SK281645B6

SK281645B6 - 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty, farmaceutické prostriedky s ich obsahom a ich použitie

Info

Publication number: SK281645B6
Application number: SK496-96A
Authority: SK
Inventors: Philippe L. Durette; William K. Hagmann; Thomas J. Lanza Jr.; Soumya P. Sahoo; Gary H. Rasmusson; Richard L. Tolman; Langen Derek Von
Original assignee: Merck & Co., Inc.
Priority date: 1993-10-21
Filing date: 1994-10-21
Publication date: 2001-06-11
Also published as: RO116197B1; CZ292614B6; KR960705839A; US5739137A; CA2173863C; NZ275293A; IL111357A0; WO1995011254A1; NO961575D0; BR1100217A; AU8086194A; NO961575L; AU680063B2; HUT74613A; FI961697A0; US5910497A; UA44257C2; US5719158A; HK1009047A1; JP2862376B2

Abstract

16-Substituované 4-azaandrostanové deriváty všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 a R2 znamenajú atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 10 atómami uhlíka a jeden zo symbolov R3 a R4 znamená atóm vodíka alebo metyl a druhý znamená aminoskupinu, kyanoskupinu, atóm fluóru, hydroxyskupinu alebo amidickú skupinu, alkyl, alkenyl, aryl, heteroaryl, príp. spoločne tvoria kyslíkový atóm karbonylovej skupiny alebo alkyl, sú inhibítormi izoenzýmu 1 5alfa-reduktázy a sú preto použiteľné v lekárstve, najmä na liečenie ochorení prostaty, akné, zvýšeného ochlpenia u žien alebo naopak plešatosti u mužov vo forme farmaceutických prostriedkov.ŕ

Description

Vynález sa týka 16-substituovaných 4-azaandrostanových derivátov, ktoré sú cennými inhibítormi 5a-reduktázy a to jej izoenzýmu 1. Tieto látky sú vhodné na použitie v lekárstve vo forme farmaceutických prostriedkov na selektívnu inhibíciu uvedeného enzýmu.

zotok, zvýšené ochlpenie u žien a pleäatosť mužského typu. Okrem toho by bolo možné použiť inhibitory 5a-reduktázy 1 aj spolu s látkami, otvárajúcimi draslíkové kanály, napríklad spolu s minoxidilom pri liečení uvedených porúch pokožky a ochlpenia. Vynález si preto kladie za úlohu nájsť zlúčeniny s dostatočnou účinnosťou pri inhibícii izoenzýmu 5a-reduktázy 1.

Doterajší stav techniky

Podstata vynálezu

Niektoré nežiaduce prejavy pozmenených fyziologických funkcií, ako sú akné vulgaris, mazotok, zvýšené ochlpenie u žien a úbytok vlasov androgénneho typu, zahrnujúci pleäatosť ženského a mužského typu a tiež benígna hyperplázia prostaty sú dôsledkom hyperandrogénnej stimulácie, ktorá je spôsobená príliš veľkým nahromadením testosterónu T alebo podobného androgénneho hormónu v metabolickom systéme. Snahy získať prostriedky na potlačenie týchto nežiaducich účinkov viedli k objavu niekoľkých steroidných antiandrogénnych látok, ktoré však tiež mali nežiaduce hormonálne účinky. Napríklad estrogény nielen potlačia účinky androgénov, ale majú tiež feminizačné účinky. Boli vyvinuté aj nesteroidné antiandrogénne látky, napríklad 4^,-nitro-3'-trifluórmetylizobutyranilid, ktorý bol opísaný v publikácii Merri a ďalší, Endocrinol., 192, 91, (2). Tieto produkty síce nemajú hormonálne účinky, avšak dostávajú sa na receptoroch do kompetície so všetkými prírodnými androgénmi, takže vzniká tendencia k feminizácii muža alebo dieťaťa mužského pohlavia pred narodením u tehotných žien a/alebo môže dôjsť k spätnej väzbe a v jej dôsledku k hyperstimulácii činnosti samčích pohlavných žliaz.

Hlavným mediátorom androgénnej účinnosti v niektorých cieľových orgánoch, napríklad v prostate je 5adihydrotestosterón, DHT, ktorý sa tvorí miestne v cieľovom orgáne pôsobením testosterón-5a-reduktázy (ďalej len 5a-reduktáza). Inhibitory tohto enzýmu potom môžu zabrániť alebo zmierniť príznaky hyperandrogénnej stimulácie v uvedených orgánoch, ako bolo opísané zvlášť v US patentových spisoch č. 4 377 584 z 22. marca 1983 a 4 760 071 z 26. júla 1988 (obidva Merck and Co., Inc). Teraz je známe, že existuje ešte druhý izoenzým uvedeného enzýmu, ktorý môže ovplyvniť najmä pokožku a zvlášť pokožku hlavy, ako bolo opísané v publikácii G. Harris a ďalší, Proc. Natl. Acad. Sci., USA, zv. 89, str. 10787 až 10791 (november 1992). Izoenzým, ktorý sa dostáva do interakcie prevažne s pokožkou sa označuje ako 5a-reduktáza 1, zatiaľ čo druhý izoenzým, ktorý pôsobí najmä na tkanivo prostaty, je označovaný ako 5a-reduktáza 2 alebo 5ct-reduktáza typu 2.

Pri liečení stavov, v ktorých hrajú svoju úlohu androgény, napríklad v prípade benígnej hyperplazie prostaty, BPH a/alebo pri prevencii a liečení zhubných nádorov prostaty by bolo žiaduce mať k dispozícii látky, ktoré sú účinné v prostate proti pôsobeniu oboch izoenzýmov tak, aby došlo k podstatnej inhibícii produkcie všetkých dihydrotestosterónových derivátov. Ďalej by bolo žiaduce mať k dispozícii látky, selektívne na inhibíciu 5a-reduktázy 1 na liečenie chorobných stavov pokožky a vlasovej časti hlavy, ako sú akné vulgaris, pleäatosť mužského typu a zvýšené ochlpenie u žien. Okrem toho by bolo možné použiť selektívne inhibitory 5a-reduktázy 1 v kombinácii s inhibítormi 5a-reduktázy 2, ako sú finasterid (Proscar¹¹) pri liečení hyperandrogénnych stavov, ako BPH a/alebo pri prevencii a liečení zhubných nádorov prostaty a na liečenie porúch pokožky, ochlpenia a vlasovej časti hlavy, ako sú akné, maPodstatu vynálezu tvoria 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty všeobecného vzorca (I)

a ich farmaceutický prijateľné soli alebo estery, v ktorých medziuhlíková dvojitá väzba v polohe 1 a 2 môže byť v prípade neprítomnosti prerušovanej čiary aj jednoduchá väzba,

R¹ znamená atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 10 atómami uhlíka,

R² znamená atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 10 atómami uhlíka, jeden zo symbolov

R³ a R⁴ znamená atóm vodíka alebo metyl a druhý znamená

a) aminoskupinu,

b) kyanoskupinu,

c) atóm fluóru,

d) hydroxyskupinu,

e) -C(O)NR^bR^c, kde R^b a R^c nezávisle znamenajú vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, aryl alebo aralkyl s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, ktorá môže byť substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, arylová skupina môže byť substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl,

f) alkyl-X- s 1 až 10 atómami uhlíka v alkylovej časti, s podmienkou, že X nie je -CH(R^e)-,

g) alkenyl-X- s 2 až 10 atómami uhlíka v alkenylovej časti, s podmienkou, že X nie je -CH(R^e)-, pričom alkyl s 1 až 10 atómami uhlíka v prípade f) a alkenyl s 2 až 10 atómami uhlíka v prípade g) môže byť substituovaný 1 až 3 substituentami zo skupiny

i) atóm halogénu, hydroxyskupina, kyanoskupina, nitroskupina, mono-, di- alebo trihalogénmetyl, oxoskupina, hydroxysulfonyl alebo karbonyl, ii) hydroxyalkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, alkyloxyskupina, alkyltioskupina, alkylsulfonyl vždy s 1 až 6 atómami uhlíka, alkyloxykarbonyl s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, pričom alkylové časti týchto zvyškov sú prípadne ešte substituované 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, iii) aryltioskupina, aryl, aryloxyskupina, arylsulfonyl, aryloxykarbonyl, pričom arylové časti sú prípadne ešte substituované 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkyl alebo alkoxyskupina vždy s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, iv) -qOjNRhR⁴, -N(R^b)-C(O)R^Ľ, -NR^, kde R^ba R^cmajú uvedený význam,

h) aryl-X-,

i) heteroaryl-Χ-, kde heteroaryl je 5, 6 alebo 7-členný heteroaromatický kruh, ktorý obsahuje aspoň jeden člen zo skupiny, atóm kyslíka v kruhu, atóm síry v kruhu, 1 až 4 atómy dusíka v kruhu alebo kombináciu týchto členov, pričom heteroaromatický kruh môže byť tiež kondenzovaný s jedným benzénovým alebo ďalším heteroaromatickým kruhom a okrem toho môže byť aryl v prípade h) a heteroaryl v prípade i) substituovaný 1 až 3 substituentami zo skupiny

v) atóm halogénu, hydroxyskupina, kyanoskupina, mono-, di- alebo trihalogénmetyl, mono-, di- alebo trihalogénmetoxyskupina, alkenyl s 2 až 6 atómami uhlíka, cykloalkyl s 3 až 6 atómami uhlíka, formyl, hydrosulfonyl, karbonyl alebo ureidoskupina, vi) alkyl, hydroxyalkyl, alkyloxyskupina, alkyloxyalkyl, alkylkarbonyl, alkylsulfonyl, alkyl tioskupina, alkylsulftnyl, alkylsulfónamido skupina, alkylarylsulfónamidoskupina, alkyloxykarbonyl alebo alkyloxykarbonylalkyl vždy s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylových častiach, RTVN-CfO)-alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, alkanoylaminoalkyl alebo aroylaminoalkyl s alkylovými časťami vždy s I až 6 atómami uhlíka, pričom tieto alkylové časti sú prípadne substituované 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka trifluórmetyl, vii) aryl, aryloxyskupina, arylkarbonyl, aryltio skupina, arylsulfonyl, arylsulfmyl, arylsul fónamidoskupina, aryloxykarbonyl, kde arylová časť je prípadne substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, viii) -C(O)NR^bR^c, -O-C(O)-NR^bR^c, -NjR^-CfOj-R', -NRbR', R^bC(O)-N(R^c)-, kde R^b a R^c majú význam, uvedený v odseku e) alebo -NjRhj-CtOjOR⁸, kde R⁸ znamená alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo aryl, pričom alkylová časť môže byť substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl a arylová časť je prípadne substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkyl alebo alkoxyskupina vždy s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, ďalej -N(R^b)-C(O)-NR^cR^d, kde R^d znamená vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo aryl, pričom alkylová a arylová časť môžu byť substituované spôsobom, uvedeným v odseku e) pre symboly R^b a R^c, ix) heterocyklická skupina, ktorou je 5, 6 alebo 7-členný kruh, obsahujúci aspoň jeden člen zo skupiny atóm kyslíka v kruhu, atóm síry v kruhu, 1 až 4 atómy dusíka v kruhu alebo kombináciu týchto členov, pričom heterocyklický kruh je aromatický, nenasýtený alebo nasýtený a pripadne kondenzovaný s benzénovým kruhom, a prípadne je heterocyklický kruh substituovaný 1 až 3 substituentami tak, ako boli definované v odsekoch v), vi), vii) a viii), s výnimkou heterocyklickej skupiny ix),

j) R³ a R⁴ spoločne tvoria kyslíkový atóm karbonylovej skupiny alebo

k) R³ a R⁴ spoločne tvoria =CH-R⁸, kde R⁸ má význam, uvedený v odseku viii) a

X sa volí zo skupiny

-0-, -S(0)„-, -C(0)-, -CH(R')-, -CfOj-O-’, -C(0)-N(R^e)-, -N(R')-C(O)-0-^lí, -O-C(O)-N(R^C)-^K, -N(R')C(0)-N(R')-, O-CHfR⁰)-*, -N(R')-, kde R' znamená vodík, alkyl s 1 až 3 atómami uhlíka, aryl, arylalkyl s 1 až 3 atómami uhlíka v alkylovej časti alebo heteroaryl, pripadne substituovaný, vo význame z odseku i), pričom ^x znamená väzbu, ktorou je skupina viazaná v polohe 16 vo všeobecnom vzorci (I) a n znamená celé číslo 0,1 alebo 2.

Kombinácie substituentov a/alebo iných častí molekuly sú prípustné v tých prípadoch, v ktorých je výsledkom týchto kombinácií stála zlúčenina.

Vhodným uskutočnením vynálezu sú deriváty všeobecného vzorca (I), v ktorom R* znamená atóm vodíka alebo metyl a R² znamená atóm vodíka alebo metyl.

Ďalšie uskutočnenie vynálezu tvoria deriváty všeobecného vzorca (I), v ktorom jeden zo symbolov

R³ a R⁴ znamená atóm vodíka alebo metyl a druhý znamená

b) kyanoskupinu,

c) atóm fluóru,

d) hydroxyskupinu,

f) alkyl-X- s 1 až 10 atómami uhlíka v alkylovej časti, kde alkylová časť je prípadne substituovaná arylovou skupinou a arylová časť môže byť substituovaná 1 až 2 substituentami zo skupiny atóm halogénu alebo alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, s podmienkou, že X nie je -CH(R^e)-,

g) alkenyl-X- s 2 až 10 atómami uhlíka v alkenylovej časti, s podmienkou, že X nie je -CH(R')-,

h) aryl-X-,

i) heteroaryl-Χ-, kde heteroaryl je 5 alebo 6-členný heteroaromatický kruh, ktorý obsahuje 1 až 2 atómy dusíka v kruhu a arylová skupina v prípade h) a heteroarylová skupina v prípade i) je pripadne substituovaná jedným alebo dvoma substituentami zo skupiny

x) atóm halogénu, kyanoskupina, nitroskupina, trihalogénmetyl, trihalogénmetoxyskupina, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, aryl, alkylsulfonyl s 1 až 6 atómami uhlika alebo alkylarylsulfónaminoskupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, xi) -NR^bR^c alebo R^b-C(O)-N(R^c)-, kde R^b a R^c nezávisle, znamenajú vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, aryl alebo arylalkyl s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, pričom alkylová časť môže byť substituovaná 1 až 3 substituentamizo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl a arylová časť je prípadne subj stituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu^ alkyl alebo alkoxyskupina vždy s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, xii) heterocyklickú skupinu s piatimi členmi v aromatickom kruhu, obsahujúcu jeden dusíka v kruhu alebo 1 atóm dusíka a 1 atóm kyslíka v kruhu a

j) R³ a R⁴ spoločne tvoria kyslíkový atóm karbonylovej skupiny,

X sa volí zo skupiny

-0-, -S(0)„-, -CH(R')-, -C(0)-N(R^e)-^x, -O-CfOl-NtR')-, kde R^e znamená vodík, alkyl s 1 až 3 atómami uhlíka, aryl alebo arylalkyl s 1 až 3 atómami uhlíka v alkylovej časti, ^x znamená väzbu, ktorou je skupina pripojená v polohe 16 všeobecného vzorca (I) a n znamená celé číslo O alebo 2.

Z nových derivátov podľa vynálezu podľa tohto uskutočnenia je možné uviesť napríklad nasledujúce zlúčeniny: 4-aza-4,7p-dimetyl-5a-androstan-3,16-dión, 4-aza-4-metyl-5a-androstan-3,16-dión,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16p-hydroxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16p-(benzylaminokarbonyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-benzoylamino-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16p-metoxy-5a-androstan, 3 -oxo-4-aza-4-metyl-16P-alyloxy-5 a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-(n-propyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-hydroxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-(fenoxy)-5a-androstan, 3 -oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(fenoxy)-5a-androst-1 -en,

3-oxo-4-aza-4-metyl-6a-metoxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16p-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan, 3-oxo~4-aza-7p-metyl-16p-(4-chlórfenoxy)-5a-androst-1 -en, 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-7p-metyl-16p-(3-chlór-4-metylfenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(4-metylfenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-7p-metyl-16P-(4-metylfenoxy)-5a-androst-l-en,

3-oxo-4-aza-7p-metyl-16p-[4-(l-pyrol)fenoxy]-5a-androst-1-en,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-hydroxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-mctoxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-alyloxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(3,3-dimetylalyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(n-propyloxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(izo-pentoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,16a-dimetyl-16P-hydroxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-etyloxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-benzyloxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7 β-dimetyl-16a-hydroxy-5 a-androstan, 3 -oxo-4-aza-4,7 β-dimetyl-16 β-metylti o-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(n-propyltio)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-íluór-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-kyano-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-(l-hexyl)-5ci-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimctyl-16p-(n-propyl)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-benzyl-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-(4-chlórbenzyl)-5a-andtOStan,

3-oxo-4-aza-4,16a-dimctyl-l 6P-metoxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-kyanofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-di mety 1-16 β-(3 -kyanofenoxy)-5 α-androstan,

3-oxo-4-aza-4,73-dimetyl-16p-(4-nitrorenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(l-naftyloxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(3-chlór-4-metylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(4-metylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(terc.-butyloxy)-5cc-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(3-metyl-1 -butyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16a-(n-propyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,73-dimetyl-16p-(4-trifluórmetylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(4-trifluórmetoxyfenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-etyltio-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-etylsulfonyl-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,73-dimetyl-l6p-(4-metylsulfonylfenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-[4-(4-tolylsulfonylamino)-fenoxy] -5 a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(3-pyridyloxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-[(4-fenyl)fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-fluórfenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(2-pyrazinyloxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-[4-(5-oxazolyl)fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(2-pyrimidinyloxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-[4-(l-pyryl)fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-aminofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-163-(4-acetylaminofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-(4-benzyoylaminofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-(fenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(2-chlórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(3-chlórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-chlórfenoxy)-5a-androst-1-en, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16-(4-chlórbenzylidén)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16-benzylidén-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16-(4-metylbenzylidén)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16-(4-chlórbenzyl)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16-(4-metylbenzyl)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16-(3-pyridylmetyl)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16a-(metánsulfonyl)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-tiofenoxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-chlórtiofenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-fluórtiofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(4-metyltiofenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-metoxytiofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-fenylsulfmyl-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-fenylsulfonyl-5 a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p, 16a-trimetyl- 16p-(4-trifluórmetylfenoxy)-5 a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p, 16a-trimetyl-l 6P-hydroxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P, 16a-trimetyl-l 63-metoxy-5a-androstan, a farmaceutický prijateľné soli týchto látok a ich analógy, v ktorých medziuhlíková väzba v polohe 1 a 2 je dvojitá väzba, v ktorých R¹ znamená atóm vodíka a/alebo R² znamená atóm vodíka alebo metyl.

Ďalším uskutočnením vynálezu sú deriváty všeobecného vzorca (I), v ktorých medziuhlíková väzba v polohe 1 a 2 je jednoduchá väzba, R¹ znamená metyl, R² znamená metyl, R³ znamená nesubstituovanú alebo substituovanú aryloxyskupinu a R⁴ znamená vodík.

Ďalej budú uvedené ďalšie príklady zlúčenín podľa vynálezu, patriace do tohto uskutočnenia.

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-kyanofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(3-kyanofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-nitrofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16β-( 1 -naftyloxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(3-chlór-4-metylfenoxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-metylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-trifluórmetylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-trifluórmetoxyfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-(4-metylsulfonylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-[4-(4-tolylsulfonylamino)-fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-[(4-fenyl)fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-fluórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-[4-(5-oxazolyl)fenoxy]-5ot-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16β-[4-( 1 -pyryl)fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(4-aminofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-(4-acetylaminofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-benzoylaminofenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-(fenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(2-chlórfenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(3-chlórfenoxy)-5a-androstan, a farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.

Cenným derivátom všeobecného vzorca (I) je 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.

Pod pojmom „alkyl“ sa v priebehu prihlášky rozumie nasýtený alifatický uhľovodíkový zvyšok s priamym alebo rozvetveným reťazcom s uvedeným počtom uhlíkových atómov, napríklad metyl (Me), etyl (Et), propyl, butyl, pentyl, hexyl, heptyl, oktyl, nonyl, decyl, izopropyl (i-Pr), izobutyl (i-Bu), terc.butyl (t-Bu), sek.butyl (s-Bu), izopentyl a podobne. Alkoxylová skupina alebo alkyloxyskupina je alkylová skupina s uvedeným počtom uhlíkových atómov, viazaná cez kyslíkový mostík, ako metoxyskupina, etoxyskupina, propyloxyskupina a podobne. Alkenyl je uhľovodíková skupina s priamym alebo rozvetveným reťazcom s najmenej jednou medziuhlíkovou dvojitou väzbou, ktorá sa môže nachádzať v ktorejkoľvek stálej polohe v priebehu reťazca, ako etenyl, propenyl alebo alyl, butenyl, pentenyl a podobne. Vynález zahrnuje aj všetky diastereoméry E a Z výsledných derivátov.

Alkylové a alkcnylové skupiny sú nesubstituované alebo môžu byť substituované najmenej jedným substituentom, výhodne 1 až 3 substituentami zo skupiny

i) atóm halogénu, hydroxyskupina, kyanoskupina, nitroskupina, mono-, di- alebo trihalogénmetyl, oxoskupina, hydroxysulfonyl alebo karboxyskupina, ii) hydroxyalkyl, alkyloxyskupina, alkyltioskupina, alkylsulfonyl alebo alkoxykarbonyl s alkylovými časťami vždy s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom tieto alkylové časti sú prípadne ďalej substituované 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, iii) aryltioskupina, aryl, aryloxyskupina, arylsulfonyl, aryloxykarbonyl, v týchto zvyškoch môže byť arylová časť ďalej substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkyl alebo alkoxyskupina vždy s 1 až 4 atómami uhlika alebo trifluórmetyl, iv) -C(O)NR^bR^c, -N(Rj-C(O)-R^c, -NR^bR^c, kde R^b a R^cmajú uvedený význam a atómom halogénu je fluór, chlór, bróm alebo jód.

