SE514255C2

SE514255C2 - System och metod för behandling av biologiska vätskor

Info

Publication number: SE514255C2
Application number: SE9301418A
Authority: SE
Inventors: David B Pall; Thomas C Gsell; Vlado I Matkovich; Thomas Bormann
Original assignee: Pall Corp
Priority date: 1990-11-06
Filing date: 1993-04-27
Publication date: 2001-01-29
Also published as: NL194639B; EP0556303B1; EP1348455A1; JP2570906B2; FI109336B; GB2264884B; AU651646B2; GB2277464B; US5100564A; ATA902991A; SE9301418D0; AU7593494A; JPH06500942A; SE514256C2; EP1038541A2; AT404674B; NL9120023A; WO1992007656A2; FI932031A0; CN1103317A

Description

_514__=255 3 visuellt måste bevaka pàsen och kritiskt och självständigt bestämma när förbindelseröret skall stängas av. v Bloduppsamlingspåsen som nu endast innehåller PRC kan tas loss och lagras vid 40 C tills den behövs för transfu- sion till en patient, eller kan en ventil eller tillslutning i röret öppnas så att PRC kan överföras till en satellitpåse antingen av trycket som genereras av plasmaextraktorn eller genom att placera bloduppsamlingsapparaten i en tryck-kammare eller genom att höja upp den för att få gravitationsströmning. (4) Den PRP-innehållande satellitpåsen samman med en annan satellitpåse uttages sedan från extraktorn och centri- fugeras med ökad centrifugalkraft (höghastighets- eller "hard- spin"?centrifugering) med tiden och hastigheten inställda så att blodplättarna koncentreras i PRP-påsens undre del. När centrifugeringen är färdig innehåller PRP-påsen sedimente- rade blodplättar i sin undre del och klar plasma i sin övre del. (5) PRP-påsen placeras sedan i plasmaextraktorn och det mesta av den klara plasman tryckes ut i en satellitpåse så att endast de sedimenterade blodkropparna lämnas kvar i PRP-påsen samman med omkring 50 ml plasma. I ett efterföljande steg dispergeras sedan denna blodplättskomposition till blod- plättskoncentrat (PC). PRP-påsen som nu innehåller en PC-pro- dukt uttages sedan och lagras i upp till 5 dagar vid 20 - 249 C tills den behövs för en blodplättstransfusion. Flera enheter blodplättar (t.ex. från 6 - l0 givare vid transfusion till en vuxen patient) kan sammanslàs till en enda blodplätts- transfusion. (6) Plasman i satellitpåsen kan själv transfunderas Ii en patient eller också kan den med komplexa processer sepa- reras till en mångfald andra, värdefulla produkter.

Andra vanligen använda system än CPDA-l är Adsol, Nutricell och SAG-M. I dessa senare system innehåller uppsam- lingspåsen endast antikoagulant och näringslösningen kan sat- sas i en satellitpåse i förväg. Denna näringslösning överfö- -res till PRC sedan PRP har separerats från PRC och därigenom åstadkommes ett högre plasmautbyte och större livslängd för PRC. 514,g5s 4 Med hänsyn till detta finns ett växande behov av ett ef- fektivt system och en metod för att uppdela ett biologiskt fluidum, t.ex. helblod, i sina komponenter. Personalen i blod- bankerna har reagerat på det ökade behovet av blodkomponenter genom att försöka öka PRC- och PC-utbytena på ett flertal sätt.

'Vid separationen av PRC- och PRP-fraktionerna, t.ex. steg 3 ovan, har blodbankspersonalen försökt trycka ut mer PRP innan strömningen från bloduppsamlingspásen stoppats, men detta har ofta visat sig motverkande, då PRP och PC som sedan extraheras ofta blir kontaminerade av röda blodkroppar som ger en rosa eller röd färg åt det normalt ljusgula PC. Närvaron av röda blodkroppar i PC är så starkt oönskad, att rosa eller rött PC ofta kastas bort eller omcentrifugeras, bådadera sätten är arbetskrävande och fördyrande. Därför måste blodbankspersona- len ligga på fel sida om säkerhetsgränsen och stoppa PRP-ström- men innan den trycks ut helt. Sålunda blir PC okontaminerat, men den outtryckta plasman, som är värdefull, kan gå till spillo. C Detta återspeglar ett annat prov vid försök att öka ut- bytet av individuella blodkomponenter. Då varje komponent är värdefull kan alla besparingar genom ökning av utbytet upp- vägas av de ökade arbetskostnaderna, om operatören för behand- lingssystemet kontinuerligt och noggrant måste bevaka systemet för att öka utbytet.

Anordningarna och metoderna enligt föreliggande uppfin- ning undanröjer de ovan beskrivna problemen och ger dessutom ett högre utbyte av PRC och PC med överlägsen kvalitet.

Separationen av de olika blodkomponenterna med centri- fugering átföljes av ett antal andra problem. När exempelvis PRP centrifugeras för att ge ett lager huvudsakligen bestående av blodplättar koncentrerade vid bottnen på den PRP-innehållan- de påsen, t.ex. steg 4 ovan, har de så koncentrerade blod- plättarna tendens att bilda ett tätt aggregat som måste dis- pergeras i plasma för att bilda blodplättskoncentrat. Disper- sionen göres vanligen genom försiktig blandning, exempelvis genom att sätta påsen på ett rörligt bord som roterar med en vaggande rörelse. Denna blandning erfordrar flera timmar, _....._.....7.._.__...._-. _.._...,.-.~.,.~_v_...-,.~,..r"- _,._..._-.-.-.;~.,._-w.-.,...-f.w-= .w - --_-.,... _ .....,,._,-_-,- en potentiellt oönskad fördröjning, och anses av många forskare producera ett delvis aggregerat blodplättskoncentrat. Det tros vidare att blodplättarna kan skadas av de pálagda krafterna under centrifugeringen; Slutligen är ett problem som hänger samman med separa- tionen av olika blodkomponenter med användning av ett flerpàs- system och centrifugering, att mycket värdefulla blodkomponen- ter stannar kvar i ledningarna som förbinder de olika påsarna och i de olika anordningarna som kan användas i systemet.

Konventionell behandlings- och lagringsteknik kan också medföra problem. Exempelvis kan luft, särskilt syre, närva- rande i lagrat blod och blodkomponenter eller i lagringsbe- hàllaren leda till en försämring av blodkomponenternas kvali- tet och minska deras lagringslivslängd. Särskilt kan syre sam- verka med en ökad metabolisk hastighet (genom glykolys), som kan leda till en minskad lagringslivslängd och minskad livs- kraft och funktion av helblodskropparna. Exempelvis kan röda blodkroppar vid lagring metabolisera glukos och bilda mjölk- och druvsyror. Dessa syror minskar mediets pH vilket i sin tur minskar de metaboliska funktionerna, Vidare kan närvaron av luft eller gas i satellitpàsen vara en risk när en patient transfunderas med en blodkomponent. Exempelvis kan så litet som 5 ml luft eller gas förorsaka allvarliga skador eller död.

Trots de farliga verkningarna av syre på lagringslivslängden och kvaliteten på blod och blodkomponenterna har tidigare tek- nik inte ägnat sig åt behovet att avlägsna gaser ur blodbe- handlingssystem under uppsamling och behandling.

Förutom de ovan nämnda komponenterna innehåller hel- blod vita blodkroppar) kollektivt benämnda leukocyter, av oli- ka slag av vilka de viktigaste är granulocyter och lymfocyter.

Vita blodkroppar skyddar mot bakteriell och viral infektion.

Transfusion av blodkomponenter som inte befriats fràn leuko- cyter är inte riskfri, för patienten som får transfusionen.

Vissa av dessa risker är påtalade i US-PS 4 923 620 och A4 880 548 som införlivas häri genom referens.

Vid den ovan beskrivna centrifugalmetoden för separa- ,tion av blod till de tre grundfraktionerna finns leukocyter _d51_4 255 *fit 6 närvarande i väsentliga mängder såväl i fraktionen med packa- de, röda blodkroppar och fraktionen med blodplättsrik plasma.

Det är nu allmänt accepterat att det är mycket önskvärt att minska leukocytkoncentrationen i dessa blodkomponenter till en så låg nivå som möjligt. Även om det inte är något fast kriterium anses det generellt att många av de oönskade effek- terna av transfusion skulle minskas om leukocytinnehållet mins- ~ kades med en faktor av omkring 100 eller mera före administre- ringen till patienten. Detta minskar approximativt det genom- snittliga, totala innehållet av leukocyter i en enda enhet PRC till mindre än omkring láx 106, och i en enhet PRP eller PC till mindre än omkring l x 105. Anordningar som tidigare har utvecklats vid försök att avhjälpa denna nackdel har grun- dat sig på användningen avpackadefibrer och har generellt be- tecknats som filter. Det är emellertid tydligt att processer som använder filtrering grundade på separation efter storlek inte kan lyckas av två skäl. För det första kan leukocyter vara större än omkring 15 ßnn, t.ex. granulocyter och makro- cyter, och så små som 5 till 7 fmn t.ex. lymfocyter. Tillsam- mans representerar granulocyter och lymfocyter huvuddelen av alla leukocyterna i normalt blod. Röda blodkroppar är omkring 7 Pm i diameter, d.v.s. har ungefär samma storlek som lymfo- cyter, en av de båda huvudklasserna av leukocyter som måste avlägsnas. För det andra deformeras alla dessa celler så att de kan gå genom mycket mindre öppningar än deras normala stor- lek. Följaktligen har det i stor utsträckning accepterats att borttagningen av leukocyter åstadkommes huvudsakligen genom adsorption på de inre ytorna i porösa media snarare än genom filtrering.

Leukocytminskning är särskilt betydelsefull med avseen- de på en sådan blodkomponent som PC. Blodplättskoncentrat framställda genom differentialcentrifugering av blodkomponen- ter har varierande nivåer på leukocytkontaminering hänförliga till tiden och storleken på kraften vid centrifugeringen. Ni- vån på leukocytkontaminering i ofiltrerade, konventionella blodplättspreparat av 6 till 10 sammantagna enheter är gene- rellt vid en nivå på omkring 5 x 108 eller mera. Det har vi- .514P255 il". 'iifiWÅf? 7 sats att en leukocytborttgning pà 81 till 85 % är tillräcklig »för att reducera omfattningen av feberreaktioner vid blod- plättstransfusion. Flera andra, nya studier rapporterar om en '_reduktion av alloimmunisering och blodplättsrefraktäritet vid nivåer pà leukocytkontaminering under omkring l x 107 per en- het. För en enda enhet PC med en genomsnittlig leukocytkontami- neringsnivà (vid nuvarande praxis) på omkring 7 x lO7 leukocy- ' ter är målet efter filtrering mindre än l x 106 leukocyter.

De existerande studierna föreslår därför en önskvärdhet av minst en tvàfaldig logaritmisk (99 %) minskning av leukocyt- kontaminering. Nyare forskningar anser att en trefaldig loga- ritmisk (99,9 %) eller till och med en fyrfaldig logaritmisk (99,99 %) minskning skulle vara signifikant hälsosammare.

Ett ytterligare önskvärt kriterium är att begränsa blod- plättsförlusten till omkring l5 % eller mindre av den ursprung- liga blodplättskoncentrationen. Blodplättar är ökända för att vara "klibbiga", ett uttryck som återspeglar tendensen hos blodplättar suspenderade i blodplasma att fästa vid varje icke- fysiologisk yta som de kommer i kontakt med. Under många om- ständigheter häftade de också starkt fast vid varandra.

I varje system som beror pà filtrering för att ta bort leukocyter från en blodplättssuspension finns en väsentlig kon- takt mellan blodplättarna och de inre ytorna på filteruppsätt- ningen. Filteruppsättningen måste vara sådan att blodplättar- na har minimal vidhäftning vid filteruppsättningens inre ytor och inte påverkas nämnvärt ogynnsamt genom kontakten med dem.

Om leukocytborttagningsanordningen har en porös struk- tur tenderar mikroaggregat, geler, fibrin, fibrinogen och fett- globuler att samlas på eller i porerna och orsaka blockering som förhindrar strömningen. Konventionella processer där filt- ret för borttagning av leukocyter från PRC förkonditioneras genom att saltlösning ledes genom filteruppsättningen med eller utan en saltlösningsspolning efter filtreringen, är olämpliga _ då vätskeinnehållet i transfusionen ökas kraftigt, och pa- tientens cirkulationssystem sålunda överbelastas potentiellt med vätska. Ett syfte med ett utförande enligt föreliggande uppfinning är en leukocytborttagningsanordning som avlägsnar 51A:255 « « -nlïïfﬂf 8 leukocyter och dessa andra element med hög effektivitet och utan sammanklumpning, inte kräver någon förkonditionering före behandling av PRC från nytappat blod och som inte behöver någon spolning efter filtrering för att återvinna kvarvarande röda blodkroppar i filtret.

På grund av den höga kostnaden och den begränsade till- gängligheten för blodkomponenter bör en anordning med ett po- röst medium för borttagning av leukocyter från biologisk vätska avge den högsta möjliga proportionen av komponenten i det do- nerade blodet; En idealisk anordning för leukocytborttagning från PRC eller PRP skulle vara billig, relativt liten, och ha förmåga att snabbt behandla blodkomponenter från omkring en enhet eller mera av biologiskt fluidum (t.ex. donerat helblod), pà exempelvis mindre än omkring en timme. Idealt bör denna Vanordning minska leukocytinnehàllet till den lägsta möjliga nivån under maximering av utbytet av en värdefull blodkompo- nent under minimering av en dyrbar, sofistikerad, arbetskrävan- de ansträngning av systemoperatören. Utbytet av blodkompo- nenten bör maximeras under samtidig avgivning av en livskraf- tig och fysiologiskt aktiv komponent, t.ex. genom minimering av skadan på grund av centrifugeringen och/eller närvaron av luft eller gas. Företrädesvis bör också det PRC-porösa mediet ha förmåga att avlägsna blodplättar liksom fibrinogen, fibrin- strängar, små fettglobuler och andra komponenter såsom mikro- aggregat som kan finnas i helblod.

Definitioner Följande definitioner användes med avseende på uppfin- ningen: (A) Blodprodukt eller biologiskt fluidum: antikoagulerat helblod (AWB), packade röda blodkroppar erhållna från AWB, blodplättsrik plasma (PRP) erhållen från AWB, blodplättskon- centrat (PC) erhållet från AWB eller PRP, plasma erhållen från AWB eller PRP, röda blodkroppar separerade från plasma och återsuspenderade i fysiologisk vätska, och blodplättar sepa- rerade från plasma och återsuspenderade i fysiologisk vätska.

Blodprodukter eller biologisk vätska innefattar också varje behandlat eller obehandlat fluidum associerat till levande 514_2s5 Ö~, i;¿L%»É 9 organismer, särskilt blod, innefattande helblod, varmt eller kallt blod och lagrat eller färskt blod, behandlat blod såsom blod utspätt med en fysiologisk lösning innefattande men inte begränsad till saltlösning, näringslösning, och/eller antikoa- gulerande lösningar, en eller flera blodkomponenter såsom blodplättskoncentrat (PC), blodplättsrik plasma (PRP), blod- plättsfri plasma, blodplättsfattig plasma, plasma eller packade röda blodkroppar (PRC), analoga blodprodukter härledda från blod eller någon blodkomponent eller härledda från benmärg.

Den biologiska vätskan kan innehålla leukocyter eller kan vara behandlad för att avlägsna leukocyter. Häri använda blodproduk- ter eller biologiska vätskor hänför sig till de ovan beskrivna komponenterna och till liknande blodprodukter eller biologiska vätskor erhållna på annat sätt och med liknande egenskaper.f' Enligt uppfinningen behandlas var och en av dessa blodproduk- ter eller biologiska vätskor på det sätt som beskrives häri.

