CZ20003527A3

CZ20003527A3 - 3',3'-N-bis substituované makrolidové antagonisty LHRV

Info

Publication number: CZ20003527A3
Application number: CZ20003527A
Authority: CZ
Inventors: Daryl R. Sauer; Fortuna Haviv; John Randolph; Nicholas A. Mort; Christopher R. Dalton; Milan Bruncko; Michele A. Kaminski; Bradley W. Crawford; Lisa Marie Frey; Jonathon Greer
Original assignee: Abbott Laboratories
Priority date: 1999-03-22
Filing date: 1999-03-22
Publication date: 2001-01-17

Description

Oblast techniky

Předložený vynález se týká skupiny makrolidů, které jsou antagonisty lutenizačního hormonu uvolňujícího hormon (LHRH), farmaceutických přípravků obsahujících sloučeniny vynálezu, způsobů používání sloučenin vynálezu a postupu přípravy těchto sloučenin. Detailněji se předložený vynález týká derivátů 3',3'-N-bis-desmethyl-3',3'-N-bissubstituovaných-6-O-methyl-l 1-deoxy-l 1,12-cyklických karbamátů erythromycinu A, které jsou antagonisty LHRH.

Dosavadní stav techniky

Pro ovulaci, spermatogenezi a biosyntézu pohlavních steroidů jsou nezbytné gonadotropiny, folikul stimulující hormon (FSH), lutenizační hormon (LH) a choriogonadotropin (CG). Jednoduchý hypotalamický hormon, hormon uvolňující gonadotropin (GnRH), také znám jako LHRH, je odpovědný za regulaci sekrece jak FSH, tak i LH u savců.

LHRH je dekapeptid mající strukturu:

’ pyro-Glu¹-His²-Trp³-Ser⁴-Tyr⁵-Gly⁶-Leu⁷-Arg⁸-Pro^!l-Gly¹⁰-NH2, kde- horní indexy označují polohu jednotlivých aminoacylových zbytků v dekapeptidovém řetězci.

LHRH se uvolňuje z hypotalamu a váže se na receptor v hypofyze, čímž vyvolá uvolnění LH a FSH, které následně působí na gonády, čímž stimuluje syntézu steroidních pohlavních hormonů. Pulzatilní uvolnění LHRH, a tím uvolnění LH a FSH, reguluje reprodukční cyklus u zvířat a lidí. Jednorázové dávky agonistů LHRH zvyšují hladiny LH a steroidních pohlavních hormonů u zvířat i lidí.-Paradoxně, soustavné dávky agonistů LHRH potlačují hladinu LH a steroidních pohlavních hormonů. V důsledku toho je účinek vícenásobných dávek agonistů LHRH takový, že potlačuje tvoření estrogenu u samic a produkci testosteronu u samců. Jak u zvířat, tak u lidí, je po aplikaci buď jednorázových anebo soustavných dávek antagonistů LHRH pozorován stejný účinek.

V posledních letech bylo vynaloženo značné úsilí kvůli nalezení antagonistů LHRH. Důsledkem toho bylo připravení velkého množství peptidových antagonistů LHRH, které potlačují LH a reproduktivní hormony u savců po aplikaci jednorázové nebo soustavných dávek. Viz M.J. Karten in Modes of Action of GnRH and GnRH analogs, edited by W.R. Crowley and P.M. Conn, 277 (1992). V odborné literatuře je publikováno, že antagonisty LHRH jsou účinné při ošetření různých stavů, ve kterých potlačení pohlavních steroidů má klíčovou úlohu, zahrnujících kontracepci, zpožděni dospívání, ošetření benigní hypertrofie prostaty, paliativní ošetření nebo remise hormonálně závislých nádorů prostaty, ošetření kryptochizmu, hirsutizmus u žen, poruchy žaludeční motility, bolestivou menstruaci a endometriózu.

Současné antagonisty LHRH jsou dekapeptidy, které v důsledku své malé perorální biologické dostupnosti jsou aplikovány intravenózně nebo subkutánně. V odborné literatuře byly publikovány nepeptidové heterocyklické antagonisty viz např. WO 95/280405, WO 95/29900, WO 97/22707, WO 97/21704 a WO 97/2103. Nepeptidové antagonisty LHRH mají výhodu spočívající ve zlepšené perorální biologické dostupnosti a mají menší molekuly.

Nicméně ještě nebyly v odborné literatuře publikovány žádné makrolidové sloučeniny jako antagonisty LHRH. Avšak makrolidová antibiotika a makrolidová prokinetická agens jsou známa. Např. v přihlášce EP 248 279 A2 jsou uvedeny makrolidová antíobiotika odvozená od erythromycinu,-která obsahují 11,12-cyklické karbamátové části. V přihlášce EP 0 559 896 Al jsou uvedeny 3 '-N-substituované deriváty erythromycinu. Jsou známa prokinetická agens s makrocyklickým laktonem (makrolidem). Viz J.S. Gidda et al., v evropské patentové přihlášce číslo 0,349100, zveřejněné 3.ledna 1990, ve které jsou uvedeny 12-členné makrolidy pro použití jako zesilovače gastrointestinalní motility. S. Omura a Z. Itoh, v US patentu č. 4,677,097, publikovaném 30.června 1987; v evropské přihlášce č. 215,355 publikované 25.března 1987; a v evropské přihlášce č. 213,617 publikované

11.března 1987; se uvádí deriváty erythromycinu A, B, C a D, které jsou účinné jako stimulans kontraktilní ústrojí zažívacího traktu. Dále T. Sunazuka et al., Chem. Pharm. Bull. 37(10): 2701-2709 (1989) uveřejňuje kvartérní deriváty 6,9-hemiacetalu 8,9anhydroerythromycinu A a 6,9-epoxidu 9,9-dihydro-erythromycinu A s gastrointestinální motorickou stimulační aktivitou. _

Žádný z těchto odkazů neuvádí nové deriváty 3',3'-N-bis-desmethyl-3',3'-N-bissubstituované-6-O-methyl-l l-deoxy-ll,12-cyklického karbamátu erythromycinu A, které jsou účinné jako antagonisty LHRH.

Deriváty 3 -N-desmethyl-3'-N-monosubstituovaného-6-O-methyl-l 1-deoxy-l 1,12cyklického karbamátu erythromycinu A jsou uvedeny v US přihlášce podané současně s touto přihláškou. Deriváty 3,'3'-N-bis-desmethyl-3',3'-N-monosubstituovaného-6-0-methyl-l 13 • ·

Podstata vynálezu

V rámci prvého aspektu se předložený vynález vztahuje na sloučeninu mající vzorec:

I, nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo estery, kde

Aje vybráno ze skupiny sestávající z:

(a)	- -c,
- (b)	-N, a -
(c)	-0;
X a Y jsou nezávisle v každém případě vybrány ze skupiny sestávající se z:
(a)	atomu vodíku,
(b)	halogenidu,
- (c)	trifluormethylu,
- (d)	alkoxy skupiny,
(e)	alkylu, ~
(f)	arylu, a
(g)	substituovaného arylu;
R a R' jsou vybrány ze skupiny sestávající z:
(a)	alkylu,
(b)	cykloalkylu,
(c)	heterocyklu,

• ·

(d) substituovaného heterocyklů, (e) alkylcykloalkylu, (f) substituovaného alkylcykloalkylu, (g) alkylarylu, (h) alkylheterocyklu, (i) alkenylu, (j) alkynylu, (k) -C(S)-NHR4, C(NR4)-NHR4, kde substituent R4 je atom vodíku, alkyl nebo aryl; a (l) -(CH2)_n-C(CH2)m-R5, kde index m je 2, 3, 4 nebo 5 a substituent R5 je alkyl, alkoxy skupina, aryl nebo substituovaný aryl;

substituenty R2 a R3 jsou nezávisle v každém případě (a) .atom vodíku, (b) methyl, nebo substituenty R2 a R3 společně vytvoří cyklickou část, pokud A je C;

substituent R3 není přítomen, pokud A je N; a index n = 1, 2 nebo 3.

V rámci dalšího aspektu se -předložený vynálezu vztahuje na postup přípravysloučeniny vzorce I. Postup zahrnuje kroky:

(a) reakci sloučeniny vzorce

s hexamethyldisilazidem sodným a karbonyldiimidazolem k získání sloučeniny vzorce:

(b) reakci sloučeni obdržené v kroku (a) s amino sloučeninou vzorce:

(^CH2)n“^NH2 následované sejmutím chránících skupin 2',4-chráněných hydroxy skupin k získání sloučeniny vzorce:

(c) postupnou desmethylaci 3 '-amino skupiny reakcí sloučeniny obdržené v kroku (b) s jodem za přítomnosti báze k získání sloučeniny vzorce:

(d) alkylaci 3 ',3 '-N-bisdesmethylované alkylačním činidlem.

sloučeniny obdržené v kroku (c) s

V rámci dalšího provedení postupu, zahrnuje tento postup kroky:

(c) selektivní ďesmethylaci sloučeniny obdržené v kroku (b) k získání sloučeniny vzorce:

(d) alkylaci 3 '-N-desmethylované sloučeniny obdržené v kroku (c) s alkylačním činidlem k získání sloučeniny vzorce:

(e) desmethylaci 3'-amino skupiny reakcí sloučeniny obdržené v kroku (d) s jodem za přítomnosti báze k získání sloučeniny vzorce:

(f) alkylaci 3 '-N-desmethylované sloučeniny obdržené v kroku (e) s alkylačním činidlem.

Sloučeniny vynálezu vykazují malou nebo žádnou antibakteriální aktivitu, ale vážou se na LHRH receptory ajsou účinnými antagonisty LHRH. Tudíž tyto sloučeniny jsou účinné při ošetření rakoviny prostaty, endometriózy, předčasné puberty a dalších Typů onemocnění, které souvisejí s pohlavními hormony.

Proto se další aspekt předloženého vynálezu vztahuje na farmaceutické přípravky, které jsou účinné jako antagonisty LHRH a potlačují LH, testosteron, estradiol a estrogen u savců.

Ještě v dalším aspektu se předložený vynález vztahuje na způsob potlačení hladin pohlavních hormonů u samců nebo samic savců zahrnující aplikování hostiteli, při potřebě takového ošetření, terapeuticky účinného množství LHRH sloučeniny v kombinaci s terapeuticky účinným množstvím antiandrogenního agens.

Podrobný popis vynálezu

Termín nižší alkyl nebo alkyl, jak je popsán zde, se vztahuje na rozvětvený nebo nerozvětvený řetězec alkylových radikálů mající jeden až dvacet atomů uhlíku, někdy označovaný jako C_x-Cy-alkyl, kde indexy x a y označují minimální a maximální počet atomů uhlíku v alkylovém radikálu. Příklady nižšího alkylu zahrnují, ale není to nikterak limitováno, methyl, ethyl, //-propyl, isopropyl, //-butyl, isobutyl, se butyl, /-butyl, //-pentyl, 1methylbutyl, 2,2-dimethyIbutyI, 2-methylpentyl, 2,2-dimethylpropyl, //-hexyl, apod.

Termín alkoxy nebo -nižší alkoxy, jak je popsán zde, se vztahuje na, výše definovanou skupinu nižšího alkylu, která je připojena na atom kyslíku etherovou vazbou. Příklady alkoxy skupiny zahrnují, ale není to nikterak limitováno, methoxy skupinu, ethoxy skupinu, izopropoxy skupinu, w-pentyloxy skupinu, /-butoxy skupinu, n-oktyloxy skupinu, apod. Tento alkoxylový radikál může také obsahovat kruh, který-zahrnuje, ale není to nikterak omezeno, 5-členný nebo 6-číenný kruh složený z atomů uhlíku, jednoho nebo dvou heteroatomů, např. dusíku, kyslíku.

Termínalkenyl, jak je popsán zde, se vztahuje na rozvětvený- nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec mající dva až dvacet atomů uhlíku, výhodně čtyři až dvanáct atomů uhlíku, zvláště pak osm až deset atomů uhlíku, který také obsahuje jeden nebo více dvojných vazeb typu uhlík-uhlík, výhodně přibližně jeden až tři dvojné vazby. Sloučeniny vynálezu mohou mít buď známou konfiguraci anebo mohou existovat jako směs izomerů.

Termínalkynyl, jak je popsán zde, se vztahuje na rozvětvený nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec mající dva až dvacet atomů uhlíku, výhodně čtyři až dvanáct atomů uhlíku, zvláště pak osm až deset atomů uhlíku, který také obsahuje jeden nebo více trojných vazeb typu uhlík-uhlík, výhodně jednu trojnou vazbu. Sloučeniny vynálezu mohou mít buď známou konfiguraci anebo mohou existovat jako směs izomerů.

Termíncykloalkyl, jak je popsán zde, se vztahuje na nasycené monocyklické uhlovodíkové skupiny mající tři až sedm atomů uhlíku v kruhu, zahrnující, ale není to nikterak omezeno, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, apod. Cyklická skupina může být případně substituována např. nižším alkylem, hydroxy skupinou, halogenem nebo amino skupinou.

Termínalkylcykloalkyl, jak je popsán zde, se vztahuje na výše definovanou cykloalkylovou skupinu připojenou na radikál nižšího alkylu. Alkylcykloalkylová skupina je připojená na výchozí část přes alkylový radikál, přičemž alkylový radikál má jeden až šest atomů uhlíku. Příklady zahrnují, ale není to nikterak omezeno, cyklopropylmethyl, cyklopropylethyl, cyklobutylmethyl, apod.

Termínaryl, jak je popsán zde, se vztahuje na mono,- kondenzovaný bicyklický nebo kondenzovaný třicyklický karbocyklický kruh mající jeden nebo více aromatických kruhů zahrnující, ale není to nikterak omezeno, fenyl, naftyl, tetrahydronaftyl, fenanthrenyl, bifenylenyl, indanyl, indenyl, apod.

Termínsubstituovaný aryl, jak je popsán zde, se vztahuje na výše definovanou arylovou skupinu substituovanou nezávislým nahrazením jednoho, dvou nebo tří atomů vodíku skupinou vybranou z Cl, Br, F, I, OH, kyano, merkapto, nitro, Ci-C3-alkyl, halogenCi-C3-alkyl, Ci-Có-alkoxy, thio-Ci-Có-alkoxy, methoxymethoxy, amino, Ci-C3-alkyl-amino, di(Ci-C3-alkyl-)amino, formyl, karboxy, alkoxykarbonyl, Ci-C3-alkyl-CO-O-, Ci-C3-alkylCO-NH- nebo karboxamidu; s výjimkou spočívající v tom, že tetraftuorfenyl a pentafluorfenyl jsou také zahrnuty v rozsahu definice substituovaný aryl.

Termínarylalkyl, jak je popsán zde, se vztahuje na výše definovanou skupinu připojenou na výše definovanou alkylovou skupinu. Arylalkylová skupina je připojená na výchozí část přes alkylovou skupinu, přičemž alkylová skupina má jeden až šest atomů uhlíku. Arylová skupina v arylalkylové skupině může být substituovaná výše definovaný způsobem. Příklady zahrnují', ale není to nikterak omezeno, 3-(4-hydroxyfenyI)p'ropyl, 1methyl-3-(4-hydroxyfenyl)-propyl, 4-hydroxybenzyl, apod.

Termín „heterocyklický kruh“ nebo heterocyklický nebo heterocykl, jak je používán zde, se vztahuje na 3-členný nebo 4-členný kruh obsahující heteroatom vybraný z atomu kyslíku, dusíku a síry; nebo 5-členný, 6-členný nebo 7-členný kruh obsahující jeden, dva nebo tři atomy dusíku; jeden atom dusíku a jeden atom síry; nebo jeden atom dusíku a jeden atom kyslíku. ó-Člennýkruh má 0 - 2 dvojné vazby a 6-členné a 7-členné kruhy mají 0 - 3 dvojné vazby. Dusíkové heteroatomy mohou být případně kvatemizovány. Termín heterocykl také zahrnuje bicyklické skupiny, ve kterých jakýkoliv z výše uvedených heterocyklických kruhů je kondenzován na benzenový kruh nebo cyklohexanový kruh nebo jiný heterocyklický kruh (např. indolyl, chinolyl, izochinolyl, tetrahydrochinolyl, apod.). Heterocykly zahrnují: azetidinyl, benzimidazolyl, 1,4-benzodioxanyl, 1,3-benzodioxolyl, benzoxazolyl, benzothiazolyl, benzothienyl, dihydroimidazolyl, dihydropyranyl, dihydrofuranyl, dioxanyl, dioxolanyl, furyl, homopiperidinyl,imidazolyl, imidazolinyl, imidazolidinyl, indolinyl, indolyl, izochinolyl, izothiazolidinyl, izothiazolyl, izoxazolidinyl, izoxazolyl, morfolinyl, naftyridinyl, oxazolidinyl, oxazolyl, piperazinyl, piperidinyl, pyrazinyl, pyrazolinyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyrrolidinyl, pyrrolinyl, pyrrolyl, chinolinyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, thiazolidinyl, thiazolyl, a thienyl.

