SA518391463B1 - VIII أشكال متباينة لعامل منخفضة تركيبات وطرق واستخدامات لمعالجة اضطرابات إرقاء الدم CpG، - Google Patents

VIII أشكال متباينة لعامل منخفضة تركيبات وطرق واستخدامات لمعالجة اضطرابات إرقاء الدم CpG، Download PDF

Info

Publication number
SA518391463B1
SA518391463B1 SA518391463A SA518391463A SA518391463B1 SA 518391463 B1 SA518391463 B1 SA 518391463B1 SA 518391463 A SA518391463 A SA 518391463A SA 518391463 A SA518391463 A SA 518391463A SA 518391463 B1 SA518391463 B1 SA 518391463B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
aav
vector
fvii
nucleic acid
sequence
Prior art date
Application number
SA518391463A
Other languages
English (en)
Inventor
انجويلا زافير
هسين - اي شين سام
Original Assignee
.سبارك ثيرابيوتكس، انك
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by .سبارك ثيرابيوتكس، انك filed Critical .سبارك ثيرابيوتكس، انك
Publication of SA518391463B1 publication Critical patent/SA518391463B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • A61K38/37—Factors VIII
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
    • A61K48/0066—Manipulation of the nucleic acid to modify its expression pattern, e.g. enhance its duration of expression, achieved by the presence of particular introns in the delivered nucleic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • C12N15/864—Parvoviral vectors, e.g. parvovirus, densovirus
    • C12N15/8645—Adeno-associated virus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/10011—Adenoviridae
    • C12N2710/10311—Mastadenovirus, e.g. human or simian adenoviruses
    • C12N2710/10341—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2710/10342—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector virus or viral particle as vehicle, e.g. encapsulating small organic molecule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/10011—Adenoviridae
    • C12N2710/10311—Mastadenovirus, e.g. human or simian adenoviruses
    • C12N2710/10341—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2710/10343—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2750/14145—Special targeting system for viral vectors

Abstract

يتعلق الاختراع الحالي بالكشف عن أشكال متباينة للحمض النووي nucleic acid variants منخفضة نوكليوتيد ثنائي من سيتوزين- جوانين cytosine-guanine dinucleotides (CpG) تشفر encoding البروتين FVIII وبطرق استخدامها. في نماذج محددة، يتم إظهار الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة CpG التي تشفر FVIII بصورة أكثر فعالية بواسطة الخلايا cells ، ويتم إفرازها عند مستويات زائدة بواسطة الخلايا خلال بروتينات proteins عامل VIII من النوع البري wild ، وتوفر إظهار و/ أو نشاط مُحسّن لبروتينات العامل VIII من النوع البري wild أو يتم تعبئتها بصورة أكثر فعالية في النواقل الفيروسية viral vectors. الشكل 8.

