SE504336C2

SE504336C2 - Indolderivat

Info

Publication number: SE504336C2
Application number: SE9301241A
Authority: SE
Inventors: Alfredo Cugola; Giovanni Gaviraghi
Original assignee: Glaxo Spa
Priority date: 1992-04-16
Filing date: 1993-04-15
Publication date: 1997-01-13
Also published as: CN1085212A; DK43193D0; ZA932642B; GB9208492D0; HU217964B; ITRM930236A1; LU88248A1; HUT70526A; AP480A; DK169890B1; JPH07505407A; IL105412A0; NO943913L; IT1265325B1; RO113242B1; CZ254394A3; US5374648A; SK281941B6; FI944800A0; GB9307808D0

Description

504 336 10 15 20 25 30 35 2 Lämpliga fysiologiskt acceptabla basadditionssalter av föreningar med formeln (I) innefattar alkalimetall- eller jordalkalimetallsalter, såsom natrium-, kalium-, kalcium-, och magnesium- och ammoniumsalter bildade med aminosyror (exempelvis lysin och arginin) och organiska baser (exempelvis prokain, fenylbenzylamin, etanolamin, dietanolamin och N-metylglukosamin).

Det bör observeras, att föreningen med formeln (I) kan produceras genom metabolism in vivo av ett lämpligt proläkemedel. Sådana proläkemedel kan vara exempelvis fysiologiskt acceptabla metaboliskt labila estrar av före- ningar med den allmänna formeln (I). Dessa kan bildas genom förestring, exempelvis av vilken som helst av kar- boxylsyragrupperna i moderföreningen med den allmänna formeln (I) med i förekommande fall föregående skyddande av eventuella andra i molekylen närvarande reaktiva grup- per åtföljt av avskyddande om detta erfordras. Exempel på sådana metaboliskt labila estrar innefattar Cl_4-alkyl- estrar, exempelvis metyl- eller etylestrar, substituerade eller osubstituerade aminoalkylestrar (exempelvis amino- etyl-, 2-(N,N-dietylamino)etyl- eller 2-(4-morfolino)- etylestrar) eller acyloxialkylestrar, såsom acyloximetyl- eller 1-acyloxietyl, exempelvis pivaloyloximetyl, l-piva- loyloxietyl, acetoximetyl, l-acetoxietyl, l-metoxi-l- metyletylkarbonyloxietyl, l-benzoyloxietyl, isopropoxi- karbonyloximetyl, l-isopropoxikarbonyloxietyl, cyklohexyl- karbonyloximetyl, l-cyklohexylkarbonyloxietylester, cyklo- hexyloxikarbonyloximetyl, 1-cyklohexyloxikarbonyloxietyl, l-(4-tetrahydropyranyloxikarbonyloxietyl) eller l-(4- tetrahydropyranyloxikarbonyloxi)etyl.

Föreningen med formeln (I) och salter och metaboliskt labila estrar därav kan bilda solvater, exempelvis hydra- ter, och uppfinningen innefattar sådana solvater.

Föredragna salter av föreningar med formeln (I) inne- fattar kalium- och speciellt natriumsaltet därav. 10 15 20 25 30 35 504 336 3 Föredragna metaboliskt labila estrar av föreningar med formeln (I) innefattar Cl_4-alkylestrar, speciellt metyl eller etyl, aminoalkylestrar, speciellt 2-(4'-mor- folino)etyl- eller acyloxialkylestrar, exempelvis acetoxi- metylpivaloyloximetyl, 1-cyklohexyloxikarbonyloxietyl el- ler 1-(4-tetrahydropyranyloxikarbonyloxi)etyl.

Föreningen med formeln (I) och/eller fysiologiskt acceptabla salter därav är antagonister till exitatoriska aminosyror. Närmare bestämt är de aktiva antagonister vid det strykninokänsliga glycinbindsätet som är förenat med NMDA-receptorkomplexet. Som sådana är de aktiva antagonis- ter till NMDA-receptorkomplexet. Vidare uppvisar förening- arna enligt uppfinningen fördelaktig aktivitetsprofil in- nefattande god biotillgänglighet och varaktighet för ver- kan. Dessa föreningar är därför användbara vid behandling eller förhindrande av neurotoxisk skada eller neurodegene- rativa sjukdomar. Föreningarna är sålunda användbara för behandling av neurotoxisk skada vilken uppträder efter cerebralt stroke, tromboembolytiskt stroke, hemorragiskt stroke, cerebral iskemia, cerebral vasospasm, hypoglykemi, anaesi, hypoxi, anoxi, perinatalt asfyxiskt hjärtstille- stånd. Föreningarna är användbara vid behandling av kro- niska neurodegenerativa sjukdomar, såsom Huntingtons dis- ease, Alzheimers senila demens, amyotropisk lateral skle- ros, Glutaric Acidaemia typ, multiinfarktdemens, status epilepticus, kontusiva skador (exempelvis ryggmärgskada), av viral infektion inducerad neurodegenerering (exempelvis AIDS, encefalopatier) Downs syndrom, epilepsi, scizofreni, depression, ångest, smärta, neurogen blåsa, irritativa blåsstörningar, drogberoende, innefattande abstinenssymtom från alkohol, kokain, opiater, nikotin, benzodiazepin.

