類似体、あるいは医薬組成物を、例えばヒトなどの患者に投与することを含み、当該患者は嚢胞性線維症を有する患者である、方法が、本明細書に開示されている。いくつかの実施形態では、患者は、Ｆ５０８ｄｅｌ／最小機能（ＭＦ）遺伝子型、Ｆ５０８ｄｅｌ／Ｆ５０８ｄｅｌ遺伝子型（Ｆ５０８ｄｅｌ変異に対してホモ接合性）、Ｆ５０８ｄｅｌ／ゲーティング遺伝子型、又はＦ５０８ｄｅｌ／残存機能（ＲＦ）遺伝子型を有する。いくつかの実施形態では、患者は、ヘテロ接合性であり、１つのＦ５０８ｄｅｌ変異を有する。

本明細書で使用される場合、「最小機能（ＭＦ）変異」とは、最小限のＣＦＴＲ機能に関連するＣＦＴＲ遺伝子変異（ほとんど又は全く機能しないＣＦＴＲタンパク質）を指し、例えば、チャネルゲーティング欠陥若しくは「ゲーティング変異」として知られているＣＦＴＲチャネルが開閉する能力の重度の欠陥に関連する変異、ＣＦＴＲの細胞プロセシング及び細胞表面へのその送達の重度の欠陥に関連する変異、ＣＦＴＲ合成なし（又は最小ＣＦＴＲ合成）に関連する変異、並びにチャネルコンダクタンスの重度の欠陥に関連する変異が含まれる。

いくつかの実施形態では、患者は、ヘテロ接合性であり、一方の対立遺伝子にＦ５０８ｄｅｌ変異を有し、他方の対立遺伝子に表２から選択される変異を有する。

いくつかの実施形態では、患者は、ヘテロ接合性であり、一方の対立遺伝子にＦ５０８ｄｅｌ変異を有し、他方の対立遺伝子に表３から選択される変異を有する。

いくつかの実施形態では、患者は、表４から選択される少なくとも１つの変異を有する。いくつかの実施形態では、患者は、Ｆ５０８ｄｅｌ変異を有しておらず、表４から選択される少なくとも１つの変異を有する。

いくつかの実施形態では、本開示はまた、前述の化合物の同位体標識誘導体を使用した治療方法を対象とする。いくつかの実施形態では、その中の１つ以上の原子が、通常、自然に発生する原子の原子質量又は質量数とは異なる原子又は原子質量数を有する原子若しくは複数の原子によって置換されている（同位体標識）、前述の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の同位体標識誘導体。市販されており、かつ本開示に好適な同位体の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、及び塩素の同位体、例えば、それぞれ、^２Ｈ、^３Ｈ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１８Ｏ、^１７Ｏ、^３１Ｐ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、及び^３６Ｃｌが挙げられる。

同位体標識化合物及び塩は、いくつかの有益な方法で使用することができる。これらは、薬剤及び／又は基質組織分布アッセイなどの様々なタイプのアッセイに好適であり得る。例えば、トリチウム（^３Ｈ）標識及び／又は炭素－１４（^１４Ｃ）標識化合物は、比較的単純な調製及び優れた検出能のため、基質組織分布アッセイなどの様々なタイプのアッセイに特に有用である。例えば、重水素（^２Ｈ）標識化合物が治療上有用であり、非^２Ｈ標識化合物よりも潜在的な治療上の利点を有する。概して、重水素（^２Ｈ）標識化合物及び塩は、以下に記載の速度論的同位体効果のため、同位体標識されていないものと比較してより高い代謝安定性を有することができる。より高い代謝安定性は、所望され得るインビボ半減期の増加又はより低い投薬量に直結する。同位体標識化合物及び塩は、通常、本明細書の合成スキーム及び関連記述、実施例の部分、並びに調製の部分に開示される手順を行い、非同位体標識反応物を容易に入手可能な同位体標識反応物に置き換えることによって調製することができる。

いくつかの実施形態では、同位体標識化合物及び塩は、重水素（^２Ｈ）標識化合物及び塩である。いくつかの特定の実施形態では、同位体標識された化合物及び塩は、重水素（^２Ｈ）標識され、その中の１つ以上の水素原子は、重水素によって置き換えられている。化学構造において、重水素は「Ｄ」として表される。

重水素（^２Ｈ）標識された化合物及び塩は、一次速度論的同位体効果によって、化合物の酸化的代謝を操作することができる。一次速度論的同位体効果は、同位体核種の交換により生じる化学反応速度の変化であり、これは、続いて、この同位体交換後の共有結合形成に必要な基底状態エネルギーの変化により引き起こされる。より重い同位体の交換は、通常、化学結合の基底状態エネルギーの低下をもたらし、それ故に、律速結合切断の減少がもたらされる。結合切断が多生成物反応の配位に沿って鞍点領域内又はその近くで生じる場合、生成物分布比が大幅に変化する可能性がある。説明目的で、重水素が交換不可能な位置で炭素原子に結合している場合、ｋ_Ｍ／ｋ_Ｄ＝２～７の速度差が典型的である。更なる考察のために、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｓ．Ｌ．Ｈａｒｂｅｓｏｎ ａｎｄ Ｒ．Ｄ．Ｔｕｎｇ，Ｄｅｕｔｅｒｉｕｍ Ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１１，４６，４０３－４１７を参照されたい。

本開示の同位体標識化合物及び塩に組み込まれる同位体（例えば、重水素）の濃度は、同位体濃縮係数によって定義され得る。本明細書で使用される「同位体濃縮係数」という用語は、指定された同位体の同位体存在度と天然存在度との間の比率を意味する。いくつかの実施形態では、本開示の化合物における置換基が重水素で示される場合、そのような化合物は、少なくとも３５００（各指定された重水素原子における５２．５％の重水素組み込み）、少なくとも４０００（６０％の重水素組み込み）、少なくとも４５００（６７．５％の重水素組み込み）、少なくとも５０００（７５％の重水素組み込み）、少なくとも５５００（８２．５％の重水素組み込み）、少なくとも６０００（９０％の重水素組み込み）、少なくとも６３３３．３（９５％の重水素組み込み）、少なくとも６４６６．７（９７％の重水素組み込み）、少なくとも６６００（９９％の重水素組み込み）、又は少なくとも６６３３．３（９９．５％の重水素組み込み）の各指定重水素原子に対する同位体濃縮係数を有する。

治療剤を発見及び開発する場合、当業者は、望ましいインビトロ特性を保持しながら、薬物動態パラメータを最適化することを試みる。薬物動態プロファイルが不十分な多くの化合物が、酸化的代謝の影響を受けやすいと想定することが合理的であり得る。

本明細書に開示される一態様は、２５０ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）を投与することを含む、嚢胞性線維症及び他のＣＦＴＲ介在性疾患を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、２５０ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）は、１日１回、単回投与を単独で、又は別のＣＦＴＲモジュレータとの組み合わせで投与される。いくつかの実施形態では、２５０ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）は、１日１回、２回分の１２５ｍｇ用量を単独で、又は別のＣＦＴＲモジュレータとの組み合わせで投与される。

本明細書に開示される一態様は、２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ及び１００ｍｇの化合物ＩＩＩ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）と組み合わせた、２５０ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）の連日投与により、嚢胞性線維症及び他のＣＦＴＲ介在性疾患を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、２５０ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）、２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、１００ｍｇの化合物ＩＩＩ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）は、別個の医薬組成物で毎日投与される。いくつかの実施形態では、２５０ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）、２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び１００ｍｇの化合物ＩＩＩ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）は、単一の医薬組成物で毎日投与される。いくつかの実施形態では、２５０ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）、２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び１００ｍｇの化合物ＩＩＩ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）は、１日１回、２つの同等の医薬組成物で一緒に投与される。

医薬組成物
本発明の別の態様は、嚢胞性線維症の治療に使用するための医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、２５０ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）を含む。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、１２５ｍｇの化合物Ｉ（又は相当量のその薬学的に許容可能な塩）を含む。

いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、２５０ｍｇの化合物Ｉ、２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、１００ｍｇの化合物ＩＩＩを含む。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、１２５ｍｇの化合物、１０．６２ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び５０ｍｇの化合物ＩＩＩを含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される医薬組成物（例えば、錠剤）は、化合物Ｉを含む第１の固体分散体（例えば、噴霧乾燥分散体）、及び化合物ＩＩＩを含む第２の固体分散体（例えば、噴霧乾燥分散体）を含む。化合物Ｉの非重水素化類似体の固体分散体、及びこのような分散体を調製する方法は、参照により本明細書に組み込まれるＰＣＴ公開第２００７／０７９１３９号に開示されている。これらの同じ固体分散体は、化合物Ｉでの使用に適している。化合物ＩＩＩの固体分散体及びその調製する方法は、参照により本明細書に組み込まれるＰＣＴ公開第２０１１／１１９９８４号及び同第２０１５／１６０７８７号に開示されている。

いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、組成物の重量に対して約３９．９重量％の化合物Ｉを含む固体分散体（固体分散体は、固体分散体の重量に対して８０重量％の化合物Ｉ、１９．５重量％のヒプロメロース酢酸エステルコハク酸エステル、及び０．５重量％のラウリル硫酸ナトリウムを含む）、組成物の重量に対して約２．７重量％の化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び組成物の重量に対して約１６．０重量％の化合物ＩＩＩを含む固体分散体（固体分散体は、固体分散体の重量に対して８０重量％の化合物Ｉ及び２０重量％のヒプロメロースを含む）を含む。

当技術分野で公知の任意の適切な医薬組成物を、化合物Ｉ、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び化合物ＩＩＩに使用することができる。化合物Ｉ及びその薬学的に許容可能な塩についてのいくつかの例示的な医薬組成物は、ＵＳ８，８６５，９０２、ＵＳ９，１８１，１９２、ＵＳ９，５１２，０７９、ＷＯ２０１７／０５３４５５、及びＷＯ２０１８／０８０５９１に見出すことができ、それら全ては参照により本明細書に組み込まれる。化合物ＩＩ及びその薬学的に許容可能な塩を含む例示的な医薬組成物は、ＷＯ２０１９／１６１０７８及びＷＯ２０２０／１０２３４６に開示されている。化合物ＩＩＩ及びその薬学的に許容可能な塩についての例示的な医薬組成物は、参照により本明細書に組み込まれる、ＷＯ２０１１／１１９９８４及びＷＯ２０１４／０１４８４１に開示されている。

本明細書に開示される医薬組成物は、任意選択的に少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体を更に含み得る。少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体は、アジュバント及びビヒクルから選択され得る。本明細書で使用される場合、少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体には、望まれる特定の剤形に適した、ありとあらゆる溶媒、希釈剤、他の液体ビヒクル、分散補助剤、懸濁補助剤、表面活性剤、等張剤、増粘剤、乳化剤、保存剤、固体結合剤、及び滑沢剤が含まれる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ ｅｄｉｔｉｏｎ，２００５，ｅｄ．Ｄ．Ｂ．Ｔｒｏｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、及びＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｅｄｓ．Ｊ．Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ ａｎｄ Ｊ．Ｃ．Ｂｏｙｌａｎ，１９８８－１９９９，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋは、医薬組成物の製剤化に使用される様々な担体及びそれらの調製のための既知の技法を開示している。任意の従来の担体が、例えば、任意の望ましくない生物学的効果をもたらすか、さもなければ医薬組成物の任意の他の成分と有害な様式で相互作用することによって、本開示の化合物と不相溶性になる場合を除いて、その使用が本開示の範囲内であることが企図される。好適な薬学的に許容可能な担体の非限定的な例には、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）、緩衝物質（例えば、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、及びソルビン酸カリウムなど）、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩、及び電解質（例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、及び亜鉛塩）、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン－ポリオキシプロピレン－ブロックポリマー、羊毛脂、糖（例えば、ラクトース、グルコース、及びスクロース）、デンプン（例えば、トウモロコシデンプン及びジャガイモデンプン）、セルロース及びその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、及び酢酸セルロース）、粉末トラガント、麦芽、ゼラチン、タルク、賦形剤（例えば、ココアバター及び座薬ワックス）、油（例えば、ピーナッツ油、綿実油、紅花油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、及び大豆油）、グリコール（例えば、プロピレングリコール及びポリエチレングリコール）、エステル（例えば、オレイン酸エチル及びラウリン酸エチル）、寒天、緩衝剤（例えば、水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウム）、アルギン酸、パイロジェンフリー水、等張生理食塩水、リンガー溶液、エチルアルコール、リン酸緩衝溶液、非毒性相溶性滑沢剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウム）、着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、保存剤、及び抗酸化剤が挙げられるが、これらに限定されない。

一実施形態では、本開示の医薬組成物は、１つ以上の充填剤、崩壊剤、及び滑沢剤を含む。

本明細書に開示される医薬組成物に適した充填剤は、医薬組成物の他の成分と適合性があり、すなわち、医薬組成物の溶解度、硬度、化学的安定性、物理的安定性、又は生物活性を実質的に低下させない。例示的な充填剤としては、セルロース、変性セルロース、（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース）、酢酸セルロース、微結晶性セルロース、リン酸カルシウム、第二リン酸カルシウム、デンプン（例えば、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン）、糖（例えば、マンニトール、ラクトース、スクロースなど）、又はそれらの任意の組み合わせが挙げられる。いくつかの実施形態では、充填剤は、微結晶性セルロースである。

いくつかの実施形態では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、少なくとも２５重量％（例えば、少なくとも２７重量％又は少なくとも３０重量％）の量で１つ以上の充填剤を含む。例えば、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、２５重量％～４０重量％（例えば、２５重量％～３５重量％又は３０重量％～３３重量％）の充填剤を含む。別の実施例では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、少なくとも２５重量％（例えば、少なくとも２７重量％又は少なくとも３０重量％）の微結晶性セルロース、例えば、Ａｖｉｃｅｌ ＰＨ１０２又はＡｖｉｃｅｌ ＰＨ１０１を含む。別の実施例では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、２５重量％～４０重量％（例えば、２５重量％～３５重量％又は３０重量％～３３重量％）の微結晶性セルロースを、含む。別の実施例では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、約３１．７重量％の微結晶性セルロースを含む。別の実施例では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、約３２．６重量％の微結晶性セルロースを含む。

本明細書に開示される医薬組成物に好適な崩壊剤は、医薬組成物の分散を高めることができ、医薬組成物の他の成分と適合性があり、すなわち、医薬組成物の化学的安定性、物理的安定性、硬度、又は生物活性を実質的に低下させない。例示的な崩壊剤には、クロスカルメロースナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスポビドン、又はそれらの組み合わせが含まれる。いくつかの実施形態では、崩壊剤は、クロスカルメロースナトリウムである。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、１０重量％以下（例えば、８重量％以下又は７重量％以下）の量で崩壊剤を含む。例えば、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、１重量％～１０重量％（例えば、２重量％～８重量％又は３重量％～７重量％）の崩壊剤を含む。別の実施例では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、１０重量％以下（例えば、８重量％以下又は７重量％以下）のクロスカルメロースナトリウムを含む。別の実施例では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、１重量％～１０重量％（例えば、２重量％～８重量％、又は３重量％～７重量％）のクロスカルメロースナトリウムを含む。別の実施例では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、約５．８重量％のクロスカルメロースナトリウムを含む。別の実施例では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、約６．０重量％のクロスカルメロースナトリウムを含む。

