SA519401806B1 - توصيل داخل القراب لفيروس مرتبط غديا ناتج عودة الارتباط الجيني يرمز بروتين 2 ربط ميثيل -cpg - Google Patents
توصيل داخل القراب لفيروس مرتبط غديا ناتج عودة الارتباط الجيني يرمز بروتين 2 ربط ميثيل -cpg Download PDFInfo
- Publication number
- SA519401806B1 SA519401806B1 SA519401806A SA519401806A SA519401806B1 SA 519401806 B1 SA519401806 B1 SA 519401806B1 SA 519401806 A SA519401806 A SA 519401806A SA 519401806 A SA519401806 A SA 519401806A SA 519401806 B1 SA519401806 B1 SA 519401806B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- associated virus
- mecp2
- vector
- aav
- virus
- Prior art date
Links
- 108010072388 Methyl-CpG-Binding Protein 2 Proteins 0.000 title claims abstract description 69
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 102100039124 Methyl-CpG-binding protein 2 Human genes 0.000 title claims abstract description 19
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 title claims description 17
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 40
- 208000006289 Rett Syndrome Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 241000649044 Adeno-associated virus 9 Species 0.000 claims abstract 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 38
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 32
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 32
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 31
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 21
- 101150083522 MECP2 gene Proteins 0.000 claims description 16
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 14
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 13
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 12
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 12
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 9
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 9
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 claims description 9
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 claims description 6
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 claims description 6
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims description 6
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 6
- 229960001025 iohexol Drugs 0.000 claims description 5
- NTHXOOBQLCIOLC-UHFFFAOYSA-N iohexol Chemical compound OCC(O)CN(C(=O)C)C1=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C1I NTHXOOBQLCIOLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 claims description 4
- 101100447432 Danio rerio gapdh-2 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101150112014 Gapdh gene Proteins 0.000 claims description 3
- AMDBBAQNWSUWGN-UHFFFAOYSA-N Ioversol Chemical compound OCCN(C(=O)CO)C1=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C1I AMDBBAQNWSUWGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 claims description 3
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 claims description 3
- 229960000780 iomeprol Drugs 0.000 claims description 3
- NJKDOADNQSYQEV-UHFFFAOYSA-N iomeprol Chemical compound OCC(=O)N(C)C1=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C1I NJKDOADNQSYQEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960004647 iopamidol Drugs 0.000 claims description 3
- XQZXYNRDCRIARQ-LURJTMIESA-N iopamidol Chemical compound C[C@H](O)C(=O)NC1=C(I)C(C(=O)NC(CO)CO)=C(I)C(C(=O)NC(CO)CO)=C1I XQZXYNRDCRIARQ-LURJTMIESA-N 0.000 claims description 3
- 229960004537 ioversol Drugs 0.000 claims description 3
- 229960002611 ioxilan Drugs 0.000 claims description 3
- UUMLTINZBQPNGF-UHFFFAOYSA-N ioxilan Chemical compound OCC(O)CN(C(=O)C)C1=C(I)C(C(=O)NCCO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C1I UUMLTINZBQPNGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 8
- 241000592503 Speea Species 0.000 claims 3
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 claims 3
- 238000012053 enzymatic serum creatinine assay Methods 0.000 claims 3
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 claims 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 claims 2
- KRQUFUKTQHISJB-YYADALCUSA-N 2-[(E)-N-[2-(4-chlorophenoxy)propoxy]-C-propylcarbonimidoyl]-3-hydroxy-5-(thian-3-yl)cyclohex-2-en-1-one Chemical compound CCC\C(=N/OCC(C)OC1=CC=C(Cl)C=C1)C1=C(O)CC(CC1=O)C1CCCSC1 KRQUFUKTQHISJB-YYADALCUSA-N 0.000 claims 1
- WKMPTBDYDNUJLF-UHFFFAOYSA-N 2-fluoroadenine Chemical group NC1=NC(F)=NC2=C1N=CN2 WKMPTBDYDNUJLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- CNJLMVZFWLNOEP-UHFFFAOYSA-N 4,7,7-trimethylbicyclo[4.1.0]heptan-5-one Chemical compound O=C1C(C)CCC2C(C)(C)C12 CNJLMVZFWLNOEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- RNIHAPSVIGPAFF-UHFFFAOYSA-N Acrylamide-acrylic acid resin Chemical compound NC(=O)C=C.OC(=O)C=C RNIHAPSVIGPAFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 claims 1
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 claims 1
- 102100028449 Arginine-glutamic acid dipeptide repeats protein Human genes 0.000 claims 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 claims 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 claims 1
- 241000283725 Bos Species 0.000 claims 1
- 102100029968 Calreticulin Human genes 0.000 claims 1
- 235000005273 Canna coccinea Nutrition 0.000 claims 1
- 240000008555 Canna flaccida Species 0.000 claims 1
- 241000511343 Chondrostoma nasus Species 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims 1
- 101710143119 Enoyl-[acyl-carrier-protein] reductase [NADH] 1 Proteins 0.000 claims 1
- 241000989913 Gunnera petaloidea Species 0.000 claims 1
- 244000031493 Gunnera tinctoria Species 0.000 claims 1
- 235000015776 Gunnera tinctoria Nutrition 0.000 claims 1
- 101001061654 Homo sapiens Arginine-glutamic acid dipeptide repeats protein Proteins 0.000 claims 1
- 101100326671 Homo sapiens CALR gene Proteins 0.000 claims 1
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 claims 1
- 208000009989 Posterior Leukoencephalopathy Syndrome Diseases 0.000 claims 1
- 102100028255 Renin Human genes 0.000 claims 1
- 102100033121 Transcription factor 21 Human genes 0.000 claims 1
- 101710119687 Transcription factor 21 Proteins 0.000 claims 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 claims 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 claims 1
- 229910052614 beryl Inorganic materials 0.000 claims 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 claims 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 claims 1
- GKPXMGUNTQSFGA-UHFFFAOYSA-N but-2-ynyl 1-methyl-3,6-dihydro-2h-pyridine-5-carboxylate;4-methylbenzenesulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1.CC#CCOC(=O)C1=CCCN(C)C1 GKPXMGUNTQSFGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 101150016491 chsA gene Proteins 0.000 claims 1
- 238000002618 extracorporeal membrane oxygenation Methods 0.000 claims 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 claims 1
- 229960000824 iopentol Drugs 0.000 claims 1
- IUNJANQVIJDFTQ-UHFFFAOYSA-N iopentol Chemical compound COCC(O)CN(C(C)=O)C1=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C1I IUNJANQVIJDFTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000020131 mattha Nutrition 0.000 claims 1
- 102000031635 methyl-CpG binding proteins Human genes 0.000 claims 1
- 108091009877 methyl-CpG binding proteins Proteins 0.000 claims 1
- HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N nifedipine Chemical compound COC(=O)C1=C(C)NC(C)=C(C(=O)OC)C1C1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 claims 1
- 238000004416 surface enhanced Raman spectroscopy Methods 0.000 claims 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 claims 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 36
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 7
- 102000006890 Methyl-CpG-Binding Protein 2 Human genes 0.000 description 64
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 56
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 47
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 46
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 36
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 34
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 28
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 25
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 17
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 17
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 15
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 14
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 13
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 11
- 238000011161 development Methods 0.000 description 11
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 11
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 11
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 11
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 9
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 9
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 9
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 9
- 102100021244 Integral membrane protein GPR180 Human genes 0.000 description 8
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 8
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 8
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 8
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 8
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 8
- 241000702423 Adeno-associated virus - 2 Species 0.000 description 7
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 7
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 7
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 7
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 7
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 7
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 7
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 6
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 5
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 5
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 5
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 5
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 4
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 4
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 4
- 210000004727 amygdala Anatomy 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 4
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 4
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 4
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 4
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 4
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 4
- 210000001103 thalamus Anatomy 0.000 description 4
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 4
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 3
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 3
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 3
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 241001164823 Adeno-associated virus - 7 Species 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 2
- 101100076422 Mus musculus Mecp2 gene Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000036353 Rett disease Diseases 0.000 description 2
- 235000015076 Shorea robusta Nutrition 0.000 description 2
- 244000166071 Shorea robusta Species 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 230000003281 allosteric effect Effects 0.000 description 2
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000006736 behavioral deficit Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 2
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 2
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 2
- 210000000877 corpus callosum Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;propane-1,2-diol Chemical compound OCCO.CC(O)CO HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 2
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 2
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 210000001259 mesencephalon Anatomy 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 210000000337 motor cortex Anatomy 0.000 description 2
- 210000001577 neostriatum Anatomy 0.000 description 2
- 210000001328 optic nerve Anatomy 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 235000008001 rakum palm Nutrition 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- ULVBNYNCYNALAV-UHFFFAOYSA-M sodium;dodecyl sulfate;prop-2-enamide Chemical compound [Na+].NC(=O)C=C.CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O ULVBNYNCYNALAV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 210000002330 subarachnoid space Anatomy 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 210000003863 superior colliculi Anatomy 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 230000002618 waking effect Effects 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 101150084750 1 gene Proteins 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000117 Abnormal behaviour Diseases 0.000 description 1
- 208000006888 Agnosia Diseases 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 206010003062 Apraxia Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 208000002109 Argyria Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001609030 Brosme brosme Species 0.000 description 1
- 101100028791 Caenorhabditis elegans pbs-5 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150044789 Cap gene Proteins 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 206010011985 Decubitus ulcer Diseases 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 101100234002 Drosophila melanogaster Shal gene Proteins 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 206010013976 Dyspraxia Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 240000002989 Euphorbia neriifolia Species 0.000 description 1
- 206010017577 Gait disturbance Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102000053171 Glial Fibrillary Acidic Human genes 0.000 description 1
- 101710193519 Glial fibrillary acidic protein Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 1
- 108010061414 Hepatocyte Nuclear Factor 1-beta Proteins 0.000 description 1
- 102100022123 Hepatocyte nuclear factor 1-beta Human genes 0.000 description 1
- 206010020112 Hirsutism Diseases 0.000 description 1
- 206010021118 Hypotonia Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 206010023509 Kyphosis Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 241000272168 Laridae Species 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108091027974 Mature messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 208000007379 Muscle Hypotonia Diseases 0.000 description 1
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100030569 Nuclear receptor corepressor 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710153660 Nuclear receptor corepressor 2 Proteins 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000012288 Phosphopyruvate Hydratase Human genes 0.000 description 1
- 108010022181 Phosphopyruvate Hydratase Proteins 0.000 description 1
- 206010062519 Poor quality sleep Diseases 0.000 description 1
- 101100409194 Rattus norvegicus Ppargc1b gene Proteins 0.000 description 1
- 241001068295 Replication defective viruses Species 0.000 description 1
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 210000001766 X chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 108700029631 X-Linked Genes Proteins 0.000 description 1
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- 201000007201 aphasia Diseases 0.000 description 1
- 208000008784 apnea Diseases 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000003926 auditory cortex Anatomy 0.000 description 1
- 230000002567 autonomic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 1
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 1
- 206010006514 bruxism Diseases 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 230000035606 childbirth Effects 0.000 description 1
- 210000000078 claw Anatomy 0.000 description 1
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000007847 digital PCR Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000000816 effect on animals Effects 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007457 establishment of nucleus localization Effects 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 238000005562 fading Methods 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000005021 gait Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 210000005046 glial fibrillary acidic protein Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000007489 histopathology method Methods 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041033 macrolides Drugs 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000013220 male mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000007257 malfunction Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004216 mammary stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 210000001767 medulla oblongata Anatomy 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 208000004141 microcephaly Diseases 0.000 description 1
- 210000000274 microglia Anatomy 0.000 description 1
- 230000037230 mobility Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000009126 molecular therapy Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000004973 motor coordination Effects 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000007472 neurodevelopment Effects 0.000 description 1
- 208000018356 neurometabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000016273 neuron death Effects 0.000 description 1
- 230000007171 neuropathology Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000007180 physiological regulation Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000009596 postnatal growth Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000008132 psychomotor development Effects 0.000 description 1