Den höggradiga och selektiva verkan av föreningen en- ligt uppfinningen vid det strykninokänsliga glycinbind- sätet närvarande på NMDA-receptorkomplexet kan lätt be- stämmas under användning av konventionella testprocedurer.

Förmågan till bindning vid det strykninokänsliga glycin- bindstället bestämdes sålunda under användning av proce- 504 336 10 15 20 25 30 35 4 duren enligt Kishimoto H et al. J Neurochem 1981, §Z 1015- 1024. Selektiviteten för verkan av föreningen enligt upp- finningen med avseende på det strykninokänsliga glycin- sätet bekräftades i studier vid andra jonotropa kända re- ceptorer för exitatoriska aminosyror. Föreningen enligt uppfinningen befanns sålunda uppvisa föga eller ingen affinitet till kaininsyra(kainat)receptorn, a-amino-3- hydroxi-5-metyl-4-isoxazolproprionsyra (AMPA)receptorn eller vid NMDA-bindsätet.

Föreningar enligt uppfinningen har även befunnits inhibera NMDA-inducerade konvulsioner hos möss under an- vändning av proceduren enligt Chiamulera C et al., Psycho- pharmacology (1990) 102, 551-552.

Den neuroprotektiva aktiviteten hos föreningarna en- ligt uppfinningen har även visats i den cerebrala mitt- artärocklusionsberedningen på möss under användning av den procedur som beskrives av Chiamulera C et al., European Journal of Pharmacology 216 (1992) 335-336. Föreningen var aktiv när den administrerades antingen pre-iskemia eller post-iskemia.

Uppfinningen innefattar därför användningen av en förening med formeln (I) och/eller fysiologiskt accep- tabelt salt eller metaboliskt labil ester därav för an- vändning i terapi och speciellt användning som medicin för antagonisering av effekterna av exitatoriska aminosyror pà NMDA-receptorkomplexet.

Genom uppfinningen åstadkommes även användning av en förening med formeln (I) och/eller ett fysiologiskt accep- tabelt salt eller en metaboliskt labil ester därav för framställning av ett läkemedel för antagonisering av ef- fekterna av exitatoriska aminosyror på NMDA-receptorkom- plexet.

Enligt en ytterligare sida av uppfinningen åstad- kommes även ett förfarande för antagonisering av effek- terna av exitatoriska aminosyror pà NMDA-receptorkomplex- et, innefattande administrering pà en patient i behov därav av en antagonistisk mängd av en förening med formeln 10 15 20 25 30 35 504 336 5 (I) och/eller ett fysiologiskt acceptabelt salt eller metaboliskt labil ester därav.

Det förstås för fackmän på området att referensen häri till behandling utsträckes till profylax ävensom be- handling av etablerade sjukdomar eller symtom.

Det förstås vidare att mängden av en förening enligt uppfinningen som erfordras för användning vid behandling varierar med karaktären av det tillstånd som behandlas, administrationssättet och åldern och tillståndet hos pa- tienten och att den slutligen avgöres av ifrågavarande läkare. I allmänhet ligger emellertid doser använda för behandling av vuxen människa typiskt inom intervallet 2 till 800 mg per dag beroende på administrationssättet.

För parenteral administration är en daglig dos ty- piskt inom intervallet 20-100 mg, företrädesvis 60-80 mg per dag. För oral administration är en daglig dos typiskt inom intervallet 200-800 mg, exempelvis 400-600 mg per dag.

Den önskade dosen kan lämpligen presenteras som en enkel dos eller som uppdelade doser administrerade med lämpliga intervaller, exempelvis som två, tre, fyra eller flera subdoser per dag. Även om det är möjligt att för användning i terapi administrera en förening enligt uppfinningen som ràkemika- lie är det föredraget att presentera den aktiva bestånds- delen som en farmaceutisk beredning.