Pod pojmom „oxo“ sa rozumie oxoskupina, ktorá môže byť uložená v akejkoľvek stálej polohe v priebehu uhlíkového reťazca za vzniku formylovej skupiny v prípade, že sa nachádza na konci reťazca alebo za vzniku acylovej alebo aroylovej skupiny v prípade, že sa nachádza na inom mieste v priebehu reťazca.

Pod pojmom „aiyl“, napríklad aryl so 6 až 10 atómami uhlíka sa rozumie fenyl alebo nafty 1, vrátane skupín, ako sú 1-nafty 1 alebo 2-naftyl, pričom tieto skupiny sú prípadne substituované uvedeným spôsobom.

Pod pojmom „heteroaryľ sa rozumie 5-, 6- alebo 7-členný heteroaromatický zvyšok, obsahujúci aspoň jeden člen zo skupiny 1 atóm kyslíka v kruhu, 1 atóm síry v kruhu, 1 až 4 atómy dusíka v kruhu alebo kombináciu týchto členov, pričom heteroarylový kruh môže byť kondenzoval ný s jedným benzénovým kruhom alebo ďalším heteroaró, matickým kruhom. Tieto skupiny zahrnujú nasledujúce nesubstituované alebo substituované (ako bude ďalej opísané) heteroaromatické kruhy: pyridyl, furyl, pyryl, tienyl, izotia_:zolyl, imidazolyl, benzimidazolyl, tetrazolyl, pyrazinyl, pyrimidyl, chinolyl, chinazolinyl, izochinolyl, benzofiiryl, izobenzofuryl, benzotienyl, pyrazolyl, indolyl, izoindolyl, purinyl, karbazolyl, izoxazolyl, tiazolyl, izotiazolyl, oxazolyl, benztiazolyl a benzoxazolyl. Heteroarylový kruh môže byť spojený so štruktúrnym vzorcom (I) cez heteroatóm, napríklad atóm dusíka alebo cez uhlíkový atóm v kruhu za vzniku stálej štruktúry. Heteroarylový kruh môže tiež byť kondenzovaný s benzénovým kruhom.

Pokiaľ ide o substituenty na arylovej skupine so 6 až 10 atómami uhlika alebo na heteroarylovom kruhu, môže ísť o 1 až 3, výhodne 1 až 2 substituenty, ktoré sa nezávisle volia z nasledujúcich skupín:

v) atóm halogénu, hydroxyskupina, kyanoskupina, nitroskupina, mono-, di- alebo trihalogénmetyl, mono-, di- alebo trihalogénmetoxyskupina, alkenyl s 2 až 6 atómami uhlíka, cykloalkyl s 3 až 6 atómami uhlíka, formyl, hydrogénsulfonyl, karboxyskupina alebo ureidoskupina, vi) alkyl, hydroxyalkyl, alkoxyskupina, alkoxyalkyl, alkylkarbonyl, alkylsulfónamidoskupina, alkylarylsulfónamidoskupina, alkoxykarbonyl alebo alkoxykarbonylalkyl vždy s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylových častiach, R^bR^cN-C(O)-alkyl s 1 až 6 atómami uhlika v alkylovej časti, alkanoylaminoalkyl alebo aroylaminoalkyl s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylových častiach, pričom alkylové skupiny môžu byť substituované s 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, vii) aryl, aryloxyskupina, arylkarbonyl, aryltioskupina, arylsulfonyl, arylsulfmyl, arylsulfónamidoskupina, aryloxykarbonyl, pričom arylová časť je prípadne substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkyl alebo alkoxyskupina vždy s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, viii) -QOjNR^, -O-QOj-NR'R⁰, -NlRhj-aCO-R⁰, -NR^bR^c alebo R^b-C(O)-N(R^c)-, kde R^b a R^c majú význam, uvedený v odseku d), ďalej -11^)-0(0)-(^, kde R^c znamená alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo aryl alebo tiež -NÍRhj-CíOj-NR'R“¹, pričom R^d znamená vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo aryl a alkylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a arylové skupiny sú prípadne substituované spôsobom, ktoiý bol opísaný pre symboly R^b a R^c v odseku d), ix) heterocyklická skupina, a to 5, 6 alebo 7-členná kruhová skupina, obsahujúca aspoň jeden člen zo skupiny 1 atóm kyslíka v kruhu, 1 atóm síry v kruhu, 1 až 4 atómy dusíka v kruhu alebo kombináciu týchto členov, pričom heterocyklický kruh je aromatický, nenasýtený alebo nasýtený a je prípadne kondenzovaný s benzénovým kruhom a prípadne substituovaný 1 až 3 substituentami, uvedenými v odsekoch

v), vi), vii) a viii), s výnimkou heterocyklickej skupiny vo význame ix).

Kondenzované heteroaromatické kruhové systémy zahrnujú purín, imidazoimidazol, imidazotiazol, pyridopyrimidín, pyridopyridazín, pyrimidopyrimidín, imidazopyridazín, pyrolopyridín, imidazopyridín a podobne.

Pod pojmom „heterocyklická skupina“ sú zahrnuté uvedené plne nenasýtené heteroarylové kruhy a tiež ich zodpovedajúce dihydro-, tetrahydro- a hexahydroderiváty, takže vznikajú čiastočne nenasýtené a plne nasýtené kruhové systémy. Ako príklady je možné uviesť dihydroimidazolyl, dihydrooxazolyl, díhydropyridyl, tetrahydrofúryl, dihydropyril, tetrahydrotienyl, dihydroizotiazolyl, 1,2-dihydrobenzimidazolyl, 1,2-dihydrotetrazolyl, 1,2-dihydropyrazinyl, 1,2-dihydropyrimidyl, 1,2-dihydrochinolyl, 1,2,3,4-tetrahydroizochinolyl, 1,2,3,4-tetrahydrobenzofuryl, 1,2,3,4-tetrahydroizobenzofuryl, 1,2,3,4-tetrahydrobenzotienyl, 1,2,3,4-tetrahydropyrazolyl, 1,2,3,4-tetrahydroindolyl, 1,2,3,4-tetrahydroizoindolyl, 1,2,3,4-tetrahydropurinyl, 1,2,3,4-tetrahydrokarbazolyl, 1,2,3,4-tetrahydroizoxazolyl, 1,2,3,4-tetrahydrotiazolyl, 1,2,3,4-tetrahydrooxazolyl, 1,2,3,4-tetrahydrobenztiazolyl, 1,2,3,4-tetrahydrobenzoxazolyl a podobne.

Heterocyklická skupina môže byť substituovaná rovnakým spôsobom ako uvedená heteroarylová skupina.

V prípade, že sa u alkylových, alkenylových skupín, alkoskupín, arylových skupín alebo heteroarylových skupín uvádza určitý počet uhlíkových atómov, napríklad 1 až 10 atómov uhlíka, ide o nezávisle uvedený počet uhlíkových atómov, takže v prípade, že sa skupina v molekule vyskytuje viackrát, môže mať zakaždým odlišný počet uhlíkových atómov.

Do vynálezu sú zahrnuté aj farmaceutický prijateľné soli zlúčenín všeobecného vzorca (I) v prípade, že sa v štruktúre nachádza bázická alebo kyslá skupina. V prípade, že molekula obsahuje kyslú skupinu, napríklad karboxylovú skupinu, je možné na použitie v liekových formách vytvoriť napríklad amónne, sodné, draselné, vápenaté a podobné soli. V prípade, že je v molekule prítomná bázická skupina, napríklad aminoskupina alebo bázický heteroarylový zvyšok, ako 4-pyridyl, je možné vytvoriť na použitie v liekových formách adičné soli s kyselinami, ako hydrochloridy, hydrobromidy, octany, pamoáty a podobne.

V prípade, že molekula obsahuje karboxylovú skupinu, je možné vytvárať aj farmaceutický prijateľné estery, napríklad alkylestery s alkylovou časťou s 1 až 5 atómami uhlíka, pivaloyloxyetylester a podobne a tiež také estery, o ktorých je známe, že modifikujú rozpustnosť alebo mož nosť hydrolýzy, tieto estery sú vhodné ako prekurzory alebo na použitie vo farmaceutických prostriedkoch s predĺženým uvoľnením účinnej látky.

Ako príklad vhodných solí je možné uviesť acetáty, laktobionát, benzénsulfonát, laurát, benzoát, malát, hydrogenuhličitan, maleát, hydrogensíran, soľ kyseliny mandľovej, hydrogentartrát, mesylát, boritan, metylbromid, bromid, metylnitrát, ededát vápenatý, metylsulfát, camsylát, soli kyseliny slížovej, uhličitan napsylát, chlorid, nitrát, klavulanát, N-metylglukamín, citrát, ďalej je možné vytvoriť amóniové soli, dihydrochlorid, oleát, ededát, oxalát, edisylát, pamoát, embonát, estolát, palmitát, esylát, pantotenát, fumarát, zmes fosfátu a hydrogenfosfátu, gluceptát, polygalakturonát, glukonát, salicylát, glutamát, stearát, glykolylarsanilát, sulfát, hexylresorcinát, subacetát, soľ s hydrabamínom, sukcinát, hydrobromid, tanát, hydrochlorid, tartrát, hydroxynaftoát, teoklát, jodid, tosylát, izotionát, trietijodid, laktát a valerát.

Okrem toho niektoré zlúčeniny podľa vynálezu môžu vytvárať solváty s vodou alebo s bežnými organickými rozpúšťadlami. Tieto solváty taktiež patria do rozsahu vynálezu.

Pod pojmom „účinné množstvo“ sa rozumie, že určité množstvo účinnej látky alebo farmaceutického prostriedku vyvolá biologický alebo liečebný účinok v tkanive alebo v systéme živočícha alebo človeka.

Deriváty podľa vynálezu obsahujú stredy chirality a môžu sa teda vyskytovať ako racemáty, racemické zmesi alebo tiež ako jednotlivé enantioméry alebo diastereoméry, pričom vynález zahrnuje všetky izoméme formy týchto zlúčenín a ich zmesi. Okrem toho môžu niektoré kryštalické formy zlúčenín podľa vynálezu existovať v polymorfných formách, tiež tieto formy sú do rozsahu vynálezu zahrnuté.

Deriváty podľa vynálezu je možné použiť na liečebné účely, najmä na liečenie hyperandrogénnych stavov, ako sú plešatosť mužského typu, akné, mazotok a nežiaduce ochlpenia u žien, na tento účel sa zlúčeniny podľa vynálezu podávajú perorálne, parenterálne alebo miestne ako také alebo v kombinácii s inhibítormi 5a-reduktázy 2 a/alebo v kombinácii s látkami, otvárajúcimi draslíkové kanály, ako je minoxidil, s antiandrogénmi, ako je flutamid, s retinoidmi, ako sú tretinoín alebo izotretinoín a s antagonistami receptorov a-1, ako je terazocín.

Zlúčeniny podľa vynálezu jc možné použiť nielen na liečenie plešatosti a na podporu rastu vlasov, ale aj na liečenie benígnej hyperplázie prostaty, prostatitídy a na liečenie a/alebo na prevenciu zhubných nádorov prostaty, na tento účel sa uvedené látky podávajú systemicky perorálne alebo parenterálne ako také alebo v kombinácii s inhibítormi 5a-reduktázy-2.

Podstatu vynálezu tvoria aj farmaceutické prostriedky, určené na miestne, systemické perorálne a parenterálne podanie na uvedený účel. Prostriedky, ktoré obsahujú ako svoju účinnú zložku zlúčeniny podľa vynálezu a sú určené na liečenie uvedených hyperandrogénnych chorobných stavov, je možné podávať v širokom rozmedzí liekových foriem, tak ako sú tieto formy bežné v prípade systemického podania. Je napríklad možné použiť bežné liekové formy, ako sú tablety, kapsuly, v oboch prípadoch s okamžitým aj spomaleným uvoľnením účinnej látky, ďalej pilulky, prášky, granuláty, elixíry, tinktúry, roztoky, suspenzie, sirupy a emulzie alebo môže tiež isť o injekčné podanie. Zlúčeniny je možné podávať vnútrožilovo jednorázovo alebo v infúzii, intraperitoneálne, podkožné, vnútrosvalovo alebo miestne pri použití bežne známych liekových foriem.

Farmaceutické prostriedky podľa vynálezu obsahujú farmaceutický prijateľný nosič a účinné množstvo derivátov všeobecného vzorca (I). Okrem toho môžu tieto prostriedky obsahovať ešte:

1. účinné množstvo inhibítorov 5a-reduktázy 2 alebo jej farmaceutický prijateľnej soli, napríklad finasteridu, epristeridu alebo turosteridu,

2. účinné množstvo látky, otvárajúce draslíkové kanály alebo jej farmaceutickej soli, ako je minoxidil,

3. účinné množstvo retinoidu alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli, ako tretinoinu alebo izotretinoínu,

4. účinné množstvo antiandrogénnej látky alebo jej farmaceutický prijateľnej soli, napríklad flutamidu, spironolaktónu alebo kasodexu.

Denná dávka derivátu podľa vynálezu sa môže pohybovať v rozmedzí 0,1 až 1000 mg denne pre dospelého človeka. V prípade perorálneho podania sa účinná látka výhodne podáva vo forme tabliet, prípadne vybavených deliacou ryhou a obsahujúcich napríklad 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0 alebo 50,0 mg účinnej látky tak, aby bolo možné ľahko upraviť vhodnú dávku na základe príznakov chorobného stavu u každého chorého. Obvykle sa používa dávka 0,002 až 50 mg/kg hmotnosti denne, výhodné rozmedzie je 0,01 až 7 mg/kg denne.

Zlúčeniny podľa vynálezu je výhodne možné podávať v jedinej dávke denne alebo je možné celkovú dennú dávku podať rozdelene vo forme 2, 3 alebo 4 denných dávok. Okrem toho je možné zlúčeniny podľa vynálezu podávať do nosa spolu s nosičom, vhodným na toto použitie alebo transdermálne použitím náplastí, ktoré sú v danej oblasti techniky známe a z ktorých sa účinná látka môže vstrebávať. V prípade transdermálneho podania ide skôr o kontinuálne podanie než o podanie vo forme jednotlivých čiastkových dávok v priebehu dňa.

Pri liečení alopécie vrátane plešatosti mužského typu, akné, mazotoku a nežiaduceho ochlpenia u žien, je možné deriváty podľa vynálezu podávať vo forme farmaceutického prostriedku, ktorý obsahuje účinnú zložku v kombinácii s farmaceutický prijateľným nosičom, vhodným na miestne podanie. Môže napríklad ísť o roztoky, krémy, masti, gély, lotióny, šampóny alebo o prostriedky typu aerosólu na nanášanie na pokožku. Tieto farmaceutické prostriedky na miestne podanie budú obvykle obsahovať deriváty podľa vynálezu v koncentrácii 0,001 až 15 % hmotnostných, okrem toho budú obsahovať farmaceutický prijateľný nosič.

V prípade liečenia akné, alopécie vrátane plešatosti mužského typu, mazotoku, nežiaduceho ochlpenia u žien, benígnej hyperplazie prostaty, prostatitídy a v prípade prevencie a/alebo liečenia zhubných nádorov prostaty, je možné použiť deriváty podľa vynálezu ako také alebo v kombinácii s účinným množstvom inhibítorov 5a-reduktázy 2, napríklad v kombinácii s fmasteridom, pričom môže ísť o systemické perorálne alebo parenterálne podanie. V prípade porúch, súvisiacich so stavom pokožky a ochlpenia, napríklad v prípade akné, plešatosti mužského typu, pri mazotoku a ochlpení u žien, je možné spracovať deriváty podľa vynálezu spolu s inhibítorom 5a-reduktázy 2 na miestne podanie. Je možné uskutočniť aj kombinovanie liečenia tak, že sa derivát všeobecného vzorca (I) a inhibítor 5a-reduktázy 3 podávajú oddelene perorálne, parenterálne alebo miestne. Je napríklad možné podávať deriváty vzorca (I) a finasterid spoločne perorálne alebo miestne alebo je možné každú z týchto účinných látok podať oddelene, napríklad v oddelenej liekovej forme na perorálne podanie alebo je možné podať perorálne finasterid a miestne derivát všeobecného vzorca (I). Pokiaľ ide o dávky a vhodné liekové formy pre inhibítory 5a-reduktázy, je možné príslušné ú daje nájsť v US patentových spisoch č. 4 377 584 a 4 760 071. V prípade, že sa účinné látky podávajú v odlišných liekových formách, je možné ich podávať súčasne alebo následne v určitom časovom odstupe.

Z inhibítorov 5a-reduktázy 2, použiteľných na uvedený účel je možné uviesť napríklad nasledujúce látky: kyselina 17p-(N-terc.-butylkarbamoyl)-androsta-3,5-dien-3-karboxylová (episterid, SmithKline and Beecham, SKF 105657), táto látka bola opísaná v medzinárodných patentových spisoch WO9113550 a WO9319758 a 17P-[N-izopropyl-N-(izopropylkarbamoyl)-karbamoyl]-4-metyl-4-aza-5a-androstan-3-on (turosterid, Farmitalia, FCE 26073), táto látka bola opísaná spolu so svojimi derivátmi v US patentovom spise č. 5 155 107.

Ďalej je možné deriváty podľa vynálezu podávať v kombinácii s účinným množstvom zlúčeniny, určenej na otváranie draslíkových kanálov, použiť je možné napríklad minoxidil, cromakalín, pinacidil, zlúčeniny odvodené od S-triazínu, tian-l-oxid, benzopyrán a pyridínpyranové deriváty alebo ich farmaceutický prijateľné soli, najmä v prípade plešatosti mužského typu. Obe účinné látky je potom možné spracovať na jediný prostriedok na miestne podanie alebo je možné obe účinné látky podávať oddelene, napríklad vo forme odlišných farmaceutických prostriedkov na miestne podanie alebo je možné perorálne podávať deriváty všeobecného vzorca (I) a miestne podávať napríklad minoxidil. Liekové formy a dávky, vhodné pre látky, otvárajúce draslíkové kanály boli uvedené napríklad v US patentových spisoch č. 4 596 812, 4 139 619 a v medzinárodnom patentovom spise č. WO 92/02225, zverejnenom 20. februára. 1992. Aj keď sa obe látky podávajú v odlišných farmaceutických prostriedkoch, jc možné ich podávať súčasne alebo aj v určitom časovom odstupe. j.·

Okrem toho je možné v prípade akné a/alebo plešatosti; mužského typu použiť kombinované liečenie tak, že sa podáva účinné množstvo derivátov všeobecného vzorca (I),prípadne v kombinácii s inhibítorom 5a-reduktázy 2 a prípadne ešte v kombinácii s účinným množstvom retinoidu; napríklad tretinoinu (Retin A) alebo izotretinoínu (Accutane, Roche), tieto látky boli opísané v US patentových spisoch č. 3 006 939, 3 746 730 a 4 556 518.

V prípade liečenia akné vulgaris, plešatosti mužského typu, mazotoku, ochlpenia u žien, benígnej hyperplazie prostaty alebo prostatitídy a pri prevencii a/alebo liečení zhubných nádorov prostaty je možné použiť kombinované liečenie tak, že sa podáva účinné množstvo derivátov všeobecného vzorca (I) spolu s účinným množstvom antiandrogénnych látok, ako sú flutamid, spironolaktón alebo kasodex.

Uvedeným spôsobom je možné dosiahnuť inhibíciu biosyntetickej premeny testosterónu na dihydrotestosterón u cicavcov vrátane človeka, veľmi výhodné je podávať cicavcom súčasne účinné množstvo derivátu všeobecného vzorca (I), prípadne v kombinácii s inhibítorom 5a-reduktázy 2.

Dávkovanie derivátu podľa vynálezu sa volí v súlade s celým radom faktorov, ako sú vek, hmotnosť, pohlavie a celkový stav chorého, závažnosť liečeného ochorenia, spôsob podávania, obličkové a pečeňové funkcie chorého, do úvahy je potrebné brať aj zvolený derivát. Účinné množstvo každého derivátu zvolí ošetrujúci lekár alebo veterinár aj v závislosti od toho, či je derivát použitý na liečebné účely alebo na prevenciu. Optimálna dávka je taká dávka, pri ktorej je možné dosiahnuť požadovaný účinok, avšak ešte sa nevyskytujú príznaky toxicity. Je teda nutné brať do úvahy biologickú dostupnosť účinnej látky v mieste, kde má pôsobiť jej distribúciu a jej vylučovanie.

SK 281645 Β6

Ako už bolo uvedené, účinné látky podľa vynálezu sa obvykle podávajú v zmesi s farmaceutickými riedidlami, pomocnými látkami alebo nosičmi na spracovanie na tablety na perorálne podanie, na kapsuly, elixíry, sirupy a podobne spôsobom, bežným vo farmaceutickom priemysle.

Napríklad v prípade tablety alebo kapsuly na perorálne podanie je možné účinnú látku miešať s inertným nosičom, ktorý je netoxický a vhodný na perorálne podanie, ako je etanol, glycerol, voda a podobne. V prípade potreby je možné použiť spojivá, klzné látky, dezintegračné činidlá a ferbivá. Vhodným spojivom je napríklad škrob, želatína, prírodné cukry, ako glukóza alebo β-laktóza, kukuričný sirup, prírodné a syntetické gumy, napríklad z akácie, tragakantu a podobne, ďalej môže ísť o alginát sodný, karboxymetylcelulózu, polyetylénglykol, vosky a podobne. Z klzných látok je možné uviesť napríklad oleát sodný, stearát sodný, stearát horečnatý, benzoát sodný, octan sodný, chlorid sodný a podobne. Z dezintegračných činidiel je možné použiť napríklad škrob, metylcelulózu, agar, bentonit, xantánovú gumu a podobne.

V kvapalných formách je možné použiť suspenzné alebo disperzné činidlá, napríklad syntetické a prírodné gumy, napríklad z tragakantu alebo akácie, ďalej metylcelulózu a podobne. Použiť je možné aj glycerol a podobné látky. Na parenterálne podanie sú vhodné sterilné suspenzie a roztoky. Na vnútrožilové podanie sú vhodné izotonické prostriedky, ktoré zvyčajne obsahujú vhodné konzervačné činidlo.

