SK125793A3

SK125793A3 - Crystalline oxathiolane derivatives

Info

Publication number: SK125793A3
Application number: SK1257-93A
Authority: SK
Inventors: Paul Ravenscroft; Tony G Roberts
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 1991-06-03
Filing date: 1992-06-02
Publication date: 1994-11-09
Also published as: DE69232387T2; EP1099700A1; TW254939B; MX9202619A; CA2070230C; NO922182D0; GEP19991834B; AU1736192A; CZ261293A3; NO301713B1; HK1009599A1; OA09913A; EP0517145A1; AU1881092A; AP300A; UA41265C2; NZ242981A; CA2311988C; CA2311988A1; SK281249B6

Description

Podľa ďalšieho aspektu sa jedná o získanie 3TC v tvare bipyramidálných kryštálov.

V následnom aspekte vynálezu sa sa jedná o získanie 3TC v kryštalickej podobe s teplotou topenia vyššou ako 170 °C, menovite teplotou 177 až 178 °C. Podľa alternatívneho aspektu sa jedná o získanie 3TC v kryštalickej podobe s endotermou na zázname DSC so začiatkom pri teplote 177 až 178 °C.

Podľa ďalšej alternatívy sa jená o získanie 3TC v kryštalickej podobe vykazujúcej absorbčné zväzky pri vlnočte IČ spektra približne^A/920 a'''850. Obzvlášť sa jedná o získanie 3TC, ktorý popri pásoch pri týchto vlnočtoch v podstate nevy4 kazuje pás pri vlnočte 1110.

3TC možno získať z jeho racemátu rozdelením na koštitučné enantioméry ľubovoľnou z metód delenia podlá súčasného stavu techniky. Výhodne je možno 3TC získať z jej známeho racemátu chirálnou HPLC prostredníctvom enzymaticky sprostredkovaného enantioselektívneho katabolizmu pomocou vhodných enzýmov ako je cytidine deaminase, alebo selektívnou enzymatickou degradáciou vhodného derivátu použitím 5 -nukleotidu. Vhodné metódy prípravy 3TC sú opísané v VO 91/17159.

3TC v tvare ihličkovitých kryštálov možno získať kryštalizáciou zlúčeniny z vodného roztoku, alebo azeotropickou destiláciou s 1-propanolom.

3TC výhodne v tvare bipiramidálných kryštálov možno získať rekryštalizáciu z nevodného prostredia, obzvlášť nižšieho C2-6 alkoholu, napríklad IMS (priemyslový metylovaný alkohol) , alebo 1-propanolu. Výhodným spôsobom možno bipyramidálny tvar získať z 3TC ihličkovitého tvaru jej udržiavaním v IMS, alebo etanole pri zvýšenej teplote (napríklad 30-70 °C, obzvlášť výhodne pri približne 50 °C) a počas vhodnej doby (napríklad 0,5 až tri hodiny, výhodne lhodinu, alebo dlhšie ako 1 hodinu).

Alternatívne možno 3TC v bipyramidálnej forme získať záhrevom zlúčeniny v ihličkovitej forme nad jej teplotu topenia 124 až 127°C, obzvlášť nad približne 170 °C, napríklad nad 177 až 178 °C a ochladením taveniny.

Podľa ďalšej alternatívy možno 3TC v bipyramidálnej forme pripraviť mletím, alebo rozotieraním zlúčeniny v tvare ihličkovitých kryštálov.

Výhodným stavom 3TC sú bipyramidálne kryštály prakticky bez prítomnosti ihličkovitých kryštálov. Ak sa tieto kryštály získavajú rekryštalizáciou, alebo stárnutím v kvapalnom prostredí získa sa zlúčenina s úplnou neprítomnosťou ihličkovitých kryštálov.

3TC v kryštalickej forme možno použiť ako antivirálny prostriedok ako je to opisné v VO91/17159 na ktorý už bolo poukázané.

3TC v kryštalickej podobe môže byť začlenený do farma5 ceutických formulácií pre použitie vo funkcii antivirálneho prostriedku ako je to opísané v spise VO91/17159.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obrázok 1 znázorňuje 3TC v tvare ihličkovitých kryštálov (tvar I).

Obrázok 2 znázorňuje 3TC v tvare bipyramidálných kryštálov (Tvar II).