Genom uppfinningen àstadkommes sålunda ytterligare en farmaceutisk beredning innefattande en förening med for- meln (I) eller ett farmaceutiskt acceptabelt salt eller metaboliskt labil ester därav tillsammans med en eller flera farmaceutiskt acceptabla bärare och eventuellt andra terapeutiska och/eller profylaktiska beståndsdelar. Bära- ren(arna) måste vara "acceptabel" i så måtto att den är kompatibel med de övriga ingredienserna i beredningen och ej skadliga för mottagaren därav. 504 336 10 15 20 25 30 35 6 Kompositionerna enligt uppfinningen innefattar sådana i en form speciellt formulerad för oral, bukal, parente- ral, inhalations- eller insuffleringsimplantat, rektal administration. Parenteral administration är föredragen.

Tabletter och kapslar för oral administration kan in- nehålla konventionella excipienter, såsom bindemedel, exempelvis sirup, accacia, gelatin, sorbitol, tragacant, mucilag av stärkelse eller polyvinylpyrrolidon; fyllmedel, exempelvis laktos, socker, mikrokristallin cellulosa, majsstärkelse, kalciumfosfat eller sorbitol; smörjmedel, exempelvis magnesiumstearat, stearinsyra, talk, polyety- lenglykol eller silika; desintegreringsmedel, exempelvis potatisstärkelse eller natriumstärkelseglykolat, eller vätmedel såsom natriumlaurylsulfat. Tabletterna kan vara överdragna enligt förfaranden som är välkända inom tek- niken. Orala vätskeberedningar kan föreligga i form av exempelvis vatten- eller oljesuspensioner, lösningar, emulsioner, sirup eller elixir, eller kan tillhandahållas som en torr produkt för konstituering med vatten eller annan lämplig vehikel före användning. Sådana vätskefor- miga beredningar kan innehålla konventionella tillsatser, såsom suspenderingsmedel, exempelvis sorbitolsirup, metyl- cellulosa, glukos/sockersirup, gelatin, hydroxietylcellu- losa, karboximetylcellulosa, aluminiumstearatgel eller hydrerade ätbara fetter: emulgermedel, exempelvis lecitin, sorbitanmonooleat eller acacia; vattenfria bärare (som kan innefatta ätliga oljor) exempelvis mandelolja, fraktione- rad kokosnötolja, oljeestrar, propylenglykol eller etyl- alkohol; och konserveringsmedel, exempelvis metyl- eller propyl-p-hydroxibenzoater eller askorbinsyra. Kompositio- nerna kan även formuleras som suppositorer, exempelvis innehålla konventionella suppositoriebaser, såsom kokos- smör eller andra glycerider.

För buccal administration kan kompositionen ta form av tabletter eller pastiller formulerade pà konventionellt sätt. 10 15 20 25 30 35 504 336 7 Kompositionen enligt uppfinningen kan formuleras för parenteral administration genom injektion eller kontinuer- lig infusion. Beredningar för injektion kan tillhanda- hållas i enhetsdosform i ampuller eller i multi-dosbehål- lare med ett tillsatt konserveringsmedel. Kompositionerna kan ta sådana former som suspensioner, lösningar eller emulsioner i olje- eller vattenbärare och kan innehålla formuleringsmedel, såsom supenderings-, stabiliserings- och/eller dispergeringsmedel. Alternativt kan den aktiva beståndsdelen föreligga i pulverform för konstitution med en lämplig bärare, exempelvis sterilt pyrogenfritt vatten, före användning.

För administration genom inhalation tillhandahålles föreningarna enligt uppfinningen lämpligen i form av en aerosolspray från trycksatta förpackningar med användning av ett lämpligt drivmedel, såsom diklordifluormetan, tri- klorfluormetan, diklortetrafluoretan, koldioxid eller an- nan lämplig gas, eller från en nebulisator. När det gäller en trycksatt aerosol kan dosenheten bestämmas genom an- ordnandet av en ventil för matning av en uppmätt mängd.

Alternativt kan för administration genom inhalation eller insufflation föreningarna enligt uppfinningen ta form av komposition av ett torrt pulver, exempelvis en pulverblandning av föreningen och en lämplig bärare, såsom laktos eller stärkelse. Pulverkompositionen kan tillhanda- hållas i enhetsdosform i exempelvis kapslar eller patroner av exempelvis gelatin, eller blåsförpackningar, från vilka pulvret kan administreras med tillhjälp av en inhalator eller insufflator.

