SE447606B - Kvantitativ immunoanalys av immunkomplex medelst clq - Google Patents
Kvantitativ immunoanalys av immunkomplex medelst clqInfo
- Publication number
- SE447606B SE447606B SE7808314A SE7808314A SE447606B SE 447606 B SE447606 B SE 447606B SE 7808314 A SE7808314 A SE 7808314A SE 7808314 A SE7808314 A SE 7808314A SE 447606 B SE447606 B SE 447606B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- clq
- antibody
- antigen
- complex
- amount
- Prior art date
Links
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 23
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 10
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 10
- 239000004816 latex Substances 0.000 claims description 10
- 229920000126 latex Polymers 0.000 claims description 10
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims description 4
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 4
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 102000005686 Serum Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010045362 Serum Globulins Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N clarithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@](C)([C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)OC)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001846 repelling effect Effects 0.000 description 1
- -1 sodium metabolite sulfite Chemical class 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/544—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being organic
- G01N33/545—Synthetic resin
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54306—Solid-phase reaction mechanisms
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/564—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for pre-existing immune complex or autoimmune disease, i.e. systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, rheumatoid factors or complement components C1-C9
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/966—Chemistry: molecular biology and microbiology involving an enzyme system with high turnover rate or complement magnified assay, e.g. multi-enzyme systems
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/811—Test for named disease, body condition or organ function
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/819—Multifunctional antigen or antibody
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/821—Chemistry: analytical and immunological testing involving complement factors or complement systems
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/823—Immunogenic carrier or carrier per se
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/826—Additives, e.g. buffers, diluents, preservatives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Rehabilitation Therapy (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Description
15 20 25 30 35 447 606 2 Clq är ett naturligt cirkulerande protein, och metoder för dess separering och rening är kända. Man erhåller det vanligen ur människo-, kanin- eller nötserum genom "euglobulin- fällning", en metod som beskrivs exempelvis i J. Immunol., 106, 304-H13 (1971).
Uppfinningen avser generellt ett förfarande för kvanti- tativ immunoanalys av ett antikropps-antigenkomplex i ett vätske- prov, vid vilket man till provet sätter en lösning av Clq.
Pörfarandet utmärkes av att man också tillsätter en känd mängd latexpartiklar belagda med ett immunoglobulin, så att Glq blir bundet vid eventuellt närvarande antikropps-antigenkomplex och återstående Clq framkallar agglutinering av latexpartiklarna; och bestämmer mängden återstående Clq och därigenom mängden antikropps-antigenkomplex genom att räkna de agglutinerade eller oagglutinerade latexpartiklarna och jämföra resultatet med standardresultat.
En utföringsform av förfarandet innebär att antikopps- antigenkomplexet bildas genom att till en utspruntligen anti- kropp eller antigen innehållande vätska sättes motsvarande an- tigen eller antikropp, varigenom mängden ursprungligen i vätskan förekommande antikropp eller antigen kan bestämmas.
I förfarandet enligt_nppfinningen används en lösning av Clq. Clq binds vid Ak:Ag-komplex, men inte vid fri Ak eller fritt Ag. Sålunda avskiljer eller binder Clq effektivare Ak:Ag- komplexen under bildning av Clq/Ak:Ag.
När Clq/Ak:Ag bildas, tenderar det i vissa fall att agglomerera, och i så fall kan det avskiljas genom centri- fugering eller filtrering, så att en klar lösning erhålls.
Denna lösning innehåller antigen (a) Clq, men inga Ak:Ag- komplex, eller (b) Ak:Ag-komplex, men ingen Clq, beroende på om Clq har tillsatts i överskott eller underskott. När denna effektiva avskiljning av Clq/Ak:Ag är möjlig, underlättas den kvantitativa bestämningen, enär man endast behöver mäta den i lösningen kvarvarande eller därifrån avskilda mängden Clq eller Ak:Ag. (Det avskilda Clq/Ak:Ag kan behandlas med buffert för frigöring av Ak:Ag från Cïq). Detta kan man enklast göra genom attanvända material, som har en identifierande märkning, L! 10 15 20 25 30 35 447 606 3 såsom en radioaktiv atom eller ett enzym eller koenzym eller en fluorescent grupp. Användningen av sådan märkning är välkänd för Ak, Ag och Ak:Ag~komplex, men man har inte tidigare före- slagit att märka Clq.
