SE436360B - N,n-dimetylacetamidaddukten av 7-/d(-)-alfa-(4-etyl-2,3-dioxo-1-piperazinkarboxamido)-alfa-(4-hydroxifenyl)acetamido/-3-/5-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl/-delta?723-cefem-4-karboxylsyra - Google Patents

Description

1810106-o' och ett farmaceutiskt godtagbart salt därav, utan N,N-dimetyl- acetamiden i nämnda förening som representeras av formeln (I).

Föreningen med formeln (II) eller ett farmaceutiskt godtagbart _ salt därav befinner sig nu under utveckling såsom terapeutiskt' medel, eftersom, såsom anges i japanska patentpublikationen 10075/78, föreningen och saltet har utomordentlig bakteriell aktivitet mot inte endast gram~positiva utan även mot gram- negativa bakterier och uppvisar låg toxicitet samt har ett brett antibakteriellt spektrum.

Enligt den japanska patentpublikationen 10075/78 erhålles föreningen med formeln (II) genom kondensation av D(-)-ar(4- etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ar(4-hydroxifenyl)- ättiksyra eller ett reaktionsbenäget derivat därav, såsom en syraklorid eller en blandad syraanhydrid, med 7-amino-3-[5- -(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-rå-cefem~4-karbonsyra i närvaro av ett inert lösningsmedel, såsom metylenklorid och liknande. En sådan reaktion är vanligen känd såsom acylering av 7-aminocefalosporiner och användes ofta.

Enligt den japanska patentpublikationen 10075/78 utföres acyle- ringen i närvaro av ett eller flera lösningsmedel, som är inerta mot reaktionen, såsom vatten, aceton, tetrahydrofuran, dioxan, acetonitril, dimetylformamid, metanol, etanol, metoxi- etanol, dietyleter, diisopropyleter, bensen, toluen, metylen- klorid, kloroform, etylacetat och metylisobutylketon. vid ett sådant förfarande erfordrar emellertid isoleringen av den av- sedda produkten ur reaktionsblandningen ektraktion med ett lös- ningsmedel, vilket komplicerar proceduren och svårigheter upp- kommer i samband med separation av produkten från biprodukter.

Ingen fördelaktig kommersiell produktion av föreningen med formeln (II) eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav kan därför förväntas.

Användningen av N,N-dimetylformamid och N,N-dimetylacetamid ' såsom lösningsmedel vid acylering beskrives i den amerikanska 7810106-0 patentskriften 3.502.665 och användningen av N,N-dimetylacet- .amid är beskriven i den publicerade japanska patentansökningen Kokai 48.688/76. Vid nu utförda försök observeras, även om N,N- dimetylformamid användes i reaktionen enligt uppfinningen, icke någon utfällning av föreningen med formeln (I) ur reak- tionsblandningen, ej heller bildning av höggradigt rent cefalo- sporin med formeln (II) vid enkel behandling av reaktionsbland- ningen erhållen med ett lösningsmedel.

Ett omfattande forskningsarbete har därför utförts för att få ett okomplicerat förfarande för framställning av föreningen med formeln (II) och ett farmaceutiskt godtagbart salt därav med hög renhet och i högt utbyte. Såsom ett resultat har det helt oväntat visat sig att när acyleringen utföres i närvaro av N,N-dimetylacetamid, förlöper reaktionen elegant och föreningen med formeln (I) kristalliserar med hög renhet och i högt utbyte, och att när den bildade föreningen med formeln (I) behandlas med ett lösningsmedel, avspaltas N,Nfdimetylacetamiden med lätthet, varigenom man erhåller föreningen med formeln (II) med hög renhet och i högt utbyte enligt en för kommersiell produktion lämplig procedur. Vid ytterligare undersökningar har det visat sig att när föreningen med formeln (II) innehållande biprodukter erhållen enligt den konventionella metoden behandlas med N,N-dimetylacetamid, bildas föreningen med formeln (I) i form av i hög grad rena kristaller, och att föreningen med formeln (II) erhålles såsom ren produkt genom att man därefter utför nämnda behandling. Det har även visat sig att föreningen i sig själv med formeln (I) uppvisar en utomordentlig anti- bakteriell aktivitet.

Ett ändamål med uppfinningen är att tillhandahålla en ny mellanprodukt med formeln (I), vilken är användbar vid fram- ställningen av användbara föreningar med formeln (II).

Ett annat ändamål med uppfinningen är att tillhandahålla föreningen med formeln (I), som uppvisr en värdefull antibak¿ teriell aktivitet. 1810106-o Ett ytterligare ändamål-med uppfinningen är att tillhandahålla ett förfarande för framställning av föreningen med formeln m.

