SK13982000A3

SK13982000A3 - 3',3'-n-bis-substituované makrolidové lhrh antagonisty

Info

Publication number: SK13982000A3
Application number: SK1398-2000A
Authority: SK
Inventors: Daryl R. Sauer; Fortuna Haviv; John Randolph; Nicholas A. Mort; Christopher R. Dalton; Milan Bruncko; Michele A. Kaminski; Bradley W. Crawford; Lisa Marie Frey; Jonathan Greer
Original assignee: Abbott Laboratories
Priority date: 1998-03-27
Filing date: 1999-03-22
Publication date: 2001-04-09
Also published as: PL343152A1; TR200002766T2; KR20010034699A; WO1999050276A1; NO20004807D0; BG104827A; CA2325519A1; US5972898A; ZA200005030B; BR9909121A; CN1303389A; NO20004807L; AU3197599A; HUP0102522A3; NZ506622A; EP1066307A1; IL138220A0; HUP0102522A2; JP2002509938A

Description

Oblasť techniky

Predložený vynález sa týka skupiny makrolidov, ktoré sú antagonisty lutenizačného hormónu uvoľňujúceho hormón (LHRH), farmaceutických prípravkov obsahujúcich zlúčeniny vynálezu, spôsobov používania zlúčenín vynálezu a postupu prípravy týchto zlúčenín. De- / tailnejšie sa predložený vynález týka derivátov 3',3'-N-bis-demetyl-3',3'-N-bis-substituovaných-6-O-metyl-l 1-deoxy-l 1,12-cyklických karbamátov erytromycínu A, ktoré sú antagonisty LHRH.

Doterajší stav techniky

Na ovuláciu, spermatogenézu a biosyntézu pohlavných steroidov sú nevyhnutné gonadotropíny, folikul stimulujúci hormón (FSH), lutenizačný hormón (LH) a choriogonadotropín (CG). Jednoduchý hypotalamický hormón, hormón uvoľňujúci gonadotropín (GnRH), tiež známy ako LHRH, je zodpovedný za reguláciu sekrécie ako FSH, tak aj LH u cicavcov.

LHRH je dekapeptid so štruktúrou:

pyro-Glu¹ -His²-T rp³-Ser⁴-Tyr⁵-Gly⁶-Leu⁷-Arg⁸-Pro⁹-Gly¹⁰-NH₂, kde horné indexy označujú polohu jednotlivých aminoacylových zvyškov v dekapeptidovom reťazci.

LHRH sa uvoľňuje z hypotalamu a viaže sa na receptor v hypofýze, čím vyvolá uvoľnenie LH a FSH, ktoré následne pôsobia na gonády, čím stimuluje syntézu steroidných pohlavných hormónov. Pulzatilné uvoľnenie LHRH, a tým uvoľnenie LH a FSH, reguluje reprodukčný cyklus u zvierat a ľudí. Jednorazové dávky agonistov LHRH zvyšujú hladiny LH a steroidných pohlavných hormónov u zvierat aj ľudí. Paradoxne sústavne dávky agonistov LHRH potlačujú hladinu LH a steroidných pohlavných hormónov. V dôsledku toho je účinok viacnásobných dávok agonistov LHRH taký, že potlačuje tvorenie estrogénu u samíc a produkciu testosterónu u samcov. Ako u zvierat, tak aj u ľudí, je po aplikácii buď jednorazových alebo sústavných dávok antagonistov LHRH pozorovaný rovnaký účinok.

V posledných rokoch bolo vynaložené značné úsilie kvôli nájdeniu antagonistov LHRH V dôsledku toho bolo pripravené veľké množstvo peptidových antagonistov LHRH, ktoré potlačujú LH a reproduktívne hormóny u cicavcov po aplikácii jednorazovej alebo sústavných dávok. Viď M.J. Karten in Modes of Action of GnRH and GnRH analogs, edited by W.R. Crowley and P.M. Conn, 277 (1992). V odbornej literatúre je publikované, že antagonisty LHRH sú účinné pri ošetrení rôznych stavov, v ktorých potlačenie pohlavných steroidov má kľúčovú úlohu, zahrnujúcich kontracepciu, oneskprenie dospievania, ošetrenie benígnej hypertrofie prostaty, paliatívne ošetrenie alebo remisia hormonálne závislých nádorov prostaty, ošetrenie kryptochizmu, hirsutizmus u žien, poruchy žalúdočnej motility, bolestivú menštruáciu a endometriózu.

Súčasné antagonisty LHRH sú dekapeptidy, ktoré v dôsledku svojej malej perorálnej biologickej dostupnosti sú aplikované intravenózne alebo subkutánne. V odbornej literatúre boli publikované nepeptidové heterocyklické antagonisty, viď napr. WO 95/280405, WO 95/29900, WO 97/22707, WO 97/21704 a WO 97/2103. Nepeptidové antagonisty LHRH majú výhodu spočívajúcu v zlepšenej perorálnej biologickej dostupnosti a majú menšie molekuly.

Avšak ešte neboli v odbornej literatúre publikované žiadne makrolidové zlúčeniny ako antagonisty LHRH. Sú však známe makrolidové antibiotiká a makrolidové prokinetické agens. Napr. v prihláške EP 248 279 A2 sú uvedené makrolidové antiobiotiká odvodené od erytromycínu, ktoré obsahujú 11,12-cyklické karbamátové časti. V prihláške EP 0 559 896 Al sú uvedené 3'-N-substituované deriváty erytromycínu. Sú známe prokinetické agens s makrocyklickým laktónom (makrolidom). Viď J.S. Gidda et al., v európskej patentovej prihláške číslo 0,349100, zverejnenej 3. januára 1990, v ktorej sú uvedené 12-členné makrolidy na použitie ako zosilňovače gastrointestinálnej motility. S. Omura a Z. Itoh, v US patente č. 4,677,097, publikovanom 30 júna 1987; v európskej prihláške č. 215,355 publikovanej 25. marca 1987; a v európskej prihláške č. 213,617 publikovanej 11 marca 1987; uvádzajú deriváty erytromycínu A, B, C a D, ktoré sú účinné ako stimulans kontraktilného ústrojenstva zažívacieho traktu. Ďalej T. Sunazuka et al., Chem. ľharm. Biill. 37(10). 2701-2709 (1989) uverejňuje kvartérne deriváty 6,9hemiacetalu 8,9-anhydroerytromycínu A a 6,9-epoxidu 9,9-dihydro-erytromycínu A s gastrointestinálnou motorickou stimulačnou aktivitou

Žiadny z týchto odkazov neuvádza nové deriváty 3',3'-N-bis-demetyl-3',3'-N-bissubstituované-6-O-metyl-l 1-deoxy-l 1,12-cyklického karbamátu erytromycínu A, ktoré sú účinné ako antagonisty LHRH.

Deriváty 3'-N-demetyl-3'-N-monosubstituovaného-6-O-metyl-l 1-deoxy-l 1,12-cyklického karbamátu erytromycínu A sú uvedené v US prihláške podanej súčasne s touto prihláškou. Deriváty 3,'3'-N-bis-demetyl-3',3'-N-monosubstituovaného-6-O-metyl-l 1-deoxy-l 1,12-cyklického karbamátu erytromycínu A predloženého vynálezu sú uvedené v tejto prihláške.

Podstata vynálezu / /

V rámci prvého aspektu sa predložený vynález vzťahuje na zlúčeninu majúcu vzorec:

(.1, alebo jej farmaceutický prijateľné soli alebo estery, kde

A je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z:

(a) -C, (b) -N, a (c) -O;

X a Y sú nezávisle v každom prípade vybrané zo skupiny pozostávajúcej z (a) atómu vodíka.

(b) halogenidu.

(c) trifluórmetylu, (d) alkoxy skupiny, (e) alkylu, (f) arylu, a f / (g) substituovaného arylu; '

R a R' sú vybrané zo skupiny pozostávajúcej z:

(a) alkylu, (b) cykloalkylu, (c) heterocyklu, (d) substituovaného heterocyklu, (e) alkylcykloalkylu, (f) substituovaného alkylcykloalkylu, (g) alkylarylu, (h) alkylheterocyklu, (i) alkenylu, (j) alkinylu, (k) -C(S)-NHR4, C(NR4)-NHR4, kde substituent R4 je atóm vodíka, alkyl alebo aryl; a (l) -(CH2)n-C(CH2)_m-R5. kde index m je 2, 3, 4 alebo 5 a substituent Rj je alkyl, alkoxy skupina, aryl alebo substituovaný aryl;

substituenty R2 a R3 sú nezávisle v každom prípade (a) atóm vodíka.

(b) metyl, alebo substituenty R₂ a R₃ spoločne vytvoria cyklickú Časť, pokiaľ A je C;

substituent R₃ nie je prítomný, pokiaľ A je N; a index n = 1, 2 alebo 3

V rámci ďalšieho aspektu sa predložený vynálezu vzťahuje na postup prípravy zlúčení ny vzorca I. Postup zahrnuje kroky:

(a) reakciu zlúčeniny vzorca

s hexametyldisilazidom sodným a karbonyldiimidazolom za získania zlúčeniny vzorca:

ch, h,q _zch,

o (b) reakciu zlúčeniny získanej v kroku (a) s amino zlúčeninou vzorca:

V (CH₂)„-nh₂ nasledované odobratím chrániacich skupín 2',4-chránených hydroxy skupín za získania zlúčeniny vzorca:

(c) postupnú demetyláciu 3 '-amino skupiny reakciou zlúčeniny získanej v kroku (b) s jódom v prítomnosti bázy za získania zlúčeniny vzorca:

(d) alkyláciu 3 ,3'-N-bisdemetylovanej zlúčeniny získanej v kroku (c) s alkylačným činidlom.

V rámci ďalšieho uskutočnenia postupu, zahrnuje tento postup kroky:

(c) selektívnu demetyláciu zlúčeniny získanej v kroku (b) za získania zlúčeniny vzorca:

(d) alkyláciu 3 '-N-demetylovanej zlúčeniny získanej v kroku (c) s alkylačným činidlom za získania zlúčeniny vzorca:

(e) demetyláciu 3 '-amino skupiny reakciou zlúčeniny získanej v kroku (d) s jódom v prítomnosti bázy za získania zlúčeniny vzorca:

(f) alkyláciu 3 '-N-demetylovanej zlúčeniny získanej v kroku (e) s alkylačným činidlom.

Zlúčeniny vynálezu vykazujú malú alebo žiadnu antibakteriálnu aktivitu, ale viažu sa na LHRH receptory a sú účinnými antagonistami LHRH. Teda tieto zlúčeniny sú účinné pri ošetrení rakoviny prostaty, endometriózy, predčasnej puberty a ďalších typov ochorení, ktoré súvisia s pohlavnými hormónmi.

Preto sa ďalší aspekt predloženého vynálezu vzťahuje na farmaceutické prípravky, ktoré sú účinné ako antagonisty LHRH a potlačujú LH, testosterón, estradiol a estrogén u cicavcov.

Ešte v ďalšom aspekte sa predložený vynález vzťahuje na spôsob potlačenia hladín pohlavných hormónov u samcov alebo samíc cicavcov zahrnujúci aplikovanie hostiteľovi, pri potrebe takého ošetrenia, terapeuticky účinného množstva LHRH zlúčeniny v kombinácii s terapeuticky účinným množstvom antiandrogénneho agens.

Podrobný opis vynálezu

Termín nižší alkyl alebo alkyl, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na rozvetvený alebo nerozvetvený reťazec alkylových radikálov majúci jeden až dvadsať atómov uhlíka, niekedy označovaný ako C_x-C_y-alkyl, kde indexy x a y označujú minimálny a maximálny počet atómov uhlíka v alkylovom radikále. Príklady nižšieho alkylu zahrnujú, ale nie je to nijak limitované, metyl, etyl, «-propyl, izopropyl, //-butyl, izobutyl, seá-butyl, /-butyl, «-pentyl, 1-metylbutyl, 2,2-dimetylbutyl, 2-metyIpentyl, 2,2-dimetylpropyl, «-hexyl, a pod

Termín alkoxy alebo nižší alkoxy, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na vyššie definovanú skupinu nižšieho alkylu, ktorá je pripojená na atóm kyslíka éterovou väzbou. Príklady alkoxy skupiny zahrnujú, ale nie je to nijak limitované, metoxy skupinu, etoxy skupinu, izopropoxy skupinu, «-pentyloxy skupinu, /-butoxy skupinu, n-oktyloxy skupinu, a pod. Tento alkoxylový radikál môže tiež obsahovať kruh, ktorý zahrnuje, ale nie je to nijak obmedzené, 5členný alebo 6-členný kruh zložený z atómov uhlíka, jedného alebo dvoch heteroatómov, napr. dusíka, kyslíka. ,

Termínalkenyl, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na rozvetvený alebo nerozvetvený uhľovodíkový reťazec majúci dva až dvadsať atómov uhlíka, výhodne štyri až dvanásť atómov uhlíka, zvlášť potom osem až desať atómov uhlíka, ktorý tiež obsahuje jeden alebo viac dvojitých väzieb typu uhlík-uhlík, výhodne približne jeden až tri dvojité väzby. Zlúčeniny vynálezu môžu mať buď známu konfiguráciu alebo môžu existovať ako zmes izomérov.

Termínalkinyl, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na rozvetvený alebo nerozvetvený uhľovodíkový reťazec majúci dva až dvadsať atómov uhlíka, výhodne štyri až dvanásť atómov uhlíka, zvlášť potom osem až desať atómov uhlíka, ktorý tiež obsahuje jeden alebo viac trojitých väzieb typu uhlík-uhlík, výhodne jednu trojitú väzbu. Zlúčeniny vynálezu môžu mať buď známu konfiguráciu alebo môžu existovať ako zmes izomérov.

Termíncykloalkyl, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na nasýtené monocyklické uhľovodíkové skupiny majúce tri až sedem atómov uhlíka v kruhu, zahrnujúce, ale nie je to nijak obmedzené, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, a pod. Cyklická skupina môže byť prípadne substituovaná napr. nižším alkylom, hydroxy skupinou, halogénom alebo amino skupinou.

Termínalkylcykloalkyl, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na vyššie definovanú cykloalkylovú skupinu pripojenú na radikál nižšieho alkylu. Alkylcykloalkylová skupina je pripojená na východiskovú časť cez alkylový radikál, pričom alkylový radikál má jeden až šesť atómov uhlíka. Príklady zahrnujú, ale nie je to nijak obmedzené, cyklopropyl metyl, cyklopropyletyl, cyklobutylmetyl, a pod.

Termínaryl, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na mono,- kondenzovaný bicyklický alebo kondenzovaný tricyklický karbocyklický kruh, majúci jeden alebo viac aromatických kruhov, zahrnujúci, ale nie je to nijak obmedzené, fenyl, naftyl, tetrahydronaftyl, fenantrenyl, bifenylenyl, indanyl, indenyl, a pod

Termínsubstituovaný aryl, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na vyššie definovanú arylovú skupinu substituovanú nezávislým nahradením jedného, dvoch alebo troch atómov vodíka skupinou vybranou z Cl, Br, F, I, OH, kyano, merkapto, nitro, Ci-C₃-alkyl, halogen-Ci-C₃-alkyl, Ci-Cô-alkoxy, tio-Ci-Ce-alkoxy, metoxymetoxy, amino, C|-C3-alkyl-amino, di(Ci-C₃-alkyl)amino, formyl, karboxy, alkoxykarbonyl, Ci-C3-alkyl-CO-O-, Ci-C₃-alkyl-CO-NH- alebo karboxamidu; s výnimkou spočívajúcou v tom, že tetrafluórfenyl a pentafluórfenyl sú tiež zahrnuté v rozsahu definície substituovaný Qryl. /

Termínarylalkyl, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na vyššie definovanú skupinu pripojenú na vyššie definovanú alkylovú skupinu. Arylalkylová skupina je pripojená na východiskovú časť cez alkylovú skupinu, pričom alkylová skupina má jeden až šesť atómov uhlíka. Arylová skupina v arylalkylovej skupine môže byť substituovaná vyššie definovaným spôsobom. Príklady zahrnujú, ale nie je to nijak obmedzené, 3-(4-hydroxyfenyl)propyl, l-metyl-3-(4hydroxy-fenyl)-propyl, 4-hydroxybenzyl, a pod.

