TW200300346A - Aryl fused azapolycyclic compounds - Google Patents

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200300346 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明説明（1) 本發明係關於經芳基稠合的氮雜多環化合，更確定地 說是下式I定義之化合物，式I化合物結合至神經元菸鹼乙 醯膽鹼特定受體部位且可用於調節膽鹼能功能，此化合物 可用於治療發炎性腸疾（包括但不限於潰瘍性結腸炎、壞疽 性膿皮疾病，Crohn氏症）、應激性腸徵候群、痙攣性排尿 困難、慢性痛、急性痛、腹腔口炎性腹瀉、pouchitis、血 管收縮、焦慮、恐慌症、抑鬱症、雙相性情感障礙、孤獨 癖、睡眠障礙、噴氣機滯後現象、肌萎縮性側索硬化 (ALS)、認知功能障礙、高血壓、貪食症、厭食症、肥胖 症、心律不整、胃酸分泌過多、潰瘍、嗜鉻細胞瘤、持續 性肌肉上的痲痹、化學品依賴及上癮（例如對尼古丁（及/或 煙草產品）、酒精、苯並二氮箪、巴比妥酸鹽、鴉片或古柯 鹼依賴或上癮）、頭痛、偏頭痛、中風、創傷性腦部受傷 (TBI)、強迫觀念與強迫行爲的障礙（OCD)、精神病、 Huntington氏舞蹈病、遲發性運動障礙、運動過度、閱讀 困難、精神分裂症、多梗塞性癡呆、與年齡相關的認知衰 退、癲癇、包括癲癇小發作、阿爾茲海默氏型老人癡呆 (AD)、巴金森氏症（PD)、注意力不集中的過度反應症 (ADHD)及Tourette氏徵候群。 本發明化合物也可結合使用抗抑鬱劑例如三環抗抑鬱 劑或血淸素再攝取抑制的抗抑鬱劑（SRI)，以便治療認知衰 退及與AD、PD、中風、Huntington氏舞蹈病或創傷性腦部 受傷（TBI)相關的抑鬱症；結合毒覃鹼刺激劑以便刺激中樞 毒蕈鹼及菸鹼受體用於治療例如ALS、認知功能障礙、與 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） - 5- 200300346 Α7 Β7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明説明（2) 年齡相關的認知衰退、AD、PD、中風、Huntington氏舞蹈 病及T B I ;結合神經營養因子例如N G F以便最大化膽驗能 增強作用用於治療例如ALS、認知功能障礙、與年齡相關 的認知衰退、AD、PD、中風、Huntington氏舞蹈病及 TBI ;或結合減緩或阻止AD之藥劑例如認知增強劑、澱粉 樣蛋白聚集抑制劑、分泌酶（secretase)抑制劑、τ激酶抑制 劑、神經元抗發炎劑及類雌激素治療劑。 結合至神經元菸鹼受體部位之其他化合物揭示在1997 年11月4日公告之美國專利申請案〇8/9 63,852號，上述申 請案與本申請案有共通點且整份倂於本文供參考，具體地 說，結合至神經元菸鹼受體部位且可用於調節膽鹼能功能 之多種化合物揭示在200 1年2月8日公告之國際專利申請 案WO 01/6 2736、1998年11月13日公告之國際專利申請 案WO 99/3 5 1 3 1、1999年4月8日公告之國際專利申請案 WO 9 9/55680、1997年10月15日公告之國際專利申請案 WO 9 8/ 18798、1998年3月31日公告之美國專利5,997,1 3 1 號、1997年11月4日公告之美國專利6,02 0,335號及1999 年3月25日公告之歐洲專利申請案ΕΡ 0 95 5 3 0 1 Α2號， 上述申請案與本申請案有共通點且整份倂於本文供參考。 發明槪述 本發明係關於式（I)之經芳基稠合的氮雜多環化合物

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· 線· -6 - 200300346 A7 B7 經濟部智慧財產局員工涓費合作社印製 五、發明説明（3)R1獨立地是氫或-COOR4，其中R4是下式之基 η

