RU2801068C2 - Трициклические соединения, действующие на белки crbn - Google Patents

Трициклические соединения, действующие на белки crbn Download PDF

Info

Publication number
RU2801068C2
RU2801068C2 RU2021107688A RU2021107688A RU2801068C2 RU 2801068 C2 RU2801068 C2 RU 2801068C2 RU 2021107688 A RU2021107688 A RU 2021107688A RU 2021107688 A RU2021107688 A RU 2021107688A RU 2801068 C2 RU2801068 C2 RU 2801068C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
reaction mixture
alkyl
group
mmol
added
Prior art date
Application number
RU2021107688A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2021107688A (ru
Inventor
Маои ЛЭЙ
Юньфу Ло
Юй Сюй
Голи ЧЖАН
Чжицзюань ЮЙ
Цзянь Ли
Шухуэй Чэнь
Original Assignee
Чиа Тай Тяньцин Фармасьютикал Груп Ко., Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Чиа Тай Тяньцин Фармасьютикал Груп Ко., Лтд. filed Critical Чиа Тай Тяньцин Фармасьютикал Груп Ко., Лтд.
Publication of RU2021107688A publication Critical patent/RU2021107688A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2801068C2 publication Critical patent/RU2801068C2/ru

Links

Abstract

Изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, фармацевтической композиции на его основе для лечения заболевания, связанного с белком CRBN, его применению для приготовления лекарственного препарата для лечения заболевания, связанного с белком CRBN, а также к способу лечения заболевания, связанного с белком CRBN. В общей формуле (I) n выбран из группы, состоящей из 0, 1 и 2; каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, C1-6-алкила, C3-6-циклоалкила, C1-6-алкокси, C1-6-алкиламино, C2-6-алкенила, , -S(=O)2NH2, -NHS(=O)2-C1-6-алкила, -N[S(=O)2-C1-6-алкила]2, -NHC(=O)-C1-6-алкила и -C(=O)NH2, где NH2, C1-6-алкил, C1-6-алкокси, , -S(=O)2NH2 и -C(=O)NH2 необязательно замещены посредством 1 или 2 Ra; кольцо A выбрано из группы, состоящей из 5-6-членного гетероарила, фенила и 5-6-членного гетероциклоалкенила; кольцо B выбрано из группы, состоящей из фенила; каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, C1-6-алкила, C1-6-алкокси, C1-6-алкиламино, -NHC(=O)-C1-6-алкила, C3-6-циклоалкиламино, 4-6-членного гетероциклоалкила, 5-6-членного гетероциклоалкиламино и 5-6-членного гетероциклоалкила, замещенного одним карбонилом, где NH2, C1-6-алкил, C1-6-алкиламино, C3-6-циклоалкиламино, 4-6-членный гетероциклоалкил и 5-6-членный гетероциклоалкиламино необязательно замещены посредством 1 или 2 R; каждый R независимо выбран из группы, состоящей из C1-3-алкила, C1-3-алкокси, C3-5-циклоалкила, -C(=O)-C1-3-алкила, -C(=O)O-C1-6-алкила, -S(=O)2-C1-3-алкила, и ; каждый из 5-6-членного гетероарила, 4-6-членного гетероциклоалкила, 5-6-членного гетероциклоалкиламино и 5-6-членного гетероциклоалкила, замещенного одним карбонилом, содержит 1 или 2 гетероатома или гетероатомных групп, независимо выбранных из группы, состоящей из -NH-, -O- и N. 5 н. и 15 з.п. ф-лы, 3 ил., 4 табл., 84 пр.

