SA521421006B1 - عوامل تحلل مستقبلات الإستروجين الانتقائية - Google Patents
عوامل تحلل مستقبلات الإستروجين الانتقائية Download PDFInfo
- Publication number
- SA521421006B1 SA521421006B1 SA521421006A SA521421006A SA521421006B1 SA 521421006 B1 SA521421006 B1 SA 521421006B1 SA 521421006 A SA521421006 A SA 521421006A SA 521421006 A SA521421006 A SA 521421006A SA 521421006 B1 SA521421006 B1 SA 521421006B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- cancer
- compound
- acceptable salt
- pharmaceutically acceptable
- phenyl
- Prior art date
Links
- 229940125641 estrogen receptor degrader Drugs 0.000 title abstract description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 41
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 103
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 56
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 33
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 claims description 30
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 24
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 24
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 18
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 17
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 17
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 17
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 17
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 17
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 17
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 15
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 13
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 13
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 10
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 10
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 claims description 10
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 claims description 9
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 claims description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 8
- 125000004566 azetidin-1-yl group Chemical group N1(CCC1)* 0.000 claims description 7
- 125000004216 fluoromethyl group Chemical group [H]C([H])(F)* 0.000 claims description 7
- -1 lithium triethylborohydride Chemical compound 0.000 claims description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 claims description 4
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 claims description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 2
- 125000005605 benzo group Chemical group 0.000 claims 2
- LISFMEBWQUVKPJ-UHFFFAOYSA-N quinolin-2-ol Chemical compound C1=CC=C2NC(=O)C=CC2=C1 LISFMEBWQUVKPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims 2
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 claims 2
- 241000511343 Chondrostoma nasus Species 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims 1
- CKJNUZNMWOVDFN-UHFFFAOYSA-N methanone Chemical compound O=[CH-] CKJNUZNMWOVDFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 93
- 102100038595 Estrogen receptor Human genes 0.000 description 66
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 65
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 33
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 33
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 102000003998 progesterone receptors Human genes 0.000 description 27
- 108090000468 progesterone receptors Proteins 0.000 description 27
- 108010007005 Estrogen Receptor alpha Proteins 0.000 description 24
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 18
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 17
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 17
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 16
- 230000004044 response Effects 0.000 description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 14
- 101710196141 Estrogen receptor Proteins 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 13
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 12
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 11
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 11
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 10
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 9
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 9
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 8
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 8
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 8
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 8
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 8
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N palladium Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 7
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 6
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical class [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 6
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 6
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 6
- 239000003087 receptor blocking agent Substances 0.000 description 6
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 6
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 6
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 6
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 6
- 108091033409 CRISPR Proteins 0.000 description 5
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VWUXBMIQPBEWFH-WCCTWKNTSA-N Fulvestrant Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3[C@H](CCCCCCCCCS(=O)CCCC(F)(F)C(F)(F)F)CC2=C1 VWUXBMIQPBEWFH-WCCTWKNTSA-N 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 229960002258 fulvestrant Drugs 0.000 description 5
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 5
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 5
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 4
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 4
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 4
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 201000007281 estrogen-receptor positive breast cancer Diseases 0.000 description 4
- 238000013100 final test Methods 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 4
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 4
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 4
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 4
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 4
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- CXBDYQVECUFKRK-UHFFFAOYSA-N 1-methoxybutane Chemical compound CCCCOC CXBDYQVECUFKRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 3
- MSXVEPNJUHWQHW-UHFFFAOYSA-N 2-methylbutan-2-ol Chemical compound CCC(C)(C)O MSXVEPNJUHWQHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010354 CRISPR gene editing Methods 0.000 description 3
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 3
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 3
- 101000882584 Homo sapiens Estrogen receptor Proteins 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 208000035327 Oestrogen receptor positive breast cancer Diseases 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000013530 TOR Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 3
- 108010065917 TOR Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 238000001983 electron spin resonance imaging Methods 0.000 description 3
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-BJUDXGSMSA-N methanone Chemical compound O=[11CH2] WSFSSNUMVMOOMR-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 3
- 229940127084 other anti-cancer agent Drugs 0.000 description 3
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 3
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241001136792 Alle Species 0.000 description 2
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N Chlorine Chemical compound ClCl KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 101000976075 Homo sapiens Insulin Proteins 0.000 description 2
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- ATHHXGZTWNVVOU-UHFFFAOYSA-N N-methylformamide Chemical compound CNC=O ATHHXGZTWNVVOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000013614 RNA sample Substances 0.000 description 2
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 2
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- ILAHWRKJUDSMFH-UHFFFAOYSA-N boron tribromide Chemical compound BrB(Br)Br ILAHWRKJUDSMFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 2
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 2
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 2
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000007872 degassing Methods 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N diphenyl Chemical compound C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 2
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 2
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 description 2
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IUYHWZFSGMZEOG-UHFFFAOYSA-M magnesium;propane;chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].C[CH-]C IUYHWZFSGMZEOG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 2
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 2
- HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N pyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CCCN1 HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 2
- 229940125944 selective estrogen receptor degrader Drugs 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 238000013414 tumor xenograft model Methods 0.000 description 2
- NXBLTKBZGUXELX-UHFFFAOYSA-N (3-chloro-7-hydroxyquinolin-4-yl)-(4-fluorophenyl)methanone Chemical compound ClC=1C=NC2=CC(=CC=C2C=1C(=O)C1=CC=C(C=C1)F)O NXBLTKBZGUXELX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001556 1-Phosphatidylinositol 4-Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010029190 1-Phosphatidylinositol 4-Kinase Proteins 0.000 description 1
- OWUTXBIONAXKAK-UHFFFAOYSA-N 2-[3-(fluoromethyl)azetidin-1-yl]ethanol Chemical compound OCCN1CC(CF)C1 OWUTXBIONAXKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZTQNUTNKGQGWCM-UHFFFAOYSA-N 2-methoxyquinoline Chemical compound C1=CC=CC2=NC(OC)=CC=C21 ZTQNUTNKGQGWCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XHELGHANYVVRLW-UHFFFAOYSA-N 3-(fluoromethyl)azetidine Chemical compound FCC1CNC1 XHELGHANYVVRLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KYBBNISHBZGENY-UHFFFAOYSA-N 3-(fluoromethyl)azetidine;hydrochloride Chemical compound Cl.FCC1CNC1 KYBBNISHBZGENY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 3-[(1r)-1-[(2r,6s)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]ethyl]-n-[6-methyl-3-(1h-pyrazol-4-yl)imidazo[1,2-a]pyrazin-8-yl]-1,2-thiazol-5-amine Chemical compound N1([C@H](C)C2=NSC(NC=3C4=NC=C(N4C=C(C)N=3)C3=CNN=C3)=C2)C[C@H](C)O[C@H](C)C1 QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 0.000 description 1
- AXUVEBXTLZJXMK-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-3-chloro-7-methoxyquinoline Chemical compound BrC1=C(Cl)C=NC2=CC(OC)=CC=C21 AXUVEBXTLZJXMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZKLEJHVLCMVQR-UHFFFAOYSA-N 4-fluorobenzoyl chloride Chemical compound FC1=CC=C(C(Cl)=O)C=C1 CZKLEJHVLCMVQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 102100022958 Adenylate kinase 7 Human genes 0.000 description 1
- 108050000848 Adenylate kinase 7 Proteins 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 102100032187 Androgen receptor Human genes 0.000 description 1
- 102000014654 Aromatase Human genes 0.000 description 1
- 108010078554 Aromatase Proteins 0.000 description 1
- 229940122361 Bisphosphonate Drugs 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000175448 Citrus madurensis Species 0.000 description 1
- 235000004332 Citrus madurensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000007438 Citrus mitis Nutrition 0.000 description 1
- 102000013701 Cyclin-Dependent Kinase 4 Human genes 0.000 description 1
- 108010025464 Cyclin-Dependent Kinase 4 Proteins 0.000 description 1
- 102000013698 Cyclin-Dependent Kinase 6 Human genes 0.000 description 1
- 108010025468 Cyclin-Dependent Kinase 6 Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 238000007399 DNA isolation Methods 0.000 description 1
- 101150105088 Dele1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 229940127406 Estrogen Receptor Agonists Drugs 0.000 description 1
- 229940119553 Estrogen receptor alpha antagonist Drugs 0.000 description 1
- 229940102550 Estrogen receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- ATFVTAOSZBVGHC-UHFFFAOYSA-N Glycolaldehyde dimer Chemical compound OC1COC(O)CO1 ATFVTAOSZBVGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101000574063 Mus musculus Progesterone receptor Proteins 0.000 description 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011789 NOD SCID mouse Methods 0.000 description 1
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000026216 Thoracic disease Diseases 0.000 description 1
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- SSFSVKVWAURAAM-UHFFFAOYSA-N [2-fluoro-4-(trifluoromethyl)phenyl]boronic acid Chemical compound OB(O)C1=CC=C(C(F)(F)F)C=C1F SSFSVKVWAURAAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MVFGXYPEQHIKIX-UHFFFAOYSA-N acetic acid;heptane Chemical compound CC(O)=O.CCCCCCC MVFGXYPEQHIKIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 108010080146 androgen receptors Proteins 0.000 description 1
- 229940046836 anti-estrogen Drugs 0.000 description 1
- 230000001833 anti-estrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003254 anti-foaming effect Effects 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003886 aromatase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940046844 aromatase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000003855 balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 1
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 1
- 150000004663 bisphosphonates Chemical class 0.000 description 1
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- GABFVMQEDHFBPS-UHFFFAOYSA-N butan-2-ol 2-methylbutan-2-ol Chemical compound CC(CC)O.CC(C)(CC)O GABFVMQEDHFBPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 150000005829 chemical entities Chemical class 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 229940125846 compound 25 Drugs 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 239000002875 cyclin dependent kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940043378 cyclin-dependent kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 229940111685 dibasic potassium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 125000003963 dichloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 238000009261 endocrine therapy Methods 0.000 description 1
- 229940034984 endocrine therapy antineoplastic and immunomodulating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- BVJUXXYBIMHHDW-UHFFFAOYSA-N iodane Chemical compound I.I BVJUXXYBIMHHDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 239000010977 jade Substances 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 229960003881 letrozole Drugs 0.000 description 1
- HPJKCIUCZWXJDR-UHFFFAOYSA-N letrozole Chemical compound C1=CC(C#N)=CC=C1C(N1N=CN=C1)C1=CC=C(C#N)C=C1 HPJKCIUCZWXJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 230000008883 metastatic behaviour Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 201000004228 ovarian endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- MUJIDPITZJWBSW-UHFFFAOYSA-N palladium(2+) Chemical compound [Pd+2] MUJIDPITZJWBSW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002935 phosphatidylinositol 3 kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940043441 phosphoinositide 3-kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CUQOHAYJWVTKDE-UHFFFAOYSA-N potassium;butan-1-olate Chemical compound [K+].CCCC[O-] CUQOHAYJWVTKDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 125000005493 quinolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 239000000333 selective estrogen receptor modulator Substances 0.000 description 1
- 229940095743 selective estrogen receptor modulator Drugs 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012321 sodium triacetoxyborohydride Substances 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- VNFWTIYUKDMAOP-UHFFFAOYSA-N sphos Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C1=CC=CC=C1P(C1CCCCC1)C1CCCCC1 VNFWTIYUKDMAOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 150000003462 sulfoxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- IRFHMTUHTBSEBK-QGZVFWFLSA-N tert-butyl n-[(2s)-2-(2,5-difluorophenyl)-3-quinolin-3-ylpropyl]carbamate Chemical compound C1([C@H](CC=2C=C3C=CC=CC3=NC=2)CNC(=O)OC(C)(C)C)=CC(F)=CC=C1F IRFHMTUHTBSEBK-QGZVFWFLSA-N 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D491/04—Ortho-condensed systems
- C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
- C07D491/052—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being six-membered
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
- A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Physiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Professional, Industrial, Or Sporting Protective Garments (AREA)
- Finger-Pressure Massage (AREA)
- Orthopedics, Nursing, And Contraception (AREA)
Abstract
يتعلّق الاختراع الحالي بعوامل تحلّل مستقبلات إستروجين انتقائية جديدة selective estrogen receptor degraders (SERDs) وفقًا للصيغة: وأملاح مقبولة صيدليًا pharmaceutically acceptable salts، تركيبات صيدلية pharmaceutical compositions، استخدامات، وطرق الاستخدام.
Description
عوامل تحلل مستقبلات الإستروجين الانتقائية SELECTIVE ESTROGEN RECEPTOR DEGRADERS الوصف الكامل
خلفية الاختراع
ترتبط عوامل تحلل مستقبلات الإستروجين الانتقائية selective estrogen receptor degraders
(SERDs) بمستقبل الإستروجين lig (ER) estrogen receptor بشكل متحكم فيه النتشاط
الانتساخي الذي يسببه مستقبل الإستروجين. يمكن أن يكون هذا التحلل والانخفاض المتحكم
5 فيه الذي تسببه عوامل تحلّل مستقبلات الإستروجين الانتقائية مفيدًا في علاج الاضطرابات
التي يسببها تكاثر الخلايا proliferation disorders 1[هه» مثل السرطان . تم الكشف عن بعض
الأمثلة صغيرة الجزيئات من عوامل Jad مستقبلات الإستروجين الانتقائية في المجال (انظرء
على dps المثال» البراءات الدولية 2005073204 2014205136 و2016097071).
ومع ell لم تصبح عوامل تحلّل مستقبلات الإستروجين الانتقائية المعروفة مفيدة كما يلزم 0 لعلاج السرطان بفاعلية. على سبيل المثال؛ قد يكون إيجاد عوامل تحلّل مستقبلات
الإستروجين الانتقائية بسمات حركيات دوائية (PK) pharmacokinetic وديناميكيات دوائية
(PD) pharmacodynamic أفضل. فاعلية أعلى في المجال الأكلينيكي؛ وتوافر حيوي فموي
جيد مفيدًا للغاية في علاج السرطان. قد يكون عامل تحلّل مستقبلات الإستروجين الانتقائية
(SERD) selective estrogen receptor degrader مضاد نقي pure antagonist بتثبيط قوي للانتساخ الذي يسببه مستقبل الإستروجين مفيدًا بشكل واضح في علاج السرطان. هناك حاجة
لعوامل تحلّل مستقبلات الإستروجين الانتقائية جديدة لعلاج أنواع السرطان Jie سرطان الثدي
«endometrial cancer سرطان بطانة الرحم ovarian cancer سرطان المبيض cbreast cancer
سرطان البروستاتا cprostate cancer سرطان الرحم cuterine cancer سرطان المعدة gastric
©00» وسرطان الرثة lung cancer بالإضافة إلى الطفرات الناتجة عن المقاومة الناشئة. على 0 وجه التحديد هناك حاجة لعوامل تحلّل مستقبلات الإستروجين الانتقائية جديدة لعلاج سرطان
الثدي؛ سرطان sand) و/أو السرطان الرئة الإيجابي لمستقبلات الإستروجين.