(B) Enhet helblod: blodbanker i USA tappar vanligen om- kring 450 ml blod av blodgivaren i en påse som innehåller ett antikoaguleringsmedel för att förhindra blodet från att lev- ras§ Den tappade mängden skiljer sig emellertid från patient till patient och tappning till tappning. Här definieras den tappade mängden vid en sådan blodgivning som en enhet helblod.

(C) Enhet packade röda blodkroppar (PRC), blodplätts- rik plasma (PRP) eller blodplättskoncentrat (PC): här definie- ras en "enhet" enligt USA praxis och en enhet PRC, PRP, PC, eller röda blodkroppar eller blodplättar i fysiologisk vätska eller plasma är den mängd som fås från en enhet helblod. Den kan också beteckna mängden tappad vid en enda blodgivning.

Typiskt varierar volymen på en enhet. Exempelvis varierar vo- lymen på en enhet PRC avsevärt beroende på hematokriten (volym- procent röda blodkroppar) i det tappade helblodet, som vanligen är i storleksordningen omkring 37 till 54 %. Den åtföljande hematokriten PRC, som varierar i området från omkring 50 till över 80_% beror delvis på om utbytet av en eller annan blod- produkt skall minimeras. De flesta PRC-enheterna är i området omkring 170 till 350 ml, men variationer under och över dessa värden är inte ovanliga. Multipla enheter av några blodkompo- 514ï255 šr« fgsçïniäi nenter, särskilt blodplättar, kan sammanslås eller kombineras,a vanligen av 6 eller flera enheter. D v (D) Plasmabefriat fluidum: ett plasmabefriat fluidum betecknar en biologisk vätska som har någon kvantitet plasma avlägsnad därifrån, t.ex. den blodplättsrika vätska som erhål- lits när plasma separerades från PRP, eller den vätska som blev kvar sedan plasma avlägsnats ur helblod. tg g (E) Poröst medium: betecknar det porösa medium genom vilket en eller flera blodkomponenter eller biologiska vätskor passerar. Det PRC-porösa mediet avlägsnar leukocyter från den packade, röda blodkroppskomponenten. Blodplätts- eller PRP- poröst medium betecknar generellt varje medium som avlägsnar leukocyter från de icke-PRC-blodkomponenterna, d.v.s. från PRP eller från PC. Den röda blodkroppsbarriären blockerar passagen för röda blodkroppar och tar bort leukocyter från PRP i större eller mindre grad medan blodplättarna kan passera.

Som beskrives mera detaljerat nedan kan det porösa me- diet för användning med PRC bildas av någon naturlig eller syn- tetisk fiber (eller av andra material med liknande yta och por- storlek) som är kompatibla med blod. Det porösa mediet kan vara kvar obehandlat. Företrädesvis är den kritiska vätande ytspänningen (CWST) på det porösa mediet inom ett visst område, såsom beskrives nedan och bestämmes av dess avsedda användning.

Porytorna i mediet kan modifieras eller behandlas för att få det önskade CWST. Exempelvis är CWST för ett PCR-poröst me- dium vanligen över omkring 53 dyn/cm. D W Det porösa mediet för användning med PRP kan göras av någon naturlig eller syntetisk fiber eller annat poröst mate- rial som är kompatibelt med blod. Det porösa mediet kan vara' a kvar obehandlat. Företrädesvis är CWST och zäta-potentialen för det porösa mediet inom vissa områden, som beskrives nedan och som bestämmes av dess avsedda användning. Exempelvis är- CWST för ett PRP-poröst medium vanligen över omkring 70 dyn/cm. iDet porösa mediet enligt uppfinningen kan vara anslutet* till en ledning insatt mellan behållarna och kan vara inlagt i ett hölje somi.sin tur kan vara anslutet till ledningen.

Filteruppsättning hänför sig häri till det porösa mediet in- . < . . . _ 514 255 ll lagt i ett lämpligt hölje. Exempel pà filteruppsättningar kan innefatta en leukocytborttagningsuppsättning eller anordning eller en barriäruppsättning eller anordning för röda blodkrop- par. Ett biologiskt vätskebehandlingssystem såsom ett system för bloduppsamling och behandling kan innehålla porösa medier, företrädesvis som filteruppsättningar. Företrädesvis bildar det porösa mediet ett hinder vid sina kanter vid insättning i höljet{ Det porösa mediet kan formas som en plan yta, ett korru- gerat ark, en väv eller ett membran. Det porösa mediet kan för- formas och utformas som ihåliga fibrer även om uppfinningen inte är begränsad därtill.

(F) Separationsmedium: ett separationsmedium betecknar ett poröst medium som är effektivt för att separera en kompo- nent i en biologisk vätska fràn en annan komponent. Separa- tionsmedierna enligt uppfinningen är lämpliga för att leda ige- nom minst en komponent i blodprodukten eller den biologiska vätskan, företrädesvis plasma, men inte andra komponenter i blodprodukten eller den biologiska vätskan, företrädesvis blodplättar och/eller röda blodkroppar.

Som anges mera detaljerat nedan kan separationsmediet för användning för en biologisk vätska göras av någon naturlig eller syntetisk fiber eller av ett poröst eller permeabelt membran (eller av andra material med liknande yta och porstor- lek) som är kompatibla med en biologisk vätska. Ytan på fib- rerna eller membranet kan vara omodifierad eller kan modi- fieras för att få en önskad egenskap. Även om separationsme- diet kan vara kvar obehandlat, behandlas fibrerna eller mem- branet företrädesvis för att göra dem ännu effektivare för se- paration av en komponent i en biologisk vätska, t.ex. plasma, fràn andra komponenter i en biologisk vätska, t.ex. blodplät- tar eller röda blodkroppar. Separationsmediet behandlas före- trädesvis för att minska eller eliminera blodplättarnas vid- häftning till mediet. Varje behandling som minskar eller eli- minerar adhesionen av blodplättar faller inom ramen för före- liggande uppfinning. Vidare kan mediet vara ytmodifierat så- som beskrives i US-PS 4 880 548, som införlivas häri genom 51,4 2,55 12 referens, för att öka den kritiska vätande ytspänningen (CWST) hos mediet och för att bli mindre vidhäftande till blodplät- tar. Definierat som CWST är ett föredraget CWST-område för ett separationsmedium enligt uppfinningen över omkring 70 dyn/cm, lämpligare över omkring 90 dyn/cm. Mediet kan också behandlas med gasplasma för att minska blodplättsvidhäftningen. Företrä- desvis är den kritiska, vätande ytspänningen (CWST) i separa- tionsmediet inom ett visst område såsom angives nedan, och som bestämmes av dess avsedda användning. Porytorna på mediet kan modifieras eller behandlas för att åstadkomma det önskade CWST.

Separationsmediet kan förformas, multilamineras och/eller behandlas för att modifiera dess yta. Om ett fibröst medium an- vändes kan fibrerna behandlas antingen före eller efter samman- läggningen av fibrerna. Det är lämpligt att modifiera fiber- *ytorna före sammanläggningen av fibrerna, emedan en mera kohe- siv, starkare produkt erhålles efter värmekompression till ett sammanhängande filterelement. Separationsmediet förformas fö- reträdesvis.

Separationsmediet kan göras med någon lämplig form, sá- som ett plant ark, ett korrugerat ark, en väv, ihåliga fibrer eller ett membran.

(G) Hálrumsvolymen är den totala volymen av alla po- rerna i ett poröst medium. Hálrumsvolymen uttryckes här nedan som procent av det porösa mediets synbara volym.

(H) Mätning av fiberytan och den genomsnittliga fiber- diametern: enligt uppfinningen är en användbar teknik för mät- ning av fiberytan, exempelvis med gasadsorption, generellt be- tecknad som "BET"-mätning. Ytan på smältblåsta vävnader kan användas för att beräkna den genomsnittliga fiberdiametern med användning av PBT som ett exempel: l Total volym fiber i l g = ïïšš cc (där 1,38 = PBTS fiberdensitet, g/cc) 2 följaktligen “d L = -l- (i) 4 1,38 Fiberns yta är ndL = Af (2) 514 255 13 Dividering av (l) med (2) -É- = -Ä-- 4 l,38Af och a = Tjä- = 27:-: eller (o,34Af)'-l där L = den totala längden av l g fiber i cm d = genomsnittlig fiberdiameter i cm, och A = fiberytan i cm2/g. f Om enheter för d är }nn blir Af m2/g (kvadratmeter/gram) som användes i fortsättningen.

(I) Kritisk vätande ytspänning: såsom beskrives i US-PS 4 880 548 kan CWST för ett poröst medium bestämmas genom att individuellt pà deras yta pålägga en serie vätskor med yt- spänningar varierande med 2 till 4 dyn/cm och med observation av absorptionen eller icke-absorptionen för varje vätska som funktion av tiden. CWST för ett poröst medium i dyn/cm definie- ras som genomsnittsvärde på ytspänningen för den vätska som absorberas och ytspänningen på vätskan med närliggande ytspän- ning som inte absorberas under en förutbestämd tid. De absor- berade och icke-absorberade värdena beror principiellt på yt- egenskaperna på det material av vilket det porösa mediet gjorts och för det andra på porstorlekskännetecknen för det porösa mediet.

Vätskor med ytspänningar lägre än CWST för ett poröst medium väter spontant mediet vid kontakt, och om mediets porer står i förbindelse med varandra strömmar vätskan lätt genom mediet. Vätskor med större ytspänningar än det porösa mediets CWST kan inte alls strömma vid låga differentialtryck, eller kan strömma ojämnt vid tillräckligt höga differentialtryck för att tvinga vätskan genom det porösa mediet. För att fà lämp- lig inträngning av en vätska såsom blod i ett fibröst medium, skall det fibrösa mediet företrädesvis ha ett CWST i området omkring 53 dyn/cm eller högre.

För det porösa medium som användes för att behandla PRC föredrages om CWST hàlles inom ett område något över CWST för obehandlad polyesterfiber (52 dyn/cm), t.ex. över omkring 53 idyn/cm, och lämpligast över omkring 60 dyn/cm. För det porösa medium som användes för behandling av PRP föredrages om CWST hàlles inom ett område över omkring 70 dyn/cm. _14 25 5 14 (J) Generell procedur för mätning av zäta-potential: zäta-potentialen mättes pà ett prov skuret av en l/2 tum tjock stapel vävnader. _ Zäta-potentialen mättes genom att placera provet i en akrylfilterhàllare som höll provet fast mellan två platinanät 100 x 100 mesh (100 tràdar per tum i varje riktning). Näten var med koppartràd kopplade till terminalerna på en Triplett Corporation modell 3360 volt-ohm-meter, med nätet på provets uppströmssida kopplat till mätarens positiva terminal. En pH- buffrad lösning strömmade genom provet med ett differential- tryck på 45 tum vattenpelare tvärs över filterhàllaren och ut- flödet uppsamlades. För mätningar vid pH 7 gjordes en buffrad lösning genom att tillsätta 6 ml pH 7-buffert (Fisher Scientific Co. katalognummer SBl08-500) och 5 ml pH 7,4-buffert (Fisher Scientific Co. katalognummer SBll0-500) till l liter pyrogenfritt, avjoniserat vatten. För mätningar vid pH 9 gjor- des en buffrad lösning genom att tillsätta 6 ml pH 9-buffert (Fisher Scientific Co. katalognummer SBll4-500) och 2 ml pH l0- buffert (Fisher Scientific Co. katalognummer SBll6-500) till 1 liter pyrogenfritt, avjoniserat vatten. Den elektriska poten- tialen tvärsöver filterhàllaren mättes under strömningen (unge- fär 30 sekunders strömning erfordrades för stabilisering av po- tentialen) och korrigerades för cellpolariseringen genom att därifrån subtrahera den elektriska potentialen mätt när ström- ningen stoppades. Under strömningen mättes vätskans pH med en Cole-Parmer modell J-5994-10 pH-mätare med en in-line modell J-5993-90 pH-sond. Vätskans konduktivitet mättes med en Cole- Parmer modell J-l48l-60 ledningsmätare med en modell J-1481-66 strömningscell. Därefter omkastades voltmätarens polaritet och utflödet strömmade baklänges genom filterhàllaren med ett differentialtryck på 45 tum vattenpelare. Liksom i det första fallet korrigerades den elektriska potentialen under ström- ningen för cellpolariseringen genom subtraktion av den elekt- riska potentialen mätt sedan strömningen stoppats. Genomsnittet på de båda korrigerade potentialerna angavs som strömnings- potentialen.

Mediets zäta-potential härledes ur strömningspotentialen 514 255 enligt följande förhållande (J. T. Davis et al, lnrerfaelal Phenomena, Academic Press, New York, 1963): zäta-potential = 4D; - Esk där n är viskositeten på den strömmande lösningen, D är dess dielektricitetskonstant, Å är ledningsförmàgan, Es är ström- ningspotentialen och P är tryckfallet tvärsöver provet under strömningsperioden. Vid dessa försök var mängden 4 nn/DP lika med 0,800.

(K) Tangentiell strömningsfiltrering: tangentiell strömningsfiltrering användes här för ledning eller för cirku- lering av en biologisk vätska generellt parallellt eller tan- gentiellt mot separationsmediets yta.

Sammanfattning av uppfinningen Med anordningarna och metoderna enligt uppfinningen gö- res leukocytreduceringen i en biologisk vätska, exempelvis PRC eller PRP, vid tiden för behandlingen, som i USA generellt är inom omkring 6 till 8 timmar från den tid blodet tappats.

Då sålunda en biologisk vätska överföres från sin pàsé av- lägsnas leukocyter med det lämpliga, porösa mediet, och leu- kocytreducerad, biologisk vätska uppsamlas i satellitpàsen.

Enligt uppfinningen ástadkommes ett system där en biologisk vätska såsom helblod behandlas till PRP och PRC. PRP leukocyt- reduceras genom att mellan bloduppsamlingspåsen och en första satellitpàse sätta in åtminstone ett poröst medium för att ta bort leukocyter frán PRP, PRC leukocytreduceras genom att mel- lan bloduppsamlingspàsen och en andra satellitpàse sätta in åtminstone ett poröst medium för att ta bort leukocyter frán PRC.

Uppfinningen innefattar också ett centrifugeringssystem där den ena eller båda de insatta leukocytreduceringsfiltren “tillsammans anordnas i en centrifugkorg pá sådant sätt att filtren, det porösa mediet i filtren och blodpàsarna inte ska- das av de mycket stora krafterna under centrifugeringen.

Processer och system enligt uppfinningen kan också in- nehálla ett barriärmedium för röda blodkroppar som medger en 514 255 16 komponent i den biologiska vätskan att passera, men förhindrar passering av en annan komponent genom mediet så att behovet av kontinuerlig övervakning av en operatör undvikes och den effek- tivitet varmed en biologisk vätska såsom helblod separeras till en eller flera komponenter förbättras.

Ytterligare kan processer och system enligt uppfinningen innefatta ett gasutlopp som tillåter gas närvarande i systemet att slippa ut.

Processer och system enligt uppfinningen kan också inne- hålla ett gasinlopp som släpper in gas i systemet för återvin- ning av en biologisk vätska som kan vara instängd eller kvar- hållen under behandlingen.