Obrázok 3 predtavuje IČ spetrum kryštálov tvaru I. Obrázok 4 predstavuje IČ spektrum kryštálov tavru II. Obrázok 5 je záznam DSC kryštálov tvaru I.

Obrázok 6 je záznam DSC kryštálov tavru II.

Nasledujúce príklady ilustrujú vynález nie sú však mienené ako jeho obmedzenia. Všetky teploty sú udávané v °C.

Príklady uskutočnenia

Medziprodukt 1

5-metoxy-l,3-oxatiolán-2-metanol benzoan.

Roztok chloridu zinočnatého (1,6 g) v horúcom metanole (15 ml) sa pridal do miešaného roztoku merkaptoacetaldehydu, dimetylacetalu (34,2 g) a benzoyloxyacetaldehydu (48,3 g) v toluéne (1300 ml), ktorý sa potom zahrieval pod refluxom v atmosfére dusíka počas 50 min. Ochladená zmes bola koncentrovaná, zriedená toluénom a filtrovaná cez diatomit. Spojené filtráty a toluén sa premyli s nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (2x) a solankou, vysušili (MgSO^) a odparili na olej, ktorý sa podrobil stĺpcovej chromatografii na S1O2 (2 kg, Merck 9385), vylúhovali chloroformom pri získaní požadovanej zlúčeniny fo forme oleja (45,1 g) zmesi anomérov (ca 1:1); 1H NMR (DMSO-d₆) 3,1 - 3,3(4H), 3,42(6H), 4,4 - 4,6(4H), 5,41(1H), 5,46(1H), 5,46(1H), 5,54(1H), 5,63(1H), 7,46(4H), 7,58(2H), 8,07(4H); tmax(CHBr₃)

1717,60111-¹.

Medziprodukt 2 (±)-cis-1-(2-benzoyloxymetyl-l,3-oxatiolan-5-yl)-(1H)pyrimidin-2-4-dión

Zmes jemne mletého uracilu (9,62 g), hexametyldisilazánu (50 ml) a síranu amonného (30 mg) sa zahrievala v dusíku pod refluxom až do získania čistého roztoku. Tento sa ochladil a odparil na bezfarebný olej, ktorý sa rozpustil pod dusíkom v acetonitrile (100 ml). Roztok sa pridal do miešaného a v ľadovom kúpeli chladeného roztoku 5-metoxy-l,3-oxatiolano-2-metanol benzoanu (medziprodukt 1) (19,43 g) v acetonitrile (600 ml) s pridaním trifluórometansíranu (14,7 ml). Po odstránení ľadového kúpeľa sa roztok zahrieval v refluxe pod dusíkom 45 minút. Po ochladení a odparení sa zvyšok prečistil stĺpcovou chromatogrfiou cez 1 kg kremičitého gélu (Merck 9385) a vylúhoval zmesou chloroformu s metanolom v pomere 9/1. Vhodné frakcie sa ochladili a odparili so získaním hrubého produktu. Tento sa frakčne kryštalizoval z minima horúceho etanolu (ca 1200 ml) so získaním uvedenj zlúčeniny (6,32 g) vo forme bielých kryštálov. 1H NMR(d^DMSO)ô ll,36(lH,bs). 7,50 - 8,00 (6H,m), 6,20 (ΙΗ,ΐ), 5,46(2H,m),

4,62(2H,m), 3,48(lH,m), 3,25(lH,m).

Medziprodukt 3 (±)-(cis)-4-amino-l-(2-benzoyloxymetyl-l,3-oxatiolano-5-yl)(1H)-pyrimidin-2-on

Spôsob (a)

Suspenzia cytozinu (20,705 g) a síranu amonného (niekoľko mg) v hexametyldisilazáne (110 ml) sa miešala a zahrievala

