SU1591808A3

SU1591808A3 - Способ получения замещенных 3-фенил-7н-тиазпло[3,2-ъ] [1,2,4]'· триазин-7-онов и способ получения 2-амино-6н-1,3,4-тиадиазинов

Info

Publication number: SU1591808A3
Application number: SU884356771A
Authority: SU
Inventors: Verner Torvart; Ulrikh Gebert; Rudolf Shlejerbakh; Robert Rajder Bartlett
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1987-01-30
Filing date: 1988-11-09
Publication date: 1990-09-07
Also published as: PT86654A; CA1317293C; MX10256A; FI880385A0; CN88100518A; US4908364A; DD287506A5; EP0276805B1; NO880405L; DE3879234D1; CS53688A2; JPS63192782A; JPH07626B2; DE3702758A1; DK47988D0; EP0276805A3; AU600080B2; DK47988A; FI880385A; NO880405D0

Description

Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности получения замещенных 3-фенил-7Н-тиазоло[3,2-Ъ] [ 1,2,4]триазин-7-онов общей формулы

НО-С»С[С(СН₃)₃1-СН

I ^и < й/|1 » »

••ц_гс»аь-с к₂с-5-с»н-с-о

2

где К,-Н-или' разветвленный С ,-С₄-алкил; или С ,-С ₃~алкил ; К_Э~Н, н~

или разветвленный С_{-С₄-алкил или СН^ОН, обладающих противовоспалительным действием,, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых активных соединений укаί

занного класса. Процесс ведут последовательной реакцией соединений общей формулы Р.2СНХ-С(О)-6=СН-СК1 С(ОН)-С [С(СН₃)₃]=СИ, где К, и К* см.выше; X - галоген, с тиосемикар'базидом, кислотой [лед.СН₃С(О)ОН и соединением ф-лы П₃-С(О)-С(О)-ОН, где К₃ см.выше, [лучше при 80°С, лед. СН₃С(О)ОН и 4н,СН1]. Полученные в первой стадии продукты могут быть выделены и использованы как ? самостоятельные промежуточные продукты. Целевые продукты с указанной активностью имеют т.пл., ^аС; бруттоф-лу: а) 257 (разл.); С_1?Н₂₅М₃0_г5;

б) 225-225 (разл.), 0_ΜΗ_ηΝ₃0₂3 ;

в) 215-217; С_2вН_г5М_аО_эЗ; г) 256-257; С₂,Н₂₇Ы₃О₂5; д) 219-220; С _2ο·Η₁₅Ν₃0₂δ;

е) 249-251; С_2вН₂₄-К₃О₂3; ж) 240-242; С₂₁Н₂₇М_э0₂8: з 216-217; 0₂₂Π_ΜΝ_β0₂δ;

4) 237-238; 0_ι3Ι!^Ν_}0,5; к)

С_пН^П_аО₂3. Новые соединения проявляют противовоспалительное действие ’ при терапевтическом спектре действия

36,7 и токсичности ЛД _5е з? 1200 мг/кг против 1,3 и 500 мг/кг для напроксена. 2 с.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к области бу получения новых замещенных 3-фенйлорганической химии, а именно к спосо- 7Н-тиазоло [3,2-в] [1,2,4] триазинω

Л1МЧИ·

сд

со.

4

1591808 , . ./

7-онов, обладающих противовоспалительным действием, что предполагает возможность применения этих соединений в медицине при лечении воспалительноревматических заболеваний, а также к способу получения 2-амино-6Н-1,3-4тиадиазинов, . которые являются промежуточными для синтеза замещенных 3фенил- 7И-тиазоло [3,2-в] [1,2,4]триазин-7-онов.

Целью изобретения является создание новых активных соединений ряда замещенных 3-фенил-7Н-т.иазоло [3,2-в]

[1,2,4]триазин-7-онов, г.. проявляющих ,₅новый вид биологического действия в этом ряду соединений, а также способ получения полупродуктов для их синте^ч'·*·

Ηϊί'·

за.

