SA518400251B1 - أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ وطرق استخدامها لعلاج أمراض مرتبطة بجين حمض ألفا-جلوكوسيداز - Google Patents

أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ وطرق استخدامها لعلاج أمراض مرتبطة بجين حمض ألفا-جلوكوسيداز Download PDF

Info

Publication number
SA518400251B1
SA518400251B1 SA518400251A SA518400251A SA518400251B1 SA 518400251 B1 SA518400251 B1 SA 518400251B1 SA 518400251 A SA518400251 A SA 518400251A SA 518400251 A SA518400251 A SA 518400251A SA 518400251 B1 SA518400251 B1 SA 518400251B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
sequence
cxc
value
gaa
aag
Prior art date
Application number
SA518400251A
Other languages
English (en)
Inventor
جوزيف شنيل فريدريك
Original Assignee
ساريبتا ثيرابيوتكس، انك
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ساريبتا ثيرابيوتكس، انك filed Critical ساريبتا ثيرابيوتكس، انك
Publication of SA518400251B1 publication Critical patent/SA518400251B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/11—Antisense
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C12N2310/314—Phosphoramidates
    • C12N2310/3145—Phosphoramidates with the nitrogen in 3' or 5'-position
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/323—Chemical structure of the sugar modified ring structure
    • C12N2310/3233—Morpholino-type ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/35—Nature of the modification
    • C12N2310/351—Conjugate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/35—Nature of the modification
    • C12N2310/351—Conjugate
    • C12N2310/3513—Protein; Peptide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2320/00—Applications; Uses
    • C12N2320/30—Special therapeutic applications
    • C12N2320/33—Alteration of splicing
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/0102—Alpha-glucosidase (3.2.1.20)
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

يتعلق الاختراع الحالي بأوليجو نيوكليوتيدات معدلة في اتجاه مضاد للنسخ، وتكون النيوكليوتيدات الموصوفة في الطلب الحالي بطول 10 على 40 قاعدة نووية وتتضمن متوالية مستهدفة متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1 من حمض mRNA قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا البشري (GAA)، تتضمن المنطقة الهدف قاعدة نووية إضافية واحدة على الأقل مقارنة بالمتوالية المستهدفة، حيث لا تضم القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل أي قاعدة نووية متممة في المتوالية المستهدفة، وحيث تكون القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل مستبطنة لمنطقة الهدف. شكل1.