När ett Ak:Ag-komplex bär en märkning (på Ak eller Ag) av ett enzym, som har ett substrat med mycket stor molekylvikt, såsom amylas, vars substrat är stärkelse, har det visat sig, att enzymets aktivitet inhiberas, när komplexet binds vid Clq.
En sådan enzymmärkning kan anbringas på Ak eller Ag med Miles och Helas metod (Nature 219, 186 (1968)). När sådan inhíbering inträffar, är det i analysmetoderna inte längre nödvändigt att avskilja Clq/Ak:Ag från provblandningen, enär blandningens totala enzymaktivitet beror endast på märkt Ak eller Ag, som inte har bundits vid Clq. Detta är ett mycket fördelaktigt särdrag vid användning av Clq i immunoanalyser med enzymmärkning. Hittills har man måst avskilja Ak:Ag-komplexet från provblandningen innan man bestämmer enzymaktiviteten. Vid användning av Clq och ett lämpligt enzymmärkt Ak- eller Ag-system är det onödigt att avskilja Ak:Ag- komplexet. Denna förenkling av förfarandet underlättar analys under kontinuerlig strömning.
Lösningar av Clq är användbara i alla slags immunoanalyser.
Exempelvis kan de användas vid bestämning av ett Ag eller en Ak, där hela mängden Ak eller Ag omvandlas till ett Ak:Ag-komplex, eller vid bestämningar genom konkurrerande bindning. Till dessa senare metoder hör sådana metoder där man till en provblandning sätter Clq i otillräcklig mängd för att binda allt Ak:Ag-komplex och märkt Ak:Ag-komplex däri. Man bestämmer sedan mängden märkt komplex, som binds vid Clq eller förblir obundet, och kan därur bestämma mängden Ak, Ag eller Ak:Ag i det ursprungliga provet. I ett annat slags analys genom konkurrerande bindning inträffar konkurrens mellan exempelvis ett märkt och ett omärkt Ag om en begränsad mängd Ak, varvid Clq används för bindning av det bildade komplexet och för effektiv avskiljning därav från obundet Ag.
Clq framkallar agglutinering av röda blodkroppar.
Det framkallar också agglutinering av material, vilka har exempelvis en beläggning eller yta av immunoglobuliner, såsom polystyrenpartiklar belagda med immunoglobulin. Sådana beläggningar 10 15 20 25 30 35 447 606 U kan bildas genom immunologiska reaktioner mellan Ak och membran- antigener eller genom fysikalisk adsorption eller kemiska reak- tioner. Med immunoglobuliner belagda polystyrenpartiklar är kommersiellt tillgängliga och kan i vart fall lätt framställas.
När sådana belagda partiklar eller röda blodkroppar kommer i kontakt med Cíq, börjar agglutineringen, men om det i lösnigen också finns ett Ak:Ag-komplex, reagerar detta snabbare med Clq, varför Clq binds vid Ak:Ag-komplexet i lös- ningen, så att ingen agglutinering av de belagda partiklarna (eller röda blodkropparna) uppträder. Sålunda kan man påvisa förekomst av Ak:Ag-komplex, exempelvis i serum, genom att bringa serumet i kontakt med (lösligt) Clq och med immunoglobulinbelagda partiklar. Om agglutinering iakttas, innehåller serumet inga Ak:Ag-komplex.
Detta innebär en mycket enkel och noggrann provning, som är tillämplig på alla Ak:Ag-komplex. Proceduren kan genom- föras exempelvis på följande sätt. 50 ul serum sätts till 50 ul lösning av Clq och blandningen sammanföres med 50 ul suspen- sion av polystyrenpartiklar belagda med immunoglobuliner. Even- tuell agglutinering av partiklarna kan lätt observeras.