Kompositionen enligt uppfinningen kan även formuleras som en depâberedning. Sådana långvarigt verkande bered- ningar kan administreras genom implantation (exempelvis subkutant eller intramuskulärt) eller genom intramuskulär injektion. Föreningarna enligt uppfinningen kan sålunda exempelvis formuleras med lämpliga polymera eller hydro- foba material (exempelvis som en emulsion i en acceptabel olja) eller jonbytarhartser eller svårlösliga derivat, 504 336 10 15 20 25 30 35 8 exempelvis som ett svårlösligt salt.

Kompositionerna enligt uppfinningen kan innehålla mellan 0,1 och 99% av den aktiva beståndsdelen, lämpligen från 30-95% för tabletter och kapslar och 3-50% för fly- tande beredningar.

Föreningen med formeln (I) och salter eller metabo- liskt labila estrar därav kan framställas genom omsättning av indolen (II), vari R1 är en karboxylskyddsgrupp , i n cl f* COJM m med en fosforylid med förmåga att omvandla gruppen CHO till gruppen ACONHPh, åtföljt av en eller flera av föl- jande operationer när det är nödvändigt eller önskvärt. (l) Avlägsnande av karboxylskyddsgruppen. (2) Omvandling av en förening, vari Rl är väteatom eller en karboxylskyddsgrupp, till ett salt eller en meta- boliskt labil ester därav.

Lämpliga karboxylskyddsgrupper R4 innefattar allyl-, alkyl-, trikloralkyl-, trialkylsilylalkyl- eller aryl- metylgrupper, såsom benzyl, nitrobenzyl eller trityl.

Vid en utföringsform av detta förfarande kan reak- tionen utföras under användning av en fosforylid med formeln (III) (R2)3P=cH coNHPh (m) vari R2 är en alkyl- eller fenylgrupp.

Reaktionen utföres i ett aprotiskt lösningsmedel, så- som acetonitril, eller en eter, såsom 1,4-dioxan och före- trädesvis med upphettning, exempelvis 40-l20°C.

Karboxvlskyddsgruppen Rl kan avlägsnas genom konven- tionella metoder kända för avlägsnande av sådana grupper.

Gruppen Rl kan sålunda avlägsnas genom hydrolys under an- vändning av en alkalimetallhydroxid, exempelvis litiumhyd- roxid, i ett lösningsmedel, såsom etanol, åtföljt om det v 10 15 20 25 30 35 504 336 9 är önskvärt eller nödvändigt av tillsatsen av en lämplig syra, exempelvis klorvätesyra, till bildning av motsva- rande fria karboxylsyra.

Fysiologiskt acceptabla salter av föreningar med formeln (I) kan framställas genom behandling av syran med lämplig bas, exempelvis alkali- eller jordalkalimetall- hydroxid, i ett lämpligt lösningsmedel, sàsom en alkanol, exempelvis metanol.

Metaboliskt labila estrar av föreningarna med formeln (I) kan framställas genom förestring av karboxylsyra- gruppen eller ett salt därav eller genom transferestring under användning av konventionella metoder. Sålunda kan exempelvis acyloxialkylestrar framställas genom omsättning av den fria karboxylsyran eller ett salt därav med lämplig acyloxialkylhalogenid i ett lämpligt lösningsmedel, sàsom dimetylformamid. För förestringen av den fria karboxyl- gruppen utföres denna reaktion företrädesvis i närvaro av en kvaternär ammoniumhalogenid, sàsom tetrabutylammonium- klorid eller benzyltrietylammoniumklorid.

Aminoalkylestrar kan framställas genom transfer- estring av en motsvarande alkylester, exempelvis metyl- eller etylester, genom omsättning med motsvarande amino- alkanol vid förhöjd temperatur, exempelvis 50-l50°.

Föreningarna med formeln (II) kan framställas genom behandling av indolen (IV) Cl I (W) com, H 6 vari R1 har ovan angivna betydelser, med N-metylformanilid och fosforoxiklorid i ett lösningsmedel, sàsom l,2-diklor- etan.

Indolerna med formeln (IV) är endera kända föreningar eller kan framställas genom förfaranden analoga med de som beskrivits för de kända föreningarna. 504 336 10 15 20 25 30 35 10 För att uppfinningen skall förstås fullständigare återges följande exempel men endast som illustration.

I mellanprodukterna och exemplen gäller om ej annat anges: Smältpunkter (smp) bestämdes på en Gallenkamp mp- apparat och är okorrigerade. Alla temperaturer avser C.