或

R2及R3 —起與和其連接之苯並環形成選自下列之二環 系統：

、R R 12

N / N R11

S

N

R (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

R

R

'N

本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部智慈財產局員工消費合作社印製 200300346 A7 B7 五、發明説明（4)

其中A環之其中一個碳原子可視需要經氧或 烷基取代； 其中R11及R12是獨立地選自氫、（Cl_C6)烷基；及（Ci_ C6)烷氧基- (CQ-C6)烷基-其中碳原子總數不超過六且其中任 何烷基部份可視需要經從1至7個氟原子取代；硝基、氰 基、鹵基、胺基、（Ci-C6)院胺基、（（Ci-C6)院基）2胺基、_ C〇2R5、-CONR6R7、-S02NiL8R9、-C( = 0)R10、-XC( = 〇)R1()、苯基、單環雜芳基，或當連接至氮原子時，可 爲下式之基：

各R5、R6、R7、R8、R9及R1G是獨立地選自氫及（C” C6)烷基，或 R6及R7或R8及R9 —起與和其連接之氮形成吡咯啶、 六氫吡啶、嗎福啉、吖丁啶、六氫吡啡、-N-iC^Cd烷基六 氫吡畊或硫嗎福啉環，或其中環硫經亞硕或硕取代之硫嗎 福啉環：且各X獨立地是（C^Cd伸烷基； 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

-8- 200300346 Α7 Β7 五、發明説明（9 條件是當R1是H，則至少其中一個R11或R12必須是 下式之基：

連接至由R2及R3形成的環之氮原子，且視需要順應 存在的鍵結關係在該氮原子形成銨離子中心，及此化合物 在藥學上可接受的鹽類。 在R2及R3之定義中，可能的雜芳基實例如下：噻嗯 基、噚唑基、異鳄唑基、吡啶基、嘧啶基、噻唑基、四唑 基、異噻唑基、三唑基、咪唑基、四唑基、吡咯基及下式 之基： --------L-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、1Τ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

其中一個R13及R14是氫或（Κ6)烷基，且另一個是鍵 結至式I之苯並環。 式I之較佳具體實施例是其中R2及R3 —起與和其連接 之苯並環形成選自下列之二環系統： 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） -9- 200300346 A7 B7 五、發明説明（

'R' R 其中R11及R12是相同於上述之定義。 式I之更佳具體實施例是其中R2及R3 —起與和其連接 之苯並環形成下列之基：

其中R11及R12是相同於上述之定義。 本發明式I之最佳具體實施例是選自包括下列： (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝· 、-口 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

N

OH

N、

N 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） -10 - 200300346

經濟部智慧財產局員工涓費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（ 和

OH

本發明之其他較佳化合物包括

Η Ν 其中R15是酮基，其與分子中不飽和部份任何可用的碳 原子形成羰基官能基。 除非另外說明，本文使用的名詞”鹵基”包括氟、氯、. 溴及碘。 除非另外說明，本文使用的名詞，，烷基”包括足夠碳原 子數之直鏈、支鏈及環狀基。 本文使用的名詞”烷氧基，，係指，，-0-烷基”或”烷基-〇-，，， 其中”烷基”如同上述之定義。 本文使用的名詞”伸烷基”係指含兩個可用的鍵結位置 之烷基（也就是-烷基-)，其中，，烷基，，如同上述之定義。 除非另外說明，本文使用的名詞”一或多個取代基，，係 指從一至根據可用的鍵結位置數之最大可能的取代基數。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

