KR830003576A - 인간의 프로인슐린선구물질과 프로인슐린 유전자를 분리, 정제하고 미생물에게 전달해서 복제하는 방법 - Google Patents
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제 1 도는 삽입부와 제한부위의 모형,
제 2 도는 cDNA 배열로 부터 유도된 mRNA 배열과 읽는 구조중의 하나로 부터 연역한 아미노산의 배열이다.
Claims (25)
- 사람의 프로인슐린 선구물질에 암호를부친 데옥시누클레오티드 배열을 보존하고 복제하는데 사용하기 위해서 DNA 전달매개자를 제조함에 있어서 제한효소로 전달매개자를 분리하여 제조된 DNA 분자와 사람의 프로인슐린 선구물질에 암호를 부친 데옥시누클레오티드 배열을 반응시키는 것을 특징으로 하는 DNA 전달 매개자의 제조방법.
- A는 데옥시아데닐, G는 데옥시구아닐, C는 데옥시시토실, T는 티미딜, J는 A나 G, K 는 T나 C, L은 A, T, C 나 G, M은 A, C나 T이고, Xn은 Yn이 A나 G인 경우 T 나 C이고, Yn이 C 나 T인 경우 C, Yn은 Xn이 C인 경우 A, G, C 나 T 이고 Xn이 T인 경우 A 나 G, Wn은 Zn이 G나 A인 경우 C나 A이고 Xn이 C나 T인 경우 C, Zn은 Wn이 C인 경우 A, G, C나 T이고 Wn이 A인 경우 A나 G, QRn은 Sn이 A, G, C 나 T인 경우 TC 이고 Sn이 T나 C인 경우 AG, Sn은 QRn이 TC인 경우 A, G, C나 T이고 QRn이 AG인 경우 T나 C이며, 밑에 쓴 숫자, 즉 n은 사람의 프로인슐린에 속하는 아미노산 배열 순서안에서의 위치와 관련된 것으로 누클레오티드 배열안에 있는 3중자 각각에 일치하며 아미노산 위치는 유전암호에 의해서 아미노말단에서 부터 번호가 매겨지는 이러한 비열을 갖는 +가닥으로 이루어진 사람의 프로인슐린 선구물질에 암호를부친 데옥시누클레오리드 배열을 특징으로 하는 청구범위 1항에 의한 DNA 전달 매개자의 제조방법.
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- 사람의 인슐린을 합성하는데 사용하기 위해서 사람의 프로인슐린에 암호를 부친 데옥시누클레오티드 배열을 제조함에 있어서, 청구범위 1항에 의해서 보존되고 복제된 사람 프로인슐린 선구물질에 암호를 부친 데옥시누클레오티드 배열의 3' 말단을 가수분해하고, 데옥시누클레오티드 3인산의 존재하에서 작용하는 T4DNA 중합효소의 촉매로 외부핵산 분해절단을 1 내지 그 이상의 단계적인 회로에 의해서 행한다음, 5' 말단을 갖는 단일-가닥의 DNA에 특수한 누클레아제 효소에 의해 촉매되는 핵산분해 절단으로 데옥시누클레오티드 배열의 5' 말단을 가수분해하는 것을 특징으로 하는 데옥시누클레오티드 배열의 제조방법
- T4DNA 중합효소로 절단하기 전에 Hhal 엔도누클레아제가 촉매하는 반응중에 사람의 프로인슐린 선구물질에 암호를 부친 배열을 특수한 부위에서 가수분해 하는 것을 특징으로 하는 청구범위 3항에 의한 데옥시누클레오티드 배열의 제조방법.