Denna provningsmetod kan också tillämpas för undersökning av förekomst av ett speciellt Ag eller en speciell Ak i serum.
Vid provning på ett speciellt antigen Ag' kan man exempelvis försätta serumet med den passande specifika antikroppen Ak' och sedan undersöka provet på förekomst av ett Ak:Ag-komplex, d.v.s.
Ak':Ag'. Om serumet från början innehåller andra Ak:Ag-komplex, måste manförst bortskaffa dessa, t.ex. med hjälp av Clq i insolu- biliserad form, såsom beskrivs i patentansökan 75 05735-6.
Förfarandet enligt uppfinningen åskådliggöres av föl- jande exempel.
Exempel 1 Bestämning av IgE 0,1 ml prov innehållande IgE pipetterades ned i ett 5 ml provrör, och 1,0 ml kaninantiserum för mänskligt IgE (utspätt 1:128) tillsattes. Blandningen inkuberades 1 h vid 3700, och 1 ml lösning innehållande 60 000 latexpartiklar av 0,8 pm diameter, vilken tidigare hade inkuberats i en fysiologisk saltlösning (in 10 15 20 30 35 447 606 5 1 mg/ml IgE, tillsattes. Blandningen skakades, och 0,1 ml lös- ning innehållande 600 ng Clq tillsattes. Blandningen inkuberades över natten och undersöktes sedan i en partikelräknare med för- måga att avvisa partiklar över 1 um i diameter. Koncentrationen av IgE var omvänt proportionell mot partikelantalet och kunde be- stämmas med hjälp av en tidigare uppgjort kalibreringskurva er- hålles med lösningar med kända koncentrationer av IgE.
Exempel 2 Automatisk analys på al-fetalprotein Det prov som skulle undersökas pumpades i ett flöde av 0,1 ml/min in i en automatisk analysator av genomströmnings- typ tillsammans med en lösning innehållande 60 000 latex- partiklar per millimeter i samma flöde. Latexpartiklarna var 0,8 um i diameter, och lösningen hade först inkuberats med antiserum för al-fetalprotein utspätt 1:60 med fysiologisk saltlösning. Blandströmmen segmenterades med luft som pumpades in i systemet med 0,32 ml/min. Efter införandet av luften in- fördes en lösning av Clq i ett flöde av 0,H ml/min. Den seg- menterade strömmen värmdes vid 3700 under 10 min och därefter under 2 min vid 6300 för förstärkning av Clq och frigöring av alla vid C1q bundna latexpartiklar, men inte de vid Ak:Ag- komplexet bundna partiklarna. Strömmen leddes sedàn genom en partikelräknare, som kunde förkasta partiklar över 1 um i diameter. Koncentrationen av al-fetalprotein i kända koncentra- tioner.
Exempel 3 Bestämning av tetanusanotoxin-Ag:Ak-komplex 100 ul av en lösning innehållande H00 ng Clq sattes till 100 ml av ett serum som misstänktes innehålla tetanus- anotoxinantigen. Blandningen skakades 0,5 h vid rumstemperatur och centrifugerades sedan med 2 000 G under 5 min. överskiktet avdrogs, och kvarstående Clq bestämdes med aminerad agaros.
Exempel H Pramställning av märkt Clq 200 ml 50 MM fosfatbuffert med pH 7,H sattes till 100 ug Clq. Blandningen delades i 20 l alikvoter, och 10 uC:125l följd av 50 ug kloramin T saattes till varje alikvot. Oxidationen 447 606 6 fick fortgå under 30 s, och reaktionen avbröts därpå genom till- sats av 50 pg natriummetabissulfit. Märkt Clq avskildes från 1251 genom att blandningen leddes genom en pelare av "Sephadex G25" och det önskade märkta materialet eluerades med ovannämnda fosfat- buffert. Eluatfraktionerna undersöktes på Y-aktivitet, och frak- tionerna med högst aktivitet slogs ihop, inneslöts i ett för- Varingskärl och frystes tills de skulle användas.