Heterocykly mohou být nesubstituované nebo monosubstituované nebo disubstituované substituenty nezávisle vybranými ze skupin hydroxy, halogenu, oxo (=0), alkylimino (R*N= kde substituent R* je skupina nižšího alkylu), cykloalkyl, aryl, arylalkyl a nižší alkyl. Navíc heterocykly obsahující dusík mohou být N-chráněné.

Termín (heterocykl)alkyl, jak je popsán zde, se vztahuje na výše definovanou heterocyklickou skupinu připojenou na výše definovaný radikál nižšího alkylu. (Heterocykl)alkylová skupina je připojená na výchozí část přes alkylovou skupinu, přičemž alkylová skupina má jedenaž šest atomů uhlíku. Příklady zahrnují, ale není to nikterak omezeno, 2-pyridylmethyl, 4-pyridylmethyl, 2-pyridylethyl, 3-(3-pyridyl)propyI, 3-(2pyridyl)propyl, 3-(4-pyridyl)propyl, 2-furylmethyl, apod.

Termín substituovaný (heterocykl)alkyl, jak je popsán zde, se vztahuje na výše definovanou heterocykloalkylovou skupinu, kde heterocyklická skupina nebo alkylová skupin je substituována nezávislým nahrazením jednoho, dvou nebo tří atomů vodíku skupinou vybranou z Cl, Br, F, I, OH, kyano, merkapto, nitro, Ci-C3-alkyl, halógen-Ci-C3-alkyl, Ci-Cóalkoxy, thio-Ci-Có-alkoxy, hydroxyalkyl, methoxymethoxy, amino, Ci-Cs-alkyl-amino, di(CiC3-alkyl)amino, karboxaldehydo, karboxy, alkoxykarbonyl, Ci-C3-alkyl-C0-0-, Ci-C3-alkylC0-NH- nebo karboxamidu. Příklady zahrnují, ale není to nikterak omezeno, 3-[(5-methyl)2-pyridyl]propyl, 3-[(6-methyl)-2-pyridyl]propyl, 4-[(6-methyl)-2-pyridyl]butyl, (5-nitro(-2thienylmethyl, apod.

Termín heteroaryl, jak je popsán zde, se vztahuje na cyklický aromatický radikál mající pet až deset atomů v kruhu, ze kterých jeden atom kruhu je vybrán z S, O a N; žádný, jeden nebo dva atomy kruhu jsou další heteroatomy nezávisle vybrané z S, O aN; a zbývající atomy kruhu jsou uhlík, radikál, který je připojen na zbývající část molekuly přes jakýkoliv atom kruhu např. pyridinyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyrrolyl, pyrazolyl, imidazolyl, thiazolyl, oxazolyl, izoxazolyl, thiadiazolyl, oxadiazolyl, thienyl, íuranyl, chinolinyl, izochinolinyl, apod.

Termínsubstituovaný heteroaryl, jak je popsán zde, se vztahuje na výše definovanou heteroarylovou skupinu substituovanou nezávislým nahrazením jednoho, dvou nebo tří atomů • ·· · ·· ··· · ··· · • · · · · • · · · · · • · · · · ······· ··· ·· vodíku skupinou vybranou z Cl, Br, F, I, OH, Ci-C3-alkyl, Ci-Có-alkoxy, methoxymethoxy, amino nebo Ci-C3-alkyl-amino nebo mohou také označovat mono-oxo substituované heteroarylové sloučeniny, např. 4-oxo-lH-chinolin.

Termín „aprotické rozpouštědlo“, jak je používán zde, se vztahuje na rozpouštědlo, které je relativně inertní k protonové aktivitě, tzn. nechová se jako donor protonu. Příklady zahrnují, ale nejsou nikterak limitovány, uhlovodíky, např. hexan a toluen, halogenované uhlovodíky, např. methylenchlorid, ethylenchlorid, chloroform, apod., heterocyklické sloučeniny, např. tetrahydrofuran a N-methylpyrrolidinon, ethery, např. diethylether a bismethoxymethylether, jakož i různé další sloučeniny jako dimethylformamid, acetonitril, aceton a ethylacetát. Takové sloučeniny jsou velmi dobře známy v oboru a je samozřejmé, že mohou být preferována jednotlivá rozpouštědla a jejich směsi pro specifické sloučeniny a reakční podmínky, které závisejí na takových faktorech jako např. rozpustnost činidel, reaktivita činidel a. preferovaných rozpětí teploty. Další informace o aprotických rozpouštědlech mohou být nalezeny v učebnicích organické chemie nebo ve specializovaných monografiích, například: Organic Solvents Physical Properties and Methods of Purification, 4* ed., edited by John A. Riddick et al., Vol. Π, in the Techniques of Chemistry Senes, John Wiley & Sons, NY, 1986.

Termín „farmaceuticky přijatelná sůl“, jak je používán zde, se vztahuje na ty soli, které jsou v rozsahu lékařského úsudku vhodné pro použití při kontaktu s lidskými tkáněmi nebo tkáněmi nižších zvířat bez toxického působení, iritace,způsobení alergických reakcí, apod. a jsou úměrné rozumnému poměru prospěšnost/riziko. Farmaceuticky přijatelné soli jsou velmi dobře známy v oboru např. S. M. Berge, et al., detailně podrobně popisuje farmaceuticky přijatelné soli v J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19(1977), zde uvedeno jako odkaz. Soli mohou být připraveny in šitu během konečné izolace a purifikace sloučenin vynálezu nebo samostatně reakcí volné báze reagující s vhodnou organickou kyselinou nebo anorganickou kyselinou. Příklady farmaceuticky přijatelných, netoxických adičních solí s kyselinou jsou soli amino skupiny formované s takovými anorganickými kyselinami jako kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina orthofosforečná, kyselina sírová nebo kyselina chloristá nebo s organickými kyselinami, např. kyselina octová, kyselina oxalová, kyselina maleinová, kyselina vinná, kyselina citrónová, kyselina jantarová nebo kyselina malonová nebo použitím jiných způsobů používaných v oboru jako je výměna iontů. Další farmaceuticky přijatelné soli zahrnují adipát, alginát, askorbát, aspartát, benzensulfonát, benzoát, bisulfát, borát, butyrát, kafrát, kafrosulfonát, citrát, cyklopentanpropionát, diglukonát, dodecylsulfát, ethansulfonát, formiát, fumarát, glukoheptonát, glycerofosfát,

• · · · · glukonát, hemisulfát, heptanoát, hexanoát, jodovodík, 2-hydroxy-ethansulfonát, laktobionát, laktát, laurát, laurylsulfát, malát, maleát, malonát, methansulfonát, 2-naftalensulfonát, nikotinát, nitrát, oleát, oxalát, palmitát, pamoát, pektinát, persulfát, 3-fenylpropionát, fosfát, pikrát, pivalát, propionát, stearát, sukcinát, sulfát, tartrát, thiokyanát, p-toluensulfonát, undekanoát, soli valerátu, apod. Reprezentativní soli alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin zahrnují následující kationty sodíku, lithia, draslíku, vápníku, hořčíku, apod. Další farmaceuticky přijatelné soli zahrnují, pokud jsou vhodné, netoxický amonný iont, kvartémí amonný iont a kationty aminu tvořené použitím opačně nabitých iontů takových jako halogenid, hydroxid, karboxylát, sulfát, fosfát, nitrát, nižší alkylsulfonát a arylsulfonát.

Termín „farmaceuticky přijatelný ester“, jak je používán zde, se vztahuje na estery, které se hydrolyzují in vivo a zahrnuje ty estery, které se ochotně odtrhnou v lidském těle a opustí výchozí sloučeninu nebo sůl této sloučeniny. Vhodné esterové skup.iny zahrnují např. skupiny odvozené od farmaceutický přijatelných alifatických karboxylových kyselin, zejména alkanové, alkenové, cykloalkanové a alkandiové kyseliny, ve kterých každá část alkylové nebo alkenylové části má výhodně ne více jak 6 uhlíkových atomů. Příklady jednotlivých esterů zahrnují formiáty, acetáty, propionáty, butyráty, akryláty a ethylsukcináty.

Ve sloučeninách předloženého vynálezu mohou existovat početná asymetrická centra. Kromě těch míst, kde je uvedeno jinak, jsou v předloženém vynálezu zahrnuty různé stereoizomery a jejich směsi. Proto tam, kde je vazba znázorněna vlnitou čárou, je míněná možná přítomnost směsi stereo-orientovaných nebo jednotlivých izomerů stanovené nebo nestanovené orientace.

Výhodná provedení

Výhodná provedení sloučenin vynálezu zahrnují ty, ve kterých substituenty R a R jsou alkyl, alkenyl, cykloalkyl, heterocykl, (heterocykl)alkyl nebo alkylcykloalkyl; X a Y jsou nezávisle chlor,-fluor, dioxalano, vodík nebo alkoxy skupina; A je -C; substituenty R2 a R3 jsou atom vodíku nebo cyklopropyl a index n je 1.

Typické sloučeniny vynálezu jsou vybrány ze skupiny sestávající se z:

3',3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-l l-deoxy-ll-[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

• · · · · »· · ··· ·· · ·

3',3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlorfenethylamino)]6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3'-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklobutyl-3 '-N-izopropyl-11 -deoxy-1 l-[karboxy-(4chlorofenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3 -N-bisdesmethyl-3'-N-izopropyl-3'-N-propyl-rl 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-izopropyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát-erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-ethyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklobutylmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy (4-chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A; 3',3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4methoxyfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyI-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3 '-N-bisdesmethyl-3', 3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlor-3fluorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

·· 99 • · · · • · · ·

S^-N-bisdesmethyl-S^-N-biscyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlor-3fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3', 3'-N-bisdesmethyl-3^,,3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlor-4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlor-4fluorfenethy lamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-cyklopentyl-3'-N-cyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3chlor-4-difluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'--N-bisdesmethyl-3', 3'-N-biscyklopropylmethyl-1 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4- difluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4difluorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklobutyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;3',3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-bis[3-(3-pyridyl)propyl]-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlor-4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3'-N-bisdesmethyl-3 '-N-—cyklopropylmethyl-3 '-N-(4-hydroxymethyl-2-furyl)methyl-11 deoxy-1 l-[karboxy-(3-chloř-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A; 3',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-3-(4-pyridyl)propyl]-11 -deoxy-11 [karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-[4-(hydroxymethyl-2-furyl)]-methyl11-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(2-furyl)methyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-[6-methyl-(2-pyridyl)]methyl-ll-deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-bis-(l-methylcyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlor4-fluořfenethylamino)]-6-O-methyl-l1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-bis-(l-methylcyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A; 3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-(l-methylcyklopropyl)methyl-3'-N-cyklopropylmethyl-ll-deoxy1 l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3 '-N-izopropyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-izopropyl-3'-N-cyklopropylmethyl-l l-deoxy-ll-[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

* · • ·

3',3'-N-bisdesmethyl-3 '-N-izopropyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3 '-N-izopropyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(biscyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3 -chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(biscyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3^l-N-bisdesmethyl-3'-N-eyklopropylmethyl-3'-N-(2,2-dimethylpropyl)-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3^,-N-bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(2,2-dimethylpropyl)-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,-4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-[3 -(4-hydroxy-3 -methoxyfenyl)-1 methyl]propyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-[3-(4-hydroxy-3-methoxyfenyl)-lmethyl]propyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12cyklický karbamát erythromycinu A;

• ·« »* *· • · · · * ·« · • · · φφφφ ·· · · · ·· · • « · · · » · ·« · φ· ·» **

3',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklobutyl-3 '-Ν-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3 -chlor-4-fl uorfenethylamino)] -6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3'-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklobutyl-3 '-N-( 1 -methyl cyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(l-ethylcyklopropyl)methyl-ll-deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-( 1 -ethyl cyklopropylmethyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3, 4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(l-fenylcyklopropyl)methyl-ll-deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-( 1 -fenylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3,4-ďichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3 '-N-ethyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 -[karboxy (3-chlor-4-fluórfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-ethyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 -[karboxy (3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-izobutyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

• ·« φφ ·· ·· « · φ * · · φφφ φ · ο · φφφ ΦΦΦΦ φφφ φφ ·· *· ·· ·

ΦΦΦΦ

3',3'-N-bisdesmethyl-3 '-N-izobutyl-3 '-Ν-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

',3'-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-( 1 -allylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

',3'-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-( 1 -allylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů a_; ',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-( 1 -benzylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-cykloprop.ylmethyl-3 '-N-( 1 -benzylcyklopropyl)methyl-l 1 -deoxy1 l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyM 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A; . . . .

',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-bis-( 1 -methylcyklobutyl) methyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 -chlor4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

',3 '-N-bisdesmethyl-3 '-N-bis-( 1 -methyl cyklobutyl) methyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

',3'-N-bisdesmethy 1-3 '-N-cyklopropylmethyb3 '-N-( 1 -methylcyklobutyl)methyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A; a

3',3'-N-bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(l-methylcyklobutyl)methyl-l 1-deoxy1 l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A.

• «· ·»······ • · · · · ···· ······· ··· ·· ·» · ·

Výhodnější sloučeniny vynálezu jsou:

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-biscyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlor-4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl- 3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlor-4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-N-bis-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A; a ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-izopropyl-3 '-N-(l -methyl cyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3 -chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-0-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A.

Účinky a použitelnost agonistů a antagonistů LHRH

Agonisté a antagonisté LHRH vynálezu jsou účinné při ošetření předčasné puberty, rakoviny prostaty, benigní hypertrofie prostaty (BPH), endometriózy, uterinní fibroidy, rakoviny prsu, akné, předmenstruačního syndromu, syndromu pólycystřckých-ovárií a onemocnění, která vyplývají z přebytků nebo nedostatků tvorby gonádních hormonů při sexuálním chování lidí nebo zvířat. Antagonisté LHRH vynálezu jsou také účinné pro regulování reprodukce u samic i samců. Sloučeniny vynálezu jsou účinné při potlačování hladin testosteronu a dihydrotestosteronu (DHT) u samců a estrogenu a estradiolu u samic.

Při provádění způsobu podle tohoto vynálezu je při potřebě takového ošetření účinné množství sloučeniny vynálezu nebo farmaceutický přípravek obsahující účinné množství sloučeniny vynálezu aplikováno lidem nebo zvířatům. Tyto sloučeniny nebo přípravky mohou být aplikovány různými způsoby v závislosti na specifickém konečném použití. Tyto způsoby zahrnují perorální, parenterální (včetně subkutánní, intramuskulámí a intravenózní aplikace), vaginální (zvláště kontracepce), rektální, bukální (včetně subligvální aplikace), transdermální nebo intranazální aplikaci. Nej vhodnější způsob v jakémkoliv uvedeném způsobu bude záviset na použití, na jednotlivé aktivní složce, na subjektu a úsudku lékaře. Sloučenina nebo přípravky mohou také být aplikovány pomocí prostředků pomale uvolňujících se, implantovaných nebo depotních preparátů, jak je zde uvedeno detailněji níže.

• · • ·· · ·· ·· • * · · · · » · · • 9 · · · · ······· ··· ·· ··

Obecně k modulování hladin pohlavních hormonů u samců nebo samic pro aplikace uvedené výše je vhodné podávat aktivní složku v množstvích přibližně 1 až 200 mg/kg tělesné hmotnosti denně, výhodněji 1 až 30 mg/kg tělesné hmotnosti denně. Aby se dosáhlo nejlepších výsledků může být toto podání dosaženo aplikováním jednorázové denní dávky, rozložením dávky do několika podání nebo pomalým uvolňováním.