2,5 hod v refluxe pod dusíkom. Rozpúšťadlo sa odstránilo odparením a tuhý zvyšok sa rozpustil v suchom acetonitrile (350 ml). Roztok sa pomocou ohybnej ihly preniesol do mieša7 ného a v ľadovom kúpeli chladeného roztoku 5-metoxy-l,3-oxatiolanu-2-metanol benzoanu (medziprodukt I) (43,57 g) v acetonitrile (650 ml) pod dusíkom. K roztoku sa pridal trimetylsilil trifluórometansulfónan (33 ml) a roztok sa nechal zahriať na teplotu miestnosti (1,5 hod) a potom sa cez noc zahrieval pod refluxom. Zvyšková zmes sa koncentrovala, zriedila s nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (500 ml) a potom extrahovala octanom etylnatým (3 x 500 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou (2x250 ml) a soľankou (250 ml), vysušili (MgSO^) a potom sa odparili na penu, ktorá sa podrobila stĺpcovej chromatografii na kremičitom géli (600 g, Merck 7734), vylúhovala sa zmesou octanu etylnatého s metanolom aby sa získala zmes anomérov (ca 1:1, 31,59 g). Zmes sa kryštalizovala z vody (45 ml) a etanolu (9,0 ml) a získala sa tuhá látka (10,23 g), ktorá sa rekryštalizovala z etanolu (120 ml) a vody (30 ml) so získaním uvažovanej zlúčeniny vo forme bielej tuhej látky (9,26 g); max(MeOH) 229,4 mm (E^1%610); 272,4 mm(E^1% lem lem

293)·,^ NMR (DMSO d6)63,14(1H), 3,50(lH), 4,07(2H), 5,52(1H), 5,66(1H), 6,28(1H), 7,22(2H), 7,56(2H), 7,72(2H), 8,10(2H).

Spôsob (b)

Oxychlorid fosforečný (7,0 ml) sa po kvapkách pridával do suspenzie 1,2,4-triazolu (11,65 g) v acetonitrile (120 ml) udržiavanej v ľadovom kúpeli a potom udržiavajúc vnútornú teplotu pod 15 °C sa po kvapkách pridáva trietanolamín (22,7)ml. Po 10 minútach sa pomaly pridáva roztok (±)-(cis)1-(2-benzoyloxymetyl-l,3-oxatiolano-5-yl)-(1H)-pyrimidín-2,4dión (medziprodukt 2) (6,27 g) v acetonitrile 330 ml). Miešanie beží pri teplote miestnosti cez noc. Zmes sa ochladí ľadovým kúpeľom a pomaly sa pridá trietylamín (30 ml) a následne voda (21 ml). Výsledný roztok sa odparí a zvyšok sa rozdelí medzi nasýtený roztok hydrogénuhličitanu sodného (400 ml) a chloroformu (3x200 ml) Spojené chloroformové extrakty sa vysušia síranom horečnatým, odfiltrujú a odparia na surový zvyšok (9,7 g). Zvyšok sa rozpustí v 1,4-dioxáne (240 ml) za prídavku koncentrovaného hydroxidu amonného (s.g. 0,880, 50 ml). Po 1,5 hod. sa roztok odparí a zvyšok sa rozpustí v metanole. Vyvolá sa tým precipitácia tuhej fázy, ktorá sa odfiltruje. Matečný roztok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou na kremičitom géli (Merck 9385, 600 g). Vhodné frakcie sa premyjú a odparia čím sa získa uvažovaná zlúčenina (2,18 g) identická so zlúčeninou získanou spôsobom (a).

Medziprodukt 4 (±)-(cis)-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3-oxatiolán-5-yl)-(1H)pyrimidín-2- on

Suspenzia (cis)-4-amino-l-(2-benzoyloxymetyl-l,3-oxatiolan-5-yl)-(1H)-pyrimidín-2-on (medziprodukt 3) (8,19 g) sa zmiešala so živicou Amberlite IRA-400 (OH) (8,24) v metanole (250 ml) a miešala sa za záhrevu pod refluxom 1,25 hod. Tuhá látka sa oddelila filtráciou a premyla metanolom. Spojené filtráty sa odparili. Zvyšok sa spracoval s octanom etylnatým (80 ml). Výsledná biela látka získaná filtráciou predstavovala požadovanú zlúčeninu (5,09 g), 1H NMR(DMSO-dg) 3,04 (1H), 3,40 (1H), 3,73(2H), 5,18(1H), 5,29(1H), 5,73(1H), 6,21(1H),

7,19(2H), 7,81(1H).