Ett ytterligare ändamål med uppfinningen är användningen av föreningen med formeln (I) vid ett förfarande för framställ- ning av föreningen med formeln (II) och dess farmaceutiskt godtagbara salt genom behandling av föreningen med formeln (I) med ett lösningsmedel för eliminering av N,N-dimetylacetamid.

Enligt uppfinningen tillhandahålles ett förfarande för kommer- siellt fördelaktig framställning av föreningen med formeln (I) och dess farmaceutiskt godtagbara salt enligt den metod, som närmare beskrives i det följande.

Andra ändamål och fördelar med föreliggande uppfinning framgår av följande beskrivning.

Enligt uppfinningen kan föreningen med formeln (I) erhållas genom att man omsätter 7-amino-3-ÅÉ-(l-metyl-1,2,3,4-tetra- zolyl)tiometyly-ZP-cefem-4-karboxylsyra-hydroklorid med formeln _ S ___ Hcl Han -fl _ N ä: (III) O/ N ,fl\ N n . enas N' coon I cn3 med ett reaktionsbenäget derivat av D(-)-qr(4-etyl-l,3-dioxo- l-piperazinkarboxamido)ni-(4~hydroxifenyl)ättiksyra med formeln 1a1o1os-o* 5 0% 'O C2H5-Q__§-CONH-ÉH-COOH (IV) OH i närvaro av N,N-dimetylacetamid såsom lösningsmedel.

Vidare framställes föreningen med formeln (Il) genom att man med ett lösningsmedel behandlar föreningen med farmeln (I) för eliminering av N,N-dimetylacetamiden.

Vid förfarandet för framställning av föreningen med formeln (II) eller dess farmaceutiskt godtagbara salt erhåller man föreningen med formeln (II) och dess farmaceutiskt godtagbara salt på ett kommersiellt lämpligt sätt i form av en ren pro- dukt i högt utbyte.

Det reaktionsbenägna derivatet av D(-)-dr(4-etyl-2,3-dioxo-l- piperazinkarboxamido)-K-(4-hydroxifenyl)ättiksyra med formeln (IV), avsett som acyleringsmedel enligt uppfinningen, kan vara framställt på förhand ur motsvarande syra i N,N-dimetylacet- amid såsom lösningsmedel och den erhållna reaktionsblandningen kan därefter användas vid acyleringsreaktionen, eller också kan det reaktionsbenägna derivatet vara framställt på förhand i ett lösningsmedel annat än N,N-dimetylacetamid och sedan användas i den erhållna formen, eller också kan det isoleras och renas före användningen. Vid framställning av det reak- tionsbenägna derivatet är det även möjligt att förutom N,N-di- metylacetamid använda ett ytterligare lösningsmedel, såsom acetonitril, aceton, metylenklorid eller kloroform. Det i reaktionssystemet kvarvarande ytterligare lösningsmedlet stör inte acyleringen enligt uppfinningen. ?s1ofißseo De reaktionsbenägna derivaten av D(-)-or(4-etyl-2,3-dioxo-l- -piperazinkarboxamido)-a-(4-hydroxifenyl)-ättïksyra med formeln (IV) inkluderar syrahalider och reaktionsprodukerna av föreningen med formeln (IV) med ett Vilsmeier-reagens. Dessa reaktions- benägna derivat framställes en konventionell metod. Halogenerings- medlet använt vid framställningen av nämnda syrahalid eller Vils- meier-reagenset inkluderar exempelvis fosgen, tionylklorid, fosfortriklorid,'fosfortribromid, fosforoxiklorid, fosforoxi- bromid, fosforpentaklorid, triklormetylklorformiat och oxalyl- klorid§ Ett särskilt lämpligt reaktionsbenäget derivat av föreningen med formeln (IV) är reaktionsprodukten av före- ningen (IV) med ett Vilsmeier-reagens.

Acylering av 7-amino-3~[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tio- metyll-¿š-cefem-4-karboxylsyra-hydroklorid med formeln (III) utföres med användning av nämnda reaktionsbenägna derivat av föreningen med formeln (IV). Ehuru det är tillräckligt att _ använda ekvimolära mängder av föreningen med formeln (IV) och föreningen med formeln (III) vid acyleringsreaktionen är det rekommendabelt att använda ett ringa överskott av det reaktionsbenägna derivatet av föreningen med formeln (IV) för att möjliggöra att den icke alltför lätt tillgängliga föreningen med formeln (III) reagerar effektivt.