- 사람의 인슐린을 합성하는데 사용하기 위해서 사람의 프로인슐린에 암호를 부친 데옥시누클레오티드 배열을 제조함에 있어서, 청구범위 1항의 제조방법에 의해서 보존되고 복제된 사람 프로인슐린 선구물질에 암호가 부쳐진 cDNA를 분리하여 제조한 사람프로인슐린 일부에 암호를 부친 cDNA 단편과, 데옥시누클레오티드 배열안에 유일한 인식부위를 갖는 제한엔도누클레아제와, cDNA 단편에 의해서 암호가 부쳐지지 아니한 사람프로인슐린의 일부에 암호를 부친것이 데옥시누클레오티드 배열인 화학합성된 DNA를 DNA 리가아제가 촉매하는 둔단결찰 반응안에서 반응시키는 것을 특징으로 하는 데옥시누클레오티드 배열의 제조방법.
- 제한엔도누클레아제가 Alul인 것을 특징으로 하는 청구범위 5항에 의한 데옥시누클레오티드 배열의 제조방법.
- A는 데옥시아데닐, G는 데옥시구아닐, C는 데옥시시토실, T는 티미딜, J는 A나 G; K 는 T나 C; L은 A, T, C 나 G; M은 A, C나 T이고, Xn은 Yn이 A나 G인 경우 T 나 C이고, Yn이 C 나 T인 경우엔 C; Yn은 X가 C인 경우 A, G, C 나 T 이고 X가 T인 경우엔 A 나 G; Wn은 Zn이 G나 A인 경우 C나 A이고 Zn이 C나 T인 경우엔 C; Zn은 Wn이 C인 경우 A, G, C나 T이고 Wn이 A인 경우 A나 G; QRn은 Sn이 A, G, C 나 T인 경우 TC 이고 Sn이 T나 C인 경우엔 AG; Sn은 QRn이 TC인 경우 A, G, C나 T이고 QRn이 AG인 경우 T나 C이며, 밑에 쓴 숫자, 즉 n은 사람의 프로인슐린에 속하는 아미노산 배열 순서 안에서의 위치와 관련된 것으로 누클 레오티드 배열안에 있는 3중자 각각에 일치하여 아미노산 위치는 유전암호에 의해서 아미노말단에서 부터번호가 매겨지는 이러한 비열을 갖는 +가닥으로 이루어진 사람의 프로인슐린에 암호를 부친 데옥시누클레오티드 배열을 특징으로하는 청구범위 3-6항에 의한 데옥시누클레오티드 배열의 제조방법
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- 제한효소로서 pBR 322와 PstI 엔도누클라제를 사용하여 전달매개자를 분리해서 제조된 DNA 분자를 특징으로 하는 청구범위 1-2항에 의한 플라스미드 PCHI-1의 제조방법.
- 사람의 프로인슐린에 암호를 부친 데옥시누클레오티드 배열을 보존하고 복제하는데 사용하기 위해서 DNA 전달 매개자를 제조함에 있어서, 청구범위 3-7항중 어느한 항에 의해서 제조된 사람프로인슐린에 암호가 부쳐진 데옥시누클레오티드 배열을 제한효소로서 잔달매개자를 분리하여 제조된 DNA 분자와 반응시키는 것을 특징으로 하는 DNA 전달매개자 제조방법.
- 제한효소로서 pBR 322와 PstI 엔도누클레아제를 사용하여 전달매개자를 분리하여 제조된 DNA 분자를 특징으로 하는 청구범위 9항에 의한 플라스미드 pcHP-1의 제방법.
- 사람의 프로인슐린 선구물질이나 프로인슐린에 암호가 부쳐진 데옥시누클레오티드 배열을 표현하는데 사용하기 위해서 청구범위 1-9항에 의해 표현전달 매개자를 제조함에 있어서, 제한효소로 전달매개자를 분리하여 제조된 DNA 분자가, 표현할 수 있는 제어부위안의 한지점에서 분리되는 것을 특징으로 하는 표현 전달매개자의 제조방법.
- N-말단배열로서 원핵단백질의 일부분과 C-말단배열로서 사람프로인슐린 선구물질의 아미노산 배열순서를 함유하는 융합단백질을 제조함에 있어서, 청구범위 1-2항에 의해 제조된 사람프로인슐린 선구물질에 암호가 부쳐진 데옥시누클레오티드 배열을 함유하는 표현 전달매개자에 의해서 형질전환된 미생물을 배양하는 것을 특징으로 하는 융합단백질의 제조방법.