11 - 200300346 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明説明（8) 本文使用的名詞”治療（treatment)，，係指反轉、減輕、抑 制或預防此名詞適用的病症或情形或此情形或病症之一或 多種徵候群之發展，本文使用的名詞”治療（treating)，，係指 治療之動作，”治療”如同上述之定義。 式I化合物可有光學中心且因此可出現不同的對掌異 構性組態，本發明包括此式I化合物之全部對掌異構物、 非對掌異構物及其他立體異構物，以及其外消旋異構物及 其他混合物。 本發明也關於式I化合物之全部放射性標示形式，較 佳的放射性標示式I化合物是其中放射性標示是選自3H、 Mc、14c、18F、1231及1251，此放射性標示化合物可以在代 謝硏究例如藥物動力學硏究等及動物與人類之結合測試法 中作爲硏究及診斷工具使用。 本發明也關於在哺乳動物包括人類用於減少尼古丁上 癮或幫助戒除或減少煙草使用之醫藥組成物，其含有效量 可以減少尼古丁上癮或幫助戒除或減少煙草使用之式I化 合物或其藥學上可接受的鹽類，以及藥學上可接受的載 劑。 本發明也關於在哺乳動物包括人類用於減少尼古丁上 癮或幫助戒除或減少煙草使用之方法，其包括將有效量可 以減少尼古丁上癮或幫助戒除或減少煙草使用之式I化合 物或其藥學上可接受的鹽類用藥至該哺乳動物。 本發明也關於一種方法在哺乳動物包括人類用於治療 選自發炎性腸疾（包括但不限於潰瘍性結腸炎、壞疽性膿皮 --------t 裝 f I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -12- 200300346 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 ____ B7_五、發明説明（9) 疾病、Crohn氏症）、應激性腸徵候群、痙攣性排尿困難、 慢性痛、急性痛、腹腔口炎性腹瀉、pouchitis、血管收 縮、焦慮、恐慌症、抑鬱症、雙相性情感障礙、孤獨癖、 睡眠障礙、噴氣機滯後現象、肌萎縮性側索硬化（ALS)、認 知功能障礙、高血壓、貪食症、厭食症、肥胖症、心律不 整、胃酸分泌過多、潰瘍、嗜鉻細胞瘤、持續性肌肉上的 痲痹、化學品依賴及上癮（例如對尼古丁（及/或煙草產品）、 酒精、苯並二氮罩、巴比妥酸鹽、鴉片或古柯鹼依賴或上 癮）、頭痛、偏頭痛、中風、創傷性腦部受傷（TBI)、強迫觀 念與強迫行爲的障礙（OCD)、精神病、Huntington氏舞蹈 病、遲發性運動障礙、運動過度、閱讀困難、精神分裂 症、多梗塞性癡呆、與年齡相關的認知衰退、癲癇、包括 癲癇小發作、阿爾茲海默氏型老人癡呆（AD)、巴金森氏症 (PD)、注意力不集中的過度反應症（ADHD)及Toilette氏徵 候群之病症或情形，其包括將有效量可以治療此病症或情 形之式I化合物或其藥學上可接受的鹽類用藥至該哺乳動 物。 本發明也關於一種醫藥組成物在哺乳動物包括人類用 於治療選自發炎性腸疾（包括但不限於潰瘍性結腸炎、壞疽 性膿皮疾病、Crohn氏症）、應激性腸徵候群、痙攣性排尿 困難、慢性痛、急性痛、腹腔D炎性腹瀉、pouchitis、血 管收縮、焦慮、恐慌症、抑鬱症、雙相性情感障礙、孤獨 癖、睡眠障礙、噴氣機滯後現象、肌萎縮性側索硬化 (ALS)、認知功能障礙、高血壓、貪食症、厭食症、肥胖 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -13- 200300346 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 Μ Β7五、發明説明（也 症、心律不整、胃酸分泌過多、潰瘍、嗜鉻細胞瘤、持續 性肌肉上的痲痹、化學品依賴及上癮（例如對尼古丁（及/或 煙草產品）、酒精、苯並二氮罩、巴比妥酸鹽、鴉片或古柯 鹼依賴或上癮）、頭痛、偏頭痛、中風、創傷性腦部受傷 (ΤΒΙ)、強迫觀念與強迫行爲的障礙（〇cD)、精神病、 Huntington氏舞蹈病、遲發性運動障礙、運動過度、閱讀 困難、精神分裂症、多梗塞性癡呆、與年齡相關的認知衰 退、癲癇、包括癲癇小發作、阿爾茲海默氏型老人癡呆 (AD)、巴金森氏症（PD)、注意力不集中的過度反應症 (ADHD)及Tourette氏徵候群之病症或情形，其含有效量之 式I化合物或其藥學上可接受的鹽類，以及藥學上可接受 的載劑。 本發明也關於式I化合物之藥學上可接受的酸加成 鹽，式I化合物之藥學上可接受的酸加成鹽實例是氫氯 酸、對甲苯磺酸、富馬酸、檸檬酸、琥珀酸、水楊酸、草 酸、氫溴酸、磷酸、甲磺酸、酒石酸、馬來酸、二對甲苯 醯基酒石酸及扁桃酸之鹽類以及從熟諳形成鹼性化合物之 藥學上可接受的酸加成鹽者已知的其他酸形成的鹽類，其 他可能的酸加成鹽是例如含藥學上可接受的陰離子之鹽 類，例如碘酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽或亞硫酸鹽、磷酸鹽或 酸式磷酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、葡糖酸鹽、糖二酸鹽、苯 甲酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽及巴莫酸鹽（也就 是1，1’-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘酸）鹽）。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -14- 200300346 A7 B7 五、發明説明（1)1 發明之詳細說明 除非另外說明，在下列反應圖式及討論中的R1至R15 是相同於上述之定義，合成經芳基稠合的氮雜多環化合物 前驅物之方法是陳述在200 1年2月8日申請之國際專利公 開案WO 01/62 736及1 998年1 1月13曰申請之國際專利公 開案WO 99/3 5 1 3 1，其整份倂於本文供參考。 本發明式I化合物之前驅物化合物有多項硏究進行， 具體地說，曾經進行5,8，14-三氮雜四環[10.3.1.Ο2，11』4’9]-十六碳-2(11)，3,5,7,9-五烯之硏究：