Uppfinningen innebär också behandling av en biologisk vätska för att utan centrifugering avskilja minst en komponent 'frán den biologiska vätskan, t.ex. behandling av PRP för att få plasma och PC eller separation av plasma från helblod. Pro- cesser och anordningar enligt uppfinningen använder ett sepa- rationsmedium som tillåter passage av en komponent i den bio- logiska vätskan, såsom plasma, men förhindrar passage-av andra komponenter, såsom blodplättar eller röda blodkroppar, genom mediet, och därigenom eliminerar behovet av "hard-spin“-centri- fugering som ett behandlingssteg. Tangentiell strömning av en biologisk vätska parallellt med separationsmediets uppströms- yta medger passage av plasma genom mediet så att benägenheten hos cellulära komponenter eller blodplättar att häfta vid me- diets yta minskas och sålunda bidrar till att förhindra blod- plättarnas passage genom separationsmediet. Hydrodynamiken för strömningen parallellt med en yta anses faktiskt vara sådan att strömningen parallellt med ytan ger blodplättarna en spinn rörelse som gör att de kan återvinnas från ytan. _ Kort beskrivning av ritningarna Fig. l är ett utförande av ett behandlingssystem enligt *uppfinningen för en biologisk vätska, där biologisk vätska uppdelas i komponenter genom centrifugalseparering.

Fig. 2 är ett annat utförande av ett behandlingssystem för biologisk vätska enligt uppfinningen innefattande en sepa- rationsanordning utan centrifugering. 17 Fig. 3 är ett utförande av uppfinningen som innehåller ett gasinlopp och ett gasutlopp.

Fig. 4 är en sprängd perspektivvy av ett utförande av ett filter, en centrifugkorg och en hållare för att hålla filt- ret i rätt läge i korgen.

Fig. 5 är ett utförande enligt föreliggande uppfinning sett framifrån..

Fig. 6 är ett tvärsnitt av ett utförande enligt uppfin- ningen som visar den första strömningsbanan i en separations- anordning enligt uppfinningen.

Fig. 7vär ett snitt genom fig. 6 längs linjen A--A.

Fig. 8 är ett snitt genom fig. 6 längs linjen B--B.

Fig. 9 är ett tvärsnitt av ett utförande enligt uppfin- ningen som visar den andra strömningsbanan i en separationsan- ordning enligt uppfinningen.

Fig. 10 är ett snitt genom fig. 9 längs linjen C--C.

Fig. ll är ett snitt genom fig. 9 längs linjen D--D.

Specifik beskrivning av uppfinningen Föreliggande uppfinning avser en biologisk vätska, före- trädesvis blod, uppsamling och behandling innehållande en förs- ta behållare och en andra behållare med en ledning som förbin- der den första behållaren med den andra, och minst en tredje behållare och en ledning som förbinder den första behållaren meddentmedje, och med minst ett första poröst medium insatt mellan den första och den andra behållaren, och med minst ett andra poröst medium insatt mellan den första och den tredje be- hållaren. Det första porösa mediet kan vara leukocytborttagan- de, en barriär för röda blodkroppar, en uppsättning innehållan- de ett medium för borttagning av leukocyter och en barriär för röda blodkroppar, eller kombinationer därav.

Det andra porösa mediet kan vara leukocytborttagande och eventuellt innehålla ett mikroaggregatfilter och/eller ett gelförfilterelement. Som framgår mera detaljerat nedan kan upp- sättningen också innehålla ytterligare behållare, porösa me- dier och ledningar som förbinder behållarna och de porösa me- dierna.

Enligt ett annat utförande av uppfinningen kan blodupp- ........... _, 514à255 :~kÃ _:n¿f"Ääf 18 samlings- och behandlingsuppsättningen innehålla behållare för- bundna med en ledning och ett poröst medium insatt i ledningen för att ta bort leukocyter från PRC, varvid det porösa mediet "har ett CWST större än omkring 53 dyn/cm.

'I ett annat utförande av uppfinningen kan bloduppsam- lings- och behandlingsuppsättningen innehålla behållare förbund- na med en ledning och ett poröst medium insatt i ledningen för att avlägsna leukocyter från PRP, där det porösa mediet har ett CWST större än omkring 70 dyn/cm.

Uppfinningen avser också ett behandlingssystem för bio- 'logisk vätska innehållande en första behållare, ett första me- dium innehållande en barriär för röda blodkroppar kommuniceran- de med den första behållaren och utgörande en första strömnings- bana, och ett andra poröst medium innehållande ett leukocyt- I avlägsnande medium kommunicerande med den första behållaren och utgörande en andra strömningsbana. Som framgår mera detaljerat nedan kan systemet också innehålla ytterligare behållare, ström- ningsbanor och porösa medier.

Uppfinningen avser också ett sätt för att uppsamla och behandla blod innefattande uppsamling av helblod i en behållare, centrifugering av helblodet, ledning av det centrifugerande blodets överstående lager genom ett första poröst medium inne- hållande minst endera av ett leukocytborttagande medium, en barriär för röda blodkroppar och ett kombinerat medium för av- lägsnande av leukocyter och röda blodkroppar, samt ledning av det centrifugerade blodets sedimentlager genom ett andra poröst medium, innehållande ett leukocytborttagningsmedium.

Uppfinningen avser också ett sätt att behandla en biolo- gisk vätska innefattande uttryckning av en biologisk vätska från en första behållare till ett första poröst medium inne- fattande en barriär för röda blodkroppar och uttryckning av en biologisk vätska från den första behållaren till ett andra po- röst medium. Som framgår mera detaljerat nedan kan metoden också innefatta behandling av vätskan genom ytterligare behål- lare, strömningsbanor och porösa medier.

Ett exempel på uppsamling av biologisk vätska och be- handlingssystem visas på fig. l. Behandlingssystemet för bio- än 1 1., _ 1514 255 19 (logisk vätska betecknas generellt med 10. Det kan innehålla en första behållare eller uppsamlingspåse ll, en nål eller kanyl 1 anpassad att stickas in i blodgivaren, en eventuell barriär 12 för röda blodkroppar, en första leukocytborttagning 13, en andra behållare (första satellitpåse) 41, en eventuell fjärde behållare (tredje satellitpåse) 42, en andra leukocytborttag- ning 17 och en tredje behållare (andra satellitpàse) 18. Alla anordningarna eller behållarna kan vara i vätskeförbindelse ge- nom ledningar, företrädesvis flexibla slangar, 20, 21, 25, 26, 27 eller 28. Den första leukocytborttagningen innefattar före- trädesvis ett poröst medium för att släppa igenom PRP, den andra leukocytborttagningen innefattar företrädesvis ett poröst medium lämpligt för att släppa igenom PRC. En försegling, ven- til, klämma eller tillslutning för grenledning eller kanyl (icke visad) kan också vara insatt i eller på ledningarna eller i uppsamlings- och/eller satellitpåsarna. Förslutningen (eller förslutningarna) öppnas när vätskan skall överföras mellan på- sarna.

Vid ett annat utföringsexempel på fig. 2 är blodbehand- lingssystemet samma som på fig. l med undantag av att delen nedströms leukocytborttagningen 13 innehåller en separation 14, företrädesvis en separation utan centrifugering.

I ett annat utföringsexempel på fig. 3 innehåller upp- finningen också minst ett gasinlopp 51, 53 och/eller minst ett gasutlopp 52, 54. Systemet på fig. 3 innehåller en första be- hållare eller uppsamlingspåse 1 i vätskeförbindelse med en eventuell barriär för röda blodkroppar 12, gasinlopp 53, en leukocytborttagning 13 och gasutlopp 54. Den första behållaren ll kan också vara i vätskeförbindelse med ett gasinlopp 51, en leukocytborttagning 17 och ett gasutlopp 52. Som visas mera detaljerat nedan kan uppsättningen också innehålla ytterligare behållare, strömningsvägar och porösa medier. - Alla antal och kombinationer av anordningar, porösa me- dier, behållare och ledningar är lämpliga. En fackman inser att den beskrivna uppfinningen kan kombineras på olika sätt som faller inom uppfinningens ram.

Varje komponent i uppsättningen skall nu beskrivas mera detaljerat nedan. 514255 De behållare som användes för den biologiska vätskebe- handlingen kan göras av varje material som är förenligt med en biologisk vätska, såsom helblod eller blodkomponenter, och med förmåga att tåla centrifugering och sterilisering. En stor mängd sådana behållare är redan kända inom tekniken. Exempel- vis göres bloduppsamlings- och satellitpåsar vanligen av mjuk- gjord polyvinylklorid, t.ec. PVC mjukgjord med dioktylftalat, dietylhexylftalat eller trioktyltrimellitat. Påsarna kan också göras av polyolefin, polyuretan, polyester och polykarbonat.

Ledningarna som användes här kan vara varje ledning som åstadkommer vätskeförbindelse mellan behållarna och göres van- ligen av samma material som dessa, företrädesvis mjukgjord PVC.

Slangarna kan gå in i behållarnas inre och kan exempelvis an- vändas som sifon. Ett antal slangar som ger vätskeförbindelse med varje individuell behållare kan finnas och slangarna kan vara orienterade på ett antal sätt. Exempelvis kan finnas minst två slangar i toppen på uppsamlingspåsen eller i botten på pà- sen eller en slang vid varje ände på påsen.

Vidare kan slangarna, uppsättningarna, de porösa me- dierna, och behållarna vara orienterade till att ge olika ström- ningsbana. När exempelvis helblod behandlas kan PRP strömma i en första bana, t.ex. genom barriären för röda blodkroppar (om sådan finns), en PRP leukocytborttagning och till en satellit- påse t.ex. en andra behållare. På liknande sätt kan PRC strömma längs en andra bana t.ex. genom PRC leukocytborttagningen och till en satellitpåse (t.ex. en tredje behållare). Då olika strömningsbanor kan finnas kan biologiska vätskor, t.ex. PRP och PRC, strömma samtidigt eller efter varandra.

En tillslutning, ventil, klämma, kran eller liknande finns i eller på ledningarna. Föreliggande uppfinning är emel- lertid inte begränsad av materialet i behållarna eller ledning- arna som förbinder dem.

Kompositionen av de olika porösa medierna beror delvis på den önskade funktionen, t.ex. blockering av röda blodkroppar eller borttagning av leukocyter. En föredragen komposition på de olika porösa medierna är en matta eller väv bestående av fibrer, som företrädesvis är termoplastiska. Fibrerna i de po- 21 rösa medierna kan vara fibrer som är kompatibla med biologiska vätskor, och de kan vara antingen naturliga eller syntetiska.

Enligt uppfinningen behandlas eller modifieras företrädesvis _fibrerna för att åstadkomma eller öka CWST. Exempelvis kan fib- rerna ytmodifieras för att öka deras kritiska vätningsytspän- ning (CWST). Exempelvis kan behandlade eller obehandlade fibrer i det porösa mediet för PRC företrädesvis ha ett CWST över om- kring 53 dyn/cm, och i det porösa mediet för PRP över omkring 70 dyn/cm. Fibrerna kan också bindas, smältas eller på annat sätt fästas med varandra, eller också kan de tvinnas samman me- kaniskt. Andra porösa medier, exempelvis skumplaster med öppna celler och ytmodifierade som ovan kan likaledes användas. 'Även om de porösa medierna kan göras av varje material som är kompatibelt med biologisk vätska, ifràgakommer främst an- vändning av kommersiellt tillgängliga material av praktiska skäl.

De porösa medierna enligt föreliggande uppfinning kan företrä- desvis göras exempelvis av någon syntetisk polymer som kan bil- da fibrer och tjäna som substrat för ympning. Företrädesvis skall polymeren ha förmåga att reagera med minst en eteniskt o- mättad monomer under inverkan av joniserande strålning utan att matrisen nämnvärt eller överdrivet påverkas ogynnsamt av strålningen. Lämpliga polymererwför användning som substrat innefattar, utan att vara begränsade därtill, polyolefiner, polyestrar, polyamider, polysulfoner, akrylplaster, polyakryl- nitriler, polyaramider, polyarylenoxider och sulfider och poly- merer och sampolymerer av halogenerade olefiner och omättade Q nitriler. Exempel är polyvinylidenfluorid, polyeten, polypropen cellulosaacetat och Nylon 6 och 66, med flera. Föredragna poly- merer är polyolefiner, polyestrar och polyamider. Den mest föredragna polymeren är polybutentereftalat (PBT). _ Ytegenskaperna på en fiber kan vara kvar omodifierad eller modifieras på ett antal olika sätt, exempelvis genom ke- misk reaktion såsom våt eller torr oxidering, genom att belägga ytan med en polymer eller genom ympreaktioner där substratet eller fiberytan aktiveras före eller under vätning av fiber- ytan med en monomerlösning, eller genom exponering för en ener- gikälla såsom värme, en Van der Graff-generator, ultraviolett '14:X2E35 . , . . . k 22 ljus eller olika andra sorters strålning, eller genom att be- handla fibrerna med gasplasma. En föredragen metod är en ymp- reaktion med gammastrálning, exempelvis från en koboltkälla.

Vid ett exempel på strålningsympning användes minst en av ett antal monomerer som var och en innehåller en eten- eller ' akryldel och en andra grupp som företrädesvis är en hydrofil grupp, t.ex. -COOH, eller -OH. Ympning av fibermediet kan också göras med föreningar innehållande en eteniskt omättad grupp, såsom en akryldel kombinerad med en hydroxylgrupp, företrädes- vis monomerer såsom hydroxietylmetakrylat (HEMA), eller akryl- syra. Föreningarna innehållande en eteniskt omättad grupp kan kombineras med en andra monomer såsom metylakrylat (MA), metyl- metakrylat (MMA) eller metakrylsyra }MAA). MA eller MMA inför- livas företrädesvis i det använda, porösa mediet för att be- handla PRC, och MAA företrädesvis i det använda porösa mediet för behandling av PRP. Företrädesvis kan MAA till HEMA monomer- viktförhållandet i den modifierade blandningen vara omkring 0,0l:l och O,5:l, och lämpligast är MA eller MMA till HEMA monomerviktförhàllandet i den modifierande blandningen mellan omkring 0,l:l och O,4:l. Användning av HEMA bidrar till ett myc- ket högt CWST. Analoger med liknande funktionella egenskaper kan också användas för att modifiera fibrernas ytegenskaper.

Det har iakttagits att porösa medier som ytbehandlats med några ympmonomerer eller kombinationer av monomerer upp- pträder olika med avseende på spännrummet mellan ytspänningen på den vätska som absorberas och ytspänningen på den vätska som inte absorberas när CWST bestämmes. Detta spännrum kan variera från mindre än 3 till så mycket som 20 dyn/cm eller mera. Fö- reträdesvis har mediet en skillnad mellan de absorberade och icke-absorberade värdena på omkring 5 dyn/cm eller mindre.

Detta val återspeglar den större precision med vilket CWST kan styras när mindre spännrum väljes, ehuru medier med större skillnader också kan användas. Användning av den mindre skill- isnaden föredrages för att förbättra styrningen av produktkva- liteten.

Strålningsympning kan öka fiber-fiberbindningen i ett fibröst medium. Följaktligen kan ett ,fibröst medium som 514kr 255 23 visar litet eller ingen fiber-fiberbindning i obehandlat till- stånd uppvisa signifikant fiber-fiberbindning sedan fibrerna stràlningsympats för att öka mediets CWST.

För poröst medium för användning med en biologisk väts- ka såsom PRP är ett föredraget område för fiberns CWST före- trädesvis över omkring 70 dyn/cm, lämpligen omkring 70 till 115 dyn/cm, lämpligast 90 till 100 dyn/cm och ännu bättre 93 till 97 dyn/cm. Ett föredraget område för zäta-potentialen vid plas- mans pH 7,3 är omkring -3 till omkring -30 millivolt, lämpligen omkring -7 till -20 mv och lämpligast omkring -10 till -14 mv.

I packade röda blodkroppar liksom i helblod är de röda blodkropparna suspenderade blodplasma som har en ytspänning av omkring 73 dyn/cm. För minskningen av PRCs leukocytinnehàll är ett CWST större än omkring 53 dyn/cm önskvärt. CWST kan vara mer än från omkring 53 dyn/cm till ll5 dyn/cm, men uppfinningen är inte begränsad därtill. Ett mera föredraget CWST är över om- kring 60 dyn/cm, och ännu lämpligare är CWST från omkring 62 dyn/cm till mindre än omkring 90 dyn/cm.