- 210000002637 putamen Anatomy 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 230000000246 remedial effect Effects 0.000 description 1
- 101150066583 rep gene Proteins 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000026416 response to pain Effects 0.000 description 1
- 238000010825 rotarod performance test Methods 0.000 description 1
- 206010039722 scoliosis Diseases 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000004092 somatosensory cortex Anatomy 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000002739 subcortical effect Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000009747 swallowing Effects 0.000 description 1
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000005100 tissue tropism Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 238000012250 transgenic expression Methods 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 238000011277 treatment modality Methods 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000001457 vasomotor Effects 0.000 description 1
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009941 weaving Methods 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/0075—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the delivery route, e.g. oral, subcutaneous
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0085—Brain, e.g. brain implants; Spinal cord
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14132—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Virology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Toxicology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Mycology (AREA)
- Psychology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
تم توفير طرق ومواد توصيل داخل القراب لفيروس مرتبط غديا 9 ناتج عودة الارتباط الجيني (rAAV9) يرمز بروتين 2 ربط ميثيل-CpG (MeCP2). تم ذكر استخدام الطرق والمواد، مثلا، لعلاج متلازمة Rett. الشكل 1
Description
توصيل داخل القراب لفيروس مرتبط غديا ناتج عودة الارتباط الجيني يرمز بروتين 2 ربط ميثيل CPG- INTRATHECAL DELIVERY OF RECOMBINANT ADENO-ASSOCIATED VIRUS ENCODING METHYL-CPG BINDING PROTEIN 2 الوصف الكامل يقوم الطلب الحالي بالمطالبة بالمنفعة لطلب براءة الاختراع الأمريكية المؤقتة رقم 423618/62 المودع في 17 نوفمبر 2016. الدمج بالإشارة للمادة المقدمة إلكترونيا تم دمج قوائم المتواليات في صورة قابلة للقراءة بواسطة كومبيوتر هنا وتم تحديدها كما يلي: ملف ASCII 5 نصي تمت تسميته "50215PCT_SeqListing. txt" 24148 بايت؛ الذي تم تكوينه في 17 نوفمبر 2017. خلفية الاختراع يرتبط الاختراع الحالي بطرق ومواد للتوصيل داخل القراب لفيروس مرتبط غديا 9 ناتج عودة الارتباط الجيني (rAAVY) يرمز بروتين 2 ربط ميثيل-6م© (46002). تم ذكر استخدام الطرق 0 والمواد؛ مثلا؛ لعلاج متلازمة ‘Rett إن متلازمة Rett عبارة عن اضطراب مسيطر مريوط بتطور عصبي X يؤثر على -1 بين كل 10000 بنت. عادة ما يموت الذكور فردانيي الزيجوت بسبب التلف الدماغي الجنيني. بينما ينجو الإناث فردانيات الزيجوت في مرحلة البلوغ ولكنهن يبدين أعراض sala شاملة صغر الدماغ؛ فقدان حركة اليد والنطق» والحالات الحركية غير الطبيعية ally تظهر بعد فترة نمو طبيعية. ويكون سن بدء الأعراض ما بين 18-6 شهرا. تم تصنيف متلازمة Rett بأنها عبارة عن مرض Rett مثالي (أو تقليدي) أو Rett غير مثالي. تقوم التطفرات الجينية الآنية بترميز بروتين 2 عامل الانتساخ الذي يربط ميثيل-0م0 (MeCP2) ويؤدي إلى أغلب )190( الحالات في كل من التصنيفات على الرغم Rett بواسطة التطفرات في الجينات غير 146002. طبيعة تطفر 166002 (مثلا Cada في مقابل تطفر النقطة) 0 وتثبيط saa المرض الخاصة بأثر كروموسوم X الملتوي. يقوم عامل انتساخ MeCP2 لآلاف
الجينات. قامت الجهود العلاجية بالتركيز على الأهداف البعدية ل MeCP2 شاملة المرسلات العصبية؛ وعوامل النمو والمسارات الأيضية. أشارت تسعة تجارب سريرية على الأقل موجه إلى متلازمة Rett إلى نتائج إيجابية خلال التدبير المختلفة؛ ولكن لم يتم التحقق من أو أدت إلى علاجات جديدة ])2016( 100-113 :39 et al, Trends in Neurosciences, ع1212]. لا توجد علاجات معتمدة
جديدة حاليا من أجل متلازمة Rett هناك نماذج فتران ذكور وإناث حيث تبدي الفئران سلوكيات شبيهة ب Guy et al. ] RTT ¢Chen et al., Nature Genetics 27: 327-331 (2001) ¢Nature Genetics, 27: 322-326 (2001)
[Katz et al., 5: 733-745 (2012) 5 إن MeCP2 عبارة عن بروتين نووي بحجم 52 كيلو دالتون والذي تم التعبير عنه في تشكيلة 0 من الأنسجة ولكن يتم تخصيبها في النيورونات وتمت دراستها في النظام العصبي. هناك اثنين من الصور المتناظرة ل MeCP2 في البشر المعروفة ب By MeCP2A (الشكل 1) [ .لد اك Weaving [Journal of Medical Genetics, 42: 1-7 (2005) يتم اشتقاق الصورتين الإسويتين من مستنسخات mRNA مشتقة تبادليا وتتضمن مواقع بدء التحول المختلفة. تتضمن MeCP2B إكسونات 1؛ 3 و4 وهي الصورة الإسوية المسيطرة في الدماخ. يرتبط MeCP2 عكسيا DNAG معالج بميثيل ashy 5 بتضمين التعبير الجيني [ Guy et al., Annual Review of Cell and Developmental Biology, )2011( 631-652 :27]. تقوم هذه الوظائف بالتخطيط لنطاق ربط ميثيل (MBD) ونطاق قمع انتساخ «(TRD) على التوالي ])2001( 532-37 :1 .[Nan & Bird, Brain & Development, 23, Suppl أصلا خلال القمع الانتساخي؛ يمكن أن يقوم 146002 بكل من حث وقمع بالتعبير الجيني المستهدف .[Chahrour et al., Science, 320: 1224-1229 (2008)] يتم افتراض MeCP2 لدعم التطوير العصبي المناسب والحفظ. في النيورونات؛ يقوم MeCP2 بتهيل تحويل النشاط التشابكي إلى التعبير الجيني خلال ربط DNA والتفاعل مع شركاء الريط المختلفين ]-341 :499 Ebert et al., Nature, ٠ [Lyst et al., Nature Neuroscience, 16: 898-902 (2013) 5 345 (2013) في الخلايا النجمية؛ يتم ربط خلل MeCP2 بحالات انقطاع النفس في الفئران ])2011( 497-500 :475 .[Lioy et al., Nature, يمكن أن يقوم خلل MeCP2 بالتسبب في تقليل حجم الدماغ؛ وزيادة شدة الغلاف العصبي والتعقيد 5 المتغضن المنخفض | Armstrong et al., Journal of Neuropathology and Experimental )1995( 195-201 :54 ,.:رع116070108]. بشكل cage لا يرتبط الموت العصبي Leonard [ MeCP2 Jia [et al., Nature Reviews, Neurology, 13: 37-51 (2017) وقد وجد أن MeCP2 أيضا موجود خارج النظام العصبي يختلف خلال الأنسجة (الشكل 2). قامت الدراسة الحالية بفحص اعتماد أعراض Rett في الفئران على التعبير عن Mecp2 المحيطي | Ross et al., Human Molecular Genetics, 0 )2016( 4389-4404 :25]. تم ربط الخلل المحيطي بالنشاط المنخفض؛ والإرهاق عند التريض
والحالات العظمية غير الطبيعية. كان أغلب السلوك المرتبطة ب (RTT حركة الاستشعار» طريقة المشي والأنماط الخيفية اللاإرادية (التنفسية والقلبية) غائبة في الفئران مع استبعاد MeCP2 محيطي. لأن MeCP2 عبارة عن جين مربوط ب X ثمة نسخة من 1/6002 يتم إسكانها بسبب تثبيط الكروموسوم (Xi) X في الإناث. على أساس كل خلية على حدة؛ يعتقد أن Xei عشوائي والذي يؤدي إلى كيمرة MeCP2 في إناث Rett يتم التأثير على حدة المرض بواسطة ما إذا كان أغلب كروموسومات X النشطة تحتوي على جين MeCP2 السليم أو المتطفر. وهو يسمى 20 ملتوي. لا يخضع الذكور ل 7601؛ وبالتالي خلل MeCP2 أكثر حدة حيث لا تتضمن أي WIA نسخة وظيفية من .MeCP2 تقوم طبيعة تطفر MeCP2 بالتأثير أيضا على حدة المرض. على مدار 600 تطفر متخلف من الجين 146002 تم شرحهم في قاعدة البيانات (http://mecp2.chw.edu.au/) RetBASE 0 شاملة عمليات الحذف؛ نقاط التطفر والنقاط غير الحسية. التطفر الأكثر شيوعا (-79 للمرضى) هي أليلة 118584 والتي تؤثر على نطاق ربط ميثيل. وهناك تطفرات أخرى موضحة في الشكل 3 Leonard] أعلاه]. بالإضافة إلى ذلك سوف تكون مسئولة عما يزيد على 740 من الحالات المذكورة في في 8000851. وقد وجد أن عمليات الحذف الكبيرة التي تتضمن 146002 في 710-8 من الحالات ])2007( 38-47 :52 Li et al., Journal of Human Genetics, و Hardwick et al., [European Journal of Human Genetics, 15: 1218-1229 (2007) 5 هناك علاقة نمطية جينية- خيفية مع R294X «R133C وتطفرات عند الطرف © وعمليات الحذف (بعد (TRD التي تؤدي إلى مرض أخف. ترتبط عمليات الحذف الكبيرة وتطفرات القطع الكبيرة (R168X 5 R255X (R270X) بمتلازمة Rett الحادة. يقوم الجدول 1 بوصف معايير تشخيص Rett المتوافقة بواسطة مجموعة من أطباء Rett الدوليين [(2010) 944-950 :68 .[Neul et al., Annals of Neurology, الجدول 1 معايير RTT التشخيصية 2010 -اعتبار التشخيص عند وجود تباطؤ ملحوظ في النمو بعد الولادة. المطلوب ل RTT مثالي أو تقليدي 1. فترة تراجع متبوعة بواسطة الشفاء أو التثبيت.* 2. كل المعايير الأساسية وكل معايير الاستبعاد 3. المعايير الداعمة غير مطلوية؛ على الرغم من أنها موجود في RTT مثالية المطلوب ل RTT غير المثالي أو المغاير 1. فترة تراجع متبوعة بالشفاء أو التثبيت 2. على الأقل 2 من أصل من 4 معايير أساسية 3 من أصل 11 المعايير الدعمية
المعايير الأساسية 1. الفقد الكلي أو الجزئي للمهارات اليدوية التي تم اكتسابها. 2. الفقد الكلي أو الجزئي للغة المكتسبة** 3. أعراض غير طبيعية في طريقة المشي: ضعف أو غياب في القدرة (خلل الأداء 1 4 حركة اليد النمطية مثل العصر/الكتابة باليد؛ التسقيف/النقرء التحدث وآليات الغسل/الفرك. معايير الاستبعاد الخاصة ب RTT 1 إصابة الدماغ الثانوية إلى الرضوض (المحيطية- أو بعد الولادة) مرض عصبي أيضي؛ أو إصابة sala والتي تتسبب في مشاكل عصبية *** 2. تطور حركي نفسي كبير غير طبيعي في أول 6 أشهر من العمر* المعايير الداعمة ل RTT غير مثالية**
اضطرابات في التنفس عند الاستيقاظ
صريف الأسنان عند الاستيقاظ
نمط نوم ضعيف
حالة عضلية غير طبيعية
اضطرابات وعائية حركية محيطية
الجنف/الحداب
تأخير النمو
نمو الأيدي والأقدام الصغيرة
الضحك/الصراخ غير المناسب
الاستجابة المتلاشية للألم
تواصل بصري حد - "اللافتة للعين" al * - قد تم تحديد تطفرات 146002 في بعض الأفراد قبل أي دليل واضح على التراجع؛ يجب أن يتم تقديم التشخيص "المحتمل" ل RTT إلى الأفراد أقل من 3 سنوات والذين لم يفقدوا أي مهارات (Sly كانت لديهم خواص تشير إلى RIT يجب أن تتم sale] تقييم هؤلاء الأفراد كل 12-6 أشهر من أجل وجود دليل على التراجع. إذا بدى التراجع؛ يجب أن يتم تغيير التشخيص إلى RTT واضح. مع cells إذا كان الطفل لا يبدي أي دليل على التراجع بحلول 5 سنوات؛ يجب طلب تشخيص RTT
= يقوم فقد اللغة المكتسبة على أساس أفضل لغة مكتوية مكتسبة؛ وليس على اكتساب الكلمات المميزة أو المهارات اللغوية الأعلى. بالتالي؛ يتم اعتبار الفرد الذي تعلم الثرثرة ولكن dag ذلك فقد هذه القدرة على أنه يعاني من فقد اللغة المكتسبة. = *” يجب أن يكون هناك دليل واضح (فحص عصبي أو بصري و1181/07) وهو ما قد يؤدي مباشرة إلى خلل عصبي. * يوجد Als غير طبيعية بشكل كبير في نقطة أن هناك علامات طبيعية (اكتساب التحكم في الرأسء البلع؛ تطوير الابتسامة الاجتماعية). نقص التوتر العام الخفيف أو غيرها من التعديلات التطورية الطفيفة المشار إليها سلفا أثناء أول ستة أشهر من الحياة شائعة في RTT ولا تشكل معيار استبعاد. = * إذا كان فرد يعاني من أو لديه خاصية سريرية مذكورة سوف يتم احتسابه كمعيار دعمه. هناك العديد من الخواص التي تتضمن اعتماد السن؛ وإظهار والسيطرة عند سن معين. بالتالي؛ يمكن أن تكون عملية تشخيص RTT غير مثالية أسهر في الأفراد الأكبر سنة غير الصغار. في حالة فرد أصغر (تحت 5 سنوات) والذي كانت لديه فترة تراجع و> 2 المعايير الأساسية ولكنها لا تلبي متطلبات من المعايير الداعمة؛ يمكن تقديم تشخيص "11 غير مثالية محتملة". يجب إعادة تقييم الأفراد الذين يفشلون في هذه الفئة مع التقدم في السن وتتم مراجعة التشخيص بناء عليه. الفيروس المرتبط بآدينو (AAV) عبارة عن فيروس صغير معيب التكاثرء؛ جينوم DNA أحادي الجديلة والذي يبلغ 4.7 كيلوقاعدة في الطول شاملة 145 تكرار طرفي محول بنيكلوتيد (11165). تم تمثيل متوالية النيكلوتيد لجينوم النمط المصلي (AAV2) 2 AAV في Srivastava et al., J Virol, 45: 555-564 (1983) كما تم تصحيحه بواسطة :75 Ruffing et al., J Gen Virol, 5 )1994( 23385-3392 متواليات تفعيل Cis التي تقوم بتوجيه تكاثر DNA الفيروسي o(rep) يتم احتواء عملية دمج كروموسوم التغليف/التعبئة والخلية العائلة في JTRS هناك ثلاثة معززات AAV (مسماة pS 0019 و40م من أجل مواضع الخريطة الخاصة بها) والي تقوم بتشغيل التعبير عن اثنين من إطارات القراءة المفتوحة الداخلية ل (Allg AAV ترمز جينات 0« و80. يؤدي اثنين من معززات pS) rep و19م)؛ مقترنة بالشق التمايزي لإنترون AAV فردي (عند النيكلوتيدات 2107 0 و2227)» والتي تؤدي إلى إنتاج أربعة من بروتينات «rep 52 «rep 68 crep 78) rep و40 (rep من جين rep تتضمن بروتينات rep العديد من الخواص الإنزيمية المسئولة عن تكاثر الجينوم الفيروسي. يتم التعبير عن جين cap من معزز 40م ويقوم بترميز ثلاثة من بروتينات كابسيد 701 752؛ و703. سوف يكون الشق البديل ومواقع بعد التحويل غير التوافقي مسئولة عن إنتاج بروتينات
كابسيد الثلاثة ذات الصلة. تم وضع موقع إضافة بولي أدينيل توافق فردي عند الموضع المخطط من جينوم AAV تتم مراجعة دورة الحياة والخواص الجينية ل AAV في Muzyczka, Current Topics in Microbiology and Immunology, 158: 97-129 (1992) تتضمن AAV خاصية فريدة lly تكون جذابة كموجه لتوصيل DNA غريب إلى الخلاياء Sie 5 في العلاج الجيني. AAV dla) للخلايا في المزرعة غير مسبب لأمراض الخلايا؛ والإصابة الطبيعية للبشر وغيرهم من الحيوانات صامتة وغير عرضية. علاوة على dls تقوم AAV بإضافة العديد من الخلايا الثدية التي تسمح باحتمالية استهداف الأنسجة المختلفة في الكائن الحي. علاوة على ذلك؛ يقوم AAV بتحويل clay للخلايا المنقسمة وغير المنقسمة؛ ويمكن أن تنجو من طوال عمر هذه الخلايا كإيبيسوم نووي نشط انتساخيا (عنصر خارج كروموسومي). جينوم AAV المعزز 0 لا للفيروس معدي DNA S منتسخ في بلازميدات والتي تقوم بجعل الجينومات ناتج عودة الارتباط الجيني مجدية. علاوة على ذلك؛ بسبب الإشارات التي تقوم بتوجيه تكاثر (AAV يتم احتواء تغليف ودمج الجينوم في 17185 لجينوم (AAV يمكن استبدال بعض أو كل من تقريبا 4.3 كيلو قاعدة من الجينوم (والذي يرمز التكاثر وبروتينات الكابسيد البنائية» (rep-cap ب DNA غريب Jie قالب جيني يحتوي على معزز؛ DNA محل الاهتمام وإشارة إضافة بولي أدينيل. يمكن تحويل بروتينات rep 5 ووطد» في ترانس. هناك خاصية مميزة أخرى وهناك خاصية أخرى مميزة ل AAV وهي أنه فيروس مستقر ونشط جدا. ومن السهل أن يتحمل الظروف المستخدمة لتثبيط فيروس غدي (56 درجة إلى 5 درجة مئوية لعدة ساعات)؛ وهو ما يجعل الحفظ على البارد ل AAV أقل حرجا. يمكن أن يتم تجفيف AAV بالتجميد. أخيراء الخلايا المصابة ب AAV ليست مقاومة للإصابة الفوقية. هناك العديد من الأنماط المصلية ل AAV موجودة وتعطي انتحاء نسيج مختلف. تتضمن الأنماط المصلية 0 المعروفة مثلاء (AAVS (AAV7 (AAV6 (AAV5 (AAV4 (AAV3 (AAV2 (AAVI LAAVIh745 AAVI3 ¢AAVI2 (AAVII (AAVIO (AAV9 تم وصف AAVO في براءة الاختراع الأمريكية رقم 7198951 وفي )2004( 6381-6388 :78 J.
Virol., مله .Gao et لا تزال هناك حاجة في المجال للطرق ومنتجات توصيل بولي نيكلوتيدات MeCP2 إلى؛ والتعبير عن البولي نيكلوتيدات في؛ النظام العصبي المركزي. 5 الوصف العام للاختراع يقدم الكشف الحالي طرق ومواد مفيدة لعلاج متلازمة Rett في مريض محتاج له. تم توفير طرق علاج متلازمة Rett في مريض يتضمن خطوة إعطاء داخل القراب لفيروس مرتبط غديا 9 ناتج عودة الارتباط الجيني (TAAVY) يرمز بروتين 2 ريط ميثيل-6م© (MeCP2) إلى مريض محتاج له؛ Cus يتضمن جينوم 8779ل< ذاتي المكمل يرمز MeCP2B وحيث تم ذكر
متوالية الجينوم ذاتي المكمل في متوالية بهوية رقم: 1. تم توفير TAAVO مثالي على أن SCAAV يسمى AVXS-201 تم توفير طرق والتي تتضمن أيضا خطوة إعطاء داخل القراب لأيوهيكسول» أيوبيتريدول؛ أيوميبرول؛ أيوباميدول؛ أيوبينول؛ أيوبروميد؛ أيوفيرسول أو أيوكسيلان» أو خلطات من اثنين أو أكثر 5 . منهاء إلى المريض» و/أو والتي تتضمن أيضا وضع المريض في موضع ‘Trendelenberg شرح مختصر للرسومات الشكل 1: المخطط البياني لموقع MeCP2 بشري. تبين الصورة مواقع بدء الانتساخ البديل (الأسهم)؛ إكسونات (المربعات) ونمط شق mRNAs الناضج. MeCP2B عبارة عن الصورة الإسوية الأكثر وفرة في الدماغ og ترميزها بواسطة 857765-201. 0 الشكل 2: يقوم المخطط بتصوير مستويات التعبير النسبي عن بروتين MeCP2 في العديد من الأنسجة البشرية بواسطة الكيمياء المناعية النسيجية. المعدلة لدى The Human Protein Atlas ٠ )17/ 177177 010161031185 .0186( الشكل 3: النطاقات الأساسية الوظيفية لبروتين MeCP2 والتطفرات الشائعة الموجودة في مرضى MBD = Rett ربط ميثيل -6م0؛ = TRD نطاق قمع انتساخي؛ = NID نطاق NCOR- Jeli ¢(NID) SMRT 5 وإشارة التموضع النووية -(NLS) الشكل 4: إثبات مفهوم استعادة التعبير عن Mecp2 الذي يتوسط فيه وتتهم في فتئران Rett ذكور . أ) صورة كرتونية من جينوم AAV ناتج عودة الارتباط الجيني. ب) التصميم الاختباري. ج) منحنى Kaplan-Meier sla يبدي البقاء الزائد ل فثران Rett تم علاجها ب sSCAAV9+738+Mecp2 مقارنة بحيوانات تم علاجها dager مقارن. د) تقوم استعادة 116002 التي يتوسط فيها الموجه بتحسين النمط 0 الخيفي السلوكي عند القياس بواسطة قياس درجات Bird (المريع 1). الشكل 5: يقوم علاج sSCAAV9#738+Mecp2 لفتران Rett ذكور وإناث بجعل المستويات الفسيولوجية J 106002 وبقوم بتحسين السلوك الشاذ. أ) التصميم الاختباري ب) قياسات شدة التألق من أجزاء الدماغ التي تم تعليمها مناعيا ل 2م1460 من فتران Rett وأخرى من النوع البري تم علاجها ب 2م797381؟1هذه:._يتشابه توزيع قياسات الشدة بين المجموعتين. ج) تبين درجات النمط الخيفي Bird تقليل في الأعراض في حيوانات تتلقى 841797380146002. 573( claw Platform «Inverted Grid «Rotarod السلوكية؛ على التوالي؛ Sg منها يبدي تحسن في الحيوانات التي تم علاجها ب 8:088179:73801/16002 في مقابل تلك التي تم علاجها بالدواء المقارن.
الشكل 6: صورة كرتونية تبدي الجيل الأول (A) وجينومات AAV ناتج عودة BUY) الجيني المعدلة (AVXS-201 «B) الموضحة هنا. تعكس الألوان التشابهات والفروق بين البنيات. بين scAAV9+738+Mecp2 و777658-201؛ تم تقصير المعززء تم تقصير المتواليات المتداخلة بين العناصر الأساسية؛ تم استبدال 2م1460 ألفا cDNA الفأري ب MeCP2B cDNA بشري؛ وإشارة إضافة بولي أدينيل هرمون نمو بقري إلى عنصر تخليقي أقصر. كانت التغيرات في الهدف الكلي لتحسين فعالية التغليف مع الحفاظ على مستويات التعبير عن MeCP2 cDNA ذات الصلة السريرية. الشكل 7: استجابة الجرعة AVXS-201 J في فئران (I Mecp2™ مخطط Kaplan-Meier للجرعات المختلفة المستخدمة لعلاج Gh 2460027. تم ترميز متوسط البقاء لمجموعات الجرعة وتمت الإشارة Led) بواسطة الخطوط المتقطعة. تضمنت كل مجموعة تلقت AVXS-201 زيادة في البقاء 0 في مقابل الفئران المتحورة المعالجة بالعقار المقارن. ب) تم تحديد بيانات البقاء المتوسط من كل de gana لتوضيح منحنى استجابة الجرعة. يمثل الخط المتقطع بقاء 1460027 تم علاجها ب PBS وهذه البيانات تتوافق مع الآثار المعروفة لخلل MeCP2 والزيادة المفرطة. الشكل 8: درجة Bird السلوكية لفئران 160027 تم ade ب LAVXS-201 أ) قامت الفئران المصابة المعالجة بالعينة المقارنة بمراكمة العيوب مع زيادة السن. تم تخفيف العيوب السلوكية مع 5 علاج AVXS-201 بغض النظر عن الجرعة. ب) تمت إعادة تخطيط نفس البيانات في (A) والتي تبدي فقط العلاج بالعينة المقارنة ومجموعة agin 1071.44 AVXS-201 فيروسي في المجموعة. الشكل 9: قامت Mecp2 (hi متحورة تم علاجها AVXS-201 بالشفاء من السير الذاتي. يبين تحليل المجال المفتوح أن hall المتحورة المعالجة ب AVXS-201 بعكس (أ) مسافة عكسية وعند متوسط سرعة (ب) زائدة مقارنة بالعينات المقارنة. ج) تم أيضا تحسين أداء Rotarod عند 3 أشهر 0 .من السن مع جرعات متوسطة من 7768-201م. م = +<0.001؛ م = *<005؛ =F م<0.0001. الشكل 10: يقوم AVXS-201 بعمل مقدار متوسط من MeCP2 عند الجرعات العلاجية. أ) مخططات وسترن ضد MeCP2 من نواتج التجانس من نصف الدماغ المصنوعة من Ol ذكور من النوع البري (PBS) أو .Mecp2” oli كانت فئران 2م1160 المتحورة جينيا إما غير محقونة (KO) 5 أو تلقت الجرعات المشار إليها من 817765-201. ب) قياس اللوح LA أعطت الجرعة العلاجية المستهدفة ل 10"*1.44جينوم فيروسي 711 من مستويات النوع البري للبروتين. الشكل 11: يتم تحمل AVXS-201 جيدا في Ohl من النوع البري. 1 مخطط بقاء Kaplan-Meier لفئران ذكور من النوع البري والتي تلقت إعطاء 1077 01 ل 817765-201. ب) تبدي درجات Bird النمطية الخيفية للفئران المعالجة ومن النوع البري أن هناك نطاق واسع من الجرعات التي يمكن 0 تحملها. أعطت الجرعة الأكبر (1071.13؛ الخط الأزرق) ضعف سلوكي طفيف.