Description

أشكال متباينة لعامل ‎VII‏ منخفضة ‎(CPG‏ تركيبات وطرق واستخدامات لمعالجة اضطرابات إرقاء الدم ‎CpG Reduced Factor VIII Variants, Compositions and Methods and Uses for‏ ‎Treatment of Hemostasis Disorders‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق هذا الاختراع بمجالات إنتاج عامل تخثر ‎coagulation factor‏ مُعاد الاتحاد الجيني 01 © ومعالجة اضطرابات ‎disorders‏ طبية مرتبطة بإرقاء الدم (وقف النزف الدموي) الشاذ ‎hemostasis‏ 85611801. بشكل أكثر ‎danas‏ يوفر الاختراع أشكال متباينة لحمض نووي (متواليات) تشفر بروتين ‎protein‏ عامل ‎Lal « Factor VIII (FVIII) VIII‏ توفر الأشكال المتباينة نسخ و/ أو إظهار زائد؛ و/ أو نشاط على بروتينات ‎FVII‏ من النوع البري 10/10 . يتم الاستشهاد بالعديد من المنشورات ووثائق براءات الاختراع في المواصفة لوصف حالة المجال التي يتعلق بها هذا الاختراع. يتم تضمين كل من هذه الاستشهادات في هذه الوثيقة كمرجع كما لو تم ذكرها بالكامل.
0 الهيموفيليا هو اضطراب نزفي متعلق ‎Xo‏ موجود في 1 من 5000 من الذكور في جميع أنحاء العالم. العلاجات التي تهدف إلى زيادة مستويات عامل التخثر فقط فوق 1 7 من المعدل الطبيعي ترتبط بتحسين كبير للنمط الظاهري للأمراض الشديدة. التجارب السريرية الحديثة لنقل جين يتدخل فيه الفيروس المرتبط بالفيروس الغدي ‎(AAV) adeno-associated Virus‏ للهيموفيليا ‎(HB) B hemophilia‏ أثبتت إظهار طويل الأمد مُستدام للمستويات العلاجية ‎levels of Jalal‏
‎(FIX) IX factor 5‏ لكن أكدت على أن جرعة الناقل ‎AAV‏ محدودة نظراً للإستجابات المناعية ضد ‎AAV‏ لقفيصة ‎AAV‏ في حين أن هذه البيانات تتعلق بالهيموفيليا 8؛ إلا أنه 780 من كل أنواع الهيموفيليا يكون بسبب نقص ‎(FVII‏ الهيموفيليا ‎.(HA) A hemophilia‏
العلاج الحالي لهذا المرض هو علاج بديل للبروتين الذي يتطلب تشريب متكرر لبروتين العامل /. هناك ‎dala‏ عاجلة لتحقيق مستويات علاجية مستدامة لإظهار العامل ‎VIE‏ بحيث لا يحتاج المرضى إلى تلك العلاجات بالبروتين المتكررة. بالفعل؛ الإظهار المستمر لعامل ‎VII‏ يمنع نويات النزف وقد يضمن إثبات التحمل المناعي للبروتين.
يتعلق الطلب الدولي 2015/038625 بنواقل عامل ‎(FVII VII‏ للفيروس المرتبط بالفيروس الغدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ بما في ذلك نواقل ‎AAV EVIE‏ ذات نشاط إظهار عالي ونواقل ‎AAV FVII‏ التي تقوم بإظهار ‎FVII‏ كامل الطول أو مجتزاً الوظيفة. يتعلق الاختراع ‎Lad‏ بطرق تصنيع نواقل ‎AAV FVII‏ الموصوفة في الطلب الحالي والاستخدامات العلاجية المرتبطة بها.
0 باختصار؛ العلاج الجيني ل ‎HA‏ يقدم 3 تحديات متميزة: (1) الخواص الفعلية ل 1/111 البشري ‎human FVII (hFVII‏ تجعل من الصعب إظهاره مقارنة مع البروتينات الأخرى ذات الحجم المشابه (2) يرتبط الحجم الكبير ل ‎FVII CDNA‏ والتأثيرات الخاصة للمتوالية بإعادة الترتيبات التي تعوق إنتاج ‎AAV‏ و(3) المعدلات العالية لتكوين جسم مضاد ‎antibody‏ ضد ‎FVIII‏ ‏(مثبطات) استجابة للعلاج بالبروتين الذي يحدث في 730-25 من مرضى ‎HA‏ شديد (< 71
‎(FVII 5‏ الوصف العام للاإختراع طبقاً للاختراع؛ يتم توفير أشكال متباينة للحمض النووي منخفضة نوكليوتيد ثنائي من سيتوزين- جوانين ‎(CpG) cytosine—guanine dinucleotides‏ تشفر بروتين العامل ‎(FVII VIE‏ تلك الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة 006 تكون مميزة عن الحمض النووي من النوع
‏0 البري الذي يشفر ‎FVII‏ وقد يشفرء على سبيل المثال؛ بروتين ‎FVII‏ بشري؛ ينقصه اختيارياً» ‎LIS‏ ‏أو جزئياً؛ النطاق 8 ‎FVII‏ تتضمن تلك الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة ‎CpG‏ أشكال متباينة تُظهر إظهار زائد ‎ia)‏ إظهار زائد بمقدار 5-1 أضعاف) مقارنة مع الأحماض النووية ‎FVIII‏ مُحسّنة الكودون ‎FVII-CO3 (ie‏ (تعريف المتوالية رقم: 21)؛ عند النقل إلى الخلاياء مما يؤدي إلى زيادة إفراز البروتين ‎71/11١‏ وبالتالي زيادة النشاط.
في نماذج معينة؛ تلك الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة ‎CPG‏ التي تُشفر ‎FVII‏ مع أو بدون ‎cally]‏ كلياً أو جزئياً؛ النطاق 8 ‎51/1١١‏ يمكن أن توفر إظهار زائد ل ‎1/11١‏ زيادة إنتاج البروتين !71/1 في كائن ثديي؛ بالإضافة إلى أنها توفر فعالية زائدة في سياق نقل الجين عن طريق زيادة مستويات البروتين ‎FVII‏ في الدورة الدموية؛ وتحقيق إرقاء الدم من أجل نتائج ‎Ladle‏ ‏5 مفدة.
في نماذج معينة؛ يتسم شكل متباين لحمض نووي يشفر [|1/ا] بمحتوى ‎CPG‏ منخفض مقارنة مع حمض نووي من نوع بري يشفر |/1/ا. في نماذج معينة؛ يتسم شكل متباين لحمض نووي بعلى الأقل 10 ‎CPGs‏ أقل من حمض نووي من نوع بري يشفر ‎FVII‏ (تعريف المتوالية رقم: 19). في نماذج معينة؛ يتسم شكل متباين لحمض نووي ‎la‏ لا يزيد عن 4 0055؛ بما لا يزيد عن 3
0 0065؛ بما لا يزيد عن 2 0065؛ أو بما لا يزيد عن ‎CPG‏ واحد. في نماذج معينة؛ يتسم شكل متباين لحمض نووي بعلى الأكثر 4 0065؛ 3 ‎«CpGs‏ 2 0065؛ أو ‎CpG‏ واحد. في نماذج معينة؛ يتسم شكل متباين لحمض نووي بعدم وجود 0065. في نماذج معينة؛ يتسم شكل متباين لحمض نووي يشفر [|1/ا] بمحتوى ‎CPG‏ منخفض مقارنة مع حمض نووي من نوع بري يشفر ‎FVII‏ ويكون لتلك الأشكال المتباينة للحمض النووية منخفضة
606 تطابق متوالية بنسبة 790 أو أكثر مع أي من تعريف المتوالية أرقام: 18-1. في نماذج معينة؛ تتسم تلك الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة ‎CPG‏ بتطابق متوالية بنسبة 791؛ 192 93 794 795 796 7297 798( 799 799.5 أو أكثر مع أي من تعريف المتوالية أرقام: 18-1. في نماذج معينة؛ تتسم تلك الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة 6 بتطابق متوالية بنسبة 795-90 مع أي من تعريف المتوالية أرقام: 18-1. في نماذج
معينة؛ تتسم الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة 006 بتطابق متوالية بنسبة 7100-95 مع أي من تعريف المتوالية أرقام: 18-1. في نماذج معينة؛ يتم ذكر الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة ‎CpG‏ التي تشفر ‎FVII‏ في أي من تعريف المتوالية أرقام: 18-1. في نماذج معينة؛ تكون الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة ‎CPG‏ مميزة عن الشكل المتباين ‎V3 FVII‏ (تعريف المتوالية رقم: 20) و/ أو مميزة عن الشكل المتباين ‎CO3 FVIII‏
5 (تعريف المتوالية رقم: 21).
في نماذج معينة؛ توفر الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة 006 التي تشفر بروتين ‎FVIII‏ إظهار أكبر و/ أو تُظهر نشاط حيوي ممتاز مقارنة مع ‎FVII‏ من نوع بري أو مقارنة مع ‎FVIII‏ من نوع بري مشتمل على إزالة لنطاق 8 ‎Sle)‏ كما تحدد بواسطة مستويات البلازما أو اختبار تخثر ‎pall‏ أو نزف منخفض في اختبار ‎FVII‏ أو نموذج ناقص ‎(FVII‏
في نماذج معينة؛ تكون الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة ‎CPG‏ التي تشفر بروتين ‎FVIII‏ متطابقة بنسبة على الأقل 775 مع حمض نووي ‎FVII‏ بشري من نوع بري أو حمض نووي ‎FVIII‏ بشري من نوع بري مشتمل على ‎All)‏ نطاق 8. في نماذج معينة؛ تكون الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة 006 التي تشفر بروتين ‎FVII‏ متطابقة بنسبة حوالي 75- 5 (مثلاء تطابق بنسبة حوالي 75 76ت ‎«X79 LT ITT‏ 80ت 81 2ق 3ق
0 84 85 86 87 88 89 90 91 292 93 294 £95( مع حمض نووي ‎FVII‏ بشري من نوع بري أو حمض نووي ‎FVII‏ بشري من نوع بري مشتمل على إزالة نطاق ‎.B‏ ‏في نماذج معينة؛ تكون الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة 606 التي تشفر بروتين ‎FVIII‏ ثديية؛ مثلا بشرية. تتضمن تلك الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة ‎CPG‏ التي 5 تشفر بروتين ‎FVII‏ الثديية أشكال بشرية؛ التي قد تعتمد على ‎FVII‏ بشري من نوع بري أو ‎FVII‏ ‏بشري من نوع بري مشتمل على إزالة نطاق 5. طبقاً للاختراع؛ يتم توفير نواقل ونواقل إظهار تتضمن الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفضة التي تشفر بروتين !1/1 كما هو مذكور هنا. في نماذج محددة؛ يشتمل الناقل أو ناقل الإظهار على ناقل فيروس مرتبط بفيروس غدي ‎adeno-associated Virus‏ (/اللظ)ء ناقل 0 فيروس قهقري ‎retroviral vector‏ « ناقل فيروس غدي ‎adenoviral vector‏ ؛ بلازميد ‎plasmid‏ « أو ناقل فيروس بطيء ‎lentiviral vector‏ في نماذج معينة؛ ‎Jail‏ ناقل ‎AAV‏ ‏على نمط مصلي ‎of AAV‏ نمط زائف ‎AAV3 (AAV2 AAV] Mie AAV‏ 4/اطل ‎(AAVS AAVT (AAV6 (AAV5‏ ونال ‎Rh74 (Rh10 AAV11 AAV10‏ أو ‎LAAV-2i8 AAV‏ في نماذج معينة؛ يتضن ناقل الإظهار أي من تعريف المتوالية أرقام: 18-1( 5 أو يشتمل على تعريف المتوالية رقم: 23 أو 24.
في نماذج معينة؛ يشتمل عنصر تحكم في الإظهار على عنصر تحكم تكوبني أو قابل للتنظيم»؛ أو عنصر تحكم في الإظهار خاص بنسيج أو معزز. في نماذج معينة؛ يشتمل عنصر تحكم في الإظهار على عنصر يضفي إظهار في الكبد. في نماذج معينة؛ يشتمل عنصر تحكم في الإظهار على معزز ترانسثيريتين ‎Transthyretin (TTR) promoter‏ أو معزز ‎TTR‏ طفري ‎mutant‏ « مثلا تعريف المتوالية رقم: 22. في جوانب محددة إضافية؛ يشتمل عنصر تحكم في الإظهار على معزز كما هو مذكور في منشور معاهدة التعاون بشأن البراءات رقم: 2016/168728 (طلبات براءات الاختراع الأمريكية رقم 62/148.696؛ 62/202.133؛ و62/212.634)؛ التي يتم تضمينها في هذه الوثيقة كمرجع بأكملها. طبقاً للاختراع؛ يتم إضافياً توفير نواقل فيروسية تتضمن شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ ‏0 يثشفر بروتين ‎FVII‏ أو نواقل أو نواقل إظهار مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض يشفر بروتين |/1/ا. في نماذج محددة؛ يشتمل ناقل فيروسي على ناقل ‎AAV‏ ناقل فيروسي قهقري؛ ناقل فيروس غدي؛ بلازميد؛ أو ناقل فيروس بطيء. في نماذج معينة؛ يشتمل ناقل ‎AAV‏ على نمط مصلي ‎AAV‏ أو نمط زائف ‎AAV‏ مشتمل على نمط مصلي لقصيفة ‎AAV‏ مختلف عن نمط مصلي ‎(BTR‏ جوانب محددة إضافية؛ يشتمل ناقل ‎AAV 5‏ على متوالية قفصية 1/01 ‎VP2‏ و/ أو ‎VP3‏ لها تطابق متوالية بنسبة 775 أو أكثر مثلاء 80 85 90 95 96 97 98 99 99.1 99.2 99.3« 199.4 799.5 799.6 799.7 299.8 إلخ) مع أي من الأنماط المصلية ‎AAV]‏ ‎(AAVT (AAVG6 (AAVS (AAV4 (AAV3 (AAV2‏ 6 /اطحل 9/ادفل ‎(AAV10‏ 11 /اطحل ‎AAV-2i8 AAV i Rh74 (Rh10‏ يمكن أن تتضمن نواقل الإظهار مكونات أو عناصر إضافية. في نماذج محددة؛ يتضمن إضافياً ناقل إظهار مثلا ناقل ‎AAV‏ إنترون؛ عنصر تحكم في الإظهار؛ واحد أو أكثر من تكررات طرفية معكوسة ‎AAV (ITRs) inverted terminal repeats‏ (مثلاء أي من: الأنماط المصلية ‎AAV10 AAVY9 (AAVS (AAVT (AAV6 (AAVS (AAV4 (AAV3 (AAV2 AAV]‏ ‎Rh74 (Rh10 (AAV11‏ أى ‎GAAV-2i8 AAV‏ أو توليفة من ذلك)؛ متوالية عديد نوكليوتيد 5 _مالئة و/ أو إشارة عديد ه. في نماذج معينة؛ يكون الإنترون داخل أو يحيط بشكل متباين لحمض
نووي منخفض 006 يشفر ‎(FVII‏ و/ أو يتصل تشغيلياً عنصر التحكم في الإظهار مع الشكل المتباين للحمض النووي منخفض 606 الذي يشفر ‎FVII‏ و/ أو يحيط ‎AAV ITR(S)‏ بالطرف أو 3' من الشكل المتباين للحمض النووي منخفض 606 الذي يشفر ‎FVIII‏ و/ أو تحيط متوالية عديد نوكليوتيد المالئة بالطرف 5' أو 3' من الشكل المتباين للحمض النووي منخفض
5 6م6 الذي يشفر ‎FVIII‏ ‏في نماذج محددة؛ يشتمل عنصر التحكم في الإظهار على عنصر تحكم تكوبني أو قابل للتنظيم؛ أو عنصر تحكم في الإظهار خاص بنسيج أو معزز. في نماذج معينة؛ يشتمل عنصر التحكم في الإظهار على عنصر يضفي إظهار في الكبد (مثلا معزز ‎TTR‏ أو معزز ‎TTR‏ طفري). طبقاً للاختراع؛ يتم إضافياً توفير خلايا عائلة تتضمن أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CPG‏
0 تشفر بروتين 1/111 كما هو مذكور هنا. في نماذج محددة؛ تتضمن خلية ‎Alle‏ شكل متباين لحمض نووي منخفض 006 يشفر بروتين ‎FVII‏ أو ناقل إظهار مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر بروتين [||1/1. في نماذج معينة؛ تنتج تلك ‎WAN‏ العائلة بروتين ‎FVII‏ تشفره الأشكال المتباينة للحمض النووي وتتم استعادة بروتين ‎FVII‏ الناتج. يمكن إعطاء البروتين ‎FVII‏ الناتج عن طريق الخلايان اختيارياً المعزول و/ أو المنقى؛ إلى كائن.
5 طبقاً للاختراع؛ يتم إضافياً أيضا توفير التركيبات المشتملة على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر ‎FVII‏ نواقل ونواقل إظهار مذكورة هنا. في نماذج محددة؛ تتضمن التركيبات الصيدلانية ناقل؛ ناقل إظهار؛ أو فيروس أو ناقل ‎AAV‏ في ‎Bale‏ حاملة أو ‎sale‏ ‏مسوغة متوافقة حيوباً. تتضمن اختيارياً تلك التركيبات الصيدلانية ‎AAV‏ بقفيصة فارغة (مثلا؛ ينقصها جينوم ناقل مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر |/1/ا). في
0 نماذج محددة إضافية؛ يتم تغليف شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر ‎(Jalil FVII‏ نواقل ‎leds)‏ أو فيروس أو نواقل ‎(BAAV‏ جسيم شحمي أو يتم خلطهم مع شحوم فوسفورية أو مذيلات. طبقاً للاختراع؛ يتم إضافياً حتى الآن توفير طرق لتوصيل أو نقل شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر بروتين ‎7/1١!‏ في كائن ثديي أو خلية ثديية. في أحد النماذج؛ تتضمن
الطريقة إعطاء أو توصيل شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر ‎FVIII‏ ناقل مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر بروتين [(1/1]؛ ‎Jab‏ إظهار مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر بروتين !1/1 أو فيروس أو ناقل ‎AAV‏ مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر بروتين ‎FVII‏ كائن ثديي أو خلية شيية؛ بالتالي يتم توصيل أو نقل متوالية الحمض النووي إلى كائن ثديي أو خلية ثديية. تقدم تلك
الطرق شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر بروتين ‎FVII‏ إلى خلية ثديية في مستنبت أو في كائن ‎Sie)‏ مريض). تتضمن أيضاً طرق الاختراع علاج كائنات ثديية (على سبيل المثال» مرضى) مثلا إنسان بحاجة إلى ‎7/11١‏ (ينتج الإنسان كمية غير كافية من بروتين ‎FVII‏ أو بروتين ‎FVII‏ ناقص أو شاذ).
0 في أحد النماذج؛ تتضمن طريقة علاج كائن ثديي بحاجة إلى ‎(FVIIE‏ توفير شكل متباين لحمض نووي منخفض 006 يشفر ‎(FVII‏ أو ناقل مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض 6 يشفر ‎FVII‏ ناقل إظهار مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض 606 يشفر ‎¢FVIII‏ أو فيروس أو ناقل ‎AAV‏ مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVIII‏ وإعطاء كمية من الشكل المتباين للحمض النووي منخفض ‎CPG‏ الذي يشفر ‎FVII‏ أو
5 تاقل مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض 606 يشفر ‎FVII‏ أو ناقل إظهار مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر !|7/1؛ أو فيروس أو ناقل ‎AAV‏ مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ الكائن الثديي بحيث يتم إظهار ‎FVIII‏ الذي يتم تشفيره بواسطة الشكل المتباين للحمض النووي في الكائن الثديي. في نموذج آخرء تتضمن طريقة معالجة اضطراب متعلق بإرقاء الدم في مربض بحاجة لذلك
0 (ثلاء مريض ينتج كمية غير كافية من بروتين ‎(FVII‏ أو بروتين ‎FVII‏ ناقص أو شاذ) إعطاء كمية فعّالة علاجياً من شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر ‎FVII‏ أو ناقل مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض 006 يشفر ‎FVII‏ أو ناقل إظهار مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض 006 يشفر [/1/1؛ أو فيروس أو ناقل ‎AAV‏ مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر ‎FVII‏ في مادة حاملة مقبولة حيوباً إلى المريض.
في نماذج معينة لطرق الاختراع؛ يتم إظهار ‎FVII‏ عند مستويات لها تأثير مفيد أو علاجي على الكائن الثديي؛ و/ أو يتم إظهار ‎FVII‏ في خلية؛ نسيج أو عضو الكائن الثديي. تتضمن تلك النماذج إدخال شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ في نسيج أو عضو مثل الكبد. تتضمن تلك النماذج أيضا إدخال شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ ‏5 إلى خلية إفرازية. تتضمن تلك النماذج إضافياً إدخال شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ ‏يشفر ‎FVII‏ إلى خلية الغدد الصماء أو خلية بطانية. تتضمن تلك النماذج ‎Tila)‏ إدخال شكل متباين لحمض نووي منخفض 006 يشفر ||1/1] إلى خلية كبدية؛ خلية بطانية جيبية؛ خلية كبيرة ‎call‏ خلية بصفيحة دموية أو خلية جذعية مكونة للدم. الكائنات المقترحة ‎Sli)‏ مريض) وكائنات ثديية ‎Ola)‏ بشريين) لإعطاء ‎Ola)‏ توصيل) شكل 10 متباين لحمض نووي منخفض 006 يشفر 7/11 أو ناقل مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ أو ناقل إظهار مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ أو فيروس أو ناقل ‎AAV‏ مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض 006 يشفر ‎FVII‏ تتضمن تلك التي لديها أو عُرضة لخطر الإصابة باضطراب مثلا: هيموفيليا ‎A‏ أمراض فون وبلبراند ونزيف دموي مرتبط بإصابة رضحية؛ إصابة؛ ‎hala‏ نقص الصفيحات في ‎ail)‏ سكتة؛ اعتلال التخثرء تجلط الدم داخل الأوعية الدموية المنتشر ‎(DIC) disseminated intravascular coagulation‏ أو اضطراب بسبب معالجة فرط منع التخثر. الكائنات المقترحة ‎Sli)‏ مريض) وكائنات ثديية ‎Ola)‏ بشريين) لإعطاء ‎Ola)‏ توصيل) شكل متباين لحمض نووي منخفض 006 يشفر ‎FVIII‏ أو ناقل مشتمل على شكل متباين لحمض 0 نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ أو ناقل إظهار مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ أو فيروس أو ناقل ‎AAV‏ مشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ تتضمن تلك تكون سالبة المصل للأجسام المضادة ‎AAV‏ بالإضافة إلى تلك التي لديها أو عُرضة لخطورة تطوير أجسام المضاد ‎AAV‏ قد تكون تلك الكائنات ‎Ole)‏ ‎(Lane‏ وكائنات ثديية (مثلاء بشربين) سالبة المصل أو موجبة المصل بالنسبة لنمط مصلي
— 0 1 — ‎(AAVS (AAVT AAV6 (AAVS5 (AAV4 AAV3 (AAV2 AAV]‏ ولاح ‎AAV10‏ ‏1ه ‎AAV-Rh74 5 AAV-Rh10‏ ‎ull‏ تتضمن إضافياً تركيبات وطرق الاختراع إعطاء قفيصة فارغة من ‎AAV‏ الكائن ‎ll‏ ‏المذكور أو المريض المذكور. في نماذج محددة؛ يتم إضافياً إعطاء قفيصة فارغة من الأنماط المصلية ‎(AAVS (AAV4 AAV3 (AAV2 AAV]‏ 6/احطح ‎(AAVS (AAVT‏ ولاطحل ‎AAV-Rh10 AAV-12 (AAV11 AAV10‏ و/ أو ‎AAV-Rh74‏ إلى الكائن الثديى أو المربيض ‎٠.‏ ‏تتضمن طرق الإعطاء ‎la)‏ التوصيل) طبقاً للاختراع أي نسق وصول أو توصيل؛ خارج الجسم ‎al‏ أو داخل الجسم الحي. في نماذج محددة يكون الإعطاء ‎Sie)‏ التوصيل): داخل الوريد؛ 0 داخل الشربان» داخل العضل؛ تحت الجلد؛ داخل التجويف؛ عن طريق إدخال أنبوب إلى المعدة؛ أو من خلال قسطرة . يوفر الاختراع أيضاً طرق لاختبار أشكال متباينة للحمض النووي منخفضة ‎CpG‏ تشفر ‎FVII‏ في نماذج حيوانات صغيرة وكبيرة التي تتحمل ‎FVIII‏ بشري لتقييم الجرعة ولمراقبة استمناع الأشكال المتباينة. استخدام النماذج الحيوانية يوفر إعداداً يسمح بتقييم البشر المتلقيين ‎Wa‏ علاج بديل 5 لبروتين مع ‎hFVIII-BDD‏ بدون دليل على استجابة جسم مضاد ضد 751/1 ومن المرجح أنهم يُظهروا استجابة مناعية لتلك الأشكال المتباينة. شرح مختصر للرسومات شكل 1 يوضح مستويات ‎FVII‏ بشري ‎(WFRV‏ بعد 24 ساعة من حقن وريد ذيلي ديناميكي مائي ب 50 ميكروجرام ‎cased‏ ل 18 نسخة مختلفة ‎XO1-X18)‏ مقابل تعريف المتوالية أرقام: 0 18-1( على التوالي) 5 ‎FVII-CO3‏ (تعريف المتوالية رقم: 21). الأشكال 22-12 توضح مستويات ‎FVII‏ في فئران مصابة بالهيموفيليا -/-8/004 بعد إعطاء ‎AAV Jalil‏ من ‎FVII‏ )1( 603 (تعريف المتوالية رقم: 21(« 609ل (تعريف المتوالية رقم: 9)؛ 2 (تعريف المتوالية رقم: 12) 5 ‎X16‏ (تعريف المتوالية رقم: 16)؛ (ب) 603 (تعريف
— 1 1 — المتوالية رقم: 21(¢ 601 (تعريف المتوالية رقم: 1( 5 ‎X11‏ (تعريف المتوالية رقم: 11)؛ أو ‎(z)‏ ‎CO3‏ (تعريف المتوالية رقم: 21( 2607 (تعريف المتوالية رقم: 7) و7610 (تعريف المتوالية ‎tad)‏ ‏10). ‏الأشكال 3-13 توضح مستويات مستضد ‎REVIT‏ بالنانوجرام/ ملليلتر (ب) أو ‎dal‏ 7
للمستضد (ج) في بلازما من فتران ‎NOD/SCID‏ بعد الإعطاء داخل الوريد سواء وسط ناقل (دائرة)» 4 ‎x‏ 1010 (مريع)؛ 8 * 1010 ‎(lic)‏ أو 1.6 ‎x‏ 1110 جينوم ناقل/ فأر (مثلث مقلوب) من ‎AAV-SPK-8005-hFVIII‏ لمدة 87 يوم. تمثل الخطوط متوسطات ‎1/1/١‏ + بالانزيم ‎(ELISA) enzyme-linked immunosorbent assay‏ وبتحول ‎FVII‏ بالنانوجرام/
مليلتر إلى مستويات ‎FVII‏ طبيعية7 بافتراض أن 150 نانوجرام/ ملليلتر يكافيء نشاط بنسبة 2100 ‎JSG‏ 3ج يوضح مستويات دايمرات لا في بلازما بفئران ‎NOD/SCID‏ بعد الإعطاء داخل الوريد سواء وسط ناقل» 4 * 1010« 8 ‎x‏ 1010 أو 1.6 ‎agua 1110 x‏ ناقل/ فأر من ‎AAV-‏ ‎SPK-8005-h FVIII‏ كما هو موضح؛ من اليسار إلى اليمين عند كل نقطة ‎(dia)‏ المحور
السيني. تمثل الأعمدة متوسطات ‎SD‏ + للفثران بكل مجموعة. يتم اختبار مستوبات الدايمر ‎D‏ ‏بواسطة الفحص المناعي المرتبط ‎enzyme-linked immunosorbent assay VL‏ ‎.(ELISA)‏
الشكل 4 يوضح إعداد دراسة ‎NHP‏ ‏الأشكال 25-15 توضح مستويات المستضد ‎FVII‏ في كائنات رئيسة غير بشرية -000
‎(NHPS) human primates 0‏ بعد إعطاء داخل الوريد سواء 2 ‎x‏ 1210 (أ)؛ 5 ‎x‏ 1210 (ب) أو 1 ‎[dil asia 1310 x‏ كجم (ج) من 50/4-8005-/01/. تمثل الخطوط الحيوانات الفردية. يتم اختبار مستويات بلازما ‎FVII‏ بشري بواسطة ‎ELISA‏ وتمثل القياسات المتكررة؛ الناتجة عن طريق النزف الدموي المتسلسل» على نفس مجموعة الحيوانات أثناء فترة الدراسة ‎=n)‏
— 2 1 — 3-2 حيوانات بكل مجموعة). يتم توضيح مستويات ‎FVII‏ بشري المقاسة في الحيوانات المعالجة مع الوسط الناقل بالمربعات الفارغة في كل المخططات الثلاثة. ع = تطوير المثبطات ضد ‎FVII‏ ‏الأشكال 26-16 توضح مستويات ناقلة أمين الألانين ‎(ALT) alanine aminotransferase‏ في كائنات رئيسة غير بشرية ‎((NHPs) non-human primates‏ عند 2 ‎x 5 )( 1210 x‏ 0 (ب) أو 1 ‎x‏ 1310 جينوم ناقل/ كجم (ج) من ‎AAV-SPK-8005‏ ‏الأشكال 7-17ج توضح مستويات دايمر ‎AD‏ كائنات رئيسة غير بشرية ‎non-human‏ ‏5 (1105ل8). تركيز مستضد الدايمر نا في البلازما من 1105ل بعد إعطاء داخل الوريد سواء 2 ‎x 5 ¢(f) 1210 x‏ 1210 (ب) أو 1 ‎x‏ 1310 جينوم ناقل/ كجم (ج) من ‎AAV=‏ ‏0 501-8005. يشير الخط المنقط إلى 500 نانوجرام/ ‎lille‏ الحد الأعلى من الطبيعي للدايمرات 00 فى البشر. الشكل 8 يوضح ملخص بيانات مستويات ‎FVII‏ في الجرعات الثلاثة ل ‎AAV-SPK-8005‏ ‏الأشكال 9-19 توضح مستويات ‎FVII‏ في بلازما قرود مكاك رياح بعد إعطاء داخل الوريد سواء 2 ‎x‏ 1210 (أ)» 6 ‎x‏ 1210 (ب) أو 2 ‎x‏ 1310 (جينوم ناقل/ كجم) (ج) من ‎AAV=‏ ‏5 5014-8011 (قفيصة ‎—(LKO3‏ /11/11). تمثل الخطوط الحيوانات الفردية. يتم اختبار مستويات بلازما ‎VII‏ بواسطة ‎ELISA‏ وتمثل القياسات المتكررة؛ الناتجة عن طريق النزف الدموي المتسلسل» على نفس مجموعة الحيوانات أثناء فترة الدراسة ‎=n)‏ 3 حيوانات بكل مجموعة). يتم توضيح مستويات ‎FVII‏ بشري المقاسة في الحيوانات المعالجة مع الوسط الناقل بالمريعات الفارغة (0 = 2). ع8 = الزمن عند الكشف عن تطوير مثبطات ضد ‎FVIII‏ فى كل حيوان فردي. 0 الشكل 10 يوضح مقارنة مستويات ‎FVIII‏ تحققت مع ‎AAV-SPK-8011‏ (قفيصة 1/403 )- 121/1 مع المستويات المسجلة ل ‎FVII‏ الذي تم توصيله بواساطة نواقل ‎AAV‏ مع القفيصات ‎AAVS 5 AAV5‏
— 3 1 — ‎AAVS5: http://www .biomarin.com/pdf/BioMarin_R&D_Day_4 20_2016.pdf,‏ ‎slide 16. AAV8: Mcintosh J et al.
Blood 2013; 121(17):3335-44.‏ الشكل 11 يوضح التوزيع الحيوي لنسيج ‎AAV=SPK‏ (تعريف المتوالية رقم: 28( 4 ‎AAV=‏ ‎LKO3‏ (تعريف المتوالية رقم: 27) في كائنات رئيسة غير بشرية؛ غالباً في الكلى؛ الطحال والكبد (العمود الثالث لكل نسيج). الشكل 12 يوضح إظهار ‎FVII‏ في الكبد والطحال بعد الإعطاء الجهازي ل ‎AAV-SPK-8005‏ ‏إلى الفئران. الشكل 13 يوضح فعالية تنبيغ القفيصة ‎AAV-LKO3‏ التي تم تحليلها في المعمل. المحور السيني؛ قرد رياح (عمود رأسي أيسر)؛ بشري (عمود رأسي أيمن). 0 الأشكال 14-114ب توضح تركيز بلازما ل )ا في الأرانب بعد إعطاء ‎AAV‏ تتلقى الأرانب حقن داخل الوريد من نواقل ‎AAV-SPK hFIX‏ أى ‎AAV-LKO3‏ عند جرعات (أ) 1 ‎x‏ 1210 جينوم ناقل/ كجم (جرعة منخفضة»؛ ‎٠‏ = 4) أو (ب) 1 % 1310 جينوم ناقل/ كجم (جرعة عالية؛ ‎=n‏ 5-3). تتم مقارنة مستويات ‎FIX‏ بشري بين المجموعات باستخدام اختبار مان ويتني مع ذيلين. لا تتم ملاحظة اختلافات كبيرة. يتم استبعاد الحيوانات 5 و15 في المجموعات منخفضة 5 الجرعة من التحليل بسبب ‎oom‏ الحقن. يتم أيضاً استبعاد الحيوانات 9 و10 من المخطط حيث أنها تُظهر أجسام ‎alias‏ متعادلة ضد ‎FIX‏ بشري. الأشكال 15-15ب توضح مسار زمني لتكوين جسم مضاد مع ‎FIX‏ بشري (مضاد ‎(FIX‏ تتلقى الأرانب حقن داخل الوريد من نواقل ‎AAV-SPK hFIX‏ أى ‎AAV-LKO3‏ عند جرعات (أ) 1 ‎x‏ ‎asia 1210‏ ناقل/ كجم (جرعة منخفضة؛ ‎N‏ = 4) أو (ب) 1 ‎x‏ 1310 جينوم ناقل/ كجم (جرعة ‎=N Alle‏ 5-3( . يتم توضيح البيانات لكل حيوان فردي . الوصف التفصيلي: يتم الكشف هنا عن أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ تشفر ‎Baas FVII‏ عن الحمض النووي من النوع البري الذي يشفر ‎FVII‏ قد يتم إظهار تلك الأشكال المتباينة للحمض النووي
منخفضة ‎CpG‏ التي تشفر ‎FVII‏ عند مستويات زائدة في الخلايا و/ أو الحيوانات؛ التي يمكن أن توفر في المقابل مستويات بروتين ‎FVII‏ زائدة في الجسم الحي. يتم الكشف أيضاً عن أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة 006 تشفر ‎FVII‏ التي يمكن توفيرها لنشاط حيوي أكبر في المعمل و/ أو في الجسم الحي. الشكل المتباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ تمثيلي يشفر ‎FVII‏ ‏5 يُظهر واحد أو أكثر مما يلي: )1( إظهار زائد في ‎WAY‏ و/ أو الحيوانات؛ (2) نشاط زائد؛ و(3) تأثير علاجي عند جرعات ‎AAV‏ أقل من !751/1 من النوع البري. يتم استخدام المصطلحات "عديد نوكليوتيد ‎aes" 3" polynucleotide‏ نووي ‎nucleic acid‏ " بصورة قابلة للتبادل هنا للإشارة إلى كل أشكال الحمض النووي؛ الأوليجونوكليوتيدات ‎oligonucleotides‏ ¢ بما في ذلك حمض ديوكسي رببونيوكليك ‎deoxyribonucleic acid‏ ‎(DNA) 0‏ وحمض الرببونوكليك ‎(RNA) ribonucleic acid‏ يتضمن عديد النوكليوتيدات ‎DNA‏ ‎DNA 5 cDNA «agin‏ مضاد للتحسس» 5 ‎FRNA tRNA (MRNA‏ مضفور أو غير مضفور ‎DNA‏ أو ‎RNA‏ تنبيطي ‎Jie (S)RNA lie (RNAI)‏ دبوس الشعر صغير أو قصين ‎RNA‏ ‏مجهري ‎(sI)RNA (MIRNA)‏ متداخل صغير أو قصيرء ‎RNA‏ مضفور بصورة عابرة؛ أو ‎RNA‏ مضاد للتحسس). عديد النوكليوتيدات يتضمن عديد نوكليوتيدات طبيعية الوجود؛ تخليقية؛ ومُعدلة أو متغيرة عن قصد ‎Ole)‏ حمض نووي متباين). يمكن أن يكون عديد النوكليوتيدات فردي؛ مزدوج؛ أو ثلاثي؛ خطي أو دائري؛ ويمكن أن يكون له أي طول. عند مناقشة عديد النوكليوتيدات؛ يتم يتم هنا وصف متوالية أو بناء لعديد نوكليوتيد محدد طبقاً لاتفاقية توفير المتوالية في الاتجاه 5' إلى 3"'. حسب الاستخدام هناء تعني المصطلحات 'تعديل" أو 'شكل متباين" والأشكال المختلفة النحوية لها 0 أنه يتم انشقاق حمض نووي؛ عديد ببتيد أو متوالية من ذلك من متوالية مرجعية. بالتالي قد يكون للمتواليات المعدلة أو المتباينة بدرجة كبيرة نفس الإظهارء النشاط أو وظيفة؛ أو إظهار أو نشاط أو وظيفة أكبر أو أقل من المتوالية المرجعية؛ لكن تحتفظ على الأقل بالنشاط أو الوظيفة الجزئية للمتوالية المرجيعة. يكون مثال محدد للتعديل أو الشكل المتباين هو شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏
يشير شكل متباين ‎(man‏ نووي" أو "عديد نوكليوتيد" إلى متوالية مُعدلة يمكن تغييرها وراثياً مقارنة من النوع البري. قد يتم تعديل المتوالية تعديلاً وراثياً بدون تغيير متوالية البروتين المشفرة. بطريقة بديلة؛ قد يتم تعديل المتوالية تعديلاً وراثياً لتشفير بروتين متباين. يمكن أيضاً أن يشير شكل متباين لحمض نووي أو عديد نوكليوتيد إلى متوالية توليفة تم تعديل الكودون بها لتشفير بروتين لا يزال
يحتفظ على الأقل بتطابق متوالية جزئية مع متوالية مرجعية؛ ‎Wie‏ متوالية بروتين من نوع بري؛ وأيضاً تم تعديل الكودون بها لتشفير بروتين متباين. على سبيل المثال؛ قد يتم تغيير بعض الكودونات من شكل متباين لحمض نووي بدون تبديل الاحماض النووية للبروتين ‎(FVII)‏ المشفر بذلك؛ ويتم تغيير بعض كودونات الشكل المتباين للحمض النووي الذي يغير في المقابل الأحماض الأمينية للبروتين ‎(FVII)‏ المشفر بذلك.
0 يشير المصطلح "عامل ‎(FVII) VIE‏ متباين" إلى ‎1/1١‏ مُعدل تم تغييره وراثياً مقارنة مع ‎FVII‏ ‏من النوع البري غير المُعدل ‎Sie)‏ تعريف المتوالية رقم: 19) أو 1/1/1-800. يمكن الإشارة إلى ذلك الشكل المتباين على أنه 'شكل متباين لحمض نووي يشفر العامل !1/1/1 (1/111)". إن مثال محدد على شكل متباين هو حمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر بروتين ‎FVII‏ أو ‎FVII=‏ ‎.BDD‏ ليس هناك ‎dala‏ إلى ظهور المصطلح "شكل متباين" في كل حالة مرجعية لحمض نووي
5 منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎(Jia FVII‏ المصطلح "حمض نووي منخفض 006" إلخ قد يلغي المصطلح 'شكل متباين" لكنه يعني أن الإشارة إلى ‎ana‏ نووي منخفض ‎"CPG‏ تتضمن الأشكال المتباينة عند المستوى الجيني. بنيات ‎FVII‏ التي بها محتوى ‎CPG‏ منخفض يمكن أن تُظهر تحسينات مقارنة مع ‎FVII‏ أو ‎FVIII-BDD‏ من النوع البري التي لا يتم فيها خفض محتوى 206؛ وبتم هذا بدون تعديلات على
0 الحمض النووي التي تؤدي إلى تغييرات للحمض الأميني إلى بروتين ‎FVIII‏ أو ‎FVII-BDD‏ ‏المشفر. عند مقارنة الإظهار؛ إذا كان الحمض النووي منخفض ‎CPG‏ يشفر بروتين ‎FVII‏ يحتفظ بالنطاق 8؛ فإنه من المناسب مقارنته مع إظهار ‎FVII‏ من النوع البري؛ وإذا كان الحمض النووي منخفض ‎CpG‏ يشفر بروتين ‎FVII‏ بدون النطاق 8؛ فإنه تتم مقارنته مع إظهار ‎FVII‏ من النوع البري الذي يتسم أيضاً بإزالة النطاق 8.
يمكن أن يعني أيضاً "عامل ‎VINE‏ متباين ‎"(FVII‏ بروتين ‎FVII‏ مُعدل بحيث يتسم البروتين المعدّل بتغيير الحمض الأميني مقارنة مع ‎FVII‏ من النوع البري. مرة ‎«(AT‏ عند مقارنة النشاط و/ أو الثبات؛ إذا كان البروتين ‎FVII‏ المتباين المشفر يحتفظ بالنطاق 8؛ يكون من المناسب مقارنته مع !1/11 من النوع البري؛ وإذا كان البروتين ‎FVII‏ المتباين المشفر يتسم بإزالة نطاق 8؛ فإنه تتم مقارنته مع ‎FVII‏ من النوع البري الذي يتسم أيضاً بإزالة النطاق 8. يمكن أن يتضمن ‎FVII‏ متباين جزءِ من النطاق 8. بالتالي» يتضمن 71/1/1-800 جزءِ من ‎(Lhe .8 Gl‏ في ‎FVIII-BDD‏ تتم إزالة النطاق 8. يمكن أن يتضمن ‎FVII‏ متباين متوالية ‎“SQ”‏ مذكورة على أنها ‎SFSQNPPVLKRHQR‏ ‏(تعريف المتوالية رقم: 29). نمطياً؛ يتسم ‎FVII‏ المتباين ذو ‎(FVII/SQ) SQ‏ ب 800؛ ‎ie‏ ‏0 تتم إزالة على الأقل كل أو جزءِ من 80. يكون ل !71/11 المتباين» ‎FVII-BDD Mis‏ كل أو ‎ga‏ ‏من المتوالية ‎“SQ”‏ أي كل أو جزء من تعريف المتوالية رقم: 29. بالتالي؛ على سبيل المثال؛ يكون ل ‎FVII-BDD‏ المتباين مع متوالية ‎(SFSQNPPVLKRHQR) SQ‏ تعريف المتوالية رقم: 29) كل أو فقط ‎gia‏ من متوالية الحمض الأميني ‎.SFSQNPPVLKRHQOR‏ على سبيل ‎«Jud‏ يكون ‎FVII-BDD I‏ 1 2« 3 4« 5< 6» 7 8 9< 10 11 12 أو 13 وحدة 5 حمض أميني بنائية من ‎SFSQNPPVLKRHQR‏ المتضمنة. بالتالي؛ يتم تضمين ‎SFSQNPPVLKRHQR‏ مع 1 2 3 4« 5< 6« 7 8 9< 10< ¢11 12 أو 13 إزالة داخلية بالإضافة إلى 1 2 3 ¢4 5« 6« 7« 8 9< 10« 11( 12 أو 13 إزالة للطرف الأميني أو الكريوكسي في بروتينات ‎FVII‏ المتباينة المذكورة هنا. تتضمن "عديد الببتيدات" "البروتينات" و"الببتيدات" المشفرة بواسطة متواليات "الحمض النووي" أو 0 "عديد نوكليوتيد" متواليات أصلية كاملة الطول ‎(FVII‏ كما مع البروتينات من النوع البري طبيعية الوجود؛ بالإضافة إلى المتواليات الفرعية الوظيفية؛ الأشكال المُعدّلة أو الأشكال المتباينة للمتوالية طالما أن المتوالية الفرعية؛ الشكل المُعدل أو الشكل المتباين يحتفظوا بدرجة وظيفية للبروتين الأصلي كامل الطول. على سبيل المثال؛ يمكن أن يتسم الحمض النووي منخفض ‎CPG‏ الذي يُشفر بروتين ‎FVII‏ بإزالة نطاق 8 كما هو مذكور هنا ‎(Sang‏ أن يحتفظ بوظيفة التخثر. في طرق 5 واستخدامات الاختراع» يمكن أن تكون تلك عديد الببتيدات؛ البروتينات والببتيدات المشفرة بواسطة
متواليات الحمض الأميني وليس من الضرورة متطابقة مع البروتين داخلي المنشاً الذي يكون ‎(pails‏ أو الذي يكون إظهاره غير كافياً؛ أو ناقصاً في الكائن الثديي المعالج. تتضمن الأمثلة غير المحدودة على التعديلات واحد أو أكثر من استبدالات نوكليوتيد أو حمض أميني (مثلاء 3-1 5-3« 10-5 15-10 20-15« 25-20« 30-25« 40-30« 40- 100-50« 150-100 200-150« 250-200« 500-250 750-500 750-
0 أو أكثر من النوكليوتيدات أو الوحدات البنائية). إن مثالاً على تعديل حمض نووي هو خفض 006. في نماذج معينة؛ يكون للحمض النووي منخفض ‎CPG‏ الذي يشفر ‎FVII‏ مثلا بروتين ‎FVII‏ بشري» 10 أو أقل من 6065 مقارنة مع متوالية من النوع البري تشفر عامل ‎FVIII‏ بشري؛ أو يكون له 5 أو أقل من 6065 مقارنة مع متوالية من النوع البري تشفر عامل
‎1/١ 0‏ بشري؛ أو لا يكون له أكثر من 5 0065 في الحمض النووي منخفض ‎CPG‏ الذي يشفر ‎FVII‏ ‏إن مثالاً على تعديل حمض أميني هو استبدال أو إزالة حمض أميني تحفظي (مثلا؛ متواليات فرعية أو شظايا) من متوالية مرجعية؛ مثلا ‎FVII‏ مثل ‎FVII‏ مع إزالة نطاق 8. في نماذج محددة؛ تحتفظ متوالية مُعدلة أو متباينة بجزء على الأقل من وظيفة أو نشاط المتوالية غير
‏5 المُعدلة. يتم بوضوح تضمين كل الأشكال الثديية وغير الثديية للحمض النووي المشفر للبروتينات؛ بما في ذلك الأشكال الثديية الأخرى للحمض النووي منخفض ‎CPG‏ الذي يشفر ‎FVII‏ وبروتينات ‎FVIII‏ ‏المكتشفة هناء سواء المعروفة أو غير المعروفة. بالتالين يتضمن الاختراع الجينات والبروتينات من الكائنات غير الثديية؛ كائنات ثديية بخلاف البشرء؛ والبشرء. حيث تعمل الجينات والبروتينات
‏0 بطريقة مشابهة بدرجة كبيرة لجينات ويروتينات ‎OH) FVII‏ بشري) الموصوفة هنا. يشير المصطلح 'ناقل" إلى جزي حمض نووي حامل صغير؛ بلازميد؛ فيروس (مثلا؛ ‎(AAV JBL‏ أو وسط ناقل آخر يمكن معالجته بواسطة إدخال أو دمج حمض نووي. يمكن استخدام تلك النواقل للمعالجة الوراثية (أي؛ "نسخ النواقل")؛ لإدخال/ نقل عديد النوكليوتيدات إلى الخلاياء ولتنسخ أو ترجمة عديد النوكليوتيد الداخل في الخلايا. يكون ‎JU‏ الإظهار" هو ناقل مخصص يحتوي على
جين أو متوالية حمض نووي ذات مناطق تنظيمي ضرورية مطلوية للإظهار في خلية ‎Able‏ ‏تحتوي وراثياً متوالية حمض نووي للناقل على الأقل على أصل تنسخ للانتشار في خلية واختيارياً عناصر إضافية؛ مثلا متوالية عديد نوكليوتيد غير متجانسة؛ عنصر تحكم في الإظهار (مثلا؛ معزز» مُحسّن)؛ إنترون» ‎dTR(S)‏ علامة قابلة للانتقاء ‎Mie)‏ مقاومة مضادة للمضاد الحيوي)؛ إشارة تذييل بعديد الأدينيلات. يشتق الناقل الفيروسي من أو يعتمد على واحد أو أكثر من عناصر الحمض النووي التي تشمل جينوم فيروسي. تتضمن النواقل الفيروسية المحددة فيروسة بطيئة؛ فيروسة بطيئة من نوع زائف ونواقل فيروسة صغيرة؛ مثلا نواقل فيروس مصاحب للغدة ‎(AAV)‏ يتم أيضاً توفير نواقل مشتملة على حمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر ‎FVII‏ ‏10 يعني المصطلح "معاد الاتحاد"؛ كمُعدّل للناقل» مثلا فيروس معاد الاتحاد؛ مثلاء تواقل فيروسة بطيئة أو صغيرة ‎(AAV Sie)‏ بالإضافة إلى مُعدّل للمتواليات مثلا عديد نوكليوتيدات وعديد ببتيدات معاد الاتحاد؛ أنه تتم معالجة التركيبات ‎Sie)‏ معالجة هندسية) بأسلوب لا يحدث ‎Lily‏ ‏في الطبيعة. أحد الأمثلة المحددة على ناقل معاد الاتحاد؛ مثلا ناقل ‎AAV‏ هو إدخال عديد نيوكليوتيد غير موجود بصورة طبيعية في الجينوم الفيروسي من النوع البري (مثلا؛ ‎daly (AAV‏ 5 الجينوم الفيروسي. ويكون أحد الأمثلة على عديد نوكليوتيد معاد الاتحاد هو نسخ حمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر بروتين ‎FVII‏ في ناقل؛ مع أو بدون مناطق 5'¢ 3' و/ أو إنترون حيث يرتبط الجين بصورة طبيعية داخل الجيوم الفيروسي (مثلا؛ ‎(AAV‏ على الرغم من عدم استخدام المصطلح "معاد الاتحاد" دائما هنا بالإشارة إلى النواقل» يتم بوضوح تضمين النواقل الفيروسية ونواقل ‎AAV‏ بالإضافة إلى متواليات مثل عديد النوكليوتيدات؛ الأشكال معادة الاتحاد بما في ذلك 0 عيد النوكليوتيدات» على الرغم من أي إزالة. يشتق "ناقل" فيروسي أو ‎"AAV JB‏ معاد الاتحاد من الجينوم بري النوع لفيروس»؛ مثلا ‎AAV‏ ‏باستخدام طرق جزيئية لإزالة الجينوم بري النوع من الفيروس (مثلا؛ ‎(AAV‏ وياستبداله مع حمض نووي غير أصلي؛ ‎Die‏ حض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر ‎FVII‏ نمطياً؛ من أجل ‎AAV‏ يتم الاحتفاظ بواحدة أو كل من متواليات تكرار طرفية معكوسة ‎(ITR) inverted terminal repeat‏ 5 .من الجينوم ‎AAV‏ في الناقل ‎AAV‏ يتميز ناقل فيروسي ‎viral vector‏ "معاد الاتحاد
‎(AAV lie) " recombinant‏ عن جينوم فيروسي ‎(AAV lie)‏ حيث يتم استبدال كل أو جزء من الجينوم الفيروسي مع متوالية غير أصلية بالنسبة إلى الحمض النووي الجينومي الفيروسي ‎ie (AAV Oli)‏ حمض نووي منخفض 006 يشفر ‎FVII‏ بالتالي يعين إدخال متوالية غير أصلية الناقل الفيروسي (مثلا؛ ‎(AAV‏ على أنه ناقل "معاد الاتحاد"؛ الذي في حالة ‎AAV‏ تتم الإشارة إليه على أنه ‎Ji‏ /اطط".
يمكن تعبئة متوالية ناقل معاد الاتحاد ‎lia)‏ بطيء؛ صغير»؛ ‎—(AAV‏ تتم الإشارة إليها هنا على أنها "جسيم” لإصابة المتوالية بعدوى (تنبيغ) لخلية؛ خارج الجسم الحي؛ في المعمل أو في الجسم الحي. عند تغليف متوالية ناقل معاد الاتحاد أو تعبئتها في جسيم ‎AAV‏ يمكن أيضا الإشارة إلى الجسيم على أنه ‎CTAAV”‏ تتضمن تلك الجسيمات بروتينات تغلف أو تعباً الجينوم الناقل. تتضمن
0 الأمثلة المحددة بروتينات غلاف فيروسي؛ وفي حالة ‎AAV‏ بروتينات قفيصة. يشير "جينوم” ناقل إلى ‎edn‏ من متوالية البلازميد معاد الاتحاد التي تتم تعبئتها أو تغليفها لتشكيل جسيم فيروسي ‎(AAV lia)‏ في الحالات التي يتم فيها استخدام بلازميدات معادة الاتحاد لبناء أو تصنيع نواقل معادة الاتحاد؛ لا يتضمن الجينوم الناقل ‎gia‏ من "البلازميد" الذي لا يتوافق مع متوالية الجينوم الناقل من البلازميد معاد الاتحاد. هذا ‎ial)‏ الجينومي غير الناقل من البلازميد
5 معاد الاتحاد تتم الإشارة ‎ad)‏ على أنه 'سلسلة أساسية من ‎Cane DU)‏ والذي يكون هام لنسخ وتكبير البلازميد» وهي عملية مطلوية لانتشار وإنتاج فيروس معاد الاتحاد؛ لكن لا يتم تعبئته أو تغليفه بذاته في جسيمات الفيروس ‎(AAV Ole)‏ بالتالي؛ يشير "جينوم” ناقل إلى الحمض النووي الذي تتم تعبئته أو تغليفه بواسطة فيروس ‎(AAV lia)‏ يتم هنا استخدام "جين مضفور' للإشارة بصورة مناسبة إلى حمض نووي معني أو تم إدخاله إلى
0 خلية أو عضو. تتضمن الجينات المضفورة أي حمض نووي؛ مثلا جين يشفر عديد ببتيد أو بروتين (مثلاء حمض نووي منخفض 606 يشفر عامل ‎(VII‏ ‏في خلية بها جين مضفور؛ يتم إدخال/ نقل الجين المضفور عن طريق ‎(Jil‏ مثلا ‎"a AAV‏ أو ‎Ji‏ عدوى" من الخلية. تشير المصطلحات ‎"nit‏ و'إصابة عدوى” إلى إدخال جزيء مثلا حمض نووي إلى خلية أو ‎GIS‏ حي عائل. قد يتم أو لا يتم دمج الجين المضفور في الحمض
النووي الجينومي من الخلية المتلقية. عندما يصبح حمض نووي داخل مدمج في الحمض النووي ‎DNA)‏ جينومي) من الخلية أو الكائن الحي المتلقي من الممكن الحفاظ عليه بثبات في تلك الخلية أو الكائن الحي وأيضاً ‎Als‏ توريثه عن طريق خلايا نسلية أو كائنات حية من الخلية أو الكائن الحي المتلقي. أخيراً؛ قد يوجد الحمض النووي ‎Jalal)‏ في الخلية المتلقية أو الكائن الحي العائل
خارج الكروموسومات؛ أو فقط بصورة عابرة. تكون "الخلية المنبغة" هي خلية يتم إدخال الجين المضفور إليها. طبقاً لذلك؛ تعني خلية 'منبغة' ‎Olid)‏ في كائن ثديي؛ مثل خلية أو نسيج أو خلية عضو)؛ تغيير ‎hy‏ في خلية بعد دمج جزيء خارجي المنشاًء على سبيل ‎(Jha)‏ حمض نووي ‎Ole)‏ جين مضفور) في الخلية. بالتالي؛ تكون الخلية ‎"deal‏ هي خلية يتم فيهاء أو نسيلة منها يتم فيها إدخال حمض نووي خارجي المنشاً.
0 يمكن انتشار الخلية (الخلايا) وإظهار البروتين الداخل؛ أو تنسخ الحمض النووي. بالنسبة لاستخدامات وطرق العلاج الجيني؛ يمكن أن تكون الخلية المنبغة في كائن. يشير "عنصر تحكم في إظهار” إلى متوالية (متواليات) حمض نووي تؤثر على إظهار حمض نووي متصل بصورة قابلة للتشغيل. يمكن أن تتضمن عناصر التحكم؛ بما في ذلك عناصر التحكم في الإظهار كما هي مذكورة هنا ‎Die‏ معززات ومُحسنات؛ متواليات ناقل» بما في ذلك نواقل ‎AAV‏
5 واحد أو أوكثر من "عناصر التحكم في الإظهار”. نمطياً؛ يتم تضمين تلك العناصر لتسهيل تنسخ عديد نوكليوتيد غير متجانس محتمل وحسب الملاءمة ترجمة ‎lie)‏ معزز؛ مُحسّن؛ إشارة جدل للإنترونات»؛ الحفاظ على إطار القراءة الصحيح للجين للسماح بترجمة ‎Jala MRNA‏ الإطار و؛ كودونات التوقف؛ إلخ). تعمل تلك العناصر نمطياً في المقرون؛ الذي تتم الإشارة إليه على أنه عنصر "يعمل كمقرون" لكنه قد يعمل أيضاً في المفروق.
0 يمكن أن يكون التحكم في الإظهار عند مستوى التنسخ؛ الترجمة؛ الجدل؛ استقرار الرسالة؛ إلخ. ‎Laas‏ يكون عنصر التحكم في الإظهار الذي يُعدّل التنسخ قريباً من النهاية 5' (أي؛ "عكس الاتجاه") للحمض النووي المنسوخ. يمكن أن تقع أيضاً عناصر التحكم في الإظهار عند النهاية 3' (أي؛ 'في نفس الاتجاه') للمتوالية المنسوخة أو داخل النسخة المطابقة ‎Ole)‏ في إنترون). يمكن أن تقع عناصر التحكم في الإظهار بجوار أو على بُعد من المتوالية المنسوخة ‎ie)‏ 10-1؛
5 25-10؛ 50-25؛ 100-50؛ 100 إلى 500 أو أكثر من النوكليوتيدات من عديد
النوكليوتيد)» حتى عند مسافات كبيرة. مع ذلك» نظراً لحدود طول النواقل المعينة؛ مثل نواقل
‎(AAV‏ نمطياً تكون عناصر التحكم في الإظهار ضمن 1 إلى 1000 نوكليوتيد من الحمض
‏النووي المنسوخ.
‏من الناحية الوظيفية» يمكن التحكم جزئياً على الأقل في إظهار الحمض النووي المتصل بصورة قابلة للتشغيل بواسطة العنصر (مثلا؛ معزز) بحيث ‎Jed‏ العنصر تنسخ الحمض النووي ون
‏حسب الملاءمة؛ ترجمة النسخة المطابقة. إن مثال خاص على عنصر التحكم في الإظهار هو
‏معزز؛ يقع ‎Sale‏ عند 5' من المتوالية المنسوخة ‎Di‏ حمض نووي منخفض 006 يشفر ‎FVII‏
‏يُزيد المعزز نمطياً كمية ظاهرة من الحمض النووي المتصل بصورة قابلة للتشغيل مقارنة مع كمية
‏ظاهرة عند عدم وجود معزز .
‏0 يمكن أن يشير ‎"ad‏ حسب الاستخدام هنا إلى متوالية واقعة بالقرب من عديد النوكليوتيد غير المتجانس. تقع عناصر المُحسّن نمطياً قبل عنصر معزز لكن تعمل أيضا ويمكن أن تقع بعد أو داخل متوالية ‎lia)‏ حمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎Jab (FVII‏ يمكن أن يقع عنصر مُحسّن قبل أو بعد 100 زوج قاعدة؛ 200 زوج قاعدة؛ أو 300 زوج قاعدة أو أكثر من حمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎(FVII‏ نمطياً تُزيد عناصر المعزز من إظهار حمض نووي متصل
‏5 بصورة قابلة للتشغيل فوق الإظهار الذي يوفره عنصر معزز. قد تشتمل بنية الإظهار على عناصر تنظيمية تعمل على حث الإظهار في نوع محدد من خلية أو نسيج. تتضمن عناصر التحكم في الإظهار (مثلان معززات) تلك النشطة في نوع محدد من خلية أو نسيج, تتم الإشارة إليهم هنا على أنهم "عناصر/ معززات تحكم في إظهار يخص نسيج”. تكون عناصر التحكم في إظهار يخص نسيج نشطة نمطياً في خلية أو نسيج خاص ‎Dae)‏ كبد). تكون
‏0 عناصر التحكم في الإظهار نشطة نمطياً في ‎(DA‏ أنسجة أو أعضاء محددة لأنه يتم التعرف عليها بواسطة بروتينات مُنشط نسخية؛ أو مُنظمات تنسخ أخرى؛ التي تكون ‎Ba‏ لنوع معين من خلية؛ نسيج أو عضو. تعرف لهؤلاء المهرة في النطاق تلك العناصر التنظيمية (انظرء ‎lie‏ ‎.(Sambrook et al. (1989) and Ausubel et al. (1992)‏
دمج العناصر التنظيمية الخاصة بنسيج في بنيات الإظهار من الاختراع توفر توجه نسيج جزئي على الأقل لإظهار حمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ إن الأمثلة على معززات نشطة في الكبد هي المعزز ‎TTR‏ معزز ألفا 1- مضاد للتريبسين بشري -1 ‎human alpha‏ ‎¢(hAAT) antitrypsin‏ زلاك )1997( 71:5124-32 ‎¢tMiyatake, et al.
J.
Virol.,‏ معزز لب فيروس التهاب كبدي ب» )1996( 3:1002-9 ‎«Sandig, et al., Gene Ther.‏ ألفا- فيتويروتين ‎Arbuthnot, et al., Hum.
Gene. «(AFP) alpha—fetoprotein‏ ‎(Ther, 7:1503-14 )1996([‏ ضمن غيرها. إن مثال على مُحسّن نشط في الكبد هو 1104-1 و4-2ا10! بروتين غير شحمي ‎(Allan et al., J. (apoE) E apolipoprotein‏ ‎.Biol.
Chem., 272:29113-19 (1997))‏ تتضمن ‎Lad‏ عناصر التحكم في الإظهار معززات/ مُحسنات واسعة الانتشار أو مختلطة قادرة على حث إظهار عديد نوكليوتيد في العديد من أنواع ‎WAN‏ المختلفة. تتضمن تلك العناصر؛ لكن بدون تحديد متواليات معزز/ مُحسّن مباشر في وقت مبكر للفيروس المضخم للخلايا ‎(CMV) cytomegalovirus‏ متواليات معزز/ ‎(lank‏ لفيروس ساركومة روس ‎Rous‏ ‎(RSV) sarcoma virus‏ والمعززات/ المُحسنات الفيروسية الأخرى النشطة في تشكيلة واسعة 5 من أنواع الخلايا الثديية؛ أو العناصر التخليقية التي لا توجد في الطبيعة (انظر؛ مثلاء ‎Boshart‏ ‎(et al, Cell, 41:521-530 (1985)‏ المعزز 51/40؛ المعزز داي هيدروفولات ربدوكتازن المعزز 8- أكتين السيتويلازمي المعزز كيناز فوسفو جليسرول ‎phosphoglycerol kinase‏ ‎(PGK)‏ ‏عناصر التحكم في الإظهار يمكن أن تضفي أيضاً إظهار بأسلوب قابل للتنظيم؛ بمعنى» أن 0 الإشارة أو المحفز تُزيد أو تقلل إظهار عديد نوكليوتيد غير متجانس متصل بصورة قابلة للتشغيل. تتم الإشارة أيضاً إلى عنصر قابل للتنظيم يُزيد إظهار عديد النوكليوتيد المتصل بصورة قابلة للتشغيل استجابة لإشارة أو محفز على أنه "عنصر قابل للتحريض" (أي؛ يتم تحريضه بواسطة إشارة). تتضمن الأمثلة المحددة؛ لكن بدون تحديد؛ معزز ‎(WE‏ للتحريض الهرموني (مثلان ستيرويد). نمطياً؛ يكون ‎lake‏ الزيادة أو الانخفاض الذي تُضفيه تلك العناصر متناسب مع مقدار 5 الإشارة أو المحفز الموجود؛ كلما ارتفع مقدار الإشارة أو المحفزء يرتفع مقدار الزيادة أو الانخفاض
في الإظهار. تتضمن أمثلة غير محدودة خاصة معزز تيونين معدني ‎(MT) metallothionine‏ من غنم قابل للتحريض بالزنك؛ معزز فيروس ورمي ثديي فأري ‎mouse mammary tumor‏ ‎(MMTV) virus‏ قابل للتحريض مع هرمون ستيرويد؛ نظام المعزز بولي ميراز 77 (الطلب الدولي رقم: 98/10088)؛ نظام قابل لكبح التيتراسيكلين ‎(Gossen, et al., Proc.
Natl.‏ ‎Sci.
USA, 89:5547-5551 )1992(( 5‏ .8680؛ نظام قابل لتحريض التيتراسيكلين ‎¢((Gossen, et al., Science. 268:1766-1769 (1995)‏ انظر أيضا ‎Harvey, et‏ ‎¢al., Curr.
Opin.
Chem.
Biol. 2:512-518 (1998))‏ نظام قابل لتحريض ‎RU486‏ ‎Wang, et al., Gene , (Wang, et al., Nat.
Biotech. 15:239-243 (1997)‏ ‎Ther. 4:432-441 (1997)]‏ ¢ ونظام قابل لتحربض راباميسين ‎(Magari, et al., J.
Clin.‏ ‎Rivera, et al., Nat.
Medicine. 2:1028- ¢Invest. 100:2865-2872 (1997) 0‏ )1996( 1032 عناصر التحكم الأخرى القابلة للتنظيم والتي تكون مفيدة في هذا السياق هي التي يتم تنظيمها بواسطة حالة فسيولوجية خاصة»؛ ‎lie‏ درجة الحرارة؛ المرحلة الحادة؛ التطوير. عناصر التحكم في الإظهار تتضمن ‎Lind‏ العنصر (العناصر) الأصلي لعديد النوكليوتيد غير المتجانس. قد يتم استخدام عنصر تحكم أصلي (مثلاء معزز) عندما يكون من المرغوب أن إظهار عديد النوكليوتيد غير المتجانس يحاكي الإظهار الأصلي. قد يتم استخدام العنصر الأصلي عند الرغبة في تنظيم إظهار عديد النوكليوتيد غير المتجانس بصورة مؤقتة أو بشكل متطور؛ بأسلوب يخص نسيج؛ أو استجابة للمحفز النسخي الخاص. قد يتم ‎Load‏ استخدام عناصر التحكم في الإظهار الأصلية الأخرى مثلا إنترونات؛ مواقع تذييل بعديد الأدينيلات أو متواليات توافق كوزاك. يعني المصطلح "'متصل بشكل قابل للتشغيل" أن يتم وضع المتواليات التنظيمية الضرورية لإظهار متوالية تشفير في المواضع المناسبة بالنسبة لمتوالية التشفير لتؤثر على إظهار متوالية التشفير. أحياناً يتم تطبيق نفس التعريف على ترتيب متواليات التشفير وعناصر التحكم في التنسخ (مثلا معززات؛ مُحسنات؛ وعناصر أنهاء) في ناقل إظهار. أحياناً يتم أيضا تطبيق هذا التعريف على ترتيب متواليات الحمض النووي من جزيء حمض نووي أول وثان حيث يتم توليد جزيء حمض نووي هجين.
في مثال على عنصر تحكم في إظهار بتوصيلة قابلة للتشغيل مع حمض نووي؛ تكون العلاقة
بحيث أن عنصر التحكم يُعدّل إظهار الحمض النووي. بصفة أكثر خصوصية؛ على سبيل المثال؛
يعني اثنتين من متواليات ‎DNA‏ المتصلتين بشكل قابل للتشغيل أن يتم ترتيب اثنين من ‎DNAS‏
(مقرون أو مفروق) بعلاقة حيث تكون واحدة على الأقل من متواليات ‎DNA‏ قادرة على بذل تأثير فسيولوجي على المتوالية الأخرى.
طبقاً ‎(lM‏ تتضمن العناصر الإضافية للنواقل؛ بدون تحديد؛ عنصر ناقل للتحكم في الإظهار
(مثلاء معزز مُحسّن)؛ إشارة إنهاء تنسخ أو كودون ‎cig‏ مناطق غير مترجمة 5' أو 3' ‎Sie)‏
متواليات تذييل بعديد الأدينيلات ‎(polyA) polyadenylation‏ التي تحيط بمتوالية؛ مثلا واحدة
أو أكثر من تُسخ متوالية ‎AAV TTR‏ أو إنترون.
0 تتضمن العناصر الإضافية؛ على سبيل المثال؛ متواليات عديد نوكليوتيد مالئة أو حشوية؛ على سبيل المثال لتحسين التعبئة ولتقليل وجود حمض نووي ملوث. تتلقى النواقل ‎AAV‏ نمطياً مقحمات ‎DNA‏ لها مقاس يتراوح بصفة عامة من حوالي 4 كيلو قاعدة إلى حوالي 5.2 كيلو قاعدة؛ أو أكثر قليلاً. بالتالي؛ بالنسبة للمتواليات الأقصرء يتم تضمين حشوة أو مادة مالئة لضبط الطول ليكون قريب من أو على الأقل عند المقاس الطبيعي للمتوالية الجينومية الفيروسية المقبولة لتعبئة
5 الناقل ‎AAV‏ في الجسيم الفيروسي. في النماذج المتنوعة؛ تكون متوالية حمض نووي مالئة/ حشوية هي قطعة غير مترجمة (تشفير بدون بروتين) من الحمض النووي. بالنسبة لمتوالية حمض نووي بأقل من 4.7 كيلو قاعدة؛ يكون لمتوالية عديد النوكليوتيد المالئة/ الحشوية طول الذي عند الاتحاد ‎Obie)‏ الإقحام في ناقل) مع المتوالية يكون له إجمالي طول بين حوالي 5.5-3 كيلو قاعدة؛ أو بين حوالي 5-4 كيلو قاعدة» أو بين حوالي 4.8-4.3 كيلو قاعدة.
0 يعمل الإنترون أيضاً كمتوالية عديد نوكليوتيد مالئة أو حشوية لتحقيق طول لتعبئة الناقل ‎AAV‏ في جسيم فيروسي. يمكن أيضاً للإنترونات أو شظايا الإنترونات التي تعمل كمتوالية عديد نوكليوتيد ‎ll‏ أو حشوية تحسين الإظهار. تشير العبارة "اضظراب متعلق بإرقاء الدم" إلى اضطرابات نزف الدم مثلاً هيموفيليا ‎A‏ مرضى هيموفيليا ‎A‏ مع أجسام مضادة تثبيطية؛ حالات قصور في عوامل التخثر ‎dX and X VIE VIE‏
لل /اء الكل ‎ddl‏ عامل فون ‎cally‏ قصور [/1//1/1 متحد؛ نقص فيتامين ك إيبوكسيد ربدوكتاز ‎(C1‏ نقص جاما- كريوكسيلاز ؛ نزيف دموي مرتبط بإصابة رضحية؛ إصابة؛ تجلط نقص الصفيحات في الدم؛ سكتة؛ اعتلال التخثرء تجلط الدم داخل الأوعية الدموية المنتشر ‎¢(DIC) disseminated intravascular coagulation‏ فرط منع التخثر مرتبط بالهيبارين»
هيبارين متنخفض الوزن الجزيئي؛ بنتاسكاريد» وارفارين» مضادات تجط صغيرة الجزيء (أي؛ مثبطات ‎((FXa‏ واضرابات بالصفائح الدموية ‎Obie‏ متلازمة برنارد- سولييه؛ وهن الصفيحات المنسوب لغلانزمان» نقص جميعة الاختزان. يعني المصطلح ‎(dg iad‏ عند الاستخدام كمُعدل لتركيبة؛ أنه قد يتم تصنيع التركيبات بيد الإنسان أو قد يتم فصلهاء بالكامل أو ‎Liga‏ على ‎(JB)‏ عن بيئتها في الجسم الحي طبيعية الوجود. بصفة
0 عامة؛ تكون التركيبات المعزولة خالية إلى حد بعيد من مادة واحد أو أكثر التي ترتبط معها عادة بصورة طبيعية؛ على سبيل المثال؛ واحد أو أكثر من بروتين» حمض نووي» ‎cand‏ كربوهيدرات؛ غشاء خلية. بالإشارة إلى الأحماض النووية من الاختراع» يشير المصطلح "معزول" إلى جزيء حمض نووي منفصل عن متوالية واحدة أو أكثر المجاور لها مباشرة (في الاتجاهات 5' و3) في الجينوم طبيعي
5 الوجود ‎DNA)‏ جينومي) من الكائن الحي الذي ‎Lay‏ منه. على سبيل المثال؛ قد يشتمل "الحمض النووي المعزول" على جزيء ‎DNA‏ أو ‎CDNA‏ مقحم في ناقل؛ مثلا بلازميد أو ناقل فيروسي؛ أو مقحم في ‎DNA‏ من خلية بدائية النواة أو حقيقية النواة. بالنسبة إلى جزيئات ‎RNA‏ من الاختراع؛ يشير المصطلح 'معزول" بصورة مبدئية إلى جزيء ‎RNA‏ يشفره جزيء ‎DNA‏ معزول كما تحدد أعلاه. بطريقة بديلة؛ قد يشير المصطلح إلى جزيء
‎RNA 0‏ تم فصله بدرجة كافية عن جزيئات ‎RNA‏ الذي يرتبط ‎dae‏ بحالاه الطبيعية (أي؛ في الخلايا أو الأنسجة)؛ بحيث يوجد في شكل ‎A‏ بدرجة كبيرة" (يتحدد أدناه المصطلح ‎A‏ بدرجة كبيرة). بالنسبة للبروتين؛ أحيانات يستخدم هنا المصطلح 'بروتين معزول" أو 'بروتين معزول ومنقى". يشير هذا المصطلح مبدثياً إلى بروتين ناتج بواسطة إظهار جزيء حمض نووي. بطريقة بديلة؛ قد
— 6 2 — يشير هذا المصطلح إلى بروتين تم فصله بدرجة كافية عن البروتينات الأخرى المرتبط معها بصورة طبيعية؛ بحيث يوجد في شكل ‎(A‏ بدرجة كبيرة". المصطلح ‎"dyad‏ لا يستثني التوليفات الناتجة بواسطة يد الإنسان» على سبيل المثال؛ متوالية ‎Jal‏ معاد ‎١‏ لاتحاد (مثلا ¢ ‎(rAAV‏ 3 أو جسيم فيروسي يعبأ أو يغلف جينوم ‎Jal‏ وصياغة صيدلانية. المصطلح "معزول" لا يستثني أيضاً الأشكال الفيزيائية البديلة من التركيبة؛ مثلا
الأشكال الخيميرية/ الهجينة؛ متعددة القسيمات/ قليلة القسيمات؛ تعديلات ‎lie)‏ فسفتة؛ ارتباط بالغليكوزيل» تكيون شحم) أو أشكال مشتقة؛ أو أشكال ظاهرة في الخلايا العائلة الناتجة بواسطة يد الإنسان. يشير المصطلح "نقي بدرجة كبيرة' إلى مستحضر مشتمل على 760-50 على الأقل من وزن
0 المركب محل الدراسة ‎Mia)‏ حمض نووي» أوليجونوكليوتيد؛ بروتين؛ إلخ). يمكن أن يشتمل المستحضر على 775 بالوزن على الأقل؛ أو ‎sa‏ 799-90 بالوزن؛ من التركيبة محل الدراسة. يتم قياس النقاء بواسطة الطرق المناسبة للمركب محل الدراسة (مثلا طرق تحليل كروماتوجرافي؛ ارتحال كهربي بواسطة هلام أجاروز أو بولي أكريلاميد؛ تحليل كروماتوجرافي للسائل عالي الأداء ‎(HPLC) High Performance Liquid Chromatography‏ إلخ).
تعني العبارة 'مكون أساسياً من" عند الإشارة إلى متوالية نوكليوتيد محددة أو متوالية حمض أميني محددة متوالية لها خواص رقم تعريف متوالية معين. على سبيل المثال؛ عند الاستخدام بالإشارة إلى متوالية حمض أميني؛ تتضمن العبارة تعديلات المتوالية بذاتها والجزيئات التي لا تؤثر على الخصائص الأساسية والجديدة للمتوالية. يشير المصطلح "أوليجونوكليوتيد" حسب الاستخدام هنا إلى مواد بطانية ومجسات؛ ويتحدد على أنه
0 جزيء حمض نووي مكون من اثنين أو أكثر من أحماض ديوكسي رببونيوكليك أو الريبونوكليك؛ مثلا أكثر من ثلاثة. يعتمد المقاس الحقيقي للأوليجونوكليوتيد على عوامل متعددة وعلى التطبيق المحدد الذي من أجله يتم استخدام الأوليجونوكليوتيد. يشير المصطلح 'مجس ' حسب ‎١‏ لاستخدام هنا إلى أوليجونوكليوتيد ¢ ‎Lae‏ نوكليوتيد أو حمض نووي» سواء ‎RNA‏ أو ‎(DNA‏ إذا كان طبيعي الوجود كما في هضم إنزيم تقييد منقى أو ناتج
بصورة تخليقية؛ والذي يكون قادراً على التلدين أو بصفة خاصة التهجين مع حمض نووي له متواليات تكميلية مع المجس. قد يكون المجس فردي الجديلة أو مزدوج الجديلة. يعتمد الطول الحقيقي للمجس على العديد من العوامل» متضمنة درجة الحرارة؛ مصدر المجس وطريقة الاستخدام. على سبيل المثال؛ بالنسبة للتطبيقات التشخيصية؛ اعتماداً على تعقد المتوالية
المستهدفة؛ يحتوي مجس الأوليجونوكليوتيد نمطياً على 25-15 أو أكثر من النوكليوتيدات؛ على الرغم من أنه قد يحتوي على نوكليوتيدات أقل. يتم هنا اختيار المجسات لتكون تكميلية "بدرجة كبيرة" للجدائل المختلفة من متوالية حمض نووي مستهدفة محددة. هذا يعني أنه يجب أن تكون المجسات تكميلية بدرجة كافية لتكون قادرة على "التهجين بصفة ‎"dials‏ أو التلدين مع الجدائل المستهدفة الخاصة بها تحت مجموعة من الظروف
0 المحددة مسبقاً. بالتالي» لا تحتاج متوالية المجس إلى عكس المتوالية التكميلية الصحيحة للمستهدف. على سبيل المثال؛ قد ترتبط شظية النوكليوتيد غير التكميلية مع النهاية 5' أو 3 من المجس؛ مع باقي متوالية المجس التكميلية مع الجديلة المستهدفة. بطريقة بديلة؛ يمكن تبعثر القواعد غير التكميلية أو المتواليات الأطول في المجس» بشرط أن يكون لمتوالية المجس تكامل كافي مع متوالية الحمض النووي المستهدف للتلدين معها بصفة خاصة.
5 يشير المصطلح ‎(ag‏ بصفة خاصة" إلى ترابط بين اثنين من جزيئات الحمض النووي فردية الجديلة لها متوالية تكميلية بدرجة كافية للسماح بذلك التهجين تحت الظروف المحددة مسبقاص المستخدمة بصفة عامة في المجال (يسمى أحياناً 'تكميلي بدرجة كبيرة'). تحديداً؛ يشير المصطلح إلى تهجين أوليجونوكليوتيد به متوالية تكميلية بدرجة كبيرة موجودة ‎Jala‏ جزيء ‎RNA i DNA‏ فردي الجديلة من الاختراع؛ مع الاستبعاد الكبير لتهجين الأوليجونوكليوتيد ذات الأحماض النووية
0 فردية الجديلة من متوالية غير تكميلية. يشير المصطلح "مواد بطانية" حسب الاستخدام هنا إلى أوليجونوكليوتيد؛ سواء ‎RNA‏ أى ‎(DNA‏ ‏سواء فردي الجديلة أو مزدوج الجديلة؛ سواء ‎Fide‏ من نظام حيوي؛ متولد عن طريق هضم إنزيم ‎cai‏ أو ناتج تخليقياً والذي؛ عند وضعه في البيئة الملائمة؛ يكون قادراً على العمل وظيفياً كباديء لتخليق حمض نووي معتمد على قالب. عند تقديمه مع قالب حمض نووي مناسب؛ مواد
5 منتجة ثلاثية الفوسفات نوكليوسيد مناسبة من الأحماض النووية؛ إنزيم ‎«Shader‏ عوامل مشتركة
مناسبة وظروف مثلا درجة ‎Hla‏ ورقم هيدروجيني مناسبين؛ قد تتمدد المادة البطانية عند الطرف 3 الخاص بها عن طريق إضافة نوكليوتيدات بواسطة تأثير نشاط بوليمراز أو نشاط مشابه على إنتاجية منتج تمدد مادة بطانية. قد تختلف المادة البطانية في الطول اعتماداً على الظروف المحددة ومتطلبات التطبيق. على سبيل المثال؛ في تطبيقات التشخيص؛ تكون المادة البطانية أوليجونوكليوتيد نمطياً بطول 25-15 أو
أكثر من النوكليوتيدات. يجب أن تكون المادة البطانية تكميلية بدرجة كافية للقالب المرغوب لبدء تخليق منتج التمدد المرغوب؛ بمعنى» تكون قادرة على التلدين مع جديلة القالب المرغوية بأسلوب كافي لتوفير شطر الهيدروكسيل 3 من المادة البطانية في تجاوز مناسب للاستخدام في بدء التخليق عن طريق بوليمراز أو إنزيم مشابه. لا يتطلب أن تمثل متوالية المادة البطانية مكمل
0 صحيح للقالب المرغوب. على سبيل المثال؛ قد ترتبط متوالية نوكليوتيد غير تكميلية مع النهاية 5' من بطانة تكميلية بطريقة أخرى. بصورة بديلة؛ قد يتم تناثر القواعد غير التكميلية داخل متوالية الباطنة الأولية الأوليجونوكليوتيد؛ بشرط أن يكون لمتوالية البطانة الأولية تكامل كافي مع متوالية جديلة القالب المرغوية لتوفير وظيفياً معقد من قالب- بطانة أولية لتخليق منتج التمدد. يعني المصطلح 'تطابق"؛ 'تجانس" والأشكال المختلفة النحوية له؛ أن يكون اثنين أو أكثر من
5 الكيانات المرجعية متشابهين؛ عندما يكونوا متواليات "مصطفة". بالتالي؛ على سبيل المثال؛ عندما تكون متواليات عديد الببتيد متطابقة؛ يكون لها نفس متوالية الحمض الأميني؛ على الأقل في المنطقة أو الجزء المرجعي. إذا كان اثنان من متواليات عديد النوكليوتيد متطابقين؛ يكون لهما نفس متوالية عديد النوكليوتيد. على الأقل في المنطقة أو ‎gall‏ المرجعي. يمكن أن يكون التطابق خلال مساحة محددة (منطقة أو نطاق) من المتوالية. تشير 'مساحة" أو 'منطقة” التطابق إلى جزءِ من
0 اثنين أو أكثر من الكيانات المرجعية التي تكون متماثلة. بالتالي؛ عندما يكون اثنتين من متواليات البروتين أو الحمض النووي متطابقتين خلال واحدة أو ‎AST‏ من مساحات أو مناطق المتوالية فإنهما تشتركان في التطابق داخل هذه المنطقة. تشير متوالية 'مصطفة” إلى تعدد من متواليات عديد نوكليوتيد أو بروتين (حمض أميني)؛ غالبا المحتوية على تصحيحات للقواعد أو الأحماض الأمينية المفقودة أو الإضافية (فجوات) مقارنة مع متوالية مرجعية.
يمتد التطابق على الطول الكلي أو جزءٍ من المتوالية. في النماذج المعينة؛ يكون طول المتوالية المشتركة في التطابق بالنسبة المئوية بمقدار 2؛ 3؛ 4؛ 5 أو أكثر من الأحماض النووية أو الأحماض الأمينية المتجاورة ‎Mia‏ 6« تع 8 ق 10 11 12 13 14 15 16 17( 8 ¢19 20 إلخ؛ من الأحماض النووية أو الأحماض الأمينية المتجاورة. في نماذج إضافية؛ يكون طول المتوالية المشتركة في التطابق بمقدار 21 أو أكثر من الأحماض النووية أو الأحماض الأمينية المتجاورة» مثلاء 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32ن 33 34( 35( 36 37« 37 39 40 إلخ؛ من الأحماض النووية أو الأحماض الأمينية المتجاورة. في نماذج إضافية؛ يكون طول المتوالية المشتركة في التطابق بمقدار 41 أو أكثر من الأحماض النووية أو الأحماض الأمينية المتجاورة؛ ‎Hie‏ 42 43 44 45 46 47 48 49 50
0 إلخ؛ من الأحماض النووية أو الأحماض الأمينية المتجاورة. في نماذج إضافية ‎lad‏ يكون طول المتوالية المشتركة في التطابق بمقدار 50 أو أكثر من الأحماض النووية أو الأحماض الأمينية المتجاورة» ‎Mia‏ 55-50» 60-55 65-60« 70-65 75-70 85-80 90-85 90- 95 100-95 150-100 200-150« 250-200 300-250 500-300 500- 0. إلخ؛ من الأحماض النووية أو الأحماض الأمينية المتجاورة.
5 كما هو مذكور ‎clin‏ تكون الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفض ‎CPG‏ التي تشفر ‎FVIII‏ ‏مميزة عن النوع البري لكنها قد تُظهر تطابق متوالية مع بروتين ‎FVII‏ من النوع البري مع؛ أو بدون نطاق 8. الأشكال المتباينة للحمض النووي منخفض ‎CPG‏ التي تشفر ‎FVIII‏ عند مستوى متوالية النوكليوتيد. يكون حمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر ‎FVIII‏ متطابق نمطياً بنسبة على الأقل حوالي 770؛ نمطياً أكثر متطابق بنسبة حوالي 775؛ نمطياً أكثر أيضا متطابق بنسبة
حوالي 785-780 مع حمض نووي يشفر ‎FVII‏ من النوع البري. بالتالي؛ على سبيل المثال؛ قد يتسم حمض نووي منخفض 006 يشفر ‎FVII‏ بتطابق يبلغ 785-775 مع جين يشفر ‎FVII‏ ‏من النوع البري؛ أو مع بعضهم البعض» أي؛ 601 مقابل ‎X03 X02‏ مقابل ‎X04‏ إلخ؛ كما هو مذكور هنا. عند مستوى متوالية حمض أميني؛ يتسم شكل متباين مثلا بروتين ‎FVII‏ متباين بتطابق يبلغ نمطياً
5 على الأقل حوالي 770؛ نمطياً أكثر تطابق بنسبة حوالي 775 أو تطابق بنسبة 780 نمطياً
أكثر أيضا تطابق بنسبة 785؛ أو 790 أو أكثر. في نماذج أخرى؛ يتسم شكل متباين مثلا بروتين ‎FVII‏ متباين بتطابق يبلغ على الأقل 90 19/ 92 193 394 95ت 396 97 798( 799 أو أكثر مع متوالية مرجعية؛ مثلا بروتين ‎7/1١!‏ من النوع البري مع أو بدون نطاق ‎.B‏ ‏5 لتحديد التطابق» إذا كان ‎FVII‏ (حمض نووي منخفض 606 يشفر ‎(FVIII‏ يحتفظ بالنطاق ‎B‏ ‏فإنه من المناسب مقارنة التطابق مع ‎7/1/١!‏ من النوع البري. وإذا كان ‎FVII‏ (حمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎(FVIII‏ يتسم بإزالة النطاق 8؛ فإنه تتم مقارن التطابق مع ‎FVII‏ من النوع البري الذي يتسم أيضاً بإزالة النطاق 8. تعني المصطلحات 'متجانس" أو 'متماثل"” أن اثنين أو أكثر من الكيانات المرجعية يشتركان جزثياً 0 على الأقل في التطابق خلال منطقة أو ‎gia‏ محدد. تعني "مساحات؛ مناطق أو نطاقات" التماثل أو التطابق أن جزءِ من اثنين او أكثر من الكيانات المرجعية يشتركوا في التماثل أو يكونوا متشابهين. بالتالي» عند تطابق متواليتين خلال واحدة أو أكثر من مناطق المتوالية فإنهما تشتركان في التطابق في هذه المناطق. يعني 'متماثل بدرجة كبيرة" أن يتم الاحتفاظ بجزيء بنائياً أو وظيفياً بحيث يتسم أو من المتوقع أن يتسم بالبناء الجزئي على الأقل أو وظيفة واحد أو أكثر من البناءات أو الوظائف (مثلاء وظيفة أو نشاط حيوي) للجزيء المرجعي؛ أو منطقة أو ‎gia‏ ذو الصلة/ مقابل من الجزيء المرجعي الذي يشترك معه في التماثل. يمكن تحقيق مدى التطابق ‎(Jalal)‏ أو "التطابق بالنسبة المئوية" بين متواليتين باستخدام برنامج حاسوب و/ أو خوارزمية رياضية. لأغراض هذا الاختراع يتم إجراء مقارنات لمتواليات حمض نووي باستخدام مجموعة ‎GCG Wisconsin‏ إصدار 9.1 متاحة من مجموعة الحاسوب للجينات في ماديسون» وبسكونسين. للملاءمة؛ تكون المعايير الافتراضية (عقوية تكوين فجوة = 12( عقوية تمدد فجوة - 4) التي حددها هذا البرنامج معنية للاستخدام هنا لمقارنة تطابق المتوالية. بطريقة بديلة؛ قد يتم استخدام البرنامج 2.0 ‎Blastn‏ الذي يوفره المركز الوطني لمعلومات التكنولوجيا الحيوية (الذي تم العثور عليه على الشبكة العالمية في ‎ncbi.nim.nih.gov/blast/; Altschul‏ ‎(et al., 1990, J Mol Biol 215:403-410‏ باستخدام اصطفاف به فجوات مع المعايير الافتراضية؛ لتحديد مستوى التطابق والتشابه بين متواليات الأحماض النووية ومتواليات الأحماض
الأمينية. بالنسبة لمقارنات متواليات عديد الببتيد؛ يتم نمطياً استخدام خوارزمية ‎BLASTP‏ في توليفة مع مصفوفة تسجيل؛ مثلا ‎BLOSUM i BLOSUM 62 (PAM 250 (PAM100‏ 0. يتم أيضاً استخدام برامج مقارنة متواليات ‎FASTA‏ مثا ‎(FASTA3 5 FASTA2‏ ‎SSEARCH‏ لتحديد مقدار التطابق ‎(Pearson et al., Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA‏ ‎«Pearson, Methods Mol Biol. 132:185 (2000) ¢85:2444 (1988) 5‏ و ‎Smith et‏
‎Mol.
Biol. 147:195 (1981)‏ .ل ,.ل8. تم ‎Lead‏ تطوير برامج لتحديد مقدار التشابه البنائي للبروتين باستخدام مخطط طوبولوجي معتمد على ديلاوني ‎(Bostick et al., Biochem‏ ‎.Biophys Res Commun. 304:320 (2003))‏ قد يتم تحضير جزيئات الحمض النووي؛ نواقل الإظهار (مثلا؛ جينومات ناقلة)؛ ‎clued‏
‏0 متضمنة أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ تشفر ‎FVII‏ من الاختراع باستخدام طرق تقنية ‎DNA‏ معاد الاتحاد. إتاحة معلومات عن متوالية النوكليوتيد ‎(Kd‏ من تحضير جزيئات الحمض النووي المعزولة من الاختراع بواسطة تشكيلة واسعة من الوسائل. على سبيل ‎Jaa‏ يمكن تصنيع أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ تشفر ‎FVII‏ باستخدام نسخ قياسي متنوع؛ تقنية ‎DNA‏ معاد الاتحادء من خلال إظهار خلية أو ترجمة في المعمل وتقنيات تخليق كيميائية.
‎(Sar 5‏ تحديد نقاء عديد النوكليوتيدات من خلال المتواليات؛ ارتحال كهربي بهلام؛ إلخ. على سبيل ‎(Jal‏ يمكن ‎Jie‏ الأحماض النووية باستخدام التهجين أو تقنيات فحص بقاعدة بيانات معتمدة على حاسوب. تتضمن تلك التقنيات؛ لكن بدون تحديد: (1) تهجين مكتبات ‎CDNA i DNA‏ جينومية مع مجسات للكشف عن متواليات نوكليوتيد متجانسة؛ (2) فحص جسم مضاد للكشف عن عديد ببتيدات لها سمات بنائية مشتركة؛ على سبيل المثال؛ باستخدام مكتبة إظهار؛ )3(
‏20 تفاعل سلسلة بوليمراز ‎(PCR) polymerase chain reaction‏ على ‎cDNA (DNA‏ جينومي باستخدام مواد بطانية قادرة على التلدين مع متوالية حمض نووي محل الدراسة؛ )4( أبحاث حاسوب لقواعد بيانات المتوالية من أجل المتواليات ذات الصلة؛ (5) فحص تفاضلي لمكتبة حمض نووي مختزلة. قد يتم الحفاظ على الأحماض النووية من الاختراع في صورة ‎DNA‏ في أي ناقل نسخ مناسب. في
‏5 أحد النماذج؛ يتم الحفاظ على النسخ في ناقل نسخ/ إظهار بلازميد؛ مثلا ‎pBluescript‏
‎«(Stratagene, La Jolla, CA)‏ التي تنتشر في خلية عائلة ‎coli‏ .ا مناسبة. بطريقة بديلة؛ قد يتم الحفاظ على الأحماض النووية في ناقل مناسب للإظهار في الخلايا الثديية. في الحالات التي يؤثر فيها التعديل اللاحقق للترجمة على وظيفة التخثرء يمكن إظهار جزيء الحمض النووي في الخلايا الثدبية.
تتضمن الأشكال المتباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ تشفر ‎FVIII‏ من الاختراع ‎«DNA‏ ‎agin RNA (DNA‏ ¢ وشظايا منهما قد تكون فردية الجديلة أو مزدوجة الجديلة. بالتالي؛ يوفر هذا الاختراع أوليجونوكليوتيدات (جدائل في اتجاه النسخ أو مضادة لاتجاه النسخ من ‎DNA‏ أو ‎(RNA‏ لها متواليات قادرة على التهجين مع متوالية واحدة على الأقل من حمض نووي طبقاً للاختراع. تكون تلك الأوليجونوكليوتيدات مفيدة كمجسات للكشف عن إظهار ‎FVII‏
0 قد يتم تحضير شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎(FVII‏ مُزال منه نطاق 8 من الاختراع» اختيارياً به استبدالات؛ إزالات أو إضافات حمض أميني في تشكيلة واسعة من الطرق؛ طبقاً للطرق المعروفة. قد تتم تنقية البروتين من مصادر مناسبة؛ ‎WA lie‏ مستنبتة بكتيرية أو حيوانية متحولة أو أنسجة تُظهر ‎FVII‏ معالج هندسياً عن طريق تنقية ذات ألفة مناعية. إتاحة أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ تُمكّن من إنتاج ‎FVII‏ باستخدام
5 طرق إظهار في المعمل معروفة في المجال. على سبيل المثال؛ قد يتم نسخ ‎CDNA‏ أو جين إلى ناقل استنساخ مناسب في المعمل؛ مثلا 05064 أو 05065 من أجل الاستنساخ في المعمل؛ تليه ترجمة خالية من الخلايا في نظام ترجمة خالية من الخلايا مناسب؛ ‎le‏ حلالات خلية شبكية من جرثومة القمح أو أرنب. تتم تجارياً إتاحة أنظمة الاستنساخ والترجمة في ‎canal‏ مثلا من ‎.Promega Biotech, Madison, Wisconsin or BRL, Rockville, Maryland‏
0 بطريقة بديلة؛ قد يتم إنتاج كميات أكبر من ‎FVII‏ عن طريق الإظهار في نظام إظهار مناسب في خلية بداية النواة أو حقيقية النواة. على سبيل المثال؛ قد يتم إقحام شكل متباين لحمض نووي منخفض 006 يشفر ‎FVII‏ على سبيل ‎(Jl)‏ في ناقل بلازميد مهياً للإظهار في خلية بكتيرية؛ ‎coli De‏ .5 أو خط خلية تديية مثلا كُلى هامستر رضيع ‎«(BHK) baby hamster kidney‏ خلايا ‎CHO‏ أو ‎(Hela‏ بطريقة بديلة؛ يمكن توليد بروتينات الاندماج المستهدفة المشتملة على
‎FVIII‏ يتم تشفير تلك بروتينات الاندماج المستهدفة مع ‎FVII‏ بواسطة ‎ea‏ أو كل من جزيء ‎«DNA‏ مترابط في إطار قراءة الكودون الصحيح مع متوالية نوكليوتيد تشفر ‎en‏ أو كل من ‎Gale‏ ‏عديد ببتيد مرغوب يتم إقحامه في ناقل بلازميد مهياً للإظهار في خلية بكتيرية؛ مثلا ‎E.coli‏ أو خلية حقيقية النواة؛. ‎Ole‏ لكن بدون تحديد؛ ‎LOA‏ خميرة وثديية.
تشتمل اختيارياً ‎Jia Jalil)‏ تلك الموصوفة هنا على عناصر تنظيمية ضرورية لإظهار ‎DNA‏ في الخلية العائلة الموضوعة بطريقة حيث يتم السماح بإظهار البروتين المشفر في الخلية العائلة. تتضمن تلك العناصر التنظيمية المطلوية للإظهار؛ لكن بدون تحديد؛ متواليات معززات؛ متواليات مُحسنات ومتواليات بدء الاستنساخ كما هي مذكورة هنا ومعروفة للشخص الماهر. قد تتم تنقية ‎FVII‏ يشفر شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎(CPG‏ ناتج بواسطة إظهار الجين
0 في نظام خلية بدائية أو حقيقية النواة معاد الاتحاد؛ طبقاً للطرق المعروفة في المجال. في أحد النماذج؛ يمكن استخدام نظام إظهار/ إفراز متاح تجارياً» عن طريقه يتم إظهار البروتين معاد الاتحاد وبعد ذلك يتم إفرازه من الخلية العائلة؛ المراد تنقيته بسهولة من الوسط المحيط. عندما لا يتم استخدام نواقل الإظهار/ الإفراز» يشتمل أسلوب بديل على تنقية البروتين معاد الاتحاد بواسطة فصل بالانجذابية؛ مثلا عن طريق تفاعل بيني مناعي مع الأجسام المضادة التي ترتبط بصفة
5 خاصة مع البروتين معاد الاتحاد أو أعمدة النيكل لعزل البروتينات معادة الاتحاد المستهدفة مع 6- 8 وحدات بنائية هيستيدين عند الطرف لا أو الطرف © الخاص بها. قد تشتمل الملحقات البديلة على القمة اللاصقة ‎GST (FLAG‏ أو القمة اللاصقة لراصة دموية. يتم استخدام تلك الطرق بصورة شائعة من قبل الممارسين المهرة. قد يتم تحليل بروتينات ‎FVII‏ التي تم تحضيرها بواسطة الطرق المذكورة أعلاه؛ طبقاً للإجراءات
0 القياسية. على سبيل المثال؛ قد يتم تقييم تلك البروتينات من أجل خواص التخثر المُعدّلة طبقاً للطرق المعروفة. طبقاً لذلك؛ يوفر الاختراع ‎Lind‏ طرق لتصنيع عديد ببتيد (كما هو مكتشف)؛ تتضمن الطريقة الإظهار من الحمض النووي المشفر لعديد الببتيد (بصفة ‎dale‏ حمض نووي). قد يتحقق هذا
بصورة ملاءمة عن طريق استنبات خلية عائلة؛ محتوية على ذلك الناقل؛ تحت الشروط المناسبة التي تتسبب أو تسمح بإنتاج عديد الببتيد. قد يتم أيضاً إنتاج عديد ببتيدات في أنظمة بالمعمل. تتضمن طرق واستخدامات الاختراع توصيل (تنبيغ) حمض نووي (جين مضفور) إلى الخلايا العائلة؛ بما في ذلك ‎LAY‏ المنقسمة و/ أو غير المنقسمة. تكون الأحماض النووية؛ الناقل معاد الاتحاد (مثلا» ‎((FAAV‏ طرق؛ استخدامات والصياغات الدوائية طبقاً للإختراع مفيدة إضافياً في طريقة توصيل؛ إعطاء أو توفير بروتين لكائن بحاجة ‎(IN‏ كطريقة معالجة. بهذا الأسلوب؛ يتم نسخ الحمض النووي وقد يتم إنتاج البروتين في الجسم الحي بكائن. قد يستفاد الكائن أو يكون بحاجة إلى البروتين لأن الكائن يتقصه البروتين» أو لأن إنتاج البروتين في الكائن قد يُضفي بعض التأثير العلاجي؛ كطريقة للمعالجة أو غير ذلك. 0 قد يتم استخدام نواقل متضمنة متواليات نواقل ‎(AAV Ole)‏ فيروسة بطيئة أو فيروسة صغيرة؛ جسيمات فيروس معاد الاتحاد؛ الطرق والاستخدامات لتوصيل شكل متباين لحمض نووي منخفض 6 يشفر !1/11 له تأثير حيوي لعلاج أو تخفيف حدة واحد أو أكثر من الأعراض المصاحبة لنقص أو شذوذ ‎FVII‏ قد يتم استخدام متواليات نواقل ‎(AAV lie)‏ فيروسة بطيئة أو فيروسة صغيرة معادة الاتحاد؛ بلازميدات» جسيمات فيروس معاد الاتحاد؛ الطرق والاستخدامات لتوفير 5 علاج لحالات مرضية متنوعة تشمل أو تكون بسبب نقص أو شذوذ ‎FVII‏ ‏الأحماض النووية؛ النواقل؛ نواق الإظهار ‎(FAAV lie)‏ وجسيمات فيروس معاد الاتحاد؛ الطرق والاستخدامات المبتكرة تسمح بمعالجة الأمراض الوراثية؛ مثلا نقص ‎FVII‏ بالنسبة للأمراض بسبب ‎ls‏ النقص؛ ‎(Sa‏ استخدام نقل الجين لتوصيل جين طبيعي إلى الأنسجة المصابة من أجل علاج بديل؛ بالإضافة إلى تخليق نماذج حيوانية للمرض باستخدام طفرات مضاد للتحسس. 0 بالنسبة للحالات المرضية غير المتزنة؛ يمكن استخدام نقل الجين لإنشاء حالة مرضية في نظام نموذجي؛ التي يمكن استخدامها بعد ذلك في الجهود المبذولة لمواجهة الحالة المرضية. من الممكن أيضاً استخدام دمج خاص بالموقع لمتواليات الحمض النووي لتصحيح العيوب. في نماذج محددة؛ قد يتم استخدام أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ تشفر ‎FVII‏ على سبيل المثال» كعوامل (بروتين أو حمض نووي) علاجية و/ أو وقائية التي تُعدل سلسلة تخثر الدم
أو في صورة جين مضفور في الجين. على سبيل المثال؛ قد تتسم الأشكال المتباينة لحمض نووي منخفضة ‎CPG‏ تشفر ‎FVII‏ بنشاط تخثر مماثل ل !1/1 من النوع البري؛ أو نشاط تخثر مُعدل مقارنة مع ‎FVII‏ من النوع البري. الاستراتيجيات المعتمدة على الخلية تسمح بالإظهار المستمر لأشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ تشفر ‎FVII‏ مرضى هيموفيليا ‎LSA‏ هو مكتشف ‎clin‏ ينتج عن التعديلات المعينة لجزيئات ‎FVII‏ (حمض نووي وبروتين) إلى زيادة
الإظهار عند مستوى الحمض النووي؛ زيادة نشاط التخثر وبالتالي تحسين بفعالية إرقاء الدم. قد يتم استخدام الأشكال المتباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ تشفر ‎FVII‏ لمجموعة من الأغراض ‎Tad‏ للإختراع. في أحد النماذج؛ يتم توفير وسط ناقل لتوصيل حمض نووي (أي؛ ناقل إظهار) لتعديل تخثر الدم حيث يشتمل ناقل الإظهار على الأشكال المتباينة لحمض نووي
0 منخفضة ‎CpG‏ تشفر ‎FVIII‏ حسب الوصف هنا. إعطاء نواقل إظهار تشفر ‎FVII‏ ينتج ‎aie‏ ‏إظهار بروتين ‎FVII‏ الذي يعمل على تغيير تسلسل التخثر. طبقاً للاختراع» إظهار أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ تشفر بروتين ‎FVII‏ حسب الوصف هناء أو شظية وظيفية يُزيد من إرقاء الدم. في نماذج إضافية من الاختراع؛ تتوافر تركيبات وطرق لإعطاء ناقل فيروسي يشمل شكل متباين
5 لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر ‎FVII‏ في أحد النماذج؛ يكون ناقل الإظهار المشتمل على شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ هو ناقل فيروسي. قد يتم إعطاء نواقل الإظهار المشتملة على أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CPG‏ يشفر ‎FVII‏ بمفردهاء أو في توليفة مع جزيئات أخرى نافعة لتعديل إرقاء الدم. طبقا للاختراع؛ قد يتم إعطاء النواقل» نواقل الإظهار أو توليفة من العوامل العلاجية إلى المريض بمفردها أو في تركيبات
0 مقبولة صيدلانيا أو متوافقة حيويا. إن التواقل الفيروسية مثل نواقل الفيروس البطيء والفيروس الصغير؛ بما في ذلك الأنماط المصلية ‎AAV‏ والأشكال المتباينة من ذلك توفر وسيلة لتوصيل حمض نووي إلى داخل الخلايا خارج الجسم الحي؛ في المعمل وفي الجسم الحي؛ مما يشفر بروتينات بحيث تظهر الخلايا المشفرة للبروتين. إن ‎AAV‏ هو فيروسات نافعة كنواقل معالجة للجين كما يمكنها اختراق الخلايا وتقديم حمض
نووي/ مادة جينية بحيث قد يظل الحمض النووي/ المادة الجينية مستقلين في الخلايا. بالإضافة
إلى ذلك؛ يمكن لتلك الفيروسات تقديم حمض نووي/ مادة جينية في مواقع خاصة؛ على سبيل
المثال. نظرا لعدم مصاحبة ‎AAV‏ بداء ممرض في البشر؛ لا تكون نواقل ‎AAV‏ قادرة على توصيل
متواليات عديد نوكليوتيد غيروي (على سبيل المثال؛ بروتينات وعوامل علاجية) إلى المرضى من البشر بدون نشوء لمرض ‎AAV‏ بدرجة كبيرة أو مرض ‎AAV‏
تتضمن النواقل الفيروسية الممكن استخدامها في الاختراع» لكن دون حصر» نواقل فيروس
مصاحب للفيروس الغدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ من أنماط مصلية متنوعة (على
سبيل المثال» ‎AAV-T‏ إلى 12-/2810/ل» وأنواع أخرى) ونواقل ‎AAV‏ هجينة/ خيمرية؛ نواقل
للفيروس البطيء ونواقل فيروس بطيء من النوع الزائف (على سبيل المثال؛ فيروس ‎Nou)‏
0 فيروس التهاب الفم الحويصلي ‎((VSV) vesicular stomatitis virus‏ وفيروس نقص المناعي الهري ‎(FIV) feline immunodeficiency virus‏ نواقل فيروس الهريس البسيط» نواقل فيروسية غدية (مع أو بدون معززات/ محسنات خاصة بالنسيج)؛ نواقل فيروس جدري البقرء نواقل فيروسية رجعية؛ نواقل فيروسية بطيئة؛ نواقل غير فيروسية ونواقل أخرى. قد يتم استخدام ‎AAV‏ وجسيمات فيروسية بطيئة لتمييزها كأوساط ناقلة لتوصيل الجين بفاعلية.
5 تحتوي تلك الفيروسات المعدية على سمات غير مرغوية لهذه التطبيقات؛ بما في ذلك الانتحاء إلى خلايا مقسمة وغير مقسمة. أيضا أوضحت تجربة سريرية سابقة بهذه النواقل عدم وجود سمية مؤكدة وتكون الاستجابات المناعية دنيا أو غير قابلة للكشف. من المعروف أن ‎AAV‏ تصيب مجموعة كبيرة من أنواع الخلية في الجسم الحي وفي المعمل بواسطة التقام يتوسطه مستقبل أو انتقال عبر الخلايا. يتم اختبار أنظمة ناقل هذه على البشر مستهدفة الظهارة الشبكية؛ الكبد؛
0 العضلة الهيكلية؛ المجاري الهوائية؛ المخ؛ المفاصل والخلايا الجذعية المكونة للدم. ‎Lal‏ تكون النواقل غير الفيروسية؛ على سبيل ‎(Jal‏ المعتمدة على ‎DNA‏ بلازميد أو الدوائر الصغيرة؛ عبارة عن نواقل ناقلة للجين مناسبة لجين كبير مثل المشفر ‎FVII‏ ‏قد يكون من المرغوب إدخال ناقل يمكنه توفير؛ على سبيل المثال نسخ عديدة من الجين المرغوب وبالتالي كميات أكبر من منتج هذا الجين. يتم وصف نواقل ‎AAV‏ والفيروس البطيء المحسنة
5 وطرق إنتاج هذه النواقل بالتفصيل في عدد من المراجع, براءات الاختراع» وطلبات براءات
الاختراع؛ بما في ذلك: ‎(Hum Gene Ther 20:698-706, 2009) Wright J.F.‏ تفنية
تستخدم لإنتاج ناقل ذو درجة سريرية في مستشفى الأطفال في فلادلفيا. يمكن أيضا إنتاج الناقل
الفيروسي البطيء في ‎CHOP‏ وتكون النواقل الأخرى متاحة من خلال معمل لب إنتاج الناقل
الفيروسي البطيء بواسطة برنامج مورد لعلاج جين ‎Gene Therapy Resource NHLBI‏ ‎(GTRP) 5‏ 00980- معمل لب إنتاج الناقل الفيروسي البطيء.
طبقا لذلك؛ في نماذج متنوعة للاختراع يتضمن الناقل ناقل فيروسي بطيء وصغير؛ مثلا ناقل
فيروسي غدي. في نماذج محددة؛ يكون الناقل معاد الاتحاد هو ناقل فيروس صغير. تكون
الفيروسات الصغيرة هي فيروسات صغيرة مع جينوم ‎DNA‏ فردي الجديلة. تكون "الفيروسات
المصاحبة للفيروس الغدي" ‎(AAV)‏ في عائلة الفيروس الصغير.
0 طلقا لهذاء يوفر الاختراع نواقل فيروسية تتضمن أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CPG‏ ‏يشفر ‎(FVII‏ على سبيل المثال؛ قد يتضمن ناقل ‎AAV‏ معاد الاتحاد أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ حيث يكون للبروتين ‎FVII‏ المشفر إزالة لنطاق 8. لذلك فإن توصيل أو إعطاء الناقل إلى كائن (على سبيل المثال؛ كائن ثديي) يوفر ‎FVII‏ إلى كائن ‎Mie‏ ‏كائن ثديي (على سبيل المثال؛ إنسان).
سوف يتسبب التوصيل المباشر للنواقل أو التنبيغ خارج الجسم الحي لخلايا بشرية يليه تشريب في الجسم في إظهار ‎FVII‏ بذلك يمارس تأثير علاجي نافع على إرقاء الدم. في سياق الاختراع فإن إعطاء العامل ‎VII‏ الموصوف هنا يحث النشاط المدعم للتخثر. نموذجيا لا تتضمن نواقل ‎AVY‏ والنواقل الفيروسية البطيئة جينات فيروسية مصحوية بمسببات المرض. نموذجيا يكون لهذه النواقل واحد أو أكثر من جينات ‎AAV‏ من النوع البري المحذوفة ‎LIS‏
0 أو ‎lia‏ على سبيل المثال الجينات المضلعة/ جينات التغليف؛ لكنها تحتفظ بمتوالية ‎ITR‏ ‏مجانحة وظيفية واحدة على ‎(J)‏ حسب الضرورة ‎SEY‏ نسخ؛ وتعبئة الناقل معاد الاتحاد في جسيم ناقل ‎AAV‏ على سبيل المثال» توجد فقط الأجزاء الأساسية للناقل على سبيل المثال؛ عناصر ‎(LTR ITR‏ على التوالي. لذلك يتضمن جينوم ناقل ‎AAV‏ متواليات مطلوبة في مقرون للنسخ والتعبئة (على سبيل المثال؛ متواليات ‎ITR‏ وظيفية).
يتضمن ناقل ‎AAV‏ معاد الاتحاد؛ بالإضافة إلى طرقه واستخداماته؛ أي سلالة فيروسية أو نمط مصلي. كمثال غير محدد؛ قد يعتمد ناقل ‎AAV‏ معاد الاتحاد على أي جينوم ‎AAV= Mie AAV‏ ‎AAV-6 AAV-5 AAV-4 AAV-3 AAV-2 1‏ 7-لاحطح ‎(AAV-8‏ و-/اطل ‎AAV-Th10 AAV-th74 (AAV-12 (AAV-11 AAV-10‏ أى ‎(AAV-2i8‏ على سبيل المثال. قد تكون تلك النواقل معتمدة على نفس السلالة أو النمط المصلي (أو مجموعة فرعية أو شكل متباين)؛ أو قد تختلف عن بعضها البعض. كمثال غير محدود؛ قد يتطابق ناقل ‎AAV‏ معاد الاتحاد المعتمد على جينوم نمط مصلي واحد مع واحد أو أكثر من بروتينات القفيصة التي تعبا الناقل. بالإضافة إلى ذلك؛ قد يعتمد جينوم ناقل ‎AAV‏ معاد الاتحاد على ‎agin‏ نمط مصلي ‎AAV‏ (على سبيل المثال؛ ‎(AAV2‏ مميز عن واحد أو أكثر من بروتينات القفيصة ‎AAV‏ ‏0 تعبا الناقل. على سبيل المثال؛ قد يعتمد جينوم الناقل ‎AAV‏ على 2/21/2؛ بينما قد يكون واحد على الأقل من بروتينات القفيصة الثلاثة ‎AAV] ga‏ 3/احطط 4/اطل ‎AAV6 (AAVS‏ ‎Rh74 (Rh10 AAV12 (AAV11 AAV10 AAV9 (AAVS (AAVT‏ أو ‎AAV-2i8‏ أو شكل متباين من ذلك؛ على سبيل المثال. في نماذج محددة؛ نواقل الفيروس المصاحب للفيروس الغدي ‎(AAV)‏ تتضمن ‎AAV2 AAV]‏ ‎AAVS5 (AAV4 AAV3 5‏ 6/احطح 7/احطح ‎AAV10 AAVO (AAVS‏ 11 /اطل 2ه ‎Rh74 (Rh10‏ أو ‎(AAV-2i8‏ بالإضافة إلى أشكال متباينة (على سبيل المثال؛ أشكال متباينة للقفيصة؛ مثلا إقحامات؛ إضافات؛ استبدالات وحذوفات حمض أميني) من ذلك؛ على سبيل المثال؛ كما هو مذكور في الطلب الدولي 2013/158879 (الطلب الدولي لمعاهدة التعاون بشأن البراءات ‎PCT‏ بي سي تي / يو اس 037170/2013)؛ الطلب الدولي 0 2015/013313 (الطلب الدولي لمعاهدة التعاون بشأن البراءات بي سي تي / يو اس 64+ والطلب الأمريكي 2 ب(براءة الاختراع الأمريكية رقم 9 التي تكشف عن ‎(LKO1‏ 402اا» ‎«LKO3‏ إلخ). أشكال ‎AAV‏ المتباينة تتضمن أشكال متباينة وخيمرات من قفيصة ‎(AAV2 AAV]‏ 3/اطل ‎(AAV5 AAV4‏ 6/احطحض ‎AAV10 AAVY (AAVS (AAVT‏ 11 لاحل 12/اطخل ‎Rh74 (Rh10 5‏ أو ‎LAAV-2i8‏ طبقا لذلك» تتوافر نواقل ‎AAV‏ وأشكال ‎AAV‏ المتباينة (على
سبيل المثال؛ أشكال قفيصة متباينة) تتضمن أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ يشفر ‎FVIII‏ ‏قد تكون أو لا تكون الأنماط المصلية (على سبيل المثال؛ متواليات ‎VP2 VPI‏ و/ أو ‎(VP3‏ ‏لأجل ‎AAV‏ وأشكال ‎AAV‏ المتباينة (على سبيل ‎(JU‏ أشكال قفيصة متباينة) مميزة عن أنماط ‎AAV 5‏ المصلية الأخرى»؛ المتضمنة؛ على سبيل المثال» ‎Rh10 sf Rh74 (AAVI-AAV12‏ (على سبيل المثال» مميزة عن متواليات ‎VP2 WPL‏ و/ أو ‎VP3‏ لأي من الأنماط المصلية ‎.(Rh10 4 Rh74 (AAV1-AAV12‏ كما هو مستخدم هناء يكون مصطلح "النمط المصلي" تمييز يستخدم للإشارة إلى ‎AAV‏ له قفيصة مميزة مصليا عن أنواع ‎AAV‏ المصلية الأخرى. يتحدد التمييز المصلي على أساس افتقار التفاعلية 0 المتصالبة بين الأجسام المضادة لأجل ‎AAV‏ واحد مقارنة مع ‎AAV‏ آخر. عادة تكون اختلافات التفاعلية المتصالبة هذه نتيجة لاختلافات متواليات بروتين قفيصة/ مواد تحديد مستضدية (على سبيل المثال؛ نتيجة لاختلافات متوالية ‎VP2 (WPT‏ و/ أو 703 للأنماط المصلية ‎(AAV‏ على الرغم من احتمالية عدم التمييز المصلي لأشكال ‎AAV‏ المتباينة المتضمنة أشكال قفيصة متباينة عن نمط ‎AAV‏ مصلي مرجعي أو نمط ‎AAV‏ مصلي آخرء فإنها تختلف بوحدة نوكليوتيد بنائية أو وحدة حمض أميني بنائية واحدة على الأقل مقارنة مع النمط المصلي المرجعي أو نمط ‎AAV‏ ‏المصلي الآخر. بموجب التعريف التقليدي؛ فإن نمط مصلي يعني أن الفيروس محل الدراسة تم اختباره ضد مصل خاص بكل الأنماط المصلية الحالية والمميزة لتحديد نشاط التعادل ولم توجد أجسام مضادة تعادل الفيروس محل الدراسة. عندما يتم اكتشاف المزيد من مواد الفيروس المعزولة التي طبيعية الوجود 0 و/ أو تتولد طفرات القفيصة؛ قد توجد أو لا توجد اختلافات مصلية لأي من الأنماط المصلية الموجودة حاليا. بالتالي؛ في الحالات التي بها لا يوجد في الفيروس الجديد (على سبيل المثال؛ ‎(AAV‏ اختلافات مصلية؛ سوف يكون هذا الفيروس الجديد (على سبيل ‎(AAV (Jill‏ مجموعة فرعية أو شكل متباين من النمط المصلي المقابل. في العديد من الحالات؛ الاختبار المصلي ‎Labial‏ التعادل ما يزال يتعين تنفيذه على فيروسات طفرية مع تعديلات متوالية قفيصة لتحديد ما إذا 5 كانت من نمط مصلي آخر طبقا للتعريف التقليدي للنمط المصلي. طبقا لهذاء لأجل الموائمة
ولتجنب ‎«HLS‏ يشير مصطلح "النمط المصلي" بصورة واسعة إلى فيروسيين مميزان مصليا (على سبيل ‎(AAV (Jd)‏ بالإضافة إلى فيروسات ‎Jo)‏ سبيل المثال؛ ‎(AAV‏ لم يتم تمييزها مصليا قد تكون ضمن مجموعة فرعية أو شكل متباين لنمط مصلي محدد. لذلك تتضمن نواقل ‎AAV‏ متواليات جين/ بروتين متطابقة مع متواليات جين/ بروتين مميزة لنمط مصلي محدد. كما هو مستخدم ‎cls‏ يشير 'ناقل ‎AAV‏ يتعلق ب 21/1/" إلى واحد أو أكثر من بروتينات ‎AAV‏ (على سبيل المثال؛ متواليات ‎VP2 WPL‏ و/ أو 03/) التي لها تطابق متوالية إلى حد كبير مع واحدة أو أكثر من متواليات عديد النوكليوتيد أو عديد الببتيد المشتملة على 1. بصورة مماثلة؛ يشير "ناقل ‎AAV‏ يتعلق ب ‎"AAVE‏ إلى واحد أو أكثر من بروتينات ‎AAV‏ (على سبيل المثال؛ متواليات 1/01 1/02 و/ أو 03/) التي لها تطابق متوالية إلى حد 0 كبير مع واحدة أو أكثر من متواليات عديد النوكليوتيد أو عديد الببتيد المشتملة على ‎AAV‏ ‏يشير "ناقل ‎AAV‏ يتعلق ب 474-/1/" إلى واحد أو أكثر من بروتينات ‎AAV‏ (على سبيل المثال؛ متواليات ‎VP2 WPT‏ و/ أو ‎(VP3‏ التي لها تطابق متوالية إلى حد كبير مع واحدة أو أكثر من متواليات عديد النوكليوتيد أو عديد الببتيد المشتملة على 8074-/20/. لذلك قد يكون لنواقل ‎AAV‏ هذه المتعلقة بنمط مصلي آخرء على سبيل المثال؛ ‎AAV2 AAV]‏ 3/اظطفل ‎AAVS AAV4 5‏ 6/احح ‎(AAV11 AAV10 AAVO (AAVS (AAVT‏ 12 /اطحل ‎Rh74 (Rh10‏ أو ‎GAAV-2i8‏ واحدة أو ‎5ST‏ من المتواليات المميزة عن ‎AAV AAV]‏ 3م 4لاحح 5/احطح 6/احطح ‎AAV10 AAVO (AAVS (AAVT‏ 11 /أاطحل 2ه ‎Rh74 (Rh10‏ أو 218 -/الل لكن يمكنه إظهار تطابق متوالية إلى حد كبير مع واحد أو أكثر من الجينات و/ أو البروتينات؛ و/ أو يكون لها واحدة أو أكثر من المميزات الوظيفية 0 لأجل ‎(AAV2 AAV]‏ د/احح ‎(AAVS (AAVT AAV6 (AAVS (AAV4‏ ولاطل ‎Rh74 (Rh10 (AAV12 (AAVI1 (AAVI0‏ أو ‎AAV-2i8‏ (على سبيل المثال» مثل انتحاء الخلية/ النسيج). أشكال ‎AAV‏ المتباينة غير المحددة التمثيلية تتضمن أشكال قفيصة متباينة لأي من ‎VPI‏ 02/ و/ أو ‎VP3‏ ‏في نماذج تمثيلية متنوعة؛ يكون لناقل ‎AAV‏ متعلق بنمط مصلي مرجعي عديد نوكليوتيد؛ عديد 5 ببتيد أو متوالية فرعية من ذلك تتضمن أو تتكون من متوالية متطابقة بنسبة 780 على الأقل أو
أكثر (على سبيل المثال» 285 90 95 196 97 98ت 99 99.1 99.2 3 299.4 299.5 إلخ) مع واحد أو أكثر من ‎(AAV4 (AAV3 AAV2 AAV]‏ ‎AAVS‏ 6/اطحل ‎(AAV11 AAV10 AAV9 (AAV (AAVT‏ 12 لاطا ‎Rh74 (Rh10‏ أو ‎AAV-2i8‏ (مثلا ‎(TR‏ أو متواليات 1/01 ‎VP2‏ 5[ أو ‎(VP3‏
تتضمن تركيبات؛ طرق واستخدامات الاختراع متواليات ‎AAV‏ (عديد ببتيدات وعديد نوكليوتيدات)؛ ومتواليات من ذلك تظهر تطابق متوالية أقل من 7100 لنمط مصلي ‎AAV‏ مرجعي مثلا ‎AAV]‏ ‎AAV10 AAVY (AAVS (AAVT (AAV6 (AAVS5 AAV4 AAV3 (AAV2‏ 11 /اطخل
‎(Rh10 (AAV12‏ 874 أو ‎AAV-2i8‏ لكنها تتميز عن أو لا تتطابق مع جينات أو بروتينات ‎AAV‏ معروفة؛ مثلا ‎cilia‏ أو بروتينات ‎(AAV4 AAV3 AAV2 AAV]‏ 5/اطل ‎AAV10 AAVO (AAVS AAVT AAV6 0‏ 11 لاط ‎Rh74 (Rh10 (AAV12‏ أو ‎AAV-2i8‏ إلخ. في أحد النماذج؛ يتضمن أو يتكون عديد ببتيد ‎AAV‏ أو متوالية فرعية من ذلك من متوالية تتطابق بنسبة 775 على الأقل أو أكثرء على سبيل المثال 80 385 386 387 8 وق ‎¢J90‏ 91 2و9 د93 4و دو 196 97/ 98 99 99.1 799.2( 799.3 7299.4 299.5 إلخ؛ وصولا إلى تطابق بنسبة 7100 مع أي متوالية ‎AAV‏ ‏5 مرجعية أو متوالية فرعية من ذلك؛ متلا ‎AAV3 AAV AAV]‏ 4/اهطفض ‎(AAVS‏ 6/اطل ‎Rh74 (Rh10 AAV12 (AAV11 AAV10 AAVY AAVS (AAVT‏ أى ‎AAV-2i8‏ ‏(على سبيل المثال ‎ITR‏ أو قفيصة ‎VP2 WPL‏ 5[ أو 03/). في نماذج معينة؛ يكون لشكل ‎AAV‏ المتباين 1 2؛ 3؛ 4؛ 5؛ 10-5؛ 20-15 أو أكثر من استبدالات الحمض الأميني. يمكن إنشاء نواقل ‎AAV‏ معادة الاتحادء تتضمن ‎AAVS (AAV4 (AAV3 (AAV2 AAV]‏ ‎AAV10 AAVO (AAVS AAVT AAV6 0‏ 11 لاط ‎Rh74 (Rh10 (AAV12‏ أو ‎AAV-2i8‏ ومتواليات متباينة؛ ذات صلة؛ هجينة وخيمرية؛ باستخدام تقنيات ‎sale)‏ اتحاد معروفة للفني ‎pala)‏ لتضمين واحدة أو ‎AST‏ من متواليات الحمض النووي (جينات مضفورة) المجانحة مع واحدة أو أكثر من متواليات ‎AAV ١14‏ الوظيفية. في أحد نماذج الاختراع؛ قد يتم إعطاء أشكال متباينة من حمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVIIL 5‏ ناقل أو ناقل ‎led)‏ إلى ‎Gage‏ من خلال التشريب في ‎sale‏ حاملة متوافقة ‎(Lg‏ على
سبيل المثال» بواسطة الحقن في الوريد. قد يتم اختياريا كبسلة الأشكال المتباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ التي تشفر ‎FVII‏ نواقل ونواقل إظهار من الاختراع في ليبوزومات أو يتم خلطها مع فوسفوليبيدات أو مذيلات لزيادة استقرار الجزيء. قد يتم إعطاء الأشكال المتباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ التي تشفر ‎FVII‏ النواقل او نواقل الإظهار من الاختراع؛ بمفردهم أو في توليفة مع عوامل ‎gal‏ معروفة لتعديل إرقاء الدم ‎Ae)‏ سبيل المثال؛ العامل ‎V‏ العامل ‎Va‏ أو مشتقات من ذلك). يمكن تحديد تركيبة ملائمة لتوصيل ‎FVII‏ عن طريق الممارس الطبي عند الأخذ في الاعتبار تشكيلة من المتغيرات الفسيولوجية؛ متضمنة؛ لكن دون ‎joan‏ حالة المربض والوضع الديناميكي الدموي. سوف تتناسب مجموعة من التركيبات لتطبيقات مختلفة وتكون طرق الإعطاء معروفة 0 جيدا في المجال وسوف يتم وصفها هنا فيما بعد. يحتوي على مصفوفة مقبولة فسيولوجيا مستحضر يحتوي على بروتين ||1/1 منقى» ناتج بإظهار أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CPG‏ تشفر ‎(FVIII‏ نواقل ونواقل إظهار من الاختراع؛ وقد تتم صياغته كمستحضر صيدلاني. قد تتم صياغة المستحضر باستخدام طرق معروفة إلى حد كبير من الفن السابق»؛ يمكن خلطه مع أملاح تحتوي على مثبتات للرقم الهيدروجيني؛ مثلا كلوريد 5 الصوديوم ‎(NaCl) Sodium chloride‏ كلوريد الكالسيوم ‎Calcium chloride‏ (08012)؛ وأحماض أمينية؛ مثلا جليسين و/ أو ليسين؛ ورقم هيدروجيني في حدود 6 إلى 8. حتى الحاجة ‎ca‏ يمكن تخزين المستحضر المنقى المحتوي على ‎FVII‏ في شكل محلول جاهز للاستعمال أو في شكل مجمد جدا أو مجفد. يمكن تخزين مستحضر في شكل مجفد ويذاب في محلول يمكن التحقق من نقاوته بالعين المجردة 0 باستخدام محلول معاد تكوينه ملائم. بصورة بديلة؛ يمكن أيضا إتاحة المستحضر طبقا للاختراع كمستحضر سائل أو كسائل مجمد جدا. قد يكون المستحضر طبقا للاختراع اختياريا مستقر على نحو ‎gl (ald‏ يمكن تركه ليستقر في شكل مذاب لفترة زمنية طويلة قبل الإعطاء أو التوصيل. يمكن إتاحة المستحضر طبقا للاختراع كمستحضر صيدلاني له نشاط ‎FVII‏ في شكل مستحضر من مكون واحد أو في توليفة مع عوامل أخرى في شكل مستحضر متعدد المكونات. قبل معالجة
— 3 4 — البروتين المنتقى في مستحضر صيدلاني؛ يخضع البروتين المنقى إلى الرقابة التقليدية على الجودة ويصنع فى شكل علاجى للتقديم ‎٠.‏ بصورة محددة» خلال تصنيع مادة معادة الاتحادء يتم اختبار المستحضر المنقى لتحديد غياب الأحماض النووبة الخلوية بالإضافة إلى الأحماض النووية المشتقة من ناقل الإظهار» كما هو مذكور في براءة الاختراع الأوروبية رقم: 0714987. قد يتم استخدام مستحضر البروتين الصيدلاني بجرعات بين 100-30 وحدة دولية/ كجم (وحدة
دولية واحدة تمثل 100 نانوجرام/ ملليلتر) كحقنة يومية فردية أو ما يصل إلى 3 مرات يوميا لعدة أيام. قد يتم علاج المرضى على الفور عند الحضور إلى العيادة مصابين بالنزيف. بصورة بديلة؛ قد يتلقى المرضى تشربب ‎daly‏ كل 8 إلى 11 ساعة؛ أو إذا لوحظ تحسن ‎AS‏ ¢ يتم تشريب ‎FVII‏ ‏مرة واحدة يوميا.
0 طبقا لهذاء يمكن في التركيبات الصيدلانية دمج أحماض نووية»؛ نواقل» نواقل معاد اتحادها (على سبيل المثال؛ ‎(rAAV‏ من أ لاختراع؛ وجسيمات فيروس معادة الاتحاد وتركيبات؛ عوامل ؛» عقاقير؛ مواد حيوية (بروتينات) أخرى. تكون تلك التركيبات الصيدلانية نافعة لأجل؛ من بين أمور أخرى؛ ‎J‏ لإعطاء والتوصيل داخل أو خارج جسم كائن حي . في نماذج محددة؛ تحتوي التركيبات الصيدلانية أيضا على مادة حاملة أو مسوغة مقبولة
5 فضسيولوجيا. تتضمن تلك المواد المسوغة أي عامل صيدلاني لا يحدث بذاته استجابة مناعية تضر الفرد المتلقي للتركيبة؛ ‎Ally‏ يمكن إعطاؤه دون حدوث سمية مفرطة. كما هو مستخدم هنا فإن المصطلحات 'مقبول صيدلانيا" أو ‎Jed‏ فسيولوجيا" تعنى صياغة؛ مادة غازية؛ سائلة أو صلبة مقبولة حيويا ‘ أو خليط من ذلك يكون مناسب لواحدة أو أكثر من طرق الإعطاء؛ التوصيل داخل الجسم ‎al)‏ أو ملامسته. إن تركيبة ‎"WV ana Ags’‏ أو 'مقبولة
0 فيولوجيا" هى مادة مقبولة حيويا أو بطريقة أخرى؛ على سبيل المثال؛ المادة ‎Al‏ يمكن إعطاؤها إلى كائن دون التسبب في تأثيرات حيوية غير مرغوية بشكل كبير. هكذا؛ قد يتم استخدام تركيبة صيدلانية؛ على سبيل المثال في إعطاء حمض نووي» ‎(JB‏ جسيم فيروسي أو بروتين إلى كائن. تتضمن المواد المسوغة المقبولة صيد ‎Ly‏ ¢ لكن دون ‎pan‏ ¢ سوائل ‎Jie‏ الماء؛ محلول ملح ¢ جليسرول؛ سكريات وإيثانول. قد توجد أيضا أملاح مقبولة صيدلانيا» على سبيل المثال» أملاح
حمض معدني مثلا هيدروكلوريد؛ هيدروبروميد؛ فوسفات؛ سلفات؛ إلخ؛ وأملاح من أحماض عضوية مثلا أسيتات؛ بروبيونات؛ مالونات؛ بنزوات؛ إلخ. بصورة إضافية؛ قد توجد في تلك الأوساط الناقلة مواد ‎Bao lise‏ مثل عوامل الترطيب أو الاستحلاب؛ المواد المثبتة للرقم الهيدروجيني؛ إلخ.
قد تتوافر التركيبة الصيدلانية كملح أو قد تتشكل مع العديد من الأحماض؛ بما في ذلك دون حصرء هيدروكلوريك» كبربتيك» أستيك» لاكتيك» طرطريك؛ ماليك؛ سكسينيك» إلخ. تميل الأملاح إلى الذويان بصورة أكثر في مذيبات مائية أو مذيبات بروتونية أخرى عنها في أشكال القاعدة الحرة المقابلة. في حالات أخرى؛ قد يكون المستحضر ‎Ble‏ عن مسحوق مجفد قد يحتوي على أي أو كل مما يلي: 50-1 مللي مولار هستيدين» 72-70.1 سكروزء 17-25 مانيتول؛ عند رقم
0 هيدروجيني يتراوح من 4.5 إلى 5.5؛ الذي يتحد مع مثبت رقم هيدروجيني قبل الاستخدام. تتضمن التركيبات الصيدلانية مذيبات (مائية أو غير مائية)؛ محاليل (مائية أو غير مائية)؛ مستحلبات (على سبيل ‎(J)‏ زيت- في- ماء أو ماء - في- زبت)؛ معلقات؛ أشرية؛ إكسيرات؛ أوساط تشتيت وتعليق» أغلفة؛. عوامل متساوية التوتر وتعزز أو تؤخر والامتصاص؛ متوافقة مع الإعطاء أو التوصيل أو ملامسة الجسم ‎All‏ صيدلانيا. المذيبات؛ المحاليل؛ والمعلقات المائية
5 وغير المائية قد تتضمن عوامل تعليق وعوامل لتغليظ القوام. تتضمن تلك المواد الحاملة المقبولة صيدلانيا أقراص (مغلفة أو غير مغلفة)؛ كبسولات (صلبة أو لينة)؛ خرزات مجهرية؛ مسحوق؛ حبيبات وبلورات. يمكن أيضا في التركيبة دمج المركبات النشطة التكميلية ‎Ao)‏ سبيل المثال؛ المواد الحافظة؛ العوامل المضادة للميكرويات؛ المضادة للفيروسات والمضادة للفطريات) . يمكن صياغة التركيبات الصيدلانية لتتوافق مع طريقة الإعطاء أو التوصيل المحددة؛ كما هو
0 مذكور هنا ومعروف للماهر في المجال. هكذاء فإن التركيبات الصيدلانية تتضمن مواد حاملة؛ مواد تخفيف؛ أو مواد مسوغة مناسبة للإعطاء بعدة طرق. تشتمل التركيبات المناسبة للإعطاء عن غير الطريق المعوي محاليل؛ معلقات أو مستحلبات مائية وغير مائية من المركب النشط؛ تكون تلك المستحضرات معقمة نموذجيا وقد تكون متساوية التوتر مع دم المتلقي المقصود. الأمثلة التوضيحية غير المحدودة تتضمن ماء؛ محلول ملح ثابت الرقم
— 5 4 — الهيدروجيني؛ محلول هانكس؛ محلول ربنجرء دكستروز» فركتوز» إيثانول» زيوت حيوانية؛ نباتية أو صناعية. قد تحتوي معلقات الحقن المائية على مواد تزيد لزوجة المعلق؛ ‎(Jie‏ سليلوز كريوكسي ‎die‏ صوديوم» سوربيتول» أو دكستران. بصورة إضافية؛ قد يتم تحضير معلقات من المركبات النشطة كمعلقات حقن ‎cw)‏ ملائمة. المذيبات أو الأوساط الناقلة المحبة للشحم المناسبة تتضمن زبوت دهنية مثل زبت السمسم؛ أو إسترات حمض دهنى صناعية؛ مثل أوليات إثيل أو ثلاثى جليسريد؛ أو ليبوزومات. ‎Lyla)‏ قد يحتوي المعلق أيضا على مواد تثبيت مناسبة أو عوامل تزيد قابلية ذويان المركبات للسماح بأن يكون المستحضر محتويا على محاليل عالية التركيز. قد تتم إضافة مذيبات مساعدة ومواد مضافة إلى الصياغة. الأمثلة غير المحدودة للمذيبات 0 1 المساعدة تحتوي على مجموعات هيدروكسيل أو مجموعات قطبية أخرى ‘ على سبيل المثال ‘ كحولات؛ مثلا كحول أيزوبروبيل؛ جليكول؛ مثلا جليكول بروبيلين؛ جليكول بولي إثيلين» جليكول بولي بروبيلين؛ إثير جليكول؛ جليسرول؛ كحولات بولي أوكسي إثيلين وإسترات حمض دهني بولي أوكسي إثيلين. المواد المضافة تتضمن؛ على سبيل المثال» منشطات سطح مثل؛ ليسيثين صويا وحمض أولييك؛ إسترات سوربيتان ‎Jie‏ ثلاثي أوليات سوربيتان؛ وبولي فينيل بيروليدون. 5 بعد تحضير التركيبات الصيدلانية؛ قد يتم وضعها في حاوية ملائمة ومزودة بملصق للمعالجة. لإعطاء النواقل أو عديد الببتيدات المحتوية على ‎FVII‏ فإن هذا الملصق سوف يتضمن كمية؛ مرات وطريقة الإعطاء . التركيبات الصيدلانية وأنظمة التوصيل الملائمة للتركيبات؛ الطرق والاستخدامات من الاختراع تكون معروفة في ‎Jal‏ انظر على سبيل المثال:
Remington: The Science and Practice of Pharmacy (2003) 20th ed., 0
Mack Publishing Co., Easton, PA; Remington’s Pharmaceutical Sciences (1990) 18th ed., Mack Publishing Co., Easton, PA; The Merck Index (1996) 12th ed., Merck Publishing Group, Whitehouse, NJ;
Pharmaceutical Principles of Solid Dosage Forms (1993), Technonic
Publishing Co., Inc., Lancaster, Pa.; Ansel and Stoklosa, Pharmaceutical
Calculations (2001) 11th ed., Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore,
MD; and Poznansky et al., Drug Delivery Systems (1980), R. L. Juliano, ed., Oxford, N.Y., pp. 253-315. يوفر الاختراع أيضا طرق لتقديم أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة 006 يشفر ‎FVII‏ ‏خلية أو حيوان. في نموذج محدد؛ يوفر الاختراع طرق لتعديل إرقاء الدم. في أحد النماذج؛ تتضمن الطريقة ملامسة أو إعطاء فرد (مربض أو كائن مثلا كائن ثديي) وسط ناقل لتوصيل حمض نووي (على سبيل المثال؛ ناقل ‎(AAV‏ يشمل شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVIII‏ ‏تحت شروط حيث يظهر عديد ببتيد !7/11 في الفرد. في نموذج آخرء تتضمن الطريقة تزويد خلايا فرد (مريض أو كائن مثلا كائن ثديي) بوسط ناقل لتوصيل حمض نووي (على سبيل المثال؛ ناقل ‎Jody (AAV‏ شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر ‎FVII‏ تحت شروط حيث يظهر عديد الببتيد ‎FVII‏ في الفرد. مما سبق؛ يمكن ملاحظة أنه يمكن استخدام الأشكال المتباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ يشفر ‎FVIII‏ في معالجة اضطرابات مصحوية بنقص؛ عدم ‎US‏ تجلط الدم أو تجلطه على نحو شاذ. 5 يمكن إعطاء تركيبات الأشكال المتباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ المتضمنة نواقل» نواقل معادة الاتحاد (على سبيل ‎((FAAV (Jl‏ وجسيمات فيروس معادة ‎Aa)‏ ويمكن توفير طرق واستخدامات من الاختراع؛ وذلك بكميات كافية أو فعالة إلى كائن بحاجة إليها. يشير مصطلح "كمية فعالة" أو 'كمية ‎ES‏ إلى كمية توفرء في جرعات فردية أو متعددة؛ بمفردها أو في توليفة» مع واحدة أو أكثر من التركيبات الأخرى (عوامل علاجية أو كابحة للمناعة مثلا 0 عقار)؛ المعالجات؛ البروتوكولات» أو عوامل أنظمة علاجية؛ استجابة يمكن اكتشافها لأي فترة زمانية (قصيرة أو ‎(Ash‏ نتيجة متوقعة أو مرغوية أو منفعة لكائن بأي درجة يمكن قياسها أو الكشف عنها لأي فترة زمنية (على سبيل المثال؛ لمدة دقائق؛ ساعات؛ ‎call‏ شهور؛ سنين؛ أو الشفاء تماما).
قد تتنوع الجرعات ويكون أساسها هو ‎chai‏ بداية؛ تقدم» ‎Ban‏ عدد مرات؛ فترة؛ أو احتمالية المرض المطلوب معالجته؛ نقطة النهائية السريرية؛ المعالجات السابقة أو المتزامنة؛ الحالة الصحية العامة؛ عمرء جنس؛ العرق أو الكفاءة المناعية ‎ASU‏ وعوامل أخرى سوف يدركها الفني الماهر. قد تتم زيادة أو خفض كمية؛ ‎cane‏ مرات أو فترات الجرعة نسبياء كما هو مشار إليه تبعا للتأثيرات الجانبية الضارة؛ المضاعفات أو ‎alse‏ الخطورة الأخرى للمعالجة أو العلاج ووضع الكائن. سوف يدرك الفني الماهر العوامل التي قد تؤثر على التجريع والتوقيت المطلويين لتوفير كمية كافية لتوفير منفعة علاجية أو وقائية. سوف تتنوع الجرعة لتحقيق التأثير العلاجي؛ على سبيل المثال؛ الجرعة في جينومات الناقل/ لكل كيلو جرام من وزن الجسم ‎asin)‏ ناقل/ كجم)؛ على أساس عدة عوامل تتضمن؛ لكن دون حصر: 0 طريقة الإعطاء؛ مستوى إظهار عديد النوكليوتيد الغيروي المطلوب لتحقيق تأثير علاجي؛ المرض الخاص المعالج؛ أي استجابة مناعية للعائل للناقل الفيروسي؛ الاستجابة المناعية ‎Jailed‏ إلى عديد النوكليوتيد الغيروي أو منتج الإظهار (بروتين)؛ واستقرار البروتين الظاهر. قد يستطيع الماهر في المجال تحديد نطاق ‎[TAAV deja‏ جينوم ناقل لعلاج ‎paige‏ مصاب بمرض أو اضطراب محدد على أساس العوامل المذكورة مسبقاء بالإضافة إلى عوامل أخرى. بصفة ‎cele‏ سوف تتراوح 5 الجرعات من على الأقل 1 ‎x‏ 810؛ أو ‎ST‏ ¢ على سبيل المثال» 1 ‎x 1 1010 x 1 910 x‏ ‎x 1 ¢1210 x 1 +60‏ 1310 أو 1 ‎x‏ 1410( أو ‎«ST‏ جينومات ناقل لكل كيلو جرام (جينوم ناقل/ كجم) من وزن الكائن؛ لتحقيق تأثير علاجي. تكون جرعة ‎AAAV‏ حدود 1 ‎x‏ ‎x1 -60‏ 1110 في الفتران» و1 ‎x 1 -1210 x‏ 1310 في الكلاب فعالة. باستخدام هيموفيليا 8 ‎(JES‏ على نحو عام؛ من المعتقد ‎cal‏ لتحقيق تأثير علاجي؛ توجد حاجة 0 إلى تركيز عامل تخثر دم أكبر من 71 من تركيز العامل الموجود في فرد طبيعي لتغيير النمط الظاهري لحدة المرض ليصبح معتدل. يتميز النمط الظاهري الحاد بتلف المفاصل ومرات النزف المهددة للحياة. لتحويل نمط ظاهري معتدل للمرض إلى نمط يمكن تحمله؛ من المعتقد وجود حاجة إلى تركيز عامل تخثر الدم أكبر بنسبة 75 عن الطبيعي. تكون مستويات !71/11 في بشر طبيعيين حوالي 200-150 نانوجرام/ ملليلتر من البلازماء لكنها قد تكون أقل (على سبيل المثتال؛ في حدود 5 150-100 نانوجرام/ ملليلتر تقريبا) أو أكبر (على سبيل المثال» في حدود 300-200 نانوجرام/
ملليلتر تقرببا) وما تزال تعتبر طبيعية نتيجة للعمل على التخثر كما تحدد؛ على سبيل المثال؛ بواسطة اختبار التخثر أحادي المرحلة لزمن ثرومبوبلاستين جزئي منشط ‎activated partial‏ ‎thromboplastin time‏ (38011). بالتالي؛ يمكن تحقيق التأثير العلاجي بإظهار ‎FVII‏ بحيث تكون كمية ‎FVIII‏ الإجمالية في الكائن/ الإنسان أكبر من 71 عن ‎FVII‏ الموجود في كائنات/ بشر طبيعيين؛ على سبيل المثال» 71 من 300-100 نانوجرام/ ملليلتر. بالنسبة إلى علاج هذا الكائن المصاب بالهيموفيليا؛ تكون الجرعة النموذجية بمقدار على الأقل 1 ‎agua 1010 *‏ ناقل ‎(VG) vector genomes‏ لكل كيلو جرام من وزن الكائن؛ أو بين حوالي 1 ‎x‏ 1010 إلى 1 ‎x‏ 1110 جينوم ناقل/ كجم من وزن الكائن؛ أو بين حوالي 1 ‎x‏ 1110 إلى 1 ‎asin 1210 x‏ ناقل/ كجم من وزن الكائن» أو بين حوالي 1 ‎x‏ 1210 إلى 1 ‎x‏ 1310 جينوم 0 ناقل/ كجم من وزن الكائن؛ لتحقيق التأثير العلاجي المرغوب. قد تكون جرعات ناقل ‎AAV‏ عند مستوى؛ نموذجيا عند النهاية الدنيا لنطاق الجرعة؛ بحيث لا توجد استجابة مناعية بدرجة كبيرة ضد عامل ‎FVII‏ أى ‎AAV‏ ‏الجرعات ب "كمية فعالة" أو 'كمية ‎"IS‏ لمعالجة (على سبيل المثال؛ لتحسين أو لتوفير منفعة علاجية تحسن) تكون فعالة نموذجيا في توفير استجابة لواحد من؛ العديد من أو كل المتلازمات 5 العكسية؛ العواقب أو المضاعفات الخاصة بالمرض؛ واحد أو ‎JST‏ من المتلازمات العكسية؛ الاضطرابات؛ العلل؛ الأمراض» أو المضاعفات؛ على سبيل المثال؛ الناتجة عن أو المصاحبة للمرض؛ إلى مدى يمكن قياسه؛ على الرغم من أن خفض؛ تقليل؛ ‎can‏ كبح؛ الحد من أو السيطرة على تقدم أو ‎spe‏ المرض ‎Jia‏ نتيجة مُرضية. قد لا توجد حاجة إلى توفير الكمية الفعالة أو الكمية الكافية في إعطاء فردي» ويمكن توفيرها في 0 العديد من الإعطاءات؛ ‎cg‏ لكن دون الحاجة إلى ذلك؛ قد يتم إعطائها بمفردها أو في توليفة مع تركيبة أخرى (على سبيل ‎(JU‏ عامل)؛ معالجة؛ بروتوكول أو نظام علاجي ‎AT‏ على سبيل المثال» قد تتم زيادة الكمية نسبيا كما هو مشار ‎ad)‏ تبعا لحاجة ‎CAEN‏ نمط» ووضع المرض المعالج وحدته أو الآثار الجانبية (إذا وجدت) للمعالجة. بصورة إضافية؛ لا توجد حاجة إلى فعالية أو كفاية الكمية الفعالة أو الكمية الكافية إذا تم إعطائها في جرعة فردية أو في جرعات متعددة 5 بدون تركيبة ثانية ‎Jeo)‏ سبيل المثال» عامل أو عقار آخر)؛ معالجة؛ بروتوكول أو نظام علاجي؛
حيث قد توجد الجرعات؛ الكميات أو الفترات الإضافية الزائدة عن تلك الجرعات؛ أو التركيبات (على سبيل المثال؛ عقاقير أو عوامل)؛ المعالجات؛ البروتوكولات أو الأنظمة العلاجية لتكون فعالة أو كافية في كائن محدد. أيضا توجد الكميات التي تعتبر فعالة ضمن الكميات المتسببة في تقليل استخدام معالجة أخرى؛ نظام علاجي أو بروتوكول آخرين؛ مثل إعطاء بروتين عامل تجلط معاد الاتحاد (على سبيل المثال» ‎(FVII‏ لمعالجة اضطراب تجلط ‎le)‏ سبيل ‎(JU)‏ هيموفيليا ‎(A‏
طبقا لهذاء تتضمن طرق واستخدامات الاختراع أيضاء من بين أمور أخرى؛ طرق واستخدامات تتسبب في تقليل الحاجة إلى أو استخدام مركب؛ ‎dale‏ عقارء نظام علاجي؛ بروتوكول معالجة؛ عملية أو دواء آخر. على سبيل المثال؛ لمرض تجلط الدم» يكون لطريقة أو استخدام الاختراع منفعة علاجية إذا تم إعطاء كائن محدد جرعة منخفضة أو بصورة أقل تكرارا أو إذا تم التخلص من
0 إعطاء بروتين عامل تجلط معاد الاتحاد لدعم نقص أو عدم فعالية عامل التجلط داخلي ‎Lana)‏ ‏(الشاذ أو الطفري) في الكائن. هكذا؛ طبقا للاختراع؛ تتوافر طرق واستخدامات لخفض الحاجة إلى أو استخدام معالجة أو علاج آخر. لا توجد حاجة إلى أن تكون الكمية الفعالة أو الكمية الكافية فعالة في كل من وكل كائن معالج ولا في معظم الكائنات المعالجة في مجموعة أو جماعة محددة. نعني بالكمية الفعالة أو الكمية الكافية
5 الفعالية أو الكفاية في كائن محدد؛ وليست مجموعة أو الجماعة العامة. كما هو نموذجي لهذه الطرق؛ سوف يظهر بعض الكائنات استجابة أكبرء أو استجابة أقل أو عدم وجود استجابة لطريقة أو استخدام معالجة محددة. إن المصطلح 'تحسين" يعني تحسن يمكن اكتشافه أو قابل للقياس في مرض الكائن أو متلازمة له؛ أو استجابة خلوية ضمنية. يتضمن التحسن القابل للاكتشاف والقابل للقياس انخفاض؛ تقليل؛
0 تثثبيط كبح» حد من أو السيطرة على معاودة؛ مرات حدوث؛ ‎(add Ban‏ أو فترة المرض بصورة موضوعية أو غير موضوعية؛ أو المضاعفات الناتجة عن أو المصاحبة للمرض؛ أو تحسن في متلازمة أو سبب أساسي أو توابع المرضء أو انعكاس المرض. بالنسبة إلى الهيموفيليا ‎A‏ سوف تكون الكمية الفعالة هي كمية تخفض مرات حدوث أو حدو نويات النزف الحادة في ‎(CAS‏ على سبيل المثال؛ أو كمية تخفض زمن التجلط حسب القياس بواسطة اختبار تجلط على سبيل المثال.
طبقا لهذاء تتضمن التركيبات الصيدلانية من الاختراع تركيبات حيث توجد المقومات النشطة بكمية فعالة لتحقيق الاستجابة العلاجية المقصودة. يكون تحديد جرعة فعالة علاجيا جيدا في حدود مقدرة الممارس الطبي الماهر المستخدم للتقنيات والإرشادات المتوافرة في الاختراع. سوف تعتمد الجرعات العلاجية على؛ من بين عوامل أخرى؛ عمر الكائن وحالته العامة حدة
النمط الظاهري لتخثر الدم الشاذء وقوة المتوليات المقارنة المنظمة لمستوبات إظهار الأشكال المتباينة لحمض نووي منخفضة ‎CPG‏ المشفر ‎FVII‏ بالتالي» سوف تقع الكمية الفعالة ‎Ladle‏ ‏في البشر في نطاق واسع نسبيا يمكن للممارس الطبي تحديده على أساس استجابة المريض منفردا لمعالجة ‎FVII‏ بالاعتماد على ناقل. قد تكون تلك الجرعات فردية أو في توليفة مع عامل أو عقار كابح للمناعة.
قد يتم توصيل تركيبات ‎Jie‏ التركيبات الصيدلانية إلى كائن» من أجل السماح بإنتاج بروتين نشط حيويا (على سبيل المثال عامل ‎(FVII VII‏ مشفر بواسطة شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎ff (CPG‏ بحث الإظهار المستمر للجين المضفور ‎FVII‏ في الجسم ‎(Al‏ بواسطة علاجات تعتمد على جين أو على خلية أو بواسطة تعديل خارج الجسم ‎al‏ لخلايا المريض أو خلايا المانح. في نموذج محدد؛ في الكائن قد تؤثر على إرقاء الدم التركيبات الصيدلانية المشتملة على مادة جينية
5 كافية لتمكين المتلقي من خفض الكمية الفعالة علاجيا من عديد ببتيد ‎FVII‏ ‏قد يتم إعطاء التركيبات بمفردها. في نماذج معينة؛ يقوم شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ ‏يشفر ‎(Jab FVII‏ ناقل إظهار/ ناقل معاد الاتحاد (على سبيل المثال؛ /81/)؛ أو جسيم فيروس معاد الاتحاد بتوفير تأثير علاجي بدون عامل كابح للمناعة. يستمر تأثير ‎FVII‏ العلاجي لفترة ‎cdi)‏ على سبيل المناكء 4-2 6-4« 8-6 10-8 14-10 20-14 25-20 30-25
0 أو 50-30 يوم أو ‎5ST‏ « على سبيل المثال» 75-50 100-75 150-100 200-150 يوم أو أكثر بدون إعطاء عامل كابح للمناعة. طبقا لذلك؛ في نماذج معينة يقوم شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CPG‏ يشفر ‎FVIII‏ ناقل؛ ناقل إظهار/ ناقل معاد الاتحاد (على سبيل المثال؛ ‎((TAAV‏ أو جسيم فيروس معاد الاتحاد بتوفير تأثير علاجي بدون إعطاء عامل كابح للمناعة لفترة زمنية.
قد يتم إعطاء التركيبات في توليفة مع عامل آخر واحد على الأقل. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ ناقل؛ ‎Jal‏ إظهار/ ناقل معاد الاتحاد (على سبيل المثال؛ ‎((TAAV‏ أو جسيم فيروس معاد الاتحاد في تقارن مع واحد أو أكثر من العوامل الكابحة للمناعة قبل؛ إلى حد كبير في نفس وقت أو بعد إعطاء شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎Jal FVII‏ ناقل إظهار/ ناقل معاد الاتحاد ‎Je)‏ سبيل المثال ‎(FAAV‏