Acyleringen utföres vanligen vid en temperatur av ungefär -ÅOOC till 30°C, företrädesvis vid ungefär -30°C till ungefär OOC, och reaktionen fullbordas inom ungefär 15 minuter till ungefär 2 timmar. Eftersom det är önskvärt att upprätthålla reaktions- systemet vattenfritt, torkas reagenserna och lösningsmedlen omsorgsfullt före användningen och reaktionen utföres under kväveatmosfär. Ett dehydratiseringsmedel, såsom trimetylklor- silan, kan tillsättas för eliminering av den fukt som kan vara närvarande i reaktionssystemet.

Efter nämnda acylering sättes en bas, såsom natriumvätekarbonat eller liknande, och vatten till reaktionsblandningen och bland-, ningen omröres, varefter N,N-dimetylacetamidaddukten med formeln 7810106-0 (I) utfäller som kristaller, vilka är i huvudsak fria från biprodukter. Dessa kristaller tillvaratages således med lätthet genom filtrering för erhållande av N,N-dimetylacetamidaddukten med formeln (I) enligt uppfinningen. Mängden vatten tillsatt vid slutet av acyleringen är 0,25-2,5 gånger, företrädesvis 1,0-1,5 gånger, den av den använda N,N-dimetylacetamiden i reaktionen, Eftersom det är önskvärt att pH i reaktionsbland- ningen vid denna tidpunkt är l-3, inställes pH efter behov genom tillsats av en bas, såsom natriumvätekarbonat eller liknande.

Enligt uppfinningen kan föreningen med formeln (II) föreligga i form av ett hydrat, oberoende av om man avser att använda den som utgângsmaterial eller som slutförening.

Den rena föreningen med formeln (II) erhålles genom omröring av suspensionen av N,N-dimetylacetamidaddukten av 7-[Ö(-)-ur (4-etyl~2,3-dioxo-1-piperazinkarboxamido)-«f(4~hydroxifenyl)- acetamidq7-3-Äš-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl7-¿@- cefem-4-karboxylsyra med formeln (I) erhållen med förfarandet enligt uppfinningen, i vatten, ett hydrofilt organiskt lös- ningsmedel, såsom metanol, etanol, acetonitril eller liknande, eller ett hydrofobt organiskt lösningsmedel, såsom metylen- klorid, bensen eller liknande, eller ett blandat lösningsmedel av det hydrofila eller hydrofoba organiska lösningsmedlet och vatten, eller alternativt genom att man först löser addukten i vatten, nämnda hydrofila eller hydrofoba organiska lösnings- medel eller nämnda lösningsmedelsblandning i närvaro eller frånvaro av en bas och utfäller kristaller ur lösningen genom exempelvis neutralisering eller utspädning med vatten. Nämnda behandling med vatten eller blandning av vatten och det hydro- fila lösningsmedlet är lämpligast.

Föreningen med formeln (II) kan överföras till ett farmaceu- tiskt godtagbart salt på konventionellt sätt. Dessa salter omfattar sådana med alkalimetaller, såsom natrium, kalium och liknande, jordalkalimetaller, såsom kalcium, magnesium och 7s1o1o6+o liknande, med ammonium och med farmaceutiskt godtagbara kväve- haltiga organiska baser. Typiska exempel på sådana baser om- fattar prokain, dibensylamin, N-bensyl-B-fenetylamin, l-efen- amin och N,N'-dibensyletylendiamin.

Uppfinningen åskådliggöres närmare medelst följande exempel, vari de angivna temperaturerna avser Celsius-grader.

Exemgel 1. _ (l) I l6 ml N,N-dimetylacetamid löstes 4,0 g D(-)fnr(4-etyl- -2,3-dioxo#l-piperazinkarboxamido)-a-(4ehydroxifenyl)-ättik- syra. Lösningen försattes medan den kyldes till -20 - Å22° med 2,02 g fosforøxiklorid under en tidrymd av 10 minuter och blandningen reagerar en timme vid denna temperatur. En blandning av 4,0 g 7-amino-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)- -tiometyl]-¿?-cefem-4-karboxylsyra-hydroklorid, 12 ml Nfihdimetyl- acetamid och 0,60 g trimetylklorsilan sattes droppvis till nämnda reaktionsblandning under en tidrymd av 7 minuter, medan temperaturen upprätthölls vid -20 - F22°. Den erhållna blandningen fick reagera 90 minuter vid samma temperatur.

Reaktionsblandningen inställdes därefter på rumstemperatur, 3,5 gïnatriumvätekarbønat och 28,8 ml vatten tillsattes och blandningen omrördes 2 timmar för utfällning av kristaller.