Termín „heterocyklický kruh“ alebo heterocyklický alebo heterocyklus, ako je používaný tu, sa vzťahuje na 3-členný alebo 4-členný kruh obsahujúci heteroatóm vybraný z atómu kyslíka, dusíka a síry; alebo 5-členný, 6-členný alebo 7-členný kruh obsahujúci jeden, dva alebo tri atómy dusíka; jeden atóm dusíka a jeden atóm síry; alebo jeden atóm dusíka a jeden atóm kyslíka. 5-Členný kruh má 0 - 2 dvojité väzby a 6-členné a 7-členné kruhy majú 0-3 dvojité väzby. Dusíkové heteroatómy môžu byť prípadne kvarternizované. Termín heterocyklus tiež zahrnuje bicyklické skupiny, v ktorých akýkoľvek z vyššie uvedených heterocyklických kruhov je kondenzovaný na benzénový kruh alebo cyklohexánový kruh alebo iný heterocyklický kruh (napr. indolyl, chinolyl, izochinolyl, tetrahydrochinolyl, a pod.). Heterocykly zahrnujú; azetidinyl, benzimidazolyl, 1,4-benzodioxanyl, 1,3-benzodioxolyl, benzoxazolyl, benzotiazolyl, benzotienyl, dihydroimidazolyl, dihydropyranyl, dihydrofuranyl, dioxanyl, dioxolanyl, furyl, homopiperidinyl,imidazolyl, imidazolinyl, imidazolidinyl, indolinyl, indolyl, izochinolyl, izotiazolidinyl, izotiazolyl, izoxazolídinyl, izoxazolyl, morfolinyl, naftyridinyl, oxazolidinyl, oxazolyl, piperazinyl, piperidinyl, pyrazinyl, pyrazolinyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyrolidinyl, pyrolinyl, pyrolyl, chinolinyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, tiazolidinyl, tiazolyl, a tienyl

Heterocykly môžu byť nesubstituované alebo monosubstituované alebo disubstituované substituentami nezávisle vybranými zo skupín hydroxy, halogénu, oxo (=0), alkylimino (R*N= kde substituent R* je skupina nižšieho alkylu), cykloalkyl, aryl, arylalkyl a nižší alkyl. Okrem toho heterocykly obsahujúce dusík môžu byť N-chránené

Termín (heterocyklus)alkyľ, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na vyššie definovanú heterocyklickú skupinu pripojenú na vyššie definovaný radikál nižšieho alkylu. (Heterocyklusjalkylová skupina je pripojená na východiskovú časť cez alkylovú skupinu, pričom alkylová skupina má jeden až šesť atómov uhlíka. Príklady zahrnujú, ale nie je to nijak obmedzené, 2-pyridylmetyl, 4-pyridyl metyl, 2-pyridyletyl, 3-(3-pyridyl)propyl, 3-(2-pyridyl)propyl, 3-(4pyridyl)propyl, 2-furylmetyl, a pod.

/ I

Termín substituovaný (heterocyklus)alkyl, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na vyššie definovanú heterocykloalkylovú skupinu, kde heterocyklická skupina alebo alkylová skupina je substituovaná nezávislým nahradením jedného, dvoch alebo troch atómov vodíka skupinou vybranou z Cl, Br, F, 1, OH, kyano, merkapto, nitro, C i -C 3-alkyl, halogén-Ci-C3-alkyl, Ci-Côalkoxy, tio-Ci-Ce-alkoxy, hydroxyalkyl, metoxymetoxy, amino, Ci-C3-alkyl-amino, di(Ci-C₃alkyl)amino, karboxaldehydo, karboxy, alkoxykarbonyl, Ci-C₃-alkyl-CO-O-, Ci-C₃-alkyl-CONH- alebo karboxamidu. Príklady zahrnujú, ale nie je to nijak obmedzené, 3-[(5-metyl)-2pyridyljpropyl, 3-[(6-metyl)-2-pyridyl]propyl, 4-[(6-metyl)-2-pyridyl]butyl, (5-nitro(-2tienylmetyl, a pod.

Termín heteroaryl, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na cyklický aromatický radikál majúci päť až desať atómov v kruhu, z ktorých jeden atóm kruhu je vybraný z S, O a N; žiadny, jeden alebo dva atómy kruhu sú ďalšie heteroatómy nezávisle vybrané z S, O a N; a zvyšné atómy kruhu sú uhlík, radikál, ktorý je pripojený na zvyšnú časť molekuly cez akýkoľvek atóm kruhu napr. pyridinyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyrolyi, pyrazolyl, imidazolyl, tiazolyl, oxazolyl, izoxazolyl, tiadiazolyl, oxadiazolyl, tienyl, furanyl, chinolinyl, izochinoiinyl, a pod.

Termínsubstituovaný heteroaryl, ako je opísaný tu, sa vzťahuje na vyššie definovanú heteroarylovú skupinu substituovanú nezávislým nahradením jedného, dvoch alebo troch atómov vodíka skupinou vybranou z Cl, Br, F, I, OH, Ci-C₃-alkyl, Ci-C₆-alkoxy, metoxymetoxy, amino alebo C]-C₃-alkyl-amino alebo môžu tiež označovať mono-oxo substituované heteroarylové zlúčeniny, napr 4-oxo-lH-chinolín

Termín „aprotické rozpúšťadlo“, ako je používaný tu, sa vzťahuje na rozpúšťadlo, ktoré je relatívne inertné k protónovej aktivite, tzn. nechová sa ako donor protónu. Príklady zahrnujú, ale nie sú nijak limitované, uhľovodíky, napr hexán a toluén, halogénované uhľovodíky, napr metylénchlorid, etylénchlorid, chloroform, a pod, heterocyklické zlúčeniny, napr. tetrahydrofurán a N-metylpyrolidinón, étery, napr. dietyléter a bis-metoxymetyléter, ako aj rôzne ďalšie zlúčeniny ako dimetylformamid, acetonitril, acetón a etylacetát. Také zlúčeniny sú veľmi dobre známe v odbore a je samozrejmé, že môžu byť preferované jednotlivé rozpúšťadlá a ich zmesi pre špecifické zlúčeniny a reakčné podmienky, ktoré závisia od takých faktorov ako napr. rozpustnosť činidiel, reaktivita činidiel a preferovaných rozpätí teploty. Ďalšie informácie o aprotických rozpúšťadlách môžu byť nájdené v učebniciach organickej chémie alebo v špecializovaných monografiách, napríklad: Organic Solvents Physical Properties and Methods of Purification, 4°¹ ed., edited by John A. Riddick et al., Vol. II, in, the Techniques of Chemistry Šerieš, John Wiley & Sons, NY, 1986.

Termín „farmaceutický prijateľná soľ“, ako je používaný tu, sa vzťahuje na tie soli, ktoré sú v rozsahu lekárskeho úsudku vhodné na použitie pri kontakte s ľudskými tkanivami alebo tkanivami nižších zvierat bez toxického pôsobenia, iritácie, spôsobenia alergických reakcií, a pod. a sú úmerné rozumnému pomeru prospešnosť/riziko. Farmaceutický prijateľné soli sú veľmi dobre známe v odbore napr. S. M. Berge, et al., detailne podrobne opisuje farmaceutický prijateľné soli v J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19(1977), tu uvedené ako odkaz. Soli môžu byť pripravené in situ počas konečnej izolácie a purifikácie zlúčenín vynálezu alebo samostatne reakciou voľnej bázy reagujúcej s vhodnou organickou kyselinou alebo anorganickou kyselinou. Príklady farmaceutický prijateľných, netoxických adičných solí s kyselinou sú soli amino skupiny formované s takými anorganickými kyselinami ako kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina ortofosforečná, kyselina sírová alebo kyselina chloristá alebo s organickými kyselinami, napr. kyselina octová, kyselina oxalová, kyselina maleínová, kyselina vinná, kyselina citrónová, kyselina jantárová alebo kyselina malónová alebo použitím iných spôsobov používaných v odbore ako je výmena iónov. Ďalšie farmaceutický prijateľné soli zahrnujú adipát, alginát, askorbát, aspartát, benzénsulfonát, benzoát, bisulfát, borát, butyrát, kafrát, kafrosulfonát, citrát, cyklopentánpropionát, diglukonát, dodecylsulfát, etánsulfonát, formiát, fumarát, glukoheptonát, glycerofosfát, glukonát, hemisulfát, heptánoát, hexanoát, jodovodík, 2hydroxy-etánsulfonát, laktobionát, laktát, laurát, laurylsulfát, malát, maleát, malonát, metánsulfonát, 2-naftalénsulfonát, nikotinát, nitrát, oleát, oxalát, palmitát, pamoát, pektinát, persulfát, 3fenylpropionát, fosfát, pikrát, pivalát, propionát, stearát, sukcinát, sulfát, tartrát, tiokyanát, ptoluénsulfonát, undekanoát, soli valerátu, a pod Reprezentatívne soli alkalických kovov alebo kovov alkalických zemín zahrnujú nasledujúce katióny sodíka, lítia, draslíka, vápnika, horčíka, a pod. Ďalšie farmaceutický prijateľné soli zahrnujú, pokiaľ sú vhodné, netoxický amónny ión, kvartérny amónny ión a katióny amínu tvorené použitím opačne nabitých iónov takých ako halogenid, hydroxid, karboxylát, sulfát, fosfát, nitrát, nižší alkylsulfonát a arylsulfonát.

Termín „farmaceutický prijateľný ester“, ako je používaný tu, sa vzťahuje na estery, ktoré sa hydrolyzujú in vivo a zahrnuje tie estery, ktoré sa ochotne odtrhnú v ľudskom tele a opustí východiskovú zlúčeninu alebo soľ tejto zlúčeniny. Vhodné esterové skupiny zahrnujú napr. skupiny odvodené od farmaceutický prijateľných alifatických karboxylových kyselín, najmä alkánové, alkénové, cykloalkánové a alkándiové kyseliny, v ktorých každá časť alkylovej alebo alkenylovej časti má výhodne nie viac ak 6 uhlíkových atómov. Príklady jednotlivých esterov zahrnujú formiáty, acetáty, propionáty, butyráty, akryláty a etylsukcináty.

V zlúčeninách predloženého vynálezu môžu existovať mnohé asymetrické centrá. Okrem tých miest, kde je uvedené inak, sú v predloženom vynáleze zahrnuté rôzne stereoizoméry a ich zmesi. Preto tam, kde je väzba znázornená vlnitou čiarou, je mienená možná prítomnosť zmesi stereo-orientovaných alebo jednotlivých izomérov stanovenej alebo nestanovenej orientácie.

Výhodné uskutočnenia

Výhodné uskutočnenia zlúčenín vynálezu zahrnujú tie, v ktorých substituenty R a R sú alkyl, alkenyl, cykloalkyl, heterocyklus, (heterocyklus)alkyl alebo alkylcykloalkyl; X a Y sú nezávisle chlór, fluór, dioxalano, vodík alebo alkoxy skupina; A je -C; substituenty R₂ a R₃ sú atóm vodíka alebo cyklopropyl a index n je 1.

Typické zlúčeniny vynálezu sú vybrané zo skupiny pozostávajúcej z:

S'J'-N-Bisdemetyl-S'^'-N-biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3^,-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6O-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3 ',3'-N-biscyklopropylmetyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3^,-N-Bisdemetyl-3^l,3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-1 l-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)]-6-0metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A,

3',3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklobutyl-3^,-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-izopropyl-3^l-N-propyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)] 6-0-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-izopropyl-11-deoxy-l l-[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A; /

3',3'-N-Bisdemetyl-3^,-N-etyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)]-6O-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-cyklobutylmetyl-3 '-N-cyklopropylmetyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'J'-N-Bisdemetyl-S'^'-N-biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4metoxyfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3^,,3^,-N-biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3', 3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlór-3fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlór-3fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-biscyklobutyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'J'-N-Bisdemetyl-S'J'-N-biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'J'-N-Bisdemetyl-J'-N-cyklopentyl-B'-N-cyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór4-difluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A,

S'J'-N-Bisdemetyl-S'^'-N-biscyklopropylmetyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4difluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-1 l-[karboxy-(3,4-difluórfenetylamino)]-6O-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A,

3^.. 3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklobutyl-3^,-N-cyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-bis[3-(3-pyridyl)propyl]-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;/

3',3'-N-Bisdemetyl-3 '-N-cyklopropylmetyl-3 '-N-(4-hydroxymetyl-2-furyl)metyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3^.. 3'-N-Bisdemetyl-3^,-N-cyklopropylmetyl-3'-N-3-(4-pyridyl)propyl]-l 1-deoxy-l l-[karboxy(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3^.. 3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-cyklopropylmetyl-3^,-N-[4-(hydroxymetyl-2-furyl)]-metyl-lldeoxy-1 l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát eryt romycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3^,-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(2-furyl)metyl-l l-deoxy-ll-[karboxy-(3chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3^,-N-[6-metyl-(2-pyridyl)]metyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-bis-(l-metylcyklopropyl)metyl-ll-deoxy-ll-[karboxy-(3’Chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-bis-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-3 '-N-cyklopropyl metyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-(l-metylcyklopropyl)metyl-3'-N-cyklopropylmetyl-11-deoxy-l 1[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'^'-N-Bisdemetyl-S'-N-izopropyl-S'-N-cyklopropylmetyl-l 1-deoxy-1 l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cykl ický karbamát erytromycínu A;

3',3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-izopropyl-3'-N-cyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3^.. 3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-izopropyI-3^,-N-(l-metylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cykličký karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-izopropyl-3'-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11-deoxy-11 -[karboxy(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-'N-(biscyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(biscyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l 1 -[karboxy(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3', 3^l-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3^,-N-(2,2-dimetylpropyl)-l 1-deoxy-l l-[karboxy(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

',3 '-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3 '-N-(2,2-dimetylpropyl)-11 -deoxy-11 -[karboxy(3,-4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3^.. 3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-[3-(4-hydroxy-3-metoxyfenyl)-l-metyl]propyl 11-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát e rytromycínu A;

3^.. 3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-[3-(4-hydroxy-3-metoxyfenyl)-lmetyl]propyl-l 1-deoxy-l I-[karboxy-(3,4-dichlórfenetyIamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3^.. 3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklobutyl-3'-N-(l-metylcyklopropyl)metyl-11-deoxy-l l-[karbo-xy(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklobutyl-3'-N-(l-metylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A,

S'J'-N-Bisdemetyl-S'-N-cyklopropylmetyl-S'-N-Q-etylcyklopropyOmetyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-cyklopropyl metyl-3 '-N-( 1 -etylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3, 4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-BisdemetyI-3'-N-cyklopropylmetyl-3^,-N-( 1 -fenylcyklopropyl)metyl-11-deoxy-11 [karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(l-fenylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-ll, 12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-etyl-3'-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3-chlór4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3 '-N-etyI-3 '-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

',3'-N-Bisdemetyl-3 '-N-izobutyl-3 '-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3 '-N-izobutyl-3 '-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4 dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3^,-N-Bisdemetyl-3^l-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(l-alylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-11[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'J'-N-Bisdemetyl-S'-N-cyklopropylmetyl-S'-N-í 1 -alylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropyl metyl-3'-N-( 1 -benzylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(l-benzylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3 ’-N-bi s-( I -metylcyklobutyl)metyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-BÍsdemetyl-3 '-N-bis-( 1 -metylcyklobutyl)metyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3^,-N-(l-metylcyklobutyl)metyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A; a ',3 '-N-BisdemetylíG '-N-cyklopropylmetyl-3 '-N-( 1 -metylcyklobutyl)metylr 11 -deoxy-11 [karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A.

Výhodnejšie zlúčeniny vynálezu sú:

S'J'-N-Bisdemetyl-S'-N-biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3^,-N-Bisdemetyl-3',3'-N-bis-(l-metylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A; a

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-izopropyl-3 -N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-1 l-[karboxy-(3chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A.

Účinky a použiteľnosť agonistov a antagonistov LHRH

Agonisty a antagonisty LHRH vynálezu sú účinné pri ošetrení predčasnej puberty, rakoviny prostaty, benígnej hypertrofie prostaty (BPH), endometriózy, uterinnej fibroidy, rakoviny prsníka, akné, predmenštruačného syndrómu, syndrómu polycystických ovárií a ochorení, ktoré vyplývajú z prebytkov alebo nedostatkov tvorby gonádnych hormónov pri sexuálnom chovaní ľudí alebo zvierat. Antagonisty LHRH vynálezu sú tiež účinné na regulovanie reprodukcie u samíc i samcov. Zlúčeniny vynálezu sú účinné pri potlačovaní hladín testosterónu a dihydrotestosterónu (DHT) u samcov a estrogénu a estradiolu u samíc.