Description

Ссылка на родственные заявки
Согласно настоящей заявке испрашивается преимущества и приоритет в соответствии с заявкой на выдачу патента Китая №201811045941.1, поданной в Национальное управление интеллектуальной собственности КНР 07 сентября 2018 года, заявкой на выдачу патента Китая №201811354986.7, поданной в Национальное управление интеллектуальной собственности КНР 14 ноября 2018 года, и заявкой на выдачу патента Китая №201910222597.7, поданной в Национальное управление интеллектуальной собственности КНР 22 марта 2019 года, содержание каждой из которых полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.
Область техники
Настоящее изобретение относится к ряду трициклических замещенных пиперидиндионовых соединений и к их применению при получения лекарственного препарата для лечения заболевания, связанного с белком CRBN, в частности, к производному соединению, представленному формулой (I), или его фармацевтически приемлемой соли.
Предпосылки изобретения
Талидомид, продаваемый под торговым названием THALOMID®, впервые был синтезирован компанией Grünenthal Group из Германии. Начиная со второй половины 1950-х и до начала 1960-х годов, его продавали как седативное средство более чем в 40 странах, а также широко применяли в качестве противорвотного средства для беременных. В конце концов, его сняли с продажи из-за вызванной им трагедии, а именно, десятки тысяч младенцев родились с фокомелией (морфогенетическим нарушением).
После данного события с талидомидом у исследователей вызвал большой интерес механизм тератогенного действия талидомида. Как было доказано, целевым белком для тератогенности талидомида является белок цереблон (CRBN). Талидомид образует комплекс убиквитинлигазы E3 путем объединения с CRBN, связывающим поврежденную ДНК белком 1 (DDB1), куллином 4A (CUL4A) и регулятором куллинов 1 (ROC1), подвергая убиквитинированию множество субстратных белков и образуя убиквитинированные цепи, вследствие чего субстратные белки распознаются и гидролизируются протеасомами. Домидные лекарственные средства, называемые иммуномодулирующими лекарственными средствами (IMiD), активируют комплекс убиквитинлигазы E3, образованный с CRBN, подвергая убиквитинированию транскрипционные факторы IKZF1 и IKZF3, которые затем распознаются и разрушаются протеасомами, оказывая в результате токсическое действие на множественную миелому. Отсутствие этих двух транскрипционных факторов остановит рост миеломы. В настоящее время домидные лекарственные средства, такие как леналидомид и помалидомид, являются лекарственными средствами первой линии при лечении множественной миеломы.
CRBN представляет собой белок, который является консервативным у ряда организмов, начиная от растений и заканчивая человеком, содержит 442 аминокислоты, его ген расположен на коротком плече p26.3 хромосомы 3 человека, а молекулярная масса составляет 51 кДа. У людей ген CRBN был выявлен в качестве гена, потенциально ответственного за развитие несиндромальной умственной отсталости с аутосомно-рецессивным наследованием (ARNSMR). CRBN широко экспрессируется в семенниках, селезенке, предстательной железе, печени, поджелудочной железе, плаценте, почке, легком, скелетных мышцах, яичнике, тонком кишечнике, лейкоцитах периферической крови, толстой кишке, головном мозге и сетчатке, а его экспрессия в ткани головного мозга (в том числе в сетчатке) и яичке значительно выше, чем в других тканях.
Было доказано, что при использовании CRBN в качестве важной мишени для противоопухолевых и иммунорегулирующих лекарственных средств достигается определенная эффективность в отношении различных гематологических злокачественных опухолей, таких как множественная миелома и хронический лимфолейкоз, кожных заболеваний, таких как узловатая лепрозная эритема, и аутоиммунных заболеваний, таких как системная красная волчанка. Все домидные лекарственные средства вызывают множество побочных эффектов, в особенности периферическую нейропатию. Существует острая потребность в разработке CRBN-модулирующих лекарственных средств без тератогенного эффекта, с меньшим количеством периферических нейропатий, более сильным иммуномодулирующим эффектом и более высокой противоопухолевой активностью для улучшения клинических терапевтических эффектов, уменьшения количества клинических побочных эффектов и облегчения долгосрочного приема пациентами.
Краткое описание изобретения
Настоящим изобретением предусмотрено соединение, представленное формулой (I), его изомер или его фармацевтически приемлемая соль,
,
где
n выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2 и 3;
каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, C1-6-алкила, C3-10-циклоалкила, C1-6-алкокси, C1-6-алкиламино, C2-6-алкенила, , -S(=O)2NH2, -NHS(=O)2-C1-6-алкила, -N[S(=O)2-C1-6-алкила]2, -N[C(=O)-C1-6-алкила]2, -NHC(=O)-C1-6-алкила и -C(=O)NH2, где OH, NH2, C1-6-алкил, C3-10-циклоалкил, C1-6-алкокси, C1-6-алкиламино, C2-6-алкенил, , -S(=O)2NH2, -NHS(=O)2-C1-6-алкил, -N[S(=O)2-C1-6-алкил]2, -N[C(=O)-C1-6-алкил]2, -NHC(=O)-C1-6-алкил и -C(=O)NH2 необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 Ra;
кольцо A выбрано из группы, состоящей из 5-6-членного гетероарила, фенила, C4-6-циклоалкила, 4-7-членного гетероциклоалкила и 4-7-членного гетероциклоалкенила;
кольцо B выбрано из группы, состоящей из 5-6-членного гетероарила и фенила;
каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, C1-10-алкила, C1-10-алкокси, C1-10-алкиламино, -C(=O)NH-C1-10-алкила, -NHC(=O)-C1-10-алкила, C3-10-циклоалкила, C3-10-циклоалкиламино, 4-10-членного гетероциклоалкила, 4-10-членного гетероциклоалкиламино и 4-10-членного гетероциклоалкила, замещенного одним карбонилом, где OH, NH2, C1-10-алкил, C1-10-алкокси, C1-10-алкиламино, -C(=O)NH-C1-10-алкил, -NHC(=O)-C1-10-алкил, -COOC1-10-алкил, C3-10-циклоалкил, C3-10-циклоалкиламино, 4-10-членный гетероциклоалкил и 4-10-членный гетероциклоалкиламино необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 R;
каждый R независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, C1-3-алкила, C1-3-алкокси, C1-3-алкиламино, C3-5-циклоалкила, -C(=O)-C1-3-алкила, -C(=O)O-C1-6-алкила, -S(=O)2-C1-3-алкила, и ;
каждый из 5-6-членного гетероарила, 4-7-членного гетероциклоалкила, 4-10-членного гетероциклоалкила, 4-10-членного гетероциклоалкиламино, 4-7-членного гетероциклоалкенила и 4-10-членного гетероциклоалкила, замещенного одним карбонилом, содержит 1, 2, 3 или 4 гетероатома или гетероатомных групп, независимо выбранных из группы, состоящей из -NH-, -O-, -S- и N.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предусмотрено соединение, представленное формулой (I), его изомер или его фармацевтически приемлемая соль,
,
где
n выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2 и 3;
каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, C1-6-алкила, C1-6-алкокси и -C(=O)NH2, где C1-6-алкил, C1-6-алкокси и -C(=O)NH2 необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 Ra;
кольцо A выбрано из группы, состоящей из 5-6-членного гетероарила, фенила, C4-6-циклоалкила и 4-7-членного гетероциклоалкила;
кольцо B выбрано из группы, состоящей из 5-6-членного гетероарила и фенила;
каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, C1-3-алкила, C1-3-алкокси и C1-5-алкиламино, где C1-3-алкил, C1-3-алкокси и C1-5-алкиламино необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 R;
каждый R независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, C1-3-алкила, C1-3-алкокси, C1-3-алкиламино и C3-5-циклоалкила;
каждый из 5-6-членного гетероарила и 4-7-членного гетероциклоалкила содержит 1, 2, 3 или 4 гетероатома или гетероатомных группы, независимо выбранных из группы, состоящей из -NH-, -O-, -S- и N.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предусмотрено соединение, представленное формулой (I), его изомер или его фармацевтически приемлемая соль,
,
где
n выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2 и 3;
каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, OH, NH2 и C1-6-алкила, где C1-6-алкил необязательно замещен посредством 1, 2 или 3 Ra;
кольцо A выбрано из группы, состоящей из 5-6-членного гетероарила, фенила, C4-6-циклоалкила и 4-7-членного гетероциклоалкила;
кольцо B выбрано из фенила;
каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH и NH2;
каждый из 5-6-членного гетероарила и 4-7-членного гетероциклоалкила содержит 1, 2, 3 или 4 гетероатома или гетероатомных группы, независимо выбранных из группы, состоящей из -NH-, -O-, -S- и N.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, C1-10-алкила, C1-10-алкокси, C1-10-алкиламино, -C(=O)NH-C1-10-алкила, -NHC(=O)-C1-10-алкила, C3-10-циклоалкила, C3-10-циклоалкиламино, 4-10-членного гетероциклоалкила, 4-10-членного гетероциклоалкиламино и 4-10-членного гетероциклоалкила, замещенного одним карбонилом, где C1-10-алкил, C1-10-алкокси, C1-10-алкиламино, -C(=O)NH-C1-10-алкил, -NHC(=O)-C1-10-алкил, -COOC1-10-алкил, C3-10-циклоалкил, C3-10-циклоалкиламино, 4-10-членный гетероциклоалкил и 4-10-членный гетероциклоалкиламино необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 R.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, C1-6-алкила, C1-6-алкокси, C1-6-алкиламино, -C(=O)NH-C1-6-алкила, -NHC(=O)-C1-6-алкила, C3-8-циклоалкила, C3-8-циклоалкиламино, 4-6-членного гетероциклоалкила, 4-6-членного гетероциклоалкиламино и 4-10-членного гетероциклоалкила, замещенного одним карбонилом, где C1-6-алкил, C1-6-алкокси, C1-6-алкиламино, -C(=O)NH-C1-6-алкил, -NHC(=O)-C1-6-алкил, -COOC1-6-алкил, C3-8-циклоалкил, C3-8-циклоалкиламино, 4-6-членный гетероциклоалкил и 4-6-членный гетероциклоалкиламино необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 R, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, C1-3-алкила, C1-3-алкокси, C1-3-алкиламино, -C(=O)NH-C1-3-алкила, -NHC(=O)-C1-3-алкила, C3-6-циклоалкила, циклогексиламино, азетидинила, пирролидин-2-она, тетрагидропирролила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, тетрагидропиранила, 3-азабицикло[3,1,0]гексила, азетидиниламино, тетрагидропирролиламино, тетрагидропирролила, пиперидиниламино, пиперазиниламино, морфолиниламино, тетрагидропираниламино и 3-азабицикло[3,1,0]гексиламино, где C1-3-алкил, C1-3-алкокси, C1-3-алкиламино, -C(=O)NH-C1-3-алкил, -NHC(=O)-C1-3-алкил, -COOC1-4-алкил, C3-6-циклоалкил, циклогексиламино, азетидинил, тетрагидропирролил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тетрагидропиранил, 3-азабицикло[3,1,0]гексил, азетидиниламино, тетрагидропирролиламино, пиперидиниламино, пиперазиниламино, морфолиниламино, тетрагидропираниламино и 3-азабицикло[3,1,0]гексиламино необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 R, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, C1-3-алкила, C1-3-алкокси, C1-3-алкиламино, -C(=O)NH-C1-3-алкила, -NHC(=O)-C1-3-алкила, C3-6-циклоалкила, циклогексиламино, азетидинила, пирролидин-2-она, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 3-азабицикло[3,1,0]гексила, тетрагидропирролила, пиперидиниламино и тетрагидропираниламино, где C1-3-алкил, C1-3-алкокси, C1-3-алкиламино, -C(=O)NH-C1-3-алкил, -NHC(=O)-C1-3-алкил, C3-6-циклоалкил, циклогексиламино, азетидинил, пирролидин-2-он, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, 3-азабицикло[3,1,0]гексил, тетрагидропирролил, пиперидиниламино и тетрагидропираниламино необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 R, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, -CH3, -CH2CH3, , , , , -C(=O)NHCH3, -NHC(=O)CH3, , , , , , , , , , и , где CH3, -CH2CH3, , , , -C(=O)NHCH3, -NHC(=O)CH3, -COOt-Bu, , , , , , , , , , и необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 R, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, -CH3, -CH2CH3, , , , -C(=O)NHCH3, -NHC(=O)CH3, , , , , , , , , , и , где -CH3, -CH2CH3, , , , , и необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 R, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый Ra выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, -CH2-, -CH2CH2-, , и , где -CH2-, -CH2CH2-, , и необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 R, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, Me, OH, NH2, , , , , , , -C(=O)NHCH3, -NHC(=O)CH3, -CH2COOt-Bu, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , и , тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R независимо выбран из группы, состоящей из C1-3-алкила, C1-3-алкокси, -C(=O)-C1-3-алкила, C3-5-циклоалкила, -C (=O)O-C1-4-алкила, -S(=O)2-C1-3-алкила, и .
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R независимо выбран из группы, состоящей из -CH3, , , , , , и , тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2, -CH2-, -CH2CH2-, и , тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения n выбран из группы, состоящей из 0, 1 и 2.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения n выбран из группы, состоящей из 0 и 1.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, C1-6-алкила, C3-10-циклоалкила, C1-6-алкокси, C1-6-алкиламино, C2-6-алкенила, , -S(=O)2NH2, -NHS(=O)2-C1-6-алкила, -N[S(=O)2-C1-6-алкила]2, -N[C(=O)-C1-6-алкила]2, -NHC(=O)-C1-6-алкила и -C(=O)NH2, где C1-6-алкил, C3-10-циклоалкил, C1-6-алкокси, C1-6-алкиламино, C2-6-алкенил, , -S(=O)2NH2, -NHS(=O)2-C1-6-алкил, -N[S(=O)2-C1-6-алкил]2, -N[C(=O)-C1-6-алкил]2, -NHC(=O)-C1-6-алкил и -C(=O)NH2 необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 Ra.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, C1-3-алкила, C3-5-циклоалкила, C1-3-алкокси, C1-3-алкиламино, C2-4-алкенила, , -S(=O)2NH2, -S(=O)2NH-C1-3-алкила, -NHS(=O)2-C1-3-алкила, -N[S(=O)2-C1-3-алкила]2, -N[C(=O)-C1-3-алкила]2, -NHC(=O)-C1-3-алкила, -C(=O)NH2 и -C(=O)NH-C1-3-алкила, где C1-3-алкил, C3-5-циклоалкил, C1-3-алкокси, C1-3-алкиламино, C2-4-алкенил, , -S(=O)2NH2, -S(=O)2NH-C1-3-алкил, -NHS(=O)2-C1-3-алкил, -N[S(=O)2-C1-3-алкил]2, -N[C(=O)-C1-3-алкил]2, -NHC(=O)-C1-3-алкил, -C(=O)NH2 и -C(=O)NH-C1-3-алкил необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 Ra, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, C1-3-алкила, C1-3-алкокси и -C(=O)NH2, где C1-3-алкил, C1-3-алкокси и -C(=O)NH2 необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 Ra, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, Me, , , , , , , -S(=O)2NH2, , , -NHCH3 и -C(=O)NH2, где Me, , , , , , , -S(=O)2NH2, , , -NHCH3 и -C(=O)NH2 необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 Ra, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, Me, , , , , , , -S(=O)2NH2, , , -NHCH3 и -C(=O)NH2, где Me, , , , -S(=O)2NH2, -NHCH3 и -C(=O)NH2 необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 Ra, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, Me, ,
где Me, необязательно замещены посредством 1, 2 или 3 Ra, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из H, Me, OH,
тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2 и C1-3-алкила, где C1-3-алкил необязательно замещен посредством 1, 2 или 3 Ra, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, OH, NH2 и Me, где Me необязательно замещен посредством 1, 2 или 3 Ra, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из H, F, Cl, Br, I, Me, OH, NH2,
тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения каждый R1 независимо выбран из Me, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения кольцо A выбрано из группы, состоящей из 5-6-членного гетероарила, фенила, 4-7-членного гетероциклоалкила и 4-7-членного гетероциклоалкенила.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения кольцо A выбрано из группы, состоящей из 5-6-членного гетероарила, фенила и 4-7-членного гетероциклоалкенила.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, 1,3-циклогексадиенила, 1,3-диоксоланила, 1,3-диоксолила, морфолинила, оксазолила, циклобутила, оксапанила, тиазолила, тетрагидротиазолила, фуранила, 2,3-дигидрофуранила, 1,4-оксазепанила, пиридинила, 2,3-дигидропиридинила, пиразолила, 4,5-дигидро-1H-пиразолила, оксазолила, 4,5-дигидрооксазолила, пирролила и 2,3-дигидро-1H-пирролила, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, 1,3-циклогексадиенила, 1,3-диоксоланила, 1,3-диоксолила, фуранила, 2,3-дигидрофуранила, пиридинила, 2,3-дигидропиридинила, пиразолила, 4,5-дигидро-1H-пиразолила, оксазолила, 4,5-дигидрооксазолила, пирролила и 2,3-дигидро-1H-пирролила, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, 1,3-диоксоланила, морфолинила, оксазолила, циклобутила, оксапанила, тиазолила, тетрагидротиазолила, фуранила, 1,4-оксазепанила, пиридинила и пирролила, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, 1,3-диоксоланила, фуранила, пиридинила и пирролила, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, 1,3-диоксоланила, морфолинила, оксазолила, циклобутила, оксапанила, тиазолила, тетрагидротиазолила, фуранила, тетрагидрофуранила и 1,4-оксазепанила, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, 1,3-диоксоланила и фуранила, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, 1,3-диоксоланила, морфолинила, оксазолила, циклобутила, оксапанила и 1,4-оксазепанила, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, 1,3-диоксоланила, 1,3-диоксолила, пиридинила, фуранила, пирролила, оксазолила и пиразолила, тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения структурная единица выбрана из группы, состоящей из , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , и , тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения структурная единица выбрана из группы, состоящей из , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , и , тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения кольцо B выбрано из фенила.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения структурная единица выбрана из группы, состоящей из и , тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения структурная единица выбрана из группы, состоящей из , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,
тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения структурная единица выбрана из группы, состоящей из ,
тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения структурная единица выбрана из группы, состоящей из , тогда как остальные переменные имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предложено соединение, его изомер или его фармацевтически приемлемая соль, выбранные из группы, состоящей из:
и ,
где n, кольцо A, кольцо B, R1, структурная единица и структурная единица имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предложено соединение, его изомер или его фармацевтически приемлемая соль, выбранные из группы, состоящей из:
где n, кольцо A и R1 имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предложено соединение, его изомер или его фармацевтически приемлемая соль, выбранные из группы, состоящей из:
, ,
и ,
где n, R1, кольцо A имеют определение, соответствующее приведенному в настоящем документе.
При этом все остальные варианты осуществления настоящего изобретения получают в результате любого сочетания описанных выше переменных.
Настоящим изобретением также предусмотрено соединение с представленной ниже формулой и его фармацевтически приемлемая соль, определение которой соответствует приведенному в настоящем документе, выбранное из группы, состоящей из:
.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предложено соединение, его изомер или его фармацевтически приемлемая соль, выбранные из группы, состоящей из:
Настоящим изобретением также предусмотрена фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество данного соединения или его фармацевтически приемлемой соли в качестве действующего ингредиента и фармацевтически приемлемый носитель.
Настоящим изобретением также предусмотрено применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтической композиции при получении лекарственного препарата для лечения заболевания, связанного с белком CRBN.
Настоящим изобретением также предусмотрено применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтической композиции при лечении заболевания, связанного с белком CRBN.
Настоящим изобретением также предусмотрен способ лечения заболевания, связанного с белком CRBN, предусматривающий введение терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтической композиции.
Настоящим изобретением также предусмотрено соединение или его фармацевтически приемлемая соль и фармацевтическая композиция для лечения заболевания, связанного с белком CRBN.
Описываемое в настоящем документе заболевание, связанное с белком CRBN, представляет собой множественную миелому.
Определения и описание
Если не указано иное, приведенные далее термины и фразы, применяемые в настоящем документе, имеют приведенные далее значения. Конкретный термин или конкретную фразу, если явно не определено иное, не следует истолковывать как неопределенные или неясные, а следует толковать в соответствии с их общим значением. При упоминания торгового наименования подразумевают отсылку к соответствующему коммерческому продукту или его действующему ингредиенту.
В контексте настоящего документа термин «фармацевтически приемлемый» применяют в отношении тех соединений, материалов, композиций и/или лекарственных форм, которые, с медицинской точки зрения, подходят для применения в контакте с тканями людей и животных, не вызывают чрезмерную токсичность, раздражение, аллергический ответ или другие проблемы или осложнения и соответствуют разумному соотношению польза/риск.
Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к соли раскрываемого в настоящем документе соединения, которая получена из соединения, содержащего определенные заместители, раскрываемые в настоящем документе, и относительно нетоксичной кислоты или относительно нетоксичного основания. Если соединение по настоящему изобретению содержит относительно кислую функциональную группу, то соль присоединения основания можно получить путем приведения нейтральной формы такого соединения в контакт с достаточным количеством основания в чистом растворе или подходящем инертном растворителе. К фармацевтически приемлемым солям присоединения оснований относятся соли натрия, калия, кальция, аммония, органического амина или магния или аналогичные соли. Если соединение по настоящему изобретению содержит относительно основную функциональную группу, то соль присоединения кислоты можно получить путем приведения нейтральной формы такого соединения в контакт с достаточным количеством кислоты в чистом растворе или подходящем инертном растворителе.
Фармацевтически приемлемые соли по настоящему изобретению можно синтезировать из исходного соединения, имеющего кислотную или основную группу, с помощью традиционных химических способов. Как правило, такие соли получают следующим способом: проводят реакцию свободной кислотной или основной формы соединения со стехиометрическим количеством соответствующего основания или кислоты в воде, или органическом растворителе, или их смеси.
Соединение по настоящему изобретению может иметь форму геометрического изомера или стереоизомера. В настоящем документе предусмотрены все такие соединения, включая цис- и транс-изомеры, (-)- и (+)- энантиомеры, (R)- и (S)- энантиомеры, диастереоизомеры, (D)-изомеры, (L)-изомеры и рацемические смеси и другие их смеси, такие как обогащенная энантиомерами или диастереоизомерами смесь, все из которых входят в объем настоящего изобретения. Такие заместители, как алкил, могут иметь дополнительный асимметричный атом углерода. Все такие изомеры и их смеси входят в объем настоящего изобретения.
Если не указано иное, термин «энантиомер» или «оптический изомер» относится к стереоизомерам, которые являются зеркальными отображениями друг друга.
Если не указанно иное, термин «диастереоизомер» относится к стереоизомерам, каждая молекула которых имеет два или более хиральных центров, и которые не являются зеркальным отображением друг друга.
Если не указанно иное, «(+)» обозначает правостороннее вращение, «(-)» обозначает левостороннее вращение, а «(±)» обозначает рацемизацию.
Если не указанно иное, абсолютная конфигурация стереогенного центра представлена клиновидной сплошной связью () и клиновидной пунктирной связью (), а относительная конфигурация стереогенного центра представлена прямой сплошной связью () и прямой пунктирной связью (). Волнистая линия () обозначает клиновидную сплошную связь () или клиновидную пунктирную связь (), или волнистая линия () обозначает прямую сплошную связь () и прямую пунктирную связь ().
Соединение по настоящему изобретению может присутствовать в конкретной форме. Если не указано иное, термин «таутомер» или «таутомерная форма» означает, что различные функциональные изомеры находятся в динамическом равновесии при комнатной температуре и могут легко превращаться друг в друга. Если возможны таутомеры (например, в растворе), то может быть достигнуто химическое равновесие таутомеров. Например, протонный таутомер, также известный как прототропный таутомер, включает взаимное превращение за счет переноса протона, такое как кето-енольная изомеризация и имин-енаминовая изомеризация. Валентный изомер включает взаимное превращение путем перегруппировки некоторых участвующих в формировании связи электронов. Конкретным примером кето-енольной таутомерии является взаимопревращение между двумя таутомерами: пентан-2,4-дионом и 4-гидроксипент-3-ен-2-оном.
Если не указано иное, термин «быть обогащенным по одному изомеру», «обогащенный по изомеру», «быть обогащенным по одному энантиомеру» или «обогащенный по энантиомеру» означает, что содержание одного из изомеров или энантиомеров составляет менее 100% и более или равно 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99,5%, 99,6%, 99,7%, 99,8% или 99,9%.
Если не указанно иное, термин «изомерный избыток» или «энантиомерный избыток» относится к разнице между относительным процентным содержанием двух изомеров или энантиомеров. Например, если содержание одного изомера или энантиомера составляет 90%, а содержание другого изомера или энантиомера составляет 10%, изомерный или энантиомерный избыток («ee») составляет 80%.
Оптически активные (R)- и (S)-изомеры и D- и L-изомеры можно получить с помощью хирального синтеза или хиральных реагентов либо другими общепринятыми методиками. Энантиомер определенного соединения по настоящему изобретению можно получить с помощью асимметричного синтеза или дериватизации с применением хирального вспомогательного вещества, при этом разделяют полученную смесь диастереоизомеров и отщепляют вспомогательную группу с получением требуемого чистого энантиомера. Альтернативно, если молекула содержит основную функциональную группу (такую как аминогруппа) или кислотную функциональную группу (такую как карбоксильная группа), соединение вступает в реакцию с соответствующей оптически активной кислотой или соответствующим оптически активным основанием с образованием соли диастереоизомера, которую затем подвергают диастереоизомерному разделению посредством традиционных в настоящей области техники способов с получением чистого энантиомера. При этом, как правило, энантиомер и диастереоизомер выделяют с помощью хроматографии с использованием хиральной неподвижной фазы, необязательно в сочетании с химической дериватизацией (например, образованием карбамата из аминов).
Если не указано иное, когда группа имеет один или несколько соединяемых участков, любой один или несколько участков такой группы можно соединить с другими группами при помощи химических связей. Если нет обозначенного способа соединения для химической связи, а атомы H присутствуют в соединяемом участке, то количество атомов H на соединяемом участке соответственно уменьшается в зависимости от количества присоединенных химических связей, и таким образом образуется группа с соответствующей валентностью. Химическая связь, которая соединяет участок с другой группой, может быть представлена связью в виде прямой сплошной линии (), связью в виде прямой пунктирной линии () или в виде волнистой линии (). Например, связь в виде прямой сплошной линии в группе -OCH 3 означает, что группа присоединена к другой группе через атом кислорода в группе; связь в виде прямой пунктирной линии в группе обозначает, что группа присоединена к другой группе через два конца атома азота в группе; волнистая линия в обозначает, что группа присоединена к другой группе через атомы углерода в положениях 1 и 2 фенильной группы; означает, что любой связываемый участок на пиперидиниле может быть связан с другой группой через 1 связь и возможны по меньшей мере 4 варианта соединения: , , и ; даже если -N- соединен с атомом H, включает вариант соединения , за исключением того, что если с участком соединена 1 связь, то количество H в этом участке соответственно уменьшается на 1, и таким образом образуется одновалентный пиперидинил.
Соединение по настоящему изобретению может содержать неестественную долю атомного изотопа по одному или нескольким атомам, входящим в состав соединения. Например, соединение можно пометить радиоизотопом, таким как тритий (3H), йод-125 (125I) или C-14 (14C). В другом примере водород можно заместить дейтерием с образованием дейтерированного лекарственного средства, и связь, образованная дейтерием и углеродом, будет более прочной, чем связь, образованная обычным водородом и углеродом. По сравнению с недейтерированным лекарственным средством дейтерированное лекарственное средство обладает рядом преимуществ, которые заключаются в снижении побочного токсического действия, повышении стабильности, повышении эффективности, увеличении биологического периода полувыведения и др. Объемом настоящего изобретения охватываются все изотопные варианты соединения по настоящему изобретению, независимо от того, радиоактивны они или нет.«Необязательный» или «необязательно» означает, что описанное далее событие или обстоятельство может иметь место быть, но не обязательно, и описание включает случаи, когда такое событие или обстоятельство имеет место быть, и случаи, когда не имеет место быть.
Термин «замещенный» означает, что один или несколько атомов водорода на конкретном атоме замещены заместителями, куда можно отнести варианты с дейтерием и водородом, при условии, что валентность конкретного атома является нормальной, а соединение после замещения является стабильным. Если заместителем является кислород (т.е.=O), это означает, что замещены два атома водорода. В ароматических группах замещение кислородом не происходит.Термин «необязательно замещенный» означает, что атом может быть или может не быть замещен заместителем. Если не указано иное, тип и количество заместителя могут быть произвольными, если это химически достижимо.
При появлении в составе или структуре соединения любой переменной (например, R) более одного раза, определение такой переменной в каждом случае является независимым. Таким образом, например, если группа имеет 0-2 заместителя R, группа может быть необязательно замещена максимум двумя R, а определение R в каждом случае является независимым. Кроме того, сочетание заместителя и/или его варианта допустимо лишь в том случае, если такое сочетание может привести к получению стабильного соединения.
Если количество соединяющих групп равно 0, например -(CRR)0-, это означает, что соединяющая группа представляет собой одинарную связь.
Если заместитель отсутствует, это означает, что заместителя не существует.Например, если в A-X отсутствует X, структура A-X фактически имеет форму A. Если не указано, каким именно атомом перечисленный заместитель связан с подлежащей замещению группой, заместитель может быть связан через любой атом данной группы. Например, пиридинил в качестве заместителя может быть связан с подлежащей замещению группой через любой атом углерода в пиридиновом кольце.
Если не указано иное, термин «C1-10-алкил» относится к линейной или разветвленной насыщенной углеводородной группе, состоящей из 1-10 атомов углерода. К C1-10-алкилу относится C1-10-, C1-9-, C1-8-, C1-6-, C1-5-, C1-4-, C1-3-, C1-2-, C2-6-, C2-4-, C10-, C8-, C7-, C6- и C5-алкил и тому подобное, и он может быть одновалентным (например, метилом), двухвалентным (например, метиленом) или поливалентным (например, метенилом). Примеры C1-12-алкила включают без ограничения метил (Me), этил (Et), пропил (в том числе н-пропил и изопропил), бутил (в том числе н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил), пентил (в том числе н-пентил, изопентил и неопентил), гексил, гептил, октил и тому подобное. Примеры C1-6-алкила включают без ограничения метил (Me), этил (Et), пропил (в том числе н-пропил и изопропил), бутил (в том числе н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил), пентил (в том числе н-пентил, изопентил и неопентил), гексил и тому подобное. Примеры C1-3-алкила включают без ограничения метил (Me), этил (Et), пропил (в том числе н-пропил и изопропил) и тому подобное.
Если не указано иное, термин «C2-6-алкенил» используют для обозначения линейной или разветвленной углеводородной группы, состоящей из 2-6 атомов углерода и содержащей по меньшей мере одну двойную межуглеродную связь, которая может быть расположена в любом месте группы. К C2-6-алкенилу относится C2-4-, C2-3-, C4-, C3- и C2-алкенил и тому подобное, он может быть одновалентным, двухвалентным или поливалентным. Примеры C2-6-алкенила включают без ограничения этенил, пропенил, бутенил, пентенил, гексенил, бутадиенил, 1,3-пентадиенил, 1,3-гексадиенил и тому подобное. Примеры C2-4-алкенила включают без ограничения этенил, пропенил, бутенил, бутадиенил и тому подобное. Примеры C2-3-алкенила включают без ограничения этенил, пропенил и тому подобное.
Если не указано иное, термин «C1-10-алкокси» обозначает такие алкильные группы, каждая из которых содержит 1-6 атомов углерода и соединена с остальной частью молекулы через атом кислорода. К C1-10-алкокси относится C1-10-, C1-9-, C1-8-, C1-6-, C1-5-, C1-4-, C1-3-, C1-2-, C2-6-, C2-4-, C10-, C8-, C7-, C6- и C5-алкокси и тому подобное. Примеры С1-10-алкокси включают без ограничения метокси, этокси, пропокси (в том числе н-пропокси и изопропокси), бутокси (в том числе н-бутокси, изобутокси, втор-бутокси и трет-бутокси), пентилокси (в том числе н-пентилокси, изопентилокси и неопентилокси), гексилокси и тому подобное. Примеры С1-6-алкокси включают без ограничения метокси, этокси, пропокси (в том числе н-пропокси и изопропокси), бутокси (в том числе н-бутокси, изобутокси, втор-бутокси и трет-бутокси), пентилокси (в том числе н-пентилокси, изопентилокси и неопентилокси), гексилокси и тому подобное. Примеры C1-3-алкокси включают без ограничения метокси, этокси, пропокси (в том числе н-пропокси и изопропокси) и тому подобное.
Если не указано иное, термин «C1-10-алкиламино» обозначает такие алкильные группы, каждая из которых содержит 1-10 атомов углерода и соединена с остальной частью молекулы через аминогруппу. К C1-10-алкиламино относится C1-10-, C1-9-, C1-8-, C1-6-, C1-5-, C1-4-, C1-3-, C1-2-, C2-6-, C2-4-, C10-, C8-, C7-, C6- и C5-алкиламино и тому подобное. Примеры C1-10-алкиламино включают без ограничения -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CH3, -N(CH3)CH2CH3, -N(CH2CH3)(CH2CH3), -NHCH2CH2CH3, -NHCH2(CH3)2, -NHCH2CH2CH2CH3 и тому подобное. Примеры C1-6-алкиламино включают без ограничения -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CH3, -N(CH3)CH2CH3, -N(CH2CH3)(CH2CH3), -NHCH2CH2CH3, -NHCH2(CH3)2, -NHCH2CH2CH2CH3 и тому подобное. Примеры C1-5-алкиламино включают без ограничения -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CH3, -N(CH3)CH2CH3, -N(CH2CH3)(CH2CH3), -NHCH2CH2CH3, -NHCH2(CH3)2, -NHCH2CH2CH2CH3 и тому подобное. Примеры C1-3-алкиламино включают без ограничения -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CH3, -N(CH3)CH2CH3, -NHCH2CH2CH3, -NHCH2(CH3)2 и тому подобное.
Если не указано иное, «C3-10-циклоалкил» относится к насыщенной циклической углеводородной группе, состоящей из 3-10 атомов углерода, и она может быть моноциклической, бициклической или трициклической системой, причем бициклическая и трициклическая системы включают спироциклические, конденсированные кольца и кольца с внутренним мостиком. К C3-10-циклоалкилу относится C3-8-, C3-6-, C3-5-, C4-10-, C4-8-, C4-6-, C4-5-, C5-8- и C5-6-циклоалкил и тому подобное, и он может быть одновалентным, двухвалентным или поливалентным. Примеры C3-10-циклоалкила включают без ограничения циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, норборнил, [2.2.2]бициклооктан, [4.4.0]бициклодекан и тому подобное. Примеры C3-8-циклоалкила включают без ограничения циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, норборнил, [2.2.2]бициклооктан и тому подобное. Примеры C3-5-циклоалкила включают без ограничения циклопропил, циклобутил, циклопентил и тому подобное. Примеры C3-6-циклоалкила включают без ограничения циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и тому подобное.
Если не указано иное, термин «4-10-членный гетероциклоалкил», сам себе или в комбинации с другими терминами, относится к насыщенной циклической группе, состоящей из 4-10 кольцевых атомов, из которых 1, 2, 3 или 4 кольцевых атома представляют собой гетероатомы, независимо выбранные из группы, состоящей из O, S и N, при этом остальные являются атомами углерода. Атом азота необязательно кватернизован, гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окислены (т.е. NO и S(O)p, где p равно 1 или 2). Сюда входят моноциклические, бициклические и трициклические системы, причем бициклические и трициклические системы включают спироциклические, конденсированные кольца и кольца с внутренним мостиком. Более того, что касается «4-10-членного гетероциклоалкила», гетероатом может занимать такое положение, где гетероциклоалкил присоединяется к остальной части молекулы. К 4-10-членному гетероциклоалкилу относится 4-8-членный, 4-6-членный, 4-5-членный, 5-6-членный, 4-членный, 5-членный и 6-членный гетероциклоалкил и тому подобное. Примеры 4-10-членного гетероциклоалкила включают без ограничения азетидинил, оксетанил, тиетанил, пирролидинил, пиразолидинил, имидазолидинил, тетрагидротиенил (в том числе тетрагидротиен-2-ил, тетрагидротиен-3-ил и т.д.), тетрагидрофуранил (в том числе тетрагидрофуран-2-ил и т.д.), тетрагидропиранил, пиперидинил (в том числе 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил и т.д.), пиперазинил (в том числе 1-пиперазинил, 2-пиперазинил и т.д.), морфолинил (в том числе 3-морфолинил, 4-морфолинил и т.д.), диоксанил, дитианил, изоксазолидинил, изотиазолидинил, 1,2-оксазинил, 1,2-тиазинил, гексагидропиридазинил, гомопиперазинил, гомопиперидинил, диоксепанил или тому подобное.
Если не указано иное, термин «4-7-членный гетероциклоалкил», сам себе или в комбинации с другими терминами, относится к насыщенной циклической группе, состоящей из 4-7 кольцевых атомов, из которых 1, 2, 3 или 4 кольцевых атома представляют собой гетероатомы, независимо выбранные из группы, состоящей из O, S и N, при этом остальные являются атомами углерода. Атом азота необязательно кватернизован, гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окислены (т.е. NO и S(O)p, где p равно 1 или 2). Сюда входят моноциклические и бициклические системы, причем бициклическая система включает спироциклические, конденсированные кольца и кольца с внутренним мостиком. Более того, что касается «4-7-членного гетероциклоалкила», гетероатом может занимать такое положение, где гетероциклоалкил присоединяется к остальной части молекулы. К 4-7-членному гетероциклоалкилу относится 4-6-членный, 4-5-членный, 4-7-членный, 5-6-членный, 4-членный, 5-членный и 6-членный гетероциклоалкил и тому подобное. Примеры 4-7-членного гетероциклоалкила включают без ограничения азетидинил, оксетанил, тиетанил, пирролидинил, пиразолидинил, имидазолидинил, тетрагидротиенил (в том числе тетрагидротиен-2-ил, тетрагидротиен-3-ил и т.д.), тетрагидрофуранил (в том числе тетрагидрофуран-2-ил и т.д.), тетрагидропиранил, пиперидинил (в том числе 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил и т.д.), пиперазинил (в том числе 1-пиперазинил, 2-пиперазинил и т.д.), морфолинил (в том числе 3-морфолинил, 4-морфолинил и т.д.), диоксанил, дитианил, изоксазолидинил, изотиазолидинил, 1,2-оксазинил, 1,2-тиазинил, гексагидропиридазинил, гомопиперазинил, гомопиперидинил, диоксепанил или тому подобное.
Если не указано иное, термины «5-6 членное гетероароматическое кольцо» и «5-6 членный гетероарил» в настоящем документе можно применять взаимозаменяемо. Термин «5-6-членный гетероарил» относится к моноциклической группе, которая состоит из 5-6 кольцевых атомов и имеет сопряженную по пи-электронам систему, из которых 1, 2, 3 или 4 кольцевых атома представляют собой гетероатомы, независимо выбранные из группы, состоящей из O, S и N, при этом остальные являются атомами углерода. Атом азота необязательно кватернизован, а гетероатомы азота и серы необязательно окислены (т.е. NO и S(O)p, где p равно 1 или 2). 5-6-членный гетероарил может быть соединен с остальной частью молекулы через гетероатом или атом углерода. К 5-6-членному гетероарилу относится 5-членный и 6-членный гетероарил. Примеры 5-6-членного гетероарила включают без ограничения пирролил (в том числе N-пирролил, 2-пирролил, 3-пирролил и т.д.), пиразолил (в том числе 2-пиразолил, 3-пиразолил и т.д.), имидазолил (в том числе N-имидазолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил, 5-имидазолил и т.д.), оксазолил (в том числе 2-оксазолил, 4-оксазолил, 5-оксазолил и т.д.), триазолил (в том числе 1H-1,2,3-триазолил, 2H-1,2,3-триазолил, 1H-1,2,4-триазолил, 4H-1,2,4-триазолил и т.д.), тетразолил, изоксазолил (3-изоксазолил, 4-изоксазолил, 5-изоксазолил и т.д.), тиазолил (в том числе 2-тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил и т.д.), фуранил (в том числе 2-фуранил, 3-фуранил и т.д.), тиенил (в том числе 2-тиенил, 3-тиенил и т.д.), пиридинил (в том числе 2-пиридинил, 3-пиридинил, 4-пиридинил и т.д.), пиразинил или пиримидинил (в том числе 2-пиримидинил, 4-пиримидинил и т.д.).
Если не указано иное, термин «4-7-членный гетероциклоалкенил», сам себе или в комбинации с другими терминами, относится к частично ненасыщенной циклической группе, содержащей по меньшей мере одну межуглеродную двойную связь и состоящей из 4-7 кольцевых атомов, из которых 1, 2, 3 или 4 кольцевых атома представляют собой гетероатомы, независимо выбранные из группы, состоящей из O, S и N, при этом остальные являются атомами углерода. Атом азота необязательно кватернизован, гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окислены (т.е. NO и S(O)p, где p равно 1 или 2). Сюда входят моноциклические, бициклические и трициклические системы, причем бициклические и трициклические системы включают спироциклические, конденсированные кольца и кольца с внутренним мостиком, и любое кольцо этих систем является неароматическим. Более того, что касается «4-7-членного гетероциклоалкенила», гетероатом может занимать такое положение, где гетероциклоалкенил соединяется с остальной частью молекулы. К 4-7-членному гетероциклоалкенилу относится 5-7-членный, 5-6-членный, 4-5-членный, 4-членный, 5-членный и 6-членный гетероциклоалкенил и тому подобное. Примеры 4-8-членного гетероциклоалкенила включают без ограничения , , , или .
Если не указано иное, к Cn-n+m или Cn-Cn+m относится любой из указанных случаев от n до n+m углеродов; например, к C1-12 относятся C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9, C10, C11 и C12; к Cn-n+m или Cn-Cn+m также относится любой диапазон в пределах от n до n+m; например, к C1-12 относятся C1-3, C1-6, C1-9, C3-6, C3-9, C3-12, C6-9, C6-12, C9-12 и т.д. Аналогично, n-n+m-членный обозначает, что количество атомов на кольце составляет от n до n+m; например, к 3-12-членному кольцу относятся 3-членное кольцо, 4-членное кольцо, 5-членное кольцо, 6-членное кольцо, 7-членное кольцо, 8-членное кольцо, 9-членное кольцо, 10-членное кольцо, 11-членное кольцо и 12-членное кольцо; n-n+m-членный также обозначает любой диапазон в пределах от n до n+m; например, к 3-12-членному кольцу относятся 3-6-членное кольцо, 3-9-членное кольцо, 5-6-членное кольцо, 5-7-членное кольцо, 6-7-членное кольцо, 6-8-членное кольцо, 6-10-членное кольцо и т.д.
Если не указано иное, термин «галогенид» или «галоген» сам по себе или как часть другого заместителя обозначает атом фтора, хлора, брома или йода.
Соединения по настоящему изобретению можно получить рядом способов синтеза, которые хорошо известны специалистам в настоящей области, включая конкретные варианты осуществления, перечисленные ниже, варианты осуществления, образованные их комбинациями с другими способами химического синтеза, и их эквиваленты, известные специалистам в настоящей области. Предпочтительные варианты осуществления включают без ограничения примеры, которые раскрыты в настоящем документе.
Растворитель, применяемый по настоящему изобретению, может быть коммерчески доступным. В настоящем изобретении применяют следующие сокращения: водн. для водного; HATU для гексафторфосфата O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония; EDC для гидрохлорида N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида; m-CPBA для 3-хлорпероксибензойной кислоты; экв. для эквивалента; CDI для карбонилдиимидазола; DCM для дихлорметана; PE для простого петролейного эфира; DIAD для диизопропилазодикарбоксилата; DMF для N,N-диметилформамида; DMSO для диметилсульфоксида; EtOAc для этилацетата; EtOH для этанола; MeOH для метанола; CBz для бензилоксикарбонила, защитной группы для аминогруппы; BOC для трет-бутоксикарбонила, защитной группы для аминогруппы; HOAc для уксусной кислоты; NaCNBH3 для цианоборгидрида натрия; к. т.для комнатной температуры; O/N для «в течение ночи»; THF для тетрагидрофурана; Boc2O для ди-трет-бутилдикарбоната; TFA для трифторуксусной кислоты; DIPEA для диизопропилэтиламина; SOCl2 для тионилхлорида; CS2 для сероуглерода; TsOH для п-толуолсульфоновой кислоты; NFSI для N-фтор-N-(фенилсульфонил)бензолсульфонамида; н-Bu4NF для тетрабутиламмония фторида; iPrOH для 2-пропанола; mp для температуры плавления; LDA для диизопропиламида лития; M для моль/л.
Соединения названы в соответствии с общепринятыми в настоящей области техники правилами номенклатуры или с использованием программного обеспечения ChemDraw®, а для коммерчески доступных соединений приведены названия из каталога поставщика.
Технические результаты
Соединения по настоящему изобретению проявляют очевидный даунрегулирующий эффект на уровень белка IKZF3 в клетках множественной миеломы MM.1S и превосходное ингибирование пролиферации клеток в линиях клеток множественной миеломы MM.1S и NCI-H929. В дополнение к этому, соединения по настоящему изобретению характеризуются низким плазменным клиренсом и высокой биодоступностью при пероральном приеме, что свидетельствует о превосходных фармакокинетических свойствах. Соединения по настоящему изобретению также проявляют очевидный противоопухолевый эффект на модели человеческой миеломы MM.1S.
Краткое описание чертежей
На фиг.1 показаны изменения внутриклеточных уровней белка IKZF3, проанализированные с помощью WB после обработки клеток множественной миеломы MM.1S соединениями WX001-WX019 по настоящему изобретению в концентрациях 50 нМ и 500 нМ.
На фиг.2 показаны изменения внутриклеточных уровней белка IKZF3, проанализированные с помощью WB после обработки клеток множественной миеломы MM.1S соединениями WX020-WX038, WX042-WX046, WX054, WX056-WX058, WX063, WX065, WX069 и WX071-WX073 по настоящему изобретению в концентрациях 50 нМ и 500 нМ.
На фиг.3 показаны изменения внутриклеточных уровней белка IKZF3, проанализированные с помощью WB после обработки клеток множественной миеломы MM.1S соединениями WX039-WX041, WX047-WX053, WX055, WX059-WX062, WX064, WX066-WX068, WX070 и WX074-WX079 по настоящему изобретению в концентрациях 50 нМ и 500 нМ.
Подробное описание
Настоящее изобретение ниже более подробно описано с помощью примеров. Тем не менее, это никоим образом не подразумевает приносящее ущерб ограничение объема настоящего изобретения. Несмотря на то, что в настоящем документе было подробно описано настоящее изобретение, а также были раскрыты конкретные примеры, специалистам в настоящей области техники будет очевидно, что в данные конкретные примеры можно внести различные изменения и модификации без отступления от сущности и объема настоящего изобретения.
Пример 1: WX001
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX001-2
WX001-1 (2,01 г, 14,55 ммоль) растворяли в ацетонитриле (20 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли N,N-диэтилхлорформамид (1,97 г, 14,55 ммоль, 1,84 мл) и карбонат калия (4,02 г, 29,11 ммоль). Реакционную смесь подогревали до 100°C и перемешивали в течение 14 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, реакцию гасили водой (30 мл) и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (60 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая целевое промежуточное соединение WX001-2. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 6,76 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,65 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6,55 (dd, J=2,0, 8,4 Гц, 1H), 5,97 (s, 2H), 3,42-3,37 (m, 4H), 1,28-1,17 (m, 6H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX001-3
Промежуточное соединение WX001-2 (2,43 г, 10,24 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (20 мл) в реакционной колбе 1 при -78°C, а затем по каплям медленно добавляли раствор трет-бутиллития в тетрагидрофуране (1,3 M, 9,45 мл). После перемешивания реакционной смеси при -78°C в течение 1 ч в указанную выше реакционную смесь по каплям добавляли раствор хлорида цинка (1,40 г, 10,24 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч. К тетрагидрофурану (20 мл) в реакционной колбе 2 при комнатной температуре добавляли ацетилхлорид (804,00 мг, 10,24 ммоль, 730,91 мкл) и дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II) (718,90 мг, 1,02 ммоль). После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли раствор хлорида диизобутилаллюминия в тетрагидрофуране (1 M, 10.24 мл), а затем полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Наконец, реакционную смесь из реакционной колбы 1 по каплям добавляли в реакционную колбу 2 при 0°C и реакционную смесь подогревали до комнатной температуры, а затем перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции добавляли насыщенный раствор хлорида аммония (50 мл), а затем добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (100 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=20/1-10/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX001-3. MS-ESI m/z: 280,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 6,85 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,57 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,07 (s, 2H), 3,48-3,40 (m, 2H), 3,38-3,32 (m, 2H), 2,55 (s, 3H), 1,27 (t, J=7,2 Гц, 3H), 1,19 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX001-4
Промежуточное соединение WX001-3 (996 мг, 3,52 ммоль, степень чистоты: 98,75%) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при комнатной температуре, а затем порциями добавляли гидрид натрия (352,13 мг, 8,80 ммоль, степень чистоты: 60%). Реакционную смесь подогревали до 100°C и перемешивали в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, реакцию гасили водой (30 мл) и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (60 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=5/1-3/1, объемное соотношение) с получением целевого промежуточного соединения WX001-4. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 11,54 (s, 1H), 6,95 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,43 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,01 (s, 2H), 4,06 (s, 2H), 3,43 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,30 (q, J=7,2 Гц, 2H), 1,24-1,21 (m, 3H), 1,19-1,16 (m, 3H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX001-5
Промежуточное соединение WX001-4 (762 мг, 2,73 ммоль) растворяли в толуоле (8 мл) при комнатной температуре, а затем к указанному выше раствору по каплям добавляли трифторуксусную кислоту (933,29 мг, 8,19 ммоль, 606,03 мкл). Реакционную смесь подогревали до 100°C и перемешивали в течение 16 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем фильтровали. Фильтрационный осадок собирали и сушили в условиях пониженного давления с получением промежуточного соединения WX001-5. MS-ESI m/z: 207,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 12,44 (s, 1H), 7,18 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,81 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 2H), 5,50 (s, 1H).
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX001-6
Промежуточное соединение WX001-5 (525 мг, 2,29 ммоль, степень чистоты: 90,10%) растворяли в этаноле (10,00 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли хлоргидрат гидроксиламина (478,35 мг, 6,88 ммоль) и уксуснокислый натрий (564,67 мг, 6,88 ммоль). Реакционную смесь подогревали до 80°C и перемешивали в течение 48 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления этанольного растворителя. К полученному в результате остатку добавляли воду (10 мл), а затем для доведения pH до 1-2 добавляли разбавленную соляную кислоту (4 M, 8 мл) и добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (50 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток суспендировали с простым петролейным эфиром/этилацетатом (10:1, 5 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч и фильтровали. После промывания с помощью простого петролейного эфира (2 мл) фильтрационный осадок собирали и сушили в условиях пониженного давления с получением промежуточного соединения WX001-6.MS-ESI m/z: 221,9 [M+H]+.
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX001-7
Промежуточное соединение WX001-6 (427 мг, 543,68 мкмоль, степень чистоты: 28,16%) растворяли в этаноле (10 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли концентрированную серную кислоту (920,00 мг, 9,19 ммоль, 0,5 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь подогревали до 75°C и перемешивали в течение 14 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления этанольного растворителя и остаток растворяли в дихлорметане (10 мл). Органическую фазу промывали водой (10 мл × 2), затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX001-7.MS-ESI m/z: 250,0 [M+H]+.
Стадия 7: синтез соединения WX001
Промежуточное соединение WX001-7 (103 мг, 282,28 мкмоль, степень чистоты: 68,30%) растворяли в N,N-диметилформамиде (5,00 мл) при 0°C в условиях атмосферы азота, а затем добавляли трет-бутоксид калия (31,67 мг, 282,28 мкмоль). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 0,5 ч добавляли акриламид (20,06 мг, 282,28 мкмоль) и реакционную смесь подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. После завершения реакции добавляли воду (50 мл), а затем добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (80 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl), а затем разделяли с помощью хроматографической пластинки (проявляющий растворитель: простой петролейный эфир/этилацетат=1/1, объемное соотношение) с получением соединения WX001. MS-ESI m/z: 275,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4) δ: 7,20 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,10 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,12 (dd, J=1,2, 14,8 Гц, 2H), 4,58 (s, 1H), 4,44 (dd, J=5,2, 12,4 Гц, 1H), 2,91-2,82 (m, 1H), 2,78-2,72 (m, 1H), 2,58-2,47 (m, 1H), 2,32-2,25 (m, 1H).
Пример 2: WX002
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX002-1
WX001-1 (6,05 г, 43,80 ммоль) и триэтиламин (6,65 г, 65,70 ммоль, 9,15 мл) растворяли в дихлорметане (80 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C добавляли ацетилхлорид (4,13 г, 52,56 ммоль, 3,75 мл). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь медленно выливали в ледяную воду (300 мл), а затем добавляли дихлорметан (200 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (200 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=50/1-20/1, объемное соотношение) с получением целевого промежуточного соединения WX002-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 6,79 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,62 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6,54 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,00 (s, 2H), 2,29 (s, 3H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX002-2