الشكل 12: علاج AVXS-201 في حيوانات من النوع البري لا تضعف السير. يبدي التحليل المفتوح للفئران الذكور من النوع البري التي تم علاجها ب AVXS-201 مسافات انتقال (أ) ومتوسط سرعات (ب) متشابهة مع مجموعة العلاج المقارن للفئران من النوع البري. ج) تم تقليل Rotarod shal في الحيوانات من النوع البري التي تلقت الجرعة العالية ل -AVXS-201 م - +<0.001؛ =p *<0.05 الشكل 13: يقوم AVXS-201 بإنتاج زيادات معتمدة على الجرعة في بروتين MeCP2 في أدمغة من النوع البري. أ) تبين مخططات وسترن ضد MeCP2 زيادة معتمدة على الجرعة لبروتين MeCP2 الكلي في العديد من مناطق الدماغ بعد 3 أسابيع بعد حقن 011077. (- 605 المخيخ؛ = Med النقي؛ Hipp = الحصين؛ = Ctx القشرة؛ = Mid منتصف الدماغ). يشير 1203 إلى عينات مأخوذة من نموذج فأري ala لمتلازمة مضاعفة 'MeCP2 2( لوح القياس LA قامت الجرعات العالية؛ وليست
0 المتوسطة من AVXS-201 بمضاعفة التعبير عن MeCP2 في مناطق الدماغ المختارة. الشكل 14: لم يقم التسريب داخل ball ل AVXS-201 في الكائنات الرئيسية غير البشرية بإضعاف زيادة وزن الجسم. تم توضيح الحيوانات الثلاثة المعالجة ب AVXS-201 بالأحمر؛ وتم توضيح وزن الجسم بالنسبة لخاضع مقارن باللون الأزرق. الشكل 15: لم يؤثر التسريب داخل القراب ل AVXS-201 في الكائنات الرئيسية غير البشرية على
5 قيم خواص الدم على مدار 18 شهر بعد الحقن. تم توضيح القيم الخاصة بالحيوانات الثلاثة المعالجة ب AVXS-201 بالأحمر وتم توضيح الخاضعين المقارنين باللون الأزرق. الشكل 16: لم fig التسريب داخل القراب ل AVXS-201 في الكائنات الرئيسية غير البشرية على الكيمياء المصلية خلال 18-12 شهر بعد الحقن. تشابهت قيم الكبد والالكتروليت بين AVXS-201 والخاضعين للعلاج المقارن. تم توضيح القيم الخاصة بالحيوانات الثلاثة المعالجة ب AVXS-201
0 بالأحمر وتم توضيح الخاضعين المقارنين باللون الأزرق. الشكل 17: لم يؤثر التسريب داخل القراب ل AVXS-201 في الكائنات الرئيسية غير البشرية على الكيمياء المصلية خلال 18-12 شهر بعد الحقن. تشابهت القيم القلبية والكلوية بين AVXS-201 والخاضعين للعلاج المقارن. تم توضيح القيم الخاصة بالحيوانات الثلاثة المعالجة ب AVXS-201 بالأحمر وتم توضيح الخاضعين المقارنين باللون الأزرق.
5 الشكل 18: المستويات المتشابهة للتعبير عن MeCP2 في أدمغة الكائنات الرئيسية غير البشرية المقارنة والمعالجة ب 7765-201م. كشفت الكيمياء المناعية النسيجية المضادة MeCP2 J عن عدم وجود حالات غير طبيعية بنائية كمية أو فروق واضحة في التعبير عن 246002. = OC القشرة القذالية؛ = TC القشرة الصدغية؛ = LSe الحبل الشوكي الطرفي؛ = Thal المهاد؛ = Hipp الحصين؛ Cb = المخيخ.
الشكل 19: تبدي مخطط وسترن لمناطق الدماغ من الحيوانات المقارنة والمحقونة ب AVXS-201 مستويات متشابهة من 116072. تم توضيح مستويات 1460702 الكلية باللون الأخضر وتم توضيح ضوابط تحميل GAPDH بالأحمر. تم توضيح قياس الألواح By A أدناه من حيث المخططات المناظرة. تشير الخطوط المتقطعة في المخططات إلى متوسط القيم المعايرة التي كشفت عن الضوابط التساهمية. = OC القشرة القذالية؛ = TC القشرة الصدغية؛ = LSe الحبل الشوكي الطرفي؛ = Thal .+ SEM المخيخ. تم توضيح القيم بقيم متوسطة Cb = الحصين؛ Hipp = «algal الشكل 20: يبدي التهجين في الموقع انتساخ مشتق من موجه في كل المناطق التي تم فحصها من
Gapdh وليس الحيوانات المقارنة. يبين الشكل مسابير ضد AVXS-201 أدمغة الحيوانات المعالجة ب أزرق). Dapi) مشتق من موجه (أخضر) بالإضافة إلى التعليم النووي MeCP2 mRNA 5 (أحمر) 0C= 0 القشرة القذالية؛. = TC القشرة الصدغية؛ = »15 الحبل الشوكي الطرفي؛ = Hipp الحصين؛ Cb = المخيخ. أعمدة القياس = 20 ميكرومتر. الشكل 21: يبدي التهجين في الموقع انتساخ مشتق من موجه في كل المناطق التي تم فحصها من أدمغة الحيوانات المعالجة ب AVXS-201 وليس الحيوانات المقارنة 18 شهر بعد الحقن. يبين الشكل مسابير ضد mRNA 5 (eal) Gapdh 116002 مشتق من موجه (أخضر) بالإضافة إلى التعليم 5 النووي Dapi) أزرق). = OC القشرة القذالية؛. = TC القشرة الصدغية؛ CAL و- CA3 مناطق من الحصين؛ = OC الجسم الثفني؛ = Thal المهاد؛ = Cau المذنب؛ = Put البطامة؛ = 50011 الأكيمة العلوية؛ = Med النقي؛ = Cb المخيخ»؛ = Cerv الحبل الشوكي العنقي؛ = Thor الحبل الشوكي الصدري؛ = Lumb الحبل الشوكي الطرفي. أعمدة القياس = 20 ميكرومتر. الوصف التفصيلي: 20 في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع طرق للإعطاء داخل القراب (أي؛ إعطاء في الفراغ تحت الغشاء العنكبوتي للدماغ أو الحبل الشوكي) لبولي نيكلوتيد يرمز MeCP2 إلى مريض يتضمن إعطاء 9 مع جينوم شاملا البولي نيكلوتيد. في بعض الجوانب» جينوم 9ت1مم« عبارة عن جينوم ذاتي المكمل. في نماذج (Al جينوم TAAVY عبارة عن جينوم أحادي الجديلة. تقوم الطرق بتوصيل البولي نيكلوتيد الذي يرمز MeCP2 إلى الدماغ والحبل الشوكي للمريض 5 (يء النظام العصبي المركزي للمربض). يتضمن التوصيل المذكور إلى بعض المناطق المستهدفة للدماغ» على سبيل المثال لا الحصرء القشرة الحركية وجذع الدماغ. يتضمن التوصيل المذكور لبعض الخلايا المستهدفة للنظام العصبي المركزي؛ على سبيل المثال لا الحصرء الخلايا العصبية والخلايا الدبقية. تتضمن الأمثلة على الخلايا الدبقية الخلايا الدبقية الدقيقة؛ الخلايا قليلة التغضن والخلايا النجمية.
تمت الإشارة إلى توصيل بولي نيكلوتيدات يرمز 2846072 Mie لعلاج متلازمة ‘Rett يتضمن "العلاج" خطوة إعطاء عبر المسار داخل القراب جرعة فعالة؛ أو جرعات متعددة فعالة؛ لتركيبة تتضمن rAAV وفقا للاختراع إلى حيوان خاضع (شاملا مريض بشري) محتاج له. إذا تم إعطاء الجرعة قبل تطوير اضطراب/مرض؛ الإعطاء وقائي. إذا تم إعطاء الجرعة بعد تطوير اضطراب/مرض» الإعطاء علاجي. في نماذج الاختراع» جرعة فعالة عبارة عن جرعة تقوم بتخفيف (إما باستبعاد أو تقليل) عرض واحد على الأقل مرتبطة بحالة الاضطراب/المرض المطلوب علاجه؛ ويقوم بتطوير عرض واحد على الأقل مرتبطة بحالة الاضطراب/المرض المطلوب علاجه؛ والذي يقوم بإبطاء أو الوقاية من تقدم حالة الاضطراب/المرض» والذي يبطل مقدار المرض» والذي يؤدي إلى تخفيف (جزئي أو كلي) للمرضء و/أو الذي يطيل البقاء.
في علاج متلازمة Rett تؤدي الطرق إلى أثر في الخاضع Olas على سبيل المثال لا الحصر؛ اكتساب حركة اليد المفيدة؛ تطوير في الحديث؛ تقليل في حالات التوقف عن التنفس؛ تقليل في التشنجات؛ تقليل في القلق؛ زيادة في التواصل الاجتماعي؛ زيادة في (IQ معايرة أنماط النمو و/أو الحركة الزائدة.
تم أيضا ذكر توليفات العلاج بواسطة الاختراع. تتضمن التوليفات المستخدمة هنا كل من
5 العلاج الآني أو التتابعي. تم ذكر توليفات طرق الاختراع مع العلاجات الطبية القياسية لمتلازمة
(lata Rett كتوليفات مع علاجات جديدة.
بينما تم ذكر التوصيل إلى فرد محتاج له بعد الولادة؛ تم أيضا ذكر التوصيل داخل الرحم إلى الجنين.
في جانب آخرء يقدم الاختراع جينومات TAAV تتضمن جينومات TAAV واحد أو أكثر
20 من AAVITRs التي تحيط ببولي نيكلوتيد يرمز 816072. يتم ربط البولي نيكلوتيد تشغيليا ب DNAs انتساخية مقارنة؛ تحديدا DNA معزز ومتوالية DNA لإشارة إضافة بولي أدينيل الوظيفية في الخلايا المستهدفة لتكوين QE جيني.” يمكن أن يتضمن القالب الجيني معززات والتي تسمح بالتعبير تحديدا في النيورونات أو تحديدا في الخلايا الدبقية. تتضمن الأمثلة إينولاز انتقائي للنيورون ومعززات بروتين حمضي تليفي دبقي. يمكن أيضا استخدام المعززات القابلة للحث تحت تحكم عقار مهتضم.
5 تتضمن الأمثلة؛ على سبيل المثال لا الحصرء الأنظمة Jie نظام تترا سيكلين (TET on/off) ass [Urlinger et al., Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA 97(14):7963-7968 (2000)] نظام مستقبل إيكديسون بالتنظيم ])2003( 1308-1315 :270 W[Palli ef al, Eur J.
Biochem يمكن أن يتضمن القالب الجيني أيضا متواليات إنترون لتسهيل معالجة نسخة RNA عند التعبير عن البولي نيكلوتيد في الخلايا الثديية.
تحتاج جينومات rAAV وفقا للاختراع إلى cap DNA 3 AAV rep يمكن أن تكون AAV DNA في جينومات rAAV (مثلاء (ITRs من أي نمط مصلي lly AAV يمكن منها اشتقاق الفيروس ناتج عودة الارتباط الجيني شاملاء على سبيل المثال لا الحصر؛ الأنماط المصلية AAV (AAVI0 (AAV9 (AAVS (AAV7 (AAV6 (AAV5 (AAV4 (AAV3 (AAV2 (AAVI
LAAVIh74 5 AAVI3 (AAVI12 ¢AAVI1 5 هناك متواليات النيكلوتيد من الجينومات الخاصة بالأنماط المصلية AAV معروفة في المجال. مثلا؛ تم توفير جينوم AAVY في Gao ef al, J. Virol, 78: 6381-6388 (2004) في جانب AT « يقدم الاختراع بلازميدات DNA تتضمن جينومات rAAV وفقا للاختراع. تم Ja بلازميدات DNA إلى الخلايا القابلة للإصابة مع فيروس مساعد من Olas) AAV فيروس 0 غديء فيروس غدي محذوف منه BI أو فيروس الهريز) لتجميع جينوم 17م« في الجسيمات الفيروسية المعدية مع بروتينات AAVO كابسيد. تم توفير التقنيات الخاصة بإنتاج جسيمات TAAV حيث تتم تعبئة جينوم (AAV جينات ccap rep ووظائف الفيروس المساعد إلى خلية؛ قياسية في المجال. يتطلب إنتاج TAA أن تكون المكونات التالية موجودة في خلية فردية (المشار إليها هنا بخلية غلافية): جينوم AAV جينات caps AAV rep منفصلة من (أي؛ ليس داخل) جينوم rtAAV 5 ووظائف الفيروس المساعد. تم الكشف عن إنتاج أشباه TAAV في؛ WO 01/83692 «Mia والتي تم دمجها بالإشارة Led) هنا كمرجع. في العديد من النماذج» يمكن تعديل بروتينات كابسيد AAV لتحسين توصيل الموجه ناتج عودة الارتباط الجيني. التعديلات على بروتينات كابسيد معروفة بشكل عام في المجال. انظر؛ (US 2009/0202490 5 US 2005/0053922 Mia وقد تم دمج الكشوف الخاصة بها بالإشارة إليها هنا. هناك طريقة لتوليد خلية غلافية وهي تكوين سلالة خلية والتي تقوم بالتعبير بشكل مستقر عن المكونات الضرورية لإنتاج جسيم Ole LAAV بلازميد (أو بلازميدات متعددة) تتضمن جينوم rAAV تحتاج إلى جينات cap 9 AAV rep تنفصل جينات cap g AAV rep من جينوم AAV ومرقم قابل للكشف عنه؛ مثل جين مقاومة نيوميسين؛ مدمجة في جينوم الخلية. تم إدخال جينومات AAV في بلازميدات بكتيرية بواسطة الإجراءات Jie تذييل Samulski et al., 1982, Proc. ) GC «(Natl Acad.
S6. USA, 79:2077-2081 5 إضافة الروابط التخليقية التي تحتوي على مواقع شق داخلية )23:65-73 (Laughlin et al, 1983, Gene, أو بواسطة Jali المباشر مقطوع الطرف ٠. (Senapathy & Carter, 1984, J.
Biol.
Chem., 259:4661-4666) بعد ذلك تتم إصابة سلالة الخلية الغلافية مع فيروس مساعد مثل فيروس غدي. Lhe هذه الطريقة هي تلك الخلايا القابلة للاختيار والمناسبة لإنتاج AAV كبيرة القياس. تقوم الأمثلة الخاصة بالطرق المناسبة باستخدام
فيروس غدي أو الفيروس العصوي بدلا من بلازميدات لإدخال جينومات TAAV و/أو جينات rep cap في الخلايا المغلفة. تتم مراجعة المبادئ العامة لإنتاج rAAV في مثا Carter, 1992, Current Opinions in ‘Biotechnology, 1533-539 و Muzyczka, 1992, Curr.
Topics in Microbial. and Immunol., 158:97-129. تم وصف العديد من الطرق في )1984( 4:2072 ‘Ratschin et al., Mol.
Cell.
Biol. Tratschin et al., Mol.
Cell. ¢Hermonat et al., Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA, 81:6466 (1984) J.
Virol., 62:1963 (1988) ¢Biol. 5:3251 (1985) لق ¢{McLaughlin et و Lebkowski et al., Mol.
Cell.
Biol., 7:349 (1988). Samulski et al. (1989, J.
Virol., 63:3822-3828) £1988 براءة الاختراع الأمريكية رقم 5173414؛ 95/13365 WO ويراءة الاختراع الأمريكية المناظرة رقم ¢WO 96/17947 ¢WO 95/13392 ¢5658776 10 01/0598/18600؛ 97/09441 WO WO 97/21825 ‘WO 97/08298 (PCT/US96/13872) «(PCT/US96/14423) Perrin et al. ¢WO 99/11764 ¢WO 97/06243 (PCT/FR96/01064) ¢(PCT/US96/20777) ‘Paul et al. (1993) Human Gene Therapy 4:609-615 ¢(1995) Vaccine 13:1244-1250 ¢Clark et al. (1996) Gene Therapy 3:1124-1132 براءة الاختراع أ لأمريكية رقم ¢5786211 براءة 5 الاختراع الأمريكية رقم 5871982؛ وبراءة الاختراع الأمريكية رقم 6258595 تم دمج الوثائق السابقة هنا بالإشارة إليها (LIS مع التركيز على هذه الأجزاء من الوثائق المرتبطة على إنتاج TAAV يقوم الاختراع بالتالي بتوفير الخلايا المغلفة التي تنتج 87م« معدية معيبة التكاثر. في أحد النماذج يمكن أن يتم تقوم الخلايا المغلفة بشكل مستقر بتحويل خلايا السرطان مثل الخلايا HeLa الخلايا 293 وخلايا PerC.6 (السلالة المترافقة 293). في نموذج آخرء الخلايا المغلفة عبارة عن 0 خلايا لم يتم تحويلها WIS السرطان Jie المرور المنخفض ل WIA 293 (خلايا الكلى البشرية الجنينية المحولة مع El للفيروس الغدي)؛ MRC-5 WAS (الخلايا الليمفاوية الجنينية البشرية)؛ LDA 171-38 (الخلايا الليمفاوية الجنينية البشرية)» خلايا Vero (الخلايا الكلوية للقرد) وخلايا متطع171 2 (خلايا رئوية جنينية لقرد الرياح). بالتالي» في جانب «AT يقدم الاختراع TAAVO ie AAV (أي؛ جسيمات TAAVY معيبة 5 التكاثر معيبة «ASH معدية dallas بكابسيد) يتضمن جينوم AAV وفقا للاختراع. تحتاج جينومات rAAV إلى AAV rep وخلاط ccap حيث؛ لم يكن هناك أي AAV rep أى cap DNA بين ITRs للجينومات. في بعض الجوانب؛ Ble TAAV agua عن جينوم ذاتي المكمل. في بعض الجوانب؛ TAAV asia عبارة عن asia أحادي الجديلة. تم توفير TAAV مثل AAVO ذاتية التكميل (5cAAVY) مسماة '817765-201." يتضمن 0 القالب الجيني (نيكلوتيدات 2558-151 للجينوم AVXS-201 المذكور في متوالية بهوية رقم: 1)؛
في متوالية؛ شظية معزز بمقدار 546 زوج قاعدة (متوالية بهوية رقم: 2) (نيكلوتيدات 74085586- 3 من NC_000086.7 في التوجيه العكسي) من جين MeCP2 الفأري؛ إنترون SV40 MeCP2B cDNA بشري (متوالية بهوية رقم: 3) (قاعدة بيانات ((CCDS48193.1# CCDS ومتوالية إشارة تخليقية لإضافة بولي أدينيل (متوالية بهوية رقم: 4). تمت إحاطة القالب الجيني بواسطة تكرار طرفي محول ب AAV2 متطفر (ITR) وتكرار طرفي محول ب AAV2 من النوع البري التي تتيح تعبئة جينومات AAV ذاتية التكامل. يحتاج الجينوم إلى cap DNA 5 AAV rep حيث؛ لا يوجد AAV rep أو cap DNA بين ITRs للجينوم. تم توفير AAV مثل sCAAVY يسمى ".scAAV9+T38sMecp2’ يتضمن القالب الجيني (نيكلوتيدات 2890-198 من جينوم 91907380116002 المذكور في متوالية بهوية رقم: 5)؛ 0 في متوالية» شظية معزز بحجم 738 زوج قاعدة (متوالية بهوية رقم: 6) (نيكلوتيدات 74085586- 3 من NC_000086.7 في التوجيه العكسي) من جين «lll MeCP2 إنترون SV40 cDNA 14160020 فأري (متوالية بهوية رقم: 7) (قاعدة بيانات CCDS 000541016.1#)؛ ومتوالية إشارة إضافة بولي أدينيل من جين هرمون النمو البقري. تتم الإحاطة بالقالب الجيني بواسطة تكرار طرفي محول ب AAV2 متطفر (ITR) وتكرار طرفي محول ب AAV2 من النوع البري التي تتيح 5 تعبئة جينومات AAV ذاتية التكامل. يحتاج الجينوم إلى «Cus cap DNA 5 AAV rep لا يوجد AAV rep أو cap DNA بين ITRs للجينوم. تم ذكر استبدالات النيكلوتيد المحافظ في TAAVY agin شاملاء على سبيل المثال لا الحصرء في القالب الجيني في جينوم ie AAV يمكن أن يتضمن cDNA 146002 في قالب جيني 0؛ لق 2ق دق لقنل دقل مقن 7ق 7/88« و9قثت 790« 91 92 0 293 294 295 296 7297 7298 أو 299 تطابق متوالية مع cDNA 1160020 في 738:12 :9 لأهف أو MeCP2B cDNA في -AVXS-201 في بعض الجوانب؛ يمكن أن يكون بولي MeCP2 iin مرمزا بواسطة TAAVY وفقا للاختراع عبارة عن صورة بولي ببتيد MeCP2 مختلفة. تقوم صورة بولي ببتيد مختلفة بالحصول على نشاط 2 وتتضمن متوالية حمض أميني على الأقل مطابقة بمقدار حوالي 60« 70 80؛ 85؛ 90؛ 5 95 97 98 99 أو 799.5 لمتوالية (mes أميني من بولي ببتيد 14602 مرمز بواسطة MeCP2a cDNA في 9738012 لاههه؟ أو cDNA 1160025 في AVXS-201 يمكن تنقية rAAV بواسطة طرق قياسية في المجال مثل بواسطة عمود كروماتوجراف أو تدريجات كلوريد سيزيوم. هناك طرق لتنقية موجهات TAAV من فيروس مساعد معروفة في المجال وتتضمن الطرق المكشوف عنها في» Clark et al., Hum.