Blandningen försattes med 1,4 ml vatten för utspädning av blandningen och denna omrördes 2 timmar vid rumstemperatur och 1 timme under iskyining. De på så sätt utfällda kristallerna tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 8 ml vattenhaltig N,N-dimetylacetamid (innehållande 80 volymprocent vatten) och torkades för bildning av 6,85 g av.N,N-dimetylacetamidaddukten av 7-[D(-)-d-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-ur(4- hydroxifenyl)-acetamido]-3-[5-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)- -tiometyl]-åê-cefem-4-karboxylsyra, smältpunkt 161-lÉ3°C (sön- derdelning), utbyte 85,3 %.

IR (xßr) cm'1=-Oc = o 1773, 1702, 1670 Nnn(n2o-Nanco3)Appm-värden; 1,20 (sn, t, -cHåca3>, 2,11 (sn, S, /CH3 /CH3 y S, -C_N\'í' )| s; )] Il I' |l o o CH3 o -3 71810106-0 3,20 - 4,20 (8H, m, )CH2 x 4), 3,97 (3H, s,;,N-CH3), 4,94 _ (lH, d, CG-H), 5,46 (lfl, s, Ca-H), 5,66 (lH, d, C7-H), 7,09 (411, Asq, ) c6H4) . (2) En blandning av 12,5 ml acetonitril och 6,2 ml vatten försattes med 5,5 g av N,N-dimetylacetamidaddukten av 7-[D(-)- -a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-a-(4-hydrokifenyl)- -acetamido]-3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-¿?- cefem-4-karboxylsyra. Blandningen försattes med 0,50 g natrium- vätekarbonat för upplösning av addukten. Den erhållna lösningen upphettades till 350 och 1,0 ml 6N saltsyra tillsattes, varefter lösningen omrördes en timme vid samma temperatur och vita kristaller utföll. Blandningen försattes medan den upprätthölls vid 350 med 14,8 ml vatten. Den erhållna blandningen kyldes så småningom till rumstemperatur. De utfällda kristallerna tillvaratogs genom filtrering och torkades för bildning av 4,6 g 7-[D(-)-a-(4-etyl-2,3-dioxoël-piperazinkarboxamido)- -a-(4-hydroxifenyl)-acetamido]-3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)- ' ~tiometyl]-¿ê-cefem-4-karboxyleyra-hydrat; Den enligt nämnda procedur erhållna föreningen innehöll i huvudsak icke nâgra biprodukter, såsom 7-[D(-)-a-(4-etyl-2,3- dioxo-l-piperazinkarboxamido)-a-(4-hydroxifenYl)~acetamid0]- -3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-¿?-cefem-4- karboxylsyra'och en Y=laktoniserad produkt av föreningaanæd formeln (II), och kunde med lätthet isoleras i form av rena vita kristaller. Således var exempelvis absorbansen vid 400 nm för ifrågavarande förening uppmätt med användning av vatten såsom kontroll mycket liten.

Exempel 2. (l) I en blandning av 8 ml N,N-dimetylacetamid och 1 ml acetonitril löstes 2,0 g D(-)-a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazin- karboxamido)-a-(4-hydroxifenyl)-ättiksyra. Den erhållna lösningen försattes droppvis med en blandning av 0,65 g triklormetylklorformiat och l ml acetonitril under en tid- rymd av 15 minuter vid -200. Efter den droppvisa tillsatsen ' fick blandningen reagera en timme vid ~20°. Reaktionsblandningen 7810106-0 io försattes droppvis med en blandning av 2,0 g 7-amino-3-[5-(lf -metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-A?-cefem-4-karboxylsyra~ hydroklorid, 6 ml N,N-dimetylacetamid och 0,3 g trimetylklor- silan under en period av 10 minuter vid -200. Den erhållna blandningen fick reagera 90 minuter vid -200. Reaktionsbland- ningen koncentrerades under reducerat tryck under 30 minuter (badtemperatur 300; l5 mm/Hg) för eliminering av acetonitril. Återstoden försattes med 1,2 g natriumvätekarbonat och 14 ml vatten och den bildade lösningen omrördes 2 timmar vid rums- temperatur för utfällning av kristaller. Blandningen utspäddes åter med 7 ml vatten och omrördes 2 timmar vid rumstemperatur och sedan l timme under iskylning. De utfällda kristallerna tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 4 ml vattenhaltig N,N-dimetylacetamid (innehållande 80 volymprocent.vatten) och torkades för bildning av 3,50 g av N,N-dimetylacetamid- addukten av 7-[D(-)-c-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)- -cr(4-hydroxifenyl)-acetamido]-3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazo- lyl)etiometyl]-A?-cefem-4-karboxylsyra, utbyte 87,1 %.