Pri uskutočňovaní spôsobu podľa tohto vynálezu je pri potrebe takého ošetrenia účinné množstvo zlúčeniny vynálezu alebo farmaceutický prípravok obsahujúci účinné množstvo zlúčeniny vynálezu aplikované ľuďom alebo zvieratám. Tieto zlúčeniny alebo prípravky môžu byť aplikované rôznymi spôsobmi v závislosti od špecifického konečného použitia. Tieto spôsoby zahrnujú perorálnu, parenterálnu (vrátane subkutánnej, intramuskulárnej a intravenóznej aplikácie), vaginálnu (zvlášť kontracepcia), rektálnu, bukálnu (vrátane subligválnej aplikácie), transdermálnu alebo intranazálnu aplikáciu. Najvhodnejší spôsob v akomkoľvek uvedenom spôsobe bude závisieť od použitia, od jednotlivej aktívnej zložky, od subjektu a úsudku lekára. Zlúčenina alebo prípravky môžu tiež byť aplikované pomocou prostriedkov pomaly uvoľňujúcich sa, implantovaných alebo depotných preparátov, ako je tu uvedené detailnejšie nižšie.

Všeobecne na modulovanie hladín pohlavných hormónov u samcov alebo samíc pre aplikácie uvedené vyššie je vhodné podávať aktívnu zložku v množstvách približne 1 až 200 mg/kg telesnej hmotnosti denne, výhodnejšie 1 až 30 mg/kg telesnej hmotnosti denne. Aby sa dosiahli najlepšie výsledky môže byť toto podanie dosiahnuté aplikovaním jednorazovej dennej dávky, rozložením dávky do niekoľkých podaní alebo pomalým uvoľňovaním.

Presná dávka a dávkovací režim aplikovania týchto zlúčenín a prípravkov bude nutne záležať od potrieb jednotlivého subjektu, ktorý je ošetrovaný, typu ošetrenia, stupňa postihnutia alebo potreby a úsudku lekára. Všeobecne vyžaduje parenterálna aplikácia nižšie dávky než u ostatných spôsobov aplikácie, ktoré viac závisia od absorpcie.

Ďalší aspekt predloženého vynálezu sa týka farmaceutických prípravkov obsahujúcich zlúčeninu vynálezu ako aktívnu zložku v zmesi s farmaceutický prijateľným netoxickým nosičom. Ako je uvedené vyššie, také prípravky môžu byť pripravené na použitie ako parenterálnu (subkutánnu, intramuskulárnu alebo intravenóznu) aplikáciu, obzvlášť vo forme tekutých roztokov alebo suspenzií; na použitie pri vaginálnej alebo rektálnej aplikácii, obzvlášť v polotuhých liekových formách, napr. krémy a čipky; na perorálnu alebo bukálnu aplikáciu, obzvlášť vo formách tabliet alebo kapsúl alebo intranazálnu, obzvlášť vo forme prášku, nosných kvapiek alebo aerosólov

Prípravky môžu byť vhodne aplikované v jednotkových dávkovacích formách a môžu byť pripravené akýmikoľvek spôsobmi, ktoré sú známe vo farmaceutickom odbore, napr spôsobmi opísanými v Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA , 1970. Prípravky na parenterálnu aplikáciu môžu obsahovať ako bežné excipienty sterilnú vodu alebo fyziologický roztok, polyalkylénglykoly, napr. polyetylénglykol, oleje rastlinného pôvodu, hydrogenované naftalény, a pod. Prípravky na inhaláciu môžu byť tuhé a obsahovať ako excipienty, napr. laktózu, alebo môžu byť vodné alebo olejové roztoky na aplikovanie vo forme nosných kvapiek. Na bukálne aplikovanie sú typickými excipientami cukor, stearát vápenatý, stearát horečnatý, predželatínovaný škrob, a pod.

Obzvlášť je požadované podávanie zlúčenín predloženého vynálezu subjektu po dlhšie

I časové obdobie, napr. po dobu jedného týždňa až jedného roka jednorázovým podaním. Môžu byť používané rôzne pomaly uvoľňujúce sa, depotné alebo implantované dávkovacie formy. Napr. dávkovacie formy môžu obsahovať farmaceutický prijateľné netoxické soli zlúčeniny vynálezu, ktoré majú malý stupeň rozpustnosti v telesných tekutinách, napr. (a) adičná soľ s viacsýtnou kyselinou, ako je napr. kyselina ortofosforečná, kyselina sírová, kyselina citrónová, kyselina vinná, kyselina trieslová, kyselina pamoová, kyselina algínová, kyselina polyglutamová, kyselina naftalénmonosulfónová alebo naftaléndisulfónová, kyselina polygalakturónová, a pod; (b) soli s polyvalenčnými katiónmi kovu , napr. katióny zinku, vápnika, bizmutu, bária, horčíka, hliníka, medi, kobaltu, niklu, kadmia, a pod. alebo s organickým katiónom vzniknutým z napr. Ν,Ν'-debenzyletyléndiamínu alebo etyléndiamínu; alebo (c) kombinácie (a) a (b) napr. soľ zinočnatého tanátu. Ďalšie zlúčeniny predloženého vynálezu alebo výhodne, relatívne nerozpustné soli, napr. práve opisované, môžu byť pripravované v géle, napr. gél monostearátu hlinitého s napr. sezamovým olejom, vhodné pre injekcie. Ďalšie výhodné soli sú soli zinku, tanátu zinku, pamoátu, a pod. Ďalšie typy pomaly uvoľňujúcich sa depotných prípravkov pre injekcie môžu obsahovať zlúčeniny alebo soli dispergované alebo opuzdrené v pomaly degradujúcich, netoxických, neantigénnych polyméroch, napr. polymér kyseliny polymliečnej/kyseliny polyglykolovej, ktorý je opísaný napr. vUS patente č. 3,773,919. Zlúčeniny vynálezu alebo, výhodne, napr. vyššie opísané relatívne nerozpustné soli môžu byť tiež pripravované v peletách s cholesterolovou matricou, najmä na použitie u zvierat. Ďalšie, pomaly sa uvoľňujúce formulácie sú napr. z literatúry veľmi známe lipozómy. Viď napr. Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978. Podrobný odkaz pokiaľ ide o typy zlúčenín LHRH, môže byť nájdený napr. v patente US č 4,010,125.

Aktivita antagonistov LHRH

Charakteristické zlúčeniny predloženého vynálezu boli vyhodnocované pri in vivo testoch na väzbu potkanieho hypofýzárneho receptoru LHRH (pKi) a na antagonistickú silu (pA₂) za inhibície LH buniek potkanej hypofýzy. Spôsoby a postupy používaných testov sú podrobne opísané v F. Haviv, et al., J. Med.Chem., 32: 2340 - 2344 (1989). Afinita väzby receptoru (pKi) je negatívny logaritmus rovnovážnej disociačnej konštanty. Výsledky pKi charakteristických , / , í zlúčenín tohto vynálezu sú uvedené v tabuľke 1.

Tabuľka 1

Príklad	pK,	Príklad	pK,
1	7.73	14	9.60
2	8.50	15	8.90
3	8.38	16	8.87
4	8.62	17	8.50
5	9.08	18	9.40
6	8.08	19	9.08
7	8.56	20	8.40
8	8.60	21	8.34
y	8.20	22	8.72
10	8.85	23	8.98
11	8.66	24	8.00
12 13	9.00 8.94	25	8.58

Hodnota pA₂ je negatívny logaritmus koncentrácie antagonista, ktorý mení krivku odozvy vytváranú agonistom leuprolidom na dvojnásobne vyššiu koncentráciu. Leuprolid je agonista LHRH, ktorý má štruktúru pyro-Glu'-His²-Trp³-Ser⁴-Tyr⁵-D-Leu⁶-Leu⁷-Arg⁸-Pro⁹-NHEt a je publikovaný a patentovaný v patente US číslo 4,005,063 Typické hodnoty pA₂ 7,0 alebo väčšie poukazujú na dobré antagonisty LHRH. Hodnoty pA₂ pre charakteristické zlúčeniny sú uvedené v tabuľke 2 nižšie.

Tabuľka 2

Príklad	pA2
2	8.27
5	9.08
4	9.90
13	9.53
14	9.12
17	8.81
18	8.34

Spôsob syntézy

Zlúčeniny a postupy predloženého vynálezu budú zrozumiteľnejšie v spojitosti s nasledujúcimi schémami syntéz 1- 6, ktoré ilustrujú spôsoby, ktorými môžu byť pripravené zlúčeniny vynálezu. Zlúčeniny sú pripravené pomocou komerčne dostupných alebo syntetizovaných činidiel.

Skratky

Skratky, ktoré sa použili pri opise schém a príkladov, sú nasledujúce: Ac pre acetyl; APCI pre chemickú ionizáciu pri atmosférickom tlaku; CDI pre karbonyldiimidazol; CH₃CN pre acetonitril; CI alebo DCI pre desorpčnú chemickú ionizáciu; DMF pre dimetylformamid; ESI pre elektrosprayovú ionizáciu; EtOAc pre etylacetát; FAB pre ostreľovanie rýchlymi časticami; FTIR pre Fourierovú transformačnú infračervenú spektrometriu; HPLC pre vysoko výkonnú kvapalinovú chromatografiu; IR pre infračervenú spektroskopiu; MeOH pre metanol; MHz pre megahertz; MIC pre mikroskop; MS pre hmotnostné spektrá; NaHMDS pre hexametyldisilazid sodný; NMR pre nukleárnu magnetickú rezonanciu; Rf pre retenčný faktor; R_t pre retenčný čas; TBAF pre fluorid tetrabutylamónny; THF pre tetrahydrofurán; TLC pre chromatografiu na tenkej vrstve ; TMS pre trimetylsilylchlorid; a DCM pre dichlórmetán.

Na východiskovú látku 6-O-metyl-erytromycín A 1 (klaritromycín, komerčne dostupný ako BIAXIN® od Abbott Laboratories) sa zavedie chrániaca skupina v polohe 2'a 4” reakciou s vhodným činidlom používaným na chránenie hydroxy skupiny, napr. opísaným v T.W. Greene and P.G.M.Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2^nd ed., John Wiley & Son, Inc., 1991. Činidlá používané na chránenie hydroxy skupiny zahrnujú napr. anhydrid kyseliny octovej, anhydrid kyseliny benzoovej, benzylchlórmravčan, hexametyldisilazan alebo trialkylsilylchlorid v aprotickom rozpúšťadle.

Schéma 1

Schéma 1 pokrač.

Zavedenie chrániacich skupín v polohe 2-hydroxy skupiny a 4 -hydroxy skupiny 6-0metylerytromycínu A l uvedenej v schéme 1 môže byť dosiahnuté postupne alebo naraz pri získaní zlúčeniny 2, kde substituent R^p je skupina chrániaca hydroxy skupinu. Výhodná skupina R^p je trimetylsilyl alebo acetyl.

Príklady aprotických rozpúšťadiel zahrnujú dichlórmetán, chloroform, DMF, tetrahydrofurán (THF), N-metylpyrolidinon, dimetylsulfoxid, dietylsulfoxid, Ν,Ν-dimetylformamid, N,Ndimetylacetamid, triamid hexametylfosforečnej kyseliny, ich zmesi alebo zmesi jedného z týchto rozpúšťadiel s éterom, tetrahydrofuránom, 1,2-dimetoxyetánom, acetonitrilom, etylacetátom, acetónom, a pod. Aprotické rozpúšťadlá neovplyvňujú reakciu a sú výhodne dichlórmetán, chloroform, DMF, tetrahydrofurán (THF), N-metylpyrolidinon alebo ich zmesi.

Chránená zlúčenina 2 sa nechá reagovať s hexametyldisilazidom sodným alebo hydridom sodným v aprotickom rozpúšťadle pri teplote 0 až 25°C a karbonyldiimidazolom, čím sa

(CH ) -NH-t získa zlúčenina 3. Reakcia zlúčeniny 3 s amino zlúčeninou vzorca ² ² buď bez rozpúšťadla alebo v acetonitrile pri teplote 25 až 80°C, potom odobratie chrániacej skupiny vedie ku vzniku N-substituovaného cyklického karbamátu charakterizovaného zlúčeninou 4. Odobratie chrániacej skupiny 2'-hydroxy a 4-hydroxy skupiny sa uskutoční spôsobom opísaným v literatúre, napríklad T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2^nd edition, John Wiley & Son, Inc. (1991).

V rámci jedného uskutočnenia postupu sa demetylácia 3 '-N-dimetyl skupiny uskutočňuje postupne reakciou zlúčeniny 4 s jódom za prítomnosti vhodnej bázy, napr. acetát sodný a svetlo alebo tepelným zdrojom, potom sa utlmí tiosulfátom sodným a spracováva na odstránenie prvej metylovej skupiny, čím sa získa zlúčenina 5. Druhá metylová skupina sa odstráni reakciou s jódom, miernou bázou, napr. trojsýtny fosforečnan draselný a zdroj svetla, čim vznikne bisdemetylamín 6. N-Demetylácia môže byť tiež dosiahnutá reakciou zlúčenín 4 s chloromravčanovými činidlami, napr. benzylchloromravčan, alylchloromravčan, vinylchloromravčan, a pod.

Alkylácia 3 '-N-bisdemetyl zlúčeniny 6 sa docieli reakciou s príslušným aldehydom alebo ketónom za prítomnosti hydridu kovu, napr. kyanoborohydridu sodného alebo triacetoxyborohydridu sodného alebo za prítomnosti Pd/C katalyzátora v protickom alebo neprotickom rozpúšťadle pod atmosférou vodíka. Aldehydy a ketóny, ktoré môžu byť používané pri príprave zlúčeniny 7 zahrnujú napr. cyklopropylkarboxaldehyd, acetón, n-propanal, cyklohexanón, cyklopentanón, izovaleraldehyd, cyklobutanón, izopropylaldehyd, 2-pyridínkarboxaldehyd, 4tiazolekarboxaldehyd.

Alkylácia 3 ,3'-N-bisdemetyl zlúčeniny 6 môže byť tiež dosiahnutá reakciou s príslušným alkylačným činidlom v prítomnosti bázy pomocou spôsobov používaných v odbore, čim sa získa zlúčenina 7. Alkylačné činidlá, ktoré môžu byť používané pri príprave zlúčeniny 7, zahrnujú nižšie alkylhalogenidy, napr. etylbromid, halogén-substituované nižšie alkylhalogenidy, kyano-substituované nižšie alkylhalogenidy, hydroxy-substituované nižšie alkylhalogenidy, ďalšie nižšie alkenylhalogenidy, napr. metylalylchlorid, nižšie alkinylhalogenidy, napr. ropargylbromid, nižšie cykloalkylhalogenidy, nižšie cykloalkylmetylhalogenidy, napr. nižší cyklopropylmetyl a benzyihalogenidy.

V ďalšom uskutočnení postupu sa ako démetylácia, tak i alkylácia uskutočňujú postupne podľa schémy 2 Prvá demetylácia zlúčeniny 4 sa uskutočňuje vyššie opísaným spôsobom, čím sa získa zlúčenina 5, ktorá sa potom monoalkyluje vyššie opísaným spôsobom, čím sa získa zlúčenina 8. Druhá demetylácia sa potom uskutočňuje vyššie opísaným spôsobom za získania zlúčeniny 9, ktorá sa potom alkyluje za získania zlúčeniny 7.

Schéma 2

Schéma 3 ilustruje špecifické uskutočnenie všeobecnej schémy opísanej v schéme 1. Ako je znázornené v schéme 3, poskytne reakcia 2 -acetyl-6-O-metylerytromycín A 10 s trimetylsilylchloridom zlúčeninu 11. Zlúčenina 11 sa nechá reagovať s hexametyldisilazidom sodným a karbonyldiimidazolom, čím sa získa derivát 12-O-acylimidazolu, ktorý sa následne nechá reagovať s 3,4-dichlórfenetylamínom, čím vznikne derivát 11,12-cyklického karbamátu. Takto získaný 11,12-cyklický karbamát sa nechá reagovať s metanolom za získania zlúčeniny 12 Odobratie skupiny chrániacej 4-hydroxy skupinu sa docieli spôsobmi používanými v odbore, čím sa dostane zlúčenina 13. Reakcia zlúčeniny 13 s jódom za prítomnosti acetátu sodného, potom utlmenie reakčnej zmesi bisulfitom sodným poskytne zlúčeninu 14. Druhá demetylácia sa docieli reakciou zlúčeniny 14 s jódom, trojsýtnym fosforečnanom draselným a zdrojom svetla, čím sa získa bisdemetylamin 15. Bisalkylácia dusíka v polohe 3' sa docieli reakciou s cyklopropánkarboxaldehydom za prítomnosti kyanoborohydridu sodného v metanole a kyseli nou octovou, čím sa získa konečný produkt, zlúčenina 16.

Schéma 3

Schéma 3 pokrač.

