SK280136B6 - Použitie ťažko rozpustných solí heteropolykyselín, - Google Patents

Použitie ťažko rozpustných solí heteropolykyselín, Download PDF

Info

Publication number
SK280136B6
SK280136B6 SK5936-90A SK593690A SK280136B6 SK 280136 B6 SK280136 B6 SK 280136B6 SK 593690 A SK593690 A SK 593690A SK 280136 B6 SK280136 B6 SK 280136B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
sparingly soluble
heteropolyacid
analyte
soluble salt
determination
Prior art date
Application number
SK5936-90A
Other languages
English (en)
Inventor
Joachim Hnes
Hans Wielinger
Volker Unkrig
Original Assignee
Boehringer Mannheim Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Mannheim Gmbh filed Critical Boehringer Mannheim Gmbh
Publication of SK280136B6 publication Critical patent/SK280136B6/sk

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G01N33/525—Multi-layer analytical elements
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/17—Nitrogen containing
    • Y10T436/173845—Amine and quaternary ammonium
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/17—Nitrogen containing
    • Y10T436/173845—Amine and quaternary ammonium
    • Y10T436/174614—Tertiary amine
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/17—Nitrogen containing
    • Y10T436/173845—Amine and quaternary ammonium
    • Y10T436/175383—Ammonia

