RU2750267C1 - Рекомбинантный ростовой дифференцировочный фактор роста 11 (GDF11), способ его получения, инъекционный препарат для повышения мышечной массы млекопитающих животных и птицы, а также способ использования препарата - Google Patents

Рекомбинантный ростовой дифференцировочный фактор роста 11 (GDF11), способ его получения, инъекционный препарат для повышения мышечной массы млекопитающих животных и птицы, а также способ использования препарата Download PDF

Info

Publication number
RU2750267C1
RU2750267C1 RU2020105836A RU2020105836A RU2750267C1 RU 2750267 C1 RU2750267 C1 RU 2750267C1 RU 2020105836 A RU2020105836 A RU 2020105836A RU 2020105836 A RU2020105836 A RU 2020105836A RU 2750267 C1 RU2750267 C1 RU 2750267C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
gdf11
protein
drug
glucan
gbd
Prior art date
Application number
RU2020105836A
Other languages
English (en)
Inventor
Владимир Глебович Лунин
Дмитрий Павлович Кузнецов
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью «НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ОБЪЕДИНЕНИЕ ИН-ВЕТ»
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью «НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ОБЪЕДИНЕНИЕ ИН-ВЕТ» filed Critical Общество с ограниченной ответственностью «НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ОБЪЕДИНЕНИЕ ИН-ВЕТ»
Priority to RU2020105836A priority Critical patent/RU2750267C1/ru
Priority to CN202180007896.4A priority patent/CN115003690B/zh
Priority to PCT/RU2021/050009 priority patent/WO2021158146A1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2750267C1 publication Critical patent/RU2750267C1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1841—Transforming growth factor [TGF]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
    • C07K1/22—Affinity chromatography or related techniques based upon selective absorption processes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
    • C07K14/495—Transforming growth factor [TGF]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione

Abstract

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению рекомбинантного иммунологически активного белка фактора роста и дифференцировки 11 (GDF11), который может быть использован для повышения мясной продуктивности сельскохозяйственных животных и увеличения их мышечной массы за счет индукции синтеза специфических аутоантител к GDF11, блокирования его действия и, как следствие, стимуляции роста мыщечной ткани. Получают рекомбинантный белок, включающий GDF11 и глюкансвязывающий домен. Разработан способ получения целевого белка на глюкане, который включает в себя связывание белка с глюкансодержащим сорбентом за счет аффинного взаимодействия, последующую отмывку от несвязавшихся бактериальных белков и выделение целевого продукта. Также получен инъекционный препарат на основе указанного белка и предложен способ повышения мышечной массы сельскохозяйственных животных, включающий проведение подкожных или внутримышечных инъекций препарата. Изобретение обеспечивает получение рекомбинантного белка GDF11, легко поддающегося очистке и обладающего достаточной иммуногенностью в отношении GDF11. 4 н.п. ф-лы, 6 табл., 5 пр.