Gene Ther., 10(6): 1031-1039 «Jie
(1999)؛ (2002) 427-443 :69 ¢Schenpp and Clark, Methods Mol.
Med., براءة الاختراع الأمريكية رقم 6,566,118 5 98/09657 WO في جانب OAT يشير الاختراع إلى تركيبات تتضمن AAV مثل AAVY ترمز بولي ببتيد MeCP2 5 تتضمن تركيبات الاختراع TAAV في مادة حاملة مقبولة صيدلانيا. يمكن أن تتضمن التركيبات Load مكونات أخرى مثل مخففات ومواد مضافة. المواد (Alaa) مخففات والمواد المضافة المقبولة غير سامة للمستقبلين وهي خاملة بشكل مفضل عند الجرعات والتركيزات المستخدمة؛ وتتضمن محاليل منظمة مثل فوسفات؛ سيترات؛ أو أحماض عضوية أخرى؛ مضادات أكسدة Jie حمض أسكوربيك؛ بولي ببتيدات منخفضة الوزن الجزيئي؛ بروتينات؛ Jie ألبومين مصل؛ جيلاتين؛
0 أو مركبات جلوبولين مناعي؛ بوليمرات كارهة للماء Jie بولي فينيل بيروليدون؛ أحماض أمينية ie (Cla جلوتامين؛ أسباراجين؛ أرجينين أو ليسين؛ مركبات مونو سكاريد؛ مركبات (gh مكاريد؛ وكربوهيدرات أخرى شاملا جلوكوز؛ مانوز؛ أو مركبات دكسترين؛ عوامل خالبة (EDTA Jie كحولات سكر مثل مانيتول أو سوربيتول؛ أيونات مضادة مكونة للملح مثل صوديوم؛ و/أو مواد خافضة للتوتر السطحية غير الأيونية (Tween fie مركبات بوليمرية ثلاثية أو بولي إيثيلين جليكول (PEG)
تم تحضير المحاليل المعقمة القابلة للحقن بواسطة دمج TAAV بالمقدار المطلوب في المذيب المطلوب مع العديد من المكونات الأخرى المذكورة coded كما هو مطلوب؛ متبوعة بواسطة التعقيم بالمرشح. بشكل عام؛ تم تحضير المشتتات بواسطة دمج المكون النشط المعقم في مادة ناقلة معقمة Ally تحتوي على وسط المشتت القاعدي والمكونات الأخرى المطلوية من تلك المرقمة أعلاه. في حالة المساحيق المعقمة لتحضير المحاليل المعقمة القابلة للحقن؛ الطرق المفضلة للمستحضر عبارة
0 عن التجفيف بالتفريغ وتقنية التجفيف بالتجميد والتي تعطي مسحوق من المكون النشط بالإضافة إلى أي مكون مطلوب من المحلول المعقم المرشح سلفا منه.
سوف تختلف معايير وجرعات TAAV المطلوب إعطاؤها في طرق الاختراع بشكل معتمد؛ Oli على AAV المحدد؛ وضع الإعطاء؛ هدف العلاج؛ (dll توقيت الإعطاء» ونوع (أنواع) الخلية المستهدفة؛ ويمكن تحديدها بواسطة طرق معيارية في المجال. يمكن أن تتفاوت معايير AAV
5 .من حوالي 109»1؛ isa 10771 حوالي 105*1؛ حوالي 107*1؛ حوالي 1091 حوالي 10*1؛ حوالي 10121 حوالي 1011 إلى حوالي 10771 أو أكثر من جسيمات مقاومة ل (DRP) DNase لكل ملل. يمكن التعبير عن الجرعات في وحدات جينومات فيروسية (جينوم فيروسي). يمكن أن تتفاوت هذه الجرعات من AAV من حوالي 10771 agin فيروسي أو ST حوالي 1071 جينوم فيروسي أو أكثر؛ حوالي 1071 asim فيروسي أو أكثر» حوالي 10751
0 جينوم فيروسي أو 5ST « حوالي 1012%6 أو أكثر؛ حوالي 10771 جينوم فيروسي أو أكثر» حوالي
3 جينوم فيروسي أو SST ¢ حوالي 1017*1.4 asin فيروسي أو أكثرء حوالي 1015*2 agin فيروسي أو أكثر؛ حوالي 10573 جينوم فيروسي أو أكثر» حوالي 10776 agin فيروسي أو أكثر؛ حوالي 10171 جينوم فيروسي أو أكثرء حوالي 10153 أو أكثر؛ حوالي 10*76 أو أكثر» حوالي 10771 جينوم فيروسي أو أكثر؛ حوالي 1073 أو أكثرء حوالي 1076 أو أكثر حوالي ]100% أو أكثر؛ حوالي 1093 أو أكثرء أو حوالي 10156 أو أكثر. بالنسبة لمولود؛ يمكن أن تتضمن جرعات AAV من حوالي 10771 جينوم فيروسي أو أكثر؛ حوالي 1071 جينوم فيروسي أو أكثر؛ حوالي 1071 جينوم فيروسي أو أكثر؛ حوالي 10*71 جينوم فيروسي أو ST حوالي 10276 أو أكثر؛ asim 10*1 Joa فيروسي أو أكثرء حوالي 1.3 10# asin فيروسي أو «JST حوالي 1051.4 agin فيروسي أو أكثر؛ حوالي 10572 جينوم فيروسي أو 0 أكثرء حوالي 10053 asin فيروسي أو أكثر؛ حوالي 1076 asin فيروسي أو أكثرء حوالي 101 جينوم فيروسي أو أكثرء حوالي 10973 أو أكثرء حوالي 1076 أو ST حوالي 1 جينوم فيروسي أو أكثرء حوالي 101773 أو أكثرء حوالي 10"*6 أو ST حوالي
]107% أو أكثرء حوالي 10773 أو أكثرء أو حوالي 10976 أو أكثر. تؤدي الطرق وفقا للاختراع إلى تحويل الخلايا المستهدفة (شاملاء على سبيل المثال لا 5 الحصرء؛ الخلايا العصبية أو الدبقية). يتم استخدام المصطلح "dia للإشارة إلى الإعطاء/توصيل لبولي نيكلوتيد إلى خلية مستهدفة إما في الكائن الحي أو في المعمل؛ عبر TAAV معيبة التكاثر معدية وفقا للاختراع والتي تؤدي إلى التعبير عن بولي ببتيد 146072 وظيفي بواسطة الخلية المستقبلة. يؤدي تحويل الخلايا باستخدام 57م وفقا للاختراع إلى التعبير المستديم عن بولي ببتيد Se yall MeCP2 بواسطة rAAV في بعض الجوانب؛ تم ذكر مستوى التعبير المستهدف بحيث يبلغ 0 حوالي 775 إلى حوالي 7125 من التعبير الطبيعي (أو من النوع البري) الفسيولوجي في خاضع يعاني من متلازمة Rett يمكن أن يبلغ مستوى التعبير المستهدف حوالي 775؛ حوالي 780 حوالي 5؛ حوالي 790 حوالي 795 حوالي 7100» حوالي 7105» حوالي L110 حوالي 7115؛
حوالي 7120 أو حوالي 7125 من مستوى التعبير الطبيعي. في بعض جوانب طرق العلاج وفقا للاختراع؛ يتم إعطاء عامل غير أيوني منخفض التناضح 5 منتخفض التعارض Lad إلى المريض. تتضمن عوامل التعارض؛ على سبيل المثال لا الحصرء أيوبيتريدول» أيوهيكسول» أيوميبرول؛ أيوباميدول؛ أيوبينول» nag ped أيوفيرسول»؛ أيوكسيلان؛ وخلطات من اثنين أو أكثر من عوامل التعارض. في بعض الجوانب؛ تتضمن طرق العلاج بالتالي أيضا إعطاء لأيوهيكسول إلى المريض. تم سرد العامل غير الأيوني منخفض التناضح منخفض التعارض أيضا زيادة تحويل الخلايا المستهدفة في النظام العصبي المركزي للمريض. تم ذكر أن 0 تحويل الخلايا يزيد عند استخدام rAAV وفقا للكشف في توليفة مع عامل تعارض كما هو مبين هنا
نسبة إلى تحويل الخلايا عند استخدام rAAV وفقا للكشف فقط. في العديد من النماذج؛ تتم زيادة تحويل الخلايا بواسطة على الأقل حوالي AT أو على الأقل حوالي 75 على الأقل حوالي 710 على الأقل حوالي 720 على الأقل حوالي 730 على الأقل حوالي 740 على الأقل حوالي 750 على الأقل حوالي 760 على الأقل حوالي 770 على الأقل حوالي 780؛ على الأقل حوالي 790 على الأقل حوالي 72100؛ على الأقل حوالي 7120؛ على الأقل حوالي 7150؛ على الأقل حوالي 0.؛ على الأقل حوالي 7200؛ على الأقل حوالي 7250؛ على الأقل حوالي 7300؛ على JN حوالي 7350؛ على الأقل حوالي 7400 على الأقل حوالي 7450؛ على الأقل حوالي 7500 أو أكثر عند الكشف عن موجه وفقا للكشف في توليفة مع عامل تعارض كما هو مبين هناء نسبة إلى تحويل موجه وفقا للكشف عند عدم الاستخدام في توليفة مع عامل تعارض. في نماذج أخرى؛ تتم 0 زيادة تحويل الخلايا بواسطة حوالي 710 إلى حوالي 750 أو بواسطة حوالي 710 إلى حوالي of 7100 بواسطة حوالي 75 إلى حوالي 710؛ أو بواسطة حوالي 75 إلى حوالي 750؛ أو بواسطة حوالي 71 إلى حوالي 7500 أو بواسطة حوالي 710 إلى حوالي 7200 أو بواسطة حوالي 710 إلى حوالي 7300؛ أو بواسطة حوالي 710 إلى حوالي 7400؛ أو بواسطة حوالي 7100 إلى حوالي 0 أو بواسطة حوالي 7150 إلى حوالي £300 أو بواسطة حوالي 7200 إلى حوالي 7500 5 عند استخدام موجه وفقا للكشف في توليفة مع عامل تعارض كما هو مبين هناء نسبة إلى تحويل موجه وفقا للكشف عند عدم الاستخدام في توليفة مع عامل تعارض. في بعض الجوانب؛ تم ذكر أن تحويل الخلايا يزيد عند وضع المريض في موضع Trendelenberg (وضع مقلوب). في بعض الجوانب؛ lie تتم إمالة المرضى في الوضع المقلوب عند حوالي 1 درجة إلى حوالي 30 درجة؛ حوالي 15 إلى حوالي 30 درجة؛ حوالي 30 إلى حوالي 0 60 درجة؛ حوالي 60 إلى حوالي 90 درجة؛ أو حوالي 90 تصل إلى حوالي 180 درجة أثناء أو بعد تسريب الموجه داخل القراب. في العديد من النماذج؛ تتم زيادة تحويل WAY بواسطة على الأقل حوالي ST أو على الأقل حوالي 75؛ على الأقل حوالي 710؛ على الأقل حوالي 20 على الأقل حوالي 730 على الأقل حوالي 740 على الأقل حوالي 750؛ على الأقل حوالي 760؛ على JN حوالي 770 على الأقل حوالي 780؛ على الأقل حوالي 790؛ على الأقل حوالي 7100 على 5 الأقل حوالي 120 على الأقل حوالي 72150؛ على الأقل حوالي 7180؛ على الأقل حوالي 200 على الأقل حوالي 7250؛ على الأقل حوالي 7300؛ على الأقل حوالي 7350؛ على الأقل حوالي 0 على الأقل حوالي 2450؛ على الأقل حوالي 7500 أو أكثر عند استخدام الموضع Trendelenberg كما هو مبين هناء نسبة إلى عدم استخدام موضع 11:600616006:8. في نماذج أخرى؛ تتم زيادة تحويل الخلايا بواسطة حوالي 710 إلى حوالي 750« أو بواسطة 0 عوالي 710 إلى حوالي 7100 أو بواسطة حوالي 75 إلى حوالي 710؛ أو بواسطة حوالي 75 إلى
حوالي 750 أو بواسطة حوالي 71 إلى حوالي £500 أو بواسطة حوالي 710 إلى حوالي 7200 أو بواسطة حوالي 710 إلى sa 7300 أو بواسطة حوالي 710 إلى حوالي 7400 أو بواسطة حوالي 7100 إلى حوالي £500 أو بواسطة حوالي 7150 إلى حوالي 7300 أو بواسطة حوالي 0 إلى حوالي 7500 عند استخدام موجه وفقا للكشف في توليفة مع عامل تعارض وموضع Trendelenberg 5 كما هو مبين هناء نسبة إلى تحويل موجه وفقا للكشف عند عدم الاستخدام في توليفة مع عامل تعارض وموضع .Trendelenberg يقدم الكشف أيضا نماذج طريقة علاج حيث الإعطاء داخل القراب للموجه وفقا للكشف وعامل تعارض إلى النظام العصبي المركزي للمريض المحتاج الذي يؤدي إلى زيادة في نجاة المريض نسبة إلى نجاة المريض عند إعطاء الموجه وفقا للكشف في غياب عامل التعارض. في العديد من 0 النماذج؛ يؤدي إعطاء موجه وفقا للكشف وعامل تعارض إلى النظام العصبي المركزي لمريض محتاج له إلى زيادة نجاة المريض بمقدار على الأقل حوالي 71؛ على الأقل حوالي 75؛ على الأقل حوالي 0 على الأقل حوالي 720 على الأقل حوالي 730 على الأقل حوالي 740 على الأقل حوالي 750 على الأقل حوالي 760؛ على الأقل حوالي 770 على الأقل حوالي 780 على الأقل حوالي 90 على الأقل حوالي 72100؛ على الأقل حوالي 7150؛ على الأقل حوالي 7200 أو أكثر من 15 نسبة إلى نجاة المريض عند إعطاء الموجه وفقا للكشف في غياب عامل التعارض. يقدم الكشف أيضا نماذج طريقة علاج حيث يؤدي الإعطاء داخل القراب لموجه وفقا للكشف وعامل تعارض إلى النظام العصبي المركزي لمريض محتاج له والذي يتم وضعه في موضع Trendelenberg إلى زبادة في نجاة المريض نسبة إلى نجاة المريض عند إعطاء الموجه وفقا للكشف في غياب عامل التعارض وموضع ع:1:©00616006. في العديد من النماذج؛ يؤدي إعطاء موجه 0 وفقا للكشف وعامل تعارض إلى النظام العصبي المركزي لمريض محتاج موضوع في موضع Trendelberg إلى زيادة نجاة المريض بمقدار على الأقل حوالي 71؛ على الأقل حوالي 75 على الأقل حوالي 710؛ على الأقل حوالي 720؛ على الأقل حوالي 730 على الأقل حوالي 740 على الأقل حوالي 750؛ على الأقل حوالي 760؛ على الأقل حوالي 770 على الأقل حوالي 780 على الأقل حوالي 790؛ على الأقل حوالي 7100؛ على الأقل حوالي 150 على الأقل حوالي 7200 أو أكثر من نسبة إلى نجاة المريض عند إعطاء الموجه وفقا للكشف في غياب عامل التعارض وموضع .Trendelenberg الأمثلة تم شرح الاختراع الحالي بواسطة ما يلي. ٠ إثبات الدراسات المفاهيمية في نماذج فئران Rett ذكور وإناث تبين فعالية علاجية بعد الحقن الوريدي ل .scAAV9+738+Mecp2 (المثال 1(
٠ يبدي موجه العلاج الجيني من الجيل الثاني 877765-201؛ تمديد البقاء في نطاق واسع من الجرعات بعد علاج عبر البطين (ICV) لفثران !27م1460. كانت الزيادة القصوى في بقاء متوسط 7477 بعد علاج LAVXS-201 (المثال 2) ه تبدي فئران 1460027 ذكور تم علاجها ب AVXS-201 تطوير مستديم في السلوك مقياس بواسطة تصنيف مركب مطور لفئران Rett (المثال 3) ٠ تم الحصول علاج المنفعة النمطية الخيفية في Mecp2™ (hi تم علاجها باستخدام AVXS- 1 مع مستويات متوسطة من التعبير البروتيني. (المثال 4) ٠ تم تحمل علاج Ohl من النوع البري مع AVXS-201 جيدا خلال كل الجرعات التي تم اختبارها مع تغيرات مستديمة في الدرجات السلوكية الملحوظة فقط في مجموعة الجرعة العالية. (المثال 5 والمثال 6) oo تشير الجرعات داخل القراب في الكائنات الرئيسية غير البشرية إلى أن AVXS-201 آمنة ويمكن تحملها على مدار 18 شهر بعد الحقن. (المثال 7) ٠ تقوم AVXS-201 بالتعبير عن الجين المتحول عند مستويات كبيرة فسيولوجيا في الدماغ والحبل الشوكي لكائن رئيسي غير بشري بعد حقن مرة واحدة داخل القراب. (المثال 8) 5 المثال 1 أثبات العلاج الجيني لمتلازمة Rett لدراسات مفاهيمية في فئران Rett ذكور وإناث كدليل على المفهوم»؛ تم علاج فتئران Rett ذكور وإناث عرضية عبر الوريد باستخدام Garg et al., The Journal of Neuroscience: The Official Journal of] scAAV9+738+Mecp2 [rhe Society for Neuroscience, 33: 13612-13620 (2013) يتضمن الجينوم الفيروسي ناتج عودة الارتباط الجيني ل SCAAV9+738<Mecp2 (متوالية بهوية رقم: 5( شظية معزز بحجم 738 زوج قاعدة من جين MeCP2 الفأري ] 3709-3722 :14 al., Human Molecular Genetics, اه Adachi Ally [(2005) تقوم بتشغيل التعبير عن cDNA 1460020 فأري (قاعدة CCDS # «lly (CCDS41016.1 وإشارة إضافة بولي أدينيل لهرمون نمو بقري. تتم إحاطة القالب الجيني (نيكلوتيدات 2890-198 من متوالية بهوية رقم: 5) بواسطة تكرار طرفي محول ب AAV2 متطفر (ITR) AAV2ITRy 5 من النوع البري Allg تتيح تعبئة جينومات AAV ذاتية التكامل. تم إنتاج AAVY ذاتية التكميل (scAAVY) بواسطة إجراءات الإصابة الانتقالية باستخدام موجه قائم على أساس AAV2ITR مزدوج الجديلة؛ مع متوالية بلازميد ترمز Rep2Cap9 كما هو ia ge سلفا [(2004) 6381-6388 :78 [Gao er al, J.
Virol., بالإضافة إلى مساعد بلازميد فيروسي غدي (Stratagene, Santa Clara, CA) pHelper في LIA 293. تم إنتاج الفيروس في ADE دفعات 0 منفصلة للاختبارات والمنقاة بواسطة اثنين من خطوات تثقية تدريج شدة كلوريد سيزيوم؛ تمت الديلزة
ضد PBS وتمت الصياغة مع 70.001 Pluronic-F68 لمنع تراكم الفيروس وتم التخزين عند 4"م. تمت معايرة كل مستحضرات الموجه بواسطة PCR كمي باستخدام تقنية Tag-Man تم تقييم نقاء الموجهات بواسطة 112-4 استشراد كهربي لجل صوديوم دوديسيل سلفات- أكريلاميد وتبقيع فضة -(Invitrogen, Carlsbad, CA)
تم علاج الفئران الذكور مع أليلة 2م1460 متحورة عبر الوريد مع 0253 asin] فيروسي من أي من 9738:1046002/اهحطهه» أو موجه SCAAVO مقارن بين أعمار 6-4 أسابيع. تم اتباع الحيوانات للبقاء وتم التقييم أسبوعيا من أجل الدرجة النمطية الخيفية [ :315 Guy et al., Science, (2007) 1143-1147]. مكونات الدرجات النمطية الخيفية من 2007 .Guy et al.
