SU984409A3 - Способ получени производных 2-арил-Iн-перимидина или их солей - Google Patents

Description

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 2-АРИЛ-1Н-ПЕРИМИДИНА Изобретение относитс  к способу получени  новых производных перимидина , обладающих свойствами иммунод прессантов, которые могут найти применение в медицине. Известна реакци  1,8-диаминонафталина с производными бензойной кис лоты с образованием 2-арил-1Н-перимидинов f1. Цель изобретени  - получение новых производных перимидина, обладаю щих ценными иммунодепрессивными сво ствами. Поставленна  цель достигаетс  способом получени  производных 2-ар г1Н-перимидина общей формулы l HN -Т-Г где R - группа R - трифторметильна , трифторметил СИ-, трифторметилтио- или пентафтор

ИЛИ ИХ СОЛЕЙ тилоксигруппа, наход ща с  в м- или -положении, ли их солей, который заключаетс  в ом, что 1,8-диаминонафталин конденируют с производным общей формулы Н,/:-л Q где R имеет указанные значени  и занимает указанные по зожени ; X - фтор, хлор, бром или водород, с последующим выделением целевого продукта в виде основани  или соли. Практическое использование пъ/а-лунодепрессантов разнообразно C2j. Иммунодепрессанты могут быть использованы при трансплантации органов , а также в терапий аутоиммунных заболеваний (аутоиммунна  гемолитическа  анеми , идиопатическа  тромбоцитопеническа  пурпура, красна  волчанка, липоидный гепатит, люпус- , нефтритис, гломерулонёфрит, почечный синдром, синдром Гудпасче, грануломатоз Вегенера, склородерма, болезнь Сезари, псориаз, увеит, ревматоидный артрит,  звенный колит, тироидоз и ложный орхит . Соединени  формулы 1 могут вводитьс  перорально либо парентеральн Соединени  имеют высокий терапевтический индекс, так что эффективные нетоксичные дозы в каждом случае относ/ тс  к широкому диапазону, В за висимости от испытуемой системы этот диапазон дл  более активных членов р да, испытанных на мелких лабораторных животньзх составл ет 1, 25 мг/кг в сутки. Дозы других соединениП р да больше, вплоть до 100 мг/кг в.сутки и более дл  мелких млекопитающих. Пример. Синтез хлоргидра ;та 2-(п-трифторметилфенил -1Н-перимидина . К 5,00 мл бензола при энергичном перемешивании и комнатной температуре одновременно добавл ют раствор 31,64 г (0,20 моль) 1,8-диаминонафталина в 500 мл бензола и раствор 20,8 г 0,20 моль. п-трифторметилбензоилхлорида в 500 мл бензола. Пос ле перемешивани  в течение 30 мин . отдел ют твердый продукт, который 1 растирают с метиловым спиртом, получают 24,6 г целевого продукта (35%, т. пл. (с разложением); ;масс-спектр продукта т/е 312. Элементный анализ дл  (gH.,Na. Найдено,%: С 61,75; Н 3,59; N 8,0 01 10,45; F 16,70. Вычислено, %: С 61,99/ Н 3,47/ N 8,03; С1 10,17/ F 16,34. При мер 2. Синтез хлоргддрата 2-{м-трифторметилфенил -1Н-перимидина . 15,82 г (0,10 моль) 1,8-диаминона талина и 20,8 г (0,10 моль м-трифто . метилбензоилхлорида обрабатывают в соответствии с методикой примера 1. В результате получают 33,3 г (95,4%) хлоргидраха 2-(м-трифторметилфенил)-1Н-пиримидина , т. пл. 280°С (с разложением ); масс-спектр т/ё 312. Элементный анализ дл  о. c-i 00. ц -, /1Т Вычислено,%: С 61,93; Н 3,47, N 8,03. . Найдено,%: С 61,68; Н 3,59/ N 8,13. Пример 3. Синтез фторгидрата 2-( п-трифторметоксифенил -1Н-У1ери мидина. В 25 мл толуола раствор ют 1,52 (0,0096 моль) 1,8-диаминонафталина и затем декантируют. Раствор ют 2,0 г трифторметоксибензоилфторида (0,0096 моль) в 25 мл толуола. Оба раствора одновременно приливают к . 25 мл толуола.. После перемешивани  , реакционной смеси в течение 4 ч мето дом тонкослойной хроматографии уста . навливают, что реакци  завершена. Реакционную смесь фильтруют и про дукт - желтое твердое вещество - су шат. Получают 2,72, г (81,4%) вещества , т. пл. 195 С с разложением , масс.-спектр т/е 328 с меньшими пиками при 361, что указывает на следы OCFC1 .2.. Элементный анализ дл  Вычислено, %: С 62,07/ П 3,47; N 8,04; F 21,82. Найдено, %: С 61,81, Н 3,58, N 8,13; F 21,59. П р и м е р 4. Синтез хлоргидрата 2-(п-трифторметилтиофенил)-1Н-перимидина . Следу  методике примера 3, провод т реакцию 14,59 г (0,092 моль 1,8-диаминонафталина и 22,2 г .( о,092 моль п-трифторметилтиобензоиллорида . В результате получают 1,86 г продукта (91,0%), т. пл. 27бС (с разлохеением); масс-спектр /е 344. Продукт суспендируют в 500 шт олуола и перемешивают в течение 2 ч, затем отдел ют фильтрованием получают 30,6 г (87,4%) продукта, . пл. 270-С (с разложением). BaTjSM овторно суспендируют в 750 мл толуоа , кип т т в течение 2 ч и отфильровывают 29,7 г (84,3%. Элементный анализ дл  . %%S; Вычислено,%: С 56,77/ Н 3,18/ 7,36. Найдено,%; С 56,57; Н 3,37/ N 7,40. П р и м е р 5. Синтез хлоргидрата 2-(п-пентафторзтоксифенил)-1Н-перимидина . Следу  методике примера 3, провод т реакцию 1,04 г (0,00656 моль) 1,8-диаминонафталина и 1,8 г 0,00656 моль) п-пентафторэтоксибен-. зоилхлорида. В результате получают 2/25 г продукта С82,7%Л т. пл. 240с (с разложением); масс-спектр т/е 378. Элементный анализ дл  Н 2,92; Вычислено,%: С 55,02; N 6,75; F . Найдено,%: С 54,82; Н 3,15, N 6 49 F 23 20 П р и м е р 6. Синтез 2,3-дигидро-2- (п-трифторметилфёнил)-1Н-перимидина . В течение 24 ч кип т т с обратным холодильником смесь 15,, 8 г (0,10 моль) йдБ-диаг-шнонафталина и 17,4 г (0,10 моль) п-трифторметилбен ,эальдегида в 1 л ксилола. Растворитель упаривают в вакууме,в результате чего получают 37,5 г продукта, который после очистки на силикагеле при элпировании толуолом дает 22,93 г (73%) продукта, , „„ о ю-Юл- i-i uAyivici, т. пл. 11у-122 С; масс-спектр т/е з14v-iic A - ш/е Элементный анализ дл  Вычислено,%: С 68,78/ П 4,17/ N8,91.