Description

Группа изобретений относится к генной инженерии, биотехнологии и ветеринарии, а конкретно к рекомбинантному дифференцировочный фактор роста 11, способу его получения, иммуногенной композиции, содержащей в качестве антигена GDF11, инъекционный препарат для повышения мышечной массы млекопитающих животных и птицы, а также метод использования указанного инъекционного препарата для увеличения мышечной массы животных.
Уровень техники
Белок GDF11, дифференцировочный фактор роста 11 (growth differentiation factor-11), относится к суперсемейству TGF-β трансформирующего фактора роста β (transforming growth factor-β). GDF11 представляет собой белок гомологичный миостатину, который действует как ингибитор роста различных тканей. GDF11 может связываться с теми же рецепторами суперсемейства TGF-бета типа I ACVR1B (ALK4), TGFBR1 (ALK5) и ACVR1C (ALK7) что и миостатин, но преимущественно использует ALK4 и ALK5 для передачи сигнала (Andersson O, Reissmann E, Ibáñez CF 2006 EMBO Reports. 7 (8): 831-7).
Из уровня техники известен патент США № 6096506, в котором раскрыто антитело, которое специфически реагирует с полипептидом миостатина. Также известен способ увеличения мышечной массы у животного путем введения моноклонального антитела против миотатина и блокирования его активности (патент США № 6468535) и способ получения слитого белка с последовательностью миостатина, способного в составе иммуногенной композиции индуцировать синтез специфических аутоантител к миостатину, блокировать его действие и, как следствие, стимулировать рост мышечной ткани (патент РФ № 2613420).
GDF11 тесно связан с миостатином, негативным регулятором роста мышц (McPherron AC, Lee SJ 1997 Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94(23):12457-61). Миостатин и GDF11 участвуют в регуляции пролиферации кардиомиоцитов. Сходство между GDF11 и миостатином подразумевают вероятность того, что используются одни и те же регулирующие механизмы, которые задействованы для регуляции размера ткани как мышечной, так костной и хрящевой. (Egerman MA et al. Cell Metab. 2015 22(1):164-74; Zimmers TA et al. 2017 Basic Res Cardiol. 112(4):48). Следовательно, блокирование активности GDF11 должно приводит к значительному увеличению мышечной массы организма.
Авторы настоящего изобретения получили неожиданный и воспроизводимый результат, демонстрирующий что слитный рекомбинантный белок с GDF11, иммуногенная композиции с этим белком и вакцинация может быть использована для увеличения мышечной массы организма.
Сущность изобретения
Техническая проблема, на решение которой направлена заявляемая группа изобретений, заключается в создании рекомбинантного иммунологически активного GDF11-содержащего белка, легко поддающегося очистке и обладающего достаточной иммуногенностью в отношении GDF11 как антигена, который может быть использован для повышения мясной продуктивности сельскохозяйственных животных (крупный рогатый скот, свиньи, лошади, кролики и т.д.) и птицы за счет индукции синтеза специфических аутоантител к GDF11, блокировании его действия и, как следствие, стимуляции роста мышечной ткани. Другая техническая проблема, на решение которой направлена заявляемая группа изобретений, заключается в разработке препарата на основе указанного белка и в создании способа использования этого препарата, решающего задачу повышения мясной продуктивности сельскохозяйственных животных и птицы при условии несистематического применения препарата. Следует отметить, что аминокислотная последовательность GDF11 идентична у всех млекопитающих животных и птиц. Вследствие этого разработанный препарат является универсальным средством для повышения мясной продуктивности сельскохозяйственных животных и птицы.
Технический результат, достигаемый при реализации заявляемой группы изобретений, заключается в расширении арсенала средств и методов, обеспечивающих повышение продуктивности скота и птицы.
Указанный технический результат достигается за счет рекомбинантного белка с молекулярной массой 35,9 кДа, включающего фрагмент белка фактора роста и дифференцировки 11 (GDF11) с последовательностью SEQ ID NO:1, Гли-Сер спейсер с последовательностью SEQ ID NO: 2, альфа-глюкансвязывающий домен (GBD) гена из Streptococcus mutans с последовательностью SEQ ID NO: 3 и последовательность нуклеотидов гена GDF11-GBD SEQ ID NO: 4.
Технический результат также достигается в способе получения рекомбинантного белка GDF11 (GDF11-GBD) на глюкане, который включает:
- выращивание клеток штамма E. сoli, экспрессирующих ген GDF11-GBD;
- связывание белка GDF11-GBD в составе клеточных экстрактов штамма E. coli BL21 [pGDF11-GBD] с глюкансодержащим (альфа-глюкансодержащем) сорбентом за счет аффинного взаимодействия при процедуре инкубации;
- последующую отмывку от несвязавшихся бактериальных белков и выделение целевого продукта.
В качестве глюкансодержащего сорбента (глюкана, альфа-глюкана) могут использоваться: пуллулан, гликоген, декстран, крахмал.
Рекомбинантный белок GDF11-GBD включает в себя белковую последовательность глюкансвязывающего домена, определяющего способность данного белка связываться с глюкансодержащим сорбентом, что позволяет проводить в одну стадию концентрирование, очистку и иммобилизацию белкового продукта на глюкане (альфа-глюкане, глюкансодержащем сорбенте). Иммобилизация на глюкане обеспечивается за счет присутствия в рекомбинантном белке глюкансвязывающего домена из альфа-глюкансвязывающего домена гена из Streptococcus mutans, который обладает высоким сродством к альфа-глюканам и обеспечивает необратимое связывание с глюкансодержащим сорбентом в широком диапазоне значений pH 6,0 - 9,0 и концентраций соли 0 - 3 М NaCl.
Поскольку в клетках E. coli отсутствуют белки, связывающиеся с альфа-глюканом, то синтезируемый в клетках E. coli рекомбинантный белок GDF11-GBD, является единственным белком клеток штамма-продуцента, прочно связывающимся с альфа-глюканом. Это обеспечивает возможность одностадийного получения высокоочищенного препарата рекомбинантного белка, иммобилизованного на глюкансодержащем сорбенте.