أو جسيم فيروس معاد الاتحاد. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء شكل متباين لحمض نووي منخفض 6 يشفر ‎(FVII‏ ناقل؛ ناقل إظهار/ ناقل معاد الاتحاد (على سبيل المثال؛ ‎((TAAV‏ أو جسيم فيروس معاد الاتحاد في تقارن مع واحد أو أكثر من العوامل الكابحة للمناعة بعد فترة زمنية تلي إعطاء شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎(Jil FVII‏ ناقل إظهار/ ناقل معاد
0 الاتحاد ‎Je)‏ سبيل ‎((FAAV (Ja‏ أو جسيم فيروس معاد الاتحاد؛ على سبيل المثال» 12-1؛ 24-2 أو 48-24 ساعة أو 4-2 6-4 6-ق 10-8 14-10 20-14 25-20« 30-25 50-30( أو أكثر من 50 يوم بعد إعطاء شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ ‏يشفر ‎(Jil FVII‏ ناقل إظهار/ ناقل معاد الاتحاد (على سبيل المثال؛ /81/)؛ أو جسيم فيروس معاد الاتحاد. يتم هذا الإعطاء للعوامل الكابحة للمناعة يعد فترة زمنية تلي إعطاء شكل متباين
5 لحمض نووي منخفض 606 يشفر ‎FVII‏ ناقل» ناقل إظهار/ ناقل معاد الاتحاد (على سبيل ‎((FAAV (Jal)‏ أو جسيم فيروس معاد الاتحاد إذا كان هناك انخفاض في ‎FVII‏ بعد مستويات الإظهار الأولية لفترة زمنية؛ على سبيل المثال» 25-20« 30-25 50-30 75-50 75- 100« 150-100 200-150 أو أكثر من 200 يوم بعد إعطاء شكل متباين لحمض نووي متخفض 606 يشفر ‎(Jil FVII‏ ناقل إظهار/ ناقل معاد الاتحاد (على سبيل المتال ‎(FAAV‏
أو جسيم فيروس معاد الاتحاد. في نماذج معينة؛ يكون العامل الكابح للمناعة هو عامل مضاد للالتهاب. في نماذج معينة؛ يكون العامل الكابح للمناعة هو ستيرويد. في نماذج معينة؛ يكون العامل الكابح للمناعة هو سيكلوسبورين (على سبيل المثال سيكلوسبورين ‎oA‏ ميكوفينولات؛ ربتوكسيماب أو مشتق من ذلك. العوامل المحددة الإضافية تتضمن مركب مثبت.
قد يتم إعطاء التركيبات في أي مادة حاملة صيدلانية متوافقة حيويا معقمة؛ بما في ذلك؛ لكن دون حصر؛ محلول ملح؛ محلول ملح ثابت الرقم الهيدروجيني؛ دكستروز؛ وماء. قد يتم إعطاء التركيبات إلى مربض بمفردهاء أو في توليفة مع عوامل أخرى (على سبيل المثال» عوامل مساعدة) تؤثر إلى إرقاء الدم.
قد يتم إعطاء العامل ‎VIE‏ بمفرده أو في اتحاد مع عوامل أخرى أو قد يتلامس أو يتم تشريبه مباشرة في مربض في مادة حاملة حيوية ‎Ads‏ كما هو موصوف هنا. قد يتم إعطاء نواقل ونواقل إظهار من الاختراع تشمل شكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ مريض بتشكيلة من الوسائل لتحقيق واختياريا الحفاظ على المستوى الفعال علاجيا و/ أو ‎Wy‏ لعديد ببتيد ‎FVIII‏ لفترة زمنية. يستطيع الماهر في المجال بسهولة تحديد بروتوكولات خاصة لاستخدام نواقل
0 إظهار تشفر 71/1 من الاختراع لمعالجة مريض محدد معالجة شافية. توصف بروتوكولات لتوليد نواقل فيروسية غدية والإعطاء إلى المريض في براءات الاختراع الأمريكية أرقام: 5/998.205؛ 6/228.646؛ 6/093.699؛ 6/100.242؛ وطلبات براءات الاختراع الدولية أرقام: 94/17810 و94/23744,؛ المندمجين هنا كمرجع بالكامل. بصورة محددة؛ على سبيل المثال» تستعمل نواقل ‎AAV‏ لتوصيل عامل ‎(FVII VIII‏ مشفر بواسطة
5 أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CPG‏ إلى مريض بحاجة إليه. قد يتم إعطاء عامل ‎(FVII VIII‏ مشفر بواسطة أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CPG‏ يتم توصيله عن طريق نواقل ‎AAV‏ من الاختراع إلى مريض بأي وسيلة معروفة. تتضمن طرق واستخدامات الاختراع توصيل وإعطاء جهازي؛ مكاني أو موضعي؛ أو بواسطة أي طريقة؛ على سبيل المثال؛ بالحقن أو التشريب. قد يتم توصيل التركيبات الصيدلانية في الجسم
0 الحي بصفة عامة عن طريق الحقن باستخدام حاقن تقليدي»؛ على الرغم من تصور طرق توصيل أخرى مثل التوصيل المحث بحمل حراري (انظرء على سبيل المثال» براءة الاختراع الأمريكية رقم: 1200). على سبيل المثال؛ قد يتم توصيل التركيبات تحت الجلد؛ عن طريق الجلد؛ داخل الجلد؛ داخل القراب؛ داخل الحجاج؛ داخل الغشاء المخاطي؛ في الغشاء البريتوني؛ في الوريد؛ في الغشاء البلوري؛ في الشريان؛ فموياء في الكبد؛ من خلال الوريد البابي؛ أو في العضل. النسق
الأخرى للإعطاء تتضمن الإعطاء الفموي والرثوي؛ التحاميل؛ والتطبيقات عبر الأدمة. قد يحدد الطبيب السريري المتخصص في معالجة المرضى المصابين باضطرابات تخثر الدم الطريقة المثالية لإعطاء نواقل مصاحبة ‎(ug pill‏ الغدي تشمل أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ ‏يشفر ‎FVII‏ على أساس عدد من المعايير؛ متضمنة؛ لكن دون حصر: ‎Ala‏ المريض وغرض المعالجة (على سبيل المثال؛ تخثر الدم المحث أو المنخفض).
قد ‎Calls‏ طرق واستخدامات الاختراع مع أي مركب؛ عامل؛ ‎lie‏ معالجة أو نظام علاجي أو بروتوكول آخر له النشاط أو التأثير العلاجي؛ النفعي؛ الإضافيء التأزري أو التكميلي المرغوب. تتضمن تركيبات ومعالجات التوليف التمثيلية مواد نشطة ثانية؛ ‎Die‏ مواد حيوية (بروتينات)؛ عوامل (على سبيل المثال» عوامل كابحة للمناعة) وعقاقير. يمكن إعطاء هذه المواد الحيوية
0 (بروتينات)؛ ‎celal)‏ العقاقير؛ المعالجات والعلاجات أو قد تتم ‎od‏ إلى حد كبير بالتزامن مع أو بعد أي طريقة أو استخدام آخر من الاختراع» على سبيل المثال» طريقة علاجية لعلاج كائن ‎Glas‏ بمرض تجلط الدم ‎Jie‏ الهيموفيليا ‎A‏ ‏يمكن إعطاء المركب؛ العامل؛ العقار؛ المعالجة أو نظام علاجي أو بروتوكول كتركيبة متآلفة؛ أو يتم إعطائهم بصورة منفصلة؛ مثلا التوصيل أو الإعطاء المتواقت في سلسلة أو بالتعاقب (قبل أو
5 بعد) لحمض نووي؛ ‎(BU‏ ناقل معاد الاتحاد (على سبيل ‎((FAAV (JED‏ أو جسيم فيروس معاد الاتحاد. لذلك يوفر الاختراع توليفات فيها تتآلف طريقة أو استخدام من الاختراع مع أي ‎(re‏ ‏عامل؛ ‎lie‏ نظام ‎ade‏ بروتوكول معالجة؛ عملية؛ دواء أو تركيبة؛ مذكورين هنا أو معروفين للماهر في المجال. يمكن إعطاء المركب؛ العامل؛ العقار؛ النظام العلاجي؛ بروتوكول المعالجة؛ العملية؛ الدواء أو التركيبة أو قد يتم قبل» بصورة متزامنة إلى حد كبير مع أو بعد إعطاء حمض
0 نووي؛ ‎(Jil‏ ناقل معاد الاتحاد (على سبيل ‎(FAAV (J‏ أو جسيم فيروس معاد الاتحاد من الاختراع؛ إلى ‎(AS‏ ‏يكون الاختراع نافع في حيوانات بما في ذلك ‎Glad)‏ وتطبيقات طبية بيطرية. الكائنات المناسبة لذلك تتضمن الكائنات الثديية؛ ‎Jie‏ البشرء بالإضافة إلى الكائنات الثديية غير البشرية. يشير المصطلح ‎GIS‏ إلى حيوان؛ نموذجيا كائن ثديي؛ مثلا البشرء الكائنات الرئيسة غير البشرية
‎sll) 5‏ العلياء قردة ‎(small‏ الشيمبانزي»؛ إنسان الغاب؛ قردة المكاك)؛ حيوان ‎Call‏ (كلاب وقطط)؛
حيوان مزرعة (الدواجن مثل الدجاج ‎cadly‏ الخيول؛ البقرء ‎Geld)‏ الماشية؛ الخنازير)» وحيوانات
التجاري (الفأرء الجرذ؛ الأرنب؛ خنزير غينيا). الكائنات البشرية تتضمن كائنات جنينية؛ وليدية؛
رضيعية؛ يافعة ويالغة. تتضمن الكائنات نماذج حيوان مصابة بالمرض؛ على سبيل المثال؛ فأر
ونماذج حيوان أخرى مصابة بأمراض تجلط الدم ‎Jie‏ الهيموفيليا ‎A‏ وأنواع أخرى معروفة للمهرة في المجال.
تتضمن الكائنات الملائمة للمعالجة طبقا للاختراع تلك التي بها أو المعرضة لخطورة إنتاج ‎aS‏
غير كافية أو لديها نقص في منتج الجين الوظيفي (على سبيل المثال» بروتين ‎(FVII‏ إنتاج منتج
جين شاذ وظيفي ‎Wis‏ أو غير وظيفي (على سبيل ‎JE)‏ بروتين ‎(FVII‏ مما قد يؤدي إلى
المرض. أيضا تتضمن الكائنات الملائمة للمعالجة طبقا للاختراع تلك التي بها أو المعرضة لخطورة
0 إنتاج منتج جين (بروتين) شاذء أو مختل (طفري) يؤدي إلى مرض بحيث أن خفض كميات؛ إظهار أو وظيفة منتج الجين (بروتين) الشاذء أو المختل (الطفري) سوف يؤدي إلى معالجة المرض» أو خفض واحدة أو أكثر من المتلازمات أو تحسين المرض. الكائنات المستهدفة ‎GUA‏ ‏تتضمن كائنات لديها إنتاج عامل تجلط دم ‎OLE‏ غير كافي أو غير موجود؛ مثلا المصابين بالهيموفيليا (على سبيل المثال» الهيموفيليا ‎(A‏
‎(Ka 5‏ اختبار الكائنات لتحديد الاستجابة المناعية؛ على سبيل المثال؛ الأجسام المضادة ضد ‎AAV‏ لذلك يمكن فحص الكائنات المقترحة المصابة بالهيموفيليا قبل المعالجة طبقا لطريقة الاختراع. يمكن ‎Lad‏ اختبار الكائنات لتحديد الأجسام المضادة ضد ‎AAV‏ بعد المعالجة؛ واختياريا تتم مراقبتها لفترة زمنية بعد المعالجة. يمكن علاج الكائنات المطورة للأجسام المضادة مع عامل كابح للمناعة؛ أو يمكن إعطائها كمية إضافية واحدة أو أكثر من ناقل ‎AAV‏
‏0 الكائنات الملائمة للمعالجة طبقا للاختراع تتضمن أيضا تلك التي بها أو المعرضة لخطورة إنتاج أجسام مضادة ضد ‎AAV‏ يمكن إعطاء أو توصيل نواقل ‎AAV‏ إلى تلك الكائنات باستخدام تقنيات متعددة. على سبيل المثال يمكن توصيل ‎AAV‏ القفيصة الفارغة ‎AAV (gl)‏ يفتقد حمض نووي ‎(FVII‏ للارتباط مع الأجسام المضادة ‎AAV‏ في الكائن بذلك للناقل ‎AAV‏ الحامل لشكل متباين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفر ‎FVII‏ بنقل الخلايا إلى الكائن. يمكن معايرة كميات من
‎AAV 5‏ القفيصة الفارغة للإعطاء على أساس كمية الأجسام المضادة ‎AAV‏ المنتجة في كائن
محدد. قد تكون القفيصة الفارغة من أي نمط مصلي ‎AAV‏ على سبيل المثال ‎AAV2 AAV]‏ ‎AAV10 AAVO (AAV (AAVT (AAV6 AAVS (AAV4 AAV3‏ 11 باطخل 2ه ‎AAV-2i8 4 Rh74 Rh10‏ بصورة بديلة أو بالإضافة إلى ‎ell‏ يمكن توصيل ناقل ‎AAV‏ بالحقن في العضل مباشرة (على سبيل المثال؛ واحد أو أكثر من ألياف العضلة بطيئة الانتفاض). في بديل آخرء يمكن استخدام
القسطرة الداخلة في الشريان الفخذي لتوصيل نواقل ‎AAV‏ إلى الكبد من خلال الشريان الكبدي. يمكن أيضا استعمال وسائل غير جراحية؛ ‎Jie‏ تصوير البنكرياس والأوعية الصفراوية بالتنظير الداخلي الرجوعي ‎«(ERCP) endoscopic retrograde cholangiopancreatography‏ لتوصيل نواقل ‎AAV‏ مباشرة إلى الكبد؛ بذلك يتم تجاوز مجرى الدم والأجسام المضادة ‎AAV‏
0 يمكن استخدام الأنظمة القنوية الأخرى؛ ‎Jie‏ قنوات الغدة تحت الفك السفلي؛ كبوابات لتوصيل تواقل ‎AAV‏ في كائن تطور أو لديها أجسام مضادة ضد ‎AAV‏ موجودة مسبقا. يمكن إتمام الإعطاء أو التوصيل في الجسم ‎Al‏ إلى كائن قبل تطور متلازمة؛ ‎lls‏ مضاعفة ضارة؛ إلخ؛ تنتج عن أو تصاحب المرض. على سبيل المثال؛ يمكن استخدام فحص (على سبيل المثال» جيني) لتحديد تلك الكائنات ككائنات مقترحة لتركيبات» طرق الاختراع واستخداماته. لذلك
5 .قد تتضمن تلك الكائنات تلك التي تكون عند الفحص موجبة لكمية غير كافية أو نقص في منتج جين وظيفي (على سبيل المثال؛ بروتين ‎(FVII‏ أو تلك المنتجة منتج جين وظيفي ‎Wis‏ أو غير وظيفي شاذ (على سبيل المثال» بروتين ‎(FVII‏ ‏يمكن ممارسة الإعطاء أو التوصيل في الجسم الحي إلى كائن طبقا لطرق واستخدامات الاختراع كما هو مبين هنا خلال 2-1 4-2 12-4 24-12 أو 72-24 ساعة بعد تحديد إصابة
0 الكائن بالمرض المستهدف للمعالجة؛ المصاب بواحدة أو أكثر من متلازمات الورم؛ أو الذي تم فحصه وتم تحديد إيجابيته كما هو مذكور هنا على الرغم من عدم إصابة الكائن بواحدة أو أكثر من متلازمات المرضء أو تم فحصه وتحديد إيجابيته كما هو مذكور هنا. تشير العبارة "شكل جرعة ‎"sang‏ كما هو مستخدم هنا إلى وحدات مميزة فيزيائيا مناسبة كجرعات وحدوية للكائن المطلوب علاجه؛ تحتوي كل وحدة على كمية محددة مسبقا اختياريا مترابطة مع
مادة حاملة صيدلانية (مادة مسوغة؛ ‎sale‏ تخفيف؛ وسط ناقل أو عامل ملء) التي؛ عند إعطائها في واحدة أو أكثر من الجرعات؛ يتم حسابها لإحداث التأثير المرغوب (على سبيل ‎JB‏ التأثير الوقائي أو العلاجي). قد تكون أشكال جرعة الوحدة داخل؛ على سبيل المثال؛ أمبولات وقناني؛ التي قد تتضمن تركيبة سائلة؛ أو تركيبة في حالة مجففة بالتجميد أو مجفدة؛ يمكن إضافة مادة حاملة سائلة معقمة؛ على سبيل المثال؛ قبل الإعطاء أو التوصيل في الجسم الحي. قد توجد أشكال
جرعة الوحدة الفردية في مجموعات أو حاويات متعددة الجرعة. يمكن تعبئة متواليات ناقل معاد اتحاده (على سبيل المثال؛ ‎(FAAV‏ جسيمات فيروس معاد اتحاده؛ وتركيبات صيدلانية من ذلك في شكل جرعة وحدة فردية أو متعدد لتسهيل إعطاء الجرعة وتجانسها.
يمكن اختبار الكائنات لتحديد كميات ‎FVII‏ أو نشاط ‎FVII‏ لتحديد مدى ملاءمة هذه الكائنات
0 للمعالجة طبقا لطريقة الاختراع. يمكن اختبار الكائنات المقترحة المصابة بالهيموفيليا لتحديد كميات أو نشاط ‎FVII‏ قبل المعالجة طبقا لطريقة الاختراع. يمكن أيضا اختبار الكائنات لتحديد كميات ‎FVIII‏ أو نشاط ‎FVII‏ بعد المعالجة طبقا لطريقة الاختراع. يمكن مراقبة تلك الكائنات المعالجة بعد المعالجة لتحديد كميات ‎FVIII‏ أو نشاط ‎FVII‏ بصورة دورية؛ على سبيل المثال». كل 4-1 أسابيع أو 6-1 شهور.
‎(Sa 5‏ اختبار الكائنات لتحديد واحد أو أكثر من إنزيمات الكبد للاستجابة العكسية أو لتحديد مدى ملاءمة تلك الكائنات للمعالجة طبقا لطريقة الاختراع. لذلك يمكن فحص الكائنات المقترحة المصابة بالهيموفيليا لتحديد كميات واحد أو أكثر من إنزيمات الكبد قبل المعالجة طبقا لطريقة الاختراع. يمكن أيضا اختبار الكائنات لتحديد كميات واحد أو أكثر من إنزيمات الكبد بعد المعالجة طبقا للاختراع. يمكن مراقبة تلك الكائنات المعالجة بعد المعالجة لتحديد إنزيمات الكبد المرتفعة؛ بصورة
‏0 دورية؛ على سبيل المثال» كل 4-1 أسابيع أو 6-1 شهور. إنزيمات الكبد التمثيلية تتضمن ناقلة أمين الألانين ‎(ALT) alanine aminotransferase‏ ناقلة أمين الأسبارتات ‎(AST) aspartate aminotransferase‏ ولاكتات ديهيدروجيناز ‎lactate‏ ‎(LDH) dehydrogenase‏ لكن يمكن أيضا مراقبة إنزيمات ‎gal‏ تدل على تلف بالكبد. يتحدد نموذجيا المستوى الطبيعي لتلك الإنزيمات في الدورة الدموية كنطاق له مستوى عالي؛ أعلاه يعتبر
مستوى الإنزيم مرتفع؛ ولذلك يدل على تلف بالكبد. يعتمد النطاق الطبيعي جزئيا على المقاييس المستخدمة المعمل السريري المجري للاختبار. يمكن مراقبة نويات النزف في الكائنات لتحديد مدى أهلية تلك الكائنات إلى أو مدى استجابتهم للمعالجة؛ و/ أو مقدار أو فترة الاستجابة. يمكن مراقبة نويات النزف في الكائنات لتحديد مدى
حاجة تلك الكائنات لمعالجة إضافية؛ على سبيل ‎(Jd‏ إعطاء ناقل ‎AAV‏ لاحق أو إعطاء عامل كابح للمناعة؛ أو مراقبة أكثر تواترا. لذلك يمكن مراقبة الكائنات المصابة بالهيموفيليا لتحديد نويات النزف قبل وبعد المعالجة طبقا لطريقة الاختراع. يمكن أيضا اختبار الكائنات لتحديد عدد مرات نويات النزف وحدتها خلال أو بعد المعالجة طبقا لطريقة الاختراع. يوفر الاختراع مجموعات مع مادة تعبئة وواحد أو أكثر من المكونات فيها. تتضمن المجموعة
0 ملصق أو نشرة عبوة داخلية تتضمن وصف المكونات أو تعليمات الاستخدام في المعمل؛ في الجسم الحي؛ أو خارج الجسم الحي؛ للمكونات الموجودة بها. قد تحتوي المجموعة على تشكيلة من تلك المكونات؛ على سبيل ‎(Jal)‏ حمض نووي؛ ناقل معاد الاتحاد؛ ناقل فيروس ‎le)‏ سبيل المثال» ‎(AAV‏ أو جسيم فيروس واختياريا شكل نشط ثاني؛ مثلا مركب»؛ ‎lie dale‏ أو تركيبة أخرى .
5 تشير مجموعة إلى بناء فيزيائي يحوي واحد أو أكثر من مكونات المجموعة. قد تحفظ مادة التعبئة المكونات معقمة؛ وقد تصنع من مادة مستخدمة ‎le gud‏ لتلك الأغراض (على سبيل المثال» ورق؛ ألياف مموجة؛ ‎pla)‏ بلاستيك؛ رقاقة؛ أمبولات؛ قناني؛ أنابيب» إلخ). قد تتضمن الملصقات أو النشرات الداخلية معلومات تعريفية لواحد أو أكثر من المكونات الموجودة بهاء كميات ‎cde all‏ الفارماكولوجية السريرية للمقوم (المقومات) النشط متضمنة آلية التأثير؛
0 الحركيات الصيدلانية والديناميكيات الصيدلانية. قد تتضمن الملصقات أو النشرات الداخلية معلومات تحدد الصانع؛ أرقام التشغيلة؛ موقع وتاريخ الصنع تواريخ انتهاء الصلاحية. قد تتضمن الملصقات أو النشرات الداخلية معلومات تحدد معلومات الصانع؛ أرقام التشغيلة؛ موقع الصانع والتاريخ. قد تتضمن الملصقات أو النشرات الداخلية معلومات عن المرض الذي قد يستخدم مكون المجموعة لأجله. قد تتضمن الملصقات أو النشرات الداخلية تعليمات للطبيب أو الكائن لاستخدام
واحد أو أكثر من مكونات المجموعة في طريقة؛ استخدام؛ أو بروتوكول معالجة أو نظام علاجي.
قد تتضمن التعليمات كميات الجرعة؛ عدد المرات أو فترات الإعطاء؛ وتعليمات لممارسة أي من
الطرق؛ الاستخدامات؛ بروتوكولات المعالجة أو الأنظمة الوقائية أو العلاجية الموصوفة هنا.
قد تتضمن الملصقات أو النشرات الداخلية معلومات عن أي فائدة قد يوفرها المكون؛ مثل الفائدة الوقائية أو العلاجية. قد تتضمن الملصقات أو النشرات الداخلية معلومات عن التأثيرات الجانبية
الضارة المحتملة؛ المضاعفات أو التفاعلات؛ مثلا تحذير للكائن أو الطبيب يتعلق بالحالات التي
فيها يكون استخدام تركيبة محددة غير ملائم. أيضا قد تحدث التأثيرات الجانبية الضارة أو
المضاعفات عند تناول ‎(ASN‏ أو تناوله فيما بعد أو تناوله في نفس الوقت لواحد أو أكثر من
الأدوية التي قد لا تتوافق مع التركيبة؛ أو عند خضوع الكائن؛ أو خضوعه في المستقبل أو في
نفس الوقت لبروتوكول معالجة آخر أو نظام علاجي ‎AT‏ قد يكون غير متوافق مع التركيبة؛ لذلك؛ قد تتضمن التعليمات معلومات تتعلق بعدم التوافق هذا. تتضمن الملصقات أو النشرات الداخلية ‎sale‏ مطبوعة"؛ على سبيل المثال» ورق أو ورق مقوى؛ أو منفصل عن أو مثبت مع مكون؛ مجموعة أو مادة تعبئة ‎lo)‏ سبيل المثال» صندوق)؛ أو مرفق ‎(Janey‏ أنبوب أو قنينة تحتوي على مكون المجموعة. قد تتضمن الملصقات أو النشرات الداخلية
5 إضافيا وسط يمكن قرائته بواسطة حاسوب؛ مثلا ملصق مطبوع مزود بكود ‎(apd‏ قرص؛ قرص ضوئي مثلا قرص مدمج ذو ذاكرة قرائية فقط أو ذاكرة القراءة فقط لقرص فيديو رقمي/ ذاكرة الوصول العشوائي» قرص فيديو رقمي؛ شربط مغناطيسي» أو أوساط تخزين كهربية مثلا ذاكرة وصول عشوائي وذاكرة القراءة فقط أو هجين منهم مثلا أوساط تخزين مغناطيسية/ ضوئية؛ أوساط مثل الفلاش أو بطاقات من نوع الذاكرة.
0 مالم يحدد خلاف هذاء يكون لكل المصطلحات التقنية والعلمية المستخدمة نفس المعني المفهوم شيوعا لصاحب المهارة العادية في المجال المنتمي له هذا الاختراع. على الرغم من إمكانية استخدام طرق ومواد مشابهة أو مكافئة لتلك الموصوفة هنا عند ممارسة أو اختبار الاختراع الحالي» توصف هنا طرق ومواد مناسبة.
— 5 9 —
تندمج كمرجع بالكامل كل براءات الاختراع» طلبات ومنشورات براءات الاختراع» والمراجع الأخرى؛ استشهادات بنك الجين واستشهادات ‎ATCC‏ المذكورة هنا. فى حالة التعارض؛ سوف تسود المواصفة؛ بما فى ذلك التعريفات. تستخدم هنا أعلاه مصطلحات متنوعة للجزيئات الحيوية من الاختراع وأيضا طوال المواصفة
وعناصر الحماية. قد يتم توليف كل السمات المبينة هنا في أي توليفة. قد يتم استبدال كل سمة مبينة في المواصفة بسمة بديلة تخدم نفس الغرض» غرض مكافئ؛ أو غرض مشابه. هكذاء؛ مالم يتحدد خلاف هذا بوضوح. تكون السمات المبينة ‎lo)‏ سبيل المثال؛ أشكال متباينة لحمض نووي منخفضة ‎CpG‏ ‏يشفر ‎FVII‏ ناقل» بلازميد؛ متوالية ناقل إظهار/ ناقل معاد الاتحاد (على سبيل المثالء ‎(FAAV‏
0 أو جسيم فيروس معاد الاتحاد) هي مثال لنوع من السمات المكافئة أو المشابهة. كما هو مستخدم ‎Lia‏ فإن صيغ المفرد ‎"the" 4 "yg Ja"‏ تتضمن صيغ الجمع مالم يدل السياق بوضوح على خلاف هذا. هكذاء على سبيل المثال ؛ الإشارة إلى "حمض نووي ' تتضمن مجموعة من تلك الأحماض النووية؛ الإشارة إلى "ناقل" تتضمن مجموعة من تلك النواقل» والإشارة إلى 'فيروس ' أو ‎NEY‏ ' تتضمن مجموعة من تلك الفيروسات/ الجسيمات .
5 كما هو مستخدم هناء فإن كل القيم العددية أو النطاقات العددية تتضمن أعداد صحيحة داخل هذه النطاقات وكسور لهذه القيم أو الأعداد الصحيحة داخل النطاقات مالم يدل السياق على خلاف هذا بوضوح. هكذاء ‎(zea gill‏ الإشارة إلى تطابق بنسبة 7.80 أو أكثرء تتضمن 81 82 83 84./« 85./¢ مقن 87/ فقث فقث 90/« ‎dl 94 793 792 J/91‏ بالإضافة إلى 1 81.2 81.3/ 81.4 81.5/ إلغ 82.1 82.2 82.3 382.4
‎dl /.82.5 20‏ وهكذا . الإشارة إلى عدد صحيح بأكثر (أكبر) أو أقل من تتضمن أي عدد أكبر من أو أقل من العدد المرجعي؛ على التوالي. هكذاء على سبيل المثال؛ الإشارة إلى أقل من 100؛ تتضمن 99 98؛ ‎al (OT‏ نزولا إلى الرقم 1؛ وأقل من 10( تتضمن 9 8 7 إلخ» نزولا إلى الرقم 1.
كما هو مستخدم هناء كل القيم أو النطاقات العددية تتضمن كسور القيم والأعداد الصحيحة ضمن هذه النطاقات وكسور الأعداد الصحيحة ضمن هذه النطاقات مالم يحدد السياق بوضوح ما يخالف هذا. هكذا؛ للتوضيح. الإشارة إلى نطاق عددي؛ مثلا 10-1 تتضمن 1 2؛ 3 4 5 6 7 8 9 10؛ بالإضافة إلى 1.1« ¢1.2 1.3» 1.4( 1.5 ‎x‏ وهكذا. لذلك الإشارة إلى نطاق من 50-1 تتضمن 2001 3 4 5 6« لق وق قل 12:11 13 14 15 16 17 8 9 20 إلخ؛ وصولا إلى ‎Lag‏ في ذلك العدد 50 بالإضافة إلى 1.1؛ 1.2( 1.3( 1.4( 1.5 إلخ» 2.1» 2.2» 2.3» 2.4 2.5 إلخ؛ وهكذا. الإشارة إلى سلسلة من النطاقات تتضمن نطاقات تضم القيم الحدودية لنطاقات مختلفة ضمن السلسلة. هكذاء لتوضيح الإشارة إلى سلسلة نطاقات؛ على سبيل المثال» 10-1 20-10« 20- 0 30 40-30 50-40« 60-50« 75-60 100-75 150-100 200-150« 200- 250« 300-250« 400-300« 500-400« 750-500« 850-750« بما في ذلك النطاقات 20-1 30-1 40-1 50-1 60-1« 30-10 40-10« 50-10« 60-10« 70-10« 80-10« 40-20 50-20« 60-20 70-20 80-20« 90-20« 75-50« 100-50« 150-50« 200-50« 250-50« 200-100« 250-100« 300-100 350-100« 5 400-100 500-100 250-150« 300-150« 350-150 400-150« 450-150« 500-150< إلخ. يتم هنا الكشف عن الاختراع ‎dele‏ باستخدام لغة إيجابية لوصف النماذج والجوانب العديدة. أيضا يتضمن الاختراع على نحو خاص نماذج فيها يتم استثناء موضوع ‎carne‏ بالكامل أو جزئيا؛ ‎Mie‏ ‏مواد أو أدوات» خطوات أو شروط؛» بروتوكولات» أو إجراءات طريقة. على سبيل المثال» في نماذج 0 أو جوانب معينة من الاختراع؛ يتم استثناء المواد و/ أو خطوات الطريقة. هكذاء على الرغم من عدم توضيح الاختراع ‎dale‏ هنا ‎Lad‏ يتعلق بعدم تضمن الاختراع لجوانب لم يتم استثنائها بوضوح في الاختراع على الرغم من هذا يتم الكشف عنها هنا. تم وصف عدد من نماذج الاختراع. على الرغم من ‎haa‏ يمكن للماهر في المجال؛ بدون الخروج عن روح ونطاق الاختراع؛ إجراء العديد من التغييرات والتعديلات على الاختراع لتهيئته لاستخدامات
— 1 6 — وشروط متنوعة. طبقا لهذاء المقصود من الأمثلة التالية توضيح نطاق الاختراع لكن دون تحديده بأي طريقة. مثال 1 يتم الكشف هنا عن بنيات الجين للاستخدام في طرق علاج جيني لعلاج الهيموفيليا. إضافة لذلك؛ قد تكون بنيات الجين التي تشفر العامل ‎(FVII VII‏ مفيدة في المعمل في إعداد نُظم إظهار البروتين» لإنتاج بروتين ‎FVII‏ معاد الاتحاد للإعطاء. يمكن أن تتضمن اختيارياً كل بنية جين واحد أو أكثر من عنصر تحكم ‎Nia)‏ معزز) في الإظهار» جين عامل ‎VII‏ وسمات تنظيمية ‎gal‏ مطلوية لإظهار الجين؛ ‎Mie‏ إنترونات» ‎(TRS‏ كودونات توقف؛ إشارات عديد ‎SOA‏ ‏مثال 2 0 متواليات ‎DNA‏ لعامل ‎VIII‏ منخفض ‎CpG‏ وبنيات ‎Jil‏ محددة؛ بنيات بلازميد وخطوط خلية تنتج ناقل ‎AAV‏ ‏يتم إنتاج 18 شكل متباين مختلفين لحمض نووي منخفض ‎CpG‏ يشفروا ‎FVII‏ (تعريف المتوالية أرقام: 18-1) وبتم تقييمهم في اختبارات الإظهار. يتم توليد بنيات ‎cDNA‏ ل ‎FVIII‏ بشري منخفض ‎CPG‏ مع معزز ترانسثيريتين طفري ‎(TTRmut) mutant transthyretin‏ (تعريف 5 المتوالية رقم: 22). يكون لمجموعة إظهار ‎AAV-SPK-8011‏ متوالية الحمض النووي 71/1/1-07] منخفض 6 والقفيصة ‎LKO3‏ للتعبئة. يكون لقفيصة ‎LKO3‏ تمائل كبير مع ‎(AAV3‏ فيرروس ‎DNA‏ ‏فردي الجديلة ناقص التنسخ ‎Landa‏ غير مسبب للمرض. يكون بلازميد التعبئة 011603 عبارة عن بنية بلازميد من 7484 زوج قاعدة تحمل الجينات نسخية ‎AAV2 - 0‏ وجينات للتغليف ‎AAV-LKO3‏ تحت التحكم في المعزز 05 ‎AAV2‏ أصل تنسخ بكتيري وجين يضفي مقاومة كاناميسين في الخلايا البكتيرية. في هذه البنية؛ يتحرك معزز التنسخ ‎PS‏ من 3 لجين التغليف من أجل تقليل احتمالية تشكيل أنواع ‎AAV‏ من نوع بري أو من نوع بري زائف؛ ولزيادة إنتاجية الناقل.
— 2 6 — يكون ‎DNA‏ المنسوخ لنقل ‎(pall‏ هو مجموعة إظهار جين» مغلفة في القفيصة ‎AAV-LKO3‏ ‏كجينوم فردي الجديلة؛ يشفر عامل تخثر بشري ‎VII‏ (0]1/111) تحت التحكم في معزز خاص بالكبد. تتم الإشارة إلى بلازميد الإظهار على أنه ‎PAAV-TTRmMUt-hFVII-X0T7‏ يتم تعديله عن طريق إدخال 4 طفرات نقطية فى المعزز ‎(TTR‏ ومنطقة التشفير المُحسّنة لزيادة إظهار ‎FVIII 5‏ بشري . تحتوي ‎J de gana‏ لإظهار ‎AAV‏ على العناصر التالية: ‎AAV2 ITR‏ معزز ترانسثيريتين ‎¢(TTR) Transthyretin‏ معزز ترانسثيريتين خاص بالكبد ‎liver-specific‏ ‎(TTR) transthyretin‏ مع 4 طفرات نقطية تُزيد إظهار الجين مقارنة مع معزز من النوع البري ‎(Costa et al. 1991)‏ 10 إنترون تخليقي مشتق من جين ‎Wl‏ لعامل الإطالة 57-1 البشري متوالية تشفير ‎(FVII‏ نطاق 8 محذوف»؛ متوالية تشفير ‎FVII‏ بشرية ‎Atak‏ ‏متوالية إشارة عديد ‎A‏ لغلوبين بيتا بأرنب )1989 ‎(Levitt et al.‏ ‎AAV2 ITR‏ يتم استخدام ثلاث بنيات بلازميد ‎DNA‏ لنقل عدوى 293 خلية كلوية جنينية بشرية لإنتاج الناقل 501-8011 بواسطة عملية خالية من فيروس مساعد )1998 ‎:(Matsushita et al.‏ يتم نسخ مجموعة الجين (متوالية تشفير !!111/1 وعناصر تنظيمية مصاحبة) في بلازميد لتوفير البلازميد الناقل ‎PAAV-TTRmMut-hFVIII-X07‏ ‏يتم نسخ الجينوم الفيروسي ‎AAV‏ (النسخي والمغلف) الذي تنقصه ‎١1145‏ الفيروسية إلى بلازميد لإعطاء بلازميد التعبئة ‎(pLKO3 AAV‏ مما يوفر جينات نسخ ‎AAV2‏ وتغليف ‎AAV-LKO3‏ ‏0 المطلوية في المفروق لتعبئة الناقل ‎AAV‏ يتم نقل موقع المعزز الفيروسي (05) للجين النسخي في البلازميد لمنع تشكيل ‎AAV‏ المنافس للتنسخ عن طريق إعادة الاتحاد المتمائل.
يتم نسخ الجينات الثلاثة من فيروس غدي-2 إلى بلازميد ثالث ‎(PCCVC-AD2HP)‏ الذي يوفر الجينات الفيروسية المساعدة الضرورية لإنتاج ناقل. يكون البلازميد ‎PCCVC-AD2HPV2‏ هو بنية بلازميد من 11832 زوج قاعدة تحمل جينات الفيروسة الغدية الثلانة؛ ‎VA 5 E4 (E2A‏ ‎RNAS‏ لتوفير الوظائف "المساعدة" الضرورية لتنسخ وتقفص الناقل ‎AAV‏ يكون البلازميد ‎pCCVC-AD2HPV2 5‏ مشتق من ‎pPCCVC-AD2HP‏ حيث تتم إزالة شظية التقييد - ‎Drdl‏
‎Drdl‏ من 1882 زوج قاعدة المحتوية على الجين ‎AMPR‏ وجزءٍ من المتوالية ‎PUC ori‏ ويتم استبدالها مع الشظية ‎Drdl= Drdl‏ من البلازميد ‎pPAAV2-hRPEGSV2‏ المحتوي على الجين ‎KanR‏ بأكمله وجزءٍ من المتوالية ‎ori‏ ولنام. تكون ركيزة الخلية المستخدمة لإنتاج الناقل ‎AAV‏ هي مشتق من ‎WIA‏ كلوية جنينية بشرية
‎(HEK) human embryonic kidney 10‏ أولية 293. خط الخلية ‎HEK293‏ هو خط دائم متحوّل بواسطة ‎DNA‏ فيروس غدي بشري مقصوص من النوع 5 ‎(Graham et al. (AdS)‏ (1977. يتم اشتقاق بنك خلية عاملة من بنك خلية أساسية ‎Baas HEK293‏ من مركز العلاجات الخلوية والجزيئية ‎(CCMT) Center for Cellular and Molecular Therapeutics‏ في مستشفى فيلادلفيا للأطفال ‎.(CHOP) Children’s Hospital of Philadelphia‏
‏5 مثال 3 تقييم نواقل ‎AAV-hEVIIE‏ في الفثران تتم تعبئة بنيات الجين المضفور ‎FVII‏ (051/111) في نواقل فيروسية مصاحبة للغدة ‎adeno—‏ ‎(AAV) associated viral‏ ويتم توصيلها للفئران. باختصار؛ يتم حقن مجموعات من 4 فثران ‎CD4-/-‏ مصابة بالهيموفيليا / في عمر 10-8 أسابيع مع 4 ‎X‏ 1210 جينوم ناقل/ كجم من
‏0 نواقل 01/111 ‎AAV‏ يتم استخدام فتران ناقصة المناعة ‎(Kall‏ من تحديد مقدار مستويات بلازما ‎Cua FVII‏ تمنع الأجسام المضادة التثبيطية مع ‎FV‏ التي يتم توليدها في فتران طبيعية تحليل إظهار ‎FVII‏ عى المدى الطويل. يتم تحديد مستويات إظهار ‎FVII‏ وفي العديد من الحالات تكون أعلى من الإظهار الذي توفره المتوالية 003 (تعريف المتوالية رقم: 21) والتي تشفر |(011/1. كما هو موضح في الشكل 2
تُظهر النواقل المتضمنة ‎AAV-SPK-8005‏ مستويات 11/1 أعلى مقارنة مع ناقل ‎AAV=‏ ‏3 مرجعي. تكشف البيانات بشكل مثير للدهشة أن العديد من متواليات ‎DNA‏ تُظهر مستويات ‎FVIII‏ أعلى من متوالية مُحسنة الكودون (003؛ تعريف المتوالية رقم: 21) تشفر ‎FVII‏ ‏يتم استخدام ‎AAV-Spark8005‏ (5014-8005 المعين أيضا)ء؛ بخلاف ‎AAV-LK03~‏ ‎SPK-8011 5 AAV-LKO3-hFVIIl) hFVIIl 5‏ المعينين أيضاً)؛ في هذه الدراسة لضمان التنبيغ الفعغال (أي؛ إظهار الجين المضفور ‎(FVII‏ للخلايا الكبدية الفأرية. بالتالي؛ يتم إعداد هذه الدراسة لتقييم سلامة إظهار ‎AEVII‏ الممتد؛ وليست سلامة القفيصة ‎AAV-LKO3‏ ‏يتم اختيار الجرعات الثلاثة من ‎x 8 1010 x 4) AAV-SPK-8005-hFVIIl‏ 1010 1.6 ‎[Jil agua 1110 x‏ فأر ؛ تقريبا 1.6 ‎x 6.4 1210 x 3.2 »1210 x‏ 1210 جينوم ناقل/ 0 كجم؛ على أساس وزن الفأر بمقدار 25 ‎(an‏ لتوليد تقريباً 25-5« 75-25« 7150-50 مستويات مستضد ||151/1؛ على التوالي. تشمل الدراسة 350 فأر 8100/5610 ذكور (جدول ‎ging (1‏ تقسيمها إلى دراستين فرعيتين: دراسة أساسية ‎Nn)‏ = 270( ودراسة تحليل حيوي ‎=n)‏ ‏0). في الدراسة الأساسية؛ تتم معالجة 60 فأر مع كل وسط ناقل أو واحدة من الجرعات الثلاثة للناقل )4 ‎x 8 <1010 x‏ 1010؛ 1.6 ‎x‏ 1110 جينوم ناقل/ فأر). تتم معالجة عشرة ‎Ob‏ ‏5 للتقييمات في اليوم 29/ 30 من دراسات الكيمياء السريرية؛ يتم استخدام 10 لمبحث الدم؛ ويتم إجراء تقييمات التخثر على ال 10 حيوانات المتبقية. يتم قتل هذه الفئران ال 30 في اليوم 29 أو 0. تتم معالجة المجموعة الأخرى المكونة من 30 فأر معالجين مع كل وسط ناقل أو واحدة من الجرعات الثلاثة للناقل بصورة مشابهة عند النقطة الزمنية في اليوم ‎(BT‏ وبتم قتلهم في اليوم 87. عند الانتهاء» يتم إجراءات ملاحظات على المرض بأكمله في كل الحيوانات في الدراسة الأساسية 0 وبتم إجراء التشريح المرضي النسيجي الشامل على 10 حيوانات/ مجموعة لكل نقطة زمنية (مجموعة فرعية لعلم الدم). يتم استخدام مجموعة أخرى من 30 فأر ساذجة لقياسات الأمراض السريرية للتحكم في الخلفية. في دراسة التحليل الحيوي؛ يتم حقن 20 مع وسط ناقل أو واحدة من جرعات الناقل الثلاثة. تنزرف هذه الحيوانات قبل حقن ‎sale‏ الاختبار وبالتسلسل في الأيام ¢15 30؛ 60؛ و87. يجب أن يكون الحجم المقصود للبلازما المتجمعة لكل عينة كافياً لتحديد مستويات كل من المستضد ‎151/11١‏
— 5 6 — والدايمر 0. مع ذلك»؛ نظراً لمجموعات حجم البلازما غير الكافية؛ يتم إجراء اختبار واحد فقط على بلازما ‎Sl‏ فردي عند كل النقاط الزمنية؛ باستثناء النقطة الزمنية النهائية. بالتالي؛ يتم تقييم بعض ‎fall‏ بالنسبة لمستويات المستضد ‎hFVII‏ فى الدورة الدموية وغيرها لمستويات الدايمر نا. حيث أنه يتطلب بلازما لإجراء ‎ELISA‏ !057/1 (بحد أدنى 50 ميكرولتر) أكثر من ‎ELISA‏ للدايمر ‎aa) © 5‏ أدنى 20 ميكرولتر)؛ يتحدد اختيار الاختبار بواسطة ‎aaa‏ البلازما المتجمعة. جدول 1: إعداد دراسة بفأر الدراسة الأساسية تركيز مستوى حجم دراسة رقم ‎١‏ | الجرعة | المجموع | المجم | 7 مادة الجرعة ‎١‏ الجرعة إ: ِ يرد ‎١‏ لتحا المجم (جينوم |5 و : الاختبار ‏ | ‎١ asin)‏ (ميكرول باء أ ال وعة ‎١‏ انقل/م الفرعية | الفرع ناقلم فار) | تر/ فار) : ‎VoL‏ ‎Ga‏ | في اليوم ‎pa]‏ الحيو 9 الوم اي 2 87 عير غير قابل | غير قابل | غير قابل قابل ‎١‏ قابل ساذجة | لا توجد قابل للتطبية ‎AAV-‏ ‎xX 2 X 4‏ ‎SPK- 2‏ 200 30 30 20 1010 1110 8005¢
— 6 6 — ‎AAV-‏ ‎X 4 Xx 8‏ ‎SPK- 3‏ 200 30 30 ]20 1010 1110 8005¢ ‎AAV-‏ ‎x 8 x 1.6‏ ‎SPK- 4‏ 200 30 30 ]20 1110 1110 8005¢ 8. يتم تجميع ‎pall‏ من الفئران عند جرعة سابقة وفي الأيام 15 30 60؛ و87 من الدراسة. 5. يتم تجميع الدم من إجمالي 30 فأر (10 فتئران ساذجة لكل تقييم مرضي سريري) من دراسة مرضية سريرية- أساسية لمستويات التحكم في الخلفية. ‎.c‏ يكون ‎AAV-SPK-8005-hFVIIl‏ هو 501-8005 تم إعداده أيضاً. 08 - غير قابل للتطبيق مستويات مستضد ‎FVII‏ في بلازما: كما هو موضح في الأشكال 3-13ب؛ تتم ملاحظة استجابة جرعة فى مستويات مستضد 51/1 بالدورة الدموية خلال 87 يوماً. عند الجرعة المنخفضة للناقل ‎x 4)‏ 1010 جينوم ناقل/ فأر)؛ يلاحظ متوسط مستويات ||151/1 بمقدار 64 +/- 49 نانوجرام/ ملليلتر في اليوم 60 بعد الحقن» ويلاحظ 115 +/- 60 نانوجرام/ ملليلتر و273 +/- 58 0 نانوجرام/ ملليلتر عند الجرعات المتوسطة والعالية؛ على التوالي. تمثل مستويات المستضد هذه 43 7 و2182 من المستوى الطبيعي للمستضد ‎FVII‏ )150 نانوجرام/ مليللتر يكافيء ‎«lid . 0‏ في فئران ‎NOD/SCID‏ طبيعية من حيث إرقاء الدم؛ يتم توقع إجمالي مستويات ‎FVIII‏ (فأري + بشري) بمقدار 7143 7177 و7282 عند مستويات الجرعة ‎AN‏ على التوالي. بالتالي» باستخدام ‎¢AAV-SPK-8005-hF VIII‏ تتم ملاحظة مستويات ‎NEVI‏ ممتدة 5 1 وفائقة الفسيولوجية فى بلازما ‎Ohad‏ ناقصة المناعة؛ مما يجعل هذه الدراسة مناسبة لتقييم سلامة إظهار ر على المدى الطويل.
مستويات دايمر لا: لتقييم احتمالية تكوين الخثرات بسبب إظهار ‎REVI‏ المستدام في الفئران الطبيعية من حيث إرقاء الدم؛ لكنها ناقصة المناعة؛ يتم قياس مستويات مستضد الدايمر نا. يكون متوسط مستوى الجرعة المسبقة لديمرات ‎D‏ من بين 50 فأر ساذج هو 8.8 +/- 2.9 نانوجرام/ ملليلتر. تمثل البيانات في الشكل 3ج متوسط مستويات دايمر 00 في المجموعات الأربعة للجرعة. لا يوجد فرق إحصائي في مستويات دايمر 00 بين المجموعات عند كل النقاط الزمنية الخمسة ‎ANOVA)‏ في اتجاه واحد ‎p‏ = 0.46). يتم استنتاج أن الإظهار المستدام ل 751/111 عند المستويات يكون عالياً بنسبة 7194 للمستوى الطبيعي (اليوم 30)؛ وبالنسبة ل 87 يوم على الأقل» لا يرتبط بمستوى ‎Me‏ من دايمرات ‎AD‏ هذه السلالة من الفئران. علم الأمراض السريري والتشريحي: هناك تسعة حيوانات (6 في الدراسة الأساسية و3 في دراسة 0 التتحليل الحيوي) سواء المقتولة بصورة رحيمة في وقت مبكر أو التي تم العثور عليها ميتة أثناء هذه الدراسة. يتم تقييم الحيوانات الستة في الدراسة الأساسية من حيث التشريح المرضي للأنسجة؛ وتلاحظ أورام ليمفاوية خبيثة في أربعة من هذه الفئران الستة؛ بما في ذلك فأر محقون بمادة مقارنة وسط ناقل واحد. (المجموعة 1 الحيوان 7729( المجموعة 3 الحيوان 7871( المجموعة 3 الحيوان 7880( 5 ولمجموعة 3 الحيوان 7874). تعتبر الأهمية الحيوية لنتائج الأورام مُبهمة. تعتبر ‎ANA‏ ‏الإحصائية لمقارنات المجموعات الفردية مع المجموعة المقارنة غير محتملة. من المعروف أن التكرار التلقائي العالي للأورام الليمفاوية بالغدة الصعترية؛ بالإضافة إلى تضخمات ورمية بالطحال والعقد الليمفاوية يحدث في هذه السلإالة ‎(Prochazka, Gaskins, Shultz, & Leiter,‏ (1992. 0 لا توجد نتائج بدون ورم متعلقة بمادة الاختبار في هذه الفتران الستة. تعتبر النتائج المجهرية الملاحظة عرضية وذات طبيعة شائعة تمت ملاحظتها في هذه السلالة وفي هذا العمر للفتران» و/ أو ذات مدى تأثير وشدة مشابهين في الحيوانات المقارنة والمعالجة 5« بالتالي؛ تعتبر ليس لها صلة بإعطاء ‎AAV-SPK-8005-hFVIIl‏
تبقى الفئران 234 المتبقية التي تم تضمينها في الدراسة الأساسية على قيد الحياة حتى النقاط الزمنية المقررة. لم تحدث ملاحظات سريرية ضارة أو مرتبطة ب ‎AAV-SPK-8005-hFVIIl‏ ‏في الفئران خلال الدراسة. تعتبر كل الملاحظات السريرية لتكوين قشرة الجرح, فقد الفراء أو غطاء هزيل وذيل منحني ليس لها ‎ile‏ بإعطاء 501/6-8005-0117/11-/ال لأن كل هذه
الملاحظات شائعة في هذه النوع من الفئران و/ أو تحدث في المجموعات. تكون أوزان الجسم وزبادات وزن الجسم قابلة للمقارنة ضمن مجموعات الجرعة ولا تتأثر بإعطاء ‎AAV-SPK-‏ ‎.8005-071١‏ الانخفاض الكبير الواضح ‎p)‏ > 0.05 أو م > 0.01) في متوسط أوزان الجسم بالمجموعة 4 من اليوم 32 حتى اكتمال الدراسة يعزو إلى إعادة توزيع أوزان المجموعات (يتم القتل الرحيم لبعض الحيوانات الأثقل في المجموعة 4 مقارنة مع المجموعة 1) بعد القتل
0 الرحيم في اليوم 29/ 30 ولا يكون له ‎dla‏ بإعطاء ١(8005-157/1->/501-/اظ.‏ فئران المجموعة 4 زاد وزنها بطريقة قابلة للمقارنة مع المجموعات الأخرى خلال الدراسة. لا تعتبر كل الفوارق الهامة الأخرى ‎p)‏ > 0.05 أو م < 0.01) في متوسط أوزان الجسم أو زيادات أوزان الجسم لها ‎dla‏ ب ‎oY (AAV-SPK-8005-hFVIIl‏ الزبادات والانخفاضات كانت متقطعة بدون الاعتماد على الجرعة ولا تعتبر ذات صلة بالتقلبات الطبيعية في أوزان جسم الفئران.
5 تحدث الأمراض السريرية في الحيوانات خلال الدراسة الأساسية. يتم تحليل معايير الكيمياء السريرية على 10 فئران/ مجموعة لكل نقطة زمنية (اليوم 30/29 واليوم 67). يتم إجراء تقييمات التخثر على المجموعة الأخرى من 10 فتئران/ مجموعة» وتتم القياسات المتعلقة بأمراض ‎pall‏ على المجموعة الأخرى من 10 ‎[oi‏ مجموعة. تحدث الأمراض الجسيمة في كل الحيوانات وبتم ‎shal‏ ‏التشريح المرضي النسيجي على المجموعة المكونة من 10 ‎lid‏ مستخدمة للتقييمات المتعلقة
0 بأمراض الدم. لا توجد تغييرات ذات الصلة ب ‎AAV-SPK-8005-hFVIII‏ في معايير الكيمياء السريرية أو المتعلقة بأمراض الدم في فئران بأي نقطة زمنية للقتل الرحيم في اليوم 30/29 واليوم 7. بصفة عامة؛ حيث توجد فوارق كبيرة ‎Pp)‏ > 0.05 أو م > 0.01) في معايير الكيمياء السريرية والمتعلقة بأمراض ‎pall‏ مقارنة مع القيم المقارنة؛ لا توجد اختلافات لها صلة ب -/اهم ‎(SPK-8005-hF VIII‏ لأن المعايير المقابلة لا تتأثر ولا تكون الملاحظات معتمدة على الجرعة.
5 كل التغييرات في معايير الكيمياء السريرية والمتعلقة بأمراض الدم متقطعة؛ تعزو إلى حيوان واحد؛
له مقدار تغيير ملاحظ بصورة شائعة في حيوانات المعمل و/ أو ضمن المعايير المرضية السريرية المحددة للحيوانات الساذجة. تتم ملاحظة التغييرات في معايير التخثر في فئران تلقت ‎AAV-SPK-8005-hFVIIl‏ تتم ملاحظة الانخفاض المعتمد على جرعة في متوسط 8011 عند نقطة زمنية في اليوم 29/ 30 مع القيم بالمجموعة 3 و4 المختلفة بدرجة كبيرة ‎p)‏ > 0.05 أو م > 0.01) عن القيم المقارنة. تتم أيضا ملاحظة الانخفاض الكبير (0 > 0.01) في متوسط القيم ‎@PTT‏ في كل المجموعات ‎AAV-SPK-8005-hF VIII‏ مقارنة مع المجموعة المقارنة عند النقطة الزمنية في اليوم 87. تتم ملاحظة متوسط زمن البروثرومبين المنخفض في المجموعات ‎AAV-SPK-8005-hFVIIl‏ ‏مقارنة مع المجموعة المقارنة في الأيام 29/ 30 و87؛ مع ذلك يكون الانخفاض كبير إحصائياً 0 فقط (م < 0.05 أو م < 0.01) للمجموعات 2 و3 في اليوم 30/29 والمجموعة 4 في اليوم 7. يكون متوسط قيم الفيبربنوجين قابل للمقارنة ضمن مجموعات الجرعة خلال الدراسة. تعتبر هذه التأثيرات ذات صلة بالتأثير الفارماكولوجي ل ‎AAAV-SPK-8005-hFVIIl‏ ولا يعتبر تأثير ضار. كما هو موضح في الأشكال 3-3ج وكما هو مناقش أعلاه؛ كل ‎hall‏ المحقونة مع ‎AAV-SPK-8005-hFVIII‏ تُظهر مستضد ‎NEVI‏ وبالتالي؛ من المتوقع انتشار مستويات 5 إجمالي ‎FVIIL‏ فائقة الفسيولوجية في بلازما هذه الفئران الطبيعية من ناحية إرقاء الدم. من المتوقع أن يكون لهذه المستويات تأثير على معايير التخثرء مثلا 8017 المنخفض وأزمنة البروثرومبين. يتم قتل مجموعة مكونة من 120 فأر في الدراسة الأساسية (30/ مجموعة) في اليوم 29 أو 30 من الدراسة. لا توجد ملاحظات مرضية جسيمة متعلقة ب ‎AAV-SPK-8005-hFVIII‏ على هذه الفئران. يكشف تحليل أوزان الأعضاء عن اختلاف الأوزان المطلقة للقلب والكلى بين 10 حيوانات 0 مقارنة ومحقونة بناقل في اليوم 29؛ مع ذلك؛ لا تتم ملاحظة هذا بين 10 حيوانات مقارنة ومحقونة بناقل في اليوم 30( لذلك تكون أهمية هذه النتيجة غير واضحة. لا توجد علاقة مجهرية مع الزيادة الكبيرة إحصائياً في الأوزان المطلقة للقلب والكلى (وتكون هذه الأوزان كنسبة مئوية لوزن المخ) الملاحظة في اليوم 29. علاوة على ذلك»؛ وزن القلب والكلي كنسبة مئوية لوزن الجسم لا يختلف بدرجة كبيرة عن العينات المقارنة. لا توجد زيادة كبيرة في متوسط وزن الرئة المطلق في
حيوانات المجموعة 2؛ لكن يعتبر هذا عرضياً وليس له صلة ب ‎AAV-SPK-8005-hFVIIl‏ ‏لأنه لا يوجد اعتماد على الجرعة. لا يلاحظ تغييرات أخرى في أوزان الأعضاء في اليوم 30/29. عند إجراء تحليلات متعلقة بالتشريح المرضي النسيجي في اليوم 30/29؛ يوجد خمسة حيوانات ذات نتائج ورمية. يلاحظ ورم غدي ‎late‏ بالقصبات السنخية في حيوان واحد )7824(
بالمجموعة 2. يلاحظ ورم ليمفاوي خبيث في حيوان واحد )7838( بالمجموعة 2؛ حيوان واحد )7885( بالمجموعة 3؛ وحيوان )7941( واحد بالمجموعة 4. يلاحظ ورم غدي في المعدة في حيوان واحد )7942( بالمجموعة 4. لا تتم ملاحظة أية نتائج ورمية في المجموعة 1. تعتبر الأهمية الحيوية لنتائج الأورام مُبهمة. تعتبر الدلالة الإحصائية لمقارنات المجموعات الفردية مع المجموعة المقارنة غير محتملة. مع ذلك؛ من الجدير بالذكر أنه تتم ملاحظة النتائج الورمية فقط
0 في الحيوانات المعالجة في اليوم 30/29. في غياب بيانات المقارنة التاريخية للفئران ‎NOD‏ ‎SCID‏ عند ‎jee‏ قابل للمقارنة؛ تكون هذه النتائج الورمية غير حاسمة. لا تلاحظ نتائج مجهرية غير ورمية متعلقة بمادة الاختبار. تعتبر النتائج المجهرية الملاحظة عرضية؛ ذات طبيعة شائعة تمت ملاحظتها في هذه السلالة وفي هذا العمر للفئران» و/ أو ذات مدى تأثير وشدة مشابهين في الحيوانات المقارنة والمعالجة و بالتالي؛ تعتبر ليس لها صلة
5 بإعطاء ‎AAV-SPK-8005-hFVIIl‏ ‏يتم قتل مجموعة أخرى مكونة من 120 فأر في الدراسة الأساسية (30/ مجموعة) بعد 87 يوم من الحقن وتحلل بطريقة مشابهة. على الرغم من عدم رؤية ملاحزات مرضية جسيمة تعتبر ذات صلة ب ‎(AAV-SPK-8005-hFVIII‏ إلا أنه تلاحظ إصابات في أريعة ‎Oh‏ (واحدة بغدة صعترية متضخمة لم يتم تحليلها نسيجياً؛ واحدة بغدة صعترية متضخمة مرتبطة بورم ليمفاوي خبيث؛ واحدة
0 بطحال متضخم لم يتم تحليله نسيجياً؛ واحدة بخصية تم تغيير لونها). على عكس ما هو ‎Ladle‏ ‏في اليوم 29/ 30 انخفاض أوزان القلب؛ لا تلاحظ زيادة في الأوزان. إضافة لذلك؛ تلاحظ انخفاضات في أوزان الكبد. تكون التغييرات الكبيرة إحصائياً في وزن القلب صغيرة ولا تتعلق بشكل واضح بالجرعة. يكون التغيير الإحصائي الكبير في وزن الكبد المطلق صغيراً وتكون أوزان الكبد إلى وزن الجسم والمخ قابلة للمقارنة ضمن المجموعات. بالتالي يتم تفسير التغييرات الطفيفة على
أنها عرضية وليس لها صلة بإعطاء ‎LAAV-SPK-8005-hFVIIl‏ لا تتم ملاحظة تغييرات أخرى في وزن الأعضاء في اليوم 87. يتم إجراء التشريح المرضي النسيجي على الفئران في اليوم 87 بعد الحقن لأربعة حيوانات معينة مع نتائج ورمية. يلاحظ ورم ليمفاوي خبيث في حيوان واحد (7808) من المجموعة 2 وثلاثة
حيوانات )7868 7869 78705( من المجموعة 3. لا تلاحظ نتائج ورمية في المجموعة 1. تعتبر الأهمية الحيوية لنتائج الأورام مُبهمة. تعتبر الدلالة الإحصائية لمقارنات المجموعات الفردية مع المجموعة المقارنة غير محتملة. مع ذلك»؛ من الجدير بالذكر أنه تتم ملاحظة النتائج الورمية فقط في الحيوانات المعالجة في اليوم 87. في غياب بيانات المقارنة التاريخية للفئران ‎NOD‏ ‎SCID‏ عند ‎jee‏ قابل للمقارنة؛ تكون هذه النتائج الورمية غير حاسمة.
0 فيما يتعلق بالتغييرات غير الورمية؛ لا تلاحظ نتائج مجهرية متعلقة بمادة الاختبار. تعتبر النتائج المجهرية الملاحظة عرضية؛ ذات طبيعة شائعة تمت ملاحظتها في هذه السلالة وفي هذا العمر للفتران» و/ أو ذات مدى تأثير مشابه في الحيوانات المقارنة والمعالجة و بالتالي؛ تعتبر ليس لها صلة بإعطاء ‎AAV-SPK-8005-hFVIIl‏ ‏الاستنتاجات: يتم التحمل جيداً لإعطاء ‎AAV=SPK-8005-hFVIIl‏ مرة واحدة في جرعات
‎x 4 laa 5‏ 1010,؛ 8 ‎x‏ 1010 أو 1.6 ‎x‏ 1110 جينوم ناقل/ فأرء أو ‎lie sale‏ عن طريق الحقن داخل الوريد إلى ‎NOD/SCID (fyi‏ ذكور . لا ينتج عن ‎AAV-SPK-8005-‏ ‎WFVII‏ أي وفيات متعلقة بمادة الاختبار» ملاحظات سريرية ضارة أو تغييرات في وزن الجسم. لا توجد اختلافات هامة من ناحية السشمية في أوزان الأعضاء؛ معايير الأمراض الدموية أو التخثر ولا توجد نتائج مرضية أو متعلقة بأمراض النسيج الجسيمة ذات صلة بالمعالجة في الفئران الذكور
‏0 بالأيام 30/29 أو اليوم 87. تعتبر الانخفاضات في متوسط 8011 وزمن البروثرومبين التي تمت ملاحظتها عند كل من النقاط الزمنية للقتل الرحيم ذات صلة بمستويات ‎FVII‏ فائقة الفسيولوجية التي تم ظهورها في هذه الفئران الطبيعية من ناحية إرقاء الدم؛ ولا تكون ضارة. ضمن الدراسة الأساسية (التقييمات النهائية)؛ تتم ملاحظات الأمراض الخبيثة في تسعة من أصل 60 فأر محقونين بناقلن أو 715 من الحيوانات. يعاني سبعة من هذه الحيوانات التسعة من أورام ليمفاوية؛
‏5 التي تتم ملاحظتها بشكل أكثر شيوعاً في العقد الليمفاوية. من المعروف أن هذه السلالة من الفئران
— 2 7 — ناقصة المناعة تعاني من التكرار العالي التلقائي للأورام الليمفاوية ‎(Prochazka et al.,‏ (1992؛ ويكون عمرها فقط 8.5 شهراً. بالتالي؛ لبس من المحتمل أن يكون تكرار الأورام الملاحظة فى هذه الدراسة ذو صلة بإعطاء ‎JAAV-SPK-8005-hFVIIl‏ غرض هذه الدراسة هو تقييم سلامة إظهار ‎REVI‏ المستدام خلال فترة ثلاثة أشهر تقريباً. لا يتم إعداد الدراسة لتقييم القفيصة ‎AAV-SPK‏ يتم استخدام ‎AAV-SPK‏ وسلالة فأر ناقص المناعة لضمان إظهار
عالي المستوى ل (|51/1. إعطاء ‎AAV-SPK-8005-hFVIIl‏ إلى فئران ‎NOD/SCID‏ ينتج ‎die‏ مستويات عالية ومستدامة من ‎MEV‏ بالتالي؛ تكون هذه الدراسة مناسبة لتقييم سلامة ‎751/1١ lek)‏ على المدى الطويل. مثال 4
0 تقييم نواقل ‎AAV-SPK-8005‏ و ‎AAV-SPK-8011‏ (قفيصة ‎(LKO3‏ 71/1/1607 (تعريف المتوالية رقم: 7)) في كائنات رئيسة غير بشرية ‎.(NHPs) non-human primates‏ على النتائج في الفئران» يتم توصيل بنيات الجين المضفور ‎FVII‏ المعبأة في نواقل فيروسية مرتبطة بالغدة ‎(AAV)‏ إلى الكائنات الرئيسة غير البشرية ‎.(NHPs) non-human primates‏ باختصار ¢ يتم إجراء دراسة على نطاق الجرعات في قرود ماكاك رياح ‎Lal‏ تشريب فردي داخل
5 الوربد من ‎AAV-SPK-8005‏ أو ‎AAV-SPK-8011‏ (قفيصة ‎(LKO3‏ يتم تقييم إظهار 00 خلال 8 أسابيع. يتم توضيح المجموعات الحيوانية ومستويات الجرعات لكل منها في الشكل 4. تلقت ‎NHPs‏ تشريب داخل الوريد من خلال الوريد الصافن باستخدام مضخة تشريب معايرة خلال 0 دقيقة تقريباً. يتم الفحص المسبق لقرود المكاك بالنسبة للأجسام المضادة المتعادلة ضد
0 القفيصة ‎LAAV‏ مبدئياً تتحدد كل الحيوانات المعالجة بأن لها معيار > 3:1 قبل إعطاء الناقل. يتم إجراء هذا لضمان التنبيغ الكبدي الناجح» حيث أن المعايير المنخفضة أيضا تثبط امتصاص الناقل بواسطة الخلايا الكبدية بعد التوصيل الجهازي )2006 ‎et al.‏ 1209ل). تكون كل الحيوانات أيضا سالبة بالنسبة لوجود الأجسام المضادة المتعادلة ضد ‎FVII‏ قبل نقل الجين.
يتم قباس مستويات بلازما ‎FVII‏ بواسطة ر يخص بشري لا يقوم بالكشف عن ‎FVII‏ داخلي ‎Lidl‏ رياح. كل الحيوانات في الدراسة؛ باستثناء قرد مكاك واحد في مجموعة متوسطة الجرعة؛ تظهر 1/11 بعد توصيل الناقل. مستويات مستضد العامل ‎VIE‏ البشري تصل للذروة في الأسابيع 2-1 تقريباً بعد إعطاء الناقل. في الأسبوع 1 بعد نقل الجين؛ فإن ‎NHPS‏ التي تم تنبيغها مع 2 ‎X‏ 1210 جينوم ‎[dil‏ كجم من ‎AAV-SPK-8005‏ تظهر مستويات مستضد [151/1 بمقدار 13.2 + 73 (متوسط + الخطأً المعياري للمتوسط). في الأسبوع 1 بعد نقل الجين؛ يكون متوسط مستويات !|7517/1 في اثنين من الحيوانات الثلاثة في ‎de gana‏ المعالجة التالية (5 ‎x‏ ‏0 جينوم ناقل/ كجم) هو 27 + 70.2 لا يمكن الكشف عن ‎FVII‏ بشري في القرد المكاك الثالث في هذه المجموعة عند أي نقطة زمنية. عند إعادة اختبار عينات البلازما بخط القاعدة قد 0 يتحدد أن هذا الحيوان في الواقع ‎Linge‏ لوجود الأجسام المضادة ضد ‎AAV‏ وأن المعيار المحدد مبدئياً بمقدار < 3:1 غير صحيح. ‎hal‏ عند ‎of‏ جرعة مختبرة بمقدار 1 ‎x‏ 1310 جينوم ناقل/ كجم»؛ تلاحظ ذروة مستويات المستضد |/151/1 بمقدار 54.1 + 715.6 بعد تشريب ‎AAV‏ ‏كما هو متوقع من الدراسات في ‎NHPs‏ تُظهر ‎FIX‏ بشري؛ ينخفض إظهار ‎FVII‏ بشري في تقريباً ثلث الحيوانات في الأسبوع 4؛ يصاحب ذلك ظهور أجسام مضادة لمثبط مع !7517/1 في 5 هذه قرود المكاك الثلاثة (المعلمة بالرمز ع في الشكل 5). تم مسبقاً توثيق تطوير الأجسام المضادة الخاصة بالأنواع مع !1517/1 في الكائنات الرئيسة غير البشرية؛ ومن المرجح أن يكون هذا بسبب الاختلافات في الوحدات البنائية المتعددة للحمض الأميني بين منتج الجين المضفور البشري ‎FVII‏ سينومولوجس داخلي ‎(Mcintosh, J. et al., Blood 121:3335- Lal‏ ((2013) 44. لتقييم التجلط المحتمل نظراً للإظهار المستمر ل ‎FVII‏ يتم قياس مستويات مستضد الدايمر 0 في هذه الدراسة. يجب ملاحظة أن التقارير عن الأهمية السربرية أو حتى القيم المتعادلة لمستويات مستضد الدايمر 00 في قرود مكاك الرياح نادرة؛ كمرجع؛ يكون النطاق الطبيعي للدايمرات 0 في البشر أقل من 500 نانوجرام/ ملليلتر. حيث أن الحيوانات تُظهر ‎FVII‏ رياح داخلي ‎Lal‏ يؤدي إنتاج ‎11/1١‏ كنتيجة لنقل جين كبدي إلى مستويات فائقة الفسيولوجية لنشاط ‎FVII‏
— 4 7 — الحيوان الذي تم تجريعه عند 5 ‎X‏ 1210 جينوم ناقل/ كجم لكنه لا يُظهر ‎FVII‏ بشري يتسم بذروة بمقدار 863 نانوجرام/ ملليلتر بعد أسبوعين من تشريب ‎AAV‏ لا تُظهر باقي الحيوانات أي زيادة كبيرة في مستويات مستضد الدايمر ‎D‏ مقارنة مع قيم خط القاعدة. ‎lee‏ تقترح هذه النتائج أن إظهار ‎FVII‏ بشري؛ عند مستويات مستهدفة فى الدراسة؛ لا يرتبط بزيادة خطر الإصابة بالتجلط. بعد أربعة أسابيع من إعطاء ‎(Ji‏ لا توجد تغييرات واضحة ذات الصلة بالناقل. توضح اختبارات
وظائف الكبد قيم طبيعية؛ مع تقلبات طفيفة يبدو أنها ليس لها علاقة بجرعة ‎(Jol)‏ حيث أنها توجد قبل التجريع في معظم الحالات (شكل 6). يتم توضيج مستويات الدايمر لا حتى ‎١‏ لأسبوع 5 في الشكل 7. يكون لاحد الحيوانات في مجموعة عالية الجرعة تقييم طفيف (577 نانوجرام/ ملليلتر)» عابر في مستويات الدايمر لا بعد أسبوع واحد
من إعطاء الناقل» عند وصول ‎FVIII‏ بشري بالدورة الدموية للذروة عند نسبة ‎(Moa‏ 100 7؛ تعود مستويات الدايمر 00 سربعاً إلى المستوى الطبيعي بعد هذا القياس المرتفع الفردي. بشكل ملحوظ لم يكن هناك ترابط بين مستويات الدايمر 0 ومستويات المستضد 151/1 (الشكل 7 الأعمدة السفلية). بالنسبة للناقل ‎AAV-SPK-8011‏ (قفيصة ‎((LKO3‏ تتم معالجة ثلاث ‎le sane‏ من قرود
مكاك رياح ‎nj‏ = 3( مع جرعات متزايدة من 11 ‎AAV-SPK-80‏ (قفيصة ‎X 2) (LKO3‏ ‎x 6 6 +60‏ 1210 و2 ‎x‏ 1310 (جينوم ناقل/ كجم)؛ الشكل 4). تتم مراقبة الحيوانات من أجل الملاحظات السريرية؛ المرض ‎Spud‏ يسبب أوزان الجسم (الكيمياء السريرية؛ أمراض ‎all‏ ‘ التخثرء تحليل بول). ‎Cilia)‏ لذلك؛ يتم تقييم مستويات المستضد ‎ChFVI‏ الأجسام المضادة التثبيطية ‎FVII‏ ومستويات الدايمر 0 خلال الدراسة.
يتم ‎mung‏ بيانات المستضد 751/11 في الشكل 9. يصل متوسط مستويات المستضد [151/11 إلى ذروته في تقريباً الأسبوع 3-2 مع 22.3 + 76.2 01/11 الملاحظ في المجموعة منخفضة ‎de all‏ و6. 61 + 715.7 و53 1 + 758.1 الملاحظ في المجموعات متوسطة وعالية الجرعة؛ على التوالي» باستخدام 150 نانوجرام/ ملليلتر على أنه 7100 من مستوى مستضد ‎011/1١١‏
— 5 7 — طبيعي (الأشكال 29-19( بالتالي؛ يقوم النمط المصلي للقفيصة ‎LKO3 AAV‏ بتنبيغ الخلايا الكبدية بفعالية في الجسم الحي على عكس كبد الفأر. تتم مقارنة مستويات إظهار ‎FVII‏ التي تم الحصول عليها مع ‎AAV-SPK-8011‏ (قفيصة ‎(LKO3‏ مع المستويات المقررة ل !71/11 التي تم الحصول عليها مع نواقل ‎AAV‏ أساسها القفيصة ‎AAVS 5‏ و8/اظلم لتوصيل ‎FVII‏ تكشف المقارنة عن أن المستويات ‎FVII‏ التي تحققت مع ‎AAV-SPK-8011‏ (قفيصة ‎(LKO3‏ أكبر من مستويات ‎FVII‏ المقررة التى تم توصيلها بواسطة النواقل ‎AAV‏ مع القفيصات ‎AAV 5 AAVS‏ (الشكل 10). يتم قياس الاستجاب الخلطية إلى !/11/1 في بلازما قرود ماكاك رياح بعد إعطاء سواء 2 * ‎x 6 60‏ 1210 أو 2 ‎agua 1310 x‏ ناقل/ كجم من ‎AAV-SPK-8011‏ (قفيصة ‎((LKO3 0‏ يتم تقييم الحيوانات من أجل الأجسام المضادة ‎19G‏ ضد 151/1 بواسطة ‎ELISA‏ عند خط القاعدة وعند النقاط الزمنية المحددة. على الرغم من ملاحظة مستويات ‎EVIE‏ العلاجية بعد وقت قصير من تقل الجين؛ في معظم الحيوانات ‎fay‏ انخفاض المستويات في الأسبوع الرابع تقريباً. هذا يتوافق مع الدراسات السابقة باستخدام ناقل |1151/11-/81/ آخرء ويرتبط بزيادة الأجسام المضادة ضد !051/11 لا تتم ‎Lad‏ ‏5 ملاحظة توليد أجسام مضادة ضد ‎FVII‏ من قبل الآخرين بعد نقل الجين (1/11ا-/اه الكبدي في ‎.(Mcintosh, J. et al., Blood 121:3335-44 )2013(( NHPs‏ مثال 5 التوزيع الحيوي للقفيصة ‎AAV-LKO3‏ في الكائنات الرئيسة غير البشرية ‎(NHPs)‏ ‏يتم تقييم التوزيع الحيوي للقفيصة ‎AAV-LKO3‏ في الكائنات الرئيسة غير البشرية في دراسة 0 بخلاف ‎.GLP‏ الإعطاء داخل الوربد للناقل المغلف ب ‎AAV-LKO3‏ الذي يشفر عامل التخثر البشري ‎(AAV-LKO3-hFIX) IX‏ يوضح أن اثنين من الأنسجة المستهدفة الأساسية هما الكبد والطحال (الشكل 11). لا يعتبر التوجيه الطحالى سمة فريدة ل ‎AAV-LKO3‏ على سبيل المثال؛ القفيصة 1/5 التى تم استخدامها في العديد من التجارب العلاجية بالجين الموجه للكبد (مثلا ‎(NCTO02576795 10102082860 (NCT02396342‏ مع سجل سلامة قوي؛ تستهدف
الطحال بنفس الكفاءة إذا لم تكن أعلى من التي تستهدف كبد الكائنات الرئيسة غير البشرية ‎.(Paneda et al. 2013)‏ مجموعة الإظهار 5014-8011 تستخدم الترانسثيربتين الفأري أو المعزز ‎(TTR‏ الذي يعتبر خاص بالكبد )1991 ,00818). لمزبد من الدعم لطبيعة المعزز الخاصة بالكبد؛ يقوم تحليل الإظهار الذي أساسه ‎POR‏ بقياس إظهار ‎FVII‏ المشتق من ناقل في الكبد والطحال من الفئران بعد إعطاء ناقل ‎AAV‏ مختلف لتعبئة نفس مجموعة الإظهار في صورة 5016-1 (أي 5014-8005-/81). كما هو موضح في الشكل 12؛ يكون إظهار ‎FVII‏ ‏البشري في الطحال عدة مرات بمقدار أقل مقارنة مع ذلك المشتق من الخلايا الكبدية. هذه هي الدراسة السريرية الأولى لاستخدام 1/403-/8/21؛ على الرغم من إجراء دراسات باستخدام نواقل ‎AAV‏ أخرى متضمنة العديد للهيموفيليا 8 ‎(NCT02396342)‏ 016701620801 0 0100076557لال ‎(NCT02618915 (NCT02484092‏ 0100979236لا ‎(NCT01687608‏ وواحد للهيموفيليا ‎A‏ (016102576795). تم إجراء دراسة من قبل سانت يهوذا مستشفى بحوث الأطفال بالتعاون مع كلية لندن الجامعية استخدمت ناقل 21/8 يحمل جينوم ذاتي التكامل يشفر ‎cDNA‏ لعامل ‎IX‏ بشري مُحسن الكودون» ‎SCAAV2[B-LPI1-‏ ‏60. يكون لعشر كائنات تلقوا الناقل مستويات عامل ‎IX‏ ثابتة بنسبة 76-1 بمتوسط أعمار 5 3.2 سنة وتم وقف كل المشاركين أو تقليلهم لاستخدام بديل العامل الوقائي ‎(Nathwani et al.‏ (2014. استخدمت الدراسة السريرية للهيموفيليا ‎A‏ عامل مغلف ب ‎AAVS‏ يشفر ‎FVII‏ بشري ‎(NCT02576795)‏ توضح البيانات التمهيدية المقدمة في 2016 زبادات في نشاط ‎FVII‏ بعد نقل الجين في العديد من الكائنات تتراوح من 760-2 مع متابعة تصل إلى 16 أسبوعاً ‎.(BioMarin, April 2016)‏ ‎Ji. 0‏ 6 فعالية تنبيغ قفيصة ‎AAV-LKO3‏ تم تحليلها في إعداد بالمعمل. يتم تنبيغ الخلايا الكبدية الأولية من أصل بشري ومن 238 مكاك رباح مع ناقل ‎AAV-LKO3‏ ‏يُظهر لوسيفيراز عند أريعة تعددات مختلفة للإصابة بالعدوى ‎multiplicities of infection‏
‎(MOI)‏ تتراوح من 500 إلى 62500 جينوم ناقل بكل خلية؛ بعد 72 ساعة من التنبيغ؛ يتم
‏تحليل إظهار لوسيفيراز.
‏توضح القفيصة ‎AAV-LKO3‏ بشكل فريد فعالية أعلى إلى حد بعيد في تنبيغ الخلايا الكبدية
‏البشرية في مستنبت. في المثال التمثيلي الموضح في الشكل 13« يوضح ‎LKO3‏ فعالية أعلى بمقدار حوالي 5 أضعاف في تنبيغ الخلايا الكبدية البشرية مقارنة مع الخلايا الليمفاوية بالكائنات
‏الرئيسة غير البشرية في المعمل. بصورة مهمة؛ تتوافق هذه النتائج عبر العديد من ‎MOIS‏
‏ودراسات التنسخ.
‏مثال 7
‏تقييم انتقال خط جرثومي من متواليات يشفرها ناقل
‏0 يكون تقييم احتمالية انتقال خط جرثومي من متواليات يشفرها ناقل حرجاً بالنسبة للترجمة السريرية لاستراتيجيات نقل الجين. يتم إعداد هذه الدراسة مع الأهداف التالية: (1) لتقييم انتشار -/اهم ‎AAV-LKO3 5 SPK‏ في السائل المنوي ولتحديد حركيات تصفية الناقل؛ و(2) لضمان أن يكون إعطاء ‎AAV‏ للأرانب ناجحاً؛ الذي يتم التأكيد عليه عن طريق تحليل مستضد عامل ‎IX‏ بشري والأجسام المضادة ضد ‎FIX‏ في البلازما.
‏5 في هذه الدراسة؛ يتم استخدام نموذج فأر لتحليل انتشار الناقل في السائل المنوي لقفيصتين ناقل؛ تحديداً ‎AAV-LKO3 5 AAV-SPK‏ (جدول 2). انتشار ‎AAV-SPK‏ في السائل المنوي يوضح الحركيات المعتمدة على كل من الجرعة والزمن؛ مع الجرعة الأعلى التي توضح مستويات عالية من متواليات الناقل في السائل المنوي لفترة زمنية أطول. تكون الحركيات مشابهة جداً لما تم ملاحظته مسبقاً مع نواقل ‎(Favaro P, et al., Molecular Therapy 17:1022- AAV8‏
‏0 ((2009) 1030. على العكس؛ يحدث الانتشار المحدود في السائل المنوي مع الناقل -/أام 3ا. ليس من المرجح أن يكون هذا بسبب انخفاض التعرض الشامل للناقل في ‎Ghd‏ المحقونة مع ‎(AAV-LKO3‏ حيث تكون مستويات ‎hFIX‏ الظاهرة من ‎AAV-LKO3‏ مشابهة أو ‎Sel‏ من تلك الملاحظة مع الناقل ‎AAV-SPK‏ ويمكن استخدام القدرة على التدخل في إظهار ‎hFIX‏ ‏مشتق من الكبد كبديل لنقل الجين.
— 7 8 — جدول 2: إعداد الدراسة رقم مستوى الجرعة عدد المجموع | مادة الاختبار (جينوم ناقل/ الحيوانات كجم) 1210 x 1| AAV-SPK-hFIX.CI6 1310 x 1| AAV-SPK-hFIX.C16
AAV-SPK-hFIX.C19- 2 1310 x 1 * 2
PD
1210 x 1| AAV-LK03-hFIX.CI6 1310 x 1| AAV-LK03-hFIX.CI6 ‏أي تتلقى‎ (AAV-SPK ‏المختلفة في المجموعات‎ hFIX ‏يتم استخدام اثنتين من متواليات تشفير‎ *
AAV-SPK- ‏وتتم معالجة الحيوانين مع‎ AAV-SPK-hFIX.C16 ‏الحيوانات الثلاثة‎ ‏حيث أن الهدف الأساسي من هذه الدراسة هو تقييم انتقال الخط‎ LhFIX.C19-Padua (PD) الجرثومى من قفيصتين ‎AAV‏ جديدتين؛ يعتبر هذا مقبولاً. الاختلافات الأساسية بين الجينات المضفورة ‎hFIX.C19-Padua 5 hFIX.C16‏ هى أن الأخير يكون مُحسّن الكودون وبشفر شكل متباين ‎hFIX‏ ذات ‎bli‏ خاص عالى. الطرق الحيوانات والنواقل: يتم الحصول على أرانب بيضاء نيوزيلندية من ‎Covance Research‏ ‎Products (Denver, PA) 0‏ وتعالج في ‎jee‏ 6 أشهر بنواقل ‎AAV‏ ناتجة في مستشفى فيلادلفيا فيكتور كور للأطفال. يتم إعطاء مواد الاختبار والمقارنة عن طريق الوريد الهامشي بالأذن.
مجموعة السائل المنوي: يتم استخدام مهبل صناعي ‎(AV) artificial vagina‏ قام بتطويرة الباحثون في ‎Argus Research Lab, Inc. (Horsham, PA)‏ لمجموعة السائل المنوي. ‎AV hag‏ بواقي ذكري تتم إزالة طرفه وتتم إضافة أنبوب تجميع؛ ويتم ملء ‎AV‏ بماء دافيء (55 مئوية). يتم الحصول على عينات السائل المنوي من ذكر حيوان تمت إثارته بصورة عملية عن طريق أنثى حيوان. يتم تجميع العينات قبل الحقن وفي الأسبوع 1 4 6« 8« 105 والأشهر 8-3 بعد الحقن. يتم نقل عينات السائل المنوي إلى معامل تشارلز ريفر ‎(Reno, NV)‏ لتحليل رقم نسخة الناقل باستخدام اختبار ‎SPCR‏ في الوقت الحقيقي موافق عليه. تجميع عينة دم: يتم تجميع الدم بواسطة الشريان الأذيني الأوسط أو ثقب الوريد الهامشي بالأذن قبل إعطاء ‎AAV‏ وعند نقاط زمنية متعددة ‎(JB)‏ أسبوع ‎dag‏ 6-1 أشهر من الحقن). يتم وضع 0 كل عينة على الثلج بعد التجميع؛ تعالج مع البلازما وتخزن في جهاز تجميد درجة حرارته - 0 مثوية حتى شحنها إلى الراعي» حيث يتم حفظها أيضا في جهاز تجميد درجة حرارته - 0 مئوية حتى يتم إجراء الاختبار. مستويات عامل ‎IX‏ بشري: يتحدد مقدار مستويات بروتين ‎FIX‏ بشري (70ا]) في بلازما الأرنب باستخدام مجموعة ‎FIX ELISA‏ من نوع ساندوتش (علوم الأحياء المتعلقة بالألفة؛ ‎(FIX:EIA‏ ‏5 كما يلي: أولاً؛ يتم تغليف عيون أطباق ذو عيار مجهري مع جسم مضاد للالتقاط الذي يدرك ‎hFIX‏ ولا ‎deli‏ بصورة عابرة مع ‎FIX‏ من أرنب داخلي المنشاً (تخفيف بنسبة 1000:1). يتم تخفيف البلازما المرجعية مع تركيز 76ا5 بشري معروف لتوليد منحني قياسي (يتم تخفيف أعلى معيار [500 نانوجرا/ ‎[lille‏ بالتسلسل حتى الوصول إلى 7.8 نانوجرام/ ملليلتر). يتم تخفيف البلازما من العينات اعتماداً على التركيز المتوقع بحيث تقع قيم الامتصاص داخل نطاق المنحنى 0 القياسي. بعد إضافة العينات إلى العيون» يتم تحضين الطبق عند درجة حرارة الغرفة لمدة 90 دقيقة ويعدئذ يتم غسلها ثلاث مرات. تتم إضافة جسم مضاد ثانوي مقترن مع بيروكسيداز من ‎dad‏ ‏حار ‎(HRP) horseradish peroxidase‏ مع ‎hFIX‏ إلى الطبق للارتباط مع ‎FIX‏ تم التقاطه (التخفيف بنسبة 100:1). بعد غسل الطبق لإزالة جسم مضاد متقارن غير مرتبط؛ يتم قياس نشاط البيروكسيداز بعد التحضين مع ركيزة ‎TMB‏ فائقة بخطوة واحدة (العلوم الحرارية؛ رقم 5 الكتالوج: 34028). يتم توقف التفاعل مع 1 مولاري حمض كبربتيك وبقرأ على قاريء ‎Gib‏
مجهري ‎SpectraMax ١1/26‏ عند إعداد للامتصاص بمقدار 450 نانومتر. تكون قيمة الامتصاص الناتجة متناسبة مع تركيز )لا ]7 الموجود في العينة. مستويات جسم مضاد ضد ‎thFIX‏ يكون الاختبار ضد )171 مشابه مفهومياً ومنهجياً ل ‎hFIX‏ ‎ELISA‏ الموصوف أعلاه. باختصار» يتم تغليف الأطباق مع 1 ميكروجرام/ ملليلتر من ‎hFIX‏ ‏5 مُعاد الاتحاد ‎Wyeth)‏ ,<86061). بعد تحضين ‎Clie‏ البلازماء يتم استخدام جسم مضاد متقارن
مع ‎HRP‏ من ماعز ضد ‎IgG‏ لأرنب ‎(SIGMA, A4914)‏ من أجل الكشف. تعتبر العينات مع مستوى 06 الأعلى بمقدار ضعفين من قراءات خط القاعدة عينات موجبة. النتائج انتشار الناقل في السائل المنوي
0 يتم حقن الأرانب النيوزيلاندية بالنواقل ‎AAV-SPK‏ أو ‎=n) AAV-LKO3‏ 5 بكل مجموعة) تظهر ‎hFIX‏ تحت التحكم في المعزز الخاص بالكبد 81///ع0مم عند جرعتين: 1 ‎x‏ 1210 جينوم ناقل/ كجم (جرعة منخفضة) أو 1 * 1310 ‎agua‏ ناقل/ كجم ‎deja)‏ عالية). يتم الحصول على عينات السائل المنوي من كل الأرانب قبل الحقن وعند 1( 2؛ 4؛ 6؛ 8؛ و10 أسابيع و8-3 أشهر بعد الحقن. تتم تنقية ‎DNA‏ جينومي من عينات السائل المنوي ويحلل من أجل وجود
متواليات ‎hFIX‏ باستخدام اختبار تفاعل سلسلة بوليمراز كمي ‎quantitative polymerase‏ ‎(Q-PCR) chain reaction‏ يتم تطوير الاختبار الموافق عليه من معامل تشارلز ريفر ‎(Reno, NV)‏ تعتبر عينات السائل المنوي موجبة إذا كانت بها مستويات ‎hFIX‏ قابلة للاكتشاف أعلى من الحد الأدني للكميات ‎[zd 10) (LLOQ) lower limit of quantitation‏ تفاعل أو 0 نسخة/ ميكروجرام عند تفريباً 200 نانوجرام/ تفاعل). لا يتم إضافيا تحليل عينات السائل
0 المنوي من الأرانب التي تكون سالبة بالنسبة لمتواليات الناقل ‎hFIX‏ عند النقاط الزمنية المتتالية ‎aa‏ على الأقل. يكون ‎DNA‏ للسائل المنوي قبل المعالجة من كل الحيوانات المحقونة بناقل ووسط ناقل سالباً بالنسبة للمتواليات 6ا5. يكون السائل المنوي من الأرانب المحقونة بالجرعة المنخفضة من ‎x 1( AAV-SPK-hFIX‏ 1210 جينوم ناقل/ كجم) سالباً بصفة ‎dale‏ بالنسبة لمتواليات
ا ‎١]‏ باستثناء الحيوانات الثلاثة التي لها مستويات منخفضة في الأسابيع 4-1 )3151 نُسخة بحد أقصى/ ميكروجرام ‎DNA‏ أو تقريباً 1 ‎x‏ 2-10 نُسخة/ جينوم أحادي الصبغيات). لا تكون أية من العينات المتجمعة بعد الأسبع 4 موجبة بالنسبة لمتواليات الناقل (جدول 3). عند الجرعة العالية من ‎agua 1310 x 1( AAV-SPK-hFIX‏ ناقل/ كجم)؛ توجد المستويات الأعلى للناقل (178.352 4505 بحد قصى/ ميكروجرام ‎DNA‏ أو 0.59 نُسخة/ جينوم ‎goal‏ الصبغيات)؛ وتستغرق ‎Ty‏ أطول لتنقيتهاء حتى 5 أشهر بين الخمسة حيوانات (جدول 3). باستثناء حيوان واحد (الأسبوع 1)؛ لا توضح ‎cul)‏ المعالجة بالجرعة المنخفضة من ‎AAV-LKO3-hFIX‏ انتشار متواليات ‎FIX‏ في السائل المنوي (جدول 3). إضافة لذلك؛ تتم ملاحظة انتشار ناقل صغير جداً في السائل المنوي عند جرعة ‎lof‏ بمقدار 10 أضعاف؛ مع ثلاثة حيوانات تنقصها أي متواليات ‎hFIX 0‏ عند كل النقاط الزمنية وحيوانين يوضحان مستويات منخفضة في الأسبوع 2 (392 نُسخة بحد أقصى/ ميكروجرام ‎DNA‏ أو تقريباً 1.3 ‎x‏ 3-10 نُسخة/ جينوم أحادي الصبغيات)؛ وليس عند نقاط زمنية لاحقة (جدول 3). من ضمن الحيوانين المحقونين بالوسط الناقل؛ يتسم الأول بدراسة زائفة في الأسبوع 1 (56 نُسخة/ ميكروجرام ‎(DNA‏ وفي الشهر 5 (96 نُسخة/ ميكروجرام ‎(DNA‏ . تكون هذه القيم قريبة من ‎(LLOQ‏ وعلى الأرجح تُمثل تلوث عند تجميع السائل المنوي أو 5 في خطوة تحضير ‎DNA‏ ‏جدول 3: الكشف عن متواليات ‎hFIX DNA‏ في السائل المنوي للأرانب بعد إعطاء ‎AAV=-SPK‏ ‎AAV-LKO3 4‏ كدالة على الزمن. ‎da‏ |الج اق آلا الأ ألا اال | الا | الا | ال ‎١‏ ال ‎Sad]‏ ‎de‏ | اس اس اس |س اس اس اشهاشهاشه|شهاشهاشه بوع ابوح ابوحعابوعابوعابوعار ار ار ار ار ار 1 |2 ]4 ]6 8 |1 ]3 |4 |5 6 |7 8 0 ‎١ SPK‏ منخ اص | 3 ]3[ ]1[ ‎Elom|ua|ua|oa|ua|o=|‏ اغ ‎El‏ ‏ف افق ]5 ]5 ]5 |« افا اف اف اف اف اير اير اير
ض |ر/ ر/ ار/ ‎Io] Io]‏ ار/ |ر/ |مح |مح |مح ة |5 5 |5 |5 5 ا 5 51 ادد ‎wl wa‏ ‎SPK‏ | اص | 15 ‎JL] 3] fA] ja]‏ ]2 اص 1/ اص اص اص اص لية اف ا5 ]5 ]5 5 |5 ا 5 اف ‎S|‏ افا اف افا اف ‎IB‏ 2[ ر/ ار )15 ار 5 5 5 ]5 51 ‎Ee] LKO‏ اص | 1[ اص اص اص اص اص اص ا صاصاغ اغ ‎El‏ ‏3 ف اف |5 ‎a] al al‏ اف ‎a al‏ اف اف اير اير اير ‎oa‏ ار/ ‎Io‏ |ر/ |ر/ ‎ID]‏ | | |ر/ ‎of‏ |مح امح امح ةق ,5 5 5 ]5 ]5 5 ]5 5 ا 5 ادد ادد ادد ‎LKO‏ اعا اص | 2/ ]2 اص اص اص اص اص ا صاصاغ اغ ‎El‏ ‏ر ر/ |ر/ ‎oo]‏ | | | امح |مح امح 5 5 |5 ]5 5 51 ]5 )5 ادد ‎Wal a‏ عدد الحيوانات من أصل 5 مع عينات سائل منوي موجبة ‎=W‏ الأسبوع؛ ‎=M‏ الشهر؛ ‎=Ndt‏ غير محدد يتم قياس مستويات ‎hFIX‏ بالدورة الدموية في عينات البلازما من الحيوانات الموصوفة أعلاه عند 5 النقاط الزمنية المحددة (الأشكال 214-114 والجدول 4).
الح الجين | جينوم 1 القفى ‎a‏ 95 |11 يوا | 7 | المض | ‎jis‏ 7 | 28 4 ]175 صة فر 6 ]4 20 3 فور ا كجم 7 2 ير غير ‎x1‏ ¢ ‎FIX.‏ مك ‎él 121 SPK| 1‏ 1 ‎C16‏ = ‎7١ 3 < 0‏ ]4112 ف ‎i‏ 7.6.0.9 <| 7|49 |6 |1 9 ]102.4 2 ير غير ‎x1‏ ¢ ‎FIX.‏ مك ‎él 121 SPK| 2‏ 1 1 1 0116 تش 0 ت 310 7 ف ‎i‏ 0149.4 .1 =« |9|50 |5 |7 |8 198.4 2 ير غير ‎x1‏ ¢ ‎FIX.‏ مك ‎él 121 SPK| 3‏ 1 0116 تش 0 ت 7 111 ف 9|6.|36 |.4 4.1 <| .4 |5 |5 |8 |7 78.9
ع ير غير ‎x1‏ م ‎FIX.‏ مك ‎él 121 SPK| 4‏ 2 21 2 0116 تش 0 ت١5)14‏ |1 31291 قت ‎us‏ | .8 ].4 .1.14 .6 فا2 |4 5 |5 |7 274.9 ما ‎el‏ ‏ع ‏ير ير غير ير ‎x1‏ ¢ ¢ ‎FIX.‏ مك مك غير ‎SPK| 5‏ 121 5 5 016 تش ت مكتشف 0 ت ت ‎3١‏ 1 ف ‎Ui‏ ‎ig‏ ش | .3.1101 قت ف ف |3 .45 3 1 1 غير ‎x 1‏ 4 2 1 ‎FIX.‏ مك ‎O| 2 7 131 SPK‏ ]9110 016 تش ‎23١ ٠ 0‏ .5312.4 قت 9 541 |2 |.6 ]9 830.7 ‎3١ 5‏ 2 غير ‎x 1‏ 34 21 4 ‎FIX.‏ مك |1 ‎SPK| 7‏ 131 17 |8 ]0133 016 تش ‎5١‏ ‏0 .4 .1 |.1 ]5.100[ .2640 ف +6 92+62 .9 9 5 4
8 3| ‏غير‎ ‎x 1 8 311 4١ ‏مك‎ FIX. 131 SPK 31101 O| 575] 4١+ ‏تش‎ C16 0 4352. 18.190 |5.| 1] 6. .| ‏ف‎ ‎81 9 7] 2 5| 5| 8 ¢ x ‏غير‎ ‏م‎ 1 x 1 FIX. ‏مك‎ ‎3 él 0 131 | C19| SPK 1 4| ‏ا23ات‎ 3 0 -PD «3 6.083] 0.| | 4] . 381.9] 6] 4.| 4 ‏اف‎ 3 ¢ x ‏غير‎ ‏م‎ 6 x 1 FIX. ‏مك غير‎ 1 & 4 131 | C19| SPK 3 iC ‏تش‎ 0 1 3+ ‏ا28ات‎ 2 0 -PD «3 4.014] 1. | =| 73] 1/1. 6| «| 5.2
1 21 3 ‏غير‎ ‎3 1] 6 3 x 1 ‏مك‎ FIX. | LKO| 1 5/19] 5 5/60] 3 121 ‏تش‎ cie| 31 1120. (8.14 |1.]9.] 4. . 0 «3 947. 8] 2| 1 2 1] 3 1١ ‏غير‎ ‎x 1 31 3| ‏مك‎ FIX. | LKO| 1 121 7/98] 0| 953] 8| ‏تش‎ cie| 3 0 31 5.06.]9.| 2. .| ‏ف‎ ‎593.4 2| 3| 6| 8| 4 2 41 ‏غير‎ ‎x 1 1 6| ‏مك‎ FIX. | LKO| 1 121 116 3| 8 5١ ‏تش‎ cie| 33 0 21 8.14.14. |45] .| ‏ف‎ ‎84.9| 7| 6] 4] 9] 9 8 ‏غير‎ ‎5 56 8 x 1 ‏مك‎ FIX. | LKO| 1 854] 5] 3 6 121 ‏تش‎ cie| 4 2.0 7.11.06. 28] ٠ 0 «3 410.4] 3] 4| 7] 4] 9] 1
‎|e‏ ‏2 ‏ير ‏غير ير ‎x 1‏ مم ‎LKO| 1‏ | لاج مك مك غير ‎él 121‏ 3 016 تش < مكتشف 0 ت 1 2 ف ‎ig‏ ‎0١ 3 Ji‏ 4.30 ف ‎a‏ 5 ]9 812.1 2 |1 غير ‎x 1‏ 9 2 21 7 ‎LKO| 1‏ | اع مك 131 0 |2(40 |6 118 ‎LES Cle 31 6‏ 0 . |.4 .5.9.5.18 ف 7 |9 ]4 5 |6 |693.2 4 غير ‎x 1‏ 2 4 |6 9 ‎LKO| 1‏ | اع مك 131 4 ]954 91 6 ‎LES Cle 317‏ ‎٠ 0‏ .6 |.4.143|5.10 ف 77" |2 |9 7 4 521.4 1 غير ‎2١‏ 6 |4 ‎x 1‏ ‎FIX. | LKO| 1‏ مك ‎5١‏ 0 |6 1 131 ‎C16 3+ 8‏ تش ]71175 201 5 0 ف |. |7|18|8.19.(87 |.2226 26 |5 674 4
2 201 غير ‎x1‏ 1 17 91 1 ‎١ LKO| 1‏ .كرا مك 131 8986 07 8 ‎Cle 319‏ تش ‎7T|11|5.|2.|17] . 0‏ | .1899 قث 774 795 3 8 غير ‎x1‏ 2 010 |6 6 ‎LKO| 2‏ | كرا مك 131 6 |]7|78 9 2166 ‎LES C16 310‏ 0 1 ].2 .05 ]2130 5489.1 قث 5 8 85 | .2168 € | 2 جح ير ير غير ير ¢ ¢ 2 اوسط .لام اغير امك مك غير & & 1 اناقل | 16 امتاح | تش ت مكتشف ت 2 3 ت ف ‎g-‏ ‎Ui‏ ا.161اش قث ف 9 |1 ا.1اف ‎C‏ | ع جح ير ير غير ير ¢ ¢ 2 اوسط ‎FIX.|‏ اغير امك مك غير & & 2 اناقل |16 امتاح | تش ت مكتشف ت 2 3 ت ف ‎g-‏ ‎S| 1110.09. Ui‏ قث ف 2 ]9.16 اف
‎ND‏ = غير مكتشف في المجموعات منخفضة الجرعة؛ يبدو أن الناقل ‎AAV-LKO3‏ هو ناقل أكثر فعالية مقارنة مع ‎(AAV-SPK‏ حسب القياس بواسطة مستويات ‎WFIX‏ في الدورة الدموية. بعد ستة أشهر من المعالجة مع ‎AAV-LK03‏ أو ‎AAV-SPK‏ يكون متوسط مستويات ‎hFIX‏ هو 552 + 217 نانوجرام/ ملليلتر مقابل 164 + 45 نانوجرام/ ملليلتر؛ على التوالي (الشكل 114( مع ذلك؛ لا يصل هذا الفرق إلى دلالة إحصائية؛ على الأرجح بسبب عدد الحيوانات المحدود. من المثير للاهتمام؛ لا يتم الكشف عن إظهار ‎hFIX‏ بعد 7 أيام من إعطاء الناقل >|50-/01ل/؛ بينما تتم ملاحظة إظهار قوي مستمد من ‎AAV-LKO3‏ عند نفس النقطة الزمنية. يعزو مستويات ‎hFIX‏ ‏المنخفضة في اثنين من الحيوانات ‎ch)‏ رقم 5 ورقم 15( القابلة للاكتشاف بدرجة طفيفة أعلى 0 الخلفية؛ إلى فشل عمليات الحقن. إزالة هذه الحيوانات من التحليل لا يُغير من عدم وجود الدلالة الإحصائية. يبدو أن القفيصتين فعّالتين بنفس القدر عند الاختبار عند الجرعة العالية. بصفة خاصة؛ بعد ستة أشهر من المعالجة مع 1 * 1310 جينوم ناقل/ كجم من ‎AAV-LKO3‏ أو ‎AAV-SPK‏ يكون متوسط مستويات ‎FIX‏ هو 2226 + 868 نانوجرام/ ملليلتر مقابل 2052 + 909 نانوجرام/ 5 مليلتر؛ على التوالي (الشكل 14ب). يلاحظ أنه؛ يتم استخدام متواليتين تشفير ‎hFIX‏ مختلفتين في المجموعة ‎(AAV-SPK‏ أي تتلقى الحيوانات الثلاثة ‎AAV-SPK-hFIX.C16‏ ويعالج الحيوانين مع ‎(PD) AAV-SPK-hFIX.C19-Padua‏ الفروق الأساسية بين الجينات المضفورة ‎hFIX.C19-PD 5 6‏ هي أن الأخير مُحسّن الكودون وبشفر شكل متباين ‎FIX‏ ذو نشاط خاص ‎Je‏ الذي يؤثر على النشاط الحيوي للبروتين؛ وليس على مستويات المستضد؛ 0 حسب القياس بواسطة ‎ELISA‏ ‏الأجسام المضادة ضد ‎FIX‏ ‏على أساس تقرير من الآخرين؛ من المتوقع أن حوالي 740-20 من الحيوانات يظهروا أجسام مضادة ضد نواقل ‎FIX‏ بشرية -17:1022 ‎(Favaro P, et al., Molecular Therapy‏ )2009( 1030. تلخص الأشكال 01515ب والجداول 5 وكب مستويات ‎IgG‏ ضد ‎AAV‏ في
— 0 9 — هذه الدراسة. على نحو مثير للدهشة؛ تكون ثلاثة من خمسة حيوانات معالجة مع الجرعة المنخفضة من ‎AAV-LKO3‏ موجبة بالنسبة للأجسام المضادة ‎FIX‏ البشرية بعد شهر واحد من إعطاء الناقل» لكن تنخفض مستويات 5 بمرور الوقت وبالكاد يكون حيوان واحد فقط ضعف مستويات خط القاعدة عند نهاية الدراسة (جدول 5ب). حركيات مظهر وا ضد ‎FIX‏ والتصفية التالية في هذه المجموعة من الأرانب تتوافق جيداً مع الانخفاض الحاد في مستويات ‎FIX‏ ‏الملاحظة في اليوم 28؛ الذي يليه "ارتداد" في ‎hFIX‏ بالدورة الدموية (الشكل 14أ). أيضاء معايير الجسم المضاد العالية ضد ‎hFIX‏ في حيوانين معالجين مع ‎AAV-SPK-hFIX.C19-Padua‏ ‏تفسر مستويات الإظهار المنخفضة في الأرنبين. جدول 5أ: ملخص تشكيل جسم مضاد (96ا نانوجرام/ ملليلتر) مع ‎FIX‏ بشري في أرانب فردية 0 محقونة ب ‎AAV‏ ‏القغفيص الجين ص 2 |5 14 17 يوا ناقل/ 7 1|94 5 المضفور فر 8 |6 7 5 ن كجم 2 1 2 |8 1 ‎x1| FIX.Cl‏ |3 |8|11 |6 |2|16 |12 ]10 ‎SPK| 1‏ 6 1210 ]9 |6|34 |2 ]631 |88|10 0 4 |7 1 1 4 |7 2 ‎x1] FIX.Cl‏ |7 ]611 |1 |7|28 ]3132 ‎SPK| 2‏ 6 1210 ]0 743 |3 |3|34 8094 6 0 21 3
1 21 2 1 16117] 7119] 3| 9|11| 9| x1] FIX.C1
SPK| 3 88153] 9 64| 9| 1/28] 0] 1210 6 2 4 9 4 1 1 1 7 1413] 0] 14] 6 10| 2| x1] FIX.C1 8 SPK| 4 57167] 366 9 84| 51210 6 9 4 2 6 1 9 6| 7 78 | 77 83 10| 0| x1] ‏دملا‎ ‎5 6| 0 SPK| 5 50 4 4 04| 8 0 6 6 4 1 6 7 S| 9 5 15] 13 12 83 x 1| FIX.C1 2 1] 4 6 SPK 92 26 46 6 1310 6 1 4| 0 5 8 7 7 72 x 1| FIX.C1 2 0 9 SPK| 7 84 1 1310 6 9 9 2 1 1] 1 1 21/14 6|25| 7] 7|/86| 0| x1| FIX.Cl
SPK
43106] 139] 0] 2| 3| 1] 0 6 9 51 9 6
1] 1 12/37] 811 7 0١8 “1| FIX.C1 63|14| 9 24 6 SPK 73 3 1310| 9-PD 4| 1] 3] 1 8 6| 0 1 1| 4 5 91 20193] 3| 4 x 1 | FIX.C1 05 6 SPK | 10 67 7156] 9] 5 1 1310| 9-PD 0 6 0 8| 6 1 2| 2 1 15/15| 719] 2| 1]18| 6] x1| FIX.Cl
LKO3 | 11 80|61| 8|73| 8| 5(21| 0] 1210 6 8 31 0 6 1] 7 8 17|15|- [10] 6] 9|13 x 1 | FIX.C1 1 LKO3 | 12 02|05| -|87| 0] 9|91 1210 6 3 3| 3 : 9 6 ¢ 10/87] |68 1| ‏ير‎ “1| FIX.C1 0 1 LKO3 | 13 1 0 50 | | 1210 6 3 0 31 ‏ح‎ ‎7 7] 5 7 76 | 63 75 x 1 | FIX.C1 0 6| 3 7 LKO3 | 14 9 6 6 1210 6 9 0| 4 6
8 6 8 117 36 3 9 x 1| FIX.C1 4 9 9 LKO3 | 15 02+ 2 1 21 1 1210 6 3 3 0 0 1 1 2 1 17 15+ 614 5| 5204 x 1| FIX.C1
LKO3 | 16 68126 2)87 0+ 7(50| 7| 1310 6 2 1 9 9 1 1 1 8 871] 10 11] 0] 5/18] 9 x 1| FIX.C1 3 LKO3 | 17 6125 96| 8| 001 | 7] 1310 6 7 7 6 9 1 1 1 2 1011] 212] 2] 319١ 0 x 1| FIX.C1
LKO3 | 18 67107 4/84] 3| 6(68| 7| 1310 6 7 6| 8 4 2 1 1 7 15| 424 2 12+ 1 x 1| FIX.C1 9 LKO3 | 19 97129 615] 3 70 31 1310 6 2 3 7 1 9 16] 13 1 19 21 1 20 x 1 | FIX.C1 6 LKO3 | 20 0343 | 4127] ‏مادا‎ | 1310 6 7
— 4 9 — ]3 5 0 ]7 9 1 8 8 9 وسط 6.61 | غير 110 85 10 | 96 21 9 4 1 ‎J‏ |6 متاح 2174 3 1117 9 4 6 4 4 8 |4 5 وسط ‎FIX.CL|‏ | غير 70 46 53 | 59 22 7 9 71 4 ‎Ju‏ |6 متاح 2 0 6 )7 7 11 1 ‎(N/A‏ غير متاح جدول 5ب: عدد الأراتب في كل مجموعة موجب بالنسبة للأجسام المضادة بمرور الوقت ‎asim 1210 1‏ ناقل/ كجم | 1 * 1310 ‎asim‏ ناقل/ كجم ‎AAV-‏ ‎AAV-LK03 AAV-SPK AAV-SPK‏ ‎LKO3‏ ‏الاستنتاج ‏يتحدد مقدار انتشار النواقل ‎AAV-SPK‏ و03 ا-ناطحط في السائل المنوي باستخدام اختبار 5 موافق عليه خلال فترة تصل إلى ثمانية شهراً. يتم الكشف عن متواليات الناقل ‎AAV-SPK‏ في السائل المنوي لكل الأرانب الخمسة بعد أسبوع واحد من إعطاء جرعة عالية من الناقل. معظم الحيوانات تخلصت من المتواليات في الأسبوع 10 وظهرت العينة الموجبة المكتشفة الأخيرة في الشهر 5. يكون هذا مشابه للمسار الزمني لناقل 0/2/8 تم إعطاؤه ‎lA‏ عند نفس نواقل
الجرعة ))2009( 17:1022-1030 ‎-(Favaro P, et al., Molecular Therapy‏ على العكس؛ تتم ملاحظة توزيع محدود جداً ل ‎AAV-LKO3‏ بعد جرعة عالية من هذا الناقل» مع ثلاثة من خمسة حيوانات لا توضح متواليات ناقل في السائل المنوي عند أي نقطة زمنية. من غير المرجح أن يكون الانتشار الأقل للناقل في السائل المنوي بسبب إجمالي تعرض أقل ل ‎AAV=‏ ‏5 03> في الأرانب. يتم توضيح التأكيد على حقن الأرانب بنجاح مع كل ناقل ‎AAV‏ عن ‎Gob‏
قياس مستويات بلازما )(ا؛ بديل ناقل الجين. عند الجرعة العالية في هذه الدراسة (1 ‎x‏ 1310 جينوم ناقل/ كجم)؛ تلاحظ مستويات ]1 متماثلة في الدورة الدموية في الحيوانات المحقونة ب ‎AAAV-SPK 5 AAV-LKO3‏ مما يدل على أن النواقل فعّالة بنفس القدر للتدخل في نقل الجين الكبدي
0 بالتوافق مع الدراسات التي تُقيّمِ نقل خط جرثومي من نواقل ‎AAV 5 AAV2‏ تُظهر جين مضفور ‎hFIX‏ فإن بعض الحيوانات تُظهر أجسام مضادة ضد ‎FIX‏ من المرجح بسبب اختلافات الحمض الأميني بين عامل ‎IX‏ بشري ومن أرنب. تتم إضافة هذه النتائج إلى مجموعة البيانات الحالية حول احتمالية نقل خط جرثومي من النواقل ‎AAV‏ يتسم ‎AAV-SPK‏ بنمط مشابه للأنماط المصلية التي تم بحثها مسبقاً؛ نواقل ‎AAV2‏
‎.(Favaro P, et al., Molecular Therapy 17:1022-1030 (2009)) AAV8; 5‏ بمعنى؛ هناك انتشار لمتواليات الناقل ‎AAV‏ المعتمدة على الجرعة في السائل المنوي؛ مع تصفية كاملة بمرور الوقت. مع ذلك؛ يختلف ‎AAV-LKO3‏ عن ‎AAV-SPK 5 (AAV AAV2‏ في أنه يتم توزيع ناقل صغير جداً على السائل المنوي؛ من المحتمل أنع يجعل قفيصة الناقل هذه أكثر أماناً من القفيصات الأخرى من حيث السْمية الجينية.
‏0 مثال 8 يتم إجراء دراسة سريرية لتحديد أمان وحركيات تشريب فردي داخل الوريد ل |1/11]-/اظلظ. من الووضح أن القفيصة ‎AAV‏ التي تم استخدامها للناقل ‎AAV‏ في الدراسات السابقة للسريرية لها سلامة وفعالية جيدين؛ قدرة على تحقيق مستويات نشاط ‎FVII‏ ذات الصلة سريرياً عند جرعة بمقدار حوالي 1 ‎X‏ 1210 جينوم ناقل/ كجم أو أكثر؛ اختيارياً بعد 3-1 أشهر من تشريب الناقل؛
وأجسام مضادة ‎(Ab)‏ متعادلة تتفاعل بصورة ‎ple‏ مع القفيصة ‎AAV‏ بانتشار يبلغ حوالي 710 أقل من 21/8/. يمكن أن يكون إعداد دراسة سريرية تمثيلية كما هو موضح في الجدول 6. جدول 6: إعداد دراسة سريرية ‎AAV=FVIII‏ ‏السلامة وقابلية تحمل | الأهمية السريرية في العلامات الحيوية؛ قيم المعمل ‎AAV-FVIII‏ والتقييمات السريرية (بما في ذلك عدد حالات النزف 5 ‎(Qol‏ من خط القاعدة حركيات ‎AAV-‏ مستويات نشاط ‎FVII‏ بالجين المضفور ومستويات = الجرعة تتضمن كل مجموعة ذات جرعات بادئة؛ متوسطة ‎mE‏ ‎[mel‏ ‎ema‏ ‏معايير التضمين القدرة على تقديم موافقة مستنيرة والالتزام بمتطلبات ‎em]‏
— 9 7 —
ذكور > 18 سنة مع تشخيص مؤكد للهيموفيليا ‎A‏ ‏)> 2 وحدة دولية/ ديسي لتر أو < 72 عامل ‎VII‏ ‏داخلي المنشاً)
تلقي > 50 في أيام الكشف لمنتجات العامل ‎VIE‏ ‏العامل ‎VII‏ أو عمليات تشربب وقائية للعامل ‎VII‏ ‏لا يوجد مثبط لعامل ‎VII‏ قابل للقياس وفقاً للتقييم بواسطة المعمل المركزي ولا يوجد تاريخ مسبق عن مثبطات لبروتين العامل ‎VIE‏ ‏الموافقة على استخدام مانع للحمل موثوق به حتى تكون العينات الثلاثة المتتالية سالبة بالنسبة لمتواليات ‎Jill‏
معايير الاستبعاد دليل على التهاب كبدي ب أو 2 نشط حالياً فيما يتعلق بعلاج مضاد لفيروس الالتهاب الكبدي ب أو ج هل يوجد دليل مصلي* على ‎HIV-1‏ أو ‎HIV-2‏ ‏مع عدات ‎CD4‏ > 200/ مم3 (* الكائنات التي لديها ‎HIV+‏ وثابتة مع عدد ‎CD4‏ > 200/ مم3 وحمل فيروسي غير قابل للاكتشاف مؤهلين
— 8 9 — هل توجد أجسام مضادة قابلة للاكتشاف ‎Ale line‏ مع قفيصة ‎AAV‏ للشكل المتباين مشارك في تجرية نقل جين خلال 52 أسبوع الأخرين غير قادر أو غير راغب في الالتزام بتقييمات الدراسة معيار ‎AAV Nab‏ هو فشل الفحص الأساسى زيارة في اليوم صفر | استعادة متزايدة للمنتج !1/11 ثم تشريب الناقل زيارات متتابعة (حوالي | تقييمات السلامة والحركية 7 زيارة) زيارة في نهاية الدراسة | تقييم السلامة النهائي (تقريباً في الأسبوع 52( ‎Jie‏ 9 معزز ‎TTR‏ ‏يتم وصف تمييز المعزز ترانسثيريتين ‎(TTR)‏ أصلياً في ,1991 ‎Costa and Grayson‏ ‎Nucleic Acids Research 19(15):4139-4145‏ تكون متوالية المعزز ‎TTR‏ هي متوالية ‎dak 5‏ من 182111616186 إلى ‎TATTGACTTAG‏ ‏معزز ‎TTR‏ مع 4 طفرات نوكليوتيد ‎(TTRmut)‏ تعريف المتوالية رقم :22
GTCTGTCTGCACATTTCGTAGAGCGAGTGTTCCGATACTCTAATCTCCC
TAGGCAAGGTTCATATTGACTTAGGTTACTTATTCTCCTTTTGTTGACTA
AGTCAATAATCAGAATCAGCAGGTTTGGAGTCAGCTTGGCAGGGATCA
GCAGCCTGGGTTGGAAGGAGGGGGTATAAAAGCCCCTTCACCAGGAG
AAGCCGTCACACAGATCCACAAGCTCCT 5 ‏مثال‎ ‏تمثيلية.‎ AAV ‏وقفيصات‎ CpG ‏منخفض‎ FVII ‏بنيات الجين المضفور تشفر‎ )1 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏يشفر‎ CPG ‏شكل متباين 7001 لحمض نووي منخفض‎ atgcagattg agctgtctac ctgcttcttc ctgtgcctge tgaggttctg cttctctgcet accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg attacatgca gtctgacctg 10 ggggagctgc ctgtggatgc caggtttccc cccagggtge ccaagagctt ccecttcaat acctctgtgg tgtataagaa gaccctgttt gtggagttca ctgatcatct gttcaacatt gctaaaccca ggcccccctg gatggggcetg ctgggceccta ccatccaggce tgaggtgtat gacactgtgg tgatcactct gaagaacatg gctagccatc ctgtgtctct gcatgcetgtg ggggtgagct actggaaggc ttctgagggg gctgagtatg atgatcagac tagccagagg 5 gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggctctcaca cctatgtctg gcaggtgcetg aaggagaatg gccccatggce ctctgatcect ctgtgtctga cctatagcta cctgagcecat gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgtagggag gggagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt tcattctgct gtttgctgtg tttgatgagg gcaagagctg gcattctgaa accaagaaca gcctgatgca ggacagggat 20 gctgcctetg ctagggectg gcccaagatg cacactgtga atgggtatgt 388130011 ctgcctggcec tgattggcetg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tgggatggge accacccctg aggtgcacag catctttctg gagggccaca ccttcctggt gaggaatcac agacaggcca gcctggagat cagccccatc accttcctga ctgcccagac cctgcetgatg gacctgggcc agtttctget gtictgccac atctctagec accagcatga tggcatggag 5S gcctatgtga aggtggactc ctgccctgag gagccccage tgaggatgaa gaataatgag gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gagatttgat gatgacaatt ctcccagctt cattcagatc aggtctgtgg ccaagaagca tcccaagacc tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gactgggact atgcccccct ggtgetggec cctgatgaca ggagctataa gagccagtac ctgaataatg gcccccagag gattgggagg 10 aagtataaga aggtgaggtt catggcctat actgatgaaa ccttcaagac cagagaggcc atccagcatg agtctgggat cctggggccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg ctgatcatct tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tctaccctca tggcatcact gatgtgaggc ctctgtacag cagaaggctg cccaaggggg tgaagcatct gaaggacttc cccattctgc ctggggagat tttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggccca 5 accaagtctg accctaggtg cctgactagg tactacagca gctttgtgaa tatggagagg gacctggcct ctggcctgat tggcccectg ctgatctget acaaggagte tgtggatcag aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag aacaggagct ggtacctgac tgagaacatt cagaggtttc tgcccaaccc tgctggggtg cagctggagg accctgaatt ccaggcctct aacatcatgc acagcattaa tggctatgtg tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta cattctgagce attggggccc agactgactt cctgtetgtg ttcttctctg gctacacctt taagcacaag atggtgtatg aggataccct gaccctgttt cctttctctg gggagactgt gttcatgage atggagaacc ctggcctgtg gatcctgggce tgccacaact ctgacttcag gaacaggggg 5 atgactgctc tgctgaaggt gagcagcetgt gataagaaca ctggggacta ctatgaggac agctatgagg acatctctgc ctatctgctg agcaagaata atgctattga gcccaggagc ttctctcaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag aactactctg cagtctgacc aggaggagat tgactatgat gacaccatct ctgtggagat gaagaaggag gattttgata tttatgatga ggatgaaaac cagagcccca ggagcttica gaagaagact 10 aggcactatt tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgtc ttctagcccc catgtgctga ggaacagggc ccagtctggce tctgtgccece agttcaagaa ggtggtgtte caggagttca ctgatggcag cttcactcag cccctgtaca ggggggagct gaatgagcac ctggggcetgce tgggcecctta tatcagggcet gaggtggagg ataacatcat ggtgacctte aggaaccagg ccagcaggcc ctacagcttc tactctagcc tgatcagcta tgaggaggac 5 cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacttat ttctggaagg tgcagcacca tatggccccc accaaggatg agtttgattg caaagcctgg gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctgggctgat tggccccctg ctggtgtgcc acaccaacac tctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag actaagagct ggtacttcac tgagaacatg gagaggaact gcagggcccc ctgcaatatc cagatggagg accccacctt taaggaaaat tataggtttc atgccattaa tggctacatc atggacaccc tgcctggect ggtgatggcec caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatgggca gcaatgagaa cattcacagc atccacttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg 5 tataatctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatc tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgagcac cctgttcctg gtgtattcta acaagtgtca gacccccctg ggcatggcect ctggccatat cagggacttc cagatcactg cctctggcca gtatgggcag tgggccccca agctggccag gctgcattac tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag gagccattca gctggattaa ggtggacctg 10 ctggctccaa tgattatcca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gtttagcagce ctgtacatct ctcagtttat catcatgtac tctctggatg gcaaaaagtg gcagacctac aggggcaatt ctactggcac tctgatggtg ttctttggca atgtggacag ctctgggatc aagcacaaca tctttaaccc ccctatcatt gccaggtaca ttaggctgca ccccacccat tacagcatca ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgatctgaa cagctgcage 5 atgcccctgg gcatggagag caaggctatc tctgatgccc agattactgc cagcagctac ttcaccaata tgtttgccac ctggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcagg tctaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag aagaccatga aggtgactgg ggtgaccacc cagggggtga agagcctgct gactagcatg tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagc caggatggcc atcagtggac cctgttcttc cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc aatcaggaca gcttcacccc tgtggtgaac agcctggacc cccccctget gaccagatac ctgaggatcc acccccagag ctgggtgeat cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggg tgtgaggccc aggacctgta ctga (2 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVIII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ X02 ‏شكل متباين‎ 5 atgcagattg agctgtctac ctgctttttc ctgtgtctgc tgaggttctg cttctctgece actaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgtcttggg attacatgca gtctgatctg ggggagctgc ctgtggatgc caggtttcct cccagggtgce ccaagtcttt ccecttcaat acctctgtgg tgtataagaa gaccctgttt gtggagttta ctgatcacct gttcaacatt gccaagccca ggcccccttg gatgggcectg ctggggcecca ccatccaggce tgaggtgtat 10 gacactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gcctctcacc ctgtgagcct gcatgcetgtg ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg gagaaggagg atgataaggt gttccctggg gggagccaca cttatgtgtg gcaggtgctg aaggagaatg gcccaatggc ctctgatccc ctgtgcctga cctattctta cctgagccat gtggacctgg tgaaggacct gaactctggce ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 5 ggctctctgg ctaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt tcatcctgct gtttgctgtg tttgatgagg ggaagagctg gcactctgag accaagaaca gcctgatgca ggacagggat gctgcctetg ccagggcectg gcccaaaatg cacactgtga atggctatgt gaataggage ctgcctggcece tgattggcetg ccacaggaag tetgtgtatt ggcatgtgat 006819996 accacccctg aggtgcactc tatcttcctg gagggccata ctttcctggt gaggaatcat aggcaggcca gcctggagat tagccccatt acctttctga ctgcccagac cctgctgatg gacctgggcc agttcctgcet gttttgccac atcagctctc accagcatga tggcatggag gcctatgtga aggtggatag ctgccctgag gagccccagce tgaggatgaa gaacaatgag gaggctgagg attatgatga tgatctgact gattctgaaa tggatgtggt gaggtttgat 5 gatgacaata gcccctcttt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca tcctaagacc tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gactgggact atgctcccct ggtgectggee cctgatgaca ggtcttacaa gagccagtac ctgaacaatg gcccccagag aattgggagg aagtataaga aggtgagatt catggcttac actgatgaga ccttcaagac tagggaggcc atccagcatg agtctggcat tctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 10 ctgatcatct tcaagaacca ggcctctagg ccctacaata tttaccccca tgggatcact gatgtgaggc ccctgtacag caggaggcetg cctaaggggg tgaagcatct gaaggacttc cccatcctge ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga agatggccce accaagtctg accctaggtg cctgaccagg tactactctt cttttgtgaa catggagagg gacctggcct ctggectgat tggcccectg ctgatctget acaaggagte tgtggaccag 15 agggggaacc agattatgtc tgacaagagg aatgtgattc tgttctctgt gtttgatgag aacaggagct ggtatctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcccaatcc 11719 cagctggagg accctgagtt ccaggccagc aacatcatgc acagcatcaa tgggtatgtg tttgattctc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgage attggggctc agactgattt cctgtctgtg ttcttttctg gctacacctt taagcataag atggtgtatg aggacactct gaccctgttt cccttctctg gggagactgt gtttatgage atggagaacc ctggcctgtg gatcctgggce tgccacaact ctgatttcag gaacaggggce atgactgctc tgctgaaggt gtcttcttgt gacaagaaca ctggggacta ttatgaggac agctatgagg acatctctge ctacctgctg agcaagaaca atgctattga gcccagatct 5 ttcagccaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcactag gaccaccctg cagtctgacc aggaggagat tgactatgat gacactatct ctgtggagat gaagaaggag gactttgata tctatgatga ggatgagaac cagtctccca ggagcttcca gaaaaagacc aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgtc ttctagcccc catgtgctga ggaacagggc ccagtctggg tctgtgccce agttcaagaa ggtggtgttc 10 caggagttca ctgatgggag cttcacccag cctctgtaca ggggggagct gaatgagcac ctggggctgce tgggccctta tattagggct gaggtggagg acaacatcat ggtgactttc aggaatcagg cctctaggcc ctatagcttc tacagctctc tgatcagcta tgaggaggat cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac ttctggaagg tgcagcacca catggctcct accaaggatg agtttgactg caaggectgg 5 gcctactttt ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggccccctg ctggtgtgtc ataccaacac cctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag accaagagct ggtactttac tgagaacatg gagaggaatt gcagagcccc ttgcaacatc cagatggagg acccaacctt caaagagaac tacaggttcc atgccatcaa tgggtacatc atggacaccc tgcctggect ggtgatggct caggaccaga ggatcaggtg gtatctgctg agcatgggca gcaatgagaa tatccatagc attcacttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg tataacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgccaagcaa ggctgggatt tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gecatgtctac cctgttectg 5 gtgtactcca ataagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctggccacat cagggacttc cagatcactg cctctggcca gtatgggcag tgggccccaa agctggccag gctgcactat tctgggagca tcaatgcttg gagcaccaag gagcctttca gctggattaa ggtggatctg ctggccccca tgatcattca tggcatcaaa acccaggggg ctagacagaa gttttctage ctgtacatca gccagttcat catcatgtac agcctggatg gcaagaagtg gcagacttac 10 aggggcaata gcactggcac cctgatggtg ttttttggca atgtggacag ctctggcatc aagcacaaca tctttaaccc ccccattatt gccaggtata tcaggctgca tcccacccac tattctatta ggtctactct gagaatggag ctgatgggct gtgacctgaa cagctgtage atgcccctgg ggatggagag caaggctatc tctgatgccc agatcactge cagctcettat ttcaccaata tgtttgccac ctggtctcce tctaaggceca ggctgcacct gcagggcagg 5 agcaatgctt ggaggcccca ggtgaataac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag aagaccatga aggtgactgg ggtgactacc cagggggtga agtctctgct gactagcatg tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagc caggatgggc atcagtggac tctgttcttc cagaatggca aggtgaaggt cttccagggg aaccaggata gcttcactcc tgtggtgaac tctctggacc cccccctgcet gactaggtat ctgaggatcc acccccagag ctgggtgcac cagattgccc tgaggatgga ggtgctggge tgtgaggccc aggacctgta ttga (3 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ X03 ‏شكل متباين‎ atgcagattg aactgtctac ttgtttcttc ctgtgcctge tgaggttttg cttctctgcet actaggaggt actatctggg ggctgtggag ctgtcttggg actatatgca gtctgacctg 5 ggggagctgc ctgtggatge taggtttcce cccagggtge ccaagagctt cccctttaac acctctgtgg tgtataagaa gactctgttt gtggagttca ctgaccatct gttcaacatt gccaagccaa ggcccccctg gatgggcectg ctgggcccca ccatccaggce tgaggtgtat gacactgtgg tgattactct gaagaacatg gccagccatc ctgtgagcct gcatgcetgtg ggggtgtctt actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac ctctcagagg 10 gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggctctcata cctatgtgtg gcaggtcctg aaggagaatg ggcccatggc ctctgaccce ctgtgcectga cctactctta tctgtctcat gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag ggcagcctgg ctaaggagaa gacccagact ctgcacaagt tcatcctgct gtttgctgtg tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag accaagaaca gcctgatgca ggacagggat 5 gctgcctetg ctagggectg gcccaagatg cacactgtga atgggtatgt gaacaggagce ctgccaggcc tgattggctg ccataggaag tctgtgtatt ggcatgtgat tgggatggag actacccctg aggtccacag cattttcctg gaggggcata cctttctggt gaggaaccac aggcaggcct ctctggagat ctctcccatt actttcctga ctgcccagac ‏اه‎ gacctgggcc agttcctgcet gttctgccac atcagcagcec accagcatga tggcatggag gcctatgtga aggtggatag ctgccctgag gagccccagce tgaggatgaa aaacaatgag gaggctgagg attatgatga tgacctgact gattctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgataaca gccccagctt catccagatt aggtctgtgg ccaagaagca tcccaagacc tgggtgcact acattgctge tgaggaggag gattgggact atgctcctct ggtgectggeec 5 cctgatgaca ggagctacaa gagccagtac ctgaataatg gcccccagag gattggcagg aagtataaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga cctttaagac cagggaggcc atccagcatg aatctgggat cctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg ctgattatct ttaagaacca ggctagcagg ccctacaaca tttaccccca tggcattact gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcacct gaaggatttc 10 cccattctge ctggggagat ctttaagtac aaatggactg tgactgtgga ggatggccect actaagtctg atcccaggtg tctgaccaga tactacagca gctttgtgaa tatggagagg gacctggctt ctggcctgat tggccccectg ctgatctget acaaggagtc tgtggaccag aggggcaatc agattatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag aacagaagct ggtacctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcccaacce tgetggggtg 5 cagctggagg accctgagtt ccaggctagc aatatcatgc acagcattaa tggctatgtg tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctattggta cattctgagce attggggccc agactgattt cctgtctgtg ttcttttctg gctacacctt caagcacaag atggtgtatg aggatactct gaccctgttt cccttctctg gggagactgt gttcatgage atggagaacc ctggcctgtg gatcctgggce tgtcacaact ctgacttcag gaacaggggce atgactgccc tgctgaaggt gagctcttgt gataagaaca ctggggacta ctatgaggac tcttatgagg acatctctgce ctacctgctg agcaagaaca atgctattga gcccaggagce ttctctcaga atccccctgt gctgaagagg catcagaggg agatcactag gactaccctg cagtctgacc aggaagagat tgactatgat gacaccatct ctgtggaaat gaagaaggag 5 gactttgata tctatgatga ggatgaaaac cagagcccca ggagcttcca gaagaagacc aggcattact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atgggatgag ctcttctcce catgtgctga ggaatagggc tcagtctggce tctgtcccac agttcaagaa ggtggtgttt caggagttca ctgatggcag cttcactcag cccctgtaca ggggggagct gaatgagcat ctgggcctge tggggceccta catcagggcet gaggtggagg ataacattat ggtgactttc 10 aggaaccagg cctctaggcc ctacagcttc tacagcagcc tgatcagcta tgaggaggac cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac taagacctat ttctggaagg tgcagcatca catggctccc actaaagatg agtttgactg caaggcectgg gcctacttct ctgatgtgga tctggagaag gatgtgcatt ctgggctgat tggcecctcetg ctggtctgcc atactaacac cctgaatcct gecccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 15 tttgccectgt tetttaccat ctttgatgag accaagtctt ggtacttcac tgagaacatg gagaggaact gcagggcccc ctgtaacatc cagatggagg accccacctt taaggagaac tacaggttcc atgccatcaa tggctacatc atggacactc tgcctggect ggtgatggec caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg tctatgggct ctaatgagaa cattcattct atccacttct ctggccatgt gtttactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg tacaatctgt accctggggt gtttgaaact gtggagatgc tgccctctaa ggctggcatce tggagggtgg agtgcctgat tggggaacac ctgcatgctg gcatgagcac cctgttcctg gtctatagca ataagtgcca gacccccctg gggatggcect ctgggcatat cagagacttc cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggccccca agcetggccag getgcactac 5 tctggcagca ttaatgcctg gagcaccaag gagcccttct cttggatcaa ggtggacctg ctggctccca tgatcatcca tgggatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttcagcagce ctgtacatct ctcagttcat catcatgtac tctctggatg gcaagaagtg gcagacctac aggggcaata gcactgggac cctgatggtg ttctttggga atgtggacag ctctggcatc aagcacaata tcttcaaccc ccccatcatt gccaggtaca tcagactgca ccccactcat 10 tacagcatca ggagcactct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa tagctgctct atgcccctgg gcatggagag caaggccatt tctgatgccc agattactge ctettettac ttcactaata tgtttgccac ctggagcccc agcaaggcca ggctgcatct gcaggggagg agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag aagactatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gaccagcatg 5 tatgtgaagg agttcctgat ctcttctagc caggatgggc accagtggac cctgtttttc cagaatggga aggtgaaggt gtttcagggc aatcaggaca gctttactcc tgtggtgaac agcctggacc cccccctget gactaggtac ctgaggattc acccccagag ctgggtgcac cagattgccc tgaggatgga ggtgctggge tgtgaggccc aggatctgta ctga
)4 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ X04 ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgtctac ctgcttcttt ctgtgcctge tgaggttctg 1-1-1026 actaggaggt attatctggg ggctgtggag ctgtcctggg actacatgca gtctgatctg ggggagctgc ctgtggatgc caggttccct cccagggtge ccaagtcttt cectttcaat acctctgtgg tgtacaagaa gactctgttt gtggagttta ctgatcacct gtttaacatt 5 gccaagccca ggceccccctg gatggggcetg ctgggcccca ccatccaggce tgaggtgtat gacactgtgg tgattactct gaagaatatg gcttctcacc ctgtgagcect gcatgcetgtg ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cttatgtgtg gcaggtgctg aaggagaatg gcccaatggc ctctgacccce ctgtgcctga cctacagcta tctgageccat 10 gtggatctgg tgaaggatct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag ggctctctgg ccaaggagaa gactcagact ctgcacaagt tcatcctgct gtttgetgtg tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag accaagaact ctctgatgca ggatagggat gctgcttctg ccagggcectg gecccaagatg cacactgtga atgggtatgt gaataggagce ctgcctgggce tgattgggtg tcacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatggge 5 accactcctg aggtgcacag catctttctg gagggccaca cttttctggt gaggaatcac aggcaggcca gcctggagat cagccccatc accttcctga ctgcccagac cctgetgatg gatctgggcc agttcctgct gttttgccat atcagcagec atcagcatga tgggatggag gcttatgtga aggtggactc ttgccctgag gagcctcage tgaggatgaa gaataatgaa gaggctgagg actatgatga tgatctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaaca gccccagctt tatccagatt aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc tgggtgcatt acattgctgc tgaggaagag gattgggact atgccccect ggtgctggec cctgatgaca ggagctacaa gtctcagtac ctgaacaatg gccctcagag gattggcagg aagtacaaga aggtgaggtt catggcttac actgatgaga ccttcaagac cagggaggcc 5 attcagcatg aatctgggat cctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg ctgattattt tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tttatcctca tggcattact gatgtgagac ccctgtacag caggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggacttc cccatcctge ctggggagat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggceccc actaagtctg accccaggtg cctgactagg tactactcca gctttgtgaa catggagagg 10 gacctggcct ctggcctgat tggcccecctg ctgatctget acaaggagtc tgtggatcag aggggcaacc agatcatgtc tgacaagaga aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag aataggtctt ggtacctgac tgagaacatc cagaggtttc tgcctaatcc tgctggggtg cagctggagg atcctgagtt ccaggcctct aacattatgc acagcatcaa tgggtatgtg tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgage 5 attggggccc agactgactt tctgtctgtg ttcttctctg gectacacctt taagcataag atggtgtatg aggacaccct gactctgttc cccttctctg gggagactgt gttcatgagce atggagaacc caggcctgtg gatcctgggce tgccacaact ctgatttcag gaataggggce atgactgccc tgctgaaggt gagcagctgt gataagaaca ctggggacta ttatgaggat agctatgagg acatctctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcccaggagce ttcagccaga atcctcetgt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccaccctg cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacactatct ctgtggagat gaagaaggag gactttgaca tctatgatga ggatgagaat cagagcccca ggagcttcca gaagaagact agacactact ttattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctcttctcce 5 catgtgctga gaaacagggc ccagtctggc tctgtgccece agttcaagaa ggtggtcttc caggagttca ctgatggctc tttcacccag cctctgtata gaggggagct gaatgagcac ctgggcctge tgggcecctta catcagggcet gaggtggagg acaatatcat ggtgacctte aggaaccagg ctagcaggcc ctactctttc tacagcagcc tgatcagcta tgaggaggac cagaggcagg gggctgagcc taggaagaat tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac 10 ttctggaagg tgcagcacca catggctccc actaaggatg agtttgactg caaggcctgg gcctactttt ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcatt ctggcctgat tggccccectg ctggtctgcc acaccaatac tctgaaccct gctcatggga gacaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag accaagtcct ggtactttac tgagaacatg gagaggaatt gcagggcccc ttgcaacatc cagatggagg accccacctt caaggaaaat 5 tataggttcc atgccatcaa tggctacatc atggacaccc tgcctggect ggtgatggcee caggaccaga ggatcaggtg gtatctgctg tctatgggct ctaatgagaa catccacagc atccatttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtataa gatggctctg tacaacctgt accctggggt ctttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatt tggagggtgg agtgcctgat tggggaacac ctgcatgctg ggatgagcac cctgttcctg gtgtactcta acaagtgcca gaccccactg ggcatggctt ctggccacat cagggatttc cagattactg cctctggcca gtatggccag tgggctccca agcetggctag gctgcactac tctgggagca tcaatgcctg gtctactaag gagcctttct cttggatcaa agtggacctg ctggccccta tgatcatcca tgggatcaag actcaggggg ccaggcagaa gttcagcage 5 ctgtacatct ctcagttcat cattatgtac agcctggatg gcaagaagtg gcagacctac aggggcaaca gcactggcac cctgatggtg ttctttggga atgtggacag ctctgggatt aagcacaaca tctttaaccc ccccatcatt gccaggtata tcaggctgca ccctacccac tacagcatta ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa cagctgcagc atgcccctgg ggatggagag caaggccatt tctgatgctc agatcactge ttctagctac 10 ttcactaaca tgtttgccac ctggtctccc agcaaggcta gactgcacct gcaggggagg agcaatgcct ggaggcccca ggtgaataat cccaaggagt ggctgcaggt ggatttccag aaaaccatga aggtgactgg ggtgactacc cagggggtga agtctctgct gaccagcatg tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagc caggatgggc atcagtggac cctgttcttt cagaatggga aggtgaaggt gtttcagggc aatcaggaca gcttcacccce tgtggtgaac 5 agcctggacc cccccctget gaccaggtac ctgaggatcc acccccagag ctgggtgeat cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggacctgta ctga (5 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏شكل متباين 7005 لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ atgcagattg agctgtctac ttgcttcttc ctgtgcctge tgaggttctg cttetctgee actaggaggt attacctggg ggctgtggag ctgagctggg actatatgca gtctgacctg ggggagctgc ctgtggatgce caggtttcct cccagggtge ctaagagctt ccecttcaac acctctgtgg tgtacaagaa gactctgttt gtggagttta ctgatcatct gttcaacatt gccaagccca ggcctccttg gatggggcetg ctgggcccca ccatccaggce tgaggtgtat gacactgtgg tgattaccct gaagaatatg gccagccatc ctgtgagcect geatgetgtg 5 ggggtgagct attggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgatcagac tagccagagg gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg gggagccata cctatgtgtg gcaggtgctg aaggagaatg gccccatggce ctctgaccct ctgtgectga cttatagcta cctgagcecat gtggatctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag ggcagcctgg ccaaggagaa gactcagacc ctgcacaagt tcatcctgct gtttgetgtg 10 tttgatgagg ggaagtcctg gcactctgag actaagaaca gcctgatgca ggatagggat gctgcttctg ccagggcectg gectaagatg cacactgtga atggctatgt gaataggagce ctgcctggcece tgattggctg ccataggaag tctgtgtact ggcatgtgat tgggatggge accacccctg aggtgcactc tattttcctg gagggccata ctttcctggt gaggaaccat aggcaggcca gcctggagat cagccccatce actttcctga ctgcccagac tetgetgatg 15 gacctgggcc agttcctgcet gttctgeccac atcagcagec atcagcatga tggcatggag gcttatgtga aggtggacag ctgccctgag gagcctcage tgaggatgaa gaataatgag gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaact ctccctcttt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccctaagacc tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggact atgcccccct ggtgetggee ccagatgaca ggagctacaa gtcccagtac ctgaacaatg gcccccagag gattggcagg aagtacaaga aggtgaggtt catggcttat actgatgaga ctttcaagac cagggaggcc atccagcatg agtctggcat cctgggcecct ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg ctgattatct tcaagaacca ggcttctagg ccctacaata tctaccctca tggcatcact 5 gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcatct gaaggatttc cccatcctge ctggggagat ctttaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatggceccc actaagtctg accccaggtg cctgaccagg tattacagca gctttgtgaa catggagagg gatctggctt ctgggctgat tggccccectg ctgatctget acaaggagte tgtggaccag aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag 10 aataggagct ggtacctgac tgagaacatc cagaggtttc tgcccaatcc ‏ا‎ ‎cagctggagg atcctgagtt tcaggcctct aatatcatgc acagcatcaa tggctatgtg tttgactctc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctattggta catcctgage attggggccc agactgactt tctgtctgtg tttttttctg gctacacctt caagcacaag atggtgtatg aggatactct gactctgttc cctttttctg gggagactgt gttcatgtct 15 atggagaacc ctgggctgtg gattctgggc tgccacaatt ctgacttcag gaacagaggc atgactgctc tgctgaaggt gagcagcetgt gacaagaaca ctggggacta ctatgaggac tcttatgagg acatttctge ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcccagaagce ttttctcaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccaccctg cagtctgacc aggaggagat tgactatgat gatactattt ctgtggagat gaagaaggag gactttgaca tctatgatga ggatgagaac cagagcccca ggtctttcca gaagaagact aggcactact ttattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atgggatgtc tagctctcct catgtgctga ggaacagggc ccagtctggc tctgtgccce agtttaaaaa ggtggtgttc caggaattca ctgatggcag ctttacccag cctctgtaca ggggggagct gaatgagcac 5 ctggggctgce tggggcectta cattagggcet gaggtggagg acaacatcat ggtgaccttc aggaatcagg ccagcaggcc ctactctttc tacagcagcc tgatctctta tgaggaggac cagaggcagg gggctgaacc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac ttctggaagg tgcagcacca catggctccc accaaggatg agtttgattg caaggcctgg gcttacttct ctgatgtgga tctggagaag gatgtgcact ctgggctgat tggccceetg 10 ctggtgtgcc acaccaacac tctgaaccct gcccatggca gacaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tettcactat ctttgatgag actaagagct ggtacttcac tgagaacatg gagaggaatt gcagggcccc ttgcaacatc cagatggagg accccacctt taaggagaac tacaggtttc atgccattaa tggctacatc atggacaccc tgcctggcect ggtgatggcec caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg tctatgggga gcaatgagaa catccacagc 15 attcacttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg tacaacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctgggatc tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg ggatgagcac cctgttcctg gtgtatagca acaagtgcca gacccccctg ggcatggect ctggccacat cagagacttt cagattactg cctctggcca gtatgggcag tgggccccca agctggccag 1008-1 tctggctcta ttaatgcctg gagcactaag gagcccttca gctggattaa ggtggacctg ctggctccca tgatcatcca tggcatcaag actcaggggg ccaggcagaa gttetcettct ctgtacatca gccagttcat tatcatgtac tccctggatg gcaagaagtg gcagacctat aggggcaaca gcactggcac cctgatggtg ttctttggga atgtggacag ctctggcatc 5 aagcataata tcttcaatcc ccccatcatt gctaggtaca tcaggctgca ccccacccac tactctatta ggtctaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa cagctgcagc atgcctctgg gcatggagag caaagccatc tctgatgccc agatcactge cagcagctac tttaccaaca tgtttgctac ttggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcaggggagg tctaatgcct ggaggceccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 0 aagactatga aggtgactgg ggtgaccacc cagggggtga agagcctgct gacctctatg tatgtgaagg agttcctgat tagcagcagc caggatggcc accagtggac cctgtttttc cagaatggga aggtgaaggt gtttcagggg aaccaggaca gcttcactcc tgtggtgaac tctctggacc cccccectgcet gaccaggtat ctgaggatce accctcagag ctgggtgcac cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggacctgta ctga 5 (6 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ X06 ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgcctge tgaggttttg cttctctgec accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg attacatgca gtctgacctg ggggagctgc ctgtggatgce caggttccct cccagggtge ccaagtcettt ccecttcaac acttctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttta ctgaccacct gttcaacatt gccaagccca ggcctcectg gatgggcectg ctgggcccca ccattcagge tgaggtgtat gacactgtgg tcatcaccct gaaaaatatg gctagccacc ctgtgtctct gcatgctgtg ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac tagccagagg gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cttatgtgtg gcaggtgetg 5 aaagagaatg gccccatggc ttctgatcce ctgtgtctga cctatagcta cctgagcecat gtggatctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag ggcagcctgg ctaaggagaa gacccagacc ctgcataagt tcatcctgcet gtttgetgtg tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag actaagaaca gcctgatgca ggatagggat gctgcttctg ccagggcectg gcccaagatg cacactgtga atgggtatgt gaacaggage 10 ctgcctggcec tgattggetg ccataggaag tctgtctatt ggcatgtgat tggcatgggce actactcctg aggtgcacag catctttctg gagggccaca ccttectggt gaggaaccac aggcaggcca gcctggagat ctctceccate actttcctga ctgctcagac cctgetgatg gacctgggcc agttcctgcet gttctgtcac atctctagcc accagcatga tggcatggag gcctatgtga aggtggatag ctgccctgag gaaccccage tgaggatgaa gaacaatgag 5 gaggctgagg attatgatga tgatctgact gattctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaatt ctcctagctt cattcagatc agatctgtgg ccaaaaagca tcctaagact tgggtgcatt atattgctgc tgaggaggag gattgggatt atgcccccect ggtgcetggcet cctgatgata ggagctacaa gtctcagtac ctgaataatg ggccccagag gattggcagg aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga ccttcaagac cagggaggcc attcagcatg agtctgggat tctggggccc ctgctgtatg gggaggtggg ggataccctg ctgatcattt tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tctaccccca tgggattact gatgtgaggc ccctgtactc taggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggatttt cctatcctge ctggggaaat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggccee 5 actaagtctg atcccaggtg tctgaccagg tattatagct cttttgtgaa catggagagg gatctggcct ctgggcetgat tggccctetg ctgatctget acaaggagte tgtggaccag aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag aacaggagct ggtatctgac tgagaacatc cagaggtttc tgcccaatcc tgctggggtg cagctggagg atcctgagtt ccaggctagc aacatcatgc acagcatcaa tgggtatgtg 0 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgtctg catgaggtgg cctactggta tatcctgtct attggggccc agactgactt cctgtctgtg tttttttctg ggtatacttt taagcacaag atggtgtatg aggacaccct gactctgttc cccttctctg gggagactgt gtttatgagce atggagaacc ctggcctgtg gatcctgggce tgccacaatt ctgacttcag gaataggggg atgactgccc tgctgaaggt gagcagcetgt gataagaata ctggggacta ctatgaggac 5 tcttatgagg acatttctgc ctatctgctg tctaagaaca atgccattga acccaggagc ttctctcaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg aaatcaccag aactactctg cagtctgatc aggaggaaat tgactatgat gacactattt ctgtggagat gaagaaggag gactttgaca tctatgatga ggatgagaac cagagcccaa ggagctticca gaagaagact aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag cagcagcccc catgtgctga gaaacagggc ccagtctggg tctgtgcccc agttcaagaa ggtggtgttc caggagttca ctgatgggag cttcacccag cccctgtata ggggggagcet gaatgagcac ctgggcctge tgggccccta tattagggct gaggtggagg acaacatcat ggtgacctte aggaatcagg cctctaggcc ctacagcttc tacagcagcc tgattagcta tgaggaggat 5 cagaggcagg gggctgaacc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctat ttctggaagg tgcagcatca catggccccc accaaggatg agtttgactg caaggcctgg gcctacttct ctgatgtgga tctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggccccectg ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct gctcatggca ggcaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag actaagtctt ggtacttcac tgagaatatg 10 gagaggaatt gcagggcccc ctgcaatatt cagatggaag accccacctt caaggagaat tacaggttcc atgccattaa tggctacatc atggataccc tgcctggcect ggtgatggec caggatcaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatgggca gcaatgagaa catccactct atccacttct ctggccatgt gtttactgtg aggaagaagg aggagtataa gatggccctg tacaacctgt accctggggt ctttgagact gtggagatgc tgcctictaa ggctggecatt 15 tggagggtgg agtgcctgat tggggaacac ctgcatgctg gcatgtctac cctgttectg gtgtacagca ataagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctgggcatat cagggatttc cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggccccaa agctggctag getgcactac tctgggagca tcaatgcctg gagcactaag gagcccttca gctggatcaa ggtggacctg
