SE452622B - N-(vinblastinoyl-23)-derivat av aminosyror, deras framstellning och farmaceutiska kompositioner - Google Patents

Description

JU 452.622 2 e som kan fås genom extraktion från blad av Catharanthus roseus. vinblastin, vinkristin och vindesin är kommersiellt tillgängliga för användning vid humanterapi, närmare bestämt för behandling av leukemi och vissa fasta tumörer. i Emellertid har dessa läkemedel visat sig ha ogynnsamma biverkningar.

Vinkristin visar-neurotoxiska effekter och vinblastin hög toxicitet vad gäller hematopoetiska vävnader. i Deras verkningsmekanism liknar den mekanism, som har postulerats för den antimitotiska effekten _av kolchicin. Dessa läkemedel antas verka genom hämlning av tubulinpolymerisationen för bildning av mikrotubuli och efterföljande 'i stopp av celldelningen -i metafasen._ _ _ Användning av lzl-komplex av antitumorala tubilin-bisindolalkaloider har beskrivits i BE-A-SSII» 053.

I vissa fall uppvisar de lägre toxicitet och mera effektiv kemoterapeutisk i aktivitet än för motsvarande fria alkalolder.

*Andra kemiska modifieringar av vinblastin har testats. Sålunda har vinglycinatsulfat (I, sulfat, R l = OCHB, Rz = COCH2N(CH3)2 - Cancer Research 1967, ä; 221-227) också testats vid kliniska försök, men det tycks generellt inte vara bättre än vinblastin eller vinkristin.

BE-A-8l3 168 beskriver vindesin (1, Rl = NHZ, R2 = H) och andra vinblastin-CB-karboxamidderivat. Senare rapporter har bekräftat det terapeu- tiska intresset för vindesin eller B-karboxamid-ü-O-deacetylvinblastin, men denna förening har visat sig vara overksam för behandling av 1210 leukemi inympadtpå möss (CJ. Barnetf et al, J. Med. Chem. _2_l, 88, 1978).

De nya föreningarna enligt föreliggande uppfinning har förmåga att väsentligt fördröja dödstidpunkten för möss, som inokulerats' intravenöst med P 388- och L 1210-leukemier.

Aktiviteterna på experimentella P 388-tumörer har överraskande nog visat sig vara mycket överlägsna vinca~alkaloider. Talrika totala remissioner har observerats.

Föreningarna enligt uppfinningen visar ytterligare andra viktiga och oväntade fördelar jämfört med vinblastin och kända analoger, speciellt vindesin.

Mera speciellt är den observerade toxiciteten generellt lägre än mot- svarande toxicitet för vindesin eller vinkristin.

De nya föreningarna enligt föreliggande uppfinning har den allmänna formeln ll: lO 452 622 där är en ester av tryptoían, .varvid estergruppen, som kan vara rak eller grenad, är en karbalkoxigrupp med 2 till 9 kolatomer, och varvid tryptofan- gruppen är bunden till vinblastin-ZB-oyl-komponenten genom en amidbindning, RI är en väteatom eller en hydroxígrupp, Rz är en väteatom, en formylgrupp eller en C2-C9-alkanoylgrupp, och R 5 är en väteatom, en metylgrupp eller en formylgrupp, med förbehållet att föreningar där samtidigt R5 är metyl och R 1 är en B-hydroxigrupp är uteslutna, eller deras additionssalter med mineralsyror eller organiska syror.

Speciellt föredragna är föreningar med den allmänna formeln (IID: (III) - . 3 0 _ "~~ <;__ Na -cu- (___ 0:14 Gti || _15 452- 622 4 där R I, RZ och Rj har den ovan angivna innebörden, R3 är gruppen och til* är en rak eller grenad C l-Cs-alkyl- eller en bensylgrupp, varvid -COOR4 företrädesvis är en karbetoxi- eller karbometoxigrupp, med förbehållet att föreningar där samtidigt RI är ß-OH och Rs är -CH3 är uteslutna, - eller deras additionssalter med en mineralsyra eller organisk syra.

Föreningarna kan betecknas som 3-dekarbometoxi-O-lß-deacetyl-vin- blastin-3-karboxamider. De kommer emellertid i det följande att företrädesvis betecknas som N-(vinb1astin-23-oyl)- eller N-(vinkristinoyl-23)-derivat av tryp- tofan.

Speciellt föredragna föreningar enligt uppfinningen med den allmänna formeln Il är sådana, där Rz är väte. Bland dessa är sådana föreningar där _tryptofangruppen är L-tryptofan särskilt intressanta.

