SU736860A3 - Способ очистки гепарина - Google Patents
Способ очистки гепарина Download PDFInfo
- Publication number
- SU736860A3 SU736860A3 SU772457090A SU2457090A SU736860A3 SU 736860 A3 SU736860 A3 SU 736860A3 SU 772457090 A SU772457090 A SU 772457090A SU 2457090 A SU2457090 A SU 2457090A SU 736860 A3 SU736860 A3 SU 736860A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- heparin
- gel
- buffer
- purification
- activity
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
Description
1
Изобретение относитс к хигликофармацевтической промышленности, а именно к очистке гепарина.
Известен способ очистки гепарина путем осс1ждени комплекса гепарин- белок 5. кислотой, протеолиг тйческого разрушени белка, многократного переосаждени целевого прб .цукта и пропускани через ионообменные смолы. Активность гепарина 100 ед/мг.
Целью изобретени вл етс повышение активности целевого продукта.
Это достигаетс тем, что гепарин раствор ют в. буферном растворе с рН от 5 до 9,5, адсорбируют на гель сефарозы, коньюгированный ic анти . ромбином или с интер-сС-трипсином и элюируют буфером.
Пример 1. Очистка гепарина на св занном с матрицей гепарине.
Гелевый адсорбент приготавливают следующим образом.
3 г BhCN раствор ют в 30 мл дис , тиллированной . 50 мп осажденной агарозы добавл ют к раствору BfCK. Смесь при перемешивании охлаждают в,вод ной бане. При добавлб НИИ 4М NaOH поднимают рН до 11,2 и выдерживают посто нным в течение
2
10 мин. Затем гель прогФзвают холЬдной дистиллированной водой и
0,2 М NaHCOj..
200 мг антитромбина, очищенного ПО Миллеру-Андурссону и растворенного S 50 МП 0,2 М МаНСОз, при рН 9jO добавл ют в.гель. Гель-протеиновую суспензию осторожно перемешивает при комнатной температу зе и ёченИб
to ночи и затем осторожно промывают с .буфером йри высокой концентрации ионов при попеременно высоких и значени х рН. : Гелевый адсорбент, содержаищй
1Б св занный с матрицей антитромбин, помещают в колонку и уравновешивают с 0,05 М. триса, 0,15 М МаСЙ, рН буфера 7,4. 300 мг гепарина/индивидуальна активность 130 ед/мг) раствор ют в 20 мл 0,05 М триса, 0,15 М Насе, рН буфера 7,4 и прокачивают через колонку, jllociie. этого гель прогФлвают буфером, а адсорбированный гепарин затем десорбируют
25 М триса, 1,0 М масе, рН буфера 7,4. Из элюированного гепарина удал ют соль путем фильтрации гел в дистиллированной воде в колонке, заполненной сефадексом G-25, после чего гепарин высу111ивают вымораживанйем . Изучение распределени молекул рных весов показыв ает, что он имеет значительно более ограниченное распределение молекул рного веса , по сравнению с первоначсшьным гепарином.
Пример 2. Антитромбиновую матрицу готов т по способу,указанному в примере 1.
Очистка гепарина; 500 мг гепарина/активность 130 ед/мг) раствор ют в 300 мл 0,05 М триса, 0,15 М NaCC, рН буфера 7,4. 300 мл осажденного св занного с матрицей антитромбина уравнивают в буфере и высушивают отсасыванием. Адсорбент,.добавл ют в раствор гепарину, который затем перемешивают при комнатной температуре в течение односо часа, ,Гель высушивают отсасыванием настекл нном фильтре и промывают 10 200 мл 0,05 М триса, 0,15 М Nad , рН буфера 7,4, Адсорбированный гепарин затем десорбируют из гел путем применени 3 200 мл 0,05 М триса. 1,0 М Nace, рН буфера 7,4, Элюированный гепарин концентрируют высуцщвают вымораживанием.., Оставшуюс соль удгш ют фильтрацией гел на Сефадекс G-25 в дистиллированной воЙё и затем гепарин высушивают вымораживанием . Активность очищенного гепарина 250 ед/мг.
Пример 3. Очистка гепарина на гелевом адсорбенте, содержащем св занный с матрицей ингибитор интер-о (-трипсин,
Приготовление гелевого адсорбента ,.
В холе очистки фактора коагул ции (х(В - фактор) получают интер-ci-трипсин ингибитор протеин-св зываю щего гепарина. Его мол. в. 150000, 250 мг этого протеина раствор ют в 200 МП 0,2 М NaHCOj, рН буфера 9,0 и затем добавл ют к 50 мл осажденной сефарозы И4В, активированной с Вг-СМ аналогично примеру 1.