Найдено, %: С 68,69/ Н 4, 40 , N 9,11.

Примеры 7-13, Гемагглютинин ва  проба у мышей, пероральное введение .

Группе из п ти швейцарских мьзшей самцов весом около 20 г внутривенн вводили 5 X 10 эритроцитов овец. Эритроциты дл  этих инъекций готовили из крови  гн т.(собранной в раствор Алсевера/ путем трехкратной промывки 0,85%-НЕЛУ физиологическим раствором и повторно суспендировали в 0,85%-ном физиологическом растворе Дев ть-суточных доз каждого испытуемого соединени , растворенного в полиэтиленгликоле 400, вводили пероргшьно дозами по 0,1 мл,начина  за три дн  до инъекции эритроцитов. Примен ли несколько доз каждого соединени с двукратным увеличением. Контрольна  группа лвлшей получала инъекции эритроцитов и дев ть суточных доз растЕ рител  вместо лекарства. Через шесть дней после инъекции антигенов у мьвией забирали кровь уколом в сердце и объедин ли сыворотку из крови 1 аждой группы ашей (по п ть мы ей. Группы сывороток после инактивации комплемента анализировали на содержание гемагглютинина, использу  смеси последовательного двукратного разбавпени  физраствором испытуемой сыворотки 0,5%-ной суспензией эритро:цитов овец, в пластмассовых конте нерах . После выдержки контейнеров в течение 3 ч при анализировали структуры гемагглютинации, Четырехкратное (75%-ное } или большее уменьшение антител в испытуемой сыворотке по сравнению с контрольной сывороткой считалось значительным. Результаты выражали в виде Р1инштальноп эффективной дозы (МЭЛ) - самой минимальной лекарственной дозы, котора  дает 75%-ное или более значительное снижение антител.

Результаты испытани   еримидиновых соединений формулы .1 на их способность снижать образование антител приведены в табл. 1.

