SU1491345A3 - Способ получени фрагмента нуклеиновой кислоты, кодирующего проинсулин человека - Google Patents
Способ получени фрагмента нуклеиновой кислоты, кодирующего проинсулин человека Download PDFInfo
- Publication number
- SU1491345A3 SU1491345A3 SU802994154A SU2994154A SU1491345A3 SU 1491345 A3 SU1491345 A3 SU 1491345A3 SU 802994154 A SU802994154 A SU 802994154A SU 2994154 A SU2994154 A SU 2994154A SU 1491345 A3 SU1491345 A3 SU 1491345A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- ctc
- cac
- ccc
- fragment
- proinsulin
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к генетической инженерии и касаетс получени фрагмента нуклеиновой кислоты, кодирующего проинсулин человека с помощью рекомбинантной ДНК-технологии. Фрагмент ДНК, кодирующий проинсулин, получают путем клонировани гена млекопитающего. После клонировани в плазмиде PBR 322 его выдел ют с помощью эндонуклеаз HHA 1 и ALU 1 или эндонуклеаз HHA 1 и модифицируют, присоедин химически синтезированную нуклеотидную последовательность 3Ъ-TTTGTGAACCAACACCTGTCGGCT CACACCTGGAAG-5Ъ, кодирующую 14 аминокислот проинсулина.
Description
Изобретение относитс к области генэтической инженерии и касаетс получени фрагмента нуклеиновой кислоты , кодирующего проинсулин человека с помощью рекомбинантной ДНК-технологии .
Фрагмент ДНК, кодирующий проинсулин , получают путем клонировани гена млекопитающего. После клонировани в плазмиде pBR322 выдел ют его с помощью эндонуклеаз Hhal и Alul и модифируют присоедин химически синтезированную иуклеотидную последовательность 3 -TTTGTGAAGGAAGACCTGTGCGG CTCAGAGCTGGAAG-5 , кодирующую 14 аминокислот проинсулина.
Пример 1. РНК получают из человеческой инсулиномы после центрифугировани в 5,7 М CsCl, содержащем 100 мМ ЭДТУ, и используют без дальнейшего фракционировани в качестве шаблона дп синтеза кДНК с использованием обратной транскриптазы и SI- нуклеазы. Приблизительно 40 нг двух- нитевой кДНК получают из 130 мкг иефракдаонированной РНК.
Нефракционированную кДНК обрабатывают концевой трансферазой в присутствии дЦТф дл получени олиго-С- хвостов на 3 -концах молекул кДНК. Плазмиду pBR322 расщепл ют эндону- клеазой ограничени Pst I и обрабаliik Р
4 ел
сн
тывают концсвсй трансферазой в присутствии dGTP дл получени олиго- dG-xBOCTOB на 3 -концах линейной плазмидной ДНК.
Сшивают полученные фрагменты и получают кольцевую плазмиду.
1 1тамм E.coli XI776 трансформируют с использованием плазмидных ДНК-со- держащих вставок. Получают 525 резистентных к тетрациклину трансформантов , Их реплицируют высевом и клас сифицируют на инсулиновые последовательности с помощью гибридизации колоний (in situ)i Ранее клонированную кДНК препроинсулина крыс используют в качестве пробы дл гибридизации, после метки кДНК крыс - с помощью Nick-трансл ции с применением ДНК-по- лимеразы 1с Поскольку аминокислотные последовательности инсулинов крыс и человека довольно сходны (инсулин, 92% гомлоги ; проинсулин, 83% гомло- ги ), предполагают, что клонированна кДНК крыс будет испытывать кросс-гибридизацию с последовательност ми человеческого инсулина в нежестких услови х . Авторадиографией вы вл ют, что две из 525 колоний гибридизиро- ваны с пробой клонированного препро- инсулина-1 крыс о Обе колонии чувствительны к ампициллину. Выделенные из колоний плазмиды приблизительно на 250 пар оснований (Ьр) и на 500 Ьр длиннее, чем сам pBR 322. Более длинную плазмиду обозначают как рсН1-1.