一部の実施形態では、本明細書に開示される医薬組成物は、滑沢剤を含む。滑沢剤は、表面（例えば、混合ボウル、造粒ロール、圧縮ダイ及び／又はパンチの表面）への混合成分の付着を防止することができる。滑沢剤はまた、造粒物内の粒子間摩擦を低減し、造粒機及び／又はダイプレスからの圧縮医薬組成物の圧縮及び吐出を改善することができる。本明細書に開示される医薬組成物に適した滑沢剤は、医薬組成物の他の成分と適合性があり、すなわち、医薬組成物の溶解度、硬度、又は生物活性を実質的に低下させない。例示的な滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、フマル酸ステアリルナトリウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸、ステアリン酸アルミニウム、ロイシン、ベヘニル酸グリセリル、水素添加植物油、又はそれらの任意の組み合わせが挙げられる。いくつかの実施形態では、滑沢剤は、ステアリン酸マグネシウムである。

一実施形態では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、５重量％以下（例えば、４重量％以下、３重量％以下、又は２重量％以下）の量で滑沢剤を含む。例えば、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、０．１０重量％～５重量％（例えば、０．５重量％～３重量％又は０．７５重量％～２重量％）の滑沢剤を含む。別の実施例では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、５重量％以下（例えば、４重量％以下、３重量％以下、又は２重量％以下）のステアリン酸マグネシウムを含む。別の実施例では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、０．１０重量％～５重量％（例えば、０．５重量％～３重量％、又は０．７５重量％～２重量％）のステアリン酸マグネシウムを含む。別の実施例では、医薬組成物は、医薬組成物の重量に対して、約１．０重量％のステアリン酸マグネシウムを含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される医薬組成物は、錠剤である。いくつかの実施形態では、錠剤は、フィルムコートを含む。いくつかの実施形態では、フィルムコートは、Ｏｐａｄｒｙ２０Ａ１０００２１である。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される錠剤は、以下を含む。

一般的な実験手順
試薬及び出発物質は、別途明記しない限り、商業的供給源から入手し、それらを精製することなく使用した。プロトン及び炭素ＮＭＲスペクトルを、それぞれ、４００ＭＨｚ及び１００ＭＨｚの^１Ｈ共鳴周波数及び^１３Ｃ共鳴周波数で動作するＢｒｕｋｅｒ Ｂｉｏｓｐｉｎ ＤＲＸ ４００ＭＨｚ ＦＴＮＭＲ分光計、又は３００ＭＨｚ ＮＭＲ分光計のいずれかで取得した。一次元プロトン及び炭素スペクトルを、２０Ｈｚの試料回転での広帯域観測（ＢＢＦＯ）プローブを使用して、それぞれ、０．１８３４Ｈｚ／Ｐｔ及び０．９０８３Ｈｚ／Ｐｔのデジタル分解能で取得した。全てのプロトン及び炭素スペクトルを、標準的な、以前に公開されたパルスシーケンス及び日常的な処理パラメータを使用して、３０℃での温度制御で取得した。化合物の最終純度を、Ｗａｔｅｒｓ製のＡｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ_１８カラム（５０×２．１ｍｍ、１．７μｍ粒径）（製品番号：１８６００２３５０）、及び３．０分間にわたる１％～９９％移動相Ｂのデュアルグラジエントの実行を使用して、逆相ＵＰＬＣによって決定した。移動相Ａ＝Ｈ_２Ｏ（０．０５％ＣＦ_３ＣＯ_２Ｈ）。移動相Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ（０．０３５％ＣＦ_３ＣＯ_２Ｈ）。流量＝１．２ｍＬ／分、注入量＝１．５μＬ、カラム温度＝６０℃。最終純度を、２つのＵＶトレース（２２０ｎｍ、２５４ｎｍ）の曲線下面積（ＡＵＣ）を平均化することによって計算した。低分解能質量スペクトルは、水素イオン（Ｈ^＋）を使用したエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）を使用した検出範囲にわたって０．１Ｄａの質量精度及び１０００ａｍｕの最小分解能のシングル四重極質量分析計を使用して得られた。（２Ｓ）－２，４－ジメチル－４－ニトロ－ペンタン酸メチルの光学純度を、２．０ｍＬ／分の流量（Ｈ_２キャリアガス）、２２０℃の注入温度及び１２０℃のオーブン温度、１５分間で、Ｒｅｓｔｅｋ Ｒｔ－βＤＥＸｃｓｔカラム（３０ｍ×０．２５ｍｍ×０．２５ｕｍ＿ｄｆ）を使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ７８９０Ａ／ＭＳＤ５９７５Ｃ機器でキラルガスクロマトグラフィー（ＧＣ）分析を使用して決定した。化合物Ｉの純度を、Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌ１２０ ＥＣ－Ｃ８カラム（４．６×１５０ｍｍ、２．７μｍ粒径、及び４０分間にわたる３０～９５％の移動相のデュアルグラジエントを使用して逆相ＨＰＬＣにより決定した。移動相Ａ＝５ｍＭの酢酸アンモニウムｐＨ４．５０及び移動相Ｂ＝アセトニトリル。流量＝１．０ｍＬ／分、注入量＝５μＬ、２５４ｎｍ、カラム温度＝３０℃。

化合物Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩは、当技術分野の任意の適切な方法によって調製することができる。化合物Ｉを作製する方法は、ＷＯ２０１９／１０９０２１及び米国特許第９，５１２，０７９号に見出すことができ、化合物ＩＩ及びその薬学的に許容可能な塩を作製する方法は、ＷＯ２０１９／１６１０７８及びＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０４６１１６に開示されており、化合物ＩＩＩ及びその薬学的に許容可能な塩を作製する方法は、ＷＯ２０１１／１１９９８４及びＷＯ２０１１／１３３７５１に開示されており、それら全てが参照により本明細書に組み込まれる。

実施例１：Ｎ－（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）－５－ヒドロキシ－４－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニル）－４－オキソ－１，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミド（化合物Ｉ）の合成
（２）（化合物Ｉ）の合成の全体スキームを以下に示し、続いて各中間体の合成手順を示す。

オーバーヘッド撹拌器を備えた５Ｌの丸底フラスコに、４－／ｅｒ／－ブチルフェノール（１４、５０３．２ｇ）、Ｋ_２ＣＯ_３（４６．３ｇ）、Ｄ_２Ｏ（１９４９ｇ、１７６１ｍＬ、３．５体積）、及びＭｅＯＤ（４０９ｇ、５０３ｍＬ、１．０体積）を充填した。混合物を加熱して、窒素雰囲気下で還流した。反応混合物を１６時間還流下で熟成させた。反応混合物を室温まで冷却し、変換のためにサンプリングした（Ｄ％組み込み）。反応物を５℃に冷却し、３５％ＤＣ１溶液（９０ｇ、７１．２ｍＬ）を加えた。反応混合物を５℃で２時間熟成させた。得られたスラリーを濾過し、ケーキをＤ_２Ｏ（８３６ｇ、７５５ｍＬ、１．５体積）で洗浄した。このプロセスは、目標のＤ％組み込みが満たされるまで繰り返された（通常、２回の交換が必要とされる）。湿潤ケーキを、一定重量が得られるまで、４０℃で窒素ブリード（ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｂｌｅｅｄ）をしながら真空オーブンで乾燥させる。４－（ｔｅｒｔ－ブチル）フェン－２，６－ｄ^２－オール－ｄ（１９）の収率は、純度は９９．６％、９９．３％のＤ％組み込みの５０６ｇの白色固体（９８％）であった。

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェン－６－ｄ－オール－ｄ及び４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２，６－ビス（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェノール－ｄ（１８）の合成手順

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）フェン－２，６－ｄ^２－オール－ｄ（１９）（１０１．８ｇ、０．６６ｍｏｌ、１．０当量）を、２Ｌ反応器中のＣＨ_２Ｃｌ_２（４００ｍＬ）中に溶解した。

（４３．０ｇ、０．５１ｍｏｌ、０．７７当量）を、２５０ｍＬフラスコ中のＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ）中に溶解した。ｔｅｒｔ－ブタノール－ｒ／の溶液を、室温で２Ｌ反応器に充填した。反応混合物を、－５℃に冷却した。Ｄ_２ＳＯ_４（５１．１ｇ、０．５１ｍｏｌ、０．７７当量）を、－４～－２℃の温度範囲を維持しながら、添加漏斗を介して滴下で加えた。反応混合物を、－２℃で３～４時間撹拌した。完全な変換後、反応を水（２８ｍＬ）を加えることによりクエンチし、１８～２０℃に加温した。底部の水層を排出し、廃棄した。ＣＨ_２Ｃｌ_２層を、飽和ＮａＨＣＣｈ水溶液（約２００ｍＬ）でｐＨを６～８に調整する。ＮａＣｌ（飽和）溶液（４００ｍＬ）を混合物に充填した。得られた溶液を５分間撹拌し、５分間静置した。下部のＣＨ_２Ｃｌ_２層を１Ｌフラスコに排出した。水層を廃棄した。ＣＨ_２Ｃｌ_２溶液を最小体積に濃縮し、ｎ－ヘプタン（２００ｍＬ）を充填した。溶液を最小体積に濃縮し、最終体積８００ｍＬになるまでｎへプタンを充填した。０．５ＮのＮａＯＨ溶液６００ｍＬ（６体積）を反応器に充填し、得られた混合物を５分間撹拌し、少なくとも５分間静置した。水層を排出し、廃棄した。１．０ＮのＮａＯＨ溶液３００ｍＬ（３体積）を反応器に充填し、得られた混合物を５分間撹拌し、少なくとも５分間静置した。水層を排出し、廃棄した。１．０ＮのＮａＯＨ溶液３００ｍＬ（３体積）を反応器に充填し、得られた混合物を５分間撹拌し、少なくとも５分間静置した。水層を排出し、廃棄した。残りのｎ－ヘプタン溶液を濃縮して乾燥し、所望の生成物である４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ^３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ^６）フェン－６－ｄ－オール－ｄ（１８）を透明油状物として１０４．５ｇ得、これを更に精製することなく次のステップに進めた。

２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェノール（１７）の合成手順

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ^３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ^６）フェン－６－ｄ－オール－ｄ（１８）（１００ｇ、０．４６２ｍｏｌ、１．０当量）を、２Ｌ反応器中のＣＨ２Ｃｌ２（８００ｍＬ、７体積）に溶解し、溶液を撹拌した。バッチを０±３℃に冷却した。バッチに、Ｎ－ブロモスクシンイミド（８４．４ｇ、０．４６２ｍｏｌ、１．０当量）を３０分間にわたって少しずつ（ｐｏｒｔｉｏｎ－ｗｉｓｅ）充填した。バッチを、０±２℃で少なくとも３０分間撹拌した。次いで、バッチを２時間にわたって２０±２℃に加熱し、２０±２℃で少なくとも１２時間撹拌した。完全な変換後、飽和ＮａＨＣＣｈ水溶液（５００ｍＬ、５体積）を充填し、バッチを少なくとも１０分間撹拌した。かき混ぜを停止して、相を少なくとも５分間分離させ、ＣＨ２Ｃｌ２層を排出し、続いて水層を除去した。ＣＴＬＣｈ層を容器に充填し戻した。バッチに、飽和ＮａＨＣＣｈ重炭酸塩水溶液（５００ｍＬ、５体積）を装入し、バッチを少なくとも１０分間撹拌した。かき混ぜを停止して、相を少なくとも５分間分離させ、ＣＨ_２Ｃｌ_２層を排出し、続いて水層を除去した。ＣＨ_２Ｃｌ_２層を容器に充填し戻し、追加のＣＨ２Ｃｌ２（３００ｍＬ、３体積）で希釈した。バッチを蒸留し（３００ｍＬを除去）、乾燥に達したかＫＦによって確認した。得られた１７の透明な黄色溶液は、更に精製することなく次のステップに進めた。

２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（１６）の合成手順

清浄な反応器に、４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェン－６－ｄ－オール－ｄ（１７）（１３６ｇ、０．４６２ｍｏｌ、１．０当量）のＣＨ_２Ｃｌ_２溶液を充填し、続いて追加のＣＨ_２Ｃｌ_２（１３０ｍＬ、１体積）を加え、この溶液を撹拌した。バッチに、４－（ジメチルアミノ）ピリジン（２．８ｇ、０．０２３ｍｏｌ、０．０５当量）及びトリエチルアミン（７０．１ｇ、０．６９３ｍｏｌ、１．５当量）を充填した。バッチを０±３℃に冷却した。バッチ温度を＜５℃に維持しながら、バッチに、４０分間にわたって、クロロギ酸メチル（４８．０ｇ、０．５０８ｍｏｌ、１．１当量）を滴下で加えた。バッチを、３±２℃で少なくとも３０分間撹拌し、次いで１時間かけて２０±２℃に加温した。完全な変換後、１ＮのＨＣｌ（４００ｍＬ、３体積）を充填した。バッチを少なくとも１０分間撹拌し、次いで層を少なくとも５分間分離させた。下部有機層を排出し、続いて水層（第１の水層）を排出した。有機層を、１ＮのＨＣｌ溶液（４００ｍＬ、３体積）とともに反応器に充填し戻した。バッチを少なくとも１０分間撹拌し、次いで層を少なくとも５分間分離させた。下部有機層を排出した。第１の水層を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３００ｍＬ、２．２体積）とともに反応器に充填した。バッチを少なくとも１０分間撹拌し、次いで層を少なくとも５分間分離させた。下部有機層を排出し、第１の有機層と合わせ、続いて水層を除去した。両方の有機層の内容物を容器に充填する。反応器を水（５００ｍＬ、３．７体積）を充填した。バッチを少なくとも１０分間撹拌し、次いで層を少なくとも５分間分離させた。下部有機層を排出し、続いて水層を排出した。有機層を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（４００ｍＬ、３体積）と一緒に反応器に充填し戻した。バッチを蒸留して８００ｍＬを除去し、ＫＦによって確実な乾燥を確認した。得られた１６の透明な黄色溶液は、更に精製することなく次のステップにはめ込まれた。

２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）－３－ニトロフェニルメチルカーボネート（１５）の合成手順

反応器に、２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（１６）を充填し、次いで溶液を０℃に冷却した。温度を５℃以下に維持しながら、硫酸（４．９当量）及び硝酸（１００％、２．０当量）を充填した。完全に変換されるまで、反応物を０℃で２時間撹拌した。次いで、反応物を、水（８．８体積）でクエンチし、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１．７体積）で希釈した。層を分離し、上層の水層をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した（２．８体積）。層を分離した後、有機層を合わせ、反応器に戻し、重炭酸ナトリウム（７．４％ｗ／ｗ、６．８体積）で洗浄した。層を分離した後、有機層を反応器に戻し、塩化ナトリウム（２３％ｗ／ｗ、３．８体積）で洗浄した。層を分離した後、有機層を反応器に戻し、最小体積まで濃縮した。メタノール（１．２体積）を充填し、次いで最小体積まで濃縮した。メタノール（１．２体積）を充填し、次いで最小体積まで濃縮した。メタノール（１．７体積）を充填し、スラリーを３０分間加熱還流し、次いで４時間かけて５℃までゆっくりと冷却した。固体生成物（１５）を濾過し、ケーキを冷メタノール（１．０体積）で洗浄した。固体２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）－３－ニトロフェニルメチルカーボネート（１５）を、真空下で４０℃～５０℃で乾燥させて、９９．９％の純度及び９９％のＤ組み込みのオフホワイト固体を得た。