Азатиоприн {имуран) , который ис ,пользуетс  в качестве клинического иммунодепрессанта, имеет МЭД 100 мг/кг f 9.

Примеры 14 - 19. Методика индивидуального анализа сыворотки.

Брали группы мышей из 10 особей. Мышей забивали, а Ьыворотку титровали индивидуально. Дл  каждой группы мышей вычисл ли среднюю величину гемагглютинина и определ ли достоверность ( р рпыта по сравнению с контрольной группой. Сама  низка  . доза, котора  значительно (,05) снижала титр антител, определ ла конечную точку. Вещества вводили перорально либо подкожно в виде дес ти суточных доз, начина  за три дн  до инъекции красных кров ных телец. Вещества суспендировали в физиологическом растворе, содержащем 0,125% метилцеллюлозы и 0,2% неионного эмульгатора. .Через семь дней после инъекцииэритроцитов определ ли антитела ( гемагглютинин). В табл. 2 приведены результаты, полученные в опытах на индивидуальных сыворотках с некоторыми соединени ми формулы I.

И р и м е р ы 20 26. Реакци  трансплантант-хоз ин (ТПХ.

Клетки селезенки родственных мышей { С57В of ) инъецировали мышам F гибридной линии (C57Bot ХСЗН). Реципиентные мыиш не отторгали клеток селезенки, поскольку гибрид признава С57Ва/ -родственные антигены его гомозигодного родител  как свои. Инъекцируемые клетки, однако, вызывают реакцию на реципиентную ткань, обусловленную чужеродными СЗН антигенами . .Вследствие этого селезенка реципиента становитс  увеличенной. Иммунодепрессанты -подавл ют или уменьшают это увеличение, ак, взвешивание селезенок дает меру ТПХ реакции и ее уменьшение под действие иммунодепрессантов.

Получали большое количество клето селезенки без обычно используемого ручного раздражени  селезенок, примен   мешалки Горинга с обращенными режущими кромками. Двух периодо ( по 6 с) перемешивани  с похлопы1ванием селезенок достаточно, чтобы освободить клетки из соединительной ткани (использовались навески - 25 «селезенок мьшеП С57 В ot в 25 мл Физиологического раствора). Ткань отфильтровывали через марлю различной толщины. Полученные суспензии клеток стандартизовали путем подсчета в камере Леви-Хаузера до содержани  нулеклестированных клеток 6ч 10 в 1 мл. Группам из дес ти мышей С 57 В oLCBH С16-18 г; интраперитонально вводили по 1 мл суспензии донорных клеток. Лечение пероральным либо подкожным введением О,2 мл начинали за три дн  до инъекций клеtoK и ежедневно продолжали в течение 1-3 сут. Контрольные животные получали лишь клетки и растворитель. Извлекали селезенки и взвешивали спуст  дес ть дней после инъекций. Результаты выражены отношением веса селезенки к весу организма.

Поскольку инъекци  С 57 В х СЗН клеток вызывала у реципиентных мышей небольшую спленомегалию, определение весов селезенок использовали дл  нахождени  100%-ного подавлени  ТПХ компонента при расчете процента подавлени , достигаемого иммунодепрессантами . Результаты полученные при обработ ке известными иммунодепрессантагл, приведены в табл. 3. Однако сингенный и нормальный «контрольные значени  только слегка мен ютс  от опыта к опыту, поэтому в расчетах прин та средн   величина ( 4, 8 , полученна  из данных дл  четырех отдельных сингенетических контрольных групп (5,20 0,37 4,99 ± 0,39). 4,42 ± 0,13 и 4,66 ± 0,12) мышей, по 20 особей в каждой. Полученные результаты реакции трансплантант-хоз ин с соединени ми фор мулы I приведены в табл. 4. Прим ер 27. Подавление стимулированного артрита у крыс. Испытан хлоргидрат 2-(п-трифторметилфенил )-1Н-перимидин на, способность подавл ть у крыс опухоль задн лапы и повреждение костей, вызванно стимулированной здемой. Чтобы количественно определить подавление опухоли задней лапы, вызванной стимулированным артритом, определ ли две стадии воспалени :. а)первично и вторично инъецированна  задн   лапа; б)вторично неинъецированна  зад н   лапа, стади , котора  обыч но начинает развиватьс  приме но спуст  дев ть дней после заражени  инъецированной лапы Уменьшение воспалени  последнего типа есть Показатель иммунодепресси ной активности. Дл  сравнительных о |нок примен ли фенопрофен (30 мг/кг)

Соединение

Хлоргидрат 2-(п-трифторметилфенил -1Н-перимидина .