Smältpunkten och IR- och NMR-värdena överensstämde med dem som erhölls i exempel 1-(1). (2) Med användning av nämnda produkt upprepades reaktionen i exempel l-(2) för bildning av 7-[D(-)-ur(4-etyl-2,3-dioxo- -1-piperazinkarboxamido)-a-(4-hydroxifenyl)-acetamido]-3-[5- -(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-¿ê-cefem-4-karboxyl- syra-hydrat.

Exempel 3. (l) En suspension av 2,0 g D(-)-a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-pipera- zinkarboxamido)-a-(4-hydroxifenyl)-ättiksyra i 20 ml metylen- klorid försattes med 1,52 ml trimetylklorsilan. Blandningen försattes droppvis under kylning med 1,58 ml trietylamin under en period av 3 minuter vid 10-l5° och reaktionen fick fortlöpa en timme vid samma temperatur. Reaktionsblandningen kyldes' till -2s° och o,46 ml N,Nfdimety1formam1d och 1,66 g 0xa1y1-; klorid tillsattes i denna ordning, varefter reaktionen fick förlöpa en timme vid -20 till -2s°. Reaktionsblandningen be- 1sío1os-o 11' friades från lösningsmedlet genom destillation under redu- cerat tryck. Återstoden löstes i 8 ml N,N-dimetylacetamíd M och den bildade lösningen sattes droppvis till en på förhand kyld lösning av 2,0 g 7-amino-3-[5-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazo- lyl)~tiometyl]-A?~cefem-4-karboxylsyra-hydroklorid i 6 ml N,N- dimetylacetamid under en tidrymd av 4 minuter vud -20 till -220. Reaktionen fick förlöpa 90 minuter vid -20 till -22°.

Reaktionsblandningen inställdes på rumstemperatur och utspäddes med l4 ml vatten, varefter pH i den utspädda blandningen in- ställdes på 2 med natriumvätekarbonat. Blandningen omrördes 2 timmar för utfällning av kristaller. Blandningen försattes åter med 7 ml vatten och omrördes 2 timmar vid rumstemperatur och därefter en timme under iskylning. De utfällda kristallerna tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 4 ml vattenhaltig N,N-dimetylacetamid (innehållande 80 volymprocent vatten) och torkades för bildning av 3,25 g av N,N-dimetylacetamidaddukten av 7-[D(-)~a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-d-(4- -hydroxifenyl)-acetamido]-3-[5-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)- '-tiometyl]-A?-cefem-4-karboxylsyra, utbyte 80,8 %. Smältpunkt och IR- och NMR-värdena överensstämde med dem som erhållits för motsvarande förening i exempel 1. (2) 20 ml vattenhaltig metanol (innehållande 80 volymprocent vatten) försattes med 2,0 g av N,N-dimetylacetamidaddukten av 7-[D(-)fla-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-a-(4- hydroxifenyl)-acetamido]-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)- -tiometyl]-rå-cefem-4-karboxylsyra. Blandningen cmrördes en timme vid rumstemperatur och därefter 1 timme under iskylning.

Kristallerna tillvaratogs genom filtrering och torkades för bildning av 1,72 g 7-[D(-)-d-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarbox- amido)-ar(4-hydroxifenyl)-acetamido]-3-[5-(lfinetyl-l,2,3,4- -tetrazolyl)-tiometyl]-AP-cefem-4~karboxylsyra-hydrat, utbyte 95,0 %.

Exemgel 4. (1) En lösning bereddes genom att man långsamt satte 2,91 g 7-[D(-)-a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-q;(4- hydroxifenyl)-acetamido]-3-[5-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)- -tiometyl]-AP-cefem-4-karboxylsyra-hydrat, erhållet enligt den 781019641 procedur som beskrivits i exemplet i den publicerade japanskay patentansökningen Kokai 70.788/76 till 12 ml N,N-dimetylacet- amid. Lösningen försattes, medan den upprätthölls vid en temperatur av 40 till 450, droppvis med 18 ml vatten. Bland- ningen kyldes till rumstemperatur och omrördes 12 timmar vid denna temperatur och omrördes sedan en timme under kylning.