Přesná dávka a dávkovači režim aplikování těchto sloučenin a přípravků bude nutně záležet na potřebách jednotlivého subjektu, který je ošetřován, typu ošetření, stupně postižení nebo potřebě a úsudku lékaře. Obecně vyžaduje parenterální aplikace nižší dávky než u ostatních způsobů aplikace, které více závisí na absorpci.

Další aspekt předloženého vynálezu se týká farmaceutických přípravků obsahujících sloučeninu vynálezu jako aktivní složku ve směsi s farmaceuticky přijatelným netoxickým nosičem. Jak je uvedeno výše, takové přípravky mohou být připraveny pro použití jako parenterální (subkutánní, intramuskulární nebo intravenózní) aplikaci, obzvláště ve formě tekutých roztoků nebo suspenzí; pro použití při vaginální nebo rektální aplikaci, obzvláště v polotuhých lékových formách, např. krémy a čípky; pro perorální nebo bukální aplikaci, obzvláště ve formách tablet nebo kapsulí nebo intranazálně, obzvláště ve formě prášku, nosních kapek nebo aerosolů.

Přípravky mohou být vhodně aplikovány v jednotkových dávkovačích formách a mohou být připraveny jakýmikoliv způsoby, které jsou známy ve farmaceutickém oboru, např. způsoby popsanými v Remingtonů Pharmačeuticál Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA., 1970. Přípravky pro parenterální aplikaci mohou obsahovat jako běžné excipienty sterilní vodu nebo fyziologický roztok, polyalkylenglykoly, např. polyethylenglykol, oleje rostlinného původu, hydrogenované naftalény, apod. Přípravky pro inhalaci mohou být tuhé a obsahovat jako excipienty, např. laktosu, nebo mohou být vodné nebo olejové roztoky pro aplikování ve formě nosních kapek. Pro bukální aplikování jsou typickými excipienty cukr, stearát vápenatý, stearát hořečnatý, předželatinovaný škrob, apod.

Obzvláště je požadováno podávání sloučenin předloženého vynálezu subjektu po delší časové období, např. po dobu jednoho týdne až jednoho roku jednorázovým podáním. Mohou být používány různé pomalu uvolňující se, depotní nebo implantované dávkovači formy.

Např. dávkovači formy mohou obsahovat farmaceuticky přijatelné netoxické soli sloučeniny vynálezu, které mají malý stupeň rozpustnosti tělních tekutinách, např. (a) adiční sůl s vícesytnou kyselinou, jako je např. kyselina orthofosforečná, kyselina sírová, kyselina citrónová, kyselina vinná, kyselina tříslová, kyselina pamoová, kyselina alginová, kyselina polyglutamová, kyselina naftalenmonosulfonová nebo naftalendisulfonová, kyselina • ·

• · · · · · · ··· ··· ·· · · ·· polygalakturonová, apod; (b) soli s polyvalenčnímikationty kovu , např. kationty zinku, vápníku, bismutu, baria, hořčíku, hliníku, mědi, kobaltu, niklu, kadmia, apod. nebo s organickým kationtem vzniklým z např. Ν,Ν'-debenzylethylendiaminu nebo ethylendiaminu; nebo (c) kombinace (a) a (b) např. sůl zinečnatého tanátu. Další sloučeniny předloženého vynálezu nebo výhodně, relativně nerozpustné soli, např. právě popisované, mohou být připravovány v gelu, např. gel monostearátu hlinitého s např. sezamovým olejem, vhodné pro injekce. Další výhodné soli jsou soli zinku, tanátu zinku, pamoátu, apod. Další typy pomalu uvolňujících se depotních přípravků pro injekce mohou obsahovat sloučeniny nebo soli dispergované nebo opouzdřené v pomalu degradujících, netoxických, neantigenních polymerech, např. polymer kyseliny polymléčné/kyseliny polyglykolové, který je popsán např. v US patentu č. 3,773,919. Sloučeniny vynálezu nebo, výhodně, např. výše popsané relativně nerozpustné soli mohou být také připravovány v peletách s cholesterolovou matricí, zejména pro použití u žvířat. Další, pomalu se uvolňující formulace jsou např.z literatury velmi známé lipozómy. Viz např. Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson ed., Marcel Dekker, Iric., New York, 1978. Podrobný odkaz pokud jde o typy sloučenin LHRH, může být nalezen např. v patentu US č. 4,010,125.

Aktivita antagonistú LHRH

Charakteristické sloučeniny předloženého vynálezu byly vyhodnocovány při in vivo testech na vazbu krysího hypofyzámího receptoru LHRH (pKj) a na antagonistickou sílu (pÁ2) za inhibice LH buněk krysí hypoíyzy. Způsoby a postupy používaných festů jsou podrobně popsány v F. Haviv, et al.,1 Med.Chem., 32: 2340 - 2344 (1989). Afinita vazby receptoru (pK[) je negativní logaritmus rovnovážné disociační konstanty. Výsledky pKi charakteristických sloučenin tohoto vynálezu jsou uvedeny v tabulce 1.

• a

Tabulka 1

Příklad	pKi	Příklad	pK,
l	7,73	14	9,60
2	8,50	15	8,90
3	8,38	16	8,87
4	8,62	17	8,50
5	9,08	18	9,40
6	8,08	19	9,08
7	8,56	20	8,40
X	8,60	21	8,34
9	8,20	22	8,72
I0	8,85	23	8,98
11	8,66	24	8,00
12 13	9,00 8,94	25	8,58

Hodnota pA2 je negativní logaritmus koncentrace antagonisty, který mění křivku odezvy vytvářenou agonistou leuprolidem na dvojnásobně vyšší koncentraci. Leuprolid je agonista LHRH, který má strukturu pyro-Glu¹-His²-Trp³-Ser⁴-Tyr⁵-D-Leu⁶-Leu⁷-Arg⁸-Pro⁹NHEt a je publikován a patentován v patentu US číslo 4,005,063. Typické hodnoty pA2 7,0 nebo větší poukazují na dobré antagonisty LHRH. Hodnoty pA2 pro charakteristické sloučeniny jsou uvedeny v tabulce 2 níže.

Tabulka 2

Příklad	M2
2	8,27
5	9,08
4	9,90
13	9,53
14	9,12
17	8,81
18	8,34

Způsob syntézy

Sloučeniny a postupy předloženého vynálezu budou srozumitelnější ve spojitosti s následujícími schématy syntéz 1- 6, které ilustrují způsoby, jimiž mohou být připraveny sloučeniny vynálezu. Sloučeniny jsou připraveny pomocí komerčně dostupných nebo syntetizovaných činidel.

Zkratky

Zkratky, které se použily při popisu schémat a příkladů, jsou následující: Ac pro acetyl; APCI pro chemickou ionizaci při atmosférickém tlaku; CDI pro karbonyldiimidazol; CH3CN pro acetonitril; Cl nebo DCI pro desorpční chemickou ionizaci; DMF pro dimethylformamid; ESI pro elektrosprayovou ionizaci; EtOAc pro ěthylacetát; FAB pro ostřelování rychlými částicemi; FTIR pro Fourierovu transformační infračervenou spektrometrii; HPLC pro vysoce výkonnou kapalinovou chromatografii; IR pro infračervenou spektroskopii; MeOH pro methanol; MHz pro megahertz; MIC pro mikroskop; MS pro hmotnostní - spektra; NaHMDS pro hexamethyldisilazid sodný; NMR pro nukleární magnetickou rezonanci; Rf pro retenční faktor; R_t pro retenční čas; TBAF pro fluorid tetrabutylamonný; THF pro tetrahydrofuran; TLC pro chromatografii na tenké vrstvě ; TMS pro trimethylsilylchlorid; a DCM pro dichlormethan.

Na výchozí látku 6-O-methyl-erythromycin A 1 (klarithromycin, komerčně dostupný jako BIAXIN® od Abbott Laboratories) se zavede chránící skupina v poloze 2'a 4 reakcí s vhodným činidlem používaným pro chránění hydroxy skupiny, např. popsaným v T.W. Greene and P.G.M.Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2^nd ed., John Wiley & Son, lne., 1991. Činidla používaná pro chránění hydroxy skupiny zahrnují např. anhydrid kyseliny octové, anhydrid kyseliny benzoové, benzylchlormravenčan, hexamethyldisilazan nebo trialkylsilylchlorid v aprotickém rozpouštědle.

Schéma 1 pokrač.

Zavedení chránících skupin v poloze 2'-hydroxy skupiny a 4 -hydroxy skupiny 6-0- _ methylerythromycinu A 1 uvedené ve schéma 1 může být dosaženo postupně nebo najednou k získání sloučeniny 2, kde substituent R^p je skupina chrániči hydroxy skupinu. Výhodná skupina R^p je trimethylsilyl nebo acetyl.

Příklady aprotických rozpouštědel zahrnují dichlormethan, chloroform, DMF, tetrahydrofuran (THF), N-methylpyrrolidinon, dimethylsulfoxid, diethylsulfoxid, N,Ndimethylformamid, Ν,Ν-dimethylacetamid, triamid hexamethylfosforečné kyseliny, jejich směsi nebo směsi jednoho z těchto rozpouštědel s etherem, tetrahydrofuranem, 1,2dimethoxyethanem, acetonitrilem, ethylacetátem, acetonem, apod. Aprotická rozpouštědla neovlivňují reakci a jsoa výhodně dichlormethan, chloroform, DMF, tetrahydrofuran (THF), N-methylpyrrolidinon nebo jejich směsi.

Chráněná sloučenina 2 se nechá reagovat s hexamethyldisilazidem sodným nebo hydridem sodným v aprotickém rozpouštědle při teplotě 0 až 25°C a karbonyldiimidazolem,

čímž se získá sloučenina 3. Reakce sloučeniny 3 s amino sloučeninou vzorce · ² ² buď bez rozpouštědla anebo v acetonitrilu při teplotě 25 až 80°C, poté sejmutí chránící skupiny vede ke vzniku N-substituovaného cyklického karbamátů charakterizovaného sloučeninou 4. Sejmutí chránící skupiny 2'-hydroxy a 4''-hydroxy skupiny se provede způsobem popsaným v literatuře, například T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective -Groups in Organic Synthesis, 2^nd edition, John Wiley & Son, Inc. (1991).

V rámci jednoho provedení postupu se desmethylace 3'-N-dimethyl skupiny provádí postupně reakcí sloučeniny 4 s jodem za přítomnosti vhodné báze, např. acetát sodný a světlo nebo tepelným zdrojem, poté se M-fUnTthiosulfátem sodným a zpracovává k odstranění první methylové skupiny, čímž se získá sloučenina 5. Druhá methylová skupina se odstraní reakcí s jodem, mírnou bází, např. trojsytný fosforečnan draselný a zdroj světlá, čímž vznikne bisdesmethylamin 6. N-Desmethylace může být také dosažena reakcí sloučenin 4 se chloromraveněanovými činidly, např. benzylchloromravenčan, allylchloromravenčan, vinylchloromravenčan, apod.

Alkylace 3 '-N-bisdesmethyl sloučeniny 6 se docílí reakcí s příslušným aldehydem nebo ketonem za přítomnosti hydridu kovu, např. kyanoborohydridu sodného nebo triacetoxyborohydridu sodného nebo za přítomnosti Pd/C katalyzátoru v protickém nebo neprotickém rozpouštědle pod atmosférou vodíku. Aldehydy a ketony, které mohou být používány při přípravě sloučeniny 7 zahrnují např. cyklopropylkarboxaldehyd, aceton, npropanal, cyklohexanon, cyklopentanon, izovaleraldehyd, cyklobutanon, izopropylaldehyd, 2pyridinkarboxaldehyd, 4-thiazolekarboxaldehyd.

Alkylace 3',3-N-bisdesmethyl sloučeniny 6 může být také dosažena reakcí s příslušným alkylačním činidlem za přítomnosti báze pomocí způsobů používaných v oboru, čímž se získá sloučenina 7. Alkylační činidla, která mohou být používána při přípravě • · · · • * * » • · · ·

• · · · sloučeniny 7, zahrnují nižší alkylhalogenidy, např. ethylbromid, halogen-substituované nižší alkylhalogenidy, kyano-substituované nižší alkylhalogenidy, hydroxy-substituované nižší alkylhalogenidy, další nižší alkenylhalogenidy, např. methylallylchlorid, , nižší alkynylhalogenidy, např. propargylbromid, nižší cykloalkylhalogenidy, nižší cykloalkylmethylhalogenidy, např. nižší cyklopropyl methyl a benzylhalogenidy.

V dalším provedení postupu se jak desmethylace, tak i alkylace provádějí postupně podle schéma 2. První desmethylace sloučeniny 4 se provádí výše popsaným způsobem, čímž se získá sloučenina 5, která se pak monoalkyluje výše popsaným způsobem, čímž se získá sloučenina 8. Druhá demethylace se pak provádí výše popsaným způsobem k získání sloučeniny 9, která se pak alkyluje k získání sloučeniny 7.

Schéma 2

• ·

Schéma 3 ilustruje specifické provedení obecného schématu popsaného ve schéma 1. Jak je znázorněno ve schématu 3, poskytne reakce 2'-acetyl-6-O-methylerythromycin A 10 s trimethylsilylchloridem sloučeninu 11. Sloučenina 11 se nechá reagovat s hexamethyldisilazidem sodným a karbonyldiimidazolem, čímž se získá derivát 12-0acylimidazolu, který se následně nechá reagovat s 3,4-dichlorfenethylaminem, čímž vznikne derivát 11,12-cyklického karbamátu. Takto obdržený 11,12-cyklický karbamát se nechá reagovat s methanolem k získání sloučeniny 12. Sejmutí skupiny chránící 4-hydroxy skupinu se docílí způsoby používanými v oboru, čímž se dostane sloučenina 13. Reakce sloučeniny 13 s jodem za přítomnosti acetátu sodného, poté utlumení reakční směsi bisulfitem sodným poskytne sloučeninu 14. Druhá desmethylace se docílí reakcí sloučeniny 14 s jodem, trojsytným fosforečnanem draselným a zdrojem světla, čímž se získá bisdesmethylamin 15. Bisalkylace dusíku v poloze 3' se docílí reakcí s cyklopropankarboxaldehydem za přítomnosti kyanoborohydridu sodného⁷ v methanolu a kyselinou octovou, čímž se získá konečný produkt, sloučenina 16.

• · • · · «

Schéma 3

15 • · · ·

Schéma 3 pokrač.

Schéma 4 ilustruje specifické provedení obecného příkladu popsaného ve schéma/2, které se týká reakce 2'-acetyl-6-O-methylerythromycinu A 10 s trimethylsilylchloridem k získání sloučenina 11 Sloučenina 11 se nechá reagovat se hexamethyldisilazidem sodným a karbonyldiimidazolem k získání derivátu 12-O-acylimidazolu, který se nechá postupně reagovat s 4-chlorfenethylaminem za vzniku derivátu 11,12-cyklického karbamátu. Takto obdržený 11,12-cyklickýkarbamát se nechá reagovat s methanolem k získání sloučeniny 17. Sejmutí skupiny chránící 4 -hydroxy skupinu se docílí způsoby používanými v oboru, čímž se dostane sloučenina 18. Reakce sloučeniny 18 s jodem za přítomnosti acetátu sodného, poté lAllwicení reakční směsi bisulfitem sodným poskytne sloučeninu 19. První alkylace se docílí reakcí s acetonem za přítomnosti kyanoborohydridu sodného v methanolu a několika kapek kyseliny octové, čímž se získá konečný produkt, sloučenina 20. Druhá dealkylace se docílí reakcí sloučeniny 20 s jodem, acetátem sodným a zdrojem světla, čímž vznikne desmethylamin 21. Alkylace dusíku v poloze 3' se docílí reakcí s cyklobutanonem za přítomnosti kyanoborohydridu sodného v methanolu a kyseliny octové, čímž se získá konečný produkt, sloučenina 22.

Schéma 4

• ·

schéma 5 ilustruje na tomto místě popsaný třetí příklad způsobu přípravy. V tomto příkladu se do aminu 23 postupně přidávají různé alkylové skupiny, čímž se získá sloučenina 25.

• · • · • ·

Schéma 5

Předchozí popis může být lépe pochopen pomocí odkazů na následující příklady, které jsou zde uvedeny pro ilustraci a nemají nikterak omezovat rozsah vynálezu.