Нуклеотидную, последовательность вставленного кДНК фрагмента рсН1-1 определ ют методом Махаш and Gilbert
Прим е р 2о кДНК вставка рсН1-1 содержит полную кодирующую последовательность дл человеческого препроннсулина о
ДНК синтетического проиисулина
обрабатывают Alu-1-эндонуклеазой дл получени двух фрагментов размером A3 Ьр и 56 Ьр. Аналогично кДНК-встав- ку рсН1-1, предпочтительно полученную с помощью обработки Hh а I, расщепл ют частичным гидролизом, катализируемым Alu-1-эндонуклеазой с образованием фрагментов по 75, 90, 110, 135, 165, 200, 245, 275, 375 и 455 Ьр соответственно их фракционируют методом гельэлектрофореза с получением фрагмента 375 Ьр, который получаетс в.результате разрыва в одном местоположении в кодоне дл аминокислоты N 14 о
0
5
0
5
0
5
0
5
0
5
Фрагменты распрпленн синтетического гена и фрат мент 375 Ьр соедин ют с помощью тупоконечной лигатуры. Точное соединение синтетического фрагмента размером 43 Ьр с 375 Ьр кДНК-фрагмента максимизируют при условии , что 375 Ьр кДНК присутствует в мол рном избытке. Возможности дл неточного соединени также минимизируют тем, что синтетические фрагменты имеют однонитевые выступающие концы, которые не вл ютс комплементарными концами 375 Ьр кДНК-фраг- мента.
Объединенный фрагмент, содержащий синтетическую последовательность дл метионина (1-13 аминокислот), и встречающа с в природе последовательность кодировани дл аминокислот 14-86 проинсулина составл ет последовательность кодировани дл проинсулина .
Проинсулин-кодирующую последовательность конструируют избирательным разрывом у внутреннего положени в проинсулин-кодирующей области с последующим пришиванием химически синтезированной последовательности, кодирующей ту часть проинсулин-кодиру- ющего участка, который удален предшествующим расщеплением. Плазмиду рсН1-1 используют в качестве источника проинсулин-кодирующего участка, который избирательно исключают обработкой Hhal-эндонуклеазойо
Любой фрагмент после выделени обрабатывают щелочной фосфатазой дл удалени 5 -концевых фосфатных групп, затем расщепл ют эндонуклеазой Alu I, имеющей уникальную точку расщеплени в области 13-14 аминокислот в проин- сулин-кодирующей последовательности. Местоположение ограничени предпочтительно располагают вблизи одного из концов проинсулин-кодирующей последовательности . Hhal-фрагмент - рсН1-1 частично разрывают Alul-эндонуклеазой с получением двух фрагментов длиной приблизительно 76 Ьр и 375 Ьр соот-. ветственно. Alul-фрагменты фракционируют методом гельэлектрофореза и выдел ют фрагмент 375 Ьр
Нуклеотидную последовательность, кодирующую первые 13 аминокислот проинсулина с 5 -концевым С (на плюс-нити ), дл заверщени кодона на аланин в положении 14 синтезируют фосфотри5I
эфирным методом о Плюс-нить синтетической ДИК HN: ет последовательность: 3 -TTTGTGAACCAACACCTGTGCGGCTCACACCTG GTGGAAG-5 .соответствующую природной последовательности,
Результирующей последовательностью вл етс последовательность,
сшита тупым концом с приблизительно 375 Ьр фрагментом Hhal-фрагментом рсН1-1. Поскольку последний имеет 5 -фосфат только на присоедин емом конце, два фрагмента соедин ют в правильном пор дке. Синтетический фрагмент правильным образом соедин ют с большим фрагментом в приблизительно 50% реакции.
-24
-...20
1, Способ получени фрагмента н 15 клеиновой кислоты, кодирующего про сулин человека со следующей нуклео тидной последовательностью: -10
met ala еи trp met org teu leu pro leu leu ofa leu leu ola let/ CCTTCTCCCATD CCC CTC TCC АТС CCC CTC CTC CCC CTC CTC CCC CTC CTC CCC CTC
Пример 3. Клонированные вставки, кодирующие на препроинсулин (пример 1) или проинсулин (пример 2), вставл ют в вектор переноса экспрессии . Когда вставка происходит при правильной ориентации.относительно начала трансл ции у местоположени вставки, она находитс в фазе относительно фрейма считывани .