De utfällda kristallerna tillvaratogs genom filtrering, tvätta- des med 3,0 ml kyld vattenhaltig N,N-dimetylacetamid (inne- hållande 80 volymprocent vatten) och torkades för bildning av 3,03 g av N,N-dimetylacetamidaddukten av 7-[D(-)-ur(4-etyl- -2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-or(4-hydroxifenyl)-acetamido]- -3-[5-(l-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-¿ê-cefem-4-karboxy1- syra, utbyte 94,4 %. Smältpunkt och IR- och NMR-värdena överensstämde med dem som erhållits för motsvarande förening i exempel l-(l). (2) Med användning av nämnda addukt upprepades reaktionen enligt exempel l-(2) för bildning av 7-[D(-)-a-(4-etyl-2,3- ' dioxo-l-piperazinkarboxamido)-m-(4-hydroxifenyl)-acetamido]- -3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)-tiometyl]-¿ê-cefem-4- karboxylsyra-hydrat. 7810106-0 13 Nedanstående försök visar de oväntade och värdefulla fördelarna med föreliggande uppfinning.

I detta försök användes N,N-dimetylacetamid som reaktions- lösningsmedel, den resulterande N,N-dimetylacetamidaddukten av T-1551 isoleras och därefter elimineras N,N-dimetylacet- amiaen, varvid -r-issi erhålles. i Sättet enligt exempel l i föreliggande beskrivning användes.

T-1551: 7~[D(-)-a-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)- a-(4-hydroxifenyl)acetamido]~3-[5-(l-metyl-l,2,3,4- tetrazolyl)tiometyl]-Û?-cefem-4-karboxylsyra O ° f n-iv s ll (J cz-x zs *Lz /N coon' ÅH3 ) / _ C2H5N NCONH-CH-CONR \_/ kv *f OH (l) Reaktionssteg och isolering av N,N-dimetylacetamid- adduktkristallerna.

I 16 ml N,N~dimetylacetamid upplöstes 4,0 g D(-)-d-(4-etyl- 2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-cr(4-hydroxifenyl)ättiksyra.

Till lösningen sattes under kylning till -20° till -22°C 2,02 g fosforoxiklorid under 10 minuter och blandningen fick reagera i l timme vid denna temperatur. En blandning av 4,0 g 7-amino-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-¿E-cefem- 4-karboxylsyrahydroklorid, 12 ml N,N-dimetylacetamid och 0,60 g trimetylklorsilan sattes droppvis till ovan nämnda reaktionsblandning under 7 minuter, under det att den hölls vid -20° till -22°C. Den erhållna blandningen fick reagera i 90 minuter vid samma temperatur. Reaktionsblandningen över- fördes därefter till rumstemperatur, 3,5 g natriumvätekarbonat och 28,8 ml vatten tillsattes och blandningen omrördes i 2 timmar för utfällning av kristaller. Till blandningen sat- tes l,4 ml vatten för att utspäda blandningen och omrörning 7810196-0 14 skedde i 2 timmar vid rumstemperatur och i l timme under iskylning. De så utfällda kristallerna samlades genom filtre- ring, tvättades med 8 ml vattenhaltig N,N-dimetylacetamid (innehållande 80 vol-% vatten) och torkades och gav 6,85 g N,N-dimetylacetamidaddukt av 7-[D(-)-q-(4-etyl-2,3-dioxo-l- piperazinkarboxamido)-q-(4-hydroxifenyl)acetamido]-3-[5~(l- metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-ÅÉ-cefem-4-karboxylsyra, smp. l6l-l63°C (sönderdelning), utbyte 85,3 %.

IR (Kur) cnflwc = o 1773, 17o2, 1670 NMR (D20-NaHC03) ppm-värden: 1,20 (3H, t, -CH2CH3), CH 2,11 (an, s, -c-cH3), 2,94 (an, s, -c-Nfi), 3,07 (an, s, ll I' 2/0113 o o cH-a -c-N\ y, a,2o-4,2o (an, m, :C412 x 4), 3,97 (an, sJN-CH3), å CH: 4,94 (in, a, cs-H), 5,46 (m, s, ca-H), 5,66 (in, a, c7-m, 7,09 (414, Aßq, IC6H4). (2) Eliminering av N,N~dimetylacetamid från addukten.