Claims (5)
1. Förfarande för kvantitativ immunoanalys av ett anti- kropps-antigenkomplex i ett vätskeprov, vid vilket man till provet sätter en lösning av C1q, k ä n n e t e c k n a t av att man också tillsätter en känd mängd latexpartiklar belagda med en immunoglobulin, så att C1q blir bundet vid eventuellt närvarande antikropps-antigenkomplex och återstående C1q fram- kallar agglutinering av latexpartiklarna; och'bestämmer mäng¥ den återstående C1q och därigenom mängden antikropps-antigen- komplex genom att räkna de agglutinerade eller oagglutinerade latexpartiklarna och jämföra resultatet med standardresultat.
2. Förfarande enligt patentkravet 1, k ä n n e - t e c k n a t av att immunoglubolinet är IgG.
3. Förfarande enligt patentkravet 1 eller 2, k ä n n e - t e c k n a t av att latexpartiklarna består av polystyren.
4. Förfarande enligt patentkravet 1, 2 eller 3, k ä n n e- t e o k n a t att till en ursprungligen antikropp eller antigen innehållande av att antikropps-antigenkomplexet bildas genom vätska sättes motsvarande antigen eller antikropp, varigenom mängden ursprungligen i vätskan förekommande antikropp eller antigen kan bestämmas.
5. Förfarande enligt något av de föregående patentkraven, k ä n n e t e c k n a t av att det genomförs under kontinuerlig strömning. _5-
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB22377/74A GB1508132A (en) | 1974-05-20 | 1974-05-20 | Analysis of biological fluids |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE7808314L SE7808314L (sv) | 1978-08-01 |
| SE447606B true SE447606B (sv) | 1986-11-24 |
Family
ID=10178404
Family Applications (4)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE7505734A SE435425B (sv) | 1974-05-20 | 1975-05-20 | Forfarande for immunanalys |
| SE7505735A SE435325B (sv) | 1974-05-20 | 1975-05-20 | Forfarande och reagens for immunanalys med rf eller c1q kovalent bunden till fast berare |
| SE7807275A SE443660B (sv) | 1974-05-20 | 1978-06-27 | Forfarande och reagens for immunanalys med rf eller clq adsorberat till fast berare |
| SE7808314A SE447606B (sv) | 1974-05-20 | 1978-08-01 | Kvantitativ immunoanalys av immunkomplex medelst clq |
Family Applications Before (3)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE7505734A SE435425B (sv) | 1974-05-20 | 1975-05-20 | Forfarande for immunanalys |
| SE7505735A SE435325B (sv) | 1974-05-20 | 1975-05-20 | Forfarande och reagens for immunanalys med rf eller c1q kovalent bunden till fast berare |
| SE7807275A SE443660B (sv) | 1974-05-20 | 1978-06-27 | Forfarande och reagens for immunanalys med rf eller clq adsorberat till fast berare |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4062935A (sv) |
| JP (4) | JPS598779B2 (sv) |
| AU (2) | AU496821B2 (sv) |
| BE (2) | BE829277A (sv) |
| CH (4) | CH631015A5 (sv) |
| DE (3) | DE2560554C2 (sv) |
| FR (2) | FR2272102B1 (sv) |
| GB (1) | GB1508132A (sv) |
| IT (1) | IT1038305B (sv) |
| NL (2) | NL182175C (sv) |
| SE (4) | SE435425B (sv) |
Families Citing this family (64)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1508132A (en) * | 1974-05-20 | 1978-04-19 | Technicon Instr | Analysis of biological fluids |
| US4283383A (en) * | 1974-05-20 | 1981-08-11 | Technicon Instruments Corporation | Analysis of biological fluids |