Medziprodukt 5 (-)-(cis)-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3-oxatiolán-5-yl)-(1H)pyrimidín-2- on (i) Tri 50 ml banky so živnou pôdou (Oxoid Ltd) sa naočkovali plnou slučkou, každá predstavujúca Escherichia coli (ATCC 23848) zoškrabané zo živnej agarovej doštičky. Banky sa inkubovali cez noc pri 37 °C za miešania pri 250 ot/min a potom sa každá banka použila na očkovanie 41 CDD média (kyselina glutamová, 3 g/1; MgSO₄, 0,2 g/1; K₂SO₄, 2,5 g/1; NaCl,

2,3 g/1; Na₂HP0₄.2H₂0, 1,1 g/1; NaH₂P0₄.2H₂0, 0,6 g/1; cytidín, 1,2 g/1) v sedem litrovom fermenteri. Kultúry sa fermen9 tovali pri 750 ot./min, 37 °C a aerácii 41/m:in. Po 24 hodinovom raste sa bunky zhromaždili odstredením (5000 g, 30 minút) s výťažkom 72 g vlhkej hmoty. Bunečné pelety sa resuspendovali v 300 ml 20 mM pufru Tris HC1 (pH 7,5) a rozptýlili ultrazvukom (4 x 45 sekúnd). Zvyšky buniek sa odstránili odstredením (30 000 g, 30 minút) a proteín zo supernatantu sa precipitoval prídavkom síranu amonného do 75 %-ného nasýtenia. Precipitát sa odstredil (30 000 g, 30 minút) a pelety sa resuspendovali v 25 ml pufru HEPES (100 mm, pH 7,0) obsahujúceho síran amonný (75 %-né nasýtenie). Enzymatický roztok sa pripravil odstreďovaním pri 12 000 ot./min počas 30 minút. Supernatant sa vyradil a pelety sa rozpustili v pufri Tris HC1 (pH 7,0; 100 mm) na pôvodný objem.

(ii) Medziprodukt 4 (115 mg sa rozpustilo vo vode (100 ml) za miešania. Pridal sa enzymatický roztok (0,5 ml) a zmes sa udržiavala pri konštantnom pH neustálým pridávaním HC1 (25 mm). Konverzia sa sledovala chiralovou HPLC, ktorá ukázala, že sa prednostne dezamínoval (+)-enantiomér substrátu. Po 22 hodinách bol (+)-enantomér substrátu úplne odstránený RT

12,5 min.) a pH roztoku sa nastavilo na 10,5 pridaním koncentrovaného roztoku hydroxidu sodného.

Roztok pripravený horeuvedeným spôsobom sa eluoval stĺpcom Sephadexu QAE (A25; Pharmacia; 30X 1,6 cm) s dopredu nastaveným pH na 11. Stĺpec sa premyl vodou (200 ml) a potom HC1 (0,1 M). Odobraté frakcie (40 ml) sa analyzovali pri reverznej fázovej HPLC. Frakcie 5 až 13 s nezreagovaným (-)-enantimérom substrátu sa spojili a ich pH sa nastavilo pomocou HC1 na 7,5. Frakcia 47, obsahujúca dezamínový produkt sa nastavila na pH 7,5 zriedeným NaOH. Analýza chirálnou HPLC ukázala, že materiál je zmesou pozostávajúcou z jedného enantioméru (RT 10,2 min) ako hlavnej zložky s druhým enantiomérom (RT 8,5 min) ako zložkou s nižším zastúpením (e.e ca 90%) .

(iii) Cyklus (ii) sa zopakoval vo väčšom rozsahu. Zlúčenina z príkladu 1 (363 mg) v 250 ml vody sa inkubovala enzýmovým roztokom (0,5 ml) pripraveným ako bolo uvedené v cykle

FloV

Detekcia Retenčný čas (i). Ďalšie príslušné množstvá (0,5 ml) enzýmu sa pridali po 18 a 47 hod. Reakčná zmes sa miešala 70 hodín a potom sa nechala stáť ďalších 64 hodín. Analýza chirálnou HPLC indikovala, že (+) enantiomér substrátu bol úplne dezaminovaný a výsledný roztok sa nastavil na pH 10,5 pomocou NaOH.

