RU2742352C2 - Векторы фактора fviii на основе аденоассоциированных вирусов, соответствующие вирусные частицы и содержащие их терапевтические композиции - Google Patents

Векторы фактора fviii на основе аденоассоциированных вирусов, соответствующие вирусные частицы и содержащие их терапевтические композиции Download PDF

Info

Publication number
RU2742352C2
RU2742352C2 RU2018114888A RU2018114888A RU2742352C2 RU 2742352 C2 RU2742352 C2 RU 2742352C2 RU 2018114888 A RU2018114888 A RU 2018114888A RU 2018114888 A RU2018114888 A RU 2018114888A RU 2742352 C2 RU2742352 C2 RU 2742352C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
fviii
subject
bases
aav
vector
Prior art date
Application number
RU2018114888A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2018114888A3 (ru
RU2018114888A (ru
Inventor
Стюарт БАНТИНГ
Питер Кэмерон КОЛОСИ
Эрно ПАНГОР
Original Assignee
Байомарин Фармасьютикал Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Байомарин Фармасьютикал Инк. filed Critical Байомарин Фармасьютикал Инк.
Publication of RU2018114888A3 publication Critical patent/RU2018114888A3/ru
Publication of RU2018114888A publication Critical patent/RU2018114888A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2742352C2 publication Critical patent/RU2742352C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • A61K38/37—Factors VIII
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/0008—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'non-active' part of the composition delivered, e.g. wherein such 'non-active' part is not delivered simultaneously with the 'active' part of the composition
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/0075—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the delivery route, e.g. oral, subcutaneous
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6854—Immunoglobulins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2710/16044—Chimeric viral vector comprising heterologous viral elements for production of another viral vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14121—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
    • G01N2333/01—DNA viruses
    • G01N2333/015—Parvoviridae, e.g. feline panleukopenia virus, human Parvovirus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана группа изобретений, включающая фармацевтическую композицию для лечения гемофилии А, содержащую рекомбинантный вирус ААВ5-FVIII-SQ в концентрации от приблизительно 1E12 вг/мл до приблизительно 2E14 вг/мл, способ лечения субъекта, страдающего от гемофилии А, способ уменьшения времени кровотечения при эпизоде кровотечения у субъекта, страдающего от гемофилии A, способ повышения экспрессии белка фактора VIII у субъекта, способ лечения субъекта, страдающего от гемофилии A, включающий этапы определения отсутствия антител к капсиду ААВ5 в сыворотке указанного субъекта и введения вышеуказанной фармацевтической композиции, и способ лечения субъекта, страдающего от гемофилии A, включающий этапы введения указанному субъекту фармацевтической композиции и, после введения указанной фармацевтической композиции, определения отсутствия или присутствия антител к капсиду ААВ5 в сыворотке указанного субъекта. Изобретение расширяет арсенал средств для лечения гемофилии А. 6 н. и 20 з.п. ф-лы, 49 ил., 1 табл., 8 пр.

Description

[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет на основании предварительной заявки на патент США № 62/232242, поданной 24 сентября 2015 г., предварительной заявки на патент США № 62/323182, поданной 15 апреля 2016 г., и предварительной заявки на патент США № 62/365544, поданной 22 июля 2016 г., содержание каждой из которых полностью включено в данную заявку посредством ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[0002] В настоящем изобретении предложены кодирующие Фактор FVIII (FVIII) векторы на основе аденоассоциированного вируса (ААВ), включая кодирующие FVIII ААВ-векторы с высокой экспрессионной активностью и кодирующие FVIII ААВ-векторы, с которых экспрессируют полноразмерный или укороченный функциональный белок FVIII. В настоящем изобретении также предложены способы получения описанных в данной заявке кодирующих FVIII ААВ-векторов, кодирующих FVIII рекомбинантных ААВ-вирусных частиц, содержащих или экспрессирующих такие векторы, соответствующие содержащие их фармацевтические композиции и их применения в терапии.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0003] Аденоассоциированный вирус (ААВ) представляет собой малый неспособный к репликации безоболочечнный вирус животных, который инфицирует людей и некоторых других видов приматов. Благодаря некоторым свойствам ААВ-вируса, он является привлекательным средством доставки терапевтических белков путем генотерапии, включая, например, неспособность ААВ вызывать заболевания человека, индукцию слабого иммунного ответа и способность ААВ-векторов инфицировать как делящиеся, так и покоящиеся клетки без встраивания в геном клетки-хозяина. Генотерапевтические векторы с использованием ААВ успешно применяют в некоторых клинических испытаниях, например, для доставки фактора IX (FIX) человека в печень для лечения гемофилии B (Nathwani и др., New Engl. J. Med. 365:2357-2365, 2011).
[0004] Тем не менее, генотерапевтические ААВ-векторы все же имеют некоторые недостатки. В частности, емкость ААВ-векторов для клонирования ограничена как следствие емкости вируса для упаковки ДНК. Состоящий из одноцепочечной ДНК геном ААВ дикого типа составляет приблизительно 4,7 тысяч пар нуклеотидов (т.п.н.). На практике, геномы ААВ до приблизительно 5,0 т.п.н. оказываются полностью упакованными, т.е., в полноразмерном виде, в вирусные частицы ААВ. Учитывая требование, чтобы геном нуклеиновых кислот в ААВ-векторах содержал два инвертированных концевых повтора (ITR) ААВ длиной приблизительно 145 оснований, емкость упаковки ДНК ААВ-вектора такая, что в капсид можно заключить максимум приблизительно 4,4 т.п.н. кодирующей белок последовательности.
[0005] Вследствие такого ограничения размера большие терапевтические гены, т.е., гены длиной более чем приблизительно 4,4 т.п.н., как правило, не подходят для применения в ААВ-векторах. Одним из таких терапевтических генов является ген фактора VIII (FVIII), мРНК которого состоит приблизительно из 7,0 т.п.н. и кодирует полипептид из 2332 аминокислот, содержащий, от N-конца к C-концу, сигнальный пептид длиной 19 аминокислот и три больших домена (т.е., тяжелую цепь (или A-домен), центральный домен (или B-домен) и легкую цепь (или C-домен)). Одна стратегия, которую использовали, чтобы преодолеть ограничение по размеру FVIII для ААВ-вектора, состояла в применении двух ААВ-векторов, один из которых кодирует тяжелую цепь, или A-домен, и другой из которых кодирует легкую цепь, или C-домен (см., например, Coutu и др., патенты США с номерами 6221349, 6200560 и 7351577). Другая стратегия, позволяющая обойти данное ограничение по размеру, состояла в получении ААВ-векторов, кодирующих FVIII, в котором центральная часть, или B-домен, белка была удалена и заменена на линкер длиной 14 аминокислот, известный как последовательность SQ (Ward и др., Blood 117:798-807, 2011, и McIntosh и др., Blood 121:3335-3344, 2013).
[0006] Хотя в литературе были описаны ААВ-векторы, содержащие геномы ААВ > 5,0 т.п.н., во многих из данных случаев 5'- или 3'-концы кодируемых генов оказывались укороченными (см. Hirsch и др., Molec. Ther. 18:6-8, 2010 и Ghosh и др., Biotech. Genet. Engin. Rev. 24:165-178, 2007). Тем не менее было показано, что в инфицированных ААВ клетках происходит гомологичная рекомбинация перекрывающихся фрагментов между нуклеиновыми кислотами, содержащими укороченный 5'-конец и укороченный 3'-конец, таким образом, что образуется ʺцелаяʺ нуклеиновая кислота, кодирующая большой белок, позволяя воссоздать функциональный полноразмерный ген.
[0007] Существует потребность в новых ААВ-векторах, кодирующих функциональный белок фактора VIII, и содержащих их рекомбинантных ААВ-вирусных частицах, полезных в генотерапевтических подходах для лечения гемофилии A. По этой причине, в настоящем изобретении предложены ААВ-векторы, которые кодируют функционально активный FVIII таким образом, что либо рекомбинантный ААВ-вирус вмещает в капсид полноразмерную нуклеиновую кислоту, кодирующую терапевтический белок, т.е., полностью упакованные кодирующие FVIII ААВ-векторы, тем самым позволяя избежать приведенных выше проблем геномов с превышенным размером, или по меньшей мере позволяет получить функционально активный белок фактора VIII, который может быть укороченным или неукороченным. В настоящем изобретении также предложено получение кодирующих FVIII ААВ-векторов с высокой активностью экспрессии FVIII. Наконец, в настоящем изобретении предложены фармацевтические композиции, содержащие кодирующие Фактор VIII ААВ-векторы и/или рекомбинантные кодирующие Фактор VIII ААВ-частицы/вирусы, содержащие любой из описанных в данной заявке кодирующих FVIII ААВ-векторов, соответствующие фармацевтические композиции и соответствующие способы введения для лечения гемофилии A у страдающих от нее субъектов.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0008] Согласно настоящему изобретению предложены ААВ-векторы, кодирующие функционально активный FVIII (называемые в данной заявке ʺFVIII-ААВ-векторамиʺ). Рекомбинантные ААВ-векторы согласно настоящему изобретению включают не встречающиеся в природе производные ААВ-вируса, в которые встроили последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие функциональный белок FVIII. Длина геномов, кодирующих функционально активный FVIII, предпочтительно составляет не более 7,0 т.п.н., более предпочтительно не более 6,5 т.п.н., еще более предпочтительно не более 6,0 т.п.н., еще более предпочтительно не более 5,5 т.п.н., еще более предпочтительно не более 5,0 т.п.н., при этом функция промотора усилена.
[0009] В данной заявке ʺфункционально активный FVIIIʺ представляет собой белок FVIII, который обладает функциональностью белка FVIII дикого типа in vitro, когда экспрессируется в культивируемых клетках, или in vivo, когда экспрессируется в клетках или тканях организма. Это включает, например, функциональное участие в каскаде свертывания крови и/или снижение времени, которое требуется для свертывания крови, у субъекта, страдающего от гемофилии A. FVIII дикого типа участвует в свертывании крови посредством каскада свертывания крови, действуя как кофактор для активированного FIX (FIXa), который в присутствии ионов кальция и фосфолипидов образует комплекс, который превращает Фактор X (FX) в активированный FX (FXa). Соответственно, функционально активный FVIII может образовывать комплекс с FIXa, который может превращать FX в FXa. Один пример функционально активного белка FVIII представляет собой белок SQ FVIII, описанный в WO 2015/038625, который включен в данную заявку посредством ссылки.
[0010] В данной заявке ʺААВ-векторʺ относится к нуклеиновым кислотам, либо одноцепочечным, либо двухцепочечным, содержащим последовательность 5'-инвертированного концевого повтора (ITR) ААВ и 3'-ITR ААВ, фланкирующие кодирующую белок последовательность (предпочтительно последовательность, кодирующую функциональный Фактор VIII), функционально связанную с регулирующими транскрипцию элементами, которые гетерологичны для генома ААВ-вируса, т.е., с одним или более промоторами и/или энхансерами, и необязательно последовательность полиаденилирования и/или один или более интронов, вставленных между экзонами кодирующей белок последовательности. Одноцепочечный ААВ-вектор относится к нуклеиновым кислотам, которые присутствуют в геноме ААВ-вирусной частицы, и может представлять собой либо смысловую цепь, либо антисмысловую цепь последовательностей нуклеиновых кислот, описанных в данной заявке. Размер таких одноцепочечных нуклеиновых кислот представлен в основаниях. Двухцепочечный ААВ-вектор относится к нуклеиновым кислотам, которые присутствуют в ДНК плазмид, например, pUC19, или в геноме двухцепочечного вируса, например, бакуловируса, используемым для экспрессии или переноса нуклеиновых кислот ААВ-вектора. Размер таких двухцепочечных нуклеиновых кислот представлен в парах оснований (п.о.).
[0011] Термин ʺинвертированный концевой повтор (ITR)ʺ в данной заявке относится к известным в данной области участкам, находящимся на 5'- и 3'-концах генома ААВ, которые функционируют в цис-положении как точки начала репликации ДНК и как сигналы упаковки для генома вируса. ITR ААВ, вместе с участком, кодирующим rep ААВ, позволяют эффективное вырезание, высвобождение и встраивание последовательности нуклеотидов, вставленной между двумя фланкирующими ITR, в геном клетки-хозяина. Последовательности некоторых связанных с ААВ ITR описаны в Yan и др., J. Virol. 79(1):364-379 (2005), который полностью включен в данную заявку посредством ссылки. Последовательности ITR, которые можно применять в данной заявке, могут представлять собой полноразмерные ITR ААВ дикого типа или их фрагменты, у которых сохранилась способность функционировать, или могут представлять собой варианты последовательности полноразмерных ITR ААВ дикого типа, которые способны функционировать в цис-положении как точки начала репликации. ITR ААВ, полезные для применения в рекомбинантных кодирующих FVIII ААВ-векторах согласно настоящему изобретению, можно получить из любого известного серотипа ААВ, и в некоторых предпочтительных вариантах реализации можно получить из серотипа ААВ2 или ААВ5.
[0012] ʺРегулирующий транскрипцию элементʺ относится к последовательности нуклеотидов гена, участвующей в регуляции транскрипции гена, включая последовательности промотора, плюс элементы ответа, активатора и энхансера для связывания факторов транскрипции, чтобы способствовать связыванию РНК-полимеразы и вызвать экспрессию, и последовательности оператора или сайленсера, с которыми связываются репрессорные белки, чтобы блокировать посадку РНК-полимеразы и предотвратить экспрессию. Термин ʺспецифичный для печени регулирующий транскрипцию элементʺ относится к регуляторному элементу, который модулирует экспрессию гена, в частности, в ткани печени. Примеры специфичных для печени регуляторных элементов включают, но не ограничены перечисленными: промотор гена транстиретина мыши (mTTR), промотор эндогенного фактора VIII человека (F8), промотор альфа-1-антитрипсина (hAAT) человека и их активные фрагменты, минимальный промотор альбумина человека и промотор альбумина мыши. Также предложены энхансеры, полученные из участков связывания специфичных для печени факторов транскрипции, такие как EBP, DBP, HNF1, HNF3, HNF4, HNF6 с Enh1.
[0013] В одном варианте реализации ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую функционально активный белок FVIII, в котором B-домен заменен на последовательность SQ, состоящую из 14 аминокислот. Последовательность SQ описана в Ward и др., Blood 117:798-807, 2011, McIntosh и др., Blood 121:3335-3344, 2013, WO 2013/186563 и WO 2015/038625. Последовательность кодирующей области FVIII может представлять собой кодон-оптимизированную кодирующую FVIII последовательность (см., например, WO 2011/005968, опубликованный 13 января 2011 г., WO 2015/038625, опубликованный 19 марта 2015 г., и McIntosh и др., Blood 121:3335-3344, 2013, содержание каждого из которых полностью включено в данную заявку посредством ссылки). В предпочтительном варианте реализации нуклеиновая кислота, кодирующая указанный функционально активный белок FVIII человека, указанного ААВ-вектора или рекомбинантной ААВ-вирусной частицы состоит из нуклеотидов с 403 по 4776 из последовательности SEQ ID NO: 1. Данную последовательность в настоящей заявке обозначают "FVIII - SQ".
[0014] В первом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит Proto 1, который схематически изображен на фигуре 2A, и включает последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 1.
[0015] Во втором аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит Proto 1S, который схематически изображен на фигуре 2B, и включает последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 2.
[0016] В третьем аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит Proto 2S, который схематически изображен на фигуре 2C, и включает последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 3.
[0017] В четвертом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит Proto 3S, который схематически изображен на фигуре 2D, и включает последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 4.
[0018] В другом варианте реализации рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую функциональный FVIII, в котором нет всего B-домена, включая последовательность SQ, и a3-домена, который расположен непосредственно с N-конца от легкой цепи или C-домена. Последовательность кодирующей области FVIII может представлять собой кодон-оптимизированную последовательность (см., например, WO 2011/005968, опубликованный 13 января 2011 г., WO 2015/038625, опубликованный 19 марта 2015 г., и McIntosh и др., Blood 121:3335-3344, 2013).
[0019] В первом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит Proto 4, который схематически изображен на фигуре 3A, и включает последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 5.
[0020] Во втором аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит Proto 5, который схематически изображен на фигуре 3B, и включает последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 6.
[0021] В третьем аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит Proto 6, который схематически изображен на фигуре 3C, и включает последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 7.
[0022] В четвертом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит Proto 7, который схематически изображен на фигуре 3D, и включает последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 8.
[0023] В других вариантах реализации рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит нуклеиновую кислоту, содержащую 5'-концевой инвертированный повтор (ITR) ААВ2 (который может быть модифицирован или может не быть модифицирован как известно в данной области), специфичную для печени регулирующую транскрипцию область, кодон-оптимизированную область, кодирующую функционально активный FVIII, необязательно один или более интронов, последовательность полиаденилирования и 3'-ITR ААВ2 (который может быть модифицирован или может не быть модифицирован, как известно в данной области). В предпочтительном варианте реализации специфичная для печени регулирующая транскрипцию область включает укороченную последовательность энхансера ApoE, проксимальный промотор альфа-антитрипсина человека (hAAT) из 186 оснований, включая 42 основания 5'-нетранслируемой области (НТО), и один или более энхансеров, выбранных из группы, состоящей из: (i) энхансера ApoE/C1 человека из 34 оснований, (ii) дистального участка X промотора AAT человека из 32 оснований и (iii) 80 дополнительных оснований дистального элемента проксимального промотора AAT человека; и кодон-оптимизированную область, кодирующую функционально активный FVIII, кодирующую вариант FVIII - SQ. В другом предпочтительном варианте реализации специфичная для печени регулирующая транскрипцию область включает последовательность энхансера α1-микроглобулина и проксимальный промотор альфа-антитрипсина человека (AAT) из 186 оснований.
[0024] В первом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 100ATG, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 9.
[0025] Во втором аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 100ATG bGH poly A, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 10.
[0026] В третьем аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит последовательность конструкции 100ATG short bGH polyA, представленную в SEQ ID NO: 11.
[0027] В четвертом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 103ATG, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 12.
[0028] В пятом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 103ATG short bGH poly A, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 13.
[0029] В шестом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 105ATG bGH poly A, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 14.
[0030] В седьмом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию DC172ATG FVIII, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 15.
[0031] В восьмом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию DC172ATG FVIII hAAT, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 16.
[0032] В девятом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию DC172 2xHCR ATG FVIII, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 17.
[0033] В десятом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию DC172 2xHCR ATG FVIII hAAT, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 18.
[0034] В одиннадцатом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 2x SerpinA hAAT ATG FVIII, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 19.
[0035] В двенадцатом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 2x SerpinA hAAT ATG FVIII 2x μ-globulin enhancer, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 20.
[0036] В тринадцатом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 100ATG short polyA 2x μ-globulin enhancer, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 21.
[0037] В четырнадцатом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию Factor VIII-BMN001, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 22.
[0038] В пятнадцатом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению включает последовательность конструкции Factor VIII-BMN002, представленную в SEQ ID NO: 23.
[0039] В шестнадцатом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 99, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 24.
[0040] В семнадцатом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 100, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 25.
[0041] В восемнадцатом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 100 reverse orientation, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 26.
[0042] В девятнадцатом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 100AT, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 27.
[0043] В двадцатом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 100AT 2x MG, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 28.
[0044] В двадцать первом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 100AT 2x MG bGH polyA, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 29.
[0045] В двадцать втором аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 100AT 2x MG (reverse) bGH polyA, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 30.
[0046] В двадцать третьем аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 100 bGH polyA, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 31.
[0047] В двадцать четвертом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 100-400, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 32.
[0048] В двадцать пятом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 101, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 33.
[0049] В двадцать шестом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит последовательность конструкции 102, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 34.
[0050] В двадцать седьмом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 103, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 35.
[0051] В двадцать девятом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 103 reverse orientation, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 36.
[0052] В тридцатом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 103AT, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 37.
[0053] В тридцать первом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 103AT 2xMG, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 38.
[0054] В тридцать втором аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 103AT 2xMG bGH polyA, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 39.
[0055] В тридцать третьем аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 103 bGH polyA, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 40.
[0056] В тридцать четвертом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 104, содержащую нуклеиновую кислоту, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 41.
[0057] В тридцать пятом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 105, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 42.
[0058] В тридцать шестом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 106, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 43.
[0059] В тридцать седьмом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит конструкцию 106AT, включающую последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 44.
[0060] В тридцать восьмом аспекте рекомбинантный ААВ-вектор согласно настоящему изобретению содержит p-100 ATGB, которая включает последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 45.
[0061] В других дополнительных вариантах реализации настоящего изобретения предложены векторные конструкции, кодирующие функциональный полипептид фактора VIII, при этом указанные конструкции содержат один или более из отдельных элементов описанных выше конструкций и их комбинации, в одной или более различных ориентациях. В настоящем изобретении также предложены описанные выше конструкции в противоположной ориентации. В настоящем изобретении также предложены рекомбинантные вирусные частицы ААВ, содержащие описанные в данной заявке кодирующие FVIII ААВ-векторы, и их применение для лечения гемофилии A.