Föreliggande uppfinning avser mera speciellt reaktionsprodukter av tryptofan med vinkristin, O-ll-deacetylvinkristin, deformyl-O-ll--deacetyl- vinkristin och deoxivinblastin B.

Den senare föreningen kan erhållas genom hydrering av anhydrovin- blastin, erhållen genom dehydratisering av vinblastin eller genom koppling av vindolin med katarantin (Potier et al, JACS _9_§, 7017, 1976).

Den speciellt föredragna föreningen enligt föreliggande uppfinning är etyl-N-(O-ß-deacetyl-lP-deoxivinblastin-2B-oyDtryptofanat.

Föreningarna enligt uppfinningen kan framställas på konventionellt sätt utgående från motsvarande vinblastinderivat genom hydrazinolys följt av nitrosering och reaktion med aminosyraestern enligt reaktionssekvens l. 452 622 Nano, nci o.C ou ou HO- _COOClí3 HO Cš-tlïl-til-lz çlZ-N3 O O tryptofanester - CEZClZ Ol-l H -s HO C-N- CO-OR4 f, å O Reaktionssekvens l Det första steget i förfarandet är att i överskott tillsätta vattenfritt hydrazin till en lösning av vinblastinbas i vattenfri metanol. Lösningen uppvärms i en inert atmosfär under 12 h till l2 dagar vid en temperatur mellan ca 30°C och 70°C. Företrädesvis hålls temperaturen omkring 60°C.

Hydraziden av bis-indolderivatet isoleras sedan genom tillsats av vatten, extraktion med diklormetan och koncentreringl Föreningen kan senare renas genom preparativ kromatografi (neutral silika). l fallet med vinkristin blir den erhållna produkten Oß-deacetyl-deformyl-vinkristinkarboxhydraziden.

Under det andra steget omvandlas hydrazidfunktionen i den modifierade vinblastlnen till en acylazid. Denna omvandling uppnås på känt sätt genom tillsats av natriumnitrit till hydraziden, löst i en vatten/metanol/syra-blandning.

Den använda syran kan vara saltsyra.

Reaktionstemperaturen hålls mellan 0°C och 5°C. Efter extraktion med ett med vatten oblandbart, aprotiskt lösningsmedel, företrädesvis .metylenklorid, koncentreras den organiska fasen partiellt.

Själva acylaziden isoleras företrädesvis inte, utan sätts direkt till ' .452 622 f 6 tryptofanestern löst i metylenklorid.

^ Mängden använd tryptofan är ca en till fem ekvivalenter av den modifierade vinblastinkarboxaziden.

Reaknonsbiandningen hålls mellan ca -a°c och +1o°c under 8-72 h, oem allmänhet under ca l5 h. Övervakning av reaktionen sker lätt genom tunnskikts- kromatografi. Efter koncentrering kan föreningen enligt uppfinningen med Formeln ll omvandlas till ett sulfatsalt eller något annat salt, härlett från någon mineralsyra eller någon organisk syra, genom kristallisation ur en metanolisk lösning av motsvarande syra.

Föreningarna enligt uppfinningen kan renas genom konventionella tekniker för kromatografi och omkristallisation. i Om så önskas, kan det sålunda erhållna li-O-deacetylvínblastinderivatet omacyleras antingen direkt för att ge vinblastinderivatet lll, där RZ är COCH3 (J. Med. Chem. g, 391, 1979) diacetoxiderivatet, följt av selektiv hydrolys av B-acetoxigruppen i B-ställning. eller genom preliminär bildning av 3,4- Hydroxigruppen i Cu kan på konventionellt sätt förestras med andra aktiverade syraderivat innehållande 2-9 kolatomer. O-li-formylderivaten erhålls genom formylering (myrsyra/ättiksyraanhydrid) av motsvarande O-lißdeacetylföreningar (se BE-.A-660 843).

Föreliggande uppfinning hänför sig också till industriella och speciellt farmaceutiska tillämpningar av de nya bisindolalkaloiderna.

Föreningarna enligt uppfinningen uppvisar speciellt mycket användbara antitumöregenskaper, som kan tillämpas vid humanterapi.

Dessa aminosyraderivat kan användas för behandling av leukemi av typen L 1210, P 388, gliomas, lymfosarkom och andra leukemier eller maligna tumörer.

Inom humanmedicinen används de för behandling av Hodgkins sjukdom och för andra fasta tumörer, som kan behandlas med vinblastin, vinkristin eller vindesin.