0 أ. الانتقالية: تتم ملاحظة Sl) عند الوضع على منصة؛ وبعد ذلك تم التعامل معها برفق. 0 = كنوع بري. 1 - حركة منخفضة عند المقارنة بالنوع البري: فترة تجميد ممتدة عند الوضع أولا على المنصة وانقضت فترات أطول دون حركة. 2 = بدون حركة عفوية عند الوضع على المنصة؛ يمكن أن يتحرك الفأر في استجابة للنخس الطفيف أو جزءٍ طعام موضوع بالقرب منه. (ملاحظة: يمكن أن تكون الفتران أكثر نشاطا عند ما تكون في البيئة القفصية الخاصة بها).
ب. طريقة المشي: 0 = Jie النوع البري. 1 = الساقين الخلفيتين متباعدتين أكثر منها في النوع البري عند السير أو التحرك مع ارتفاع منخفض للحوض؛ والتي تؤدي إلى طريقة المشي "المتمايلة". 2 - الحالات غير الطبيعية الأكثر حدة: رعشة عند رفع القدم؛ والسير إلى الخلف all كالأرنب' بواسطة ريع كل من القدمين الخلفيتين في المرة الواحدة.
ج. تشابك الأطراف الخلفية: الفأر الملحوظ عند التعليق بواسطة حمل قاعدة الذيل. 0 = أرجل
0 متباعدة تجاه الخارج. 1 - تم سحب الأطراف الخلفية تجاه بعضها البعض (بدون لمس) أو تم سحب رجل واحدة إلى الجسم. 2 - تم سحب كلا الرجلين بشكل محكم؛ إما تلامس بعضها البعض أو تلامس الجسم.
د. رعشة: الفأر الملحوظ عند الوقوف على الكف المسطح لليد. 0 - بدون رعشة. 1 - رعشة طفيفة متقطعة. 2- * رعشة مستمرة أو رعشة قوية متقطعة.
5 ه. التنفس: حركة الكفلين الملحوظ عند الثبات. 0 = تنفس طبيعي. 1 = فترات التنفس المنتظم المشتت مع فترات قصيرة من التنفس الأسرع أو مع حالات توقف في التنفس. 2- * التنفس غير المنتظم جدا - لهث أو شدة التنفس.
و. الحالة العامة: الفأر الملحوظ للمؤشرات الخاصة بالسلامة العامة مثل حالة الطلاء؛ العيون» حالة الجسم. 0 - طلاء لامع نظيف؛ أعين صافية؛ حالة طبيعية. 1 = عيون غائمة؛ طلاء غائم/غير
0 منتظم» وقفة مقوسة نوعا ما. =D * أعين متقشرة أو ضيقة أو انتصاب الشعرء؛ وضعية محدبة.
— 2 2 — يبين الشكل 4 أن المجموعة التي تم علاجها ب SCAAV9-T38:Mecp2 لم تصل إلى بقاء متوسط أثناء فترة الاختبار ولكن تم تخطي الحيوانات المعالجة بالعلاج المقارن بواسطة أكثر من 10 أسابيع في وقت النشر. تتضمن حيوانات تم علاجها ب 2م088179+73801460: أيضا درجة سلوك أقل مقارنة بالحيوانات المعالجة بالعلاج المقارن. تم تكرار الاختبار مع oh إناث متأثرة (الشكل 5). تم علاج الحيوانات عبر الوريد بأي من 2م17/9:738010460مهه؟ أو عينة مقارنة قبل مع الذكور. تم علاج الإناث بين 12-10 أشهر من عندما تكون Rett (hy عرضية. تمت متابعة الحيوانات لمدة تقريبا 6 أشهر بعد الحقن وتم اختبارها من حيث الدرجة النمطية الخيفية. بشكل مهم؛ لا تتضمن قتل مبكر أكثر من الذكور الأكثر حدة [(2001) 322-326 :27 Nature Genetics, .اه [Guy er قام العلاج ب 797382 هه بإيقاف تقدم المرض وأشار إلى عكس المرض مع درجات علاج تصل إلى 0 1. وكان هذا يتعارض مع الحيوانات المعالجة بالعلاج المقارن والتي أنهت الاختبار مع الدرجات النمطية الخيفية القريبة من 6 التي تشير إلى سوء الأعراض (الشكل 5ج). تم الحصول على البيانات من crotarod اختبار التصفية العكسي؛ اختبار المنصة واختبار قدرة التعشيش والتي تدعم التطوير السلوكي في الحيوانات التي تم علاجها ب 2م1790738:1/760م ههه مقارنة بالحيوانات المعالجة بالعلاج المقارن. أبدى التحليل بعد الوفاة للأدمغة من الإناث التي تم علاجها ب SCAAVO:738:Mecp2 أن قياسات شدة تألق التعبير عن MeCP2 التي عكست أن الأدمغة من النوع البري تشير إلى أن التعبير الجيني | لانتقالي عن العلاج الجيني موجود عند مستويات فسيولوجية تقريبا . المثال 2 دراسات الفعالية السريرية AVXS-201 الأولية لتحسين فعالية التعبئة ولدمج MeCP2 cDNA البشرية النسبية مع الحفاظ على المستويات الفسيولوجية للتعبير الجيني؛ تمت إعادة تصميم SCAAV9+738+Mecp2 مع معزز أقصر MeCP2B cDNA بشري؛ وإشارة بولي أدينيل تخليقية. تمت تعبئة الجينوم المعاد تصميمه في كابسيدات AAV كما هو مبين أدناه وتمت تسمية تاهذء: الناتج "TAVXS-201" (الشكل 6). تمت تسمية AVXS-201 أصلا ".AAV9-P545-MeCP2" متوالية منطقة المعزز (شظية معزز MeCP2 فأري) (متوالية بهوية رقم: 2) GTGAACAACGCCAGGCTCCTCAACAGGCAACTTTGCTACTTCTACAGAAAA 5 TGATAATAAAGAAATGCTGGTGAAGTCAAATGCTTATCACAATGGTGAACT ACTCAGCAGGGAGGCTCTAATAGGCGCCAAGAGCCTAGACTTCCTTAAGCG CCAGAGTCCACAAGGGCCCAGTTAATCCTCAACATTCAAATGCTGCCCACA AAACCAGCCCCTCTGTGCCCTAGCCGCCTCTTTTTTCCAAGTGACAGTAGAA CTCCACCAATCCGCAGCTGAATGGGGTCCGCCTCTTTTCCCTGCCTAAACAG 0 ACAGGAACTCCTGCCAATTGAGGGCGTCACCGCTAAGGCTCCGCCCCAGCC TGGGCTCCACAACCAATGAAGGGTAATCTCGACAAAGAGCAAGGGGTGGG GCGCGGGCGCGCAGGTGCAGCAGCACACAGGCTGGTCGGGAGGGCGGGGC
— 3 2 — GCGACGTCTGCCGTGCGGGGTCCCGGCATCGGTTGCGCGCGCGCTCCCTCCT CTCGGAGAGAGGGCTGTGGTAAAACCCGTCCGGAAAAC متوالية منطقة ترميز MeCP2B cds) بشري) (متوالية بهوية رقم: 3( ATGGCCGCCGCCGCCGCCGCCGCGCCGAGCGGAGGAGGAGGAGGAGGCGA GGAGGAGAGACTGGAAGAAAAGTCAGAAGACCAGGACCTCCAGGGCCTCA 5 AGGACAAACCCCTCAAGTTTAAAAAGGTGAAGAAAGATAAGAAAGAAGAG AAAGAGGGCAAGCATGAGCCCGTGCAGCCATCAGCCCACCACTCTGCTGAG CCCGCAGAGGCAGGCAAAGCAGAGACATCAGAAGGGTCAGGCTCCGCCCC GGCTGTGCCGGAAGCTTCTGCCTCCCCCAAACAGCGGCGCTCCATCATCCGT GACCGGGGACCCATGTATGATGACCCCACCCTGCCTGAAGGCTGGACACGG 0 AAGCTTAAGCAAAGGAAATCTGGCCGCTCTGCTGGGAAGTATGATGTGTAT TTGATCAATCCCCAGGGAAAAGCCTTTCGCTCTAAAGTGGAGTTGATTGCGT ACTTCGAAAAGGTAGGCGACACATCCCTGGACCCTAATGATTTTGACTTCAC GGTAACTGGGAGAGGGAGCCCCTCCCGGCGAGAGCAGAAACCACCTAAGA AGCCCAAATCTCCCAAAGCTCCAGGAACTGGCAGAGGCCGGGGACGCCCCA 5 AAGGGAGCGGCACCACGAGACCCAAGGCGGCCACGTCAGAGGGTGTGCAG GTGAAAAGGGTCCTGGAGAAAAGTCCTGGGAAGCTCCTTGTCAAGATGCCT TTTCAAACTTCGCCAGGGGGCAAGGCTGAGGGGGGTGGGGCCACCACATCC ACCCAGGTCATGGTGATCAAACGCCCCGGCAGGAAGCGAAAAGCTGAGGC CGACCCTCAGGCCATTCCCAAGAAACGGGGCCGAAAGCCGGGGAGTGTGGT 0 GGCAGCCGCTGCCGCCGAGGCCAAAAAGAAAGCCGTGAAGGAGTCTTCTAT CCGATCTGTGCAGGAGACCGTACTCCCCATCAAGAAGCGCAAGACCCGGGA GACGGTCAGCATCGAGGTCAAGGAAGTGGTGAAGCCCCTGCTGGTGTCCAC CCTCGGTGAGAAGAGCGGGAAAGGACTGAAGACCTGTAAGAGCCCTGGGC GGAAAAGCAAGGAGAGCAGCCCCAAGGGGCGCAGCAGCAGCGCCTCCTCA 5 CCCCCCAAGAAGGAGCACCACCACCATCACCACCACTCAGAGTCCCCAAAG GCCCCCGTGCCACTGCTCCCACCCCTGCCCCCACCTCCACCTGAGCCCGAGA GCTCCGAGGACCCCACCAGCCCCCCTGAGCCCCAGGACTTGAGCAGCAGCG TCTGCAAAGAGGAGAAGATGCCCAGAGGAGGCTCACTGGAGAGCGACGGC TGCCCCAAGGAGCCAGCTAAGACTCAGCCCGCGGTTGCCACCGCCGCCACG 0 GCCGCAGAAAAGTACAAACACCGAGGGGAGGGAGAGCGCAAAGACATTGT TTCATCCTCCATGCCAAGGCCAAACAGAGAGGAGCCTGTGGACAGCCGGAC GCCCGTGACCGAGAGAGTTAGCTGA متوالية بولي A (تخليقية) (متوالية بهوية رقم: 4( AATAAAAGATCTTTATTTTCATTAGATCTGTGTGTTGGTTTTTTGTGTG 5 تم إنتاج scAAVY بواسطة إجراءات الإصابة الانتقالية باستخدام موجه قائم على أساس AAV2-ITR مزدوج الجديلة؛ مع متوالية بلازميد ترمز Rep2Cap9 كما هو موضح Gao et] Wu cal. أعلاه] بالإضافة إلى مساعد بلازميد فيروسي غدي (Stratagene, Santa Clara, CA) pHelper في خلايا 293. تم إنتاج الفيروس في ثلاثة دفعات منفصلة للاختبارات والمنتقاة بواسطة اثنين من 40 خطوات تنفية تدريج شدة كلوريد سيزيوم؛ تمت الديلزة ضد PBS وتمت الصياغة مع 70.001 Pluronic-F68 لمنع تراكم الفيروس وتم التخزين عند 4م ٠. تمت معايرة كل المستحضرات الخاصة بالموجه بواسطة PCR كمي باستخدام تقنية Tag-Man تم تقييم نقاء الموجهات بواسطة 7124
استشراد كهربي لجل صوديوم دوديسيل سلفات- أكربلاميد وتبقيع فضة ) Invitrogen, Carlsbad, (CA
تم تنفيذ دراسات الفعالية وإعطاء الجرعات في نفس سلالة Rett od كما في الشكل 4. الجرعات بين المثال 1 والمثال 2 غير مقارنة بسبب عمليات التطوير في طرق المعايرة. قامت الاختبارات في المثال 1 باستخدام المعايرة البصرية للمستحضرات الفيروسية أثناء الدراسات في المثال 2 وعند استخدام معاير PCR الرقمي الأكثر دقة. لمحاكاة مسار التوصيل السريري المقترح للإعطاء داخل القراب؛ تم تنفيذ عمليات الحقن هذه كحقن عبر البطين (161) في جراء بعمر يوم 1 بعد الولادة. تم اختيار التوصيل داخل القراب لتوصيل AVXS-201 مباشرة إلى النظام العصبي وهو الموقع الأساسي لأثر متلازمة Rett تم إتباع الجراء من أجل الأعمار الطبيعية وتم التقييم من أجل 0 الدرجة النمطية الخيفية المركب celal والمجال المفتوح وسلوك 2042:00. تم توضيح بيانات البقاء على مدار اثنين من نطاقات لوغاريتم الجرعة في الشكل 7. gan النتائج المبينة في الشكل 7 أن توليفة الموجهات والتقنيات المستخدمة في طرق العلاج وفقا للاختراع لتحقيق الناتج المحسن. قامت كل الجرعات باختبار البقاء الممتد المتوسط في مقابل (hid !146002 تم علاجها بالعلاج المقارن مع أقصى قيمة بقاء تصل إلى 500 يوم (مستمرة) مقارنة ب 93 يوم لفئران Rett المعالجة بالدواء 5 المقارن. تم تحقيق متوسط العمر الأعلى (315د) مع جرعة متوسطة بمقدار 10"71.44جينوم فيروسي لكل حيوان. تبين البيانات استجابة جرعة على شكل جرس (الشكل (ST والتي تقوم بتمييز النتائج التي تم تحقيقها هنا من أثر جرعة MeCP2 غير الملائمة (رقم النسخة الجينية) الملحوظة Lalu [اتنظنرء Lombardi et al., The Journal of Clinical Investigation, 125: 2914-2923 «Mia (2015)]. بشكل cage حتى عند الجرعة الأكبر التي تم اختبارهاء لم يقم علاج AVXS-201 بتقصير
0 بقاء Mecp™ oly نسبة إلى علاج مقارن. بالإضافة إلى البقاء» تم تسجيل ofall المعالجة والمقارنة أسبوعيا للأنماط الخيفية ل Rett (الأنماط الخيفية المذكورة في المثال السابق). تتطور الذكور التي لم يتم علاجها بسرعة من الدرجة 0 إلى dad متوسطة بمقدار 5.25 بعمر 10 أسابيع (الشكل 8). على العكس؛ وصلت الدرجات النمطية الخيفية لكل المجموعات التي تم علاجها فقط إلى درجة حوالي 2 بعمر 17 أسابيع باستثناء 5 105.56 مجموعة الجينوم الفيروسي والتي وصلت إلى درجة 5 عند 18 أسابيع. تم أيضا تقييم الحيوانات المعالجة والمقارنة أيضا في اختبارات مفتوحة المجال rotarod (الشكل 9). الحركة الآنية المنخفضة عبارة عن أحد أعراض Rett Oy الذكور. تم تنفيذ التحليل المفتوح لتقييم الحركة الآنية والسرعة عندما تكون المجموعات jen 3-2. تضمنت الحيوانات المصابة تقريبا 743 تقليل في المسافة الكلية التي تم تحركها مقارنة بالفئران من النوع البري. تمت ملاحظة الزيادات الملحوظة في 0 المسافة التي تم تحركها في كل المجموعة التي تم علاجها AVXS-201 باستثناء اثنين في مقابل
ذكور 2م1160 تم علاجها بالدواء المقارن. تم تحسين السرعة مقارنة بعلاجات الاستبعاد الذين تم علاجهم بالدواء المقارن بشكل ملحوظ. وهي تبدي أن علاج AVXS-201 لنموذج فأر 1860 ذكر يقوم بتحسين السلوك الكشفي والسير. تم اختبار الحيوانات المعالجة والمقارنة بعمر 3 أشهر للعمل على Allg rotarod هي القياس الخاص بالتنسيق الحركي. تم اختبار الحيوانات في ثلاثة أيام متتالية وتم أخذ متوسط الدرجات والجرعة في خلال أيام. تم توضيح البيانات الناتجة في الشكل 9ج. قامت فثران 7م146 المعالجة بالدواء المقارن بشكل ملحوظ على rotarod مقارنة بالمعالجة بالدواء المقارن من النوع البري. تم تحسين أداء Rotarod بشكل ملحوظ في مقابل علاج مقارن في مجموعات 0 و1010*1.44جينوم فيروسي. المثال 3 0 تعبير AVXS-201 عن بروتين MeCP2 في دماغ فأر Rett علاجه في 3 أسابيع بعد الحقن؛ تم قتل ذكر تم علاجه ب PBS من النوع البري؛ Rett غير معالج وحيوانات dallas Rett بالموجه لفحص مستويات بروتين MeCP2 في الدماغ بعد يوم 1 من الولادة لحقنة AVXS-201 1017. تمت مجانسة نصف دماغ واحد وتم التحليل بواسطة مخطط وسترن لمراقبة التعبير عن 206002. تم توضيح مخطط تمثيلية والقياس في الشكل 10. بعد المعايرة بالأدمغة 5 المعالجة ب PBS من النوع البري؛ لم تتضمن حيوانات الاستبعاد ومجموعة العلاج بجرعة 5 جينوم فيروسي AVXS-201 لم يكن لها مستويات ALG للكشف عنها من .MeCP2 قام العلاج ب 107*3.50جينوم فيروسي و107*7.00جينوم فيروسي بإنتاج مستويات MeCP2 قابلة للكشف عنها Ally وصلت إلى -71 و73.6 من مستويات النوع البري؛ على التوالي. قامت الزيادة في الجرعة الأكثر فعالية عند القياس بواسطة الزيادة في متوسط بقاء (10"71.44جينوم فيروسي) 0 بإعطاء -211 من مستويات MeCP2 من النوع البري. قامت deja 10"75.56جينوم فيروسي بفحص مستويات MeCP2 الناتجة بواسطة مخطط وسترن بمقدار -754 من النوع gull بينما وصلت 3 إلى أكثر من ضعفي مستويات النوع البري. تبين هذه البيانات أن مستوى التعبير البروتيني والتوزيع الدماغي أساسين لتوقع فعالية علاج MeCP2 الجيني. المثال 4 5 علاج الفئران من النوع البري ب (el AVXS-201 وسهل تحمله هناك اعتبار مهم لعلاج استبدال 16002 لتقييم الأثر على WAY التي تعبر عن daw سليمة من 216002. تم تصميم AVXS-201 بهذا الاعتبار بواسطة دمج شظية من معزز Mecp2 فأري لدعم التنظيم الفسيولوجي للجين المتحور 246072. لاختبار أمان 87765-201؛ تم تنفيذ تحليل البقاء والسلوك على المجموعات للفئران من النوع البري التي تلقت حقن 167 1ط ل AVXS-201 30 مثل فتران Rett ذكور .