Промежуточное соединение WX002-1 (3,02 г, 16,76 ммоль) растворяли в смеси уксусной кислоты (5 мл) и диэтилэфирата трехфтористого бора (5 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем реакционную смесь нагревали до 100°C и перемешивали при 100°C в течение 0,5 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и pH доводили до 9-10 с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (80 мл), а затем добавляли этилацетат (60 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали водой (60 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=100/1-10/1, объемное соотношение) с получением целевого промежуточного соединения WX002-2. MS-ESI m/z: 181,0 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 12,96 (s, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,38 (s, 1H), 5,92 (s, 2H), 2,45 (s, 3H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX002-3
Промежуточное соединение WX002-2 (0,808 г, 3,91 ммоль, степень чистоты: 87,23%) растворяли в диэтилкарбонате (15 мл) при 0°C в условиях атмосферы азота, а затем добавляли гидрид натрия (625,96 мг, 15,65 ммоль, степень чистоты: 60%). Реакционную смесь нагревали до 130°C и перемешивали при 130°C в течение 5 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду (50 мл) и добавляли простой метил-трет-бутиловый эфир (20 мл × 3) для экстракции. Органическую фазу отбрасывали, а pH водной фазы доводили до 3-4 с помощью 2 M водного раствора разбавленной соляной кислоты (5 мл). Реакционную смесь фильтровали, фильтрат отбрасывали, а фильтрационный осадок концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток суспендировали с простым петролейным эфиром/этилацетатом (10:1, 11 мл, объемное соотношение), фильтровали и промывали с помощью простого петролейного эфира (20 мл) с получением промежуточного соединения WX002-3. MS-ESI m/z: 206,9 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 12,38 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,06 (s, 1H), 6,16 (s, 2H), 5,47 (s, 1H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX002-4
Промежуточное соединение WX002-3 (1,17 г, 5,38 ммоль), хлоргидрат гидроксиламина (727,42 мг, 10,47 ммоль) и уксуснокислый натрий (858,67 мг, 10,47 ммоль) растворяли в этаноле (20,00 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали при 80°C в течение 24 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления этанола. К полученному в результате остатку для растворения добавляли воду (50 мл), а затем добавляли 2 M водный раствор разбавленной соляной кислоты для доведения рН до 1-2 и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, а полученный в результате остаток суспендировали с простым петролейным эфиром/этилацетатом (10:1, 50 мл, объемное соотношение) и промывали с помощью простого петролейного эфира (20 мл) с получением промежуточного соединения WX002-4. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 12,79 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 6,18 (s, 2H), 3,97 (s, 2H).
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX002-5
Промежуточное соединение WX002-4 (1,21 г, 3,64 ммоль, степень чистоты: 66,6%) растворяли в этаноле (20 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли концентрированную серную кислоту (364,67 мг, 3,64 ммоль, 198,19 мкл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали при 80°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли ледяную воду (50 мл) и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (20 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=10/1-5/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX002-5. MS-ESI m/z: 250,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 7,36 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 6,18 (s, 2H), 4,14 (q, J=7,0 Гц, 2H), 4,08 (s, 2H), 1,20 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX002
Промежуточное соединение WX002-5 (0,485 г, 1,92 ммоль, степень чистоты: 98,71%) растворяли в N,N-диметилформамиде (10 мл) при 0°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли трет-бутоксид калия (215,55 мг, 1,92 ммоль) и акриламид (273,08 мг, 3,84 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. После завершения реакции для разведения добавляли воду (50 мл), а затем добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением соединения WX002. MS-ESI m/z: 275,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,05 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 6,18 (s, 2H), 4,47 (dd, J=5,0, 11,8 Гц, 1H), 2,81-2,69 (m, 1H), 2,63-2,53 (m, 1H), 2,49-2,40 (m, 1H), 2,22-2,10 (m, 1H).
Пример 3: WX003
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX003-2
WX003-1 (50 г, 346,81 ммоль) и диэтилкарбамоилхлорид (70,54 г, 520,22 ммоль) растворяли в ацетонитриле (500 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли карбонат калия (71,90 г, 520,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-3/1, объемное соотношение) с получением целевого промежуточного соединения WX003-2. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,90-7,77 (m, 3H), 7,62 (d, J=2,2 Гц, 1H), 7,52-7,42 (m, 2H), 7,32 (dd, J=2,3, 8,8 Гц, 1H), 3,59-3,33 (m, 4H), 1,41-1,19 (m, 6H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX003-3
Промежуточное соединение WX003-2 (10 г, 41,10 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до -78°C медленно добавляли смешанный раствор диизопропиламида лития в тетрагидрофуране и н-гептане (2 M, 24,66 мл). Реакционную смесь подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции получали раствор неочищенного промежуточного соединения WX003-3 в тетрагидрофуране (124 мл) и непосредственно использовали его на следующей стадии.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX003-4
Смешанный раствор диизопропиламида лития в тетрагидрофуране и н-гептане (2 M, 46,03 мл) добавляли к раствору неочищенного промежуточного соединения WX003-3 в тетрагидрофуране (32,64 ммоль, 99 мл) при -78°C. После нагревания реакционной смеси до 0°C добавляли триметилхлорсилан (4,29 г, 39,46 ммоль, 5,01 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 15 мин, а затем подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 15 мин. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (100 мл). Для доведения pH до 6-7 добавляли 2 M разбавленную соляную кислоту и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-20/1, объемное соотношение) с получением целевого промежуточного соединения WX003-4. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 11,57 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,82 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,68 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,52 (dt, J=1,0, 7,6 Гц, 1H), 7,39-7,31 (m, 1H), 7,28 (s, 1 H), 2,79 (s, 3H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX003-5
Промежуточное соединение WX003-4 (3,8 г, 20,41 ммоль) растворяли в толуоле (80 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли гидрид натрия (3,26 г, 81,63 ммоль, степень чистоты: 60%) и диэтилкарбонат (9,64 г, 81,63 ммоль, 9,89 мл). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали в течение 16 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем добавляли ледяную воду (100 мл) и добавляли этилацетат (50 мл) для разведения. После отделения жидкости удаляли органическую фазу, а водную фазу подвергали экстракции с помощью этилацетата (30 мл × 2) и удаляли органическую фазу. У водной фазы pH доводили до 5-6 с помощью 2 M разбавленной соляной кислоты и получали желтоватое твердое вещество. После фильтрации твердое вещество собирали и сушили в условиях вакуума с получением целевого промежуточного соединения WX003-5. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 8,46 (s, 1H), 8,11 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,98 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,67-7,60 (m, 1H), 7,56-7,43 (m, 1H), 5,69 (s, 1H).
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX003-6
Промежуточное соединение WX003-5 (2,2 г, 10,37 ммоль) растворяли в этаноле (30 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли хлоргидрат гидроксиламина (2,52 г, 36,29 ммоль) и уксуснокислый натрий (2,98 г, 36,29 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 7 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток добавляли к насыщенному раствору бикарбоната натрия (100 мл), а затем фильтровали. У фильтрата рН доводили до 3-4 с помощью 1 M разбавленной соляной кислоты и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX003-6. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 12,99 (br s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,16 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,09 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,63 (ddd, J=1,2, 6,8, 8,2 Гц, 1H), 7,53 (ddd, J=1,2, 6,8, 8,2 Гц, 1H), 4,23 (s, 2H).
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX003-7
Промежуточное соединение WX003-6 (350 мг, 1,54 ммоль) растворяли в этаноле (10 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли концентрированную серную кислоту (644,00 мг, 6,57 ммоль, 350,00 мкл). Реакционную смесь нагревали до 70°C и перемешивали в течение 5 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя и в полученный в результате остаток для растворения добавляли воду (50 мл) и этилацетат (30 мл). После отделения жидкости органическую фазу собирали, а водную фазу подвергали экстракции с помощью этилацетата (20 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-5/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX003-7. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,28 (s, 1H), 8,05-7,95 (m, 3H), 7,65-7,54 (m, 1H), 7,52-7,44 (m, 1H), 4,25 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4,16 (s, 2H), 1,28 (t, J=7,1 Гц, 3H).
Стадия 7: синтез промежуточного соединения WX003
Промежуточное соединение WX003-7 (250 мг, 979,36 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (30 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли акриламид (69,61 мг, 979,36 мкмоль) и трет-бутоксид калия (109,90 мг, 979,36 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После завершения реакции к полученному в результате остатку для разведения добавляли воду (50 мл) и этилацетат (50 мл). После отделения жидкости органическую фазу собирали, а водную фазу подвергали экстракции с помощью этилацетата (20 мл × 5). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX003. MS-ESI m/z: 281,0 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,18 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,11 (dd, J=8,6, 11,4 Гц, 2H), 7,64 (t, J=7,0 Гц, 1H), 7,57-7,50 (m, 1H), 4,74 (dd, J=5,0, 11,8 Гц, 1H), 2,92-2,77 (m, 1H), 2,76-2,60 (m, 2H), 2,36-2,22 (m, 1H).
Пример 4: WX004
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX004-2
WX004-1 (9 г, 48,33 ммоль) и диэтилкарбонат (80 мл) растворяли в толуоле (80 мл) при комнатной температуре. После охлаждения реакционной смеси до 0°C порциями медленно добавляли гидрид натрия (9,67 г, 241,67 ммоль, степень чистоты: 60%). Полученную в результате реакционную смесь затем нагревали до 120°C и перемешивали при 120°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду (200 мл). Для экстракции добавляли этилацетат (200 мл × 2), а органическую фазу отбрасывали. У водной фазы pH доводили до 1-2 с помощью концентрированной соляной кислоты и подвергали экстракции этилацетатом (200 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая целевое промежуточное соединение WX004-2.
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX004-3
Промежуточное соединение WX004-2 (7 г, 32,99 ммоль) растворяли в метаноле (80 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли бикарбонат натрия (9,70 г, 115,46 ммоль) и хлоргидрат гидроксиламина (8,02 г, 115,46 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 75°C и перемешивали при 75°C в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток добавляли к 1 M водному раствору гидроксида натрия (50 мл). Для экстракции добавляли этилацетат (50 мл), а органическую фазу отбрасывали. У водной фазы pH доводили до 2 с помощью концентрированной соляной кислоты и подвергали экстракции этилацетатом (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX004-3. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 13,03 (br s, 1H), 8,26-8,09 (m, 3H), 7,91 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,76 (dt, J=1,4, 7,6 Гц, 1H), 7,67-7,58 (m, 1H), 4,39 (s, 2H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX004-4
Промежуточное соединение WX004-3 (3,5 г, 15,40 ммоль) растворяли в этаноле (50 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли концентрированную серную кислоту (6,44 г, 64,35 ммоль, 3,50 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали при 90°C в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. К полученному в результате остатку для растворения добавляли воду (30 мл), а затем добавляли водный раствор (1 н.) гидроксида натрия для доведения pH до 9 и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=30/1-20/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX004-4. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 8,24-8,08 (m, 3H), 7,92 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,75 (ddd, J=1,3, 7,1, 8,3 Гц, 1H), 7,63 (dt, J=1,2, 7,5 Гц, 1H), 4,50 (s, 2H), 4,15 (q, J=7,2 Гц, 2H), 1,16 (t, J=7,1 Гц, 3H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX004
Промежуточное соединение WX004-4 (3,4 г, 13,32 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100 мл) при комнатной температуре. После охлаждения реакционной смеси до 0°C добавляли акриламид (946,71 мг, 13,32 ммоль) и трет-бутоксид калия (1,49 г, 13,32 ммоль). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. После завершения реакции реакцию гасили водой (200 мл) и добавляли этилацетат (200 мл) для экстракции. Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (150 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX004. MS-ESI m/z: 281,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,16 (s, 1H), 8,29-8,12 (m, 3H), 7,94 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,79-7,72 (m, 1H), 7,69-7,60 (m, 1H), 5,07 (dd, J=4,4, 11,6 Гц, 1H), 2,92-2,77 (m, 1H), 2,72-2,54 (m, 2H), 2,42-2,27 (m, 1H).
Пример 5: WX005
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX005-2
WX005-1 (20 г, 131,45 ммоль, 16,95 мл) растворяли в N,N-диметилформамиде (300 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли карбонат калия (18,17 г, 131,45 ммоль) и бромацетальдегиддиэтилацеталь (25,91 г, 131,45 ммоль, 19,77 мл). Реакционную смесь нагревали до 100°C и перемешивали при 100°C в течение 16 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Для разведения добавляли воду (400 мл), а для экстракции добавляли смешанный раствор простого петролейного эфира/этилацетата (объемное соотношение: 3/1, 100 мл × 4). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4/1, объемное соотношение) с получением целевого промежуточного соединения WX005-2. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 12,70 (s, 1H), 7,64 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,48 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 6,43 (d, J=2,4 Гц, 1H), 4,84 (t, J=5,2 Гц, 1H), 4,04 (d, J=5,3 Гц, 2H), 3,77 (qd, J=7,1, 9,4 Гц, 2H), 3,64 (qd, J=7,0, 9,4 Гц, 2H), 2,56 (s, 3H), 1,26 (t, J=7,2 Гц, 6H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX005-3
Промежуточное соединение WX005-2 (14 г, 52,18 ммоль) растворяли в толуоле (200 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли полифосфорную кислоту (14 г). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали при 120°C в течение 20 мин. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Собирали жидкий супернатант, а нижнюю часть в форме суспензии выливали в ледяную воду (200 мл) и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат объединяли с супернатантом и удаляли растворитель в условиях пониженного давления. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-95/1, объемное соотношение) с получением целевого промежуточного соединения WX005-3. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 12,43 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,57 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,05 (s, 1H), 6,74 (dd, J=0,8, 2,0 Гц, 1H), 2,71 (s, 3H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX005-4
Промежуточное соединение WX005-3 (2,1 г, 11,92 ммоль) растворяли в толуоле (30 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли диэтилкарбонат (5,63 г, 47,68 ммоль, 5,78 мл) с последующим порционным дополнительным добавлением гидрида натрия (1,91 г, 47,68 ммоль, степень чистоты: 60%). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали при 120°C в течение 2,5 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду (100 мл). Для экстракции добавляли этилацетат (50 мл × 3), а органическую фазу отбрасывали. У водной фазы pH доводили до 3-4 с помощью 1 M разбавленной соляной кислоты и получали большое количество твердого вещества. После фильтрации фильтрационный осадок собирали и сушили в условиях вакуума с получением промежуточного соединения WX005-4. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 12,55 (br s, 1H), 8,11 (s, 1H), 8,09 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,09 (d, J=1,2 Гц, 1H), 5,58 (s, 1H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX005-5
Промежуточное соединение WX005-4 (2,1 г, 10,39 ммоль) растворяли в этаноле (30 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли хлоргидрат гидроксиламина (2,53 г, 36,36 ммоль) и уксуснокислый натрий (2,98 г, 36,36 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали при 80°C в течение 6 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток добавляли к насыщенному водному раствору бикарбоната натрия (100 мл), а затем фильтровали. У фильтрата рН доводили до 3-4 с помощью 1 M водного раствора разбавленной соляной кислоты и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX005-5. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 12,89 (br s, 1H), 8,11 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,13 (dd, J=0,8, 2,4 Гц, 1H), 4,13 (s, 2H).
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX005-6
Промежуточное соединение WX005-5 (400 мг, 1,84 ммоль) растворяли в этаноле (10 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли концентрированную серную кислоту (368,00 мг, 3,68 ммоль, 0,2 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 70°C и перемешивали при 70°C в течение 1 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток добавляли в воду (20 мл) и добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-9/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX005-6. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,86 (s, 1H), 7,70 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,65 (s, 1H), 6,87 (dd, J=0,8, 2,4 Гц, 1H), 4,23 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4,08 (s, 2H), 1,27 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX005
Промежуточное соединение WX005-6 (0,5 г, 2,04 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (20 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли акриламид (144,92 мг, 2,04 ммоль) и трет-бутоксид калия (228,79 мг, 2,04 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (50 мл) и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. В полученный в результате остаток добавляли N,N-диметилформамид (3 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали ацетилнитрилом (20 мл × 3), а затем фильтрационный осадок собирали и сушили в условиях вакуума с получением целевого соединения WX005. MS-ESI m/z: 271,0 [M+H]+,1H ЯМР (400МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 8,12 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,11 (d, J=2,0 Гц, 1H), 4,65 (dd, J=5,2, 11,6 Гц, 1H), 2,90-2,72 (m, 1H), 2,69-2,54 (m, 2H), 2,35-2,17 (m, 1H).
Пример 6: WX006
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX006-2
WX006-1 (30 г, 197,18 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (300 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем при 18-25°C порциями добавляли гидрид натрия (7,89 г, 197,18 ммоль, степень чистоты: 60%), а в конце добавляли бромацетальдегиддиэтилацеталь (38,86 г, 197,18 ммоль, 29,66 мл). Реакционную смесь нагревали до 100°C и перемешивали при 100°C в течение 36 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду (400 мл) и добавляли простой метил-трет-бутиловый эфир (100 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-9/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX006-2. 1H ЯМР (399 МГц, CDCl3) δ: 13,25 (s, 1H), 7,33 (t, J=8,4 Гц, 1H), 6,58 (dd, J=1,2, 8,4 Гц, 1H), 6,36 (dd, J=0,8, 8,4 Гц, 1H), 4,93 (t, J=5,2 Гц, 1H), 4,07 (d, J=5,6 Гц, 2H), 3,81-3,73 (m, 2H), 3,67-3,59 (m, 2H), 2,73 (s, 3H), 1,26 (t, J=7,0 Гц, 6H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX006-3
Промежуточное соединение WX006-2 (5 г, 18,64 ммоль) растворяли в толуоле (80 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли полифосфорную кислоту (3 г). Реакционную смесь помещали непосредственно в предварительно разогретую маслянную баню при 120°C и перемешивали при 120°C в течение 20 мин. После завершения реакции жидкий супернатант непосредственно выливали в круглодонную колбу и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-9/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX006-3. 1H ЯМР (399 МГц, CDCl3) δ: 12,86 (s, 1H), 7,67 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,63 (d, J=2,0 Гц, 1H), 6,91 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,77 (d, J=2,4 Гц, 1H), 2,92 (s, 3H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX006-4
Промежуточное соединение WX006-3 (1,3 г, 7,38 ммоль) растворяли в толуоле (15 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота и затем добавляли диэтилкарбонат (14,63 г, 123,80 ммоль, 15 мл), а в конце при температуре 0-15°C порциями добавляли гидрид натрия (885,43 мг, 22,14 ммоль, степень чистоты: 60%). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали при 120°C в течение 6 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду (100 мл) и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органическую фазу удаляли. У водной фазы pH доводили до 2-3 с помощью 1 M разбавленной соляной кислоты, и в осадок выпадало желтоватое твердое вещество. Для экстракции добавляли 2-метилтетрагидрофуран (100 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX006-4. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 12,63 (br s, 1H), 8,13 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,89 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,29 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,06 (d, J=2,4 Гц, 1H), 5,65 (s, 1H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX006-5
Промежуточное соединение WX006-4 (1,74 г, 8,61 ммоль) растворяли в этаноле (30 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли хлоргидрат гидроксиламина (2,09 г, 30,12 ммоль) и уксуснокислый натрий (2,47 г, 30,12 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали при 80°C в течение 5 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления большей части растворителя. Добавляли воду (100 мл), pH доводили до 3-4 с помощью 1 M разбавленной соляной кислоты и получали твердое вещество. Для экстракции добавляли этилацетат (100 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX006-5.
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX006-6
Промежуточное соединение WX006-5 (1,5 г, 6,91 ммоль) растворяли в этаноле (20 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли серную кислоту (552,00 мг, 5,52 ммоль, 300,00 мкл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 70°C и перемешивали при 70°C в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления большей части растворителя, а для растворения добавляли воду (50 мл) и этилацетат (50 мл). После отделения жидкости органическую фазу собирали, а водную фазу подвергали экстракции с помощью этилацетата (30 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-10/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX006-6. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,76 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,71 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,50 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,92 (d, J=2,4 Гц, 1H), 4,25 (d, J=6,8 Гц, 2H), 4,24 (s, 2H), 1,23 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 6: синтез WX006
Промежуточное соединение WX006-6 (300 мг, 1,22 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (15 мл) при комнатной температуре, а затем одновременно добавляли акриламид (86,95 мг, 1,22 ммоль, 84,42 мкл) и трет-бутоксид калия (137,27 мг, 1,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (10°C) в течение 12 ч. После завершения реакции добавляли воду (100 мл), а затем добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX006. MS-ESI m/z: 271,1 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,22 (s, 1H), 8,15 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,98 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,71 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,18 (d, J=2,0 Гц, 1H), 4,71 (dd, J=4,8, 12,8 Гц, 1H), 2,96-2,87 (m, 1H), 2,70-2,66 (m, 1H), 2,60-2,55 (m, 1H), 2,33-2,22 (m, 1H).
Пример 7: WX007
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX007-2
Пропан-1,2,3-триол (25,30 г, 274,69 ммоль, 20,57 мл) добавляли к раствору концентрированной серной кислоты (29,72 г, 296,96 ммоль, 16,15 мл, степень чистоты: 98%) в воде (15 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. Реакционную смесь нагревали до 110°C, а затем последовательно добавляли WX007-1 (15 г, 74,24 ммоль), концентрированную серную кислоту (15 мл, степень чистоты: 98%), воду (15 мл) и пропан-1,2,3-триол (15 мл). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 140°C и перемешивали при 140°C в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду (300 мл). Добавляли 2 н. водный раствор гидроксида натрия для доведения pH до 8 и добавляли этилацетат (400 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-1/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX007-2. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 8,85 (dd, J=1,8, 4,2 Гц, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,25 (dd, J=1,6, 8,0 Гц, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,41 (dd, J=4,4, 8,4 Гц, 1H), 4,00 (s, 3H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX007-3
Промежуточное соединение WX007-2 (8 г, 33,60 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (100 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли трибутил(1-этоксивинил)станнан (18,20 г, 50,40 ммоль, 17,01 мл) и дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II) (1,18 г, 1,68 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали при 90°C в течение 4 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры (25°C) добавляли разбавленную соляную кислоту (2 M, 16,80 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. После завершения реакции добавляли водный раствор калия фторида (100 мл) и этилацетат (100 мл) с последующей фильтрацией. После отделения жидкости органическую фазу собирали, а водную фазу подвергали экстракции с помощью этилацетата (100 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-1/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX007-3. MS-ESI m/z: 202,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 8,89 (dd, J=1,6, 4,0 Гц, 1H), 8,39 (dd, J=1,2, 8,0 Гц, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,42 (dd, J=4,2, 8,2 Гц, 1H), 4,01 (s, 3H), 2,61 (s, 3H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX007-4
Промежуточное соединение WX007-3 (2,4 г, 11,93 ммоль) растворяли в водном растворе бромистоводородной кислоты (50 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали при 120°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и pH доводили до 7 с помощью 2 н. водного раствора гидроксида натрия, а затем добавляли этилацетат (100 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-1/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX007-4. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,43 (s, 1H), 8,88 (dd, J=1,6, 4,4 Гц, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,39 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=4,2, 8,2 Гц, 1H), 7,36 (s, 1H), 2,76 (s, 3H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX007-5
Промежуточное соединение WX007-4 (0,8 г, 4,27 ммоль) растворяли в диэтилкарбонате (9 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C порциями добавляли гидрид натрия (854,73 мг, 21,37 ммоль, степень чистоты: 60%). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали при 120°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду (200 мл). Для экстракции добавляли этилацетат (100 мл × 2), а органическую фазу отбрасывали. Водную фазу концентрировали в условиях пониженного давления до удаления воды, таким образом получая промежуточное соединение WX007-5.
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX007-6
Промежуточное соединение WX007-5 (1,6 г, 7,51 ммоль) растворяли в метаноле (30 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (2,15 г, 26,27 ммоль) и хлоргидрат гидроксиламина (1,83 г, 26,27 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (25°C) в течение 1,5 ч, а затем нагревали до 80°C и перемешивали при 80°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX007-6.
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX007-7
Промежуточное соединение WX007-6 (6 г, 26,29 ммоль) растворяли в этаноле (80 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем по каплям добавляли концентрированную серную кислоту (5 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали при 90°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Для разведения добавляли воду (50 мл), для доведения pH до 6-7 добавляли насыщенный водный раствор бикрбоната натрия и добавляли этилацетат (100 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-5/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX007-7. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 9,05 (dd, J=1,8, 4,2 Гц, 1H), 8,63 (d, J=8,4 Гц, 2H), 8,27 (s, 1H), 7,57 (dd, J=4,0, 8,4 Гц, 1H), 4,37 (s, 2H), 4,18 (q, J=7,2 Гц, 2H), 1,21 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 7: синтез WX007
Промежуточное соединение WX007-7 (0,27 г, 1,05 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (8 мл) при 15°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли акриламид (78,63 мг, 1,11 ммоль) и раствор трет-бутоксида калия в тетрагидрофуране (1 M, 1,11 мл). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 12 ч, а затем нагревали до 30°C и перемешивали при 30°C в течение 1 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (15 мл) и добавляли этилацетат (10 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX007. MS-ESI m/z: 282,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,23 (s, 1H), 9,17 (dd, J=1,4, 4,2 Гц, 1H), 8,81 (s, 1H), 8,78 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,72 (dd, J=4,6, 8,6 Гц, 1H), 4,81 (dd, J=5,0, 12,2 Гц, 1H), 2,89-2,81 (m, 1H), 2,70-2,66 (m, 2H), 2,33-2,28 (m, 1H).
Пример 8: WX008
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX008-2
WX008-1 (10 г, 68,89 ммоль) растворяли в дихлорметане (100 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли N-йодосукцинимид (15,50 г, 68,89 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 12 ч, и в осадок выпадало твердое вещество. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали, а фильтрационный осадок собирали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением промежуточного соединения WX008-2. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 10,93 (s, 1H), 8,66 (dd, J=1,4, 4,2 Гц, 1H), 8,27 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,88 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,51 (dd, J=4,2, 8,4 Гц, 1H), 7,45 (d, J=9,2 Гц, 1H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX008-3
Промежуточное соединение WX008-2 (15 г, 55,34 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (150 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли карбонат калия (22,94 г, 166,02 ммоль) и бромистый бензил (11,36 г, 66,41 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 60°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (400 мл) и для экстракции добавляли этилацетат (300 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали полунасыщенным солевым раствором (100 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-1/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX008-3.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX008-4
Промежуточное соединение WX008-3 (20 г, 55,37 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (200 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли соединения трибутил(1-этоксивинил)станнан (26,00 г, 71,99 ммоль) и дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II) (2,73 г, 15,94 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до 25°C и перемешивали в течение 1 ч. Затем добавляли насыщенный водный раствор калия фторида (200 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч с последующей экстракцией этилацетатом (300 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-0/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX008-4.
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX008-5
Промежуточное соединение WX008-4 (10 г, 36,06 ммоль) растворяли в трифторуксусной кислоте (80 мл) при комнатной температуре, а затем реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (150 мл), для доведения pH до 9 добавляли твердый карбонат натрия и добавляли этилацетат (200 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX008-5. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 13,58 (s, 1H), 8,81 (dd, J=1,4, 4,2 Гц, 1H), 8,50 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,17 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,49 (dd, J=4,4, 8,8 Гц, 1H), 7,40 (d, J=9,2 Гц, 1H), 2,88 (s, 3H).
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX008-6
Промежуточное соединение WX008-5 (5,5 г, 29,38 ммоль) растворяли в диэтилкарбонате (100 мл) при комнатной температуре. После охлаждения реакционной смеси до 0°C порциями добавляли гидрид натрия (5,88 г, 146,91 ммоль, степень чистоты: 60%). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали в течение 10 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду (200 мл). Добавляли этилацетат (150 мл × 2) для экстракции и отбрасывали органическую фазу, а водную фазу концентрировали в условиях пониженного давления до удаления воды, таким образом получая промежуточное соединение WX008-6.
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX008-7
Промежуточное соединение WX008-6 (13,5 г, 63,32 ммоль) растворяли в этаноле (150 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли уксуснокислый натрий (18,18 г, 221,63 ммоль) и хлоргидрат гидроксиламина (15,40 г, 221,63 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 1,5 ч, а затем нагревали до 80°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, доводили pH до 5 с помощью 3 н. соляной кислоты и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления воды, таким образом получая промежуточное соединение WX008-7.
Стадия 7: синтез промежуточного соединения WX008-8
Промежуточное соединение WX008-7 (34 г, 13,28 ммоль) растворяли в этаноле (500 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли концентрированную серную кислоту (15 мл). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разводили с помощью этилацетата (300 мл) и воды (300 мл), а затем для доведения pH до 7 добавляли твердый бикарбонат натрия. Разделяли фазы и водную фазу подвергали экстракции этилацетатом (300 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (300 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-0/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX008-8. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 8,99 (dd, J=1,6, 4,4 Гц, 1H), 8,60-8,56 (m, 1H), 8,24 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,18 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,76 (dd, J=4,4, 8,4 Гц, 1H), 4,54 (s, 2H), 4,14 (q, J=7,2 Гц, 2H), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 8: синтез промежуточного соединения WX008-9
Промежуточное соединение WX008-8 (2,2 г, 8,59 ммоль) растворяли в дихлорметане (45 мл) при 0°C, а затем добавляли м-хлорпероксибензойную кислоту (2,09 г, 10,30 ммоль). Реакционную смесь подогревали до комнатной температуры (15°C) и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции полученную в результате реакционную смесь непосредственно разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: дихлорметан/этанол=1/0-20/1, объемное соотношение), таким образом получая промежуточное соединение WX008-9.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 8,83 (d, J=9,6 Гц, 1H), 8,68 (d, J=6,0 Гц, 1H), 8,21 (d, J=9,6 Гц, 1H), 8,07 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,71 (dd, J=6,4, 8,4 Гц, 1H), 4,55 (s, 2H), 4,15 (q, J=7,0 Гц, 2H), 1,16 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 9: синтез промежуточного соединения WX008-10
Промежуточное соединение WX008-9 (0,5 г, 1,84 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (4,19 г, 55,10 ммоль, 4,34 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли п-толуолсульфонилхлорид (451,67 мг, 2,37 ммоль). После охлаждения реакционной смеси до 0°C добавляли триэтиламин (464,59 мг, 4,59 ммоль, 639,05 мкл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (15°C) в течение 16 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли насыщенный раствор карбоната натрия (10 мл) и добавляли этилацетат (10 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=5/1-3/1, объемное соотношение), таким образом получая промежуточное соединение WX008-10.
Стадия 10: синтез WX008
Промежуточное соединение WX008-10 (0,3 г, 908,17 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) при 0°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли акриламид (64,55 мг, 908,17 мкмоль, 62,67 мкл) и трет-бутоксид калия (101,91 мг, 908,17 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (10°C) в течение 14 ч. После завершения реакции реакционную смесь добавляли в воду (10 мл) и добавляли смешанный раствор (этилацетат/2-метилтетрагидрофуран=1/1) (10 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX008. MS-ESI m/z: 356,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,34 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,24 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,90 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,22 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,76 (t, J=4,6 Гц, 2H), 4,67-4,58 (m, 1H), 3,85 (t, J=4,4 Гц, 2H), 3,48 (s, 3H), 3,10-2,99 (m, 1H), 2,87-2,72 (m, 2H), 2,62-2,56 (m, 1H).
Пример 9: WX009
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX009-2
WX009-1 (25,00 г, 183,62 ммоль) растворяли в смешанном растворе диэтилкарбоната (250 мл) и толуола (250 мл) при комнатной температуре. После охлаждения реакционной смеси до 0°C порциями добавляли гидрид натрия (36,72 г, 918,12 ммоль, степень чистоты: 60%). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и медленно выливали в ледяную воду (500 мл) и добавляли этилацетат (500 мл × 2) для экстракции. Органическую фазу отбрасывали, а pH водной фазы доводили до 3 с помощью 3 н. соляной кислоты и подвергали ее экстракции этилацетатом (1 л × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX009-2. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 12,52 (s, 1H), 7,82 (dd, J=1,6, 7,6 Гц, 1H), 7,68-7,62 (m, 1H), 7,40-7,32 (m, 2H), 5,59 (s, 1H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX009-3
Промежуточное соединение WX009-2 (25,00 г, 154,19 ммоль) растворяли в метаноле (300 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (44,27 г, 539,65 ммоль) и хлоргидрат гидроксиламина (37,50 г, 539,65 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 1,5 ч, а затем нагревали до 80°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, доводили pH до 5 с помощью 3 н. соляной кислоты, а затем концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Добавляли воду (200 мл) и реакционную колбу помещали в баню с ледяной водой для охлаждения одновременно с доведением pH до 3 путем добавления 3 н. соляной кислоты. После перемешивания в течение 30 минут реакционную смесь фильтровали, а фильтрационный осадок собирали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX009-3.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX009-4
Промежуточное соединение WX009-3 (28,00 г, 158,05 ммоль) растворяли в этаноле (600 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли концентрированную серную кислоту (28 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 6 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разводили с помощью этилацетата (300 мл) и воды (300 мл) и для доведения pH до 7 добавляли твердый бикарбонат натрия. После отделения жидкости собирали органическую фазу, а водную фазу подвергали экстракции этилацетатом (300 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (300 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-0/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX009-4. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 7,84 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,74 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,70-7,63 (m, 1H), 7,44-7,37 (m, 1H), 4,21 (s, 2H), 4,14 (q, J=7,2 Гц, 2H), 1,19 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX009-5
Промежуточное соединение WX009-4 (24,00 г, 116,95 ммоль) добавляли к дымящейся азотной кислоте (180 мл) при 0°C и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (500 мл) и добавляли этилацетат (500 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали водой (200 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-10/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX009-5. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 8,93 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,51 (dd, J=2,0, 9,2 Гц, 1H), 7,99 (d, J=9,2 Гц, 1H), 4,34 (s, 2H), 4,15 (q, J=7,4 Гц, 2H), 1,2 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX009-6
Промежуточное соединение WX009-5 (5,50 г, 21,98 ммоль) растворяли в этаноле (120 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли дигидрат хлористого олова (19,84 г, 87,93 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 2 ч. Реакционную смесь дополняли дигидратом хлористого олова (14,88 г, 65,95 ммоль), а затем перемешивали в течение 5 ч. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разводили с помощью дихлорметана (200 мл) и воды (300 мл), а затем для доведения pH до 7 добавляли твердый бикарбонат натрия. Полученный в результате раствор фильтровали через воронку, содержащую диатомовую землю. Диатомовую землю промывали 2-метилтетрагидрофураном (1000 мл) и собирали фильтрат.После отделения жидкости собирали органическую фазу, а водную фазу подвергали экстракции 2-метилтетрагидрофураном (200 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (нейтральная алюмооксидная колонка 200-300 меш, элюент: простой петролейный эфир/этилацетат/дихлорметан=1/0/0-6/3/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX009-6.
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX009-7
Промежуточное соединение WX009-6 (1,50 г, 6,81 ммоль) растворяли в дихлорметане (30 мл) при комнатной температуре, а затем при 0°C добавляли N-бромсукцинимид (1,21 г, 6,81 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0-15°C в течение 2 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (15 мл), а затем добавляли дихлорметан (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX009-7. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 7,51 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,16 (d, J=8,8 Гц, 1H), 5,42 (s, 2H), 4,20-4,08 (m, 4H), 1,20 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 7: синтез промежуточного соединения WX009-8
Промежуточное соединение WX009-7 (1,1 г, 3,68 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (10 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли триметилсилилацетилен (722,38 мг, 7,36 ммоль), триэтиламин (930,30 мг, 9,20 ммоль), йодид калия (610,46 мг, 3,68 ммоль), йодид меди(I) (70,04 мг, 368,00 мкмоль) и дихлорметановый комплекс 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладий(II)дихлорида (300,31 мг, 368,00 мкмоль). Реакционную смесь нагревали до 110°C и проводили реакцию по действием микроволн (3 бара) в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (30 мл) и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали полунасыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=3/1, объемное соотношение). Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением промежуточного соединения WX009-8. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,63 (s, 1H), 7,69 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,42 (d, J=9,2 Гц, 1H), 6,79 (d, J=1,2 Гц, 1H), 4,26 (s, 2H), 4,15 (q, J=7,0 Гц, 2H), 1,20 (t, J=7,0 Гц, 3H), 0,34 (s, 9H).
Стадия 8: синтез промежуточного соединения WX009-9
Промежуточное соединение WX009-8 (300,00 мг, 948,09 мкмоль) растворяли в ацетонитриле (20 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли раствор фторида тетрабутиламмония (1 M, 948,09 мкл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь нагревали до 70°C и перемешивали в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-2/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX009-9. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,69 (s, 1H), 7,71 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,55 (t, J=2,8 Гц, 1H), 7,42 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,63 (s, 1H), 4,26 (s, 2H), 4,14 (q, J=7,2 Гц, 2H), 1,17 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 9: синтез WX009
Промежуточное соединение WX009-9 (125,00 мг, 511,78 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (7 мл) при 0°C, а затем последовательно добавляли акриламид (36,38 мг, 511,78 мкмоль) и трет-бутоксид калия (57,43 мг, 511,78 мкмоль). Реакционную смесь подогревали до комнатной температуры (10°C) и перемешивали в течение 1 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (10 мл) и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX009. MS-ESI m/z: 270,1 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,71 (s, 1H), 11,20 (s, 1H), 7,72 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,56 (t, J=2,6 Гц, 1H), 7,44 (d, J=9,2 Гц, 1H), 6,56 (s, 1H), 4,69 (dd, J=5,0, 11,8 Гц, 1H), 2,90-2,81 (m, 1H), 2,70-2,59 (m, 1H), 2,47-2,37 (m, 1H), 2,28-2,15 (m, 1H).
Пример 10: WX010
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX010-2
WX010-1 (10 г, 42,18 ммоль, 25,00 мл) растворяли в дихлорметане (200 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли ацетилхлорид (3,31 г, 42,18 ммоль, 3,01 мл) и в конце при 5-15°C порциями добавляли треххлористый алюминий (8,44 г, 63,27 ммоль, 3,46 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (15°C) в течение 1 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (200 мл) и добавляли дихлорметан (200 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая смесь промежуточного соединения WX010-2 и WX010-3 в соотношении 3/10.
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX010-3
Смесь промежуточного соединения WX010-2 и WX010-3 (11 г, соотношение WX010-2 к WX010-3 составляло 3/10, молярное соотношение) растворяли в дихлорметане (100 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до температуры от -50°C до -30°C медленно по каплям добавляли раствор трихлорида бора в дихлорметане (1 M, 39,41 мл). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до 0°C и перемешивали при 0°C в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (200 мл), а затем добавляли дихлорметан (200 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX010-3. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 13,39 (s, 1H), 7,96 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,92 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,79 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,64 (dd, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 7,17 (d, J=8,8 Гц, 1H), 2,85 (s, 3H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX010-4
Промежуточное соединение WX010-3 (10 г, 37,72 ммоль) растворяли в толуоле (100 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли диэтилкарбонат (48,75 г, 412,68 ммоль, 50 мл) и в конце при 5-10°C порциями добавляли гидрид натрия (4,53 г, 113,16 ммоль, степень чистоты: 60%). Реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 30 минут, а затем нагревали до 120°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (500 мл) и добавляли этилацетат (100 мл × 3) для экстракции. Органическую фазу удаляли, а рН водной фазы доводили до 3-4 посредством 2 M разбавленной соляной кислоты и подвергали ее экстракции 2-метилтетрагидрофураном (300 мл × 5). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX010-4. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 13,01 (s, 1H), 9,19 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,32 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,17 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,80 (dd, J=2,2, 9,4 Гц, 1H), 7,58 (d, J=9,2 Гц, 1H), 5,76 (s, 1H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX010-5
Промежуточное соединение WX010-4 (4,3 г, 14,77 ммоль) растворяли в этаноле (200 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли хлоргидрат гидроксиламина (6,67 г, 96,02 ммоль) и уксуснокислый натрий (4,24 г, 51,70 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 85°C и перемешивали в течение 56 ч, а затем нагревали до 90°C и перемешивали в течение 32 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем добавляли 2 M разбавленную соляную кислоту (200 мл). Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления этанола и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (50 мл × 5) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX010-5.
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX010-6
Промежуточное соединение WX010-5 (4,5 г, 14,70 ммоль) растворяли в этаноле (20 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли серную кислоту (1,88 г, 18,76 ммоль, 1,02 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь подогревали до 70°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Добавляли воду (100 мл) и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-9/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX010-6. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,16 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,00 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,88 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,76 (dd, J=2,0, 8,8 Гц, 1H), 7,73 (d, J=9,2 Гц, 1H), 4,32 (s, 2H), 4,23 (q, J=7,2 Гц, 2H), 1,22 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX010-7
Промежуточное соединение WX010-6 (2,7 г, 8,08 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (40 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли дихлорметановый комплекс 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладий(II)дихлорида (659,83 мг, 807,99 мкмоль), фосфат калия (1,89 г, 8,89 ммоль) и винилфторборат калия (1,41 г, 10,50 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали при 80°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. К реакционной смеси добавляли воду (100 мл) и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-9/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX010-7. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,06 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 2H), 7,80 (dd, J=1,8, 8,6 Гц, 1H), 7,68 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,90 (dd, J=11,0, 17,4 Гц, 1H), 5,91 (d, J=17,6 Гц, 1H), 5,39 (d, J=10,8 Гц, 1H), 4,33 (s, 2H), 4,23 (q, J=7,0 Гц, 2H), 1,22 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 7: синтез промежуточного соединения WX010-8
Промежуточное соединение WX010-7 (1,5 г, 5,33 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (40 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли акриламид (379,01 мг, 5,33 ммоль) и трет-бутоксид калия (598,35 мг, 5,33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (10°C) в течение 3 ч. После завершения реакции добавляли воду (50 мл) и добавляли этилацетат (100 мл × 5) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-1/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX010-8. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,18 (s, 1H), 8,19-8,10 (m, 3H), 7,92 (t, J=7,4 Гц, 2H), 6,94 (dd, J=11,0, 17,4 Гц, 1H), 6,04 (d, J=17,6 Гц, 1H), 5,41 (d, J=10,8 Гц, 1H), 5,06 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 2,90-2,81 (m, 1H), 2,68-2,54 (m, 2H), 2,40-2,37 (m, 1H).
Стадия 8: синтез промежуточного соединения WX010-9
Промежуточное соединение WX010-8 (1 г, 3,26 ммоль) растворяли в дихлорметане (250 мл) при комнатной температуре, а затем подавалаи озон (под давлением 15 psi) в течение 15 минут при -70°C. После того, как система становилась синей, вводили кислород в течение 15 минут (до исчезновения синего цвета). В конце добавляли диметилсульфид (1,69 г, 27,23 ммоль, 2 мл) и реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь подогревали до комнатной температуры, а затем концентрировали в условиях пониженного давления при 35°C до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением промежуточного соединения WX010-9 (желтоватое твердое вещество, 0,4 г). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,16 (s, 1H), 10,19 (s, 1H), 8,79 (d, J=0,8 Гц, 1H), 8,43 (d, J=9,2 Гц, 2H), 8,11 (dd, J=1,4, 8,6 Гц, 1H), 8,08 (d, J=9,2 Гц, 1H), 5,12 (dd, J=4,6, 11,8 Гц, 1H), 2,92-2,79 (m, 1H), 2,72-2,56 (m, 2H), 2,44-2,31 (m, 1H).
Стадия 9: синтез промежуточного соединения WX010-10
Промежуточное соединение WX010-9 (300 мг, 973,12 мкмоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (14 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли пероксимоносульфат калия (598,24 мг, 973,12 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (10°C) в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали для сбора маточного раствора, таким образом получая раствор промежуточного соединения WX010-10 в N,N-диметилформамиде.
Стадия 10: синтез WX010
К раствору промежуточного соединения WX010-10 (0,0695 M, 7,00 мл) в N,N-диметилформамиде при 0°C в условиях атмосферы азота последовательно добавляли гексафторфосфат 2-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония (277,50 мг, 729,82 мкмоль) и триэтиламин (98,47 мг, 973,09 мкмоль, 135,44 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 15 минут добавляли 2-метоксиэтиламин (40,20 мг, 535,20 мкмоль, 46,53 мкл). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до комнатной температуры (10°C) и перемешивали при 10°C в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (20 мл), а затем добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX010. MS-ESI m/z: 382,1 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,17 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,30 (d, J=9,2 Гц, 2H), 8,13 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,02 (d, J=9,2 Гц, 1H), 5,10 (dd, J=5,2, 12,0 Гц, 1H), 3,51 (s, 4H), 3,44 (s, 3H), 2,92-2,80 (m, 1H), 2,69-2,58 (m, 2H), 2,42-2,32 (m, 1H).
Пример 11: гидрохлорид WX011
Стадия 1: синтез WX011
Промежуточное соединение WX010-9 (150 мг, 486,56 мкмоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли ледяную уксусную кислоту (29,22 мг, 486,56 мкмоль, 27,83 мкл) и раствор диметиламина (2 M, 243,28 мкл) в тетрагидрофуране. После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 мин добавляли триацетоксиборогидрид натрия (206,24 мг, 973,12 мкмоль) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (30 мл) и добавляли дихлорметан (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, а водную фазу непосредственно лиофилизировали. Остатки объединяли, а затем разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) c получением гидрохлорида целевого соединения WX011. MS-ESI m/z: 338,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,14 (s, 1H), 10,88 (s, 1H), 8,35 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,22 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,01 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,98 (d, J=7,6 Гц, 1H), 5,11 (dd, J=4,6, 11,8 Гц, 1H), 4,49 (s, 2H), 2,92-2,80 (m, 1H), 2,74 (s, 6H), 2,68-2,54 (m, 2H), 2,42-2,38 (m, 1H).
Пример 12: WX012
Стадия 1: синтез WX012