Infraröd spektra uppmättes pà ett FT-IR-instrument. Spekt- ra av protonmagnetisk ressonans (IH-NMR) registrerades vid 300 MHz, kemiska växlingar anges i ppm nedfällt (d) från Me4Si använd som internstandard och anges som singletter (s), dubletter (d), dubletter av dubletter (dd), triplet- ter (t), kvartetter (q) eller multipletter (m). Kolonn- kromatografi utfördes på silikagel (Merck AG Darmstadt, Tyskland). Följande förkortningar användes i texten: EA = etylacetat, CH = cyklohexan, DCM = diklormetan, DBU = 1,8 diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en. DMF = N,N-dimetylformamid, MeOH = metanol. Tlc avser tunnskiktskromatografi pà sili- kaplattor. Lösningar torkades över vattenfritt natrium- sulfat.

Mellanprodukt 1 Etyl-4,6-diklorindol-2-karboxylat Till en lösning av etylpyruvat (2,05 ml) i absolut etanol (38 ml) sattes koncentrerad svavelsyra (0,5 ml) under kraftig omröring. Den erhållna blandningen omröres vid 23° i 10 minuter, varefter 3,5-diklorfenylhydrazin- hydroklorid (4g) tillsattes portionsvis. Blandningen upphettades till återflöde i 4 timmar, kyldes till 23°, hälldes i kallt vatten (500 ml) och extraherades med dietyleter (3x300 ml). De organiska skikten avskildes och torkades. Lösningsmedlet avdrevs under reducerat tryck till bildning av 2-(3,5-diklorfenylhydrazon)propionsyra- etylestern som ett gult fast ämne (5g; tlc DCM, Rf=0,79, 0,47) i en blandning av E- och Z-isomerer. Det fasta ämnet sattes till polyfosforsyra (20 g) under omröring, och blandningen upphettades till 45” i 20 minuter till bild- ning av en brun produkt, som kristalliserades genom 95% 10 15 20 25 30 35 504 336 ll etanol (300 ml) till bildning av rubricerade förening som ett gulbrunt fast ämne (3.3 gzsmp. 180°; Tlc DCM, Rf=0,54). IR(CDCl3) Vmax(cm-1)3440(NH), 1772-l709(C=O).

IH-NMR(CDC13)9.00(s), 7.28(d), 4.42(q), 1.42(t).

Mellangrodukt II Etyl-3-formyl-4,6-dikloroindol-2-karboxylat En lösning av N-metylformanilid (5,l9 g) och forfor- oxiklorid (5,53 g) omrördes vid 23” i 15 minuter. 1,2- Dikloretan (60 ml) och mellanprodukten I (6 g) tillsattes, och den erhållna suspensionen omrördes vid 80° i 6 timmar.

Reaktionsblandningen hälldes i en 50% vattenlösning av natriumacetat (300 ml) till bildning genom filtrering av rubricerade förening som ett gult fast ämne (4,1 g; tlc EA/CH:4/6, Rf=0,4).

IR(Nujol) Vmax(cm'l) 1726 (C=O), 1663 (C=O), 1556 (C=C), 2725-2669 (CH). lu-Nmnunmso) 13.1s(s), 4.43(q), l.36(t). lO.60(s), 7.54(d), 7.40(d), Exemgel 1 (E) Etyl-3-[2-(fenylkarbamoyl)etenyl]-4,6-diklorindol-2- karboxylat DBU (319 mg) sattes till en omrörd suspension av fenylkarbamoylmetyltrifenylfosfoniumbromid (1 g) i aceto- nitril (10 ml) under kväve. Omröring upprätthölls vid 0° i 15 minuter, varefter mellanprodukten II (680 mg) tillsat- tes och blandningen àterflödeskokades i 6 timmar. Efter utspädning med diklormetan (15 ml) uppsamlades den bildade fällningen genom filtrering till bildning av rubricerade förening (380 mg; tlc EA/CH:3/7, Rf=0.5) som ett vitt fast ämne.

IR(Nujol) Vmax(cm_l)3305-3288(NH), 1678-l662(C=O), 1627- l60l(C=C), IH-NMR(DMSO) 12.61(s), 10.20(s), 8.27(d), 7.73(d), 7.52(d), 7.36-7.30(m), 7.06(m), 6.77(d), 4.39(q), l.36(t). 504 336 10 15 20 25 30 35 12 Exempel 2 (E)3-[2-(fenylkarbamoyl)etenyl]-4,6-diklorindol-2- karboxxlszra Till en lösning av Exempel l (250 mg) i etanol (2,5 ml) sattes litiumhydroxid (104 mg) vid 23°. Reaktions- blandningen omrördes vid 50° i 6 timmar, varefter lös- ningsmedlet avdrevs och återstoden upplöstes i vatten (5 ml). Vattenskiktet surgjordes med 1N klorvätesyra till dess att en vit fast fällning utföll. Den senare uppsam- lades genom filtrering och torkades till bildning av rub- ricerade förening som ett vitt fast ämne (230 mg). 1R(nujol) Vmax(cm-1) 3402-3281-3192 (0H,NH), l66l(C=O), 1607-1579 (C=C).