Description

أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ وطرق استخدامها لعلاج أمراض مرتبطة بجين حمض ألفا- جلوكوسيداز ‎Antisense Oligomers and Methods of Using the Same for Treating Diseases‏ ‎Associated with the Acid Alpha-Glucosidase Gene‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الكشف الحالي بأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense oligomers‏ وتركيبات ذات الصلة وطرق لحث تضمين اكسون ‎@XON‏ كعلاج لمرض ‎I‏ الغليكوجين من النوع الثاني ‎glycogen storage disease type ١١‏ (١ا١-0ا65)‏ المعروف أيضا باسم داغ بومبه ‎Pompe‏ ‎disease 5‏ داءٌ غليكوجيني ‎glycogenosis ١١ ١١‏ ؛ نقص المالتاز الحمضي ‎acid maltase‏ ‎«(AMD) deficiency‏ نقص جلوكوسيداز- ألفا الحمضي ‎acid alpha-glucosidase‏ ‎deficiency‏ ؛ ونقص جلوكوسيداز - ألفا في الجسيمات الحالة ‎lysosomal alpha—‏ ‎glucosidase deficiency‏ « وبشكل أكثر تحديدا يتعلق بحث تضمين اكسون 2 2 ‎exon‏ ‏وبالتالي استعادة مستويات بروتين جلوكوسيداز-ألفا الحمضي النشط بشكل إنزيمئ ‎(GAA) enzymatically active acid alpha—glucosidase 0‏ المشفرة بواسطة جين ‎.GAA protein encoded‏ يزيد الجدل البديل من إمكانات الترميز للجينوم البشري ‎human genome‏ عن طريق إنتاج بروتينات متعددة من جين واحد. ويرتبط أيضاً الجدل البديل غير الملائم بالعدد المتنامي للأمراض البشرية ‎.growing number of human diseases‏ يعتبر ‎GSD‏ اضطراب تخزين متنحي صبغي جسدي موروث متعلق بالجسيمات الحالة ناتج عن نقص إنزيم يدعى حمض ألفا جلوكوسيداز ‎.(GAA) called acid alpha-glucosidase‏ ويكون دور ‎GAA‏ داخل الجسم هو تعطيل الجليكوجين ‎glycogen‏ تؤدي المستويات المنخفضة أو الناقصة لفعالية ‎GAA‏ إلى تراكم الجليكوجين ‎glycogen‏ في الأنسجة المتضررة؛ بما في ذلك القلب ‎heart‏ والعضلات الهيكلية ‎skeletal muscles‏ (بما في ذلك تلك المعنية بالتنفس)
والكبد والجهاز العصبي. ويعتقد أن تراكم الجليكوجين لإحداث الضعف العضلي المتزايد وقصور الجهاز التنفسي في الأشخاص المصابين ب ‎«GSD‏ ويمكن أن يحدث ‎650-١١‏ في الرضع أو الأطفال الصغار أو البالغين؛ ويختلف مآل المرض ‎lg‏ لوقن بدء الأعراض وشدتها. سريرياً؛ قد يظهر ‎6500-١١‏ مع طيف واسع ومستمر للشدة التي تتراوح من الشكل الشديد (الطفلي)
‎severity ranging from severe (infantile) 5‏ إلى الشكل الأخف لبدايته المتأخرة في البالغين. وفي نهاية المطاف يموت المرضى نتيجة لقصور الجهاز التنفسي. هناك علاقة جيدة بين شدة المرض وفعالية حمض الألفا-الجليكوسيداز المتبقي؛ حيث إن الفعالية يكون 9620-10 من المعدل الطبيعي في وقت متأخر من بداية المرض» وأقل من 962 في أشكال بداية المرض المبكرة. ويقدر أن ‎650-١١‏ يؤثر تقريباً على حوالي من 5,000 إلى 10,000 شخص على
‏0 نطاق عالمي. إن الطفرة الأكثر شيوعاً المتعلقة بشكل المرض البادئ في البالغين هي ‎IVS1-13T>G‏ وقد ظهر في أكثر من ‎J‏ المرضى المصابين ب ا١-650‏ البادئ في البالغين؛ قد تمنح هذه الطفرة ميزة انتقائية في الأفراد متغايرة الزيجوت أو تعد طفرة قديمة جدا. ويجادل التباين العرقي الواسع للأفراد المصابين ب ‎GSD‏ البادئ في البالغين مع هذه الطفرة ضد مؤسس مشترك.
‏5 يتألف جين ‎GAA‏ من 20 أكسون تمتد لحوالي 20 كيلوبايت. وبشفر 3.4 كيلويايت من ‎MRNA‏ ‏بروتين له وزن جزيئي حوالي 105 كيلو دالتون. وتؤدي الطفرة ‎IVS1-13T>G‏ إلى فقد الأكسون 2 ( قاعدة) الذي يحتوي على رامزة الشررع ‎initiation AUG codon AUG‏ . قد اشتمل علاج ‎650-١١‏ على استراتيجيات معالجة العقاقير؛ والتلاعب بالنظام الغذائي؛ وزرع النخاع العظمي دون تحقيق نجاح كبير. في السنوات الأخيرة؛ قدم علاج استبدال الإنزيم
‎(ERT) enzyme replacement therapy 20‏ أملا جديدا لمرضى ‎(GSD‏ على سبيل المثال» تلقى ‎®Myozyme‏ عقار البروتين ‎GAA‏ المأشوب؛ الموافقة للاستخدام مع المصابين بمرض ‎6500-١١‏ في عام 2006 في كل من الولايات المتحدة وأورويا. ويعتمد ‎®Myozyme‏ ‏على المانوز -6-فوسفات ‎(MOP) mannose-6-phosphates‏ على سطح البروتين ‎GAA‏ ‏لتوصيله إلى الجسيمات الحالة.
قد تتم تهيئة التكنولوجيا المضادة للنسخ؛ المستخدمة غالباً لتنظيم ‎RNA‏ السفلي» في الأونة الأخيرة لتغيير عملية الجدل. وتشترك ‎dallas‏ المنتسخات الجينية الأولية ‎primary gene transcripts‏ لجين ‎MRNA‏ القبلي هل]016-0014_لجينات عديدة في إزالة الإنترونات ‎many genes‏ ‎involves the removal of introns‏ والجدل الدقيق للإكسونات ‎precise splicing of‏ ‎Cus eXONS 5‏ يتم ضم موقع جدل أحد الجهات المائحة إلى موقع جدل المستقبل. يعد الجدل
عملية دقيقة؛ تنطوي على تنظيم منسق لأحد الجهات المانحة ومواقع الجدل المستقبل؛ ونقطة الريط أعلى موقع جدل المستقبل ‎upstream of the acceptor splice site‏ مع اتزان محفزات ‎Jas‏ ‏الأكسونات الموجبة التي تقع بشكل أساسي داخل الأكسون 6007 وتتابعات تنظيمية للجدل السالبة (كواتم الجدل الواقعة بشكل أساسي في الإنترونات ‎splice silencers are located‏
‎predominantly in the introns 0‏ ). من المحتمل أن تكون العوامل الفعالة التي يمكن أن تُغير من الجدل لأحماض ‎MRNAS‏ القبلية لجين ‎GAA‏ مفيدة بشكل علاجي لعلاج 650-11 المحسن. الوصف العام للاختراع في أحد الجوانب؛ يتميز الكشف بأوليجو نيوكليوتيدات معدلة ‎modified antisense‏
‎Oligonucleotide 5‏ في اتجاه مضاد للنسخ بطول 10 إلى 40 قاعدة نووية؛ تتضمن أوليجو نيوكليوتيدات المعدلة في اتجاه مضاد للنسخ متوالية مستهدفة متممة لمنطقة هدف ‎target region‏ في نطاق حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا ‎human alpha glucosidase (sd.‏ ‎(GAA)‏ (على سبيل المثال» في نطاق إنترون 1 من ‎(GAA‏ مثل منطقة مستهدفة ضمن متوالية برقم تعريف :1)؛ حيث تشتمل المنطقة المستهدفة على قاعدة نووية ‎nucleobase‏ إضافية
‏0 واحدة على الأقل مقارنة بالمتوالية المستهدفة ‎«targeting sequence‏ حيث لا تضم القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل أي قاعدة نووية متممة في المتوالية المستهدفة؛ وحيث تكون القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل مستبطنة لمنطقة الهدف؛ قد يكون التفاعل بين المنطقة المستهدفة والمتوالية المستهدفة بخلاف ذلك متمم بنسبة 96100 ولكنه قد يتضمن أيضًا قيم حدية للتتام أقل (مثل 9680 و 9681 و 9682 و 9683 و 9684 و 9685 و 9686 و 9687 9688
‏5 9089؛ 9090 7091 ‎NIT 9696 9095 9694 9093 N92‏ 9098 %99(( قد
تتضمن المنطقة المستهدفة واحدة على الأقل من متوالية برقم تعريف : 2 أو متوالية برقم تعريف :3( بشكل اختياري؛ قد تتضمن المنطقة المستهدفة متوالية برقم تعريف: 4؛ بشكل اختياري؛ قد تتضمن المنطقة المستهدفة متوالية برقم تعريف :5؛ قد تعزز أوليجو نيوكليوتيدات المعدلة في اتجاه مضاد للنسخ احتجاز اكسون 2 في ‎GAA MRNA‏ عند ربط المتوالية المستهدفة بمنطقة الهدف؛ 5 .قد تتضمن منطقة الهدف من واحد إلى ثلاث قواعد نووية إضافية مقارنة بالمتوالية المستهدفة؛ ومع ذلك؛ يمكن أيضًا وجود أكثر من ثلاث قواعد نووية إضافية بمنطقة الهدف» علاوة على ذلك؛ يمكن فصل القواعد النووية الإضافية من بعضها البعض على طول منطقة الهدف؛ قد يحث أوليجو نيوكليوتيدات المعدل في اتجاه مضاد للنسخ فعالية إنزيم ‎GAA‏ مرتين على الأقل وفقا لاختبار فعالية الإنزيم مقارنة بأوليجو نيوكليوتيدات ثانية في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ ‎Oligonucleotide 0‏ متممة تمامًا لمنطقة الهدف ضمن متوالية برقم تعريف: 1؛ يمكن أن تحث أوليجو نيوكليوتيدات ‎oligonucleotide‏ المعدلة في اتجاه مضاد للنسخ فعالية إنزيم ‎GAA‏ ثلاثة أضعاف على الأقل أو ‎dal‏ أضعاف على الأقل وفقًا لاختبار فعالية الإنزيم مقارنة بأوليجو نيوكليوتيدات ثانية في اتجاه مضاد للنسخ متممة تمامًا لمنطقة هدف ضمن متوالية برقم تعريف: 1 في جانب ‎AT‏ ¢ يتميز الكشف بمركب أوليجومر ‎oligomer‏ اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة (ا): 1 ‎Nu‏ ب ‎J‏ ‏ماح ‏ ‎Nu 0‏ ً 1 ‎J‏ ‎ee 1‏ ‎O=—P—R‏ ‎SE‏ ‎J‏ ‏2 ‎R‏
أو ملح مقبول صيدلانياً ‎(die‏ حيث: تمثل كل لال قاعدة نووية ‎nucleobases‏ تتخذ ‎Ge‏ شكل متوالية مستهدفة ‎targeting‏ ‎sequence‏ ؛ و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ يتم اختيار كل ‎١7‏ بشكل مستقل من © و44الا-؛ حيث يتم اختيار كل ‎R4‏ بشكل مستقل ‎He‏ ‏61-6 ألكيل ‎«alkyl‏ آرألكيل ‎«—C(=NH)NH2 « aralkyl‏ - ‎«C(O)(CH2)NNRS5C(=NH)NH2‏ ‎«—C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNRSC(=NH)NH2‏ و 6؛ حيث يتم اختيار ‎RS‏ من ‎H‏ ‏و 601-06 ألكيل ‎alkyl‏ و ‎Jian‏ عدد صحيح من 1 إلى 5؛ يتم اختيار ‎T‏ من ‎OH‏ وجزءِ من الصيغة: 6ج م ب حيث : يتم اختيار مه من ‎-OH‏ و ‎-N(R7)2‏ و ‎RT‏ حيث يتم اختيار كل ‎RT‏ بشكل مستقل من ‎١1‏ و 01-6 ألكيل ‎alkyl‏ « 5 وتتم اختيار ‎R6‏ من ‎(OH‏ 1)49(01120)0(10112١-؛‏ وجزء من الصيغة:
nN N—R10 co ‏حيث:‎ ‏؛‎ alkyl ‏ألكيل‎ 61-66 gH ‏من‎ RO ‏يتم اختيار‎
ويتم اختيار ‎R10‏ من 6؛ ‎acyl dud =C(0)-R110H‏ ؛ تربتيل ‎trityl‏ ؛ 4- ميثوكسي تريتيل ‎«methoxytrityl‏ ‎—C(0)(CH2)MNR12C(=NH)NH2 ~C(=NH)NH2‏ و ‎—C(O)(CH2)2NHC(0)(CH2)SNR12C(=NH)NH2‏ حيث:
‎am 5‏ عدد صحيح من 1 إلى ‎S‏ ‏1 من الصيغة -(0)- ألكيل ‎alkyl‏ )لا - حيث لا هي عدد صحيح من 3 إلى 10 و يتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎alkyl‏ لا بشكل مستقل من 62-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و يتم اختيار ‎R12‏ من ‎3H‏ 61-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ 0 .يتم تحديد كل حالة من ‎RT‏ بشكل مستقل من: ‎cua —N(R13)2‏ يتم اختيار كل ‎R13‏ بشكل مستقل من ‎5H‏ 601-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ وجزءِ من الصيغة (ا!): ‎RY‏ 7ج ‎an‏ ما 2% يتم اختيار 815 من ‎H‏ 6 01-06 ألكيل ‎~C(=NH)NH2 « alkyl‏ 12ل (11ل1-) 180 0()6112(901)©- و ‎—C(O)(CH2)2NHC(0)(CH2)SNR1SC(=NH)NH2‏ حيث: يتم اختيار ‎R18‏ من ‎C1-C6 H‏ ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و
هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و يتم اختيار كل ‎R17‏ بشكل مستقل من ‎H‏ و ميثيل ‎methyl‏ ؛و ‎ein‏ من الصيغة (!اا): 0ج مم ‎am‏ 1 ض حيث: يتم اختيار ‎R19‏ بشكل مستقل من 1" و ‎(C1-CO‏ ‎«—C(O)(CH2)rNR22C(=NH)NH2 «~C(=NH)NH2 ةااكلا Ji‏ ‎«—C(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(=NH)NH2‏ ‎«—C(0)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NR22C(=NH)NH2‏ ‎—~C(O)CH(NH2)(CH2)4NH2 0‏ و 6؛ حيث: يتم اختيار ‎R22‏ من اا و 61-06 ألكيل الماا8 ؛ و ‎sar‏ عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و يتم اختيار ‎R20‏ من ‎5H‏ 61-06 ألكيل ‎«alkyl‏ أو يكون ‎R19‏ و ‎Gia R20‏ إلى جنب مع ذرة النيتروجين ‎nitrogen atom‏ التي يتم إرفاقهم بها 5 بحيث تشكل حلقة غير متجانسة ‎heterocyclic‏ أو حلقة أريل غير متجانسة ‎heteroaryl ring‏ تتضمن من 5 إلى 7 ذرات بحلقة وتحتوي اختياربًا على ذرة غير متجانسة ‎heteroatom‏ مختارة من الأكسجين 00 والنيتروجين ‎nitrogen‏ و الكبريت ‎sulfur‏ ؛ و يتم اختيار ‎R2‏ من 1ا» 6؛ أسيل ‎acyl‏ ؛ تربتيل ‎trityl‏ ¢ 4- ميثوكسي تريتيل ‎methoxytrityl‏ ‏بنزويل ‎benzoyl‏ « ستيرويل ‎C1-C6 « stearoyl‏ ألكيل ‎—C(0)- «—C(=NH)NH2 « alkyl‏ ‎«—C(0)(CH2)sNR24C(=NH)NH2 (R23 0‏ -
‎«CG(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NR24C(=NH)NH2‏ - ‎«C(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(=NH)NH2‏ وجزءِ من الصيغة: إٍْ لح ‎oe SA‏ ‎R23 5‏ يكون بالصيغة -( ©)- ألكيل ‎OH - v( alkyl‏ حيث ‎V‏ يمثل عدد صحيح من 3 إلى 10 ويتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎v alkyl‏ بشكل مستقل من الألكيل ‎C2- alkyl‏ ‎«C6‏ ‏و ‏يتم اختيار ‎R24‏ من ‎١1‏ و 61-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ 10 5 هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ يتم اختيار ‎L‏ من ‎5-C(O)(CH2)6C(O)—‏ (0()0112(252)0112(20)0)-؛ و كل ‎R25‏ يتخذ الصيغة 6112(206)0(11)426(2)- وحيث يكون كل ‎R26‏ بالصيغة - ‎«(CH2)6NHC(=NH)NH2‏ ‏حيث © يمثل ببتيد ثاقب للخلية ‎("CPP") cell penetrating peptide‏ جزءٍ رابط تم اختياره من 11-000ل0)0()0112(5- ‎«—C(0)(CH2)2NH-CPP‏ - ‎«—C(O)CH2NH-CPP (C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NH-CPP‏ و:
— 0 1 — ‎i‏ 0 خب حيث يتم إرفاق ‎CPP‏ بجزءٍ الرابط من خلال رابطة أميد عند حد كريوكسي ‎«CPP carboxy‏ و ‎Cua‏ قد يكون © موجودًا فى حدث واحد أو غائب ؛ في نماذج معينة؛ يكون كل 41 هو 1)0113(2١-؛‏ في بعض النماذج؛ يمثل حوالي 1690-50 من مجموعات 1+ ثنائي ميثيل امينو ‎dimethylamino‏ (أي 11)0113(2-)؛ في نماذج معينة؛ يكون حوالى 90666 من مجموعات 1+ عبارة عن ‎Al‏ ميثيل ‎dimethylamino sud‏ « في بعض النماذج غير المحددة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من متواليات بالجداول 2أ- 2ج؛ حيث يتم اختيار ‎X‏ من يوراسيل ‎uracil‏ (لا) أو ثيمين ‎thymine‏ (1)؛ في بعض النماذج غير الحصرية؛ يكون ‎R1US‏ هو0113(2)ل1-_وبتم اختيار المتوالية المستهدفة من متواليات بالجدول 0 2أ- 2ج؛ حيث يتم اختيار ‎X‏ من يوراسيل ‎uracil‏ (لا) أو ثيمين ‎thymine‏ (1)؛ في بعض نماذج الكشف»؛ يمكن اختيار 41 من: ‎+O‏ محري سل ‎HOA \‏ / مك 0-0 ببح 0-0 م بهد ‎NH,‏ ’ \ ٌ سر ‎KO TH‏ في نماذج معينة؛ يتم اختيار ‎T‏ من:
— 1 1 — ‎i‏ ‎HO‏ ‎a Do oN 3‏ كل 7 0 سن ص ‎OH TTT 1‏ وبصت أن ‎OL 0‏ ل ‎YF ¢ oY‏ ¢ ل و ‎sc *‏ 7 هو 0 فى كل مرة؛ فى بعض ‎oz all‏ يتم اختيار ‎R2‏ من ‎H‏ و ‎G‏ و أسيل ‎acyl‏ تريتيل ‎trityl‏ » 4- ميثوكسى تريتيل ‎methoxytrityl‏ ؛ ستيرويل ‎stearoyl‏ « فى نماذج معينة؛ يكون 1 بالصيغة: صرف 3 0 0 ا 0" 0 7 7 هو 0 فى كل حُدُوث و ‎Gs R2‏ فى نماذج معينة؛ يكون 1 بالصيغة: 6 ‎١‏ ‏ب ‏لست ‏0 ‏نج ‏ولا هو 0 فى كل حُدُوث
‎NH, G‏ 0 ‎J‏ ‏ل ب ‎OH na‏ مت ب 1 ب 11983
— 2 1 — ‎oT hr‏ ‎ol‏ ‎Te‏ ‏في نماذج معينة؛ يكون 1 بالصيغة: ‎Yo‏ + لاهو © فى كل حُدُوث؛ كل ‎Rl‏ ‏هو ‎—N(CH3)2‏ و ‎R2‏ هو 1 في جانب آخرء يتميز الكشف بمركب أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎FV)‏ ‏1 ‏مرح ‎N‏ ‏ماح ‏ ‏0 ‎Nu (VID‏ ( ‎J‏ ‏ماه ‏ا سس ‎J Nu‏ ‎N‏ ‏ ‎R2‏ ‏5 أو ملح مقبول صيدلائياً ‎(Aa‏ ‏حيث يكون كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية تتخذ الاشكال التالية معا للمتوالية المستهدفة؛ و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ يتم اختيار ‎HE T‏
— 3 1 — 0 مح ‎ANH, HO 3‏ جه 0 نج 0 - 0 ‎“nN ~~ , | N‏ ‎av Ope N(CH); |‏ بصي اه | ‎NE OR‏ ‎i 5,‏ ‎ou © o‏ ‎oY‏ ؛ نج ‎vo A‏ كل ‎R1‏ هو ‎—N(R4)2‏ حيث كل ‎R4‏ هو بشكل مستقل ‎C1-C6‏ ألكيل؛ و يتم اختيار ‎R2‏ من لاو 6 و أسيل ‎acyl‏ ؛ تريتيل ‎trityl‏ » 4- ميثوكسي تربتيل ‎methoxytrityl‏ ‎٠»‏ ستيرويل ‎Cus « stearoyl‏ © يمثل ببتيد ثاقب للخلية (0007)") وجزءٍ رابط تم اختياره من ‎~C(O)(CH2)2NHC(O)( «~C(O)(CH2)2NH-CPP (~C(O)(CH2)5NH-CPP‏ ‎~C(O)CH2NH-CPP (CH2)5NH-CPP‏ و: ‎CPP‏ 0 يك ‎N‏ ‏حيث يتم إرفاق ‎CPP‏ بجزءٍ الرابط من خلال رابطة أميد عند حد كريوكسي ‎«CPP carboxy‏ و
‎NH, bi NH‏ 0 ‎J.‏ ‏مات ‎OTe‏ ‎Nv 5 ;‏ ‎NN |‏ 0 يواه } حيث آهو ‏ 7# | أو 8"2هو6
في بعض ‎cz dail)‏ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ من الكشف حيث تتضمن؛ على سبيل المثال» بعض نماذج لأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ من الصيغة ‎(I)‏ ‏و (/ا)؛ تم اختيارهم من المتواليات الموضحة في الجداول 2أ-2ج؛ كما هو موصوف هناء وكما متوالية ‎Loser‏ رقم: 13 ‎(GGC CAG AAG GAA 666 GAG AAA AGC)‏ حيث تكون قيمة ‎Z‏ هي 22 متوالية بهوية رقم: 14 ‎(GCC AGA AGG AAG GCG AGA AAA GCX)‏ حيث تكون قيمة ‎Z‏ هي 22 متوالية بهوية رقم: 15 ‎(CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC)‏ حيث تكون 0 قيمة 2 هي 22 متوالية بهوية رقم: ‎(CAG AAG GAA GGC GAG AAA AGC XCC)16‏ حيث تكون قيمة ‎Z‏ هي 22 متوالية بهوية رقم: ‎(AGA AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA)17‏ حيث تكون قيمة 2 هي 22 5 متوالية بهوية رقم: ‎(GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC CAG)18‏ حيث تكون قيمة ‎Z‏ هي 22 متوالية بهوية رقم: ‎(AAG GAA GGC GAG AAA AGC XCC AGC)19‏ حيث تكون قيمة ‎Z‏ هي 22 متوالية بهوية رقم: ‎(AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA GCA)20‏ حيث تكون 0 قيمة “2 هي 22 متوالية بهوية رقم: ‎(CGG CXC XCA AAG CAG CXC XGA GA)21‏ حيث تكون قيمة 2 هي 21
— 1 5 —
متوالية بهوية رقم: ‎(ACG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AG)22‏ حيث تكون قيمة
«21 ‏و هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (CAC GGC XCX CAA AGC AGC XCX GA)23 ‏متوالية بهوية رقم:‎
و هي 21« متوالية بهوية رقم: ‎(XCA 066 CXC XCA AAG CAG CXC XG)24‏ حيث تكون قيمة
21 ‏و هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (CXC ACG GCX CXC AAA GCA GCX CX)25 ‏متوالية بهوية رقم:‎
«21 ‏و هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (ACX CAC GGC XCX CAA AGC AGC XC)26 ‏متوالية بهوية رقم:‎
«21 ‏هي‎ Z 10 ‏حيث تكون قيمة‎ (GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA GC)27 ‏متوالية بهوية رقم:‎
«21 ‏و هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (BGC GGC ACX CAC GGC XCX CAA AG)28 ‏متوالية بهوية رقم:‎
«21 ‏و هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (CGG CAC XCA CGG CXC XCA AAG CA)29 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5
«21 ‏و هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (GCA CXC ACG GCX CXC AAA GCA GC)30 ‏متوالية بهوية رقم:‎
«21 ‏و هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC ACX CAC GGC XCX CAA AGC AG)31 ‏متوالية بهوية رقم:‎
«21 ‏هي‎ Z 20 ‏حيث تكون قيمة‎ (CAC XCA 066 CXC XCA AAG CAG CX)32 ‏متوالية بهوية رقم:‎
و هي 21
— 1 6 — ‏حيث تكون قيمة‎ (GCC AGA AGG AAG GCG AGA AAA GC)33 ‏متوالية بهوية رقم:‎ «21 ‏و هي‎
Z ‏حيث تكون قيمة‎ (CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG C)34 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ¢19 ‏هي‎ ‎Z ‏حيث تكون قيمة‎ (CAG AAG GAA GGC GAG AAA AGC)35 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 ¢19 ‏هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (BGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA AG)36 ‏متوالية بهرية رقم:‎ «21 ‏و هي‎
Z ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA A)37 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ¢19 ‏هي‎ 10
Z ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA)38 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ¢19 ‏هي‎ ‎dad ‏تكون‎ Cus (CGG CAC XCA 066 CXC XCA AAG CA)39 ‏متوالية بهوية رقم:‎ «21 ‏و هي‎ dad ‏تكون‎ Cus (GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA GC)40 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 «21 ‏و هي‎
GGC GGC ACX ( 41 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏هى 21؛‎ Z ‏حيث تكون قيمة‎ CAC GGC XCX CAA AG) ‏حيث تكون‎ (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GGC)42 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 22 ‏قيمة 2 هي‎ 20 ‏حيث تكون قيمة‎ (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GC)43 ‏متوالية بهوية رقم:‎ «21 ‏و هي‎
— 1 7 —
Z ‏حيث تكون قيمة‎ (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA C)44 ‏متوالية بهوية رقم:‎ «20 ‏هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC CAG AAG GAA GCG AGA AAA 60(45 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏و هي‎
Z dad ‏تكون‎ Cus (BGC CAG AAG GAA CGA GAA AAG C)46 ‏متالية بهوية رقم:‎ 5 «20 ‏هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (AGG AAG CGA GAA AAG CXC CAG CAAT ‏متوالية بهوية رقم:‎ «21 ‏و هي‎
Z ‏تكون قيمة‎ Cus (AGG AAC GAG AAA AGC XCC AGC A)48 ‏متوالية بهوية رقم:‎ «20 ‏هي‎ 10
Z ‏تكون قيمة‎ Cus (AGG AAC GAG AAA AGC XCC AGC A)48 ‏متوالية بهوية رقم:‎ «20 ‏هي‎ ‏حيث تكون‎ )066 GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA) ‏متوالية بهوية رقم:‎ $22 ‏قيمة 2 هي‎
Z ‏حيث تكون قيمة‎ (CGC XCX CAA AGC AGC XCX GAG (50 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 ‏هي 20؛‎ ‏هى‎ Z ‏حيث تكون قيمة‎ (CCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA)51 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ¢19 ‏حيث تكون‎ (BGC GGC ACX CAC GGG CXC XCA AAG)52 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 22 ‏قيمة 2 هي‎ 20
Z ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC GGC ACX CAC GCX CXC AAA G)53 ‏متوالية بهوية رقم:‎ «20 ‏هي‎
— 1 8 — ‏هي‎ Z ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC GGC ACX CAC CXC XCA AAG)54 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ¢19 ‏حيث تكون‎ (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGC)55 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 22 AZ ‏قيمة‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GC)56 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 21 ‏هي‎ 2
Lad ‏حيث تكون‎ (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG C)57 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏هي‎ 2
Z ‏حيث تكون قيمة‎ (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACC)S58 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (19 ‏هي‎ 0 ‏(1)؛‎ thymine ‏(لا) أو الثايمين‎ uracil ‏من اليوراسيل‎ X ‏حيث يتم اختيار‎ ‏ال‎ ‏تكون‎ Cua (GGC CAG AAG GAA GGG CGA GAA AAG C)59 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة > هى‎ ‏تكون‎ Cua ) CCA GAA GGA AGG GCG AGA AAA GCX 0660 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 23 ‏قيمة > هى‎ ‏تكون‎ Cua ) AAG GAA GGG CGA GAA AAG CXC CAG 0(61 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة > هى‎
Cus ) GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGG C)62 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏تكون قيمة 2 هي‎ 20
Cus ) XGG GGA GAG 660 CAG AAG GAA GGG C)63 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏هي‎ Z dad ‏تكون‎
— 1 9 — ‏تكون‎ Cua (AGA AGG AAG 660 GAG AAA AGC XCC A)64 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 23؛‎ ‏تكون‎ Cua ) GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX C)65 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 23؛‎ ‏حيث تكون‎ (CXC XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC (66 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 ‏قيمة 2 هي 23؛‎ ‏حيث تكون‎ ) XCX CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA (67 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 23؛‎ ‏تكون‎ Cua (CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA C)68 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة 2 هي‎ 0 ‏حيث تكون‎ ) XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC C)69 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 23؛‎ ‏حيث تكون‎ (CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC G) 70 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 23؛‎ ‏تكون‎ Cus (AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG C) 71 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 ‏قيمة 2 هي 23؛‎ ‏تكون‎ Cua (AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC G) 72 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 23؛‎ ‏تكون‎ Cus (AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC GCG G) 73 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة 2 هي‎ 20 ‏حيث تكون‎ (GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG 066 C) 74 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏23؛ و‎ AZ ‏قيمة‎
‏تكون‎ Cua (CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC GGC X) 75 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 AZ ‏قيمة‎ ‎¢(T) thymine ‏أو الثايمين‎ (U) uracil ‏من اليوراسيل‎ X ‏حيث يتم اختيار‎ ‏اال‎ ‏تكون‎ Cua (GCC AGA AGG AAG 666 GAG AAA AGC X) 76 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 23 ‏هي‎ Z ‏قيمة‎ ‏تكون‎ Cua (CAG AAG GAA GGG CGA GAA AAG CXC C) 77 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 23؛‎ ‏حيث تكون‎ (GAA GGA AGG GCG AGA AAA GCX CCA G) 78 ‏رقم:‎ diggs ‏متوالية‎ ‎23 ‏قيمة 2 هي‎ 0 ‏تكون‎ Cua (AGG AAG GGC GAG AAA AGC XCC AGC A) 79 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏هي‎ Z ‏قيمة‎ ‏تكون‎ Cua (ACX CAC GGG GCX CXC AAA GCA GCX C) 80 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 23؛‎
Z dad ‏تكون‎ Cua (GGCXCXCAAAGCAGCXCXGAGACAX) 81 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 ‏هي 23؛‎ ‏تكون قيمة 2 هي‎ Cua (GGC XCX CAA AGC AGC XCX GA) 82 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ¢18 ‏هي‎ Z ‏حيث تكون قيمة‎ (GAG AGG GCC AGA AGG AAG GG) 83 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ¢18 20 ‏هي‎ Z ‏حيث تكون قيمة‎ (XXX GCC AXG XXA CCC AGG CX) 84 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ¢18
متوالية بهوية رقم: 85 ‎Cua (GCG CAC CCX CXG CCC XGG CC)‏ تكون قيمة 2 هي 518 متوالية بهوية رقم: 86 ‎(GGC CCX GGX CXG CXG GCX CCC XGC X)‏ حيث تكون قيمة > هي 23؛ و حيث يتم اختيار ‎X‏ من اليوراسيل ‎uracil‏ (لا) أو الثايمين ‎«(T) thymine‏
في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام لتعريف المتوالية: 13( 29-27 36-34( 59؛ و82؛ في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام لتعريف المتوالية: 13 و29-27 و36-34 و59؛ في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13
0 و29-27 و36-34؛ في نماذج ‎cima‏ يكون كل حالة ل ل في أي متوالية من المتواليات بأرقام لتعريف المتوالية: 13« 29-27 و 36-34 و 59 و 82 هو ‎T‏ ‏في بعض النماذج؛ ‎Lay‏ في ذلك؛ على سبيل المثال» بعض نماذج لأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة (ا) و ‎(IV)‏ تكون المتوالية المستهدفة متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1 ( برقم تعريف للمتوالية :1) من حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا البشري ‎human‏
‎ «(GAA) alpha glucosidase 5‏ بعض النماذج؛ تكون المتوالية المستهدفة متممة لمنطقة هدف في اكسون 2 أو إنترون 2 من جين ‎GAA‏ البشري؛ في نماذج مختلفة بما في ذلك؛ على سبيل المثال» نماذج لأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة (ا) و ‎(IV)‏ تكون المتوالية المستهدفة متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1 ( برقم تعريف للمتوالية :1) من حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا البشري ‎(GAA) human alpha glucosidase‏ حيث
‏0 تشتمل منطقة الهدف على قاعدة نووية إضافية واحدة على الأقل مقارنة بالمتوالية المستهدفة؛ ‎Cua‏ ‏لا تتضمن القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل قاعدة نووية متممة في المتوالية المستهدفة؛ وحيث تكون القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل داخل منطقة الهدف؛ في نماذج معينة؛ تشتمل المتوالية المستهدفة على متوالية تم اختيارها من أرقام هوية المتوالية: 86-13؛ كما هو موضح هنا في الجداول 2 أ -2 ج؛ في نماذج معينة؛ تشتمل المتوالية المستهدفة على متوالية تم
اختيارها من الجدولين 2 أ و 2 ب؛ في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13( 29-27« 36-34؛ 59؛ و 82؛ بالإضافة إلى ذلك؛ وفيما يتعلق بالمتواليات المفصلة في الجداول 2أ- 2ج (أو الجداول 2ب و 2 ج) هناء في نماذج معينة؛ يتم تحديد متوالية متممة بنسبة 100 % وبتم إزالة قاعدة نووية واحدة أو أكثر من القواعد
النووية (أو يتم توليفها بالتناوب مع واحدة أو أكثر من القواعد النووية المفقودة) بحيث تتضمن المتوالية المستهدفة واحدة أو أكثر من القواعد النووية المفقودة أكثر من متممها الطبيعي في منطقة ‎cag‏ وباستثناء الجزء الذي تتم فيه إزالة واحدة أو أكثر من القواعد النووية؛ من المتوقع أن تكون الأجزاء المتبقية متممة بنسبة 100 96؛ ومع ذلك؛ فإنه في نطاق هذا الاختراع يمكن أن يكون هناك انخفاض في مستويات التتام.
0 في بعض النماذج؛ يكون ‎X‏ واحد على الأقل من أرقام هوية المتوالية: 13 - 86 هوآ ؛ في بعض النماذج؛ يكون ‎X‏ واحد على الأقل من أرقام هوية المتوالية: 13 - 86 ‎Usp‏ ؛ في بعض النماذج؛ يكون كل كلمن أرقام هوية المتوالية: 13 - 86 هو آ؛ في بعض النماذج؛ يكون كل
كلمن من أرقام هوية المتوالية: 13 - 86 هولا ؛ في نماذج مختلفة؛ يكون ‎X‏ واحد على الأقل من المتوالية المستهدفة ‎T ga‏ ؛ في نماذج مختلفة؛ يكون كل ل في المتوالية المستهدفة هو آ في
5 تماذج مختلفة؛ يكون ‎X‏ واحد على الأقل من المتوالية المستهدفة هولا ؛ في نماذج مختلفة؛ يكون كل ‎X‏ من المتوالية المستهدفة هو لا. ستصبح تلك الجوانب وغيرها من الجوانب الأخرى بالكشف الحالي واضحة عند الرجوع إلى الوصف التفصيلي التالي والرسومات المرفقة؛ يتم تضمين جميع المراجع التي تم الكشف عنها هنا بالإشارة إليها كمرجع في مجملها كما لو تم تضمين كل منها على حدة.
0 شرح مختصر للرسومات الشكلان 1 و 2 عبارة عن رسوم بيانية بالأعمدة تصور فعالية إنزيم ‎GAA‏ (فحص الإنزيم) الموجود لمركبات ‎PMO‏ المختلفة أثناء الفرزء يمثل المحور 7 الزيادة بمقدار الضعف في فعالية إنزيم ‎GAA‏ بالنسبة للعينة المقارنة غير المعالجة؛ يشير "!ا" إلى عدد النسخ التي تم تقييمها في كل دراسة؛ يشير الخط المنقط الأفقي إلى مستوى فعالية ‎GAA‏ في الخلايا غير المعالجة؛ تم تقدير
— 3 2 — جرعة المركبات الفردية عند 5 ميكرومولار و 062 ‎gag Sie‏ يشير الخط المنقط الأفقي إلى مستوى فعالية ‎GAA‏ فى الخلايا غير المعالجة. الشكلان 3 و 4 عبارة عن رسوم بيانية بالأعمدة يوضحان الاستجابة للجرعة باختبار الإنزيم الموجودة للعديد من مركباتن ‎PM‏ « يمثل المحور ‎Y‏ الزيادة بمقدار الضعف في فعالية إنزيم مل 5بالنسبة إلى العينة المقارنة غير المعالجة؛ تم تقدير جرعة المركبات الفردية عند 5
‎gag San‏ 1 ميكرومولار» 062 ميكرومولار و 0:4 ميكرومولار؛ يشير الخط المنقط الأفقي إلى مستوى فعالية فى الخلايا غير المعالجة. تمثل الأشكال 8-5 رسوم بيانية بالأعمدة تصور الاستجابة للجرعة باختبار الإنزيم فحص الموجودة للعديد من مركباتن ‎PM‏ « يمثل المحور ‎Y‏ الزيادة بمقدار الضعف في فعالية إنزيم
‎GAA 0‏ بالنسبة إلى العينة المقارنة غير المعالجة؛ تم تقدير جرعة المركبات الفردية عند 5 ‎gag San‏ 1 ميكرومولار؛ 062 ميكرومولار و 0:04 ميكرومولار» يشير الخط المنقط الأفقي إلى مستوى فعالية ‎GAA‏ فى الخلايا غير المعالجة. تمثل الأشكال 14-9 رسوم بيانية بالأعمدة تصور الاستجابة للجرعة باختبار الإنزيم الموجودة للعديد من مركبات 01/0 ؛ يمثل المحور 7 الزيادة بمقدار الضعف في فعالية إنزيم ‎GAA‏ بالنسبة
‏5 إلى العينة المقارنة غير المعالجة؛ تم تقدير جرعة المركبات الفردية عند 5 ميكرومولار» 166 ميكرومولار»؛ 0.5 ميكرومولار و 0:16 ميكرومولار؛ يشير الخط المنقط الأفقي إلى مستوى فعالية ‎GAA‏ الخلايا غير المعالجة. تمثل الأشكال 15-115 رسوم بيانية بالأعمدة تصور الاستجابة للجرعة باختبار الإنزيم الموجودة للعديد من مركبات ‎(PPMO‏ يمثل المحور ل الزيادة بمقدار الضعف فى فعالية إنزيم ‎GAA‏
‏0 بالنسبة إلى العينة المقارنة غير المعالجة؛ تم تقدير جرعة المركبات الفردية عند 5 ميكرومولار» 6 ميكرومولار» و 0:5 ميكرومولار» يشير الخط المنقط الأفقي إلى مستوى فعالية ‎GAA‏ في الخلايا غير المعالجة. يمثل الشكل 16 رسم بياني بالأعمدة يصور الاستجابة للجرعة باختبار الإنزيم الموجودة للعديد من مركبات ‎(PMO‏ يمثل المحور 7 الزيادة بمقدار الضعف في فعالية إنزيم ‎GAA‏ بالنسبة إلى العينة
— 2 4 —
المقارنة غير المعالجة؛ تم تقدير جرعة المركبات الفردية عند 5 ميكرومولار؛ يشير الخط المنقط
الأفقى إلى مستوى فعالية ‎GAA‏ فى ‎WAY‏ غير المعالجة.
تمثل الأشكال 17 و 18 رسوم بيانية بالأعمدة يصوران فعالية إنزيم ‎GAA‏ (اختبار الإنزيم)
الموجودان لمركبات ‎PPMO‏ المختلفة؛ يمثل المحور 7 الزيادة بمقدار الضعف في فعالية إنزيم
628 بالنسبة إلى العينة المقارنة غير المعالجة؛ تم تقدير جرعات المركبات الفردية عند 5
ميكرومولار؛ 146 ميكرومولار؛ و 0.5 ميكرومولار؛ يشير الخط المنقط الأفقي إلى مستوى فعالية
‎GAA‏ في الخلايا غير المعالجة؛ يشير " ل١-‏ 9" إلى عدد النسخ التي تم تقييمها في كل دراسة؛
‏تظهر جداول ملخص البيانات 5050 مقدره بالميكرو مولار.
‏يمثل الشكل 19 جدول لملخص بيانات يصور 050 مقدر (بالميكرو مولار) بالنسبة لمركبات ‎PPMO 0‏ المختلفة.
‏تمثل الأشكال 22-20 رسوم بيانية بالأعمدة حيث تصور فعالية إنزيم ‎GAA‏ (اختبار الإنزيم)
‏للعديد من مركبات ‎(PPMO‏ يمثل المحور ل الزيادة بمقدار الضعف في فعالية إنزيم ‎GAA‏
‏بالنسبة إلى العينة المقارنة غير المعالجة؛ تم تقدير جرعة المركبات الفردية عند 5 ميكرومولار»
‏6 ميكرومولار» 5 065 ميكرومولار» يشير الخط المنقط الأفقي إلى مستوى فعالية ‎GAA‏ في 5 الخلايا غير المعالجة؛ تظهر جداول ملخص البيانات 5050 مقدره بالميكرو مولار.
‏يمثل الشكل 23 جدول لملخص البيانات يصور ‎ECS0‏ مقدره (بالميكرو مولار) لمركبات
‏001/0 المختلفة.
‏تمثل الأشكال 26-24 رسوم بيانية بالأعمدة حيث تصور فعالية إنزيم ‎GAA‏ (اختبار الإنزيم)
‏للعديد من مركبات ‎(PPMO‏ يمثل المحور ل الزيادة بمقدار الضعف في فعالية إنزيم ‎GAA‏ ‏0 بالنسبة إلى العينة المقارنة غير المعالجة؛ تم تقدير جرعة المركبات الفردية عند 5 ميكرومولار»
‏6 ميكرومولار» 5 065 ميكرومولار» يشير الخط المنقط الأفقي إلى مستوى فعالية ‎GAA‏ في
‏الخلايا غير المعالجة؛ تظهر جداول ملخص البيانات 5050 مقدره بالميكرو مولار.
‏الوصف التفصيلى:
— 5 2 — تعريفات ما لم يتم تعريفها بطريقة ‎(gal‏ فإن جميع المصطلحات التقنية والعلمية المستخدمة هنا لها نفس المعنى الذي يفهمه عادة الأشخاص ذوو المهارة العادية في المجال الذي ينتمى إليه الاكتشاف. وعلى الرغم من أنه يمكن استخدام طرق ومواد مشابهة أو مكافئة لتلك الموضحة طيه فى ممارسة أو اختبار الموضوع محل النقاش في الاكتشاف الحالي؛ يفضل استخدام الطرق والمواد الموضحة.
لأغراض الاكتشاف الحالى؛ يتم تعريف المصطلحات التالية أدناه. تستخدم أدوات التعريف "8" و”80" للإشارة إلى واحد أو أكثر من واحد (أي واحد على ‎(JY)‏ من الأغراض النحوية لأداة التعريف. على سبيل ‎(Jl)‏ يقصد بكلمة "عنصر" عنصر واحد أو أكثر من عنصر واحد .
0 يقصد بكلمة "حوالي" الكمية أو المستوى أو القيمة أو العدد أو التردد أو النسبة المئوية أو البعد أو الحجم أو المقدار أو الوزن أو الطول الذي يتغير بمقدار 30 إلى 25 و 20 و 15و 10و 9و 8 9 67 أو 5 أو 4 أو 3 أو 2 أو 1 96 من الكمية المرجعية أو المستوى المرجعي أو القيمة المرجعية أو العدد المرجعي أو التردد المرجعي أو النسبة المئوية المرجعية أو البعد المرجعي أو الحجم المرجعي أو المقدار المرجعي أو الوزن المرجعي أو الطول المرجعي.
5 يقصد ب ‎Ald‏ الترميز" أي متوالية حمض نووي التي تساهم في ترميز منتج عديد الببتيد للجين. وفي المقابل» تشير 'متوالية عدم الترميز" إلى أي متوالية حمض نووي التي لا تساهم بشكل مباشر في ترميز منتج عديد الببتيد ‎polypeptide‏ للجين ‎.gene‏ ‏طوال هذا الاكتشاف؛ ما لم يتطلب المحتوى خلاف ذلك؛ سوف يتم فهم الكلمات 'يشتمل" و'تشتمل" و" مشتمل" تتضمن تضمين خطوة أو ‎Ade pale‏ أو مجمو ‎de‏ من | لخطو ات أو العناصر ولكن
دون استثناء لأي خطوة أخرى أو عنصر ‎AT‏ أو مجموعة أخرى من الخطوات أو العناصر . يقصد ب 'يتكون من" يتضمن؛ دون التقييد بأي مما يلي عبارة 'يتكون من": وبالتالي ‎Ju‏ عبارة " يتكون من" على العناصر المدرجة سواء كانت مطلوبة أو إلزامية؛ وأنه لا توجد عناصر أخرى موجودة. يقصد 2 " متألف بشكل أساسى من " ضضم أي عناصر مدرجة بعد العبارة وتقتصر على العناصر الأخرى التي لا تتدخل أو تساهم في الفعالية أو الإجراء المحدد في الاكتشاف للعناصر
المدرجة. ‎lly‏ تدل عبارة 'متألف بشكل أساسي من" على العناصر المدرجة مطلوية أو إلزامية؛ ولكن تكون عناصر أخرى اختيارية وقد تكون عناصر أخرى موجودة أو غير موجودة ‎Tol‏ على ما إذا كانت ‎Glad jig‏ على فعالية أو عمل العناصر المدرجة. كما هو مستخدم طيه؛ تضم المصطلحات "التلامس مع الخلية" أو "إدخال" أو 'تسليم” تسليم الألوميجرات الخاصة بالاكتشاف في خلية من خلال روتين الطرق في المجال؛ على سبيل المثال؛
نقل العدوى صناعياً على سبيل المثال؛ الجسيم الشحمي ‎liposome‏ ؛ فوسفات-كالسيوم ‎calcium-phosphate‏ « بولي إيثيلين أمين ‎«polyethyleneimine‏ التخريم ‎Hest‏ ‎Ae electroporation‏ سبيل المثال» نقل عدوى بالنوية ‎nucleofection‏ ؛ الحقن المجهري ‎.microinjection‏
كما هو مستخدم هنا؛ يقصد بالمصطلح "ألكيل ‎mn” alkyl‏ مجموعات هيدروكربون غير عطرية خطية (أي؛ غير متفرعة أو لا حلقية) أو متفرعة أو حلقية أو متعددة الحلقات؛ والتي يتم استبدالها اختيارياً بواحدة أو أكثر من المجموعات الوظيفية. ما لم تحديد خلاف ذلك؛ تحتوي مجموعات ‎"UIP‏ على من واحد إلى ثماني ذرات كريون؛ ويفضل من واحدة إلى ست ذرات كريون. ويقصد ‎Jil‏ 61-06 أنه يتضمن مجموعات ألكيل 1© و 62 و 63 و 64 و 65 و 06. ‎ing‏
5 الألكيل المنخفض إلى مجموعات الألكيل المحتوية على من 1 إلى 6 ذرات كربون. وتضم أمثلة الألكيل» على سبيل المثال لا الحصرء ‎methyl, ethyl, n—propyl, isopropyl,‏ ‎cyclopropyl, butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, cyclobutyl, pentyl,‏ ‎isopentyl tert-pentyl, cyclopentyl, hexyl, isohexyl, cyclohexyl‏ ؛ إلخ. ويمكن استبدال الألكيل أو عدم استبداله. وتضم مجموعات الألكيل المستبدلة التوضيحية؛ على سبيل
0 المثال لا الحصرنء ‎fluoromethyl, difluoromethyl, trifluoromethyl, 2-fluoroethyl,‏ ‎3—-fluoropropyl, hydroxymethyl, 2—hydroxyethyl, 3— hydroxypropyl, benzyl,‏ ‎substituted benzyl, phenethyl‏ « فانيثيل مستبدل ‎substituted phenethyl‏ « إلخ. كما هو مستخدم هناء يقصد بمصطلح "ألوكسي ‎AKOXY‏ ' مجموعة فرعية من الألكيل والتي فيها ترتبط مجموعة الألكيل كما هو محدد أعلاه ذات عدد الكريون الموصى باستخدامه من خلال فنطرة
5 أكسيجينية ‎Oxygen bridge‏ . على سبيل المثال؛ يشير "ألوكسي" إلى مجموعات -0-ألكيل -
‎O-alkyl‏ ؛ حيث تحتوي مجموعة الألكيل على من 1 إلى 8 ذرات كربون في تكوين خطي أو متفرع أو حلقي. تضم أمثلة 'ألوكسي"؛ على سبيل المثال لا الحصرء ميثوكسي وإيثوكسي وان- برويوكسي ‎Sogn ls‏ وتي-بوتوكسي ‎uly‏ بينتوكسي ‎methoxy, ethoxy, N—propoxy,‏ ‎i-propoxy, t-butoxy, n—butoxy, s—pentoxy‏ وما شابه. كما هو مستخدم هناء يشير المصطلح ‎aryl dof‏ " المستخدم وحده أو كجزءِ من شطر أكبر ‎Jie‏
"رالكيل ‎aralkyl‏ " أو "آرالكوكسي ‎aralkoxy‏ " أو "أريلوكسي- الكيل ‎aryloxy-alkyl‏ "» إلى مجموعات حلقة عطرية تحتوي على ستة إلى أربعة عشر 53 حلقية؛ ‎Jie‏ : فينيل و1-تفثيل و2- تفيل و 1 -أنثراسيل و2- أنثراسيل ‎phenyl, 1 —naphthyl, 2-naphthyl, 1 —anthracyl‏ ‎2-anthracyl‏ 800. وقد تحتوي حلقة ‎"dal"‏ على واحد أو أكثر من البدائل. يمكن استخدام
0 المصطلح "ريل" بالتبادل مع مصطلح حلقة " أريل". وبضم أيضاً "آرايا" أنظمة حلقية عطرية متعددة الدورات منصهرة بحيث يتم صهر الحقلة العطرية واحدة أو أكثر من الحلقات. تضم الأمثلة غير المقيدة لمجموعات حلقيى أريل مفيدة فينيل وهيدروكسيفينيل» وهالوفينيل» وألكوكسي ‎ih‏ ‏وديلكوكسي فينيل؛ وثلاثي أوكسي فينيل» وألكينيدوكسي ‎«od‏ ونافثيل» وفينانثريل» وأنثريل» وفينانترى ‎phenyl, hydroxyphenyl, halophenyl, alkoxyphenyl, dialkoxyphenyl,‏
‎trialkoxyphenyl, alkylenedioxyphenyl, naphthyl, phenanthryl, anthryl, 15‏ ‎phenanthro‏ وما شابه؛ بالإضافة إلى 1 - نفتيل» و2 - نفثيل» و1 - أنثراكيل و2- أنثراكيل 1 ‎naphthyl, 2-naphthyl, 1-anthracyl and 2-anthracyl‏ -. كما تم تضمينه ضمن ‎Gla‏ مصطلح "ريل ‎aryl‏ © كما هو مستخدم هناء وهو ‎Ble‏ عن مجموعة يتم فيها صهر حلقة عطرية مع واحدة أو ‎SST‏ من الحلقات غير العطرية؛ كما هو الحال في إناندل؛ أو فيناتثريديل» أو
‏0 رباعي هيدرو ‎(JB‏ حيث يكون جذر أو نقطة التعلق على الحلقة العطرية. يقصد بمصطلح 'أسيل" مجموعة ‎C(O)R‏ (والتي فيها تكون ‎R‏ تحدد ل أو ألكيل أو أريل كما هو محدد أعلاه). تضم أمثلة أسيل فورميل ‎acyl formyl‏ وأسيتيل ‎acetyl‏ وبينزويل ‎benzoyl‏ ‏وفينيلاسيتيل ‎phenylacetyl‏ ومجموعات مشابهة. يقصد بمصطلح 'مماثل ‎LS" homolog‏ هو مستخدم هنا المركبات المختلفة بشكل منتظم من
‏5 خلال إضافة متتابعة لنفس المجموعة الكيميائية. على سبيل المثال؛ قد يختلف ‎files‏ المركب من
خلال إضافة واحدة أو أكثر من مجموعات -0112- أو بواقي الحمض الاميني ‎amino acid‏ أو النيوكليوتيدات ‎nucleotides‏ أو تظائر النيوكليوتيد ‎.nucleotide analogs‏ يتم استخدام المصطلحات "الببتيد المخترق للخلايا" ‎(CPP) cell penetrating peptide‏ أو "شطر الببتيد ‎peptide moiety‏ الذي يعزز الامتصاص الخلوي" بالتبادل وتشير إلى الببتيدات المخترقة للخلايا الكاتيونية ‎cationic cell‏ ؛ وتسمى ‎Lead‏ "الببتيدات الناقلة ‎transport‏ ‎peptides‏ أو "الببتيدات الحاملة ‎carrier peptides‏ " أو "مجالات تقل الببتيد". تمتلك الببتيدات؛ كما هو موضح هناء القدرة على حث اختراق الخلايا ضمن حوالي أو على الأقل حوالي 0 أو 9640 أو 9650 أو 9660 أو 9670 أو 9680 أو 9690 أو 16100 للخلايا الخاصة بجمهرة مزرعة الخلايا المتوفرة وتسمح بتغيبر موضع كبير الجزيئات داخل الأنسجة المتعددة في 0 الأحياء عقب إعطاء الدواء النظامي. في بعض النماذج؛ تتخذ ‎CPPs‏ ‏الصيغة ‎—[(C(O)CHR'NH)MIR"‏ حيث ‎'R‏ عبارة عن سلسلة جانبية لحمض أميني حادث طبيعياً أو مماثله ذو ذرة أو اثنين من الكربون؛ ويمكن اختيار 4" من الهيدروجين أو أسيل ‎Ms‏ ‏عبارة عن عدد صحيح يصل إلى 50. وقد يكون أيضاً ‎CPPs J‏ الصيغة ‎—[(C(O)CHR'NH)M]Ra‏ حيث ‎'R‏ عبارة عن سلسلة جانبية لحمض أميني حادث 5 طبيعياً أو مماثله ذو ذرة أو اثنين من الكربون؛ ويمكن اختيار ‎Ra‏ من الهيدروجين أو الأسيل أو البينزول أو السترويل. يمكن ربط 00055 لأي هيكل ب 3” أو 5" نهاية لأوليجومر المضاد للنسخ عبر ‎(Jie "Lady‏ على سبيل المثال» -0()0112(5111)©-. أو ‎~C(O)(CH2)2NH~-‏ ‏أو ‎—~C(O)(CH2)2NH-C(O)(CH2)5NH-‏ أو -11ل0(01121)©-. إن ‎CPPs‏ الإضافية المعروفة جيداً في المجال وبتم كشفهاء على سبيل المثال» في طلب براءة الاختراع الامريكية رقم 0 0016215/2010؛ والذي تم استخدامه هنا كمرجع في مجمله. في نماذج ‎M (gal‏ عبارة عن عدد صحيح مختار من 1 إلى 50 حيث؛ عندما تكون ‎m‏ تساوي 1؛ يكون ‎gall‏ عبارة عن حمض أميني واحد أو مشتق منه. كما هو مستخدم ‎(la‏ يشير "الحمض الأميني ‎amino acid‏ " إلى مركب يتألف من ذرة كربون التي يرتبط بها مجموعة أمينية أولية ومجموعة أحماض الكريوكسيليك ‎carboxylic acid‏ وسلسلة 5 جانبية وذرة هيدروجين ‎hydrogen atom‏ . على سبيل ‎(JUAN‏ يضم المصطلح "الحمض الأميني
‎"amino acid‏ على سبيل المثال لا الحصرء جليسين ‎Glycine‏ « وألانين ‎Alanine‏ ؛ وفالين
‎« Asparagine ‏؛ واسباراجين‎ Isoleucine ‏وايسولوسين‎ « Leucine ‏وليسين‎ ¢ Valine
‏وغلوتامين ‎Glutamine‏ ؛ وليسين ‎Lysine‏ وأرجينين ‎Arginine‏ . بالإضافة إلى ذلك؛ كما هو
‏مستخدم ‎(la‏ يضم ‎Load‏ 'الحمض الأميني ‎"amino acid‏ أيضًا مشتقات الأحماض الأمينية ‎Jie‏ ‏5 الإسترات والأميدات والأملاح؛ بالإضافة إلى المشتقات الأخرى؛ ‎Ly‏ في ذلك المشتقات التي تحتوي
‏على الأدوية على التمثيل الغذائي إلى شكل نشط. وبالتالي؛ يفهم من المصطلح "الحمض الأميني"
‏أنه يضم الأحماض الأمينية ‎amino acids‏ الحادثة طبيعياً والحادثة غير طبيعياً.
‏كما هو مستخدم هناء يشير "زوج من الإلكترونات ‎electron pair‏ ' إلى زوج ‎BS‏ من
‏الإلكترونات غير مرتبط أو مشترك مع ذرات أخرى.
‏0 كما هو مستخدم هناء يشير 'تماثل" إلى النسبة المئوية لعدد الأحماض الأمينية المماثلة أو التي تشكل بدائل متحفظة. ويمكن تحديد التماثل باستخدام برامج مقارنة المتواليات مثل ‎GAP‏ ‏(ديفيروكس ‎«(ys aly‏ 1984؛ بحوث الأحماض النووية 12( 387- 5). وبهذه الطريقة يمكن مقارنة المتواليات ذات طول مماثل أو مختلف بشكل كبير مع تلك المذكورة في هذه الوثيقة بإدراج الفجوات في المحاذاة؛ ويتم تحديد هذه الفجوات؛ على سبيل المثال؛
‏5 بواسطة خوارزمية المقارنة التي تستخدمها ‎GAP‏ ‏يقصد ب 'معزول" المادة التي تكون خالية بشكل كبير أو بشكل أساسي من المكونات التي تصاحبها بشكل عادي في حالتها الفطرية. على سبيل المثال؛ قد يشير "عديد النيوكليوتيد المعزول" أو "أوليجو نيوكليوتيد معزول" أو "أوليجومر معزول" كما هو مستخدم هناء إلى عديد النيوكليوتيد الذي تم تقيته أو إزالته من المتواليات التي تجنبه في حالة حدوثه طبيعياً؛ء على سبيل ‎(Jaa‏ شدفة
‎DNA 20‏ التي يتم إزالتها من المتواليات المتاخمة للشدفة في الجينوم. يشير المصطلح ‎"Jie"‏ فيما يتعلق بالخلايا إلى تنقية الخلايا على سبيل المثال» الخلايا الليفية الأولية ‎fibroblasts‏ ؛ الخلايا الليمفاوية الأولية ‎lymphoblasts‏ من حالة المصدر على سبيل المثال» حالة تعاني من داء تكرار عديد النيوكليوتيد ‎polynucleotide‏ في محتوى ‎MRNA‏ أو البروتين» يشير "عزل" إلى استرجاع ‎MRNA‏ أو البروتين من مصدرء؛ على سبيل ‎JE‏ الخلايا.
تتضمن مصطلحات "تعديل" 'زيادة" أو 'إنقاص” واحد أو أكثر من المتغيرات القابلة للقياس الكمي؛ بشكل اختياري بواسطة كمية محددة و / أو ذات دلالة إحصائية. تشير الكلمات "يزيد" أو 'زيادة"؛ أو 'يعزز" أو "تعزيز" أو ‎and‏ أو 'تنبيه” بشكل عام إلى قدرة واحد أو أكثر من مركبات أو التركيبات المضادة للنسخ لإنتاج أو إحداث استجابة فسيولوجية أكبر (أي آثار المراحل النهائية) في خلية أو حالة متعلقة بالاستجابة الناتجة عن مركب غير مضاد للنسخ أو مركب التحكم. وستظهر الاستجابات الفسيولوجية أو الخلوية ذات الصلة (في الأحياء أو في المختبر) للأشخاص الضالعين في المجال؛ وقد تضم زيادات في تضمين إكسون 2 في ترميز ‎MRNA (eal GAA=‏ القبلي؛ أو زيادات في التعبير الوراثي لإنزيم ‎GAA‏ الوظيفي في خلية أو نسيج أو حالة محتاج إليها. ‎sale‏ ‏ما تكون الكمية "المتزايدة" أو "المعززة' كمية 'ذات دلالة إحصائية"؛ وقد تشمل زيادة قدرها 1.1؛ 0 321.2 654« 7» 8 9 ¢10 15 20 أو 30 أو 40 أو 50 مرة أو أكثر (على سبيل المتال» 500 1000 مرة)؛ بما في ذلك كل الأعداد الصحيحة والنقاط العشرية ‎Lad‏ بين 1 وما فوق 1 ‎Jo)‏ سبيل المثال؛ ¢1.5 1.6 1.7. 1.8)؛ الكمية التي ينتجها المركب المضاد للنسخ (غياب العامل) أو مركب تحكم. قد يتعلق المصطلح 'يقلل" أو 'يثبط" بشكل عام بقدرة واحد أو أكثر من المركبات أو التركيبات المضادة للنسخ ل "خفض" الاستجابة الفسيولوجية أو الخلوية ذات 5 الصلة؛ مثل عرض المرض أو الحالة الموضحة طيه؛ كما يتم قياسها وفقاً التقنيات الروتينية في المجال التشخيصي. وستظهر الاستجابات الفسيولوجية أو الخلوية ذات الصلة (في الأحياء أو في المختبر) للأشخاص الضالعين في المجال؛ وقد تضم انخفاضات في ‎abel‏ أو مرضيات مرض تخزين الجليكوجين مثل داء بومبيه؛ على سبيل المثال» انخفاض في تراكم الجليكوجين في واحد أو أكثر من الأنسجة. قد يكون "الانخفاض" في الاستجابة ‎"Lilian Lage’‏ مقارنة بالاستجابة الناتجة 0 من خلال مركب لا مضاد للنسخ أو تركيبة التحكم؛ وقد يضم 961 أو 962 أو 963 أو 964 أو 5 أو 966 أو 967 أو 968 أو 969 أو 9610 أو 9611 أو 9612 أو 9613 أو 9614 أو 5 أو 9616 أو 9617 أو 9618 أو 9619 أو 9620 أو 9625 أو 9630 أو 9635 أو 9640 أو 9645 أو 9650 أو 9655 أو 9660 أو 9665 أو 9670 أو 9675 أو 9680 أو 9685 أو 0 أو 9695 أو 16100 انخفاض؛ بما في ذلك جميع الأعداد الصحيحة بينهما.
كما هو مستخدم ‎lia‏ يشير ‎ET‏ التُوكليوتيد في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ ‎oligonucleotide‏ " أو "أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense oligomer‏ ' أو ‎J"‏ ‏الَُوكليوتيد ‎oligonucleotide‏ " إلى متوالية نيكليوتيدات خطية ‎linear‏ أو نظائر النيكليوتيد؛ التي تسمح للقاعدة النووية بتهجينها إلى متوالية الهدف في ‎RNA‏ من خلال تزاوج قاعدة واتسون- كربك؛ لتشكيل أوليجومر: مضاعف التغاير ‎RNA‏ داخل متوالية الهدف. وقد تستخدم المصطلحات "أوليجو نيوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ ” و"أوليجو نيوكليوتيد مضاد لاتجاه النسخ معدل" و"أوليجومر مضاد للنسخ” و"أوليجومر” و'مركب" بالتبادل للإشارة إلى أوليجومر. يمكن أن تستند الوحدات الفرعية الحلقية على ‎ribose jeu)‏ أو ‎Su‏ بنتوز ‎pentose sugar‏ آخرء؛ أو في بعض النماذج؛ مجموعة مورفولينو ‎morpholino‏ انظر وصف أوليجومرات مورفيلينو
‎morpholino oligomers 0‏ أدناه. وبتم التفكير في أحماض الببتيد النووية ‎peptide nucleic‏ ‎«(PNAs) acids‏ والأحماض النووية المؤمنة ‎«(LNAs) locked nucleic acids‏ وأوليجومرات ‎DNA‏ ثلاثي الحلقة ‎tricyclo—DNA oligomers‏ ¢ وأوليجومرات فيسفوروثيوات ثلاقية الحلقة ‎tricyclo—phosphorothioate oligomers‏ ¢ وأوليجومرات 2:-0-مثيل -:2 ‎O-Methyl oligomers‏ « ضمن عوامل مضادة للنسخ أخرى معروفة في المجال.
‏5 يتضمن ذلك أوليجومرات حادثة بشكل غير طبيعي؛ أو "نظائر قليلة النيوكليوديدات؛" بما في ذلك الأوليجومرات التي لديها ‎(i)‏ بنية السلسلة المعدلة ‎«Jie‏ الريط فسفودايستر ‎phosphodiester‏ ‏القياسي الموجود في أوليجو -ونيوكليدات الحادثة بشكل طبيعي؛ و/أو ‎(ii)‏ أشطار السكر المعدلة؛ على سبيل المثال؛ أشطار المورفولينو بخلاف أشطار الريبوز أو الديوكسي ريبوز ‎deoxyribose‏ ‏. تدعم نظائر الأوليجومرات القواعد القادرة على ربط الهيدروجين ‎hydrogen‏ من خلال قاعدة
‏0 واتسون-كربك التي تتزاوج مع القواعد عديدة النيوكليوتيدات» حيث تمثل سلسلة النظائر القواعد بطريقة تسمح بربط الهيدروجين ذلك بطريقة متسلسلة محددة بين جزيء نظير الأوليجومر والقواعد في عديدات النيوكليوتيد القياسية على سبيل ‎(JB)‏ الحمض النووي الريبي أحادي الجديلة ‎single-stranded RNA‏ أو الحمض النووي الأحادي الجديلة ‎DNA‏ 5:0916-5080080. وتكون النظائر المفضلة هي تلك التي لديها فسفور ‎phosphorus‏ غير مشحون بشكل كبير
‏5 المحتوي على سلسلة.
يشير أوليجومر ‎glad‏ للنيوكلياز ‎nucleobase‏ " إلى الذي لديه سلسلة مقاومة بشكل كبير لانقسام النيوكلياز ‎nucleases‏ في شكل غير مختلط أو مختلط؛ من خلال النيوكليوزات 85 الشائعة خارج وداخل الخلية في الجسم على سبيل ‎Jal‏ من خلال أكسونيوكليازات ‎exonucleases‏ مثل 3”-أكسونيوكليازات» إندونيوكليانات ‎3’—exonucleases‏ ‎(RNase 1+ 5‏ أي ‎(of‏ الأوليجومر يظهر عدم انقسام النيوكلياز أو وجود انقسام قليل تحت
ظروف النيوكلياز الطبيعية في الجسم الذي يتعرض له الأوليجومر. يشير 'مضاعف التغاير المقاوم للنيوكلياز" إلى مضاعف التغاير المكون من قبل ربط الأوليجومر المضاد للنسخ بهدفه المتمم؛ بحيث يكون مضاعف التغاير مقاوماً بشكل كبير للتحلل في الجسم ‎all‏ من خلال النيكليازات خارج وداخل الخلية؛ التي تكون قادرة على قطع مركبات ‎RNA/RNA‏ أو
‎RNA/DNA 10‏ ذات طاقين. يشير "'مضاعف التغاير" إلى مضاعف بين أوليجومر مضاد للنسخ ‎gig‏ متمم ل ‎RNA‏ الهدف. كما هو مستخدم هناء يتم استخدام 'قاعدة نووية" ‎nucleobase” (Nu) (NU)‏ أو ‎ea"‏ التزاوج القاعدي " أو ‎"sae‏ بالتبادل للإشارة إلى قاعدة بيورين أو بيريميدين الموجودة في ‎DNA‏ أو ‎RNA‏ الفطري اليوراسيل ‎uracil‏ والثايمين ‎thymine‏ والأدينين والسيتوزين والجوانين)؛ وكذلك
‏5 نظائر البيوربنات والبيريميدينات الحادثة طبيعياً؛ ما يمنح خواص محسنة؛ بحيث تريط الألفة بالأوليجومر. تضم النظائر التمثيلية هيبوزينتين (المكون القاعدي لإينوزين النيوكيوزيد)؛ 2, 6- ثنائي أمينوبيورين ‎6-diaminopurine‏ ,2 ؛ 5-سيتوزين الميثيل ‎5S—methyl cytosine‏ ؛ -بروبينيل-بريميدينات معدلة ‎C5-propynyl-modifed pyrimidines‏ ¢ 9-(أمينوثيكسي) فينواكسازين ‎9-(aminoethoxy)phenoxazine (G-clamp)‏ (ماسك على شكل ‎(CG‏ وما
‏0 شابه. تتضمن الأمثلة الإضافية لأشطار التزاوج القاعدية؛ على سبيل المثال لا الحصرء اليوراسيل ؛ والثايمين ؛ والأدينين» والسيتوزين» والجوانين» والهيبوكسانثين ‎uracil, thymine, adenine,‏ ‎cytosine, guanine and hypoxanthine‏ المحتوية على المجموعات الأمينية الخاصة بها المحمية بمجموعات حماية الأسيل» 2-فلورويوراسيل» 2-فلوروسيتوزين» 5-بروموراسيل» 5-
‏5 أيدوراسيل» 2,6-ثنائي أمينوبيورين» أزايسيتوزين -5 ‎2—fluorouracil, 2—fluorocytosine,‏
— 3 3 — ‎<bromouracil, S—iodouracil, 2,6—diaminopurine, azacytosine,‏ نظائر البيريميدين ‎pyrimidine analogs‏ مثل بسيودوسيتوزين وسيودوراسيل ‎pseudoisocytosine and‏ ‎pseudouracil‏ وقواعد نووية معدلة مثل 8-بيورينات ‎purines‏ مستبدلة أو زانثاين ‎xanthine‏ ‏أو هيبوزانثاين ‎hypoxanthine‏ (يكون الاثنين الآخرين منتجات انخفاض الأداء الطبيعية). ‎aig‏ ‏5 أيضاً أخذ القواعد النووية المعدلة الموضحة في تشيو وراناء 2003 9 1048-1034 وليمباك ‎Oats‏ بحوث الأحماض النووية؛ 4 )؛ 22 » 2196-2183 وريفانكار وراو؛ كيمياء المنتجات الطبيعية الشاملة؛ المجلد 7 313 يعين الاعتبار. تتضمن أمثلة إضافية لأشطار التزاوج القاعدي؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ القواعد النووية ‎Nucleic base‏ موسعة الحجم والتي يتم فيها إضافة واحدة أو أكثر من حلقات البنزين. ويتم 0 التفكير في بدائل القاعدة النووية الموضحة في كتالوج جلين ربسيرش ‎¢(WWW.glenresearch.com)‏ كروجسر ايه تي وآأخرون؛ حسابات البحوث الكيميائية؛ 2007 40« 150-141؛ كوول وأخرون»؛ حسابات البحوث الكيميائية 2002 35 943-936؛ بينير اس ايه وأخرون»؛ مجلة الطبيعة؛ علم ‎«ysl‏ 2005 6 543-553؛ روميسبيرج؛ اف. اي .‘ وآخرون» الرأي الحالي في ‎ale‏ الأحياء الكيميائية. 2003» 7( 733-723؛ هيراو» أي الرأي الحالي في علم الأحياء الكيميائية. 2006« 10؛ 627-622؛ على أنها مفيدة لتخليق الأوليجومرات الموضحة هنا. يتم توضيح أمثلة القواعد النووية موسعة الحجم أدناه: ‎A pe‏ ‎oF I NH; oO‏ يرك صر ‎N‏ يرك حك ‎ry SOR N‏ ‎AAA‏ ل ل لحر 0 ‎whe bs‏ ‎N NY N NH;‏ ع 0 حاسم ‎woe‏ ‏ ‎١ SN, NH =n‏ 0 ‎TY‏ الت 7 7777 0 ا
تشتمل القاعدة النووية المرتبطة تساهمياً مع الريبوز أو نظير السكر أو مورفولينو على نيوكليوزيد. وتتكون 'النيوكليوزيدات" من نيوكليوزيد مصاحب لمجموعة قوسفات. وترتبط مجدموعات الفوسفات تساهمياً بالنيوكليوزيدات المتجاورة واحدة تلو الأخرى لتكون الأوليجومر. 'يختلط' الأوليجومر "بشكل خاص” بعديد نيوكليوتيد الهدف إذا اختلط الأوليجومر بالهدف تحت الظروف الفسيولوجية؛ ومع كون 170 أكبر إلى حد كبير من 40 درجة مئوية أو 45 درجة مئوية ويفضل 50 درجة مئوية على الأقل ونمطياً 60 درجة مئوية - 80 درجة مئوية أو أعلى. ويفضل أن يتطابق هذا التهجين مع ظروف التهجين الشديدة. عند القوة الأيونية ودرجة الحموضة المعطاة؛ تكون ‎TM‏ هي درجة الحرارة والتي عندها يختلط 7050 من متوالية الهدف بعديد النيوكليوتيد المتتام. وقد يحدث هذا التهجين مع متتام 'قريب" أو 'كبير” لأوليجومر مضاد للنسخ إلى متوالية 0 الهدف؛ وكذلك مع المتتام الصحيح. كما هو مستخدم هناء يشير "الطول الكافي" إلى الأوليجومر المضاد للنسخ أو متوالية المستهدفة الخاصة به والتي تكون متممة ل 8 على الأقل أو 9 على الأقل أو على الأقل 10 أو على الأقل 1 أو على الأقل 12 أو على الأقل 13 أو على الأقل 14 أو على الأقل 15 أو على الأقل 16 أو على الأقل 17 أو على الأقل 18 أو على الأقل 19 أو على الأقل 20 أو على الأقل 21 أو 5 22 على الأقل أو على الأقل 23 أو على الأقل 24 أو على الأقل 25 أو على الأقل 26 أو على الأقل 27 أو على الأقل 28 أو على الأقل 29 أو أكثر. ‎Jia‏ 40-8 ومثل 40-15 من القواعد النووية المجاورة في منطقة الإنترون 1 لجين ‎GAA‏ أو الأكسون 2 2 00»© أو الإنترون 2 32 أو منطقة تمتد لأي مما سلف ذكره. ويحتوي الأوليجومر المضاد للنسخ للطول الكافي على عدد أدنى للنيوكليوتيدات القادرة على التهجين تحديداً لمنطقة تكرار حمض ‎MRNA‏ القبلي ‎GAA! 20‏ في ‎RNA‏ المتحول. ويفضل أن يكون الطول الكافي لأوليجومر من 8 إلى 30 نيكليوتيدة في الطول. ويفضل أكثر أن يكون الطول الكافي لأوليجومر من 9 إلى 27 نيكليوتيدة في الطول. ومن الأفضل أن يكون الطول الكافي لأوليجومر من 15 إلى 40 نيكليوتيدة في الطول. تشير المصطلحات 'متوالية التعريف" أو على سبيل المثال» مشتمل على 'متوالية متطابقة 9650 مع" كما هو مستخدم هناء إلى المحتوى الذي تكون فيه المتواليات متطابقة على أساس
نيوكيوتيدات-على-نيوكليوتيدات أو أساس حمض أميني-على-حمض أميني على مدى نافذة المقارنات. وبالتالي؛ يمكن حساب "النسبة المئوية من متوالية التعريف" من خلال مقارنة متواليتين متسقتين على النحو الأمثل على مدى نافذة المقارنات؛ مما يحدد عدد الأماكن التي تحدث فيها قاعدة الحمض الأميني المتطابقة ‎le)‏ سبيل ‎(TA (Jad‏ © ©؛ ‎)١‏ أو باقي الحمض الأميني المتطابق (مثل 8ا8/ و 000 و +58 و 175 و لاا6© و ل8/ا و ناا و ‎slle‏ 006 و ‎Tyr‏ و ‎Trp‏ ‏و 5لا و و80 و ‎His‏ و ‎Asp‏ و ‎Glu‏ و ‎Asn‏ و ‎Gln‏ و ‎Cys‏ و ‎(Met‏ في كلا المتواليتين لحساب عدد الأماكن المطابقة؛ وتقسيم عدد الأماكن المطابقة من خلال عدد إجمالي للأماكن في نافذة المقارنات (أي؛ ‎ana‏ النافذة)؛ ومضاعفة النتيجة إلى 100 لحساب النسبة المئوية لمتوالية التعريف. يمكن إجراء المحاذاة الأمثل للتتابعات لمحاذاة نافذة المقارنة من خلال تطبيقات خوارزمية 0 محوسبة ‎GAP)‏ و 8551711 و ‎FASTA‏ و ‎TFASTA‏ في الإصدار 7.0 من مجموعة ويسكونسن لبرمجيات ‎ale‏ الوراثة؛ مجموعة حاسوبية ‎ale‏ الوراثة؛ 575 سايني درايف ماديسون؛ ولاية ويسكونسن؛ الولايات المتحدة) أو من خلال المعاينة والمحاذاة الأفضل (أي؛ الناتجة في ‎Silas‏ النسبة المئوية الأعلى على مدى نافذة المقارنات) المتولدة بفعل أي طرق متنوعة مختارة. كما يمكن الإشارة إلى برامج عائلة الخلايا الأولية ‎Primary Cell Family Programs‏ ‎(BLAST) 5‏ على سبيل المثال ما هو موضح من قبل ألتسكول وآخرون»؛ بحوث الأحماض النووية؛ 25: 3389 1997. تتضمن "حالة" أو "حالة بحاجة لذلك" حالة ثديية مثل حالة بشرية. وتعاني الحالات الثديية التمثيلية أو تكون في خطر الإصابة ب ‎650-١١‏ (أو داء بومبيه). كما هو مستخدم ‎(la‏ يشير المصطلح ‎"6500-١١'‏ إلى مرض تخزين الجليكوجين من النوع الثاني (ا١-6500‏ أو داء بومبيه)؛ وهو مرض 0 بشري صبغي جسدي متنحي والذي ‎We‏ ما يتميز بتعبير تحتي لبروتين ‎GAA‏ في الأفراد المصابين. في نماذج معينة؛ قامت الحالة بتقليل تعبير و/أو فعالية بروتين ‎GAA‏ في واحد أو أكثر من الأنسجة؛ على سبيل المثال؛ القلب والعضلات الهيكلية والكبد وأنسجة الجهاز العصبي. في بعض النماذج؛ قامت الحالة بزيادة تراكم الجليكوجين في واحد أو أكثر من الأنسجة؛ على سبيل المثال؛ القلب والعضلات الهيكلية والكبد وأنسجة الجهاز العصبي. في نماذج معينة؛ تعاني 5 الحالة من طفرة ‎IVS1-13T>G‏ أو طفرة ‎gal‏ تؤدي إلى تعبير منخفض لبروتين ‎GAA‏
الوظيفي (انظرء زامبيري وآخرون؛ المجلة الأوروبية لعلم الوراثة البشرية 19: 431-422؛ 011). كما هو مستخدم هناء يشير المصطلح "هدف" إلى منطقة ‎(RNA‏ وتحديداً؛ إلى المنطقة المعروفة بجين //3. في نموذج معين يكون الهدف عبارة عن منطقة داخل إنترون 1 لترميز حمض ‎MRNA 5‏ القبلي لجين - ‎GAA‏ (على سبيل المثال؛ متوالية بهوية رقم :1)؛ المسئول عن كبت الإشارة التي تحث على دمج الأكسون 2. في نموذج آخر تكون منطقة الهدف ل ‎MRNA‏ الخاصة بأكسون 2 ‎(GAA‏ وفي نموذج إضافي؛ يشتمل الهدف واحدة أو أكثر المناطق الفرعية المتفردة للإنترون 1 لترميز حمض ‎MRNA‏ القبلي لجين - ‎(GAA‏ وتتضمن المناطق الفرعية تلك؛ على سبيل المثال لا الحصرء المتواليات المحددة من قبل متوالية بهوية رقم: 2 ومتوالية بهوية رقم: 3. 10 يشير المصطلح "متوالية الهدف" إلى جزء من ‎RNA‏ الهدف والذي في مقابله يتم توجيه نظير الأوليجومر» أي المتوالية التي يختلط عندها نظير الأوليجومر من خلال تزاوج قاعدة واتسون- كربك للمتوالية المتممة. يكون المصطلح ‎Alsi‏ مستهدفة" عبارة عن متوالية في أوليجومر أو نظير أوليجومر المتممة (بمعنى؛ بالإضافة إلى ذلك؛ متممة بشكل كبير) ل 'متوالية الهدف" في جينوم ‎(RNA‏ وقد تكون متوالية الأوليجومر المضاد للنسخ بأكملها أو ‎ohn‏ منها فقط متممة لمتوالية الهدف. على سبيل المثال» في أوليجومر يحتوي على 30-20 قاعدة؛ قد يكون حوالي 6 أو 7 أو 8 أو 9أو 10 أو 1 أو 12 أو 13 أو 14 أو 15 أو 16 أو 17 أو 18 أو 19 أو 20 أو 21 أو 22 أو 23 أو 4 أو 25 أو 26 أو 27 أو 28 أو 29 متواليات مستهدفة التي تكون متممة لمنطقة الهدف. عادةً؛ يتم تشكيل المتوالية المستهدفة لقواعد مجاورة في الأوليجومر؛ ولكن قد يتم تشكيلها بشكل 0 بديل للمتواليات غير المجاورة عندما يتم تكوينهاء على سبيل المثال؛ من النهايات المقابلة للأوليجومر؛ وتشكل المتوالية التي تمتد على متوالية الهدف. قد يكون ل "المتوالية المستهدفة" تتام "قريب" أو "أساسي" إلى متوالية الهدف ولا تزال تعمل من أجل غرض الاكتشاف ‎Jal‏ أي لا تزال 'متتامة". وعلى نحو مفضل؛ تحتوي مركبات نظائر الأوليجومر المستخدمة في الاكتشاف الحالي على اختلاف واحد على الأكثر مع متوالية الهدف من
— 7 3 — أصل 10 نيوكليوتيدات؛ وبفضل اختلاف واحد على الأكثر من أصل 20. وبدلاً من ‎«ld‏ تحتوي الأوليجومرات المضادة للنسخ المستخدمة على 9690 على الأقل من مماثل المتوالية؛ ويفضل على الأقل من مماثل المتوالية؛ مع متواليات مستهدفة تمثيلية كما معين هنا. كما هو مستخدم ‎cls‏ تشير المصطلحات "16" أو ‎LY‏ جليكول ثنائي الإثيلين ‎triethylene‏ ‏5 انعا ‎glycol‏ " إلى أشطار الجليكول ثنائى الإثيلين المقترنة با لأوليجونيوكيوتيد ‎oligonucleotide‏ ‏¢ على سبيل ‎JU‏ عند نهايته 3 - أو 5 ”-, على سبيل ‎JE‏ فى بعض ‎oz ail‏ يتضمن ‎"TEG®‏ بحيث؛ على سبيل المثال؛ يكون ‎T‏ الخاص بمركب من الصيغة )1( أو ‎(VI) FV)‏ له الصيغة: 0 0 ‎hy‏ حلم 3 0 ‎N‏ ‏/_ ‎TN‏ ‏10 كما هو مستخدم هناء تشير المصطلحات "التحديد الكمي” أو "التقدير الكمي" أو كلمات أخرى ذات صلة إلى تحديد كمية أو ‎ABS‏ أو تركيز في وحدة أو ‎ana‏ لحمض نووي ‎nucleic acid‏ أو عديد نيوكليوتيد ‎polynucleotide‏ أو أوليجومر ‎oligomer‏ أو ببتيد ر أو عديد ببتيد ‎polypeptide‏ ‏أو بروتين. كما هو مستخدم هناء يكون 'العلاج" للحالة (على سبيل ‎JE‏ تديي؛ ‎Jie‏ الإنسان) أو لخلية من 5 أي نوع من التدخلات المستخدمة في محاولة لتغيير المسار الطبيعي للفرد أو الخلية. يضم العلاج؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ إعطاء تركيبة ‎Ai ana‏ ويمكن إجراءه سواء بشكل وقائي أو لاحقاً لبدء حدث مرضي أو تلامس مع عامل ممرض. وأيضاً يتم إدراج العلاجات "الوقائية"؛ والتي يمكن توجيهها لتقليل معدل تقدم المرض أو الحالة المرض التي يتم علاجهاء أو تأجيل بدء هذا المرض أو الحالة المرضية؛ أو تقليل شدة بدءه. ولا يدل كل من "العلاج” أو "المعالجة الوقائية" بالضرورة قضاء ‎lS‏ أو شفاء تام أو منع تام للمرض أو الحالة المرضية أو الأعراض المصاحبة له.
GAA ‏متواليات لتعديل جدل‎ LI
تتعلق نماذج معينة بطرق تعزيز مستوى لترميز حمض ‎MRNA‏ القبلي لجين - ‎GAA‏ المحتوي
على الأكسون 2- المتعلق بحمض ‎MRNA‏ القبلي لجين - ‎GAA‏ محذوف الأكسون 2 600
‎2—containing GAA-coding mRNA relative to exon-2‏ في الخلية؛ مما يشتمل على تلامس الخلية مع أوليجومر مضاد للنسخ للطول الكافي والمتتام تحديداً لخلطه بمنطقة داخل الجين
‎«GAA‏ بحيث يتم تعزيز حمض ‎MRNA‏ القبلي لجين - ‎GAA‏ المحتوي على أكسون 2 المتعلق
‏بحمض ‎MRNA‏ القبلي لجين - ‎GAA‏ محذوف الأكسون 2 في الخلية. في بعض النماذج؛ تكون
‏الخلية في حالة؛ وتشتمل الطريقة على إعطاء الأوليجومر المضاد للنسخ للحالة.
‏0 يمكن تصميم الأوليجومر مضاد النسخ لمنع نقل ‎MRNA‏ أو تثبيطه أو تعديله أو لتثبيط معالجة جدل حمض ‎MRNA‏ القبلي أو تعديلهاء أو للحث على خفض ‎MRNAS‏ المستهدفة؛ ويمكن القول بأنه يتم 'توجيهه إلى" أو 'يوجه ضد” متوالية الهدف التي يختلط بها. في نماذج معينة؛ تضم متوالية الهدف مطقة تضم موقع جدل 3 أو 175 ‎MRNA‏ قبل المعالج» أو نقطة ربط أو متوالية أخرى تشترك في تنظيم الجدل. وقد تكون متوالية الهدف ضمن إكسون أو ضمن إنترون أو تمتد
‏5 إلى ملتقى الإنترون/الإكسون. في نماذج معينة؛ يحتوي أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على متوالية كافية متممة ل ‎RNA‏ ‏الهدف ‎le)‏ سبيل المثال» ‎RNA‏ الذي يتم تعديل انتقاء موقع الجدل) لمنع منطقة ‎RNA‏ الهدف (على سبيل المثال» لحمض ‎MRNA‏ القبلي) بطريقة فعالة. في نماذج تمثيلية؛ يعمل ‎pie‏ حمض ‎MRNA‏ القبلي لجين ‎GAA‏ هذا على تعديل الجدل؛ سواء من خلال إعاقة موقع الربط للبروتين
‏0 الفطري الذي من شأنه ‎doses‏ الجدل و/أو تغيير هيكل ‎RNA‏ المستهدف. في بعض النماذج؛ يكون ‎RNA‏ الهدف عبارة عن حمض ‎Lal) MRNA‏ الهدف ‎le)‏ سبيل ‎(Jia)‏ حمض ‎MRNA‏ ‎Lal‏ لجين ‎(GAA‏ ‏يقصد بأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ الذي يحتوي على متوالية كافية متممة ل ‎RNA‏ الهدف لتعديل جدل ‎RNA‏ الهدف أن العامل المضاد للنسخ يحتوي على متوالية كافية لتحريك إعاقة موقع
— 9 3 — ‎Ja‏ لبروتين فطري الذي من شأنه تعديل الجدل و/أو تغيير الهيكل ثلاثي الأبعاد ل ‎RNA‏ ‏المستهدف. وبالمثل» يقصد بكاشف أوليجومر الذي يحتوي على متوالية كافية لمتوالية ‎RNA‏ ‏الهدف لتعديل ‎RNA as‏ الهدف أن كاشف أوليجومر يحتوي على متوالية كافية لتحريك ‎dale)‏ ‏موقع الربط لبروتين فطري الذي من شأنه تعديل الجدل و/أو تغيير الهيكل ثلاثي الأبعاد ل ‎RNA‏ ‏5 المستهدف. في نماذج معينة؛ يحتوي أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على طول وتتام كافيان لمتوالية في إنترون 1 لحمض ‎MRNA‏ القبلى لجين ‎GAA‏ البشري؛ أو إكسون 2 لحمض ‎MRNA‏ القبلى لجين ‎GAA‏ البشري؛ أو إنترون 2 لحمض ‎MRNA‏ القبلي لجين ‎GAA‏ البشري. يتم أيضاً إدراج أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ والتي تكون متممة للمنطقة التي تمتد إلى إنترون 1/إكسون 2 0 - لحمض ‎MRNA‏ القبلى لجين ‎GAA‏ البشري؛ أو المنطقة التى تمتد إلى إكسون 2/إنترون 2
لحمض ‎MRNA‏ القبلي لجين ‎GAA‏ البشري. يتم توضيح متواليات الإنترون 1 (متوالية بهوية رقم:1) والإكسون 2 (متوالية بهوية رقم :4) والإنترون 2 (متوالية بهوية رقم :5) لجين ‎GAA‏ ‏البشري في الجدول 1 أدناه (إن 1/6 الموضحة ‎ll‏ من النهاية 3” لمتوالية بهوية رقم :1 ‎Ble‏ ‏عن الطفرة ‎IVS1-13T>G‏ الموضحة أعلاه؛ وفي هذا الموقع يكون النيوكليوتيد سواء 1 أو 6).
جدول 1
متواليات هدف خاصة بأوليجومرات مستهدفة - ‎GAA‏ ( من ‎-NG‏ 009822)
متوالية الاسم متوالية (:5-3) بهوية رقم
1 GTGAGACACCTGACGTCTGCCCCGCGCTGCCGG GAA-
CGGTAACATCCCAGAAGCGGGTTTGAACGTGCCT IVS]
AGCCGTGCCCCCAGCCTCTTCCCCTGAGCGGAG
CTTGAGCCCCAGACCTCTAGTCCTCCCGGTCTTT
ATCTGAGTTCAGCTTAGAGATGAACGGGGAGCCG
CCCTCCTGTGCTGGGCTTGGGGCTGGAGGCTGC
ATCTTCCCGTTTCTAGGGTTTCCTTTCCCCTTTTG
ATCGACGCAGTGCTCAGTCCTGGCCGGGACCCG
AGCCACCTCTCCTGCTCCTGCAGGACGCACATGG
CTGGGTCTGAATCCCTGGGGTGAGGAGCACCGT
GGCCTGAGAGGGGGCCCCTGGGCCAGCTCTGAA
ATCTGAATGTCTCAATCACAAAGACCCCCTTAGGC
CAGGCCAGGGGTGACTGTCTCTGGTCTTTGTCCC
TGGTTGCTGGCACATAGCACCCGAAACCCTTGGA
AACCGAGTGATGAGAGAGCCTTTTGCTCATGAGG
TGACTGATGACCGGGGACACCAGGTGGCTTCAG
GATGGAAGCAGATGGCCAGAAAGACCAAGGCCT
GATGACGGGTTGGGATGGAAAAGGGGTGAGGGG
CTGGAGATTGAGTGAATCACCAGTGGCTTAGTCA
ACCATGCCTGCACAATGGAACCCCGTAAGAAACC
ACAGGGATCAGAGGGCTTCCCGCCGGGTTGTGG
AACACACCAAGGCACTGGAGGGTGGTGCGAGCA
GAGAGCACAGCATCACTGCCCCCACCTCACACCA
GGCCCTACGCATCTCTTCCATACGGCTGTCTGAG
TTTTATCCTTTGTAATAAACCAGCAACTGTAAGAA
ACGCACTTTCCTGAGTTCTGTGACCCTGAAGAGG
GAGTCCTGGGAACCTCTGAATTTATAACTAGTTGA
TCGAAAGTACAAGTGACAACCTGGGATTTGCCAT
TGGCCTCTGAAGTGAAGGCAGTGTTGTGGGACTG
AGCCCTTAACCTGTGGAGTCTGTGCTGACTCCAG
GTAGTGTCAAGATTGAATTGAATTGTAGGACACCC
AGCCGTGTCCAGAAAGTTGCAGAATTGATGGGTG
TGAGAAAAACCCTACACATTTAATGTCAGAAGTGT
GGGTAAAATGTTTCACCCTCCAGCCCAGAGAGCC
CTAATTTACCAGTGGCCCACGGTGGAACACCACG
TCCGGCCGGGGGCAGAGCGTTCCCAGCCAAGCC
TTCTGTAACATGACATGACAGGTCAGACTCCCTC
GGGCCCTGAGTTCACTTCTTCCTGGTATGTGACC
AGCTCCCAGTACCAGAGAAGGTTGCACAGTCCTC
TGCTCCAAGGAGCTTCACTGGCCAGGGGCTGCTT
TCTGAAATCCTTGCCTGCCTCTGCTCCAAGGCCC
GTTCCTCAGAGACGCAGACCCCTCTGATGGCTGA
CTTTGGTTTGAGGACCTCTCTGCATCCCTCCCCC
ATGGCCTTGCTCCTAGGACACCTTCTTCCTCCTTT
CCCTGGGGTCAGACTTGCCTAGGTGCGGTGGCT
CTCCCAGCCTTCCCCACGCCCTCCCCATGGTGTA
TTACACACACCAAAGGGACTCCCCTATTGAAATCC
ATGCATATTGAATCGCATGTGGGTTCCGGCTGCT
CCTGGGAGGAGCCAGGCTAATAGAATGTTTGCCA
TAAAATATTAATGTACAGAGAAGCGAAACAAAGGT
CGTTGGTACTTGTTAACCTTACCAGCAGAATAATG
AAAGCGAACCCCCATATCTCATCTGCACGCGACA
TCCTTGTTGTGTCTGTACCCGAGGCTCCAGGTGC
AGCCACTGTTACAGAGACTGTGTTTCTTCCCCATG
TACCTCGGGGGCCGGGAGGGGTTCTGATCTGCA
AAGTCGCCAGAGGTTAAGTCCTTTCTCTCTTGTG
GCTTTGCCACCCCTGGAGTGTCACCCTCAGCTGC
GGTGCCCAGGATTCCCCACTGTGGTATGTCCGTG
CACCAGTCAATAGGAAAGGGAGCAAGGAAAGGTA
CTGGGTCCCCCTAAGGACATACGAGTTGCCAGAA
TCACTTCCGCTGACACCCAGTGGACCAAGCCGCA
CCTTTATGCAGAAGTGGGGCTCCCAGCCAGGCGT
GGTCACTCCTGAAATCCCAGCACTTCGGAAGGCC
AAGGGGGGTGGATCACTTGAGCTCAGGAGTTCG
AGACCAGCCTGGGTAACATGGCAAAATCCCGTCT
CTACAAAAATACAGAAAATTAGCTGGGTGCGGTG
GTGTGTGCCTACAGTCCCAGCTACTCAGGAGGCT
GAAGTGGGAGGATTGCTTGAGTCTGGGAGGTGG
AGGTTGCAGTGAGCCAGGATCTCACCACAGCACT
CTGGCCCAGGCGACAGCTGTTTGGCCTGTTTCAA
GTGTCTACCTGCCTTGCTGGTCTTCCTGGGGACA
TTCTAAGCGTGTTTGATTTGTAACATTTTAGCAGA
CTGTGCAAGTGCTCTGCACTCCCCTGCTGGAGCT
TTTCTCGCCCTTCCTTCTGGCCCTCTCCCCAGTCT
AGACAGCAGGGCAACACCCACCCTGGCCACCTTA
CCCCACCTGCCTGGGTGCTGCAGTGCCAGCCGC
GGTTGATGTCTCAGAGCTGCTTTGAGAGCCCCGT
GAGTGCCGCCCCTCCCGCCTCCCTGCTGAGCCC
Ia 2 | TCTCAGAGCTGCTTTGAGAGCCCCGTGAGTGCCG GAA- 60616 1 -76- (-38 3| GGAGCTTTTCTCGCCCTTCCTTCTGGCCCTCTC GAA-
IVS1 -192( )-0 4| GCCTGTAGGAGCTGTCCAGGCCATCTCCAACCAT| - GAA
GGGAGTGAGGCACCCGCCCTGCTCCCACCGGCT | 2 ‏كسون‎ ‎CCTGGCCGTCTGCGCCCTCGTGTCCTTGGCAACC ‎GCTGCACTCCTGGGGCACATCCTACTCCATGATT ‎TCCTGCTGGTTCCCCGAGAGCTGAGTGGCTCCTC ‎CCCAGTCCTGGAGGAGACTCACCCAGCTCACCA ‎GCAGGGAGCCAGCAGACCAGGGCCCCGGGATG ‎CCCAGGCACACCCCGGCCGTCCCAGAGCAGTGC ‎CCACACAGTGCGACGTCCCCCCCAACAGCCGCTT ‎CGATTGCGCCCCTGACAAGGCCATCACCCAGGAA ‎CAGTGCGAGGCCCGCGGCTGTTGCTACATCCCT
GCAAAGCAGGGGCTGCAGGGAGCCCAGATGGGG
CAGCCCTGGTGCTTCTTCCCACCCAGCTACCCCA
GCTACAAGCTGGAGAACCTGAGCTCCTCTGAAAT
GGGCTACACGGCCACCCTGACCCGTACCACCCC
CACCTTCTTCCCCAAGGACATCCTGACCCTGCGG
CTGGACGTGATGATGGAGACTGAGAACCGCCTCC
ACTTCACG
| GTGGGCAGGGCAGGGGCGGGGGCGGCGGCCAG GAA-
GGCAGAGGGTGCGCGTGGACATCGACACCCACG IVS2
CACCTCACAAGGGTGGGGTGCATGTTGCACCACT
GTGTGCTGGGCCCTTGCTGGGAGCGGAGGTGTG
AGCAGACAATGGCAGCGCCCCTCGGGGAGCAGT
GGGGACACCACGGTGACAGGTACTCCAGAAGGC
AGGGCTCGGGGCTCATTCATCTTTATGAAAAGGT
GGGTCAGGTAGAGTAGGGCTGCCAGAGGTTGCG
AATGAAAACAGGATGCCCAGTAAACCCGAATTGC
AGATACCCCAGGCATGACTTTGTTTTTTTGTGTAA
GGATGCAAAATTTGGGATGTATTTATACTAGAAAA
GCTGCTTGTTGTTTATCTGAAATTCAGAGTTATCA
GGTGTTCTGTATTTTACCTCCATCCTGGGGGAGG
CGTCCTCCTCCTGGCTCTGCAGATGAGGGAGCC
GAGGCTCAGAGAGGCTGAATGTGCTGCCCATGG
TCCCACATCCATGTGTGGCTGCACCAGGACCTGA
CCTGTCCTTGGCGTGCGGGTTGTTCTCTGGAGAG
TAAGGTGGCTGTGGGGAACATCAATAAACCCCCA
‎١‏ كما في نماذج معينة؛ تم تصميم متواليات مستهدفة في اتجاه مضاد للنسخ لتهجين منطقة لواحدة أو أكثر من متواليات الهدف المذكورة في الجدول 1؛ يمكن جعل متواليات مستهدفة في اتجاه مضاد للنسخ التي تم اختيارها أقصر؛ على سبيل المثال؛ بحوالي 12 قاعدة؛ أو أطول؛ على سبيل المثال؛ بحوالي 40 قاعدة وتتضمن عددًا صغيرًا من الاختلافات طالما كانت المتوالية متممة بما ‏5 يكفي لإحداث تعديل الجدل عند تهجين متوالية الهدف»؛ وبشكل بشكل اختياري مع ‎RNA‏ مُضافث ‎las‏ له ‎Tm‏ عند 45 درجة مثوبة أو أكبر. في نماذج معينة؛ تكون درجة التتام بين متوالية الهدف والمتوالية المستهدفة في اتجاه مضاد للنسخ كافية لتشكيل مضاعف ثابت؛ قد تكون منطقة تتام أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ مع متوالية الهدف ‎RNA‏ قصيرة بمقدار من 11-8 قاعدة؛ لكن يمكن أن تكون من 15-12 قاعدة أو ‎ST‏ ‏0 على سبيل المثال» 40-10 قاعدة؛ 30-12 قاعدة؛ 25-12 قاعدة؛ 25-15 قاعدة؛ أو 12- ‏0 قاعدة؛ أو 20-15 قاعدة؛ بما في ذلك جميع الأعداد الصحيحة الموجودة بين هذه النطاقات؛ قد يكون أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ عند حوالي 14 إلى 15 قاعدة عادة طويلاً بما يكفي بحيث يتضمن متوالية متممة فريدة من نوعه؛ في نماذج معينة؛ قد يتطلب الأمر طول أدنى من القواعد المتممة لتحقيق ارتباط ‎TM‏ المطلوب؛ كما هو موضح في هذه الوثيقة. ‏5 في ‎pila‏ معينة؛ قد تكون أوليجومرات بطول مناسب وهو 40 قاعدة؛ حيث يكون الحد الأدنى على الأقل من القواعد؛ على سبيل المثال؛ 12-10 قاعدة؛ متمماً لمتوالية الهدف؛ في بعض النماذج؛ يتم تحسين الامتصاص الميسر أو النشط في ‎WAY‏ عند أطوال لأوليغمر أقل من حوالي 0 قاعدة؛ بالنسبة لأوليغومرات ‎(PMO‏ الموصوفة هناء فإن التوازن الأمثل لثبات الارتباط