Π р и м е ρ 1. Получение 3-(3,5ди-трет-бутил-4-оксифенил)-7Н-тиазоло-[3,2-в] [1,2,4]триазин-7-она (соединение, 1) .

а. Получение 2-бром-1-(3,5-дитрет-бутил-4-оксифенил)-этанола. 25

Растворяют при перемешивании 206 г (0,83 моль)1-(3,5-ди-трет-бутил-4оксифенил) этанола в 415.мл хлористого метилена, нагревают до кипения и в течение 30 мин по каплям смешивают с 144 г (0,9 моль) брома. После этого нагревают еще 2 ч при флегме.

Смесь охлаждают, смешивают с 400 мл воды, отделяют органическую фазу и сушат над сульфатом натрия. После удаления растворителя при пониженном 35 давлении полученный твердый сырой продукт перекристаллизовывают из 540 мл метилдиклогексана. Получают 191 г (67%) продукта с т.пл. 105—

108°С. С_и Н₂₃ВгО₂. · ⁴⁰

б. Получение 2-амино-5-(3,5-дитрет-бутил-4-оксифенил)-бН-1,3,4тиадиазина гидробромида.

Раствор 32,7 г (0,1 моль) 2-бром1-(3,5-ди-трет-бутйл-4-оксифенил) этанона и 9,1 г (0,1 моль) тиосемикарбазида в 250 мл ледяной уксусной кислоты перемешивают 1 ч при комнатной температуре и выделившийся осадок отфильтровывают и растворяют в 50 500 мл этанола в горячем состоянии. После охлаждения отсасывают кристаллы, несколько раз промывают этиловым эфиром уксусной кислоты и сушат в вакууме. Получают 27,2 г 68%)· продук- 55 та с т.пл. 255-257 С.

«Найдено, %: С 50,71; И 6,52;

Вт 19,92; N 10,46; 8 8,17.

С₁₇И₂₆ВгЫ₃05.

. Вычислено, %: С 51,00; Н 6,55;

Вг 19,96; N 10,49; 8 8,01 .

в. Получение 3-(3,5-ди-трет-бутил-4-оксифенил) -7Н-тиаз.оло[3,2-в ]

[1,2,4]триазин-7-она.

В раствор 10,0 г (0,025 моль) 2амино-5-(3,5-ди-трет-бутил-4-оксифенил)-бН-1,3,4-тиадиазин гидробромида в 250 мл ледяной уксусной кислоты и 25 мл 4 н. соляной кислоты прикапывают при 80°С 4,8 г (0,05 моль) моногидрата глиоксиловой кислоты в 75 мл воды. После 20-часового перемешивания при 80°С выпаривают при пониженном давлении. Твердый остаток очищают хроматографией на колонке на силикагеле- хлористым метиленом/метан.олом (25:1) в качестве .растворителя и последующей перекристаллизацией из этанола. Получают -3,9 г (42%). продукта с т.пл. 255-256°С (разложение). С_{эН_гзК^0_г 8.

Характеристики других замещенных 3-фенил-7Н-тиазоло[3,2-в] [1,2,4]триазин-7-онов приведены в табл.1.

Π р и м е р 2. Изучение фармакологического действия.

Испытание соединений на противовоспалительное действие, влияние иммунопатологических процессов, дезактивирующую способность кислородных радикалов, ульцерогенную активность и острую токсичность проводили на животных, причем в исследования в качестве сравнительного вещества было включено причисляемое в ревмотерапиии к стандартным препаратам первого выбора противовоспалительное средство Напроксен: 2-(6-метокси-2-нафтил)-пропионовая кислота.

Дополнительный артрит.

В качестве подопытных животных служили крысы мужского пола штамма Вистара-Льюиса с весом тела 130 200 г. Испытываемые соединения назначали орально (через рот) при дозах 50 мг на 1 кг веса тела один раз ежедневно с 1-го по 5-й опытный день. Животные контрольной группы получали индиферентную основу лекарственного препарата. Каждая группа с препаратом и контрольная группа включали 8 животных. В качестве критерия эффективности служило снижение в процентах прироста объема лапы по сравнению с необработанной контрольной группой.