[0062] Длина указанных ААВ-векторов согласно настоящему изобретению в одноцепочечной форме составляет менее чем приблизительно 7,0 т.п.н., или составляет менее чем 6,5 т.п.н., или составляет менее чем 6,4 т.п.н., или составляет менее чем 6,3 т.п.н., или составляет менее чем 6,2 т.п.н., или составляет менее чем 6,0 т.п.н., или составляет менее чем 5,8 т.п.н., или составляет менее чем 5,6 т.п.н., или составляет менее чем 5,5 т.п.н., или составляет менее чем 5,4 т.п.н., или составляет менее чем 5,4 т.п.н., или составляет менее чем 5,2 т.п.н. или составляет менее чем 5,0 т.п.н. Длина указанных ААВ-векторов согласно настоящему изобретению в одноцепочечной форме находится в диапазоне от приблизительно 5,0 т.п.н. до приблизительно 6,5 т.п.н., или в диапазоне от приблизительно 4,8 т.п.н. до приблизительно 5,2 т.п.н., или от 4,8 т.п.н. до 5,3 т.п.н., или в диапазоне от приблизительно 4,9 т.п.н. до приблизительно 5,5 т.п.н., или от приблизительно 4,8 т.п.н. до приблизительно 6,0 т.п.н., или приблизительно от 5,0 т.п.н. до 6,2 т.п.н. или от приблизительно 5,1 т.п.н. до приблизительно 6,3 т.п.н., или от приблизительно 5,2 т.п.н. до приблизительно 6,4 т.п.н., или от приблизительно 5,5 т.п.н. до приблизительно 6,5 т.п.н.
[0063] В другом варианте реализации согласно настоящему изобретению предложены способы получения рекомбинантных частиц аденоассоциированного вируса (ААВ), содержащих любые из указанных ААВ-векторов согласно настоящему изобретению. Указанные способы включают этапы культивирования клетки, которая была трансфицирована любым из указанных ААВ-векторов согласно настоящему изобретению (соединенных с различными генами ААВ cap и rep), и извлечения кодирующих FVIII рекомбинантных ААВ-вирусных частиц из супернатанта трансфицированной клетки.
[0064] Клетки согласно настоящему изобретению, полезные для получения рекомбинантного ААВ, представляют собой клетки любого типа, восприимчивые к инфицированию бакуловирусом, включая клетки насекомых, такие как High Five, Sf9, Se301, SeIZD2109, SeUCR1, Sf9, Sf900+, Sf21, BTI-TN-5B1-4, MG-1, Tn368, HzAm1, BM-N, Ha2302, Hz2E5 и Ao38. Предпочтительные клетки млекопитающих могут представлять собой HEK293, HeLa, CHO, NS0, SP2/0, PER.C6, Vero, RD, BHK, HT 1080, A549, Cos-7, ARPE-19 и MRC-5.
[0065] Согласно настоящему изобретению также предложена рекомбинантная вирусная частица, содержащая любые из указанных ААВ-векторов согласно настоящему изобретению, или любая вирусная частица, полученная с помощью упомянутых выше способов согласно настоящему изобретению.
[0066] "ААВ-вирион", или "ААВ-вирусная частица", или "ААВ-векторная частица", или "ААВ-вирус" относится к вирусной частице, состоящей из по меньшей мере одного капсидного белка ААВ и заключенного в капсид полинуклеотидного ААВ-вектора, описанного в данной заявке. Если указанная частица содержит гетерологичный полинуклеотид (т.е. полинуклеотид, отличный от генома ААВ дикого типа, такой как трансген, который нужно доставить в клетку млекопитающего), то ее обычно называют "ААВ-векторной частицей" или просто "ААВ-вектором". Таким образом, получение ААВ-векторных частиц обязательно включает получение ААВ-вектора, так как такой вектор содержится внутри ААВ-векторной частицы.
[0067] Согласно настоящему изобретению также предложены клетки, содержащие любые из указанных ААВ-векторов согласно настоящему изобретению, и вирусные частицы, продуцируемые данными клетками согласно настоящему изобретению.
[0068] В другом варианте реализации согласно настоящему изобретению предложены способы лечения пациента, страдающего от гемофилии A, включающие введение пациенту терапевтически эффективного количества любого из указанных ААВ-векторов согласно настоящему изобретению, или вирусной частицы согласно настоящему изобретению, или вирусной частицы, полученной с помощью способа согласно настоящему изобретению.
[0069] В другом варианте реализации согласно настоящему изобретению предложены способы повышения уровней белка FVIII в кровотоке у нуждающегося в этом субъекта, включающие введение указанному субъекту любого из указанных ААВ-векторов согласно настоящему изобретению, или вирусной частицы согласно настоящему изобретению, или вирусной частицы, полученной с помощью способа согласно настоящему изобретению.
[0070] В другом варианте реализации согласно настоящему изобретению предложены способы индукции экспрессии белка FVIII у нуждающегося в этом субъекта, включающие введение указанному субъекту любого из указанных ААВ-векторов согласно настоящему изобретению, или вирусных частиц согласно настоящему изобретению, или вирусной частицы, полученной с помощью способа согласно настоящему изобретению.
[0071] В другом варианте реализации согласно настоящему изобретению предложены способы повышения экспрессии белка FVIII у нуждающегося в этом субъекта, включающие введение указанному субъекту любого из указанных ААВ-векторов согласно настоящему изобретению, или вирусных частиц согласно настоящему изобретению, или вирусной частицы, полученной с помощью способа согласно настоящему изобретению.
[0072] Согласно настоящему изобретению также предложен любой из способов согласно настоящему изобретению, дополнительно включающий этап определения отсутствия или присутствия антител к капсиду ААВ в сыворотке указанного субъекта после введения указанного терапевтически эффективного количества указанного рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса. Кроме того, согласно настоящему изобретению предложен любой из способов согласно настоящему изобретению, дополнительно включающий этап введения эффективного количества кортикостероида указанному субъекту после определения присутствия антител к капсиду ААВ в сыворотке указанного субъекта.
[0073] В дополнительном варианте реализации согласно настоящему изобретению предложено применение любого из указанных ААВ-векторов согласно настоящему изобретению или рекомбинантных вирусных частиц ААВ согласно настоящему изобретению для получения лекарственного средства для лечения гемофилии A. В одном аспекте указанное лекарственное средство содержит количество ААВ-вектора или рекомбинантной кодирующей FVIII ААВ-вирусной частицы, которые экспрессируют FVIII человека в количестве, эффективном для лечения гемофилии A. Согласно настоящему изобретению также предложено любое из применений согласно настоящему изобретению, в котором после введения лекарственного средства определяют отсутствие или присутствие антител к капсиду ААВ в сыворотке субъекта. Если определили, что в сыворотке субъекта есть антитела к капсиду ААВ, то применяют эффективное количество кортикостероида для получения лекарственного средства для введения указанному субъекту, в сыворотке которого есть антитела к капсиду ААВ.
[0074] В другом варианте реализации согласно настоящему изобретению предложена композиция, содержащая любой из указанных ААВ-векторов или рекомбинантных ААВ-вирусных частиц согласно настоящему изобретению для лечения гемофилии A. В одном аспекте указанная композиция содержит ААВ-вектор или рекомбинантные ААВ-вирусные частицы, которые экспрессируют FVIII человека, в количестве, эффективном для лечения гемофилии A. Кроме того, любую из композиций согласно настоящему изобретению вводят вместе с эффективным количеством кортикостероида субъекту, в сыворотке которого определили присутствие антител к капсиду ААВ после введения указанной композиции.
[0075] В другом варианте реализации ААВ-векторы согласно настоящему изобретению применяют для получения ААВ-вирусных частиц, которые полезны для лечения пациента, страдающего от гемофилии A.
[0076] В другом варианте реализации согласно настоящему изобретению предложены фармацевтические композиции, содержащие рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-вирусные частицы, описанные в данной заявке. В частности, в некоторых аспектах, в настоящем изобретении предложены фармацевтические композиции, которые содержат рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ-вирус, буферное вещество, изотонический агент, объемообразующий агент и поверхностно-активное вещество. В особенно предпочтительных вариантах реализации указанные фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению содержат ААВ5-FVIII-SQ, p-100 ATGB или любой из других описанных в данной заявке векторов и/или стабильны при хранении при ≤ 65°C в течение по меньшей мере 2 недель. В других дополнительных вариантах реализации настоящего изобретения указанная фармацевтическая композиция содержит двухосновный фосфат натрия в концентрации от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 3 мг/мл, моногидрат одноосновного фосфата натрия в концентрации от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 3 мг/мл, хлорид натрия в концентрации от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 20 мг/мл, маннит в концентрации от приблизительно 5 мг/мл до приблизительно 40 мг/мл и полоксамер 188 в концентрации от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 4 мг/мл. В особенно предпочтительном варианте реализации фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит двухосновный фосфат натрия в концентрации приблизительно 1,42 мг/мл, моногидрат одноосновного фосфата натрия в концентрации приблизительно 1,38 мг/мл, хлорид натрия в концентрации приблизительно 8,18 мг/мл, маннит в концентрации приблизительно 20 мг/мл, и полоксамер 188 в концентрации приблизительно 2 мг/мл. Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут находиться в жидкой форме и могут содержать кодирующую FVIII ААВ-вирусную частицу при концентрации от приблизительно 1E12 векторных геномов (вг)/мл до приблизительно 2E14 вг/мл, более предпочтительно при концентрации приблизительно 2E13 вг/мл. В одном варианте реализации указанные фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению полезны для внутривенного введения человеку, страдающему от гемофилии A.
[0077] В настоящем изобретении также предложены способы лечения субъекта, страдающего от гемофилии A, которые включают этап введения указанному субъекту терапевтически эффективного количества рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса, который необязательно может входить в состав описанной выше композиции. В предпочтительном варианте реализации субъект, страдающий от гемофилии A, представляет собой человека. В одном варианте реализации рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ-вирус представляет собой ААВ5-FVIII-SQ. В одном варианте реализации этап введения осуществляют путем внутривенного (в/в) введения. В некоторых аспектах настоящего изобретения этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта. В некоторых вариантах реализации этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более недель после введения. В некоторых вариантах реализации указанное терапевтически эффективное количество кодирующего FVIII ААВ-вируса, которое вводят субъекту, составляет по меньшей мере 2E13 вг/кг массы тела, иногда по меньшей мере 6E13 вг/кг массы тела. В некоторых вариантах реализации, дополнительно к введению терапевтически эффективного количества кодирующего FVIII ААВ-вируса, указанного субъекта лечат кортикостероидом либо профилактически, либо терапевтически, либо профилактически и терапевтически, чтобы предупредить и/или лечить любую гепатотоксичность, связанную с введением кодирующего FVIII ААВ-вируса. В одном варианте реализации ассоциированную гепатотоксичность измеряют путем сравнения исходных (т.е., до введения дозы FVIII-ААВ) уровней аланин-аминотрансферазы (АЛТ) с уровнями АЛТ после лечения, при этом повышение уровней АЛТ после введения дозы свидетельствует об ассоциированной гепатотоксичности. Профилактическое лечение кортикостероидом относится к введению кортикостероида для предотвращения гепатотоксичности и/или для предотвращения повышения измеренных уровней АЛТ у субъекта. Терапевтическое лечение кортикостероидом относится к введению кортикостероида для уменьшения гепатотоксичности, вызванной введением кодирующего FVIII ААВ-вируса, и/или для уменьшения повышенной концентрации АЛТ в кровотоке у субъекта, вызванной введением кодирующего FVIII ААВ-вируса. В некоторых вариантах реализации профилактическое или терапевтическое лечение кортикостероидами может включать введение субъекту по меньшей мере 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 или более мг кортикостероида в сутки. В некоторых вариантах реализации профилактическое или терапевтическое лечение субъекта кортикостероидами можно проводить в течение длительного периода, составляющего по меньшей мере приблизительно 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более недель.
[0078] В настоящем изобретении также предложена композиция, содержащая терапевтически эффективное количество рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса, для применения для лечения субъекта, страдающего от гемофилии A. В одном варианте реализации кодирующий FVIII ААВ-вирус представляет собой ААВ5-FVIII-SQ. В другом варианте реализации кодирующий FVIII ААВ-вирус содержит вектор p-100 ATGB. Указанная композиция необязательно может быть приготовлена, как описано выше. В некоторых вариантах реализации композиции, содержащие терапевтически эффективное количество кодирующего FVIII ААВ-вируса, вводят вместе с композицией, содержащей профилактический и/или терапевтический кортикостероид, для применения для предупреждения и/или лечения любой гепатотоксичности, связанной с введением кодирующего FVIII ААВ-вируса. Композиция для профилактического или терапевтического лечения кортикостероидами может содержать суточную дозу кортикостероида, равную по меньшей мере 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 или более мг. В некоторых вариантах реализации композиции, содержащие профилактический или терапевтический кортикостероид, можно вводить в течение длительного периода, составляющего по меньшей мере приблизительно 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более недель.
[0079] В настоящем изобретении также предложено применение терапевтически эффективного количества рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса для получения лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от гемофилии A. В некоторых вариантах реализации кодирующий FVIII ААВ-вирус представляет собой ААВ5-FVIII-SQ или вирус, содержащий вектор p-100 ATGB. Указанное лекарственное средство необязательно может входить в состав описанной композиции. В предпочтительном варианте реализации субъект, страдающий от гемофилии A, представляет собой человека. В одном варианте реализации лекарственное средство вводят путем внутривенного (в/в) введения. В одном аспекте настоящего изобретения введение лекарственного средства приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта через 16 недель или более после введения. В некоторых вариантах реализации лекарственное средство также содержит профилактический и/или терапевтический кортикостероид для предотвращения и/или лечения любой гепатотоксичности, связанной с введением кодирующего FVIII ААВ-вируса. Указанное лекарственное средство, содержащее кортикостероид для профилактического или терапевтического лечения, может содержать по меньшей мере 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 или более мг кортикостероида в сутки. В некоторых вариантах реализации лекарственное средство, содержащее кортикостероид для профилактического или терапевтического лечения, можно вводить в течение длительного периода, составляющего по меньшей мере приблизительно 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более недель.
[0080] В настоящем изобретении также предложены способы уменьшения времени кровотечения во время эпизода кровотечения у субъекта, страдающего от гемофилии A, которые включают этап введения указанному субъекту терапевтически эффективного количества рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса, описанного в данной заявке, который необязательно может входить в состав описанной выше композиции. В предпочтительном варианте реализации субъект, страдающий от гемофилии A, представляет собой человека. В одном варианте реализации этап введения осуществляют путем внутривенного (в/в) введения. В некоторых вариантах реализации этап введения осуществляют по меньшей мере приблизительно за 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50 или более недель до эпизода кровотечения. В одном аспекте настоящего изобретения этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта. В некоторых вариантах реализации этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более недель после введения. В некоторых вариантах реализации, дополнительно к введению терапевтически эффективного количества кодирующего FVIII ААВ-вируса, указанного субъекта лечат кортикостероидом либо профилактически, либо терапевтически, либо профилактически и терапевтически, чтобы предупредить и/или лечить любую гепатотоксичность, связанную с введением кодирующего FVIII ААВ-вируса, как описано выше.
[0081] В настоящем изобретении также предложена композиция, содержащая терапевтически эффективное количество рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса, для применения для уменьшения времени кровотечения при эпизоде кровотечения у субъекта, страдающего от гемофилии A. В одном варианте реализации кодирующий FVIII ААВ-вирус представляет собой ААВ5-FVIII-SQ. Указанная композиция необязательно может быть получена, как описано выше. В предпочтительном варианте реализации субъект, страдающий от гемофилии A, представляет собой человека. Указанную композицию можно вводить до эпизода кровотечения. В одном варианте реализации композицию вводят путем внутривенного (в/в) введения до эпизода кровотечения. В одном аспекте настоящего изобретения этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта. В некоторых вариантах реализации этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более недель после введения. В некоторых вариантах реализации композиции, содержащие терапевтически эффективное количество кодирующего FVIII ААВ-вируса для применения для уменьшения времени кровотечения вводят вместе с композицией, содержащей профилактический и/или терапевтический кортикостероид, для применения для предупреждения и/или лечения любой гепатотоксичности, связанной с введением кодирующего FVIII ААВ-вируса, как описано выше.
[0082] Согласно настоящему изобретению также предложен любой из способов уменьшения времени кровотечения, дополнительно включающий этап определения отсутствия или присутствия антител к капсиду ААВ в сыворотке указанного субъекта после введения указанного терапевтически эффективного количества указанного рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса. Кроме того, согласно настоящему изобретению предложен любой из способов уменьшения времени кровотечения, дополнительно включающий этап введения эффективного количества кортикостероида указанному субъекту после определения присутствия антител к капсиду ААВ в сыворотке указанного субъекта.
[0083] В настоящем изобретении также предложено применение терапевтически эффективного количества рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса для получения лекарственного средства для уменьшения времени кровотечения при эпизоде кровотечения у субъекта, страдающего от гемофилии A. В одном варианте реализации кодирующий FVIII ААВ-вирус представляет собой ААВ5-FVIII-SQ. Указанное лекарственное средство необязательно может входить в состав описанной выше композиции. В предпочтительном варианте реализации субъект, страдающий от гемофилии A, представляет собой человека. Указанное лекарственное средство можно вводить до эпизода кровотечения. В одном варианте реализации лекарственное средство вводят путем внутривенного (в/в) введения до эпизода кровотечения. В одном аспекте настоящего изобретения введение лекарственного средства приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта. В некоторых вариантах реализации введение лекарственного средства приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более недель после введения. В некоторых вариантах реализации лекарственные средства, содержащие терапевтически эффективное количество кодирующего FVIII ААВ-вируса, для уменьшения времени кровотечения также содержат профилактический и/или терапевтический кортикостероид для предотвращения и/или лечения любой гепатотоксичности, связанной с введением кодирующего FVIII ААВ-вируса, как описано выше. Кроме того, любую из композиций согласно настоящему изобретению для применения для уменьшения времени кровотечения вводят вместе с эффективным количеством кортикостероида субъекту, в сыворотке которого определили присутствие антител к капсиду ААВ после введения указанной композиции.
[0084] В настоящем изобретении также предложены способы индукции экспрессии функционального белка FVIII у нуждающегося в этом субъекта, которые включают этап введения указанному субъекту рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса, описанного в данной заявке, который необязательно может входить в состав описанной выше композиции, при этом такое введение приводит к повышенной экспрессии функционального белка FVIII или повышенным концентрациям функционального белка FVIII в кровотоке у субъекта. В предпочтительном варианте реализации нуждающийся в лечении субъект представляет собой человека. В одном варианте реализации этап введения осуществляют путем внутривенного (в/в) введения. В одном аспекте настоящего изобретения этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта. В некоторых вариантах реализации этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более недель после введения. В некоторых вариантах реализации, дополнительно к введению кодирующего FVIII ААВ-вируса, указанного субъекта лечат кортикостероидом либо профилактически, либо терапевтически, либо профилактически и терапевтически, чтобы предупредить и/или лечить любую гепатотоксичность, связанную с введением кодирующего FVIII ААВ-вируса, как описано выше. Кроме того, в любом из применений согласно настоящему изобретению после введения лекарственного средства для уменьшения времени кровотечения определяют отсутствие или присутствие антител к капсиду ААВ в сыворотке субъекта. Если определили, что в сыворотке субъекта есть антитела к капсиду ААВ, то предполагается применение эффективного количества кортикостероида для получения лекарственного средства для введения указанному субъекту, в сыворотке которого есть антитела к капсиду ААВ.
[0085] В настоящем изобретении также предложены способы повышения экспрессии белка FVIII у нуждающегося в этом субъекта, которые включают этап введения указанному субъекту рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса, описанного в данной заявке, который необязательно может входить в состав описанной выше композиции, при этом такое введение приводит к повышенной экспрессии функционального белка FVIII или повышенным концентрациям функционального белка FVIII в кровотоке у субъекта. В предпочтительном варианте реализации нуждающийся в лечении субъект представляет собой человека. В одном варианте реализации этап введения осуществляют путем внутривенного (в/в) введения. В одном аспекте настоящего изобретения этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта. В некоторых вариантах реализации этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более недель после введения. В некоторых вариантах реализации дополнительно к введению кодирующего FVIII ААВ-вируса, указанного субъекта лечат кортикостероидом либо профилактически, либо терапевтически, либо профилактически и терапевтически, чтобы предупредить и/или лечить любую гепатотоксичность, связанную с введением кодирующего FVIII ААВ-вируса, как описано выше.
[0086] В настоящем изобретении также предложена композиция, содержащая терапевтически эффективное количество рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса, для применения для повышения или индукции экспрессии белка FVIII у нуждающегося в этом субъекта. В одном варианте реализации кодирующий FVIII ААВ-вирус представляет собой ААВ5-FVIII-SQ. Указанная композиция необязательно может быть получена, как описано выше. В предпочтительном варианте реализации нуждающийся в лечении субъект представляет собой человека, страдающего от гемофилии A. Указанную композицию можно вводить до эпизода кровотечения. В одном варианте реализации композицию вводят путем внутривенного (в/в) введения до эпизода кровотечения. В одном аспекте настоящего изобретения этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта. В некоторых вариантах реализации этап введения приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более недель после введения. В некоторых вариантах реализации композиции, содержащие терапевтически эффективное количество кодирующего FVIII ААВ-вируса для применения для повышения или индукции экспрессии белка FVIII, вводят вместе с композицией, содержащей профилактический и/или терапевтический кортикостероид, для применения для предупреждения и/или лечения любой гепатотоксичности, связанной с введением кодирующего FVIII ААВ-вируса, как описано выше.
[0087] В настоящем изобретении также предложено применение терапевтически эффективного количества рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса для получения лекарственного средства для повышения или индукции экспрессии белка FVIII у нуждающегося в этом субъекта. В одном варианте реализации нуждающийся в лечении субъект представляет собой человека, страдающего от гемофилии A. В одном варианте реализации кодирующий FVIII ААВ-вирус представляет собой ААВ5-FVIII-SQ. Указанное лекарственное средство необязательно может входить в состав описанной выше композиции. Указанное лекарственное средство можно вводить до эпизода кровотечения. В одном варианте реализации лекарственное средство вводят путем внутривенного (в/в) введения до эпизода кровотечения. В одном аспекте настоящего изобретения введение лекарственного средства приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта. В некоторых вариантах реализации введение лекарственного средства приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл белка фактора VIII в кровотоке у субъекта через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более недель после введения. В некоторых вариантах реализации лекарственные средства, содержащие терапевтически эффективное количество кодирующего FVIII ААВ-вируса для повышения или индукции экспрессии белка FVIII, также содержат профилактический и/или терапевтический кортикостероид для предотвращения и/или лечения любой гепатотоксичности, связанной с введением кодирующего FVIII ААВ-вируса, как описано выше.