Prostriedky na miestne podanie obsahujú účinnú látku v zmesi s rôznymi známymi nosnými alebo pomocnými látkami, ide napríklad o alkoholy, gél z aloe, alantoín, glycerol, olej s obsahom vitamínu A a E, minerálne oleje, PPG2, myristylpropionát a podobne, výsledné prostriedky môžu mať napríklad formu roztokov v alkohole, čistiacich krémov, gélov, suspenzií a tiež šampónov typu krémov alebo gélov, tieto prostriedky boli opísané napríklad v EP 285 382, pokiaľ ide o ich vhodné všeobecné zloženie.

Deriváty podľa vynálezu je možné podávať aj vo forme lipozómov. Môže ísť o malé unilameláme útvary, veľké unilameláme guľovité útvary alebo multilameláme guľovité útvary. Lipozómy je možné vytvoriť použitím rôznych fosfolipidov, napríklad cholesterolu, stearylamínu alebo fosfatidyl cholínu.

Deriváty podľa vynálezu je možné dopravovať na miesto určenia aj použitím monoklonálnych protilátok ako nosičov, na ktoré sú molekuly týchto derivátov viazané. Deriváty podľa vynálezu je možné tiež viazať na rozpustné polyméry ako na nosiče, ktoré je možné účelne dopraviť na potrebné miesto určenia. Z vhodných polymérov je možné uviesť polyvinylpyrolidón, pyranové kopolyméry, konjugát polyhydroxypropylmetakrylamidu a fenolu, polyhydroxyetylaspartamidofenol alebo polyetylénoxidpolylyzín, substituovaný palmitoylovými zvyškami. Okrem toho je možné deriváty podľa vynálezu viazať na skupinu biologicky degradovateľných polymérov, použiteľných na dosiahnutie riadeného uvoľnenia účinnej látky, ide napríklad o kyselinu polymliečnu, o polyepsilónkaprolaktón, kyselinu polyhydroxymaslovú, polyortoestery, polyacetály, polydihydropyrány, polykyanoakryláty a zosietené alebo amfipatické blokové kopolyméry hydrogélov.

Deriváty podľa vynálezu je možné ľahko pripraviť rôznymi postupmi, ktoré sú uvedené v nasledujúcich reakčných schémach a v jednotlivých príkladoch, alebo je možné tieto postupy modifikovať použitím ľahko dostupných východiskových látok, reakčných činidiel a bežných syntetických postupov. Pri týchto reakciách je možné využiť aj rôzne známe varianty, ktoré v týchto postupoch nie sú vy slovene podrobnejšie uvedené. Špecifické definície jednotlivých symbolov v schémach, napríklad R = CH₃ sú, uvedené len na ilustráciu a postup nemá byť na tieto významy obmedzený. V schémach sú uvedené nasledujúce skratky: pH = fenyl, Ac = acyl, t-Bu = tere.-butyl, Et = etyl, Me = = metyl, i-Am = izoamyl a EtOAc = etylacetát.

Inhibítory je možné podľa schémy 1 pripraviť nasledujúcim spôsobom. Najskôr sa premení 4-aza-8-metyl-5ot-androstan-3,17-dión A na izomémy 3,16-dión vzorca (1) nasledujúcimi reakciami: 1. na A sa pôsobí izoamylnitrilom v tere.-butanole v prítomnosti tere.-butoxidu draslíka, čím sa ako medziprodukt získa 16-oximino-17-ketón, 2. 17-ketoskupina tejto látky sa redukuje pôsobením hydrazínhydrátu a hydroxidu draselného v etylénglykole pri vyššej teplote za vzniku 16-oxímu vzorca B a potom sa 3. odštiepi 16-oximinoskupina zo zlúčeniny B hydrolýzou pôsobením vodného roztoku kyseliny pri vyššej teplote alebo hydrogénsiričitanom sodným a potom sa zmes spracováva vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, čím sa získa derivát vzorca (1). Redukciu 16-ketónu vzorca (1) na Ιόβ-alkohol vzorca (2) je možné uskutočniť použitím vhodného redukčného činidla na báze hydridu, napríklad hydroborátu sodného v metanole alebo lítiumtrisek.butylhydroborátu v tetrahydrofuráne, THF. Alkohol vzorca (2) sa potom premení na alkyléterové deriváty vzorca (3) a (4) tak, že sa najskôr vytvorí alkoxidový anión pôsobením hydridu draslíka v Ν,Ν-dimetylformamide, DMF alebo pôsobením hydroxidu draselného v dimetylsulfoxide, DMSO a potom sa uskutoční adícia príslušného alkylbromidu alebo alkyljodidu. 160-(n-propyloxy)-derivát vzorca (5) sa pripraví z prekurzora, 16P-(alyloxy)-derivát vzorca (4) sa pripraví katalytickou hydrogenáciou.

Inhibítory je tiež možné podľa schémy 2 pripraviť tak, že sa 16-oxim B premení na Ιόβ-amín C katalytickou hydrogenáciou v prítomnosti heterogénneho katalyzátora, napríklad oxidu platiny vo vodnej kyseline octovej. Acyláciu zlúčeniny C je možné uskutočniť pôsobením príslušného anhydridu alebo chloridu kyseliny v prítomnosti látky, schopnej viazať kyselinu, napríklad pyridínu, trietylamínu alebo 4-dimetylaminopyridínu, DMAP. Týmto spôsobom je možné pripraviť zlúčeniny 6 a 7. Karbamáty, napríklad zlúčeninu 8 zo schémy 3 je možné získať tak, že sa na alkohol vzorca (2) pôsobí príslušným izokyanátom v prítomnosti organickej bázy, napríklad trietylamínu, pyridínu alebo 4-dimetylaminopyridínu.

Inhibítory, opísané v schéme 4 je možné pripraviť tým spôsobom, že sa Ιόβ-alkohol vzorca (2) premení na 16-alfa-alkohol vzorca (9) pôsobením kyseliny 4-nitrobenzoovej v prítomnosti dietylazadikarboxylátu, DEAD a trifenylfosfínu za vzniku medziproduktu, 16a-(p-nitrobenzoátjesteru D s následnou hydrolýzou pôsobením vodnej bázy v príslušnom alkohole. Alkylácia zlúčeniny vzorca (9) sa vykoná analogickým spôsobom s použitím alkoholu vzorca (2), získajú sa požadované 16a-alkylétery, napríklad 16a-metoxyderivát, ktorý je znázornený v schéme 4 a ktorého príprava je podrobnejšie opísaná v príklade 10.

7β-Μ^1ίη1ιίύίΙο^, opísané v schéme 5, je možné pripraviť podobným spôsobom ako deriváty zo schémy 1, avšak ako východisková látka sa použije 4-aza-4^-dimetyl-5a-androstan-3,17-dión vzorca (E).

7β-Metylinhibítory, opísané v schéme 6, je možné pripraviť ľahko nasledujúcim spôsobom: zlúčeninu 20 je možné pripraviť tak, že sa na alkohol vzorca (12) pôsobí terc.-butyltrichlóracetimidátom v prítomnosti organickej sulfónovej kyseliny, napríklad kyseliny trifluórmetánsulfónovej. ^-Aryloxyderiváty, napríklad zlúčeniny 21 až 24,

SK 281645 Β6 je možné pripraviť tak, že sa najskôr vytvorí alkoxidový anión z alkoholu vzorca (12) pôsobením hydridu draselného alebo sodného v tetrahydrofiiráne alebo N,N-dimetylformamide alebo pôsobením hydroxidu draselného v dimetylformamide alebo pôsobením hydroxidu draselného v dimetylsulfoxide s následnou adíciou príslušne substituovaného fluórbenzénového derivátu.

17p-Metyléninhibítory zo schémy 7 je možné pripraviť podobným spôsobom ako uvedené zlúčeniny v schéme 4, avšak ako východisková látka sa použije 7P-metyl-16p-ol, medziprodukt vzorca (12). Premena konfigurácie v polohe 16 za vzniku derivátu vzorca (F) sa uskutoční transformáciou podľa Mitsunoby tak, ako je znázornené v schéme 7. Potom sa uskutoční ešte O-alkylácia, ako už bolo opísané, čím sa získajú 16a-étery, napríklad vzorca (26).

Inhibítory, uvedené v schéme 8 je možné pripraviť tak, že napríklad adíciou metylmagnéziumbromidu v tetrahydrofuráne na ketón vzorca (1) alebo vzorca (11) je možné pripraviť zodpovedajúci 16a-metyl-17P-alkohol vzorca (27) alebo (28). O-alkylácia alebo O-arylácia sa potom uskutočni podobne ako v predchádzajúcich schémach, čím sa získajú napríklad 16a-metyl-16P-éterové deriváty vzorca (29) a (30).

Inhibítory, opísané v schémach 9 je možné pripraviť nasledujúcimi reakciami. Východiskový 17P-metyl-16a-alkohol vzorca (25) sa premení na Ιόβ-tiol vzorca (H) pôsobením kyseliny tioloctovej v prítomnosti diizopropylazodikarboxylátu DIAD a trifenylfosfinu za vzniku medziproduktu, 16P-tioacetátu G, ktorý sa potom hydrolyzuje za alkalických podmienok, čím sa získa tiol H. Alkylácia sa uskutoční vytvorením merkaptidového aniónu pôsobením hydridu sodného alebo draselného v tetrahydrofuráne alebo Ν,Ν-dimetylformamide s následnou adíciou príslušného alkylhalogenidu. Týmto spôsobom je možné pripraviť deriváty z príkladov 31 až 33. Zodpovedajúci sulfonyl, napríklad zlúčeninu 34 je možné pripraviť tak, že sa na tioétery vzorca (31) až (33) pôsobí oxidačným činidlom, napríklad organickou perkyselinou alebo peroxymonosulfátom draselným (Oxone), vhodným prostredím je vodný metanol.

Inhibítory, opísané v schéme 10 je možné pripraviť tak, že sa p-nitrofenoxyderivát vzorca (50) redukuje pri použití paládia na aktívnom uhlí pri teplote miestnosti vo vodíkovej atmosfére za vzniku p-aminofenoxyderivátu vzorca (51). Amín sa potom acyluje pôsobením acetylchloridu v metylénchloride v prítomnosti pyridínu za získania p-acetylaminofenoxyderivátu vzorca (52) alebo sa pôsobí benzoylchloridom za vzniku zodpovedajúceho p-benzoylaminoderivátu vzorca (53). Na aminozlúčeninu vzorca (51) je tiež možné pôsobiť tosylchloridom, čím sa získa p-tosylaminoderivát vzorca (54).

Inhibítory, opísané v schéme 11 je možné pripraviť tak, že sa na 16-alkohol vzorca (55) s N-2,4-dimetoxybenzylovou ochrannou skupinou pôsobí p-fluórchlórbenzénom a hydridom draslíka v dimetylformamide, čím sa získa p-chlórfenoxyderivát vzorca (56), na ktorý sa pôsobí kyselinou trifluóroctovou v metylénchloride na odstránenie N-2,4-dimetoxybenzylovej ochrannej skupiny za vzniku derivátu vzorca (57). Na tento derivát sa pôsobí plynným vodíkom a paládiom na aktívnom uhlí ako katalyzátorom v metanole, čím sa z fenylového kruhu odstráni atóm chlóru a získa sa fenoxyderivát vzorca (58). Na túto látku sa pôsobí metyljodidom a hydridom sodíka v dimetylformamide, čím dôjde k metylácii dusíkového atómu v kruhu za vzniku derivátu vzorca (61). Na derivát 58 je tiež možné pôsobiť DDQ a BSTFA v toluéne na zavedenie dvojitej väzby do polohy 1, čím sa získa zlúčenina vzorca (59). Použitím podobnej redukcie sa z 1,2-dihydroandrostanu 57 získa p-chlórandrost-l-en vzorca (60). Táto látka sa potom metyluje v polohe 1 pôsobením metyljodidu a hydridu sodíka v dimetylformamide, čím sa ziska derivát vzorca (62).

Inhibítory, ktoré sú opísané v schéme 12 je možné pripraviť podobnými reakciami ako inhibítory zo schémy 11. Na 16-alkohol vzorca (55) s N,N-dimetoxybenzylovou ochrannou skupinou sa pôsobí 4-metyl-3-chlórfluórbenzénom a hydridom draslíka v dimetylformamide za vzniku 4-metyl-3-chlórfenoxyderivátu vzorca (63), ktorý sa potom spracováva kyselinou trifluóroctovou v metylénchloride za vzniku derivátu vzorca (64), na ktoiý sa pôsobí plynným vodíkom a paládiom na aktívnom uhlí v metanole na odstránenie atómu chlóru z fenylového kruhu za vzniku derivátu vzorca (65), v ktorom sa pôsobením metyljodidu a hydridu sodíka v dimetylformamide metyluje atóm dusíka v kruhu za vzniku derivátu (67). Na derivát (65) je tiež možné pôsobiť DDQ a BSTFA v toluéne na zavedenie dvojitej väzby do polohy 1, čím sa získa derivát vzorca (66).

Inhibítory zo schémy 13 sa získajú tak, že sa 16-alkohol vzorca (25) spracováva kyselinou metánsulfónovou v pyridíne s obsahom DMAP za vzniku mesylátu vzorca (77), na ktorý sa pôsobí tiofenónom v bezvodom THF s obsahom hydridu sodíka. Získa sa tiofenoxyderivát 78, 4-chlórtiofenoxyderivát 79, 4-fluórtiofenoxyderivát 80, 4-metyltiofenoxyderivát 81 alebo 4-metoxytiofenoxyderivát vzorca (82). V prípade spracovania tiofenoxyderivátu 78 kyselinou m-chlórperbcnzoovou v metylénchloride 1 hodinu pri 0 °C vzniká fenyl sulfinylderivát vzorca (83). Pri jeho spracovaní rovnakým spôsobom, avšak 3 hodiny vzniká fenylsulfonylový derivát 84.

Inhibítory zo schémy 14 sa získajú tak, že sa na 16-ketón vzorca (11) pôsobí arylmetyldietylfosfonátom za Witti-. gových podmienok s použitím hydridu sodíka v DMF piji, 80 až 100 °C za vzniku zodpovedajúceho 4-ch Ιόζbenzylidénu 71, benzylidénu 72 a 4-metylbenzylidénu 73* Tieto látky sa redukujú v etanole v atmosfére vodíka s použitím 5 % ródia na aktívnom uhlí za vzniku 4-chlórbenzylderivátu 74 a 4-metylbenzylderivátu 75. 3-Pytidyímetylderivát 76 sa získa v dvoch stupňoch, vykonaných podobným spôsobom.

Schéma 1

1KH, DMF alebo KOH/DMSO potom R?ľ alebo R⁷Br

Schéma 2

Schéma 6

Schéma 3

(24): R'°- F

Schéma 7

Schéma 4

4-NO₂-C_bHjCO_sH.

DEAD, Ph₃P, CgHg

4-NO₂-C₆H₄CO₂H, DEAD, Ph₃P, C₆H₈

CHj (2)

I

Schéma 5

KH/DNF alebo KOM/DMSO poraň R®I alebo R^Br

(26)

Schéma 8

(13) :R⁹=CH₃;

(14) :R⁹-CH₂CH₃;

(15) : R’ - CH₂CH=CH₂:

(16) :R⁸-CH₂Ph;

(17) :R⁹->CH₂CH=C(CH₃h pre derivár (15): Hj. PtO₈, EtOAc;

pre derivát (17): H₂.10% Pd(C), EtOAc

KH, DMF potom CHj (27): R²* H

CHjMgBr/ ⁿ -40*C až teplota = H alebo CH (18); R“ - CH₂CH_aCH₃; (1 S): R^a = CH₂CH₂CH(CH₃)₃

Schéma 9

Schéma 12

CH₃ (_H)

CH, (31) : R-CH,;

(32) : R¹¹-CH₃CH₃:

(33) : R = CH,CH₃CH₃

Schéma 10

Schéma 13

Schéma 11

(62)

Schéma 14

Ai fenyl (23)

4-chlórfenyl (71)

4-metylfenyl (73)

3-pyridyl

Δί

4-chlórfenyl (74) 4-metylfenyl (75) 3-pyridyl (76)

V nasledujúcich príkladoch sú uvedené podrobnosti, týkajúce sa spôsobu výroby derivátov podľa vynálezu. Tieto príklady sú uvedené len na ilustráciu a nemajú slúžiť na obmedzenie rozsahu vynálezu. Okrem toho je zrejmé, že okrem zlúčenín, uvedených v jednotlivých konkrétnych príkladoch je možné vytvoriť ešte veľký rad ďalších substituentov a okrem toho je možné uskutočniť celý rad variácií a modifikácií v priebehu jednotlivých postupov. Všetky tieto možné podružné variácie taktiež patria do rozsahu vynálezu. Všetky teplotné údaje v príkladovej časti sú uvedené v stupňoch celzia.

Východiskovú látku, 4-aza-4-metyl-5a-androstan-3,17-dión (zlúčenina vzorca (A) v uvedenej schéme 1) je možné pripraviť spôsobom, opísaným v publikácii Rasmusson a ďalší, J. Med. Chem., 27, str. 1600 až 1701, 1984. Ďalší východiskový materiál, 4-aza-4,7p-dimetyl-5a-androstan-3,17-dión je možné pripraviť spôsobom, ktorý bude ďalej opísaný v príklade 36.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

4-aza-4-Metyl-5a-androstan-3,16-dión Časť 1: 4-aza-4-metyl-5a-androstan-3,17-dión-16-oxím

Do banky s guľatým dnom, obsahujúcej 14 ml 2-metyl-2-propanolu sa v prúde plynného dusíka pridá 740 mg (6,59 mmol) terc.butoxidu sodného. Po vytvorení roztoku sa pridá 1,0 g (3,30 mmol) 4-aza-4-metyl-5<x-androstan-3,17-diónu a v miešaní sa pokračuje 1 hodinu. Vytvorí sa do zlatistá sfarbený roztok, do ktorého sa za stáleho miešania po kvapkách pridá 0,884 ml (6,58 mmol) izoamylnitrilu a reakčná zmes sa cez noc mieša za vzniku tmavooranžového roztoku. Zmes sa riedi rovnakým objemom vody a privedie sa na kyslé pH asi 2 pridaním 2 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej. Po pridaní dietyléteru sa vytvorí tuhá látka, ktorá sa filtruje, premyje sa éterom a suší sa vo vákuu za vzniku výslednej zlúčeniny.

Časť 2: 4-aza-4-metyl-5a-androstan-3-on-16-oxim

Do zmesi 596 mg (1,79 mmol) 4-aza-4-metyl-5a-andostan-3,17-dión-16-oxímu v 5 ml etylénglykolu sa pridá 54 μί (1,74 mmol) 98 % roztoku hydrazínu a 568 mg (10,12 mmol) hydroxidu draselného vo forme prášku. Zmes sa zohrieva 16 hodín pri teplote 140 °C a potom ochladí a neutralizuje pridaním 2 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej. Vzniknutá tuhá látka sa filtruje, premyje sa vodou a suší sa vo vákuu za vzniku výslednej zlúčeniny. Hmotnostná spektrometria: m/z 318 (M).

Časť 3:4-aza-4-metyl-5a-androstan-3,l 6-dión

Zmes 218 mg (0,684 mmol) 4-aza-4-metyl-5a-androstan-3-on-16-oxímu a 249 mg (23,9 mmol) bisulfitu sodného v 10 ml 50 % vodného roztoku etanolu sa 3 hodiny zohrieva pod refluxom. Po pridaní 33 ml 0,5 M roztoku zriedenej kyseliny chlorovodíkovej a 50 ml metylénchloridu sa zmes niekoľko minút energeticky mieša. Organický podiel sa oddelí, premyje sa roztokom hydrogenuhličitanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad síranom sodným a odparuje sa. Zlúčenina sa čistí rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 15 % roztokom acetónu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny. FAB hmotnostné spektrum: m/z 304 (M + 1).

400 MHz *H NMR (CDClj): δ 0,89 (s, 3H), 0,91 (s, 3H),

2,90 (s, 3H), 3,05 (dd, 1H).

Príklad 2

3-oxo-4-aza-4-Metyl-16p-hydroxy-5a-androstan

Roztok 100 mg (0,330 mmol) 4-aza-4-metyl-5a-androstan-3,16-diónu v 2 ml metanolu sa chladí v ľadovom kúpeli. Na tento roztok sa 1 hodinu pôsobí 38 mg (0,989 mmol) bórhydridu sodného. Reakčná zmes sa zriedi vodou a extrahuje sa dvakrát 20 ml metylénchloridu. Zlúčené organické extrakty sa premyjú nasýteným roztokom chloridu sodného, sušia sa nad síranom sodným a odparujú sa. Požadovaný produkt sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 10 % roztokom acetónu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny. FAB hmotnostné spektrum: m/z 306 (M + 1).

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,88 (s, 3H), 0,95 (s, 3H),

2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H) a 4,39 (m, 1H).

Príklad 3 3-oxo-4-aza-4-Metyl-16P-metoxy-5a-androstan

Do roztoku 35 mg (0,115 mmol) 3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-hydroxy-5a-androstanu v 1,0 ml dimetylsulfoxidu sa pridá 32 mg (0,575 mmol). Po 15 minútach miešania pri teplote miestnosti a v atmosfére dusíka sa pridá 36 μί (0,575 mmol) jódmetánu a v miešaní sa pokračuje ďalšie 4 hodiny. Zmes sa zriedi 30 ml dietylesteru a vzniknutý roztok sa premyje vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad síranom sodným a odparuje sa. Požadovaný produkt sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 10 % roztokom acetónu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny. Hmotnostné spektrum: m/z 391 (M).

400 MHz ‘H NMR (CDClj): δ 0,88 (s, 6H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H), 3,21 (s, 3H) a 3,83 (m, 1H).

Príklad 4 3-oxo-4-aza-4-Mctyl-16p-alyloxy-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 3, s použitím alylbromidu namiesto jódmetánu za vzniku výslednej zlúčeniny.

Hmotnostné spektrum: m/z 345 (M).

