SU633879A1 - Способ получени флуоресцеин-5изотиоцианата нейтрального - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к способам получени  флуоресцеин-5-изотиоцианата нейтрального,  вл ющегос  флуорес центным микробиологическим красителем формулы НО .п. ,ОН Это соединение примен етс  в флуо ресцентной микроскопии дл  приготовлени  люминесцирующих сывороток и как флуоресцентный метчик белка. В микробиологической практике дл  флуоресцентной метки белка и при готовлени  люминесцирующих сывороток широко используют хлоргидрат флуорес цеин-5-изотиоцианата. Однако он меиее удобен при применении, чем флуоресцеин-5-изотиоцианат нейтральный, так как в самом процессе применени  исследователи-биологи вынуждены хлор гидрат переводить в нейтральный продукт , что усложн ет исследование био логических систем, кроме того, ои менее стабилен при хранении. Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату  вл етс  способ получени  флуоресдеии-5-изотиоцианата нейтрального путем взаимодействи  хроматографически чистого 5-аминофлуоресцеина с тиофосгеис в среде ацетона в присутствии реагента, удал ющего хлористый водород, образующийс  в процессе реакции. В качестве такого реагента используют углекислый кальций i . Синтез провод т следующим образом. Суспензию в ацетоне .из 5-аминофлуоресцеина , тиофосгена и углекислого кальци , вз тых в мол рном cooTHOitjeнии 1:1,1:3,5, кип т т в течение 3 ч. После этого теплую смесь отфильтровывают от выпавших солей кгшьци , которые, однако, содержат значительное количество целевого продукта. Дл  извлечени  его из осадка последний экстрагируют ацетоном, вновь фильтруют и промывают гор чим ацетоном . Смесь ацетоновых растворов упаривают под вакуумом и затем прибавл ют петролейный эфир до помутиеии. Смесь выдерживают в течеиие иочи, гфи