[0088] В настоящем изобретении также предложен способ лечения субъекта, страдающего от гемофилии A, включающий этапы (i) определения отсутствия антител к капсиду ААВ в сыворотке указанного субъекта, и (ii) введения указанному субъекту терапевтически эффективного количества рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса.
[0089] В настоящем изобретении также предложено применение терапевтически эффективного количества рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса для получения лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от гемофилии A, при этом антитела к капсиду ААВ отсутствуют в сыворотке субъекта.
[0090] В настоящем изобретении также предложена композиция, содержащая терапевтически эффективное количество рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса, для применения для лечения субъекта, страдающего от гемофилии A, при этом антитела к капсиду ААВ отсутствуют в сыворотке субъекта.
[0091] В настоящем изобретении также предложен способ лечения субъекта, страдающего от гемофилии A, включающий этапы (i) введения указанному субъекту терапевтически эффективного количества рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса, и, (ii) после введения указанного терапевтически эффективного количества указанного рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса, определения отсутствия или присутствия антител к капсиду ААВ в сыворотке указанного субъекта. В одном варианте реализации указанный способ дополнительно включает этап введения эффективного количества кортикостероида субъекту после определения присутствия антител к капсиду ААВ в сыворотке указанного субъекта.
[0092] В настоящем изобретении предложено применение терапевтически эффективного количества рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса для получения лекарственного средства для лечения гемофилии A, при этом после введения лекарственного средства определяют отсутствие или присутствие антител к капсиду ААВ в сыворотке субъекта. Если определили, что в сыворотке субъекта есть антитела к капсиду ААВ, то применяют эффективное количество кортикостероида для получения лекарственного средства для введения указанному субъекту, в сыворотке которого есть антитела к капсиду ААВ. В настоящем изобретении также предложена композиция, содержащая эффективное количество рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ для лечения гемофилии A, при этом указанную композицию вводят вместе с эффективным количеством кортикостероида субъекту, в сыворотке которого определили присутствие антител к капсиду ААВ после введения указанной композиции.
[0093] Другие варианты реализации настоящего изобретения будут очевидны для специалиста в данной области после прочтения настоящего описания патента.
ОПИСАНИЕ ФИГУР
[0094] На фигуре 1 представлено схематическое изображение типичного кодирующего FVIII рекомбинантного ААВ-вектора. Слева направо, указанный вектор содержит последовательность 5'-ITR ААВ2, последовательность ААВ2-вируса дикого типа, последовательность энхансера ApoE/C1 человека из 34 оснований, последовательность дистального участка X промотора AAT человека из 32 оснований, последовательность промотора AAT человека из 186 оснований, которая содержит последовательность 5'-НТО из 42 оснований, кодон-оптимизированную последовательность SQ FVIII человека, синтетическую последовательность полиаденилирования Proudfoot из 49 оснований, последовательность ААВ2-вируса дикого типа и последовательность 3'-ITR ААВ2 (см. WO 2011/005968, опубликованный 13 января 2011 г., который полностью включен в данную заявку посредством ссылки, и McIntosh и др., Blood 121:3335-3344, 2013). Длина данного вектора составляет 5081 основание.
[0095] На фигуре 2A - фигуре 2D представлены схематические изображения некоторых рекомбинантных кодирующих FVIII ААВ-векторов согласно настоящему изобретению: (A) Proto 1, (B) Proto 1S, (C) Proto 2S и (D) Proto 3S.
[0096] На фигуре 3A - фигуре 3D представлены схематические изображения некоторых рекомбинантных кодирующих FVIII ААВ-векторов согласно настоящему изобретению: (A) Proto 4, (B) Proto 5, (C) Proto 6 и (D) Proto 7.
[0097] На фигуре 4A - фигуре 4JJ представлены схематические изображения некоторых рекомбинантных кодирующих FVIII ААВ-векторов согласно настоящему изобретению. (A) Конструкция 100ATG, (B) конструкция 100ATG bGH polyA, (C) конструкция 100ATG short bGH poly A, (D) конструкция 103ATG, (E) конструкция 103ATG short bGH poly A, (F) конструкция 105ATG bGH polyA, (G) конструкция DC172ATG FVIII, (H) конструкция DC172ATG FVIII hAAT, (I) конструкция DC172 2xHCR ATG FVIII, (J) конструкция DC172 2xHCR ATG FVIII hAAT, (K) конструкция 2x SerpinA hAAT ATG FVIII, (L) конструкция 2x SerpinA hAAT ATG FVIII 2x μ-globulin enhancer, (M) конструкция 100ATG short bGH poly A 2x μ-globulin enhancer, (N) конструкция Factor VIII-BMN001, (O) конструкция Factor VIII-BMN002, (P) конструкция 99, (Q) конструкция 100, (R) конструкция 100 reverse orientation, (S) конструкция 100AT, (T) конструкция 100AT 2x MG, (U) конструкция 100AT 2x MG bGH polyA, (V) конструкция 100AT 2x MG (reverse) bGH poly A, (W) конструкция 100 bGH poly A, (X) конструкция 100-400, (Y) конструкция 101, (Z) конструкция 102, (AA) конструкция 103, (BB) конструкция 103 reverse orientation, (CC) конструкция 103AT, (DD) конструкция 103AT 2x MG, (EE) конструкция 103AT 2x MG bGH poly A, (FF) конструкция 103 bGH poly A, (GG) конструкция 104, (HH) конструкция 105, (II) конструкция 106 и (JJ) конструкция 106AT.
[0098] На фигуре 5 представлены результаты оценки рекомбинантных кодирующих FVIII конструкций Proto ААВ на мышах Rag2 и продемонстрировано, что конструкции вируса Proto трансдуцируют FVIII аналогично вектору, показанному на фигуре 1, при этом ось y представляет нг/мл белка FVIII, которые определили с помощью анализа ELISA.
[0099] На фигуре 6 продемонстрировано, что различные рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-конструкции согласно настоящему изобретению вызывают экспрессию белка FVIII in vivo, что измеряли в анализе гидродинамической инъекции в хвостовую вену мыши.
[00100] На фигуре 7 продемонстрировано, что различные рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-конструкции согласно настоящему изобретению вызывают экспрессию белка FVIII in vivo, что измеряли в анализе гидродинамической инъекции в хвостовую вену мыши.
[00101] На фигуре 8 продемонстрировано, что различные рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-конструкции согласно настоящему изобретению вызывают экспрессию белка FVIII in vivo, что измеряли в анализе гидродинамической инъекции в хвостовую вену мыши.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[00102] Согласно настоящему изобретению предложены ААВ-векторы, кодирующие функционально активный FVIII, например, полностью упакованные кодирующие FVIII ААВ-векторы или кодирующие FVIII ААВ-векторы с высокой экспрессионной активностью. Рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-векторы согласно настоящему изобретению обеспечивают повышенную экспрессию трансгена, а также повышенный выход продукции ААВ-вируса и упрощенную очистку. Введение одного или более интронов в кодирующую белок FVIII область повышает экспрессию. Изменение конфигурации количества и расположения энхансеров также повышает экспрессию.
Пример кодирующего FVIII ААВ-вектора.
[00103] Пример рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вектора, показанного на фигуре 1, который подробно описан в WO 2011/005968, опубликованном 13 января 2011 г., который полностью включен в данную заявку посредством ссылки, и McIntosh и др., Blood 121:3335-3344, 2013, представляет собой кодирующий FVIII ААВ-вектор с превышенным размером, т.е., больше 5,0 т.п.н. На фигуре 1 показано, что данный кодирующий FVIII ААВ-вектор содержит, слева направо, последовательность 5'-ITR серотипа ААВ 2 (ААВ2), последовательность вируса, полученную из ААВ2 дикого типа, энхансерный элемент аполипопротеина E (ApoE)/C1 человека из 34 оснований, дистальный участок X промотора альфа-антитрипсина (AAT) человека из 32 оснований, промотор AAT человека (hAAT) из 186 оснований, включая последовательность 5'-нетранслируемой области (НТО) из 42 оснований, кодон-оптимизированную последовательность FVIII человека, в которой B-домен FVIII замещен на последовательность SQ, состоящую из 14 аминокислот, синтетическую последовательность полиаденилирования Proudfoot из 49 оснований, последовательность вируса, полученную из ААВ2 дикого типа, и последовательность 3'-ITR ААВ2. Длина данного вектора составляет 5081 основание и, как показано в WO 2011/005968, он экспрессирует функционально активный FVIII как in vitro, так и in vivo.
Векторы Proto 1, Proto 1S, Proto 2S и Proto 3S.
[00104] Для того, чтобы избежать проблем, связанных ААВ-векторами с превышенным размером, и/или чтобы повысить экспрессию трансгена FVIII с ААВ-векторов, согласно настоящему изобретению предложены полностью упакованные ААВ-векторы меньшего размера, т.е., менее 5,0 т.п.н., кодирующие функциональный белок FVIII. Последовательность нуклеотидов из 4970 п.о. рекомбинантной конструкции ААВ Proto 1 предложена в последовательности SEQ ID NO: 1.
[00105] Для получения рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вектора Proto 1, последовательности, которые определили как необязательные для получения функционально активного FVIII, удаляли из вектора, показанного на фигуре 1. В примере 1 показано, что удаляли 111 оснований чужеродной ДНК, включая 53 основания последовательности ААВ2-вируса дикого типа с 3'-стороны от 5'-ITR ААВ2, 46 оснований последовательности вируса ААВ2 с 5'-стороны от 3'-ITR ААВ2, и 12 оснований, расположенных рядом с кодон-оптимизированной кодирующей белок FVIII областью. Кодон-оптимизированную последовательность SQ FVIII вектора, представленного на фигуре 1, также заменяли на новую кодон-оптимизированную последовательность SQ FVIII, называемую в данной заявке "FVIII-SQ". Последовательность, кодирующую FVIII-SQ (основания 403-4776 в последовательности SEQ ID NO: 1), затем внедряли в вектор Proto 1. Полученный вектор Proto 1 был длиной 4970 оснований и содержал, слева направо, модифицированный 5'-ITR серотипа ААВ 2 (ААВ2), энхансерный элемент аполипопротеина E (ApoE)/C1 человека из 34 оснований, дистальный участок X промотора альфа-антитрипсина (AAT) человека из 32 оснований, промотор hAAT из 186 оснований, включая последовательность 5'-нетранслируемой области (НТО) из 42 оснований, новую кодон-оптимизированную последовательность FVIII человека, в которой B-домен FVIII замещен на последовательность SQ, состоящую из 14 аминокислот, синтетическую последовательность полиаденилирования Proudfoot из 49 оснований и модифицированный 3'-ITR ААВ2. При разработке было неизвестно, сможет ли вектор Proto 1 экспрессировать функциональный полипептид FVIII, либо in vitro, либо in vivo.
[00106] Для получения ААВ-вектора Proto 1S, 10 оснований на 3'-конце 5'-ITR ААВ2 и 10 оснований на 5'-конце 3'-ITR ААВ2 удаляли из вектора Proto 1. Длина полученного вектора Proto 1S составляла 4950 оснований. Последовательность нуклеотидов Proto 1S представлена в последовательности SEQ ID NO: 2.
[00107] Для получения ААВ-вектора Proto 2S синтетический интрон из 100 оснований встраивали между экзонами 1 и 2 последовательности FVIII-SQ в векторе Proto 1S. Энхансер ApoE/C1 из 34 оснований и дистальный участок X промотора AAT человека из 32 оснований удаляли из положения против хода транскрипции от промотора AAT человека и встраивали в синтетический интрон в обратной ориентации (по отношению к ориентации, когда данные элементы были расположены против хода транскрипции от промотора AAT человека). Длина полученного вектора Proto 2S составляла 4983 основания. Последовательность нуклеотидов Proto 2S представлена в последовательности SEQ ID NO: 3.
[00108] Для получения ААВ-вектора Proto 3S дистальный участок X промотора AAT человека удаляли из вектора Proto 2S и заменяли на вторую копию энхансера ApoE/C1 из 34 оснований в обратной ориентации. Длина полученного вектора Proto 3S составляла 4984 основания. Последовательность нуклеотидов Proto 3S представлена в последовательности SEQ ID NO: 4.
Векторы Proto 4, Proto S, Proto 6 и Proto 7.
[00109] В попытке дополнительно уменьшить размер кодирующих FVIII ААВ-векторов и/или повысить экспрессию трансгена FVIII с ААВ-векторов, согласно настоящему изобретению также предложены полностью упакованные ААВ-векторы меньшего размера, т.е., менее 5,0 т.п.н., кодирующие FVIII с удаленным B-доменом и a3-доменом.
[00110] Для получения ААВ-вектора Proto 4 из вектора Proto 1 удаляли последовательность SQ, состоящую из 14 аминокислот, и a3-домен, расположенный рядом с C-доменом. Суммарное количество удаленной последовательности FVIII составляло 55 аминокислот или 165 оснований. Длина полученного вектора Proto 4 составляла 4805 оснований. Последовательность нуклеотидов Proto 4 представлена в последовательности SEQ ID NO: 5.
[00111] Для получения ААВ-вектора Proto 5, укороченный интрон FVIII из 129 оснований встраивали между экзонами 1 и 2 кодон-оптимизированной последовательности FVIII в векторе Proto 4. Длина полученного вектора Proto 5 составляла 4934 основания. Последовательность нуклеотидов Proto 5 представлена в последовательности SEQ ID NO: 6.
[00112] Для получения ААВ-вектора Proto 6, 34 основания указанного интрона FVIII заменяли на вторую копию энхансера ApoE/C1 человека из 34 оснований в прямой ориентации в векторе Proto 5. Длина полученного вектора Proto 6 составляла 4934 основания. Последовательность нуклеотидов Proto 6 представлена в последовательности SEQ ID NO: 7.
[00113] Для получения ААВ-вектора Proto 7, 34 основания указанного интрона FVIII заменяли на вторую копию энхансера ApoE/C1 человека из 34 оснований в обратной ориентации в векторе Proto 5. Длина полученного вектора Proto 7 составляла 4934 основания. Последовательность нуклеотидов Proto 7 представлена в последовательности SEQ ID NO: 8.
Дополнительные рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-векторы с улучшенными последовательностями промотора/энхансера.
[00114] ААВ-векторы с превышенным размером с сильными промоторами получали, чтобы повысить экспрессию FVIII с удаленным B-доменом и a3-доменом, и данные конструкции получали с модифицированными последовательностями энхансера и/или промотора. В некоторых вариантах реализации кодирующие FVIII ААВ-векторы экспрессируют укороченный функциональный FVIII. Данные конструкции содержали одну или более последовательностей промотора и энхансера, таких как HCR ApoE или его фрагменты, энхансер μ-глобулина или его фрагменты, промотор альфа-1-антитрипсина человека (hAAT) или его фрагменты, энхансер серпина A или его фрагменты, энхансер промотора LP1 или его фрагменты или энхансер макроглобулина или его фрагмент. Данные конструкции содержат последовательность полиаденилирования, такую как последовательность поли(A) bGH или синтетическая последовательность поли(A) β-глобина кролика. В некотором варианте реализации указанные конструкции содержат интрон или фрагменты интрона, такого как интрон hAAT или интрон β-глобина человека. В некоторых вариантах реализации рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-векторы включают новую кодон-оптимизированную последовательность, кодирующую FVIII-SQ.
