TW200536552A - Hepatopathy preventive or inhibitory agents and functional food for preventing or inhibiting hepatopathy - Google Patents

Description

200536552 、 (1) 九、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明爲關於預防或抑制肝病之用劑及使用於預防或 抑制肝病之特定保健用食品等之機能性食品，更詳言係關 於抑制起因於肝細胞壞死血淸中 GOT値及GPT値之上 升，及爲預防及/或抑制肝病之預防或抑制肝病之用劑及 使用於預防或抑制肝病之機能性食品。 【先前技術】 肝臟爲代謝之中樞器官，具有產生膽汁、排泄、解毒 等豐富多彩且重要功能。但另一方面，因具強大預備力， 被稱爲沉默之器官，很難呈現倦怠感及黃疸、浮腫、腹水 等症狀，極易延緩發現其病變。一般已知G Ο T (鍵胺酸-草 酸乙酸轉醯胺基酶）及G P T (魅胺酸-丙酮酸轉醯胺基酶）多 存在肝臟，由於血中GOT値及GPT値可敏銳反應肝臟細 ^ 胞壞死程度，肝病簡易之測定多藉由此二者進行評估。 近年來，由於飮食生活歐美化，營養平衡偏頗，酒精 攝取及因藥物而增加之肝臟負擔，脂肪肝之患者亦正大幅 增加。另外慢性肝臟疾病，係肝細胞因爲經過一年多重複 破壞及再生過程，肝組織纖維化進而發展成肝硬化、肝細 胞癌之疾病，此類患者正增加中。 目前，對於肝臟疾病並無特效藥，以飮食療法及靜養 爲中心進行治療爲主流，例如，對慢性肝臟疾病有時會使 用強力新明發健C (登錄商標M i 11 〇 p h a g e η社製）等之甘草素 200536552 . (2) . 製劑。但甘草素製劑因於腸內不具活化性，無法期待經口 之效果，主要以注射劑方式使用。因而，產生日常注射之 痛苦，此外，亦經報告會產生高血壓及低血鉀血症等副作 用。 另一方面，各種胺基酸製劑有時會做爲肝硬化、肝功 能不全之肝臟疾病所引起之肝性腦症及低血淸白蛋白血症 之改善等目的而被使用。但該胺基酸製劑與其稱爲係治療 # 肝臟疾病，不如說只能期待改善因肝臟疾病引起之營養障 礙，即藉由血漿胺基酸不均衡之矯正，改善氮代謝，或降 低血液中氨値低下而被使用。 近來，於特開200 1 -226289號公報，曾被提案以乳鐵 過氧化酶及/或乳鐵傳遞蛋白做爲效成分之肝機能改善 劑，已知許多哺乳類動物之乳汁含有該種乳鐵傳遞蛋白。 然而，乳鐵傳遞蛋白易因熱而變性，一般已知進行通 常的高溫殺菌加熱處理等，即容易地產生變性（例如食品 ^ 新素材有效利用技術系列「乳鐵傳遞蛋白」）（參照平成1 2 年3月發行，財團法人菓子總合技術中心）、乳業技術 Vol.51.2001「牛乳之乳鐵傳遞蛋白」、Journal of Dairy Science Vol.74，Νο·1，p65-71，1991)。因此，工業上有 分離及利用之限制，亦有成本及於通用性的點的問題。 近年來，已知乳淸蛋白含有胃黏膜保護成分（α 一乳 淸蛋白）等多種生理機能成分’但是於經由通常的加熱殺 菌處理過的乳類及乳淸蛋白，並無被報告具肝機能改善功 tb 。 -6- 200536552 (3) 【發明內容】 本發明之目的爲提供於日常可連續使用，安全性佳， 有效預防及/或能夠抑制肝胞壞死等肝病，預防或抑制肝 病之用劑及包含該劑之使用於預防或抑制肝病之特定保健 用食品等之機能性食品。 若依據本發明，提供含有有效成分乳淸蛋白之預防或 Φ 抑制肝病之用劑。 另外若依據本發明，提供含有上述預防或抑制肝病之 用劑之使用於預防或抑制肝病之機能性食品。 更進一步地若依據本發明，提供爲製造預防或抑制肝 病之用劑，乳淸蛋白之使用。 另外若依據本發明，提供爲製造使用於預防或抑制肝 病之機能性食品，乳淸蛋白之使用。 本發明之預防或抑制肝病之用劑，因以具食用經驗之 ® 乳淸蛋白爲有效成分，於日常可連續使用，安全性佳，能 夠有效預防及/或抑制肝胞壞死等肝病。另外，本發明之 使用於預防或抑制肝病用之機能性食品，因含有上述本發 明之預防或抑制肝病之用劑，能期待其對於預防及/或抑 制肝病。 【實施方式】 以下，針對本發明更進一步詳細地說明。 本發明之預防或抑制肝病之用劑，爲含有有效成分乳 200536552 (4) 淸蛋白，例如，能夠有效的預防及/或抑制肝細胞壞死爲 主因之血中GOT値及GPT値之上昇。 