الوصف العام للاختراع
يتم هنا في هذ الاختراع توفير مركبات لها الصيغة التالية:
ححصم F
F نل © 0 ِ oy
HO NF
وأملاح مقبونلة pharmaceutically acceptable salts Lalas a منهاء وتركيبات صيدلية . منها pharmaceutical compositions يتم Lad توفير طرق لاستخدام مركب على النحو الموصوف هناء أملاح مقبولة صيدليًا منهاء وتركيبات صيدلية منهاء لعلاج سرطان الثدي؛ سرطان المبيض؛ سرطان بطانة الرحم» سرطان البروستاتاء سرطان الرحم؛ سرطان المعدة؛ أو سرطان الرئة. تتضمن الطرق إعطاء كمية فعالة علاجيًا من مركب على النحو الموصوف هناء أو ملح مقبول صيدليًا منه؛ إلى مريض بحاجة لذلك. يتم كذلك توفير المركب على النحو الموصوف هناء وملح مقبول صيدليًا منه؛ للاستخدام في 0 العلاج. يمكن استخدام المركب الموصوف هناء وأملاح مقبولة صيدليًا منه؛ في علاج سرطان الثدي» سرطان المبيض؛ سرطان بطانة الرحم؛ سرطان البروستاتاء سرطان الرحم؛ سرطان المعدة؛ أو سرطان الرئة. يتم توفير استخدام مركب على النحو الموصوف هناء وأملاح مقبولة صيدليًا منه؛ لتصنيع دواء لعلاج سرطان الثدي؛ سرطان المبيض» سرطان بطانة الرحم» سرطان البروستاتاء سرطان 5 الرحم؛ سرطان المعدة؛ أو سرطان الرئة كذلك. الوصف التفصيلي: يتم هنا الكشف عن مركب جديد رباعي الحلقات novel tetracyclic compound وأملاح صيدلية pharmaceutical salts منه يعمل كعوامل تحلّل مستقبلات الإستروجين الانتقائية هنا. يمكن استخدام عوامل تحلّل مستقبلات الإستروجين الانتقائية إما كعوامل مفردة أو في توليفة مع فئات أخرى من العقاقير بما في ذلك معدلات مستقبل الإستروجين الانتقائية مثبطات أروماتاز Cyclin-dependent kinase 4 مثبطات كيناز المعتمد على السيكلين caromatase inhibitors 4 (014)؛ مثبطات كيناز المعتمد على السيكلين 6 6 Cyclin-dependent kinase «(PI3K) Phosphoinositide 3-kinase مثبطات كيناز 3 فوسفو أيونوسيتايد «(CDKG6)
ومثبطات هدف التدييات من الراباميسين za! (mTOR) mammalian target of rapamycin سرطان الثدي الموجب positive breast cancer لمستقبل الهرمون -hormone receptor يكون المركب الجديد الموصوف هنا مركب له الصيغة: F ححصم C 0 ِ نل F ب HO nF يتم وصف الأملاح المقبولة صيدليًا من المركب أيضًا. يمكن تسمية المركب باستخدام تسميات الاتحاد الدولي للكيمياء البحتة و التطبيقية International Union of Pure and Applied (IUPAC) Chemistry ك (4-(3[1-2- (فلورو ميثيل )أزبتيدين - 1 -يل]إيثوكسيأفينيل)[3-[2- فلورو -4- (تراي فلورو ميثيل)فينيل]-7-هيدروكسي كينولين-4-يل)ميثانون -3[-2{-4( (fluoromethyl)azetidin-1-yl]ethoxy ( phenyl) {3-[2-fluoro-4-(trifluoromethyl)phenyl]-7- .hydroxyquinolin-4-yl}methanone 0 يتم هنا أيضًا وصف تركيبة صيدلية pharmaceutical composition تتضمن مركب على النحو الموصوف هناء أو ملح مقبول صيلليًا منه؛ في توليفة مع سواغ cexcipient مادة حاملة carrier أو مادة مخففة diluent مقبولة صيدليًا. يمكن تحضير التركيبات الصيدلية الموصوفة هنا باستخدام مواد إضافة مقبولة صيدليًا pharmaceutically acceptable additives يشير 5 التعبير 'مادة (مواد) إضافة مقبولة صيدليًا" على النحو المستخدم هناء إلى واحدة أو أكثر من المواد الحاملة ccarriers المواد المخففة cdiluents والسواغات excipients التي تتوافق مع مواد الإضافة الأخرى من التركيبات أو الصيغ وغير المضرة للمريض. يمكن صياغة المركب؛ أو أملاح مقبولة صيدليًا edie الموصوف هنا كتركيبات صيدلية يتم إعطاؤها بواسطة مجموعة من الطرق؛ مثل عن طريق الفم أو الوريد. غالبًا ما يكون التوافر الحيوي عاملًا في علاج السرطان 0 وتكون القدرة على تصميم طرق الإعطاء والتركيبات الصيدلية للتحكم في أو تحسين التوافر الحيوي لمكون نشط مفيدة. قد تكون تركيبة عامل تحلّل مستقبلات الإستروجين الانتقائية متوفرة حيونًا عن طريق الفم مفيدة على وجه التحديد. يعتقد أن المركب» أو أملاح مقبولة صيدليًا منه؛ على النحو الموصوف هنا يتوافر حيويًا عن طريق الفم. يمكن إيجاد أمثلة التركيبات الصيدلية والعمليات المستخدمة لتحضيرها في “Remington: The Science and Practice of
Pharmacy”, L.
V.
Allen Jr, Editor, 22™ Ed., Mack Publishing Co., 2012 تتضمن الأمثلة غير الحصرية Spall الحاملة؛ المواد المخففة؛ والسواغات المقبولة صيئليًا ما يلي: محلول ملحي celal) csaline النتشفاء السكريات» مانيتول mannitol ومشتقات السليكا silica ¢derivatives عوامل الريط binding agents مثل كريوكسي ميثيل سيلولوز carboxymethyl cellulose 5 ومشتقات السيلولوز cellulose derivatives الأخرى»؛ مركبات ألجينات calginates جيلاتين cgelatin وبولي فنيل-بيروليدون ¢polyvinyl-pyrrolidone كاولين kaolin وينتونايت tbentonite مركبات بولي إيثيل جلايكول -polyethyl glycols يتم هنا كذلك وصف طرق لعلاج السرطان. تتضمن الطرق الموصوفة هنا إعطاء إلى مريض بحاجة لهذا العلاج كمية فعالة من مركب على النحو الموصوف هناء أو ملح مقبول صيدليًا 0 منه. على سيبيل المثال» يمكن أن تكون طريقة إعطاء الكمية الفعالة من المركب على النحو الموصوف هناء أو ملح مقبول صيدليًا منه؛ إعطاءًا عن طريق الفم. يمكن أن يكون السرطان سرطان يستجيب للإستروجين responsive cancer 60ع5008. على نحو إضافيء يمكن أن يكون السرطان سرطان الثدي؛ سرطان المبيض؛ سرطان بطانة الرحم؛ سرطان البروستاتاء سرطان الرحم؛ سرطان المعدة؛ أو سرطان الرئة. على سبيل المثال؛ يمكن أن يكون السرطان سرطان الثدي الإيجابي لمستقبل الإستروجين؛ سرطان المعدة الإيجابي لمستقبل الإستروجين؛ أو سرطان الرئة الإيجابي لمستقبل الإستروجين. يتم هنا Load وصف مركب على النحو الموصوف هناء أو ملح مقبول صيدليًا منه؛ للاستخدام في العلاج. يمكن استخدام المركب على النحو الموصوف هناء أو أملاح مقبولة lana منهاء على النحو الموصوف هنا في علاج سرطان الثدي» سرطان المبيض» سرطان بطانة الرحم؛ 0 سرطان البروستاتاء سرطان الرحم؛ سرطان المعدة؛ أو سرطان الرئة. على dag التحديد؛ يمكن أن يكون السرطان سرطان الثدي الإيجابي لمستقبل الإستروجين؛ سرطان المعدة الإيجابي لمستقبل الإستروجين؛ أو سرطان الرئة الإيجابي لمستقبل الإستروجين. على سبيل المثال» يمكن إعطاء المركب؛ أو ملح مقبول Wana منه؛ عن طريق الفم. على نحو إضافي؛ يمكن استخدام المركب على النحو الموصوف هناء أو أملاح مقبولة صيدليًا منه؛ في تصنيع دواء لعلاج السرطان. على سبيل المثال» يمكن إعطاء الدواء عن طريق الفم. تتضمن أنواع السرطان التي تستخدم الأدوية على النحو الموصوف هنا لعلاجها سرطان
الثدي؛ سرطان المبيض»؛ سرطان بطانة الرحم؛ سرطان البروستاتاء سرطان الرحم؛ سرطان المعدة» أو سرطان الرئة. على وجه التحديد يمكن أن يكون السرطان سرطان الثدي الإيجابي لمستقبل الإستروجين؛ سرطان المعدة الإيجابي لمستقبل الإستروجين؛ أو سرطان الرئة الإيجابي لمستقبل الإستروجين.
يمكن استخدام المركب على النحو الموصوف هناء وأملاح مقبولة صيدليًا cane أكلينيكيًا كعامل مفرد أو في توليفة مع عوامل مضادة للسرطان anti-cancer agents أخرى ؛ لعلاج أنواع السرطان مثل سرطان الثدي؛ سرطان المبيض؛ سرطان بطانة الرحم؛ سرطان البروستاتاء سرطان الرحم؛» سرطان المعدة؛ وسرطان الرئة. عند استخدامه في توليفة مع عوامل مضادة للسرطان أخرى؛ يمكن استخدام المركب على النحو الموصوف هناء أو أملاح مقبولة Waren
cate 0 في نفس الوقت؛ بشكل تتابعي؛ أو بشكل منفصل مع العوامل المضادة للسرطان الأخرى. مثال عامل مضاد للسرطان آخر يمكن دمجه مع المركب على النحو الموصوف هنا هو 5- (4-(31-2- (فلورو ميثيل)أزيتيدين -1-يل]إيشوكسي)فينيل)-8- (تراي فلورو ميثيل)-511- [[إبينزو بيرانو[4» 3-]|كينونين-2-اول 5-(4-{2-[3-(fluoromethyl)azetidin-1- .yl]ethoxy ( phenyl)-8-(trifluoromethyl)-5H-[1]benzopyrano[4,3-c]quinolin-2-o0l
5 على النحو المستخدم هناء يشير التعبير 'كمية فعالة" إلى الكمية أو الجرعة من المركب على النحو الموصوف هناء أو أملاح مقبولة صيلليًا منهاء والتي؛ عند إعطاء جرعات مفردة أو متعددة إلى المريض؛ توفر التأثير المرغوب فيه في المريض الخاضع للتشخيص أو العلاج. على نحو oJ mde يتمثل تأثير مرغوب فيه في تثبيط تكاثر خلايا الورم tumor cell «منلة ]0011 موت خلايا الورم؛ أو كليهما. يكون المركب على النحو الموصوف هناء أو
0 أملاح مقبولة صيدليًا منه؛ على النحو الموصوف هنا فعالًا بصفة dele عبر نطاق جرعات عريض. على سبيل المثال؛ عادة ما تندرج الجرعات في اليوم في النطاق اليومي الذي يبلغ حوالي 100 مجم إلى حوالي 2000 مجم. على النحو المستخدم هناء يشير Called 'علاج” أو alles إلى منع؛ cola إيقاف؛ أو عكس تقدم dla أو حدة (mie أو اضطراب موجود.
5 على النحو المستخدم هناء يشير التعبير 'مريض" إلى بشر مصاب بمرض» اضطراب؛ أو حالة مرضية محددة.