1000000608 tgattatcca tgggattaag actcaggggg ccaggcagaa 0116806806 ctgtacatca gccagttcat tatcatgtac agcctggatg gcaagaagtg gcagacctat aggggcaact ctactgggac cctgatggtg ttctttggga atgtggatag ctctgggatc aagcacaata tcttcaaccc ccccatcatt gccaggtata tcaggctgca ccccacccac tacagcatta ggtctaccct gaggatggag ctgatgggct gtgatctgaa cagctgtage 5 atgcctctgg gcatggagtc taaggccatt tctgatgccc agattactge tagcagctac ttcaccaaca tgtttgccac ctggtctccc agcaaggcca ggctgcatct gcagggcagg tctaatgctt ggaggcccca ggtgaacaac ccaaaggagt ggctgcaggt ggatttccag aagactatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agtctctgct gacctctatg tatgtgaagg agttcctgat ctctagcagc caggatggcc atcagtggac cctgttcttc 10 cagaatggca aggtgaaagt gttccagggc aatcaggata gcttcactcc agtggtgaac agcctggatc cccctcetget gactaggtac ctgaggatcc acccccagag ctgggtgcac cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggacctgta ctga )7 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ XOT ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgtctge tgaggttctg cttctctgece 5 accaggaggt attacctggg ggctgtggag ctgagctggg actatatgca gtctgacctg ggggagctgc ctgtggatge taggttccecec cccagggtge ccaagagctt ceectttaac acttctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt gccaagccca ggcccccctg gatggggcetg ctggggecca ccatccagge tgaggtgtat gacactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gccagccacc ctgtgagcct 8090 ggggtgagct actggaaggc ttctgagggg gctgagtatg atgaccagac tagccagagg gagaaggagg atgacaaggt gtttcctggg ggcagccata cctatgtgtg gcaggtgctg aaggagaatg gccccatggce ctctgaccce ctgtgcctga cctacagceta cctgtctcat gtggacctgg tgaaggacct gaactctggce ctgattgggg ctetgetggt gtgtagggag 5 ggcagcctgg ctaaggaaaa gacccagacc ctgcataagt ttatcctgcet gtttgctgtg tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag accaagaaca gcctgatgca ggatagggat gctgcctetg ccagggcttg gecctaagatg cacactgtga atgggtatgt gaataggagce ctgcctggcec tgattggcetg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tgggatggge accacccctg aggtccatag catcttcctg gagggccaca ctttcctggt gaggaaccac 10 agacaggcct ctctggagat ctctcccatc accttcctga ctgctcagac tctgetgatg gacctgggcc agttcctgcet gttttgccat attagcagcc accagcatga tgggatggag gcctatgtga aggtggatag ctgccctgag gagcctcage tgaggatgaa gaacaatgag gaggctgaag actatgatga tgacctgact gattctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaata gccccagctt cattcagatc aggtctgtgg ccaagaaaca ccccaagacc 5 tgggtgcact acattgctgc tgaggaagag gactgggact atgctcccct ggtgectggee cctgatgata ggtcttataa gagccagtac ctgaacaatg ggccccagag gattggcagg aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaaa ccttcaaaac cagggaggcc attcagcatg agtctggcat cctgggccct ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg ctgatcatct tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tctatcctca tggcatcact gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcacct gaaagacttc cccatcctge ctggggagat ctttaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatggccct accaagtctg accccaggtg tctgaccagg tactattcta gctttgtgaa catggagagg gacctggcct ctggcctgat tgggcccctg ctgatctget acaaggagtc tgtggaccag 5 aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttttctgt gtttgatgag aataggagct ggtacctgac tgagaacatc cagaggtttc tgcccaatcc tgctggggtg cagctggagg atcctgagtt ccaggccagc aatatcatgc atagcatcaa tggctatgtg tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgectg catgaggtgg cctactggta catcctgage attggggccc agactgactt tctgtctgtg ttcttttctg gctatacctt caagcacaag 0 atggtgtatg aggataccct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt gttcatgagce atggagaatc ctgggctgtg gatcctgggg tgccacaact ctgattttag gaacaggggg atgactgccc tgctgaaggt gtctagctgt gataagaaca ctggggacta ctatgaggac agctatgagg acatttctgc ttatctgctg tctaagaata atgccattga gcccagaagce ttcagccaga atccccectgt gctgaagaga catcagaggg agatcaccag aactaccctg 5 cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacactatct ctgtggagat gaagaaggag gactttgaca tctatgatga ggatgagaat cagtctccca ggagctttca gaagaagacc agacattact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctctagccct catgtgctga ggaacagggc ccagtctggce tctgtgccece agttcaagaa ggtggtgtte caggaattca ctgatggcag cttcacccag cccctgtaca ggggggagct gaatgagcac ctgggcctge tggggcctta tatcagggcet gaggtggagg ataatattat ggtgactttc aggaaccagg ccagcaggcc ctactctttc tatagcagcc tgatctctta tgaggaggat cagaggcagg gggctgagcc taggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac taagacctac ttctggaagg tccagcacca catggcccect accaaggatg agtttgactg caaggectgg 5S gcctatttct ctgatgtgga tctggagaag gatgtccatt ctgggctgat tggccccctg ctggtgtgcc acactaacac tctgaatcct gcccatggca ggcaggtgac tgtccaggag tttgccctgt tettcactat ctttgatgag accaagagct ggtactttac tgagaacatg gagaggaact gcagagctcc ttgcaatatt cagatggagg accccacctt caaggagaat tacaggttcc atgccattaa tgggtacatc atggacaccc tgcctggect ggtgatgget 10 caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatgggct ctaatgagaa tatccacagc atccacttct ctgggcatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggctctg tataatctgt accctggggt gtttgaaact gtggagatgc tgccctctaa ggctggcatc tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgagcac cctgttcctg gtgtacagca acaagtgcca gacccccectg ggcatggcect ctggccacat cagggacttc 5 cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggccccca agctggeccag getgcactat tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag gagcccttca gctggatcaa ggtggacctg ctggccccca tgatcattca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttcagctcet ctgtacatct ctcagttcat catcatgtac tctctggatg ggaagaagtg gcagacctac aggggcaaca gcactggcac cctgatggtg ttctttggga atgtggactc ttctggcatc aagcacaaca tcttcaatcc ccccatcatt gctaggtata ttaggctgca tcccacccac tacagcatca ggtctaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa ctcttgcage atgcccctgg gcatggagtc taaggccatc tctgatgccc agattactgc cagcagctac ttcaccaaca tgtttgccac ctggagcccc tctaaggcca ggctgcatct gcaggggagg 5S agcaatgcct ggaggcctca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggatttccag aagaccatga aggtgactgg ggtgaccacc cagggggtca agagcctgct gaccagcatg tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagc caggatggcc accagtggac tctgttcttt cagaatggga aggtgaaggt gtttcagggc aatcaggact ctttcacccc tgtggtgaac agcctggacc ccccectget gaccagatac ctgaggatcc acccccagte ttgggtgecat 10 cagattgccc tgaggatgga ggtgctggge tgtgaggctc aggatctgta ctga (8 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVIII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ XO8 ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgagcac ttgctttttt ctgtgcctgc tgaggttttg tttttctgec accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg actatatgca gtctgatctg ggggagctgc ctgtggatgc caggttccce cccagggtge ccaagtcttt tcecttcaac 15 acctctgtgg tgtataagaa gaccctgttt gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt gctaagccta ggccccecctg gatgggectg ctgggeccta ccattcagge tgaggtgtat gacactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gccagccatc ctgtgagcct gcatgcetgtg ggggtctctt actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagaga gagaaggagg atgacaaggt cttccctggg ggctctcaca cctatgtgtg gcaggtgcetg aaggaaaatg gccccatggce ctctgaccce ctgtgcctga cctacagceta tctgagcecat gtggatctgg tgaaggacct gaattctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag ggcagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt ttatcctgcet gtttgetgtg tttgatgagg gcaagtcttg gcactctgag actaagaaca gcctgatgca ggacagggat 5 gctgcctetg ccagggcectg gcccaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggage ctgcctgggce tgattggctg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatggge accacccctg aggtgcacag catcttcctg gaaggccaca ctttcctggt gaggaaccat aggcaggcca gcctggagat cagccctatc accttcctga ctgcccagac cetgetgatg gatctggggce agttcctgcet gttctgccac atctctagcc accagcatga tgggatggag 10 gcctatgtga aggtggacag ctgcccagag gagcctcage tgaggatgaa aaacaatgaa gaggctgagg attatgatga tgatctgact gactctgaga tggatgtggt gagatttgat gatgacaata gccctagctt tattcagatc aggtctgtgg ctaagaagca ccccaagacc tgggtgcatt acattgctgc tgaggaggag gactgggatt atgctcctct ggtgctggec cctgatgata ggagctacaa gagccagtac ctgaataatg gccctcagag gattggcagg 5 aagtacaaga aggtgaggtt catggcttac actgatgaga ccttcaagac tagggaggcc atccagcatg agtctgggat cctggggccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg ctgatcatct tcaagaacca ggctagcagg ccttacaaca tctatcccca tgggatcact gatgtgagac ctctgtacag caggaggctg cccaaggggg tcaagcatct gaaagacttc cccatcctge ctggggagat ctttaagtat aagtggactg tgactgtgga 09381009026 accaagtctg accccaggtg cctgaccagg tattacagca gctttgtgaa catggagagg gatctggcct ctgggcetgat tggccceectg ctgatctgtt acaaggaatc tgtggatcag aggggcaatc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag aataggtctt ggtacctgac tgaaaacatc cagaggttcc tgcccaaccce tgetggggtc 5 cagctggagg atcctgagtt ccaggctagc aacatcatgc acagcatcaa tgggtatgtg tttgatagcc tgcagctgtce tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgtct attggggccc agactgactt cctgtctgtg ttcttttctg gctacacctt caagcacaag atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt ctttatgagce atggagaacc ctgggcetgtg gatcctgggce tgccacaact ctgatttcag gaatagggge 0 atgactgctc tgctgaaggt gagctcttgt gacaagaaca ctggggatta ctatgaggac agctatgagg acatttctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcctaggagce tttagccaga atcctectgt cctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccaccctg cagtctgacc aggaggagat tgactatgat gataccatct ctgtggagat gaagaaggag gactttgaca tctatgatga ggatgagaat cagtctccca ggagcttcca gaagaagacc 5 aggcactatt tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag cagctctcct catgtgctga ggaatagggc tcagtctggce tctgtgccce agttcaagaa agtggtgttt caggagttca ctgatggctc tttcacccag cctctgtata ggggggagct gaatgagcac ctggggctgce tgggccccta tatcagggcet gaggtggagg ataacatcat ggtgaccttc aggaaccagg cctctaggcc ctacagcttc tatagcagcc tgatcagcta tgaggaggac cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacttac ttctggaagg tgcagcatca catggccccc accaaggatg agtttgactg taaggcctgg gcctacttct ctgatgtgga tctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggccccectg ctggtgtgcc ataccaatac tctgaaccct gctcatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 5 tttgctctgt tcttcactat ctttgatgag accaagtctt ggtatttcac tgagaatatg gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc cagatggagg accccacctt taaggagaac tataggtttc atgccatcaa tggctacatc atggacaccc tgcctggcect ggtgatggec caggatcaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatggggt ctaatgagaa catccacagc atccacttct ctggccatgt gtttactgtg agaaagaagg aggagtacaa gatggctctg 10 tacaatctgt accctggggt ctttgagact gtggagatgc tgcctagcaa ggctgggatce tggagggtgg agtgcctgat tggggaacat ctgcatgctg ggatgtctac tctgttcctg gtgtacagca acaagtgcca gacccccctg ggcatggctt ctggccatat cagggacttt cagattactg cctctgggca gtatggccag tgggccccca agctggctag gctgcattat tctggcagca tcaatgcctg gtctactaag gagcccttca gectggatcaa ggtggatctg 5 ctggccccca tgatcatcca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gtttagctct ctgtacatta gccagttcat catcatgtac agcctggatg ggaagaagtg gcagacctac aggggcaatt ctactggcac cctgatggtg ttctttggca atgtggacag ctctggcatc aagcacaaca tctttaaccc ccctatcatt gctaggtaca tcaggctgca tcccacccat tacagcatca ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa ctcttgcage atgcccctgg gcatggagag caaggccatt tctgatgccc agattactgc cagcagctac ttcactaaca tgtttgccac ctggtctccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcagg agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggatttccag aagaccatga aggtgactgg ggtgaccacc cagggggtga agagcctgct gactagcatg 5 tatgtgaagg agttcctgat cagctctagc caggatggcc accagtggac tctgtttttc cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc aaccaggact ctttcactcc tgtggtgaac agcctggacc cccccctget gaccaggtat ctgaggattc acccccagte ttgggtgcat cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggatctgta ctga
(9 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVIII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ X09 ‏شكل متباين‎ 10 atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgtctge tgagattttg cttttctgec actaggaggt attacctggg ggctgtggag ctgtcttggg actacatgca gtctgatctg ggggagctgc ctgtggatgc caggttccca cctagggtge ctaagagctt tcccttcaat acctctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt gccaagccta ggcccccectg gatgggcectg ctgggececta ccatccagge tgaagtgtat 15 gacactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gccagccacc ctgtgagcct gcatgctgtg ggggtgtctt actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgatcagac cagccagagg gagaaggaag atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cctatgtctg gcaggtgctg aaggagaatg gccccatggce ctctgatcee ctgtgectga cctactctta cctgagecat gtggacctgg tgaaggatct gaattctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag ggcagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcataagt tcatcctgct gtttgetgtg tttgatgaag ggaagagctg gcactctgag actaagaaca gcctgatgca ggacagggat gctgcttctg ccagggcectg gecccaagatg cacactgtga atggctatgt gaatagaagce ctgcctggcec tgattgggtg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tgggatggge 5 actacccctg aggtgcatag catcttcctg gaaggccata ccttecctggt gaggaatcat aggcaggctt ctctggaaat ttctcccatc actttcctga ctgctcagac cctgctgatg gacctgggcc agttcctgcet gttctgccac atcagctctc accagcatga tgggatggag gcctatgtga aggtggacag ctgtcctgag gagccccage tgaggatgaa gaacaatgag gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt caggtttgat 0 gatgacaata gcccctcttt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagact tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggatt atgcccctct ggtgectggee cctgatgaca ggagctataa gtctcagtac ctgaataatg gcccccagag gattgggagg aagtataaga aggtgaggtt tatggcctac actgatgaga ccttcaagac cagggaggcc atccagcatg agtctggcat cctgggcccce ctgetgtatg gggaggtggg ggatacectg 5 ctgatcatct tcaagaacca ggcctctagg ccctacaata tctaccctca tggcatcact gatgtgagac ccctgtatag caggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggacttc cccatcctge ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatggccce accaagtctg accccaggtg cctgaccagg tattacagct cttttgtgaa catggagagg gatctggcct ctgggcetgat tggcccactg ctgatctget acaaggagtc tgtggatcag aggggcaatc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttttctgt gtttgatgaa aataggtctt ggtatctgac tgagaacatc cagaggtttc tgcccaatcc tgctggggtg cagctggagg atcctgagtt tcaggcctct aatatcatgc attctatcaa tggctatgtg tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgage 5 attggggctc agactgactt cctgtctgtg ttcttttctg gctatacttt caagcacaag atggtgtatg aggacactct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt gttcatgtct atggaaaatc ctgggctgtg gattctgggc tgccacaatt ctgacttcag gaataggggg atgactgccc tgctgaaggt gtctagctgt gataagaaca ctggggatta ctatgaggac tcttatgaag atatctctgc ctatctgctg agcaagaaca atgccattga gcccaggage 10 ttcagccaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccactctg cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacactatct ctgtggagat gaagaaggag gattttgaca tttatgatga ggatgagaac cagtctccca ggagcttcca gaagaagacc aggcattact ttattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atgggatgag cagctctcct catgtgctga ggaacagggc ccagtctggg tctgtgccce agttcaagaa ggtggtgttc 5 caggagttca ctgatgggag cttcacccag cccctgtata ggggggagcet gaatgagcac ctgggcectge tgggcecccta catcagggcet gaggtggagg ataatatcat ggtgaccttc aggaaccagg ctagcaggcc ttacagcttt tacagcagcc tgatctctta tgaagaagac cagaggcagg gggctgagcc caggaagaat tttgtgaagc ctaatgagac caagacttat ttttggaagg tgcagcatca catggctcct accaaggatg agtttgactg caaggcctgg gcctactttt ctgatgtgga tctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggccctctg ctggtgtgcc atactaacac tctgaaccct gcccatggga ggcaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tettcactat ttttgatgag accaagtctt ggtatttcac tgagaacatg gagaggaact gcagggctcc ctgcaacatc cagatggaag accccacctt caaggagaac 5 tataggttcc atgccatcaa tgggtacatc atggataccc tgcctggcect ggtgatggec caggatcaga ggattaggtg gtatctgctg agcatgggct ctaatgagaa catccacagc atccatttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggctctg tacaacctgt atcctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatc tggagggtgg aatgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgagcac tetgttcctg 10 gtgtatagca acaagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctggccatat cagggatttc cagatcactg cttctggcca gtatggccag tgggccccca agctggccag gctgcactat tctggcagca tcaatgcctg gagcactaag gagccttttt cttggatcaa ggtggacctg ctggcccecta tgattattca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttctctage ctgtacatct ctcagttcat cattatgtat agcctggatg gcaagaagtg gcagacctac 5 aggggcaata gcactggcac cctgatggtg ttttttggga atgtggactc ttctgggatc aagcacaaca tctttaaccc ccccatcatt gccaggtata ttaggctgca ccccacccac tacagcatca ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgatctgaa ttcttgctct atgcccctgg gcatggagag caaggccatc tctgatgccc agatcactge cagctcttac ttcaccaaca tgtttgccac ctggtctcct agcaaggcca ggctgcatct gcagggcagg agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag aagaccatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gacctctatg tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagc caggatggcc accagtggac tctgttcttc cagaatggga aggtgaaggt gttccagggc aaccaggata gctttaccce tgtggtgaac 5 agcctggacc ctcctetget gaccagatac ctgaggatcc atcctcagag ctgggtgcac cagattgccc tgaggatgga ggtgctggge tgtgaggccc aggatctgta ctga (10 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ X10 ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgagcac ttgcttcttc ctgtgcctge tgaggttctg cttttctgct actaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg attacatgca gtctgacctg 10 ggggagctgc cagtggatgc caggttccce cccagggtge ccaagtcttt tectttcaac acctctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt gccaagccca ggcccccctg gatggggcetg ctggggecca ccatccagge tgaggtgtat gacactgtgg tgattaccct gaagaacatg gctagccacc ctgtgagcct gcatgcetgtg ggggtgagct attggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgatcagac cagccagagg 5 gaaaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccata cttatgtgtg gcaggtgcetg aaggagaatg ggcccatggc ctctgacccc ctgtgcctga cttacagcta tctgagccat gtggacctgg tgaaggatct gaactctggc ctgattgggg ctctgctggt gtgcagggag ggcagcctgg ctaaggagaa gactcagact ctgcataagt tcatcctgcet gtttgetgtg tttgatgaag gcaagagctg gcactctgag accaagaact ctctgatgca ggatagggat gctgcctetg ccagggcttg gecccaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggagce ctgcctggcece tgattgggtg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatggge accacccctg aggtgcacag cattttcctg gagggccaca ccttectggt gaggaatcac aggcaggcca gcctggagat cagccccatc accttcctga ctgcccagac cetgetgatg 5 gacctggggc agtttctgcet gttctgccac atcagcagec atcagcatga tggcatggag gcctatgtga aggtggactc ttgccctgag gagccccagce tgaggatgaa gaacaatgag gaggctgagg attatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaata gccccagctt catccagatt aggtctgtgg ccaagaagca ccctaagacc tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggatt atgcccccect ggtgetgget 10 cctgatgaca ggtcttataa gagccagtac ctgaacaatg ggccccagag gattggcagg aagtacaaga aggtgaggtt catggcttac actgatgaga ccttcaagac tagggaggcc atccagcatg agtctggcat cctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggataccctg ctgatcatct tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tttaccctca tggcatcact gatgtgaggc ccctgtacag caggagactg cccaaggggg tgaagcacct gaaggatttt 5 cccattctge ctggggagat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggccce accaagtctg atcccaggtg cctgactagg tactactctt cttttgtgaa tatggagagg gatctggcct ctggcctgat tggccccectg ctgatctget acaaggagtc tgtggaccag aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag aataggagct ggtacctgac tgagaatatc cagaggttcc tgcctaatcc 12-1999916 cagctggagg atcctgagtt ccaggctagc aacattatgc acagcatcaa tggctatgtg tttgattctc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cttactggta catcctgtct attggggccc agactgattt cctgtctgtg ttcttctctg gectacacttt caagcataag atggtgtatg aggataccct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt gttcatgtct 5 atggagaacc ctggcctgtg gatcctgggce tgtcataact ctgacttcag aaacaggggc atgactgccc tgctgaaggt gagcagctgt gacaagaaca ctggggacta ctatgaggac agctatgagg atatctctgc ttatctgctg agcaagaata atgccattga gcccaggage ttcagccaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcactag gactaccctg cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacaccatct ctgtggagat gaagaaggag 10 gactttgaca tctatgatga ggatgagaac cagtccccca ggtctttcca gaagaagacc aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctctagcccc catgtgctga ggaacagggc tcagtctggc tctgtgccce agttcaagaa ggtggtcttc caggagttca ctgatggctc ttttacccag cctctgtaca gaggggagct gaatgagcac ctgggcctge tgggcecccta catcagggcet gaggtggagg ataatatcat ggtgaccttc 5 agaaaccagg cctctaggcc ctacagcttc tacagcagcc tgatctctta tgaggaggat cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac ttctggaagg tgcagcacca tatggcccct actaaggatg agtttgactg caaggcectgg gcttattttt ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctgggctgat tggcccectg ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tettcactat ctttgatgag accaagagct ggtacttcac tgagaacatg gagagaaatt gtagggctcc ctgcaatatc cagatggagg accccacctt caaagaaaat tacagattcc atgccatcaa tgggtacatc atggataccc tgcctgggcet ggtgatggct caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatggggt ctaatgagaa catccactct 5 atccatttct ctggccatgt gttcactgtg agaaagaagg aggagtataa gatggctctg tacaacctgt acccaggggt gtttgagact gtggaaatgc tgcccagcaa agctgggatc tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgtctac cctgttectg gtgtacagca acaagtgcca gactcccctg ggcatggcect ctgggcacat cagggatttt cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggccccca agctggecag getgcactac 10 tctggcagca ttaatgcttg gagcactaag gagcccttca gctggatcaa ggtggatctg ctggccccca tgatcatcca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttctctage ctgtacattt ctcagttcat catcatgtac agcctggatg ggaagaagtg gcagacctac agggggaaca gcactgggac cctgatggtg ttctttggca atgtggatag ctctggcatc aagcacaata tcttcaatcc ccccattatt gccaggtaca ttaggctgca tectactcac 5 tactctatta ggagcaccct gaggatggag ctgatggggt gtgacctgaa cagctgttct atgcccctgg gcatggagtc taaggctatc tctgatgccec agatcactge cagcagctac ttcactaata tgtttgccac ctggagccct agcaaggcca gactgcacct gcagggcagg agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag aagaccatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gaccagcatg tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagc caggatggcc accagtggac cctgttcttc cagaatggga aggtgaaggt gttccagggc aaccaggact ctttcacccc tgtggtgaac agcctggatc ctcccctget gaccaggtac ctgaggatcc acccccagag ctgggtgcac cagattgctc tgaggatgga agtgctgggc tgtgaggccc aggatctgta ctga 5 (11 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ X11 ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgcectge tgaggttttg cttctctgcet accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg actatatgca gtctgacctg ggggagctgc ctgtggatgc taggttccct cccagggtge ccaagagctt cccctttaat acctctgtgg tgtacaagaa aaccctgttt gtggagttca ctgaccatct gttcaacatt 10 gccaagccca ggceccccttg gatgggcectg ctgggcccca ccattcagge tgaggtgtat gacactgtgg tcattaccct gaagaacatg gcttctcacc ctgtgagcct gcatgctgtg ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg gagaaggagg atgataaggt gttccctggg ggcagccaca cctatgtgtg gcaggtgctg aaggagaatg gccccatggc ctctgatcce ctgtgectga cctactctta tetgtctcat 15 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ctctgetggt gtgcagggag ggctctctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt ttattctgct gtttgctgte tttgatgagg gcaagagctg gcattctgag accaagaaca gcctgatgca ggacagggat gctgcctetg ccagggcectg gcccaaaatg cacactgtga atggctatgt gaacaggage ctgcctggcece tgattggcetg ccacaggaag tetgtgtact ggcatgtgat tggcatggge accacccctg aggtgcacag catcttcctg gagggccaca cctttctggt gaggaatcac aggcaggcca gcctggagat tagccccatc accttcctga ctgcccagac cetgetgatg gacctgggcc agttcctgcet gttctgccac atcagcagcc accagcatga tggcatggag gcctatgtga aggtggatag ctgccctgag gagccccage tgaggatgaa aaacaatgag 5 gaggctgagg attatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaata gccccagctt tattcagatt aggtctgtgg ctaagaagca ccccaagact tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggact atgcccctct ggtcctggece cctgatgata ggtcttacaa gagccagtat ctgaacaatg gcccccagag gattggcagg aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga cctttaagac cagggaggcc 10 attcagcatg agtctgggat cctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacactctg ctgatcatct tcaagaacca ggccagcagg ccttataaca tctaccctca tgggatcact gatgtgaggc ccctgtactc tagaaggctg cccaaggggg tcaagcacct gaaggatttt cccatcctge ctggggagat tttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggccce accaagtctg accctaggtg cctgaccagg tactacagct cttttgtgaa catggagagg 5 gacctggcct ctggcctgat tggccctcetg ctgatttgect acaaggagtc tgtggaccag aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttttctgt gtttgatgag aacaggtctt ggtacctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcctaaccc agctggggtg cagctggagg atcctgagtt ccaggccagc aatattatgc atagcattaa tggctatgtg tttgatagcc tgcagctgte tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgage attggggccc agactgactt tctgtctgtg ttcttctctg gectacacctt 89 atggtgtatg aggacaccct gactctgttc cctttttctg gggagactgt gtttatgagc atggagaatc ctggcctgtg gatcctgggce tgccataatt ctgacttcag gaacaggggce atgactgccc tgctgaaagt gagcagcetgt gacaagaata ctggggacta ctatgaagac 5 agctatgagg acatctctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcccaggagce ttcagccaga accccccagt gctgaagagg caccagagag agatcaccag gactaccctg cagtctgacc aggaggagat tgactatgat gacaccattt ctgtggagat gaagaaggag gactttgaca tttatgatga ggatgagaat cagagcccca ggagcttcca gaagaagact aggcactatt ttattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag cagctctccc 0 catgtgctga ggaatagggc ccagtctggce tctgtgectc agttcaagaa ggtggtgtte caggagttca ctgatggcag ctttacccag cccctgtata ggggggagcet gaatgagcac ctgggcctge tgggccccta tatcagggcet gaggtggagg acaatattat ggtgaccttt aggaaccagg ccagcaggcc ctactctttc tatagcagcc tgatcagcta tgaggaggac cagaggcagg gggctgagcc caggaagaat tttgtgaagc ctaatgagac caagacctac 5 ttctggaagg tgcagcatca catggccccc accaaggatg agtttgactg caaggcttgg gcctatttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggccccctg ctggtgtgcc acactaacac tctgaatcct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag accaagagct ggtacttcac tgagaacatg gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc cagatggagg atcccacctt caaggagaac tacaggtttc atgccatcaa tggctacatc atggacactc tgcctggcect ggtgatggcec caggatcaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatgggct ctaatgagaa tatccatagc atccacttct ctggccatgt gttcactgtc aggaagaagg aggagtacaa gatggctctg tataatctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatc 5 tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg ggatgagcac cctgtttctg gtgtactcta acaagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctgggcacat cagggatttc cagatcactg cttctggcca gtatggccag tgggccccca agectggccag getgcactac tctggcagca tcaatgcctg gtctaccaag gagccctttt cttggattaa ggtggacctg ctggccccca tgatcatcca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttcagcage 10 ctgtacatca gccagttcat catcatgtac agcctggatg gcaaaaagtg gcagacctac aggggcaata gcactgggac tctgatggtg ttctttggca atgtggacag ctctgggatc aagcacaata tcttcaaccc tcccatcatt gctaggtaca tcaggctgca ccccacccac tatagcatca ggtctaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa ctcttgcagce atgcccctgg gecatggagtc caaagctatc tctgatgcce agattactge cagcagctac 5 ttcaccaaca tgtttgccac ctggtctccc tctaaggcca ggctgcacct gcagggcagg agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaat cccaaggagt ggctgcaggt ggatttccag aaaactatga aggtgactgg ggtgaccacc cagggggtga agtctctgct gaccagcatg tatgtgaagg agttcctgat ctcttctagc caggatggcc accagtggac tctgttctte cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc aaccaggaca gcttcacccc tgtggtgaac tctctggatc cccceectget gaccaggtac ctgaggattc atccccagag ctgggtgecac cagattgctc tgagaatgga ggtgctgggg tgtgaggctc aggacctgta ttga )12 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ X12 ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgtctac ttgttttttt ctgtgcctge tgaggttctg ctictctgecc 5 accaggaggt attacctggg ggctgtggag ctgagctggg attacatgca gtctgatctg ggggagctgc ctgtggatgc caggttccce cccagggtge ccaagagctt 060110886 acctctgtgg tgtataagaa gaccctgttt gtggagttca ctgatcatct gtttaacatt gccaagccca ggcccccctg gatgggcectg ctgggceccaa ctatccagge tgaggtgtat gacactgtgg tcatcaccct gaagaatatg gccagccatc ctgtgagect gecatgetgtg 10 ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cctatgtgtg gcaggtgcetg aaggagaatg gccccatggc ctctgaccce ctgtgectga cttatagcta cctgtctcat gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt ctgtagggaa ggcagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt ttattctgcet gtttgetgtg 5 tttgatgaag gcaagagctg gcactctgag accaagaatt ctctgatgca ggatagggat gctgcctetg ccagggcectg gcccaagatg catactgtga atggctatgt gaacagaagce ctgcctggcec tgattggcetg ccataggaag tctgtgtatt ggcatgtgat tgggatgggce actacccctg aagtgcacag cattttcctg gagggccaca ctttcctggt gaggaaccac aggcaggcct ctctggagat cagccccatt actttcctga ctgcccagac cctgetgatg gatctgggcc agttcetgct gttctgeccac atctctagec accagcatga tggcatggag gcctatgtga aggtggacag ctgccctgag gagccccage tgaggatgaa gaataatgag gaggctgagg attatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgataata gccccagctt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca tcccaagacc 5 tgggtgcact atattgctgc tgaagaggag gactgggact atgcccctct ggtgetggcet cctgatgaca ggagctataa gagccagtat ctgaacaatg ggccccagag gattgggagg aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga cctttaagac cagggaggcc atccagcatg agtctggcat tctggggccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacactctg ctgatcattt tcaagaacca ggccagcagg ccctacaata tttaccccca tggcatcact 10 gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcacct gaaggacttc cccatcctge ctggggagat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggccct accaagtctg accctaggtg tctgactagg tactacagca gctttgtgaa catggagaga gacctggctt ctggcctgat tggccccectg ctgatctget acaaggagtc tgtggatcag aggggcaacc agattatgtc tgataagagg aatgtcatcc tgttctctgt gtttgatgag 5 aacaggagct ggtatctgac tgagaacatt cagaggttcc tgcccaaccc tgctggggtg cagctggagg accctgagtt ccaggccagc aacatcatgc attctattaa tggctatgtg tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgectg catgaggtgg cctactggta catcctgage attggggccc agactgactt tctgtctgtg tttttctctg ggtacacctt caagcacaag atggtctatg aggacaccct gaccctgttc cccttttctg gggaaactgt gtttatgage atggagaacc ctgggcetgtg gatcctgggce tgccacaact ctgactttag gaataggggce atgactgccc tgctgaaggt gagcagctgt gacaagaata ctggggatta ctatgaggac agctatgagg atatctctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcctaggagce ttcagccaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccaccctg 5 cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacaccatct ctgtggagat gaagaaggag gactttgata tttatgatga ggatgagaac cagagcccca ggagcttcca gaagaagacc aggcactatt tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctctagcccc catgtgctga ggaacagggc ccagtctggce tctgtgccece agttcaagaa ggtggtgtte caggaattta ctgatggcag ctttacccag cccctgtaca gaggggagct gaatgagcac 10 ctgggcctge tgggcccecta catcagggcet gaggtggagg ataatatcat ggtgaccttt aggaaccagg cctctaggcc ctattctttt tacagcagcc tgatcagcta tgaggaggac cagaggcagg gggctgagcc taggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac ttttggaaag tgcagcacca catggccccc actaaggatg agtttgattg caaggcectgg gcctatttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggcceectg 5 ctggtgtgcc acaccaacac tctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tctttaccat ctttgatgag actaagagct ggtatttcac tgagaacatg gagaggaact gcagagcccc ttgcaacatc cagatggagg accctacctt caaggagaac tataggttcc atgccatcaa tgggtacatc atggataccc tgcctggcect ggtgatggct caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatgggga gcaatgagaa cattcatagc atccacttct ctgggcatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtataa gatggccctg tacaacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcate tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgagcac tctgttectg gtgtacagca acaagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctggccacat cagggacttc 5 cagattactg cctctgggca gtatgggcag tgggccccca agctggccag gcetgcactac tctgggtcta tcaatgcttg gagcaccaag gagcctttca gctggatcaa ggtggatctg ctggccccca tgatcattca tgggatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttcagcagce ctgtatattt ctcagttcat catcatgtat tctctggatg gcaaaaagtg gcagacctat agagggaaca gcactgggac cctgatggtg ttttttggca atgtggatag ctctggcatc 10 aagcacaata tcttcaaccc ccccattatt gccaggtaca tcaggctgca ccccacccac tactctatca ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgatctgaa cagctgctct atgcctctgg ggatggaaag caaggccatc tctgatgccc agatcactgc cagcagctat ttcaccaata tgtttgccac ttggagccct agcaaggcta ggctgcatct gcagggcagg tctaatgcct ggaggceccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 5 aagactatga aagtgactgg ggtgaccacc cagggggtga aaagcctgct gaccagcatg tatgtgaagg agttcctgat tagcagcagc caggatggcc accagtggac cctgttcttc cagaatggga aggtgaaggt gtttcagggc aatcaggata gcttcacccc agtggtgaac agcctggacc cccccctget gaccaggtac ctgaggatcc acccccagag ctgggtgcac cagattgccc tgaggatgga ggtgctggge tgtgaggccc aggatctgta ctga )13 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ X13 ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgagcac ctgctttttc ctgtgcctge tgaggttctg cttctctgcet accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgtcttggg attacatgca gtctgacctg ggggagctgc ctgtggatgc caggtttcce cccagggtge ccaagtcttt ccectttaac 5 acctctgtgg tgtataagaa gactctgttt gtggagttca ctgatcacct gttcaatatt gccaagccca ggceccccttg gatgggcectg ctgggcccca ctatccagge tgaggtgtat gacactgtgg tcatcaccct gaagaacatg gccagccacc ctgtgagcect gcatgcetgtg ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg gagaaggagg atgacaaggt gttcccaggg gggtctcaca cttatgtgtg gcaggtgctg 10 aaggagaatg ggcccatggc ctctgaccct ctgtgcctga cttatagcta cctgtctcat gtggatctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag gggagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt tcatcctgcet gtttgetgtg tttgatgagg ggaagagctg gcactctgag accaagaata gcctgatgca ggacagggat gctgcttctg ctagggcectg gectaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggage 5 ctgcctggcece tgattgggtg tcacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatgggg actactccag aagtgcacag catcttcctg gaggggcaca ccttcectggt gaggaatcac aggcaggcca gcctggagat ttctcccatc actttcctga ctgcccagac cetgetgatg gatctggggc agttcctgcet gttctgccac atcagcagec atcagcatga tgggatggag gcctatgtga aggtggacag ctgccctgag gagcctcage tgaggatgaa gaacaatgag gaggctgagg actatgatga tgatctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaact ctcccagctt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggatt atgctcccct ggtgetggct cctgatgata ggagctacaa gagccagtat ctgaataatg ggccccagag gattggcagg 5 aagtataaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga cctttaagac cagggaggct attcagcatg agtctggcat cctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg ctgatcattt tcaagaacca ggccagcagg ccctataaca tctatcccca tgggatcact gatgtgaggc ccctgtactc taggaggctg cccaaggggg tcaagcacct gaaggacttc cccatcctge ctggggagat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggccce 10 actaagtctg accccaggtg cctgactagg tactacagca gctttgtgaa catggagaga gatctggcct ctggcctgat tggccccectg ctgatctget acaaagagtc tgtggatcag aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag aacagaagct ggtacctgac tgagaacatt cagaggtttc tgcccaaccc tgctggggtc cagctggagg accctgagtt tcaggccagc aacatcatgc acagcatcaa tgggtatgtg 5 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta tatcctgage attggggccc agactgattt cctgtctgtg ttcttctctg gectacacttt caagcacaag atggtgtatg aggataccct gaccctgttc cctttctctg gggaaactgt gttcatgagce atggagaacc ctgggcetgtg gatcctgggg tgccacaatt ctgatttcag gaacagaggc atgactgctc tgctgaaggt gtctagctgt gacaagaaca ctggggacta ctatgaggac agctatgagg acatctctgc ctacctgctg agcaagaaca atgctattga acccaggtct ttcagccaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcactag gaccaccctg cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacaccatct ctgtggagat gaagaaggag gactttgaca tctatgatga ggatgagaat cagtctccca ggagcttcca gaagaagact 5 aggcattact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctctagccct catgtgctga ggaacagggc ccagtctggce tctgtgccece agttcaagaa ggtggtgttt caggagttca ctgatggcag cttcacccag cccctgtaca ggggggagct gaatgagcat ctgggcctge tgggcccecta catcagggcet gaggtggagg acaacatcat ggtgacctte agaaatcagg ctagcaggcc ctacagcttc tacagcagcc tgatctctta tgaggaggac 10 cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctat ttctggaagg tgcagcacca catggccccc accaaggatg agtttgattg caaggcectgg gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcatt ctgggctgat tggccctctg ctggtgtgcc acaccaacac cctgaatcct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag tttgccectgt tetttactat ctttgatgag accaagtctt ggtattttac tgagaacatg 15 gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc cagatggagg accccacctt caaggagaac tacagattcc atgccatcaa tggctacatt atggacactc tgcctggcect ggtgatggcc caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg tctatgggca gcaatgagaa cattcactct atccacttct ctgggcatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg tacaacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcctagcaa 992-10993816 tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgtctac cctgttectg gtgtacagca acaagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctggccacat cagagatttt cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggctccta agctggccag getgcactac tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag gagcccttta getggatcaa ggtggacctg ‏م‎ ‎ctggccccca tgatcatcca tggcatcaag actcaggggg ccaggcagaa gttctctage ctgtacatta gccagttcat catcatgtat agcctggatg gcaagaagtg gcagacctac aggggcaaca gcactgggac cctgatggtg ttctttggga atgtggacag ctctgggatc aagcacaata tcttcaaccc ccccattatt gccaggtata ttaggctgca ccccactcac tacagcatta ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgatctgaa cagctgcage 10 atgcccctgg gcatggagtce taaggccatc tctgatgccc agatcactgc cagctcttac ttcaccaaca tgtttgccac ttggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcagg agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggatttccag aagactatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gactagcatg tatgtgaagg agttcctgat cagctctagc caggatggcc accagtggac cctgttettt 15 cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc aaccaggact ctttcacccc tgtggtgaat tctctggacc ctceectget gactaggtat ctgaggattc atccccagag ctgggtgceat cagattgccc tgaggatgga ggtgctggge tgtgaggccc aggacctgta ttga (14 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVIII ‏يشفر‎ CPG ‏لحمض نووي منخفض‎ X14 ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgectge tgaggttttg cttttctgee actaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgtcttggg attacatgca gtctgacctg ggggagctgc cagtggatgc caggttcccc ccaagggtge ccaagtcttt tcccttcaat acctctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttta ctgatcatct gtttaacatt gccaagccca ggcccccectg gatggggetg ctgggeccca ccatccagge tgaggtgtat 5 gatactgtgg tgattaccct gaagaatatg gccagccatc ctgtgtctct gcatgcetgtg ggggtgtctt attggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgatcagac cagccagagg gagaaggagg atgataaggt gttccctggg ggctctcaca cctatgtgtg gcaggtgctg aaggagaatg ggcctatggc ctctgaccca ctgtgcctga cttacagcta tctgagccat gtggacctgg tgaaggacct gaactctggg ctgattgggg ccctgctggt gtgcagggag 10 ggcagcctgg ccaaggagaa gactcagacc ctgcacaagt tcatcctgct gtttgetgtg tttgatgagg gcaagtcttg gcactctgag accaagaaca gcctgatgca ggatagggat gctgcctetg ccagggcectg gcccaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggtcet ctgcctggcece tgattggcetg ccacaggaag tetgtgtact ggcatgtgat tggcatggge accacccctg aggtgcatag cattttcctg gagggccaca ccttectggt gaggaaccac 5 aggcaggcta gcctggagat cagccccatc actttcctga ctgcccagac cctgctgatg gacctgggcc agttcctgcet gttctgccac atctctagcc accagcatga tggcatggag gcctatgtga aggtggactc ttgtcctgag gagccccage tgaggatgaa gaacaatgag gaggctgagg attatgatga tgatctgact gattctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaaca gcccctcttt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggatt atgccccect ggtgetggec cctgatgaca ggagctataa gtctcagtac ctgaacaatg gcccccagag aattggcagg aagtacaaga aggtgaggtt catggcctat actgatgaga ccttcaaaac cagggaggcc attcagcatg agtctggcat cctggggccc ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccetg 5 ctgatcatct tcaagaacca ggctagcagg ccttacaaca tctaccccca tgggatcact gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggacttt cccattctgc ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatgggccc accaagtctg accccaggtg cctgactagg tactactcta gctttgtgaa catggagagg gacctggcct ctgggctgat tggccccectg ctgatctgtt acaaggagtc tgtggaccag 0 aggggcaacc agatcatgtc tgataagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag aacaggagct ggtacctgac tgagaacatc cagagattcc tgcccaaccc tgctggggtg cagctggagg atcctgagtt ccaggccagc aacatcatgc attctatcaa tgggtatgtg tttgatagcc tgcagctgtce tgtgtgtctg catgaggtgg cctactggta cattctgage attggggccc agactgactt cctgtctgtg ttcttctctg gcetacacttt caaacacaag 5 atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt gtttatgage atggagaacc ctgggctgtg gattctgggc tgccacaact ctgacttcag 33886809996 atgactgccc tgctgaaggt gtcttcttgt gataagaaca ctggggacta ttatgaagac agctatgagg acatctctgc ctacctgctg agcaagaata atgctattga gcccaggtct ttctctcaga accccccetgt 01-11389038909 caccagaggg agatcaccag gaccaccctg cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacactattt ctgtggagat gaagaaggaa gactttgata tctatgatga ggatgagaac cagagcccta ggagcttcca gaagaagact aggcattact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag cagcagcccc catgtgctga ggaatagggc tcagtctggce tctgtgcctc agttcaagaa ggtggtgtic 5 caggaattca ctgatggcag cttcactcag cccctgtaca ggggggagct gaatgagcac ctggggctgce tgggcecctta catcagggcet gaggtggagg acaatatcat ggtgaccttt aggaaccagg cctctaggcc ttacagcttc tactctagcc tgatctctta tgaagaggac cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac taagacttac ttctggaagg tgcagcacca catggctccc accaaggatg agtttgactg caaggcttgg 10 gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctgggctgat tgggccectg ctggtgtgcc acactaacac tctgaatcct gcccatggca gacaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tttttaccat ctttgatgag actaagtctt ggtacttcac tgagaacatg gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc cagatggagg atcccacctt caaggagaac tacaggtttc atgccatcaa tggctacatc atggacaccc tgcctggect ggtgatgget 5 caggaccaga ggattaggtg gtatctgctg agcatgggca gcaatgagaa tatccactct atccacttct ctgggcatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg tataacctgt atcctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatc tggagagtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgagcac tctgtttctg gtgtatagca acaagtgtca gacccctctg ggcatggcect ctgggcacat tagggacttt cagatcactg cttctggcca gtatgggcag tgggctccca agctggccag gctgcactat tctggcagca ttaatgcctg gagcaccaag gagcctttca gctggatcaa ggtggacctg ctggccccca tgatcatcca tgggatcaag acccaggggg ctaggcagaa gttcagcagce ctgtacatca gccagtttat catcatgtat tctctggatg gcaagaagtg gcagacctac 5 aggggcaatt ctactggcac tctgatggtg ttctttggga atgtggatag ctctgggatc aagcataata tcttcaatcc ccccattatt gctaggtata tcaggctgca ccccacccac tatagcatca ggagcaccct gaggatggag ctgatggggt gtgacctgaa cagctgcage atgcccctgg gcatggagag caaggctatt tctgatgccc agatcactge cagcagctac tttactaata tgtttgccac ctggagcccc agcaaggcca gactgcacct gcagggcagg 10 tctaatgcct ggaggcectca ggtgaataac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag aaaaccatga aggtgactgg ggtgactacc cagggggtga agtctctgct gaccagcatg tatgtgaagg agttcctgat ctcttctagc caggatggcc accagtggac cctgttcttt cagaatggga aggtgaaggt cttccagggc aaccaggata gcttcacccc tgtggtgaat agcctggatc ctcctetget gaccaggtat ctgaggatcc acccccagag ctgggtgecat 15 cagattgccc tgaggatgga ggtgctggge tgtgaggctc aggacctgta ctga (15 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ X15 ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgagcac ctgtttcttc ctgtgcctge ‏و1089911-1‎ 1-1026 actaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg actatatgca gtctgacctg ggggagctgc ctgtggatgc caggttccce cccagggtge ctaagagctt ccecttcaat acttctgtgg tgtacaagaa gactctgttt gtggagttta ctgaccacct gttcaacatt gctaagccca ggccteectg gatggggcetg ctgggcccca ccatccaggce tgaggtgtat gatactgtgg tgattaccct gaagaacatg gcctctcatc cagtgagcct gcatgctgtg ggggtgagct actggaaggc ctctgaaggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg 5 gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cctatgtgtg gcaggtgcetg aaggagaatg gcccaatggc ctctgacccce ctgtgcctga cttatagcta cctgagccat gtggatctgg tgaaggacct gaattctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagagag ggctctctgg ctaaggagaa gacccagact ctgcacaagt tcatcctget gtttgetgtg tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag actaagaata gcctgatgca ggacagggat 0 gctgcttctg ccagggcectg gecccaagatg catactgtga atggctatgt gaacaggagce ctgcctggcece tgattggctg tcacaggaaa tctgtctact ggcatgtgat tgggatgggce actacccctg aggtgcactc tatcttcctg gagggccata ccttecctggt gaggaaccac aggcaggcca gcctggagat ctctcecatt accttcctga ctgcccagac cctgcetgatg gatctgggcc agttcetget gttctgccac atcagcagec accagcatga tgggatggag 5 gcttatgtga aggtggatag ctgccctgag gagccccagce tgaggatgaa gaacaatgag gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaact ctcccagctt tattcagatc aggtctgtgg ctaagaagca ccccaagact tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gactgggact atgcccctct ggtgectggct cctgatgaca ggtcttacaa gtctcagtac ctgaataatg gccctcagag gattggcagg aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga ccttcaagac cagggaggcc atccagcatg agtctggcat cctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggataccctg ctgatcatct tcaagaatca ggccagcagg ccctacaaca tctaccccca tggcatcact gatgtgaggc cactgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcatct gaaggacttc 5 cccattctgc ctggggagat cttcaagtac aaatggactg tgactgtgga ggatggccct accaagtctg accccaggtg tctgaccagg tactacagca gctttgtgaa tatggagagg gacctggcct ctggcctgat tggcccectg ctgatctget acaaggagtc tgtggaccag aggggcaatc agatcatgtc tgataagagg aatgtgattc tgttctctgt gtttgatgag aacaggagct ggtacctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcccaatcc tgctggggtg 10 cagctggagg accctgagtt ccaggccagc aatatcatgc acagcatcaa tggctatgtc tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cttactggta tattctgagce attggggccc agactgattt cctgtctgtg ttcttttctg gctatacctt taagcacaag atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt gttcatgtct atggagaacc ctgggctgtg gatcctgggce tgccacaact ctgacttcag gaacaggggg 5 atgactgccc tgctgaaggt gtctagctgt gataagaaca ctggggacta ttatgaggac agctatgagg acatctctgc ttacctgctg agcaagaaca atgccattga gcccaggtet ttcagccaga atcccccetgt gctgaagagg catcagaggg agatcaccag gaccaccctg cagtctgatc aggaggagat tgattatgat gacactatct ctgtggaaat gaagaaggag gactttgaca tctatgatga ggatgagaac cagagcccca ggagcttcca gaagaagacc aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggatt atggcatgag cagctctccc catgtgctga ggaacagagc ccagtctggce tctgtgcctc agttcaagaa ggtggtcttc caggagttca ctgatggctc tttcacccag cccctgtaca ggggggagct gaatgagcac ctgggcctge tggggceccta cattagggcet gaggtggagg ataacatcat ggtgactttc 5 agaaaccagg ccagcaggcc ttacagcttt tactcttctc tgattagcta tgaggaggat cagaggcagg gggctgagcc taggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctat ttctggaagg tgcagcacca catggctccc actaaggatg agtttgactg caaggcttgg gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctggcectgat tgggcccctg ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 0 tttgccctgt tcttcaccat ctttgatgag actaagagct ggtacttcac tgagaacatg gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc cagatggagg accccacctt caaggagaat tacaggttcc atgccatcaa tggctacatt atggacaccc tgcctggect ggtgatggcee caggatcaga ggatcaggtg gtatctgctg agcatgggct ctaatgagaa catccacagc atccacttct ctggccatgt gtttactgtg aggaagaagg aggaatacaa gatggctctg 5 tataacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctgggatc tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg ggatgagcac cctgttcctg gtgtatagca ataagtgcca gacccccctg ggcatggctt ctggccacat cagggatttc cagatcactg cttctggcca gtatggccag tgggctccca agctggctag getgcattac tctgggtcta tcaatgcctg gagcactaag gagcccttca gctggatcaa ggtggacctg ctggccccca tgatcattca tggcatcaag acccaggggg ctaggcagaa gttcagcagce ctgtacatca gccagttcat cattatgtac agcctggatg gcaagaagtg gcagacttac aggggcaata gcactgggac tctgatggtg ttctttggca atgtggactc ttctggcatc aagcacaaca tcttcaaccc tcccatcatt gccaggtaca ttaggctgca ccctacccac 5 tactctatca ggagcaccct gaggatggag ctgatggggt gtgatctgaa ctcttgcage atgcctctgg gcatggaaag caaagccatc tctgatgccc agatcactgce ctctagctat ttcaccaata tgtttgccac ctggagccct agcaaggcca ggctgcacct gcagggcaga tctaatgcct ggaggcccca ggtgaacaat cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag aagaccatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gactagcatg 10 tatgtgaagg agttcctgat ctcttctagc caggatggcc accagtggac cctgttcttc cagaatggca aggtgaaagt gttccagggc aaccaggata gcttcactcc tgtggtgaac tctctggacc ctceectget gactaggtac ctgaggattc atccccagag ctgggtgcac cagattgccc tgaggatgga ggtgctggge tgtgaggccc aggatctgta ctga
)16 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏يشفر‎ CpG ‏لحمض نووي منخفض‎ X16 ‏شكل متباين‎ 15 atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgcctge tgaggttctg cttctetgee accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgtcttggg actatatgca gtctgacctg ggggagctgc cagtggatgc caggttccce cccagggtge ccaagagctt tectttcaac acttctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttca ctgaccacct gttcaatatt gctaagccca ggccaccctg gatgggectg ctgggceccta ccattcagge tgaggtgtat gacactgtgg tgattactct gaagaatatg gccagccacc ctgtgagcct gcatgcetgtg ggggtgtctt actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgatcagac ttctcagagg gagaaggagg atgataaggt gttccctggg ggctctcaca cttatgtgtg gcaggtgctg aaggagaatg gccccatggc ttctgatcca ctgtgcectga cctactctta cctgagecat 5 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag ggcagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcataagt tcatcctgcet gtttgetgtg tttgatgagg ggaagagctg gcactctgag accaagaatt ctctgatgca ggacagggat gctgcctetg ccagggcectg gectaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggtcet ctgcctggcece tgattggctg ccacaggaag tetgtgtact ggcatgtgat tggcatggge 0 actacccctg aggtgcacag cattttcctg gagggccaca ccttcctggt caggaaccat aggcaggcct ctctggagat cagccccatc actttcctga ctgcccagac cctgcetgatg gacctgggcc agttcctgcet gttctgccac attagcagcc accagcatga tggcatggag gcctatgtga aggtggactc ttgccctgag gagccccagce tgaggatgaa gaacaatgag gaagctgagg attatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat 5 gatgacaaca gccccagctt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggact atgctcccct ggtgetggcet cctgatgata ggagctacaa gtctcagtac ctgaataatg gcccccagag gattggcagg aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga ccttcaagac cagagaggct atccagcatg agtctgggat cctggggccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg ctgatcatct tcaagaacca ggccagcaga ccctacaaca tctaccccca tgggatcact gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggacttc cccatcctge ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatgggccc accaagtctg accctaggtg cctgactagg tactactcta gctttgtgaa catggagagg 5 gacctggcct ctggcctgat tggccceectg ctgatttget acaaggagte tgtggatcag aggggcaatc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag aataggtctt ggtacctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcctaatcc tgctggggtg cagctggagg accctgagtt tcaggccagc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtg tttgactctc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cttactggta tatcctgage 10 attggggctc agactgactt cctgtctgtg ttcttttctg gctacacttt taagcacaag atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc cccttttctg gggagactgt gttcatgtct atggagaacc ctgggctgtg gattctgggce tgtcacaact ctgacttcag aaacaggggc atgactgccc tgctgaaggt gtctagctgt gacaagaata ctggggacta ctatgaggac agctatgagg acatttctgc ctatctgctg agcaagaaca atgccattga gcccaggage 5 ttttctcaga atcccccetgt gctgaagagg caccagagag agatcaccag gaccactctg cagtctgatc aggaggagat tgattatgat gacactatct ctgtggagat gaagaaagag gactttgata tctatgatga ggatgagaat cagtctccca ggagcttcca gaagaagact agacactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctctagccct catgtgctga ggaacagggc ccagtctggg tctgtgcccec agttcaagaa ggtggtgttc caggagttca ctgatggcag ctttacccag cccctgtata ggggggagct gaatgagcat ctgggcctge tgggccccta tattagggct gaagtggagg acaacatcat ggtgaccttt aggaaccagg ccagcaggcc ctacagcttt tacagcagcc tgattagcta tgaggaggat cagagacagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac 5 ttctggaagg tgcagcacca catggcccct accaaggatg agtttgactg caaggcctgg gcttacttct ctgatgtgga cctggagaaa gatgtgcact ctggcctgat tgggccectg ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct gcccatggga ggcaggtgac tgtgcaggag tttgccectgt ttttcaccat ctttgatgag accaagagct ggtacttcac tgagaacatg gagaggaact gcagggcccc ctgtaacatc cagatggagg atcctacttt caaggagaac 0 tacaggttcc atgccattaa tgggtacatc atggacaccc tgcctgggct ggtgatggcec caggatcaga ggattaggtg gtatctgctg tctatgggct ctaatgagaa catccactct atccacttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg tacaacctgt accctggggt gtttgaaact gtggagatgc tgccctctaa agctgggatc tggagggatgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgetg gcatgagcac cctgttcetg 5 gtgtacagca ataagtgcca gactcccctg ggcatggctt ctgggcacat cagggatttc cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggccccca agcetggctag gctgcactac tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag gagcccttct cttggattaa ggtggacctg ctggctccca tgatcattca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttttctage ctgtatatta gccagttcat catcatgtat agcctggatg ggaagaagtg gcagacctac agggggaata gcactggcac cctgatggtg ttttttggca atgtggattc ttctggcatc aagcataaca tcttcaatcc ccctatcatt gccaggtaca ttaggctgca tcccacccat tactctatca ggagcaccct gaggatggag ctgatggggt gtgatctgaa cagctgtage atgcccctgg gcatggagtc caaggctate tctgatgecce agatcactge cagcagctac 5 ttcaccaaca tgtttgccac ctggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcagg tctaatgcct ggaggcccca ggtgaacaat cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag aagactatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gaccagcatg tatgtgaagg agttcctgat ctcttctagc caggatgggc atcagtggac cctgtttttt cagaatggca aagtgaaggt gtttcagggg aatcaggaca gctttacccc tgtggtgaac 10 agcctggatc ctectctget gactagatac ctgaggatcc acccccagag ctgggtccac cagattgctc tgaggatgga ggtgctgggg tgtgaggctc aggacctgta ctga (17 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏لحمض نووي منخفض 006 يشفر‎ X17 ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgagcac ctgcttcttt ctgtgcctge tgaggttctg cttctctgece accaggaggt actacctggg ggctgtggaa ctgagctggg actatatgca gtctgacctg 5 ggggagctgc ctgtggatgce caggttccce cccagggtgce ccaagtcttt cccctttaac acttctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttta ctgaccacct gttcaatatt gccaagccca ggcccccctg gatgggcectg ctgggceccaa ccatccaggce tgaggtgtat gatactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gccagccacc ctgtgagcect gcatgcetgtg ggggtgagct attggaaggc ttctgagggg gctgagtatg atgaccagac tagccagagg gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg gggtctcata cctatgtgtg gcaggtgctg aaggagaatg gccccatggce ctctgacccce ctgtgectga cctattctta cctgagecat gtggacctgg tcaaggacct gaactctggc ctgattgggg ctetgetggt gtgcagggag ggcagcctgg ccaaggagaa gactcagact ctgcataagt tcatcctgct gtttgetgtg 5 tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag accaagaact ctctgatgca ggatagggat gctgcctetg ccagggcectg gcccaagatg cacactgtga atggctatgt gaataggtet ctgcctggcece tgattggctg ccataggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatgggce actacccctg aggtgcactc tatcttcctg gaggggcaca ccttcetggt gaggaaccac aggcaggcca gcctggagat ctctcccate accttectga ctgcccagac tctgetgatg 10 gacctgggcc agttcctgcet gttctgccat atcagcagec accagcatga tggcatggag gcctatgtga aggtggacag ctgcccagag gaaccccagc tgaggatgaa gaacaatgag gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaaca gccccagctt tattcagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gactgggatt atgcccccct ggtgetggeec 5 cctgatgaca ggtcttacaa gtctcagtac ctgaacaatg gcccccagag gattgggagg aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga ccttcaagac cagggaggcc atccagcatg agtctggcat cctggggccc ctgctgtatg gggaggtggg ggataccctg ctgattatct tcaagaacca ggctagcagg ccctataaca tctaccccca tggcattact gatgtgaggc ccctgtactc taggagactg cccaaggggg tgaagcacct gaaagacttc cccatcctge ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatggccce actaagtctg accccaggtg cctgaccagg tattacagca gctttgtgaa tatggagagg gatctggctt ctggcctgat tgggcctctg ctgatttgct acaaggagtc tgtggatcag agggggaacc agattatgtc tgacaagagg aatgtgattc tgttctctgt gtttgatgag 5 aacaggagct ggtacctgac tgagaatatc cagaggttcc tgcctaatcc tgctggggatg cagctggagg accctgagtt ccaggctagc aacattatgc acagcatcaa tggctatgtg tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cttactggta cattctgtct attggggccc agactgactt cctgtetgtg ttcttctctg gctacacctt caagcacaag atggtgtatg aggacactct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt gttcatgage 0 atggagaatc ctgggctgtg gattctgggg tgccacaact ctgatttcag 03886809996 atgactgccc tgctgaaggt gagcagctgt gacaagaaca ctggggatta ttatgaggac agctatgagg acatttctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcctaggagc ttcagccaga atccccctgt gctgaagaga caccagaggg agatcactag gaccactctg cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacaccattt ctgtggagat gaagaaggag 15 gactttgata tttatgatga ggatgagaac cagagcccca gaagcttcca gaagaagacc aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggatt atggcatgtc ttctagcccc catgtgctga ggaacagggc tcagtctggc tctgtgcctc agttcaagaa ggtggtgttc caggagttca ctgatgggag cttcacccag cctctgtaca ggggggagct gaatgaacat ctgggcctge tggggceccta catcagggcet gaggtggagg ataatatcat ggtgactttc aggaatcagg cctctaggcc ctacagcttc tactctagcc tgatcagcta tgaggaggac cagaggcagg gggctgagcc taggaagaat tttgtgaaac ccaatgagac caagacctac ttttggaagg tgcagcacca catggcccct accaaggatg agtttgactg taaggectgg gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcatt ctgggctgat tggcccectg 5 ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag actaagagct ggtatttcac tgagaacatg gagaggaact gtagggctcc ctgcaacatc cagatggagg atccaacttt caaggagaac tacaggttcc atgccatcaa tggctacatc atggacaccc tgcctggect ggtgatggec caggaccaga ggattaggtg gtacctgctg agcatgggct ctaatgagaa catccactct 10 atccacttct ctggccatgt gtttactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggctctg tacaacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcctagcaa ggctggcatt tggagagtgg agtgtctgat tggggagcac ctgcatgctg ggatgtctac cctgttcctg gtgtactcta acaagtgcca gacccccctg gggatggctt ctgggcacat cagagatttt cagattactg cttctgggca gtatggccag tgggctccca agctggeccag actgcattac 5 tctggctcta ttaatgcttg gagcaccaag gagcctttca gctggatcaa ggtggacctg ctggctccca tgatcatcca tggcattaag actcaggggg ctaggcagaa gttcagcagce ctgtatattt ctcagtttat tatcatgtat tctctggatg gcaagaagtg gcagacttac aggggcaaca gcactggcac cctgatggtg ttctttggca atgtggacag ctctgggatc aagcataaca tcttcaaccc ccccattatt gccaggtaca tcaggctgca ccccacccac tattctatca ggagcactct gaggatggag ctgatggggt gtgacctgaa cagctgctct atgcccctgg gcatggagag caaggccatc tctgatgcce agatcactge cagctcttat ttcaccaaca tgtttgccac ctggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcaga agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaat cctaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 5 aagactatga aggtgactgg ggtgactacc cagggggtga agagcctgct gaccagcatg tatgtgaagg agttcctgat tagcagcagc caggatgggc atcagtggac cctgttcttc cagaatggga aggtgaaggt gttccagggc aatcaggaca gcttcaccce tgtggtgaac agcctggacc cccccctget gaccaggtac ctgaggatcc atccccagag ctgggtgcac cagattgctc tgagaatgga ggtgctgggc tgtgaggccc aggacctgta ttga 10 (18 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ FVII ‏يشفر‎ CpG ‏لحمض نووي منخفض‎ X18 ‏شكل متباين‎ atgcagattg agctgtctac ctgttttttt ctgtgcctge tgaggttctg cttectctgcet accaggaggt attatctggg ggctgtggag ctgagctggg actacatgca gtctgacctg ggggagctgc ctgtggatgc caggtttcct cccagggtge ctaagagctt ccecttcaac acctctgtgg tgtacaagaa gactctgttt gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt 15 gccaagccca ggcecccecctg gatggggetg ctgggcccca ctatccagge tgaggtgtat gatactgtgg tgattaccct gaagaacatg gcctctcacc ctgtgtctct gcatgcetgtg ggggtgagct actggaaggc ttctgagggg gctgaatatg atgatcagac ctctcagagg gagaaggagg atgacaaggt gtttcctggg ggcagccaca cctatgtgtg gcaggtgctg aaggagaatg ggcccatggc ctctgatccce ctgtgectga cctacagcta 010806081 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag ggcagcctgg ccaaggaaaa gacccagacc ctgcataagt tcatcctgct gtttgetgtg tttgatgagg gcaagtcttg gcactctgag accaagaaca gcctgatgca ggacagggat gctgcectetg ctagggectg gecccaagatg cacactgtga atgggtatgt gaacagatect 5 ctgcctggcece tgattggcetg ccacaggaag tetgtgtact ggcatgtgat tggcatgggg accacccctg aggtgcatag catcttcctg gaggggcaca ccttcctggt gagaaatcat aggcaggcca gcctggagat tagccccatc accttcctga ctgcccagac cetgetgatg gacctgggcc agttcctgcet gttctgccac atttctagcc accagcatga tggcatggag gcctatgtga aggtggatag ctgccctgaa gagccccagce tgaggatgaa gaacaatgag 10 gaggctgagg attatgatga tgatctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaaca gccccagctt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccctaagacc tgggtgcact acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgcccccct ggtgetggec ccagatgaca ggtcttacaa gagccagtac ctgaataatg gcccccagag gattgggagg aagtataaga aagtgaggtt catggcttac actgatgaga cctttaagac tagggaggcc 15 attcagcatg agtctgggat tctgggccct ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg ctgatcattt tcaagaacca ggccagcagg ccctataata tttatcccca tgggattact gatgtcaggc ccctgtacag caggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggacttc cccattctge ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatggcccc accaagtctg atcctaggtg cctgaccagg tactatagca gctttgtgaa catggagagg gacctggctt ctggcctgat tggccccectg ctgatctgect acaaggaatc tgtggaccag aggggcaacc agattatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttttctgt gtttgatgag aataggagct ggtatctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcccaatcec tgctggggtg cagctggagg accctgagtt ccaggcttct aacatcatgc atagcatcaa tgggtatgtg 5 tttgactctc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctattggta catcctgage attggggccc agactgactt cctgtctgtg ttcttctctg gctacacctt caagcacaag atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc cctttctctg gggagactgt gttcatgagce atggagaacc ctggcctgtg gattctgggc tgccataatt ctgacttcag 33886800996 atgactgctc tgctgaaggt gagcagcetgt gacaagaata ctggggacta ctatgaggac 10 tcttatgagg atatttctgc ctacctgctg agcaagaaca atgctattga gcccaggage ttcagccaga acccccctgt cctgaagagg catcagaggg agatcactag gaccaccctg cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacactatct ctgtggaaat gaagaaggag gactttgata tctatgatga ggatgagaac cagagcccca ggtctttcca gaagaagacc aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgtc tagcagccce 5 catgtgctga ggaacagagc ccagtctggc tctgtgccece agttcaagaa ggtggtgttt caggagttca ctgatgggag cttcactcag cccctgtata ggggggagct gaatgagcat ctgggcctge tggggceccta catcagggcet gaggtggagg ataacatcat ggtgaccttc aggaaccagg ccagcaggcc ctactctttc tactcttctc tgatcagcta tgaggaggat cagaggcagg gggctgagcc taggaagaac tttgtcaagc ctaatgagac taagacctac ttttggaagg tgcagcacca catggctccc actaaggatg agtttgattg caaggcctgg gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggcccectg ctggtgtgtc acaccaatac cctgaaccct gcccatggca ggcaggtcac tgtgcaggag tttgccctgt ttttcactat ctttgatgag actaagtctt ggtacttcac tgagaacatg 5 gaaaggaatt gcagggctcc ctgcaacatc cagatggagg accccacctt caaggagaac tacaggtttc atgccatcaa tggctacatc atggacaccc tgcctggcect ggtgatggct caggatcaga ggattaggtg gtatctgctg agcatgggca gcaatgagaa catccacagc atccactttt ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggctctg tacaatctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctgggatc 10 tggagggtgg agtgcctgat tggggaacac ctgcatgctg gcatgtctac cctgttectg gtgtactcta acaagtgcca gactcccctg ggcatggcect ctgggcacat cagggacttc cagatcactg cctctgggca gtatggccag tgggccccta agctggctag gctgcattac tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag gagcccttca gctggatcaa ggtggacctg ctggccccta tgatcatcca tggcatcaag acccaggggg ccagacagaa gttctettet 5 ctgtacatct ctcagttcat catcatgtac tctctggatg gcaagaagtg gcagacctac agggggaatt ctactggcac tctgatggtg ttctttggga atgtggatag ctctgggatc aagcataata ttttcaaccc ccccattatt gctaggtaca tcaggctgca cccaacccac tactctatta ggtctaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa ctcttgtagce
21006062199 gcatggagag caaggctatc tctgatgccc agatcactgec cagcagctac tttaccaaca tgtttgctac ttggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcagg agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggattttcag aagaccatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga aaagcctgct gactagcatg tatgtgaagg agtttctgat cagcagctct caggatggcc atcagtggac cctgttcttc 5 cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc aaccaggata gcttcacccc tgtggtgaat agcctggacc cccccctget gaccaggtac ctgaggatcc atccccagag ctgggtgcac cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaagccc aggacctgta ctga (19 : ‏من النوع البري (تعريف المتوالية رقم‎ VIII-BDD ‏لعامل‎ cDNA
ATGCAAATAG AGCTCTCCAC CTGCTTCTTT CTGTGCCTTT 10
TGCGATTCTG CTTTAGTGCC
ACCAGAAGAT ACTACCTGGG TGCAGTGGAA CTGTCATGGG
ACTATATGCA AAGTGATCTC
GGTGAGCTGC CTGTGGACGC AAGATTTCCT CCTAGAGTGC
CAAAATCTTT TCCATTCAAC 15
ACCTCAGTCG TGTACAAAAA GACTCTGTTT GTAGAATTCA
CGGATCACCT TTTCAACATC
GCTAAGCCAA GGCCACCCTG GATGGGTCTG CTAGGTCCTA
CCATCCAGGC TGAGGTTTAT
GATACAGTGG TCATTACACT TAAGAACATG GCTTCCCATC 20
CTGTCAGTCT TCATGCTGTT
GGTGTATCCT ACTGGAAAGC TTCTGAGGGA GCTGAATATG
ATGATCAGAC CAGTCAAAGG
GAGAAAGAAG ATGATAAAGT CTTCCCTGGT GGAAGCCATA
CATATGTCTG GCAGGTCCTG
AAAGAGAATG GTCCAATGGC CTCTGACCCA CTGTGCCTTA 5
CCTACTCATA TCTTTCTCAT
GTGGACCTGG TAAAAGACTT GAATTCAGGC CTCATTGGAG
CCCTACTAGT ATGTAGAGAA
GGGAGTCTGG CCAAGGAAAA GACACAGACC TTGCACAAAT
TTATACTACT TTTTGCTGTA 0
TTTGATGAAG GGAAAAGTTG GCACTCAGAA ACAAAGAACT
CCTTGATGCA GGATAGGGAT
GCTGCATCTG CTCGGGCCTG GCCTAAAATG CACACAGTCA
ATGGTTATGT AAACAGGTCT
CTGCCAGGTC TGATTGGATG CCACAGGAAA TCAGTCTATT 5
GGCATGTGAT TGGAATGGGC
ACCACTCCTG AAGTGCACTC AATATTCCTC GAAGGTCACA
CATTTCTTGT GAGGAACCAT
CGCCAGGCGT CCTTGGAAAT CTCGCCAATA ACTTTCCTTA
CTGCTCAAAC ACTCTTGATG 0
GACCTTGGAC AGTTTCTACT GTTTTGTCAT ATCTCTTCCC
ACCAACATGA TGGCATGGAA
GCTTATGTCA AAGTAGACAG CTGTCCAGAG GAACCCCAAC
TACGAATGAA AAATAATGAA
GAAGCGGAAG ACTATGATGA TGATCTTACT GATTCTGAAA
TGGATGTGGT CAGGTTTGAT
GATGACAACT CTCCTTCCTT TATCCAAATT CGCTCAGTTG 5
CCAAGAAGCA TCCTAAAACT
TGGGTACATT ACATTGCTGC TGAAGAGGAG GACTGGGACT
ATGCTCCCTT AGTCCTCGCC
CCCGATGACA GAAGTTATAA AAGTCAATAT TTGAACAATG
GCCCTCAGCG GATTGGTAGG 0
AAGTACAAAA AAGTCCGATT TATGGCATAC ACAGATGAAA
CCTTTAAGAC TCGTGAAGCT
ATTCAGCATG AATCAGGAAT CTTGGGACCT TTACTTTATG
GGGAAGTTGG AGACACACTG
TTGATTATAT TTAAGAATCA AGCAAGCAGA CCATATAACA 15
TCTACCCTCA CGGAATCACT
GATGTCCGTC CTTTGTATTC AAGGAGATTA CCAAAAGGTG
TAAAACATTT GAAGGATTTT
CCAATTCTGC CAGGAGAAAT ATTCAAATAT AAATGGACAG
TGACTGTAGA AGATGGGCCA 0
ACTAAATCAG ATCCTCGGTG CCTGACCCGC TATTACTCTA
GTTTCGTTAA TATGGAGAGA
GATCTAGCTT CAGGACTCAT TGGCCCTCTC CTCATCTGCT
ACAAAGAATC TGTAGATCAA
AGAGGAAACC AGATAATGTC AGACAAGAGG AATGTCATCC
TGTTTTCTGT ATTTGATGAG
AACCGAAGCT GGTACCTCAC AGAGAATATA CAACGCTTTC 5
TCCCCAATCC AGCTGGAGTG
CAGCTTGAGG ATCCAGAGTT CCAAGCCTCC AACATCATGC
ACAGCATCAA TGGCTATGTT
TTTGATAGTT TGCAGTTGTC AGTTTGTTTG CATGAGGTGG
CATACTGGTA CATTCTAAGC 10
ATTGGAGCAC AGACTGACTT CCTTTCTGTC TTCTTCTCTG
GATATACCTT CAAACACAAA
ATGGTCTATG AAGACACACT CACCCTATTC CCATTCTCAG
GAGAAACTGT CTTCATGTCG
ATGGAAAACC CAGGTCTATG GATTCTGGGG TGCCACAACT 5
CAGACTTTCG GAACAGAGGC
ATGACCGCCT TACTGAAGGT TTCTAGTTGT GACAAGAACA
CTGGTGATTA TTACGAGGAC
AGTTATGAAG ATATTTCAGC ATACTTGCTG AGTAAAAACA
ATGCCATTGA ACCAAGAAGC 20
TTCTCCCAAA ACCCACCAGT CTTGAAACGC CATCAACGGG
AAATAACTCG TACTACTCTT
CAGTCAGATC AAGAGGAAAT TGACTATGAT GATACCATAT
CAGTTGAAAT GAAGAAGGAA
GATTTTGACA TTTATGATGA GGATGAAAAT CAGAGCCCCC
GCAGCTTTCA AAAGAAAACA
CGACACTATT TTATTGCTGC AGTGGAGAGG CTCTGGGATT ‏؛‎ ‎ATGGGATGAG TAGCTCCCCA
CATGTTCTAA GAAACAGGGC TCAGAGTGGC AGTGTCCCTC
AGTTCAAGAA AGTTGTTTTC
CAGGAATTTA CTGATGGCTC CTTTACTCAG CCCTTATACC
GTGGAGAACT AAATGAACAT 10
TTGGGACTCC TGGGGCCATA TATAAGAGCA GAAGTTGAAG
ATAATATCAT GGTAACTTTC
AGAAATCAGG CCTCTCGTCC CTATTCCTTC TATTCTAGCC
TTATTTCTTA TGAGGAAGAT
CAGAGGCAAG GAGCAGAACC TAGAAAAAAC TTTGTCAAGC 15
CTAATGAAAC CAAAACTTAC
TTTTGGAAAG TGCAACATCA TATGGCACCC ACTAAAGATG
AGTTTGACTG CAAAGCCTGG
GCTTATTTCT CTGATGTTGA CCTGGAAAAA GATGTGCACT
CAGGCCTGAT TGGACCCCTT 0
CTGGTCTGCC ACACTAACAC ACTGAACCCT GCTCATGGGA
GACAAGTGAC AGTACAGGAA
TTTGCTCTGT TTTTCACCAT CTTTGATGAG ACCAAAAGCT
GGTACTTCAC TGAAAATATG
GAAAGAAACT GCAGGGCTCC CTGCAATATC CAGATGGAAG
ATCCCACTTT TAAAGAGAAT
TATCGCTTCC ATGCAATCAA TGGCTACATA ATGGATACAC 5
TACCTGGCTT AGTAATGGCT
CAGGATCAAA GGATTCGATG GTATCTGCTC AGCATGGGCA
GCAATGAAAA CATCCATTCT
ATTCATTTCA GTGGACATGT GTTCACCGTA CGAAAAAAAG
AGGAGTATAA AATGGCACTG 10
TACAATCTCT ATCCAGGTGT TTTTGAGACA GTGGAAATGT
TACCATCCAA AGCTGGAATT
TGGCGGGTGG AATGCCTTAT TGGCGAGCAT CTACATGCTG
GGATGAGCAC ACTTTTTCTG
GTGTACAGCA ATAAGTGTCA GACTCCCCTG GGAATGGCTT 5
CTGGACACAT TAGAGATTTT
CAGATTACAG CTTCAGGACA ATATGGACAG TGGGCCCCAA
AGCTGGCCAG ACTTCATTAT
TCCGGATCAA TCAATGCCTG GAGCACCAAG GAGCCCTTTT
CTTGGATCAA GGTGGATCTG 0
TTGGCACCAA TGATTATTCA CGGCATCAAG ACCCAGGGTG
CCCGTCAGAA GTTCTCCAGC
CTCTACATCT CTCAGTTTAT CATCATGTAT AGTCTTGATG
GGAAGAAGTG GCAGACTTAT
CGAGGAAATT CCACTGGAAC CTTAATGGTC TTCTTTGGCA
ATGTGGATTC ATCTGGGATA
AAACACAATA TTTTTAACCC TCCAATTATT GCTCGATACA 5
TCCGTTTGCA CCCAACTCAT
TATAGCATTC GCAGCACTCT TCGCATGGAG TTGATGGGCT
GTGATTTAAA TAGTTGCAGC
ATGCCATTGG GAATGGAGAG TAAAGCAATA TCAGATGCAC
AGATTACTGC TTCATCCTAC 10
TTTACCAATA TGTTTGCCAC CTGGTCTCCT TCAAAAGCTC
GACTTCACCT CCAAGGGAGG
AGTAATGCCT GGAGACCTCA GGTGAATAAT CCAAAAGAGT
GGCTGCAAGT GGACTTCCAG
AAGACAATGA AAGTCACAGG AGTAACTACT CAGGGAGTAA 5
AATCTCTGCT TACCAGCATG
TATGTGAAGG AGTTCCTCAT CTCCAGCAGT CAAGATGGCC
ATCAGTGGAC TCTCTTTTTT
CAGAATGGCA AAGTAAAGGT TTTTCAGGGA AATCAAGACT
CCTTCACACC TGTGGTGAAC 20
TCTCTAGACC CACCGTTACT GACTCGCTAC CTTCGAATTC
ACCCCCAGAG TTGGGTGCAC
CAGATTGCCC TGAGGATGGA 6611016666 TGCGAGGCAC
AGGACCTCTA CTGA
(20 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ V3 VIII Jalal cDNA
ATGCAGATTGAGCTGAGCACCTGCTTCTTCCTGTGCCTGCTGAGGTTC
TGCTTCTCTGCCACCAGGAGATACTACCTGGGGGCTGTGGAGCTGAG 5
CTGGGACTACATGCAGTCTGACCTGGGGGAGCTGCCTGTGGATGCCA
GGTTCCCCCCCAGAGTGCCCAAGAGCTTCCCCTTCAACACCTCTGTGG
TGTACAAGAAGACCCTGTTTGTGGAGTTCACTGACCACCTGTTCAACAT
TGCCAAGCCCAGGCCCCCCTGGATGGGCCTGCTGGGCCCCACCATCC
AGGCTGAGGTGTATGACACTGTGGTGATCACCCTGAAGAACATGGCCA 0
GCCACCCTGTGAGCCTGCATGCTGTGGGGGTGAGCTACTGGAAGGCC
TCTGAGGGGGCTGAGTATGATGACCAGACCAGCCAGAGGGAGAAGGA
GGATGACAAGGTGTTCCCTGGGGGCAGCCACACCTATGTGTGGCAGG
TGCTGAAGGAGAATGGCCCCATGGCCTCTGACCCCCTGTGCCTGACC
TACAGCTACCTGAGCCATGTGGACCTGGTGAAGGACCTGAACTCTGGC 5
CTGATTGGGGCCCTGCTGGTGTGCAGGGAGGGCAGCCTGGCCAAGG
AGAAGACCCAGACCCTGCACAAGTTCATCCTGCTGTTTGCTGTGTTTG
ATGAGGGCAAGAGCTGGCACTCTGAAACCAAGAACAGCCTGATGCAG
GACAGGGATGCTGCCTCTGCCAGGGCCTGGCCCAAGATGCACACTGT
GAATGGCTATGTGAACAGGAGCCTGCCTGGCCTGATTGGCTGCCACA 0
GGAAGTCTGTGTACTGGCATGTGATTGGCATGGGCACCACCCCTGAG
GTGCACAGCATCTTCCTGGAGGGCCACACCTTCCTGGTCAGGAACCA
CAGGCAGGCCAGCCTGGAGATCAGCCCCATCACCTTCCTGACTGCCC
AGACCCTGCTGATGGACCTGGGCCAGTTCCTGCTGTTCTGCCACATCA
GCAGCCACCAGCATGATGGCATGGAGGCCTATGTGAAGGTGGACAGC 5
TGCCCTGAGGAGCCCCAGCTGAGGATGAAGAACAATGAGGAGGCTGA
GGACTATGATGATGACCTGACTGACTCTGAGATGGATGTGGTGAGGTT
TGATGATGACAACAGCCCCAGCTTCATCCAGATCAGGTCTGTGGCCAA
GAAGCACCCCAAGACCTGGGTGCACTACATTGCTGCTGAGGAGGAGG
ACTGGGACTATGCCCCCCTGGTGCTGGCCCCTGATGACAGGAGCTAC 5
AAGAGCCAGTACCTGAACAATGGCCCCCAGAGGATTGGCAGGAAGTA
CAAGAAGGTCAGGTTCATGGCCTACACTGATGAAACCTTCAAGACCAG
GGAGGCCATCCAGCATGAGTCTGGCATCCTGGGCCCCCTGCTGTATG
GGGAGGTGGGGGACACCCTGCTGATCATCTTCAAGAACCAGGCCAGC
AGGCCCTACAACATCTACCCCCATGGCATCACTGATGTGAGGCCCCTG 0
TACAGCAGGAGGCTGCCCAAGGGGGTGAAGCACCTGAAGGACTTCCC
CATCCTGCCTGGGGAGATCTTCAAGTACAAGTGGACTGTGACTGTGGA
GGATGGCCCCACCAAGTCTGACCCCAGGTGCCTGACCAGATACTACA
GCAGCTTTGTGAACATGGAGAGGGACCTGGCCTCTGGCCTGATTGGC
CCCCTGCTGATCTGCTACAAGGAGTCTGTGGACCAGAGGGGCAACCA 15
GATCATGTCTGACAAGAGGAATGTGATCCTGTTCTCTGTGTTTGATGAG
AACAGGAGCTGGTACCTGACTGAGAACATCCAGAGGTTCCTGCCCAAC
CCTGCTGGGGTGCAGCTGGAGGACCCTGAGTTCCAGGCCAGCAACAT
CATGCACAGCATCAATGGCTATGTGTTTGACAGCCTGCAGCTGTCTGT
GTGCCTGCATGAGGTGGCCTACTGGTACATCCTGAGCATTGGGGCCC 0
AGACTGACTTCCTGTCTGTGTTCTTCTCTGGCTACACCTTCAAGCACAA
GATGGTGTATGAGGACACCCTGACCCTGTTCCCCTTCTCTGGGGAGAC
TGTGTTCATGAGCATGGAGAACCCTGGCCTGTGGATTCTGGGCTGCCA
CAACTCTGACTTCAGGAACAGGGGCATGACTGCCCTGCTGAAAGTCTC
CAGCTGTGACAAGAACACTGGGGACTACTATGAGGACAGCTATGAGGA 5
CATCTCTGCCTACCTGCTGAGCAAGAACAATGCCATTGAGCCCAGGAG
CTTCAGCCAGAACAGCAGGCACCCCAGCACCAGGCAGAAGCAGTTCA
ATGCCACCACCATCCCTGAGAATGACATAGAGAAGACAGACCCATGGT
TTGCCCACCGGACCCCCATGCCCAAGATCCAGAATGTGAGCAGCTCT
GACCTGCTGATGCTGCTGAGGCAGAGCCCCACCCCCCATGGCCTGAG
CCTGTCTGACCTGCAGGAGGCCAAGTATGAAACCTTCTCTGATGACCC 5
CAGCCCTGGGGCCATTGACAGCAACAACAGCCTGTCTGAGATGACCC
ACTTCAGGCCCCAGCTGCACCACTCTGGGGACATGGTGTTCACCCCT
GAGTCTGGCCTGCAGCTGAGGCTGAATGAGAAGCTGGGCACCACTGC
TGCCACTGAGCTGAAGAAGCTGGACTTCAAAGTCTCCAGCACCAGCAA
CAACCTGATCAGCACCATCCCCTCTGACAACCTGGCTGCTGGCACTGA 0
CAACACCAGCAGCCTGGGCCCCCCCAGCATGCCTGTGCACTATGACA
GCCAGCTGGACACCACCCTGTTTGGCAAGAAGAGCAGCCCCCTGACT
GAGTCTGGGGGCCCCCTGAGCCTGTCTGAGGAGAACAATGACAGCAA
GCTGCTGGAGTCTGGCCTGATGAACAGCCAGGAGAGCAGCTGGGGCA
AGAATGTGAGCACCAGGAGCTTCCAGAAGAAGACCAGGCACTACTTCA 5
TTGCTGCTGTGGAGAGGCTGTGGGACTATGGCATGAGCAGCAGCCCC
CATGTGCTGAGGAACAGGGCCCAGTCTGGCTCTGTGCCCCAGTTCAA
GAAGGTGGTGTTCCAGGAGTTCACTGATGGCAGCTTCACCCAGCCCCT
GTACAGAGGGGAGCTGAATGAGCACCTGGGCCTGCTGGGCCCCTACA
TCAGGGCTGAGGTGGAGGACAACATCATGGTGACCTTCAGGAACCAG 0
GCCAGCAGGCCCTACAGCTTCTACAGCAGCCTGATCAGCTATGAGGA
GGACCAGAGGCAGGGGGCTGAGCCCAGGAAGAACTTTGTGAAGCCCA
ATGAAACCAAGACCTACTTCTGGAAGGTGCAGCACCACATGGCCCCCA
CCAAGGATGAGTTTGACTGCAAGGCCTGGGCCTACTTCTCTGATGTGG
ACCTGGAGAAGGATGTGCACTCTGGCCTGATTGGCCCCCTGCTGGTG 5
TGCCACACCAACACCCTGAACCCTGCCCATGGCAGGCAGGTGACTGT
GCAGGAGTTTGCCCTGTTCTTCACCATCTTTGATGAAACCAAGAGCTG
GTACTTCACTGAGAACATGGAGAGGAACTGCAGGGCCCCCTGCAACAT
CCAGATGGAGGACCCCACCTTCAAGGAGAACTACAGGTTCCATGCCAT
CAATGGCTACATCATGGACACCCTGCCTGGCCTGGTGATGGCCCAGG
ACCAGAGGATCAGGTGGTACCTGCTGAGCATGGGCAGCAATGAGAAC 5
ATCCACAGCATCCACTTCTCTGGCCATGTGTTCACTGTGAGGAAGAAG
GAGGAGTACAAGATGGCCCTGTACAACCTGTACCCTGGGGTGTTTGAG
ACTGTGGAGATGCTGCCCAGCAAGGCTGGCATCTGGAGGGTGGAGTG
CCTGATTGGGGAGCACCTGCATGCTGGCATGAGCACCCTGTTCCTGG
TGTACAGCAACAAGTGCCAGACCCCCCTGGGCATGGCCTCTGGCCAC 0
ATCAGGGACTTCCAGATCACTGCCTCTGGCCAGTATGGCCAGTGGGC
CCCCAAGCTGGCCAGGCTGCACTACTCTGGCAGCATCAATGCCTGGA
GCACCAAGGAGCCCTTCAGCTGGATCAAGGTGGACCTGCTGGCCCCC
ATGATCATCCATGGCATCAAGACCCAGGGGGCCAGGCAGAAGTTCAG
CAGCCTGTACATCAGCCAGTTCATCATCATGTACAGCCTGGATGGCAA 5
GAAGTGGCAGACCTACAGGGGCAACAGCACTGGCACCCTGATGGTGT
TCTTTGGCAATGTGGACAGCTCTGGCATCAAGCACAACATCTTCAACC
CCCCCATCATTGCCAGATACATCAGGCTGCACCCCACCCACTACAGCA
TCAGGAGCACCCTGAGGATGGAGCTGATGGGCTGTGACCTGAACAGC
TGCAGCATGCCCCTGGGCATGGAGAGCAAGGCCATCTCTGATGCCCA 0
GATCACTGCCAGCAGCTACTTCACCAACATGTTTGCCACCTGGAGCCC
CAGCAAGGCCAGGCTGCACCTGCAGGGCAGGAGCAATGCCTGGAGG
CCCCAGGTCAACAACCCCAAGGAGTGGCTGCAGGTGGACTTCCAGAA
GACCATGAAGGTGACTGGGGTGACCACCCAGGGGGTGAAGAGCCTGC
TGACCAGCATGTATGTGAAGGAGTTCCTGATCAGCAGCAGCCAGGATG 5
GCCACCAGTGGACCCTGTTCTTCCAGAATGGCAAGGTGAAGGTGTTCC
AGGGCAACCAGGACAGCTTCACCCCTGTGGTGAACAGCCTGGACCCC
CCCCTGCTGACCAGATACCTGAGGATTCACCCCCAGAGCTGGGTGCA
CCAGATTGCCCTGAGGATGGAGGTGCTGGGCTGTGAGGCCCAGGACC
TGTACTGA
(21 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ COZ VIII ‏لعامل‎ cDNA 5 atgcagattg agctgtcaac ttgctttttc ctgtgcctge tgagattttg tttttccgcet actagaagat actacctggg ggctgtggaa ctgtcttggg attacatgca gagtgacctg ggagagctgc cagtggacgc acgatttcca cctagagtcc ctaaatcatt ccccttcaac accagcgtgg tctataagaa aacactgttc gtggagttta ctgatcacct gttcaacatc gctaagcctc ggccaccctg gatgggactg ctgggaccaa caatccagge agaggtgtac 10 gacaccgtgg tcattacact gaaaaacatg gcctcacacc ccgtgagcect gcatgcetgtg ggcgtcagct actggaaggc ttccgaaggg gcagagtatg acgatcagac ttcccagaga gaaaaagagg acgataaggt gtttcctggc gggtctcata cctatgtgtg gcaggtcctg aaagagaatg gccccatggc ttccgaccct ctgtgecctga cctactctta tctgagtcac gtggacctgg tcaaggatct gaacagcgga ctgatcggag cactgetggt gtgtagggaa 5 gggagcctgg ctaaggagaa aacccagaca ctgcataagt tcattctgct gttcgecegtg tttgacgaag gaaaatcatg gcacagcgag acaaagaata gtctgatgca ggaccgggat gccgcttcag ccagagcttg gcccaaaatg cacactgtga acggctacgt caatcgctca ctgcctggac tgatcggetg ccaccgaaag agcgtgtatt ggcatgtcat cggaatgggce accacacctg aagtgcactc cattttcctg gaggggcata cctttctggt ccgcaaccac 20 cgacaggcct ccctggagat ctctccaatt accttcctga cagctcagac 1-9 gatctgggac agttcctgcet gttttgccac atcagctcce accagcatga tggcatggag gcctacgtga aagtggacag ctgtcccgag gaacctcage tgaggatgaa gaacaatgag gaagctgaag actatgacga tgacctgacc gactccgaga tggatgtggt ccgattcgat gacgataaca gcccctcctt tatccagatt agatctgtgg ccaagaaaca ccctaagaca 5 tgggtccatt acatcgcagc cgaggaagag gactgggatt atgcaccact ggtgctggca ccagacgatc gatcctacaa atctcagtat ctgaacaatg gaccacagcg gattggcaga aagtacaaga aagtgaggtt catggcttat accgatgaaa ccttcaagac tcgcgaagca atccagcacg agagcgggat tctgggacca ctgctgtacg gagaagtggg ggacaccctg ctgatcattt ttaagaacca ggccagcagg ccttacaata tctatccaca tggaattaca 0 gatgtgcgcc ctetgtacag ccggagactg ccaaagggceg tcaaacacct gaaggacttc ccaatcctgc ccggggaaat ttttaagtat aaatggactg tcaccgtcga ggatggeccce actaagagcg accctaggtg cctgacccgc tactattcta gtttcgtgaa tatggaaagg gatctggcca gcggactgat cggcccactg ctgatttgtt acaaagagag cgtggatcag agaggcaacc agatcatgtc cgacaagagg aatgtgattc tgttcagtgt ctttgacgaa 5 aaccggtcat ggtatctgac cgagaacatc cagagattcc tgcctaatcc agccggagtg cagctggaag atcctgagtt tcaggcttct aacatcatgc atagtattaa tggctacgtg ttcgacagtc tgcagctgtc agtgtgtctg cacgaggtcg cttactggta tatcctgagce attggagcac agacagattt cctgagcgtg ttcttttccg gctacacttt taagcataaa atggtgtatg aggacacact gactctgttc cccttcagcg gcgaaaccgt gtttatgtce atggagaatc ccgggcetgtg gatcctggga tgccacaaca gcgatttcag 881209 atgactgccc tgctgaaagt gtcaagctgt gacaagaaca ccggagacta ctatgaagat tcatacgagg acatcagcgc atatctgctg tccaaaaaca atgccattga acccaggtct tttagtcaga atcctccagt gctgaagagg caccagcgceg agatcacccg cactacectg 5 cagagtgatc aggaagagat cgactacgac gatacaattt ctgtggaaat gaagaaagag gacttcgata tctatgacga agatgagaac cagagtcctc gatcattcca gaagaaaacc cggcattact ttattgctgc agtggagcgce ctgtgggatt atggcatgtc ctctagtcct cacgtgctgc gaaatcgggc ccagtcaggg agcgtcccac agttcaagaa agtggtcttc caggagttta cagacggatc ctttactcag ccactgtacc ggggcgaact gaacgagcac 0 ctggggctgce tgggacccta tatcagagct gaagtggagg ataacattat ggtcaccttc agaaatcagg catctaggcc ttacagtttt tattcaagcc tgatctctta cgaagaggac cagaggcagg gagcagaacc acgaaaaaac ttcgtgaagc ctaatgagac caaaacatac ttttggaagg tgcagcacca tatggcccca acaaaagacg aattcgattg caaggcatgg gcctattttt ctgacgtgga tctggagaag gacgtccaca gtggcectgat cgggccactg 5 ctggtgtgtc atactaacac cctgaatccc gcacacggca ggcaggtcac tgtccaggaa ttcgcectgt tctttaccat ctttgatgag acaaaaagct ggtacttcac cgaaaacatg gagcgaaatt gccgggctcc atgtaatatt cagatggaag accccacatt caaggagaac taccgctttc atgccatcaa tgggtatatt atggatactc tgcccggact ggtcatggcet caggaccaga gaatcaggtg gtacctgctg agcatggggt ccaacgagaa tatccactca attcatttca gcggacacgt gtttactgtc cggaagaaag aagagtataa aatggccctg tacaacctgt atcccggcegt gttcgaaacc gtcgagatgce tgcctagcaa ggcagggatce tggagagtgg aatgcctgat tggggagcac ctgcatgccg gaatgtctac cctgtttctg gtgtacagta ataagtgtca gacacccctg gggatggctt ccggacatat ccgggatttc 5 cagattaccg catctggaca gtacggccag tgggccccta agctggctag actgcactat tccgggtcta tcaacgcettg gtccacaaaa gagcctttct cttggattaa ggtggacctg ctggcaccaa tgatcattca tggcatcaaa actcaggggg ccaggcagaa gttctcctct ctgtacatct cacagtttat catcatgtac agcctggatg gcaagaaatg gcagacatac cgcggcaata gcacagggac tctgatggtg ttctttggca acgtggacag ttcagggatc 10 aagcacaaca ttttcaatcc ccctatcatt gctagataca tcaggctgca cccaacccat tattctattc gaagtacact gcggatggaa ctgatggggt gcgatctgaa cagttgttca atgcccctgg gaatggagtc caaggcaatc tctgacgccc agattaccgce tagctcctac ttcactaata tgtttgctac ctggagcccc tccaaagcac gactgcatct gcagggacga agcaacgcat ggcgaccaca ggtgaacaat cccaaggagt ggctgcaggt cgattttcag 5 aaaactatga aggtgaccgg agtcacaact cagggcgtga aaagtctgct gacctcaatg tacgtcaagg agttcctgat ctctagttca caggacggcc accagtggac actgttcttt cagaacggaa aggtgaaagt cttccagggc aatcaggatt cctttacacc tgtggtcaac tctctggacc cacccctget gactcgctac ctgcgaatcc acccacagte ctgggtgceat cagattgcac tgagaatgga agtcctgggc tgcgaggccc aggacctgta ttga
Jalal cDNA ‏إنترون تخليقي»‎ ((TTRMUL) ‏طفري‎ TTR ‏كامل الطول تتضمن معزز‎ de gana (23 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ ١145و‎ A ‏عديد‎ (CpG ‏منخفض‎ VIII cctgcaggca gctgecgcegct cgetcgetca ctgaggecge ccgggcaaag 60902006 gggcgacctt tggtcgceccg gectcagtga gecgagcgagce gcgcagagag ggagtggecca 5 actccatcac taggggttcc tacgcgtgtc tgtctgcaca tttcgtagag cgagtgttcc gatactctaa tctccctagg caaggttcat attgacttag gttacttatt ctccttttgt tgactaagtc aataatcaga atcagcaggt ttggagtcag cttggcaggg atcagcagcc tgggttggaa ggagggggta taaaagcccc ttcaccagga gaagccgtca cacagatcca caagctcctg ctagcaggta agtgccgtgt gtggttcccg cgggcectggce ctctttacgg 0 gttatggccc ttgcgtgcect tgaattactg acactgacat ccacttttte tttttctcca caggtttaaa cgccaccatg cagattgagc tgagcacctg cttcttcctg tgtctgcetga ggttctgcett ctctgccacc aggaggtatt acctgggggce tgtggagcetg agectgggact atatgcagtc tgacctgggg gagctgectg tggatgctag gttcccececce agggtgcecca agagcttccc ctttaacact tctgtggtgt acaagaagac cctgtttgtg gagttcactg 5 accacctgtt caacattgcc aagcccaggc ccccctggat ggggcetgcetg gggcccacca tccaggctga ggtgtatgac actgtggtga tcaccctgaa gaacatggcc agccaccctg tgagcctgca tgctgtgggg gtgagctact ggaaggcettc tgagggggcet gagtatgatg accagactag ccagagggag aaggaggatg acaaggtgtt tcctgggggc agccatacct atgtgtggca ggtgctgaag gagaatggcc ccatggcectc tgaccccctg tgectgacct acagctacct gtctcatgtg gacctggtga aggacctgaa ctctggcctg attggggctc tgctggtgtg tagggagggce agcectggcta aggaaaagac ccagaccctg cataagttta tcectgcetgtt tgctgtgttt gatgagggca agagctggca ctctgagacc aagaacagcc tgatgcagga tagggatgct gcctctgecca gggcettggec taagatgcac actgtgaatg 5 ggtatgtgaa taggagcctg cctggcectga ttggctgcca caggaagtct gtgtactgge atgtgattgg gatgggcacc acccctgagg tccatagcat cttcctggag ggccacactt tcctggtgag gaaccacaga caggcctctc tggagatctc tcccatcacc ttcctgactg ctcagactct gctgatggac ctgggccagt tcctgcetgtt ttgccatatt agcagccacc agcatgatgg gatggaggcc tatgtgaagg tggatagctg ccctgaggag cctcagctga 10 ggatgaagaa caatgaggag gctgaagact atgatgatga cctgactgat tctgagatgg atgtggtgag gtttgatgat gacaatagcc ccagcttcat tcagatcagg tctgtggcca agaaacaccc caagacctgg gtgcactaca ttgctgctga ggaagaggac tgggactatg ctccectggt getggeccct gatgataggt cttataagag ccagtacctg 3868810996 cccagaggat tggcaggaag tacaagaagg tgaggttcat ggcctacact gatgaaacct 5 tcaaaaccag ggaggccatt cagcatgagt ctggcatcct gggccctctg ctgtatgggg aggtggggga caccctgctg atcatcttca agaaccaggc cagcaggccc tacaacatct atcctcatgg catcactgat gtgaggcccc tgtacagcag gaggctgccc aagggggtga agcacctgaa agacttcccc atcctgectg gggagatctt taagtataag tggactgtga ctgtggagga tggccctacc aagtctgacc ccaggtgtct gaccaggtac tattctagct ttgtgaacat ggagagggac ctggcctctg gectgattgg geccctgetg atctgctaca aggagtctgt ggaccagagg ggcaaccaga tcatgtctga caagaggaat gtgatcctgt tttctgtgtt tgatgagaat aggagctggt acctgactga gaacatccag aggtttctge ccaatcctgce tggggtgcag ctggaggatc ctgagttcca ggccagcaat atcatgcata 5 gcatcaatgg ctatgtgttt gacagcctgc agctgtctgt gtgcctgcat gaggtggect actggtacat cctgagcatt ggggcccaga ctgactttct gtctgtgtte ttttctggct ataccttcaa gcacaagatg gtgtatgagg ataccctgac cctgttcccc ttctctgggg agactgtgtt catgagcatg gagaatcctg ggctgtggat cctggggtgc cacaactctg attttaggaa cagggggatg actgccctgc tgaaggtgtc tagctgtgat aagaacactg 0 gggactacta tgaggacagc tatgaggaca tttctgctta tctgctgtct aagaataatg ccattgagcc cagaagcttc agccagaatc cccctgtget gaagagacat cagagggaga tcaccagaac taccctgcag tctgatcagg aggagattga ctatgatgac actatctctg tggagatgaa gaaggaggac tttgacatct atgatgagga tgagaatcag tctcccagga gctttcagaa gaagaccaga cattacttca ttgctgetgt ggagaggcetg tgggactatg 5 gcatgagctc tagccctcat gtgctgagga acagggccca gtctggctct gtgccccagt tcaagaaggt ggtgttccag gaattcactg atggcagctt cacccagccc ctgtacaggg gggagctgaa tgagcacctg ggcctgetgg ggccttatat cagggctgag gtggaggata atattatggt gactttcagg aaccaggcca gcaggcccta ctctttctat agcagcctga tctcttatga ggaggatcag aggcaggggg ctgagcctag gaagaacttt gtgaagccca atgagactaa gacctacttc tggaaggtcc agcaccacat ggcccctacc aaggatgagt ttgactgcaa ggcctgggcc tatttctctg atgtggatct ggagaaggat gtccattctg ggctgattgg ccccctgetg gtgtgccaca ctaacactct gaatcctgee catggcaggce aggtgactgt ccaggagttt gccctgttct tcactatctt tgatgagacc aagagetggt 5 actttactga gaacatggag aggaactgca gagctccttg caatattcag atggaggacc ccaccttcaa ggagaattac aggttccatg ccattaatgg gtacatcatg gacaccctgc ctggcctggt gatggctcag gaccagagga tcaggtggta cctgctgage atgggctcta atgagaatat ccacagcatc cacttctctg ggcatgtgtt cactgtgagg aagaaggagg agtacaagat ggctctgtat aatctgtacc ctggggtgtt tgaaactgtg gagatgctgc 10 cctctaaggc tggcatctgg agggtggagt gectgattgg ggagcacctg catgctggcea tgagcaccct gttcctggtg tacagcaaca agtgccagac ccccectgggce atggcectetg gccacatcag ggacttccag atcactgcct ctggccagta tggccagtgg gcccccaage tggccaggct gcactattct ggcagcatca atgcctggag caccaaggag cccttcagct ggatcaaggt ggacctgctg gcccccatga tcattcatgg catcaagacc cagggggcca 5 ggcagaagtt cagctctctg tacatctctc agttcatcat catgtactct ctggatggga agaagtggca gacctacagg ggcaacagca ctggcaccct gatggtgttc tttgggaatg tggactcttc tggcatcaag cacaacatct 38166006 catcattgct aggtatatta ggctgcatcc cacccactac agcatcaggt ctaccctgag gatggagcetg atgggcetgtg acctgaactc ttgcagcatg 0219919008 tggagtctaa ggccatctct gatgcccaga ttactgccag cagctacttc accaacatgt ttgccacctg gagcccctct aaggccaggce tgcatctgca ggggaggagc aatgcctgga ggcctcaggt gaacaacccc aaggagtgge tgcaggtgga tttccagaag accatgaagg tgactggggt gaccacccag ggggtcaaga gcctgetgac cagcatgtat gtgaaggagt tcctgatcag cagcageccag gatggccace 5 agtggactct gttctttcag aatgggaagg tgaaggtgtt tcagggcaat caggactctt tcacccctgt ggtgaacagc ctggacccce ccetgetgac cagatacctg aggatccacc cccagtcttg ggtgcatcag attgccctga ggatggaggt gctgggcetgt gaggctcagg atctgtactg agcggccgca ataaaagatc agagctctag agatctgtgt gttggttttt tgtgtaggaa cccctagtga tggagttggc cactccctct ctgcgegcete gectecgetcac 10 tgaggccggg cgaccaaagg tcgcccgacg cccgggcttt gccecgggegg cectcagtgag cgagcgagcg cgcagctgcc tgcagg ‏لعامل‎ DNA ‏إنترون تخليقي»‎ ((TTRMUE) ‏طفري‎ TTR ‏بلازميد كامل الطول يتضمن معزز‎ (24 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ ١145و‎ A ‏عديد‎ (CpG ‏منخفض‎ VIII cctgcaggca gctgcgcegct cgcetecgetca ctgaggecge ccgggcaaag ccecgggegte 5 gggcgacctt tggtcgececcg gectcagtga gcgagcgage gecgcagagag ggagtggceca actccatcac taggggttcc tacgcgtgtc tgtctgcaca tttcgtagag cgagtgttcc gatactctaa tctccctagg caaggttcat attgacttag gttacttatt ctccttttgt tgactaagtc aataatcaga atcagcaggt ttggagtcag cttggcaggg atcagcagcc tgggttggaa ggagggggta taaaagcccc ttcaccagga gaagccgtca cacagatcca caagctcctg ctagcaggta agtgccgtgt gtggttcccg cgggcectggce ctctttacgg gttatggccc ttgcgtgcect tgaattactg acactgacat ccacttttte tttttctcca caggtttaaa cgccaccatg cagattgagc tgagcacctg cttcttcctg tgtctgcetga ggttctgctt ctetgccacec aggaggtatt acctgggggce tgtggagcetg agetgggact 5 atatgcagtc tgacctgggg gagctgectg tggatgctag gttcccececce agggtgcecca agagcttccc ctttaacact tctgtggtgt acaagaagac cctgtttgtg gagttcactg accacctgtt caacattgcc aagcccaggc ccccctggat ggggcetgcetg gggcccacca tccaggctga ggtgtatgac actgtggtga tcaccctgaa gaacatggcc agccaccctg tgagcctgca tgctgtgggg gtgagctact ggaaggcettc tgagggggcet gagtatgatg 0 accagactag ccagagggag aaggaggatg acaaggtgtt tcctgggggc agccatacct atgtgtggca ggtgctgaag gagaatggcc ccatggcectc tgaccccctg tgectgacct acagctacct gtctcatgtg gacctggtga aggacctgaa ctctggcectg attggggctc tgctggtgtg tagggagggce agcectggcta aggaaaagac ccagaccctg cataagttta tcctgcetgtt tgetgtgttt gatgagggca agagcetggcea ctctgagacc aagaacagee 5 tgatgcagga tagggatgct gcctctgcca gggcttggec taagatgcac actgtgaatg ggtatgtgaa taggagcctg cctggcectga ttggctgcca caggaagtct gtgtactgge atgtgattgg gatgggcacc acccctgagg tccatagcat cttcctggag ggccacactt tcctggtgag gaaccacaga caggcctctc tggagatctc tcccatcacc ttcctgactg ctcagactct gctgatggac ctgggccagt tcctgcetgtt ttgccatatt agcagccacc agcatgatgg gatggaggcc tatgtgaagg tggatagctg ccctgaggag cctcagcetga ggatgaagaa caatgaggag gctgaagact atgatgatga cctgactgat tctgagatgg atgtggtgag gtttgatgat gacaatagcc ccagcttcat tcagatcagg tctgtggcca agaaacaccc caagacctgg gtgcactaca ttgctgctga ggaagaggac tgggactatg 5 ctcecectggt getggeccect gatgataggt cttataagag ccagtacctg aacaatgggce cccagaggat tggcaggaag tacaagaagg tgaggttcat ggcctacact gatgaaacct tcaaaaccag ggaggccatt cagcatgagt ctggcatcct gggccctctg ctgtatgggg aggtggggga caccctgctg atcatcttca agaaccaggc cagcaggccc tacaacatct atcctcatgg catcactgat gtgaggcccc tgtacagcag gaggctgccc aagggggtga 10 agcacctgaa agacttcccc atcctgectg gggagatctt taagtataag tggactgtga ctgtggagga tggccctacc aagtctgacc ccaggtgtct gaccaggtac tattctagct ttgtgaacat ggagagggac ctggcctctg gcctgattgg gcccctgetg atctgctaca aggagtctgt ggaccagagg ggcaaccaga tcatgtctga caagaggaat gtgatcctgt tttctgtgtt tgatgagaat aggagctggt acctgactga gaacatccag aggtttctge 5 ccaatcctgce tggggtgcag ctggaggatc ctgagttcca ggccagcaat atcatgcata gcatcaatgg ctatgtgttt gacagcctgc agctgtctgt gtgcctgcat gaggtggect actggtacat cctgagcatt ggggcccaga ctgactttct gtctgtgtte ttttctggct ataccttcaa gcacaagatg gtgtatgagg ataccctgac cctgttcccc ttctctgggg agactgtgtt catgagcatg gagaatcctg ggctgtggat cctggggtgc cacaactctg attttaggaa cagggggatg actgccctgce tgaaggtgtc tagctgtgat aagaacactg gggactacta tgaggacagc tatgaggaca tttctgctta tctgctgtct aagaataatg ccattgagcc cagaagcttc agccagaatc cccctgtget gaagagacat cagagggaga tcaccagaac taccctgcag tctgatcagg aggagattga ctatgatgac actatctctg 5 tggagatgaa gaaggaggac tttgacatct atgatgagga tgagaatcag tctcccagga gctttcagaa gaagaccaga cattacttca ttgctgctgt ggagaggcetg tgggactatg gcatgagctc tagccctcat gtgctgagga acagggccca gtctggctct gtgccccagt tcaagaaggt ggtgttccag gaattcactg atggcagctt cacccagccc ctgtacaggg gggagctgaa tgagcacctg ggcctgctgg ggccttatat cagggctgag gtggaggata 0 atattatggt gactttcagg aaccaggcca gcaggcccta ctctttctat agcagcctga tctcttatga ggaggatcag aggcaggggg ctgagcctag gaagaacttt gtgaagccca atgagactaa gacctacttc tggaaggtcc agcaccacat ggcccctacc aaggatgagt ttgactgcaa ggcctgggcc tatttctctg atgtggatct ggagaaggat gtccattctg ggctgattgg ccccectgetg gtgtgccaca ctaacactct gaatcctgee catggcagge 15 aggtgactgt ccaggagttt gccctgttct tcactatctt tgatgagacc aagagctggt actttactga gaacatggag aggaactgca gagctccttg caatattcag atggaggacc ccaccttcaa ggagaattac aggttccatg ccattaatgg gtacatcatg gacaccctgc ctggcctggt gatggctcag gaccagagga tcaggtggta cctgctgage atgggctcta atgagaatat ccacagcatc cacttctctg ggcatgtgtt cactgtgagg aagaaggagg agtacaagat ggctctgtat aatctgtacc ctggggtgtt tgaaactgtg gagatgctgc cctctaaggc tggcatctgg agggtggagt gectgattgg ggagcacctg catgctggcea tgagcaccct gttcctggtg tacagcaaca agtgccagac ccccctgggce atggcectctg gccacatcag ggacttccag atcactgcct ctggccagta tggccagtgg gecccccaage 5S tggccaggct gcactattct ggcagcatca atgcctggag caccaaggag cccttcagcet ggatcaaggt ggacctgctg gcccccatga tcattcatgg catcaagacc cagggggcca ggcagaagtt cagctctctg tacatctctc agttcatcat catgtactct ctggatggga agaagtggca gacctacagg ggcaacagca ctggcaccct gatggtgttc tttgggaatg tggactcttc tggcatcaag cacaacatct tcaatcccce catcattget aggtatatta 10 ggctgcatcc cacccactac agcatcaggt ctaccctgag gatggagcetg atgggctgtg acctgaactc ttgcagcatg cccctgggca tggagtctaa ggccatctct gatgcccaga ttactgccag cagctacttc accaacatgt ttgccacctg gagcccctct aaggccaggce tgcatctgca ggggaggagc aatgcctgga ggcctcaggt gaacaacccc aaggagtggce tgcaggtgga tttccagaag accatgaagg tgactggggt gaccacccag ggggtcaaga 15 gcctgctgac cagcatgtat gtgaaggagt tcctgatcag cagcagccag gatggccacc agtggactct gttctttcag aatgggaagg tgaaggtgtt tcagggcaat caggactctt tcacccctgt ggtgaacagc ctggacccce ccctgetgac cagatacctg aggatccacc cccagtcttg ggtgcatcag attgccctga ggatggaggt gctgggetgt gaggctcagg atctgtactg agcggccgca ataaaagatc agagctctag agatctgtgt gttggttttt tgtgtaggaa cccctagtga tggagttggc cactccctct ctgcgegcete 0160-1686 tgaggccggg cgaccaaagg tcgcccgacg cccgggcttt gcccgggegg cctcagtgag cgagcgagcg cgcagctgcc tgcaggggca gcttgaagga aatactaagg caaaggtact gcaagtgctc gcaacattcg cttatgcgga ttattgccgt agtgccgecga cgeecggggge 5 aagatgcaga gattgccatg gtacaggccg tgcggttgat attgccaaaa cagagctgtg ggggagagtt gtcgagaaag agtgcggaag atgcaaaggc gtcggctatt caaggatgcc agcaagcgca gcatatcgcg ctgtgacgat gctaatccca aaccttaccc aacccacctg gtcacgcact gttaagccgce tgtatgacgce tctggtggtg caatgccaca aagaagagtc aatcgcagac aacattttga atgcggtcac acgttagcag catgattgcc acggatggca 10 acatattaac ggcatgatat tgacttattg aataaaattg ggtaaatttg actcaacgat gggttaattc gctcgttgtg gtagtgagat gaaaagaggc ggcgcttact accgattccg cctagttggt cacttcgacg tatcgtctgg aactccaacc atcgcaggca gagaggtctg caaaatgcaa tcccgaaaca gttcgcaggt aatagttaga gcctgcataa cggtttcggg attttttata tctgcacaac aggtaagagc attgagtcga taatcgtgaa gagtcggcga 15 gcctggttag ccagtgctct ttcegttgtg ctgaattaag cgaataccgg aagcagaacc ggatcaccaa atgcgtacag gcgtcatcgc cgcccagcaa cagcacaacc caaactgagc cgtagccact gtctgtcctg aattcattag taatagttac gctgcggcect tttacacatg accttcgtga aagcgggtgg caggaggtcg cgctaacaac ctcctgecgt tttgccegtg catatcggtc acgaacaaat ctgattacta aacacagtag cctggatttg ttctatcagt aatcgacctt attcctaatt aaatagagca aatcccctta ttgggggtaa gacatgaaga tgccagaaaa acatgacctg ttggccgcca ttctcgcgge aaaggaacaa ggcatcgggg caatccttgc gtttgcaatg gcgtaccttc gcggcagata taatggcggt gcgtttacaa aaacagtaat cgacgcaacg atgtgcgcca ttatcgccta gttcattcgt gaccttctcg 5 acttcgccgg actaagtagc aatctcgctt atataacgag cgtgtttatc ggctacatcg gtactgactc gattggttcg cttatcaaac gcttcgctge taaaaaagcc ggagtagaag atggtagaaa tcaataatca acgtaaggcg ttcctcgata tgctggcgtg gtcggaggga actgataacg gacgtcagaa aaccagaaat catggttatg acgtcattgt aggcggagag ctatttactg attactccga tcaccctcgc aaacttgtca cgctaaaccc aaaactcaaa 10 tcaacaggcg ccggacgcta ccagcttctt tcccgttggt gggatgecta ccgcaagcag cttggcctga aagacttctc tccgaaaagt caggacgctg tggcattgca gcagattaag gagcgtggcg ctttacctat gattgatcgt ggtgatatcc gtcaggcaat cgaccgttge agcaatatct gggcttcact gccgggcegcet ggttatggtc agttcgagca taaggctgac agcctgattg caaaattcaa agaagcgggc ggaacggtca gagagattga tgtatgagca 5 gagtcaccgc gattatctcc gctctggtta tctgcatcat cgtctgectg tcatgggctg ttaatcatta ccgtgataac gccattacct acaaagccca gcgcgacaaa aatgccagag aactgaagct ggcgaacgcg gcaattactg acatgcagat gcgtcagcgt gatgttgctg cgctcgatgc aaaatacacg aaggagttag ctgatgctaa agctgaaaat gatgctctge gtgatgatgt tgccgcetggt cgtcgtcggt tgcacatcaa agcagtctgt cagtcagtge gtgaagccac caccgcctcc ggcgtggata atgcagcctc ccceccgactg gcagacaccg ctgaacggga ttatttcacc ctcagagaga ggctgatcac tatgcaaaaa caactggaag gaacccagaa gtatattaat gagcagtgca gatagagttg cccatatcga tgggcaactc atgcaattat tgtgagcaat acacacgcgc ttccagcgga gtataaatgc ctaaagtaat 5 aaaaccgagc aatccattta cgaatgtttg ctgggtttct gttttaacaa cattttctge gccgcecacaa attttggetg catcgacagt tttcttctge ccaattccag aaacgaagaa atgatgggtg atggtttcct ttggtgctac tgctgccggt ttgttttgaa cagtaaacgt ctgttgagca catcctgtaa taagcagggc cagcgcagta gcgagtagca tttttttcat ggtgttattc ccgatgcttt ttgaagttcg cagaatcgta tgtgtagaaa attaaacaaa 10 ccctaaacaa tgagttgaaa tttcatattg ttaatattta ttaatgtatg tcaggtgcga tgaatcgtca ttgtattccc ggattaacta tgtccacagc cctgacgggg aacttctctg cgggagtgtc cgggaataat taaaacgatg cacacagggt ttagcgcgta cacgtattge attatgccaa cgccccggtg ctgacacgga agaaaccgga cgttatgatt tagcgtggaa agatttgtgt agtgttctga atgctctcag taaatagtaa tgaattatca aaggtatagt 15 aatatctttt atgttcatgg atatttgtaa cccatcggaa aactcctgct ttagcaagat tttccctgta ttgctgaaat gtgatttctc ttgatttcaa cctatcatag gacgtttcta taagatgcgt gtttcttgag aatttaacat ttacaacctt tttaagtcct tttattaaca cggtgttatc gttttctaac acgatgtgaa tattatctgt ggctagatag taaatataat gtgagacgtt gtgacgtttt agttcagaat aaaacaattc acagtctaaa tcttttcgca cttgatcgaa tatttcttta aaaatggcaa cctgagccat tggtaaaacc ttccatgtga tacgagggcg cgtagtttgc attatcgttt ttatcgtttc aatctggtct gacctcecttg tgttttgttg atgatttatg tcaaatatta ggaatgtttt cacttaatag tattggttgc gtaacaaagt gcggtcctge tggcattctg gagggaaata caaccgacag atgtatgtaa 5 ggccaacgtg ctcaaaftctt catacagaaa gatttgaagt aatattttaa ccgctagatg aagagcaagc gcatggagcg acaaaatgaa taaagaacaa tctgctgatg atccctccgt ggatctgatt cgtgtaaaaa atatgcttaa tagcaccatt tctatgagtt accctgatgt tgtaattgca tgtatagaac ataaggtgtc tctggaagca ttcagagcaa ttgaggcagc gttggtgaag cacgataata atatgaagga ttattccctg gtggttgact gatcaccata 10 actgctaatc attcaaacta tttagtctgt gacagagcca acacgcagtc tgtcactgtc aggaaagtgg taaaactgca actcaattac tgcaatgccc tcgtaattaa gtgaatttac aatatcgtcc tgttcggagg gaagaacgcg ggatgttcat tcttcatcac ttttaattga tgtatatgct ctcttttctg acgttagtct ccgacggcag gcettcaatga cccaggcetga gaaattcccg gacccttttt gctcaagagc gatgttaatt tgttcaatca tttggttagg 5 aaagcggatg ttgcgggttg ttgttctgcg ggttctgttc ttcgttgaca tgaggttgce ccgtattcag tgtcgctgat ttgtattgtc tgaagttgtt tttacgttaa gttgatgcag atcaattaat acgatacctg cgtcataatt gattatttga cgtggtttga tggcctccac gcacgttgtg atatgtagat gataatcatt atcactttac gggtcctttc cggtgatccg acaggttacg gggcggcgac ctgcctgatg cggtattttc tccttacgca tetgtgeggt atttcacacc gcatacgtca aagcaaccat agtacgcgcc ctgtagcggce gcattaagceg cggcgggtgt ggtggttacg cgcagegtga ccgctacact tgccagegcec ttagcgececeg ctectttcge tttetteect tectttctcg ccacgttecge 0001116626 cgtcaagcete taaatcgggg gctcccttta gggttccgat ttagtgcettt acggcacctc gaccccaaaa 5 aacttgattt gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgce ctttgacgtt ggagtccacg ttctttaata gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaactctat ctcgggctat tcttttgatt tagacctgca ggcatgcaag cttggcactg gccgtegttt tacaacgtcg tgactgggaa aaccctggceg ttacccaact taatcgectt gcagcacatc cccctttcge cagcetggcegt aatagcgaag aggcccgcac cgatcgeect 10 tcccaacagt tgcgcagcect gaatggcgaa tgcgatttat tcaacaaagc 0060916629 tcaagtcagc gtaatgctct gccagtgtta caaccaatta accaattctg attagaaaaa ctcatcgagc atcaaatgaa actgcaattt attcatatca ggattatcaa taccatattt ttgaaaaagc cgtttctgta atgaaggaga aaactcaccg aggcagttcc ataggatggc aagatcctgg tatcggtctg cgattccgac tcgtccaaca tcaatacaac ctattaattt 15 cccctcgtca aaaataaggt tatcaagtga gaaatcacca tgagtgacga ctgaatccgg tgagaatggc aaaagcttat gcatttcttt ccagacttgt tcaacaggcc agccattacg ctcgtcatca aaatcactcg catcaaccaa accgttattc attcgtgatt gcgectgage gagacgaaat acgcgatcgc tgttaaaagg acaattacaa acaggaatcg aatgcaaccg gcgcaggaac actgccagcg catcaacaat attttcacct gaatcaggat attcttctaa tacctggaat gctgttttcc cggggatcgec agtggtgagt aaccatgcat catcaggagt acggataaaa tgcttgatgg tcggaagagg cataaattcc gtcagccagt ttagtctgac catctcatct gtaacatcat tggcaacgct acctttgcca tgtttcagaa acaactctgg cgcatcgggc ttcccataca atcgatagat tgtcgcacct gattgcccga cattatcgeg 5 agcccattta tacccatata aatcagcatc catgttggaa tttaatcgcg gcttcgagca agacgtttcc cgttgaatat ggctcataac accccttgta ttactgttta tgtaagcaga cagttttatt gttcatgatg atatattttt atcttgtgca atgtaacatc agagattttg agacacaacg tggctttgtt gaataaatcg aacttttgct gagttgaagg atcagatcac gcatcttccc gacaacgcag accgttccgt ggcaaagcaa aagttcaaaa tcaccaactg 10 gtccacctac aacaaagctc tcatcaaccg tggctccctc actttctgge tggatgatgg ggcgattcag gcctggtatg agtcagcaac accttcttca cgaggcagac ctctcgacgg agttccactg agcgtcagac cccgtagaaa agatcaaagg atcttcttga gatccttttt ttctgcgegt aatctgctge ttgcaaacaa aaaaaccacc gctaccagceg gtggtttgtt tgccggatca agagctacca actctttttc cgaaggtaac tggcttcage agagcgcaga 5 taccaaatac tgttcttcta gtgtagccgt agttaggcca ccacttcaag aactctgtag caccgcctac atacctcgct ctgctaatcc tgttaccagt ggctgctgec agtggcgata agtcgtgtct taccgggttg gactcaagac gatagttacc ggataaggcg cagcggtcgg gctgaacggg gggttcgtge acacagccca gettggagecg aacgacctac accgaactga gatacctaca gcgtgagcta tgagaaagcg ccacgcttcc cgaagggaga aaggcggaca ggtatccggt aagcggcagg gtcggaacag gagagcgcac gagggagctt ccagggggaa acgcctggta tctttatagt cctgtcgggt ttcgccacct ctgacttgag cgtcgatttt tgtgatgctc gtcagggggg cggagcctat ggaaaaacgc cagcaacgcg gcctttttac ggttcctgge cttttgetgg ccttttgetc acatgt 5 ‏بخط سميك/ تحتها خط‎ SQ ‏متوالية‎ .XO01-X18 ‏تشفره متواليات الحمض النووي‎ FVIII-BDD )25 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎
MQIELSTCFFLCLLRFCFSATRRYYLGAVELSWDYMQSDLGELPVDARFP
PRVPKSFPFENTSVVYKKTLFVEFTDHLFNIAKPRPPWMGLLGPTIQAEVYD
TVVITLKNMASHPVSLHAVGVSYWKASEGAEYDDQTSQREKEDDKVFPG 0
GSHTYVWQVLKENGPMASDPLCLTYSYLSHVDLVKDLNSGLIGALLVCRE
GSLAKEKTQTLHKFILLFAVFDEGKSWHSETKNSLMQDRDAASARAWPK
MHTVNGYVNRSLPGLIGCHRKSVYWHVIGMGTTPEVHSIFLEGHTFLVRN
HRQASLEISPITFLTAQTLLMDLGQFLLFCHISSHQHDGMEAYVKVDSCPE
EPQLRMKNNEEAEDYDDDLTDSEMDVVRFDDDNSPSFIQIRSVAKKHPKT 5
WVHYIAAEEEDWDYAPLVLAPDDRSYKSQYLNNGPQRIGRKYKKVRFMA
YTDETFKTREAIQHESGILGPLLYGEVGDTLLIIFKNQASRPYNIYPHGITDV
RPLYSRRLPKGVKHLKDFPILPGEIFKYKWTVTVEDGPTKSDPRCLTRYYS
SFVNMERDLASGLIGPLLICYKESVDQRGNQIMSDKRNVILFSVFDENRSW
YLTENIQRFLPNPAGVQLEDPEFQASNIMHSINGYVFDSLQLSVCLHEVAY 0
WYILSIGAQTDFLSVFFSGYTFKHKMVYEDTLTLFPFSGETVFMSMENPGL
WILGCHNSDFRNRGMTALLKVSSCDKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIE
PRSFSQNPPVLKRHQREITRTTLQSDQEEIDYDDTISVEMKKEDFDIYDED
ENQSPRSFQKKTRHYFIAAVERLWDYGMSSSPHVLRNRAQSGSVPQFKK
VVFQEFTDGSFTQPLYRGELNEHLGLLGPYIRAEVEDNIMVTFRNQASRP
YSFYSSLISYEEDQRQGAEPRKNFVKPNETKTYFWKVQHHMAPTKDEFD
CKAWAYFSDVDLEKDVHSGLIGPLLVCHTNTLNPAHGRQVTVQEFALFFTI
FDETKSWYFTENMERNCRAPCNIQMEDPTFKENYRFHAINGYIMDTLPGL
VMAQDQRIRWYLLSMGSNENIHSIHFSGHVFTVRKKEEYKMALYNLYPGV 5
FETVEMLPSKAGIWRVECLIGEHLHAGMSTLFLVYSNKCQTPLGMASGHI
RDFQITASGQYGQWAPKLARLHYSGSINAWSTKEPFSWIKVDLLAPMIIHG
IKTQGARQKFSSLYISQFIIMYSLDGKKWQTYRGNSTGTLMVFFGNVDSSG
IKHNIFNPPIIARYIRLHPTHYSIRSTLRMELMGCDLNSCSMPLGMESKAISD
AQITASSYFTNMFATWSPSKARLHLQGRSNAWRPQVNNPKEWLQVDFQ 0
KTMKVTGVTTQGVKSLLTSMYVKEFLISSSQDGHQWTLFFQNGKVKVFQ
GNQDSFTPVVNSLDPPLLTRYLRIHPQSWVHQIALRMEVLGCEAQDLY
(26 ‏من نوع بري مع 800 (تعريف المتوالية رقم:‎ FVIII
MQIELSTCFFLCLLRFCFSATRRYYLGAVELSWDYMQSDLGELPVDARFP
PRVPKSFPFNTSVVYKKTLFVEFTDHLFNIAKPRPPWMGLLGPTIQAEVYD 5
TVVITLKNMASHPVSLHAVGVSYWKASEGAEYDDQTSQREKEDDKVFPG
GSHTYVWQVLKENGPMASDPLCLTYSYLSHVDLVKDLNSGLIGALLVCRE
GSLAKEKTQTLHKFILLFAVFDEGKSWHSETKNSLMQDRDAASARAWPK
MHTVNGYVNRSLPGLIGCHRKSVYWHVIGMGTTPEVHSIFLEGHTFLVRN
HRQASLEISPITFLTAQTLLMDLGQFLLFCHISSHQHDGMEAYVKVDSCPE 0
EPQLRMKNNEEAEDYDDDLTDSEMDVVRFDDDNSPSFIQIRSVAKKHPKT
WVHYIAAEEEDWDYAPLVLAPDDRSYKSQYLNNGPQRIGRKYKKVRFMA
YTDETFKTREAIQHESGILGPLLYGEVGDTLLIFKNQASRPYNIYPHGITDV
RPLYSRRLPKGVKHLKDFPILPGEIFKYKWTVTVEDGPTKSDPRCLTRYYS
SFVNMERDLASGLIGPLLICYKESVDQRGNQIMSDKRNVILFSVFDENRSW ~~ 25
YLTENIQRFLPNPAGVQLEDPEFQASNIMHSINGYVFDSLQLSVCLHEVAY
WYILSIGAQTDFLSVFFSGYTFKHKMVYEDTLTLFPFSGETVFMSMENPGL
WILGCHNSDFRNRGMTALLKVSSCDKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIE
PRSFSQNSRHPSTRQKQFNATTIPENDIEKTDPWFAHRTPMPKIQNVSSS
DLLMLLRQSPTPHGLSLSDLQEAKYETFSDDPSPGAIDSNNSLSEMTHFR 5
PQLHHSGDMVFTPESGLQLRLNEKLGTTAATELKKLDFKVSSTSNNLISTIP
SDNLAAGTDNTSSLGPPSMPVHYDSQLDTTLFGKKSSPLTESGGPLSLSE
ENNDSKLLESGLMNSQESSWGKNVSSTESGRLFKGKRAHGPALLTKDNA
LFKVSISLLKTNKTSNNSATNRKTHIDGPSLLIENSPSVWQNILESDTEFKK
VTPLIHDRMLMDKNATALRLNHMSNKTTSSKNMEMVQQKKEGPIPPDAQ 10
NPDMSFFKMLFLPESARWIQRTHGKNSLNSGQGPSPKQLVSLGPEKSVE
GQNFLSEKNKVVVGKGEFTKDVGLKEMVFPSSRNLFLTNLDNLHENNTHN
QEKKIQEEIEKKETLIQENVVLPQIHTVTGTKNFMKNLFLLSTRQNVEGSYD
GAYAPVLQDFRSLNDSTNRTKKHTAHFSKKGEEENLEGLGNQTKQIVEKY
ACTTRISPNTSQQNFVTQRSKRALKQFRLPLEETELEKRIIVDDTSTQWSK 5
NMKHLTPSTLTQIDYNEKEKGAITQSPLSDCLTRSHSIPQANRSPLPIAKVS
SFPSIRPIYLTRVLFQDNSSHLPAASYRKKDSGVQESSHFLQGAKKNNLSL
AILTLEMTGDQREVGSLGTSATNSVTYKKVENTVLPKPDLPKTSGKVELLP
KVHIYQKDLFPTETSNGSPGHLDLVEGSLLQGTEGAIKWNEANRPGKVPF
LRVATESSAKTPSKLLDPLAWDNHYGTQIPKEEWKSQEKSPEKTAFKKKD 0
TILSLNACESNHAIAAINEGQNKPEIEVTWAKQGRTERLCSQNPPVLKRHQ
REITRTTLQSDQEEIDYDDTISVEMKKEDFDIYDEDENQSPRSFQKKTRHY
FIAAVERLWDYGMSSSPHVLRNRAQSGSVPQFKKVVFQEFTDGSFTQPL
YRGELNEHLGLLGPYIRAEVEDNIMVTFRNQASRPYSFYSSLISYEEDQRQ
GAEPRKNFVKPNETKTYFWKVQHHMAPTKDEFDCKAWAYFSDVDLEKDV 5
HSGLIGPLLVCHTNTLNPAHGRQVTVQEFALFFTIFDETKSWYFTENMERN
CRAPCNIQMEDPTFKENYRFHAINGYIMDTLPGLVMAQDQRIRWYLLSMG
SNENIHSIHFSGHVFTVRKKEE YKMALYNLYPGVFETVEMLPSKAGIWRVE
CLIGEHLHAGMSTLFLVYSNKCQTPLGMASGHIRDFQITASGQYGQWAPK
LARLHYSGSINAWSTKEPFSWIKVDLLAPMIIHGIKTQGARQKFSSLYISQFI
IMYSLDGKKWQTYRGNSTGTLMVFFGNVDSSGIKHNIFNPPIIARYIRLHPT 5
HYSIRSTLRMELMGCDLNSCSMPLGMESKAISDAQITASSYFTNMFATWS
PSKARLHLQGRSNAWRPQVNNPKEWLQVDFQKTMKVTGVTTQGVKSLL
TSMYVKEFLISSSQDGHQW TLFFQNGKVKVFQGNQDSFTPVVNSLDPPLL
TRYLRIHPQSWVHQIALRMEVLGCEAQDLY
(27 ‏(تعريف المتوالية رقم:‎ AAV-LKO3 VPI ‏قفيصة‎ 10
MAADGYLPDWLEDNLSEGIREWWALQPGAPKPKANQQHQDNARGLVLP
GYKYLGPGNGLDKGEPVNAADAAALEHDKAYDQQLKAGDNPYLKYNHAD
AEFQERLKEDTSFGGNLGRAVFQAKKRLLEPLGLVEEAAKTAPGKKRPVD
QSPQEPDSSSGVGKSGKQPARKRLNFGQTGDSESVPDPQPLGEPPAAP
TSLGSNTMASGGGAPMADNNEGADGVGNSSGNWHCDSQWLGDRVITT 5
STRTWALPTYNNHLYKQISSQSGASNDNHYFGYSTPWGYFDFNRFHCHF
SPRDWQRLINNNWGFRPKKLSFKLFNIQVKEVTQNDGTTTIANNLTSTVQ
VFTDSEYQLPYVLGSAHQGCLPPFPADVFMVPQYGYLTLNNGSQAVGRS
SFYCLEYFPSQMLRTGNNFQF SYTFEDVPFHSSYAHSQSLDRLMNPLIDQ
YLYYLNRTQGTTSGTTNQSRLLFSQAGPQSMSLQARNWLPGPCYRQQRL 0
SKTANDNNNSNFPWTAASKYHLNGRDSLVNPGPAMASHKDDEEKFFPM
HGNLIFGKEGTTASNAELDNVMITDEEEIRTTNPVATEQYGTVANNLQSSN
TAPTTRTVNDQGALPGMVWQDRDVYLQGPIWAKIPHTDGHFHPSPLMGG
FGLKHPPPQIMIKNTPVPANPPTTFSPAKFASFITQYSTGQVSVEIEWELQK
ENSKRWNPEIQYTSNYNKSVNVDFTVDTNGVYSEPRPIGTRYLTRPL 5
AAV-SPK-8005 ‏(تعريف المتوالية رقم: 28) المستخدم في‎ AAV-SPK VP] ‏قفيصة‎ ‎AAV-SPK-hFIX ‎MAADGYLPDWLEDNLSEGIREWWDLKPGAPKPKANQQKQDNGRGLVLP ‎GYKYLGPFNGLDKGEPVNAADAAALEHDKAYDQQLQAGDNPYLRYNHAD ‎AEFQERLQEDTSFGGNLGRAVFQAKKRVLEPLGLVESPVKTAPGKKRPVE 5
PSPQRSPDSSTGIGKKGQQPAKKRLNFGQTGDSESVPDPQPIGEPPAAP
SGVGPNTMAAGGGAPMADNNEGADGVGSSSGNWHCDSTWLGDRVITT
STRTWALPTYNNHLYKQISNGTSGGSTNDNTYFGYSTPWGYFDFNRFHC
HFSPRDWQRLINNNWGFRPKRLNFKLFNIQVKEVTQNEGTKTIANNLTSTI
QVFTDSEYQLPYVLGSAHQGCLPPFPADVFMIPQYGYLTLNNGSQAV 0
GRSSFYCLEYFPSQMLRTGNNFEFSYNFEDVPFHSSYAHSQSLDRLMNP
LIDQYLYYLSRTQSTGGTAGTQQLLFSQAGPNNMSAQAKNWLPGPCYRQ
QRVSTTLSQNNNSNFAWTGATKYHLNGRDSLVNPGVAMATHKDDEERFF
PSSGVLMFGKQGAGKDNVDYSSVMLTSEEEIKTTNPVATEQYGVVADNL
QQQNAAPIVGAVNSQGALPGMVWQNRDVYLQGPIWAKIPHTDGNFHPSP 56
LMGGFGLKHPPPQILIKNTPVPADPPTTFNQAKLASFITQYSTGQVSVEIE
WELQKENSKRWNPEIQYTSNYYKSTNVDFAVNTEGTYSEPRPIGTRYLTR
NL
X06 X02 x09 CO3 (WT) hFVIIl ‏النسبة المئوية للمصفوفة المتطابقة من العوامل‎
X13 X16 X03 X07 X11 X04 X12 X01 X14 X18 X05 X15 X08 20 (X10 X17
‎١‏ 1ط ط أ ط اط ا ط لط ا ط لط ا ط ا ط لطا ط اط لط لط م الطلط ‎FIF|F|F|F|F|F|F|F|F|F|F|F|F|F|F|F|F|F|F‏
‏بد بد بدا بدا بدا بد بدا با بد بحا بدا بدا بد بحا بدا بح بحا بحا لا لا ‎١|١١١] ١/١/١] ١/١/١ ١ ١|١١١‏ ‎١|١١١] ١/١/١] ١/١/١ ١ ١|١١١‏ ‎١|١١١] ١/١/١] ١/١/١ ١ ١|١١١‏
‏ميا )لا )ل )ل )اا اا )ا )اا )اا »ا اا )لا اا »ا ا لا ‎X |X‏ 0007 0/1) 01/1 1)0)0/1)0/1)0/ 1/1/1 0|7|3|6|3|7|1|4|2]1|4|8|5|5|8]|6]2(9]|3
‎77+ |(7|7|7|7\7|7|7|7| |7|7|7|7|7|7|7] | hFVII 919(7(9|9(9(9|9]9]9|9]|7|9|9|9|9|9|9]|7 WT doll lo ee]
‎316] |1]|4]2|4|4|4]6|6] [1|3|2]3]1|5]2 8/8(8|8(8[8|8|8|8|8|8|8(8|8|8|8|8|8| |7]| hFVIl 2/2/1111 /1/1/1/1/1/1/1/1/1/1/1/1/ |7| 893 201(8|9]|6(8|7|3[1]1|4]|2]6|6(|3|5[9|9]| 2 9|9(9(9|9(9(9|9]|9|9|9| |9| [9]9]9]| |8|7]| 07/١ 11/1/21 /2/1/1 1/1/1 |9/1/9/1/1 01| |1]|9| X09 ‏اا 2 ااا ااا‎
‎6|1(8[1|5(|2(7|7|5|5(4| |8| |8]4]|5| 5
999,9 9 919 99,9 919 98 7١ hEVI 2/1 2/19 11/91/19 1/229 1 11/976 2 lel e222) le 1935 5 919 721 34 591 9999 99 99999999 99 87| 1/١١ 11 2/1/1199 1/12/1111 1 11/1/99 X06 ‏.ا‎ A I I Ie I I EE I I I ‏|.ا.‎ .٠ ‏5ا4ا)6)4)7)‎ 5 7)3 8589 8 443 99999 99999999 999) 87| ١/١١ 1١11 2/119 2/2/1211 1 11/1/19 X08 cle ‏ا2ا.‎ . |. ee] lel] 9663 7 535 28 8 5 38232 999,9 9999999 919 8|7| hFVII 922221921222112 1)1)9 9119+ X15 cp oo 20] e212) ٠ 5531 52/1 3/7 2 819 63 91919(191919(9(9|9(9]|9 91919199 |8|7| hFVII 912112122212 2/1 1/21/1956 5 200 eel] SE ‏ا .ةا .ا‎ 9(3(T7|6|1|5|1|4|7|9]|5 258 18 1
99999999 9 99999 8 ‏ارالحطط‎ ‎9]1]1 11/1/1112 91 2/1/1112 97 X18 200-0] 13]: lel 19 581/47 81 6 562 2 9999999 9)9)9)9) 909/908) 7| hEVII 9122 1111 99 1111/1 /1/1/1/1 976 4 2). 0... .|.. 3 lel] 523886 6 69788 76 999999999 999,9 98 7١ hEVI 22222223 9(9(2(2(2(2|9|1]|1|9] 1 lel eee] 3030. 2]-]-]-
1416 25654 733 16
9999 99 9 9)9)9)9) 909/908) 7| hEVII
2 ا/1]/1/9 222/111 39 99 22212 ا .ا .3 |[ .3 | ...2.1 2 .ا ‎I I‏
6647 4 4 1411/5/7) 95 4
919 919 9 919(9(19(9(9|9|9|9(8|7| hEVII
2191192 9211/2 2)2/1)/1/1/1+9 4 ‏.ا2ا.ا.‎ 2٠ 200 lel]!
519 515 6 365*123 897 4
999,9 9 9 999999 98 7١ hEVI 11121 92 29 211/1229 9])]1)1)]9 1 ‏2ا.ا.ا.ا.‎ 2.2... 2012)
989 6 6 588 55 774
99,9 9 9 99999 919(9(8|7| hFVII
21 92 29 22/11/29 9])]1)1)2/1)9+ X07 ‏ا.ا.ا.‎ 6 A270 e212]!
7194 1 6 461 5552
99,9 9 999999999 98 7١ hEVI 11229 2 )9])1 22/11/11 2/1/1911 )01)9 XO3 . A A200 ee]
60117 1 54015 84060174 54
9 9 9(9(9(9191919(9]9(9(9(9|8|7| 0/١
2192 99]1)1)1 2211/2/11 /1)2/1/9 6 ‏2ا.‎ ٠ 2020 | lolol]
8 4 95723/17247511
919 999 9 999 * 99999 99 86 hF VIII
212 22 223921221222 2217 X13 ole ER FE 1 EO EO EA (I EE ‏...ا‎ 9
34 473 462 8 3 3 3 43 886
‎5/١١‏ |919191919(9(9(9(9(9|9|9(9|9|8|7 9 9 ‎X17‏ 9 2 1/2/1111 21)1)1221/1 29 2 ا : 6 1 69 06)4)8)8)95)6 89 19 4 9 ‎969)9)9])8])7١ hFVII‏ 9 999 99 999 ‎X10‏ 19 99991 1222 22212 ‎celle 2222]‏ 3 816 9 1 795 6 98)8 التعريفات/ الاختصارات المعينة المستخدمة ‎:BDD‏ تتم إزالة كل أو جزءِ على الأقل من النطاق 8 ‎(BD)‏ ‎FVIII :FVIII-BDD‏ مع إزالة النطاق 8 ‎SFSQNPPVLKRHQR :SQ‏ (تعريف المتوالية رقم: 29) ‎FVIII :FVIII/SQ 5‏ مع ‎SQ‏ ‎:FVIIIX01-X18‏ أشكال متباينة لحمض نووي يشفر ‎FVIII‏ منخفض ‎(CPG‏ مذكورة على أنها تعريف المتوالية أرقام: 18-1؛ على التوالي. ‎:TTRmut‏ معزز ‎TTR‏ مع 4 طفرات؛ من ‎TATTGACTTAG TAMGTGTAG‏ 3: شكل متباين لحمض نووي ‎FVII‏ مُحسّن الكودون» مذكور على أنه تعريف المتوالية ‎tad)‏ ‏0 21 ‎:NHP‏ كائن رئيسي غير بشري ‎ALT‏ ألانين أمينو ترانسفيراز دايمر-لا: شظية بروتين من تكسير خثرة دم
‎:SPK-8005‏ قفيصة ‎AAV‏ (تعريف المتوالية رقم: 28( + ‎¢TTRmMuUt=hFVIII=X07‏ تتم الإشارة إليه أيضاً على أنه ‎AAV-SPK-8005‏ ‎:SPK-8011‏ قفيصة ‎AAV LKO3‏ (تعريف المتوالية رقم: 27( + ‎¢TTRmut-hFVIII=-X07‏ ‏تتم الإشارة إليه أيضاً على أنه ‎AAV-SPK-8011‏ ‏5 في حين أنه تم وصف بعض النماذج من الاختراع وتمثيلها بصفة خاصة أعلاه؛ فهذا لا يعني أن
يقتصر ا لاختراع على تلك النماذ ج قد يتم إجراء تعديلات متنوعة لها بدون الحيود عن نطاق وروح الاختراع؛ كما هو مذكور في عناصر الحماية التالية. قائمة المتواليات 1 <400> atgcagattg agctgtctac ctgcttcttc ctgtgcctge tgaggttetg ‏أعواعاعاه‎ 60 10 accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg attacatgca gtctgacctg 120 ggggagctgc ctgtggatgce caggtttccc cccagggtge ccaagagctt ccecttcaat 180 acctctgtgg tgtataagaa gaccctgttt gtggagttca ctgatcatct gttcaacatt 240 15 gctaaaccca ggcccccectg gatggggcetg ctgggceccta ccatccaggce tgaggtgtat 300 gacactgtgg tgatcactct gaagaacatg gctagccatc ctgtgtctct gcatgctgtg 360 ggggtgagct actggaaggc ttctgagggg gctgagtatg atgatcagac tagccagagg
420 20 gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggctctcaca cctatgtctg gcaggtgcetg 480 aaggagaatg gccccatggc ctctgatcct ctgtgtctga cctatagcta cctgagcecat 540 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggce ctgattgggg ccctgetggt gtgtagggag 5 600 gggagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt tcattctgct gtttgctgtg 660 tttgatgagg gcaagagctg gcattctgaa accaagaaca gcctgatgca ggacagggat 720 0 gctgcctetg ctagggectg gcccaagatg cacactgtga atgggtatgt caataggtct 780 ctgcctggcece tgattggcetg ccacaggaag tetgtgtact ggcatgtgat tgggatgggce 840 accacccctg aggtgcacag catctttctg gagggccaca ccttcctggt gaggaatcac 5 900 agacaggcca gcctggagat cagccccatc accttcctga ctgcccagac cctgetgatg 960 gacctgggcc agtttctgcet gttctgccac atctctagec accagcatga tggcatggag 1020 0 gcctatgtga aggtggactc ctgccctgag gagccccage tgaggatgaa gaataatgag 1080 gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gagatttgat 1140 gatgacaatt ctcccagctt cattcagatc aggtctgtgg ccaagaagca tcccaagacc 1200 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gactgggact atgcccccect ggtgetggee 5 1260 cctgatgaca ggagctataa gagccagtac ctgaataatg gcccccagag gattgggagg 1320 aagtataaga aggtgaggtt catggcctat actgatgaaa ccttcaagac cagagaggcc 1380 10 atccagcatg agtctgggat cctggggccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 1440 ctgatcatct tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tctaccctca tggcatcact 1500 gatgtgaggc ctctgtacag cagaaggctg cccaaggggg tgaagcatct gaaggacttc 5 1560 cccattctge ctggggagat tttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggccca 1620 accaagtctg accctaggtg cctgactagg tactacagca gctttgtgaa tatggagagg 1680 20 gacctggcct ctggcctgat tggccccctg ctgatctget acaaggagtc tgtggatcag 1740 aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag 1800 aacaggagct ggtacctgac tgagaacatt cagaggtttc tgcccaaccc tgctggggtg 1860 cagctggagg accctgaatt ccaggcctct aacatcatgc acagcattaa tggctatgtg ‏م‎ ‎1920 ‎tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta cattctgagce 1980 attggggccc agactgactt cctgtcetgtg ttcttctctg getacacctt taagcacaag 2040 atggtgtatg aggataccct gaccctgttt cctttctctg gggagactgt gttcatgage 0 atggagaacc ctggcctgtg gatcctgggce tgccacaact ctgacttcag gaacaggggg 10 2160 atgactgctc tgctgaaggt gagcagcetgt gataagaaca ctggggacta ctatgaggac 2220 agctatgagg acatctctgc ctatctgctg agcaagaata atgctattga gcccaggagce 2280 15 ttctctcaga accccccetgt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag aactactctg 2340 cagtctgacc aggaggagat tgactatgat gacaccatct ctgtggagat gaagaaggag 2400 gattttgata tttatgatga ggatgaaaac cagagcccca ggagcttica gaagaagact 0 2460 aggcactatt tcattgctge tgtggagagg ctgtgggact atggcatgtc ttctageccce 2520 catgtgctga ggaacagggc ccagtctggc tctgtgccce agttcaagaa ggtggtgtte 2580 caggagttca ctgatggcag cttcactcag cccctgtaca ggggggagct gaatgagcac 2640 5 ctggggctgce tgggccctta tatcagggcet gaggtggagg ataacatcat ggtgacctte 2700 aggaaccagg ccagcaggcc ctacagcttc tactctagcc tgatcagcta tgaggaggac 2760 cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacttat 10 2820 ttctggaagg tgcagcacca tatggccccc accaaggatg agtttgattg caaagcctgg 2880 gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctgggctgat tggccccctg 2940 15 ctggtgtgcc acaccaacac tctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag actaagagct ggtacttcac tgagaacatg 3060 gagaggaact gcagggcccc ctgcaatatc cagatggagg accccacctt taaggaaaat 3120 0 tataggtttc atgccattaa tggctacatc atggacaccc tgcctggect ggtgatggcec 3180 caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatgggca gcaatgagaa cattcacagc 3240 atccacttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg 3300 tataatctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatc 5
3360 tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgagcac cctgttcctg 3420 gtgtattcta acaagtgtca gacccccctg ggcatggcect ctggccatat cagggacttc
3480 10 cagatcactg cctctggcca gtatgggcag tgggccccca agctggccag gctgcattac 3540 tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag gagccattca gctggattaa ggtggacctg 3600 ctggctccaa tgattatcca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gtttagcage 5 3660 ctgtacatct ctcagtttat catcatgtac tctctggatg gcaaaaagtg gcagacctac 30 aggggcaatt ctactggcac tctgatggtg ttctttggca atgtggacag ctctgggatc 3780 aagcacaaca tctttaaccc ccctatcatt gccaggtaca ttaggctgca ccccacccat
3840 20 tacagcatca ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgatctgaa cagctgcagce 3900 atgcccctgg gcatggagag caaggctatc tctgatgccc agattactgc cagcagctac 3960 ttcaccaata tgtttgccac ctggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcagg 4020 tctaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 5 4080 aagaccatga aggtgactgg ggtgaccacc cagggggtga agagcctgct gactagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagc caggatggcc atcagtggac cctgttcttc 4200 10 cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc aatcaggaca gcttcaccce tgtggtgaac 4260 agcctggacc cccccctget gaccagatac ctgaggatcc acccccagag ctgggtgeat 4320 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggg tgtgaggccc aggacctgta ctga 5 4374 <210> 2 <211> 4374 <212> DNA <213> Artificial Sequence 20 <220>
<223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 2 atgcagattg agctgtctac ctgctttttc ctgtgtctgc tgaggttctg cttctctgece 60 actaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgtcttggg attacatgca gtctgatctg 120 ggggagctgc ctgtggatgc caggtttcct cccagggtge ccaagtcttt ccccttcaat 180 5 acctctgtgg tgtataagaa gaccctgttt gtggagttta ctgatcacct gttcaacatt 240 gccaagccca ggcccccttg gatgggcectg ctggggccca ccatccagge tgaggtgtat 300 gacactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gcctctcacc ctgtgagcct gcatgcetgtg 360 10 ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg 420 gagaaggagg atgataaggt gttccctggg gggagccaca cttatgtgtg gcaggtgctg 480 aaggagaatg gcccaatggc ctctgatcce ctgtgectga cctattctta cctgageccat 15 540 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 600 ggctctctgg ctaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt tcatcctgct gtttgctgtg 660 20 tttgatgagg ggaagagctg gcactctgag accaagaaca gcctgatgca ggacagggat 720 gctgcctetg ccagggcectg gcccaaaatg cacactgtga atggctatgt gaataggagce 780 ctgcctggcece tgattggcetg ccacaggaag tetgtgtatt ggcatgtgat 006819996 840 5 accacccctg aggtgcactc tatcttcctg gagggccata ctttcctggt gaggaatcat 900 aggcaggcca gcctggagat tagccccatt acctttctga ctgcccagac cctgctgatg 960 gacctgggcc agttcctgcet gttttgccac atcagctctc accagcatga tggcatggag
1020 10 gcctatgtga aggtggatag ctgccctgag gagccccagce tgaggatgaa gaacaatgag 1080 gaggctgagg attatgatga tgatctgact gattctgaaa tggatgtggt gaggtttgat 110 gatgacaata gcccctcttt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca tcctaagacc
1200 15 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gactgggact atgctccect ggtgctggee 1260 cctgatgaca ggtcttacaa gagccagtac ctgaacaatg gcccccagag aattgggagg 1320 aagtataaga aggtgagatt catggcttac actgatgaga ccttcaagac tagggaggcc 20 1380 atccagcatg agtctggcat tctgggcccc ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 1440 ctgatcatct tcaagaacca ggcctctagg ccctacaata tttaccccca tgggatcact 1500 gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cctaaggggg tgaagcatct gaaggacttc 5 1560 cccatcctge ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga agatggcccc 1620 accaagtctg accctaggtg cctgaccagg tactactctt cttttgtgaa catggagagg 1680 10 gacctggcct ctggcctgat tggccceectg ctgatctget acaaggagtc tgtggaccag 1740 agggggaacc agattatgtc tgacaagagg aatgtgattc tgttctctgt gtttgatgag 0 aacaggagct ggtatctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcccaatcc tgctggggtg 1860 15 cagctggagg accctgagtt ccaggccagc aacatcatgc acagcatcaa tgggtatgtg 1920 tttgattctc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgagce 1980 attggggctc agactgattt cctgtctgtg ttcttttctg gctacacctt taagcataag 2040 atggtgtatg aggacactct gaccctgttt cccttctctg gggagactgt gtttatgage 2100 0 atggagaacc ctggcctgtg gatcctgggce tgccacaact ctgatttcag gaacaggggce 2160 atgactgctc tgctgaaggt gtcttcttgt gacaagaaca ctggggacta ttatgaggac 2220 agctatgagg acatctctge ctacctgctg agcaagaaca atgctattga gcccagatct 5 2280 ttcagccaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcactag gaccaccctg 2340 cagtctgacc aggaggagat tgactatgat gacactatct ctgtggagat gaagaaggag 2400 10 gactttgata tctatgatga ggatgagaac cagtctccca ggagcttcca gaaaaagacc 2460 aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgtc ttctagcccc 2520 catgtgctga ggaacagggc ccagtctggg tctgtgcccec agttcaagaa ggtggtgttc 2580 15 caggagttca ctgatgggag cttcacccag cctctgtaca ggggggagct gaatgagcac 2640 ctggggctgce tgggccctta tattagggct gaggtggagg acaacatcat ggtgactttc 2700 aggaatcagg cctctaggcc ctatagcttc tacagctctc tgatcagcta tgaggaggat 0 2760 cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac 2820 ttctggaagg tgcagcacca catggctcct accaaggatg agtttgactg caaggcctgg 2880 gcctactttt ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggcccectg 2940 5 ctggtgtgtc ataccaacac cctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag accaagagcet ggtactttac tgagaacatg 3060 gagaggaatt gcagagcccc ttgcaacatc cagatggagg acccaacctt caaagagaac
3120 10 tacaggttcc atgccatcaa tgggtacatc atggacaccc tgcctggcect ggtgatggct 3180 caggaccaga ggatcaggtg gtatctgctg agcatgggca gcaatgagaa tatccatagc 3240 attcacttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg 5 3300 tataacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgccaagcaa ggctgggatt 3360 tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgtctac cctgttcctg
3420 0 gtgtactcca ataagtgcca gacccccctg ggcatggect ctggccacat cagggacttc 3480 cagatcactg cctctggcca gtatgggcag tgggccccaa agctggccag gctgcactat 3540 tctgggagca tcaatgcttg gagcaccaag gagcctttca gctggattaa ggtggatctg 3600 ctggcccecca tgatcattca tggcatcaaa acccaggggg ctagacagaa gttttctage 5 3660 ctgtacatca gccagttcat catcatgtac agcctggatg gcaagaagtg gcagacttac 3720 aggggcaata gcactggcac cctgatggtg ttttttggca atgtggacag ctctggcatc 3780 10 aagcacaaca tctttaaccc ccccattatt gccaggtata tcaggctgca tcccacccac 3840 tattctatta ggtctactct gagaatggag ctgatgggct gtgacctgaa cagctgtage 3900 atgcccctgg ggatggagag caaggctatc tctgatgccec agatcactge cagctcttat 3960 15 ttcaccaata tgtttgccac ctggtctccc tctaaggcca ggctgcacct gcagggcagg 4020 agcaatgctt ggaggcccca ggtgaataac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 4080 aagaccatga aggtgactgg ggtgactacc cagggggtga agtctctgct gactagcatg 0 4140 tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagc 80038109002 atcagtggac tctgttcttc 4200 cagaatggca aggtgaaggt cttccagggg aaccaggata gcttcactcc tgtggtgaac 4260 tctctggacc ccccectget gactaggtat ctgaggatce acccccagag ctgggtgcac 5
4320 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggacctgta ttga 4374 <210> 3
<211> 4374 10 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid
<400> 3 5 atgcagattg aactgtctac ttgtttcttc ctgtgcctge tgaggttttg cttctctgcet 60 actaggaggt actatctggg ggctgtggag ctgtcttggg actatatgca gtctgacctg 120 ggggagctgc ctgtggatgc taggtttcce cccagggtge ccaagagctt cccctttaac 180 acctctgtgg tgtataagaa gactctgttt gtggagttca ctgaccatct gttcaacatt 240 20 gccaagccaa ggcccccctg gatgggcectg ctgggcccca ccatccaggce tgaggtgtat 300 gacactgtgg tgattactct gaagaacatg gccagccatc ctgtgagcct gcatgcetgtg 360 ggggtgtctt actggaaggce ctctgagggg gectgagtatg atgaccagac ctctcagagg 5 420 gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggctctcata cctatgtgtg gcaggtcctg 480 aaggagaatg ggcccatggc ctctgacccce ctgtgcctga cctactctta tctgtctcat 540 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 0 600 ggcagcctgg ctaaggagaa gacccagact ctgcacaagt tcatcctgcet gtttgctgtg 660 tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag accaagaaca gcctgatgca ggacagggat 720 15 gctgcctetg ctagggectg gecccaagatg cacactgtga atgggtatgt gaacaggage 780 ctgccaggcc tgattggctg ccataggaag tetgtgtatt ggcatgtgat tgggatgggg 840 actacccctg aggtccacag cattttcctg gaggggcata cctttctggt gaggaaccac 900 20 aggcaggcct ctctggagat ctctcccatt actttcctga ctgcccagac ‏اه‎ 960 gacctgggcc agttcctgcet gttctgccac atcagcagcec accagcatga tggcatggag 1020 gcctatgtga aggtggatag ctgccctgag gagccccagce tgaggatgaa aaacaatgag 1080 gaggctgagg attatgatga tgacctgact gattctgaga tggatgtggt gaggtttgat 1140 5 gatgataaca gccccagctt catccagatt aggtctgtgg ccaagaagca tcccaagacc 1200 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggact atgctcctct ggtgctggcee 1260 cctgatgaca ggagctacaa gagccagtac ctgaataatg gcccccagag gattggcagg 10 1320 aagtataaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga cctttaagac cagggaggcc 1380 atccagcatg aatctgggat cctgggcccc ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg
1440 15 ctgattatct ttaagaacca ggctagcagg ccctacaaca tttaccccca tggcattact 1500 gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcacct gaaggatttc 1560 cccattctgc ctggggagat ctttaagtac aaatggactg tgactgtgga ggatggcect 20 1620 actaagtctg atcccaggtg tctgaccaga tactacagca gctttgtgaa tatggagagg 1680 gacctggctt ctggcctgat tggccccectg ctgatctget acaaggagtc tgtggaccag 1740 aggggcaatc agattatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag 1800 5 aacagaagct ggtacctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcccaaccc tgetggggtg 1860 cagctggagg accctgagtt ccaggctagc aatatcatgc acagcattaa tggctatgtg 1920 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctattggta cattctgagce 1980 10 attggggccc agactgattt cctgtctgtg ttcttttctg gectacacctt caagcacaag 2040 atggtgtatg aggatactct gaccctgttt cccttctctg gggagactgt gttcatgage 0 atggagaacc ctggcctgtg gatcctgggce tgtcacaact ctgacttcag gaacaggggce 2160 atgactgccc tgctgaaggt gagctcttgt gataagaaca ctggggacta ctatgaggac 5 2220 tcttatgagg acatctctgce ctacctgctg agcaagaaca atgctattga gcccaggage 2280 ttctctcaga atccccctgt gectgaagagg catcagaggg agatcactag gactaccctg
2340 0 cagtctgacc aggaagagat tgactatgat gacaccatct ctgtggaaat gaagaaggag 2400 gactttgata tctatgatga ggatgaaaac cagagcccca ggagcttcca gaagaagacc 2460 aggcattact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atgggatgag ctcttctcce 2520 5 catgtgctga ggaatagggc tcagtctggce tctgtcccac agttcaagaa ggtggtgttt 2580 caggagttca ctgatggcag cttcactcag cccctgtaca ggggggagct gaatgagcat 2640 ctgggcctge tggggceccta catcagggcet gaggtggagg ataacattat ggtgactttc 10 2700 aggaaccagg cctctaggcc ctacagcttc tacagcagcc tgatcagcta tgaggaggac 2760 cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac taagacctat 2820 15 ttctggaagg tgcagcatca catggctccc actaaagatg agtttgactg caaggcectgg 2880 gcctacttct ctgatgtgga tctggagaag gatgtgcatt ctgggctgat tggccctcetg 2940 ctggtctgcc atactaacac cctgaatcct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 0 tttgccctgt tetttaccat ctttgatgag accaagtctt ggtacttcac tgagaacatg 3060 gagaggaact gcagggcccc ctgtaacatc cagatggagg accccacctt taaggagaac 3120 tacaggttcc atgccatcaa tggctacatc atggacactc tgcctggect ggtgatggee 3180 caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg tctatgggct ctaatgagaa cattcattct 5 3240 atccacttct ctggccatgt gtttactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg 3300 tacaatctgt accctggggt gtttgaaact gtggagatgc tgccctctaa ggctggcatc 3360 tggagggtgg agtgcctgat tggggaacac ctgcatgcetg gecatgagcac cctgttcectg 0 3420 gtctatagca ataagtgcca gacccccctg gggatggcect ctgggcatat cagagacttc 3480 cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggccccca agcetggccag getgcactac 3540 15 tctggcagca ttaatgcctg gagcaccaag gagcccttct cttggatcaa ggtggacctg 3600 ctggctccca tgatcatcca tgggatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttcagcagce 3660 ctgtacatct ctcagticat catcatgtac tctctggatg gcaagaagtg gcagacctac |3720 20 aggggcaata gcactgggac cctgatggtg ttctttggga atgtggacag ctctggcatc 3780 aagcacaata tcttcaaccc ccccatcatt gccaggtaca tcagactgca ccccactcat 3840 tacagcatca ggagcactct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa tagctgctct 3900 atgcccctgg gcatggagag caaggccatt tctgatgcce agattactge ctcttcttac 5 3960 ttcactaata tgtttgccac ctggagcccc agcaaggceca ggctgcatct gcaggggagg 4020 agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 4080 10 aagactatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gaccagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat ctcttctagc caggatgggc accagtggac cctgttittc 4200 cagaatggga aggtgaaggt gtttcagggc aatcaggaca gctttactcc tgtggtgaac 4260 15 agcctggacc cccccctgcet gactaggtac ctgaggattc acccccagag ctgggtgcac 4320 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggatctgta ctga 4374 <210> 4 20 <211> 4374
<212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 4 5 atgcagattg agctgtctac ctgcttcttt ctgtgcctge tgaggttctg tttctctgece 60 actaggaggt attatctggg ggctgtggag ctgtcctggg actacatgca gtctgatctg 120 ggggagctgc ctgtggatgc caggttccct cccagggtge ccaagtcttt ccctttcaat 180 acctctgtgg tgtacaagaa gactctgttt gtggagttta ctgatcacct gtttaacatt 240 gccaagccca ggcccccectg gatggggetg ctgggeccca ccatccagge tgaggtgtat 0 300 gacactgtgg tgattactct gaagaatatg gcttctcacc ctgtgagect 89 360 ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg 420 gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cttatgtgtg gcaggtgetg 5 480 aaggagaatg gcccaatggc ctctgacccce ctgtgecctga cctacagcta tctgagecat 540 gtggatctgg tgaaggatct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 600 20 ggctctctgg ccaaggagaa gactcagact ctgcacaagt tcatcctgct gtttgetgtg 660 tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag accaagaact ctctgatgca ggatagggat 720 gctgcttctg ccagggcectg gecccaagatg cacactgtga atgggtatgt gaataggagce 780 5 ctgcctgggce tgattgggtg tcacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatgggce 840 accactcctg aggtgcacag catctttctg gagggccaca cttttctggt gaggaatcac 900 aggcaggcca gcctggagat cagccccatc accttcctga ctgcccagac cctgctgatg
960 10 gatctgggcc agttcctgct gttttgccat atcagcagcec atcagcatga tgggatggag 1020 gcttatgtga aggtggactc ttgccctgag gagcctcage tgaggatgaa gaataatgaa 1080 gaggctgagg actatgatga tgatctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat 5 1140 gatgacaaca gccccagctt tatccagatt aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc 1200 tgggtgcatt acattgctgc tgaggaagag gattgggact atgccccect ggtgctggece
1260 20 cctgatgaca ggagctacaa gtctcagtac ctgaacaatg gccctcagag gattggcagg 1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcttac actgatgaga ccttcaagac cagggaggcc 1380 attcagcatg aatctgggat cctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 1440 ctgattattt tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tttatcctca tggcattact 1500 5 gatgtgagac ccctgtacag caggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggacttc 1560 cccatcctge ctggggagat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggcccc 1620 actaagtctg accccaggtg cctgactagg tactactcca gctttgtgaa catggagagg 0 1680 gacctggcct ctggcctgat tggccccctg ctgatctget acaaggagtc tgtggatcag 1740 aggggcaacc agatcatgtc tgacaagaga aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag
1800 15 aataggtctt ggtacctgac tgagaacatc cagaggtttc tgcctaatcc tgctggggtg 1860 cagctggagg atcctgagtt ccaggcctct aacattatgc acagcatcaa tgggtatgtg 1920 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgage 1980 20 attggggccc agactgactt tctgtctgtg ttcttctetg getacacctt taagcataag 2040 atggtgtatg aggacaccct gactctgttc cccttctctg gggagactgt gttcatgage 2100 atggagaacc caggcctgtg gatcctggge tgccacaact ctgatttcag gaataggggce 2160 atgactgccc tgctgaaggt gagcagctgt gataagaaca ctggggacta ttatgaggat 2220 5 agctatgagg acatctctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcccaggagce 2280 ttcagccaga atcctcetgt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccaccctg 2340 cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacactatct ctgtggagat gaagaaggag 10 2400 gactttgaca tctatgatga ggatgagaat cagagcccca ggagcttcca gaagaagact 2460 agacactact ttattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctcttctccc 2520 catgtgctga gaaacagggc ccagtctggc tctgtgccece agttcaagaa ggtggtettc 5 2580 caggagttca ctgatggctc tttcacccag cctctgtata gaggggagct gaatgagcac 2640 ctgggcctge tgggcecctta catcagggcet gaggtggagg acaatatcat ggtgacctte 2700 20 aggaaccagg ctagcaggcc ctactctttc tacagcagcc tgatcagcta tgaggaggac 2760 cagaggcagg gggctgagcc taggaagaat tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac 2820 ttctggaagg tgcagcacca catggctccc actaaggatg agtttgactg caaggcctgg 2880 gcctactttt ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcatt ctggcctgat tggcccectg 2940 5 ctggtctgcc acaccaatac tctgaaccct gctcatggga gacaggtgac tgtgcaggag 3000 tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag accaagtcct ggtactttac tgagaacatg 3060 gagaggaatt gcagggcccc ttgcaacatc cagatggagg accccacctt caaggaaaat 3120 10 tataggttcc atgccatcaa tggctacatc atggacaccc tgcctggect ggtgatggcee 3180 caggaccaga ggatcaggtg gtatctgctg tctatgggct ctaatgagaa catccacagce 3240 atccatttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtataa gatggctctg 15 3300 tacaacctgt accctggggt ctttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatt 3360 tggagggtgg agtgcctgat tggggaacac ctgcatgctg ggatgagcac cctgttectg 3420 0 gtgtactcta acaagtgcca gaccccactg ggcatggctt ctggccacat cagggatttc 3480 cagattactg cctctggcca gtatggccag tgggctccca agcetggctag gctgcactac 3540 tctgggagca tcaatgcctg gtctactaag gagcctttct cttggatcaa agtggacctg 3600 ctggcccecta tgatcatcca tgggatcaag actcaggggg ccaggcagaa gttcagcagce 3660 5 ctgtacatct ctcagttcat cattatgtac agcctggatg gcaagaagtg gcagacctac 3720 aggggcaaca gcactggcac cctgatggtg ttctttggga atgtggacag ctctgggatt 3780 aagcacaaca tctttaaccc ccccatcatt gccaggtata tcaggctgca ccctacccac 0 3840 tacagcatta ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa cagctgcagc 3900 atgcccctgg ggatggagag caaggccatt tctgatgctc agatcactgce ttctagctac 3960 15 ttcactaaca tgtttgccac ctggtctccc agcaaggcta gactgcacct gcaggggagg 4020 agcaatgcct ggaggcccca ggtgaataat cccaaggagt ggctgcaggt ggatttccag 4080 aaaaccatga aggtgactgg ggtgactacc cagggggtga agtctctgct gaccagcatg 20 4140 tatgtgaagg agttcctgat 30208003926 8090310002 atcagtggac cctgttcttt 4200 cagaatggga aggtgaaggt gtttcagggc aatcaggaca gcttcacccc tgtggtgaac 4260 agcctggacc cccccctget gaccaggtac ctgaggatcc acccccagag ctgggtgecat 5 4320 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggacctgta ctga 4374 <210> 5 <211> 4374 10 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 5 15 atgcagattg agctgtctac ttgcttcttc ctgtgcctge tgaggttctg cttetctgee 60 actaggaggt attacctggg ggctgtggag ctgagctggg actatatgca gtctgacctg 120 ggggagctgc ctgtggatgc caggtttcct cccagggtge ctaagagctt ccecttcaac 180 20 acctctgtgg tgtacaagaa gactctgttt gtggagttta ctgatcatct gttcaacatt 240 gccaagccca 011001-2-110 gatggggcetg ctgggcccca ccatccaggce tgaggtgtat 300 gacactgtgg tgattaccct gaagaatatg gccagccatc ctgtgagcct gcatgctgtg 360 ggggtgagct attggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgatcagac tagccagagg ‏م‎ ‎420 ‎gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg gggagccata cctatgtgtg gcaggtgcetg 480 aaggagaatg gccccatggce ctctgaccct ctgtgectga cttatagcta cctgagccat 540 10 gtggatctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 600 ggcagcctgg ccaaggagaa gactcagacc ctgcacaagt tcatcctget gtttgetgtg 660 tttgatgagg ggaagtcctg gcactctgag actaagaaca gcctgatgca ggatagggat 15 720 gctgcttctg ccagggcectg gectaagatg cacactgtga atggctatgt gaataggage 780 ctgcctggcece tgattggctg ccataggaag tctgtgtact ggcatgtgat tgggatggge 840 accacccctg aggtgcactc tattttcctg gagggccata ctttcctggt gaggaaccat 900 20 aggcaggcca gcctggagat cagccccatc actttcctga ctgcccagac tetgctgatg 960 gacctgggcc agttcctgcet gttctgeccac atcagcagec atcagcatga tggcatggag 1020 gcttatgtga aggtggacag ctgccctgag gagcctcage tgaggatgaa gaataatgag 1080 gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat 5
1140 gatgacaact ctccctcttt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccctaagacc 1200 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggact atgcccccct ggtgetggec
1260 10 ccagatgaca ggagctacaa gtcccagtac ctgaacaatg gcccccagag gattggcagg 1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcttat actgatgaga ctttcaagac cagggaggcc 1380 atccagcatg agtctggcat cctgggccct ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 5 1440 ctgattatct tcaagaacca ggcttctagg ccctacaata tctaccctca tggcatcact 1500 gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcatct gaaggatttc 1560 cccatcctge ctggggagat ctttaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatggccce 20 1620 actaagtctg accccaggtg cctgaccagg tattacagca gctttgtgaa catggagagg 1680 gatctggctt ctgggctgat tggccccectg ctgatctgect acaaggagte tgtggaccag 1740 aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag 5
1800 aataggagct ggtacctgac tgagaacatc cagaggtttc tgcccaatcc tgctggggtg 1860 cagctggagg atcctgagtt tcaggcctct aatatcatgc acagcatcaa tggctatgtg
1920 10 tttgactctc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctattggta catcctgage 1980 attggggccc agactgactt tetgtctgtg tttttttctg gctacacctt caagcacaag 2040 atggtgtatg aggatactct gactctgttc cctttttctg gggagactgt gttcatgtct 2100 atggagaacc ctgggcetgtg gattctgggc tgccacaatt ctgacttcag gaacagaggce
2160 15 atgactgctc tgctgaaggt gagcagctgt gacaagaaca ctggggacta ctatgaggac 2220 tcttatgagg acatttctge ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcccagaagce 2280 ttttctcaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccaccctg 0 2340 cagtctgacc aggaggagat tgactatgat gatactattt ctgtggagat gaagaaggag 2400 gactttgaca tctatgatga ggatgagaac cagagcccca ggtctttcca gaagaagact 2460 aggcactact ttattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atgggatgtc tagctctcct 2520 5 catgtgctga ggaacagggc ccagtctggce tctgtgccee agtttaaaaa ggtggtgttc 2580 caggaattca ctgatggcag ctttacccag cctctgtaca ggggggagct gaatgagcac 2640 ctggggctgce tggggcectta cattagggct gaggtggagg acaacatcat ggtgaccttc 10 2700 aggaatcagg ccagcaggcc ctactctttc tacagcagcc tgatctctta tgaggaggac 2760 cagaggcagg gggctgaacc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac 2820 15 ttctggaagg tgcagcacca catggctccc accaaggatg agtttgattg caaggcctgg 2880 gcttacttct ctgatgtgga tctggagaag gatgtgcact ctgggctgat tggeccectg 2940 ctggtgtgcc acaccaacac tctgaaccct gcccatggca gacaggtgac tgtgcaggag 3000 0 tttgccctgt tettcactat ctttgatgag actaagagcet ggtacttcac tgagaacatg 3060 gagaggaatt gcagggcccc ttgcaacatc cagatggagg accccacctt taaggagaac 3120 tacaggtttc atgccattaa tggctacatc atggacaccc tgcctggcect ggtgatggec 3180 caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg tctatgggga gcaatgagaa catccacagc 5 3240 attcacttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg 3300 tacaacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctgggatc 3360 10 tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg ggatgagcac cctgttectg 3420 gtgtatagca acaagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctggccacat cagagacttt 3480 cagattactg cctctggcca gtatgggcag tgggccccca agctggecag getgcactat 15 3540 tctggctcta ttaatgcctg gagcactaag gagcccttca getggattaa ggtggacctg 3600 ctggctccca tgatcatcca tggcatcaag actcaggggg ccaggcagaa gttctcttct 3660 20 ctgtacatca gccagttcat tatcatgtac tccctggatg gcaagaagtg gcagacctat 3720 aggggcaaca gcactggcac cctgatggtg ttctttggga atgtggacag ctctggcatc 3780 aagcataata tcttcaatcc ccccatcatt gctaggtaca tcaggctgca ccccacccac 3840 tactctatta ggtctaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa cagctgcage 5 3900 atgcctctgg gcatggagag caaagccatc tctgatgccc agatcactgc cagcagctac 3960 tttaccaaca tgtttgctac ttggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcaggggagg 4020 10 tctaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 4080 aagactatga aggtgactgg ggtgaccacc cagggggtga agagcctgct gacctctatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat tagcagcagc caggatggcc accagtggac cctgtttttc 5 4200 cagaatggga aggtgaaggt gtttcagggg aaccaggaca gcttcactcc tgtggtgaac 4260 tctctggacc cccccctget gaccaggtat ctgaggatce accctcagag ctgggtgecac 4320 0 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggacctgta ctga 4374
<210> 6
<211> 4
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220> 5
<223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid
<400> 6 atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgcctge tgaggttttg cttctctgec 60 accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg attacatgca gtctgacctg 120 10 ggggagctgc ctgtggatgc caggttccct cccagggtge ccaagtcttt ceecttcaac
180 acttctgtgg tgtacaagaa gacccigttt gtggagttta ctgaccacct gttcaacatt 240 gccaagccca ggcctcectg gatgggectg ctgggeccca ccattcaggce tgaggtgtat 300 15 gacactgtgg tcatcaccct gaaaaatatg gctagccacc ctgtgtctct gcatgctgtg 360 ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac tagccagagg
420 gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cttatgtgtg gcaggtgctg 480 20 aaagagaatg gccccatggc ttctgatcce ctgtgtctga cctatagcta cctgagcecat 540 gtggatctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 600 ggcagcctgg ctaaggagaa gacccagacc ctgcataagt tcatcctgcet gtttgetgtg 5
660 tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag actaagaaca gcctgatgca ggatagggat 720 gctgcttctg ccagggcectg gecccaagatg cacactgtga atgggtatgt gaacaggagce
780 0 ctgcctggcec tgattggetg ccataggaag tctgtctatt ggcatgtgat tggcatgggce 840 actactcctg aggtgcacag catctttctg gagggccaca ccttcctggt gaggaaccac 900 aggcaggcca gcctggagat ctctcccate actttcctga ctgctcagac ‏واه‎
960 15 gacctgggcc agttcctgcet gttctgtcac atctctagecc accagcatga tggcatggag 1020 gcctatgtga aggtggatag ctgccctgag gaaccccagce tgaggatgaa gaacaatgag 1080 gaggctgagg attatgatga tgatctgact gattctgaga tggatgtggt gaggtttgat 1140 20 gatgacaatt ctcctagctt cattcagatc agatctgtgg ccaaaaagca tcctaagact 1200 tgggtgcatt atattgctgc tgaggaggag gattgggatt atgcccccct ggtgetgget 1260 cctgatgata ggagctacaa gtctcagtac ctgaataatg ggccccagag gattggcagg
1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga ccttcaagac cagggaggcc
1380 5 attcagcatg agtctgggat tctggggccc ctgctgtatg gggaggtggg ggataccctg
1440 ctgatcattt tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tctaccccca tgggattact
1500 gatgtgaggc ccctgtactc taggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggatttt 10
1560 cctatcctge ctggggaaat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggccce
1620 actaagtctg atcccaggtg tctgaccagg tattatagct cttttgtgaa catggagagg ١0 gatctggcct ctgggctgat tggccctetg ctgatctget acaaggagtc tgtggaccag 5
1740 aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag
1800 aacaggagct ggtatctgac tgagaacatc cagaggtttc tgcccaatcc tgctggggtg 1860 20 cagctggagg atcctgagtt ccaggctagc aacatcatgc acagcatcaa tgggtatgtg
1920 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgtctg catgaggtgg cctactggta tatcctgtct 1980 attggggccc agactgactt cctgtctgtg ttttittctg ggtatacttt taagcacaag 2040 atggtgtatg aggacaccct gactctgttc cccttctctg gggagactgt gtttatgage 2100 atggagaacc ctggcctgtg gatcctgggce tgccacaatt ctgacttcag gaataggggg 2160 5 atgactgccc tgctgaaggt gagcagctgt gataagaata ctggggacta ctatgaggac 2220 tcttatgagg acatttctge ctatctgctg tctaagaaca atgccattga acccaggagce 2280 ttctctcaga accccccetgt gctgaagagg caccagaggg aaatcaccag aactactctg 2340 10 cagtctgatc aggaggaaat tgactatgat gacactattt ctgtggagat gaagaaggag 2400 gactttgaca tctatgatga ggatgagaac cagagcccaa ggagcttcca gaagaagact 2460 aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag cagcagcccec 5 2520 catgtgctga gaaacagggc ccagtctggg tctgtgcccec agttcaagaa ggtggtgttc 2580 caggagttca ctgatgggag cttcacccag cccctgtata ggggggagct gaatgagcac 2640 0 ctgggcctge tgggccccta tattagggct gaggtggagg acaacatcat 09108016 2700 aggaatcagg cctctaggcc ctacagcttc tacagcagcc tgattagcta tgaggaggat 2760 cagaggcagg gggctgaacc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctat 5 2820 ttctggaagg tgcagcatca catggccccc accaaggatg agtttgactg caaggcectgg 2880 gcctacttct ctgatgtgga tctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggccccctg 2940 ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct gctcatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 10 3000 tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag actaagtctt ggtacttcac tgagaatatg 360 gagaggaatt gcagggcccc ctgcaatatt cagatggaag accccacctt caaggagaat 3120 tacaggttcc atgccattaa tggctacatc atggataccc tgcctggect ggtgatggee 5 3180 caggatcaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatgggca gcaatgagaa catccactct 3240 atccacttct ctggccatgt gtttactgtg aggaagaagg aggagtataa gatggccctg 3300 20 tacaacctgt accctggggt ctttgagact gtggagatgce tgccttctaa ggctggecatt ١0 tggagggtgg agtgcctgat tggggaacac ctgcatgctg gcatgtctac cctgttectg 3420 gtgtacagca ataagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctgggcatat cagggatttc 3480 cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggccccaa agcetggetag getgcactac 5 3540 tctgggagca tcaatgcctg gagcactaag gagcccttca gectggatcaa ggtggacctg 3600 ctggccccca tgattatcca tgggattaag actcaggggg ccaggcagaa gttcagcagce 3660 10 ctgtacatca gccagttcat tatcatgtac agcctggatg gcaagaagtg gcagacctat 3720 aggggcaact ctactgggac cctgatggtg ttctttggga atgtggatag ctctgggatc 3780 aagcacaata tcttcaaccc ccccatcatt gccaggtata tcaggcetgca ccccacccac 5 3840 tacagcatta ggtctaccct gaggatggag ctgatgggct gtgatctgaa cagctgtage 3900 atgcctctgg gcatggagtc taaggccatt tctgatgccc agattactge tagcagctac 3960 20 ttcaccaaca tgtttgccac ctggtctccc agcaaggcca ggctgcatct gcagggcagg 4020 tctaatgctt ggaggcccca ggtgaacaac ccaaaggagt ggctgcaggt ggatttccag 4080 aagactatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agtctctgct gacctctatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat ctctagcagc caggatggcc atcagtggac ccigttcttc 4200 5 cagaatggca aggtgaaagt gttccagggc aatcaggata gcttcactcc agtggtgaac 4260 agcctggatc cccctetget gactaggtac ctgaggatcec acccccagag ctgggtgcac 4320 cagattgccc tgaggatgga ggtgctggge tgtgaggccc aggacctgta ctga 0 4374 <210> 7 <211> 4374 <212> DNA <213> Artificial Sequence 15 <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 7 atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgtctge tgaggttctg cttctctgece 60 accaggaggt attacctggg ggctgtggag ctgagctggg actatatgca gtctgacctg 20 120 ggggagctgc ctgtggatgc taggttcccec cccagggtge ccaagagctt cecectttaac 180 acttctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt 240 gccaagccca ggceccccctg gatggggcetg ctggggcecca ccatccagge tgaggtgtat 300 5 gacactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gccagccacc ctgtgagcct gcatgctgtg 360 ggggtgagct actggaaggc ttctgagggg gctgagtatg atgaccagac tagccagagg 420 gagaaggagg atgacaaggt gtttcctggg ggcagccata cctatgtgtg gcaggtgetg 10 480 aaggagaatg gccccatggce ctctgaccce ctgtgectga cctacagceta cctgtctcat 540 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ctctgctggt gtgtagggag 600 15 ggcagcctgg ctaaggaaaa gacccagacc ctgcataagt ttatcctgct gtttgctgtg 660 tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag accaagaaca gcctgatgca ggatagggat 720 gctgcctetg ccagggcttg gecctaagatg cacactgtga atgggtatgt gaataggage 20 780 ctgcctggcece tgattggetg ccacaggaag tetgtgtact ggcatgtgat tgggatggge 840 accacccctg aggtccatag catcttcctg gagggccaca ctttcctggt gaggaaccac 900 agacaggcct ctctggagat ctctcccatc accttcctga ctgctcagac tctgetgatg 960 5 gacctgggcc agttcctgcet gttttgccat attagcagcc accagcatga tgggatggag 1020 gcctatgtga aggtggatag ctgccctgag gagcectcage tgaggatgaa gaacaatgag 1080 gaggctgaag actatgatga tgacctgact gattctgaga tggatgtggt gaggtttgat 10 1140 gatgacaata gccccagctt cattcagatc aggtctgtgg ccaagaaaca ccccaagacc 1200 tgggtgcact acattgctgc tgaggaagag gactgggact atgctccect ggtgctggee
1260 5 cctgatgata ggtcttataa gagccagtac ctgaacaatg ggccccagag gattggcagg 1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaaa ccttcaaaac cagggaggcc 1380 attcagcatg agtctggcat cctgggccct ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 0 1440 ctgatcatct tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tctatcctca tggcatcact 1500 gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcacct gaaagacttc 1560 cccatcctge ctggggagat ctttaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatggcect ‏د‎
1620 accaagtctg accccaggtg tctgaccagg tactattcta gctttgtgaa catggagagg 1680 gacctggcct ctggcctgat tgggceccctg ctgatctget acaaggagte tgtggaccag
1740 10 aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttttctgt gtttgatgag 0 aataggagct ggtacctgac tgagaacatc cagaggtttc tgcccaatcc tgctggggtg 1860 cagctggagg atcctgagtt ccaggccagc aatatcatgc atagcatcaa tggctatgtg
1920 15 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgage 1980 attggggccc agactgactt tctgtctgtg ttcttttctg getatacctt caagcacaag 2040 atggtgtatg aggataccct gaccctgttc cccttctetg gggagactgt gttcatgage 10 atggagaatc ctgggctgtg gatcctgggg tgccacaact ctgattttag gaacaggggg
2160 0 atgactgccc tgctgaaggt gtctagctgt gataagaaca ctggggacta ctatgaggac 2220 agctatgagg acatttctgc ttatctgctg tctaagaata atgccattga gcccagaagce 2280 ttcagccaga atccccctgt gectgaagaga catcagaggg agatcaccag aactaccctg 5
2340 cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacactatct ctgtggagat gaagaaggag 2400 gactttgaca tctatgatga ggatgagaat cagtctccca ggagcttica gaagaagacc
2460 10 agacattact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctctagccct 2520 catgtgctga ggaacagggc ccagtctggc tctgtgccce agttcaagaa ggtggtgtte 2580 caggaattca ctgatggcag cttcacccag cccctgtaca ggggggagcet gaatgagcac 5 2640 ctgggcctge tggggcctta tatcaggget gaggtggagg ataatattat ggtgactttc 700 aggaaccagg ccagcaggcc ctactctttc tatagcagcc tgatctctta tgaggaggat 2760 cagaggcagg gggctgagcc taggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac taagacctac 0 2820 ttctggaagg tccagcacca catggcccct accaaggatg agtttgactg 8800609 2880 gcctatttct ctgatgtgga tctggagaag gatgtccatt ctgggcetgat tggeccecectg 2940 ctggtgtgcc acactaacac tctgaatcct gcccatggca ggcaggtgac tgtccaggag 3000 5 tttgccctgt tettcactat ctttgatgag accaagagct ggtactttac tgagaacatg 3060 gagaggaact gcagagctcc ttgcaatatt cagatggagg accccacctt caaggagaat 3120 tacaggttcc atgccattaa tgggtacatc atggacaccc tgcctggect ggtgatggcet
3180 10 caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatgggct ctaatgagaa tatccacagc 3240 atccacttct ctgggcatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggctctg 3300 tataatctgt accctggggt gtttgaaact gtggagatgce tgccctctaa ggctggcatc 3360 5 tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgagcac cctgttcctg 3420 gtgtacagca acaagtgcca gaccccecctg ggcatggcect ctggccacat cagggacttc 3480 cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggccccca agetggccag getgcactat 0 3540 tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag gagcccttca gectggatcaa ggtggacctg 3600 ctggccccca tgatcattca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttcagctcet 3660 ctgtacatct ctcagticat catcatgtac tctctggatg ggaagaagtg gcagacctac 3720 5 aggggcaaca gcactggcac cctgatggtg ttctttggga atgtggactc ttctggcatc 3780 aagcacaaca tcttcaatcc ccccatcatt gctaggtata ttaggctgca tcccacccac 3840 tacagcatca ggtctaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa ctcttgcage 10 3900 atgcccctgg gcatggagtc taaggccatc 1010310066 agattactge cagcagctac 3960 ttcaccaaca tgtttgccac ctggagcccc tctaaggcca ggctgcatct gcaggggagg
4020 15 agcaatgcct ggaggcctca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggatttccag 4080 aagaccatga aggtgactgg ggtgaccacc cagggggtca agagcctgct gaccagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagce caggatggcc accagtggac tctgttettt 20 4200 cagaatggga aggtgaaggt gtttcagggc aatcaggact ctttcacccc tgtggtgaac 4260 agcctggacc cccccctget gaccagatac ctgaggatcc acccccagte ttgggtgcat 4320 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggctc aggatctgta ctga 5 4374 <210> 8 <211> 4374 <212> DNA <213> Artificial Sequence 10 <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 8 atgcagattg agctgagcac ttgctttttt ctgtgcctgc tgaggttttg tttttctgece 60 accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg actatatgca gtctgatctg 5 120 ggggagctgc ctgtggatgc caggttccce cccagggtgce ccaagtcttt tcccttcaac 180 acctctgtgg tgtataagaa gaccctgtit gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt 240 gctaagccta ggccccectg gatgggectg ctgggceccta ccattcagge tgaggtgtat 20 300 gacactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gccagccatc ctgtgagcct 810 360 ggggtctctt actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagaga 420 gagaaggagg atgacaaggt cttccctggg ggctctcaca cctatgtgtg gcaggtgetg 5 480 aaggaaaatg gccccatggce ctctgaccce ctgtgcctga cctacagceta tctgagcecat 540 gtggatctgg tgaaggacct gaattctggce ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 600 10 ggcagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt ttatcctgcet gtttgetgtg 660 tttgatgagg gcaagtcttg gcactctgag actaagaaca gcctgatgca ggacagggat 720 gctgcectetg ccagggcectg geccaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggage 15 780 ctgcctgggce tgattggctg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatggge 840 accacccctg aggtgcacag catcttcctg gaaggccaca ctttcctggt gaggaaccat 900 20 aggcaggcca gcctggagat cagccctatc accttcctga ctgcccagac cctgetgatg 960 gatctggggc agttcctgcet gttctgeccac atctctagecec accagcatga tgggatggag 1020 gcctatgtga aggtggacag ctgcccagag gagcctcage tgaggatgaa aaacaatgaa 1080 gaggctgagg attatgatga tgatctgact gactctgaga tggatgtggt gagatttgat 1140 5 gatgacaata gccctagctt tattcagatc aggtctgtgg ctaagaagca ccccaagacc 1200 tgggtgcatt acattgctgc tgaggaggag gactgggatt atgctcctct ggtgetggec 1260 cctgatgata ggagctacaa gagccagtac ctgaataatg gccctcagag gattggcagg 10 1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcttac actgatgaga ccttcaagac tagggaggcc 1380 atccagcatg agtctgggat cctggggccc ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg
1440 15 ctgatcatct tcaagaacca ggctagcagg ccttacaaca tctatcccca tgggatcact 1500 gatgtgagac ctctgtacag caggaggctg cccaaggggg tcaagcatct gaaagacttc 1560 cccatcctgc ctggggagat ctttaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatgggcce 20 1620 accaagtctg accccaggtg cctgaccagg tattacagca gctttgtgaa catggagagg 1680 gatctggcct ctgggcetgat tggccceectg ctgatctgtt acaaggaatc tgtggatcag 1740 aggggcaatc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag 80 aataggtctt ggtacctgac tgaaaacatc cagaggttcc tgcccaaccc tgetggggtc 5 1860 cagctggagg atcctgagtt ccaggctagc aacatcatgc acagcatcaa tgggtatgtg 1920 tttgatagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgtct 1980 attggggccc agactgactt cctgtcetgtg ttettttctg gctacacctt caagcacaag 2040 10 atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt ctttatgage 2100 atggagaacc ctgggctgtg gatcctgggce tgccacaact ctgatttcag gaataggggce 2160 atgactgctc tgctgaaggt gagctcttgt gacaagaaca ctggggatta ctatgaggac 2220 15 agctatgagg acatttctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcctaggagce 2280 tttagccaga atcctectgt cctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccaccctg 2340 cagtctgacc aggaggagat tgactatgat gataccatct ctgtggagat gaagaaggag 20 2400 gactttgaca tctatgatga ggatgagaat cagtctccca ggagcttcca gaagaagacc 2460 aggcactatt tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag cagctctcct 2520 catgtgctga ggaatagggc tcagtctggce tctgtgccec agttcaagaa agtggtgttt 5
2580 caggagttca ctgatggctc tttcacccag cctctgtata ggggggagct gaatgagcac 2640 ctggggctgce tgggcceccta tatcagggcet gaggtggagg ataacatcat ggtgaccttc
2700 10 aggaaccagg cctctaggcc ctacagcttc tatagcagcc tgatcagcta tgaggaggac 2760 cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacttac 2820 ttctggaagg tgcagcatca catggccccc accaaggatg agtttgactg taaggectgg 5 2880 gectacttct ctgatgtgga tctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggccecctg 2940 ctggtgtgcc ataccaatac tctgaaccct gctcatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 tttgctctgt tcttcactat ctttgatgag accaagtctt ggtatttcac tgagaatatg 3060 20 gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc cagatggagg accccacctt taaggagaac 3120 tataggtttc atgccatcaa tggctacatc atggacaccc tgcctggcct 0910381002 3180 caggatcaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatggggt ctaatgagaa catccacagc 3240 atccacttct ctggccatgt gtttactgtg agaaagaagg aggagtacaa gatggctctg 5 3300 tacaatctgt accctggggt ctttgagact gtggagatgc tgcctagcaa ggctgggate 3360 tggagggtgg agtgcctgat tggggaacat ctgcatgctg ggatgtctac tetgttcctg 3420 gtgtacagca acaagtgcca gacccccectg ggcatggctt ctggccatat cagggacttt 10 3480 cagattactg cctctgggca gtatggccag tgggccccca agctggctag gctgcattat 3540 tctggcagca tcaatgcctg gtctactaag gagcccttca gctggatcaa ggtggatctg 3600 15 ctggccccca tgatcatcca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gtttagcetcet 3660 ctgtacatta gccagttcat catcatgtac agcctggatg ggaagaagtg gcagacctac 3720 aggggcaatt ctactggcac cctgatggtg ttctttggca atgtggacag ctctggcatc 3780 20 aagcacaaca tctttaaccc ccctatcatt gctaggtaca tcaggctgca tcccacccat 3840 tacagcatca ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa ctcttgcagce 3900 atgcccctgg gcatggagag caaggccatt tctgatgccc agattactgc cagcagctac 3960 ttcactaaca tgtttgccac ctggtctccc agcaaggceca ggctgcacct gcagggcagg ‏م‎ ‎4020 ‎agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggatttccag 4080 aagaccatga aggtgactgg ggtgaccacc cagggggtga agagcctgct gactagcatg 4140 10 tatgtgaagg agttcctgat cagctctage caggatggcc accagtggac tetgttittc 4200 cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc aaccaggact ctttcactcc tgtggtgaac 4260 agcctggacc cccccctget gaccaggtat ctgaggattc acccccagte ttgggtgcat 4320 15 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggatctgta ctga 4374 <210> 9 <211> 4374 <212> DNA 20 <213> Artificial Sequence
<220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 9 atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgtctge tgagattttg cttttctgec 60 actaggaggt attacctggg ggctgtggag ctgtcttggg actacatgca gtctgatctg 120 5 ggggagctgc ctgtggatgce caggttccca cctagggtgce ctaagagctt teccttcaat 180 acctctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt 240 gccaagccta ggcccccectg gatgggcectg ctgggceccta ccatccaggce tgaagtgtat 300 10 gacactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gccagccacc ctgtgagcct gcatgctgtg 360 ggggtgtctt actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgatcagac cagccagagg 420 gagaaggaag atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cctatgtctg gcaggtgetg 5 480 aaggagaatg gccccatggce ctctgatcee ctgtgectga cctactctta cctgagcecat 540 gtggacctgg tgaaggatct gaattctggce ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 600 20 ggcagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcataagt tcatcctgcet gtttgetgtg 660 tttgatgaag ggaagagctg gcactctgag actaagaaca gcctgatgca ggacagggat 720 gctgcettctg ccagggectg geccaagatg cacactgtga atggctatgt gaatagaage 5 780 ctgcctggcece tgattgggtg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tgggatgggce 840 actacccctg aggtgcatag catcttcctg gaaggccata ccttecctggt gaggaatcat 900 10 aggcaggctt ctctggaaat ttctcccatc actttcctga ctgctcagac ‏واه‎ 960 gacctgggcc agttcctgcet gttctgeccac atcagctctc accagcatga tgggatggag 1020 gcctatgtga aggtggacag ctgtcctgag gagccccagce tgaggatgaa gaacaatgag 1080 15 gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt caggtttgat 1140 gatgacaata gcccctcttt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagact 1200 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggatt atgcccctct ggtgctggee 20 1260 cctgatgaca ggagctataa gtctcagtac ctgaataatg gcccccagag gattgggagg 1320 aagtataaga aggtgaggtt tatggcctac actgatgaga ccttcaagac cagggaggcc 1380 atccagcatg agtctggcat cctgggcccce ctgetgtatg gggaggtggg ggataccctg 5 1440 ctgatcatct tcaagaacca ggcctctagg ccctacaata tctaccctca tggcatcact 1500 gatgtgagac ccctgtatag caggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggacttc 1560 10 cccatcctge ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatggcccc 1620 accaagtctg accccaggtg cctgaccagg tattacagct cttttgtgaa catggagagg 1680 gatctggcct ctgggcetgat tggcccactg ctgatctget acaaggagtc tgtggatcag 5 1740 aggggcaatc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttttctgt gtttgatgaa 1800 aataggtctt ggtatctgac tgagaacatc cagaggtttc tgcccaatcc tgctggggtg 1860 cagctggagg atcctgagtt tcaggcctct aatatcatgc attctatcaa tggctatgtg 1920 20 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgage 1980 attggggctc agactgactt cctgtctgtg ttcttttctg gctatacttt caagcacaag 2040 atggtgtatg aggacactct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt gttcatgtct 2100 atggaaaatc ctgggctgtg gattctgggce tgccacaatt ctgacttcag gaataggggg 2160 atgactgccc tgctgaaggt gtctagetgt gataagaaca ctggggatta ctatgaggac 5
2220 tcttatgaag atatctctgc ctatctgctg agcaagaaca atgccattga gcccaggage 2280 ttcagccaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccactctg
2340 10 cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacactatct ctgtggagat gaagaaggag 2400 gattttgaca tttatgatga ggatgagaac cagtctccca ggagcticca gaagaagacc 2460 aggcattact ttattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atgggatgag cagctctcct 2520 5 catgtgctga ggaacagggc ccagtctggg tctgtgcccec agttcaagaa ggtggtgttc 2580 caggagttca ctgatgggag cttcacccag cccctgtata ggggggagct gaatgagcac 2640 ctgggcctge tgggcecccta catcagggcet gaggtggagg ataatatcat ggtgaccttc 0 2700 aggaaccagg ctagcaggcc ttacagcttt tacagcagcc tgatctctta tgaagaagac 2760 cagaggcagg gggctgagcc caggaagaat tttgtgaagc ctaatgagac caagacttat 2820 ttttggaagg tgcagcatca catggctcct accaaggatg agtttgactg caaggectgg 5
2880 gcctactttt ctgatgtgga tctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggccctctg 2940 ctggtgtgcc atactaacac tctgaaccct gcccatggga ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 tttgccctgt tettcactat ttttgatgag accaagtctt ggtatttcac tgagaacatg 3060 10 gagaggaact gcagggctcc ctgcaacatc cagatggaag accccacctt caaggagaac 3120 tataggttcc atgccatcaa tgggtacatc atggataccc tgcctggcect ggtgatggcec 3180 caggatcaga ggattaggtg gtatctgctg agcatgggct ctaatgagaa catccacagc 5 3240 atccatttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggctctg 3300 tacaacctgt atcctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatc
3360 20 tggagggtgg aatgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgagcac tctgttectg 3420 gtgtatagca acaagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctggccatat cagggatttc
3480 cagatcactg cttctggcca gtatggccag tgggccccca agctggccag gctgcactat
3540 tctggcagca tcaatgcctg gagcactaag gagccttttt cttggatcaa ggtggacctg 5
3600 ctggccccta tgattattca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttctctage
3660 ctgtacatct ctcagttcat cattatgtat agcctggatg gcaagaagtg gcagacctac 3720 aggggcaata gcactggcac cctgatggtg ttttttggga atgtggactc tictgggatc 3780 10 aagcacaaca tctttaaccc ccccatcatt gccaggtata ttaggctgca ccccacccac
3840 tacagcatca ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgatctgaa ttcttgctct
3900 atgcccctgg gcatggagag caaggccatce tctgatgcee agatcactge cagcetcttac 5
3960 ttcaccaaca tgtttgccac ctggtctcct agcaaggcca ggctgcatct gcagggcagg
4020 agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 4080 20 aagaccatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gacctctatg
4140 tatgtgaagg agttcctgat 30268003926 caggatggcc accagtggac tctgttcttc 4200 cagaatggga aggtgaaggt gttccagggc aaccaggata gctttacccc tgtggtgaac 4260 agcctggacc ctectectget gaccagatac ctgaggatce atcctcagag ctgggtgcac 5 4320 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggatctgta ctga 4374 <210> 10 <211> 4374 10 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 10 15 atgcagattg agctgagcac ttgcttcttc ctgtgcctge tgaggttctg cttttctgct 60 actaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg attacatgca gtctgacctg 120 ggggagctgc cagtggatgc caggttccce cccagggtge ccaagtcttt tectttcaac 180 20 acctctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt 240 gccaagccca 00600260210 gatggggcetg ctggggcecca ccatccagge tgaggtgtat 300 gacactgtgg tgattaccct gaagaacatg gctagccacc ctgtgagcct gecatgcetgtg 360 ggggtgagct attggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgatcagac cagccagagg 5 420 gaaaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccata cttatgtgtg gcaggtgcetg 480 aaggagaatg ggcccatggc ctctgacccc ctgtgcctga cttacagcta tctgagccat 540 10 gtggacctgg tgaaggatct gaactctggc ctgattgggg ctetgetggt gtgcagggag 600 ggcagcctgg ctaaggagaa gactcagact ctgcataagt tcatcctgct gtttgctgtg 660 tttgatgaag gcaagagctg gcactctgag accaagaact ctctgatgca ggatagggat 5 720 gctgcctetg ccagggcttg gecccaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggagce 780 ctgcctggcec tgattgggtg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatggge 840 20 accacccctg aggtgcacag cattttcctg gagggccaca ccttcctggt gaggaatcac 900 aggcaggcca gcctggagat 0800600316 accttcctga ctgcccagac 9 960 gacctggggc agtttctgcet gttctgccac atcagcagcec atcagcatga tggcatggag 1020 gcctatgtga aggtggactc ttgccctgag gagccccage tgaggatgaa gaacaatgag ‏م‎ ‎1080 ‎gaggctgagg attatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat 1140 gatgacaata gccccagctt catccagatt aggtctgtgg ccaagaagca ccctaagacc 1200 10 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggatt atgcccccct ggtgetggcet 1260 cctgatgaca ggtcttataa gagccagtac ctgaacaatg ggccccagag gattggcagg 1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcttac actgatgaga ccttcaagac tagggaggcec 5 1380 atccagcatg agtctggcat cctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggataccctg 1440 ctgatcatct tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tttaccctca tggcatcact 1500 20 gatgtgaggc ccctgtacag caggagactg cccaaggggg tgaagcacct gaaggatttt 1560 cccattctgc ctggggagat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggccce 1620 accaagtctg atcccaggtg cctgactagg tactactctt cttttgtgaa tatggagagg 0 gatctggcct ctggcctgat tggccccectg ctgatctget acaaggagte tgtggaccag 1740 5 aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag 1800 aataggagct ggtacctgac tgagaatatc cagaggttcc tgcctaatcc tgctggggte 1860 cagctggagg atcctgagtt ccaggctagc aacattatgc acagcatcaa tggctatgtg 0 1920 tttgattctc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cttactggta catcctgtct 1980 attggggccc agactgattt cctgtctgtg ttcttctetg getacacttt 889 2040 atggtgtatg aggataccct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt gttcatgtct 2100 atggagaacc ctggcctgtg gatcctgggce tgtcataact ctgacttcag aaacagggge 5 2160 atgactgccc tgctgaaggt gagcagctgt gacaagaaca ctggggacta ctatgaggac 2220 agctatgagg atatctctgc ttatctgctg agcaagaata atgccattga gcccaggagce 2280 0 ttcagccaga acccccectgt gctgaagagg caccagaggg agatcactag gactaccctg 2340 cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacaccatct ctgtggagat gaagaaggag 2400 gactttgaca tctatgatga ggatgagaac cagtccccca ggtctttcca gaagaagacc ‏م‎ ‎2460 ‎aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctctagcccc 2520 catgtgctga ggaacagggc tcagtctggc tctgtgccce agttcaagaa ggtggtcttc 2580 10 caggagttca ctgatggctc ttttacccag cctctgtaca gaggggagct gaatgagcac 2640 ctgggcctge tgggcccecta catcagggcet gaggtggagg ataatatcat ggtgacctte 2700 agaaaccagg cctctaggcc ctacagcttc tacagcagcc tgatctctta tgaggaggat 5 2760 cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac 2820 ttctggaagg tgcagcacca tatggcccct actaaggatg agtttgactg caaggcctgg 2880 20 gcettattttt ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctgggcetgat tggcccecectg 2940 ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct 01-60083810008 ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 tttgccctgt tettcactat ctttgatgag accaagagct ggtacttcac tgagaacatg 3060 gagagaaatt gtagggctcc ctgcaatatc cagatggagg accccacctt caaagaaaat 3120 5 tacagattcc atgccatcaa tgggtacatc atggataccc tgcctgggcet ggtgatggct 3180 caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatggggt ctaatgagaa catccactct 3240 atccatttct ctggccatgt gttcactgtg agaaagaagg aggagtataa gatggctctg 10 3300 tacaacctgt acccaggggt gtttgagact gtggaaatgc tgcccagcaa agctgggatc 3360 tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgtctac cctgttectg 3420 15 gtgtacagca acaagtgcca gactcccctg ggcatggcct ctgggcacat cagggatttt 3480 cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggccccca agcetggccag getgcactac 3540 tctggcagca ttaatgcttg gagcactaag gagcccttca gctggatcaa ggtggatctg 20 3600
100000003 tgatcatcca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttctctage 3660 ctgtacattt ctcagttcat catcatgtac agcctggatg ggaagaagtg gcagacctac 3720 agggggaaca gcactgggac cctgatggtg ttctttggca atgtggatag ctctggcatc 5
3780 aagcacaata tcttcaatcc ccccattatt gccaggtaca ttaggctgca tcctactcac 0 tactctatta ggagcaccct gaggatggag ctgatggggt gtgacctgaa cagctgttct 3900 atgcccctgg gcatggagtc taaggctatc tctgatgccec agatcactge cagcagctac 10 3960 ttcactaata tgtttgccac ctggagccct agcaaggcca gactgcacct gcagggcagg 4020 agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag
4080 15 aagaccatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gaccagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagc caggatggcc accagtggac cctgttcttc 4200 cagaatggga aggtgaaggt gttccagggc aaccaggact ctttcacccc tgtggtgaac 20 4260 agcctggatc ctccectget gaccaggtac ctgaggatcc 32660-60839030 00010086 4320 cagattgctc tgaggatgga agtgctgggc tgtgaggccc aggatctgta ctga 4374 <210> 11 5
<211> 4374 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220>
<223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid 10 <400> 11 atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgcctgce tgaggttttg cttctctgcet 60 accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg actatatgca gtctgacctg 120 ggggagctgc ctgtggatgc taggttccct cccagggtge ccaagagctt ceectttaat 5 180 acctctgtgg tgtacaagaa aacccigttt gtggagttca ctgaccatct gtticaacatt 240 gccaagccca ggcccccttg gatgggectg ctgggcccca ccattcaggce tgaggtgtat 300 gacactgtgg tcattaccct gaagaacatg gcttctcacc ctgtgagcct gcatgctgtg 360 20 ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg 420 gagaaggagg atgataaggt gttccctggg ggcagccaca cctatgtgtg gcaggtgctg 480 aaggagaatg gccccatggce ctctgatcce ctgtgectga cctactctta tctgtctcat 540 5 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ctctgctggt gtgcagggag 600 ggctctctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt ttattctgct gtttgctgtc 660 tttgatgagg gcaagagctg gcattctgag accaagaaca gcctgatgca ggacagggat 720 0 gctgcctetg ccagggcectg gcccaaaatg cacactgtga atggctatgt gaacaggage 780 ctgcctggcece tgattggcetg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatgggce 840 accacccctg aggtgcacag catcttcctg gagggcecaca cctttctggt gaggaatcac 5 900 aggcaggcca gcctggagat tagccccatc accttcctga ctgcccagac cctgetgatg 960 gacctgggcc agttcctgcet gttctgccac atcagcagcec accagcatga tggcatggag 1020 0 gcctatgtga aggtggatag ctgccctgag gagccccagce tgaggatgaa aaacaatgag 1080 gaggctgagg attatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat 1140 gatgacaata gccccagctt tattcagatt aggtctgtgg ctaagaagca ccccaagact 1200 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggact atgcccctcet ggtcctggee 5 1260 cctgatgata ggtcttacaa gagccagtat ctgaacaatg gcccccagag gattggcagg 1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga cctttaagac cagggaggcc 1380 10 attcagcatg agtctgggat cctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacactctg 1440 ctgatcatct tcaagaacca ggccagcagg ccttataaca tctaccctca tgggatcact 1500 gatgtgaggc ccctgtactc tagaaggctg cccaaggggg tcaagcacct gaaggatttt 5 1560 cccatcctge ctggggagat tttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggcccc 1620 accaagtctg accctaggtg cctgaccagg tactacagct cttttgtgaa catggagagg 1680 20 gacctggcct ctggcctgat tggccctetg ctgatttget acaaggagtce tgtggaccag 1740 aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttttctgt gtttgatgag 0 aacaggtctt ggtacctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcctaaccc 3 0 1860 cagctggagg atcctgagtt ccaggccagc aatattatgc atagcattaa tggctatgtg 1920 5 tttgatagcc tgcagctgte tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgage 1980 attggggccc agactgactt tctgtctgtg ttcttctetg getacacctt caagcataag 2040 atggtgtatg aggacaccct gactctgttc cctttttctg gggagactgt gtttatgage 2100 atggagaatc ctggcctgtg gatcctgggce tgccataatt ctgacttcag gaacaggggce
2160 10 atgactgccc tgctgaaagt gagcagctgt gacaagaata ctggggacta ctatgaagac 2220 agctatgagg acatctctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcccaggagce 2280 ttcagccaga accccccagt gctgaagagg caccagagag agatcaccag gactaccctg 5 2340 cagtctgacc aggaggagat tgactatgat gacaccattt ctgtggagat gaagaaggag 2400 gactttgaca tttatgatga ggatgagaat cagagcccca ggagcttcca gaagaagact
2460 20 aggcactatt ttattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag 300161666 2520 catgtgctga ggaatagggc ccagtctggce tctgtgectc agttcaagaa ggtggtgtte 2580 caggagttca ctgatggcag ctttacccag cccctgtata ggggggagcet gaatgagcac 5 2640 ctgggcctge tgggccccta tatcagggcet gaggtggagg acaatattat ggtgaccttt 2700 aggaaccagg ccagcaggcc ctactctttc tatagcagcc tgatcagcta tgaggaggac 2760 10 cagaggcagg gggctgagcc caggaagaat tttgtgaagc ctaatgagac caagacctac 2820 ttctggaagg tgcagcatca catggccccc accaaggatg agtttgactg caaggcttgg 2880 gcctattict ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggcccectg 2940 5 ctggtgtgcc acactaacac tctgaatcct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag accaagagcet ggtacticac tgagaacatg 3060 gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc cagatggagg atcccacctt caaggagaac 3120 0 tacaggtttc atgccatcaa tggctacatc atggacactc tgcctggcect ggtgatggcc 3180 caggatcaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatgggct ctaatgagaa tatccatagc 3240 atccacttct ctggccatgt gttcactgtc aggaagaagg aggagtacaa gatggctctg 3300 tataatctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatc 5 3360 tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg ggatgagcac cctgtttctg 3420 gtgtactcta acaagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctgggcacat cagggatttc 3480 10 cagatcactg cttctggcca gtatggccag tgggccccca agctggccag getgcactac 3540 tctggcagca tcaatgcctg gtctaccaag gagccctttt cttggattaa ggtggacctg 3600 ctggccccca tgatcatcca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttcagcagce 3660 15 ctgtacatca gccagttcat catcatgtac agcctggatg gcaaaaagtg gcagacctac 3720 aggggcaata gcactgggac tctgatggtg ttctttggca atgtggacag ctctgggatc 3780 aagcacaata tcttcaaccc tcccatcatt gctaggtaca tcaggctgca ccccacccac 0 3840 tatagcatca ggtctaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa 161100806 3900 atgcccctgg gcatggagtc caaagctatc tctgatgcce agattactgc cagcagctac 3960 ttcaccaaca tgtttgccac ctggtctcce tctaaggcca ggcetgcacct gcagggcagg ‏م‎ ‎4020 ‎agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaat cccaaggagt ggctgcaggt ggatttccag 4080 aaaactatga aggtgactgg ggtgaccacc cagggggtga agtctctgct gaccagcatg 4140 10 tatgtgaagg agttcctgat ctcttctagc caggatggcc accagtggac tetgticttc 4200 cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc aaccaggaca gcttcacccc tgtggtgaac 4260 tctctggatc ccceectget gaccaggtac ctgaggattc atccccagag ctgggtgcac 4320 15 cagattgctc tgagaatgga ggtgctgggg tgtgaggctc aggacctgta ttga 4374 <210> 12 <211> 4374 <212> DNA <213> Artificial Sequence 20 <220>
<223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 12 atgcagattg agctgtctac ttgttttttt ctgtgcctge tgaggttctg cttctctgec 60 accaggaggt attacctggg ggctgtggag ctgagctggg attacatgca gtctgatctg 120 5 ggggagctgc ctgtggatgc caggttccce cccagggtge ccaagagctt cecccttcaac 180 acctctgtgg tgtataagaa gaccctgttt gtggagtica ctgatcatct gtttaacatt 240 gccaagccca ggcecccecctg gatgggectg ctgggceccaa ctatccagge tgaggtgtat 300 10 gacactgtgg tcatcaccct gaagaatatg gccagccatc ctgtgagcct gcatgctgtg 360 ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg 420 gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cctatgtgtg gcaggtgetg 5 480 aaggagaatg gccccatggc ctctgaccce ctgtgectga cttatagcta cctgtctcat 540 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgcetggt ctgtagggaa 600 ggcagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt ttattctgcet gtttgetgtg 0 660 tttgatgaag gcaagagctg gcactctgag accaagaatt ctctgatgca ggatagggat 720 gctgcctetg ccagggcectg gcccaagatg catactgtga atggctatgt gaacagaagce 780 ctgcctggcec tgattggetg ccataggaag tctgtgtatt ggcatgtgat tgggatgggce 840 5 actacccctg aagtgcacag cattttcctg gagggccaca ctttcctggt gaggaaccac 900 aggcaggcct ctctggagat cagccccatt actttcctga ctgcccagac cctgetgatg 960 gatctgggcc agttcctgct gttctgccac atctctagec accagcatga tggcatggag 10 1020 gcctatgtga aggtggacag ctgccctgag gagccccage tgaggatgaa gaataatgag 1080 gaggctgagg attatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat
1140 15 gatgataata gccccagctt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca tcccaagacc 1200 tgggtgcact atattgctgc tgaagaggag gactgggact atgcccctct ggtgetggcet 1260 cctgatgaca ggagctataa gagccagtat ctgaacaatg ggccccagag gattgggagg 20 1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga cctttaagac cagggaggcc 1380 atccagcatg agtctggcat tctggggccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacactctg 1440 ctgatcattt tcaagaacca ggccagcagg ccctacaata tttaccccca tggcatcact 5
1500 gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcacct gaaggacttc 1560 cccatcctge ctggggagat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggcecct
1620 10 accaagtctg accctaggtg tctgactagg tactacagca gctttgtgaa catggagaga 1680 gacctggctt ctggcctgat tggccccectg ctgatctget acaaggagtc tgtggatcag 1740 aggggcaacc agattatgtc tgataagagg aatgtcatcc tgttctctgt gtttgatgag 1800 15 aacaggagct ggtatctgac tgagaacatt cagaggttcc tgcccaaccc tgctggggtg 1860 cagctggagg accctgagtt ccaggccagc aacatcatgc attctattaa tggctatgtg 1920 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgage 1980 20 attggggccc agactgactt tetgtctgtg tttttctctg ggtacacctt caagcacaag 2040 atggtctatg aggacaccct gaccctgttc cccttttctg gggaaactgt 9113810396 2100 atggagaacc ctgggctgtg gatcctgggce tgccacaact ctgactttag gaataggggce 2160 atgactgccc tgctgaaggt gagcagctgt gacaagaata ctggggatta ctatgaggac 2220 5 agctatgagg atatctctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcctaggagce 2280 ttcagccaga acccccectgt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccaccctg 2340 cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacaccatct ctgtggagat gaagaaggag 10 2400 gactttgata tttatgatga ggatgagaac cagagcccca ggagcticca gaagaagacc 2460 aggcactatt tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctctagcccc 2520 15 catgtgctga ggaacagggc ccagtctggc tctgtgccce agttcaagaa ggtggtgtte 2580 caggaattta ctgatggcag ctttacccag cccctgtaca gaggggagct gaatgagcac 2640 ctgggcctge tgggcecccta catcagggcet gaggtggagg ataatatcat ggtgaccttt 20 2700 aggaaccagg cctctaggcc ctattctttt tacagcagcc tgatcagcta tgaggaggac 2760 cagaggcagg gggctgagcc taggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac 2820 ttttggaaag tgcagcacca catggccccc actaaggatg agtttgattg caaggectgg 5 2880 gcctatttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggccccctg 2940 ctggtgtgcc acaccaacac tctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 tttgcccetgt tetttaccat ctttgatgag actaagagcet ggtatttcac tgagaacatg 3060 10 gagaggaact gcagagcccc ttgcaacatc cagatggagg accctacctt caaggagaac 3120 tataggttcc atgccatcaa tgggtacatc atggataccc tgcctggcect ggtgatggct 3180 caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatgggga gcaatgagaa 811681306 3240 15 atccacttct ctgggcatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtataa gatggccctg 3300 tacaacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcate 3360 tggagggatgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgetg gecatgagcac tctgttcctg 0 3420 gtgtacagca acaagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctggccacat cagggacttc 3480 cagattactg cctctgggca gtatgggcag tgggccccca agctggccag gcetgcactac 3540 tctgggtcta tcaatgcttg gagcaccaag gagcctttca gectggatcaa ggtggatctg 5 3600 ctggccccca tgatcattca tgggatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttcagcagce 3660 ctgtatattt ctcagttcat catcatgtat tctctggatg gcaaaaagtg gcagacctat 70 agagggaaca gcactgggac cctgatggtg ttttttggca atgtggatag ctctggcatc 0 3780 aagcacaata tcttcaaccc ccccattatt gccaggtaca tcaggctgca ccccacccac 3840 tactctatca ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgatctgaa cagctgctct 3900 15 atgcctctgg ggatggaaag caaggccatc tctgatgccc agatcactge cagcagctat 3960 ttcaccaata tgtttgccac ttggagccct agcaaggcta ggctgcatct gcagggcagg 4020 tctaatgcct ggaggeccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 0 4080 aagactatga aagtgactgg ggtgaccacc cagggggtga aaagcctgct gaccagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat tagcagcagc caggatggcc accagtggac cctgttcttc 4200 cagaatggga aggtgaaggt gtttcagggc aatcaggata gcttcacccc agtggtgaac 5 4260 agcctggacc cccccctget gaccaggtac ctgaggatcc acccccagag ctgggtgcac 4320 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggatctgta ctga 4374 10 <210> 13 <211> 4374 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> 15 <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 13 atgcagattg agctgagcac ctgctttttc ctgtgcctge tgaggttctg cttctctgcet 60 accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgtcttggg attacatgca gtctgacctg 120 0 ggggagctgc ctgtggatgce caggtttccc cccagggtge ccaagtcttt cecectttaac 180 acctctgtgg tgtataagaa gactctgttt gtggagttca ctgatcacct gttcaatatt 240 gccaagccca ggcccccttg gatgggectg ctgggcccca ctatccaggce tgaggtgtat 300 gacactgtgg tcatcaccct gaagaacatg gccagccacc ctgtgagect gcatgcetgtg 360 5 ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg 420 gagaaggagg atgacaaggt gttcccaggg gggtctcaca cttatgtgtg gcaggtgctg 480 aaggagaatg ggcccatggc ctctgaccct ctgtgectga cttatagcta cctgtctcat 540 10 gtggatctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgectggt gtgcagggag 600 gggagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt tcatcctgcet gtttgctgtg 660 tttgatgagg ggaagagctg gcactctgag accaagaata gcctgatgca ggacagggat 5 720 gctgcttctg ctagggcectg gecctaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggagce 780 ctgcctggec tgattggotg tcacaggaag tetgtgtact ggcatgtgat tggcatgggg 840 actactccag aagtgcacag catcttcctg gaggggcaca ccttcctggt gaggaatcac 20 900 aggcaggcca gcctggagat ttctcccatc actttcctga ctgcccagac cctgetgatg 960 gatctggggce agttcctgcet gttctgccac atcagcagecc atcagcatga tgggatggag 1020 gcctatgtga aggtggacag ctgccctgag gagcectcage tgaggatgaa gaacaatgag 5 1080 gaggctgagg actatgatga tgatctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat 1140 gatgacaact ctcccagctt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc 1200 10 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggatt atgctccect ggtgetggct 1260 cctgatgata ggagctacaa gagccagtat ctgaataatg ggccccagag gattggcagg 1320 aagtataaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga cctttaagac cagggagget 15 1380 attcagcatg agtctggcat cctgggcccc ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 1440 ctgatcattt tcaagaacca ggccagcagg ccctataaca tctatcccca tgggatcact 1500 20 gatgtgaggc ccctgtactc taggaggctg cccaaggggg tcaagcacct gaaggacttc 1560 cccatcctge ctggggagat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga 0081006006 1620 actaagtctg accccaggtg cctgactagg tactacagca gctttgtgaa catggagaga 1680 gatctggcct ctggcectgat tggccccectg ctgatctget acaaagagte tgtggatcag 5 1740 aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag 1800 aacagaagct ggtacctgac tgagaacatt cagaggtttc tgcccaaccc tgctggggtc 1860 10 cagctggagg accctgagtt tcaggccagc aacatcatgc acagcatcaa tgggtatgtg 1920 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta tatcctgage 1980 attggggccc agactgattt cctgtetgtg ttcttctctg getacacttt caagcacaag 2040 atggtgtatg aggataccct gaccctgttc ccttictctg gggaaactgt gticatgage 2100 5 atggagaacc ctgggctgtg gatcctgggg tgccacaatt ctgatttcag gaacagaggc 2160 atgactgctc tgctgaaggt gtctagctgt gacaagaaca ctggggacta ctatgaggac 2220 agctatgagg acatctctgc ctacctgctg agcaagaaca atgctattga acccaggtct 0 2280 ttcagccaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcactag gaccaccctg 2340 cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacaccatct ctgtggagat gaagaaggag 2400 gactttgaca tctatgatga ggatgagaat cagtctccca ggagcttcca gaagaagact 5 2460 aggcattact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctctagccct 2520 catgtgctga ggaacagggc ccagtctggce tctgtgccece agttcaagaa ggtggtgttt 2580 10 caggagttca ctgatggcag cttcacccag cccctgtaca ggggggagct gaatgagcat 2640 ctgggcctge tgggcecccta catcagggcet gaggtggagg acaacatcat ggtgaccttc 2700 agaaatcagg ctagcaggcc ctacagcttc tacagcagcc tgatctctta tgaggaggac 5 2760 cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctat 2820 ttctggaagg tgcagcacca catggccccc accaaggatg agtttgattg caaggcectgg 2880 20 gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcatt ctgggctgat tggccctctg 2940 ctggtgtgcc acaccaacac cctgaatcct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 tttgcccetgt tetttactat ctttgatgag accaagtctt ggtattttac tgagaacatg 3060 gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc cagatggagg accccacctt caaggagaac 3120 5 tacagattcc atgccatcaa tggctacatt atggacactc tgcctggcct ggtgatggec 3180 caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg tctatgggca gcaatgagaa cattcactct 3240 atccacttct ctgggcatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg 10 3300 tacaacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcctagcaa ggctgggatc 3360 tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgtctac cctgttectg 3420 15 gtgtacagca acaagtgcca gacccccctg ggcatggcect ctggccacat cagagatttt 3480 cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggctccta agctggccag getgcactac 3540 tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag gagcccttta gctggatcaa ggtggacctg 20 3600
100000008 tgatcatcca tggcatcaag actcaggggg ccaggcagaa gttctctage 3660 ctgtacatta gccagttcat catcatgtat agcctggatg gcaagaagtg gcagacctac 3720 aggggcaaca gcactgggac cctgatggtg ttctttggga atgtggacag ctctgggatc 5 3780 aagcacaata tcttcaaccc ccccattatt gccaggtata ttaggctgca ccccactcac 3840 tacagcatta ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgatctgaa cagctgcagce 3900 10 atgcccctgg gcatggagtc taaggccatce tctgatgccc agatcactgce cagctcttac 3960 ttcaccaaca tgtttgccac ttggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcagg 4020 agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggatttccag 5 4080 aagactatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gactagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat cagctctagc caggatggcc accagtggac cctgttcttt 4200 cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc aaccaggact ctttcaccce tgtggtgaat 20 4260 tctctggacc ctcecectget gactaggtat ctgaggattc atccccagag ctgggtgcat 4320 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggc tgtgaggccc aggacctgta ttga 4374 <210> 14 <211> 4374 <212> DNA 5 <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 14 atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgcctge tgaggttttg cttttctgec 60 10 actaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgtcttggg attacatgca gtctgacctg 120 ggggagctgc cagtggatgc caggttcccc ccaagggtge ccaagtcttt tcccttcaat 180 acctctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttta ctgatcatct gtttaacatt 240 15 gccaagccca ggceccccctg gatggggcetg ‏ممم ووو‎ ccatccaggce tgaggtgtat 300 gatactgtgg tgattaccct gaagaatatg gccagccatc ctgtgtctct gcatgcetgtg 360 ggggtgtctt attggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgatcagac cagccagagg 420 20 gagaaggagg atgataaggt gttccctggg ggctctcaca cctatgtgtg gcaggtgctg 480 aaggagaatg ggcctatggc ctctgaccca ctgtgcctga cttacagcta tctgagccat 540 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggg ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 5 600 ggcagcctgg ccaaggagaa gactcagacc ctgcacaagt tcatcctget gtttgetgtg 660 tttgatgagg gcaagtcttg gcactctgag accaagaaca gcctgatgca ggatagggat 720 0 gctgcctetg ccagggcectg gcccaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggtcet 780 ctgcctggcec tgattggetg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatggge 840 accacccctg aggtgcatag cattttcctg gagggccaca ccttectggt gaggaaccac 5 900 aggcaggcta gcctggagat cagccccatc actttcctga ctgcccagac ‏موا‎ ‎960 ‎gacctgggcc agttcctgcet gttctgeccac atctctagecec accagcatga tggcatggag 1020 0 gcctatgtga aggtggactc ttgtcctgag gagccccage tgaggatgaa gaacaatgag 1080 gaggctgagg attatgatga tgatctgact gattctgaga tggatgtggt gaggtttgat 110 gatgacaaca gcccctcttt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc 1200 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggatt atgccccect ggtgetggece 1260 5 cctgatgaca ggagctataa gtctcagtac ctgaacaatg gcccccagag aattggcagg 1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcctat actgatgaga ccttcaaaac cagggaggcc 1380 attcagcatg agtctggcat cctggggccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 0 1440 ctgatcatct tcaagaacca ggctagcagg ccttacaaca tctaccccca tgggatcact 1500 gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggacttt 1560 15 cccattctge ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatgggccc 1620 accaagtctg accccaggtg cctgactagg tactactcta gctttgtgaa catggagagg 1680 gacctggcct ctgggctgat tggccccctg ctgatctgtt acaaggagte tgtggaccag 0 1740 aggggcaacc agatcatgtc tgataagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag ٠0 aacaggagct ggtacctgac tgagaacatc cagagattcc tgcccaaccc 1-790 1860 cagctggagg atcctgagtt ccaggccagc aacatcatgc attctatcaa tgggtatgtg 1920 tttgatagcc tgcagctgtc tgtgtgtctg catgaggtgg cctactggta cattctgage 1980 5 attggggccc agactgactt cctgtcetgtg ttcttctctg getacacttt caaacacaag 2040 atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt gtttatgage 2100 atggagaacc ctgggcetgtg gattctggge tgccacaact ctgacttcag 3886800996 2160 atgactgccc tgctgaaggt gtcttcttgt gataagaaca ctggggacta ttatgaagac 10 2220 agctatgagg acatctctgc ctacctgctg agcaagaata atgctattga gcccaggtct 2280 ttctctcaga acccccctgt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccaccctg
2340 15 cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacactattt ctgtggagat gaagaaggaa 2400 gactttgata tctatgatga ggatgagaac cagagcccta ggagcttcca gaagaagact 2460 aggcattact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag cagcagcccc 0 2520 catgtgctga ggaatagggc tcagtctggce tctgtgectc agttcaagaa ggtggtgttc 2580 caggaattca ctgatggcag cttcactcag cccctgtaca ggggggagct gaatgagcac 2640 ctggggctgce tgggccctta catcagggcet gaggtggagg acaatatcat ggtgaccttt 5
2700 aggaaccagg cctctaggcc ttacagcttc tactctagcc tgatctctta tgaagaggac 2760 cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac taagacttac
2820 10 ttctggaagg tgcagcacca catggctccc accaaggatg agtttgactg caaggcettgg 2880 gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctgggctgat tgggcccctg 2940 ctggtgtgcc acactaacac tctgaatcct gcccatggca gacaggtgac tgtgcaggag 15 3000 tttgcccetgt tttttaccat ctttgatgag actaagtctt ggtacttcac tgagaacatg 3060 gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc cagatggagg atcccacctt caaggagaac 3120 tacaggtttc atgccatcaa tggctacatc atggacaccc tgcctggcect ggtgatgget 0 3180 caggaccaga ggattaggtg gtatctgctg agcatgggca gcaatgagaa tatccactct 3240 atccacttct ctgggcatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg 3300 tataacctgt atcctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatc 5
3360 tggagagtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgagcac tctgtttctg 3420 gtgtatagca acaagtgtca gacccctctg ggcatggcect ctgggcacat tagggacttt
3480 10 cagatcactg cttctggcca gtatgggcag tgggctccca agctggccag gctgcactat 3540 tctggcagca ttaatgcctg gagcaccaag gagcctttca gctggatcaa ggtggacctg 3600 ctggcccecca tgatcatcca tgggatcaag acccaggggg ctaggcagaa gttcagcage 5 3660 ctgtacatca gccagtttat catcatgtat tctctggatg gcaagaagtg gcagacctac 3720 aggggcaatt ctactggcac tctgatggtg ttctttggga atgtggatag ctctgggatc 3780 aagcataata tcttcaatcc ccccattatt gctaggtata tcaggctgca ccccacccac
3840 20 tatagcatca ggagcaccct gaggatggag ctgatggggt gtgacctgaa cagctgcage 3900
21006062199 gcatggagag caaggctatt tctgatgcce agatcactge cagcagctac 3960 tttactaata tgtttgccac ctggagcccc agcaaggcca gactgcacct gcagggcagg 4020 tctaatgcct ggaggcectca ggtgaataac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 5 4080 aaaaccatga aggtgactgg ggtgactacc cagggggtga agtctctgct gaccagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat ctcttctagc caggatggcc accagtggac cctgttettt 4200 cagaatggga aggtgaaggt cttccagggc aaccaggata gcttcaccce tgtggtgaat 0 4260 agcctggatc ctectctget gaccaggtat ctgaggatcc acccccagag ctgggtgceat 4320 cagattgccc tgaggatgga ggtgctggge tgtgaggctc aggacctgta ctga 4374 5 <210> 15 <211> 4374 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> 20 <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid
<400> 15 atgcagattg agctgagcac ctgtttcttc ctgtgcctge tgaggttctg tttctctgee 60 actaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgagctggg actatatgca gtctgacctg 120 ggggagctgc ctgtggatgc caggttccce cccagggtge ctaagagctt ccecttcaat 5 180 acttctgtgg tgtacaagaa gactctgttt gtggagttta ctgaccacct gttcaacatt 240 gctaagccca ggcectecctg gatggggcetg ctgggcccca ccatccaggce tgaggtgtat 300 gatactgtgg tgattaccct gaagaacatg gcctctcatc cagtgagcct gcatgctgtg 360 10 ggggtgagct actggaaggc ctctgaaggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg 420 gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cctatgtgtg gcaggtgctg 480 aaggagaatg gcccaatggc ctctgacccc ctgtgectga cttatagcta cctgageccat 15 540 gtggatctgg tgaaggacct gaattctggce ctgattgggg ccctgetggt gtgcagagag 600 ggctctctgg ctaaggagaa gacccagact ctgcacaagt tcatcctgct gtttgetgtg 660 tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag actaagaata gcctgatgca ggacagggat 0 720 gctgcttctg ccagggcectg gecccaagatg catactgtga atggctatgt 03880086 780 ctgcctggcece tgattggctg tcacaggaaa tctgtctact ggcatgtgat tgggatgggce 840 actacccctg aggtgcactc tatcttcctg gagggccata ccttcetggt gaggaaccac 900 5 aggcaggcca gcctggagat ctctcccatt accttcctga ctgcccagac cctgctgatg 960 gatctgggcc agttcetgct gttctgccac atcagcagcec accagcatga tgggatggag 1020 gcttatgtga aggtggatag ctgccctgag gagccccage tgaggatgaa gaacaatgag 10 1080 gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat 1140 gatgacaact ctcccagctt tattcagatc aggtctgtgg ctaagaagca ccccaagact 1200 15 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gactgggact atgcccctct ggtgctggct 1260 cctgatgaca ggtcttacaa gtctcagtac ctgaataatg gccctcagag gattggcagg 1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga ccttcaagac cagggaggcc 20 1380 atccagcatg agtctggcat cctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggataccctg
1440 ctgatcatct tcaagaatca ggccagcagg ccctacaaca tctaccccca tggcatcact
1500 gatgtgaggc cactgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcatct gaaggacttc ‏م‎
1560 cccattctge ctggggagat cttcaagtac aaatggactg tgactgtgga ggatggccct
1620 accaagtctg accccaggtg tctgaccagg tactacagca gctttgtgaa tatggagagg 1680 10 gacctggcct ctggcctgat tggcccectg ctgatctget acaaggagtc tgtggaccag
1740 aggggcaatc agatcatgtc tgataagagg aatgtgattc tgttctctgt gtttgatgag 1800 aacaggagct ggtacctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcccaatcc tgctggggtg 1860 15 cagctggagg accctgagtt ccaggccagc aatatcatgc acagcatcaa tggctatgtc
1920 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cttactggta tattctgagce 1980 attggggccc agactgattt cctgtctgtg ttcttttctg getatacctt taagcacaag 2040 atggtgtatg aggacaccct gacccigtic cccttctctg gggagactgt gttcatgtct 2100 20 atggagaacc ctgggctgtg gatcctgggce tgccacaact ctgacttcag gaacaggggg 2160 atgactgccc tgctgaaggt gtctagctgt gataagaaca ctggggacta ttatgaggac 2220 agctatgagg acatctctgc ttacctgctg agcaagaaca atgccattga gcccaggtct 5 2280 ttcagccaga atcccectgt gctgaagagg catcagaggg agatcaccag gaccaccctg 2340 cagtctgatc aggaggagat tgattatgat gacactatct ctgtggaaat gaagaaggag 2400 10 gactttgaca tctatgatga ggatgagaac cagagcccca ggagcttcca gaagaagacc 2460 aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggatt atggcatgag cagctctccc 2520 catgtgctga ggaacagagc ccagtctggce tctgtgcctc agttcaagaa ggtggtcttc 5 2580 caggagttca ctgatggctc tttcacccag cccctgtaca ggggggagcet gaatgagcac 2640 ctgggcctge tggggceccta cattagggcet gaggtggagg ataacatcat ggtgactttc 2700 20 agaaaccagg ccagcaggcc ttacagcttt tactcttctc tgattagcta tgaggaggat 2760 cagaggcagg gggctgagcc taggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctat 2820 ttctggaagg tgcagcacca catggctccc actaaggatg agtttgactg caaggcttgg 2880 gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tgggecectg 5 2940 ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag actaagagct ggtacttcac tgagaacatg 3060 gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc cagatggagg accccacctt caaggagaat 10 3120 tacaggttcc atgccatcaa tggctacatt atggacaccc tgcctggcect ggtgatggcee 3180 caggatcaga ggatcaggtg gtatctgctg agcatgggct ctaatgagaa catccacagc 3240 15 atccacttct ctggccatgt gtttactgtg aggaagaagg aggaatacaa gatggctctg 3300 tataacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctgggatc 3360 tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgetg ggatgagcac cctgttcctg 0 3420 gtgtatagca ataagtgcca gacccccctg ggcatggctt ctggccacat cagggatttc 3480 cagatcactg cttctggcca gtatggccag tgggctccca agctggctag getgcattac 3540 tctgggtcta tcaatgcctg gagcactaag gagcccttca getggatcaa ggtggacctg 5 3600 ctggccccca tgatcattca tggcatcaag acccaggggg ctaggcagaa gttcagcagce 3660 ctgtacatca gccagttcat cattatgtac agcctggatg gcaagaagtg gcagacttac 3720 10 aggggcaata gcactgggac tctgatggtg ttctttggca atgtggactc ttctggcatc | 0 aagcacaaca tcttcaaccc tcccatcatt gccaggtaca ttaggctgca ccctacccac 3840 tactctatca ggagcaccct gaggatggag ctgatggggt gtgatctgaa ctcttgcage 3900 15 atgcctctgg gcatggaaag caaagccatc tctgatgccc agatcactgc ctctagctat 3960 ttcaccaata tgtttgccac ctggagccct agcaaggcca ggctgcacct gcagggcaga 4020 tctaatgcct ggaggcccca ggtgaacaat cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 0 4080 aagaccatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gactagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat ctcttctage caggatggcc accagtggac cctgttcttc 4200 cagaatggca aggtgaaagt gttccagggc aaccaggata gcttcactcc tgtggtgaac 4260 5 tctctggacc ctccectget gactaggtac ctgaggattc atccccagag ctgggtgcac 4320 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggc tgtgaggccc aggatctgta ctga 4374 <210> 16 10 <211> 4374 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid 15 <400> 16 atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgcctge tgaggttctg cttctetgee 60 accaggaggt actacctggg ggctgtggag ctgtcttggg actatatgca gtctgacctg 120 ggggagctgc cagtggatgc caggttcccc cccagggtge ccaagagctt tectttcaac 20 180 acttctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttca ctgaccacct gttcaatatt 240 gctaagccca ggccaccctg gatgggectg ctgggcccta ccattcagge tgaggtgtat 300 gacactgtgg tgattactct gaagaatatg gccagccacc ctgtgagcct gcatgctgtg 360 5 ggggtgtctt actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgatcagac ttctcagagg 420 gagaaggagg atgataaggt gttccctggg ggctctcaca cttatgtgtg gcaggtgctg 480 aaggagaatg gccccatggc ttctgatcca ctgtgcctga cctactctta cctgageccat 10 540 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 600 ggcagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcataagt tcatcctgcet gtttgetgtg 660 15 tttgatgagg ggaagagctg gcactctgag accaagaatt ctctgatgca ggacagggat 720 gctgcctetg ccagggcectg gectaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggtcet 780 ctgcctggcece tgattggcetg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatggge 20 840 actacccctg aggtgcacag cattttcctg gagggccaca ccttcctggt caggaaccat 900 aggcaggcct ctctggagat cagccccatc actttcctga ctgcccagac cctgctgatg 960 gacctgggcc agttcctgcet gttctgecac attagcagec accagcatga tggcatggag 5 1020 gcctatgtga aggtggactc ttgccctgag gagccccagce tgaggatgaa gaacaatgag 1080 gaagctgagg attatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat 1140 10 gatgacaaca gccccagctt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc 1200 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gattgggact atgctcccct ggtgetggcet 1260 cctgatgata ggagctacaa gtctcagtac ctgaataatg gcccccagag gattggcagg 5 1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga ccttcaagac cagagaggct 1380 atccagcatg agtctgggat cctggggccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 1440 20 ctgatcatct tcaagaacca ggccagcaga ccctacaaca tctaccccca tgggatcact 1500 gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggacttc
1560 cccatcctgc ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatgggcecc
1620 accaagtctg accctaggtg cctgactagg tactactcta gctttgtgaa catggagagg 5
1680 gacctggcct ctggcctgat tggccceectg ctgatttget acaaggagte tgtggatcag
1740 aggggcaatc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag 80 aataggtctt ggtacctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcctaatcc tgctggggtg 10
1860 cagctggagg accctgagtt tcaggccagc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtg
1920 tttgactctc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cttactggta tatcctgage 1980 attggggctc agactgactt cctgtctgtg ttcttttctg gctacacttt taagcacaag 2040 15 atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc cccttttctg gggagactgt gttcatgtct 2100 atggagaacc ctgggctgtg gattctgggc tgtcacaact ctgacttcag aaacaggggc
2160 atgactgccc tgctgaaggt gtctagctgt gacaagaata ctggggacta ctatgaggac 2220 0 agctatgagg acatttctgc ctatctgctg agcaagaaca atgccattga 1668008096 2280 ttttctcaga atcccccetgt gctgaagagg caccagagag agatcaccag gaccactctg 2340 cagtctgatc aggaggagat tgattatgat gacactatct ctgtggagat gaagaaagag 5 2400 gactttgata tctatgatga ggatgagaat cagtctccca ggagcttcca gaagaagact 2460 agacactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag ctctagccct 2520 10 catgtgctga ggaacagggc ccagtctggg tctgtgcccec agttcaagaa ggtggtgttc 2580 caggagttca ctgatggcag ctttacccag cccctgtata ggggggagcet gaatgagcat 2640 ctgggcctgce tgggcecccta tattaggget gaagtggagg acaacatcat ggtgaccttt 15 2700 aggaaccagg ccagcaggcc ctacagcttt tacagcagcc tgattagcta tgaggaggat 2760 cagagacagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgagac caagacctac 2820 20 ttctggaagg tgcagcacca catggcccct accaaggatg agtttgactg caaggcectgg 2880 gcettacttct ctgatgtgga cctggagaaa gatgtgcact ctggcctgat tgggccecectg 2940 ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct gcccatggga ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 tttgccctgt ttttcaccat ctttgatgag accaagagct ggtacttcac tgagaacatg 3060 gagaggaact gcagggcccc ctgtaacatc cagatggagg atcctacttt caaggagaac 5 3120 tacaggttcc atgccattaa tgggtacatc atggacaccc tgcctgggct ggtgatggcec 3180 caggatcaga ggattaggtg gtatctgctg tctatgggct ctaatgagaa catccactct 3240 10 atccacttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg 3300 tacaacctgt accctggggt gtttgaaact gtggagatgc tgccctctaa agctgggate 3360 tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgetg gcatgagcac cctgttcetg 5 3420 gtgtacagca ataagtgcca gactcccctg ggcatggctt ctgggcacat cagggatttc 3480 cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggccccca agcetggctag getgcactac 3540 20 tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag gagcccttct cttggattaa ggtggacctg 3600 ctggctccca tgatcattca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttttctage 3660 ctgtatatta gccagttcat catcatgtat agcctggatg ggaagaagtg gcagacctac 3720 agggggaata gcactggcac cctgatggtg ttttttggca atgtggattc tictggcatc 3780 5 aagcataaca tcttcaatcc ccctatcatt gccaggtaca ttaggctgca tcccacccat 3840 tactctatca ggagcaccct gaggatggag ctgatggggt gtgatctgaa cagctgtage 3900 atgcccctgg gcatggagtc caaggctatc tctgatgccc agatcactgec cagcagctac 10 3960 ttcaccaaca tgtttgccac ctggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcagg 4020 tctaatgcct ggaggcccca ggtgaacaat cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 4080 15 aagactatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga agagcctgct gaccagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat ctcttctagc caggatgggc atcagtggac cctgtttttt 4200 cagaatggca aagtgaaggt gtttcagggg aatcaggaca gctttacccc tgtggtgaac 4260 20 agcctggatc ctectctgcet gactagatac ctgaggatcc acccccagag ctgggtccac 4320 cagattgctc tgaggatgga ggtgctgggg tgtgaggctc aggacctgta ctga 4374 <210> 17 <211> 4374 <212> DNA 5
<213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 17 atgcagattg agctgagcac ctgcttcttt ctgtgcctge tgaggttctg cttctetgee 60 10 accaggaggt actacctggg ggctgtggaa ctgagctggg actatatgca gtctgacctg 120 ggggagctgc ctgtggatgc caggttccce cccagggtge ccaagtcttt cecctttaac 180 acttctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagtita ctgaccacct gttcaatatt 240 15 gccaagccca ggcecccecctg gatgggectg ctgggeccaa ccatccaggce tgaggtgtat 300 gatactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gccagccacc ctgtgagect gcatgcetgtg 360 ggggtgagct attggaaggc ttctgagggg gctgagtatg atgaccagac tagccagagg 20 420 gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg gggtctcata cctatgtgtg gcaggtgctg 480 aaggagaatg gccccatggce ctctgaccce ctgtgcctga cctattctta cctgagcecat 540 gtggacctgg tcaaggacct gaactctggc ctgattgggg ctctgetggt gtgcagggag 5 600 ggcagcctgg ccaaggagaa gactcagact ctgcataagt tcatcctgct gtttgctgtg 660 tttgatgagg gcaagagctg gcactctgag accaagaact ctctgatgca ggatagggat 720 0 gctgcctetg ccagggcectg gcccaagatg cacactgtga atggctatgt gaataggtet 780 ctgcctggcece tgattggctg ccataggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatgggce 840 actacccctg aggtgcactc tatcttcctg gaggggcaca ccttcectggt gaggaaccac 900 15 aggcaggcca gcctggagat ctctceccate accttectga ctgcccagac tetgcetgatg 960 gacctgggcc agttcctgcet gttctgecat atcagcagec accagcatga tggcatggag 1020 gcctatgtga aggtggacag ctgcccagag gaaccccagc tgaggatgaa gaacaatgag 20 1080 gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat 1140 gatgacaaca gccccagctt tattcagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc 1200 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gactgggatt atgccccect ggtgetggee 5 1260 cctgatgaca ggtcttacaa gtctcagtac ctgaacaatg gcccccagag gattgggagg 1320 aagtacaaga aggtgaggtt catggcctac actgatgaga ccttcaagac cagggaggcc 1380 10 atccagcatg agtctggcat cctggggccc ctgctgtatg gggaggtggg ggataccctg 1440 ctgattatct tcaagaacca ggctagcagg ccctataaca tctaccccca tggcattact 1500 gatgtgaggc ccctgtactc taggagactg cccaaggggg tgaagcacct gaaagacttc 5 1560 cccatcctge ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatggcccc 1620 actaagtctg accccaggtg cctgaccagg tattacagca gctttgtgaa tatggagagg 1680 20 gatctggctt ctggcctgat tgggcectctg ctgatttgct acaaggagtce tgtggatcag 1740 agggggaacc agattatgtc tgacaagagg aatgtgattc tgttctctgt gtttgatgag 100 aacaggagct ggtacctgac tgagaatatc cagaggttcc tgcctaatcc tgctggggtg 1860 cagctggagg accctgagtt ccaggctagc aacattatgc acagcatcaa tggctatgtg 1920 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cttactggta cattctgtct 1980 5 attggggccc agactgactt cctgtctgtg ttettctetg getacacctt caagcacaag 2040 atggtgtatg aggacactct gaccctgttc cccttetctg gggagactgt gttcatgage 10 atggagaatc ctgggctgtg gattctgggg tgccacaact ctgatttcag gaacaggggce 2160 atgactgccc tgctgaaggt gagcagctgt gacaagaaca ctggggatta ttatgaggac 10 2220 agctatgagg acatttctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcctaggagce 2280 ttcagccaga atccccctgt gctgaagaga caccagaggg agatcactag gaccactctg
2340 15 cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacaccattt ctgtggagat gaagaaggag 2400 gactttgata tttatgatga ggatgagaac cagagcccca gaagcticca gaagaagacc 2460 aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggatt atggcatgtc ttctagcccc 2520 20 catgtgctga ggaacagggc tcagtctggce tctgtgcctc agttcaagaa ggtggtgtte
2580 caggagttca ctgatgggag cttcacccag cctctgtaca ggggggagct gaatgaacat
2640 ctgggcctge tggggceccta catcagggcet gaggtggagg ataatatcat ggtgactttc 5
2700 aggaatcagg cctctaggcc ctacagcttc tactctagcc tgatcagcta tgaggaggac
2760 cagaggcagg gggctgagcc taggaagaat tttgtgaaac ccaatgagac caagacctac 2820 10 ttttggaagg tgcagcacca catggcccct accaaggatg agtttgactg taaggcctgg
2880 gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcatt ctgggctgat tggccccectg 2940 ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 3000 15 tttgccctgt tettcaccat ctttgatgag actaagagcet ggtatttcac tgagaacatg 3060 gagaggaact gtagggctcc ctgcaacatc cagatggagg atccaacttt caaggagaac
3120 tacaggttcc atgccatcaa tggctacatc atggacaccc tgcctggect ggtgatggec 3180 20 caggaccaga ggattaggtg gtacctgctg agcatgggct ctaatgagaa catccactct
3240 atccacttct ctggccatgt gtttactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggctctg 3300 tacaacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcctagcaa ggctggcatt 3360 tggagagtgg agtgtctgat tggggagcac ctgcatgctg ggatgtctac cctgttcctg 5
3420 gtgtactcta acaagtgcca gacccccctg gggatggcett ctgggcacat cagagatttt 3480 cagattactg cttctgggca gtatggccag tgggctccca agctggccag actgcattac
3540 10 tctggctcta ttaatgcttg gagcaccaag gagcctttca gctggatcaa ggtggacctg 3600 ctggctccca tgatcatcca tggcattaag actcaggggg ctaggcagaa gttcagcagce 3660 ctgtatattt ctcagtttat tatcatgtat tctctggatg gcaagaagtg gcagacttac 3720 5 aggggcaaca gcactggcac cctgatggtg ttctttggca atgtggacag ctctgggatc 3780 aagcataaca tcttcaaccc ccccattatt gccaggtaca tcaggctgca ccccacccac 3840 tattctatca ggagcactct gaggatggag ctgatggggt gtgacctgaa cagctgctct 20 3900
2100602199 gcatggagag caaggccatc tctgatgcce agatcactge 3001611 3960 ttcaccaaca tgtttgccac ctggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcaga 4020 agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaat cctaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 5 4080 aagactatga aggtgactgg ggtgactacc cagggggtga agagcctgct gaccagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctgat tagcagcagc caggatgggc atcagtggac cctgttcttc 4200 10 cagaatggga aggtgaaggt gttccagggc aatcaggaca gcttcacccc tgtggtgaac 4260 agcctggacc cccccctget gaccaggtac ctgaggatcc atccccagag ctgggtgcac 4320 cagattgctc tgagaatgga ggtgctgggce tgtgaggccc aggacctgta ‏دو‎ 5 4374 <210> 18 <211> 4374 <212> DNA <213> Artificial Sequence 20 <220>
<223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 18 atgcagattg agctgtctac ctgttttttt ctgtgcctge tgaggttctg cttectctgcet 60 accaggaggt attatctggg ggctgtggag ctgagctggg actacatgca gtctgacctg 120 5 ggggagctgc ctgtggatgc caggtttcct cccagggtgce ctaagagctt ccecttcaac 180 acctctgtgg tgtacaagaa gactctgtit gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt 240 gccaagccca ggcccccctg gatggggcetg ctgggcccca ctatccagge tgaggtgtat 300 10 gatactgtgg tgattaccct gaagaacatg gcctctcacc ctgtgtctct gcatgcetgtg 360 ggggtgagct actggaaggc ttctgagggg gctgaatatg atgatcagac ctctcagagg 420 gagaaggagg atgacaaggt gtttcctggg ggcagccaca cctatgtgtg gcaggtgctg 480 15 aaggagaatg ggcccatggc ctctgatccc ctgtgectga cctacagcta cctgagccat 540 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 600 ggcagcctgg ccaaggaaaa gacccagacc ctgcataagt tcatcctgcet gtttgetgtg 0 660 tttgatgagg gcaagtcttg gcactctgag accaagaaca gcctgatgca ggacagggat 720 gctgcctetg ctagggectg gecccaagatg cacactgtga atgggtatgt gaacagatct 780 ctgcctggcec tgattggetg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatgggg 5S
840 accacccctg aggtgcatag catcttcctg gaggggcaca ccttcctggt gagaaatcat 900 aggcaggcca gcctggagat tagccccatc accttcctga ctgcccagac cctgetgatg
960 10 gacctgggcc agttcctgcet gttctgeccac atttctagecc accagcatga tggcatggag 1020 gcctatgtga aggtggatag ctgccctgaa gagccccagce tgaggatgaa gaacaatgag 1080 gaggctgagg attatgatga tgatctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtitgat 1140 5 gatgacaaca gccccagctt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccctaagacc 1200 tgggtgcact acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgccccect ggtgetggec 1260 ccagatgaca ggtcttacaa gagccagtac ctgaataatg gcccccagag gattgggagg 20 1320 aagtataaga aagtgaggtt catggcttac actgatgaga cctttaagac tagggaggcc 1380 attcagcatg agtctgggat tctgggccct ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 1440 ctgatcattt tcaagaacca ggccagcagg ccctataata tttatcccca tgggattact 1500 5 gatgtcaggc ccctgtacag caggaggctg cctaaggggg tgaagcacct gaaggacttc 1560 cccattctgc ctggggagat cttcaagtat aagtggactg tgactgtgga ggatggcccc 1620 accaagtctg atcctaggtg cctgaccagg tactatagca gctttgtgaa catggagagg 10 1680 gacctggctt ctggcctgat tggccccectg ctgatctget acaaggaatc tgtggaccag 1740 aggggcaacc agattatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttttctgt gtttgatgag ١10 aataggagct ggtatctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcccaatcc tgctggggtg 5 1860 cagctggagg accctgagtt ccaggcttct aacatcatgc atagcatcaa tgggtatgtg 1920 tttgactctc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctattggta catcctgage 1980 attggggccc agactgactt cctgtctgtg ttettctetg getacacctt caagcacaag 2040 20 atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc cctttctctg gggagactgt gttcatgage 2100 atggagaacc ctggcctgtg gattctgggc tgccataatt ctgacttcag 3880800996 2160 atgactgctc tgctgaaggt gagcagcetgt gacaagaata ctggggacta ctatgaggac 2220 tcttatgagg atatttctge ctacctgctg agcaagaaca atgctattga gcccaggage 5 2280 ttcagccaga acccccctgt cctgaagagg catcagaggg agatcactag gaccaccctg 2340 cagtctgatc aggaggagat tgactatgat gacactatct ctgtggaaat gaagaaggag 2400 10 gactttgata tctatgatga ggatgagaac cagagcccca ggtctttcca gaagaagacc 2460 aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgtc tagcagcccc 2520 catgtgctga ggaacagagc ccagtctggc tctgtgccec agtticaagaa ggtggtgttt 15 2580 caggagttca ctgatgggag cttcactcag cccctgtata ggggggagct gaatgagcat 2640 ctgggcctge tggggceccta catcagggcet gaggtggagg ataacatcat ggtgaccttc 2700 20 aggaaccagg ccagcaggcc ctactctttc tactcttctc tgatcagcta tgaggaggat 2760 cagaggcagg gggctgagcc taggaagaac tttgtcaagc ctaatgagac taagacctac 2820 ttttggaagg tgcagcacca catggctccc actaaggatg agtttgattg caaggcctgg 2880 gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggcccectg 5 2940 ctggtgtgtc acaccaatac cctgaaccct gcccatggca ggcaggtcac tgtgcaggag 3000 tttgcccetgt ttttcactat ctttgatgag actaagtctt ggtacttcac tgagaacatg 3060 gaaaggaatt gcagggctcc ctgcaacatc cagatggagg accccacctt caaggagaac 10 3120 tacaggtttc atgccatcaa tggctacatc atggacaccc tgcctggcect ggtgatggct 3180 caggatcaga ggattaggtg gtatctgctg agcatgggca gcaatgagaa catccacagc 3240 15 atccactttt ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggctctg 3300 tacaatctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctgggatce 3360 tggagggatgg agtgcctgat tggggaacac ctgcatgctg gcatgtctac cctgttcctg 20 3420 gtgtactcta acaagtgcca gactcccctg ggcatggcect ctgggcacat cagggacttc 3480 cagatcactg cctctgggca gtatggccag tgggccccta agctggctag gctgcattac 3540 tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag gagcccttca gctggatcaa ggtggacctg 5 3600 ctggcccecta tgatcatcca tggcatcaag acccaggggg ccagacagaa gttetettct 3660 ctgtacatct ctcagttcat catcatgtac tctctggatg gcaagaagtg gcagacctac 30 agggggaatt ctactggcac tctgatggtg ttctttggga atgtggatag ctctgggatc 3780 10 aagcataata ttttcaaccc ccccattatt gctaggtaca tcaggctgca cccaacccac 3840 tactctatta ggtctaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa ctcttgtage 3900 atgcccctgg gcatggagag caaggctatc tctgatgccc agatcactgc cagcagctac 3960 15 tttaccaaca tgtttgctac ttggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcagg 4020 agcaatgcct ggaggcccca ggtgaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggattttcag 4080 aagaccatga aggtgactgg ggtgaccact cagggggtga aaagcctgct gactagcatg 20 4140 tatgtgaagg agtttctgat cagcagctct caggatggcc atcagtggac ccigticttc 4200 cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc aaccaggata gcttcacccc tgtggtgaat 4260 agcctggacc cccccctget gaccaggtac ctgaggatcc atccccagag ctgggtgcac 4320 5 cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggce tgtgaagccc aggacctgta ctga 4374 <210> 19 <211> 4374
<212> DNA 10 <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 19 atgcaaatag agctctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgec 60 15 accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aagtgatctc 120 ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct cctagagtge caaaatcttt tccattcaac 180 acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt gtagaattca cggatcacct tttcaacatc 240 gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg ctaggtccta ccatccagge tgaggtttat 300 gatacagtgg tcattacact taagaacatg gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt 360 ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg 420 5 gagaaagaag atgataaagt cttccctggt ggaagccata catatgtctg gcaggtectg 480 aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca ctgtgcctta cctactcata tctttctcat 540 gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc ctcattggag ccctactagt atgtagagaa 600 10 gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta 660 tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa acaaagaact ccttgatgca ggatagggat 720 gctgcatctg ctcgggectg gectaaaatg cacacagtca atggttatgt aaacaggtet 15 780 ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggce 840 accactcctg aagtgcactc aatattcctc gaaggtcaca catticttgt gaggaaccat 900 cgccaggcegt ccttggaaat ctcgccaata actttcctta ctgctcaaac actcttgatg 960 20 gaccttggac agtttctact gttttgtcat atctcttccc accaacatga tggcatggaa 1020 gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa 1080 gaagcggaag actatgatga tgatcttact gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat 1140 gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact 1200 tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgctccctt agtcctcgece ‏م‎ ‎1260 ‎cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat ttgaacaatg gccctcageg gattggtagg 1320 aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct 1380 10 attcagcatg aatcaggaat cttgggacct ttactttatg gggaagttgg agacacactg 1440 ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga ccatataaca tctaccctca cggaatcact 1500 gatgtccgtc ctitgtattc aaggagatta ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt 1560 15 ccaattctgc caggagaaat attcaaatat aaatggacag tgactgtaga agatgggcca 1620 actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc tattactcta gtttcgttaa tatggagaga 1680 gatctagctt caggactcat tggccctctc ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa 1740 agaggaaacc agataatgtc agacaagagg aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag 20 1800 aaccgaagct ggtacctcac agagaatata caacgctttc tccccaatcc agctggagtg 1860 cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt 1920 tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg catgaggtgg catactggta cattctaagc 1980 5 attggagcac agactgactt cctttctgtc ttctictctg gatatacctt caaacacaaa 2040 atggtctatg aagacacact caccctattc ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg 2100 atggaaaacc caggtctatg gattctgggg tgccacaact cagactticg gaacagaggc 2160 atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac 10 2220 agttatgaag atatttcagc atacttgctg agtaaaaaca atgccattga accaagaagc 2280 ttctcccaaa acccaccagt cttgaaacgc catcaacggg aaataactcg tactactctt
2340 15 cagtcagatc aagaggaaat tgactatgat gataccatat cagttgaaat gaagaaggaa 2400 gattttgaca tttatgatga ggatgaaaat cagagccccc gcagctttca aaagaaaaca 2460 cgacactatt ttattgctgc agtggagagg ctctgggatt atgggatgag tagctcccca 0 2520 catgttctaa gaaacagggc tcagagtggc agtgtccctc agttcaagaa agttgttttc 2580 caggaattta ctgatggctc ctttactcag cccttatacc gtggagaact aaatgaacat 2640 ttgggactcc tggggccata tataagagca gaagttgaag ataatatcat ggtaactttc 2700 5 agaaatcagg cctctcgtcc ctattccttc tattctagcc ttatttctta tgaggaagat 70 cagaggcaag gagcagaacc tagaaaaaac tttgtcaagc ctaatgaaac caaaacttac 2820 ttttggaaag tgcaacatca tatggcaccc actaaagatg agtttgactg caaagcctgg 2880 10 gcttatttct ctgatgttga cctggaaaaa gatgtgcact caggcctgat tggacccctt 2940 ctggtctgcc acactaacac actgaaccct gctcatggga gacaagtgac agtacaggaa 3000 tttgctctgt ttttcaccat ctttgatgag accaaaagct ggtacttcac tgaaaatatg 360 gaaagaaact gcagggctcc ctgcaatatc cagatggaag atcccacttt taaagagaat 15 3120 tatcgcttcc atgcaatcaa tggctacata atggatacac tacctggctt agtaatggcet 3180 caggatcaaa ggattcgatg gtatctgctc agcatgggca gcaatgaaaa catccattct 3240 attcatttca gtggacatgt gttcaccgta cgaaaaaaag aggagtataa aatggcactg 20 3300 tacaatctct atccaggtgt ttttgagaca gtggaaatgt taccatccaa agctggaatt 360 tggcgggtgg aatgcecttat tggcgagcat ctacatgctg ggatgagcac actttttcty 3420 gtgtacagca ataagtgtca gactcccctg ggaatggctt ctggacacat tagagatttt 3480 cagattacag cttcaggaca atatggacag tgggccccaa agctggccag acttcattat 5
3540 tccggatcaa tcaatgcctg gagcaccaag gagccctttt cttggatcaa ggtggatctg 3600 ttggcaccaa tgattattca cggcatcaag acccagggtg cccgtcagaa gttctccage
3660 10 ctctacatct ctcagtttat catcatgtat agtctigatg ggaagaagtg gcagacttat 0 cgaggaaatt ccactggaac cttaatggtc ttctttggca atgtggattc atctgggata 3780 aaacacaata tttttaaccc tccaattatt gctcgataca tccgtttgca cccaactcat 380 tatagcattc gcagcactct tcgcatggag ttgatgggct gtgatttaaa tagttgcagc 3900 atgccattgg gaatggagag taaagcaata tcagatgcac agattactgc ttcatcctac 5 3960 tttaccaata tgtttgccac ctggtctcct tcaaaagctc gacttcacct ccaagggagg 4020 agtaatgcct ggagacctca ggtgaataat ccaaaagagt ggctgcaagt ggacttccag 4080 aagacaatga aagtcacagg agtaactact cagggagtaa aatctctgct taccagcatg 20 4140 tatgtgaagg agttcctcat ctccagcagt caagatggcc atcagtggac ‏للتتتاعاها‎ 4200 cagaatggca aagtaaaggt ttttcaggga aatcaagact ccttcacacc tgtggtgaac 4260 tctctagacc caccgttact gactcgctac cttcgaattc acccccagag ttgggtgcac 4320 5 cagattgccc tgaggatgga ggttctgggce tgcgaggcac aggacctcta ctga 4374 <210> 20 <211> 4890
<212> DNA 10 <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 20 atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgcctge tgaggttctg cttctetgee 60 15 accaggagat actacctggg ggctgtggag ctgagctggg actacatgca gtctgacctg 120 ggggagctgc ctgtggatgc caggttccce cccagagtge ccaagagctt cecccttcaac 180 acctctgtgg tgtacaagaa gacccigttt gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt 240 20 gccaagccca ggceccccctg gatgggectg ctgggceccca ccatccagge tgaggtgtat 300 gacactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gccagccacc ctgtgagcct gcatgctgtg 360 ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg ‏م‎ ‎420 ‎gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cctatgtgtg gcaggtgcetg 480 aaggagaatg gccccatggce ctctgaccce ctgtgectga cctacagcta cctgagecat 540 10 gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgetggt gtgcagggag 600 ggcagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt tcatcctgcet gtttgetgtg 660 tttgatgagg gcaagagctg gcactctgaa accaagaaca gcctgatgca ggacagggat 5 720 gctgcctetg ccagggcectg gcccaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggage 780 ctgcctggcec tgattggetg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatggge 840 20 accacccctg aggtgcacag catcttcctg gagggccaca ccttcetggt caggaaccac 900 aggcaggcca gcctggagat 08000060316 accttcctga ctgcccagac 9 960 gacctgggcc agttcctgcet gttctgccac atcagcagcec accagcatga tggcatggag 1020 gcctatgtga aggtggacag ctgccctgag gagccccagce tgaggatgaa gaacaatgag 5S 1080 gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat 1140 gatgacaaca gccccagctt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc 1200 10 tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gactgggact atgccccect ggtgetggec 1260 cctgatgaca ggagctacaa gagccagtac ctgaacaatg gcccccagag gattggcagg 1320 aagtacaaga aggtcaggtt catggcctac actgatgaaa ccttcaagac cagggaggcc 5 1380 atccagcatg agtctggcat cctgggcccce ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 1440 ctgatcatct tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tctaccccca tggcatcact 1500 20 gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcacct gaaggacttc 1560 cccatcctge ctggggagat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga 0081006006 1620 accaagtctg accccaggtg cctgaccaga tactacagca gctttgtgaa catggagagg 1680 gacctggcct ctggcctgat tggcccectg ctgatctget acaaggagte tgtggaccag 5 1740 aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag 1800 aacaggagct ggtacctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcccaaccc tgetggggtg 1860 10 cagctggagg accctgagtt ccaggccagc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtg 1920 tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgage 1980 attggggccc agactgactt cctgtetgtg ttcttctetg getacacctt caagcacaag 2040 atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc ccctictctg gggagactgt gttcatgage 2100 5 atggagaacc ctggcctgtg gattctgggc tgccacaact ctgacttcag gaacaggggce 2160 atgactgccc tgctgaaagt ctccagetgt gacaagaaca ctggggacta ctatgaggac 2220 agctatgagg acatctctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcccaggage 0 2280 ttcagccaga acagcaggca ccccagcacc aggcagaagc agttcaatgc caccaccatc 2340 cctgagaatg acatagagaa gacagaccca tggtttgccc accggacccc catgcccaag 2400 atccagaatg tgagcagctc tgacctgctg atgctgctga ggcagagccc caccccccat 5 2460 ggcctgagcc tgtctgacct gcaggaggcec aagtatgaaa ccttctctga tgaccccagce 2520 cctggggcca ttgacagcaa caacagcctg tctgagatga cccacttcag geccccagcetg 2580 10 caccactctg gggacatggt gttcacccct gagtctggcce tgcagctgag gctgaatgag 2640 aagctgggca ccactgctgc cactgagctg aagaagctgg acttcaaagt ctccagcacc 2700 agcaacaacc tgatcagcac catcccctct gacaacctgg ctgctggcac tgacaacacc 5 2760 agcagcctgg gcccccccag catgcectgtg cactatgaca gccagcetgga caccaccctg 2820 tttggcaaga agagcagccc cctgactgag tctgggggec ccctgagcect gtctgaggag 2880 20 aacaatgaca gcaagctgct ggagtctggc ctgatgaaca gccaggagag cagctggggc 2940 aagaatgtga gcaccaggag cttccagaag aagaccaggc actacttcat tgctgctgtg 3000 gagaggctgt gggactatgg catgagcagc agcccccatg tgctgaggaa cagggceccag 3060 tctggctctg tgccccagtt caagaaggtg gtgttccagg agttcactga tggcagettc 3120 5 acccagcccc tgtacagagg ggagctgaat gagcacctgg gcctgetggg cccctacatc 3180 agggctgagg tggaggacaa catcatggtg accttcagga accaggccag caggccctac 3240 agcttctaca gcagcctgat cagctatgag gaggaccaga ggcagggggc tgagcccagg 10 3300 aagaactttg tgaagcccaa tgaaaccaag acctacttct ggaaggtgca gcaccacatg 3360 gcccccacca aggatgagtt tgactgcaag gectgggcect acttctctga tgtggacctg
3420 15 gagaaggatg tgcactctgg cctgattggc cccctgetgg tgtgccacac caacaccctg 3480 aaccctgccc atggcaggca ggtgactgtg caggagtttg ccctgttctt caccatcttt 3540 gatgaaacca agagctggta cttcactgag aacatggaga ggaactgcag ggccccctgce
3600 20 aacatccaga tggaggaccc caccttcaag gagaactaca ggttccatgc catcaatggc 3660 tacatcatgg acaccctgcc tggcctggtg atggcccagg accagaggat caggtggtac 3720 ctgctgagca tgggcagcaa tgagaacatc cacagcatcc acttctctgg ccatgtgttc 3780 actgtgagga agaaggagga gtacaagatg gccctgtaca acctgtaccc tggggtgttt 5 3840 gagactgtgg agatgctgcc cagcaaggct ggcatctgga gggtggagtg cctgattggg 3900 gagcacctgc atgctggcat gagcaccctg ttcctggtgt acagcaacaa gtgccagacc 3960 10 cccctgggcea tggectctgg ccacatcagg gacttccaga tcactgecte tggccagtat 4020 ggccagtggg cccccaagct ggccaggcetg cactactctg gcagcatcaa tgectggage 4080 accaaggagc ccttcagctg gatcaaggtg gacctgectgg cccccatgat catccatgge 15 4140 atcaagaccc agggggccag gcagaagttc agcagcctgt acatcagcca gttcatcatc 4200 atgtacagcc tggatggcaa gaagtggcag acctacaggg gcaacagcac tggcaccctg 4260 20 atggtgttct ttggcaatgt ggacagctct ggcatcaagc acaacatctt caacccceccce 4320 atcattgcca gatacatcag gctgcacccc acccactaca gcatcaggag caccctgagg 4380 atggagctga tgggctgtga cctgaacagc tgcagcatgce ccctgggcat ggagagcaag 4440 gccatctctg atgcccagat cactgccage agctacttca ccaacatgtt tgccacctgg 5 4500 agccccagca aggccaggct gcacctgcag ggcaggagca atgcctggag gccccaggte 4560 aacaacccca aggagtggct gcaggtggac ttccagaaga ccatgaaggt gactggggtg 4620 10 accacccagg gggtgaagag cctgctgacc agcatgtatg tgaaggagtt cctgatcagce 4680 agcagccagg atggccacca gtggaccctg ttcttccaga atggcaaggt gaaggtgttc 4740 cagggcaacc aggacagctt cacccctgtg gtgaacagcc tggaccccce cctgetgace 5 4800 agatacctga ggattcaccc ccagagctgg gtgcaccaga ttgccctgag gatggaggtg 4860 ctgggctgtg aggcccagga cctgtactga 4890 <210> 21 20 <211> 4374
<212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Nucleic Acid <400> 21 5 atgcagattg agctgtcaac ttgctttttc ctgtgcctge tgagattttg tttttccget 60 actagaagat actacctggg ggctgtggaa ctgtcttggg attacatgca gagtgacctg 120 ggagagctgc cagtggacgc acgatttcca cctagagtcc ctaaatcatt ccccttcaac
180 10 accagcgtgg tctataagaa aacactgtic gtggagttta ctgatcacct gttcaacatc 240 gctaagcctc ggccaccctg gatgggactg ctgggaccaa caatccaggc agaggtgtac 300 gacaccgtgg tcattacact gaaaaacatg gcctcacacc ccgtgagcct gcatgctgtg
360 15 ggcgtcagct actggaaggc ttccgaaggg gcagagtatg acgatcagac ttcccagaga 420 gaaaaagagg acgataaggt gtttcctggc gggtctcata cctatgtgtg gcaggtcctg 480 aaagagaatg gccccatggc ttccgaccct ctgtgectga cctactctta tctgagtcac 540 20 gtggacctgg tcaaggatct gaacagcgga ctgatcggag cactgctggt gtgtagggaa 600 gggagcctgg ctaaggagaa aacccagaca ctgcataagt tcattctgct gttcgecgtg 660 tttgacgaag gaaaatcatg gcacagcgag acaaagaata gtctgatgca ggaccgggat 5 720 gccgcttcag ccagagcttg gcccaaaatg cacactgtga acggctacgt caatcgctca 780 ctgcctggac tgatcggcetg ccaccgaaag agcgtgtatt ggcatgtcat cggaatggge 840 10 accacacctg aagtgcactc cattttcctg gaggggcata cctttctggt ccgcaaccac 900 cgacaggcct ccctggagat ctctccaatt accttcctga cagctcagac tetgectgatg 960 gatctgggac agttcctgcet gttttgccac atcagctcce accagcatga tggcatggag 1020 5 gcctacgtga aagtggacag ctgtcccgag gaacctcage tgaggatgaa gaacaatgag 1080 gaagctgaag actatgacga tgacctgacc gactccgaga tggatgtggt ccgattcgat 1140 gacgataaca gcccctcctt tatccagatt agatctgtgg ccaagaaaca ccctaagaca 0 1200 tgggtccatt acatcgcagc cgaggaagag gactgggatt atgcaccact ggtgctggca 1260 ccagacgatc gatcctacaa atctcagtat ctgaacaatg gaccacagcg gattggcaga 1320 aagtacaaga aagtgaggtt catggcttat accgatgaaa ccttcaagac tcgcgaagca 5 1380 atccagcacg agagcgggat tctgggacca ctgctgtacg gagaagtggg ggacaccctg 1440 ctgatcattt ttaagaacca ggccagcagg ccttacaata tctatccaca tggaattaca 1500 10 gatgtgcgcc ctetgtacag ccggagactg ccaaagggceg tcaaacacct gaaggacttc 1560 ccaatcctgc ccggggaaat ttttaagtat aaatggactg tcaccgtcga ggatggceccc 1620 actaagagcg accctaggtg cctgacccgce tactattcta gtttcgtgaa tatggaaagg 15 1680 gatctggcca gcggactgat cggcccactg ctgatttgtt acaaagagag cgtggatcag 1740 agaggcaacc agatcatgtc cgacaagagg aatgtgattc tgttcagtgt ctttgacgaa 1800 20 aaccggtcat ggtatctgac cgagaacatc cagagattcc tgcctaatcc agccggagtg 1860 cagctggaag atcctgagtt tcaggcttct aacatcatgc atagtattaa tggctacgtg 1920 ttcgacagtc tgcagctgtc agtgtgtctg cacgaggtcg cttactggta tatcctgagce 1980 attggagcac agacagattt cctgagcgtg ttcttttccg gctacacttt taagcataaa 2040 atggtgtatg aggacacact gactctgttc cccticagcg gcgaaaccgt gtttatgtcc 2100 atggagaatc ccgggctgtg gatcctggga tgccacaaca gecgattticag gaatcgeggg 5S
2160 atgactgccc tgctgaaagt gtcaagctgt gacaagaaca ccggagacta ctatgaagat 2220 tcatacgagg acatcagcgc atatctgctg tccaaaaaca atgccattga acccaggtct
2280 10 tttagtcaga atcctccagt gctgaagagg caccagcgceg agatcacccg cactaccctg 2340 cagagtgatc aggaagagat cgactacgac gatacaattt ctgtggaaat gaagaaagag 2400 gacttcgata tctatgacga agatgagaac cagagtcctc gatcattcca gaagaaaacc 15 2460 cggcattact ttattgctgc agtggagcgce ctgtgggatt atggcatgtc ctctagtcct 2520 cacgtgctgc gaaatcgggc ccagtcaggg agcgtcccac agttcaagaa agtggtcttc 2580 caggagttta cagacggatc ctttactcag ccactgtacc ggggcgaact gaacgagcac 0 2640 ctggggctgce tgggacccta tatcagagct gaagtggagg ataacattat ggtcaccttc 2700 agaaatcagg catctaggcc ttacagtttt tattcaagcc tgatctctta cgaagaggac 2760 cagaggcagg gagcagaacc acgaaaaaac ttcgtgaagc ctaatgagac caaaacatac 5 2820 ttttggaagg tgcagcacca tatggcccca acaaaagacg aattcgattg caaggcatgg 2880 gcctattttt ctgacgtgga tctggagaag gacgtccaca gtggcctgat cgggccactg 2940 10 ctggtgtgtc atactaacac cctgaatccc gcacacggca ggcaggtcac tgtccaggaa 3000 ttcgccctgt tetttaccat ctttgatgag acaaaaagct ggtacttcac cgaaaacatg 360 gagcgaaatt gccgggctcc atgtaatatt cagatggaag accccacatt caaggagaac 3120 15 taccgctttc atgccatcaa tgggtatatt atggatactc tgcccggact ggtcatggcet 3180 caggaccaga gaatcaggtg gtacctgctg agcatggggt ccaacgagaa tatccactca 3240 attcatttca gcggacacgt gtttactgtc cggaagaaag aagagtataa aatggccctg 3300 20 tacaacctgt atcccggcegt gttcgaaacc gtcgagatgc tgcctagcaa ggcagggate 3360 tggagagtgg aatgcctgat tggggagcac ctgcatgccg gaatgtctac cctgtttctg 3420 gtgtacagta ataagtgtca gacacccctg gggatggctt ccggacatat ccgggatttc 3480 cagattaccg catctggaca gtacggccag tgggccccta agctggctag actgcactat 5
3540 tccgggtcta tcaacgcttg gtccacaaaa gagcctttct cttggattaa ggtggacctg 3600 ctggcaccaa tgatcattca tggcatcaaa actcaggggg ccaggcagaa gttctectct 3660 ctgtacatct cacagtttat catcatgtac agcctggatg gcaagaaatg gcagacatac 10 3720 cgcggcaata gcacagggac tctgatggtg ttctttggca acgtggacag ttcagggatc 3780 aagcacaaca ttttcaatcc ccctatcatt gctagataca tcaggctgca cccaacccat
3840 15 tattctattc gaagtacact gcggatggaa ctgatggggt gcgatctgaa cagttgttca 3900 atgcccctgg gaatggagtc caaggcaatc tctgacgccc agattaccgce tagctectac 3960 ttcactaata tgtttgctac ctggagcccc tccaaagcac gactgcatct gcagggacga
4020 20 agcaacgcat ggcgaccaca ggtgaacaat cccaaggagt ggctgcaggt cgattttcag 4080 aaaactatga aggtgaccgg agtcacaact cagggcgtga aaagtctgct gacctcaatg 4140 tacgtcaagg agttcctgat ctctagttca caggacggcc accagtggac actgttcttt 4200 cagaacggaa aggtgaaagt cttccagggc aatcaggatt cctttacacc tgtggtcaac 4260 5 tctctggacc cacccctget gactcgcetac ctgcgaatcc acccacagte ctgggtgceat 4320 cagattgcac tgagaatgga agtcctgggc tgcgaggccc aggacctgta ttga 4374 <210> 22 10 <211> 222 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: TTR Promoter 15 <400> 22 gtctgtctgc acatttcgta gagcgagtgt tccgatactc taatctccct aggcaaggtt 60 catattgact taggttactt attctccttt tgttgactaa gtcaataatc agaatcagca 120 ggtttggagt cagcttggca gggatcagca gcctgggttg gaaggagggg gtataaaagc 180 20 cccttcacca ggagaagcecg tcacacagat ccacaagctc ct 222 <210> 23 <211> 5066 <212> DNA <213> Artificial Sequence 5 <220> <223> Description of Artificial Sequence: Expression Cassette <400> 23 cctgcaggca getgegegct cgcetcgetca ctgaggecge ccgggcaaag cccgggegte 60 10 gggcgacctt tggtcgcececg gectcagtga gcgagcgage gecgcagagag ggagtggceca 120 actccatcac taggggttcc tacgcgtgtc tgtctgcaca tticgtagag cgagtgttcc 180 gatactctaa tctccctagg caaggttcat attgacttag gttacttatt ctcctttigt 240 tgactaagtc aataatcaga atcagcaggt ttggagtcag cttggcaggg atcagcagecc 15 300 tgggttggaa ggagggggta taaaagcccc ttcaccagga gaagccgtca cacagatcca 360 caagctcctg ctagcaggta agtgccgtgt gtggttcccg cgggcectggce ctctttacgg 420 20 gttatggccc ttgcgtgect tgaattactg acactgacat ccactttttc tttttctcca 480 caggtttaaa cgccaccatg cagattgagc tgagcacctg cttcttcctg tgtctgetga 540 ggttctgctt ctctgccacc aggaggtatt acctgggggce tgtggagcetg agctgggact 600 atatgcagtc tgacctgggg gagctgcectg tggatgctag gttccccece agggtgecca 5 660 agagcttccc ctttaacact tctgtggtgt acaagaagac cctgtttgtg gagttcactg 720 accacctgtt caacattgcc aagcccaggc ccccctggat ggggcetgetg gggcccacca 780 tccaggctga ggtgtatgac actgtggtga tcaccctgaa gaacatggcc agccaccctg 0 840 tgagcctgca tgctgtgggg gtgagctact ggaaggcttc tgagggggcet gagtatgatg 900 accagactag ccagagggag aaggaggatg acaaggtgtt tcctgggggc agccatacct 960 15 atgtgtggca ggtgctgaag gagaatggcc ccatggcctc tgaccccectg tgectgacct 1020 acagctacct gtctcatgtg gacctggtga aggacctgaa ctctggcectg attggggctc 1080 tgctggtgtg tagggagggce agcctggcta aggaaaagac ccagaccctg cataagttta 0 1140 tcctgcetgtt tgctgtgttt 01319399903 agagcetggca ctctgagacc 38808868026 1200 tgatgcagga tagggatgct gcctctgcca gggcttggec taagatgcac actgtgaatg 1260 ggtatgtgaa taggagcctg cctggcctga ttggctgcca caggaagtct gtgtactgge 5 1320 atgtgattgg gatgggcacc acccctgagg tccatagcat cttcctggag ggccacactt 1380 tcctggtgag gaaccacaga caggcctctc tggagatctc tcccatcacc ttcctgactg 1440 10 ctcagactct gctgatggac ctgggcecagt tectgetgtt ttgecatatt agcagccace 1500 agcatgatgg gatggaggcc tatgtgaagg tggatagctg ccctgaggag cctcagcetga 1560 ggatgaagaa caatgaggag gctgaagact atgatgatga cctgactgat tctgagatgg 1620 15 atgtggtgag gtttgatgat gacaatagcc ccagcttcat tcagatcagg tctgtggcca 1680 agaaacaccc caagacctgg gtgcactaca ttgctgctga ggaagaggac tgggactatg 1740 ctcceetggt getggeccect gatgataggt cttataagag ccagtacctg aacaatggge 20 1800 cccagaggat tggcaggaag tacaagaagg tgaggttcat ggcctacact gatgaaacct 1860 tcaaaaccag ggaggccatt cagcatgagt ctggcatcct gggccctctg ctgtatgggg 1920 aggtggggga caccctgctg atcatcttca agaaccaggc cagcaggccc tacaacatct 5
1980 atcctcatgg catcactgat gtgaggcccc tgtacagcag gaggctgccc aagggggtga 2040 agcacctgaa agacttcccc atcctgectg gggagatctt taagtataag tggactgtga
2100 10 ctgtggagga tggccctacc aagtctgacc ccaggtgtct gaccaggtac tattctagcet 2160 ttgtgaacat ggagagggac ctggcctctg gcctgattgg gcccctgetg atctgctaca 2220 aggagtctgt ggaccagagg ggcaaccaga tcatgtctga caagaggaat gtgatcctgt 15 2280 ttictgtgtt tgatgagaat aggagcetggt acctgactga gaacatccag aggtttctigec 0 ccaatcctgce tggggtgcag ctggaggatc ctgagttcca ggccagcaat atcatgcata 2400 gcatcaatgg ctatgtgttt gacagcctgc agcetgtctgt gtgcctgcat gaggtggect 2460 20 actggtacat cctgagcatt ggggcccaga ctgactttct gtctgtgttc ttttctgget 2520 ataccttcaa gcacaagatg gtgtatgagg ataccctgac cctgttcccc ttctctgggg 2580 agactgtgtt catgagcatg gagaatcctg ggctgtggat cctggggtgc cacaactctg 2640 attttaggaa cagggggatg actgccctgc tgaaggtgtc tagctgtgat aagaacactg 5
2700 gggactacta tgaggacagc tatgaggaca tttctgctta tctgctgtct aagaataatg 2760 ccattgagcc cagaagcttc agccagaatc cccectgtget gaagagacat cagagggaga 2820 tcaccagaac taccctgcag tctgatcagg aggagattga ctatgatgac actatctctg 0 2880 tggagatgaa gaaggaggac tttgacatct atgatgagga tgagaatcag tctcccagga 2940 gctttcagaa gaagaccaga cattacttca ttgctgctgt ggagaggctg tgggactatg
3000 15 gcatgagctc tagccctcat gtgctgagga acagggcecca gtctggcetct gtgccccagt 3060 tcaagaaggt ggtgttccag gaattcactg atggcagctt cacccagccc ctgtacaggg 3120 gggagctgaa tgagcacctg ggcctgctgg ggccttatat cagggctgag gtggaggata 0 3180
2131181001 gactttcagg aaccaggcca gcaggcccta ctctttctat agcagcctga 3240 tctcttatga ggaggatcag aggcaggggg ctgagcctag gaagaacttt gtgaagccca 3300 atgagactaa gacctacttc tggaaggtcc agcaccacat ggcccctacc aaggatgagt 5 3360 ttgactgcaa ggcctgggcec tatttctctg atgtggatct ggagaaggat gtccattctg 3420 ggctgattgg ccccctgetg gtgtgccaca ctaacactct gaatectgec catggcagge 3480 aggtgactgt ccaggagttt gcccetgttct tcactatctt tgatgagacc aagagctggt 3540 10 actttactga gaacatggag aggaactgca gagctccttg caatattcag atggaggacc 3600 ccaccttcaa ggagaattac aggttccatg ccattaatgg gtacatcatg gacaccctgc 3660 ctggcctggt gatggctcag gaccagagga tcaggtggta cctgectgage atgggcetcta 5 3720 atgagaatat ccacagcatc cacttctctg ggcatgtgtt cactgtgagg aagaaggagg 3780 agtacaagat ggctctgtat aatctgtacc ctggggtgtt tgaaactgtg gagatgctgc 3840 cctctaaggc tggcatctgg agggtggagt gectgattgg ggagcacctg catgctggca 20 3900 tgagcaccct gttcctggtg tacagcaaca agtgccagac ccccectgggce atggcectcetg 3960 gccacatcag ggacttccag atcactgcct ctggccagta tggccagtgg gecccccaage 4020 tggccaggct gcactattct ggcagcatca atgcctggag caccaaggag cccttcaget 5 4080 ggatcaaggt ggacctgctg gcccccatga tcattcatgg catcaagacc cagggggcca 4140 ggcagaagtt cagctctctg tacatctctc agttcatcat catgtactct ctggatggga 4200 agaagtggca gacctacagg ggcaacagca ctggcaccct gatggtgttc tttgggaatg 0 4260 tggactcttc tggcatcaag cacaacatct tcaatcccce catcattget aggtatatta 0 ggctgcatcc cacccactac agcatcaggt ctaccctgag gatggagctg atgggctgtg 4380 acctgaactc ttgcagcatg cccctgggca tggagtctaa ggccatctct gatgcccaga 5 4440 ttactgccag cagctacttc accaacatgt ttgccacctg gagcccctct aaggccaggce 4500 tgcatctgca ggggaggagc aatgcctgga ggcctcaggt gaacaacccc aaggagtggce 4560 20 tgcaggtgga tttccagaag accatgaagg tgactggggt gaccacccag ggggtcaaga 4620 gcctgctgac cagcatgtat gtgaaggagt tcctgatcag cagcagccag gatggccacc 4680 agtggactct gtictttcag aatgggaagg tgaaggtgtt tcagggcaat caggactctt 4740 tcacccctgt ggtgaacagc ctggacccce ccetgetgac cagatacctg aggatccacc 4800 5 cccagtcttg ggtgcatcag attgccctga ggatggaggt gectgggcetgt gaggctcagg 4860 atctgtactg agcggccgca ataaaagatc agagctctag agatctgtgt gttggttttt 4920 tgtgtaggaa cccctagtga tggagttggc cactccctct ctgcgegcete getcgetcac 4980 10 tgaggccggg cgaccaaagg tcgcccgacg cccgggcttt gcccgggegg cctcagtgag 5040 cgagcgagcg cgcagctgec tgcagg 5066 <210> 24 <211> 11976 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Plasmid <400> 24 20
0119689903 getgegegct cgcetcgetca ctgaggecge ccgggcaaag cccgggegte
60 gggcgacctt tggtcgcececg gectcagtga gcgagcgage gecgcagagag ggagtggceca
120 actccatcac taggggttcc tacgcgtgtc tgtctgcaca tttcgtagag cgagtgttcc 180 5 gatactctaa tctccctagg caaggttcat attgacttag gttacttatt ctcctttigt 240 tgactaagtc aataatcaga atcagcaggt ttggagtcag cttggcaggg atcagcagcc
300 tgggttggaa ggagggggta taaaagcccc ttcaccagga gaagccgtca cacagatcca 360 10 caagctcctg ctagcaggta agtgccgtgt gtggttcccg cgggcectggce ctctttacgg
420 gttatggccc ttgcgtgect tgaattactg acactgacat ccactttttc tttttctcca 480 caggtttaaa cgccaccatg cagattgagc tgagcacctg cttcttcctg tgtctgetga 540 ggttctgctt ctctgccacc aggaggtatt acctgggggce tgtggagcetg agetgggact 5
600 atatgcagtc tgacctgggg gagctgectg tggatgctag gttccccece agggtgecca
660 agagcttccc ctttaacact tctgtggtgt acaagaagac cctgtttgtg gagttcactg 720 accacctgtt caacattgcc aagcccaggc ccccctggat ggggcetgetg gggcccacca 0
780 tccaggctga ggtgtatgac actgtggtga tcaccctgaa 013380810066 agccaccctg 840 tgagcctgca tgctgtgggg gtgagctact ggaaggcettc tgagggggcet gagtatgatg 900 accagactag ccagagggag aaggaggatg acaaggtgtt tcctgggggce agccatacct 5 960 atgtgtggca ggtgctgaag gagaatggcc ccatggcctc tgaccccctg tgecctgacct 1020 acagctacct gtctcatgtg gacctggtga aggacctgaa ctctggcectg attggggctc 1080 10 tgctggtgtg tagggagggce agcctggcta aggaaaagac ccagaccctg cataagttta 1140 tcctgcetgtt tgctgtgttt gatgagggca agagctggca ctctgagacc aagaacagcc 1200 tgatgcagga tagggatgct gcctctgcca gggcettggec taagatgcac actgtgaatg 5 1260 ggtatgtgaa taggagcctg cctggcctga ttggctgcca caggaagtct gtgtactgge 1320 atgtgattgg gatgggcacc acccctgagg tccatagcat cttcctggag ggccacactt 1380 20 tcctggtgag gaaccacaga caggcctctc tggagatctc tcccatcacc ttcctgactg 1440 ctcagactct gctgatggac ctgggccagt tectgetgtt ttgccatatt agcagccace 7-10 agcatgatgg gatggaggcc tatgtgaagg tggatagctg ccctgaggag cctcagcetga 1560 ggatgaagaa caatgaggag gctgaagact atgatgatga cctgactgat tctgagatgg 1620 5 atgtggtgag gtttgatgat gacaatagcc ccagcttcat tcagatcagg tctgtggcca 1680 agaaacaccc caagacctgg gtgcactaca ttgctgctga ggaagaggac tgggactatg 1740 ctcceetggt getggeccect gatgataggt cttataagag ccagtacctg aacaatggge 10 1800 cccagaggat tggcaggaag tacaagaagg tgaggttcat ggcctacact gatgaaacct 1860 tcaaaaccag ggaggccatt cagcatgagt ctggcatcct gggccctctg ctgtatgggg 1920 15 aggtggggga caccctgcetg atcatcttica agaaccaggc cagcaggccc tacaacatct 1980 atcctcatgg catcactgat gtgaggcccc tgtacagcag gaggctgccc aagggggtga 2040 agcacctgaa agacttcccc atcctgectg gggagatctt taagtataag tggactgtga 20 2100 ctgtggagga tggccctacc aagtctgacc ccaggtgtct gaccaggtac tattctagcet 2160 ttgtgaacat ggagagggac ctggcctctg gcctgattgg gcccctgetg atctgctaca 2220 aggagtctgt ggaccagagg ggcaaccaga tcatgtctga caagaggaat gtgatcctgt 5 2280 ttictgtgtt tgatgagaat aggagctggt acctgactga gaacatccag aggttictgec 2340 ccaatcctgce tggggtgcag ctggaggatc ctgagttcca ggccagcaat atcatgcata 2400 gcatcaatgg ctatgtgttt gacagcctgc agctgtctgt gtgcctgcat gaggtggect 2460 0 actggtacat cctgagcatt ggggcccaga ctgactttct gtctgtgttc ttttctgget 0 ataccttcaa gcacaagatg gtgtatgagg ataccctgac cctgttcccc ttctctgggg 2580 agactgtgtt catgagcatg gagaatcctg ggctgtggat cctggggtgc cacaactctg 2640 15 attttaggaa cagggggatg actgccctgc tgaaggtgtc tagctgtgat aagaacactg 2700 gggactacta tgaggacagc tatgaggaca tttctgctta tctgctgtct aagaataatg 2760 ccattgagcc cagaagcttc agccagaatc cccectgtget gaagagacat cagagggaga 2820 20 tcaccagaac taccctgcag tctgatcagg aggagattga ctatgatgac actatctctg 2880 tggagatgaa gaaggaggac tttgacatct atgatgagga tgagaatcag tctcccagga 2940 gctttcagaa gaagaccaga cattacttca ttgctgctgt ggagaggctg tgggactatg ‏م‎ ‎3000 ‎gcatgagctc tagccctcat gtgctgagga acagggccca gtctggctct gtgeccccagt 3060 tcaagaaggt ggtgttccag gaattcactg atggcagctt cacccagccc ctgtacaggg 3120 10 gggagctgaa tgagcacctg ggcctgctgg ggccttatat cagggctgag gtggaggata 3180 atattatggt gactttcagg aaccaggcca gcaggcccta ctctttctat agcagcctga 3240 tctcttatga ggaggatcag aggcaggggg ctgagcctag gaagaacttt gtgaageccca 5 3300 atgagactaa gacctacttc tggaaggtcc agcaccacat ggcccctacc aaggatgagt 3360 ttgactgcaa ggcctgggcec tatttctctg atgtggatct ggagaaggat gtccattctg 3420 ggctgattgg ccccctgetg gtgtgccaca ctaacactct gaatcctgec catggcagge 0 3480 aggtgactgt ccaggagttt gccctgttct tcactatctt tgatgagacc aagagetggt 3540 actttactga gaacatggag aggaactgca gagctccttg caatattcag atggaggacc 3600 ccaccttcaa ggagaattac aggttccatg ccattaatgg gtacatcatg gacaccctge 3660 ctggcctggt gatggctcag gaccagagga tcaggtggta cctgectgage atgggcetcta 5 3720 atgagaatat ccacagcatc cacttctctg ggcatgtgtt cactgtgagg aagaaggagg 3780 agtacaagat ggctctgtat aatctgtacc ctggggtgtt tgaaactgtg gagatgctgce 3840 cctctaaggc tggcatctgg agggtggagt gectgattgg ggagcacctg catgctggca 10 3900 tgagcaccct gttcctggtg tacagcaaca agtgccagac ccccectgggce atggcectctg 3960 gccacatcag ggacttccag atcactgcct ctggccagta tggccagtgg gecccccaage 4020 15 tggccaggct gcactattct ggcagcatca atgcctggag caccaaggag cccttcagcet 4080 ggatcaaggt ggacctgctg gcccccatga tcattcatgg catcaagacc cagggggcca 4140 ggcagaagtt cagctctctg tacatctctc agttcatcat catgtactct ctggatggga 4200 20 agaagtggca gacctacagg ggcaacagca ctggcaccct gatggtgttc tttgggaatg 4260 tggactcttc tggcatcaag cacaacatct tcaatcccce catcattget aggtatatta 0 ggctgcatcc cacccactac agcatcaggt ctaccctgag gatggagctg atgggctgtg 4380 acctgaactc ttgcagcatg cccctgggca tggagtctaa ggccatctct gatgcccaga 4440 5 ttactgccag cagctacttc accaacatgt ttgccacctg gagcccctct aaggccagge 4500 tgcatctgca ggggaggagc aatgcctgga ggcctcaggt gaacaacccc aaggagtggce 4560 tgcaggtgga tttccagaag accatgaagg tgactggggt gaccacccag ggggtcaaga 10 4620 gcctgctgac cagcatgtat gtgaaggagt tcctgatcag cagcagccag gatggccacc 4680 agtggactct gtictttcag aatgggaagg tgaaggtgtt tcagggcaat caggactctt 4740 tcacccctgt ggtgaacagc ctggacccce ccctgetgac cagatacctg aggatccace 5 4800 cccagtcttg ggtgcatcag attgccctga ggatggaggt gectgggcetgt gaggctcagg 4860 atctgtactg agcggccgca ataaaagatc agagctctag agatctgtgt gttggttitt 4920 tgtgtaggaa cccctagtga tggagttggc cactccctct ctgcgegcete gectcgetcac 0 4980 tgaggccggg cgaccaaagg tcgcccgacg cccgggcttt gcccgggegg cctcagtgag 5040 cgagcgagcg cgcagctgcc tgcaggggca gcttgaagga aatactaagg caaaggtact 5100 gcaagtgctc gcaacattcg cttatgcgga ttattgccgt agtgccgega cgecggggge 5S
5160 aagatgcaga gattgccatg gtacaggccg tgcggttgat attgccaaaa cagagctgtg 5220 ggggagagtt gtcgagaaag agtgcggaag atgcaaaggc gtcggctatt caaggatgcc
5280 10 agcaagcgca gcatatcgcg ctgtgacgat gctaatccca aaccttaccc aacccacctg 5340 gtcacgcact gttaagccgce tgtatgacgce tctggtggtg caatgccaca aagaagagtc 5400 aatcgcagac aacattttga atgcggtcac acgttagcag catgattgcc acggatggca 5 5460 acatattaac ggcatgatat tgacttattg aataaaattg ggtaaatttg actcaacgat 5520 gggttaattc gctcgttgtg gtagtgagat gaaaagaggc ggcgcttact accgattccg 5580 cctagttggt cacttcgacg tatcgtctgg aactccaacc atcgcaggca gagaggtctg 20 5640 caaaatgcaa tcccgaaaca gttcgcaggt aatagttaga gcctgcataa cggtttcggg 5700 attttttata tctgcacaac aggtaagagc attgagtcga taatcgtgaa gagtcggcga 5760 gcctggttag ccagtgctct ttccgttgtg ctgaattaag cgaataccgg aagcagaacc 5 5820 ggatcaccaa atgcgtacag gcgtcatcgc cgcccagcaa cagcacaacc caaactgagc 5880 cgtagccact gtctgtcctg aattcattag taatagttac gctgcggect tttacacatg 590 accttcgtga aagcgggtgg caggaggtcg cgctaacaac ctectgecgt titgecegtg 10 6000 catatcggtc acgaacaaat ctgattacta aacacagtag cctggatttg ttctatcagt 60 aatcgacctt attcctaatt aaatagagca aatcccctta ttgggggtaa gacatgaaga 6120 tgccagaaaa acatgacctg ttggccgceca ttctcgcgge aaaggaacaa ggcatcgggg 15 6180 caatccttgc gtttgcaatg gcgtaccttc gcggcagata taatggcggt gegtttacaa 6240 aaacagtaat cgacgcaacg atgtgcgcca ttatcgccta gttcattcgt gaccttctcg 6300 acttcgccgg actaagtagc aatctcgctt atataacgag cgtgtttatc ggctacatcg 6360 20 gtactgactc gattggttcg cttatcaaac gcttcgctge taaaaaagcc ggagtagaag 6420 atggtagaaa tcaataatca acgtaaggcg ttcctcgata tgctggegtg gtcggaggga 6480 actgataacg gacgtcagaa aaccagaaat catggttatg acgtcattgt aggcggagag 5 6540 ctatttactg attactccga tcaccctcgc aaacttgtca cgctaaaccc aaaactcaaa 6600 tcaacaggcg ccggacgcta ccagcttctt tcccgttggt gggatgcecta ccgcaagcag 6660 10 cttggcctga aagacttctc tccgaaaagt caggacgctg tggcattgca gcagattaag 6720 gagcgtggcg ctttacctat gattgatcgt ggtgatatcc gtcaggcaat cgaccgttge 6780 agcaatatct gggcttcact gccgggcgcet ggttatggtc agttcgagca taaggctgac 6840 15 agcctgattg caaaattcaa agaagcgggc ggaacggtca gagagattga tgtatgagca 6900 gagtcaccgc gattatctcc gcetetggtta tetgcatcat cgtctgectg tcatgggetg 6960 ttaatcatta ccgtgataac gccattacct acaaagccca gcgcgacaaa aatgccagag 7020 0 aactgaagct ggcgaacgcg gcaattactg acatgcagat gcgtcagcgt gatgttgctg 7080 cgctcgatgc aaaatacacg aaggagttag ctgatgctaa agctgaaaat 0810-1-06 7140 gtgatgatgt tgccgctggt cgtcgteggt tgcacatcaa agcagtetgt cagtcagtge 70 gtgaagccac caccgcctcc ggcgtggata atgcagcctc cccccgactg gcagacaccg 7260 5 ctgaacggga ttatttcacc ctcagagaga ggctgatcac tatgcaaaaa caactggaag 7320 gaacccagaa gtatattaat gagcagtgca gatagagttg cccatatcga tgggcaactc 7380 atgcaattat tgtgagcaat acacacgcgc ttccagcgga gtataaatgc ctaaagtaat 10 7440 aaaaccgagc aatccattta cgaatgtttg ctgggtttct gttttaacaa cattttctgc 7500 gccgcecacaa attttggetg catcgacagt tttcttctge ccaattccag aaacgaagaa 7560 atgatgggtg atggtttcct ttggtgctac tgctgccggt tigttttgaa cagtaaacgt 7620 5 ctgttgagca catcctgtaa taagcagggc cagcgcagta gcgagtagca tttttttcat 7680 ggtgttattc ccgatgcttt ttgaagttcg cagaatcgta tgtgtagaaa attaaacaaa 7740 ccctaaacaa tgagttgaaa tttcatattg ttaatattta ttaatgtatg tcaggtgcga 0 tgaatcgtca ttgtattccc ggattaacta tgtccacagc cctgacgggg aacttctctg 7860 20 cgggagtgtc cgggaataat taaaacgatg cacacagggt ttagcgcgta 86018106 7920 attatgccaa cgccceggtg ctgacacgga agaaaccgga cgttatgatt tagcgtggaa 7980 agatttgtgt agtgttctga atgctctcag taaatagtaa tgaattatca aaggtatagt 8040 5 aatatctttt atgttcatgg atatttgtaa cccatcggaa aactcctgct ttagcaagat 8100 tttccctgta ttgctgaaat gtgatttctce ttgatttcaa cctatcatag gacgtttcta 0 taagatgcgt gtttcttgag aatttaacat ttacaacctt tttaagtcct tttattaaca 220 cggtgttatc gttttctaac acgatgtgaa tattatctgt ggctagatag taaatataat 80 gtgagacgtt gtgacgtttt agttcagaat aaaacaattc acagtctaaa tcttttcgca 8340 0 cttgatcgaa tatttcttta aaaatggcaa cctgagccat tggtaaaacc ttccatgtga 8400 tacgagggcg cgtagtttgc attatcgttt ttatcgtttc aatctggtct gacctecttg 8460 tgttttgttg atgatttatg tcaaatatta ggaatgtttt cacttaatag tattggttgc 0 gtaacaaagt gcggtcctge tggcattctg gagggaaata caaccgacag atgtatgtaa 8580 15 ggccaacgtg ctcaaatctt catacagaaa gatttgaagt aatattttaa ccgctagatg 8640 aagagcaagc gcatggagcg acaaaatgaa taaagaacaa tctgctgatg atccctccgt 8700 ggatctgatt cgtgtaaaaa atatgcttaa tagcaccatt tctatgagtt accctgatgt 8760 20 tgtaattgca tgtatagaac ataaggtgtc tctggaagca ttcagagcaa ttgaggcagc 8820 gttggtgaag cacgataata atatgaagga ttattccctg gtggttgact gatcaccata 0 actgctaatc attcaaacta tttagtctgt gacagagcca acacgcagtc tgtcactgtc 8940 aggaaagtgg taaaactgca actcaattac tgcaatgccc tcgtaattaa gtgaatttac 5 9000 aatatcgtcc tgttcggagg gaagaacgcg ggatgttcat tcttcatcac ttttaattga 9060 tgtatatgct ctettttctg acgttagtct ccgacggcag gcttcaatga cccaggctga 9120 gaaattcccg gacccttttt gctcaagagc gatgttaatt tgttcaatca tttggttagg 9180 aaagcggatg ttgcgggttg ttgtictgcg ggttctgttc ttcgttgaca tgaggttgcc 9240 0 ccgtattcag tgtcgctgat ttgtattgtc tgaagttgtt tttacgttaa gttgatgcag 9300 atcaattaat acgatacctg cgtcataatt gattatttga cgtggtttga tggcctccac 60 gcacgttgtg atatgtagat gataatcatt atcactttac gggtcctttc cggtgatccg 9420 acaggttacg gggcggcgac ctgcctgatg cggtattttc tccttacgeca tetgtgeggt 9460 atttcacacc gcatacgtca aagcaaccat agtacgcgcc ctgtagcgge gcattaageg 5 9540 cggcegggtgt ggtggttacg cgcagecgtga ccgctacact tgccagcgcec ttagcgeccg 9600 ctectttecge tttetteect tectttctcg ccacgttcge cggctttecce cgtcaagcete 9660 taaatcgggg gctcccttta gggttccgat ttagtgcettt acggcacctc gaccccaaaa 9720 aacttgattt gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc 9780 ctttgacgtt ggagtccacg tictttaata gtggactctt gttccaaact ggaacaacac 0 tcaactctat ctcgggctat tcttttgatt tagacctgca ggcatgcaag cttggcactg 9900 5 gccgtegttt tacaacgtcg tgactgggaa aaccctggceg ttacccaact taatcgectt 9960 gcagcacatc cccctttcge cagcetggegt aatagcgaag aggcccgcac cgatcgcecct 10020 tcccaacagt tgcgcagcect gaatggcgaa tgcgatttat tcaacaaage 00260916660 10 10080 tcaagtcagc gtaatgctct gccagtgtta caaccaatta accaattctg attagaaaaa 10140 ctcatcgagc atcaaatgaa actgcaattt attcatatca ggattatcaa taccatattt 10200 ttgaaaaagc cgttictgta atgaaggaga aaactcaccg aggcagttcc ataggatgge 5 10260 aagatcctgg tatcggtctg cgattccgac tcgtccaaca tcaatacaac ctattaattt 10320 cccctecgtca aaaataaggt tatcaagtga gaaatcacca tgagtgacga ctgaatccgg 10380 tgagaatggc aaaagcttat gcatttcttt ccagacttgt tcaacaggcc agccattacg 0 10440 ctcgtcatca aaatcactcg catcaaccaa accgttattc attcgtgatt gcgectgage 10500 gagacgaaat acgcgatcgc tgttaaaagg acaattacaa acaggaatcg aatgcaaccg 10560 gcgcaggaac actgccagceg catcaacaat attttcacct gaatcaggat attcttctaa 5 10620 tacctggaat gctgttttcc cggggatcgc agtggtgagt aaccatgcat catcaggagt 10680 acggataaaa tgcttgatgg tcggaagagg cataaattcc gtcagccagt ttagtctgac 10740 10 catctcatct gtaacatcat tggcaacgct acctttgcca tgtttcagaa acaactctgg 10800 cgcatcgggc ttcccataca atcgatagat tgtcgcacct gattgccecga cattatcgeg 10860 agcccattta tacccatata aatcagcatc catgttggaa tttaatcgcg gcttcgagca 10920 15 agacgtttcc cgttgaatat ggctcataac accccttgta ttactgttta tgtaagcaga 10980 cagttttatt gttcatgatg atatattttt atcttgtgca atgtaacatc agagatttty 11040 agacacaacg tggctttgtt gaataaatcg aacttttgct gagttgaagg atcagatcac 11100 gcatcttccc gacaacgcag accgttccgt ggcaaagcaa aagttcaaaa tcaccaactg 0 11160 gtccacctac aacaaagctc tcatcaaccg tggctccctc actttctgge tggatgatgg 11220 ggcgattcag gcctggtatg agtcagcaac accttcttca cgaggcagac ctctcgacgg 11280 agttccactg agcgtcagac cccgtagaaa agatcaaagg atcticttga gatcctittt 5S 11340 ttctgcgegt aatctgctge ttgcaaacaa aaaaaccacc gctaccagceg gtggtttgtt 11400 tgccggatca agagctacca actctttttc cgaaggtaac tggcttcagc agagcgcaga 11460 10 taccaaatac tgttcttcta gtgtagccgt agttaggcca ccacttcaag aactctgtag 1150 caccgcctac atacctcgct ctgctaatcc tgttaccagt ggctgctgee agtggcgata 11580 agtcgtgtct taccgggttg gactcaagac gatagttacc ggataaggcg cagcggtcgg 11640 15 gctgaacggg gggttcgtge acacagccca gettggagcg aacgacctac accgaactga 11700 gatacctaca gcgtgagcta tgagaaagcg ccacgcttcc cgaagggaga aaggcggaca 11760 ggtatccggt aagcggcagg gtcggaacag gagagcgcac gagggagctt ccagggggaa 20 11820 acgcctggta tctttatagt cctgtcgggt ttcgccacct ctgacttgag cgtcgatttt 110 tgtgatgctc gtcagggggg cggagcctat ggaaaaacgc cagcaacgcg gcctttttac 11940 ggttcctggce ctittgetgg ccttttgete acatgt 11976 <210> 25 <211> 1457 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Peptide <400> 25 10
Met GIn lle Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe 1 5 10 15
Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser
Trp Asp Tyr Met Gin Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg 15
Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val 60
Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn lle
65 70 75 80
Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr lle 0 85 90 95
Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val lle Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser 100 105 110 5
His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser 115 120 125
Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp GIn Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp 130 135 140
Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu 10 145 150 155 160
Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser 165 170 175
Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu lle 180 185 190 15
Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr 195 200 205
GIn Thr Leu His Lys Phe lle Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly 210 215 220
Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Glin Asp Arg Asp 225 230 235 240
Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr 245 250 255
Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu lle Gly Cys His Arg Lys Ser Val 5 260 265 270
Tyr Trp His Val lle Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser lle 275 280 285
Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser 290 295 300 10
Leu Glu lle Ser Pro lle Thr Phe Leu Thr Ala Gin Thr Leu Leu Met 305 310 315 320
Asp Leu Gly GIn Phe Leu Leu Phe Cys His lle Ser Ser His Gin His 325 330 335
Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro 15 340 345 350
Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp 355 360 365
Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser
370 375 380
Pro Ser Phe lle Gin lle Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr 385 390 395 400
Trp Val His Tyr lle Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro 405 410 415 5
Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser GIn Tyr Leu Asn 420 425 430
Asn Gly Pro Gin Arg lle Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met 435 440 445
Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala lle Gln His Glu 10 450 455 460
Ser Gly lle Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu 465 470 475 480
Leu lle lle Phe Lys Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Asn lle Tyr Pro 485 490 495 15
His Gly lle Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys 500 505 510
Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro lle Leu Pro Gly Glu lle Phe 515 520 525
Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp 530 535 540
Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg 545 550 555 560
Asp Leu Ala Ser Gly Leu lle Gly Pro Leu Leu lle Cys Tyr Lys Glu 5 565 570 575
Ser Val Asp GIn Arg Gly Asn Gin lle Met Ser Asp Lys Arg Asn Val 580 585 590 lle Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu 595 600 605 10
Asn lle GIn Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val GIn Leu Glu Asp 610 615 620
Pro Glu Phe GIn Ala Ser Asn lle Met His Ser lle Asn Gly Tyr Val 625 630 635 640
Phe Asp Ser Leu GIn Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp 15 645 650 655
Tyr lle Leu Ser lle Gly Ala Gin Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe 660 665 670
Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr
675 680 685
Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro 690 695 700
Gly Leu Trp lle Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly 705 710 715 720 5
Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp 725 730 735
Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp lle Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys 740 745 750
Asn Asn Ala lle Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Pro Pro Val Leu 10 755 760 765
Lys Arg His GIn Arg Glu lle Thr Arg Thr Thr Leu GIn Ser Asp 07 770 775 780
Glu Glu lle Asp Tyr Asp Asp Thr lle Ser Val Glu Met Lys Lys Glu 785 790 795 800 15
Asp Phe Asp lle Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gin Ser Pro Arg Ser Phe 805 810 815
Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe lle Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp 820 825 830
Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gin 835 840 845
Ser Gly Ser Val Pro 0 Phe Lys Lys Val Val Phe Gin Glu Phe Thr 850 855 860
Asp Gly Ser Phe Thr GIn Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His 5 865 870 875 880
Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr lle Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn lle 885 890 895
Met Val Thr Phe Arg Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser 900 905 910 10
Ser Leu lle Ser Tyr Glu Glu Asp GIn Arg Gin Gly Ala Glu Pro Arg 915 920 925
Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val 930 935 940
GIn His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp 15 945 950 955 960
Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu 965 970 975 lle Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His
980 985 990
Gly Arg Gin Val Thr Val 60 Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr lle Phe 995 1000 1005
Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn 1010 1015 1020 5
Cys Arg Ala Pro Cys Asn lle GIn Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys 1025 1030 1035
Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala lle Asn Gly Tyr lle Met Asp Thr 1040 1045 1050
Leu Pro Gly Leu Val Met Ala GIn Asp GIn Arg lle Arg Trp Tyr 10 1055 1060 1065
Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn lle His Ser lle His Phe 1070 1075 1080
Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met 1085 1090 1095 15
Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met 1100 1105 1110
Leu Pro Ser Lys Ala Gly lle Trp Arg Val Glu Cys Leu lle Gly 1115 1120 1125
Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser 1130 1135 1140
Asn Lys Cys GIn Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His lle Arg 1145 1150 1155
Asp Phe Gin lle Thr Ala Ser Gly Gin Tyr Gly Gln Trp Ala Pro 5 1160 1165 1170
Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser lle Asn Ala Trp Ser 1175 1180 1185
Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp lle Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro 1190 1195 1200 10
Met lle lle His Gly lle Lys Thr Gin Gly Ala Arg Gin Lys Phe 1205 1210 1215
Ser Ser Leu Tyr lle Ser Gln Phe lle lle Met Tyr Ser Leu Asp 1220 1225 1230
Gly Lys Lys Trp GIn Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu 15 1235 1240 1245
Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly lle Lys His Asn 1250 1255 1260 lle Phe Asn Pro Pro lle lle Ala Arg Tyr lle Arg Leu His Pro
1265 1270 1275
Thr His Tyr Ser lle Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly 1280 1285 1290
Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys 1295 1300 1305 5
Ala lle Ser Asp Ala GIn lle Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn 1310 1315 1320
Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu 0 1325 1330 1335
Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro GIn Val Asn Asn Pro Lys Glu 10 1340 1345 1350
Trp Leu GIn Val Asp Phe GIn Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val 1355 1360 1365
Thr Thr GIn Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys 1370 1375 1380 15
Glu Phe Leu lle Ser Ser Ser Gin Asp Gly His GIn Trp Thr Leu 1385 1390 1395
Phe Phe GIn Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp 1400 1405 1410
Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr 1415 1420 1425
Arg Tyr Leu Arg lle His Pro Gin Ser Trp Val His Gin lle Ala 1430 1435 1440
Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala 60 Asp Leu Tyr 5 1445 1450 1455 <210> 26 <211> 2351 <212> PRT <213> Artificial Sequence 10 <220> <223> Description of Artificial Sequence: FVIII Peptide <400> 26
Met GIn lle Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe 1 5 10 15 15
Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser
Trp Asp Tyr Met Gin Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg
Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val 60
Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn lle 65 70 75 80
Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr lle Gin 5 85 90 95
Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val lle Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser 100 105 110
His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser 115 120 125 10
Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp GIn Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp 130 135 140
Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu 145 150 155 160
Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser 15 165 170 175
Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu lle 180 185 190
Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr
195 200 205
GIn Thr Leu His Lys Phe lle Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly 210 215 220
Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Glin Asp Arg Asp 225 230 235 240 5
Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr 245 250 255
Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu lle Gly Cys His Arg Lys Ser Val 260 265 270
Tyr Trp His Val lle Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser lle 10 275 280 285
Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser 290 295 300
Leu Glu lle Ser Pro lle Thr Phe Leu Thr Ala GIn Thr Leu Leu Met 305 310 315 320 5
Asp Leu Gly GIn Phe Leu Leu Phe Cys His lle Ser Ser His GIn His 325 330 335
Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro 340 345 350
Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp 355 360 365
Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser 370 375 380
Pro Ser Phe lle GIn lle Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr 5 385 390 395 400
Trp Val His Tyr lle Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro 405 410 415
Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn 420 425 430 10
Asn Gly Pro Gin Arg lle Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met 435 440 445
Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala lle GIn His Glu 450 455 460
Ser Gly lle Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu 15 465 470 475 480
Leu lle lle Phe Lys Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Asn lle Tyr Pro 485 490 495
His Gly lle Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys
500 505 510
Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro lle Leu Pro Gly Glu lle Phe 515 520 525
Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp 530 535 540 5
Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg 545 550 555 560
Asp Leu Ala Ser Gly Leu lle Gly Pro Leu Leu lle Cys Tyr Lys Glu 565 570 575
Ser Val Asp GIn Arg Gly Asn Gin lle Met Ser Asp Lys Arg Asn Val 10 580 585 590 lle Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu 595 600 605
Asn lle GIn Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val GIn Leu Glu Asp 610 615 620 15
Pro Glu Phe GIn Ala Ser Asn lle Met His Ser lle Asn Gly Tyr Val 625 630 635 640
Phe Asp Ser Leu Gin Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp 645 650 655
Tyr lle Leu Ser lle Gly Ala Gin Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe 660 665 670
Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr 675 680 685
Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro 5 690 695 700
Gly Leu Trp lle Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly 705 710 715 720
Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp 725 730 735 10
Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp lle Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys 740 745 750
Asn Asn Ala lle Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Ser Arg His Pro 755 760 765
Ser Thr Arg GIn Lys GIn Phe Asn Ala Thr Thr lle Pro Glu Ash Asp 15 770 7175 780 lle Glu Lys Thr Asp Pro Trp Phe Ala His Arg Thr Pro Met Pro Lys 785 790 795 800 lle Gin Asn Val Ser Ser Ser Asp Leu Leu Met Leu Leu Arg Gin Ser
805 810 815
Pro Thr Pro His Gly Leu Ser Leu Ser Asp Leu GIn Glu Ala Lys Tyr 820 825 830
Glu Thr Phe Ser Asp Asp Pro Ser Pro Gly Ala lle Asp Ser Asn Asn 835 840 845 5
Ser Leu Ser Glu Met Thr His Phe Arg Pro GIn Leu His His Ser Gly 850 855 860
Asp Met Val Phe Thr Pro Glu Ser Gly Leu 60 Leu Arg Leu Asn Glu 865 870 875 880
Lys Leu Gly Thr Thr Ala Ala Thr Glu Leu Lys Lys Leu Asp Phe Lys 10 885 890 895
Val Ser Ser Thr Ser Asn Asn Leu lle Ser Thr lle Pro Ser Asp Asn 900 905 910
Leu Ala Ala Gly Thr Asp Asn Thr Ser Ser Leu Gly Pro Pro Ser Met 915 920 925 15
Pro Val His Tyr Asp Ser GIn Leu Asp Thr Thr Leu Phe Gly Lys Lys 930 935 940
Ser Ser Pro Leu Thr Glu Ser Gly Gly Pro Leu Ser Leu Ser Glu Glu 945 950 955 960
Asn Asn Asp Ser Lys Leu Leu Glu Ser Gly Leu Met Asn Ser Gin Glu 965 970 975
Ser Ser Trp Gly Lys Asn Val Ser Ser Thr Glu Ser Gly Arg Leu Phe 980 985 990
Lys Gly Lys Arg Ala His Gly Pro Ala Leu Leu Thr Lys Asp Asn Ala 5 995 1000 1005
Leu Phe Lys Val Ser lle Ser Leu Leu Lys Thr Asn Lys Thr Ser 1010 1015 1020
Asn Asn Ser Ala Thr Asn Arg Lys Thr His lle Asp Gly Pro Ser 1025 1030 1035 10
Leu Leu lle Glu Asn Ser Pro Ser Val Trp Gln Asn lle Leu Glu 1040 1045 1050
Ser Asp Thr Glu Phe Lys Lys Val Thr Pro Leu lle His Asp Arg 1055 1060 1065
Met Leu Met Asp Lys Asn Ala Thr Ala Leu Arg Leu Asn His Met 15 1070 1075 1080
Ser Asn Lys Thr Thr Ser Ser Lys Asn Met Glu Met Val Gin Gin 1085 1090 1095
Lys Lys Glu Gly Pro lle Pro Pro Asp Ala 60 Asn Pro Asp Met
1100 1105 1110
Ser Phe Phe Lys Met Leu Phe Leu Pro Glu Ser Ala Arg Trp lle 1115 1120 1125
Gln Arg Thr His Gly Lys Asn Ser Leu Asn Ser Gly Gin Gly Pro 1130 1135 1140 5
Ser Pro Lys GIn Leu Val Ser Leu Gly Pro Glu Lys Ser Val Glu 1145 1150 1155
Gly GIn Asn Phe Leu Ser Glu Lys Asn Lys Val Val Val Gly Lys 1160 1165 1170
Gly Glu Phe Thr Lys Asp Val Gly Leu Lys Glu Met Val Phe Pro 10 1175 1180 1185
Ser Ser Arg Asn Leu Phe Leu Thr Asn Leu Asp Asn Leu His Glu 1190 1195 1200
Asn Asn Thr His Asn 60 Glu Lys Lys lle Gin Glu Glu lle Glu 1205 1210 1215 15
Lys Lys Glu Thr Leu lle GIn Glu Asn Val Val Leu Pro Gin lle 1220 1225 1230
His Thr Val Thr Gly Thr Lys Asn Phe Met Lys Asn Leu Phe Leu 1235 1240 1245
Leu Ser Thr Arg ‏صاى‎ Asn Val Glu Gly Ser Tyr Asp Gly Ala Tyr 1250 1255 1260
Ala Pro Val Leu GIn Asp Phe Arg Ser Leu Asn Asp Ser Thr Asn 1265 1270 1275
Arg Thr Lys Lys His Thr Ala His Phe Ser Lys Lys Gly Glu Glu 5 1280 1285 1290
Glu Asn Leu Glu Gly Leu Gly Asn GIn Thr Lys GIn lle Val Glu 1295 1300 1305
Lys Tyr Ala Cys Thr Thr Arg lle Ser Pro Asn Thr Ser Gin 0 1310 1315 1320 10
Asn Phe Val Thr Gln Arg Ser Lys Arg Ala Leu Lys Gin Phe Arg 1325 1330 1335
Leu Pro Leu Glu Glu Thr Glu Leu Glu Lys Arg lle lle Val Asp 1340 1345 1350
Asp Thr Ser Thr Gin Trp Ser Lys Ash Met Lys His Leu Thr Pro 15 1355 1360 1365
Ser Thr Leu Thr GIn lle Asp Tyr Asn Glu Lys Glu Lys Gly Ala 1370 1375 1380 lle Thr Gin Ser Pro Leu Ser Asp Cys Leu Thr Arg Ser His Ser
1385 1390 1395 lle Pro GIn Ala Asn Arg Ser Pro Leu Pro lle Ala Lys Val Ser 1400 1405 1410
Ser Phe Pro Ser lle Arg Pro lle Tyr Leu Thr Arg Val Leu Phe 1415 1420 1425 5
Gln Asp Asn Ser Ser His Leu Pro Ala Ala Ser Tyr Arg Lys Lys 1430 1435 1440
Asp Ser Gly Val GIn Glu Ser Ser His Phe Leu Gln Gly Ala Lys 1445 1450 1455
Lys Asn Asn Leu Ser Leu Ala lle Leu Thr Leu Glu Met Thr Gly 10 1460 1465 1470
Asp GIn Arg Glu Val Gly Ser Leu Gly Thr Ser Ala Thr Asn Ser 1475 1480 1485
Val Thr Tyr Lys Lys Val Glu Asn Thr Val Leu Pro Lys Pro Asp 1490 1495 1500 15
Leu Pro Lys Thr Ser Gly Lys Val Glu Leu Leu Pro Lys Val His 1505 1510 1515 lle Tyr Gin Lys Asp Leu Phe Pro Thr Glu Thr Ser Asn Gly Ser 1520 1525 1530
Pro Gly His Leu Asp Leu Val Glu Gly Ser Leu Leu Gin Gly Thr 1535 1540 1545
Glu Gly Ala lle Lys Trp Asn Glu Ala Asn Arg Pro Gly Lys Val 1550 1555 1560
Pro Phe Leu Arg Val Ala Thr Glu Ser Ser Ala Lys Thr Pro Ser 5 1565 1570 1575
Lys Leu Leu Asp Pro Leu Ala Trp Asp Asn His Tyr Gly Thr Gin 1580 1585 1590 lle Pro Lys Glu Glu Trp Lys Ser GIn Glu Lys Ser Pro Glu Lys 1595 1600 1605 10
Thr Ala Phe Lys Lys Lys Asp Thr lle Leu Ser Leu Asn Ala Cys 1610 1615 1620
Glu Ser Asn His Ala lle Ala Ala lle Asn Glu Gly GIn Asn Lys 1625 1630 1635
Pro Glu lle Glu Val Thr Trp Ala Lys Gln Gly Arg Thr Glu Arg 15 1640 1645 1650
Leu Cys Ser Gln Asn Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gin Arg Glu 1655 1660 1665 lle Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gin Glu Glu lle Asp Tyr
1670 1675 1680
Asp Asp Thr lle Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp lle 1685 1690 1695
Tyr Asp Glu Asp Glu Asn 60 Ser Pro Arg Ser Phe Gin Lys Lys 1700 1705 1710 5
Thr Arg His Tyr Phe lle Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr 1715 1720 1725
Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala GIn Ser 1730 1735 1740
Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gin Glu Phe Thr 10 1745 1750 1755
Asp Gly Ser Phe Thr Gin Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu 1760 1765 1770
His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr lle Arg Ala Glu Val Glu Asp 1775 1780 1785 15
Asn lle Met Val Thr Phe Arg Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Ser 1790 1795 1800
Phe Tyr Ser Ser Leu lle Ser Tyr Glu Glu Asp Gin Arg Gin Gly 1805 1810 1815
Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr 1820 1825 1830
Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu 1835 1840 1845
Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu 5 1850 1855 1860
Lys Asp Val His Ser Gly Leu lle Gly Pro Leu Leu Val Cys His 1865 1870 1875
Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gin 1880 1885 1890 10
Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr lle Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp 1895 1900 1905
Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn 1910 1915 1920 lle Gin Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His 15 1925 1930 1935
Ala lle Asn Gly Tyr lle Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met 1940 1945 1950
Ala GIn Asp GIn Arg lle Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser
155 1960 1965
Asn Glu Asn lle His Ser lle His Phe Ser Gly His Val Phe Thr 1970 1975 1980
Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr 1985 1990 1995 5
Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly 2000 2005 2010 lle Trp Arg Val Glu Cys Leu lle Gly Glu His Leu His Ala Gly 2015 2020 2025
Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys 60 Thr Pro 10 2030 2035 2040
Leu Gly Met Ala Ser Gly His lle Arg Asp Phe Gin lle Thr Ala 2045 2050 2055
Ser Gly Gin Tyr Gly GIn Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His 2060 2065 2070 15
Tyr Ser Gly Ser lle Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser 2075 2080 2085
Trp lle Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met lle lle His Gly lle 2090 2095 2100
Lys Thr Gin Gly Ala Arg Gin Lys Phe Ser Ser Leu Tyr lle Ser 2105 2110 2115
Gln Phe lle lle Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gin Thr 2120 2125 2130
Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn 5 2135 2140 2145
Val Asp Ser Ser Gly lle Lys His Asn lle Phe Asn Pro Pro lle 2150 2155 2160 lle Ala Arg Tyr lle Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser lle Arg 2165 2170 2175 10
Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys 2180 2185 2190
Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala lle Ser Asp Ala Gin 2195 2200 2205 lle Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser 15 2210 2215 2220
Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu GIn Gly Arg Ser Asn Ala Trp 2225 2230 2235
Arg Pro GIn Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu GIn Val Asp Phe
2240 2245 2250
Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr GIn Gly Val Lys 2255 2260 2265
Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu lle Ser Ser 2270 2275 2280 5
Ser Gln Asp Gly His GIn Trp Thr Leu Phe Phe Gin Asn Gly Lys 2285 2290 2295
Val Lys Val Phe Gin Gly Asn Gin Asp Ser Phe Thr Pro Val Val 2300 2305 2310
Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg lle His 10 2315 2320 2325
Pro Gin Ser Trp Val His GIn lle Ala Leu Arg Met Glu Val Leu 2330 2335 2340
Gly Cys Glu Ala GIn Asp Leu Tyr 2345 2350 15 <210> 27 <211> 1736 <212> PRT <213> Artificial Sequence
<220> <223> Description of Artificial Sequence: AAV Capsid <400> 27
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser 1 5 10 15 5
Glu Gly lle Arg Glu Trp Trp Ala Leu GIn Pro Gly Ala Pro Lys Pro
Lys Ala Asn GIn Gin His GIn Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro 10 60
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp 65 70 75 80
Gln Gin Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala 85 90 95 15
Asp Ala Glu Phe GIn Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly 100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gin Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro 115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg 130 135 140
Pro Val Asp GIn Ser Pro Gin Glu Pro Asp Ser Ser Ser Gly Val Gly 145 150 155 160
Lys Ser Gly Lys GIn Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly GIn Thr 5 165 170 175
Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gin Pro Leu Gly Glu Pro Pro 180 185 190
Ala Ala Pro Thr Ser Leu Gly Ser Asn Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly 195 200 205 10
Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ser 210 215 220
Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser GIn Trp Leu Gly Asp Arg Val lle 225 230 235 240
Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu 15 245 250 255
Tyr Lys ‏ماي‎ lle Ser Ser Gin Ser Gly Ala Ser Asn Asp Asn His Tyr 260 265 270
Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His
275 280 285
Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp ‏ماه‎ Arg Leu lle Asn Asn Asn Trp 290 295 300
Gly Phe Arg Pro Lys Lys Leu Ser Phe Lys Leu Phe Asn lle Gin Val 305 310 315 320 5
Lys Glu Val Thr GIn Asn Asp Gly Thr Thr Thr lle Ala Asn Asn Leu 325 330 335
Thr Ser Thr Val GIn Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr 60 Leu Pro Tyr 340 345 350
Val Leu Gly Ser Ala His GIn Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp 10 355 360 365
Val Phe Met Val Pro Gin Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly Ser 370 375 380
Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser 385 390 395 400 15
Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe GIn Phe Ser Tyr Thr Phe Glu 405 410 415
Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser GIn Ser Leu Asp Arg 420 425 430
Leu Met Asn Pro Leu lle Asp GIn Tyr Leu Tyr Tyr Leu Asn Arg Thr 435 440 445
Gln Gly Thr Thr Ser Gly Thr Thr Asn Gln Ser Arg Leu Leu Phe Ser 450 455 460
GIn Ala Gly Pro GIn Ser Met Ser Leu Gin Ala Arg Asn Trp Leu Pro 5 465 470 475 480
Gly Pro Cys Tyr Arg Gin GIn Arg Leu Ser Lys Thr Ala Asn Asp Asn 485 490 495
Asn Asn Ser Asn Phe Pro Trp Thr Ala Ala Ser Lys Tyr His Leu Asn 500 505 510 10
Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys 515 520 525
Asp Asp Glu Glu Lys Phe Phe Pro Met His Gly Asn Leu lle Phe Gly 530 535 540
Lys Glu Gly Thr Thr Ala Ser Asn Ala Glu Leu Asp Asn Val Met lle 15 545 550 555 560
Thr Asp Glu Glu Glu lle Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Gin 565 570 575
Tyr Gly Thr Val Ala Asn Asn Leu GIn Ser Ser Asn Thr Ala Pro Thr
580 585 590
Thr Arg Thr Val Asn Asp Gin Gly Ala Leu Pro Gly Met Val Trp 0 595 600 605
Asp Arg Asp Val Tyr Leu GIn Gly Pro lle Trp Ala Lys lle Pro His 610 615 620 5
Thr Asp Gly His Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Leu 625 630 635 640
Lys His Pro Pro Pro GIn lle Met lle Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala 645 650 655
Asn Pro Pro Thr Thr Phe Ser Pro Ala Lys Phe Ala Ser Phe lle Thr 10 660 665 670
Gln Tyr Ser Thr Gly 60 Val Ser Val Glu lle Glu Trp Glu Leu Gin 675 680 685
Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu lle Gin Tyr Thr Ser Asn 690 695 700 15
Tyr Asn Lys Ser Val Asn Val Asp Phe Thr Val Asp Thr Asn Gly Val 705 710 715 720
Tyr Ser Glu Pro Arg Pro lle Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu 725 730 735
<210> 28 <211> 738 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> 5 <223> Description of Artificial Sequence: AAV Capsid <400> 28
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser 1 5 10 15
Glu Gly lle Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro 10
Lys Ala Asn GIn Gin Lys Gin Asp Asn Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro 60 15
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp 65 70 75 80
Gln 0 Leu GIn Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala 85 90 95
Asp Ala Glu Phe GIn Glu Arg Leu GIn Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly 100 105 110
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe GIn Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro 115 120 125
Leu Gly Leu Val Glu Ser Pro Val Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg 5 130 135 140
Pro Val Glu Pro Ser Pro Gin Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly lle 145 150 155 160
Gly Lys Lys Gly 60 GIn Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly 60 165 170 175 10
Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gin Pro lle Gly Glu Pro 180 185 190
Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Pro Asn Thr Met Ala Ala Gly Gly 195 200 205
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser 15 210 215 220
Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val 225 230 235 240 lle Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
245 250 255
Leu Tyr Lys Gin lle Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp 260 265 270
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn 275 280 285 5
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gin Arg Leu lle Asn 290 295 300
Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn 305 310 315 320 lle Gln Val Lys Glu Val Thr Gin Asn Glu Gly Thr Lys Thr lle Ala 10 325 330 335
Asn Asn Leu Thr Ser Thr lle Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr 0 340 345 350
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His 60 Gly Cys Leu Pro Pro Phe 355 360 365 15
Pro Ala Asp Val Phe Met lle Pro Gin Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn 370 375 380
Asn Gly Ser Gin Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr 385 390 395 400
Phe Pro Ser GIn Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr 405 410 415
Asn Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser GIn Ser 420 425 430
Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu lle Asp Gin Tyr Leu Tyr Tyr Leu 5 435 440 445
Ser Arg Thr GIn Ser Thr Gly Gly Thr Ala Gly Thr Gln Gin Leu Leu 450 455 460
Phe Ser Gln Ala Gly Pro Asn Asn Met Ser Ala Gln Ala Lys Asn Trp 465 470 475 480 10
Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gin GIn Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser 485 490 495 ‏ماك‎ Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His 500 505 510
Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr 15 515 520 525
His Lys Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Met 530 535 540
Phe Gly Lys GIn Gly Ala Gly Lys Asp Asn Val Asp Tyr Ser Ser Val
545 550 555 560
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu lle Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr 565 570 575
Glu 60 Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn Leu Gln GIn Gin Asn Ala Ala 580 585 590 5
Pro lle Val Gly Ala Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val 595 600 605
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu GIn Gly Pro lle Trp Ala Lys lle 610 615 620
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe 10 625 630 635 640
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gin lle Leu lle Lys Asn Thr Pro Val 645 650 655
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gin Ala Lys Leu Ala Ser Phe 660 665 670 15 lle Thr Gin Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu lle Glu Trp Glu 675 680 685
Leu GIn Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu lle GIn Tyr Thr 690 695 700
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu 705 710 715 720
Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro lle Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg 725 730 735
Asn Leu 5 <210> 29 <211> 14 <212> PRT