| SE441041B (sv) * | 1976-09-08 | 1985-09-02 | Pharmacia Diagnostics Ab | Sett vid pavisning av rheumatoida faktorer |
| SE441042B (sv) * | 1976-09-08 | 1985-09-02 | Pharmacia Diagnostics Ab | Sett att pavisa rheumatoida faktorer |
| JPS5339265U (sv) * | 1976-09-09 | 1978-04-05 | ||
| GB1590524A (en) * | 1976-11-24 | 1981-06-03 | Nat Res Dev | Assay of immune complexes |
| GB1603406A (en) * | 1977-08-31 | 1981-11-25 | Nat Res Dev | Assay of immune complexes |
| GB1592450A (en) * | 1976-12-10 | 1981-07-08 | Technicon Instr | Biological analysis |
| JPS5387877U (sv) * | 1976-12-21 | 1978-07-19 | ||
| JPS5387876U (sv) * | 1976-12-21 | 1978-07-19 | ||
| JPS53115946A (en) * | 1977-03-18 | 1978-10-09 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | High frequency heating apparatus |
| JPS53119441A (en) * | 1977-03-28 | 1978-10-18 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | High-frequency heater |
| JPS53128781A (en) * | 1977-04-15 | 1978-11-10 | Matsushita Electric Industrial Co Ltd | Touch switch and method of producing same |
| DE2731992A1 (de) * | 1977-07-15 | 1979-02-01 | Behringwerke Ag | Verfahren zur bestimmung von immunologisch veraendertem immunglobulin |
| ES471585A1 (es) * | 1977-07-15 | 1979-01-16 | Behringwerke Ag | Procedimiento para la determinacion de reactivos fc |
| JPS5423977A (en) * | 1977-07-22 | 1979-02-22 | Sato Shinichi | Contacttswitch circuit |
| US4210622A (en) * | 1977-09-07 | 1980-07-01 | National Research Development Corporation | Kit for assay of immune complexes |
| US4231750A (en) * | 1977-12-13 | 1980-11-04 | Diagnostic Reagents, Inc. | Methods for performing chemical assays using fluorescence and photon counting |
| JPS54113064U (sv) * | 1978-01-30 | 1979-08-08 | ||
| DE2836046A1 (de) * | 1978-08-17 | 1980-02-28 | Behringwerke Ag | Immunologisches bestimmungsverfahren |
| US4307190A (en) * | 1978-10-30 | 1981-12-22 | Technicon Instruments Corporation | Immunoassay using ascitic fluid |
| DE2853453A1 (de) * | 1978-12-11 | 1980-06-19 | Behringwerke Ag | Mittel zur therapie von immunkomplexerkrankungen |
| FI58566C (fi) * | 1979-02-22 | 1981-02-10 | Orion Yhtymae Oy | Foerbaettrat foerfarande att framstaella indikatorsystem foer bestaemning av antigen-antikroppsreaktioner med hjaelp av hemolys i gel |
| GB2045431B (en) * | 1979-02-26 | 1983-04-20 | Technicon Instr | Immunoassay utilising two particulate reagents |
| US4282002A (en) * | 1979-09-06 | 1981-08-04 | Akzona Incorporated | Sensitized sheep stroma immunoassay for rheumatoid factor |
| US4399229A (en) * | 1980-04-14 | 1983-08-16 | Immutron, Inc. | Rapid radioimmunoassay product and method of making and using same |
| JPS5742854A (en) * | 1980-08-27 | 1982-03-10 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | Latex sensitized with complement 1q |
| GB2109932B (en) * | 1980-10-24 | 1984-08-01 | David Parratt | A method of diagnosis |
| US4427781A (en) * | 1981-03-16 | 1984-01-24 | International Institute Of Cellular And Molecular Pathology | Particle agglutination immunoassay with agglutinator for determining haptens; PACIA |
| WO1983001118A1 (en) * | 1981-09-18 | 1983-03-31 | Univ Georgetown | Monoclonal antibody detection system |
| US4434227A (en) | 1982-02-08 | 1984-02-28 | Abbott Laboratories | Immunoassay for class specific immunoglobulin antibodies |