يمكن تحضير المركب على النحو الموصوف هناء أو أملاح مقبولة صيدليًا منه؛ على النحو الموصوف هنا بواسطة مجموعة من الإجراءات المعروفة في المجال؛ التي يتم توضيح بعضها في uly man wll والمثال أدناه. يمكن دمج الخطوات التخليقية المحددة لكل من الطرق الموصوفة بطرق مختلفة؛ أو li SVL مع الخطوات من الإجراءات المختلفة؛. لتحضير المركب على النحو الموصوف هناء أو أملاح مقبولة صيدليًا منه. يمكن استخلاص المنتجات بواسطة الطرق التقليدية المعروفة جيدًا في المجال؛ بما في ذلك الاستخلاص» التبخيرء الترسيب» الاستشراب؛ الترشيح المعايرة» والبلورة. تتوفر الكواشضف reagents ومواد البدء starting materials بسهولة لصاحب المهارة العادية في المجال. في خطوة اختيارية؛ يمكن تشكيل ملح مقبول صيدليًا من المركب على النحو الموصوف هنا 0 بواسطة تفاعل قاعدة حرة ملائمة وفقًا للاختراع الحالي مع حمض مقبول صيلليًا pharmaceutically acceptable acid ملائم في مذيب مناسب في الظروف القياسية. على نحو إضافي؛ يمكن تشكيل هذه الأملاح في نفس الوقت عند نزع مجموعة الحماية من مجموعة حماية من النيتروجين group ع01008©0-01016©008. يكون التشكيل المحتمل للأملاح المقبولة صيدليًا معروف جيدًا. انظرء على Jur ws المثال» Gould, P.L., “Salt selection for basic drugs,” International Journal of Pharmaceutics, 33: 201-217 (1986); Bastin, R.J., ef al. 15 “Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities,” Organic Process Research and Development, 4: 427-435 (2000); and Berge, S.M., et al., “Pharmaceutical Salts,” Journal of Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, (1977) سؤُدرك صاحب المهارة العادية في المجال أنه يتم تحويل مركب على النحو الموصوف هنا بسهولة 0 إلى ويمكن alle كملح مقبول صيدليًا. ما لم يلاحظ ذلك على dag التحديد»؛ يتم تعريف الاختصارات المستخدمة هنا وفقًا ل cAldrichimica Acta, Vol. 17, No. 1, 4 أو المعنى المقبول Bale لأصسحاب المهارة في المجال. يتم تعريف الاختصارات الأخرى كما يلي: يشير AUC إلى المساحة تحت المنحنى tarea under curve يشير "BSA" إلى ألبومين المصل البقري ¢Bovine Serum Albumin يشير 5 01" إلى داي كلورو ميشان dichloromethane أو كلوريد ميثيلين ¢tmethylene chloride يشير 'DMA" إلى داي ميثيل أمين ¢dimethylamine يشير "DMEM" إلى الوسط Eagle المعدل ب ¢Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium Dulbecco يشير "011" إلى —N «N
داي ميثيل فورماميد ¢N N-dimethylformamide يشير "DMSO" إلى داي ميثيل سلفوكسيد ¢dimethyl sulfoxide يشير "DNA" إلى حمض دايوكسي رايبونوكليك deoxyribonucleic
40 ؛ يشير "cDNA" إلى حمض دايوكسي رايبونوكليك التكاملي complementary tdeoxyribonuclease إلى دايوكسي رايبو نوكلياز "DNase’ يشير ¢deoxyribonucleic acid
يشير "017" إلى داي ثيو ثريتول tdithiothreitol يشير "505:0" إلى تركيز عامل ينتج 750 استجابة للنشاط المستهدف مقارنة بمركب مقارن موجب محدد مسبقًا ECso) المطلقة)؛ يشير "EDTA إلى حمض إيثيلين داي أمين تترا أسيتيك tethylenediaminetetraacetic acid يشير "10" إلى مستقبل الإستروجين testrogen receptor alpha Wl يشير "EtOAc" إلى أسيتات
tethyl acetate Ji) يشير "EtOH" إلى إيثانول tethanol يشير "FBS" إلى المصل البقري
0 الجنيني ¢Fetal Bovine Serum يشير "HBSS" إلى محلول ملح متوازن Hank’s Hank ¢Balanced Salt Solution يشير "HEPES" إلى حمض 4-(2-هيدروكسي إيثيل)-1- بيبرازين
إيثان سلفونيك ¢4-(2-hydroxyethyl)-1-pipozineethanesulfonic acid يشير "ICs" إلى تركيز
عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية محتملة لهذا العامل» (تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية النسبية)؛ أو تركيز عامل ينتج 750 تثبيط للنشاط الإنزيمي المستهدف
5 مقارنة بمجموعة المقارنة الإرضائية (تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية المطلقة) ؛ يشير 0117© إلى أيزو برويانول isopropanol أو أيزو بروييل الكحول isopropyl ¢alcohol يشير "TV" الإعطاء في الوريد administration 1000760005؛ يشير "Ki" إلى
ثابت التثبيط ¢inhibition constant يشير "MeOH" إلى ميثيل الكحول methyl alcohol أو ميثانول ¢methanol يشير "MTBE" إلى إيثر ميثيل 7-بيوتيل ¢methyl -butyl ether يشير
'PBS" 0 إلى محلول ملحي منظم بفوسفات ¢Phosphate Buffered Saline يشير "PO" إلى إعطاء عن طريق الفم ¢oral administration يشير "PRa’ إلى مستقبل البروجستيرون ألفا
¢progesterone receptor alpha يشير "00" إلى إعطاء جرعات مرة يوميًا؛ يشير "RNA" إلى الحمض النووي الرايبوزي ¢ribonucleic acid يشير "81286 إلى راييو نوكلياز tribonuclease يشير "RT-PCR" إلى تفاعل النسخ العكسي لسلسةة بوليمراز reverse transcription
tpolymerase chain reaction 25 يشير 7-0001 إلى تفاعل النسخ العكسي الكمي لسلسلة بوليمراز ¢reverse transcription quantitative polymerase chain reaction يشير "THF إلى
تترا هيدرو فيوران ttetrahydrofuran وبشير "62 "XPhos Pd إلى كلورو )510-2( سيكلو هكسيل فوسفينو-2» 4» 6ستراي أيزو بروبيل-1» 1-باي فينيل)[2-(2-أمينو-1؛ 1-باي فينيل)]البالاديوم(11) chloro(2-dicyclohexylphosphino-2',4',6"-triisopropyl-1,1"- .biphenyl)[2-(2'-amino-1,1"-biphenyl)]palladium(II) 5 توضح المستحضرات والأمثلة التالية بمزيد من التفصيل الاختراع. المستحضرات والأمثلة المستحضر 1 2-[3- (فلورو ميثيل)أزبتيدين- 1 -يل]إيثان - 1-اول 2-[3-(Fluoromethyl)azetidin-1-ylJethan- l-ol 0 H س# - قم بإضافة تراي أسيتوكسي بو روهيدريد الصوديوم sodium triacetoxyborohydride )405 جم 1 مول) على أجزاء على مدار 15 دقيقة إلى محلول تم تقليبه درجة حرارته صفر درجة مثوية من هيدروكلوريد 3- (فلورو ميثيل)أزبتيدين 3-(fluoromethyl)azetidine hydrochloride aa 160( 5 1.28 مول) في داي كلورو (Lae (2.4 لتر) في جو من النيتروجين nitrogen (ND) وقم بالتقليب عند صفر درجة Augie لمدة 10 دقائق. قم بإضافة 1 4-دايوكسان-2؛ 5-دايول can 99( 1.4-dioxane-2,5-diol 0.83 مول) عند صفر درجة مئوية على 6 أجزاء على مدار 1[ ساعة ثم قم بالتقليب عند صفر-5 درجة Lge لمدة 15 دقيقة. اسمح بتدفئة خليط التفاعل إلى درجة حرارة الغرفة وقم بالتقليب لمدة ساعتين في جو من النيتروجين. قم 0 بتبريد خليط التفاعل إلى 15-10 درجة مثوية على مدار 20 دقيقة. قم بإضافة الماء )800 ملليلتر) على مدار 30-25 دقيقة عند 15-10 درجة مثوية؛ اسمح بالتدفثة إلى درجة حرارة الغرفة لمدة 10-5 دقائق ثم قم بفصل الطبقات. قم بغسل الطبقة المائية بداي كلورو ميثان )800 ملليلتر)؛ قم بفصل الطبقات ثم قم بتبريد الطبقات المائية المجمعة combined aqueous layers إلى 15-10 درجة مئوية وقم بتهيئة الرقم الهيدروجيني إلى 14-13 باستخدام 750 من محلول هيدروكسيد الصوديوم sodium hydroxide solution )~540 ملليلتر) ٠ اسمح بتدفئة الطبقة الماثية aqueous layer إلى درجة حرارة الغرفة؛ قم بالاستخلاص بداي كلورو ميثان )4
* 800 ملليلتر)؛ قم بالتجفيف بسلفات الصوديوم (an 80) sodium sulfate قم بالترشيح؛ وقم بالتركيز إلى الجفاف للحصول على المركب المطلوب. أعطى اتباع عملية التحضير المذكورة 9 جم )782( من المركب المطلوب كزبت أصفر Jade القوام بإى أس/أم أس ES/MS (m/z) يبلغ 134.1 (11+71). المستحضر 2 هيدروكلوريد 31-2 (فلورو ميثيل)أزيتيدين-١-يل]إيثان-1-اول 23 (Fluoromethyl)azetidin-1-yl]ethan-1-ol hydrochloride Oh ~~ OH " HCI 0 قم بإذابة 3[1-2-(فلورو ميثيل)أزيتيدين - 1-يل]إيثان-1-اول 2-[3-(fluoromethyl)azetidin-1- ylethan-1-ol )529 جم؛ 4 مول) في إيثر ميثيل 1-بيوتيل (2.6 لتر) وقم بالتبريد إلى صفر درجة مئوية. قم بإبضافة محلول حمض الهيدروكلوريك hydrochloric acid (11©1)/إيثانول )492 ملليلترء 730 بالوزن) بالتقطير على مدار 30 دقيقة ثم قم بالتقليب عند صفر درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. قم بترشيح المواد الصلبة وقم بغسل عجينة الترشيح filter cake بإيثر 5 ميثيل 7-بيوتيل (2 x 200 ملليلتر). قم بالتجفيف في جو من النيتروجين لمدة 8 ساعات للحصول على المركب المطلوب. أعطى اتباع عملية التحضير المذكورة 580 جم (786) من المركب المطلوب كمادة صلبة slay اللون ب (m/z) ES/MS يبلغ 134.0 (11+11). المستحضر 3 0 (3-كلورو-7-ميثوكسي كينولين-4-يل)-(4-فلورو فينيل)ميثانون (3-Chloro-7- methoxyquinolin-4-yl)-(4-fluorophenyl)methanone
F
(Jo ~o ل NZ 4-bromo-3-chloro-7- خليط من 4-برومو-3-كلورو-7-ميثوكسي كينولين api قم مول) وتترا هيدرو فيوران (1 لتر) إلى -40 درجة Me 254 can 70) methoxyquinoline
مثوية في جو من النيتروجين مما ينتج die تريب المادة. قم بإضافة كلوريد أيزو بروبيل مجنسيوم isopropylmagnesium chloride )2 مولار في تترا هيدرو فيوران» 254 ملليلترء 9 مللي مول) على مدار 20 دقيقة وقم بتقليب الخليط saad 1 ساعة. قم بإضافة محلول من كلوريد 4-فلورو بنزويل 4-fluorobenzoyl chloride )66 ملليلتر» 559 (Ale مول) في تترا هيدرو فيوران )140 مليلتر) بالتقطير ثم اسمح بالتدفئة إلى درجة حرارة الغرفة. قم بإخماد التفاعل بمحلول كلوريد الأمونيوم المشتيع saturated ammonium chloride solution )300 ملليلتر) والماء (200 ملليلتر) وقم بفصل الطبقات. قم بغسل الطبقة العضوية organic layer بمحلول كلوريد الأمونيوم المشبع )300 مليلتر)؛ قم بالتجفيف فوق كبريتات المغسيوم Magnesium Sulfate (50ع11)؛ قم بالترشيح: وقم بالتركيز لتوفير مادة متبقية زيتية. قم 0 بترشيح الزيت البني الخام من خلال التصفية التتابعية بهلام السليكا بخليط من إيثر ميثيل 7- بيوتيل/إهكسان hexane (1: 1) للحصول على المنتج الخام كمادة صلبة صفاء اللون )84 جم). قم بمعالجة المادة الصلبة بنسبة 710 من أسيتات heptane (yl /methylacetate die (AL 800) وقم بالتقليب عند درجة حرارة الغرفة طوال الليل. قم بالترشيح لتجميع المواد الصلبة وقم بالحفظ. قم بتركيز ناتج الترشيح وقم بالتنقية بعملية التصفية التتابعية بالسليكا silica 5 بنسبة 740-10 من أسيتات إيثيل/ مركبات هكسان hexanes ثم قم بمعالجة المنتج بنسبة 710 من أسيتات ميثيل/هبتان (200 مليلتر) وقم بالتقليب عند درجة حرارة الغرفة لمدة 3 ساعات. قم بترشيح المواد الصلبة الناتجة؛ قم بدمجها مع المواد الصلبة من عملية الترشيح السابقة وقم بالتجفيف تحت التفريغ طوال الليل للحصول على المركب المطلوب. أعطى اتباع عملية التحضير المذكورة 31 جم (738) من المركب المطلوب كمادة صلبة صفراء اللون ب (m/z) ES/MS 0 يبلغ 316.0 (M+H) المستحضر 4 (3-كلورو--7-هيدروكسي كينولين-4-"يل)-(4-فلورو فينيل)ميثانون (3-Chloro-7- hydroxyquinolin-4-yl)-(4-fluorophenyl)methanone