Schéma 4 ilustruje špecifické uskutočnenie všeobecného príkladu opísaného v schéme 2, ktoré sa týka reakcie 2'-acetyl-6-O-metylerytromycínu A 10 s trimetylsilylchloridom za získania zlúčeniny 11. Zlúčenina 11 sa nechá reagovať sa hexametyldisilazidom sodným a karbonyldiimidazolom za získania derivátu 12-O-acylimidazolu, ktorý sa nechá postupne reagovať s 4-chlórfenetylamínom za vzniku derivátu 11,12-cyklického karbamátu. Takto získaný 11,12cyklický karbamát sa nechá reagovať s metanolom za získania zlúčeniny 17. Odobratie skupiny chrániacej 4''-hydroxy skupinu sa docieli spôsobmi používanými v odbore, čím sa dostane zlúčenina 18. Reakcia zlúčeniny 18 s jódom za prítomnosti acetátu sodného, potom utlmenie reakčnej zmesi bisulfitom sodným poskytne zlúčeninu 19. Prvá alkylácia sa docieli reakciou s acetónom za prítomnosti kyanoborohydridu sodného v metanole a niekoľkých kvapiek kyseliny octovej, čim sa získa konečný produkt, zlúčenina 20. Druhá dealkylácia sa docieli reakciou zlúčeniny 20 s jódom, acetátom sodným a zdrojom svetla, čím vznikne demetylamín 21. Alkylácia dusíka v polohe 3' sa docieli reakciou s cyklobutanónom za prítomnosti kyanoborohydridu sodného v metanole a kyseliny octovej, čím sa získa konečný produkt, zlúčenina 22.

Schéma 4

IS

Schéma 4 pokrač.

schéma 5 ilustruje na tomto mieste opísaný tretí príklad spôsobu prípravy. V tomto príklade sa do amínu 23 postupne pridávajú rôzne alkylové skupiny, čím sa získa zlúčenina 25.

Schéma 5

Predchádzajúci opis môže byť lepšie pochopený pomocou odkazov na nasledujúce príklady, ktoré sú tu uvedené na ilustráciu a nemajú nijak obmedzovať rozsah vynálezu.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

S'J'-N-bisdemetyl-B'J'-N-biscyklopropylmetyl-l l-deoxy-ll-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)]6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A / í

Na 6-0-metyl erytromycín A (komerčne dostupný u Abbott Laboratories ako BIAXIN) sa zavedie skupina chrániaca hydroxy skupinu v polohe 2' spôsobom opísaným v odbornej literatúre.

Krok 1: 2'-O-Ac-4-O-trimetylsilyl-6-O-metyl-erytromycín A (zlúčenina 11, schéma 3) 2'-OAc-6-O-metyl-erytromycín A (45 g, 57 mmol) sa rozpustí v 450 ml CH2CI2 a ochladí na teplotu 0°C v kúpeli ľad/voda. Naraz sa pridá pyridín (13,8 ml, 171 mmol), potom po kvapkách v priebehu 15 minút TMSC1 (14,5 ml, 114 mmol). Reakcia sa mieša za ochrany sušiacou trubicou po dobu 1 hodiny, po ktorej TLC (CítC^MeOH, 9:1) indikuje úplnú premenu na novú, menej polárnu látku. Reakcia sa potom utlmí 500 ml 0,5 M NaH2PO4, organická vrstva sa pred sušením (Na2SO₄), filtrovaním a koncentrovaním separuje a premyje H2O (300 ml), NaHCO3(nasýt.) (300 ml), H2O (300 ml) a soľankou ( 100 ml). Zvyšok sa kryštalizuje z CH3CN za získania 48 g zlúčeniny 11 (98 %). Teplota topenia 235-237°C (CH3CN); Rf = 0,5 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1 ): MS (ESI) (M+H)⁺ pri m/z 862; ^l3C NMR (75 MHz, CDCb) δ 221,0,

175,6, 169,9, 100,0, 96,0, 80,5, 80,3, 78,3, 77,8, 76,4, 74,1 , 73,2, 72,0, 69,0, 67,1, 65,2, 62,7,

50,3, 49,4, 45,1, 44,9, 40,5, 38,7, 38,6, 37,1, 35,6, 30,9, 22,1, 21,5, 21,4, 20,9, 19,7, 19,2, 17,8,

15,9,15,8, 12,1,10,4, 8,9,0,8.

Krok 2: 4-O-Trimetylsilyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl11,12-cyklický karbamát erytromycínu A (zlúčenina 12, schéma 3)

Zlúčenina 11 (6,0 g, 6,96 mmol) z vyššie uvedeného kroku sa rozpustí v 10 ml bezvodého THF, potom zriedi 50 ml DMF. Výsledný roztok sa ochladí v kúpeli ľad/voda a nechá naraz reagovať s l,ľ-karbonyldiimidazolom (5,64 g, 34,8 mmol), potom sa po častiach pridá 1,0 g (25 mmol) NaH (60% suspenzia). Reakcia sa nechá ohriať na izbovú teplotu a mieša pod atmosférou N2 po dobu 1 hodiny, po ktorej TLC [EtOAcMeOH, 95 5, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na polámejšiu, UV aktívnu látku. Reakcia sa opatrne utlmí vodou, potom rozdelí medzi vrstvy EtOAc (300 ml) a vody (300 ml). Organická fáza sa pred sušením (Na₂SO4) a koncentrovaním spojí a premyje vodou (2 x 300 ml) a soľankou (200 ml). Vzorka výslednej bezfarebnej peny sa podrobí hmotnostnej spektrálnej analýze, ktorá ukáže požadované (M+H)⁺pri m/z 938. Zvyšná látka sa rozpustí v CH3CN (25 ml), nechá reagovať s 5,0 g (26 mmol) 3,4dichlórfenetylamínu a mieša pod atmosférou N2 pri teplote 55°C. Po 48 hodinách TLC [EtOAc:MeOH, 95:5, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na menej polámu látku, ktorá po ochladení na izbovú teplotu precipituje. Výsledný precipitát sa rekryštalizuje z CH3CN za získania 5,74 g chráneného cyklického karbamátu vo forme bezfarebných ihličiek MS (ESI) (M+H)⁺ pri m/z 1059; ¹³C NMR (75 MHz, CDC13) δ 216,4, 176,3, 170,1, 157,2, 139,3, 132,2,

131,1, 130,3, 130,1, 128,4, 100,2, 96,3, 82,R, 80,5, 79,9, 79,0, 77,5, 76,2, 73,2, 67,4, 65,4, 62,8,

60.3, 50,5, 49,6, 45,5, 45,3, 44,8, 41,0, 39,0, 38,7, 38,5, 35,7, 32,6, 31,0, 22,2, 21,9, 21,6, 20,2,

19.3, 18,8, 16,1, 14,3, 14,1, 10,2, 9,2, 1,9, 0,8.

Chránený cyklický karbamát (5,74 g, 5,42 mmol) sa suspenduje v 250 ml metanolu a suspenzia sa zahrieva na teplotu 55 °C za ochrany sušiacou trubicou, po ktorej TLC [CH₂Cl₂:MeOH, 9:1, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu východiskovej látky na novú, polárnejšiu látku, ktorá po ochladení na izbovú teplotu kryštalizuje. Výsledná tuhá látka sa kryštalizuje z MeOH/vody za získania 5,24 g zlúčeniny 12 (74% zo zlúčeniny 11): Teplota topenia 112-114°C; R_f = 0,65 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1); MS (ESI) (M+H)⁺ pri m/z 1017; HRMS m/z (M+H)⁺ vypočítaná 999,5116, zistená 999,5110; *H NMR (300 MHz, CDCB) δ 7,46 (d, J = 2 Hz, Ar H), 7,35 (d, J = 8 Hz, Ar H), 7,19 (dd, J = 8, 2 Hz, Ar H), 4,91 (d, J = 4,4 Hz, 1 H), 4,56 (d, J = 7 Hz, 1 H, C-ľ CH), 3,75 (d, J = 10 Hz, 1 H, C-3 CH), 3,70 (s, 1 H, C-l 1 CH), 3,67 (d, J = 8 Hz, 1 H, C-5 CH), 3,31 (s, 3H, C-6 OCH3), 3,07 (s, 3H, C-6 OCH3), 2,38 (d, J = 15 Hz, 1 H, C-2 CH), 2,28 (s, 6H, C-2' N(CH3)2), 1,43 (s, 3H, C-6 CH3), 1,40 (s, 3H, C-12 CH3), 1,07 (d, J = 23 Hz, 3H, C-10 CH3), 0,82 (t, J = 7 Hz, 3H, C-l5 CH3), 0,16 (s, 9H, C-4 OSi(CH3)3); ^I3C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 216,1, 176,5, 157,2, 139,3, 132,1, 131,0, 130,2, 130,0, 128,4, 102,4, 96,6, 82,8, 80,6, 79,9, 79,0, 78,0, 76,1, 73,1, 71,1, 68,0, 65,2, 64,7, 60,3, 50,6, 49,6, 45,5,

45,3, 44,8, 40,0 (2C), 39,1, 38,9, 35,6, 32,6, 28,6, 22,1, 21,8, 21,7, 20,1, 19,2, 18,8, 16,0, 14,1, 14,0, 10,2, 9,0, 0,8,

Krok 3: 11-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A (zlúčenina 13, schéma 3)

Trimetylsilyléter 12 (5,24 g, 5,15 mmol) z vyššie uvedeného kroku sa rozpustí v 50 ml THF, nechá reagovať s 5,4 ml TBAF (1 M/THF, 2,6 mmol) a mieša pri izbovej teplote. Po 2 hodinách TLC [CHChiMeORNLLjOH, 90:8:1, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na novú, polárnejšiu látku. Reakčná zmes sa rozdelí medzi vrstvy EtOAc (300 ml) a vody (300 !

/ ml). Organická fáza sa pred sušením (Na₂SO₄) a koncentrovaním premyje NaHCO3 (nasýt., 200 ml), vodou (200 ml) a soľankou (200 ml). Výsledný zvyšok sa kryštalizuje z CH3CN za získania 4,82 g zlúčeniny 13 (99%); R_f = 0,45 (CHCl₃:MeOH:NH4OH, 90:8:1); Teplota topenia 240243°C; MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 945; *H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,45 (d, J = 2 Hz, 1 H, Ar H), 7,35 (d, J = 8 Hz, 1 H, Ar H), 7,19 (dd, J = 8, 2 Hz, 1 H, Ar H), 4,44 (d, J = 7 Hz, 1 H, C-ľ CH), 3,75 (d, J = 10 Hz, IH, C-3 CH), 3,69 (s, IH, C-l 1 CH), 3,33 (s, 3H, C-3 OCH3), 3,07 (s, 3H, C-6 OCH3), 2,29 (s, 6H, C-3' N(CH3)2), 2,19 (d, J = 10 Hz, IH, C-4” OH), 1,44 (s, 3H, C-6 CH3), 1,40 (s, 3H, C-12 CH3), 1,31 (d, J = 6 Hz, 3H, C-6 CH3), 1,26 (s, 3H, C-3 CH3), 1,15 (d, J = 7 Hz, 3H, C-8 CH3), 1,12 (d, J = 8 Hz, 3H, C-4 CH3), 1,02 (d, J = 7 Hz, 3H, C-10 CH3), 0,83 (t, J = 8 Hz, 3H, C-15 CH3); ¹³C NMR (75 MHz, CDC13) δ 216,2, 176,4,

157,2, 139,3, 132,1 , 131,0, 130,2, 130,1, 128,4, 102,9, 96,2, 82,8, 80,1, 78,9, 77,9, 77,8, 76,2,

72,6, 70,9, 68,9, 65,8, 65,6, 60,3, 50,6, 49,5, 45,5, 45,3, 44,8, 40,2 (2C), 39,0, 38,9, 34,8, 32,6,

28,5, 21,9, 21,5 (2C), 20,2, 18,9, 18,7, 16,0, 14,2, 14,1, 10,2, 9,0; IR (KBr) v 3430, 2970, 2940, 1760, 1735, 1710, 1460, 1420, 1380, 1235, 1170, 1070, 1055, 1010, 1000 cm'¹; Analyticky vypočítané pre C47H₇4Cl₂N₂Oi3»0,5 H₂O: C, 59,11: H, 7,91; N, 2,93. Zistené : C, 59,13; H, 8,12: N, 2,89.

Krok 4. 3'-N-Demetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12cyklický karbamát erytromycínu A (zlúčenina 14, schéma 3)

2,5 g zlúčeniny 13 (2,65 mmol) z vyššie uvedeného kroku sa rozpustí v 50 ml metanolu a nechá reagovať s 1,80 g NaOAc*3H₂O (13,25 mmol) a 0,71 g of I₂ (2,78 mmol). Roztok sa ožaruje 500W halogénovou pracovnou lampou, ktorá udržuje reakciu pri refluxnej teplote Po 2 hodinách TLC indikuje úplnú premenu na novú, polárnejšiu látku. Prebytok I₂ sa utlmí pridaním (po kvapkách) IM Na₂S₂O3. Reakčná zmes sa koncentruje a výsledný zvyšok sa rozdelí medzi vrstvy EtOAc (200 ml) a NaHCO3 (nasýt.) (200 ml) Organická fáza sa premyje soľan37 kou (100 ml), suší (Na₂SO4), filtruje a koncentruje. Výsledný zvyšok sa čistí na stĺpci silikagélu (mobilná fáza CHChMeOHNTLOH, 90:8:1) za získania l,75g zlúčeniny 14 (71%) vo forme amorfnej tuhej látky: Rf = 0,33 (CHCl3:MeOH:NH4OH, 90:8:1); Teplota topenia 136 - 142°C (CH3CN/H2O); MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 931; *H NMR (300 MHz, CDCb) δ 7,45 (d, J = 2 Hz, 1 H, Ar H), 7,35 (d, J = 8 Hz, 1 H, Ar H), 7,19 (dd, J = 8, 2 Hz, 1 H, Ar H), 4,42 (d, J = 7 Hz, 1 H, C-ľ CH), 3,74 (d, J = 9 Hz, 1 H, C-3 CH), 3,69 (s, 1 H, C-l 1 CH), 3,32 (s, 3H, C-3 OCH3), 3,07 (s, 3H, C-6 OQH3), 2,42 (s, 3H, C-3¹ NCH3), 1,44 (s, 3H, C-6 CH₃), 1,41 (s, 3H, C-12 CH₃), 1,31 (d, J = 6 Hz, 3H, C-6 CH₃), 1,26 (s, 3H, C-3 CH₃), 1,16 (d, J = 7 Hz, 3H, C8 CH₃), 1,07 (d, J = 8 Hz, 3H, C-4 CH₃), 1,03 (d, J = 7 Hz, 3H, C-10 CH₃), 0,82 (t, J = 7 Hz, 3H, C-15 CH₃); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 216,2, 176,2, 157,1, 139,2, 132,2, 131,0, 130,3,

130,2, 128,4, 102,4, 96,2, 82,7, 80,5, 78,8, 77,8, 77,7, 76,3, 75,0, 72,7, 68,6, 65,7, 60,3, 50,7, 50,6, 49,5, 45,4, 45,3, 44,8, 39,0, 38,9, 38,8, 37,3, 34,8, 33,3, 32,6, 21,9, 21,5, 21,3, 20,1, 18,9,

18,7, 16,0, 14,2, 14,1, 10,2, 9,6; IR (KBr) v 3420, 2970, 2940, 1760, 1735, 1710, 1460, 1420, 1380, 1235, 1170, 1065, 1050, 1010, 1000 cm'¹; Analyticky vypočítané pre

C₄₆H₇₂C1₂N₂O,₃·0,75 H₂O: C, 56,39; H, 7,44; N, 2,81. Zistené : C, 56,63; H, 7,36; N, 2,78.