400 MHz ‘H NMR (CDClj): δ 0,88 (s, 6H), 0,90 (s, 3H),

2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H), 3,90 (m, 2H), 3,99 (m, 1H), 5,11 -5,2 (m, 2H) a 5,83 -5,93 (m, 1H).

Príklad 5

3-oxo-4-aza-4-Metyl-16P-(n-propyloxy)-5a-androstan

Roztok 0,85 ml 3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-alyloxy-5a-androstanu v etylacetáte sa v prítomnosti 4 mg oxidu platiny 30 minút hydrogenuje za atmosférického tlaku a pri teplote miestnosti. Katalyzátor sa odstráni filtráciou s použitím Millex-HV 0,45 pm filtračného zariadenia. Po čistení rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 10 % roztokom acetónu v metylénchloride vznikne výsledná zlúčenina.

Hmotnostné spektrum: m/z 348 (M + 1).

400 MHz ‘H NMR (CDClj): δ 0,88 (s, 6H), 0,89 (s, 3H),

2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H), 3,28 (t, 2H) a 3,92 (m, 1H).

Príklad 6 3-oxo-4-aza-4-Metyl-16p-(acetamido)-5a-androstan Časť 1: 3-oxo-4-aza-4-metyl-16p-(amino)-5<x-androstan

Za prítomnosti 50 mg oxidu platiny sa cez noc hydrogenuje za atmosférického tlaku 150 mg (0,471 mmol) 4-aza-4-metyl-5a-androstan-3-on-16-oxímu v 15 ml etanolu a 7 ml kyseliny octovej. Katalyzátor sa odstráni filtráciou s použitím Millex-HV 0,45 pm filtračného zariadenia a filtrát sa odparí. Vzniknutý zvyšok sa rozpustí v 50 ml metylén

SK 281645 Β6 chloridu a vzniknutý roztok sa premyje nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad síranom sodným a odparuje sa za vzniku požadovaného amínu.

Časť 2: 3-oxo-4-aza-4-metyl-16p-(acetamido)-5a-androstan

V 1,0 ml metylénchloridu sa rozpustí 56 mg (0,184 mmol) výsledného amínu z predchádzajúcej časti 1 a na vzniknutý roztok sa pri teplote miestnosti 2 hodiny pôsobí 0,6 ml pyridínu, 5 ml 4-dimetylaminopyridínu a 0,3 ml anhydridu kyseliny octovej. Zmes sa zriedi 50 ml metylénchloridu, roztok sa premyje vodou, 1 M roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného. Po sušení nad síranom sodným a odparovaní vznikne zvyšok, ktorý sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí chromatografiou pri elúcii 2 % roztokom metanolu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny. Hmotnostné spektrum: m/z 346 (M).

400 MHz 'H NMR (CDC1₃): δ 0,82 (s, 3H), 0,87 (s, 3H), 1,93 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, IH), 4,28 (m, IH) a

5,54 (d, IH).

Príklad 7

3-oxo-4-aza-4-Metyl-16P-(benzamido)-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 6, s použitím benzoylchloridu namiesto anhydridu kyseliny octovej.

Hmotnostné spektrum: m/z 408 (M).

400 MHz 'H NMR (CDC1₃): δ 0,89 (s, 3H), 0,90 (s, 3H),

2,90 (s, 3H), 3,01 (dd, IH), 4,48 (m, IH), 6,12 (d, IH).

Príklad 8

3-oxo-4-aza-4-Metyl-16p-(benzylaminokarbonyloxy)-5a-androstan

Do roztoku 40 mg (0,131 mmol) 3-oxo-4-aza-4-metyl-16p-hydroxy-5a-androstanu v 2 ml metylénchloridu sa pridá 67 μί (0,481 mmol) trietylamínu, 2 mg 4-dimetylaminopyridínu a 50 μί (0,405 mmol) benzyl izokyanátu. Reakčná zmes sa 48 hodín mieša pri teplote miestnosti a odparuje sa. Vzniknutý zvyšok sa po absorpcii na silikagéli čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 15 % roztokom acetónu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny. FAB hmotnostné spektrum: m/z 439 (M+l).

400 MHz 'H NMR (CDC1₃): δ 0,87 (s, 6H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, IH), 4,33 (m, 2H), 4,90 (m, IH) a 5,11 (m, IH).

Príklad 9 3-oxo-4-aza-4-Metyl-160-hydroxy-5a-androstan Časť 1: 3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-(4-nitrobenzyloxy)-5a-androstan

Do roztoku 34 mg (0,111 mmol) 3-oxo-4-aza-4-metyl-163-hydroxy-5a-androstanu v 1,5 ml bezvodého benzénu sa pridá 35 mg (0,134 mmol) trifenylfosflnu, 22 mg (0,134 mmol) kyseliny 4-nitrobenzoovej a 21 μί (0,134 mmol) dietylazodikarboxylátu. Reakčná zmes sa 1 hodinu zohrieva v olejovom kúpeli s teplotou 80 °C v atmosfére dusíka. Odparením za zníženého tlaku sa odstráni benzén a vzniknutá surová zmes sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 2 % roztokom metanolu v metylénchloride za vzniku požadovaného produktu s primesou 97 mg trifenylfosflnu, ktorý sa saponizuje podľa postupu uvedeného v časti 2).

Časť 2: 3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-(hydroxy)-5a-androstan

V 0,5 ml etanolu sa uvedie do suspenzie 97 mg surovej výslednej zlúčeniny z predchádzajúcej časti 1. Na suspenziu sa pôsobí 0,36 ml (0,144 mmol) 0,4 M roztoku hydroxidu sodného a po 90 minútach miešania pri teplote miestnosti sa reakčná zmes neutralizuje pridaním niekoľkých kvapiek ľadovej kyseliny octovej, dvakrát sa extrahuje 20 ml etylacetátu a premyje sa vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného. Po sušení nad síranom sodným a odparení vznikne produkt, ktorý sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí chromatografiou pri elúcii 20 % roztokom acetónu v metylénchloride. Vznikne výsledná zlúčenina. Hmotnostné spektrum: m/z 305 (M).

400 MHz Ή NMR (CDC1₃): δ 0,70 (s, 3H), 0,85 (s, 3H),

2,90 (s, 3H), 3,02 (dd, IH) a4,47 (m, IH).

Príklad 10

3- oxo-4-aza-4-Metyl-16P-metoxy-5a-androstan

Do roztoku 20 mg (0,065 mmol) 3-oxo-4-aza-4-metyl-16p-hydroxy-5a-androstanu v 0,6 ml dimetylsulfoxidu sa pridá 18 mg (0,325 mmol) hydroxidu draselného vo forme prášku. Po 15 minútach miešania pri teplote miestnosti sa v atmosfére dusíka pridá 20 μί (0,325 mmol) jódmetánu a cez noc sa v miešaní pokračuje pri teplote miestnosti. Zmes sa zriedi 25 ml dietyléteru, vzniknutý roztok sa premyje dvakrát 10 ml vody, suší sa nad síranom sodným a odparí sa. Požadovaný produkt sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 10 % roztokom acetónu v metylénchloride.

Hmotnostné spektrum: m/z 319 (M).

400 MHz 'H NMR (CDC1₃): δ 0,70 (s, 3H), 0,87 (s, 3H),

2,90 (s, 3H), 3,01 (dd, IH), 3,22 (s, 3H) a 3,92 (m, IH). «

Prikladll ?

4- aza-4,7P-Dimetyl-5a-androstan-3,16-dión

Časť 1: 4-aza-4,7p-dimetyl-5a-androstan-3,16-dión-16- ŕ -oxím

Do banky s guľatým dnom, obsahujúcej 28 ml 2-metyl-2-propanolu sa v prúde plynného dusíka pridá 1,35 g (12,1 mmol) terc.butoxidu draselného. Po vytvorení roztoku sa pridá 1,92 g (6,0 mmol) 4-aza-4,7p-dimetyl-5a-androstan-3,17-diónu a v miešaní sa pokračuje ďalšiu 1 hodinu, až sa vytvorí zlatosfarbený roztok. Za stáleho miešania sa do roztoku po kvapkách pridá 1,63 ml (12,1 mmol) izoamylnitritu a miešanie pokračuje pri teplote miestnosti cez noc. Vytvorí sa tmavooranžový roztok, ktorý sa riedi rovnakým objemom vody a pridaním 2 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej sa okyslí na približnú hodnotu pH 2. Po extrakcii trikrát 50 ml dietyléteru sa zlúčené éterové extrakty premyjú nasýteným roztokom chloridu sodného, sušia sa nad síranom sodným a odparujú sa. Surový produkt sa čistí rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 5 % roztokom metanolu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny.

Časť 2: 4-aza-4,7P-dimetyl-5a-androstan-3-on-16-oxím

Do zmesi 2,7 g (7,79 mmol) 4-aza-4,7P-dimetyl-5a-androstan-3,16-dión-16-oxímu v 30 ml etylénglykolu sa pridá 0,27 ml (8,57 mmol) 98 % roztoku hydrazínu a 2,62 g (46,8 mmol) hydroxidu draselného vo forme prášku. Vzniknutá zmes sa 3 hodiny zohrieva pri teplote 140 °C, ochladí sa, zriedi sa 100 ml vody a neutralizuje sa pridaním koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej za vzniku žltohnedej zrazeniny. Po filtrácii a sušení vznikne 1,7 g produktu, ktorý sa čistí rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 2 % roztokom metanolu v metylénchloride za vzniku surového produktu.

Časť 3: 4-aza-4,7a-dimetyl-5a-androstan-3,16-dión

Zmes 0,55 g (1,65 mmol) 4-aza-4,7P-dimetyl-5a-androstan-3-on-16-oxímu v 20 ml 60 % roztoku kyseliny chlorovodíkovej sa 48 hodín zohrieva pod refluxom, ochladená zmes sa riedi 25 ml vody a trikrát sa extrahuje 50 ml metylénchloridu. Zlúčené extrakty sa premyjú nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného, sušia sa nad síranom sodným a odparujú sa. Po rýchlej chromatografii na stĺpci silikagélu pri elúcii 2 % roztokom metanolu v metylénchloride vznikne surová výsledná zlúčenina. Hmotnostné spektrum: m/z 317 (M).

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,88 (s, 3H), 0,89 (s, 3H), 1,00 (d, 3H), 2,90 (s, 3H) a 3,07 (dd, 1H).

Príklad 12 3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-163-hydroxy-5a-androstan

V kúpeli ľadu sa chladí roztok 390 mg (1,23 mmol) 4-aza-4,7p-dimetyl-5a-androstan-3,16-diónu v 8 ml metanolu, na ktorý sa pôsobí 30 minút 140 mg (3,68 mmol) bórhydridu sodného. Reakčná zmes sa zriedi vodou a extrahuje sa trikrát 50 ml metylénchloridu. Zlúčené organické extrakty sa premyjú nasýteným roztokom chloridu sodného, sušia sa nad síranom sodným a odparujú sa. Produkt sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 10 % roztokom acetónu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny. Hmotnostné spektrum: m/z 391 (M).

400 MHz Ή NMR (CDClj): δ 0,83 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H) a4,36 (m, 1H).

Príklad 13

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimctyl-16p-metoxy-5cc-androstan

Do roztoku 20 mg (0,063 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-hydroxy-5a-androstanu v 0,5 ml dimetylsulfoxidu sa pridá 18 mg (0,313 mmol) hydroxidu draselného vo forme prášku. Po 15 minútach miešania pri teplote miestnosti a v atmosfére dusíka sa pridá 20 μί (0,313 mmol) jódmetánu a v miešaní sa pokračuje cez noc pri teplote miestnosti. Zmes sa zriedi 25 ml dietyléteru a vzniknutý roztok sa premyje vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad síranom sodným a odparuje sa. Požadovaný produkt sa po absorpcii na silikagél čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 1,5 % roztokom metanolu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny. Hmotnostné spektrum: m/z 334 (M + 1).

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,83 (s, 3H), 0,89 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H) a3,80 (m, 1H).

Príklad 14

3-oxo-4-aza-4,73-Dimetyl-16p-etoxy-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 13, s použitím jódetánu namiesto jódmetánu a roztoku hydridu draselného v Ν,Ν-dimetylformamide namiesto roztoku hydroxidu draselného v dimetylsulfoxide za vzniku výslednej zlúčeniny.

Hmotnostné spektrum: m/z 347 (M).

400 MHz ‘H NMR (CDClj): δ 0,83 (s, 3H), 0,90 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 1,18 (t, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H) a 3,39 (m, 2H) a 4,40 (m, 1H).

Príklad 15

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16P-alyloxy-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 13, s použitím alylbromidu namiesto jódmetánu za vzniku výslednej zlúčeniny.

Hmotnostné spektrum: m/z 359 (M).

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,83 (s, 3H), 0,91 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H), 3,90 (m, 2H), 3,96 (m, 1H), 5,11 - 5,29 (m, 2H) a 5,85 - 5,93 (m, 1H).

Príklad 16 3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16p-benzyloxy-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 14, s použitím benzylbromidu namiesto jódetánu za vzniku výslednej zlúčeniny.

Hmotnostné spektrum: m/z 409 (M).

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H), 4,01 (m, 1H), 4,43 (q, 2H)a7,31 (m,5H).

Príklad 17 3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16P-(3,3-dimetylalyloxy)-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 13, s použitím 3,3-dimetylalylbromidu namiesto jódmetánu za vzniku výslednej zlúčeniny.

400 MHz *H NMR (CDClj): δ 0,82 (s, 3H), 0,90 (s, 3H), 1,02 (d, 3H), 1,6 (s, 3H), 1,71 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H), 3,93 (m, 1H) a 5,31 (m, 1H)

Príklad 18 3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-(n-propyloxy)-5a-androstan

Roztok 13,0 mg (0,036 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-alyloxy-5a-androstanu v 0,5 ml etylacetátu sa za prítomnosti 4 mg oxidu platiny 30 minút hydrogenuje za atmosférického tlaku a pri teplote miestnosti. Katalyzátor sa odstráni filtráciou s použitím Millex-HV 0,45 pm filtračného zariadenia. Po čistení rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 1 % roztokom metanolu v metylénchloride vznikne výsledná zlúčenina. Hmotnostné spektrum: m/z 361 (M).

400 MHz ‘íl NMR (CDClj): δ 0,82 (s, 3H), 0,89 (s, 3H), 0,89 (t, 3H), 1,05 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H), 3,29 (t, 2H) a 3,89 (m, 1H).

Príklad 19 3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16p-(3-metyl-l-butyloxy)-5a-androstan

Za prítomnosti 3 mg 10 % roztoku paládia na aktívnom uhlí sa 30 minút hydrogenuje za atmosférického tlaku roztok 12 mg 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(3,3-dimetylalyloxy)-5a-androstanu v 0,5 ml etylacetátu. Katalyzátor sa odstráni filtráciou s použitím Millex-HV 0,45 pm filtračného zariadenia. Vzniknutý produkt sa čistí lýchlou chromatografiou po absorpcii na stĺpec silikagélu a pri elúcii 2 % roztokom metanolu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny.

Hmotnostné spektrum: m/z 389 (M).

400 MHz Ή NMR (CDClj): δ 0,82 (s, 3H), 0,88 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H), 3,33 (m, 2H) a 3,88 (m, 1H).

Príklad 20 3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-(t-butoxy)-5a-androstan

Do roztoku 20 mg (0,063 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-hydroxy-5a-androstanu v 0,5 ml metylénchloridu chladeného v kúpeli ľadu sa pridá 23 pl (0,126 mmol) t-butyltrichlóracetimidátu a 0,56 pl (0,0063 mmol) kyseliny trifluórmetánsulfónovej. Reakčná zmes sa nechá zohriať na teplotu miestnosti a potom sa pridá ďalších 23 pl (0,126 mmol) t-butyltrichlóracetimidátu a 0,56 pl (0,0063 mmol) kyseliny trifluórmetánsulfónovej. Po 1 hodine sa ešte raz pridá rovnaké množstvo reakčných činidiel a reakčná zmes sa 5 hodín zohrieva pri teplote miestnosti. Zmes sa zriedi 50 ml dietyléteru, premyje sa 10 ml 1 M roztoku hydroxidu sodného, 10 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej a nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného. Po sušení nad síranom sodným a odparení vznikne surový produkt, ktorý sa čistí rýchlou chromatografiou po absorpcii na stĺpec silikagélu a pri elúcii 10 % roztokom acetónu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny.

Hmotnostné spektrum: m/z 375 (M).

400 MHz ’H NMR (CDC1₃): δ 0,82 (s, 3H), 0,90 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 1,11 (s, 9H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, 1H) a 4,00 (m, 1H).

Príkladžl

3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16p-(4-kyanofenoxy)-5a-androstan

Do roztoku 20 mg (0,063 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-hydroxy-5a-androstanu v 0,5 ml N,N-dimetylformamidu sa pridá 15 mg (0,126 mmol, 35 % hmotnostných) hydridu draselného vo forme prášku. Vzniknutá reakčná zmes sa 15 minút mieša pri teplote miestnosti a v atmosfére dusíka. Pridá sa 38 mg (0,315 mmol) 4-fluórbenznitrilu a zmes sa 2 hodiny mieša pri teplote miestnosti. Po zriedení 25 ml metylénchloridu sa reakcia skončí pridaním zmesi ľadu a vody. Vodná vrstva sa extrahuje trikrát 25 ml metylénchloridu a zlúčené organické podiely sa premyjú nasýteným roztokom chloridu sodného, sušia sa nad síranom sodným a odparujú sa. Vzniknutý produkt sa čistí rýchlou chromatografiou po absorpcii na stĺpec silikagélu a pri elúcii 2 % roztokom metanolu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny. Hmotnostné spektrum: m/z 420 (M).

400 MHz ’H NMR (CDC1₃): δ 0,86 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 4,76 (m, 1H), 6,87 (τη, 2H) a 7,53 (m, 2H).

Príklad 22

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-(4-trifluórmetylfenoxy)-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 21, kde namiesto 4-fluórbenznitrilu sa použije 4-fluórbenztrifluorid.

Hmotnostné spektrum: m/z 463 (M).

400 MHz 'H NMR (CDC1₃): δ 0,85 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 4,76 (m, 1H), 6,88 (d, 2H) a 7,50 (d, 2H).

Príklad 23

3-oxo-4-aza-4,73-Dimetyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 21, kde namiesto 4-fluórbenznitrilu sa použije 1-chlór-4-fluórbenzén.

Hmotnostné spektrum: m/z 430 (M + 1).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 5,28 (m, 1H), 6,74 (d,2H)a7,19(d,2H).

Príklad 24

3-oxo-4-aza-4,73-Dimetyl-16p-(4-fluórfenoxy)-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 21, kde namiesto 4-fluórbenznitrilu sa použije 1,4-difluórbenzén.

Hmotnostné spektrum: m/z 414 (M+l).

400 MHz ‘H NMR (CDC1₃): δ 0,85 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,91 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 4,65 (m, 1H), 6,75 (m, 2H) a 6,92 (m, 2H).

Príklad 25 3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16p-hydroxy-5a-androstan Časť 1: 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(4-nitrobenzyloxy)-5a-androstan

Do roztoku 178 mg (0,560 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-hydroxy-5a-androstanu v 10 ml bezvodého benzénu sa pridá 294 mg (1,12 mmol) trifenylfosfinu, 187 mg (1,12 mmol) kyseliny 4-nitrobenzoovej a 176 μΙ (1,12 mmol) dietylazokarboxylátu. Reakčná zmes sa v atmosfére dusíka 1 hodinu zohrieva v kúpeli oleja s teplotou 80 °C. Po odstránení benzénu odparovaním za zníženého tlaku sa vzniknutý produkt čistí rýchlou chromatografiou pri absorpcii na stĺpec silikagélu a pri elúcii 2 % roztokom metanolu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny s prímesou 404 mg trifenylfosfinu, ktorá sa odstráni saponifikáciou podľa postupu uvedeného v časti 2.

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,80 (s, 3H), 0,88 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,05 (dd, 1H) a 5,48 (m, 1H).

Časť 2: 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16a-hydroxy-5a-androstan

Po uvedení do suspenzie 404 mg výsledného produktu časti 1 v 5 ml etanolu sa na suspenziu pôsobí 1,82 ml (0,728 mmol) 0,4 M roztoku hydroxidu sodného. Po 90 minútach miešania pri teplote miestnosti sa reakčná zmes neutralizuje pridaním niekoľkých kvapiek ľadovej kyseliny octovej a extrahuje sa 100 ml etylacetátu. Po premytí dvakrát 25 ml vody a nasýteným roztokom chloridu sodného sa vzniknutý produkt čistí rýchlou chromatografiou po absorpcii na stĺpec silikagélu a pri elúcii 20 % roztokom acetónp v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny. Hmotnostné spektrum: m/z 319 (M). T

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,71 (s, 3H), 0,82 (s, 3H), 1,02 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,03 (dd, 1H) a4,42 (m, 1H).

Príklad 26 3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16a-(n-propoxy)-5<x-androstan

Do roztoku 20 mg (0,063 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7fi-dimetyl-16a-hydroxy-5a-androstanu v 0,65 ml N,N-dimetylformamidu sa pridá 15 mg (0,126 mmol, 35 % hmotnostných) hydridu draselného vo forme prášku. Po 15 minútach miešania pri teplote a v atmosfére dusíka sa pridá 27 μΐ (0,315 mmol) alylbromidu a v miešaní sa pokračuje 2 hodiny. Po pridaní ďalších 15 mg hydridu draselného a 27 μΐ alylbromidu sa reakčná zmes mieša cez noc. Zmes sa zriedi 50 ml dietyléteru a 10 ml vody. Organický podiel sa premyje 10 ml 1 M roztokom kyseliny chlorovodíkovej, 10 ml vody a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad síranom sodným a odparuje sa. Požadovaný produkt sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 2 % roztokom metanolu v metylénchloride za vzniku zlúčeniny, ktorá sa 0,5 ml etylacetátu a za prítomnosti 10 % roztoku paládia na aktívnom uhlí 2 hodiny hydrogenuje. Katalyzátor sa odstráni filtráciou s použitím Millex-HV 0,45 pm filtračného zariadenia. Vzniknutý produkt sa čistí rýchlou chromatografiou po absorpcii na stĺpec silikagélu a pri elúcii 10% roztokom izopropanolu v hexáne za vzniku výslednej zlúčeniny. Hmotnostné spektrum: m/z 361 (M).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,76 (s, 3H), 0,82 (s, 3H), 0,90 (t, 3H), 1,02 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 3,29 (t, 2H) a 3,98 (m, 1H).