« · * · · · ·

... .··· »·· ·» ··

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

3',3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-l 1 -deoxy-11 -[karboxy-(4chlorfenethylamino)j-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Na 6-O-methyl erythromycin A (komerčně dostupný u Abbott Laboratories jako BIAXIN) se zavede skupina chránící hydroxy skupinu v poloze 2' způsobem popsaným v odborné literatuře.

Krok 1: 2'-O-Ac-4''-O-trimethylsilyl-6-O-methyl-erythromycin A (sloučenina 11, schéma 3) 2'-O-Ac-6-O-methyl-erythromycin A (45 g, 57 mmol) se rozpustí v 450 ml CH2CI2 a ochladí na teplotu 0°C v lázni led/voda. Najednou se přidá pyridin (13,8 ml, 171 mmol), poté po kapkách v průběhu 15 minut TMSC1 (14,5 ml, 114 mmol). Reakce se míchá za ochrany vysoušeči trubicí po dobu 1 hodiny, po které TLC (ChLC^MeOH, 9:1) indikuje úplnou přeměnu na novou, méně polánu látku. Reakce se pak utlumí 500 mí 0,5 M NařLPCL, organická vrstva se před sušením (Na2SO4), filtrováním a koncentrováním separuje a promyje H2O (300 ml), NaHCO3(nasyc.) (300 ml), H2O (300 ml) a solankou ( 100 ml),. Zbytek se krystalizuje z CH3CN k získání 48 g sloučeniny 11 (98 %): Teplota tání 235-237°C (CH3CN); R_f = 0,5 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1): MS (ESI) (M+H)⁺ při m/z 862; ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ

221,0,175,6, 169,9,100,0,96,0, 80,5, 80,β, 78,3, 77,8,76,4,74,T , 73,2, 72,0, 69,0,67,1,

65,2, 62,-7, 50,3,49,4,45,1,44,9,40,5, 38,7, 38,6, 37,1, 35,6, 30,9,22,1,21,5,21,4,20,9,

19,7, 19,2, 17,8, 15,9,15,8, 12,1, 10,4, 8,9, 0,8.

Krok 2: 4-O-Trimethylsilyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-Omethyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A (sloučenina 12, schéma 3)

Sloučenina 11 (6,0 g, 6,96 mmol) z výše uvedeného kroku se rozpustí v 10 ml bezvodého THF, pak zředí 50 ml DMF. Výsledný roztok se ochladí v lázni led/voda a nechá najednou reagovat s 1.1'-karbonyldiimidazolem (5,64 g, 34,8 mmol), poté se po částech přidá 1,0 g (25 mmol) NaH (60% suspenze). Reakce se nechá ohřát na pokojovou teplotu a míchá pod atomosférou N₂ po dobu 1 hodiny, po které TLC [EtOAc.MeOH, 95:5, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu na polárnější, UV aktivní látku. Reakce se opatrně utlumí vodou, poté rozdělí mezi vrstvy EtOAc (300 ml) a vody (300 ml). Organická fáze se před sušením (Ť^SOA a koncentrováním spojí a promyje vodou (2 x 300 ml) a solankou

(200 ml). Vzorek výsledné bezbarvé pěny se podrobí hmotnostní spektrální analýze, která ukáže požadované (M+H)⁺ při m/z 938. Zbývající látka se rozpustí v CH3CN (25 ml), nechá reagovat s 5,0 g (26 mmol) 3,4-dichlorfenethylaminu a míchá pod atmosférou N2 při teplotě 55°C. Po 48 hodinách TLC [EtOAc:MeOH, 95:5, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu na méně polární látku, která po ochlazení na pokojovou teplotu precipituje. Výsledný precipitát se rekrystalizuje z CH₃CN získání 5,74 g chráněného cyklického karbamátu ve formě bezbarvých jehliček: MS (ESI) (M+H)⁺ při m/z 1059; ¹³C NMR (75

MHz, CDCI3) δ 216,4, 176,3, 170,1, 157,2, 139,3, 132,2, 131,1, 130,3, 130,1, 128,4, 100,2,

96,3, 82,R, 80,5, 79,9, 79,0, 77,5, 76,2, 73,2, 67,4, 65,4, 62,8, 60,3, 50,5, 49,6, 45,5, 45,3,

44,8, 41,0, 39,0, 38,7, 38,5, 35,7, 32,6, 31,0, 22,2, 21,9, 21,6,20,2, 19,3, 18,8, 16,1, 14,3,

14,1, 10,2, 9,2, 1,9, 0,8.

Chráněný cyklický karbamát (5,74 g, 5,42 mmol) se suspenduje v 250 ml methanolu a suspenze se zahřívá na teplotu 55 °C za ochrany vysoušeči trubicí^ po které TLC [CH2Cl2:MeOH, 9:1, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu výchozí látky na novou, polárnější látku, která po ochlazení na pokojovou teplotu krystalizuje. Výsledná tuhá látka se krystalizuje z MeOH/vodý ři získání 5,24 g sloučeniny 12 (74% ze sloučeniny 11): Teplota tání 112-114°C; R_f = 0,65 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1); MS (ESI) (M+H)⁺ při m/z 1017; HRMS m/z (M+H)⁺ vypočtená 999,5116, zjištěná 999,5110; ^!H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,46 (d, J = 2 Hz, ArH),7,35(d, J = 8Hz, ArH),7,19(dd, J = 8,2Hz, ArH),4,91 (d, J = 4,4 Hz, 1 H), 4,56 (d, J = 7 Hz, 1 JH, C-1' CH), 3,75 (d, 7 = 10 Hz, 1 H, C-3 CH), 3,70 (s, 1 H, C-l 1 CH),

3,67 (d, J = 8 Hz, 1 H, C-5 CH), 3,31 (s, 3H, C-6 OCH₃), 3,07 (s, 3H, C-6 OCH₃), 2,38(d, J = 15 Hz, 1 H, C-2 CH), 2,28 (s, 6H, C-2' N(CH₃)₂), 1,43 (s, 3H, C-6 CH₃), 1,40 (s, 3H, C-12 CH₃), 1,07 (d, J = 23 Hz, 3H, C-10 CH₃), 0,82 (t, J = 7 Hz, 3H, C-l5 CH₃), 0,16 (s, 9H, C-4 OSi(CH₃)₃); ¹³CNMR(75 MHz, CDC1₃) δ 216,1, 176,5, 157,2, 139,3, 132,1, 131,0, 130,2,

130,0, 128,4, 102,4, 96,6, 82,8, 80,6, 79,9, 79,0, 78,0, 76,1, 73,1, 71,1, 68,0, 65,2, 64,7, 60,3,

50,6, 49,6, 45,5, 45,3, 44,8, 40,0 (2C), 39,1, 38,9, 35,6, 32,6, 28,6, 22,1, 21,8, 21,7, 20,1,

19,2,18,8,16,0,14,1, 14,0,10,2, 9,0,0,8,

Krok 3: 11-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A (sloučenina 13, schéma 3)

Trimethylsilylether 12 (5,24 g, 5,15 mmol) z výše uvedeného kroku se rozpustí v 50 ml THF, nechá reagovat s 5,4 ml TBAF (1 M/THF, 2,6 mmol) a míchá při pokojové teplotě. Po 2 hodinách TLC [CHCl₃:MeOH:NH₄OH, 90:8:1, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou • · přeměnu na novou, polárnější látku. Reakční směs se rozdělí mezi vrstvy EtOAc (300 ml) a vody (300 ml). Organická fáze se před sušením (Na₂SO₄) a koncentrováním promyje NaHCO₃ (nasyc., 200 ml), vodou (200 ml) a solankou (200 ml). Výsledný zbytek se krystalizuje z CRCNA získání 4,82 g sloučeniny 13 (99%): Rf= 0,45 (CHCl₃:MeOH:NH₄OH, 90:8:1); Teplota tání 240-243°C; MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 945; *H

NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,45 (d, J = 2 Hz, 1 H, Ar H), 7,35 (d, J = 8 Hz, 1 H, Ar H), 7,19 (dd, J = 8, 2 Hz, 1 H, Ar H), 4,44 (d, J = 7 Hz, 1 H, C-1 ’ CH), 3,75 (d, J = 10 Hz, ÍH, C-3

CH), 3,69 (s, ÍH, C-l 1 CH), 3,33 (s, 3H, C-3 OCH₃), 3,07 (s, 3H, C-6 OCH₃), 2,29 (s, 6H, C-3' N(CH₃)₂), 2,19 (d, J = 10 Hz, ÍH, C-4 OH), 1,44 (s, 3H, C-6 CH₃), 1,40 (s, 3H, C-12 CH₃), 1,31 (d, J = 6 Hz, 3H, C-6 CR), 1,26 (s, 3H, C-3 CR), 1,15 (d, J = 7 Hz, 3H, C-8

CR), 1,12 (d, J = 8 Hz, 3H, C-4 CR), 1,02 (d, J = 7 Hz, 3H, C-10 CR), 0,83 (t, J = 8 Hz,

3H, C-15€H₃); ¹³CNMR(75 MHz, CDC1₃) δ 216,2, 176,4, 157,2, 139,3, 132,1 , 131,0,

130,2, 130,1, 128,4, 102,9, 96,2, 82,8, 80,4, 78,9, 77,9, 77,8, 76,2, 72,6, 70,9, 68,9, 65,8, 65,6,

60,3, 50,6, 49,5, 45,5,45,3, 44,8, 40,2 (2C), 39,0, 38,9, 34,8, 32,6, 28,5, 21,9, 21,5 (2C), 20,2,

18,9, 18,7, 16,0,14,2,14,1, 10,2, 9,0; IR (KBr) v 3430, 2970, 2940, 1760, 1735, 1710, 1460, 1420, 1380, 1235, 1170, 1070, 1055, 1010, 1000 cm'¹; Analyticky vypočteno pro

C₄7H₇₄Cl₂N₂Oi₃*0,5 H₂O: C, 59,11: H, 7,91; N, 2,93. Zjištěno : C, 59,13;H, 8,12: N, 2,89.

Krok 4: 3'-N-Desmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl11,12-cyklický karbamát erythromycinu A (sloučenina 14, schéma 3)

2,5 g Sloučeniny 13 (2,65 mmol) z výše uvedeného kroku se rozpustí v 50 ml methanolu a nechá reagovat s 1,80 gNaOAc*3H₂O (13,25 mmol) a 0,71 g of I₂ (2,78 mmol). Roztok se ozařuje 500W halogenovou pracovní lampou, která udržuje reakci při refluxní teplotě. Po 2 hodinách TLC indikuje úplnou přeměnu na novou, polárnější látku. Přebytek I₂se zháší přidáním (po kapkách) IM Na₂S₂O₃. Reakční směs se koncentruje a výsledný zbytek se rozdělí mezi vrstvy EtOAc (200 ml) a NaHCO₃ (nasyc.) (200 ml). Organická fáze se promyje solankou (100 ml), suší (Na₂SO₄), filtruje a koncentruje. Výsledný zbytek se čistí na sloupci silikagelu (mobilní fáze CHCl₃:MeOH:NH₄OH, 90:8:1) k získání l,75g sloučeniny 14 (71%) ve formě amorfní tuhé látky: Rf = 0,33 (CHCl₃:MeOH:NH₄OH, 90:8:1); Teplota tání 136 - 142°C (CRCN H₂O); MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 931; ^!H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ

7,45 (d, J = 2 Hz, 1 R Ar H), 7,35 (d, J = 8 Hz, 1 H, Ar H), 7,19 (dd, J = 8, 2 Hz, 1 H, Ar H), 4,42 (d, J = 7 Hz, 1 R C-l' CH), 3,74 (d, J = 9 Hz, 1 H, C-3 CH), 3,69 (s, 1 H, C-l 1 CH),

3,32 (s, 3H, C-3 OCR), 3,07 (s, 3H, C-6 OCR), 2,42 (s, 3H, C-3' NCR), 1,44 (s, 3H, C-6 » «

CH₃), 1,41 (s, 3H, C-12 CH₃), 1,31 (d, J = 6 Hz, 3H, C-6 CH₃), 1,26 (s, 3H, C-3 CH₃), 1,16 (d, J = 7 Hz, 3H, C-8 CH₃), 1,07 (d, J = 8 Hz, 3H, C-4 CH₃ ), 1,03 (d, J = 7 Hz, 3H, C-10 CH₃), 0,82 (t, J = 7 Hz. 3H, C-15 CH₃); ^J3C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 216,2, 176,2, 157,1,

139,2, 132,2, 131,0, 130,3, 130,2, 128,4, 102,4, 96,2, 82,7, 80,5, 78,8, 77,8, 77,7, 76,3, 75,0,

72,7, 68,6, 65,7, 60,3, 50,7, 50,6, 49,5, 45,4, 45,3, 44,8, 39,0, 38,9, 38,8, 37,3, 34,8, 33,3,

32,6, 21,9, 21,5, 21,3, 20,1, 18,9, 18,7, 16,0, 14,2, 14,1, 10,2, 9,6; IR (KBr) v 3420, 2970, 2940, 1760, 1735, 1710, 1460, 1420, 1380, 1235, 1170, 1065, 1050, 1010, 1000 cm’¹; Analyticky vypočteno pro C46H7₂Cl2N2Oi₃*0,75 H₂0: C, 56,39; H, 7,44; N, 2,81. Zjištěno : C, 56,63; H, 7,36; N, 2,78.

Krok 5: 3' 3'-N-Bisdesmethyl-ll-deoxy-ll-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-Omethyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A (sloučenina 15, schéma 4)

Roztok 2,07 g (2,19 mmol) sloučeniny 14 se rozpustí v 50 ml methanolu a nechá po kapkách reagovat s roztokem 2,32 g K₃PO4 (11,0 mmol) v 5 ml H₂O, poté najednou s 1,11 g í₂ (4,38 mmol). Roztok se ozařuje 500W halogenovou lampou, která udržuje reakci při refluxní teplotě. Po 0,75 hodinách se jodová barva ztratí a HPLC s reverzní fází indikuje částečnou přeměnu na novou, polárnější látku. Reakční směs se koncentruje na 1/3 objemu a rozdělí mezi vrstvy ethylacetátu (400 ml) a nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (100 ml). Organická vrstva se před sušením (NaiSO^, filtrováním a koncentrováním promyje vodou (300 ml) a solankou (300 ml). Výsledný zbytek se znovu podrobí výše uvedeným reakčním podmínkám. Po 1 hodině se jodová barvavytratí a HPLC s reverzní fází indikuje úplnou přeměnu na novou, polárnější látku. Reakční směs se koncentruje na 1/3 objemu a rozdělí mezi vrstvy ethylacetátu (400 ml) a nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (100 ml). Organická vrstva se) před sušením (Na₂SO₄), filtrováním a koncentrováním promyje vodou (300 ml) a solankou (300 ml) .Výsledný zbytek se krystalizuje z CH₃CN 24 získání 1,25 g sloučeniny 15 (62%): Teplota tání 223-225°C (EtOAc); MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 917; 'H NMR (300 MHz, CDC1₃) 85,46 (d, J = 2 Hz, Ar H), 7,35 (d, J = 8 Hz, Ar H), 7,19 (dd, J = 8, 2 Hz, Ar H), 4,39 (d, J = 7 Hz, C-l' CH), 4,04-3,98 (m, 1 H, C-5 CH), 3,32 (s, 3H, C-3 OCH₃), 2.68-2,61 (m, 1 H, C-8 CH), 1,44 (s, 3H, C-6 CH₃), 1,41 (s, 3H, C-12 CH₃), 1,06 (d, J = 8 Hz, 3H, C-4 CH₃), 1,03 (d, J = 7 Hz, 3H, C-10 CH₃), 0,83 (t, J = 7 Hz,

3H, C-15 CH₃); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 216,0, 176,1, 157,1, 139,1, 132,1, 130,9,

130,2, 130,1, 128,3, 102,3, 96,1, 82,7, 80,5, 78,8, 77,8, 77,7, 77,3, 76,3, 72,6, 68,5, 65,7, 60,3,

52,4, 50,6, 49,3, 45,3, 45,2, 44,7, 41,3, 38,9, 38,7, 34,7, 32,5, 21,8, 21,4, 21,0, 20,0, 18,8, « «

18,6, 15,9, 14,2, 14,1, 10,1, 9,6; IR (KBr) v 3440,2970, 2930, 1760, 1735, 1165,1065, 1010 cm’¹.