Roztok bol naplnený do toho istého stĺpca QAE a eluoval sa ako v cykle (i). Frakcie 2 až 6, obsahujúce zmes reziduálneho substrátu a dezamínovaného produktu sa spojili. Frakcie 7 až 13 obsahujúce reziduálny substrát ((·)enantiomér) sa spojili a pH sa nastavilo na 7,5. Frakcie 25 až 26 obsahujúce dezaminovaný produkt sa spojili a neutralizovali.

Frakcie 2 až 6 sa re-eluovali cez ten istý stĺpec QAE. Frakcie 3 až 11 z tohto druhého stĺpca obsahovali nezreagovaný substrát ((-)-enantiomér). Frakcia 70 obsahovala dezamínový produkt.

(iv) Oddelené frakcie z cyklov (ii) a (iii) sa spojili a ich pH sa nastavilo na 7,5. Tento roztok sa eluoval cez stĺpec XAD-16 (40 x 2,4 cm), pripravený vo vode. Stĺpec sa premyl vodou a potom eluoval zmesou acetónu a vody (1:4, objemové pomery). Frakcie obsahujúce požadovaný (-)-enatiomér sa spojili a vysušili vymrazovaním za vzniku bieleho prášku (190 mg)

Použité metódy HPLC:

1. Reverzná fázovo analytická HPLC

Stĺpec : Capital Cartrige

Sherisorb ODS-(5uM)

150 x 4,6 mm

Eluant Dihydrofosforečňan amonný (50 mM) + 5 % MeCN

1,5 ml/min UV, 270 nm BCH 189 5,5 min dezaminovaný BCH-189 8,1 min

2. Chirálno analytická HPLC

Stĺp ec

Eluant

FloV

Detekcia Retenčný čas (biokonverzia : Cyclobond I Acetyl

250 x 4,6 mm 150 x 4,6 mm

0,2 % octan trietanol amonný 9 (pH 7,2) ml/min UV, 270 nm

BCH 189 11,0 a 12,5 min : dezamínovaný BCH-189 8,5 a 10,2 min sa zisťovala sledovaním straty piku pri 12,5 min., a akumulovaného produktu pri 10,2 min).

Príklad 1

Suspenzia medziproduktu 5 (64,8 g) vo vode (200 ml) sa zahriala na 45 °C za získania roztoku. Roztok sa ochladil na 30 °C.

Produkt vykryštalizoval ako nemiešaťeľná hmota. Táto sa podrvila a suspenzia sa miešala 1 hod. pri ca 10 °C. Produkt sa izoloval filtráciou a premyl etanolom (IMS; 2 x 30 ml), potom sa sušil 24 dodín pri 45 °C vo vákuu so získaním 3TC vo forme I (jemné ihličkovité kryštály).

Zlúčenina vykazovala IČ spektrum a DSC termogram rovnaké aké sa nachádzajú na obrázkoch 3 a 5.

Príklad 2

Suspenzia zlúčeniny z príkladu 1 (10 g) v priemyselnom metylovanom alkohole (IMS; 200 ml; 20 ojemov) sa pod refluxom zahrievala do vzniku čistého roztoku. Roztok sa za horúca odfiltroval destiloval sa pri atmosférickom tlaku až na zbytkový objem 100 ml (10 objemov). Roztok sa očkoval s autentickým materiálom^ a nechal ochladiť z 80° an 25 ° jpočas jednej hodiny. Kryštalizácia začala pri 79 Suspenzia sa miešala pri 15° počas. 1 hod. Produkt sa oddelil filtráciou a premyl pomocou IMS (10 ml; 1 objem). Sušenie vo vákuu pri 50 °C poskytlo požadovanú zlúčeninu ako zhluky bipyramíd (8,42 g), bod topenia 179 až 181 °C.(-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3-2oxatiolán-5-yl)-(1H)-pyriraidín-2-on.

Skúškou zistené: C=41,9, H=4,85, N=18,35% ^C8^H11^N3°3^S vyžaduje: C=41,9, H=4,8, N=18,3%

Zlúčenina vykazuje IČ spektrum a DSC termogram rovnaké aké sú uvedené na obrázkoch 4 a 6.

Príklad 3

Suspenzia produktu z príkladu 1 (20,0 g) v priemyslovom metylovanom alkohole sa pomaly miešala pri 50 °C počas hodiny.

Malá vzorka (ca 100 mg) po odobratí vysušila vo vákuu pri 50 °C a vyšetrila mikroskopicky a pomocou diferenciálnej skannovacej kalorimetrie (DSC).