6

1591808

Острая гастральная язва.

Исследования проводили соответственно на 10 крысах мужского пола с сенсибилизированной голодным ст'рес- сом слизистой оболочки желудка. Вес тела животных 200-300 г. 'За 48 ч перед назначением испытываемых препаратов до умерщвления' животных их лишали корма при свободном доступе к ед питьевой воде. Крыс умерщвляли через 24 ч после орального приема вещества, извлекали содержимое желудков, очищали .в проточной воде и осматривали повреждения на слизистой оболочке. Язва- ед ми считали все видимые микроскопические повреждения. Определяли число животных с язвой на одну дозу и отсюда вычисляли по Лифйлиду и Уилкоксону ио_5о-величины, т.е. те дозы_г с 20

которыми у 50% животных были вызваны повреждения.

Острая токсичность.

Определение величины ЛД_5в производили по стандарту через смертность, 25 наступившую в течение 7 дней у ΝΜΚ.Ι (Ыауа1 МесНса1 ЛеэеагсЬ ТпзСхбиРе) мышей (6 животных на дозу)после~однократного внутрибрюшинного приема.

Результаты этих исследований при- зо ведены в табл.2.

Из кривой эффективности дозы в модели дополнительного артрита получалась, например, для соединения вели-ед чина ЕД^о (разовая доза) 10,9 мг/кг, которая благоприятнее, чем соответствующая сравнительная величина

17,5 мг/кг для стандартного препарата Напроксена, В пересчете на острую язву отсюда образованием частного от деления ип_5о на ЕД _5о вычисляется те-, рапевтический спектр действия >36,7 для соединения, который при сравнительном препарате Напроксена составляет только 1,3., т.е. высокое значение придается исключительно хорошей' желудочной совместимостью соединения 1, Такое же превосходство относительно сравнительного соединения получается, если при вычислении терапевтического спектра действия берут за основу определенные ЛД ₅₀-величины и образуют частное ЛД^/ЕД^, которое для соединения примера 1 лежит выше 110, а для Напроксена составляет лишь 28,6.

Торможение иммунопатологических процессов.

Прогрессирующее течение воспалительно-ревматических заболеваний в основном вызывается нарушениями в иммунной системе и причинная терапия может удаваться только с такими медикаментами, которые могут прервать эти иммунопатологические процессы.

Вызванный дополнительно артрит.

В описанной модели с крысами вызванный добавкой Фройндша артрит обычно сильно снижает иммунную активность лимфоцитов относительно таких определенных митогенов, как конкавалин-А,' 5и-‘’ тогемагглютинин-А и декстрансульфат. Поэтому искали стимулирующее дейст- . вие на этот сильно подавленный иммунный ответ. При этом, например, соединение после орального назначения в дозах 3,15 и 6,3 мг/кг вызывало значительную нормализацию иммун- . ной радиоактивности, в то время как при дозах до 25 мг/кг испытанный Напроксен был неэффективным.

Вызванный коллагеном типа II артрит .

В этом опыте артрит вызывали на крысах Вистара мужского пола при помощи коллагена типа II, который получали по стандартным методам Миллера и Родеса из носовой перегородки теленка и впрыскивали внутрикожно животным в смеси с неполной добавкой Фройндша. Этот процесс иммунизации повторяли через 7 дней. Через 20 дней после первой иммунизации разделяли заболевших крыс на группы по 7 животных, которые в последующий 20дневный период лечения получали один раз в день соответствующее испытываемое вещество или чистую индиферентную основу лекарственного препарата (контрольная группа) орально.

На 41-й день опытов, т.е. через день после последнего приема вещества, определяли прирост объема задних лап.

При этом соединение показывало зависимое от дозы торможение увеличения объема лап, которое от доз 25 мг/кг при оральном назначении было статистически значительным, в то время как для Напроксена при одинаковой дозировке получались только небольшие величины торможения.