Технический результат достигается также за счет инъекционного препарата для повышения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы, который содержит рекомбинантный белок GDF11-GBD, охарактеризованный выше, суспендированный в среде из глюкансодержащего (альфа-глюкансодержащего) сорбента в приемлемом для инъекционного использования жидком адьюванте (носителе), а также за счет реализации метода повышения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы, который включает проведение подкожных или внутримышечных инъекций препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, суспендированный в среде из глюкансодержащего (альфа-глюканового) сорбента в приемлемом для инъекционного использования жидком носителе, в дозе 0,5 - 50 мкг указанного белка на один килограмм массы тела животного или птицы.
Таким образом, создан бифункциональный рекомбинантный белок GDF11-GBD, обладающий способностью самопроизвольно связываться с глюкансодержащим сорбентом, формируя высокоиммуногенную композицию в форме полиантигена, индуцировать синтез специфических аутоантител к GDF11 при введении животным и, как следствие, стимулировать рост мышечной ткани.
Получение рекомбинантного слитного белка GDF11 (GDF11-GBD)
На первом этапе осуществляют получение гена GDF11 с последующим его клонированием.
Ген GDF11 получали химико-ферментативным методом. Был спланирован олигонуклеотидный дуплекс, кодирующий соответствующий ген, оптимизированный для экспрессии в E.coli. Затем осуществляли получение плазмиды pGDF11-GBD, содержащей последовательности, кодирующие GDF11, cпейсер и глюкансвязывающий домен (GBD).
Получение штамма E. coli-продуцента рекомбинантного антигена GDF-11, соединенного с глюкансвязыващим доменом
Для получения штамма E. coli-продуцента рекомбинантного белка GDF11-GBD клетки E. coli BL21 трансформировали плазмидой pGDF11-GBD. В культуру добавляли 3 мкл 0,1 М раствора изопропил-бета-D-тиогалактопиранозида (ИПТГ) и выращивали в течение 3 часов при температуре 37°С. При сравнении спектра белков, синтезированных клетками штамма E. coli BL21 [pGDF11-GBD] обнаруживали появление дополнительной белковой полосы. Молекулярная масса дополнительной полосы соответствовала ожидаемой для рекомбинантного белка GDF11-GBD массе в 35,9 кДа. Уровень синтеза белков в E. coli определяли, сравнивая интенсивность окрашивания полосы рекомбинантного белка с полосой соответствующего белка - стандарта молекулярной массы. Было показано, что рекомбинантный белок GDF11-GBD синтезируется в клетках E.coli в нерастворимой форме в виде телец-включения.
Получение иммобилизованного на альфа-глюкане рекомбинантного белка (GDF11) GDF11-GBD
Для получения рекомбинантного белка клеточную культуру штамма E.coli BL21 [pGDF11-GBD] выращивали в 1000 мл среды LB с ампициллином (100 мкг/мл) при 37°C до оптической плотности, соответствующей 1 ед. поглощения при длине волны 550 нм. В среду добавляли 15 мкл 0,1 М раствора ИПТГ и выращивали в течение 3 часов. Клетки осаждали центрифугированием при 5500g в течение 15 минут.
Осадок ресуспендировали в фосфатном буфере с лизоцимом. Дополнительно суспензию обрабатывали ультразвуком. После центрифугирования при 6000g нерастворимый белок GDF11-GBD оставался в осадке. Осадок суспендировали в 8М мочевине, центрифугировали при 12000g 30 минут и отбирали надосадочную жидкость. Для иммобилизации рекомбинантного белка GDF11-GBD на глюкансодержащем сорбенте супернатант разводили физиологическим фосфатным буфером с нейтральным рН в четыре раза, добавляли 1/10 объема суспензии альфа-глюкана (пуллулана или гликогена или декстрана или крахмала), инкубировали при 25°C в течение 2 часов. Центрифугировали при частоте оборотов, равной 8000 об/мин, осадок ресуспендировали в фосфатном буфере; отмывку альфа-глюкана повторяли 3 раза. Иммобилизованный на альфа-глюкане антиген GDF11-GBD представлял собой суспензию сорбента с адсорбированными на нем белком. Степень чистоты препарата составляла не менее 90 %. Консервацию препарата проводили добавляя бензиловый спирт до концентрации 0,1 %.
Биологическое действие рекомбинантного белков GDF11-GBD
В предпочтительном варианте осуществления изобретения препарат содержит раствор рекомбинантного белка GDF-11-GBD в буфере с нейтральным рН, суспендированный в адъювантах: смеси раствора глюкана и водно-масляной суспензии MONTANIDE ISA 206 VG (50% на 50% по массе); MONTANIDE ISA 70 VG (30% на 70% по массе), 2, 3 или 6%-ной суспензии гидроокиси алюминия (от 5 до 30 % от общего объёма), либо в других коммерческих адъювантах, в соответствии с инструкцией производителя по их применению, и используется путем подкожных или внутримышечных инъекций препарата однократно или дважды с межинъекционным интервалом 20 - 30 суток в дозе 0,5-150 мкг рекомбинантного белка на один килограмм массы тела животного или птицы. Механизм действия препарата основан на временном блокировании активности эндогенного GDF11 с помощью аутоантител.
Эффективность применения препарата для повышения мышечной массы тела у сельскохозяйственных животных иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Влияние препарата с рекомбинантным белком GDF11-GBD на увеличение массы тела поросят
В условиях промышленного свиноводческого комплекса поросятам породы крупная белая в возрасте 90-120 суток с массой тела 20 - 25 кг был введен препарат, содержащий рекомбинантный белок GDF11-GBD, суспендированный в среде адъюванта: смеси из альфа-глюкана (50% по массе) и водно-масляной суспензии MONTANIDE ISA 206 VG (50% по массе) двукратно с интервалом 21 суток из расчета 0,10-150 мкг рекомбинантного белка на 1 кг живой массы тела животных. Препарат вводили подкожно. В каждой опытной и контрольной группе было по 10 животных. Животным контрольной группы препарат не вводился. Результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1
Удельная доза реком-бинантно-го белка, мкг/кг Средняя масса тела животных, при первой инъекции препарата, кг Средняя масса тела животных через 30 суток после первой инъекции препарата, кг % привеса к контрольной группе через 30 суток Средняя масса тела животных через 90 суток после второй инъекции препарата, кг % привеса к контрольной группе через 90 суток
0,1 19,7 39,9 -0,3 92,9 -0,3
0,3 20,5 41,1 2,8 96,3 3,3
0,5 20,2 42,2 5,5 105,7 13,4
5,0 21,0 44,3 10,8 114,3 22,6
50 20,5 46,9 17,3 120 28,8
100 20,7 47,1 17,8 119,9 28,6
110 20,5 47,3 18,3 119,8 28,5
130 21,0 47,4 18,5 120,1 28,9
150 20,2 47,3 18,3 119,9 28,6
Контроль 21,0 40 - 93,2 -