Krok 5: 3' 3'-N-Bisdemetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl11,12-cyklický karbamát erytromycínu A (zlúčenina 15, schéma 4)

Roztok 2,07 g (2,19 mmol) zlúčeniny 14 sa rozpustí v 50 ml metanolu a nechá po kvapkách reagovať s roztokom 2,32 g K₃PO4 (11,0 mmol) v 5 ml H₂O, potom naraz s 1,11 g I₂ (4,38 mmol). Roztok sa ožaruje 500W halogénovou lampou, ktorá udržuje reakciu pri refluxnej teplote. Po 0,75 hodinách sa jódová farba stratí a HPLC s reverznou fázou indikuje čiastočnú premenu na novú, polárnejšiu látku. Reakčná zmes sa koncentruje na 1/3 objemu a rozdelí medzi vrstvy etylacetátu (400 ml) a nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (100 ml). Organická vrstva sa pred sušením (Na₂SO4), filtrovaním a koncentrovaním premyje vodou (300 ml) a soľankou (300 ml). Výsledný zvyšok sa znovu podrobí vyššie uvedeným reakčným podmienkam. Po 1 hodine sa jódová farba vytratí a HPLC s reverznou fázou indikuje úplnú premenu na novú, polárnejšiu látku Reakčná zmes sa koncentruje na 1/3 objemu a rozdelí medzi vrstvy etylacetátu (400 ml) a nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (100 ml). Organická vrstva sa pred sušením (Na₂SO4), filtrovaním a koncentrovaním premyje vodou (300 ml) a soľankou (300 ml) Výsledný zvyšok sa kryštalizuje z CH₃CN za získania 1,25 g zlúčeniny 15 (62%): Teplota topenia 223-225°C (EtOAc); MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 917; *H NMR (300 MHz, CDC1₃) Ô 7,46 (d, J = 2 Hz, Ar H), 7,35 (d, J = 8 Hz, Ar H), 7,19 (dd, J = 8, 2 Hz, Ar H),

4,39 (d, J = 7 Hz, C-ľ CH), 4,04-3,98 (m, 1 H, C-5 CH), 3,32 (s, 3H, C-3 OCH₃), 2,68-2,61 (m, 1 H, C-8 CH), 1,44 (s, 3H, C-6 CH₃), 1,41 (s, 3H, C-12 CH₃), 1,06 (d, J = 8 Hz, 3H, C-4 CH₃), 1,03 (d, J = 7 Hz, 3H, C-10 CH₃), 0,83 (t, J = 7 Hz, 3H, C-15 CH₃); ¹³C NMR (75 MHz,

CDCI₃) δ 216,0, 176,1, 157,1, 139,1, 132,1, 130,9, 130,2, 130,1, 128,3, 102,3, 96,1, 82,7, 80,5,

78,8, 77,8, 77,7, 77,3, 76,3, 72,6, 68,5, 65,7, 60,3, 52,4, 50,6, 49,3, 45,3, 45,2, 44,7, 41,3, 38,9, i !

38,7, 34,7, 32,5, 21,8, 21,4, 21,0, 20,0, 18,8, 18,6, 15,9, 14,2, 14,1, 10,1, 9,6; IR (KBr) v 3440, 2970, 2930, 1760, 1735, 1165, 1065, 1010 cm’¹.

Krok 6: S'.S'-N-Bisdemetyl-S'^'-N-biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l l, 12-cyklický karbamát erytromycínu A (zlúčenina 16, schéma 3)

290 mg (0,32 mmol) zlúčeniny 15 z vyššie uvedeného kroku sa rozpustí v 15 ml metanolu a nechá reagovať s cyklopropánkarboxaldehydom (460 mg, 6,6 mmol), kyanoborohydridom sodným (80 mg, 1,3 mmol) a kyselinou octovou (7 kvapiek na pH 5-6) a zmes sa mieša pri izbovej teplote. Po 24 hodinách TLC [CHCl₃:MeOH, 98:2, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na novú, menej polárnu látku. Reakcia sa koncentruje a výsledný zvyšok sa rozdelí medzi vrstvy etylacetátu (159 ml) a vody (150 ml). Organická vrstva sa pred sušením (Na2SO4), filtrovaním a koncentrovaním premyje vodou (150 ml) a soľankou (150 ml). Výsledný zvyšok sa čistí na stĺpci silikagélu (mobilná fáza CHCl₃:MeOH:NH4OH, 90:8:1) a kryštalizuje z acetonitrilu za získania 180 mg zlúčeniny 16 (56%) vo forme jemných ihličiek MS (FAB)(M+H)⁺pri m/z 1025; 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,46 (d, J =2 Hz, IH), 7,35 (d, J = 8, IH), 7,20 (dd, J = 8, 1,8, IH), 4,93 (d, J = 5, IH), 4,90 (dd, J = 9, 2,2, 1 H), 4,49 (d, J = 7, 1 H), 4,05 -4,02 (m, IH), 3,90-3,81 (série m, 3H), 3,75 (d, J = 10, 1 H), 3,70 (s, 1 H), 3,67 (d, J = 7, 1 H), 3,51 3,48 (m, IH), 3,34 (s, 3H), 3,17 -3,12 (série m, 2H), 3,07 (s, 3H), 3,05 -2,87 (série multipletov, 5H), 2,64 -2,59 (série m, 3H), 2,38 (d, J = 15, 1 H), 2,22 (d, J = 7, 1 H), 2,19 (d, J = 7, IH) 2,14 (d, J = 10, 1 H), 1,94 - 1,87 (série multipletov, 2H), 1,78 - 1,76 (série m, 2H), 1,66 - 1,52 (série m, 4H), 1,43 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,31 (d, J = 6, 3H), 1,26 -1,20 (série multipletov, 9H), 1,17 1,15 (série m, 6H), 1,03 (d, J = 7,0, 3H), 0,86 - 0,81 (série m, 5H), 0,57 (t, J = 10,0, 2H), 0,47 (t, J = 10,0, 2H), 0,13 - 0,11 (m, 4H); ¹³C NMR (CDC13) δ 216,3, 176,3, 157,2, 139,3, 132,2,

131,0, 130,3, 130,1, 128,4, 103,1, 96,0, 82,8, 80,3, 78,9, 77,8, 76,2, 72,6, 70,4, 69,1, 65,8, 61,7,

60,4, 54,5, 50,6, 49,5, 45,6, 45,3, 44,8, 39,1, 39,0, 39,0, 34,8, 32,6, 30,3, 21,9, 21,5, 21,5, 20,2,

18,9, 18,6, 16,0, 14,2, 14,1, 10,4, 10,2, 9,0, 5,5, 2,7; Analyticky vypočítané pre C53H82CI2 N₂0i₃: C, 62,04; H, 8,05; N, 2,73 Zistené: C, 61,66; H, 8,10 N, 2,59.

Príklad 2 / /

3',3'-N-Bisdemetyl-3'L3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)]-6-Ometyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa postupu opísaného v príklade 1 s výnimkou, spočívajúcou v tom, že sa nahradí cyklobutanón za cyklopropánkarboxaldehyd. Produkt sa čistí na stĺpci silikagélu za získania amorfnej tuhej látky : Rf = 0,58 (CHCl₃:MeOH:NH4OH 94:5:1); IR (KBr) v 3440, 2960, 2925, 1755, 1730, 1460, 1380, 1165, 1105, 1065, 1050 cm'¹; *H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,45 (d, J =2 Hz, 1 H), 7,34 (d, J = 8, Hz 1 H), 7,19 (dd, J = 8, 2 Hz, 1 H),

4,92 (d, J = 5 Hz, 1 H), 4,89 (dd, J = 11, 2 Hz, 1 H), 4,40 (d, J = 7 Hz, 1 H), 4,02 -3,99 (m, 1 H), 3,88-3,78 (m, 2H), 3,72 (d, J = 10 Hz, 1 H), 3,69 (s, 1 H), 3,65 (d, J = 7, 1H), 3,47 -3,44 (m, 1H), 3,33 (s, 3H), 3,31-3,26 (série m, 2H), 3,12 (q, J =7 Hz, 2H), 3,07 (s, 3H), 3,05 -2,84 (série multipletov, 6H), 2,65 -2,61 (m, 1H), 2,50 (široký singlet, 1 H), 2,38 (d, J =7 Hz, 1 H), 2,ΜΙ,43 (série multipletov, 21 H), 1,41 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,30 (d, J = 6 Hz, 3H), 1,24 -1,20 (série multipletov, 11 H), 1,15 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,11 (d, J = 7 Hz, 3H), 0,82 (t, J = 7 Hz, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 216,4, 176,3, 157,2, 139,2, 132,1, 131,0, 130,2, 130,1, 128,4, 103,3,

95,9, 82,8, 80,3, 78,8, 77,8, 77,7, 76,2, 72,6, 70,7, 69,2, 65,7, 60,3, 58,8, 54,3, 50,6, 49,5, 45,5,

45,2, 44,7, 39,0, 38,9, 38,8, 34,8, 32,6, 31,2, 30,0, 29,7, 21,9, 21,5, 20,1, 18,9, 18,6, 16,0, 15,6,

14,2, 14,1, 10,2, 9,0;MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 1025; Analyticky vypočítané pre C53H82CI2 N2O13 C, 62,04; H, 8,05; N, 2,73. Zistené- C, 61,94; H, 8,24 N, 2,61.

Príklad 3

3^,,3'-N-Bisdemetyl-3^,,3'-N-biscyklopropylmetyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 1 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 4-chlórfenetylamín za 3,4-dichlórfenetylamín. Produkt sa kryštalizuje z CH3CN/H2O: Rf = 0,38 (8% MeOH / DCM, 0, 1 % NH4OH); IR (KBr) v 3440, 2970, 2940, 1765, 1735, 1715, 1490, 1460, 1420, 1380, 1330, 1280, 1235, 1170, 1130, 1110, 1095, 1070, 1055, 1015, 1000 cm’¹: *H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,30-7,22 (série m, 4H), 4,96-4,92 (série m, 2H), 4,40 (d, J = 67,1 Hz, 1H), 4,04-3,97 (m, 1 H), 3,87-3,80 (m, 2H), 3,75-3,70 (série m, 3H), 3,64 (d, J =7,5 Hz, 1H), 3,50-3,40 (m, 1H), 3,34 (s, 3H), 3,28-3,20 (m, 2H), 3,20-3,09 (m, 2H), 3,07 (s, 3H), 3,06-2,80 (série m, 5H), 2,68-2,57 (m, 1H), 2,54-2,43 (m, 1H), 2,38 (d, J =

15,3 Hz, 1H), 2,10 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,08-1,98 (série m, 3H), 1,97-1,82 (série m, 6H), 1,801,74 (m, 2H), 1,67-1,50 (série m, 7H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,29 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,22 (d, J =6,4 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,13 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,83 (t, J = 7,3 Hz, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) δ

216,2, 176,3, 157,2, 137,5, 131,9, 130,3, 128,5, 103,4, 96,0, 82,8, 80,4, 78,9, 77,9, 77,8, 76,3,

72,7, 70,9, 69,3, 65,8, 60,4, 58,9, 50,7, 49,5, 45,6, 45,3, 45,0, 39,1, 39,0, 34,9, 32,9, 32,7, 31,2,

30,1, 22,0, 21,5, 20,2, 18,9, 18,6, 16,0, 15,7, 14,2, 14,1, 10,3, 9,0 ; MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 991: Analyticky vypočítané pre C53H83CIN2O13 : C, 64,19; H, 8,44; N, 2,82. Zistené: C, 64,10; H, 8,54, N, 2,79.

Príklad 4

3',3'-N-bisdemetyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)]-6-Ometyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 2 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 4-chlórfenetylamín za 3,4-dichlórfenetylamín. Produkt sa kryštalizuje z CH3CN/H2O: R_f = 0,38 (8% MeOH / DCM, 0,1 % NH₄0H); IR (KBr) v 3440, 2970, 2940, 1765, 1735, 1715, 1490, 1460, 1420, 1380, 1330, 1280, 1235, 1170, 1130, 1110, 1095, 1070, 1055, 1015, 1000 cnť' ; 'H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,30-7,22 (série m, 4H), 4,96-4,92 (série m, 2H), 4,40 (d, J = 67,1 Hz, 1 H), 4,04-3,97 (m, 1 H), 3,87-3,80 (m, 2H), 3,75-3,70 (série m, 3H), 3,64 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 3,50-3,40 (m, 1 H), 3,34 (s, 3H), 3,28-3,20 (m, 2H), 3,20-3,09 (m, 2H), 3,07 (s, 3H), 3,06-2,80 (série m, 5H), 2,68-2,57 (m, 1 H), 2,54-2,43 (m, 1 H), 2,38 (d, J = 15,3 Hz, 1 H), 2,10 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,08-1,98 (série m, 3H), 1,97-1,82 (série m, 6H), 1,80-1,74 (m, 2H), 1,67-1,50 (série m, 7H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,29 (d, J = 6,1 Hz, 3H),

1,25 (s, 3H), 1,22 (d, J =6,4 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,13 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,83 (t, J = 7,3 Hz, 3H); ^,3C NMR (75 MHz, CDCb) δ

30,1, 22,0, 21,5, 20,2, 18,9, 18,6, 16,0, 15,7, 14,2, 14,1, 10,3, 9,0; MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 991; Analyticky vypočítané pre C53H83CI N2O13: C, 64,19; H, 8,44; N, 2,82. Zistené: C, 64,10; H, 8_?54; N, 2,79.

Príklad 5 ',3'-N-Bisdemetyl-3 '-N-cyklobutyl-3 '-N-izopropyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Krok 1: 4'-O-trimetylsilyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12cyklický karbamát erytromycínu A (Zlúčenina 17, schéma 4)

Zlúčenina 11 (10,2 g, 11,8 mmol) získaná v príklade 1 sa rozpustí v 10 ml bezvodého THF, potom zriedi 60 ml DMF. Výsledný roztok sa ochladí v kúpeli ľad/voda a nechá naraz reagovať s l,ľ-karbonyldiimidazolom (9,8 g, 60,4 mmol), potom sa po častiach pridá 1,8 g (45 mmol) NaH (60% suspenzia). Reakcia sa zahreje na izbovú teplotu a mieša pod atmosférou N₂po dobu 1 hodiny, po ktorej TLC [EtOAc:MeOH, 95:5, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na polárnejšiu, UV aktívnu látku. Reakcia sa opatrne utlmí vodou, potom rozdelí medzi vrstvy EtOAc (300 ml) a vody (300 ml). Organická fáza sa pred sušením (Na₂SO₄) a koncentrovaním spojí a premyje vodou (3 x 300 ml) a soľankou (200 ml). Vzorka výslednej bezfarebnej peny sa podrobí hmotnostnej spektrálnej analýze, ktorá ukáže požadované (M+H)⁺ pri m/z 938. Zvyšná látka sa rozpustí v 10 ml THF, zriedi CH3CN (40 ml), nechá reagovať s 18,0 g (115,7 mmol) 4-chlórfenetylamínu a mieša pod atmosférou N₂ pri teplote 50°C. Po 18 hodinách TLC [CH₂Cl₂:MeOH, 9 1, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na menej polárnu látku Reakčná zmes sa potom rozdelí medzi vrstvy EtOAc (300 ml) a 0,5 N NaH₂PO₄ (400 ml). Organická fáza sa spojí a pred sušením (Na₂SO₄) a koncentráciou sa premyje ďalším 0,5 N NaH₂PO₄ (400 ml), vodou (5 x 300 ml) a soľankou (200 ml). Výsledný zvyšok sa rekryštalizuje z CH3CN za získania 7,4 g (61% zo zlúčeniny 11) chráneného cyklického karbamátu vo forme bezfarebných ihličiek. Chránený cyklický karbamát sa suspenduje v 75 ml metanolu a suspen42 zia sa za ochrany sušiacou trubicou zahrieva na teplotu 50°C. Po 18 hodinách TLC [CH₂Cl₂:MeOH, 9:1, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na novú polárnejšiu látku, ktorá po ochladení na izbovú teplotu kryštalizuje. Výsledná tuhá látka kryštalizuje z CH₃CN za získania 6,75 g zlúčeniny 17 (58 % zo zlúčeniny 11): Rf = 0,45 (CHžCfcMeOH, 9:1); MS (DCI) (M+H)⁺ pri m/z 983.

Krok 2: 11-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)]-6-0-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A (zlúčenina 18, schéma 4)

Trimetylsilyléter 17 (6,75 g, 6,87 mmol) získaný v kroku 1 sa rozpustí v 50 ml THF, nechá reagovať s 7,5 ml TBAF (1 M/THF, 7,5 mmol) a mieša pri izbovej teplote. Po 1 hodine TLC [CH₂Cl₂:MeOH, 91, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na novú polárnejšiu látku. Reakčná zmes sa rozdelí medzi vrstvy EtOAc (300 ml) a 10% NaHCO₃ (100 ml). Organická fáza sa pred sušením (Na₂SO₄) a koncentrovaním premyje vodou (2 x 300 ml) a soľankou (200 ml). Výsledný zvyšok sa kryštalizuje z CH₃CN, čím sa získa 6,04 g zlúčeniny 18 (97%):

R_f= 0,15 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1); MS (DCI) (M+H)⁺pri m/z 911.

Krok 3: 3 '-N-Demetyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4-chlórfenetylamino)]-6-0-metyl-11,12-cykIický karbamát erytromycínu A (zlúčenina 19, schéma 4)

6,04 g Zlúčeniny 18 (6,63 mmol) z vyššie uvedeného kroku sa rozpustí v 60 ml metanolu a nechá reagovať s 4,52 g NaOAc«3H₂O (33,2 mmol) a 1,69 g I₂ (6,66 mmol). Roztok sa ožaruje 500W halogénovou lampou, ktorá udržuje reakciu pri refluxnej teplote. Po 3 hodinách TLC [CHCl₃:MeOH:NH4OH, 90:8:1] indikuje úplnú premenu na novú, polárnejšiu látku. Prebytok I₂ sa utlmí pridaním (po kvapkách) IM NaHSO₃. Reakčná zmes sa koncentruje a výsledný zvyšok rozdelí medzi vrstvy CH₂C1₂ (300 ml) a H₂O (300 ml). Organická fáza sa premyje NaHCO₃ (nasýt) (300 ml), soľankou, suší (Na₂SO₄), filtruje a koncentruje za získania 5,41 g (91%) zlúčeniny 19: R_f = 0,15 (CHCI₃:MeOH:NH₄OH, 90:8:1); MS (DCI) (M+H)⁺ pri m/z 897.