Claims (1)
- Формула изобретени1, Способ получени фрагмента ну- клеиновой кислоты, кодирующего проинсулин человека со следующей нуклео- тидной последовательностью: -10.trp gttfTCC CCA1 /0pro охр pro ofa ofo afo pfie vol oia gfn h/5 teu cy ser his feu vatCCT CAC CCA CCC CCA CCC TTT CUC AAC CAA CAC CTC /CC CCC tCA CAC CT& CT& СДАQlo teu grCCT CTC111 N rAlu f 20JOti/r feu vof ci/5 gig glu orggfy p/ie phe tj/r thr pro lys thrarg org gig aloTAC СТА CTt TCC CCC CAA CCACCC TTC TTC TAC АСА CCC AAC ACCCCC CCC CAC CCAglu asp CAC CAC0 soleu gin wl gig gin val glu leu gig g/y gfc/ pro gfi/ olo gig str feu gfn proCTt CAG &TC C&C CAC CfC CAC CTG GtC CCC C&C CCT CCT CCA CCC A6C CTC GAG CCCeu ofoTT& GCCAluf60 70leu glu gfv ser leu gin tyj arg gtg lie ко glu gin tgi cys thr ser lie cyiCTC GAD CCC TCCCTD CAG AAG CCT CCC ATT GTC GAA САД TCC TGT ACC AGO АТС TCCser leu.TCC сто60Обtyr gfn leu g/uasn tyr cyj 05ПTAC CAC CTG CAGAAC TAC TGC AAC TAG ACGCACCCCCCACCCACCCCCCCA CCCCCCCCCTCCTCCAAiHw/ ffjCCCACA&ACATDGAATAAACCCCTTCAACCACCЦМ Iзаключающийс в том, что клетки островков Лангерганса центрн})угируют в растворе, содержащем 5,7 М CsCl и 100 ЭДТУ, отдел ют РНК препро- инсулина, синтезируют кДНК, полученную кДНК встраивают в PstI сайт плаз- миды pBR 322 с помощью dA-олиго- dT- метода, трансформируют рекомбинант- ной плазмидной ДНК штаммы бактерий Escherichia coli и отбирают клоны, гибридизующиес с клонированной кДНК препроинсулина крыс, содержащей радиоактивную метку, выдел ют из них плазмиду рсН1-1 со вставкой кДНК пре- проинсулина, обрабатывают рсН1-1 эн- донуклеазой Hha I с последующим частичным ги ;ролизом Alul зндонуклеазой.5ввыдел ют фрагмент длиной 375 Ьр и лигируют ДНК-лигазой Т с фрагментом длиной 43 Ьр химически синтезированной нуклеотидной последовательности 3 -TTTGTGAACCAACACC TGTGCGGCTCACACCT GGTGG AAG-5 , кодирующей 1-14 аминокислоты проинсулина, оканчивающейс г.айтом Alu loПо1,отличаю- что плазмиду рсН1-12„ Способ по щ и и с тем, обрабатывают зндонуклеазой Hhal, выдел ют фрагмент длиной 375 Ьр, который тупоконечно лигируют с нуклеотидной последовательностью З -TTTGT GAACCAACACCTGTGCGGCTCACACCTGGTGGAAG-5 .
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US7519279A | 1979-09-12 | 1979-09-12 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1491345A3 true SU1491345A3 (ru) | 1989-06-30 |
Family
ID=22124154
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU802994154A SU1491345A3 (ru) | 1979-09-12 | 1980-09-11 | Способ получени фрагмента нуклеиновой кислоты, кодирующего проинсулин человека |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0026598A1 (ru) |
| JP (1) | JP2637393B2 (ru) |
| KR (1) | KR870000501B1 (ru) |
| AT (1) | AT377003B (ru) |
| AU (1) | AU538154B2 (ru) |
| BE (1) | BE885196A (ru) |
| BG (2) | BG41137A3 (ru) |
| CA (1) | CA1180289A (ru) |
| CZ (2) | CZ278883B6 (ru) |
| DD (3) | DD155004A5 (ru) |
| DK (1) | DK385980A (ru) |
| ES (3) | ES8107307A1 (ru) |
| FI (1) | FI802837A (ru) |
| FR (1) | FR2464997B1 (ru) |
| GR (1) | GR70279B (ru) |
| IE (1) | IE52781B1 (ru) |
| IL (1) | IL61041A (ru) |
| IT (1) | IT1129250B (ru) |
| LU (1) | LU82757A1 (ru) |
| NZ (1) | NZ194786A (ru) |
| PH (1) | PH26475A (ru) |
| PL (1) | PL226725A1 (ru) |
| PT (1) | PT71790B (ru) |
| RO (1) | RO80005A (ru) |
| SK (1) | SK621580A3 (ru) |
| SU (1) | SU1491345A3 (ru) |
| YU (1) | YU233480A (ru) |
| ZA (1) | ZA805341B (ru) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4342832A (en) * | 1979-07-05 | 1982-08-03 | Genentech, Inc. | Method of constructing a replicable cloning vehicle having quasi-synthetic genes |