Как видно из представленных данных, двукратное (с интервалом 21 сутки) введение препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, привело к увеличению массы тела поросят через 90 суток после второй инъекции препарата при применении в дозе 0,5 мкг/кг рекомбинантного белка на 13,4% по отношению к этому показателю в контрольной группе; при применении препарата в дозе 50 мкг/кг рекомбинантного белка - на 28,8%; при применении препарата в дозе 100 мкг/кг рекомбинантного белка - на 28,6%. Таким образом, при введении препарата в дозах, лежащих в диапазоне от 0,5 до 150 мкг/кг наблюдался значимый прирост массы тела поросят относительно величины прироста в контрольной группе.
Кроме того, также было обнаружено, что даже однократное введение препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, обеспечивает значительный прирост массы тела поросят.
Важно отметить, что при введении препарата в дозах, лежащих вне диапазона доз 0,5-150 мкг/кг наблюдался существенный спад прироста массы тела поросят относительно величины прироста в контрольной группе.
В таблице 2 представлены уровни аутоантител к миостатину в сыворотках поросят после иммунизации препаратом, содержащим рекомбинантный белок GDF11-GBD (метод ИФА).
Таблица 2.
Результаты определения в ИФА уровня аутоантител к GDF11 в образцах сывороток поросят иммунизированных препаратом, содержащим рекомбинантный белок GDF11-GBD
2-кратная иммунизация с 21-суточным интервалом между иммунизациями Доза рекомбинантного белка GDF11-GBD на1кг
массы тела		 № поросенка Результаты ИФА сывороток поросят, полученных через n недель после иммунизации, ед/мл
n = 1 n = 3 n = 7
0,3 мкг 1 4 000 73 000 95 000
2 4 000 76 000 93 000
3 5 000 73000 94 000
4 4 000 72 000 96 000
5 4 000 69 000 94 000
6 3 000 77000 96 000
Ср. значение 4 000 73 333 94 666
0,5 мкг 1 4 000 95 000 139 000
2 3 000 109 000 135 000
3 5 000 102 000 146 000
4 4 000 98 000 133 000
5 3 000 101 000 142 000
6 4 000 104 000 139 000
Ср. значение 3 833 101 500 139 000
5,0 мкг 1 4 000 185 000 257 000
2 3 000 207 000 304 000
3 5 000 169 000 256 000
4 4 000 178 000 267 000
5 3 000 196 000 289 000
6 4 000 201 000 273 000
Ср. значение 3 833 189 333 274 333
50 мкг 1 4 000 309 000 443 000
2 5 000 344 000 437 000
3 5 000 303 000 396 000
4 4 000 301 700 417 000
5 4 000 329 000 448 000
6 5000 333 000 407 000
Ср. значение 4 500 319 950 424 667
100 мкг 1 6 000 339 000 412 000
2 5 000 314 000 417 000
3 5 000 323 000 406 000
4 5 000 354 000 438 000
5 5 000 337 000 451 000
6 5 000 341 000 427 000
Ср. значение 5 167 334 667 425 167
150 мкг 1 3 000 329 000 423 000
2 5 000 327 000 414 000
3 4 000 331 000 413 000
4 5 000 348 000 429 000
5 5 000 347 000 448 000
6 4 000 339 000 437 000
Ср. значение 4 333 336 833 427 333
Из данных таблицы 1 и 2 следует, что оптимальной дозой препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, для индукции аутоантител у животных является доза, равная 0,5-150 мг/кг массы тела животного.
Пример 2. Влияние препарата с рекомбинантным белком GDF11-GBD на увеличение массы тела быков холмогорской породы
В условиях откормочного комплекса бычкам холмогорской породы в возрасте 3-х месяцев был введен препарат, содержащий рекомбинантный белок GDF11-GBD, суспендированный в среде адъюванта: смеси из альфа-гликана (50% по массе) и водно-масляной суспензии MONTANIDE ISA 206 VG (50% по массе) двукратно с интервалом 25 сутки из расчета 0,1 - 150 мкг рекомбинантного белка на 1 кг живой массы тела животных. Препарат вводили подкожно в область нижней трети шеи. В каждой опытной и контрольной группе было по 10 животных. Животным контрольной группы препарат не вводился.
Результаты представлены в таблице 3.
Таблица 3
Удельная доза рекомбинан-тного белка, мкг/кг Средняя масса тела животных, при первой инъекции препарата, кг Средняя масса тела животных через 30 суток после первой инъекции препарата, кг % привеса к контроль-ной группе через 30 суток Средняя масса тела животных через 90 суток после второй инъекции препарата, кг % привеса к контрольной группе через 90 суток
0,1 91,8 114,1 0,8 176,4 0,1
0,3 91,1 115,9 2,4 182,5 3,6
0,5 90,9 119,5 5,6 187,5 6,4
5 90,3 120,5 6,4 201,1 14,1
50 91,4 122,1 7,9 214,7 21,9
100 91,2 122,4 8,1 215,1 22,1
110 90,9 122,9 8,6 214,9 22,0
130 91,5 123,1 8,7 215 22,0
150 90,2 123,2 8,8 215,1 22,1
Контроль 91,7 113,2 - 176,2 -
Из представленных данных видно, что двукратное (с интервалом 25 суток) введение препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, привело к увеличению массы тела бычков через 90 суток после второй инъекции препарата при применении в дозе 0,5 мкг/кг рекомбинантного белка на 6,4% по отношению к этому показателю в контрольной группе; при применении препарата в дозе 5 мкг/кг рекомбинантного белка - на 14,1%; при применении препарата в дозе 50 мкг/кг рекомбинантного белка - на 10,8%, при увеличении дозы в двое до 100 или 150 мкг/кг привесы увеличиваются на 22,1%.
Таким образом, при введении препарата в дозах, лежащих в диапазоне от 0,5 до 150 мкг/кг наблюдался значимый прирост массы тела поросят относительно величины прироста в контрольной группе.
Кроме того, также было обнаружено, что даже однократное введение препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, обеспечивает значительный прирост массы тела бычков.
Важно отметить, что при введении препарата в дозах, лежащих вне диапазона доз 0,5-150 мкг/кг наблюдался существенный спад прироста массы тела бычков относительно величины прироста в контрольной группе.
Пример 3. Влияние препарата с рекомбинантным белком GDF11-GBD на увеличение массы тела ягнят
Ягнятам романовской породы в возрасте 2 - 3 месяцев был введен препарат, содержащий рекомбинантный белок GDF11-GBD, суспендированный в среде адъюванта: смеси из альфа-гликана (50% по массе) и суспензии 3%-ной гидроокиси алюминия (15% по объему), двукратно с интервалом 30 суток из расчета 0,1 - 150 мкг рекомбинантного белка на 1 кг живой массы тела животных. Препарат вводили внутримышечно. В каждой опытной и контрольной группе было по 10 животных. Животным контрольной группы препарат не вводился. Результаты представлены в таблице 4.
Таблица 4
Удельная доза реком-бинантно-го белка, мкг/кг Средняя масса тела животных, при первой инъекции препарата, кг Средняя масса тела животных через 30 суток после первой инъекции препарата, кг % к контрольной группе через 30 суток Средняя масса тела животных через 90 суток после второй инъекции препарата, кг % к контрольной группе через 90 суток
0,1 18,0 24,6 -0,8 37,1 1,1
0,3 18,2 25,1 1,2 38,2 4,1
0,5 18,1 26,3 6,0 40,9 11,4
5 17,8 27,9 12,5 42,8 16,6
50 17,9 29,2 17,7 45,1 22,9
100 18,2 28,9 16,5 45,2 23,2
110 17,9 29,1 17,3 45,0 22,6
130 18,0 29 16,9 45,1 22,9
150 17,6 29,3 18,1 45,3 23,4
Контроль 17,7 24,8 - 36,7 -