５－アミノ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（７）の合成手順

５重量％の５％Ｐｄ／Ｃ（５０～６５重量％の湿潤、ＪＭタイプ３７）を反応器に充填する。（４．０体積）メタノールを充填する。系を閉じる。２．０ＢａｒでＮ２_（ｇ＞でパージする。２．０ＢａｒでＨ２_（ｇ）で活性化する。２５℃±５℃で容器にＨ２_（ｇ＞を２．０Ｂａｒまで充填する。２５℃±５℃の温度を維持しながら、２時間以上撹拌する。排気し、２．０ＢａｒでＮ２_（ｇ）でパージする。化合物１５（１．０当量）を、Ｎａ２ＨＰＯ_４（２．３当量）とともに反応器に充填する。（１１．０体積）のメタノールを充填する。系を閉じる。２．０ＢａｒでＮ２_（ｇ＞でパージする。２．０ＢａｒでＨ２_（ｇ）で活性化する。２５℃±５℃で容器にＨ２_（ｇ＞を２．０Ｂａｒまで充填する。２５℃±５℃の反応温度を維持しながら、約２４時間撹拌する。完全に変換したら、７．７体積のＭｅＯＨを加えて反応混合物を希釈する。反応混合物を３５．０℃±５℃に加熱する。触媒及びＮａ２ＨＰＯ_４を濾別する。反応器及び濾過ケーキをメタノール（４．０体積）で洗浄し、最初の濾液と合わせて濾過する。Ｐｄ含量をチェックし、必要に応じて樹脂処理を実施する（樹脂処理は、ＳＰＭ－３２樹脂（５重量％）を充填する。樹脂処理溶液を３５．０℃±５℃で３時間以上撹拌する。樹脂を濾別する。

反応器及び濾過ケーキをメタノール（２．０体積）で洗浄し、濾過して、最初の濾液と合わせる）。Ｎｏｒｉｔ ＣＡＳＰ活性炭素（３重量％）を充填する。３５．０℃±５℃で３時間以上撹拌する。活性炭を濾別する。反応器及び濾過ケーキをメタノール（２．０体積）で洗浄し、濾過して、最初の濾液と合わせる。５０℃以下で、８．０体積まで真空下で蒸留する。温度を４５℃±５℃に維持しながら、水（２．０体積）を充填する。得られたスラリーを０℃±５℃に２時間かけて冷却する。スラリーを０℃±５℃で１時間以上保持し、撹拌する。濾過し、ケーキを２．０体積のメタノール／水（８：２）で０℃±５℃で洗浄する。５－アミノ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（７）を４０℃以下で真空下で乾燥し、純度＞９９．５％の白色の固体を得る。

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）－５－（４－オキソ－ｌ，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミド）フェニルメチルカーボネート（８）の合成手順

化合物７を化合物８に変換する手順は、化合物５についての類似の手順に従って行うことができる。

Ｎ－（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）－５－ヒドロキシ－４－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニル）－４－オキソ－ｌ，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミド（２）（化合物Ｉ）の合成手順

化合物８を化合物２に変換する手順は、化合物１の合成についての類似の手順に従って行うことができる。

実施例２：５－アミノ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（７）の合成
化合物７の合成の別の全体スキームを以下に示し、続いて各合成中間体の合成手順を示す。

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）フェン－２，６－ｄ２－オール－ｄ（１９）の合成手順

清浄で乾燥した５００ｍＬ反応器に、４－／ｃ／７－ブチルフェノール（１４）（２４．６ｇ、０．１６２ｍｍｏｌ、１．００当量）、ＣＨ_２Ｃｌ_２（６４ｍＬ、２．６体積）、及びヘプタン（６４ｍＬ、２．６体積）を充填し、この混合物を２５℃に加温し、全ての固体が溶解するまで撹拌した。この溶液に、塩化重水素（重水素酸化物中３５％ｗ／ｗ、２５ｍＬ、１．０体積）を充填し、この混合物を少なくとも３．５時間かき混ぜた。かき混ぜを停止し、相を分離させ、次いで水層（底部）を反応器から排出した。反応器に、塩化重水素（重水素酸化物中３５％ｗ／ｗ、２５ｍＬ、１．０体積）を充填し、この混合物を少なくとも３．５時間かき混ぜた。かき混ぜを停止し、相を分離させ、次いで水層（底部）を反応器から排出した。反応器に、塩化重水素（重水素酸化物中３５％ｗ／ｗ、２５ｍＬ、１．０体積）を充填し、この混合物を少なくとも３．５時間かき混ぜた。かき混ぜを停止し、相を分離させ、次いで水層（底部）を反応器から排出した。得られた溶液をサンプリングし、出発物質４－／ｅｒ／－ブチルフェノールに対して、少なくとも９９％の所望の重水素組み込み生成物４－（ｔｅｒｔ－ブチル）フェン－２，６－ｄ２－オール－ｄ（１９）であることを確認した。反応器内の溶液を、以下に記載される次のステップに継続させた。

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェン－６－ｄ－オール（１８）の合成手順

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）フェン－２，６－ｄ２－オール－ｄ（１９）の反応混合物を含有する塩化メチレン溶液に、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１２５ｍＬ、５体積）を充填した。蒸留ヘッドを使用し、反応器を６０℃に加熱して、およそ１２５ｍＬの反応溶液を反応器から蒸留した。反応器にＣＨ_２Ｃｌ_２（１２５ｍＬ、５体積）を充填した。次いで、およそ１００ｍＬの反応液を反応器から蒸留し、この時点で、溶液をサンプリングして、含水量（ＫＦ）が３００ｐｐｍ未満であることを確認し、ＣＨ_２Ｃｌ_２及びヘプタン含有量を測定した。バッチ体積の測定後、ＣＨ_２Ｃｌ_２（８ｍＬ、０．２４体積）を充填して、総ＣＨ_２Ｃｌ_２含有量を３体積に調整し、ヘプタン（６８ｍＬ、２．８体積）を充填して、ヘプタン含有量を４．５体積に調整した。溶液に、／ｃｖｖ－ブチルアセト酸ｅ－ｄｇ（３０．２ｇ、１．４６当量）を充填し、得られた溶液を０℃に冷却した。溶液に、硫酸－Ｊ２（８．１２ｇ、０．４９当量）を少なくとも１５分間にわたって充填し、溶液を、０～５℃で温度を維持しながら２時間かき混ぜた。この時間後、温度を２時間にわたって２０℃まで上昇するよう設定し、溶液を更に１４時間かき混ぜた。溶液をサンプリングして、４－／ｃ７７－ブチルフェノール（１４）又は４－（ｔｅｒｔ－ブチル）フェン－２，６－ｄ２－オール－ｄ（１９）が３％未満で存在することを確認した。反応器にＣＨ_２Ｃｌ_２（５８ｍＬ、２．４体積）及びヘプタン（９０ｍＬ、３．７体積）を充填し、溶液を０～５℃に冷却した後、水（１２５ｍＬ、５体積）を充填した。混合物を１５分間かき混ぜた後、かき混ぜを停止し、相を分離させた。水相（底部）を反応器から排出した後、０．５ＮのＮａＯＨ水溶液（１２５ｍＬ、５体積）を充填し、温度を２０℃に調整した。混合物を２０分間かき混ぜた後、かき混ぜを停止し、相を分離させた。有機相（上部）をサンプリングして、４－ｔｅｒｔ－ブチルフェノール（１４）又は４－（ｔｅｒｔ－ブチル）フェン－２，６－ｄ２－オール－ｄ（１８）が０．５％未満で存在することを確認した。水相（底部）を反応器から排出した。反応器内の溶液を、以下に記載される次のステップに継続させた。

２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェノール（１７）の合成手順

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェン－６－ｄ－オール－ｄ（１８）を生成するためのアルキル化反応のかき混ぜた溶液を０～５℃にした後、温度を５℃未満に維持しながら臭素（３８．４ｇ、１．４５当量）を少なくとも１時間にわたって充填した。溶液をサンプリングして、４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェン－６－ｄ－オールが１％未満で存在することを確認した。温度を１０℃未満に維持しながら、溶液に二亜硫酸ナトリウム（２０％ｗ／ｗ水溶液、１４７ｇ、０．９５当量）を少なくとも１時間にわたって充填し、温度を２０℃に調整した後、混合物を更に１時間かき混ぜた。かき混ぜを中止し、相を分離させた。水相（底部）を反応器から排出し、水（１２５ｍＬ、５体積）を反応器に充填した。混合物を１５分間かき混ぜた後、かき混ぜを停止し、相を分離させた。水相（底部）を反応器から排出した。反応器内の１７の溶液は、以下に記載される次のステップに継続させた。

驚くべきことに、この臭素化反応は、ニトロ化反応の選択性を著しく改善した。本プロセスに対する別の予想外の利点は、臭素化により、化合物１８及び４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２，６－ビス（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェノールの混合物が、同じ所望の生成物（１７）に変換されたことであった。これにより、全体的な収率が大幅に改善された。

２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（１６）の合成手順

２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェノール（１７）を生成する臭素化反応の溶液に、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１２５ｍＬ、５体積）を充填した。蒸留ヘッドを使用し、反応器を６０℃に加熱して、およそ１２５ｍＬの反応溶液を反応器から蒸留した。反応器にＣＨ_２Ｃｌ_２（１２５ｍＬ、５体積）を充填した。およそ１２５ｍＬの反応液を反応器から蒸留した。反応器にＣＨ_２Ｃｌ_２（１２５ｍＬ、５体積）を充填した。次いで、およそ１２５ｍＬの反応液を反応器から蒸留し、この時点で、溶液をサンプリングして、含水量（ＫＦ）が３００ｐｐｍ未満であることを確認し、ＣＨ２Ｃｌ２及びヘプタン含有量を測定した。バッチ体積の測定後、ＣＦＬＣｈを充填して、総ＣＨ_２Ｃｌ_２含有量を５．３体積に調整し、ヘプタンを充填して、ヘプタン含有量を８体積に調整した。溶液に、トリエチルアミン（３１．７ｇ、１．９１当量）を充填し、溶液を０～５℃に冷却した。溶液に、温度を１０℃未満に維持しながら、クロロギ酸メチル（２４．１ｇ、１．５６当量）を少なくとも１時間にわたって充填した、溶液を１時間かき混ぜ、溶液のサンプルを採取して、２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェノール（１７）が１％未満で存在することを確認した。温度を１０℃未満に維持しながら、溶液に１Ｎの塩酸水溶液（１２５ｍＬ、０．７６当量）を少なくとも３０分間にわたって充填した。次いで、温度を２０℃に調整し、かき混ぜを停止し、相を分離させた。水相（底部）を反応器から排出した後、水（１２５ｍＬ、５体積）を反応器に充填した。混合物を１５分間かき混ぜた後、かき混ぜを停止し、相を分離させた。水相（底部）を反応器から排出した後、水（１２５ｍＬ、５体積）を反応器に充填した。混合物を１５分間かき混ぜた後、かき混ぜを停止し、相を分離させた。水相（底部）を反応器から排出した。反応器内の（１６）の溶液は、以下に記載される次のステップに継続させた。

２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）－３－ニトロフェニルメチルカーボネート（１５）の合成手順

２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（１６）を生成する保護反応の溶液に、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１２５ｍＬ、５体積）を充填した。蒸留ヘッドを使用し、反応器を６０℃に加熱して、およそ１２５ｍＬの反応溶液を反応器から蒸留した。反応器に、ＣＨ_２Ｃｌ_２塩化物（１２５ｍＬ、５体積）を充填した。およそ１２５ｍＬの反応液を反応器から蒸留した。反応器にＣＨ_２Ｃｌ_２（１２５ｍＬ、５体積）を充填した。反応器にＣＨ_２Ｃｌ_２（１２５ｍＬ、５体積）を充填した。およそ１２５ｍＬの反応液を反応器から蒸留した。次いで、およそ１２５ｍＬの反応液を反応器から蒸留し、この時点で、溶液をサンプリングして、含水量（ＫＦ）が３００ｐｐｍ未満であることを確認し、ＣＨ_２Ｃｌ_２及びヘプタン含有量を測定した。バッチ体積の測定後、ＣＨ_２Ｃｌ_２を充填して、総ＣＨ_２Ｃｌ_２含有量を６体積に調整し、ヘプタンを充填して、ヘプタン含有量を９体積に調整した。溶液を０～５℃に冷却した後、温度を５℃未満に維持しながら、硫酸（１７２ｇ、１０．３当量）を少なくとも３０分間にわたって充填した。温度を１０℃未満に維持しながら、混合物に硝酸（７０％ｗ／ｗ、１９．１ｇ、１．３１当量）を少なくとも３０分間にわたって充填した。混合物を１時間かき混ぜた後、試料を採取し、分析して、２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（１６）が１％未満で存在することを確認した。温度を１０℃未満に維持しながら、混合物に水（１００ｍＬ、４体積）を少なくとも１時間にわたって充填した。かき混ぜを停止し、相を分離させ、水相（底部）を反応器から排出した。かき混ぜを再開した後、温度を１０℃未満に維持しながら、重炭酸ナトリウム（８％ｗ／ｗ水溶液、１００ｍＬ、４体積、０．６２当量）を少なくとも１０分間にわたって充填した。温度を２０℃に調整し、かき混ぜを停止し、相を分離させた。反応器から水相（底部）を排出した後、水（１００ｍＬ、４体積）を反応器に充填し、混合物を１５分間かき混ぜた。かき混ぜを停止し、相を分離させ、水相（底部）を反応器から排出した。混合物に、水（１００ｍＬ、４体積）を充填し、この混合物を１５分間かき混ぜた。かき混ぜを停止し、相を分離させ、水相（底部）を反応器から排出した。反応器の溶媒レベルをマーキングした後、蒸留ヘッドを取り付け、温度を８０℃に設定した。溶液にメタノール（５７０ｍＬ、２３体積）を充填し、同時に蒸留し、溶媒レベルをマークに維持することによって、添加速度を蒸留速度に一致させた。バッチ容量がおよそ２６４ｍＬ（１１体積）になり、およそ１．１０ｋｇの蒸留物が除去されるまで、蒸留を継続した。混合物をサンプリングして分析し、ヘプタンが１％ｖ／ｖ未満で存在することを確認した。温度を４時間にわたって０℃に調節した。母液を採取して分析し、２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）－３－ニトロフェニルメチルカーボネート（１５）の濃度を決定し、混合物を濾過した。反応器にメタノール（５１．１ｍＬ、２体積）を充填し、温度が０～５℃に達するまでこれをかき混ぜた。この溶液を使用して、フィルターケーキを洗浄し、次いで、フィルターケーキを少なくとも１時間、吸引により乾燥させた。次いで、固体を真空乾燥させて、２－ブロモ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－６－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）－３－ニトロフェニルメチルカーボネート（１５）を４１．５ｇのオフホワイト固体として生成した（純度９８．４％ｗ／ｗ、純度補正後の収率６３％）。