والامتصاص يحدث عمومًا عند أطوال 25-18 قاعدة؛ يشتمل هذا الكشف على أوليغومرات في اتجاه مضاد للنسخ (مثل ‎PMOs‏ و ‎PMO-X‏ و ‎PNAs‏ و ‎LNAs‏ و 2-01/86) التي تتكون من حوالي 10 و 11و 512 13و 14و 515 16و 17و 518 519 20 أو 21 أو 22 أو 23 أو 24 أو 25 أو 26 أو 27 أو 28 أو 29 أو 30 أو 31 أو 32 أو 33 أو 34 أو 35 أو 36 أو 37 أو 38 أو 39 أو 40 قاعدة؛ حيث ما لا يقل عن حوالي 6»؛ 8 و 9و 10و 11 و 512 513 514 515 16و 517 518 519 520 321 522 23و 524 25و 6 527 28و 29 و 30و 31و 32 33 أو 34 أو 35 أو 36 أو 37 أو 38 أو 39 أو 0 قاعدة متجاورة أو غير متجاورة تكون متممة لمتواليات الهدف بالجدول 1 ‎le)‏ سبيل ‎(Jaa‏ ‏أرقام هوية المتوالية 5-1 متوالية تمتد من أرقام ‎Liga‏ المتوالية : 4/1 أو أرقام هوبة المتوالية : 0 4/5( ‎Bale‏ ما تشتمل الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ على متوالية قاعدية متممة بدرجة كافية لمتوالية أو منطقة داخل أو بالقرب من انترون 1 أو أكسون 2 أو انترون 2 من متوالية ‎Lill MRNA‏ لجين ‎GAA‏ البشري؛ في نماذج معينة؛ تكون الأوليجومرات متممة لمتوالية بهوية رقم : 2 و لمتوالية بهوية رقم :3؛ من الناحية المثالية؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ 5 قادراً على تعديل الجدل الشاذ لجين 68/8 ل ‎MRNA‏ القبلي بفعالية؛ وبالتالي زيادة التعبير الوراثي لبروتين ‎GAA‏ النشطء يتم استيفاء هذا الشرط اختياريًا عندما يتضمن مركب الأوليجومر القدرة على أن ينتقل من خلال خلايا الثدييات بفاعلية؛ وبمجرد ‎caddis‏ يشكل مضاعف مستقر (أو مضاعف متغاير) مع ‎MRNA‏ للهدف؛ بشكل اختياري يكون ‎TM‏ أكبر من حوالي 40 درجة مئوية أو 45 درجة ‎gia‏ ‏0 في نماذج معينة؛ قد تكون الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ متممة بنسبة 100 % لمتوالية الهدف؛ أو قد تتضمن اختلافات؛ على سبيل المثال؛ لاستيعاب المتغيرات؛ طالما تم تكوين مضاعف متغاير بين الأوليجومر ومتوالية الهدف مستقرًا بما يكفي لتحمل عمل القواعد النووية الخلوية وأنماط التحلل الأخرى التي قد تحدث في الجسم ‎al)‏ وبالتالي؛ قد تتضمن أوليجومرات معينة تتام جوهري؛ بمعنى»؛ حوالي أو على الأقل حوالي 9670 من تتام المتوالية؛ على سبيل 5 المثال 70م 9471 972 673 ‎HTT 976 475 %T4‏ 478 679 9680
1 %82 %83 %84 حقك %86 %87 9688 %89 9690 9691 9692 3 9694 9695 تكامل 9696 9697 9698 9699 أو 96100 من تتام المتوالية؛ بين الأوليجومر ومتوالية الهدف؛ تتم مناقشة هنا الأجزاء الأهم للأوليجومر التي هي أقل عرضة للانشقاق من قبل القواعد النووية؛ ‎Bale‏ ما تكون الاختلافات» ان وجدت؛ أقل زعزعة للاستقرار تجاه المناطق الطرفية بالمضاعف الهجين مقارنة بالوسط؛ء سيعتمد عدد الاختلافات المسموح بها على طول الأوليجومر» والنسبة المئوية لأزواج قاعدة © :6 في المضاعف؛ وموضع الاختلاف (الاختلافات) في المضاعف؛ ‎Tidy‏ لمبادئ ثبات المضاعف التي تم فهمها ‎Tun‏ على الرغم من أن الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ لا يكون بالضرورة متمماً بنسبة 96100 لمتوالية الهدف ‎ov‏ إلا أنه يكون فعّالاً في الارتباط بثبات ويشكل خاص بمتوالية الهدف؛ بحيث يتم تعديل جدل الحمض 0 ملام القبلي للهدف. يعد استقرار المضاعف الذي يتشكل بين الأوليجومر ومتوالية الهدف دالة لارتباط ‎TM‏ وحساسية المضاعف للانشقاق الأنزيمي الخلوي؛ يمكن قياس ‎TM‏ للأوليجومر ‎Lad‏ يتعلق بمتوالية ‎RNA‏ ‏المتممة من خلال الطرق التقليدية؛ ‎Jie‏ تلك التي وصفها من خلال هاميس وآخرون؛ تهجين الحمض النووي؛ ‎(IRL Press‏ 1985؛ صفحات 108-107 أو كما هو موضح في ‎Miyada‏ ‏5 66و88 ‎Wallace‏ « 1987( تقنيات تهجين الأوليجومر؛ طرق انزيمول؛ المجلد؛ 154( 94- 7. في نماذج معينة؛ يمكن أن تحتوي الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ على ‎Tm)‏ ؛ ‎Lash‏ يتعلق بمتوالية ‎RNAG‏ ؛ أكبر من درجة حرارة الجسم وبفضل أكثر من حوالي 45 درجة مئوية أو 50 درجة مئوية؛ يتم أيضًا تضمين 10075 في النطاق من 80-60 درجة مئوية أو أكبر» وفقا لمبادئ معروفة ‎clas‏ يمكن زيادة ‎TM‏ للأوليجومر؛ ‎Lad‏ يتعلق بهجين ‎RNA‏ على 0 اساس التتام» عن طريق زيادة نسبة ‎G‏ :0 للقواعد المزدوجة في المضاعف؛ و / أو عن ‎Gob‏ ‏زيادة طول (في أزواج القاعدة) المضاعف المتغاير؛ في نفس الوقت؛ لأغراض تحسين الامتصاص الخلوي؛ قد يكون من المفيد الحد من حجم الأوليجومر؛ لهذا السبب؛ تُفضل المركبات التي تُظهر ‎Lille Tm‏ (50-45 درجة مئوية أو أكبر) عند طول 25 قاعدة أو أقل بشكل عام عن المركبات التي تتطلب أكثر من 25 قاعدة لقيم ‎TM‏ المرتفعة.
— 4 8 — ‏تعرض الجداول 512 2 ب و 2ج متواليات مستهدفة تمثيلية (في اتجاه من ”5 إلى 37( متممة‎ ‏البشري.‎ GAA ‏القبلى لجين‎ MRNA ‏لمتواليات حمض‎ 2 ‏جدول‎ ‏جدول 2أ- متواليات مستهدفة تمثيلية‎ ) ‏متواليات خَبْن‎ ( )15( ‏متوالية مستهدفة‎ * ‏الاحداثيات متوالية بهوية رقم‎ (5-3) 13 GGC CAG AAG GAA GGC GAG GAA-
AAA AGC | IVS1.SA.(-189,- 165)-G 14 GCC AGA AGG AAG GCG AGA GAA-
AAA GCX | IVS1.SA.(-190,- 166)-G
CCA GAA GGA AGG CGA GAA GAA-
AAG CXC | IVS1.SA.(-191,- 167)-G 16 CAG AAG GAA GGC GAG AAA GAA-
AGC XCC | IVS1.SA.(-192,- 168)-G
‏جدول 12 متواليات مستهدفة تمثيلية‎ ) ‏متواليات خَبْن‎ ( (TS) ‏متوالية مستهدفة‎ * ‏الاحداثيات متوالية بهوية رقم‎ )5-3( 17 | AGA AGG AAG GCG AGA AAA GCX GAA-
CCA | IVS1.8A.(-193,- 169)-G 18 GAA GGA AGG CGA GAA AAG GAA-
CXC CAG | IVS1.5A.(-194,- 170)-G 19 | AAG GAA GGC GAG AAA AGC XCC GAA-
AGC | IVS1.8A.(-195,- 171)-G | AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA GAA-
GCA | IVS1.SA.(~196,- 172)-G 21 | CGG CXC XCA AAG CAG CXC XGA | GAA-IVS](-T6-
GA 52)-2G 22 | ACG GCX CXC AAA GCA GCX CXG | GAA-IVS1(-T75-
AG 51)-2G
— 5 0 — ‏جدول 12 متواليات مستهدفة تمثيلية‎ ) ‏متواليات خَبْن‎ ( )15( ‏متوالية مستهدفة‎ * ‏الاحداثيات متوالية بهوية رقم‎ )5-3( 23 | CAC 666 XCX CAA AGC AGC XCX | GAA-IVS1(-74-
GA 50)-2G 24 | XCA 066 CXC XCA AAG CAG CXC | GAA-IVS1(-73-
XG 49)-2G | CXC ACG GCX CXC AAA GCA GCX | GAA-IVS1(-72-
CX 48)-2G 26 | ACX CAC GGC XCX CAA AGC AGC | GAA-IVS1(-71-
XC 47)-2G 27 | GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA | GAA-IVS1(-66-
GC 42)-2G 28 GGC GGC ACX CAC GGC XCX | GAA-IVS1(-65-
CAA AG 41)-2G 29 | CGG CAC XCA 066 CXC XCA AAG | GAA-IVS1(-67-
CA 43)-2G | GCA CXC ACG GCX CXC AAA GCA | GAA-IVS](-69-
GC 45)-2G
— 5 1 — ‏جدول 12 متواليات مستهدفة تمثيلية‎ ) ‏متواليات خَبْن‎ ( (TS) ‏متوالية مستهدفة‎ * ‏الاحداثيات متوالية بهوية رقم‎ )5-3( 31 | GGC ACX CAC 660 XCX CAA AGC | GAA-IVS](-68-
AG 44)-2G 32 | CAC XCA CGG CXC XCA AAG CAG | GAA-IVS]1(-T70- 0 46(-6 33 GCC AGA AGG AAG GCG AGA GAA-
AAA GC | IVS1.SA.(-189,- 166)-G 34 CCA GAA GGA AGG CGA GAA GAA-
AAG C | IVS].SA.(~189,- 167)-G
CAG AAG GAA GGC GAG AAA GAA-
AGC | IVS1.8A.(-189,- 168)-G 36 GGC CAG AAG GAA GGC GAG GAA-
AAA AG | IVS].SA.(~188,- 165)-G
— 5 2- ‏جدول 2أ- متواليات مستهدفة تمثيلية‎ ) ‏متواليات خَبْن‎ ( )15( ‏متوالية مستهدفة‎ * ‏الاحداثيات متوالية بهوية رقم‎ )5-3( 37 GGC CAG AAG GAA GGC GAG GAA-
AAA A | IVS1.SA.(-187.- 165)-G 38 GGC CAG AAG GAA GGC GAG GAA-
AAA | IVS1.SA.(-186,~ 165)-G 39 | CGG CAC XCA 066 CXC XCA AAG | GAA-IVS1(-67-
CA 43)-2G | GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA | GAA-IVS](-66-
GC 42)-2G 41 GGC GGC ACX CAC GGC XCX | GAA-IVS1(-65-
CAA AG 41)-2G 42 XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA-
GAA GGC | IVS1.SA.(-180,- 156)-G
— 5 3 — جدول 12= متواليات مستهدفة تمثيلية ( متواليات ‎(ond‏ * متوالية مستهدفة ‎(TS)‏ ‏الاحداثيات متوالية بهوية رقم )5-37( 43 XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA-
GAA GC | IVS] SA.(-180,- 156)-2G 44 XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA-
GAA C | IVS1.SA.(-180,- 156)-3G
GGC CAG AAG GAA GCG AGA GAA-
AAA GC | IVS] SA.(-189,- 165)-2G 46 GGC CAG AAG GAA CGA GAA GAA-
AAG C | IVS] SA.(-189,- 165)-3G 47 | AGG AAG CGA GAA AAG CXC CAG GAA-
CA | IVS1.SA.(-196,- 172)-2G 48 | AGG AAC GAG AAA AGC XCC AGC GAA- ‏لم‎ IVS1.8A.(-196,- 172)-3G
— 5 4- ‏جدول 2أ- متواليات مستهدفة تمثيلية‎ ) ‏متواليات خَبْن‎ ( )15( ‏متوالية مستهدفة‎ * ‏الاحداثيات متوالية بهوية رقم‎ )5-3( 49 CGG GCX CXC AAA GCA GCX | GAA-IVS1(-76-
CXG AGA 52)-G | CGC XCX CAA AGC AGC XCX GAG | GAA-IVS1(-76-
A 52)-3G 51 | CCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA | GAA-IVS1(-76- 52)-4G 52 GGC GGC ACX CAC GGG CXC | GAA-IVS1(-65-
XCA AAG 41)-G 53 | GGC 666 ACX CAC GCX CXC AAA | GAA-IVS1(-65-
G 41)-3G 54 | GGC GGC ACX CAC CXC XCA AAG | GAA-IVS1(-65- 41)-4G
GCG GGA GGG GCG GCA CXC | GAA-IVS](-57-
ACG GGC 33)-G 56 GCG GGA GGG GCG GCA CXC | GAA-IVS](-57-
ACG GC 33)-2G
— 5 5 — جدول 12 متواليات مستهدفة تمثيلية ( متواليات خَبْن ) * متوالية مستهدفة (15) الاحداثيات متوالية بهوية رقم )5-3( ‎GCG GGA GGG GCG GCA CXC | GAA-IVS1(-57~‏ 57 ‎ACG © 33)-3G‏ ‎GCG GGA GGG GCG GCA CXC | GAA-IVS1(-57~‏ 58 ‎ACC 33)-4G‏ بالنسبة لأي من المتواليات الواردة في جدول 2أ؛ يتم اختيار كل ‎XO‏ بشكل مستقل من الثايمين ‎thymine‏ (1) أو البوراسيل ‎(U) uracil‏ ¢ تعين '©-» ”26-»,؛ ‎“3G”‏ أو ”46-“ متواليات مستهدفة متممة لمنطقة الهدف فى نطاق انترون 1 ( متوالية بهوية رقم : 137( لحمض ‎MRNA‏ القبلي لجين جلوكوسيداز ألفا البشري ‎Cua (GAA)‏ تشتمل منطقة الهدف على واحد أو اثنين أو ثلاثة أو أربعة قواعد ‎diggs‏ إضافية مقارنة مع المتوالية المستهدفة؛ ‎Cus‏ تكون تلك القواعد النووية الإضافية عبارة عن سيتوزينات؛ وحيث لا يكون للقواعد النووية الواحدة أو الاثنتين أو الثلاثة أو الأريعة الإضافية قواعد نووية متممة متناظرة في المتوالية المستهدفة ‎Allg)‏ ¢ -6 (الجوانين)» 26-» ‎=3G‏ أو 46-)؛ تكون القواعد النووية الإضافية بينية فى المنطقة الهدف؛ جدول 2ب
— 5 6 — ‏جدول 2ب- متواليات مستهدفة تمثيلية‎ ‏متوالية مستهدفة (15) متوالية‎ * ‏الاحداثيات‎ ‏بهوية رقم‎ (5-3) 59| GGC CAG AAG GAA GGG CGA GAA GAA-
AAG C | IVS1.SA.(-189,~ 165)
CCA GAA GGA AGG GCG AGA AAA GAA-
GCX C | IVS1.8A.(-191,- 167) 61 AAG GAA GGG CGA GAA AAG CXC GAA-
CAG C | IVS1.8A.(-195,~ 171) 62 | GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG | GAA-IVSI(-5T7-
GGG C 33) 63 XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GAA-
GGG C | IVS1.SA.(-180,- 156) 64 | AGA AGG AAG GGC GAG AAA AGC GAA-
XCC A | IVS1.SA.(-193,- 169) 65 GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA | GAA-IVS1(-80-
CAX C 56)
— 5 7 — ‏جدول 2ب- متواليات مستهدفة تمثيلية‎ ‏متوالية مستهدفة (15) متوالية‎ * ‏الاحداثيات‎ ‏بهوية رقم‎ )5:-3(
CXC XCA AAG CAG CXC XGA GAC | ‏-81-)51/الحمى‎ ‎AXC A 57) 67 XCX CAA AGC AGC XCX GAG ACA | GAA-IVSI(-82-
XCA A 58)
CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX | GAA-IVS1(-83-
CAA © 59)
XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC | GAA-IVSI(-84~-
AAC C 60) 70 CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA | GAA-IVS1(-85-
ACC G 61) 71 AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA | ‏-86-)51/الحخذى‎ ‎CCG C 62) 12 AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC | GAA-IVSI(-8T-
CGC G 63) 73 AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC | ‏-88-)51/الحمى‎ ‎GCG G 64) 74 GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG | GAA-IVS](-89-
CGG C 65)
— 8 5 — جدول 2ب- متواليات مستهدفة تمثيلية #* متوالية مستهدفة ‎(TS)‏ متوالية الاحداثيات )5-3( بهوية رقم ‎CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC | GAA-IVS1(-90-‏ 75 ‎GGC X 66)‏ بالنسبة لأي من المتواليات في الجدول 2 ب»؛ يتم اختيار كل ‎X‏ بشكل مستقل من الثايمين ‎thymine‏ (1) أو اليوراسيل ‎«(U) uracil‏ جدول ‎z2‏ ‏جدول 2ج- متواليات مستهدفة تمثيلية #* متوالية مستهدفة ‎(TS)‏ متوالية الاحداثيات (37-:5) بهوية رقم 76 GCC AGA AGG AAG GGC GAG GAA-
AAA AGC X | IVS1.8A.(-190,- 166) 77 CAG AAG GAA GGG CGA GAA GAA-
AAG CXC C | IVS1.8A.(-192,- 168) 78 GAA GGA AGG GCG AGA AAA GAA-
GCX CCA G | IVS1.SA.(-194,- 170)
— 5 9 — ‏جدول 2ج- متواليات مستهدفة تمثيلية‎ ‏متوالية مستهدفة (15) متوالية‎ * ‏الاحداثيات‎ ‏بهوية رقم‎ )5:-3( 79 AGG AAG GGC GAG AAA AGC GAA-
XCC AGC A | IVS1.SA.(-196,- 172)
ACX CAC GGG GCX CXC AAA GCA | GAA-IVS1(-T1-
GCX C 47) 81 | GGCXCXCAAAGCAGCXCXGAGACA | GAA-IVSI(-T79-
X 55) 82 | GGC XCX CAA AGC AGC XCX GA | GAA-IVSI(-74- 55) 83 | GAG AGG GCC AGA AGG AAG GG GAA-IVSI(- 179-160) 84 | XXX GCC AXG XXA CCC AGG CX GAA-
IVS1.2178.20 85| GCG CAC CCX CXG CCC XGG CC GAA-
IVS2.27.20
GGC CCX GGX CXG CXG GCX | GAAEX2A(+202
CCC XGC X +226)
اسم الم الاحداثيات (5-3) بهوية رقم بالنسبة لأي من المتواليات في الجدول 2 ‎or‏ يتم اختيار كل ‎X‏ بشكل مستقل من وهكذا تشتمل أوليجومرات معينة في اتجاه مضاد للنسخ على؛ تتكون؛ أو تتكون أساسا من متوالية في الجداول 2أ- 2ج أو ‎on‏ (أجزاء) متغيرة أو متجاورة أو غير متجاورة منهاء على سبيل المثال؛ تشتمل بعض الأوليجومرات في ‎slat)‏ مضاد للنسخ على حوالي أو على الأقل حوالي 6؛ 7 8؛ 9 0 11« 12 13 14« ¢15 19387016 222120 23 24 25 26 أو 27 نيوكليوتيدات مجاورة أو غير متجاورة في أي من أرقام هوية المتوالية المبينة في الجداول 2- 2ج في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13 29-27( 36-34( ¢59 و 82( ‎dually‏ للأجزاء غير المتجاورة؛ يمكن حذف النيوكليوتيدات المتداخلة» تتضمن الأمثلة الإضافية للمتغيرات الأوليجومرات التي تحتوي على حوالي أو على الأقل حوالي 9670 من هوبة المتوالية أو ‎(SLA‏ على سبيل المثال» 9670؛ ‎%7T8 77 716 15 %T4 73 12-971 0‏ 179 %80 681 9682 3 %84« %85 986 9687 9688 689 9690 9691 9692 9693 9694 5 96 % أو 9697 أو 9698 أو 9699 أو 96100 من هوبة المتوالية أو ‎(SLE‏ على كامل طول أي من أرقام هوية المتوالية الموضحة في الجداول 2أ-ج؛ في بعض النماذج؛ تشتمل أي من الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ أو المركبات؛ أو تتكون منء أو تتكون بشكل أساسي من تلك المتواليات المختلفة التي تقوم بقمع عنصر 155 و / أو عنصر ‎SESS‏ حمض ‎Lill MRNA‏ لجين ‎«GAA‏ في بعض النماذج؛ يقوم الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ أو المركب مع متوالية مستهدفة تتضمن؛ أو تتكون؛ أو تتكون بشكل أساسي من متوالية متغيرة ؛ بقمع ‎jae‏ 155 و / أو ‎SESS‏ حمض ‎MRNA‏ القبلي لجين ‎(GAA‏ في بعض النماذج؛ يقوم الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ أو المركب مع متوالية مستهدفة ‎ana‏ أو تتكون؛ أو تتكون
بشكل أساسي من متوالية متغيرة؛ بتحسين؛ أو تعزيز احتجاز اكسون 2 في حمض ‎MRNA‏ لجين ‎GAA‏ الناضج: اختياريًا؛ من خلال حوالي 9610 على الأقل أو 9615 أو 9620 أو 9625 أو 0 أو 9635 أو 9640 أو 9645 أو 9650 أو 9655 أو 9660 أو 9665 أو أكثر نسبة إلى ‎dill‏ المقارنة؛ وذلك ‎Gg‏ لأحد الأمثلة على الأقل أو الطرق الموضحة هناء في بعض النماذج؛
يقوم الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ أو المركب مع متوالية مستهدفة تتضمن؛ أو تتكون؛ أو تتكون بشكل أساسي من متوالية متغيرة؛ بتحسين أو تعزيز التعبير الوراثي لبروتين ‎GAA‏ في خلية؛ بشكل اختياري»؛ بنسبة 9610 على الأقل» 15 96 أو 9620 أو 9625 أو 9630 أو 9635 أو 0 أو 9645 أو 9650 أو 9655 أو 9660 أو 91665 أو أكثر نسبة إلى عينة مقارنة؛ ‎Wy‏ ‏لأحد الأمثلة أو الطرق الموضحة على الأقل في هذه الوثيقة؛ في بعض النماذج يزيد الأوليجومر
0 في اتجاه مضاد للنسخ أو المركب الذي يتضمنء أو يتكون؛ أو يتكون بشكل أساسي من متوالية متغيرة؛ الفعالية الأنزيمي ل ‎GAA‏ في خلية؛ بشكل ‎(lid)‏ بنسبة 9610 على ‎«JN‏ 9615؛ %20 9625 أو 9630 أو 9635 أو 9640 أو 9645 أو 9650 أو 9655 أو 9660 أو 9665 أو أكثر نسبة إلى عينة مقارنة؛ وذلك ‎Gag‏ لأحد الأمثلة أو الطرق الموضحة هنا على الأقل؛ كما هو موضح ‎(lb‏ يمكن الحصول على خلية (على سبيل المثال» أَرومَةٌ ليفيّة) من مريض لديه طفرة
‎IVS1-13T>G 5‏ في بعض النماذج؛ تتضمن أوليجومرات معينة في اتجاه مضاد للنسخ أو تتكون أو تتكون بشكل أساسي من متوالية كما هو مفصل في الجدول 2ب (أو جدول 2ج) أو ‎(shal) en‏ متغيرة أو متجاورة أو غير متجاورة منهاء على سبيل ‎(JU‏ تتضمن أوليجومرات معينة في اتجاه مضاد للنسخ حوالى أو على الأقل حوالي 6 تن 8 9< 0ل 1ل 12 13 14 15 16 1817
‏0 19« 20« 21 22؛ 23( ¢24 25؛ 26؛ أو 27 نيوكليوتيدات مجاورة أو غير متجاورة في أي من أرقام هوية المتوالية المبينة في الجدول 2ب أو 22( بالنسبة للأجزاء غير المتجاورة؛ يمكن حذف النيوكليوتيدات المتداخلة؛ تتضمن الأمثلة الإضافية لمتغيرات تتضمن الأوليجومرات التي تحتوي على حوالي أو على الأقل حوالي 9670 من هوية المتوالية أو ‎(BLE‏ على سبيل المثال؛ ‎%T5 %T4 73 172 471 0‏ 976 9.77 678 979 9680 9681
‎9693 9692 9691 9690 689 %88 9487 %86 %85 %84 %83 9482 5
4 9695 96 % أو 9697 أو 9698 أو 1699 أو 96100 من هوبة المتوالية أو التماثل؛ على كامل طول أي من أرقام هوية المتوالية الموضحة في الجداول 2ب أو 2ج؛ في بعض النماذج؛ يتضمن الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ أو المركب مع متوالية مستهدفة؛ تتضمن؛ أو تتكون؛ أو تتكون بشكل أساسي من متوالية متغيرة تقوم بقمع عنصر 155 و / أو عنصر ‎ESS‏ ‏5 في حمض ‎MRNA‏ القبلي لجين ‎«GAA‏ في بعض النماذج؛ يقوم الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ أو المركب مع متوالية مستهدفة تتضمن؛ أو تتكون؛ أو تتكون بشكل أساسي من متوالية متغيرة؛ بزيادة؛ تحسين؛ أو تعزيز احتجاز اكسون 2 في حمض ‎GAA (pal MRNA‏ الناضج؛ ‎(Glial‏ من خلال حوالي 9610 على الأقل أو 9615 أو 9620 أو 9625 أو 9630 أو 9635 أو 0 أو 9645 أو 9650 أو 9655 أو 9660 أو 1665 أو أكثر نسبة إلى العينة المقارنة؛ وذلك ‎Gy 0‏ لأحد الأمثلة على الأقل أو الطرق الموضحة هناء في بعض النماذج؛ يقوم الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ أو المركب مع متوالية مستهدفة تتضمن؛ أو تتكون؛ أو تتكون بشكل أساسي من متوالية متغيرة؛ بزيادة؛ تحسين» أو تعزيز التعبير الوراثي لبروتين ‎GAA‏ في خلية؛ بشكل اختياري؛ بنسبة 9610 على ‎(INI‏ 15 96 أو 9620 أو 9625 أو 9630 أو 9635 أو 9640 أو أو 9650 أو 9655 أو 9660 أو 9665 أو أكثر نسبة إلى عينة مقارنة؛ وفقًا لأحد الأمثلة 5 أو الطرق الموضحة على الأقل في هذه الوثيقة؛ في بعض النماذج؛ يقوم الأوليجومر في اتجاه ‎alias‏ للنسخ أو المركب الذي يتضمن؛ أو يتكون؛ أو يتكون بشكل أساسي من متوالية متغيرة؛ ‎sal‏ تحسين» أو تعزيز الفعالية الأنزيمي ‎CAAT‏ في خلية؛ بشكل ‎(glial‏ بنسبة 9610 على ‎(Jd‏ 9615© %20 9625 أو 9630 أو 9635 أو 9640 أو 9645 أو 9650 أو 9655 أو 0 أو 1665 أو أكثر نسبة إلى عينة مقارنة؛ وذلك وفقًا لأحد الأمثلة أو الطرق الموضحة هنا 0 على الأقل؛ كما هو موضح هناء يمكن الحصول على خلية (على سبيل المثال» أَرومَةٌ ليفيَّة) من مريض لديه طفرة ‎G‏ <51-131/ا. في جوانب مختلفة؛ يتم توفير أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ أو مركب؛ يتضمن متوالية مستهدفة متممة (على سبيل المثال» بنسبة على الأقل 0 1ق 82( 3ق 84 5ق 6ق 87« 88 89« 90 91 92 93 أو 94 أو 95 أو 96 أو ‎OT‏ أو 98 أو 99 أو متممة بنسبة %100( 5 لمنطقة هدف لحمض ‎AAIMRNA‏ لجين ‎GAA‏ البشري؛ بشكل اختياري حيث تكون المتواليات
المستهدفة كما هي محددة في أي من الجداول 2أ-2ج؛ في جانب آخرء يتم توفير أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ أو مركب يتضمن متوالية مستهدفة متغيرة؛ مثل أي من تلك الموصوفة هناء حيث تكون المتوالية المستهدفة المتغيرة المرتبطة بمنطقة هدف لحمض 8ل0(]41القبلي البشري متممة (على سبيل ‎(Jal)‏ بنسبة 80 96 = متممة بنسبة %100( لواحدة أو أكثر من المتواليات المستهدفة المنصوص عليها في أي من الجداول 2 أ -2 ج؛ في بعض النماذج؛ يرتبط أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ أو مركب بمتوالية مستهدفة تتضمن 10 على الأقل (على سبيل المثال؛ على الأقل 11 12 13 050014 16« 17 18 2019 2221 23 24 25 26 27( 28( 29« 30( 31( 32( 33 34« 35« 36« 37« 38« 39 أو 40( 5208 متتالية لحمض ‎MRNA‏ القبلي لجين ‎GAA‏ البشري (على سبيل المثال» بأي من أرقام هوية المتوالية: 1 0 أو 2 أو 3 أو متوالية تقطع وصلة جدل حمض ‎Lill MRNA‏ لجين ‎GAA‏ المحددة بواسطة أرقام هوية المتوالية 4/1 أو أرقام ‎Liga‏ المتوالية 5/4)؛ في بعض النماذج؛ تكون متوالية الهدف متممة (على سبيل ‎(Jl‏ على الأقل ‎duty‏ 80« 81( 2ق 83( 4ق 85« 86« 7ق 88« 89« 90 91 92 93 94 95 96 97( 98 أو 99 أو متممة بنسبة %100( لواحد أو أكثر من المتواليات المستهدفة المنصوص عليها في أي من الجداول 2 أ -2 ج. في بعض ‎all‏ ‏5 تكون متوالية الهدف متممة (على سبيل المثال؛ على ‎AVI‏ بنسبة 80« 81( 82 83 84« 85؛ 6 88 89» 90 91 92 93 94 95 96 97 98 أو 99 أو متممة بنسبة 0 + على الأقل ل 10 (على سبيل المثال. على الأقل 11 12 13 14 15 16 17 18« 19« 20؛ 21( 22( 23( 24؛ 25؛ 26« 27؛ أو 28) قاعدة متتالية لواحد أو أكثر من المتواليات المستهدفة المنصوص عليها في أي من الجداول 2 أ -2 ج؛ في بعض النماذج؛ يتم 0 تعريف متوالية الهدف من خلال موقع للتطويع (على سبيل المثال»(-189؛ -165) ‎GAA-‏ ‏1 )كما هو محدد في واحدة أو أكثر من الجداول الواردة هنا. يمكن تقييم فعالية الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ ومتغيرات منه وفقا للتقنيات الروتينية في الفن؛ على سبيل المثال؛ يمكن تقييم أشكال الجدل ومستويات التعبير الوراثي من ‎RNAS‏ ‏والبروتينات التي تم مسحها من قبل أي مجموعة واسعة من الطرق المعروفة بالكشف عن أشكال 5 الجدل و / أو التعبير الوراثي عن حمض نووي مَتْسُوخ أو بروتين؛ تتضمن الأمثلة غير الحصرية
لتلك الطرق ‎RT-PCR‏ من أشكال مجدولة من ‎RNA‏ متبوعة ‎ad‏ حجم منتجات ‎PCR‏ طرق تضخيم الحمض النووي على سبيل المثال؛ البقع الشمالية و / أو استخدام مصفوفات الحمض النووي؛ طرق تضخيم الحمض النووي؛ الطرق المناعية للكشف عن البروتينات؛ طرق تنقية البروتين؛ ووظيفة البروتين أو اختبارات الفعالية. يمكن تقييم مستويات التعبير الوراثي ‎RNA‏ من خلال تحضير ‎cDNA / MRNA‏ ( أي؛ عَدِيْدٌ
النوكليوتيد المنسوخ) من خلية أو نسيج أو كائن حي؛ وعن ‎Gob‏ تهجين ‎DNA / mRNA‏ مع ‎Bae‏ النوكليوتيد مرجعي المتمم للحمض النووي الذي تم اختباره؛ أو شُذْقَة ‎«(Kay edie‏ اختياريًا؛ تضخيم ‎CDNA‏ باستخدام أي من مجموعة متنوعة من تفاعلات البلمرة التسلسلية أو طرق النسخ المختبري قبل التهجين مع حَدِيْدُ النوكليوتيد المتمم؛ وبفضل؛ ألا تكون مضخمة؛ ويمكن أيضا
0 الكشف عن التعبير الوراثي لنسخة واحدة أو أكثر من النسخ باستخدام 504 الكمي لتقييم مستوى التعبير الوراثي عن النسخة (النسخ). كيمياء الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ الخصائص العامة تم بشكل محدّد تهجين بعض الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالكشف الفوري لعنصر كاتم
5 الصوت للجدل الإنتروني أو عنصر كاتم للجدل الاكسوني؛ تشتمل بعض الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ على متوالية مستهدفة محددة في الجداول 2أ- 2ج؛ وهي تمثل شدفة من 10 نيكليوتيدات متجاورة على الأقل من متوالية مستهدفة في الجداول 2أ- 2ج أو متغير له هوية متوالية تمثل 80 96 على الأقل من المتوالية المستهدفة في الجداول 2أ- 2ج؛ تتكون بعض الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ أو تتكون أساسا من متوالية مستهدفة منصوص عليها في
0 الجداول 2أ- 2ج؛ في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر مقاوم ‎oligomer is SLE‏ ‎nuclease-resistant‏ . في نماذج معينة؛ يشتمل الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على الاساس الكيميائي غير الطبيعي الذي تم اختياره من الأوليجومر مورفولينو فوسفورأميدات أو الفوسفوريوديداتيت ‎ phosphorodiamidate morpholino oligomer‏ (1/0)؛ وهو حمض نووي من الببتيد
‎(PNA) peptide nucleic acid‏ حمض نووي مقفل ‎locked nucleic acid‏ (ظلا)؛ و أوليجومر فوسفوروثيوات ‎phosphorothioate oligomer‏ « أوليجومر ثلاثي سيكلو- ‎ctricyclo-DNA oligomer DNA‏ أوليجومر ثلاثي سيكلو - فوسفوروثيوات-110/610 ‎phosphorothioate oligomer‏ » 2' أورثو ‎Me—‏ - أوليجومر معدل ‎2’0-Me-modified‏ ‎oligomer 5‏ ¢ أو أي توليفة من ما سبق؛ ومتوالية مستهدفة متممة لمنطقة داخل انترون 1( متوالية بهوية رقم :1) ‎La]‏ في ذلك الأجزاء المحددة بواسطة متوالية بهوية رقم :2 و متوالية بهوية رقم :]» انترون2 ( متوالية بهوية رقم :5)؛ او اكسون 2 ( متوالية بهوية رقم :4) الحمض ‎MRNA‏ ‏القبلي لجين ألفا - جلوكوسيداز الحمضي البشري ‎human acid alpha-glucosidase‏ ‎(GAA)‏ على سبيل المثال» في بعض النماذج, يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المتواليات 0 الموضحة في الجداول 2أ- 2ج؛ حيث يتم اختيار ‎X‏ من اليوراسيل ‎uracil‏ (لا) أو الثايمين ‎thymine‏ (1)؛ علاوة على ذلك؛ ‎Jeg‏ سبيل المثال؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المتواليات الموضحة في الجداول 2أ- 2ج؛ في بعض النماذج؛ يحتوي ‎CLE‏ التُوكليوتيد الموصوف هنا على متوالية مستهدفة موضحة في الجداول 24-14 تتضمن الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالكشف بشكل عام مجموعة متعددة من الوحدات الفرعية التُوكْليُوتيدية تحمل كل منها قاعدة نووية تتخذ معا شكلًا أو تشتمل على متوالية مستهدفة؛ على سبيل المثال؛ كما تمت مناقشته أعلاه؛ وفقًا لذلك» في بعض ‎ez Sail)‏ تتراوح الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ في الطول بين حوالي 10 إلى حوالي 40 وحدة فرعية؛ وبفضل أكثر من 0 إلى 30 وحدة فرعية؛ وعادة ما تكون 25-15 وحدة فرعية؛ على سبيل المثال؛ قد تكون المركبات في اتجاه مضاد للنسخ بالكشف هي 10 11 12 13 14 15 16 18017 0 19« 20 21 22 23 24 25 26» 27؛ 28« 29 30 أو 31 أو 32 أو 33 أو 34 أو 5 أو 36 أو 37 أو 38 أو 39 أو 40 وحدة فرعية في الطول أو تتراوح من 10 وحدات فرعية إلى 40 وحدة فرعية و 10 وحدات فرعية إلى 30 وحدة فرعية و 14 وحدة فرعية إلى 25 وحدة فرعية و 15 وحدة فرعية إلى 30 وحدة فرعية و 17 وحدة فرعية إلى 30 وحدة فرعية و 17 وحدة فرعية إلى 27 وحدة فرعية و 10 وحدات فرعية إلى 27 وحدة فرعية و 10 وحدات فرعية إلى 25 5 وحدة فرعية و 10 وحدات فرعية إلى 20 وحدة فرعية؛ في نماذج معينة؛ يقارب الأوليجومر في
اتجاه مضاد للنسخ حوالي 10 إلى حوالي 40 أو حوالي 5 إلى حوالي 30 نيوكليوتيدات في الطول؛ في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ حوالي 14 إلى حوالي 25 أو حوالي 17 إلى حوالي 27 نيوكليوتيدات في الطول. في نماذج مختلفة؛ قد يشتمل الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على مجموعة رئيسية معدلة ‎cla 5‏ على سبيل المثال؛ يتم تعديل مقدار 96100 من المجموعة الرئيسية ‎Ae)‏ سبيل المثال؛
يشتمل الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ 25 ‎Mer‏ على مجموعته الرئيسية الكاملة المعدلة مع أي توليفة من التعديلات الأساسية كما هو موصوف هنا)؛ في نماذج مختلفة؛ قد يشتمل الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على حوالي 96100 إلى 962.5 من مجموحته الرئيسية المعدلة؛ في نماذج مختلفة؛ قد يشتمل الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على حوالي 9699 و
10 95 و 90 و 9685 و %80 و 075و 9070و 65 و 60و 17655و %50 و و 9640 و 35 96 أو 9630 أو 9625 أو 9620 أو 9615 أو %10 أو 965 أو 962.5 من مجموعته الرئيسية المعدلة به وتكرارات بينهماء في نماذج ‎al‏ قد يشتمل الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على أي توليفة من التعديلات الأساسية كما هو موصوف هنا. في نماذج مختلفة؛ قد يتضمن الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ؛ يتكون أو يتكون أساسا من
5 الأوليجومرات مورفولينو فوسفورأميدات و الأوليجومرات مورفولينو الفوسفوريوديداتيت ‎«(PMO) phosphorodiamidate morpholino oligomer‏ الأوليجومرات المعدلة من فوسفورًميدات؛ 2' أورثو - ميثيل الأوليجومرات ‎Daal)‏ ¢ حمض نووي من الببتيد ‎peptide‏
‎«(PNA) nucleic acid‏ حمض نووي مقفل ‎«(LNA) locked nucleic acid‏ الأوليجومرات
‏فوسفوروثيوات ‎phosphorothioate oligomer‏ « 2' أورثو - ‎MOE‏ -الأوليجومرات المعدلة
‎2°O-Me-modified oligomer 0‏ « 2' — فلورو - أوليجومر معدل» 2' أورثو + 4' 6- أحماض نووية موصلة -بالإيثيلين ‎—fluoro-modified oligomer, 2'0,4'C-ethylene—‏ ’2 ‎((ENAs) bridged nucleic acids‏ ثلاثي سيكلو - ‎(DNAS‏ ثلاثي سيكلو - نيوكليوتيدات فوسفوروتيوات ‎tricyclo—DNAs, tricyclo—-DNA phosphorothioate nucleotides DNA‏ ‎٠+‏ 2" -أورثو - [2-( ‎=N‏ ميثيل كاربامويل) ايثيل ] الأوليجومرات المعدلة -1)-2]-2-0
‎methylcarbamoyl)ethyl] modified oligomers 25‏ » الأوليجومرات مورفولينو
‎morpholino oligomers‏ » الأوليجومرات مورفولينو فوسفورأميدات المترافقة - بالببتيد ‎«peptide-conjugated phosphoramidate morpholino oligomers (PPMO)‏ الأوليجومرات مورفولينو فوسفورأاميدات ‎phosphorodiamidate morpholino oligomers‏ لها ذرة فُوسْفُور ‎phosphorous atom‏ مع ‎(i)‏ روابط تساهمية بذرة النيتروجين ‎nitrogen atom‏ بحلقة مورفولينو ‎morpholino ring‏ و ‎(ii)‏ رابطة تساهمية ثانية ب(1.4- ببرازين)-1- بديل إيل ‎(1,4-piperazin)-1-yl substituent‏ أو مستبدلة ‎1¢d)‏ - ببرازين )- 1- إيل -1,4) ‎((PMOplus) piperazin)-1-yl (PMOplus)‏ و الأوليجومرات مورفولينو فوسفورأميدات ‎phosphorodiamidate morpholino oligomers‏ التي تتضمن ذرة فوسفوربة ‎phosphorus atom‏ مع ‎(i)‏ رابطة تساهمية لذرة النيتروجين ‎nitrogen atom‏ في حلقة 0 مورفولينو ‎morpholino ring‏ و ‎(if)‏ رابطة تساهمية ثانية بالنيتروجين الحلقي ‎ring nitrogen‏ ل 4- امينو بيبيردين- 1- إيل ‎4-aminopiperdin—1-yl‏ ( أي» ‎(APN‏ أو مشتق من الكيمياء 4 - امينو بيبيردين- 1- ‎4-aminopiperdin—1-yl dil‏ (01/0-76)؛ بما في ذلك توليفات من أي مما سبق. في بعض النماذج؛ تكون المجموعة الرئيسية للأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ إلى حد كبير غير 5 مشحونة؛ ويتم التعرف عليها اختيارياً كركيزة للنقل النشط أو الميسر عبر غشاء الخلية؛ في بعض النماذج؛ تكون كل روابط النوكليوزيد البينية غير مشحونة؛ إن قدرة الأوليجومر لتشكيل مضاعف مستقر مع ‎RNA‏ الهدف قد تتصل أيضا بالسمات الأخرى للمجموعة الرئيسية؛ ‎Lay‏ في ذلك طول ودرجة تتام الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ فيما يتعلق بالهدف؛ تتطابق نسبة © :6 إلى قاعدة ‎TA‏ و أي مواضع لأي قواعد غير متطابقة؛ إن قدرة الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على 0 مقاومة النيوكليازيس الخلوية قد تعزز البقاء على قيد الحياة والتوصيل النهائي للعامل إلى سيتويلازم الخلية؛ يرد في الجداول 2 أ و 2 ب و 2 ج متواليات مستهدفة مثلي للأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ. في نماذج معينة؛ يتضمن الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ رابط نوكُليوزيد داخلي واحد على ‎JY)‏ مشحون إيجابياً أو كاتيوني عند الرقم الهيدروجيني الفسيولوجي؛ في بعض النماذج؛ يتضمن 5 الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ رابط وكُليوزيد داخلي واحد على الأقل يظهر ‎pKa‏ بين حوالي
وحوالي 12؛ في نماذج إضافية؛ يحتوي الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ حوالي»؛ على الأقل حوالي؛ أو لا أكثر من حوالي 1؛ 2؛ 3؛ ‎ed‏ أو 5؛ أو 6 أو ‎١7‏ أو 8؛ أو 9؛ أو 10 روابط نوكليوزيد بينية تظهر ‎PKA‏ بين حوالي 4:5 وحوالي 12؛ في بعض النماذج؛ يحتوي الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على حوالي أو على الأقل حوالي 9610 9615 9620؛
5 309725 3 35 فك 40 % 45 فك 50 % 55 % 60 وك 65 فك 70 فك 75 % 0 % 85 % 90 96 95 96 أو 100 % من روابط 10950865 بينية تظهر 0148 بين حوالي 5 وحوالي 12؛ بشكل اختياري؛ يحتوي الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على رابط نُوكليوزيد داخلي واحد على الأقل مع كل من نيتروجين قاعدي ومجموعة ألكيل؛ ارييل؛ أو أر الكيل» في نماذج معينة؛ يشتمل رابط أو روابط الثوكُليوزيد البينية الكاتيونية على مجموعة 4- امينو بيبيردين-
0 1- إيل ‎(APN)‏ أو مشتقة منهاء على الرغم من عدم التقييد بأي نظرية؛ إلا أنه يعتقد أن وجود رابط أو روابط كاتيونية (على سبيل المثال» مجموعة ‎APN‏ أو مشتق ‎(APN‏ في الأوليجومر يسهل ارتباطه بالفوسفات سالب الشحنة في نوكليوزيد الهدف؛ وهكذاء فإن تشكيل المضاعف المتطاير بين818 الطافر و الأوليجومر المحتوي على رابطة كاتيونية يمكن حجزه من خلال كل من قوة جذب أيونية وازدواج قاعدة واطسون-كريك ‎Watson—-Crick base pairing‏ .
5 في بعض النماذج؛ يكون عدد الروابط الكاتيونية 2 على الأقل ولا يزيد عن حوالي نصف مجموع روابط الثوكُليوزيد البينية ‎linkages‏ 101601001605106 ؛ على سبيل المثال؛ حوالي أو أكثر من حوالي 21 3؛ 4 5؛ 6 7 8 5109 11و 512 513 514 515 516 17و 8و 19 و 20 من الروابط الكاتيونية؛ في بعض النماذج؛ غير ‎ci)‏ تصل جميع روابط الوكُليوزيد البينية إلى روابط كاتيونية. على سبيل المثال؛ حوالي أو على الأقل حوالي 1؛ 2؛ 3
‎T 6S 4 0‏ 8 9 ¢10 1211 13 514 15و 16و 517 518 519 520 21و 522 523 5324 525 526 527 528 529 330 531 532 533 34و 935 536 537 38 39 أو 40 من مجموع روابط الثوكليوزيد البينية هي روابط كاتيونية ‎cationic‏
‎dlinkages‏ في نماذج محددة؛ قد يتضمن أوليجومر مكون من حوالي 20-19 وحدة فرعية عدد من 10-2( على سبيل المثال» 8-4 روابط كاتيونية؛ والباقي عبارة عن روابط غير مشحونة؛ في
‏5 نماذج محددة ‎(gyal‏ قد يحتوي أوليجومر من 15-14 ‎sang‏ فرعية على 7-2 على سبيل ‎JE‏
2 5 6؛ أو 7 روابط كاتيونية والباقي عبارة عن روابط غير مشحونة؛ يمكن أن يختلف العدد الإجمالي للروابط الكاتيونية في الأوليجومر من حوالي 1 إلى 10 إلى 15 إلى 20 إلى 30 أو أكثر (بما في ذلك كل الأعداد الصحيحة بينهما)؛ ويمكن أن تتخلل عبر الأوليجومر. في بعض النماذج؛ قد يتضمن الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ حوالي او يصل إلى حوالي ارتباط كاتيوي واحد لكل 5-2 أو 2؛ 3؛ 4؛ أو 5 روابط غير مشحونة؛ ‎Jie‏ حوالي 5-4 أو 4 أو
5 لكل 10 روابط غير مشحونة. تتضمن نماذج معينة للأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ حوالي 9610 9615 9620 9625 35ت %40 %45 %50 %55 %60 %65 9470 ‎«%T5‏ %80 9685 0 9695؛ أو 96100 روابط كاتيونية؛ في نماذج معينة؛ يمكن ملاحظة التحسن الأمثل في
0 فعالية باتجاه مضاد للنسخ إذا كان حوالي 9625 من الروابط الأساسية ‎Ble‏ عن روابط كاتيونية؛ في نماذج معينة؛ يمكن رؤية التحسين برقم صغير على سبيل المثال؛ روابط كاتيونية 90620-10؛ أو حيث يكون عدد الروابط الكاتيونية في النطاق من 9680-50؛ مثل حوالي 91660. في بعض النماذج؛ تتخلل الروابط الكاتيونية باتجاه المجموعة الرئيسية؛ تحتوي تلك الأوليجومرات بشكل اختياري على رابطين متتاليين غير مشحونتين على الأقل؛ أي؛ لا يتضمن الأوليجومر
5 اختيارياً نمط متناوب بشكل صارم بمحاذاة طوله الكامل» في حالات محددة؛ يتم فصل كل رابطة (روابط) أو رابطين كاتيونيتين بمحاذاة المجموعة الرئيسية بواسطة على الأقل 1 أو 2 أو 3 أو 4 أو 5 روابط غير مشحونة. يتم أيضا تضمين الأوليجومرات التي لها كتل من الروابط الكاتيونية وكتل من الروابط غير المشحونة؛ على سبيل المثال» قد يتم وضع ‎AS‏ مركزية من الروابط غير المشحونة بواسطة كتل
0 .من الروابط الكاتيونية؛ أو العكس بالعكس؛ في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر بطول مساوي تقريبًا ل 3 و 3 وله مناطق مركزية؛ وتكون النسب المئوية للروابط الكاتيونية في منطقة المركز أكبر من حوالي 9650 أو 9660 أو 9670 أو 9680 من العدد الإجمالي للروابط الكاتيونية؛ في بعض الأوليجومرات باتجاه مضاد للنسخ؛ يتم توزيع الكتلة الحجمية للروابط الكاتيونية (على سبيل المثال» 70 ‎«HTS‏ 9680 9690 من الروابط الكاتيونية) على مقرية من الروابط الأساسية
"بمنطقة - المركز”؛ على سبيل المثال» 6 أو 7 أو 8 أو 9 أو 10 أو 11 أو 12 أو 13 أو 14 أو 15 رابطة مركزية؛ على سبيل المثال؛ قد يتضمن أوليجومر مع 16 أو 17 أو 18 أو 19 أو 0 أو 21 أو 22 أو 23 أو ‎mer24‏ 9650 9660 9670؛ أو 9680 على الأقل من ‎Saal‏ ‏الروابط الكاتيونية المُوَضَّعَة بالروابط المركزية 8 أو 9 أو 10 أو 11 أو 12. سمات كيمياء المجموعة الأساسية يمكن للأوليجومرات باتجاه مضاد للنسخ ان تستخدم مجموعة متنوعة من الكيمياء باتجاه مضاد ‎cal‏ تتضمن أمثلة كيمياء الأوليجومر؛ على سبيل المثال لا الحصر» الأوليجومرات مورفولينو فوسفورأميدات و الأوليجومرات مورفولينو الفوسفوريوديداتيت ‎(PMO)‏ الأوليجومرات المعدلة من فوسفورأميدات؛ 2' أورثو - ميثيل الأوليجومرات ‎clonal)‏ حمض نووي من الببتيد ‎(PNA)‏ حمض 0 نووي مقفل ‎(LNA)‏ الأوليجومرات فوسفوروثيوات» 2' أورثو - ‎MOE‏ -الأوليجومرات المعدلة؛ 2' - فلورو - أوليجومر معدل» 2' أورثو ؛ 4' ©- أحماض نووية موصلة -بالإيثيلين -4'0 ‎((ENAs) ethylene-bridged nucleic acids‏ ثلاثني سيكلو- ‎(DNAs‏ ثلاثي سيكلو- نيوكليوتيدات فوسفوروثيوات ‎(DNA‏ 2' -أورثو - [2-( ‎=N‏ ميثيل كاربامويل) ايثيل [ الأوليجومرات المعدلة ‎2'-0-[2-(N-methylcarbamoyl)ethyl] modified oligomers‏ 5 + الأوليجومرات مورفولينو» الأوليجومرات مورفولينو فوسفورأميدات المترافقة - بالببتيد ‎peptide‏ ‎«(PPMO) conjugated phosphoramidate morpholino oligomers‏ الأوليجومرات مورفولينو فوسفورًميدات لها ذرة فُوسْفُور مع )1( روابط تساهمية بذرة النيتروجين بحلقة مورفولينو و ‎(ii)‏ رابطة تساهمية ثانية ب(1.4- ببرازين)-1- بديل إيل الا-1-(1,4-010618207) 1 أو مستبدلة (164 - ببرازين )- 1- ‎(1,4-piperazin)-1- (PMOplus) Ji}‏ ‎yl (PMOplus) 0‏ و الأوليجومرات مورفولينو فوسفورأميدات التي تتضمن ذرة فوسفورية مع (أ) رابطة تساهمية لذرة النيتروجين في حلقة مورفولينو و ‎(i)‏ رابطة تساهمية ثانية بالنيتروجين الحلقي ل 4- امينو بيبيردين- 1- إيل ‎4-aminopiperdin—1-yl‏ ( أي» ‎(APN‏ أو مشتق من الكيمياء 4 - امينو بيبيردين- 1- إيل ‎((PMO=X)‏ بما في ذلك توليفات من أي مما سبق؛ بشكل ‎ale‏ يمكن أن تستخدم كيمياء ‎PNA‏ و ‎LNA‏ متواليات مستهدفة استهداف أقصر بسبب قوة ارتباط 5 الهدف العالية ‎Lows‏ بالنسبة إلى 01/0 و 2' أورثو-1/16 -الأوليجومرات المعدلة؛ يمكن الجمع
بين فوسفوروثيوات و 2' أورثو- ‎Me‏ -للكيمياء المعدلة لإنشاء2' أورثتو - ‎Me‏ -المجموعة الأساسية من الفوسفوروثيوات؛ ‎lil‏ على سبيل ‎(Jal)‏ منشور معاهدة التعاون في شؤون براءات الاختراع للطلب الدولي رقم / 112053/2013 والطلب الدولي رقم / 008725/2009؛ واللذين تم استخدامهما في هذه الوثيقة كمرجع في مجملهما. في بعض الحالات؛ يمكن أن تكون الأوليجومرات باتجاه مضاد للنسخ ‎(fie‏ 01/05 مترافقة مع
ببتيدات تخترق الخلية ‎(CPPs) conjugated to cell penetrating peptides‏ لتسهيل التوصيل داخل الخلاياء تسمى ‎PMOs‏ المترافقة بالببتيد 01/105 وتتضمن بعض النماذج تلك الموصوفة في منشور معاهدة التعاون في شؤون براءات الاختراع للطلب الدولي رقم / 2012/ 0 960« والتي تم استخدامها في هذه الوثيقة كمرجع في مجملهاء في بعض النماذج؛ يمكن
0 استخدام متوالية ببتيد غنية بأرجينين مترافقة أو مرتبطة؛ على سبيل ‎(Jad)‏ بنهاية طرفية 3 'لأوليجومر باتجاه مضاد للنسخ كما هو موصوف هناء في نماذج معينة؛ يمكن استخدام متوالية ببتيد غنية بأرجينين مترافقة أو مرتبطة؛ على سبيل المثال؛ بنهاية طرفية 5 ' لأوليجومر باتجاه مضاد للنسخ كما هو موصوف هنا. أحماض نووية من الببتيد ‎(PNAs) Peptide Nucleic Acids‏
5 الأحماض النووية الببتيدية ‎(PNAS)‏ هي نظائر للحمض النووي ‎Cus DNA‏ تكون المجموعة الأساسية متماثلة الهيئة بنائياً باستخدام مجموعة أساسية من ديوكسي ‎«deoxyribose jeu;‏ تتكون من وحداتلا = (2- أمينو إيثيل) جليسين ‎N—(2-aminoethyl) glycine units‏ التي ترتبط بها قواعد البيريميدين ‎pyrimidine‏ أو البيورين 000106 ؛ تحتوي ‎PNAS‏ على قواعد البيورين والبيريميدين الطبيعي التي تهجن الأوليجومرات المتممة التي تتبع قواعد ازدِواج قاعدة
0 واطسون-كريك» وتحاكي الحمض النووي ‎Lad‏ يتعلق بالتعرف على الزوج القاعدي (إيجيلهوم؛ بوشاردت واخرون 1993)؛ يتم تشكيل المجموعة الأساسية ل ‎PNAS‏ بواسطة روابط الببتيد بدلا من روابط فسفودايستر» مما يجعلها مناسبة بشكل جيد لتطبيقات باتجاه مضاد للنسخ (انظر البنية أدناه)» تكون المجموعة الأساسية غير مشحونة؛ مما ينتج عنها مضاعفات ‎PNA / PNA/DNA‏ أو ‎PNA / RNA‏ تعرض استقرار حراري أعلى من الطبيعي؛ لا يتم التعرف على ‎PNAS‏ بواسطة
5 تيوكليازيس أو إنزيمات ‎«lig ll‏ يتم ادناه توضيح مثال غير حصري على ‎PNA‏ :
— 2 7 — ‎“ut 8‏ ب ‎be‏ ‎od‏ ‎JEN 8‏ ‎LJ‏ سبع ا ٍ " ‎be 3 RY .‏ ‎i,‏ ‎gud ©‏ ‎FRA‏ ‏على الرغم من التغيير البنيوي الجذري في البنية الطبيعية؛ فإن ال ‎PNAS‏ قادرة على ربط متوالية محددة فى شكل حلزونى 2 ‎DNA‏ أو ‎RNA‏ ¢ وتتضمن خصائقص ‎al PNAs‏ ارتباط ‎lle‏ 2
غلاطاو ‎RNA‏ المتمم؛ وهو تأثير غير مساعد على التثبيت يسببه عدم تطابق لقاعدة واحدة؛ مقاومة للنيوكليازيس وانزيمات ‎dang «lig ll‏ التهجين باستخدام ‎DNA‏ أو ‎Naive RNA‏ عن تركيز الملح والتكوين الثلاثي باستخدام ‎DNA‏ متجانس البورين» قامت ‎PANAGENE‏ ™ بتطوير مونومرات ‎BTS PNA‏ الخاصة بها (815؛ مجموعة بنزوثيازول -2- سلفونيل
‎benzothiazole—2-sulfonyl‏ وعملية قلة القسيمات المتماثلة مسجلة الملكية؛ تتكون قلة 0 القسيمات المتماثلة ل ‎PNA‏ باستخدام مونومرات ‎BTS PNA‏ من دورات متكررة من نزع مجموعة الحماية؛ والاقتران والتغطية»؛ يمكن إنتاج ال ‎Lelia PNAS‏ باستخدام أي تقنية معروفة في الفن» انظرء على سبيل المثال؛ براءات الاختراع الامريكية رقم 6:969.766 7:211:668« 1 7125994 7145006 5 ¢7¢179¢896 انظر أيضًا براءات الاختراع الامريكية رقم ¢5¢539:082 5714331 و 5719262 الخاصة بتحضير ‎(PNAS‏ يمكن 5 الاطلاع على مزيد من التعاليم بشان مركبات ‎PNA‏ في نيلسن واخرون» علم» 254: 1497- ¢1500 1991. تم استخدام كل ما سبق ذكره في هذه الوتيقة كمرجع في مجملها. الأحماض النووية المقفلة ‎(LNAs) Locked Nucleic Acids‏ قد تحتوي مركبات الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ ‎Lia‏ على وحدات فرعية 'للحمض النووي المقفل ‎(LNAs) Locked Nucleic Acids‏ ". تعد " فطلا " عبارة عن عضو بفئة من
— 3 7 — التعديلات التى تسمى بالحمض النووي الموصل ‎(BNA) bridged nucleic acid‏ يتميز ‎(BNA‏ خلال ارتباط تساهمي يقفل تشكيل حلقة الريبوز في ‎C30‏ - إندو لغضن من السكر (نورثرن) ‎٠‏ بالنسبة ‎LNA J‏ ¢ تتكون الوصلة | أمنطر 4 من بت ميثيلين بين المواضع 2 أورثو و4 = ‎and the 4°-C positions .C‏ 27-0 يعزز ‎LNA‏ التنظيم المسبق للمجموعة الاساسية وتكديس قاعدي لزيادة التهجين والاستقرار الحراري ‎thermal stability‏ . يمكن العثور على بنى ل ‎LNAs‏ » على سبيل المثال ؛ فى ونجيل»؛ وآخرون ‎٠‏ الاتصالات الكيميائية )1998( 455؛ رباعي السطوح )1998( 4 3607 وحسابات الكيمياء . أبحاث (1999) 32: ‎Kul ¢(301‏ وآخرون؛ خطابات رياعي السطوح )1997( 38: ¢8735 )1998( 39: 5401 و الكيمياء الطبية البيولوجية )2008( 16: 9230« والتي تم استخدامها هنا كمرجع في مجملها. 0 1 وبوضح أدناه مثال غير حصري على ملا ا: سل ماين 1“ ‎pees ’‏ يله ب ‎Sey‏ ‎LNA‏ ‏قد تشتمل مركبات الكشف على واحد أو أكثر من ‎LNAS‏ فى بعض الحالات؛ قد تتكون المركبات بالكامل من ‎LNAS‏ . يتم وصف طرق لتخليق الوحدات الفرعية الفردية لنوكليوزيد ‎LNA‏ ودمجها في الأوليجومرات؛ على سبيل المثال» في براءات الاختراع الامريكية بأرقام: 76572582 و
5 57569575 7084:125و 7060.609 و 7053»207و 7034133 و 9 و 6:670:461؛ ولقد تم استخدام كل منها في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. تتضمن الروابط النمطية للوحدة الفرعية البينية أنصاف من فسفودايستر والفوسفوروثيوات؛ بدلا من ذلك؛ قد يتم استخدام الروابط التي لا تحتوي على الفوسفور. تشتمل النماذج الإضافية على مركب يحتوي على ‎LNA‏ حيث يتم فصل كل وحدة فرعية 8لا اعن طريق وحدة فرعية من الحمض
— 4 7 — ‎DNA gos)‏ . تتكون مركبات معينة من وحدات فرعية ‎LNA‏ و ‎DNA‏ متناوية حيث يكون رابط الوحدة الفرعية البينية مكون من الفوسفوروثيوات. تكون 2' أورثو ؛ 4' ©- أحماض نووية موصلة -بالإيثيلين ‎2'0,4'C~ethylene-bridged‏ ‎(ENAS) nucleic acids‏ عبارة عن عضو آخر من الفئة 5/ل81. ويوضح أدناه مثال غير حصري . : ‎a.‏ ‏ا 3 المح اه أ ها ‎a‏ إ الل عت : ‎ENA‏ ‏تم وصف ‎ENA sal)‏ وتحضيرتها في أوبيكا وآخرون» :)50( 38 ‎Tetrahedron Ltt‏ 5 ولقد تم استخدامها في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. قد تشتمل مركبات الكشف على وحدة فرعية واحدة أو أكثر من الوحدات الفرعية ‎ENA‏ 0 فوسفوروثيوات ‎Phosphorothioates‏ ‏تمثتل " فوسفوروثيوات " (أو 5-وحدات الأوليجو) ‎Phosphorothioates” (or S—oligos)‏ متغير للحمض النووي العادي الذي يتم فيه استبدال أحد ذرات الأكسجين غير الموصلة بواسطة الكبريت . ويوضح أدناه مثال غير حصري للفوسفوروثيوات :
BASE var 58 0 0 BASE 5 — 0 ِ | ‏نم‎ 0- ( ‏عرب‎ 5 تخفض المعالجة بالكبريت ‎sulfurization‏ لرابطة النوكليوتيد البينية عمل النوكلياز الداخلى والخارجي ‎Le endo-and exonucleases‏ في ذلك 5 "إلى 3 و 3 "إلى 5' نوكلياز خارجي ‎«(DNA POL 1‏ نوكلياز ‎(RNases (P1581‏ نوكليازات المصل و فسفو دايستراز
‎phosphodiesterase‏ من زعاف الحية. تصنع الفوسفوروثات ‎Phosphorothioates‏ من طريقين رئيسيين: من خلال عمل محلول من كبربت عنصري في ثاني كبربتيد الكربون ‎carbon‏ ‎Ae disulfide‏ فوسفونات الهيدروجين ‎hydrogen phosphonate‏ « أو بطريقة معالجة فوسفات ثلاثى الأيستر بالكبريت مع رباعي إثيل ثيورام ثنائي السلفيد ‎tetraethylthiuram‏
‎(TETD) disulfide 5‏ أو 3 ‎(1-H‏ 2- بينسو دي ثيول-3- واحد 1 1 - ثنائي أكسيد ‎3H-1,‏ ‎(BDTD) 2-bensodithiol-3-one 1, 1-0006‏ (انظر على سبيل المثال» ‎lyer et‏ ‎«J.
Org.
Chem. 55 al.‏ 4693-4699« 1990(« والتي تم استخدامها هنا كمرجع في مجملها). تتجنب الطرق الأخيرة مشكلة عدم قابلية الكبريت العنصري للذويان في معظم المذيبات العضوية وسمية ثاني كبريتيد الكريون. تنتج طرق ‎TETD‏ و ‎BDTD‏ أيضا فوسفوروثيوات عالية
‏0 النقاوة. ثلاثي سيكلو -100085 ونيوكليوتيدات ثلاثي سيكلو الفوسفوروثيوات تعتبر ثلاثي ‎(tC-DNA) DNAS— 5s‏ فئة من نظائر الحمض النووي المقيدة التي يتم فيها تعديل كل نوكليوتيد عن طريق إدخال حلقة سيكلوبرويان 0201001008106 _لتقييد المرونة الإمتثالية للمجموعة الاساسية ولتحسين الشكل الهندسي للمجموعة الاساسية لزاوية الالتواء 7.
‏5 يشكل أدينين متجانس القاعدة و الثيمين - المحتوي على 16-0185 أزواج قاعدة 1-ظ مستقرة بشكل غير عادي مع ‎RNAS‏ المتممة. يرد وصف ثلاثي سيكلو ‎DNAS—‏ وطرق تخليقها في منشور الطلب الدولي لبراءة الاختراع الدولية رقم 2010[ 115993 الذي تم استخدامه هنا في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. قد تشتمل مركبات الكشف على واحدة أو أكثر من نيوكليوتيدات ثلاثي سيكلو الحمض النووي؛ في بعض الحالات؛ قد تتكون المركبات بالكامل من نيوكليوتيدات
‏0 ثلاثي سيكلو الحمض النووي. تعد نيوكليوتيدات ‎DIE‏ سيكلو الفوسفوروثيوات عبارة عن نوكليوتيدات ثلاثي سيكلو الحمض النووي مع روابط لوحدة بينية فرعية من الفوسفوروثيوات. تم وصف النيوكليوتيدات ثلاثي سيكلو الفوسفوروثيوات وتوليفها في منشور الطلب الدولي لبراءة الاختراع 053928/2013؛ والذي تم استخدامه هنا في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. قد تشتمل مركبات الكشف على واحد أو أكثر
‏5 -_من النيوكليوتيدات ثلاثي سيكلو الحمض النووي؛ في بعض الحالات؛ قد تتكون المركبات بالكامل
— 6 7 — من نيوكليوتيدات من النوع ثلاثي سيكلو الحمض النووي. تم وصف مثال غير حصري لنيوكليوتيدات ‎DU‏ سيكلو الحمض النووي/ ثلاثي سيكلو أدناه: ‎O=P-0-‏ ‏ب 9 ‎oi J me 0‏ مووقصر | * كر ات > ‎tricyclo-DINA‏ ‏أوليجومرات 2 أورثو- ميثيل 4 2 أورثو- ‎MOE‏ و 2 ‎F—‏ تحمل جزيئات " 2' أورثو- ‎Me‏ أوليجومر" مجموعة ميثيل عند بقايا 011-2 لجزيء ‎sel‏ ‏تظهر 2' أورثو- ‎ain RNAs— Me‏ السلوك (أو ما شابه) ‎Jie‏ الحمض النووي؛ ولكنها محمية ضد تدهور وكُلياز. يمكن أيضًا دمج 2' أورثو- ‎RNAS— Me‏ مع أوليجومرات الفوسفوروثيوات
Me ‏لمزيد من التثبيت. يمكن تخليق2' أورتو-‎ (PTOs) phosphothioate oligomers ‏أوليجومرات (فسفودايستر أو فوسفوروثيوات) وفقًا للتقنيات الروتينية في الفن (انظر على سبيل‎ ‏والذي تم استخدامه‎ «2004 (Nucleic Acids Res. 32: 2008-16 «Yoo et al. ‏المثال‎ 0
Me ‏هنا في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها). يوضح المثال أدناه مثال غير حصري ل 2" أورثو-‎ ‏أوليجومر:‎ ‏ب‎ ‎A A 2
Vy ‏"م‎ ‎oe 0 ‏ب - سل‎ ‏م‎ ‎Me ‏فوسفوروثيوات (2' أورثو-‎ daly ‏أوليجومرات أيضا‎ Me = ‏يمكن أن يتضمن 2' أورثو‎ 5 ‏مثل‎ «(MOE ‏أوليجومرات فوسفوروثيوات).؛ 2'- أورثو = أوليجومرات ميثوكسي ايثيل )2'— أورثو‎
— 7 7 — 2' أورثو — ‎Me‏ أوليجومرات» تحمل مجموعة ميثوكسي ايثيل عند بقايا ‎OH="2‏ لجزيء الريبوز. ولقد تمت مناقشتها فى ,1995 ,486-504 ,78 ‎«Martin et al., Helv.
Chim.
Acta,‏ والذي تم استخدامه هنا في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. يتم أدناه وصف مثال غير حصري ل 2' أورثو- 0©5لاانوكليوتيد: § ‎B‏ ئ ‎On one‏ 9 ‎MOE 5‏ على النقيض من مشتقات الريبوز الألكيلية السابقة 0142؛ فإن 2' - فلورو أوليجومرات لها جذور فلورية عند موضع 2 ‎A‏ ل من 0712 . وبوضح أدناه مثال غير حصري ‎F -'2 J‏ أوليجومر : ‎B‏ 3 ‎b__ on)‏ ‎Si‏ ‏? : ‎“Ey,‏ ‏37 ‏ساس ‏يرد وصف2"- فلورو أوليجومرات في الطلب الدولي 043977/2004؛ والذي تم استخدامه هنا 0 في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. وقد تشتمل مركبات الكشف على واحدة أو أكثر من الوحدات الفرعية 2' أورثو- ميثيل» 2' أورثو-]0/ا ؛ 5 ‎F="2‏ وبمكن أن تستخدم ‎Gl‏ من روابط الوحدة الفرعية البينية التي تم وصفها هنا. في بعض الحالات؛ يمكن أن يتكون مركب بالكشف من الوحدات الفرعية 2' أورثو- ميثيل» 2' ‎MOE = gis‏ ؛ 5 ‎F="2‏ بالكامل. يتكون أحد النماذج لمركب بالكشف بالكامل من وحدات فرعية 2' أورثو- ميثيل. 2 -أورثو = [2-( ‎-N‏ ميثيل كاربامويل) ايثيل ] اوليغونيكليوتيدات-ل0)-2]-2-0 ‎(MCEs) methylcarbamoyl)ethyl] Oligonucleotides‏
— 8 7 — تعد ‎MCES‏ مثالاً آخر على 2' أورثو رببونوكليوزيد معدلة مفيدة في مركبات الكشف. هناء؛ يتم اشتقاق 0112 إلى نصف 2- ( ل١-‏ ميثيل كاريامويل) ‎2-(N= Ji‏ ‎methylcarbamoyl)ethyl‏ لزيادة مقاومة نوكلياز . ‎agg‏ أدناه مثالاً غير حصري لقيمة أوليجومر ‎MCE‏ ‎q‏ ‏ل ‎oe‏ ‎Hoy ad‏ ‎١ Surge Bh‏ 5 قل ‎TA‏ ‎pb, Ld‏ ‎RL‏ § ‎ee 5‏ > ‎Hoge‏ £ 5 5 { ‎Tek we {bg‏ مك7 § ‎ou Binge DR‏ 8 لقد تم وصف ‎MCES‏ وتخليقها في ‎«J.
Org.
Chem. (Yamada et al.‏ -3042 :)9( 76 53 والذي تم استخدامه هنا في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. قد تتضمن مركبات الكشف واحدة أو أكثر من وحدات ‎MCE‏ الفرعية. أوليجومرات فراغية محددة 0 تعد الأوليجومرات الفراغية المحددة هى تلك الأوليجومرات الخاصة بالكيمياء الفراغية لكل رابطة تحتوي على الفوسفور يتم تثبيتها عن طريق طريقة التخليق بحيث يتم إنتاج أوليجومر واحد نقي إلى حد كبير . وبوضح أدناه مثال غير حصري للأوليجومر الفراغي المحدد : نت 0 ‎R‏ ‏2 ‏8 ص 0 ‎n‏
في المثال ‎coded‏ يحتوي كل فوسفور للأوليجومر على نفس الكيمياء الفراغية. تتضمن الأمثلة الإضافية الأوليجومرات الموصوفة أعلاه. على سبيل المثال؛ يمكن تحضير كحلا و ‎ENAs‏ ‏وثلاثي ‎DNAS— 5iSu‏ و ‎MCES‏ و 2' أورثو- ميثيل» 2' أورثو-14108 ؛ و2" و الأوليجومرات المكونة أساسا من المورفولينو باستخدام روابط نوكليوزيد بينية تحتوي على فوسفور فراغي محدد ‎Jie‏ على سبيل المثال؛ فوسفوروثيوات؛ فسفودايستر؛ فوسفورميدات
‎phosphoramidate‏ ؛ فوسفور ‎gla‏ أميدات ‎phosphorodiamidate‏ ؛ أو ‎ye‏ من روابط نوكليوزيد بينية تحتوي على الفوسفور. يتم وصف أوليغومرات محددة فراغية؛ وطرق للتحضير» تخليق ‎ane‏ التناظر ‎Shall‏ متحكم ‎dd‏ وتصميم عديم التناظر المرآتي؛ و ملحقات ‎dene‏ التناظر المرآتي لاستخدامها في تحضير تلك الأوليجومرات؛ على سبيل ‎(Jha)‏ في الطلب الدولي رقم
‏0 2015107425 2015108048 2015108046 2015108047 2012039446 2010064146 2011034072« 2014010250 2014012081 20130127856 و 2011005761؛ ولقد تم استخدام كل منها في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. أوليجومرات مكونة أساسا من المورقولينو ‎Morpholino—-based Oligomers‏ تشير أوليجومرات مكونة أساسا من المورفولينو إلى أوليجومر يتضمن وحدات فرعية من
‏5 المورفولينو تدعم القاعدة النووية؛ بدلا من الرببوزء يحتوي على حلقة مورفولينو . تتضمن روابط النوكليوزيد البينية المثالية» على سبيل المثال» روابط نوكليوزيد بينية من الفوسفورًميدات أو الفوسفور داي أميدات البينية التي تريط بين النيتروجين بحلقة المورفولينو بإحدى الوحدات الفرعية بكريون خارج الحلقة 4' لوحدة فرعية مجاورة من المورفولينو. تتضمن كل وحدة فرعية من المورفولينو قاعدة نووية من البيورين ‎purine‏ أو البيريميدين ‎pyrimidine‏ الفعال للريطء عن
‏0 طريق الترابط الهيدروجيني المحدد القاعدة؛ بقاعدة قليل النوكليوتيد. لقد تم تناول أوليجومرات مكونة أساسا من المورفولينو (بما في ذلك أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ) بالتفصيل»؛ على سبيل المثال» في براءات الاختراع الأمريكية رقم 5:698.685؛ 6 5142047؛ 5034506؛ 5166315؛ 5185444. 5521063؛ 5506337 وطلبات براءات الاختراع الأمريكية المعلقة رقم 12 / 271036 271040/12. وفي منشور
‏5 الطلب الدولي رقم / 064471/2009 و الطلب الدولي رقم / 043730/2012 و
‎«Summerton et al. 1997‏ تطوير عقار للحمض النووي وفي اتجاه مضاد للنسخ؛ 7 187- ولقد تم استخدامها في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. داخل هيكل الأوليجومر؛ يشار ‎Sale‏ ‏إلى مجموعات الفوسفات بانها تكون 'روابط نوكليوزيد بينية" من الأوليجومر. إن رابطة نوكليوزيد البينية ل ‎RNA‏ و ‎DNA‏ التي تحدث بشكل طبيعي هي رابطة فسفودايستر تتراوح بين 3' إلى 5'. 5 تشتمل مجموعة "الفوسفوراميد" على الفوسفور الذي يحتوي على ثلاث ذرات أكسجين مرفقة وذروة نيتروجين واحدة مرفقة؛ في حين تشتمل مجموعة 'فسفور داي اميدات" على فوسفور يحتوي على ذرتين أكسجين مرفقتين وذرتي نيتروجين مرفقتين. في روابط الوحدة الفرعية البينية غير المشحونة أو الكاتيونية لأوليجومرات مكونة أساسا من المورفولينيو الموصوفة ‎(La‏ تكون أحد ذرات النيتروجين معلقة دائمًا بسلسلة المجموعة الاساسية. وتكون ذرة النتروجين الثانية؛ في رابطة فسفور 0 داي أميدات» هي عادة ذرة نيتروجين بحلقة في بنية حلقة المورفولينو. يشير ‎'PMO-X"‏ إلى أوليجومرات مكونة أساسا من المورفولينو فسفور داي اميدات لها ذرة فسفور مع ‎(i)‏ رابطة تساهمية بذرة النيتروجين بحلقة المورفولينو و ‎(ii)‏ رابطة تساهمية ثانية بالنيتروجين الحلقي من 4- امينو بيبيردين- 1- إيل ( أي؛ ‎(APN‏ أو مشتق من 4 - امينو بيبيردين- 1- إيل. حيث يتم الكشف عن أوليجومرات ‎PMO-X‏ النموذجية في طلب معاهدة التعاون في شؤون 5 براءات الاختراع الامريكية رقم / 38459/2011 و منشور معاهدة التعاون في شؤون براءات الاختراع للطلب الدولي رقم / 074834/2013« واللذين تم استخدامهما في هذه الوثيقة كمرجع في مجملهما. يشتمل ‎PMO-X‏ على " ‎PMO-apn‏ " أو "801" والذي يشير إلى ‎PMO=X egal‏ يتضمن رابطة نوكليوزيد بيني واحدة على الأقل حيث يتم ربط ذرة الفسفور بمجموعة المورفولينو وبالنيتروجين الحلقي ل4- امينو بيبيردين- 1- إيل ( أي ‎(APN‏ في نماذج 0 محددة؛ يشتمل أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على متوالية مستهدفة على النحو المنصوص عليه في الجداول 5112 2ب أو 2ج على ‎daly‏ واحدة على الأقل تحتوي على ‎APN‏ رابطة تحتوي على مشتق ‎APN‏ تتضمن النماذج المختلفة أوليجومرات مكونة أساسا من المورفولينو تتضمن حوالي 10 96؛ 15 % 20 96 25 96 30 % 35 % 40 فى 45 % 50 % 5 % 60 % 65 م9 70 96 75 96 9680 9685 9690 %95« أو 96100 روابط 5 تحتوي على مشتق ‎APN / APN‏ حيث تكون الروابط المتبقية (إذا كانت أقل من %100( عبارة
— 1 8 — عن روابط غير مشحونة؛ على سبيل المثال» يعد حوالي أو على الأقل حوالي 1 أو 2 أو 3 أو 4 أو 5 أو 6 أو 7 أو 8 أو 9 أو 10 أو 11 أو 12 أو 13 أو 14 أو 15 أو 16 أو 17 أو 18 أو 19 أو 20 أو 21 أو 22 و 23 أو 24 أو 25 أو 26 أو 27 أو 28 أو 29 أو 320 أو 31 أو 32 أو 33 أو 34 أو 35 أو 36 أو 37 أو 38 أو 39 أو 40 من مجموع روابط نوكليوزيد البينية ‎le‏ عن روابط تحتوي على مشتق من ‎APN / APN‏ في بعض النماذج؛ يعد الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ ‎Ble‏ عن مركب بالصيغة (!): ‎T‏ ‎XY‏ ‎N‏ ‎ola‏ ‏ ‏7 ‎Nu 0‏ ' 1 ‎J‏ ‏اه ‏م ‎Nu‏ 0 ‎J‏ ‎R2‏ ‏أو ملح مقبول صيدلانياً ‎(die‏ حيث: 0 تمثل كل ‎NU‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛
-2 8 — يتم اختيار كل 7 بشكل مستقل من © 5 ‎NRA‏ حيث يتم اختيار كل ‎RA‏ بشكل مستقل ‎Hoe‏ ؛ 01-6 أتكيل ‎alkyl‏ « آرألكيل ‎aralkyl‏ ‎«~C(O)(CH2)NNR5C(=NH)NH2 «~C(=NH)NH2 ٠‏ ‎—G(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NR5C(=NH)NH2‏ و6 « حيث يتم اختيار 5 من ‎H‏ ‏5 و 01-06 ألكيل ‎٠ alkyl‏ يمثل عدد صحيح من 1 إلى 5؛ يتم اختيار آ من ‎OH‏ وجزءٍ من الصيغة: 6ج م نج حيث : يتم اختيار ‎A‏ من ‎-N(R7)2 5—OH‏ و 1 ‎cua‏ يتم اختيار كل 1 بشكل مستقل من 4 و 0 01-0606 أتكيل اماه ؛ و يتم اختيار 6 من ‎—N(RO)CH2C(O)NH2 (OH‏ وجزء من الصيغة: ‎Fn N—R?"0‏ حيث: يتم اختيار ‎RO‏ من ا و 01-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و يتم اختيار ‎R10‏ من 6؛ 1101-(0)0- ‎acyl dad,‏ تربتيل ‎trityl‏ ؛ 4- ميثوكسي تريتيل ‎methoxytrityl‏ « ‎—C(0)(CH2)MNR12C(=NH)NH2 « ~C(=NH)NH2‏ و ‎~C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNR12C(=NH)NH2‏ « حيث:
‎am‏ عدد صحيح من 1 إلى 5؛ 1 من الصيغة -(0 - ألكيل ‎alkyl‏ )لا - حيث لا هي عدد صحيح من 3 إلى 10 و يتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎alkyl‏ لا بشكل مستقل من 62-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ 3 يتم اختيار12» من لا و ‎C1-C6‏ ألكيل ‎alkyl‏ ؛ يتم تحديد كل ‎dls‏ من ‎RT‏ بشكل مستقل من: ‎cua ++)))2‏ يتم اختيار كل ‎R13‏ بشكل مستقل من ‎5H‏ 01-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ وجزءِ من الصيغة (ا!): ‎R'‏ اع ‎an)‏ ييا با ‎J‏ ‏0 حيث: يتم اختيار ‎R15‏ من ‎—C(-NH)NH2 «Jif 01-06 6 H‏ ‎«—~C(O)(CH2)gNR18C(~-NH)NH2‏ و ‎—C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNR18C(=NH)NH2‏ حيث: يتم اختيار ‎R18‏ من ‎C1-C6 H‏ ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و 5 © هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و يتم اختيار كل ‎R17‏ بشكل مستقل من ‎methyl gH‏ ؛ و ‎ea‏ من الصيغة )1(
-4 8 — 0ح م ‎am)‏ 1 ض او حيث: يتم اختيار ‎R19‏ بشكل مستقل من ‎C1-C6 5 H‏ ؛ ‎«~C(O)(CH2)rNR22C(=NH)NH2 ~C(=NH)NH2 «li‏ ‎«—C(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(=NH)NH2 5‏ ‎«—C(0)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NR22C(=NH)NH2‏ ‎~C(O)CH(NH2)(CH2)4NH2‏ و ©؛ حيث: يتم اختيار ‎R22‏ من اا و 61-06 ألكيل الماا8 ؛ و ‎sar‏ عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و 0 يتم اختيار ‎R20‏ من ‎C1-C6 5H‏ ألكيل ‎alkyl‏ ؛ أو يكون ‎R19‏ و ‎Gia R20‏ إلى جنب مع ذرة النيتروجين ‎nitrogen atom‏ التي يتم إرفاقهم بها بحيث تشكل حلقة غير متجانسة ‎heterocyclic‏ أو حلقة أريل غير متجانسة ‎heteroaryl ring‏ تتضمن من 5 إلى 7 ذرات بحلقة وتحتوي اختياربًا على ذرة غير متجانسة ‎heteroatom‏ مختارة من الأكسجين 00 والنيتروجين ‎nitrogen‏ و الكبريت ‎sulfur‏ ؛ و يتم اختيار ‎R2‏ من ‎«GH‏ أسيل ‎acyl‏ ؛ تربتيل ‎trityl‏ ¢ 4- ميثوكسي تريتيل ‎methoxytrityl‏ ‏بنزويل ‎benzoyl‏ « ستيرويل ‎C1-C6 « stearoyl‏ ألكيل ‎—C(0)- «—C(=NH)NH2 « alkyl‏ ‎«=C(0)(CH2)sNR24C(=NH)NH2 (R23‏ - ‎«C(O)(CH2)2NHC(0)(CH2)5NR24C(-NH)NH2‏ - ‎«C(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(=NH)NH2‏ وجزءِ من الصيغة:
— 5 8 — ‎A,‏ ‎SA‏ ‎R23‏ يكون بالصيغة -( ©0)- ألكيل ‎OH - v( alkyl‏ حيث ‎V‏ يمثل عدد صحيح من 3 إلى 10 ويتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎alkyl‏ لا بشكل مستقل من الألكيل ‎C2- alkyl‏ ‎«C6 5‏ و يتم اختيار ‎R24‏ من ‎١1‏ و 61-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ يتم اختيار ‎L‏ من ‎—C(O)(CH2)6C(0)—‏ و ‎¢=C(0)(CH2)282(CH2)2C(0)—‏ و 0 كل ‎R25‏ يتخذ الصيغة 0112(206)0(10)426(2)- وحيث يكون كل ‎R26‏ بالصيغة - ‎«(CH2)6NHC(=NH)NH2‏ ‏حيث © يمثل ببتيد ثاقب للخلية ‎('CPPY)‏ جزء رابط تم اختياره من ‎~C(0)(CH2)2NHC(0)( «~C(O)(CH2)2NH-CPP (~C(O)(CH2)5NH-CPP‏ ‎«—C(O)CH2NH-CPP (CH2)5NH-CPP‏ و: ‎i‏ 0 ‎aS‏ ‏15 ‏حيث يتم إرفاق ‎CPP‏ بجزء الرابط من خلال رابطة أميد عند حد كريوكسي ‎«CPP carboxy‏ و
— 6 8 — حيث قد يكون © موجودًا فى حدث واحد أو غائب. في بعض النماذج؛ ‎oe R2 Jia‏ من الصيغة: 1 ‎N‏ 0
A
(RZ®)N A Lo —C(0)(CH2)282(CH2)2C(0)~ §-C(O)(CH2)6C(O)— ‏حيث يتم اختيار )من‎ ويكون كل ‎R25‏ من الصيغة ‎—(CH2)20C(OIN(R26)2‏ حيث يكون كل 26» من الصيغة 1411(10112-)0112(610116)-. يتم وصف هذه الاجزاء بمزيد من التفصيل في ‎Sel‏ ‏الاختراع الامريكية رقم 7.935.816 ولقد تم استخدامها في هذه البراءة كمرجع في مجملها . في نماذج معينة؛ قد يشتمل ‎R2‏ أي جزءٍ تم وصفه ادناه: 9"
Ha Aw ‏محلا يلاس‎ woe AM Hs hd a \ Ain, ( في نماذج معينة؛ يكون كل 1+ 98 ‎—N(CH3)2‏ . في بعض النماذج؛ يكون حوالي 1690-50 من مجموعات ‎RI‏ عبارة عن ثنائي ميثيل أمينو ( أي ‎(-N(CH3)2‏ في نماذج معينة؛ يكون حوالي 9666 من مجموعات 1+ عبارة عن ثنائي ميثيل أمينو. في بعض النماذج غير الحصرية؛ يتم اختيار المتواية المستهدفة من متواليات بالجداول 2أ- 2ج؛ حيث يتم اختيار ‎X‏ من يوراسيل ‎(U) uracil‏ 5 أو ثيمين ‎thymine‏ (1). في بعض النماذج غير الحصرية؛ يكون ‎RIJS‏ هو ‎-١1)0113(2‏ ‏ويتم اختيار المتوالية المستهدفة من متواليات بالجدول 2أ- 2ج؛ حيث يتم اختيار ‎X‏ من يوراسيل ‎(U) uracil‏ أو ثيمين ‎thymine‏ (1).
" RI ‏في بعض نماذج الكشف؛ يمكن اختيار‎
HO HOO HOOK
HO-0rO-O +O
HOO +O +O,
HO OX
PEN
WO I ie
Ops He . + ‏في بعض النماذج؛ يكون 1+ واحد على الأقل هو:‎ +O
في نماذج معينة؛ يتم اختيار 1 من : ° مم ‎HO’‏ ‎G Ox, NR 3‏ ‎Spe N‏ )0 ىن 1 ‎LA wn N‏ ‎ho | 0 |‏ ‎ren OH TTT O==P——N(CHy),‏ ‎i |‏ ‎oY‏ ¢ 7 ¢ ؛و ‏ * و 7 هو 0 فى كل مرة؛ فى بعض ‎oz all‏ يتم اختيار ‎R2‏ من ‎H‏ و ‎G‏ و أسيل ‎acyl‏ تريتيل ‎trityl‏ » 4- ميثوكسى تربتيل ا/01610/1117؛ بنزويل ‎benzoyl‏ ؛ ستيرويل ‎.stearoyl‏ ‏5 في نماذج معينة؛ يتم اختيار ‎HE T‏ 8 0 3 ‎Cr N‏ 77 سي ‎Oh 0 am BCH oor,‏ ‎I }‏ 1 نج وال ‎٠ Ix‏ اهو ‎O‏ عند كل حدوث و ‎R2‏ هو 6. فى بعض النماذ ‎‘z‏ يكون 1 بالصيغة : ‎OH‏ ‎Loo‏ ‏سات ‏0 ‏ال ‏يتخذ ‎R6‏ الصيغة: {— بم ‎RM OH 1 0‏ مث“ 7 هو 0 عند كل حدوث و ‎R2‏ هو ‎.G‏ ‏فى بعض النماذ ‎‘z‏ يكون 1 بالصيغة :
‎Ah‏ ‎SN‏ ‏} ‎ad‏ ‏ا هو ‎O‏ عند كل حدوث؛ يكون كل #1اهو ‎—N(CH3)2‏ و 2 هو 6. في بعض النماذج؛ يكون ‎T‏ بالصيغة: 8 ( اس ‎SN‏ ‏ب ‎Y 5‏ هو ‎O‏ عند كل حدوث؛ في بعض النماذج؛ يكون ‎T‏ بالصيغة: 6 ‎N‏ ‎(J‏ ‎ot crn‏ ب ‎Y‏ هو © عند كل حدوث؛ يكون كل 1جاهو 1)0113(2- و ‎R2‏ هو أسيتيل ‎acetyl‏ ‏+ ‎HO 3‏ ‎orem‏ ‏في نماذج معينة؛ يكون ‎T‏ بالصيغة : بي ‎Y‏ هو © عند كل حدوث» يكون كل #1اهو 0113(2)/ا- و ‎R2‏ هو ‎H‏
— 0 9 — فى بعض ‎oz all‏ يتم اختيار ‎R2‏ من ‎H‏ أسيل ‎acyl‏ « تريتيل ‎trityl‏ ¢ 4- ميثوكسى تريتيل ال06100/11؛ بنزويل ‎benzoyl‏ « ستيرويل ‎.stearoyl‏ ‏في نماذج مختلفة يتم اختيار 2+ من ‎Gl H‏ . في نموذج معين» يكون ‎Gg R2‏ . في بعض النماذج؛ يكون ‎R2‏ هو ‎١١‏ أو أسيل. في بعض ‎ez dail‏ يكون كل ‎RT‏ هو 11)0113(2- . في بعض النماذج؛ يكون ‎ART‏ حالة واحدة على الأقل هو0113(2)ل1- . في نماذج معينة؛ تكون كل حالة لذ 1+اهو0113(2)ل- . فى بعض ‎oz all‏ يكون 6 بالصيغة: ]8 \ و 0 حيث يتم اختيار ‎(H (Ra‏ أسيل ‎acyl‏ ؛ بنزويل ‎benzoyl‏ ؛ ستيرويل الا516810. فى بعض ‎oz dail‏ يكون ‎Ra‏ هو أسيل ‎acyl‏ ‏في بعض ‎oz all‏ يتخذ ‎CPP‏ الصيغة: ا ‎A s‏ حيث يتم اختيار ‎(He Ra‏ أسيل ‎acyl‏ ؛ بنزويل ‎benzoyl‏ ؛ وستيرويل ‎A .stearoyl‏ بعض 5 النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل ‎acetyl‏ .
— 1 9 — فى جانب آخرء يتخذ ‎CPP‏ الصيغة: ا ‎s‏ اب حيث يتم اختيار ‎(He Ra‏ أسيل ‎acyl‏ ؛ بنزويل ‎benzoyl‏ ؛ وستيرويل ‎A .stearoyl‏ بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل . في جانب آخرء يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ عبارة عن مركب بالصيغة (8ا) : ‎T‏ ‎CY Nu‏ ‎N‏ ‎a‏ ‏ ‎Nu (1a)‏ ' 1 ‎J‏ ‎ol‏ ‏بج ‎Nu‏ 1 ‎N‏ ‏ ‎R2‏ ‏أو ملح مقبول صيدلانياً ‎(die‏ حيث: ‎Jia‏ كل ‎Nu‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ ‎Z‏ عبارة عن عدد صحيح من حوالي 13 إلى حوالي 38
-2 9 — يتم اختيار كل ‎Y‏ بشكل مستقل من © 5 ‎NRA‏ حيث يتم اختيار كل ‎RA‏ بشكل مستقل ‎Hop‏ ؛ ‎«<li 01-6‏ آرالكيل» ‎«—C(O)(CH2)NNR5C(=NH)NH2 —C(=NH)NH2‏ ‎<—C(O)(CH2)2NHC(0)(CH2)SNR5C(=NH)NH2‏ و6 « حيث يتم اختيار ‎R5‏ من ‎H‏ ‏و 601-06 ألكيل و ‎Ban‏ عدد صحيح من 1 إلى 5؛ يتم اختيار آ من ‎OH‏ وجزءِ من الصيغة: 6ج م ب حيث : يتم اختيار 8 من 1ا0- و ‎-N(R7)2‏ و 41 حيث: يتم اختيار كل ‎RT‏ بشكل مستقل من ‎١1‏ و 01-06 ‎«SI‏ و 0 يتم اختيار ‎RG‏ من ‎(OH‏ 49(01120)0(11112)ل1- ‎ging‏ من الصيغة: ‎N—R10‏ م حيث: يتم اختيار ‎RY‏ من ‎sH‏ 01-06 ألكيل؛ و يتم اختيار ‎R10‏ من 6؛ ‎=C(0)-R110H‏ ,؛ أسيل ‎acyl‏ ؛ تربتيل ‎trityl‏ ¢ 4- ميثوكسي 5 تريتيل ‎methoxytrityl‏ « ‎—C(O)(CH2)MNR12C(-NH)NH2 « ~C(-NH)NH2‏ و ‎—C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNR12C(=NH)NH2‏ « حيث:
‎am‏ عدد صحيح من 1 إلى 5؛ 1 من الصيغة -(0 - ألكيل ‎alkyl‏ )لا - حيث لا هي عدد صحيح من 3 إلى 10 و يتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎alkyl‏ لا بشكل مستقل من 62-06 ألكيل ‎alkyl‏ ‎IX‏
‏5 يتم اختيار12» من ا و 01-06 ألكيل ‎alkyl‏ ¢ يتم تحديد كل ‎dls‏ من ‎RT‏ بشكل مستقل من: ‎—N(R13)2‏ حيث يتم اختيار كل 13» بشكل مستقل من ‎H‏ و 61-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ ‎das‏ من الصيغة (ا!):
‎R'‏ اع ‎an)‏ ييا با ‎J‏ ‏0 حيث: يتم اختيار ‎R15‏ من ‎—C(-NH)NH2 (Jf C1-C6 «G H‏ ‎<—C(O)(CH2)aNR18C(=NH)NH2‏ و ‎~C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5SNR18C(=NH)NH2‏ حيث: يتم اختيار ‎R18‏ من ‎C1-C6 H‏ ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و © هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و يتم اختيار كل ‎R17‏ بشكل مستقل من ‎gH‏ ميثيل ‎methyl‏ ؛ و جزء من الصيغة )1(
-4 9 — 0ح م ‎am)‏ 1 ض او حيث: يتم اختيار ‎R19‏ بشكل مستقل من ‎C1-C6 5 H‏ ؛ ألكيل ‎«—C(O)(CH2)rNR22C(=NH)NH2 «~C(=NH)NH2‏ ‎«—C(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(=NH)NH2 5‏ ‎«—C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NR22C(=NH)NH2‏ ‎«Gy ~C(O)CH(NH2)(CH2)4NH2‏ حيث: يتم اختيار ‎R22‏ من ‎C1-C6 5H‏ ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و ‎sar‏ عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و 0 يتم اختيار ‎R20‏ من ‎C1-C65H‏ ألكيل ‎alkyl‏ ؛ أو يكون ‎R19‏ و ‎R20‏ جنبا إلى جنب مع ذرة النيتروجين التي يتم إرفاقهم بها بحيث تشكل حلقة غير متجانسة أو حلقة أريل غير متجانسة تتضمن من 5 إلى 7 ذرات بحلقة وتحتوي اختياريا على ذرة غير متجانسة مختارة من الأكسجين 007 والنيتروجين ‎nitrogen‏ الكبريت ‎sulfur‏ ؛ و يتم اختيار ‎R2‏ من ‎cad GH‏ تريتيل؛ 4- ميثوكسي تريتيل؛ بنزوبل ستيرويل؛ 01-6 ‎~C(0)=«-C(=NH)NH2. Jif 5‏ ‎—C(0)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NR24C ~C(O)(CH2)sNR24C(=NH)NH2R23‏ ‎«—C(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(=NH)NH2 «(=NH)NH2‏ جزءِ من الصيغة:
— 5 9 — 1 0 ‎X‏ ‎oe SA‏ حيث: 3 يكون بالصيغة -(0 -ألكيل) 7 -1ا0_حيث ‎V‏ يمثل عدد صحيح من 3 إلى 10 وبتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎V‏ بشكل مستقل من ألكيل 06©-2؛ و يتم اختيار 24» من ‎C1-C6 5H‏ ألكيل؛ 5 هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ يتم اختيار ‎L‏ من ‎~C(O)(CH2)6C(O)-‏ و -(0()9112(252)0112(26)0)-؛ و كل ‎R25‏ يتخذ الصيغة 0112(200)0(11)426(2)- وحيث يكون كل ‎R26‏ بالصيغة - ‎«(CH2)6NHC(=NH)NH2‏ ‏0 حيث © يمثل ببتيد ثاقب للخلية ‎(CPP)‏ وجزء رابط يشتمل على الصيغة ‎—C(O)CH2NH-CPP‏ حيث يتخذ ‎CPP‏ الصيغة : ‎H‏ 7 ‎N‏ ‏5 % ‎NH‏ ‎Pr‏ ‏6 ‏حيث تكون ‎Ra‏ هو ‎١!‏ أو أسيل؛ و حيث قد يكون 6 موجوداً فى حدث واحد أو غائب.
في نماذج معينة؛ يتم اختيار ‎T‏ من : 0 ~~ ‎HO‏ ‎Ox, Pi 3‏ & ا > ْ ‎a 0‏ 9 ‎SCT‏ | 1 ‎O==P——N(CHa),‏ وميد أ ‎QOH‏ يراه ساد } 1 ان ‎OY ¢ nd‏ ¢ ؛و ‏ * ليو 7 هو 0 فى كل مرة. فى بعض ‎oz all‏ يتم اختيار ‎R2‏ من ‎H‏ و ‎G‏ و أسيل ¢ تريتيل « 4- ميثوكسي تريتيل؛ بنزويل؛ وستيرويل. في نماذج معينة؛ يتم اختيار ‎HE T‏ بإب ‎HO‏ ‏3 ‎hg MH N‏ ‎JO‏ ‏يواه ‎OH 5 mp wmf CH‏ ‎i |‏ ‎nd‏ ال ؛ و ‎Y che‏ هو ‎O‏ عند كل حدوث و ‎R2‏ هو 6. فى بعض النماذ ‎‘z‏ يكون ‎T‏ بالصيغة :
‎RS‏ ‎ters‏ ‏0 ‎co OY‏ يتخذ ‎R6‏ الصيغة:
و م ‎Neon‏ ‏7 هو 0 عند كل حدوث و ‎R2‏ هو ‎.G‏ ‏فى بعض ‎oz all‏ يكون 1 بالصيغة: ‎Ah‏ ‎A‏ ‏} ‎oY‏ ‏5 7 هو © عند كل حدوث و ‎R2‏ و ‎.G‏ فى يعض ‎oz ail‏ يكون ‎T‏ بالصيغة: ب ‎HO 3‏ ‎A‏ ‏} ‎oY‏ ‏لا هو © عند كل حدوث؛ءكل1 هو ‎-N(CH3)2‏ ؛ و ‎R2‏ هو 6. فى بعض ‎oz all‏ يكون 1 بالصيغة: ‎G‏ ‏ ‏@ ‏مات ‏0 ‏رج ‏10 و 7 هو ‎O‏ عند كل حدوث؛ فى بعض النماذج؛ يكون ‎T‏ بالصيغة:
— 9 8 —
G
0 مات 0 نج ‎Y‏ هو © عند كل حدوث؛ كل 1+ يكون ‎-١1)6113(2‏ و 2 هو أسيتيل. ‎hy‏ ‎od,‏ ‏1 ‏فى نماذ ‎z‏ معينة؛ يكون ‎T‏ بالصيغة :ال ‎Y‏ هو © عند كل حدوث» يكون كل 1جهو ‎—N(CH3)2‏ و ‎Hs R2‏ في بعض ‎oz all‏ يتم اختيار ‎R2‏ من ‎H‏ و أسيل ¢ تربتيل « 4- ‎oS ge‏ تريتيل بنزويل وستيرويل. في نماذج معينة؛ يتم اختيار 2+ من ‎H‏ أو ‎.G‏ في نموذج معين» يكون ‎R2‏ هو ‎.G‏ في بعض النماذج؛ يكون ‎R2‏ هو ‎STH‏ أسيل. في نماذج معينة؛ يكون كل ‎R1‏ هو 11)0113(2-. في 0 بعض النماذج؛ في حالة واحدة على الأقل يكون ‎RI‏ هو 11)0113(2-. في نماذج معينة؛ في كل ‎dls‏ ل ‎R1‏ يكون ‎~N(CH3)2‏ ‏في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. في بعض النماذج؛ ‎Lay‏ في ذلك؛ على سبيل المثال» نماذج للأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة )1( و (18)؛ تعد المتوالية المستهدفة متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1 (برقم 5 تعريف للمتوالية: 1) من حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا البشري ‎(GAA)‏ في نماذج مختلفة تتضمن؛ على سبيل المثال؛ نماذج للأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة (ا) و ‎(la)‏ المتوالية المستهدفة متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1 (برقم تعريف للمتوالية: 1) من
حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا ‎«(GAA) human alpha glucosidase (sll‏ حيث تشتمل منطقة الهدف على قاعدة نووية إضافية واحدة على الأقل مقارنة بالمتوالية المستهدفة؛ حيث لا تتضمن القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل أي قاعدة نووية متممة في المتوالية المستهدفة؛ وحيث تكون القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل بالداخل من منطقة الهدف.
في نماذج معينة؛ تشتمل المتوالية المستهدفة على متوالية تم اختيارها من أرقام هوية المتوالية: 86-3؛ كما هو موضح هنا في الجداول 2 أ -2 ج. في نماذج معينة؛ تشتمل المتوالية المستهدفة على متوالية تم اختيارها من الجدولين 2 أ و2 ب. في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13 29-27 36-34 59؛ و82. بالإضافة إلى ذلك؛ وفيما يتعلق بالمتواليات الموضحة في الجداول 2 أ -2 ج (أو الجداول
0 2ب و2 ج) هناء في نماذج معينة؛ يتم تحديد متوالية مع تتام 100 96 وبتم إزالة واحدة أو أكثر من القواعد النووية ‎of)‏ يتم تخليقها بالتناوب مع واحدة أو ‎AST‏ من القواعد النووية المفقودة) بحيث تتضمن المتوالية الناتجة واحدة أو أكثر من القواعد النووية المفقودة أكثر من متممتها الطبيعية في المنطقة المستهدفة. وباستثناء الجزءِ الذي تتم فيه إزالة واحدة أو أكثر من القواعد النووية؛ فمن المتوقع أن تكون الأجزاء المتبقية متممة بنسبة 96100. ومع ذلك؛ فإنه في نطاق هذا الاختراع
5 يمكن أن يكون هناك انخفاض في مستويات التتام. في نماذج معينة؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ الخاص بالكشف عبارة عن مركب له الصيغة (8/ا):
تآ مل مال 0 2 0 ‎J‏
أو ملح مقبول صيدلانياً منه؛ حيث: تمثل كل ‎NU‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ ‎Z‏ عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ يتم اختيار آ من ‎OH‏ وجزء من الصيغة: ‎RE‏ ‏مله ‎١‏ ‎Ys‏ ‏حيث : يتم اختيار ‎A‏ من 01- و 7(248+)ل- و 1+ حيث: يتم اختيار كل ‎RT‏ بشكل مستقل من ‎5H‏ 61-06 ألكيل الماا8 ؛ و يتم اختيار 8+امن ‎ging —N(RO)CH2C(O)NH2 (OH‏ من الصيغة: ‎Ne‏ ‏10 نك حيث: يتم اختيار 9 من ‎١1‏ و 61-06 ألكيل الماا8 ؛ و يتم اختيار ‎R10‏ من ‎acyl dud «—=C(0)-R110H‏ ¢ تريتيل ‎trityl‏ ¢ 4- ميثوكسي تريتيل ‎methoxytrityl‏ « ‎«—C(O)(CH2)MNRI2C(=NH)NH2 « —-C(=NH)NH2 5‏ و ‎—C(0)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNR12C(=NH)NH2‏ « حيث: 1 هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛
1 من الصيغة -(0 = ألكيل ‎alkyl‏ )لا - حيث لا هي عدد صحيح من 3 إلى 10 و يتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎alkyl‏ لا بشكل مستقل من 62-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ ويتم اختيار12» من ‎5H‏ 61-66 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ تكون كل حالة ‎Sao RI‏ مستقل هي ‎dua —N(RI3)2R14‏ يتم اختيار ‎RI3US‏ بشكل مستقل من ‎H‏ و ‎-C6‏ 1 ©ألكيل ‎alkyl‏ “و يتم اختيار 14 ‎R‏ من زوج ‎J‏ لإلكترون و ‎¢H‏ و يتم اختيار ‎R2‏ من ‎acyl dad « H‏ ؛ تريتيل ‎trityl‏ » 4- ميثوكسى تريتيل ‎methoxytrityl‏ ؛ و 01-6 أتكيل ‎.alkyl‏ ‏فى نماذج معينة؛ يتم اختيار ‎T‏ من : & Bo. ‏بالا‎ of br
Say 0 0 me NER OH TTT open ‎oY ¢ IY‏ ’ ¢ 0 ؛و بحا ؛و ‏10 7 هو 0 في كل مرة. في بعض ‎oz all‏ يتم اختيار ‎R2‏ من ‎H‏ و أسيل ‎acyl‏ ‘ تريتيل ‎trityl‏ ‘ ‏4- ميثوكسى تربتيل ال0161007/1؛ بنزويل ‎benzoyl‏ ؛ ستيرويل ‎.stearoyl‏ ‏فى نماذج معينة؛ يتم اختيار ‎HE T‏ ‎Tbr ‎Ny A ‎Rl y a C ]
G [3 fom 1 MEH ot vo ‎A Ix Ty ¢ IY ‏يكون 1 بالصيغة:‎ oz all ‏فى بعض‎
RS te 0 3¢ oY ‏الصيغة:‎ R6 ‏يتخذ‎ ‎/ \ p
Fn ‏و‎ ‏ما ل مك“‎ ‏يكون 1 بالصيغة:‎ oz all ‏فى بعض‎ ‏م ألم‎ ! ad 5 ‏فى حالة واحدة على‎ oz dail) ‏تريتيل؛ أو أسيل . فى بعض‎ H ‏هى‎ R2 ‏تكون‎ oz all ‏فى بعض‎ ~N(CH3)2 ‏هي‎ RI ‏الاقل تكون 81 هي 11)0113(2-. في بعض النماذج؛ تكون كل‎ ‏في نماذج معينة؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ الخاص بالكشف عبارة عن مركب له‎ :)!/5( ‏الصيغة‎ ‏مرح‎ ‏ماه‎ ‏ا‎ ‎C be (ve) ‏مل‎ ‎} ‎2 ‎01 ‎k 10 ‏حيث:‎ (die ‏أو ملح مقبول صيدلائياً‎
‎Jia‏ كل ‎Nu‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ يتم اختيار آ١‏ من ‎ed‏ من الصيغة: 0 0 ‎NH, HO 3‏ 0 ‎TY‏ ‏تج
N oH TT ‏يهاه‎ ْ ل ‎oY ¢ oY‏ ؛و حيث يتم اختيار ‎R3‏ من اا و 61-06 ألكيل ¢ تكون كل حالة ل41 هي بشكل مستقل 1)44(2-» حيث يتم اختيار كل ‎RA‏ بشكل مستقل من ‎4H‏ 61-066 ألكيل؛ و يتم اختيار ‎R2‏ من ‎١١‏ و أسيل ‎c acyl‏ تريتيل ‎trityl‏ ¢ 4- ميثوكسي تريتيل ‎«methoxytrityl‏ ‏بنزويل ‎benzoyl‏ « ستيرويل ‎stearoyl‏ » و 01-06 ألكيل. في نماذج مختلفة يتم اختيار ‎R2‏ من ‎H‏ أو أسيل . في بعض النماذج؛ يكون ‎R2‏ هوا . فى نماذج معينة؛ يكون 1 من الصيغة: ‎av‏ ‎IN‏ ‎x 1‏ يكون ‎R2‏ هو الهيدروجين. في نماذج معينة؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ الخاص بالكشف عبارة عن مركب له 5 الصيغة (6/ا):
‎en‏ ‏} ‏ل ‏ٍ ‎C vy ave)‏ ‎ns‏ ‏0 ‏أو ملح مقبول صيدلائياً ‎(die‏ حيث: ‎Jia‏ كل ‎Nu‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ كل لاهو ©؛
‎NH, <¢—N NH +‏ لادج ‎Oe HO HO‏
‎HN
‎OH HO ‏مأ سلا‎ ‏او‎ ,ٌْ ْ —N(CH3)2 ‏حيث يكون 1+ واحد على الأقل هو‎
في بعض النماذج؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من أرقام هوية المتوالية من 4 إلى 30 133 إلى 255؛ أو 296 إلى 342؛ حيث يتم اختيار ‎X‏ من اليوراسيل ‎uracil‏ (لا) أو الثايمين ‎thymine‏ (1). في بعض النماذج؛ يكون كل ‎R1‏ هو ‎—N(CH3)2‏ ‏في نماذج معينة؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ هو مركب بالصيغة ‎HV)‏ ‏باه ‏7 ‏سات ‏00 مح 1 واه 2 5 ‎J 5‏ أو ملح مقبول صيدلائياً ‎(die‏ حيث: ‎Jia‏ كل ‎Nu‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ و > عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38 في بعض النماذج ‎La‏ في ذلك؛ على سبيل المثال؛ نماذج الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ 0 بالصيغة ‎(IVE) (IVD) (IVa)‏ و (/)؛ تكون المتوالية المستهدفة متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1 ( متوالية بهوية رقم :1) من حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا البشري ‎(GAA)‏ نماذج مختلفة بما في ذلك؛ على سبيل المثال؛ نماذج الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(IVC) (IVD) (IVa)‏ و (/)؛ تكون المتوالية المستهدفة متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1 ( متوالية بهوية رقم :1) من حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا البشري
‎Cus (GAA)‏ تشتمل منطقة الهدف على قاعدة نووية إضافية واحدة على الأقل مقارنة بالمتوالية المستهدفة؛ حيث لا تتضمن القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل أي قاعدة نووية متممة في المتوالية المستهدفة؛ وحيث تكون القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل بالداخل من منطقة الهدف. في نماذج معينة؛ تشتمل المتوالية المستهدفة على متوالية تم اختيارها من متوالية بهوية رقم: 3- متوالية بهوية رقم: 86« كما هو موضح هنا في الجداول 2 ‎Zz 2- j‏ في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13« 29-27؛ 36-4؛ ¢59 و82. في نماذج معينة؛ تشتمل المتوالية المستهدفة على متوالية تم اختيارها من الجداول 2 أ -2 ج. بالإضافة إلى ذلك؛ ‎Lady‏ يتعلق بالمتواليات الموضحة في الجداول 2 أ -2 ج (أو الجداول 2ب و2 ج هنا ¢ في نماذج معينة؛ يتم تحديد متوالية مع تتام 00 1 96 ودتم إزالة 0 واحدة أو أكثر من القواعد النووية (أو يتم تخليقها بالتناوب مع واحدة أو أكثر من القواعد النووية المفقودة) بحيث تتضمن المتوالية الناتجة واحدة أو أكثر من القواعد النووية المفقودة أكثر من متممتها الطبيعية في المنطقة المستهدفة. وباستثناء الجزءٍ الذي تتم فيه إزالة واحدة أو أكثر من القواعد النووية؛ فمن المتوقع أن تكون الأجزاء المتبقية متممة بنسبة 96100. ومع ذلك؛ فإنه في نطاق هذا الاختراع يمكن أن يكون هناك انخفاض في مستويات التتام. 5 في نماذج معينة؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ هو مركب بالصيغة ‎HV)‏ ‎Nu‏ 0 >“ جاه } 0 مح 1 ماح } 72 أو ملح مقبول صيدلائياً ‎(die‏ حيث:
تمثل كل ‎NU‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ حيث يتم اختيار آ من: 0 0 ‎J N‏ ب م ب ‎RY‏ ‏0 0 0 ‎N‏ | , كيو ‎Lf OP N(CH),‏ ‎oN OM | =‏ ‎oI‏ ‎oY ‘ NY‏ ؛ ‎Fg teehee‏ ¢ جر ++ ‎°—N NH; <¢—N NH‏ سل 1 رو 0 ) ْ ا + .ا ‎{nd‏ م ‎and \‏ مذ“ سر زر ) ‎HoN ’‏ يتم اختيار ‎R2‏ من ‎١1‏ و ‎dad‏ تربتيل» 4- ميثوكسي تربتيل؛ بنزويل» وستيرويل ¢ حيث 6 هو ببتيد خارق للخلية ‎eins (CPP)‏ رابط تم اختياره من ‎—C(0)(CH2)2NHC(O)( «~C(O)(CH2)2NH-CPP ~C(O)(CH2)SNH-CPP‏ ‎—C(O)CH2NH-CPP (CH2)5NH-CPP 0‏ 3 : ‎i‏ 0 ‎aS‏
حيث يتم إرفاق ‎CPP‏ بجزء الرابط من خلال رابطة أميد عند نهاية كريوكسي ‎«CPP‏ و ‎G‏ ‏ ‎N‏ ‏© ‏واه ‏} ‏حيث تكون ‎OY aT‏ 82 هى ‎G‏ ‏فى نماذج معينة؛ تكون 1 بالصيغة : ‎Ah‏ ‎ol om,‏ } ‎oY‏ ‎R2 5 5‏ هو 6. في نماذج معينة؛ يكون حدوث واحد على الأقل ذ41 هو ‎~N(CH3)2‏ في بعض النماذج؛ يكون كل حدوث ل 41 هو 0113(2)ل1-. في بعض النماذج؛ يكون ‎T‏ بالصيغة: 6 إ 0 سات 0 رج فى نماذج معينة؛ يكون حدوث واحد على الأقل ‎R11‏ هو ‎—N(CH3)2‏ فى بعض النماذج؛ يكون كل حدوث لذ ‎RI‏ هو ‎—N(CH3)2‏ ‏10 فى يعض ‎oz all‏ يكون 1 بالصيغة :
0 0 ‎hr‏ حلم 3 0 ‎N‏ ‎ll /‏ ‎O—P—N‏ ‎٠8‏ ل ‎R2‏ هو ©؛ يكون كل حدوث ‎RII‏ هو ‎—N(CH3)2‏ ‏فى نماذج معينة؛ يتم اختيار ‎R2‏ من ‎«H‏ أسيل ‎acyl‏ ¢ تريتيل ‎trityl‏ « 4- ميثوكسى تريتيل ال0©100711؛ بنزويل ‎benzoyl‏ ؛ ستيرويل ‎stearoyl‏ ؛ ويكون ‎T‏ بالصيغة : 6 0 ‎N‏ ‏ملل ‎O—P——N‏ ‏\ ‎oN 5‏ في نماذج معينة؛ يكون ‎R2‏ هو أسيل. في نماذج معينة؛ يكون حدوث واحد على ‎RITA‏ هو ‎—N(CH3)2‏ في نماذج معينة؛ يكون كل حدوث ‎RII‏ هو ‎—N(CH3)2‏ ‏في نماذج مختلفة؛ يتم اختيار ‎R2‏ من ‎«H‏ أسيل ¢ تريتيل + 4- ميثوكسي تريتيل بنزويل وستيرويل. في نماذج معينة؛ يكون ‎R2‏ هو أسيتيل ¢ ويكون ‎T‏ بالصيغة : 6 © ‎N‏ ‏/ ‎O=—P——N‏ ‎LN‏ ‏0 ‎OF‏ ء وكل حدوث 811 هو ‎~N(CH3)2‏
في بعض النماذج؛ حيث يكون ‎G‏ بالصيغة: ]8 حك ‎A s‏ حيث يتم اختيار 48 من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى بعض ‎oz all‏ يكون ‎CPP‏ بالصيغة: ‎TI‏ ‎Ps 6 5‏ حيث يتم اختيار 48 من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ هو مركب بالصيغة ‎FVII)‏ ‏.1 ‏} ‏نآ مح 8 1 ل نا أو ملح مقبول صيدلانياً ‎(die‏ حيث:
‎Jia‏ كل ‎Nu‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ حيث يتم اختيار آ من: 0 0 ‎NH, HO 3‏ 0 5 ‎EN J N‏ 8ج 0 “ 0 ‎N‏ | اص ‎i ;‏ ‎i 2 Dr eee N(CH, Jp |‏ ‎OFTEN OM | O=——=P——N(CH3);‏ ‎DSL |‏ ‎oY ‘ oY 5‏ ¢ ؛و 7 ¢ يكون كل ‎R1‏ هو ‎—-N(R4)2‏ حيث يكون كل ‎R4‏ هو بشكل مستقل ‎C1-C6‏ ألكيل؛ و يتم اختيار ‎R2‏ من ‎١١‏ و أسيل ‎c acyl‏ تريتيل ‎trityl‏ ¢ 4- ميثوكسي تريتيل ‎«methoxytrityl‏ ‏بنزويل ‎benzoyl‏ « ستيرويل ‎stearoyl‏ « حيث ‎G‏ هو ببتيد خارق للخلية ‎(CPP)‏ وجزء رابط تم اختياره من ‎—C(0)(CH2)2NHC(O)( «~C(O)(CH2)2NH-CPP ~C(O)(CH2)SNH-CPP‏ ‎«—C(O)CH2NH-CPP (CH2)5NH-CPP‏ 3 : ‎i‏ 0 يت حيث يتم إرفاق ‎CPP‏ بجزء الرابط من خلال رابطة أميد عند نهاية كربوكسي ‎CPP‏ و
‎G‏ ‎N‏ ‏0 ‏باه ‏} ‏حيث تكون ‎aT‏ * -- أو 2 هى 6. في بعض النماذج؛ تكون كل حالة واحدة على الأقل ل 41 هو 11)6113(2-. في بعض النماذج؛ تكون كل حالة ل ‎R1‏ هو ‎~N(CH3)2‏ ‏فى نماذج معينة؛ تكون 1 بالصيغة : 0 0 ‎ir‏ حلي ‎N‏ ‏0 ‏هاه ‏} ‎oY 5‏ و ‎R2‏ هو 6. في نماذج معينة؛ يكون حدوث واحد على الأقل ل41 هو ‎~N(CH3)2‏ في بعض التماذج؛ يكون كل حدوث ل 41 هو ‎.-١1)0113(2‏ في بعض النماذج» يكون © بالصيغة: ]8 \ و حيث يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى يعض ‎oz all‏ يكون ‎CPP‏ بالصيغة:
ا 6 ا حيث يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ هو مركب بالصيغة (118/): 1 مرح ‎N‏ ‎a‏ ‏} ‎Nu (Vila)‏ ' 1 ‎J‏ ‎oe‏ ‏. : ‎J Nu‏ ‎N‏ ‏1 ‏5 أو ملح مقبول صيدلانياً ‎die‏ حيث: ‎Jia‏ كل ‎Nu‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ حيث يتم اختيار 1 من:
0 0 0 ‏وال‎ HO 3
J
‏نج‎
N
‎N(CH), |‏ سد بعص | ‎OH‏ ‎0 0 ‎0 IY ‏نج‎ oY ‏ألكيل؛ و‎ C1-C6 ‏هو بشكل مستقل‎ R4 ‏حيث يكون كل‎ —-N(R4)2 ‏هو‎ R1 ‏يكون كل‎ ‏رابط تم اختياره‎ hag (CPP) ‏حيث © هو ببتيد خارق للخلية‎ ~C(0)(CH2)2NHC(O)( «~C(0)(CH2)2NH-CPP (~C(0)(CH2)SNH-CPP ‏من‎ ‏و:‎ «—C(O)CH2NH-CPP (CH2)SNH-CPP 5 0 fr 0
CPP ‏بجزءِ الرابط من خلال رابطة أميد عند نهاية كربوكسي‎ CPP ‏حيث يتم إرفاق‎ ‏يكون هو 1)0113(2-. في نماذج معينة؛‎ R13 ‏في بعض النماذج؛ في حالة واحدة على الأقل‎ —N(CH3)2 ‏هو‎ RI ‏يكون كل حدوث لذ‎ ‏يكون 6 بالصيغة:‎ oz all ‏فى يعض‎ 10 ‏و‎ \ 8] ‏هو أسيتيل.‎ Ra ‏أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون‎ (H ‏من‎ Ra ‏حيث يتم اختيار‎
فى نماذج مختلفة فى كل حالة لذ 41 يكون هو ‎«—N(CH3)2‏ © يكون بالصيغة: ‎N 8]‏ حك ‎A .‏ 6و يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى نماذج معينة؛ يكون ‎CPP‏ بالصيغة: ‎TI‏ ‏5 ‘ اب حيث يتم اختيار 48 من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى نماذج مختلفة فى كل حالة لذ 41 يكون هو ‎«—N(CH3)2‏ يكون ‎CPP‏ بالصيغة: 3 ب ؛و يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى جوانب مختلفة » يتضمن قليل النوكليوتيد فى اتجاه مضاد للنسخ بالكشف مركب بالصيغة ‎(Vib)‏
‎hp‏ ‎HO’‏ ‏3 ‎N‏ ‏0 ‏ماح ‏} ‎NG Nu‏ ‎J‏ ‎a‏ ‏} ‎A Nu (Vib)‏ ‎J‏ ‎a‏ ‎LL,‏ ‎Nu‏ 0 ‎J‏ ‏} ‏أو ملح مقبول صيدلانياً ‎(die‏ حيث: تمثل كل ‎NU‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ يكون كل 1 هو ‎—N(R4)2‏ حيث يكون كل ‎R4‏ هو بشكل مستقل ‎C1-C6‏ ألكيل؛ و حيث © هو ببتيد خارق للخلية ‎hag (CPP)‏ رابط تم اختياره من ‎~C(0)(CH2)2NHC(O)( «~C(O)(CH2)2NH-CPP (~C(O)(CH2)SNH-CPP‏ ‎~C(O)CH2NH-CPP (CH2)5NH-CPP‏ و: ‎i‏ 0 0
حيث يتم إرفاق ‎CPP‏ بجزءٍ الرابط من خلال رابطة أميد عند نهاية كربوكسي ‎CPP‏ ‏في بعض النماذج؛ في حالة واحدة على الأقل ل41 يكون هو ‎—N(CH3)2‏ في نماذج معينة؛ يكون كل حدوث لذ ‎RI‏ هو ‎—N(CH3)2‏ ‏في بعض ‎oz all‏ يكون 6 بالصيغة: 9 . و 6 لم حيث يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى نماذج مختلفة فى كل حالة لذ 41 يكون هو ‎«—N(CH3)2‏ © يكون بالصيغة: ]8 \ و ‎A s‏ 6 و يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى نماذج معينة؛ يكون ‎CPP‏ بالصيغة: ]ا 6 ا
حيث يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى نماذج مختلفة فى كل حالة لذ 41 يكون هو ‎«—N(CH3)2‏ يكون ‎CPP‏ بالصيغة: ا 8 ا ¢ و يكون 8» هو أسيتيل. في جوانب مختلفة؛ يتضمن قليل النوكليوتيد في اتجاه مضاد للنسخ بالكشف مركب بالصيغة ‎:(Vllc)‏
‎Pp‏ ‎HO‏ ‏3 ‎N‏ ‎(J‏ ‎A‏ ‏} ‎NG Nu‏ 7 يواح } ‎C Nu (Vio)‏ ‎J‏ ‎SN‏ ‏ورا ‎Nu‏ 0 7 1 أو ملح مقبول صيدلانياً ‎(die‏ حيث: ‎Jia‏ كل ‎Nu‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ ‎Z‏ عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ و © هو ببتيد خارق للخلية ‎(CPP)‏ وجزء رابط تم اختياره من ‎—C(0)(CH2)2NHC(O)( «~C(O)(CH2)2NH-CPP ~C(O)(CH2)SNH-CPP‏ ‎«—C(O)CH2NH-CPP (CH2)5NH-CPP‏ 3 : ‎i‏ 0 خب حيث يتم إرفاق ‎CPP‏ بجزءٍ الرابط من خلال رابطة أميد عند نهاية كريوكسي ‎CPP‏
فى بعض ‎oz all‏ يكون 6 بالصيغة: ‎N 8]‏ حك
‎A 6‏ حيث يتم اختيار 48 من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى نماذج مختلفة؛ © يكون بالصيغة: ‎KT‏ \ حك
‎5 = 5
‏يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى نماذج معينة؛ يكون ‎CPP‏ بالصيغة: ا
‏8 ا حيث يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل.
‏0 في نماذج مختلفة؛ يكون ‎CPP‏ بالصيغة:
ا 6 ا ¢ و يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. في جوانب مختلفة؛ يتضمن الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالكشف مركب بالصيغة (1/110): 6 ‎N‏ ‏0 ‏باح ‏} ‎NG Nu‏ ‎J‏ ‏اح ‏} ‎o Nu (VIId)‏ ‎J‏ ‏مب ‎lz‏ 9 ‎Nu‏ 0 ‎J‏ ‏2 ‎R‏ ‏5 حيث: ‎Jia‏ كل ‎Nu‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛
يكون كل ‎R1‏ هو ‎-١11)44(2‏ حيث يكون كل 44 هو بشكل مستقل ‎C1-C6‏ ألكيل؛ و يتم اختيار ‎R2‏ من ا ‎(din‏ 4- ميثوكسي ‎(Jig‏ أسيتيل ؛ بنزويل» وستيرويل؛ و ‎G‏ هو ببتيد خارق للخلية (0007") وجزء رابط تم اختياره من ‎~C(0)(CH2)2NHC(O)( «~C(O)(CH2)2NH-CPP (~C(O)(CH2)SNH-CPP‏ ‎~C(O)CH2NH-CPP (CH2)5NH-CPP 5‏ و: ‎i‏ 0 0 حيث يتم إرفاق ‎gia: CPP‏ الرابط من خلال رابطة أميد عند نهاية كربوكسي ‎CPP‏ ‏في بعض النماذج؛ في حالة واحدة على الأقل ‎R13‏ يكون هو 1)0113(2-. في نماذج معينة؛ يكون كل حدوث لذ ‎RI‏ هو ‎—N(CH3)2‏ ‏10 فى يعض ‎oz all‏ يكون 6 بالصيغة: ]8 حك حيث يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى نماذج مختلفة فى كل حالة لذ 41 يكون هو ‎«—N(CH3)2‏ © يكون بالصيغة:
‎N 8]‏ و
‎A s
‏6 و
‏يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى نماذج معينة؛ يكون ‎CPP‏ بالصيغة: ا
‏6 ا
‏5 حيث يتم اختيار ‎(He Ra‏ أسيل ‎acyl‏ ؛ بنزويل ‎benzoyl‏ ؛ وستيرويل الا516810. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ أسيتيل. فى نماذج مختلفة فى كل حالة لذ 41 يكون هو ‎«—N(CH3)2‏ ‏يكون ‎CPP‏ بالصيغة:
‏ا ‎s‏ ل 6 و يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى جوانب مختلفة » يتضمن قليل النوكليوتيد فى اتجاه مضاد للنسخ بالكشف مركب بالصيغة ‎:(Vlle)‏
‎G‏ ‎N‏ ‎(J‏ ‏ا ‎A‏ ‏} ‎NG Nu‏ ‎J‏ ‏ا ‎a‏ ‏} ‏متام ‎Nu‏ ' 1 ‎J‏ ‎ot‏ ‎Iz‏ 0 ‎Nu‏ 0 ‎J‏ ‏2 ‎R‏ ‏أو ملح مقبول صيدلانياً ‎(die‏ حيث: ‎Jia‏ كل ‎Nu‏ قاعدة نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ يتم اختيار ‎R2‏ من ‎ing oH‏ 4- ميثوكسي ‎(Jig‏ أسيتيل ؛ بنزويل» وستيرويل؛ و ‎G‏ هو ‎any‏ خارق للخلية ‎('CPPY)‏ وجزءٍ رابط تم اختياره من ‎—C(O)(CH2)2NHC(O)(CH «~C(O)(CH2)2NH-CPP ~C(O)(CH2)5SNH-CPP‏ ‎«—C(O)CH2NH-CPP (2)5NH-CPP‏ و: ‎i‏ 0 يت
حيث يتم إرفاق ‎CPP‏ بجزءٍ الرابط من خلال رابطة أميد عند نهاية كربوكسي ‎CPP‏ ‏فى بعض ‎oz all‏ يكون 6 بالصيغة: ‎N 8]‏ حك لم حيث يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. فى نماذج مختلفة؛. © يكون بالصيغة: ‎N 8]‏ و لم 6 و يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. في نماذج معينة؛ يكون ‎CPP‏ بالصيغة: ا ا 0 حيث يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎(H‏ أسيل؛ بنزويل» وستيرويل. في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. في نماذج مختلفة؛ يكون ‎CPP‏ بالصيغة:
ا سك ؛'و يكون ‎Ra‏ هو أسيتيل. في بعض النماذج؛ ‎Lay‏ في ذلك؛ على سبيل المثال؛ نماذج للأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(VI)‏ و ‎(VII)‏ و ‎(Vila)‏ و(0اا/ا) و (1/110) 5 ‎(VII) 5 (Vile) 5 (VII)‏ تعد المتوالية
المستهدفة متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1 (برقم تعريف للمتوالية: 1) من حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا البشري ‎(GAA)‏ في نماذج مختلفة تتضمن؛ على سبيل المثال» نماذج للأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(VI)‏ و ‎(VII)‏ و ‎(lla)‏ و(0اا/ا) و ‎(VII) 5 (Vile) 5 (VII) 5 (Vic)‏ المتوالية المستهدفة متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1
0 (برقم تعريف للمتوالية: 1) من حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ‎ll‏ البشري ‎(GAA)‏ ‏حيث تشتمل منطقة الهدف على قاعدة نووية إضافية واحدة على الأقل مقارنة بالمتوالية المستهدفة؛ حيث لا تتضمن القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل أي قاعدة نووية متممة في المتوالية المستهدفة؛ وحيث تكون القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل بالداخل من منطقة الهدف. في نماذج ‎(dima‏ تشتمل المتوالية المستهدفة على متوالية تم اختيارها من متوالية بهوية رقم: 13-
5 متوالية بهوية رقم: 86 (على سبيل المثال؛ أرقام هوية المتوالية: 13- 58 أو 59- 75). في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13( 29-27« 36-34 59؛ و82. في نماذج معينة؛ تشتمل المتوالية المستهدفة على متوالية تم اختيارها من الجداول 2 أ -2 ج. بالإضافة إلى ذلك؛ ‎Lady‏ يتعلق بالمتواليات الموضحة هنا في الجداول 2 أ -2 ج؛ في نماذج معينة؛ يتم تحديد متوالية مع تتام 100 % وبتم إزالة واحدة أو
0 أكثر من القواعد النووية (أو يتم تخليقها بالتناوب مع واحدة أو أكثر من القواعد النووية المفقودة) بحيث تتضمن المتوالية الناتجة واحدة أو أكثر من القواعد النووية المفقودة ‎AST‏ من متممتها
الطبيعية في المنطقة المستهدفة. وباستثناء الجزءِ الذي تتم فيه إزالة واحدة أو أكثر من القواعد النووية؛ فمن المتوقع أن تكون الأجزاء المتبقية متممة بنسبة 96100. ومع ذلك؛ فإنه في نطاق هذا الاختراع يمكن أن يكون هناك انخفاض في مستويات التتام. في بعض النماذج لأي من الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ أو الطرق أو التركيبات التي تم وصفها هناء يعد 2 هو عدد صحيح من 8 إلى 28؛ من 15 إلى 38؛ 15 إلى 28؛ 8 إلى 25؛ من 15 إلى 25؛ من 10 إلى 38؛ من 10 إلى 25؛ من 12 إلى 38؛ من 12 إلى 25؛ من 14 إلى 38؛ أو من 14 إلى 25. في بعض النماذج لأي من الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ أو الطرق أو التركيبات التي تم وصفها هناء يكون ‎Z‏ هو ‎١12‏ 13 14؛ 15 أو 16 أو 17 أو 18 أو 19 أو 20 أو 21 أو 22 أو 23 أو 24 أو 25 أو 26 أو 27 أو 28 أو 29 أو 30 أو 31 0 أو 32 أو 33 أو 34 أو 35 أو 36 أو 37 أو 38. في بعض النماذج لأي من الأوليجومرات في ‎sla‏ مضاد للنسخ أو الطرق أو التركيبات المضادة التي تم وصفها هناء يكون ‎Z‏ هو 12 13؛ 4 15 16 17« 18« 19 20 21 22« 23؛ 24؛ 25 26 27؛ أو 28.. في بعض النماذج لأي من الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ أو الطرق أو التركيبات المضادة التي تم وصفها هناء يكون ‎Z‏ هو 15 أو 16 أو 17 أو 18 أو 19 أو 20 أو 21 أو 22 أو 23 أو 24 5 أو 25. في بعض النماذج؛ يكون كل 2 بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن مركبات بالصيغ (ا) ‎(VII) (V1) «(V) «(IVc) (IVb) (IVa) (la)‏ (قلا/ي ‎«(VIIb)‏ ‎(Vile) «(VIId) «(Viic)‏ و ‎(VIII)‏ وهو عدد صحيح من 8 إلى 28 في بعض النماذج؛ يكون كل 2 بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن 0 مركبات بالصيغ ‎(IVb) (IVa) (la) «(l)‏ زعلا ‎«(VIIb) ((Vla) (VII) (V1) «(V)‏ ‎(Vile) (VII) ((Viic)‏ و ‎(VII)‏ وهو عدد صحيح من 15 إلى 38 في بعض النماذج؛ يكون كل ‎Z‏ بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ ‎Ble‏ عن مركبات بالصيغ (ا) ‎(VII) (V1) «(V) «(IVc) (IVb) (IVa) (la)‏ (قلا/ي ‎«(VIIb)‏ ‎(Vile) (VII) (Vic)‏ و ‎(VII)‏ وهو عدد صحيح من 15 إلى 28
في بعض ‎oz dal‏ يكون كل 2 بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن مركبات بالصيغ (ا) ‎(VII) (V1) «(V) «(IVc) (IVb) (IVa) (la)‏ (قلا/ي ‎«(VIIb)‏ ‎(Vile) «(VIId) «(Viic)‏ و ‎(VIII)‏ وهو عدد صحيح من 8 إلى 25 في بعض ‎oz dal‏ يكون كل ‎Z‏ بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن مركبات بالصيغ (ا) ‎(VII) (V1) «(V) «(IVc) (IVb) (IVa) (la)‏ (علا/ي ‎«(VIIb)‏ ‎(Vile) (VII) (Vic)‏ و ‎(VII)‏ وهو عدد صحيح من 15 إلى 25 في بعض ‎oz dal‏ يكون كل ‎Z‏ بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن مركبات بالصيغ (ا) ‎(VII) (V1) «(V) «(IVc) (IVb) (IVa) (la)‏ (قلا/ي ‎«(VIIb)‏ ‎(Vile) «(VIId) ((Vlic)‏ و ‎(VIII)‏ وهو عدد صحيح من 10 إلى 38 0 في بعض ‎oz dail‏ يكون كل 2 بالأوليجومرات في ‎slat)‏ مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن مركبات بالصيغ (ا) ‎(VII) (V1) «(V) «(IVc) (IVb) (IVa) (la)‏ (قلا/ي ‎«(VIIb)‏ ‎(Vie) (Vid) (Vic)‏ و ‎(VII)‏ وهو صحيح من 10 إلى 25 في بعض ‎oz dal‏ يكون كل 2 بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن مركبات بالصيغ (ا) ‎(VII) (V1) «(V) «(IVc) (IVb) (IVa) (la)‏ (قلا/ي ‎«(VIIb)‏ ‎(Vile) «(VIId) (Vile) 5‏ و ‎(VIII)‏ وهو عدد صحيح من 12 إلى 38 في بعض ‎oz dal‏ يكون كل 2 بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن مركبات بالصيغ (ا) ‎(VII) (V1) «(V) «(IVc) (IVb) (IVa) (la)‏ (قلا/ي ‎«(VIIb)‏ ‎(Vile) (VII) (Vic)‏ و ‎(VII)‏ وهو عدد صحيح من 12 إلى 25 في بعض ‎oz dal‏ يكون كل 2 بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن 0 مركبات بالصيغ ‎(IVb) (IVa) (la) «(l)‏ زعلا ‎«(VIIb) ((Vla) (VII) (V1) «(V)‏ ‎(Vile) (VII) (Vic)‏ و ‎(VII)‏ وهو عدد صحيح من 14 إلى 38
في بعض النماذج؛ يكون كل 2 بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن مركبات بالصيغ (ا) ‎(IVa) (la)‏ (طلال ‎(VII) «(V1) «(V) «(IVC)‏ بعلالي (طاا/)ء ‎(Vie) «(VIId) (Vic)‏ و ‎(VII)‏ وهو عدد صحيح من 14 إلى 25. في بعض النماذج؛ يكون كل 2 بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن مركبات بالصيغ ‎(I)‏ (قا) ‎«(V) (IVC) «(IVb) (IVa)‏ زان ‎(VII)‏ بعلالي (طاا/)ء ‎(Vile) »)1/110( ¢(Vlic)‏ و (ااا/ا)» من 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 2827 29 30 31( 32 33 34 35 36 37 أو 38. في بعض النماذج؛ يكون كل ‎Z‏ بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ ‎Ble‏ عن مركبات بالصيغ (ا) ‎(IVa) (la)‏ (طلال ‎(VII) «(V1) «(V) «(IVC)‏ بعلالي (طاا/)ء 0 اولاني ‎(VIII) 5 (Vlle) ((VIld)‏ 1200 « 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 أو 28. في بعض النماذج؛ يكون كل 2 بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ عبارة عن مركبات بالصيغ (ا) ‎(IVa) (la)‏ (طلال ‎(VII) «(V1) «(V) «(IVC)‏ بعلالي (طاا/)ء ‎(Vile) «(VIid) «(Vlic)‏ و ‎(VIII)‏ من15 16 ¢17 18 19« 20« 21 22 23 24 أو 5 25 في بعض النماذج؛ تتضمن كل ‎NU‏ بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ المعدلة بالكشف؛ مركبات بالصيغ (ا) ‎(IVa) (la)‏ (طلال ‎(VII) «(V1) «(V) «(IVC)‏ بعلالي (طاا/)ء ‎(Vile) »)1/110( (Vic)‏ و ‎(VII‏ يتم اختيارها بشكل مستقل من المجموعة المكونة من الأدينين» الجوانين» الثايمين ‎thymine‏ اليوراسيل ‎curacil‏ السيتوزين» الهيبوكسانثين» 26= 0 داي أمينو بيورين؛ 5-ميثيل السيتوزين» 5© -برويينل- بيرميدينات معدلة؛ و 9- (أمينو إيثوكسي) فينأوكسازين. في بعض النماذج؛ تتضمن المتوالية المستهدفة بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالكشف؛ مركبات لها الصيغ (اى ‎¢(V) «(IVC) (IVb) (IVa) (la)‏ زال ‎(VII)‏ بعلالي (طلا/)ء (1/110)» (1/110)؛ ‎(Vile)‏ و ‎(VII)‏ حيث انها متممة ل 10 أو أكثر من النيوكليوتيدات المتجاورة
في منطقة هدف في نطاق إنترون 1 ( متوالية بهوية رقم :1)؛ إنترون 21 ( متوالية بهوية رقم :60( أو اكسون 2( متوالية بهوية رقم :61) من حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا البشري ‎(GAA)‏ في نماذج معينة؛ تتضمن المتوالية المستهدفة بالأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالكشف؛ مركبات لها الصيغ (ا) ‎«(V) ¢(IVe) (IVb) (IVa) ¢(la)‏ زال ‎(VII)‏
‎(Vile) (VIId) (Vic) «(VIIb) (Vila) 5‏ و ‎(VIE‏ تشتمل على متوالية تم اختيارها من المتواليات بالجداول 2أ- 2ج؛ كما هو موصوف هناء وهي شدفة من 12 نيوكليوتيد مجاور بالمتوالية التي تم اختيارها من الجداول 2أ- 22 كما هو موصوف هناء أو هي متغير له نسبة تطابق مئوية 9690 على الأقل مع متوالية تم اختيارها من الجداول 2أ- 22 كما هو موصوف هنا (حيث يتم اختيار ‎X‏ من اليوراسيل ‎(U) uracil‏ أو الثايمين ‎thymine‏ (1) حسب مقتضى
‏0 الحال اعتمادا على الجدول المشار إليها). في نماذج ‎dime‏ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13( 29-27 36-34 59 و 82. تتضمن الأولجغومرات في اتجاه مضاد للنسخ / كيمياء التي يمكن استخدامها وفقاً للإفصاح الحالي تلك الموصوفة في براءات الاختراع ومنشورات البراءات التالية؛ والتي تم استخدامها هنا في هذه البراءة كمرجع في مجملها: منشور معاهدة التعاون في شؤون براءات الاختراع للطلب الدولي رقم /
‏5 002390/2007؛ الطلب الدولي رقم / 120820/2010؛ و الطلب الدولي رقم /¢148249/2010 براءة الاختراع الامريكية رقم €7:838¢657 وطلب براءة الاختراع الامريكية رقم 1 0269820/201. يمكن تحضير الأوليجونيكليوتيدات في اتجاه مضاد للنسخ بواسطة تخليق الطور الصلب بصورة متقطعة»؛ باستخدام طرق معروفة في الفن وموصوفة في المراجع المذكورة هنا.
‏20 ج. ‎CPPs‏ ومترافقات من الببتيد غنية -بالأرجينين ‎(PPMOs) Arginine-Rich Peptide‏ في نماذج معينة؛ يترافق قليل النوكليوتيد في اتجاه مضاد للنسخ مع ببتيد ثاقب للخلية -اا06 ‎penetrating peptide‏ (يشار إليه هنا باسم ‎"CPP" cell-penetrating peptide‏ ). في بعض النماذج؛ يكون ‎CPP‏ عبارة عن ببتيد غني بالأرجينين. يشير مصطلح " غني بالأرجينين " ‎CPP)‏ يتضمن 2 على ‎(J)‏ وبفضل 2؛ 3؛ 4؛ 5؛ 6؛ 7( أو 8 بقايا من الأرجينين؛ يتم
فصل كل منها اختياريا من خلال واحدة أو أكثر من البقايا غير الآلفة للماء غير المشحونة؛ واختياريا تحتوي على حوالي 14-6 بقية من الأحماض الأمينية. كما هو موضح أدناه؛ ويتم ريط ‎CPP‏ بطريقة مفضلة عند حدها الكريوكسي نحو النهاية 3 'و / أو 5' من قليل النوكليوتيد في اتجاه مضاد للنسخ خلال رابط» قد يكون أيضا واحدا أو أكثر من الأحماض ‎dine)‏ ويكون بطريقة مفضلة أيضا مغطى عند اطرافه الأمينية من خلال بديل ‎Ra‏ مع 48 تم اختياره من ‎SH‏ ‏أسيل أو بنزويل أو ستيرويل . في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ عبارة عن أسيتيل. كما يتضح من الجدول أدناه؛ تتضمن الأمثلة غير الحصرية للاستخدام 1 ‎CPP‏ هنا ‎—(RXR)4~‏ ‎~GLY-R6- «~GLY-R~(FFR)3-Ra -B-X~(RXR)4-Ra R-(FFR)3-Ra (Ra‏ 8 و ‎—R6-Ra‏ حيث يتم اختيار 48 من ‎١!‏ أو أسيل أو بنزويل أو ستيرويل وحيث تكون ‎R‏ ‏0 هي أرجينين؛ و هو 6- حمض أمينو هكسانويك؛ 8 هو 8 - ألانين؛ يكون © هو فينيل ألانين و ‎GLY‏ ( أو 6 ) هو جلايسين. ويهدف ‎"RG"‏ 000 للإشارة إلى الببتيد من ستة )6( بقايا من الأرجينين مرتبطة ‎Lae‏ عن طريق روابط من الأميد (وليس بديلا واحد على سبيل المتال6» ) في بعض النماذج؛ يكون ‎Ra‏ عبارة عن أسيتيل. يتم توفير ‎CPPs‏ النموذجية في جدول 2د (أرقام تعريف متوالية: 12-6). جدول 2د: ببتيدات تمثيلية ثاقبة للخلية ‎oo RXRRXRRXRRXR (RXR)4‏ ‎RFFRFFRFFR (RFF)3R‏ ‎oo RXRRXRRXRRXRXB (RXR)4XB‏ ‎RXRRXRRXRRXRXB (RFF)3RXB‏ خخ ‎RFFRFFRFFR (RFF)3RG‏
‎X‏ هو 6- حمض أمينو هكسانويك؛ 8 هو 8 - ألانين؛ يكون ‎F‏ هو فينيل ألانين و تاهو جلايسين توف كذلك ‎CPPS‏ وتخليقها وطرق الاقتران بأوليجومر في منشور الطلب الأمريكي رقم 2 وفي منشور الطلب الدولي لبراءة الاختراع 150960/2012؛ 9 و ¢150960/2012 ولقد تم استخدام كل منها هنا في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. في بعض النماذج؛ يشتمل ‎(UE‏ الأوكليوتيد في اتجاه مضاد للنسخ على بديل "6 يُعرّف بأنه توليفة من ‎CPP‏ ورابط. يقوم الرابط ‎CPP days‏ عند نهاية كربوكسية خاص به بالنهاية 3' و / أو 5 من ‎(LE‏ الأوكليوتيد. في نماذج مختلفة؛ قد يشتمل ‎(lh‏ النُوكليوتيد في اتجاه مضاد للنسخ على ‎CPP‏ واحد فقط مرتبط بالنهاية 3' من الأوليجومر. في نماذج ‎«(GAT‏ قد يشتمل ‎(lB‏ التوكليوتيد في اتجاه مضاد للنسخ على ‎CPP‏ واحد فقط مرتبط بالنهاية 5' من الأوليجومر. 0 1 قد يتضمن رابط داخل© ¢ على سبيل المثال .1 أو 2 أو 3 أو 4 أو 5 أحماض أمينية. فى نماذج معينة؛ يتم اختيار ‎HE G‏ ‎«C(O)(CH2)5NH-CPP‏ ‎«C(O)(CH2)2NH-CPP‏ ‎¢C(0)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NH-CPP‏ ‎«C(O)CH2NH-CPP 5‏ والصيغة: ‎i‏ 0 0
حيث يتم إرفاق ‎CPP‏ بجزء الرابط من خلال رابطة أميد عند نهاية كربوكسية خاصة ب ‎{CPP‏ ‏في نماذج مختلفة؛ يكون ‎CPP‏ عبارة عن ببتيد غني بالأرجينين كما هو موضح أعلاه ويتضح من خلال الجدول 2د. في نماذج معينة؛ يكون ‎CPP‏ الغني بالأرجينين هو-46-548- (أي ستة بقايا من الأرجينين؛ متوالية بهوية رقم: 12)؛ حيث يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎STH‏ أسيل أو بنزويل أو ستيرويل. يكون ‎Ra‏ هو الأسيتيل. في نماذج مختلفة؛ يتم اختيار ‎CPP‏ من أرقام هوية المتوالية: 6 أو 7 أو 12 وبتم اختيار رابط من المجموعة الموضحة أعلاه. في بعض النماذج؛ يكون ‎CPP‏ ‏هو متوالية بهوية رقم: 12 ويكون الرابط هو ‎Gly‏ ‏في نماذج معينة؛ يكون © هو ‎~C(O)CH2NH-R6-Ra‏ مرتبط تساهميًا بأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالكشف عند الطرف 5 'و / أو 3 من ‎١‏ لأوليجومر ‎٠‏ حيث يكون ‎Ra‏ هو ‎H‏ أو أسيل 0 أو بنزويل أو ستيرويل أو لتغطية النهاية الأمينية من ‎Ra RE‏ هو الأسيتيل. في هذا المثال غير الحصري» يكون ‎CPP is -R6-Ra‏ والرابط هو -1ل0(0112)©-, (أي؛ ‎(GLY‏ يتم تمثيل هذا المثال الخاص ل ‎Lead G = ~C(O)CH2NH-R6-Ra‏ في البنية التالية: ]8 حك ‎cus‏ يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎١١‏ أو أسيل أو بنزويل أو ستيرويل. في بعض النماذج, يتم اختيار ‎G‏ ‏5 .من أرقام هوية المتوالية: 6-3. في نماذج معينة؛ يكون © هو متوالية بهوية رقم: 6. في بعض النماذج؛ 48 هو الأسيتيل. في نماذج مختلفة؛ يكون ‎CPP‏ هو 46-148!-؛ كما يتم تمثيله أيضا بالصيغة التالية:
‎H‏ 9 ‎N‏ ‏م 5 ‎NH‏ ‎NH,‏ لضن 6 حيث يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎H‏ أو أسيل ‎acyl‏ ؛ بنزويل ‎benzoyl‏ « وستيرويل ‎-stearoyl‏ في بعض النماذج؛ تكون ‎CPP‏ برقم تعريف للمتوالية: ‎XX‏ فى بعض النماذج؛ 8 هو أسيتيل . في بعض النماذج؛ يكون ‎CPP‏ هو ‎«(RXR)4-Ra‏ كما يتم تمثيله أيضا بالصيغة التالية: ا 7 ‎fr y‏ ‎HN NH, HN NH \ 5‏ في نماذج مختلفة؛ يكون ‎CPP‏ هو ‎—R—(FFR)3-Ra‏ كما يتم تمثيله أيضا بالصيغة التالية: ‎SN‏ ‎HN‏ ‏0 0 ‎H H‏ ‎N N‏ فج لي ‎N‏ ‎H H‏ 0 0 ‎HN 3‏ ‎A‏ ‏في نماذج معينة؛ يتم اختيار ‎HE G‏
‎¢C(O)(CH2)SNH-CPP‏ ‎¢C(O)(CH2)2NH-CPP‏ ‎¢C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5SNH-CPP‏ ‎«C(O)CH2NH-CPP‏ والصيغة: ‎i‏ 0 يح حيث يتم إرفاق ‎CPP‏ بجزء الرابط بواسطة رابطة أميد ‎amide bond‏ عند نهاية كربوكسية ‎carboxy terminus‏ خاصة ب ‎«CPP‏ وحيث يتم اختيار ‎CPP‏ من : ب ‎HN‏ ‏0 0 ‎N N‏ فيج لي ‎N‏
H H
«(-R-(FFR)3-Ra) « "" NH rT ‏أو‎ «(~(RXR)4-Ra) « «10
0 H
N
2 5
NH
H NH, acetyl ‏هو أسيتيل‎ Ra ‏في بعض النماذج؛‎ .(-R6-Ra) « 6 ‏عبارة عن‎ antisense ‏في اتجاه مضاد للنسخ‎ oligomer ‏في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر‎ ‏تم اختياره من:‎ (VI) ‏مركب بالصيغة‎ 3 7 N(CH © 9 a ‏لأ ها‎ / A N(CH3) (HCN, S of ‏ما ب‎ N 0 Ra
J ‏ب 6 1 5 ة‎ (VIIIa) 5 ‏و‎ ‎5 3' ‏برقع‎ “AS A A ° 6 (A SE i (H3C)N, f ~ N{(CH3)
Pa Ne / \ N
J ‏ال‎ 5 \ 6 “Rb (VIIIb) ‏لأي مما سبق؛ حيث:‎ wy ‏أو ملح مقبول صيد‎
تمثل كل ‎NU‏ قاعدة نووية أو جزءٍ ازدواج قاعدي من البيورين ©0010 أو البيريميدين ‎pyrimidine‏ يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة؛ ‎Z‏ عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ يتم اختيار ‎How Ra‏ أو أسيل ‎acyl‏ ؛ بنزويل ‎benzoyl‏ ؛ وستيرويل ‎stearoyl‏ ؛ و يتم ‎Rb lust‏ من ‎acyl H‏ « بنزويل ‎benzoyl‏ ؛ وستيرويل ‎stearoyl‏ ؛ و 4- ‎Sei‏
تريتيل ‎.4—-methoxytrityl‏ ‏في بعض النماذج؛ بما في ذلك؛ على سبيل المثال؛ نماذج من الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(VII)‏ تكون المتوالية المستهدفة متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1 ( متوالية بهوية رقم : 1) من حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا البشري ‎human‏
‎.(GAA) alpha glucosidase 0‏ في نماذج معينة؛ بما في ذلك؛ على سبيل المثال؛ نماذج للأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة (|1/1)؛ تعد المتوالية المستهدفة متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1 (برقم تعريف للمتوالية: 1) من حمض ‎MRNA‏ قبلي لجين جلوكوسيداز ألفا البشري ‎pre-mRNA of the‏ ‎(GAA) human alpha glucosidase‏ حيث تشتمل منطقة الهدف على قاعدة نووية إضافية
‏5 واحدة على الأقل مقارنة بالمتوالية المستهدفة؛ حيث لا تتضمن القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل أي قاعدة نووية متممة في المتوالية المستهدفة؛ وحيث تكون القاعدة النووية الإضافية الواحدة على الأقل بالداخل من منطقة الهدف. في نماذج معينة؛ تشتمل المتوالية المستهدفة على متوالية تم اختيارها من متوالية بهوية رقم: 13-متوالية بهوية رقم: 86 (على سبيل المثال؛ أرقام هوية المتوالية: 58-13 أو 75-59). في نماذج معينة؛ تشتمل المتوالية المستهدفة على متوالية
‏0 .تم اختيارها من الجداول 2 أ -2 ج. في نماذج معينة؛ تشتمل المتوالية المستهدفة على متوالية تم اختيارها من الجداول 2 أ و2 ج. بالإضافة إلى ذلك؛ وفيما يتعلق بالمتواليات الموضحة هنا في الجداول 2 أ -2 ج؛ في نماذج معينة؛ يتم تحديد متوالية مع تتام 100 % وبتم إزالة واحدة أو أكثر من القواعد النووية (أو يتم تخليقها بالتتاوب مع واحدة أو أكثر من القواعد النووية المفقودة) بحيث تتضمن المتوالية الناتجة واحدة أو أكثر من القواعد النووية المفقودة ‎AST‏ من متممتها
الطبيعية في منطقة الهدف. وباستثناء الجزء الذي تتم فيه إزالة واحدة أو أكثر من القواعد النووية؛ فمن المتوقع أن تكون الأجزاء المتبقية متممة بنسبة 96100. ومع ذلك؛ فإنه في نطاق هذا الاختراع يمكن أن يكون هناك انخفاض في مستويات التتام. في بعض النماذج؛ تتضمن المتوالية المستهدفة للأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ؛ على سبيل المثال» بعض نماذج للأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة(ا) ‏ (ها) (8/اا) ‎«(IVb)‏ ‎«(IVc)‏ ( لي ‎(V1)‏ (لالاي ‎«(Vlla)‏ (طاا/ا)ء ‎(Vile) )1/11( (Vic)‏ و ‎(VII)‏ يتم ‏اختيارها من المتواليات الموضحة في الجداول 2أ- 2ج؛ كما هو موصوف هناء وكما يلي: ‏ا ‎Cus (GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA AGC) 13 ‏ش ش) متوالية بهوية رقم:‎ 22 2 Z 0 ‎Cus (GCC AGA AGG AAG GCG AGA AAA GCX) 14 ‏ت ت) متوالية بهرية رقم:‎ ‏2 هي 22 ‏ث ث) متوالية بهوية رقم: 15 ‎(CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC)‏ حيث ‎22 ‏هي‎ 2
Z ‏حيث‎ (CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC) 16 ‏خ خ) متوالية بهوية رقم:‎ 5 ‏هي 22 ‎Z ‏حيث‎ (AGA AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA) 17 ‏ذ ذ) متوالية بهوية رقم:‎ ‏هي 22 ‎Z ‏حيث‎ (GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC CAG) 18 ‏وو) متوالية بهوية رقم:‎ 22 ‏هي‎ 0 ‎Z ‏حيث‎ (AAG GAA GGC GAG AAA AGC XCC AGC) 19 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (Til ‏هي 22
(AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA GCA) 20 ‏ب ب ب) متوالية بهوية رقم:‎ 2 ‏حيث 7 هي‎ ‏حيث‎ )066 CXC XCA AAG CAG CXC XGA GA) 21 ‏ج ج ج) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏و هي‎
Z ‏حيث‎ (ACG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AG) 22 ‏ددد) متوالية بهوية رقم:‎ 5 21 ‏هي‎ ‏حيث‎ (CAC GGC XCX CAA AGC AGC XCX GA) 23 ‏هاه ه) متوالية بهوية رقم:‎ «21 ‏و هي‎
Z cus (XCA 066 CXC XCA AAG CAG CXC XG) 24 ‏ووو) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 10
Z ‏حيث‎ (CXC ACG GCX CXC AAA GCA GCX CX) 25 ‏ززز) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ ‎Z ‏حيث‎ (ACX CAC GGC XCX CAA AGC AGC XC) 26 ‏ح ح ح) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ ‏حيث‎ (GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA GC) 27 ‏طط ط) متوالية بهوية رقم:‎ 5 21 ‏و هي‎ ‏حيث‎ (GGC GGC ACX CAC GGC XCX CAA AG) 28 ‏ي ي ي) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏و هي‎ ‏حيث‎ (CGG CAC XCA 066 CXC XCA AAG CA) 29 ‏رقم:‎ ise: ‏ك ك ك) متوالية‎ 21 ‏هي‎ Z 20
Z tus (GCA CXC ACG GCX CXC AAA GCA GC) 30 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (J ‏ل ل‎ 21 ‏هي‎
Z ‏حيث‎ (GGC ACX CAC GGC XCX CAA AGC AG) 31 ‏م م م) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ ‎Z ‏حيث‎ (CAC XCA 066 CXC XCA AAG CAG CX) 32 ‏ن ن ن) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ ‎(GCC AGA AGG AAG GCG AGA AAA GC) 33 ‏رقم:‎ ge ‏س س س) متوالية‎ 5 21 ‏حيث 7 هى‎
Z ‏حيث‎ (CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG C) 34 ‏رقم:‎ dugg ‏ع ع ع) متوالية‎ ¢19 ‏هي‎ ‎Z tus (CAG AAG GAA GGC GAG AAA AGC) 35 ‏ف ف ف) متوالية بهرية رقم:‎ ¢19 ‏هي‎ 10 (GGC CAG AAG GAA 666 GAG AAA AG) 36 ‏رقم:‎ dig: ‏ص ص ص) متالية‎ 21 ‏حيث 7 هى‎
Z tus (GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA A) 37 ‏ق ق 3( متوالية بهوية رقم:‎ ¢19 ‏هي‎ ‏هي‎ Z ‏حيث‎ (GGC CAG AAG GAA 666 GAG AAA) 38 ‏ررر) متوالية بهوية رقم:‎ 5 ¢19 ‏حيث‎ (CGG CAC XCA CGG CXC XCA AAG CA) 39 ‏ش ش ش) متوالية بهوية رقم:‎ «21 ‏و هي‎ ‏حيث‎ (GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA GC) 40 ‏تت ت) متوالية بهوية رقم:‎ «21 ‏هي‎ Z 20
GGC GGC ACX ( 41 ‏ث ث ث) متوالية بهوية رقم:‎ ‏هى 21؛‎ Z ‏حيث‎ (CAC GGC XCX CAA AG
(XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GGC) 42 ‏خ خ خ) متوالية بهوية رقم:‎ 2 ‏حيث 7 هى‎
Z ‏حيث‎ (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GC) 43 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (333 21 ‏هي‎ ‏حيث 2 هى‎ (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA C) 44 ‏ووو) متوالية بهوية رقم:‎ 5 «20
Z tus (GGC CAG AAG GAA GCG AGA AAA GC) 45 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (If 21 ‏هي‎ ‎(GGC CAG AAG GAA CGA GAA AAG C) 46 ‏ب ب ب ب) متوالية بهرية رقم:‎ «20 ‏هي‎ Z ‏حيث‎ 0 (AGG AAG CGA GAA AAG CXC CAG CA) 47 ‏ج ج ج ج) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏حيث 7 هي‎ ‏هى‎ Z ‏حيث‎ (AGG AAC GAG AAA AGC XCC AGC A) 48 ‏دددد) متوالية بهوية رقم:‎ «20 (CGG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA) 49 ‏هه 4( متوالية بهرية رقم:‎ & 15 2 ‏حيث 7 هي‎ ‏هى‎ Z ‏حيث‎ (CGC XCX CAA AGC AGC XCX GAG A) 50 ‏وووو) متوالية بهوية رقم:‎ «20 ‏هى‎ Z ‏حيث‎ (CCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA) 51 ‏زززز) متوالية بهوية رقم:‎ ¢19 20 (BGC GGC ACX CAC GGG CXC XCA AAG) 52 ‏ح ح ح ح) متوالية بهوية رقم:‎ 2 ‏حيث 7 هي‎
‏حيث‎ (GGC 660 ACX CAC GCX CXC AAA 6( 53 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (& Lil «20 ‏و هي‎
Z ‏حيث‎ (GGC 660 ACX CAC CXC XCA AAG) 54 ‏ي ي ي) متوالية بهوية رقم:‎ © ¢19 ‏هي‎ ‎(GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGC) 55 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (dd ‏5ك ك‎ «22 ‏حيث 7 هى‎ ‏رقم:‎ digg Allg
GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GC) 56 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (J ‏ل‎ J ‏ل‎ ‎21 ‏حيث 7 هى‎
Z ‏حيث‎ (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG C) 57 ‏م م م م) متوالية بهوية رقم:‎ «20 ‏هي‎ 10
Z ‏حيث‎ (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACC) 58 ‏ن ن ن ن) متوالية بهوية رقم:‎ ¢19 ‏هي‎ ‏(1)؛‎ thymine ‏(لا) أو الثايمين‎ uracil ‏من اليوراسيل‎ X ‏حيث يتم اختيار‎
Al
Cus (GGC CAG AAG GAA GGG CGA GAA AAG C) 59 ‏ص) متوالية بهرية رقم:‎ 15 «23 ‏و هي‎
Z ‏حيث‎ (CCA GAA GGA AGG GCG AGA AAA GCX C) 60 ‏ق) متوالية بهرية رقم:‎ ¢23 ‏هي‎ ‎Z ‏حيث‎ (AAG GAA GGG CGA GAA AAG CXC CAG C) 61 ‏ر) متوالية بهوية رقم:‎ «23 ‏هي‎ 20
Cus (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGG C) 62 ‏ش) متوالية بهوية رقم:‎ «23 ‏و هي‎
‏حيث‎ (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GGG C) 63 ‏ت) متوالية بهوية رقم:‎ ¢23 ‏و هي‎ ‏حيث‎ (AGA AGG AAG GGC GAG AAA AGC XCC A) 64 ‏ث) متوالية بهرية رقم:‎ ¢23 ‏و هي‎
Z ‏حيث‎ (GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX C) 65 ‏خ) متوالية بهوية رقم:‎ 5 «23 ‏هي‎ ‎Z ‏حيث‎ (CXC XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC A) 66 ‏ذ) متوالية بهوية رقم:‎ «23 ‏هي‎ ‎Z ‏حيث‎ (XCX CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA A) 67 ‏و) متوالية بهرية رقم:‎ «23 ‏هي‎ 10
Z cus (CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA C) 68 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (If «23 ‏هي‎ ‏حيث‎ (XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC C) 69 ‏ب ب) متوالية بهرية رقم:‎ ¢23 ‏و هي‎ ‏حيث‎ (CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC G) 70 ‏ج ج) متوالية بهوية رقم:؛‎ 5 ¢23 ‏و هي‎
Z cus (AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG C) 71 ‏دد) متوالية بهوية رقم:‎ «23 ‏هي‎ ‏حيث‎ (AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC G) 72 ‏ه ه) متوالية بهوية رقم:‎ «23 ‏هي‎ Z 20 ‏حيث‎ (AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC GCG G) 73 ‏وو) متوالية بهوية رقم:‎ ¢23 ‏و هي‎
Cus (GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG 066 C) 74 ‏زز) متوالية بهوية رقم:‎ ‏هي 3 و‎ 7
Cua (CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC 660 X) 75 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (z z «23 ‏و هي‎ ‏(1)؛‎ thymine ‏(لا) أو الثايمين‎ uracil ‏من اليوراسيل‎ X ‏حيث يتم اختيار‎ 5
Al
Z cua (GCC AGA AGG AAG 660 GAG AAA AGC X) 76 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (J ¢23 ‏هي‎ ‎Z ‏حيث‎ (CAG AAG GAA GGG CGA GAA AAG CXC C) 77 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (a «23 ‏هي‎ 10
Z ‏حيث‎ (GAA GGA AGG GCG AGA AAA GCX CCA G) 78 ‏ن) متوالية بهرية رقم:‎ ¢23 ‏هي‎ ‎Cus (AGG AAG GGC GAG AAA AGC XCC AGC A) 79 ‏س) متوالية بهوية رقم:‎ «23 ‏و هي‎
Z ‏حيث‎ (ACX CAC GGG GCX CXC AAA GCA GCX C) 80 ‏ع متوالية بهوية رقم:‎ 15 ¢23 ‏هي‎ ‏هي‎ Z ‏حيث‎ (GGCXCXCAAAGCAGCXCXGAGACAX) 81 ‏ف) متوالية بهوية رقم:‎ ¢23 ‏هي 18؛‎ Z cus (GGC XCX CAA AGC AGC XCX GA) 82 ‏ص) متوالية بهوية رقم:‎ ¢18 ‏هى‎ Z cus (GAG AGG GCC AGA AGG AAG GG) 83 ‏متوالية بهرية رقم:‎ (3 20 ‏هي 18؛‎ Z ‏حيث‎ (XXX GCC AXG XXA CCC AGG CX) 84 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (
ش) متوالية بهوية رقم: 85 ‎(GCG CAC CCX CXG CCC XGG CC)‏ حيث 2 هي 18؛ و ت) متوالية بهوية رقم: 86 ‎(BGC CCX GGX CXG CXG GCX CCC XGC X)‏ حيث 2 هي 23 حيث يتم اختيار ‎X‏ من اليوراسيل ‎uracil‏ (لا) أو الثايمين ‎thymine‏ (1)؛
في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13( 29-27 36-34؛ 59؛ و82. في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13 و29-27 و36-34 و59. في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13 و
0 29-27 و 36-34. في نماذج ‎dine‏ يكون كل حالة ل ل في أي رقم من أرقام هوية المتوالية: 3 29-27 و 36-34 و 59 و 82 هو ‎.١‏ ‏في بعض ‎or Sail‏ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة (ا) من المتواليات الموضحة في الجداول 2-2ج. في بعض النماذج؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ بالصيغة
5 (8ا) من المتواليات الموضحة في الجداول 2-12ج. في بعض ‎or dail)‏ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(IVa)‏ من المتواليات الموضحة في الجداول 2-12ج. في بعض النماذج؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(IVD)‏ من المتواليات الموضحة في الجداول 2-12ج. في بعض النماذج؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(IVE)‏ من
0 المتواليات الموضحة في الجداول 2-12ج. في بعض النماذج؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(V)‏ من المتواليات الموضحة في الجداول 2-2ج. في بعض ‎oz dail‏ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(VI)‏ من المتواليات الموضحة في الجداول 2-2ج. في بعض النماذج يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(VI)‏ من المتواليات
الموضحة في الجداول 2-12ج. في بعض النماذج؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(VIIA)‏ من المتواليات الموضحة في الجداول 2أ- 2ج. في بعض النماذج؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(VID)‏ من المتواليات الموضحة في الجداول 2-12ج. في بعض النماذج؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(VIE)‏ من المتواليات
الموضحة في الجداول 2-12ج. في بعض النماذج؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(VIIA)‏ من المتواليات الموضحة في الجداول 2أ- 2ج. في بعض النماذج؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(Ve)‏ من المتواليات الموضحة في الجداول 2-12ج. في بعض النماذج؛ يتم اختيار
0 المتوالية المستهدفة لمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(VI)‏ من المتواليات الموضحة في الجداول 22712 في بعض النماذج؛ يكون ل واحد على الأقل من المتواليات الموضحة في الجداول 22-12 هو 1. في بعض النماذج؛ يكون )ل واحد على الأقل من المتواليات الموضحة في الجداول 2أ-2ج هو هو لا. في بعض النماذج؛ يكون كل ‎X‏ من المتواليات الموضحة في الجداول 22-12 هو ‎GT‏
5 بعض النماذج؛ يكون كل ‎X‏ من المتواليات الموضحة في الجداول 22-12 هو لا. في نماذج مختلفة؛ يكون ‎X‏ واحد على الأقل من المتوالية المستهدفة هو 1. في نماذج مختلفة؛ يكون كل ‎X‏ ‏في المتوالية المستهدفة هو 1. في نماذج مختلفة؛ يكون ‎X‏ واحد على الأقل من المتوالية المستهدفة هو لا. في نماذج مختلفة؛ يكون كل ‎X‏ من المتوالية المستهدفة هو لا. علاوة على ذلك؛ في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالكشف عبارة عن
0 مركب بالصيغة ‎(XX)‏
0 ‏بغ‎ ‎0 ‎N ‏أب :ل‎ ‏اا‎ ‎nd ‏ل‎ 9
Nr
N
HCN }
PP nd ‏ل‎ 0
I
N
‏لوال‎ ‎> ‎nd § 9 0 Nu
T [3] 27
N
2
HN, ‏م‎ ‎NH ‎NY 8
H,N 6 (XX) ‏حيث:‎ (die ‏أو ملح مقبول صيدلائياً‎ ‏شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية‎ Taw ‏عبارة عن قاعدة نووية يتخذن‎ NU ‏كل‎ .١ ‏هى 22؛‎ 2 cua (GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA AGC)13 : ‏رقم‎
كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 60014 ‎(GCC AGA AGG AAG GCG AGA AAA‏ حيث 2 هى 22؛ كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : ‎(CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC)15‏ حيث 2 هي 22؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : ‎cus (CAG AAG GAA 666 GAG AAA AGC XCC)16‏ 2 هي 22؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : ‎(AGA AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA)17‏ حيث 2 ‎a‏ 22؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية 0 رقم : 686(18 ‎(GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC‏ حيث 2 ‎a‏ 22؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : ‎cus (AAG GAA 666 GAG AAA AGC XCC AGC)19‏ 2 هي 22؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 20 ‎cus (AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA GCA)‏ 2 هي 22؛ 5 كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Taw‏ شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 21 ‎cus (CGG CXC XCA AAG CAG CXC XGA GA)‏ 2 هي 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 22 ‎cus (ACG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AG)‏ 2 هي 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية 0 رقم : 23 ‎(CAC 666 XCX CAA AGC AGC XCX GA)‏ حيث 2 هي 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 24 ‎(XCA 066 CXC XCA AAG CAG CXC XG)‏ حيث 2 هي 21؛
كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 25 ‎cua (CXC ACG GCX CXC AAA GCA GCX CX)‏ 2 هي 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 26 ‎a 2 cua (ACX CAC GGC XCX CAA AGC AGC XC)‏ 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 27 ‎(GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA GC)‏ حيث 2 ‎a‏ 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 28 ‎(GGC GGC ACX CAC GGC XCX CAA AG)‏ حيث ‎AZ‏ 21؛ كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 29 ‎(CGG CAC XCA CGG CXC XCA AAG CA)‏ حيث ‎AZ‏ 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 30 ‎(GCA CXC ACG GCX CXC AAA GCA GC)‏ حيث ‎AZ‏ 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 31 ‎(GGC ACX CAC 666 XCX CAA AGC AG)‏ حيث 2 هى 21؛ 5 كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Taw‏ شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 32 ‎a 2 cua (CAC XCA CGG CXC XCA AAG CAG CX)‏ 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 33 ‎cus (GCC AGA AGG AAG GCG AGA AAA GC)‏ 2 هي 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية 0 رقم : 34 ‎(CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG C)‏ حيث 2 هى 19؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 35 ‎(CAG AAG GAA GGC GAG AAA AGC)‏ حيث 2 هي 19؛
كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 36 ‎(GGC CAG AAG GAA 666 GAG AAA AG)‏ حيث 2 هي 21؛ كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 37 ‎cua (GGC CAG AAG GAA 666 GAG AAA A)‏ 2 هي 19؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 38 ‎Z cua (GGC CAG AAG GAA 666 GAG AAA)‏ هى 19؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 39 ‎(CGG CAC XCA CGG CXC XCA AAG CA)‏ حيث ‎AZ‏ 21؛ كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية 0 رقم : 40 ‎GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA GC)‏ حيث ‎Z‏ هى 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 41 ) ‎(GGC 666 ACX‏ ‎CAC GGC XCX CAA AG‏ حيث ‎Z‏ هى 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية 5 رقم : 42 ‎(XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GGC)‏ حيث 2 هي 22؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 43 ‎(XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GC)‏ حيث 2 هى 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 44 ‎(XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA C)‏ حيث 2 هي 20؛ كل ‎Nu‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم: 45 ‎cua (GGC CAG AAG GAA GCG AGA AAA GC)‏ 2 هي 21؛
كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم: 46 ‎(GGC CAG AAG GAA CGA GAA AAG C)‏ حيث 2 هى 20؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم: 47 ‎cus (AGG AAG CGA GAA AAG CXC CAG CA)‏ 2 هي 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم: 48 ‎(AGG AAC GAG AAA AGC XCC AGC A)‏ حيث 2 هى 20؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم: 49 ‎(CCGG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA)‏ حيث ‎Z‏ هي $22 كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية 0 رقم: 50 ‎(CGC XCX CAA AGC AGC XCX GAG A)‏ حيث 2 هى 20؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم: 51 ‎cus (CCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA)‏ 2 هي 19؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم: 52 ‎(GGC GGC ACX CAC GGG CXC XCA AAG)‏ حيث 2 هى 22؛ 5 كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Taw‏ شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم: 53 ‎(GGC GGC ACX CAC GCX CXC AAA G)‏ حيث 2 هى 20؛ ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 ! ن متوالية بهوية كل ‎Nu‏ عبارة عن نووية يتخذن معا شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهود رقم: 54 ‎(GGC GGC ACX CAC CXC XCA AAG)‏ حيث ‎Z‏ هي ¢19 كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم: 55 ‎(GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGC)‏ حيث 2 هى 22؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم: 56 ‎(GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GC)‏ حيث 2 هى 21؛
كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم: 57 (© ‎Z cus (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG‏ هي 20؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم: 58 ‎cus (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACC)‏ 2 هي 19؛ حيث يتم اختيار ‎X‏ من اليوراسيل ‎(U) uracil‏ أو الثايمين ‎¢(T) thymine‏ ‎Al‏ ‏كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم :59 ‎(GGC CAG AAG GAA GGG CGA GAA AAG C)‏ حيث 2 هى 23؛ كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية 0 رقم :60 ‎(CCA GAA GGA AGG GCG AGA AAA GCX C)‏ حيث ‎Z‏ هي 3 ج) كل دالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 61 ‎(AAG GAA GGG CGA GAA AAG CXC CAG C)‏ حيث 2 هي 23 د) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 62 ‎(GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGG C)‏ حيث ‎Z‏ هي 3 ه) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 63 ‎(XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GGG C)‏ حيث ‎Z‏ هي 23 و) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3( من متوالية بهوية 0 رقم : 64 ‎(AGA AGG AAG GGC GAG AAA AGC XCC A)‏ حيث ‎Z‏ هي 3 ز) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم :65 ‎(GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX C)‏ حيث ‎Z‏ هي 3
ح) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 66 ‎Z Cus (CXC XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC A)‏ هي 3 ط) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 67 ‎(XCX CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA A))‏ حيث 2 هي $23 ي) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 68 ‎(CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA C)‏ حيث ‎Z‏ هي 3 ك) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 69 ‎(XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC C)‏ حيث ‎Z‏ هي 3 0 ل) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 70 ‎(XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC C)‏ حيث ‎Z‏ هي 3 م) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Taw‏ شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 71 ‎(AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG C)‏ حيث ‎Z‏ هي 23؛ ن) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 "إلى 3( من متوالية 5 بهوية رقم : 72 ‎cus (AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC G)‏ 2 هي 23؛ س) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 73 ‎(AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC GCG G)‏ حيث ‎Z‏ هي 3 ع) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Tew‏ شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 74 ‎(GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG CGG C)‏ حيث ‎Z‏ هي 3 0 و ف) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 75 ‎(CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC GGC X)‏ حيث ‎Z‏ هي 3
حيث يتم اختيار ‎X‏ من اليوراسيل ‎(U) uracil‏ أو الثايمين ‎thymine‏ (1)؛ و ‎Al‏ ‏كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 76 ‎AZ Cua (GCC AGA AGG AAG GGC GAG AAA AGC X)‏ 23؛ ب) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 77 ‎(CAG AAG GAA GGG CGA GAA AAG CXC C)‏ حيث 2 هي 23 ج) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 18 ‎(GAA GGA AGG GCG AGA AAA GCX CCA G)‏ حيث ‎Z‏ هي 0 23؛ د) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 79 ‎a 2 cua (AGG AAG GGC GAG AAA AGC XCC AGC A)‏ 23؛ ه) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 80 ‎(ACX CAC GGG GCX CXC AAA GCA GCX C)‏ حيث ‎Z‏ هي 23؛ و) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 81 ‎(GGCXCXCAAAGCAGCXCXGAGACAX)‏ حيث ‎a Z‏ 23؛ ز) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 82 ‎cua (GGC XCX CAA AGC AGC XCX GA)‏ 2 هي 18؛ ح) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 83 ( ‎(GAG AGG GCC AGA AGG AAG GG)‏ حيث 2 هي 18؛
ط) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية
بهوية رقم : 84 ‎(XXX GCC AXG XXA CCC AGG CX)‏ حيث 2 هي 18؛
ي) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية
بهوية رقم : 85 ‎(GCG CAC CCX CXG CCC XGG CC)‏ حيث ‎Z‏ هي 18؛ ك) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 "إلى 3( من متوالية
بهوية رقم : 86 ‎(GGC CCX GGX CXG CXG GCX CCC XGC X)‏ حيث 2 هي
¢23
حيث يتم اختيار ‎X‏ من اليوراسيل ‎(U) uracil‏ أو الثايمين ‎¢(T) thymine‏
و يكون ‎Ra‏ هو ‎H‏ وأسيتيل .
0 في بعض النماذج؛ يكون ‎X‏ واحد على الأقل من أرقام هوية المتوالية 86-13 هو 1. في بعض النماذج» يكون ‎X‏ واحد على الأقل من أرقام هوية المتوالية 86-13 هو لا. في بعض النماذج؛ كل ‎X‏ من أرقام هوية المتوالية 86-3 هو 1 في ‎ar)‏ النماذج؛ يكون كل من أرقام هوية المتوالية 86-13 هو لا. في نماذج مختلفة؛ يكون ل واحد على الأقل من من أرقام هوية المتوالية 86-13 هو 1. في نماذج مختلفة؛ يكون كل ‎X‏ من المتوالية المستهدفة هو 1. في نماذج
5 مختلفة؛ يكون ل واحد على الأقل من المتوالية المستهدفة هو لا. في نماذج مختلفة؛ يكون كل ‎X‏ ‏من المتوالية المستهدفة هو ‎U‏ ‏في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13 29-27« 36-34؛ 59؛ و 82. في بعض النماذج؛ على الأقل ‎X‏ واحد من أرقام ‎Liga‏ المتوالية: 13« 29-27؛ 36-34 59 و 82 هو 1. في بعض النماذج؛ يكون ‎X‏ واحد
على الأقل من أرقام هوية المتوالية: 13( 29-27 36-34 وي و 82 هو ‎U‏ في بعض النماذج» كل ‎X‏ من أرقام هوية المتوالية: 13 29-27 « 36-34( 59؛ 82 هو 1. في بعض النماذج» يكون كل ‎X‏ من أرقام هوية المتوالية: 13 29-27 « 36-34 ¢59 82 هو لا.
في بعض نماذج الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالكشف ‎Lay‏ في ذلك؛ على سبيل المثال» الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة (206)؛ يمكن أن يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ((04ل): ]5[ 0 مح 0 ‎N‏ ‎HCN 1‏ ‎TiN‏ ‏0 ل ‎nd‏ ‎re‏ ‎N‏ ‎HCN 1‏ ‎BS‏ ‎nd 4 0‏ ‎I‏ ‎N‏ ‎HC |‏ ‎N—P__‏ ‎5nd § 9‏ ‎Nu‏ 0 ‎J [3]‏ 7 ‎N‏ ‏2 ‏مرا ‎NH‏ ‎oN :‏ ‎H,N‏ ‏6 ‎(XXD)‏
أو ملح مقبول صيدلانياً ‎(die‏ حيث: ‎A‏ ‏كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 13 ‎(GGC CAG AAG GAA 666 GAG AAA AGC)‏ حيث 2 هو 22؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 14 ‎Z Cus (GCC AGA AGG AAG GCG AGA AAA GCX)‏ هو 22؛ كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 15 ‎(CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC)‏ حيث 2 هو 22؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية 0 رقم : 16 ‎(CAG AAG GAA 666 GAG AAA AGC XCC)‏ حيث 2 هو 22؛ كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 17 ‎(AGA AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA)‏ حيث 2 هو 22؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 18 ‎(GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC CAG)‏ حيث ‎Z‏ هو 22؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 19 ‎(AAG GAA 666 GAG AAA AGC XCC AGC)‏ حيث 2 هو 22؛ كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 20 ‎(AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA GCA)‏ حيث 2 هو 22؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية 0 رقم : 21 ‎(CGG CXC XCA AAG CAG CXC XGA GA)‏ حيث 2 هو 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 22 ‎(ACG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AG)‏ حيث 2 هو 21؛
كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 23 ‎(CAC GGC XCX CAA AGC AGC XCX GA)‏ حيث 2 هو 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 24 ‎(XCA CGG CXC XCA AAG CAG CXC XG)‏ حيث 2 هو 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 25 ‎(CXC ACG GCX CXC AAA GCA GCX CX)‏ حيث ‎Z‏ هو 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 26 ‎(ACX CAC GGC XCX CAA AGC AGC XC)‏ حيث ‎Z‏ هو 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 27 ‎Z Cus (GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA GC)‏ هو 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 28 ‎Z Cus (GGC GGC ACX CAC GGC XCX CAA AG)‏ هو 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 29 ‎Z Cus (CGG CAC XCA CGG CXC XCA AAG CA)‏ هو 21؛ 5 كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Taw‏ شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 30 ‎(GCA CXC ACG GCX CXC AAA GCA GC)‏ حيث ‎Z‏ هو 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 31 ‎Z Cus (GGC ACX CAC GGC XCX CAA AGC AG)‏ هو 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية 0 رقم :32 ‎(CAC XCA CGG CXC XCA AAG CAG CX)‏ حيث ‎Z‏ هو 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 33 ‎(GCC AGA AGG AAG GCG AGA AAA GC)‏ حيث ‎Z‏ هو 21؛
كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 34 ‎(CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG C)‏ حيث ‎Z‏ هو 19؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 35 ‎(CAG AAG GAA 666 GAG AAA AGC)‏ حيث ‎Z‏ هو 19؛ كل دلا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Taw‏ شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 36 ‎(GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA AG)‏ حيث ‎Z‏ هو 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 37 ‎(GGC CAG AAG GAA 666 GAG AAA A)‏ حيث ‎Z‏ هو 19؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية 0 رقم : 38 ‎(GGC CAG AAG GAA 666 GAG AAA)‏ حيث ‎Z‏ هو 19؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 39 ‎Z Cus (CGG CAC XCA CGG CXC XCA AAG CA)‏ هو 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 40 ‎Z Cus (GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA GC)‏ هو 21؛ 5 كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Taw‏ شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 41 ‎(GGC 666 ACX‏ ‎Z cus CAC GGC XCX CAA AG)‏ هو 21؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 42 ‎(XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GGC)‏ حيث 2 هو 22؛ كل ‎Nu‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 43 ‎(XGG GGA GAG 666 CAG AAG GAA GC)‏ حيث 2 هو 21؛
كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 44 ‎(XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA C)‏ حيث ‎Z‏ هو 20؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 45 ‎Z cua (GGC CAG AAG GAA GCG AGA AAA GC)‏ هو 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 46 ‎(GGC CAG AAG GAA CGA GAA AAG C)‏ حيث ‎Z‏ هو 20؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 47 ‎(AGG AAG CGA GAA AAG CXC CAG CA)‏ حيث ‎Z‏ هو 21؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية 0 رقم : 48 ‎(AGG AAC GAG AAA AGC XCC AGC A)‏ حيث ‎Z‏ هو 20؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 49 ‎(CGG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA)‏ حيث 2 هو 22؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 50 ‎Z cua (CGC XCX CAA AGC AGC XCX GAG A)‏ هو 20؛ 5 كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Taw‏ شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 51 ‎Z cua (CCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA)‏ هو 19؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم :52 ‎Z Cus (GGC GGC ACX CAC GGG CXC XCA AAG)‏ هو 22؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية 0 رقم : 53 ‎(GGC GGC ACX CAC GCX CXC AAA G)‏ حيث ‎Z‏ هو 20؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 54 ‎(GGC GGC ACX CAC CXC XCA AAG)‏ حيث ‎Z‏ هو 19؛
كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم :55 ‎Z Cus (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGC)‏ هو 22؛ كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم :56 ‎Z Cus (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GC)‏ هو 21؛ كل دلا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Taw‏ شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية
رقم : 57 (© ‎(GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG‏ حيث 2 هو 20؛ و كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 58 ‎Z cus (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACC)‏ هو 19؛ حيث يتم اختيار ‎X‏ من اليوراسيل ‎(U) uracil‏ أو الثايمين ‎¢(T) thymine‏
‎Al 10‏ كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم :59 ‎(GGC CAG AAG GAA GGG CGA GAA AAG C)‏ حيث ‎Z‏ هي 3 كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : ‎(CCA GAA GGA AGG GCG AGA AAA GCX C)60‏ حيث ‎Z‏ هي 3
‏5 كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 61 ‎cus (AAG GAA GGG CGA GAA AAG CXC CAG C)‏ 2 هي 23؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 62 ‎(GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGG C)‏ حيث ‎Z‏ هي 3 كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية
‏0 رقم : ‎(XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GGG C)63‏ حيث 2 هي 22؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 64 ‎(AGA AGG AAG GGC GAG AAA AGC XCC A)‏ حيث ‎Z‏ هي 3
كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم :65 ‎(GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX C)‏ حيث 2 هى 23؛ كل ‎le NU‏ عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 66 ‎(CXC XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC A)‏ حيث 2 هى 23؛ كل دلا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Taw‏ شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 67 ‎(XCX CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA A)‏ حيث 2 ‎a‏ 23؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 68 ‎a 2 cua (CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA C)‏ 23؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 69 ‎AZ Cua (XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC C)‏ 23؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 70 ‎(CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC G)‏ حيث 2 هى 23؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 71 ‎(AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG C)‏ حيث 2 ‎a‏ 23؛ 5 كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Taw‏ شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 72 ‎(AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC G)‏ حيث 2 ‎a‏ 23؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 73 ‎AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC GCG G)‏ حيث ‎Z‏ هى 23؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية 0 رقم :74 © 666 ‎cua (GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG‏ 2 هي 23؛ كل ‎NU‏ عبارة عن 52218 نوودة يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3"( من متوالية ‎Bigg‏ ‏بارة عن نووية يتخذن متوالية مستهد إلى 3) من متوالية بهود رقم : 75 ‎a 2 cua (CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC GGC X)‏ 23؛
حيث يتم اختيار ‎X‏ من اليوراسيل ‎(U) uracil‏ أو الثايمين ‎thymine‏ (1)؛ و ‎Al‏ ‏كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 76 ‎AZ Cua (GCC AGA AGG AAG GGC GAG AAA AGC X)‏ 23؛ كل نالا عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 77 ‎(CAG AAG GAA GGG CGA GAA AAG CXC C)‏ حيث 2 هى 23؛ كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 18 ‎(GAA GGA AGG GCG AGA AAA GCX CCA G)‏ حيث ‎Z‏ هي 3 س) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Tae‏ شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 79 ‎(AGG AAG GGC GAG AAA AGC XCC AGC A)‏ حيث ‎Z‏ هي 23 ع) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 80 ‎(ACX CAC GGG GCX CXC AAA GCA GCX C)‏ حيث ‎Z‏ هي 23 5 ف) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 81 ‎Cua (GGCXCXCAAAGCAGCXCXGAGACAX)‏ 2 هى 23؛ ص) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3( من متوالية بهوية رقم : 82 ‎cua (GGC XCX CAA AGC AGC XCX GA)‏ 2 هي 18؛ ق) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة )5 "إلى 3) من متوالية 0 بهوية رقم : 83 ‎cus (GAG AGG GCC AGA AGG AAG GG)‏ 2 هي 18؛ ر) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية بهوية رقم : 84 ‎cua (XXX GCC AXG XXA CCC AGG CX)‏ 2 هي 18؛
ش) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن معاً شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية
بهوية رقم : 85 ‎(GCG CAC CCX CXG CCC XGG CC)‏ حيث 2 هي 18؛ و
ت) كل ‎NU‏ عبارة عن قاعدة نووية يتخذن ‎Tae‏ شكل متوالية مستهدفة (5 "إلى 3) من متوالية
بهوية رقم : 86 ‎(GGC CCX GGX CXG CXG GCX CCC XGC X)‏ حيث 2 هي $23
حيث يتم اختيار ‎X‏ من اليوراسيل ‎(U) uracil‏ أو الثايمين ‎¢(T) thymine‏
و يكون ‎Ra‏ هو ‎H‏ وأسيتيل .
في بعض النماذج؛ يكون ‎X‏ واحد على الأقل من أرقام هوية المتوالية 86-13 وهو 1. في بعض
النماذج» يكون ‎X‏ واحد على الأقل من أرقام هوية المتوالية 86-13 وهو لا. في بعض النماذج؛
0 1 كل ‎X‏ من أرقام هوية المتوالية 3 1 —86 وهو ‎T‏ في يعض ‎oz all‏ يكون كل ‎X‏ من أرقام هوية المتوالية 86-13 وهو لا. في نماذج مختلفة؛ يكون ‎X‏ واحد على الأقل من أرقام هوية المتوالية 86-13 وهو 1. في نماذج مختلفة؛ يكون كل ‎X‏ من المتوالية المستهدفة هو آ. في نماذج مختلفة؛ يكون ‎X‏ واحد على الأقل من المتوالية المستهدفة هو لا. في نماذج مختلفة؛ يكون كل ‎X‏ ‏من المتوالية المستهدفة هو ‎U‏
5 في نماذج معينة؛ يتم اختيار المتوالية المستهدفة من المجموعة التي تتكون من أرقام هوية المتوالية: 13 29-27« 36-34؛ 59؛ و 82. في بعض النماذج؛ على الأقل ‎X‏ واحد من أرقام ‎Liga‏ المتوالية: 13« 29-27؛ 36-34 59 و 82 هو 1. في بعض النماذج؛ يكون ‎X‏ واحد على الأقل من أرقام هوية المتوالية: 13 29-27 36-34 59؛ و 82 هو ‎U‏ في بعض ‎cz dail‏ كل ‎X‏ من أرقام هوية المتوالية: 13- 86 هو 1. في بعض النماذج؛ يكون كل ‎X‏ من
0 أرقام هوية المتوالية: 13» 29-27 « 36-34 59 82 هو لا. في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ هو مركب بالصيغة ‎(XX)‏ أو ملح مقبول صيدلانياً ‎(dia‏ مختار من: من:
on [51] BREAK A BREAK B BREAK C 3 Fe Te last 0 ‏لاح‎ 0 =N 9 =N 1, ‏“زان‎ o A oC
J N T NH T ‏ل‎ ‎N N N= N N=( N N=
O° ‏ليلا محلييلا‎ NH, \—b=0 hd ae Nh=0 a
I ‏سرك ؟‎ ١ ‏يه‎ SP ( ‏ب ل‎ oY 0 ng ‏م ب‎ ‏ب‎ J N= J hs" J N=
N—P=0 AW ‏ب“‎ , N—P=0 —p= NH, No a ‏مما حجار 0 ار يام‎ 0 no 1 0 1. 0 1 ey 0 FN NH,