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Description

Oblasť techniky
Vynález sa týka použitia ťažko rozpustných solí heteropolykyselín na stanovenie analytu a na výrobu prostriedku na stanovenie analytu tvorbou heteropolymodrej. Ďalej sa vynález týka spôsobov stanovenia analytu pomocou tvorby heteropolymodrej a nakoniec sa tiež týka činidiel na uskutočňovanie týchto spôsobov.
Doterajší stav techniky
Heteropolykyseliny sú anorganické polykyseliny s aspoň dvoma rôznymi centrálnymi atómami. Vznikajú z viacbázických kyslíkatých kyselín kovu, ako je molybdén, volfrám a vanád a nekovu alebo kovu, ako je fosfor, kremík, arzén, jód, železo, mangán a kobalt ako parciálne zmesové anhydridy. Ako príklady je možné uviesť kyselinu fosformolybdénovú alebo fosforvolfrámovú. Heteropolykyseliny sú vo vode rozpustné. Sú však stabilné len v kyslých roztokoch.
Heteropolykyseliny molybdénu a volfrámu sú už dlhý čas známe reagencie. Ich analytické použitie sa viaže na stanovenie fosforečnanov a tiež na dôkaz arzeničnanov alebo kremičitanov za tvorby príslušných heteropolykyselín s molybdénanom alebo volfrámom a za nasledujúcej redukcie heteropolykyseliny na modré farbivo, takzvanú heteropolymodrú. Zafarbenie spočíva v absorpcii svetla prechodom elektrónov medzi päťmocným a šesťmocným molybdénom alebo volfrámom. Heteropolymodrá na báze heteropolykyselín je vždy farbivo s vysokou extinkciou, ktoré má v závislosti od vlnovej dĺžky veľmi široké absorpčné maximum. Toto je typické pre absorpčné pásy transferu náboja.
Heteropolykyseliny na dôkaz redukujúcich zlúčenín za tvorby heteropolymodrej sú známe. V publikácii „Spot Tests in Organic Analysis“ F. Fiegl, Elsevier Publishing Company, 5. vydanie, 1956, str. 128 až 129, je opísané, že sa kyselina 12-molybdofosforečriá redukuje mnohými redukujúcimi látkami na molybdénovú modrú. Vzhľadom na to, že táto dôkazná reakcia je nešpecifická, doporučuje sa na docielenie určitej selekti vi ty. aby sa skúšané vzorky zalkalizovali a potom sa extrahovali éterom. Éterový extrakt obsahuje potom predovšetkým aromatické dusíkaté bázy a v éteri rozpustné neutrálne látky. Kyslé látky zostávajú rozpustené vo vodnej fáze.
Z publikácie P. B. Issopoulos, Pharm. Acta Helv. 64, 82 (1989) je známe, že určité liečivá, obsahujúce ohydrochinónovú štruktúru, ako napríklad metyldopa pôsobia v roztoku v kyseline sírovej redukčné na kyselinu molybdofosforečnú a spôsobujú tvorbu molybdénovej modrej.
V publikácii M. L. Matheke a kol., Clin. Chem. 33. 2109-2110 (1987) je opísané použitie kyseliny fosforvolfrámovej na dôkaz kyseliny močovej. Reduktívna tvorba volfrámovej modrej slúži ako indikátor na prítomnosť kyseliny močovej. Dôkazná reakcia je rušená prítomnosťou redukčné pôsobiacich liečiv.
Z publikácie B. Klein a kol., Clin. Chem. 12, 816-823 (1966) je známe stanovenie glukózy v sére alebo plazme, ktoré spočíva v nasledujúcich reakčných krokoch:
Glukóza sa oxiduje pomocou hexakyanoželezitanu draselného, pričom vytvorený hexakyanoželeznatan draselný pôsobí redukčné na kyselinu fosformolybdénovú a spôsobuje tvorbu molybdénovej modrej. Vzhľadom na to, že sérum a plazma môže obsahovať rôzne množstvo kyseliny močovej, liečiv alebo ďalších redukčné pôsobiacich látok, ako je napríklad bilirubín a glutathion, je ich rušivý vplyv pri tomto postupe predprogramovaný.
Nevýhoda všetkých známych analytických metód, ktoré využívajú reduktívnu tvorbu heteropolymodrej z heteropolykyselín, spočíva predovšetkým v nešpecifite týchto dôkazných reakcií. Veľmi mnoho redukujúcich substancií môže pôsobiť rušivo, keďže takisto vedú k tvorbe heteropolymodrej. Okrem toho sú heteropolykyseliny stabilné len v kyslom prostredí. To veľmi silno obmedzuje rozsah použitia.
Doteraz nie je známe najmä spojenie tvorby heteropolymodrej s enzymatickými reakčnými krokmi na špecifický dôkaz a na špecifické stanovenie látok. Priamo na dôkaz súčastí telových tekutín, ako je krv, sérum, plazma, moč a podobne, sú však často potrebné enzymatické spôsoby stanovenia.
Úlohou predloženého vynálezu teda bolo využiť tvorbu heteropolymodrej ako reakcie na dôkaz a stanovenie látok, najmä látok obsiahnutých v telových tekutinách a najmä v kombinácii s enzymatickými reakčnými krokmi. Pri tom nemajú pôsobiť rušivo redukčné pôsobiace sprievodné látky a reakcia na dôkaz a na stanovenie majú prebiehať pri hodnotách pH, potrebných pre enzymatické reakcie. Okrem toho má byť možné uskutočňovať reakcie na dôkaz a na stanovenie rýchlo.
Uvedená úloha bola vyriešená použitím ťažko rozpustných solí heteropolykyselín na stanovenie analytu.
Bolo zistené, že ťažko rozpustná soľ heteropolykyseliny sa môže výhodne použiť na stanovenie analytu, najmä vtedy, keď analyt je na elektróny bohatý amín alebo k takému spoločne s ďalšími látkami vedie.
Podstata vynálezu
Predmetom vynálezu je použitie ťažko rozpustných solí heteropolykyselín na stanovenie analytu, ktorý je na elektróny bohatý' aromatický amín alebo látka, ktorá v predbežnej reakcii s jednou alebo niekoľkými ďalšími látkami, k takému amínu vedie.
Ako ťažko rozpustné soli heteropolykyseliny sa výhodne používajú soli heteropolykyseliny molybdénu, molybdénu a volfrámu, vanádu a molybdénu alebo vanádu a molybdénu a volrámu s fosforom, arzénom, kremíkom alebo germániom ako heteroatómami. Katión tejto soli je výhodne väčší ako amóniový ión.
Ďalej je predmetom vynálezu spôsob stanovenia analytu pomocou tvorby heteropolymodrej, ktorého podstata spočíva v tom, že sa analyt nechá zreagovať s látkou, ktorá vedie k na elektróny bohatému aromatickému amínu, s ktorým sa uvedie do styku ťažko rozpustná soľ heteropolykyseliny, ktorej množstvo rozpustné v roztoku analytu samo osebe na stanovenie analytu nepostačuje.
Predmetom vynálezu je ďalej spôsob stanovenia na elektróny bohatého amínu pomocou tvorby heteropolymodrej, ktorého podstata spočíva v tom, že sa roztok stanovovaného na elektróny bohatého aromatického amínu uvedie do styku s ťažko rozpustnou soľou heteropolykyseliny.
Predmetom vynálezu sú tiež činidlá na stanovenie analytu uvedenými spôsobmi. Podstatou jedného z týchto činidiel je, že obsahuje látku vytvárajúcu s analytom na elektróny bohatý aromatický amín a ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny, alebo na to potrebné látky a podstatou druhého je, že obsahuje ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny alebo na jej vznik potrebné látky v kvapalnom médiu alebo vo forme viazanej na nosič.
Nakoniec je predmetom vynálezu tiež použitie ťažko rozpustnej soli heteropolykyseliny na výrobu prostriedku na stanovenie analytu tvorbou heteropolymodrej.
Pod označením „ťažko rozpustná soľ heteropolykyseliny“ sa v zmysle predloženého vynálezu rozumie taká soľ heteropolykyseliny, ktorá je vo vode alebo vodných médiách, ako sú pufre alebo telové tekutiny, ako je napríklad krv, plazma, sérum, moč alebo sliny, úplne nerozpustná alebo len veľmi málo rozpustná a taká tiež zostáva pri podmienkach testu a tvorby zafarbenia. Predovšetkým je soľ heteropolykyseliny tak špatné rozpustná, že maximálne rozpustiteľné množstvo v kvapalnej vzorke samotnej nestačí na stanovenie v nej obsiahnutého analytu.
Prekvapivo sa ukázalo, že takáto ťažko rozpustná soľ heteropolykyseliny je stabilná nielen v kyslom prostredí, ale tiež v neutrálnej a bázickej oblasti pH, v ktorých je aktívna väčšina enzýmov a tým sa môže využiť tvorba heteropolykyseliny v kombinácii s enzymatickými reakciami. Predovšetkým v nerozpustnom stave sú ťažko rozpustné soli heteropolykyselín podľa vynálezu stabilné tiež pri zvýšených teplotách. Napriek zlej rozpustnosti sa ukázalo, že analyt sa dá pomocou soli heteropolykyseliny podľa predloženého vynálezu veľmi rýchlo, to znamená počas niekoľko málo sekúnd až niekoľko málo minút, dokázať a stanoviť v dôsledku tvorby heteropolymodrej. Pritom je možné selektívne stanovenie bez rušenia inými redukčné pôsobiacimi látkami. To dovoľuje citlivá metóda, ktorá najmä tiež kvôli širokému absorpčnému maximu, ktoré dosahuje od asi 550 až cez 1100 nm, nem žiadne zvláštne požiadavky na meracie prístroje a dá sa tiež dobre vizuálne sledovať.
Podľa vynálezu použiteľné soli heteropolykyselín sú soli hetcrokyselín molybdénu, molybdénu a volfrámu, vanádu a molybdénu alebo vanádu a molybdénu a volfrámu s fosforom, arzénom, kremíkom alebo germániom ako heteroatómami. Veľmi výhodné sú heteropolykyseliny molybdénu s fosforom alebo arzénom. Fosfor je ako nekovový atóm najvýhodnejší. Ako kovový atóm je najvýhodnejšie molybdén. Veľmi vhodné sú ťažko rozpustné soli kyseliny 12-molybdofosforečnej, kyseliny 18-molybdodifosforečnej, kyseliny 12-molybdoarzeničnej, kyseliny 18-molybdodiarzeničnej, kyseliny 11-molybdo-l-vanadofosforečnej, kyseliny 10-molybdo-2-vanadofosforečnej a kyseliny 9-molybdo-3-vanadofosforečnej, pričom ak veľmi výhodnú je potrebné hodnotiť, na základe jej vysokého farebného výťažku pri redukcii na molybdénovú modrú, kyselinu 18-molybdodifosforcčnú.
Ťažko rozpustné soli heteropolykyselín sú také, ktorých katióny sú väčšie ako amóniový ión NH4 +. Ako výhodné je možné uviesť katióny so všeobecným vzorcom (I)
R'R2R3R4X+ (I), v ktorom
R1, R2, R3 a R4 sú rovnaké alebo rôzne a znamenajú alkylovú skupinu, arylovú skupinu alebo aralkylovú skupinu, alebo znamenajú vodíkový atóm, keď nie sú všetky zvyšky rovnaké, alebo dva zvyšky spoločne tvoria alkylénovú skupinu a
X znamená atóm fosforu alebo dusíka.
V alkylovej skupine a aralkylovej skupine znamená alkyl priamy alebo rozvetvený alkylový zvyšok s 1 až 22 uhlíkovými atómami, výhodne s 1 až 6 uhlíkovými atómami. Aryl v arylovej skupine alebo aralkylovej skupine znamená aromatický zvyšok so 6 až 10 uhlíkovými atómami. Veľmi výhodná je fenylová alebo naftylová skupina.
Ako aralkylová skupina je veľmi výhodná benzylová skupina.
Alkylénová skupina je tvorená nasýteným alebo nenasýteným uhľovodíkovým reťazcom so 4 až 6 uhlíkovými atómami. Výhodne so 4 alebo 5 uhlíkovými atómami, ktorý je obidvoma svojimi koncami viazaný na X. Katión so všeobecným vzorcom (I) môže obsahovať dva takéto alkylénové zvyšky, výhodne však je prítomný len jeden alkylénový zvyšok.
Vo všeobecnom vzorci (I) znamená X výhodne dusíkový atóm. Takisto tiež môžu byť výhodné katióny v ťažko rozpustných soliach heteropolykyseliny vybranej zo skupiny dusíkatých heteroatómov, obsahujúcich kvartémy dusíkový atóm. Ako príklady je možné uviesť pyridín alebo chinolín, ktoré na svojom dusíkovom atóme nesú alkylovú skupinu, arylovú skupinu alebo aralkylovú skupinu, pričom definícii týchto zvyškov takisto prislúchajú významy uvedené pre zvyšky R1, R2, R3 a R4 vo všeobecnom vzorci (I).