Príklad 27

3-oxo-4-aza-4,16a-Dimetyl-16p-hydroxy-5a-androstan

Do roztoku 50 mg (0,165 mmol) 4-aza-4-metyl-5a-androstan-3,16-diónu ochladeného na teplotu -40 °C sa za stáleho miešania po kvapkách pridá 275 μΐ (0,825 mmol) 3,0 M roztoku metylmagnéziumbromidu v dietyléteri. Reakčná zmes sa nechá zohriať na teplotu miestnosti a potom sa 2 hodiny mieša v atmosfére dusíka. Reakcia sa skončí pridaním 25 ml nasýteného roztoku chloridu amónneho a dvakrát sa extrahuje 50 ml metylénchloridu. Zlúčené organické extrakty sa premyjú nasýteným roztokom chloridu sodného, sušia sa nad síranom sodným a zvyšok sa odparuje. Vzniknutý produkt sa čistí rýchlou chromatografiou po absorpcii na stĺpec silikagélu za vzniku výslednej zlúčeniny.

Hmotnostné spektrum: m/z 319 (M).

400 MHz ‘H NMR (CDClj): δ 0,88 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 1,31 (s, 3H), 2,90 (s, 3H) a 3,00 (dd, IH).

Príklad 28

3-oxo-4-aza-4,7P,16a-Trimetyl-16P-hydroxy-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 27, s použitím 4-aza-4,7p-dimetyl-5a-androstan-3,16-diónu ako východiskovej zlúčeniny namiesto 4-aza-4-metyl-5a-androstan-3,16-diónu. Hmotnostné spektrum: m/z 333 (M).

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,82 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 1,01 (d, 3H), 1,30 (s, 3H), 2,90 (s, 3H) a 3,00 (dd, IH).

Príklad 29

3-oxo-4-aza-4,16a-Dimetyl-16P-hydroxy-5a-androstan

Do roztoku 31 mg (0,097 mmol) 3-oxo-4-aza-4,16a-dímetyl-16p-hydroxy-5a-androstanu v 0,5 ml Ν,Ν-dimetylformamidu sa pridá 23 mg (0,194 mmol, 35 % hmotnostných) hydridu draselného vo forme prášku. Po 15 minútach miešania pri teplote miestnosti sa pridá 32 μΐ (0,485 mmol) jódmetánu a miešanie pokračuje cez noc pri teplote miestnosti. Zmes sa zriedi dietyléterom a vzniknutý roztok sa premyje 10 ml 2 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 10 ml vody a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad síranom sodným a odparuje sa. Požadovaný produkt sa po absorpcii na silikagél čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 2 % roztokom metanolu a metylénchloridu za vzniku výslednej zlúčeniny. Hmotnostné spektrum: m/z 333 (M).

400 MHz ‘H NMR (CDClj): δ 0,88 (s, 3H), 0,90 (s, 3H),

1,22 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, IH) a 3,17 (s, 3H).

Príklad 30

3-oxo-4-aza-4,7P, 16a-Trimetyl-16P-metoxy-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 29, s použitím 3-oxo-4-aza-4,7p,16a-trimetyl-16p-hydroxy-5a-androstanu ako východiskovej zlúčeniny namiesto 3 -oxo-4-aza-4,16a-dimetyl-16P-hydroxy-5 a-androstanu.

Hmotnostné spektrum: m/z 347 (M).

400 MHz Ή NMR (CDClj): δ 0,82 (s, 3H), 0,90 (s, 3H), 1,02 (d, 3H), 1,22 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, IH) a 3,18 (s, 3H).

Príklad 31

-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-metántio-5a-androstan Časť 1: 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(acetyltio)-5a-androstan

Do banky s guľatým dnom sa vložia v atmosfére dusíka ml bezvodého tetrahydrofuránu a í 77 mg (0,676 mmol) trifcnylfosfínu. Banky sa v kúpeli ľadu ochladia a pridá sa 133 μΐ (0,676 mmol) diizopropylazodikarboxylátu. Vzniknutá reakčná zmes sa 30 minút mieša pri teplote 0 °C. Pridá sa 108 mg (0,338 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16a-hydroxy-5a-androstanu a 49 μΐ (0,676 mmol) kyseliny tioloctovej v 2,0 ml tetrahydrofuránu. Reakčná zmes sa 1 hodinu mieša pri teplote 0 °C a potom ďalšiu hodinu pri teplote miestnosti. Po odparovaní sa vzniknutý produkt čistí rýchlou chromatografiou po absorpcii na stĺpec silikagélu a pri elúcii 10 % roztokom acetónu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny s prímesou trifenylfosfmu. Zmes sa bez ďalšieho čistenia použila v časti 2) tohto príkladu.

400 MHz Ή NMR (CDClj): δ 0,80 (s, 3H), 0,82 (s, 3H), 1,00 (d, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, IH) a 3,80 (m, IH).

Časť 2: 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(merkapto)-5a-androstan

Do roztoku 208 mg výslednej zmesi z časti 1) v 4,0 ml etanolu sa pridá 1,8 ml (0,716 mmol) 0,4 M roztoku hydroxidu sodného. Po 1 hodine miešania pri teplote miestnosti sa reakčná zmes neutralizuje pridaním niekoľkých kvapiek kyseliny octovej, zriedi sa 100 ml etylacetátu, premyje sa dvakrát 10 ml vody a nasýteným roztokom chloridu sodného. Po sušení nad síranom sodným, odparovaní a po absorpcii na stĺpec silikagélu sa vzniknutý 16-merkaptán čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 20 % roztokom acetónu v hexáne za vzniku výslednej zlúčeniny.

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,82 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,02 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, IH) a 3,28 (m, IH).

Časť 3: 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-metántio-5a-androstan

Do roztoku 18 mg (0,054 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(merkapto)-5a-androstanu v 0,5 ml bezvodého tetrahydrofuránu sa pridá v atmosfére dusíka 3,2 mg (0,108 mmol) 80 % disperzie hydridu sodného v minerálnom oleji. Po 15 minútach miešania pri teplote miestnosti sa pridá 17 μΐ (0,20 mmol) jódmetánu a miešanie pokračuje 3 hodiny pri teplote miestnosti. Po zriedení 50 ml metylénchloridu sa roztok premyje 10 ml vody a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad síranom sodným a vzniknutý zvyšok sa odparuje. Vzniknutý produkt sa čistí rýchlou chromatografiou po absorpcii na stĺpec silikagélu a pri elúcii 10 % roztokom izopropanolu a hexánu za vzniku surovej výslednej zlúčeniny. Hmotnostné spektrum: m/z 349 (M).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,82 (s, 3H), 0,91 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,01 (dd, IH), 3,08 (m, IH).

Príklad d 32 3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-etántio-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 31 s použitím jódetánu namiesto jódmetánu v časti 3).

Hmotnostné spektrum: m/z 363 (M).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,82 (s, 3H), 0,91 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 1,24 (t, 3H), 2,57 (q, 2H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, IH), 3,18(m, IH).

SK 281645 Β6

Príklad d 33

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16β-( 1 -propántio)-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 31 s použitím 1-jódpropánu namiesto jódmetánu v časti 3).

Hmotnostné spektrum: m/z 377 (M).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,82 (s, 3H), 0,90 (s, 3H), 0,98 (t, 3H), 1,03 (d, 3H), 2,51 (t, 2H), 2,90 (s, 3H), 3,01 (dd, 1H), 3,13 (m, 1H).

Príklad 34

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-etánsulfonyl-5a-androstan

Do roztoku 17 mg (0,047 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-etántio-5a-androstanu v 1,0 ml metanolu sa pridá roztok 19 mg oxónu, monopersulfátovej zlúčeniny v 1 ml vody. Po 2 hodinách miešania pri teplote miestnosti sa pridá ďalších 19 mg oxónu v 0,5 ml vody a zmes sa 10 minút mieša a potom sa zriedi 25 ml vody a trikrát sa extrahuje 50 ml metylénchloridu. Zlúčené organické extrakty sa premyjú nasýteným roztokom chloridu sodného, sušia sa nad síranom sodným a vzniknutý zvyšok sa odparuje. Vzniknutý produkt sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 2 % roztokom metanolu a metylénchloridu za vzniku surovej výslednej zlúčeniny. Hmotnostné spektrum: m/z 395 (M).

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 1,39 (t, 3H), 2,91 (s, 3H), 2,99 (q, 2H), 3,00 (dd, 1H), 3,41 (m, 1H).

Príklad 35

3- oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16p-fluór-5a-androstan

Do roztoku 18 mg (0,056 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16a-hydroxy-5a-androstanu v 0,5 ml metylénchloridu sa pri teplote miestnosti pridá 19 pl (0,144 mmol) trifluoridu dietylaminosíry. Po 1 hodine miešania pri teplote miestnosti sa reakčná zmes zriedi 25 ml metylénchloridu, roztok sa premyje 25 ml vody, 10 ml nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 10 ml nasýteného roztoku chloridu sodného a suší sa nad síranom sodným. Vzniknutý zvyšok sa odparuje a po absorpcii na stĺpec silikagélu sa čistí rýchlou chromatografiou pri elúcii 10 % roztokom acetónu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny. Hmotnostné spektrum: m/z 321 (M).

400 MHz ^!H NMR (CDClj): δ 0,87 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,01 (dd, 1H), 5,12 (dm, 1H).

Príklad 36

4- aza-4,7P-Dimetyl-5a-androstan-3,17 dión (zlúčenina E v schéme 5)

Časť 1: 3-acetoxy-androst-5-en-17-ol

Do roztoku 100 mg (0,303 mmol) 3-acetoxy-androst-5-en-17-onu v 3 ml etanolu sa pri teplote -10 °C a za stáleho miešania pridá 22,9 mg (0,606 mmol) bórhydridu sodného. Po 1,5 hodine miešania sa zmes zriedi 10 ml vody. Rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu a vzniknutý zvyšok sa extrahuje etylacetátom. Organický podiel sa premyje vodným roztokom uhličitanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného. Po sušení nad síranom sodným a zahustení vznikne surová výsledná zlúčenina z časti 1, ktorá sa dokáže protónovou NMR.

Časť 2: 3-acetoxy-androst-5-en-17-ol-t 7-t-butyldimetylsilyléter

Do roztoku 4,5 g (13,55 mmol) androstan-17-olu z predchádzajúcej časti v 50 ml dimetylformamidu sa pri teplote 23 C pridá 2,76 g (40,65 mmol) imidazolu. Po pri daní 3,065 g (20,32 mmol) t-butyldimetylsilylchloridu sa reakčná zmes mieša za vzniku zrazeniny ako tuhej látky. Pridá sa ďalších 20 ml dimetylformamidu a zmes sa cez noc mieša. Po vliatí do 1 1 vody sa tuhá látka oddelí filtráciou, premyje sa vodou a rozpustí sa v etylacetáte. Organický podiel sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad síranom sodným a zahusti sa za vzniku výslednej zlúčeniny. Protónovou NMR sa dokáže opísané zloženie výslednej zlúčeniny z časti 2.

Časť 3: 17-on-17P-ol-17-t-butyldimetylsilylétcr

Do 5,6 g (12,55 mmol) výslednej zlúčeniny z predchádzajúcej časti 2 v 100 ml acetonitrilu sa pri teplote 23 °C pridá 3,958 g (43,92 mol) 90 % roztoku t-butylperoxidu vodíka a 138 mg chrómium hexakarbonylu. Vzniknutá reakčná zmes sa v atmosfére dusíka zohrieva pod refluxom 24 hodín, potom sa vleje do 1 1 vody, tuhá látka sa oddelí filtráciou a vzniknutý zvyšok sa premyje 500 ml vody a rozpustí sa v 350 ml metylénchloridu. Organický podiel sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa za vzniku surového produktu. Po absorpcii na silikagéli sa chromatografiou na tenkej vrstve dokáže pri elúcii zmesou hexánu a etylacetátu v pomere 3 :1 prítomnosť východiskových zlúčenín. Tuhá látka sa čistí chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 7 % roztokom etylacetátu v hexáne za vzniku výslednej zlúčeniny. Protónovou NMR sa dokáže opísané zloženie výslednej zlúčeniny z časti 3.

Časť 4: 3,7-dihydroxy-7-metyl-androst-5-en-17P-ol-17-t-butyldimetylsilyléter

Do roztoku 440 mg (0,956 mmol) výslednej zlúčeniny z predchádzajúcej časti 3 v bezvodom tetrahydrofúráne sa pri teplote 0 °C po kvapkách pridá počas 5 až 10 minúť¹' metylmagnéziumchlorid. Reakčná zmes sa nechá 24 hodín·; miešať pri teplote miestnosti a potom sa vleje do nasýtené-⁵* ho vodného roztoku chloridu amónneho. Tetrahydrofurán^ ako rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu a vodný podiel saextrahuje etylacetátom. Organický podiel sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa a zahustí sa vo vákuu za vzniku surového produktu. Výsledná zlúčenina sa bez ďalšieho čistenia použije v ďalšej časti syntézy. Protónovou NMR sa dokáže opísané zloženie výslednej zlúčeniny z časti 4.

Časť 5: 7-metyl-androst-4,6-dien-3-on-17P-ol-17-t-butyl-dimetylsilyléter

V zmesi 50 ml toluénu a 50 ml cyklohexanónu sa rozpustí 3,5 g (7,142 mmol) výslednej zlúčeniny z predchádzajúcej časti 4 ako Grignardovho roztoku a 20 ml rozpúšťadla sa oddelí destiláciou vo vákuu. Do takto vzniknutej reakčnej zmesi sa pridá 4,54 g izopropoxidu hliníka a zmes sa 15 hodín zohrieva pod refluxom. Zmes sa ochladí, riedi sa etylacetátom, premyje sa vínanom sodnodraselným a nasýteným roztokom chloridu sodného. Organický podiel sa zahustí vo vákuu. Vzniknutý zvyšok sa destiluje s parou a vzniknutý zvyšok sa extrahuje etylacetátom, premyje sa nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa a čistí chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 5 % roztokom etylacetátu v hexáne za vzniku výslednej zlúčeniny.

Časť 6: 7P-metyl-androst-5-en-3-on-17P-ol-t-butyldimetylsilyléter

Do roztoku 370 mg výslednej zlúčeniny z predchádzajúcej časti 5 v 5,5 ml amoniaku, 1 ml tetrahydrofuránu a 1 ml toluénu sa po malých častiach pridá 50 mg kovového lítia. Vzniknutý modrý roztok, ktorý sa 2 hodiny mieša, a potom sa pridá roztok 1,2-dibrómmetánu v 2 ml tetrahydrofuránu. Roztok sa 10 minút mieša pri teplote -78 °C, pridá sa 250 mg chloridu amónneho a zmes sa 10 minút mieša. Prebytok amoniaku sa odstráni odparovaním v prúde dusíka. Reakčná zmes sa riedi nasýteným roztokom chloridu sodného a extrahuje sa etylacetátom. Organický podiel sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa a zahustí za vzniku surovej zlúčeniny, ktorá sa bez ďalšieho čistenia použije v nasledujúcej časti syntézy.

Časť 7: 7p-metyl-androst-4-en-3-on-l7p-ol-t-butyldimetylsilyléter

Do roztoku 432 mg výslednej zlúčeniny z predchádzajúcej časti 6 v 4 ml tetrahydrofúránu sa pod dusíkom za stáleho miešania pridá 150 μί DBU (1,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-enu. Zmes sa 1,5 hodiny zohrieva pod refluxom, ochladí sa a riedi roztokom chloridu amónneho. Tetrahydrofurán ako rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu a zvyšok sa extrahuje etylacetátom. Organický podiel sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa a zahustí za zníženého tlaku za vzniku surového produktu. Produkt sa čistí chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 10 % roztokom etylacetátu v hexáne.

Časť 8: kyselina 17P-(t-butyldimetylsilyloxy)-7p-metyl-5-oxo-A-nor-2,3-sekoandrost-3-ová

Do roztoku 884 mg výsledného produktu z predchádzajúcej časti 7 v 15 ml t-butylalkoholu sa pri teplote 80 °C pridá roztok 248 mg uhličitanu sodného v 1,5 ml vody a potom sa po kvapkách pridá počas 15 až 20 minút zmes 2,273 g jodistanu sodného so 16,8 mg manganistanu draselného v 8 ml vody. Reakčná zmes sa 2 hodiny zohrieva pri teplote 80 °C, ochladí sa, prefiltruje sa a vzniknutý zvyšok sa premyje vodou. Extrakt sa zahustí vo vákuu, okyslí sa pridaním vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej a extrahuje sa etylacetátom. Organický podiel sa premyje vodným roztokom hydrogensiričitanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa a zahustí za vzniku surového produktu. Protónovou NMR sa dokáže opísané zloženie výslednej zlúčeniny vzorca (9).

Časť 9: 4,7P-dimetyl-4-aza-androst-5-en-3-on-17P-ol-t-butyldimetylsilyléter

Do roztoku 840 mg výsledného produktu z predchádzajúcej časti 8 v 5 ml etylénglykolu sa pridá 1,5 g octanu sodného a 737 mg metylamínhydrochloridu. Vzniknutá reakčná zmes sa 4 hodiny mieša pri teplote 180 °C. Zmes sa ochladí, riedi sa vodou a extrahuje sa etylacetátom. Po sušení a zahustení vznikne surová výsledná zlúčenina. Protónovou NMR sa dokáže opísané zloženie výslednej zlúčeniny z časti 9.

Časť 10: 4,7[l-dimetyl-4-aza-androst-5-en-3-on-l7P-ol

Do roztoku 700 mg výslednej zlúčeniny z predchádzajúcej časti 9 v 20 ml acetonitrilu sa pri teplote 0 °C pridá 500 μί vodného roztoku fluorovodíka. Vzniknutá reakčná zmes sa 1 hodinu mieša, pridaním vodného roztoku uhličitanu sodného sa neutralizuje roztok fluorovodíka a zmes sa riedi vodou. Acetonitril sa odstráni vo vákuu a vzniknutý zvyšok sa extrahuje etylacetátom. Organický podiel sa suší a zahustí za vzniku surovej výslednej zlúčeniny, ktorá sa po absorpcii na silikagéli čistí preparatívnou chromatografiou pri elúcii zmesou chloroformu a acetónu v pomere 3:1.

Časť 11: 4,7P-dimetyl-4-aza-androst-3-on-17p-ol

Do roztoku 350 mg výslednej zlúčeniny z predchádzajúcej časti 10 v 10 ml kyseliny octovej sa pridá 100 mg o xidu platičitého a vzniknutá reakčná zmes sa evakuuje a prepláchne vodíkom. Zmes sa pri teplote miestnosti cez noc pretrepáva pri tlaku vodíka 0,28 MPa. Roztok sa filtruje a zahustí a vzniknutý zvyšok sa spracuje etylacetátom. Organický podiel sa zahustí vo vákuu, riedi sa etylacetátom a premyje sa vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného. Po sušení a zahustení vznikne výsledná zlúčenina. Hmotnostné spektrum: 320 (M+l).

Časť 12: 4-aza-4,7p-dimetyl-5a-androst-3,17-dión

Roztok 1,013 g (3,176 mmol) výslednej zlúčeniny z predchádzajúcej časti 11 v 6 ml metylénchloridu sa umiestnia do suchej banky. Do banky sa pridá 1,6 g molekulárneho sita s veľkosťou ôk 4 ako prášku, 0,558 g (4,76 mmol) N-metylmorfolín-N-oxidu (NMO), a následne 55 mg (0,159 mmol) tetrapropylamóniumperutanátu (TPAP). Zmes sa 2 hodiny mieša, riedi sa 150 ml etylacetátu a filtruje sa. Filtrát sa odparí do sucha za vzniku surového produktu, z ktorého po kryštalizácii z etylacetátu vznikne surová výsledná zlúčenina s teplotou topenia 135 až 138 °C. Elementárna analýza pre C₂₀H₃|NO₂: molekulová hmotnosť = 317,48, vypočítané: C 75,67, H 9,84, N 4,41 nájdené: C 75,16, H 10,22, N 4,13.

Hmotnostné spektrum: 318 (M + 1).

Zlúčeniny nasledujúcich príkladov 37 až 49 sa vyrobia podľa postupu uvedeného v príklade 21, ale s použitím zodpovedajúceho 4-fluór derivátu namiesto 4-fluórbenzonitrilu.

Príklad 37 3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16p-(4-metylsulfonylfenoxy)-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 474 (M+l).

400 MHz 'H NMR (CDC1₃): δ 0,85 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (s, 3H), 4,80 (m, 1H), 6,92 (d, 2H), 7,81 (d, 2H).

Príklad 38 3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16P-(3-pyridyloxy)-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 397 (M + 1).

400 MHz *H NMR (CDC1₃): δ 0,85 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,91 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 4,75 (nt, 1H), 7,21 (m, 2H), 8,22 (m, 2H).

Príklad 39 3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16p-(4-fcnylfenoxy)-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 472 (M+l).

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 1,05 (d, 3H), 2,91 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 4,76 (m, 1H), 6,9 (d, 2H), 7,26 (m, 1H), 7,43 (m, 2H), 7,52 (m, 4H).

Príklad 40 3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-(3-chlórfenoxy)-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 431 (M + 1).

400 MHz *H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,05 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 4,68 (m, 1H), 6,71 (m, 1H), 6,80 (m, 1H), 6,88 (m, 1H), 7,13 (m, 1H).

Príklad 41 3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-(4-trifluónnetoxyfenoxy)-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 480 (M+l).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,91 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 4,69 (m, 1H), 6,78 (m, 2H), 7,09 (m, 2H).