F Oo 5 NZ | ل HO قم بإضافة (shi بروميد بورون boron tribromide )1 مولار في داي كلورو ميثان» 295 ملليلتر» 295 مللي مول) إلى خليط من (3-كلورو-7-ميثوكسي كينولين -4-يل)-(4-فلورو فينيل)ميثانون (31 pn 98 مللي مول) في داي كلورو ميثان )217 ملليلتر) وقم بتقليب الخليط عند درجة حرارة الغرفة لمدة 3 أيام. قم بصب الخليط ببطء في محلول درجة حرارته صفر درجة مثوية من فوسفات بوتاسيوم AUS القاعدية dibasic potassium phosphate )2 مولار في الماء؛ 700 مليلتر) والماء (200 مليلتر). اسمح بتدفئة الخليط إلى درجة Sha الغرفة وقم بالتقليب لمدة 1 ساعة. قم بتركيز المحلول في جو مفرغ لإزالة المذيبات العضوية corganic solvents قم بالترشيح؛ قم بتجميع ناتج الترشيح filtrate وقم بتجفيف ناتج الترشيح 0 تحت التفريغ عند 45 درجة Asie طوال الليل. قم بمعالجة المواد الصلبة بداي كلورو ميثان/هبتان (1: 1 450 ملليلتر) وقم بالتقليب طوال الليل. قم بتجميع المواد الصلبة وقم بالتجفيف تحت التفريغ طوال الليل للحصول على المركب المطلوب. أعطى اتباع عملية التحضير المذكورة 32 جم (ناتج كمي) من المركب المطلوب كمادة صلبة لونها بني فاتح ب (m/z) ES/MS يبلغ 302.0 .(M+H) 15 المستحضر 5 (3-كلورو-7-هيدروكسي كينولين-4-يل)-(31-21-4-(فلورو ميثيل)أزبتيدين-1- يل]إيثوكسي)فينيل)ميثاتنون (3-Chloro-7-hydroxyquinolin-4-yl)-(4-{2-[3- 1100116 10( 1 نوعطم } (fluoromethyl)azetidin- 1-yl]ethoxy 0 C 0 للء Cl > HO J NZ 20 قم بإضافة هيدروكلوريد 2-[3- (فلورو ميثيل)أزبتيدين - 1-يلإإيثان-1-اول )3.90 «a> 23.0 مللي مول) إلى محلول تم تقليبه من (3-كلورو -7-هيدروكسي كينولين -4-يل)-(4-فلورو
فينيل)ميثانون (5.00 Ae 15.3 can مول) في (NN ميثيل فورماميد (75 ملليلتر) يتبع ذلك هيدريد الصوديوم sodium hydride (760 في زبت معدني اذه «mineral 3.07 جم؛ 6 مللي مول). قم بالتقليب في جو من النيتروجين وقم بالتدفئة إلى 40 درجة مئوية لمدة دقيقة. قم بإخماد المحلول بالماء وقم بالتركيز. قم بتجزئة المادة المتبقية بين 720 من 5 أيزو برويانول/كلوروفورم Chloroform (:ل©011) ومحلول بيكربونات الصوديوم المائي المشبع saturated aqueous sodium bicarbonate وقم (duals قم باستخلاص المائي بنسبة 2 x 720 من أيزو برويانول/كلوروفورم» قم بدمج نواتج الاستخلاص العضوية corganic extracts قم بتجفيف الطبقات العضونة المجمعة combined organic layers فوق سلفات المجنسيوم؛ قم بترشيح وقم بتركيز ناتج الترشيح للحصول على المنتج الخام كزبت لونه أحمر داكن. قم بتنقية 0 المادة الخام بواسطة التصفية التتابعية باستشراب عمود هلام السليكا بتدرج يبلغ 10-5 7 من 7 عيار من أمونيا (NH3) ammonia في ميثانول/داي كلورو ميثان للحصول على المركب المطلوب. أعطى اتباع عملية التحضير المذكورة 5.31 جم (784) من المركب المطلوب كمادة صلبة صفراء اللون ب (m/z) ES/MS يبلغ 415.0 (+11). 5 المستحضر 6 (4-فلورو فينيل)-[3-[2-فلورو-4-(تراي فلورو ميثيل)فينيل]- 7-هيدروكسي -4- كينوليل إميثانون (4-Fluorophenyl)-[3-[2-fluoro-4-(trifluoromethyl)phenyl]-7-hydrox y-4- quinolyl]methanone F Co AK 7 كن HO 0 .قم بنزع الغاز/ التطهير ب 5 أضعاف من النيتروجين وهو خليط من (3-كلورو- 7-هيدروكسي -4-كينوليل)-(4-فلورى فينيل)ميثانون (3-chloro-7-hydroxy-4-quinolyl)-(4- fluorophenyl)methanone (140 جم 440.8 مللي مول)» حمض 2-فلورو -4- (تراي فلورو ميثيل )فينيل بوروتيك «a> 183.3) 2-fluoro-4-(trifluoromethyl)phenylboronic acid 881.7 (Ale مول)» كريونات البوتاسيوم potassium carbonate )184.6 جم» 1.3 مول)» 2-ميثيل-
2-بيوتانول 2-methyl-2-butanol )1.7 لتر) والماء (0.56 لتر). قم بإبضافة كلورو (2-داي سيكلو هكسيل فوسفينو-2"» 4 6'-تراي أيزو بروبيل-1» 1'-باي فينيل)[2-(2-أمينو-1؛ 1سباي فينيل)]البالاديوم(11) (7.1 جم؛ 8.82 مللي (Use وقم بتسخين عند 80 درجة مئوية لمدة 2 ساعة. قم بتبريد الخليط إلى درجة حرارة الغرفة وقم بتبخير المذيب mall قم بإضافة أسيتات إيثيل (1 لتر) والماء (0.2 لتر). قم بفصل الطبقة العضوية وقم بتجفيفها فوق سلفات المجنسيوم. قم بترشضيح هذه المادة عبر هلام السليكا وقم بالتركيز إلى الجفاف. قم بسحق المادة الخام crude material بخليط من مركبات هكسان (1.25 لتر) وإيثر ميثيل 1- بيوتيل (0.25 لتر) لتوفير مادة صلبة. قم بترشيح المادة الصلبة وقم بالتجفيف تحت التفريغ. قم بإذابة المادة الصلبة في تترا هيدرو فيوران )1.5 لتر) وقم بإضافة مادة كاسحة scavenger 0 من SiliaMetS® Thiol (150 جم). قم بتقليب الخليط عند درجة حرارة الغرفة طوال الليل. قم بترشيح المادة الكاسحة وقم بتبخير ناتج الترشيح إلى الجفاف للحصول على المركب المطلوب. ac اتباع عملية التحضير المذكورة 185.5 جم (796) من المركب المطلوب كمادة صلبة بيضاء اللون ب (m/z) ES/MS يبلغ 430.0 (11+17). 5 المثال 1 (4-(2-[3- (فلورو ميثيل)أزيتيدين- [ -يل]إيتوكسي)فينيل)(3-[2-فلورو-4-(تراي فلورو ميثيل)فينيل]|-7-هيدروكسي كينولين -4- يلأميثانون 0 oy HO nF إلى وعاء؛ مزود بمدخل ل النيتروجين» قم بإضافة تترا هيدرو فيوران )2.8 لتر)؛ تيرت- 0 بيتوكسيد البوتاسيوم <a> 274.5) potassium tert-butoxide 2.45 مول) و2-(3- (فلورو ميثيل)أزبتيدين - 1 -يل)إيثان-1-اول 2-(3-(fluoromethyl)azetidin-1-ylethan-1-ol (168 جمء 1.22 مول). قم بتقليب الخليط لمدة 10 دقائق. قم بإضافة بالتقطير محلول من (4- فلورو فينيل)-[3-[2-فلورو-4-(تراي فلورو ميثيل)فينيل]-7-هيدروكسي -4-
كينوليل]ميثانون )350 «an 0.81 مول) في تترا هيدرو فيوران (0.7 لتر). قم بالتقليب عند
درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة. قم بإخماد التفاعل ب 1 عيار من حمض الهيدروكلوريك حتى
رقم هيدروجيني يبلغ 8 وقم بالتخفيف بأسيتات إيثيل (4 لتر). قم بفصل الطبقة العضوية وقم
بغسلها بمحلول ملحي (2 لتر). قم بتجفيف المحلول فوق سلفات المجنسيوم؛ قم بترشيح المحلول؛ وقم بالتركيز إلى الجفاف للحصول على المركب المطلوب. hel اتباع عملية
التحضير المذكورة 415 جم )793.8( من المركب المطلوب كمادة صلبة لونها بني باهت ب
(M+H) 543.2 يبلغ (m/z) ES/MS
المثال البديل 1
0 .قم بنزع الغاز/ التطهير ب النيتروجين X 5 وهو خليط (3-كلورو-7-هيدروكسي كينولين-4- يل)-(4-(2-[3- (فلورو ميثيل)أزيتيدين -1 -يل]إيتوكسي)فينيل)ميثانون )200 مجم 0.48 مللي مول)؛ حمض 2-فلورو -4- (تراي فلورو ميثيل)فينيل بورونيك )158 cane 0.72 مللي (Use كربونات البوتاسيوم (202 came 1.45 مللي (Use 2-ميثيل -2-بيوتانول -2-016071 001ها:-2 )3 ملليلتر)؛ والماء (1 ملليلتر) في قارورة ميكروويف. قم بإضافة كلورو (2-داي
5 سيكلو هكسيل فوسفينو-2» 4 6-تراي أيزو بروبيل-1» 1-باي فينيل)[2-(2-أمينو-1؛ sb] فينيل)]البالاديوم(11) )12 مجم 0.015 مللي مول)؛ قم بإحكام الإغلاق على الخليطء وقم بالتعريض لميكروويف عند 80 درجة مئوية لمدة ساعتين. قم بتجزئة المادة المتبقية بين إيثر ميثيل 7-بيوتيل ومحلول كلوريد الأمونيوم المشبع. قم بفصل الطبقات وقم باستخلاص المائية بإيثر ميثيل 1-بيوتيل. قم بدمج نواتج الاستخلاص العضوية؛ قم بتجفيفهم فوق سلفات
0 المجنسيوم؛ قم بالترشيح؛ وقم بتركيز ناتج الترشيح للحصول على مادة متبقية برتقالية اللون. قم بتنقية المادة الخام بواسطة التصفية التتابعية باستشراب عمود هلام السليكا ب 75 ميثانول/داي كلورو ميثان للحصول على المركب المطلوب. أعطى اتباع عملية التحضير المذكورة 205 مجم (778) من المركب المطلوب كمادة صلبة صفراء اللون ب (m/z) ES/MS يبلغ 543.2 .(M+H)
5 المثال 2
5-(4-(31-2- (فلورو ميثيل)أزيتيدين- 1 -يل]إيثوكسي)فينيل)-8- (تراي فلورو ميثيل)-511- [[إبنزو بيرانو[4» 3-ع]|كينولين-2- اول الرا سيمي -3[-2{-4(-5 Racemic (Fluoromethyl)azetidin-1-yl]ethoxy ( phenyl)-8-(trifluoromethyl)-5H- [1]benzopyrano[4,3-c]quinolin-2-o0l NO F Re F ®@ XX HO C NZ 5 قم بتبريد محلول من (4-(2-[3- (فلورو ميثيل)أزيتيدين - 1 -يل]إيثوكسي)فينيل)[3-[2-فلورو- 4-زتراي فلورو ميثيل)فينيل]-7-هيدروكسي كينولين-4-يل)ميثانون (5.27 جم» 9.71 مللي مول) في 1 4-دايوكسان 1.4-dioxane (100 ملليلتر) إلى 5 درجة مئوية. قم بإضافة تراي إيثيل بوروهيدريد الليثيوم Vee 1( lithium triethylborohydride في تترا هيدرو فيوران» 30.0 0 ملليلترء 30.0 مللي مول). قم بإزالة حمام التبريد وقم بالتقليب لمدة 1.5 ساعة عند درجة حرارة الغرفة. قم بإخماد الخليط بالماء. قم بإبمضافة محلول كلوريد ١ لأمونيوم Ammonium chloride (011+01) المشبع وأسيتات إيثيل. قم بفصل الطبقات وقم باستخلاص الطبقة المائية بأسيتات إيثيل. قم بدمج نواتج الاستخلاص العضوية؛ قم بالتجفيف فوق كبريتات المغنسيوم اللامائي » قم بالترشيح؛ وقم بتركيز ناتج الترشيح. قم بإذابة المادة المتبقية الخام في تترا هيدرو فيوران )100 ملليلتر). قم بإضافة هيدريد الصوديوم )760 في Cu) معدني؛ 4 جم 48.5 مللي مول). قم بتسخين محلول الإرجاع لمدة 1.5 ساعة. قم بإضافة هيدريد صوديوم إضافي (760 في زيت معدني؛ 4 جم 48.5 مللي مول)؛ ثم الإرجاع لمدة 30 دقيقة إضافية. قم بتبريد المحلول إلى درجة حرارة الغرفة وقم بالإخماد بالماء. قم بإضافة أسيتات إيثيل ومحلول كلوريد الأمونيوم المشبع. قم بفصل الطبقات وقم باستخلاص الطبقة المائية بأسيتات إيثيل. قم 0 بدمج ناتج الاستخلاص العضوي؛ قم بالتجفيف فوق كبريتات المغنسيوم اللامائي؛ قم بالترشيح؛ وقم بتركيز ناتج الترشيح. قم بتنقية المادة المتبقية بواسطة التصفية التتابعية باستشراب عمود هلام السليكا بتدرج يبلغ 77-5 ميثانول في داي كلورو ميثان للحصول على المركب المطلوب )3.70 جم» 772) كرغوة لونها أصفر فاتح. (M+H) 525.2 :ES/MS (m/z) 5 الاختبارات الحيوية
— 1 7 —
تمت الإشارة إلى العلاقة بين التعبير عن مستقبل الإستروجين وأنواع سرطان معينة في المجال؛ (لسرطان الثدي /نظرء على سبيل المثال؛ Puhalla S, Bhattacharya 5, Davidson N., Hormonal therapy in breast cancer: A model disease for the personalization of cancer care, Molecular Oncology, 2012, 6:222-236; Kennecke H, Yerushalmi R, Woods R, Cheang MCU, Voduc D, Speers CH, Nielsen TO, Gelmon K, Metastatic behavior of 5 ¢breast cancer subtypes, J Clin Oncol, 2010, 28(20):3271-3277 لسرطان المبيض انظرء على سببيل O'Donnell AJ, Macleod KG, Burns DJ, Smyth JF, Langdon SP, «JUall Estrogen receptor-alpha mediates gene expression changes and growth response in ovarian cancer cells exposed to estrogen, Endocr Relat Cancer, 2005;12(4):851-66; Walker G, MacLeod K, Williams AR, Cameron DA, Smyth JF, Langdon SP, Estrogen 10 regulated gene expression predicts response to endocrine therapy in patients with ovarian cancer, Gynecol Oncol, 2007, 106(3):461-8; Smyth JF, Gourley C, Walker G, MacKean MJ, Stevenson A, Williams AR, et al., Antiestrogen therapy is active in selected ovarian cancer cases: The use of letrozole in estrogen receptor-positive patients, Clin Cancer Res, 13(12):3617-22 ,€2007 لسرطان البروستاتا /انظرء على سبيل Bonkohoff H, «JGall Fixemer 1 Hunsicker I and Remberger K, Estrogen receptor expression in prostate cancer ¢and premalignant prostate lesions, Am J Pathol, 1999, 155:641-647 لسرطان بطانة الرحم وسرطان الرحم انظرء على سبيل المثال» Krasner C, Aromatase inhibitors in gynecologic cancer, J Steroid Biochem Mol Biol, 2007, Aug—Sep;106(1-5):76-80; Boisen MM, Andersen CL, Sreekumar S, et al., Treating gynecologic malignancies with selective 0 estrogen receptor downregulators (SERDs): Promise and challenges, Mol Cell ¢Endocrinol, 2015, 418:322-3330 لسرطان الرئة انظرء على Jw المثال» Baik CS, Eaton KD et al., Estrogen signaling in lung cancer: An opportunity for novel therapy, Cancer, 2012, 4:969-988; Marquez-Garban DC, Chen H-W, Goodglick L, Fishbein MC and Pietras RJ, Targeting aromatase and estrogen signaling in human non-small cell lung | 25 cancer.
Steroid enzymes and cancer, Ann.
N.
Y.