Гель-протеиновую суспензию осторожно перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Затем гель проьывают так же, как в примере 1,
Очистка гепарина.
Гелевый,адсорбент, содержащий св занный с матрицей протеин, помещают в колонку, 300 мг гепарина раствор ют в 20 мл 0,05 М триса, 0,15 М Nace, рН буфера 7,4 и прокачивают через колонку.
Гель про1иывают буфером и адсорбированный гепарин затем десорбируют О,.05 М триса, 1,00 М NaCE , рН буфе-° ра 7,4. Соль удал ют из гепарина путем фильтрации гел на Сефадекс G-25 в дистиллированной воде и затем гель высушивают вымораживанием. Активность очищенного гепарина 230 ед/мг,
Предлагаекый способ позвол ет повысить активность целевого продукта.
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ очистки гепарина путем адсорбции, отличающийс тем, что, с целью повышени активности целевого продукта, гепарин раствор ют в буферном растворе с рН от 5 до 9,5, адсорбируют на гел сефарозы, конъюгированный с антитромбином или с интер-1.- трипсином и Элюируют буфером.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE7603040A SE431218B (sv) | 1976-03-05 | 1976-03-05 | Forfarande for rening av heparin |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU736860A3 true SU736860A3 (ru) | 1980-05-25 |
Family
ID=20327240
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU772457090A SU736860A3 (ru) | 1976-03-05 | 1977-03-04 | Способ очистки гепарина |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS52108012A (ru) |
| AT (1) | AT356818B (ru) |
| AU (1) | AU508430B2 (ru) |
| CA (1) | CA1079272A (ru) |
| CS (1) | CS196349B2 (ru) |
| DE (1) | DE2709500C2 (ru) |
| DK (1) | DK155606C (ru) |
| ES (1) | ES456196A1 (ru) |
| FI (1) | FI62103C (ru) |
| FR (1) | FR2342991A1 (ru) |
| GB (1) | GB1539332A (ru) |
| HU (1) | HU176811B (ru) |
| IE (1) | IE44907B1 (ru) |
| IL (1) | IL51346A (ru) |
| NL (1) | NL186385C (ru) |
| NO (1) | NO144388C (ru) |
| NZ (1) | NZ183480A (ru) |
| PL (1) | PL103049B1 (ru) |
| SE (1) | SE431218B (ru) |
| SU (1) | SU736860A3 (ru) |
| ZA (1) | ZA771267B (ru) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE449753B (sv) * | 1978-11-06 | 1987-05-18 | Choay Sa | Mukopolysackaridkomposition med reglerande verkan pa koagulation, lekemedel innehallande densamma samt forfarande for framstellning derav |
| GB2164346B (en) * | 1984-08-31 | 1988-03-30 | Nicolas Huberto Behrens | A non-thrombogenic heparin and a process for its obtention |
| WO2015112121A1 (en) | 2014-01-21 | 2015-07-30 | The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas | Heparin affinity tag for use in protein purification |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2623001A (en) * | 1949-04-07 | 1952-12-23 | Bengt E G V Sylven | Preparing heparin |
| DE1195010B (de) * | 1962-05-12 | 1965-06-16 | Ormonoterapia Richter S P A | Verfahren zur Reinigung von Heparin nach der Chromatographischen Methode |
-
1976
- 1976-03-05 SE SE7603040A patent/SE431218B/xx not_active IP Right Cessation
-
1977
- 1977-01-27 IL IL51346A patent/IL51346A/xx unknown
- 1977-02-14 CA CA271,731A patent/CA1079272A/en not_active Expired
- 1977-02-15 FI FI770491A patent/FI62103C/fi not_active IP Right Cessation
- 1977-02-22 NL NLAANVRAGE7701882,A patent/NL186385C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-02-23 ES ES456196A patent/ES456196A1/es not_active Expired
- 1977-02-25 JP JP2016477A patent/JPS52108012A/ja active Pending
- 1977-03-02 NZ NZ183480A patent/NZ183480A/xx unknown
- 1977-03-03 IE IE469/77A patent/IE44907B1/en not_active IP Right Cessation
- 1977-03-03 ZA ZA00771267A patent/ZA771267B/xx unknown
- 1977-03-04 HU HU77KA1485A patent/HU176811B/hu unknown
