RU96123299A

RU96123299A - Растворимые полипептидные фракции протеина lag-3; способ получения; терапевтическая композиция; антиидиотипическое антитело

Info

Publication number: RU96123299A
Application number: RU96123299/13A
Authority: RU
Inventors: Фор Флоранс; Эрсен Тьерри; Юар Бертран; Триебель Фредерик
Original assignee: Энститю Гюстав Русси; Энститю Насьональ Де Ля Санте Де Ля Решерш Медикаль (Энсэрм); Апплайд Резеч Системз Арс Холдинг Н.В.
Priority date: 1994-05-06
Filing date: 1995-05-05
Publication date: 1999-01-20

Claims

1. Терапевтическая композиция с иммуноподавляющей активностью, отличающаяся тем, что она включает растворимую полипептидную фракцию, образованную целиком или частью по крайней мере одного из четырех внеклеточных доменов иммуноглобулинового типа протеина LAG-3 (аминокислоты 1-149, 150-239, 240-330 и 331-412 последовательности 1) или пептидной последовательностью, получающейся из этих доменов за счет замены, добавления и/или делеции одной или нескольких аминокислот, и которая обладает специфичностью, по крайней мере равной таковой LAG-3 и его лигаде.

2. Применение растворимой полипептидной фракции, образованной целиком или частью, по крайней мере, одного из четырех внеклеточных доменов иммуноглобулинового типа протеина LAG-3 (аминокислоты 1-149, 150-239, 240-330 и 331-412 последовательности 1) или пептидной последовательностью, получающейся из этих доменов за счет замены, добавления и/или делеции одной или нескольких аминокислот, и которая обладает специфичностью, по крайней мере, равной таковой LAG-3 в его лигаде, для приготовления терапевтической композиции с иммуноподавляющей активностью.

3. Применение антител, направленных против LAG-3, или растворимых фракций, образованных целиком или частью по крайней мере одного из четырех внеклеточных доменов иммуноглобулинового типа протеина LAG-3 (аминокислоты 1-149, 150-239, 240-330 и 331-412 последовательности 1) или пептидной последовательностью, получающейся из этих доменов за счет замены, присоединения и/или делеции одной или нескольких аминокислот, и которая обладает специфичностью, по крайней мере равной таковой LAG-3 в его лигаде, или фрагментов этих антител для приготовления терапевтической иммуностимулирующей композиции.

4. Применение по п.3, отличающееся тем, что антителами являются моноклональные антитела или фрагменты этих антител, особенно фрагменты Fab, Fab', F(ab')₂.

5. Применение по п.4, отличающееся тем, что моноклональные антитела связаны с цитотоксической молекулой или радиоактивным изотопом.

6. Анти-идиотипические антитела, включающие "внутренний образ" LAG-3, направленные против антител по любому из пп. 1-5.

7. Терапевтическая композиция, включающая анти-идиотипические антитела по п.6.

8. Растворимая полипептидная фракция, образованная целиком или частью по крайней мере одного из четырех внеклеточных доменов иммуноглобулинового типа протеина LAG-3 (аминокислоты 1-149, 150-239, 240-330 и 331-412 последовательности 1), включающего замещение глутаминовой кислотой (Glu) одного или нескольких аргининовых остатков (Arg)в положениях 73,75 и 76 последовательности 1.

9. Полипептидная фракция, образованная целиком или частью по крайней мере одного из четырех внеклеточных доменов иммуноглобулинового типа протеина LAG-3 (аминокислоты 1-149, 150-239, 240-330 и 331-412 последовательности 1) или пептидной последовательностью, получающейся из этих доменов путем замены, присоединения и/или делеции одной или нескольких аминокислот, и которая обладает специфичностью, по крайней мере равной таковой LAG-3 в его лиганде, отличающаяся тем, что пептиная последовательность LAG-3 включает, кроме того, на своем С - конце и/или N-конце дополнительную пептидную последовательность, так, чтобы образовать слитый белок.

10. Растворимая полипептидная фракция по п.9, отличающаяся тем, что она связана, кроме того, с токсином или радиоактивным изотопом.

11. Растворимая полипептидная фракция по п.9 или 10, отличающаяся тем, что полипептидная область LAG-3 включает часть иммуноглобулина.

12. Растворимая полипептидная фракция по п.9, отличающаяся тем, что иммуноглобулином является изотип IgG4.

13. Способ получения растворимых полипептидных фракций по п.11 или 12, отличающийся тем, что в вектор вставляют фрагменты кДНК, кодирующей полипептидные области, соответствующие LAG-3 или производные LAG-3, возможно после амплификации с помощью полимеразной цепной реакции, и кДНК, кодирующую подходящую область иммуноглобулина, соединенную с кДНК, кодирующей соответствующие или происходящие от LAG-3 полипептидные области, и, после трансфекции, фрагменты кДНК экспрессируют в системе экспрессии, особенно в клетках млекопитающих, например, в клетках яичника хомяка.

14. Способ получения антител по п.11 или 12, отличающийся тем, что осуществляют расщепление конъюгата LAG-3 с иммуноглобулином, сконструированного так, что он содержит соответствующий сайт расщепления.