Как видно из представленных данных, двукратное (с интервалом 30 суток) введение ягнятам романовской породы препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, привело к увеличению массы тела животных через 90 суток после второй инъекции препарата при применении в дозе 0,5 мкг/кг рекомбинантного белка на 11,4% по отношению к этому показателю в контрольной группе; при применении препарата в дозе 5 мкг/кг рекомбинантного белка - на 16,6%; при применении препарата в дозе 50 мкг/кг рекомбинантного белка - на 22,9%; при применении препарата в дозе 100 мкг/кг рекомбинантного белка - на 23,2%; при применении препарата в дозе 150 мкг/кг рекомбинантного белка - на 23,4%.
Кроме того, также было обнаружено, что даже однократное введение препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, обеспечивает значительный прирост массы тела ягнят.
Важно отметить, что при введении препарата в дозах, лежащих вне диапазона доз 0,5-150 мкг/кг наблюдался существенный спад прироста массы тела ягнят относительно величины прироста в контрольной группе.
Пример 4. Влияние препарата с рекомбинантным белком GDF11-GBD на увеличение массы тела кроликов
Кроликам породы Белый великан в возрасте 2 - 3 месяцев был введен препарат, содержащий рекомбинантный белок GDF11-GBD, суспендированный в среде адъюванта: смеси из альфа-гликана (50% по массе) и суспензии 3%-ной гидроокиси алюминия (10% по объему), двукратно с интервалом 28 суток из расчета 0,1 - 150 мкг рекомбинантного белка на 1 кг живой массы тела животных. Препарат вводили внутримышечно. В каждой опытной и контрольной группе было по 10 животных. Животным контрольной группы препарат не вводился. Результаты представлены в таблице 5.
Таблица 5
Удельная доза реком-бинантн-ого белка, мкг/кг Средняя масса тела животных, при первой инъекции препарата, кг Средняя масса тела животных через 30 суток после первой инъекции препарата, кг % к контрольной группе через 30 суток Средняя масса тела животных через 90 суток после второй инъекции препарата, кг % к контрольной группе через 90 суток
0,1 1,66 2,49 0,4 3,44 0,3
0,3 1,70 2,51 1,2 3,49 1,7
0,5 1,59 2,56 3,2 3,63 5,8
5 1,71 2,74 10,5 3,79 10,5
50 1,68 2,83 14,1 3,95 15,2
100 1,70 2,84 14,5 3,95 15,2
110 1,72 2,83 14,1 3,96 15,5
130 1,71 2,84 14,5 3,95 15,2
150 1,65 2,84 14,5 3,96 15,5
Контроль 1,67 2,48 - 3,43 -
Двукратное (с интервалом 28 суток) введение кроликам породы Белый великан препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, привело к увеличению массы тела животных через 90 суток после второй инъекции препарата при применении в дозе 0,5 мкг/кг рекомбинантного белка на 5,8% по отношению к этому показателю в контрольной группе; при применении препарата в дозе 5 мкг/кг рекомбинантного белка - на 10,5%; при применении препарата в дозе 50-150 мкг/кг рекомбинантного белка - на 15,2%.
Кроме того, также было обнаружено, что даже однократное введение препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, обеспечивает значительный прирост массы тела кроликов.
Важно отметить, что при введении препарата в дозах, лежащих вне диапазона доз 0,5-150 мкг/кг наблюдался существенный спад прироста массы тела кроликов относительно величины прироста в контрольной группе.
Пример 5. Влияние препарата с рекомбинантным белком GDF11-GBD на увеличение массы тела индеек
Препарат, содержащий рекомбинантный белок, был применен на индейках (самцах) породы белая широкогрудая (тяжелый кросс) в возрасте 50 - 60 суток. Препарат применяли в дозе 0,1; 0,3; 0,5; 5; 50; 100; 110; 130; 150 мкг/кг рекомбинантного белка на 1 кг живой массы тела индюков, содержащий рекомбинантный белок GDF11-GBD, суспендированный в среде адъюванта: смеси из альфа-гликана (30% по массе) и водно-масляной суспензии MONTANIDE ISA 70 VG (70% по массе), двукратно с интервалом 21 сутки. Препарат вводили внутримышечно. В каждой опытной и контрольной группе было по 10 животных. Птице контрольной группы препарат не вводился. Результаты представлены в табл. 6.
Таблица 6
Удельная доза рекомбинан-тного белка, мкг/кг Средняя масса тела индюков при первой инъекции препарата, кг Средняя масса тела индюков через 30 суток после первой инъекции препарата, кг % к контрольной группе через 30 суток Средняя масса тела индюков через 90 суток после второй инъекции препарата, кг % к контрольной группе через 90 суток
0,1 1,66 10,09 0,1 14,58 1,7
0,3 1,70 10,45 3,7 14,97 4,4
0,5 1,59 10,76 6,7 15,54 8,4
5 1,71 11,03 9,4 15,97 11,4
50 1,68 11,34 12,5 17,37 21,1
100 1,70 11,35 12,6 17,41 21,4
110 1,72 11,34 12,5 17,42 21,5
130 1,71 11,37 12,8 17,43 21,5
150 1,65 11,38 12,9 17,44 21,6
Контроль 5,07 10,08 - 14,34 -
Как видно из представленных данных, двукратное (с интервалом 21 суток) введение индюкам препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, суспендированный в среде адъюванта: смеси из альфа-гликана (30% по массе) и водно-масляной суспензии MONTANIDE ISA 70 VG (70% по массе), привело к увеличению массы тела животных через 90 суток после второй инъекции препарата при применении в дозе 0,5 мкг/кг рекомбинантного белка на 8,4% по отношению к этому показателю в контрольной группе; при применении препарата в дозе 5 мкг/кг рекомбинантного белка - на 11,4%; при применении препарата в дозе 50 мкг/кг рекомбинантного белка - на 21.1%; при применении препарата в дозе 150 мкг/кг рекомбинантного белка - на 21.6%.
Кроме того, также было обнаружено, что даже однократное введение препарата, содержащего рекомбинантный белок GDF11-GBD, обеспечивает значительный прирост массы тела индюков.
Важно отметить, что при введении препарата в дозах, лежащих вне диапазона доз 0,5-150 мкг/кг наблюдался существенный спад прироста массы тела индюков относительно величины прироста в контрольной группе.
Приведенные примеры осуществления изобретения не являются исчерпывающими. Возможные иные примеры осуществления, соответствующие объему патентных притязаний.
--->
Перечень последовательностей
<110> Limited Liability Company "SCIENTIFIC AND PRODUCTION CORPORATION IN-VET"
<120> Growth Differentiation Factor 11 (GDF11), Injectable Preparation for Muscle Mass Increase in Mammals and Poultry, a Method for the Production Thereof, and a Method for the Application Thereof
Последовательности аминокислот GDF11
<160> SEQ ID NO 1
<210> 1
<211> 107
<212> PRT
<213> Artifical Sequence
<400> 1
Gly Leu Asp Cys Asp Glu His Ser Thr Glu Ser Arg Cys Cys Arg Tyr 1 5 10 15
Pro Leu Thr Val Asp Phe Glu Ala Phe Gly Trp Asp Trp Ile Ile Ala
20 25 30