J CY ‏ص‎ ry NG NY, \ NH; AN i= N o TJ N=
N—P=0 ‏ل‎ NHz A N a N Jee N—P=0 ‏ليا‎ ‏م‎ ane ” ‏مي‎ TT ‏مم‎ ‎ONE ot eid OY ‏وميا‎ NH; AN ~. Ns ‏ب بها‎ ~ / 1 NH N—=0 2 N—P=0 NH, N—P=0 Ne
Sey 7075 0 ‏بر‎ Mi \ Mi 6 I 0 2 NH, 0 0 I NH, 0 oY
J ‏يب > مي ب‎ 0 N N
LJ J BAS, TY ©
N—P=0 A \ ١ N / ‏ل‎ NH, N—P=0 N—P=0 0 1 ‏ل / 2 سدح‎ PN / ‏ل مر احم‎ > Tt ‏م ب‎ 0 ng ry
N° J N= J =
N—P=0 A ‏ب“‎ NH, NH 1 N—P=0 N—-P=0 / ‏لاح‎ / 1
I's NH, 0 PN 0 / 4 ~~ NH,
XY a Ne OA 06 ‏م‎ a 0 ‏ردلا‎ NH N
N J ‏بدلا‎ J ‏ردلا‎ NH, ‏لك‎ N N
N=o N ‏سلب‎ NH, Je ‏ميم م‎ BREAK B BREAK C ١
J NH
N=, pL eo (XXII a)
BREAK A on ]5[ BREAK A BREAK B BREAK C 3 Too Wo Veo
To PN ‏مرتحم , ؟ م‎ Pa 0 ng oN_/ Ng 9 JT NH T Ne MH T 1 ‏بدا‎ N ~ N ‏بدلا‎ ‏ب“‎ NH, \ | NH, ‏ميلا‎ ‎0.0 N-p=0 Nee / N
Y / =N NH. 6 =N 0 0 ‏حم‎ NH, 0 NET eR Od
ON J Nes J hs 0 ‏دلا‎ ‏محر ميلا 0 محر‎ NH, ‏ليا‎ ‎0 o 9 0 a PN NH, 0 2 oh / ‏الحم لم‎ NH,
J NH ‏ب‎ a ‏ب‎ N N ‏ب 7ل ب‎
N NY J Ne J T TJ ‏ردلا‎ ‏وديا‎ RH, \ Nd vy ae N ‏محبار محبصر مسار‎ " 9 = 0 9 ‏حم مام 0 ماحم‎ 6 ‏مي :8 اي مب‎ o Lo o ‏نمي‎ ‎J NY J Ns" J Ns J N="
W—b=0 ‏وال‎ \ v NH; A NH \ ‏ل‎ NH, / NH Nee N f=0 2 Nie 0 َ oY 2 0 1 ‏والا# حم 1 “بي 0 0 0 اام‎ ‏ب‎ T Y ‏ب‎ TS > Y ‏ب‎ > TY ‏بدا الس بدا اس 8 ال‎ 25 7
N—P=0 ‏ل الك‎ NH. \ JL
J 1 NH N—p=0 2 ‏محر‎ ‎0 0 ‏الم 5 / 2 ك2‎ NH, 0 = 0 0 ‏ب م 0 اللا‎ ng ‏اه‎ ‎NH ‎Ory OLS! YN
AV \ \ NH, NH
N—P=0 — N—P=0 / 0 ‏لاحم‎ NH, A N / é ‏الحم‎ NH. = NH ‏اح‎ 2
CYNE ‏مب 2 6ل م‎ at my 0 ‏ل ب ال‎ TD 0 - AL 8 6
BREAK A BREAK B BREAK ‏ن‎ ‎(XXII b)
OH [51 BREAK A BREAK B BREAK C 3 “T. VT vo ‏بر‎ ‎Be = NH 1, 2 ‏مي 6 سمي م مير لاح‎ : © ‏ب ام‎ J ( NH J A=
J Ne N=(¢ N [Fe] \ N ‏ب“‎ NH, \
Y ‏م ار ديز‎ NH ‏حدر‎ ‘ 5 / ‏اذاه‎ 9 ads 0 . Oo"
N Ne a ‏ب حر ب‎ Y 2 ‏مير‎ J N=/ \ N 0 \ N ‏مير ولام م‎ Mie - 1 Me ‏الم‎ 1 ‏اب"‎ 1 r~ 0 oui 0 ~~ \ J T OY ‏ب‎ TS ‏ب‎ Y fm ‏ووأ ل و ابا م الس م محر‎ 0 ‏الا 2 حر‎ NH, N—P=0 2 N—P=0
Yr ‏محبصر‎ / _N 0 a NH
Ory 0 2 0 0 ‏مي‎ 2 o oY ‏ملا‎ Xr fo J = JY ‏وم‎ ‎/ 4 1 yA ‏ميلا‎ ‎0 = NH; —p= NH, 0 0 Jee /7 ‏و باح‎ 0 ‏ب‎ Y 2 0 0 ‏لاحم‎ NH, 0 ‏باه م‎ 0 ‏ها ب بدلا‎ 0] (HH ‏مر‎ J N= vO i NH ‏الل‎ PN boo ‏مير‎ 0 ‏احم 2 ل‎ NH 1 = NH; HN, _NH
J !), NH 0 ١. 2 ON J Y 0
N x © J Ne NH, ‏ب" سلب‎ N N= ‏ل“‎ ‎BREAK A W—t=0 ‏محصر‎ 6 7 N 9 ‏لاح‎ NH 0 . 0 0 ‏م‎ ‎Crk TH
J Ns" N ‏بدا‎ ‏ملب‎ NH; ‏سلب‎ ‎BREAK B BREAK C (XXII ‏نه‎ on ]3[ BREAK A BREAK B BREAK C 3 VT Neo Yo
N—h=0 / N 2 ‏الك‎ NH, 1 / 4 ‏اذاه‎ 0 Lo 6 ‏م‎ ‎t © nO Ne J NaH J Ne
N J ‏بدلا‎ WN ‏ب‎ \ \ 2 \ebeo Ne Ne N=o N
N / 20 0 0 Ay d ~ NH, 1 J 0 ‏م‎ : ON. _N ON ‏أ‎ ‏لا‎ J (= J T J N=/
N—P=0 N NV VY
TL AT He /1( 717 ‏وم‎ ‎OG -N._N / ‏حم مي لام‎ 0 " ON 0 22
ON 6 NH 0 J NH ‏يديا‎ ‎\ | J N= M N N=( N =~ ‏محللا .= 0 تساي‎ NH, ‏طبلا‎ NH, { Cy ‏بير لالح 2 ’ وديا‎ 7 0 PN
ON? ‏الحم / أ‎ 6 o 0 2 0 oY
J ‏م الا ل اللا‎ \ J NaH N N 0 [31]
A N yA X ‏ميلا‎ 2 0 = 0 ‏اي‎ NH, —P= ‏ان‎ rT Te PN 0
J n=" 0 Lo" Or Pa = ‏7ب‎ \ NH
L Ne >< N= \ Nu NH
BREAK A \—p=0 را٠صبحم‎ \ / ‏“بي 0 ير ام نه‎ 7 9 ? oO N~¢ 0
CYS Cy TL. ‏ردلا‎ N \ 7 ‏محلييلا‎ 6
N—P=0 A \ / ‏لبي 0 مر لام‎
Cr TH ‏با الى‎ 1 ‏سلب‎ NH,
BREAK B BREAK C
(XXII d) on [51 BREAK A BREAK B BREAK 0
N A ‏لير ملل‎ ° Te | ‏ملا م رحج‎ AN
ON ON
4 ok Ok ONS
N Nk 0 " \ ‏مط‎ NH, Neo 0 0 N—P= —P=f N
Y / =N NH. / 0 ==N 6 0 = NH,
N. ~ 2 0 0 7 () ON hens! vb N WY =~ . 1 ‏1غ‎ N ‏مار مير‎ NH; ‏محيصر م‎ 0 0 ‏لحم‎ 0 é =N ‏احم 0 2 7 0 يري‎ NH, ‏ب‎ a 0 ‏ل‎ ١ ‏ها ب 21 ب‎
J N= J N= \ J T . J ‏ردلا‎ ‏ل الأ‎ NH, \ ِ 1 7/0 52 0 re ‏هه 5 يميم‎ ree oo = J _ Ao 0 ‏ب حل ب 7لال0. د‎ 2 6 , xy ‏و‎ XY ‏ص‎ J pet Yi 1
N p= 2 I 2 b= NH, ‏ا‎ p 0 NA NH ‏مير‎ NH » p 0 NH 0 ‏سرضصح‎ 2 o _N 4 = NH, 2 0 5
OL -N_ _N ON. ‏ب‎ at
ASR ONE ‏يان‎ 7 boo NH ‏ليا‎ NH, ‏مير‎ ‎Lor ‏ا‎ a I 2 NH, 0
O._N_ _N ON Ne a Y
Xr T X J +5 J ‏بدلا‎ NH,
A ‏ا“ ب“‎ NH, ّ
He pe Me MR ‏ا‎ ‎— 2 0 ‏اح‎ NH = 2
ON ON} ON ond ‏الل‎ ‎N 0 Ns 0 ‏سل سلب‎ ale
BREAK B BREAK C
BREAK A
(XXII ‏و‎
8 [5] BREAK A BREAK B BREAK C \ CT 9 ‏حدر حبرا ملسلا‎ 1 7 ‏ذا‎ a = ‏م‎ 9 o ‏لاحم‎ NH, 0
OY OY ‏ب‎ TN ~/
OP von A) NH; ‏لبا‎ ‎1 ‏مجر‎ Jo 74 N
NH NH = 0 ‏مهيبا | “مما “نا‎
WE Ory TY iad
Me NH, ‏ا‎ oe ‏ا‎ ‎7 oY N—P=0 Neto N—p=0 ory 4 74 10 AA 5 ox o. x 0 ‏ا‎ ‎0 Xr 0 CH
N—-P=0 N=. / ‏ال ا‎ \ J ue Ne 0 LC Mae NH MTEC an, Mie ‏حر‎ NH, ‏“با ماد‎ hoor Thu \ ١ ree ‏امل ل اصن‎ 0 No N—b=0 ‏وديا‎ N—P=0 ong 2 N re ro N
J NH = NH, = NH, , ‏بدا ال‎ OY ‏مب‎ x CYNE [31
Nb=o NH, N N= J N hs 0 . or" ‏ميا مير‎ 7 ‏لايح © زر‎ Te ‏نارح‎ 9
O_N._N O._N_ _N HN.~0 yd Ory Ory ‏سلب‎ \ J o J 0 NH
BREAK A ‏حبر‎ N—t=0 0 =N ‏م‎ / =N
WE ‏مهما‎ EY ‏ل با ل‎ L ‏سل‎ NH, an
BREAK B BREAK C
(XXII § [57] BREAK A BREAK B BREAK C 1 wo a Me ° _N o ‏حم 0 لحم‎ NH, = NH; 0 0 oN NZ ١ 1 ‏“يبب‎ Nerd ONG 00 N N= ‏ب“‎ Xe ei
X ae eo MR
NH NH, ‏احم‎ ‎0 Lo OX ‏اما‎ od"
N ‏ب‎ NN 7 N J ‏ب‎ ‏ملبر‎ \ J T N T \ 1 N= 0 =N_ ‏و‎ i \ ‏لب‎ ‎0 0 A ‏محر‎ A N
NH 0 = ‏م‎ ‏م با ل‎ x ox ‏م‎ 0 ‏متلا‎ NH, J J J ‏"ليمأ‎ ‎60 0 cr ‏مير‎ NH ‏مير‎ NH ‏صر‎ 0 NH, 0: 2 2 4 2 2 0 ‏و‎ 6
ASR ‏لما لما “لما‎ ‏ات مدر‎ \ J ° 0. 0 =N —p= ‏ل‎ ‎fT a 2
T NH o [YN 0 ‏صلب‎ TY or bo wo ‏ل مالع‎ ‏لحم‎ 0 N—P=0 N—P=0 0. ‏اك‎ NH, / A ‏ب‎ Ie L 0 Y ’ 9 0 oy ‏ب‎ 0
N N=( ‏ب‎ 00 > TY ‏مير‎ NH, ON o N 6 ° NH, he Nb 6 oF Coy Taye
ON / oN) 2 0 1
XL Xr Ns X J 2 ‏ل‎ NH, 1
BREAK A ‏سلب‎ ‎BREAK B BREAK C (XXII g)
§ [57] BREAK A BREAK B BREAK C \ CTE 1 ‏ليل يلا‎ 0. rae . 0 =N 0 0 ‏مح‎ NH, 0 o Oo" ‏مب ا م‎ a ‏له‎ NH
N ) Cr - . J in \ J - he ‏مر‎ i” ‏حبر‎ 2 0" A 0 0 ‏م 2 2 0 2 يه‎ NH, (J o LX oN CTS
W-t=0 J 1 J T ‏بدلا ل‎ 7 ‏ميلا ديا ميا مرح‎ ‏ا‎ 2/6 Me / 07
T pl 0 Ne Ya 8# Cr NY OY ©
Me ‏امام‎ 5 J 0 ~ 0 N—P=0 N—b=0 A 2
N / ‏لم‎ NH / 1 NH 0
Cr ‏لما “كلما‎ ds
Veto ‏وال‎ J 1 XY 1 NH a a ‏وديا ليلا‎ ry 70 ‏لاح‎ NH 2 ‏ا ا‎ o. 0 ‏خا لب ل‎ RB
N—P=0 N N= 79 ‏يا ميلا م الام‎ § 0 / NH, A NH, ‏ب‎ Te 0 0 oY 2 60 oY 2
VM TY ‏ب‎ TY pe NH ! 5 ١ ‏باح‎ َ 0 Meteo ١ ‏ليا‎ ّ ‏ب‎ ng 79 =p a =N NH
J NH ON ol :
N N= ‏يي . ملي ب‎ ‏ليا‎ a J Ne" J 2 /7 ‏:م بح‎ NH, hl
CT BREAK B BREAK C
1 0 (XXII h
BREAK A ) ‏و‎ ‎5: [51 BREAK A BREAK B BREAK C
No Nimo Neo 1, 7 ry Ap a)
OX .0 N. 0. __X § Or Crd Or ‏مب‎ Meio Ne NH, Nie
N A NH, Shee 1 NH, ( ) 0 ae 2 5 De 0 YY
ON. _N O._N_ _N 6 N__N ‏ا‎ he
Le oY ‏ال الاب‎ 0 =N — | \
FN FP N—b=0 N—pP=0 N—P=0
ON 2 =N / / ‏لي‎ ‎XY pos ‏مأ مهي م “الما‎ ,
N
‏صر‎ ne ON ‏جد‎ J Ne J ‏مأ‎ 0 Ne ‏حير ميلا‎
TY NH 9 ‏مي الام و + سر لام‎ 0 0
Ns Ne Ng ‏ب‎ a Ne +
N
“1 NH. pL NH NH
N5=0 : \ J N= J N=( J ‏بكلا‎ ‎0 2 N—P=0 ‏ميا‎ NH, ‏ملا‎ NH,
SF Cae ar Toe
ON 7 ‏أ‎ 0 | O._N 2 v 0 ‏كم‎ 3 31
J od ot oo 285 x x A 6 0 yr BREAK B BREAK C mo
AN
MC a R ‏م‎ x ng
J TY
‏سلس‎ ‎BREAK A ¢ (XXII i)
‏ملم‎ 0
Vea J حيث يتم اختيار 7 عند كل حدوث بشكل مستقل من ‎(U) o‏ أو 0 ‎(T)‏ في بعض النماذج؛ يكون كل ‎X‏ عبارة عن 1. في نماذج ‎egal‏ يكون كل ‎X‏ عبارة عن لا. في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ بالصيغة ‎(XXII)‏ هو الصيغة (8 ‎(XXII‏ حيث يكون )ل واحد على الأقل هو لا. في بعض النماذج؛ يكون ‏5 مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة (8 ‎(XX‏ حيث يكون )ل واحد على الأقل هو آ. في بعض ‎or Hall‏ يكون المركب بالصيغة (ال204) هو الصيغة ‎a)‏ ال204) حيث يكون كل ‎X‏ عبارة عن لا. ‏في بعض ‎oz all‏ يكون مركب بالصيغة ) ‎(XXI‏ هو الصيغة ‎(XXI I a)‏ حيث يكون كل ‎X‏ هو ‎5 ‏في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎XXII)‏ ‎(b 0‏ حيث يكون ‏ واحد على الأقل هو لا. في بعض النماذج؛ يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو ‏الصيغة ‎(XXII b)‏ حيث يكون * واحد على الأقل هو 1. في بعض النماذج؛ يكون المركب ‏بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎(XXII b)‏ حيث يكون كل ‎X‏ عبارة عن لا. في بعض النماذج؛ ‏يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎b)‏ ال204) حيث يكون كل ‎X‏ هو 1. ‏في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎XXII)‏ ‏5 ع) حيث يكون ‏ واحد على الأقل هو لا. في بعض النماذج؛ يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو ‏الصيغة )© ‎(XXII‏ حيث يكون ‎X‏ واحد على الأقل هو 1. في بعض النماذج؛ يكون المركب ‏بالصيغة ‎(XXII)‏ هو الصيغة (© ‎(XXII‏ حيث يكون كل ‎X‏ عبارة عن لا. في بعض النماذج؛ ‏يكون مركب بالصيغة ‎(XXII)‏ هو الصيغة (© ال204) حيث يكون كل ‎X‏ هو 1. ‏في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎XXII)‏ ‎(d 0‏ حيث يكون ‏ واحد على الأقل هو لا. في بعض النماذج؛ يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو ‏الصيغة ‎(XXII d)‏ حيث يكون * واحد على الأقل هو 1. في بعض النماذج؛ يكون المركب ‏بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎d)‏ ا(206) حيث يكون كل ‎X‏ عبارة عن لا. في بعض النماذج؛ ‏يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎d)‏ ال204) حيث يكون كل ‎X‏ هو 1.
في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(XXII)‏ هو الصيغة ‎XXII)‏ ‏©) حيث يكون ‎X‏ واحد على الأقل هو لا. في بعض النماذج؛ يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة (© ‎(XXII‏ حيث يكون ‎X‏ واحد على الأقل هو آ. في بعض النماذج؛ يكون المركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة (© ‎(XXII‏ حيث يكون كل ‎X‏ عبارة عن لا. في بعض النماذج؛ يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة (© ال706) حيث يكون كل ‎X‏ هو 1.
في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(XXII)‏ هو الصيغة ‎XXII)‏ ‎(f‏ حيث يكون ‎X‏ واحد على الأقل هو لا. في بعض النماذج؛ يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎(XXII)‏ حيث يكون ‎X‏ واحد على الأقل هو آ. في بعض النماذج؛ يكون المركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎(XXII)‏ حيث يكون كل ‎X‏ عبارة عن لا. في بعض النماذج؛
0 يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ( ال706) حيث يكون ‎XS‏ هو 1. في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(XXII)‏ هو الصيغة ‎XXII)‏ ‏9) حيث يكون ‎X‏ واحد على الأقل هو لا. في بعض النماذج؛ يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة (9 ‎(XXII‏ حيث يكون ‎X‏ واحد على الأقل هو آ. في بعض النماذج؛ يكون المركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة (9 ‎(XXII‏ حيث يكون كل ‎X‏ عبارة عن لا. في بعض النماذج؛
5 يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة (9 ‎(XX‏ حيث يكون كل ‎X‏ هو 1. في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(XXII)‏ هو الصيغة ‎XXII)‏ ‎(h‏ حيث يكون ‎X‏ واحد على الأقل هو لا. في بعض النماذج؛ يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎(XXII h)‏ حيث يكون ‎X‏ واحد على الأقل هو آ. في بعض النماذج؛ يكون المركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎(XXII h)‏ حيث يكون كل ‎X‏ عبارة عن لا. في بعض النماذج؛
0 يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو الصيغة ‎(XX h)‏ حيث يكون كل ‎X‏ هو 1. في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(XXII)‏ هو الصيغة ‎XXII)‏ ‎i‏ حيث يكون ‎X‏ واحد على الأقل هو لا. في بعض النماذج؛ يكون مركب بالصيغة ‎(XX)‏ هو بالصيغة (آ ا(204) حيث يكون ‎X‏ واحد على الأقل هو آ1. في بعض النماذج؛ يكون المركب oz all ‏فى يعض‎ U
SU ‏عبارة عن‎ X USC ‏لصيغة‎ ‎ٍ ‏حيث يكون‎ (XX i oe in (XK i) ‏لصيغة‎ ‏حيث يكون‎ (XXII 0 0 ~ ‏حي‎ (XK i) ‏بالصيغة‎ Lo oT ‏هو بالصدٍ‎ (XXII) ‏ض لصيغة‎ 0" ‏للنسخ بالكشف بما في ذلك؛‎ or ‏اتجاه مضاد‎ 8 ٍ: | oo 1 ‏للنسخ‎ sil ‏ب" الأوليجومرات في‎ 0. ol ‏فيد داه لصي 0001 تين‎ oni ‏ض‎ ٍ * A - - 0 ‏يدم | ياره‎ dia ‏صيد لاثئباً‎ J | = oo : 0. " ]5[ ‏مقبول صيدلاند‎ i ns oe ‏أو ملح‎ (OXI ‏بالصيغة‎ 0 ‏فت‎ BREAK B | "١ | ‏ض‎ ‎0 a N Tr 0 - . ‏محبصر‎ NT 3 ‏أ هربا‎ 1 ‏ص“‎ WN Ne ١ tC ® ‏ملل‎ X rE : vo 8 ‏ل‎ ‎Q ‏بز “ارما‎ NH, \ Pg
A ‏ل مر ام‎ 1 N= Ne ‏مي‎ 1 —P=
Lays Yo, Na oo \ N N=( 0 Ig ‏م‎ Me ) . 5 (egos Y << / 0 ‏ارا لي يها‎ 0 _ WN hs" 0 aa 1 0 ‏لاحم‎ 0 N—P=0 NH, X 1 ' ّ rh / ‏نه‎ 0 = Veto 1 5 ‏م‎ ‎2 5 $ ‏باب‎ 2 _N \ J (LN 0 a Node ‏بكلا‎ H NC Lo ‏ا‎ ‏ا ا‎ ye =N Mi po © ‏د لبا مهب‎ : - 2 N FY 2 / T° oo N
J T ‏لاحم‎ Nelo ~ x 7 ‏“ارما مر‎ ge $ 6 ‏ب“ لاحم‎ N= NC sd Lo
Cr Me 2 > 2
Net Ne Ne ‏مجر‎ peo To : / hee ‏ل لاح‎ fe ‏ب م‎
Cer BREAK B . 9 = =
N Ne 8 0" ‏ض‎ he 6 REAK C
AK A ‏ض‎ ‎(XXIII 2)
on ]5[ BREAK A BREAK B BREAK C 1 Te I ‏مل‎ ‎0 ‏لا 0 0 لاح 0 0 لاح‎ 1, Coys Cr oat
N= N= ‏ردلا‎ ‎3 0 ‏ملا‎ eo ‏طلا‎ on, Nebo "1 ‏لاحم و7‎ NH, 7 ‏لاحم 7 ا‎ NH
OLN
® Or or Or = N
Meteo NY ‏6م ا‎ “ 7 0 2° A Nee = 0 ‏لاص‎ 0 NH. N ‏حم‎ NH, 7 2 0 = NH. er Or Crk Cres” ١ Ne AN Nr WN 0 N ‏بدلا‎ ‎Jo . ‏ديلا مصبر با‎ ‏لاح 0 0 بح‎ 0 0 _N / ‏لاح للم‎ 6
ON ~ 0 ‏عيبا باب‎ Re Rg ‏محليلا‎ NH, VY NH, \ 0 ‏ب‎ "ْ
N—P=0 N—P=0 NH, ‏ذا‎ 2
VA ‏همير‎ ‏عشبا “مما‎ Cae Tan ‏ب ل ب ىلا0‎ 0 7 ‏ل لاب \ ا‎ \ J T J ‏َم‎ J Ns" Cr T [31 em ‏مر “9 كر‎ 9 =N ‏مي = © ادا‎ o
ON N 0 8 َ 0 _uN-/
Tr oT Norge \—bo \ ‏ل \ ل‎ NH, 7 ‏الح‎ NH; » 1° N ‏ار‎ ve N = = NH.
ORS, ‏مه ميم 6 “مي ب‎ 0
N Ne J Nee J N= NH, ‏ب‎ A AL .
BREAK A BREAK B BREAK C
(XXIII b) on [57] BREAK A BREAK B BREAK C 3 - ‏م م‎ 1 0 N a No 79 ‏لاحم‎ NH, 4 i = 0 1 ‏بر‎ 0 Lo OPE
N J J ‏ما الى‎ ‏م0ي6‎ N “١ NH. \ ‏مب( مير يا ب‎ " 60 FN NH, 1 ox 2 Fy NH " ‏با‎ a NOT Ors ‏مير‎ J ‏لعن الل و‎
NH, \ —P= 0 o a 2 Ji=o MN 0 0 . N P=0 N
NN 0 ‏الحم‎ 0 F 0 0 ‏مح‎ 0
T Y OuN ON
WN 0 er 7 5 7 4 ‏ا‎ Y ‏"أي‎ ‎N—p=0 0 N=( WN N=( N =~ 70 A ‏ال“‎ NH, N—P=0 NH, ‏وال ميلا‎ 0 Nee / ‏نم‎ N / NH ‏ب‎ Ny S Ao ‏حم‎ NH, 0 ‏ولا حم‎
J 5 Ores or Ory
A. NH N=/ v
MC A " ‏ملا‎ "7 5 Pl [yy NH: N—P=0 NH, Sh N
Crs / ‏ير احم‎ 0 1 9 0 0 ‏“يي ب م“ 0 ردلا‎ M0
N 1 NH ‏ميلا‎ N J Ne J NX / ‏ل“ 0 لم‎ NC NH,
La Og ‏مر‎ Me 0 ‏لاسب‎ = NH,
CY he 0 Lo" Or Ny 0 ‏ل‎ NH, J oN ‏ل‎ Na NH,
BREAK A Y-b=0 ‏محصر‎ 6 7 ‏مر لام‎ 9 0 = NH
O._ «uN ‏م“‎ ‏ملب‎ od ‏سل‎ NH, wd
BREAK B BREAK C
(XXIII c)
or ‏الام‎ BREAK A BREAK B BREAK C 3 “1 ‏حرا‎ Veo
N—p=0 / y N / ‏اح م‎ NH, 1, 2 ‏الحم‎ NH, o Lo 0 NO
Or N 2 Cu J - 0.0 N N= \ NV Ne, “ ‏طلا ب‎ Jobo ‏صل ا‎ 0 / 5 ‏لاح‎ NH, 0 0 oY 2 0 0 oC"
Crt NOY ro
Jeo NH \ ind Neto © \ ‏مساب‎ ‎1 A" ‏حبر‎ 0 My a » 'y oo ‏ا اب"‎ 8 0 ol 0 ‏مي‎ ‎IY EN NS 0
N 0 Y NH NM ‏بدا‎ ‏ب“ بحا الس ميلا‎ X vy NH, / N A NH; N—P=0 NH, ‏وديا‎ ‎9 ~ NH, N—P=0 71 Sh NH 0 ‏مخ‎ / N 0 NH 0 ‏حم‎ oki ‏مب با ل‎ Lo Ores Or ‏ييا‎ J N=" NS N= N 0 [31 7/7 ‏اح‎ \ i" N—b=0 = 0 N—P=0 2 7 N
ON / / ‏لم‎ N 90 lng 0 o
N Y NH 9 ~ NH 0 nN HN ‏م 0 بدا‎ Y NH
N NH, J N N=( ‏سلب‎ 2 \ N N=/ N hl NH,
BREAK A Ji=o \ Me A ‏ير‎ ‎SN wm oJ ‏ب‎ -
ORS rd Tn
N= ‏ب‎ ‏ار ميا‎ 6 7 Np 9 ‏ردير لاحم‎ 0 ‏ا‎ NOY
J N=" N N=
XL NH ‏سلب‎ ‎BREAK B BREAK © (XXIII d) on [57 BREAK A BREAK B BREAK C 2 ‏مت م‎ Mo 7٠# PN ‏لج . ؟‎ © Nm, 0 0 ِ CY Cr NO
N= N N= N N= 5 ‏ب‎ NH, \ NH, Nobo
O° ‏مجر حبر‎ ME A ‏بير‎ ‎| Coop Come Thy
ON O uN / 4 ‏أ‎ ‎C oro ON bas ‏لير‎ N ‏مير مير‎ NH, “peo 9 ١ ‏م‎ 0 =N nH 0 A 3 ‏اح‎ am 0 ‏مي‎ 0 9 1 z ol I oN ‏باب‎ oN ‏الحا كبا‎ ‏مر‎ ne ‏حير مير مير‎ 1 0 = 0 0 ‏مح 0 06 لاحم 0 0 لاحم‎ 0
OWN / OsN~/ ON 2 0 Nf ,
XY pos OY 20 Oy ‏َم‎ CY 10S 3] bo Na Neo NH, ‏ميلا‎ NH, 1 NH, a a 7 / N AN ] = ‏م‎ WAL
O«N.__N 0 ON /
Try Urge Ot
N N rio ‏مر ل مير اا بحم‎ 0 0 2 2 ‏احم‎ ‎| 0 ‏لاح‎ NH 9 ~ 0 HNg_ NH
ON. _N ON 1 ‏ب‎ ١.7 Y 0 ry rN FL
Neto AN vA NH, z 74 A ‏ير‎ rae N A A ‏بر‎ ‎= NH. 2 2 8 ‏2م ب ’ 0 0 ال‎
N 3 ‏ات يهاب | غاب‎ wd ‏سل سد‎
BREAK A BREAK B BREAK C
(XXIII c)
BREAK C
BREAK B ‏ص مدر‎ NH,
BREAK A Who ‏م رم‎ Cr 0 ‏ميلا و8‎ NH 60 0 ‏ال ا‎
N Te Te a 0 a N NH, ‏اك‎ ~ + 1 ‏ب‎ T ‏ليا ردنا‎ NH, Onn N { OY To ‏بج‎ Je —P=0 NH, 0. N
O° ‏ب 26 7 ار‎ TY Yio No 1 0 ‏الأب"‎ N / 4 Lo (J or Me ‏مر‎ Bae
N ‏ل‎ / H N pio ‏م \ مد" 0 مل مل ل‎ Ne NH, 2 2 7 ot. hm Cr o Ni oY
Ory Cr T ‏ا‎ 2 NYY / 4 o
N NL H N
TL, or TY a 0 ‏حم‎ Ou uN. _N / 0 F 2 [3 1 ‏ب ل مول‎
J ‏ملم مار 4 را‎ N I Ne! \ 3 0 ‏محططيلا و‎ Nan ‏ا‎ OL WN. NH N —P= 1 ‏اح‎ 2
Ct Ta wry
NOT N 7 8: ‏ليا‎ NH, HN
N= 2 ‏ير طلم صل‎ (+ o JX rE am "LOY Cry
LN T T vy 0
T T © ‏سهد‎ ١! nn Ny
N 0 ‏لم / ب“‎ = NH, uo Jeo ‏مرح‎ Cre 0 Nees
AK A oN XL . or Or 1 4 ‏وال‎ BREAK C
BREAK B
(XXII f)
BREAK C
B \ Io
BREAK N v 3 : NH,
BREAK A Ey Or v / o = 8 [51 \ Te 0 a N p= NT
N a Ch N TY NX GS. 0 at N NH, / ~ 1 1, N J N= ‏محليا‎ NH, Ne a
NF I Ne
N / ‏ع م‎
N N—b=o NH, out. MN ¥
O° 7 84 T T ‏ميا‎ No
T SN ‏مه"‎ 70 ِ
J N J T ‏الي 0 مر مسليلا‎ \ 7d J MX yl ‏اللا 0 مل ليا‎ WN NH, 0"
Mie ~~ 0 / ‏لم‎ . C 1 N T I Mo AY 2 31 0 a T 7 \ ¥ NH, own. N
Y N= N 0 N—P=0 26 I 1 8 NH, ‏ميا‎ NH, 70 oN. Nh N ° =o oe ry XY YY © 24 Ory N © HN 0 0 ‏ديلا‎ 0
Cy 1 ‏لها‎ My ° 2 ‏محر ميلا‎ =N ‏بدا 0 مدير‎
Coe ‏ما 977 ما‎ : oh TY ne we © oo
J ‏ب “وما‎ ‏ب“‎ NH; W—b=o NH, on. ‏أ‎ ‎7 ‏ل الما مح‎ : 0 ‏م‎ N T T \ ‏مل‎ ‎J ‏بكلا‎ \ N N 5 ‏لاحم‎ NH;
N —
Nebo NHz NH, Mie No PN / ‏سدح‎ 6 a 0 N yt N I Ns Xr ‏م‎ 0 NH, BREAK C we REAK B
BREAK A B
(XXIII g)
§ [51 BREAK A BREAK B BREAK C ‏ل‎ ‎1 pu Whoo . PA 0 0 =N 9 ‏بح‎ 0 a NH, = NH ON
ON aN J ‏ب‎ a N ‏مي‎ ‏ب‎ hous! ‏سل‎ Od
Y oe Wo Wo de
NH, NH, ‏احم‎ 2
CJ ‏م ».© م‎ oY ‏“ارب‎ ‏مير‎ J T J T 1 hd 9 = 0 ‏يلا بيبا ليا‎
Cr 79 Ape / ‏مرح 7 مل‎ ‏ما بك‎ N.__NH ‏ب‎ N._NH Ne NZ ,
N wo [31]
Mo J 1 ‏ل لبح‎ 9 NA N—£=0 N—P=0 2 / ‏ل‎ NH, NH, 0 er Lap TC 3
Na Ory Cry / ‏ااا حم‎ N—b=0 ‏ميا‎ ‏الاب‎ Tse ‏يي" نا‎ o ‏ال مب الب‎ Ne, 0 ‏يا‎ > Ne J T “3 =p ‏ميا مير‎ 5 / ‏ل‎ NH; / ‏الم‎ NH,
ON Ta Tay ‏مايا‎ NH, J T Y T aK ‏ليا ميلا م ااام‎ ‏مر الج 7 اهم مب‎ / 3 =N NH,
J NH O uN / 0 ~ 2
N N: N << ‏ب‎ 7 3}
Wo rH ‏اا‎ ‎0 ‏سلب ولاس حم‎ NH; ‏ل‎ ‏رحبا‎ BREAK B BREAK C ‏م ص‎ ‏سلب‎ ‎BREAK A (XXIII h) ‏و‎ ‎5 [5 BREAK A BREAK B BREAK C ‏ليلا ) محللا‎ 1 / é Ae / 5 = 0 / S Apo ? O- aN.__NH O._N O_sN.__NH : ‏الا‎ NOG Ory 0.0 NL \ ON =( \ N "1 Shee NH, Nie Ne NH Pal NH, 0 ‏“لبا‎ ar ‏اكيبا‎ ‎N ‏مر‎ LJ JY I o = ‏م‎ N—P=0 N—P=0 ‏ليا‎ ‎/ ‏لم‎ / =
Cr ‏ملم 0 60 “بيع م هبر م‎
N = A N 27 N N._ NH
V-b=0 Ha J Ne J N= J T 0 ‏ليلا ميا محر ع‎
ON / ‏لم‎ =N / ‏ا 4 / ا ال‎
N Y he 0 ‏مي‎ 9 . Co o 0 ‏بي‎ ‎\ 0 NH, J NN Y LL TY he NH ‏حجار‎ WN N =~ N =~ 1 Yr ١١ 0 ‏ليلا‎ Nz ‏وال ليا‎ er 1 7 ‏ل سير لاجم‎ 22 / A a 2 ‏ل‎ NC oll oN [37
Yio N Nes J T J Ne
TA ” 1 AN one BREAK B BREAK C ow 0
Mo oor oO N._N ‏ب‎ 1] YY yt 0
N 0 NH, ‏سلب‎ ‎BREAK A § (XXII i)
في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(XX)‏ هو بالصيغة ‎(XXII @)‏ في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ من الصيغة ‎(XXII)‏ هو بالصيغة (0 ‎(XX‏ في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ من الصيغة ‎(XX)‏ هو بالصيغة (© ‎(XXII‏ في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ من الصيغة ‎(XX)‏ هو بالصيغة ‎(XX d)‏ في بعض ‎zr Sail)‏ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ الخاص بالصيغة ‎(XX)‏ هو بالصيغة ‎(XXIII ©(‏ في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(XX‏ هو بالصيغة ‎(XX)‏ في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالصيغة ‎(XXII)‏ هو بالصيغة (9 ‎(XXII‏ في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ 0 .من الصيغة ‎(XXII)‏ هو بالصيغة ‎(XXII BY‏ في بعض النماذج؛ يكون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ من الصيغة ‎(XXII)‏ هو بالصيغة ‎(XX)‏ ‏في جانب آخر؛ يتميز الكشف بمركب الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ باي صيغة من الصيغ من ‎(XX)‏ إلى ‎(XIE)‏ أو ملح مقبول صيدلانياً منه؛ حيث يتم اختيار * عند كل حدث بشكل ‎J‏ اللا الي مستقل من ‎(YU)‏ أو 0 (1). في بعض النماذج؛ يكون كل ‎X‏ عبارة عن 1. 5 في جانب آخرء؛ يتميز الكشف بمركب الأوليجومر باي صيغة من الصيغ من (!ال24 أ) إلى ‎(XXIII)‏ أو ملح مقبول صيدلانياً منه. د. تحضير ‎PMO-X‏ باستخدام روابط نُوكُليوزيد بينية من النيتروجين القاعدي ‎Basic Nitrogen Internucleoside Linkers‏ يمكن تحضير وحدات فرعية من المورفولينو ‎Morpholino subunits‏ » ارتباطات الوحدة الفرعية 0 البينية المعدلة؛ والأوليجومرات التي تحتوي على نفس الشيء كما هو موصوف؛ على سبيل ‎(Ja‏ ‏في براءات الاختراع الأمريكية رقم 5185444 و 7 9437762 والتي تم استخدامها كمرجع هنا في مجملها. يمكن تحضير الوحدات الفرعية من المورفولينو وفقًا لمخطط التفاعل العام التالي ا
مخطط التفاعل | تحضير وحدة فرعية من المورفولينو ‎Morpholino subunits‏ ‎B‏ ‎ae Sd Eo |‏ 8 أ الا ‎agp 3 srt‏ أوسا ‎Walla‏ ‏ا ا ين ‎he 5 i . ’ Soap 0‏ ‎H |‏ # ابورا تلان ‎St‏ ألين: ‎Joel,‏ ‎J X, = 4 a i E %‏ ‎RG GH parsonage aed HOH‏ ‎٠‏ اعوج ‎x‏ ‎a |‏ و ل § 0 2 أ اس إسا#سا ا لي يض ‎(١‏ ‎TY . | aa Se‏ “ديدج ‎oe oC |‏ : ٍْ ل ئيس كين ‎of Ly‏ ‎Tg =‏ لز ‎Ba 88‏ بالإشارة إلى مخطط ‎Gia B Jia Cua 1 Je lal)‏ من ‎J‏ لإقران القاعدى ودمثل ‎PG‏ مجموعة حماية؛ يمكن تحضير الوحدات الفرعية من المورفولينو ‎Morpholino subunits‏ من الرببونوكليوزيد 000001605006 المقابل (1) كما هو موضح. يمكن ‎doles‏ الوحدة الفرعية من المورفولينو )2( اختيارتا عن طريق التفاعل مع مادة سلف لمجموعة حماية مناسبة؛ على سبيل المثال كلوريد التريتيل. يتم إزالة مجموعة الحماية 3 'بشكل عام أثناء تخليق أوليغومر بحالة صلبة كما هو موضح بمزيد من التفاصيل أدناه. قد يكون جزءٍ الإقران القاعدي ‎Gane‏ بشكل مناسب لتخليق أوليجومر بطور صلب. تتضمن مجموعات الحماية المناسبة البنزويل للأدينين والسيتوزين ‎benzoyl for adenine and cytosine 0‏ « فينيل أسيتيل لغوانين ‎phenylacetyl for‏ ‎guanine‏ ؛ وبيفال ‎gf‏ أوكسى ميثيل خاص بهيبوزانثين ‎pivaloyloxymethyl for‏ ‎.)١( hypoxanthine‏ يمكن إدخال ‎Jaw de‏ أويل أ مل قع ‎NT‏ لقاعدة 0لا يمكن ! مجموعة بيغال ‎(Hg)‏ أوكحسي ‎he‏ موقع هيبوزانثين متغايرة الحلقة. على الرغم من أنه قد يتم استخدام وحدة فرعية غير محمية من الهيبوزانثين ‘ فإن إنتاجية تفاعلات التنشيط تكون أعلى بكثير عندما تكون ‎sac al)‏ محمية. تتضمن
مجموعات الحماية المناسبة الأخرى التي تم الكشف عنها في الطلب الأمريكي المعلق المشترك رقم
2 40 والذي تم استخدامه هنا كمرجع في مجمله.
ينتج تفاعل 3 مع مركب الفوسفور النشط 4؛ في وحدات فرعية من المورفولينو لها ‎on‏ رابط
مرغوب 5. يمكن تحضير مركبات لها البنية 4 باستخدام أي عدد من الطرق المعروفة لذو المهارة
في الفن. على سبيل المثال؛ قد يتم تحضير مثل هذه المركبات عن طريق تفاعل الأمين المقابل و
أوكسي كلوريد الفوسفور. في هذا الصدد؛ يمكن تحضير مادة البدء الأمينية باستخدام أي طريقة
معروفة في الفن؛ على سبيل المثال تلك الطرق الموضحة في الأمثلة وفي براءة الاختراع الأمريكية
رقم 7.943.762
يمكن استخدام مركبات لها البنية 5 في تخليق أوليجومر مؤتمت بطور صلب لتحضير أوليجومرات 0 تشتمل على روابط للوحدة الفرعية البينية. تعد تلك الأساليب معروفة جيدا في الفن. باختصار؛
يمكن تعديل مركب له البينة 5 عند الطرف "5 ليحتوي على رابط للدعم الصلب. على سبيل
المثال؛ قد يتم ريط المركب 5 بدعم قوي بواسطة رابط يتضمن 11 و15 .
يتم وصف تحضير وحدات فرعية معدلة من المورفولينو المعدلة والأوليجومرات من المورفولينو
بمزيد من التفصيل في الأمثلة. يمكن تحضير الأوليجومرات من المورفولينو التي تحتوي على أي 5 عدد من الروابط المعدلة باستخدام الطرق الموصوفة هناء والطرق المعروفة في الفن و / أو
الموصوفة في هذا المرجع. كما يرد في الأمثلة تعديلات عالمية لأوليجومرات من المورفولينو أعدت
كما سبق وصفها (انظر على سبيل ‎(JE‏ منشور معاهدة التعاون في شؤون براءات الاختراع
للطلب الدولي رقم 2008036127).
يشير المصطلح "مجموعة حماية" إلى ‎shal‏ كيميائية تإعاقة بعض أو كل الأجزاء التفاعلية لمركب 0 وتمنع تلك الأجزاء من المشاركة في التفاعلات الكيميائية حتى يتم إزالة مجموعة الحماية؛ على
سبيل المثال» تلك الأجزاء المذكورة والموصوفة في ‎TW‏ غرين؛ بى جى ام. واتس؛ مجموعات
الحماية في التخليق العضوي؛ الطبعة الثالثة جون ‎ig‏ وابنائه (1999). قد يكون من المفيد؛ في
حالة استخدام مجموعات حماية مختلفة؛ أن تكون كل مجموعة حماية (مختلفة) قابلة للنقل بوسائل
مختلفة. تسمح مجموعات الحماية المنقسمة في ظروف تفاعل متباينة تمامًا بإزالة تفاضلية
لمجموعات الحماية هذه. على سبيل ‎JU‏ يمكن إزالة مجموعات الحماية عن طريق الحمض والقاعدة؛ و التحلل بالهدروجين ‎hydrogenolysis‏ . تكون مجموعات ‎Jie‏ التريتيل ‎trityl‏ ؛ ثنائي ميثوكسي التربتيل ‎dimethoxytrityl‏ ؛ اسيتال ‎acetal‏ و ثلاثي- البوتيل ثنائي ميثيل سيليل ‎tert-butyldimethylsilyl‏ متغيرة قاعدية ويمكن استخدامها لحماية الأجزاء التفاعلية من الكربوكسي والهيدروكسي في وجود مجموعات أمينية محمية بمجموعات ‎CBZ‏ والتي يمكن إزالتها عن طريق التحلل بالهدروجين» ومجموعات ‎Ally FMOC‏ تكون متغيرة قاعدية. قد يتم إعاقة ‎shal‏ ‏الحمض الكريوكسيلي مع مجموعات متغيرة قاعدية؛ على سبيل المثال لا الحصرء الميثيل أو الإيثيل ‎methyl, or ethyl‏ « وقد يتم إعاقة الأجزاء التفاعلية الهيدروكسية باستخدام مجموعات متغيرة قاعدية ‎Jie‏ الأسيتيل في وجود الأمينات المحجوية باستخدام مجموعات متغيرة قاعدية ‎Jie‏ ‏0 ثلاثي- البيوتيل. الكريامات أو مع كاريامات التي هي على حد سواء حامض وقاعدة مستقرة ولكنها قابلة ‎Jal‏ بطريقة هدروليتية. قد يتم أيضًا حظر الحمض الكريوكسيلي ‎Carboxylic acid‏ والاجزاء التفاعلية الهيدروكسيلية التفاعلي باستخدام مجموعات الحماية قابلة للنقل بطريقة هدروليتية ‎de sane Jie‏ البنزيل ‎benzyl‏ ‏؛ في حين قد يتم حظر المجموعات الأمينية باستخدام مجموعات متغيرة قاعدية مثل 5010©6. إن 5 مجموعة الحماية الأمينية ‎suid)‏ على وجه الخصوص لتخليق مركبات مركبات بالصيغة (ا) هي ثلاثي فلورو أسيتاميد. قد يتم حظر الاجزاء التفاعلية لحمض الكاريوكسيل ‎Carboxylic acid‏ باستخدام مجموعات حماية قابلة للنقل - بعامل مؤكسد ‎Jie‏ 2:4 ثنائي ميتوكسي بنزيل -2,4 ‎dimethoxybenzyl‏ في حين قد يتم حظر مجموعات الأمينو 0 المتعايشة مع كاريامات سيليل الفلوريد المتغيرة ‎fluoride labile silyl carbamates‏ . 0 تكون مجموعات الإعاقة من الأليل ‎Allyl‏ مفيدة في وجود مجموعات الحماية الحمضية والقاعدية حيث أن الأول مستقر ويمكن إزالته ‎Ga‏ بواسطة المحفزات الفلزية أو الحمضية - ‎metal or‏ ‎catalysts pi‏ 01-2610. على سبيل المثال؛ يمكن نزع مجموعة الحماية عن الحامض الكريوكسيلي المعاق بالأليل من خلال التفاعل المحفز بالبلاديوم )0( -(811800101)0م ‎catalyzed reaction‏ في وجود ‎t‏ - بوتيل كريامات ‎t-butyl carbamate‏ متغيرة حمضية أو 5 مجموعات حماية أمينية من أسيتات متغيرة حمضية ‎base-labile acetate amine‏ . والشكل
الآخر من أشكال مجموعة الحماية هو الراتينج ‎Cus resin‏ يمكن أن يرفق به مركب أو وسيط. طالما يتم إرفاق البقايا بالراتنج 26810 » حيث يتم حظر تلك المجموعة الوظيفية ولا يمكنها التفاعل. ويمجرد تحريرها من الراتنج ‎resin‏ تكون المجموعة الوظيفية متاحة للتفاعل. تعد ‎J Cle gana‏ لإعاقة / الحماية النموذجية معروفة فى الفن وتتضمن 3 على سبيل المثال لا الحصرء الاجزاء التالية: رٍ ا 210 ٍ 2 0م 0 جلها لح هه ‎Allyl Bn PMB TBDMS Me‏ ‎HiC, OHy HaCn OH,‏ 0-2 ‎HoT T‏ الاين يح مله 1 محص 0 ‎Alloc Cbz TEOC BOC‏ ‎X‏ ‎oY‏ ‎HaCs 4 Ph _* HaC 5‏ ‎wT or T‏ ‎Ph 0‏ 3 ‎FMOC‏ ل ‎t-butyl trityl acetyl‏ ما لم يذكر خلاف ذلك؛ يتم الحصول على جميع المواد الكيميائية من ‎Sigma-Aldrich‏ ‎Fluka‏ تم الحصول على البنزويل ‎benzoyl cytidine‏ ؛ بنزيل ساتيدين؛ وغوانوسين فينيل أسيتيل ‎phenylacetyl guanosine‏ من ‎Carbosynth‏ ليمتد» المملكة المتحدة.
0 تتم تخليق ‎PMO‏ و+ ‎PMO‏ و ‎PPMO‏ و ‎PMO-X‏ التي تحتوي على مزيد من تعديلات الريط كما هو موصوف هنا باستخدام طرق معروفة في الفن وتم وصفها في الطلبات الأمريكية المعلقة رقم 12 / 271.036 و 12 / 2710040 ومنشور معاهدة التعاون في شؤون براءات الاختراع للطلب الدولي رقم 2009[ 064471« التي تم استخدامها هنا في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها.
5 يتم تخليق ‎PMO‏ بتعديل 3' التريتيل بشكل أساسي كما هو موضح في منشور معاهدة التعاون في شؤون براء ات ‎١‏ لاختراع للطلب الدولي رقم 2009[ 1 06447 باستثناء حذف خطوة نزع مجموعة التريتيل.
‎IV‏ الصيغ يتم أيضاً مزج مركبات الاختراع أو تغليفها أو اقترانها أو ارتباطها بطريقة أخرى مع جزيئات أخرى أو هياكل جزيئية أو مخاليط المركبات؛ على سبيل المثال؛ جسيمات شحمية أو جزيئات مستهدفة للمستقبلات أو التركيبات الفموية أو الشرجية أو الموضعية أو صيغ ‎(AT‏ للمساعدة في القبط و/أو التوزيع و/أو الامتصاص. تتضمن براءات الاختراع التي تمثل الولايات المتحدة التي تتناول تحضير تلك التركيبات التي تساعد على القبط و/أو التوزيع و/أو الامتصاص؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ براءات الاختراع أرقام 5 108 921؛5 354 644؛ 5 416 016؛ 5 459 127؛ 5 521 291؛5 543 158؛ 5 547 932؛ 5 583 020؛ 5 591 721؛ 4 426 330؛ 4 4 ¢899 5 013 556؛ 5 108 921؛ 5 213 804« 5 227 170؛ 5 264 221؛ 5 0 356 633« 5 395 619؛ 5 416 016؛ 5 417 978؛ 5 462 ¢854 5 469 ¢854 5 512 ¢295 5 527 528« 5 534 259 ؛ 5 543 ¢152 5 556 ¢948 5 580 575؛ و5 5 2756 إدراج كل منها هنا في المرجع. تتتضمن المركبات في اتجاه مضاد للنسخ في الاختراع أي أملاح مقبولة صيدلانياً أو إسترات أو أملاح تلك الإسترات أو مركب آخر والذي؛ بعد إعطاء الدواء للحيوان؛ ‎Lay‏ في ذلك الإنسان» يكون 5 قادراً على توفير (بشكل مباشر أو غير مباشر) المستقلب النشط بيولوجياً أو بقايا منه. وبالتالي؛ على سبيل ‎(Jal‏ يبين الاكتشاف أيضاً العقاقير الأولية والأملاح المقبولة صيدلانيًا لمركبات الاكتشاف؛ والأملاح المقبولة صيدلانياً من هذه العقاقير الأولية؛ وغيرها من المكافئات الحيوية. يشير مصطلح "العقار الأولي" على العامل العلاجي الذي يتم تحضيره في شكل غير نشط والذي يتحول إلى شكل نشط (أي العقار) داخل الجسم أو داخل خلاياه من خلال فعل الإنزيمات 0 مستبطنة المنشاً أو مواد كيميائية أخرى و/أو حالات أخرى. تحديداً؛ يتم تحضير إصدارات العقار ات الأولية لأوليجومرات الاكتشاف كمشتقات ‎SATE‏ [(5 -أسيتيل-2- ثيوايثيل) فوسفات] -5)] ‎phosphate]‏ (الا2-111080-ا/2061._وفقاً للطرق الموضحة في الطلب الدولي 3 جوسيلين وآخرين؛ التي تم نشرها في 9 ديسمبر» 1993 أو في الطلب الدولي 4 وداءة الاختراع الامريكية رقم 5,770,713 لإيمباك وآخرين.
يشير مصطلح "الأملاح المقبولة صيدلانياً” إلى أملاح مركبات الاختراع المقبولة فسيولوجياً وصيدلانياً: أي؛ الأملاح التي تحتفظ بالفعالية البيولوجي المطلوب للمركب الأم ولا تنقل التأثيرات السامة غير المرغوب فيها. فيما يخص الأوليجومرات؛ يتم أيضاً وصف أمثلة الأملاح المقبولة صيدلانياً واستخداماتها في براءة الاختراع الامريكية رقم: 6 ,287 ,860 التي يتم إدراجها هنا
بالكامل. يضم الاكتشاف الحالي أيضاً التركيبات الصيدلانية والتركيبات التي تتضمن مركبات الاختراع في اتجاه مضاد للنسخ. يمكن إعطاء التراكيب الصيدلانية للاكتشاف الحالي بعدة طرق تعتمد على العلاج المرغوب سواء محلي أو نظامي وعلى المنطقة التي يتم علاجها. قد يكون إعطاء الدواء موضعياً (بما في ذلك العيون والأغشية المخاطية ‎Loy‏ في ذلك التناول المهبلي والشرجي) أو ‎(Ugh)‏
0 على سبيل المثال من خلال استنشاق أو نفخ المساحيق أو المرذذات؛ بما في ذلك من خلال مرذاذ؛ داخل الرغامي وداخل الأنف وتحت البشرة وعبر الأدمة) أو فموباً أو بالحقن. ويضم إعطاء الدواء بالحقن إعطاء الدواء بالحقن الوربدي أو داخل الجوف أو تحت الجلد أو داخل الجسد أو ‎Jal‏ العضل أو النقع أو داخل الجمجمة؛ على سبيل المثال» داخل القراب أو داخل البطين. ويعتقد أن الأوليجومرات التي لديها واحد على الأقل من تعديلات 2'-0-ميثيل أوكسيسيل -2-0
‎methoxyethyl 5‏ تكون مفيدة تحديداً لإعطاء الدواء عن طريق الفم. قد تتضمن التركيبات والمسنحضرات الصيدلانية لإعطاء الدواء الموضعي رقع تحت الجلد و المراهم والمحاليل والكريمات والجل والقطرات والأقماع والبخاخات والسوائل والمساحيق. قد تكون الناقلات والقواعد المائية أو قواعد المساحيق أو القواعد الزيتية والمخثرات الصيدلانية التقليدية وما شابه ضرورية أو مرغوبة. وقد يمكن ‎Load‏ استخدام الواقيات الذكرية المغلفة والقفازات.
‏20 قد يتم تحضير التركيبات الصيدلانية بالاكتشاف الحالي؛ والتي ما تتمثل تقليدياً في شكل وحدة جرعات؛ وفقاً للتقنيات التقليدية المعروفة جيداً في الصناعة الصيدلانية. وتتضمن مثل تلك التقنيات خطوة الإدخال في رابطة المكونات النشطة مع ‎sale‏ ناقلة ‎alse)‏ ناقلة) ‎carrier(s)‏ أو سواغ (سواغات) ‎excipient(s)‏ صيدلانية. وفي المجمل؛ يتم تحضير التركيبات من خلال إدخال بشكل موحد وعلى نحو موثق في رابطة المكونات النشطة مع الناقلات السائلة أو الناقلات الصلبة
‏5 المقسمة بدقة أو كلاهماء ‎dang‏ ذلك؛ إذا لزم الأمرء تشكيل المنتج.
قد تتم صياغة تركيبات الاكتشاف الحالي في أي من أشكال الجرعات الممكنة العديدة ‎(Jie‏ على سبيل المثال لا الحصرء أقراص» وكبسولات؛ وكبسولات هلامية» وشراب سائل» ومواد هلامية ناعمة؛ وأقماع؛ وحقن شرجية. يتم أيضاً تكوين تركيبات الاكتشاف الحالي كمعلقات في الوسط المائي أو غير المائي أو المختلط. قد تحتوي المعلقات المائية أيضًا على مواد تزيد من لزوجة التعليق بما في ذلك؛ على سبيل المثال» كربوكسي ميثيل سلولوز الصوديوم ‎sodium‏ ‎carboxymethylcellulose‏ » و/أو السوربيتول ‎sorbitol‏ و / أو ديكستران 06*0810. ويمكن أيضاً أن يحتوي التعليق على مثبتات ‎stabilizers‏ ‏تتضمن التركيبات الصيدلانية للاكتشاف الحالي؛ على سبيل المثال لا الحصرء المحاليل والمستحلبات والرغاوي والتركيبات المحتوية على الجسيمات الشحمية. قد تشتمل التركيبات 0 والتركيبات الصيدلانية للاكتشاف الحالي على واحد أو أكثر من معززات الاختراق؛ أو الحوامل؛ أو السواغات أو المكونات النشطة أو غير النشطة الأخرى. تكون المستحلبات عادة أنظمة غير متجانسة لسائل واحد منتشر في آخر في شكل قطرات تتجاوز عادة 0.1 ميكرومتر في القطر. قد تحتوي المستحلبات على مكونات إضافية بالإضافة إلى المراحل المتفرقة؛ والأدوية الفعالة التي قد تكون موجودة كحل في أي من الطور المائي أو الطور 5 الزيتي أو نفسها كمرحلة منفصلة. يتم تضمين المستحلبات الصغيرة كنموذج للاكتشاف الحالي. كذلك يتم توضيح المستحلبات واستخداماتها في براءة الاختراع الامريكية رقم: 6 ,287 ,860؛ والتي تم استخدامها هنا كمرجع في مجملها. تتضمن الصيغ بالاكتشاف الحالي صيغ جسيمية شحمية. كما هو مستخدم في الاكتشاف الحالي؛ يقصد بالمصطلح "جسيم شحمي"حويصلة تتكون من دهنيات مزدوجة ‎AY)‏ مرتبة في طبقة ثنائية 0 أو كروية. تعد الجسيمات الشحمية هي حويصلات أحادية الطبقة أو حبيبات متعددة الطبقات لها غشاء مكون من مادة محبة للدهون ومستبطنة مائية تحتوي على التركيبة المراد تناولها. إن الجسيمات الشحمية الكاتيونية هي جسيمات شحمية موجبة الشحنة والتي يعتقد أنها تتفاعل مع جزيئات ‎DNA‏ سالبة الشحنة لتشكيل مركب مستقر. ويعتقد أن الجسيمات الشحمية التي تكون حساسة للرقم الهيدروجيني أو مشحونة بالسلب؛ تقوم بإدخال ‎Yay DNA‏ من تعقيده. قد يتم استخدام 5 كل من الجسيمات الشحمية الكاتيونية وغير الكاتيونية لتسليم ‎DNA‏ إلى الخلايا.
تتضمن الجسيمات الشحمية ‎Wal‏ على الجسيمات الشحمية ‎Whi) dial‏ وهو مصطلح يشير» كما هو مستخدم هناء إلى الجسيمات الشحمية التي تشتمل على واحدة أو أكثر من الدهنيات المتخصصة التي؛ عند دمجها في الجسيمات الشحمية؛ تؤدي إلى تحسين عمر الدورة بالنسبة إلى الجسيمات الشحمية التي تفتقر إلى هذه الدهون المتخصصة. من الأمثلة على الجسيمات الشحمية المستقرة استقرائيًا تلك التي يكون فيها جزء من جزءٍ الشحوم المكونة لحويصلة من الجسيم الشحمي يشتمل على واحد أو أكثر من الجليكوليبيدات ‎glycolipids‏ أو يتم اشتقاقه ببوليمر واحد أو أكثر من البوليمرات المائية؛ ‎Jie‏ شطر البولي إيثيلين جلايكول ‎.(PEG) polyethylene glycol‏ كذلك يتم توضيح الجسيمات الشحمية واستخداماتها في براءة الاختراع الامريكية رقم: 6, 287 ,860( التي يتم إدراجها هنا بالكامل.
0 قد تتضمن ‎Lad‏ التركيبات والتركيبات الصيدلانية للاكتشاف الحالي مواد ذات توتر سطحي ‎aa surfactants‏ استخدام المواد ذات التوتر السطحي في منتجات العقار والتركيبات وفي المستحلبات معروفاً جيداً في المجال. كذلك يتم توضيح مواد ذات توتر سطحي واستخداماتها في براءة الاختراع الامريكية رقم: 6 ,287 ,860؛ التي يتم إدراجها هنا بالكامل. في ‎op Sail (any‏ يوظف الاكتشاف ‎all‏ معززات اختراق متنوعة لتؤثر على التناول الفعلي
5 للأحماض النووية؛ وتحديداً الأوليجومرات. بالإضافة إلى مساعدة نشر الأدوية غير المحبة للدهون عبر أغشية ‎(DAN‏ تعزز معززات الاختراق أيضًا نفاذية الأدوية المحبة للدهون. ويمكن تصنيف معززات الاختراق على أنها تنتمي إلى واحدة من خمس فئات عربضة؛ أي المواد ذات التوتر السطحي؛ والأحماض الدهنية؛ والأملاح الصفراوية؛ وعوامل الخالبة؛ والمواد التي ليس لها توتر سطحي. كذلك يتم توضيح معززات الاختراق واستخداماتها في براءة الاختراع الامريكية رقم:
0 6,287,860؛ التي يتم إدراجها هنا بالكامل. سيدرك من له مهارة في المجال أنه يتم تصميم التركيبات روتينياً وفقًا لاستخدامها المقصود؛ أي مسار إعطاء الدواء. تتضمن التركيبات لإعطاء الدواء موضعياً تلك التي تكون فيها أوليجومرات الاكتشاف ممزوجة بعامل التناول الموضعي ‎(spall Jie‏ والجسيمات الشحمية؛ والأحماض الدهنية ‎nucleic acids‏
« وإسترات الأحماض الدهنية ‎fatty acid esters‏ ؛ والستيرويدات؛ وعوامل خالبة والمواد الفعالة السطحية. وتتضمن الليبيدات والليبوسومات المحايدة على سبيل المثال» دايوليولفوسفاتيديل ‎(DOPE dioleoylphosphatidyl‏ إيثانولامين ‎«ethanolamine‏ ديميرستوبلفوسفاتيديل كولين ‎«DMPC dimyristoylphosphatidyl choline‏ ديستياروليفوسفاتيديل كولين ‎distearolyphosphatidyl choline 5‏ والسالبة على سبيل المثال»؛ ديميرستوبلفوسفاتيديل جليسيرول ‎DMPG dimyristoylphosphatidyl glycerol‏ والكاتيونية ‎cationic‏ على سبيل المثال» دايوليودلتيتراميثيل أمينوبروبيل ‎DOTAP dioleoyltetramethylaminopropyl‏ ودايوليولفوسفاتيديل إيثانولامين ‎DOTMA dioleoylphosphatidyl ethanolamine‏ . فيما يتعلق بإعطاء الدواء موضعياً أو بشكل ‎«AT‏ يمكن أن يتم تغليف أوليجومرات الاكتشاف 0 ضمن الليبوسومات أو قد تشكل مركباتهاء تحديداً للليبوسومات الكاتيونية ‎cationic liposomes‏ . وبدلاً من ذلك؛ قد يمكن تعقيد الأوليجومرات إلى سوائل؛ وتحديداً إلى السوائل الكاتيونية ‎cationic lipids‏ . يتم توضيح كذلك أحماض دهنية ‎clin‏ وأملاحها المقبولة صيدلانياً واستخداماتها في براءة الاختراع الامريكية رقم: 6,287,860؛ التي يتم إدراجها هنا بالكامل. يتم توضيح صيغ موضعية بالتفصيل في طلب براءة اختراع مسبق برقم تسلسلي: 315,298/09 تم تقديمها في 20 ‎ile‏ 1999 التي يتم إدراجها هنا بالكامل. تتضمن التركيبات والتركيبات لإعطاء الدواء عن طريق الفم مساحيق أو حبيبات أو جزيئات صغيرة أو جزيئات نانوية أو معلقات أو محاليل في الماء أو الوسائط غير المائية أو الكبسولات أو كبسولات هلامية أو أكياس أو أقراص أو أقراص صغيرة. يمكن أن تكون مخثرات أو عوامل منكهة؛ أو مواد مخففة؛ أو مستحلبات؛ أو مواد تشتيت أو مواد تثبيت. يتم إعطاء التركيبات الفموية 0 الموجودة في أوليجومرات الاكتشاف بالاقتران مع واحد أو أكثر من معززات الاختراق ومواد ذات توتر سطحي وخالبات. وتتضمن المواد ذات التوتر السطحي أحماض دهنية و/أو إسترات أو أملاحه؛ والأحماض الصفراء و/أو أملاحها. يتم توضيح كذلك أحماض/أملاح الصفراء والأحماض الدهنية واستخداماتها في براءة الاختراع الامريكية رقم: 6 ,287 ,860؛ التي يتم إدراجها هنا بالكامل. في بعض النماذج؛ يوفر الاكتشاف الحالي تجميعات لمعززات الاختراق؛ على سبيل 5 المثال؛ الأحماض/الأملاح الدهنية مجتمعة مع أحماض/أملاح الصفراء. تكون التجميعة التمثيلية
عبارة عن ملح الصوديوم لحمض اللوريك وحمض الكاربيك 5 ‎UDCA‏ وكذلك تتضمن معززات الاختراق بولي أوكسي إيثيلين-9-لوريل إيثير؛ بولي أوكسي إيثيلين-20-سيتيل إيثير. قد يتم تناول أوليجومرات الاكتشاف عن طريق الفم؛ في شكل حبيبي بما في ذلك الجسيمات المجففة التي تم رشهاء أو معقّدة لتشكيل الجسيمات الصغرى أو النانوية. يتم توضيح ‎alge‏ تعقيد أوليجومر واستخداماتها في براءة الاختراع الامريكية رقم: 6, 287 ‎B60,‏ التي يتم إدراجها هنا بالكامل. يتم توضيح صيغ الأوليجومرات وتحضيرها بالتفصيل في طلب مسبق بأرقام تسلسلية 108/09, 673 (تم تقديمها في 1 يوليو 1998)؛ 09 / 315؛ 298 (تم تقديمها في 20 مايو 1999) و 10 / 2 تم تقديمها في 8 فبراير 2002 ولقد تم استخدام كل منها كمرجع في مجملها. قد تتضمن التركيبات والصيغ الخاصة بإعطاء الدواء بالحقن أو داخل القراب أو داخل البطين 0 محاليل مائية معقمة والتي قد تحتوي أيضًا على محاليل منظمة ومخففات ومضافات مناسبة أخرى مثل؛ على سبيل المثال لا الحصر» محسنات الاختراق والمركبات الحاملة وغيرها من الحوامل أو السواغات المقبولة صيدلانياً. توفر نماذج معينة للاكتشاف تركيبات صيدلانية تحتوي على واحد أو أكثر من مركبات أوليجومر وواحد أو ‎JST‏ من عوامل علاجية أخرى التي تعمل من خلال آلية غية في اتجاه مضاد للنسخ.
Jie ‏تتضمن أمثلة العوامل العلاجية على سبيل المثال لا الحصر عقاقير كيمائية علاجية للسرطان‎ 5 daunorubicin, daunomycin, dactinomycin, doxorubicin, epirubicin, idarubicin, esorubicin, bleomycin, mafosfamide, ifosfamide, cytosine arabinoside, bis—chloroethylnitrosurea, busulfan, mitomycin C, actinomycin
D, mithramycin, prednisone, hydroxyprogesterone, testosterone, tamoxifen, dacarbazine, procarbazine, hexamethylmelamine, pentamethylmelamine, 20 mitoxantrone, amsacrine, chlorambucil, methylcyclohexylnitrosurea, nitrogen mustards, melphalan, cyclophosphamide, 6-mercaptopurine, 6- thioguanine, cytarabine, 5—azacytidine, hydroxyurea, deoxyco—formycin, 4-hydroxyperoxycyclophosphoramide, 5-fluorouracil (5-FU), 5- ‎fluorodeoxyuridine (5-FUdR) ~~ 25‏ عندما تستخدم مع مركبات الاكتشاف؛ قد يمكن استخدام
العوامل الكيميائية العلاجية تلك بشكل منفرد على سبيل المثال» ‎FU-5‏ وأوليجومر ‎oligomer‏ ؛ أو تتابعياً (على سبيل المثال» ‎FU=5‏ وأوليجومر لفترة زمنية يعقبه ‎MTX‏ وأوليجومر)؛ أو مجتمعة مع واحد أو أكثر من العوامل الكيميائية العلاجية الأخرى على سبيل المثال» ‎MTX 5 FU=5‏ وأوليجومر» أو ‎(FU=5‏ ومعالجة بالإشعاع وأوليجومر ‎radiotherapy and oligomer‏ . ويمكن أيضاً جمع الأدوية المضادة للالتهاب ‎anti-inflammatory drugs‏ بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصرء العقاقير المضادة للالتهاب غير الستيرويدية ‎nonsteroidal‏ ‏والكورتيكوستيرويدات 00010051610105 ؛ والأدوية المضادة للفيروسات؛ بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصرء الريبيفيرين 1101/1510 » فيدارارين ‎vidarabine‏ ؛ الأسيكلوفير ‎acyclovir‏ ‏جانسيكلوفير 980010107 ؛ مع تراكيب الاكتشاف. وتكون أيضاً تجميعات المركبات في اتجاه 0 مضاد للنسخ وعقاقير أخرى غير في اتجاه مضاد للنسخ ضمن نطاق هذا الاكتشاف. ويمكن استخدام اثنين أو أكثر من المركبات المجمعة معاً أو تباعاً. في نموذج متعلق آخرء قد تحتوي تركيبات الاكتشاف على واحد أو ‎FST‏ من المركبات لفي اتجاه مضاد للنسخ؛ تحديداً أوليجومرات؛ الموجهة إلى الحمض النووي الأول وواحد أو ‎SST‏ من المركبات في اتجاه مضاد للنسخ الموجهة إلى هدف الحمض النووي الثاني. وكبديل لذلك؛ قد تحتوي تركيبات 5 الاكتشاف على اثنين أو أكثر من المركبات في اتجاه مضاد للنسخ الموجهة إلى مناطق مختلفة لنفس هدف الحمض النووي. وهناك أمثلة هائلة للمركبات في اتجاه مضاد للنسخ معروفة في هذا المجال. ويمكن استخدام اثنين أو أكثر من المركبات المجمعة معاً أو تباعاً. ‎WV‏ طرق الاستخدام تعلق نماذج معينة بطرق زيادة التعبير الوواثي لأكسون 2 -يحتوي على حمض ‎MRNA‏ لجين ‎GAA 20‏ و/أو بروتين باستخدام أوليجومرات في ‎slat)‏ مضاد للنسخ في الاكتشاف الحالي للأغراض العلاجية (على سبيل ‎(JO)‏ علاج الحالات المصابة ب ا١-6510).‏ وبالتالي؛ في بعض النماذج؛ يوفر الاكتشاف ‎Jal)‏ طرقًا لعلاج فرد مصاب أو معرض للخطر اا-650 المطور؛ يشتمل على إعطاء كمية فعالة من أوليجومر مضاد للنسخ للاكتشاف لهذه الحالة. في بعض النماذج؛ يشتمل الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على متوالية نيوكليوتيد لطول وتتام كافيان ليختلط تحديداً إلى 5 منطقة ضمن حمض ‎MRNA‏ القبلي لجين حمض ألفا جليكوسيداز -81008 ‎acid‏
‎(GAA) glucosidase‏ حيث يزيد ربط الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بالمنطقة من مستوى أكسون 2 - المحتوي على حمض ‎MRNA‏ لجين ‎GAA‏ في خلية و/أو نسيج الحالة. يتم توضيح المتواليات المستهدفة في اتجاه مضاد للنسخ التمثيلية في الجداول 2أ- 2ج المدرجة طيه. يتم أيضاً تضمين الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ للاستخدام في تحضير المادة الطبية لعلاج مرض تجزين الجليكوجين من النوع الثاني ‎¢GSD-II)‏ داء بومبيه)؛ المشتمل على متوالية نيوكليوتيد لطول ومتتام كافيان ليختلط تحديداً إلى منطقة ضمن حمض ‎MRNA‏ القبلي لجين حمض ألفا جليكوسيداز ‎«(GAA) acid alpha-glucosidase‏ حيث يزيد ربط الأوليجومر فى اتجاه مضاد للنسخ بالمنطقة أكسون 2 - المحتوي على حمض ‎MRNA‏ لجين ‎GAA‏ ‏في بعض نماذج لطرق علاج ‎650-١١‏ أو المادة الطبية لعلاج ١١-6500؛‏ يشتمل مرطب 0 الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على: سلسلة كيميائية غير طبيعية مختارة من أوليجومر مورفيلينو فسفوراميدات أو فسفورودياميدات ‎(PMO) phosphorodiamidate morpholino oligomer‏ أو حمض الببتيد النووي ‎(PNA) peptide nucleic acid‏ أو حمض نووي مغلق ‎(LNA) locked nucleic acid‏ أو أوليجومر فوسفوروثيوات ‎phosphorothioate oligomer‏ « أو أوليجومر ثلاتى ‎DNA‏ الحلقى ‎tricyclo-DNA oligomer 5‏ أو أوليجومر فوسفوروثيوات الثلاثي الحلقي ‎tricyclo—‏ ‎phosphorothioate oligomer‏ أو 0-2 ‎Me—‏ - أوليجومر معدل ‎2’0-Me-modified‏ ‎oligomer‏ أو أي مجموعة مما سبق؛ و متوالي مستهدفة لمنطقة داخل الإنترون 1 (متوالية التعريف رقم: 1)؛ أو الإنترون 2 (متوالية التعريف رقم: 60)؛ أو الإكسون 2 (متوالية التعريف رقم: 61) لحمض ‎MRNA‏ القبلي لجين ألفا 0 جليكوسيداز البشري ‎.(GAA)human acid alpha-glucosidase‏ كما هو ملاحظ هناء يشير "ا١-3650"‏ إلى مرض تخزين الجليكوجين من النوع الثاني ‎glycogen‏ ‎6500-١١ storage disease type ١١‏ أو داء بومبيه ‎650-١١ or Pompe disease‏ « وهو مرض بشري صبغي جسدي متنحي والذي ‎We‏ ما يتميز بالتعبير الوراثي الدفين لبروتين ‎GAA‏
في الأفراد المصابة. وبتم تضمين الحالات المصابة ب ‎GSD‏ والذين يعانون من أشكال البدء المتأخر للمرض . في نماذج معينة؛ قامت الحالة بتقليل التعبير الوراثي و/أو فعالية بروتين ‎GAA‏ في واحد أو أكثر من الأنسجة؛ (على سبيل المثال؛ فيما يتعلق بحالة سليمة أو نقطة مبكرة في الزمن)؛ بما في ذلك؛ القلب والعضلات الهيكلية والكبد وأنسجة الجهاز العصبي. في بعض النماذج؛ قامت الحالة بزيادة تراكم الجليكوجين في واحد أو أكثر من الأنسجة؛ (على سبيل المثال؛ فيما يتعلق بحالة سليمة أو نقطة مبكرة في الزمن)؛ بما في ذلك؛ القلب والعضلات الهيكلية والكبد وأنسجة الجهاز العصبي. في نماذج معينة؛ تعاني الحالة من طفرة 51-131<6/! واحدة على الأقل (يشار إليها أبضاً ب ‎(€.336-13T>G‏ من المحتمل أن تجتمع بطفرة (طفرات) أخرى والتي تؤدي إلى التعبير الوراثي 0 منخفض لبروتين ‎GAA‏ الوظيفي يتم توضيح ملخص اختبار الجيني الجزيئي المستخدمة في ‎GSD-II‏ فى الجدول 3 أدناه.
الجدول: 3 تردد اكتشاف العينة الطفرات من إتاحة طريقة الاختبار الطفرات المكتشفة الجينية خلال ‎dh‏ الاختبار ا لاختبار ‎GAA‏ تحليل المتوالية ‎*p.Arg854‏ ~%50-%60 |سريري ‎p.Asp645Glu‏ ~%40-%80 ‎IVS1-13T>G‏ ~%50-%85 متغيرات متواليات 7693-3 أخرى في الجين تحليل متوالية متغيرات المتوالية فى | 1693-9683 الإكسونات المختارة | الإكسونات المختارة تحليل الطفرة متغيرات المتوالية في | 970100 من المستهدفة المواقع المستهدفة المتغيرات ضمن الطفرات المستهدفة تحليل عمليات 9613-5 الحذف/التضاعف | الحذف/التضاعف الإكسونية وللجين بكامله
تتعلق نماذج معينة بطرق زيادة التعبير الوراثي لأكسون 2- المحتوي على حمض ‎MRNA‏ لجين ‎GAA‏ أو بروتين في خلية و/أو نسيج و/أو ‎Ala‏ كما هو موضح هنا. في بعض الحالات؛ تتم زيادة أكسون 2- المحتوي على حمض ‎MRNA‏ لجين ‎GAA‏ أو بروتين بحوالي أو على الأقل حوالي 965 أو 966 أو 967 أو 968 أو 969 أو 9610 أو 9611 أو 9612 أو 9613 أو 9614 أو %15 أو 9616 أو 9617 أو 9618 أو 9619 أو 9620 أو 9625 أو 9630 أو 9635 أو 0 أو 9645 أو 9650 أو 9655 أو 9660 أو 9665 أو 9670 أو 9675 أو 9680 أو 9685 أو 9690 أو 9695 أو 96100 أو 9685 أو 9690 أو 9695 أو 96100 فيما يخص التحكم؛ على سبيل المثال التحكم بالخلية/الحالة و/أو التحكم بتركيبة دون الأوليجومر مضاد للنسخ و/أو غياب العلاج و/أو نقطة الزمن المبكرة. ويتم أيضاً تضمين طرق لرصد التعبير الوراثي المحتوي 0 على حمض ‎MRNA‏ لجين ‎GAA‏ أو البروتين لمستويات التحكم الصحية. تتعلق بعض النماذج بطرق زيادة التعبير الوراثي لبروتين ‎GAA‏ النشط / الوظيفي في خلية و/أو نسيج و/أو حالة كما هو موضح هنا. في حالات معينة؛ تتم زيادة مستوى بروتين ‎GAA‏ ‏الوظيفي/النشط بحوالي أو على الأقل حوالي 965 أو 966 أو 967 أو 968 أو 969 أو 9610 أو 1 أو 9612 أو 9613 أو 9614 أو 9615 أو 9616 أو 9617 أو 9618 أو 9619 أو 9620 5 أو %25 أو 9630 أو 9635 أو 9640 أو 9645 أو 9650 أو 9655 أو 9660 أو 9665 أو 0 أو 9675 أو 9680 أو 9685 أو 9690 أو 9695 أو 96100 أو 9685 أو 9690 أو 5 أو 96100 ‎Lad‏ يخص التحكم»؛ على سبيل المثال التحكم بالخلية/الحالة و/أو التحكم بتركيبة دون الأوليجومر مضاد للنسخ و/أو غياب العلاج و/أو نقطة الزمن المبكرة. ويتم أيضاً تضمين طرق رصد التعبير الوراثي لبروتين ‎GAA‏ الوظيفي/النشط ‎Lad‏ يتعلق بمستويات التحكم الصحية. 0 تتعلق نماذج محددة بطرق تقليل تراكم الجليكوجين في واحدة أو أكثر من الخلايا و/أو الأنسجة و/أو الحالات كما هو موضح هنا. في حالات معينة؛ يتم تقليل ‎GAA‏ تراكم الجليكوجين بحوالي أو على الأقل حوالي 965 أو 966 أو 967 أو 968 أو 969 أو 9610 أو 9611 أو 9612 أو 3 أو 9614 أو 9615 أو 9616 أو 9617 أو 9618 أو 9619 أو 9620 أو 9625 أو 9630 أو 9635 أو 9640 أو 9645 أو 9650 أو 9655 أو 9660 أو 9665 أو 9670 أو 1675 أو 5 9680 أو 9685 أو 9690 أو 9695 أو 916100 أو 9685 أو 9690 أو 9695 أو 96100 فيما
يخص التحكم؛ على سبيل المثال خلية مقارنة /حالة و/أو تركيبة مقارنة بدون الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ و/أو غياب العلاج و/أو نقطة الزمن المبكرة. يتم تضمين طرق رصد مستويات الجليكوجين الصحي الطبيعية أو غير ذلك في خلية و/أو نسيج و/أو حالة (على سبيل المثال؛ المستويات غير المصحوية بأعراض أو المستويات مصاحبة لأعراض منخفضة ل ا١-650).‏
يتم تضمين طرق تقليل واحد أو أكثر من أعراض ‎650-1١‏ في حالة بحاجة لذلك. تتضمن أمثلة محددة أعراض ‎6500-١‏ الطفلي مثل تضخم القلب؛ نقص التوتر العضلي؛ اعتلال عضلة القلب؛ انسداد انسداد البطين الأيسرء؛ ضيق التنفس؛ تأخر العضلات / ضعف العضلات؛ وصعويات التغذية / الفشل في النمو. وتتضمن الأمثلة الإضافية أعراض التأخر في الظهور في مرحلة ‎650-١١‏ مثل ضعف العضلات (مثل ضعف العضلات والهيكل العظمي بما في ذلك ضعف
0 العضلات التدريجي) أو السعال الضعيف أو التهابات الصدر المتكررة أو نقص التوتر أو تأخر الحركات الحركية أو صعوية ‎ald)‏ أو المضغ وانخفاض القدرة الحيوية أو قصور الجهاز التنفسي. يمكن إعطاء أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ من الاكتشاف لحالات لعلاج (وقائياً أو ‎(Lode‏ ‎.GSD-II‏ بالاقتران مع ‎Jie‏ هذا العلاج؛ يمكن اعتبار علم الصيدلة الجيني (أي دراسة العلاقة بين التمط الجيني للفرد واستجابة ذلك الفرد لمركب أجنبي أو عقار أجنبي). يمكن أن تؤدي
5 _الاختلافات في التمثيل الغذائي للعلاجات إلى سمية شديدة أو فشل علاجي عن طريق تغيير العلاقة بين الجرعة وتركيز الدم للدواء النشط صيدلانياً. وبالتالي؛ يمكن للطبيب أو الممارس النظر في تطبيق المعرفة التي تم الحصول عليها في الدراسات الصيدلانية ذات الصلة في تحديد ما إذا كان يجب أن يتم إعطاء عامل علاجي وكذلك تكييف الجرعة و / أو نظام العلاج للمعالجة بعامل علاجي.
0 يعد التسليم الفعال لأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ إلى الحمض النووي الهدف عبارة عن ناحية واحدة من العلاج. تصم طرق تسليم أوليجومر المضاد للنسخ؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ طرق نظامية مختلفة؛ بما في ذلك الطرق الفموية والخاصة ‎(pally‏ على سبيل المثال؛ الحقن الوريدي؛ تحت الجلد؛ داخل الصفاق؛ والعضل؛ بالإضافة إلى الاستنشاق؛ عبر الجلد والتسليم الموضعي. ويمكن تحديد الطريق المناسب من قبل الضالع في المجال؛ كما هو مناسب لظروف ‎Aad)‏
الخاضعة للعلاج. تعد كل من الدوران الوعائي أو خارج الأوعية الدموية؛ أو الدم أو اللمف؛ والسائل الدماغي الشوكي هي بعض المواقع غير المحددة حيث يمكن إدخال ‎(RNA‏ ويمكن توظيف التسليم المباشر ل ‎«ONS‏ على سبيل المثال» يمكن استخدام إعطاء الدواء داخل المخ أو داخل البطين أو داخل القراب كطرق لإعطاء الدواء.
في نماذج محددة؛ يمكن إعطاء أوليجومر (أوليجومرات) في اتجاه مضاد للنسخ للحالة من خلال الحقن داخل العضلى ‎«(IM) intramuscular injection‏ أي يتم إعطائها وتسليمها عن طريق العضلات. تتضمن أمثلة غير محدودة من مواقع الحقن العضليالعضلة الدالية في الذراع؛ العضلة الوحشية المتسعة من الساق؛ والعضلات الفرجية في الفخذين» وعضلات الظهر العضلية في الأرداف. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء ‎PMO‏ أو ‎PMO-X‏ أو 001/0 من خلال الحقن داخل
0 العضل. في نماذج معينة؛ تكون الحالة بحاجتها كتراكم الجليكوجين ‎glycogen‏ في أنسجة الجهاز العصبي المركزي ‎nervous system tissues‏ ل06018. تتضمن الأمثلة حالات تساهم فيها أمراض الجهاز العصبي المركزي في حالات القصور التنفسية في ‎lil) 650-١١‏ على سبيل ‎(Jad)‏ ‏دي روسيو وآخرون» ‎PNAS‏ الولايات المتحدة 106: 24-9419 2009). وفقا لذلك» يمكن
5 تسليم أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ الموصوفة هنا إلى النظام العصبي للموضوع بأي طريقة معترف بها من قبل المجال؛ على سبيل المثال؛ حيث تكون الحالة التي تعاني من ‎6510-١١‏ ‏بمشاركة ‎(CNS‏ على سبيل المثال؛ يمكن استخدام حقن الدم المحيطي من أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ لتسليم الكواشف المذكورة إلى الخلايا العصبية الطرفية عبر وسائل نشرية و / أو نشطة. بدلا من ذلك؛ يمكن تعديل أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ لتشجيع عبور حاجز الدم
0 في الدماغ ‎(BBB) blood-brain-barrier‏ لتحقيق تسليم الكواشف المذكورة لخلايا الخلايا العصبية في الجهاز العصبي المركزي ‎central nervous system‏ (0115). وقد وسعت التطورات الأخيرة المحددة في تكنولوجيا أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ واستراتيجيات التسليم ‎Glas‏ استخدام أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ للاضطرابات العصبية (انظرء على سبيل المثال؛ فورتيه؛ إيه. وآخرون. 2005. أهداف العقار الحالى: جايجرء إل. بي.ء؛ ودبليو. إيه.
5 بانكس. 2005. طرق في الطب الجزيئي 106: 251-237؛ فينوجرادوف» اس. في. وآخرون.
4. الكيمياء المترافقة لعلم الأحياء 5: 60-50« ويتم إدراج ما سلف ذكره هنا كمرجع في مجمله). على سبيل المثال؛ يمكن توليد الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ التابعة للاكتشاف كمركبات حمض الببتيد النووي ‎(PNA) peptide nucleic acid‏ وقد تم تحديد كل الكواشف ‎PNA‏ لعبور 888 (جايجرء إل. بي.؛ ودبليو. إيه. بانكس. 2005. طرق في الطب الجزيئي 106: 251-237). كما تم وصف علاج ‎dla‏ ب على سبيل ‎(JB)‏ عامل فعال وعائياً؛ لتعزيز ‎Jal‏ عبر 888 (10). قد يتم أيضاً استخدام توصيل أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ في الاكتشاف بعوامل يتم نقلها بفعالية عبر 888 كآلية تسليم. يمكن ‎Load‏ أن يسهل إعطاء العوامل في اتجاه مضاد للنسخ مع عوامل التباين مثل أيوإكسول (على سبيل ‎(JB‏ بشكل منفصل؛ في نفس الوقت؛ في نفس الصيغة) التسليم عبر ‎BBB‏ كما هو موضح في منشور معاهدة براءات 0 الاختراع للطلب الدولي رقم / 2013/ 086207« والذي تم استخدامه في هذه الوتيقة كمرجع في مجملها. في نماذج معينة؛ يمكن تسليم أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ الخاصة بالاكتشاف من خلال طرق عير الجلد (على سبيل المثال» عن طريق دمج أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ في على سبيل المثال المستحلبات؛ مع تعبئة أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ تلك اختياريا في الجسيمات 5 الشحمية). وصفت هذه الطرق عبر الجلد والمستحلب /طرق التسليم بوساطة الجسيمات الشحمية لأوليجومرات الفي اتجاه مضاد للنسخ؛ على سبيل المثال» في براءة اختراع الامريكية رقم: 6 ,965 ,025 التي تم استخدام محتوياتها في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. يمكن أيضاً تسليم الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ الموضحة هنا عبر جهاز مغروس. يُعد تصميم هذا الجهاز عملية معروفة من قبل المجال؛ على سبيل ‎(JU‏ تصميم الغرس الاصطناعي 0 الموصوف في؛ على سبيل المثال في براءة الاختراع الامريكية رقم: 6, 969 ,400 التي تم استخدام محتوياتها في هذه الوثيقة كمرجع في مجملها. يمكن إدخال الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ إلى الخلايا باستخدام تقنيات معروفة في المجال (على سبيل المثال؛ نقل العدوى صناعياً؛ والمسامية الكهربائية؛ والانصهار؛ والجسيمات الشحمية؛ وجزبئات بوليمرية غروانية وناقلات الفيروسية وغير الفيروسية؛ وكذلك وسائل أخرى معروفة في 5 المجال). تعتمد طريقة التسليم المختارة على الأقل على كيمياء أوليجومر» والخلايا المراد معالجتها
وموقع الخلايا؛ وسوف تكون واضحة للضالعين في المجال. على سبيل المثال؛ يمكن تحقيق التوطين من خلال الجسيمات الشحمية مع معلمات محددة على السطح لتوجيه الحقن المباشر في ‎LAY‏ المستهدفة المحتوية على الأنسجة؛ امتصاص محدد بوساطة المستقبلات؛ أو ما شابه. كما هو معروف في المجال؛ قد يتم تسليم الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ باستخدام» على سبيل المثال» طرق تشترك في تناول بوساطة الجسيمات الشحمية والمتقارنات السائلة وتناول
بوساطة البولي ليزين وتناول بوساطة جسيمات نانوية والتقام خلوي بوساطة المستقبلات؛ وكذلك الأوضاع غير الالتقامية الإضافية للتسليم» ‎Jie‏ الحقن المجهري والإنفاذية ‎Ae)‏ سبيل ‎JE‏ ‏إنفاذية ستربتوليزين-©0؛ إنفاذية أيونية للببتيد) والمسامية ‎(Al gS)‏ وطرق تسليم متنوعة غير غزوانية وغير التقامية معروفة في المجال (بالإشارة إلى دوكا وروجاناساكول؛ مراجعات تسليم
0 العقار المتقدمة 44 49-35 المدجة بأكملها في المرجع). ويمكن إعطاء الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ في مركبة أو ناقلة ملائمة ‎lg‏ تكون مقبولة فسيولوجياً و/أو صيدلانياً. وقد تتضمن تلك التركيبة أي تنوع من الناقلات القياسية المقبولة صيدلانياً التي يتم توظيفها من قبل من لديهم خبرة في المجال. وتتضمن الأمثلة؛ على سبيل المثال لا الحصرء المحلول الملحي» والفوسفات والمخزن ‎phosphate buffered saline lll‏
‎(PBS) 5‏ والماء؛ والإيثانول المائي؛ والمستحلبات؛ ‎Jie‏ مستحلبات الزيت / الماء أو مستحلبات الدهون الثلاثية؛ والأقراص والكبسولات. وسيختلف اخيار 'مادة ناقلة مناسبة مقبولة صيدلانياً بناء على وضع إعطاء الدواء المختار. ويقصد ب ‎sal’‏ ناقلة مقبولة صيدلانياً” أنها تتضمن أي من أو كل المذيبات؛ ووسائط التشتت؛ والطلاءات؛ والعوامل المضادة للبكتيريا والفطريات؛ وعوامل التأخير متساوي التوتر والاستيعاب وما شابه؛ المتوافقة مع إعطاء الدواء صيدلانياً. ‎dang‏ استخدام الوسائط
‏0 والعوامل للمواد النشطة صيدلانياً معروفاً جيداً في المجال. باستثناء ما لا يتطابق أي من الوسائط أو العوامل التقليدية مع المركب الفعال؛ يتم التفكير في استخدامه في التراكيب. ويمكن أيضاً إدراج المركبات النشطة المتممة في التركيبات. يمكن استخدام المركبات (على سبيل المثال؛ الأوليجومرات الفي اتجاه مضاد للنسخ) بشكل عام كحمض حر أو قاعدة حرة. وبدلاً من ذلك؛ يمكن استخدام المركبات التابعة ‎LEU‏ في هيئة
‏5 إضافة أملاح حمض أو قاعدة. كن تحضير أملاح إضافة الحمض للمركبات الأمينية الحرة
‎LEO‏ الحالي بطرق معروفة في المجال؛ ويمكن أن تتكون من الأحماض العضوية وغير العضوية. الأحماض العضوية المناسبة تشمل ‎organic acids include maleic, fumaric,‏ ‎benzoic, ascorbic, succinic, methanesulfonic, acetic, trifluoroacetic, oxalic,‏ ‎propionic, tartaric, salicylic, citric, gluconic, lactic, mandelic, cinnamic,‏ ‎.aspartic, stearic, palmitic, glycolic, glutamic, and benzenesulfonic acids 5‏ تتضمن الأحماض غير العضوية المناسبة أحماض الهيدروكلوريك ‎hydrochloric‏ والهيدروبروميك ‎hydrobromic‏ والكبريتيك ‎phosphoricels se silly sulfuric‏ والنيتريك 01016. تتضمن نت أملاح الإضافة القاعدية تلك الأملاح التي تتشكل مع أنيون الكريوكسيل وتشمل الأملاح التي تكونت مع الكاتيونات العضوية وغير العضوية مثل تلك المختارة من معادن الأرض الفازية القلوية 0 والقلوية على سبيل المثال؛ الليثيوم ‎lithium‏ والصوديوم ‎sodium‏ والبوتاسيوم ‎potassium‏ ‏والمغنيسيوم ‎magnesium‏ والباريوم ‎barium‏ والكالسيوم 800 ؛ وكذلك أيون الأمونيوم والمشتقات المستبدلة منه على سبيل المثال» ديبنزيلامونيوم ‎dibenzylammonium‏ « بنزيلامونيوم ‎benzylammonium‏ « 2-هيدروكسي إيثيل أمونيوم -2 ‎hydroxyethylammonium‏ » وما شابه. ومن ثم؛ يقصد بالمصطلح "ملح مقبول صيدلانياً” أنه يتضمن أي وكافة أشكال الملح المقبول. بالإضافة إلى ذلك؛ يتم أيضاً تضمين العقاقير الأولية ضمن محتوى هذا الاكتشاف. وتعد العقاقير الأولية عبارة عن ناقلات ربط تساهية والتي تطلق مركب في الأحياء عندما يتم إعطاء هذا العقار الأولي للمريض. وبشكل عام يتم تحضير العقاقير الأولية من خلال تعديل المجموعات الوظيفية بطريقة بحيث ينقسم ‎canal)‏ سواء من خلال التداول الروتيني أو في الأحياء؛ مما يعطي المركب 0 الأم. وتتضمن العقاقير ‎dal)‏ على سبيل المثال؛ مركبات هذا الاكتشاف حيث يتم ربط مجموعات الهيدروكسي ‎hydroxy‏ أو الأميني ‎amine‏ أو السولفيدريل ‎(sb sulfhydryl‏ مجموعة من شأنها ‎oof‏ عندما يتم إعطاء الدواء للمريض» تنقسم إلى شكل مجموعات هيدروكسي أو أميني أو سولفيدريل ‎sulfhydryl‏ ويالتالي؛ تتضمن الأمثلة التمثيلية للعقاقير الأولية (على سبيل المثال لا الحصر) مشتقات الأسيتات ‎acetate‏ والفورمات والبينزاوات ‎formate and benzoate‏ 5 للمجموعات الوظيفية الكحول ‎alcohol‏ والأمين لأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ للاكتشاف.
وبالإضافة إلى ‎cally‏ في حالة حمض الكريوكسيليك (-00011) -) ‎carboxylic acid‏ ‎«COOH)‏ قد يتم توظيف الإسترات ‎esters‏ مثل إسترات الميثيل ‎methyl esters‏ وإسترات ‎ethyl esters Ji)‏ وما شابه. في بعض الحالات؛ يمكن توظيف الجسيمات الشحمية لتسهيل أخذ أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ في الخلايا ‎Hail)‏ على سبيل المثال؛ ويليام» اس. ايه. لوكيميا 12(10): 1989-1980؛ لابالينين وآخرون» البحوث المضادة للفيروسات» 23: 119؛ 1994؛ أولمان وآخرون؛ أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ: ‎fae‏ علاجي جديد؛ البحوث الكيميائية؛ الحجم 90؛ رقم 4,25 صفحات 584-544 1990؛ جريجوريادس؛ جي؛ الفصل 14 الجسيمات الشحمية ونافلات العقاقير في علم الأحياء والطب؛ صفحة 341-287( البحوث الأكاديمية؛ 1979). وبمكن ‎Load‏ استخدام 0 الهلام المائي كناقلات لإعطاء أوليجومر المضاد للنسخ؛ على سبيل المثال؛ كما هو موضح في الطلب الدولي 93/ 01286. وكبديل لذلك؛ يمكن إعطاء الأوليجومرات في جسيمات مركزية أو جزيئات صغيرة. ‎lat)‏ على سبيل ‎«JB‏ وو؛ جي واي. ووو؛ سي اتش. مجلة ‎abel‏ الأحياء 2: 4432-4429؛ 30؛ 1987). بدلا من ذلك؛ يمكن استخدام الفقاعات الدقيقة المليئة بالغاز المعقدة مع أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ لتعزيز التسليم إلى الأنسجة المستهدفة؛ كما 5 هو موضح في براءة الاختراع الامريكية رقم 6245747. يمكن ‎Wal‏ استخدام تركيبات الإصدارات المستدامة. وقد تتضمن هذه المصفوفات البوليمرية نصف النهائية في شكل مواد على شكل شرائح أو كبسولات مصغرة. في ‎aa‏ النماذج؛ يتم إعطاء أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ لحالة ثديية؛ على سبيل ‎(Jl‏ ‏الإنسان أو الحيوانات الأليفة. مما يظهر أعراض اضطراب تخزين الجسيمات الشحمية؛ في ناقلة 0 صيدلانية مناسبة. في أحد جوانب الطريقو؛ تكون الحالة ‎Ala‏ بشرية؛ على سبيل ‎(JB‏ مريض تم تشخيصه على أنه يعاني من ‎650-١١‏ (داء بومبيه). في أحد النماذج المفضلة؛ يتم احتواء الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ في ناقلة مقبولة صيدلانياً؛ ويتم تناوله عن طريق الفم. في نموذج مفضل آخرء يتم احتواء الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ في ناقلة مقبولة صيدلانياً؛ ويتم تناوله عن طريق الحقن داخل الوريد (1.7.).
في أحد النماذج؛ يتم إعطاء المركب في اتجاه مضاد للنسخ بكمية وطريقة فعالة ليؤدي إلى ذروة تركيز الدم من ما لا يقل عن 400-200 نانومتر من الأوليجومر المضاد للنسخ. ‎Bale‏ يتم إعطاء واحد أو أكثر من جرعات الأوليجومر المضاد للنسخ؛ عموماً في فترات منتظمة؛ لمدة حوالي أسبوع أو أسبوعين. تكون الجرعات المفضلة لإعطاء الدواء الفموي من حوالي 1000-1 ملجم أوليجومر لكل 70 كجم. في بعض الحالات؛ قد يكون من الضروري وجود جرعات أكثر من 0 ملجم أوليجومر/المريض. وفيما يخص الإعطاء عن طريق الحقن ‎Jab‏ الوريد؛ تكون الجرعات المفضلة من حوالي 0.5 ملجم إلى 1000 ملجم أوليجومر لكل 70 كجم. يمكن إعطاء أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ على فترات زمنية منتظمة لمدة زمنية قصيرة؛ على سبيل المثال؛ يومياً لمدة أسبوعين أو أقل. وعلى الرغم من ذلك؛ في بعض الحالات يتم إعطاء الأوليجومر في
‎cli 0‏ متقطعة على مدار فترة زمنية طويلة. ويمكن إتباع إعطاء الدواء من خلال أو بالتزامن مع؛ إعطاء مضاد حيوي أو ‎dallas‏ علاجية أخرى. يمكن تعديل نظام المعالجة (الجرعة؛ التردد؛ المسار» إلخ) كما هو محدد؛ بناءً على نتائج الاختبارات ‎dae bial)‏ والاختبارات الكيميائية الحيوية الأخرى والفحص الفسيولوجي للحالة الخاضعة للعلاج. قد يختلف نظام العلاج الفعال في الأحياء الذي يستخدم الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ
‏5 للاكتشاف وفقاً لفترة إعطاء الدواء وجرعته وتردده ومساره» وكذلك ظرف الحالة الخاضعة للعلاج (أي؛ إعطاء الدواء الوقائي في مقابل إعطاء الدواء استجابةً للإصابة الموضعية أو النظامية). وبالتالي» فإن ‎Jie‏ هذا العلاج في الأحياء غالباً ما يتطلب مراقبة بواسطة اختبارات مناسبة لنوع معين من الاضطراب تحت العلاج: والتعديلات المقابلة في الجرعة أو نظام ‎ez dad)‏ من أجل تحقيق نتيجة علاجية مثالية.
‏0 ويمكن رصد العلاج؛ على سبيل ‎(Jal‏ من خلال مؤشرات ‎dale‏ للمرض معروفة في المجال. يمكن تحديد فعالية أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ المعطى في الأحياء الخاص بالاكتشاف من العينات البيولوجية (نسيج؛ دم؛ بول؛ إلخ) مأخوذة من حالة قبل وأثناء وعقب إعطاء أوليجومر المضاد للنسخ. وتتضمن اختبارات تلك العينات (1) رصد وجود أو غياب تكوين مضاعف متغاير مع متواليات الهدف وغير الهدف؛ باستخدام إجراءات معروفة لمن الخبرة في المجال؛ على سبيل
‏5 المثال اختبار حركة الهلام الرحلاني؛ (2) رصد كمية ‎MRNA‏ الطفري ل ‎MRNA‏ الطبيعي
المرجعي أو البروتين المرجعي كما هو محدد من قبل التقنيات القياسية ‎RT-PCR (fie‏ أو وصمة نورثون أو ‎ELISA‏ أو وصمة وسترن. في بعض النماذج؛ يتم تناول أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بفعالية من قبل الخلايا الثديية. في نماذج إضافية؛ يمكن اقتران الأوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ بشطر النقل ‎Ao)‏ سبيل المثال؛
ببتيد النقل أو ‎(CPP‏ كما هو موضح هنا لتسهيل ‎Jie‏ هذا التناول. ‎LVI‏ الجرعات يعتقد أن صيغة التراكيب العلاجية وإعطاء الدواء (الجرعات) اللاحقة لها ضمن معرفة من لهم خبرة في المجال. تعتمد الجرعات على شدة واستجابة ‎Ala‏ المرض لأن يتم ‎clade‏ مع فترة علاج تستغرق من عدة أيام إلى عدة أشهر؛ أو حتى يتم الشفاء أو تناقص في تقدم الحالة المرضية.
0 يمكن حساب جداول الجرعات المثلى من قياسات تراكم العقار في جسم المريض. ‎Sarg‏ ‏للأشخاص ذوي المهارة العادية تحديد الجرعات المثلى ومنهجيات الجرعات ومعدلات التكرار. قد تتنوع الجرعات المثلى اعتماداً على فاعلية نسبية لأوليجومرات فردية؛ ويمكن تقديرها بشكل عام ‎ly‏ على 0505 التي ثبت فعاليتها في النماذج الحيوانية في المختبر وفي الأحياء. عامة؛ تكون الجرعة من 0.01 ميكروجرام إلى 100 ‎aba‏ لكل كيلوجرام من وزن الجسم؛ ويمكن إعطاؤها مرة أو
5 أكثر يوميًا أو أسبوعيًا أو شهربًا أو سنويّاء أو مرة واحدة كل عامين إلى 20 عامًا. يمكن أن يقدر الأشخاص ذوو المهارة العادية بسهولة معدلات التكرار للجرعات ‎plu‏ على أوقات الإقامة المقاسة والتركيزات المقاسة للعقار في سوائل وأنسجة الجسم. عقب العلاج الناجح؛ يكون من المرغوب فيه أن يخضع المريض لمداومة العلاج لمنع تكرار الحالة المرضية؛ حيث يتم إعطاء الأوليجومر في جرعات مداومة؛ بشكل يتراوح بين 0.01 ميكروجرام إلى 100 ‎aha‏ لكل كيلوجرام من وزن الجسم؛
0 مرة أو أكثر يومياً؛ إلى مرة واحدة كل 20 عاماً. بينما يتم توضيح الاكتشاف الحالي مع مواصفة بشكل محدد وفقاً لنماذجه؛ تعمل الأمثلة التالية فقط لتوضيح الاكتشاف وليس المقصود منها الحد من ذلك. وبتم إدراج المراجع ويراءات الاختراع وطلبات براءات الاختراع وأرقام الدخول للبنك الجيني؛ ‎aig‏ إدراج ما شابه سرده في الاختراع الحالي هنا بالرجوع إليها بالكامل.
‎VI‏ الأمثلة
‎1 Jal
‏تصميم متواليات مستهدفة في اتجاه مضاد للنسخ
‏تم تصميم المتواليات المستهدفة لأوليجومر مضاد للنسخ من أجل تطبيقات تحويل الجدل العلاجي المتعلقة بالطفرة ‎IVS1-13T>G‏ في جين ‎GAA‏ البشري. هناء من المتوقع أن أوليجومرات تحويل
‏وعليه سيعزز احتجاز إكسون 2 في حمض ‎pal MRNA‏ 56/8 الناضج. بعد ‎eld‏ يؤدي استراد
‏التعبير الوراثي لجين ‎GAA‏ الطبيعي أو شبه الطبيعي إلى تخليق الإنزيم الوظيفي؛ وبالتالي توفير
‏فائدة سريرية لمرضى ‎.650-١١‏
‏0 ولالتالي تم تصميم متواليات مستهدفة معينة في اتجاه مضاد للنسخ لحجب عناصر كتم الجدل؛ سواء داخل إكسون 2 للجين ‎GAA‏ أو داخل إنتروناته المجنحة. تتضمن الأمثلة غير المقيدة لأهداف العناصر الكاتمة المحتملة تتابعات تنظيمية 0010/81 (/18666)؛ وتتابعات تنظيمية 1282-8 وتتابعات تنظيمية 689. وتم أيضاً استخدام تحليل بنية السيليكا الثانوي ‎(mFold)‏ للإنترونات 1 و2 ‎VST)‏ و52/؛ على التوالي) ل ‎MRNAS‏ لتعريف تفاعلات
‏5 المسافة الطويلة التي توفر متواليات الهدف في اتجاه مضاد للنسخ المناسبة. يتم توضيح المتواليات المستهدفة في اتجاه مضاد للنسخ الناتجة عن هذا التحليل في الجداول 2أ- 2ج المدرجة طيه. تم تحضير الأوليجومرات التمثيلية المشتملة على متوالية مستهدفة كما هو منصوص عليه في الجداول 2أ- 2ج ك ‎PMOs‏ و/أو ‎PPMOs‏ (أوليجومرات مقترنة ب ‎(CPP‏ مثل ‎CPP‏ الغني بالأرجينين). وكما هو موضح هناء تم إدخال الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ تلك إلى الخلايا
‏0 اليفية الأولية المستخلصة من المريض المصاب ب ‎650-١١‏ باستخدام بروتوكول نقل عدوى بالنوية كما هو موضح أيضاً في المثال 2 أدناه. مثال 2 المواد والطرق
تم استزراع خلاياً١١-650©‏ من الخلايا الليفية المشتقة من المرضى أو الخلايا الليمفاوية من الأفراد ذوي ‎650-١١‏ ( خطوط الخلية كوريل1/00443© و ‎aay ) GM11661‏ للبروتوكولات القياسية في وسط زراعة الخلية ‎Eagle’s MEM‏ مع 9610 ‎.FBS‏ تم تمرير الخلايا لحوالي 5-3 أيام قبل التجارب وهي متمادية بمقدار 1680 تقريبًا عند نقل العدوى صناعيا أو نقل العدوى بالنوية.
تكون الخلايا الليفية 61/00443 من ذكر يبلغ من العمر 30 سنة. يكون الشكل البالغ؛ في بداية العقد الثالث؛ ويكون الحجم والمقدار طبيعي ل ‎MRNA‏ بالنسبة لجين ‎«GAA‏ وهو بروتين ‎GAA‏ ‏تم اكتشافه بواسطة الجسم المضاد؛ ولكن يمثل فعالية الجلوكوسيداز 1.4- ألفا -الحمضي الطبيعي ‎normal acid-alpha—1,4 glucosidase activity‏ من 9 إلى 9626 فقط؛ مرور 3 عند 00. تكون الحالة المائحة متخالفة الجينات مع أليل واحد يحمل تغيير للموقع ‎G‏ <1 عند