Vzorka predstavovala 100 % formy II (bipyramidálny habit) .

Suspenzia sa miešala pri 50 °C ďalšie 2 hodiny a znova sa odobrala vzorka. Mikroskópia neukázala nijakú zmenu.

Suspenzia sa miešala pri 50 °C počas 22 hodín a potom sa ochladila na 20 °C a miešala 1 hod.

Suspenzia sa odfiltrovala a produkt sa premyl s IMS (20 ml, H- objem) a vysušil vo vákuu pričom sa získala biela kryštalická látka (17,3 g) (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl1,3-oxatiolán-5-yl)-(1H)-pyrimidín-2-on, bod topenia 180 až 181 °C.

Skúškou zistené: C=41,85, H=4,85, N=18,13 % ^C8^H11^N3°3^S vyžaduje: C=41,9, H=4,8, N=18,3 %

Príklad 4

Kryštalografické údaje formy II

Kryštálové údaj e:

^C8^H11^N3°3^S’ ^m=229>²⁶

Tetragonálna sústava, a=b= 8,749(3), c= 26,523(9), V= 2030(2) A³ (spresnením zo 14 automaticky centrovaných difrakcií, lambda=l,54184 A).

priestorová grupa P4^2^2 (No.96), z=8, D_c=l,50 g.cm—³. F(000)=960, m(Cu/Ka) = 27,5 cm^-1.

Rozmery kryštálu 0,48 x 0,32 x 0,30 mm.

Monokryštály formy II (bezfarebné bipyramídy) sa skúmali pomocou rtg.-difrakcie. Na difraktometri Siemens R³m/V difraktometri s monochromatizovaným žiarením CuKa pri použití scanu 2J/w sa celkove zmeralo 1651 difrakcií (3<2J<115°). štuktúra sa vyriešila pomocou priamých metód a nevodíkové atómy sa spresnili anizotrópne. Vodíkové atómy spojené s uhlíkom sa idealizovali (C-H=0,96 A) a umožnil sa ich pohyb okolo materských a -OH skupinách atómov uhlíka. Tri vodíkové: atómy na -NH2 sa lokalizovali na základe diferenčnej Fourierovej mapy. Všetky vodíkové atómy sa spresnili izotropné. Spresnenie konvergovalo na hodnotu R=0,068, 1^=0,069, w^- =[(F)+0,005[F]. Maximálna reziduálna elektrónová husQ tota bolsi 0,45 eA . Absolútna chiralita sa potvrdila Rogerovým eta testom [h=0,99(90].

Príklad 5

Farmaceutické formulácie (a) 100 mg tablety zložky na 1 tabletu

3TC(formaII) 100,0 mg mikrokryštalická celulóza NF 189,5 mg sodný glykolát škrobu NF stearan horečnatý NF

9,0 mg 1,5 mg celková hmotnosť

300,0 mg

3TC (forma II), mikrokryštalická celulóza a sodný glykolát škrobu sa sitovali a miešali vo V-miešači približne 15 minút. Potom sa pridal sitovaný stearan horečnatý a miešanie pokračovalo ďalšie 2 minúty.

Zmes sa stláčala v štandardnom tabletovacom zariadení a potiahli sa tenkým filmom vodnej suspenzie sivej Opadry za účelom získania esteticky prijatelných tabliet.

(b) 300 mg tablety zložky na 1 tabletu

3TC(formaII) mikrokryštalická celulóza NF sodný glykolát škrobu NF stearan horečnatý NF

300,0 mg 279,0 mg

18,0 mg 1,5 mg celková hmotnosť

600,0 mg :r

Tablety sa pripravili ako je uvedené v prípade (a).

ρν 42.5^-13

Claims

1. (-)cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3-oxatiolán-5-yl)

-(1H)-pyrimidín-2-on v kryštalickej forme.

2. (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3-oxatiolán-5-yl) -(1H)-pyrimidín-2-on vo forme bipyramidálných kryštálov.

3. Kryštalická forma podľa nároku 1 alebo 2, ktorá má teplotu topenia vyššiu ako 170 °C.

4. Kryštalická forma podľa nároku 1,2 alebo 3, ktorá má teplotu topenia 177 až 178 °C.

5. Kryštalická forma podľa ľubovoľného z nárokov 1 až

4, majúca v infračervenom spetre absorbčné pásy pri vlnočtoch 920 a 850.