| US4450231A (en) * | 1982-03-31 | 1984-05-22 | Biostar Medical Products, Inc. | Immunoassay for determination of immune complexes with polymer-coated plastic base |
| JPS59501123A (ja) * | 1982-03-31 | 1984-06-28 | バイオスタ−・メディカル・プロダクツ・インコ−ポレ−テッド | 免疫分析法、それに使用する装置及びかかる装置の製法 |
| IE820942L (en) * | 1982-04-21 | 1983-10-21 | Bartos Patent Dev Holding | Determining in-viro effectiveness of cytostatic agents |
| US4420461A (en) * | 1982-05-26 | 1983-12-13 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Agglutination-inhibition test kit for detecting immune complexes |
| US4427779A (en) | 1982-05-26 | 1984-01-24 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Agglutination-inhibition test method for detecting immune complexes |
| US4459361A (en) * | 1982-06-04 | 1984-07-10 | Angenics, Inc. | Ligand assay with one or two particulate reagents and filter |
| US4547466A (en) * | 1983-06-01 | 1985-10-15 | Allied Corporation | Detecting rheumatoid factor with synthetic particles having immune complexes thereon |
| US4551435A (en) * | 1983-08-24 | 1985-11-05 | Immunicon, Inc. | Selective removal of immunospecifically recognizable substances from solution |
| US4595654A (en) * | 1983-11-07 | 1986-06-17 | Immunomedics Inc. | Method for detecting immune complexes in serum |
| JPS60256057A (ja) * | 1984-06-01 | 1985-12-17 | Dai Ichi Pure Chem Co Ltd | 免疫学的測定法 |
| DK445585A (da) * | 1984-10-02 | 1986-04-03 | Calpis Food Ind Co Ltd | Stof-konjugeret komplementkomponent clq |
| JPS6178041U (sv) * | 1984-10-29 | 1986-05-24 | ||
| FR2585367B1 (fr) * | 1985-07-26 | 1987-10-02 | Lyonnaise Eaux | Procede de dosage immunologique en continu de composes organiques dans un fluide en circulation, et dispositif de mise en oeuvre |
| DE3603085C1 (en) * | 1986-02-01 | 1987-04-23 | Medac Klinische Spezialpraep | Immunological method for detecting antigen-specific antibodies and test kit for carrying out the method |
| US5223441A (en) | 1986-10-09 | 1993-06-29 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Receptors for immune complexes |
| DE3839869C2 (de) * | 1987-12-10 | 1993-12-09 | Wild Gmbh & Co Kg Rudolf | Süßungsmittel |
| JP2670498B2 (ja) * | 1988-03-04 | 1997-10-29 | 株式会社エスアールエル西日本 | 免疫複合体の測定法 |
| DE69130217T2 (de) * | 1990-04-06 | 1999-06-02 | University Of Florida, Gainesville, Fla. | Flüssigphasenimmundiagnostisches analysenverfahren |
| US5843794A (en) * | 1992-03-26 | 1998-12-01 | Montefiore Medical Center | Technique for the prevention of false positive reactions in immunological testing due to C1 and C1q components of the complement and method for screening for rheumatic factor |
| CA2110159A1 (en) * | 1992-03-26 | 1993-09-30 | Jacques Singer | Technique for prevention of false positive reactions in immunological testing |
| US5270169A (en) * | 1992-06-23 | 1993-12-14 | Sangstat Medical Corporation | Detection of HLA antigen-containing immune complexes |
| WO1994017410A1 (en) * | 1993-01-22 | 1994-08-04 | Imre Corporation | Improved immune complex assay |
| US5561049A (en) * | 1994-09-21 | 1996-10-01 | Behringwerke Ag | Method for detecting antibodies |
| US6303325B1 (en) | 1998-05-29 | 2001-10-16 | Dade Behring Inc. | Method for detecting analytes |
| AT409801B (de) * | 2000-05-31 | 2002-11-25 | Cistem Biotechnologies Gmbh | Verfahren zum screenen und isolieren von mikroorganismen, insbesondere prokaryontischer und eukaryontischer zellen, die ein antigen präsentieren |