Föreningarna är även användbara inom veterinärmedicinen för behandling av djurtumörer.

Andra intressanta terapeutiska användningar kan också tänkas för de nya derivaten av bisindolalkaloider. Det har beskrivits, att vinblastin kan användas för behandling av vissa fomer av artrit (US-A-/i 208 lill) och att vinkristin kan användas för behandling av psoriasis (US-A-B 749 7814).

För terapeutisk användning administreras föreningarna enligt uppfin- ningen, eventuellt i lyofiliserad form, företrädesvis parenteralt, lösta i något farmaceutiskt godtagbart lösningsmedel, i form av en bas eller ett farmaceutiskt godtagbart syraadditionssalt. Bland syraadditionssalterna är de icke-toxiska och farmaceutiskt godtagbara salterna såsom oorganiska syrasalter, somfhydro- 452 622 7 klorid-, fosforsyra- och svavelsyrasalterna, eller salter med organiska syror såsom ättiksyra-, propionsyra-, bärnstenssyra-, vinsyra-, oxalsyra-, metansulfonsyra~ och bensensulfonsyrasalter föredragna.

Fysiologiskt vatten och andra koksaltlösningar, som är buffrade med exempelvis en fosfatbuffert, är lämpliga lösningsmedel. Generellt kan före- ningarna användas inom humanterapi på sätt analogt med tekniker och begränsningarna vid användning av andra alkaloider av vinca-typ.

Den aktiva substansen distribueras i allmänhet vid en dos varierande rnellan 0,01 mg och ca 5 mg/kg, beroende på det speciella derivatet och det tillämpade terapeutiska schemat. Totala veckodoser varierar i allmänhet mellan 0,1 och ca 35 mg/kg.

Kompositíonen enligt uppfinningen framställs som enhetsdoser på 2 till 900 mg. i Föreningarna enligt uppfinningen kan användas separat eller i kombination med andra karcinostatiska medel, däribland exempelvis alkyleringsmedel, anti- metaboliter såsom metotrexat, 5-fluoruracil, 6-merkaptopurin, 6-tioguanin, cystosinarabinosider och antibiotika såsom aktinomycin D, daunorubicin, adria- mycin och cis-diaminodiklorplatin. Speciellt kan de nya vinblastinderivaten användas i kombination.

Följande speciella exempel illustrerar på ett ett icke begränsande sätt förfarandet för framställning av föreningarna enligt uppfinningen.

Exempel 1 I. Framställning av O-lß-deacetyl-N-deformylvinkristin-monohydrazid A 985 mg vinkristinbas löses i en blandning av 10 ml vattenfritt hydrazin och ml metanol. Reaktionsblandningen hålls vid 60°C under omrörning i 22 h.

Reaktionsblandningen behandlas sedan med vatten och därefter med vatten mättat med NaCl. Vattenlösningen extraheras åtta gånger med 15 ml diklor- metan. De uppsamlade organiska faserna behandlas med 20 ml vatten, sedan med Efter filtrering och vakuumkoncentrering fâr man 900 mg O-ll-deacetylvinkristin- ml vatten mättat med NaCl och torkas slutligen över NazSOa. monohydrazid (renhet över 90%).

NlVlR-spektrum (CDCla 360 Ml-lz) 9,76 (S, lH), 8,37 (s, lH), 8,06 (S, lH), 7,53 (d, lH), 7,24 och 7,07 (m, BH), 6,82 (s, IH), 6,22 (s, lH), 5,87 (dd, lH), 5,67 (d, IH), 5,43 (s, IH), 4,03 (s, lH), 3,94 (s, BH), 3,86 (s, IH), 3,73 (s, 3H), 3,52 (s, 3H), 2,82 (s, 2H), 2,51 (s, lH), 0,93 (Zt, 2 x BH) Masspektrum (elektronisk stötjonisering) 154, 294, 355, 413, 524, 555, 695, 7l0, 723, 736, 739, 755 (M + 1)- 768, 769, 782 452 622. beräknat för CqzHjflN6O7 754,942 2. "Frainställning av syraazid av modifierad vinkristin En lösning av 850 mg vinkristin-monohydrazid A i 20 ml metanol behandlas med 63 mi 1N Hcl och 175,5 mg narrmmnitriti 15 minuter vid o°c. Den vid o°c hållna lösningen neutraliseras sedan med NaHCOB vid 0°C och extraheras därefter 3, gånger med diklormetan. De uppsamlade organiska faserna torkas över Na SO 2, 4' lösning på ca 10 ml. 3. Reaktion med etgltry' ptofanat 300 mg etyltryptofanat tillsätts sedan under omrörning vid 4°C och reaktionen kontrolleras med TLC. Efter 10 dagar renas reaktionsprodukten genom kromatografisk separation (40 g sllikagel 60, elueringsmedel eter/NH3- mättad metanol 96:11 volym/volym). 15 ml-fraktioner uppsamlas, vilka kontrolle- filtreras och vakuumkoncentreras utan värmning tills man får en ras med TLC. Den oreagerade aminosyran uppsamlas först (fraktion 30 till 40). _ Elueringsmedlet ändras (eter/NHB-rnättad metanol 86:14), och de reagerade derivaten uppsamlas som 3 fraktioner: fraktioner 44 och 45: 30 mg; fraktioner 46-53: 257 mg; fraktioner 54-60: 115 mg.