此化合物之合成方法可見於國際專利公開案W0 99/3 5 1 3 1及W0 01/62736，在肝臟微粒體中分析此特定前 驅物化合物，證明5,8，14-三氮雜四環[lOJ.l.O2’11』4’9]-十 六碳-2(11)，3,5,7,9-五烯進行1^胺基甲醯基葡糖苷酸化而形 成下式之活性化合物： (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣.

、1T f 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

當使用特定情形及共同因子以支持此種生物轉化反應 (碳酸氫鹽緩衝液、C02氣壓、UDPGA)。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -15- 200300346 A7 B7 五、發明説明（4 也曾經在活體內（大鼠、猴子、小鼠及人類）硏究化合物 5,8514-三氮雜四環[10.3.1.02’11.04’9]-十六碳-2(11)，3,557,9-五烯，代謝結構揭示在下列圖式I，人類循環中的代謝物包 括N-胺基甲醯基葡糖苷酸，N-甲醯基：

Η Ν 及Ν-己糖共軛物（在喹鳄啉氮位置及氮雜二環氮位置）

OH

N (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 以及微量代謝物（稱爲羰基代謝物因爲分子量是14質 量單位大於5,8,14-三氮雜四環[1〇·3 .1.02’1 VO4’9]-十六碳-2(11)，3,5,7,9-五烯）：

其中R15是酮基，其與分子上不飽和部份之任何可用的 碳原子形成羰基官能基。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） -16- 200300346 A7 B7 五、發明説明（也 N-胺基甲醯基葡糖苷酸代表一種不尋常、雖然不是非 慣例的代謝物，其出現是經由二氧化碳與二級胺結合後葡 糖苷酸化，臨床前物種具有這些代謝物以及其他少量的推 定的氧化性代謝物，在人類中唯一排泄出的代謝物是羥基 喹噚啉代謝物（2.9 %之劑量）：

及N-胺基甲醯基葡糖苷酸（3.6%之劑量），N-胺基甲醯 基葡糖苷酸是存在於大鼠及猴子，羥基喹噚啉代謝物也顯 示存在於大鼠尿中。 圖式I (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝.