6. Kryštalická forma podľa ľubovoľného z nárokov 1 až

5, majúca v infračervenom spetre absorbčný pás pri vlnočte 1110.

7. Kryštalická forma podľa ľubovoľného z nárokov 1 až

6, ktorá na zázname diferenčnej skanovacej kalorimetrie vykazuje endoterm s počiatkom pri 177 až 178 °C.

8. (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3-oxatiolán-5-yl)

-(1H)-pyrimidin-2-on vo forme ihličkovitých kryštálov.

9. Kryštalická forma podľa nároku 1 alebo 8, ktorá má teplotu topenia nižšiu ako 130 °C.

10. Kryštalická forma podľa nároku 1, 8 alebo 9, ktorá má teplotu topenia 124 až 127 °C.

11. Kryštalická forma podľa nároku 1 alebo ľubovoľného z nárokov 8 až 11 ktorá na zázname diferenčnej skanovacej kalorimetrie vykazuje endoterm s počiatkom pri 124 až 127 °C. na zázname diferenčnej skanovacej kalorimetrie vykazuje endoterm s počiatkom pri 177 až 178 °C.

12. Kryštalická forma podľa nároku 1 alebo ľubovoľného z nárokov 8 až 11, ktorá vykazuje v infračervenom spetre absorbčný pás pri vlnočte 1110.

13. (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3-oxatiolán-5-yl) (1H)-pyrimidín-2-on v kryštalickej podobe ako je znázornené na obrázku 1.

14. (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3-oxatiolán-5-yl) (1H)-pyrimidín-2-on v kryštalickej ako je znázornené na obrázku 2.

15. (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl- 1,3-oxatiolán-5yl)-(1H)-pyrimidín-2-on v kryštalickej podobe a s infračerve ným spektrom ako j e znázornené na obrázku 3.

16. (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3-oxatiolán-5-yl) -(1H)-pyrimidín-2-on v kryštalickej podobe a s infračerveným spektrom ako je znázornené na obrázku 4.

17. Spôsob prípravy zlúčeniny (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3-oxatiolán-5-yl)-(1H)-pyrimidín-2-on podľa nároku 1 až 16 v kryštalickej forme, vyznačuj úci sa tým, že zahrňuje kryštalizáciu zlúčeniny z vodného roztoku.

18. Spôsob prípravy zlúčeniny (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-l,3-oxatiolán-5-yl)-(1H)-pyrimidín-2-on v kryštalickej forme, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje azeotropickú destiláciu vodného roztoku zlúčeniny s propán-1-olom.

19. Spôsob prípravy zlúčeniny (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-1,3-oxatiolán-5-yl)-(1H)-pyrimidín-2-on v kryštalickej forme, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje rekryštalizáciu z nevodného prostredia.

20. Spôsob podľa nároku 19, vyznačujúci sa tým, že nevodným médiom je C2-6 ^alkohol.

21. Spôsob podľa ľubovoľného z nárokov 20 alebo 21, vyznačujúci sa tým, že nevodné médium sa volí zo skupiny etanol a priemyslový métylovaný alkohol.

22. Spôsob prípravy zlúčeniny (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl-1,3-oxatiolán-5-yl)-(1H)-pyrimidín-2-on vo forme bipyramidálných kryštálov, vyznačuj úci sa tým, že zahrňuje expozíciu zlúčeniny vo forme ihličkovitých kryštálov v etanole alebo priemyslovom metylovanom alkohole pri zvýšenej teplote.

23. Farmaceutická formulácia, vyznačuj úca sa tým, že zahrňujúca (-)-cis-4-amino-l-(2-hydroxymetyl1,3-oxat.iolán-5-yl) - (1H)-pyrimidín-2-on v kryštalickej forme a jej farmaceutický prijateľný nosič.

24. Farmaceutická formulácia podľa nároku 23, vyznačujúca sa tý m, že v podobe vhodnej na orálne podávanie .

25. Farmaceutická formulácia podľa nároku 23 alebo 24, vyznačujúca sa tým, že je vo forme tabliet, alebo kapsúl.