Till en blandning av 12,5 ml acetonitril och 6,2 ml vatten sattes 5,5 g N,N-dimetylacetamidaddukt av 7-[D(-)-d-(4-etyl- 2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)-d-(4-hydroxifenyl)acetamido]- 3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-LP-cefem-4-karbox- ylsyra. Till blandningen sattes 0,50 g natriumvätekarbonat för att upplösa addukten. Den erhållna lösningen upphettades till 35°C och 1,0 ml 6N saltsyra tillsattes, varefter lös- ningen omrördes i 1 timme vid sama temperatur, varvid vita kristaller utfälldes. Till blandningen, som hölls vid 35°C, sattes 14,8 ml vatten. Den erhållna blandningen kyldes gradvis till rumstemperatur. De utfällda kristallerna samlades genom filtrering och torkades och gav 4,6 g 7-[D(-)-a-(4-etyl-2,3- dioxo-1-piperazinkarboxamido)-a-(4-hydrorifenyl)acetamido]- D 3-[5-(1-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-ŧ-cefem-4-karboxyl- syrahydrat.

Den på ovan angivet sätt erhållna önskade föreningen innehöll praktiskt taget inga biprodukter, såsom 7-[D(-)-a~(4-etyl-2,3- dioxo-l-piperazinkarboxamido)-a-(4-hydroxifenyl)acetamido]-3- [5-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]fD?-cefem-4-karbøxyl- 7810106-0 15 syra och en X-laktoniserad produkt av T-1551 och kunde lätt isoleras i form av rena vita kristaller. Exempelvis var den optiska densiteten vid 400 nm av föreningen, mätt med använd- ning av vatten som kontroll, mycket låg.

Försök 2 I detta försök ersättes N,N-dimetylacetamiden enligt försök 1 med N,N-dimetylformamid.

Förfarandet i försök l upprepades, förutom att samma mängd N,N-dimetylformamid användes i stället för N,N-dimetylacet- amid; I steget motsvarande försök 1 (1) observerades inte någon kristallisation av N,N-dimetylformamidaddukten av T-1551. Därför bestämdes bildningen av T-lS5l i reaktionsbland- ningen med hjälp av högupplösande vätskekromatografi (HPLC).

För reaktionsblandningen erhållen i försök l (l) bestämdes även bildningen av T-1551. De erhållna resultaten framgår av tabell l.

Tabell 1 Bildning av T-1551 (HPLC-metod) Användning av N,N- Användning av N,N- dimetylacetamid- dimetylformamid- .lösningsmedel lösningsmedel Försök l 6,73 g (95,1 %) 3,97 g (56,l %) Försök 2 6,66 g (94,l %) 3,79 g (53,5 %) Det framgår klart av de ovan angivna försöken att steget mot- svarande försök 1 (2) inte kunde genomföras för N,N-dimetyl- formamid och att det inte ens när reaktionsblandningen behandla- des på olika sätt var möjligt att erhålla T-1551 i högt utbyte med hög renhet såsom vid fallet med N,N-dimetylacetamid. 78101964) 15 Försök 3 I detta försök behandlas orena kristaller av T-1551-dihydrat med N,N-dimetylacetamid eller N,N-dimetylformamid för att erhålla N,N-dimetylacetamid~ eller N,N-dimetylformamidadduk- ten av T-l55l - ett försök till rening av T-1551.

Försöksmetod.

I 16 ml N,N-dimetylacetamid eller N,N-dimetylformamid upplös- tes 4 g orena kristaller av T-1551-dihydrat och 24 ml vatten vid 30°C sattes droppvis till lösningen under 30 minuter, varefter den erhållna blandningen omrördes i 3 timmar. De så utfällda kristallerna samlades genom filtrering, tvättades med 4 ml 20 %ig N,N-dimetylacetamid eller N,N-dimetylformamid och torkades vid 40°C i 24 timmar och gav en förening, i vilken en molekyl N,N-dimetylacetamid eller N,N-dimetylformamid adderats till T-1551. De erhållna resultaten framgår av tabell 2.

Tabell 2 Användning av N,N- Användning av N,N- Addukt I dimetylformamid ,. .dimetylacetamid Utbyte _ 3,49 g 4,11 g vattenhaltx 2,40 % 2,68 % Utvinning av addukt 78,8 % 90,8 % Märk: Xvarje addukt har en tendens till vattenaddering Försök 4 I detta försök sker acyleringsreaktionen med användning av N,N-dimetylacetamid på samma sätt som i försök l (1) för framställning av följande förening, som har liknande kemisk struktur som T-1551: '7810106-0 17 o o czz-:Slf NcoNa-cH-cobz: S e “-' N csz2s-\ S C53 coon OH Förfarandet i exempel 1 (1) upprepades, förutom att 4,2 g 7-amino-3- [2- (S-metyl-l , 3 A-tiadiazolyl) tiometyl ]- É-cefem- 4-karboxylsyrahydroklorid användes i stället för 4,0 g 7-amino- 3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-Åp-cefem-4-karboxyl- syrahydroklorid. Ingen utfällning av kristaller av N,N-dime- tylacetamidaddukten av föreningen, såsom i exempel 2, obser- verades.