Príklad 42

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16fl-(2-chlórfenoxy)-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 431 (M + 1).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,91 (s, 3H), 3,03 (dd, 1H), 4,80 (m, 1H), 6,81 (m, 2H), 7,24 (m, 1H), 7,32 (m, 2H).

Príklad 43

3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16p-(2-pyrazinyloxy)-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 398 (M+l).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 5,34 (m, 1H), 8,04 (d,2H), 8,15 (1H).

Príklad 44

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-(2-pyrimidinyloxy)-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 398 (M + 1).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 5,35 (m, 1H), 6,89 (m, 1H), 8,15 (d, 2H).

Príklad 45

3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-[4-(l-pyryl)fenoxy]-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 461 (M + 1).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,05 (d, 3H), 2,91 (s, 3H), 4,73 (m, 1H), 6,30 (m, 2H), 6,84 (m, 2H), 6,96 (m, 2H), 7,25 (m, 2H).

Príklad 46

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-(3-kyanofenoxy)-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 420 (M).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,86 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 1,07 (d, 3H), 2,92 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 6,70 (d, 1H), 7,32 (m, 2H), 7,44 (m, 2H), 7,78 (m, 1H), 8,24 (1H).

Príklad 47

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-(l-naftyloxy)-5a-androstan Hmotnostné spektrum: m/z 445 (M).

Príklad 48

3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-(3-chlór-4-metylfenoxy)-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 445 (M+l).

400 MHz Ή NMR (CDClj): δ 0,84 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,92 (s, 3H), 4,76 (m, 1H), 6,62 (m, 1H), 6,81 (m, 1H), 7,12 (d, 1H).

Príklad 49

3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-[4-(5-oxazolyl)fenoxy]-5a-androstan

Hmotnostné spektrum: m/z 463 (M + 1).

400 MHz ‘H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,05 (d, 3H), 2,91 (s, 3H), 4,76 (m, 1H), 6,86 (d, 2H), 7,21 (s, 1H), 7,53 (d, 2H), 7,84 (s, 1H).

Príklad 50

3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16p-(4-nitrofenoxy)-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 21 s použitím l-fluór-4-nitrobenzénu namiesto 4-fluórbenzonitrilu.

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 1,05 (d, 3H), 2,92 (s, 3H), 3,03 (dd, 1H), 4,81 (q, 1H), 6,87 (d, 2H), 8,17 (d, 2H).

Príklad 51

3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-(4-aminofenoxy)-5a-androstan

Do roztoku 163 mg (0,36 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-(4-nitrofenoxy)-5a-androstanu v 8 ml etylacetátu a 8 ml metanolu sa pridá 25 mg (0,23 mmol) 10 % roztoku paládia na aktívnom uhlí. Vzniknutá reakčná zmes sa 4 hodiny mieša pri teplote miestnosti a v atmosfére vodíka. Po filtrácii cez celit a odparovaní vznikne 148 mg výslednej zlúčeniny, ktorá sa použije bez ďalšieho čistenia na ďalší postup syntézy.

Hmotnostné spektrum: m/z 411 (M + 1).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,84 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 1,37 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,03 (dd, 1H), 4,64 (q, 1H), 6,70 (d, 2H), 6,78 (d, 2H).

Príklad 52

3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16p-(4-acetylaminofenoxy)-5a-.

-androstan «n«t

Do roztoku 48 mg (0,116 mmol) 3-oxo-4-aza-4,7p-dHs·s metyl-16p-(4-aminofenoxy)-5a-androstanu v 1 ml metyl-”4S énchloridu a 0,037 ml (0,46 mmol) pyridínu sa pridá 0,022 ΐ» ml (0,23 mmol) anhydridu kyseliny octovej a 5 mg (0,04' mmol) 4-N,N-dimetylaminopyridínu (DMAP). Vzniknutá reakčná zmes sa pri teplote miestnosti a v atmosfére dusíka mieša cez noc a potom sa riedi 50 ml metylénchloridu a premyje sa 50 ml vody a 50 ml nasýteného roztoku chloridu sodného. Organická vrstva sa suší nad síranom sodným a odparuje sa. Surový produkt sa po absorpcii na tenkú vrstvu silikagélu s hrúbkou 1000 mikrometrov čistí preparatívnou chromatografiou pri elúcii 5 % roztokom metanolu v metylénchloride. Vznikne 51 mg výslednej zlúčeniny.

Hmotnostné spektrum: m/z 453 (M + 1).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,84 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,92 (s, 3H), 3,03 (dd, 1H), 4,68 (q, 1H), 6,76 (d, 2H), 7,11 (s, 1H), 7,33 (d, 2H).

Príklad 53

3-oxo-4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-(4-benzoylaminofenoxy)-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 52, ale s použitím benzoylchloridu namiesto anhydridu kyseliny octovej a trietylamínu namiesto pyridínu a 4-Ν,Ν-dimetylaminopyridínu (DMAP). Hmotnostné spektrum: m/z 515 (M + 1).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,84 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 1,05 (d, 3H), 2,92 (s, 3H), 3,04 (dd, 1H), 4,73 (q, 1H), 6,82 (d, 2H), 7,49 (m, 5H), 7,2 (s, 1H), 7,84 (d, 2H).

Príklad 54

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-(4-metylsulfónamidofenoxy)-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 52, ale s použitím tosylchloridu namiesto anhydridu kyseliny octovej.

Hmotnostné spektrum: m/z 565 (M+l).

400 MHz 'H NMR (CDC1₃): δ 0,84 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,92 (s, 3H), 3,02 (dd, IH), 4,63 (q, IH), 6,34 (s, IH), 6,67 (d, 2H), 6,91 (d, 2H), 7,19 (d, 2H), 7,56 (d, 2H).

Príklad 55 3-oxo-4-aza-4-(2,4-Dimetoxybenzyl)-7P-metyl-16p-hydroxy-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu na výrobu zlúčeniny 12 uvedenom v schéme 5. Zodpovedajúci analóg benzénu (zlúčenina E v schéme 5) sa pripraví podľa postupu opísaného v príklade 36, kde namiesto metylamínu sa použije 2,4-dimetoxybenzylamín.

Príklad 56 3-oxo-4-aza-4-(2,4-Dimetoxybenzyl)-7P-metyl-16P-(4-chlór-fenoxy)-5 a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 23, ale s použitím 3-oxo-4-aza-4-(2,4-dimetoxybenzyl)-7p-metyl-16p-hydroxy-5a-androstanu namiesto 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-hydroxy-5a-androstanu. Výsledná zlúčenina sa použije bez čistenia pre ďalší postup syntézy.

Príklad 57

3-oxo-4-aza-7P-Metyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan

Do roztoku 130 mg (0,23 mmol) 3-oxo-4-aza-4-(2,4-dimetoxybenzyl)-7P-metyl-16p-(4-chlórfenoxy)-5a-androstanu v 1 ml metylénchloridu sa pridá 1 ml kyseliny trifluóroctovej. Vzniknutá reakčná zmes sa cez noc mieša pri teplote miestnosti, rozpúšťadlo sa odstráni odparovaním a zvyšok sa spracuje metylénchloridom. Organický podiel sa premyje nasýteným roztokom uhličitanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného. Po sušení nad síranom sodným a odparovaní vznikne surová zlúčenina, ktorá sa po absorpcii na tenkú vrstvu silikagélu s hrúbkou 1000 mikrometrov čistí preparatívnou chromatografiou pri elúcii 20 % roztokom acetónu v metylénchloride. Vznikne výsledná zlúčenina.

400 MHz H NMR (CDC1₃): δ 0,86 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,01 (d, 3H), 3,07 (dd, IH), 4,67 (q, IH), 5,49 (s, IH), 6,73 (d,2H), 7,18 (d, 2H).

Príklad 58 3-oxo-4-aza-7P-Metyl-16p-fenoxy-5a-androstan

Do roztoku 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstanu v metanole sa pridá 20 % roztok paládia na aktívnom uhlí. Roztok sa 1 deň prctrepáva v atmosfére vodíka pri tlaku 0,336 MPa. Po filtrácii cez celit a odparovaní sa surový produkt čistí rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 20 % roztokom acetónu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny.

400 MHz 'H NMR (CDC1₃): δ 0,86 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,01 (d, 2H), 3,08 (dd, IH), 4,71 (q, IH), 5,48 (s, IH), 6,81 (d, 2H), 6,89 (t, IH), 7,24 (t, 2H).

Príklad 59

3-oxo-4-aza-7p-Metyl-16p-fenoxy-5a-androstan-1 -en

Do roztoku 145 mg (0,35 mmol) 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-fenoxy-5a-androstanu v 3 ml toluéne sa pridá 95 mg (0,42 mmol) DDQ a 360 mg (1,4 mmol) BSTFA. Po pridaní 4,04 mg (0,027 mmol) kyseliny trifluóroctovej sa vzniknutá reakčná zmes mieša cez noc v atmosfére dusíka a pri teplote miestnosti. Pridá sa 4,06 mg (0,035 mmol) metylacetátu, roztok sa mieša 1 hodinu a potom sa cez noc zohrieva pod refluxom. Po vliatí do 75 ml roztoku vody obsahujúceho 160 mg uhličitanu sodného a 120 mg bisultitu sodného sa vodný podiel trikrát extrahuje 40 ml metylénchloridu. Organické podiely sa zlúčia a premyjú 50 ml vody a 50 ml nasýteného roztoku chloridu sodného. Po sušení nad síranom sodným a odparovaní sa surová zlúčenina čistí rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 15 % roztokom acetónu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny.

400 MHz Ή NMR (CDClj): δ 0,92 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 1,02 (d, 3H), 3,34 (dd, IH), 4,72 (q, IH), 5,31 (s, 1 H), 5,80 (d, IH), 6,80 (d, IH), 6,82 (d, 2H), 6,89 (t, IH), 7,24 (t, 2H).

Príklad 60 3-oxo-4-aza-7P-Metyl-16p-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan-1-en

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 59, ale s použitím 3-oxo-4-aza-7p-metyl-16p-(4-chlórfenoxy)-5a-androstanu namiesto 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-fenoxy-5a-androstanu.

400 MHz *H NMR (CDC1₃): δ 0,92 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,02 (d, 2H), 3,34 (dd, IH), 4,67 (q, IH), 5,27 (s, IH), 5,80 (d, IH), 6,73 (d, 2H), 6,78 (d, IH), 7,18 (d, 2H).

Príklad 61 3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-fenoxy-5a-androstan

Do roztoku 60 mg (0,16 mmol) 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-fenoxy-5a-androstanu v 1 ml Ν,Ν-dimetylformamidu sa pridá 8 mg (0,21 mmol) hydridu sodného vo forme 60 % disperzie v minerálnom oleji. Po 30 minútach miešania pri teplote miestnosti sa pridá pod dusíkom 40 mg (0,28 mmol) metyljodidu a v miešaní sa pokračuje cez noc. Zmes sa zriedi 50 ml etylacetátu a vzniknutý roztok sa premyje 50 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 50 ml vody a 50 ml nasýteného roztoku chloridu sodného. Organická vrstva sa suší nad síranom sodným a odparuje sa. Surový produkt sa po absorpcii na silikagéli čisti rýchlou chromatografiou pri elúcii roztokom 10% acetónu v metylénchloride za vzniku výslednej zlúčeniny.

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,05 (d, 2H), 2,91 (s, 3H), 3,02 (dd, IH), 4,72 (q, IH), 6,81 (d, 2H), 6,89 (t, IH), 7,24 (t, 2H).

Príklad 62 3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan-l-en

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 61, ale s použitím 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan-l-enu namiesto 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-fenoxy-5a-androstanu.

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,87 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,07 (d, 2H), 2,93 (s, IH), 3,34 (dd, IH), 4,68 (q, IH), 5,84 (d, IH), 6,69 (d, IH), 6,73 (d, 2H), 7,18 (d, 2H).

Príklad 63

-oxo-4-aza-4-(2,4-Dimetoxybenzyl)-7 β-metyl-16 β-(3 -chlór-4-metylfenoxy)-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 56, s použitím 2-chlór-4-fluórtoluénu namiesto 1-chlór-4-fluórbenzénu. Zlúčenina sa použije v ďalšej časti syntézy bez čistenia.

Príklad 64

3-oxo-4-aza^-Metyl-16β-(3-ε1ιΙόΓ-4-πιεΙγ1Γεηοχν)-5α-3ηdrostan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 57, ale s použitím 3-oxo-4-aza-4-(2,4-dimetoxybenzyl)^-metyI-^-(3-chlór-4-metylfenoxy)-5a-androstanu namiesto 3-oxo-4-aza-(2,4-dimetoxybenzyl)-7fi-metyl-l 6β-(4-chlórfenoxy)-5a-androstanu.

400 MHz Ή NMR (CDClj): δ 0,86 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,01 (d, 3H), 2,26 (s, 3H), 3,08 (dd, IH), 4,66 (q, IH), 5,59 (s, IH), 6,62 (m, IH), 6,81 (d, IH), 7,06 (d, 2H).

Príklad 65 3-oxo-4-aza^-Metyl-^-(4-metylfenoxy)-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 58, ale s použitím 3-oxo-4-aza^-metyl-^-(3-chlór-4-metylfenoxy)-5a-androstanu namiesto 3-oxo-4-aza^-metyl-16β-(4<Ιι1όΓίεηοχ/)-5α-3ηΰΓθ5ΐ3ηη. 400 MHz Ή NMR (CDClj): δ 0,86 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 2,25 (s, 3H), 4,69 (q, IH), 6,71 (d, 2H), 7,03 (d, 2H).

Príklad 66 3-oxo-4-aza^-Metyl-^-(4-metylfenoxy)-5a-androstan-1-en

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 59, ale s použitím 3-oxo-4-aza^-metyl-^-(4-metylfenoxy)-5a-androstanu namiesto 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16β-fenoxy-5α-androstanu.

400 MHz Ή NMR (CDClj): δ 0,92 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 2,25 (s, 3H), 3,34 (dd, IH), 4,68 (q, IH), 5,35 (s, IH), 5,81 (d, IH), 6,71 (d, 2H), 6,79 (d, IH), 7,03 (d, 2H).

Príklad 67

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16β-(4-π^1ίΐ3Κ^)-5(Χ-3η£1Γ05tan-l-en

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 61, ale s použitím 3-oxo-4-aza^-metyl-^-(4-metylfenoxy)-5a-androstanu namiesto 3-oxo-4-aza^-metyl-16β-fenoxy-5α-androstanu.

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,91 (s, 3H), 3,05 (dd, IH), 4,69 (q, 1 H), 6,71 (d, 2H), 7,04 (d, 2H).

Príklad 68

3-oxo-4-aza-4,7p-Dimetyl-16β-fluór-5α-androstan

Na zlúčeninu označenú ako medziprodukt 12 (schéma 5) sa pri teplote miestnosti pôsobí trifluoridom dietylaminosíry v metylénchloride. Po čistení chromatografiou na stĺpci silikagélu vznikne výsledná zlúčenina s výťažkom 64%.

Hmotnostné spektrum: m/z 321 (M).

400 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,91 (s, 3H), 3,05 (dd, IH), 4,69 (q, IH), 6,71 (d, 2H), 7,04 (d, 2H).

Príklad 69

3-oxo-4-aza-4^-Dimetyl-16P-kyano-5a-androstan

Zlúčenina sa získa premenou medziproduktu 25 uvedeného v prehľade 77 na derivát metánsulfónový pôsobením metánsulfonylchloridom alebo roztokom anhydridu kyseliny metánsulfónovej v metylénchloride za prítomnosti organickej bázy, ako napríklad pyridínu, trietylamínu a 4-N,N-dimetylaminopyridínu (DMAP). Oddelenie metánsulfónovej skupiny sa dosiahne zohrievaním v zodpovedajúcom rozpúšťadle, ako sú Ν,Ν-dimetylformamid alebo dimetylsulfoxid, za prítomnosti kyanidu sodného alebo draselného.

Príklad 70

3- oxo-4-aza-4-Metyl-163-(l-hexyl)-5a-androstan

Časť 1: 3 -oxo-4-aza-4-metyl-^-(l-hexenyl)-5a-androstan

Do banky s guľatým dnom s objemom 50 ml sa pod dusíkom pridá 141 mg (0,33 mmol) 1-hexyl-trifenylfosfóniumbromidu a následne 1 ml čerstvo destilovaného tetrahydrofuránu. Vzniknutá zmes sa ochladí na teplotu 0 °C a pridá sa 0,132 ml (0,33 mmol) 2,5 M roztoku butyllítia v hexánoch za vzniku svetlooranžového roztoku. Roztok sa 10 minút mieša pri teplote 0 °C a potom sa do roztoku vloží 50 mg (0,165 mmol) 4-aza-4-metyl-5a-an-drostan3,16-diónu v 0,5 ml tetrahydrofuránu. Reakčná zmes sa nechá zohriať na teplotu miestnosti a cez noc sa mieša. Po rozdelení zmesi do 10 ml vody a 20 ml etylacetátu sa organické podiely oddelia, premyjú sa dvakrát 10 ml 0,5 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej a nasýteným roztokom chloridu sodného a sušia sa nad síranom sodným. Vzniknutý zvyšok sa po odparovaní čistí rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 1 % roztokom metanolu a metylénchloridu. Vznikne 29,6 mg výslednej zlúčeniny, ktorá sa bez ďalšieho čistenia použije v nasledujúcej častipríkladu.

i

Časť 2: 3-oxo-4-aza-4-metyl-16β-( 1 -hexyl)-5a-androstan

Pri teplote miestnosti sa 1 hodinu za prítomnosti 5 mgoxidu platiny hydrogenuje roztok 22 mg výslednej zlúčeniny z predchádzajúcej časti 1 v 0,5 ml etylacetátu v banke naplnenej plynným vodíkom. Katalyzátor sa odstráni filtráciou s použitím Milles-HV filtra, filtrát sa odparí a vzniknutá zlúčenina sa čistí rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii 20 % roztokom acetónu v hexáne za vzniku výslednej zlúčeniny s výťažkom 5,2 mg. Hmotnostné spektrum: m/z 374 (M + 1).

400 MHz ’H NMR (CDClj): δ 2,42 (dd, 2H), 2,90 (s, 3H), 3,00 (dd, IH).

Príklad 71

4- aza-4,7P-Dimetyl-16β-(4-chlórbenzylidén)-5α-androstan-3-on

Podľa reakčnej schémy 14 sa zohrieva pri teplote 80 °C 1 hodinu roztok 32 mg (0,1 mmol) 4-aza-4^-dimetyl-5a-androstan-3,17-diónu (príklad 11), 5 mg (1,02 ekvivalentov) hydridu sodného, 27 mg (1,02 ekvivalentov) dietyl-4-chlórbenzylfosfonátu a 0,5 ml dimetylformamidu. Reakčná zmes sa ochladila, zriedila sa dichlórmetánom a premyla sa dvakrát vodou a potom nasýteným roztokom chloridu sodného. Po sušení nad bezvodým síranom horečnatým, filtrácii a zahustení vznikne požadovaný produkt, ktorý sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí chromatografiou pri elúcii zmesou hexánov a izopropanolu v pomere 4:1. Vznikne zmes E/Z izomérov v pomere 5:1. Hmotnostné spektrum zmesi E/Z izomérov: m/z 389.

SK 281645 Β6

500 MHz *H NMR (CDClj): δ 0,75 (s, 3H), 0,82 (s, 3H), 0,90 (d, 3H), 2,96 (s, 3H), 3,08 (dd, 1H), 6,34 (s, 0,4H), 6,41 (s, 0,6H), 7,18-7,38 (m, 5H).

Príklad 72 4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-benzylidén-5a-androstan-3-on

Zlúčenina sa vyrobí podľa postupu uvedeného v predchádzajúcom príklade 71, kde namiesto dietyl-4-chlórbenzylfosfonátu sa použije dietylbenzylfosfonát. Hmotnostné spektrum: m/z 390.

500 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,75 (s, 3H), 0,88 (s, 3H), 1,05 (d, 3H), 2,94 (s, 3H), 3,08 (dd, 1H), 6,28 (s, 0,4H), 6,35 (s, 0,6H), 7,15 - 7,35 (m, 5H).

Príklad 73

4-aza-4,7P-Dimety1-16p-(4-metylbenzylidén)-5a-androstan-3-on

Zlúčenina sa vyrobí podľa postupu uvedeného v predchádzajúcom príklade 71, kde namiesto dietyl-4-chlórbenzylfosfonátu sa použije dietyl-4-metylfosfonát. Hmotnostné spektrum: m/z 404.

500 MHz 'H NMR (CDClj): δ 0,78 (s, 3H), 0,85 (s, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,94 (s, 3H), 3,08 (dd, 1H), 6,30 (s, 0,4H), 6,38 (s, 0,6H), 7,10 - 7,24 (m, 5H).

Príklad 74 4-aza-4,7p-Dimetyl-16-(4-chlórbenzyl)-5a-androstan-3-on

Do roztoku 33 mg 4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-chlórbenzylidén)-5a-androstan-3,17-diónu uvedeného v príklade 71 v 4 ml etanolu sa pridá roztok 5 % rodia na aktívnom uhlí a vzniknutá čierna suspenzia sa mieša v banke s obsahom vodíka. Po 2 hodinách sa filtráciou oddelí katalyzátor, filtrát sa zahusti a čistí chromatografiou na stĺpci silikagélu pri elúcii zmesou hexánu a acetónu v pomere 3 : 1 za vzniku zmesi izomérov výslednej zlúčeniny v pomere 3:1. Hmotnostné spektrum: m/z 427.

500 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,84 (s, 3H), 0,86 (s, 3H), 1,02 (d, 3H), 2,92 (bs, 2,7H), 2,93 (bs, 1,3H), 2,98 (s, 3H), 3,02 (dd, 1H), 7,10 (d, 2H), 7,25 (d, 2H).

Príklad 75 4-aza-4,7P-Dimetyl-16-(4-metylbenzyl)-5a-androstan-3-on

Zlúčenina sa pripraví podľa rovnakého postupu, ktorý sa opisuje na prípravu výslednej zlúčeniny z príkladu 74. Hmotnostné spektrum: m/z 408.