上述有效成分之乳淸蛋白，來自乳類，含有將酪蛋白 質等根據常用方法全部或大部分去除所得水分層（水分画 分）部分，可舉出酸性乳淸蛋白及/或乳酪乳淸蛋白等。 酸性乳淸蛋白爲利用乳酸菌發酵所得之發酵乳淸蛋白，含 有將酸加入乳類中將酪蛋白質等根據常用方法全部或大部 分去除所得水分層，可舉出酪乳淸蛋白等，特別是以對於 肝病之預防及/或抑制效果佳此點看來，希望含有發酵乳 淸蛋白。 上述發酵乳淸蛋白，通常可得自乳類以乳酸菌發酵， 或藉由乳酸菌和酵母共生發酵方法等，可舉出發酵乳淸蛋 白等。原料之乳類爲，例如牛乳、山羊乳、羊乳等動物 乳；豆奶等植物乳；這些原料乳之加工乳可舉出爲脫脂 乳、還原乳、粉乳、煉乳等。使用時能作爲混合物使用。 乳類之固形物濃度無特別被規定，例如使用脫脂乳時 無脂乳固形物濃度最常使用9質量％濃度。但是，考慮各 設備之生產量時，能夠在某種程度上提高無脂乳固形物濃 度。發酵乳生產時所得發酵乳淸蛋白，能夠與其他乳成分 離使用之外，用作後述之機能性食品等時，未必需要與其 他之乳成分分離。 上述之乳酸菌可舉出屬於乳酸菌之鏈球菌屬 (Streptococcus· sp.)、乳酸菌屬（Lactococcus sp·)、乳酸乳 桿菌屬（L a c t 〇 b a c i 11 u s s p ,)、比菲德氏菌屬（B i f i d 〇 b a c t e r i u m 200536552 (5) sp·)等，但最好是乳酸乳桿菌屬。具體而言，可舉出例 如保加利亞氏菌（Lactobacillus bulgaricus)、纖維二乳桿菌 (Lactobacillus helveticus)、乾酪乳桿菌（Lactobacillus casei)、嗜乳酸桿菌（Lactobacillus acidophilus)、發酵乳桿 菌（Lactobacillus fermentum)等，特別是纖維二乳桿菌能夠 適於使用。進一步具體而言，可舉出纖維二糖乳桿菌 A T C C 1 5 0 0 9、纖維二糖乳桿菌a T C C 5 2 1、C Μ 4株（經濟 ® 產業省產業技術總合硏究所生命工學工業技術硏究所 專利生物寄存中心 寄存編號·· FERM ΒΡ - 6060， 寄存 日1997.8.15)(以下稱作CM4)，特別是CM4最爲合 適。此CM4在關於承認國際專利申請手續上微生物之寄 存的布達佩斯條約上，登錄上述之寄存編號，因此細菌株 已寄存，去除了第三者無法取得之限制。 上述之乳酸菌最好使用預先培養好活性十分高之菌 種。初始菌數希望爲105〜1〇7個/ ml左右。 # 上述發酵乳淸蛋白利用爲特定保健用食品等之機能食 品時，爲使風味和嗜好性良好，能夠在上述發酵時與酵母 倂用。酵母之菌種未特別限定，但舉出最好是例如 Saccharomyces cerevisiae 等之 Saccharomyces sp.酵母 〇 酵母之含有比例可因應目的適宜地選擇。 發酵方法爲可以上述乳酸菌之1種或2種以上於培養 基上培養，或是混合上述乳酸菌之1種或2種以上與上述 酵母之1種或2種以上，於培養基上培養。培養基爲只有 自上述乳成分之1種或2種以上做爲培養基，或於這些培 200536552 (6) 養基適宜地添加副成分：酵母菌萃取物、抗環血酸等維他 命類、半胱氨酸等氨基酸、氯化鈉等鹽類、葡萄糖、蔗糖、 蜜三糖、水蘇糖等糖類、明膠等安定劑、香料等’做爲培 養基。 發酵通常爲藉由靜置或攪拌’例如，能夠進行以發酵 溫度20〜50°C，最好是30〜45°C，發酵初期ρΗ6·0〜7·0 之條件等，藉由菌數變爲107個/ ml以上，ρΗ5·0時停止 培養等方法。另外發酵前之乳類亦可施以高溫加熱殺菌 等。 可獲得之發酵乳淸蛋白可由通常之分離操作自凝乳分 離而得。另外，有效成分之發酵乳淸蛋白於後述用作機能 食品時，可因應需要，不分離發酵乳淸蛋白，原封不動使 用含該乳淸蛋白之發酵乳’此外’可適宜地決定分離操作 之程度。 上述之酪乳淸蛋白，爲上述全乳或脫脂乳等固形物 時，於溶解於蒸餾水之乳中，加入例如乳酸、檸檬酸、醋 酸、酒石酸、反丁烯二酸、蘋果酸、葡糖酸、己二酸等，能 夠去除主要的酪等蛋白質調整酸度後，依從膜處理法等常 用方法後，由分離乳淸蛋白份（水分層）而得。此時，加入 酸之前之乳類，亦可施以高溫加熱殺菌等。