| DE3001928A1 (de) * | 1980-01-19 | 1981-08-06 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | Genprodukt eines hoeheren organismus aus einem dieses gen enthaltenden mikroorganismus |
| US4249952A (en) * | 1980-03-03 | 1981-02-10 | Pennsylvania Engineering Corporation | Method for producing cement clinker from cement kiln waste dust |
| AU545912B2 (en) * | 1980-03-10 | 1985-08-08 | Cetus Corporation | Cloned heterologous jive products in bacillies |
| US4338397A (en) * | 1980-04-11 | 1982-07-06 | President And Fellows Of Harvard College | Mature protein synthesis |
| NZ199391A (en) * | 1981-01-02 | 1985-12-13 | Genentech Inc | Chimeric polypeptides comprising a proinsulin sequence,and preparation by recombinant dna technique;production of human insulin |
| ZA824218B (en) * | 1981-06-29 | 1983-04-27 | Cetus Corp | Plasmid for producing human insulin |
| JPS58183659A (ja) * | 1982-03-31 | 1983-10-26 | ジェネテイックス、インスチチュ−ト、インコ−ポレ−テッド | 修飾プロインシュリン前駆体、これを暗号化するｄｎａ配列およびそれらの産生方法 |
| US5023321A (en) * | 1982-12-13 | 1991-06-11 | Howard Florey Institute Of Experimental Physiology & Medicine | Molecular cloning and characterization of a further gene sequence coding for human relaxin |
| NZ206534A (en) * | 1982-12-13 | 1988-05-30 | Florey Howard Inst | Molecular cloning and characterisation of gene sequence coding for human relaxin |
| IL71991A (en) | 1983-06-06 | 1994-05-30 | Genentech Inc | Preparation of human FGI and FGE in their processed form through recombinant AND tranology in prokaryotes |
| EP0247494B1 (en) * | 1986-05-20 | 1996-07-31 | The General Hospital Corporation | Method for evaluating the effect of a heterologous agent on an animal |
| ATE386811T1 (de) | 1996-04-05 | 2008-03-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Alphaviren-vektors mit eine reduzierte inhibierung der synthese von zellmakromolekülen |
| AUPP655698A0 (en) * | 1998-10-16 | 1998-11-05 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Delivery system for porcine somatotropin |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ187300A (en) * | 1977-05-27 | 1982-08-17 | Univ California | Dna transfer vector and micro-organism modified to contain a nucleotide sequence equivalent to the gene of a higher organism |
| EP0001931A3 (en) * | 1977-11-08 | 1979-06-13 | Genentech, Inc. | Synthetic dna, process for preparing it and recombinant microbial cloning vehicle containing such dna |
| FI783365A (fi) * | 1977-11-08 | 1979-05-09 | Genentech Inc | Foerfarande foer mikrobipolypeptiduttryck |
| US4411994A (en) * | 1978-06-08 | 1983-10-25 | The President And Fellows Of Harvard College | Protein synthesis |
| FI792481A (fi) * | 1978-08-11 | 1980-02-12 | Univ California | Syntes av enkaroytiskt protein genom anvaendning av mikro-organismer |
-
1980
- 1980-08-25 GR GR62740A patent/GR70279B/el unknown
- 1980-08-27 NZ NZ194786A patent/NZ194786A/en unknown
- 1980-08-28 ZA ZA00805341A patent/ZA805341B/xx unknown
- 1980-09-09 FR FR8019399A patent/FR2464997B1/fr not_active Expired
- 1980-09-10 PT PT71790A patent/PT71790B/pt unknown
- 1980-09-10 IL IL61041A patent/IL61041A/xx not_active IP Right Cessation
- 1980-09-10 LU LU82757A patent/LU82757A1/fr unknown
- 1980-09-10 FI FI802837A patent/FI802837A/fi not_active Application Discontinuation
- 1980-09-11 BE BE0/202074A patent/BE885196A/fr not_active IP Right Cessation
- 1980-09-11 PH PH24566A patent/PH26475A/en unknown
- 1980-09-11 DK DK385980A patent/DK385980A/da not_active Application Discontinuation
- 1980-09-11 AU AU62324/80A patent/AU538154B2/en not_active Expired
- 1980-09-11 IT IT68405/80A patent/IT1129250B/it active
- 1980-09-11 SU SU802994154A patent/SU1491345A3/ru active
- 1980-09-11 EP EP80303195A patent/EP0026598A1/en not_active Ceased