Промежуточное соединение WX010-9 (100 мг, 324,37 мкмоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли ледяную уксусную кислоту (19,48 мг, 324,37 мкмоль, 18,55 мкл) и 2-метоксиэтиламин (24,36 мг, 324,37 мкмоль, 28,20 мкл). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре (10°C) в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (137,50 мг, 648,74 мкмоль) и полученную в результате реакционную смесь перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции добавляли воду (30 мл), а затем добавляли дихлорметан (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, а водную фазу непосредственно лиофилизировали. Остатки объединяли, а затем разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX012. MS-ESI m/z: 368,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,13 (s, 1H), 9,45 (s, 1H), 8,31 (d, J=11,6 Гц, 2H), 8,20 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,00 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,94 (d, J=7,6 Гц, 1H), 5,10 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,37 (s, 2H), 3,64 (t, J=5,0 Гц, 2H), 3,39 (s, 3H), 3,12 (s, 2H), 2,92-2,80 (m, 1H), 2,71-2,54 (m, 2H), 2,45-2,35 (m, 1H).
Пример 13: WX013
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX013-2
WX013-1 (20 г, 106.26 ммоль) растворяли в дихлорметане (300 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли ацетилхлорид (8,34 г, 106,26 ммоль, 7,58 мл) и треххлористый алюминий (21,25 г, 159,39 ммоль, 8,71 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (18°C) в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь медленно выливали в ледяную воду (400 мл). После отделения жидкости собирали органические фазы, а водную фазу подвергали экстракции дихлорметаном (100 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX013-2. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,78 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,69 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,25 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,17 (dd, J=2,4, 9,2 Гц, 1H), 7,10 (d, J=2,4 Гц, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,90 (s, 3H), 2,65 (s, 3H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX013-3
Промежуточное соединение WX013-2 (24,45 г, 106,18 ммоль) растворяли в дихлорметане (250 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем по каплям добавляли раствор трихлорида бора (1 M, 106,18 мл) в дихлорметане при температуре от -65°C до -40°C. Реакционную смесь подогревали до 0°C и перемешивали при 0°C в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь медленно выливали в ледяную воду (500 мл) и добавляли дихлорметан (100 мл × 4) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX013-3. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 13,17 (s, 1H), 8,01 (d, J=9,6 Гц, 1H), 7,80 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=2,8, 9,2 Гц, 1H), 7,15-7,12 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX013-4
Промежуточное соединение WX013-3 (21,5 г, 99,43 ммоль) растворяли в толуоле (200 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли диэтилкарбонат (195,00 г, 1,65 моль, 200 мл) и в конце при 10-20°C порциями добавляли гидрид натрия (11,93 г, 298,29 ммоль, степень чистоты: 60%). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали при 120°C в течение 5 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем медленно выливали в ледяную воду (800 мл) и добавляли этилацетат (200 мл × 3) для экстракции. Органическую фазу удаляли, а pH водной фазы доводили до 3-4 с помощью 1 M разбавленной соляной кислоты. В осадок выпадало желтоватое твердое вещество, и затем его собирали фильтрацией. Полученное в результате твердое вещество перемешивали с метанолом (200 мл) при комнатной температуре в течение 30 минут, а затем фильтровали и твердое вещество концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX013-4. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 12,85 (s, 1H), 9,17 (d, J=9,6 Гц, 1H), 8,10 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,49 (d, J=4,4 Гц, 1H), 7,47 (d, J=1,6 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,8, 9,6 Гц, 1H), 5,73 (s, 1H), 3,89 (s, 3H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX013-5
Промежуточное соединение WX013-4 (13 г, 53,67 ммоль) растворяли в дихлорметане (200 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем при температуре от -50°C до -30°C по каплям добавляли трехбромистый бор (49 г, 195,59 ммоль, 18,85 мл). Реакционную смесь подогревали до 10°C и перемешивали при 10°C в течение 15 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (500 мл) и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (500 мл × 5) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX013-5.
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX013-6
Промежуточное соединение WX013-5 (9 г, 39,44 ммоль) растворяли в этаноле (150 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли хлоргидрат гидроксиламина (9,59 г, 138,04 ммоль) и этилат натрия (9,39 г, 138,04 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали при 80°C в течение 15 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 1 M разбавленную соляную кислоту (100 мл) и полученную в результате реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления этанола. Добавляли воду (100 мл) и для экстракции добавляли этилацетат (200 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX013-6.
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX013-7
Промежуточное соединение WX013-6 (10 г, 41,12 ммоль) растворяли в этаноле (100 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли концентрированную серную кислоту (3,68 г, 36,77 ммоль, 2 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 70°C и перемешивали при 70°C в течение 6 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления большей части растворителя. Полученный в результате остаток разводили водой (100 мл) и для экстракции добавляли этилацетат (70 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-7/3, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX013-7. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,90 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,68 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,55 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,24 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,17 (dd, J=2,4, 7,6 Гц, 1H), 6,01 (br s, 1H), 4,24 (s, 2H), 4,15 (q, J=7,0 Гц, 2H), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 7: синтез промежуточного соединения WX013-8
Промежуточное соединение WX013-7 (500 мг, 1,84 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (8 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли йодметан (1,05 г, 7,37 ммоль, 458,99 мкл) и карбонат калия (1,02 г, 7,37 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (10°C) в течение 2 ч. После завершения реакции добавляли воду (30 мл) и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали полунасыщенным солевым раствором (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX013-8. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,02 (d, J=9,6 Гц, 1H), 7,87 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,67 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,34 (dd, J=2,8, 8,0 Гц, 1H), 4,31 (s, 2H), 4,22 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,95 (s, 3H), 1,21 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 8: синтез WX013
Промежуточное соединение WX013-8 (400 мг, 1,40 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли акриламид (99,66 мг, 1,40 ммоль) и трет-бутоксид калия (157,33 мг, 1,40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (10°C) в течение 3 ч. После завершения реакции добавляли воду (50 мл) и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX013. MS-ESI m/z: 311,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,12 (s, 1H), 8,14 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,11 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,89 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,64 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,36 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,02 (dd, J=5,0, 11,4 Гц, 1H), 3,91 (s, 3H), 2,89-2,80 (m, 1H), 2,67-2,52 (m, 2H), 2,39-2,33 (m, 1H).
Пример 14: WX014
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX014-1
Промежуточное соединение WX013-7 (1 г, 3,69 ммоль) растворяли в ацетонитриле (20 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли карбонат калия (1,02 г, 7,37 ммоль) и диэтил-бис(бромдифторметил)фосфонат (1,97 г, 7,37 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (10°C) в течение 12 ч. После завершения реакции добавляли воду (50 мл), а затем добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-9/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX014-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,13 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,92 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,74 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,71 (d, J=1,6 Гц, 1H), 7,49 (dd, J=2,0, 8,8 Гц, 1H), 6,83-6,46 (m, 1H), 4,32 (s, 2H), 4,23 (q, J=7,0 Гц, 2H), 1,22 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез WX014
Выделенный материал WX014-1 (100 мг, 311,26 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (3 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли акриламид (22,12 мг, 311,26 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 311,26 мкл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (10°C) в течение 2 ч. После завершения реакции добавляли воду (10 мл), а затем добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX014. MS-ESI m/z: 347,0 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,14 (s, 1H), 8,31 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,23 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,00 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,98 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,59-7,57 (m, 1H), 7,56-7,20 (m, 1H), 5,07 (dd, J=4,4, 11,6 Гц, 1H), 2,89-2,79 (m, 1H), 2,69-2,57 (m, 2H), 2,40-2,32 (m, 1H).
Пример 15: гидрохлорид WX015
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX015-1
WX013-7 (500 мг, 1,84 ммоль), 2-(диметиламино)этанол (180,73 мг, 2,03 ммоль) и трифенилфосфин (628,49 мг, 2,40 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (15 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли N,N-диизопропилэтиламин (484,53 мг, 2,40 ммоль, 564,89 мкл). Реакционную смесь подогревали до комнатной температуры (20°C) и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в воду (40 мл) и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (40 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (50 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0 до 0/1, дихлорметан/метанол=1/0-19/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX015-1.
Стадия 2: синтез WX015
Соединение WX015-1 (0,41 г, 1,2 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (12 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли акриламид (85,11 мг, 1,2 ммоль) и раствор трет-бутоксида калия в тетрагидрофуране (1 M, 1,2 мл). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры (20°C) и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции pH реакционной смеси доводили до 3 с помощью 2 н. разбавленной соляной кислоты и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX015. MS-ESI m/z: 368,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4) δ: 8,18 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,04 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,77 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,63 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,47 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 4,93 (dd, J=5,0, 10,2 Гц, 1H), 4,53 (t, J=5,0 Гц, 2H), 3,69 (t, J=5,0 Гц, 2H), 3,04 (s, 6H), 2,91-2,74 (m, 2H), 2,71-2,61 (m, 1H), 2,53-2,48 (m, 1H).
Пример 16: WX016
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX016-1
Промежуточное соединение WX013-7 (400 мг, 1,47 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (8 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли карбонат калия (815,20 мг, 5,90 ммоль) и соединение 1-бром-2-метоксиэтан (614,85 мг, 4,42 ммоль, 415,44 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 2 ч добавляли йодид калия (48,96 мг, 294,91 мкмоль). Реакционную смесь нагревали до 50°C и перемешивали при 50°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (30 мл) и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали полунасыщенным солевым раствором (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-7/3, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX016-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,03 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,86 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,68 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,43-7,35 (m, 2H), 4,31 (s, 2H), 4,27 (t, J=4,6 Гц, 2H), 4,22 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,84 (t, J=4,6 Гц, 2H), 3,50 (s, 3H), 1,20 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез WX016
Промежуточное соединение WX016-1 (350 мг, 1,06 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли акриламид (75,54 мг, 1,06 ммоль, 73,33 мкл) и трет-бутоксид калия (119,25 мг, 1,06 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 3 ч. После завершения реакции добавляли воду (50 мл), а затем добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX016.
MS-ESI m/z: 355,1 [M+H]+. H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,11 (s, 1H), 8,15 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,09 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,89 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,66 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=2,8, 9,2 Гц, 1H), 5,03 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,25 (t, J=4,6 Гц, 2H), 3,74 (t, J=4,4 Гц, 2H), 3,34 (s, 3H), 2,90-2,79 (m, 1H), 2,69-2,54 (m, 2H), 2,42-2,31 (m, 1H).
Пример 17: WX017
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX017-1
Промежуточное соединение WX013-7 (300 мг, 1,11 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (5 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли карбонат калия (611,38 мг, 4,42 ммоль) и соединение 2,2-дифторэтилтрифторметансульфонат (710,37 мг, 3,32 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 12 ч. После завершения реакции добавляли воду (100 мл), а затем добавляли метил-трет-бутиловый эфир (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX017-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,07 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,88 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,71 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,41-7,35 (m, 2H), 6,34-6,03 (m, 1H), 4,39-4,33 (m, 2H), 4,32 (s, 2H), 4,23 (q, J=7,0 Гц, 2H), 1,22 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез WX017
Промежуточное соединение WX017-1 (300 мг, 894,72 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при комнатной температуре, а затем одновременно добавляли акриламид (63,59 мг, 894,72 мкмоль) и трет-бутоксид калия (100,40 мг, 894,72 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (10°C) в течение 3 ч. После завершения реакции добавляли воду (20 мл), а затем добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток дважды разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX017. MS-ESI m/z: 361,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,12 (s, 1H), 8,19 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,10 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,92 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,76 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,44 (dd, J=2,8, 8,8 Гц, 1H), 6,65-6,32 (m, 1H), 5,04 (dd, J=4,8, 11,6 Гц, 1H), 4,49 (dt, J=3,6, 14,6 Гц, 2H), 2,91-2,79 (m, 1H), 2,70-2,53 (m, 2H), 2,43-2,31 (m, 1H).
Пример 18: WX018
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX018-1
Промежуточное соединение WX010-8 (300 мг, 979,38 мкмоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (3 мл) при комнатной температуре, а затем реакционную смесь охлаждали до -70°C и подавали озон (под давлением 15 psi) при -70°C в течение 15 мин. После подогревания реакционной смеси до комнатной температуры (10°C) добавляли дихлорметан (10 мл), а затем реакционную смесь снова охлаждали до -70°C и снова подавали озон (под давлением 15 psi) при -70°C в течение 15 мин. После подачи кислорода в течение 10 минут реакционную смесь подогревали до 10°C и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления большей части дихлорметана. Добавляли гидроперсульфат калия (602,09 мг, 979,38 мкмоль), а затем реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали для сбора маточного раствора, таким образом получая раствор промежуточного соединения WX018-1 в N,N-диметилформамиде.
Стадия 2: синтез WX018
К раствору промежуточного соединения WX018-1 (0,326 M, 3,00 мл) в N,N-диметилформамиде при 0°C в условиях атмосферы азота добавляли растворитель N,N-диметилформамид (5 мл), а затем последовательно добавляли гексафторфосфат 2-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония (484,11 мг, 1,27 ммоль) и триэтиламин (198,21 мг, 1,96 ммоль, 272,64 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 15 минут добавляли циклопропилметиламин (69,65 мг, 979,38 мкмоль). Реакционную смесь оставляли до достижения комнатной температуры (10°C) и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции добавляли воду (20 мл), а затем добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX018. MS-ESI m/z: 378,1 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,16 (s, 1H), 8,81 (t, J=5,6 Гц, 1H), 8,68 (s, 1H), 8,30 (d, J=9,2 Гц, 2H), 8,14 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,01 (d, J=8,8 Гц, 1H), 5,10 (dd, J=4,8, 11,6 Гц, 1H), 3,22 (t, J=6,0 Гц, 2H), 2,89-2,80 (m, 1H), 2,72-2,58 (m, 2H), 2,43-2,30 (m, 1H), 1,14-1,02 (m, 1H), 0,53-0,42 (m, 2H), 0,32-0,22 (m, 2H).
Пример 19: WX019
Стадия 1: синтез WX019
Промежуточное соединение WX013-7 (100 мг, 368,64 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли акриламид (26,20 мг, 368,64 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 442,37 мкл) в тетрагидрофуране. После перемешивания при комнатной температуре (10°C) в течение 2 ч реакционную смесь дополняли раствором трет-бутоксида калия (1 M, 0,2 мл) в тетрагидрофуране, а затем перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь медленно выливали в 0,5 M разбавленную соляную кислоту (20 мл), а затем добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX019. MS-ESI m/z: 297,1 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,14 (s, 1H), 9,90 (s, 1H), 8,07 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,99 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,82 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,40 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,26 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 4,98 (dd, J=4,8, 11,2 Гц, 1H), 2,90-2,77 (m, 1H), 2,66-2,55 (m, 2H), 2,42-2,34 (m, 1H).
Пример 20: WX020
Стадия 1: синтез WX020-1
Промежуточное соединение WX013-7 (500 мг, 1,84 ммоль) растворяли в дихлорметане (20 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли ацетат меди (334,78 мг, 1,84 ммоль), пиридин (291,59 мг, 3,69 ммоль, 297,54 мкл), триэтиламин (373,03 мг, 3,69 ммоль, 513,10 мкл) и 3-метоксифенилбориновую кислоту (560,17 мг, 3,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали на открытом воздухе при 10°C в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (50 мл), а затем добавляли дихлорметан (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX020-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,11 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,85 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,70 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,54 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,46 (dd, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 7,31-7,26 (m, 1H), 6,76-6,70 (m, 1H), 6,69-6,64 (m, 1H), 6,64 (d, J=1,6 Гц, 1H), 4,33 (s, 2H), 4,24 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,81 (s, 3H), 1,23 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез WX020
Промежуточное соединение WX020-1 (310 мг, 821,43 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (15 мл) при 10°C, а затем одновременно добавляли акриламид (58,39 мг, 821,43 мкмоль) и трет-бутоксид калия (92,17 мг, 821,43 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 3 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (40 мл), а затем добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX020. MS-ESI m/z: 403,1 [M+H]+. 1H ЯМР (399 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,12 (s, 1H), 8,28 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,15 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,74 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,49 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 7,32 (t, J=8,2 Гц, 1H), 6,77 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,69 (t, J=2,2 Гц, 1H), 6,62 (dd, J=2,2, 8,2 Гц, 1H), 5,05 (dd, J=5,0, 11,4 Гц, 1H), 3,75 (s, 3H), 2,89-2,79 (m, 1H), 2,69-2,53 (m, 2H), 2,42-2,31 (m, 1H).
Пример 21: WX021
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX021-1
Промежуточное соединение WX013-7 (500 мг, 1,84 ммоль) растворяли в дихлорметане (20 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли ацетат меди (334,20 мг, 1,84 ммоль), пиридин (291,09 мг, 3,68 ммоль, 297,03 мкл), триэтиламин (372,38 мг, 3,68 ммоль, 512,21 мкл) и 4-фторфенилбориновую кислоту (514,91 мг, 3,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивали на открытом воздухе при 10°C в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (50 мл) и дихлорметан (30 мл). Полученную в результате реакционную смесь фильтровали для сбора маточного раствора. После отделения жидкости собирали органическую фазу, а водную фазу подвергали экстракции дихлорметаном (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX021-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,11 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,83 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,70 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,47-7,40 (m, 2H), 7,15-7,03 (m, 4H), 4,32 (s, 2H), 4,24 (q, J=7,0 Гц, 2H), 1,24 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез WX021
Промежуточное соединение WX021-1 (400 мг, 1,09 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при комнатной температуре, а затем одновременно добавляли акриламид (77,82 мг, 1,09 ммоль) и трет-бутоксид калия (122,85 мг, 1,09 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (10°C) в течение 3 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (50 мл), а затем добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX021. MS-ESI m/z: 391,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,13 (s, 1H), 8,28 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,13 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,68 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,48 (dd, J=2,4, 9,2 Гц, 1H), 7,33-7,23 (m, 2H), 7,21-7,14 (m, 2H), 5,04 (dd, J=4,4, 11,6 Гц, 1H), 2,90-2,79 (m, 1H), 2,67-2,56 (m, 2H), 2,42-2,31 (m, 1H).
Пример 22: WX022
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX022-1
Промежуточное соединение WX013-7 (1 г, 3,69 ммоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (30 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли ацетат меди (669,56 мг, 3,69 ммоль), пиридин (583,19 мг, 7,37 ммоль, 595,09 мкл), триэтиламин (746,05 мг, 7,37 ммоль, 1,03 мл) и 3-ацетамидофенилбориновую кислоту (1,32 г, 7,37 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 35°C и перемешивали на открытом воздухе в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь разводили водой (50 мл) и дихлорметаном (30 мл). Полученную в результате реакционную смесь фильтровали для сбора маточного раствора. После отделения жидкости собирали органическую фазу, а водную фазу подвергали экстракции дихлорметаном (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-2/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX022-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,01 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,74 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,58 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,44 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,35 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 7,22-7,15 (m, 3H), 6,73 (d, J=7,2 Гц, 1H), 4,24 (s, 2H), 4,15 (q, J=7,2 Гц, 2H), 2,04 (s, 3H), 1,16 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез WX022
Промежуточное соединение WX022-1 (280 мг, 656,08 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли акриламид (54,13 мг, 761,56 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 721,69 мкл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 4 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли 1 M разбавленную соляную кислоту (1 мл) и воду (5 мл), а затем добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl), полученный в результате этого остаток затем разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; нейтральная система: 10 мМ NH4HCO3) с получением целевого соединения WX022. MS-ESI m/z: 430,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,11 (s, 1H), 10,00 (s, 1H), 8,30 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,16 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,95 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,77 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,50 (dd, J=2,4, 9,2 Гц, 1H), 7,40-7,30 (m, 3H), 6,78 (d, J=8,0 Гц, 1H), 5,06 (dd, J=4,8, 11,6 Гц, 1H), 2,94-2,79 (m, 1H), 2,70-2,59 (m, 2H), 2,44-2,32 (m, 1H), 2,00 (s, 3H).
Пример 23: гидрохлорид WX023
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX023-1
Промежуточное соединение WX013-7 (500 мг, 1,84 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при 15°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли 4-(2-гидроксиэтил)морфолин (265,96 мг, 2,03 ммоль, 248,56 мкл) и трифенилфосфин (628,49 мг, 2,40 ммоль). После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат (484,53 мг, 2,40 ммоль, 465,89 мкл). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 15°C и перемешивали при 15°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/1-0/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX023-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,03 (d, J=9,6 Гц, 1H), 7,86 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,68 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,43-7,32 (m, 2H), 4,31 (s, 2H), 4,26 (t, J=5,8 Гц, 2H), 4,22 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,77 (t, J=8,6 Гц, 4H), 2,90 (t, J=5,8 Гц, 2H), 2,64 (t, J=4,6 Гц, 4H), 1,21 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез WX023
Промежуточное соединение WX023-1 (250 мг, 650,32 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли акриламид (46,22 мг, 650,32 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 455,23 мкл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 2 ч. После завершения реакции для доведения pH до 5-6 к реакционной смеси по каплям добавляли 4 M гидрохлорид этилацетата, а затем реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX023. MS-ESI m/z: 410,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, D2O) δ: 7,76 (t, J=9,4 Гц, 2H), 7,52 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,23 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,72 (d, J=5,6 Гц, 1H), 4,45 (t, J=4,4 Гц, 2H), 4,15 (d, J=11,6 Гц, 2H), 3,91 (t, J=12,0 Гц, 2H), 3,72 (t, J=4,4 Гц, 2H), 3,70-3,61 (m, 2H), 3,37 (t, J=10,0 Гц, 2H), 2,90-2,63 (m, 2H), 2,57-2,35 (m, 2H).
Пример 24: гидрохлорид WX024
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX024-1
Промежуточное соединение WX013-7 (500 мг, 1,84 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при 15°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли 1-(2-гидроксиэтил)-4-метилпиперазин (291,89 мг, 2,02 ммоль) и трифенилфосфин (627,40 мг, 2,39 ммоль). После охлаждения реакционной смеси до 0-5°C по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат (483,69 мг, 2,39 ммоль, 465,08 мкл). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до 15°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/1-0/1 и метанол/дихлорметан=0/1-1/9, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX024-1.
Стадия 2: синтез WX024
Промежуточное соединение WX024-1 (330 мг, 830,26 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли акриламид (59,01 мг, 830,26 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 747,23 мкл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 1 ч. После завершения реакции для доведения pH до 5-6 к реакционной смеси по каплям добавляли 4 M гидрохлорид этилацетата, а затем реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX024. MS-ESI m/z: 423,2 [M+H]+ , 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4 ) δ: 8,17 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,04 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,77 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,64 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,49 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 4,93 (dd, J=5,0, 10,2 Гц, 1H), 4,61 (t, J=4,6 Гц, 2H), 3,83 (t, J=4,6 Гц, 2H), 3,82-3,55 (m, 8H), 3,05 (s, 3H), 2,93-2,74 (m, 2H), 2,72-2,60 (m, 1H), 2,58-2,44 (m, 1H).
Пример 25: гидрохлорид WX025
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX025-1
Промежуточное соединение WX013-7 (500 мг, 1,84 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при 15°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли 1-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]этанон (348,58 мг, 2,02 ммоль) и трифенилфосфин (627,40 мг, 2,39 ммоль). После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат (483,69 мг, 2,39 ммоль, 465,08 мкл). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до 15°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/1-0/1, дихлорметан/метанол=1/0-9/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX025-1.
Стадия 2: синтез WX025
Промежуточное соединение WX025-1 (400 мг, 940,12 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (15 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли акриламид (66,82 мг, 940,12 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 752,10 мкл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 2 ч. После завершения реакции для доведения pH до 5-6 к реакционной смеси по каплям добавляли 4 M гидрохлорид этилацетата, а затем реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX025. MS-ESI m/z: 451,2 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,45 (s, 1H), 11,13 (s, 1H), 8,19 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,13 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,74 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,44 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,8, 11,2 Гц, 1H), 4,60 (t, J=4,4 Гц, 2H), 4,44 (d, J=11,6 Гц, 1H), 4,02 (d, J=13,6 Гц, 1H), 3,70-3,55 (m, 5H), 3,28-3,00 (m, 3H), 2,92-2,78 (m, 1H), 2,73-2,54 (m, 2H), 2,43-2,30 (m, 1H), 2,05 (s, 3H).
Пример 26: WX026
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX026-1
Промежуточное соединение WX013-7 (500 мг, 1,84 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при 15°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли N-гидроксиэтилпиперидин (261,50 мг, 2,02 ммоль) и трифенилфосфин (627,40 мг, 2,39 ммоль). После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат (483,69 мг, 2,39 ммоль, 465,08 мкл). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до 15°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/1-0/1, объемное соотношение), полученный в результате этого остаток затем разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением промежуточного соединения WX026-1. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4 ) δ: 8,18-8,11 (m, 1H), 8,05-7,99 (m, 1H), 7,79-7,71 (m, 1H), 7,63-7,57 (m, 1H), 7,49-7,42 (m, 1H), 4,55 (t, J=5,0 Гц, 2H), 4,42-4,36 (m, 2H), 4,21 (q, J=7,4 Гц, 2H), 3,72-3,64 (m, 4H), 3,13 (t, J=11,4 Гц, 2H), 2,06-1,95 (m, 2H), 1,93-1,78 (m, 3H), 1,67-1,49 (m, 1H), 1,21 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез WX026
Промежуточное соединение WX026-1 (150 мг, 358,07 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли акриламид (25,45 мг, 358,07 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 429,68 мкл) в тетрагидрофуране. После перемешивания реакционной смеси при 15°C в течение 1 ч добавляли раствор трет-бутоксида калия (1 M, 300 мкл) в тетрагидрофуране. Полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 2 ч. После завершения реакции для доведения pH до 5-6 к реакционной смеси по каплям добавляли 4 M гидрохлорид этилацетата, а затем реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl), полученный в результате этого остаток затем разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; нейтральная система: 10 мМ NH4HCO3). У полученной в результате фракции pH доводили до 5-6 с помощью 6 M соляной кислоты и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая целевое соединение WX026. MS-ESI m/z: 408,2 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4 ) δ: 8,18 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,05 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,82-7,70 (m, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,46 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 4,94 (dd, J=5,2, 10,4 Гц, 1H), 4,56 (t, J=5,0 Гц, 2H), 3,75-3,60 (m, 4H), 3,14 (t, J=11,4 Гц, 2H), 2,95-2,73 (m, 2H), 2,72-2,60 (m, 1H), 2,57-2,44 (m, 1H), 2,09-1,76 (m, 5H), 1,69-1,47 (m, 1H).
Пример 27: гидрохлорид WX027
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX027-1
Промежуточное соединение WX013-7 (0,5 г, 1,84 ммоль), N-гидроксиэтилпирролидин (233,52 мг, 2,03 ммоль) и трифенилфосфин (628,49 мг, 2,40 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (15 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат (484,53 мг, 2,40 ммоль, 465,89 мкл). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до 20°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в воду (40 мл) и добавляли этилацетат (40 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (40 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-0/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX027-1.
Стадия 2: синтез WX027
Промежуточное соединение WX027-1 (0,2 г, 542,85 мкмоль) и акриламид (38,58 мг, 542,85 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (6 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли раствор трет-бутоксида калия в тетрагидрофуране (1 M, 434,28 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. После завершения реакции pH реакционной смеси доводили до 5-6 с помощью гидрохлорида этилацетата (4 M), а затем концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX027. MS-ESI m/z: 394,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4 ) δ: 8,16 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,02 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,74 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,60 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,46 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 4,93 (dd, J=5,0, 10,2 Гц, 1H), 4,50 (t, J=4,8 Гц, 2H), 3,83-3,70 (m, 4H), 3,29-3,24 (m, 2H), 2,90-2,73 (m, 2H), 2,70-2,60 (m, 1H), 2,53-2,45 (m, 1H), 2,27-2,15 (m, 2H), 2,14-2,02 (m, 2H).
Пример 28: гидрохлорид WX028
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX028-2
Промежуточное соединение WX028-1 (4 г, 21,48 ммоль) растворяли в ацетонитриле (50 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли карбонат калия (4,45 г, 32,21 ммоль) и 2-бромэтанол (3,22 г, 25,77 ммоль, 1,83 мл). Реакционную смесь нагревали до 50°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали для сбора маточного раствора, который концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/1-0/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX028-2. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 3,63 (t, J=5,2 Гц, 2H), 3,45 (t, J=5,0 Гц, 4H), 2,67 (s, 1H), 2,56 (t, J=5,4 Гц, 2H), 2,46 (t, J=5,0 Гц, 4H), 1,47 (s, 9H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX028-3
Промежуточное соединение WX013-7 (1 г, 3,69 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (30 мл) при 15°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли промежуточное соединение WX028-2 (933,89 мг, 4,06 ммоль) и трифенилфосфин (1,26 г, 4,79 ммоль). После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат (969,05 мг, 4,79 ммоль, 931,78 мкл). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до 15°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (50 мл) и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (100 мл × 5) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/1-1/4, объемное соотношение), полученный в результате этого остаток затем разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: вода/ацетонитрил; нейтральная система: 10 мМ бикарбонат аммония) с получением промежуточного соединения WX028-3. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,99 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,85 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,65 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,37-7,29 (m, 2H), 4,35-4,25 (m, 4H), 4,23-4,15 (m, 2H), 3,49 (s, 4H), 3,23 (s, 2H), 2,95 (s, 1H), 2,63 (s, 3H), 1,43 (s, 9H), 1,22-1,11 (m, 3H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX028-4
Промежуточное соединение WX028-3 (900 мг, 1,73 ммоль, гидрохлорид) растворяли в тетрагидрофуране (20 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли акриламид (122,96 мг, 1,73 ммоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 1,73 мл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 3 ч. После завершения реакции pH реакционной смеси доводили до 6-7 с помощью гидрохлорида этилацетата (4 M), а затем концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением гидрохлорида промежуточного соединения WX028-4. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4 ) δ: 8,16 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,02 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,75 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,61 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,46 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 4,92 (dd, J=5,2, 10,0 Гц, 1H), 4,57 (t, J=4,8 Гц, 2H), 4,24 (s, 2H), 3,75 (t, J=4,8 Гц, 3H), 3,72-3,60 (m, 2H), 3,30-3,18 (m, 3H), 2,95-2,73 (m, 2H), 2,71-2,59 (m, 1H), 2,57-2,45 (m, 1H), 1,49 (s, 9H).
Стадия 4: синтез WX028
Промежуточное соединение WX028-4 (650 мг, 1,19 ммоль, гидрохлорид) растворяли в соляной кислоте/этилацетате (4 M, 20 мл) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 3 ч, и в осадок выпадало белое твердое вещество. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали для сбора твердого вещества, которое концентрировали в условиях пониженного давления с получением гидрохлорида целевого соединения WX028. MS-ESI m/z: 409,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 9,62 (s, 2H), 8,18 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,13 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,92 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,73 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,45 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,03 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,56 (s, 2H), 3,64 (s, 2H), 3,47 (s, 8H),2,90-2,79 (m, 1H), 2,70-2,55 (m, 2H), 2,41-2,34 (m, 1H).
Пример 29: WX029
Стадия 1: синтез WX029
Соединение WX028 (150 мг, 337,15 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли метансульфонилхлорид (38,62 мг, 337,15 мкмоль, 26,09 мкл) и триэтиламин (170,58 мг, 1,69 ммоль, 234,63 мкл). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 24 ч. После завершения реакции pH реакционной смеси доводили до 6-7 с помощью гидрохлорида этилацетата (4 M), а затем концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; нейтральная система: 10 мМ NH4HCO3) с получением целевого соединения WX029. MS-ESI m/z: 487,1 [M+H]+ , 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 8,14 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,09 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,89 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,68 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,37 (dd, J=2,4, 9,2 Гц, 1H), 5,02 (dd, J=4,8, 11,2 Гц, 1H), 4,25 (t, J=5,6 Гц, 2H), 3,13 (t, J=4,8 H, 4H), 2,87 (s, 3H), 2,83 (t, J=6,0 H, 3H), 2,63 (t, J=4,6 H, 4H), 2,60-2,52 (m, 2H), 2,42-2,31 (m, 1H).
Пример 30: WX030
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX030-1
Промежуточное соединение WX013-7 (5 г, 18,43 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (80 мл) при 15°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли N-трет-бутоксикарбонил-N-метиламиноэтанол (3,88 г, 22,12 ммоль, 268,76 мкл) и трифенилфосфин (6,28 г, 23,96 ммоль). После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат (4,85 г, 23,96 ммоль, 4,66 мл). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до 15°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX030-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,03 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,86 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,68 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,39-7,30 (m, 2H), 4,31 (s, 2H), 4,28-4,18 (m, 4H), 3,67 (t, J=5,2 Гц, 2H), 3,03 (s, 3H), 1,48 (s, 9H), 1,21 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX030-2
Промежуточное соединение WX030-1 (6,6 г, 15,40 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (150 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли акриламид (1,09 г, 15,40 ммоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 13,86 мл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 1 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (100 мл). Для доведения pH до 6-7 добавляли 1 M разбавленную соляную кислоту и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=4/1-1/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX030-2. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,36 (s, 1H), 7,94 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,88 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,69 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,33 (dd, J=2,8, 8,8 Гц, 1H), 4,74-4,67 (m, 1H), 4,24 (s, 2H), 3,69 (t, J=5,2 Гц, 2H), 3,03 (s, 3H), 2,95-2,85 (m, 1H), 2,81-2,64 (m, 2H), 2,61-2,50 (m, 1H), 1,48 (s, 9H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX031
Промежуточное соединение WX030-2 (4,1 г, 9,04 ммоль) растворяли в соляной кислоте/этилацетате (4 M, 40 мл) при 15°C и реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно фильтровали для сбора твердого вещества, которое концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX031.
Стадия 4: синтез WX030
Промежуточное соединение WX031 (100 мг, 256,52 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (21,04 мг, 256,52 мкмоль) и 1-ацетил-4-пиперидон (36,21 мг, 256,52 мкмоль, 31,49 мкл). После перемешивания реакционной смеси в течение 30 минут при 10°C добавляли триацетоксиборогидрид натрия (108,73 мг, 513,04 мкмоль). После перемешивания в течение 5 ч при 10°C реакционную смесь дополняли уксуснокислым натрием (25 мг, 304,80 мкмоль), а затем реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX030. MS-ESI m/z: 479,2 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 8,19 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,13 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,94 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,73 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,43 (dd, J=2,0, 8,8 Гц, 1H), 5,03 (dd, J=4,4, 11,6 Гц, 1H), 4,55 (s, 3H), 4,05-3,91 (m, 1H), 3,78-3,68 (m, 1H), 3,65-3,51 (m, 3H), 3,13-3,00 (m, 1H), 2,91-2,79 (m, 4H), 2,65-2,55 (m, 2H), 2,41-2,34 (m, 1H), 2,17-2,04 (m, 2H), 2,02 (s, 3H), 1,75-1,45 (m, 2H).
Пример 31: гидрохлорид WX031
Стадия 1: синтез WX031
Промежуточное соединение WX031 (90 мг, 254,69 мкмоль, гидрохлорид) разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX031. MS-ESI m/z: 354,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 M Гц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 9,14 (s, 2H), 8,20 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,14 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,92 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,72 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,42 (dd, J=2,8, 9,2 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,43 (t, J=5,0 Гц, 2H), 3,45-3,38 (m, 2H), 2,91-2,77 (m, 1H), 2,70-2,55 (m, 5H), 2,43-2,28 (m, 1H).
Пример 32: гидрохлорид WX032
Стадия 1: синтез WX032
Промежуточное соединение WX031 (120 мг, 339,59 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксусную кислоту (20,39 мг, 339,59 мкмоль, 19,42 мкл) и циклогексанон (33,33 мг, 339,59 мкмоль, 35,19 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (143,94 мг, 679,17 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX032. MS-ESI m/z: 436,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,12 (s, 1H), 10,85 (s, 1H), 8,19 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,13 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,92 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,74 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,41 (dd, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,67-4,52 (m, 2H), 3,71-3,61 (m, 1H), 3,55-3,44 (m, 1H), 3,35-3,25 (m, 1H), 2,91-2,80 (m, 1H), 2,79 (d, J=4,8 Гц, 3H), 2,70-2,55 (m, 2H), 2,42-2,31 (m, 1H), 2,20-2,05 (m, 2H), 1,87-1,76 (m, 2H), 1,62 (d, J=12,4 Гц, 1H), 1,54-1,39 (m, 2H), 1,37-1,22 (m, 2H), 1,20-1,04 (m, 1H).
Пример 33: гидрохлорид WX033
Стадия 1: синтез WX033
Промежуточное соединение WX031 (100 мг, 282,99 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (5 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксусную кислоту (16,99 мг, 282,99 мкмоль, 16,18 мкл) и тетрагидропиранон (28,33 мг, 282,99 мкмоль, 25,99 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (119,95 мг, 565,98 мкмоль). Полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX033. MS-ESI m/z: 438,1 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 11,04 (s, 1H), 8,19 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,13 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,92 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,74 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,42 (dd, J=2,8, 9,2 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,8, 11,2 Гц, 1H), 4,67-4,53 (m, 2H), 4,03-3,92 (m, 2H), 3,75-3,65 (m, 1H), 3,58-3,47 (m, 2H), 3,34 (td, J=1,6, 12,0 Гц, 2H), 2,92-2,83 (m, 1H), 2,84 (d, J=5,6 Гц, 3H), 2,69-2,55 (m, 2H), 2,43-2,30 (m, 1H), 2,13-1,97 (m, 2H), 1,84-1,69 (m, 2H).
Пример 34: гидрохлорид WX034
Стадия 1: синтез WX034
Промежуточное соединение WX031 (200 мг, 565,98 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксусную кислоту (33,99 мг, 565,98 мкмоль, 32,37 мкл) и N-метил-4-пиперидон (64,04 мг, 565,98 мкмоль, 65,82 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (239,91 мг, 1,13 ммоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX034. MS-ESI m/z: 451,2 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,49 (s, 1H), 11,13 (s, 1H), 11,05 (s, 1H), 8,18 (d, J=8,0 Гц, 1H), 8,13 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,92 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,44 (d, J=8,4 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=2,8, 9,6 Гц, 1H), 4,61 (s, 2H), 3,76-3,52 (m, 6H), 3,15-2,97 (m, 2H), 2,92-2,80 (m, 4H), 2,77-2,61 (m, 4H), 2,44-2,30 (m, 2H), 2,26-2,12 (m, 2H).
Пример 35: WX035
Стадия 1: синтез WX035
Промежуточное соединение WX031 (1 г, 2,57 ммоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (40 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (464,29 мг, 5,66 ммоль) и N-трет-бутоксикарбонил-4-пиперидон (620,23 мг, 3,11 ммоль, 65,82 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (1,2 г, 5,66 ммоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (50 мл) и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl), полученный в результате этого остаток затем разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; нейтральная система: 10 мМ NH4HCO3) с получением целевого соединения WX035. MS-ESI m/z: 537,3 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 8,14 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,10 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,88 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,66 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,35 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,02 (dd, J=4,8, 11,2 Гц, 1H), 4,18 (t, J=5,8 Гц, 2H), 3,97 (d, J=11,2 Гц, 2H), 2,92-2,79 (m, 3H), 2,76-2,54 (m, 5H), 2,42-2,33 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 1,71 (d, J=12,0 Гц, 2H), 1,38 (s, 9H), 1,34-1,20 (m, 2H).
Пример 36: гидрохлорид WX036
Стадия 1: синтез WX036
Промежуточное соединение WX035 (0,9 г, 1,68 ммоль) растворяли в соляной кислоте/этилацетате (4 M, 10 мл) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно фильтровали для сбора твердого вещества, которое концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX036. MS-ESI m/z: 437,2 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,38 (s, 1H), 11,13 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 9,13 (s, 1H), 8,19 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,13 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,74 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,44 (dd, J=2,0, 9,2 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,68-4,52 (m, 2H), 3,72-3,52 (m, 3H), 3,49-3,40 (m, 3H), 3,02-2,76 (m, 6H), 2,71-2,54 (m, 2H), 2,41-2,19 (m, 2H), 2,11-1,94 (m, 2H).
Пример 37: гидрохлорид WX037
Стадия 1: синтез WX037
Промежуточное соединение WX031 (150 мг, 384,78 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (5 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (63,13 мг, 769,56 мкмоль) и 1-N-метансульфонил-4-пиперидон (68,19 мг, 384,78 мкмоль). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (163,10 мг, 769,56 мкмоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Весь остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX037. MS-ESI m/z: 515,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,14 (s, 1H), 10,97 (s, 1H), 8,19 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,13 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,74 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,44 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,64-4,52 (m, 2H), 3,77-3,67 (m, 3H), 3,61-3,52 (m, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,88-2,74 (m, 6H), 2,71-2,55 (m, 2H), 2,43-2,31 (m, 1H), 2,30-2,14 (m, 2H), 1,87-1,71 (m, 2H).
Пример 38: гидрохлорид WX038
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX038-1
Промежуточное соединение WX013-7 (5 г, 18,43 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (80 мл) при 15°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли N-трет-бутоксикарбонилэтаноламин (3,86 г, 23,96 ммоль, 3,71 мл) и трифенилфосфин (6,28 г, 23,96 ммоль). После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат (4,85 г, 23,96 ммоль, 4,66 мл). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до 15°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX038-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,02 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,84 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,66 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,35-7,30 (m, 2H), 6,48 (s, 1H), 4,30 (s, 2H), 4,21 (q, J=7,4 Гц, 2H), 4,16 (t, J=5,0 Гц, 2H), 3,60 (q, J=5,0 Гц, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,20 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX038-2
Промежуточное соединение WX038-1 (5 г, 12,06 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли акриламид (857,49 мг, 12,06 ммоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 12,06 мл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 1 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (200 мл). Для доведения pH до 6-7 добавляли 1 M разбавленной соляной кислотой и для экстракции добавляли этилацетат (100 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=4/1-1/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX038-2. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,12 (s, 1H), 8,16 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,10 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,89 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,65 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,35 (dd, J=2,4, 9,2 Гц, 1H), 7,08 (t, J=5,4 Гц, 1H), 5,02 (dd, J=4,8, 11,2 Гц, 1H), 4,12 (t, J=5,6 Гц, 2H), 3,37 (q, J=5,6 Гц, 2H), 2,92-2,77 (m, 1H), 2,70-2,54 (m, 2H), 2,44-2,30 (m, 1H), 1,39 (s, 9H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX038-3
Промежуточное соединение WX038-2 (3,1 г, 7,05 ммоль) растворяли в соляной кислоте/этилацетате (4 M, 78,73 мл) при 15°C и реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 12 ч с получением желтоватого твердого вещества. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно фильтровали для сбора твердого вещества, которое концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX038-3. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,12 (s, 1H), 8,29 (s, 2H), 8,20 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,14 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,92 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,71 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,41 (dd, J=2,4, 9,2 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,8, 11,2 Гц, 1H), 4,36 (t, J=5,0 Гц, 2H), 3,30 (s, 2H), 2,91-2,79 (m, 1H), 2,70-2,54 (m, 2H), 2,43-2,34 (m, 1H).
Стадия 4: синтез WX038
Промежуточное соединение WX038-3 (100 мг, 266,10 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (5 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (43,66 мг, 532,19 мкмоль) и циклогексанон (26,12 мг, 266,10 мкмоль, 27,58 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (112,79 мг, 532,19 мкмоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX038. MS-ESI m/z: 422,1 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 8,96 (s, 2H), 8,20 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,14 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,72 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,42 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,03 (dd, J=4,8, 11,2 Гц, 1H), 4,44 (t, J=5,2 Гц, 2H), 3,51-3,39 (m, 2H), 3,17-3,05 (m, 1H), 2,93-2,79 (m, 1H), 2,70-2,55 (m, 2H), 2,44-2,33 (m, 1H), 2,10 (d, J=10,4 Гц, 2H), 1,79 (d, J=13,2 Гц, 2H), 1,62 (d, J=12,0 Гц, 1H), 1,44-1,09 (m, 5H).
Пример 39: гидрохлорид WX039
Стадия 1: синтез WX039
Промежуточное соединение WX038-3 (150 мг, 399,14 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (5 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (65,48 мг, 798,29 мкмоль) и тетрагидропиранон (39,96 мг, 399,14 мкмоль, 36,66 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (169,19 мг, 798,29 мкмоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX039. MS-ESI m/z: 424,2 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,12 (s, 1H), 9,03 (s, 2H), 8,21 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,15 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,73 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,43 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,03 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,43 (t, J=4,8 Гц, 2H), 3,94 (dd, J=4,0, 10,8 Гц, 2H), 3,53-3,35 (m, 5H), 2,92-2,78 (m, 1H), 2,65-2,55 (m, 2H), 2,43-2,34 (m, 1H), 2,06-1,96 (m, 2H), 1,70-1,56 (m, 2H).
Пример 40: гидрохлорид WX040
Стадия 1: синтез WX040
Промежуточное соединение WX038-3 (150 мг, 399,14 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (5 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (65,48 мг, 798,28 мкмоль) и N-метил-4-пиперидон (45,17 мг, 399,14 мкмоль, 46,42 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (169,19 мг, 798,28 мкмоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (30 мл) и добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX040. MS-ESI m/z: 437,2 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 10,81 (s, 1H), 9,71 (s, 2H), 8,19 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,14 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,92 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,43 (d, J=8,0 Гц, 1H), 5,03 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,58-4,48 (m, 2H), 3,62-3,42 (m, 2H), 3,10-2,93 (m, 2H), 2,92-2,54 (m, 8H), 2,42-2,16 (m, 4H), 2,14-1,97 (m, 2H).
Пример 41: гидрохлорид WX041
Стадия 1: синтез WX041