تم علاج إجمالي 131 فأر ذكر من النوع البري بالعديد من جرعات 167 3 AVXS-201 وتم اتباعها من أجل البقاء (الشكل 11). لم يتم تسجيل أو وفيات في الجرعة العلاجية المستهدفة (10'"*1.44جينوم فيروسي) مع 21 حيوان تم علاجهم أحياء خلال 0342. لم يتم تسجيل أو وفيات في المجموعة التي تم علاجها ب PBS وتم تسجيل أحد الوفيات في المجموعات التي تم علاجها ب
10°%3.50< 10'%2.78 و101*1.13جينوم فيروسي. تقوم الدرجات السلوكية باستخدام المعايير من المريع 1؛ بإظهار أن المجموعات التي تم علاجها بالموجه تتضمن بشكل كبير متوسط الدرجات النمطية الخيفية <1. كان متوسط الدرجات التراكمية >1 ملحوظة فقط في اثنين من المجموعات ذات الجرعة الأعلى )10'9%5.56 و1077*1.13جينوم فيروسي). أبدى الاختبار المفتوح عند 2- 3 أشهر عدم وجود أي فرق استاتيكي بين الذكور التي تم علاجها بالموجه 5 PBS من النوع البري
0 «(الشكل 12). بشكل مهم؛ تم الكشف عن تقليل ملحوظ في أداء 0 في مجموعة 3 إحينوم فيروسي مقارنة بالمعالجة بالدواء المقارن الفئران من النوع البري عند سن ثلاثة أشهر. تشير هذه البيانات إلى الأثر السمي للتعبير المفرط عن MeCP2 عند lef جرعة AVXS- 1. تشير هذه البيانات إلى أن "السيناريو "Toul لعلاج AVXS-201 فقط متحول من LA النوع البري؛ وكان هناك أقل أثر على بقاء الحيوان والسلوك عند الجرعة العلاجية المستهدفة.
5 المثال 5 تم الحفاظ على المستويات الفسيولوجية ل MeCP2 في أدمغة الفتران من النوع البري تم علاجها بالجرعات العلاجية ل AVXS-201
لفحص المستويات المرتبطة بالتعبير العرضي المفرط عن 816002 تلقت الفئران الذكور
من النوع البري حقن 011077 من PBS أو AVXS-201 عند الهدف العلاجي ل 10971.44جينوم 0 فيروسي أو الجرعة الأكبر التي تم اختبارها بمقدار 101171.13جينوم فيروسي. تم قتل الحيوانات بعد 3 أسابيع بعد الحقن» وتم جمع الأدمغة من أجل مخطط وسترن. للمقارنة؛ تم تخطيط الأنسجة بالإضافة إلى أدمغة نموذج فأري للتعبير المفرط عن MeCP2 والتي تسمى 183. تم قطع الأدمغة في مناطق منفصلة (0©-المخيخ»؛ 8460-النقي» 11:00-الحصين» «©-القشرة و11:0-منتصف الدماغ؛ الشكل 13) وتم تجانس المناطق الفردية للتخطيط. تمت معايرة البيانات إلى مستويات 5 106002 في أدمغة تم علاجها ب PBS من النوع البري. تضمن العلاج بالجرعة العلاجية المستهدفة (10'"*1.44جينوم فيروسي) مستويات 146002 بين 1 x1.55 من أنسجة من النوع البري خلال كل المناطق التي تم فحصها. تفاوتت الجرعة العالية (1071.13جينوم فيروسي) من 1.31- 6 من مستويات النوع البري؛ ولكنها لم تصل إلى مستويات x3.93-2.31 من أنسجة 183. تقوم هذه البيانات؛ بالإضافة إلى البيانات السلوكية والبقاء المبينة سلفاء بإعطاء الثقة الخاصة ب AVXS-201 0 تعبر عن بروتين قريب من المستويات الفسيولوجية عند الإعطاء عند الجرعة المستهدفة.
— 7 2 — بشكل مهم؛ الجرعات العلاجية لا تقترب من ضعف مستوبات البروتين المرتبطة بمتلازمة مضاعفة 1»©2. وهي تبين أمان طريقة استبدال MeCP2 باستخدام العلاج الجيني. المتال 6 كان وزن الجسم؛ خواص الدم والكيمياء المصلية غير ملحوظة في الكائنات الرئيسية غير البشرية على مدار 18 شهر بعد الحقن داخل القراب ل AVXS-201 لفحص أمان وتحما shals AVXS-201 الحقن داخل القراب ذو الصلة؛ تم إتباع ثلاثة قرود مكاك ذكور معالجة لمدة 18 شهر بعد الحقن. تم إظهار متغيرات الجرعات في الجدول 2. جينومات موجه ID فيروسية حقن Cs نومات/وزر: فيروسدٍ Q)y leg الجدول أ الجسم مدة بعد Tx 2 حي | كلية (جينوم الجسم (جينوم : (كجم) فيروسي) فيروسي/كجم) خواص | 15034 | 10%x6.0 1069 الدم 13 12 15C40 4 [1.79 10-8 8 شهر والكيمياء التعبير | 15038 | 10°x1.3 7 66 أسابيع عن 13 12 1 15C49 ١ MeCP2 60> ]1.30 10-7 6 أسابيع تم علاج اثنين من الحيوانات عند الجرعة العلاجية المطلوية (-44. 1 [جينوم فيروسي 0 مكافئة على أساس كل كجم من وزن الجسم)؛ وتم تلقي جرعة أقل بمقدار -2 ضعف (-105*7.00 جينوم فيروسي مكافئ على أساس كجم من وزن الجسم). تم توضيح إجراء الحقن داخل القراب سلفا في Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene مله Meyer et Therapy, 23: 477-487 (2015) بشكل مختصر؛ تم خلط الموجه مع عامل تعارض للتحقق من انتشار الموجه. تم تحضير الخاضع المعقد في موضع وضع استلقاء جانبي وموقع حقن خط 5 1 المنتصف الخلفي عند مستوى 14/5- (تحت مخروط الحبل الشوكي) ٠ في الظروف المعقمة؛ تم إدخال الإبرة الشوكية وتم التأكيد على التوصيل تحت العنكبوتية مع تدفق CSF واضح من الإبرة. تم
توزيع 0.8 ملل من CSF لتقليل الضغط في الفراغ تحت العنكبوتية ومباشرة بعد حقن محلول الموجه. بعد الحقن؛ تم الحفاظ على الحيوانات في موضع Trendelenburg وتمت إمالة الجسم وجعل الرأس للأسفل لمدة 10 دقائق. تم إعطاء الحيوانات المعالجة عند سن 6 أو 12 شهرء وتم تجميع بيانات وزن الجسم خواص الدم وخواص الدم الكيماوية شهريا على مدار أول 6 أشهر بعد الحقن؛ وكل شهرين من بعد ذلك. تم توضيح وزن الجسم في الشكل 14؛ تم توضيح خواص الدم في الشكل 15 وتم توضيح خواص الدم الكيماوية في الأشكال 16 و17 التي تم تخطيطها مع قيم من الحيوانات المعالجة بالعلاج المقارن من نفس المستعمرة في مؤسسة مانهايمر (Homestead, FL) بشكل (AS كانت بيانات وزن الجسم؛ عدد الخلايا وقيم المصل من حيوانات تم علاجها بالموجه متوافقة مع الحيوانات المعالجة بالعلاج المقارن. لم تنحرف أي قيم بشكل أساسي عن النواتج المقارنة لمدة أكثر 0 من 2 من الملاحظات المتتالية في حيوان معين باستثناء أميلاز الذي كان أعلى في اثنين من حيوانات تم علاجها بالموج عند dad أساسية. تبين هذه البيانات أن AVXS-201 وإجراء الحقن داخل القراب آمنة وسهلة التحمل. المثال 7 التحليل النسيجي المرضي للأنسجة من الكائنات الرئيسية غير البشرية بعد الحقن داخل القراب ل AVXS-201 5 تم إرسال عينات التحليل في الكائن الحي (المثال 6) والتحليل بعد الوفاة (المثال 8) للأنسجة الوعائية والعصبية من حيوانات 15038 15C49 و15034 (الجدول 1( إلى GEMpath Inc. (CO Longmont) لبارافين مدمج؛ تقطيع؛ هيماتوكسيلين؛ وتبقيع يوسين. تظل الحيوانات المتبقية (الجدول 8.2) في الحياة وسوف يتم إرسالها للتحليل لاستنتاج الدراسة. تمت قراءة الشرائح وتم 0 تحضير التقارير بواسطة شهادة الباثولوجي البيطري معتمد (01204000. تم توضيح الأنسجة التي تم أخذ عيناتها وتم فحصهم في الجدول 3. تشير تقارير المرضية إلى أن علاج AVXS201 لا يقوم بحث الأمراض في أي أنسجة محددة بالبروتوكول عند نقطة الزمن لمدة 6 أسابيع أو 18 أسبوع. الجدول 3 الغدة الكلوية؛ الدماغ (اللوزة. المخططة؛ الحصين» القشرة القذالية» القشرة الصدغية؛ الدماغ الوسطى؛ جذع الدماغ؛ المخيخ)؛ العين والعصب البصريء 15038 القلب؛ all (SU الرئة؛ العقدة الليمفاوية (أرببي)؛ البنكرياس؛ الحبل 15C49 الشوكي (قطاعات من مناطق العنق؛ الصدرء الفقرات القطنية؛ بعض القطاعات تتضمن عقد جذربة ظهربة)؛ الأمعاء الدقيقة (الصائم والأمغاء الغليظة)؛ العضلة الهيكلية (الحجاب الحاجزء (lull عضلات الفخذء
العضلات العضدية ثلاثية النقاطء جذعية عرضية؛ الظنبوب الأمامي)؛ iE الغدة الكلوية؛ الدماغ (اللوزة؛ المخططة؛ الحصين؛ المهاد المنخفض» القشرة البشرية؛ القشرة الحركية والحسية الجسدية؛ القشرة الترابطية؛ القشرة السمعية؛ الأكيمات العلوية والسفلية؛ المخيخ؛ الأنوية الدماغية العميقة؛ والنخاع المستطيل)؛ العين والعصب البصري؛ القلب؛ الكلى؛ الكبد؛ الرئة؛ العقدة 1134 الليمفاوية؛ البنكرياس؛ الحبل الشوكي (قطاعات من مناطق العنق؛ all الفقرات القطنية)؛ الأمعاء الدقيقة (الصائم والأمعاء الغليظة)؛ العضلة الهيكلية (الحجاب الحاجز؛ الساق» عضلات الفخذ؛ العضلات العضدية ثلاثية النقاط جذعية عرضية؛ الظنبوب الأمامي)؛ الطحال؛ الخصية/البريخ؛ الغدة الدرقية؛ مثانة البول Juli 8 المستويات الفسيولوجية ل 146072 في دماغ الكائن الرئيسي غير البشري باتباع الحقن داخل القراب ل AVXS-201 تلقى اثنين من قرود مكاك ذكور بعمر 12 شهر حقن داخل القراب بمقدار 102*7.7جينوم فيروسي/كجم ل AVXS-201 كما هو مبين أعلاه. استدامت الحيوانات لمدة ست أسابيع بعد الحقن وتم القتل لتحليل التعبير عن .MeCP2 تم تحليل مناطق الدماغ المختارة للتعبير SU عن MeCP2 بواسطة الكيمياء المناعية النسيجية (الشكل 18). بدون الكشف عن زبادات ملحوظة في MeCP2 في مناطق قشرية أو تحت قشرية وليست قريبة من موقع الحقن (الحبل الشوكي الطرفي). بشكل مهم؛ تفشل هذه البيانات في إظهار حالات كلية غير طبيعية في الأنسجة من الحيوانات التي تلقت 0 حقنة LAVXS-201 لفحص التعبير الجيني المتحول؛ تم تجانس مناطق الدماغ وتمت المقارنة ضد النسيج المقارن النسيجي من حيوانات من نفس المستعمرة (الشكل 19). تم تحليل عينات القشرة القذالية والصدغية؛ المهاد السفلي؛ الحبل الشوكي الطرفي؛ المهاد؛ اللوزة؛ الحصين والمخيخ بواسطة مخطط وسترن للتعبير الكلي عن .MeCP2 في كل المناطق بفحص منطقة لم تبدي > x2 مستوى التعبير عن MeCP2 فوق العينات المقارنة. تم الكشف عن MeCP2 المرتفعة في المهاد السفلي 5 وللوزة والتي هي مناطق قريبة من الثقب الثالث والثقب الجانبي؛ على التوالي؛ ولكن ليس المخيخ. أيضاء كان الحبل الشوكي الطرفي قريبا من موقع الحقن لم تبدي مستويات MeCP2 مرتفعة. تقوم هذه البيانات بالإشارة إلى توليفة من الجرعة الفيروسية وبنية التعبير عبارة عن تنظيم التعبير عن .MeCP2 أيضاء تم تنفيذ التهجين في الموقع (ISH) للكشف عن الانتساخ المشتق من الموجه وتحديد التوزيع في الدماغ عند 6 أسابيع و18 شهر بعد الحقن (الأشكال 20 و21). أبدت كل المناطق التي
تم فحصها في الدماغ والحبل الشوكي (القشرة القذالية؛ القشرة الصدغية؛ الحصين؛ الجسم الثفني؛ المهاد؛ المذنب؛ البطامة؛ الأكيمة العلوية؛ النقي؛ المخيخ؛ الرقبة؛ الصدر والحبل الشوكي) التعبير عن انتساخ مشتق من موجه والذي لم يكن موجودا في الأنسجة من الحيوانات المعالجة بالعلاج المقارن. تبدي هذه البيانات انتقائية 1511 لمستنسخ 146002 مشتق من موجه وتبدي أن بنية معزز
AVXS-201 5 وظيفية في نسيج النظام العصبي 80118. تبين هذه البيانات أن AVXS-201 تقوم بتوزيع CNS عند الإعطاء في ثقب طرفي وتعبر عن مستويات فسيولوجية. بينما تم وصف الاختراع الحالي من حيث العديد من النماذج والأمثلة؛ سيتم فهم أن هناك صور مختلفة وأن عمليات التطوير سوف تتم للمهارة في المجال. بالتالي؛ يجب تطبيق هذه القيود كما هو مبين في عناصر الحماية الاختراع.
10
Claims (4)
- عناصر الحماية (rAAV) virus recombinant adeno-associated مؤتلف Lae فيروس مرتبط vector ناقل -1 يشتمل على قالب جيني gene cassette يشتمل على معزز يتكون من متوالية برقم تعريف: 2؛ إنترون 0 متوالية متعددة النيوكليوتيد Pri polynucleotide sequence بروتين 2 ربط CpG—ddize synthetic (nal ومتوالية إشارة تخليقية لإضافة بولي (MECP2) methyl-CpG-binding protein 2 epolyadenylation signal sequence 5 حيث تمت إحاطة القالب الجيني gene cassette بواسطة تكرار طرفي محول بجينوم النمط المصلي 2 للناقل الفيروسي المرتبط adeno-associated virus Lad (AAV2) serotype 2 متطفر mutant وتكرار طرفي محول من النوع البري. 2- ناقل vector الفيروس المرتبط غديا المؤتلف (rAAV) recombinant adeno-associated virus 0 وفقاً لعنصر الحماية 1 حيث يكون ناقل vector الفيروس المرتبط غدياً adeno-associated virus self-complementary adeno-associated virus ذاتي التكميل AAV عبارة عن (AAV).(scAAV) 3- ناقل vector الفيروس المرتبط غديا المؤتلف (rAAV) recombinant adeno-associated virus وفقاً لعنصر الحماية 1 حيث يكون الفيروس المرتبط (AAV) adeno-associated virus Lag عبارة عن الفيروس المرتبط adeno-associated virus 9 9 bad (9تاهذ). (rAAV) recombinant adeno-associated virus الفيروس المرتبط غديا المؤتلف vector ناقل -4 وفقاً لأي عنصر من عناصر الحماية 3-1؛ حيث تشتمل متوالية متعدد النيوكليوتيد polynucleotide sequence 0 التي ترمز بروتين 2 ربط ميثيل-6م© 2 (MECP2) methyl-CpG-binding protein على متوالية برقم تعريف: 3. (rAAV) recombinant adeno-associated virus الفيروس المرتبط غديا المؤتلف vector ناقل -5 viral vector recombinant لعنصر الحماية 1؛ حيث يشتمل الفيروس المرتبط غديا المؤتلف Gg .1 على نيكلوتيدات 2558-151 من متوالية برقم تعريف: adeno-associated virus (لأاخف 5— 2 3 — 6- ناقل vector الفيروس المرتبط baz المؤتلف (rAAV) recombinant adeno-associated virus وفقاً لعنصر الحماية 4» حيث تشتمل متوالية الإشارة الناتجة من تعدد الأدنلة polyadenylation على متوالية برقم تعريف: 4.7- فيروس يشتمل على الناقل الفيروسي viral vector وفقاً لعنصر الحماية 1. 8- الفيروس وفقاً لعنصر الحماية 7 يشتمل أيضاً على بروتينات كابسيد capsid proteins واحد أو أكثر.9- تركيبة صيدلاتنية تشتمل على ناقل vector الفيروس المرتبط غديا المؤتلف recombinant (rAAV)adeno-associated virus وفقاً لعنصر الحماية 1 . 0- تركيبة صيدلانية تشتمل على الفيروس وفقاً لعنصر الحماية 7 .1- التركيبة الصيدلانية وفقاً لعنصر الحماية 9 أو 10؛ حيث يتم تحضير التركيب للإعطاء داخل القراب JIT intrathecal administration 2- التركيبة الصيدلانية وفقاً لعنصر الحماية 11؛ تشتمل أيضاً على عامل تعارض contrast agent 0 غير أيوني منخفض التناضح. 3- التركيبة الصيدلانية وفقاً لعنصر الحماية 12( حيث يشتمل عامل التعارض contrast agent غير الأيوني منخفض التناضح على واحد أو أكثر من أيونيتريدول 100101001 أيوهكسول ciohexol أيوميبرول 01«مع:00 أيوباميدول dopamidol أيوبينتول ciopentol أيوبروميد ciopromide 5 أيوفيرسول ioversol وأيوكسيلان صدانهه1.— 3 3 — 4- التركيبة الصيدلانية وفقاً لعنصر الحماية 12( حيث يشتمل عامل التعارض contrast agent غير الأيوني منخفض التناضح على أيوهكسول 1006:01. 5- ناقل vector الفيروس المرتبط Laz المؤتلف recombinant adeno-associated virus (rAAV) 5 وفقاً لعنصر الحماية 1؛ معد للاستخدام في معالجة متلازمة ربت ‘Rett syndrome 6- الفيروس Wy virus لعنصر الحماية 7 معد للاستخدام في معالجة متلازمة ريت Rett.syndrome 0 17- التركيبة الصيدلانية وفقاً لعنصر الحماية 12 معدة للاستخدام في معالجة متلازمة ربت Rett.syndrome 8- التركيبة الصيدلانية وفقاً لعنصر الحماية 17 حيث يتم تحضير التركيبة للإعطاء داخل القراب IT intrathecal administration— 3 4 — البدينة A إشالات يولي MECPBATG MECPPANG on op Se أ ELPA ECR, A AG MBO TRL امريد ea ot الاي اس ل eben [a rE rE ارت مجع ie لا A عد } rH EI : د 2 ب oo iin Eh Tags Se 8 \ شكلAe Sead RsERge Ey . wr ' § ww BREE EEERE aE الفرجة 0 ES 8 8 1: 8 ل : We AUTRE LE SHARE EEGEEE Nesansas إ ل Si A 8 3 0 3 y 1 0 د 3 3 3 0 د د Sagas 3 . 8 5 8 5 2 BEET SRE Rae ل 1 Ean ا 0 8 8 8 5 8 8 J] 8 TEER IR 8 mE 8 8 8 § BEE 8 ا fen 8 8 8 8# 8 8 3 HEEEOER SEY iEv EEE SEEN ER aes ] 3 8 88 J 2 SRE “8 ا 88 3 5 جز ا ل ا ل اخ ModE Lo 8 8 8 8 § 3 88 THER N{[ gas EES ا تي i N STERNER TEENY 3 EEE 8 0": 8 0 TERRY 3 HEEERN 3 ا #88 x 3 NE8EEEE ا 1 2 N 85 8 8 8 3 iB 8 8 8 “8 8 ا ا 1 XR 8 WEA Huy HREES 3 UN 8 8 8 8 8 3 3 8 88 i X 8 8 5 2 8 i § 3 3 3 3 3 5 = I 8 8 8 5 3 8 i 0 8 & . | | La . . . ا ْ اا RE El 0" TE SERER 8 HR BREE Ere Er اح BERYL E [het ct es م ]913552 0 ااا ل 17 1 ليثم اكتشافيا ¢ § : 7 : 0 £ 3 1 & ! 