500 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,86 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,95 (s, 2H), 2,96 (s, 1H), 3,05 (dd, 1H), 7,06 - 7,11 (m, 4H).

Príklad 76 4-aza-4,7P-Dimetyl-16-(3-pyridylmetyl)-5a-androstan-3-on

Zlúčenina sa pripraví podľa rovnakého postupu, ktorý sa opisuje na prípravu výslednej zlúčeniny z príkladu 74, s použitím 3-pyridylmetyldimetylfosfonátu. Hmotnostné spektrum: m/z 395.

500 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,89 (s, 3H), 0,88 (s, 3H), 1,03 (d, 3H), 2,93 (bs, 2H), 2,94 (bs, 1H), 2,98 (s, 3H), 3,04 (dd, 1H), 7,10 (d, 2H), 7,25 (d, 2H), 7,58 (s, 1H), 8,55 (s, 2H).

Príklad 77 4-aza-4,7p-Dimetyl-16a-metánsulfonyl-5a-androstan-3-on

Podľa reakčnej schémy 13 sa do roztoku 65 mg (0,2 mmol) 4-aza-4,7P-dimetyl-16a-hydroxy-5a-androstan-3,17-diónu v bezvodom dichlórmetáne pridá katalytické množstvo 4-N,N-dimetylaminopyridínu (DMAP) a násled ne 45 mg (1,1 ekvivalent) anhydridu kyseliny metánsulfónovej. Po 15 minútach sa zmes zriedi dichlórmetánom a premyje sa trikrát 1 M roztokom kyseliny chlorovodíkovej, 1 M roztokom uhličitanu sodného, vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného. Po sušení nad bezvodým síranom horečnatým, filtrácii a zahustení vznikne dostatočne čistá výsledná zlúčenina Hmotnostné spektrum: m/z 398.

500 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,78 (s, 3H), 0,85 (s, 3H), 1,02 (d, 3H), 2,95 (s, 3H), 3,1 (dd, 2H), 5,18 (m, 1H).

Príklad 78

4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-tiofenoxy-5a-androstan-3-on

Do roztoku 50 μί (2,5 ekvivalentu) tiofenolu v bezvodom tetrahydrofuráne sa pridá 20 mg (2,6 ekvivalentov) hydridu sodného. Po 20 minútach miešania sa pridá roztok 65 mg (0,2 mmol) 4-aza-4,7p-dimetyl-16a-metánsulfonyl-5a-androstan-3-onu (príklad 77) v tetrahydroftrráne a vzniknutá zmes sa 20 hodín mieša pri teplote miestnosti. Reakcia sa skončí pridaním 1 M roztoku chloridu amónneho a po zriedení etylacetátom sa roztok premyje vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad bezvodým síranom horečnatým. Vzniknutý zvyšok sa filtruje a zahustí za vzniku požadovaného produktu, ktoiý sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí chromatografiou pri elúcii zmesou hexánov a izopropanolu v pomere 9:1. Hmotnostné spektrum: m/z 412.

500 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,86 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 1,06 (d, 3H), 2,94 (s, 3H), 3,06 (dd, 2H), 3,65 (m, 1H), 7,26 - 7,0 (m, 5H).

Príklad 79

4-aza-4,7p-Dimetyl-16P-(4-chlórtiofenoxy)-5a-androstan-3-on

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu prípravy 4-aza-4,7p-dimetyl-16p-tiofenoxy-5a-androstan-3-onu, výslednej zlúčeniny z príkladu 78, ale s použitím 4-chlórtiofenolu namiesto tiofenolu.

Hmotnostné spektrum: m/z 446.

500 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,94 (s, 3H), 3,02 (dd, 2H), 3,61 (m, 1H), 7,22 (d, 2H), 7,32 (d, 2H).

Príklad 80

4-aza-4,7P-Dimetyl-16p-(4-fluórtiofenoxv)-5a-androstan-3-on

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu prípravy 4-aza-4,7p-dimetyl-16p-tiofenoxy-5a-androstan-3-onu, výslednej zlúčeniny z príkladu 78, ale s použitím 4-fluórtiofenolu namiesto tiofenolu.

Hmotnostné spektrum: m/z 431.

500 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,85 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 1,05 (d, 3H), 2,92 (s, 3H), 3,03 (dd, 2H), 3,51 (m, 1H), 6,99 (d, 2H), 7,35 (d, 2H).

Príklad 81

4-aza-4,7p-Dimetyl-16p-(4-metyltiofenoxy)-5a-androstan-3-on

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu prípravy 4-aza-4,7P-dimetyl-16P-tiofenoxy-5a-androstan-3-onu, výslednej zlúčeniny z príkladu 78, ale s použitím 4-metyltiofenolu namiesto tiofenolu.

Hmotnostné spektrum: m/z 426.

500 MHz ’H NMR (CDClj): δ 0,75 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,94 (s, 3H), 3,03 (dd, 2H), 3,59 (m,lH), 7,09 (d, 2H), 7,22 (d, 2H).

Príklad 82

4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-(4-metoxytiofenoxy)-5a-androstan-3-on

Zlúčenina sa pripraví podľa postupu prípravy 4-aza-4,7p-dimetyl-16P-tiofenoxy-5a-androstan-3-onu, výslednej zlúčeniny z príkladu 78, ale s použitím 4-metoxytiofenolu namiesto tiofenolu.

Hmotnostné spektrum: m/z 443.

500 MHz Ή NMR (CDC1₃): δ 0,81 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 1,18 (d, 3H), 2,93 (s, 3H), 3,02 (dd, 2H), 3,50 (m, IH), 3,81 (s, 3H), 7,45 (d, 2H), 7,67 (d, 2H).

Príklad 83

4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-fenylsulfinyl-5a-androstan-3-on

Do roztoku 20 mg (0,05 mmol) 4-aza-4,7p-dimetyl-16p-tiofenoxy-5a-androstan-3-onu, výslednej zlúčeniny z príkladu 78, v dichlórmetáne sa pri teplote 0 C pridá 11 mg (1 ekvivalent) mCPBA a vzniknutý roztok sa 1 hodinu mieša. Po zriedení dichlórmetánom sa vzniknutý roztok premyje 1 M roztokom uhličitanu sodného, vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad bezvodým síranom sodným a vzniknutý zvyšok sa po absorpcii na stĺpci silikagélu čistí chromatografiou. Vznikne zmes diastereomérov výslednej zlúčeniny v pomere 4,6 :1. Hmotnostné spektrum: m/z 428.

500 MHz ’H NMR (CDC1₃): δ 0,83 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 1,01 (d, 3H), 2,92 (s, 3H), 3,01 (dd, 2H), 3,19 (m, 0,85H),

3,55 (m, 0,15H), 7,5 - 7,70 (m, 5H).

Príklad 84

4-aza-4,7P-Dimetyl-16P-fenylsulfinyl-5a-androstan-3-on

Do roztoku 912 mg (0,03 mmol) 4-aza-4,7P-dimetyl-16P-fenylsulfinyl-5a-androstan-3-onu, výslednej zlúčeniny z príkladu 83, v dichlórmetáne sa pridá 9 mg (1,5 ekvivalentu) mCPBA a vzniknutý roztok sa 3 hodiny mieša. Po zriedení dichlórmetánom sa vzniknutý roztok premyje 1 M roztokom uhličitanu sodného, vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad bezvodým síranom sodným a vzniknutý zvyšok ako požadovaný produkt sa po absorpcii na stĺpec silikagélu čistí chromatografiou pri elúcii zmesou hexánu a izopropanolu v pomere 7:3. Hmotnostné spektrum: m/z 444.

500 MHz Ή NMR (CDC1₃): δ 0,85 (s, 3H), 0,91 (s, 3H), 1,0 (d, 3H), 2,95 (s, 3H), 3,05 (dd, 2H), 3,55 (m, 0,15H), 7,41 (t, IH), 7,55 (t, 2H), 7,90 (d, IH).

Príklad 85

-oxo-4-aza-4,16p-Dimetyl-5a-androstan

Zlúčenina sa pripraví zo 4-aza-4,16P-dimetyl-5a-androstan-3,17-diónu premenou na zodpovedajúci 17-trifluóracetát. Redukciou tohto trifluóracetátu bežnými metódami vznikne výsledná zlúčenina.

Hmotnostné spektrum: m/z 304 (M + 1).

400 MHz ‘H NMR (CDC1₃): δ 0,76 (s, 3H), 0,85 (s, 3H), 1,04 (d, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,01 (dd, 2H).

Biologické skúšky

Príprava 5-reduktázy z ľudskej prostaty a pokožky hlavy

Vzorky ľudského tkaniva boli zmrazené, mleté v zmrazenom stave a potom homogenizované v 40 mM pufri fosfátu draselného s pH 6,5 s obsahom 5 mM síranu horečnatého, 25 mM chloridu draselného, 1 mM fenylmetylsulfonylchloridu, 1 mM ditiotreitolu DTT a 0,25 M sacharózy, na homogenizáciu bol použitý Potter-Elvehjemov homogenizátor. Odstredením homogenátu pri 1500 g počas 15 minút bola pripravená surová usadenina bunkových jadier. Po dvojnásobnom premytí a znovu uvedení do suspenzie v dvoch objemoch pufra bol pridaný glycerol do konečnej koncentrácie 20 %. Suspenzia enzýmu bola zmrazená po jednotlivých podieloch na -80 °C. Reduktáza z prostaty aj z pokožky hlavy bola za týchto podmienok stála najmenej 4 mesiace.

Klonovaný enzým

Na stanovenie IC₅₀ boli skúmané inhibitory 5a-reduktázy a 2 rozpustené v etanole v sériovom riedení na požadované koncentrácie. 5a-reduktáza rekombinantného typu 1 po expresii baculovírom bola vopred inkubovaná s inhibítorom (0,1 až 1000 nM) v 40 mM fosforečnanu sodného s pH 7,0 s obsahom 500 mikroM NADPH, 1 mM DTT a 1 mg/ml BSA celkom 18 hodín pri teplote 4 C. Reakcia sa začne pridaním [7-³H]T (NEN, 20 Ci/mmol) a NADPH do konečnej koncentrácie 0,3 mikroM a NADPH a zmes sa inkubuje 90 minút pri teplote 37 °C. Podobne bola vopred inkubovaná aj rekombinantná 5a-reduktáza 2 z toho istého zdroja s inhibítorom 1 až 10 000 nM, v 40 mM citronanu sodného s pH 5,5 s obsahom 500 mikroM NADPH, 1 mM DTT a 1 mg/ml BSA celkom 18 hodín pri teplote 4 °C. Reakcia sa začala pridaním [7-³H]T (NEN, 20 Ci/mmol) do 0,3 mikroM a NADPH do koncentrácie 500 mikroM. Premena T na DHT bola sledovaná detektorom s následným delením pomocou HPLC v reverznej fáze (stĺpec Whatman RACI1 C18, prietok 1 ml/min., 0,1 % TFA v zmesi vody a metanolu 42 : 58, T: čas retencie 6,3 minút, DHT 9,7 minút).

Skúška s 5a-reduktázou

Reakčná zmes pre 5a-reduktázu typu 1 obsahovala 40 mM fosforečnanu draselného s pH 6,5, 5 mikroM [7-³H]-testosterónu, 1 mM ditiotreitolu a 500 mikroM NADPH ý konečnom objeme 100 mikrolitrov. V typických prípadoch bola skúška začatá pridaním 50 až 100 mikrogramov homogenátu prostaty alebo 75 až 200 mikrogramov homogenátu pokožky hlavy a zmes bola inkubovaná pri 37 °C. Po 10 až 50 minútach bola reakčná zmes zmiešaná na zastavenie reakcie s 250 mikrolitrami zmesi 70 % cyklohexánu a 30 % etylacetátu s obsahom 10 mikrogramov DHT a T. Vodná a organická vrstva boli oddelené odstredením pri 14 000 otáčkach/min. v Eppendorfovej mikroodsterdivke. Organická fáza bola podrobená HPLC v normálnej fáze (stĺpec 10 cm Whatman, oxid kremičitý, partisil 5, rovnovážny stav v 70 % cyklohexánu a 30 % etylacetátu, prietok 1 ml/min., čas retencie: DHT 6,8 až 7,2 minút, androstandiol 7,6 až 8,0 minút, T 9,1 až 9,7 minút. Systém pre HPLC bol tvorený zariadením Waters Model 680 na vytvorenie gradientu, vzorky boli odoberané zariadením Hitachi Model 655A, prístroj bol vybavený UV detektorom (Applied Biosystems Model 757) a analyzátorom rádioaktívneho zariadenia (radiomatic Model A120). Premena T na DHT bola sledovaná prietokovým detektorom rádioaktivity po zmiešaní materiálu, vytekajúceho zo stĺpca pre HPLC s jedným objemom scintilačnej kvapaliny Flo Scint 1 (Radiomatic). Za opísaných podmienok bola produkcia DHT lineárna po dobu najmenej 25 minút. Jedinými steroidmi, ktoré bolo možné dokázať v preparátoch z ľudskej prostaty a pokožky hlavy boli T, DHT a androstandiol.

Sledovanie inhibície

Zlúčeniny boli rozpustené v 100 % etanole. Hodnoty IC₅o predstavujú koncentráciu inhibítora, ktorá je potrebná na zníženie účinnosti enzýmu na 50 % v porovnaní s kontrolou. Hodnoty IC₅o boli stanovené šesťbodovou titráciou, pričom koncentrácia inhibítora sa pohybovala v rozmedzí 0,1 až 1000 nM.

Reprezentačné zlúčeniny podľa vynálezu boli pri uvedenom teste podrobené skúškam na účinnosť na 5a-reduktázu typu 1 a 2. V prípade inhibície enzýmu typu 1 mali zlúčeniny IC50 nižšie než 600 nM, pre väčšinu zlúčenín v rozmedzí 0,3 až 200 nM. Pre enzým typu 2 mali tie isté látky hodnoty IC₅₀ vyššie než 155 nM, pre väčšinu zlúčenín vyššie než 1000 nM. Každá zo skúmaných látok mala najmenej dvojnásobnú selektivitu pre typ 1 enzýmu v porovnaní s typom 2, väčšina látok mala desaťnásobnú alebo vyššiu selektivitu pre typ 1 enzýmu. Výsledky dokazujú použiteľnosť zlúčenín podľa vynálezu na liečenie uvedených stavov.

Zlúčeniny, uvádzané ako inhibítory 5a-reduktázy 2 majú účinnosť pri skúške na inhibíciu tohto izoenzýmu, podobne inhibítory typu 1 majú schopnosť spôsobiť inhibíciu izoenzýmu 1.

Skúška s papilou ľudského vlasu

Papila je malá skupina buniek na báze každého vlasového folikulu a všeobecne sa uznáva, že ide o skupinu buniek, ktorá je príčinou rastu vlasov. Bolo dokázané, že tieto skupiny buniek produkujú 5a-reduktázu, a preto je možné prípadné inhibítory podrobiť skúškam na bunkových kultúrach týchto buniek.

Izolované bunkové kultúry boli pripravené podľa publikácií Messenger A. G., The Culture of Dermal Papilla Cells From Human Hair Follicles, Br. J. Dermatol., 110, 685 až 689, 1984 a Itami S. a ďalší, 5a-Reductase Activity In Cultured Human Dermal Papilla Cells From Beard Compared With Reticular Dermal Fibrobalsts, J. Invest. Dermatol, 94, 150 až 152, 1990. Bunkový materiál z brady a z okcipitálnej časti vlasovej pokožky dvoch jednotlivcov bol použitý v uskutočnení všetkých pokusov. Bunkový materiál bol pestovaný do vytvorenia súvislej vrstvy medzi

4. až 6. subkultúrou. Vrstvy boli dvakrát opláchnuté fyziologickým roztokom chloridu sodného s fosfátovým pufrom, oddelené od podložky a vložené do skúmavky pre odstredivku. Potom bola bunková suspenzia odstredená 10 minút pri 1500 otáčkach/minútu pri 4 °C. Usadenina bola znova uvedená do suspenzie v 20 mM tris-HCl-pufri s pH 7,5 pri 4 °C, pufer obsahoval 250 mM sacharózy, 1 mM MgCl₂ a 2 mM CaCl₂ a bol premiešaný desiatimi prechodmi injekčnou striekačkou. Surový homogenát bol potom homogenizovaný homogenizátorom zo skla s teflónovým povlakom a bol použitý k štúdiám na lokalizáciu 5a-reduktázy. Na tento účel bol odstredený 10 minút pri 800 g za vzniku usadenín jadier. Supematant bol ďalej odstredený 15 minút pri 10 000 g za získania usadeniny mitochondrií. Potom bol supematant odstredený pri 10 000 g 60 minút na získanie usadeniny mikrozómov a cytozolu. Každá časticová frakcia bola dvakrát premytá a potom znova uvedená do suspenzie v pufri.

Štandardná inkubačná zmes obsahovala 50 nM [³HJ-testosterónu, 1 mMNADPH, 100 mM citronanu sodného s pH 5,5 alebo 100 mM tris-HCl s pH 7,5 a 50 mikrolitrov bunkového homogenátu v konečnom objeme 100 mikrolitrov. Každá skúmavka obsahovala 50 až 100 mikrogramov bunkovej bielkoviny. Inkubácia trvala 30 minút pri teplote 37 °C. V priebehu inkubácie je reakcia priamo úmerná reakčnej dobe. Na zistenie optimálneho pH bol použitý citrátový pufer s pH 4,5 až 6,5 a tris-HCl-pufer s pH 7,0 až 9,0. Obsah bielkoviny bol stanovený podľa publikácie Lowry a ďalší, Proteín Measurement With The Folin Phenol Reagent, J. Biol. Chem., 193, 265 až 275, 1951.

Po inkubácii sa reakcia zastaví pridaním štvornásobného objemu zmesi chloroformu a metanolu v objemovom pomere 2 : 1 s obsahom 110 mikrogramov každého z nosných steroidov. Extrahované steroidy sa analyzujú chromatografiou na tenkej vrstve podľa publikácie Gomez a ďalší, In Vitro Metaboliym Of Testosterone-4-¹⁴C a Delta-androstene-3,17-dione-4-¹⁴C In Human Skin. Biochem., 7, 24 až 32, 1968 a čistota každého steroidu sa stanoví prekryštalizovaním. Účinnosť 5a-reduktázy sa vyjadrí ako súhrne množstvo vytvoreného dihydrotestosterónu, androstandiolu a androstandiónu. [l,2-³H]-testosterón s aktivitou 55,2 Ci/mmol sa získa od New England Nuclera Corporation (Boston, MA), neznačené steroidy je možné získať od Sigma Chemical Company (St-Louis, MO). Fetálne teľacie sérum je možné získať od Hazleton (Lenaxa, Kansan). Všetky ostatné chemické látky boli analyticky čisté.

Model akné na krysách s normálnou srsťou

Dospelé krysy s modelom akné sú krysy, ktorých celý chrbát pokrýva pokožka hnedej farby s mazotokom, a u ktorých dochádza k abnormálne zvýšenej produkcii mazu, ako bolo dokázané, ide o dôsledok androgénnych hormónov v obehu. Roztoky s obsahom 0,1, 0,05 a 0,025 % zvoleného inhibítora 5a-reduktázy boli pripravené vo vhodnom nosnom prostredí ako zmesi propylénglykolu, izopropanolu, izopropylmyristátu a vody v pomere 50 : 30 : 2 : 18 a miestne nanesené na chrbát dospelých krýs samcov uvedeného typu krýs, bolo nanášaných 0,2 ml prostriedku na každé zviera denne počas 4 týždňov. Pri kontrolách bolo použité len nosné prostredie a okrem toho bolo päť samcov vykastrovaných. Po dvoch týždňoch dochádza k zlepšeniu mazotoku v závislosti od použitej dávky, po 4 týždňoch bol dve hodiny pred usmrtením krýs intraperitoneálne podaný brómdeoxyuridín BrdU v dávke 200 mg/kg. Vzorky pokožky boli inkubované s 20 mM EDTA vo fosfátovom pufri 1,5 hodín pri 30 C. Vrstva s obsahom mazových žliaz a vlasových vačkov bola oddelená a fixovaná formalínom na imunologické farbenie BrdU. Bunkový materiál, v ktorom je možné dokázať syntézu DNA a BrdU-pozitívnc jadro je uložený na vonkajšom okraji žliaz. Množstvo buniek vo fáze S sa stanoví zariadením na mikrofotografie. Pri použití materiálu, fixovaného formaldehydom sa zmrazené rezy farbia pôsobením 1 % osmia a meria sa rozmer vačku. Pozitívny inhibítor 5a-reduktázy bude pri tejto skúške znižovať produkciu mazu inhibíciou rýchlosti odlupovania bunkového materiálu za súčasného zníženia rozmeru žliaz.

Ďalej bude uvedený príklad postupu, ktorý je možné použiť na detekciu rastu vlasov.

Fotografické postupy na detekciu rastu vlasov A. Makrofotografické postupy

Miesto: ID-karta

Oblasť na hodnotenie počtu vlasov Zariadenie: Film: Kodak-T, maximálne 24 snímkov kamera: Nikon N-6000 šošovka: Mikkor 60 mm f 2,8 blesk: Nikon SB-21B Macroflash registrácia: bežné registračné zariadenie.

Postup

Pri získavaní týchto klinických fotografií môže byť jedinou premennou veličinou počet vlasov. Typ emulzie filmu, osvetlenie, zameranie, expozícia a vyvolávanie musí zostať stále.

1. Oblasť, v ktorej budú počítané vlasy sa pripraví tak, že sa uloží malé označenie s veľkosťou približne 1 mm na okraj bezvlasového úseku, bezprostredne v blízkosti stredu celej oblasti pri použití bežného označovacieho zariadenia alebo ručne pomocou ihly a atramentu. Oblasť rozmeru približne 2,5 x 2,5 cm okolo značky sa ostrihá nakrátko na dĺžku vlasov približne 2 mm. Oddelené vlasy sa vyfotografujú po odstránení z hlavy. Na ľahšie oddelenie je možné použiť stlačený vzduch alebo umytie pokožky etanolom.