另外，酸之混 合比例因應酸之種類等，通常，能夠以酸度變爲1 . 0〜4.0 %比例混合。 上述乳酪乳淸蛋白，爲於通常乳酪製造時，藉由凝乳 酵素使凝乳凝固後，該凝乳依從常用方法由分離乳淸蛋白 -10- 200536552 (7) 份而得。此時’以凝乳酵素處理前之乳類，亦可施以高溫 加熱殺菌等。 本發明之預防或抑制肝病之用劑其有效成分乳淸蛋白 之投藥量爲，由投藥之持續性等能夠適宜地選擇，沒有特 別被限定，通常，凍結乾燥粉末爲0 · 0 0 1 g /體重k g /日 以上，希望爲〇·〇1 g /體重kg/日以上。另外，於本發明 之預防或抑制肝病之用劑，因需要亦可能含有乳淸蛋白以 外之具有預防或抑制肝病作用之成分。 本發明之預防或抑制肝病之用劑之型態爲與乳淸蛋白 完全相同，或爲其處理物，例如將乳淸蛋白以減壓濃縮等 方法濃縮爲濃縮物，另外，亦可將乳淸蛋白進行凍結乾 燥、噴霧乾燥等乾燥處理，成爲乾燥後粉末之型態。 本發明之預防或抑制肝病之用劑之投藥，通常爲能夠 經口投藥，例如，肝病發生前持續的或斷續的，更進一步 地，於肝病發生後，能夠持續的或斷續的攝取。 本發明之使用於預防或抑制肝病之機能性食品，爲含 有上述預防或抑制肝病之用劑。 上述機能性食品，可舉出訴求預防及抑制肝細胞壞死 之肝病之特定保健用食品等之食品。 於上述機能性食品亦可添加糖類、蛋白質、脂質、維 他命、礦物質、香料、或爲這些物質之混合物等之添加 物。另外，分離乳淸蛋白前亦可含有乳淸蛋白以外之乳成 分。 於本發明之機能性食品，與上述有效成分之乳淸蛋白 -11 - 200536552 (8) 之配合比例，能夠因應食品之型態及種類適宜地選擇，可 因應此機能性食品之攝取持續性等適宜地選擇，無特別被 限定，但通常1〜100質量％濃度之範圍爲適當的。 上述機能性食品之型態，可舉出例如優格、乳酸菌飮 料等發酵乳製品、乳淸蛋白配合加工飮食品、乾燥粉末、 錠劑、膠囊劑、顆粒劑等。 本發明之機能性食品，其投藥量及投藥時期無特別被 # 限定，但最好爲攝取上述有效之投藥量程度，例如，肝病 發生前持續的或斷續的，更進一步地，於肝障礙發生後， 最好能夠持續的或斷續的攝取。 實施例 以下藉由實施例更進一步詳細地說明，但本發明不被 限定於這些實施例。 _實施例1及2 市售之脫脂奶粉以蒸餾水溶解使成爲固形率9重量％ 濃度，以高溫滅菌鍋1 〇 5 °c，1 〇分鐘高溫加熱殺菌後，冷 卻至室溫，接種Lactobacillus helveticus CM4之原種3質 量％濃度，於37°C進行24小時培養獲得發酵乳。此發酵 乳以1 2 0 0 0 G，離心2 0分鐘，去除固形物調製成發酵乳淸 蛋白。 另外，市售之脫脂奶粉以蒸餾水溶解使成爲固形率9 質量％濃度，以高溫滅菌鍋1 05 °C，1 〇分鐘高溫加熱殺菌 -12- 200536552 、 （9) . 後，冷卻至室溫，加入乳酸使酸度成爲2.2 %。接著，以 1 2000G ’離心20分鐘，藉由去除固形物調製成酪乳淸蛋 白。 所得之發酵乳淸蛋白（實施例1 )或酪乳淸蛋白（實施例 2)以蒸餾水稀釋成1 0重量％濃度，做爲飮水提供以下之 動物實驗。另外對於作爲對照之不含乳淸蛋白之蒸餾水之 對照組亦進行試驗。 • 將3周大之ICR系雄性小鼠分爲3群（10隻/ 1群）， 使其個別自由攝取固形飼料（商品名「MF」）、Oriental酵 母工業（股）製）’及以上述方法調製之10重量％濃度發酵 乳淸蛋白蒸餾水，或以上述方法調製之1 0重量％濃度酪 乳淸蛋白蒸餾水。接著，使小鼠斷食1 8小時後，再將各 群分爲每5隻1群，經腹腔投藥生理食鹽水或乙醯氨基酚 溶液（7 0 Omg/ kg)。此乙醯氨基酚爲鎭熱止痛劑，亦被使 用於一般醫藥品，但若大量攝取則肝臟無法代謝，已知會 ^ 引起如猛爆性肝衰竭之肝病，常使用於評估肝病之實驗。 投藥後，於第2小時及第4小時，藉由使用轉胺基酶 C Π試驗套組（和光社製）測定血淸中之G Ο T値及G P T値， 用以評估預防或抑制肝病之作用。結果表示於表1。 由表1之結果，對照之蒸餾水投藥群，血淸中之GOT 値及GPT値因投藥乙醯氨基酚而有顯著之上升，但於發酵 乳淸蛋白投藥群及酪乳淸蛋白投藥群被抑制如蒸餾水投藥 群般之上升，判斷表現出較佳之預防或抑制肝病之作用。 特別在發酵乳淸蛋白投藥群爲較酪乳淸蛋白投藥群，被抑 -13- 200536552 (10)

