SU520926A3 - Способ получени 2-замещенного-4(р)-гидроксициклопентан1,4-диона - Google Patents

Description

1

Изобретение относитс  к области микробиологии .

Известен способ получени  2-замешенного-4 (Л )-гидроксициклопентан-1,4-диона путем микробиологической трансформации 2-замещенного-циклопентан-1 ,3,4 триона или 2-замещенного-З-метоксициклопент-2-ен- -1,4-диона с помощью культуры класса Ascomyce-tes на среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли , с последующим вьзделением целевого продукта .

Недостатком известного способа  вл етс  невысокий выход целевого продукта.

С целью повьпнени  выхода целевого про дукта предлагаетс  трансформацию проводить на среде с начальной концентрацией углеводов 2-6% и рН 5-6, поддержива  в процессе вьфапшвани  концентрацию углеводов 0,1-1% и рН 4-5 и добавл   субстрат в среду со скоростью О,О4-О,1 г/час на 1 л среды.

При проведении процесса в указанных услови х конверси  микроорганизма на стадии инкубации и скорость конверсии субстрата

повышаютс  в 2-3 и 2-5 раз соответственно .

Пример 1. Дл  инкубации микроорганизма и конверсии субстрата используют питательную среду, содержащую (г/л воды):

3,0

Цитрат натри  )(COONa) 5,0 Дигидрофосфат кали  ,

Нитрат аммони  NH. N0 2,0

Сульфат магни  Mg- 7Н О 0,2

Хлорид кальци  CcLCl гн о 0,1 5,0 5,0

Дрожжевой экстракт

Казаминокислоты 40,0

Глюкоза

Claims (1)

1. Дл  инокулировани  5О мл среды, помещенной в колбу Эрленмейера на 25О мл, используют одно кольцо поверхностного нароста с однонедельного солодового экстракта косого агара Dipodascus tininucLeo-tXTSИнокулирование провод т при 26-32 С и взбалтывании со скоростью ЗОО об/мин в течение 36 час. Затем полученную массу, содержащую 5% вещества, переливают в колбу Фернбаха емкостью 2,8 л, содержащую 1 л указанной вьш1е питательной среды, и инкубируют 24 час. После офазовани  вещества в колбу Фернбаха в течение Здне через каждые 8 час добавлшот 400 мг 2- (6 -карбометоксигексил) -циклопентан-1,3, -триона. В ходе конверсии с помощью 1 М K.Hj,PO поддерживают рН среды 4,2-4,5 Концентрацию глюкозы поддерживают равно О,1-О,4% путем порционной загрузки глюкозы . В ходе конверсии периодически отбирают пробы, обрабатьшают 0,5 объема этилацетата , суспендируют осадок в ацетоне и хроматографируют на силикагеле, элюиру  системой из 110 мл этилацетата, 5О мл изооктана и 20 мл уксусной кислоты и про $тл   в УФ-свете. Через 72 час после первого добавлени  субстрата клетки отфильтро вывают, верхний слой сатурируют хлоридом натри , подкисл ют сол ной кислотойдорН2,Ои экстрагируют 1 объемом этилацетата. Экстракт выпаривают досуха, перекристаллкзовывают остаток из смеси этилацетат-петролейный эфир и получают 2,8 г продукта т пл. 80-86°С; +2О,з(хлороформ ) . Пример 2. 9л среды того же состава , что и в примере 1, помещают в ферментер объемотч 14 л, инокулируют культурой Dipodascus uninuclecLtus,выращенной за 24 час в колбе Фернбаха емкос -ью 2,8 л. Ферментацию провод т при ЗО С, аэрации 5 л/мин воздуха и взбалтывании со скоростью 300 об/мин. Дл  регулировани  пенообразовани  используют антивспениватель . После инкубации в течение 24 час в порошок через каждые 8 час в течение 72 час добавл ют 4 г 2-( 6-карбометоксигексил ) -циклопентан-1,3,4-триона. В ходе конверсии поддерживают рН среды 4,2-4,5 с помощью 1 М КНоЮ.,, а концентрацию глюкозы,равной ОД-0,4% путем порционной загрузки глюкозы. Через 72 час после первого добавлени  2-(б-карбометоксигексил )-пшшопентан-1,3,4-триона клетки отдел ют и вьщел ют 2-(б-карбометоксигексил )-4 ( Ю-гвдроксициклопентан-1 ,4-дион. Выход после перекристалтаз и 25,0 г; . 89,5-91,0°С; ил.Д +19,1 (хлороформ). Формула изобретени  Способ получени  2-замещенного-4-( Ц )-гидроксициклопентан-1 ,4-диона путем микробиологической трансформации 2-замещенного-циклопентан-1 ,3,4-триона или 2-замещенного-З-метоксициклопент-2-ен-1 4-д иона с помощью культуры класса Ascomyс etes на среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, с последующим выделением целевого продукта, о т л и ч аю щ и и с   тем, что, с целью повьщхени  выхода целевого продукта, трансформацию провод т на среде с начальной концентацией углеводов 2-6% и рН 5-6, поддерива  в процессе выращивани  концентрацию глеводов 0,1-1% и рН 4-5 и добавл   субтрат в среду со скоростью О,О4-О,1 г/час а 1 л среды.