Acad Sci, 2009, 1155:194-205; Hamilton DH, Griner LM, Keller JM, Hu X, Southall N, Marugan J, David JM, Ferrer M and Palena C, Targeting estrogen receptor signaling with fulvestrant enhances immune and chemotherapy mediated cytotoxicity of human lung cancer, Clin Cancer Res, 2016, Rodriguez-Lara V, Hernandez-Martinez JM, Arrieta O, Influence of 0 ;22(24):6204-16 estrogen in non-small cell lung cancer and its clinical implications, J Thoracic Disease, 10(1):482-497 ,€2018 لسرطان المعدة انظرء على سبيل المثال؟؛ Tang W, Liu R, Yan Y, Pan X, Wang M, Han X, Ren H, and Zhang Z, Expression of estrogen receptors and androgen receptor and their clinical significance in gastric cancer, Oncotarget, 2017,
.8(25) 40765-777) 5
توضح الاختبارات التالية أن المركبات الموضحة تكون عوامل تحليل قوية لمستقبل الإستروجين ألفا من النوع غير المعالج والبروتينات المطفرة. توضح تتائج الاختبارات أيضًا أن المركبات dain gal) تكون مواد مضادة قوية potent antagonists لمستقبل الإستروجين ألفا من النوع غير المعالج والمستقبلات المطفرة mutant receptors وتثبط نشاط النسخ الذي يسببه مستقبل الإستروجين. على نحو إضافي؛ توضح الاختبارات أن المركب By للمثال 1 يثبط تكاثر سلالات خلايا cell lines سرطان الثدي مستقبل الإستروجين+»؛ وإرسال إشارات مستقبل الإبستروجين ألفا ويثبط نمو الورم في نموذج الطعم الخارجي من سرطان الثدي الإيجابي لمستقبل الإستروجين. اختبار الريط التنافسي لمستقبل الإستروجين ألفا (من النوع غير المعالج) ومستقبل الإستروجين ألفا (طفرة (Y537S يكون غرض اختبارات الريط التنافسي لمستقبل الإستروجين التالية تحديد ألفة ارتباط مركب الاختبار ضد مستقبل الإستروجين ألفا (من النوع غير المعالج) ومستقبل الإستروجين ألفا (طفرة (Y537S انظر “Estrogen receptor alpha somatic mutations Y537S and .له Fanning et D538G confer breast cancer endocrine resistance by stabilizing the activating function-2 5 2 علناء binding conformation,” قم بإجراء اختبار الريط التنافسي في محلول منظم buffer يحتوي على 50 مللي مولار من حمض 4-(2-هيدروكسي إيثيل)-1-بيبرازين إيثان سلفونيك؛ برقم هيدروجيني يبلغ 7.5 1.5 مللي مولار من حمض (gla Gali أمين تترا أسيتيك؛ 150 مللي مولار من كلوريد الصوديوم ¢(NaCl) sodium chloride 0 710 جليسرول cglycerol 1 مجم/ ملليلتر من ألبيومين البيض covalbumin و5 مللي مولار من داي ثيو ثريتول» باستخدام 0.025 ميكرو كوري بكل عين من 311-إسترادايول 311-88080101 (118 كوري/مللي مول» 1 Ae كوري/ ملليلتر)» 7.2 نانو جم/ العين من مستقبل الإستروجين ألفا (من النوع غير المعالج)؛ أو 7.2 نانو جم/ العين من مستقبل الإستروجين ألفا (طفرة .(Y537S قم بإضافة مركب الاختبار عند 10 تركيزات مختلفة 5 تتراوح من 10000 نانو مولار إلى 0.5 نانو مولارء وتحديد الارتباط غير النوعي في وجود 1 ميكرو مولار من 8-17 إسترادايول estradiol 17-0. قم بحضانة تفاعل الارتباط (140 ميكرو لتر) لمدة 4 ساعات عند درجة حرارة الغرفة؛ ثم قم بإضافة محلول منظم من ديكستران البارد.-
الفحم النباتي cold dextran-charcoal buffer )70 ميكرو لتر) (يحتوي بكل 50 lle من المحلول المنظم للاختبار cassay buffer على 0.75 جم من الفحم النباتي و0.25 جم من ديكستران) إلى كل تفاعل. قم بخلط الأطباق sad 8 دقائق على جهاز هزاز مداري عند 4 درجة مئوية ثم قم بالمعالجة بالطرد المركزي عند 3000 لفة في الدقيقة عند 4 درجة مئوية لمدة 10 دقائق. قم بنقل جزء متساوي (120 ميكرو لتر) من الخليط إلى طبق مسطح القاع أبيض اللون به 96 عين آخر (Costar) وقم بإضافة المائع الومضي Perkin Elmer Optiphase Supermix )175 ميكرو لتر) إلى كل عين. قم بإحكام الإغلاق على الأطباق وقم بالرج بقوة على جهاز هزاز مداري. بعد حضانة لمدة 2.5 ساعة؛ قم بقراءة الأطباق في عداد Microbeta عد17811. قم بحساب تركيز عامل ينتج 0 من أقصى استجابة تثبيطية باستخدام 0 مواءمة منحنيات لوجستية رباعية المتغيرات وقم بحساب التثبيط 7 عند 10 ميكرو مولار. قم بتحويل قيم تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية للمركب إلى ثابت التثبيط باستخدام معادلة 0:05012-ع05608. توضح نتائج هذا الاختبار أن المركب وفقًا للمثال 1 يرتبط بمستقبل الإستروجين ألفا الناتج عن عودة الارتباط الجيني من النوع غير المعالج بثابت التثبيط (نانو مولار) يبلغ 3.78 + 0.74 Laing (3=n) بطفرة مستقبل الإستروجين ألفا (75375) ب 5 ثابت التثبيط (نانو مولار) يبلغ 21.24 + 2.12 (دد3). توضح نتائج هذا الاختبار ألفة ارتباط وقوة المركب الموضح ضد مستقبل الإستروجين ألفا من النوع غير المعالج والبروتينات المطفرة (75375 (ESRI اختبار تحلل مستقبل الإستروجين ألفا في الخلايا al سى أف 7 MCF7 0 يكون غرض اختبار تحلل مستقبل الإستروجين ألفا التالي قياس تحلل مستقبل الإستروجين ألفا بواسطة مركب الاختبار في سلالة خلايا سرطان ثدي موجبة لمستقبل الإستروجين ألفا مثل -MCF7 قم بزراعة الخلايا MCF7 (التي تم شراؤها من (ATCC HTB-22 في أوساط الوسط Eagle المعدل ب Dulbecco مكملة بنسبة 710 المصل البقري الجنيني» 0.01 مجم/ ملليلتر من 5 الإنسولين البشري human insulin 1 و71 من المضادات الحيوية antibiotics بنسيلين «تللزعندعم/ستريتومايسين streptomycin وقم بوضعها في أطباق مسطحة القاع بها 384 عين عند
كثافة تبلغ 4000 خلية بكل عين في أوساط الوسط Eagle المعدل ب Dulbecco خالية من الفينول الأحمر )20 ميكرو لتر) تحتوي على 710 من المصل البقري الجنيني المنزوع منه الفحم النباتي . قم بحضانة الخلايا طوال الليل في حضّانة مزرعة cell culture incubator WIA (75
ثانى أكسيد الكربون ¢(CO,) carbon dioxide 795 رطوية نسبية و37 درجة مئوية) واسمح
بارتباط الخلايا بالطبق. في اليوم التالي قم بتلقيم الخلايا مركب الاختبار. قم باستخدام موزع صوتي Echo 5 لتحضير التخفيفات التسلسلية من مركب الاختبار (1: 3) في نطاق من 6 ميكرو
مولار إلى 0.0003 ميكرو مولار. أضف إلى الخلايا 5 ميكرو لتر من طبق التخفيف التسلسلي
إلى طبق الخلايا الذي ينتج تركيز داي ميثيل سلفوكسيد نهائي يبلغ 70.2 مع نطاق جرعات من
تركيز مركب الاختبار النهائي بين 2 و0.0001 ميكرو مولار. لأقصى نقطة؛ قم باستخدام أوساط
0 تحتوي على 70.2 من داي ميثيل سلفوكسيد ولأدنى نقطةء قم باستخدام فولفيسترانت fulvestrant مخفف عند 2 ميكرو مولار من التركيزات النهائية في أوساط growth media gail التي تحتوي
على 70.2 داي ميثيل سلفوكسيد. بعد إعطاء جرعات من مركب الاختبار» قم بحضانة أطباق الخلايا عند 37 درجة مئوية و75 ثانى أكسيد الكربون لمدة 24 ساعة. قم بتثبيت الخلايا بواسطة إضافة 714 بارا-فورمالد هايد para-formaldehyde )10 ميكرو لتر) لمدة 30 دقيقة عند درجة
5 حزارة الغرفة. قم بغسل الخلايا مرة واحدة ب محلول ملحي منظم بفوسفات )20 ميكرو لتر) وقم بالحضانة مع محلول ملحي منظم بفوسفات )20 ميكرو لتر) يحتوي على 70.5 (حجم/ حجم) من
sad TWEEN® 0 1 ساعة. قم بغسل الخلايا بمحلول ملحي منظم بفوسفات يحتوي على
5 من 20 TWEEN® )2 ضعف) وقم بتعطيل النشاط ب 73 ألبومين المصل البقري في
محلول ملحي منظم بفوسفات يحتوي على 70.05 من 20 TWEEN® و 70.1 من TRITON™
0 100 (20 ميكرو لتر/ العين) لمدة 1 ساعة عند das حرارة الغرفة. قم بإضافة 1: 500 من الجسم المضاد ا لأولي Primary antibody )20 ميكرو لتر) (تخفيف الجسم المضاد أحادي النسيلة monoclonal rabbit antibody من أرنب مستقبل الإستروجين Wl (النسخة HRM-9101-S (SP1
(Thermo Scientific في 1 ألبومين المصل البقري في محلول ملحي منظم بفوسفات يحتوي على
5 من 20 TWEEN® بكل عين؛ قم بإحكام إغلاق الأطباق وقم بحضاتتها طوال الليل عند
5 4 درجة مثوية. في اليوم التالي قم بغسل الخلايا بمحلول ملحي منظم بفوسفات يحتوي على 5 من 20 TWEEN® )2 ضعف) وقم بالحضانة مع الجسم المضاد الثانوي secondary
antibody )20 ميكرو لتر/ العين) (تخفيف 1: 1000 جسم مضاد لمجملويولين مناعى م (IgM) Immunoglobulin M لأرنب من ماعز 488 (ALEXA FLUOR™ في محلول ملحي منظم بفوسفات يبلغ 71 ألبومين المصل البقري لمدة 105 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة. بعد غسل الأطباق بمحلول ملحي منظم بفوسفات 20x2) ميكرو Al (( قم بإضافة رايبو نوكلياز (Sigma) 5 (20 ميكرو لتر من 50 ميكرو جم/ ملليلتر) وتخفيف يوديد بروييديوم propidium iodide 1: 0 في محلول ملحي منظم بفوسفات بكل عين (20 ميكرو لتر). قم بإحكام إغلاق الأطباق وقم بحضانتها 1 ساعة عند درجة حرارة الغرفة على المنضدة (المحجوية عن الضوء). قم يفحص الأطباق ب ACUMEN EXPLORER™ [مقياس sae الخلايا في الأطباق المجهرية الفلوري الماسح بالليزر الذي يتم تصنيعه بواسطة [TTP LABTECH LTD لقياس مستقبل الإستروجين 0 ألفا. يستند تحليل الصور على الإشارات الفلورية الخلوية cellular fluorescent signals لتحديد الخلايا الموجبة Lpositive cells قم بتحديد الخلايا الموجبة لمستقبل الإستروجين بواسطة متوسط الشدة. قم باستخدام إجمالي الشدة عند 640-575 نانو jie من يوديد البروبيديوم/بحمض دايوكسي رايبونوكليك لتحديد الخلايا الفردية. تكون مخرجات الاختبار هي الخلايا الموجبة لمستقبل الإستروجين 7. قم بتحديد تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية بواسطة مواءمة المنحنيات حسب المعادلة اللوجستية رباعية المتغيرات لكل من المخرجات باستخدام GENE .DATA™ توضح تتائج هذا الاختبار أن المركب الذي له الصيغة )1( يكون عامل تحلّل مستقبلات الإستروجين الانتقائية له نشاط تحليل قوي لمستقبل الإستروجين ألفا في الخلايا. على وجه التحديد؛ توضح النتائج التحلل القوي لمستقبل الإستروجين ألفا بواسطة المركب By للمثال 1 0 في WIA سرطان الثدي 80077. باستخدام هذا الاختبار» تكون قيمة تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية النسبية (ميكرو مولار) للمركب Gg للمثال 1 2.16 + 0.96 نانو مولار (ه-15). اختبار حث مستقبل البروجستيرون ألفا في الخلايا 11077 5 يكون غرض اختبار حث مستقبل البروجستيرون ألفا التالي تحديد إذا ما كان لمركب الاختبار نشاط مساعد ضد مستقبل مستقبل الإستروجين ألفا (يتوقع أن تنشط المادة المساعدة المستقبل).
قم بزراعة MCF7 (التي تم شراؤها من 1113-22 (ATCC في أوساط الوسط Bagle المعدل ب Dulbecco مكملة بنسبة 710 المصل البقري الجنيني؛ 0.01 مجم/ ملليلتر من الإنسولين البشري
1 و21 من المضادات الحيوية بنسيلين/ستربتومايسين وقم بوضع الخلايا (قبل أن تصبح متشابكة النسيج الخلوي بنسبة 770) في أطباق مسطحة القاع بها 384 عين عند كثافة تبلغ 4000 خلية
بكل عين بحجم يبلغ 20 ميكرو لتر في أوساط الوسط Eagle المعدل ب Dulbecco خالية من الفينول phenol الأحمر تحتوي على 710 المصل (gad) الجنيني (منزوع الفحم النباتي). قم بحضانة WAN طوال الليل في حضّانة مزرعة WIA (75 ثانى أكسيد الكريون» 795 رطوية نسبية عند 37 درجة (Augie واسمح بارتباط الخلايا بالطبق. في اليوم التالي؛ قم بتلقيم الخلايا
مركب الاختبار. قم باستخدام موزع صوتي 555 Echo لتحضير التخفيفات التسلسلية من المركب
0 (3:1) في نطاق من 6 ميكرو مولار إلى 0.0003 ميكرو مولار. أضف إلى الخلايا مركب الاختبار (5 ميكرو لتر) من طبق التخفيف التسلسلي إلى طبق الخلايا الذي ينتج تركيز داي ميثيل سلفوكسيد نهائي يبلغ 70.2 بنطاق جرعات من تركيز مركب الاختبار النهائي بين 2 و0.0001
ميكرو مولار. لأقصى نقطة قم باستخدام أوساط تحتوي على 70.2 من داي ميثيل سلفوكسيد
ولأدنى نقطة؛ قم باستخدام فولفيسترانت مخفف عند 2 ميكرو مولار من التركيزات النهائية في
5 أوساط النمو التي تحتوي على 70.2 داي dine سلفوكسيد. بعد إعطاء جرعات من مركب الاختبار» قم بحضانة أطباق الخلايا عند 37 درجة مئوية و75 ثانى أكسيد الكربون لمدة 24 ساعة. قم بتثبيت الخلايا بواسطة إضافة 714 بارا-فورمالدهايد (10 ميكرو لتر) لمدة 30 دقيقة
عند درجة حرارة الغرفة. قم بغسل الخلايا مرة واحدة بمحلول ملحي منظم بفوسفات (20 ميكرو لتر)
وقم بالحضانة مع محلول ملحي منظم بفوسفات (20 ميكرو لتر) يحتوي على 70.5 (حجم/ حجم)
من 20 TWEEN® لمدة 1 ساعة. قم بغسل الخلايا مرتان بمحلول ملحي منظم بفوسفات )20 ميكرو لتر) يحتوي على 70.05 من 20 TWEEN® وقم بتعطيل النشاط ب 73 ألبومين المصل
البقري في محلول ملحي منظم بفوسفات يحتوي على 70.05 من 20 TWEEN® و 70.1 من TRITONT™ X-100 (20 ميكرو لتر/ العين) لمدة 1 ساعة عند درجة حرارة الغرفة. قم بإضافة 1:
0 من تخفيف الجسم المضاد الأولي (20 ميكرو لتر) (الجسم المضاد البشري من فأر أحادي
5 النسيلة لمستقبل البروجيسترون؛ النسخة (M3569 PgR 636 Dako في 71 ألبومين المصل