Промежуточное соединение WX038-3 (150 мг, 399,14 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (5 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (65,48 мг, 798,29 мкмоль) и 1-ацетил-4-пиперидон (56,35 мг, 399,14 мкмоль, 49,00 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (169,19 мг, 798,29 мкмоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (30 мл) и добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX041. MS-ESI m/z: 465,2 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,12 (s, 1H), 9,27 (s, 2H), 8,20 (J=8,8 Гц, 1H), 8,14 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,73 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,43 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,03 (dd, J=4,4, 11,2 Гц, 1H), 4,46 (t, J=4,8 Гц, 3H), 3,92 (d, J=13,2 Гц, 1H), 3,52-3,43 (m, 3H), 3,06 (t, J=12,4 Гц, 1H), 2,91-2,78 (m, 1H), 2,69-2,55 (m, 3H), 2,42-2,34 (m, 1H), 2,19-2,05 (m, 2H), 2,02 (s, 3H), 1,66-1,36 (m, 2H).
Пример 42: гидрохлорид WX042
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX042-1
Промежуточное соединение WX038-3 (300 мг, 798,29 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (20 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (130,97 мг, 1,60 ммоль) и N-трет-бутоксикарбонил-4-пиперидон (159,06 мг, 798,29 мкмоль, 46,42 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (338,38 мг, 1,60 ммоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (30 мл) для разбавления и добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением промежуточного соединения WX042-1. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,12 (s, 1H), 8,99 (s, 2H), 8,20 (d, J=9,6 Гц, 1H), 8,14 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,72 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,42 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,03 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,43 (t, J=4,2 Гц, 2H), 4,02 (d, J=11,6 Гц, 2H), 3,52-3,40 (m, 2H), 2,93-2,73 (m, 3H), 2,67-2,55 (m, 3H), 2,44-2,35 (m, 1H), 2,07 (d, J=11,2 Гц, 2H), 1,55-1,44 (m, 2H), 1,41 (s, 9H).
Стадия 2: синтез WX042
Промежуточное соединение WX042-1 (200 мг, 357,75 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в соляной кислоте/этилацетате (4 M, 10 мл) при 15°C и реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 12 ч, и в осадок выпадало твердое вещество. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали для сбора твердого вещества, которое концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX042. MS-ESI m/z: 423,2 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 9,77 (s, 2H), 9,33 (s, 1H), 9,08 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,20 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,14 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,92 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,73 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,44 (dd, J=2,4, 9,2 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,8, 11,2 Гц, 1H), 4,49 (t, J=4,2 Гц, 2H), 3,51-3,36 (m, 6H), 3,03-2,80 (m, 3H), 2,74-2,54 (m, 2H), 2,43-2,21 (m, 2H), 2,02-1,85 (m, 2H).
Пример 43: гидрохлорид WX043
Стадия 1: синтез WX043
Промежуточное соединение WX038-3 (150 мг, 399,14 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (5 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (65,48 мг, 798,29 мкмоль) и 1-N-метансульфонил-4-пиперидон (70,74 мг, 399,14 мкмоль). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (169,19 мг, 798,28 мкмоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) для получения гидрохлорида целевого соединения WX043. MS-ESI m/z: 501,1 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 9,38 (s, 2H), 8,21 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,15 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,73 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,44 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,47 (t, J=8,4 Гц, 2H), 3,67 (d, J=12,0 Гц, 2H), 3,53-3,41 (m, 2H), 2,91 (s, 3H), 2,89-2,75 (m, 3H), 2,71-2,54 (m, 3H), 2,44-2,31 (m, 1H), 2,26-2,15 (m, 2H), 1,79-1,64 (m, 2H).
Пример 44: WX044
Стадия 1: синтез WX044
Промежуточное соединение WX038-3 (200 мг, 532,19 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли триэтиламин (269,26 мг, 2,66 ммоль, 370,37 мкл) и ацетилхлорид (54,31 мг, 691,85 мкмоль, 49,37 мкл). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 12 ч. После завершения реакции для доведения pH до 6-7 к реакционной смеси по каплям медленно добавляли 4 M гидрохлорид этилацетата, а затем реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX044. MS-ESI m/z: 382,1 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,12 (s, 1H), 8,17 (d, J=3,2 Гц, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,10 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,89 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,67 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,37 (dd, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 5,02 (dd, J=4,6, 11,0 Гц, 1H), 4,14 (t, J=5,4 Гц, 2H), 3,49 (q, J=5,8 Гц, 2H), 2,91-2,78 (m, 1H), 2,69-2,54 (m, 2H), 2,42-2,30 (m, 1H), 1,85 (s, 3H).
Пример 45: WX045
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX045-1
Промежуточное соединение WX013-7 (2 г, 7,37 ммоль), бромэтанол (1,01 г, 8,11 ммоль, 575,84 мкл) и трифенилфосфин (2,51 г, 9,58 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (60 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат (1,94 г, 9,58 ммоль, 1,86 мл). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в воду (40 мл) и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (80 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-10/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX045-1.
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX045-2
Промежуточное соединение WX045-1 (1 г, 2,64 ммоль) и акриламид (187,93 мг, 2,64 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (30 мл) при комнатной температуре, а затем по каплям добавляли раствор трет-бутоксида калия в тетрагидрофуране (1 M, 2,64 мл). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (70 мл) и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (80 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-3/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX045-2.
Стадия 3: синтез WX045
Промежуточное соединение WX045-2 (0,3 г, 744,00 мкмоль) и 2-окса-6-аза-спиро[3,3]гептан (73,75 мг, 744,00 мкмоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (3 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли йодид калия (123,51 мг, 744,00 мкмоль) и триэтиламин (75,29 мг, 744,00 мкмоль, 103,56 мкл). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 12 ч. После завершения реакции pH реакционной смеси доводили до 6-7 с помощью гидрохлорида этилацетата (4 M), а затем концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX045. MS-ESI m/z: 458,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4 ) δ: 8,18 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,04 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,78 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,61 (t, J=2,4 Гц, 1H), 7,49-7,40 (m, 1H), 4,94 (dd, J=5,2, 10,4 Гц, 1H), 4,47-4,43 (m, 2H), 4,36-4,26 (m, 4H), 3,90 (s, 1H), 3,86 (s, 1H), 3,83-3,77 (m, 3H), 3,66 (s, 1H), 2,91-2,75 (m, 2H), 2,72-2,63 (m, 1H), 2,54-2,48 (m, 1H).
Пример 46: WX046
Стадия 1: синтез WX046
Промежуточное соединение WX045-2 (0,1 г, 248,00 мкмоль) и 3-азабицикло[3.1.0]гексан (29,66 мг, 248,00 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в N,N-диметилформамиде (1 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли йодид калия (41,17 мг, 248,00 мкмоль) и N,N-диизопропилэтиламин (32,05 мг, 248,00 мкмоль, 43,20 мкл). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 24 ч. После завершения реакции pH реакционной смеси доводили до 6-7 с помощью гидрохлорида этилацетата (4 M), а затем концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX046. MS-ESI m/z: 406,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4 ) δ: 8,19 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,05 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,78 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,62 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,46 (dd, J=2,8, 9,2 Гц, 1H), 4,94 (dd, J=5,0, 10,2 Гц, 1H), 4,50 (t, J=4,8 Гц, 2H), 3,83 (d, J=11,6 Гц, 2H), 3,75 (t, J=5,0 Гц, 2H), 3,58 (d, J=11,2 Гц, 2H), 2,92-2,75 (m, 2H), 2,73-2,63 (m, 1H), 2,55-2,48 (m, 1H), 1,92 (t, J=4,0 Гц, 2H), 0,92-0,86 (m, 1H), 0,77-0,73 (m, 1H).
Пример 47: WX047
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX047-1
Промежуточное соединение WX013-7 (1 г, 2,99 ммоль), п-метоксибензилмеркаптан (461,54 мг, 2,99 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (773,51 мг, 5,99 ммоль, 1,04 мл) растворяли в 1,4-диоксане (30 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли 4,5-бис-дифенилфосфино-9,9-диметилксантен (173,15 мг, 299,25 мкмоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий (137,02 мг, 149,63 мкмоль). Реакционную смесь подогревали до 120°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем выливали в воду (80 мл) и добавляли этилацетат (80 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (100 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-9/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX047-1.
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX047-2
Промежуточное соединение WX047-1 (0,74 г, 1,82 ммоль) и акриламид (129,08 мг, 1,82 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (22 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли трет-бутоксид калия (203,78 мг, 1,82 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в воду (60 мл) и добавляли 2 н. разбавленную соляную кислоту для доведения pH до 6-7, а также добавляли 2-метилтетрагидрофуран (60 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (80 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/2-метилтетрагидрофуран=1/0-3/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX047-2. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ: 11,13 (s, 1H), 8,13-8,10 (m, 2H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,65 (dd, J=1,8, 8,6 Гц, 1H), 7,32 (d, J=8,4 Гц, 2H), 6,89-6,83 (m, 3H), 5,03 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,33 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 2,88-2,79 (m, 1H), 2,66-2,54 (m, 2H), 2,37-2,32 (m, 1H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX047-3
Промежуточное соединение WX047-2 (0,4 г, 924,88 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (8 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли N-хлорсукцинимид (370,50 мг, 2,77 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX047-3.
Стадия 4: синтез WX047
Промежуточное соединение WX047-3 (0,15 г, 396,00 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (4 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли N,N-диизопропилэтиламин (102,36 мг, 792,00 мкмоль, 137,95 мкл) и раствор метиламина (2 M, 198,00 мкл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь разводили водой (10 мл) и pH доводили до 5-6 с помощью 2 н. разбавленной соляной кислоты, а также добавляли этилацетат (10 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX047. MS-ESI m/z: 374,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4 ) δ: 8,62 (d, J=1,6 Гц, 1H), 8,45 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,29 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,09 (dd, J=1,6, 8,8 Гц, 1H), 7,96 (d, J=9,2 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=5,2, 10,8 Гц, 1H), 2,94-2,86 (m, 1H), 2,85-2,78 (m, 1H), 2,77-2,69 (m, 1H), 2,58 (s, 3H), 2,56-2,50 (m, 1H).
Пример 48: WX048
Стадия 1: синтез WX048
Промежуточное соединение WX047-3 (0,15 г, 396,00 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (4 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли N,N-диизопропилэтиламин (102,36 мг, 792,00 мкмоль, 137,95 мкл) и раствор диметиламина в тетрагидрофуране (2 M, 198,00 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь разводили водой (10 мл) и pH доводили до 5-6 с помощью 2 н. разбавленной соляной кислоты, а также добавляли этилацетат (10 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX048. MS-ESI m/z: 388,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4 ) δ: 8,59 (d, J=1,6 Гц, 1H), 8,46 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,32 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,03 (dd, J=1,8, 8,6 Гц, 1H), 7,96 (d, J=9,2 Гц, 1H), 5,03 (dd, J=4,8, 10,8 Гц, 1H), 2,90-2,83 (m, 2H), 2,76 (s, 6H), 2,74-2,71 (m, 1H), 2,57-2,51 (m, 1H).
Пример 49 и пример 50: гидрохлорид WX049 и гидрохлорид WX050
Стадия 1: синтез WX049 и WX050
Соединение WX015 (200 мг, 495,22 мкмоль, гидрохлорид) разделяли с помощью сверхкритической жидкостной хроматографи (условия разделения: колонка: DAICEL CHIRALCEL OJ (250 мм * 30 мм, 10 мкм); подвижная фаза: [0,1% NH3H2O IPA]; B%: 35%-35%, 6 минут) и собирали образец со временем удерживания 3,04 мин с получением гидрохлорида целевого соединения WX049 (ee%: 96,3%), а также собирали образец со временем удерживания 2,65 мин с получением гидрохлорида целевого соединения WX050 (ee%: 99,04%). Целевое соединение WX049: MS-ESI m/z: 368,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 10,64 (s, 1H), 8,19 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,12 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,92 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,73 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,43 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,8, 11,2 Гц, 1H), 4,53 (t, J=4,8 Гц, 2H), 3,58 (s, 2H), 2,87 (s, 6H), 2,85-2,79 (m, 1H), 2,71-2,54 (m, 2H), 2,44-2,30 (m, 1H). Целевое соединение WX050: MS-ESI m/z: 368,1 [M+H]+ , 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 10,61 (s, 1H), 8,19 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,12 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,92 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,73 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,43 (dd, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,4, 11,2 Гц, 1H), 4,53 (t, J=4,8 Гц, 2H), 3,59 (s, 2H), 2,87 (s, 6H), 2,85-2,79 (m, 1H), 2,71-2,55 (m, 2H), 2,43-2,31 (m, 1H).
Пример 51: WX051
Стадия 1: синтез WX051
Промежуточное соединение WX010-6 (200 мг, 624,73 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при 12°C, а затем одновременно добавляли акриламид (44,40 мг, 624,73 мкмоль) и трет-бутоксид калия (70,10 мг, 624,73 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 12°C в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в 0,5 M разбавленную соляную кислоту (20 мл), а затем добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX051. MS-ESI m/z: 359,0 [M+H]+ , 361,0 [M+H+2]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,13 (s, 1H), 8,47 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,22 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,21 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,01 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,85 (dd, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 5,07 (dd, J=4,6, 11,8 Гц, 1H), 2,90-2,78 (m, 1H), 2,74-2,59 (m, 2H), 2,43-2,34 (m, 1H).
Пример 52: WX052
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX052-1
Промежуточное соединение WX010-6 (300 мг, 897,76 мкмоль) растворяли в 1,4-диоксане (10 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (51,87 мг, 44,89 мкмоль), карбонат натрия (333,04 мг, 3,14 ммоль) и циклопропилтрифторборат калия (265,69 мг, 1,80 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем непосредственно фильтровали. Фильтрационный осадок промывали этилацетатом (10 мл × 2), а фильтрат собирали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-9/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX052-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,01 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,88 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,69 (d, J=1,6 Гц, 1H), 7,66 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,40 (dd, J=2,0, 8,8 Гц, 1H), 4,31 (s, 2H), 4,22 (q, J=7,2 Гц, 2H), 2,16-2,06 (m, 1H), 1,22 (t, J=7,2 Гц, 3H), 1,12-1,03 (m, 2H), 0,88-0,77 (m, 2H).
Стадия 2: синтез WX052
Промежуточное соединение WX052-1 (230 мг, 778,79 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (20 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли акриламид (55,35 мг, 778,79 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 778,79 мкл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в 0,5 M разбавленную соляную кислоту (20 мл), а затем добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX052. MS-ESI m/z: 321,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, CD3CN) δ: 8,96 (s, 1H), 8,04 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,00 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,79 (d, J=1,6 Гц, 1H), 7,73 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,43 (dd, J=1,8, 8,6 Гц, 1H), 4,79 (dd, J=5,0, 10,6 Гц, 1H), 2,84-2,61 (m, 3H), 2,51-2,41 (m, 1H), 2,14-2,06 (m, 1H), 1,11-1,01 (m, 2H), 0,87-0,78 (m, 2H).
Пример 53: WX053
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX053-1
Промежуточное соединение WX010-6 (300 мг, 897,76 мкмоль) растворяли в толуоле (4 мл) и воде (2 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли ацетат палладия (20,16 мг, 89,78 мкмоль), н-бутил-бис(1-адаминил)фосфин (64,38 мг, 179,55 мкмоль), этилфторборат калия (366,19 мг, 2,69 ммоль) и карбонат цезия (877,53 мг, 2,69 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. К реакционной смеси добавляли воду (10 мл) и добавляли этилацетат (10 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-9/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX053-1.
Стадия 2: синтез WX053
Промежуточное соединение WX053-1 (250 мг, 882,39 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (20 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли акриламид (62,72 мг, 882,39 мкмоль) и трет-бутоксид калия (99,01 мг, 882,39 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в 0,5 M разбавленную соляную кислоту (20 мл), а затем добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-3/2, объемное соотношение), полученный в результате этого остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX053. MS-ESI m/z: 309,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,16 (s, 1H), 8,14 (d, J=9,2 Гц, 2H), 7,97 (s, 1H), 7,89 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,61 (d, J=8,4 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,8, 11,2 Гц, 1H), 2,93-2,76 (m, 3H), 2,70-2,55 (m, 2H), 2,42-2,30 (m, 1H), 1,29 (t, J=7,6 Гц, 3H).
Пример 54 и пример 55: WX054 и WX055
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX010-3
WX010-1 (30 г, 126,53 ммоль, 75,00 мл) растворяли в дихлорметане (400 мл) при 10°C, а затем добавляли ацетилхлорид (9,93 г, 126,53 ммоль, 9,03 мл). После трех продувок азотом порциями добавляли треххлористый алюминий (33,74 г, 253,07 ммоль) при 5-10°C в условиях атмосферы азота. После перемешивания при 10°C в течение 2 ч реакционную смесь дополняли ацетилхлоридом (1,5 мл) и полученную в результате реакционную смесь затем перемешивали в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (200 мл) и добавляли 2 M разбавленную соляную кислоту (50 мл) для разведения, а затем добавляли дихлорметан (200 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX010-3. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 13,39 (s, 1H), 7,97 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,80 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,64 (dd, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 7,17 (d, J=9,2 Гц, 1H), 2,85 (s, 3H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX010-4
Промежуточное соединение WX010-3 (31 г, 116,94 ммоль) растворяли в диэтилкарбонате (302,25 г, 2,56 моль, 310,00 мл) при 10°C в условиях атмосферы азота, а затем при 5-10°C порциями добавляли гидрид натрия (23,38 г, 584,68 ммоль, степень чистоты: 60%). После перемешивания при 10°C в течение 1 ч реакционную смесь нагревали до 60°C и перемешивали в течение 1 ч, а затем реакционную смесь нагревали до 130°C и перемешивали в течение 16 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем выливали в ледяную воду (500 мл) и добавляли этилацетат (500 мл) для экстракции. Органическую фазу удаляли, а рН водной фазы доводили до 3-4 посредством 6 M соляной кислоты и подвергали ее экстракции 2-метилтетрагидрофураном (2000 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток добавляли к простому метил-трет-бутиловому эфиру (100 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 минут, а затем фильтровали. Фильтрационный осадок собирали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX010-4.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX010-5
Промежуточное соединение WX010-4 (24 г, 82,45 ммоль) растворяли в этаноле (400 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли хлоргидрат гидроксиламина (37,24 г, 535,90 ммоль) и уксуснокислый натрий (23,67 г, 288,56 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 60 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли 2 M разбавленную соляную кислоту (200 мл) и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления большего количества этанола и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (500 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX010-5.
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX010-6
Промежуточное соединение WX010-5 (25 г, 81,67 ммоль) растворяли в этаноле (300 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли серную кислоту (5,52 г, 55,15 ммоль, 3 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь подвергали высокотемпературному фильтрованию при 80°C. Маточный раствор собирали и охлаждали до комнатной температуры, и в осадок выпадало твердое вещество. Смесь фильтровали для сбора твердого вещества, которое концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX010-6. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,16 (d, J=1,6 Гц, 1H), 8,00 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,88 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,77 (dd, J=1,8, 9,0 Гц, 1H), 7,74 (d, J=9,2 Гц, 1H), 4,33 (s, 2H), 4,24 (q, J=7,2 Гц, 2H), 1,24 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX054-1
Промежуточное соединение WX010-6 (5 г, 14,96 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (70 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли бензофенонимин (3,12 г, 17,21 ммоль, 2,89 мл), карбонат цезия (12,19 г, 37,41 ммоль), 4,5-бис-дифенилфосфино-9,9-диметилксантен (1,30 г, 2,24 ммоль) и ацетат палладия (503,89 мг, 2,24 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали при 80°C в течение 8 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали для сбора маточного раствора. Фильтрационный осадок промывали этилацетатом (100 мл × 2), а фильтрат собирали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (нейтральный алюмооксид: 200-300 меш, элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-10/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX054-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,87 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,83-7,79 (m, 2H), 7,76 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,60 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,54-7,49 (m, 1H), 7,48-7,42 (m, 2H), 7,34 (d, J=1,6 Гц, 1H), 7,26-7,19 (m, 3H), 7,18-7,13 (m, 2H), 7,09 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 4,27 (s, 2H), 4,17 (q, J=7,4 Гц, 2H), 1,13 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX056
Промежуточное соединение WX054-1 (2 г, 4,60 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (40 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли акриламид (327,18 мг, 4,60 ммоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 4,14 мл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 2 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (100 мл), добавляли 1 M разбавленную соляную кислоту для доведения pH до 4-5 и добавляли этилацетат (100 мл × 2) для экстракции. Органические фазы объединяли и промывали с помощью 2 M разбавленной соляной кислоты (20 мл × 2). Водные фазы объединяли, органическую фазу отбрасывали, а pH водной фазы доводили до 7-8 с помощью твердого бикарбоната натрия и подвергали экстракции этилацетатом (100 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; нейтральная система: 10 мМ NH4HCO3). У полученной в результате фракции pH доводили до 6-7 с помощью 2 M разбавленной соляной кислоты и концентрировали ее в условиях пониженного давления до удаления ацетонитрила. У полученной в результате водной фазы pH доводили до 7-8 с помощью насыщенного раствора бикарбоната натрия и подвергали ее экстракции этилацетатом (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением промежуточного соединения WX056. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,11 (s, 1H), 7,90 (d, J=9,6 Гц, 1H), 7,81 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,69 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,10 (dd, J=2,6, 7,4 Гц, 2H), 5,44 (s, 2H), 4,92 (dd, J=5,2, 11,2 Гц, 1H), 2,87-2,76 (m, 1H), 2,70-2,53 (m, 2H), 2,42-2,28 (m, 1H).
Стадия 7: синтез WX054 и WX055
Промежуточное соединение WX056 (100 мг, 338,65 мкмоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл) при 15°C, а затем добавляли метансульфонилхлорид (38,79 мг, 338,65 мкмоль, 26,21 мкл) и триэтиламин (34,27 мг, 338,65 мкмоль, 47,14 мкл). После перемешивания при 15°C в течение 12 ч реакционную смесь дополняли триэтиламином (50 мкл) и метансульфонилхлоридом (40 мкл), перемешивали в течение 5 ч, а затем дополняли триэтиламином (60 мкл) и метансульфонилхлоридом (20 мкл). Полученную в результате реакционную смесь затем перемешивали при 15°C в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (20 мл), а затем добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевых соединений WX054 и WX055. Целевое соединение WX054: MS-ESI m/z: 374,0 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 10,06 (s, 1H), 8,21 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,15 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,91 (d, J=9,2 Гц, 2H), 7,59 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,01 (dd, J=4,6, 11,8 Гц, 1H), 3,07 (s, 3H), 2,90-2,76 (m, 1H), 2,71-2,55 (m, 2H), 2,43-2,30 (m, 1H). Целевое соединение WX055: MS-ESI m/z: 452,0 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,17 (s, 1H), 8,44 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,30 (d, J=9,2 Гц, 2H), 8,06 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,82 (dd, J=2,2, 8,6 Гц, 1H), 5,12 (dd, J=4,6, 11,8 Гц, 1H), 3,63 (s, 6H), 2,94-2,79 (m, 1H), 2,74-2,58 (m, 2H), 2,45-2,33 (m, 1H).
Пример 56: WX056
Стадия 1: синтез WX056
Промежуточное соединение WX054-1 (1,2 г, 2,76 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (30 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли акриламид (196,31 мг, 2,76 ммоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 2,49 мл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 2 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (100 мл), а затем добавляли этилацетат (100 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; нейтральная система: 10 мМ NH4HCO3) и у полученной в результате фракции pH доводили до 3-4 с помощью 4 M гидрохлорида этилацетата, перемешивали при 15°C в течение 15 мин и подвергали экстракции этилацетатом (50 мл). Органическую фазу удаляли промыванием 2 M разбавленной соляной кислотой (50 мл × 2). Водные фазы объединяли, pH доводили до 7-8 насыщенным раствором карбоната натрия и подвергали их экстракции этилацетатом (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX056. MS-ESI m/z: 296,1 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,14 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,21-8,14 (m, 1H), 8,00-7,92 (m, 1H), 7,91-7,81 (m, 1H), 7,61-7,50 (m, 1H), 5,04 (dd, J=3,4, 11,4 Гц, 1H), 2,90-2,77 (m, 1H), 2,70-2,56 (m, 2H), 2,42-2,30 (m, 1H).
Пример 57: WX057
Стадия 1: синтез WX057
Промежуточное соединение WX056 (100 мг, 338,65 мкмоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли ацетилхлорид (26,58 мг, 338,65 мкмоль, 24,17 мкл) и триэтиламин (34,27 мг, 338,65 мкмоль, 47,14 мкл). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 3 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (20 мл) и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX057. MS-ESI m/z: 338,1 [M+H]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 10,25 (s, 1H), 8,48 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,18 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,10 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,88 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,79 (dd, J=2,0, 8,8 Гц, 1H), 5,02 (dd, J=4,8, 11,6 Гц, 1H), 2,89-2,77 (m, 1H), 2,69-2,55 (m, 2H), 2,42-2,31 (m, 1H), 2,12 (s, 3H).
Пример 58: WX058
Стадия 1: синтез WX058
Промежуточное соединение WX056 (50 мг, 169,32 мкмоль) растворяли в 1,4-диоксане (3 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли ацетат меди (76,89 мг, 423,30 мкмоль), пиридин (46,88 мг, 592,62 мкмоль, 47,83 мкл) и метилбориновую кислоту (25,34 мг, 423,30 мкмоль). Реакционную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали этилацетатом (10 мл × 2), а фильтрат собирали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX058. MS-ESI m/z: 310,1 [M+H]+ , 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 8,15 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,09 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,88 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,48 (d, J=8,0 Гц, 1H), 5,01 (dd, J=4,6, 11,0 Гц, 1H), 2,91 (s, 3H), 2,88-2,77 (m, 1H), 2,71-2,57 (m, 2H), 2,42-2,31 (m, 1H).
Пример 59: WX059
Стадия 1: синтез WX059
Промежуточное соединение WX010-8 (1,5 г, 5,33 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (40 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли акриламид (379,01 мг, 5,33 ммоль) и трет-бутоксид калия (598,35 мг, 5,33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 3 ч. После завершения реакции добавляли воду (50 мл), а затем добавляли этилацетат (100 мл × 5) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX059. MS-ESI m/z: 307,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,17 (s, 1H), 8,22-8,16 (m, 3H), 7,96-7,89 (m, 2H), 6,94 (dd, J=10,8, 17,6 Гц, 1H), 6,04 (d, J=17,6 Гц, 1H), 5,41 (d, J=11,2 Гц, 1H), 5,06 (dd, J=4,6, 11,8 Гц, 1H), 2,92-2,79 (m, 1H), 2,70-2,56 (m, 2H), 2,42-2,31 (m, 1H).
Пример 60: WX060
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX010-10
Промежуточное соединение WX010-9 (300 мг, 973,12 мкмоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (14 мл) при 10°C, а затем добавляли пероксимоносульфат калия (598,24 мг, 973,12 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 10°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали для сбора маточного раствора, таким образом получая раствор промежуточного соединения WX010-10 в N,N-диметилформамиде (0,0695 M, 14 мл).
Стадия 2: синтез WX060
К раствору промежуточного соединения WX010-10 в N,N-диметилформамиде (0,0695 M, 7,00 мл) при 0°C в условиях атмосферы азота последовательно добавляли гексафторфосфат 2-(7-бензотриазол оксид)-N,N,N',N'-тетраметилурония (277,50 мг, 729,82 мкмоль) и триэтиламин (98,47 мг, 973,09 мкмоль, 135,44 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 15 минут добавляли трет-бутилглицинат (76,59 мг, 583,85 мкмоль). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до 10°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (20 мл) и добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; нейтральная система: 10 мМ NH4HCO3), полученный в результате этого остаток затем разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX060. MS-ESI m/z: 438,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,17 (s, 1H), 9,12 (t, J=5,8 Гц, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,35 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,31 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,14 (dd, J=1,6, 8,8 Гц, 1H), 8,03 (d, J=8,8 Гц, 1H), 5,12 (dd, J=4,4, 11,2 Гц, 1H), 3,98 (d, J=6,0 Гц, 2H), 2,91-2,79 (m, 1H), 2,71-2,56 (m, 2H), 2,43-2,30 (m, 1H), 1,44 (s, 9H).
Пример 61: WX061
Стадия 1: синтез WX061
Промежуточное соединение WX010-9 (100 мг, 324,37 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем при 0°C добавляли борогидрид натрия (12,27 мг, 324,37 мкмоль). Реакционную смесь подогревали до 10°C и перемешивали в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в 0,5 M разбавленную соляную кислоту (20 мл), а затем добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX061. MS-ESI m/z: 311,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,13 (s, 1H), 8,20 (d, J=6,4 Гц, 1H), 8,18 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,91 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,68 (d, J=8,4 Гц, 1H), 5,39 (t, J=5,6 Гц, 1H), 5,05 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,71 (d, J=5,2 Гц, 2H), 2,92-2,78 (m, 1H), 2,69-2,54 (m, 2H), 2,43-2,34 (m, 1H).
Пример 62: WX062
Стадия 1: синтез WX062
Промежуточное соединение WX010-10 (130 мг, 400,88 мкмоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (5 мл) при 0°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли гексафторфосфат 2-(7-бензотриазолоксид)-N,N,N',N'-тетраметилурония (228,64 мг, 601,32 мкмоль) и триэтиламин (121,69 мг, 1,20 ммоль, 167,39 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 15 минут добавляли диметиламин (35,96 мг, 440,97 мкмоль, 40,40 мкл, HCl). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 10°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции добавляли воду (40 мл) и затем добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX062. MS-ESI m/z: 352,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,14 (s, 1H), 8,29 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,27 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,00 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,74 (d, J=8,4 Гц, 1H), 5,09 (dd, J=4,6, 11,8 Гц, 1H), 3,06 (s, 3H), 2,98 (s, 3H), 2,92-2,78 (m, 1H), 2,73-2,56 (m, 2H), 2,44-2,35 (m, 1H).
Пример 63: WX063
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX063-2
Промежуточное соединение WX063-1 (40 г, 240,71 ммоль) добавляли к диэтилкарбонату (300 мл) и толуолу (600 мл) при комнатной температуре. После охлаждения реакционной смеси до 0°C порциями добавляли гидрид натрия (38,51 г, 962,85 ммоль, степень чистоты: 60%) при перемешивании, реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции параллельные реакции для двух порций проводили совместно. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем выливали в воду (4000 мл). Для экстракции добавляли этилацетат (2000 мл × 2), а органическую фазу отбрасывали. У водной фазы доводили pH до 3 с помощью концентрированной соляной кислоты (12 н.) и подвергали ее экстракции 2-метилтетрагидрофураном (4000 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX063-2.
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX063-3
Промежуточное соединение WX063-2 (45 г, 234,17 ммоль) растворяли в дихлорметане (600 мл) при комнатной температуре. После охлаждения реакционной смеси до -78°C по каплям добавляли трехбромистый бор (234,66 г, 936,68 ммоль, 90,25 мл). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 20°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции параллельные реакции для двух порций проводили совместно. Реакционную смесь медленно выливали в ледяную воду (3000 мл) и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (3000 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX063-3.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX063-4
Промежуточное соединение WX063-3 (36 г, 202,09 ммоль) растворяли в этаноле (550 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли хлоргидрат гидроксиламина (42,13 г, 606,26 ммоль) и этилат натрия (41,26 г, 606,26 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции параллельные реакции для двух порций проводили совместно. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем pH доводили до 5 посредством 2 н. соляной кислоты и концентрировали ее в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разводили водой (500 мл) и добавляли этилацетат (400 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением промежуточного соединения WX063-4.
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX063-5
Промежуточное соединение WX063-4 (34 г, 176,02 ммоль) растворяли в этаноле (300 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли концентрированную серную кислоту (3,68 г, 36,77 ммоль, 2 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 16 ч. После завершения реакции параллельные реакции для двух порций проводили совместно. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разводили с помощью этилацетата (400 мл) и воды (200 мл) и после отделения жидкости водную фазу подвергали экстракции этилацетатом (150 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали водой (100 мл × 6) для доведения pH до приблизительно 6, затем промывали солевым раствором (100 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-2,3/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX063-5. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 9,64 (s, 1H), 7,54 (d, J=8,8, 1H), 7,11 (dd, J=2,4 Гц, 8,8 Гц, 1H), 7,02 (d, J=2,0 Гц, 1H), 4,13 (q, J=7,0 Гц, 2H), 4,131 (s, 2H), 1,20 (t, J=7,2, 3H).
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX063-6
Промежуточное соединение WX063-5 (3 г, 13,56 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (60 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли карбонат калия (5,62 г, 40,69 ммоль) и аллилбромид (1,64 г, 13,56 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (100 мл) и добавляли этилацетат (100 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали полунасыщенным солевым раствором (200 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-19/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX063-6.
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX063-7
Промежуточное соединение WX063-6 (2,5 г, 9,57 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (40 мл) при комнатной температуре, а реакционную смесь нагревали до 240°C и перемешивали в течение 4 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли полунасыщенный солевой раствор (100 мл) и добавляли этилацетат (150 мл) для экстракции. Органическую фазу промывали полунасыщенным солевым раствором (80 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=19/1-3/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX063-7. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,32 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,08 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,07-5,98 (m, 1H), 5,42 (s, 1H), 5,14 (dd, J=1,6 Гц, 10,0 Гц, 1H), 4,97 (dd, J=1,6 Гц, 17,2 Гц, 1H), 4,22 (q, J=7,0 Гц, 2H), 4,08 (s, 2H), 3,64-3,61 (m, 2 H), 1,27 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 7: синтез промежуточного соединения WX063-8
Промежуточное соединение WX063-7 (0,8 г, 3,06 ммоль) и ацетат меди (1,67 г, 9,19 ммоль) добавляли в воду (2,5 мл) и N,N-диметилформамид (12,5 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли хлорид лития (398,42 мг, 9,19 ммоль) и хлорид палладия (27,15 мг, 153,10 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере воздуха в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали и разводили водой (15 мл) и этилацетатом (20 мл) с последующим отделением жидкости. Органическую фазу промывали полунасыщенным солевым раствором (10 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-5,25/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX063-8. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,62 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,40 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,64 (s, 1H), 4,22 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4,13 (s, 2H), 2,55 (s, 3H), 1,24 (t, J=7,2, 3H).
Стадия 8: синтез WX063
Промежуточное соединение WX063-8 (0,1 г, 385,72 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (3 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли акриламид (27,42 мг, 385,72 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия в тетрагидрофуране (1 M, 385,72 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции pH реакционной смеси доводили до 6 посредством 1 н. разбавленной соляной кислоты и разводили водой (5 мл) и этилацетатом (10 мл) с последующим отделением жидкости. Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный в результате остаток очищали с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; нейтральная система: 10 мМ NH4HCO3, нейтральная система), а рН полученной в результате фракции доводили до приблизительно 6 с помощью 1 н. соляной кислоты и концентрировали ее в условиях пониженного давления до удаления ацетонитрила, а также добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления с получением целевого соединения WX063. MS-ESI m/z: 285,0 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,15 (s, 1H), 7,85 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,58 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,82 (s, 1H), 4,71 (dd, J=5,0 Гц, 12,2 Гц, 1H), 2,88-2,79 (m, 1H), 2,69-2,63 (m, 1H), 2,52 (s, 3H), 2,46-2,39 (m, 1H), 2,28-2,21 (m, 1H).
Пример 64: WX064
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX064-1
Промежуточное соединение WX063-5 (0,5 г, 2,26 ммоль) растворяли в концентрированной серной кислоте (5 мл, степень чистоты: 98%) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C добавляли нитрат калия (239,94 мг, 2,37 ммоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 20°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (60 мл) и затем добавляли дихлорметан (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (60 мл × 3) и насыщенным солевым раствором (60 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX064-1.
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX064-2
Промежуточное соединение WX064-1 (0,46 г, 1,73 ммоль) растворяли в этаноле (10 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C добавляли дигидрат хлорида олова (2,73 г, 12,10 ммоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 20°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, разводили водой (30 мл), доводили pH до 6-7 с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и фильтровали, а фильтрат собирали и подвергали экстракции 2-метилтетрагидрофураном (60 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (60 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX064-2.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX064-3
Промежуточное соединение WX064-2 (0,3 г, 1,27 ммоль) и триэтилортоацетат (309,04 мг, 1,90 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (6 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли тетрахлорид циркония (295,96, 1,27 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (50 мл) и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, последовательно промывали полунасыщенным солевым раствором (60 мл × 3) и насыщенным солевом раствором (60 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-6/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX064-3. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,69 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,51 (d, J=9,2 Гц, 1H), 4,27 (s, 2H), 4,26 (q, J=7,2 Гц, 2H), 2,71 (s, 3H), 1,28 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 4: синтез WX064
Промежуточное соединение WX064-3 (0,27 г, 1,04 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли акриламид (73,74 мг, 1,04 ммоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 1,04 мл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 3 ч. После завершения реакции pH реакционной смеси доводили до 6 посредством 1 н. разбавленной соляной кислоты, добавляли солевой раствор (20 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток дважды разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX064. MS-ESI m/z: 286,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,16 (s, 1H), 8,04 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,77 (d, J=9,2 Гц, 1H), 4,66 (dd, J=4,8, 12,0 Гц, 1H), 2,95-2,85 (m, 1H), 2,84-2,75 (m, 1H), 2,69 (s, 3H), 2,67-2,62 (m, 1H), 2,21-2,17 (m, 1H).
Пример 65: WX065
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX063-6
Промежуточное соединение WX063-5 (5 г, 22,60 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (75 мл) при 20°C, а затем добавляли карбонат калия (10,93 г, 79,11 ммоль) и по каплям добавляли 3-бром-1-пропен (2,87 г, 23,73 ммоль). Полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали и к фильтрату добавляли воду (80 мл) и этилацетат (80 мл). Органическую фазу промывали полунасыщенным солевым раствором (50 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-9/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX063-6.
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX065-1
Промежуточное соединение WX063-6 (4,5 г, 17,22 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (60 мл) при 20°C в условиях атмосферы азота и реакционную смесь нагревали до 240°C и перемешивали в течение 4 ч. После завершения реакции реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и к реакционной смеси добавляли полунасыщенный солевой раствор (100 мл) и этилацетат (150 мл). Органическую фазу промывали полунасыщенным солевым раствором (80 мл × 3). Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=19/1-3/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX065-1. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4 ) δ: 7,33 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,15 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,06-5,96 (m, 1H), 5,02-4,98 (m, 1H), 4,80 (q, J=2,2 Гц, 1H), 4,20 (q, J=7,0 Гц, 2H), 4,08 (s, 2H), 3,62 (t, J=1,8 Гц, 1H), 3,61 (t, J=2,0 Гц, 1H), 1,26 (t, J=7,4 Гц, 3H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX065-2
Промежуточное соединение WX065-1 (1 г, 3,83 ммоль) и 3-бромпроп-1-ен (463,03 мг, 3,83 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (20 мл) при 20°C, а затем добавляли карбонат калия (1,59 г, 11,48 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали, а фильтрат выливали в 0,5 M разбавленную соляную кислоту (60 мл) и добавляли этилацетат (40 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали полунасыщенным солевым раствором (60 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-49/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX065-2. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,41 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,22 (d, J=9,2 Гц, 1H), 6,10-5,97 (m, 2H), 5,41 (dd, J=1,4, 17,4 Гц, 1H), 5,28 (dd, J=1,4, 10,6 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=1,6, 10,0 Гц, 1H), 4,84 (dd, J=1,6, 17,2 Гц, 1H), 4,59-4,57 (m, 2H), 4,22 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4,09 (s, 2H), 3,72-3,62 (m, 2H), 1,27 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX065-3
Промежуточное соединение WX065-2 (850,00 мг, 2,82 ммоль) растворяли в толуоле (20 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли гидрохлорид трис(трифенилфосфин)карбонилрутения (268,65 мг, 282,08 мкмоль). Реакционную смесь нагревали до 65°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-49/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX065-3. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,36-7,27 (m, 1H), 7,19-7,12 (m, 1H), 6,47-6,39 (m, 1H), 6,33-5,92 (m, 2H), 5,17-5,06 (m, 1H), 4,80-4,69 (m, 1H), 4,14-3,92 (m, 4H), 1,88-1,85 (m, 2H), 1,66-1,46 (m, 3H), 1,19-1,10 (m, 3H).
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX065-4
Промежуточное соединение WX065-3 (0,6 г, 1,99 ммоль) растворяли в толуоле (18 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли катализатор GRUBBS (второго поколения) (84,52 мг, 99,56 мкмоль). Реакционную смесь нагревали до 60°C и перемешивали в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-32/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX065-4.
Стадия 6: синтез WX065
Промежуточное соединение WX065-4 (0,365 г, 1,49 ммоль) и акриламид (105,79 мг, 1,49 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли раствор трет-бутоксида калия в тетрагидрофуране (1 M, 1,49 мл). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 12 ч. После завершения реакции pH реакционной смеси доводили до 5-6 посредством 2 н. разбавленной соляной кислоты и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток дважды разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX065. MS-ESI m/z: 271,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,17 (s, 1H), 8,26 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,97 (dd, J=0,6, 9,0 Гц, 1H), 7,71 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,18 (dd, J=0,8, 2,0 Гц,, 1H), 4,77 (dd, J=5,0, 12,2 Гц, 1H), 2,87-2,78 (m, 1H), 2,69-2,63 (m, 1H), 2,47-2,41(m, 1H), 2,33-2,25 (m, 1H).
Пример 66: WX066
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX066-2
Промежуточное соединение WX066-1 (20 г, 120,36 ммоль) растворяли в толуоле (200 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли диэтилкарбонат (146,25 г, 1,24 моль, 150 мл) и в конце порциями добавляли гидрид натрия (19.26 г, 481.42 ммоль, степень чистоты: 60%) при 5-10°C. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 30 минут, а затем нагревали до 120°C и перемешивали при 120°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем медленно выливали в ледяную воду (500 мл) и добавляли этилацетат (100 мл × 2) для экстракции. Органическую фазу удаляли, а рН водной фазы доводили до 5-6 посредством 6 M разбавленной соляной кислоты и подвергали ее экстракции 2-метилтетрагидрофураном (100 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX066-2. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 11,27 (s, 1H), 7,55 (t, J=8,2 Гц, 1H), 6,94 (d, J=8,4 Гц, 2H), 5,51 (s, 1H), 3,90 (s, 3H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX066-3
Промежуточное соединение WX066-2 (20 г, 104,08 ммоль) растворяли в дихлорметане (300 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем по каплям добавляли трехбромистый бор (78,22 г, 312,23 ммоль, 30,08 мл) при температуре от -50°C до -30°C. Реакционную смесь нагревали до 10°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь медленно выливали в ледяную воду (500 мл) и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (500 мл × 4) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX066-3.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX066-4
Промежуточное соединение WX066-3 (5 г, 28,07 ммоль) растворяли в метаноле (100 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли хлоргидрат гидроксиламина (6,83 г, 98,24 ммоль) и уксуснокислый натрий (8,06 г, 98,24 ммоль). После перемешивания при 10°C в течение 15 минут реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 12 ч, а затем нагревали до 90°C и перемешивали при 90°C в течение 6 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, к ней добавляли 2 M разбавленную соляную кислоту (200 мл) и ее концентрировали в условиях пониженного давления для удаления большей части этанола и добавляли этилацетат (100 мл × 4) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX066-4.
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX066-5
Промежуточное соединение WX066-4 (4 г, 20,71 ммоль) растворяли в этаноле (40 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли серную кислоту (920,00 мг, 9,19 ммоль, 0,5 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 4 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX066-5. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,84 (s, 1H), 7,43 (t, J=8,2 Гц, 1H), 7,12 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,78 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,30 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4,12 (s, 2H), 1,33 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX066-6
Промежуточное соединение WX066-5 (2,6 г, 11,75 ммоль) растворяли в концентрированной серной кислоте (15 мл, степень чистоты: 98%) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем порциями добавляли нитрат калия (1,19 г, 11,75 ммоль) при 0-10°C. Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 12°C и перемешивали в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь медленно по каплям выливали в ледяную воду (100 мл) и добавляли дихлорметан (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-7/3, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX066-6. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 11,67 (s, 1H), 8,30 (d, J=9,6 Гц, 1H), 7,17 (d, J=9,6 Гц, 1H), 4,25 (q, J=7,4 Гц, 2H), 4,16 (s, 2H), 1,29 (t, J=7,4 Гц, 3H).
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX066-7
Промежуточное соединение WX066-6 (2,1 г, 7,89 ммоль) растворяли в этаноле (30 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли дигидрат хлорида олова (12,46 г, 55,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 35°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Добавляли воду (50 мл) и pH с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия доводили до 6-7. Полученную в результате смесь фильтровали, а фильтрат подвергали экстракции с помощью дихлорметана (100 мл × 3). К фильтрационному осадку добавляли дихлорметан (100 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, а затем фильтровали, собирая фильтрат.Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX066-7.
Стадия 7: синтез промежуточного соединения WX066-8
Промежуточное соединение WX066-7 (1,5 г, 6,35 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (30 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли тетрахлорид циркония (739,88 мг, 3,17 ммоль, 264,24 мкл) и триэтилортоацетат (1,55 г, 9,52 ммоль, 1,75 мл). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 24 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (100 мл), а затем добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX066-8. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,84 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,56 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,26 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4,20 (s, 2H), 2,71 (s, 3H), 1,28 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 8: синтез WX066
Промежуточное соединение WX066-8 (55 мг, 211,34 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли акриламид (15,02 мг, 211,34 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 211,34 мкл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в 0,5 M разбавленную соляную кислоту (20 мл), а затем добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl), полученный в результате этого остаток затем разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; нейтральная система: 10 мМ NH4HCO3) с получением целевого соединения WX066. MS-ESI m/z: 286,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 7,99 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,79 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,72 (dd, J=4,0, 12,4 Гц, 1H), 2,97-2,83 (m, 1H), 2,74-2,68 (m, 1H), 2,67 (s, 3H), 2,38-2,22 (m, 2H).
Пример 67: WX067
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX067-1
Промежуточное соединение WX010-1 (20 г, 84,36 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (600 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли йодид меди(I) (16,07 г, 84,36 ммоль) и хлорид меди (83,51 г, 843,55 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 140°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, медленно выливали в ледяную воду (1000 мл) и фильтровали, а фильтрационный осадок собирали и концентрировали в условиях пониженного давления. Затем полученный в результате остаток растворяли в этилацетате (500 мл), нерастворимые материалы удаляли с помощью фильтрации и фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления с получением промежуточного соединения WX067-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,76 (s, 1H), 7,68 (d, J=6,4 Гц, 1H), 7,66 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,39 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,18 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,12 (s, 1H), 3,93 (s, 3H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX067-2