Nerozpustná soľ heteropolykyseliny podľa predloženého vynálezu sa môže napríklad získať reakciou heteropolykyseliny a príslušnej bázickej substancie. Zvyčajne sa na to používa jedna látka vo forme roztoku, výhodne vo forme vodného roztoku. Môžu sa obidva komponenty soli pridávať v pevnej forme do kvapaliny, najmä vodnej kvapaliny, alebo naopak.
Ako analyt sa označuje stanovovaná látka. Ako veľmi vhodný sa vynález ukázal pre látky, ktoré sa vyskytujú rozpustené v kvapaline, najmä vodnej kvapaline. Veľmi výhodne môžu byť použité ťažko rozpustné soli heteropolykyselín stanovenie určitých látok v telových tekutinách, ako je napríklad krv, plazma, sérum, moč alebo sliny. Ako možné analyty sú v tomto zmysle napríklad glukóza, cholesterol, laktát, NAD1I alebo etylalkohol. Zásadne môže byť podľa predloženého vynálezu stanovené všetky zlúčeniny, ktoré môžu byť zreagované s jednou alebo niekoľkými inými zlúčeninami na také látky, alebo sú samé takými látkami, ktoré sú schopné, vzhľadom na svoj redox potenciál a vzhľadom na svoju kinetiku, redukovať ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny počas niekoľko málo sekúnd až niekoľkých minút, výhodne v čase menej ako tri minúty, na heteropolymodrú.
Prekvapivo sa ukázalo, že na elektróny bohaté aromatické amíny sú toho schopné. Predovšetkým je prekvapivé, že pritom je možné selektívne stanovenie, bez rušenia inými redukčné pôsobiacimi zlúčeninami.
Pod pojmom na elektróny bohatý' aromatický amín sa rozumie zlúčenina, ktorá je na elektróny bohatšia ako anilín a predstavuje teda silnejšie redukčné činidlo ako je anilín. Na elektróny bohaté aromatické amíny majú redox potenciál menší ako 0,6 V, výhodne menší ako 0,45 V, proti normálnej vodíkovej elektróde. Veľkosť redox potenciálu samotného však nie je rozhodujúca. Okrem toho je dôležité, aby príslušná látka redukovala rýchlo, to znamená počas menej ako asi troch minút, ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny na heteropolymodrú. Do úvahy prichádzajú napríklad všetky anilínové deriváty, ktoré nesú jeden alebo niekoľko +1 a/alebo +M substituenty, ako je hydroxylová skupina, alkylová skupina, alkoxylová skupina, aryloxyskupina, alkyltioskupina, aryltioskupina, aminoskupina, monoalkylaminoskupina a dialkylaminoskupina.
Alkylová skupina, alkoxylová skupina, alkyltioskupina, monoalkylaminoskupina a dialkylaminoskupina sú zvyšky, v ktorých znamená alkyl uhľovodíkový zvyšok s 1 až 6 atómami uhlíka, ktorý môže byť substituovaný hydroxylovou skupinou, aminoskupinou, ktorá je prípadne raz alebo niekoľkokrát substituovaná alkylovovu skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, ďalej skupinou PO3H2, skupinou SO3H alebo skupinou CO2H. Zvyšky kyselín PO3H2, SO3H a COOH sa môžu vyskytovať samy osebe, alebo vo forme solí,
SK 280136 Β6 najmä ako amónne soli s alkalickými kovmi alebo s kovmi alkalických zemín.
Aryloxyskupiny a aryltioskupiny sú zvyšky so 6 až 10 atómami uhlíka, pričom veľmi výhodné sú fenoxyskupina a fenyltioskupina.
Pod pojmom deriváty anilínu sa rozumejú zlúčeniny, ktoré nesú na aromatickom kruhovom systéme nesubstituovanú aminoskupinu alebo aminoskupinu raz alebo niekoľkokrát substituovanú alkylovou skupinou, pričom tento aromatický kruhový systém je substituovaný jedným alebo niekoľkými aromatickými a/alebo alicyklickými kruhmi. Ako aromatické kruhy pritom prichádzajú do úvahy tak uhľovodíkové aromatické kruhové systémy, ako aj tiež heteroaromáty. Ako príklady je možné uviesť anelované benzénové alebo naftalénové kruhy alebo anelovaný pyridínový kruh.
Pod pojmom alicyklické kruhy sa rozumejú nasýtené alebo nenasýtené cykloalifatické kruhy s 5 až 7 atómami uhlíka, výhodne s 5 až 6 atómami uhlíka.
Ako možné substituenty alkylovej aminoskupiny môžu byť napríklad uhľovodíkové zvyšky s 1 až 6 atómami uhlíka, ktoré sú substituované hydroxylovou skupinou, aminoskupinou, ktorá je raz alebo niekoľkokrát substituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, skupinou PO3H2, skupinou SO3H alebo skupinou CO2H. Kyselinové zvyšky sa môžu vyskytovať samy osebe alebo vo forme solí ako soli amónne, soli s alkalickými kovmi alebo s kovmi alkalickým zemín.
Veľmi vhodné sú ako na elektróny bohaté aromatické amíny zlúčeniny so všeobecným vzorcom (II)
v ktorom znamená
R5 hydroxylovú skupinu alebo aminoskupinu, pričom aminoskupina je prípadne raz alebo dvakrát substituovaná alkylovou skupinou a alkylovú skupina je prípadne substituovaná hydroxylovou skupinou, aminoskupinou, substituovanou prípadne raz alebo niekoľkokrát alkylovou skupinou, ďalej skupinou PO3H2, skupinou SO3H alebo skupinou CO2H.
R6 a R7, ktoré sú rovnaké alebo rôzne, vodíkový atóm alebo alkylovú skupinu, pričom alkylová skupina je prípadne substituovaná hydroxylovou skupinou, aminoskupinou, substituovanou prípadne raz alebo niekoľkokrát alkylovou skupinou, skupinou PO3H2, skupinou SO3H alebo skupinou CO2H a
R8, R9, R10 a R11, ktoré sú rovnako alebo rôzne, vodíkový atóm, alkylovú skupinu, alkoxylovú skupinu, alkyltioskupinu, aryloxyskupinu, aryltioskupinu, atóm halogénu, karboxylovú skupinu, karboxyalkylovú skupinu alebo alkoxykarbonylovú skupinu.
Alkylové skupiny a alkyly v alkyltioskupine, karboxyalkylovej skupine a alkoxykarbonylovej skupine predstavujú uhľovodíkové zvyšky s 1 až 6 atómami uhlíka. Veľmi výhodné sú zvyšky s 1 až 3 atómami uhlíka.
Alkylové zvyšky obsahujú takisto 1 až 6 atómov uhlíka, najmä výhodne sú alkoxylové zvyšky s 1 až 3 atómami uhlíka. Aryloxyskupiny a aryltioskupiny sú zvyšky so 6 až 10 atómami uhlíka, pričom veľmi výhodná je fenoxyskupina a fenyltioskupina. Atóm halogénu predstavuje chlór, fluór, bróm alebo jód. Ako halogénové substituenty sú výhodné chlór a bróm.
Zvyšky PO31I2, SO3H alebo CO2H sa môže vyskytovať samy osebe, alebo vo forme solí ako soli amónne, soli s alkalickými kovmi alebo s kovmi alkalických zemín.
Amónne soli sú také, ktoré obsahujú amóniový ión, NH+, alebo také, ktoré obsahujú amóniové katióny, raz alebo niekoľkokrát substituované alkylovou skupinou, arylovou skupinou alebo aralkylovou skupinou. Alkyl v alkylovej a aralkylovej skupine znamená uhľovodíkový zvyšok s 1 až 6 atómami uhlíka. Aryl v arylovej skupine a aralkylovej skupine znamená aromatický kruhový systém so 6 až 10 atómami uhlíka, pričom výhodná je fenylová skupina. Výhodný aralkylový zvyšok je benzylová skupina.
Ako soli s alkalickými kovmi je možno uviesť najmä soli lítne, sodné a draselné. Výhodné soli s kovmi alkalických zemín sú soli horečnaté a vápenaté.
Na elektróny bohaté aromatické amíny je možné bezprostredne stanoviť pomocou ťažko rozpustnej soli heteropolykyseliny tvorbou heteropolymodrej. Môžu sa stanoviť látky, ktoré sa chemickou alebo enzymatickou reakciou s ďalšími látkami stcchiometricky prevedú na aromatický amín bohatý na elektróny. Napríklad sa môžu ako reakčné zložky použiť také látky, ktoré už v sebe základnú štruktúru na elektróny bohatého aromatického amínu obsahujú, pričom sa tento amín z uvedenej látky chemickou alebo enzymatickou reakciou so stanovovaným analytom môže uvoľniť. Výhodne sa pod takýmito látkami rozumejú také zlúčeniny, ktoré hydrolýzou poskytujú na elektróny bohatý aromatický amín. Ako príklady je možné uviesť amidy, estery alebo glykozidy na elektróny bohatých aromatických amínov.
Analyty, ktoré majú byť stanovované, sú výhodne enzýmy, ktoré katalyzujú reakcie príslušných substrátov na aromatické amíny bohaté na elektróny, najmä hydrolázy. Ako príklady je možné uviesť enzýmy štiepiace amidové väzby a/alebo peplidové väzby, čo sú väzby karboxylových kyselín, kyseliny fosforečnej alebo kyseliny sírovej a enzýmy štiepiace glykozidické väzby. Ďalej ide tiež o transferázy, ktoré katalyzujú prenos skupín, ako je napríklad gama-glutamiltransferáza.
Ďalej je tiež možné napríklad stanovovať látky, ktoré sa môžu enzymaticky oxidovať, pričom sa ako akceptory elektrónov používajú také zlúčeniny, ktoré redukciou poskytujú na elektróny bohaté aromatické amíny. Predovšetkým pre látky, obsiahnuté v telových tekutinách, ako je krv, plazma, sérum, moč alebo sliny, je známy veľký počet oxidoreduktáz, ktoré vždy špecificky určité látky rozoznajú a v prítomnosti akceptora elektrónov tieto látky oxidujú.
Ako príklady je možné uviesť od flavínu závislé oxidázy, ako je oxidáza L a D aminokyselín, cholesterol-oxidáza, glukozooxidáza, glycerol-3-fosfátoxidáza, laktátoxidáza alebo pyruvázoxidáza a od NAD(P) nezávislé dehydrogenázy, ako je od pyrolochinolín-chinónu závislá glukozodehydrogenáza alebo tiež diaforázu (NADH: dye-oxidoreduktáza).
V prípade oxidoreduktáz, najmä pokiaľ ide o oxidázy a od NAD(P) nezávislé dehydrogenázy, je možné pre enzymatickú oxidáciu použiť akceptory elektrónov, ktoré sa enzymatickou oxidáciou enzýmovcho substrátu redukujú na aromatický amín, bohatý' na elektróny. Tiež sa môžu dokázať a stanoviť potom také látky, ktoré sa enzymaticky oxidujú, uvedením vzniknutého aromatického amínu bohatého na elektróny do styku s ťažko rozpustnou soľou heteropolykyseliny za vzniku heteropolymodrej.
Ako výhodné akceptory elektrónov v zmysel predloženého vynálezu je možné v tejto súvislosti uviesť mimoriad ne aromatické nitrozlúčeniny, oxímy a hydroxylamíny. Veľmi výhodné sú aromatické nitrozlúčeniny a oxímy. Mimoriadne výhodné sú taktiež nitrozlúčeniny a oxímy, ktoré sú opísané v EP prihláške č. EP-A-0354 441.
Na to, aby sa uskutočnilo stanovenie analytu tvorbou heteropolymodrej podľa predloženého vynálezu stačí, ak sa analyt opísaným spôsobom nechá reagovať so zlúčeninou na aromatický amín bohatý na elektróny a potom sa kontaktuje s ťažko rozpustnou soľou heteropolykyseliny. Keď je na elektróny bohatý aromatický amín sám bezprostredne stanovovaným analytom, uvádza sa bez predchádzajúcej chemickej alebo enzymatickej reakcie do styku s ťažko rozpustnou soľou heteropolykyseliny.
Zvyčajne sa aspoň nakoniec vyskytuje na elektróny bohatý aromatický amín, pôsobiaci na ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny, v rozpustenej forme, výhodne vo vodnom roztoku, napríklad rozpustený vo vode, v pufri alebo telovej tekutine. Výhodne je v prípade, že stanovovaný analyt nie je sám na elektróny bohatým aromatickým amínom, zlúčenina nutná spoločne s analytom na prípravu aromatického amínu, bohatého na elektróny, rozpustná vo vodných kvapalinách. Vodná kvapalina sa môže pridávať k vzorke pred kontaktovaním s ťažko rozpustnou soľou heteropolykyseliny. Môže sa ale tiež uviesť do kontaktu až spoločne s ťažko rozpustnou soľou heteropolykyseliny alebo dokonca nakoniec so skúmanou vzorkou. Aké poradie sa zvolí závisí od jednotlivých prípadov a môže byť odborníkmi zvolené v závislosti od uskutočňovaného analytického stanovovania na základe všeobecných odborných poznatkov alebo na základe uskutočňovaných orientačných pokusov. Látka potrebná na prípravu na elektróny bohatého aromatického amínu sa môže do vodnej vzorky pridávať v pevnej alebo rozpustenej forme.