Om så önskas kan den biologiska vätskans strömming genom filtret regleras till att ge en total strömningsperiod på om- kring 10 till 40 minuter genom att välja den lämpliga diametern, tjockleken, fiberdiametern och densiteten på elementet och/eller genom att variera slangens diameter antingen uppströms eller nedströms filtret eller både upp- och nedströms. Vid dessa strömningshastigheter kan en effektivitet av leukocytminsk- ningen med mer än 99,9 % åstadkommas. Om den biologiska vätskan som behandlas är PRP kan dessa effektivitetsnivåer resultera i en PC-produkt med mindre än omkring 0,1 x 106 leukocyter per enhet PC jämfört med målet på mindre än omkring l x l06.

Det porösa mediet för leukocytminskning i PRC är främst avsett för användning samman med PRC från blod inom omkring 8 timmar från blodgivningen. Det kan också användas för att filtrera PRC som lagrats vid 40 C i upp till flera veckor, men då risken för levring under filtreringen ökar med lagrings- tiden, kan risken minskas genom exempelvis användning av för- filter före det häri beskrivna mediet.

Ett PRC-poröst medium enligt uppfinningen kan göras med d 514 255 24 ett brett effektivitetsomràde för leukocytborttagning. Om det porösa mediet är sammansatt av 2,6 Pm fibrer och väger omkring p<27,98 - 2%ÉåÉ-X ) gram (3) där 0 = fiberdensiteten i g/cc, och V = hålrumsvolymen i % _ kan vid användning för leukocytborttagning från PRC log för effektiviteten definieras som förhållandet mellan den ingående leukocytkoncentrationen och den utgående, beräknas ur formeln log effektivitetsnivà = 25,5 (1 - ï%6) (4) För de flesta användningar är det önskvärt att hålla strömnings- tiden för en enhet PRC genom det porösa mediet vid trycksättning till omkring 30 till 300 mm Hg på mindre än omkring 30 till 40 minuter. För att uppnå denna strömningshastighet bör anordningen företrädesvis ha en genomströmningsyta pà omkring 30 till 60 cmz.

Exempelvis ett poröst medium med 8,63 cm diameter (yta = 58,5 cmz) gjort av 7,7 g 2,6 Pm diameter 1,38 g/cm3 densitets- fibrer med en hálrumsvolym på 76,5 %, uppfyller kraven i formel (3) och dess effektivitet för leukocytborttagning enligt ekva- tion (4) kommer att bli log 6. Om sålunda den ingående kon- centrationen skulle vara 109 leukocyter/enheter skulle den ut- gående koncentrationen bli 9 06 F' På samma sätt med V = 88,2 % och användning av 2,6 Inn fibrer med densiteten 1,38 g/cc skulle vikten på det porösa mediet bli enligt ekvation (3) 88,2 1,38 [27,9s - (2946 x 100 = 3,0 g och logaritmen för effektiviteten enligt ekvation (4): ,5 (1 - --88'2) log effektivitet 100 3,0 514, 255 Om sålunda den ingående leukocytkoncentrationen vore 109 per enhet PRC skulle den utgående koncentrationen bli = 106 per enhet lig 103 Ekvationerna (3) och (4) är tillämpliga för en hálrumsvolym av omkring 73 till 88,5 %, som spänner över effektivitetsom- rådet från omkring log 3 till log 7. _ Ekvationerna (3) och (4) ger mycket användbara riktlin- jer för att utforma och bygga optimala eller nästan optimala PRC-filter med begränsade försök, men en fackman inom området inser att variationer från dessa formler och modifikationer för de porösa medierna kan göras för att framställa användbara produkter. Exempelvis på modifikationer och deras effekt på de porösa mediernas verkningsgrader anges nedan: önskade filteregenskaper ändringar från ekvationerna (3) och (4) ökad leukocytborttag- - minskad fiberdiameterl ningseffektivitet - ökad fibervikt ' - minskad hàlrumsvolym minskad möjlighet till - ökad filterarea klumpning - använda förfiltrering - ökad hålrumsvolym minskad inre kvarhållen - minskad hålrumsvolymz . . . . 2 volym - - ingen förfiltrering - använd finare fibrerl ökad strömningshastighet - behandla blodet så att PRC får för PRC lägre hematokrit och följakt- ligen lägre viskositet - använd högre huvud vid filtre- ring - öka filterytan med åtföljande minskning av tjockleken - öka filtrets hàlrumsvolym 514. i 255 11; _' is* 26 motstå högre, pàlagt - minska hålrumsvolymen differentialtryck - använd grövre fibrer på be- kostnad av minskad effekti- vitet - använd fibrer med högre modul 1 Användning av alltför liten fiberdiameter kan resultera i att filtret faller ihop vid normalt arbets-differential- itryck. 2 Kan resultera i överdrivet långa filtreringstider eller fullständig sammanklumpning innan en transfusion blir färdig. _ Barriärmedium för röda blodkroppar Barriärer för röda blodkroppar gjorda enligt ett utfö- rande av uppfinningen och som exempelvis är insatta mellan blod- uppsamlingspàsen och PRP-påsen tar vanligen bort omkring 85 till 99 % eller mera av de tillhörande leukocyterna, en bort- tagning som inte kan vara tillräcklig för att alltid ge en ràterstàende leukocytmängd mindre än l06 leukocyter per enhet PC. En principiell funktion av denna uppsättning är emellertid att verka som en automatisk "ventil" under dekanteringen genom att momentant stoppa strömmen av biologisk vätska såsom det överstående lagret (t.ex. PRP) i det ögonblick då de röda blod- kropparna kommer i kontakt med det porösa mediet. Mekanismen för denna ventillika verkan är inte fullständigt klargjord, men den kan återspegla aggregeringen av de röda blodkropparna då de når den porösa ytan sà att de bildar en barriär som för- hindrar eller blockerar ytterligare strömning av supernatant- lagret genom det porösa mediet.

Aggregeringen av röda blodkroppar vid kontakt med det po- rösa filtret synes vara hänförlig till CWST och/eller till andra mindre väl kända ytegenskaper pà fibrerna, som genereras med den häri beskrivna proceduren för modifieringen av dem. Denna teori för den föreslagna mekanismen understödes av förekomsten av filter med förmåga till mycket effektiv leukocytborttagning från humana, röda blodkroppssuspensioner och som har porstorle- kar så små som 0,5 Pm genom vilka röda blodkroppar går fritt och fullständigt utan någon hopklumpning med pålagda tryck av 514255 27 samma storlek som den som användes enligt föreliggande uppfin- ning. Å andra sidan stoppar filtren enligt uppfinningen, som har pordiametrar större än omkring 0,5 Pm, abrupt strömningen av röda blodkroppar när dessa kommer i kontakt med det porösa me- diet. Detta tyder på att den ventilliknande verkan inte är hän- förlig till eller orsakad av porstorleken eller av en filtre- ringsmekanism. Mekanismen hos denna ventillika verkan är inte helt förklarad, men den kan återspegla den zäta-potential-rela- terade aggregeringen av de röda blodkropparna när de när fil- terytan under bildning av en barriär som förhindrar eller bloc- kerar ytterligare strömning av en biologisk vätska innehållande röda blodkroppar genom det porösa mediet.

Vid ett utförande enligt uppfinningen innefattar filtret för de röda blodkropparna ett föredraget område pà fiberytan av omkring 0,04 till omkring 0,3 m2, och bättre omkring 0,06 till omkring 0,20 m2. Ett föredraget område för det porösa me- diets strömningsyta är omkring 3 till 8 cmz, och ett mera före- draget område är omkring 4 till 6 cmz. Ett föredraget-område för hàlrumsvolymen är omkring 71 till 83 % och ännu bättre fràn omkring 73 till 80 %. På grund av den lilla storleken har en föredragen anordning enligt denna variation av uppfinningen en låg restvolym. När exempelvis den biologiska vätskan som be- handlas är PRP, kvarhàller anordningen enligt denna variation av uppfinningen internt endast omkring 0,5 till l cc PRP, vil- ket representerar en.förlust av blodplättar som är mindre än 0,5 %.

Vid en annan variation av anordningarna enligt uppfin- ningen ledes PRP från en enda enhet pá omkring 450 cc humant blod under ett strömningsintervall pà omkring l0 till 40 minu- ter genom ett filter innehàllande ett poröst medium företrädes- vis innehållande ympade fibrer, med en yta pà omkring 0,08 till l,0 m2 och företrädesvis omkring 0,1 till 0,7 m2 med en hål- rumsvolym i området omkring 50 till 89 %, företrädesvis omkring 60 till 85 %. Filterelementet är företrädesvis cylindriskt med förhållandet mellan diameter och tjocklek lämpligen i området omkring 7:1 till 40:l. Fiberdiametern är företrädesvis omkring .14 255 28 1,0 till 4 fm och lämpligare omkring 2 till 3 Pm. I förhål- lande till den tidigare variationen av uppfinningen har denna större fiberyta, större strömningsyta på det porösa mediet, mindre densitet i det porösa mediet och ökad hålrumsvolym. Alla dessa parametrar kan varieras, exempelvis kan diametern på det porösa mediet minskas och tjockleken ökas med bibehållande av samma totala mängd fibrer, eller fibrerna kan ha större diame- ter med ökning av den totala mängden fibrer, eller kan fibrerna vara packade i motsats till förformade i en cylindrisk skiva.

Sådana variationer faller inom området för föreliggande upp- finning.

En annan variation av denna uppfinning kan innefatta ett >poröst medium, vari uppströmsdelen har högre densitet än ned- strömsdelen. Exempelvis kan det porösa mediet innehålla ett uppströmslager med högre densitet för att blockera de röda blodkropparnas passage och ett nedströmslager med mindre densi- tet för avlägsnande av leukocyter.

Vid ett utförande av uppfinningen modifieras fiberytan på samma sätt som i de föregående utförandena, men fiberytan är ökad medan samtidigt densiteten är något minskad. På detta sätt kombineras den automatiska blockeringen av strömningen vid kon- takt med röda blodkroppar med mycket hög effektivitet på leu- kocytborttagning. ' Ett föredraget område för fiberytan vid denna variation av uppfinningen är från omkring 0,3 till 2,0 m2 och mera före- draget från omkring 0,35 till 0,6 m2. Den övre gränsen på fi- berytan återspeglar önskan att åstadkomma filtreringen på re- lativt kort tid, och kan vara ökad om längre filtreringssidor är acceptabla. En föredragen hålrumsvolym i barriären för röda blodkroppar är omkring 71 till 83 %, och företrädesvis omkring 75 till 80 %. En föredragen strömningsyta är från omkring 2,5 till l0 cmz och lämpligare från omkring 3 till 6 cmz. Leukocyt- borttagningseffektivitet överstigande omkring 99,9 %, som mot- svarar ett genomsnittligt, återstående leukocytinnehåll per enhet av mindre än omkring 0,05 x 106 kan erhållas.

Vid ett föredraget utförande enligt uppfinningen kan ett poröst medium för användning med en biologisk vätska, såsom 29 ett supernatantlager, t.ex. PRP, innehålla det slag av anord- ning som beskrives i US-PS 4 880 548, och som införlivas häri genom referens. Vid ett föredraget utförande enligt uppfinning- en kan ett poröst medium för användning av en biologisk vätska sàsom ett sedimentlager, t.ex. PRC, innehålla det slag av an- ordning som beskrives i US-PS 4 925 572 och 4 923 620, vilka båda införlivas häri genom referens.

Såsom anmärkts ovan kan sedimentlagret, t.ex. PRC, när det uttryckes från uppsamlingspåsen ledas genom en anordning med ett leukocytborttagningselement för att minska dess leuko- cytinnehåll. Enligt uppfinningen _innehàl1er det porösa mediet för borttagning av leukocyter från den packade röda blodkropps- komponenten i en biologisk vätska ett leukocytborttagnings- element eller poröst medium. Det föredragna elementet är lämp- ligen gjort av strålningsympade, smältblåsta fibrer med en genomsnittsdiameter på omkring l till 4 }nn, företrädesvis omkring 2 till 3 )nn. Polybutentereftalat (PBT) väv, som är det föredragna materialet, kan värmekomprimeras till en hålrums- volym på omkring 65 till 90 %, företrädesvis omkring 13 till 88,5 s. ' Separationsuppsättning Föreliggande uppfinning innebär separation av en eller flera komponenter från en biologisk vätska. Enligt uppfinning- en kan en biologisk vätska, speciellt blod, utsättas för ett separationsmedium lämpligt för att leda igenom minst en kom- ponent av den biologiska vätskan, särskilt blod, men inga and- ra komponenter i vätskan, särskilt blodplättar och/eller röda blodkroppar. Sammanklumpning av separationsmediet genom dessa andra komponenter minimeras eller förhindras.

Vid utförandet av uppfinningen som innehåller en separa- tionsuppsättning 14, företrädesvis inte någon centrifug, kan det överstáende lagret, t.ex. PRP, ledas genom en leukocyt- borttagning och sedan genom den icke centrifugerande separa- tionsanordningen 14, där den kan behandlas och uppdelas i kom- “ponenter, som uppsamlas separat i behållaren l5 och behålla-- Aren 16. Vid ett föredraget utförande där den överstáende väts- kan är PRP, kan den separeras till plasma och blodplättskon- 514 _2455 so centrat då PRP ledes genom den icke-centrifugerande separa- tionsanordningen.* Som visas på fig. 5 innehåller en föredragen separations- anordning enligt föreliggande uppfinning ett hus 210 med första och andra delar 2l0a, 2l0b sammansatta pà något lämpligt sätt.

Exempelvis kan de första och andra husdelarna 2l0a, 2l0b vara sammanfogade med ett lim, ett lösningsmedel eller ett eller flera skarvdon. Huset 210 har också ett inlopp 211 och första och andra utlopp 212 och 213 respektive, så att en första väts- kebana 214 upprättas mellan inloppet 211 och det första utlop- pet 212 och en andra vätskebana 215 mellan inloppet 211 och det andra utloppet 213. Ett separationsmedium 216 med första och andra ytor 2l6a, 216b är insatt inuti huset 210 mellan de första »och andra husdelarna 2l0a, 2l0b. Vidare sitter separationsme- diet 216 parallellt med den första vätskebanan 214 och vinkel- rätt mot den andra vätskebanan 215.

Utföranden av föreliggande uppfinning kan uppbyggas på olika sätt för att säkerställa maximal kontakt mellan den bio- logiska vätskan och separationsmediets 216 första yta-216a och minska eller eliminera sammanklumpning på separationsme- diets första yta 2l6a. Exempelvis kan separationsanordningen innefatta en första grund kammare framför separationsmediets 216 första yta 2l6a. Den första kammaren kan innehålla ribbor som sprider strömmen av biologisk vätska över hela separations- mediets första yta 2l6a. Alternativt kan den första kammaren innehålla en eller flera kanaler, rännor, ledningar, passager eller liknande som kan vara slingrande, parallella, böjda eller ha» många andra utföranden.

Vätskeströmningskanalerna kan ha någon lämplig utform- ning och konstruktion. Exempelvis kan kanalerna vara rektangu- lära, triangulära eller halvcirkelformiga i tvärsnitt och ha ett konstant djup. Företrädesvis har kanalerna rektangulärt tvärsnitt och varierande djup, exempelvis mellan inloppet 211 och utloppet 212. ' ' I utförandet som visas på fig. 6, 7 och 8, är husets 210 inlopp 211 anslutet till de serpentinformiga vätskeström- .ningskanalerna 220, 221 och 222 som vetter mot separationsme- 51,4 2255 31 diets 216 första yta 2l6a. Dessa kanaler 220 - 222 uppdelar in- loppsströmmen av biologisk vätska i separata strömningsbanor tangentiella till separationsmediets 216 första yta 2l6a. Ser- pentinkanalerna 220, 221 och 222 sträcker sig längs den första 'ytan 2l6a och kan vara sammantagna vid husets 210 första ut- lopp 212.