Krok 6; 3',3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A (sloučenina 16, schéma 3).

290 mg (0,32 mmol) Sloučeniny 15 z výše uvedeného kroku se rozpustí v 15 ml methanolu a nechá reagovat s cyklopropankarboxaldehydem (460 mg, 6,6 mmol), kyanoborohydridem sodným (80 mg, 1,3 mmol) a kyselinou octovou (7 kapek na pH 5-6) a směs se míchá při pokojové teplotě. Po 24 hodinách TLC [CHCLrMeOH, 98:2, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu na novou, méně polární látku. Reakce se koncentruje a výsledný zbytek se rozdělí mezi vrstvy ethylacetátu (159 ml) a vody (150 ml). Organická vrstva se před sušením (Na₂SO4), filtrováním a koncentrováním prómyje-vodou (150 ml) a solankou (150 ml). Výsledný zbytek se čistí na sloupci silikagelu (mobilní fáze CHChiMeOHrNfLtOH, 90:8:1) a krystalizuje z acetonitrilu k získám 180 mg sloučeniny 16 (56%) ve formě jemných jehliček: MS (FAB)(M+H)⁺ při m/z 1025; ‘H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,46 (d, J =2 Hz, ÍH), 7,35 (d, J = 8,1H), 7,20 (dd, J = 8,1,8,1H), 4,93 (d, J = 5, 1H), 4,90 (dd, J = 9,2,2,1 H), 4,49 (d, J = 7,1 H), 4,05 -4,02 (m, 1H), 3,90-3,81 (série m, 3H), 3,75 (d, J = 10,1 H), 3,70 (s, 1 H), 3,67 (d, J = 7,1 H), 3,51 -3,48 (m, 1H), 3,34 (s, 3H), 3,17-3,12 (série m, 2H), 3;07 (s, 3H), 3,05 -2,87 (série multipletů, 5H), 2,64 -2,59 (série m, ’ 3H), 2,38 (d, J =15,1 H), 2,22 (d, J = 7,1 H), 2,19 (d, J = 7, IH) 2,14 (ď, J = 10,1-H), 1,94 1,87 (série multipletů, 2H), 1,78 - 1,76 (série m, 2H), 1,66 - 1,52 (série m, 4H), 1,43 (s, 3H),

1,40 (s, 3H), 1,31 (d, J = 6, 3H), 1,26 -1,20 (série multipletů, 9H), 1,17-1,15 (série m, 6H), 1,03 (d, J = 7,0, 3H), 0,86 - 0,81 (série m, 5H), 0,57 (t, J = 10,0, 2H), 0,47 (t, J = 10,0, 2H), 0,13-0,11 (m, 4H); ¹³C NMR (CDCI3) δ 216,3, 176,3, 157,2, 139,3, 132,2, 131,0,130,3,

130,1, 128,4, 103~,1,96,0, 82,8, 80,3, 78,9, 77,8, 76,2, 72,6, 70,4, 69,1, 65,8, 61,7, 60,4, 54,5,

50.6, 49,5, 45,6/45,3. 44,8, 39,1, 39,0, 39,0, 34,8, 32,6, 30,3, 21,9, 21,5; 21,5, 20,2, 18,9,

18.6, 16,0, 14,2, 14,1, 10,4, 10,2, 9,0, 5,5, 2,7; Analyticky vypočteno pro C53H82CI2 N2O13: C, 62,04; H, 8,05; N, 2,73. Zjištěno : C, 61,66; H, 8,10 N, 2,59.

Příklad 2

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'L3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylaminol)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A

Požadovaná sloučenina se připraví podle postupu popsaného v příkladu 1 s výjimkou, spočívající v tom, že se nahradí cyklobutanon za cyklopropankarboxaldehyd. Produkt se čistí na sloupci silikagelu k získání amorfní tuhé látky : Rf = 0,58 (CHCb.MeOHíNRtOH 94:5:1);

IR (KBr) v 3440, 2960, 2925, 1755, 1730, 1460, 1380, 1165, 1105, 1065, 1050 cm'¹; ’H

NMR (300 MHz, CDCb) δ 7,45 (d, J =2 Hz, 1 H), 7,34 (d, J = 8, Hz 1 H), 7,19 (dd, J = 8, 2

• «·	*	9 ·		« t
• · ·	·· 1	•	• ·	9 ·
• ·	• ·	•	• ί-	4 ♦

» 9	9 9	•	9 ·	• «
·· <·«··	• 99	··	• 9	··

Hz, 1 H), 4,92 (d, J = 5 Hz, 1 H), 4,89 (dd, J = 11, 2 Hz, 1 H), 4,40 (d, J = 7 Hz, 1 H), 4,02 3,99 (m, 1 H), 3,88-3,78 (m, 2H), 3,72 (d, J = 10 Hz, 1 H), 3,69 (s, 1 H), 3,65 (d, J = 7, ÍH), 3,47 -3,44 (m, ÍH), 3,33 (s, 3H), 3,31-3,26 (série m, 2H), 3,12 (q, J =7 Hz, 2H), 3,07 (s, 3H), 3,05 -2,84 (série multipletů, 6H), 2,65 -2,61 (m, ÍH), 2,50 (široký singlet, 1 H), 2,38 (d, J =7 Hz, 1 H), 2,14-1,43 (serie multipletů, 21 H), 1,41 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,30 (d, J - 6 Hz, 3H),

1,24 -1,20 (série multipletů, 11 H), 1,15 (d, J = 7 Hz_? 3H), 1,11 (d, J = 7 Hz, 3H), 0,82 (t, J = 7 Hz, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 216,4, 176,3, 157,2, 139,2, 132,1, 131,0, 130,2,

130.1, 128,4, 103,3, 95,9, 82,8, 80,3, 78,8, 77,8, 77,7, 76,2, 72,6, 70,7, 69,2, 65,7, 60,3, 58,8,

54,3, 50,6, 49,5, 45,5,45,2, 44,7, 39,0, 38,9, 38,8, 34,8, 32,6, 31,2, 30,0, 29,7, 21,9, 21,5,

20.1, 18,9,18,6,16,0,15,6, 14,2, 14,1, 10,2,.9,0;MS (FAB) (M+H)* při m/z 1025; Analyticky vypočteno pro C₅₃H«Cl2 N₂O_n C, 62,04; H, 8,05; N, 2,73. Zjištěno : C, 61,94; H, 8,24 N, 2,61.

. Příklad 3 3',3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-ll-deoxy-ll-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-ll,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 1 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 4-chlorfenethylamin za 3,4-dichlorfenethylamin. Produkt se krystalizuje z CH3CN/H2O: Rf = 0,38 (8% MeOH / DCM, 0, 1 % NH4OH); IR (KBr) v 3440, 2970, 2940,

- 1765, 1735, 1715, 1490, 1460, 1420, 1380, 1330, 1280, 1235, 1170, 1130, 1110, 1095, 1070,

1055, 1015, 1000 cm'¹: *H NMR (300 MHz, CDC-b) δ 7,30-7,22 (série m, 4H), 4,96-4,92 (série m, 2H), 4,40 (d, J = 67,1 Hz, ÍH), 4/)4-3,97 (m, 1 H), 3,87-3,80 (m, 2H), 3,75-3,70 (série m, 3H), 3,64 (d, J =7,5 Hz, ÍH), 3,50-3,40 (m, ÍH), 3,34 (s, 3H), 3,28-3,20 (m, 2H),

3,20-3,09 (m, 2H), 3,07 (s, 3H), 3,06-2,80 (série m, 5H), 2,68-2,57 (m, ÍH), 2,54-2,43 (m,

ÍH), 2,38 (d, J = 15,3 Hz, 1H), 2,10 (d, J = 10,2 Hz, ÍH), 2,08-1,98 (série m, 3H), 1,97-1,82 (série m, 6H), 1,80-1,74 (m, 2H), 1,67-1,50 (série m, 7H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,29 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,25 (s. 3H), 1,22 (d, J =6,4 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 7,1

Hz, 3H), 1,13 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,83 (t, J = 7,3 Hz, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 216,2, 176,3, 157,2, 137,5, 131,9, 130,3, 128,5, 103,4, 96,0, 82,8, 80,4,

78,9, 77,9, 77,8, 76,3, 72,7, 70,9, 69,3, 65,8, 60,4, 58,9, 50,7, 49,5, 45,6, 45,3, 45,0, 39,1, 39,0, 34,9, 32,9, 32,7, 31,2, 30,1, 22,0, 21,5, 20,2, 18,9, 18,6, 16,0, 15,7, 14,2, 14,1, 10,3, 9,0 ; MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 991: Analyticky vypočteno pro C53H83CIN2O13: C, 64,19; H, 8,44; N, 2,82. Zjištěno : C, 64,10; H, 8,54; N, 2,79.

Příklad 4

3', 3'-N-bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlorfenethylamino)]6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 2 s výjimkou spočívající v tom_> že se nahradí 4-chlorfenethylamin za 3,4-dichlorfenethylamin. Produkt se krystalizuje z CH3CN/H2O: R_f = 0,38 (8% MeOH / DCM, 0,1 % NFLOH); IR (KBr) v 3440, 2970, 2940, 1765, 1735, 1715, 1490, 1460, 1420, 1380, 1330, 1280, 1235, 1170, 1130, 1110, 1095,1070,

1055, 1015, 1000 cm’¹; *H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,30-7,22 (série m, 4H), 4,96-4,92 (série m, 2H), 4,40 (d, J = 67,1 Hz, 1 H), 4,04-3,97 (m, 1 H), 3,87-3,80 (m, 2H), 3,75-3,70 (série m, 3H), 3,64 (d, J = 7,5 Hz, IH), 3,50-3,40 (m, 1 H), 3,34 (s, 3H), 3,28-3,20 (m, 2H),

3,20-3,09 (m, 2H), 3,07 (s, 3H), 3,06-2,80 (série m, 5H), 2,68-2,57 (m, 1 H), 2,54-2,43 (m, 1 H), 2,38 (d, J - 15,3 Hz, 1 H), 2,10 (d, J = 10,2 Hz, IH), 2,08-1,98 (série m, 3H), 1,97-1,82 (série m, 6H), 1,80-1,74 (m, 2H), 1,67-1,50 (série m, 7H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,29 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,22 (d, J =6,4 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 7,1

Hz, 3H), 1,13 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,83 (t, J = 7,3 Hz, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCb) δ 216,2, 176,3, 157,2,137,5, 131,9, 130,3, 128,5, 103,4, 96,0, 82,8, 80,4,

78,9, 77,9, 77,8, 76,3, 72,7, 70,9, 69,3, 65,8, 60,4, 58,9, 50,7, 49,5, 45,6, 45,3, 45,0, 39,1, 39,0,34,9,32,9,32,7,31,2,30,1,22,0,21,5, 20,2, 18,9, 18,6, 16,0, 15,7, 14,2, 14,1; 10,3, 9,0;

MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z-991; Analyticky vypočteno pro C53H83CI N2O13: C, 64^19; H, 8,44; N, 2,82. Zjištěno : G, 64,10; H, 8,54; N, 2,79.

Příklad 5

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklobutyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A « ·

Krok 1: 4-O-trimethylsilyl-l 1-deoxy-ll-[karboxy-(4-chlorfenethylamino)]-6-O-methyl11,12-cyklický karbamát erythromycinu A (Sloučenina 17, schéma 4)

Sloučenina 11 (10,2 g, 11,8 mmol) obdržená v příkladu 1 se rozpustí v 10 ml bezvodého THF, pak zředí 60 ml DMF. Výsledný roztok se ochladí v lázni led/voda a nechá najednou reagovat s 1,1 '-karbonyldiimidazolem (9,8 g, 60,4 mmol), poté se po částech přidá

1,8 g (45 mmol) NaH (60% suspenze). Reakce se zahřeje na pokojovou teplotu a míchá pod atmosférou N₂ po dobu 1 hodiny, po které TLC [EtOAc:MeOH, 95:5, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu na polárnější, UV aktivní látku. Reakce se opatrně utlumí vodou, poté rozdělí mezi vrstvy EtOAc (300 ml) a vody (300 ml). Organická fáze se před sušením (Na₂SO4) a koncentrováním spojí a promyje vodou (3 x 300 ml) a solankou (200 ml). Vzorek výsledné bezbarvé pěny se podrobí hmotnostní spektrální analýze, která ukáže požadované (M+H)⁺ při m/z 938. Zbývající látka se rozpustí v 10 ml THF, zředí CH3CN (40 ml), nechá reagovat s 18,0 g (115,7 mmol) 4-chlorfenethylaminu a míchá pod atmosférou N₂ přř teplotě 50°C. Po 18 hodinách TLC [CH₂Cl₂:MeOH, 9:1, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu na méně polární látku. Reakční směs se pak rozdělí mezi vrstvy EtOAc (300 ml) a 0,5 N NaH₂PO4 (400 ml). Organická fáze se spojí a před sušením (Na₂SO4) a koncentrací se promyje dalším 0,5 N NaH₂PO4 (400 ml), vodou (5 x 300 ml) a solankou (200 ml). Výsledný zbytek se rekrrystalizuje z CH3CN za získání 7,4 g (61% ze sloučeniny 11) chráněného cyklického karbamátu ve formě bezbarvých jehliček. Chráněný cyklický karbamát se suspenduje v 75 methanolu a suspenze, se za ochrany vysoušeči trubicí zahřívá na teplotu 50°C: Po 18 hodinách TLC [CH₂CI₂:MeOH, 9:1, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu na novou polárnější látku, která po ochlazení na pokojovou teplotu krystalizuje. Výsledná tuhá látka krystalizuje z CH3CN k získání 6,75 g sloučeniny 17 (58 % ze sloučeniny 11): R_f = 0,45 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1); MS (DCI) (M+H)⁺ při m/z 983.

Krok 2: 11-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A (sloučenina 18, schéma 4)

Trimethylsilylether 17 (6,75 g, 6,87 mmol) obdržený v kroku 1 se rozpustí v 50 ml THF, nechá reagovat s 7,5 ml TBAF (1 M/THF, 7,5 mmol) a míchá při pokojové teplotě. Po 1 hodině TLC [CH₂Cl₂:MeOH, 9:1, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu na novou polárnější látku. Reakční směs se rozdělí mezi vrstvy EtOAc (300 ml) a 10% NaHCO3 (100 ml). Organická fáze se před sušením (Na₂SO4) a koncentrováním promyje vodou (2 x 300 • ·

ml) a solankou (200 ml). Výsledný zbytek se krystalizuje z CH3CN, čímž se získá 6,04 g sloučeniny 18 (97%):

R_f= 0,15 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1); MS (DCl) (M+H)⁺při m/z 911.

Krok 3: 3'-N-Desmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12cyklický karbamát erythromycinu A (sloučenina 19, schéma 4)

6,04 g Sloučeniny 18 (6,63 mmol) z výše uvedeného kroku se rozpustí v 60 ml methanolu a nechá reagovat s 4,52 g NaOAc*3H₂O (33,2 mmol) a 1,69 g I₂ (6,66 mmol). Roztok se ozařuje 500W halogenovou lampou, která udržuje reakci při refluxní teplotě. Po 3 hodinách TLC [CHC^MeOLLNFLtOH, 90:8:1] indikuje úplnou přeměnu na novou, polárnější látku. Přebytek I₂ se utlumí přidáním (po kapkách) 1M NaHSO3. Reakční směs se koncentruje a výsledný zbytek rozdělí mezi vrstvy CH₂C1₂ (300 ml) a H₂O (300 ml). Organická fáze se promyje NaHCO3 (nasyc.) (300 ml), solankou, suší (Na₂S04j, filtruje a koncentruje za získání 5,41 g (91%) sloučeniny 19: R_f = 0,15 (CHCl₃:MeOH:NH4OH, 90:8:1); MS (DCl) (M+H)⁺-při m/z 897.