’1T 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

式I化合物及其藥學上可接受的鹽類（以下稱爲，，活性 化合物”）可以經由口服、經皮（例如經由使用貼布）、鼻內、 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇X 297公釐） 麟 -17- 200300346 經濟部智慧財產局員工，消費合作社印製 A7 _____ B7_五、發明説明（li 舌下、.直腸、不經腸道或局部途徑用藥，較宜是經皮及口 服用藥，活性鹽之用藥劑量範圍是每天從約〇 · 〇 1毫克至約 1 5 00毫克，較宜每天從約〇.；[毫克至約3 00毫克單次或分 次給藥，但是決定於被治療者之體重及情形以及選擇的特 定用藥途徑需要改變，最宜使用的給藥水準範圍是每天每 公斤體重約〇. 〇〇 1毫克至約1 0毫克，決定於被治療者之體 重及情形以及其對該藥劑之個別回應、以及選擇的藥劑調 製物種類及進行此用藥之時間及間隔而需要改變，在部份 情形中，給藥水準低於上述範圍之下限可能更合適，而在 其他情形可能需要使用不會造成任何有害副作用之更高劑 量，條件是此更高劑量是先分成數個小劑量供當天用藥。 該活性化合物可以單獨或結合藥學上可接受的載劑或 稀釋劑經由任何先前提到的數種途徑用藥，更確定地說， 該活性鹽可以在多種不同的給藥形式下用藥，例如其可結 合不同的藥學上可接受的惰性載劑在片劑、膠囊劑、經皮 貼布、錠劑、糖錠劑、硬糖劑、粉劑、噴霧劑、乳膏、油 膏、栓劑、凝膠、膠體、糊劑、洗劑、軟膏、水性懸浮 液、可注射的溶液、酏劑、漿劑等形式用藥，此載劑包括 固體稀釋劑或塡充劑、無菌水性介質及不同的無毒有機溶 劑，此外，口服醫藥組成物可以適當地甜化及/或調味，通 常該活性鹽在此給藥形式中存在的濃度水準範圍是從約5.0 %至約7 0重量％。 對於口服用藥，可以使用含不同的賦形劑例如微晶纖 維素、丁二酸鈉、碳酸鈣、磷酸二鈣及甘油及不同的分解 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