البقري/محلول ملحي منظم بفوسفات مع 0.05 من 20 TWEEN® بكل عين؛ قم بإحكام إغلاق الأطباق وقم بحضانتها طوال الليل عند 4 درجة مئوية. في اليوم التالي؛ قم بغسل الخلايا بمحلول ملحي منظم بفوسفات يبلغ 70.05 من 20 TWEEN® )20%2 ميكرو لتر) وقم بالحضانة مع الجسم المضاد الثانوي (20 ميكرو لتر/ العين) (تخفيف 1: 1000< جسم مضاد لجلويولين مناعى م لأرنب من ماعز 488 (ALEXA FLUOR™ في محلول ملحي منظم بفوسفات يبلغ 71 ألبومين المصل البقري لمدة 105 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة. بعد الغسل بمحلول ملحي منظم بفوسفات (20*2 ميكرو لتر)؛ قم بإضافة رايبو نوكلياز (20 ميكرو لتر من 50 ميكرو جم/ ملليلتر) (Sigma) وقم بتخفيف يوديد بروبيديوم 1: 1000 في محلول ملحي منظم بفوسفات JS عين. قم بإحكام إغلاق الأطباق وقم بحضانتها | ساعة عند درجة حرارة 0 الغرفة على المنضدة (المحجوية عن (sell قم بفحص الأطباق ب ACUMEN EXPLORER™ [مقياس عدد الخلايا في الأطباق المجهرية الفلوري الماسح بالليزر الذي يتم تصنيعه بواسطة TTP [LABTECH LTD لقياس مستقبل البروجيسترون ألفا. يستند تحليل الصور على الإشارات الفلورية الخلوية لتحديد الخلايا الموجبة. قم بتحديد الخلايا الموجبة لمستقبل البروجيسترون بواسطة متوسط الشدة. قم باستخدام إجمالي الشدة عند 640-575 نانو jie من يوديد البروبيديوم/بحمض دايوكسي 5 رايبونوكليك لتحديد الخلايا الفردية. تكون مخرجات الاختبار هي الخلايا الموجبة لمستقبل البروجيسترون 7. قم بتحديد تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية بواسطة مواءمة المنحنيات حسب المعادلة اللوجستية رباعية المتغيرات لكل من المخرجات باستخدام GENE .DATA™ باستخدام هذا الاختبار؛ تكون تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية النسبية (ميكرو 0 مولار) من المركب وفقًا للمثال 1 > 2 ميكرو مولار. توضح نتائج هذا الاختبار عدم وجود نشاط مساعد له دلالة إحصائية Lag للمثال 1 في خلايا سرطان الثدي JMCF7 توضح هذه النتائج أيضًا أن المركب Bag للمثال 1 يكون مضاد قوي ل مستقبل الإستروجين ألفا في خلايا سرطان الثدي MCF7 5 اختبار الخلايا المثبطة لمستقبل البروجستيرون ألفا (التضاد الوظيفي لمستقبل الإستروجين ألفا) في الخلايا MCF7-ESR1 Y537N 682 CRISPR
يكون غرض اختبار الخلايا المثبطة لمستقبل البروجستيرون ألفا التالي (التضاد الوظيفي لمستقبل الإستروجين ألفا) تحديد النشاط المضاد لمركب الاختبار ضد مستقبل الإستروجين ألفا المطفُر 7. يتوقع أن تعيق مادة مضادة في هذا الاختبار عمل مستقبل مستقبل الإستروجين ألفا. مستقيل البروجستيرون (PGR) Progesterone Receptor alpha Wl هو هدف نسخي بعدي لمستقبل الإستروجين ألفا وبالتالي يتوقع أن المادة المضادة لمستقبل الإستروجين ألفا تثبط التعبير
عن مستقبل البروجستيرون ألفا. قم بزراعة 7753718-682 MCF7-ESR1 (التي يتم إنتاجها بواسطة التعديل الوراثي CRISPR/Cas9 للجين إى أس آر 1 2581 في الخلايا <MCF7 النسخة رقم 682) في أوساط الوسط Eagle المعدل ب Dulbecco مكملة بنسبة 710 المصل البقري الجنيني و71 من المضادات الحيوية 0 بنسيلين/ستريتومايسين وقم بوضع الخلايا J) أن تصبح متشابكة النسيج الخلوي بنسبة 770) في أطباق مسطحة القاع بها 384 عين عند كثافة تبلغ 4000 خلية JS عين في أوساط الوسط Eagle المعدل ب Dulbecco خالية من الفينول الأحمر تبلغ 710 المصل البقري الجنيني (حجم يبلغ 20 ميكرو لتر) (منزوع الفحم النباتي). قم بحضانة الخلايا طوال الليل في حضّانة مزرعة خلايا (75 ثانى أكسيد الكريون» 795 رطوية نسبية و37 درجة مئوية) واسمح بارتباط الخلايا 5 بالطبق. في اليوم التالي قم بتلقيم WA مركب الاختبار. قم باستخدام موزع صوتي 555 Echo لتحضير التخفيفات التسلسلية من المركب (1: 3) في نطاق من 6 ميكرو مولار إلى 0.0003 ميكرو مولار. أضف إلى الخلايا 5 ميكرو لتر من طبق التخفيف التسلسلي إلى طبق الخلايا الذي ينتج تركيز داي ميثيل سلفوكسيد نهائي يبلغ 70.2 مع نطاق جرعات من تركيز مركب الاختبار النهائي بين 2 و0.0001 ميكرو مولار. لأقصى نقطة قم باستخدام أوساط تحتوي على 70.2 من 0 داي ميثيل سلفوكسيد ولأدنى نقطة؛ قم باستخدام فولفيسترانت مخفف عند 2 ميكرو مولار من التركيزات النهائية في أوساط النمو التي تحتوي على 70.2 داي ميثيل سلفوكسيد. بعد إعطاء جرعات من مركب الاختبار» قم بحضانة أطباق الخلايا عند 37 درجة مئوية و75 ثانى أكسيد الكريون لمدة 72 ساعة. قم بتثبيت الخلايا بواسطة إضافة 714 بارا-فورمالدهايد (10 ميكرو لتر) لمدة 30 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة. قم بغسل الخلايا بمحلول ملحي منظم بفوسفات 20x1) 5 ميكرو لتر) وقم بحضانتها مع محلول ملحي منظم بفوسفات )20 ميكرو لتر) يحتوي على 70.5 (حجم/ حجم) من 20 TWEEN® لمدة 1 ساعة. قم بغسل الخلايا بمحلول ملحي منظم بفوسفات
20x2) ميكرو لتر)ء 70.05 من 20 ©177122811؛ وقم بتعطيل النشاط ب 73 ألبومين المصل البقري/محلول ملحي منظم بفوسفات يبلغ 70.05 من 20 ©1178811؛ 70.1 من TRITON™ X-100 (20 ميكرو لتر/ العين) لمدة 1 ساعة عند درجة حرارة الغرفة. قم بإضافة 1: 500 من تخفيف الجسم المضاد الأولي (20 ميكرو لتر) (الجسم المضاد البشري من فأر أحادي النسيلة لمستقبل البروجيسترون؛ النسخة (M3569 PgR 636 Dako في 71 ألبومين المصل البقري/محلول ملحي منظم بفوسفات يبلغ 0.05 من 20 JS TWEEN® عين؛ قم بإحكام إغلاق الأطباق وقم بحضانتها طوال الليل عند 4 درجة Asie في اليوم التالي» قم بغسل الخلايا بمحلول ملحي منظم بفوسفات يبلغ 70.05 من © 20x2) ميكرو لتر) وقم بحضانتها مع الجسم المضاد الثانوي (20 ميكرو لتر/ العين) (تخفيف 1: 1000 0 جسم مضاد لجلوبولين مناعى م لأرنب من ماعز 488 (ALEXA FLUOR™ في محلول ملحي منظم بفوسفات يبلغ 71 ألبومين المصل البقري لمدة 105 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة. بعد الغسل بمحلول ملحي منظم بفوسفات (20*2 ميكرو لتر)؛ قم بإضافة رايبو نوكلياز (20 ميكرو لتر من 50 ميكرو جم/ ملليلتر) (Sigma) وقم بتخفيف يوديد بروييديوم 1: 1000 في محلول ملحي منظم بفوسفات JS عين. قم بإحكام إغلاق الأطباق وقم بحضانتها | ساعة عند درجة حرارة 5 الغرفة على المنضدة (المحجوية عن الضوء). قم بفحص الأطباق ب ACUMEN EXPLORER™ [مقياس عدد الخلايا في الأطباق المجهرية الفلوري الماسح بالليزر الذي يتم تصنيعه بواسطة TTP [LABTECH LTD لقياس مستقبل البروجيسترون ألفا. يستند تحليل الصور على الإشارات الفلورية الخلوية لتحديد الخلايا الموجبة. قم بتحديد الخلايا الموجبة لمستقبل البروجيسترون بواسطة متوسط الشدة. قم باستخدام إجمالي الشدة عند 640-575 نانو jie من يوديد البروبيديوم/بحمض دايوكسي 0 رايبونوكليك لتحديد الخلايا الفردية. تكون مخرجات الاختبار هي الخلايا الموجبة لمستقبل البروجيسترون 7. قم بتحديد تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية بواسطة مواءمة المنحنيات حسب المعادلة اللوجستية رباعية المتغيرات لكل من المخرجات باستخدام GENE .DATA™ باستخدام هذا Lal ¢ تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية النسبية (نانو مولار) 5 .من المركب Gy للمثال 1 تكون 7.602 + 4.804 نانو مولار («-14). توضح هذه النتائج التثبيط القوي لمستقبل البروجستيرون ألفا والتضاد الوظيفي بواسطة المثال 1 في خلايا سرطان
الثدي Y537N) MCF7 8511 طفرة متغايرة الزيجوت). وهكذاء يكون المركب وفقًا للمثال 1 alias قوي لطفرة مستقبل الإستروجين ألفا (Y537N) ومثبط قوي للانتساخ الذي يسببه مستقبل الإستروجين ألفا. يكون مستقبل البروجستيرون ألفا أيضًا هدف نسخي لمستقبل الإستروجين ألفا وتوضح النتائج من هذا الاختبار تثبيط قوي لنسخ مستقبل البروجستيرون ألفا الذي يسببه مستقبل الإستروجين ألفا. اختبار الخلايا المثبطة لمستقبل البروجستيرون ألفا (التضاد الوظيفي لمستقبل الإستروجين ألفا) في الخلايا MCF7 يكون غرض اختبار الخلايا المثبطة لمستقبل البروجستيرون ألفا التالي (التضاد الوظيفي لمستقبل 0 الإستروجين ألفا) تحديد النشاط المضاد لمركب الاختبار ضد مستقبل الإستروجين ألفا. يتوقع أن تعيق مادة مضادة في هذا الاختبار عمل مستقبل الإستروجين ألفا. مستقبل البروجستيرون ألفا هو هدف نسخي بعدي لمستقبل الإستروجين Wl وبالتالي يتوقع أن المادة المضادة لمستقبل الإستروجين ألفا تثبط التعبير عن مستقبل البروجستيرون ألفا. قم بتنفيذ ظروف الاختبار على النحو المذكور بالتفصيل في اختبار Jail Cell base Acumen 5 مستقبل الإستروجين ألفا أعلاه؛ باستخدام سلالة الخلايا MCF7 باستثناء eal قبل توزيع مركب الاختبار» قم بإزالة الأوساط من طبق WAY وقم بمعالجة جميع العيون مسبقًا باستثناء عيون مجموعة المقارنة السالبة (العمود 24 من الطبق) بأوساط الاختبار التي تحتوي على 0.47 نانو مولار من إسترادايول estradiol لمدة 30 دقيقة. في هذا الاختبار» قم بإجراء التلطيخ المناعي للكشضف عن مستقبل البروجستيرون Wl وقم بفحص الأطباق ب ACUMEN EXPLORER™ 0 ([مقياس عدد الخلايا في الأطباق المجهرية الفلوري الماسح بالليزر الذي يتم تصنيعه بواسطة TTP [LABTECH LTD لقياس مستقبل البروجستيرون ألفا. يستند تحليل الصور على الإشارات الفلورية الخلوية لتحديد الخلايا الموجبة. قم بتحديد الخلايا موجبة مستقبل البروجستيرون ألفا بواسطة متوسط الشدة. قم باستخدام إجمالي الشدة عند 640-575 من يوديد البروبيديوم/(حمض دايوكسي رايبونوكليك لتحديد الخلايا الفردية. تكون مخرجات الاختبار هي الخلايا موجبة مستقبل 5 البروجستيرون ألفا 7. قم بتحديد تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية بواسطة
مواءمة المنحنيات حسب المعادلة اللوجستية رباعية المتغيرات لكل من المخرجات باستخدام .GENE DATA™ باستخدام هذا الاختبار» تكون تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية النسبية (نانو مولار) من المركب Uy للمثال 1 في هذا الاختبار 15.75 + 9.037 نانو مولار (ه-15). توضح تتائج هذا الاختبار التثبيط القوي لمستقبل البروجستيرون ألفا والتضاد الوظيفي بواسطة المثال 1 في WDA سرطان الثدي 24077. وهكذاء يكون المركب lg للمثال 1[ مضاد قوي لبروتين مستقبل الإستروجين ألفا من النوع غير المعالج ومثبط قوي للانتساخ الذي يسببه مستقبل الإستروجين ألفا. يكون مستقبل البروجستيرون ألفا أيضًا هدف نسخي لمستقبل الإستروجين ألفا وتوضح النتائج من هذا الاختبار تثبيط قوي لنسخ مستقبل البروجستيرون ألفا 0 الذي يسببه مستقبل الإستروجين ألفا. اختبار تكاثر خلية في MCF7-ESR1 Y537N-682 3 MCF7 يكون غرض اختبارات ISS الخلايا التالية بصفة dale الكشضف Lee إذا كان لمركب الاختبار تأثيرات على تكاثر (DA قابلية بقاء LAY على قيد الحياة؛ وسمية الخلايا استجابة للعلاج 5 في تجارب مزرعة الخلايا. تتم مراقبة تكاثر الخلايا بواسطة مراقبة عدد الخلايا بمرور الزمن ويسمح اختبار يوديد البرويدوديوم المستخدم بقياس مستمر لقابلية بقاء الخلايا على قيد الحياة بمرور الزمن. قم بتكوين بلورات الخلايا ll) MCF7 تم شضراؤها من 1113-22 (ATCC عند كثافة تبلغ 2000 خلية JS عين في أوساط الوسط Eagle المعدل ب Dulbecco خالية من الفينول الأحمر تبلغ 0 210 المصل البقري الجنيني (حجم يبلغ 20 ميكرو لتر) (منزوع الفحم النباتي) في طبق مزرعة WDA شفاف القاع به 384 عين. قم بوضع 682- All) MCF7-ESRY537N يتم إنتاجها بواسطة التعديل الوراثي CRISPR/Cas9 للجين ESRI في الخلايا 204077 النسخة رقم 682) في أوساط الوسط Eagle المعدل ب Dulbecco مكملة بنسبة 710 المصل البقري الجنيني؛ و71 من المضادات الحيوية بنسيلين/إستريتومايسين عند كثافة تبلغ 1000 خلية بكل عين. قم بحضانة 5 الأطباق عند 37 درجة مئوية و75 ثانى أكسيد الكربون. في اليوم التالي قم بتلقيم الخلايا مركب الاختبار. قم باستخدام موزع صوتي 555 Echo لتحضير التخفيفات التسلسلية من مركب الاختبار
(1: 3) في نطاق من 60 ميكرو مولار إلى 0.003 ميكرو مولار. أضف إلى الخلايا 5 ميكرو لتر من طبق التخفيف التسلسلي إلى طبق (DAN مما يؤدي إلى إنتاج تركيز داي ميثيل سلفوكسيد نهائي يبلغ 70.2 مع نطاق جرعات من تركيز مركب الاختبار النهائي بين 20 و 0.001 ميكرو مولار. لأقصى نقطة قم باستخدام أوساط تحتوي على 70.2 من داي ميثيل سلفوكسيد ولأدنى نقطة 5 .قم باستخدام فولفيسترانت مخفف عند 2 ميكرو مولار من التركيزات النهائية في أوساط النمو التي تحتوي على 70.2 داي ميثيل سلفوكسيد. بعد إعطاء جرعات من مركب الاختبار» قم بحضانة أطباق الخلايا عند 37 درجة مئوية و75 ثانى أكسيد الكربون. بعد سبعة أيام من إضافة مركب الاختبار» قم بإزالة الأطباق من الحضّانة وقم بإضافة إيثانول بارد 796 (65 ميكرو لتر) إلى كل عين. بعد 30 دقيقة؛ قم بإزالة الأوساط وقم بإضافة رايبو نوكلياز (20 ميكرو لتر من 50 ميكرو 10 جم/ ملليلتر) (Sigma) وقم بتخفيف يوديد بروبيديوم 1: 1000 في محلول ملحي منظم بفوسفات بكل عين. قم بإحكام إغلاق الأطباق وقم بحضانتها 1 ساعة عند درجة حرارة الغرفة على المنضدة (المحجوية عن الضوء). قم بفحص الأطباق ب ACUMEN EXPLORER™ [مقياس عدد الخلايا في الأطباق المجهرية الفلوري الماسح بالليزر الذي يتم تصنيعه بواسطة [TTP LABTECH LTD تنمو سلالة الخلايا 14077 IK se تكتلات؛ قد لا يمكن استخدام عدد الخلايا Jie عدد الأشياء كقراءة مخرجة؛ لذا يمكن تقييم عدد الخلايا عبر الرقم التقديري للخلايا (المحسوب من خلال متغير المساحة (نسبة إجمالي مساحة إجمالي مجموعة الخلايا (نطاق معين لشدة ذروة peak intensity (PI) أف أل-1 FL-1 ومتوسط مساحة مجموعة الخلايا المفردة (المحددة من خلال المحيط)). قم بتحديد تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية بواسطة مواءمة المنحنيات حسب المعادلة اللوجستية رياعية المتغيرات لكل من المخرجات باستخدام GENE DATA™ 0 باستخدام هذا الاختبارء تكون تركيز عامل ينتج 750 من أقصى استجابة تثبيطية النسبية (نانو مولار) من المركب ay للمثال 1 في MCF7 ESRI من النوع غير المعالج 9.243 + 1.741 نانو مولار (2=n) وتكون في الخلايا المطفرة 17753717 MCF7-ESR1 7.960 + 3.691 نانو مولار .(6=n) تظهر هذه النتائج نشاط مضاد للتكاثر قوي وتثبيط لنمو الخلايا بواسطة المثال 1 في خلايا سرطان الثدي ESR1) MCF7 من النوع غير المعالج) 5 MCF7 (الطفرة ESR1 5 175373).