５－アミノ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（７）の合成手順

５重量％の５％Ｐｄ／Ｃ（５０～６５重量％の湿潤、ＪＭタイプ３７）を反応器に充填する。（４．０体積）メタノールを充填する。系を閉じる。２．０ＢａｒでＮ２_（ｇ＞でパージする。２．０ＢａｒでＨ２_（ｇ）で活性化する。２５℃±５℃で容器にＨ２_（ｇ＞を２．０Ｂａｒまで充填する。２５℃±５℃の温度を維持しながら、２時間以上撹拌する。排気し、２．０ＢａｒでＮ２_（ｇ）でパージする。化合物１５（１．０当量）を、Ｎａ_２ＨＰＯ_４（２．３当量）とともに反応器に充填する。（１１．０体積）のメタノールを充填する。系を閉じる。２．０ＢａｒでＮ２_（ｇ＞でパージする。２．０ＢａｒでＨ２_（ｇ）で活性化する。２５℃±５℃で容器にＨ２_（ｇ＞を２．０Ｂａｒまで充填する。２５℃±５℃の反応温度を維持しながら、約２４時間撹拌する。完全に変換したら、７．７体積のＭｅＯＨを加えて反応混合物を希釈する。反応混合物を３５．０℃±５℃に加熱する。触媒及びＮａ_２ＨＰＯ_４を濾別する。反応器及び濾過ケーキをメタノール（４．０体積）で洗浄し、最初の濾液と合わせて濾過する。Ｐｄ含有量をチェックし、必要に応じて樹脂処理を実施する（樹脂処理は、ＳＰＭ－３２樹脂（５重量％）を充填する。樹脂処理溶液を３５．０℃±５℃で３時間以上撹拌する。樹脂を濾別する。

反応器及び濾過ケーキをメタノール（２．０体積）で洗浄し、濾過して、最初の濾液と合わせる）。Ｎｏｒｉｔ ＣＡＳＰ活性炭素（３重量％）を充填する。３５．０℃±５℃で３時間以上撹拌する。活性炭を濾別する。反応器及び濾過ケーキをメタノール（２．０体積）で洗浄し、濾過して、最初の濾液と合わせる。５０℃以下で、８．０体積まで真空下で蒸留する。温度を４５℃±５℃に維持しながら、水（２．０体積）を充填する。得られたスラリーを０℃±５℃に２時間かけて冷却する。スラリーを０℃±５℃で１時間以上保持し、撹拌する。濾過し、ケーキを２．０体積のメタノール／水（８：２）で０℃±５℃で洗浄する。５－アミノ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（７）を４０℃以下で真空下で乾燥し、純度＞９９．５％の白色の固体を得る。

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）－５－（４－オキソ－ｌ，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミド）フェニルメチルカーボネート（８）の合成手順

化合物７を化合物８に変換する手順は、化合物５についての類似の手順に従って行うことができる。

Ｎ－（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）－５－ヒドロキシ－４－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニル）－４－オキソ－ｌ，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミド（２）（化合物Ｉ）の合成手順

化合物８を化合物２に変換する手順は、化合物１の合成についての類似の手順に従って行うことができる。

実施例３：５－アミノ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（７）の合成
化合物７の合成の別のスキームを以下に示し、続いて各合成中間体の合成手順を示す。

５－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－ヒドロキシ安息香酸（１５）の合成手順

ヘキサン中１．６ＭのｎＢｕＬｉ（３．４９ｇ）を、磁気撹拌子、熱電対、及びＮ２バブラーを備えた丸底フラスコに加えた。丸底フラスコを－２０℃に冷却し、撹拌を開始した。ＭＴＢＥ（１２．５ｍＬ）中の２－ブロモ－４－ｔｅｒｔ－ブチルフェノール（２６）（５．００ｇ）の溶液を調製し、－２０℃に冷却し、－２０℃±５℃に温度を維持しながら、丸底フラスコに滴下で加えた。反応混合物を、－２０℃±５℃で１５分間撹拌し、次いで２３℃まで温めた。室温で１５分後、リチウム化の完全性を、’Ｈ ＮＭＲ（２００ｐＬの反応混合物を０．７５ｍＬのｄ４－ＭｅＯＨに希釈した）によって測定した。１％未満の２－ブロモ－４－ｔｅｒｔ－ブチルフェノールが観察されたとき、反応が、完了したとみなされた。反応混合物を０℃に冷却し、ドライアイス（固体ＣＯ_２）を加え、反応物を室温で４５分間撹拌した。水（５０．０ｍＬ）を加えて、反応をクエンチした。混合物を分液漏斗に移し、相を分離し、有機相を廃棄した。水相を、１Ｍ ＨＣｌ（１５．０ｍＬ）でｐＨ約２に酸性化し、次いでＭＴＢＥ（２５．０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機抽出物を減圧下で濃縮し、５－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－ヒドロキシ安息香酸（２５）を黄色固体として得た（２．２５ｇ、収率５３．１５％）、３／４ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ４－ＭｅＯＨ）：７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ）、７．５４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．６Ｈｚ）、６．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ）、１．３０（９Ｈ，ｓ）。

５－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－ヒドロキシ安息香酸メチル（２４）の合成手順

この反応は、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ，２００５，ｖｏｌ．１５（２１），ｐ．４７５２－４７５６に記載されている手順に従って行うことができる。

２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）オキシ）－５－（ｔｅｒｔ－ブチル）安息香酸メチル（２３）の合成手順

ジ－／ｅ／７－ブチルカーボネート（２３０．５５ｇ）及びＣＨ_２Ｃｌ_２（４００ｍＬ）を１Ｌ反応器に充填し、混合物を固体が完全に溶解するまで撹拌した。ジメチルアミノピリジン（０．５８７ｇ）を、５－（／ｅｒ／－ブチル）－２－ヒドロキシ安息香酸メチル（２４）（２００ｇ）とともに撹拌溶液に充填した。反応混合物を１５～３０℃で撹拌し、６０分後に試料アリコートを用いてＨＰＬＣ（方法）により完全性を測定した。５－ｔｅｒｔ－ブチル－２－ヒドロキシ安息香酸塩（２４）のピーク面積が１％未満になったとき、反応を完了したとみなした。飽和アンモニウム塩化アンモニウム溶液（２００ｍＬ）を水（２００ｍＬ）で希釈することにより、塩化アンモニウムの半飽和溶液を別個のフラスコ中で調製した。反応混合物を、飽和水性塩化アンモニウム溶液で２回洗浄した（各洗浄２００ｍＬ）。各洗浄中、混合物を１５分間撹拌し、１５分間保持した。続いて、有機溶液を、水で２回洗浄した（各洗浄１００ｍＬ）。各洗浄中、混合物を１５分間撹拌し、１５分間保持した。有機溶液を１Ｌの丸底フラスコに移し、３５℃以下で真空下で濃縮して白色固体を得た（２７５．５１ｇ及びＨＰＬＣ分析（方法）による測定で純度９９．４６％、収率９３．０％の２（（／ｅｒ／－ブトキシカルボニル）オキシ）－５－（ｔｅｒ／－ブチル）安息香酸メチル（２３））。３／４ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｂ）：８．０１（ｍ，１Ｈ）；７．５７（ｍ，１Ｈ）；７．１１（ｍ，１Ｈ）；３．８９（ｓ，３Ｈ）；１．５８（ｓ，９Ｈ）；１．３３（ｓ，９Ｈ）。

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェノール（２２）の合成手順

ＴＨＦ（１７６ｍＬ）を５００ｍＬジャケット反応器に充填し、５℃に冷却した。撹拌溶媒に、０～３５℃で、ジブチルエーテル（１４５ｍＬ）中の（メチル－ｄ３）マグネシウムヨージド（６０．５ｇ）の溶液をゆっくりと充填した。得られたスラリーを、２０～３０℃にして、維持しながら、ＴＨＦ（４４ｍＬ）中の２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）オキシ）－５－（／ｃ／７－ブチル（安息香酸（２３）（２２ｇ）の溶液を４～６時間かけて充填した。反応混合物を、２０～３０℃で撹拌し、６０分後に試料アリコートを用いてＨＰＬＣにより完全性を測定した。２－（（／ｅｒ／－ブトキシカルボニル）オキシ）－５－（／ｅｒ／－ブチル）安息香酸（２３）のピーク面積が１％未満になったとき、反応を完了したとみなした。第２の反応器に６Ｎの塩酸水溶液（１１０ｍＬ）を充填し、撹拌溶液を０～１０℃に冷却した。反応スラリーを、０～３５℃の酸性溶液にゆっくりと移した。相を１５分間撹拌し、１５分保持してから分離した。水相を、ジブチルエーテル（１３２ｍＬ）で抽出した。抽出中、相を１５分間撹拌し、１５分間保持してから分離した。合わせた有機相を、水（２×７７ｍＬ）、５％チオ硫酸ナトリウム水溶液（７７ｍＬ）、及び水（７７ｍＬ）で順次洗浄した。各洗浄中、混合物を１５分間撹拌し、１５分間保持した。有機溶液を丸底フラスコに移し、８０℃未満で、真空下で濃縮して、４－（／ｅｒ／－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェノール（２２）を、粗製油状物として得た（５．９４ｇ及びＨＰＬＣ分析（方法）による測定で純度８３．８％、ＬＣ／ＭＳ分析でＤ９同位体純度９９．３％のＨＰＬＣ分析、収率８４．９％のメチル４－（／ｅｒ／－ブチル）－２－（２－（メチル－ｉ３／４）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－＾フェノール（２３））。３／４ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：７．２２（ｍ，１Ｈ）；７．００（ｍ，１Ｈ）；６．６５（ｍ，１Ｈ）；１．２６（ｓ，９Ｈ）。

（２３）のグリニャール反応により、（２２）におけるいくらかの重水素組み込みがもたらされた。Ｈ／Ｄ交換を行うために、混合物を一連のＨＣｌ洗浄に供した：

Ｈ／Ｄ交換の手順
化合物２２の重水素化類似体（１．００当量）を反応器に充填する。ＤＣＭ（５体積）を充填する。ジャケットを２０℃に設定する。かき混ぜて、固体を溶解させる。３５％塩酸（５体積）を充填する。６時間以上かき混ぜて、層を混合する。かき混ぜを停止し、層を少なくとも３０分間静置する。反応器から底層（有機層）を排出する。反応器から水層を排出する。有機部分を反応器に充填し戻す。ＨＣｌ洗浄手順を２回繰り返す。予め混合した水（２．５体積）及び飽和ＮａＣｌ水溶液（２．５体積）を装入する。３０分間かき混ぜて層を混合する。かき混ぜを停止し、層を少なくとも３０分間静置する。反応器から底層（有機層）を排出する。反応器から水性物を排出する。有機部分を反応器に充填し戻す。水（５体積）を充填する。３０分間かき混ぜて層を混合する。かき混ぜを停止し、層を少なくとも３０分間静置する。反応器から底層（有機層）を排出する。反応器から水性物を排出する。有機部分を反応器に充填し戻す。減圧下で溶媒を最小体積まで蒸留する（３５℃の浴温度のロトバップを使用した）。ＤＣＭ（５体積）を充填する。減圧下で溶媒を最小体積まで蒸留する（３５℃の浴温度のロトバップを使用した）。ＤＣＭ（５体積）を充填する。溶液をサンプリングし、ＫＦで含水量を測定する。含水量が３００ｐｐｍ未満になるまで繰り返す。注：この溶液を次の反応に直接使用したため、ＤＣＭの最終量は、化合物２２のアルコキシホルミル化反応に必要な量であるべきである。

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（２１）の合成手順

化合物２２を化合物２１に変換する手順は、化合物１２についての類似の手順に従って行うことができる。

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）－５－ニトロフェニルメチルカーボネート（２０）の合成手順

化合物２１を化合物２０に変換する手順は、化合物１１Ａについての類似の手順に従って行うことができる。

５－アミノ－４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニルメチルカーボネート（７）の合成手順

化合物２０を化合物７に変換する手順は、化合物４についての類似の手順に従って行うことができる。

４－（ｔｅｒｔ－ブチル）－２－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）－５－（４－オキソ－ｌ，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミド）フェニルメチルカーボネート（８）の合成手順

化合物７を化合物８に変換する手順は、化合物５についての類似の手順に従って行うことができる。

Ｎ－（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）－５－ヒドロキシ－４－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニル）－４－オキソ－ｌ，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミド（２）（化合物Ｉ）の合成手順

（８）から（２）への変換する手順は、化合物Ｉの合成についての類似の手順に従って行うことができる。

実施例４：（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（化合物ＩＩ）の合成
試薬及び出発物質は、別途明記しない限り、商業的供給源から入手し、それらを精製することなく使用した。

プロトン及び炭素ＮＭＲスペクトルを、それぞれ、４００ＭＨｚ及び１００ＭＨｚの^１Ｈ共鳴周波数及び^１３Ｃ共鳴周波数で動作するＢｒｕｋｅｒ Ｂｉｏｓｐｉｎ ＤＲＸ ４００ＭＨｚ ＦＴＮＭＲ分光計、又は３００ＭＨｚ ＮＭＲ分光計のいずれかで取得した。一次元プロトン及び炭素スペクトルを、２０Ｈｚの試料回転での広帯域観測（ＢＢＦＯ）プローブを使用して、それぞれ、０．１８３４Ｈｚ／Ｐｔ及び０．９０８３Ｈｚ／Ｐｔのデジタル分解能で取得した。全てのプロトン及び炭素スペクトルを、標準的な、以前に公開されたパルスシーケンス及び日常的な処理パラメータを使用して、３０℃での温度制御で取得した。

パートＡ：２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸の合成

ステップ１：７－（ブロモメチル）ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン

１０００ｍＬの三口丸底フラスコに、機械的撹拌器、冷却浴、添加漏斗、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ、及び窒素入口／出口を装着した。この容器に、窒素雰囲気下で、トリフェニルホスフィン（１０２．７ｍＬ、４４３．２ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１Ｌ）を充填し、これにより、透明な無色の溶液を得た。撹拌を開始し、冷却浴にアセトンを充填した。－１５℃のポット温度が得られるまでドライアイスを冷却浴に少量ずつに分けて添加した。添加漏斗に臭素（２２．８２ｍＬ、４４３．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２２０ｍＬ、１０ｍＬ／ｇ）溶液を充填し、その後、これを１時間にわたって滴加した。ポット温度を－１５℃に維持するために、添加中にドライアイスを冷却浴に少量ずつに分けて添加した。臭素の添加が完了した後、淡黄色の懸濁液を－１５℃で１５分間撹拌し続け、その時点で、懸濁液を－３０℃に冷却した。添加漏斗に、ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルメタノール（５０ｇ、４０２．６ｍｍｏｌ）、ピリジン（３５．８２ｍＬ、４４２．９ｍｍｏｌ）、及びジクロロメタン（２５０ｍＬ、５ｍＬ／ｇ）の溶液を充填した。次いで、ポット温度を－３０℃に維持しながら、透明な淡黄色の溶液を１．５時間にわたって滴加した。結果として生じた透明な淡黄色の反応混合物を、－５℃のポット温度に徐々に加温させ、次いで、－５℃で１時間撹拌し続けた。次いで、反応混合物をヘキサン（２０００ｍＬ）中に注ぎ、これにより、沈殿物が形成された。懸濁液を室温で３０分間撹拌し、次いで、２０ｍｍのセライト層を備えたガラスフリットブフナー漏斗に通して濾過した。透明な濾液を減圧下で濃縮して（水浴温度２０℃）、黄色の油を得たが、いくらかの沈殿物が存在した。油をいくらかのヘキサンで希釈し、室温で１５分間静置させ、次いで、２０ｍｍのセライト層を備えたガラスフリットブフナー漏斗に通して濾過した。透明な濾液を減圧下で濃縮して（水浴温度２０℃）、透明な黄色の油として７－（ブロモメチル）ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン（７０ｇ、９３％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ３．４９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、１．９０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、１．０６－０．８４（ｍ，４Ｈ）、０．７１（ｄｄｄ，Ｊ＝９．１，５．１，４．０Ｈｚ，２Ｈ）、０．５４（ｄｄｄｄ，Ｊ＝８．６，４．８，３．８，１．０Ｈｚ，２Ｈ）。