- 1977-03-04 DE DE2709500A patent/DE2709500C2/de not_active Expired
- 1977-03-04 NO NO770764A patent/NO144388C/no unknown
- 1977-03-04 SU SU772457090A patent/SU736860A3/ru active
- 1977-03-04 GB GB9275/77A patent/GB1539332A/en not_active Expired
- 1977-03-04 AT AT144577A patent/AT356818B/de not_active IP Right Cessation
- 1977-03-04 PL PL1977196438A patent/PL103049B1/pl unknown
- 1977-03-04 AU AU22953/77A patent/AU508430B2/en not_active Expired
- 1977-03-04 DK DK096077A patent/DK155606C/da not_active IP Right Cessation
- 1977-03-04 FR FR7706469A patent/FR2342991A1/fr active Granted
- 1977-03-07 CS CS771523A patent/CS196349B2/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL51346A0 (en) | 1977-03-31 |
| AU2295377A (en) | 1978-09-07 |
| ZA771267B (en) | 1978-01-25 |
| DK96077A (da) | 1977-09-06 |
| SE7603040L (sv) | 1977-09-06 |
| JPS52108012A (en) | 1977-09-10 |
| FR2342991A1 (fr) | 1977-09-30 |
| FI770491A (ru) | 1977-09-06 |
| FI62103B (fi) | 1982-07-30 |
| AT356818B (de) | 1980-05-27 |
| NL186385B (nl) | 1990-06-18 |
| IE44907L (en) | 1977-09-05 |
| ATA144577A (de) | 1979-10-15 |
| NZ183480A (en) | 1979-08-31 |
| IL51346A (en) | 1979-11-30 |
| CA1079272A (en) | 1980-06-10 |
| IE44907B1 (en) | 1982-05-19 |
| PL103049B1 (pl) | 1979-05-31 |
| DK155606B (da) | 1989-04-24 |
| NO144388C (no) | 1981-08-19 |
| DK155606C (da) | 1989-09-11 |
| ES456196A1 (es) | 1978-07-01 |
| NO144388B (no) | 1981-05-11 |
| FR2342991B1 (ru) | 1981-10-30 |
| DE2709500C2 (de) | 1986-09-18 |
| CS196349B2 (en) | 1980-03-31 |
| AU508430B2 (en) | 1980-03-20 |
| NL186385C (nl) | 1990-11-16 |
| NL7701882A (nl) | 1977-09-07 |
| GB1539332A (en) | 1979-01-31 |
| SE431218B (sv) | 1984-01-23 |
| HU176811B (en) | 1981-05-28 |
| FI62103C (fi) | 1982-11-10 |
| DE2709500A1 (de) | 1977-09-08 |
| NO770764L (no) | 1977-09-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3842061A (en) | Method for isolation of antithrombin from animal tissue materials by adsorption on sulfated carbohydrate gel | |
| US4264738A (en) | Process for purification of proteolytic enzymes | |
| JPH07103044B2 (ja) | Ｃ１不活性化剤を含有する医薬の調製方法 | |
| US4119774A (en) | Heparin purification method | |
| RU2008134479A (ru) | Очистка и применение фактора, способствующего заживлению ран | |
| NL7907791A (nl) | Werkwijze voor het zuiveren van interferon. | |
| MXPA05000395A (es) | Proceso para la preparacion de fibrinogeno. | |
| US4020268A (en) | Agarose containing affinity matrix materials | |
| SU736860A3 (ru) | Способ очистки гепарина | |
| JPH09503775A (ja) | 治療に使用するためのインター−α−トリプシンインヒビター濃縮物の調製方法、およびそのようにして得られる濃縮物 | |
| US4510084A (en) | Method of producing an antithrombin III-heparin concentrate or antithrombin III-heparinoid concentrate | |
| US5071961A (en) | Method of enrichment of coagulation factors ii, vii, ix and x | |
| Takagi et al. | Polypeptide chain involved in the cross-linking of stabilized bovine fibrin | |
| US4259448A (en) | Protein adsorbent and process for the purification of urokinase | |
| JPS6154450A (ja) | 群特異性を有するアフイニテイクロマトグラフイ用ゲルおよびその製造法 | |
| JPS6119485A (ja) | プロテア−ゼ吸着体 | |
| US3926730A (en) | Separation and purification of alpha-amylase | |
| EP0059182B1 (en) | A process for isolating aminoacylase enzyme from a mammal kidney extract | |
| JPH07291999A (ja) | 血小板安定化因子ｉｘ−フラグメント、その製造方法及びこれを含有する薬剤 | |
| SU1377292A1 (ru) | Способ очистки протеиназ цистеинового типа | |
| US3016337A (en) | Process for depyrogenation and purification of streptokinase | |
| JPS6031479B2 (ja) | 純コンドロイチナ−ゼｃの製造法 | |
| US4225675A (en) | Adsorbent for urokinase and process for the production of urokinase | |
| SU942427A1 (ru) | Способ очистки протеолитических ферментов | |
| JPH0446960B2 (ru) |