Látka poskytujúca spoločne so stanovovaným analytom na elektróny bohatý aromatický amín sa musí so vzorkou kontaktovať v tak veľkom množstve, aby sa mohol všetok analyt priviesť k reakcii. Výhodne sa táto látka pridáva v dvoj- až desaťnásobnom nadbytku.
Ťažko rozpustná soľ heteropolykyseliny sa môže uviesť do kontaktu so skúmanou vzorkou vo forme pevnej látky . Môže sa ale tiež použiť vo forme suspenzie v kvapaline, výhodne vo vodnej kvapaline, pričom sa potom na uskutočňovanie stanovenia táto suspenzia zmieša so skúmanou vzorkou. Pri prítomnosti stanovovaného analytu sa tvorí vo vode ťažko rozpustná heteropolymodrá, ktorá j c na základe svojho intenzívneho zafarbenia zistiteľná.
Pre kvantitatívne stanovenie je možné oddeliť vo vode ťažko rozpustnú heteropolymodrú, ako aj nezreagovanú soľ heteropolykyseliny, od kvapaliny, napríklad centrifúgáciou, potom ju rozpustiť vo vhodnom rozpúšťadle, ako je napríklad dimetylsulfoxid a fotometrický merať koncentráciu ťarbiva na báze heteropolymodrej pri použití štandardných roztokov alebo kalibračnej krivky a tým nakoniec stanoviť koncentráciu zisťovaného analytu.
Ťažko rozpustná soľ heteropolykyseliny musí byť prítomná v tak veľkom množstve, aby vo vzorke prítomný alebo vytvorený na elektróny bohatý aromatický amín bol všetok prevedený na heteropolymodrú, ktorá je v kvantitatívnej súvislosti s množstvom stanovovaného analytu prípadne aromatického amínu bohatého na elektróny. Zásadne sa preto musí pridať toľko ťažko rozpustnej soli heteropolykyseliny, aby až do najvyššej relevantnej koncentrácii aromatického amínu bohatého na elektróny zvýšené množstvo amínu viedlo k zväčšeniu množstva heteropolymodrej.
Činidlo podľa predloženého vynálezu na stanovovanie analytu tvorbou heteropolymodrej obsahuje látku, ktorá re akciou s analytom vedie k aromatickému amínu bohatému na elektróny a ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny. Takéto činidlo sa môže používať napríklad vo forme suspenzie alebo ako lyofílizát, práškovitá zmes alebo ako zmes zlisovaná do tabliet. Jednotlivé súčasti sa môžu vyskytovať vedľa seba alebo oddelenie, pričom sa každá zo súčastí môže spracúvať vo svojej najúčelnejšej forme. Je tiež možné, že činidlo podľa predloženého vynálezu neobsahuje priamo vo vode ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny, ale obsahuje oddelene len nutné komponentny na prípravu tejto soli, totiž napríklad heteropolykyselinu a kationickú alebo bázickú zlúčeninu, ktoré sa uvedú do styku až bezprostredne pred reakciou prebiehajúcou pri stanovovaní podľa vynálezu a potom až poskytujú príslušnú soľ heteropolykyseliny. Veľmi výhodné je, keď činidlo podľa predloženého vynálezu obsahuje ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny v jemne rozomletej forme, takže má veľký reaktívny povrch. Činidlo podľa predloženého vynálezu môže prípadne obsahovať ešte ďalšie reagencie, napríklad puťre a pomocné látky, ako sú namáčadlá, stabilizátory a podobne. Keď je stanovovaným analytom samotný na elektróny bohatý aromatický amín, nie je pre činidlo podľa predloženého vynálezu potrebná samozrejme žiadna látka, ktorá by až s analytom viedla k aromatickému amínu bohatému na elektróny.
Veľmi výhodná sa ukázala byť realizácia stanovenia podľa predloženého vynálezu pri použití takzvaného suchého testu. Zariadenia, ktoré sú vhodné na realizáciu tohto suchého testu, sú napríklad opísané v EP-A 16 387, DE-A 32 47 608, EP-A 262 445 alebo EP-A 256 806. Môžu byť označované ako nosič testu. Pritom sa uložia látky potrebné na uskutočňovanie testu v suchej forme, to znamená nerozpustené v kvapaline, napríklad do, alebo na pijavý materiál, ako je napríklad papier, otvorený film podľa EP-A 16 387, rúno zo sklených vlákien alebo pórovitá plastová membrána, aby sa uviedli aspoň niektoré možné materiály, alebo do, alebo na napučiavajúci materiál, ako je napríklad príslušný plastový film, želatína alebo celulóza.
Pri nanesení skúšanej kvapaliny na nosič testu, alebo pri namočení nosiča testu do skúšanej kvapaliny, sa v nosiči testu vytvorí kvapalné prostredie, v ktorom prebieha dôkazová reakcia. Reakciou spôsobená tvorba farbiva sa môže vyhodnotiť vizuálne alebo fotometrický, napríklad pomocou reflexnej fotometrie.
Na výrobu činidla podľa predloženého vynálezu vo forme zabudovanej do nosiča sa vhodný nosný materiál, ako je napríklad filtračný papier, celulóza alebo rúno z plastových vlákien, impregnuje roztokmi a/alebo suspenziami zlúčenín, potrebných na prípravu tohto činidla, v ľahko prchavých rozpúšťadlách, ako je napríklad voda, metylalkohol alebo acetón. To sa môže uskutočňovať pri všetkých impregnačných krokoch. Často je účelné uskutočňovať impregnáciu vo viacerých krokoch, pričom sa používajú roztoky a/alebo suspenzie, ktoré vždy obsahujú len časť zložiek hotového činidla. Tak sa môže napríklad v prvom stupni naniesť na nosný materiál suspenzia ťažko rozpustnej soli heteropolykyseliny a v druhom stupni sa nanesie roztok látky, ktorá so stanovovaným analytom poskytuje na elektróny bohatý aromatický amín, ako aj prípadne pufer a iné prísady. Takto spracovaný nosný materiál sa môže použiť sám osebe, alebo sa známym spôsobom nalepí na držadlá alebo prúžky plastovej fólie, aby bol lepšie použiteľný.
Namiesto niekoľkonásobnej impregnácie rovnakého nosného materiálu sa môžu zlúčeniny činidla podľa predloženého vynálezu rozdeliť na rôzne nosné materiály, ktoré
SK 280136 Β6 sa pri uskutočňovaní analytického stanovenia uvedú do kontaktu, umožňujúceho výmenu kvapaliny.
Pri výrobe testovacích činidiel zabudovaných na nosiči je možné namiesto impregnovaných nosičov tiež vyrobiť roztoky s filmotvomých prostriedkov, to znamená z polymérov alebo z disperzií polymérov, ktoré sú tak viskózne, že sa z nich pomocou známych spôsobov, ako je stieranie, navaľovanie a podobne, dajú vyrobiť filmy. Do týchto roztokov sa zabudujú zložky činidla a prípadne pufre a pomocné látky. Získaná hmota sa nanesie na nosnú fóliu, usuší sa a hotový film sa napríklad spracuje na testovacie prúžky.
Prehľad obrázkov na výkresoch
Príklady výhodných testov na nosiči sú znázornené na obr. 1 a 6. Na ostatných obrázkoch 2 až 5 a 7 sú znázornené diagramy závislosti reflexie v percentách od času, vlnovej dĺžky alebo analytickej koncentrácie, dosiahnuté pomocou testov na nosiči podľa obr. 1, prípadne 6.
Jednotlivé uvedené obrázky obsahujú: obr. 1 prierez výhodným testom na nosiči; obr. 2 diagram ukazujúci závislosť reflexie v percentách od času v sekundách po nanesení vzorky na test na nosiči podľa obr. 1 pre vzorky a) až f) s vždy rôznou koncentráciou glukózy;
obr. 3 diagram závislosti reflexie v percentách od meranej vlnovej dĺžky v nanometroch pre vzorky a) až f) s rôznymi koncentráciami glukózy pri použití testu na nosiči podľa obr. 1;
obr. 4 diagram závislosti reflexie v percentách od koncentrácie glukózy pri meraní s testom na nosiči podľa obr. 1;
obr. 5 diagram závislosti reflexie v percentách od koncentrácie NADH pri meraní s testom na nosiči podľa obr. 1; obr. 6 prierez ďalším výhodným testom na nosiči a obr. 7 diagram závislosti reflexie v percentách od koncentrácie etylalkoholu pri meraní s testom na nosiči podľa obr. 6.
Nasledujúce príklady realizácie ukazujú niektoré možnosti spôsobov stanovenia analytu tvorbou heteropolymodrej. Neznamenajú však žiadne obmedzenie vynálezu na tieto formy realizácie. Obrázky sú v príkladoch bližšie objasnené.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Dôkaz glukózy 18-molybdodifosfátom
Vyrobí sa test na nosiči podľa obr. 1. Je zložený z polyesterovej fólie s hrúbkou 350 pm (Melinex, ICI, Frankfurt, SRN) ako nosnej fólie (1) s rozmermi 2x3 cm. V centre fólie sa nachádza otvor s priemerom 6 mm. Pomocou transfemého lepidla 2 sa upevni nosič 6 reagencií, zloženou z 200 pm hrubej transparentnej polykarbonátovej fólie 5 (Pokalon, Lonza, Rheinfelden, SRN), prvej reagenčnej vrstvy 4 a druhej reagenčnej vrstvy 3, cez otvor nosnej fólie 1 tak, aby vzorka kvapaliny, nanášaná cez tento otvor, prišla do styku najprv s druhou reagenčnou vrstvou 3. Nosič 6 reagencií má rozmer 2 x 1 cm.
Výroba nosiča 6 reagencií prebieha týmto spôsobom: prvá reagenčná vrstva:
113 g dvakrát destilovanej vody,
36,3 g 2 % xantánu (hmotn. %) (Keltrol F, Kelco, Oklahoma, USA) v 0,2 M citrátovom pufri, pH 7,0, g Propiofanu (BASF, Ludwigshafen, SRN), 15 ml 15 % (hmotn.) nonylsulfátu sodného vo vode, 6 g propylvinylpyrolidónu (Kollidon 25, BASF, Ludwigshafen, SRN),
3,9 g tetrabutylamóniumchloridu, g kyseliny 18-molybdofosforečnej (vyrobená podľa G. Bauer, „Handbuch der präparativcn anorganischem Chemie“, EnkeVerlag, Stutgart, 1954) v 15 g vody a g Celatomu MW 25 (Eagle Picher, Cincinnati, Ohio, USA) sa rozmieša do homogénnej hmoty a rozotrie sa na hrúbku 150 pm na transparentnú fóliu 5. Táto vrstva sa nechá usušiť pri teplote 60 °C počas jednej hodiny.
Druhá reagenčná vrstva:
g dvakrát destilovanej vody, g oxidu titaničitého RN 56 (Kronos-Titan GmbH, Leverkusen, SRN),
36,3 g 2 % (hmotn.) Keltrolu F (Kelco, Oklahoma, USA) v 0,2 M citrátovom pufri, pH 6,0, g Propiofanu 70 D (BASF, Ludwigshafen, SRN), 15 ml 15 % (hmotn.) nonylsulfátu sodného vo vode, 6 g Kollidonu 25 (BASF, Ludwigshafen, SRN), 188 g vody, g Celatomu 25 MW (Eagle-Picher, Cincinnati, Ohio, USA),
400 mg N,N-bis-(2-hydroxyetyl)-p-nitrozoanilínu x HCI v 20 g vody a g glukózaoxidázy (200 U/mg) v 12 g vody, sa rozmieša na homogénnu zmes a rozotrie sa v hrúbke 400 pm na prvú reagenčnú vrstvu. Vzduchové bubliny sa odstránia a druhá vrstva sa suší pri teplote 69 °C počas jednej hodiny.
V čase t = 0 sa na opísaným spôsobom vyrobený test na nosiči nanesie ľudská plazma s a) 0 mg glukózy/dl, b) 47,5 mg glukózy/dl, c) 108,7 mg glukózy/ml, d) 200,8 mg glukózy/dl, e) 392,3 mg glukózy/dl a f) 766 mg glukózy/dl. Pri 950 nm sa meria remisia v %. Prvé meranie sa uskutočňuje po ôsmich sekundách, ďalšie merania v štvorsekundových intervaloch. Pri vynesení remisie (R) v percentách proti času (t) v sekundách sa získa diagram podľa obr. 2. Tvorba farby a pokles remisie sú už pri prvom meraní prakticky úplné. Výsledkom je stabilná konečná hodnota, ktorá sa môže namerať prakticky v ľubovoľnom čase po štarte.