[00115] Длина конструкции 100ATG (фигура 4A) составляет 5511 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 9, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 160-502 представляют собой HCR ApoE, основания 509-726 представляют собой промотор hAAT, основания 727-910 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 923-5296 представляют собой FVIII-SQ, основания 5305-5352 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5367-5511 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00116] Длина конструкции 100ATG bGH poly A (фигура 4B) составляет 5688 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 10, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 160-502 представляют собой HCR ApoE, основания 509-726 представляют собой промотор hAAT, основания 727-910 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 923-5296 представляют собой FVIII-SQ, основания 5305-5529 представляют собой поли(A) bGH и основания 5544-5688 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00117] Длина конструкции 100ATG short bGH poly A (фигура 4C) составляет 5613 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 11, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 160-502 представляют собой HCR ApoE, основания 509-726 представляют собой промотор hAAT, основания 727-910 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 923-5296 представляют собой FVIII-SQ, основания 5305-5454 представляют собой короткую поли(A) bGH и основания 5469-5613 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00118] Длина конструкции 103ATG (фигура 4D) составляет 5362 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 12, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-344 представляют собой четыре копии (4x) повтора ApoE из 44 п.о., основания 360-577 представляют собой промотор hAAT, основания 578-761 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 774-5147 представляют собой FVIII-SQ, основания 5156-5203 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5218-5362 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00119] Длина конструкции 103ATG short bGH poly A (фигура 4E) составляет 5464 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 13, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-344 представляют собой четыре копии (4x) повтора ApoE из 44 п.о., основания 360-577 представляют собой промотор hAAT, основания 578-761 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 774-5147 представляют собой FVIII-SQ, основания 5156-5305 представляют собой короткую поли(A) bGH и основания 5320-5464 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00120] Длина конструкции 105ATG bGH polyA (фигура 4F) составляет 6354 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 14, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 173-512 представляют собой две копии (2x) энхансера микроглобулина из 170 п.о., основания 519-736 представляют собой промотор hAAT, основания 737-920 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 933-5306 представляют собой FVIII-SQ, основания 5315-5539 представляют собой поли(A) bGH, основания 5546-6195 представляют собой две копии (2x) HCR ApoE из 325 п.о. и основания 6210-6354 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00121] Длина конструкции DC172ATG FVIII (фигура 4G) составляет 6308 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 15, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 160-449 представляют собой две копии (2x) энхансера макроглобулина из 145 п.о., основания 450-1347 представляют собой промотор hAAT из 898 п.о., основания 1348-1531 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 1544-5917 представляют собой FVIII-SQ, основания 5926-6149 представляют собой поли(A) bGH и основания 6164-6308 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00122] Длина конструкции DC172ATG FVIII hAAT (фигура 4H) составляет 5635 оснований. Данная конструкция представлена как последовательность SEQ ID NO: 16, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 160-449 представляют собой две копии (2x) энхансера макроглобулина из 145 п.о., основания 457-674 представляют собой промотор hAAT, основания 675-858 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 871-5244 представляют собой FVIII-SQ, основания 5253-5476 представляют собой поли(A) bGH и основания 5490-5635 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00123] Длина конструкции DC172 2xHCR ATG FVIII (фигура 4I) составляет 6962 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 17, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 160-807 представляют собой две копии (2x) HCR ApoE из 321 п.о., основания 814-1103 представляют собой две копии (2x) энхансера макроглобулина из 145 п.о., основания 1104-2001 представляют собой промотор hAAT из 898 п.о., основания 2002-2185 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 2198-6571 представляют собой FVIII-SQ, основания 6580-6803 представляют собой поли(A) bGH и основания 6818-6962 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00124] Длина конструкции DC172 2xHCR ATG FVIII hAAT (фигура 4J) составляет 6289 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 18, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 160-807 представляют собой две копии (2x) HCR ApoE из 321 п.о., основания 814-1103 представляют собой две копии (2x) энхансера макроглобулина из 145 п.о., основания 1111-1328 представляют собой промотор hAAT, основания 1329-1512 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 1525-5898 представляют собой FVIII-SQ, основания 5907-6130 представляют собой поли(A) bGH и основания 6245-6289 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00125] Длина конструкции 2x SerpinA hAAT ATG FVIII (фигура 4K) составляет 5430 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 19, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 168-309 представляют собой две копии (2x) энхансера серпина A из 71 п.о., основания 326-543 представляют собой промотор hAAT, основания 544-727 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 740-5113 представляют собой FVIII-SQ, основания 5122-5271 представляют собой короткую поли(A) bGH и основания 5286-5430 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00126] Длина конструкции 2x SerpinA hAAT ATG FVIII 2x μ-globulin enhancer (фигура 4L) составляет 5779 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 20, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 168-309 представляют собой две копии (2x) энхансера серпина A из 71 п.о., основания 326-543 представляют собой промотор hAAT, основания 544-727 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 740-5113 представляют собой FVIII-SQ, основания 5122-5271 представляют собой короткую поли(A) bGH, основания 5279-5618 представляют собой две копии (2x) энхансера μ-глобулина из 170 п.о. и основания 5635-5779 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00127] Длина конструкции 100ATG short bGH poly A 2x μ-globulin enhancer (фигура 4M) составляет 5962 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 21, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 160-502 представляют собой HCR ApoE, основания 509-726 представляют собой промотор hAAT, основания 727-910 представляют собой модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, основания 923-5296 представляют собой FVIII-SQ, основания 5305-5454 представляют собой короткую поли(A) bGH, основания 5462-5801 представляют собой две копии (2x) энхансера микроглобулина из 170 п.о. и основания 5818-5962 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00128] Длина конструкции Factor VIII-BMN001 (фигура 4N) составляет 5919 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 22, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 160-480 представляют собой HCR ApoE, основания 487-884 представляют собой промотор hAAT из 398 п.о., основания 885-1145 представляют собой укороченный интрон hAAT, основания 1155-5528 представляют собой FVIII-SQ, основания 5537-5760 представляют собой поли(A) bGH и основания 5775-5919 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00129] Длина конструкции Factor VIII-BMN002 (фигура 4O) составляет 5306 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 23, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 175-705 представляют собой промотор/энхансер LP1, основания 718-5091 представляют собой FVIII-SQ, основания 5100-5147 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5162-5306 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00130] Длина конструкции 99 (фигура 4P) составляет 5461 основание. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 24, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-627 представляют собой HCR ApoE/MAR, основания 634-866 представляют собой промотор hAAT, основания 873-5246 представляют собой FVIII-SQ, основания 5255-5302 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5317-5461 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00131] Длина конструкции 100 (фигура 4Q) составляет 5327 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 25, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-493 представляют собой HCR ApoE, основания 509-726 представляют собой промотор hAAT, основания 739-5112 представляют собой FVIII-SQ, основания 5121-5168 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5183-5327 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00132] Длина конструкции 100 reverse orientation (фигура 4R) составляет 5309 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 26, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 160-484 представляют собой HCR ApoE в обратной ориентации, основания 491-708 представляют собой промотор hAAT, основания 721-5094 представляют собой FVIII-SQ, основания 5103-5150 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5165-5309 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00133] Длина конструкции 100AT (фигура 4S) составляет 5532 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 27, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-493 представляют собой HCR ApoE, основания 509-726 представляют собой промотор hAAT, основания 727-931 представляют собой интрон hAAT, основания 944-5317 представляют собой FVIII-SQ, основания 5326-5373 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5388-5532 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00134] Длина конструкции 100AT 2x MG (фигура 4T) составляет 5877 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 28, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-493 представляют собой HCR ApoE, основания 508-847 представляют собой две копии (2x) энхансера μ-глобулина из 170 п.о., основания 854-1071 представляют собой промотор hAAT, основания 1072-1276 представляют собой интрон hAAT, основания 1289-5662 представляют собой FVIII-SQ, основания 5671-5718 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5733-5877 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00135] Длина конструкции 100AT 2x MG bGH poly A (фигура 4U) составляет 6054 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 29, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-493 представляют собой HCR ApoE, основания 508-847 представляют собой две копии (2x) энхансера μ-глобулина из 170 п.о., основания 854-1071 представляют собой промотор hAAT, основания 1072-1276 представляют собой интрон hAAT, основания 1289-5662 представляют собой FVIII-SQ, основания 5671-5895 представляют собой поли(A) bGH и основания 5910-6054 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00136] Длина конструкции 100AT 2x MG (reverse) bGH poly A (фигура 4V) составляет 6054 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 30, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-493 представляют собой HCR ApoE, основания 508-847 представляют собой две копии (2x) энхансера μ-глобулина из 170 п.о. в обратной ориентации, основания 854-1071 представляют собой промотор hAAT, основания 1072-1276 представляют собой интрон hAAT, основания 1289-5662 представляют собой FVIII-SQ, основания 5671-5895 представляют собой поли(A) bGH и основания 5910-6054 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00137] Длина конструкции 100 bGH poly A (фигура 4W) составляет 5504 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 31, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-493 представляют собой HCR ApoE, основания 509-726 представляют собой промотор hAAT, основания 739-5112 представляют собой FVIII-SQ, пары оснований 5121-5345 представляют собой поли(A) bGH и основания 5360-5504 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00138] Длина конструкции 100-400 (фигура 4X) составляет 5507 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 32, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-493 представляют собой HCR ApoE, основания 512-906 представляют собой промотор hAAT из 398 п.о., основания 919-5292 представляют собой FVIII-SQ, основания 5301-5348 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5363-5507 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00139] Длина конструкции 101 (фигура 4Y) составляет 5311 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 33, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 170-477 представляют собой две копии (2x) HCR ApoE из 154 п.о., основания 493-710 представляют собой промотор hAAT, основания 723-5096 представляют собой FVIII-SQ, основания 5105-5152 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5167-5311 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00140] Длина конструкции 102 (фигура 4Z) составляет 5156 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 34, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-322 представляют собой HCR ApoE из 154 п.о., основания 338-555 представляют собой промотор hAAT, основания 568-4941 представляют собой FVIII-SQ, основания 4950-4997 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5012-5156 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00141] Длина конструкции 103 (фигура 4AA) составляет 5178 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 35, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-344 представляют собой четыре копии (4x) HCR ApoE из 44 п.о., основания 360-577 представляют собой промотор hAAT, основания 590-4963 представляют собой FVIII-SQ, основания 4972-5019 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5034-5178 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00142] Длина конструкции 103 reverse orientation (фигура 4BB) составляет 5160 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 36, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 160-335 представляют собой четыре копии (4x) HCR ApoE из 44 п.о. в обратной ориентации, основания 342-559 представляют собой промотор hAAT, основания 572-4945 представляют собой FVIII-SQ, основания 4954-5001 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5016-5160 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00143] Длина конструкции 103AT (фигура 4CC) составляет 5383 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 37, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-344 представляют собой четыре копии (4x) HCR ApoE из 44 п.о., основания 360-577 представляют собой промотор hAAT, основания 578-782 представляют собой интрон hAAT, основания 795-4374 представляют собой FVIII-SQ, основания 5177-5224 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5239-5383 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00144] Длина конструкции 103AT 2x MG (фигура 4DD) составляет 5728 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 38, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-344 представляют собой четыре копии (4x) HCR ApoE из 44 п.о., основания 359-698 представляют собой две копии (2x) энхансера μ-глобулина из 170 п.о., основания 705-922 представляют собой промотор hAAT, основания 923-1127 представляют собой интрон hAAT, основания 1140-5513 представляют собой FVIII-SQ, основания 5522-5569 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5584-5728 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00145] Длина конструкции 103AT 2x MG bGH poly A (фигура 4EE) составляет 5905 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 39, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-344 представляют собой четыре копии (4x) HCR ApoE из 44 п.о., основания 359-698 представляют собой две копии (2x) энхансера μ-глобулина из 170 п.о., основания 705-922 представляют собой промотор hAAT, основания 923-1127 представляют собой интрон hAAT, основания 1140-5513 представляют собой FVIII-SQ, основания 5522-5746 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5761-5905 представляют собой 5'-ITR ААВ2.
[00146] Длина конструкции 103 bGH poly A (фигура 4FF) составляет 5355 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 40, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-344 представляют собой четыре копии (4x) HCR ApoE из 44 п.о., основания 360-577 представляют собой промотор hAAT, основания 590-4963 представляют собой FVIII-SQ, основания 4972-5196 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5211-5355 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00147] Длина конструкции 104 (фигура 4GG) составляет 5618 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 41, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 169-784 представляют собой четыре копии (4x) HCR ApoE из 154 п.о., основания 800-1017 представляют собой промотор hAAT, основания 1030-5403 представляют собой FVIII-SQ, основания 5412-5459 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5474-5618 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00148] Длина конструкции 105 (фигура 4HH) составляет 5993 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в SEQ ID NO: 42, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 173-512 представляют собой две копии (2x) энхансера μ-глобулина из 170 п.о., основания 519-736 представляют собой промотор hAAT, основания 749-5122 представляют собой FVIII-SQ, основания 5131-5178 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика, основания 5185-5834 представляют собой две копии (2x) HCR ApoE и основания 5849-5993 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00149] Длина конструкции 106 (фигура 4II) составляет 5337 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 43, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 173-512 представляют собой две копии (2x) энхансера μ-глобулина из 170 п.о., основания 519-736 представляют собой промотор hAAT, основания 749-5122 представляют собой FVIII-SQ, основания 5131-5178 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5193-5337 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00150] Длина конструкции 106AT (фигура 4JJ) составляет 5542 основания. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 44, в которой основания 1-145 представляют собой 5'-ITR ААВ2, основания 173-512 представляют собой две копии (2x) энхансера μ-глобулина из 170 п.о., основания 519-736 представляют собой промотор hAAT, основания 737-941 представляют собой интрон hAAT, основания 954-5327 представляют собой FVIII-SQ, основания 5336-5383 представляют собой синтетическую последовательность поли(A) β-глобина кролика и основания 5398-5542 представляют собой 3'-ITR ААВ2.
[00151] Длина конструкции p-100 ATGB составляет 5640 оснований. Последовательность нуклеотидов данной конструкции представлена в последовательности SEQ ID NO: 45 и содержит 5'-ITR ААВ2, HCR ApoE, промотор hAAT, модифицированный 2ой интрон β-глобина человека, кодирующую FVIII-SQ последовательность, последовательность поли(A) bGH и 3'-ITR ААВ2.
ААВ-векторы.
[00152] В данной заявке термин "ААВ" является стандартной аббревиатурой для аденоассоциированного вируса. Аденоассоциированный вирус представляет собой одноцепочечный ДНК-парвовирус, который растет только в клетках, в которых определенные функции предоставляет коинфицированный вирус-помощник. На сегодняшний день охарактеризовано тринадцать серотипов ААВ, представленных ниже в таблице 1. Основные сведения и обзоры на тему ААВ можно найти, например, в Carter, 1989, Handbook of Parvoviruses, том 1, стр. 169-228, и Berns, 1990, Virology, стр. 1743-1764, Raven Press, (Нью-Йорк). Тем не менее, вполне ожидаемо, что те же самые принципы будут применимы к дополнительным серотипам ААВ, поскольку хорошо известно, что различные серотипы довольно близкородственны, как структурно, так и функционально, даже на генетическом уровне (см., например, Blacklowe, 1988, стр. 165-174, Parvoviruses and Human Disease, J. R. Pattison, изд.; и Rose, Comprehensive Virology 3:1-61 (1974)). Например, все серотипы ААВ очевидно проявляют очень сходные репликативные свойства, опосредованные гомологичными генами rep; и все содержат три родственных капсидных белка. Степень родства дополнительно подтверждается гетеродуплексным анализом, который выявил обширную перекрестную гибридизацию между серотипами по всей длине генома; и присутствием аналогичных самоотжигающихся фрагментов на концах, которые соответствуют "последовательностям инвертированных концевых повторов" (ITR). Сходные паттерны инфицирующей способности также позволяют предположить, что функции репликации у каждого серотипа находятся под сходным регуляторным контролем.
[00153] "ААВ-вектор" в данной заявке относится к вектору, содержащему один или более интересующих полинуклеотидов (или трансгенов), которые фланкированы последовательностями концевых повторов (ITR) ААВ и функционально связаны с одним или более контролирующими экспрессию элементами. Такие ААВ-векторы могут реплицироваться и упаковаться в инфекционные вирусные частицы, когда они присутствуют в клетке-хозяине, которую трансфицировали вектором, кодирующим и экспрессирующим продукты генов rep и cap.
[00154] "ААВ-вирион", или "ААВ-вирусная частица", или "ААВ-векторная частица" относится к вирусной частице, состоящей из по меньшей мере одного капсидного белка ААВ и заключенного в капсид полинуклеотидного ААВ-вектора. Если указанная частица содержит гетерологичный полинуклеотид (т.е. полинуклеотид, отличный от генома ААВ дикого типа, такой как трансген, который нужно доставить в клетку млекопитающего), то ее обычно называют "ААВ-векторной частицей" или просто "ААВ-вектором". Таким образом, получение ААВ-векторной частицы обязательно включает получение ААВ-вектора, так как такой вектор содержится внутри ААВ-векторной частицы.
[00155] Гены "rep" и "cap" ААВ представляют собой гены, кодирующие белки репликации и заключения в капсид, соответственно. Гены rep и cap ААВ были обнаружены во всех серотипах ААВ, изученных на сегодняшний день, и описаны в данной заявке и в ссылочных материалах. В ААВ дикого типа гены rep и cap, как правило, находят в геноме вируса расположенными рядом друг с другом (т.е., они "соединены" в виде примыкающих или перекрывающихся единиц транскрипции), и они, как правило, консервативны среди серотипов ААВ. Гены rep и cap ААВ также отдельно и в совокупности называют "генами упаковки ААВ". Гены cap ААВ в соответствии с настоящим изобретением кодируют белки Cap, которые способны упаковывать ААВ-векторы в присутствии rep и функции аденовирусного помощника, и способны связывать целевые клеточные рецепторы. В некоторых вариантах реализации ген cap ААВ кодирует капсидный белок, последовательность аминокислот которого получена из конкретного серотипа ААВ, например, из серотипов, показанных в таблице 1.
Таблица 1. Серотипы ААВ.
Серотип ААВ Номер доступа в Genbank
ААВ-1 NC_002077.1
ААВ-2 NC_001401.2
ААВ-3 NC_001729.1
ААВ-3B AF028705.1
ААВ-4 NC_001829.1
ААВ-5 NC_006152.1
ААВ-6 AF028704.1
ААВ-7 NC_006260.1
ААВ-8 NC_006261.1
ААВ-9 AX753250.1
ААВ-10 AY631965.1
ААВ-11 AY631966.1
ААВ-12 DQ813647.1
ААВ-13 EU285562.1
[00156] Последовательности ААВ, используемые для получения ААВ, можно получить из генома любого серотипа ААВ. Как правило, геномные последовательности серотипов ААВ обладают значительной гомологией на уровнях аминокислот и нуклеиновых кислот, дают сходный набор генетических функций, продуцируют вирионы, которые по существу физически и функционально эквивалентны, и реплицируются и собираются с помощью практически идентичных механизмов. Геномные последовательности серотипов ААВ и обсуждение геномного подобия см., например, в следующих источниках: номер доступа в GenBank U89790; номер доступа в GenBank J01901; номер доступа в GenBank AF043303; номер доступа в GenBank AF085716; Chiorini и др., J. Vir. 71: 6823-33(1997); Srivastava и др., J. Vir. 45:555-64 (1983); Chiorini и др., J. Vir. 73:1309-1319 (1999); Rutledge и др., J. Vir. 72:309-319 (1998); и Wu и др., J. Vir. 74: 8635-47 (2000).
[00157] Геномная организация всех известных серотипов ААВ очень сходна. Геном ААВ представляет собой линейную одноцепочечную молекулу ДНК длиной менее чем приблизительно 5000 нуклеотидов (н.т.). Инвертированные концевые повторы (ITR) фланкируют уникальные кодирующие последовательности нуклеотидов неструктурных белков репликации (Rep) и структурных (VP) белков. Белки VP образуют капсид. Концевые 145 н.т. самокомплементарны и организованы таким образом, что может сформироваться энергетически стабильный внутримолекулярный дуплекс с образованием шпильки в форме буквы T. Данные структуры шпильки действуют как точки начала репликации вирусной ДНК и служат в качестве праймеров для клеточного комплекса ДНК-полимеразы. Указанные гены rep кодируют белки Rep: Rep78, Rep68, Rep52 и Rep40. Rep78 и Rep68 транскрибируются с промотора p5 и Rep 52 и Rep40 транскрибируются с промотора p19. Гены cap кодируют белки VP, VP1, VP2 и VP3. Указанные гены cap транскрибируются с промотора p40. ITR, используемые в векторах согласно настоящему изобретению, могут соответствовать тому же серотипу, как и у соответствующих генов cap, или отличному серотипу. В особенно предпочтительном варианте реализации ITR, используемые в векторах согласно настоящему изобретению, соответствуют серотипу ААВ2 и гены cap соответствуют серотипу ААВ5.
[00158] В некоторых вариантах реализации последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей капсидный белок ААВ, функционально связана с контролирующими экспрессию последовательностями для экспрессии в определенном типе клеток, таком как клетки Sf9 или HEK. Для осуществления настоящего изобретения можно применять известные специалисту в данной области методики экспрессии чужеродных генов в клетках-хозяевах насекомых или клетках-хозяевах млекопитающих. Методика молекулярного конструирования и экспрессии полипептидов в клетках насекомых описана, например, в Summers и Smith. 1986. A Manual of Methods for Baculovirus Vectors and Insect Culture Procedures, Техасская сельскохозяйственная экспериментальная станция, номер бюллетеня 7555, College Station, Tex.; Luckow. 1991, в Prokop и др., Cloning and Expression of Heterologous Genes in Insect Cells with Baculovirus Vectors' Recombinant DNA Technology and Applications, 97-152; King, L. A. и R. D. Possee, 1992, The baculovirus expression system, Chapman и Hall, Великобритания; O'Reilly, D. R., L. K. Miller, V. A. Luckow, 1992, Baculovirus Expression Vectors: A Laboratory Manual, Нью-Йорк; W.H. Freeman и Richardson, C. D., 1995, Baculovirus Expression Protocols, Methods in Molecular Biology, том 39; патент США номер 4745051; US2003148506 и WO 03/074714. Промотор, особенно подходящий для транскрипции последовательности нуклеотидов, кодирующей капсидный белок ААВ, представляет собой, например, промотор polyhedron. Тем не менее, в данной области известны другие промоторы, которые активны в клетках насекомых, например, промоторы p10, p35 или IE-1, и также предложены дополнительные промоторы, описанные в указанных выше ссылочных материалах.
[00159] Использование клеток насекомых для экспрессии гетерологичных белков хорошо известно, также как и способы внедрения нуклеиновых кислот, таких как векторы, например, совместимые с клетками насекомых векторы, в такие клетки и способы поддержания таких клеток в культуре. См., например, METHODS IN MOLECULAR BIOLOGY, изд. Richard, Human Press, NJ (1995); O'Reilly и др., BACULOVIRUS EXPRESSION VECTORS, A LABORATORY MANUAL, Oxford Univ. Press (1994); Samulski и др., J. Vir. 63:3822-8 (1989); Kajigaya и др., Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 88: 4646-50 (1991); Ruffing и др., J. Vir. 66:6922-30 (1992); Kirnbauer и др., Vir. 219:37-44 (1996); Zhao и др., Vir. 272:382-93 (2000); и Samulski и др., патент США номер 6204059. В некоторых вариантах реализации конструкция нуклеиновой кислоты, кодирующая ААВ в клетках насекомых, представляет собой совместимый с клетками насекомых вектор. "Совместимый с клетками насекомых вектор" или "вектор" в данной заявке относится к молекуле нуклеиновой кислоты, способной эффективно трансформировать или трансфицировать насекомое или клетку насекомого. Примеры биологических векторов включают плазмиды, линейные молекулы нуклеиновых кислот и рекомбинантные вирусы. Можно использовать любой вектор при условии, что он совместим с клеткой насекомого. Указанный вектор может встраиваться в геном клеток насекомых, но присутствие вектора в клетке насекомого не обязательно должно быть постоянным, и временные эписомные векторы также входят в объем настоящего изобретения. Указанные векторы можно внедрить с помощью любых известных средств, например, путем химической обработки клеток, электропорации или инфекции. В некоторых вариантах реализации вектор представляет собой бакуловирус, вирусный вектор или плазмиду. В более предпочтительном варианте реализации вектор представляет собой бакуловирус, т.е. конструкция представляет собой бакуловирусный вектор. Бакуловирусные векторы и способы их применения описаны в приведенных выше ссылочных материалах по молекулярному конструированию клеток насекомых.
[00160] Бакуловирусы представляют собой содержащие оболочку ДНК-вирусы членистоногих, два представителя которых являются хорошо известными векторами экспрессии для получения рекомбинантных белков в культурах клеток. Бакуловирусы содержат кольцевые двухцепочечные геномы (80-200 т.п.н.), которые можно сконструировать таким образом, чтобы позволить доставку большого содержимого генома в определенные клетки. Вирусы, используемые в качестве вектора, как правило, представляют собой вирус множественного ядерного полиэдроза Autographa californica (AcMNPV) или вирус ядерного полиэдроза Bombyx mori ((Bm)NPV) (Kato и др., 2010).
[00161] Бакуловирусы широко применяют для инфицирования клеток насекомых для экспрессии рекомбинантных белков. В частности, экспрессию гетерологичных генов в насекомых можно осуществить, как описано, например, в патенте США номер 4745051; Friesen и др. (1986); EP 127,839; EP 155,476; Vlak и др. (1988); Miller и др. (1988); Carbonell и др. (1988); Maeda и др. (1985); Lebacq-Verheyden и др. (1988); Smith и др. (1985); Miyajima и др. (1987); и Martin и др. (1988). Множество штаммов и вариантов бакуловируса и соответствующие чувствительные хозяева - клетки насекомых, которые можно использовать для продукции белка, описаны в Luckow и др. (1988), Miller и др. (1986); Maeda и др. (1985) и McKenna (1989).
Способы получения рекомбинантных ААВ.
[00162] В настоящем изобретении предложены материалы и способы получения рекомбинантных ААВ в клетках насекомых или млекопитающих. В некоторых вариантах реализации указанная вирусная конструкция дополнительно содержит промотор и сайт рестрикции по ходу транскрипции от промотора, чтобы позволить вставку полинуклеотида, кодирующего один или более интересующих белков, при этом указанные промотор и сайт рестрикции расположены по ходу транскрипции от 5'-ITR ААВ и против хода транскрипции от 3'-ITR ААВ. В некоторых вариантах реализации указанная вирусная конструкция дополнительно содержит посттранскрипционный регуляторный элемент по ходу транскрипции от сайта рестрикции и против хода транскрипции от 3'-ITR ААВ. В некоторых вариантах реализации указанная вирусная конструкция дополнительно содержит полинуклеотид, встроенный в сайт рестрикции и функционально связанный с промотором, где указанный полинуклеотид содержит кодирующую область интересующего белка. Для квалифицированного специалиста будет очевидно, что любой из ААВ-векторов, описанных в настоящей заявке, можно применять в указанном способе в качестве вирусной конструкции для получения рекомбинантного ААВ.
[00163] В некоторых вариантах реализации функции помощника предоставляет одна или более плазмид-помощников или вирусов-помощников, содержащих гены-помощники аденовируса или бакуловируса. Лишь некоторые из примеров генов-помощников аденовируса или бакуловируса включают, но не ограничены перечисленными: E1A, E1B, E2A, E4 и VA, которые могут предоставлять функции помощника для упаковки ААВ.