Промежуточное соединение WX067-1 (16,25 г, 84,35 ммоль) растворяли в дихлорметане (180 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем по каплям добавляли ацетилхлорид (7,28 г, 92,79 ммоль, 6,62 мл) при 0°C и порциями добавляли треххлористый алюминий (22,50 г, 168,71 ммоль) при 0°C в условиях атмосферы азота. Реакционную смесь затем нагревали до 15°C и перемешивали в течение 4 ч. После завершения реакции реакционную смесь медленно выливали в ледяную воду (500 мл) и добавляли дихлорметан (100 мл × 2) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (200 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX067-2. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 13,38 (s, 1H), 8,04 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,81 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,78 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,53 (dd, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 7,19 (d, J=9,2 Гц, 1 H), 2,86 (s, 3H).
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX067-3
Промежуточное соединение WX067-2 (18 г, 81,58 ммоль) растворяли в диэтилкарбонате (100 мл) и толуоле (100 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем порциями добавляли гидрид натрия (16,31 г, 407,88 ммоль, степень чистоты: 60%) при 0°C. Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем медленно выливали в ледяную воду (500 мл) и добавляли этилацетат (200 мл × 2) для экстракции. Органическую фазу удаляли, а рН водной фазы доводили до 4-5 посредством 1 M разбавленной соляной кислоты и подвергали ее экстракции ее этилацетатом (300 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (500 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX067-3. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 13,07 (s, 1H), 9,28 (d, J=9,6 Гц, 1H), 8,19 (d, J=6,4 Гц, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,71 (dd, J=2,4, 9,2 Гц, 1H), 7,60 (d, J=9,2 Гц, 1H), 5,79 (s, 1H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX067-4
Промежуточное соединение WX067-3 (2 г, 8,11 ммоль) растворяли в этаноле (40 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (2,33 г, 28,38 ммоль) и хлоргидрат гидроксиламина (3,38 г, 48,65 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 36 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления этанола, а затем добавляли воду (20 мл) и 1 M разбавленную соляную кислоту (10 мл) и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX067-4.
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX067-5
Промежуточное соединение WX067-4 (2 г, 7,64 ммоль) растворяли в этаноле (40 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли серную кислоту (1,84 г, 18,39 ммоль, 1 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 4 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления большей части растворителя. Полученный в результате остаток разводили водой (100 мл) и подвергали экстракции 2-метилтетрагидрофураном (200 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-20/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX067-5. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,07 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,00 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,90 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,76 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,64 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 4,33 (s, 2H), 4,23 (q, J=7,0 Гц, 2H), 1,23 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 6: синтез WX067
Промежуточное соединение WX067-5 (560 мг, 1,93 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (20 мл) при 15°C, а затем при 0°C последовательно добавляли акриламид (137,39 мг, 1,93 ммоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 1,93 мл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 2 ч. После завершения реакции добавляли 1 M разбавленную соляную кислоту для доведения pH до 4-5, добавляли воду (50 мл) и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX067. MS-ESI m/z: 315,0 [M+H]+ , 317,1 [M+H+2]+ , 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4) δ: 8,23 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,13 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,08 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,85 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,70 (dd, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 4,97 (dd, J=5,0, 10,6 Гц, 1H), 2,90-2,77 (m, 2H), 2,74-2,64 (m, 1H), 2,57-2,47 (m, 1H).
Пример 68: WX068
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX068-1
Промежуточное соединение WX010-1 (10 г, 42,18 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (300 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем по каплям медленно добавляли раствор н-бутиллития в н-гексане (2,5 M, 18,56 мл) при -78°C. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 0,5 ч. Затем порциями добавляли N-фторбисбензолсульфонамид (83,51 г, 843,55 ммоль, 20,17 мл) и реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч. Реакционную смесь нагревали до 15°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь медленно выливали в ледяную воду (100 мл) и добавляли этилацетат (100 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-20/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX068-1.
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX068-2
Промежуточное соединение WX068-1 (3,5 г, 19,87 ммоль) растворяли в дихлорметане (60 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли ацетилхлорид (1,72 г, 21,85 ммоль, 1,56 мл) и при 0°C порциями добавляли треххлористый алюминий (5,30 г, 39,73 ммоль, 2,17 мл). Реакционную смесь затем подогревали до 15°C и перемешивали в течение 4 ч. После завершения реакции реакционную смесь медленно выливали в ледяную воду (50 мл) и добавляли дихлорметан (50 мл × 2) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-5/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX068-2.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX068-3
Промежуточное соединение WX068-2 (2,3 г, 11,26 ммоль) растворяли в диэтилкарбонате (20 мл) и толуоле (20 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем партиями добавляли гидрид натрия (2,25 г, 56,32 ммоль, степень чистоты: 60%) при 0°C. Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем медленно выливали в ледяную воду (100 мл) и добавляли этилацетат (200 мл × 2) для экстракции. Органическую фазу удаляли, а рН водной фазы доводили до 4-5 посредством 1 M разбавленной соляной кислоты и подвергали ее экстракции ее этилацетатом (300 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (500 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX068-3. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6) δ: 13,01 (s, 1H), 9,34 (dd, J=5,6, 9,6 Гц, 1H), 8,19 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,88 (dd, J=3,0, 9,8 Гц, 1H), 7,61 (dd, J=2,8, 12,8 Гц, 1H), 7,59 (d, J=9,2 Гц, 1H), 5,77 (s, 1H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX068-4
Промежуточное соединение WX068-3 (2,2 г, 9,56 ммоль) растворяли в этаноле (80 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли хлоргидрат гидроксиламина (3,98 г, 57,34 ммоль) и этилат натрия (2,28 г, 33,45 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 36 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления этанола, а затем добавляли воду (100 мл) и 1 M разбавленную соляную кислоту (20 мл) и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (200 мл × 2) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX068-4.
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX068-5
Промежуточное соединение WX068-4 (0,9 г, 3,67 ммоль) растворяли в этаноле (20 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли серную кислоту (920,00 мг, 9,19 ммоль, 0,5 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 1 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления большей части растворителя. Полученный в результате остаток разводили водой (50 мл) и подвергали экстракции 2-метилтетрагидрофураном (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-20/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX068-5. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,13 (dd, J=5,2, 9,2 Гц, 1H), 7,92 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,76 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,66 (dd, J=2,6, 9,4 Гц, 1H), 7,47 (td, J=2,8, 8,6 Гц, 1H), 4,33 (s, 2H), 4,23 (q, J=7,0 Гц, 2H), 1,22 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 6: синтез WX068
Промежуточное соединение WX068-5 (200 мг, 731,91 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) при комнатной температуре, а затем при 0°C последовательно добавляли акриламид (52,02 мг, 731,91 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 585,53 мкл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 2 ч. После завершения реакции добавляли 1 M разбавленную соляную кислоту для доведения pH до 4-5, добавляли воду (50 мл) и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX068. MS-ESI m/z: 299,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4) δ: 8,28 (dd, J=5,8, 9,0 Гц, 1H), 8,08 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,84 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,80 (dd, J=2,6, 9,8 Гц, 1H), 7,53 (td, J=2,6, 8,6 Гц, 1H), 4,96 (dd, J=5,4, 10,6 Гц, 1H), 2,89-2,78 (m, 2H), 2,73-2,64 (m, 1H), 2,55-2,49 (m, 1H).
Пример 69: WX069
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX069-1
Промежуточное соединение WX013-1 (10 г, 53,13 ммоль) растворяли в дихлорметане (100 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C порциями добавляли N-бромсукцинимид (14,18 г, 79,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали, а фильтрационный осадок промывали дихлорметаном (100 мл × 2). Фильтрат собирали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/2-метилтетрагидрофуран=1/0-49/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX069-1.
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX069-2
Промежуточное соединение WX069-1 (8 г, 29,95 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (240 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до -78°C по каплям добавляли н-бутиллитий (2,5 M, 13,18 мл). После перемешивания при -78°C в течения 0,5 ч в реакционную смесь дополнительно добавляли раствор N-фторбисбензолсульфонамида (14,17 г, 44,92 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл). После перемешивания при -78°C в течение 1 ч полученную в результате реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакцию гасили ледяной водой (200 мл) и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (200 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (100 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-49/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX069-2.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX069-3
Промежуточное соединение WX069-2 (4 г, 19,40 ммоль) и ацетилхлорид (1,67 г, 21,34 ммоль, 1,52 мл) растворяли в дихлорметане (80 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C порциями добавляли треххлористый алюминий (5,17 г, 38,79 ммоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. После завершения реакции реакцию гасили ледяной водой (20 мл) и добавляли дихлорметан (40 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (40 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-49/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX069-3. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 13,36 (s, 1H), 8,17 (d, J=9,6 Гц, 1H),7,81 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,36 (t, J=9,2 Гц, 1H), 7,19 (d, J=9,2 Гц, 1H), 4,03 (s, 3H), 2,85 (s, 3H).
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX069-4
Промежуточное соединение WX069-3 (0,94 г, 4,01 ммоль) растворяли в толуоле (10 мл) и диэтилкарбонате (10 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C порциями добавляли гидрид натрия (642,12 мг, 16,05 ммоль, степень чистоты: 60%). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, реакцию гасили ледяной водой (50 мл) и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (50 мл × 3) для экстракции. Органическую фазу отбрасывали, а рН водной фазы доводили до 2-3 посредством 2 н. разбавленной соляной кислоты, а затем подвергали ее экстракции 2-метилтетрагидрофураном (60 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (60 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX069-4.
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX069-5
Промежуточное соединение WX069-4 (1 г, 3,84 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до -78°C по каплям добавляли трехбромистый бор (1,93 г, 7,69 ммоль, 740,57 мкл). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Реакционную смесь снова охлаждали до -78°C и по каплям добавляли трехбромистый бор (1,93 г, 7,69 ммоль, 740,57 мкл). Реакционную смесь нагревали до 50°C и перемешивали в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду (50 мл) с последующим отделением жидкости. Водную фазу подвергали экстракции с помощью 2-метилтетрагидрофурана (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX069-5.
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX069-6
Промежуточное соединение WX069-5 (0,7 г, 2,84 ммоль) и хлоргидрат гидроксиламина (691,54 мг, 9,95 ммоль) растворяли в этаноле (10 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли этилат натрия (677,21 мг, 9,95 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, разводили водой (40 мл), и доводили pH до 2-3 посредством 2 н. разбавленной соляной кислоты, и добавляли этилацетат (40 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX069-6.
Стадия 7: синтез промежуточного соединения WX069-7
Промежуточное соединение WX069-6 (0,8 г, 3,06 ммоль) растворяли в этаноле (8 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем по каплям добавляли концентрированную серную кислоту (0,5 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Добавляли воду (50 мл) для разведения и добавляли этилацетат (40 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (40 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-7/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX069-7.
Стадия 8: синтез промежуточного соединения WX069-8
Промежуточное соединение WX069-7 (0,5 г, 1,73 ммоль), 2-(диметиламино)-этанол (169,48 мг, 1,90 ммоль, 190,86 мкл) и трифенилфосфин (589,40 мг, 2,25 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (15 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат (454,39 мг, 2,25 ммоль, 436,92 мкл). Полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в воду (40 мл) и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (40 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (50 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением гидрохлорида промежуточного соединения WX069-8. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,11 (s, 1H), 8,24 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,01 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,94 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,84 (t, J=8,6 Гц, 1H), 4,66 (t, J=4,8 Гц, 2H), 4,51 (s, 2H), 4,15 (q, J=7,0 Гц, 2H),3,58 (q, J=4,4 Гц, 2H), 2,89 (s, 3H), 2,88 (s, 3H), 1,17 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 9: синтез WX069
Промежуточное соединение WX069-8 (0,22 г, 554,38 мкмоль, гидрохлорид) и акриламид (39,40 мг, 554,38 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли раствор трет-бутоксида калия в тетрагидрофуране (1 M, 554,38 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции pH реакционной смеси доводили до 6-7 с помощью гидрохлорида этилацетата (4 M), а затем концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; нейтральная система: 10 мМ NH4HCO3) и снова разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX069. MS-ESI m/z: 386,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, MeOD_d 4 ) δ: 8,30 (d, J=9,6 Гц, 1H), 8,04 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,90 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,69 (t, J=8,8 Гц, 1H), 4,95 (dd, J=4,8, 10,4 Гц, 1H), 4,60 (t, J=5,0 Гц, 2H), 3,69 (t, J=4,8 Гц, 2H), 3,07 (s, 6H), 2,90-2,78 (m, 2H), 2,75-2,66 (m, 1H), 2,55-2,49 (m, 1H).
Пример 70: WX070
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX070-2
Промежуточное соединение WX070-1 (45 г, 209,26 ммоль) растворяли в диэтилкарбонате (250 мл) и толуоле (250 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C порциями добавляли гидрид натрия (33,48 г, 837,04 ммоль, степень чистоты: 60%). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции параллельные реакции для четырех порций проводили совместно. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, для гашения реакции добавляли ледяную воду (6000 мл) и добавляли этилацетат (4000 мл × 3) для экстракции. Органическую фазу отбрасывали, рН водной фазы доводили до 2-3 посредством 2 н. разбавленной соляной кислоты, и в осадок выпадало белое твердое вещество. Смесь фильтровали, а фильтрационный осадок собирали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX070-2. MS-ESI m/z: 240,9 [M+H]+, 242,9 [M+H+2]+ .
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX070-3
Промежуточное соединение WX070-2 (50 г, 207,44 ммоль) растворяли в этаноле (500 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли хлоргидрат гидроксиламина (50,45 г, 726,03 ммоль) и уксуснокислый натрий (59,56 г, 726,03 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции параллельные реакции для четырех порций проводили совместно. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем pH доводили до 6-7 посредством 2 н. разбавленной соляной кислоты и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разводили водой (800 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (1500 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая промежуточное соединение WX070-3. MS-ESI m/z: 255,9 [M+H]+, 257,9 [M+H+2]+.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX070-4
Промежуточное соединение WX070-3 (50 г, 195,27 ммоль) растворяли в этаноле (300 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем по каплям добавляли концентрированную серную кислоту (3 мл, степень чистоты: 98%). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции параллельные реакции для четырех порций проводили совместно. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и отфильтровывали осадки. Собирали фильтрационный осадок, а маточный раствор концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Остаток, полученный в результате концентрирования маточного раствора в условиях пониженного давления, разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-49/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX070-4. MS-ESI m/z: 284,0 [M+H]+, 286,0 [M+H+2]+.
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX070-5
Промежуточное соединение WX070-4 (20 г, 70,40 ммоль) и трет-бутилкарбамат (24,74 г, 211,19 ммоль) растворяли в толуоле (425 мл) и воде (85 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли трис(дибензилиденацетон)липалладий (4,51 г, 4,93 ммоль), фосфат калия (59,77 г, 281,59 ммоль) и 2-ди-трет-бутилфосфин-2',4',6'-триизопропилбифенил (4,19 г, 9,86 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 105°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции параллельные реакции для четырех порций проводили совместно. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду (800 мл), а затем фильтровали и добавляли этилацетат (600 мл) для экстракции. Собирали маточный раствор и производили разделение жидкостей, а водную фазу подвергали экстракции этилацетатом (2000 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-20/1) с получением промежуточного соединения WX070-5. MS-ESI m/z: 319,1 [M-H]-.
Стадия 5: синтез промежуточного соединения WX070-6
Промежуточное соединение WX070-5 (45 г, 140,48 ммоль) растворяли в гидрохлориде этилацетата (4 M, 750 мл) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции параллельные реакции для двух порций проводили совместно. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления, выливали в воду (1000 мл), а pH доводили до 7-8 с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и добавляли этилацетат (800 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-6/1) с получением промежуточного соединения WX070-6. MS-ESI m/z: 221,1 [M+H]+.
Стадия 6: синтез промежуточного соединения WX070-7
Промежуточное соединение WX070-6 (45 г, 204,34 ммоль) растворяли в дихлорметане (600 мл) при комнатной температуре, а затем порциями добавляли N-бромсукцинимид (40,01 г, 224,77 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали, а маточный раствор концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4/1) с получением промежуточного соединения WX070-7. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,35 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,02 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,23 (q, J=7,0 Гц, 2H), 4,16 (s, 2H), 3,94 (s, 2H), 1,27 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 7: синтез промежуточного соединения WX070-8
Промежуточное соединение WX070-7 (1,3 г, 4,35 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (13 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли метилбориновую кислоту (780,47 мг, 13,04 ммоль), фторид цезия (2,24 г, 14,78 ммоль) и дихлорметановый комплекс бис(дифенилфосфино)ферроценпалладий(II)дихлорида (354,92 мг, 434,61 мкмоль). Реакционную смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=5/1-3/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX070-8. 1H ЯМР (400 M Гц, DMSO_d 6 ) δ: 7,26 (d, J=7,6 Гц, 1H), 6,97 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,23 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4,11 (s, 2H) 3,76 (s, 2H), 2,34 (s, 3H), 1,27 (t, J=7,4 Гц, 3H).
Стадия 8: синтез промежуточного соединения WX070-9
Промежуточное соединение WX070-8 (0,9 г, 3,84 ммоль) и ацетат калия (1,21 г, 12,29 ммоль) добавляли в хлороформ (20 мл) при комнатной температуре. После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли уксусный ангидрид (1,18 г, 11,53 ммоль, 1,08 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 0,5 ч реакционную смесь нагревали до 60°C, а затем в нее добавляли изоамиловый нитрит (900,16 мг, 7,68 ммоль, 1,03 мл). Полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 5,5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду (30 мл) и дихлорметан (50 мл). Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. К остатку добавляли этанол (20 мл) и соляную кислоту (4 н., 10 мл) при температуре 30°C и смесь перемешивали в течение 2 ч. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до 15 мл, а затем подвергали экстракции насыщенным солевым раствором (30 мл) и этилацетатом (30 мл). Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4,5/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX070-9. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 10,87 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,72 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,65 (d, J=9,2 Гц, 1H), 4,24 (q, J=6,8 Гц, 2H), 4,22 (s, 2H), 1,25 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 9: синтез WX070
Промежуточное соединение WX070-9 (0,11 г, 448,55 мкмоль) добавляли к тетрагидрофурану (4 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли акриламид (31,88 мг, 448,55 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия (1 M, 448,55 мкл) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли 1 н. соляную кислоту для доведения pH до 6 и добавляли воду (20 мл) и этилацетат (20 мл) для экстракции. Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; система: 0,05% HCl, система на основе соляной кислоты) с получением целевого соединения WX070. MS-ESI m/z: 271,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,18 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,88 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,77 (d, J=9,2 Гц, 1H), 4,76 (dd, J=4,6, 11,8 Гц, 1H), 2,91-2,78 (m, 1H), 2,72-2,65 (m, 1H), 2,45-2,37 (m, 1H), 2,30-2,15 (m, 1 H).
Пример 71: WX071
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX071-1
Промежуточное соединение WX066-5 (1 г, 4,52 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (15 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли карбонат калия (1,87 г, 13,56 ммоль) и аллилбромид (656,17 мг, 5,42 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 5 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (100 мл) для разведения и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали полунасыщенным солевым раствором (50 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-4/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX071-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,43 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,14 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,61 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,12-5,98 (m, 1H), 5,47-5,38 (m, 1H), 5,36-5,30 (m, 1H), 4,69-4,61 (m, 2H), 4,19 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4,10 (s, 2H), 1,24 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX071-2
Промежуточное соединение WX071-1 (1 г, 3,83 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (20 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота и реакционную смесь нагревали до 240°C и перемешивали в течение 7 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разводили водой (100 мл) и подвергали экстракции этилацетатом (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали полунасыщенным солевым раствором (20 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления с получением остатка. Полученный в результате остаток разделяли колоночной хроматографией (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-7/3, объемное соотношение), а затем снова разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением промежуточного соединения WX071-2.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX071-3
Промежуточное соединение WX071-2 (260,00 мг, 995,13 мкмоль) растворяли в диоксане (5 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли п-бензохинон (107,57 мг, 995,13 мкмоль) и хлорид бис(ацетонитрил)палладия(II) (12,91 мг, 49,76 мкмоль). Реакционную смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 16 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разводили водой (20 мл) и этилацетатом (15 мл). После отделения жидкости собирали органическую фазу, а водную фазу подвергали экстракции этилацетатом (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (50 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-19/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX071-3.
Стадия 4: синтез WX071
Промежуточное соединение WX071-3 (129,00 мг, 497,56 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (3 мл) при 15°C в условиях атмосферы азота, а затем последовательно добавляли акриламид (35,37 мг, 497,56 мкмоль) и трет-бутоксид калия (55,83 мг, 497,56 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 15°C в течение 4 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (20 мл). Добавляли 2 M разбавленную соляную кислоту для доведения pH до 6-7 и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (15 мл) для разведения. После отделения жидкости собирали органическую фазу, а водную фазу подвергали экстракции 2-метилтетрагидрофураном (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (10 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX071. MS-ESI m/z: 285,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,23 (s, 1H), 7,85 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,62 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,78 (d, J=0,8 Гц, 1H), 4,67 (dd, J=5,0, 12,6 Гц, 1H), 2,97-2,84 (m, 1H), 2,72-2,61 (m, 1H), 2,59-2,53 (m, 1H), 2,48 (s, 3H), 2,34-2,19 (m, 1H).
Пример 72 и пример 73: WX072 и WX073
Стадия 1: синтез промежуточных соединений WX072-1 и WX073-2
Соединение WX003 (570 мг, 2,03 ммоль) растворяли в концентрированной серной кислоте (5 мл, степень чистоты: 98%) при 0°C в условиях атмосферы азота, а затем добавляли нитрат калия (205,61 мг, 2,03 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в ледяную воду (200 мл) и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя, таким образом получая 600 мг неочищенного продукта, 500 мг которого разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением смеси промежуточных соединений WX072-1 и WX073-2.
Стадия 2: синтез WX072 и WX073
Смесь промежуточных соединений WX072-1 и WX073-2 (300 мг, 922,30 мкмоль) растворяли в этаноле (5 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота, а затем добавляли дигидрат дихлорида олова (1,46 г, 6,46 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 50°C и перемешивали в течение 24 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Добавляли воду (50 мл) для разведения и pH с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия доводили до 6-7. В осадок выпадало твердое вещество, и данную смесь подвергали фильтрации. Фильтрационный осадок промывали 2-метилтетрагидрофураном (50 мл × 2). После отделения фильтрата собирали органическую фазу, а водную фазу подвергали экстракции с помощью 2-метилтетрагидрофурана (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; нейтральная система: 10 мМ NH4HCO3) с получением целевых соединений WX072 и WX073. Целевое соединение WX072: MS-ESI m/z: 296,1 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 8,39 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,31 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,23 (t, J=7,8 Гц, 1H), 6,76 (d, J=7,2 Гц, 1H), 5,87 (s, 2H), 4,70 (dd, J=4,6, 11,8 Гц, 1H), 2,85-2,75 (m, 1H), 2,65-2,55 (m, 2H), 2,28-2,19 (m, 1H). Целевое соединение WX073: MS-ESI m/z: 296,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 8,64 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,31 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,21 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,61 (d, J=7,6 Гц, 1H), 6,11 (s, 2H), 4,62 (dd, J=5,0, 12,2 Гц, 1H), 2,98-2,75 (m, 2H), 2,65-2,57 (m, 1H), 2,24-2,12 (m, 1H).
Пример 74: гидрохлорид WX074
Стадия 1: синтез WX074
Промежуточное соединение WX038-3 (300 мг, 798,29 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (20 мл) при 10°C, а затем последовательно добавляли уксуснокислый натрий (130,97 мг, 1,60 ммоль) и N-трет-бутоксикарбонил-4-пиперидон (159,06 мг, 798,29 мкмоль, 46,42 мкл). После перемешивания реакционной смеси при 10°C в течение 30 минут добавляли, триацетоксиборогидрид натрия (338,38 мг, 1,60 ммоль). Полученную в результате реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (30 мл) для разведения и добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток дважды разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) c получением гидрохлорида целевого соединения WX074. MS-ESI m/z: 467,2 [M-55]+ . 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 9,17 (s, 2H), 8,20 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,15 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,93 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,73 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,43 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,04 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,44 (s, 2H), 4,02 (d, J=11,6 Гц, 2H), 3,46 (s, 2H), 2,92-2,72 (m, 3H), 2,70-2,53 (m, 3H), 2,43-2,34 (m, 1H), 2,08 (d, J=10,0 Гц, 2H), 1,56-1,45 (m, 2H), 1,41 (s, 9H).
Пример 75: WX075
Стадия 1: синтез WX075
Промежуточное соединение WX038-3 (150 мг, 399,14 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в 1,2-дихлорэтане (3 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли триэтиламин (201,95 мг, 2,00 ммоль, 277,78 мкл) и метансульфонилхлорид (45,72 мг, 399,14 мкмоль, 30,89 мкл). После перемешивания при 15°C в течение 12 ч реакционную смесь дополняли триэтиламином (100 мкл) и метансульфонилхлоридом (50 мкл). После нагревания до 30°C и перемешивания в течение 12 ч реакционную смесь охлаждали до 15°C и дополнительно дополняли триэтиламином (100 мкл) и метансульфонилхлоридом (50 мкл). После еще одного цикла нагревания до 30°C и перемешивания в течение 12 ч реакционную смесь снова охлаждали до 15°C и дополняли триэтиламином (100 мкл) и метансульфонилхлоридом (50 мкл). Затем реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и по каплям медленно добавляли 4 M гидрохлорид этилацетата для доведения pH до 6-7, а затем реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX075. MS-ESI m/z: 418,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,12 (s, 1H), 8,17 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,11 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,90 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,67 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=2,8, 9,2 Гц, 1H), 7,34 (d, J=6,0 Гц, 1H), 5,03 (dd, J=4,8, 11,6 Гц, 1H), 4,20 (t, J=5,8 Гц, 2H), 3,42 (q, J=5,8 Гц, 2H), 2,98 (s, 3H), 2,90-2,77 (m, 1H), 2,68-2,54 (m, 2H), 2,43-2,31 (m, 1H).
Пример 76: WX076
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX076-1
Промежуточное соединение WX013-7 (2 г, 7,37 ммоль), бромэтанол (1,01 г, 8,11 ммоль, 575,84 мкл) и трифенилфосфин (2,51 г, 9,58 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (60 мл) при комнатной температуре в условиях атмосферы азота. После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям добавляли диизопропилазодикарбоксилат (1,94 г, 9,58 ммоль, 1,86 мл). Полученную в результате реакционную смесь подогревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в воду (60 мл) и добавляли этилацетат (60 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (80 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью колоночной хроматографии (элюент: простой петролейный эфир/этилацетат=1/0-11/1, объемное соотношение) с получением промежуточного соединения WX076-1.
Стадия 2: синтез промежуточного соединения WX076-2
Гидрохлорид трет-бутил-4-аминобутаноата (277,85 мг, 1,75 ммоль) и йодид калия (241,40 мг, 1,45 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (6 мл) при комнатной температуре, а затем по каплям добавляли триэтиламин (147,15 мг, 1,45 ммоль, 202,41 мкл) и добавляли промежуточное соединение WX076-1 (0,55 г, 1,45 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь выливали в воду (40 мл) и добавляли этилацетат (50 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (80 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: TFA) с получением промежуточного соединения WX076-2.
Стадия 3: синтез промежуточного соединения WX076-3
Промежуточное соединение WX076-2 (0,4 г, 876,17 мкмоль) растворяли в дихлорметане (8 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли трифторуксусную кислоту (1,4 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением промежуточного соединения WX076-3.
Стадия 4: синтез промежуточного соединения WX076-4
Промежуточное соединение WX076-3 (0,09 г, 206,00 мкмоль, гидрохлорид) растворяли в N,N-диметилформамиде (2 мл) при комнатной температуре, а затем добавляли гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N,N-тетраметилурония (117,49 мг, 309,01 мкмоль) и триэтиламин (62,54 мг, 618,01 мкмоль, 86,02 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением промежуточного соединения WX076-4.
Стадия 5: синтез WX076
Промежуточное соединение WX076-4 (0,06 г, 156,90 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (2 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли акриламид (11,15 мг, 156,90 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия в тетрагидрофуране (1 M, 156,90 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции pH реакционной смеси доводили до 5-6 посредством 4 M гидрохлорида этилацетата, а затем ее концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX076. MS-ESI m/z: 408,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,12 (s, 1H), 8,15 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,09 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,90 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,68 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,36 (dd, J=2,6, 9,0 Гц, 1H), 5,02 (dd, J=4,6, 11,4 Гц, 1H), 4,25 (t, J=5,4 Гц, 2H), 3,63 (t, J=5,4 Гц, 2H), 3,50 (t, J=7,0 Гц, 2H), 2,87-2,80 (m, 1H), 2,67-2,65 (m, 1H), 2,58-2,54 (m, 1H), 2,42-2,35 (m, 1H), 2,23 (t, J=8,0 Гц, 2H), 1,99-1,87 (m, 2H).
Пример 77: WX077
Стадия 1: синтез WX077
Промежуточное соединение WX056 (100 мг, 338,65 мкмоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (5 мл) при 15°C, а затем последовательно добавляли уксусную кислоту (20,34 мг, 338,65 мкмоль, 19,37 мкл) и водный раствор формальдегида (60,46 мг, 745,02 мкмоль, 55,47 мкл, степень чистоты: 37%). После перемешивания реакционной смеси при 15°C в течение 30 минут добавляли триацетоксиборогидрид натрия (143,55 мг, 677,30 мкмоль). После перемешивания при 15°C в течение 12 ч реакционную смесь дополняли водным раствором формальдегида (30 мкл, степень чистоты: 37%). Полученную в результате реакционную смесь затем перемешивали при 15°C в течение 8 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX077. MS-ESI m/z: 324,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,13 (s, 1H), 8,14 (d, J=9,2 Гц, 1H), 8,08 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,87 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 5,01 (dd, J=4,8, 11,6 Гц, 1H), 3,10 (s, 6H), 2,92-2,78 (m, 1H), 2,70-2,54 (m, 2H), 2,41-2,30 (m, 1H).
Пример 78: WX078
Стадия 1: синтез промежуточного соединения WX078-1
Промежуточное соединение WX070-9 (300 мг, 1,22 ммоль) растворяли в ацетоне (5 мл) при комнатной температуре. После охлаждения реакционной смеси до 0°C последовательно добавляли карбонат калия (338,14 мг, 2,45 ммоль) и йодметан (156,27 мг, 1,10 ммоль, 68,54 мкл). После подогревания до комнатной температуры и перемешивания в течение 12 ч реакционную смесь дополняли йодметаном (100 мкл). Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции реакционную смесь непосредственно фильтровали. Фильтрационный осадок промывали этилацетатом (10 мл × 2), а маточный раствор собирали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью пластинки силикагеля (проявляющий растворитель: простой петролейный эфир/этилацетат=1/1) с получением промежуточного соединения WX078-1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,11 (s, 1H), 7,64 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,60 (d, J=9,2 Гц, 1H), 4,22 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4,19 (s, 5H), 1,24 (t, J=7,0 Гц, 3H).
Стадия 2: синтез WX078
Промежуточное соединение WX078-1 (50 мг, 192,86 мкмоль) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) при комнатной температуре, а затем последовательно добавляли акриламид (13,71 мг, 192,86 мкмоль) и раствор трет-бутоксида калия в тетрагидрофуране (1 M, 192,86 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После завершения реакции к реакционной смеси добавляли воду (20 мл) и добавляли этилацетат (20 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, а фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью препаративной HPLC (подвижная фаза: ацетонитрил/вода; кислотная система: 0,05% HCl) с получением целевого соединения WX078. MS-ESI m/z: 285,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,17 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,02 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,84 (d, J=9,6 Гц, 1H), 4,77 (dd, J=5,0, 12,2 Гц, 1H), 4,17 (s, 3H), 2,92-2,78 (m, 1H), 2,70-2,66 (m, 1H), 2,57-2,52 (m, 1H), 2,31-2,21 (m, 1H).
Пример 79: WX079
Промежуточное соединение WX009 (50 мг, 182,41 мкмоль, степень чистоты: 98,23%) растворяли в N,N-диметилформамиде (5 мл) при 0°C в условиях атмосферы азота, а затем добавляли трет-бутоксид калия (40,94 мг, 364,82 мкмоль) и диметилсульфат (98,23 мг, 778,79 мкмоль, 73,86 мкл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. После завершения реакции добавляли воду (20 мл) и добавляли этилацетат (30 мл × 3) для экстракции. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (50 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления до удаления растворителя. Полученный в результате остаток разделяли с помощью SFC (колонка: Chiralpak AD-3 50×4,6 мм внутренний диаметр: 3 мкм; подвижная фаза: A: CO2, B: метанол (0,05% диэтаноламин); градиент: от 5% до 40% раствора B за 2 минуты и удерживали 40% в течение 1,2 минуты, затем 5% раствора B в течение 0,8 минуты; скорость потока: 4 мл/мин; температура колонки: 35°C; давление: 1500 psi) с получением целевого соединения WX079. MS-ESI m/z: 284,1 [M+H]+,1H ЯМР (400 МГц, DMSO_d 6 ) δ: 11,71 (s, 1H), 7,73 (d, J=8,8 Гц, 1H),7,54 (d, J=4,8 Гц, 1H), 7,44 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,50 (s, 1H), 4,78 (dd, J=5,0, 11,8 Гц, 1H), 3,11 (s, 3H), 3,02-2,88 (m, 1H), 2,85-2,65 (m, 1H), 2,49-2,41 (m, 1H), 2,33-2,12 (m, 1H).
Экспериментальный пример 1: in vitro анализ уровня белка IKZF3 в клетках множественной миеломы
Цель эксперимента
С помощью способа WB исследовали соединения на предмет того, как они в различных концентрациях изменяют уровень белка IKZF3 в клетках множественной миеломы MM.1S.
Процедура эксперимента
1) клетки MM.1S размораживали и дважды пересеивали;
2) клетки MM.1S инокулировали в 6-луночный планшет в количестве 1×106 клеток на лунку, а затем обрабатывали тестируемым соединением в определенной концентрации;
3) спустя 16 часов после обработки образец культивированных клеток растворяли в буфере RIPA (Sigma-Aldrich) или буфере NETN (150 мМ NaCl, 1% NP-40, 50 мМ Tris-HCl, pH 8,0), содержащем полный ингибитор гистонов (Roche), помещали на лед и оставляли отстаиваться на 20 минут;
4) после центрифугирования (скорость вращения: 17950 об./мин) в течение 15 минут собирали надосадочную жидкость и проводили количественное определение белка (набор для анализа белков с использованием BCA, Pierce, от компания Thermo);
5) с помощью SDS-PAGE отделяли равное количество белка по 20 мкг из каждого образца и переносили на PVDF или найлоновую мембрану (Invitrogen);
6) добавляли 5% сухого обезжиренного молока с последующей инкубацией в течение ночи в 5% BSA с первичным антителом (антителом к IKZF3 (NBP2-24495, Novus Biologicals) и антителом к актину (1844-1, Epitomics)) при температуре 4°C;
7) после окончательной реакции со связанным с HRP вторичным антителом (антителом козы к IgG кролика (sc-2004, Santa Cruz)) в течение 1 часа детектировали бэнды на мембране с помощью хемилюминесцентного субстрата (Thermo Scientific).
Результаты экспериментов показаны на фиг.1, 2 и 3.
Экспериментальный пример 2: оценка антипролиферативного действия на клеточных линиях множественной миеломы MM.1S и NCI-H929
Цель эксперимента: в данном эксперименте выявляли ингибирование тестируемыми соединениями пролиферации клеток в линиях клеток множественной миеломы MM.1S и NCI-H929.
Материалы, использованные в ходе эксперимента
1. Линия клеток и способ культивирования
Линия клеток Тип опухоли Характеристики роста Способ культивирования
MM.1S Множественная миелома Полуадгезия RPMI-1640+10%FBS
NCI-H929 Миелома Суспензия RPMI-1640+0,05 мM 2-меркаптоэтанола+10%FBS
2. Среда для культивирования и реагент
Среда для культивирования и реагент Производитель Номер в каталоге
RPMI 1640 GIBCO 22400-089
PBS по Дульбекко Hyclone SH30256.01
FBS Hyclone SY30087.03
Антибиотик-антимикотик GIBCO 15240-062
0,25% трипсин GIBC®O 25200072
DMSO SIGMA D2650
2-меркаптоэтанол SIGMA 60-24-2
3. Многолуночный планшет
96-луночный планшет Greiner CELLSTAR®, плоскодонная рабочая область (с крышкой и прозрачным дном), №655090.
4. Реагент и прибор для эксперимента по определению жизнеспособности клеток
(1) Набор для анализа жизнеспособности клеток с помощью люминесцентного способа Promega CellTiter-Glo (Promega-G7573).
(2) Планшет-ридер EnVision® 2104, PerkinElmer.
Процедура эксперимента
1. Культивирование клеток
Линии опухолевых клеток культивировали в термостате при 37°C/5% CO2 в соответствии с вышеупомянутыми условиями культивирования. Выполняли периодическое пересеивание, а для посева отбирали клетки в логарифмической фазе роста.
2. Нанесение покрытия клеток
(1) Клетки окрашивали трипановым синим и подсчитывали жизнеспособные клетки.
(2) Концентрацию клеток доводили до подходящего уровня.
Линия клеток Плотность (на 96 лунок)
MM.1S 4000
NCI-H929 6000
(3) В каждую лунку планшета для культивирования добавляли 90 мкл клеточной суспензии, а в пустые контрольные лунки добавляли бесклеточную среду в соответствии с представленной выше таблицей.
(4) Планшет для культивирования инкубировали в течение ночи в термостате при 37°C/5% CO2 и 100% относительной влажности.
3. Подготовка планшета для хранения соединения
Подготовка планшета для хранения маточного раствора с концентрацией, в 400 раз превышающей исходную концентрацию соединения: с помощью DMSO соединение разводили от максимального градиента концентрации до наиболее низкой концентрации. Свежий раствор готовили непосредственно перед применением.
4. Приготовление рабочего раствора с концентрацией, в 10 раз превышающей исходную концентрацию соединения, и обработка клеток соединением
(1) Приготовление рабочего раствора с концентрацией, в 10 раз превышающей исходную концентрацию соединения: 76 мкл раствора культуры клеток вносили в 96-луночный планшет с V-образным дном и из планшета для хранения материнского раствора с концентрацией, в 200 раз превышающей исходную концентрацию соединения, забирали пипеткой 4 мкл соединения и вносили в культуру клеток в 96-луночном планшете. В лунки контрольной среды и холостого контроля вносили 4 мкл DMSO. После добавления соединения или DMSO смесь пипетировали и тщательно перемешивали, и 78 мкл культуры клеток вносили в 96-луночный планшет с V-образным дном, и из планшета для хранения материнского раствора с концентрацией, в 400 раз превышающей исходную концентрацию соединения, забирали пипеткой 2 мкл соединения и вносили в культуру клеток в 96-луночном планшете. В лунки контрольной среды и холостого контроля вносили 2 мкл DMSO. После добавления соединения или DMSO смесь пипетировали и тщательно перемешивали.
(2) Внесение дозы: в планшет для культивирования клеток вносили 10 мкл рабочего раствора с концентрацией, в 10 раз превышающей исходную концентрацию соединения. В лунки контрольной среды и холостого контроля вносили 10 мкл смеси культуры клеток и DMSO.
(3) 96-луночный планшет с клетками снова помещали в термостат для культивирования MM.1S (3-кратное разведение, 5 суток совместной инкубации с соединением) и NCI-H929 (3-кратное разведение, 5 суток совместной инкубации с соединением).
5. Анализ жизнеспособности клеток люминесцентным способом CellTiter-Glo
Следующую процедуру проводили в соответствии с инструкциями из набора для люминесцентного анализа жизнеспособности клеток Promega CellTiter-Glo (Promega-G7573).
(1) Буфер CellTiter-Glo размораживали и оставляли отстаиваться до достижения комнатной температуры.
(2) Субстрат CellTiter-Glo оставляли отстаиваться до достижения комнатной температуры.
(3) В емкость с субстратом CellTiter-Glo вносили 10 мл буфера CellTiter-Glo для растворения субстрата, получая таким образом рабочий раствор CellTiter-Glo.
(4) Производили медленное встряхивание на вортексе до полного растворения субстрата.
(5) Вынимали планшет для культивирования клеток и оставляли на 30 минут для уравновешивания до комнатной температуры.
(6) В каждую лунку вносили 50 мкл (что равно половине объема культуры клеток в каждой лунке) рабочего раствора CellTiter-Glo. Планшет с клетками заворачивали в алюминиевую фольгу для защиты от света.
(7) Планшет встряхивали на орбитальном шейкере в течение 2 минут для индукции лизиса клеток.
(8) Планшет для культивирования помещали в условия комнатной температуры на 10 минут для стабилизации люминесцентных сигналов.
(9) Люминесцентные сигналы детектировали на планшет-ридере 2104 EnVision.
6. Анализ данных
Значения степени ингибирования (IR) у детектируемых соединений рассчитывали по следующей формуле: IR (%)=(RLU контрольной среды - RLU соединения) / (RLU контрольной среды - RLU холостого контроля) × 100%. Значения степени ингибирования у соединений в различных концентрациях рассчитывали в Excel с последующим построением кривых ингибирования и расчетом соответствующих параметров, в том числе минимальной степени ингибирования (%), максимальной степени ингибирования (%) и IC50, с помощью программного обеспечения GraphPad Prism.
Результаты экспериментов: результаты тестов показаны в таблице 1.
Таблица 1. Ингибирование пролиферации клеток в линиях клеток MM.1S и NCI-H929 при помощи раскрываемых в настоящем документе соединений
Соединение IC50 MM.1S (нM) IC50 NCI-H929 (нM)
WX004 6,6 21,2
WX005 / 19,1
WX006 2 /
WX009 0,4 0,5
WX013 4,5 /
WX015 3,8 /
WX023 6,4 10,3
WX027 3,4 /
Гидрохлорид WX039 2,6 /
Гидрохлорид WX050 2,9 /
WX061 3,4 /
WX065 4 /
WX070 8,9 13
Вывод
Раскрываемые в настоящем документе соединения характеризовались превосходным ингибированием пролиферации клеток в линиях клеток множественной миеломы MM.1S и NCI-H929.
Экспериментальный пример 3: фармакокинетическая оценка соединений на мышах
Цель эксперимента
Тестируемыми животными в данном исследовании были самцы мышей линии C57BL, и для количественного определения концентрации лекарственного средства в плазме мышей в различные моменты времени после внутривенной инъекции или перорального введения тестируемых соединений и эталонного соединения использовали LC/MS/MS способ, таким образом оценивая фармакокинетические характеристики тестируемых лекарственных соединений на мышах.
Материалы, использованные в ходе эксперимента
Мыши линии C57Balb/C (C57) (самцы, 20-30 г, возрастом 7-10 недель, Beijing Vital River или Shanghai SLAC).
Процедура эксперимента
Прозрачный или суспендированный раствор тестируемого соединения вводили через хвостовую вену мышам линии C57 (которых держали без еды в течение ночи) или вводили внутрижелудочно мышам линии C57 (которых держали без еды в течение ночи). В случае внутривенной инъекции 200 мкл крови каждый раз собирали путем пункции яремной вены в моменты времени 0 ч (перед инъекцией) и 0,0833 ч, 0,25 ч, 0,5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч и 24 ч (после инъекции), а затем помещали в антикоагуляционную пробирку с добавлением EDTA-K2 (Jiangsu KANGJIAN Medical Apparatus Co., Ltd.) и смесь тщательно перемешивали на вортексе при 4°C и центрифугировали на скорости 13000 об./мин в течение 10 мин; в случае внутрижелудочного введения кровь собирали путем пункции яремной вены в моменты времени 0 ч (перед введением) и 0,5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч и 24 ч (после введения), а затем помещали в антикоагуляционную пробирку с добавлением EDTA-K2 (Jiangsu KANGJIAN Medical Apparatus Co., Ltd.) и смесь тщательно перемешивали на вортексе и центрифугировали на скорости 13000 об./мин в течение 10 минут.Концентрацию в плазме измеряли с помощью LC-MS/MS способа и соответствующие фармакокинетические параметры рассчитывали с помощью фармакокинетического программного обеспечения WinNonlin™ версии 6.3 (Pharsight, Маунтин-Вью, Калифорния) с использованием линейно-логарифмического метода трапеций с некомпартментной моделью.
Результаты экспериментов: результаты тестов показаны в таблице 2.
Таблица 2. Фармакокинетические параметры раскрываемых в настоящем документе соединений у мышей
Фармакокинетические параметры у мышей Внутривенная инъекция (2 мг/кг) Пероральное введение
(10 мг/кг)
Плазменный клиренс (мл/мин/кг) Период полувыведения (ч) Площадь под кривой зависимости концентрации в плазме от времени (0-inf, мкМ.ч) Пиковая концентрация (мкМ) Время до достижения пиковой концентрации (ч) Площадь под кривой зависимости концентрации в плазме от времени (0-inf, мкМ.ч) Биодоступность F (%)
WX009 23,2 0,89 5,34 10,52 0,25 12,29 46,1
WX023 11,8 3,37 6,87 17,50 0,25 34,40 100,3
Экспериментальный пример 4: фармакокинетическая оценка соединений на крысах
Цель эксперимента
Тестируемыми животными в данном исследовании были самцы крыс линии SD, и для количественного определения концентрации лекарственного средства в плазме крыс в различные моменты времени после внутривенной инъекции или перорального введения тестируемых соединений и эталонного соединения использовали LC/MS/MS способ, таким образом оценивая фармакокинетические характеристики тестируемых лекарственных соединений на крысах.
Материалы, использованные в ходе эксперимента
Крысы линии Sprague Dawley (SD) (самцы, 200-300 г, возрастом 7-10 недель, Beijing Vital River или Shanghai SLAC).
Процедура эксперимента
Прозрачный раствор тестируемого соединения вводили через хвостовую вену крысам линии SD (которых держали без еды в течение ночи) или вводили внутрижелудочно крысам линии SD (которых держали без еды в течение ночи). В случае внутривенной инъекции 200 мкл крови каждый раз собирали путем пункции яремной вены в моменты времени 0 ч (перед инъекцией) и 0,0833 ч, 0,25 ч, 0,5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч и 24 ч (после инъекции), а затем помещали в антикоагуляционную пробирку с добавлением EDTA-K2 (Jiangsu KANGJIAN Medical Apparatus Co., Ltd.) и смесь тщательно перемешивали на вортексе при 4°C и центрифугировали на скорости 13000 об./мин в течение 10 мин; в случае внутрижелудочного введения кровь собирали путем пункции яремной вены в моменты времени 0 ч (перед введением) и 0,5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч и 24 ч (после введения), а затем помещали в антикоагуляционную пробирку с добавлением EDTA-K2 (Jiangsu KANGJIAN Medical Apparatus Co., Ltd.) и смесь тщательно перемешивали на вортексе и центрифугировали на скорости 13000 об./мин в течение 10 минут.Концентрацию в плазме измеряли с помощью LC-MS/MS способа и соответствующие фармакокинетические параметры рассчитывали с помощью фармакокинетического программного обеспечения WinNonlin™ версии 6.3 (Pharsight, Маунтин-Вью, Калифорния) с использованием линейно-логарифмического метода трапеций с некомпартментной моделью.
Результаты экспериментов: результаты тестов показаны в таблице 3.
Таблица 3. Фармакокинетические параметры раскрываемых в настоящем документе соединений у крыс
Фармакокинетические параметры у крыс Внутривенная инъекция (2 мг/кг) Внутрижелудочное введение (10 мг/кг)
Плазменный клиренс (мл/мин/кг) Период полувыведения (ч) Площадь под кривой зависимости концентрации в плазме от времени (0-inf, мкМ.ч) Пиковая концентрация (мкМ) Время до достижения пиковой концентрации (ч) Площадь под кривой зависимости концентрации в плазме от времени (0-inf, мкМ.ч) Биодоступность F (%)
WX009 15,9 0,90 7,92 12,75 0,50 26,34 66,5
WX023 21,7 1,24 3,76 3,08 0,75 19,69 73,7
Экспериментальный пример 5: in vivo фармакодинамическое изучение соединений у модели CB-17SCID с подкожным ксенотрансплантатом опухоли, развившейся из клеток миеломы человека MM.1S
Культивирование клеток: клетки множественной миеломы человека MM.1S (ATCC® CRL-2974™) культивировали in vitro полусуспендированным способом с составленной в ATCC средой RPMI-1640, содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки, 100 ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина, в термостате при 37°C/5% CO2. Пересеивание проводили дважды в неделю. При достижении требуемого количестве клетки забирали из среды, подсчитывали и инокулировали.
Животные: мыши линии CB-17 SCID, самки, возрастом 6-8 недель, массой 18-20 г.
Процедура эксперимента
0,2 мл (5×106 клеток) клеток MM.1S (вместе с матригелем в объемном соотношении 1:1) подкожно инокулировали в правую часть спины каждой мыши и после достижения среднего объема опухоли примерно 130 мм3 мышей разделяли на группы для введения соединения. Цикл введения составлял семь суток, дважды в сутки с интервалом в 12 часов, и тестируемое соединение вводили перорально в течение итого четырех циклов. Тестируемые соединения WX009 и WX023 вводили дозой 5 мг/кг, объем опухоли измеряли дважды в неделю с помощью двумерного штангенциркуля и данный объем измеряли в кубических миллиметрах и рассчитывали по следующей формуле: V=0,5 a × b2, где a и b соответственно обозначали длинный и короткий диаметр опухоли. Противоопухолевую эффективность определяли путем деления среднего увеличения объема опухоли у животных, обрабатываемых соединением, на среднее увеличение объема опухоли у животных без обработки.
Результаты экспериментов
Результаты тестов показаны в таблице 4.
Таблица 4. Результаты тестирования соединений у модели CB-17 SCID с подкожным ксенотрансплантатом опухоли, развившейся из клеток миеломы человека MM.1S
Группа Вводимая доза Объем опухоли (мм3)
(0-е сутки)		 Объем опухоли (мм3)
(24-е сутки)		 TGI (%)
(24-е сутки)
Контрольная среда 0 мг/кг 130±9 2637±332 /
WX009 5 мг/кг 131±12 14±5 105
WX023 5 мг/кг 130±8 15±4 105
TGI: ингибирование роста опухоли. TGI(%)=[1 - (средний объем опухоли в группе обработки в конце введения - средний объем опухоли в группе обработки во время введения) / (средний объем опухоли в группе контрольного растворителя в конце обработки - средний объем опухоли объем в группе контрольного растворителя в начале обработки)] × 100%.