IH-NMR (DMSO) l2.4(s), 7.27(t), 10.l(s), 8.50(d), 7.74(d), 7.48(s), 7.16(s), 7.1l(d), 6.99(t).

Exempel 3 (E) 3-[2-(fenylkarbamoyl)etenyl]-4,6-diklorindol-2- karboxylsyranatriumsalt Metanol sattes droppvis till en suspension av (E)3- [2-(fenylkarbamoyl)etenyl]-4,6-diklorindol-2-karboxylsyra 200 mg i 0,5 M natriumhydroxid (l,0l ml) till dess att en klar lösning erhölls. Efter 15 minuters omröring induns- tades lösningen till torrhet, och återstoden torkades vid 50° i 12 timmar till bildning av rubricerade förening som ett vitt fast ämne (150 mg).

IR(nujo1 Vmax(cm'l) 3404-3126-(NH), 1624(C=0), l600(C=C).

IH-NMR (DMSO) 11.9(s), l0.06(s), 8.59(d), 7.75(d), 7.44(d), 7.27(t), 7.21(d), 7.10(d), 6.98(t).

Exempel 4 (E)-2-[-2-(N,N-dietylamino)etyl]-3[2-(fenylaminokarbonyl)- etenyl]-4,6-diklorindol-2-karboxylat.

(E)Etyl-3-[2-(fenylkarbamoyl)etenyl]-4,6-diklorindol- 2-karboxylat (0,3 g) och N,N-dietyletanolamin (1,3 g) om- rördes i 20 minuter innan natriumkarbonat (0,078 g) till- sattes, och blandningen upphettades vid 70° i 24 timmar. 10 l5 20 25 30 35 0504 336 13 Lösningen koncentrerades i vakuum och återstoden fick stà över natten resulterande i en vit fällning. Filtrering och kristallisation ur etylacetat gav rubricerade förening (0,l3 g; Rf O.65=DCM/MeOH:8.2) som ett vitt fast ämne.

IR(nujol) Vmax(cm_l) 3300 (NH), 1676(C=O), l624(C=C).

IH-NMR (DMSO) l2.52(s), 10.18(s), 8.22(d), 7.70(d), 7.50(d), 7.32(d), 7.31(t), 7.04(t), 6.73(d), 4.36(t), 2.75(t), 2.49(q), 0.90(t).

Exempel 5 (E) 2-[4-(-2'N-morfolin)ety1]3-[2-(feny1aminokarbonyl)- etenyl]-4,6-diklorindol-2-karboxylat En blandning av (E)etyl-3-[2-(fenylkarbamoyl)etenyl]- 4,6-diklorindol-2-karboxylat (400 mg), 4-(2-hydroxietyl)- morfolin (7 ml) och p-toluensulfonsyra (15 mg) omrördes vid 130” i 120 timmar. Blandningen utspäddes med vatten och extraherades med etylacetat (3xl0O ml). De organiska extrakten torkades, koncentrerades, och fällningen upp- samlades till bildning av rubricerade förening som ett vitt fast ämne (110 mg Rf 0.51 = DCM/Me0H:9/1, 267”. ln-NMR (nmso) 1o.21(s), 7.35(t), 7.08(t), 6.74(d), 2.70(t). smp=266- 7.56-7.35(d,d), 2.43(m), 7.75(d), 3.54(m), 8.28(d), 4.46(t), Exempel 6 (a) (E)-2-(t-Butylkarbonyloximetyl)3-[2-fenylaminokarbo- nyl)etenyl]-4,6-diklorindol-2-karboxylat Exempel 2 (200 mg) upplöstes i DMF (4 ml) och tetra- butylammoniumklorid (168 mg) tillsattes. Efter omröring i en halv timme tillsattes klormetylpivalat (118 mg) dropp- vis, och reaktionsblandningen omrördes vid rumstemperatur i 48 timmar. Blandningen utspäddes med vatten och extra- herades med etylacetat (2xl00 ml). Det organiska skiktet tvättades med koksaltlösning, torkades och indunstades till bildning av en ràprodukt, som renades genom flash- kromatografi till bildning av rubricerade förening som ett 504 336 10 15 20 25 30 35 14 gult fast ämne (190 mg) smp=205°.