[00164] Вирусы-помощники ААВ известны в данной области и включают, например, вирусы из семейства Adenoviridae и семейства Herpesviridae. Примеры вирусов-помощников ААВ включают, но не ограничены перечисленными: вирус-помощник SAdV-13 и подобный SAdV-13 вирус-помощник, описанный в публикации патента США № 20110201088 (описание которого включено в данную заявку посредством ссылки), векторы-помощники pHELP (Applied Viromics). Для квалифицированного специалиста должно быть очевидно, что в данной заявке можно использовать любой вирус-помощник или плазмиду-помощник ААВ, которые могут обеспечить достаточную функцию помощника ААВ.
[00165] В некоторых вариантах реализации в плазмиде присутствуют гены cap ААВ. Плазмида может дополнительно содержать ген rep ААВ, который может соответствовать или может не соответствовать тому же серотипу, что и у генов cap. Гены cap и/или ген rep из любого серотипа ААВ (включая, но не ограничиваясь перечисленными: ААВ1, ААВ2, ААВ4, ААВ5, ААВ6, ААВ7, ААВ8, ААВ9, ААВ10, ААВ11, ААВ12, ААВ13 и любые их варианты) можно применять в данной заявке для получения рекомбинантного ААВ. В некоторых вариантах реализации гены cap ААВ кодируют капсид из серотипа 1, серотипа 2, серотипа 4, серотипа 5, серотипа 6, серотипа 7, серотипа 8, серотипа 9, серотипа 10, серотипа 11, серотипа 12, серотипа 13 или варианта перечисленных серотипов.
[00166] В некоторых вариантах реализации клетку насекомого или млекопитающего можно трансфицировать плазмидой-помощником или вирусом-помощником, вирусной конструкцией и плазмидой, кодирующей гены cap ААВ; и можно собирать рекомбинантный ААВ-вирус в различные моменты времени после котрансфекции. Например, рекомбинантный ААВ-вирус можно собирать через приблизительно 12 часов, приблизительно 24 часа, приблизительно 36 часов, приблизительно 48 часов, приблизительно 72 часа, приблизительно 96 часов, приблизительно 120 часов или через время в промежутке между любыми из двух указанных моментов времени после котрансфекции.
[00167] Рекомбинантный ААВ также можно получить, применяя любой из обычных способов, известных в данной области, подходящих для получения инфекционного рекомбинантного ААВ. В некоторых случаях рекомбинантный ААВ можно получить, используя клетку насекомого или млекопитающего, которая стабильно экспрессирует некоторые из компонентов, необходимых для продукции частиц ААВ. Например, в геном указанной клетки можно встроить плазмиду (или множество плазмид), содержащую гены rep и cap ААВ, и селектируемый маркер, такой как ген устойчивости к неомицину. Указанную клетку насекомого или млекопитающего затем можно коинфицировать вирусом-помощником (например, аденовирусом или бакуловирусом, предоставляющим функции помощника) и вирусным вектором, содержащим 5'- и 3'-ITR ААВ (и последовательность нуклеотидов, кодирующую гетерологичный белок, при необходимости). Преимущества данного способа состоят в том, что указанные клетки можно подвергнуть селекции, и они подходят для крупномасштабного производства рекомбинантного ААВ. В качестве другого лишь одного из примеров, для внедрения генов rep и cap в пакующие клетки можно применять аденовирус или бакуловирус вместо плазмид. В качестве другого лишь одного из примеров, в ДНК клеток-продуцентов можно стабильно встроить как вирусный вектор, содержащий 5'- и 3'-LTR ААВ, так и гены rep-cap, и функции помощника для продукции рекомбинантного ААВ могут быть предоставлены аденовирусом дикого типа.
Типы клеток, используемые для получения ААВ.
[00168] Вирусные частицы, содержащие указанные ААВ-векторы согласно настоящему изобретению, можно получить, используя любой тип клеток беспозвоночных, который позволяет получение ААВ или биологических продуктов и который можно поддерживать в культуре. Например, используемая линия клеток насекомого может быть получена из Spodoptera frugiperda, такая как SF9, SF21, SF900+, линий клеток дрозофилы, линий клеток комара, например, полученные из Aedes albopictus линии клеток, линий клеток одомашненного тутового шелкопряда, например, линий клеток Bombyx mori, линий клеток Trichoplusia ni, таких как клетки High Five, или линий клеток Lepidoptera, таких как линии клеток Ascalapha odorata. Предпочтительные клетки насекомых представляют собой клетки из видов насекомых, которые восприимчивы к инфицированию бакуловирусом, включая High Five, Sf9, Se301, SeIZD2109, SeUCR1, Sf9, Sf900+, Sf21, BTI-TN-5B1-4, MG-1, Tn368, HzAm1, BM-N, Ha2302, Hz2E5 и Ao38.
[00169] Бакуловирусы представляют собой содержащие оболочку ДНК-вирусы членистоногих, два представителя которых являются хорошо известными векторами экспрессии для получения рекомбинантных белков в культурах клеток. Бакуловирусы содержат кольцевые двухцепочечные геномы (80-200 т.п.н.), которые можно сконструировать, чтобы позволить доставку генома большого размера в определенные клетки. Указанные вирусы, применяемые в качестве вектора, как правило, представляют собой вирус множественного ядерного полиэдроза Autographa californica (AcMNPV) или Bombyx mori (Bm NPV) (Kato и др., 2010).
[00170] Бакуловирусы широко применяют для инфицирования клеток насекомых для экспрессии рекомбинантных белков. В частности, экспрессию гетерологичных генов в насекомых можно осуществить, как описано, например, в патенте США номер 4745051; Friesen и др. (1986); EP 127,839; EP 155,476; Vlak и др. (1988); Miller и др. (1988); Carbonell и др. (1988); Maeda и др. (1985); Lebacq-Verheyden и др. (1988); Smith и др. (1985); Miyajima и др. (1987); и Martin и др. (1988). Множество штаммов и вариантов бакуловируса и соответствующих чувствительных клеток-хозяев насекомых, которые можно применять для продукции белков, описаны в Luckow и др. (1988), Miller и др. (1986); Maeda и др. (1985) и McKenna (1989).
[00171] В другом аспекте настоящего изобретения, указанные способы согласно настоящему изобретению также осуществляли с использованием любого типа клеток млекопитающего, который позволяет репликацию ААВ или получение биологических продуктов и который можно поддерживать в культуре. Предпочтительные используемые клетки млекопитающих могут представлять собой клетки HEK293, HeLa, CHO, NS0, SP2/0, PER.C6, Vero, RD, BHK, HT 1080, A549, Cos-7, ARPE-19 и MRC-5.
Проверка кодирующих FVIII ААВ-векторов.
[00172] Анализы для тестирования полностью упакованных кодирующих FVIII ААВ-векторов согласно настоящему изобретению включают, например, (1) временную трансфекцию состоящими из двухцепочечной ДНК плазмидами, содержащими нуклеиновые кислоты ААВ-вектора, клеток HepG2 - линии клеток, полученной из печени человека, - чтобы проверить экспрессию и сплайсинг специфической для печени мРНК, и продукцию белка FVIII и его секрецию in vitro; (2) получение ААВ-вирионов, содержащих кодирующие FVIII ААВ-векторы, в клетках HEK293 и инфицированных бакуловирусом клетках насекомых; (3) оценка нуклеиновых кислот ААВ-вектора с помощью анализа в щелочном геле и анализов репликации; и (4) оценка экспрессии FVIII, активности FVIII и специфической активности FVIII в мышах Rag2. Данные анализы более подробно описаны в разделе Примеры.
[00173] Полностью упакованные кодирующие FVIII ААВ-векторы согласно настоящему изобретению проявляют по меньшей мере такой же уровень экспрессии и/или активности, как и пример вектора, показанный на фигуре 1, и предпочтительно в 1,5 раза, в 2 раза, в 3 раза, в 4 раза или в 5 раз или более высокий уровень экспрессии и/или активности по сравнению с вектором, показанным на фигуре 1.
[00174] Полностью упакованные кодирующие FVIII ААВ-векторы согласно настоящему изобретению позволяют получить высокий выход вектора с небольшим количеством примесей фрагментарного генома или без них, и предпочтительно в 1,5 раза, в 2 раза, в 3 раза, в 4 раза или в 5 раз больший выход вектора по сравнению с вектором, показанным на фигуре 1.
Фармацевтические композиции.
[00175] В других вариантах реализации в настоящем изобретении предложены фармацевтические композиции экспрессирующих FVIII ААВ-векторов/вирионов, полезных для введения субъектам, страдающим от гемофилии A. В некоторых аспектах фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению представляют собой жидкие композиции, которые содержат рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-вирионы, полученные из векторов, описанных в данной заявке, при этом концентрация рекомбинантных кодирующих FVIII ААВ-вирионов в указанной композиции может изменяться в широком диапазоне. В некоторых вариантах реализации концентрация рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вириона в указанной композиции может находиться в диапазоне от 1E12 вг/мл до 2E14 вг/мл. В особенно предпочтительном варианте реализации концентрация рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вириона в указанной композиции составляет приблизительно 2E13 вг/мл. В другом предпочтительном варианте реализации рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ-вирион, присутствующий в композиции, представляет собой ААВ5-FVIII-SQ, полученный в результате заключения в капсид вектора Proto 1, который схематично показан на фигуре 2A в капсиде ААВ5.
[00176] В других аспектах фармацевтическая композиция кодирующего FVIII ААВ согласно настоящему изобретению содержит одно или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, чтобы придать композиции полезные свойства для хранения и/или введения субъектам для лечения гемофилии A. В некоторых вариантах реализации указанные фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению можно хранить при ≤ 65°C в течение периода времени, составляющего по меньшей мере 2 недели, предпочтительно по меньшей мере 4 недели, более предпочтительно по меньшей мере 6 недель и еще более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 8 недель, без поддающегося обнаружению изменения стабильности. В этом отношении термин "стабильный" означает, что рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ-вирус, присутствующий в композиции, по существу сохраняет физическую стабильность, химическую стабильность и/или биологическую активность во время хранения. В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ-вирус, присутствующий в фармацевтической композиции, сохраняет по меньшей мере приблизительно 80% своей биологической активности в пациенте-человеке во время хранения в течение определенного периода времени при ≤ 65oC, более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, 98% или 99% своей биологической активности в пациенте-человеке.
[00177] В некоторых аспектах композиция, содержащая рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-вирионы, дополнительно содержит одно или более буферных веществ. Например, в различных аспектах, композиция согласно настоящему изобретению содержит двухосновный фосфат натрия при концентрации, равной от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 3 мг/мл, от приблизительно 0,5 мг/мл до приблизительно 2,5 мг/мл, от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 2 мг/мл, или от приблизительно 1,4 мг/мл до приблизительно 1,6 мг/мл. В особенно предпочтительном варианте реализации композиция, содержащая кодирующий FVIII ААВ согласно, настоящему изобретению содержит приблизительно 1,42 мг/мл двухосновного фосфата натрия (безводного). Другое буферное вещество, которое можно применять в лекарственных формах рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ согласно настоящему изобретению, представляет собой моногидрат одноосновного фосфата натрия, который, в некоторых вариантах реализации, можно применять при концентрации от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 3 мг/мл, от приблизительно 0,5 мг/мл до приблизительно 2,5 мг/мл, от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 2 мг/мл или от приблизительно 1,3 мг/мл до приблизительно 1,5 мг/мл. В особенно предпочтительном варианте реализации композиция, содержащая кодирующий FVIII ААВ, согласно настоящему изобретению содержит приблизительно 1,38 мг/мл моногидрата одноосновного фосфата натрия. В еще одном особенно предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения композиция, содержащая рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ, согласно настоящему изобретению содержит приблизительно 1,42 мг/мл двухосновного фосфата натрия и приблизительно 1,38 мг/мл моногидрата одноосновного фосфата натрия.
[00178] В другом аспекте композиция, содержащая рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ согласно настоящему изобретению, может содержать один или более изотонических агентов, таких как хлорид натрия, предпочтительно при концентрации, равной от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 20 мг/мл, например, от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 10 мг/мл, от приблизительно 5 мг/мл до приблизительно 15 мг/мл, или от приблизительно 8 мг/мл до приблизительно 20 мг/мл. В особенно предпочтительном варианте реализации композиция согласно настоящему изобретению содержит приблизительно 8,18 мг/мл хлорида натрия. Другие буферные вещества и изотонические агенты, известные в данной области, также подходят, и их можно обычным способом использовать для применения в композициях согласно настоящему описанию.
[00179] В другом аспекте композиции, содержащие рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ, согласно настоящему изобретению могут содержать один или более объемообразующих агентов. Примеры объемообразующих агентов включают, без ограничения, маннит, сахарозу, декстран, лактозу, трегалозу и повидон (PVP K24). В некоторых предпочтительных вариантах реализации композиции согласно настоящему изобретению содержат маннит, который может присутствовать в количестве от приблизительно 5 мг/мл до приблизительно 40 мг/мл, или от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 30 мг/мл, или от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 25 мг/мл. В особенно предпочтительном варианте реализации маннит присутствует в концентрации приблизительно 20 мг/мл.
[00180] В другом дополнительном аспекте композиции, содержащие рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ, согласно настоящему изобретению могут содержать одно или более поверхностно-активных веществ, которые могут представлять собой неионные поверхностно-активные вещества. Примеры поверхностно-активных веществ включают ионные поверхностно-активные вещества, неионные поверхностно-активные вещества и комбинации перечисленных веществ. Например, поверхностно-активное вещество может представлять собой, без ограничения, TWEEN 80 (также известный как полисорбат 80, или его химическое название - полиоксиэтиленсорбитан моноолеат), додецилсульфат натрия, стеарат натрия, лаурилсульфат аммония, TRITON AG 98 (Rhone-Poulenc), полоксамер 407, полоксамер 188 и тому подобные вещества и их комбинации. В особенно предпочтительном варианте реализации композиции согласно настоящему изобретению содержит полоксамер 188, который может присутствовать в концентрации от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 4 мг/мл, или от приблизительно 0,5 мг/мл до приблизительно 3 мг/мл, от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 3 мг/мл, от приблизительно 1,5 мг/мл до приблизительно 2,5 мг/мл, или от приблизительно 1,8 мг/мл до приблизительно 2,2 мг/мл. В особенно предпочтительном варианте реализации полоксамер 188 присутствует в концентрации приблизительно 2,0 мг/мл.
[00181] В конкретном предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит ААВ5-FVIII-SQ, входящий в состав жидкого раствора, который содержит приблизительно 1,42 мг/мл двухосновного фосфата натрия, приблизительно 1,38 мг/мл моногидрата одноосновного фосфата натрия, приблизительно 8,18 мг/мл хлорида натрия, приблизительно 20 мг/мл маннита и приблизительно 2 мг/мл полоксамера 188.
[00182] Композиции, содержащие рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ-вирус, согласно настоящему описанию стабильны, и их можно хранить в течение более длительных периодов времени без неприемлемого изменения качества, эффективности или чистоты. В одном аспекте композиция стабильна при температуре приблизительно 5°C (например, от 2°C до 8oC) в течение по меньшей мере 1 месяца, например, по меньшей мере 1 месяца, по меньшей мере 3 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев, по меньшей мере 24 месяцев или дольше. В другом аспекте композиция стабильна при температуре, меньшей или равной приблизительно -20oC, в течение по меньшей мере 6 месяцев, например, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев, по меньшей мере 24 месяцев, по меньшей мере 36 месяцев или дольше. В другом аспекте композиция стабильна при температуре, меньшей или равной приблизительно -40oC, в течение по меньшей мере 6 месяцев, например, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев, по меньшей мере 24 месяцев, по меньшей мере 36 месяцев или дольше. В другом аспекте композиция стабильна при температуре, меньшей или равной приблизительно -60oC, в течение по меньшей мере 6 месяцев, например, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев, по меньшей мере 24 месяцев, по меньшей мере 36 месяцев или дольше.
Способы лечения.
[00183] В некоторых вариантах реализации в настоящем изобретении предложены способы лечения субъекта, страдающего от гемофилии A, включающие введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества кодирующего FVIII ААВ-вектора, рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса или фармацевтической композиции, содержащей их. В других дополнительных вариантах реализации настоящего изобретения предложены способы уменьшения времени кровотечения во время эпизода кровотечения у субъекта, страдающего от гемофилии A, включающие введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества кодирующего FVIII ААВ-вектора, рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса или фармацевтической композиции, содержащей их. В этом отношении, "терапевтически эффективное количество" для лечения гемофилии A или для применения в способе уменьшения времени кровотечения во время эпизода кровотечения у субъекта, страдающего от гемофилии A, относится к количеству, способному вызывать один или более из следующих эффектов: (1) уменьшение, ингибирование или предотвращение, до некоторой степени, одного или более физиологических симптомов гемофилии A, включая, например, возникновение синяков, боль или отечность суставов, длительную головную боль, тошноту или утомляемость, (2) улучшение способности сворачивать кровь, (3) уменьшение общего времени кровотечения во время эпизода кровотечения, (4) введение приводит к измеримому повышению концентрации или активности функционального белка FVIII в плазме субъекта, и/или (5) ослабление, до некоторой степени, одного или более симптомов, связанных с расстройством. "Терапевтически эффективное количество" кодирующего FVIII ААВ-вектора или вируса, или содержащей его фармацевтической композиции, для целей лечения, описанных в данной заявке, можно определить опытным путем и обычным способом. В некоторых вариантах реализации, тем не менее, "терапевтически эффективное количество" рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса находится в диапазоне от приблизительно 1E12 вг/кг массы тела до приблизительно 1E14 вг/кг массы тела, предпочтительно от приблизительно 6E12 вг/кг массы тела до приблизительно 6E13 вг/кг массы тела. В особенно предпочтительном варианте реализации терапевтически эффективное количество рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса составляет приблизительно 2E13 вг/кг массы тела. В другом особенно предпочтительном варианте реализации терапевтически эффективное количество рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса составляет приблизительно 6E13 вг/кг массы тела.
[00184] Рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-векторы/вирус согласно настоящему изобретению можно вводить субъекту, предпочтительно млекопитающему субъекту, более предпочтительно субъекту человеку, посредством различных известных методик введения. В предпочтительном варианте реализации рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ-вирус для генотерапии вводят путем внутривенной инъекции либо в виде однократного болюса, либо в течение длительного периода времени, который может составлять по меньшей мере приблизительно 1, 5, 10, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 120, 150, 180, 210 или 240 минут, или более. В особенно предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ-вирус, который вводят, представляет собой ААВ5-FVIII-SQ.
[00185] Введение рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вектора/вируса, или содержащей его фармацевтической композиции, согласно настоящему изобретению предпочтительно приводит к повышению функциональной активности белка FVIII в плазме субъекта по меньшей мере на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или более МЕ/дл по сравнению с величиной функциональной активности белка FVIII, присутствующего в плазме у субъекта перед введением. В некоторых вариантах реализации введение рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вектора/вируса, или содержащей его фармацевтической композиции, согласно настоящему изобретению приводит к экспрессии по меньшей мере приблизительно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более МЕ/дл функциональной активности белка FVIII в плазме субъекта. В этом отношении, термин "МЕ" или "международная единица" касательно активности FVIII является хорошо понятным и общепринятым термином, при этом 1 МЕ активности FVIII эквивалентна количеству FVIII в одном мл плазмы нормального человека. Активность FVIII в плазме можно количественно измерить с помощью множества хорошо известных и общепринятых способов анализа, включая, например, способ с определением активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ) (см., например, Miletich JP: Activated partial thromboplastin time. В Williams Hematology. Пятое издание. Редакторы E Beutler, MA Lichtman, BA Coller, TJ Kipps. Нью-Йорк, McGraw-Hill, 1995, стр. L85-86, Greaves и Preston, Approach to the bleeding patient. В Hemostasis and Thrombosis: Basic Principles and Clinical Practice. Четвертое издание. Редакторы RW Colman, J Hirsh, VJ Marder, и др. Филадельфия, JB Lippincott Co, 2001, стр. 1197-1234 и Olson и др., Arch. Pathol. Lab. Med. 122:782-798 (1998)) или хромогенный анализ с FXa (Harris и др., Thromb. Res. 128(6):125-129 (2011)).
[00186] В других вариантах реализации настоящего изобретения время кровотечения у субъекта можно измерить с помощью хорошо известных и общепринятых методик, включая, например, способ Иви (см., например, Ivy и др., Surg. Gynec. Obstet. 60:781 (1935) и Ivy и др., J. Lab. Clin. Med. 26:1812 (1941)) или способ Дьюка (см., например, Duke и др., JAMA 55:1185 (1910)). "Эпизод кровотечения" у субъекта относится к повреждению, которое приводит к кровотечению у субъекта, либо внешнему, либо внутреннему, и, как правило, включает период времени от момента повреждения до образования сгустка крови.