Krok 4: 3'-N-Demetyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)]-6-Ometyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A (zlúčenina 20, schéma 4)

5,40 g (6,03 mmol) Zlúčeniny 19 sa rozpustí v 50 ml metanolu a nechá reagovať s acetónom (7,0 g, 120 mmol), kyanoborohydridom sodným (454 mg, 7,23 mmol) a kyselinou octovou (pridáva sa po kvapkách na pH 5-6) a zmes sa mieša pri izbovej teplote. Po 24 hodinách TLC [CHCl₃:MeOH, 98:2, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na novú, menej polárnu látku. Reakcia sa konceritruje a výsledný zvyšok sa rozdelí medzi vrstvy CH2CI2 (300 ml) a vody (250 ml). Organická vrstva sa pred sušením (Na2SO₄), filtrovaním a koncentrovaním premyje NaHCO₃ (nasýt.) (200 ml) a soľankou (150 ml). Výsledný zvyšok sa čistí na stĺpci silikagélu (mobilná fáza CHCl^MeOttNHtOH, 90:8:1) a kryštalizuje z acetonitrilu za získania 4,23 g (75%) zlúčeniny 20: R_f = 0,80 (CHCl₃:MeOH:NH₄OH, 90:8:1); MS (DCI) (M+H)⁺ pri m/z 939.

Krok 5: 3^,,3'-N-Bisdemetyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)]-6-Ometyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A (zlúčenina 21, schéma 4)

1,6 g Zlúčeniny 20 (1,7 mmol) sa rozpustí v 50 ml metanolu a nechá reagovať s 1,16 g NaOAc*3H2O (8,5 mmol) a 0,48 g I2 (1,88 mmol). Roztok sa ožaruje 500W halogénovou lampou, ktorá udržuje reakciu pri refluxnej teplote. Po 3 hodinách TLC [CHCl₃:MeOH:NH₄OH, 90:8:1] indikuje úplnú premenu na novú, polárnejšiu látku. Prebytok U sa utlmí pridaním (po kvapkách) IM NaHSO₃. Reakčná zmes sa koncentruje a výsledný zvyšok rozdelí medzi vrstvy CH2CI2 (300 ml) a NaHCO₃ (300 ml). Organická fáza sa premyje NaHCO₃ (nasýt.) (300 ml), soľankou, suší (Na2SO₄), filtruje a koncentruje za získania 1,13 g (71%) zlúčeniny 21: Rf = 0,50 (CHCI₃:MeOH:NH₄OH, 90:8:1); MS (DCI) (M+H)⁺pri m/z 925.

Krok 6' 3^,,3'-N-Bisdemetyl-3^,-N-cyklobutyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A (zlúčenina 22, schéma 4)

110 mg (0,119 mmol) zlúčeniny 21 z vyššie uvedeného kroku sa rozpustí v 50 ml metanolu a nechá reagovať s cyklobutanónom ( 1,0 g, 14,3 mmol), kyanoborohydridom sodným (15 mg, 0,24 mmol) a kyselinou octovou (pridáva sa po kvapkách na pH 5-6) a zmes sa mieša pri izbovej teplote. Po 72 hodinách TLC [CHCl₃:MeOH, 98:2, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na novú, menej polárnu látku. Reakcia sa koncentruje a výsledný zvyšok sa rozdelí medzi vrstvy EtOAc (100 ml) a vody (100 ml). Organická vrstva sa pred sušením (Na2SO4), t

filtrovaním a koncentrovaním premyje soľankou (50 ml). Výsledný zvyšok sa čistí na stĺpci silikagélu (mobilná fáza CHCl₃:MeOH:NTLtOH (90:8:1)), čím sa získa 65 mg (56%) zlúčeniny 22: R_f = 0,95 CHC1₃: MeORNLLOH, (90:8:1); MS (ESI)(M+H)⁺ pri m/z 979; HRMS m/z (M+H)⁺ vypočítaná 979,5662. Zistené 979,5660; Analyticky vypočítané pre Cs₂H8₃ClN₂0i₃: C, 63,75; H, 8,53; N, 2,85. Zistené: C, 63,48; H, 8,71; N, 2,79.

Príklad 6

3',3 '-N-Bisdemetyl-3 -N-izopropyl-3 -N-propyl-11-deoxy-l l-[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 5 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí propionaldehyd za cyklobutanón: Rf = 0,35 (CHCl₃:MeOH:NH4OH, 90:8:1); MS (ESI)(M+H)⁺ pri m/z 967

Príklad 7

3,3 '-N-Bisdemetyl-3^,-N-cyklopropylmetyl-3'-N-izoproyl-ll-deoxy-ll-[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 5 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí cyklopropánkarboxaldehyd za cyklobutanón: Teplota topenia 211-213°C (CH₃CN); R_f = 0,85 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1), MS (FAB)(M+H)⁺ pri m/z 979; HRMS m/z (M+H)⁺vypočítaná 979,5662. Zistené 979,5659: IR (KBr) v 3440, 2965, 2930, 1760, 1735, 1715, 1460, 1380, 1235, 1170, 1090, 1065, 1055, 1015 cm'¹; ¹³C NMR (CDC1₃) δ 216,4, 176,4, 157,2,

137,4, 131,8, 130,3, 128,4, 103,0, 95,9, 82,7, 80,2, 78,8, 77,9, 77,7, 76,2, 72,6, 70,5, 69,1, 65,7,

60,3, 59,6, 50,7, 49,5, 49,2, 47,5, 45,6, 45,2, 45,0, 39,0, 38,9 (2C), 34,8, 34,3, 32,8, 22,9, 21,9,

21,5, 21,4, 20,2, 18,9, 18,6 , 16,0, 14,2, 14,1, 11,1, 10,3, 9,0, 5,7, 2,5: Analyticky vypočítané pre C₅₂H₈₅C1N₂O,₃: C, C, 63,75; H, 8,53; N, 2,85 Zistené. C, C 63,45; H, 8,36; N, 2,72.

Príklad 8

3',3 '-N-Bisdemetyl-3'-N-etyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlórfenetyIamino)]-6O-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 5 s výnimkou spočívajúcou /

v tom, že sa nahradí acetaldehyd za cyklobutanón: teplota topenia 225-229°C (CH3CN/H2O): Rr = 0,70 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1); MS (ESI)(M+H)⁺ pri m/z 953; IR (KBr) v 3440, 2960, 2930, 1760, 1735, 1715, 1460, 1380, 1235, 1170, 1100, 1090, 1065, 1055, 1015 cm'¹; ¹³C NMR (CDCI3) δ 216,2, 176,3, 157,2, 137,5, 131,9, 130,3, 128,5, 103,0, 96,0, 82,7, 80,2, 78,9, 77,9,

77,8, 76,3, 72,7, 70,6, 69,1, 65,8, 60,4, 59,9, 50,7, 49,5, 47,9, 45,6, 45,3, 45,0, 39,1, 39,0 (2C),

38,2, 34,9, 34,5, 32,9, 22,9, 21,9, 21,5, 21,4, 20,1, 19,0, 18,9, 18,7, 15,9, 15,7, 14,2, 14,1, 10,3,

8,9.

Príklad 9

3^,,3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklobutylmetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 5 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí cyklobutylkarboxaldehyd za acetón a cyklopropánkarboxaldehyd za cyklobutanón: R_f = 0,65 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1); MS (APCI)(M+H)⁺ pri m/z 1005; IR (KBr) v 3440, 2970, 2930, 1760, 1735, 1710, 1460, 1580, 1380, 1235, 1170, 1100, 1090, 1065, 1055, 1015 cm’¹; ¹³C NMR (CDC1₃) δ 216,2, 176,3, 157,1, 137,4, 131,8, 130,3, 128,4, 103,0, 95,9, 82,7,

80,2, 78,8, 77,9, 77,7, 76,2, 72,6, 70,4, 69,0, 65,7, 62,0, 60,3, 55,4, 54,9, 50,6, 49,4, 45,5, 45,2,

44,9, 39,0 (2C), 38,9, 34,8, 34,3, 32,8, 30,1, 27,0, 26,6, 21,9, 21,5, 21,4, 20,1, 18,8, 18,6, 18,5,

16,0, 14,2, 14,1, 10,3, 10,2, 8,9, 5,4,2,6

Príklad 10

S'J'-N-Bisdemetyl-S'J'-N-biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-1 l-[karboxy-(4metoxyfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 1 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 4-metoxyfenetylamín za 3,4-dichlórfenetylamín. Produkt sa kryštalizuje z CH3CN/H2O: R_f =0,53 (8% MeOH/DCM, 0,1% NH4OH): IR (KBr) v 3440, 2965, 2935, 1755, 1735, 1705, 1610, 1515, 1455, 1380, 1325, 1250, 1235, 1165, 1110, 1070, 1050, 1010, 1000 ‘ cm'¹; ’H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,24 (d, J = 8,8 líz, 2H), 6,83 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,98 (dd, J = 10,9, 2,4 Hz, IH), 4,92 (d, J = 4,4 Hz, 1 H), 4,49 (d, J = 67,2 Hz, 1 H), 4,08-3,97 (m, 1 H), 3,90-3,78 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,73 (s, 2H), 3,66 (d, J =7,2 Hz, IH), 3,55-3,44 (m, IH), 3,33 (s, 3H), 3,18-3,10 (m, 2H), 3,09 (s, 3H), 3,07-2,78 (série m, 5H), 2,70-2,56 (série m, 3H), 2,37 (d, J = 15,3 Hz, 1 H), 2,21 (d, J = 7,1 Hz, IH), 2,17 (d, J = 6,8 Hz, IH), 2,13 (d, J = 10,2 Hz, IH), 2,02-1,86 (m, 2H), 1,77 (d, J = 6,5 Hz, IH), 1,68-1,46 (série m, 4H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,30 (d, J =6,1 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,22 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 6,1 Hz, 3H),

1,15 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,14 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,92-0,78 (série m, 2H), 0,83 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 0,60-0,53 (m, 2H), 0,50-0,41 (m, 2H), 0,16-0,08 (série m, 4H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) Ô 216,1, 176,2, 158,1, 157,2, 131,0, 129,9, 113,8, 103,1,95,9, 82,6,

80.3, 78,8, 77,9, 77,8, 76,3, 72,6, 70,4, 69,0, 65,7, 61,7, 60,4, 55,2, 54,5, 50,7, 49,5, 45,5, 45,4,

45.3, 39,0, 34,8, 32,6, 30,3, 22,0, 21,5, 21,5, 20,2, 18,9, 18,6, 16,0, 14,3, 14,1, 10,4, 10,3, 9,0,

5,5, 2,7; MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 987; Analyticky vypočítané pre CsÄeNzOi^O^ H2O: C, 65,22; H, 8,80; N, 2,82. Zistené: C, 65,23; H, 8,52; N, 2,74.

Príklad 11

3',3^l-N-Bisdemetyl-3',3'-N-biscykIopropylmetyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 1 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 4-fluórfenetylamín za 3,4-dichlórfenetylamín. Produkt sa izoluje na stĺpci silikagélu (mobilná fáza 3% MeOH/DCM / 0,2% NH4OH) vo forme amorfnej tuhej látky Teplota topenia 207-210°C (rozkl.) IR (KBr) v 3440, 2960, 2930, 2870, 2820, 1755, 1730, 1710, 1505, 1455, 1420, 1375, 1325, 1280, 1230, 1220, 1165, 1125, 1105, 1075, 1065, 1050, 1010, 995 cm¹: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,32-7,25 (série m, 2H), 6,99-6,93 (série m,

2Η), 4,98-4,92 (série m, 2H), 4,49 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 4,06-4,00 (m, 1 H), 3,87-3,80 (m, 2H),

3,75 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 3,72 (s, 1 H), 3,66 (d, J = 7, 1 Hz, 1 H), 3,53-3,44 (m, 1 H), 3,34 (s, 3H), 3,19-3,11 (m, 2H), 3,08 (s, 3H), 3,07-2,81 (série m, 5H), 2,68-2,56 (série m, 3H), 2,38 (d, J = 15,3 Hz, IH), 2,23-2,12 (série m, 3H), 1,98-1,83 (m, 2H), 1,79-1,75 (m, 2H), 1,68-1,48 (série m, 5H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,3t) (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,23 (d, J = 5,4 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,16 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,14 (d, J = 7,4 Hz, 3H), 1,03 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,92-0,81 (série m, 2H), 0,83 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 0,62-0,52 (m, 2H), 0,51-0,42 (m, 2H), 0,16-0,08 (série m, 4H); ¹³C NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 216,2, 176,3, 157,2, 134,7,130,4,

130,3, 115,2, 114,9, 103,2, 96,0, 82,7, 80,3, 78,9, 78,0, 77,8, 76,3, 72,7, 70,5, 69,1, 65,8, 61,8,

60.5, 54,6, 50,7, 49,5, 45,5, 45,3, 45,2, 39,1, 39,1, 39,0, 34,9, 32,7, 30,4, 22,0, 21,5, 20,2, 18,9,

18.6, 16,0, 14,3, 14,1, 10,4, 10,3, 9,0, 5,5, 2,7; MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 975.

Príklad 12

S'J'-N-Bisdemetyl-S'J'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlór-3fluórfenetylamino)]-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycinu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 2 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 4-chlór-3-fluórfenetylamín za 3,4-dichlórfenetylamín. Produkt sa izoluje na stĺpci silikagélu (mobilná fáza 3% MeOH/DCM / 0,2% NH4OH) vo forme amorfnej tuhej látky R_f = 0,43 (8% MeOH / DCM, 0,1 % NH4OH); IR (KBr) v 3440, 2970, 2940, 2880, 1760, 1735, 1710, 1580, 1495, 1460, 1425, 1380, 1330, 1285, 1240, 1170, 1105, 1070, 1055, 1015, 1000 cm¹; 'H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,32-7,26 (m, IH), 7,16 (dd, J = 10,2, 2,1 Hz, 1 H),

7,07 (dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1 H), 4,93-4,88 (m, 2H), 4,40 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 4,06-3,96 (m, 1 H), 3,91-3,70 (série m, 3H), 3,69 (s, 1 H), 3,64 (d, J = 7,1 Hz, IH), 3,51-3,41 (m, IH), 3,34 (s, 3H), 3,30-3,08 (série m, 4H), 3,06 (s, 3H), 3,06-2,82 (série m, 5H), 2,68-2,56 (m, 1 H), 2,55-2,44 (m, 1 H), 2,37 (d, J = 14,9 Hz, 1 H), 2,10 (d, J = 10,5 Hz, 1 H), 2,08-1,81 (série m, 9H), 1,79-1,72 (m, 2H), 1,68-1,46 (série m, 9H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,29 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,25 (s,

3H), 1,22 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 1,12 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,82 (t, J = 7,5 Hz, 3H), ^,3C NMR (300 MHz, CDCI₃) δ

216,4, 176,4, 157,2, 140,0, 139,9, 130,3, 125,4, 117,3, 117,0, 103,4, 96,0, 82,8, 80,3, 78,9, 77,9,

77.7, 76,2, 72,6, 70,8, 69,2, 65,7, 60,3, 58,8, 54,4, 50,7, 49,5, 45,6, 45,2, 44,8, 39,0 (2C), 38,9,

34.8, 32,8, 32,5, 31,2, 30,1, 21,9, 21,5, 20,1, 18,9, 18,6, 16,0, 15,7, 14,2, 14,1, 10,2, 9,0; MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 1009; Analyticky vypočítané pre C53H82CIFN2O13: C, 63,05; H, 8,19; N, 2,77. Zistené: C, 63,06: H, 8,50; N, 2,68.