И в этой модели артрита с коллагеном чувствительно нарушается иммунное состояние лимфоцитов. Поэтому

из селезенки опытных животных получали лимфоциты и исследовали их им7

1591808

В

10

20

мунную активность относительно митогенов, причем снова для соединений по изобретению можно показать зависимые от дозы лече.бные действия на сильно ослабленную иммунную систему, в то время как Напроксен не проявлял никакого действия. Так, например, при помощи дозы 12 мг/кг при оральном назначении соединения из примера 1 полностью нормализовали иммунную функцию так Т-так и В-лимфоцитов.'

Активная реакция Артюса.

В качестве подопытных животных слу жили 8рга2ие-1)а^1еу-крысы с весом тела 80-100 г, которым впрыскивали 0,5 мл эмульсии вакцины коклюша и овальбумина в вазелиновом Масле подкожно в корень копчика. Через две недели крыс разделяли на группы по 8 животных. За 24 ч и 1 ч до провоцирования реакции Артюса'инъекцией 0,1 мл 0,4%-ного раствора овальбумина в правую заднюю лапу проводили наз~25 начение орально соответствующего испытываемого вещества или чистой инди- ’. ферентной основы лекарственного препарата (положительный контроль)·. В левую лапу впрыскивали раствор хлористого натрия. Группу несенсибилйзированных животных (отрицательный ¹ контроль) точно также обрабатывали овальбумином, чтобы можно было исключить неспецифические реакции относительно протеина.

В качестве параметра измерения для действия препарата Служило торможение увеличения объема лапы по сравнению с торможением хотя и сенсибилизированной, но не обработанной контрольной группы (положительный контроль) через 4 ч после провокации овальбумина, когда опухание достигает своей максимальной величины

Нестероидальные противовоспалительные средства, включая Напроксен, при этой постановке опыта неэффективны, Напротив, реакцию Артюса можно с успехом тормозить после орального назначения с ЕД_5о.между 1.0 и 15 мг/кг.

30

35

40

45

Антиокислительное действие. Вызванное адриамицином воспаление.

Исследования проводили на Зргадие0аи1еу -крысах мужского пола с весом тела 200 - 230 г в группах по 7 животных, которые получали 0,1 мг адриамицина, растворенного в 0,1 мл 0,’9%ного раствора хлористого натрия, подкожной инъекцией в левую заднюю лапу.

Через 72 ч определяли увеличение объема лапы как меру степени воспаления при помощи измерения плетизмографом.';

Оральное назначение испытываемых препаратов в водной суспензии карбоксиметилцеллюлозы проводили один раз в день в течение'4 следующих друг за другом дней,' начиная со дня инъекцииадриамицина.

Как видно из табл.З, например, у соединения 1 сильный зависимый от дозы защитный.эффект против вызванного адриамицином разрушения ткани. Как стероидальные, так и нестероидальные противовоспалительные средства, включая Напроксен, при этой постановке опыта неэффективны.

6. Торможение 5-липоксигеназЪ1.

Тормозящее действие соединений на катализированное 5-липоксигеназой расщепление арахидоновой кислоты было обнаружено на опытах в пробирке на изолированных полиморфноядерных гуманных грануляцитах. Для этого инкубировали стимулированные кальций - ионофором А 23 187 клетки с 14С-маркированной арахидоновой кислотой и образованные через 15 мин. при 37°С биотрансформацией радиоактивные продукты основного расщепления арахидоновой кислоты: 5-оксиэйкозатетраеновая кислота (5-НЕТЕ) и оказывающий особенно сильное,, противовоспалительное действие на лейкотриен В'₄(ЪТВ₄), после отделения определяли количественно методом жидкостной хроматографии При высоком давлении (НРЬС) при помощи радиомонитора.

В этой экспериментальной установ- ке можно было значительно тормозить образование как ЬТВ_ь , так и 5-НЕТЕ и, следовательно, расщепление арахидоновой кислоты через 5-липоксйгеназу в результате 15-минутного предварительного инкубирования гранулицитов при помощи соединения примера 1 в области концентраций между 10и 10^_ί моль/л.