اختبار التثبيط المستهدف في جسم الكائن الحي (IVTI) In Vivo Target inhibition (الاختبار تفاعل النسخ العكسي الكمي لسلسلة بوليمراز لمستقبل البروجستيرون ألفا) في الأورام MCF7 يكون غرض اختبار التثبيط المستهدف في جسم الكائن الحي المذكور قياس قدرة مركب الاختبار (عامل تحلّل مستقبلات الإستروجين الانتقائية) على تثبيط التعبير الوراثي عن مستقبل البروجيسترون Wl (النسخ) بعد مستقبل الإستروجين ll في الأورام خارجية المنشاً المغروسة في الفئران. قم بغرس 1075 © من خلايا سرطان الثدي 14077 ال HTB-22 ATCC) ER+ve #( في إناث الفئران (a> 25-22) NOD SCID من Envigo RMS, Inc., Madison, Wisconsin تحت الجلد في منطقة الخاصرة اليمنى في 1: 1 من محلول HBSS + MATRIGEL™ )200 ميكرو لتر). 0 قم بغرس LS 17- م إسترادايول )0.18 مجم/ الكرية؛ إطلاق لمدة 90 يوم؛ من Innovative (research تحت الجلد قبل 1 يوم من غرس خلايا الورم. قم بقياس نمو الورم ووزن الجسم مرتان في الأسبوع بدءًا من اليوم السابع بعد الغرس. عندما تصل أحجام الورم إلى 350-250 ملليمترة؛ قم بتوزيع الحيوانات عشوائيًا وقم بتجميعها في مجموعات من خمسة حيوانات. قم بإعطاء جرعة إلى الحيوانات من إما مركب الاختبار في مادة ناقلة معينة (71 هيدروكسي إيثيل سللولوز fhydroxyethylcellulose 5 70.25 من 80 /TWEEN® 70.05 من عامل مضاد لتكوين الرغوة في ماء منقى) أو المادة الناقلة وحدها عن طريق الفم لمدة 3 أيام وقم تجميع الأورام والدم عند الفووصل الزمنية المرغوب فيها بعد أخر جرعة. قم بقتل الحيوانات باستخدام التخدير بأيزو فلوران isoflurane زائد خلع العنق. قم بالتجميد الومضي للأورام وقم بالتخزين عند -80 درجة مئوية حتى المعالجة لعزل الحمض النووي الرايبوزي واختبار تفاعل النسخ العكسي الكمي لسلسلة بوليمراز. قم بتجميع 0 الدم في أنابيب حمض إيثيلين داي أمين تترا أسيتيك؛ قم بإبطاء السرعة لاستخلاص البلازماء وقم بالتجميد عند -80 درجة مئوية في طبق به 96 عين. قم بتحديد مرات تعرض مركب الاختبار للضوء باستخدام مقياس الطيف الكتلي. قم بسحق الأورام في النيتروجين السائل وقم بالتحليل في 1 ضعف من محلول منظم لتحليل الحمض النووي الرايبوزي (من أطقم Jie الحمض النووي الرايبوزي) باستخدام خرزات Matrix D «MP Biomedical) 5 #6913-500( في ماكينة توزيع الخلايا MP) FASTPREP-24™ (Biomedical قم بنقل نواتج تحليل الورم إلى أنابيب نظيفة بعد التدوير عند 14000 لفة في
الدقيقة لمدة 20 دقيقة عند 4 درجة مئوية. قم بعزل الحمض النووي الرايبوزي من نواتج تحليل الورم tumor lysates باستخدام الطاقم (Invitrogen #1218301 8A) PURELINK® RNA Mini أو الطاقم Qiagen #74104) RNeasy Mini 5 #74106( قم بإزالة ملوثات حمض دايوكسي رايبونوكليك بامستخدام المعدات (Invitrogen #12185010) PURELINK® DNase أو المعدات (Qiagen #79254) RNase-Free DNase 5 قم بقياس تركيز الحمض النووي الرايبوزي المعزول بواسطة تخفيف العينات في ماء خالي من رايبو نوكلياز وقياس الامتصاص عند 260 نانو متر على قارئ أطباق (506000112*190). قم بطرح متوسط قياس الامتصاص الذي يبلغ 260 نانو متر للعينة الفارغة (ماء خالي من رايبو نوكلياز فقط) من القياسات التي تبلغ 260 نانو متر لجميع عينات الحمض النووي الرايبوزي الأخرى. قم بتخفيف عينات الحمض النووي الرايبوزي إلى تركيزات 0 متساوية في الماء الخالي من رايبو نوكلياز. قم بتخليق حمض دايوكسي رايبونوكليك التكاملي من الحمض النووي الرايبوزي المخفف باستخدام نظام تخليق الجديلة الأولى لتفاعل النسخ العكسي لسلسلة بوليمراز («10710086» #18080-051). لإجراء تفاعل النسخ العكسي الكمي لسلسلة بوليمراز » Vl قم بتخفيف حمض دايوكسي رايبونوكليك التكاملي في الماء الخالي من رايبو نوكلياز. قم بدمج 2 ضعف من خليط Blue qPCR ROX المطلق «(AB-4139/A# Thermo) البادئ مستقبل البروجستيرون ألفا ¢(Hs01556702_m1 Thermo) وحمض دايوكسي رايبونوكليك التكاملي المخفف لكل تفاعل في طبق تفاعل سلسلةة بوليمراز «Applied Biosystems) 9.م.. قم بتضخيم حمض دايوكسي رايبونوكليك التكاملي بواسطة حضانة العينات لمدة 2 دقيقة عند 50 درجة مئوية يتبع ذلك 15 دقيقة عند 95 درجة مئوية في المدور الحراري (نظام كشف المتواليات 7900117 (ABI Prism استمر في الحضانة عند 95 درجة مئوية لمدة 15 ثانية 0 يتبع ذلك 50 درجة Logie لمدة 60 ثانية لإجمالي 40 دورة. يتم قياس الدورات عن Gob جين الإدامة housekeeping gene واستخدامها لحساب تثبيط مستقبل البروجستيرون ألفا 7# مقارنة بالمادة الناقلة وحدها. قم بتحليل كل عينة في ثنائيات وقم بامستخدام متوسط الأرقام لعمليات الحساب. قم بحساب النسبة المئوية للتثبيط المستهدف (مستقبل البروجستيرون ألفا) باستخدام
XL ومواءمة Excel للمثال 1 يثبط التعبير عن مستقبل البروجستيرون ألفا Bay توضح تتائج هذا الاختبار أن المركب 25 في نموذج الطعم الخارجي للورم. بالإضافة إلى ذلك؛ يثبط المركب وفقًا للمتال 1 التعبير عن
مستقبل البروجستيرون ألفا بنسبة -757 في نموذج الطعم الخارجي للورم لمدة 24 ساعة بجرعة تبلغ 30 مجم/ كجم عند إعطاؤه عن طريق الفم. توضح هذه النتائج تثبيط كبير ومستدام Lill المضاد لمستقبل الإستروجين Wl ونشاط النسخ الذي يسببه مستقبل الإستروجين ألفا في جسم الكائن الحي في نموذج خارجي المنشاً للورم.
دراسة تثبيط نمو الورم في جسم الكائن الحي في الورم خارجي المنشاً 14077 المغروس في الفئران يكون غرض اختبار تثبيط نمو الورم خارجي المنشاً التالي قياس التقلص في حجم asl استجابة لإعطاء مركب الاختبار.
0 قم بتوسيع رقعة WIA سرطان الثدي البشرية (ATCC # HTB-22) MCF7 في مزرعة؛ قم بالحصاد وحقن 10X5 “خلية في 1: 1 من محلول HBSS+MATRIGEL™ (200 ميكرو لتر) تحت الجلد على الخاصر اليمنى الخلفية لإناث الفثران ca 25-22) NOD SCID RMS, Inc 0ع2071). قبل day) وعشرون ساعة من غرس الخلايا 24077 قم بغرس كريات الإستروجين (0.18 مجم/ الكرية» B17 إسترادايول» إطلاق لمدة 90 يوم Innovative
(Research 5 تحت الجلد. قم بقياس نمو الورم ووزن الجسم مرتان في الأسبوع بدءًا من اليوم السابع بعد الغرس. عندما تصل أحجام الورم إلى 350-250 ملليمتر؛ قم بتوزيع الحيوانات عشوائيًا وقم بتجميعها في مجموعات من 5 حيوانات. قم بتحضير مركب الاختبار في Bale ناقلة ملائمة (71 هيدروكسي إيثيل سيلولوز/70.25 من 80 [TWEEN® 70.05 من عامل مضاد لتكوين الرغوة في ماء منقى) وقم بإعطاؤه بالتغذية الفموية الجبرية لمدة 42 يوم. قم
0 بتحديد استجابة الورم بواسطة قياس حجم الورم الذي يتم إجراؤه مرتان في الأسبوع أثناء سياق العلاج. قم بأخذ وزن الجسم كقياس عام للسمية كلما يتم قياس حجم الورم. عند استخدامه في هذا الاختبار» وجد أن المركب Gg للمثال 1 له قيم دلتا 77/0 على النحو الذي يتم توفيره في الجدول 6 أدناه. تدل هذه النتائج على أن المركب Gay للمثال 1 يظهر توافر حيوي فموي جيد في Ohl ونشاط مضاد للورم كبير أو انحسارات في حجم الورم في
5 نموذج طعم خارجي من سرطان الثدي البشري MCF7
دراسة تثبيط نمو الورم في جسم الكائن الحي في الورم خارجي المنشاً 14077 المغروس في الفئران الجدول 6 الجرعة ٍ ل" الجدول | Cs 71/0 Wl كجم) ا MCF7 (طعم خارجي من سرطان | 30 -36 <0.001* الثدي) ita تحليل ana الورم على 10 Log وبنية التباين المشترك .SpatialPower 5 *: له دلالة إحصائية (0.05>p) مقارنة de ganas المقارنة المعالجة بمادة ناقلة. يتم حساب دلتا 77/0 عندما يكون حجم الورم عند النقطة النهائية في مجموعة تم علاجها عند أو أعلى من حجم الورم عند الخط القاعدي. الصيغة هي «(C-Co)/(T-T))*100 حيث 1 Cs هما متوسط أحجام الورم عند النقطة النهائية في المجموعة التي تم علاجها أو مجموعة المقارنة؛ على الترتيب. Coy To هما متوسط أحجام الورم عند الخط القاعدي في تلك 0 المجموعات. يتم حساب الانحسار# عندما يكون الحجم عند النقطة النهائية أقل مما عند الخط القاعدي. الصيغة هي To Cus To/(T-T)*100 هو متوسط حجم الورم عند الخط القاعدي للمجموعة التي تم علاجها. يتم استخدام متوسط Grand لجميع المجموعات من الخط القاعدي (التوزيع العشوائي) باليوم 32 لحوسبة تغيير 1/0 7. اختبار التوافر الحيوي الفموي في الجرذان يكون غرض الاختبار التالي توضيح إذا ما كان مركب الاختبار متوفر حيوتا. قم بإعطاء مركب الاختبار إلى الجرذان Sprague-Dawley عن طريق الوريد عند 1 مجم/ كجم 0 (باستخدام المواد الناقلة من أي من: 720 CAPTISOL® في 25 (A مولار من محلول منظم من
فوسفات الصوديوم sodium phosphate buffer كمية كافية من ¢pH2 أو 5 داي ميثيل أمين» إيثانول» 710 بروبيلين جلايكول <propylene glycol 725 2-بيروليدون «2-pyrrolidone 125 ماء منقى) و إعطاء عن طريق الفم عند 10 مجم/ كجم (باستخدام مادة ناقلة من 71 هيدروكسي إيثيل سيلولوز» 70.25 بولي سوربات 80« 70.05 عامل مضاد لتكوين الرغوة -1510 (US 5 وكمية كافية من الماء المنقى). قم بتجميع عينات الدم التسلسلية بعد 0.08 0.25 0.5؛ 1 2 4 1258 ساعة من الجرعة لجرعة عن طريق الوربد كبيرة وبعد 0.25 0.5 1 2 4 8 و12 ساعة من الجرعة بعد إعطاء عن طريق الفم. بعد العلاج بعامل مخثر coagulant حمض إيفيلين داي أمين تترا أسيتيك؛ قم بالحصول على البلازما بواسطة الطرد المركزي وتخزينها عند - 0 درجة مئوية حتى التحليل بواسطة استشراب سائل مع مطيافية الكتلة Liquid chromatography—mass spectrometry | 0 (10-15)/مطيافية الكتلة. قم بتحديد تركيز مركب الاختبار في البلازما وقم بالتحميل في نظام Cus Watson LIMS™ يتم استخدام التحليل غير fall لحساب المساحة تحت المنحنى لكل من الأذرع عن طريق الوريد وعن طريق الفم. قم بحساب التوافر الحيوي الفموي (FZ) عن طريق المعادلة التالية؛ x (DosePO*AUCIV) | (DoselVxAUCPO) = 7 100 5 باستخدام هذا الاختبارء يظهر المركب Bay للمثال 1 dad 17 7 تبلغ 727. يظهر هذا الاختبار أن المثال 1 يتسم بتوافر حيوي فموي جيد.
Claims (9)
- — 4 3 — عناصر الحماية 1 مركب له الصيغة F نل 0 F JF Ll HO كن أو ملح مقبول صيدليًا pharmaceutically acceptable salt منه.
- 2. تركيبة صيدلية pharmaceutical composition تشتمل على مركب وفقًا لعنصر الحماية 1ء أو ملح مقبول aie pharmaceutically acceptable salt Wana في توليفة مع واحد أو أكثر من السواغات cexcipients المواد حاملة carriers أو المواد المخففة diluents المقبولة صيدليًا.
- 3. التركيبة الصيدلية pharmaceutical composition وفقًا لعنصر الحماية 2؛ تشتمل كذلك على 0 واحد أو أكثر من العوامل العلاجية therapeutic agents الإضافية.
- 4 مركب Gy لعنصر الحماية oe] ملح مقبول pharmaceutically acceptable salt Wana منه؛ للاستخدام في العلاج.