0 الموضع -13 لموقع المستقبل لأنترون 1 بالجين ‎(GAA‏ مما ينتج ‎die‏ نسخ مجدولة بطريقة بديلة مع حذف أكسون التشفير الأول[أكسون 2 ‎L(IVS1-13T>G)‏ ‏تكون الخلايا الليفية 61/111661 من ذكر يبلغ من العمر 38 سنة. اختبارات وظائف الكبد غير الطبيعي؛ في بعض الاحيان تيبس عضلي مؤلم في الساق أثناء الفعالية البدني؛ الصداع الصباحي؛ عدم تحمل الأطعمة الدهنية؛ كيس بطني؛ خلية ليفية ضعيفة و فعالية الجلوكوسيداز ل 5 1.4 - حمض ألفا ©8//؛ تعد الحالة المانحة ‎Ble‏ عن مركب متغاير الزيجوت: أليل واحد يحمل تغيير للموقع © <1 عند الموضع -13 لموقع المستقبل لأنترون 1 بالجين ‎GAA‏ -51/!) (©<131؛ مما ينتج ‎die‏ نسخة مجدولة بطريقة بديلة لها في حذف إطار أكسون 2 الذي يحتوي على رامزة ابتدارية؛ أليل اثنين يحمل حذف لأكسون ‎exon‏ 18. بروتوكول نقل العدوى بالنوية. يتم تحضير 01/05 / 001/05 في اتجاه مضاد للنسخ ( يكون ‎PMOs 0‏ مترافق مع ببتيد غني بالارجينين ‎arginine‏ كمحاليل تخزين من 2-1 ‎Ae‏ مولار في المياه الخالية من النوكلياز (غير معالج ب ‎lly (DEPC‏ يتم منها صنع المحاليل المخففة المناسبة الخاصة بنقل العدوى بالنوية. يتم تعريض ‎Cun ill 650-١١ WIA‏ ويتم عدهاء ويتم طردها عند 90 جرام لمدة 10 دقائق؛ ويعاد تعليق 1075-1 5 من الخلايا لكل عين في محلول نقل العدوى ‎Solution P24 galls‏ 10110160180100 (10028). بعد ذلك يتم إضافة محلول ‎PMO‏ ‏5 في اتجاه مضاد للنسخ والخلايا إلى كل عين بشريط كفيت نووي سعة 16- عين؛ ويدار بالنبض
باستخدام البرنامج ‎.EN-100‏ تم تحضين الخلايا في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق وتحويلها إلى طبق 12 عين للنسخ. يتم ‎RNA Jie‏ الكلي من الخلايا المعالجة بعد 48 ساعة باستخدام طقم دوران 96 ‎GE llustra‏ بعد البروتوكول الموصي به من الشركة المصنعة. يتم تخزين ‎RNA‏ ‏المستعاد عند -80 درجة ‎dogs‏ قبل التحليل.
‎.GAA RT-PCR 5‏ بالنسبة إلى الكشف بتفاعل البلمرة المتسلسل ‎PCR‏ لأ كسون 2 المحتوي على حمض ‎MRNAS‏ يتم اختيار متواليات البادئ من أكسون 1 (للأمام) إلى أكسون 3 (للعكس). سوف يقوم ‎RT-PCR‏ عبر أكسون 3-1 بتوليد امبليكون بكامل طوله وهو حوالي 7 قاعدة. إن اختلاف الحجم بين الامبليكون السليم (- 1177 قاعدة) والنسخة الأساسية ~ 0 المفقودة عند أكسون 2 (يكون أكسون 2~ 578 قاعدة) يعني أنه سيكون هناك تضخم
‏0 جوهري تفضيلي للمنتج الأقصر. وهذا من شأنه أن يضع معيارًا ‎We‏ في تقييم كفاءة وحدات الأوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ لحث جدل نسخة بكامل طولها أو نسخة محتوية على أكسون 2 يتم إجراء المنتسخة العكسية ‎PCR‏ لتضخيم الأليل ‎GAA‏ باستخدام نظام ‎RT-PCR‏ من خطوة واحدة برمز دليلي فوقي ‎(Invitrogen) III RT-PCR system‏ . يتم النسخ العكسي لمقدار 400 نانوجرام من اجمالي ‎RNA‏ الذي تم عزله من الخلايا التي تم نقل العدوى لها بالنوية وبتم تضخيمها باستخدام بادئات محددة الجين. يتم اضافة محلول التضخيم المقدم في طقم من خطوة واحدة مع ‎—Cy5‏ المسمى 0000 ‎(GE)‏ ‏وذلك لتمكين إظهار الشريط من خلال التفلور. يتم تشغيل العينات المهضومة على جيل سبق صبه 0 أكربلاميد ‎(Invitrogen) TBE / acrylamide‏ وتصوره على ‎Trihoon Trio (GE)‏ باستخدام استثارة بالليزر عند 633 نانو ‎jie‏ الإثارة و 670 نانو متر ومرشح انبعاث ‎BP30‏ مع المستوى البؤري على سطح الاسطوانة. يتم تحليل المواد الهلامية باستخدام برنامج ‎ImageQuant‏ ‎(GE)‏ لتحديد شدة الأشرطة. يتم إضافة الكثافة من جميع الأشرطة المحتوية على أكسون 2 ‎be‏ ‏لتمثل مستويات النسخ الكاملة لأكسون 2 في تحليل الاندماج.
بدلا من ذلك؛ يتم تحليل منتجات تضخيم ‎PCR‏ (بدون 5لا)- المسمى 100100 المكمل) على
محلل بيولوجي من نوع ‎Agilent 2200 Tape Station i Caliper LabChip GX‏ لتحديد
نسبة اندماج الاكسون ‎Yo‏
اختبار إنزيم ‎GAA‏ و وبس للبروتين البسيط. تم نقل العدوى بالنوية إلى ‎WAY‏ الليفية المشتقة من
المريض غير المتحولة ‎(GMO0443)‏ مع ‎PMO‏ بتركيزات مختلفة في محلول لعامل نقل العدويى
بالنوية ‎Lonza’s P3‏ وحضنت عند 37 درجة مئوية مع 5 96 من غاز ثاني أكسيد الكريون
2 لمدة ستة أيام. تم غسل الخلايا مرتين باستخدام محلول الملح المتوازن ‎Hank’s‏
‎(HBSS) Balanced Salt Solution‏ من ‎(Hank‏ يتم التحلل باستخدام محلول ‎H20‏ غير
‏المنظم؛ الذي تم تجميده / ذويانه ثلاث مرات»؛ ومن ثم هزه عند 1000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة 0 واحدة. تم استخدام طقم اختبار حيوي ™ ‎Rad DC‏ لتحديد كمية تركيز البروتين الكلية. لاختبار
‏الإنزيم» تم جمع حلالة خلية مع 1.4 مللي مولار 4-ميثيل أومبليفزيل ‎a=‏ -0 = الجلوكوبيرانوزيد
‎methylumbelliferyl a-D—glucopyranoside‏ في 0.2 مولار من محلول منظم من
‏الأسيتات (الرقم الهيدروجيني 3.9 أو 6.5( وحضنت عند 37 درجة مئوية لمدة ثلاث ساعات؛
‏ومن ثم تم قراءة التفلور عند استثارة 360 نانومتر وانبعاث عند 460 نانومتر. تم إنشاء منحنى 5 قياسي باستخدام 4-ميثيل أمبيليفيرون ‎.4-methylumbelliferone‏
‏تم إجراء لطخة ويسترن على بروتين ‎GAA‏ باستخدام نظام ™ ‎ProteinSimple® Wes‏ (طقم
‏رئيسي 12 - 230 كيلو دالتون ). تم تخفيف جسم مضاد لضد ‎GAA—‏ في أرتب [نسيلة
‎GAPDH- ‏إلى 1: 100 وتمت مضاعفته باستخدام مضاد‎ Abcam ‏من‎ [EPR4716(2)
‏[نسيلة 6065] من فأر من سانتا كروز للتكنولوجيا بيولوجية المخفف 1: 5. تم الجمع بين الأجسام 0 المضادة الثانوية من الفأر والأرانب من ‎ProteinSimple®‏ 1: 1 للمضاعفة. تم قياس ‎GAA‏
‏باستخدام برنامج ‎ProteinSimple® Compass‏ كمنطقة تحت المنحنى لجميع أشكال ‎GAA‏
‏وتطبيعتها إلى ‎GAPDH‏
‏مثال 3
‏تحضير ‎PPMOS 3 PMOS‏ 3 اتجاه مضاد للنسخ
تم تصميم 01/05 في اتجاه مضاد للنسخ لاستهداف الحمض ‎MRNA‏ القبلي ‎GAA (pal‏ البشري (على سبيل المثال؛ أنترون 1 من الحمض ‎MRNA‏ القبلي لجين ‎GAA‏ البشري) تم تخليقهم كما هو موصوف هنا وتستخدم لعلاج الخلايا الليفية المشتقة من المربيض ‎.GSD-II‏ ‏جدول لجا مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎Adagio‏ | متوالية مرتكز ‎(Ts)‏ ا أ ‎TS‏ 5 متوالية بهوية ‎CPPa3)‏ ‎x 3% % (‘3 -5(‏ 3% * ‎H| TEG GGC CAG AAG | GAA-‏ ‎GAA GGC GAG | IVS].‏ ‎AAA AGC | SA.(-‏ 13 -,189 -(165 6 ‎H| 6 GCC AGA AGG | GAA-‏ ‎AAG GC GAG | IVS].‏ ‎AAA AGC T | SA.(-‏ 87 -,190 -(166 6
جدول جا مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز ‎(TS)‏ ا ا ‎CPPa3) ‏متوالية بهوية‎ 5 TS * % % (‘3 -5( * 3%
H| TEG CCA GAA GGA | GAA-
AGG CGA GAA | IVS].
AAG CTC | SA.(- 88 191,- 167)-
G
H| TEG CAG AAG GAA | ‏طحن‎ ‎GGC GAG AAA | 91
AGC TCC | SA.(- 192,- 168)-
G
H| TEG AGA AGG AAG | GAA-
GCG AGA AAA | IVS. 607 CCA | SA.(- 193,-
جدول 4 مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية مستهدفة . | متوالية مرتكز ‎(7s)‏ بهوية رقم ار |3 ‎TS‏ 5 متوالية بهوية ‎CPPa3)‏ ‏(5- 3‘( % % * 3% * 169)-
G
H| TEG GAA GGA AGG | GAA-
CGA GAA AAG | IVS.
CTC CAG | SA.(- 91 194,- 170(- 6
H| 6 AAG GAA GGC | GAA-
GAG AAA AGC | IVS.
TCC AGC | SA.(- 92 195,- 171)-
G
جدول جا مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز ‎(TS)‏ ا ا ‎CPPa3) ‏متوالية بهوية‎ 5 TS * % % (‘3 -5( * 3%
H| TEG AGG AAG GCG | GAA-
AGA AAA GCT | IVSI.
CCA GCA | SA.(- 93 196,- 172(- 6
H| 6 066 CTC TCA | GAA-
AAG CAG CTC | IVS] 94 TGA GA| -76- 52)- 2G
H| TEG ACG GCT CTC | ‏همه‎ ‎95 | AAA GCA GCT | IVS](
CTG AG | -75-
جدول جا مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز ‎(TS)‏ ا ا ‎CPPa3) ‏متوالية بهوية‎ 5 TS * % % (‘3 -5( * 3% 51)- 2G
H| TEG CAC GGC TCT | GAA-
CAA AGC AGC | 1/51
TCT GA| -74- 50)- 2G
H| TEG TCA CGG CTC | GAA-
TCA AAG CAG | IVS]( 97 CTC TG | -73- 49)- 2G
H| TEG CTC ACG GCT | GAA-
CTC AAA GCA | IVS] (
GCT CT| -72-
جدول لجا مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎Age‏ | متوالية مرتكز 3| ‏بهوية رقم ار‎ (7s)
CPPad) ‏متوالية بهوية‎ 5 15 *#* (3 -5( * 3% 48) 26
H| TEG ACT CAC GGC | GAA-
TCT CAA AGC | 5)
AGC TC -71- 47) 26
H| TEG GCG GCA CTC | GAA-
ACG GCT CTC | ١/51) 100 AAA GC | -66- 42) 26
H| TEG GGC GGC ACT | GAA- 101| CAC GGC TCT | 1/5
CAA AG | -65-
جدول 4 مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز sae (TS)
CPPa3) ‏متوالية بهوية‎ 5 TS * * ‏عد‎ (3 -5( *#ٍ 41(- 26
H| 76 CGG CAC TCA | GAA- 066 CTC TCA | ١/51 102 AAG CA | -67- 43)- 2G
H| TEG GCA CTC ACG | GAA- 607 CTC AAA | IVS]( 103 GCA GC | -69- 45)- 2G
H| TEG GGC ACT CAC | GAA- 104| GGC TCT CAA | 17
AGC AG | -68-
جدول 4 مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز 3| ‏بهوية رقم ار‎ (7s)
CPPa3) ‏متوالية بهوية‎ 5 TS * % % (‘3 -5( * 3% 44)- 2G
H| TEG CAC TCA CGG | GAA-
CTC TCA AAG | IVS]( 105 CAG 67 -70- 46)- 2G
H| TEG GCC AGA AGG | GAA-
AAG GCG AGA | IVS].
AAA GC | SA.(- 33 189,- 166(- 6
جدول لجا مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية مستهدفة . ‎١‏ متوالية مرتكز ‎(7s)‏ بهوية رقم ار |3 ‎TS‏ 5 متوالية بهوية ‎CPPa3)‏ ‏(5- 3‘( % % * 3% *
H| TEG CCA GAA GGA | GAA-
AGG CGA GAA | IVS].
AAG C | SA.(- 34 189,- 167(- 6
H| TEG CAG AAG GAA | ‏طحن‎ ‎GGC GAG AAA | IVS.
AGC | SA.(- 189,- 168(- 6
H| TEG GGC CAG AAG | GAA- 26 | GAA 666 GAG | IVSL.
AAA AG | SA.(- 188,-
جدول 4 مركبات ‎PMO‏ أو 061/0 منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dias‏ | متوالية مرتكز 3| ‏بهوية رقم ار‎ (7s)
CPPa3) ‏متوالية بهوية‎ 5 TS * % x (‘3 -5( * % 165)-
G
H| TEG GGC CAG AAG | GAA-
GAA GGC GAG | IVS].
AAA A | SA.(- 37 187, 165)-
G
H| TEG GGC CAG AAG | GAA-
GAA GGC GAG | IVS]. 38 AAA | SA.(- 186, 165)-
G
جدول جا مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز ‎(TS)‏ ا ا ‎TS‏ 5 متوالية بهوية ‎CPPa3)‏ ‏(5- 3‘( % % * 3% * 11| R6G| 6 CGG CAC TCA | GAA-
CGGC TCT | 1/1
CAA AGC ‏ام‎ -67- 106 43)- 2G/R 6 11| R6G| 6 GCG GCA CTC | GAA-
ACGG CTC | IVS](
TCA AAG C | -66- 107 42)- 2G/R 6 11| R6G| 6 GGC GGC ACT | GAA-
CAC 6 607 IVS 108 1
CTC AAA 6| -65- 41(-
جدول 4 مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز ‎sae (TS)‏ ‎TS‏ 5 متوالية بهوية ‎CPPa3)‏ ‏(5- 3( عد * * ٍ#* 26/8 6 11| R6G| TEG CCA GAA GGA | GAA-
AGG CGA GAA | IVS].
AAG C | SA.(- 34 189,- 167)- 8086 11| R6G| TEG CAG AAG GAA | GAA-
GGC GAG AAA | IVS].
AGC | SA.(- 189,- 168)- 8086
جدول 4 مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز ‎(TS)‏ ا ا ‎TS‏ 5 متوالية بهوية ‎CPPa3)‏ ‏(5- 3‘( % % * 3% * 11| R6G| 6 GGC CAG AAG | GAA-
GAA GGC GAG | IVSI.
AAA AG | SA.(- 36 188,- 165(- 8086 11| R6G| 6 GGC CAG AAG | GAA-
GAA GGC GAG | IVSI.
AAA AGC | SA.(- 13 189,- 165(- 8086
H| 6 766 GGA GAG | GAA-
GGC CAG AAG | IVS. 109 !
GAA GGC | SA.(- 180,-
جدول جا مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز ‎(TS)‏ ا ا ‎TS‏ 5 متوالية بهوية ‎CPPa3)‏ ‏(5- 3‘( % % * 3% * 156)-
G
H| TEG TGG GGA GAG | GAA-
GGC CAG AAG | IVS.
GAA GC | SA.(- 110 180,- 156)- 2G
H| TEG TGG GGA GAG | GAA-
GGC CAG AAG | IVS.
GAA C | SA.(- 111 180,- 156)- 3G
‏جدول جا‎ ) ‏منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة‎ PPMO ‏أو‎ PMO ‏مركبات‎ ‏الاسم | *متوالية مستهدفة . | متوالية مرتكز‎ 3| ‏بهوية رقم ار‎ (7s)
CPPa3) ‏متوالية بهوية‎ 5 TS * % % (‘3 -5( * 3%
H| TEG GGC CAG AAG | GAA-
GAA GCG AGA | IVSI.
AAA GC | SA.(- 45 189,- 165(- 26
H| 6 GGC CAG AAG | GAA-
GAA CGA GAA | IVS].
AAG C | SA.(- 46 189,- 165(- 36
H| 6 AGG AAG CGA | GAA-
GAA AAG CTC | 51٠ 112 !
CAG CA | SA.(- 196,-
جدول جا مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز ‎(TS)‏ ا ا ‎CPPa3) ‏متوالية بهوية‎ 5 TS * % % (‘3 -5( * 3% 172)- 2G
H| TEG AGG AAC GAG | GAA-
AAA AGC TCC | IVSI.
AGC A | SA.(- 113 196,- 172(- 36
H| 6 066 GCT CTC | GAA-
AAA GCA GCT | IVS]( 114 CTG AGA | -76- 52)-
G
جدول جا مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز 3| ‏بهوية رقم ار‎ (7s)
CPPa3) ‏متوالية بهوية‎ 5 TS * % % (‘3 -5( * 3%
H| TEG CGC TCT CAA | GAA-
AGC AGC TCT | ١/51 115 GAG ‏ام‎ -76- 52)- 3G
H| TEG CCT CTC AAA | GAA-
GCA GCT CTG | 51 116 AGA | -76- 52)- 4G
H| TEG GGC GGC ACT | GAA-
CAC GGG CTC | 1/5 117 TCA AAG | -65- 41)-
G
جدول جا مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية مستهدفة . | متوالية مرتكز 3| ‏بهوية رقم ار‎ (7s)
CPPa3) ‏متوالية بهوية‎ 5 TS * % % (‘3 -5( * 3%
H| TEG GGC GGC ACT | GAA-
CAC GCT CTC | 51 118 AAA 6 | -65- 41(- 36
H| 6 GGC GGC ACT | GAA-
CAC CTC TCA | 1/51 119 AAG | -65- 41)- 4G
H| TEG GCG GGA GGG | GAA-
GCG GCA CTC | IVS]( 120 ACG GGC | -57- 33)-
G
جدول 4 مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية ( متواليات خبن مستبطنة ) الاسم | *متوالية ‎dag‏ متوالية مرتكز sae (TS)
CPPa3) ‏متوالية بهوية‎ 5 TS * * ‏عد‎ (3 -5( *#ٍ
H| 76 GCG GGA GGG | GAA-
GCG GCA CTC | IVS]( 121 ACG GC | -57- 33)- 2G
H| TEG GCG GGA GGG | GAA-
GCG GCA CTC | IVS]( 122 ACG ‏اج‎ -57- 33)- 3G
H| TEG GCG GGA GGG | GAA-
GCG GCA CTC | IVS]( 123 ACC | -57- 33)- 4G
*يكون الثايمين ‎thymine‏ (1) بشكل اختياري هو اليوراسيل ‎uracil‏ (لا). ** تم تعريف 156 أعلاه. جدول 4ب مركبات ‎PMO‏ أو 001/0 منقول لها العدوى بالنوية الاسم | *متوالية مستهدفة | متوالية بهوية مرتكز | متوالية بهوية ‎(TS)‏ رقم ‎Fe TS‏ |3 رقم ‎CPP‏ ‏5 ‏(5- 3( **#* 3% *
H TEG GGC CAG GAA-
AAG GAA | IVS1.SA 59
GGG CGA | .)-189,-
GAA AAG C 165)
H TEG CCA GAA GAA-
GGA AGG | IVS1.SA 124
GCG AGA | .)-191,-
AAA GCT C 167)
H TEG AAG GAA GAA-
GGG CGA | IVS1.SA 125
GAA AAG CTC | .)-195,-
CAG C 171)
‏جدول 4ب‎ ‏أو 001/0 منقول لها العدوى بالنوية‎ PMO ‏مركبات‎ ‏متوالية بهوية‎ | Sipe ‏الاسم *متوالية مستهدفة | متوالية بهوية‎
CPP ‏رقم 75 مرتكز ]3 رقم‎ (TS) * % x (‘3 -5( **
H| 6 GCG GGA| GAA-
GGG GCG | IVSI(- 126
GCA CTC | 57-33)
ACG GGG C
H| 6 TGG GGA | GAA-
GAG GGC | IVS].SA 127
CAG AAG | .(-180,-
GAA GGG C 156) 11| R6G| 6 GGC CAG | ‏همع‎ ‎AAG GAA | IVS].SA 59
GGG CGA | .(-189,-
GAA AAG C | 165)-R6 11| R6G| 6 GGC TCT CAA| GAA- 128 | AGC AGC TCT | 7/51
GA
جدول 4ب مركبات ‎PMO‏ أو 001/0 منقول لها العدوى بالنوية الاسم *متوالية مستهدفة | متوالية بهوية ‎Sipe‏ | متوالية بهوية
CPP ‏رقم 75 مرتكز ]3 رقم‎ (TS) * % x (‘3 -5( ** 74-55(-
RG
H| 6 AGA AGG | GAA-
AAG GGC | IVS1.SA 129
GAG AAA | .)-193,-
AGC TCC A 169)
H| 6 GCT CTC AAA| GAA-
GCA GCT| IVS1(- 130
CTG AGA CAT | 80-56) 0
H| 6 CTC TCA AAG | ‏ممع‎ ‎131 | CAG CTC TGA | IVSI(-
GAC ATC A| 81-57)
‏جدول 4ب‎ ‏أو 001/0 منقول لها العدوى بالنوية‎ PMO ‏مركبات‎ ‏متوالية بهوية‎ | Sipe ‏الاسم *متوالية مستهدفة | متوالية بهوية‎
CPP ‏رقم 75 مرتكز ]3 رقم‎ (TS) * % x (‘3 -5( **
H| 6 TCT CAAAGC | ‏ممع‎ ‎AGC TCT | IVS1(- 132
GAG ACA TCA | 82-58)
A
H| 6 CTC AAA GCA| ‏ممع‎ ‎GCT CTG| IVSI1(- 133
AGA CAT CAA | 83-59) 0
H| 6 TCA AAG CAG | ‏ممع‎ ‎134 | CTC TGA GAC | IVSI(-
ATC AAC C| 84-60)
H| 6 CAA AGC| GAA-
AGC TCT | IVS1(- 135
GAG ACA TCA | 85-61)
ACC G
جدول 4ب مركبات ‎PMO‏ أو 001/0 منقول لها العدوى بالنوية الاسم *متوالية مستهدفة | متوالية بهوية ‎Sipe‏ | متوالية بهوية
CPP ‏رقم 75 مرتكز ]3 رقم‎ (TS) * % x (‘3 -5( **
H| 6 AAA GCA 6617 ‏همع‎ ‎136 | CTG AGA ‏تمه‎ ١ ١/51)
CAA CCG C| 86-62)
H| 6 AAG CAG | GAA-
CTC TGA GAC | IVS1(- 137
ATC AAC CGC | 87-63)
G
H| 6 AGC AGC TCT| GAA- 138 | GAG ACA TCA | IVSI(-
ACC GCG G| 88-64)
H| 6 GCA GCT| ‏همعنو‎ ‎CTG AGA CAT | 1/51) 139
CAA CCG | 89-65)
CGG C
جدول 4ب مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية الاسم *متوالية مستهدفة | متوالية بهوية مرتكز | متوالية بهوية ‎(TS)‏ رقم 75 مرتكز 3 رقم ‎CPP‏ ‏5' ‏(5- 3‘( % % * *#* ‎H TEG CAG CTC TGA GAA-‏ ‎GAC ATC AAC | IVS1(-‏ | 140 ‎CGC GGC T| 90-66)‏ *يكون الثايمين ‎(T) thymine‏ بشكل اختياري هو اليوراسيل ‎uracil‏ (لا). ‎FF‏ تم تعريف 16 ‎Del‏ .جدول 4ج مركبات ‎PMO‏ أو ‎PPMO‏ منقول لها العدوى بالنوية الاسم *متوالية مستهدفة ‎(TS)‏ | متوالية بهوية مرتكز بس رقم 75 مرتكز 3 (5- 3) 5 #* * *% ‎H TEG GGC CAG AAG GAA-IVS1 SA.(-‏ ‎GAA GGG CGA 190,-166)‏ 141 ‎GAA AAG C‏
‏أعلاه .جدول 4ج‎ TEG ‏تم تعريف‎ *# ‏منقول لها العدوى بالنوية‎ PPMO ‏أو‎ PMO ‏مركبات‎ ‏متوالية بهوية مرتكز‎ (TS) ‏الاسم *متوالية مستهدفة‎ 3| ‏ب رقم 15 مرتكز‎ (3-5) *# %* *
H TEG CCA GAA GGA GAA-IVS1.SA. (- 142| AGG GCG AGA 192,168)
AAA GCT C
H TEG GCC AGA AGG GAA-IVS1.SA. (- 143| AAG GGC GAG 194,-170)
AAA AGC T
H TEG CAG AAG GAA GAA-IVS1 SA.(- 144| GGG CGA GAA 196,-172)
AAG CTC C
H TEG GAA GGA AGG | GAA-IVS] )-71-47( 145 GCG AGA AAA
GCT CCA G
R6G TEG AGG AAG GGC | GAA-IVS1 (=79-55) 146 GAG AAA AGC
TCC AGC A
‏.جدول 4ج‎ Del 16 ‏تم تعريف‎ FF ‏منقول لها العدوى بالنوية‎ PPMO ‏أو‎ PMO ‏مركبات‎ ‏متوالية بهوية مرتكز‎ | (TS) ‏الاسم *متوالية مستهدفة‎ 3 ‏مرتكز‎ TS ‏رقم‎ ‎5 )3 -5( * 3% x *
R6G TEG ACT CAC GGG GAA-IVS1(-74- 128 GCT CTC AAA 55)
GCA GCT C
H TEG GGCTCTCAAAGCA GAA-IVSI(-179- 83
GCTCTGAGACAT 160)
H TEG GGC TCT CAA | GAA-IVS1.2178.20 146
AGC AGC TCT GA
H TEG GAG AGG GCC GAA-IVS2.27.20 147
AGA AGG AAG GG
H TEG TTT GCC ATG TTA | GAAEX2A(+202+22 148
CCC AGG CT 6) ‏(لا).‎ uracil ‏بشكل اختياري هو اليوراسيل‎ (T) thymine ‏*يكون الثايمين‎ ‏تم تعريف 156 أعلاه.‎ ** ‏المثال 4 : أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ لحث مستويات التعبير الوراثي المتصاعدة لحمض‎ 6510-١١ ‏ألفا جليكوسيداز في خلايا ليفية أولية مشتقة من مريض مصاب ب‎
تم تسليم ‎PMOs‏ و001/05 في اتجاه مضاد للنسخ الموضحة أعلاه إلى خلايا 60/000443 أو 1 من خلال نقل العدوى بالنوية (انظر ‎coded‏ على سبيل المثال؛ المواد والطرق). بعد ستة أيام من فترة الحضانة عند 37 درجة مئوية مع 965 من غاز 002؛ تم حل ‎Wall‏ وتم قياس فعالية ‎GAA‏ في نواتج الانحلال أو التعبير الوراثي لبروتين ‎GAA‏ من خلال الاختبار المناعي كما هو موصوف أعلاه. وعامةً؛ كان التعبير ‎Soll‏ البروتيني لإنزيم ‎GAA‏ في الخلايا
المعالجة بأوليجونيكليوتيدات في اتجاه مضاد للنسخ الخاصة بالاكتشاف أعلى من مستوى التعبير ‎GAA Jl‏ في ‎WAN‏ غير المعالجة؛ (انظر النتائج التجريبية المحددة أدناه). وتدل تلك النتائج على أن أوليجونيوكليوتيدات الاكتشاف تحث على مستويات تهصير البروتين المتصاعدة لإنزيم ‎GAA‏ في ‎LAY‏ الليفية الأولية المشتقة من مريض مصاب ب ‎.650-١١‏ في حين عدم التقييد
0 بأي نظرية أو آلية للفعل» من منظور النتائج التجريبية الموضحة هناء يعتقد المخترعون أن أوليجومرات الاكتشاف تكبت عناصر 155 و/أو ‎ESS‏ وبالتالي تعزيز احتجاز إكسون 2 في الحمض ‎MRNA‏ لجين ‎GAA‏ الناضج. كما هو مفصل في التجارب التالية؛ تم تقييم سلسلة من أوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO‏ ىو ‎PMO‏ ‏المتغيرة لقدرتها على زيادة التعبير الوراثي و/أو فعالية إنزيم ‎GAA‏ في ‎WAY‏ من المرضى
5 المصابين بمرض بومبيه. ‎(AS‏ المتوالية المستهدفة لأوليجونيوكليوتيدات ‎oligonucleotides‏ ‏المتغيرة متممة لمنطقة الهدف داخل الإنترون 1 (متوالية بهوية رقم:1) لحمض ‎MRNA‏ القبلي لجين حمض ‎Wl‏ جليكوسيداز ‎(GAA) human alpha glucosidase‏ حيث ‎Jails‏ منطقة الهدف على واحد أو اثنين أو ثلاثة أو أربعة من القواعد النووية الإضافية مقارنة بالمتوالية المستهدفة؛ ‎Cua‏ تكون تلك القواعد النووية الإضافية عبارة عن سياتوزينات» وحيث لا تحتوي واحدة
0 أو اثنين أو ثلاثة أو أربعة من القواعد النووية الإضافية على قواعد نووية متممة مناظرة في المتوالية المستهدفة (ومن ثم؛ ‎"CG"‏ (الجوانين) أو '26- " أو '36- " أو '46- ' تعليقات ). وتكون القواعد النووية الإضافية داخل منطقة الهدف. ومن المثير للدهشة أنه تم اكتشاف أن العديد من الأوليجونيوكليوتيدات المتغيرة كان لها نفس الفعالية أو فعالية ‎Silas‏ لأوليجونيوكليوتيدات ذات متوالية مستهدفة غير متغيرة ‎hil)‏ على سبيل المثال؛ الشكلين 10 ب و 16). في بعض
5 الحالات؛ كانت الأوليجونيوكليوتيدات التي تحتوي على متواليات مستهدفة متغيرة أكثر فعالية آ عند
زيادة فعالية الإنزيم ‎GAA‏ في ‎LIA‏ المريض» مقارنة الأوليجونيوكليوتيدات ‎oligonucleotides‏
ذات متوالية مستهدفة غير متغير (انظرء على سبيل المثال» الشكل 16 ( . على سبيل المثال» كما
هو موضح في الشكل 16( كانت اثنين من الأوليجونيوكليوتيدات المختلفة التي لديها متواليات
ممستهدفة متغيرة مع باقي © واحد أقل» مقارنة بأوليجونيوكليوتيدات ذات متواليات مستهدفة والتي تكون متممة 96100 ل ‎GAA‏ (غير المتغير)؛ أكثر فعالية ا عند زيادة ‎GAA‏ في ‎LAY‏ الليفية
الأولية المشتقة من مرضى بومبيه ‎Pompe patients‏ (الشكل 16).
التجرية 1
تم تقييم الأوليجونيوكليوتيدات المختارة في خلايا 61/100443 عند عدة جرعات (5 ميكرو مولار»
و0.2 ميكرو مولار). عقب فترة حضانة الخلايا المنقول لها العدوى بالنوية لمدة ستة ‎abl‏ تم
0 تحضير نواتج الانحلال كما هو موضح أعلاه وتم قياس فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال. وكما هو موضح في الأشكال 1 و2؛ أظهرت نواتج الانحلال المعالجة ‎J‏ من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. التجرية 2
5 في تجرية أخرى؛ تم تقييم الأوليجونيوكليوتيدات المختارة في خلايا 61/00443 عند عدة جرعات (5 ميكرو مولارء 1 ميكرو مولار و0.2 ميكرو مولار و0.4 ميكرو مولار). وكما هو موضح في الأشكال 3 45 أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة.
0 التجرية 3 في تجربة ‎(gal‏ تم تقييم الأوليجونيوكليوتيدات المختارة في خلايا 61/000443 عند عدة جرعات (5 ميكرو مولارء 1 ميكرو مولار و0.2 ميكرو مولار و0.04 ميكرو مولار). وكما هو موضح في الأشكال 8-5( أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات
المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. التجرية 4 فى تجرية ‎«gal‏ تم تقييم الأوليجونيوكليوتيدات ‎oligonucleotides‏ المختارة في خلايا
00/000443 عند عدة جرعات(<ميكرو مولار؛ 1.6 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار و0.16
ميكرو مولار). وكما هو موضح في الشكل 9؛ أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. التجرية 5
في تجرية أخرى ¢ تم تقييم ا لأوليجوتيوكليوتيدات المختارة في خلايا 0023 عند ‎sae‏ ‏جرعات(<ميكرو مولارء 1.6 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار و0.16 ميكرو مولار). وكما هو موضح في الشكل 110 أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة.
5 التجرية 6 في تجرية ‎gal‏ تم تقييم الأوليجونيوكليوتيدات المختارة في ‎GM11661 WIA‏ عند عدة جرعات(<ميكرو مولارء 1.6 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار و0.16 ميكرو مولار). وكما هو موضح في الشكل 10ب أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج
الانحلال من الخلايا غير المعالجة. التجرية 7 فى تجرية ‎gal‏ تم تقييم الأوليجونيوكليوتيدات ‎oligonucleotides‏ المختارة في خلايا 3 عند عدة جرعات(كميكرو مولارء 1.6 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار و0.16
ميكرو مولار). وكما هو موضح في الأشكال 11 125( أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. التجرية 8
في تجرية أخرى؛ تم تقييم الأوليجونيوكليوتيدات ‎oligonucleotides‏ المختارة في خلايا 3 عند عدة جرعات (كميكرو مولارء 1.6 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار و0.16 ميكرو مولار). وكما هو موضح في الشكل 13ب أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة.
0 التجرية 9 فى تجرية ‎gal‏ تم تقييم الأوليجونيوكليوتيدات ‎oligonucleotides‏ المختارة في خلايا ‎GM11661‏ عند عدة جرعات(5ميكرو مولار 6 1.6 ميكرو مولار و5 .0 ميكرو مولار و6 0.1 ميكرو مولار). وكما هو موضح في الشكل 13ب أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA 5‏ نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. التجرية 10 فى تجرية ‎«gal‏ تم تقييم الأوليجونيوكليوتيدات ‎oligonucleotides‏ المختارة في خلايا 3 عند عدة جرعات (كميكرو مولارء 1.6 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار و0.16 ميكرو مولار). وكما هو موضح في الشكل 14؛ أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك 0 المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. التجرية 11 :
فى تجرية ‎«gal‏ تم تقييم أوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO oligonucleotides‏ المختارة في خلايا 3 عند عدة جرعات(كميكرو مولارء 1.6 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار و0.16 ميكرو مولار). وكما هو موضح في الشكل 115 أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA 5‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. التجرية 12 فى تجرية ‎«gal‏ تم تقييم أوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO oligonucleotides‏ المختارة في خلايا ‎GM11661‏ عند عدة جرعات(5ميكرو مولار 6 1.6 ميكرو مولار و5 .0 ميكرو مولار و6 0.1 ميكرو مولار). وكما هو موضح في الشكل 15ب أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك 0 المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. التجرية 13 فى تجرية ‎«gal‏ تم تقييم الأوليجونيوكليوتيدات ‎oligonucleotides‏ المختارة في خلايا 3 على جرعة واحدة 5ميكرو مولار. وكما هو موضح في الشكل 16( أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. التجرية 14 فى تجرية ‎«gal‏ تم تقييم أوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO oligonucleotides‏ المختارة في خلايا 3 عند عدة جرعات(5ميكرو مولار و1.6 مولار و0.5 ميكرو مولار). وكما هو 0 موضح في الشكل 17( أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. وإضافة إلى ذلك؛ يتراوح 050 (ميكرو مولار) من 0.042 إلى 0.836.
التجرية 15 فى تجرية ‎«gal‏ تم تقييم أوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO oligonucleotides‏ المختارة في خلايا ‎GM11661‏ عند ‎se‏ جرعات(5ميكرو مولار و6. 1 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار) . وكما هو موضح في الشكل 18( أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة
التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎CAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. وإضافة إلى ذلك؛ يتراوح 050 (ميكرو مولار) من 0.086 إلى 0.414. التجرية 16 يوفر الشكل 19 جدول موجز لقيم 5050 (ميكرو مولار) لأوليجونيوكليوتيدات
‎PPMO oligonucleotides 0‏ المختارة المقدرة فى كل من خلايا ‎GM0O0443‏ و ‎«GM11661‏ ‏بما متوسطه ثلاث تجارب؛ ‎N‏ = 9 التجرية 17 فى تجرية ‎«gal‏ تم تقييم أوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO oligonucleotides‏ المختارة في خلايا 3 عند عدة جرعات(5ميكرو مولار و1.6 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار). وكما هو
‏5 موضح في الشكل 20 أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. وإضافة إلى ذلك؛ يتراوح 5050 (ميكرو مولار) من 0.149 إلى 0.896. التجرية 18
‏0 في تجرية ‎egal‏ تم تقييم أوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO oligonucleotides‏ المختارة في خلايا 3 عند عدة جرعات(5ميكرو مولار و1.6 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار). وكما هو موضح في الشكل 21 أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج
الانحلال من الخلايا غير المعالجة. وإضافة إلى ذلك؛ يتراوح 5050 (ميكرو مولار) من 0.100
إلى 0.550.
التجرية 19
فى تجرية ‎«gal‏ تم تقييم أوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO oligonucleotides‏ المختارة في خلايا ‎GMO0443 5‏ عند عدة جرعات )5505 مولار و1.6 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار). وكما
هو موضح في الشكل 22( أظهرت نواتج الانحلال المعالجة ‎JS‏ من تلك المركبات عند كافة
التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج
الانحلال من الخلايا غير المعالجة. وإضافة إلى ذلك؛ يتراوح 050 (ميكرو مولار) من 0.025
إلى 0.675.
0 التجرية 20 يوفر الشكل 23 جدول موجز لقيم 5050 (ميكرو مولار) لأوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO oligonucleotides‏ المختارة المقدرة فى كل من ‎GM00443 WA‏ و ‎«GM11661‏ ‏عبر كافة الاختبارات؛ ‎١‏ -9. التجرية 21
في تجربة أخرى» تم تقييم أوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO oligonucleotides‏ المختارة في خلايا ‎GM11661‏ عند ‎se‏ جرعات(5ميكرو مولار و6. 1 ميكرو مولار و0.5 ميكرو مولار) . وكما هو موضح في الشكل 24 أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. وإضافة إلى ذلك؛ يتراوح 5050 (ميكرو مولار) من 0.144
0 إلى 0.630. التجرية 22 فى تجرية ‎«gal‏ تم تقييم أوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO oligonucleotides‏ المختارة في خلايا ‎GM11661‏ عند عدة جرعات (5ميكرو مولار و6. 1 ميكرو مولار و5 .0 ميكرو مولار) . وكما
هو موضح في الشكل 25 أظهرت نواتج الانحلال المعالجة ‎JS‏ من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج الانحلال من الخلايا غير المعالجة. وإضافة إلى ذلك؛ يتراوح ‎EC50‏ (ميكرو مولار) من 0.128 إلى 0.763. التجرية 23
فى تجرية ‎«gal‏ تم تقييم أوليجونيوكليوتيدات ‎PPMO oligonucleotides‏ المختارة في خلايا ‎GM11661‏ عند ‎se‏ جرعات ) 5ميكرو مولار و6 .1 ميكرو مولار و5 .0 ميكرو مولار) . وكما هو موضح في الشكل 26 أظهرت نواتج الانحلال المعالجة بكل من تلك المركبات عند كافة التركيزات المختبرة فعالية إنزيم ‎GAA‏ المتزايد مقارنة بمستوى فعالية إنزيم ‎GAA‏ في نواتج
0 الانحلال من الخلايا غير المعالجة. وإضافةً إلى ‎cells‏ يتراوح ‎ECS0‏ (ميكرو مولار) من 0.002 إلى 0.2186. ‎Sarepta Therapeutics, Inc.‏ >110< <120>أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ وطرق استخدامها لعلاج أمراض مرتبطة بجين حمض ألفا-جلوكوسيداز
>130< 67460.01016 5 <140> WO PCT/US2017/028002 <141> 2017-04-17
<150> US 62/324,185 20 <151> 2016-04-18
<160> 9 <170> Notepad
<210> 1 <211> 2664 <212> DNA ‏<213>هومو سابينس‎
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (2652)..(2652) <223> nistorg
<400> 1 gtgagacacc tgacgtctgc cccgcegetge cggcggtaac atcccagaag cgggtttgaa 60 cgtgcctage 9100600083 gectcettcee ctgagecggag cttgagecce agacctctag 120 tccteeceggt ctttatctga gttcagcetta gagatgaacg gggagcecgcece cteetgtget 180 gggcttgggg ctggaggctg catcttcceg tttctagggt ttectttcee cttttgateg 240 acgcagtgct cagtcctgge cgggacccga gccacctete ctgctcctge aggacgcaca 5 300 tggctgggtc tgaatccctg gggtgaggag caccgtggece tgagaggggg cccectgggec 360 agctctgaaa tctgaatgtc tcaatcacaa agaccccctt aggccaggcec aggggtgact 420 10 gtctctggte tttgtccetg gttgctggeca catagcaccec gaaacccttg gaaaccgagt 480 gatgagagag ccttttgctc atgaggtgac tgatgaccgg ggacaccagg tggcttcagg 540 atggaagcag atggccagaa agaccaaggc ctgatgacgg gttgggatgg aaaaggggtg 600 15 aggggctgga gattgagtga atcaccagtg gcttagtcaa ccatgcctgc acaatggaac 660 cccgtaagaa accacaggga tcagagggct tcccgecggg ttgtggaaca caccaaggca 720 ctggagggtg gtgcgagcag agagcacagc atcactgccc ccacctcaca ccaggeccta 20 780 cgcatctctt ccatacggct gtctgagttt tatccttigt aataaaccag caactgtaag 840 aaacgcactt tcctgagttc tgtgaccctg aagagggagt cctgggaacc tctgaattta 900 taactagttg atcgaaagta caagtgacaa cctgggattt gccattggcc tctgaagtga 960 5 aggcagtgtt gtgggactga gcccttaacc tgtggagtct gtgctgactc caggtagtgt 1020 caagattgaa ttgaattgta ggacacccag ccgtgtccag aaagttgcag aattgatggg 1080 tgtgagaaaa accctacaca tttaatgtca gaagtgtggg taaaatgttt caccctccag 10 1140 cccagagagc cctaatttac cagtggccca cggtggaaca ccacgtccgg ccgggggeag 1200 agcgttccca gccaagcctt ctgtaacatg acatgacagg tcagactccec tcgggcecctg 1260 5 agttcacttc ttcctggtat gtgaccagct cccagtacca gagaaggttg cacagtcctc 1320 tgctccaagg agcttcactg gccaggggct gcetttctgaa atccttgect gectetgete 1380 caaggcccgt tcctcagaga cgcagacccce tctgatggcet gactttggtt tgaggacctc 1440 20 tctgcatcce tcecceccatgg cettgetect aggacacctt cttectectt tcectggggt 1500 cagacttgcc taggtgcggt ggctctccca 000160008 cgecctecece atggtgtatt 1560 acacacacca aagggactcc cctattgaaa tccatgcata ttgaatcgca tgtgggttcc 1620 ggctgctcct gggaggagcec aggctaatag aatgtttgcc ataaaatatt aatgtacaga 1680 5 gaagcgaaac aaaggtcgtt ggtacttgtt aaccttacca gcagaataat gaaagcgaac 1740 ccccatatct catctgcacg cgacatectt gttgtgtctg tacccgagge tccaggtgea 1800 gccactgtta cagagactgt gtttcttccc catgtacctc gggggecggg aggggttetg 1860 10 atctgcaaag tcgccagagg ttaagtcctt tctctcttgt ggctttgcca ccectggagt 1920 gtcaccctca gctgeggtge ccaggattce ccactgtggt atgtccgtge accagtcaat 1980 aggaaaggga gcaaggaaag gtactgggtc cccctaagga catacgagtt gccagaatca 2040 15 cttccgctga cacccagtgg accaagccgce acctttatgc agaagtgggg ctcccagceca 2100 ggcgtggtca ctcctgaaat cccagcactt cggaaggcca aggggggtgg atcacttgag 2160 ctcaggagtt cgagaccagc ctgggtaaca tggcaaaatc ccgtctctac aaaaatacag 20 2220 aaaattagct gggtgcggtg gtgtgtgcct acagtcccag ctactcagga ggctgaagtg 2280 ggaggattgc ttgagtctgg gaggtggagg ttgcagtgag ccaggatctc accacagcac 2340 tctggcccag gegacagcetg tttggectgt ttcaagtgtc tacctgectt getggtettic 2400 5 ctggggacat tctaagcgtg tttgatttgt aacattttag cagactgtgc aagtgctctg 2460 cactccectg ctggagcttt tetcgecctt cettetggece ctetcececcag tectagacage 2520 agggcaacac ccaccctggc caccttaccc cacctgcectg ggtgctgcag tgccagecgce 2580 ggttgatgtc tcagagctgce tttgagagcc ccgtgagtge 060661666 gectecectge 10 2640 tgagcccgcet tncttctcee geag 2664 <210> 2
38 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية >220<
<223 >متوالية هدف
>400< 2 tctcagagct gctttgagag ccccgtgagt 0600066 38 <210> 3 5 <211> 33 <212> DNA ‏>متوالية صناعية‎ 213< <220> 10 ‏<223>متوالية هدف‎ <400> 3 ggagcttttc tcgcccttee ttetggecect cte 33
<210> 4 <211> 578 <212> DNA ‏>هومو سابينس‎ 3<
>400< 4 gcctgtagga gctgtccagg ccatctccaa ccatgggagt gaggcacccg 601001626 60 accggctcct ggcecgtcetge gecctegtgt cettggcaac cgetgecacte ctggggcaca 5 120 tcctactcca tgatttcctg ctggttccece gagagcetgag tggctectee ccagtectgg 180 aggagactca cccagctcac cagcagggag ccagcagacc agggccccgg gatgcccagg 240 cacaccccgg ccgtcccaga gcagtgecca cacagtgcga 0166606066 aacagecget 10 300 tcgattgcgc ccctgacaag gccatcaccec aggaacagtg cgaggcccge ggcetgttget 360 acatccctgc aaagcagggg ctgcagggag cccagatggg gcagccctgg tgcttcttce 420 15 cacccagcta ccccagctac aagctggaga acctgagctc ctctgaaatg ggctacacgg 480 ccaccctgac ccgtaccacc cccaccttct tccccaagga catcctgacc ctgeggcetgg 540 acgtgatgat ggagactgag aaccgcctcc acttcacg 578 0
<210> 5 <211> 6 <212> DNA ‏>هومو سابينس‎ 72
>400< 5 gtgggcaggg 899990999 ggeggeggec agggcagagg gtgegegtgg acatcgacac 60 ccacgcacct cacaagggtg gggtgcatgt tgcaccactg tgtgctggge ccttgetggg 120 10 agcggaggtg tgagcagaca atggcagcgc ccctcgggga gcagtgggga caccacggtg 180 acaggtactc cagaaggcag ggctcggggc tcattcatct ttatgaaaag gtgggtcagg 240 tagagtaggg ctgccagagg ttgcgaatga aaacaggatg cccagtaaac ccgaattgca 5 300 gataccccag gcatgacttt gtttttttgt gtaaggatgc aaaatttggg atgtatttat 360 actagaaaag ctgcttgttg tttatctgaa attcagagtt atcaggtgtt ctgtatttta 420 cctccatect gggggaggceg tectecteet ggetctgcag atgagggage cgaggctcag 480 20 agaggctgaa tgtgctgccc atggtcccac atccatgtgt ggctgcacca ggacctgacc 540 tgtccttgge gtgcgggttg ttctctggag agtaaggtgg ctgtggggaa catcaataaa 600 cccccatcte ttctag 616 5 <210> 6 <211> 12 <212> PRT ‏<213>متوالية صناعية‎ 0 <220> ‏ثاقب للخلية‎ any<223> <220> 5 daw <221> misc <222> (2)..(2) ‏حمض أمينو هكسانويك‎ —6<223> 5
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> )5(..)5( ‏هكسانويك‎ gud ‏حمض‎ -6 <223> Xaa is <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (8)..(8) ‏حمض أمينو هكسانويك‎ ->223< is 6 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (11)..(11) ‏حمض أمينو هكسانويك‎ ->223< is 6 >400< 6
Arg Xaa Arg Arg Xaa Arg Arg Xaa Arg Arg Xaa Arg 1 5 10
<210> 17 <211> 10 <212> PRT ‏>متوالية صناعية‎ 213< <220> ‏>ببتيد ثاقب للخلية‎ 223< <400> 7
Arg Phe Phe Arg Phe Phe Arg Phe Phe Arg 10 1 5 10 <210> 8 <211> 14 <212> PRT 15 ‏>متوالية صناعية‎ 213< <220> ‏>ببتيد ثاقب للخلية‎ 223<
>220< ‎misc_‏ <221كسمة (2(..)2) >222< ‎Xaais 6 5‏ <223>- حمض أمينو هكسانويك
<220> ‏<22[1كسمة‎ misc _ <222> (5)..(5)
‎Xaais 6 0‏ <223>- حمض أمينو هكسانويك >220< ‎misc_‏ <221كسمة )8)..(8( >222<
‎Xaais 6 5‏ <223>- حمض أمينو هكسانويك >220< ‎misc_‏ <221كسمة )11)..(11( >222<
‏حمض أمينو هكسانويك‎ ->223< 6 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (13)..(13) 5 ‏حمض أمينو هكسانويك‎ ->223< is 6 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (14)..(14) 10 <223> Xaa is beta-alanine <400> 8
Arg Xaa Arg Arg Xaa Arg Arg Xaa Arg Arg Xaa Arg Xaa Xaa 1 5 10 15 <210> 9 <211> 12 <212> PRT dae lua ‏>متوالية‎ 213< <220> ‏<223>ببتيد ثاقب للخلية‎ <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (11)..(11) ‏حمض أمينو هكسانويك‎ ->223< is 6 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (12)..(12) <223> Xaa is beta—alanine <400> 9
Arg Phe Phe Arg Phe Phe Arg Phe Phe Arg Xaa Xaa 1 5 10
<210> 10 <211> 11 <212> PRT ‏>متوالية صناعية‎ 213< <220> ‏>ببتيد ثاقب للخلية‎ 223< <400> 10
Arg Phe Phe Arg Phe Phe Arg Phe Phe Arg Gly 10 1 5 10 <210> 11 <211> 17 <212> PRT 15 ‏>متوالية صناعية‎ 213< <220> ‏<223>ببتيد ثاقب للخلية‎
>400< 1
Arg Arg Arg Arg Arg Arg Gly 1 5 <210> 12 <211> 6 <212> PRT ‏>متوالية صناعية‎ 213< <220> ‏>ببتيد ثاقب للخلية‎ 223< >400< 12 5
Arg Arg Arg Arg Arg Arg 1 5 <210> 13
4 <211> ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 3 <400> ‎ggccagaagg aaggcgagaa aagc 24‏
14 >210< 24 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف >220<
0156 <221كسمة (24(..)24) >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏5 14 >400< ‎gccagaagga aggcgagaaa agen 24‏ >210< 24 >211< ‎DNA 10‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 15 >220< ‎misc_‏ <221كسمة )23)..(23( >222< © <223> هي ‎uit‏
>400< 5 ccagaaggaa ggcgagaaaa gcnc 24 <210> 16 5
<211> 24
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> 10
<223>متوالية هدف
<220>
‎misc_‏ <221كسمة )22)..(22( >222<
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎>400< 6
‎cagaaggaag gcgagaaaag cncc 24
<210> 7 >211< 4 <212> DNA ‏<213متوالية صناعية‎ 5 <220> ‏<223>متوالية هدف‎ <220> 10 ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (21)..(21) uit ‏هي‎ >223< © <400> 17 5 agaaggaagg cgagaaaagc ncca 24 <210> 18 <211> 24
<212> DNA
<213>متوالية صناعية
>220< <223 >متوالية هدف
<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‏)20)..(20( >222< 0 © <223> هي )أو لا
‎<400> 18
‎gaaggaaggc gagaaaagcn ccag 24 <210> 19 15
‎<211> 24
‎<212> DNA
‏<213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف >220< 0156 <221كسمة )19)..(19( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏9 >400< ‎aaggaaggcg agaaaagcnc cagc 24 10‏ >210< 24 >211< ‎DNA‏ >212< 5 <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (18)..(18) uit ‏هي‎ >223< ©
<400> 20 aggaaggcga gaaaagcncc agca 24 <210> 21 <211> 23 10 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎ <220> ‏<223>متوالية هدف‎ 15 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> )5(..)5(
uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (7).(T) 5 uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_
<222> (17)..(17) 0 uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_
<222> (19)..(19) 15 uit ‏هي‎ >223< © <400> 21 cggcncncaa agcagcncng aga 23
22 >210< 23 >211< ‎DNA‏ >212< <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 0 >220< 0156 <221كسمة )6(.-)6( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏5 >220< 0156 <221كسمة (8(..)8) <222> © <223> هي ‎uit‏
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (18)..(18) uit ‏هي‎ >223< ©
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (20)..(20) uit ‏هي‎ >223< ©
<400> 22 acggcncnca aagcagcncn gag 23 <210> 23 <211> 23 15 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎ <220>
<223>متوالية هدف >220< ‎misc_‏ <221كسمة (0..0 >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‎misc_‏ <221كسمة 0 )9)..(9( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‎misc_‏ <221كسمة )19)..(19( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‎misc_‏ <221كسمة
(21(..)21) >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏23 >400< ‎cacggcncnc aaagcagcnc nga 23 5‏ 24 >210< 23 >211< ‎DNA‏ >212< 10 <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف >220< 0156 <221كسمة (1(..)1) >222< © <223> هي ‎uit‏
<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> )8(..)8(
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎5
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (10)..(10)
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (20)..(20)
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (22)..(22)
‎uit ‏هي‎ >223< ©
<400> 4 ncacggcncn caaagcagcn cng 23 <210> 25 5
<211> 23
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> 10
<223>متوالية هدف
<220>
‎misc_‏ <221كسمة )2)..(2( >222<
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
)9)..(9( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‏5 00156 <221كسمة
>222< (11)..(11) uit ‏هي‎ >223< © <220>
00156 <221كسمة )21)..(21( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏>220<
00156 <221كسمة )23)..(23( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏25 >400< chcacggcnc ncaaagcagc hcn 23 <210> 26 <211> 23 <212> DNA 5 ‏<213>متوالية صناعية‎ <220> ‏<223>متوالية هدف‎
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (3)..(3) uit ‏هي‎ >223< ©
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (10)..(10) uit ‏هي‎ >223< ©
<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (12)..(12) u ‏أو‎ t ‏هي‎ <223> n 5
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (22)..(22) uit ‏هي‎ >223< n 0
‎<400> 6
‎acncacggcn cncaaagcag 06 23 <210> 27 15
‎<211> 23
‎<212> DNA
‏<213 >متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف >220< 00156 <221كسمة )8)..(8( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‏10 00156 <221كسمة )15)..(15( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‏15 00156 <221كسمة )17)..(17( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏7 <400>
23 806 0017200088 020900301703 28 >210< 23 >211< ‎DNA 5‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (9)..(9) uit ‏هي‎ >223< ©
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (16)..(16) uit ‏هي‎ >223< ©
<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (18)..(18) ult ‏هي‎ >223< © 5
‎<400> 28
‎ggcggcacnc acggencnca aag 23 <210> 29 10
‎<211> 23
‎<212> DNA
‏<213>متوالية صناعية >220<
‏<223>متوالية هدف
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
<222> )7(..)7( uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ 0156 5 <222> (14)..(14) uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ 00156 10 <222> (16)..(16) uit ‏هي‎ >223< © <400> 29 cggcacncac ggchcncaaa gca 23 5 <210> 30 <211> 23 <212> DNA
<213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
>220< ‎misc_‏ <221كسمة )5)..(5( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏10 ‏>220< ‎misc_‏ <221كسمة )12)..(12( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏15 ‏>220< ‎misc_‏ <221كسمة )14)..(14( <222> © <223> هي ‎uit‏
>400< 0 gcacncacgg cnchcaaagc 386 23 <210> 31 5
<211> 23
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> 10
<223>متوالية هدف
<220>
‎misc_‏ <221كسمة )6)..(6( >222<
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
)13)..(13( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‏5 00156 <221كسمة )15)..(15( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏1 >400< ‎ggcacncacg gcncncaaag cag 23 10‏ 32 >210< 23 >211< ‎DNA‏ >212< <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (4)..(4)
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (11)..(11)
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (13)..(13)
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (23)..(23)
‎uit ‏هي‎ >223< ©
<400> 2 cachcacggc nchcaaagca gen 23 <210> 33 5
<211> 23
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> 10
<223>متوالية هدف
<400> 3 gccagaagga aggcgagaaa agc 23
<210> 34
<211> 22
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎
<220> ‏<223>متوالية هدف‎ <400> 34 5 ccagaaggaa ggcgagaaaa gc 22 <210> 35 <211> 21 <212> DNA 10 doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> ‏<223>متوالية هدف‎
<400> 5 cagaaggaag gcgagaaaag ‏©؟‎ 21 <210> 36
23 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 6 >400< ‎ggccagaagg aaggcgagaa 9 23‏
37 >210< 22 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف 7 >400< ggccagaagg aaggcgagaa aa 22 <210> 38 <211> 21 <212> DNA 5 doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> ‏<223>متوالية هدف‎
<400> 38 ggccagaagg aaggcgagaa a 21 <210> 39
<211> 23 15 <212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220>
‏<223>متوالية هدف‎ <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (7).(T) 5 uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (14)..(14) 10 uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (16)..(16) 15 uit ‏هي‎ >223< © <400> 9 cggcacncac ggchcncaaa 8 23
40 >210< 23 >211< ‎DNA‏ >212< <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 0 >220< 0156 <221كسمة (8(..)8) <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏5 >220< 0156 <221كسمة )15)..(15( <222> © <223> هي ‎uit‏
>220< ‎misc_‏ <221كسمة )17)..(17( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏5 ‏40 >400< ‎gcggcacnca cggcnhcncaa 806 23‏ 41 >210< 23 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف >220< ‎misc_‏ <221كسمة )9)..(9( >222< uit ‏هي‎ >223< ©
<220>
‎misc_‏ <221كسمة )16)..(16( >222<
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة )18)..(18( >222<
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎>400< 1
‎00200903072 acggcncnca 9 23
‎<210> 2
‎>211< 4
‎<212> DNA
‏<213>متوالية صناعية
<220> ‏<223>متوالية هدف‎ <220> 5 ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (1)..(1) uit ‏هي‎ >223< © <400> 42 0 nggggagagg gccagaagga aggc 24 <210> 43 <211> 23 <212> DNA 15 doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> ‏<223>متوالية هدف‎
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (1)..(1) u ‏أو‎ t ‏هي‎ <223> n 5 <400> 43 nggggagagg gccagaagga agc 23 <210> 44 10 <211> 22 <212> DNA ‏>متوالية صناعية‎ 213< <220> 15 ‏<223>متوالية هدف‎ <220> ‏<221كسمة‎ misc_
<222> )1(..)1( uit ‏هي‎ >223< © >400< 4 nggggagagg gccagaagga ac 22 5
<210> 45 <211> 23 <212> DNA
<213>متوالية صناعية >220<
<223>متوالية هدف
>400< 45 5 ggccagaagg aagcgagaaa agc 23 <210> 46 <211> 22
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> ‏>متوالية هدف‎ 2 23< 5 <400> 6 ggccagaagg aacgagaaaa gc 22 <210> 47 10 <211> 23 <212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> 15 ‏<223>متوالية هدف‎ <220> ‏<221كسمة‎ misc_
)17)..(17( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏7 <400> ‎aggaagcgag aaaagcncca 8 23 5‏ 48 >210< 22 >211< ‎DNA‏ >212< 10 <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف >220< 0156 <221كسمة )16)..(16( >222< © <223> هي ‎uit‏
<400> 48 aggaacgaga aaagcnccag ca 22 <210> 49 <211> 24 5 <212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> ‏<223>متوالية هدف‎ 10 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (6)..(6) u ‏هي ؟ أو‎ <223> n 5 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (8)..(8)
uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (18)..(18) 5 uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (20)..(20) 10 uit ‏هي‎ >223< © <400> 49 cgggcncnca aagcagcncn gaga 24
<210> 50 <211> 22 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎
>220< <223>متوالية هدف >220< ‎misc_‏ <221كسمة )4)..(4( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏0 >220< 0156 <221كسمة )6)..(6( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏5 >220< 0156 <221كسمة )16)..(16( <222> © <223> هي ‎uit‏
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (18)..(18) uit ‏هي‎ >223< ©
>400< 0 cgcncncaaa gcagcncnga ga 22 <210> 51 <211> 21 10 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎ <220> ‏<223>متوالية هدف‎ 15 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (3)..(3)
uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (5)..(5) 5 uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (15)..(15) 0 uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (17)..(17) 5 uit ‏هي‎ >223< © >400< 1 ccncnhcaaag cagecncngag a 21
52 >210< 24 >211< ‎DNA‏ >212< <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 0 >220< 0156 <221كسمة )9)..(9( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏5 >220< 0156 <221كسمة (17(..)17) <222> © <223> هي ‎uit‏
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (19)..(19) uit ‏هي‎ >223< ©
<400> 52 ggcggcacnc acgggencnc aaag 24 <210> 53 <211> 22 10 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎ <220> ‏<223>متوالية هدف‎ 15 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (9)..(9)
uit ‏هي‎ >223< ©
<220>
‎misc_‏ <221كسمة )15)..(15( >222<
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة 0 )17)..(17( >222<
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<400> 3
‎00009030072 acgencncaa ag 22
‎<210> 54
‎<211> 21
‎<212> DNA
‏<213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف >220< ‎misc_‏ <221كسمة )9)..(9( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏0 >220< 0156 <221كسمة )14)..(14( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏5 >220< 0156 <221كسمة )16)..(16( <222> © <223> هي ‎uit‏
>400< 4 ggcggcacnc 3607070388 ١9 21 <210> 5 <211> 24 5
<212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎ <220>
10 <223>متوالية هدف >220< ‎misc_‏ <221كسمة )17)..(17( >222<
‎n 5‏ <223> هي أو نا <400> 24 6 9903002686 92699989999
6 >210< 23 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف >220< 00156 <221كسمة )17)..(17( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏6 >400< ‎gcgggagggg cggcacncac 096 23 5‏ 57 >210< 22 >211< ‎DNA‏ >212<
<213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
>220< ‎misc_‏ <221كسمة )17)..(17( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏10 ‏7 >400< ‎gcgggagggg cggcacncac gc 22‏ 58 >210< 21 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية >220<
<223>متوالية هدف >220< ‎misc_‏ <221كسمة )17)..(17( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏58 >400< ‎gcgggagggg cggcacncac ¢ 21‏
59 >210< 25 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف 9 >400<
‎ggccagaagg aagggcgaga 38896 25‏ 60 >210< 25 >211< ‎DNA 5‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ >222< (24)..(24) uit ‏هي‎ >223< ©
<400> 60 ccagaaggaa gggcgagaaa agenc 25 <210> 1
>211< 5
<212> DNA
<213>متوالية صناعية >220<
<223>متوالية هدف
<220>
‎misc_‏ <221كسمة 0 )20)..(20( >222<
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎>400< 1
‎aaggaagggc gagaaaagcn ‏68و08‎ 25
‎<210> 62
‎<211> 25
‎<212> DNA
‏<213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف <220> 0156 <221كسمة )17)..(17( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏0 62 <400> ‎cggeacncac 9999© 25‏ 9099939999 3 <210> 5 >211< ‎DNA 5‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (1)..(1) ult ‏هي‎ >223< © 5
‎<400> 63
‎nggggagagg gccagaagga aggge 25 <210> 64 10
‎<211> 25
‎<212> DNA
‏<213>متوالية صناعية >220<
‏<223>متوالية هدف
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
<222> (22)..(22) uit ‏هي‎ <223> n <400> 4 agaaggaagg gcgagaaaag cncca 25 5 <210> 65 <211> 25 <212> DNA ‏<213متوالية صناعية‎ 0 <220> ‏<223>متوالية هدف‎ <220> 5 ‏<221كسمة‎ 0156 <222> (3)..(3) uit ‏هي‎ >223< ©
<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (5)..(5)
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (15)..(15)
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (17)..(17)
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎>222< (24)..(24)
‎uit ‏هي‎ >223< ©
>400< 5 gcncncaaag cagencngag acanc 25 <210> 66 5
<211> 25
<212> DNA
<213>متوالية صناعية 0 >220<
<223>متوالية هدف
<220>
‎misc_‏ <221كسمة )2)..(2( >222<
‎uit ‏هي‎ >223< ©
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
(4(..)4) <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‏5 00156 <221كسمة )14)..(14( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‏10 00156 <221كسمة )16)..(16( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‏15 00156 <221كسمة )23)..(23( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏66 >400<
‎cncncaaagc 80900009898 canca 25‏ 7 >210< 25 >211< ‎DNA 5‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> )1(..)1( uit ‏هي‎ >223< ©
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (3)..(3) uit ‏هي‎ >223< ©
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (13)..(13) u ‏أو‎ t ‏هي‎ <223> n 5
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (15)..(15)
u ‏هي ] أو‎ >223< n 0 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (22)..(22)
u ‏هي ] أو‎ >223< n 5 <400> 7 ncncaaagca gencngagac ancaa 25
68 >210< 25 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف >220< 00156 <221كسمة (2(..)2) >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‏15 00156 <221كسمة (12(..)12) >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220<
0156 <221كسمة )14)..(14( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏5 >220< ‎misc_‏ <221كسمة )21)..(21( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏0 68 >400< ‎cncaaagcag cncngagaca ncaac 25‏ 69 >210< >211< ‎DNA 15‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (1)..(1) u ‏أو‎ t ‏هي‎ <223> n 5 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (11)..(11) ‏نا‎ lt ‏هي‎ <223> n 10 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (13)..(13) ‏نا‎ lt ‏هي‎ <223> n 15 <220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (20)..(20)
© <223> هي ‎uit‏ ‏9 <400> ‎ncaaagcagc ncngagacan caacc 25‏
70 >210< 25 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف >220< 00156 <221كسمة )10)..(10( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏>220<
0156 <221كسمة )12)..(12( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏5 >220< ‎misc_‏ <221كسمة )19)..(19( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏10 70 >400< ‎caaagcagcn cngagacanc aaccg 25‏ 1 >210< >211< ‎DNA 15‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
>220< ‎misc_‏ <221كسمة )9)..(9( >222< © <223> هي ‎ult‏ ‏>220< ‎misc_‏ <221كسمة )11)..(11( >222< 0 © <223> هي أو نا >220< ‎misc_‏ <221كسمة )18)..(18( >222< ‎n 5‏ <223> هي أو نا 1 >400< ‎aaagcagcnc ngagacanca accgc 25‏
2 >210< >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية 5 >220< <223>متوالية هدف >220< 00156 <221كسمة )8)..(8( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‏15 00156 <221كسمة )10)..(10( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220<
0156 <221كسمة )17)..(17( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏5 72 >400< ‎gagacancaa ccgcg 25‏ 38890800000 3 >210< 25 >211< ‎DNA 10‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
>220< ‎misc_‏ <221كسمة )7)..(7( >222< © <223> هي ‎uit‏
<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (9)..(9) u ‏أو‎ t ‏هي‎ <223> n 5
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (16)..(16) u ‏هي ] أو‎ >223< n 0
‎<400> 3
‎agcagcncng agacancaac cgcgg 25 <210> 74 15
‎<211> 25
‎<212> DNA
‏<213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف >220< 00156 <221كسمة )6)..(6( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‏10 00156 <221كسمة )8)..(8( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‏15 00156 <221كسمة )15)..(15( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏4 <400>
25 90996 930800882626 0089000093 >210< 5 <211> ‎DNA 5‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (5)..(5) uit ‏هي‎ >223< ©
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (7)..(7) uit ‏هي‎ >223< ©
<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‎<222> (14)..(14) ult ‏هي‎ >223< © 5
‎<220>
‎misc_‏ <221كسمة
‏)25)..(25( >222< © <223> هي ا أو نا
‎<400> 5
‎cagcncngag acancaaccg cggen 25 <210> 76 15
‎<211> 25
‎<212> DNA
‏<213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف <220> 0156 <221كسمة )25)..(25( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏0 76 <400> ‎gccagaagga agggcgagaa aagen 25‏ 7 >210< >211< ‎DNA 15‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (23)..(23) u ‏أو‎ t ‏هي‎ <223> n 5 <400> 7 cagaaggaag ggcgagaaaa gence 25 <210> 78 10 <211> 25 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎ <220> 5 ‏<223>متوالية هدف‎ <220> ‏<221كسمة‎ misc_
(21(..)21) >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏78 >400< ‎gaaggaaggg cgagaaaagc nccag 25 5‏ 79 >210< 25 >211< ‎DNA‏ >212< 0 <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف >220< 0156 <221كسمة )19)..(19( >222< © <223> هي ‎uit‏
9 <400> 25 48 39338889006 8093899909 80 >210< 25 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف >220< ‎misc_‏ <221كسمة )3)..(3( >222< ‎n 5‏ <223> هي ؟ أو ‎u‏ ‏>220< ‎misc_‏ <221كسمة )12)..(12( >222< uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ >222< (14)..(14) 5 uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ >222< (24)..(24) 0 uit ‏هي‎ >223< © <400> 0 acncacgggg cncncaaagc agenc 25
<210> 81 <211> 25 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎
>220< <223>متوالية هدف >220< ‎misc_‏ <221كسمة )4)..(4( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏0 >220< 0156 <221كسمة )6)..(6( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏5 >220< 0156 <221كسمة )16)..(16( <222> © <223> هي ‎uit‏
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (18)..(18) uit ‏هي‎ >223< ©
<220> ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (25)..(25) uit ‏هي‎ >223< ©
<400> 1 ggcnencaaa gcagenenga gacan 25 <210> 82 <211> 20 15 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎ <220>
<223>متوالية هدف >220< ‎misc_‏ <221كسمة )4)..(4( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‎misc_‏ <221كسمة 0 )6)..(6( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‎misc_‏ <221كسمة )16)..(16( <222> © <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‎misc_‏ <221كسمة
<222> (18)..(18) uit ‏هي‎ >223< © <400> 82 ggcncncaaa gcagcncnga 20 5 <210> 83 <211> 20 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎ 10 <220> ‏<223>متوالية هدف‎ <400> 83 5 gagagggcca gaaggaaggg 20 <210> 84 <211> 20
‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <23 2 >متوالية هدف >220< ‎misc_‏ <221كسمة )1)..(3( >222< ‎n 10‏ >223< هي ‎lt‏ نا >220< ‎misc_‏ <221كسمة )8)..(8( >222< ‎n 15‏ >223< هي ‎lt‏ نا >220< ‎misc_‏ <221كسمة )10)..(11( >222<
© <223> هي ‎uit‏ ‏>220< ‎misc_‏ <221كسمة )20)..(20( >222< © <223> هي ‎uit‏ ‏4 >400< ‎nnngccangn nacccaggen 20‏
85 >210< 20 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف >220<
‏<221كسمة‎ 0156 >222< (9)..(9) uit ‏هي‎ >223< © <220> 5 ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (11)..(11) uit ‏هي‎ >223< © <220> 10 ‏<221كسمة‎ misc_ <222> (16)..(16) uit ‏هي‎ >223< © <400> 85 5 gcgeaccenc ngecenggee 20 <210> 86 <211> 25
‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <23 2 >متوالية هدف >220< ‎misc_‏ <221كسمة )6)..(6( >222< ‎n 10‏ >223< هي ‎lt‏ نا >220< ‎misc_‏ <221كسمة )9)..(9( >222< ‎n 15‏ >223< هي ‎lt‏ نا >220< ‎misc_‏ <221كسمة )11)..(11( >222< uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ >222< (14)..(14) 5 uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ >222< (18)..(18) 0 uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_ >222< (22)..(22) 15 uit ‏هي‎ >223< © <220> ‏<221كسمة‎ misc_
<222> (25)..(25) uit ‏هي‎ >223< © >400< 6 00020009902 ngenggence cngen 25 5 <210> 87 <211> 24 <212> DNA ‏<213متوالية صناعية‎ 0 <220> ‏<223>متوالية هدف‎ >400< 87 5 gccagaagga aggcgagaaa agct 24 <210> 88 <211> 24
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> ‏>متوالية هدف‎ 2 23< 5 <400> 88 ccagaaggaa ggcgagaaaa gctc 24 <210> 89 10 <211> 24 <212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> 15 ‏<223>متوالية هدف‎ <400> 9 cagaaggaag gcgagaaaag ctcc 24
90 >210< 24 >211< ‎DNA‏ >212< <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 90 >400< ‎agaaggaagg cgagaaaagc tcca 24‏ 91 >210< 24 >211< ‎DNA 15‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
>400< 1 gaaggaaggc gagaaaagct ccag 24 <210> 92 5
<211> 24
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> 10
<23 2 >متوالية هدف
<400> 92 aaggaaggcg agaaaagctc cagc 24
<210> 93
<211> 24
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎
<220> ‏<223>متوالية هدف‎ <400> 93 5 aggaaggcga gaaaagctcc agca 24 <210> 94 <211> 23 <212> DNA 10 ‏<213>متوالية صناعية‎ <220> ‏<223>متوالية هدف‎
<400> 4 cggctctcaa agcagctctg aga 23 <210> 95
23 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 95 <400> ‎acggctctca aagcagctct gag 23‏
96 >210< 23 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف 96 >400< cacggctctc aaagcagctc tga 23 <210> 97 <211> 23 <212> DNA 5 doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> ‏<223>متوالية هدف‎
<400> 7 tcacggctct caaagcagct ctg 23 <210> 98 <211> 23 15 <212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220>
‏<223>متوالية هدف‎ <400> 98 ctcacggctc tcaaagcagc tct 23
<210> 99 <211> 23 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎
<220> ‏<223>متوالية هدف‎ >400< 9 actcacggct ctcaaagcag ctc 23 5 <210> 100 <211> 23 <212> DNA
<213>متوالية ‎doc lua‏ >220< <223>متوالية هدف
<400> 100 gcggcactca cggctctcaa agc 23 <210> 101
<211> 23 10 <212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220>
<223 >متوالية هدف 1 <400> ‎ggcggcactc acggctctca 9 23‏
102 >210< 23 >211< ‎DNA‏ >212< <213 >متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف 2 >400< ‎cggcactcac ggctctcaaa 08 23 0‏ 103 >210< 23 >211< ‎DNA‏ >212< 5 <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<400> 103 gcactcacgg ctctcaaagc agc 23
<210> 104 <211> 23 5
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎
>220< <223>متوالية هدف
<400> 4 ggcactcacg gctctcaaag cag 23 <210> 105 15
<211> 23
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎
<220> ‏<223>متوالية هدف‎ <400> 105 cactcacggc tctcaaagca get 23 5 <210> 106 <211> 23 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎ 10 <220> ‏<223>متوالية هدف‎ <400> 106 5 cggcactcac ggctctcaaa gca 23 <210> 107 <211> 23
<212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎ <220> ‏>متوالية هدف‎ 223< 5 <400> 7 gcggcactca cggctctcaa agc 23 <210> 108 10 <211> 23 <212> DNA ‏<213>متوالية صناعية‎ <220> 5 ‏<223>متوالية هدف‎ <400> 108 ggcggcactc acggctctca aag 23
<210> 109 <211> 24 <212> DNA ‏<213متوالية صناعية‎ 5 <220> ‏<223>متوالية هدف‎ <400> 109 10 tggggagagg gccagaagga aggc 24 <210> 110 <211> 23 <212> DNA 15 doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> ‏<223>متوالية هدف‎
>400< 110 tggggagagg gccagaagga agc 23 <210> 111 5
<211> 22
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> 10
<223>متوالية هدف
>400< 1 tggggagagg gccagaagga ac 22
<210> 112
<211> 23
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎
<220> ‏<223>متوالية هدف‎ <400> 112 5 aggaagcgag aaaagctcca gca 23 <210> 113 <211> 22 <212> DNA 10 ‏<213>متوالية صناعية‎ <220> ‏<223>متوالية هدف‎
<400> 113 aggaacgaga aaagctccag ca 22 <210> 114
4 <211> ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 4 >400< ‎cgggctctca aagcagctct gaga 24‏
115 >210< 22 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف 5 >400< cgctctcaaa gcagctctga ga 22 <210> 6 <211> 21 <212> DNA 5 doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220> ‏<223>متوالية هدف‎
<400> 6 cctctcaaag cagctctgag a 21 <210> 117
<211> 24 15 <212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220>
‏>متوالية هدف‎ 2 23< >400< 7 ggcggcactc acgggctctc aaag 24
<210> 118 <211> 22 <212> DNA ‏>متوالية صناعية‎ 213<
<220> ‏>متوالية هدف‎ 2 23< <400> 118 ggcggcactc acgctctcaa ag 22 5 <210> 119 <211> 21 <212> DNA
<213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<400> 119 ggcggcactc acctctcaaa g 21 <210> 120
<211> 24 10 <212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎ ‎<220>
<23 2 >متوالية هدف 120 >400< ‎gcgggagggg cggcactcac gggce 24‏
1 <210> 23 >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف 1 <400> ‎cggcactcac 996 23 0‏ 002909939999 122 >210< 22 >211< ‎DNA‏ >212< 5 <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<400> 122 gcgggagggg cggcactcac ge 22
<210> 123 <211> 21 5
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎
>220< <223>متوالية هدف
<400> 123 gcgggagggg cggcactcac c 21 <210> 124 15
<211> 25
<212> DNA doc lua ‏<213>متوالية‎
<220> ‏<223>متوالية هدف‎ >400< 4 ccagaaggaa gggcgagaaa agctc 25 5 <210> 125 <211> 25 <212> DNA ‏<213متوالية صناعية‎ 0 <220> ‏<223>متوالية هدف‎ >400< 125 5 aaggaagggc gagaaaagct ccagc 25 <210> 126 <211> 25
‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 126 >400< ‎gcgggagggg cggcactcac gggge 25‏ 127 >210< >211< ‎DNA‏ >212< <213>متوالية صناعية 5 >220< <223>متوالية هدف 7 <400> ‎tggggagagg 96689388998 6 25‏
8 >210< 20 >211< ‎DNA‏ >212< <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 0 128 <400> ‎ggctctcaaa gcagctctga 20‏ 129 >210< >211< ‎DNA 15‏ >212< <213 >متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
>400< 9 agaaggaagg gcgagaaaag ctcca 25 <210> 130 5
<211> 25
<212> DNA
<213 >متوالية صناعية >220<
<223>متوالية هدف
<400> 0 gctctcaaag cagctctgag acatc 25
<210> 131
<211> 25
<212> DNA
<213 >متوالية صناعية
<220> ‏<223>متوالية هدف‎ >400< 131 5 ctctcaaagc agctctgaga 8 25 <210> 132 <211> 25 <212> DNA 10 ‏>متوالية صناعية‎ 213< <220> ‏<223>متوالية هدف‎
>400< 2 tctcaaagca gctctgagac atcaa 25 <210> 133
<211> ‎DNA‏ >212< <213 >متوالية صناعية 5 >220< <23 2 >متوالية هدف 133 >400< ‎ctcaaagcag ctctgagaca tcaac 25‏
134 >210< 25 >211< ‎DNA‏ >212< <213 >متوالية صناعية
>220< <23 2 >متوالية هدف 4 <400> tcaaagcagc tctgagacat caacc 25 <210> 135 <211> 25 <212> DNA 5 ‏>متوالية صناعية‎ 213< <220> ‏<223>متوالية هدف‎
<400> 135 caaagcagct ctgagacatc aaccg 25 <210> 136
>211< ‎DNA‏ >212< <213 >متوالية صناعية >220<
<23 2 >متوالية هدف
>400< 6 aaagcagctc tgagacatca accgc 25
<210> 137
<211> 25
<212> DNA
<213 >متوالية صناعية
<220>
<23 2 >متوالية هدف
<400> 137 aagcagctct gagacatcaa ccgcg 25 15
<210> 138
<211> 25
<212> DNA
<213 >متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<400> 8 agcagctctg agacatcaac cgcgg 25 <210> 139
25 >211< ‎DNA‏ >212< <213 >متوالية صناعية >220<
<23 2 >متوالية هدف 9 <400> ‎gcagctctga gacatcaacc 906 25‏
140 >210< 25 >211< ‎DNA‏ >212< <213 >متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف 140 >400< ‎cagctctgag acatcaaccg cggct 25 10‏ 141 >210< >211< ‎DNA‏ >212< 5 <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<400> 1 gccagaagga agggcgagaa aagct 25
<210> 142 <211> 25 5
<212> DNA
<213>متوالية صناعية
>220< <223>متوالية هدف
<400> 142 cagaaggaag ggcgagaaaa gctcc 25 <210> 143 15
<211> 25
<212> DNA
<213>متوالية صناعية
<220> ‏<223>متوالية هدف‎ >400< 3 gaaggaaggg cgagaaaagc tccag 25 5 <210> 144 <211> 25 <212> DNA ‏<213متوالية صناعية‎ 0 <220> ‏<223>متوالية هدف‎ >400< 144 5 aggaagggcg agaaaagctc 48 25 <210> 145 <211> 25
<212> DNA ‏>متوالية صناعية‎ 213< <220> ‏>متوالية هدف‎ 2 23< 5 <400> 5 actcacgggg ctctcaaagc agctc 25 <210> 146 10 <211> 25 <212> DNA ‏>متوالية صناعية‎ 213< <220> 5 ‏<223>متوالية هدف‎ >400< 6 ggctctcaaa gcagctctga gacat 25
7 >210< 20 >211< ‎DNA‏ >212< <213متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف 147 >400< ‎gcgcaccctc tgecctggec 20‏ 148 >210< >211< ‎DNA 15‏ >212< <213 >متوالية صناعية >220< <223>متوالية هدف
<400> 148 ggccctggte tgctggcetce ctget 25 <210> 149 5
<211> 20
<212> DNA
<213 >متوالية صناعية >220<
<223>متوالية هدف
>400< 9 ttgccatgt tacccaggct 20