Claims (6)

7s1o1os-o 18 PATENmKRAv

1. N,N-dimetylacetamidaddukten av 7-[D(-)-a-(4~etyl-2,3- dioxo-l-piperazinkarboxámido)-ar(4-hydroxifenyl)acetamido]- -3-{S-(1-metyl-1,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-Å?-cefem-4- karboxylsyra med formeln (I) oš /o . S I Q _ _ :H-ca-coNH--K N"'N U c2H5 n__§ cor . )rN;;J\\ 1 ä .(CH3)2N-c-QH3 (I). o I cngs N” coon. I ofl - CH3

2. I Förfarande för framställning av N,N-dimetylacetamid~ . addukten av 7-[D(-)-ur(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarbokami- do)-a-(4-hydroxifenyl)acetamido]-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-tetra- zolyl)tiometyl]-Å?-cefem-4-karboxylsyra med formeln (I) O H N--N N /J\ /å -(cH3)2m-c-cn3 (I) S f: o§_q?o I C235-Q__§-coNH-cn-coNH-KT”S âN 0 | CH2 cooH CH ÖH 3 k ä n n e t e c k n a t därav, att man omsätter en förening med formeln (III) . . _ s N--N hclfixzn ïf ä un) ”N N I o 3 cnas N coon I 7810106-0 19 med ett reaktionsbenäget derivat av en förening med formeln (IV) Q 2 O š-<9 _ C235-H N-sena-ca-coon (iv) ä) OH i närvaro av N,N-dimetylacetamid som lösningsmedel.

3. Förfarande enligt patentkravet 2, k ä n n e t e c k - n a t därav, att det reaktionsbenägna derivatet av föreningen med formeln (IV) är en syrahalogenid av föreningen med for- meln (IV) eller reaktionsprodukten av föreningen med formeln (IV) med ett Vilsmeier-reagens.

4. Förfarande enligt patentkravet 2, k ä n n e t e c k - n a t därav, att det reaktionsbenägna derivatet av föreningen med formeln (IV) utgör reaktionsprodukten av föreningen med formeln (IV) med ett Vilsmeier-reagens.

5. Förfarande enligt patentkravet 2, k ä n n e t e c k - n a t därav, att acyleringen genomföres vid en temperatur av -4o°c till +3o°c.

6. Användning av föreningen med formeln (I) enligt patent- kravet 1 vid framställning av 7-[D(~)-ur(4-etyl-2,3-dioxo-l- piperazinkarboxamido)-of(4-hydroxifenyl)acetamido]-3-[5-(1- metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]-Zš-cefem-4-karboxylsyra med formeln (II) o o \ ( S -_ -cows-cH-coNH.___/ N--N _- ZHD §e_y 1 /J\ ä li), | *csas N' c ,N OH coon CH3 7810106-0 20 vid vilket förfarande N,N-dimetylacetamidaddukten av 7-[D- (-)-u-(4-etyl-2,3-dioxo-l-piperazinkarboxamido)~dr(4-hydroxi- fenyl)acetamido]-3-[5-(1-metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometyl]- âê-cefem-4-karboxylsyra med formeln (I) on áp 0 _ _ _ H-cH-coNH --K S N r-'N Ü C235 ¥__§ QON ' I N¥;L\ “ -(cH3)2N-c-CH3 (I) I cH2s _ « i N 0 N” coon. I en oH 3 behandlas med ett lösningsmedel för elíminering av N,N-dime- tylacetamiden. 7810106-0 Sammandrag N,N-dimetylacetamidaddukten av 7-[B(-)-N:(4-etyl-2,3-dioxo-l- piperazinkarboxamido)- -(4-hydroxifenyl)acetamidq7-3-Åš-(l- metyl-l,2,3,4-tetrazolyl)tiometylZ¥Aê-cefem-4-karboxylsyra med formeln of .o ïr-47 S 0 can;-N N-conn-ca-CONHÜIT” N-N H - \__/ N Å n . (CH )2N-c-CH (I), / 3 3 o cH2s _N» coon I ' oH CH3 förfarande för framställning därav samt förfarande för fram- - ställning av nämnda syra och ett farmaceutiskt godtagbart salt därav via nämnda addukt, till användning som antibakteriellt medel eller som mellanprodukt vid framställning av föreningar med formeln o o §-«V C H -N N-coNH_vH-coNH--fs N'-N 2 5 '\.__/ _! I N Ä H af- N - 0 cH s N' _ coon 2 I oH CH3