Claims (31)

1. Соединение, представленное формулой (I), или его фармацевтически приемлемая соль,
,
где n выбран из группы, состоящей из 0, 1 и 2;
каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, C1-6-алкила, C3-6-циклоалкила, C1-6-алкокси, C1-6-алкиламино, C2-6-алкенила, , -S(=O)2NH2, -NHS(=O)2-C1-6-алкила, -N[S(=O)2-C1-6-алкила]2, -NHC(=O)-C1-6-алкила и -C(=O)NH2, где NH2, C1-6-алкил, C1-6-алкокси, , -S(=O)2NH2 и -C(=O)NH2 необязательно замещены посредством 1 или 2 Ra;
кольцо A выбрано из группы, состоящей из 5-6-членного гетероарила, фенила и 5-6-членного гетероциклоалкенила;
кольцо B выбрано из группы, состоящей из фенила;
каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, C1-6-алкила, C1-6-алкокси, C1-6-алкиламино, -NHC(=O)-C1-6-алкила, C3-6-циклоалкиламино, 4-6-членного гетероциклоалкила, 5-6-членного гетероциклоалкиламино и 5-6-членного гетероциклоалкила, замещенного одним карбонилом, где NH2, C1-6-алкил, C1-6-алкиламино, C3-6-циклоалкиламино, 4-6-членный гетероциклоалкил и 5-6-членный гетероциклоалкиламино необязательно замещены посредством 1 или 2 R;
каждый R независимо выбран из группы, состоящей из C1-3-алкила, C1-3-алкокси, C3-5-циклоалкила, -C(=O)-C1-3-алкила, -C(=O)O-C1-6-алкила, -S(=O)2-C1-3-алкила, и ;
каждый из 5-6-членного гетероарила, 4-6-членного гетероциклоалкила, 5-6-членного гетероциклоалкиламино и 5-6-членного гетероциклоалкила, замещенного одним карбонилом, содержит 1 или 2 гетероатома или гетероатомных групп, независимо выбранных из группы, состоящей из -NH-, -O- и N.
2. Соединение по п. 1, где каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, C1-3-алкила, C1-3-алкокси, C1-3-алкиламино, -NHC(=O)-C1-3-алкила, циклогексиламино, азетидинила, пирролидин-2-она, тетрагидропирролила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, тетрагидропиранила, 3-азабицикло[3,1,0]гексила, азетидиниламино, тетрагидропирролиламино, тетрагидропирролила, пиперидиниламино, пиперазиниламино, морфолиниламино, тетрагидропираниламино и 3-азабицикло[3,1,0]гексиламино, где C1-3-алкил, C1-3-алкокси, C1-3-алкиламино, -NHC(=O)-C1-3-алкил, циклогексиламино, азетидинил, тетрагидропирролил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тетрагидропиранил, 3-азабицикло[3,1,0]гексил, азетидиниламино, тетрагидропирролиламино, пиперидиниламино, пиперазиниламино, морфолиниламино, тетрагидропираниламино и 3-азабицикло[3,1,0]гексиламино необязательно замещены посредством 1 или 2 R; предпочтительно каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, -CH3, -CH2CH3, , , , , -NHC(=O)CH3, , , , , , , , , , и , где -CH3, -CH2CH3, , , , -NHC(=O)CH3, , , , , , , , , , и необязательно замещены посредством 1 или 2 R.
3. Соединение по п. 1, где каждый Ra выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, -CH3, -CH2CH3, , и , где -CH3, -CH2CH3, , и необязательно замещены посредством 1 или 2 R.
4. Соединение по п. 1, где каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, , , , , , , -NHC(=O)CH3, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , и .
5. Соединение по п. 1, где каждый R независимо выбран из группы, состоящей из C1-3-алкила, C1-3-алкокси, -C(=O)-C1-3-алкила, C3-5-циклоалкила, -C(=O)O-C1-4-алкила, -S(=O)2-C1-3-алкила, и ; предпочтительно каждый R независимо выбран из группы, состоящей из -CH3, , , , , , и .
6. Соединение по п. 1, где каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, C1-3-алкила, C3-5-циклоалкила, C1-3-алкокси, C1-3-алкиламино, C2-4-алкенила, , -S(=O)2NH2, -NHS(=O)2-C1-3-алкила, -N[S(=O)2-C1-3-алкила]2, -NHC(=O)-C1-3-алкила и -C(=O)NH2, где C1-3-алкил, C1-3-алкокси, , -S(=O)2NH2 и -C(=O)NH2 необязательно замещены посредством 1 или 2 Ra.
7. Соединение по п. 1, где каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, , , , и , где и необязательно замещены посредством 1 или 2 Ra; предпочтительно каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из OH, , , , , , , , и .
8. Соединение по п. 1, где каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, , , , , , , -S(=O)2NH2, и , где , , и необязательно замещены посредством 1 или 2 Ra; предпочтительно каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, , , , , , , -S(=O)2NH2, и , где , , и -S(=O)2NH2 необязательно замещены посредством 1 или 2 Ra; более предпочтительно каждый R1 независимо выбран из группы, состоящей из F, Cl, Br, OH, NH2, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , и .
9. Соединение по п. 1, где кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, 1,3-диоксолила, оксазолила, тиазолила, фуранила, 2,3-дигидрофуранила, пиридинила, 2,3-дигидропиридинила, пиразолила, 4,5-дигидро-1H-пиразолила, оксазолила, 4,5-дигидрооксазолила, пирролила и 2,3-дигидро-1H-пирролила; предпочтительно кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, оксазолила, тиазолила и фуранила; более предпочтительно кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила и оксазолила.
10. Соединение по п. 1, где кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, оксазолила, тиазолила, фуранила, пиридинила и пирролила; предпочтительно кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила, фуранила, пиридинила и пирролила; более предпочтительно кольцо A выбрано из группы, состоящей из фенила и фуранила.
11. Соединение по п. 1, где структурная единица выбрана из группы, состоящей из , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , и .
12. Соединение по п. 1, где структурная единица выбрана из группы, состоящей из и .
13. Соединение по п. 1, где структурная единица выбрана из группы, состоящей из , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , и .
14. Соединение по п. 1, выбранное из группы, состоящей из
и ,
где n, кольцо A и R1 имеют определение согласно п. 1.
15. Соединение, представленное приведенной ниже формулой, и его фармацевтически приемлемая соль, выбранные из группы, состоящей из:
.
16. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, связанного с белком CRBN, содержащая терапевтически эффективное количество соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-15 в качестве действующего ингредиента и фармацевтически приемлемый носитель.
17. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-15 и фармацевтической композиции по п. 16 при приготовлении лекарственного препарата для лечения заболевания, связанного с белком CRBN.
18. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-15 и фармацевтическая композиция по п. 16 для лечения заболевания, связанного с белком CRBN.
19. Способ лечения заболевания, связанного с белком CRBN, предусматривающий введение терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-15 и фармацевтической композиции по п. 16.
20. Способ по п. 19, где заболевание, связанное с белком CRBN, представляет собой множественную миелому.
RU2021107688A 2018-09-07 2019-09-09 Трициклические соединения, действующие на белки crbn RU2801068C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811045941.1 2018-09-07
CN201811354986.7 2018-11-14
CN201910222597.7 2019-03-22