Utföranden av föreliggande uppfinning kan också utformas på många olika sätt för att minimera mottrycket pà andra sidan om separationsmediet 216 och säkerställa tillräckligt hög ström- ningshastighet till det andra utloppet 212 för att förhindra förorening av ytan 2l6a under minimering av den kvarhàllna vo- lymen. Separationsanordningen innehåller en andra, grund kam- mare som vetter mot separationsmediets 216 andra yta 2l6b. Lik- som den första kammaren kan den andra kammaren innehålla an- ordningar av ribbor eller en eller flera kanaler, rännor, led- ningar, passager eller liknande, som kan vara serpentinformiga, parallella, kurvformiga eller ha en mångfald andra former.

Vätskeströmningskanalerna kan ha någon lämplig utform- ning och konstruktion. Exempelvis kan kanalerna ha rektangu- lärt, halvcirkulärt eller triangulärt tvärsnitt och konstant eller varierande djup. I det på fig. 9 - ll visade utförandet vetter flera serpentinkanaler 231, 232, 233, 234 och 235 mot 'separationsmediets 216 andra yta 2l6b. Serpentinkanalerna 231 - 235 går längs den andra ytan 2l6b och kan vara sammantagna vid det andra utloppet 213.

Ribbor, väggar eller utspràng 241, 242 kan användas för att avgränsa kanalerna 220 - 222.231 - 235 i de första och andra kamrarna och/eller kan uppbära eller placera separa- tionsmediet 216 i huset 210. Vid ett föredraget utförande en- ligt uppfinningen finns fler väggar 242 i den andra kammaren än i den första för att förhindra deformering av separations- mediet 216 orsakat av tryckskillnaden genom separationsmediet.

Vid användning ledes en biologisk vätska, t.ex. hel- blod eller PRP under tillräckligt tryck in i husets 210 inlopp 211 från någon lämplig källa för den biologiska vätskan. Exem- pelvis kan den biologiska vätskan injiceras med en spruta i inloppet 211 eller också kan den pressas in i inloppet 211 51.4 2:55 32 från en flexibel påse med användning av ett tryckhuvud, en tryckmanschett eller en uttryckningsanordning. Från inloppet 211 kommer den biologiska vätskan in i kanalerna 220 - 222 i den första kammaren och går tangentiellt eller parallellt med separationsmediets 216 första yta 2l6a på vägen till det förs- ta utloppet 212 via den första vätskebanan 214. Åtminstone en komponent i den biologiska vätskan t.ex. plasma ledes genom se- parationsmediet 216, kommer in i den andra kammarens kanaler 231 - 235 och riktas mot det andra utloppet 213 via den andra vätskeströmningsbanan 215. Då den biologiska vätskan fortsätter längs den första strömningsbanan 214 tangentiellt eller paral- lellt med den förstaytan2l6a går mer och mer plasma genom se- parationsmediet 216. En plasmareducerad vätska lämnar sedan hu- set 210 genom det första utloppet 212 och utvinnes i den ena behållaren 217, medan plasma går ut från huset 210 genom det andra utloppet 213 och utvinnes i en annan behållare 218.

Medan varje biologisk vätska innehållande plasma kan an- vändas i samband med föreliggande uppfinning, är uppfinningen särskilt lämplig för användning samman med blod och blodproduk- ter, särskilt helblod eller PRP. Genom att behandla PRP enligt föreliggande uppfinning kan PC och blodplättsfri plasma erhål- las utan centrifugering av PRP med de åtföljande nackdelarna som diskuterats ovan. Likaledes kan blodplättsfri plasma erhål- las från helblod. Den biologiska vätskan kan tillföras i någon lämplig mängd beroende på hela anordningens kapacitet och med något lämpligt medel, t.ex. satsvis med exempelvis en blodpåse ansluten till en tryckkälla eller en spruta, eller kontinuer- ligt som en del av exempelvis ett aferesissystem. Exempel på källor för biologisk vätska innefattar en spruta 219 som visas på fig. 5 eller ett biologiskt vätskeuppsamlings- och behand- lingssystem såsom det i US P-ans. 07/609 654, 6 november, 1990, som införlivas häri genom referens. En källa för biologisk vätska kan också innehålla ett aferesissystem och/eller ett system där biologisk vätska àtercirkuleras genom systemet.

Separationsmediet och huset kan vara av något lämpligt material och konstruktion och separationsmediet kan anordnas i den föreliggande anordningen enligt uppfinningen på något 51.4 255 33 lämpligt sätt så länge den biologiska vätskeströmmen tangen- tiellt eller parallellt med separationsmediet upprätthålles i tillräckligt hög grad för att undvika eller minimera någon vä- sentlig blodplättsvidhäftning till separationsmembranet. Hydro- dynamiken i en strömning parallell med en yta kan anses vara sådan att under strömningen parallellt med ytan kommer blod- plättarna i spinn vilket gör att de kan utvinnas frán ytan. Även om den föredragna anordningen har ett inlopp och två ut- lopp kan andra konstruktioner användas utan att påverka anord- ningens riktiga funktion ogynnsamt. Exempelvis kan multipla in- lopp för en biologisk vätska användas så länge som denna ström- mar tangentiellt tvärsöver separationsmediets framsida. Plasman kan företrädesvis lagras i ett område avskilt från separa- tionsmediet för att undvika möjlig återströmning av plasman tillbaka till den plasmabefriade vätskan genom separations- mediet.

En fackman inser att blodplättsadhesionen kan styras el- ler påverkas genom manipulering av någon av ett flertal fakto- rer: vätskeströmmens hastighet, kanalens utformning, kanalens djup, djupvariationer i kanalen, separationsmediets ytegenska- per, mediets ytjämnhet och/eller den vinkel med vilken vätskan strömmar över separationsmediets framsida, bland andra fakto- rer. Exempelvis är den första vätskeströmmens hastighet före- trädesvis tillräcklig för att avlägsna blodplättar från sepa- rationsmediets yta. Utan att vara begränsad därtill har en has- tighet överstigande omkring 30 cm/sek visat sig vara lämplig.

Vätskeströmmens hastighet kan också påverkas av den biologiska vätskans volym, av variationer i kanalens djup och av kanalens bredd. Exempelvis kan kanaldjupet variera från om- kring 0,25 tum till omkring 0,001 tum såsom visas på fig. 7.

En fackman inser att den önskade hastigheten kan åstadkommas genom att variera dessa och andra element. Ävenledes kan blod- plättarna inte vidhäfta lika lätt till ett separationsmedium med en slät yta jämfört med en ojämnare yta.

Enligt uppfinningen innehåller separationsmediet ett po- röst medium lämpligt för att släppa igenom plasma. Det använda separationsmediet kan inbegripa, men är inte begränsat till 514255 34 polymera fibrer (inbegripet ihåliga fibrer), polymera fiber- matriser, polymera membraner och fasta, porösa medium. Separa- tionsmedier enligt uppfinningen avlägsnar plasma från en bio- logisk lösning innehållande blodplättar, såsom helblod eller PRP, utan att avlägsna äggvitehaltiga blodkomponenter och utan att låta en väsentlig mängd blodplättar passera genom.

Ett separationsmedium enligt uppfinningen har företrä- desvis en genomsnittlig porstorlek generellt eller i sig själv mindre än blodplättarnas genomsnittsstorlek, och företrädes- yvis vidhäftar blodplättarna inte till separationsmediets yta och minskar sålunda porblockeringen. Separationsmediet bör också ha låg affinitet för äggvitehaltiga komponenter i den bio- logiska vätskan, såsom PRP. Detta ökar sannolikheten för att -den blodplättsfattiga lösningen, t.ex. blodplättsfri plasma skall ha en normal koncentration av äggvitehaltiga koagula- tionsfaktorer, tillväxtfaktorer och andra nödvändiga kompo- nenter.

För separation av omkring en enhet helblod kan en ty- pisk separationsanordning enligt uppfinningen ha en effektiv porstorlek mindre än blodplättarnas genomsnitt, typiskt mindre än omkring 4 }nn, företrädesvis mindre än omkring 2 ann. Per- meabiliteten och storleken på separationsanordningen är före- trädesvis tillräcklig för att producera omkring 160 till 240 I-cc plasma vid skäliga tryck (t.ex. mindre än omkring 20 psi) på skälig tid (t.ex. mindre än omkring en timme). Enligt upp- finningen kan alla dessatypiskaparametrar varieras för att upp- nå ett önskat resultat, d.v.s. varieras företrädesvis till att minimera blodplättsförlusten och maximera produktionen av blod- plättsfri plasma.

Enligt uppfinningen kan ett separationsmedium gjort av fibrer vara kontinuerligt, sammanhäftat eller smältblåst. Fib- rerna kan vara av något material som är kompatibelt med en bio- logisk vätska innehållande blodplättar, t.ex. helblod eller 'PRP, och kan behandlas på en mångfald sätt för att göra me- diet effektivare. Fibrerna kan också vara sammanlimmade, sam- mansmälta eller på annat sätt fixerade till varandra, eller också kan de helt enkelt vara mekaniskt sammanflätade. Med 514255 separationsmedium bildat av ett membran avses här ett eller flera polymera ark, såsom en vävd eller sammanfiltad fiberväv med eller utan någon flexibel, porös bärare, eller kan inne- hålla ett membran bildat av en polymer lösning i ett lösnings- medel genom utfällning av en polymer när polymerlösningen bringas i kontakt med ett lösningsmedel i vilket polymeren är olöslig. Det porösa, polymera arket bör ha en huvudsakligen lik- formig, kontinuerlig matrisstruktur innehållande en myriad av små, till övervägande delen sammanhängande porer.

Separationsmediet enligt uppfinningen kan göras exempel- vis av någon syntetisk polymer med förmåga att bilda fibrer eller ett membran. Även om det inte är nödvändigt för apparatu- ren eller metoden enligt uppfinningen har polymeren i ett före- draget utförande förmåga att tjänstgöra som substrat för ymp- ning med eteniskt omättade, monomera material. Företrädesvis bör polymeren kunna reagera med minst en eteniskt omättad mono- mer under inverkan av joniserande strålning eller annan aktive- ring utan att matrisen påverkas ogynnsamt. Lämpliga polymerer för användning som substrat innefattar, men är inte begränsade till, polyolefiner, polyestrar, polyamider, polysulfoner, poly- arylenoxider och sulfider, och polymerer och sampolymerer av halogenerade olefiner och omättade nitriler. Föredragna poly- _merer är polyolefiner, polyestrar och polyamider, t.ex. poly- butentereftalat (PBT) och nylon. I ett föredraget utförande kan ett polymermembran göras av en fluorerad polymer såsom polyvinylidendifluorid (PVDF). De mest föredragna separations- medierna är ett mikroporöst polyamidmembran eller ett poly- karbonatmembran.

Ytegenskaperna på en fiber eller ett membran kan påver- kas såsom beskrivits ovan för ett poröst medium. Ett exempel på strålningsympning använder minst en av en mångfald monome- rer som var och en innehåller en eten eller akryldel och en andra grupp som kan vara vald från hydrofila grupper, t.ex.

-COOH eller -OH, eller hydrofoba grupper, t.ex. en metylgrupp eller mättade kedjor såsom -CH2CH2CH3. Ympning av fibern eller membranytan kan också göras med föreningar innehållande en eteniskt omättad grupp, Såsom en akryldel kombinerad med en ,. .4 . ._ f U < , .. _ . . ._ , , | »l v. f - -<. < _ :<1 .. . |«. «v. f f. . - _ 4. . . . r ,' n - . ., . .mm 36 hydroxylgrupp, såsom hydroxietylmetakrylat (HEMA). Användning av HEMA som monomer bidrar till ett mycket högt CWST. Analoger med liknande egenskaper kan också användas för att modifiera fibrernas ytegenskaper. _ Enligt ett utförande av uppfinningen kan separationsme- diet ytmodifieras såsom med strålningsympning för att åstadkom- 'ma de önskade verkningarna, där blodplättar koncentreras med en minimal mediumblockering och där den resulterande plasmalös- ningen innehåller huvudsakligen alla sina naturliga äggvite- haltiga beståndsdelar. Exempel på membran med låg affinitet för äggvitehaltiga substanser beskrives i US-PS 4 886 836, 4 906 374, 4 964 989 och 4 968 533, som alla införlivas häri genom referens. _ Lämpliga membran enligt ett utförande av uppfinningen kan vara mikroporösa och kan framställas av en lösning med en gjutningsmetod.

Såsom anmärkts ovan minimeras blodplättsuppsamlingen i separationsmediet eller vid passagen därigenom genom att en tan- gentiell strömning av den biologiska vätskan som behandlas pa- rallellt eller tangentiellt med ytan på separationsmediet.

Enligt uppfinningen kan den tangentiella strömningen åstadkom- mas med någon mekanisk utformning av strömningsbanan som alst- rar en hög, lokal vätskehastighet omedelbart intill membran- 'ytan. Trycket för att driva den biologiska vätskan genom sepa- rationsmediet kan fås med något lämpligt medel, exempelvis ge- nom gravitation eller med en tryckkälla.

Den biologiska vätskans tangentiella strömning kan rik- tas tangentiellt eller parallellt med separationsmediets yta på något lämpligt sätt, företrädesvis så att en väsentlig del av mediets yta utnyttjas under upprätthållande av tillräcklig strömning för att säkerställa att blodplättarna inte häftar vid eller blockerar separationsmediets porer. Den biologiska vätskans strömning är företrädesvis riktad tangentiellt eller 'parallellt med separationsmediets yta genom användning av minst en serpentinformad strömningskanal som är utformad för att maximera utnyttjandet av separationsmediet, säkerställa en tillräcklig, total yta för kontakt mellan den biologiska 51.4 255 37 _vätskan och separationsmediet, och upprätthålla en tillräcklig strömning av biologisk vätska för att minimera eller förhindra blodplättsadhesion till separationsmediet. Bäst användes flera, t.ex. tre eller flera, vätskeströmningskanaler så att separa- tionsmediet fixeras på plats och sättningar i membranet genom det pålagda trycket förhindras. Strömningskanalerna kan ha nà- gon lämplig utformning och konstruktion och är företrädesvis _variabla med avseende pà djupet, såsom det djup som fordras för att upprätthålla optimalt tryck och vätskeströmning genom ytan på separationsmediet. Vätskekanaler kan också användas pà mem- bransidan motsatt den tangentiella biologiska vätskeström- ningen för att styra strömningshastigheten och tryckfallet för en blodplättsfattig vätska, såsom plasma.

Anordningen enligt uppfinningen kan på liknande sätt va- ra del av ett aferesissystem. Den biologiska vätska som behand- las, den blodplättsrika lösningen och/eller den blodplätts- fattiga lösningen kan hanteras antingen satsvis eller konti- nuerligt. Storleken, naturen och konfigurationen på den före- liggande anordningen enligt uppfinningen kan justeras-för att variera anordningens kapacitet för att passa dess avsedda om- givning.

Gasinlopp/utlopp Under vissa omständigheter kan det vara önskvärt att maximera utvinningen av biologisk vätska kvarhállen eller inne- sluten i olika element i behandlingssystemet för vätskan. Under typiska betingelser och med en typisk anordning kan exempelvis den biologiska vätskan dränera genom systemet tills strömningen stoppas och lämna kvar en del av vätskan i systemet. Vid ett utförande enligt uppfinningen kan den kvarhàllna vätskan utvin- nas genom användning av minst ett gasinlopp och/eller minst ett gasutlopp. Ett exempel pà konfigurationen av detta utföran- de visas på fig. 3. I _ Gasutloppet är ett poröst medium som släpper ut gas som kan finnas närvarande i ett biologiskt vätskebehandlingssystem när den biologiska vätskan behandlas i systemet. Gasinloppet är ett poröst medium som släpper in gas i ett biologiskt vätskebehandlingssystem. ' _ .. .«.._ . u . _ . . . - . = -. z r . . _. ._ . . . f- r .-- --\ .. .«. --. . z - . - f _ _. . i . c 1 r - ff - _ _ :mer r _ I ; v 38 Gas betecknar här något gasformigt fluidum, såsom luft, steriliserad luft, syre, koldioxid och liknande, men uppfin- ningen är inte begränsad till den använda gastypen.