IR(nujOl) Vmax(Cm_l). 3383-3308 (NH), 1747 (C=0), 1688 (c=o), 1634-1603 (c=c). ln-NMa(nMso) 12.7s(s), 1o.22(s), s.22(a), 7.73(d), 7.s4(a), 7.3s(a), v.33(t), 7.o7(t), e.79 1.1s(s).

Under användning av samma allmänna procedur fram- ställdes följande förening: (b) (E)-2-[l-(Tetrahydro-4-pyran-4-yloxikarbonyloxi)- etyl]3-2-[2-(fenylaminokarbonyl)etenyl]-4,6-diklorindol-2- karboxylat Från Exempel 2 (200 mg) i torr DMF (11 ml) benzyltri- etylylammoniumklorid (178 mg) och 1-(tetrahydro-4-H-pyran- 4-yloxikarbonyloxi)etylklorid (244 mg), efter 4 dagars om- röring vid rumstemperatur erhölls rubricerade förening som ett gult fast ämne (209 mg) smp=209°. 1R(nuj01) vmax(cm'1) 3300 (NH), 1749 (c=o), 1730 (c=o), IH-NMR (DMSO) 12.73(s), l0.22(s), 8.2l(d), 7.72(d), 7.53(d), 7.34(d), 7.32(t), 7.05(t), 6.90(q), 6.76(d), 4.76(m), 3.72(m), 1.87-l.53(m), 1.6l(d). (c) (E)-2[1-(Cyklohexyloxikarbonyloxi)etyl]3-[2-(fenyl- aminokarbonyl)etenyl]-4,6-diklorindol-2-karboxylat Från Exempel 2 (300 mg) i torr DMF (8 ml), benzyltri- etylammoniumklorid (178 mg) och 1-(cyklohexyloxikarbonyl- oxi)ety1klorid (242 mg) efter en halv timmes omröring vid rumstemperatur erhölls rubricerade förening som ett gult fast ämne (170 mg) smp=l25°. 1R(nuj°1) vmax(cm'1) 3300 (NH), 173o (c=o).

IH-NMR (DMSO) 12.71 (s), lO.2l(s), 8.2l(d), 7.71(d), 7.5l(d), 7.36-7.26(m), 7.05(t), 6.85(q), 6.76(d), 4.54(m), l.79(m), l.51.l.l(m), l.6(d). (d) (E)-2[(Metoxikarbonylmetyl)3-[2-(fenylaminokarbonyl)- etenyl]-4,6-diklorindol-2-karboxylat 10 15 20 25 30 35 504 336 15 Från Exempel 2 (200 mg) i torr DMF (4 ml), tetrabu- tylammoniumklorid (168 mg) och metylkloracetat (85 mg) efter 48 timmars omröring vid rumstemperatur erhölls Egg; ricerade förening som ett smutsvitt fast ämne (210 mg). smp=24l-242°. mmujoi) vmaxmnfl) 3348 (un), 1749 (c=o), 1672 (c=o), 1634-16l0(C=C).

IH-NMR(DMSO) l2.8(s), l0.2l(s), 8.28(d), 7.72(d), 7.38-7.28(m), 7.06(t), 6.48(d), 5.02(s), 3.73(s). 7.54(d), Farmakologiexempel A. Kapslar/Tabletter Aktiv beståndsdel 200.0 mg Stärkelse 1500 32.5 mg Mikrokristallin cellulosa 60.0 mg Croscarmellosnatrium 6.0 mg Magnesiumstearat 1.5 mg Den aktiva beståndsdelen blandas med de andra exci- pienterna. Blandningen kan användas för att fylla gelatin- kapslar eller komprimeras till bildning av tabletter under användning av lämpliga pressverktyg. Tabletterna kan över- dras under användning av konventionell teknik och över- drag.

B. Tablett Aktiv beståndsdel 200.0 mg Laktos 100.0 mg Mikrokristallin cellulosa 28.5 mg Povidon 25.0 mg Croscarmellosnatrium 6.0 mg Magnesiumstearat 1.5 mg Den aktiva beståndsdelen blandas med laktos, mikro- kristallin cellulosa och en del av croscarmellosnatriet.

Blandningen granuleras med povidone efter dispergering i ett lämpligt lösningsmedel (dvs vatten). Efter torkning 504 336 10 15 20 25 30 35 16 och sönderdelning blandas granulen med återstående exci- pienter. Blandningen kan komprimeras under användning av lämpliga pressverktyg och tabletterna överdras under an- vändning av konventionell teknik och överdrag.