| WO2002003068A1 (fr) * | 2000-06-30 | 2002-01-10 | Kyowa Medex Co.,Ltd. | Reactif de dosage immunologique nephelometrique a particules-supports insolubles |
| US9575070B2 (en) * | 2001-12-04 | 2017-02-21 | Wayne State University | Neoepitope detection of disease using protein arrays |
| JPWO2004061452A1 (ja) * | 2003-01-07 | 2006-05-18 | 株式会社医学生物学研究所 | 抗体の測定方法 |
| US7799556B2 (en) * | 2004-06-17 | 2010-09-21 | George Dacai Liu | System and method for antigen structure-independent detection of antigens captured on antibody arrays |
| DE102004052729A1 (de) * | 2004-10-30 | 2006-05-04 | Roche Diagnostics Gmbh | Immunkomplex-spezifsicher Antikörper zur Reduktion des Nullwerts beim Nachweis von Antigen-spezifisch gebundenen Antikörpern einer bestimmten Immunglobulinklasse in Array-Testformaten |
| EP2606362B1 (en) | 2010-08-19 | 2015-09-30 | Roche Diagniostics GmbH | An assay for measurement of antibodies binding to a therapeutic monoclonal antibody |
| JP5467365B2 (ja) * | 2010-12-09 | 2014-04-09 | パナソニック株式会社 | 抗原抗体複合体を分離する方法 |
| CN107976535B (zh) * | 2017-11-03 | 2020-03-20 | 科美诊断技术股份有限公司 | 一种检测样本中目标IgM抗体的均相免疫检测试剂盒及其使用方法和应用 |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL125235C (sv) * | 1965-04-15 | |||
| GB1179435A (en) * | 1966-06-17 | 1970-01-28 | Ortho Pharma Corp | Stable Reagent for the Detection of Rheumatoid Arthritis |
| SE337223B (sv) * | 1967-05-23 | 1971-08-02 | Pharmacia Ab | |
| AT279804B (de) * | 1967-08-22 | 1970-03-25 | Barbara Dr Polheim | Verfahren zur Isolierung von Antigenen und Antikörpern |
| US3639558A (en) * | 1968-02-19 | 1972-02-01 | Louis Csizmas | Immunological reagent particles having proteinaceous materials covalently bonded thereto |
| US3654090A (en) * | 1968-09-24 | 1972-04-04 | Organon | Method for the determination of antigens and antibodies |
| NL154599B (nl) * | 1970-12-28 | 1977-09-15 | Organon Nv | Werkwijze voor het aantonen en bepalen van specifiek bindende eiwitten en hun corresponderende bindbare stoffen, alsmede testverpakking. |
| US3852157A (en) * | 1971-05-14 | 1974-12-03 | Syva Corp | Compounds for enzyme amplification assay |
| GB1508132A (en) * | 1974-05-20 | 1978-04-19 | Technicon Instr | Analysis of biological fluids |
| US3992517A (en) * | 1975-02-19 | 1976-11-16 | Pfizer Inc. | Detection of hepatitis B surface antigen by latex agglutination |
-
1974
- 1974-05-20 GB GB22377/74A patent/GB1508132A/en not_active Expired
-
1975
- 1975-05-17 DE DE2560554A patent/DE2560554C2/de not_active Expired
- 1975-05-17 DE DE2522086A patent/DE2522086C2/de not_active Expired
- 1975-05-17 DE DE2522087A patent/DE2522087C2/de not_active Expired
- 1975-05-19 US US05/578,698 patent/US4062935A/en not_active Expired - Lifetime
- 1975-05-19 US US05/578,699 patent/US4143124A/en not_active Expired - Lifetime
- 1975-05-20 FR FR7515590A patent/FR2272102B1/fr not_active Expired
- 1975-05-20 AU AU81333/75A patent/AU496821B2/en not_active Expired
- 1975-05-20 IT IT23549/75A patent/IT1038305B/it active
- 1975-05-20 JP JP50060114A patent/JPS598779B2/ja not_active Expired
- 1975-05-20 AU AU81332/75A patent/AU498364B2/en not_active Expired
- 1975-05-20 CH CH645875A patent/CH631015A5/de not_active IP Right Cessation