Den andra delen var etyllN-(O-li-deacetyldeformylvinkrlstin-ZB-oyßtryp- tofanat la, som' var homogent enligt TLC.

Masspektrum: 984, 970, 956 (M+ + 1) 913, 912, 899 (DCJ isobutan), beräknat för C55H66N6O9: 955,181.

UV-spektrum (CH3OH): max: zsz (mo) ~ 290 (u,1s)- 322 (396) 254-287-305 lll-spektrum: (cm-l) 3400 - 2920 - 1720 - 1660 - 1610 - 1485 - 1450 - 1370 -1345 - 1330 - 1290 - 1220 - 1165 - 1130 -1025 - 1005 - 920 - 885 - 830 - 740 NMR-spektrum (CDCI3) 360 MHz (ppm) 8,50 (S, 1H): 8,03 (S, 2H): 7,77 (d, 111): 7,60 (d, 1H): 7,57 (d, 111): 6,95 (S, 111): 6,35 (S, 111): 5,89 (d.d., 1H): 5,72 (d, 111): 4,75 (q, 1H): 3,83 (S, 311): 3,67 (S, 311); 1,23 (r, 3H)= 0,98 (r, 3H)= 0,89 (t, aH) Etyl-N-(Oß-deacetylvinkristin-ZB-oylkryptofanat IB. Det deformylerade min: derivatet la (257 mg) omformyleras genom tillämpning av den metod, som beskrivs i BE-A-811 110.

Den sålunda erhållna råprodukten renas genom kromatografisk separation med användning av en 20 cm kolonn (silikagel, 30 g) och i tur och ordning 3 elueringsmedel: eter/NHB-mättad .MeOH 92:8; 88:12; 86:14. Utflödet uppsamlas som 15 ml-fraktioner. Fraktionerna 44-54 (34,l mg) innehöll det N-omformylera- 9452 622 9 de derivatet lb. _ Massgektrum (isobutan DCD: l0l1,997, 983 (M+ + 1), 970, 982, 996, 998, 999, 1012 beräknat för C56H66N6O1 = 983,192 uv-sgëktrum (CHBoH) - max: 270 (4,18) - 290 (4,1l) platåz. 280 (4,12) skuldra (4,03) IR-sgektrum (KBr) _ band vid 3400 - 3040 - 2960 - 2920 - 2880 - 2850 - 1735 - 1725 - 1680 - 1670 - 1665 - 1610 - 1490 _-1450 -1225 - 745.

ExemEe12 Etyl-N-(O-4-deacetyldeoxi-4'-vinblastin-2B-oyl-Bhryptofanat lc' O-4-deacetyldeoxivinblastinhydraziden framställs genom den metod, som beskrivs i US-A-4 203 898 (spalt 24, rad 51 ff). 500 mg av hydrazlden i 12 ml metanol behandlas sedan med 37 ml 1N HCl och 104 mg NaNOz under 15 minuter vid 0°C. Lösningen neutraliseras därefter ned NaHCO3 och extraheras sex gånger med 15 ml dlklormetan. De organiska faserna torkas över NazSOq och koncentreras till en volym av ca 10 ml.

Azlden i lösning förs sedan i kontakt med etyltryptofanat (300 mg) vid 4°C under omrörning. Reaktionen kontrolleras genom TLC (eter, MeOH). Efter 6 dagar är reaktionen fullbordad, och reaktionsprodukten renas genom kolonnkro- matografi på sllikagei (18 cm, 30 g), eluering med 15 ml fraktioner.