Krok 4: 3'-N-Desmethyl-3'-Ň-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlorfenethylamino)]-6O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A (sloučenina 20, schéma 4)

5,40 g (6,03 mmol) Sloučeniny 19 se rozpustí v 50 ml methanolu a nechá reagovat s acetonem (7,0 g, 120 mmol), kyanoborohydridem sodným (454 mg, 7,23 mmol) a kyselinou octovou (přidává se po kapkách na pH 5-6) a směs se míchá při pokojové teplotě. Po 24 hodinách TLC [CHC^MeOH, 98:2, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu na novou, méně polární látku. Reakce se koncentruje a výsledný zbytek se rozdělí mezi vrstvy CH₂C1₂(300 ml) a vody (250 ml). Organická vrstva se před sušením (Na₂SO4), filtrováním a koncentrováním promyje NaHCO3 (nasyc.) (200 ml) a solankou (150 ml). Výsledný zbytek se čistí na sloupci silikagelu (mobilní fází CHCLiMeOHiNI-LOH, 90:8:1) a krystalizuje z acetonitrilu za získání 4,23 g (75%) sloučeniny 20: Rf = 0,80 (CHCLiMeOH-.NILibH, 90:8:1); MS (DCl) (M+H)⁺ při m/z 939.

Krok 5: 3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A (sloučenina 21, schéma 4)

1,6 g Sloučeniny 20 (1,7 mmol) se rozpustí v 50 ml methanolu a nechá reagovat s 1,16 g NaOAc*3H2O (8,5 mmol) a 0,48 g h (1,88 mmol). Roztok se ozařuje 500W halogenovou lampou, která udržuje reakci při refluxní teplotě. Po 3 hodinách TLC [CHCl3:MeOH:NH4OH, 90:8:1] indikuje úplnou přeměnu na novou, polárnější látku. Přebyktek I2 se utlumí přidáním (po kapkách) ÍM NaHSCL. Reakční směs se koncentruje a výsledný zbytek rozdělí mezi vrstvy CH2CI2 (300 ml) a NaHCCb (300 ml). Organická fáze se promyje NaHCO3 (nasyc.) (300 ml), solankou, suší (Na2SO4), filtruje a koncentruje za získání 1,13 g (71%) sloučeniny 21: R_f = 0,50 (CHCl₃:MeOH:NH₄OH, 90:8:1); MS (DCI) (M+H)⁺při m/z 925.

Krok 6: 3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklobutyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A (sloučenina 22, schéma 4)

110 mg (0,119 mmol) Sloučeniny 21 z výše uvedeného kroku se rozpustí v 50 ml methanolu a nechá reagovat s cyklobutanonem (1,0 g, 14,3 mmol), kyanoborohydridem sodným (15 mg, 0,24 mmol) a kyselinou octovou (přidává se po kapkách na pH 5-6) a směs se míchá při pokojové teplotě. Po 72 hodinách TLC [CHCh.MéOH, 98:2, Ce (TV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu na novou, méně polární látku. Reakce se koncentruje a výsledný zbytek se rozdělí mezi vrstvy EtOAc (100 ml) a vody (100 ml). Organická vrstva se před sušením (Na2SO4), filtrováním a koncentrováním promyje solankou (50 ml). Výsledný zbytek se čistí na sloupci silikagelu (mobilní fáze CHCl3:MeOH:NH4OH (90:8:1)), čímž se získá 65 mg (56%) sloučeniny 22: R_f = 0,95 CHC1₃: MeOIENILfOH, (90:8:1); MS (ESI)(M+H)⁺ při m/z 979; HRMS m/z (M+H)⁺ vypočtená 979,5662. Zjištěno 979,5660; Analyticky vypočteno pro C₅2H₈3ClN₂Oi3: C, 63,75; H, 8,53; N, 2,85. Zjištěno; C, 63,48; H, 8,71 ;N, 2,79.

Příklad 6 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3'-N-izopropyl-3'-N-propyl-14-deoxy-11 -[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 5 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí propionaldehyd za cyklobutanon: Rf = 0,35 (CHC^MeOPkNEhOH, 90:8:1); MS (ESI)(M+H)⁺ při m/z 967

Příklad 7

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-izoproyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 5 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí cyklopropankarboxaldehyd za cyklobutanon: Teplota tání 211-213 °C (CH₃CN); R_f = 0,85 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1); MS (FAB)(M+H)⁺ při m/z 979; HRMS m/z (M+H)⁺ vypočtená 979,5662. Zjištěno 979,5659: IR (KBr) v 3440, 2965, 2930, 1760, 1735, 1715, 1460,1380, 1235, 1170, 1090,1065,1055,1015 cm’¹; ¹³C NMR (CDC1₃) δ 216,4,

176,4, 157,2, 137,4, 131,8, 130,3, 128,4, 103,0, 95,9, 82,7, 80,2, 78,8, 77,9, 77,7, 76,2, 72,6,

70,5, 69,1, 65,7, 60,3, 59,6, 50,7,49,5,49,2,47,5,45,6,45,2, 45,0, 39,0, 38,9 (2C), 34,8, 34,3,32,8, 22,9,21,9,21,5,21,4, 20,2, 18,9,18,6,16,0,14,2, 14,1,11,1, 10,3,9,0, 5,7,2,5: Analyticky vypočteno pro C₅₂H₈5ClN₂Oi3: C, C, 63,75; H, 8,53; N, 2,85. Zjištěno : C, C 63,45; H, 8,36; N, 2,72.

Příklad 8 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3'-N-ethyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 5 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí acetaldehyd za cyklobutanon: Teplota tání 225-229°C (CH3CN/H₂O): Rf = 0,70 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1); MS (ESI)(M+H)⁺ při m/z 953; IR (KBr) v 3440, 2960,2930, .

1760,1735,1715,1460,1380, 1235,1170,1100,1090,1065,1055,1015 cm’¹; ¹³CNMR (CDC1₃) δ 216,2,176,3,157,2, 137,5,131,9,130,3,128,5,103,0, 96,0, 82,7, 80,2, 78,9, 77,9,

77,8, 76,3, 72,7, 70,6, 69,1, 65,8, 60,4, 59,9, 50,7,49,5,47,9,45,6,45,3, 45,0, 39,1, 39,0 (2C), 38,2, 34,9, 34,5, 32,9, 22,9, 21,9, 21,5, 21,4, 20,1, 19,0, 18,9, 18,7, 15,9, 15,7, 14,2,

14,1,10,3,8,9.

Příklad 9 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklobutylmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(4-chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 5 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí cyklobutylkarboxaldehyd za aceton a cyklopropankarboxaldehyd za cyklobutanon: R_f = 0,65 (CH₂Cl₂:MeOH, 9:1); MS (APCI)(M+H)⁺ při m/z 1005; IR (KBr) v 3440, 2970, 2930, 1760, 1735, 1710, 1460, 1580, 1380, 1235, 1170, 1100, 1090, 1065, 1055,

1015 cm’¹; ¹³C NMR (CDClj) δ 216,2, 176,3, 157,1, 137,4, 131,8, 130,3, 128,4, 103,0, 95,9,

82.7, 80,2, 78,8, 77,9, 77,7, 76,2, 72,6, 70,4, 69,0, 65,7, 62,0, 60,3, 55,4, 54,9, 50,6, 49,4,

45,5, 45,2, 44,9, 39,0 (2C), 38,9, 34,8, 34,3, 32,8, 30,1, 27,0, 26,6, 21,9, 21,5, 21,4, 20,1,

18.8, 18,6, 18,5, 16,0, 14,2, 14,1, 10,3, 10,2, 8,9, 5,4, 2,6.

Příklad 10 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-N-biscyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4methoxyfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 1 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 4-methoxyfenethylamin za 3,4-dichlorfenethylamin. Produkt se krystalizuje z CH₃CN/H₂O: R_f =0,53 (8% MeOH/DCM, 0,1% NH4OH): IR (KBr) v 3440, 2965, 2935, 1755, 1735, 1705, 1610, 1515, 1455, 1380, 1325, 1250, 1235, 1165, 1110, 1070, 1050, 1010, 1000 cm'¹; ŇMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,24 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,83 (d, J =

8,8 Hz, 2H), 4,98 (dd, I = 10,9, 2,4 Hz, IH), 4,92 (d, J = 4,4 Hz, 1 H), 4,49 (d, J = 67,2 Hz, 1 H), 4,08-3,97 (m, 1 H), 3,90-3,78 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,73 (s, 2H), 3,66 (d, J =7,2 Hz, IH), 3,55-3,44 (m, IH), 3,33 (s, 3H), 3,18-3,10 (m, 2H), 3,09 (s, 3H), 3,07-2,78 (série m, 5H), 2,70-2,56 (série m, 3H), 2,37 (d, J = 15,3 Hz, 1 H), 2,21 (d, J = 7,1 Hz, IH), 2,17 (d, J = 6,8 Hz, IH), 2,13 (d, J = 10,2 Hz, IH), 2,02-1,86 (m, 2H), 1,77 (d, J = 6,5 Hz, IH), 1,68-1,46 (série m, 4H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,30 (d, J =6,1 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,22 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,14 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,92-0,78 (série m, 2H), 0,83 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 0,60-0,53 (m, 2H), 0,50-0,41 (m, 2H), 0,16-0,08 (série m, 4H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 216,1,176,2,158,1,157,2,

131,0, 129,9, 113,8, 103,1, 95,9, 82,6, 80,3, 78,8, 77,9, 77,8, 76,3, 72,6, 70,4, 69,0, 65,7, 61,7,

60,4, 55,2, 54,5, 50,7, 49,5, 45,5, 45,4, 45,3, 39,0, 34,8, 32,6, 30,3, 22,0, 21,5, 21,5, 20,2,

18,9, 18,6, 16,0, 14,3, 14,1, 10,4, 10,3, 9,0, 5,5, 2,7; MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 987;

Analyticky vypočteno pro C54H₈₆N₂Oi4*0,4 H₂O: C, 65,22; H, 8,80; N, 2,82. Zjištěno : C, 65,23; H, 8,52; Ň, 2,74.

Příklad 11

3',3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-ll-deoxy-ll-[karboxy-(4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 1 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 4-fluorfenethylamin za 3,4-dichlorfenethylamin. Produkt se izoluje na sloupci silikagelu (mobilní fáze 3% MeOH/DCM / 0,2% NH4OH) ve formě amorfní tuhé látky: Teplota tání 207-210°C (rozkl.): IR (KBr) v 3440, 2960, 2930, 2870, 2820, 1755, 1730, 1710, 1505, 1455, 1420, 1375, 1325, 1280, 1230, 1220, 1165, 1125, 1105, 1075, 1065, 1050, 1010, 995 cm¹: ’H NMR (300 MHz, CDClj) δ 7,32-7,25 (série m, 2H), 6,99-6,93 (série m, 2H), 4,98-4,92 (série m, 2H), 4,49 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 4,06-4,00 (m, 1 H), 3,87-3,80 (m, 2H),

3,75 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 3,72 (s, 1 H), 3,66 (d, J = 7, 1 Hz, 1 H), 3,53-3,44 (m, 1 H), 3,34 (s, 3H), 3,19-3,11 (m, 2H), 3,08 (s, 3H), 3,07-2,81 (série m, 5H), 2,68-2,56 (série m, 3H), 2,38 (d, J = 15,3 Hz, IH), 2,23-2,12 (série m, 3H), 1,98-1,83 (m, 2H), 1,79-1,75 (m, 2H), 1,68-1,48 (série m, 5H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), l,3t) (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,23 (d, J = 5,4 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,16 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,14 (d, J = 7,4 Hz, 3H), 1,03 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,92-0,81 (série m, 2H), 0,83 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 0,62-0,52 (m, 2H), 0,51-0,42 (m, 2H), 0,16-0,08 (série m, 4H); ¹³C NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 216,2, 176,3, 157,2, 134,7,

130,4, 130,3, 115,2, 114,9,103,2, 96,0, 82,7, 80,3; 78,9,78,0, 77,8,76,3, 72,7, 70,5, 69,1,

65,8, 61,8, 60,5, 54,6, 50,7, 49,5, 45,5, 45,3, 45,2, 39,1, 39,1, 39,0, 34,9, 32,7, 30,4,22,0,

21,5, 20,2, 18,9, 18,6,16,0, 14,3, 14,1,10,4, 10,3, 9,0, 5,5,2,7;MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 975.

Příklad 12 .3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-N-biscyklobutyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4-chlor-3flu6rfenethylamino)]-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z-příkladu 2 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 4-chlor-3-fluorfenethylamin za 3,4-dichlorfenethylamin. Produkt se izoluje na sloupci silikagelu (mobilní fáze 3% MeOH/DCM / 0,2% NH4OH) ve formě amorfní tuhé látky: R_f = 0,43 (8% MeOH / DCM, 0,1 % NH4OH); IR (KBr) v 3440, 2970, 2940, 2880, 1760, 1735, 1710, 1580, 1495, 1460, 1425, 1380, 1330, 1285, 1240, 1170, 1105, 1070, 1055, 1015, 1000 cm'; *H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,32-7,26 (m, IH), 7,16 (dd, J =

10,2, 2,1 Hz, 1 H), 7,07 (dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1 H), 4,93-4,88 (m, 2H), 4,40 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 4,06-3,96 (m, 1 H), 3,91-3,70 (série m, 3H), 3,69 (s, 1 H), 3,64 (d, J = 7,1 Hz, IH), 3,513,41 (m, IH), 3,34 (s, 3H), 3,30-3,08 (série m, 4H), 3,06 (s, 3H), 3,06-2,82 (série m, 5H), 2,68-2,56 (m, 1 H), 2,55-2,44 (m, 1 H), 2,37 (d, J = 14,9 Hz, 1 H), 2,10 (d, J = 10,5 Hz, 1 H), 2,08-1,81 (série m, 9H), 1,79-1,72 (m, 2H), 1,68-1,46 (série m, 9H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s,

3H), 1,29 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,22 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 5,8 Hz, 3H),

1,15 (d, J - 7,8 Hz, 3H), 1,12 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,82 (t, J = 7,5 Hz,

3H); ^I3C NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 216,4, 176,4, 157,2, 140,0, 139,9, 130,3, 125,4, 117,3, 117,0, 103,4, 96,0, 82,8, 80,3, 78,9, 77,9, 77,7, 76,2, 72,6, 70,8, 69,2, 65,7, 60,3, 58,8, 54,4, 50,7, 49,5, 45,6, 45,2, 44,8, 39,0 (2C), 38,9, 34,8, 32,8, 32,5, 31,2, 30,1, 21,9, 21,5, 20,1,

18,9, 18,6, 16,0, 15,7, 14,2, 14,1, 10,2, 9,0; MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 1009; Analyticky vypočteno pro C₅₃H₈₂C1FN₂Oi₃: C, 63,05; H, 8,19; N, 2,77. Zjištěno: C, 63,06: H, 8,50; N, 2,68.

Příklad 13

3', 3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-11-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlor-3fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 1 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 4-chlor-3-fluorfenethylamin za 3,4-dichlorfenethylamin. Produkt se izoluje chromatografii na sloupci silikagelu (3% MeOH/DCM /0,2% NH4OH) ve formě amorfní tuhé látky: R_f = 0,44 (8% MeOH / DCM + 0,1 % NH4OH); IR (KBr) v 3440, 2970, 2940, 2880, 1760, 1735, 1715, 1585, 1495, 1460, 1425, 1380, 1330, 1285, 1240, 1170, 1125, 1110, 1090, 1070, 1055, 1015, 1000 cm'¹; *H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,32-7,26 (m, IH),

7,16 (dd, J = 1.0,2, 2,1 Hz, 1 H), 7,07 (dd, J = 8,1,1,3 Hz, 1 H), 4,94-4,88 (m, 2H), 4,49 (d, J ’ = 6,8 Hz, 1 H), 4,08-3,98 (m, 1 H), 3,92-3,78 (m, 2H), 3,74 (d, J = 9,8 Hz, 1 H), 3,70 (s, 1

H), 3,66 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 3,54-3,43 (m, 1 H), 3,33 (s, 3H), 3,20-3,07 (m, 2H), 3,06 (s„

3H), 3,05-2,82 (série m, 5H), 2,70-2,56 (m, 3H), 2,34 (d, J = 15,6 Hz, IH), 2,24-2,lOýsérie m,

3H), 1,98-1,84 (m, 2H), 1,80-1,72 (m, 2H), 1,71-1,46 (série m, 5H), 1,42 (s, 3H), l,40 (s, 3H),

1,30 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,22 (d, J = 57,1 Hz, 3H), 1,21 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,16 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,13 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,91-0,78 (série m, 2H),

0,82 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,63-0,52 (m, 2H), 0,52-0,41 (m, 2H), 0,18-0,08 (série m, 4H); ¹³C

NMR (75 MHz, CDClj) δ 216,4, 176,4, 159,7, 157,2, 156,3, 140,0, 139,9, 130,3, 125,4,

117,3, 117,0, 103,1, 96,0, 82,8, 80,2, 78,9, 77,9, 77,7, 76,2, 72,6, 70,4, 69,1,65,8,'61,7, 60,3,

54,5, 50,7, 49,5, 45,6, 45,3, 44,8, 39,0 (2C), 34,8, 32,8, 30,2, 21,9, 21,5, 20,2, 18^, 18,6,

16,0, 14,2, 14,1, 10,4, 10,2, 9,0, 5,5 (2C), 2,7 (2C); MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 1009; Analyticky vypočteno pro C₅₃H₈₂C1iFiN₂Oi₃*0,2 C6Hi₄*0,2 H₂O: C, 63,17; H, 8,33; N, 2,72. Zjištěno: C, 63,02; H, 8,63; N, 2,63.