Gasinloppet och gasutloppet är valda så att systemets sterilitet inte äventyras. Gasinloppet och gasutloppet är sär- skilt lämpliga för användning i slutna system eller kan använ- das senare, exempelvis inom omkring 24 timmar efter det att ett system öppnats.

Gasinloppet och gasutloppet innehåller vardera minst ett poröst medium utformat till att låta gas passera genom. En mångfald olika material kan användas förutsatt att de erforder- liga egenskaperna på det partikulära, porösa mediet uppnås.

Dessa innefattar den nödvändiga styrkan för att tåla de använ- da differentialtrycken och möjligheten att tillhandahålla den önskade filtreringsförmågan genom att ha den önskade permeabi- liteten utan påläggning av överdrivna tryck. I ett sterilt sys- tem bör också det porösa mediet företrädesvis ha en porstorlek på omkring 0,2 fun eller mindre för att förhindra bakterie- passage.

Gasinloppet och gasutloppet kan innehålla ett poröst .medium, exempelvis ett poröst fibermedium såsom ett djupfilter, eller ett poröst membran eller ett ark. Flerlagriga porösa me- dier kan användas, exempelvis ett flerlagrigt mikroporöst mem- bran med ett lager likvofobt och det andra likvofilt.

Föredragna utgångsmaterial är syntetiska polymerer inne- fattande polyamider, polyestrar, polyolefiner, särskilt poly- propen och polymetylpenten,_perfluorerade polyolefiner såsom polytetrafluoreten, polysulfoner, polyvinylidendifluorid, poly- akrylnitril och liknande samt kompatibla blandningar av poly- merer. Den mest föredragna polymeren är polyvinylidendifluorid.

Av polymererna innefattar de föredragna polyhexametylen- adipamid, poly-¿1-kaprolaktam, polymetylensebakamid, poly-7- aminoheptanamid, polytetrametylenadipamid (nylon 46), eller 'polyhexametylenazelainamid med polyhexametylenadipamid (nylon 66) mest föredraget. Särskilt föredragna är skinnfria, huvud- sakligen alkohololösliga, hydrofila polyamidmembraner såsom de som beskrives i US-PS 4 340 479. 514, 2,55 39 'Andra utgångsmaterial kan också användas till de porösa medierna enligt uppfinningen innefattande cellulosaderivat, såsom cellulosaacetat, cellulosapropionat, cellulosaacetat- propionat, cellulosacetatbutyrat och cellulosabutyrat. Icke- hartsmaterial såsom glasfibrer kan också användas.

Storleken på luftströmmen genom gasutloppet eller gasin- loppet kan vara anpassat till den specifika vätskan eller väts- korna av intresse. Hastigheten på luftströmmen varierar direkt med det porösa mediets yta och det pàlagda trycket. Generellt är det porösa mediets yta utformat för att möjliggöra att det biologiska vätskebehandlingssystemet fungerar erforderlig tid under användningsbetingelserna. Vid exempelvis medicinska an- vändningar är det önskvärt att kunna preparera en intravenös uppsättning på från omkring 30 till 60 sekunder. I sådana lik- som andra mekaniska tillämpningar är det typiska porösa mediet ett membran som kan vara i form av en skiva med en diameter på omkring l till 100 mm, företrädesvis från omkring 2 till 80 mm och lämpligast från omkring 3 till 25 mm.7 Enligt uppfinningen kan process-systemet förses-med ett gasinlopp för att möjliggöra tillförsel av gas till systemet och/eller med ett gasutlopp för att låta gaser i de olika ele- menten i systemet separeras från den biologiska vätska som be- handlas. Gasinloppet och gasutloppet kan användas tillsammans i förbindelse med minst en anordning, ett poröst medium eller en behållare i systemet, eller också kan de användas var för sig.

För detta kan ett gasinlopp eller ett gasutlopp ingå i något av de olika elementen i det biologiska vätskebehandlings- systemet. Som illustration kan ett gasinlopp eller ett gasut- lopp ingå i minst en av ledningarna som förbinder de olika be- hållarna, i väggen på behållarna som tar emot den behandlade biologiska vätskan, eller i en öppning på eller i en av dessa behållare. Gasinloppet eller gasutloppet kan också ingå i något eller i en kombination av de ovannämnda elementen. Även- ledes kan en anordning eller ett poröst medium innehålla ett eller flera gasinlopp eller gasutlopp såsom beskrivits ovan.

Generellt emellertid föredrages att sätta in ett gasinlopp 514 255 +f@a »}«ïﬁ.$by 40 eller gasutlopp i ledningarna som förbinder behàllarna eller i den funktionella, medicinska anordningen. Inom uppfinningens ram är också användning av mer än ett gasinlopp eller gasut- lopp i någon ledning, mottagningsbehållare, anordning eller poröst medium.

Det är tydligt för en fackman att placeringen av ett gas- inlopp eller ett gasutlopp kan optimeras för att ge ett önskat resultat. Det kan exempelvis vara önskvärt att lokalisera gas- inloppet uppströms ett poröst medium och i eller så nära som möjligt till den första behållaren då detta är praktiskt för att maximera återvinningen av biologisk vätska. Det kan också vara önskvärt att lokalisera gasutloppet nedströms det porösa mediet och så nära som möjligt till mottagningsbehàllaren för att maximera den gasvolym som släppes ut från systemet.

Sådan placering av gasinloppet eller gasutloppet är sär- skilt önskvärd om det finns endast ett gasinlopp eller gasut- lopp i systemet.

Enligt uppfinningen kan återvinningen av den biologiska vätskan från de olika elementen i processystemet maximeras.

Exempelvis underkastas helblod ett behandlingssteg som resul- terar i separata PRP och PRC-lager. Sedan tryckes de separata blodkomponentsfraktionerna ut till sina respektive mottagnings- behållare genom de eventuella ledningarna och porösa medierna.

Blodprodukter som blir inneslutna i dessa element under be-D 'handlingen kan återvinnas antingen genom att leda renspolnings- gas genom ledningarna och de porösa medierna, eller genom att skapa minst ett partiellt vakuum i systemet för att suga ut den kvarvarande blodprodukten och låta den rinna in i den lämp- liga mottagningsbehàllaren eller anordningen.

Renspolningsgasen kan komma från någon av ett antal olika källor. Det biologiska vätskebehandlingssystemet kan exempelvis vara försett med en lagringsbehållare för lagring av spolgasen, spolgasen kan vara den gas som avlägsnades från systemet under behandlingen, eller kan spolgasen insprutas aseptiskt i systemet från en källa utanför (t.ex. genom en spruta). Exempelvis kan det vara önskvärt att använda steril spolgas som steriliseras i en separat behållare avskild från s14 25s 41 vätskebehandlingssystemet.

Enligt uppfinningen kan en klämma, tillslutning eller lik- fnande vara insatt på eller i någon eller alla ledningarna för att underlätta en önskad funktion, d.v.s. åstadkomma en önskad strömningsbana för biologisk vätska eller gas. Vid exempelvis behandling av en biologisk vätska, t.ex. PRP, i ett system sä- som det på fig. 3 illustrerade kan det vara önskvärt att under bortledningen av gaser från ledningarna och leukocytreduce- 'ringen stänga till ledningen omedelbart under gasutloppet 54.

När det är önskvärt att använda gasinloppet 53 för att maximera återvinningen av biologisk vätska lossas tillslutningen under gasutloppet 54 och en tillslutning i ledningen intill gasin- loppet 53 öppnas. Såsom exemplifieras på fig. 3 kan andra gas- inlopp och gasutlopp, t.ex. 51 och 52, användas på liknande sätt.

Med fortsatt hänvisning till fig. 3, drives när en ko- lonn med biologisk vätska, t.ex. PRP, strömmar från den första behållaren ll genom ledningen och leukocytreduceringen l3 mot satellitpåsen 41, gasen i dessa elementen mot gasutloppet 54.

Gasutloppet kan innehålla ett förgreningselement med tre grenar. Ena benet kan innehålla ett likvofobt, poröst me- dium som företrädesvis har en porstorlek som inte är större än 0,2 Pm. Vid förgreningselementet rör sig gasen framför den biologiska vätskekolonnen in i en gren i förgreningselementet.

Då gasen passerar genom det likvofoba, porösa mediet men inte den biologiska vätskan, separeras gasen från PRP och förhind- ras att komma in i satellitpàsen 15. _ De avskilda gaserna från gasutloppet 54 kan släppas ut från systemet eller samlas upp i en gasbehàllare (icke visad) och återgå till systemet som en spolningsgas för att under- lätta återvinningen av biologisk vätska som stängts in i sys- temets olika komponenter. Z Sedan systemet gjorts iordning och gasutloppet inakti- verats öppnas klammern intill behållarna eller uppsättningen för att låta behållarna fyllas med behandlad, biologisk väts- ka. Detta fortsätter tills uppsamlingspåsen ll kollapsar. För att återvinna den mycket värdefulla, biologiska vätska som 514 .255 42 kvarhálles i systemet kan luft från omgivningen eller en steril gas släppas in i systemet genom gasinloppet 51 eller 53. Om gasinloppet 51 eller 53 skötes manuellt öppnas en tillslut- ning eller en klämma, och om gasutloppet 51 eller 53 är auto- matiskt bringar tryckskillnaden mellan gasinloppet och behål- larna att luften eller gasen strömmar genom ledningarna, genom det porösa mediet och till de respektive behållarna. I pro- cessen kvarhållen biologisk vätska som är instängd i dessa ele- ment under behandlingen återvinnes från komponenterna och sam- las upp i behållarna. Det bör nämnas att spolningsluften el- ler gasen företrädesvis avskiljes från den biologiska vätskan vid gasutloppet 52 eller 54, så att liten eller ingen spol- ningsgas mottages av behållarna. Detta kan åstadkommas genom att tillsluta ledningen nedströms gasutloppet 52 eller 54. Vid ett annat utförande enligt uppfinningen kan spolningsluften eller gasen separeras från systemet från ett gasutlopp i själ- va påsen.

Filterhállare Vid ett annat utförande omfattar uppfinningen också en hållare som säkrar en filteruppsättning med ett poröst medium eller en eller flera komponenter i en uppsättning på plats under centrifugering så att inga skador uppstår av påkän- ningarna under centrifugeringen.

Bloduppsamlingen och processuppsättningen 10 med en eller flera satellitpåsar fastsatta eller anslutna med en ledning kan användas tillsammans för att separera komponenter ur helblod.

Detta utförande av uppfinningen förstås lättare genom hänvis- ning till det exempel på utformning som visas på fig. 4. Under 'centrifugeringen där de röda blodkropparna koncentreras vid bottnen på uppsamlingspåsen kan krafter alstras på upp till 5000 gånger tyngdkraften (5000 G) eller mera. Därför är upp- samlingspåsen företrädevis flexibel liksom de andra påsarna så att de kan vila mot bottnen och väggarna i en centrifug- skál 120, så att påsarna själva utsättes för liten eller ingen pàkänning.

I motsats till flexibiliteten och elasticiteten på pà- sarna och ledningarna är det porösa mediet insatt i ett styvt 514255 43 plasthus, en kombination som betecknas som en filteruppsätt- ning. PRC-huset är typiskt större än PRP-huset och har därför lättare för att skada eller skadas under centrifugeringen. Exem- pelvis kan en typisk PRC-filteruppsättning väga omkring 20 g I (omkring 0,04 lbs), men dess effektiva vikt kan vara 5000 gånger större, eller omkring 200 lbs vid centrifugering med 5000 G.

I vanliga centrifugeringssystem är det därför svårt att undvika skador på plasthuset. Även försiktig placering av PRC-filter- uppsättningen i centrifugskålen resulterar sannolikt i skador på plastledningarna eller påsarna. Vidare är det inte önsk- värt att göra centrifugskàlen större för att rymma filterupp- sättningen under centrifugeringen, då detta inte endast skulle fordra en större och dyrbarare centrifug, utan också fordra omskolning av de tusentals blodbehandlingsteknikerna för att på ett riktigt sätt sätta in blodpåsarna i en ny slags centri~ fugskål.

Följaktligen är det önskvärt att förbättra ett blodupp- samlings- och behandlingssystem för användning samman med be- fintliga centrifugskålar. Enligt uppfinningen åstadkommes detta företrädesvis genom att placera PRC-filteruppsättningen borta från den största G-kraften, och detta är lämpligast utanför eller delvis utanför den vanligen använda centrifugskålen på det sätt som visas på fig. 4.

Fig. 4 visar en centrifugskål 120 av det slag som vanli- gen användes i nuvarande blodbanker. Dessa skålar har tjocka väggar av höghållfast stål med ett öppet utrymme l2l vari blod- påsen, dess satellitpåsar och de mellanliggande slangarna kan placeras. Hållaren l22 för en filteruppsättning kan vara av något höghållfast material, företrädesvis metall eller metall- legering, och titan eller rostfritt stål föredrages för sin styrka och den lätthet varmed sanitära betingelser kan upp- rätthållas. Den undre delen 123 av hàllaren l22 är utformad för att samverkande passa in i hàlrummet l2l, företrädesvis till ett djup pà omkring 0,5 till l em. Fjäaerklämmer eller andra medel kan användas för att lokalisera och/eller kvar- hålla hàllaren l22 i skålen 120. Rännan 124 i övre delen av hàllaren l22 är företrädesvis utformad för att samverkande ta 514155 f çïsußitw 44 emot utloppsöppningen 125 i filteruppsättningen 114 och låta dess bottendel vila på hållarens 122 platta, övre ytor intill rännan 124. Rännans 124 mittdel 126 kan vara dimensionerad så att filteruppsättningens 114 utlopp passar in i åtminstone en del av rännan 124 med friktionspassning. Rännans 124 ändar är företrädesvis minskade till en sådan bredd att flexibla led- ningar 112 anslutna till filteruppsättningens 114 inlopp och utlopp hålles fast och därigenom bidrar till att stabilisera filteruppsättningen 114 efter pàsättning på hållaren 122. De flexibla ledningarnas 112 icke understödda delar går sedan ned «i skålen i förbindelse med resten av bloduppsamlingsuppsätt- ningen däri. Lämpligen håller hàllaren 122 fast filteruppsätt- ningen 114 så att det porösa mediets plan är huvudsakligen vin- kelrätt mot G-kraften under centrifugeringen. Hållaren och fil- teruppsättningen skall också lokaliseras på eller i centrifug- skàlen att de inte stör skålens 120 normala, fritt svängande rörelse i centrifugen under rotationen.

Emedan PRP-filtret är relativt litet och mycket lätt kan det placeras i skålen samman med påsarna och slangarna.

Vid ett annat utförande enligt uppfinningen kan emellertid rännan 124 utformas till att hålla fast mer än en filterupp- sättning, exempelvis både en PRC- och en PRP-filteruppsättning.

Vid ett annat utförande enligt uppfinningen kan en stör- re hållare användas för att hålla fast en första filteruppsätt- ning och en andra hållare för en andra filteruppsättning vara fastsatt ovanpå den första hållaren och filteruppsättningen.

En fackman ser att olika utformningar, konstruktioner och/eller medel kan användas för att uppfylla dessa funktioner.