Хлоргидрат 2-(м-трифторметилфенил -1Н- перимидина

Фторгидрат 2-(п-трифторметоксифенил )-1Н-перюидина

Хлоргидрат 2-(п-трифторметилтиофенил)-1Н-перимидина ,

Хлоргидрат 2-(п-пентафторэтоксилфенил -1Н-перимидина

Таблица

МЭД, мг/кг f 9 как стандартное противовоспалительное соединение. Стимулированный артрит вызывали у мужских особей крыс Льюиса-Вистера (200-210 г) однократной субплантарной инъекцией в правую заднюю лапу (0,1 мл); 0,5%-ной суспензии убитого теплом лиофилизованного Mycobacteri urn tuberculosis в минеральном масле. Группа из п ти крыс (ТВ-контрольна  получала только это лечение. Друга  группа из п ти крыс не получала лечени  (нормальна  контрольна  группа ) . Каждое испытуемое соединение суспедировали в карбоксиметилцеллюлозе (1% и вводили крысам (группам из п ти крыс в каждой) в виде суточных пероральных доз 30 мг/кг, начина  со дн  инъекции и продолжа  в течение 17 дней после стимулирующей инъекции (17 доз). Объем лапы измер ли в ртутном устройстве, примен   датчикдавлени  Статама и вольтметр. Объем зараженных и незараженных задних лап измер ли на,2, 4, 7, 9, 11, 14, 16 и 18 сутки. После забо  животных на 18-ый день делали рентгеновские снимки. Измерени  объема лап у незараженных животных, начина  с 9 и по 18 дней, приведены в табл. 4. Анализ рентгеновских снимков показал отсутствие поражени  костей у животных, подвергнутых лечению хлоргидратом , 2-(п-трифторметилфенил)-1Н-перимидина , в то врем  как такое .повреждение было очень заметным дл  ТВ-контрольной группы. соединение . , ; Хлоргидрат 2-(п-трифторметилтио фенил)-1Н-перимидин , Лечение с помощью известного соединени  1-(б-Метокси-2-бензотиазолил)-3-фенилмочевина , 12,5 Мг/кг 13 ( перорально; Нет(ТТ1Х контрольные) Нвт(П .контрольные) Нет (нормальные контрольные) при м е ч а н и

Соединение

Хлоргидрат 2-( п-трифторметилфенил -1Н-перимидин (перорально)

Контрольна 

Примечани : а

Процент поМг селезенки давлени . г/веса ыши (среднее + SE) Р д ТПХ

4,75±0,42

101 53 77 96 78 6,62+1,17

2,5 5,67+0,51 6,2 4,96+0 ,-31 3,1 5,66+0,33 1,6

. . 8,64±1ДО

Claims (2)

1. - тпхконтрольныё-обраОотанныёхТии процент подавлени / ТПХ контрольные -5 ;пконтрольные, в - р 0,00i; ,005, d ,0l; е - р 0,05.  : средние значени  дл  группы из п ти мышей/ ТПХ контрольные-обработанные; ТПХ контрольные Syr , .контрольные (процент подавлени  ,01, сравнительно с ТПХ .контрольными); Syn - сингенные. Таблица2 СхемадозГ ( р 0,05), мг/кг7 10 SSSr T«lll;l перорально Перорально50 ТаблицаЗ Мг селезенкй/г веса Процент поорганизма + SE давлени  «WWCMBK 6,86+0,8074 11,55 + 0,01О 5,20 + 0,37100 4,.16 + 0,17 Таблица4 Формула изобретени  Способ получени  производных 2-арил-1Н-перимидина общей форму 1 : I , HJJ-R Rjf -трифторметильна , трифтормет ОКСИ-, трифторметилтио- или пент этилоксигруппа, наход ща с  в мили И-положении, или их солей отличающи с   тем, что 1,8-диаминонафтали с производным общей конденсируют формулы / У где RI имеет указанные значени  и занимает указанные положени ; Х- фтор, ХЛОР, бром или водород, с последующим выделением целевого продукта в виде основани  или соли. Приоритет по признакам 19.12.77при RJ-п- или м-трифторметильна  группа; X имеет указанные значени . 21.09.78при или м-трифторметилокси , п- или м-трифторметилтиоили п- или м-пентафторэтилоксигруппа . Источники информации, прин тые во вниманиепри экспертизе 1.Патент США № 3528981, кл. 260-2564, опублик. 1970.
2. 2.Машковский М.Д. Лекарственные средства. М., Медицина, 1978.