Příklad 14

3',3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l l-deoxy-ll-[karboxy-(3-chlor-4fluorfenethylamino)]-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 2 s výjimkou, spočívající v tom, že se nahradí 3-chlor-4-fluorfenethylamin za 3,4-dichlorfenethylamin: *H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,39 (dd, J = 2, 7 Hz, 1 H, Ar H), 7,22 -7,19 (m, 1 H, Ar H), 7,04 (dd, J = 9 Hz, 1 H, Ar H), 4,41 (d, J = 7 Hz, 1 H, C-1' CH), 4,03 - 4,00 (m, 1 H, C-5 CH), 3,74 (d, J =

Hz, 1 H, C-3 CH), 3,70 (s, 1 H, C-11 CH), 3,65 (d, J = 7 Hz, 1 H, C-5 CH), 3,47-3,44 (m, 1H, C-5' CH), 3,34 (s, 3H, C-3 OCH₃), 3,08 (s, 3H, C-6 OCH₃), 2,64 -2,63 (m, 1 H, C-8 CH), 2,37 (d, J = 15 Hz, 1H, C-2 CH), 2,10 (d, J = 10 Hz, 1 H, C-4 OH), 1,43 (s, 3H, C-6 CH₃), 1,40 (s, 3H, C-12 CH₃), 1,30 (d, J = 6, 3H, C-6 CH₃), 1,15 (d, J = 7 Hz, 3H, C-2 CH₃), 1,13 (d, J = 7 Hz, 3H, C-4 CH₃), 1,03 (d, J = 7 Hz, 3H, C-10 CH₃), 0,83 (t, J = 7 Hz, 3H, C-15 CH₃); ¹³C NMR (CDCb) δ 216,3, 176,3, 157,7, 157,2, 155,8, 136,0, 136,0, 131,0, 128,6,

128,5,116,4, 116,2, 103,0, 96,0, 82,8,-80,3, 78,9, 77,9,77,8,-76,2, 72,6, 70,8, 69,2, 65,7, 60,3,

58,8, 54,3, 50,7,49,5,45,6,45,2, 45,0, 39,0, 39,0, 38,9, 34,8, 32,5, 32,5,31,2, 30,0,21,9,

21,5, 20,1, 18,9, 18,6, 16,0,15,6, 14,2, 14,1, 10,2, 8,9; MS (ESI) (M+H)⁺ při m/z 1009; Analyticky vypočteno pro C5₃Hs2ClFN20i₃: C, 63,05: H, 8,19;_N, 2,77. Zjištěno : C, 62,89; H, 8,14; N, 2,81.

Příklad 15 ',3 '-N-Bisdešmethyl-3 ',3 '-N-biscyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 -čhlor-4fluoryfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 1 s výjimkou, spočívající v tom, že se nahradí 3-chlor-4-fluorfenethylamin za 3,4-dichlorfenethylamin: ^!H NMR (300 MHz, CDCb) δ 7,40 (dd, J = 2, 7 Hz, 1 H), 7,23 - 7,20 (m, 1 H), 7,05 (dd, J = 9 Hz, 1 H), 4,95 - 4,91 (série m, 2H), 4,50 (d, J = 7 Hz, 1 H), 4,06 - 4,02 (m, 1 H), 3,90 - 3,78 (série m, 2H), 3,76 (d, J = 10 Hz, I H), 3,71 (s, 1 H), 3,67 (d, J = 7 Hz, 1 H), 3,51 - 3,41 (m, 1 H), 3,34 (s, 3H), 3,17 - 3,12 (série m, 2H), 3,08 (s, 3H), 3,05 - 2,84/série m, 5H), 2,67 -2,60 (série m, 3H), 2,39 (d, J = 15 Hz, 1 H), 2,23 - 2,19 (série m, 2H), 2,13 (d, J = 10 Hz, 1H), 1,95 - 1,87 (série m, 2H), 1,80 -1,77 (série m, 2H), 1,66 - 1,52 (série m, 4H), 1,44 (s, 3H), 1,40 (s, 3H),

1,31 (d, J = 6 Hz, 3H), 1,26 (s, 3H), 1,24-1,21 (série m, 6H), 1,17-1,14 (série m, 6H), 1,03 (d, J = 7 Hz, 3H), 0,84 (t, J = 7 Hz, 3H), 0,60 - 0,56 (m, 2H), 0,49 - 0,45 (m, 2H), 0,14 - 0,12 (série m, 4H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCb) δ 216,3, 176,3, 157,8, 157,2, 155,8, 136,0, 131,0, 128,6, 128,5, 116,4, 116,2, 103,1, 96,0, 82,8, 80,3, 78,9, 77,9, 77,8, 76,3, 72,7, 70,6, 69,1,

65,8, 61,8, 60,4, 54,5, 50,7, 49,5, 45,6, 45,3, 45,0, 39,1, 39,0, 34,9, 32,5, 30,3, 21,9, 21,5,

20,2, 18,9, 18,6, 16,0, 14,2, 14,1, 10,4, 10,2, 9,0, 5,5, 2,7; MS (ESI) (M+H)⁺ při m/z 1009; Analitycky vypočteno pro C53H₈2ClFN₂O3-0,25(CH₂Cl2): C, 62,04; H, 8,06; N, 2,71. Zjištěno: C, 62,44; H, 8,34; N, 2,66.

Příklad 16 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopentvl-3'-N-cyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 5 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí cvklopentanon za aceton, cyklopropylkarboxaldehyd za cyklobutanon a

4-fluor-3-chlorfenethylamin za 4-chlorfenethylamin: MS (ESI) (M+H)⁺ při m/z 1095.

Příklad 17

3',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-N-biscyklopropylmethyl-11 -deoxy-1 l-[karboxy-(3,4difluorfenethylamino)]-6-O-methyl-ll,12-cyklicky karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 1 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 3,4-difluorfenethylamin za 3,4-dichlorfenethylamin. Produkt se krystalizuje z CH₃CN/H₂O: Teplota tání = 209-211°C (CH₃CN/H₂O); IR (KBr) v 3442, 2972, 2938,2883,2831, 1761,1735, 1711, 1609,1519, 1458,1424, 1379, 1326, 1282, 1235, 1211, T167, 1126, 1106, 1089, 1067, 1052, Í012, 1000 cm¹; ’ll NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,22 7,03 (série m, 3H), 4,95 - 4,90 (série m, 2H), 4,49 (d, J = 7, 1 Hz, 1 H), 4,09-3,97 (m, 1 H), 3,92-3,79 (m, 2H), 3,74 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 3,70 (s, 1 H), 3,66 (d, J = 7,5 Hz, IH), 3,54-3,44 (m, IH), 3,34 (s, 3H), 3,18-3,11 (m, 2H), 3,10-2,80 (série m, 5H), 3,07 (s, 3H), 2,68-2,57 (m, 3H), 2,38 (d, J = 15,2 Hz, 1 H), 2,23-2,15 (m, 2H), 2,14 (d, J= 10,2 Hz, IH), 1,98-1,74 (série m, 4H), 1,71-1,47 (série m, 4H), 1,43 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,30 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,23 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,21 (ď, J = 6,1 Hz, 3H), 1,16 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,14 (d, J =

7,1 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 0,91 - 0,80 (série m, 2H), 0,83 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,62 0,52 (m, 2H), 0,51 - 0,41 (m, 2H), 0,17-0,07 (série m, 4H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ

216,29, 176,37, 157,19, 152,5 - 146,5 (m, 2C), 136,5-135,5 (m, 1 C), 125,0 - 124,7 (m, 1 C),

117,9 -116,8 (m, 2C), 103,16, 96,02, 82,78, 80,29, 78,94, 77,96, 77,83, 76,27, 72,68, 70,49, 69,08, 65,81, 61,81, 60,44, 54,55 (2C), 50,64, 49,48, 45,59, 45,33, 45,03, 39,12, 39,05, 39,02, 34,89, 32,71, 30,37, 21,97, 21,52, 21,49, 20,18, 18,88, 18,65, 16,01, 14,22, 14,12, 10,40,

10,23, 9,00, 5,48 (2C), 2,69 (2C); MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 993; Analyticky vypočteno pro C₅₃H₈₂F₂N₂Oi₃*0,2 H₂0: C, 63,86; H, 8,33; N, 2,81. Zjištěno : C, 63,87; H, 8,29; N, 2,80.

Příklad 18 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l l-deoxy-ll-[karboxy-(3,4difluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 2 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 3, 4-difluorfenethylamin za 3,4-dichlorfenethylamin. Produkt se krystalizuje z CH₃CN/H₂O: Teplota tání 220-222°C (CH3CN(H₂O); IR (KBr) v 3446, 2977, 2938, 2883, 1745, 1734, 1713, 1607, 1518, 1459, 1425, 1378, 1327, 1284, 1236, 1168, 1103, 1094, 1070, 1055, 1013, 1001 cm’¹; ’H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,23-7,03 (série m, 3H),

4,94-4,89 (série m, 2H), 4,46 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 4,07-3,97 (m, 1 H), 3,92-3,78 (série m, 2H), 3,75 (d, J = 9,1 Hz, ÍH), 3,70 (s, ÍH), 3,67 (d, J = 7,8 Hz, ÍH), 3-;54-3,44 (m, ÍH), 3,33 (s, 3H), 3,24-3,11 (m, 2H), 3,10-2,80 (série m, 5H), 3,07 (s, 3H), 2,68 - 2,55 (m, 2H), 2,472,40 (m, ÍH), 2,37 (d, J= 15,2 Hz, ÍH), 2,31 (s, 3H), 2,31-2,19 (m, ÍH), 2,15 (d, J = 10,1 Hz, ÍH), 1,98-1,72 (série m, 4H), 1,68 - 1,46 (série m, 4H), 1,43 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,30 (d, J =

6,1 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,22 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,22 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 7,4 Hz, 3H), 1,13 (d, J = 7,5 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,89 - 0,78 (m, ÍH), 0,83 (t, J =

7,3 Hz, 3H), 0,58-0,46 (m, 2H), 0,15 - 0,07 (m, 2H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCb) δ 216,35, 1-76,43, 157,20, 152,5-146,5 (m, 2C), 136,5-135,5 (m, IQ, 125,0-124,7'(m, IC), 117,9116,8 (m, 2C), 103,02/96,13, 82,77, 80,19, 78,94, 77,92, 77,89, 76,26, 72,63, 70,55, 68,96, 65,78, 64,61, 60,34, 58,59, 50,67, 49,49, 45,56, 45,30, 44,99, 39,09 (2C), 39,01, 36,91, 34,85, 32,69, 29,42, 21,93, 21,49, 20,18, 18,89, 18,68, 16,03, 14,23, 14,13, 10,25,10,04, 9,01, 4,41, 3,36; MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 953; Analyticky vypočteno pro C5oH7₈F₂N₂Oi₃: C, 63,01; H, 8,25; N, 2,94. Zjištěno: C, 63,08; H, 8,28; N, 2,89.

Příklad 19 ',3'-N-B isdesmethyl-3 ’-N-cyklobutyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-0-methyI-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A (sloučenina 25, schéma 5)

Roztok 140 mg (0,16 mmol) sloučeniny 23, připravený podle způsobu z příkladu 5 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 3-chlor-4-fluorfenethylamin za 3,4dichlorfenethylamin, se rozpustí v 5 ml methanolu a nechá reagovat s cyklobutanonem (20

mg, 0,29 mmol), kyanoborohydridem sodným (40 mg, 0,65 mmol) a kyselinou octovou (na pH 5 - 6) a směs se míchá při pokojové teplotě. Po 48 hodinách TLC [CHCb MeOH, 98:2, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu na novou, méně polární látku. Reakční směs se koncentruje a výsledný zbytek se rozdělí mezi vrstvy ethylacetátu (150 ml) a NaHCO₃(nasyc.) (150 ml). Organická vrstva se před sušením (Na₂SO4), filtrováním a koncentrováním promyje NaHCOí (nasyc.) (2 x 150 ml) a solankou (100 ml). Výsledný zbytek se čistí na sloupci silikagelu (mobilní fází CHCb:MeOH, 9: l)7ři získání 135 mg sloučeniny 24 (8^/o): MS (FAB)(M+H)⁺ při m/z 955.

Roztok 135 mg (0,14 mmol) sloučeniny 24 se rozpustí ve 4 ml methanolu a nechá reagovat s cyklopropankarboxaldehydem (20 mg, 0,29 mmol), kyanoborohydridem sodným (140 mg, 2,3 mmol) a kyselinou octovou (pH 5 - 6) a směs se míchá při pokojové teplotě. Po 48 hodinách TLC [CHCl₃:MeOH, 98:2, Ce (IV) vizualizace] indikuje úplnou přeměnu na novou, méně polární látku. Reakce se koncentruje a výsledný zbytek se rozdělí mezi vrstvy ethylacetátu (100 ml) a NaHCCb (nasyc.) (100 ml). Organická vrstva se před sušením (Na2SO4), filtrováním a koncentrováním promyje NaHCO₃ (nasyc.) (2 x 150 ml) a solankou (100 ml). Výsledný zbytek se čist í na sloupci silikagelu (mobilní fáze CHCb:MeOH, 9:1), čímž se získá sloučenina 25: MS (FAB)(M+H)⁺ při m/z 997; Analytičky vypočteno pro C₅2H₈₂C1FN₂Oi₃: C, 63,05; H, 8,19; N, 2,77. Zjištěno: C, 62,92: H, 8,13; N, 3,07.

Příklad 20

3',3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-bis-[3-(2-pyridyl)-propyl]-ll-deoxy-ll-[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 1 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 3-(2-pyridyI)propanal za cyklopropankarboxaldehyd. Surový produkt se čistí na sloupci silikagelu (mobilní fáze CHCb až MeOH:CHCl₃, 2:98), čímž se získá amorfní tuhá látka. IR (MIC) v 2970, 2938, 1758, 1734, 1458, 1423, 1168, 1128, 1104, 1067, 1053, 1012, 997 cm’¹, ¹³C (CDCb) δ 216,34, 176,43, 157,23, 149,68, 147,47, 139,35, 135,86, 132,20, 131,06, 130,30, 128,45, 102,92, 96,23, 82,86, 80,40, 78,92, 78,17, 77,85, 76,26,

72,89, 70,77, 68,89, 65,91, 62,59, 60,36, 50,72, 49,58, 49,27, 45,59, 45,30, 44,84, 39,02, 35,01, 32,66, 30,67, 30,56, 30,40, 21,46, 21,41, 20,21, 18,94, 18,75, 16,07, 14,22, 14,17,

10,28, 9,14, MS (APCI) při m/z 1157 (M+H)⁺.

Příklad 21

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-4-hydroxymethyl-(2-furyl)methyl-l 1deoxy-1 l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 19 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí sloučenina 15 za sloučeninu 23 a 4-hydroxymethyl-2furaldehyd za cyklobutanon: MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 1153.