Таким образом, замещенные 3-фенил7Н-тиазоло[3,2-в] [1,2,4]триазин-7оны по противовоспалительному действию превосходят препарат Напроксен и являются более эффективными для лечения воспалительно-ревматоидных заболеваний'.

9 1591

Claims

Формула изобретения

1. Способ получения замещенных 3-фенил-7Н-тиазоло-[3,2-Ь]^1,2,41триазин— 7-онов общей формулы $

С(СН₃)₃

N р

ΛΛη 5 Ν ^υ

гдеЕ - алкильная группа с прямой или разветвленной цепью с 1-4 атомами углерода;

К - водород или алкильный остаток с 1-3 атомами углерода;

- водород, алкильная группа с прямой или разветвленной цепью с 1-4 атомами углерода или оксиметил,

о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,

2-галоген-1-фенилалканон общей формулы

С((ЭД₃НО/ '

1.0

15

Βί

30

и,снк

X вию

- ч

де К,и К₂ имеют указанные значения;

” - галоген, подвергают взаимодейсс тиосемикарбазидом, образующий_ И Τ 1 4 О 7. Λ» » , 1 Λ Д *Т» /*к

35

формулы

40

где К._л и К ₂ имеют указанные значения, превращают в кислой среде в 3-амино- .

808 10

2-имино-2,3-дигидротиазол общей'формулы

где К, и К₂ имеют указанные значения который затем подвергают взаимодейст вию с «7-кетокарбоновой кислотой общей формулы η 0_

³Н II 0 0

где К. имек!т указанные значения.

3 -Г2. Способ получения 2-амино-6Н-1, 3,4-тиадиазинов общей формулы

20

25

где - алкильная группа с прямой или разветвленной цепью с

1-4 атомами углерода;

К ₂ - водород или алкильный остаток с 1-3 атомами углерода,

о__т лич ающий с я тем, что 2галоген-1-фенилалканон общей формулы

С(СН₃)з

^Н0А

Β,-Μ-Ο-Ο

К₂СНХ

где и.Кимеют указанные значения, подвергают взаимодействию с тиосемикарбазидом.

11 1591808 12

Т а б л и ц а 1

Замещение 3-фенил-7Н-тиазоло £3,2-Ъ] £1,2,4]

триазин -7 - оны

СВДз

нОхА,

κ,ΑΑ. _ΝΤΙ,κ₃

κάΛ^Λ°

Пример | И, | . Ή | ^вз | Т.пл."С 1 (Н_ЭС)₃С- н н 257 (разложение) 2 Н₃С- н н 225-226 (разложение) 3 (н₅с)_эс- н -сн₂-он 215-217 4 (Н₃С)₃С- -сн₃ -сн₃ 256-257 5 . (Н₃С)₃С- ' н -сн₃ 219-220 6 (Н₃С)_ЭС-· -сн₃ й 249-251 7 <н₃с)₃с- н -сн₂-сн₃ 240-242 8 (Н₃с)₈с- н -сн_й-сн₂-СК₃ 216-217 9 (Н₃С)₃С- н -сн(сн₃). 237-238 ¹⁰ н₃с- н -сн₃ 232-233

Таблица 2

— —--------^! Соединение* Дополнительный артрит (тормо.жение при 50 мг хг ρ.ο.,Ζ) Острая язва 1¾ , мг/кг Острая , токсичность ЛД^-р мг/кг 1 67 400** ' 1200 2 41 400** 1200 3 41 200** 1200 6 50 200** . 1200 9 45 200**. 1200 Напроксен 55 23 500

*Нумерация соединений соответствует табл,1.

Хм.

Соответственно назначенная максимальная доза.

13

1591808

14

ТаблицаЗ ι

Животные Защитное действие, % Доза (оральное введение), мг/кг Увеличение объема лапы, мл Контроль - 430 Соединение 20 220 49 С / <· по приме- 40 • 200 54 η г.# РУ 1 80 10 98

^Значимость р<0,05.