Keď sa použije test na nosiči podľa obr. 1, vyrobený opísaným spôsobom a vzorky s koncentráciou glukózy a) 0 mg/dl, b) 100 mg/dl, c) 240 mg/dl a d) 800 mg/dl, meria sa pri rôznych vlnových dĺžkach a nanesie sa remisia (R) v percentách proti vlnovej dĺžke (lambda) v nm do diagramu, získa sa obr. 3. Ako už bolo povedané, môžu sa na meranie koncentrácie glukózy použiť ľubovoľné vlnové dĺžky v rozmedzí 550 až viac ako 1100 nm. Kvôli veľmi plochému spektru je tolerancia pre výkyvy merania vlnovej dĺžky veľmi vysoká.
Príklad 2
Špecifita dôkazu glukózy s 18-molybdodifosfátom
Rušivé látky, uvedené v tabuľke 1, sa v udaných koncentráciách pridajú do ľudskej plazmy s a) 0 mg glukózy/dl (Cciu = 0) a b) 110 mg glukózy/dl (C01u = 110 mg/dl). Keď sa takáto ľudská plazma skúša pomocou testu na nosiči podľa obr. 1, ktorý je opísaný a vyrobený podľa príkladu 1, zistia sa remisné hodnoty v percentách (% R), merané pri 660 nm, ktoré sú uvedené v tabuľke 1.
Rušivá konečná cGIU = o CGlu
látka koncentrácia %R mg/dl
žiadna 0 60,3 %R 43,0
(porov.) NaOH 1 mM 59.9 42,5
kyselina 10 mg/dl 59,5 42,4
močová 20 mg/dl 60,1 42,4
laktát 100 mg/dl 59,7 43,2
300 mg/dl 60,2 42,8
bilirubín 10 mg/dl 60,0 42,7
20 mg/dl 61,5 43,0
glutathion 1 mM 59,3 43,0
5 mM 59,4 43,8
metyldopa 10 mg/dl 59,5 43,1
100 mg/dl 59,0 42,1
dobezylát 20 mg/dl 59,4 41,8
kyselina gentisová 50 mg/dl 59,6 43,0
kyselina 5 mg/dl 59,9 42,1
acetylsali- 60 mg/dl 60,0 42,0
Tabuľka 2
heteropolymodrá vzorec absorpčné
z rôznych heteropoly- max. hetero-
kyselín polymodrej
východisková látka
kyselina 12-molybdo- H3(PMo12O40) x n 725 nm
fosforečná H2O
18-molybdodifos- Na6(P2Mo18O62) x 693 nm
forečnan sodný 42 H2O
12-molybdoarzeni- K3(AsMoi2O40) x n 840 nma)
čnan draselný H20 652 nmb)
18-molybdodiarze- NaJAsjMoigO,,,) x 672 nm
ničnan sodný 23 H2O
kyselina 11-molybdo- H4(PMohVO40) x 665 nm
-1 -vanadofosforečná nH2O
kyselina 10-molybdo- H5(PMol0V2O40) x 620 nm
-2-vanadofosforečná nH2O
kyselina 9-molybdo- H6(PMo9V3OI0) x 780 nm
-3 -vanadofosforečná n H2O
cylová
Nezávisle od koncentrácie glukózy v ľudskej plazme (0 a 110 mg/dl) nebolo zistené žiadne signifikantné rušenie.
S testom na nosiči podľa obr. 1, ktorý bol vyrobený analogicky ako je opísané v príklade 1 a ktorý· je identický s tam opísaným testom na nosiči, až na prídavok tetrabutylamóniuchloridu, ktorý je pre porovnávací test na nosiči vynechaný, sa dosiahnu ťažko reprodukovateľné a silne rozptýlené výsledky. Použitá kyselina 18-molybdo-fosforečná sa totiž pri pH vyššom ako 5,5 rozkladá. Okrem toho tu spôsobujú redukujúce látky ďalšie rušivé zafarbenie.
Príklad 3
Test na nosiči na dôkaz glukózy na báze 12-molybdofosfätu
Keď sa v receptúre z príkladu 1 nahradí kyselina 18-molybdodifosforečná rovnakým množstvom kyseliny 12-molybdofosforečnej (Fluka, Buchs, Švajčiarsko), tak sa získa test na nosiči so slabšou tvorbou farby za prítomnosti glukózy, čo je veľmi vhodné na vyššie koncentrácie glukózy. Pri použití vzoriek s rôznou, ale známou koncentráciou glukózy (C) a keď sa meria vždy remisia (R) v percentách pri 650 nm, sa získa krivka podľa obr. 4. Keď sa meria remisia pri 950 nm, získa sa identická krivka.
Podobné výsledky sa získajú s 12-molybdoarzeničnanom, 18-molybdodiarzeničnanom, 11-molybdo-l-vanadofosforečnanom, 10-molybdo-2-vanadofosforečnanom a 9-molybdo-3-vanadofosforečnanom, pričom všetky tieto zlúčeniny jc možné pripraviť podľa G. Brauer, „Handbuch der präparativen anorganischen Chemie“, EnkeVerlag, Stuttgart (1954). V nasledujúcej tabuľke 2 sú uvedené názvy a vzorce heteropolykyselín, ako aj absorpčné maximá príslušných heteropolymodrých.
a) málo redukčného činidla (glukózy)
b) veľa redukčného činidla (glukózy)
Príklad 4
Test na nosiči na stanovenie NAD(P)H
Keď sa v receptúre podľa príkladu 1 nahradí glukózaoxidáza rovnakým množstvom diaforázy, získa sa test na nosiči na stanovenie NAD(P)H. Zo vzoriek so známou koncentráciou NADH a merania reakcie v percentách pri 660 nm sa získa krivka, znázornená na obr. 5. Táto krivka môže slúžiť ako kalibračná krivka na stanovenie neznámych koncentrácií NADH.
Metódy pre tvorbu NAD(P)H z NAD(P) - závislej dehydrogenázy, zodpovedajúci substrát a NAD(P) sú známe. Po príslušnej predbežnej reakcii sa môže test na nosiči použiť na dôkaz substrátov dehydrogenázy alebo na dôkaz dehydrogcnáz samotných.
Príklad 5
Test na nosiči na stanovenie etylalkoholu pomocou alkoholdehydrogenázy a diaforázy, ako aj 18-molybdodifosforečnanu
a) Výroba testu na nosiči
Vyrobí sa test na nosiči podľa obr. 6. Tento test je zostavený tak, že indikátorovým systémom, zloženým zo 4 ml 0,2 M citrátového pufra, pH6, ml 10 % (hmotn.) nonylsulfátu sodného vo vode, 60 mg tartazínu,
0,1 mg N,N-bis-(2-hydroxyetyl)-p-nitrozanilínu x HCl, 6,8 ml 20 % (hmotn.) kyseliny 18-molybdodifosforečnej vo vode, g 25 % (hmotn.) tetraetylamóniumchloridu vo vode, g 5 % (hmotn.) Kollidonu 25 (BASF, Ludwigshafen, SRN) v 50 mM citrátového pufra, pH 6,0, je napustený pijavý papier (Langfaser, Schoeller, Germsbach, SRN) a ten je potom počas 30 minút pri teplote 40 °C. usušený.
Enzýmy sa nachádzajú na zvláštnom papieri (Langfaser, Schoeller, Germsbach, SRN). Tento papier jc nasýtený roztokom zloženým z g 0,2 M fosfátového pufra, pH 7,0, g vody, ml 10 % (hmotn.) nonylsulfátu sodného vo vode, g diaforázy (15 U/mg lyofilizátu) a g alkoholdehydrogenázy a potom vysušený počas 20 minút pri teplote 40 °C. Takto vyrobený indikátorový papier 13 a enzýmový papier 12 sa nastrihajú na prúžky s veľkosťou 14x6 mm.
Na polyesterovú fólii s hrúbkou 350 μπι, dĺžkou 9,8 cm a šírkou 0,6 cm (Melinex, ICI, Frankfurt, SRN) s pomocou prúžku tavného lepidla 18 pripevní 16 mm dlhý, 6 mm široký a 0,25 mm hrubý pásik rúna zo sklených vláken s plošnou hmotnosťou 25 g/m2 ako transportné rúno (14), ďalej 6 mm široký, 6 mm dlhý a 700 pm hrubý prúžok rúna zo sklených vláken s plošnou hmotnosťou 60 g/m2 ako oddeľovacie rúno (15) erytrocytov a ochranná mriežka 16 zo Scrynelu PE280HC rotR (Zuricher Beuteltuchfabrik AG, Ruschlikon, Švajčiarsko) s rozmermi 6x8 mm a veľkosťou ôk 280 pm, ako je znázornené na obr. 6. Enzýmový papier a indikátorový papier 13 sa spoločne s 200 pm hrubou, 15 mm dlhou a 6 mm širokou transparentnou polykarbonátovou fóliou 11 (Pokalon, Lonza, Rheinfelden, SRN) pripevnia pomocou kvapky tavného lepidla 19 na nosnú fóliu 17 tak, aby polykarbonátová fólia 11, enzýmový papier 12 a indikátorový papier 13 neboli v styku, tlakom však sa môžu dostať tak do vzájomného styku, ako aj do kontaktu s kvapalinou, ktorá sa nachádza v transportnom rúne 14.
b) Stanovenie etylalkoholu
Na teste na nosiči, pripravenom podľa odeku a) a znázornenom na obr. 6, sa na ochrannú mriežku 16 nanesie 32 pi krvi. Po uplynutí 60 sekúnd sa tlakom na transparentnú fóliu 11 pritlačí enzýmový papier 12 a indikátorový papier na transportnom rúne 14 a na tu sa nachádzajúce sérum. Po 120 sekundách sa cez transparentnú fóliu 11 zmeria remisia v percentách pri 642 nm. Pri použití známych, ale rôznych koncentrácií etylalkoholu v krvi sa získa krivka podľa obr. 7. Táto krivka môže slúžiť ako kalibračná krivka na stanovenie neznámych koncentrácii etylalkoholu vo vzorke.
Príklad 6
Stanovenie beta-galaktozidázy (EC 3.2.1.23)
Používajú sa tieto roztoky: pufer: 0,1 M HEPES, 20 mM chlorid horečnatý, pH 6,8, substrát: 50 mM p-aminofenyl-beta-galaktozid (vyrobený z p-nitrofenyl-beta-D-galaktozidu hydrogenáciou vodíkom na paládiu na uhlí podľa „OrganikunT, VEB Deutscher Verlag der Wissenschaften, 15. vydanie, Berlín 1976) vo vode, ncutralizátor 1 N hydroxid sodný, indikátor 100 mg/ml kyseliny 18-molybdodifosforečnej a 50 mg/ml fenyl-trimetylamóniuchioridu vo vode a enzým 180 U/ml vpufri (udávaná enzýmová aktivita sa vzťahuje na použitie o-nitrofenyl-galaktozidu ako substrátu).
S cieľom uskutočniť test sa v jednej reakčnej nádobe zmieša:
pufer 700 μΐ, indikátor 100 μΐ, neutralizátor 20 μΐ, enzým a) 0, b) 1, c) 2, d) 3, e) 4, f) 5 μΐ.
Po inkubácii počas 4 1/2 minúty sa zmes zcentrifuguje počas 30 sekúnd, horná vrstva sa zleje, sediment sa rozpusti v 1 ml dimetylsulfoxidu a hneď sa zmeria extinkcia (E). Výsledky sú uvedené v tabuľke 3.
Tabuľka 3
μΐ enzýmu U/ml enzýmu E (800 nm)
0 0 0,065
1 0,18 0,571
2 0,36 1,245
3 0,54 1,697
4 0,72 2,350
5 0,90 2,907
Hodnoty vyplývajúce z tejto kalibračnej krivky môžu byť použité na zisťovanie obsahu beta-galaktozidázy v neznámych vzorcoch.
Príklad 7
Stanovenie alkalickej fosfatázy (EC 3.1.3.1)
Keď sa v receptúre podľa príkladu 6 použije ako substrát 50 mM p-aminofenylťosfát (vyrobený podľa L.H. De Riemer, C.F. Meares, Biochemistry 20. 1606 (1981)) a ako puľer IM dietanolamín, 1 mM chloridu horečnatého, 0,1 mM chloridu zinočnatého pri pH 9,8, potom sa môže uvedeným spôsobom stanovovať enzým alkalická fosfatáza. Pomocou známych koncentrácií enzýmu sa zistí ako v príklade 6 lineárna závislosť medzi koncentráciou enzýmu a extinkciou pri 800 nm.
Príklad 8
Test na nosiči na dôkaz gama-glutamyltransfcrázy (EC 2.3.2.2)
Test na nosiči sa zhotoví analogicky ako je opísané v príklade 1, ale s týmito zmenami:
V druhej reagenčnej vrstve sa pufer (2 % hmotnostné Keltrolu F v 0,2 M citrátovom pufri, pH 6) nahradí 2 % hmotnostnými Keltrolu F vo vode a N,N-bis-(2-hydroxyetyl)-p-nitrozoanilín x HC1 a glukózaoxidáza sa vypustia. Medzi transfemé lepidlo 2 a druhú reagenčnú vrstvu 3 sa zaradí papier napustený substrátom, pripravený týmto spôsobom:
Jemný pijavý papier (papier na čajové sáčky) (12 g/m2) sa nasýti roztokom 250 mM glycylglycínu a 20 mM gama-L-glutamyl-3-karboxyl-1,4-fenyléndiamínu (pripraveného podľa EP-A 103 823) v 250 mM tris-pufri, pH 7,6 a potom sa počas 20 minút suší pri teplote 50 °C.
V 0,1 M tris-pufri s 10 mg/ml albumínu z hovädzieho séra s pH 7,5 sa pripraví zrieďovacia séria gama-glutamyltransferázy. 10 μΐ tohto roztoku sa nanesie na opísaný test na nosiči. Po jednej minúte sa pri teplote 37 °C namerajú hodnoty remisie v percentách pri vlnovej dĺžke 950 nm, uvedené v nasledujúcej tabuľke 4.
Tabuľka 4 koncentrácia enzýmu remisia pri 950 nm v %
U/ml
0 50,0
0.245 57,0
0,471 55,5
1.31 52,7
2,77 49,7
4,93 45,8
7,39 42,2
9,85 39,0
Týmto spôsobom získaná krivka sa môže využiť na stanovenie neznámych obsahov gama-glutamyltransferázy v kvapalinách.
SK 280136 Β6
Príklad 9
Test na nosiči na dôkaz kyslej fosfatázy (EC 3.1.3.2)
Analogicky ako v príklade 8 sa získa test na nosiči na dôkaz kyslej fosfatázy, keď sa jemný pijavý papier nasýti 10 mM p-aminofenylfosfátu (vyrobeného podľa L.H. De Riemer, C.F. Meares, Biochemistry 20, 1606 (1981)) v 0,1 M citrátového pufra, pH 5,0.