Príklad 13

3',3'-N-Bisdemetyl-3 ',3'-N-biscyklopropylmetyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4-chlór-3/ / fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 1 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 4-chlór-3-fluórfenetylamín za 3,4-dichlórfenetylamín. Produkt sa izoluje chromatografiou na stĺpci silikagélu (3% MeOH/DCM /0,2% NH4OH) vo forme amorfnej tuhej látky: R_f = 0,44 (8% MeOH / DCM + 0,1 % NH4OH); IR (KBr) v 3440, 2970, 2940, 2880, 1760, 1735, 1715, 1585, 1495, 1460, 1425, 1380, 1330, 1285, 1240, 1170, 1125, 1110, 1090, 1070, 1055, 1015, 1000 cm'¹; ’H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,32-7,26 (m, 1H), 7,16 (dd, J =

10.2, 2,1 Hz, 1 H), 7,07 (dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1 H), 4,94-4,88 (m, 2H), 4,49 (d, J = 6,8 Hz, 1 H), 4,08-3,98 (m, 1 H), 3,92-3,78 (m, 2H), 3,74 (d, J = 9,8 Hz, 1 H), 3,70 (s, 1 H), 3,66 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 3,54-3,43 (m, 1 H), 3,33 (s, 3H), 3,20-3,07 (m, 2H), 3,06 (s, 3H), 3,05-2,82 (série m, 5H), 2,70-2,56 (m, 3H), 2,34 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 2,24-2,10 (série m, 3H), 1,98-1,84 (m, 2H), 1,80-1,72 (m, 2H), 1,71-1,46 (série m, 5H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,30 (d, J = 6,1 Hz, 3H),

1,25 (s, 3H), 1,22 (d, J = 57,1 Hz, 3H), 1,21 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,16 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,13 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,91-0,78 (série m, 2H), 0,82 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,63-0,52 (m, 2H), 0,52-0,41 (m, 2H), 0,18-0,08 (série m, 4H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ

216,4, 176,4, 159,7, 157,2, 156,3, 140,0, 139,9, 130,3, 125,4, 117,3, 117,0, 103,1, 96,0, 82,8,

80.2, 78,9, 77,9, 77,7, 76,2, 72,6, 70,4, 69,1,65,8, 61,7, 60,3, 54,5, 50,7, 49,5, 45,6, 45,3, 44,8, 39,0 (2C), 34,8, 32,8, 30,2, 21,9, 21,5, 20,2, 18,9, 18,6, 16,0, 14,2, 14,1, 10,4, 10,2, 9,0, 5,5 (2C), 2,7 (2C); MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 1009; Analyticky vypočítané pre CssHíuCI^NjO,3*0,2 C₆H_I4«0,2 H₂O: C, 63,17, H, 8,33, N, 2,72. Zistené: C, 63,02; H, 8,63; N, 2,63.

Príklad 14

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 2 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 3-chlór-4-fluórfenetylamín za 3,4-dichlórfenetylamín: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,39 (dd, J = 2, 7 Hz, 1 H, Ar H), 7,22 -7,19 (m, 1 H, Ar H), 7,04 (dd, J = 9 Hz, 1 H, Ar H), 4,41 (d, J = 7 Hz, 1 H, C-ľ CH), 4,03 - 4,00 (m, 1 H, C-5 CH), 3,74 (d, J = 10 Hz, 1 H, C-3 CH), 3,70 (s, 1 H, C-11 CH), 3,65 (d, J = 7 Hz, 1 H, C-5 CH), 3,47-3,44 (m, 1H, C-5’ CH),

3,34 (s, 3H, C-3 OCH₃), 3,08 (s, 3H, C-6 OCH₃), 2,64 -2,63 (m, 1 H, C-8 CH), 2,37 (d, J = 15 Hz, 1H, C-2 CH), 2,10 (d, J = 10 Hz, 1 H, C-4 OH), 1,43 (s, 3H, C-6 CH₃), 1,40 (s, 3H, C-12 CH₃), 1,30 (d, J = 6, 3H, C-6 CH₃), 1,15 (d, J = 7 Hz, 3H, C-2 CH₃), 1,13 (d, J = 7 Hz, 3H, C-4 CH₃), 1,03 (d, J = 7 Hz, 3H, C-10 CH₃), 0,83 (t, J = 7 Hz, 3H, C-15 CH₃); ¹³C NMR (CDC1₃) δ

216,3, 176,3, 157,7, 157,2, 155,8, 136,0, 136,0, 131,0, 128,6, 128,5, 116,4, 116,2, 103,0, 96,0,

82,8, 80,3, 78,9, 77,9, 77,8, 76,2, 72,6, 70,8, 69,2, 65,7, 60,3, 58,8, 54,3, 50,7, 49,5, 45,6, 45,2, 45,0, 39,0, 39,0, 38,9, 34,8, 32,5, 32,5, 31,2, 30,0, 21,9, 21,5, 20,1, 18,9, 18,6, 16,0, 15,6, 14,2,

14,1, 10,2, 8,9; MS (ESI) (M+H)⁺ pri m/z 1009; Analyticky vypočítané pre C5₃Hg2ClFN20i₃: C, 63,05: H, 8,19; N, 2,77. Zistené: C, 62,89; H, 8,14; N, 2,81.

Príklad 15

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-biscyk.lopropylmetyl-l 1 -deoxy-11 -[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 1 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 3-chlór-4-fluórfenetylamín za 3,4-dichlórfenetylamín: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,40 (dd, J = 2, 7 Hz, 1 H), 7,23 - 7,20 (m, 1 H), 7,05 (dd, J = 9 Hz, 1 H), 4,95 - 4,91 (série m, 2H), 4,50 (d, J = 7 Hz, 1 H), 4,06 - 4,02 (m, 1 H), 3,90 - 3,78 (série m, 2H), 3,76 (d, J = 10 Hz, I H), 3,71 (s, 1 H), 3,67 (d, J = 7 Hz, 1 H), 3,51 - 3,41 (m, 1 H), 3,34 (s, 3H), 3,17 3,12 (série m, 2H), 3,08 (s, 3H), 3,05 - 2,84 (série m, 5H), 2,67 -2,60 (série m, 3H), 2,39 (d, J = 15 Hz, 1 H), 2,23 - 2,19 (série m, 2H), 2,13 (d, J = 10 Hz, 1H), 1,95 - 1,87 (série m, 2H), 1,80 1,77 (série m, 2H), 1,66 - 1,52 (série m, 4H), 1,44 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,31 (d, J = 6 Hz, 3H),

1,26 (s, 3H), 1,24 - 1,21 (série m, 6H), 1,17 - 1,14 (série m, 6H), 1,03 (d, J = 7 Hz, 3H), 0,84 (t, J = 7 Hz, 3H), 0,60 - 0,56 (m, 2H), 0,49 - 0,45 (m, 2H), 0,14 - 0,12 (série m, 4H); ^I3C NMR (75

MHz, CDCb) δ 216,3, 176,3, 157,8, 157,2, 155,8, 136,0, 131,0, 128,6, 128,5, 116,4, 116,2,

103,1, 96,0, 82,8, 80,3, 78,9, 77,9, 77,8, 76,3, 72,7, 70,6, 69,1, 65,8, 61,8, 60,4, 54,5, 50,7, 49,5,

45,6, 45,3, 45,0, 39,1, 39,0, 34,9, 32,5, 30,3, 21,9, 21,5, 20,2, 18,9, 18,6, 16,0, 14,2, 14,1, 10,4,

10,2, 9,0, 5,5, 2,7; MS (ESI) (M+H)⁺ pri m/z 1009; Analyticky vypočítané pre C₅₃H₈₂ClFN2O₃-0,25(CH₂Cl2): C, 62,04; H, 8,06; N, 2,71. Zistené: C, 62,44; H, 8,34; N, 2,66.

Príklad 16

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopentvl-3'-N-cyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 5 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí cyklopentanón za acetón, cyklopropylkarboxaldehyd za cyklobutanón a 4fluór-3-chlórfenetylamín za 4-chlórfenetylamín: MS (ESI) (M+H)⁺ pri m/z 1095.

Príklad 17

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3^,-N-biscyklopropylmetyl-l 1 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4difluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 1 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 3, 4-difluórfenetylamín za 3,4-dichlórfenetylamín. Produkt sa kryštalizuje z CH₃CN/H₂O· Teplota topenia = 209-211°C (CH₃CN/H₂O); IR (KBr) v 3442, 2972, 2938, 2883, 2831, 1761 , 1735, 1711, 1609, 1519, 1458, 1424, 1379, 1326, 1282, 1235, 1211, 1167, 1126, 1106, 1089, 1067, 1052, 1012, 1000 cm’¹; *H NMR (300 MHz, CDCb) δ 7,22 - 7,03 (série m, 3H), 4,95 - 4,90 (série m, 2H), 4,49 (d, J = 7, 1 Hz, 1 H), 4,09-3,97 (m, 1 H), 3,92-3,79 (m, 2H), 3,74 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 3,70 (s, 1 H), 3,66 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 3,54-3,44 (m, 1H),

3,34 (s, 3H), 3,18-3,11 (m, 2H), 3,10-2,80 (série m, 5H), 3,07 (s, 3H), 2,68-2,57 (m, 3H), 2,38 (d, J = 15,2 Hz, 1 H), 2,23-2,15 (m, 2H), 2,14 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 1,98-1,74 (série m, 4H), 1,71-1,47 (série m, 4H), 1,43 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,30 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,23 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,21 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,16 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,14 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 0,91 - 0,80 (série m, 2H), 0,83 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,62 - 0,52 (m, 2H),

0,51 - 0,41 (m, 2H), 0,17-0,07 (série m, 4H); ^I3C NMR (75 MHz, CDC13) δ 216,29, 176,37, 157,19, 152,5 - 146,5 (m, 2C), 136,5-135,5 (m, 1 C), 125,0 - 124,7 (m, 1 C), 117,9 -116,8 (m, 2C), 103,16, 96,02, 82,78, 80,29, 78,94, 77,96, 77,83, 76,27, 72,68, 70,49, 69,08, 65,81, 61,81, 60,44, 54,55 (2C), 50,64, 49,48, 45,59, 45,33, 45,03, 39,12, 39,05, 39,02, 34,89, 32,71, 30,37, 21,97, 21,52, 21,49, 20,18, 18,88, 18,65, 16,01, 14,22, 14,12, 10,40, 10,23, 9,00, 5,48 (2C), 2,69 (2C); MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 993; Analyticky vypočítané pre C53Hg₂F₂N₂Oi₃»0,2 H₂O: C, 63,86; H, 8,33; N, 2,81. Zistené: C, 63,87; H, 8,29; N, 2,80.

Príklad 18

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-difluórfenetylamino)]-6O-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 2 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 3, 4-difluórfenetylamín za 3,4-dichlórfenetylamín. Produkt sa kryštalizuje z CH₃CN/H₂O: Teplota topenia 220-222°C (CH₃CN(H₂O); IR (KBr) v 3446, 2977, 2938, 2883,

1745, 1734, 1713, 1607, 1518, 1459, 1425, 1378, 1327, 1284, 1236, 1168, 1103, 1094, 1070, 1055, 1013, 1001 cm’¹; *H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,23-7,03 (série m, 3H), 4,94 - 4,89 (série m, 2H), 4,46 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 4,07-3,97 (m, 1 H), 3,92-3,78 (série m, 2H), 3,75 (d, J =

9,1 Hz, IH), 3,70 (s, IH), 3,67 (d, J = 7,8 Hz, IH), 3,54-3,44 (m, IH), 3,33 (s, 3H), 3,24-3,11 (m, 2H), 3,10-2,80 (série m, 5H), 3,07 (s, 3H), 2,68 - 2,55 (m, 2H), 2,47-2,40 (m, IH), 2,37 (d, J = 15,2 Hz, IH), 2,31 (s, 3H), 2,31-2,19 (m, IH), 2,15 (d, J = 10,1 Hz, IH), 1,98-1,72 (série m, 4H), 1,68 - 1,46 (série m, 4H), 1,43 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,30 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,22 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,22 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 7,4 Hz, 3H), 1,13 (d, J = 7,5 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,89 - 0,78 (m, IH), 0,83 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,58-0,46 (m, 2H), 0,15 - 0,07 (m, 2H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 216,35, 176,43, 157,20, 152,5-146,5 (m, 2C), 136,5-135,5 (m, 1C), 125,0-124,7 (m, 1C ), 117,9 - 116,8 (m, 2C), 103,02, 96,13, 82,77,

80,19, 78,94, 77,92, 77,89, 76,26, 72,63, 70,55, 68,96, 65,78, 64,61, 60,34, 58,59, 50,67, 49,49,

45,56, 45,30, 44,99, 39,09 (2C), 39,01, 36,91, 34,85, 32,69, 29,42, 21,93, 21,49, 20,18, 18,89, 18,68, 16,03, 14,23, 14,13, 10,25, 10,04, 9,01, 4,41, 3,36; MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 953; Analyticky vypočítané pre C₅oH₇₈F₂N₂0|₃ C, 63,01; H, 8,25; N, 2,94. Zistené: C, 63,08; H, 8,28; N, 2,89.

Príklad 19

S'^'-N-Bisdemetyl-S'-N-cyklobutyl-S'-N-cyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-ch!ór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A (zlúčenina 25, schéma

5) , I

Roztok 140 mg (0,16 mmol) zlúčeniny 23, pripravený podľa spôsobu z príkladu 5 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 3-chlór-4-fluórfenetylamín za 3,4dichlórfenetylamín, sa rozpustí v 5 ml metanolu a nechá reagovať s cyklobutanónom (20 mg, 0,29 mmol), kyanoborohydridom sodným (40 mg, 0,65 mmol) a kyselinou octovou (na pH 5 6) a zmes sa mieša pri izbovej teplote. Po 48 hodinách TLC [CHC^MeOH, 98:2, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na novú, menej polárnu látku. Reakčná zmes sa koncentruje a výsledný zvyšok sa rozdelí medzi vrstvy etylacetátu (150 ml) a NaHCO₃ (nasýt.) (150 ml). Organická vrstva sa pred sušením (Na₂SO₄), filtrovaním a koncentrovaním premyje NaHCO₃ (nasýt.) (2 x 150 ml) a soľankou (100 ml). Výsledný zvyšok sa čistí na stĺpci silikagélu (mobilná fáza CHCl₃:MeOH, 9:1) za získania 135 mg zlúčeniny 24 (88 %): MS (FAB)(M+H)⁺ pri m/z 955.

Roztok 135 mg (0,14 mmol) zlúčeniny 24 sa rozpustí v 4 ml metanolu a nechá reagovať s cyklopropánkarboxaldehydom (20 mg, 0,29 mmol), kyanoborohydridom sodným (140 mg, 2,3 mmol) a kyselinou octovou (pH 5 - 6) a zmes sa mieša pri izbovej teplote. Po 48 hodinách TLC [CHCl₃:MeOH, 98:2, Ce (IV) vizualizácia] indikuje úplnú premenu na novú, menej polárnu látku. Reakcia sa koncentruje a výsledný zvyšok sa rozdelí medzi vrstvy etylacetátu (100 ml) a NaHCO₃ (nasýt.) (100 ml). Organická vrstva sa pred sušením (Na₂SO₄), filtrovaním a koncentrovaním premyje NaHCO₃ (nasýt.) (2 x 150 ml) a soľankou (100 ml). Výsledný zvyšok sa čistí na stĺpci silikagélu (mobilná fáza CHC1₃ MeOH, 9:1), čím sa získa zlúčenina 25: MS (FAB)(M+H)⁺ pri m/z 997; Analyticky vypočítané pre C5₂H₈₂ClFN₂Oi₃: C, 63,05; H, 8,19; N, 2,77. Zistené: C, 62,92: H, 8,13; N, 3,07

Príklad 20

3^,,3^,-N-Bisdemetyl-3'„3^,-N-bis-[3-(2-pyridyl)-propyl]-11-deoxy-l l-[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 1 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 3-(2-pyridyl)propanal za cyklopropánkarboxaldehyd. Surový produkt sa čisti na stĺpci silikagélu (mobilná fáza CHCb až MeOH CHCb, 2:98), čím sa získa amorfná tuhá látka. IR (MIC) v 2970, 2938, 1758, 1734, 1458, 1423, 1168, 1128, 1104, 1067, 1053, 1012, 997 cm'¹, ¹³C (CDCb) δ 216,34, 170,43, 157,23, 149,68, 147,47, 139,35, 135,86, 132,2(( 131,06, 130,30, 128,45, 102,92, 96,23, 82,86, 80,40, 78,92, 78,17, 77,85, 76,26, 72,89, 70,77,

68,89,65,91, 62,59, 60,36, 50,72, 49,58, 49,27, 45,59, 45,30, 44,84, 39,02, 35,01, 32,66, 30,67,

30,56, 30,40, 21,46, 21,41, 20,21, 18,94, 18,75, 16,07, 14,22, 14,17, 10,28, 9,14, MS (APCI) pri m/z 1157 (M+H)⁺.

Príklad 21

3',3^,-N-Bisdemetyl-3^l-N-cyklopropylmetyl-3'-N-4-hydroxymetyl-(2-furyl)metyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 19 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí zlúčenina 15 za zlúčeninu 23 a 4-hydroxymetyl-2-furaidehyd za cyklobutanón: MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 1153.