制因投藥乙醯氨基酚而引起GOT値及GPT値之上升。 表1 第2小時之値 第4小時之値 G 對照 水+生理食鹽水投藥群 164 198 〇 水+乙醯氨基酚投藥群 577 841 T 實施例1 發酵乳淸蛋白+生理食鹽水投藥群 83.9 59 値 發酵乳淸蛋白+乙醯氨基酚投藥群 125 229 實施例2 酪乳淸蛋白+生理食鹽水投藥群 123 212 酪乳淸蛋白+乙醯氨基酚投藥群 340 798 對照 水+生理食鹽水投藥群 11.8 28.4 G 水+乙醯氨基酚投藥群 128 618 P 實施例1 發酵乳淸蛋白+生理食鹽水投藥群 6.29 15.8 T 發酵乳淸蛋白+乙醯氨基酚投藥群 6.02 30.1 値 實施例2 酪乳淸蛋白+生理食鹽水投藥群 14.6 20.5 酪乳淸蛋白+乙醯氨基酚投藥群 40.5 110 -14-

Claims (1)

1. 200536552 (1) 十、申請專利範圍 1 · 一種預防或抑制肝病之用劑，其特徵爲包含作爲 有效成分之乳淸蛋白。 2 ·如申請專利範圍第1項之預防或抑制肝病之用 劑’其中乳淸蛋白係酸性乳淸蛋白及乳酪乳淸蛋白之至少 一種。 3 ·如申請專利範圍第2項之預防或抑制肝病之用 劑，其中酸性乳淸蛋白係包含由包含乳酸菌之菌株使乳類 發酵所得之發酵乳淸蛋白。 4.如申請專利範圍第 3項之預防或抑制肝病之用 劑，其中乳酸菌係L a c t 〇 b a c i 11 u s s p .乳酸菌。 5 ·如申請專利範圍第 4項之預防或抑制肝病之用 劑，其中 Lactobacillus sp.乳酸菌係纖維二糖乳桿菌 (Lactobacillus helveticus) ° 6 ·如申請專利範圍第 5項之預防或抑制肝病之用 劑，其中纖維二糖乳桿菌（Lactobacillus helveticus)係纖維 二糖乳桿菌（Lactobacillus helveticus)CM4 (經濟產業省產 業技術總合硏究所生命工學工業技術硏究所 專利生物 寄存中心寄存編號：FERM BP - 6060 )。 7 ·如申請專利範圍第 2項之預防或抑制肝病之用 劑，其中酸性乳淸蛋白係酸加入乳類所得含水分層之酪乳 淸蛋白。 8 · —種使用於預防或抑制肝病之機能性食品，其特 徵爲包含如申請專利範圍第1〜7項中任一項之預防或抑 -15- 200536552 (2) 制肝病之用劑。 9.如申請專利範圍第8項之機能性食品，其中更包含 乳淸蛋白以外之乳成分。

   -16- 200536552 七、指定代表圖： (一） 、本案指定代表圖爲：無 (二） 、本代表圖之元件代表符號簡單說明··無

   本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵之化學式：無