Claims (2)

  1. عناصر الحماية 1- أوليجو نيوكليوتيد معدل ‎modified oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ ‏بطول من 10 إلى 40 قاعدة نووية ‎nucleobases‏ تشتمل على: متوالية مستهدفة ‎targeting‏ ‏486 متممة لمنطقة هدف في نطاق إنترون 1 ( متوالية بهوية رقم:1) من حمض ‎MRNA‏ قبلى لجين جلوكوسيداز ألفا البشري ‎pre-mRNA of the human alpha‏ ‎(GAA) glucosidase 5‏ حيث تتضمن منطقة الهدف ‎target region‏ قاعدة نووية ‎nucleobases‏ إضافية واحدة على الأقل مقارنة بالمتوالية المستهدفة ‎targeting sequence‏ « حيث لا تضم القاعدة النووية ‎nucleobases‏ الإضافية الواحدة على الأقل أي قاعدة نووية 01085 متممة فى المتوالية المستهدفة ‎targeting sequence‏ ؛ وحيث تكون القاعدة التووية 011016008565 الإضافية الواحدة على الأقل مستبطنة لمنطقة الهدف؛ 0 حيث يكون الأوليجو نيوكليوتيد ‎oligonucleotide‏ عبارة عن مركب له الصيغة (ا): 1 ‎XY‏ ‎N‏ ‏ماح ‏ ‎Nu 0‏ ' 1 ‎J‏ ‎a‏ ‏ا ‎be‏ ‎N‏ ‏ ‎R2‏ ‏أو ملح مقبول صيدلائياً ‎(die‏ حيث: تمثل كل ‎NU‏ قاعدة نووية ‎nucleobases‏ تتخذ ‎Ge‏ شكل متوالية مستهدفة ‎targeting‏ ‎sequence‏ ؛
    و عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38؛ يتم اختيار كل ‎١7‏ بشكل مستقل من © 5 ‎NRA‏ حيث يتم اختيار كل ‎RA‏ بشكل مستقل من 4ا؛ 61-6 ألكيل ‎«alkyl‏ آرألكيل ‎«—C(=NH)NH2 « aralkyl‏ - ‎«C(0)(CH2)NNR5C(=NH)NH2‏ ‎—C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNRSC(=NH)NH2 5‏ و 6؛ حيث يتم اختيار 5» من ‎H‏ ‏و 601-06 ألكيل ‎alkyl‏ و ‎Jian‏ عدد صحيح من 1 إلى 5؛ يتم اختيار آ من ‎OH‏ وجزءٍ من الصيغة: 6ج
    م و حيث :
    10 يتم اختيار 8 من ‎-OH‏ و ‎-N(R7)2‏ و ‎RT‏ حيث يتم اختيار كل ‎RT‏ بشكل مستقل من ‎"١‏ و 01-6 ألكيل ‎alkyl‏ « ‎aig‏ اختيار ‎RG‏ من ‎ging —N(RO)CH2C(O)NH2 (OH‏ من الصيغة: ‎Fn N—R?"0‏ حيث:
    يتم اختيار ‎RY‏ من 1١و‏ 61-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ ويتم اختيار ‎R10‏ من 6؛ 1١4110-(0)©-؛‏ أسيل ‎acyl‏ ؛ تربتيل ‎trityl‏ ¢ 4- ميثوكسي تريتيل ‎«methoxytrityl‏ ‎—C(O)(CH2)MNR12C(=NH)NH2 «~C(=NH)NH2‏ و ‎«—C(0)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNR12C(=NH)NH2‏ حيث:
    ‎am 20‏ عدد صحيح من 1 إلى 5؛ 1 من الصيغة -(0)- ألكيل ‎alkyl‏ )لا - حيث لا هي عدد صحيح من 3 إلى 10 و
    يتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎alkyl‏ لا بشكل مستقل من 62-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و يتم اختيار ‎R12‏ من ‎3H‏ 61-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ يتم تحديد كل ‎Als‏ من ‎RT‏ بشكل مستقل من: 10)813(2-؛ ‎cua‏ يتم اختيار كل ‎R13‏ بشكل مستقل من 1 و 61-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ وجزء من الصيغة )11( 17ج 17ج ‎FN N—R'S (I)‏ 17ج ‎R17‏ ‏يتم اختيار ‎R15‏ من لا 6 01-06 ألكيل ‎—~C(-NH)NH2 « alkyl‏ 0 122لا (لا-)0()6112(001186)- و ‎«—C(0)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNR18C(=NH)NH2‏ حيث: يتم اختيار ‎R18‏ من ‎H‏ 1-66 ألكيل ‎alkyl‏ ؛و 0 هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و يتم اختيار كل ‎R17‏ بشكل مستقل من ‎oH‏ ميثيل ‎methyl‏ ؛ و 5 جزءِ من الصيغة ‎(I)‏ ‏0م ‎(Ii‏ 1 ض اا يتم اختيار ‎R19‏ بشكل مستقل من 1" و ‎(C1-CO‏ ‏ألكيل ‎«—C(O)(CH2)rNR22C(=NH)NH2 —C(=NH)NH2 « alkyl‏ ‎—G(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(=-NH)NH2 0‏ ‎«—C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNR22C(=NH)NH2‏ ‎—C(O)CH(NH2)(CH2)4NH2‏ و ©؛ حيث:
    يتم اختيار ‎R22‏ من اا و 61-06 ألكيل الماا8 ؛ و هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و يتم اختيار ‎R20‏ من ‎5H‏ 61-06 ألكيل ‎«alkyl‏ أو يكون ‎R19‏ و ‎Gis R20‏ إلى جنب مع ذرة النيتروجين ‎nitrogen atom‏ التي يتم إرفاقهم بها بحيث تشكل حلقة غير متجانسة ‎heterocyclic‏ أو حلقة أريل غير متجانسة ‎heteroaryl ring‏ تتضمن من 5 إلى 7 ذرات بحلقة وتحتوي اختياربًا على ذرة غير متجانسة ‎heteroatom‏ مختارة من الأكسجين 00 والنيتروجين ‎nitrogen‏ و الكبريت ‎sulfur‏ ؛ و يتم اختيار ‎R2‏ من ‎acyl dud «GH‏ ؛ تريتيل ‎trityl‏ » 4- ميثوكسي تريتيل ‎methoxytrityl‏ ‏بنزويل ‎benzoyl‏ « ستيرويل ‎C1-C6 « stearoyl‏ ألكيل ‎—C(0)- «—C(=NH)NH2 « alkyl‏ ‎«~C(0)(CH2)sNR24C(=-NH)NH2 (R23 0‏ - ‎«C(O)(CH2)2NHC(0)(CH2)5NR24C(-NH)NH2‏ - ‎«C(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(=NH)NH2‏ وجزءِ من الصيغة: ‎T‏ ‏0 ‎A‏ ‎ASA‏ ‏حيث: ‏5 23> يكون بالصيغة -( ©)- ألكيل ‎OH - v( alkyl‏ حيث ‎V‏ يمثل عدد صحيح من 3 إلى 10 ويتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎١ alkyl‏ بشكل مستقل من ‎alkyl JS‏ -62 ‎«C6‏ ‏و ‏يتم اختيار ‎R24‏ من ‎١1‏ و 61-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ 5 هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ يتم اختيار ‎L‏ من -(0()0112(60)0)- و (0()0112(252)0112(20)0)-؟؛ و
    كل ‎R25‏ يتخذ الصيغة 0112(200)0(11)426(2)- وحيث يكون كل ‎R26‏ بالصيغة - ‎«(CH2)6NHC(=NH)NH2‏ ‏حيث © يمثل ببتيد ثاقب للخلية ‎("CPP") cell penetrating peptide‏ جزءٍ رابط تم اختياره من ‎«—C(O)(CH2)2NH-CPP «~C(O)(CH2)SNH-CPP‏ - ‎«—C(O)CH2NH-CPP (C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5SNH-CPP 5‏ 9 :
    0 CPP ae ‏و‎ «CPP carboxy ‏بجزءٍ الرابط من خلال رابطة أميد عند حد كريوكسي‎ CPP ‏حيث يتم إرفاق‎ ‏حيث قد يكون © موجودًا في حدث واحد أو غائب»؛ وحيث يتم اختيار المتوالية المستهدفة‎ ‏من المجموعة التي تتكون من:‎ 13210610070 sequence
    Cua (GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA AGC) 13 ‏متوالية ذات رقم الهرية:‎ (I 10 22 ‏عبارة عن‎ Z ‏تكون‎ ‎(GCC AGA AGG AAG GC GAG AAA AGC X) 14 ‏ب) متوالية ذات رقم الهوية:‎ 22 ‏عن‎ Ble > ‏حيث تكون‎ (CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC) 15 ‏ج) متوالية ذات رقم الهوية:‎
    حيث تكون > عبارة عن 22 د) متوالية ذات رقم الهرية: 16 ‎(CAG AAG GAA 660 GAG AAA AGC XCC)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 22؛ ه) متوالية ذات رقم الهرية: 17 ‎Cus (AGA AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA)‏ تكون ‎Z‏ عبارة عن 22
    Cus (GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC CAG) 18 ‏متوالية ذات رقم الهرية:‎ (5 0 22 ‏عبارة عن‎ Z ‏تكون‎ ‎(AAG GAA GGC GAG AAA AGC XCC AGC) 19 ‏ز) متوالية ذات رقم الهوية:‎ 22 ‏عن‎ Ble > ‏حيث تكون‎
    ح) متوالية ذات رقم الهوية: 20 ‎(AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA GCA)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 22 ط) متوالية ذات رقم الهوية: 21 ‎us (CGG CXC XCA AAG CAG CXC XGA GA)‏ تكون ‎Z‏ عبارة عن 21 ي) متوالية ذات رقم الهوية: 22 ‎us (ACG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AG)‏ تكون ‎Z‏ عبارة عن 21 ك) متوالية ذات رقم الهوية: 23 ‎(CAC GGC XCX CAA AGC AGC XCX GA)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21 ‎(J‏ متوالية ذات رقم الهوية: 24 ‎(XCA 066 CXC XCA AAG CAG CXC XG)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21 م) متوالية ذات رقم الهوية: 25 ‎(CXC ACG GCX CXC AAA GCA GCX CX)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21 ن) متوالية ذات رقم الهوية: 26 ‎(ACX CAC 660 XCX CAA AGC AGC XC)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21؛ 5 س) متوالية ذات رقم الهوية: 27 ‎(GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA GC)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21؛ ع) متوالية ذات رقم الهوية: 28 ‎(GGC GGC ACX CAC 660 XCX CAA AG)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21؛ ف) متوالية ذات رقم الهوية: 29 ‎us (CGG CAC XCA 066 CXC XCA AAG CA)‏ تكون ‎Z‏ عبارة عن 21 ص) متوالية ذات رقم الهوية: 30 ‎(GCA CXC ACG GCX CXC AAA GCA GC)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21 ق) متوالية ذات رقم الهوية: 31 ‎(GBC ACX CAC GGC XCX CAA AGC AG)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21 5 ر) متوالية ذات رقم الهوية: 32 ‎CAC XCA 066 CXC XCA AAG CAG CX)‏ ) حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21؛
    ش) متوالية ذات رقم الهوية: 33 ‎(GCC AGA AGG AAG GCG AGA AAA GC)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21 ت) متوالية ذات رقم الهوية: 34 ‎CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG C)‏ ) حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 19؛ ث) متوالية ذات رقم الهوية: 35 ‎Cua (CAG AAG GAA GGC GAG AAA AGC)‏ تكون ‎He Z‏ عن 19؛ خ) متوالية ذات رقم الهوية: 36 ‎(GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA AG)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21 3( متوالية ذات رقم الهوية: 37 ‎(GGC CAG AAG GAA 666 GAG AAA A)‏ حيث 0 تكون ‎Z‏ عبارة عن 19( ض) متوالية ذات رقم الهوية: 38 ‎(GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 19؛ غخ) متوالية ذات رقم الهوية: 39 ‎(CGG CAC XCA 0666 XCX CAA AGC A)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21 5 ظ) متوالية ذات رقم الهوية: 40 ‎(GCG GCA CXC 8066 CXC XCA AAG C)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21؛ ج ج) متوالية ذات رقم الهوية: 41 (6 ‎(GGC 666 ACX CAC 6 GCX CXC AAA‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 21؛ د د) متوالية ذات رقم الهوية: 42 ‎(XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GGC)‏ حيث تكون ل عبارة عن 22 ه ه) متوالية ذات رقم الهوية: 43 ‎(XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GGC)‏ حيث تكون ‎Ble Z‏ عن 21 و 5( متوالية ذات رقم الهوية: 44 ‎(XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA C)‏ حيث تكون ‎Ble Z‏ عن 20؛ 5 ز 5( متوالية ذات رقم الهوية: 45 ‎(GGC CAG AAG GAA GCG AGA AAA GC)‏ حيث تكون ‎Ble Z‏ عن 21
    ح ح) متوالية ذات رقم الهوية: 46 ‎(GGC CAG AAG GAA CGA GAA AAG C)‏ حيث تكون ‎Ble Z‏ عن 20؛ ط ط) متوالية ذات رقم الهوية: 47 ‎(AGG AAG CGA GAA AAG CXC CAG CA)‏ حيث تكون ‎Ble Z‏ عن 21 ي 6( متوالية ذات رقم الهرية: 48 ‎Cus (AGG AAC GAG AAA AGC XCC AGC A)‏ تكون ‎Ble Z‏ عن 20؛ ك ك) متوالية ذات رقم الهرية: 49 ‎(CGG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA)‏ حيث تكون > ‎Ble‏ عن 22 ل ‎(J‏ متوالية ذات رقم الهوية: 50 ‎(CGC XCX CAA AGC AGC XCX GAG A)‏ حيث 0 تكون ‎Z‏ عبارة عن $20 م م) متوالية ذات رقم الهوية: 51 ‎(CCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA)‏ حيث تكون ‎He Z‏ عن 19؛ ن ن) متوالية ذات رقم الهرية: 52 ‎(GGC 666 ACX CAC GGG CXC XCA AAG)‏ حيث تكون > عبارة عن 22؛ س س) متوالية ذات رقم الهوية: 53 (6 ‎(BGC GGC ACX CAC GCX CXC AAA‏ حيث تكون ‎Ble Z‏ عن 20؛ ع ع) متوالية ذات رقم الهوية: 54 ‎(GGC 666 ACX CAC CXC XCA AAG)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 19؛ ف ف) متوالية ذات رقم الهوية: 55 ‎(GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGC)‏ حيث تكون ل عبارة عن 22 ص ص) متوالية ذات رقم الهوية: 56 ‎(GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GC)‏ حيث تكون ‎Ble Z‏ عن 21 ق ق) متوالية ذات رقم الهوية: 57 ‎(GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG C)‏ حيث تكون > ‎Ble‏ عن 20 5 رر) متوالية ذات رقم الهوية: 58 ‎(GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACC)‏ حيث تكون ‎Z‏ عبارة عن 19؛
    حيث يتم اختيار )ل من يورأسيل ‎(U) acyl‏ أو ثيمين (1).
    2- الأوليجو نيوكليوتيد المعدل ‎modified oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ
    ‎antisense‏ وفقا لعنصر الحماية 1؛ ‎Gus‏ تشتمل منطقة الهدف ‎target region‏ على واحدة على الأقل من متوالية بهوية رقم: 2 أو متوالية بهوية رقم: 3.
    ‏3- الأوليجو نيوكليوتيد المعدل ‎modified oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ
    ‏6 وفقا لعنصر الحماية 2 ‎Gus‏ تشتمل منطقة الهدف ‎target region‏ على متوالية
    ‏بهوية رقم: 2.
    ‏10 ‏4- الأوليجو نيوكليوتيد المعدل ‎modified oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ 6 وفقا لعنصر الحماية 2 ‎Gus‏ تشتمل منطقة الهدف ‎target region‏ على متوالية بهوية رقم: 3.
    ‏5 5- الأوليجو نيوكليوتيد المعدل ‎modified oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ 056056 وفقاً لأي من عناصر الحماية من 4-1؛ حيث يعزز الأوليجو نيوكليوتيد ‎oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ من احتجاز أكسون ‎exon‏ 2 في حمض ‎GAA (pal MRNA‏ عند ارتباط المتوالية المستهدفة ‎targeting sequence‏ بمنطقة الهدف ‎target region‏ .
    ‏20 ‏6- الأوليجو نيوكليوتيد المعدل ‎modified oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ 6 وفقا لعنصر الحماية 1 ‎Gua‏ تشتمل منطقة الهدف ‎target region‏ على عدد من واحد إلى ثلاث قواعد نووية إضافية مقارنة بالمتوالية المستهدفة ‎targeting sequence‏ .
    ‏5 7- الأوليجو نيوكليوتيد المعدل ‎modified oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ 256056 وفقا لعنصر الحماية 1؛ حيث يتضمن الأوليجو نيوكليوتيد ‎oligonucleotide‏ في
    ‎sla)‏ مضاد للنسخ ‎antisense‏ فعالية انزيم ‎GAA‏ وهو يزيد بمقدار الضعف على الأقل وفقا لاختبار فاعلية انزيم بالمقارنة مع أوليجو نيوكليوتيد ثانٍ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ وهو متمم بالكامل لمنطقة الهدف ‎target region‏ ضمن متوالية بهوية رقم: 1.
    8- الأوليجو نيوكليوتيد المعدل ‎modified oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎dg antisense‏ لعنصر الحماية 1؛ حيث يحث الأوليجو نيوكليوتيد ‎oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ فعالية انزيم ‎GAA‏ إلى ثلاث اضعاف على الأقل أو أربعة اضعاف على الأقل وفقا لاختبار فاعلية انزيم بالمقارنة مع أوليجو نيوكليوتيد ‎oligonucleotide‏ ‎Ob‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ وهو متمم بالكامل لمنطقة الهدف ‎target region‏ ضمن
    متوالية بهوية رقم: 1. 9- الأوليجو نيوكليوتيد المعدل ‎modified oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎Wg antisense‏ لعنصر الحماية 1؛ حيث يتم اختيار المتوالية المستهدفة ‎targeting‏ ‎SEQUENCE‏ من أي رقم من أرقام هوية المتوالية: 13- 58.
    ‎sais) -0‏ نيوكليوتيد المعدل ‎modified oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎Wg antisense‏ لعنصر الحماية 1؛ حيث يتم اختيار المتوالية المستهدفة ‎targeting‏ ‏56006008 من أي رقم من أرقام هوبة المتوالية: 13 38-33 45 46؛ و 87- 123. 0 11- الأوليجو نيوكليوتيد المعدل ‎modified oligonucleotide‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎Wg antisense‏ لعنصر الحماية 1؛ حيث يتم اختيار المتوالية المستهدفة ‎targeting‏ ‎SEQUENCE‏ من أي رقم من أرقام هوية المتوالية: 13 29-27 أو 34- 36. 2- مركب أوليجومر في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ بالصيغة (ا):
    ‎Ne Nu‏ ‎J‏ ‎a‏ ‏ ‎Y‏ ‏0 مح 1 ‎N‏ ‏اه ‎Loo,‏ ‎J‏ ‏ ‎R2‏ ‏أو ملح مقبول صيدلانياً ‎(die‏ حيث: تمثل كل ‎Nu‏ قاعدة نووية 710016058565 يتخذن ‎Ge‏ شكل متوالية مستهدفة ‎targeting‏ ‎(sequence‏ ‏5 > عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38 يتم اختيار كل ‎١‏ بشكل مستقل من © و44الا-؛ حيث يتم اختيار كل ‎R4‏ بشكل مستقل ‎He‏ ‏61-6 ألكيل ‎«alkyl‏ آرألكيل ‎«C(=NH)NH2- « aralkyl‏ - ‎«C(O)(CH2)NNRS5C(=NH)NH2‏ ‎«—C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNRSC(=NH)NH2‏ و 6؛ حيث يتم اختيار ‎RS‏ من ‎H‏ ‏0 و 61-606 ألكيل ‎alkyl‏ و ‎٠“‏ يمثل عدد صحيح من 1 إلى 5؛ يتم اختيار آ من ‎OH‏ وجزءٍ من الصيغة: ‎RE‏ ‎A‏ سم ‎oy‏ ‏حيث :
    يتم اختيار ‎A‏ من ‎OH‏ و ‎-N(R7)2‏ و 81 حيث يتم اختيار كل ‎RT‏ بشكل مستقل من ا و 61-6 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و يتم اختيار 6 من ‎—N(RO)CH2C(O)NH2 (OH‏ وجزء من الصيغة: )ا حيث:
    يتم اختيار 9 من ‎5H‏ 01-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و يتم اختيار ‎R10‏ من 6؛ ‎acyl dud —C(0)-R110H‏ ¢ تريتيل ‎trityl‏ ؛ 4- ميثوكسي ‎Jig‏ ‎«methoxytrityl‏ ‎—C(O)(CH2)MNRI2C(=NH)NH2 «~C(=NH)NH2‏ و
    ‎«C(0)(CH2)2NHC(0)(CH2)5NR12C(=NH)NH2- 0‏ حيث: هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ 1 من الصيغة -(0)- ألكيل ‎alkyl‏ )لا - حيث لا هي عدد صحيح من 3 إلى 10 و يتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎alkyl‏ لا بشكل مستقل من 62-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و
    ‏5 يتم اختيار 12 من لا و 01-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ يتم تحديد كل حالة من ‎RT‏ بشكل مستقل من: ‎(N(R13)2-‏ حيث يتم اختيار كل ‎R13‏ بشكل مستقل من ‎5H‏ 01-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ ‎das‏ من الصيغة (ا!):
    ‎RY RY
    ‏ب جا ما
    ‏0 حيث: يتم اختيار 815 من ‎H‏ 6 01-06 ألكيل ‎«C(=NH)NH2- ¢ alkyl‏ ‎«C(O)(CH2)aNR18C(=NH)NH2-‏ و
    ‎«—C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNR18C(=NH)NH2‏ حيث: يتم اختيار ‎R18‏ من ‎C1-C6 H‏ ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و 0 هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و يتم اختيار كل ‎R17‏ بشكل مستقل من ‎gH‏ ميثيل ‎methyl‏ ؛ و جزءٍ من الصيغة ‎(lM)‏ ‏ا ‏نا | يس حيث: يتم اختيار ‎R19‏ بشكل مستقل من 1" و 01-606؛ ‎«—C(O)(CH2)rNR22C(=NH)NH2 «~C(=NH)NH2 ةااكلا Ji‏ ‎«—C(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(=NH)NH2 0‏ ‎«—C(0)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NR22C(=NH)NH2‏ ‎—~C(O)CH(NH2)(CH2)4NH2‏ و 6؛ حيث: يتم اختيار ‎R22‏ من اا و 61-06 ألكيل الماا8 ؛ و هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و 5 يتم اختيار ‎R20‏ من 1" و 61-606 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ أو يكون ‎R19‏ و ‎Gis R20‏ إلى جنب مع ذرة النيتروجين ‎nitrogen atom‏ التي يتم إرفاقهم بها بحيث تشكل حلقة غير متجانسة ‎heterocyclic‏ أو حلقة أريل غير متجانسة ‎heteroaryl ring‏ تتضمن من 5 إلى 7 ذرات بحلقة وتحتوي اختياربًا على ذرة غير متجانسة ‎heteroatom‏ مختارة من الأكسجين 007 والنيتروجين ‎nitrogen‏ والكبريت ‎sulfur‏ ؛ و 0 يتم اختيار ‎R2‏ من ‎acyl Jud «GH‏ ؛ ‎trityl Joy‏ « 4- ميثوكسي تريتيل ‎methoxytrityl‏ ‏بنزويل ‎benzoyl‏ « ستيرويل ‎C1-C6 « stearoyl‏ ألكيل ‎«C(=NH)NH2- « alkyl‏ -(0)0- ‎«—C(0)(CH2)sNR24C(=NH)NH2 «R23‏ - ‎«C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NR24C(=NH)NH2‏ - ‎«C(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(=NH)NH2‏ جزءِ من الصيغة:
    T 0
    ل ‎CL‏ ‏حيث: ‏3 يكون بالصيغة -( 0)- ألكيل ‎v( alkyl‏ -1ا©0 حيث ‎V‏ يمثل عدد صحيح من 3 إلى 10 ويتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎١ alkyl‏ بشكل مستقل من ‎alkyl JS‏ -62
    06؛ و يتم اختيار ‎R24‏ من ‎١1‏ و 61-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ 8 هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ يتم اختيار ‎L‏ من -(0)0()0112(60)0- و ‎+C(0O)(CH2)282(CH2)2C(0)-‏ و 0 كل ‎R25‏ يتخذ الصيغة 0112(200)0(11)426(2)- وحيث يكون كل ‎R26‏ بالصيغة - ‎«(CH2)6NHC(=NH)NH2‏ ‏حيث © يمثل ببتيد ثاقب للخلية ‎("CPP") cell penetrating peptide‏ جزءٍ رابط تم اختياره من ‎«—C(0)(CH2)2NH-CPP (C(0)(CH2)5NH-CPP-‏ - ‎«—C(O)CH2NH-CPP (C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NH-CPP‏ و: ‎a CPP‏ )0 ض حيث يتم إرفاق ‎jas CPP‏ الرابط من خلال ‎da)‏ أميد عند حد كريوكسي ‎«CPP carboxy‏ و حيث قد يكون © موجودًا في حدث واحد أو غائب؛ وحيث يتم اختيار المتوالية المستهدفة ‎sequence‏ 13210610070 من المجموعة التي تتكون من: ‎A‏
    ‏حيث تكون‎ (GGC CAG AAG GAA 660 GAG AAA AGC) 13 ‏متوالية بهرية رقم:‎ ‏22؛‎ AZ dad ‏حيث تكون‎ (GCC AGA AGG AAG GC GAG AAA AGC X) 14 ‏متوالية بهرية رقم:‎ 22 AZ ‏قيمة‎ ‏تكون‎ Cua (CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC) 15 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 22 AZ ‏قيمة‎ ‏تكون‎ Cua (CAG AAG GAA 660 GAG AAA AGC XCC)16 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 22 AZ ‏قيمة‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (AGA AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA)1T ‏متوالية بهوية رقم:‎ 22 2 Z 0 ‏حيث تكون‎ (GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC CAG)18 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 22 AZ ‏قيمة‎ ‏حيث تكون‎ (AAG GAA GGC GAG AAA AGC XCC AGC)19 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 22 AZ ‏قيمة‎ ‏حيث تكون‎ (AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA GCA)20 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 22 AZ ‏قيمة‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (CCGG CXC XCA AAG CAG CXC XGA GA)21 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 ‏تكون قيمة‎ Cus (ACG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AG)22 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 2 Z 0 ‏حيث تكون قيمة‎ (CAC 660 XCX CAA AGC AGC XCX GA)23 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 ‏حيث تكون قيمة‎ (XCA CGG CXC XCA AAG CAG CXC XG)24 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 Lad ‏حيث تكون‎ (CXC ACG GCX CXC AAA GCA GCX 0025 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 21 ‏هي‎ 2
    ‏حيث تكون قيمة‎ (ACX CAC GGC XCX CAA AGC AGC XC)26 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 ‏حيث تكون قيمة‎ (GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA GC)27 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 ‏حيث تكون قيمة‎ (BGC GGC ACX CAC GGC XCX CAA AG)28 ‏متالية بهوية رقم:‎ 5 21 ‏هي‎ 2 ‏حيث تكون قيمة‎ (CGG CAC XCA CGG CXC XCA AAG CA)29 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 ‏حيث تكون قيمة‎ (GCA CXC ACG GCX CXC AAA GCA GC)30 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 2 Z 0 ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC ACX CAC GGC XCX CAA AGC AG)31 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 ‏حيث تكون قيمة‎ (CAC XCA 066 CXC XCA AAG CAG CX)32 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏21؛‎ AZ ‏حيث تكون قيمة‎ (GCC AGA AGG AAG GCG AGA AAA 60(33 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 ‏21؛‎ AZ Z dad ‏حيث تكون‎ (CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG C)34 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (19 ‏هي‎ ‎Z ‏تكون قيمة‎ Cus (CAG AAG GAA GGC GAG AAA AGC)35 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (19 ‏هي‎ 0 ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA AG)36 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 Z dad ‏تكون‎ Cus (BGC CAG AAG GAA 660 GAG AAA (37 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (19 ‏هي‎ ‎Z ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA)38 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 (19 ‏هي‎
    ‏حيث تكون قيمة‎ (CGG CAC XCA CGGC XCX CAA AGC A)39 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 ‏حيث تكون قيمة‎ (GCG GCA CXC ACGG CXC XCA AAG C)40 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC GGC ACX CAC 6 GCX CXC AAA 6(41 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 ‏21؛‎ AZ ‏حيث تكون‎ (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GGC)42 ‏متوالية بهوية رقم:‎ $22 ‏قيمة 2 هي‎ ‏تكون قيمة‎ Cus (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA 60(43 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 2 Z 0 Z ‏حيث تكون قيمة‎ (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA C)44 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC CAG AAG GAA GCG AGA AAA GC)45 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 Z dad ‏حيث تكون‎ (BGC CAG AAG GAA CGA GAA AAG 0(46 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 20 ‏هي‎ ‏حيث تكون قيمة‎ (AGG AAG CGA GAA AAG CXC CAG CAAT ‏متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ 2 Z ‏تكون قيمة‎ Cus (AGG AAC GAG AAA AGC XCC AGC A)48 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 220 ‏هي‎ 20 Z ‏حيث تكون قيمة‎ (AGG AAC GAG AAA AGC XCC AGC A)48 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 20 ‏هي‎ ‏حيث تكون‎ )066 GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA) ‏متوالية بهوية رقم:‎ $22 ‏قيمة 2 هي‎ Z ‏حيث تكون قيمة‎ (CGC XCX CAA AGC AGC XCX GAG (50 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 ‏هي 20؛‎
    ‏هي‎ Z ‏حيث تكون قيمة‎ (CCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA)51 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ¢19 ‏حيث تكون‎ (GGC GGC ACX CAC GGG CXC XCA AAG)S2 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 22 ‏هي‎ Z ‏قيمة‎ ‎Z ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC GGC ACX CAC GCX CXC AAA G)53 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 ‏هي‎ ‏هي‎ Z ‏حيث تكون قيمة‎ (GGC GGC ACX CAC CXC XCA AAG)54 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ¢19 ‏حيث تكون‎ (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGC)55 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 22 ‏قيمة 2 هي‎ 0 ‏حيث تكون قيمة‎ (BCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG 6056 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏21؛‎ AZ ‏حيث تكون قيمة‎ (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG ©(57 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏هي 20؛ و‎ 2 Z ‏حيث تكون قيمة‎ (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACC)58 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 (19 ‏هي‎ ‏أو الثايمين (1)؛‎ (U) acyl ‏من اليورأسيل‎ X ‏حيث يتم اختيار‎ ‏ال‎ ‏حيث تكون‎ ((GGC CAG AAG GAA GGG CGA GAA AAG 059 ‏رقم:‎ ise ‏متوالية‎ ‎23 ‏قيمة 2 هي‎ 0 ‏حيث تكون‎ (CCA GAA GGA AGG GCG AGA AAA GCX C 60 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 23؛‎ ‏حيث تكون‎ (AAG GAA GGG CGA GAA AAG CXC CAG C 61 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 23؛‎ ‏حيث‎ ((GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGG 62 ‏مقتوالية بهوية رقم:‎ 5 23 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎
    Cus ((XGG GGA GAG 660 CAG AAG GAA GGG C 63 ‏رقم:‎ dugg ‏متوالية‎ ‎23 ‏هي‎ Z dad ‏تكون‎ ‏تكون‎ Cua (AGA AGG AAG 660 GAG AAA AGC XCC A 64 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة > هى‎ ‏حيث تكون‎ ((GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX C 65 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 23 ‏قيمة > هى‎ ‏حيث تكون‎ (CXC XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC A 66 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة > هى‎ ‏حيث تكون‎ ((XCX CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA A 67 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة 2 هي‎ 0 ‏تكون‎ Cua ((CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA C 68 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة > هى‎ ‏حيث تكون‎ ((XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC 69 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة > هى‎ ‏تكون‎ Cua ((CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC 6 70 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 23 ‏قيمة > هى‎ ‏تكون‎ Cua (AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG C 71 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة > هى‎ ‏تكون‎ Cua (AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC G 72 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة 2 هي‎ 20 ‏تكون‎ Cua (AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC GCG 6 73 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏قيمة > هى‎ ‏تكون‎ Cua ((GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG 066 C 74 ‏متوالية بهوية رقم:‎ ‏23؛ و‎ AZ ‏قيمة‎ ‏تكون‎ Cua ((CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC GGC X 75 ‏متوالية بهوية رقم:‎ 5 23 ‏قيمة > هى‎
    حيث يتم ‎Xia)‏ من اليورأسيل ‎acyl‏ (لا) أو الثايمين (1). 3- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ 4 اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ وفقا لعنصر الحماية 2 حيث يكون كل ‎R1‏ هو ‎~N(CH3)2‏ ‏5 ‏4- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ 4 اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ وفقا لعنصر الحماية 2 يمكن اختيار ‎RT‏ من: / ‎+O +O HO‏ / ‎-2—N N -5—N N -5—N N—‏ ‎Oa 3‏ أن ‎AH‏ -ر' ‎—2—N N 0 -2—N NH -5—N N‏ ‎HO HU HU‏ ب \ ‎i‏ ‎HzN ’‏ بهم بلا مد ; \ » مر ‎NH,‏ ‎HoN }‏ ‎NH 3‏ زر + - طم ‎KO TH‏ ‎NH‏ 0
    م ‎ba NH‏ ‎HN‏ ‏/ \ و { ‎St NH‏ ‎$n NH So‏ 5 3 > لذ“ ‎Ms , and‏ 3 5- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ ,38 لعنصر الحماية 12( حيث يتم اختيار 1 من:
    ص حصي ‎Ox NH 3‏ 5 ‎AL I >‏ ‎RA ١‏ 207 ‎i So _ Lo‏ [ ‎Sag” 1 N‏ ‎od OH OOH SE‏ + اال أ ب ¢ ‎AY ¢ rd‏ ؛و ‎Y‏ هو © عند كل حدوث. 6- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ 4 اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ وفقا لعنصر الحماية 0 15 حيث يتم اختيار ‎١1 R2‏ و © و ‎acyl dad‏ ؛ تريتيل ‎trityl‏ ؛ 4- ميثوكسي ‎Jug‏ ‎cmethoxytrityl‏ بنزويل ‎benzoyl‏ « وستيرويل ‎stearoyl‏ . 7- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ وفقاً لأي من عناصر الحماية من 12- 14؛ حيث يتم اختيار آ من:
    i Ph Oy A od 3 ‏م‎ ا ا مب ‎L : ]‏ ب ‎a‏ ‏بساك يريا )ات تدده ‎OH‏ ‏0 ْ ] ‎Oo .‏ اا ‏7 ¢ > ؛و ل لاهو © عند كل حدوث و ‎Gg R2‏ . 8- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ وفقاً لأي من عناصر الحماية 12- 14؛ حيث يكون ‎T‏ بالصيغة: ‏2 حل ‎A‏ ‏1 ‎٠ 5‏ يكون ‎١‏ هو ‎O‏ عند كل حدوث؛ وكل 1 هو ‎(N(CH3)2-‏ و ‎R2‏ هو
    ‎.G‏ ‏9- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ©2056 وفقاً لعناصر الحماية 14-12( حيث يكون ‎CPP‏ بالصيغة: ّ 8 م حيث يتم اختيار ‎(He Ra‏ أسيل ‎acyl‏ ؛ بنزويل ‎benzoyl‏ « وستيرويل ‎stearoyl‏ . 0- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ 4 اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ وفقا لعنصر الحماية
    9. حيث يكون ‎Ra‏ عبارة عن أسيتيل ‎acetyl‏ ‏15
    1- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ©2056 وفقاً لعناصر الحماية 14-12( حيث يشتمل ‎CPP‏ على المتوالية التي تم وصفها في أي رقم من أرقام هوية المتوالية : 12-6. 22- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ 4 اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ وفقا لعنصر الحماية 12( حيث يكون ‎T‏ بالصيغة : ‎oT 5 5‏ ‎x‏ ‏ل ‏ممست ‎Oe,‏ ‏> ؛ يكون ‎Y‏ هو © عند كل حدوث؛ ويكون ‎RT JS‏ هو ‎«N(CH3)2—‏ و ‎R2‏ هو ‎H‏ ‏0 23- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎G28, antisense‏ لعناصر الحماية 14-2 أو 22 ‎Gua‏ يكون كل حدوث ل ل هو 1. 4- تركيبة صيدلانية تشتمل على: (أ) ‎sale‏ ناقلة ‎carrier‏ مقبولة صيدلانياً و (ب) مركب أوليجو في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense oligomer‏ بالصيغة ‎:(I)‏ ‏ماده ‏ا ‏0 + 1 مأل ا 2 ا م
    أو ملح مقبول صيدلانياً منه؛ حيث: تمثل كل ‎Nu‏ قاعدة نووية 710016058565 يتخذن ‎Ge‏ شكل متوالية مستهدفة ‎targeting‏ ‏560106706؛ ‎Z‏ عبارة عن عدد صحيح من 8 إلى 38 يتم اختيار كل ‎١‏ بشكل مستقل من © و44ال١-؛‏ حيث يتم اختيار كل ‎RE‏ بشكل مستقل من ‎H‏ ‏61-6 ألكيل ‎«alkyl‏ آرألكيل ‎«—C(=NH)NH2 « aralkyl‏ - ‎«C(O)(CH2)NNR5C(=NH)NH2‏ ‎—=C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NRSC(=NH)NH2‏ و © ؛ حيث يتم اختيار كا من ‎H‏ ‏و 601-06 ألكيل ‎alkyl‏ و ‎Jian‏ عدد صحيح من 1 إلى 5؛ 0 يتم اختيار ‎T‏ من ‎OH‏ وجزءِ من الصيغة: ‎RS‏ ‎A‏ ان ب حيث : يتم اختيار ‎A‏ من ‎-OH‏ و ‎-N(R7)2‏ و ‎RT‏ حيث يتم اختيار كل 7+ بشكل مستقل من 1" و 61-6 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و 5 يتم اختيار ‎RO‏ من ‎hag —N(RO)CH2C(O)NH2 (OH‏ من الصيغة: مر م حيث: يتم اختيار 9 من ‎١1‏ و 61-06 ألكيل الماا8 ؛ و يتم اختيار ‎R10‏ من 6؛ ‎acyl dud —C(0)-R110H‏ ¢ تريتيل ‎trityl‏ ؛ 4- ميثوكسي ‎Jig‏ ‎«methoxytrityl 0‏ ‎«—C(O)(CH2)MNR12C(=NH)NH2 -)- 2‏ و ‎«—C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNR12C(=NH)NH2‏ حيث:
    هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ 1 من الصيغة -( ©0)- ألكيل ‎alkyl‏ )لا - حيث لا هي عدد صحيح من 3 إلى 10 و يتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎alkyl‏ لا بشكل مستقل من 62-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و يتم اختيار 12» من لا و ‎C1-C6‏ ألكيل ‎alkyl‏ ؛ يتم تحديد كل ‎Als‏ من ‎RT‏ بشكل مستقل من: 2+ حيث يتم اختيار كل ‎R13‏ بشكل مستقل من ‎5H‏ 61-06 ألكيل ‎alkyl‏ ؛ وجزه من الصيغة (!): 7ج ‎RY?‏ ‏ل ‏)5 م ‎RY RY‏ 0 حيث: يتم اختيار ‎R15‏ من لا 6 01-06 ألكيل ‎—~C(-NH)NH2 « alkyl‏ ‎«—~C(O)(CH2)gNR18C(~-NH)NH2‏ و ‎—C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)SNR18C(=NH)NH2‏ حيث: يتم اختيار ‎R18‏ من ‎C1-C6 H‏ ألكيل ‎alkyl‏ ؛ و ‎aq 5‏ عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و يتم اختيار كل ‎R17‏ بشكل مستقل من ‎gH‏ ميثيل ‎methyl‏ ؛ و جزء من الصيغة )1( ا ا ‎fn {Im‏ يتم اختيار 19 بشكل مستقل من ل" و ‎(C1-C6‏ ‏ألكيل ‎«—C(O)(CH2)rNR22C(=NH)NH2 —C(=NH)NH2 « alkyl‏ ‎«—C(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(-NH)NH2‏
    ‎«—C(0)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NR22C(=NH)NH2‏ ‎—~C(O)CH(NH2)(CH2)4NH2‏ و 6؛ حيث: يتم اختيار ‎R22‏ من اا و 61-06 ألكيل الماا8 ؛ و هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ و يتم اختيار 20> من ‎sH‏ 61-606 ألكيل ‎alkyl‏ أو
    يكون ‎R19‏ و ‎Gis R20‏ إلى جنب مع ذرة النيتروجين ‎nitrogen atom‏ التي يتم إرفاقهم بها بحيث تشكل حلقة غير متجانسة ‎heterocyclic‏ أو حلقة أريل غير متجانسة ‎heteroaryl ring‏ تتضمن من 5 إلى 7 ذرات بحلقة وتحتوي اختياربًا على ذرة غير متجانسة ‎heteroatom‏ مختارة من الأكسجين 007 والنيتروجين ‎nitrogen‏ والكبريت ‎sulfur‏ ؛ و methoxytrityl ‏ميثوكسي تريتيل‎ -4 « trityl Jay ‏؛‎ acyl Jud «GH ‏من‎ R2 ‏يتم اختيار‎ 0 —C(0)- «—C(=NH)NH2 « alkyl ‏ألكيل‎ C1-C6 « stearoyl ‏ستيرويل‎ « benzoyl ‏بنزويل‎ ‎- «—C(0)(CH2)sNR24C(=NH)NH2 «R23 - «C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5NR24C(=NH)NH2 ‏وجزءِ من الصيغة:‎ «C(O)CH(NH2)(CH2)3NHC(=NH)NH2
    T (J A
    سايم حيث: 3 يكون بالصيغة -( ©0)- ألكيل ‎OH - v( alkyl‏ حيث ‎V‏ يمثل عدد صحيح من 3 إلى 10 ويتم اختيار كل مجموعة من مجموعات ألكيل ‎١ alkyl‏ بشكل مستقل من ‎alkyl JS‏ -62 ‎«C6‏
    ويتم اختيار ‎R24‏ من ‎3H‏ 61-06 ألكيل ‎alkyl‏ ¢ 8 هو عدد صحيح من 1 إلى 5؛ يتم اختيار ‎L‏ من -(0()0112(60)0)- و -(0)0()0112(252)0112(20)0-؟؛
    ‎R25 JS‏ يتخذ الصيغة ‎—(CH2)20C(0)N(R26)2‏ وحيث يكون كل ‎R26‏ بالصيغة - ‎«(CH2)6NHC(=NH)NH2‏ ‏حيث © يمثل ببتيد ثاقب للخلية ‎("CPP") cell penetrating peptide‏ جزءٍ رابط تم اختياره من ‎«—C(O)(CH2)2NH-CPP (C(O)(CH2)5NH-CPP-‏ - ‎«—C(O)CH2NH-CPP (C(O)(CH2)2NHC(O)(CH2)5SNH-CPP 5‏ 9 :
    a CPP 0) ‏و‎ «CPP carboxy ‏بجزءٍ الرابط من خلال رابطة أميد عند حد كريوكسي‎ CPP ‏حيث يتم إرفاق‎ ‏حيث قد يكون © موجودًا في حدوث واحد أو غائب؛ وحيث يتم اختيار المتوالية المستهدفة‎ ‏من المجموعة التي تتكون من:‎ 13210610070 sequence
    J 0 Cus (GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA AGC) 13 ‏متوالية بهرية رقم:‎ 1 ‏هي 22؛‎ Z ‏تكون قيمة‎ ‏حيث‎ (GCC AGA AGG AAG GC GAG AAA AGC X) 14 ‏ب) متوالية بهرية رقم:‎ 22 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎
    Cus (CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC) 15 ‏ج) متوالية بهرية رقم:‎ 5 22 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎ ‏حيث‎ (CAG AAG GAA 660 GAG AAA AGC XCC)16 ‏د) متوالية بهرية رقم:‎ 22 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎ Cus (AGA AGG AAG GCG AGA AAA GCX 00/8(17 ‏ه) متوالية بهرية رقم:‎
    22 ‏هي‎ 2 dad ‏تكون‎ 0 Cus (GAA GGA AGG CGA GAA AAG CXC CAG)18 ‏و) متوالية بهرية رقم:‎ 22 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎ ‏حيث‎ (AAG GAA 660 GAG AAA AGC XCC AGC)19 ‏ز) متوالية بهوية رقم:‎ 22 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎
    Cus (AGG AAG GCG AGA AAA GCX CCA GCA)20 ‏ح) متوالية بهوية رقم:‎ 22 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎ ‏تكون‎ Cua (CGG CXC XCA AAG CAG CXC XGA GA)21 ‏ط) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ Z ‏قيمة‎ ‏حيث تكون‎ (ACG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AG)22 ‏ي) متوالية بهوية رقم:‎ 5
    21 ‏هي‎ Z ‏قيمة‎ ‏تكون‎ Cua (CAC GGC XCX CAA AGC AGC XCX GA)23 ‏ك) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏هي‎ Z ‏قيمة‎ ‏حيث تكون‎ (XCA CGG CXC XCA AAG CAG CXC XG)24 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (J
    0 قيمة 2 هي 21 م) متوالية بهوية رقم: ‎(CXC ACG GCX CXC AAA GCA GCX CX)25‏ حيث تكون قيمة ‎Z‏ هي 21 ن) متوالية بهوية رقم: ‎(ACX CAC 660 XCX CAA AGC AGC XC)26‏ حيث تكون قيمة ‎Z‏ هي 21
    Cus (GCG GCA CXC ACG GCX CXC AAA 60(27 ‏س) متوالية بهوية رقم:‎ 5 21 ‏تكون قيمة 2 هي‎ ‏حيث تكون‎ (GGC GGC ACX CAC 660 XCX CAA AG)28 ‏ع) متوالية بهوية رقم:‎ ‏هي 21؛‎ Z ‏قيمة‎ ‎Cus (CGG CAC XCA 066 CXC XCA AAG CA)29 ‏ف) متوالية بهوية رقم:‎
    0 تكون ‎Z dad‏ هي 21 ص) متوالية بهوية رقم: ‎Cus (GCA CXC ACG GCX CXC AAA GCA GC)30‏ تكون قيمة 2 هي 21 ق) متوالية بهوية رقم: 86(31م ‎(GGC ACX CAC 660 XCX CAA AGC‏ حيث تكون قيمة ‎Z‏ هي 21؛
    ر) متوالية بهرية رقم: 07032 ‎Cus (CAC XCA CGG CXC XCA AAG CAG‏ تكون قيمة ‎Z‏ هي 21
    Cus (GCC AGA AGG AAG GCG AGA AAA GC)33 ‏ش) متوالية بهرية رقم:‎ 21 ‏تكون قيمة 2 هي‎ ‏تكون‎ Cus (CCA GAA GGA AGG CGA GAA AAG C)34 ‏ت) متوالية بهرية رقم:‎ ‏هي 19؛‎ Z ‏قيمة‎ ‏تكون‎ Cua (CAG AAG GAA 660 GAG AAA AGC)3S ‏ث) متوالية بهرية رقم:‎ 5 ‏هي 19؛‎ Z ‏قيمة‎ ‎Cus (GGC CAG AAG GAA GGC GAG AAA AG)36 ‏خ) متوالية بهرية رقم:‎ 21 ‏تكون قيمة 2 هي‎ ‏تكون‎ Cus (GGC CAG AAG GAA 660 GAG AAA (37 ‏ذ) متوالية بهرية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 19؛‎ 0 ‏تكون‎ Cus (GGC CAG AAG GAA 660 GAG AAA)3S8 ‏ض) متوالية بهرية رقم:‎ ‏هي 19؛‎ Z ‏قيمة‎ ‏حيث تكون‎ )066 CAC XCA 0660 XCX CAA AGC A)39 ‏غخ) متوالية بهوية رقم:‎ ‏هي 21؛‎ Z ‏قيمة‎ ‏تكون‎ Cua (GCG GCA CXC ACGG CXC XCA AAG 0(40 ‏ظ) متوالية بهوية رقم:‎ 5 21 ‏هي‎ Z ‏قيمة‎ ‏حيث‎ (GGC GGC ACX CAC G GCX CXC AAA G)41 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (if 21 ‏تكون قيمة 2 هي‎ Cus (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA 660(42 ‏بب) متوالية بهوية رقم:‎ 22 ‏هي‎ 2 dad ‏تكون‎ 0 Cus (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GC)43 ‏جج) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏تكون قيمة 2 هي‎ ‏تكون‎ Cus (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA C)44 ‏دد) متوالية بهوية رقم:‎ ‏هي‎ Z ‏قيمة‎ ‎Cus (GGC CAG AAG GAA GCG AGA AAA 60(45 ‏هد) متوالية بهرية رقم:‎ 25 21 ‏تكون قيمة 2 هي‎
    ‏تكون‎ Cus (GGC CAG AAG GAA CGA GAA AAG 0(46 ‏وو) متوالية بهرية رقم:‎ ‏هي‎ Z ‏قيمة‎ ‎Cus (AGG AAG CGA GAA AAG CXC CAG CA)4T ‏زز) متوالية بهوية رقم:‎ 21 ‏تكون قيمة 2 هي‎ ‏حيث تكون‎ (AGG AAC GAG AAA AGC XCC AGC (48 ‏رقم:‎ Luger ‏حح) متوالية‎ 5 20 ‏هي‎ Z ‏قيمة‎ ‏تكون‎ Cus (AGG AAC GAG AAA AGC XCC AGC A)48 ‏طط) متوالية بهوية رقم:‎ 20 ‏هي‎ Z ‏قيمة‎ ‎Cus (CGG GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA)49 ‏يي) متوالية بهوية رقم:‎ 22 ‏تكون قيمة 2 هي‎ 10 ‏حيث تكون‎ (CGC XCX CAA AGC AGC XCX GAG (50 ‏كك) متوالية بهوية رقم:‎ ‏هي 20؛‎ Z ‏قيمة‎ ‏حيث تكون‎ (CCX CXC AAA GCA GCX CXG ‏لل) متوالية بهوية رقم: 6/8(51م‎ ‏هي 19؛‎ Z ‏قيمة‎ ‎Cus (GGC 660 ACX CAC GGG CXC XCA AAG)52 ‏جم) متوالية بهوية رقم:‎ 5 22 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎ ‏حيث تكون‎ (BGC 660 ACX CAC GCX CXC AAA 6(53 ‏نن) متوالية بهوية رقم:‎ ‏هي 20؛‎ Z ‏قيمة‎ ‏تكون‎ Cua (GGC 660 ACX CAC CXC XCA 86(54 ‏سس) متوالية بهوية رقم:‎ ‏قيمة 2 هي 19؛‎ 0 Cus (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGC)55 ‏عع) متوالية بهوية رقم:‎ 22 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎ Cus (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GC)56 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (ad 21 ‏تكون قيمة 2 هي‎ Cus (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG (57 ‏صص) متوالية بهوية رقم:‎ 25 ‏هي 20؛ و‎ > dad ‏تكون‎
    ‏حيث تكون‎ (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACC)58 ‏3ق) متوالية بهوية رقم:‎ ‏هي 19؛‎ Z ‏قيمة‎ ‏(لا) أو الثايمين (1)؛‎ acyl ‏من اليورأسيل‎ X ‏حيث يتم اختيار‎ ‏ال‎ ‏حيث‎ (GGC CAG AAG GAA GGG CGA GAA AAG C) 59 ‏أ) متوالية بهوية رقم:‎ 5 23 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎ (CCA GAA GGA AGG GCG AGA AAA GCX C) 60 ‏ب) متوالية بهرية رقم:‎ 23 ‏حيث تكون قيمة > هي‎ (AAG GAA GGG CGA GAA AAG CXC CAG © ( 61 ‏ج) متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏هي‎ Z dad ‏حيث تكون‎ 10 (GCG GGA GGG GCG GCA CXC ACG GGG C) 62 ‏د) متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏حيث تكون قيمة > هي‎ (XGG GGA GAG GGC CAG AAG GAA GGG C (63 ‏ه) متوالية بهرية رقم:‎ 23 ‏حيث تكون قيمة > هي‎ ‏حيث‎ (AGA AGG AAG 666 GAG AAA AGC XCC A 64 ‏متوالية بهرية رقم:‎ ) 5 23 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎ (GCX CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX 6 ( 65 ‏ز) متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏حيث تكون قيمة > هي‎ (CXC XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC A) 66 ‏ح) متوالية بهرية رقم:‎ £23 ‏هي‎ Z dad ‏حيث تكون‎ 20 ‏حيث‎ (XCX CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA A )67 ‏ط) متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎ ‏حيث‎ (CXC AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA C) 68 ‏ي) متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏هي‎ Z ‏تكون قيمة‎ (XCA AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC 6 ( 69 ‏متوالية بهوية رقم:‎ (& . 5 23 ‏حيث تكون قيمة > هي‎
    ‏حيث‎ (CAA AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC 6 ( ‏متوالية بهوية رقم:70‎ (J 23 ‏هي‎ Z dad ‏تكون‎ ‎Cus (AAA GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG C) 71 ‏م) متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏هي‎ Z dad ‏تكون‎ ‎Cus (AAG CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC 6(72 ‏ن) _ متوالية بهوية رقم:‎ 5
    23 ‏هي‎ Z dad ‏تكون‎ ‎(AGC AGC XCX GAG ACA XCA ACC GCG 6 ) 73 ‏س) متوالية بهوية رقم:‎ 23 ‏حيث تكون قيمة > هي‎ (GCA GCX CXG AGA CAX CAA CCG 0666 C) 74 ‏ع) متوالية بهوية رقم:‎
    0 حيث تكون قيمة ‎AZ‏ 23؛ و ف) متوالية بهوية رقم: 75 ( ‎(CAG CXC XGA GAC AXC AAC CGC GGC X‏ حيث تكون قيمة > هي 23 حيث يتم اختيار ل من اليورأسيل ‎acyl‏ (لا) أو الثايمين (1).
    25- التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 24؛ حيث يكون كل ‎RI‏ هو 6113(2)ل8- . 6- التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 24؛ حيث يتم اختيار ‎RL‏ من :
    / ‎HOH‏ محم من ‎HOH +O‏ ‎NH -5—N N‏ اصح 0 ‎—2—N N‏ ‎Ho HOA‏ + +
    = .\ ‎N‏ ‎HN :‏ ‎+O +O‏ ‎NH,‏ ’ \ ’ مر ا لاوط بم ‎WOT‏ ‎NH;‏ 0 ‎HoN‏ ‎be NH‏ ) م م \ / " ان 3 ‎NH‏ ل + 3 \ ل“ ؟ بر ‎NH, . and‏ و 7- التركيبة الصيدلانية وفقاً لعنصر الحماية 24؛ حيث يتم اختيار 1 من: م 0 1 ‎br‏ ال : ‎A‏ = 1 ‎“J 0‏ 9 واه ‎OH Gp‏ بمو ل 1 1 باوكا ‎TT‏ ‎oY 5‏ ¢ > ¢ ؛و ‏ 7 ؛و
    ‎Y‏ هو © عند كل حدوث. 8- التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 27؛ حيث يتم اختيار 2 من ‎١1‏ و © و أسيل ‎acyl‏ » تريتيل ‎trityl‏ » 4- ميثوكسى تريتيل ‎emethoxytrityl‏ بنزويل ‎benzoyl‏ ؛ وستيرويل ‎stearoyl 5‏ . 9- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎antisense‏ ,38 لعنصر الحماية 24 حيث يتم اختيار آ من: ‎or + =‏ ‎wn Tl‏ ‎Sy oN 2‏ ب ‎ie‏ 1 ب 8 ~ 5 ‎R‏ ‏و أن ‎OH guest‏ ٍ ‎GQ, 0‏ ‎Fs oY‏ ء؛و سمس 7 هو © خند كل حدوث و 82 هو 6. 0- التركيبة الصيدلائية وفقاً لعنصر الحماية 24 حيث يكون 1 بالصيغة: ‎wh‏ ‏ب ‏م ا ‎Os‏ ‏7 ؛ يكون ‎١7‏ هو © عند كل حدوث؛ وكل ‎RI‏ هو ‎-N(CH3)2‏ و ‎R2‏ هو
    ‎.G‏ ‏15 321- التركيبة الصيدلانية وفقاً لعنصر الحماية 26-24( حيث يكون ‎CPP‏ بالصيغة:
    حيث يتم اختيار ‎Ra‏ من ‎H‏ ؛ أسيل ‎acyl‏ ؛ بنزويل ‎benzoyl‏ « وستيرويل ‎stearoyl‏ . 2- التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 31 حيث ‎Ra‏ هو أسيتيل ‎acetyl‏ ‏5
    3- التركيبة الصيدلانية وفقاً لعناصر الحماية 24- 26؛ حيث يشتمل ‎CPP‏ على المتوالية التى تم وصفها في أي من أرقام هوية المتوالية : 2-6 1 . 4- التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 24؛ حيث يكون 1 بالصيغة :
    wD”
    0
    — ‎I HCH)‏ 0 > ؛ يكون ‎Y‏ هو © عند كل حدوث؛ ويكون كل ‎Rl‏ هو ‎¢"N(CH3)2‏ و ‎R2‏ هو ‎H‏ ‏5- التركيبة الصيدلانية وفقاً لعناصر الحماية 24- 26 أو 34؛ حيث يكون كل حدوث ‎XJ‏ هو 1
    6- مركب الأوليجومر المعدل في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا لعنصر الحماية 1؛ حيث يتم اختيار المتوالية المستهدفة ‎targeting sequence‏ _من أي من المتواليات بهوية رقم 38-33.
    7- مركب الأوليجومر المعدل في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا لعنصر الحماية 1؛ ‎Cua‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎a targeting sequence‏ المتوالية بهوية رقم 33. 38- مركب الأوليجومر المعدل في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا لعنصر الحماية 1؛ ‎Cua‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎a targeting sequence‏ المتوالية بهوية رقم 34. 9-مركب الأوليجومر المعدل في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا 0 لعنصر الحماية 1 حيث تكون المتوالية المستهدفة ‎targeting sequence‏ هى المتوالية بهوية رقم 35. 0- مركب الأوليجومر المعدل في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا لعنصر الحماية 1؛ ‎Cua‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎a targeting sequence‏ المتوالية بهوية رقم 36. 1- مركب الأوليجومر المعدل في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا لعنصر الحماية 1؛ ‎Cua‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎a targeting sequence‏ المتوالية بهوية رقم 37.
    2- مركب الأوليجومر المعدل في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا لعنصر الحماية 1؛ ‎Cua‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎a targeting sequence‏ المتوالية بهوية رقم 38.
    3- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense‏ ‎Ld oligomer‏ لعنصر الحماية 12؛ حيث يتم اختيار المتوالية المستهدفة ‎targeting‏ ‎SEQUENCE‏ من أي من المتواليات بهوية رقم 38-33. 44- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا لعنصر الحماية 12( ‎Cus‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎a targeting sequence‏ المتوالية بهوية رقم 33. 5- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ 0 وثقا لعنصر الحماية 12؛ حيث تكون المتوالية المستهدفة ‎targeting sequence‏ هى المتوالية بهوية رقم 34. 6- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا لعنصر الحماية 12( ‎Cus‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎a targeting sequence‏ المتوالية بهوية رقم 35 7- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا لعنصر الحماية 12( ‎Cus‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎a targeting sequence‏ المتوالية بهوية رقم 36.
    8- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا لعنصر الحماية 12( ‎Cus‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎a targeting sequence‏ المتوالية بهوية رقم 37.
    9- مركب الأوليجومر ‎oligomer‏ في اتجاه مضاد للنسخ ‎modified antisense oligomer‏ وفقا لعنصر الحماية 12( ‎Cus‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎a targeting sequence‏ المتوالية بهوية رقم 38 50- التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 24؛ حيث يتم اختيار المتوالية المستهدفة
    .38-33 ‏من أي من المتواليات بهوية رقم‎ targeting sequence targeting ‏التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 24؛ حيث تكون المتوالية المستهدفة‎ -1 .33 ‏هي المتوالية بهوية رقم‎ 2686© 2- التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 24؛ حيث تكون المتوالية المستهدفة ‎targeting‏ ‏©2686 هي المتوالية بهوية رقم 34. 3- التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 24؛ ‎Cua‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎targeting‏ ‎sequence 5‏ هي المتوالية بهوية رقم 35. 4- التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 24؛ حيث تكون المتوالية المستهدفة ‎targeting‏ ‏©2086 هي المتوالية بهوية رقم 36. ‏0 55- التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 24؛ ‎Gus‏ تكون المتوالية المستهدفة ‎targeting‏ ‏©2086 9 هي المتوالية بهوية رقم 37. 6- التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية 24؛ حيث تكون المتوالية المستهدفة ‎targeting‏ ‏©9286 هي المتوالية بهوية رقم 38 ey 8 ‏ل‎ ER, ‏اي‎ ‏بر ا‎ ‏ام‎ He ~ Ne, , RN ‏ار اك ال‎ ‏و 7 3 ل‎ ‏ل‎ se 0 hee 8 So TREE ‏حل ا بكلا جنا‎ ‏ل‎ to ‏ار اا‎ : Bang ‏ا ل‎ Rp SR, TS ‏اللي‎ A fe 8 Ree fon Se 0 ‏ب‎ ٍ 7 ‏الك الا ال‎ ‏ار ا ادا السب‎ 53 TR : ‏اح‎ He, ‏بي‎ ‏ا ا احم‎ 31 ‏ريركت الس‎ EEE ‏ري ب بي‎ ‏ا ب يد ماص‎ “3 on RR We Ard ‏ب ٍ ل‎ ae dd fo TEs 8 F conan Fa ly - ‏م‎ TNS Ss wo ER am = cond.
    We ‏ارفك‎ ‎a So a Se NM, ban Ld ‏ا‎ a ‏ل‎ , g ‏أله ا‎ RT ogy 7 55 OS ES 1 # ‏ب وما أ‎ RES SERENE ‏الت‎ Phe, kia Ey Sart ce ge Aig, 6 ou TT TW 3 wy RRR ‏ري ار أب‎ “By 2 ‏الس ب‎ a ‏ا‎ © 3 ‏نآ :. ب & اموت وت وح ب وس ووو وسو‎ ‏وا‎ RE ‏ا : ات َّ لل ا‎ . xX 2 . fy "3 Sake ‏ت ا رين‎ RRR ‏د ا ود‎ > Lo ir i; ‏ا ص‎ RRR ER RC ‏ل‎ | Rok 3 ’ WR hy fay dd op Ey WP p ERA for ‏ا‎ “By i wil 8 ‏ا‎ Lo ‏.ب‎ ‎: =i os Hh ———————————— TB ‏ايد ! تيد ا‎ NE Po ‏يا الا‎ ‏ب دي ّ| مهي‎ { (Fyre vom 0 oC eed) be Bey LES vero veel gt vers REA sry ‏أذ‎ WYO “% ¥ § = gL ) ‏قا‎
    SW — 7 bao > ‏ل‎ RX ‏اا ض‎ : a #5 | ‏اق‎ ‎Wr 8, ‏الو‎ 5 g “3, By sma La 5. SF ‏ف‎ ‏ا‎ Ws Me Te TE
    B.S a, Po Sle 2 NB Ty ‏ل ل‎ WR NE ‏كاي‎ ‎7 ‏ا 3 ْم 1 ا 3 الست‎ ‏ال‎ EY ‏يها‎ TB Co CREE ‏يالا اي‎ Wg yer RO SE SON RRR Sy oe 0 * Oa fy : REY ke Cri 8, Sh Ce £5, “by me, Cd Th oe ‏ون اا‎ CY 4 ‏اتنس اس‎ RY wy ‏ايه و‎ ‏يل را وات م ويا ا"‎ 1 ‏ا ل خخ‎ F a mC, ee = ‏ل ل اا ا اين يس‎ ْ J A: $ Ea Re ‏ب‎ Ten hs : ‏ميق‎ ‏يا أله اده ا‎ 2 ‏ام ال الي اله ل ا‎ =f TREE Rw Ne A > ‏جح >< ا ا‎ x i 7 - SERRE : ‏الا‎ 4 Wig 0 2 3, oe TAREE Pais i ‏ل‎ : id = aaa 07 he Sp ‏يخ‎ ‏و يو كان اال بق ا‎ Tony —— LTR Ry ‏ارك‎ ‎Las ented ‏اا‎ Ne Bn ‏ا اي‎ TY Ey TS Fe Haase : “3, : Fae, " Be “8, ‏الى ال‎ RTH ‏ره‎ TD ‏ا اا اا‎ By Es TN 6, Te ‏وو‎ ‎RE re ‏ال‎ 3 EN 23 sant. We Se 5, i amigas —p—p—— : ‏م‎ <5 5 ‏اتاج الات اح ا راان‎ pee. sy ‏ما‎ FUE SR PY ‏ا‎ - wr a ‏جع‎ 5 By 00,5, “ey Fan . i or Sat as il Se { thre vemary ‏“تي ثيه‎ rep) wh Fey fF Yun Te
    - x i ‏الوا ا ا‎ oe Ee ‏ا‎ ‎—— ad 1 1 ey oi ‏ل‎ ‎: NN ‏ال‎ ‎Sa ‏اج ا‎ "hy ST ‏اا ال ا‎ = Tm, ‏اا‎ ‎Naren E> EEE Tf ‏ا ا‎ ey SN ‏ا ل‎ fi? ‏ا لصوف‎ Ek ‏اا ل‎ 3 ‏نسي‎ Rg ‏يق ال الث‎ JI I TN Hg SEER ‏ا‎ “5, : THREES ry CA 5 : ‏ا‎ pe +4 ‏ب جه ا‎ ‏ب 5 ا أ ل‎ Ee Ne ) ‏د‎ 0 EE ‏لا 0 م :ّ ب 1 بس‎ ‏ليه‎ Sy " = ‏جمد ل 0 ل‎ “a B SR 8 EN 1 MR x 3 88 * ‏ا الج جد حا‎ >
    : . on X } h © = a> uw Suma Ty ‏ل‎ % Cs Saas Es 3: 3 * * ‏ايل = ا‎ TO oh ‏وله‎ es By 3 J 3 E— ‏ا‎ i 1 : - a 0 5 4 3 ood ‏لي‎ Se ‏ا‎ 1 saan Eg CT a EN ~~ ey 1 SR 8 1 ‏ب‎ ‏م‎ ‏ليسا يويسا سييست بس مسجب‎ SRK “ig : ‏م‎ - = 6 0 5 27 ٍ ‏ا ل‎ xe ira are STFC oF wey 2) { ‏و‎ verry ‏لوي‎ oF rod) ee TE Py IT ‏ابض‎
    8 م ‎SNR‏ ‏ااي الل ‎RR A‏ ا ‎Seen SS REE SESE,‏ : الل ‎Saas‏ ‎Snead TK‏ ‎A ee‏ ‎Sa‏ ‎Re hay Fw‏ ب ال — ‎RE SR‏ :نا ‎Ed 2 “hy‏ ‎I >. TH‏ ‎Sol BH‏ ‎SEER © FN‏ ‎es REC‏ ‎Sy‏ ست ‎Sra‏ ‏= ب ‎RE R‏ ا ‎By‏ اي وحن ‎RRR‏ ‎EE TT‏ ‎ones a be 5‏ ميا ‎FRR a‏ : ‎et 5 : LAN‏ مجح تتم ماج لحت ل ‎BO rn‏ ا اا الا ان شه ته ‎SR SE‏ ا : ف 1 8 : ا 8 ل ‎on‏ يا ا | سني ‎SENN 2 Se : 4‏ ‎Ay 2‏ ل ‎Tw 1‏ ‎ke‏ ارا اص ‎A AOL‏ ا ‎hh oy Ty po‏ ب« ‎rind a Ee‏ و اخ ‎mn‏ ‎SEL NE SEERA + a‏ لح اجا ‎ay aE ER By x‏ لخ ‎x, sid‏ اا مووي ‎OR NE‏ ]8 ‎RCE RRS Sa‏ سس - ‎[i‏ : ‎RR AR RR RB hie‏ ا ا 0 عيبا ابي" ‎Hp pr‏ ‎abn He . Wg‏ » ا ‎ag “3‏ ا ا أل« ‎“x‏ ا ‎As Es‏ يا ‎OF‏ ا : 3 ب : ‎mes ae aaa Rs HE‏ ان لا ‎k, Ti EE ON RAEN : SE 2 0 fy .‏ ب | ‎ow hid)‏ ‎BN‏ لمق 4 4 3 ‎RRR 5 5‏ ; . ا 0 مط أ ال 3 ‎wood‏ ‎ELS‏ ولجنا ‎TET a He SAMS‏ م ‎ER,‏ ا ا الس ‎٠‏ : اغا ,0 لسو د55 ا ا ‎FR‏ ‎A‏ ا اا مسج 0 ‎oF = 23‏ يم لامجا م مله اا مه ما ماحم اتات مل لس و ‎١ 8 8‏ ‎hE‏ جل * اهذا ‎Tow pm owe‏ ‎a 3 Ey‏ 2 ب )2 ‎tae‏ ص ‎a.‏ 8 مم { ‎ob Be Be EE pageant § >;‏ ] ‎oni FC vy‏ يدوي بجي ‎(Fire‏ ‏ا ل ‎I‏ ‏ايديا لجر ضرح
    ال حا ‎NER XS a <a, .‏ 3 ‎ro Sy‏ ا »م ‎Ale‏ ‎Gy CS‏ الاج م ‎ni ER ER : %y .‏ ‎x THs 1‏ ا 48 0 اع ‎eed re‏ ل 1 ‎wo, By‏ ام ‎EE‏ : ,5 : ب ‎Co a‏ اا > ل« ‎Bae‏ ‏ض ض ض 8 :0 باس ا * يق - و ا ال ب حا 1 , ‎Supa %‏ -- : } 3 الحا : ‎Be‏ اا 5 ‎RE‏ = 3 3 د ‎SANE NR Ta Le‏ 0 ; : ض ‎See Ey “a‏ 0 ض : ; 13 : ض ‎١‏ ض ‎١‏ 1 م : ‎CR SEE‏ 3 0 4 ب ‎Hk 3 a A‏ 8 ل م . 3 ب بر ‎Cl Coa‏ ? 7 0 0 اام #8 ‎i TR‏ ‎SNE a,‏ 0 88 7 1 ا ال 3 ب اي 1 ‎oy “Sy Sa 5‏ ا ' & ض % | اف ال 3 ِ ست ا ا ا ا . ‎Se - 6“‏ 0 ‎ig‏ 3 27 ِ حصي سن ‎Soa Qu Ty 2‏ — ؤ ‎RRR Ce sine 3 : y‏ ‎Ma‏ و ‎it‏ اخ ‎Sa Bo i 3 Re . : yo Ral BR‏ ‎By Te‏ ا ل ‎RR i Sava wy, | Y |‏ * : ا .سسب ; ‎i RNs BY ie = Tn‏ ‎HE Ta‏ = " £3 ارقلا ‎sp Seo‏ دس ‎oo “hy :‏ 2 اي 8 0 ‎Se . A, %‏ ‎ha om SHEA Es 5‏ ‎Se Ey : Ly, :‏ 8 ‎i SREER SE Se : & - : 1‏ ‎RA oe‏ ا 1 ض ‎i Sy‏ ا ل 2 ب ‎Re : FEN g‏ + ‎ho Bs Fe‏ 0 : د | رك “ | 0 ا - ‎EN :‏ : يب 4 ‎١‏ ض ض 2 ض - = ا 3 ‎a a © =‏ 3 48 ض ‎See.
    RR 0 a‏ رن لحا 88 ‎Sa‏ 0 ض ,5 : | ‎a,‏ لي ده ا ا ب اا ايا .ب ااي > :م ‎wend “Se Lie‏ " ‎a‏ © ية ‎sii‏ ‎Py, oo TE‏ = ‎a sod BS ha‏ نت 8 ‎RES Ra: “ pg‏ : بل ال © ‎me‏ ‏,5 ب ا ٍ 0 و ‎mae Ry,‏ دي 5 ‎Ri Hy Te‏ لست ا 0 ب ا اح 8 8 8< وي 0 ا ‎wl‏ 3 ‎TR‏ ل واد تب سح ‎HERR : se on 5 5‏ ‎ORR Sd ~ >‏ ‎RRR 5 ْ >‏ ‎a RE > &‏ ‎h HE 1‏ | : ‎piney jg | ;‏ ‎AE vad)‏ نا 2 1 م ا “اي لو ويد يسيم و8 ‎ve‏ عي ‎ie RASC na re ZY!‏ { ‎inf‏ يجروج ‎Yon‏
    ا ال إن الست اا ا ادا ا ٍ ‎FON oR SER Si‏ 4 ‎ER i‏ إل اي ال تت ‎Boe ae we‏ ا : ‎i i‏ الا ‎a RNR‏ & ب ‎Seanad Pes Ee‏ @ ا ‎Sain Bop TW‏ ا ‎fT‏ ‎SOREN : As‏ 3 الوك ل اس ‎K : oF A ES‏ ال ‎Se‏ ال 3 الا 8 & ا ّ ممست ‎RRA‏ دحتا ‎x,‏ - 3 1 3 وا ‎peg TF Eas Tl‏ ‎ELA ١ 1 I‏ ‎SX, Try‏ ات أ بس بس _ن_ ووو 3 ‎HT ot‏ ان ا 0 المي ‎ny SRE.‏ ارا ‎ea Rt a Ea‏ اا توي 7 م ‎ne Sn Ro NE‏ : : * ‎Ts fe‏ ان ‎hay Be Mel‏ ‎ER PE‏ & سا ص سوا 3 3“ ري ‎aa‏ ‎ir)‏ 2 18 0 ا ال ‎eR . “Rs, :‏ * ا ‎bt‏ ا ‎Te‏ الب اللا ا ا © الاوك ‎de NN‏ تفج جم تا ا 5 ‎a‏ 1 خخ حون ا م احج ومسا ا ب انا اللا ا ا الا لوو ل 8 ‎Tn‏ ا ‎BRB‏ اذ ‎r a 4 Te ®‏ ‎Loo Sind a Eg‏ ‎SENN Se ERE‏ الس ‎Natal‏ ‎ER Teo Pu‏ ان ا 5 ‎GENER‏ ‎TIAA =‏ اليه ا ‎eA pty Sa a :‏ ا : ا 5 ‎RR ERR A SS IS REIN‏ ‎Ee os‏ عد ا ا ا د ب 881 ا ‎vi NERNEY, & SRR oF‏ ‎He WFR‏ حي ‎RR‏ ‎g 3‏ ا 7 ‎Se Rt TE 1‏ ‎١‏ احا الي التاق ‎Lo CERRY 8 7‏ ‎ft‏ 2 ا ا ل : بل ‎PEERS RN‏ -
    ‎Fe.‏ ا ل ا ‎ome Thy‏ ‎oo SUEY Te 88‏ ند ايم م ‎Toi TN‏ ل ا لم قي نو ا ل ‎TS‏ ل الس لطا ني ‎a SESE INANE =, “a‏ ا : ‎FER “Pe‏ + ا ب الست ‎A‏ ا ل 2 لد ‎ET NN‏ ‎Te‏ ا ا اد ‎BERR‏ ل
    ‎ay. = A‏ اج ا ا ‎us‏ — ححا ا انز ا ‎NS‏ ل ا ‎“Ka‏ اها الل ل ا ا يي ‎SRR NIRA ar Ba i]‏ ‎spied Sh hi‏ : م اع ل 7 الا ا[ ا رن # ل ها الجن ا ل ‎fe te‏ الجن ‎ERATOR‏ ‏ا ا ‎TU md‏ ‎RRR YT Rs fir‏ ‎Sold ht pa) . Er‏ ‎TR 5‏ لش ‎BEE eB Hy‏ ‎ae TR‏ ال ينج ‎Sg Bd 5‏ يا الوحت سي 8 الحا لأا ا تساي بي ا ‎xy‏ ورك المي لسك لس ا ا اس ‎WE Be a Tak‏ حي الما لها اليا ‎an HL‏ اليه > ‎27a‏ . كيه (3 قن ثح ‎Fa Se‏ 0 : اروص ‎oF‏ الأو احج و1 ‎Ema aa‏ ‎parte le YD‏
    ‏ىج[‎ «© << © ig Bo pew " 5 a ‏ا أ‎ Na ‏و‎ ‎3 7 ‏ارط الع‎ ‏اذ‎ x iNT ah a 4 ‏ب الج‎ 3 3 42 4 “en ‏ا ا‎ 3 ‏اي را ااا له ل‎ Pg ‏ل آي‎ Wee ‏ا‎ ‎AR ‏و اب مق ل ذ‎ bid : we a 75 SU by, My Lal “8, a Lh al ‏لمكا نك‎ by a Ree ‏اي 1 ا‎ : by SRE Fa ha 8 Sa fe, WC ‏ةن الا‎ by S44 WN ‏ال‎ TY Lo REECE XE rf 5 ‏اق‎ te, TE EEN by pee 7 ‏ا‎ 5 : Er 1 Gk x, aoa OE Te ب٠ ‏سج 0 ,2“ رق‎ ‏ا او ل‎ ‏ب ب مر الس‎ ‏ال اها ات‎ ‏ب‎ TN 0 ‏ل‎ i “a 1 a Ly LS RY oe J ES LY ‏اي تاتقي‎ ec WS Ay STR Ba 5 ‏ل‎ Se ‏ا‎ ‏ا ا‎ g Ag : Bas aan Ty Sy A 0 By, RR A AHR ie ‏د مسيم‎ 3 + be ha oO Sea Re Tl Sahni Sy Ty 8 Ty 7 1 CE Se Ta . ‏ال ب‎ ‏نا‎ ‎Fp ‏و ب اد ال ل ل‎ “b, ‏الى ب‎ TENT ‏ل‎ ; oF ‏جهدا سلج رح‎ Be ‏ا اسهد‎ ES 1 1 ٍ 0 oR Ee ‏اا‎ ‎Chap pms ‏رسيي‎ peel wd page wo HER { ‏ني جمس و‎ oF we) A 40 Er md Se “0 ry i YD ‏ب‎
    ْ ‏يي‎ ‏ها اش أن‎ 8 * ‏د ا‎ 414 05 ‏ا عيذ في الي‎ vA 1g 33 11 Bhs 3 ee ese RL Anda " Te San + Res mmm . POR ‏جوع جات مدت ااا‎ A : Fs EE ‏اد‎ - Ba : > ; ce ‏را‎ ‎5 ‏اا ل‎ 6 ‏ما‎ “8 TERR ‏ا‎ © 7 ‏بج‎ ‎3 ‏اغا ا اموا‎ ‏ا ا‎ ‏وسور‎ Ga 8 ‏ا ل‎ = REE a Loo £ a} ‏امت‎ ; W ‏ول‎ A Saas a Spree 0 ‏جل‎ ّ: BRR ® RR 0 1 BE Ey el ‏ا اما‎ ‏لا‎ 2 RN Ry SHORE ‏ب ار‎ ‏الا الا‎ EL ‏الست ام سو‎ a, 0 ‏ار الت‎ A Sa Ey ‏م‎ dy — Sa 2 By PR By = i Bo : Fo: a ‏الوذ‎ >“ Be $s an Say - {thre veo ‏صب‎ oF om @) ‏وي‎ ‎ey IEF VY bP | 8 0 ‏ا ا‎ * ‏ب‎ = 8 aa Ca ES 5 4 qq ‏حا‎ ‏نا لات‎ Add 3 3 3 2 ‏له‎ ‎TYR OD a TY TYR, «ER 5 LL _— 3 =“ ‏ار‎ ‏الا م ها‎ oy, “9 ‏لاا‎ CEL Se oman BH Bey SI RGN 5 ‏يا‎ ry en 2 : Es 2 : Sh . aad ٠ ‏ممم‎ 3 “a ‏اح‎ by EN a ‏الف‎ & SN) ‏ا‎ ‎SERN pias 8 ‏م‎ | Se By ‏ب‎ ‏ا‎ : NG ‏ا اا‎ Fa Sasa 3 CER “Ha D ‏ا ا بي‎ By ‏ا اميا‎ Sh ‏ايك‎ : : ’ ‏اا ا‎ ar 3 ‏متم‎ i 0 ‏ا‎ By Ca, Hy 1 ‏واس د ا ا‎ ‏ا ل ع‎ 3 3 Fe - Bey oR a ‏لمتحا‎ ” Reo why Ny 1 ‏م و جك كا لقب‎ > EN ‏ا‎ 8 : Eon, \ i 5 CAR ‏وك‎ ‏ا ول ا حو اد اس مي‎ eens ‏ا اي‎ 1 = rans ‏يم ل‎ = By ‏ل ا الي‎ A TR On eel 0. Do on hd Hy Sade TE Yh TERRE a a ‏م‎ I : ‏الت‎ ie, ek By Eas oF Fo 3 & 3 wd ‏ونا اينما‎ ١ ‏او ل الل‎ Hy ‏الما ماك ال‎ TE . So BE Be ‏رع ا‎ ‏ا لاست ست سوسس تم‎ Zn ‏بز‎ ‎«# | ‏ب كات # حل + اند اج الا امعد‎ ‏ل حي هي ات اع‎ “ats {Thre somo spl oF wd) 5 00 ‏وين ذا‎ erty ‏ب ويا نج‎ gE © 8 8 2 © i Pa ‏م‎ © re & + oe a-ak 3 “Ha : ‏ب‎ ‎SR ‎= 4 3 37 J od Tay wy > I Ce a g ‏ل‎ ‏ا ا‎ : gaa CTY 5 ‏اي العم‎ = Swe 3 “Ea ered ft. Lo RESIS Vid re a a ay eo Ea ‏م‎ Wi, RRS BRIS REL Eh ind Fe " ww mS WE ‏ل‎ 5 . aE “Fi A ‏ل‎ NE . Tt ‏ا‎ “a, : a a ‏ا‎ ‎0# ‏ا م‎ 1 Loo BERRIEN TE Py ‏ب‎
    ‏...م‎ 4 5 8 ‏ا لو ل‎ 5 : ‏سنس سس‎ eee Ls Sy aR REG Re A Tey NF iid Po ‏الي ا‎ ‏ل‎ Be By SRR ET PS i Ea ‏و‎ Th : ERNE : Sx 0 E, Shi RTS Oei: | N 5 Tele TIE ERY ‏بخ ا‎ ٍ - . rts Fhe Hh SE a Sy CREE. 0 ‏لهي ا ا‎ ‏ل‎ So ١ ‏سس ا م ب ا‎ ‏ا ا‎ 5 ‏ال‎ “8 1 0# i : ‏ا ا‎ Ha hr. a ‏ا ل‎ : Re 8 _ _ _ ‏الإ يإ > أ‎ die ii Ted sy LEE Re : ‏ي ول‎ ‏ا ل‎ oy ‏الع حت ا‎ ARRAS RE “a o£ 3 ‏ا م‎ REE a rinsing eine Bo 5 “Fe ; a Ly ; Ro we ae eh Ty ‏الج‎ ‎1 ‏اا الب‎ oo oo Ck HE ‏ا‎ 23 1 Pe (Core ‏جوم‎ vei ‏“تي‎ vir?) ‏جيل‎ ‎an 2 ‏يض‎ moe 0 ty UF 5
    ا ‎aay‏ حب ا حت ا لخ 8 ‎BO‏ د ار ان نا & ابيا« «* 9 + ب حير ‎Ed Ea‏ ‎k Ay ky ow‏ 4 4 4 د ‎Cd‏ 8 3 ,3 3 اا 1 ,3 ‎pa TY‏ ‎Hi ETRAR Cl‏ ءا ال ا اما ل ‎>R eaten RE Ra‏ 3 : 7 ‎Eh‏ ال ا ا ‎Foe‏ ‏اي 2 8 ‎gee‏ ‏اا ال ا اي ‎Te‏ مرا ا سج جا ‎ed ho TN‏ ‎Saag TS‏ : ع 5 ‎SRE IY‏ ا ا ,8“ اا ‎FE HERS‏ ‎Pa Sp‏ :1 رق .»م ‎IY HE 5 #2‏ ‎SHR Sie %‏ يي : ‎RRR Eo are‏ ‎SR Ti A .‏ ‎a 0‏ : ا 8 ‎Aaa‏ ‎By‏ حلا ا 5 ‎ARR.
    Wr, ow‏ ‎Be, \ &, i‏ سحب سمي ‎cone Se ay‏ نسي 1 ‎oo an Sd‏ ‎x Say ;‏ ا ل ¥ ف ال 00 ‎“SHES‏ ‎PE *‏ ا 7 ‎ET RNR.‏ ‎RT 888 Re, >‏ ال باك وب نكيل جيل ‎A‏ ادكية احج اديت ب ا ا ا ف اا ‎TR‏ ا الب ا 8 = 188 88 5 شت ‎RR‏ اما الا ‎aay 1‏ ‎TR‏ اسان الل ‎RRR So =x oo‏ ال امسج ‎SN Rh By‏ ‎mE ba‏ : ا يع . } ايلا ‎peed‏ الت ا ‎AS‏ 5 ‎on ee, =) Sa‏ ره ‎fi RETR‏ ‎Ao‏ وضع ل . ‎oy ow ores.‏ ‎wove}‏ درج ‎(Fre‏ { ‎xian‏ ال ‎Load Ege‏ ابا ‎BF‏ يخرضح ‎FEE LTE ES‏
    ‏ب اه الا‎ ET a YN ‏با‎ ‎a ow 1 * a ; “FW 13133 . k $n ISR qm am i 3 3 3 = EEL : 2 or ork JERSE ey TY ‏ل‎ 7 Sy BA TA NE oa . a go ‏ب‎ ‏ا ال(‎ 4 Fy RNR pO Ke : ‏ب ا‎ 0 on 27 So a Bn EN 8, De he wh ‏كة ال لي‎ ‏ا‎ a a SERENE We Bn Bae Wy Fe PL ‏الل ا‎ Re Ry 4 ‏الب‎ | ve ‏علا‎ :
    i. ‏قا للا اص‎ ‏ال‎ Wy his AR NE fx i Th wl a ٠ Ve CANN “hats * a . ‏خم‎ ‎+ ‏ا أ اس‎ x j ‏وا‎ Re | ‏ل‎ ‏اليب‎ Hy ‏الخال اب‎ Ta 8 ‏ا عي م تساي‎ 5 ‏ا ا ل‎ ‏ا‎ ‏ب ووو حت‎ 8 : Eo RRR * Se ١ ‏بط‎ ‎oo 5 “5 Freed Eng ’ dy a ‏اين‎ TRE Fe ‏تج‎ A ‏مب‎ ‏ل 1 ا الت‎ 3 oS 3 i bin we ) {Frere voi? Com) Te Ty . tN To a ew ‏ب ل إل‎ Fr TY YYD
    د لح 88 0 0 0 ل 3 »؟ > ‎oF‏ © = ع 5 * ‎Ba ie 8‏ ‎qe‏ .3 ا ‎COTES CEE‏ سس ‎qm my‏ ا 4 ‎F‏ لا الع ا ا ل لا اك اا ‎TTY TY Oe RE‏ ‎Se 2‏ ةالوو جد وو > ا ا ا ا ‎Ea‏ ا لو قو ا مركي ال ‎nN‏ ‏ل اق ا ‎So‏ ا :5 الل ‎ei‏ ‏ا اا ب مر اللا لل ‎Se‏ 8 لس ل سس سو سس سس
    ‎Fy. Ee‏ : ٍ ب بس مس ‎SPR‏ ‏و ‎Ay A‏ ‎Com‏ اله ال ال ‎REsaas Ta ; Es, ” &‏ ‎BE 2 mE 3‏ امسق 1 1 ‎asa‏ ‏ا 7 ‎fs‏ لمن ‎By‏ ا ا ا ‎١‏ ا ‎a‏ سس سيق . سل اي د © ‎ENTER.‏ ‎Ra 3 Sa, x by‏ م ‎aN Note, 5 a‏ صب ا ‎TA‏ اح ا سس
    ‎a.‏ احاح ‎NNN‏ ‏8 ب 0 اي_إ_إ_إ_ ا
    ‎ ... << “a ? LN‏ : ب ‎SE‏ ‎Nae hel‏ ل ال ‎a‏ ‎EER Ry‏ ‎SRR SN SE ey‏ ف : 0 اس سد ا ‎oR‏ ام ‎Ten‏ ا الل ‎$y‏ £2 ا ‎RY‏ ‎Ry‏ ا ‎Re‏ ‎Pk DCI AN 3‏ الاج اما ‎i Sh yy‏ ‎SS Wh 3‏ ‎ra 7 a 3 : We Re‏ واج جح جح حت جح جوع ومح جم ع ‎Th 0‏ م اح ‎x‏ #3 بخ ل الى : ا ‎wn 32) Ne‏ 2 : ا الخ جلا ‎vy oF wep]‏ رج سد ‎{Fre‏ { لديا ا ساق اذ ا ‎HOE YYD‏ يرضح
    2 ne : Fa 0 ‏اكير‎ ‎a #7 ‏حر«‎ ‏اا 0 لتحي‎ * ‏الب 8 ال ا‎ - ft 7 ‏ل‎ ‎qT ‏الك‎ oY 3d J > ama TY ‏م الل‎ 27 8 SEE ‏جا‎ ‏ا ل‎ CoE REL Svan 7 ‏ا اج‎ ‏امي ل‎ Br A Rr 2 a : dy Waa ‏ية‎ 5 mE Ey eRe. at ‏ا‎ ‎“Rae RRR Tr - Ty ‏ا ا‎ GW, op ENE a i 8 ‏ا ل‎ Tad Pg Ag JERSE RIAN SIE. A 0 he : = .
    SR. re 2 ‏ا‎ « BEER. ‏ا‎ a R 1 ‏اللي‎ Bw ‏ال ا‎ RN Jaman ; Fel . 0 dy 1 5. RE ‏ب‎ Ph oll REAR. Sa, Ei TE . ‏ا السو‎ as ‏ا‎ wy . BR EE RS DR BRIG = 2 ‏ا‎ 7 Ry ‏ا‎ [ee Ty 3 ‏اا‎ -- 5, Ck, 0 ‏ير‎ ‎NNER ‏مف م7‎ sme ١ 0 ‏ا‎ 9% ’ Ha, 1 ‏حي‎ SEE ‏ا ا‎ ‏ا اا ا‎ ‏ل اللا أشي‎ 8 ‏نا امار ا ا‎ 23 W 7 ‏ما ل‎ Thy EER ‏الس ا‎ © ‏ل‎ Bae de + RRR RS ONANEO SIAR BRS . pe SERRE To ) uy a “HL A A CR A ARR RRR Pe wo = - AAS hd ‏كا‎ 0 Per ‏ل تح‎ 3 1 ‏اق الا‎ 1 eas 3 Co Lm ge : a ‏اا اه‎ ‏ا — ا رود لوس ولع‎ ‏نج تنو مج يح‎ vr) ‏و‎
    ‏.ال ا‎ ian 300 ‏به‎ a ‏لا لين شار اشن شنم‎ : ‏قار ذأ خرص‎
    ‎IR J RR 2‏ ‎ORE pos an‏ ‎SE SE‏ بن ل 8 ‎E‏ ‏¥ ا ¥ 1 “هر . 25# ‎oa‏ ‎TR‏ جل ‎a‏ ‎vo gq‏ ان ‎ORE RR‏ ‎TR‏ الي اال 4 ال ‎a 3, 3 3 a‏ التي ‎dy‏ أو ‎To‏ ‏ا الم الحم ‎TN‏ ‏م ا ا 77 3 ‎SENN The‏ + ~ ‎Lah‏ ‏ال ‎cecilia‏ ‎SEEN A‏ 8 رق ‎Cn‏ ‏حا اال ا ال ‎We CE‏ اا لت ل ا ال ا اننا ال ا الا ‎a Ce nl‏ ا ‎Rad Fre RR‏ ‎iia Bee Tey 5‏ ا 0 ا ال © ا #0 ووو ييه ا ل 8 ‎x Fe 7 0‏ اوت ‎RN‏ = ‎RSENS an TL‏ 3 اك الاق ‎Pg‏ ا ل ‎RL + © .‏ ال ‎ER A‏ ‎a‏ ا ‎Li‏ ااا لالس ‎SEERA, Re, ) “8‏ & ا ا ‎AE‏ ف ا ‎aaa 58. ey 8‏ ال ! الاك ااا الى ‎Sn‏ 2 احا ليع تا اا ا ‎Le Bi‏ ا 7 ل 1 ‎To TR Sy,‏ ا ‎ET‏
    ‏ل .ات ا ‎SN TR,‏ اا ااي ‎Fe‏ > 7 ال ‎ted TR po‏ و ‎We‏ الى 7 اللا اسح ا يمي ‎Ce wh wR ِ‏ ا : اش 00 الا > ل سخ 7 ا ا 5 : ‎go‏ ‏ار ا —_ : ‎Ee EY pr “= .‏ ا ل ا روا تي 2 ‎aE Re we NE yo Tx,‏ = ‎Ry‏ لظ )2 ‎hn am‏ 3 ; 3 5 حا لتو ‎٠‏ 1[ 0 ا ‎wD Fv)‏ ود ‎Chr‏ {
    د . يحم ' ‎na‏ + ولي ‎gente UN WYD‏
    8 0 ou a © 3 - a ‏ب‎ x 3 ER ‏بن‎ a ‏و4‎ Ee : 3 Fe h3 37 ‏اال‎ UY 3 } oo ‏اليد ال‎ Re ER TAR sum 3 ‏ا‎ 5 Eis), Te ‏ل‎ ‎CREE RRR EY ‏اللي‎ By ‏م ا الا‎ ‏ل ل بيع‎ BR a ‏ا الا‎ ٍ ‏ا ل‎ Pe RRR wy 5 dma ganna ‏ارا‎ ‎TE ha We RNR wy . By . FE TEV ENE ‏ال‎ 5 : RE RE Re EEN - PN Seer rer nae TE da © 2 ow EEE HRN SE S % * : Re Sy, ‏الأ‎ - CT ‏ليلاي‎ TR ‏ميم‎ ‏ال الا ا‎ ‏”ا‎ Re Sy, J UIA ‏ب‎ EY 03 sa ‏اللا‎ Thy SARTRE ho TE TUNE ‏يا‎ aR Basen 5 ‏تسيب‎ Te be, CAREER “os ‏ل‎
    ‏.يي ...ب‎ 4 Ty ‏ا ارت الس سيق“‎ ‏أ‎ Ta, oR 38 ‏و‎ aid Bo CRE ‏للا‎ tw, Thy ‏ا‎ at 5 “8 HENNE Wk TE oH SO oo GRY By ‏ل‎ ‎1 6 1 8 8 RN a Be pe Sy AL eee —— Bs, > 8 | ‏ايلا‎ on we pit “Fy Co ‏ا‎ ‎{rors roma ‏الس‎ $C end) Tw 0 { (Fre ‏“تب دومج‎ vB) 3 ‏يرصح‎ UW ‏توي‎ ‏ب ل‎ 5 .
    Te iin - ‏ل‎ ‎EE eee 3 Ro NR ER ‏علي جين الي لس الا‎ 5 8 1 8 EN Rl Pr me te] en : ‏ال يد‎ EEE SE RN a vn Goal Se ‏ماج‎ ow ‏ا‎ A I 33 ‏إن ال الس‎ ‏ا‎ ¥ + Saas : Ex Sy oy J . ‏د ل‎ Ay : Th EN A Le 3, 3 3 Ea 4 LY : LY ol ‏ال د م أو‎ by 3, Te SE RN EERE BRS ‏ا‎ CE RE ‏ا اا ا‎ HOES ERE He ¥ <n, . 2 ¥ = eS Wn . ‏ا اخ ا‎ Go Phe TR By i ‏رم ا جو ل‎ 3 Be oN ‏امسو‎ ON ENR Sy ih N ar ‏م‎ CRN TR ‏ل‎ ‎= ‏ا سلس مستا‎ 8 Saas fp Ee mm. 7 fy Hy Ee Red SE maa Th Tw TH NR Res LE TR RRR EE ‏ال‎ ٌ Fi ‏جا‎ ‏مودت‎ Se i EERE Fes CR ‏ا ال‎ 5 0 ST ‏ا نل‎ ‏ع يي تاس‎ 4 TREES Se “e, 3 . 2 En " ESE SE AR SER dpe ‏ال سسا‎ Ty 5, SE ‏ا‎ Ce NE : ARR ee ‏ا‎ Sg ] : & Ra a Ry % : ‏ا‎ ‏ال‎ Ye ‏اب‎ ‏سينا ا اق اي‎ ‏ا ل‎ Te ee ‏ل لي‎ 5 7 ad SNE 2 siting XE Fl ٍ ‏ا ا‎ : By aa hi fas 8 By pe ‏مج ما ا اا‎ : a J ; Ae. : dy ‏لق‎ 3 © ‏ا ل‎ Te STERNER © Sy 28 Eh Bg da Sol Tn rs ‏رج الو اللا‎ ‏اج ا‎ Te ‏لم‎ ‎0: : ‏ل .. مش‎ TN RE ‏ا ا ا‎ ‏عن مج ا‎ we ‏دا ا اشوا‎ Ry, = ‏و‎ ‏ا‎ Re Le Egy ‏ا‎ : ul ‏ا‎ 8 {Chee ‏اد يود‎ 0 ew) 4 Ga ae AT rey ‏مخ‎ WYO
    : a iE a * 8 4 why ry 131 AR REY 3 * = Sra Tro RENE 1 4, 3 HENNE ERR Sy TRY sodas SN ‏خا الى لساج ا ا‎ : ‏الاسم‎ + TX ERNE TG, hy UH awe ® 5 3 : 58 ‏ل‎ : | 5 TR " EN om Ye, ‏اذ‎ ‎0 ) cid Na wy Co aN EE Ba RR a “a By & #7 JA ‏ان‎ 8 ; ‏اتاو ل‎ Hy 2 0 - * ‏و‎ ‏ا‎ BY A RAR ‏ا‎ x Sx x. foo er 8 ARN aig ‏ب‎ on lf ‏ا اده مس‎ Be, By, . . RARER Nu TE CEE ‏جين‎ Th ¢ A} ‏ال‎ We 2 0 i Na ‏بي‎ 1 &. 1 a ERENT ‏ا‎ 2, ‏الس‎ Tn, Ry ‏ت‎ 1 ‏و ل ليج‎ 4 Sane, hw Hes a Ts Rt 3 7 ig wa, we, ‏أ‎ ‎~~ “5 Say, he 8 ‏ا الع‎ YON wy Ee hes! FS PR: Ld © Yo ‏جين‎ nN = Be, "ER Ty LR go ‏ا‎ ‎on RR ‏جه يد جه اللبمتتييسم‎ * Fa 0 CE Ne TE Ey ‏به‎ an a : Rar] > 0 an ] ‏بن 0 (روا كع ضري وار يد‎ STEER HER ERT ER ت٠‎ a Ed : parte IF YYO
    ‏الا‎ ‏ل‎ ‎oO, ‎BEER oa ‏اا با‎ Gane, ‏ا ا ل ا‎ ‏يارت ارت للا‎ ‏سس‎ A ‏با‎ abo CEE AS By ‏ل‎ ae Tel Ee SERRE A Be RT SOR EE ‏ا ا‎ ‏ا‎ RN SRR i Ee RR 2 : Ah Rei Be . ‏للا‎ amr ee ‏المت‎ te Se RRR ‏ا‎ Ne Ne ‏لل‎ ‎a Tm nap ‏ب فاك 00 تيبسيييسة(ؤ‎ © - Fee SRNR ‏ال‎ al ‏د و ل‎ Lal 1 ‏ل‎ ey ‏رج‎ ‎TE ‏ا‎ by ١ ‏ا ل اا‎ Aa RC SS grad Se 7 ‏ير ليق‎ ‏بي التاق ا‎ 7 ‏الب اتا السو‎ : | RE ns Se ‏الاج‎ 1 : & fe Bie, & ‏اووس‎ Dr ‏ا‎ ‏ل ا 0 ا‎ sig oo. bE ‏الي‎ OE RSE fo ER CS ‏حي‎ To TERI 5 ‏ا ل لوي‎ 8. Eek Bit : eh a aD So Ch ‏ل مق‎ “65 Sa | fo 3, of Sh ¢ ‏بخ‎ ‎0 Sy Ry Soo bs £8 ‏انا - ا‎ Be Tah AEE BER A ‏ا‎ BOER RC TI ‏اق و‎ Renn. Wn gt ‏ارا‎ 3 Ley 5 oe < Eo Be a A ad aSeiMg
    EE. el Es Be ey gianna sponse ‏الا رك ا‎ Sor d ‏الس ا‎ a, TRAE > Ce we ‏اي‎ e = ‏ا يل‎ ‏ا اخ شف ا‎ { ‏لاجد موجه وي‎ oF vp) 425 gery {FF ‏فايرا‎
    AAA ‏ااا ا‎ ‏وت حي ست سي سم سوم‎ ‏عي اا الجا‎ RT ‏صا يأ لوا‎ ee Pal ‏لهاك‎ ‏اخ ال و ل ا + لل‎ ges EES ‏ا‎ Ls ‏ا ا ل م ا اش ل من الى مداخ شا الي‎ ‏إ ا ا‎ - 1 Foo ‏الا ب ا اا‎ ‏ال‎ TE Pod ‏ااا ا ا‎ ‏م0‎ +k Shown SNH i 10 0 ‏ات ل‎ ‏الأ‎ cad Bb Bed bad Rr TOR IRR ‏ا‎ voi FREY 3 8 3 a i i Fo 3 Ba 1 EIR wy Lt 4 Fy oe $Y med ad : i Yi 4 a § EG i Ea en EEN CE SE TEE ECE : 5 | 2 Ta Fan 8 So a i 5 Yo Foy SE ‏ا 1 ا‎ es "0 8 ‏ا ا ل ا‎ SO a Bo Ere oR ‏الا‎ AL UAE ‏حك‎ ‎Ny Ld : ‏ل‎ ‎4 Pod i) ‏ا ل‎ SER RON dd Uda Rg poh ial on ae ae EE EE RE ‏اا ااي ا‎ : 3 BAe RR RESET EER Sey ‏ال‎ ‎NNR AY LA SUSE RE a ERE al EE Lo alate ala Ri ging NG TE \ SRY Peis SER Va ‏الا‎ RE REAR EE RR ae eva SEE Somat ‏الما‎ Lb ‏و‎ ‎: oo 3 0 ‏الح لش‎ nr Ne 5 CEE NEE ven 2 PE REX] B § 5 8 8
    8 . ‏يا‎ Be ab fies ‏ل ُ اا ا لذ‎ ‏اجاج اتات تاق ب‎ 3 dan CERO ‏ليد‎ EE 0 ‏م ااا 8 الم‎ 8 ‏ا‎ 8 31 Ne PR ‏ما أ ال اي‎ § Eo ‏ال‎ ‎BREE Ee ‏ا‎ 8 i pres ofA Toa a 8 3 eR 1 3 x LNG % ‏ب \ 3 } ل‎ oF ny AE RR ‏الاج ا‎ vB oR TERE os ‏ات نستي‎ didigdaldigis Cw cs FRY ‏لي‎ ‎FE + RRR i ROSS Te o 002 FEROS Na 0 ‏ا ل ل‎ Tw Ra TR, J 3 i RAR © Coole ‏ولد‎ SN SNE IS Ne it a Yi = TEEN Nh i «> RE Ws He SI a ve 2 TE, Sa % 3 ‏ا‎ Wy, Ta TY ‏ا © لخت جا حمسا ص و‎ 5 TR 5 ey, oo By A, Seen Ws Be Asay Se Ne Rae ‏ممة‎ as > ‏الل > > خخ خخخ خخخ‎ Be 5 ‏ا‎ ed LN ) 5 y ea Be ‏ما‎ ‎RR tt ry [ye Ses ‏ا‎ Se Me 5 ese Ne : SR ‏ل‎ : FR 7 ‏و‎ ‎SNe ETT + ENR ‏لين 2 الخ‎ ‏ل‎ 8 2 ‏ا‎ Ed + en 5 SE ‏حي‎ ‏ا م ل‎ i mba [| TE EERE hh 5 ‏اا اج‎ FR ame inn TE TE - AN 3 Be ads ‏اا‎ = aE 1 ‏حجن 5 ا‎ ‏ا ا‎ 5 Ma ‏بي اين‎ ‏امن ساحن‎ Th YR Ce A . Soa ‏ود ب‎ ‏ان ااا أ ا‎ . ‏ا ا‎ He ‏ا‎ A ] 58 ‏ا‎ ‎0 SX TR yc Ulan NN No a : aaa Na . t Hy #8 ‏ل ا‎ NEA ب٠ ‏ال‎ ‏بك الو ااا‎ ‏ال اللا‎ YR TN ‏ا‎ Fe ‏سخ‎ ‎8 ‏ل‎ oA rd Sy 8 a 5 = , RR ‏سنت ب سر‎ ER “i a ‏هد عر‎ UE EER = 3 fe) LR 8 1 ‏اليل‎ iS RR ‏ل‎ 3 Sa, dma ’ ‏ار }3 ل الوم ا ا‎ { Thre ‏لاود بد جد‎ oF ‏ارم‎ ‏وا 7 يضرو‎
    ل ا ا . حا رو اا ااا ‎Pao Fo Foard TEETH‏ اه ‎Side Too tod‏ ‎oe ET‏ 5 حد ا ‎RAO RN pat: a BA‏ ‎HiT iE is fe iby azine :‏ ‎BT de tha Ha Food on bd BE‏ ‎SERA CAREERS probe oie 3‏ ‎F de ¢ WEE Fab abet 2 §‏ : ‎Wed bus Pui na Gd ey‏ ‎$e ih SE Sat : i 3 3‏ ‎SEE sd = i §‏ 1 اح ‎SIRE‏ ‎Eh oan g i 3 8‏ | ايج 8 ‎wow Ln SEN i 3 3‏ انب ‎wd Ed i 10‏ ‎io‏ اي ‎Sd i‏ ‎a | | Lo‏ ‎١ ١ be ar foo‏ \ اااي ‎Co EE LE‏ خا ‎ae‏ ا ا ‎ba‏ 1 ا ا ا 8 الل الا اله ل ا 15 ا & ‎gd a‏ ا ا ااا ‎Sell‏ ا ااا ‎mbes Pde ed‏ ا ‎Fal wm‏ د جد اا ‎A‏ ا ل ا ‎SE‏ اش ال ادا ايا الواج ‎Ale BIRR‏ ات ا ا اخ ا اح ل ل ‎a‏ ال سا : ‎LIER NE Loy Coded Fab ied‏ ‎Poem BORE wer ELEY { Aa PETAR 4‏ ‎FR oa WER BN‏ ال ‎Fd ES £23 BE‏ ‎Lehn pa aha md‏ ا الا ‎Se Ro Fa WHEL OES FER‏ 037 ل ‎lb‏ ا ‎sud a‏ ‎Foe PRES A §‏ الل ‎Nid 2 Poly we‏ ‎RN da a Sond a pan 3 3 8‏ ا ل ا ااال ا ‎Tat‏ تالالا اتا ا تتا لكان المت ‎Po J een Se BE‏ 2 ‎x SRE‏ ‎fo n> Ree Be‏ 0 ل ا ‎Bis‏ : ألا 8 ‎aw » RT SE‏ ‎Rp Ee SRR ES‏ ‎RX - sea Th‏ ‎RE‏ = + الام ا حا ‎be WS‏ : ‎a RE Ee‏ ال ‎CRY‏ ‏ا ‎Coda TR‏ به ال ‎ay‏ ‎he Ow‏ ا اا 4 نا الخ ا لوو امس . 1 ‎THERESE a A 8‏ 3 3 7 ا : 2 اما ‎i SERRE a A :‏ ‎Ty‏ اللا ا ال ‎TEI‏ ‏0 از لوو ‎EH ENE TR 3 BS‏ حي ا ‎OR‏ المت اليك ال ا ‎SEO | Hy fe‏ ا
  2. 2 .ب ‎ON ONE OR Oa) Wy‏ ‎SHORT hE ws 80 .‏ ‎ES 84‏ ا ا ل ‎i‏ ل ا م ا : جا ‎oie ETE‏ ني 1 ‎a Ca gi‏ السب ‎Ry‏ ال ‎Bs ’‏ ا لاإ ‎ma‏ ‎ei Tha 0 9‏ ‎ee 8‏ ليل ‎i Sass 5 & Sik gor‏ ‎aa Fe Ry =<‏ ا ‎Se‏ يت اس : جين ب ‎oy a‏ ‎Ry‏ 1 سي يخ % ‎ca‏ ‏ري ا ل م ل ني اليا ااا ٍ ب ‎Rs Ga‏ = ا حي و اب إل 8 ‎es Se XR >‏ 3 ني الل ان 1 با ‎ee‏ ‎Cheon OW 8‏ ب ‎Ng‏ اللاي ‎Ea NE‏ المت ا ‎TE MH‏ ٍ ب 3 ‎Sl‏ % ب ا ا ‎Rc 8 a‏ ‎ol VE‏ ‎wg AY Fs‏ . ‎Ha SE‏ ا لب * ‎oH‏ . 5 ‎ee Ela He ETS‏ ِ ‎HR Ww‏ : ‎CRTs ero ay Et i 7‏ { ‎nny]‏ الح اا ‎EP‏ 3 : ب ال يي . ‎TF wer} Si‏ + 325 3852 7 ا ‎sate TE‏ موصي 7 رمج
    EE ‏بي تت بي بت ا‎ ‏الم‎ EEE > ‏الت‎ 1 oki I 3 Sy 3 ‏ا ا ا ا ا : 8 بع‎ a a ER ER Li Cee J bowed Bi 3 Soo ‏حا‎ 1 Ee bs fe foe ‏ااي‎ ‏ال‎ J = ‏لج ل‎ Far FE Leda qd {=i = ‏لالد‎ mw Pet LT Fe ‏اس ان‎ ae ow] ‏وك‎ boon Le k = 1 Tall 8 ‏ال حار اس‎ ET el ow 3 ‏اا‎ TE ‏ل ا‎ a =] © ‏ل‎ Ed ‏نل‎ 1 497 : ; : : RS ; : 3 ¥ 3 ‏ا 5-0 ل‎ ٍ ‏ا‎ © © 00 oe Lo vod R pins i i ; : J i Foy ge 3 4 ; ‏؟]‎ 1 J “wy : ; : 4 ١# 3 ‏وا‎ © ‏ا 7 فين‎ : wa 8 ; ‏لا ا 0 لي ا‎ 23 3 8 ‏ار‎ [ PED ‏ل مو اس‎ 4 q ‏حص 30 و‎ : ‏ا‎ ap - 0b wy ‏ابيع حي م‎ 1 2d ‏ا‎ 3 k 3 CERT ‏ا + مع‎ “es ‏ب‎ x ase A ee Re : [RE = Fok] ‏الع 1 ال-0‎ > CEE ERY Ved 8 3 BATE HE Set ow od ‏ا‎ ‎i I ‏ال‎ LE ‏ا‎ EERE: re ed bi 0" ‏اس‎ = g Bais RR Co as Pod Sie | SE ud ‏ا‎ Cod ٠ 8 ‏ا‎ fe: RE : = 8 J Si J E20 po 3 4 Nes ‏ا ا‎ SE a Lo ig a ‏ا از ا مما ال ا‎ § 4 Re) RRR NE SE Rn ; i Sih : . 0 5 4 1 AEE i HE 1 : 1 i 5 4 ‏متت‎ § 5 ‏ا ا ا ب‎ Fo TEE FE 3 4 3 RONEN EE Ros i os Pod 3 0 8 NN he HL SE Bi oud RR — i ‏ا ا اط اللا‎ Cg Se: FS i Cd Pad STOW 32) pa EER RE ir bod BS a g 2 Efe fi os 3 = 0 : Ee Sn 1 ET i Pro hd 0 ae T ad ca . ood ‏سي‎ ‏ا ا‎ Ba Ben Cn es foe | I RONEN 3 os aR : folie a boos 4 So 7 0 EE 8 oR . era 8 Hore 0 : 4 Fn | ‏ضع ال‎ AD ‏ال‎ 8 0 = A Ba Nd Ta po hr Cad ‏م‎ be ‏شن‎ Ld 3 sad ‏ال ع ال الكل‎ 0 ‏ا ل‎ Ly gi FA AR pag 0% nd ENRON oo ‏ا‎ A EE A oF or] ‏ال‎ ‏ال د‎ a A Load ed em fe] end ama LL L 8 | 2 a EE & 3 8 ‏ال‎ 2 Be RD NY CF paar SARE Sen Sic ‏قات‎ Po i NK 8 5 pT SEE 5 ‏دا ال 4 دا ص ا‎ 4 : 0 0 ّ 2 ‏ا شل ا‎ 5 FIL ed has] ead NRA 2 ‏ل 5 ا‎ 1 COREY ‏ا له‎ i ma BR 3 aN prey TE ons fi ee, Eo Sad dab a = x Las i Faas 2 : aN I wn Er Lad ‏اا‎ wed] ek ‏حا‎ = i ve i ‏م‎ bbs ‏جام ا‎ eld ‏ا الس‎ WL Fas 1 Lk ‏الا اها‎ wd ‏ل لك ا‎ Fd ‏ال‎ REE BNE ‏الجن احا ال اداه‎ 0 8 ‏ها الحا م‎ BC El ‏ا ل‎ ٍ ‏ااا ا‎ FALE se] ‏الجن‎ fr Cog LE EE Fa Pe © LL ‏اد مايا2 ااي‎ ny BER > Se ggg =] ‏كاج‎ ia 1c ‏لاي دا اج ياتا‎ Rag” Sat 1 REL ef sa dk a {a bag] Gd ep CT ‏سه‎ RE pa sd ‏لقعا ات‎ els 3 0 ِ aN - ‏اق‎ FAA EAR ‏دي الات‎
    :ٍ ‏يي سل الا ا ا‎ gn ‏جا ا‎ 6 ‏ا‎ "1:0 a 1 Re 3 Niu] ‏خاي‎ o ‏ا‎ Fe ‏لا حر‎ | a fer | we { : Qe be ead Ree de fa Bae KF Hs 3 We 0 | fo fa FORE ‏ال‎ RE ‏ل ها لاع اه‎ wg 5 ‏الاي اا‎ > 3 ‏ا اا ا اح‎ ed TR ; 00 ‏ا حل‎ 5 Fo SAE 0 : Sad 5 of ‏ل حت‎ { Ric ! Xia 5 ‏الات لايع ا‎ RE £ ‏الا لا ال لت‎ BL re Ri sal pl be Si Fins Poke] a Nang PRE 1 x ‏ا‎ So 0 ‏ا‎ Fg EE ss i 0 ‏ال‎ NE LE 1 pa Toe 2D ‏الا‎ IA 8 0 5 ag j = 1 8 3 oN p ‏ا‎ rn] ‏ا ال ا‎ + SN hoa ‏اا‎ Ea af 8 i BOAR i ae Wal SEPT ‏و ا‎ 4 ‏اجاج باج اجا‎ ‏ل ا د ال ل ال‎ AE a EN ‏ل الا الت اا را‎ CRON aa ‏لج أن كاد الخد لما‎ anes dos ‏ا‎ ‏د ا ا ال لكا‎ EER RE ON i] 0 ‏الا‎ EEE ‏ا‎ en ‏وات . الما عا ااا‎ TS ‏ا ا إْ‎ i : : ey 4 ‏ا‎ Fa 3 : LE : ® Sx = a J 3 8 Fe i 3 aE i Ea ‏ل ون‎ oy en i ue Egon EY pT a SR at gin ga RTE a ae ‏الا‎ ash Se Be Se REN ed oa ‏اا جه اجاج ا لج اتج ال‎ i TEFL E 4 ‏ا الج‎ sis ‏ا ما ا‎ RS EST ‏خا‎ La en des 3 So Se x i et As TAINAN INR ‏ا‎ ‎EE a ‏اي‎ ‎ARN ‏ا‎ ‏ال‎ TRE ‏ما ا‎ ‏ا ل‎ : i" SEE ج‎ ] 2 ABE ‏ا‎ Ti BE 8 8 1 1 ‏ادح حت‎ : 8 8 ٍ 8 ‏ا‎ Fa Se a Fou San ‏ل‎ ‎ans + RAR RR HE dg 47 ‏م‎ SR ‏ا اي‎ Ry 3 ‏ا ال‎ We +5 ‏ا‎ Sgro ‏ل‎ LR Ta ‏اليك المي لج‎ 8 17% ‏لين‎ ww ns ١ 0 ‏يه‎ Re TREE a SER ‏ا لا ا ا أي‎ + ic) } ‏ا‎ OR, | i “x Cog oe ey ATONE. hn fx A 7 . 1: i 8 SEE Ea TY aa 5, “2, acai ‏روط غلا‎ ‏ا‎ a TRE LE RE Ra ENS RR $5 iY 5 REE T EL bl a 4 ‏ال ا‎ RES 5 “2 8 ‏ا ل“ ا‎ ‏ا ا ا‎ 0 SNS. TIN ‏الحو ا‎ ‏ا الي ا يل‎ ُْ 8 ‏ل ل ال ا‎ : i 3 ‏الح‎ ‎ee - ‏ال‎ - Moe ‏الح‎ TH ‏ود‎ CEE ‏ج اج‎ Be a A Adis ‏ل اللا‎ Faas of EE ‏ل‎ A BS TERI TERR - ‏ا ذأ‎ ‏ا‎ NL ‏ا‎ ‎CR IR Ros ‏ل اتا‎ He, DL Ty Wm NNN Te A Fae Ta Ro RRR A 0 Hy nd en fer RE oi Ee 68 8 Vs #3 SNR Ps 0 ‏ا ا‎ ‏دل الا ااي‎ 8 RRR AER > Ti ML oe ‏ع ل‎ ‏مر الحا‎ SE ATE LE hadi TE : ae “os Shs EL © ‏ال‎ 8 ‏ل لت جل‎ AS A aS Rae 5 ‏ا‎ ‏جيجه تاج‎ say 3 5 RE 5 ‏ا ا ميا ادا »م‎ 0 EE ‏ال‎
    ‎... ‏تت ! 1 لس‎ ١ ‏ا‎ ‎{Red verre ‏الى ارود‎ 2 { Cre ‏وج‎ med ‏“ني‎ ee fg Lo ard ‏ورا يا ل‎ pe arty RYE
    ‎oR Sd SBE:‏ 1 مسج لم 1 اد 5 8 حى ‎i we i edo Pare oe Ud ee lied‏ 5 ما ‎Feed‏ نواه ‎se i‏ 103 سا3 > ‎FLEA RE‏ ‎ae 13 04 aa 1 ded‏ اق ‎EEL‏ طلا ‎CE TREE A‏ 3 1ن ‎dT gE‏ 8 ‎Ren gn TORY ERR RT‏ ا ‎EE‏ الا ‎i# Pe SH SE I i‏ م 4 8 ‎na HE i ES‏ ا ‎A‏ 5 0 ‎EAL 7 Hi aq de‏ ‎RIE £5 i cd RN‏ ااا ا ‎Sai i I‏ ‎I Si‏ ا 1 ا ال ا ‎Red nd Hn Sn |‏ ‎SEG 3 JRA‏ ل 0 ل 3 ‎Rd 3‏ ا لاا ا ‎SUN ad‏ ‎HE BEY Ey 8 i wl SY Ne‏ 5 ل ‎ON Se 8 oR | = 4. Pa =‏ : 3 ا 8 ¥ ‎Ead‏ ل 8 § 3 ‎k 2 SN‏ ‎sy‏ خم ال اح اكد ب اص اما ‎ONE‏ ‏ا ا ا ‎aba‏ 3 لخ ‎a‏ حا ‎SAR Sot RE‏ د لات ا ‎SNE A FSS FR ay Ras 1 LEE‏
    ‎i . odo <5‏ م 5 . 2 ‎es a;‏ 7 ا الا ادا اك ‎SU‏ ‎a mye‏ لخ 20 لاض ازاجم ‎Rb‏ لاوا الا ‎oy oy wi‏ ا ا ا 8 ل 5 ‎Fie‏ 8 ‎IER 2 psy a‏ ل ‎is‏ } ‎A Tas Ee da‏ لامجل ححا ‎CTRL era en‏ ا اا اتا الا ‎Eola‏ ‎Rood wef UR FEE aR RETR‏ ا ل ‎Satan‏ 4 & ‎el‏ ال 1 ‎AL RTA reg FUNNY NRE ge‏ . ةقانا كلت لاا ا ال ‎ew‏ ال ال ‎Le ts‏ ‎id RRS‏ ‎EE Be‏ ‎SEER NM‏ ‎a RRL | iL TNR‏ 2 ا ا ‎oy JE‏ ‎os‏ ا ‎a‏ § 5 8 ا 2 ‎i [oN‏ ا ‎BH‏ 3 § ‎gr = SE‏ + من ‎SH‏ 3% 8 . ا ا ا أي لني الي ا ا ا 0 ‎oA + + TEE xd why wad‏ ‎TA ay TER 7 aig‏ ‎oN shuns we “bi,‏ ‎mm ye TE TR‏ ‎Hg 3 ® CT‏ 7 الف الوق سور وي 3 لي اط حرا ا لا م ا 7 ‎nom‏ ا ‎El Als TR Ty Fy‏ 5 ‎ied 5 0‏ ٍ 0 ‎Largan Ney fas?‏ : ‎eed po Ee‏ ‎SERRE Ea Bu‏ ‎Tx eo‏ م ‎ri ERR ARIE ENA.‏ ‎RSENS A 7%. RR NG‏ ‎RR AR AER, 3. Be 3 A‏ ‎Te‏ ا 5" 2 1 :1 : ‎CARAS CRE TE, . 0‏ ‎REET Sig “he aR‏ ‎A CE To A Ar A ye TT‏ ‎THEE Hie $i:‏ ‎TE, Be] ;‏ ل ‎Ie, Eo 5 oF‏ ‎whe He oR‏ ا ‎a‏ ‎١ 2 ok 2g A =‏ ‎Se 1 Sg‏ ‎Grin tr fo‏ ‎ERE eg fy‏ ‎ia SINE Ho Foy Fal‏ ‎Be ol ET Be, ps 3‏ ‎fe 8 2‏ ‎a 3‏ : 8 لوط ودر ‎BRIER Eo os‏ ‎Essar. Pad‏ ‎Temramiadaa the Er‏ ‎hia Ag‏ | ب را ‎TT he Ty,‏ ‎sd HG Hh‏ اَي الاق ‎BREE. El‏ رس ا ا ب ا م ف ‎TEE Hr Bey‏ : ‎RE TT‏ ‎SERRE 3 aE‏ ‎RR >i‏ ‎rh‏ ‏ف ا 0 لف7555 و حي 3 { ‎on‏ ‏ا ‏ا حك ف لوا ‎SEI‏ ‎FE SR‏ ‎EER he ge‏ ‎“en En‏ ل“ ‎RAN RA Ag RNA RAR EH‏ ‎We ta‏ به لج ‎ashi‏ ” : 3 اج 5 ‎woe ho‏ ِب * ‎A in‏ ا 2 لمن ضرح 0 ‎Tome‏ ‎ho ot - al 2.0 yield‏ ‎ony oF werd %‏ يوب ريه ‎[Fes‏ ‏الو و ‎foe a‏ ‎ore i PYG‏
    ا ا جا ل و ا ل اح ا ا : اي 7 الا :0 ‎fa 3 jas‏ & 1 ‎dp bed anf‏ كا ‎SEE 1 a { woe ped‏ ‎PERUSE LE ba ee Bap eid‏ ا ب ‎wd‏ ل 87 # اد ا احج ‎EW ET Fo ERE‏ ‎hE‏ ا اا لج ال ا ‎Nord ed GTR‏ ‎Ee pert ye 2 LEE TEER‏ ‎ESE‏ مع ‎[ER i RE‏ 0 3 ‎fn 8 8 wi id :‏ : ا ا تا 0 3 ‎i i‏ 0 ‎a A Nr BE i Frid‏ 1 ال : انا ‎EEL, 1 0 Sn‏ ‎Fr AER TE Eh :‏ الل ‎ST Ln Ta Sin CELL :‏ ‎eka po os Fo ad‏ ‎es Las id Beard Reed :‏ : ا ناش ال 1 ,= ‎i‏ } ب ‎ay‏ ’ ‎PETIA ET :‏ لس 83 ‎Nn‏ ‎ag Heth Ra a‏ اا ‎SH‏ 5 3 ‎A Rad EEE hae‏ ‎fo EERE PSE‏ 1 2 ‎AACE WR hal HE‏ ال ا ‎Lo Ng cok‏ ا ‎ie RT We‏ الجر الح ا ‎EY PRET‏ 1 لخ 0 ‎AW LER RE LE RE‏ ا 8 ‎BEE Badia‏ اش جا ات ‎“ENN nh‏ = : ‎WY 0 E Ta‏ لط أ ‎SE NT 1 Re‏ :ا ال ل ا الا 03 ‎Ue of haus‏ ال مد ‎x7 SE‏ > اليه ا از ايت ا اير اللي اجاج يعي ا بو اااي ااا 1 8 ‎oR‏ ‎eld ad‏ ا ‎TREE‏ ا 23 > عر الي ا ‎BERR IRR‏ لات ‎qo SE Sheil‏ ‎BE pe 3 Epes 8 8 5 ER i 1 5 2 :‏ اتج و حي ال لج ‎de‏ ال ‎US EEE RRL‏ 51 ‎dv ER‏ تا ا ا 4 ‎J:‏ . ا ل ا اا ا ا ا اللا ع شد أ اكد مد اا ايا ‎CE‏ الى ‎Toe‏ ‎IRC Be‏ ا حا ا ‎he‏ ا 7 }= ‎I‏ . ‎a‏ وا ال ل اع ا د ل ال ا 1 اج الاح ا ‎Beart‏ ع ‎Cer TaN‏ 2 د انا لاا 0 0 ‎x,‏ & أ ‎a‏ لك ‎Ey ag naa Lad DER‏ لش تاشت اتات ‎eR EAs sas‏ ا ل ال ا ل ‎RA ah‏ ‎EE‏ ب 5 ‎nents pA‏ ‎sel wa‏ 5 ‎CUTE ie‏ ‎BN NT HR,‏ ‎ha‏ اليا ا ا ال الي ‎DOORN LT 4‏ تتم ‎nd, He Tu‏ ‎om hy‏ ا" ‎RR ed le Mg,‏ © ‎A NR es Rd‏ ب" ا 555 ليد م 4 ‎RR Loge‏ ‎Hy,‏ 7 ا ‎TE k‏ بين ‎aes RE Rn‏ ‎Ry‏ لا ‎Clive‏ ‎Ns Wr NE‏ 3 ‎RIA SEA oe TN 2‏ ‎AA SU ARAN + = TE‏ 2 امك الإ ‎RR RON‏ ‎NI EES Td :‏ ا 72 ب 5 ‎Sadler NE‏ ‎a La‏ 5 ا ‎SS :‏ ‎Way Sd . TER, pron‏ ا ‎we‏ ا ‎EN‏ -- ب ‎NS RE‏ ل ‎TL TI 0# LA wh‏ : ‎po‏ مب ‎SEER 3 RB‏ ” ‎SERENA i fy :‏ ‎BOB P=‏ ا الي ب ‎SH ye Sy‏ ا مي ‎Rs:‏ ل ل ْ اسه ‎EEE ne Ty RW‏ ‎١ i cook Ti Be‏ ‎SRE RE 3‏ ‎Hy‏ = ا : ‎ERE a‏ ‎Rt NF ON, CA Xa‏ ل ‎EL‏ اا ‎Ea ae We Ro‏ ا ا ‎RNR Why Bort‏ ‎WRENN Wa Se‏ ‎LE AE‏ ‎a Ey "Ris‏ ‎RN ٠-7 ee +‏ ‎RRR Rs‏ ‎TREN Sa‏ ‎Sh Ha‏ 9 نز ‎Sag 7‏ : ‎ie FX‏ ا ‎se Sy Re‏ ‎Ns Nao TW‏ ‎RCINNNSR RR i. ve‏ + ‎RE eT EA‏ ‎hE‏ اي ‎Naan‏ ‎ey Vy, Ta‏ ‎FR fa Hp SN‏ ‎moo Wo #3‏ ب ل انيع ‎NRE‏ ‎By‏ ااا لالج ‎SRR. Tn Bi‏ ‎Lf rs fa‏ ‎a A, EL‏
    ‎RC. 8 on‏ : ‎dR‏ ‏ال ان ال 3 ‎X 3 a SK a‏ اتح بتو انو ‎RAN‏ لان لمر ‎VR wee Tay‏ ب = يل }2 ‎a ed‏ ‎sd? FC oy)‏ ا ‎Crs‏ { ‎Ce + wmf‏ ‎pee TR WED‏
    TEN ‏جا‎ ‎Sa ep & 39 HE wd TE pica 8 A 1: 2 x i 5 ‏ممت ل‎ 0 8 ‏ا ا‎ 3 E 5 ‏"ع ميسو‎ Laie TTT SON BR hg GA xed EE a ‏ل‎ N13 CE ‏الا‎ Be on Rg 5 ‏حم وي‎ ‏و‎ 0 ay BU" Ey ope Phi semen SR sila dak ‏ا ل اا‎ : ELE VT - ‏ا داج الا ار ال‎ in No PE Foal Sled Ob ‏ا با ا ا‎ OR sod = i Shaw BL 1g dd a 4 ‏ا‎ ian {i= 5 eg #4 Lo pe ‏ا + 0 8 ا ا‎ AT $e HE wad 7 PR ede oy ‏غات‎ : IPE hd Eos JOE Ly RE NE 1 ‏ل‎ 11 8 A pn 1 ‏م‎ 3 Ee Via 1 ay i Cee Le EE ENE 3 Li acca 8 Pg > ‏ا‎ 7 3 BR 3 ww ati ‏ماج بجا‎ Lodi ii Yate HEE ‏ام اتيت‎ SL aw + a 3 en ; “i oo 3 : ; a Bay PT fod a Tobie Nee Ld a “rma Lost La ST Pee rE To ENE {= i A sed ‏او‎ Vea wy 1 d i ‏ل ل‎ LE on ‏ا 7 ا 3 ا‎ ‏ال ل‎ Ed EE vg a. 8 wi EE of RR Wd Geb Ey ‏اهما 080 عن 6 انه‎ Be Seay EE TE a Ty Be ASE “ge Ci oie Yo 8 a i” Ld ‏ل ب"‎ opr i ¥ 3 + ‏ل ا‎ : = wd Si TL so Vay ere Ne dod Shon Sl | 3 RE 35 i aus i Yaw a Th be bof CEE ‏ل‎ ES oo ie fo i or ‏ا +601 أ‎ i PEE ae Fie i “de £ od a Bi ibe Loo foe Rs sed oh SAE ‏ال م‎ oobi) Pei iN iC AR 0 Toda a ‏م‎ fame RE 5 se ia ‏الا‎ PE Soon Ng NN ed ‏ين 8 سم‎ - Be 30057 3 ‏الاي‎ ‎oR 3 iy se EI 3? Fae Ao qi. roid 5 a as Fa l= {ie a iE go ‏ا ضر وامها‎ 8 RN 3 ‏يبا اج‎ Co tee : YL ‏الا‎ ‎2 3 4 ! = : 5 i Ea i 1 ‏ل‎ i i { os a i= 0 od ea BE St ( Bs: + i = 1 Ma | pu a i - i 3 erp { 8 Fa NR Ay + i + aon En ie fe 3 cae Pig 3 i 8 11 18s ard “3 Pris woe SON hE Ca da a - TER 3 on 3 q 0% Eo A rE +1 3 #4 Sy i egy ie { “A AR 6 ‏ا ا الما‎ owed CN) Sop SB 3 SL ‘od oe SE Bs RoE i LE 3 Rs 2 ‏ال‎ HEL oy Etta SEN LT SR a or 233 8 ‏ا بخ‎ 0 8 Ad * 8 o : $F TT Ei ‏ل‎ + =o) Se ‏ا‎ en iy LY = YT “ap Roy GRAS sigs ‏بك‎ i ‏ب ا ا‎ ® ‏81خ‎ : 0 i Cw ES 1 ‏ا 4 0 8 = 0 خا ال‎ i Cg : SUR it fw fo Sg ear UO es : ON ‏ا‎ W Pas cy ‏ا‎ hE Loos Sat \ PRG ie fo a A = 5 ol NE 3 1 Bag HEY 8 ‏ا 07 0 ا 2 اللخ‎ Lod ‏ا مور‎ ‏ا‎ wo i a Fold BY “a So i a 3 i 8 + 188 0 ‏ال‎ ‏ا‎ sad £0 Hoel ‏ا م ا‎ $e 3 Shel ‏يم‎ ‎8 ‏ا‎ 3 Stain wi Ro ‏اد‎ ee 3 an NO) i . SRN +8 i pi = 5 ‏اا‎ i Eg sop s EE AN yo FE ‏ا ا‎ 7 8 Yo 8 : ‏ال ل‎ | ide ‏ا ا‎ Vo Lye ‏اتا لاب‎ I ‏و‎ ‎ANS wl Porn ey EUR ST ST 5 Ei ‏سج ا ا‎ Na Ait Sah oie le Popes Sar i eres SE + wed xy we Vine} Lt REAR HE Ea ‏سيل‎ SE] ‏ا ا اما ا‎ ONG {a= 0 EE ren LS > FI NE La San Pode TAT rd on Poi SER Pot 05 o Cand 2 ‏يا الب ا‎ : ad 1 7 0 ‏اما‎ we ‏ال‎ i i io 5 SE Pod wd al I x Tre Foo 23 a edi i 3 Re Ea 3 « 8 ‏اا‎ 3 a ae 5 ‏ا‎ sid 0 3 de a Va Ne ¥ a SW ‏م الا‎ i bo SI 3 wg i LL yo dog : ANNE 5 0 ‏سسا‎ LR FROM Na a ‏ل‎ an Pais Ne EN Eo 0 A 3 = Er ‏ل ا‎ ‏ا‎ 8 0 AA ne ‏مر‎ y i i 1 ad bE i ‏ا‎ 3 ln $i 8 8 ‏ا‎ ‎20 ak + 2 1 ‏ا‎ 1 jot Ey Nn 1 1 ‏ا 8 ا‎ 8 A Sey i 8 0 Gn i Ta 4 : Lay i Fi 8 ON al ‏البح ا أ‎ Co 3 HEE Vid Vii EN ‏ا‎ edd ES BES Fey View Na Take i nN a ‏ل ا #8 2 ب‎ i Pao So 8 ‏ا[‎ 1 EE i Te 8 a + 3 wid vi 8 ‏ا‎ PLoS dR a a ih 2 SE 1 3 mE SN i FE sah Ir 0 8 A Sg i 8 ‏ل‎ 1 Tad 2 wy np 5 5 5 ‏ل لط‎ i Ad SEY i SF SRE Na SEE iw SM 8 ‏الا ال‎ ‏اا‎ Bi 8a sia DY CE LR TE SE Cate UR gy A 15 We sR “NEA Sal wd oy Fi $503 AR Ned 1 ow HE wil Ne Ay i wy EER a LAN 1 ig si SN HE Be Wag Hoh Gp i TER NE RAE Ld Siow SLE SEELEY Se A NR § oa Ee Fad IR AR ¥ ee GR TR eS i STE fi Na ‏ا ا ا ا 38 ا ا ا منت اللا‎ ‏الجا اا ا ااا الداع 1 ا‎ NLL ‏اق‎ Cat aE Dente ja Cb SRE ALF ‏م‎ 8 TI WE Fy ‏ال ا‎ ‏امات‎ FT aw bog was 3 ‏تش‎ 1S hat SUR bog Eu ‏ا ا‎ = NE A 0 Re ~~ sass b ay = Lis REE SE
    يي وتاج ‎oo 1 ad YE‏ 83 تجا ‎en fa 5 dh UN Ge fee‏ وا ا 0 ‎Ec‏ ‎i en i v pS a : x Tm} ee‏ اد | ‎Lx‏ ‎ers Fier Eee gl 4 ae bai i “4‏ اكت 1 ‎RE LM Er ET‏ ‎aad Rian ad Rapa: IE‏ 0 8 ‎SoS for ie RR 3‏ ‎gr a i SI SRR Ea FEE‏ ‎whedon bd CE Ini‏ ‎Sn En 1 A 5 1‏ ‎pet ped peg be‏ أذ ‎NE od bd Id wal‏ ا ب 0 0 ال 1 ‎Ld CE a bE ee FEY a‏ ا ‎“i 1 NN do CR x & a =‏ اج أ جد الست لد أ ا الا ‎i‏ الما 8 ‎BB‏ ‎ails tld‏ ا ‎REY Ra‏ ‎Saas‏ اج لد ‎vw NNR FREE‏ ‎i SRR‏ ا ا بد ‎RE‏ اعد ا تم ا اخ ‎A B® FR NEE TEE dE‏ 8“ + * 7 ‎she Shel‏ ا ‎lS SR NM‏ ا ل د الذي ا ا ا ل 0 اا ‎AWE an i FREER REE‏ 3 4 1 ا ل ات و ااي ‎pe @ Ee‏ اك ل ‎permed‏ 5 ‎Es 5‏ | ب 2 8 8 ‎Se sed 1 = 8 SE‏ ا 8 م 0 33 ا ‎ER‏ ا ل ا ا : 3 ياواه اال واد ل ‎Hoon‏ ‏ا اد د ا 0 لش < لاد اليد ‎CRIED AEN LE SEN‏ : أ 5 ‎La 12‏ 213 ا لا ا ااي ‎To omni ao AE SR RRR‏ ‎se‏ ‎sad‏ ‎RR RN PIR‏ + ‎Ny‏ ا اا ا ‎CRANES‏ ‎dk‏ : ‎RR SR‏ ‎or NRHN Ye‏ ‎w=,‏ ا ‎NN‏ ‎rR NEN Yi‏ و ’ ‎BR eR ESR MG‏ 4 ا ا ; + ل ا ‎RH‏ : ب 8 ‎oa‏ ‎SENN 5 $i‏ 0# الج ار ‎NERNEY‏ ‎Se‏ اا ل ‎SV wd NE =‏ ‎SUES HEN WW‏ ‎wy‏ ا ‎NERY‏ ‏اج 8 1 لل ‎a‏ ‎Ta, 2S .‏ اا ‎TANNER‏ جو ‎ROR AOA.
    RI Rn Cp‏ ا ‎A oes a‏ ِ اا 5 ‎nd‏ : ‎on‏ ا نا الام ع ‎Se‏ ال ل ‎Ne By‏ ل ‎pre JORDON "6 5 «‏ ‎SERRE Rg Eo 0 Be >‏ 2 ‎WS Ta We‏ ‎Aa MN he gE‏ ا ع ‎I SC‏ ‎a Re -‏ ال ل ا سيا ود د ‎TURNER‏ ‎Bg‏ سا يس 7< ‎hs ey le sete‏ ‎uy 0 Le Ss‏ ‎AER Te “Hy‏ ‎SRE Ng &‏ ‎FREE he Ty OW‏ ‎Es oo Reo‏ 5 3 ‎Coasssd Yd 8‏ ‎NN TR =‏ = ا ‎RRR‏ ‎NEN‏ ‎ON TN‏ ‎RE 1 8‏ ال اخ ل ب ‎Sty‏ : 8 ا ا ‎Su VE‏ الت ‎Neo‏ ان ‎AN‏ ‎ed 5‏ ا ا ع : ‎SS‏ ا ‎SONNE, 3‏ ا الل ‎SEN‏ ‎Bs‏ ا 2 اا ‎REN‏ ‏8 ا ال وي ا حا ‎AYU‏ ‎LOR Re‏ 8 ‎oe Re Si‏ ‎Fe % Hog‏ ‎=e rac hel‏ ‎ge : Bl‏ - اي ‎i on ; ae‏ 5 } ل ] : ‎Tr‏ ‏ارسي 0 لوو دوي ميم ‎{Fre‏ { ل لصحي ‎oi‏ ‎Fey TUF UY‏
    0 الا ‎١‏ ا الل ال ال الات ورا ا ها الا المت ةا ا الا اكاب ل 0 ا لاا نم العا ا د ‎Ee‏ اق : :5 م ل 3 = م 8 لا ‎a a SE‏ ا ‎NR AE eRe EEE og 5 oo Pe‏ ‎AN Rn Bond Vio . nT‏ ‎Feel bon 7 adhe Pa‏ ‎CS wi gE Vega a $0‏ ‎i 3‏ 1 : 1 ل ‎Cle Yo Void da HE‏ ‎SEAN pom lab bl BE‏ ‎ERE Fr EEE Ar Fo‏ 5
    ‎i.‏ ال | لت ‎Yoo‏ ا ‎RN] NE NCE‏ ‎NONE AE Fin SEE LE Yn‏ ‎NR bd ide bale bo de‏ ‎OA 0 QUINN A PY AER‏ ‎ay‏ ا ‎oN i 1 [Ra Yo x ns 2 Fi‏ ‎PoE i VOTER EEA ETE‏ ‎or SEN 1 8 YEE EN yA +‏ . ‎i or i al x 1 3 | wl‏ لل ‎Bg Sa‏ 8 5 ا لاوا ا ا ‎BR‏ الا اا ا ا ال ب 3 : ‎JEN vid Ea TR eles‏ ‎CORA i SEES URE SERENE‏ ‎aE aa Sob SE STEER AFIS See‏ 5 ‎em Ee a be ba‏ الب كي ‎ERR‏ ال - = : ‎ae SOLA Ng‏ الج ‎Te SEE TSR‏ الي ا , احج الجخ ل جما ‎A IMR] PEER BOR‏ 4ك لايس ااي وي 5 ‎ey‏ ل لل ال ‎XN‏ ال راد الت ‎RST‏ يا و ل ‎or ie aria‏ ا ا الل ا ا ا ‎wb ded‏ اا ‎Rady foo PE VETERE Ye Ig Ua‏ ‎EUS ER Lo MA 3 fai‏ ا الها ‎PREG‏ ‎pW Pr BREE SVS SAS BR ENS‏ ‎Le Sig x‏ ال الي 8,00 3 3 ¥ ا ‎ay EE‏ الا الال ال الا ‎TEL‏ ل 0 0 ‎ETE EE Soy tab ate rE elas‏ ‎Roam Pg Tizi@dgigiiig| gins‏ ‎SLUT TY ier bE AE ARS ELST‏ ل £3 ‎r‏ ‏ا ‏ب ال . ا امد 1 ‎id SL‏ ‎Came Ty‏ ‎SEE il‏ ‎RY Mh RECS‏ ‎“Xi‏ ا ‎ROR‏ ‎CRRERN + #5‏ ‎es oo EA i‏ 1 1 بي ‎He‏ £3 ‎NEE Re 2% :‏ ‎Es,‏ ا « ‎NERA‏ ‏ار اه الل لون ب 8 ‎or SE‏ ‎Me Ty‏ الجخ
    ‎Na. << :‏ ‎EN No Ears 1‏ رب # ‎a a a‏ :3 3 اده يج شو د ا ا ‎RRR ~ Sy‏ ع ‎hy‏ ال الا يا ال ‎We dy‏ ا ل ‎Re Ny‏ ل ‎a‏ ا ا © ‎SATAN‏ ‎fists Hey wy‏ ‎he‏ 2ج ‎sai‏ ‎EN 5 He‏ ‎ENR TE Ts p=‏ اج : ا ل 0 ‎SRR “a‏ ‎iment Xe SE‏ ‎Qa Re Th‏ ‎Ty RE‏ ا ‎aba‏ ‎SONNETS Rw "5‏ ‎TRS‏ ا 1 ا ‎SERRE‏ ‎Sid RG hy‏
    ‎AN. Th‏ ‎RNR x ;‏ ‎SOUR‏ ‎REE 8. Sn‏ ‎Ty Ta‏ ‎il ae EY‏ ‎iid x 1‏ ‎i A WR‏ : م ‎New‏ ‎Ee‏ ا ا ‎RRS Fn NE‏ ‎ad Sel TN‏ ‎ANN Rg “h‏ ‎CREE Se ©‏ ‎NRO TRE‏ ا ‎RRR TR‏ ‎hoa Va‏ ‎TYE NE‏ بي ‎ER‏ 8 ا - 0 ‎ig DW‏ 1 ا 2 ‎i‏ .8 : اساي مكار ‎SAE ANA‏ ننم انانب سميج ا ال : : ل ‎om Tg Fw‏ ذا © » حب 2 3 ‎Er > Re‏ ‎of Re‏ ا ا ‎fog 5 ; en ’ He‏ ب ‎FC a)‏ ثري مرج ‎tes‏ { ويد اجر كرمج ‎EA ar‏ =
    > ‏جح م لحم مم‎ AAR AAAS N ENN ry SRE A aaa spss nny a 1:84 SEE i 2 1 ٍ ‏ا ع‎ 4 1 ORIN a8 Fae fr Ea A= OR TE Foe ba TA Re ‏لال‎ Pe] a Ee) FR PON TREES set ‏دش‎ ; NL ‏لم | لخادت | لات‎ wd ad ‏ا الم‎ a » 3 ‏ااا‎ i. ME Coll SE f= 2 ‏ب‎ a RUE 1 0 : 5 ‏ا‎ ‎8 ‏ا‎ Sd SE Lara Ho Ci ER os: ::. Foi . Ld al f L 3 Fob ‏د‎ ‎pen eg SRA: SR 1: i 3 on SHA A = 3 t a ] : ‏ل 5 ا ا‎ t CY bb ‏اج« لهاي لا‎ ds : CL BEN na GEERT R 1 ‏ىع‎ i 2 > na 2 i 5 i ON ‏ب‎ co oR em IE x 1 8 ‏ب"‎ 3 A ‏لت ا الات‎ 1 8 i RO EL oy wy i ‏ص‎ GY ‏تعدا‎ aR ‏ا لي‎ 8 ORME 5 CE eds bE XK FESS i ‏اا‎ NE ESE ERE ‏ا نينا‎ FOI 04 8 2 ‏انب 2 ا‎ pad eta i - + ‏ل الا لان ا ل شا‎ 1 Sar Fa ‏ا ا اا على‎ ‏ا ات بخ‎ YS ‏العا لاع ا اد سا للج‎ ‏ال ل ا ا‎ EIR Ea ‏لاط‎ ‎11 1 ERE ¥ 5 - no i ‏ا إٍْ د ف‎ fe oy | La] ‏بيد‎ 3 8 - SNE ‏اخ لمكي لإا الات أ اس الا‎ ER ‏ا 3 م‎ - ‏لا ا‎ RE ‏م ا ا ل ا‎ i $3 ‏اج ا ل 0 1و‎ Sys ‏ذال‎ Bannan ER Ld 0 ‏اا للم‎ 5 wd or 3 1 ‏ل‎ = 2 5 iq t 3 = = Rg N hE § = Pood wd ‏ل‎ 1 2 > 3 = a TE OW Sho ‏للقت‎ gliadin dl dln asd ‏ين‎ ‎ea ‏ال‎ ‎NN 38 ‏الث الا‎ ‏الما‎ TNE : ‏لات‎ 4 ‏الا لاق‎ Ny ‏اذا الث لوي‎ : 8 3 Se } - ١ 8 id LR Ss CRs Pe ‏الي‎ 8 se ‏ا الي‎ ll AR Ne mE 1 ‏ايب ب اا ا الم‎ ‏ل‎ NL TR 1 ‏ال ا ل م‎ 8 RRR RR i ‏ل ل السو‎ Ty MH Fe ‏ا‎ Lo ‏ال‎ ‎ESN 8 BY Ee AARNE re Ry ‏اننا الات‎ ‏اا ب ا‎ ‏ل ا الاي‎ The 8 ‏ا لا‎ 8 ١ ‏ام ال ا‎ CO NG Sg Te NR we We ‏مه ا لك اللا د اي‎ RRR ‏اا الا‎ & 5 To ro A ‏سا سس‎ Re Te > ST wR Na ‏لض اال ا‎
    ERG. ‏اا اللي‎ ‏ات حي‎ NNR, ‏ا ال ارجا‎ ‏ا ا‎ 8 8 ٍ 2 8 ‏ب‎ fey Fn 8 amd eh aa fa TT SNR Th wy RRR eo Fo : nd NTN SEES ‏ا ا‎ AR Te 3 ¢ AA Ne o No ‏ا انا ال‎ : TNE 2 cums Tu ey 5 ANE LT ‏بط‎ ‏ا‎ WH SSE : = EN * ‏ل‎ ‏ا ا‎ & 3 Toa WX CR By Ta ANA SANA ASAT oe Yay Fi * ) + ‏ال‎ oh ‏ل‎ : <1 * £5 lk Lo 3 ‏اليه مب سي‎ : 7 Fig EI SE A ‏اا : ع‎ { Choe veya wr a en x ey PATRI REEL SR aH 2p i Nn ‏ا‎ hi a ee ‏الجر‎ ‎T ry ‏وا يدك‎
    الحاضهة الهيلة السعودية الملضية الفكرية ‎Swed Authority for intallentual Property pW‏ ‎RE‏ .¥ + \ ا 0 § ام 5 + < ‎Ne‏ ‎ge‏ ”بن اج > عي كي الج دا لي ايام ‎TEE‏ ‏ببح ةا ‎Nase eg‏ + ‎Ed - 2 -‏ 3 .++ .* وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها ‎of‏ سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. »> صادرة عن + ب ب ‎٠.‏ ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > ”+ ص ب ‎101١‏ .| لريا ‎1*١ uo‏ ؛ المملكة | لعربية | لسعودية ‎SAIP@SAIP.GOV.SA‏
SA518400251A 2016-04-18 2018-10-16 أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ وطرق استخدامها لعلاج أمراض مرتبطة بجين حمض ألفا-جلوكوسيداز SA518400251B1 (ar)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662324185P 2016-04-18 2016-04-18
PCT/US2017/028002 WO2017184529A1 (en) 2016-04-18 2017-04-17 Antisense oligomers and methods of using the same for treating diseases associated with the acid alpha-glucosidase gene