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2021107688A RU2021107688A (ru) 2022-10-07
RU2801068C2 true RU2801068C2 (ru) 2023-08-01

Family

ID=

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007007919A2 (en) * 2005-07-14 2007-01-18 Astellas Pharma Inc. Heterocyclic janus kinase 3 inhibitors
WO2008156739A1 (en) * 2007-06-18 2008-12-24 Schering Corporation Heterocyclic compounds and use thereof as erk inhibitors
RU2448101C2 (ru) * 2006-08-30 2012-04-20 Селджин Корпорейшн 5-замещенные изоиндолиновые соединения
WO2016146583A1 (en) * 2015-03-13 2016-09-22 4Sc Discovery Gmbh Kv1.3 inhibitors and their medical application
WO2017152076A1 (en) * 2016-03-04 2017-09-08 Vanderbilt University Substituted indole mcl-1 inhibitors
US20180228907A1 (en) * 2014-04-14 2018-08-16 Arvinas, Inc. Cereblon ligands and bifunctional compounds comprising the same

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007007919A2 (en) * 2005-07-14 2007-01-18 Astellas Pharma Inc. Heterocyclic janus kinase 3 inhibitors
RU2448101C2 (ru) * 2006-08-30 2012-04-20 Селджин Корпорейшн 5-замещенные изоиндолиновые соединения
WO2008156739A1 (en) * 2007-06-18 2008-12-24 Schering Corporation Heterocyclic compounds and use thereof as erk inhibitors
US20180228907A1 (en) * 2014-04-14 2018-08-16 Arvinas, Inc. Cereblon ligands and bifunctional compounds comprising the same
WO2016146583A1 (en) * 2015-03-13 2016-09-22 4Sc Discovery Gmbh Kv1.3 inhibitors and their medical application
WO2017152076A1 (en) * 2016-03-04 2017-09-08 Vanderbilt University Substituted indole mcl-1 inhibitors

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7422139B2 (ja) Ｃｒｂｎタンパク質に作用する三環式化合物
AU2020267169B2 (en) Processes of making and crystalline forms of a MDM2 inhibitor
JP7098825B2 (ja) 三環式置換ピペリジンジオン類化合物
EP4069691A1 (en) Substituted tetrahydrofurans as modulators of sodium channels
US11319330B2 (en) Tricyclic furan-substituted piperidinedione compound
RU2720677C1 (ru) Соединение, представляющее собой пролекарство ланостерина, а также способ его получения и его применение
CN112105610A (zh) 作为pd1/pd-l1相互作用/活化的抑制剂的双环化合物
CN112689507A (zh) 具有无支链接头的氨基酸化合物及其使用方法
JP7212763B2 (ja) ＫＥＡＰ１－Ｎｒｆ２タンパク質－タンパク質相互作用の阻害剤
CN111285850A (zh) 一类异吲哚啉类化合物、其制备方法、药物组合物及其应用
KR20240031300A (ko) 나트륨 채널 조절제로서의 n-(하이드록시알킬 (헤테로)아릴) 테트라하이드로푸란 카르복스아미드
KR20210095143A (ko) Hbv의 치료를 위한 5원 헤테로아릴 카르복스아미드 화합물
JP2021528398A (ja) ＲＯＲγＴのモジュレーターとしての６−アミノピリジン−３−イルピラゾール
KR20240024060A (ko) 인테그린 억제제에 대한 확장된 투여량 요법
JP7057427B2 (ja) 寄生虫感染の処置のための新規化合物
JP2022550641A (ja) Ｋｖ１．３カリウムシェーカーチャネル遮断薬としてのアリール複素二環式化合物
RU2801068C2 (ru) Трициклические соединения, действующие на белки crbn
TW201930268A (zh) 吲哚胺2,3-雙加氧酶抑制劑以及它們在醫學上的應用
JP6656246B2 (ja) プロキネチシン介在消化器疾患を治療するためのスルホニルピペリジン誘導体及びその使用
JP2023525933A (ja) Ｒｅｔキナーゼ阻害剤としての化合物およびその応用
CN115785094B (zh) 苄基取代α-咔啉化合物或其药用盐、其药物组合物及其制备方法和用途
JP2022551198A (ja) Ｋｖ１．３カリウムシェーカーチャネル遮断薬としてのアリールメチレン複素環式化合物
WO2023047107A1 (en) Aryl or heteroaryl derived compounds for the treatments of microbial infections
EA047707B1 (ru) Ингибитор sos1, содержащий фосфор