Príklad 22

3^,,3^,-N-Bisdemetyl-3^,-N-cyklopropylmetyl-3'-N-[3-(4-pyridyl)propyl]-l 1-deoxy-l l-[karboxy(3,4-dichlórfenetylaminol]-6-O-metyl-erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 21 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 3-(4-pyridyl)-propanal za 4-hydroxymetyl-2-furaldehyd Surový produkt sa čisti na stĺpci silikagélu (CHCb až MeOH:CHCb, 2:98), čím sa získa kryštalická tuhá látka:

Teplota topenia 115-6°C; IR (film) v 3442, 2970, 2937, 1755, 1458, 1168, 1067, 1053, 1011 cm'¹, ¹³C NMR (CDCb) δ 216,28, 176,33, 157,17, 151,13, 149,49, 139,27, 132,16, 131,02, 130,25, 130,12, 128,38, 123,82, 102,94, 96,04, 82,80, 80,33, 78,87, 77,87, 77,81, 76,25, 72,69,

70,60, 68,94, 65,78, 62,50, 60,34, 55,14, 50,65, 49,47, 48,91, 45,54, 45,27, 44,79, 39,08, 38,99, 34,83, 32,91, 32,61, 30,46, 29,67, 21,90, 21,46, 21,44, 20,17, 18,89, 18,65, 16,03, 14,18, 14,12, 10,23, 9,04, 8,51, 5,38, 2,88; MS (APCI) (M+H)⁺ pri m/z 1090.

Príklad 23 ',3 '-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(4-hydroxymetyl-2-furyl)metyl-11 -deoxy-11[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 19 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 4-hydroxymetyl-2-furaldehyd za cyklobutananón: MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 1137.

Príklad 24

3',3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3^,-N-(2-furyl)metyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 19 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí furaldehyd za cyklobutanón: MS (FAB) (M+H)⁺pri m/z 1107.

Príklad 25

3^,,3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(6-metyl-2-pyridyl)metyl-11-deoxy-l 1[karboxy-(3-chIór-4-fluórfenetylaminoI]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 19 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 6-metyl-2-pyridylkarboxaldehyd za cyklobutanón: MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 1132

Príklad 26

S'^'-N-BisdemetyW-N-bis-O-metylcyklopropyOmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylaminol)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 15 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 1-metylcyklopropánkarboxaldehyd za cyklopropánkarboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 1036.

Príklad 27

3^,,3'-N-Bisdemetyl-3',3^,-N-bis-(l-metylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 1 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 1-metylcyklopropánkarboxaldehyd za cyklopropánkarboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 1052.

Príklad 28

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-( l-metylcyklopropyl)metyl-3'-N-cykIopropylmetyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 19 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 1-metylcyklopropánkarboxaldehyd za cyklobutanón: MS (FAB) (M+H)⁺pri m/z 1022.

Príklad 29

3',3'-N-Bisdemetyl-3¹-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyI-3 '-N-cyklopropylmetyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3,4-dichlórofenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 28 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí 3,4-dichlórfenetylamín za 3-chlór-4-fluórfenetylamín: MS (FAB) (M+H)⁺pri m/z 1038.

Príklad 30 z /

3^l,3'-N-Bisdemetyl-3^,-N-izopropyl-3'-N-cyklopropylmetyl-l 1-deoxy-1 l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 28 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí acetón za 1-metylcyklopropánkarboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 996.

Príklad 31 ',3 '-N-Bi sdemetyl-3 '-N-izopropyl-3 '-N-cyklopropylmetyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 29 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí acetón za 1-metylcyklopropánkarboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 1012.

Príklad 32

S'J'-N-Bisdemetyl-S'-N-izopropyl-S'-N-l l-metylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 28 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí acetón za cyklopropánkarboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 1010.

Príklad 33

S'J'-N-Bisdemetyl-S'-N-izopropyl-S'-N-íl-metylcyklopropyljmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 29 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí acetón za cyklopropánkarboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 1026.

Príklad 34

S'^'-N-Bisdemetyl-S'-N-cyklopropyW-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlóryfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A

Požadovaná zlúčenina sa pripraví podľa spôsobu z príkladu 5 s výnimkou spočívajúcou v tom, že sa nahradí [(l-etoxycyklopropyl)ony]trimetylsilan za cyklobutanón; MS (FAB) (M+H)⁺ pri m/z 965.

Príklad 35-60

Zlúčenina v príkladoch 35 - 60 znázornených v tabuľke 3 sa pripraví podľa spôsobov o písaných vo vyššie uvedených príkladoch.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Zlúčenina majúca vzorec:

íl), alebo jej farmaceutický prijateľné soli alebo estery, kde

A je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z:

(a) -C, (b) -N, a (c) -O;

X a Y sú nezávisle v každom prípade vybrané zo skupiny pozostávajúcej z:

(a) atómu vodíka, (b) halogenidu, (c) trifluórmetylu, (d) alkoxy skupiny, (e) alkylu, (f) aryl u, a (g) substituovaného arylu;

R a R' sú vybrané zo skupiny pozostávajúcej z (a) alkylu, (b) cykloalkylu, (c) heterocyklu, (d) substituovaného heterocyklu, (e) alkylcykloalkylu, (f) substituovaného alkylcykloalkylu, (g) alkylarylu, (h) alkylheterocyklu, (i) alkenylu, (j) alkinylu, (k) -C(S)-NHR4, C(NR4)-NHR4, kde substituent R4 je atóm vodíka, alkyl a lebo aryl; a l !

(l) -(CH₂)n-C(CH2)ni-R5, kde index m je 2, 3, 4 alebo 5 a substituent R5 je al kyl, alkoxy skupina, aryl alebo substituovaný aryl;

substituenty R₂ a R3 sú nezávisle v každom prípade (a) atóm vodíka, (b) metyl, alebo substituenty R₂ a R3 spoločne vytvoria cyklickú časť, pokiaľ A je C; substituent R3 nie je prítomný, pokiaľ A je N; a index n = 1, 2 alebo 3.
2. Zlúčenina podľa nároku 1, kde substituenty R a R' sú alkyl, alkenyl, cykloalkyl, hetero cyklus, (heterocyklus)alkyl alebo alkylcykloalkyl; X a Y sú nezávisle chlór, fluór, dio xalano, vodík alebo alkoxy; A je -C; substituenty R₂ a R₃ sú atóm vodíka alebo cyklop ropyl a index n je 1.
3. Zlúčenina vybraná zo skupiny pozostávajúcej z:

3', 3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N~biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3^,-N-Bisdemetyl-3^,,3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'J'-N-Bisdemetyl-S'J'-N-biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'J'-N-BisdemetyW.S'-N-biscyklobutyl-11-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlórfenetylamino)] 6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklobutyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlórofenetylamino)]-6-0-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3'-N-izopropyl-3 '-N-propyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

/ /

3',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-cyklopropylmetyl-3 '-N-izopropyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-etyl-3 '-N-izopropyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-cyklobutylmetyl-3 ’-N-cyklopropylmetyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(4-chlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-biscyklopropylmetyl-11 -deoxy-1 l-[karboxy-(4metoxyfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-biscyklopropylmetyl-l 1 -deoxy-11 -[karboxy-(4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3 ',3 '-N-Bisdemetyl-3', 3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlór-3fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlór-3fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3^,,3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-biscyklopropylmetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-0-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3', 3 '-N-B i sdemetyl-3 '-N-cyklopentyl-3 '-N-cyklopropyl metyl -11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 chlór-4-difluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'^'-N-BisdemetyWJ'-N-biscyklopropylmetyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4difluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

i /

3 ',3 '-N-Bisdemetyl-3',3 '-N-biscyklobutyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4difluórfenetylamino)]-6-O-metyI-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklobutyl-3 '-N-cyklopropylmetyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-ll, 12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-bis[3-(3-pyridyl)propyl]-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-biscyklopropylmetyl-3'-N-(4-hydroxymetyl-2-furyl)metyl-l 1deoxy-1 l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-0-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-[3'-N-3-(4-pyridyl)propyl]-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-[4-(hydroxymetyl-2-furyl)]-metyl-l 1deoxy-1 l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A,

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(2-furyl)metyl-l 1-deoxy-11-[karboxy(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-[6-metyl-(2-pyndyl)]metyl-l 1-deoxy1 l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'J'-N-BisdemetyW-N-bis-O-metylcyklopropyOmetyl-l 1-deoxy-1 l-[karboxy-(3chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-ll, 12-cyklický karbamát erytromycínu A;

z ΐ

3 ',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-bis-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3 ',3 '-N-Bisdemetyl-3'-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-3 '-N-cyklopropylmetyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-(l-metylcyklopropyl)metyl-3'-N-cyklopropylmetyl-l 1-deoxy1 l-[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

33'-N-Bisdemetyl-3 '-N-izopropyl-3 '-N-cyklopropylmetyl-1 1-deoxy-ll-[karboxy-(3chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3 '-N-izopropyl-3 '-N-cyklopropylmetyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-izopropyl-3 '-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromy cínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-izopropyl-3'-N-(l-metylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-1 l-[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3^,,3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3^,-N-(biscyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(biscyklopropyl)metyI-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-0-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycinu ^A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(2,2-dimetylpropyl)-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3^,-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(2,2-dimetylpropyl)-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycinu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-[3-(4-hydroxy-3-metoxyfenyl)-lmetyl]propyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12cyklický karbamát erytromycinu A;

33 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-cyklopropylmetyl-3 '-N-[3 -(4-hydroxy-3 -metoxyfenyl)-1 metyl]propyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12cyklický karbamát erytromycinu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklobutyl-3 '-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'J'-N-Bisdemetyl-S'-N-cyklobutylA-N-O-metylcyklopropyOmetyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycinu

A;

6Ί

3'J'-N-Bisdemetyl-S'-N-cyklopropylmetyl-S'-N-C 1 -etylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3-chlór-4-ťluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'J'-N-BisdemetyW-N-cyklopropylmetyl-S'-N-O-etylcyklopropyOmetyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3, 4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

z

3',3^,-N-Bisdemetyl-3^,-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(l-fenylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy1 l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-cyklopropylmetyl-3 '-N-(l -fenylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-etyl-3'-N-(l-metylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3^,-N-etyl-3'-N-(l-metylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-izobutyl-3'-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-izobutyl-3 '-N-( 1 -metylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3', 3 ’-N-B i sdemety 1-3 '-N-cyklopropyl metyl-3 '-N-( 1 -alylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3 ',3 '-N-B isdemetyl-3 '-N-cyklopropyl metyl-3 '-N-( 1 -alylcyklopropyl)metyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3^,-N-Bisdemetyl-3'-N-cyklopropylmetyl-3'-N-(l-benzylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy1 l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytZ romycínu A;

3 ',3 '-N-Bisdemetyl-3 '-N-cyklopropyl metyl-3 '-N-( 1 -benzy lcyklopropyl)metyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-0-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-bis-( l-metylcyklobutyl)metyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-bis-( 1 -metylcyklobutyl)metyl-11 -deoxy-1 l-[karboxy-(3,4dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-11,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

S'J'-N-BisdemetyW-N-cyklopropylmetyl-S'-N-p-metylcyklobutyOmetyl-ll-deoxy1 l-[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A; a

S'^'-N-Bisdemetyl-S'-N-cyklopropylmetyl-S'-N^l-metylcyklobutyOmetyl-l 1-deoxy1 l-[karboxy-(3,4-dichlórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A.
4. Zlúčenina podľa nároku 3, vybraná zo skupiny pozostávajúcej z:

3',3'-N-Bisdemetyl-3'-N-biscyklopropyImetyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl- 3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlór-4fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A;

3',3'-N-Bisdemetyl-3',3'-N-bis-(l-metylcyldopiOpyl)metyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A; a

3',3'-N-Bisdemetyl-3^,-N-izopropyl-3^l-N-(l-metylcyklopropyl)metyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlór-4-fluórfenetylamino)]-6-O-metyl-l 1,12-cyklický karbamát erytromycínu A.

/ / / /
5. Farmaceutický prípravok na inhibíciu uvoľňovania LH vyznačujúci sa tým, že obsahuje terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny podľa nároku 1 v kombinácii s farmaceutický prijateľným nosičom.
6. Spôsob inhibície uvoľňovania LH u cicavcov pri potrebe takého ošetrenia, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje aplikovanie cicavcovi terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa nároku 1.
7. Spôsob prípravy zlúčeniny znázornenej vzorcom:

(I), alebo jej farmaceutický prijateľnej soli alebo esteru, kde

A je vybrané zo skupiny pozostávajúcej z:

(a) -C, (b) -N, a (c) -O;

X a Y sú nezávisle v každom prípade vybrané zo skupiny pozostávajúcej z:

(a) atómu vodíka, (b) halogenidu, (c) trifluórmetylu, (d) alkoxy skupiny, (e) alkylu, / i (f) arylu, a (g) substituovaného arylu;

R a R' sú vybrané zo skupiny pozostávajúcej z:

(a) alkylu, (b) cykloalkylu, (c) heterocyklu, (d) substituovaného heterocyklu, (e) alkylcykloalkylu, (f) substituovaného alkylcykloalkylu, (g) alkylarylu, (h) alkylheterocyklu, (i) alkenylu, (j) alkinylu, (k) -C(S)-NHR4, C(NR4)-NHR4, kde substituent R4 je atóm vodíka, alkyl a lebo aryl; a (l) -(CH2)n-C(CH₂)_m-R₅, kde index m je 2, 3, 4 alebo 5 a substituent R5 je al kyl, alkoxy skupina, aryl alebo substituovaný aryl;

substituenty R₂ a R3 sú nezávisle v každom prípade (a) atóm vodíka, (b) metyl, alebo substituenty R₂ a R3 spoločne vytvoria cyklickú časť, pokiaľ A je C;

substituent R3 nie je prítomný, pokiaľ A je N; a index n = 1, 2 alebo 3.

vyznačujúci sa tým, že zahrnuje kroky:

(a) reakciu zlúčeniny vzorca s hexametyldisilazidom sodným a karbonyldiimidazolom za získania zlúčeniny vzorca:

CHj Η,ς _zCHj (b) reakciu zlúčeniny získanej v kroku (a) s amino zlúčeninou vzorca:

í^chí>„-nh2 nasledované odobratím chrániacich skupín 2',4 -chránených hydroxy skupín za získania zlúčeniny vzorca:

(c) postupná demetylácia 3'-amino skupiny reakciou zlúčeniny získanej v kroku (b) s jódom v prítomnosti bázy za získania zlúčeniny vzorca:

(d) alkylácia 3',3'-N-bisdemetylovanej zlúčeniny získanej v kroku (c) alkylačným činidlom.
8. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že reakcia v kroku (a) sa uskutočňuje v aprotickom rozpúšťadle pri teplote 0 - 25°C.
9. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že reakcia v kroku (b) sa uskutočňuje bez rozpúšťadla alebo v acetonitrile pri teplote 25 - 80°C.
10. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že demetylácia sa uskutočňuje reakciou zlúčeniny získanej v kroku (b) s jódom v prítomnosti bázy a svetla alebo v prítomnosti zdroja tepla.
11. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že demetylácia sa uskutočňuje reakciou zlúčeniny získanej v kroku (b) s chloromravčanom vybraným zo skupiny pozostávajúcej z benzylchloromravčanu, alylchloromravčanu a vinylchloromravčanu.

/ /
12. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že alkylácia v kroku (d) sa docieli reakciou zlúčeniny získanej v kroku (c) s aldehydom alebo ketónom za prítomnosti hydridu kovu alebo za prítomnosti Pd/C katalyzátora v protickom alebo neprotickom rozpúšťadle v prostredí vodíka.
13. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že alkylácia v kroku (d) sa docieli reakciou zlúčeniny získanej v kroku (c) s alkylhalogenidom v prítomnosti bázy.
14. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že substituent R je alkyl, alkenyl, cykloalkyl, heterocyklus, (heterocyklus)alkyl alebo alkylcykloalkyl; X a Y sú nezávisle v každom prípade chlór, fluór, dioxalano, atóm vodíka alebo alkoxy; A je -C; substituenty R₂a R₃ sú nezávisle v každom prípade atóm vodíka alebo spoločne vytvárajú cyklopropylovú časť a index n je 1.
15. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že alkylačné činidlo je cyklopentanón a alkylácia sa uskutočňuje za prítomnosti kyanoborohydridu sodného v metanole.
16. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že postup zahrnuje kroky:

(c) selektívne demetylovanie zlúčeniny získanej v kroku (b), čím sa získa zlúčenina vzorca:

(d) alkyláciu 3'-N-demetylovanej zlúčeniny získanej v kroku (c) s alkylačným činidlom za získania zlúčeniny vzorca:

(e) demetyláciu 3 -amino skupiny reakciou zlúčeniny získanej v kroku (d) s jódom v prítomnosti bázy za získania zlúčeniny vzorca.

o (f) alkyláciu 3 '-N-demetylovanej zlúčeniny získanej v kroku (e) alkylačným činid