Claims (1)

  1. عناصر الحماية 1- شكل متباين لحمض نووي ‎nucleic acid variant‏ يشفر عامل ‎(FVII Factor VIII‏ يتسم بإزالة نطاق 8 ‎domain deletion (FVIII-BDD)‏ 8؛ حيث يشتمل الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid‏ على تطابق بنسبة 9698 مع تعريف المتوالية رقم: 7. 2- شكل متباين لحمض نووي ‎nucleic acid variant‏ يشفر عامل ‎Factor VIII‏ يتسم بإزالة نطاق 8 ‎domain deletion (hFVIII-BDD)‏ 8؛ حيث يشتمل الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid‏ على تطابق بنسبة 9695 مع تعريف المتوالية رقم: 7 وبشتمل على ما لا يزيد على 2 من نوكليوتيدات ثنائية من سيتوزين-جوانين ‎cytosine—guanine dinucleotides‏
    ‎.(CpGs)‏ 3- الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid variant‏ طبقاً لعنصر الحماية 2 حيث يشتمل الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid‏ على تطابق متوالية بنسبة %99 مع تعريف المتوالية رقم: 7. 5 4- الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid variant‏ طبقاً لعنصر الحماية 1؛ ‎Gua‏ ‏يشتمل الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid‏ على 1 الى 20 من نوكليوتيدات ثنائية من سيتوزين -جوانين ‎.(CpGs) cytosine—-guanine dinucleotides‏ 5- الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid variant‏ طبقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث يشفر الشكل المتباين للحمض النووي ‎FVIII-BDD nucleic acid‏ له تعريف المتوالية رقم: 5؛ أو يشفر ‎FVIII-BDD‏ له المتوالية التي تتسم ‎dll‏ واحد؛ ‎gia‏ أو جميع الأحماض الأمينية للمتوالية لتعريف المتوالية رقم: 29 في المتوالية لتعريف متوالية رقم: 25. 6- الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid variant‏ طبقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث أن ‎FVIII-BDD 5‏ المذكور هو ‎FVII-BDD‏ بشري.
    7- الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid variant‏ طبقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث أن ‎FVII-BDD‏ المذكور هو بولي ببتيد يتكون من متوالية حمض أميني واردة في تعريف المتوالية رقم: 25 8- الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid variant‏ طبقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث يشتمل الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid‏ على ما لا يزيد على 2 من ‎CpGs‏ ‏9- الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid variant‏ طبقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث يشتمل الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid variant‏ على 1 ‎.CpG‏ ‏10 ‏0- الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid variant‏ طبقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث لا يشتمل الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid‏ على أي ‎.CpGs‏ ‏1- ناقل ‎vector vector‏ فيروس مرتبط بفيروس غدي ‎adenovirus—associated Virus‏ ‎(AAV) 5‏ يشتمل على الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid variant‏ طبقاً لعنصر الحماية 1. 2- ناقل ‎vector‏ ال ‎lh AAV‏ لعنصر الحماية 11( حيث يشتمل ناقل ‎vector‏ ال ‎AAV‏ ‏المذكور إضافياً من: 0 أ) ‎AAV La‏ مصلى بقفيصة ‎«capsid serotype‏ ب) إنترون ‎tintron‏ ‏ج) عنصر تحكم في التعبير ‎expression control element‏ متصل تشغيلياً مع الشكل المتباين للحمض النووي المذكور ؛و ‎(a‏ تكررات ‎AAV‏ طرفية معكوسة ‎¢(ITRs) inverted terminal repeats‏ حيث يحيط ‎ITR(s)‏ ‏25 المذكورة بالطرف 5' أو 3' من الشكل المتباين للحمض النووي ‎nucleic acid‏ المذكور.
    3- ناقل ‎AAV J vector‏ طبقاً لعنصر الحماية 12؛ حيث تم تعديل مما ذُكر من الإنترون؛ ‎pate‏ التحكم في التعبير ؛ ‎ITRS‏ ليشتمل على 0065 منخفضة. ‎AAV J vector Jit -4‏ طبقاً لعنصر الحماية 12 أو 13؛ حيث أن الإنترون» أو عنصر التحكم في التعبير ؛ أو ‎ITRS‏ المذكورين بهم من 1 الى 20 0065. 5- ناقل ‎AAV I vector‏ طبقاً لعنصر الحماية 12( حيث يشتمل عنصر التحكم في التعبير المذكور على عنصر يضفى تعبير فى الكبد ‎diver‏ ‏0 16- ناقل ‎AAV I vector‏ طبقاً لعنصر الحماية 12؛ ‎Gua‏ يشتمل عنصر التحكم في التعبير المذكور على معزز ‎TTR‏ أو معزز ‎TTR‏ طفري. 7- ناقل ‎vector‏ ال ‎AAV‏ طبقاً لعنصر الحماية 12؛ ‎Gua‏ تشتمل ‎ITRS‏ المذكورة على ‎ITRs‏ ‏من أي: الأنماط المصلية ‎(AAVS5 (AAV4 (AAV3 ححا/2 (AAV 1serotypes AAV‏ ‎AAV-2i8 4 Rh74 (Rh10 (AAV11 (AAV10 AAVO (AAVS ¢ AAVT (AAVG6 5‏ « أو توليفة من ذلك. 8- ناقل ‎vector‏ ال ‎AAV‏ طبقاً لعنصر الحماية 12( حيث يشتمل ناقل ‎vector‏ ال ‎AAV‏ ‏المذكور إضافياً على ‎TR‏ معزز ‎promoter‏ إشارة عديد ‎A polyA signal‏ ومتوالية إنترون ‎intron sequence 20‏ مذكورة في تعريف المتوالية رقم: 23. 9- ناقل ‎vector‏ ال ‎AAV‏ طبقاً لعنصر الحماية 12؛ حيث يشتمل النمط المصلى لقفيصة ‎AAV‏ المذكور على قفيصة ‎(WPT‏ أو 02/أو ‎VP3‏ مُعدلة أو من الشكل المتباين ل ‎AAV‏ لها تطابق بنسبة 9695 مع متواليات ‎(AAV6 (AAVS5 (AAV4 AAV3 (AAV2 AAV]‏ ‎(AAV-2i8 VP1 4 Rh74 (Rh10 AAV11 (AAV10 AAVY (AAVS (AAVT 5‏ ‎VP3 VP2‏
    0- ناقل ‎vector‏ ال ‎AAV‏ طبقاً لعنصر الحماية 12؛ حيث يشتمل الناقل ‎AAV vector‏ المذكور على قفيصة ‎capsid‏ لها تطابق متوالية بنسبة 9695 مع تعريف المتوالية رقم: 27 أو قفيصة ‎capsid‏ لها تطابق متوالية بنسبة 90695 مع تعريف المتوالية رقم: 28. 21- تركيبة صيدلانية تشتمل على واحد أو مجموعة من نواقل ‎AAV‏ طبقاً لأي من عناصر الحماية 20-12 فى ‎sale‏ حاملة ‎carrier‏ أو مادة مسوغة ‎excipient‏ متوافقة حيوباً. 2- التركيبة الصيدلانية طبقاً لعنصر الحماية 21 تشتمل إضافياً على قفيصات فارغة ‎AAV‏
    ‎.empty capsids‏ 3- التركيبة الصيدلانية طبقاً لعنصر الحماية 22 حيث تكون نسبة القفيصات ‎AAV‏ الفارغة المذكورة إلى ناقل ‎vector‏ ال ‎AAV‏ المذكور حوالى 2ن ال 3: 1 4: 1 5: 1 6: 1 1:7 8: 1« 9: 6 أو 1:10. 5 24- التركيبة الصيدلانية طبقاً لعنصر الحماية 21؛ تشتمل إضافياً على خافض توتر سطحي ‎surfactant‏ . 5- التركيبة طبقاً لعنصر الحماية 21 لعلاج بشري بحاجة للعامل ‎FVII‏ 0 26- التركيبة طبقاً لعنصر الحماية 21؛ لعلاج الهيموقيليا أ ‎hemophilia A‏ 7- التركيبة طبقاً لعنصر الحماية 21 حيث يتم إعطاء التركيبة الصيدلانية المذكورة إلى بشري داخل الوريد لا5لا100817/600؛ داخل ‎dintraarterially (Lyall‏ أو من خلال قسطرة ‎.catheter‏ 5 28- التركيبة ‎lads‏ لعنصر الحماية 21( حيث يتم إعطاء التركيبة مع عامل كابت للمناعة
    ‎.Immunosuppressive agent‏
    9- ناقل ‎AAV I vector‏ طبقاً لعنصر الحماية 12( حيث يحيط عنصر التحكم في التعبير المذكور بالطرف 5' من الشكل المتباين للحمض النووي ‎said nucleic acid variant‏ المذكور.
    الشكل + مستويات ]011/11 بعد ‎Yt‏ ساعة من ‎HTV Ola‏ اب << ميكروجرام بلازميد؛ ل ‎VA‏ نسخة مختلفة ‎(X01-X18)‏ د03 مستويات 111/111 بعد حتن ‎HTV‏ 8 ‎vy hy‏ ‎a‏ ‏1 ‎h‏ 2 ‎NOR‏ ‎Po‏ ‎Jd 0 |‏ ض ‎Zs‏ ‎Bk 9-10 or ean I‏ 05-30 امد عه ماع 00 ‎iii‏ ¥ 5 ‎E ٠ «٠ i TEED BS ne .‏ ‎i ~ , |‏ هن ني د كد ان اذ لكي كين لكين ‎FE‏ أن ين اطي اي ين عل ين لي اا ا ااه ‎EE‏ الات اي واو يي ‎EE EE‏ أي ل تو لو ني أي لعي ‎FEE‏ الي ا ني أي ب لب ب بم بم ينآث 7< حقن وريد ذيلي ديتاميكي ‎he‏ ‏7 متعادل مع وحدة نسبية وأحدة ‎eid‏ 003
    £ s ‏الأشكال ؟أ-؟ج‎ : ‏ااا الاج‎ AFH } AAV ‏بعد إعطاء‎ LI ‏مستويات !17111 بشري في‎ 0 _! ‏)ج‎ ‎2 hee se 1 3 OY 0 Hew ge ‏جوت ! الور‎ a ‏هي‎ TTR BER 8 ‏لاوا احج‎ OT 3 ‏م ا‎ TIRE 3 ‏الط ارو ا يح‎ XE ‏ب‎ ‏اه ع‎ 7 hi 5 + 5 ¥ ed L ‏اج‎ ores wef £ Fak L ‏احم‎ a we oR ‏م‎ + = or Ted a : 3 Fa Bn 1 | 5 I ge Eee JIE a Yee Fee 0 : "- 3 io N ‏ل 1 ادا امم ا ازع‎ ening 1: ‏تسغر‎ + - = fea 1 ha ¥ A ha % * ‏الأسبوع يعد المعالجة الأسبوع بعد المعالجة‎ (2) 3 ‏تسباوح ب 3 برخ ب‎ A Fa ~~ VINER ‏تجح‎ ‎3 ‏هت‎ 1 XR
    =. ‏حل‎ TINGE ‏د‎ ‎> +e : 3 3 far 5 ee : ‏ا لج ال‎ SE ‏نموذج كار: +604 قر‎ . ‏ب‎ Fe . + mE 1 ‏ال ل مشهت ايه‎ bend Aagall A a TO ke ¢ A ‏الأسبوع بعد المعالجة‎
    ّ ‏ا‎ 1 5 5 ‏لنب‎ = Y ‏الأشكال‎ ‎ٍ ‎3 = i | 5 ‏ا‎ ‎: ‏الس ا ارج‎ wr wb db gL A fa I ‏ا‎ WL { z) ‏إجماني (- للمستضصد‎ 8 {=} alla 0 ‏مستوريات !يرط بالثانوجرام‎ -~ * or x 3 ; A wd NODISCID ‏في بلازما قثران‎ { i) ‏ب‎ Bay 1 {i} Fu i . SN os : Ps Taw ie 2 juga yi R 13 6 2#
    = . i i ‏أجيلوم ناكلا كار‎ Tan A ‏عا‎ ‎So Ee we | Sma ‏كنس‎ ‎te . ‏إٍْ‎ : 1 Yan Co : Se Te: A : : I a 2 1 ‏الست الإ‎ | Hoye. Led ‏ا إٍْ‎ ‏اصن دمج ل‎ + i om 5 A : ; SE ‏ويف‎ § : i ] 3 ‏سل آم الملا‎ i To 0 ‏الف‎ a ‏امت 8 ا 2 ا اد اه م ال ا مضي‎ eee 3 ‏الى‎ 2 i EE 7 1 Te AT hd i Sh) oo [TET ‏مس‎ Eee Te . ST, oN ‏ار‎ een ‏ا ا م د‎ AN a Ll a ‏الحا ل جات‎ 0 A tA inte errr] ou Ha Ta Le I Ae Yak SH ‏ع ل‎ 3 x A ‏ام‎ ‏الإيام بعد الحكن‎ Sad ‏بعد‎ SLA
    ‎١‏ 1 1 بن الشكل ‎ZY‏ ‏مستويات دايمرات © في يلازما بغتران ‎NOD/SCID‏ بعد إعطاء ‎AAV-SPK-8005-hFVill‏ داخل الوريد 1 لل متوسطات المجموعة لكل النقاط الزمنية ©( 0
    يج وسط تال ) 2 ‎Try wf‏ يلوم فق ‎va N ib‏ 3 ا ‎aie ’ oar‏ ناكل( فا ب" 3 ‎TILL ٍ Span -‏ ان ‎De‏ ‏ا الج لي به ‎Bl‏ 1
    : ‏ال‎ aN ‏لج نا‎ Ne Yaw
    ‎BB LE‏ لل
    ‎ses TH = A - \ = ‏ا‎ NN
    ‎LN [LN EN PN RY ‏مش‎ LE LL LN A. ‏يي 3 ا ل‎ ‏با 3 عن‎ Ts AY ‏النقطة الزمتية (اليوم)‎
    ‎Ca [A 2 1 ah Hast‏ يخ ‎cam‏ 2 شكز £ : راسة ‎PLS‏ رئيسي غير بشري ~= : قود زياج )8 مكاك طويل ‎(Oe‏ اا اليم ‎nn RR - jo‏ لا عا ‎TERE‏ ‎ps 0 : { LEGA 2 wy 50-1 3 SDE-200S 2 : a : :‏ 3 . ات ل ماد الاختيان ; = 2 ‎i : i‏ ا دان ؟ إلى ‎sel Co ase‏ ‎x i Diana ena‏ إلى ¢ كجم ٍ ِ ب ‎ie La oe ft‏ الودن ‎Gan‏ ل ‎a‏ : ‎abil & SU‏ ا لال ‎Saad - Ea‏ .م المع لمم تدم ا ‎ETT‏ ‎nr‏ 8 ا ا ا وا ‎Le‏ لمج هويا ‎ea‏ كعك هزه كه ا ا | ‎a NR‏ حا حت جك الو مسستوى الجرعة ‎NHPsas oo‏ | المجموعة ‎BF‏ مستوى ‎BR Goad‏ عند دقل 11111 سرع ‎Di‏ ‏جينوم ناش كجم ‎SB‏ : | جينوم ‎pS‏ ذكر ‎nS en‏ ا ب ا ‎TTS aE EET ERNE‏ ‎MS Reker Se‏ ا (عينة مقارية! جار + : * ; 5 [متخانض) : ‎{usd} ¥ § ¥ Tey WY‏ ا لل ل,|لو»هو”واسل0«©وا7”لللل©ل”لل”ل#“مستد ت ” <ولااالاو”ماد7ا”7اا©3طةطةئزو_'©غ ع و ل لا ا ‎feat‏ ال اا ا ا ‎maga‏ ‏و اب : تس : £ (عالي) : ‎EY Ny‏ ¥ 1 +إعاني)
    = ا ‎a TE ER‏ ‎as—fo JEAN .‏ ا ب بين * ] مستوياتث مستصضد ‎AFVIH‏ في دتري : ب <{ | 0 ‎Trix 2 rh YY xa‏ نوم ‎and FOE‏ = ‎NT‏ ل تاكل 0 كجم مع & ٍ جوم نض + خخ 7 ‎F‏ ‏0 “لبود ‎seven,‏ سل = ‎on, Fn Thre EN‏ 0 2 8 ‎BORE 1 h Th, 3 3‏ ‎ene | . a 5‏ 8 3 ‎fo Fs‏ ل ‎pen‏ الجا حب 3 - : 9 ل ‎ines‏ الي ‎RS‏ ‎if + 18 ge Fr ] 3 ta Fotis +‏ ‎vd 0 > ٍ‏ 4 8 م 7 ‎ved‏ ‏جين ‎Ras‏ تقل 0 ‎uy J‏ وسط تقل ‎Ny‏ صني رار : عد ‎"ty FRR‏ حينم ‎"a, > samen ono VE . . ay 4 / A aad RU‏ ا اي ‎ape EER‏ ناكل ‎gad‏ و | ‎youd‏ 1 اك ‎Avy‏ "يتوم تاكن كجم لظي 4 ‎od‏ + م 3 3 1 ‎I od‏ ‎i 5 { NE‏ 1 ‎TS So > by Lf 8‏ .ا ‎EF BE iene Fe ¥ ,‏ ا ال ا ‎I‏ ريف ل حم حل ‎mc be drm‏ اال الت تح لج حدم تأ ‎omen ein‏ اسار مالو تاسراتس اس صر 3 م8 يا هش ‎£a RoE‏ ؤي كش ‎a £-‏ ران رهد ‎AE x SEN‏ الآيام بعد انحن الآيام بعد الحقن 0{ بكة _ ‎LYE 1‏ ا وي = { 15 جينوم اقل ‎Lae pad‏ َ ‎LF‏ ‎ns‏ ‎RR ER‏ وات ‎pt 5 ey‏ ‎aa‏ لأ د ا ل حاوس ‎J‏ انا م ا ا ا رص تان 1 0 ‎sy baa‏ ‎area‏ " لالخ ا ‎A‏ المع ٌ أ ا 7 ‎apa‏ نائلركجم ‎vo FL Sean sl SE‏ اجيقوم دقل كج ‎A FEN‏ اعد ‎ARI‏ ...اا اا ا 1 ‎J‏ ; ‎Re ةئيع(١ > da‏ 5 م له ام ‎Ray‏ ل لي ¥ ‎ea, RL FT TRENT‏ $ » ‎corn SO‏ لاوا اذ ‎a‏ ام ‎oe hit‏ اج ثم 8 ‎TE‏ الما ا لضا ‎i jE Ny‏ ‎i Nhe Prin :‏ ‎Cima i Leh EXER‏ ب 3 (متوسط { ‎a . = he ag i‏ ‎i‏ 0 م ل = الح 8 ا ا ‎a Ya‏ ‎IE TTT‏ ا ا تت ا وما أ ‎Sei‏ ةل اا ‎HR,‏ ‎sha Ya $< 5, Se AR em OR Yea eg 8‏ للستت اا تت ‎El TER‏ : ب ‎a2‏ 3 الآيام بعد الحقن ‎Sql Salina abun‏ 8
    Eo i > an 1 ‏ال‎ ‎z 1-1 ha ‏ب‎ 4 . ‘ (HP's ‏فى‎ ALT ‏ستويات‎ ‎MN MEP 5 ‏أي‎ i ‏با‎ Buin} sin wy . ‏له وس اقل‎ dy ‏م وسط قائل دي‎ 8 od ‏ا‎ oe IIT ‏يق تاق كم لعا عي دا و جيني اقل كجم 1 و أل‎ he 0 ‏ماقرا جم‎ agian. BR Re fs) hail SA ‏ا ع‎ iz) aS {lS a dan ١33 3: 3 R XN + + TES : ye . yA 3
    5. 8 ٍ : 5. : oe a ber HE wel ‏ير را‎ i Yaad ‏ب تق‎ i SE a of : <4 & ie 5 ‏الث كا‎ oa EL i ‏م ا ا ب‎ 2 0 ‏الام‎ = 4 5 i IEC 1 Yo A Tig ee ‏ل ٍ ال تعر ا ا‎ : ES a 1% 1 ‏ااه‎ oB Eada Tee = ‏الت اساسا‎ CE] ‏ا يك‎ ‏الت سساح ال ل ا ام لج‎ Pat ‏متمق‎ cima 73 Br al NN een a Wl EFTTA 1 ‏ل‎ a | ipo See ‏ل اح الاج زايا ابا‎ CE hed wad Spee ET ‏موي‎ ~ ya Pigs PI ‏ا سح لي‎ ‏عر‎ ; “a, i 1 | i 2 ‏ب ساي ل‎ ¥ S$ = Fe =F 5 2 = ‏م‎ ¥ : LE v8 a x Tow ‏ارك م‎ pas ‏وال من سن ؟# م م ا‎ Fe 4 ‏ا ا‎ ‏اليا يم‎ RET
    جال-١؟‎ Jaan ‏ات ع فى ي!‎ a 43 NHPs ‏في‎ D ‏مستويات دايمرات‎ 0 ‏ج نا ={ سط تاقل‎ = 3 ‏لد‎ 0 BU ‏و سا‎ he tz) Ed 3 ‏ماع ولا‎ SUR ‏ايت ناش كج ا ين و دوم‎ Crew a a had LASERs, 3 Foi "Se Vax # ‏الج‎ Jor » ‏جدنع د ناب جم‎ Yon ‏ا‎ ge 1 : ‏جيذ اق‎ Ir ‏جنم هركم‎ Fron ‏ادا ؟"جيتوم تاقلا كجم‎ fray ‏ناقل/ كجم‎ sae ‏حو‎ LEE a V8 2 3 ‏ا‎ El 5 1 Ces A 3 3, 1 ‏ل‎ ‎oa FY “AN ‏اي بجا جا‎ i fF p ‏حك 5 و‎ A x: Ea 1 : A 3 ‏وو يد“‎ sg aS A ‏باق‎ ete, in = a : J ® Freemont rss dpe hy & oui eNO 0 FEST en 3 Res fgg BR ‏ا الت لحت صن‎ si Fi EERE -- hie TIE Rea eR es Emde Serica Al ‏بعد‎ i ‏يع‎ A : : Tr ‏ب صر‎ $x Ay 58 Shad ‏يعد‎ al Eat 0 ‏الحكن‎ old ‏الأيام بعد‎ Galt ‏بعد‎ abit ‏الاج‎ ٍ pe ES 37 ‏ك3‎ Sell 3 ) Ses . 3 Ya. : ‏ل‎ a 4 3 oh 2 tre * a ! Pe 3 2 7 3 ) 1 ou - . ‏ع‎ 3 ‏4ه‎ Hama sate oy Lo tar ‏ا * + لي‎ 3% » * » Te Ra [2 ‏جرفم‎ 0 pa : Ha AL ve YL ‏ضفر‎ ١٠١ ‏الل ؟‎ te Shia 2x te a ‏الطبيعن؛‎ gill JY EVER ‏للمستوي الطبيعي]‎ 7 hEVIR ‏أ.. للمستوى الطبيعي)‎ Wi ‏للمستوي الطبيعي:‎ LY EVE ‏الطبيعي.‎ geal 4 ‏و( للمستوي الطبيعي)‎
    A ‏الشكل‎ ‏الملخضصن‎ ‎¥ oN Cabo wn ‏مج‎ 3 Ly TE i FEY voy ‏م الك‎ FS Mo ARR RG ‏تحت‎ ES TEV HJ ‏المستشيات العااحية‎ * ‏ا‎ = ny aE ESE a ‏ع‎ 0 CORLEONE ‏اا‎ 3 ‏اا 3 ا تع ممع‎ Sha ‏اتا‎ ‎501-8005 ‏من‎ is ‏ا‎ ede ‏كانت" فر مقط‎ REVI Baga ‏متوسط ذروة ب1ريظ شيع ا ل‎ Bale ‏نابت" شي‎ 017111 Bugle. ‏ا امه ااا‎ Slat A a ‏ليا ذا‎ 0 - Ae ‏كل الحيوانات‎ on NHPs W/O : Somme SE 4 ‏ب‎ 1 3 Es ¢ : ‏الام‎ ‎SERIE ‏ا ا ا‎ ET 3 | ‏لحا لقب‎ dE 1 ‏كل ترس‎ de cme ‏الطبيعي)‎ SRT) ‏للمستوى الطبيعي)‎ .7( 0 TE EL 0 LH CE LE i 5 i ean HE Ea Rar Ey EET SE = CR Ly al Joa ‏ل # ردك جينوم‎ eb VN I eR ny EE RnR ‏ل‎ ha be he pal FAC ‏ريم‎ Sead ’ 5 ‏ا‎ 2 To : X ‏ل‎ 3 : LT ‏ب‎ 1 ٍ i 5 A 1 : 0 : ‏ل‎ ‏ال اس اا‎ want wer En RR She a dn .: ‏تاكن كجم‎ agia TY any EL Tg ye ‏ل ا‎ gl Ta ‏ل‎ EE ‏ا لخ‎ ‏الي ال لما‎ I Fw ‏الي للكخء‎ wy 2 TERY 8 Adds ‏الحا لحم‎ EEE aad Sv Fd ؟ ‏وض الم احا‎ = FEV ‏الا‎ ohhh A ee 508 ‏بخ‎ ‎OEE ‏لاد الخ لس ا ل ان سد كا سرد ا‎ PA HAGE Aad ‏المنؤادة‎ san dd ® 34 3 « > ‏لخ الح‎ wate ‏مايا‎ a WE ‏بالا مة‎ dale ‏مسا‎ Jad ‏لذ‎ ©
    ‏اب 5 ع‎ ‏الأشكال ؟أ-؟د‎ age i 1 0 ‏ا ا 4 ~ ا ب ا لا + 0 مك ] + ا ا‎ BA ‏وح ص‎ Tho ‏مستويات مستضد !151/11 في قرود مكاك‎ :AAV-SPK-8011 (LKO3) g {4 ‏سس‎ 5 = {=} own xe ‏دك الل‎ aa / ‏تافل‎ agian 85 ‏كجم مقط‎ {UR ‏جينوم‎ ١ ST ’ = ‏الي‎ i. 8 ‏ويا > 8 م م اي‎ ih : ‏ال‎ SE © iy 3; Fg 0" = ne ‏د‎ { fd “ Tx F To E 8 ‏ا‎ 3 Nx 0 ‏اا حا‎ By AN ‏م ب ب‎ 8 ًُْ 3 3 ‏ارال ! 8 الس الم ال‎ 0 vd ENT Te ‏ب‎ 0 ead ‏مقا ا‎ hy Sf Bao, 8 ‏ل‎ 4 RNR . ERGY Sa 0 ped i Do by As 0 ‏ال ا‎ ‏اميل‎ EN ‏ب‎ 3 tree rca! aE ‏ص‎ sts : £ pete Sz os > ‏ا‎ JOG cai gk Ye YT ‏وج‎ PR g¥ ox oF TUN 4 va YY OYE ‏اواو‎ fray = 58 Salt ‏الأيام بعد‎ g. iE LL { = da 7 ‏تافر جم‎ 3 ja ya RY 1 1 ‏ميدع‎ ine oa ‏ان # ا‎ 2 ‏ا ل ا اا م‎ Rad 3 ¥ x 5 7 ‏ا ل‎ . 7 RE : # ‏ست الا و : أ‎ SERGE REI 3 FR | Mya Peete Lila Hoven fw 8 {Efe ةنيعل١‎ As ْ 1 ‏الات الل ا الأ عورا‎ ‏شب‎ 8 Be i Ed eit ‏ا‎ ah shia HEIR pe Se. ‏نالا الح‎ sedan PA ‏عرز‎ vy ‏دلا 4؟‎ og 2. ay Clee Yer maar Shall ‏الأيام بعد‎
    الشكز و4 ‎dad i) AAV-SPK-8011‏ 11603 ) مقابل ‎AAVS‏ مقابل ‎AAVS‏ : مستويات ‎oh i a a TF‏ مستضد 11/111 في قرود المكاك . ال ‎NE bee‏ 8 ا ا ا ال ا ل ‎Doves > == AAV-LED3‏ الا مج > ا ٍْ 7 جينوم تقل ‎J AAS‏ ~ الى 8088 عند الذروة )1 ‎deeds‏ الطبيعية | ركيم ‎hes] 0 | | 3 /‏
    ‎3. Re ‏م‎ ‎aE X $‏ يريم تيوت وح عرس موا سيد الم الات ا اتا ‎1 ‎reaps be el i ; ven] | tes | Fees J Se ‏وا ااا تت ا د‎ Sn ‏ا ا ا م بم‎ 3 i o£ ‏ات ب‎ ey Prvrd | ewe | ‏س2‎ Tb ees ‎hae 3‏ = * ا ‎eR,‏ ‎eee 0 | (6135 nin) on‏ عض" ‏000000 | 011 نجه ا صلق ‎Lo‏
    : ا ‎i, oo‏ يه > الشكل ‎ty‏ ‎i‏ وى تتسج ‎AAV-LKOS‏ 3 كائئات ‎duly wb dd)‏ توزيع حيوي لنسيج ‎AAV-LKOS‏ في كائنات رئيسة غير بشرية ‎Jabal & pd x 5 : : ْ ]‏ قط | 'ْ إ: ‎١ L‏ ‎AAV-SPK‏ ا ٍ: ْ ‎dan‏ ‏دمصي » ْ ' : م" ٍ | <> القطنية 77 الغدة الصعترية ‎ah Pot | :‏ ‎S— |‏ العلى ‎N—— |‏ زب ‎Saal Lipa) Me—‏ الممستتتبسب: ‏ انط ‎d‏ ‎ef‏ ااا $ 2 مك لبخ الناقل/ جينوم أحادي الصبغيات ‏ *'
    إظهار 1/111 بالكيد والطحال يعد الإعطاء الجهاري ل ‎ABV-REVIE(SPK-8005)‏ إلى ‎CLARE‏ ‏ا يالا لاا 1 ا ل أ ‎z % x os 1:‏ 0 4
    ‎te.‏ £3 ‎Ya‏ ‎get‏ ‎yo‏ : ‎١‏ الشكل ‎٠١‏ ‎ks 11‏ ب ال اليد
    + ‏نشكا‎ : 2 1 ٍ AAV-LKO3 ‏تنبيغ تقيصة‎ dalled MOI 500 MOI 2500
    رت ‎we‏ اا ا 3 ربا 8ن ‎Towa‏ 3
    بقري ‎Ls‏ 3 م ‎SEE‏ لل 3
    “3 + : ; 3 Yea ol 8 4 ‏ا 4 | ا‎ 0 ا ْ ا ‎Fee “ a Lo 3 | Sn) 0‏ 5 ا © | لالد 2
    MOI 12500 NOL 62500 3 Aa eww 4-0 Ti 3 ‏بباح ب + بام رك‎ : ose ‏بشري‎ 9 Dosw gms ‏ا‎ ‎“3 Terex ‏الا 5 ب ب‎ 4 Faso x J 0 1 0 8 0 Faun ‏ل‎ TH Carano ‏ل‎ 4 ‏مس = ل‎ N 5 ‏ار‎ ٠٠ . & mm
    BEER 6 ‏ا‎ ‏الإشكال + ألحكاب‎
    = . ‏الع الى‎ EB Yoyo ‏لحي‎ lw ‏داعي‎ ‏في الاراتب يعد‎ hFIX ‏ليلا زيمأ ل‎ ١ ‏تركيز‎ ‎AAV ‏إعطاء‎ ‎{ 1 daisy Aga {= ‏عالية‎ Am 4 Fash 3 El ‏حي * لام مح يقية‎ 3 . Nl SERN ‏حرج‎ u $i © 3 LTE SALE of 0 ‏)8م‎ TE ‏ا ووم‎ ّ ‏م‎ Faas ‏ب‎ i CE ‏جب‎ - 3 : i a { ‏َل جل‎ Sede ‏لم‎ 0x Lo. a 3 oA x ‏ا‎ A Ty Ox i Si al i . By 7 4 ‏اي ا : : ل‎ ‏ال ألا ل‎ TR TE Lb - 3 ‏ا اس أي‎ or Min 5 ‏اال ب اهسك اك الم‎ 3 i ‏ب‎ ‎Na, ol hv “+ i i TH 2 3 = ْ ‏ص‎ i wr Te To & \ = oe 3] 8 i > ‏الا‎ i 1 i Fg “35 > = i ae ‏ا‎ 2 wt -. - ARR ‏اا مه ا‎ ten i 3 : . { 1 es —— bis 1 ‏سا ل‎ Rana 2 Yes toa Tae WL de a Vix bos Ysa BLY elk) ‏بعد‎ sli = ‏م‎ : g ‏الآيام بعد إعطاء الناشض‎ JEU ‏الايام بعد إعطاء‎
    ‎Hy FEA ¥i‏ = َ ل كال م ‎wy o=iy‏ أل 1 ‎Ss sh‏ | لتشكيل ‎awa‏ مضاد مه ‎(edu FIX‏ المسار الزمني لتشكيل جسم مضاد مع ‎FIX‏ بشري ا الل« £4 ‎diate a‏ )0 جرعة ‎ide‏ ={ جرعه منخفضة 3 e 1 BEE RY ١ 2 wow ‏بم‎
    3 i in EF RANE 4 ’ i Se ‏ارفج ارق‎ Fh 4 i 0 ‏ب ب‎ | 0 1 Bi
    ] rar i § La ‏ا‎ ASNCLREE roy 3 aan Sh ‏اقش هد‎ ‏الله أ ا‎ ١ iy A Teed ‏ا ْ 3 إلا ال‎
    ‎cra 4 : 8 y‏ وا ‎i ig wk x‏ : ان
    ‎2 ‏اخ اليمج‎ 3, ae ‏ار ا‎ ‏إٍْ ب‎ Fi 8 8 ‏مهو‎ sone Joos) y 3 id es
    ‎0 ‏ا‎ 8 a ee wT aR Ee 8
    ‎ERAN ‏اش الح‎ Bn ‏الك‎ OF ‏تدم تيج سهدي محا تح متحي ديه ةم حش حلي‎ eer, ‏الج اا لسك ا أ د ضقي الك‎ 1 ‏ض‎ phos 3+ Tun 3 3 Yous 0 ‏و3 و ضهن‎ By T ‏اط‎ ‎ْ ٍ ‏ل 4 1 يي‎ 8
    ‎2 7 ‏لي 3 ب‎ PY Lhe Wy Et 4 . ‏ب‎ Jalil ‏ليام يبك إعطام‎ i 2 ‏أ التاقل‎ bag | 3 ; al!
    الحاضهة الهيلة السعودية الملضية الفكرية ‎Swed Authority for intallentual Property pW‏ ‎RE‏ .¥ + \ ا 0 § ام 5 + < ‎Ne‏ ‎ge‏ ”بن اج > عي كي الج دا لي ايام ‎TEE‏ ‏ببح ةا ‎Nase eg‏ + ‎Ed - 2 -‏ 3 .++ .* وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها ‎of‏ سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. »> صادرة عن + ب ب ‎٠.‏ ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > ”+ ص ب ‎101١‏ .| لريا ‎1*١ uo‏ ؛ المملكة | لعربية | لسعودية ‎SAIP@SAIP.GOV.SA‏
SA518391463A 2015-10-30 2018-04-29 VIII أشكال متباينة لعامل منخفضة تركيبات وطرق واستخدامات لمعالجة اضطرابات إرقاء الدم CpG، SA518391463B1 (ar)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562249001P 2015-10-30 2015-10-30
US201662331872P 2016-05-04 2016-05-04
US201662349532P 2016-06-13 2016-06-13
US201662357874P 2016-07-01 2016-07-01
PCT/US2016/059793 WO2017075619A1 (en) 2015-10-30 2016-10-31 Cpg reduced factor viii variants, compositions and methods and uses for treatment of hemostasis disorders