ステップ２：２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルアセトニトリル

１０００ｍＬの三口丸底フラスコに、機械的撹拌器、二次格納容器として使用した冷却浴、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ、及び窒素入口／出口を装着した。この容器に、窒素雰囲気下で、７－（ブロモメチル）ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン（３５ｇ、１８７．１ｍｍｏｌ）及びジメチルスルホキシド（２４５ｍＬ）を充填し、これにより、透明な琥珀色の溶液を得た。撹拌を開始し、ポット温度は１９℃を記録した。次いで、容器にシアン化ナトリウム（１１．４６ｇ、２３３．８ｍｍｏｌ）を固体として一度に添加して充填し、これにより、濃色の溶液が生じ、１５分間にわたって徐々に発熱して４９℃になった。数分後、ポット温度が低下し始め、混合物を室温で一晩（約１５時間）撹拌し続けた。濃色の反応混合物を氷冷飽和炭酸ナトリウム溶液（５００ｍＬ）でクエンチし、次いで、分液漏斗に移し、ジエチルエーテル（５００ｍＬ）で分配した。有機層を除去し、残りの水層をジエチルエーテル（２×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム（２００ｇ）で乾燥させ、次いで、ガラスフリットブフナー漏斗に通して濾過した。透明な琥珀色の濾液を減圧下で濃縮して（水浴温度２０℃）、透明な濃琥珀色の油として２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルアセトニトリル（２１ｇ、８４％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ２．４２（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、１．６９（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．０２－０．８８（ｍ，４Ｈ）、０．７９－０．７０（ｍ，２Ｈ）、０．６６－０．５５（ｍ，２Ｈ）。

ステップ３：２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル酢酸

２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルアセトニトリル（２．１ｇ、１４．１９ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３２ｍＬ）溶液に、水酸化ナトリウム（５．１２ｇ、１２８．０ｍｍｏｌ）、続いて、水（１３ｍＬ）を添加し、結果として生じた溶液を撹拌し、一晩にわたって７０℃に加熱した。次いで、混合物を室温に冷却し、水で希釈し、ジエチルエーテルで抽出した。６Ｎ塩酸を添加して水相をｐＨ＝１に調整し（濁った沈殿物が生じた）、ジエチルエーテル（３回）で抽出した。有機相を乾燥させ（硫酸マグネシウム）、濾過し、濃縮して、オレンジ色の固体として２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル酢酸（２．１９ｇ、収率９９％、純度９８％）を得て、これを更に精製することなく次のステップに使用した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ２．４４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、１．６７（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、０．９１（ｄｄｄ，Ｊ＝９．０，５．２，３．９Ｈｚ，２Ｈ）、０．８１（ｄｄｄｄ，Ｊ＝８．９，５．２，３．９，０．５Ｈｚ，２Ｈ）、０．６９（ｄｄｄ，Ｊ＝８．９，５．２，３．９Ｈｚ，２Ｈ）、０．５６－０．４４（ｍ，２Ｈ）。

ステップ４：２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエタノール

氷／水浴中で冷却したテトラヒドロフラン（３３．７１ｍＬ）中に溶解した水素化アルミニウムリチウム（８２７．４ｍｇ、９０２．３μＬ、２１．８０ｍｍｏｌ）に、テトラヒドロフラン（７．４７０ｍＬ）中の２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル酢酸（２．５５２ｇ、１６．７７ｍｍｏｌ）を、反応温度を＜２０℃に保ちながら１５分間にわたって滴加した。混合物を合計１８時間撹拌させ、周囲温度に徐々に加温した。混合物を氷／水浴で冷却し、水（８３８．４ｍｇ、８３８．４μＬ、４６．５４ｍｍｏｌ）、続いて、水酸化ナトリウム（５Ｍの１．００６ｍＬ、５．０３１ｍｍｏｌ）、次いで、水（２．４９３ｇ、２．４９３ｍＬ、１３８．４ｍｍｏｌ）を緩徐に加えて順次にクエンチし、白色の粒状スラリーを得て、これをセライトで濾過した。濾過した固体をジエチルエーテルで洗浄した。濾液を約３００ｍｂａｒの真空中及び３０℃の水浴中で濃縮した。残渣をジエチルエーテルで希釈し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、濾過し、約３００ｍｂａｒの真空中及び３０℃の水浴中で濃縮し、その後、真空下で約３０秒間濃縮して、
２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエタノール（２．３１８ｇ、１００％）を得て、これを更に精製することなく次のステップで直接使用した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ３．６４（ｓ，２Ｈ）、１．６８（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）、１．３９（ｓ，１Ｈ）、１．３１（ｓ，１Ｈ）、０．８２（ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ，４Ｈ）、０．６５（ｓ，２Ｈ）、０．５０（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，２Ｈ）。

ステップ５：３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

５－オキソ－１Ｈ－ピラゾール－２－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２．９４２ｇ、１５．９７ｍｍｏｌ）及び２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエタノール（２．３１８ｇ、１６．７７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３６．７８ｍＬ）溶液に、トリフェニルホスフィン（４．３９９ｇ、１６．７７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物にアゾジカルボン酸ジイソプロピル（３．３９１ｇ、３．３０２ｍＬ、１６．７７ｍｍｏｌ）を１０分間にわたって緩徐に滴加した（軽度の発熱が認められた）。反応混合物を室温で３０分間、次いで、５０℃で３０分間撹拌した。テトラヒドロフランを真空中で除去した。粗残渣にトルエン（２３．５４ｍＬ）を添加し、混合物を一晩撹拌すると、沈殿物が徐々に結晶化した。セライトでスラリー化し、次いで、沈殿物を濾去し、トルエン（８．７０５ｍＬ）で洗浄し、トルエン（８．７０５ｍＬ）で再度洗浄した。濾液を真空中で濃縮した。粗生成物を、１００％ヘキサンから１００％酢酸エチルへの緩やかな勾配を使用したシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３．４４９ｇ、７１％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値３０４．１７８６８、実測値３０５．１（Ｍ＋１）^＋；保持時間：０．８２分（ＬＣ法Ａ）。

ステップ６：３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）－１Ｈ－ピラゾール

３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５．３０４ｇ、１７．４３ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（２９．８１ｇ、２０．１４ｍＬ、２６１．４ｍｍｏｌ）とともにジクロロメタン（５３．０４ｍＬ）中に溶解し、反応物を室温で１２０分間撹拌した。反応物を蒸発させ、結果として生じた油を酢酸エチルと飽和重炭酸ナトリウム溶液との間に分配し、層を分離した。水性部分を酢酸エチルで更に２回抽出し、次いで、有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、油として３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）－１Ｈ－ピラゾール（３．５６ｇ、１００％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値２０４．１２６２７、実測値２０５．１（Ｍ＋１）^＋；保持時間：０．５９分（ＬＣ法Ａ）。

ステップ７：２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

２，６－ジクロロピリジン－３－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４．３２２ｇ、１７．４２ｍｍｏｌ）、３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）－１Ｈ－ピラゾール（３．５５９ｇ、１７．４２ｍｍｏｌ）、及び炭酸カリウム（２．８９１ｇ、２０．９２ｍｍｏｌ）を無水ジメチルスルホキシド（７１．１８ｍＬ）中で合わせた。１，４－ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（３９１．１ｍｇ、３．４８７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を窒素下室温で１６時間撹拌した。反応混合物を水（１３６．９ｍＬ）で希釈し、１５分間撹拌した。結果として生じた白色の固体を濾過し、水で洗浄した。固体をジクロロメタン中に溶解し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。混合物を濾過し、蒸発させて、白色の固体として２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５．６９ｇ、７９％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ８．３５（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、８．１８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．６９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．９４（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．２５（ｓ，２Ｈ）、１．９０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、１．６２（ｓ，９Ｈ）、１．４９（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ）、０．８５（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，４Ｈ）、０．６５（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，２Ｈ）、０．５２（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，２Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳｍ／ｚ計算値４１５．１６６２６、実測値３６０．０（Ｍ－ｔＢｕ）＋；保持時間：２．０９分（ＬＣ方法Ｂ）。

ステップ８：２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸

２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５．８５ｇ、１４．０７ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（１６．２６ｍＬ、２１１．１ｍｍｏｌ）とともにジクロロメタン（５８．５ｍＬ）中に溶解し、反応物を室温で１６時間撹拌した。反応物を蒸発させ、結果として生じた固体にエーテルを添加し、次いで、エーテルを減圧下で除去した。このエーテルからの蒸発を更に２回繰り返して、白色の固体で２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸（５．０６ｇ、１００％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ８．４１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、８．３７（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．９７（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．２７（ｓ，２Ｈ）、１．９１（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）、１．５０（ｓ，１Ｈ）、０．８５（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，４Ｈ）、０．７１－０．６２（ｍ，２Ｈ）、０．５２（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，２Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ｃａｌｃ．３５９．１０３６７，実測値３６０．２（Ｍ＋１）^＋；保持時間：２．１６分（ＬＣ方法Ｂ）。

パートＢ：（４Ｓ）－２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチルの合成

ステップ１：（Ｅ）－（２－オキソテトラヒドロピラン－３－イリデン）メタノラート（ナトリウム塩）

５Ｌの三口丸底フラスコに、機械的撹拌器、加熱マントル、添加漏斗、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ／コントローラ及び窒素入口／出口を装着した。容器に、窒素雰囲気下で水素化ナトリウム（６０％ｗ／ｗの５９．９１ｇ、１．４９８ｍｏｌ）、続いてヘプタン（１．５Ｌ）を充填し、灰色の懸濁液を得た。撹拌を開始し、ポット温度は１９℃を記録した。次いで、容器にエチルアルコール（３．４５１ｇ、７４．９１ｍｍｏｌ）をシリンジで加えて充填すると、ガスが発生した。添加漏斗に、テトラヒドロピラン－２－オン（１５０ｇ、１．４９８ｍｏｌ）及びギ酸エチル（１１１ｇ、１．５０ｍｏｌ）の透明な淡黄色の溶液を充填した。溶液を１時間にわたって滴加すると、ガスが発生し、徐々に発熱して４５℃になった。次いで、結果として生じた濃い白色の懸濁液を６５℃に２時間加熱し、次いで、室温まで冷却させた。混合物を室温で一晩（約１０時間）撹拌し続けた。反応混合物を、窒素流下で、ガラスフリットブフナー漏斗（中程度の多孔度）を通して真空濾過した。濾過ケーキをヘプタン（２×２５０ｍＬ）で置換洗浄し、数分間吸引した。わずかにヘプタンで湿ったケーキをガラストレイに移し、真空オーブン中、４５℃で１５時間乾燥させて、所望の生成物、（Ｅ）－（２－オキソテトラヒドロピラン－３－イリデン）メタノラート（ナトリウム塩）として白色の固体（２０５ｇ、１．３６ｍｏｌ、収率９１％）を得た。

ステップ２：３－メチレンテトラヒドロピラン－２－オン

５Ｌの三口丸底フラスコに、機械的撹拌器、加熱マントル、添加漏斗、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ／コントローラ及び窒素入口／出口を装着した。この容器に、窒素雰囲気下で、（Ｅ）－（２－オキソテトラヒドロピラン－３－イリデン）メタノラート（ナトリウム塩）（２０５ｇ、１．３６６ｍｏｌ）（２０５ｇ、１．３６６ｍｏｌ）及びテトラヒドロフラン（１６４０ｍＬ）を充填し、これにより、白色の懸濁液を得た。撹拌を開始し、ポット温度は１９℃を記録した。次いで、容器にパラホルムアルデヒド（１３６．６ｇ、４．５４９ｍｏｌ）を固体として一度に添加して充填した。得られた懸濁液を６３℃に加熱し、その状態を１５時間維持した。加熱すると、反応混合物はわずかにゼラチン質になった。白色ゼラチン質の混合物を減圧下で濃縮して、テトラヒドロフランのほとんどを除去した。残っている残留物を、分液漏斗中に酢酸エチル（１０００ｍＬ）、飽和塩化ナトリウム（５００ｍＬ）、及び飽和炭酸水素ナトリウム（５００ｍＬ）で分配した。有機物を除去し、残留水溶液を酢酸エチル（５×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機物を、硫酸ナトリウム（５００ｇ）上で乾燥させ、次いで、２０ｍｍのセライト層を備えたガラスフリットブフナー漏斗を通して真空濾過した。濾過ケーキを酢酸エチル（２５０ｍＬ）で置換洗浄した。透明な濾液を減圧下で濃縮して、所望の粗生成物として透明な淡黄色の油（１３５ｇ）を得た。この物質を、１時間にわたる１００％ヘキサンからヘキサン中６０％酢酸エチルへの勾配で溶出するシリカゲルカラムフラッシュクロマトグラフィー（液体ロード）により精製し、４５０ｍＬの画分を収集した。生成物を、３：１のヘキサン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルでのＴＬＣ分析によって検出し、ＵＶ下で可視化した。生成物画分を合わせ、減圧下で濃縮して、所望の生成物、３－メチレンテトラヒドロピラン－２－オンとして透明な無色の油（１３２ｇ、１．１８ｍｏｌ、収率７２％、ＮＭＲにより１６重量％の残留酢酸エチル含有）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ_６）δ６．１８（ｑ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．６０（ｑ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．４０－４．２６（ｍ，２Ｈ）、２．６１（ｄｄｔ，Ｊ＝７．０，６．３，２．０Ｈｚ，２Ｈ）、１．９０－１．７５（ｍ，２Ｈ）。