Pro Lys Arg Tyr Lys Ala Asn Tyr Cys Ser Gly Gln Cys Glu Tyr Met
35 40 45
Phe Met Gln Lys Tyr Pro His Thr His Leu Val Gln Gln Ala Asn Pro
50 55 60
Arg Gly Ser Ala Gly Pro Cys Cys Thr Pro Thr Lys Met Ser Pro Ile
65 70 75 80
Asn Met Leu Tyr Phe Asn Asp Lys Gln Gln Ile Ile Tyr Gly Lys Ile
85 90 95
Pro Gly Met Val Val Asp Arg Cys Gly Cys Ser
100 105
Последовательность аминокислот спейсера
<160> SEQ ID NO 2
<210> 2
<211> 15
<212> PRT
<213> Artifical Sequence
<400> 2
Gly Ser Pro Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala
1 5 10 15
Последовательность аминокислот альфа-глюкансвязывающего домена из Streptococcus mutans
<160> SEQ ID NO 3
<210> 3
<211> 180
<212> PRT
<213> Streptococcus mutans
<400> 3
Glu Leu Asn Arg Lys Asn Tyr His Tyr Gln Gln Phe Ile Thr Ala Tyr
1 5 10 15
Glu Asn Leu Leu Arg Asp Lys Val Glu Asn Asp Ser Ala Glu Pro Gln
20 25 30
Thr Phe Thr Ala Asn Gly Arg Gln Leu Ser Gln Asp Ala Leu Gly Ile
35 40 45
Asn Gly Asp Gln Val Trp Thr Tyr Ala Lys Lys Gly Asn Asp Phe Arg
50 55 60
Thr Ile Gln Leu Leu Asn Leu Met Gly Ile Thr Ser Asp Trp Lys Asn
65 70 75 80
Glu Asp Gly Tyr Glu Asn Asn Lys Thr Pro Asp Glu Gln Thr Asn Leu
85 90 95
Leu Val Thr Tyr Pro Leu Thr Gly Val Ser Met Ala Glu Ala Asp Arg
100 105 110
Ile Ala Lys Gln Val Tyr Leu Thr Ser Pro Asp Asp Trp Leu Gln Ser
115 120 125
Ser Met Ile Ser Leu Ala Thr Gln Val Lys Thr Asn Glu Asn Gly Asp
130 135 140
Pro Val Leu Tyr Ile Gln Val Pro Arg Leu Thr Leu Trp Asp Met Ile 145 150 155 160
Tyr Ile Asn Glu Thr Ile Lys Pro Glu Thr Pro Lys Val Pro Glu Gln
165 170 175
Pro Gln His Pro
180
Последовательность нуклеотидов гена GDF11-GBD
<160> SEQ ID NO 4
<210> 4
<211> 1080
<212> DNA
<213> Artifical Sequence
<400> 4
CTCGAGAAAT CATAAAAAAT TTATTTGCTT TGTGAGCGGA TAACAATTAT AATAGATTCA 60
ATTGTGAGCG GATAACAATT TCACACAGAA TTCATTAAAG AGGAGAAATT AACT 114
ATG AGA GGA TCG CAT CAC CAT CAC CAT CAC GGA TCC CCG GGT TCT GGC 162
Met Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser Pro Gly Ser Gly
1 5 10 15
TCC GGC TCT GGT TCC GGT TCT GGC GCC AGA TCC GAA CTG AAC CGC AAA 210
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala Arg Ser Glu Leu Asn Arg Lys
20 25 30
AAC TAT CAT TAT CAG CAG TTT ATT ACC GCG TAT GAA AAC CTG CTG CGC 258
Asn Tyr His Tyr Gln Gln Phe Ile Thr Ala Tyr Glu Asn Leu Leu Arg
35 40 45
GAC AAA GTG GAA AAC GAT AGC GCG GAA CCG CAG ACC TTT ACC GCG AAC 306
Asp Lys Val Glu Asn Asp Ser Ala Glu Pro Gln Thr Phe Thr Ala Asn
50 55 60
GGC CGC CAG CTG AGC CAG GAT GCT CTG GGC ATT AAC GGC GAT CAG GTG 354
Gly Arg Gln Leu Ser Gln Asp Ala Leu Gly Ile Asn Gly Asp Gln Val
65 70 75 80
TGG ACC TAC GCT AAA AAA GGC AAC GAT TTT CGC ACC ATT CAG CTG CTG 402
Trp Thr Tyr Ala Lys Lys Gly Asn Asp Phe Arg Thr Ile Gln Leu Leu
85 90 95
AAC CTG ATG GGC ATT ACC AGC GAC TGG AAA AAC GAA GAT GGC TAT GAA 450
Asn Leu Met Gly Ile Thr Ser Asp Trp Lys Asn Glu Asp Gly Tyr Glu
100 105 110
AAC AAC AAA ACT CCA GAT GAA CAG ACC AAC CTG CTG GTG ACC TAC CCG 498
Asn Asn Lys Thr Pro Asp Glu Gln Thr Asn Leu Leu Val Thr Tyr Pro
115 120 125
CTG ACC GGT GTT TCT ATG GCT GAA GCT GAT CGC ATT GCG AAA CAG GTG 546
Leu Thr Gly Val Ser Met Ala Glu Ala Asp Arg Ile Ala Lys Gln Val
130 135 140
TAT CTG ACC AGC CCG GAT GAT TGG CTG CAG AGC AGC ATG ATT AGC CTG 594
Tyr Leu Thr Ser Pro Asp Asp Trp Leu Gln Ser Ser Met Ile Ser Leu
145 150 155 160
GCG ACC CAG GTG AAA ACC AAC GAA AAC GGC GAT CCG GTG CTG TAT ATT 642
Ala Thr Gln Val Lys Thr Asn Glu Asn Gly Asp Pro Val Leu Tyr Ile
165 170 175
CAG GTG CCG CGC CTG ACC CTG TGG GAT ATG ATT TAT ATT AAC GAA ACC 690
Gln Val Pro Arg Leu Thr Leu Trp Asp Met Ile Tyr Ile Asn Glu Thr
180 185 190
ATT AAA CCG GAA ACC CCG AAA GTG CCG GAA CAG CCG CAG CAT CCG AGA 738
Ile Lys Pro Glu Thr Pro Lys Val Pro Glu Gln Pro Gln His Pro Arg
195 200 205
TCC GGC TCT GGT TCT GGT CTG GAC TGC GAC GAA CAC TCT ACC GAA TCT 786
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Leu Asp Cys Asp Glu His Ser Thr Glu Ser
210 215 220
CGT TGC TGC CGT TAC CCG CTG ACC GTT GAC TTC GAA GCG TTC GGT TGG 834
Arg Cys Cys Arg Tyr Pro Leu Thr Val Asp Phe Glu Ala Phe Gly Trp
225 230 235 240
GAC TGG ATC ATC GCT CCG AAA CGT TAC AAA GCT AAC TAC TGC TCT GGA 882
Asp Trp Ile Ile Ala Pro Lys Arg Tyr Lys Ala Asn Tyr Cys Ser Gly
245 250 255
CAG TGC GAA TAC ATG TTC ATG CAG AAA TAC CCG CAC ACC CAC CTG GTT 930
Gln Cys Glu Tyr Met Phe Met Gln Lys Tyr Pro His Thr His Leu Val
260 265 270
CAG CAG GCT AAC CCG CGT GGT TCT GCT GGT CCG TGC TGC ACC CCG ACC 978
Gln Gln Ala Asn Pro Arg Gly Ser Ala Gly Pro Cys Cys Thr Pro Thr
275 280 285
AAA ATG TCT CCG ATC AAC ATG CTG TAC TTC AAC GAC AAA CAG CAG ATC 1026
Lys Met Ser Pro Ile Asn Met Leu Tyr Phe Asn Asp Lys Gln Gln Ile
290 295 300
ATC TAC GGT AAA ATC CCG GGT ATG GTT GTT GAC CGC TGC GGT TGC TCT 1074
Ile Tyr Gly Lys Ile Pro Gly Met Val Val Asp Arg Cys Gly Cys Ser
305 310 315 320
TAA CCG 1080
<210> 5
<211> 320
<212> PRT
<213> Artifical Sequence
<400> 5
Met Arg Gly Ser His His His His His His Gly Ser Pro Gly Ser Gly
1 5 10 15
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala Arg Ser Glu Leu Asn Arg Lys
20 25 30
Asn Tyr His Tyr Gln Gln Phe Ile Thr Ala Tyr Glu Asn Leu Leu Arg
35 40 45
Asp Lys Val Glu Asn Asp Ser Ala Glu Pro Gln Thr Phe Thr Ala Asn
50 55 60
Gly Arg Gln Leu Ser Gln Asp Ala Leu Gly Ile Asn Gly Asp Gln Val
65 70 75 80
Trp Thr Tyr Ala Lys Lys Gly Asn Asp Phe Arg Thr Ile Gln Leu Leu
85 90 95
Asn Leu Met Gly Ile Thr Ser Asp Trp Lys Asn Glu Asp Gly Tyr Glu
100 105 110
Asn Asn Lys Thr Pro Asp Glu Gln Thr Asn Leu Leu Val Thr Tyr Pro
115 120 125
Leu Thr Gly Val Ser Met Ala Glu Ala Asp Arg Ile Ala Lys Gln Val
130 135 140
Tyr Leu Thr Ser Pro Asp Asp Trp Leu Gln Ser Ser Met Ile Ser Leu
145 150 155 160
Ala Thr Gln Val Lys Thr Asn Glu Asn Gly Asp Pro Val Leu Tyr Ile
165 170 175
Gln Val Pro Arg Leu Thr Leu Trp Asp Met Ile Tyr Ile Asn Glu Thr
180 185 190
Ile Lys Pro Glu Thr Pro Lys Val Pro Glu Gln Pro Gln His Pro Arg
195 200 205
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Leu Asp Cys Asp Glu His Ser Thr Glu Ser
210 215 220
Arg Cys Cys Arg Tyr Pro Leu Thr Val Asp Phe Glu Ala Phe Gly Trp
225 230 235 240
Asp Trp Ile Ile Ala Pro Lys Arg Tyr Lys Ala Asn Tyr Cys Ser Gly
245 250 255
Gln Cys Glu Tyr Met Phe Met Gln Lys Tyr Pro His Thr His Leu Val
260 265 270
Gln Gln Ala Asn Pro Arg Gly Ser Ala Gly Pro Cys Cys Thr Pro Thr
275 280 285
Lys Met Ser Pro Ile Asn Met Leu Tyr Phe Asn Asp Lys Gln Gln Ile
290 295 300
Ile Tyr Gly Lys Ile Pro Gly Met Val Val Asp Arg Cys Gly Cys Ser
305 310 315 320
<---