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA518391463B1 true SA518391463B1 (ar) 2022-12-13

Family

ID=58630834

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA518391463A SA518391463B1 (ar) 2015-10-30 2018-04-29 VIII أشكال متباينة لعامل منخفضة تركيبات وطرق واستخدامات لمعالجة اضطرابات إرقاء الدم CpG،

Country Status (19)

Country Link
US (2) US20180312571A1 (ar)
EP (1) EP3368560A4 (ar)
JP (2) JP7088831B2 (ar)
KR (1) KR20180090795A (ar)
CN (1) CN108368164A (ar)
AU (1) AU2016344030B2 (ar)
BR (1) BR112018008766A2 (ar)
CA (1) CA3002689A1 (ar)
CL (1) CL2018001107A1 (ar)
CO (1) CO2018005306A2 (ar)
IL (1) IL258959A (ar)
MX (2) MX2018005490A (ar)
MY (1) MY190926A (ar)
PE (2) PE20231949A1 (ar)
PH (1) PH12018501055A1 (ar)
RU (1) RU2745506C2 (ar)
SA (1) SA518391463B1 (ar)
SG (1) SG11201802972UA (ar)
WO (1) WO2017075619A1 (ar)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201508026D0 (en) 2015-05-11 2015-06-24 Ucl Business Plc Capsid
KR102415896B1 (ko) 2015-06-23 2022-06-30 더 칠드런스 호스피탈 오브 필라델피아 변형된 인자 ix, 및 세포, 기관 및 조직으로 유전자를 전달하기 위한 조성물, 방법 및 용도
JP6994018B2 (ja) 2016-07-26 2022-01-14 バイオマリン ファーマシューティカル インコーポレイテッド 新規アデノ随伴ウイルスキャプシドタンパク質
JP2020533276A (ja) * 2017-08-01 2020-11-19 スパーク セラピューティクス インコーポレイテッドＳｐａｒｋ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， Ｉｎｃ． 第ｖｉｉｉ因子（ｆｖｉｉｉ）遺伝子治療法
KR20200035130A (ko) * 2017-08-09 2020-04-01 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. 핵산 분자 및 이의 용도
KR101952102B1 (ko) * 2017-12-07 2019-02-26 주식회사 지앤피바이오사이언스 단백질 발현량이 증대된 인자 ⅷ 변이체 발현벡터
SG11202010830WA (en) 2018-05-09 2020-11-27 Biomarin Pharm Inc Methods of treating phenylketonuria
US20200069819A1 (en) 2018-05-14 2020-03-05 Biomarin Pharmaceutical Inc. Stable expression of aav vectors in juvenile subjects
TW202005978A (zh) 2018-05-14 2020-02-01 美商拜奧馬林製藥公司 新穎肝靶向腺相關病毒載體
US10842885B2 (en) 2018-08-20 2020-11-24 Ucl Business Ltd Factor IX encoding nucleotides
BR112021003399A2 (pt) * 2018-08-24 2021-05-18 Spark Therapeutics, Inc. sequências de promotores otimizadas, construtos de expressão livres de íntron e métodos de uso
GB201900702D0 (en) * 2019-01-18 2019-03-06 Univ Bristol Therapy
SG11202108357PA (en) 2019-02-15 2021-08-30 Crispr Therapeutics Ag Gene editing for hemophilia a with improved factor viii expression
EP3938523A4 (en) * 2019-03-13 2023-06-21 Generation Bio Co. NON-VIRAL DNA VECTORS AND THEIR USES FOR THE EXPRESSION OF FVIII THERAPEUTICS
WO2021084277A2 (en) * 2019-11-01 2021-05-06 Freeline Therapeutics Limited Transcription regulatory elements
WO2023036054A2 (en) * 2021-09-08 2023-03-16 Inspirar Limited Composition and method for treating hemophilia
WO2023211316A1 (en) * 2022-04-28 2023-11-02 Joint Stock Company "Biocad" Codon-optimized nucleic acid encoding the fviii-bdd
WO2024050039A2 (en) * 2022-08-31 2024-03-07 Hydrogene Therapeutics, Inc. Methods and compositions for hydrodynamic gene delivery
CN115948408A (zh) * 2022-09-23 2023-04-11 上海信致医药科技有限公司 改进的人凝血因子viii基因表达盒及其应用

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6818439B1 (en) 1994-12-30 2004-11-16 Chiron Corporation Methods for administration of recombinant gene delivery vehicles for treatment of hemophilia and other disorders
US6458563B1 (en) * 1996-06-26 2002-10-01 Emory University Modified factor VIII
US20020065236A1 (en) 1998-09-09 2002-05-30 Yew Nelson S. CpG reduced plasmids and viral vectors
US20060099685A1 (en) 1999-04-15 2006-05-11 Yallop Christopher A Recombinant expression of factor VIII in human cells
ATE430578T1 (de) * 1999-12-24 2009-05-15 Chemo Sero Therapeut Res Inst Faktor viii oder von willebrand faktor zur behandlung von thrombopathie assoziierenden hämorrhagischen erkrankungen
HUP0301179A3 (en) * 2000-09-19 2006-11-28 Univ Emory Modified factor viii
DE102004037611B4 (de) * 2004-08-03 2013-10-02 Geneart Ag Induzierbare Genexpression
GB0908515D0 (en) 2009-05-18 2009-06-24 Apitope Technology Bristol Ltd Peptide
GB0911870D0 (en) 2009-07-08 2009-08-19 Ucl Business Plc Optimised coding sequence and promoter
MY180714A (en) 2011-07-08 2020-12-07 Bioverativ Therapeutics Inc Factor viii chimeric and hybrid polypeptides, and methods of use thereof
KR20190094480A (ko) * 2012-02-15 2019-08-13 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. 재조합 인자 viii 단백질
US20140271550A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Constructs and Methods for Delivering Molecules via Viral Vectors with Blunted Innate Immune Responses
WO2015013313A2 (en) * 2013-07-22 2015-01-29 The Children's Hospital Of Philadelphia Variant aav and compositions, methods and uses for gene transfer to cells, organs and tissues
PL3044231T3 (pl) 2013-09-12 2021-01-11 Biomarin Pharmaceutical Inc. Wektory aav zawierające gen kodujący czynnik viii
WO2015054439A2 (en) * 2013-10-08 2015-04-16 Haplomics, Inc. Hybrid factor viii polypeptides for use to treat hemophilia a
GB201403684D0 (en) * 2014-03-03 2014-04-16 King S College London Vector
EP3180022A4 (en) * 2014-08-13 2019-02-20 The Children's Hospital of Philadelphia IMPROVED EXPRESSION CASSETTE FOR THE PACKAGING AND EXPRESSION OF VARIANT FACTOR VIII FOR THE TREATMENT OF HEMOSTATIC DISEASES
BR112018008519A2 (pt) 2015-10-28 2018-11-06 Sangamo Therapeutics Inc construtos específicos de fígado, cassetes de expressão de fator viii e métodos de uso dos mesmos
JP2020533276A (ja) 2017-08-01 2020-11-19 スパーク セラピューティクス インコーポレイテッドＳｐａｒｋ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， Ｉｎｃ． 第ｖｉｉｉ因子（ｆｖｉｉｉ）遺伝子治療法

Also Published As

Publication number Publication date
RU2745506C2 (ru) 2021-03-25
PH12018501055A1 (en) 2019-01-28
IL258959A (en) 2018-06-28
JP2022137029A (ja) 2022-09-21
US20180312571A1 (en) 2018-11-01
RU2018119710A3 (ar) 2020-04-02
KR20180090795A (ko) 2018-08-13
BR112018008766A2 (pt) 2018-10-30
US11168124B2 (en) 2021-11-09
CN108368164A (zh) 2018-08-03
MX2018005490A (es) 2018-08-16
JP2019503649A (ja) 2019-02-14
CA3002689A1 (en) 2017-05-04
MX2023001600A (es) 2023-03-09
MY190926A (en) 2022-05-20
CL2018001107A1 (es) 2018-10-05
PE20181168A1 (es) 2018-07-19
EP3368560A1 (en) 2018-09-05
JP7088831B2 (ja) 2022-06-21
PE20231949A1 (es) 2023-12-05
US20170216408A1 (en) 2017-08-03
RU2018119710A (ru) 2019-12-06
AU2016344030B2 (en) 2021-05-06
EP3368560A4 (en) 2019-03-27
WO2017075619A1 (en) 2017-05-04
AU2016344030A1 (en) 2018-05-10
CO2018005306A2 (es) 2018-11-30
SG11201802972UA (en) 2018-05-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA518391463B1 (ar) VIII أشكال متباينة لعامل منخفضة تركيبات وطرق واستخدامات لمعالجة اضطرابات إرقاء الدم CpG،
KR20200066289A (ko) 인자 viii (fviii) 유전자 요법 방법
CN111432635B (zh) 具有经工程改造的免疫球蛋白λ轻链的非人动物以及所述非人动物的用途
KR20200032174A (ko) 강화된 키메라 항원 수용체 및 이의 용도
CN109843930A (zh) 酸性α-葡萄糖苷酶变体及其用途
KR20180016722A (ko) 재조합 glut1 아데노-관련 바이러스 벡터 작제물 및 glut1 발현을 회복하기 위한 관련된 방법
KR20210022038A (ko) 근육 이영양증을 치료하기 위한 근육 특이적 마이크로-디스트로핀의 아데노-연관 바이러스 벡터 전달
KR20210005146A (ko) 유전자 편집된 t 세포에서의 인간 foxp3의 발현
US6284507B1 (en) Mitofusin genes and their uses
CN113166748A (zh) 用于治疗mma的非破坏性基因疗法
CN112912112A (zh) 肝特异性核酸调节元件以及其方法及用途
KR20230069157A (ko) GJB2를 코딩하는 재조합 아데노 연관 바이러스 (rAAV) 및 그의 용도
KR20240001708A (ko) 유전적 장애의 치료를 위해 생체내 뉴클레아제-매개의 유전자 표적화를 위한 조성물 및 방법
CN116348149A (zh) 用于肌营养不良症的腺相关病毒载体递送
RU2808274C2 (ru) Способы генотерапии с использованием гена фактора viii (fviii)
US20240139306A1 (en) Methods and compositions for detecting and producing porcine morbillivirus and vaccines thereof
CN116997657A (zh) 编码GJB2的重组腺相关病毒(rAAV)及其用途
KR20240021166A (ko) 스테레오실린 이중 벡터 시스템을 사용하여 감각신경성 청력 상실을 치료하기 위한 조성물 및 방법
CN117693592A (zh) 用于治疗遗传性疾患的体内核酸酶介导的基因靶向的组合物和方法
CN115279419A (zh) 用于基因组工程的组合物和方法