- 1980-09-11 CA CA000360565A patent/CA1180289A/en not_active Expired
- 1980-09-11 AT AT0458580A patent/AT377003B/de not_active IP Right Cessation
- 1980-09-12 KR KR1019800003590A patent/KR870000501B1/ko active
- 1980-09-12 SK SK6215-80A patent/SK621580A3/sk unknown
- 1980-09-12 IE IE1912/80A patent/IE52781B1/en unknown
- 1980-09-12 JP JP55127043A patent/JP2637393B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1980-09-12 DD DD80223873A patent/DD155004A5/de unknown
- 1980-09-12 RO RO80102151A patent/RO80005A/ro unknown
- 1980-09-12 YU YU02334/80A patent/YU233480A/xx unknown
- 1980-09-12 BG BG8257337A patent/BG41137A3/xx unknown
- 1980-09-12 ES ES495030A patent/ES8107307A1/es not_active Expired
- 1980-09-12 DD DD80238569A patent/DD201693A5/de unknown
- 1980-09-12 DD DD80238563A patent/DD208989A5/de unknown
- 1980-09-12 BG BG8049043A patent/BG41136A3/xx unknown
- 1980-09-12 CZ CS806215A patent/CZ278883B6/cs unknown
- 1980-09-12 PL PL22672580A patent/PL226725A1/xx unknown
-
1981
- 1981-06-30 ES ES503567A patent/ES503567A0/es active Granted
- 1981-06-30 ES ES503568A patent/ES503568A0/es active Granted
-
1984
- 1984-07-16 CZ CS845488A patent/CZ548884A3/cs unknown
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ulrich А.et,al.Science 196, 1977, p.1313. * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SU1491345A3 (ru) | Способ получени фрагмента нуклеиновой кислоты, кодирующего проинсулин человека | |
| Huang et al. | A persistent untranslated sequence within bacteriophage T4 DNA topoisomerase gene 60 | |
| Hackett et al. | Localization of the hsp83 transcript within a 3292 nucleotide sequence from the 63B heat shock locus of D. melanogaster | |
| KR940002536B1 (ko) | 사람의 릴랙신을 암호하는 제 2 유전자 서열의 분리방법 | |
| US5326694A (en) | Process for synthesizing human H2-prorelaxin, human H2-relaxin and fusion proteins thereof | |
| Shirakawa et al. | Primary structure of non-histone chromosomal protein HMG2 revealed by the nucleotide sequence | |
| IE914449A1 (en) | Cloning and expression of borrelia lipoproteins | |
| Himeno et al. | Isolation and sequencing of a cDNA clone encoding 107 kDa sialoglycoprotein in rat liver lysosomal membranes | |
| Wingender et al. | Expression of human parathyroid hormone in Escherichia coli | |
| WO1991009867A1 (en) | Mucin nucleotides | |
| Hartl et al. | The N terminus of laminin A chain is homologous to the B chains | |
| EP0252302A1 (de) | Hauptglykoprotein des menschlichen Cytomegalovirus, seine Herstellung und Verwendung | |
| EP0167548B1 (en) | Cloning of cdna and expression of murine-interleukin-3 | |
| JP2506322B2 (ja) | Ｇｒｆ前駆体をコ―ドするｄｎａ | |
| WO1990001542A1 (en) | Luciferase, luciferase-coding gene, and process for preparing luciferase | |
| US5631227A (en) | Somatotropin analogs | |
| WO1993010231A1 (en) | Collagen-like polypeptides | |
| Parimoo et al. | Construction of a cDNA clone for a nuclear-coded subunit of cytochrome c oxidase from rat liver | |
| EP0236452B1 (en) | Enhanced bioactivity of mammalian somatotropin through selective deamidation | |
| EP0263206B1 (en) | Enhanced bioactivity of mammalian somatotropin through selective deamidation | |
| AU570762B2 (en) | Cloning of cdna for il-3 | |
| EP0325773A1 (en) | A gene coding for human 5-lipoxygenase polypeptide | |
| JPH05317050A (ja) | Ｐｚｐ−４遺伝子及び避妊ワクチン | |
| ES2133236A1 (es) | Gen quimerico formado por las secuencias de dna que codifican los determinantes antigenicos de cuatro proteinas de l. infantum, aplicable para el diagnostico serologico de leishmaniosis canina y proteina obtenida. | |
| HUT51676A (en) | Process for producing proteins n-terminally beginning with proline |