Claims (14)

1. Použitie ťažko rozpustných solí heteropolykyselín na stanovenie analytu, ktorým je na elektróny bohatý aromatický arnín alebo látka, ktorá v predbežnej reakcii s jednou alebo niekoľkými ďalšími látkami, k takémuto amínu vedie.
2. Spôsob stanovenia analytu pomocou tvorby heteropolymodrej, vyznačujúci sa tým, že sa analyt nechá zreagovať s látkou, ktorá vedie k na elektróny bohatému aromatickému amínu, s ktorým sa uvedie do styku ťažko rozpustná soľ heteropolykyseliny.
3. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa t ý m , že sa použije ťažko rozpustná soľ heteropolykyseliny molybdénu, molybdénu a volfrámu, vanádu a molybdénu alebo vanádu a volfrámu s fosforom, arzénom, kremíkom alebo germániom ako heteroatómami.
4. Spôsob podľa nároku 2 alebo 3, vyznačujúci sa t ý m , že sa ako účinná ťažko rozpustná soľ heteropolykyseliny použije taká soľ, ktorej katión je väčší ako amóniový ión.
5. Spôsob podľa niektorého z nárokov 2 až 4, vyzná é u j ú c i sa tým, že sa ako ťažko rozpustná soľ heteropolykyseliny použije taká soľ, ktorej katión zodpovedá všeobecnému vzorcu (I)
R‘R2R3R4X+ (I), v ktorom
R1, R2, R3 a R4 sú rovnaké alebo rôzne a znamenajú alkylovú skupinu, arylovú skupinu alebo aralkylovú skupinu, alebo znamenajú vodíkový atóm, keď nie sú všetky zvyšky rovnaké, alebo dva zvyšky spoločne tvoria alkylénovú skupinu a
X znamená atóm fosforu alebo dusíka.
6. Spôsob podľa niektorého z nárokov 2 až 4, v y značujúci sa tým,žcsa ako ťažko rozpustná soľ heteropolykyseliny použije taká soľ, ktorej katión je zo skupiny kvatemizovaných dusíkatých heteroaromátov.
7. Spôsob stanovenia na elektróny bohatého amínu pomocou tvorby heteropolymodrej, vyznačujúci sa t ý m , žc sa roztok stanovovaného na elektróny bohatého aromatického amínu uvedie od styku s ťažko rozpustnou soľou heteropolykyseliny.
8. Činidlo na stanovenie analytu za tvorby heteropolymodrej, vyznačujúce sa tým, že obsahuje látku vytvárajúcu s analytom na elektróny bohatý aromatický arnín a ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny, alebo na to potrebné látky.
9. Činidlo podľa nároku 8, vyznačujúce sa t ý m , že obsahuje ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny molybdénu, molybdénu a volfrámu, vanádu a molybdénu alebo vanádu, molybdénu a volfrámu s fosforom, arzén, kremík alebo germánium ako heteroatómy.
10. Činidlo podľa nároku 8 alebo 9, vyznačujúce sa tým, že ako ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny obsahuje takú soľ, ktorej katión je väčší ako amónny ión.
11. Činidlo podľa niektorého z nárokov 8 až 10, vyznačujúce sa t ý m , žc ako ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny obsahuje takú soľ, ktorej katión zodpovedá všeobecnému vzorcu (I)
R‘R2R3R4X+ (I), v ktorom
R1, R2, R3 a R4 sú rovnaké alebo rôzne a znamenajú alkylovú skupinu, arylovú skupinu alebo aralkylovú skupinu, alebo znamenajú vodíkový atóm, keď nie sú všetky zvyšky rovnaké, alebo dva zvyšky spoločne tvoria alkylénovú skupinu a
X znamená atóm fosforu alebo dusíka.
12. Činidlo podľa niektorého z nárokov 8 až 10, vyznačujúce sa tým, že ako ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny obsahuje takú soľ, ktorej katión je zo skupiny kvartérnych dusíkatých heteroatómov.
13. Činidlo na stanovenie na elektróny bohatého aromatického amínu tvorbou heteropolymodrej, vyznačujúce sa tým, že obsahuje ťažko rozpustnú soľ heteropolykyseliny alebo na jej vznik potrebnej látky v kvapalnom médiu alebo vo forme viazanej na nosič.
14. Použitie ťažko rozpustnej soli heteropolykyseliny na výrobu prostriedku na stanovenie analytu tvorbou heteropolymodrej.
SK5936-90A 1989-12-02 1990-11-29 Použitie ťažko rozpustných solí heteropolykyselín, SK280136B6 (sk)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3940010A DE3940010A1 (de) 1989-12-02 1989-12-02 Verwendung eines schwer loeslichen salzes einer heteropolysaeure zur bestimmung eines analyts, entsprechendes bestimmungsverfahren sowie hierfuer geeignetes mittel