-18- 200300346 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

A7 B7五、發明説明（4 劑例如澱粉（較宜是玉米、馬鈴薯或樹薯激粉）、藻酸及部份 複合矽酸鹽以及粒化黏著劑例如聚乙烯吡咯酮、蔗糖、明 膠及阿拉伯膠之片劑，此外，爲了製造片劑之目的可以使 用潤滑劑例如硬脂酸鎂、硫酸月桂酯鈉及滑石，也可以使 用類似形式之固體組成物作爲明膠膠囊劑之塡充劑，關於 此點之較佳物質也包括乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二 醇，當需要水性懸浮液及/或酏劑供口服用藥時，活性成份 可以結合不同的甜化劑或調味劑、染劑及視需要選用的乳 化劑及/或懸浮劑，結合稀釋劑例如水、乙醇、丙二醇、甘 油及其不同的組合物。 對於不經腸道用藥，可以使用在芝麻油或花生油或在 丙二醇水溶液中的溶液，該水溶液必須視需要適當地緩衝 化（較宜pH大於8)，並用液體稀釋劑先使其等滲化，這些 水溶液合適用於靜脈內注射之目的，油性溶液合適用於動 脈內、肌肉內及皮下注射之目的，在無菌情形下製備全部 這些溶液可以經由從事此項技藝者熟知的標準製藥技術輕 易地完成。 也可能局部用藥該活性化合物，且此可經由乳膏、貼 布、凝膠、膠體、糊劑、軟膏等根據標準醫藥實務完成。 生物測試法 活性化合物抑制尼古丁結合至特定受體位置之有效性 是經由下列方法測定，其係改良自Lippiello, P. M. and Fernandes，K. G.(在 The Binding of L-[3H]Nicotine To A (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -19- 200300346 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明説明（诟 Single Class of High-Affinity Sites in Rat Brain Membranes, Molecular Pharm.，29，448-54，（ 1 986)及 Anderson, D. J. and Arneric, S. P. (¾ Nicotinic Receptor Binding of 3H- Cy stisine, 3H-Nicotine and 3H-Methylcarmb amyl choline In Rat Brain, European J. Pharm., 253，2 6 1 -67 (1 994))之方 法。 步驟 將從 Charles River 之雄性 Sprague-Dawley 大鼠（200- 3 〇〇克）分組飼養在懸掛的不鏽鋼籠並維持1 2小時晝/夜循 環（白晝時間是早上七點-晚上七點），其無限制接受標準的 Purina Rat Chow 及水0 經由斷頭將大鼠殺死，斷頭後立即取出腦，根據部份 改良自 Lippiello 及 Fernandes 之方法（Molecular Pharm·，29, 448-54,（ 1 986))製備膜，取出腦後，用冰冷的緩衝液淸洗病 在〇°C及10倍體積緩衝液（重量/體積）使用設定6之 Brinkmann Polytron™均勻化30秒，緩衝液是含50毫莫耳 濃度Tris HC1，在室溫pH 7.5，經由離心使均勻物沈澱（10 分鐘，50，000 xg;0至4C)，將上淸液倒出並用Polytron 溫和地將膜再度懸浮並再度離心（10分鐘，50,000 X g; 0至 4 °C )，第二次離心後，將膜在濃度是1 · 0克/1 〇 〇毫升下再度 懸浮在測試緩衝液中，標準測試緩衝液之組成物是50毫莫 耳濃度TrisHCl、12〇毫莫耳濃度NaCl、5毫莫耳濃度 KC1、2毫莫耳濃度MgCl2、2毫莫耳濃度CaCl2且在室溫 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -20- 200300346 A7 B7 五、發明説明（1)7 pH 是 7.4。 在硼矽酸鹽玻璃試管內進行例行測試，測試混合物在 1.0毫升之最終培養體積中通常含0.9毫克膜蛋白質，準備 三組試管其中各試管分別含50微升媒劑、空白或測試化合 物溶液，在各試管中加入200微升在測試緩衝液中的[3H]尼 古丁，隨後加入750微升膜懸浮液，各試管中尼古丁的最 終濃度是0.9毫微莫耳濃度，空白中野靛鹼的最終濃度是1 微莫耳濃度，媒劑是由每50毫升含30微升1當量濃度醋 酸之去離子水組成，將測試化合物及野靛鹼溶解在媒劑， 將膜懸浮液加入試管後經由攪拌開始測試，在冰冷的搖動 水浴中將樣本在0至4°C培養，使用Brandel™多種組織收 集器經由Whatman GF/Btm玻璃纖維濾紙在真空下快速過濾 而終止培養，在初步過濾測試混合物後，將濾紙用冰冷的 測試緩衝液淸洗兩次（各5毫升），然後將濾紙放在計數瓿內 並與2〇毫升Ready Safe™ (Beckman)激烈混合後進行放射 性定量，在40-50%功率下在LKB Wallach Rackbeta™液體 閃爍計數器中計數，全部測定都是三重複。 計算 對膜之特定結合（C)是只含媒劑及膜之樣本的總結合（A) 與含膜及野靛鹼之樣本的非特定結合（B)之差，也就是 特定結合=(C) = (A) - (B) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} -裝l· -訂 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -21 - 200300346 A7 B7 五、發明説明（也 在測試化合物存在下的特定結合（Ε)是在測試化合物存 在下的總結合（D)與非特定結合（Β)之差，也就是（E) = (d) (B) 〇 抑制 ％ = (1-((E)/(C))乘以 1〇0。 在上述測試中測試的本發明化合物顯示的値低於 1 0微莫耳濃度。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝卜 經濟部智慈財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -22-

Claims (1)

1. 200300346 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 1 1 .—'種式（I)之化合物

   其中R1獨立地是氫或-COOR4，其中R4是下式之基 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

   (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4現格（210X 297公釐） -23- 200300346 六、申請專利範圍 2 8 8 8 8 ABCD