I* Ett annat kännetecken för uppfinningen är placeringen och det sätt på vilket det porösa mediet, särskilt PRC-mediet, monteras på centrifugskålen under centrifugeringen. Försök med ett antal provfilterhus utformade för att passa samman med centrifugskålen visade tydligt att slangledningarna ofta per- forerades av huset under centrifugeringen. Det är också mycket svårt att utforma ett hus som säkert tål centrifugeringen utan natt skadas. Vidare är de befintliga centrifugskålarna utfor- made för de vanliga bloduppsamlingsuppsättningarna, som inte 51.4 2.55 45 .har några filterelement. Inpassning av den ytterligare volymen av en PRC-filteruppsättning i en konventionell skål blev så- lunda mycket svår. Dessa svåra problem undanröjes genom att montera PRC-filteruppsättningen på en hållare utanför skålen.

Detta ger tillfredsställande stöd för filteruppsättningen genom samverkan mellan hållarens l22 flänsdel l27 (fig. 4) och kan- terna på centrifugskålen. Vidare sättes hållaren l22 företrädes- vis ovanpå skålens topp, en placering som blir mycket närmare 'centrifugens rotationscentrum, så att filteruppsättningen en- dast utsättes för ungefär 40 till 60 % av kraften vid skålens 120 botten. Vidare kan de trånga slitsarna vid hållarens båda ändar hålla fast slangledningarna och låta dem sticka ned i skålen. Helt överraskande uthärdade de nedhängande delarna av slangarna centrifugeringen mycket bra.

Ett system enligt föreliggande uppfinning kan användas i förening med andra uppsättningar eller porösa medier, inne- fattande filtrerings- och/eller separationsanordningar, t.ex. en anordning för att ta bort leukocyter från en blodplättsinne- hållande lösning eller koncentrat. Exempel på anordningar be- skrives 1 Us-Ps 4 sso 548 och 4 925 572 som införlivas när: 1 sin helhet genom referens.

Husen kan tillverkas av något lämpligt, ogenomträngligt material, såsom någon ogenomtränglig termoplast. Exempelvis kan huset företrädesvis tillverkas genom sprutgjutning av en transparent eller translucent polymer, såsom ett akryl, polystyren eller polykarbonatharts. Ett sådant hus är inte en- dast lätt och ekonomiskt att tillverka, utan det medger också observation av vätskans passage genom huset.

Huset vari det porösa mediet är inneslutet eller inpas- sat är utformat för att vara lätt att använda, snabbt att stäl- la iordning och effektivt att spola med luft.

Huset kan göras på en mångfald olika sätt och huset till ett poröst medium enligt föreliggande uppfinning liknar före- trädesvis det som beskrives i US-PS 4 880 548, 4 923 620 och 4 925 S72, som har generellt liknande utformning som huset ll4 på fig. 4.

Ett antal ytterligare behållare kan kommunicera med l514.25s 46 det biologiska vätskebehandlingssystemet, och kan användas för . att definiera olika strömningsbanor. Exempelvis kan en ytter- ligare satellitpàse innehållande fysiologisk lösning placeras i förbindelse med det biologiska vätskebehandlingssystemet upp- ströms leukocytborttagningen (t.ex. genom gasinloppet), och lösningen kan ledas genom leukocytborttagningen så att den biologiska vätska som kvarhölls där kan samlas upp.

På liknande sätt kan en satellitpáse innehållande fysio- logisk lösning placeras i förbindelse med det biologiska väts- kebehandlingssystemet nedströms leukocytborttagningen (t.ex. genom gasutloppet), och lösningen ledas genom leukocytborttag- ningen så att den biologiska vätskan som hàlles kvar där kan uppsamlas senare. _ Det bör nämnas att när den biologiska vätskan fràn upp- samlingspàsen ll tryckes mot behállarna kan en del av den bio- logiska vätskan stängas in i ledningarna och/eller de porösa medierna. Exempelvis kvarhålles vanligen 8 till 35 cc i syste- met, men så litet som 2 cc och sà mycket som l50 cc eller mera kan stanna kvar i vissa slags system. - Vid ett utförande enligt uppfinningen (icke visat) kan luft eller gas lagras i minst en gasbehâllare och när ventilen eller klämman i ledningarna öppnas kan gas matas genom dem för att renspola ledningarna och anordningarna och därigenom un- derlätta återvinning av biologisk vätska som kan ha stannat kvar under behandlingen.

Företrädesvis ledes renspolningsluften eller gasen till ledningrna vid en punkt som är sà nära behållaren ll som möj- ligt för att maximera volymen återvunnen, biologisk vätska.

Luft- eller gasbehàllaren är företrädesvis flexibel så att ga- sen däri kan ledas ut till systemet endast genom en enkel kompression. De biologiska vätskebehàllarna och luft- eller gasbehállarna kan vara av samma material. Y Förbehandling eller iordningställande betyder här vät- ning eller behandling av de inre ytorna i en anordning innan dess verkliga användning genom att låta en separat substans injiceras i systemet. En ventil eller klämma öppnas för att 47 låta vätska strömma genom anordningen varvid under passagen av vätska genom anordningen gas släppes ut nedströms vätskan ge- nom gasutloppet tills vätskan når ett förgreningselement, vid vilken punkt klämman stänges. Med klämman stängd kan förbin- delsen nedströms gasutloppet öppnas eller göras färdigt för användning utan att vätska i anordningen droppar genom förbin- delsen; Enligt uppfinningen skall anordningen för biologisk vätskeuppsamling och behandling kunna stå emot noggrann steri- lisering och centrifugering exempelvis bestående av strålnings- sterilisering (med omkring 2,5 megarad) och/eller autoklavering (vid omkring ll0 till l20O C i omrking l5 till 60 minuter) och/eller centrifugering (med omkring 2500 till 3500 G i om-i kring 5 till 15 minuter, men beroende på vilken biologisk vätskekomponent som avses återvinnas maximalt kan centrifuge- ringen vara omkring 5000 G i omkring l0 till 20 minuter).

Uppfinningen omfattar också ett sätt att samla upp och behandla blod innefattande uppsamling av helblod i en behål- lare, centrifugering av helblodet, ledning av det centrifuge- rade blodets supernatanta lager genom ett första poröst medium, varvid det första porösa mediet innehåller minst endera av ett leukocytborttagningsmedium, en barriär för röda blodkroppar och en kombination av leukocytborttagning och barriär för röda blodkroppar, och ledning av det centrifugerade blodets sedimentlager genom ett andra, poröst medium, där det andra porösa mediet innehåller ett leukocytborttagningsmedium.

Uppfinningen kan också innefatta ett sätt att behandla en biologisk vätska genom ledning av en biologisk vätska från en första behållare till ett första poröst medium innehållan- de en barriär för röda blodkroppar, vari den biologiska väts- kan passerar i en första strömningsbana, och ledning av en biologisk vätska från en första behållare till ett andra, po- röst medium innehållande ett leukocytborttagningsmedium, vari. den biologiska vätskan passerar i en andra strömningsbana.

Generellt behandlas donerat helblod så snart som prak- tiskt är möjligt för att effektivare minska eller eliminera kontamineringsfaktorer, innefattande men inte begränsat till leukocyter och mikroaggregat. :a14255 Ülïï* 48 Leukocytborttagning har hittills gjorts genom transfu- sion vid sängkanten, men enligt uppfinningen sker leukocyt- borttagning under den inledande behandlingen av helblodet, som enligt USA-praxis generellt göres inom 8 timmar från tapp- ningen av givaren. Sedan de röda blodkropparna sedimenterats genom centrifugering tryckes supernatant PRP ut från blodupp- samlingspàsen till en första satellitpåse genom ett eller flera porösa medier som minskar mängden leukocyter och/eller blocke- rar röda blodkroppar, och kvarvarande PRC i bloduppsamlingspà- sen ledes sedan till en andra satellitpåse genom ett poröst medium som avlägsnar leukocyter.

Med figurerna som referens upptages den biologiska väts- kan (t.ex. givarens helblod) generellt direkt in i uppsamlings- pàsen ll. Med eller utan de andra elementen i systemet kan denna sedan centrifugeras för att separera den biologiska väts- kan till ett supernatantlager 31 och ett sedimentlager 32. Om helblod användes är supernatantlagret primärt PRP och sedi- mentlagret primärt PRC efter centrifugeringen. Den biologiska vätskan kan tryckas ut från uppsamlingspåsen som separata su- pernatant och sedimentlager, respektive. En klämma eller lik- nande kan finnas mellan uppsamlingspàsen ll och den flexibla slangen 25, eller inuti slangen, för att förhindra strömmen av supernatantlagret att komma in i fel ledning.

Transporten av den biologiska vätskan genom systemet àstadkommes med en tryckskillnad mellan uppsamlingspásen och den biologiska vätskans destillation (t.ex. en behållare såsom en satellitpåse eller en nál i slutet av en ledning). Systemet enligt uppfinningen är lämpligt för användning med konventio- *nella anordningar för att åstadkomma tryckskillnaden, t.ex. en tryckgivare. Exempel på sätt att åstadkomma denna tryck- skillnad kan vara genom tyngdkraften, påläggning av tryck på uppsamlingspàsen exempelvis manuellt eller med tryckmanschett, 'eller genom att placera den andra behållaren, exempelvis sa- tellitpàsen, i en kammare, t.ex. en vakuumkammare, som åstad- kommer en tryckskillnad mellan uppsamlingspàsen och den andra behållaren. Inom ramen för uppfinningen ligger även tryck- givare som alstrar huvudsakligen jämnt tryck över hela upp- samlingspäsen. 514, 25,5. 49 Då den biologiska vätskan går från en påse till nästa kan den passera genom minst ett poröst medium. Om den biolo- giska vätskan är supernatantlagret, t.ex. PRP, kan den gå från uppsamlingspåsen genom en eller flera anordningar eller upp-_ sättningar innehållande ett eller flera porösa medier, en leu- kocytborttagning, en barriär för röda blodkroppar, ett poröst medium som kombinerar barriären för röda blodkroppar med leuko- cytborttagningen i ett enda poröst medium, eller en leukocyt- borttagning och en barriär för röda blodkroppar i serie. Su- pernatantlagret 31 tryckes ut från den första behållaren ll tills strömningen stoppas, såsom genom tillslutning med en klämma i ledningen 20, eller automatiskt om uppsättningen inbe- griper ett barriärmedium 12 för röda blodkroppar. Företrädesvis passerar supernatantlagret genom en barriär för röda blodkrop- par och sedan genom en leukocytborttagning. Supernatantlagret, har sedan minskat leukocytinnehåll sedan det passerat genom leukocytborttagningen. Ytterligare behandling kan om så önskas göras nedströms leukocytborttagningen antingen i anslutning till systemet eller efter separation från systemet. _ Sedimentlagret 32 i uppsamlingspåsen ll kan ledas genom en uppsättning för leukocytborttagning l7 och in i en behållare 18, såsom en satellitpåse. Uppsamlingspåsen ll som nu primärt innehåller röda blodkroppar utsättes sedan för en tryckskillnad såsom angivits ovan för att preparera leukocytborttagningen l7 och initiera strömning.

Enligt ett ytterligare utförande av uppfinningen åstad- kommes ett sätt varigenom återvinningen av olika biologiska vätskor inneslutna eller kvarhållna i olika element i systemet maximeras, antingen genom att låta en gasvolym bakom den inne- slutna eller kvarhållna biologiska vätskan skjuta fram denna genom elementen och in i den avsedda behållaren, anordningen eller porösa mediet, eller genom att transportera den inne- slutna eller kvarhållna vätskan in i den avsedda behållaren, uppsättningen eller porösa mediet genom tryckskillnad, t.ex. tyngdkraft, tryckmanschett,sug,eller liknande. Detta sörjer för en fullständigare tömning av behållaren, uppsättningen el- ler det porösa mediet. Då väl behållaren är fullständigt tömd 514,2s5 -50 stoppas strömningen automatiskt.

För att den beskrivna uppfinningen bättre skall för- stås anger de följande exemplen användning av föreliggande uppfinning. Dessa exempel är endast illustrerande och begränsar inte uppfinningen på något sätt. ' EXEMPEL ' Exempel l _ Det biologiska vätskebehandlingssystemet i det första exemplet innehåller en bloduppsamlingspåse, separata PRP och PRC- leukocytborttagningar liksom separata PRP och PRC-satellitpå- sar, Vidare spärrar en barriär för röda blodkroppar mellan upp- samlingspåsen och PRP-leukocytborttagningen strömning av röda blodkroppar in i PRP-satellitpåsen.

Barriären för röda blodkroppar innehåller ett poröst me- dium för blockering av strömning vid kontakt med röda blodkrop- par när PRP passerar från uppsamlingspàsen. Barriären för röda blodkroppar var förformad av PBT-fibrer med genomsnittsdiame- tern 2,6 jun, vilka ytmodifierats med de metoder som beskrives i US-PS 4 880 548 med användning av hydroxietylmetakrylat och metakrylsyra i ett monomerförhållande 0,35:l för att få ett "CWST på 95 dyn/cm och en zäta-potential på -ll,4 millivolt. Det porösa elementets effektiva diameter var 2,31 cm, med en filter- yta på 4,2 cmz, tjockleken var 0,051 cm, hålrumsvolymen 75 % (densitet 0,34 g/cc) och fiberytan o,oa m2. volymen kvarhàllen PRP i huset var <0,4 cc represente- rande en PRP-förlust genom kvarhållningen av mindre än 0,2 %.

Strömmen stoppades abrupt när röda blodkroppar nådde uppströms- ytan på barriären för röda blodkroppar och inga synliga tecken på röda blodkroppar eller hemoglobin fanns nedströms.

PRP-leukocytborttagningen innehöll ett poröst medium för borttagning av leukocyter från PRP efter passagen genom bar- riären för röda blodkroppar beskrives i US-PS 4 880 548. Pá 'samma sätt beskrives PRC-leukocytborttagningen med ett poröst medium för borttagning av leukocyter från PRC-enheten i US-PS 4 925 572. Exemplet använde en enda enhet helblod från en blodgivare. Blodenheten uppsamlades i en uppsamlingspåse som i förväg fylldes med 63 ml CPDA anti-koagulant. Det uppsamlade 514 255 51 blodet centrifugerades med "soft-spin" enligt vanlig blodbanks- praxis. Uppsamlingspàsen överfördes försiktigt, för att undvika att störa innehållet, till en plasmaextraktor som var fjäder- belastad till ett tryck pà omkring 90 mm Hg.

Trycket från uttryckningsanordningen drev PRP från upp- samlingspåsen genom barriären för röda blodkroppar, PRP-filtret, där leukocyterna avlägsnades, och till satellitpàsen. När PRP gick ut från uppsamlingspåsen steg gränsytan mellan PRC och PRP. När de röda blodkropparna, i främre kanten på PRC-lagret, kom i kontakt med barriären för röda blodkroppar stannade ström- ningen automatiskt.

Kvarvarande PRC i uppsamlingspåsen behandlades också.

Uppsamlingspåsen hängdes upp och kramades för att fylla PRC- leukocytborttagningsfiltret och PRC befriades från leukocyter.

När den upphängda påsen var tom stoppade processen automatiskt.

Den från leukocyter befriade produkten av röda blodkroppar uppsamlades eventuellt i satellitpàsen och var tillgänglig för transfusion till en patient vid behov.

PRP som tidigare uppsamlats i satellitpåsen behandlades - med normala blodbanksprocedurer, d.v.s. "hard-spin"-centrifu- gering till PC och plasma.

Exempel 2 I Helblod uppsamlades i en AdsofÉLgivare och behandlades under standardbetingelser till en enhet PRP. PRP filtrerades sedan för att avlägsna leukocyter med ett filter som beskrivits i US-PS 4 880 548. Borttagningseffektiviteten var >99,9 %.