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA518400251B1 true SA518400251B1 (ar) 2023-01-12

Family

ID=60117051

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA518400251A SA518400251B1 (ar) 2016-04-18 2018-10-16 أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ وطرق استخدامها لعلاج أمراض مرتبطة بجين حمض ألفا-جلوكوسيداز

Country Status (14)

Country Link
US (2) US11060089B2 (ar)
EP (1) EP3445405A4 (ar)
JP (3) JP7033547B2 (ar)
KR (1) KR102522059B1 (ar)
CN (1) CN109414511B (ar)
AU (1) AU2017254106B2 (ar)
BR (1) BR112018071477A2 (ar)
CA (1) CA3021267A1 (ar)
EA (1) EA201892366A1 (ar)
MX (1) MX2018012695A (ar)
SA (1) SA518400251B1 (ar)
SG (1) SG11201808964PA (ar)
TW (1) TWI766861B (ar)
WO (1) WO2017184529A1 (ar)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2017254106B2 (en) 2016-04-18 2024-07-11 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense oligomers and methods of using the same for treating diseases associated with the acid alpha-glucosidase gene
EP3697910A4 (en) 2017-10-18 2021-07-14 Sarepta Therapeutics, Inc. ANTISENSE OLIGOMERIC COMPOUNDS
CA3108285A1 (en) * 2018-08-02 2020-02-06 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for treating pompe disease
AU2019316103A1 (en) 2018-08-02 2021-03-11 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for treating facioscapulohumeral muscular dystrophy
US11638761B2 (en) 2021-07-09 2023-05-02 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for treating Facioscapulohumeral muscular dystrophy
EP4392558A1 (en) * 2021-09-30 2024-07-03 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense oligonucleotides having one or more abasic units
WO2024016003A2 (en) 2022-07-14 2024-01-18 The Broad Institute, Inc. Aav capsids that enable cns-wide gene delivery through interactions with the transferrin receptor
WO2024073404A1 (en) * 2022-09-28 2024-04-04 Sarepta Therapeutics, Inc. Pompe disease mouse model generation, characterization and methods of use

Family Cites Families (113)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4534899A (en) 1981-07-20 1985-08-13 Lipid Specialties, Inc. Synthetic phospholipid compounds
US4426330A (en) 1981-07-20 1984-01-17 Lipid Specialties, Inc. Synthetic phospholipid compounds
US5521063A (en) 1985-03-15 1996-05-28 Antivirals Inc. Polynucleotide reagent containing chiral subunits and methods of use
US5217866A (en) 1985-03-15 1993-06-08 Anti-Gene Development Group Polynucleotide assay reagent and method
US5185444A (en) 1985-03-15 1993-02-09 Anti-Gene Deveopment Group Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages
DE3650349T2 (de) 1985-03-15 1995-12-14 Antivirals Inc Immunotestmittel für polynukleotid und verfahren.
US5166315A (en) 1989-12-20 1992-11-24 Anti-Gene Development Group Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids
US5506337A (en) 1985-03-15 1996-04-09 Antivirals Inc. Morpholino-subunit combinatorial library and method
US5034506A (en) 1985-03-15 1991-07-23 Anti-Gene Development Group Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages
US5354844A (en) 1989-03-16 1994-10-11 Boehringer Ingelheim International Gmbh Protein-polycation conjugates
US5108921A (en) 1989-04-03 1992-04-28 Purdue Research Foundation Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules
US5227170A (en) 1989-06-22 1993-07-13 Vestar, Inc. Encapsulation process
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5356633A (en) 1989-10-20 1994-10-18 Liposome Technology, Inc. Method of treatment of inflamed tissues
US5527528A (en) 1989-10-20 1996-06-18 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Solid-tumor treatment method
US5469854A (en) 1989-12-22 1995-11-28 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods of preparing gas-filled liposomes
US5580575A (en) 1989-12-22 1996-12-03 Imarx Pharmaceutical Corp. Therapeutic drug delivery systems
US5264618A (en) 1990-04-19 1993-11-23 Vical, Inc. Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules
DE4021108A1 (de) 1990-07-03 1992-01-09 Bayer Ag Optisch aktive n-(alpha)-fluoracryloyl-aminosaeure-derivate, ihre herstellung, die daraus hergestellten optisch aktiven polymeren und deren verwendung zur spaltung von racematen
JP3220180B2 (ja) 1991-05-23 2001-10-22 三菱化学株式会社 薬剤含有タンパク質結合リポソーム
US5714331A (en) 1991-05-24 1998-02-03 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility
US5539082A (en) 1993-04-26 1996-07-23 Nielsen; Peter E. Peptide nucleic acids
US5719262A (en) 1993-11-22 1998-02-17 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having amino acid side chains
WO1993001286A2 (en) 1991-06-28 1993-01-21 Massachusetts Institute Of Technology Localized oligonucleotide therapy
US5521291A (en) 1991-09-30 1996-05-28 Boehringer Ingelheim International, Gmbh Conjugates for introducing nucleic acid into higher eucaryotic cells
NZ244306A (en) 1991-09-30 1995-07-26 Boehringer Ingelheim Int Composition for introducing nucleic acid complexes into eucaryotic cells, complex containing nucleic acid and endosomolytic agent, peptide with endosomolytic domain and nucleic acid binding domain and preparation
FR2692265B1 (fr) 1992-05-25 1996-11-08 Centre Nat Rech Scient Composes biologiquement actifs de type phosphotriesters.
US5583020A (en) 1992-11-24 1996-12-10 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Permeability enhancers for negatively charged polynucleotides
JP3351476B2 (ja) 1993-01-22 2002-11-25 三菱化学株式会社 リン脂質誘導体及びそれを含有するリポソーム
US5395619A (en) 1993-03-03 1995-03-07 Liposome Technology, Inc. Lipid-polymer conjugates and liposomes
US5462854A (en) 1993-04-19 1995-10-31 Beckman Instruments, Inc. Inverse linkage oligonucleotides for chemical and enzymatic processes
FR2705099B1 (fr) 1993-05-12 1995-08-04 Centre Nat Rech Scient Oligonucléotides phosphorothioates triesters et procédé de préparation.
US5534259A (en) 1993-07-08 1996-07-09 Liposome Technology, Inc. Polymer compound and coated particle composition
US5543158A (en) 1993-07-23 1996-08-06 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable injectable nanoparticles
US5417978A (en) 1993-07-29 1995-05-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Liposomal antisense methyl phosphonate oligonucleotides and methods for their preparation and use
US5595756A (en) 1993-12-22 1997-01-21 Inex Pharmaceuticals Corporation Liposomal compositions for enhanced retention of bioactive agents
US5543152A (en) 1994-06-20 1996-08-06 Inex Pharmaceuticals Corporation Sphingosomes for enhanced drug delivery
US5591721A (en) 1994-10-25 1997-01-07 Hybridon, Inc. Method of down-regulating gene expression
US5512295A (en) 1994-11-10 1996-04-30 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Synthetic liposomes for enhanced uptake and delivery
DK0876165T3 (da) 1995-12-18 2007-08-06 Angiotech Biomaterials Corp Tværbundne polymersammensætninger og fremgangsmåder til deres fremstilling
US6245747B1 (en) 1996-03-12 2001-06-12 The Board Of Regents Of The University Of Nebraska Targeted site specific antisense oligodeoxynucleotide delivery method
US7572582B2 (en) 1997-09-12 2009-08-11 Exiqon A/S Oligonucleotide analogues
US6794499B2 (en) 1997-09-12 2004-09-21 Exiqon A/S Oligonucleotide analogues
US7084125B2 (en) 1999-03-18 2006-08-01 Exiqon A/S Xylo-LNA analogues
AU776362B2 (en) 1999-05-04 2004-09-09 Roche Innovation Center Copenhagen A/S L-ribo-LNA analogues
US6287860B1 (en) 2000-01-20 2001-09-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibition of MEKK2 expression
US6784291B2 (en) 2000-05-04 2004-08-31 Avi Biopharma, Inc. Splice-region antisense composition and method
KR100408844B1 (ko) 2000-07-29 2003-12-06 한국산업기술평가원 동물세포 발현벡터
US20040049022A1 (en) 2001-04-24 2004-03-11 Nyce Jonathan W. Composition & methods for treatment and screening
CA2459347C (en) 2001-09-04 2012-10-09 Exiqon A/S Locked nucleic acid (lna) compositions and uses thereof
US6965025B2 (en) 2001-12-10 2005-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of connective tissue growth factor expression
KR100464261B1 (ko) 2002-01-24 2005-01-03 주식회사 파나진 Ｐｎａ 올리고머를 합성하기 위한 신규한 단량체 및 그의제조방법
KR20030084444A (ko) 2002-04-26 2003-11-01 주식회사 파나진 Ｐｎａ 올리고머를 합성하기 위한 신규한 단량체 및 그의제조방법
US7569575B2 (en) 2002-05-08 2009-08-04 Santaris Pharma A/S Synthesis of locked nucleic acid derivatives
AU2003291682A1 (en) 2002-11-05 2004-06-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-methoxy substituted oligomeric compounds and compositions for use in gene modulations
US7250496B2 (en) 2002-11-14 2007-07-31 Rosetta Genomics Ltd. Bioinformatically detectable group of novel regulatory genes and uses thereof
EP1560931B1 (en) 2002-11-14 2011-07-27 Dharmacon, Inc. Functional and hyperfunctional sirna
DK2351844T3 (da) 2003-04-29 2014-09-22 Sarepta Therapeutics Inc Præparater til forøgelse af transport- og antisense-effektivitet af nukleinsyreanalog i celler
US7211668B2 (en) 2003-07-28 2007-05-01 Panagene, Inc. PNA monomer and precursor
WO2005078077A2 (en) 2004-02-10 2005-08-25 Zystor Therapeutics, Inc. Acid alpha-glucosidase and fragments thereof
US20050288246A1 (en) 2004-05-24 2005-12-29 Iversen Patrick L Peptide conjugated, inosine-substituted antisense oligomer compound and method
US7838657B2 (en) 2004-12-03 2010-11-23 University Of Massachusetts Spinal muscular atrophy (SMA) treatment via targeting of SMN2 splice site inhibitory sequences
EP3470072A1 (en) 2005-06-23 2019-04-17 Biogen MA Inc. Compositions and methods for modulation of smn2 splicing
EP1937066A4 (en) 2005-08-18 2008-12-24 Alnylam Pharmaceuticals Inc METHOD AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF NERVOUS DISEASES
SI2024499T1 (en) 2006-05-10 2018-04-30 Sarepta Therapeutics, Inc. Analogues of the oligonucleotide, with cationic links between subunits
JP5864100B2 (ja) 2007-06-29 2016-02-17 サレプタ セラピューティクス インコーポレイテッド 組織特異的ペプチドコンジュゲートおよび方法
US20100016215A1 (en) 2007-06-29 2010-01-21 Avi Biopharma, Inc. Compound and method for treating myotonic dystrophy
JP2010533170A (ja) 2007-07-12 2010-10-21 プロセンサ テクノロジーズ ビー．ブイ． 化合物を種々の選択された臓器、組織又は腫瘍細胞に標的化するための分子
US7935816B2 (en) 2007-10-25 2011-05-03 Gene Tools, Llc Molecular transporter compositions comprising dendrimeric oligoguanidine with a triazine core that facilitate delivery into cells in vivo
KR101617472B1 (ko) 2007-11-15 2016-05-02 사렙타 쎄러퓨틱스 인코퍼레이티드 모르폴리노 올리고머의 합성 방법
DK2607484T3 (en) 2008-10-27 2016-03-07 Biomarin Technologies B V Methods and means for efficient skipping of exon 45 in Duchenne muscular dystrophy pre-MRNA
SG171914A1 (en) 2008-12-02 2011-07-28 Chiralgen Ltd Method for the synthesis of phosphorus atom modified nucleic acids
DK2417257T3 (da) 2009-04-10 2016-06-06 Ass Inst De Myologie Tricyclo-dna-antisense-oligonukleotider, sammensætninger, og fremgangsmåder til behandlingen af sygdom
US20120149757A1 (en) 2009-04-13 2012-06-14 Krainer Adrian R Compositions and methods for modulation of smn2 splicing
CN116440150A (zh) 2009-06-17 2023-07-18 冷泉港实验室 用于在对象中调节smn2剪接的组合物和方法
AU2010270714B2 (en) 2009-07-06 2015-08-13 Wave Life Sciences Ltd. Novel nucleic acid prodrugs and methods use thereof
US8536148B2 (en) 2009-09-04 2013-09-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Disabling autophagy as a treatment for lysosomal storage diseases
CN102574888A (zh) 2009-09-16 2012-07-11 株式会社启拉坚 用于rna及其衍生物的合成的新型保护基
ES2657452T3 (es) 2009-12-29 2018-03-05 Curna, Inc. Tratamiento de enfermedades relacionadas con el factor respiratorio nuclear 1 (NRF1) mediante inhibición de transcrito antisentido natural a NRF1
FR2957090A1 (fr) 2010-03-05 2011-09-09 Immunosearch Methode d'evaluation du potentiel irritant d'un compose test
US8802642B2 (en) 2010-04-28 2014-08-12 Iowa State University Research Foundation, Inc. Spinal muscular atrophy treatment via targeting SMN2 catalytic core
US8779128B2 (en) 2010-05-28 2014-07-15 Sarepta Therapeutics, Inc. Oligonucleotide analogues having modified intersubunit linkages and/or terminal groups
EP2575857B1 (en) 2010-06-01 2018-01-24 aTyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of lysyl-trna synthetases
US10428019B2 (en) 2010-09-24 2019-10-01 Wave Life Sciences Ltd. Chiral auxiliaries
HUE030292T2 (en) 2010-09-30 2017-04-28 Nippon Shinyaku Co Ltd Morpholino-nucleic acid derivatives
US9161948B2 (en) 2011-05-05 2015-10-20 Sarepta Therapeutics, Inc. Peptide oligonucleotide conjugates
EP2704749A1 (en) 2011-05-05 2014-03-12 Sarepta Therapeutics, Inc. Peptide oligonucleotide conjugates
EP2747855B1 (en) 2011-08-25 2017-11-15 DB Equipment AS Accessory bag having reinforced sidewalls and variable length
ES2535654T3 (es) 2011-10-13 2015-05-13 Association Institut De Myologie ADN triciclo-fosforotioato
JP2015500204A (ja) 2011-11-18 2015-01-05 サレプタ セラピューティクス， インコーポレイテッド 機能的に修飾されたオリゴヌクレオチドおよびそのサブユニット
ES2727481T3 (es) 2011-11-30 2019-10-16 Sarepta Therapeutics Inc Inclusión inducida de exón en atrofia muscular espinal
AU2012347765B2 (en) 2011-12-06 2017-05-04 Research Institute At Nationwide Childrens's Hospital Non-ionic, low osmolar contrast agents for delivery of antisense oligonucleotides and treatment of disease
AU2013212758A1 (en) 2012-01-27 2014-08-14 Biomarin Technologies B.V. RNA modulating oligonucleotides with improved characteristics for the treatment of Duchenne and Becker muscular dystrophy
DE102012101676A1 (de) 2012-02-29 2013-08-29 Klaus-Dieter Rösler Verfahren und Vorrichtung zum Bearbeiten von Formularen mit einer Datenverarbeitungsanlage
WO2013173601A1 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Rana Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating bdnf expression
EP2850184A4 (en) 2012-05-16 2016-01-27 Rana Therapeutics Inc COMPOSITIONS AND METHOD FOR MODULATING GENE EXPRESSION
ES2613691T3 (es) * 2012-07-11 2017-05-25 Sangamo Biosciences, Inc. Métodos y composiciones para el tratamiento de enfermedades por almacenamiento lisosomal
US9598458B2 (en) 2012-07-13 2017-03-21 Wave Life Sciences Japan, Inc. Asymmetric auxiliary group
SG11201500232UA (en) 2012-07-13 2015-04-29 Wave Life Sciences Pte Ltd Chiral control
CN117844807A (zh) 2013-03-14 2024-04-09 萨勒普塔医疗公司 用于治疗肌营养不良的外显子跳跃组合物
US9108673B2 (en) 2013-03-15 2015-08-18 Steering Solutions Ip Holding Corporation Crash release mechanism for automotive steering column
CN105793422B (zh) * 2013-09-05 2020-03-03 萨罗塔治疗公司(美国) 酸性α-葡糖苷酶中反义诱导的外显子2纳入
EP3095460A4 (en) 2014-01-15 2017-08-23 Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. Chiral nucleic acid adjuvant having anti-allergic activity, and anti-allergic agent
JPWO2015108048A1 (ja) 2014-01-15 2017-03-23 株式会社新日本科学 抗腫瘍作用を有するキラル核酸アジュバンド及び抗腫瘍剤
JPWO2015108047A1 (ja) 2014-01-15 2017-03-23 株式会社新日本科学 免疫誘導活性を有するキラル核酸アジュバンド及び免疫誘導活性剤
US10160969B2 (en) 2014-01-16 2018-12-25 Wave Life Sciences Ltd. Chiral design
US9790495B2 (en) 2014-05-16 2017-10-17 Oregon State University Antisense antibacterial compounds and methods
EP3795687A1 (en) 2014-05-23 2021-03-24 Genzyme Corporation Inhibiting or downregulating glycogen synthase by creating premature stop codons using antisense oligonucleotides
AU2015272127A1 (en) * 2014-06-10 2017-01-19 Erasmus University Medical Center Rotterdam Methods for characterizing alternatively or aberrantly spliced mRNA isoforms
EP4039807A1 (en) * 2014-06-10 2022-08-10 Erasmus University Rotterdam Medical Center Antisense oligonucleotides useful in treatment of pompe disease
CA2917705C (en) 2015-02-25 2019-06-18 Jervis B. Webb Company Method and system for automated luggage security inspection
CA2977528A1 (en) 2015-02-27 2016-09-01 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense-induced exon2 inclusion in acid alpha-glucosidase
AU2017254106B2 (en) 2016-04-18 2024-07-11 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense oligomers and methods of using the same for treating diseases associated with the acid alpha-glucosidase gene

Also Published As

Publication number Publication date
US20190284555A1 (en) 2019-09-19
TW201741459A (zh) 2017-12-01
JP2023155418A (ja) 2023-10-20
BR112018071477A2 (pt) 2019-02-19
KR20180134389A (ko) 2018-12-18
US11060089B2 (en) 2021-07-13
CN109414511B (zh) 2023-05-23
JP7033547B2 (ja) 2022-03-10
EP3445405A4 (en) 2019-12-18
JP2019513405A (ja) 2019-05-30
CN109414511A (zh) 2019-03-01
KR102522059B1 (ko) 2023-04-14
CA3021267A1 (en) 2017-10-26
MX2018012695A (es) 2019-06-20
AU2017254106B2 (en) 2024-07-11
TWI766861B (zh) 2022-06-11
US20220364085A1 (en) 2022-11-17
JP2022082544A (ja) 2022-06-02
JP7342169B2 (ja) 2023-09-11
EP3445405A1 (en) 2019-02-27
WO2017184529A1 (en) 2017-10-26
SG11201808964PA (en) 2018-11-29
AU2017254106A1 (en) 2018-11-01
EA201892366A1 (ru) 2019-03-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA518400251B1 (ar) أوليجومرات في اتجاه مضاد للنسخ وطرق استخدامها لعلاج أمراض مرتبطة بجين حمض ألفا-جلوكوسيداز
US20210285015A1 (en) THERAPEUTIC USES OF GENOME EDITING WITH CRISPR/Cas SYSTEMS
JP6865871B2 (ja) 酸性α−グルコシダーゼにおけるアンチセンス誘導エクソン２包含
AU2020203825B2 (en) Antisense-induced exon2 inclusion in acid alpha-glucosidase
KR101094617B1 (ko) 알티피801 억제제의 치료적 용도
US11518995B2 (en) Gapmers and methods of using the same for the treatment of muscular dystrophy
US20220411796A1 (en) Compositions and methods for decreasing tau expression
EP3347469A2 (en) Methods and compositions for the treatment of glaucoma
JP2023541404A (ja) ＤＵＸ４の発現を阻害するためのＲＮＡｉ剤、その組成物、及び使用方法
CN115397436A (zh) 用于抑制PNPLA3表达的RNAi剂、其药物组合物和使用方法
KR20230104880A (ko) 올리고뉴클레오티드의 신경교세포로의 선택적 전달
CN101374528A (zh) Rtp801的治疗用途
WO2019143831A1 (en) Compositions and methods for increasing expression of scn2a
JP2021500016A (ja) アンチセンスオリゴマー化合物
US20210274726A1 (en) THERAPEUTIC USES OF GENOME EDITING WITH CRISPR/Cas SYSTEMS
US20240167035A1 (en) RNAi Agents for Inhibiting Expression of Complement Component C3 (C3), Pharmaceutical Compositions Thereof, and Methods of Use
US20220162599A1 (en) Methods and compositions for modulating splicing of alternative introns
EP3271464A1 (en) Mirna mimetics and their use in treating sensory conditions
TW202405174A (zh) 用於抑制超氧化物歧化酶1(SOD1)表現之RNAi藥劑、其組合物及使用方法
NZ751385B2 (en) Complement component c5 irna compositions and methods of use thereof
NZ751385A (en) Complement component c5 irna compositions and methods of use thereof
BR112016005062B1 (pt) Compostos de oligômero antissenso, composição farmacêutica compreendendo os ditos compostos e usos dos mesmos para tratar uma doença de armazenamento de glicogênio tipo ii