   其中A環之其中一個碳原子可視需要經氧或 烷基取代； 其中R11及R12是獨立地選自氫、（Cl-C6)烷基；及（Ci_ CO院氧基_(C()-C6)烷基-其中碳原子總數不超過六且其中任 何院基部份可視需要經從i至7個氟原子取代；硝基、氰 基、鹵基、肢基、（Ci-C6)院胺基、（（Ci-C6)院基）2胺基、_ C〇2R5、-CONR6R7、_S〇2NR8R9、-C( = 〇)R10、- xc(=o)R1Q、苯基、單環雜芳基，或當連接至氮原子時，可 爲下式之基： ----------裝-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 訂 -J絲 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

   各R5、R6、R7、R8、R9及R1Q是獨立地選自氫及（Cl-C6)烷基，或 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -24- 200300346 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 3 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) R6及R7或R8及R9 —起與和其連接之氮形成吡咯啶、 六氫吡啶、嗎福啉、吖丁啶、六氫吡畊、烷基六 氫吡哄或硫嗎福啉環，或其中環硫經亞硕或硕取代之硫嗎 福啉環：且各X獨立地是（CrCd伸烷基； 條件是當R1是Η時，則至少其中一個R11或R12必須 是下式之基：

   連接至由R2及R3形成的環之氮原子，且視需要順應 存在的鍵結關係，在該氮原子形成銨離子中心； 及其藥學上可接受的鹽類。 2.根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R2及R3 — 起與和其連接之苯並環形成選自下列之二環系統：

   R11 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 其中R11及R12是如申請專利範圍第1項所定義。 3.根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R2及R3 — 本纸張尺度適用中國國家標準（ CNS ) Α4規格（210X297公釐） ~ ' 200300346 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 4 起與和其連接之苯並環形成下式基

   4.根據申請專利範圍第1項之化合物，其係選自包括 Η

   Ν

   及

   Ν (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝. 、-口 0 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 5 · —種醫藥組成物，其係在哺乳動物包括人類用於減少 尼古丁上癮或幫助戒除或減少煙草使用，其包含減少尼古 丁上癮或幫助戒除或減少煙草使用有效量之根據申請專利 範圍第1至4項中任一項之式I化合物或其藥學上可接受 的鹽類，以及藥學上可接受的載劑。 6 . —種用於治療哺乳動物之選自發炎性腸疾、潰瘍性結 腸炎、壞疽性膿皮疾病、Crohn氏症、應激性腸徵候群、痙 攣性排尿困難、慢性痛、急性痛、腹腔口炎性腹瀉、 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 26- 200300346 Α8 Β8 C8 D8 A、申請專利範圍 5 pouchitis、血管收縮、焦慮、恐慌症、抑鬱症、雙相性情 感障礙、孤獨癖、睡眠障礙、噴氣機滯後現象、肌萎縮性 側索硬化（ALS)、認知功能障礙、高血壓、貪食症、厭食 症、肥胖症、心律不整、胃酸分泌過多、潰瘍、嗜鉻細胞 瘤、持續性肌肉上的痲痹、對尼古丁、煙草產品、酒精、 苯並二氮箪、巴比妥酸鹽、鴉片或古柯鹼之化學品依賴及 上癮、頭痛、偏頭痛、中風、創傷性腦部受傷（TBI)、強迫 觀念與強迫彳了爲的障礙（0CD)、精神病、Huntington氏舞蹈 病、遲發性運動障礙、運動過度、閱讀困難、精神分裂 症、多梗塞性癡呆、與年齡相關的認知衰退、癲癇、包括 癲癇小發作、阿爾茲海默氏型老人癡呆（AD)、巴金森氏症 (PD)、注意力不集中的過度反應症（ADHD)及Tourette氏徵 候群之病症或情形的醫藥組成物，其含有效量之根據申請 專利範圍第1至4項中任一項之式I化合物或其藥學上可 接受的鹽類，以及藥學上可接受的載劑。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇χ297公釐） -27- 200300346 本案無圖式

   本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化 學式：

   3-