2. Zväčšenie: každá šošovka zväčšovala v pomere 1 : 1,2. Otvor; každá snímka bola vytvorená pri 1722.

Film: T-max (24 snímok).

3. Oblasť po strihaní vlasov bola trikrát vyfotografovaná pri -2/3,0 a+2/3 f).

Skúsený pracovník označí pomocou séra všetky viditeľné vlasy. Označenie sa vykonáva tak, že sa cez fotografiu položi priehľadný materiál, na ktorom sa označenie vykoná namiesto na fotografii. Vytvorené body sa potom hodnotia počítačom.

Fotografia sa náhodne označí číslom. Za 6 mesiacov sa vypočítajú výsledky pôvodných fotografií a fotografií po 6 mesiacoch a výsledky sa hodnotia. Po 12 mesiacoch sa takto vyhodnotia pôvodné fotografie, fotografie po 6 mesiacoch a po 12 mesiacoch a výsledky sa opäť hodnotia.

Metodika hodnotenia rastu vlasov bola opísaná v publikácii Olsen E. A. a Delong E., J. Američan Academy of Dermatology, zv. 23, str. 470,1990.

B. Celkový fotografický postup Miesto: farebná karta/chorý Id celková fotografia:

Zariadenie: Film: Kodachrom KR-64 s 24 snímkami, kamera: Nikon N-6000 šošovka: Mikkor 60 mm f 2,8 blesk: Nikon SB-23.

Postup

Pri získavaní týchto fotografií musí byť jedinou premennou veličinou celkový vzhľad oblasti. Musí byť vylúčené oblečenie, nábytok, pohľad na steny a podobne.

1. Celkové fotografie sú získané pred zopnutím vlasov v pevnej polohe, stanovené stereotaktickým zariadením. Vlasy na hlave chorého sa zopnú vždy rovnako tak, aby nezakrývali oblasť bez vlasov.

2. Zväčšenie: každá fotografia zväčšovala v pomere 1 : 6.

Otvor: každá fotografia bola získaná s otvorom f/11.

Film: Kodachrom, 24 snímkov.

3. Boli vykonané tri celkové fotografie chorého pri kompenzácii O.

Vynález bol opísaný v súvislosti s určitými uskutočneniami, je však zrejmé, že by bolo možné navrhnúť ešte celý rad modifikácii taktiež patriacich do rozsahu vynálezu. Bolo by napríklad možné uskutočniť ďalšie zmeny dávok v závislosti od odpovede chorého na liečení alebo by bolo možné použiť iný spôsob podania alebo iný nosič, tak ako je to v danej oblasti techniky bežné. Je teda zrejmé, že rozsah vynálezu nemôže byť na opísané uskutočnenia obmedzený.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty všeobecné vzorca (I) a ich farmaceutický prijateľné soli alebo estery, v ktorých medziuhlíková dvojitá väzba v polohe 1 a 2 môže byť v prípade neprítomnosti prerušovanej čiary aj jednoduchá väzba,

R¹ znamená atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 10 atómami uhlíka,

R² znamená atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 10 atómami uhlíka, jeden zo symbolov

R³ a R⁴ znamená atóm vodíka alebo metyl a druhý znamená

a) aminoskupinu,

b) kyanoskupinu,

c) atóm fluóru,

d) hydroxyskupinu,

e) -C(O)NR^bR^c, kde R^b a R^c nezávisle znamenajú vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, aryl alebo aralkyl s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, ktorá môže byť substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, arylová skupina môže byť substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl,

f) alkyl-X- s 1 až 10 atómami uhlíka v alkylovej časti, s podmienkou, že X nie je -CH(R')-,

g) alkenyl-X- s 2 až 10 atómami uhlíka v alkenylovej časti, s podmienkou, že X nie je -CH(R')-, pričom alkyl s 1 až 10 atómami uhlíka v prípade f) a alkenyl s 2 až 10 atómami uhlíka v prípade g) môže byť substituovaný 1 až 3 substituentami zo skupiny

i) atóm halogénu, hydroxyskupina, kyanoskupina, nitroskupina, mono-, di- alebo trihalogénmetyl, oxoskupina, hydroxysulfonyl alebo karbonyl, ii) hydroxyalkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, alkyloxyskupiriä, alkyltioskupina, alkylsulfonyl vždy s 1 až 6 atómami uhlíka, alkyloxykarbonyl s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, pričom alkylové časti týchto zvyškov sú prípadne ešte substituované 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, iii) aryltioskupina, aryl, aryloxyskupina, arylsulfonyl, aryloxykarbonyl, pričom arylové časti sú prípadne ešte substituované 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkyl alebo alkoxyskupina vždy s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, iv) -CfOjNRhR, -NjR^-CfOjR', -NR^bR^c, kde R^ba R^cmajú uvedený význam,

h) aryl-X-,

i) heteroaryl-Χ-, kde heteroaryl je 5, 6 alebo 7-členný heteroaromatický kruh, ktorý obsahuje aspoň jeden člen zo skupiny, atóm kyslíka v kruhu, atóm síry v kruhu, 1 až 4 atómy dusíka v kruhu alebo kombináciu týchto členov, pričom heteroaromatický kruh môže byť tiež kondenzovaný s jedným benzénovým alebo ďalším heteroaromatickým kruhom a okrem toho môže byť aryl v prípade h) a heteroaryl v prípade i) substituovaný 1 až 3 substituentami zo skupiny

v) atóm halogénu, hydroxyskupina, kyanoskupina, mono-, di- alebo trihalogénmetyl, mono-, di- alebo trihalogénmetoxyskupina, alkenyl s 2 až 6 atómami uhlíka, cykloalkyl s 3 až 6 atómami uhlíka, formyl, hydrosulfonyl, karbonyl alebo ureidoskupina, vi) alkyl, hydroxyalkyl, alkyloxyskupina, alkyl oxyalkyl, alkylkarbonyl, alkylsulfonyl, alkyltioskupina, alkylsulfinyl, alkylsulfónamido skupina, alkylarylsulfónamidoskupina, alkyloxykarbonyl alebo alkyloxykarbonylalkyl vždy s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylových častiach, R'TUN-C/O)-alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, alkanoyl- aminoalkyl alebo aroylaminoalkyl s alkylovými časťami vždy s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom tieto alkylové časti sú prípadne substituované 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka trifluórmetyl, vii) aryl, aryloxyskupina, arylkarbonyl, aryltio skupina, arylsulfonyl, arylsulfinyl, arylsulfónamidoskupina, aryloxykarbonyl, kde arylová časť je prípadne substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, viii) -QOjNR^, -0-0(01-^^, -NÍRhj-QOj-R’, -NR'Tš⁰, R^bC(0)-N(R^c)-, kde R“ a R^c majú význam uvedený v odseku e) alebo -N(R^b)-C(O)OR⁸, kde R⁸ znamená alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo aryl, pričom alkylová časť môže byť substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl a arylová časť je pripadne substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkyl alebo alkoxyskupina vždy s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, ďalej -N(R^b)-C(0)-NR^cR^d, kde R^d znamená vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo aryl, pričom alkylová a arylová časť môžu byť substituované spôsobom, uvedeným v odseku e) pre symboly R^b a R^c, ix) heterocyklická skupina, ktorou je 5, 6 alebo 7-členný kruh, obsahujúci aspoň jeden člen zo skupiny atóm kyslíka v kruhu, atóm síry v kruhu, 1 až 4 atómy dusíka v kruhu alebo kombináciu týchto členov, pričom heterocyklický kruh je aromatický, nenasýtený alebo nasýtený a pripadne kondenzovaný s benzénovým kruhom a prípadne je heterocyklický kruh substituovaný 1 až 3 substituentami tak, ako boli definované v odsekoch v), vi), vii) a viii) s výnimkou heterocyklickej skupiny ix),

j) R³ a R⁴ spoločne tvoria kyslíkový atóm karbonylovej skupiny alebo

k) R³ a R⁴ spoločne tvoria =CH-R⁸, kde R⁸ má význam, uvedený v odseku viii) a

X sa volí zo skupiny

-0-, -S(0)_n-, -C(0)-, -CH(R')-, -C(O)-O-^X, -C(O)-N(R')-^X, -N(R')-C(O)-O-^X, -0-0(0)-14^% -N(R')C(0)-N(R^e)-, -O-CH(R^e)-^x, -N(R')-, kde R' znamená vodík, alkyl s 1 až 3 atómami uhlíka, aryl, arylalkyl s 1 až 3 atómami uhlíka v alkylovej časti alebo heteroaryl, prípadne substituovaný, vo význame z odseku i), pričom ^x znamená väzbu, ktorou je skupina viazaná v polohe 16 vo všeobecnom vzorci (I) a n znamená celé číslo O, 1 alebo 2.
2. 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, v ktorých R¹ znamená atóm vodíka alebo metyl a R² znamená atóm vodíka alebo metyl.
3. 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, v ktorých heteroarylová skupina sa volí zo substituovaných alebo nesubstituovaných skupín pyridyl, fúryl, pyryl, tienyl, izotiazolyl, imidazolyl, benzimidazolyl, tetrazolyl, pyrazinyl, pyrimidyl, chinolyl, chinazolyl, izochinolyl, benzofúryl, izobenzofúryl, benzotienyl, pyrazolyl, indolyl, izoindolyl, purinyl, karbazolyl, izoxazolyl, tiazolyl, izotiazolyl, oxazolyl, benztiazolyl a benzoxazolyl.
4. 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty všeobecného vzorca (I) podľa nároku 3, v ktorých heteroarylová skupina môže byť substituovaná jedným alebo dvoma substituentami.
5. 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, v ktorých heterocyklická skupina sa volí zo substituovaných alebo nesubstituo vaných skupín pyridyl, fúryl, pyryl, tienyl, izotiazolyl, imidazolyl, benzimidazolyl, tetrazolyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, chinolyl, izochinolyl, benzofúryl, izobenzofúryl, benzotienyl, pyrazolyl, indolyl, izoindolyl, purinyl, karbazolyl, izoxazolyl, tiazolyl, oxazolyl, benztiazolyl, benzoxazolyl a dihydroderiváty, tetrahydroderiváty, hexahydroderiváty a nasýtené deriváty týchto látok.
6. 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty všeobecného vzorca (I) podľa nároku 5, v ktorých heterocyklická skupina je pripadne substituovaná jedným alebo dvoma substituentami.
7. 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty všeobecného vzorca (I) podľa nároku 2, v ktorých jeden zo symbolov

R³ a R⁴ znamená atóm vodíka alebo metyl a druhý znamená

b) kyanoskupinu,

c) atóm fluóru,

d) hydroxyskupinu,

f) alkyl-X- s 1 až 10 atómami uhlíka v alkylovej časti, kde alkylová časť je prípadne substituovaná arylovou skupinou a arylová časť môže byť substituovaná 1 až 2 substituentami zo skupiny atóm halogénu alebo alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, s podmienkou, že X nie je -CHÍR⁶)-

g) alkenyl-X- s 2 až 10 atómami uhlíka v alkenylovej časti, s podmienkou, že X nie je -CH(R^e)-,

h) aryl-X-,

i) heteroaryl-Χ-, kde heteroaryl je 5 alebo 6-členný heteroaromatický kruh, ktorý obsahuje 1 až 2 atómy dusíka v kruhu a arylová skupina v prípade h) a heteroarylová skupina v prípade i) je prípadne substituovaná jedným alebo dvoma substituentami zo skupiny

x) atóm halogénu, kyanoskupina, nitroskupina, trihalogénmetyl, trihalogénmetoxyskupina, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, aryl, alkylsulfonyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkylarylsulfónaminoskupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, xi) -NRhR^c alebo R^b-C(0)-N(R^v)-, kde R^b a R^c nezávisle znamenajú vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, aryl alebo arylalkyl s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, pričom alkylová časť môže byť substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl a arylová časť je prípadne substituovaná 1 až 3 substituentami zo skupiny atóm halogénu, alkyl alebo alkoxyskupina vždy s 1 až 4 atómami uhlíka alebo trifluórmetyl, xii) heterocyklickú skupinu s piatimi členmi v aromatickom kruhu, obsahujúcu jeden atóm dusíka v kruhu alebo 1 atóm dusíka a 1 atóm kyslíka v kruhu a

j) R³ a R⁴ spoločne tvoria kyslíkový atóm karbonylovej skupiny,

X sa volí zo skupiny

-0-, -S(0)„-, -CH(R^e)-, -CfOj-NÍR')-’, -O-QOj-NÍR')-’, kde R' znamená vodík, alkyl s 1 až 3 atómami uhlíka, aryl alebo arylalkyl s 1 až 3 atómami uhlíka v alkylovej časti, ^x znamená väzbu, ktorou je skupina pripojená v polohe 16 všeobecného vzorca (I) a n znamená celé číslo O alebo 2.
8. 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 zo skupiny 4-aza-4,7P-dimetyl-5a-androstan-3,16-dión, 4-aza-4-mctyl-5a-androstan-3,16-dión, 3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-hydroxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4-metyl-16fl-(benzylaminokarbonyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-benzoylamino-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-metoxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-alyloxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-(n-propyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16a-hydroxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-(fenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(fenoxy)-5a-androst-l-en,

3-oxo-4-aza-4-metyl-6a-metoxy-5a-androstan,

3 -oxo-4-aza-4-metyl-16p-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androst-l-en,

3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-7p-metyl-16p-(3-chlór-4-metylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(4-metylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(4-metylfenoxy)-5a-androst-1 -en,

3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-[4-(l-pyiol)fenoxy]-5a-androst-1-en,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-hydroxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-metoxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-alyloxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(3,3-dimetylalyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(n-propyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(izo-pentoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,16a-dimetyl-16P-hydroxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-etyloxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-benzyloxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16a-hydroxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-metyltio-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(n-propyltio)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-fluór-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-kyano-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4-metyl-16P-(l-hexyl)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-(n-propyl)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-benzyl-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(4-chlórbenzyl)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,16a-dimetyl-16p-metoxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-kyanofenoxy)-5ct-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(3-kyanofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(4-nitrofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16β-( 1 -naftyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(3-chlór-4-metylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-(4-metylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(terc.-butyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(3-metyl-l-butyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16a-(n-propyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-trifluórmetylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-trifluórmetoxyfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-etyltio-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-etylsulfonyl-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-metylsulfonylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-[4-(4-tolylsulfonylamino)-fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(3-pyridyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-[(4-fenyl)fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-fluórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(2-pyrazinyloxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-[4-(5-oxyzolyl)fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(2-pyrimidinyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-[4-(l-pyryl)fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-aminofenoxy)-5a-andr ostaň,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-acetylaminofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(4-benzyoylaminofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(fenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(2-chlórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-(3-chlórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-ch[órfenoxy)-5a-androst-1-en, i3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16-(4-chlórbenzylidén)-5a-an· ·. drostan, 7

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16-benzylidén-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16-(4-metylbenzylidén)-5a-an- drostan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16-(4-chlórbenzyi)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16-(4-metylbenzyl)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16-(3-pyridylmetyl)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16a-(metánsulfonyl)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-tiofenoxy-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-chlórtiofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-fluórtiofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-metyltiofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-metoxytiofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-fenylsulflnyl-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-fenylsulfonyl-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p,16a-trimetyl-16p-(4-trifluórmetylfenoxy)-5a-androstan, 3-oxo-4-aza-4,7p,16a-trimetyl-16p-hydroxy-5a-androstan, 3 -oxo-4-aza-4,7P, 16a-trimetyl-16 P-metoxy-5a-androstan a farmaceutický prijateľné soli týchto látok a ich analógy, v ktorých medziuhlíková väzba v polohe 1 a 2 je dvojitá väzba, v ktorých R¹ znamená atóm vodíka a/alebo R² znamená atóm vodíka alebo metyl.
9. 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty všeobecného vzorca (I) podľa nároku 7, v ktorých medziuhlí ková väzba v polohe 1 a 2 je jednoduchá väzba, R¹ znamená metyl, R² znamená metyl, R³ znamená nesubstituovanú alebo substituovanú aryloxyskupinu a R⁴ znamená vodík.
10. 16-substituované-4-azaandrostanové deriváty všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 zo skupiny 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-kyanofenoxy)-5a-androstan,

3 -oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16β-(3 -kyanofenoxy)-5 a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,70-dimetyl-16p-(4-nitrofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(l-naftyloxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(3-chlór-4-metylfenoxy-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16p-(4-metylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7B-dimetyl-16p-(4-trifluórmetylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-trifluórmetoxyfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-metylsulfonylfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-[4-(4-tolylsulfonylamino)-fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-[(4-fenyl)fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-fluórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-[4-(5-oxyzolyl)fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-[4-(l-pyryl)fenoxy]-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-aminofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-acetylaminofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-benzoylaminofenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(fenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(2-chlórfenoxy)-5a-androstan,

3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(3-chlórfenoxy)-5a-androstan a farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.
11. 16-substituovaný-4-azaandrostanový derivát všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, ktorým je 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan alebo jeho farmaceutický prijateľné soli.
12. 16-substituovaný-4-azaandrostanový derivát všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, ktorým je 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(4-metylfenoxy)-5a-androst-1 -én.
13. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m , že ako účinnú zložku obsahuje derivát podľa nároku 1.
14. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 13, v y značujúci sa tým, že ďalej obsahuje účinné množstvo inhibítora 5a-reduktázy 2 alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ.
15. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 14, vyzná f u j ú c i sa tým, že ako inhibitor 5ot-reduktázy obsahuje finasterid, epristerid alebo turosterid.
16. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 13, vyzná J u j ú c i sa tým, že ako zlúčeninu podľa ná roku 1 obsahuje 3-oxo-4-aza-4,7p-dimetyl-16p-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ.
17. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 13, vyzná č u j ú c i sa tým, že ďalej obsahuje látku otvárajúcu draslíkové kanály alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ.
18. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 17, vyzná č u j ú c i sa tým, že ako látku otvárajúcu draslíkové kanály obsahuje minoxidil alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ.
19. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 17, v y značujúci sa tým, že ďalej obsahuje nosič, vhodný na miestne podanie.
20. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 13, vyzná í u j ú c i sa tým, že ďalej obsahuje retinoid alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ.
21. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 20, v y značujúci sa tým, že ako retinoid obsahuje tretinoín, izotretinoín alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ.
22. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 13, v y značujúci sa tým, že ďalej obsahuje antiandrogén alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ.
23. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 22, v y značujúci sa tým, že ako antiandrogén obsahuje flutamid, spironolaktón, kasodex alebo ich farmaceutický prijateľnú soľ.
24. Použitie zlúčeniny podľa nároku 1, prípadne v kombinácii s inhibítorom 5a-reduktázy 2 na výrobu liečiva na inhibíciu 5a-reduktázy alebo jej izoenzýmov.
25. Použitie účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1, prípadne v kombinácii s inhibítorom 5a-reduktázy 2 na výrobu liečiva na liečbu akné vulgaris, plešatosti mužského typu, zvýšeného ochlpenia u žien, benígnej hyperplazie prostaty, prostatitídy a zhubných nádorov prostaty.
26. Použitie podľa nároku 25, kde ochorením je plešatosť mužského typu.
27. Použitie podľa nároku 25, kde sa ako inhibítor 5a-reduktázy 2 použije finasterid, epristerid alebo turosterid.
28. Použitie podľa nároku 25, kde sa ako zlúčenina podľa nároku 1 použije 3-oxo-4-aza-4,7P-dimetyl-16P-(4-chlórfenoxy)-5a-androstan alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.
29. Použitie účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1, prípadne s inhibítorom 5a-reduktázy 2 a ďalej v kombinácii s látkami otvárajúcimi draslíkové kanály na výrobu liečiva na liečenie androgénnej alopécie.
30. Použitie podľa nároku 29, kde sa ako látka otvárajúca draslíkové kanály použije minoxidil alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.
31. Použitie účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1, prípadne v kombinácii s inhibítorom 5a-reduktázy 2 a ďalej s retinoidom na výrobu liečiva na liečenie akné vulgaris.
32. Použitie podľa nároku 31, kde sa ako retinoid použije tretinoín, izotretinoín alebo farmaceutický prijateľná soľ týchto látok.
33. Použitie účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1, prípadne v kombinácii s inhibítorom 5a-reduktázy 2 a ďalej s antiandrogénom na výrobu liečiva na liečenie a/alebo prevenciu zhubných nádorov prostaty.
34. Použitie podľa nároku 33, kde sa ako antiandrogén použije flutamid, spironolaktón, kasodex alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.

SK 281645 Β6
35. Použitie účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1, prípadne v kombinácii s inhibítorom 5a-reduktázy 2 na výrobu liečiva na liečenie benígnej hyperplázie prostaty.
36. Použitie podľa nároku 35, kde sa ako inhibítor 5a-reduktázy 2 použije finasterid, epristerid, turosterid alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.
37. Použitie účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1, prípadne s inhibítorom 5a-reduktázy 2 a ďalej s antagonistom α-1-receptora na výrobu liečiva na liečenie benígnej hyperplázie prostaty.
38. Použitie podľa nároku 37, kde sa ako antagonista a-1-receptora použije terazosín.
39. Použitie účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1, prípadne spolu s inhibítorom 5a-reduktázy 2 na výrobu liečiva na liečbu androgénnej alopécie a podpory rastu vlasov.
40. Použitie účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1, spolu s inhibítorom 5a-reduktázy 2 na výrobu liečiva na inhibíciu biosyntetickej premeny testosterónu na dihydrotestosterón.
41. Použitie 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16p-(4-metylfenoxy)-5a-androst-l-énu podľa nároku 12 na výrobu liečiva na inibíciu 5a-reduktázy alebo jej izomérov.
42. Použitie 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16P-(4-metylfenoxy)-5a-androst-l-énu podľa nároku 12 a mhibítora 5a-reduktázy 2 na výrobu liečiva na inhibíciu 5a-reduktázy alebo jej izomérov.
43. Použitie podľa nároku 42, kde človekom je muž a inhibítorom 5a-reduktázy 2 je finasterid.
44. Použitie 3-oxo-4-aza-7P-metyl-16p-(4-metylfenoxy)-5a-androst-l-énu podľa nároku 12 na výrobu liečiva na liečbu acne vulgaris.