- 5 5. مركب Gig لعنصر الحماية ol ملح مقبول pharmaceutically acceptable salt Wana cane للاستخدام في علاج سرطان الثدي breast cancer سرطان المبيض covarian cancer سرطان بطانة الرحم endometrial cancer سرطان البروستاتا eprostate cancer سرطان الرحم cuterine cancer سرطان المعدة cancer 8850126 أو سرطان الرئة Jung cancer
- 6. المركب؛ أو ملح مقبول cate pharmaceutically acceptable salt Gana للاستخدام Lad لعنصر الحماية oS حيث يتم إعطاء المركب عن طريق الفم.— 5 3 —
- 7. المركب للاستخدام Gig لعنصر الحماية 6» أو ملح مقبول صيدليًا pharmaceutically cdi acceptable salt حيث يكون سرطان الثدي breast cancer هو سرطان sal الإيجابي positive breast cancer لمستقبل الإستروجين .estrogen receptor
- 8. المركب للاستخدام Gg لعنصر الحماية 6» أو ملح مقبول صيدليًا pharmaceutically acceptable salt منه؛ Cua يكون سرطان المعدة gastric cancer هو سرطان المعدة الإيجابي positive gastric cancer لمستقبل الإستروجين .estrogen receptor
- 9. المركب للاستخدام Gg لعنصر الحماية 6» أو ملح مقبول صيدليًا pharmaceutically Gua cde acceptable salt 0 يكون سرطان الرثة lung cancer هو سرطان الرئة الإيجابي positive lung cancer لمستقبل الإستروجين .estrogen receptor0. طريقة لتحضير 5-(4-(2-[3-(فلورو ميثيل)أزيتيدين-1 -يل]إيثوكسي)فينيل)-8- (تراي فلورو .| ميثيل)-501-[1]بنزو . بيرانو[4» . 3-©]كينولين-2-اول -13-)-4)-5 (Fluoromethyl)azetidin—1-yllethoxy}phenyl)-8—(trifluoromethyl)-5H- 5 ([1]benzopyrano[4,3—c]quinolin—2-ol تشتمل على تبريد محلول من (4-(2-[3- (فلورو ميقيل)أزيتيدين - 1 -يل]إيثوكسي)فينيل)(3-[2-فلورو-4- (تراي فلورو_ ميثيل)فينيل]-7-هيدروكسي كينولين -4-يل)ميثانون (4—-{2-[3—(fluoromethyl)azetidin—1-yllethoxy}phenyl){3— [2-fluoro—4~ (trifluoromethyl) phenyl]-7-hydroxyquinolin-4-yltmethanone في 1 4-دايوكسان 4—d ioxane 1 إلى حوالى 5 درجة مثوية ثم إضافة تراي إيثيل بوروهيدريد الليثيوم Jithium triethylborohydride وفقًا لعنصر الحماية 3 حيث يكون pharmaceutical composition التركيبة الصيدلية .1 الإضافيى 5-(4-(2-[3- (فلورو ميثيل)أزيتيدين-1- therapeutic agent العامل العلاجي 5-)4- 6-3]كينولين-2-اول Alsi يل ]إيثوكسي)فينيل)-8-زتراي فلورو ميثيل)-51-[1]بنزو 5— 3 6 — {2-[3—(fluoromethyl)azetidin—1-yl]lethoxy}phenyl)-8~(trifluoromethyl)-5SH- .[1]benzopyrano[4,3—c]quinolin-2-olالحاضهة الهيلة السعودية الملضية الفكرية Swed Authority for intallentual Property pW RE .¥ + \ ا 0 § ام 5 + < Ne ge ”بن اج > عي كي الج دا لي ايام TEE ببح ةا Nase eg + Ed - 2 - 3 .++ .* وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها of سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. »> صادرة عن + ب ب ٠. ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > ”+ ص ب 101١ .| لريا 1*١ uo ؛ المملكة | لعربية | لسعودية SAIP@SAIP.GOV.SA
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201862697100P | 2018-07-12 | 2018-07-12 | |
| US201962825172P | 2019-03-28 | 2019-03-28 | |
| PCT/US2019/041342 WO2020014440A1 (en) | 2018-07-12 | 2019-07-11 | Selective estrogen receptor degraders |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA521421006B1 true SA521421006B1 (ar) | 2023-02-08 |
Family
ID=67480324
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA521421006A SA521421006B1 (ar) | 2018-07-12 | 2021-01-12 | عوامل تحلل مستقبلات الإستروجين الانتقائية |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210260052A1 (ar) |
| EP (1) | EP3820874B1 (ar) |
| JP (1) | JP7085056B2 (ar) |
| KR (1) | KR102577142B1 (ar) |
| CN (1) | CN112424205B (ar) |
| AU (1) | AU2019299952B2 (ar) |
| BR (1) | BR112020025381A2 (ar) |
| CA (1) | CA3105491C (ar) |
| CL (1) | CL2021000046A1 (ar) |
| CO (1) | CO2021000041A2 (ar) |
| CR (1) | CR20210006A (ar) |
| DK (1) | DK3820874T3 (ar) |
| EC (1) | ECSP21001786A (ar) |
| ES (1) | ES2932867T3 (ar) |
| FI (1) | FI3820874T3 (ar) |
| HR (1) | HRP20230080T1 (ar) |
| HU (1) | HUE061032T2 (ar) |
| IL (1) | IL279990B2 (ar) |
| JO (1) | JOP20210004A1 (ar) |
| LT (1) | LT3820874T (ar) |
| MD (1) | MD3820874T2 (ar) |
| MX (1) | MX2021000377A (ar) |
| NZ (1) | NZ771719A (ar) |
| PE (1) | PE20211245A1 (ar) |
| PH (1) | PH12021550048A1 (ar) |
| PL (1) | PL3820874T3 (ar) |
| PT (1) | PT3820874T (ar) |
| RS (1) | RS63876B1 (ar) |
| SA (1) | SA521421006B1 (ar) |
| SG (1) | SG11202100145YA (ar) |
| SI (1) | SI3820874T1 (ar) |
| UA (1) | UA125890C2 (ar) |
| WO (1) | WO2020014440A1 (ar) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108366996B (zh) | 2015-10-01 | 2021-04-09 | 奥列马制药公司 | 四氢-1H-吡啶[3,4-b]吲哚类抗雌激素药物 |
| WO2020014489A2 (en) | 2018-07-11 | 2020-01-16 | H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. | Dimeric immuno-modulatory compounds against cereblon-based mechanisms |
| TWI702219B (zh) * | 2018-07-12 | 2020-08-21 | 美商美國禮來大藥廠 | 選擇性雌激素受體降解劑 |
| CN117715902A (zh) * | 2021-08-31 | 2024-03-15 | 卫材R&D管理有限公司 | 单环吡啶衍生物的制造方法 |
| US11926634B2 (en) | 2022-02-01 | 2024-03-12 | Eli Lilly And Company | Processes for the preparation of selective estrogen receptor degraders |
| WO2024042157A1 (en) | 2022-08-25 | 2024-02-29 | Sanofi | Novel substituted quinoline and tetrahydronaphthalene carboxylic acid derivatives and therapeutic uses thereof |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6756388B1 (en) * | 1993-10-12 | 2004-06-29 | Pfizer Inc. | Benzothiophenes and related compounds as estrogen agonists |
| US5521214A (en) * | 1995-01-25 | 1996-05-28 | Eli Lilly And Company | Methods of inhibiting environmental estrogens |
| JPH10204082A (ja) * | 1996-10-25 | 1998-08-04 | Eli Lilly & Co | 選択的エストロゲンレセプターモジュレーターとしての活性を有する置換されたベンゾ［ｂ］チオフェン化合物 |
| DE60210283T2 (de) | 2001-05-22 | 2006-11-09 | Eli Lilly And Co., Indianapolis | 2-substituierte 1,2,3,4-tetrahydrochinoline und derivate davon, zusammensetzungen und verfahren |
| US7329654B2 (en) | 2001-12-19 | 2008-02-12 | Janssen Pharmaceutica N.V. | Heteroatom containing tetracyclic derivatives as selective estrogen receptor modulators |
| NZ536291A (en) * | 2002-04-19 | 2006-09-29 | Signal Pharm Inc | Benzopyranone compounds, compositions thereof, and methods of treatment therewith |
| DE20301728U1 (de) * | 2002-10-11 | 2004-03-11 | Ligand Pharmaceuticals, Inc., San Diego | 5-substituierte 7,9-Difluor-5H-Chromeno(3,4-f) -Chinolin-Verbindungen als selektive Progesteronrezeptormodulator-Verbindungen |
| CL2004000985A1 (es) * | 2003-05-16 | 2005-01-14 | Wyeth Corp | Compuestos derivados de fenilquinolinas; composicion farmaceutica, proceso de preparacion; y uso para tratar osteoporosis, enfermedad de paget, dano vascular, osteoartritis, cancer oseo, cancer ovarico, cancer prostatico, hipercolesterolemia, aterosc |
| EP1709021B1 (en) * | 2004-01-22 | 2010-08-04 | Eli Lilly And Company | Selective estrogen receptor modulators for the treatment of vasomotor symptoms |
| EP1789420A2 (en) * | 2004-09-07 | 2007-05-30 | Wyeth, A Corporation of the State of Delaware | 6H-[1]BENZOPYRANO[4,3-b]QUINOLINES AND THEIR USE AS ESTROGENIC AGENTS |
| US20080221163A1 (en) | 2005-01-18 | 2008-09-11 | Jeffrey Alan Dodge | Selective Estrogen Receptor Modulators |
| MX2015016171A (es) | 2013-06-19 | 2016-08-08 | Seragon Pharmaceuticals Inc | Moduladores del receptor de estrogeno de azetidina y usos de los mismos. |
| EP3233828B1 (en) * | 2014-12-18 | 2020-03-04 | F. Hoffmann-La Roche AG | Estrogen receptor modulators and uses thereof |
| JP6768711B2 (ja) * | 2015-05-26 | 2020-10-14 | エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | 複素環式エストロゲン受容体モジュレーター及びその使用 |
| JP7241542B2 (ja) * | 2016-04-08 | 2023-03-17 | エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | テトラヒドロイソキノリン エストロゲン受容体モジュレーター及びその使用 |
| JP7229162B2 (ja) * | 2017-01-06 | 2023-02-27 | ジー１ セラピューティクス， インコーポレイテッド | 癌の治療に対する併用療法 |
| TWI702219B (zh) * | 2018-07-12 | 2020-08-21 | 美商美國禮來大藥廠 | 選擇性雌激素受體降解劑 |
-
2019
- 2019-07-11 AU AU2019299952A patent/AU2019299952B2/en active Active
- 2019-07-11 PE PE2021000017A patent/PE20211245A1/es unknown
- 2019-07-11 CN CN201980046170.4A patent/CN112424205B/zh active Active
- 2019-07-11 LT LTEPPCT/US2019/041342T patent/LT3820874T/lt unknown
- 2019-07-11 CR CR20210006A patent/CR20210006A/es unknown
- 2019-07-11 NZ NZ771719A patent/NZ771719A/en unknown
- 2019-07-11 JO JOP/2021/0004A patent/JOP20210004A1/ar unknown
- 2019-07-11 FI FIEP19746252.6T patent/FI3820874T3/fi active
- 2019-07-11 WO PCT/US2019/041342 patent/WO2020014440A1/en unknown
- 2019-07-11 PT PT197462526T patent/PT3820874T/pt unknown
- 2019-07-11 JP JP2021500586A patent/JP7085056B2/ja active Active
- 2019-07-11 DK DK19746252.6T patent/DK3820874T3/da active
- 2019-07-11 KR KR1020217000473A patent/KR102577142B1/ko active IP Right Grant
- 2019-07-11 MX MX2021000377A patent/MX2021000377A/es unknown
- 2019-07-11 BR BR112020025381-2A patent/BR112020025381A2/pt unknown
- 2019-07-11 UA UAA202100103A patent/UA125890C2/uk unknown
- 2019-07-11 SI SI201930407T patent/SI3820874T1/sl unknown
- 2019-07-11 HU HUE19746252A patent/HUE061032T2/hu unknown
- 2019-07-11 HR HRP20230080TT patent/HRP20230080T1/hr unknown
- 2019-07-11 RS RS20230014A patent/RS63876B1/sr unknown
- 2019-07-11 SG SG11202100145YA patent/SG11202100145YA/en unknown
- 2019-07-11 CA CA3105491A patent/CA3105491C/en active Active
- 2019-07-11 EP EP19746252.6A patent/EP3820874B1/en active Active
- 2019-07-11 ES ES19746252T patent/ES2932867T3/es active Active
- 2019-07-11 PL PL19746252.6T patent/PL3820874T3/pl unknown
- 2019-07-11 US US17/254,991 patent/US20210260052A1/en active Pending
- 2019-07-11 MD MDE20210464T patent/MD3820874T2/ro unknown
-
2021
- 2021-01-06 CO CONC2021/0000041A patent/CO2021000041A2/es unknown
- 2021-01-06 IL IL279990A patent/IL279990B2/en unknown
- 2021-01-07 CL CL2021000046A patent/CL2021000046A1/es unknown
- 2021-01-08 PH PH12021550048A patent/PH12021550048A1/en unknown
- 2021-01-11 EC ECSENADI20211786A patent/ECSP21001786A/es unknown
- 2021-01-12 SA SA521421006A patent/SA521421006B1/ar unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SA521421006B1 (ar) | عوامل تحلل مستقبلات الإستروجين الانتقائية | |
| TWI784255B (zh) | 四氫-吡啶并[3,4-b]吲哚雌激素受體調節劑及其用途 | |
| US8658668B2 (en) | PI3 kinase/mTOR dual inhibitor | |
| SA521421008B1 (ar) | عوامل تحلل مستقبلات الإستروجين الانتقائية | |
| US10172835B2 (en) | Anticancer agent composition | |
| TW201306842A (zh) | 使用ｐｉ３ｋ／ｍｔｏｒ吡啶並嘧啶酮抑制劑及苯達莫司汀及／或利妥昔單抗治療惡性血液疾病之組合療法 | |
| US8710068B2 (en) | Method of treating cancer using a survivin inhibitor | |
| CN103874689A (zh) | Akt抑制剂化合物和威罗菲尼的组合及使用方法 | |
| TW201842912A (zh) | 醫藥組成物 | |
| CN108883112A (zh) | 用于癌症患者分级和癌症治疗的化合物、组合物和方法 | |
| CN111372934B (zh) | Tg02的多晶型形式 | |
| CN111053768A (zh) | 用于治疗黑素瘤的药物组合 | |
| CA2868081A1 (en) | Inhibition of mcl-1 and/or bfl-1/a1 | |
| Lai et al. | Design, synthesis and biological evaluation of a novel tubulin inhibitor 7a3 targeting the colchicine binding site | |
| JP6147246B2 (ja) | Ａｋｔ及びｍｅｋ阻害剤化合物の組み合わせ、及び使用方法 | |
| JP2020537641A (ja) | 薬学的組成物および剤形 | |
| KR20210027382A (ko) | 접히지 않은 단백질 반응의 활성화제 | |
| US20220257571A1 (en) | Inhibitor of map kinase interacting serine/threonine kinase 1 (mnk1) and map kinase interacting serine/threonine kinase 2 (mnk2), cancer therapy and therapeutic combinations | |
| CN104662022A (zh) | 治疗实体瘤的手段和方法 | |
| CN108602779A (zh) | 制备取代的5,6-二氢-6-苯基苯并[f]异喹啉-2-胺的方法 | |
| US20160039770A1 (en) | Crystalline forms of an estrogen receptor modulator | |
| EP2701690A1 (en) | Method of treating lymphoma using pyridopyrimidinone inhibitors of pi3k/mtor | |
| Ibrahim et al. | Synthesis of novel pyrimido [4, 5‐b] quinolines as potential anticancer agents and HER2 inhibitors | |
| Su et al. | 1, 3, 5-triazines inhibit osteosarcoma and avert lung metastasis in a patient-derived orthotopic xenograft mouse model with favorable pharmacokinetics | |
| EA041610B1 (ru) | Селективные супрессоры рецептора эстрогена |