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK280136B6 true SK280136B6 (sk) 1999-08-06

Family

ID=6394747

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK5936-90A SK280136B6 (sk) 1989-12-02 1990-11-29 Použitie ťažko rozpustných solí heteropolykyselín,

Country Status (26)

Country Link
US (3) US5240860A (sk)
EP (1) EP0431456B1 (sk)
JP (1) JPH0687790B2 (sk)
KR (1) KR950001124B1 (sk)
CN (1) CN1030735C (sk)
AT (1) ATE118552T1 (sk)
AU (1) AU628688B2 (sk)
CA (1) CA2031238C (sk)
CZ (1) CZ284677B6 (sk)
DE (2) DE3940010A1 (sk)
DK (1) DK0431456T3 (sk)
ES (1) ES2069661T3 (sk)
FI (1) FI98569C (sk)
GR (1) GR3015363T3 (sk)
HU (1) HU212120B (sk)
IE (1) IE65537B1 (sk)
IL (1) IL96473A (sk)
MX (1) MX23524A (sk)
NO (1) NO300244B1 (sk)
NZ (1) NZ236249A (sk)
PL (1) PL166907B1 (sk)
PT (1) PT96029B (sk)
RU (1) RU2052819C1 (sk)
SK (1) SK280136B6 (sk)
YU (1) YU227790A (sk)
ZA (1) ZA909625B (sk)