[00187] Введение кодирующего FVIII ААВ-вируса согласно настоящему изобретению в некоторых случаях может приводить к заметной степени гепатотоксичности. Гепатотоксичность можно измерить с помощью различных хорошо известных и обычных способов, например, путем измерения концентраций некоторого(-ых) связанного(-ых) с печенью фермента(-ов) (например, аланин-аминотрансферазы, АЛТ) в кровотоке у субъекта как перед введением кодирующего FVIII ААВ (т.е., исходная), так и после введения кодирующего FVIII ААВ. Заметное увеличение концентрации АЛТ после введения кодирующего FVIII ААВ (по сравнению с таковой до введения) указывает на лекарственную гепатотоксичность. В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения дополнительно к введению терапевтически эффективного количества кодирующего FVIII ААВ-вируса указанного субъекта можно лечить либо профилактически, либо терапевтически, либо профилактически и терапевтически кортикостероидом, чтобы предупредить и/или лечить любую гепатотоксичность, связанную с введением кодирующего FVIII ААВ-вируса. "Профилактическое" лечение кортикостероидами относится к введению кортикостероида для предотвращения гепатотоксичности и/или для предотвращения повышения измеренных уровней АЛТ у субъекта. "Терапевтическое" лечение кортикостероидами относится к введению кортикостероида для уменьшения гепатотоксичности, вызванной введением кодирующего FVIII ААВ-вируса, и/или для уменьшения повышенной концентрации АЛТ в кровотоке у субъекта, вызванной введением кодирующего FVIII ААВ-вируса. В некоторых вариантах реализации профилактическое или терапевтическое лечение кортикостероидами может включать введение субъекту по меньшей мере 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 или более мг кортикостероида в сутки. В некоторых вариантах реализации профилактическое или терапевтическое лечение субъекта кортикостероидами можно проводить в течение длительного периода, составляющего по меньшей мере приблизительно 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более недель. Кортикостероиды, которые можно применять в указанных способах, описанных в данной заявке, включают любой известный или обычно используемый кортикостероид, включая, например, дексаметазон, преднизон, флудрокортизон, гидрокортизон и тому подобные кортикостероиды.
Обаружение антител к ААВ.
[00188] Для того чтобы максимизировать вероятность успешной трансдукции печени путем системного опосредованного ААВ переноса гена фактора VIII, перед введением ААВ-вектора в рамках схемы лечения пациенту-человеку, как описано выше, у указанного потенциального пациента можно оценить наличие антител к капсиду ААВ, которые способны блокировать трансдукцию клеток или другим способом снижать общую эффективность указанной схемы лечения. Такие антитела могут присутствовать в сыворотке потенциального пациента и могут быть направлены против капсида ААВ любого серотипа. В одном варианте реализации серотип, против которого направлены уже присутствующие антитела, представляет собой ААВ5.
[00189] Способы обнаружения уже присутствующего иммунитета к ААВ хорошо известны и обычно используются в данной области, и включают основанные на клеточной системе анализы ингибирования трансдукции (TI) in vitro, анализы TI in vivo (например, у мышей) и детектирование на основе ELISA общих антител к капсиду (TAb) (см., например, Masat и др., Discov. Med. 15:379-389 (2013) и Boutin и др., Hum. Gene Ther. 21:704-712 (2010)). В анализах TI можно использовать клеток-хозяев, в которые заранее внедрили индуцируемый ААВ репортерный вектор. Указанный репортерный вектор может содержать индуцируемый репортерный ген, такой как GFP, и т.д., экспрессия которого вызывается после трансдукции клетки-хозяина ААВ-вирусом. Антитела к капсиду ААВ, присутствующие в сыворотке человека, которые способны предотвращать/снижать трансдукцию клетки-хозяина, тем самым уменьшат общую экспрессию репортерного гена в системе. Следовательно, такие анализы можно применять для обнаружения присутствия антител к капсиду ААВ в сыворотке человека, которые способны предотвращать/снижать трансдукцию клетки терапевтическим кодирующим FVIII ААВ-вирусом.
[00190] В анализах TAb для обнаружения антител к капсиду ААВ можно применять связанный с твердой фазой капсид ААВ в качестве "захватывающего агента", через который пропускают сыворотку человека, тем самым позволяя антителам к капсиду, присутствующим в сыворотке, связаться со связанным с твердой фазой капсидом - "захватывающим агентом". После промывки для удаления неспецифического связывания можно использовать "детектирующий агент" для обнаружения присутствия антител к капсиду, связанных с захватывающим агентом. Указанный детектирующий агент может представлять собой антитело, капсид ААВ или тому подобную молекулу, и его можно пометить поддающейся обнаружению меткой, чтобы способствовать обнаружению и определению количества связанного антитела против капсида. В одном варианте реализации детектирующий агент помечен рутением или комплексом рутения, который можно обнаружить, применяя методики и устройства, основанные на явлении электрохемилюминесценции.
[00191] Такую же методику, как описанная выше, можно применять, чтобы оценить и обнаружить выработку иммунного ответа против капсида ААВ у пациента, которого ранее лечили терапевтическим интересующим ААВ-вирусом. По этой причине, данные методики можно использовать не только для того, чтобы оценить присутствие антител к капсиду ААВ до лечения терапевтическим кодирующим FVIII ААВ-вирусом, но также их можно использовать, чтобы оценить и измерить индукцию иммунного ответа против введенного терапевтического кодирующего FVIII ААВ-вируса после введения. По этой причине, в настоящем изобретении предложены способы, в которых объединены методики обнаружения антител к капсиду ААВ в сыворотке человека и введение терапевтического кодирующего FVIII ААВ-вируса для лечения гемофилии A, при этом указанные методики обнаружения антител к капсиду ААВ в сыворотке человека можно осуществить либо до, либо после введения указанного терапевтического кодирующего FVIII ААВ-вируса.
[00192] Другие аспекты и преимущества настоящего изобретения будут понятны после рассмотрения следующих пояснительных примеров.
ПРИМЕРЫ
Пример 1
Получение векторов Proto 1, Proto 1S, Proto 2S и Proto 3S.
[00193] Рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ-вектор, схематически показанный на фигуре 1, который подробно описан в WO 2011/005968, опубликованном 13 января 2011 г., который полностью включен в данную заявку посредством ссылки, и McIntosh и др., Blood 121:3335-3344, 2013, представляет собой ААВ-вектор с превышенным размером, т.е., больший, чем 5,0 т.п.н. На фигуре 1 показано, что данный вектор содержит, слева направо, 5'-ITR ААВ серотипа 2 (ААВ2), последовательность ААВ2-вируса дикого типа, энхансер аполипопротеина E (ApoE)/C1 человека из 34 оснований, дистальный участок X промотора альфа-антитрипсина (AAT) человека из 32 оснований, промотор AAT человека из 186 оснований, включая последовательность 5'-нетранслируемой области (НТО) из 42 оснований, кодон-оптимизированную последовательность FVIII человека, в которой B-домен FVIII замещен на последовательность SQ, состоящую из 14 аминокислот, синтетическую последовательность полиаденилирования из 49 оснований, последовательность ААВ2-вируса дикого типа, и 3'-ITR ААВ2. Длина указанного вектора составляет 5081 основание.
[00194] Для получения вектора, который меньше, чем вектор FVIII, показанный на фигуре 1, последовательности ДНК, которые авторы настоящего изобретения считали необязательными для экспрессии и/или активности FVIII, или для продукции ААВ-вириона, удаляли из исходной последовательности вектора. Последовательность чужеродной ДНК удаляли, включая 53 основания последовательности вируса ААВ2 с 3'-стороны от 5'-ITR ААВ2, 46 оснований последовательности вируса ААВ2 с 5'-стороны от 3'-ITR ААВ2, и 11 оснований, расположенных рядом с кодон-оптимизированной кодирующей FVIII SQ областью. Также получали новую кодон-оптимизированную кодирующую FVIII с удаленным B-доменом последовательность, содержащую линкер SQ, и внедряли в новые рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-векторы. В последовательности 5'- и 3'-ITR ААВ2 внесли некоторые изменения. Полученный вектор Proto 1, длина которого составила 4970 оснований, показан в схематичном виде на фигуре 2A, и полная последовательность нуклеотидов представлена в SEQ ID NO: 1. Авторы настоящего изобретения продемонстрировали, что Proto 1 продуцирует инфекционный рекомбинантный ААВ-вирус и кодирует функциональный полипептид фактора VIII.
[00195] Последовательности, расположенные рядом со шпилькой-петлей в ITR ААВ2, также могут быть необязательны в рекомбинантных ААВ-векторах (см. Srivastava и др., патент США № 6521225; Wang и др., J. Virol. 70:1668-1677, 1996; и Wang и др., J. Virol. 71:3077-3082, 1997). Для того чтобы дополнительно уменьшить размер вектора Proto 1, удаляли 10 оснований из последовательности ААВ2 непосредственно с 3'-стороны от шпильки-петли в 5'-ITR ААВ2 и удаляли 10 оснований из последовательности ААВ2 непосредственно с 5'-стороны от шпильки-петли в 3'-ITR ААВ2. Полученный вектор Proto 1S, длина которого составляла 4950 оснований, показан в схематичном виде на фигуре 2B, и его последовательность представлена в SEQ ID NO: 2.
[00196] В попытке повысить экспрессию указанного варианта FVIII SQ в векторе Proto 1S, между экзонами 1 и 2 кодон-оптимизированной последовательности FVIII встраивали синтетический интрон длиной 100 оснований. Известно, что вставка интрона может привести к повышенному уровню экспрессии мРНК в противном случае не содержащих интроны генов, таких как, например, гены интерферонов.
[00197] Энхансеры характеризуют как работающие независимым от расстояния и ориентации образом. Энхансер ApoE/C1 из 34 оснований работает независимым от расстояния и ориентации образом в отношении экспрессии FVIII, примером чего является его предполагаемая энхансерная активность, описанная в патенте США номер 8030065 (экспрессия FIX) и в WO 2011/005968 (экспрессия FVIII), содержание каждой из которых полностью включено в данную заявку посредством ссылки. Дистальный участок X промотора AAT человека из 32 оснований, описанный у Di Simone и др., EMBO J. 6:2759-2766, 1987, расположен внутри регуляторного домена, который повышает экспрессию гетерологичного промотора.
[00198] В другой попытке дополнительно повысить экспрессию указанного варианта FVIII SQ в векторе Proto 1S, синтетическая последовательность интрона содержала энхансер ApoE/C1 человека из 34 оснований и дистальный участок X промотора AAT человека из 32 оснований, который был перемещен из исходного положения против хода транскрипции от промотора AAT человека. Два данных регуляторных элемента встраивали в обратной ориентации по отношению к их ориентации в Proto 1S. Полученный вектор Proto 2S, длина которого составляет 4983 основания, показан в схематичном виде на фигуре 2C, и его последовательность представлена в SEQ ID NO: 3.
[00199] Так как ранее не было показано, что дистальный участок X промотора AAT человека функционирует по ходу транскрипции от сайта инициации транскрипции в интроне, данный регуляторный элемент в векторе Proto 2S заменили на вторую копию энхансера ApoE/C1 человека из 34 оснований в той же ориентации, как и первая копия энхансера в интроне. Полученный вектор Proto 3S, длина которого составляет 4985 оснований, показан в схематичном виде на фигуре 2D, и его последовательность представлена в SEQ ID NO: 4.
[00200] Нуклеиновые кислоты векторов Proto 1, Proto 1S, Proto 2S и Proto 3S клонировали в плазмиду бактериальной экспрессии pUC19, тем самым позволяя получить двухцепочечные формы кодирующих FVIII ААВ-векторов.
Пример 2 Получение векторов Proto 4, Proto 5, Proto 6 и Proto 7.
[00201] Для того, чтобы дополнительно уменьшить размер вектора Proto 1 и/или повысить экспрессию FVIII по сравнению с вектором Proto 1, удаляли домен a3, который расположен рядом с легкой цепью или C-доменом. Домен a3 участвует в связывании с фактором фон Виллебранда, но может быть необязательным для функционально активного FVIII in vivo.
[00202] Начиная с вектора Proto 1, последовательность SQ, состоящую из 14 аминокислот, и домен a3 из 41 аминокислоты (соответствует аминокислотам 1649-1689 FVIII дикого типа) удаляли. Полученный вектор Proto 4, длина которого составляла 4805 оснований, показан в схематичном виде на фигуре 3A, и его последовательность представлена в SEQ ID NO: 5.
[00203] В попытке повысить экспрессию FVIII с удаленными B-доменом и a3-доменом, интрон укороченного FVIII из 129 оснований встраивали между экзонами 1 и 2 кодон-оптимизированной последовательности FVIII в векторе Proto 4. Полученный вектор Proto 5, длина которого составляла 4934 основания, показан в схематичном виде на фигуре 3B, и его последовательность представлена в SEQ ID NO: 6.
[00204] В попытке дополнительно повысить экспрессию FVIII с удаленными B-доменом и a3-доменом, в вектор Proto 5 встраивали вторую копию энхансера ApoE/C1 человека из 34 оснований либо в прямой, либо в обратной ориентации. Полученный вектор Proto 6, длина которого составляла 4934 основания и который содержал интронный энхансер ApoE/C1 в прямой ориентации, показан в схематичном виде на фигуре 3C, и его последовательность представлена в SEQ ID NO: 7.
[00205] Полученный вектор Proto 7, длина которого составляла 4934 основания и который содержал интронный энхансер ApoE/C1 в обратной ориентации, показан в схематичном виде на фигуре 3D, и его последовательность представлена в SEQ ID NO: 8.
[00206] Нуклеиновые кислоты векторов Proto 4, Proto 5, Proto 6 и Proto 7 клонировали в плазмиду бактериальной экспрессии pUC19, с помощью которой получали двухцепочечные формы кодирующих FVIII ААВ-векторов.
Пример 3 Анализы для проверки экспрессии и активности кодирующих FVIII ААВ-векторов.
[00207] Анализы для проверки рекомбинантных кодирующих FVIII ААВ-векторов согласно настоящему изобретению включают, например, (1) временную трансфекцию состоящими из двухцепочечной ДНК плазмидами, содержащими нуклеиновые кислоты ААВ-вектора, клеток HepG2 - линии клеток, полученной из печени человека, - чтобы проверить экспрессию и сплайсинг специфической для печени мРНК, и продукцию белка FVIII и его секрецию in vitro; (2) получение ААВ-вирионов, содержащих кодирующие FVIII ААВ-векторы, в клетках 293 и инфицированных бакуловирусом клетках насекомых; (3) оценку нуклеиновых кислот ААВ-вектора с помощью анализа в щелочном геле и анализов репликации; и (4) оценку экспрессии FVIII, активности FVIII и специфической активности FVIII в мышах Rag2.
Анализы временной трансфекции.
[00208] Проводили предварительный анализ in vitro для сравнения экспрессии и активности FVIII из кодирующих FVIII ААВ-векторов согласно настоящему изобретению с таковыми из экспрессирующего FVIII вектора, показанного на фигуре 1. Двухцепочечными формами кодирующих FVIII ААВ-векторов согласно настоящему изобретению временно трансфицировали линию клеток печени человека - HepG2. После трансфекции, например, через 24 или 48 часов, измеряли антиген FVIII и его активность в культуральных супернатантах.
[00209] Применяя данный анализ выяснили, что активность FVIII в клетках HepG2, временно трансфицированных векторами Proto 1, Proto 1S и Proto 2S, была сходна с активностью FVIII, полученного с применением вектора FVIII, представленного на фигуре 1, демонстрируя, что векторы Proto 1, Proto 1S и Proto 2S были способны экспрессировать функциональный белок фактора VIII.
Получение кодирующих FVIII ААВ-вирионов в клетках 293 и инфицированных бакуловирусом клетках насекомых.
[00210] Для того чтобы продемонстрировать, что рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-векторы согласно настоящему изобретению действительно упаковывают нуклеиновые кислоты, кодирующие FVIII, двухцепочечные формы кодирующих FVIII ААВ-векторов, полученных, как описано в примерах 1 и 2, внедряли в клетки, способные продуцировать ААВ-вирионы. В первой системе продукции ААВ-вируса плазмидами, содержащими нуклеиновые кислоты кодирующего FVIII ААВ-вектора в двухцепочечной форме, котрансфицировали клетки 293 вместе с плазмидой, которая экспрессирует белки Cap и Rep ААВ, и с плазмидой, которая экспрессирует функции помощника аденовируса, необходимые для продукции ААВ-вириона. Во второй системе продукции ААВ-вируса получали конструкции бакуловируса, экспрессирующие нуклеиновые кислоты кодирующего FVIII ААВ-вектора и белки Cap и Rep ААВ, а затем коинфицировали ими клетки насекомого Sf9. Полученные в результате этого ААВ-вирионы, продуцированные во временно трансфицированных клетках 293 или инфицированных бакуловирусом клетках Sf9, очищали и анализировали с помощью стандартных способов, известных в данной области.
Оценка с помощью анализа в щелочном геле и анализа репликации.
[00211] Анализ методом электрофореза в щелочном геле использовали, чтобы определить размер упакованной нуклеиновой кислоты. Анализ центров репликации применяли, чтобы определить, какие из кодирующих FVIII ААВ-векторов упакованы в интактной форме с помощью обоих способов упаковки.
[00212] Анализ удлинения праймеров использовали, чтобы определить количество нуклеиновых кислот кодирующих FVIII ААВ-векторов, у которых концы целые, т.е., которые оканчиваются 5'-концом шпильки-петли в 5'-ITR (смысловая цепь) или 3'-ITR (антисмысловая цепь) ААВ2.
[00213] В качестве альтернативы использовали анализ ПЦР, чтобы определить, целые ли концы у нуклеиновых кислот кодирующих FVIII ААВ-векторов, т.е., оканчиваются ли они 5'-концом шпильки-петли в 5'-ITR (смысловая цепь) или 3'-ITR (антисмысловая цепь) ААВ2.
Оценка в мышах Rag2.
[00214] Для ААВ-вирионов, полученных во временно трансфицированных клетках 293, или упакованных векторов, полученных в инфицированных бакуловирусом клетках Sf9, исследовали экспрессию и активность FVIII в мышах Rag2 при внутривенном введении дозы 2e11, 2e12, и 2e13 геномов вируса (вг)/кг. Мышей Rag2 использовали в данном анализе, так как экспрессия и/или активность FVIII не осложнялась(-ись) присутствием иммунного ответа хозяина на ААВ-вирус или белок FVIII человека.
[00215] Антиген FVIII определяют, применяя анализ на основе ELISA. Активность FVIII определяют, применяя анализ активации FXa и/или анализ свертывания. Используя анализы антигена и активности FVIII, определяют специфическую активность FVIII.
[00216] Специалисты в данной области после рассмотрения настоящих предпочтительных вариантов реализации будут ожидать, что при осуществлении настоящего изобретения встретится множество его модификаций и вариаций. Следовательно, единственные ограничения, которые следует применять к объему настоящего изобретения, представляют собой ограничения, которые встречаются в прилагаемой формуле изобретения.
Пример 4 Получение конструкций с улучшенными последовательностями промотора/энхансера.
[00217] Для получения дополнительных рекомбинантных ААВ-векторов с сильными промоторами, которые повышают экспрессию функционального FVIII, получали конструкции с модифицированными последовательностями энхансера и/или промотора. В некоторых вариантах реализации указанные конструкции содержали укороченные варианты энхансеров ApoE или μ-глобулина. Данные конструкции получали, применяя стандартные методики клонирования ДНК, и их последовательности показаны в SEQ ID NOS: 9-45.
Пример 5 Получение ААВ-вирусных частиц.
Получение рекомбинантной бакмиды.
[00218] Bac-компетентные клетки DH10 размораживали на льду. Добавляли рекомбинантную челночную плазмиду (например, pFB-GFP), аккуратно смешивали с компетентными клетками и инкубировали на льду в течение 30 минут. Компетентные клетки затем подвергали нагреву при температуре приблизительно 42˚C в течение 30 секунд, а затем остужали на льду в течение 2 минут. Указанные компетентные клетки подвергали тепловому шоку в течение 30 секунд при 42°C и остужали на льду в течение 2 мин. К клеткам добавляли SOC и оставляли для инкубации при 37°C при взбалтывании в течение 4 часов, чтобы позволить пройти рекомбинации. Во время периода инкубации X-gal распределяли по двум чашкам с LB (дополнительно содержащей различные антибиотики (например, канамицин, гентамицин и тетрациклин)) для трансформации, после чего добавляли IPTG.
[00219] Некоторое количество инкубационной смеси получали, разбавляли, а затем распределяли по двум чашкам с LB и инкубировали при 37˚C в течение приблизительно 30-48 часов. Из каждой чашки выбирали несколько белых колоний и культивировали их в течение ночи в среде LB, содержащей такую же комбинацию антибиотиков, которая находилась в чашках с LB. Затем получали бакмидную ДНК и глицериновый исходный раствор (сток) и хранили при -80˚C.
Очистка рекомбинантной бакмидной ДНК.
[00220] Отбирали некоторое количество глицеринового исходного раствора бакмиды и инокулировали им среду LB, содержащую такую же комбинацию антибиотиков, которая находилась в чашках с LB, как описано выше. Культурам позволяли расти в течение ночи при 37˚C при встряхивании. Затем некоторое количество культуры центрифугировали в микроцентрифуге на полной скорости в течение приблизительно 30 секунд.
[00221] Полученные осадки ресуспендировали в ресуспендирующем буфере, используя пипетку, затем добавляли лизирующий буфер и переворачивали пробирку несколько раз, чтобы перемешать буфер, а затем инкубировали при комнатной температуре в течение приблизительно 5 минут. Типичный ресуспендирующий буфер содержит 50 мМ Трис-CL, pH 8,0, 10 мМ ЭДТА и 100 мкг/мл РНКазы A. Типичный лизирующий буфер содержит 200 мМ NaOH и 1% ДСН. Некоторое количество преципитирующего буфера (например, буфера, содержащего 3,0 М ацетат калия, pH 5,5) медленно добавляли и переворачивали пробирку несколько раз, чтобы перемешать буфер, а затем инкубировали на льду в течение приблизительно 10 минут. Пробирку центрифугировали в течение приблизительно 10 минут на полной скорости, и супернатант переливали в пробирку, содержащую изопропанол. Пробирку переворачивали несколько раз, чтобы перемешать раствор.
[00222] Затем полученный раствор центрифугировали на полной скорости в течение приблизительно 15 минут при комнатной температуре и после центрифугирования супернатант незамедлительно удаляли с помощью пипетки.