- 1975-05-20 SE SE7505734A patent/SE435425B/sv not_active IP Right Cessation
- 1975-05-20 FR FR7515589A patent/FR2272398B1/fr not_active Expired
- 1975-05-20 NL NLAANVRAGE7505868,A patent/NL182175C/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-05-20 CH CH645975A patent/CH627281A5/de not_active IP Right Cessation
- 1975-05-20 BE BE156525A patent/BE829277A/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-05-20 JP JP50060115A patent/JPS5949545B2/ja not_active Expired
- 1975-05-20 NL NL7505867A patent/NL7505867A/xx active Search and Examination
- 1975-05-20 BE BE156526A patent/BE829278A/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-05-20 SE SE7505735A patent/SE435325B/sv not_active IP Right Cessation
-
1978
- 1978-06-27 SE SE7807275A patent/SE443660B/sv not_active IP Right Cessation
- 1978-08-01 SE SE7808314A patent/SE447606B/sv not_active IP Right Cessation
-
1979
- 1979-09-28 CH CH878779A patent/CH637770A5/de not_active IP Right Cessation
-
1980
- 1980-12-12 CH CH918880A patent/CH630465A5/de not_active IP Right Cessation
-
1983
- 1983-06-15 JP JP58105968A patent/JPS5915860A/ja active Granted
-
1984
- 1984-06-13 JP JP59120050A patent/JPS6022662A/ja active Granted
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SE447606B (sv) | Kvantitativ immunoanalys av immunkomplex medelst clq | |
| JP3364537B2 (ja) | 非競合結合検定方法 | |
| US4279617A (en) | Iummunoassay involving agglutination | |
| EP0296398B1 (en) | Immunoassay method for detecting antibodies to antigens | |
| JP2000510581A (ja) | 血小板顆粒蛋白質を用いた血小板数アッセイ | |
| US4138213A (en) | Agglutination immunoassay of immune complex with RF or Clq | |
| JPH0562302B2 (sv) | ||
| EP0207152B1 (en) | Solid phase diffusion assay | |
| US4283383A (en) | Analysis of biological fluids | |
| EP0746767B1 (en) | Analyzer cuvette, method and diagnostic test kit for determination of analytes in whole blood samples | |
| US4865997A (en) | Assay for ligands by separating bound and free tracer from sample | |
| US4721681A (en) | Immunoassay in centrifugal field with complementary particles of differing specific gravities | |
| US4587222A (en) | Reagent comprising treated red blood cells and methods for detecting rheumatoid factor | |
| US4307190A (en) | Immunoassay using ascitic fluid | |
| GB1592450A (en) | Biological analysis | |
| EP0643836B1 (en) | Agglutination assays and kits employing colloidal dyes | |
| WO1986007463A1 (en) | Microtiter - surface - flocculation assay for antigen or antibody screening | |
| KR940009958B1 (ko) | 간접 응집 면역 측정 방법 및 장치 | |
| CA1057194A (en) | C1q in immunochemical determination | |
| JP2010078374A (ja) | 抗赤血球抗体の検出方法 | |
| US6500673B1 (en) | Electrostatic device and method for immunological detection | |
| Kimura et al. | Lewis blood group determination in bloodstains by planimetric measurement of eluted monoclonal antibodies | |
| Davis et al. | A sensitive reverse passive haemagglutination immunoassay for hepatic caeruloplasmin | |
| Wenz et al. | Improved method for detecting hemagglutination by centrifugal analysis. | |
| WO1994017412A1 (en) | Assay method |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 7808314-4 Effective date: 19941210 Format of ref document f/p: F |
|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 7808314-4 Format of ref document f/p: F |