Claims (4)

1. Рекомбинантный белок GDF11-GBD, обладающий способностью связываться с глюкансодержащим сорбентом и индуцировать синтез специфических аутоантител к GDF11, с последовательностью аминокислот, приведенной в SEQ ID NO: 4.
2. Способ получения рекомбинантного белка GDF11-GBD на глюкане, включающий: выращивание клеток E. сoli, экспрессирующих белок GDF11-GBD по п. 1, связывание указанного белка GDF11-GBD в составе клеточных экстрактов указанных клеток E. сoli с альфа-глюкансодержащим сорбентом за счет аффинного взаимодействия при процедуре инкубации, последующую отмывку от не связавшихся бактериальных белков и выделение целевого продукта.
3. Инъекционный препарат для повышения мышечной массы сельскохозяйственных животных, содержащий рекомбинантный белок GDF11-GBD по п. 1, суспендированный в среде альфа-глюкансодержащего сорбента в приемлемом для инъекционного использования жидком адъюванте.
4. Способ повышения мышечной массы сельскохозяйственных животных, включающий проведение подкожных или внутримышечных инъекций препарата по п. 3 в дозе 0,5 – 150 мкг указанного белка GDF11-GBD на один килограмм массы тела животного.
RU2020105836A 2020-02-07 2020-02-07 Рекомбинантный ростовой дифференцировочный фактор роста 11 (GDF11), способ его получения, инъекционный препарат для повышения мышечной массы млекопитающих животных и птицы, а также способ использования препарата RU2750267C1 (ru)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020105836A RU2750267C1 (ru) 2020-02-07 2020-02-07 Рекомбинантный ростовой дифференцировочный фактор роста 11 (GDF11), способ его получения, инъекционный препарат для повышения мышечной массы млекопитающих животных и птицы, а также способ использования препарата
CN202180007896.4A CN115003690B (zh) 2020-02-07 2021-01-18 重组生长分化因子11(gdf11)
PCT/RU2021/050009 WO2021158146A1 (ru) 2020-02-07 2021-01-18 Рекомбинантный ростовой дифференцировочный фактор роста 11 (gdf11),