C. Injektionsberedning Aktiv beståndsdel Natriumfosfat 0.1 - 7.00 mg/ml 1.0 - 50.00 mg/ml Na0H qs önskat pH (intervall 3-10) vatten för injektion qs till 1 ml Formuleringen kan packas i glas (ampuller) med en gummikork (rör, sprutor) och ett överdrag av plast/metall (endast rör).

D. Torrt pulver för konstitution med en lämplig bärare Aktiv beståndsdel 0.1 -100.00 mg Mannitol qs till 0.02- 5.00 mg packas i glasrör eller sprutor med en gummipropp och (en- dast rör) ett plast-metallöverdrag.

E. Inhalationspatroner mg/patron Aktiv beståndsdel 5.00 (mikroniserad) Laktos till 25.00 Den aktiva beståndsdelen mikroniseras i en fluid- energikvarn till ett intervall av fin partikelstorlek före blandning med laktos av normal tabletteringskvalitet i en högenergiblandare. Pulverblandningen fylles på lämplig en- hetsdosbehàllare som blàsbehàllare eller kapsel för an- vändning i en lämplig inhalations- eller insufflations- anordning. 10 15 20 25 30 35 504 336 17 Affiniteten av föreningen enligt uppfinningen med avseende på strykninokänsligt glycinbindsäte bestämdes under användning av proceduren enligt Kishimoto H. et al.

J. Neurochem 1981, 32, 1015-1024. I detta test befanns föreningen enligt Exempel 2 ha ett pKi-värde av 8,5.

Förmågan hos föreningarna enligt uppfinningen att inhibera NMDA inkluderade konvulsioner på mus bestämdes under användning av proceduren enligt Chiamulera C et al.

Psychopharmacology 1990, 102, 551-552. I detta test under- söktes föreningens förmåga att inhibera de generaliserade gripningar som inducerats med en intracerebroventrikulär injektion av NMDA på möss vid ett antal dosnivàer. Från dessa resultat beräknades den dos som erfordrades för att skydda 50% av djuren från den konvulsiva verkan av NMDA.

Detta uttryckt som mg/kg kallas ED50-värde.

Representativa resultat erhållna med föreningarna enligt uppfinningen givna genom intravenös och oral admi- nistration anges i följande tabell.

Ex. Nr. EDSO mg/kg iv po l 0.7 0.3-1 3 0.06 5.98 5 0.3 3.2 6 0.3 10 Föreningarna enligt uppfinningen är i huvudsak ogif- tiga i terapeutiskt användbara doser. Sålunda gav exempel- vis föreningen enligt Exempel 3 inga ogynnsamma sidoeffek- ter vid administration på råttor och möss i doser om 3-30 mg/kg iv eller 30-300 mg/kg oralt.

Claims

10 15 20 25 30 35 18 PATENTKRAV

1. l. Förening med formeln (I) vari A representerar en osubstituerad etenylgrupp i trans- (E)-konfiguration, eller ett fysiologiskt acceptabelt salt eller en metaboliskt labil ester därav.

2. Förening enligt patentkravet l, vari det fysiolo- giskt acceptabla saltet därav är natriumsaltet.

3. Förening enligt patentkravet l, vari den metabol- iskt labila estern är etylestern.

4. Förening enligt patentkravet l, vari den metabo- liskt labila estern är 2-(4-morfolino)etylestern.

5. Föreningar enligt nágot av patentkraven 1 till 4 för användning i terapi.

6. Användning av en förening enligt något av patent- kraven l till 4 vid framställningen av ett läkemedel för att antagonisera effekterna av exitatoriska aminosyror på NMDA-receptorkomplexet.

7. Farmaceutisk komposition innehållande en förening enligt något av patentkraven l till 4 i blandning med en eller flera fysiologiskt acceptabla bärare eller excipien- ter,

8. Förfarande för framställning av föreningen enligt patentkravet l, vilket innefattar omsättning av indolen (II), vari Rl är en karboxylskyddsgrupp CJ I O ! (3 ä CEÉRI med en fosforylid med förmåga att omvandla CHO-gruppen till gruppen ACONHPh, åtföljt när det är nödvändigt eller 5 10 15 20 25 30 35 '504 336 19 önskvärt av en eller flera av följande operationer: (1) avlägsnande av karboxylskyddsgruppen (2) omvandling av den resulterande föreningen med førmeln (I) eller dess karboxylskyddade derivat till ett salt därav eller en metaboliskt labil ester.