- N-말단 배열로서 원핵단백질의 일부분과 C-말단 배열로서 사람프로인슐린의 아미노산 배열순서를 함유하는 융합단백질을 제조함에 있어서, 청구범위 9항에 의해 제조된 사람프로인슐린에 암호가 부쳐진 데옥시누클레오티드 배열을 함유하는 표현전달 매개자에 의해서 형질전환된 미생물을 배양하는 것을 특징으로 하는 융합단백질의 제조방법.
- C 펩티드에 의해서 서로가 분리된 A, B 펩티드를 함유하는 사람프로인슐린을 합성함에 있어서, 청구범위 3-7항에 의해 제조된 사람프로인슐린에 암호가 부쳐진 데옥시누클레오티드 배열을 함유하는 표현전달 매개자에 의해서 형질전환된 미생물을 배양함으로서 특징지워지는 사람프로인슐린의 합성방법.
- A는 데옥시아데닐, G는 데옥시구아닐, C는 데옥시시토실, T는 티미딜, J는 A나 G; K 는 T나 C; L은 A, T, C 나 G; M은 A, C나 T이며, Xn은 Yn이 A나 G인 경우 T 나 C이고, Yn이 C 나 T인 경우엔 C; Yn은 XN이 C인 경우 A, G, C 나 T 이고 Xn이 T인 경우엔 A 나 G; Wn은 Zn이 G나 A인 경우 C나 A이고, Zn이 C나 T인 경우엔 C; Zn은 Wn이 C인 경우 A, G, C나 T이고, Wn이 A인 경우엔 A나 G; QRn은 Sn이 A, G, C 나 T인 경우 TC 이고, Sn이 T나 C인 경우엔 AG; Sn은 QRn이 TC인 경우 A, G, C나 T이고 QRn이 AG인 경우엔 T나 C이며, 밑에 쓴 숫자, 즉 n은 사람의 프로인슐린에 속하는 아미노산 배열순서안에서의 위치와 관련된 것으로, 누클레오티드 배열안에 있는 3중자에 일치하며 아미노산 위치는 유전암호에 의해서 아미노말단에서 부터 번호가 매겨지는 이러한 배열을 갖는 +가닥으로 이루어진 사람인슐린의 B 사슬에 암호가 부쳐진 데옥시누클레오티드 배열과, 역시 +가닥으로 이루어진 A사슬에 암호가 부쳐진데옥시누클레오티드 배열을 특징으로 하는 청구범위 14항에 의한 사람프로인슐린의 합성방법.
- A배열 :
-
- B배열 :
- 사람프로인슐린에 암호가 부쳐진 데옥시누클레오티드 배열이 a) 5'와 3' 말단을 가지면서 Na, Nb, Nc가 A, T, G나 C이며 J가 0-100 중에 어떤 정수일 경우에 NaNbNc는 TGA, TAA나 TAG가 아닌 데옥시누클레오티드 배열(NaNbNc)j와 ;b) (NaNbNc) j의 5' 말단에 부착된 사람인슐린의 B사슬에 암호가 부쳐진 데옥시누클레오티드 배열과;c) (NaNbNc) j의 3' 말단에 부착된 사람인슐린의 A 사슬에 암호가 부쳐진 데옥시누클레오티드 배열 등을 갖는 +가닥으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 청구범위 4항에 의한 사람프로인슐린이 합성방법
- 청구범위 14-16항중 어느한 항에 의하여 제조된 사람프로인슐린의 A,B 펩티드 위에 있는 수황기를 산화히서 A, B 펩티드 사이에 이황화물 다리결합을 형성한 다음, C펩티드를 A, B 펩티드에 연결하는 결합에 있어서 특수한 효소가 촉매하는 가수분해 반응으로 C펩티드를 절단하는 것을 특징으로 하는 사람인슐린의 합성방법
- ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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