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020105836A RU2750267C1 (ru) 2020-02-07 2020-02-07 Рекомбинантный ростовой дифференцировочный фактор роста 11 (GDF11), способ его получения, инъекционный препарат для повышения мышечной массы млекопитающих животных и птицы, а также способ использования препарата

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2750267C1 true RU2750267C1 (ru) 2021-06-25

Family

ID=76504823

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020105836A RU2750267C1 (ru) 2020-02-07 2020-02-07 Рекомбинантный ростовой дифференцировочный фактор роста 11 (GDF11), способ его получения, инъекционный препарат для повышения мышечной массы млекопитающих животных и птицы, а также способ использования препарата

Country Status (3)

Country Link
CN (1) CN115003690B (ru)
RU (1) RU2750267C1 (ru)
WO (1) WO2021158146A1 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2792817C1 (ru) * 2022-07-14 2023-03-24 Общество с ограниченной ответственностью "БИОМЕД-РЕСУРС" Рекомбинантный белок GBO-ActRIIB для увеличения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы
WO2024014989A1 (ru) * 2022-07-14 2024-01-18 Общество с ограниченной ответственностью "БИОМЕД-РЕСУРС" Рекомбинантный белок gbd-actriib для увеличения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6468535B1 (en) * 1993-03-19 2002-10-22 The Johns Hopkins University School Of Medicine Growth differentiation factor-8
RU2613420C1 (ru) * 2016-04-13 2017-03-16 Сергей Михайлович Юдин Рекомбинантный белок Мио-ГСД, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мышечной массы сельскохозяйственных животных, птицы и животных семейства псовых, а также способ использования препарата

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060216279A1 (en) * 2005-03-22 2006-09-28 Glass David J Myostatin inhibiting fusion polypeptides and therapeutic methods thereof
US7807159B2 (en) * 2005-04-25 2010-10-05 Amgen Fremont Inc. Antibodies to myostatin
CN102286513B (zh) * 2011-07-06 2014-05-07 西南民族大学 藏绵羊肌肉生长抑制素重组表达蛋白质
EP2943512A4 (en) * 2013-01-11 2016-06-01 California Inst Biomedical Res FUSION BOVINE ANTIBODIES
US10092627B2 (en) * 2013-04-08 2018-10-09 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for rejuvenating skeletal muscle stem cells
KR20170010893A (ko) * 2014-06-06 2017-02-01 더 캘리포니아 인스티튜트 포 바이오메디칼 리써치 아미노 말단 면역글로불린 융합 단백질 및 이의 조성물을 구축하는 방법
AU2016297248A1 (en) * 2015-07-22 2018-02-15 Scholar Rock, Inc. GDF11 binding proteins and uses thereof
MX2018003196A (es) * 2015-09-15 2019-05-16 Scholar Rock Inc Anticuerpos anti-promiostatina o miostatina latente y usos de los mismos.
MY189425A (en) * 2015-12-18 2022-02-10 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-myostatin antibodies, polypeptides containing variant fc regions, and methods of use
KR101810385B1 (ko) * 2016-02-04 2017-12-20 주식회사 강스템바이오텍 Gdf11을 포함하는 조성물 및 그의 용도
MX2018014375A (es) * 2016-06-17 2019-04-22 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpos antimiostatina y metodos de uso.
WO2019144053A1 (en) * 2018-01-19 2019-07-25 President And Fellows Of Harward College Gdf11 variants and uses thereof

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6468535B1 (en) * 1993-03-19 2002-10-22 The Johns Hopkins University School Of Medicine Growth differentiation factor-8
RU2613420C1 (ru) * 2016-04-13 2017-03-16 Сергей Михайлович Юдин Рекомбинантный белок Мио-ГСД, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мышечной массы сельскохозяйственных животных, птицы и животных семейства псовых, а также способ использования препарата

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MCPHERRON A.C. METABOLIC FUNCTIONS OF MYOSTATIN AND GDF11, Immunol. Endocr. Metab. Agents Med. Chem., 2010, v.10, n.4, p.217-231. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2792817C1 (ru) * 2022-07-14 2023-03-24 Общество с ограниченной ответственностью "БИОМЕД-РЕСУРС" Рекомбинантный белок GBO-ActRIIB для увеличения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы
WO2024014989A1 (ru) * 2022-07-14 2024-01-18 Общество с ограниченной ответственностью "БИОМЕД-РЕСУРС" Рекомбинантный белок gbd-actriib для увеличения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы

Also Published As

Publication number Publication date
CN115003690A (zh) 2022-09-02
CN115003690B (zh) 2024-04-05
WO2021158146A1 (ru) 2021-08-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK201100184Y4 (da) Antistoffer fra immuniserede fugle
JP7083362B2 (ja) セネカウイルスａ免疫原性組成物およびその方法
JP3583421B2 (ja) ＩｇＥの不変部の一部を含有するＩｇＥ媒介アレルギー反応治療用ワクチン
JPH06504907A (ja) 抗原発現キメラタンパク質
JPH06508988A (ja) 乳頭腫ウイルスｌ２蛋白
JP2013514060A (ja) Ｅｂウィルスにより誘発される腫瘍に対する融合ポリペプチドとコリシンｉａ変異体
US20070231341A1 (en) Cat dander allergen treatments
KR20160102993A (ko) Ospa의 돌연변이 단편 및 이와 관련된 방법 및 용도
RU2750267C1 (ru) Рекомбинантный ростовой дифференцировочный фактор роста 11 (GDF11), способ его получения, инъекционный препарат для повышения мышечной массы млекопитающих животных и птицы, а также способ использования препарата
JP2002531064A (ja) 強化ワクチン
RU2613420C1 (ru) Рекомбинантный белок Мио-ГСД, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мышечной массы сельскохозяйственных животных, птицы и животных семейства псовых, а также способ использования препарата
JPH10509038A (ja) 免疫、精製及び検出適用のためのたんぱく質、ペプチド及び複合物の高い水準の発現と容易な精製
JPH09510702A (ja) インヒビン組成物およびそれらの使用方法
WO1993014786A1 (en) Composition and method to prevent conception or to cause sterility in animals
CN114699521B (zh) 基于金属硫蛋白家族的免疫佐剂及其应用
RU2792817C1 (ru) Рекомбинантный белок GBO-ActRIIB для увеличения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы
JPH05507208A (ja) 線虫ワクチン
RU2614115C1 (ru) Рекомбинантный соматостатинсодержащий белок, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, а также способ использования препарата
WO2024014989A1 (ru) Рекомбинантный белок gbd-actriib для увеличения мышечной массы сельскохозяйственных животных и птицы
CN1321189A (zh) 细胞性免疫的诱导方法以及被诱导了细胞免疫的细胞
JP3116087B2 (ja) 神経突起伸長活性を有する蛋白質
US20040220098A1 (en) Inhibin compositions and methods of enhancing fertility and growth
EP2431052B1 (en) Protein for the immunocastration for mammals
AU643444B2 (en) SRIF-related peptides and uses thereof
AU783851B2 (en) Method for preparing a polypeptide soluble in an aqueous solvent in the absence of detergent