Families Citing this family (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3940010A1 (de) * 1989-12-02 1991-06-06 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung eines schwer loeslichen salzes einer heteropolysaeure zur bestimmung eines analyts, entsprechendes bestimmungsverfahren sowie hierfuer geeignetes mittel
DE4311460A1 (de) * 1993-04-08 1994-10-13 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur kolorimetrischen Bestimmung eines Analyten mittels Benzylalkoholdehydrogenase und einem chromogenen Redoxindikator
DE4311464A1 (de) * 1993-04-08 1994-10-13 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur kolorimetrischen Bestimmung eines Analyten mit einer PQQ-abhängigen Dehydrogenase
DE4338811A1 (de) * 1993-11-15 1995-05-18 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung von Teststreifen zur Bestimmung der UV-Intensität oder zur Vorbestimmung der sonnenbrandfreien Aufenthaltsdauer in der Sonne sowie hierfür geeignetes Testsystem und Teststreifenpackung
US5696193A (en) * 1994-04-25 1997-12-09 Clinical Diagnostic Systems, Inc. Immunoassay elements comprising polymers containing vandium IV (V+4) ions
US5601997A (en) 1995-02-03 1997-02-11 Tchao; Ruy Chemotaxis assay procedure
US6617119B2 (en) 1997-02-21 2003-09-09 The Regents Of The University Of California Assay for specific strains of multiple disease related conformations of a protein
US6620629B1 (en) * 1997-02-21 2003-09-16 The Regents Of The University Of California Method for detecting prions
US20060008494A1 (en) * 1997-02-21 2006-01-12 The Regents Of The University Of California Complete inactivation of infectious proteins
US6221614B1 (en) * 1997-02-21 2001-04-24 The Regents Of The University Of California Removal of prions from blood, plasma and other liquids
US6719988B2 (en) 1997-02-21 2004-04-13 The Regents Of The University Of California Antiseptic compositions for inactivating prions
US6720355B2 (en) * 1997-02-21 2004-04-13 The Regents Of The University Of California Sodium dodecyl sulfate compositions for inactivating prions
US6121050A (en) * 1997-08-29 2000-09-19 Han; Chi-Neng Arthur Analyte detection systems
WO2000011514A1 (fr) * 1998-08-21 2000-03-02 Senju Pharmaceutical Co., Ltd. Compositions destinees a des verres de contact
KR100311854B1 (ko) * 1998-10-29 2001-12-28 신한길 지하수자동관측시스템
DE19945828B4 (de) 1999-09-24 2011-06-01 Roche Diagnostics Gmbh Analysenelement und Verfahren zur Bestimmung eines Analyten in Flüssigkeit
US6645359B1 (en) 2000-10-06 2003-11-11 Roche Diagnostics Corporation Biosensor
CA2450104C (en) 2001-06-08 2010-05-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Bodily fluid sampling device and test media cassette to be used with such a device
US6659966B2 (en) 2001-11-15 2003-12-09 Roche Diagnostics Corporation Fluid sampling apparatus
DE10163775A1 (de) 2001-12-22 2003-07-03 Roche Diagnostics Gmbh Analysensystem zur Bestimmung einer Analytkonzentration unter Berücksichtigung von proben- und analytunabhängigen Lichtintensitätsänderungen
US6759190B2 (en) * 2002-06-15 2004-07-06 Acon Laboratories, Inc. Test strip for detection of analyte and methods of use
US7572237B2 (en) * 2002-11-06 2009-08-11 Abbott Diabetes Care Inc. Automatic biological analyte testing meter with integrated lancing device and methods of use
DE10303265A1 (de) 2003-01-28 2004-07-29 Roche Diagnostics Gmbh Fluorimetrische Bestimmung von Analyten durch ein intramolekulares Quencher-Fluorophor-Konjugat
DE10304448A1 (de) 2003-02-04 2004-08-12 Roche Diagnostics Gmbh Fluorimetrische Bestimmung von Analyten durch Amin-N-Oxide als Redoxindikatoren
DE10346863A1 (de) * 2003-10-09 2005-05-04 Roche Diagnostics Gmbh On-Board-Kontrolle für Analyseelemente
RU2413002C2 (ru) 2004-12-13 2011-02-27 Байер Хелткэр Ллк Самостоятельно ограничивающие размер композиции и тестирующие устройства для измерения содержания анализируемых веществ в биологических жидкостях
EP1853598B1 (en) 2005-03-01 2012-11-21 Life Technologies Corporation Chemical probe compounds that become fluorescent upon reduction, and methods for their use
US20060241669A1 (en) * 2005-04-04 2006-10-26 Stout Jeffrey T Narrow-profile lancing device
US7955484B2 (en) * 2005-12-14 2011-06-07 Nova Biomedical Corporation Glucose biosensor and method
US8008068B2 (en) * 2008-02-29 2011-08-30 Light Pointe Medical, Inc. Nonhemolytic optical sensor with enhanced reflectance
US20090219509A1 (en) * 2008-02-29 2009-09-03 Hiroshi Nomura Optical sensor with enhanced reflectance
PL2936124T3 (pl) 2012-12-20 2017-08-31 F.Hoffmann-La Roche Ag Sposoby oceniania medycznych krzywych pomiarowych
KR101750638B1 (ko) 2012-12-20 2017-06-23 에프. 호프만-라 로슈 아게 체액의 샘플을 분석하는 방법
EP2781919A1 (en) 2013-03-19 2014-09-24 Roche Diagniostics GmbH Method / device for generating a corrected value of an analyte concentration in a sample of a body fluid
EP3161102B1 (en) 2014-06-30 2019-01-16 3M Innovative Properties Company Photochromic articles containing polyoxometalate derivatives and methods of making same
WO2016003685A1 (en) 2014-06-30 2016-01-07 3M Innovative Properties Company Photochromic articles containing a polyoxometalate and methods of making same
EP3183246B1 (en) 2014-08-22 2020-09-23 Roche Diagnostics GmbH Redoxindicators
WO2018067235A1 (en) 2016-10-05 2018-04-12 Roche Diabetes Care, Inc. Detection reagents and electrode arrangements for multi-analyte diagnostic test elements, as well as methods of using the same
EP3339431A1 (en) 2016-12-22 2018-06-27 Roche Diabetes Care GmbH Glucose dehydrogenase variants with improved properties
WO2019166394A1 (en) 2018-02-28 2019-09-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Biocompatibility coating for continuous analyte measurement
CN108508064B (zh) * 2018-03-22 2020-08-14 中国科学院上海硅酸盐研究所 文物表面可溶盐含量的检测设备
CN109394782B (zh) * 2018-12-03 2020-10-20 中北大学 胆固醇衍生物改性多钼氧簇杂化物及其制备和应用
CN110813339A (zh) * 2019-11-29 2020-02-21 吉林师范大学 一种缺陷杂多蓝/TiO2复合可见光合成氨催化剂的制备方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT630626A (sk) * 1959-05-15
JPS5637050A (en) * 1979-09-04 1981-04-10 Ube Ind Ltd Preparation of catalyst for preparing unsaturated acid
JPS5963198A (ja) * 1982-10-01 1984-04-10 Toyo Jozo Co Ltd 酵素を用いる定量法
US4935346A (en) * 1986-08-13 1990-06-19 Lifescan, Inc. Minimum procedure system for the determination of analytes
DE3630999A1 (de) * 1986-09-12 1988-03-17 Boehringer Mannheim Gmbh Mehrschichtiger testtraeger
US4952495A (en) * 1987-06-08 1990-08-28 Eastman Kodak Company Hydrolyzable compounds which release electron transfer agents and analytical use of same
DE3826922A1 (de) * 1988-08-09 1990-02-22 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur kolorimetrischen bestimmung eines analyten mittels enzymatischer oxidation
DE3940010A1 (de) * 1989-12-02 1991-06-06 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung eines schwer loeslichen salzes einer heteropolysaeure zur bestimmung eines analyts, entsprechendes bestimmungsverfahren sowie hierfuer geeignetes mittel

Also Published As

Publication number Publication date
CS593690A3 (en) 1992-03-18
ES2069661T3 (es) 1995-05-16
AU6694990A (en) 1991-06-06
CA2031238C (en) 1995-10-24
GR3015363T3 (en) 1995-06-30
HU212120B (en) 1996-02-28
CN1052376A (zh) 1991-06-19
FI98569B (fi) 1997-03-27
KR910012717A (ko) 1991-08-08
IE904317A1 (en) 1991-06-05
YU227790A (sh) 1992-12-21
MX23524A (es) 1993-10-01
JPH03191799A (ja) 1991-08-21
CA2031238A1 (en) 1991-06-03
CN1030735C (zh) 1996-01-17
EP0431456B1 (de) 1995-02-15
NO905202D0 (no) 1990-11-30
ZA909625B (en) 1991-10-30
US5240860A (en) 1993-08-31
DE3940010A1 (de) 1991-06-06
FI98569C (fi) 1997-07-10
US5382523A (en) 1995-01-17
ATE118552T1 (de) 1995-03-15
NZ236249A (en) 1993-02-25
DK0431456T3 (da) 1995-07-17
NO905202L (no) 1991-06-03
KR950001124B1 (ko) 1995-02-11
HUT56631A (en) 1991-09-30
JPH0687790B2 (ja) 1994-11-09
NO300244B1 (no) 1997-04-28
HU908021D0 (en) 1991-06-28
FI905925A0 (fi) 1990-11-30
EP0431456A1 (de) 1991-06-12
FI905925A (fi) 1991-06-03
DE59008475D1 (de) 1995-03-23
PT96029B (pt) 1998-02-27
CZ284677B6 (cs) 1999-01-13
PT96029A (pt) 1991-09-13
IE65537B1 (en) 1995-11-01
PL166907B1 (pl) 1995-07-31
RU2052819C1 (ru) 1996-01-20
US5521060A (en) 1996-05-28
IL96473A (en) 1995-03-15
AU628688B2 (en) 1992-09-17
IL96473A0 (en) 1991-08-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK280136B6 (sk) Použitie ťažko rozpustných solí heteropolykyselín,
EP1312922B1 (en) Stabilized tetrazolium reagent compositions with nitrite and methods for using the same
CA2069946C (en) Redox mediator reagent and biosensor
IE55165B1 (en) High glucose-determining test device
KR20030041809A (ko) 안정화된 테트라졸륨-페나진 시약 조성물 및 이의 사용방법
CN1219676A (zh) 电流型双介体基多酶生物传感器及其应用方法
CZ2003705A3 (cs) Zkušební proužky pro detekci přítomnosti redukovaného kofaktoru ve vzorku a způsoby jejich použití
FI77896B (fi) Komposition foer bestaemning av urinsyra eller kolesterol i ett vaetskeprov.
US4176008A (en) Method, composition and element for the detection of nitrogen-containing compounds
JP2005118014A (ja) 分析方法およびそれに用いる試薬
US5776779A (en) Integral multi-layer element for analyzing bile acid sulfate
JPS6259782B2 (sk)
EP0259133A2 (en) Use of organic buffers to reduce dehydroascorbic acid interference in analytical methods
JP3980683B2 (ja) 還元型ニコチンアミド補酵素の測定用試薬および測定方法
CA1206077A (en) Sensitive enzymatic creatinine assay
AU5878896A (en) Use of a salt of 6-carboxy-3-methylbenzothiazolone hydrazone hydrate in colorimetric determination of hydrogen peroxide

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Expiry date: 20101129