Följande elueringsmedel har använts i tur och ordning: Eter 96, NH3-mättad MeOH 4, fraktioner 1-49 " 92 -"- 8, fraktioner 50-57 " 86 -"- 14, fraktioner 71-90 Fraktionerna 50-57 innehåller den önskade reaktionsprodukten Ic (108 mg).

Sulfatet framställs genom eterfällning (296 HzSOa/etanol).

UV-sgektrum för sulfat (CHBOH) max: 224 (4,63) - 272 (4,32) min: 247 (4,03) skuldra: zse 01,22) - 312 0,72) lR-sgektrum (KBr) av sulfat 3420 - 3060 - 2960 - 2930 - 2880 - 2600 (svag) - 1725 - 1660 - 1615 - 1500 - 1455 -1430 - 1375 - 1230 - 1105 - 1060 - 1015 - 920 - 745 cm-l.

IO '54s2 622 NMR-spektrum (CDCIB) 360 MHz av basen i ppm 9,116 s 1 H 7,53 d 1 H 14,911 q IH 8,311 s 1 H 7,30 d 1 H 14,18 d IH 7,92 s 1 H 6,51 s 1 H 11,05 q 2H 7,67 d 1 H 6,011 s 1 H 3,77 s 3H 7,59 d 1 H m. kring s. centrerad på 5,81 3,58 s RH: 3,117 s lH: 2,82 s 2H: 2,77 s 3H: 2,59 s IH: 1,111 t BH: 0,95 t 3H: 0,27 1 311 ' Massgektrum av basen DCl isobutan M +1* vid 9511,1v1+ 14 +1* vid 963,11 + zs + 1* vid 932 153 - 155 - 157 - 171 - 172 - 185 - 186 - 199 - 213- 223 - 227 - 255 - 257 - 279 - 281- 283 - 285 - 3119 - 398 - 1159 - 516 - 569 - 952 - 953 - 955 - 967 - 969 - 981- 983 beräknat för C H N O - 952208 56 68 6 8' Akut toxicitet - bestämning av LD joner vid 50 Den akuta toxiciteten för föreningen enligt Exempel 2: etyl-N-(O-h- deacetyldeoxi-lfl-vinblastin-ZB-oyl-Bhryptofanat bestämdes pâ NMRl-möss av honkön. Ökande doser av läkemedlet administrerades intravenöst i en enda injektion. Dödlighetsprocenten bestämdes som funktion av tiden. LDjo-värdena för den ovanstående föreningen (deoxi-VTrpE) och en referensprodukt, deoxivinblas- tin (deoxi-VBL), anges nedan Leiemedel el” Deoxi-VBL 20 Deoxi-VTrpE 91,5 (dvs. förening Ic) Föreningen deoxi-VTrpE är sålunda mindre toxisk än referensföreningen.

Antitumör aktivitet Den kemoterapeutiska aktiviteten för sulfatsaltet av deoxi-VTrpE har 'studerats pa lymmuasfisk ieukemi 1. 1210 och P ass. 1. k_1_2_1_(_)_ DBAfmöss av honkön ympades med 104 leukemiceller. Produkten administrerades intravenöst dagen efter ympningen med en dos av 5D mg/kg.

Dödligheten hos djuren observerades som funktion av tiden. Tabell 1 nedan anger resultat erhållna med föreningen enligt Exempel 2 (lc). Vid de testade doserna är föreningen mer aktiv än vinblastin. Denna överlägsenhet har bekräftats i jämförelse med deoxivinblastirw. 452 622 II 2. P 388 DBAZ-möss av honkön admínistrerades intravenöst med 104 Ieukemiceller.

Produkterna administreradeshv. dagen efter ympningen. Dödligheten hos djuren observerades som funktion av tiden. Resultaten anges i Tabell I. Deoxi-VTrpE. är Klart aktivare än jämíörelseföreningen och indikerar högre procentuell överlev- nad i långtidsperspelctiv. 452 622 12 ...uwov mcàwcm o S; mmowbficmEwm :Bvoëoxmq .oo=wu~Eox:v_ uwcwñï: >m wšcxm :wapcøuooa u ÜÜMÜNC>U~uU>Û CMZvUrC H om mä ...m2 Ofi UUE .>.~ mMQFÉA CQXCOC >M mmßrrïNzwfiø o oo oo EN om oo oo oo oo SN oo oo R of à .2 om 2 oo R S š oo 2 oo o o BR of oo oo moåïxovo o o No- MW o o .Eïäao o o oo of o o ä> än m o o E Ni o. oo wošïxouo o o oi- ox 2 2 ä; o o Én os. _ 2 o .E> EN. ._ om www om man o» omwmw om .Bro woQ wxsvoom .ñEPr vmc>m4oo>w vmc>wïw>w mf: HWS.. ÉÉ< ZUDQCUUOkm :UDHCUUO-.fl _ zunm...