3 i 1 { : 1 AEN م 1 £0 fide php Y شكلالاج + 4 ال يي الي ذو قات wl al مت ل ا ا ا ااا ل To 4 ; PoE Po | i ; 3 ا CRE Porm ’ الا ال we ال me Ee Nk oy CE قا Ta RT i Loads Tem ant odie شي عكس اتجاه التسخ مششركة AN aE SUE ٠ 3 ا rent ا RE ام ار ا ال أ ار جٍ تخي ل الى العمل على Bind TY الريط 5 ERR | AT | NE ل i Th = ا ا A GA SF 1 1 | Co يا ا بن وا awe ل ااا الا 8 oh Chan ARN 7 مشتركة تتسيب في التطفيرات I ٠ 8 ا التى لصنت في sag النسخ : 858 PRR i وحدود خاصة بتطفيرات قطع متاكرة Bey ا 5 } v i } ب 3 Ra ا oR 1 ا 8 طايه Bag ال سي ا الت هزاجا معدي ٍ FHS aL OY TYE حك VA ETE 3 ASE Apts ge الكيمياء المناعية. River وم يهاي ص مودت ال سسية ص وول 2 8 3 5 واه 0 ج slit nN x 3 1 1 oy ] 3 SR i ia لج > 1 24 اج لم y متها 4 Ad Fie 0 Awd = 4 gq owed نمن ER Yk 3 & Ria 3 3 2 of Fg دع g fo نأ 1 win) لاجد د TY - vi اا ا اي § x الهج يه وج سج مين * اويا تح لأسي سات ل sy eo ١١. 3 YY YS “ 2 Ye Ya ¥. (بالأسابيع) sedi AAV Sha أسابيع بعد3 اميت اه لعي ا اي وي ب } Tr ye BERET Yoo ل ARNE ب عم لبه ايحي ‘ CREE 3 ا لاف اطي م | edd BY Cy ER HOES sebastian ال BEL Gn FRY ب ppd SERRE Le ان : Shag 3 CORRE RNR Feed rs BEES ek صر Ph Sak SX ig Se SN § hte JE AES SSR Baas TR CUAL Awe he FER ov As وده م#ة {au Sang) Fad F503 نهد Fah ذربة] Say Ww ورم ادوم Ka عينة BER وتيا ا 8 ا 2: ٍ : ٍ 8 8 = + ات 1 3 ج a. 3 ب a Ay 5 ay EE ] جح me Now COE الت اا he 5, bet RE 4 ل ل 4 FET wa 3 ER OATH .م ve Hoe add ; Low a 1 CR : 1 + EB CR ال TE اب ELE Jak : 3+ ب ال oR = Bs 0 5 : 8 3 ا يق ا ki 4 EA. fd | § > £48 3 Yi 3 a TE ا الوق قا J © = EE 3 ب 8 ا 0 ا Ween TT RR ل 1 ا ل den RIE 2 ا كلسي ا BJ ERR 0 AR © i 2 mL Ry ee 3. 13 لاحي vig §8 > 5 © # 9 8 3: لاا ساد STEED FURIE 330 ا ا اه[ ya وج Hd Td ا 3 4 8 1 0 FEY = ENE 2د GEER A «RAR RASABD. يعد حقن git BER SEY في es IR a | £5—_ 3 9 —_ = اكريما RTE لض وضع RE oni TF i SCAAVS.T38 Mecp2 الك ال ات : | oh واس >ئ>:>ج>>5اك>إجيجسي5فس«وجيويي>ففوز7ًزؤز/7لا|[-ل#نها7/7 [7ا7 ز 7اجدم]نوج إ[لاٍغ ITS Ged BRED كع إن اساسا سق nS isn em 0 ار eh اا راعذ اعد Tad Fair fad oh Fry.He > AVXE-201 HiT a 38 الس “سا ne OE ببس مسمسسدبط amis الا روج 8 I< تب3 i «# «+ 0 ال ا i : ب مر بجر : وا ا TEE م ال : ل REAR { ااا + i متحي ا SR 0 5 5 5 to المي i Ea اله ضاي TEE i i ب : Goual LEER OE Teese 4 قل RE اد Pee Shady i a a + تس ةا 8 i LR SENN ERIE A, Far i a IEE ATR he SANE SIRRD “J Fad Bony اها وت eo tami 3 i 3 i WE الا a 4 3 x 2 % 3 ! 1 ب مس سس ب ! 5 pe مو حصي TY ل ا # ١0 لمت | Seedy ب ُ ُ ّ ا لدت ا ىام ال Wy TE No ¥ 5 3 ا ال Ii ny Fai WE 8 8 ا ا الم K ! CREE الممسة» YEE ااا لع 8 ل i 4 8 1 a Yee ET i Baa i 2 3 1 i *y Coy : : ل NE CE 8 1 ا 4 لوال لا سسا ان لت و وو سا اا اجاج سبع x Fa AE As Tha و Tea اع باع .لجخ Wes ° Li fe oad VT a aa ضرت ايض تج Pk iad 0 } AVKBE0 r بك دبي اوج ; © 7 ا Ne - ? 84 باع Fa SN اللا SN 4, i & No HE % ¥ oS { N x be | j yaad 2# : & 1 0 : i § 4 4 1 8 ل ع ا 8 لعل 1 = 8 با $ اا 3 Ne Tred أب Sa 8» CL a EE a RR AT a ان ا ا اد د PRS > : : a wT bodies ا جاب RA RR 3 Ye $4 3 Ty A a Yo. * i ب 1 {vg) dg all 1 في زر بي 5 A 2 oaded رقو الا الما لفحم SRR wT )= £ fein] SANE LW } \ B الم Yay Foal ] y i Hri=R] EE SE 8 i Foren] NEE SENS ¥ Al Pris) SAEs 4 ب الوكاة لحا روك 18 ’ 3 3 } i "0 oy ewe - 7< pa 3 1 1 i ¥ Be i BEER ¥ . 3 FN ل ا 1 Toa 5 SW 3 % ل x} foe ل wi + Wg sod HLS RES 3 { of OY eet ا ل i Loved 2 i NOSE METER cae احا الال od dl 3 ‘ ا SRT pe ان اما مج الل ا a 3 Rn ood Laden ae 4 RRR A اا ال ا 1 : Soa TERETE TR 8 ا ال 0 لهت اهن 93 ا ا اا .امات ا ا To Sn RR es tis H ¥ Yo £0 30 ve fe Yad AY Cet (بالأيام. قي ٠ ال ا * Ea | ¥ 8 4 ال we لمم Al Tr) ل اما even مك 1 © SE SRE الم { 1 1 & ب § = YW 2 = a NORE a prey + ERE A § + i vi 3 £ ]3 مخ اخ ب ’ ا er Fg a oe] ¥ SRS i § ¥ . SE nh 5 eT ا Ny الت ين ا الا § ِ ب ERR يكاج aT الت ااا i Ea مج 1 أي التي لين ل : 1 0 0 ب Ny مي ا نا BY ا ا كيه الات لاص لشت ااا Te ya Se bed 1 £5 ,¥ AF x i 1 السن (بالايام)
- 2 .ا at © -£ } لو يع pie ford 3 me Ce Ta baa ~ 320 7 ب 1 ب 81 TY 1 } X c Fx; regent ! SH 4 ا a | ا ا ا التي bo 1 ا Yor ا Pod 1 Uris = Lo bode OB A Te gel TR yaw eri TE iawn Boy Post EE 3 معني ل 7 EA أ اا HERES 5 1 . 8 3 TECTURE 1 TE ERNE 3 we ¢ Ce Ss LEE oo wo A FIR OEE ER HEN ا BT aT ا كت ل A اد مع A i RAE NEER T . EER 8 1 ans |: Bd DE ow ¥ * A RY Rg ال ا ب اا ا حا RX 0 LEE OL - Jer الات NEE dn ا 1 ين ااا لي ل لا لاا لا * : ا RELA ب ل RAR SRA SE Ye Shas ١ 8 iE be EE ا ا WH Yo BRIERE LEE CIEE aT wv BE 4 BURR GE FANS ol Ea BW NE 3 PEE TE HER 5 HE RLIEER NE SERN ES jo 8 0 8 & NMERIEIRE 8 ا لاا ii 18 2 Hg 8 اك م اا ع REE ا Mam ل = SR لا الك SEY ا ااا HA ER BRLIRS RAR LIRR ERNE 8 ا ا ل ا لال لال . .3 ب جاجع ري ا RS i oe : ممست RR وتاج ثانا BY RE 5 1-0155 دمجي ابد اا صوق ل َ : ا 5 ف الي لاا حا Nam Yet NR) Tl - لحل et on EA ce 8 ا KG 0تعيق لصا م330 BY عع 5 كوا AG 2 8 مح 5 ا ب 3 Wi » § شكل£ Seen تسا ا 3 us a A : م ل ل See ae Fa Foi i se ee SEE IRR WY كن الام 3 Ki a poi) ينب 2 2% م الأ ا po = aw Ee 18% > ع 1 8 1 8 £55 A par = 2 fad 8 ١ 7 ل يه oY wy El Lo > * TY 3 3 ب 7 1 1 8 0 8 ا ب pe يم BE fos Xe TR ; NE He QL Lib TRIE 9 coed © © أ 1 EF = bed Bi pny BR a BB x a 1 0 Bn oi Bas: i SE-B RY RG +o لق باج EES - NY BY NY الي E 0 ا ع 0 BY be 8 ل REN& . 0 ف EAN 0 5 ف ا th J A A %. a | Oh 1 ب 3 ; ’$0.00 8.5.0.0 جه ال SR CRF Rat ae eat Ln ANT اليا pal AW AR lh all eg AE AAR OWE 3 oY Mid رط a A Rx ¥ &نبب : Nox 3 gshae Es i سد i CONE aye Ab 4 ا 1 0 0 4 { أدب 1 i * i ,4 i Ne ¥ " 3 af 16 4 197 Ts 1 ¥ Xd LAM ® : ا FE 3 vod i a BN eg الا اي ا 2 الت الل الا ملتسا Ew YW Taw 2 EN ER ne EE Ra ¥ ry 1 v \ s q . 4 8 3 ¥ 7 5 & 0 ~ 0 8 ايا ١ السن (بالأيام) م موي اا ات NET م ا لتقا لتقا 1١ KE: & 7 : } Yeas dy = 3 Th pi sie : boop 1 [BT TE = i vob Ee te DE No doo ال ل الى in 1 0 Rha | La ا 37 لا 0 is #8 RE 3 SNE TRE h 3 3 ا ل ا اا
- 3... 00 BUNNERE 5. BRN Ni Ni ع \ N NE El Sr WIN RERE Hors X SENSE 3 ا RIN NX 5 ا 0 0 اخ 2 ِ ا ا ا ا سب i ا 0 EAR SRN 3 X 8 ب : CER GN . N BH لال لا الال لأ لال BURGER ال جا ا لذ . RLS RR TE FRR = Se CREE gee J SRT ERE RR TE hel SR DAYS RIN os ie Sets SE ONCLPRS NE WY. 8000 BN WHET العا SS AEE wr So wi wn } VY شكل x } #83 PATRI ملتست ل ل ل ل oy 3 5 ا ا ا لب ابا ا ب TR A RR . & son تا cco: ARE Su A SA A DRO Madd | woo Line | esd ai HER | RR RR "م لمجم لومي مد . CE يي Fa i el ال : WE ER RE Ne Aves : RRR RRA ٠ اصح اج Cain | Has : fdid RAS SI * NE pre © 8 5 : § I 8 لعي »م ا
- 4 . 5 اميسو - CE hat 3 8 Co . x i po Rat & ES OBE san 3 1 8 اي - ا To ms £00 Lo pm ا ل" 0 3 ا 8 § : x SR RE 1H . 3 5 GER 23 LEE i 3 3 $3 ER 888 ب Y 3} 8ج 2 5 RR 0 88 HE 3 3 = BRE IR Ra § oR eB so ERRY ذا RR + Saar 8 اال ا الي ال لب ازيم امب dL RA الات RRR ...امج م امد ا اذ ل ch 3 ا للم RRR اا ا 0 4 ا عن لض الك Ra 0 1 م SREY Si 5 0 ITE BY Se RENIN NR ERR ا خا Hans 0 ال ا كا اا 0 A Ni سا ا مجه م ا ا RE EN ل ل ا 1 EARP X PRES TTR SEG Rind EE ve a su م Med Hipp Cy Aid ; 4 ب— 4 7 —وطن + ار | _ يوضم لظو حم اي ّ| ٍْ yw : po SECS AT SRS تش اس ا ا 3< geet j إٍْ >ين صر .5 Beg ١ . pe 1 با ا ’ بي تمي go امي 3 اها سي Tio | ة Stage? Rw wR fs RE اليل ا 0 اما م Yow ye Ya & * 1 ان 0 $3 io الزمن (شهور من الإنتاج) شكل Ve a EE git ا vay vie hid ; ; % | i onal A ATA i 0 - 1 3d AA 3 i ا ااا aE 2 ESE td 1 4 =. Ses . 4 WS % LFS, Shen ا a Nn * 1 الا جلت تق ا ل Lo er” ES RE vai % i eh ين 3 2 OL EP v ITT اا ا الات ان {empty imi {asi الزمن assy ah nnn الم مجلا ما 1 لح« : al02. : ] Sek ns ب i wl Fil اق ofan hoagie ' 2 ٍ ل اياي x : i EA #3 Fess * ال لي J 4 DEN 0 0 ا ا Ik vil a oS A بيست id TETRIS CTE TTT RTT frm fossa) الزمن fot) co (شيورة ed a EE PR BEERS در Rp قد NEA تجن EECA SNPS TY SS ال ا ل vo, Ig =Fey Sos Farag i YE at ; + Ee ا ل ا i . i 0 { TN, ; NE ل ا pee ل سب A 3 (id Aa i 4 8 ا للا ENE اا الا ا عي لاف ا ee ا <7 امس ER Ee Th rd Ci 5 ا ل ا Cy امج الزمن إجهرد) fast) wt fad) bos Va i الجا عات care WN ب 2 ْ: ل | 0 cola يا ا ل ام ا ارا أ اي اا كن العا Pos ALN PR يع oe RGIS la I BREE tf Sr Re ae ATER Re ~ Nada eT اا 5 ae > وب ST i dy Do 5 hp 1 Lo re Er ey ’ So ’ ال 7 ل الزن (شهور) {ise} رمن (شهور) الزمن a ons PEE TER ERY 5 2 ل he مج اع ا #1 ا # ميخ Foo Tred i 2 ا ا Pity £4 in rs ونين جد عي 8 ل Lili SN ARPA TARE TOT 4 8 Fr Se ROLE PANKE (253 0038 st ص يتبع ٠# شكل ّWaT يم بيج لك 1 x3 5 AE ا CAA CATERER A A ny SRY eT INS of ee x Ee 8 : Light (SN 3 ) go SST ا 5 sed =, a ' = اا اا اط ااي كيين Fel مم STE ا TET 0 راع i إٍْ 1 Sere ل er ا ال ااا ipo Aw bE = 2 و i] > - Ya ا o » الزمن (شهور) fasts foarte كم NRE ححا ARF Yay a; 5 i i 7 2 i 3 3 .5 Tho ABET, 3 © ا ووو ١2 لالم المعو وقول 7 GRRE © اس ةن الم ا o eT اi . 4 i ae Fe بعل زه pepe ب A rrr errr Xa * te [i ص 5 ‘ 2“ Yo ¢ . الزمن لالهو الزمن (شهون] الزمن }403{ SPEEA Ae BA ACRE صمت كا ال ABCA نهم wd PBEM AREATARNRAR FEY نهم دص شكل 15 rik يجام Sein FR A i Vg MEL § 5 اا -— ا فجت را ااي ECE ار ا § vd af EE ’ . 8 ال Ee % 3 جمدم ا لاج حي ERE ~ 8 x 3 IN am i الم لاسا < ال للا م he Sess سيا تي {ashi La الزمن (نهونة الزن ox Ny er ey 3 4 1 رايع 1 : 0" i i % y ِ i A 5 ا ا i HE : 1 hpi Sato i ¥ 0 oe, . 5 لمم ic i متي مج { i i i hms Asim ns ا ein ind } } > 2 Ye va 3 5 ال تاي ةع لس I الزمن (شيون) المزمن Las dash ع العو اعم TRCN we PREIS ob {HIS PORE By تق تنبا ال مد وض ا لاي ow 8: gt ¥ شكل furs San vas, RA اجليسبريداتا . or eid 2 + 0 : Vi gd + ا BEN rrr oA AR Sian ¥ 3 1 A EE SES DA ا ¥ 3 . ¥ id م محا العامة بيه امور = vs to t > a hi CORE خم i : CE Ba RC ei EA To «SRE See * ian nine ماف يم ane Kaan تت اع محم م ذا em nm mn ِ an عب 5 ع iz : As 2 ب 5 Na Te 3 > اا Spl) المت att رمن 9 (شهور) ond {asa} الزن Fadi الزّمن ورا 4 ٍ جد ب as ak pic i 4 0 يٍِ 0 إٍْ * ا 1 ا اع مضي ب مهي : SER ل CTR ارا Ya pram wv BEAT oN TEER oo Po pest wks : Dr ل Latent 2 ل ل dana aad aan: 0 2 ا FE ع 2 Ay 5 i TRY (شهرر ad 1د no : الزمخ [شهربا Aas} انزمن {ask الزمن مكلت ا ها VERT ل ا A IHREN الخد متام ايم ENR ١ شلأميلوز sadn كاه Sag 0 You; Hae, i i Co red Lt te ns in os ام 5 8 i aa 3 يجي اس XE DN 3 EP :3 3 سي مسي لاسي نا تمصي ضر ا + 9 م مايا ا الاك لين لضا NT عل ا AS Bt د ميا Se rn : 0 ky oT rT LTTE الزمن [شهور الزمن Caan) ait {oad FBE11% ل مت #0 oe PES 196 "0 vad Nd cd fe FRSC (AXE 200 15034 ا الا الح od Sel wos Sens © a rr )201 130 عق ا جح ته : AYRE 200) تبعت يا مسي سيت سيسات الزحن Losi شكل AY0 - cmPEE 481 PBS AVXS201 ea A RT SO Sate ا SR re A ا ا ا ل ا ا ا ا ل Ee Shea es 0 ل sana ل aha ee TEA FR oc a SEE SEES, Seis That SARS ene Uh Eee ER Shona ate ee Shodan ino SOE i ae aie SEES CTR SRSA Hs Shas NRE SHEAR ل للدت ا جياه ا ايا ا ا SERIA AT Sri ST ل ل لي الك ل na ا ل اج ال اي ا 0 0 اا لت SARE ا ا ا 0 ل ا و تاو ا ل تالا 0 CER SRE EE Tan ا اا ال Cana ل RE ل ل ل ل ES ال ل ل a ال ل arian ا ال 0 Sima TOUTE ا Hipd a cs EE ER han “ GEESE GEREN ا ا oes SRE ee CES SESS SRS Hadas Sm Sh, canna I EET ea SLE CR i ل 0 الي ا ا ee 0 ا ا ل ا ا ل ل 0 a Ga Eee EGET 0 ا حي ل Ea Senin antenna EEE an ee ات ا ده الم وا ا ا ا ا ا ل ا ا ل ال ا any0 ا se ال ا ا ا ل : ا ا ا اله ل ل ا الت ا ا ل الا a ا ا ا الا ل ا ا EE Saw a يب Gonioa dd Sand iniag قا EN ine Selmi Sa La nw ا ال 1 ETERS Tha re SNR a Sa ا ا ل ا Soden BERR ss SEE Shan ah Bn CORNER a Ve 1 م 0 LN TS 52 ل a ل ال ل ل Simm RSE a SE i : اROE§ BARRY BANG اك grep CARON REE انها ان جه الات عد ERIE تبن tha! EEE EEN Ep الم Hivos SSRN SE ل TT, a 8 خلج g ¥ Sd oy ' Se i 3 I ce gy oY : ا ُ 3 3 v1 5 = % Eo “iby J es = A wnt py TB i TF poi > 1 : ا 5 - ; i i ] ا ] prt k ; 3 3 5 wl i 1 5 * 7 وا 1 N ¥ oy a hoe ا a EL ab PE I EE ال + 00 TC Ham اد That Avg Hp Op +4 Je_— 6 5 _— Co Akasa 5 قو eT en, لها ا اله 7 ا جه اا ا - ee ابا - م مدي ا اد الات اث لتكلا اللا لوقا EOC ال م الا ا د ل ا ل ERE 5 شكل + ؟ا لي HE As ka i Rey AY ل SAN i متت اط اا SE I ER ل ORIENT SER Cea ALR STE IER ا IANA . hoes ل ل ا ا لحا الا اح ال ا ا 5 G a B d ا" ا ا ل ل ل ما :5 ل ا ا ا ا ا ا ا ل الج نج ايت لدت مج وعد مو ٍ ا lay = SE EE np a Te Re ae SI co DEERE EE a RRA RE ل ل JCP) RARE ie Rs SRR fey SRT SIE TRE SR ANIL A: Ee ل ل ل A Ro fo ATR EER er ne ال NT rR ا لا لات لات اا لوي ار لات وتات نوعسي سا ل اي ا اا gobi م لق ل ا ال ل ا ل ا ا ال AE | Ee a SEL ا CE الم فيج ممه wr CY الموج اج op CAN امسو ECE ا ا ل ل ا لس وي ل RR جم تح ل i i ل ل ا FE ER ل ا ل ل ا ل ا ا اما اجا ال اه م ا ل i na ا ل 1 ال لا الما ا ل ا ا ا ERAN ميج ل الا الما لا ا لاي الم ا تح الوا لج الم ا ا ل Ra ا Ne IR a I geal Ra ا BE a a RR i i ا Loo ESR ERE te ل لاي oe Pind Tom Fag . se ال ا ا ا ا ل ا ل ل ل ل ال ap BO Se ET = ne ei dot ns CO FERRER ae RT CR Se TE ا .الاي FREE REE ae ES ARES SER EEE Rr Res PES Recs A Ee Se Hai JR ’ يم ا ا ل ا اس ا ا ل ا ER ee SR Te ار ار رج د ال ل rr OE ل اليا سس ا جوم ود تب جر الج يرمح واه لمعي اف وم لوو عن م أ مكاي ادا لو اج م رو ال ا الت لج تت ا ل ا ل لح ل امم اح السك ا ا اتا الح ل ا د ا ا ل en ل ال ل ا مي مج تدا مما ا مس ل ا وت ا ا ا ل Fad ا لح ال مو لس ا ام حا ور ا ال ل se Ea ا الا ا ا > الما ل ا ا ا ا ل ل ال = 0 3 شكل vy es Wn AEE Sad [ESE Sst ب امسو ا ا ااا لواحن جتنت ع عون دي الا ا ليا ا “الجن واي ات ل لز سحي وا ال اي جو ا ا RS الا لو الو ا ا ا ا ا ل as 3 RR NR Gapdh BE RE و ال nN ea ل ا ا ل ل ل EN A a kr goes Re: gone 5 ا om BIBI PCRS 3 5 78 £8208 oe gE Rn > 3 ا 0 ا 1 5 2 ب Th 2 LS I RR Eat aaa . a A كالمو م ا I a ااا التاق الم الات ال ا ا NC SR ph hE RE SRG RAE NL “adi DI ال tn OT د ل اكت a RARE NG i I SINE SR Ae rs SRS ل S300: Rn RARE A BES SB SE JER oC EE SA eo ل Tae 3 Ee TR I NL ا ل ا ا SERS الات الحا لاا ل ا ا ال ا انا انما التي لد اانا نه لب الا ا 7 ا بح ا ا ل : ل RBA ا ل ل لاا Se ا ل ا م oa SE IE he i الا ل eke re ea se a SS ECMO ا JOR CRTC Re LORS الا الم oh RRR S SOAR INC MURAI He ال Re D0 AONE SOBER i a لا ال ا ما ارت ما ادي تي ال ا حا ا ل و ا ل ra Bo ال ا ل ا ا INTE لطا ل بواجي احاح ديام A الا حبس ٍ ال ا د ال ا ل ل RR INR LT ا وا لبد ال ل ا CRN engin EGSm. Ee ل a A Ga dh REE SIO. SHRINE ESTE: Base. ل ل ل ل I ل ا ل ل ا ل ا ا ا ل Ne 1 ل ا ا ل ل Era لي م ا ما تت اا اا ا ا ا ا الو لت ل ا ل يا ات وا ل و ا ل J Ras ل ل ا IR ET SR a ا امي SR RT Re ER ا ENR RE AE SER ل SESSA BSH (SCA SE ORS a ee es SE EN Cn ا ا ا ne Rg Hera iE ا الس ae es الما ECE ل ل ا ا ل Ro Sa ل ل وود I ns : ل ل ا ل ل A rN hs ا ل ا ل 1 EE Fara aR I السام ا ل TS ا ااي HE ¥ 3 Ji ا { J ae .الحاضهة الهيلة السعودية الملضية الفكرية Swed Authority for intallentual Property pW RE .¥ + \ ا 0 § ام 5 + < Ne ge ”بن اج > عي كي الج دا لي ايام TEE ببح ةا Nase eg + Ed - 2 - 3 .++ .* وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها of سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. »> صادرة عن + ب ب ٠. ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > ”+ ص ب 101١ .| لريا 1*١ uo ؛ المملكة | لعربية | لسعودية SAIP@SAIP.GOV.SA