ステップ３：３－（２－メチル－２－ニトロ－プロピル）テトラヒドロピラン－２－オン

５０００ｍＬの三口丸底フラスコに、機械的撹拌器、二次格納容器として使用した冷却浴、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ、添加漏斗及び窒素入口／出口を装着した。容器に、窒素雰囲気下で２－ニトロプロパン（１０４．９ｇ、１．１７７ｍｏｌ）を充填した。撹拌を開始し、ポット温度は１９℃を記録した。次いで、容器に１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（２２．４１ｇ、１４７．２ｍｍｏｌ）を一度にそのままで添加して充填し、透明な淡黄色の溶液を得た。発熱は観察されなかった。添加漏斗に３－メチレンテトラヒドロピラン－２－オン（１１０ｇ、９８１．０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１１００ｍＬ）溶液を充填し、これを１時間にわたって滴加すると、透明な淡黄色の溶液が得られ、徐々に発熱して２４℃になった。反応混合物を、室温で３．５時間撹拌し続け、次いで減圧下で濃縮した。残りの残留物をジクロロメタン（１０００ｍＬ）中に溶解し、１モルのクエン酸溶液／飽和塩化ナトリウム溶液の３：２混合物５００ｍＬで分配した。結果として生じた有機相は、透明な淡青色の溶液であり、水相は、わずかに濁った非常に淡い青色の溶液であった。有機層を除去し、残りの水層をジクロロメタン（３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和塩化ナトリウム溶液（３００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム（２５０ｇ）で乾燥させ、次いで、ガラスフリットブフナー漏斗に通して濾過した。濾液を減圧下で約２００ｍＬの体積まで濃縮した。透明な淡青色のジクロロメタン溶液をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（１５００ｍＬ）で希釈し、濁った溶液を減圧下で約２００ｍＬの体積まで濃縮し、懸濁液を得た。混合物を再びメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（１５００ｍＬ）で希釈し、減圧下で約２５０ｍＬの体積まで濃縮した。得られた懸濁液を、一晩（約１２時間）室温で静置させた。固体をガラスフリットブフナー漏斗内での真空濾過により収集し、濾過ケーキを冷メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（２×１５０ｍＬ）で置換洗浄し、次いで、３０分間吸引した。この物質を更に真空オーブン中で、４５℃で５時間乾燥させて、所望の生成物、３－（２－メチル－２－ニトロ－プロピル）テトラヒドロピラン－２－オンとして白色の固体（１６０ｇ、０．７９５ｍｏｌ、収率８１％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ_６）δ４．３４（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．１，９．３，４．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．２０（ｄｔ，Ｊ＝１１．１，５．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．７５－２．６２（ｍ，１Ｈ）、２．５６（ｄｄ，Ｊ＝１４．９，５．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．０１－１．８９（ｍ，２Ｈ）、１．８９－１．６７（ｍ，２Ｈ）、１．５５（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，６Ｈ）、１．４４（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１２．８，１１．５，８．１，６．６Ｈｚ，１Ｈ）。

ステップ４：３－（３－ヒドロキシプロピル）－５，５－ジメチル－ピロリジン－２－オン

１０００ｍＬの三口丸底フラスコに、Ｔｅｆｌｏｎ撹拌棒、加熱マントル、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ／コントローラ、及びゴムセプタムを装着した。容器に、３－（２－メチル－２－ニトロ－プロピル）テトラヒドロピラン－２－オン（２５ｇ、１２４．２ｍｍｏｌ）及びエチルアルコール（３７５ｍＬ）を充填し、白色懸濁液を得た。撹拌を開始し、懸濁液を４０℃に１０分間加熱し、透明な無色の溶液を得た。次いで、容器にガス分散管を装着し、溶液を１５分間にわたって窒素で脱気した。次いで、容器にラネーニッケル（８．０１９ｇの５０％ｗ／ｗ、６８．３１ｍｍｏｌ）を充填し、次いで、容器にセプタムを装着した。容器を排気し、水素雰囲気下に置いた。このプロセスを３サイクル繰り返した。次いで、容器を１気圧の水素下に置き、反応混合物を徐々に６０℃まで加熱した。反応物を、６０℃で２４時間撹拌し続けた。室温に冷却した後、容器にガス分散管を装着し、反応混合物を１５分間にわたって窒素で脱気した。混合物を、２０ｍｍのセライト層を備えたガラスフリットブフナー漏斗に通して真空濾過した。濾過ケーキをエタノール（２×１００ｍＬ）で置換洗浄し、エチルアルコールの湿気がわずかになるまで吸引し、次いで水で湿らせ、使用したラネーニッケル触媒を水中に廃棄した。透明な淡い琥珀色の濾液を減圧下で濃縮して、透明な粘性の淡い琥珀色の油を得た。油をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（１５００ｍＬ）で希釈し、濁った溶液を、約１５０ｍＬの体積まで減圧下で濃縮して懸濁液を得た。混合物を再びメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（１５００ｍＬ）で希釈し、減圧下で約１５０ｍＬの体積まで濃縮した。得られた懸濁液を、一晩（約１２時間）室温で静置させた。固体を、ガラスフリットブフナー漏斗内で真空濾過によって収集し、濾過ケーキを、冷メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（２×５０ｍＬ）で置換洗浄し、次いで３０分間吸引した。この物質を、４５℃において３時間、真空オーブン中で更に乾燥させて、生成物、３－（３－ヒドロキシプロピル）－５，５－ジメチル－ピロリジン－２－オンとして白色の固体（１９ｇ、０．１１１ｍｏｌ、８９％収率）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ_６）δ７．６３（ｓ，１Ｈ）、３．３８（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．３７（ｔｄｄ，Ｊ＝９．８，８．５，４．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．０２（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，８．６Ｈｚ，１Ｈ）、１．７２（ｔｄｄ，Ｊ＝９．６，７．５，４．４Ｈｚ，１Ｈ）、１．５２－１．３２（ｍ，３Ｈ）、１．２８－１．０３（ｍ，７Ｈ）。

ステップ５：３－（５，５－ジメチルピロリジン－３－イル）プロパン－１－オール

５Ｌの三口丸底フラスコに、機械的撹拌器、加熱マントル、添加漏斗、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ／コントローラ及び窒素入口／出口を装着した。容器に、水素化アルミニウムリチウムペレット（１９．３９ｇ、５１０．９ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で充填した。次いで容器にテトラヒドロフラン（５００ｍＬ、２０ｍＬ／ｇ）を充填した。撹拌を開始し、ポット温度は２０℃を記録した。混合物を室温で０．５時間撹拌し、ペレットを溶解させた。得られた灰色がかった懸濁液のポット温度は２４℃を記録した。添加漏斗に、３－（３－ヒドロキシプロピル）－５，５－ジメチル－ピロリジン－２－オン（２５ｇ、１４６．０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５００ｍＬ）溶液を充填し、透明な淡黄色の溶液を９０分にわたって滴加した。均質性を達成するために、わずかな加熱が必要であった。添加完了後、得られた灰色がかった懸濁液のポット温度は２４℃を記録した。次いで、混合物を６５℃のポット温度に加熱し、その状態を７２時間維持した。この時点での反応混合物の分析により、いくらかの残留出発物質が依然として残っており、生成物形成に変化がなかったことが示された。その後、反応はこの時点で停止した。加熱マントルを取り外し、容器に冷却浴を取り付けた。懸濁液を粉砕した氷／水冷却浴で０℃に冷却し、次いで水（１９．９３ｍＬ）、続いて１５重量％の水酸化ナトリウム溶液（１９．９３ｍＬ）、次いで最後に水（５９．７９ｍＬ）の非常にゆっくりとした滴加によってクエンチした。得られた白色懸濁液のポット温度は５℃を記録した。冷却浴を取り外し、容器に再び加熱マントルを取り付けた。懸濁液を６０℃に加温し、その状態を３０分間維持した。温懸濁液を、２０ｍｍのセライト層を備えたガラスフリットブフナー漏斗を通して真空濾過した。次いで、濾過ケーキを６０℃のテトラヒドロフラン（２×２５０ｍＬ）で置換洗浄し、次いで３０分間吸引した。透明な濾液を減圧下で濃縮して、所望の生成物、３－（５，５－ジメチルピロリジン－３－イル）プロパン－１－オールとして透明な淡黄色の粘性油（２３．５ｇ、０．１４９ｍｏｌ、収率９９％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ_６）δ３．３７（ｄｔ，Ｊ＝８．３，６．４Ｈｚ，３Ｈ）、２．９５（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．４０（ｄｄ，Ｊ＝１０．７，７．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．０４（ｄｔ，Ｊ＝１６．１，８．１Ｈｚ，１Ｈ）、１．６９（ｄｄ，Ｊ＝１２．２，８．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．５０－１．２４（ｍ，５Ｈ）、１．１１－０．９４（ｍ，７Ｈ）。

ステップ６：４－（３－ヒドロキシプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

１Ｌの三口丸底フラスコに、機械的撹拌器、冷却浴、添加漏斗、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ、及び窒素入口／出口を装着した。容器に、３－（５，５－ジメチルピロリジン－３－イル）プロパン－１－オール（１５ｇ、９５．３９ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２２５ｍＬ、１５ｍＬ／ｇ）を窒素雰囲気下で充填し、透明な淡黄色の溶液を得た。撹拌を開始し、ポット温度は１９℃を記録した。冷却浴に粉砕した氷／水を充填し、ポット温度を０℃に下げた。添加漏斗にトリエチルアミン（１２．５５ｇ、１２４．０ｍｍｏｌ）を充填し、続いて５分にわたってそのまま滴加した。発熱は観察されなかった。次いで添加漏斗に、ジクロロメタン（２２５ｍＬ）中に溶解した二炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２２．８９ｇ、１０４．９ｍｍｏｌ）を充填した。次いで透明な淡黄色の溶液を３０分にわたって滴加すると、穏やかなガス発生が生じた。発熱は観察されなかった。冷却浴を除去し、結果として生じた透明な薄黄色の溶液を室温に加温させ、室温で３時間撹拌し続けた。反応混合物を分液漏斗に移し、水（７５ｍＬ）で分配した。有機物を取り出し、飽和塩化ナトリウム溶液（７５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム（１５０ｇ）上で乾燥させ、次いでガラスフリットブフナー漏斗を通して濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、所望の粗生成物として透明な淡黄色の油（３０ｇ）を得た。この物質を、ジクロロメタン中の１００％ジクロロメタンからジクロロメタン中の１０％メチルアルコールの勾配で６０分にわたって溶出するシリカゲルカラムフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタンによる液体投入）により精製して５０ｍＬの画分を収集した。所望の生成物画分を合わせ、減圧下で濃縮して、４－（３－ヒドロキシプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２２ｇ、０．０８５５ｍｏｌ、収率９０％）を透明な淡黄色の粘性油として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ４．３８（ｔｄ，Ｊ＝５．２，１．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．５４（ｄｔ，Ｊ＝１０．３，６．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３８（ｔｄ，Ｊ＝６．６，３．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．７６（ｑ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．０７（ｔｄ，Ｊ＝１１．６，５．７Ｈｚ，１Ｈ）、１．８７（ｄｄｄ，Ｊ＝１６．７，１２．１，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、１．３７（ｄｄ，Ｊ＝１４．２，１０．４Ｈｚ，１７Ｈ）、１．２４（ｓ，３Ｈ）。

ステップ７：２，２－ジメチル－４－（３－メチルスルホニルオキシプロピル）ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

４－（３－ヒドロキシプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５０．５ｇ、１９６．２２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３９．７１１ｇ、５４．６９８ｍＬ、３９２．４４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５００ｍＬ）中に溶解し、結果として生じた溶液を氷水浴中で３０分間冷却した。塩化メシル（２４．７２５ｇ、１６．７０６ｍＬ、２１５．８４ｍｍｏｌ）を３０分間にわたって滴加し、次いで、氷浴を取り外し、混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、反応物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２００ｍＬ）でクエンチした。相を分離し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム（２００ｍＬ）及び水（２×１００ｍＬ）で抽出した。水相を廃棄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、２，２－ジメチル－４－（３－メチルスルホニルオキシプロピル）ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６４．２ｇ、９３％）を淡黄色の油として得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値３３５．１７６６、実測値３３６．４（Ｍ＋１）^＋；保持時間：５．５４分（ＬＣ法Ｑ）。

ステップ８：４－（３－アミノプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

２，２－ジメチル－４－（３－メチルスルホニルオキシプロピル）ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６４．２ｇ、１９１．３８ｍｍｏｌ）をジオキサン（６５０ｍＬ）中に溶解し、次いで、水酸化アンモニウム（６５０ｍＬ）を添加し、結果として生じた混合物を４５℃に１８時間加熱した。１８時間後、反応物を室温に冷却した。溶液を１Ｍ水酸化ナトリウム（２００ｍＬ）で希釈し、次いでジエチルエーテル（３×６５０ｍＬ）で抽出した。水相を廃棄し、合わせた有機相を水（２×２００ｍＬ）で抽出した。水相を廃棄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、４－（３－アミノプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４８．９ｇ、９５％）を淡黄色の油として得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値２５６．２１５１、実測値２５７．３（Ｍ＋１）^＋；保持時間：３．７０分（ＬＣ法Ｑ）。

ステップ９：２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

ジメチルスルホキシド（７５ｍＬ）中の４－（３－アミノプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（８．９１ｇ、３４．８ｍｍｏｌ）及び６－フルオロピリジン－２－スルホンアミド（６．１３ｇ、３４．８ｍｍｏｌ）に、炭酸カリウム（４．９１ｇ、３５．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１２時間撹拌し、次いで周囲温度に冷却し、更に４時間（合計１６時間）撹拌した。反応混合物を、水（２００ｍＬ）中の塩酸（１Ｍの３５ｍＬ、３５．００ｍｍｏｌ）にゆっくりと注ぎ（いくらか泡立つ）、酢酸エチル（２５０ｍＬ）で希釈した。有機相を分離し、１００ｍＬのブラインで洗浄した。有機相を、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、セライト上で濾過し、真空中で濃縮して、暗黄色の油を得た。粗生成物を、ヘキサン中の０％～１００％の酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。純粋（９．０ｇ）画分及び純粋でない（３ｇ）画分の両方を収集した。ヘキサン中の０％～１００％の酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって純粋でない画分を精製して、合計で、２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１０．０ｇ、６９％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ_６）δ７．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，７．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．０７（ｓ，２Ｈ）、６．９５（ｄｄ，Ｊ＝７．２，０．７Ｈｚ，２Ｈ）、６．６１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．５５（ｑ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．３２－３．２４（ｍ，２Ｈ）、２．７９（ｑ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．１３（ｄ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ，１Ｈ）、１．９６－１．８２（ｍ，１Ｈ）、１．５１（ｄｔ，Ｊ＝１８．０，９．３Ｈｚ，２Ｈ）、１．３７（ｄｄ，Ｊ＝１２．９，１０．６Ｈｚ，１５Ｈ）、１．２４（ｓ，３Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ｃａｌｃ．４１２．２１４４２，実測値４１３．１（Ｍ＋１）^＋；保持時間：２．３４分（ＬＣ方法Ｄ）。

ステップ１０：（４Ｓ）－２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

ラセミ２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（７ｇ、１６．９７ｍｍｏｌ）を、７０ｍＬ／分で１１．０分にわたって４０％メタノール／６０％二酸化炭素移動相でＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＧ（２５０×２１．２ｍｍカラム、５μｍ粒径）を使用する（注入量＝メタノール中の３２ｍｇ／ｍＬ溶液の５００μＬ）、ＳＦＣクロマトグラフィーによるキラル分離に供して、最初に溶出するピークとして（４Ｓ）－２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３．４４８１ｇ、９９％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値４１２．２１４４２、実測値４１３．２（Ｍ＋１）^＋；保持時間：０．６３分（ＬＣ法Ａ）。