Den filtrerade PRP-enheten placerades sedan i en tryck- manschett och ett tryck pà 300 mm Hg pálades. Slangen från påsen (sluten med klämma vid denna punkt) anslöts till inlopps- öppningen pá en separationsanordning visad på fig. 5, 6 och 9.

-Ett mikroporöst polyamidmembran med en porstorlek på 0,65 }nn användes som separationsmedium i anordningen. Membranens yta var omkring l7,4 cmz. Djupet i de första vätskekanalerna mins- kade från omkring 0,03 cm nära inloppet till omkring 0,01 cm nära utloppet. Djupet i de andra vätskekanalerna var omkring 0,025 cm. Anordningens utloppsöppningar var anslutna till slangar som släppte ut vätskevolymen för att mätas-och sparas 514, 255 52 för analys.

Försöket inleddes med att klämman öppnades och PRP fick gà inii anordningen. Klar vätska, plasma, observerades gá ut genom en öppning och grumlig vätska, blodplättskoncentrat, gick ut genom den andra öppningen. Försökets varaktighet var 42 minuter varunder 154 ml plasma och 32 ml blodplättskon- centrat uppsamlades. Blodplättskoncentrationen i plasmat visade sig vara 1,2 x 10%/Fl medan koncentrationen av blodplättar i jblodplättskoncentratet var 1,43 x l06/Pl.

Resultaten ovan visar att blodplättar kan koncentreras till en användbar nivà och plasma kan utvinnas pá skälig tid med en anordning enligt uppfinningen.

Exempel 3 Helblod uppsamlades och behandlades till blodkomponenter gliksom i exempel 2 och jämfördes med vad som producerades med konventionell behandling. Resultaten av jämförelse mellan blod- komponenternas volymer och deras respektive leukocytmängder anges i tabell I, som visar den förbättrade effektiviteten pà leukocytborttagningen jämfört med de konventionella metoderna.

Tabell I visar också det ökade plasmautbytet och motsvarande minskade PRC-utbyte vid användningen av uppfinningen.

Tabell I Konventionellt uppfinningen helblod volym, cc 450 - 500 450 - 500 wBc-hèlbloa 2 x 109 2 x 109 PC volym, cc _ 50 - 65 50 - 65 wBc-Pc ï 101 x 108 æl x 105 plasniavolym, cc 165 - 215 170 - 220 wBc-plasma, <1o8 <1o8 PRC-volym, cc* 335 320 wBc-1>_Rc* 2 2 x 109 »1 x 106 _* w/Adsofä Exempel 4 - 8 Bloduppsamlingsuppsättningen för exemplen överensstämde generellt med fig. l, utan den eventuella barriären för röda blodkroppar, och metoden var den tidigare beskrivna med an- _ 514.255 53 vändning av en apparat enligt fig. 4 för det första centrifu- geringssteget.

Det porösa mediet för borttagning av leukocyter från PRP förformades till ett cylindriskt filterelement med 2,5 cm “diameter och 0,33 cm tjocklek av PBT-fibrer med 2,6 }nn medel- diameter och densiteten 1,38 g/cc, ytmodifierade enligt US-PS 4 880 548 med en blandning av hydroxietylmetakrylat och met- akrylsyramonomerer i ett viktförhållande 0,3:l. Det porösa me- diet hade ett CWST på 95 dyn/cm och en zäta-potential pá -ll,4 millivolt vid pH 7,4 i plasmat. Fiberytan var 0,52 m2 och hålrumsvolymen 80 %.

Det porösa mediet för leukocytborttagningen från PRC enligt ekvationerna (3) och (4) ovan, beräknades ge en leuko- cytborttagningseffektivitet bättre än log 3, d.v.s. >99,9 % minskning av leukocytinnehàllet. Detta àstadkoms med 3,4 g PBT-fiber med 2,6 }nn diameter, omkring 13 % mera fiber än i ekvationerna (3) och (4), och för att ytterligare förbättra effektiviteten av leukocytborttagningen minskades hålrumsvo- lymen till 8l %. Dessa ändringar ökade effektiviteten till bättre än log 4, d.v.s. till >99,99 %. När PRC byttes ut ge- nom detta filtermedium insatt i ett hus med 6,4 cm diameter er- hölls strömningstider i det önskade l0 till 30 minuters-omrà- det vid ett pàlagt tryck av 90 mm Hg. Fiberytorna hade modi- fierats enligt US-PS 4 925 572 med en blandning av hydroxi- etylmetakrylat och metylmetakrylat i ett viktförhállande 0,27 till l, och det porösa mediet hade ett CWST på 66 dyn/cm.

Det ovan beskrivna PRC-porösa mediet föregicks av ett iförfilter bestående av fem lager smältblàst PBT-väv i den nedan angivna ordningen till en total tjocklek av 0,25 cm: Grad vikt, mg/cm2 fiberdiameter, }nn CWST 2,0 - 0,6 0,002 12 50 2,0 - 1,0 0,002 9 50 2,5 - 3,5 - 0,003 ' 4,5 66 ,6 - 7,1 0,006 3,0 66 ,2 - 10,3 0,006 2,6 66 :14 .v255 54 Alla exemplen använde en enda blodenhet från en blod- Igivare. Blodenheten uppsamlades i en bloduppsamlingsuppsats utformad såsom visas på fig. l (utan den eventuella barriären för röda blodkroppar), och med 63 ml CPDA anti-koagulant till- satt i uppsamlingspàsen. Den uppsamlade blodvolymen från de olika givarna anges i kolumn l i tabell II. Uppsamlingsanord- ningen var placerad i centrifugskålen på fig. 4 enligt vanlig 'blodbankspraxis med undantag av att PRC-filtret var påsatt på hållaren, som i sin tur var monterad på övre delen av centri- fugskàlen och sålunda säkrade PRC-filtret utanpå och ovanför centrifugskålen.

Centrifugskålen roterades sedan med en hastighet som gav 2280 G, vid skålens botten, i 3 minuter, tillräckligt för att få de röda blodkropparna att sedimentera i undre delen av uppsamlingspàsen. Hållaren uttogs sedan och uppsamlingspàsen överfördes försiktigt för att undvika att innehållet stördes, till en plasmaextraktor som var fjäderbelastad för att ge ett tryck på omkring 90 mm Hg. öppningen av tillslutningen mellan uppsamlingspàsen och PRP-filtret och sedan öppning av_till- slutningen mellan PRP-filtret och satellitpåsen tillät det över- stående PRP-lagret att strömma från uppsamlingspàsen genom PRP- filtret till satellitpåsen. Då PRP strömmade ut steg gränsytan mellan PRC och PRP i uppsamlingspàsen och strömningen fort- satte i omkring l0 till 20 minuter tills all PRP gått genom PRP-filtret, varvid strömningen slutade abrupt och automatiskt då framkanten på PRC-lagret nådde PRP-filtret. Slangen till- slöts då intill uppsamlingspàsen och intill satellitpåsen och slangen mellan de två klämmorna och PRP-filtret klipptes av.

I satellitpåsen uppsamlat PRP behandlades sedan med normala blodbanksmetoder till leukocytbefriad PC och plasma. Volymerna av PC och plasma anges i tabell II samman med antalet åter- stående leukocyter i PC. ' Uppsamlingspåsen som nu innehöll endast de sedimente- rade, röda blodkropparna uttogs från plasmaextraktorn och 100 ml AS3 näringslösning som i förväg satsats i den andra satel- litpåsen överfördes till uppsamlingspàsen genom PRC-filtret.

Innehållet i uppsamlingspàsen blandades sedan noggrant. Med s14Xz5s 55 ett tryck av 120 mm Hg pålagt genom tyngdkraften befriades PRC i uppsamlingspåsen därefter från leukocyter genom passage ge- nom PRC-filtret till satellitpåsen. PRC fanns nu tillgängligt för transfusion till en patient vid behov. volymen, hemato- kriter och den återstående leukocytmängden i PRC anges i tabell II. _ I , Leukocytmängderna i tabellen återspeglar känsligheten hos de metoder som användes för att bestämma antalet kvarva- rande leukocyter i PRC och PC-utloppen. Inga leukocyter kunde faktiskt upptäckas i de leukocytbefriade utloppen i något exempel. Parallella försök med känsligare men mera arbetskrä- vande analysmetoder visar att leukocytborttagningseffektivi- teterna var omkring l0 till 100 gånger bättre än vad som visas av data i tabellen.

Tabell II ' -~ - -- ----_-_-- ---- - » ---_«_ PJ-ZQV. 1 - ErPVZ 2" rovß »Qrov 4 rov helblod ' uppsaml . ,ml 407 387 399 410 410 helbled Hct, % 45 425 40 41 3&5 PRP-filtr . tid, min. 16 11 14 15 19 PRP-volym, nal 211 173 196 177 232 PC-volym, rnl 47 52 49 69 61 återstående _ Wgßpc* <1,ox1_o* <1,1x1o* <1,mø* <1,sx1o* <1px1oß PRC-filtr. tid, min 15 18 11 « 11 , 12 PRC-volym, m1 285 318 301 _ 306 288 PRC Het, % 64.5 s? 51 52.5 60.5 återstående WBC_PRC* <7,3x10° <10“ <7,7x1o° <7,zx10° * per enhet 514 -255 56 Uppfinningen har beskrivits i vissa detaljer genom illustrationer och exempel, men det skall förstås att den kan tillämpas i olika modifikationer och alternativa utföranden och att den inte är begränsad till de specifika utförandena som anges i exemplen. Dessa specifika utföranden är inte av- sedda att begränsa uppfinningen utan avsikten är tvärtemot att täcka alla modifikationer, ekvivalenter och alternativ som faller inom ramen för uppfinningen.

Claims

.57 _514 255 Patentkrav

1. System för behandling av en biologisk vätska, k ä n n e t e c k n a t därav, att det innefattar en första behållare (11), en andra behållare (41) och en tredje behållare (18), att den första behållaren (ll) står i medieförbindelse med den andra behållaren (41), att ett första poröst medium (12, 13) är interfolierat mellan den första behållaren (11) och den andra behållaren (41), att det första porösa mediet (12, 13) innefattar minst ettdera av ett leukocytborttagningsmedium, ett barriärmedium för röda blodkroppar och kombinationen av ett 1eukocytborttagningsmedium och ett barriärmedium för röda blodkroppar, att den tredje behållaren (18) står i mediekommunikation med den första behållaren (11) och att ett andra poröst medium (17), som är interfolierat mellan den första behållaren (11) och den tredje behållaren (18), innefattar ett leukocytborttagningsmedium.

2. System enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t därav, att det första porösa mediet (12, 13) och det andra porösa mediet (17) innefattar fibrer.

3. System enligt krav 2, k ä n n e t e c k n a t därav, att det första porösa mediet (12, 13) och det andra porösa mediet (17) innefattar fibrer som har modifierats genom exponering för en monomer innehållande en polymeriserbar grupp och en hydroxylinnehållande grupp.

4. System enligt krav 3, k ä n n e t e c k n a t därav, att fibrerna i det första porösa mediet (12, 13) och/- eller det andra porösa mediet (17) har modifierats med en blandning av monomerer som innehåller hydroxietylmetakrylat och metakrylsyra. .

5. System enligt krav 4, k ä n n e t e_c k n a t därav, att viktförhållandet mellan metakrylsyra- och hydroxi- etylmetakrylatmonomererna i blandningen är mellan 0,01:1 och 0,5:1.

6. System enligt något av kraven 1-5, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det första porösa mediet (12, 13) tillåter blodplättar att passera igenom tills röda blodkroppar blockerar mediet.

7. System enligt något av kraven 1-6, k ä n n e- 514 255 se t e c k n a t därav, att det första porösa mediet (12, 13) innehåller ett fibröst medium och att det första porösa mediets (12, 13) fiberyta är 0,3 till 2,0 nF.

8. System enligt något av kraven 1-6, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det första porösa mediets (12, 13) genomströmningsyta är 2,5 till 10 cm”.

9. System enligt något av kraven 1-8, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det första porösa mediet (12, 13) innehåller ett fibröst medium och att det första porösa mediets (12, 13) fiberyta är 0,35 till 0,6 af.

10. System enligt något av kraven 1-9, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det första porösa mediet (12, 13) innehåller ett fibröst medium och att det första porösa mediets (12, 13) fiberyta är från 0,04 till 0,3 nﬁ.

11. System enligt något av kraven 1-10, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det första porösa mediet (12, 13) innehåller ett fibröst medium och att det första porösa mediets (12, 13) fiberyta är från 0,08 till 1,0 m”.

12. System enligt något av kraven 1-11, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det första porösa mediet (12, 13) har en zäta-potential från -3 till -30 millivolt vid pH 7,3.

13. System enligt något av kraven 1-12, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det första porösa mediet (12, 13) har ett CWST större än 70 dyn/cm.

14. System enligt något av kraven 1-12, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det andra porösa mediet (17) har ett CWST större än 53 dyn/cm.

15. System enligt något av kraven 1-14, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det andra porösa mediet (17) även I inkluderar ett förfilter. W

16. System enligt något av kraven 1-15, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det innehåller minst ett gasinlopp (53).

17. System enligt något av kraven 1-16, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det innehåller minst ett gasutlopp (54). _

18. System enligt något av kraven 1-17, k ä n n e- 5É114 255 59 t e c k n a t därav, att det_biologiska mediet är en blod- produkt.

19. System enligt något av kraven 1-18, k ä n n e- t e c k n a t därav, att nämnda system är ett slutet sterilt system.

20. System enligt något av kraven 1-19, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det innehåller ett separationsmedium (21b).

21. Sätt att behandla en biologisk vätska, k ä n n e t e c k n a t därav, att den biologiska vätskan separeras till ett överstående lager och ett sedimentlager, att den biologiska vätskans överstående lager ledes genom ett första poröst medium (12, 13), som innehåller minst ettdera av ett leukocytborttagningsmedium, ett barriärmedium för röda blodkroppar, och en kombination av ett leukocytborttagnings- medium och ett barriärmedium för röda blodkroppar, och att den biologiska vätskans sedimentlager förs genom ett andra poröst medium (17), som innefattar ett leukocytborttagningsmedium.

22. Sätt enligt krav 20, k ä n n e t e c k n a t därav, att det överstående lagret förs genom ett separations- medium (216).

23. Sätt enligt krav 21 eller krav 22, k ä n n e- t e c k n a t därav, att gas införs genom ett gasinlopp (53).

24. Sätt enligt något av kraven 21-23, k ä n n e- t e c k n a t därav, att gas matas ut genom ett gasutlopp (54).

25. Sätt enligt något av kraven 21-24, k ä n n e- t e c k n a t därav, att genomföring av den biologiska vätskan genom det första porösa mediet (12, 13) innefattar att det överstående lagret förs genom ett barriärmedium för röda blod-, kroppar eller ett kombinerat medium för leukocytborttagning och röda celler tills mediet har blockerats.

26. Sätt enligt något av kraven 21-25, k ä n n e- t e c k n a t därav, att den biologiska vätskans överstående lager förs genom minst ett förfiltreringsskikt innan den biolo- giska vätskans överstående lager förs genom det andra porösa mediet (17).

27. Sätt enligt något av kraven 21-26, k ä n n e- .f514 255 60 t e c k n a t därav, att den biologiska vätskan är en blod- produkt. '

28. Sätt enligt något av kraven 21-27, k ä n n e- t e c k n a t därav, att nämdna biologiska vätska behandlas i ett slutet sterilt system. _

29. Sätt enligt något av kraven 21-28, k ä n n e- t e c k n a t därav, att nämnda biologiska vätska behandlas inom ca 8 timar efter det att den biologiska vätskan har tagits ut från en kropp.

30. Sätt enligt något av kraven 21-29, k ä n n e- t e c k n a t därav, att det överstående lagret förs ut till det första porösa mediet (12, 13) och att sedimentlagret förs ut till ett andra poröst medium (17) i tur och ordning.