Příklad 22

3',3'-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-[3 -(4-pyridyl)propyl]-11 -deoxy-11[karboxy-(3,4-dichlorfenethylammol]-6-Ó-methyl-erythromcyinu A r

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 21 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 3-(4-pyridyl)-propanal za 4-hydroxymethyl-2-furaldehyd. Surový produkt se čistí na sloupci silikagelu (CHCI3 až MeORCHCh, 2:98), čímž se získá krystalická tuhá látka: Teplota tání 115-6°C; IR (film) v 3442,2970,2937, 1755, 1458, 1168, 1067, 1053, 1011 cm'¹; ¹³C NMR (CDC1₃) δ 216,28,176,33,157,17, 151,13, 149,49, 139,27, 132,16, 131,02, 130,25, 130,12, 128,38, 123,82, 102,94, 96,04, 82,80, 80,33, 78,87, 77,87, .

77,81, 76,25, 72,69, 70,60, 68,94, 65,78, 62,50, 60,34, 55,14, 50,65, 49,47, 48,9Γ, 45,54, 45,27,44,79, 39,08, 38,99, 34,83, 32,91, 32,61,30,46,29,67,21,90, 21,46, 2Í,44, 20,17-, 18,89, 18,65, 16,03, 14,18, 14,12, 10,23, 9,04, 8,51, 5,38, 2,88; MS (APCI) (M+H)⁺ při m/z 1090.

Příklad 23 ',3 '-N-Bisdesmethýl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(4-hydroxymethyl-2-furyl)methyI-l 1deoxy-1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 19 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 4-hydroxymethyl-2-furaldehyd za cyklobutananon: MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 1137.

Příklad 24

3',3'-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-(2-furyl)methyl-11 -deoxy-11 -[karboxy(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 19 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí furaldehyd za cyklobutanon: MS (FAB) (M+H)⁺při m/z 1107.

Příklad 25 ',3 '-N-B isdesmethy 1-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-(6-methyl-2-pyridyl)methyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylaminol]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 19 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 6-methyl-2-pyridylkarboxaldehyd za cyklobutanon: MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 1132.

Příklad 26

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-bis-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 -[kařboxy-(3 -chlor4-fluorfenethylaminol)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 15 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 1-methyl cyklopropankarboxaldehyd ža cyklópropankárboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 1036.

Příklad 27 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-N-bis-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 1 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 1-methylcyklopropankarboxaldehyd za cyklopropankarboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 1052.

Příklad 28

3^,,3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-(l-methylcyklopropyl)methyl-3^,-N-cyklopropylmethyl-l 1-deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

• ·

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 19 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 1-methylcyklopropankarboxaldehyd za cyklobutanon: MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 1022.

Příklad 29

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-(l-methylcyklopropyl)methyl-3'-N-cyklopropylmethyl-ll-deoxy1 l-[karboxy-(3,4-dichlorofenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 28 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí 3,4-dichlorfenethylamin za 3-chlor-4-fluorfenethylamin: MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 1038.

Příklad 30- : _ _r ',3 '-N-BisdesmethyI-3 '-N-izopropyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 28 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí aceton za 1-methylcyklópropankarboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺při m/z 996.

Příklad 31

3', 3'-N-Bisdesmethyl-3 '-N-izopropyl-3 '-N--11-deoxy-l l-[karboxy-(3,4m/z 1010.

dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 29 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí aceton za 1-methylcyklopropankarboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 1012.

Příklad 32 _

3', 3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-izopropyl-3'-N-l l-methylcyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 28 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí aceton za cyklopropankarboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺ při • * · • t · ·

Příklad 33 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3'-N-izopropyl-3'-N-(l-methylcyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 29 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí aceton za cyklopropankarboxaldehyd: MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 1026.

Příklad 34

3',3'-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropyl-3 '-N-izopropyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4chloryfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 5 s výjimkou spočívající v tom, že se nahradí [(l-ethoxycyklopropyl)oxy]trimethylsilan zacyklobutanon; MS (FAB) (M+H)⁺ při m/z 965.

Příklad 35- 60

Sloučenina v příkladech 35 -60 znázorněné v tabulce 3 se připraví podle způsobů popsaných ve výše uvedených příkladech.

φ ·

37	F, Cl	Ty N 1
38	Cl, Cl	Ty N !
39	F, Cl	Y _±
...		’ U-OH
40	Cl, Cl	N ''S ti ''^OMe ’ uu
	-
41	F, Cl	xx
42	Cl, Cl	XX
43	F, Cl
44	Cl, Cl	Xp
45	F, Cl	«Χγ^ν
46	Cl, Cl	pX^uv

• · · · · · · • · · · · · « ··· · · · ·

47	F, Cl	t^. N 1
48	CI, CI	t^ !
49	F, CI	tr N I
50	CI, Cl	tr !
51	F, Cl	tt !
52	CI, Cl	tt Ϊ
53	F, Cl
54	Cl, Cl
55	F, Cl
56	CI, Cl
57	F, Cl

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY (I), nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo estery, kde

A je vybráno ze skupiny sestávající z:

(a) -C, (b) -N, a (c) -O; ' ,

X a Y jsou nezávisle v každém případě vybrány ze skupiny sestávající z:

(a) atomu vodíku, (b) halogenidu, (c) trifluormethylu, (d) alkoxy skupiny, (e) alkylu, (f) arylu, a (g) substituovaného arylu; R a R' jsou vybrány ze skupiny sestávající z:

(a) alkylu, (b) cykloalkylu, (c) heterocyklu, (d) substituovaného heterocyklu, (e) alkylcykloalkylu, • · (f) substituovaného alkylcykloalkylu, (g) alkylarylu, (h) alkylheterocyklu, (i) alkenylu, (j) alkynylu, (k) -C(S)-NHR4, C(NR4)-NHR4, kde substituent R4 je atom vodíku, alkyl nebo aryl; a (l) -(CH₂)n-C(CH2)m-R5, kde index m je 2, 3, 4 nebo 5 a substituent R5 je alkyl, alkoxy skupina, aryl nebo substituovaný aryl;

substituenty R₂ a R3 jsou nezávisle v každém případě (a) atom vodíku, (b) methyl, nebo substituenty R₂ a R3 společně vytvoří cyklickou část, pokud A je C;

substituent R₃ není přítomen, pokud A je N; a index n = 1, 2 nebo 3.
2. Sloučenina podle nároku 1, kde substituenty R a R' jsou alkyl, alkenyl, cykloalkyl, heterocykl, (heterocykl)alkyl nebo álkylcykloalkyl; X a Y jsou nezávisle chlor, fluor, dioxalano, vodík nebo alkoxy; A je -C; substituenty R₂ a R3 jsou atom vodíku nebo cyklopropyl a index n je 1.
3. Sloučenina vybraná ze skupiny sestávající se z:

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-N-biscyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-N-biscyklobutyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l 1 -[karboxy-(4-chlorfenethylamino)]6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

• ·

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklobutyl-3 '-N-izopropyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4chlorofenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-izopropyl-3 '-N-propyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3', 3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-ethyl-3'-N-izopropyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4chlorfenethylamino)]-6-O-methy 1-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklobutylmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-11 -deoxy-11[karboxy-(4-chlorfenethylaminó)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3',3 '-N-biscyklopropyhnethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4methoxyfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-N-biscyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlor-3fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3', 3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscýklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(4-chlor-3fIuorfenethylamino)]-6-O-methyM 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-N-biscyklobutyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 -chlor-4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlor-4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopentyl-3'-N-cyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3chlor-4-difluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklícký karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-biscyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4difluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-N-biscyklobutyl-11 -deoxy-11 -fkarboxy-(3,4difluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-BisdesmethyI-3'-N-cyklobutyl-3'-N-cyklopropylmethyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-N-bis[3 -(3 -pyridyl)propyl] -11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 -chlor-4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-bis-cyklopropylmethyl-3'-N-(4-hydroxymethyl-2-furyl)methyl-lldeoxy-1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bišdesmethyi-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-3-(4-pyridyl)propyl]-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3 -chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3',3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-[4-(hydroxymethyl-2-furyl)]-methyl11-deoxy-l í-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-(2-furyl)methyl-11 -deoxy-11 -[karboxy(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-[6-methyl-(2-pyridyl)]methyl-l 1-deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3 -N-bis-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-1 l-[karboxy-(3-chlor4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-bis-(l-methylcyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-( 1 -methyl cyklopropyl)methyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A; 3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát - erythromycinu A;

3 ',3'-N-Bisdesmethyl-3 '-N-izopropyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-izopropyl-3'-N-cyklopropylmethyl-11-deoxy-l l-[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3 '-N-B isdesmethy 1-3 '-N-izopropyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-izopropyl-3'-N-(l-methylcyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l1[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu

A:

• · »· » ♦ ··♦ · · ·· · • · ··· »··« ·· · · ··· · · · • β · · ♦ · · · · ···«··· ··· · · · · · ·

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(biscyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-0-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-(biscyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 -N-(2,2-dimethylpropyl)-11 -deoxy-11[karboxy-(3 -chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-0-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

_ 3',3'-N-Bisdesmethyl*3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(2,2-dimethylpropyl)-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,-4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A; 3',3 '-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-[3 -(4-hydroxy-3 -methoxyfenyl)-1 methyl]propyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-[3-(4-hydroxy-3-methoxyfenyl)-lmethyl]propyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklobutyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A; _

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklobutyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 [karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu

A:

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(l-ethylcyklopropyl)methyl-l 1-deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

3 ',3'-N-Bi sdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-( 1 -ethylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3, 4-dichlorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

3 ',3 '-N-Bisdesmethy 1-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-( 1 -fenylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

- 3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(í-fenylcyklopropyl)methyl-ll-deoxy1 l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-ethyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 -[karboxy(3 -chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

3 ',3'-N-Bisdesmethyl-3 '-N-ethyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-1 1 -[karboxy(3,4-diehlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

3 ',3 '-N-B isdesmethyl-3 '-N-izobutyl-3 '-N-( 1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

3', 3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-izobutyl-3'-N-(l-methyIcyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-( 1 -allylcyklopropyl)methyl-l 1 -deoxy-11 [karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinů A;

• ·

3',3'-N-Bisdesmethyl-3’-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(l-allylcyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3 '-N-B isdesmethy 1-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-( 1 -benzylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy1 l-[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3'-N-Bisdesmethyl-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-( 1 -benzylcyklopropyl)methyl-11 -deoxyI l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-bis-(l-methylcyklobutyl)methyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chIor4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3 '-N-Bisdesmethyl-3 '-N-bis-(l -methyl cyklobutyl)methyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3,4dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3 ',3 '-N-B isdesmethy 1-3 '-N-cyklopropylmethyl-3 '-N-( 1 -methylcyklobutyl) methyl-11 -deoxýII -[karboxy-(3 -chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A; a

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-cyklopropylmethyl-3'-N-(l-methylcyklobutyl)methyl-ll-deoxy1 l-[karboxy-(3,4-dichlorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A.
4. Sloučenina podle nároku 3, vybraná ze skupiny sestávající se z :

3 ',3 '-N-B isdesmethyI-3 '-N-biscyklopropylmethyl-11 -deoxy-11 -[karboxy-(3 -chlor-4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

3',3'-N-Bisdesmethyl- 3'-N-biscyklobutyl-l 1-deoxy-l l-[karboxy-(3-chlor-4fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A;

• ·

3 ',3 '-N-Bisdesmethyl-3 ',3 '-Ν-b i s - (1 -methylcyklopropyl)methyl-11 -deoxy-11 - [karboxy-(3 chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-0-methyl-l 1,12-cyklický karbamát erythromycinu A; a

3',3'-N-Bisdesmethyl-3'-N-izopropyl-3'-N-(l-methylcyklopropyl)methyl-l 1-deoxy-l 1[karboxy-(3-chlor-4-fluorfenethylamino)]-6-O-methyl-11,12-cyklický karbamát erythromycinu A.
5. Farmaceutický přípravek pro inhibici uvolňování LH vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1 v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem.
6. Způsob inhibice uvolňování LH u savců, při potřebě takového ošetření, vyznačující se tím, že zahrnuje aplikování savci terapeuticky účinné množství sloučeninypodle nároku 1.

Ί. Způsob přípravy sloučeniny znázorněné vzorcem :

nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo estery, kde A je vybráno ze skupiny sestávající z:

(a) -C, (b) -N, a (c) -O;

• Λ

X a Υ jsou nezávisle v každém případě vybrány se skupiny sestávající z:

(a) atomu vodíku, (b) halogenidu, (c) trifluormethylu, (d) alkoxy skupiny, (e) alkylu, (f) arylu, a (g) substituovaného arylu;

R a R' jsou vybrány ze skupiny sestávající z:

(a) alkylu, (b) cykloalkylu, (c) heterocyklu, (d) substituovaného heterocyklu, (e) alkylcykloalkylu, (f) substituovaného alkylcykloalkylu, (g) alkylarylu, (h) alkylheterocyklu, (i) alkenylu, (j) alkynylu, (k) -C(S)-NHR4, C(NR4)-NHR4, kde substituent R4 je atom vodíku, alkyl nebo aryl; a (l) -(CH₂)n-C(CH2)m-R5, kde index m je 2, 3, 4 nebo 5 a substituent R5 je alkyl, alkoxy skupina, aryl nebo substituovaný aryl;

substituenty R₂ a R3 jsou nezávisle v každém případě (a) atom vodíku, (b) methyl, nebo substituenty R₂ a R3 společně vytvoří-cyklickou část, pokud A je C;

substituent R3 není přítomen, pokud A je N; a index η - 1, 2 nebo 3.

vyznačující se tím, že zahrnuje kroky:

(a) reakci sloučeniny vzorce s hexamethyldisilazidem sodným a karbonyldiimidazolem získání sloučeniny vzorce:

(b) reakci sloučeniny obdržené v kroku (a) s amino' sloučeninou vzorce:

R2“· A—Rj (CH₂)„-NH₂ následované sejmutím chráničích skupin 2',4-chráněných hydroxy skupin ZA získání sloučeniny vzorce:

♦ · (c) postupná desmethylace 3'-amino skupiny reakcí sloučeniny obdržené v kroku (b) s jodem za přítomnosti báze za získání sloučeniny vzorce;

(d) alkylace 3',3'-N-bisdesmethylované alkylačním činidlem.

sloučeniny obdržené v kroku (c)
8. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že reakce v kroku (a) se provádí v aprotickém rozpouštědle při teplotě 0 - 25°C.
9. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že reakce v kroku (b) se provádí bez rozpouštědla nebo v acetonitrilu při teplotě 25 - 80°C.
10. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že desmethylace se provádí reakcí sloučeniny obdržené v kroku (b) s jodem za přítomnosti báze a světla nebo za přítomnosti zdroje tepla.
11. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že desmethylace se provádí reakcí sloučeniny obdržené v kroku (b) s chloromravenčanem vybraným ze skupiny sestávající z benzylchloromravenčanu, allylchloromravenčanu a vinylchloromravenčanu.
12. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že alkylace v kroku (d) se docílí reakcí sloučeniny obdržené v kroku (c) s aldehydem nebo ketonem za přítomnosti hydridu kovu nebo za přítomnosti Pd/C katalyzátoru v protickém nebo neprotickém rozpouštědle v prostředí vodíku.
13. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že alkylace v kroku (d) se docílí reakcí sloučeniny obdržené v kroku (c) s alkylhalogenidem za přítomnosti báze.
14. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že substituent R je alkyl, alkenyl, cykloalkyl, heterocykl, (heterocykl)alkyl nebo alkylcykloalkyl; X a Y jsou nezávisle v každém případě chlor, fluor, dioxalano, atom vodíku nebo alkoxy; A je -C; substituenty R₂ a R₃ jsou nezávisle v každém případě atom vodíku nebo společně vytvářejí cyklopropylovou část a index n je 1. '
15. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že alkylační činidlo je cyklopentanon a alkylace se provádí za přítomnosti kyanoborohydridu sodného v methanolu.
16. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že postup zahrnuje kroky:

(c) selektivní- desmethylované sloučeniny obdržené v kroku (b), čímž se získá sloučenina vzorce:

• » (d) alkylaci 3'-N-desmethylované sloučeniny obdržené v kroku (c) s alkylačním činidlem^ získání sloučeniny vzorce:

(e) desmethylaci 3'-amino skupiny reakcí jodem za přítomnosti báze Iq získání sloučeniny vzorce:

sloučeniny obdržené v kroku (d) s

Rj-a— r₃ o, (ch₂\ ch Λ (f) alkylaci 3'-N-desmethylované sloučeniny obdržené v kroku (e) alkylačním činidlem.