[00223] Добавляли некоторое количество 70% этанола, чтобы ополоснуть осадок, и снова центрифугировали на полной скорости в течение 1 минуты. Этанол затем удаляли и раствор снова центрифугировали, чтобы удалить оставшееся следовое количество этанола. Некоторое количество буфера TE/EB добавляли в каждую пробирку и аккуратно растворяли осадок с помощью пипетки. Раствор хранили при -20˚C, если не использовали незамедлительно.
Получение исходного раствора P0 рекомбинантного бакуловируса.
[00224] Клетки Sf9 высевали при плотности приблизительно 1×106 клеток/лунку в 6-луночный планшет (или 6×106 клеток в чашку диаметром 10 см или 1,7×107 клеток в чашку диаметром 15 см), и позволяли клеткам прикрепиться в течение по меньшей мере 1 часа перед трансфекцией.
[00225] Растворы для трансфекции A и B получали, как описано далее. Раствор A: некоторое количество бакмиды разбавляли в некотором количестве бессывороточной среды без антибиотиков в пробирке емкостью 15 мл. Раствор B: некоторое количество CellFectin разбавляли в некотором количестве бессывороточной среды без антибиотиков в пробирке емкостью 15 мл. Раствор B добавляли в раствор A, аккуратно смешивали с помощью пипетки приблизительно три раза и инкубировали при комнатной температуре в течение 30 ~ 45 минут. Затем отбирали среду из чашки и добавляли некоторое количество бессывороточной среды без антибиотиков, чтобы промыть клетки. Некоторое количество SF900II без антибиотиков добавляли в каждую пробирку, содержащую смеси липид-ДНК.
[00226] Отбирали среду из чашек с клетками, добавляли к клеткам раствор для трансфекции и инкубировали клетки в течение приблизительно 5 часов при 28˚C. Раствор для трансфекции удаляли и добавляли некоторое количество бессывороточной среды+антибиотики, и инкубировали в течение приблизительно 4 дней при 28˚C. Среду, которая содержит рекомбинантный бакуловирус, собирали и центрифугировали в течение приблизительно 5 минут при 1000 об/мин, чтобы удалить обломки клеток. Бакуловирус хранили при 4˚C в темноте.
Амплификация бакуловируса (P1).
[00227] Клетки Sf9 растили до концентрации приблизительно 4×106 клеток/мл и разбавляли свежей средой до концентрации приблизительно 2×106 клеток/мл во встряхиваемом флаконе. Некоторое количество клеток Sf9 инфицировали некоторым количеством исходного раствора P0 бакуловируса. Множественность заражения (MOI) составляет приблизительно 0,1.
[00228] Клетки Sf9 инкубировали в течение приблизительно 3 дней и собирали бакуловирус. Клетки центрифугировали при 2000 об/мин в течение 5 минут, чтобы осадить клетки, собирали супернатант и хранили при 4˚C в темноте. Титр бакуловируса определяли, следуя протоколу из набора Rapid Titer от Clontech.
Получение ААВ с применением рекомбинантных бакуловирусов P1.
[00229] Клетки Sf9 растили до концентрации приблизительно 1×107 клеток/мл и разбавляли до концентрации приблизительно 5×106 клеток/мл. Некоторое количество разбавленных клеток Sf9 инфицировали Bac-вектором (5 MOI) и Bac-помощником (15 MOI) в течение 3 дней. Жизнеспособность клеток оценивали на третий день (обнаружили приблизительно 50% ~ 70% мертвых клеток).
[00230] Осадки клеток собирали путем центрифугирования при 3000 об/мин в течение 10 минут. Среды удаляли и клетки лизировали (или осадки клеток хранили при -20˚C, если не использовали незамедлительно).
Протокол лизиса и зонирования/очистки.
[00231] Некоторое количество лизирующего Sf9 буфера с бензоназой добавляли к каждому осадку клеток и тщательно встряхивали на вортексе, чтобы ресуспендировать клетки. Ресуспендированные клетки Sf9 инкубировали на льду в течение приблизительно 10 мин., чтобы остудить лизат. Лизат разрушали ультразвуком в течение приблизительно 20 секунд, чтобы тщательно лизировать клетки, а затем инкубировали при 37˚C в течение приблизительно 30 минут.
[00232] Добавляли некоторое количество 5 М NaCl и полученную смесь встряхивали на вортексе, а затем инкубировали в течение дополнительных 30 минут при 37°C. Добавляли некоторое количество NaCl, чтобы довести концентрацию соли до приблизительно 500 мМ, встряхивали на вортексе и центрифугировали при 8000 об/мин в течение 20 минут при 15°C для получения осветленного лизата.
[00233] Осветленный лизат переходил на этапы ультрацентрифугирования. Градиент CsCl получали путем добавления сначала осветленного лизата, затем некоторого количества раствора CsCl плотностью 1,32 г/см3 и некоторого количества раствора CsCl плотностью 1,55 г/см3 через шприц с длинной иглой. Поверхность раздела между указанными растворами CsCl маркировали. Добавляли ФБР до верха центрифужных пробирок, и указанные пробирки аккуратно уравновешивали и запечатывали.
[00234] Пробирки центрифугировали при 55000 об/мин в течение приблизительно 20 часов при 15°C. В крышке каждой пробирки прокалывали дырочку и полосу ААВ, расположенную немного выше отметки поверхности раздела двух растворов CsCl маркировали.
[00235] Проводили второе центрифугирование в CsCl путем переноса раствора ААВ в центрифужную пробирку для ротора 70.1 Ti и добавляли некоторое количество раствора CsCl рядом с верхом пробирки. Пробирки уравновешивали и запечатывали. Пробирки центрифугировали при 65000 об/мин в течение приблизительно 20 часов и собирали полосу ААВ (нижняя полоса, более высокая полоса представляла собой пустые капсиды).
Пример 5 Оценка конструкций в мышах Rag2.
[00236] ААВ-вирионы, которые содержат кодон-оптимизированную последовательность гена, кодирующую SQ-FVIII, получали, применяя бакуловирус и клетки 293 с использованием вектора FVIII, представленного на фигуре 1: конструкции Proto 1, Proto 1S, Proto 2S и Proto 3S. Пределы упаковки составляли приблизительно 4800 п.о. для бакуловируса и приблизительно 4950 п.о. для клеток 293.
[00237] На фигуре 5 показано, что все исследованные конструкции с укороченными (T) или неукороченными (NT) геномами были способны вызывать экспрессию FVIII. Экспрессия FVIII с Proto 1 была сходна с таковой для конструкции FVIII, представленной на фигуре 1, когда данные ААВ были получены в бакуловирусной системе. Включение интрона в Proto 2S и Proto 3S не приводило к улучшению экспрессии FVIII по сравнению с Proto 1. Вектор FVIII, представленный на фигуре 1, содержащий фланкирующие ААВ последовательности, полученный в клетках 293, был более эффективен, чем тот же вектор, в котором нет последовательности ААВ, полученный в бакуловирусе. В результате в Proto 1 добавляли дополнительные энхансеры, например, конструкции 101, 102, 102 и 104, в попытке повысить эффективность и соответствующую экспрессию FVIII.
Пример 6 Экспрессия и активность кодирующих FVIII ААВ-векторов с улучшенными последовательностями промоторов/энхансеров.
[00238] Экспрессию и активность дополнительных рекомбинантных кодирующих FVIII ААВ-векторов исследовали, применяя протокол гидродинамической инъекции. Гидродинамическая доставка представляет собой быстрый способ проверки эффективности различных рекомбинантных кодирующих FVIII ААВ-векторов in vivo. В частности, плазмидную ДНК кодирующего FVIII ААВ получали, как описано выше, а затем разбавляли в растворе для гидродинамической доставки TransIT-QR. Плазмидную ДНК вводили путем инъекции в хвостовую вену мышей C57Bl/6 в возрасте 5-6 недель (массой 18-25 г) в объеме, определенном по формуле: масса мыши (г)/10=0,1 мл раствора для доставки. Время инъекции составляло менее 5 секунд. Затем собирали плазму из каждой мыши через 48 часов после инъекции и измеряли количество экспрессированного белка FVIII, применяя анализ ELISA. Количество FVIII в плазме мыши, которой вводили инъекцию, измеряли, применяя анализ ELISA, и рекомбинантный FVIII (Xyntha SQ Equivalents) использовали в качестве стандарта для сравнения.
[00239] Для того, чтобы исследовать экспрессию FVIII, некоторые рекомбинантные кодирующие FVIII ААВ-конструкции согласно настоящему изобретению исследовали в протоколе гидродинамической инъекции для измерения их способности приводить к экспрессии функционального белка FVIII in vivo. На фигуре 6 показано, что все исследованные конструкции при дозе плазмиды 5 мкг продуцировали функциональный FVIII на различных уровнях эффективности.
[00240] На фигурах 7 и 8 приведены результаты гидродинамической инъекции для дозы плазмиды 1 мкг различных рекомбинантных кодирующих FVIII ААВ-конструкций согласно настоящему изобретению. На фигурах 7 и 8 показано, что инъекции всех различных исследованных конструкций приводили к экспрессии белка FVIII in vivo с различными уровнями эффективности.
Пример 7
Анализ ААВ-вируса, содержащего вектор p-100 ATGB.
[00241] Получали ААВ-вирус, содержащий FVIII-SQ-кодирующий вектор p-100 ATGB, представленный в данной заявке как SEQ ID NO: 45 ("ААВ5-p100ATGB-FVIII"), и оценивали его способность экспрессировать функциональный белок FVIII-SQ в мышах Rag2, как описано выше в примере 5. В частности, мышам Rag2 вводили однократную дозу либо вируса ААВ5-FVIII-SQ, либо вируса ААВ5-p100ATGB-FVIII в дозе либо 6E12 вг/кг, либо 2E13 вг/кг, либо 6E13 вг/кг, и впоследствии определили концентрации белка FVIII в кровотоке у мышей. Результаты данных анализов продемонстрировали, что введение вируса ААВ5-p100ATGB-FVIII вызывало приблизительно в 3 раза более высокий уровень в кровотоке функционального белка FVIII, чем вызывал вирус ААВ5-FVIII-SQ, при двух более низких уровнях дозы. Наблюдаемое различие в экспрессии до некоторой степени уменьшалось при наиболее высокой исследуемой дозе, хотя даже при наиболее высокой исследуемой дозе вирус ААВ5-p100ATGB-FVIII позволял получить более высокий уровень функционального белка FVIII в кровотоке, чем вирус ААВ5-FVIII-SQ. Полученные результаты демонстрируют, что вирус ААВ5-p100ATGB-FVIII эффективно трансдуцирует клетки печени in vivo и обеспечивает экспрессию высоких уровней функционального белка FVIII.
Пример 8
Исследования специфического кодирующего рекомбинантный FVIII ААВ-вектора/вируса при гемофилии A.
[00242] Гемофилия A (ГА) представляет собой X-сцепленное рецессивное нарушение гемостаза, которое поражает приблизительно 1 из 5000 мужчин. Оно вызывается недостаточной активностью фактора свертывания VIII (FVIII) -кофактора, необходимого для внутреннего пути активации свертывания крови. Данное расстройство может либо быть наследственным, либо возникать вследствие новой мутации, либо вследствие приобретенного иммунологического процесса, приводящим к недостаточным количествам FVIII или дисфункциональному FVIII, но для всех случаев характерно нарушение пути активации свертывания крови. Клинический фенотип пациентов с ГА в значительной степени определяется уровнем остаточной экспрессии. Тяжелая ГА классифицируется по активности FVIII менее 1% от таковой для дикого типа (< 1 МЕ/дл), при умеренном заболевании активность составляет 1-5% от активности дикого типа (1 МЕ/дл - 5 МЕ/дл) и при легкой форме активность составляет 5-40% (5 МЕ/дл - 40 МЕ/дл). Клиническими проявлениями тяжелой ГА остаются частые спонтанные эпизоды кровотечения, преимущественно в суставах и мягких тканях, с существенно более высоким риском смерти от кровоизлияния, если вовлечен головной мозг.
[00243] Лечение тяжелой ГА в настоящее время состоит во внутривенных инъекциях концентратов плазматического или рекомбинантного белка FVIII (rhFVIII), как для профилактики 2-3 раза в неделю, так и во время кровотечения, чтобы предотвратить или контролировать эпизоды кровотечения, соответственно. Время полувыведения rhFVIII (менее 24 часов для наиболее одобренных продуктов) вынуждает к частым инфузиям, и несмотря на значительный успех в лечении ГА, все же обычно у тяжелых пациентов с ГА продолжает возникать множество эпизодов кровотечения при прохождении лечения (в среднем от 1 до 7 эпизодов/год с профилактикой от 30 до 50 при лечении по мере необходимости). Последствием множества эпизодов кровотечения является развитие сопутствующего заболевания, которое способствует инвалидизирующей артропатии множества суставов и значительно более высокому риску смерти. Химическая модификация (например, конъюгирование напрямую с полимерами полиэтиленгликоля (ПЭГ)) и биоинженерия FVIII (например, получение слитых белков FVIII-Fc) улучшают время полувыведения приблизительно на 50% и, таким образом, перспективны в отношении введения меньших доз и поддержания уровней активности выше 1%-ного минимума. Тем не менее, данные FVIII с более длительной активностью остаются зависимыми от множества инфузий для поддержания необходимых уровней активности FVIII у пациентов с тяжелой ГА. Следовательно, существует сильная неудовлетворенная потребность в полностью предотвращающем ГА лечении, которое даст пациентам уровень FVIII, достаточный для нормальной и свободной от кровоизлияний жизни.
[00244] Генотерапия дает потенциальную возможность терапии, изменяющей течение заболевания, путем постоянной эндогенной продукции активного FVIII после однократного внутривенного введения вектора с подходящей последовательностью генов. Для лечения гемофилии A хорошо подходит подход замещения гена, так как клинические проявления вызываются недостаточностью одного продукта гена (FVIII), который циркулирует в плазме в незначительных количествах (200 нг/мл). Строго регулируемый контроль экспрессии генов не обязателен, и умеренные повышения уровня FVIII (любое повышение уровня в плазме на 2 нг/мл вызывает повышение активности на 1%) может снижать выраженность тяжелой формы заболевания. Таким образом, относительно малые изменения эндогенной активности FVIII приводят к клинически значимому улучшению фенотипа заболевания. Наконец, ответ на трансдукцию гена можно оценить, применяя утвержденные количественные, а не качественные конечные критерии оценки, которые легко проанализировать, применяя известные лабораторные методики.
[00245] Оценили несколько различных стратегий переноса генов для замещения FVIII, но аденоассоциированные вирусные (ААВ) векторы подают наибольшие надежды. У них превосходный и четко определенный профиль безопасности, и они могут направлять продолжительную экспрессию трансгена с тропностью к определенным тканям, таким как ткань печени (для серотипов 2, 5 и 8, среди прочих). Действительно, в текущем генотерапевтическом клиническом испытании для сходного расстройства - гемофилии B - установили, что можно достичь стабильной (> 36 месяцев) экспрессии фактора IX человека на уровнях, которых достаточно для перехода их фенотипа кровотечений от тяжелого до умеренного или легкого, после однократного введения в периферическую вену экспрессирующего рекомбинантный FIX вектора ААВ-8. Несколько участников данного исследования смогли прервать профилактику указанным фактором без возникновения у них спонтанных кровоизлияний, даже когда они предпринимали действия, которые ранее приводили к кровотечению. Таким образом, генотерапевтическое лечение привело к значительному улучшению качества их жизни.
Дополнительные доклинические испытания.
[00246] Рекомбинантный кодирующий FVIII-SQ вектор Proto1 (показанный в данной заявке на фигуре 2A и SEQ ID NO: 1) использовали для получения рекомбинантного кодирующего FVIII-SQ вируса ААВ5, применяя систему экспрессии на основе бакуловируса/Sf9, описанную выше. Полученный вирус (обозначенный в данной заявке "ААВ5-FVIII-SQ") очищали и включали в состав композиции для доклинических испытаний на животных в фосфатно-солевом буферном растворе Дульбекко (DPBS), содержащем 0,001% полоксамер 188.
[00247] Неклиническая программа с ААВ5-FVIII-SQ была разработана таким образом, чтобы исследовать трансдукцию, относительную экспрессию и активность белка FVIII-SQ и общий профиль безопасности капсида ААВ5 и компонентов трансгенного продукта FVIII-SQ из ААВ5-FVIII-SQ, чтобы поддержать однократное в/в введение рекомбинантного вируса пациентам-людям. Неклинический профиль ААВ5-FVIII-SQ оценивали в одном исследовании in vitro и в десяти исследованиях введения однократной дозы мышам: нормального дикого типа (WT), Rag2 -/- (B6,129S6-Rag2tm1Fwa N12) и мышам Фактор VIII -/- (B6;129S-F8tm1Kaz/J), скрещенным с мышами Rag2 -/- (Rag2 -/- x FVIII -/-), - и яванскому макаку и макаку-резусу.
[00248] Оценка фармакодинамики (ФД) продемонстрировала, что (i) генотерапия ААВ5-FVIII-SQ приводила к экспрессии в плазме FVIII-SQ правильного размера (легкая и тяжелая цепи), по сравнению с ReFacto® (rhFVIII-SQ; доступным на рынке как ReFacto® в Евросоюзе и Xyntha® в США), у мышей, (ii) введение ААВ5-FVIII-SQ корригировало коагулопатию в модели гемофилии A у мышей дозозависимым образом, аналогично вводимому экзогенно ReFacto®, и (iii) предложенный клинический путь введения путем в/в инфузии вероятно аналогичен или лучше, чем болюсное введение, когда сравнивают белок FVIII-SQ в плазме и его активность или соответствующие уровни РНК и ДНК в печени у мышей.
[00249] Предполагают, что временная экспрессия FVIII-SQ у не относящихся к человеку приматов видоспецифична, и не ожидали, что ее можно добиться в клинических условиях, что наблюдали в других клинических испытаниях, в которых добились стабильной экспрессии трансгена у пациентов-людей. Иммуногенность будут тщательно отслеживать в клинических условиях и оценивать взаимосвязь с экспрессией белка.
[00250] Во всей неклинической программе рассматривали потенциальную токсичность ААВ5-FVIII-SQ и его основных компонентов - капсида ААВ5 и трансгенного продукта FVIII-SQ. Последовательность аминокислот FVIII-SQ такая же, как и у доступного на рынке рекомбинантного фактора для заместительной терапии - ReFacto®. Дизайн токсикологической программы подразумевал характеристику токсикологического профиля ААВ5-FVIII-SQ, включая определение органов-мишеней, относительного содержания белка FVIII-SQ в плазме и его относительной активности, иммуногенности и количества геномов ДНК и РНК в печени. Проводили одно исследование GLP с однократным введением дозы ААВ5-FVIII-SQ нормальным мышам CD-1 с 4- и 13-недельным периодом последующего наблюдения. ФД исследования на мышах Rag2 -/- x FVIII -/- и нормальных обезьянах содержали дополнительные параметры токсичности гистологии и клинической патологии.
[00251] Неклинический профиль безопасности ААВ5-FVIII-SQ включал ожидаемую наблюдаемую иммуногенность: (i) обнаружение антител к ААВ5 в плазме у всех иммунокомпетентных животных (мыши CD1 и обезьян), которых лечили вектором ААВ5, и (ii) были обнаружены антитела к FVIII-SQ у иммунокомпетентных животных - одной мыши и нескольких обезьян, которые не коррелировали с экспрессией или активностью FVIII, но могли вносить вклад в небольшое увеличение АЧТВ у четырех обезьян, которым вводили 6E12 или 6E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ. Уровни антител не определяли у мышей, полученных из Rag2 -/-, так как у них отсутствуют зрелые B- и T-лимфоциты, и они неспособны вырабатывать гуморальные иммунные ответы. Тем не менее, межвидовую перекрестную реакционную способность антитела к FVIII-SQ с FVIII обезьяны не оценивали, что не позволяет сделать однозначные выводы относительно вклада антитела в свертывание крови. Независимое от дозы воспаление почек от минимальной до легкой степени наблюдали у мышей Rag2 -/- x FVIII -/- через 8 недель, без соответствующих изменений в параметрах клинической биохимии почек, что указывало на дисфункцию почек. Полученные для почек результаты не наблюдали у мышей CD-1 через 13 недель, позволяя предположить зависящий от штамма ответ на гетерологичный белок. У обезьян не наблюдали связанных с ААВ5-FVIII-SQ изменений в клинической биохимии печени, которые свидетельствовали бы о дисфункции печени или цитотоксичности. Провели одно незапланированное умерщвление макака-резуса, которому вводили 6E12 вг/кг в день 14, вследствие потери массы тела за период акклиматизации и исследования, и считали, что тяжесть заболевания не была связана с ААВ5-FVIII-SQ вследствие постоянной потери массы тела и обнаруженных в толстом кишечнике находок. Не было замечено других связанных с ААВ5-FVIII-SQ находок, включая изменения в параметрах клинической биохимии печени, у обезьян - яванских или резусов, - которым вводили ААВ5-FVIII-SQ.
[00252] Не было особых находок, связанных с трансгенным продуктом FVIII-SQ, отличных от ожидаемой иммуногенности. Так как у трансгенного продукта FVIII-SQ конечная последовательность такая же, как и у доступного на рынке ферментативного композиции ReFacto®, не обнаружили уникальной характерной для FVIII токсичности для органов-мишеней.
[00253] Не наблюдали уникальных связанных с капсидом ААВ5 токсичностей, дополнительно к ожидаемой иммуногенности, в неклинической программе. Иммуногенность капсида ААВ будут отслеживать в неклинической и клинической программах.