パートＣ：（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（化合物ＩＩ）の合成

ステップ１：（４Ｓ）－４－［３－［［６－［［２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボニル］スルファモイル］－２－ピリジル］アミノ］プロピル］－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸（５．２ｇ、１４．４５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）溶液にカルボニルジイミダゾール（２．８ｇ、１６．５１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で１時間撹拌した。この混合物に、テトラヒドロフラン（１５ｍＬ）中（４Ｓ）－２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６．０ｇ、１４．５４ｍｍｏｌ）、続いて、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（６．５ｍＬ、４３．４７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で１６時間撹拌した。反応物を水（１５０ｍＬ）で希釈し、混合物を塩酸水溶液（６Ｍ １５ｍＬ、９０．００ｍｍｏｌ）で酸性化した。混合物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で抽出し、有機相を分離した。有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、セライトで濾過し、真空中で濃縮して、白色の沈殿物を得た。沈殿物をアセトニトリルでスラリー化し、中型ガラスフリットを使用した濾過により固体を収集し、アセトニトリルで洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、黄色の油を得た。粗製油をアセトニトリル及びいくらかのＮ－メチル－２－ピロリドンで希釈し、水中５０％～１００％のアセトニトリルで溶出する、４１５ｇの逆相Ｃ_１８カラムでクロマトグラフィー処理し、（４Ｓ）－４－［３－［［６－［［２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボニル］スルファモイル］－２－ピリジル］アミノ］プロピル］－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４．５ｇ、４１％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値７５３．３０７５６、実測値７５４．４（Ｍ＋１）^＋；保持時間：３．７９分（ＬＣ法Ｄ）。

ステップ２：２－クロロ－Ｎ－［［６－［３－［（３Ｓ）－５，５－ジメチルピロリジン－３－イル］プロピルアミノ］－２－ピリジル］スルホニル］－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボキサミド（トリフルオロ酢酸塩）

（４Ｓ）－４－［３－［［６－［［２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボニル］スルファモイル］－２－ピリジル］アミノ］プロピル］－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５．９ｇ、７．８２１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）及びトルエン（１５ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（６．０ｍＬ、７７．８８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で１８時間撹拌した。溶媒を、浴温度を４５℃に設定して真空中で除去し、濃い黄色い油を得た。油をトルエン（１２５ｍＬ）で希釈し、溶媒を、浴温度を４５℃に設定して真空中で除去した。油をトルエンで希釈し、溶媒を真空中で除去して、濃い粘性の黄色い油、２－クロロ－Ｎ－［［６－［３－［（３Ｓ）－５，５－ジメチルピロリジン－３－イル］プロピルアミノ］－２－ピリジル］スルホニル］－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボキサミド（トリフルオロ酢酸塩）（６．０ｇ、１００％）を得て、これを更に精製することなく、次のステップに使用した。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値６５３．２５５１、実測値６５４．３（Ｍ＋１）^＋；保持時間：２．６分（ＬＣ法Ｂ）。

ステップ３：（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（化合物ＩＩ）

２－クロロ－Ｎ－［［６－［３－［（３Ｓ）－５，５－ジメチルピロリジン－３－イル］プロピルアミノ］－２－ピリジル］スルホニル］－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボキサミド（トリフルオロ酢酸塩）（６．０ｇ、７．８１０ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（１４０ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（５．３ｇ、３８．３５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物に窒素を５分間パージした。次いで、混合物を１５０℃で２２時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、水（３００ｍＬ）に添加し、オフホワイト色の固体沈殿物を得た。混合物を塩酸水溶液（６Ｍ １２ｍＬ、７２．００ｍｍｏｌ）で注意深く酸性化し、泡状スラリーを得た。中型ガラスフリットを使用した濾過により固体を収集した。湿潤フィルターケーキを酢酸エチル（５００ｍＬ）中に溶解し、２００ｍＬのブラインで洗浄した。水相はわずかに混濁していたため、少量の６Ｎ塩酸で酸性化し、有機相に戻した。水相を分離し、有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、淡黄色の油を得た。この粗生成物をアセトニトリルで希釈し、水中５０％～１００％のアセトニトリルで溶出する４１５ｇのＣ_１８逆相カラムでクロマトグラフィー処理した。生成物を、クリーム色の泡状物として単離した。泡状物を４８時間４５℃において真空中で乾燥させ、（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（化合物ＩＩ）（３．３２ｇ、６８％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ_６）δ１２．４８（ｓ，１Ｈ）、８．２０（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８１（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．５７（ｄｄ，Ｊ＝８．５，７．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．０５（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．９７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．９１（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、６．７１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．０８（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、４．２１（ｔｄ，Ｊ＝６．７，１．３Ｈｚ，２Ｈ）、３．９２（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．１６（ｓ，１Ｈ）、２．９５（ｄ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．７８－２．６６（ｍ，１Ｈ）、２．０７（ｓ，１Ｈ）、１．９２－１．７２（ｍ，４Ｈ）、１．６０（ｓ，６Ｈ）、１．５１（ｓ，３Ｈ）、１．４７（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）、１．３１（ｑ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ）、０．８９－０．７７（ｍ，４Ｈ）、０．６９－０．６１（ｍ，２Ｈ）、０．５３－０．４５（ｍ，２Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ 計算値６１７．２７８４４、実測値６１８．４（Ｍ＋１）^＋、保持時間：１０．２９分（ＬＣ方法Ｆ）。

実施例５：化合物ＩＩ（遊離形態）形態Ａ
反応器には、オーバーヘッド撹拌器、還流冷却器、Ｎ_２バブルライン及び出口、並びに温度プローブが装備された。（１４Ｓ）－８－ブロモ－１２，１２－ジメチル－２λ^６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１^１１，^１４．０^５，^１０］テトラコサ－１（２３），５，７，９，１９，２１－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（８６％ｗ／ｗ ＩＰＡｃの１２０ｇ［１０３．２ｇ（１４Ｓ）－８－ブロモ－１２，１２－ジメチル－２λ^６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１^１１，^１４．０^５，^１０］テトラコサ－１（２３），５，７，９，１９，２１－ヘキサエン－２，２，４－トリオン］、０．２１ｍｏｌ、１当量）、３－（２－（ジスピロ［２．０．２^４．１^３〕ヘプタン－７－イル）エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール（４２．６ｇ、０．２１ｍｏｌ、１当量）、３２５メッシュＫ_２ＣＯ_３（６３．４ｇ、０．４６ｍｏｌ、２．２当量）、ＣｕＩ（３．３ｇ、１７．２ｍｍｏｌ、０．０８３当量）及びＢｕＯＡｃ（７４０ｍＬ）の混合物を反応器に充填した。混合物を、周囲温度で撹拌した。次いでＤＭＦ（３００ｍＬ、２．９体積）及び
Ｎ，Ｎ’－ジメチルシクロヘキサン－１，２－ジアミン（１４．６ｇ又は１６．２ｍｌ、０．１ｍｏｌ、０．４９当量）を反応器に充填し、混合物を３回のＮ_２／真空／Ｎ_２サイクルでパージした。次いで、混合物を、１２０℃に４時間加熱し、次いで周囲温度まで冷却させた。１０％ｗ／ｖシュウ酸水溶液（８６０ｍＬ、０．９６ｍｏｌ、４．６当量）を滴加し、混合物を少なくとも１時間撹拌した。次いで、混合物を濾過して、懸濁固体を除去した。除去した固体を、（２×１２０ｍＬ）で洗浄した。濾液からの層を分離した。有機層を、８％ｗ／ｖのクエン酸三ナトリウム水溶液（６００ｍＬ）で洗浄した。相分離を助けるために、必要に応じてブラインを添加した。有機層を１：１ ｖ／ｖの水／ブライン（４００ｍＬ）で洗浄した。有機層を、セライトのパッドを通して濾過した。濾過パッドをＩＰＡｃ（１５０ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮し、次いで８００ｍＬの１－ＰｒＯＨ（７．８体積）を加え、混合物を濃縮した。このステップをもう一度繰り返した。トルエン（８００ｍＬ）を加え、混合物を濃縮した。このステップをもう一度繰り返し、濃厚なスラリーを得た。粗混合物を、３００ｍＬ（２．９体積）のトルエンの体積になるまで濃縮した。一晩スラリーを撹拌した後、固体を濾過することによって収集し、固体をトルエン（２×１００ｍＬ、０．９７体積）で洗浄した。乾燥減量が１．０％以下になるまで、固体を窒素ブリードしながら５０℃で真空下で乾燥させ、白色／オフホワイトの固体として化合物ＩＩ（１０７．０ｇ、８３％、９４．５％（ＡＵＣ）ＨＰＬＣ純度）を得た。

再結晶化：化合物ＩＩ形態Ａ［２２．２ｇ、９４．６％（ＡＵＣ）化合物ＩＩ形態Ａを、トルエン（４４０ｍＬ、化合物ＩＩに基づいて２０体積）に懸濁し、混合物を加熱還流した。２時間以内還流を保持した後、混合物を８時間かけて周囲温度まで冷却した。周囲温度で一晩スラリーを撹拌した後、固体を濾過することによって収集し、固体をトルエン（４０ｍＬ、１．８体積）で洗浄した。乾燥減量が１．０％以下になるまで、固体を窒素ブリードしながら５０℃で真空下で乾燥させ、白色／オフホワイトの固体として化合物ＩＩ形態Ａ（１８．８ｇ、８４％、９６．８％（ＡＵＣ）ＨＰＬＣ純度）を得た。

２回目の再結晶化：化合物ＩＩ形態Ａ［１７．５ｇ、９７．０％（ＡＵＣ）化合物ＩＩ形態Ａ］を、トルエン（３５０ｍＬ、化合物ＩＩに基づいて２０体積）に懸濁し、混合物を加熱還流した。還流で２時間以上保持した後、混合物を８時間かけて周囲温度まで冷却した。周囲温度で一晩スラリーを撹拌した後、固体を濾過することによって収集し、固体をトルエン（４０ｍＬ、１．８体積）で洗浄した。乾燥減量が１．０％以下になるまで、固体を窒素ブリードしながら５０℃で真空下で乾燥させ、白色／オフホワイトの固体として化合物ＩＩ形態Ａ（遊離形態）（１５．７ｇ、８９％、９８．４％（ＡＵＣ）ＨＰＬＣ純度）を得た。

化合物ＩＩ遊離形態Ａは、周囲温度での水分活性≦０．９５で、最も安定な多形形態である。

Ａ．Ｘ線粉末回折
ＸＲＰＤパターンは、Ｖａｎｔｅｃ－１検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ Ａｄｖａｎｃｅを使用して、反射モードで室温で取得した。試料は、０．０１４４５３１°のステップサイズ及び０．２５秒のステップ当たりの時間での連続モードで、３～４０°２シータで、シリコン試料ホルダーで分析した。試料は１５ｒｐｍで回転した。化合物ＩＩ（遊離形態）形態ＡのＸＲＰＤディフラクトグラムを図１に提供し、ＸＲＰＤデータを以下の表５に要約する。

Ｂ．単結晶の解明
化合物ＩＩ（遊離形態）形態Ａの構造を有する単結晶を、アセトン／ヘプタンから成長させた。Ｘ線回折データは、Ｍｏ Ｋ_α線（λ＝０．７１０７３Å）及びＣＣＤ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ回折計で、２９８Ｋで取得した。構造を、ＳＨＥＬＸプログラム（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．，Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．，（２００８）Ａ６４，１１２－１２２）を使用して解明し、精密化し、結果を以下の表６に要約する。

Ｃ．固体ＮＭＲ
１．固体ＮＭＲ実験（化合物ＩＩの全ての結晶性形態に適用される）：
Ｂｒｕｋｅｒ－Ｂｉｏｓｐｉｎ ４ｍｍ ＨＦＸプローブを備えたＢｒｕｋｅｒ－Ｂｉｏｓｐｉｎ ４００ＭＨｚワイドボア分光計を使用した。試料を、４ｍｍのＺｒＯ_２ローターに充填し、通常１２．５ｋＨｚに設定した回転速度で、マジック角回転（ＭＡＳ）条件下で回転させた。^１３Ｃ交差分極（ＣＰ）ＭＡＳ実験において適切なリサイクル遅延を設定するために、プロトン緩和時間を^１Ｈ ＭＡＳ Ｔ_１飽和回復緩和実験を使用して測定した。炭素ＣＰＭＡＳ実験のＣＰ接触時間を、２ミリ秒に設定した。直線ランプ（５０％～１００％）を有するＣＰプロトンパルスを用いた。炭素ハルトマン－ハーンマッチを、外部参照試料（グリシン）で最適化した。炭素スペクトルを、およそ１００ｋＨｚの電界強度でＴＰＰＭ１５デカップリング配列を使用してプロトンデカップリングで記録した。

２．化合物ＩＩ（遊離形態）形態Ａの固体ＮＭＲ
化合物ＩＩ（遊離形態）形態Ａの固体^１３Ｃ ＮＭＲデータを図２に示し、以下の表７に要約する。

Ｄ．示差走査熱量測定分析
ＤＳＣは、ＴＡ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ示差走査熱量計（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｎｅｗ Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）を使用して実施された。装置はインジウムで較正された。約１～１０ｍｇの試料を、密封パンに計量し、１つの孔を有する蓋を使用して圧着した。ＤＳＣ試料を、１０℃／分の加熱速度で、２５℃～３００℃で走査した。データを収集し、Ｔｒｉｏｓ Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェア（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社、Ｎｅｗ Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）によって分析した。サーモグラムは、約２２７℃で単一の融解吸熱ピークを示した。

実施例６：化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ａ
化合物ＩＩのカルシウム塩水和物形態Ａは、速度論的に最も好ましいカルシウム塩水和物の形態であり、他のカルシウム塩水和物形態よりも高い溶解性、溶解度、及び曝露性をもたらす。

化合物ＩＩのカルシウム塩水和物形態Ａは、０．２ｍｍｏｌの化合物ＩＩ（遊離形態）形態Ａ及び０．１ｍｍｏｌのＣａ（ＯＭｅ）_２乾燥粉末を、約４５ｍｇ／ｍＬのＩＰＡと充填し、約１０％の水でスパイクし、７０℃に加熱することによって調製される。最初に、全ての固体が溶解した。５分後、白色の固体が沈殿した。得られたスラリーを室温で４日間撹拌した。固体を、真空濾過により化合物ＩＩのカルシウム塩水和物形態Ａとして単離し、真空下で４０℃で一晩乾燥させた（単離収率約７８％）。

化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ａを調製する別の方法では、６３ｍＬのＩＰＡ及び７ｍＬの水を充填した１０ｇの化合物Ｉ（遊離形態形態Ａ）を利用した。スラリーを５５～６５℃に加熱した。混合物に、１．１当量のＮａＯＨを加えた。混合物を、溶液が均質になるまで撹拌した。次いで、溶液を２５℃に冷却し、０．１ｇの化合物ＩＩナトリウム塩水和物形態Ａをシード添加（ｓｅｅｄ）した。スラリーを１８時間撹拌した。次いで、溶液を４５℃に加熱した。スラリーに０．１ｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ａをシード添加した。０．５５当量のＣａＣｌ_２、９ｍＬのＩＰＡ、及び１ｍＬの水の溶液を５時間かけて加えた。得られたスラリーを２時間撹拌した。スラリーを、５時間かけて２０℃に冷却した。得られた固体を真空濾過により収集し、得られた湿潤ケーキを５０ｍＬの水で洗浄した。洗浄された湿潤ケーキを、１時間風乾した。風乾した湿潤ケーキを、わずかに窒素ブリードしながら、４５℃の真空オーブンに２０時間移し、結晶性化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ａ（８．５ｇ、単離収率８２％）を得た。

Ａ．Ｘ線粉末回折：
ＸＲＰＤパターンは、Ｖａｎｔｅｃ－１検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ Ａｄｖａｎｃｅを使用して、反射モードで室温で取得した。試料は、０．０１４４５３１°のステップサイズ及び０．２５秒のステップ当たりの時間での連続モードで、３～４０°２シータで、シリコン試料ホルダーで分析した。試料は１５ｒｐｍで回転した。化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態ＡのＸＲＰＤディフラクトグラムを図３に示し、表８に要約する。