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201662423618P | 2016-11-17 | 2016-11-17 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA519401806B1 true SA519401806B1 (ar) | 2023-03-08 |
Family
ID=62145776
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA519401806A SA519401806B1 (ar) | 2016-11-17 | 2019-05-17 | توصيل داخل القراب لفيروس مرتبط غديا ناتج عودة الارتباط الجيني يرمز بروتين 2 ربط ميثيل -cpg |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US11583564B2 (ar) |
| EP (1) | EP3541429A4 (ar) |
| JP (3) | JP7106534B2 (ar) |
| KR (1) | KR102641846B1 (ar) |
| CN (1) | CN110325219B (ar) |
| AU (2) | AU2017362491B2 (ar) |
| BR (1) | BR112019009834B1 (ar) |
| CA (1) | CA3044291A1 (ar) |
| CL (1) | CL2019001354A1 (ar) |
| IL (1) | IL266678A (ar) |
| MA (1) | MA46863A (ar) |
| MX (1) | MX2019005874A (ar) |
| SA (1) | SA519401806B1 (ar) |
| SG (1) | SG10202105090WA (ar) |
| WO (1) | WO2018094251A1 (ar) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MX2019005874A (es) * | 2016-11-17 | 2020-02-07 | Nationwide Childrens Hospital Inc | Administracion intratecal de virus recombinante adeno-asociado que codifica la proteina 2 que une metilo-cpg. |
| CA3129077A1 (en) * | 2019-02-04 | 2020-08-13 | Research Institute At Nationwide Children's Hospital | Adeno-associated virus delivery of cln3 polynucleotide |
| US20220389453A1 (en) * | 2019-10-18 | 2022-12-08 | Research Institute At Nationwide Children's Hospital | Materials and methods for the treatment of disorders associated with the irf2bpl gene |
| JP2024515623A (ja) | 2021-04-13 | 2024-04-10 | リサーチ インスティチュート アット ネイションワイド チルドレンズ ホスピタル | 髄腔内送達によってピット・ホプキンス症候群を治療するためのメチル－ｃｐｇ結合タンパク質２をコードする組換えアデノ随伴ウイルス |
Family Cites Families (33)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5173414A (en) | 1990-10-30 | 1992-12-22 | Applied Immune Sciences, Inc. | Production of recombinant adeno-associated virus vectors |
| DE69433592T2 (de) | 1993-11-09 | 2005-02-10 | Targeted Genetics Corp., Seattle | Die erzielung hoher titer des rekombinanten aav-vektors |
| ATE272123T1 (de) | 1993-11-09 | 2004-08-15 | Ohio Med College | Stabile zellinie, die in der lage ist, das replikationsgen des adenoassoziertenvirus zu exprimieren |
| US5658785A (en) | 1994-06-06 | 1997-08-19 | Children's Hospital, Inc. | Adeno-associated virus materials and methods |
| RU2273645C9 (ru) | 1994-08-17 | 2006-11-27 | Дзе Рокефеллер Юниверсити | Полипептид ожирения (ов)(варианты), его аналог (варианты) и слитый белок (варианты), изолированная молекула нуклеиновой кислоты, молекула днк, рекомбинантный вектор клонирования, рекомбинантный вектор экспрессии, фармацевтическая композиция, моноклональное и поликлональное антитело |
| US5856152A (en) | 1994-10-28 | 1999-01-05 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Hybrid adenovirus-AAV vector and methods of use therefor |
| JPH10511264A (ja) | 1994-12-06 | 1998-11-04 | ターゲティッド ジェネティックス コーポレイション | 高力価組換えａａｖベクターの生成のためのパッケージング細胞株 |
| FR2737730B1 (fr) | 1995-08-10 | 1997-09-05 | Pasteur Merieux Serums Vacc | Procede de purification de virus par chromatographie |
| CA2230655C (en) | 1995-08-30 | 2008-06-17 | Genzyme Corporation | Chromatographic purification of adenovirus and aav |
| EP0850313B8 (en) | 1995-09-08 | 2009-07-29 | Genzyme Corporation | Improved aav vectors for gene therapy |
| US5910434A (en) | 1995-12-15 | 1999-06-08 | Systemix, Inc. | Method for obtaining retroviral packaging cell lines producing high transducing efficiency retroviral supernatant |
| IL128779A0 (en) | 1996-09-06 | 2000-01-31 | Univ Pennsylvania | Method for recombinant adeno-associated virus-directed gene therapy |
| US6566118B1 (en) | 1997-09-05 | 2003-05-20 | Targeted Genetics Corporation | Methods for generating high titer helper-free preparations of released recombinant AAV vectors |
| CA2995542A1 (en) | 1997-09-05 | 1999-03-11 | Genzyme Corporation | Methods for generating high titer helper-free preparations of recombinant aav vectors |
| US6258595B1 (en) | 1999-03-18 | 2001-07-10 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for helper-free production of recombinant adeno-associated viruses |
| GB9916702D0 (en) | 1999-07-16 | 1999-09-15 | Cantab Pharma Res | Virus vectors and preparations and their use |
| CA2406743A1 (en) | 2000-04-28 | 2001-11-08 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Recombinant aav vectors with aav5 capsids and aav5 vectors pseudotyped in heterologous capsids |
| AU2002359284A1 (en) | 2001-12-17 | 2003-06-30 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Adeno-associated virus (aav) serotype 9 sequences, vectors containing same, and uses therefor |
| US9441244B2 (en) | 2003-06-30 | 2016-09-13 | The Regents Of The University Of California | Mutant adeno-associated virus virions and methods of use thereof |
| US9233131B2 (en) | 2003-06-30 | 2016-01-12 | The Regents Of The University Of California | Mutant adeno-associated virus virions and methods of use thereof |
| WO2005078099A1 (en) | 2004-02-17 | 2005-08-25 | The Hospital For Sick Children | Mecp2e1 gene |
| PL2066791T3 (pl) * | 2006-10-03 | 2013-02-28 | Genzyme Corp | Terapia Genowa do leczenia stwardnienia zanikowego bocznego i innych zaburzeń rdzenia kręgowego |
| AU2009206089B2 (en) | 2008-01-15 | 2014-08-28 | Abbvie Inc. | Improved mammalian expression vectors and uses thereof |
| US20090246768A1 (en) | 2008-02-15 | 2009-10-01 | Sawalha Amr H | Predicting and Diagnosing Patients With Autoimmune Disease |
| US11219696B2 (en) | 2008-12-19 | 2022-01-11 | Nationwide Children's Hospital | Delivery of polynucleotides using recombinant AAV9 |
| US9415121B2 (en) * | 2008-12-19 | 2016-08-16 | Nationwide Children's Hospital | Delivery of MECP2 polynucleotide using recombinant AAV9 |
| DE102012007232B4 (de) | 2012-04-07 | 2014-03-13 | Susanne Weller | Verfahren zur Herstellung von rotierenden elektrischen Maschinen |
| JP2015092462A (ja) | 2013-09-30 | 2015-05-14 | Tdk株式会社 | 正極及びそれを用いたリチウムイオン二次電池 |
| JP6202701B2 (ja) | 2014-03-21 | 2017-09-27 | 株式会社日立国際電気 | 基板処理装置、半導体装置の製造方法及びプログラム |
| JP6197169B2 (ja) | 2014-09-29 | 2017-09-20 | 東芝メモリ株式会社 | 半導体装置の製造方法 |
| CA2967468A1 (en) | 2014-12-16 | 2016-06-23 | Board Of Regents Of The University Of Nebraska | Gene therapy for juvenile batten disease |
| MX2019005874A (es) * | 2016-11-17 | 2020-02-07 | Nationwide Childrens Hospital Inc | Administracion intratecal de virus recombinante adeno-asociado que codifica la proteina 2 que une metilo-cpg. |
| KR20200015701A (ko) * | 2017-06-06 | 2020-02-12 | 유니버시티 오브 매사추세츠 | 레트 증후군에서의 MeCP2의 안전한 발현을 위한 자가-조절 AAV 벡터 |
-
2017
- 2017-11-17 MX MX2019005874A patent/MX2019005874A/es unknown
- 2017-11-17 CN CN201780072105.XA patent/CN110325219B/zh active Active
- 2017-11-17 KR KR1020197017104A patent/KR102641846B1/ko active IP Right Grant
- 2017-11-17 MA MA046863A patent/MA46863A/fr unknown
- 2017-11-17 SG SG10202105090WA patent/SG10202105090WA/en unknown
- 2017-11-17 CA CA3044291A patent/CA3044291A1/en active Pending
- 2017-11-17 WO PCT/US2017/062371 patent/WO2018094251A1/en unknown
- 2017-11-17 BR BR112019009834-8A patent/BR112019009834B1/pt active IP Right Grant
- 2017-11-17 EP EP17872045.4A patent/EP3541429A4/en active Pending
- 2017-11-17 US US16/461,837 patent/US11583564B2/en active Active
- 2017-11-17 JP JP2019527321A patent/JP7106534B2/ja active Active
- 2017-11-17 AU AU2017362491A patent/AU2017362491B2/en active Active
-
2019
- 2019-05-16 IL IL266678A patent/IL266678A/en unknown
- 2019-05-17 SA SA519401806A patent/SA519401806B1/ar unknown
- 2019-05-17 CL CL2019001354A patent/CL2019001354A1/es unknown
-
2022
- 2022-07-13 JP JP2022112657A patent/JP2022137210A/ja active Pending
-
2023
- 2023-01-02 US US18/149,151 patent/US20230321164A1/en active Pending
- 2023-04-28 AU AU2023202598A patent/AU2023202598A1/en active Pending
-
2024
- 2024-01-24 JP JP2024008380A patent/JP2024045289A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2017362491A1 (en) | 2019-06-06 |
| MX2019005874A (es) | 2020-02-07 |
| BR112019009834A2 (pt) | 2019-10-08 |
| AU2017362491B2 (en) | 2023-02-02 |
| KR20190126047A (ko) | 2019-11-08 |
| AU2023202598A1 (en) | 2023-07-20 |
| RU2019118300A3 (ar) | 2021-01-11 |
| CA3044291A1 (en) | 2018-05-24 |
| MA46863A (fr) | 2019-09-25 |
| US11583564B2 (en) | 2023-02-21 |
| JP2020503265A (ja) | 2020-01-30 |
| EP3541429A1 (en) | 2019-09-25 |
| JP2024045289A (ja) | 2024-04-02 |
| BR112019009834B1 (pt) | 2022-05-17 |
| US20230321164A1 (en) | 2023-10-12 |
| KR102641846B1 (ko) | 2024-02-27 |
| JP7106534B2 (ja) | 2022-07-26 |
| EP3541429A4 (en) | 2020-08-12 |
| US20200179467A1 (en) | 2020-06-11 |
| WO2018094251A1 (en) | 2018-05-24 |
| IL266678A (en) | 2019-07-31 |
| SG10202105090WA (en) | 2021-06-29 |
| CN110325219B (zh) | 2024-03-26 |
| JP2022137210A (ja) | 2022-09-21 |
| CL2019001354A1 (es) | 2019-09-13 |
| RU2019118300A (ru) | 2020-12-17 |
| CN110325219A (zh) | 2019-10-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SA519401806B1 (ar) | توصيل داخل القراب لفيروس مرتبط غديا ناتج عودة الارتباط الجيني يرمز بروتين 2 ربط ميثيل -cpg | |
| TWI722310B (zh) | 用於aav之遞送之組合物及方法 | |
| Jiang et al. | Gain of toxicity from ALS/FTD-linked repeat expansions in C9ORF72 is alleviated by antisense oligonucleotides targeting GGGGCC-containing RNAs | |
| JP2020164540A (ja) | 網膜およびｃｎｓ遺伝子治療用ａａｖベクター | |
| TW202015742A (zh) | 投遞腺相關病毒（ａａｖ）之組成物和方法 | |
| US20210371470A1 (en) | Compositions and methods for delivery of aav | |
| JP2023058630A (ja) | 線条体および皮質へのウイルス粒子の強化された送達 | |
| TW202134260A (zh) | 微小肌縮蛋白基因療法之構築體及其用途 | |
| ES2947311T3 (es) | Gen UBE3A modificado para un enfoque de terapia génica para el síndrome de Angelman | |
| US20100111911A1 (en) | Mitochondrial nucleic acid delivery systems | |
| SA518391113B1 (ar) | طرق ومواد للعلاج بجين galgt2 | |
| CN118078860A (zh) | 用脐带血移植(ucbt)和增加的半乳糖脑苷酯酶(galc)表达治疗克拉伯病 | |
| KR20160008987A (ko) | 뇌신경계 질환 치료용 물질을 발현하는 줄기세포를 포함하는 비강내 투여용 조성물 | |
| JP2024069332A (ja) | Ｔｍｅｍ１７６ｂ、その発現または活性モジュレーターを有効成分として含む神経変性脳疾患の予防または治療用組成物 | |
| AU2018395121B2 (en) | Adeno-associated virus (AAV) vector having hybrid HGF gene introduced thereto | |
| JP2022525564A (ja) | アンジェルマン症候群を治療するためのベクターおよび方法 | |
| EP4137145A1 (en) | Pharmaceutical composition for treating degenerative brain disease, including glycine transporter as active ingredient | |
| Sych et al. | Feasibility of combined treatment for type III spinal muscular atrophy: a pilot study | |
| Johnson et al. | AAV9 gene therapy restores lifespan and treats pathological and behavioral abnormalities in a mouse model of CLN8-Batten disease | |
| US10246712B2 (en) | Genetic or pharmacological reduction of PERK enhances cortical- and hippocampus-dependent cognitive function | |
| US20210269829A1 (en) | Optimized cln5 genes and expression cassettes and their use | |
| Cossins et al. | Dose escalation pre-clinical trial of novel Dok7-AAV in mouse model of DOK7 congenital myasthenia | |
| KR20210127609A (ko) | 글라이신 수송체를 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 치료용 약학적 조성물 | |
| WO2022170038A1 (en) | Adeno-associated virus delivery of cln3 polynucleotide | |
| Cheong | Gene therapy for Alzheimer's disease: Characterising lentivirus and adeno-associated virus spread from the adult mouse hippocampus |