Claims (10)

10 15 452 622 13 PATENTKRAV

1. .1. Vinblastinderivat med den allmänna formeln (II) .__ C_R 5 OH H O där R är en ester av tryptofan, varvid estergruppen, som kan vara rak eller grenad, är en karbalkoxigrupp med 2-9 kolatomer, och varvid tryptofangruppen är bunden till'vinblastin-Z3-oyl-komponenten genom en amidbindning, RI är en väteatom eller en hydroxigrupp, Rz är en väteatom, en formylgrupp eller en C2- C9-alkanoylgrupp, och R 5 är en väteatom, en metylgrupp eller en formylgrupp, med förbehållet att föreningar där samtidigt 125 är metyl och RI är en ß- hydroxigrupp är uteslutna, eller deras additionssalter med mineralsyror eller organiska syror.

2. - Förening enligt patentkravet 1, kännetecknad avattRär RB O -NH-'cH-Ö-olza där Rá är gruppen_ CH_ J/ 2 i: (lv ) il och R¿,_ är en rak eller grenad C l-Cs-alkyl- eller en bensylgrupp.

3. , Förening enligt patentkravet 1 eller 2, k ä n n e- t e c k n a d av att den är etyl- eller metyl-N-(O-ll-deacetylvinkristin- 10 15 20 452 622 » 14 ZB-oyD-L-tryptofanat eller deras additionssalter med farmaceutlskt godtagbara syror.

4. Förening enligt patentkravet l eller 2, k ä n n e t e c k n a d av att den är etyl- eller metyl-N-(O-ll-deacetyldeformyl- vinkristin-ZB-OyD-L-tryptofanat eller deras additionssalter med farmaceutiskt godtagbara syror.

5. S. Förening enligt patentkravet l eller 2, k ä n n e t e c k n a d av att den är etyl-N-(O-ll-deacetyldeoxivinblastin-238- oyD-L-tryptofanat eller deras additionssalter med farmaceutiskt godtagbara syror.

6. Föreningar enligt något av patentkraven 1 till 5, k ä n n e t e c k n a d e av att additionssaltet är lzl-additionssaltet med svavelsyra.

7. Föreningar enligt något av patentkraven I till 6 för användning som läkemedel, särskilt för användning inom human- eller veterinärmedicin för behandling av neoplastiska sjukdomar.

8. Farmaceutisk komposition, särskilt för användning inom human- eller veterinärmedicin för behandling av neoplastiska sjukdomar, k ä n n e t e c k n a d av att den innefattar en eller flera föreningar med den allmänna formeln. 10 15 452 622 15 där R är en ester av tryptofan, varvid estergruppen, som kan vara rak eller grenad, är en karbalkoxigrupp med 2-9 kolatomer, och varvid tryptofangruppen är bunden till vinblastin-23-oyl-komponenten genom en amidbindning, RI är en väteatom eller en hydroxigrupp, Rz är en väteatom, en formylgrupp eller en C2- C9-alkanoylgrupp, och H5 är en väteatom, en metylgrupp eller en formylgrupp, med förbehållet att föreningar där samtidigt Rj är metyl och RI är en 8- hydroxigrupp är uteslutna, eller deras additionssalter med mineralsyror eller organiska syror, i kombination med farmaceutiskt godtagbara bärare eller farmaceutiskt godtagbara spädningsmedel.

9. Farmaceutisk komposition enligt patentkravet 8, k ä n n e t e c k n a d av att den aktiva föreningen ingår i en mängd av ca 2-900 mg för en enhetsdos.

10. Farmaceutisk komposition enligt patentkravet 8 eller 9, k ä n n e t e c k n a d av att den aktiva föreningen är etyl-N-(O-lll-deacetylvin- kristin-23-oyD-L-tryptofanat, etyl-N-(O-l#-deacetyldeformylvinkristin-23-oyl)-l.- tryptofanat eller etyl-N-(O-U-deacetyldeoxivinblastin-ZBB-oyD-L-tryptofanat eller dessa föreningars additionssalter med farmaceutiskt godtagbara syror.