Ｂ．単結晶の解明
化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ａの構造を有する結晶は、１ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ａをジクロロエタン／エタノールの９０／１０混合物の３５０μＬに溶解することによって成長させ、次いでペンタンで数日間にわたって蒸気を拡散させた。Ｘ線回折データは、Ｃｕ Ｋ_α線（λ＝１．５４７８Å）及びＣＣＤ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ回折計で、１００Ｋと２９８Ｋの両方で取得した。構造を、ＳＨＥＬＸプログラム（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．，Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．，（２００８）Ａ６４，１１２－１２２）を使用して解明し、精密化し、結果を以下の表９に要約する。

Ｃ．固体ＮＭＲ
化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ａの固体^１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを図４に示し、表１０に要約する。

Ｄ．示差走査熱量測定分析：
ＤＳＣサーモグラムは、ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ＤＳＣ Ｑ２０００を使用して得た。試料を、１０℃／分で、３０℃～３５０℃で加熱した。サーモグラムは、約２２３℃で吸熱ピークを示した。

実施例７：化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ
化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、エタノール及び水の混合物など、特定の条件下で最も安定なカルシウム塩水和物の形態である。

約２５ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ａに、０．５ｍＬのＥｔＯＨ：水６７：３３ｗ／ｗを加えた。スラリーを、６５℃で８日間加熱した。真空濾過によって収集された得られた固体は、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄであった。

あるいは、化合物ＩＩのカルシウム塩水和物形態Ｄを、１０８０ｍＬのＩＰＡ及び１２０ｍＬの水を加えた８９ｇの化合物ＩＩナトリウム水和物形態Ａから調製した。スラリーを５５～６５℃に加熱した。スラリーに、１８ｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄシードを入れた。このスラリーを、０．５５当量のＣａＣｌ_２、８１ｍＬのＩＰＡの溶液及び９ｍＬの水を５時間かけて加えた溶液として湿式粉砕した。Ｘ線粉末回折により、スラリーが全て化合物Ｉカルシウム塩水和物形態Ｄであることが確認されるまで湿式粉砕機を稼働させた。得られた固体を真空濾過により収集し、湿潤ケーキを３５０ｍＬの水で洗浄した。洗浄された湿潤ケーキを、１時間風乾した。風乾した湿潤ケーキを、わずかに窒素ブリードしながら、４５℃の真空オーブンに２０時間移し、結晶性化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ（８３．１５ｇ、単離収率９０．６％）を得た。

化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄは、周囲温度から６０℃までの水分活性０．１～０．９５で、ＩＰＡ／水中で最も安定な多形形態である。

Ａ．Ｘ線粉末回折：
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）スペクトルを、密封管源及びＰＩＸｃｅｌ １Ｄ Ｍｅｄｉｐｉｘ－２検出器（Ｍａｌｖｅｒｎ ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ Ｉｎｃ、Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ）を備えたＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ Ｅｍｐｙｒｅａｎシステムを使用して、反射モードで室温で記録した。Ｘ線発生装置を、銅線（１．５４０６０Å）を使用して、４５ｋＶの電圧及び４０ｍＡの電流で動作させた。粉末試料を、バックフィルド試料ホルダーに入れ、機器に装填した。試料を、０．０１３１３０３°のステップサイズ及びステップ当たり４９．７２５秒で、約３°～約４０°２θの範囲にわたってスキャンされた。化合物Ｉカルシウム塩水和物形態ＤのＸＲＰＤディフラクトグラムを図５に示し、表１１に要約する。

Ｂ．単結晶の解明
結晶は、エタノール／水中での、化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄシード添加プロセスから選択される。Ｘ線回折データは、Ｒｉｇａｋｕ ＭＭ００７ＨＦ回転陽極で提供されるＣｕ Ｋ_ａ線（ｌ＝１．５４７８）及びＣＭＯＳ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ回折計で、１００Ｋで取得した。構造を、ＳＨＥＬＸプログラム（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．，Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．，（２００８）Ａ６４，１１２－１２２）を使用して解明し、精密化し、結果を表１２に要約する。

Ｃ．固体ＮＭＲ：
化合物Ｉカルシウム塩水和物形態Ｃの固体^１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを図６に示し、表１３に要約する。

Ｄ．示差走査熱量測定分析
ＤＳＣは、ＴＡ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ示差走査熱量計（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｎｅｗ Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）を使用して実施された。装置はインジウムで較正された。約１～１０ｍｇの試料を、密封パンに計量し、１つの孔を有する蓋を使用して圧着した。ＤＳＣ試料を、１０℃／分の加熱速度で、２５℃～３００℃で走査した。データを収集し、Ｔｒｉｏｓ Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェア（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社、Ｎｅｗ Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）によって分析した。サーモグラムは、約１８２℃及び約２０８℃で複数の吸熱ピークを示した。

実施例８：２５０ｍｇの化合物Ｉの有効性データ
臨床試験では、アイバカフトールを用いた安定した治療を受けている、ゲーティング変異を有する対象における、１２週間時点でのＳｗＣｌの絶対的変化に関する比較試験が実施された。化合物Ｉは、一般的に安全であり、１５０ｍｇ及び２５０ｍｇで１２週間投与しても良好な忍容性があると考えられた。２５０ｍｇの用量は、１２週目で、アイバカフトールベースラインと比較して、ＳｗＣｌの改善を示したのに対し、化合物１の１５０ｍｇの用量は、アイバカフトールベースラインと比較して、ＳｗＣｌの減少を示した。

実施例９：例示的な錠剤製剤の調製
表１５の顆粒内成分（化合物Ｉの噴霧乾燥分散体（ＳＤＤ）、化合物ＩＩのカルシウム塩水和物形態Ｄ、化合物ＩＩＩのＳＤＤ、微結晶セルロース、及びクロスカルメロースナトリウム）を計量し、スクリーンを通してふるいにかけ、ビンブレンダーに入れた。これらの成分をブレンドして組み合わせて顆粒内粉末ブレンドを調製した。顆粒内粉末ブレンドをローラーコンパクタを使用して乾式造粒し、次いで粉砕して顆粒にした。顆粒外微結晶セルロースを計量し、スクリーンを通過させ、ビンブレンダー中で粉砕された顆粒と混合した。ステアリン酸マグネシウムを計量し、ふるいにかけ、次いでビンブレンダーに添加し、混合した。ブレンドされた成分を、電動補助回転式打錠機を使用して圧縮し、必要なコア重量及び硬度を有するテーブルを調製した。次いで、錠剤をコーターに入れ、非機能性コーティングを加えた。

他の実施形態
前述の説明は、本開示の単に例示的な実施形態を開示し、記載しているに過ぎない。当業者は、このような説明並びに添付の図面及び特許請求の範囲から、様々な変化、変更、及び変形が、以下の特許請求の範囲で定義される本開示の趣旨及び範囲から逸脱することなく、それらにおいて行われ得ることを容易に認識するであろう。

Claims (24)

1. 嚢胞性線維症を治療する方法であって、
   （ａ）２５０ｍｇの化合物Ｉ又は相当量のその薬学的に許容可能な塩、及び
   （ｂ）２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ
   
   （ｃ）１００ｍｇの化合物ＩＩＩ
   
   又は相当量のその薬学的に許容可能な塩を、連日投与することを含む、方法。
2. 嚢胞性線維症を治療する方法であって、治療を必要とする患者に
   （ａ）２５０ｍｇの化合物Ｉ。
   （ｂ）２１．２４０ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び
   （ｃ）１００ｍｇの化合物ＩＩＩを、
   連日投与することを含む、方法。
3. 化合物Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩが、別個の組成物で投与される、請求項１又は２に記載の方法。
4. 化合物Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩが、単一の組成物で投与される、請求項１又は２に記載の方法。
5. 化合物Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩが、２つの組成物として１日１回投与され、各組成物が、１２５ｍｇの化合物Ｉ、１０．６２ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び５０ｍｇの化合物ＩＩＩを含む、請求項１又は２に記載の方法。
6. 嚢胞性線維症を治療する方法であって、２５０ｍｇの化合物Ｉ
   
   又は相当量のその薬学的に許容可能な塩を、１日１回、治療を必要とする患者に投与することを含む、方法。
7. 前記患者が、Ｆ５０８ｄｅｌ変異に対してホモ接合性であるか、又はＦ５０８ｄｅｌ／最小機能遺伝子型、Ｆ５０８ｄｅｌ／ゲーティング遺伝子型、又はＦ５０８ｄｅｌ／残存機能遺伝子型を有する、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
8. 前記患者がヘテロ接合性遺伝子型を有し、かつ１つのＦ５０８ｄｅｌ変異を有する、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
9. 前記患者が、表３から選択される１つの変異を有する、請求項８に記載の方法。
10. 前記患者が、表４から選択される１つの変異を有する、請求項８に記載の方法。
11. 前記患者が、表４から選択される少なくとも１つの変異を有する、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
12. （ａ）２５０ｍｇの化合物Ｉ又は相当量のその薬学的に許容可能な塩、
    （ｂ）２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び
    （ｃ）１００ｍｇの化合物ＩＩＩ又は相当量のその薬学的に許容可能な塩を含む、医薬組成物。
13. （ａ）２５０ｍｇの化合物Ｉ、
    （ｂ）２１．２４ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び
    （ｃ）１００ｍｇの化合物ＩＩＩを含む、医薬組成物。
14. （ａ）１２５ｍｇの化合物Ｉ又は相当量のその薬学的に許容可能な塩、
    （ｂ）１０．６２ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び
    （ｃ）５０ｍｇの化合物ＩＩＩ又は相当量のその薬学的に許容可能な塩を含む、医薬組成物。
15. （ａ）１２５ｍｇの化合物Ｉ、
    （ｂ）１０．６２ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄ、及び
    （ｃ）５０ｍｇの化合物ＩＩＩを含む、医薬組成物。
16. （ａ）化合物Ｉを含む１５６．３ｍｇの固体分散体であって、前記固体分散体が、
    （ｉ）前記固体分散体の重量に対して、８０重量％の化合物Ｉ、
    （ｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、１９．５重量％のヒプロメロース酢酸エステルコハク酸エステル、及び
    （ｉｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、０．５重量％のラウリル硫酸ナトリウムを含む、固体分散体と、
    （ｂ）１０．６ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄと、
    （ｃ）化合物ＩＩＩを含む６２．５ｍｇの固体分散体であって。前記固体分散体が、
    （ｉ）前記固体分散体の重量に対して、８０重量％の化合物ＩＩＩ、及び
    （ｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、２０重量％のヒプロメロースを含む、固体分散体と、
    （ｄ）１２４．０ｍｇの微結晶セルロースと、
    （ｅ）２２．８ｍｇのクロスカルメロースナトリウムと、
    （ｆ）３．８ｍｇのステアリン酸マグネシウムと、を含む、錠剤。
17. （ａ）化合物Ｉを含む１５６．３ｍｇの固体分散体であって、前記固体分散体が、
    （ｉ）前記固体分散体の重量に対して、８０重量％の化合物Ｉ、
    （ｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、１９．５重量％のヒプロメロース酢酸エステルコハク酸エステル、及び
    （ｉｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、０．５重量％のラウリル硫酸ナトリウムを含む、固体分散体と、
    （ｂ）１０．６ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄと、
    （ｃ）化合物ＩＩＩを含む６２．５ｍｇの固体分散体であって。前記固体分散体が、
    （ｉ）前記固体分散体の重量に対して、８０重量％の化合物ＩＩＩ、及び
    （ｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、２０重量％のヒプロメロースを含む、固体分散体と、
    （ｄ）１２４．０ｍｇの微結晶セルロースと、
    （ｅ）２２．８ｍｇのクロスカルメロースナトリウムと、
    （ｆ）３．８ｍｇのステアリン酸マグネシウムと、
    （ｇ）１１．４ｍｇのフィルムコートと、を含む、錠剤。
18. （ａ）化合物Ｉを含む１５６．３ｍｇの固体分散体であって、前記固体分散体が、
    （ｉ）前記固体分散体の重量に対して、８０重量％の化合物Ｉ、
    （ｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、１９．５重量％のヒプロメロース酢酸エステルコハク酸エステル、及び
    （ｉｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、０．５重量％のラウリル硫酸ナトリウムを含む、固体分散体と、
    （ｂ）１０．６ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄと、
    （ｃ）化合物ＩＩＩを含む６２．５ｍｇの固体分散体であって。前記固体分散体が、
    （ｉ）前記固体分散体の重量に対して、８０重量％の化合物ＩＩＩ、及び
    （ｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、２０重量％のヒプロメロースを含む、固体分散体と、を含む、錠剤。
19. 前記錠剤が、７０～１７０ｍｇの微結晶セルロースを更に含む、請求項１８に記載の錠剤。
20. 前記錠剤が、１０～４０ｍｇのクロスカルメロースナトリウムを更に含む、請求項１８に記載の錠剤。
21. 前記錠剤が、７０～１７０ｍｇの微結晶セルロース及び１０～４０ｍｇのクロスカルメロースナトリウムを更に含む、請求項１８に記載の錠剤。
22. （ａ）化合物Ｉを含む１５６．３ｍｇの固体分散体であって、前記固体分散体が、
    （ｉ）前記固体分散体の重量に対して、８０重量％の化合物Ｉ、
    （ｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、１９．５重量％のヒプロメロース酢酸エステルコハク酸エステル、及び
    （ｉｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、０．５重量％のラウリル硫酸ナトリウムを含む、固体分散体と、
    （ｂ）１０．６ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄと、
    （ｃ）化合物ＩＩＩを含む６２．５ｍｇの固体分散体であって。前記固体分散体が、
    （ｉ）前記固体分散体の重量に対して、８０重量％の化合物ＩＩＩ、及び
    （ｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、２０重量％のヒプロメロースを含む、固体分散体と、
    （ｄ）１２５．０ｍｇの微結晶セルロースと、
    （ｅ）２２．８ｍｇのクロスカルメロースナトリウムと、
    （ｆ）２．９ｍｇのステアリン酸マグネシウムと、を含む、錠剤。
23. （ａ）化合物Ｉを含む１５６．３ｍｇの固体分散体であって、前記固体分散体が、
    （ｉ）前記固体分散体の重量に対して、８０重量％の化合物Ｉ、
    （ｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、１９．５重量％のヒプロメロース酢酸エステルコハク酸エステル、及び
    （ｉｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、０．５重量％のラウリル硫酸ナトリウムを含む、固体分散体と、
    （ｂ）１０．６ｍｇの化合物ＩＩカルシウム塩水和物形態Ｄと、
    （ｃ）化合物ＩＩＩを含む６２．５ｍｇの固体分散体であって。前記固体分散体が、
    （ｉ）前記固体分散体の重量に対して、８０重量％の化合物ＩＩＩ、及び
    （ｉｉ）前記固体分散体の重量に対して、２０重量％のヒプロメロースを含む、固体分散体と、
    （ｄ）１２４．５ｍｇの微結晶セルロースと、
    （ｅ）２２．８ｍｇのクロスカルメロースナトリウムと、
    （ｆ）３．８ｍｇのステアリン酸マグネシウムと、任意選択的に
    （ｇ）１５．９ｍｇのフィルムコートと、を含む、錠剤。
24. ２５０ｍｇの化合物Ｉ
    
    又は相当量のその薬学的に許容可能な塩を含む、医薬組成物。