[00254] Как нормальных мышей, так и мышей с моделью заболевания и ограниченное количество обезьян использовали для проверки обоснованности концепции, оценки потенциального межвидового масштабирования и ответа на дозу, чтобы выбрать дозу FVIII, равную 6E12 вг/кг. Для определения начальной дозы принимали во внимание все результаты доклинических испытаний, проводимых на мышах (нормальных и с моделью заболевания - Rag2 -/- x FVIII -/-) и обезьянах. Поддающийся обнаружению фармакологический ответ, на основе активности, наблюдали при дозе 6E12 вг/кг у мышей и двух видов обезьян. Не было замечено четкого межвидового масштабирования между мышами и яванскими макаками и макаками-резусами, которое помогло бы установить более точные рекомендуемые дозы. 10-кратный коэффициент безопасности вычисляли на основе дозы, не оказывающей явного нежелательного действия (NOAEL), равной 6E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, в 13-недельном исследовании GLP на нормальных мышах при наиболее высокой вводимой дозе. Не наблюдали связанных с ААВ5-FVIII-SQ изменений в клинических наблюдениях или биохимии у обезьяны при дозах до 6E13 вг/кг - 10-кратного коэффициента безопасности - через 8 недель. В целом, не наблюдали связанных с ААВ5-FVIII-SQ отклонений, за исключением ожидаемого образования антител к ААВ5 у всех животных и ограниченного образования низких титров антител к FVIII-SQ у иммуннокомпетентных животных при наиболее высоких вводимых дозах, равных 6E13 вг/кг, у нормальных мышей и обезьян, соответственно.
[00255] Проводили одно исследование in vitro и девять исследований in vivo, чтобы оценить первичную фармакодинамику (ФД) ААВ5-FVIII-SQ (шесть исследований на мышах не по GLP и три исследования на обезьянах не по GLP). Во всех исследованиях использовали однократную дозу и внутривенный (в/в) путь введения. Предложенным для клиники путем введения была в/в инфузия продолжительностью до 60 минут. Большинству животных в данной программе вводили ААВ5-FVIII-SQ посредством в/в болюсной инъекции, так что оценку влияния длительности введения (в/в болюс по сравнению с инфузией в течение 30 минут) на экспрессию FVIII-SQ проводили в одном исследовании на мышах. В двух исследованиях ответа на дозу на мышах, которым вводили от 2E10 до 2E14 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, установили взаимосвязь параметров ФД концентрации белка и активности FVIII-SQ в плазме, включая экспрессию ДНК и РНК в печени через 8 недель. Одно исследование на мышах поддержало селекцию инфицированной бакуловирусом линии клеток для производства. В одном исследовании на мышах оценивали белок FVIII и его активность в плазме, наряду с ДНК и РНК в печени, в течение 4 и 13 недель. В одном исследовании на мышах оценивали время кровотечения как функциональную оценку свертывания крови. Два исследования на обезьянах поддержали селекцию указанного вектора ААВ5 и инфицированной бакуловирусом линии клеток для производства. В третьем исследовании у обезьян сравнивали ФД эффект ААВ5-FVIII-SQ у яванских макаков и макаков-резусов.
[00256] Конечные критерии оценки ФД (белок FVIII-SQ и его активность в плазме, геномы вектора ДНК и копии транскрипции РНК в печени) оценили в исследованиях на мышах и обезьянах. Геномы вектора ДНК и копии транскрипции РНК в печени оценили, чтобы подтвердить трансдукцию печени ААВ5-FVIII-SQ. Белок FVIII-SQ и его активность в плазме использовали в качестве биомаркеров экспрессии в печени трансгена FVIII-SQ. Несколько конечных критериев оценки токсичности объединили в одном исследовании на мышах (гистология) и трех исследованиях на обезьянах (клиническая патология), чтобы оценить межвидовое соотношение доз для двух видов.
Фармакодинамическая оценка ААВ5-FVIII-SQ в мышах Rag2-/- x FVIII-/-.
[00257] Цель данного исследования состояла в том, чтобы оценить первичную ФД ААВ5-FVIII-SQ в течение 4 и 13 недель после однократного в/в введения самцам мышей Rag2-/- x FVIII-/- дозы 6E12 или 6E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ. Конечные критерии оценки ФД включали уровни белка FVIII-SQ в плазме и уровни активности и присутствие РНК и ДНК FVIII-SQ в печени. Шестьдесят самцов мышей Rag2-/- x FVIII-/- были в возрасте 8 недель на момент начала испытания. Животных произвольно распределяли по шести группам (10/группу) и вводили однократную в/в инъекцию в хвостовую вену либо среды, либо 6E12, либо 6E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ.
[00258] Планшеты покрывали в течение ночи подходящими моноклональными антителами в конечной концентрации 2 мкг/мл - GMA8023 для тяжелой цепи FVIII, и GMA8001 для легкой цепи FVIII. На следующий день лунки блокировали зеленым разбавителем, и образцы плазмы мыши (50 мкл) из Группы 4 и Группы 6, или образцы плазмы нормальной мыши метили Xyntha® (500 нг/мл), разбавляли равным объемом зеленого разбавителя и добавляли 100 мкл смеси в отдельные лунки для обогащения тяжелыми или легкими цепями FVIII. Обогащенные образцы плазмы разделяли на денатурирующих восстанавливающих полиакриламидных гелях и переносили на нитроцеллюлозную мембрану для анализа методом вестерн-блот. Тяжелую цепь FVIII детектировали путем последовательной инкубации с конъюгированными с биотином поликлональными антителами к FVIII (SAFC-APBIO, 0,5 мкг/мл) и конъюгированной со стрептавидином щелочной фосфатазой (0,25 мкг/мл). Легкую цепь FVIII-SQ детектировали путем последовательной инкубации с моноклональным антителом к FVIII (GMA8025, 1,0 мкг/мл) и антителами осла против антител мыши, конъюгированными с щелочной фосфатазой (0,25 мкг/мл). Мембраны проявляли, применяя колориметрический преципитирующий субстрат для щелочной фосфатазы (WesternBlue), и получали изображение.
[00259] Оценка молекулярной массы полученных из трансгена ААВ тяжелых и легких цепей FVIII-SQ из сыворотки животных, которым вводили 6E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, с помощью вестерн-блоттинга позволила установить, что молекулярный размер экспрессируемых в плазме тяжелых и легких цепей FVIII-SQ был сходен с таковым у белка rhFVIII-SQ. Это свидетельствовало о том, что, несмотря на потенциально укороченный геном, экспрессированная как тяжелая, так и легкая цепь FVIII-SQ была правильного размера. Эффективная и функциональная экспрессия дисферлина и фактора VIII гемофилии A с векторов с такими укороченными геномами была продемонстрирована ранее. Молекулярная масса обеих цепей белка FVIII-SQ в плазме была правильной величины, и у соответствующих мышей наблюдалась активность FVIII-SQ.
Исследование в/в болюса и инфузии у мышей Rag2-/-.
[00260] Цель данного исследования состояла в сравнении влияния однократного в/в болюса или 30-минутной в/в инфузии 6,0E12 и 2,0E13 вг/кг на ДНК и РНК FVIII-SQ в ткани печени и уровни белка FVIII-SQ в плазме и уровни активности у мышей Rag2-/- через 5 недель после введения дозы. Шестьдесят самцов мышей Rag2-/- были в возрасте приблизительно 8 недель на момент начала испытания. Животных произвольно распределяли по 6 группам (10 животных/группу). Группам 1-3 и 4-6 вводили однократный в/в болюс или 30-минутную в/в инфузию (среда, 6,0E12 или 2,0E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ) через хвостовую вену, соответственно.
[00261] У животных, которым вводили 6,0E12 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, количество геномов вектора hFVIII-SQ/клетку печени составляло 5,06E-2 и 3,50E-2 в группах в/в инфузии и медленного болюса, соответственно. Количество экспрессированных копий FVIII-SQ/мкг РНК в печени составляло 3,76E4 и 1,87E4 в группах в/в инфузии и болюса, соответственно. У животных, которым вводили 2,0E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, количества ДНК составляли 0,342 геномов вектора/клетку для группы инфузии и 0,316 геномов вектора/клетку для группы болюса. Количество экспрессированных копий FVIII-SQ/мкг РНК в печени составляло 2,35E5 для группы инфузии и 1,53E5 для группы болюса.
[00262] У животных, которым вводили 6,0E12 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ (низкая доза), наблюдали небольшое различие в уровнях РНК и ДНК в печени или белка FVIII-SQ в плазме и уровнях активности при в/в введении либо посредством болюса, либо посредством 30-минутной инфузии. У животных, которым вводили 2,0E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, введение путем в/в инфузии в течение 30 минут приводило к приблизительно вдвое большим уровням белка FVIII-SQ и активности в плазме, тогда как уровни РНК и ДНК в печени оставались сходными. На основании полученных результатов предложенное клиническое введение ААВ5-FVIII-SQ путем в/в инфузии вероятно сходно или лучше, чем болюсное введение.
Оценка времени кровотечения у мышей Rag2-/- x FVIII-/-.
[00263] Цель данного исследования состояла в том, чтобы оценить конечную точку функционального свертывания - время кровотечения - через 8 недель после введения однократной дозы ААВ5-FVIII-SQ самцам мышей Rag2-/- x FVIII-/-, по сравнению с мышами дикого типа (C57BL/6J). Кроме того, изменения времени кровотечения через 8 недель после лечения ААВ5-FVIII-SQ сравнивали с результатами, достигнутыми на мышах Rag2-/- x FVIII-/-, которых лечили ReFacto®. Сто самцов мышей Rag2-/- x FVIII-/- и двадцать самцов мышей C57BL/6J соответствующего возраста были в возрасте приблизительно 8 недель на момент начала испытания. Животных произвольно распределяли по четырем группам (20 животных/дозу) и вводили им однократную в/в инъекцию ААВ5-FVIII-SQ через хвостовую вену (C57BL/6J: среда; Rag2-/- x FVIII-/-: среда, 2,0E13 или 1E14 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ).
[00264] У животных Rag2 -/- x FVIII -/-, которым вводили ReFacto®, наблюдали зависимое от дозы уменьшение времени и объема кровотечения. У животных Rag2-/- x FVIII-/-, которым вводили 50 ед/кг ReFacto®, наблюдали среднюю потерю крови, составляющую 0,49 ± 0,30 г, и среднее время кровотечения, составляющее 18,1 ± 9,39 мин. У мышей Rag2-/- x FVIII-/-, которым вводили 200 ед/кг ReFacto®, наблюдали среднюю потерю крови и среднее время кровотечения 0,134 ± 0,19 г и 4,29 ± 6,16 мин.
[00265] Уровни в плазме ReFacto® и FVIII-SQ были сходны у мышей, которым вводили 50 ед/кг ReFacto® и 2E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, соответственно.
[00266] Введение ААВ5-FVIII-SQ мышам Rag2-/- x FVIII-/- приводило к зависимому от дозы уменьшению объема потери крови и времени кровотечения через 8 недель после введения дозы. Зависимое от дозы уменьшение объема потери крови и времени кровотечения наблюдали через 8 недель после введения дозы. У животных, которым вводили 1E14 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, потеря крови и время кровотечения коррегировались до уровней дикого типа, сравнимых с коррекцией, которой добивались при лечении ReFacto®. Введение ААВ5-FVIII-SQ может коррегировать коагулопатию в модели гемофилии A у мышей дозозависимым образом, аналогично экзогенному введению ReFacto®.
Дозозависимый эффект у мышей Rag2-/- x FVIII-/-.
[00267] У мышей Rag2-/- x FVIII-/-, которым вводили от 2E11 до 2E12 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, не были обнаружены уровни белка или активности FVIII-SQ в плазме.
[00268] В настоящем исследовании шестьдесят самцов мышей Rag2-/- x FVIII-/- были в возрасте приблизительно 8 недель на момент начала испытания. Животных произвольно распределяли по шести группам (10 животных/дозу) и вводили однократную в/в инъекцию ААВ5-FVIII-SQ через хвостовую вену (среда, 2E12, 6E12, 2E13, 6E13 и 2E14 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ).
[00269] Уровни белка FVIII-SQ в плазме, как правило, зависели от дозы у животных, которым вводили ≥ 1,5E12 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ. Уровни белка FVIII-SQ были ниже предела количественного определения у животных, которым вводили ≤ 1,7E11 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ. ФД активность, как правило, повышалась с повышением дозы, и коррелировала с активностью. У животных, которым вводили ≤ 1,8E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, наблюдали вариабельность между отдельными животными, и лишь у подгруппы животных наблюдали поддающиеся обнаружению уровни белка FVIII-SQ и активности в плазме.
[00270] В соответствии с уровнями белка FVIII-SQ и уровнями активности, наблюдали копии генома вектора и копии экспрессии (РНК) у животных, которым вводили ≥ 1,5E12 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ. Количества копий ДНК генома вектора и копий экспрессии РНК/мкг РНК как правило повышались с повышением дозы.
[00271] Уровни белка FVIII-SQ в плазме, уровни активности и уровни геномов и РНК вектора, как правило, зависели от дозы у животных Rag2-/- x FVIII-/-, которым вводили ≥ 1,5E12 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ. В подгруппе животных, которым вводили 1,5E12 (два животных) или 1,8E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ (восемь из десяти животных) -дозы, которые охватывают значение предложенной клинической дозы FVIII 6,0E12 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, - активность находилась в диапазоне от 2,8 до 66,4% от нормального значения. Это свидетельствовало о том, что ФД активности в клинических условиях можно добиться при уровне дозы 6,0E12, так как полученные в результате этого уровни белка FVIII-SQ в плазме и уровни активности, вероятно, будут приводить к более постоянному ответу у животных.
Выбор капсида у яванских макак.
[00272] Цель данного исследования состояла в том, чтобы оценить относительную активность двух капсидов (ААВ5.2 FVIII-SQ и ААВ8.2 FVIII-SQ, т.е., капсидного белка ААВ5 и ААВ8, соответственно, и ITR ААВ2) с трансгенами FVIII-SQ в течение 8 недель при введении в виде однократного в/в болюса яванскому макаку. Восемь самцов яванских макак были в возрасте от 2,8 до 4,1 года и весили от 2,6 до 3,6 кг на момент начала исследования. Всех животных подвергали предварительному скринингу на присутствие активностей, ингибирующих трансдукцию ААВ5 или ААВ8, по сравнению с таковыми в сыворотке иммуноистощенного яванского макака. Животных распределяли по четырем группам и вводили либо 2,0E12, либо 2,0E13 вг/кг ААВ5.2-hFVIII-SQ или ААВ8.2-hFVIII-SQ в виде однократного внутривенного введения медленного болюса (0,5 и 5,0 мл/кг, соответственно).
[00273] Введение однократной инъекции ААВ5.2 hFVIII-SQ и ААВ8.2 hFVIII-SQ приводило к поддающимся обнаружению уровням белка FVIII-SQ в плазме, которые хорошо переносились яванскими макаками, которым вводили 2,0E13 вектора/кг. Не наблюдали связанных с ААВ5-FVIII-SQ изменений в клинической биохимии печени, что указывало на отсутствие дисфункции печени. Капсид ААВ5 выбрали для дальнейшей разработки.
Исследование введения однократной в/в дозы яванским макакам.
[00274] Цель данного исследования состояла в том, чтобы оценить относительную активность ААВ5-FVIII-SQ из двух производственных партий, полученных в двух линиях клеток (инфицированных бакуловирусом клетках sf9 насекомого и клетках 293 человека), в течение 8 недель после однократного в/в введения яванскому макаку. Восемь не получающих лечения самцов обезьян были в возрасте от 3,9 до 4,3 года и весили от 2,8 до 4,3 кг на момент начала исследования. Всех животных подвергали предварительному скринингу на присутствие антител к ААВ5 и активностей, ингибирующих трансдукцию ААВ5, перед включением в исследование. Каждая обезьяна (2/дозовую группу) получала однократную в/в инъекцию медленного болюса (2E13 и 6E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ), и за ней наблюдали в течение восьми недель.
[00275] Относительные уровни белка FVIII-SQ в плазме оценивали через 8 недель. Возможно связанное с ААВ5-FVIII-SQ удлинение АЧТВ наблюдали у животных с образованием антитела к FVIII. Это известный результат потенциальной иммуногенности при экзогенном замещении фактора. Не наблюдали связанных с ААВ5-FVIII-SQ изменений в клинической биохимии печени, что указывало на то, что не наблюдали дисфункции печени. Уровни FVIII-SQ в плазме повышались в течение от трех до шести недель, но после этого снижались.
[00276] Все животные, которым вводили ААВ5-FVIII-SQ, экспрессировали уровни FVIII-SQ в плазме после недели 2 после введения. Как правило, уровни FVIII-SQ повышались с течением времени, а затем снижались к неделе 8. Пиковые уровни FVIII-SQ в плазме находились в диапазоне от 4,8 нг до 67,4 нг FVIII-SQ/мл.
Исследование введения однократной в/в дозы яванским макакам и макакам-резус.
[00277] У яванских макак и макак-резус, которым вводили 6E12 и 2E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, оценивали относительную экспрессию FVIII-SQ в течение 6 недель. Не наблюдали связанных с ААВ5-FVIII-SQ изменений в клинической биохимии печени, что указывало на отсутствие дисфункции печени. Уровни белка FVIII-SQ в плазме были больше у яванского макака по сравнению с макаком-резус. Уровни FVIII-SQ в плазме повышались в течение от четырех до пяти недель, но после этого снижались. ДНК генома вектора в печени обнаружили у всех животных, которым вводили ААВ5-FVIII-SQ, и это означает, что уровни трансдукции ААВ5-FVIII-SQ наблюдались у всех животных. Копии РНК FVIII-SQ в печени наблюдали у животных, которые экспрессировали белок FVIII-SQ в плазме. Не наблюдали связанных с ААВ5-FVIII-SQ изменений в клинической биохимии печени у выживших обезьян, что указывало на то, что не наблюдали дисфункции печени.
Выводы.
[00278] В целом во множестве исследований на мышах Rag2-/- x FVIII-/-, уровень белка FVIII-SQ в плазме и % от его нормальной активности у человека, похоже, как правило, пропорционален дозе; аналогично для ДНК и РНК в печени. Активность и уровни белка FVIII-SQ, как правило, повышаются с течением времени после введения однократной дозы ААВ5-FVIII-SQ мыши, в то время как в печени повышались уровни РНК с течением времени. Экспрессия белка FVIII-SQ и его активность в плазме проявляла тенденцию к корреляции между данными исследованиями. Наблюдали высокую вариабельность между отдельными животными и отдельными исследованиями у животных, которым вводили ≤ 6E12 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, о чем свидетельствовали уровни белка FVIII-SQ в плазме и его активность. Соответствующую экспрессию белка FVIII-SQ в плазме наблюдали у животных, которым вводили ≥ 6E12 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ.
[00279] У ограниченного количества обезьян, которым вводили от 2E12 до 6E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ, уровни FVIII-SQ в плазме были обнаружены у животных, которым вводили ≥ 6E12 вг/мл, при этом не наблюдали поддающихся обнаружению уровней в плазме животных, которым вводили 2E12 вг/кг.
[00280] В исследованиях, проведенных на яванских макаках, экспрессия FVIII-SQ была пиковой между 3 и 5 неделями после введения дозы, и снижалась к концу исследования до уровней, которые были в некоторых случаях ниже предела количественного обнаружения. В некоторых случаях антитела к FVIII были обнаружены у животных до или после пиковых уровней FVIII-SQ в плазме. Тем не менее, антитело не было обнаружено у всех животных с уменьшенной экспрессией FVIII-SQ, позволяя предположить, что экспрессию ингибируют другие потенциальные механизмы, такие как опосредованный цитотоксическими T-лимфоцитами (CTL) клиренс трансдуцированных клеток, или возможно другие не установленные ингибиторы экспрессии. Предполагают, что временная экспрессия FVIII-SQ у не относящихся к человеку приматов видоспецифична, и не ожидают, что она будет происходить в клинических условиях.
[00281] Введение однократного в/в болюса ААВ5-FVIII-SQ обезьянам приводило к измеримым уровням белка FVIII-SQ в плазме при предложенной клинической начальной дозе 6E12 вг/кг и до 6E13 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ; введение ААВ5-FVIII-SQ мыши привело к уровням белка FVIII-SQ в плазме и уровням активности, соответствующим наблюдаемым в исследованиях со сравнимым диапазоном доз. Предложенную в фазе 1/2 клинического испытания на людях начальную дозу - 6E12 вг/кг ААВ5-FVIII-SQ - выбрали на основании 10-кратного коэффициента безопасности, при этом она приводила к поддающемуся обнаружению уровню белка FVIII-SQ в плазме и уровню активности как у обезьян, так и у мышей, снижая вероятность субтерапевтического результата.
Исследование безопасности, переносимости и эффективности повышения дозы ААВ5-FVIII-SQ у пациентов-людей с тяжелой гемофилией A.
[00282] В настоящем исследовании кодирующие рекомбинантный FVIII ААВ-вирионы, содержащие кодирующий FVIII-SQ вектор Proto1, представленный на фигуре 2A (SEQ ID NO: 1), будут доставлять пациентам-людям путем однократного внутривенного введения дозы. Данное исследование разработано таким образом, чтобы добиться стабильной, потенциально пожизненной экспрессии в плазме активного hFVIII, синтезированного в трансдуцированной вектором ткани печени. Данное клиническое испытание представляет собой первое испытание на человеке, разработанное для того, чтобы оценить взаимосвязь дозы вектора с увеличением остаточной активности FVIII и оценить, достаточно ли данных уровней для изменения клинического фенотипа. Взаимосвязь дозы с безопасностью будут коррелировать с активностью hFVIII у пациентов с тяжелой ГA.
[00283] Первичными целями данного исследования являются (i) оценка безопасности однократного внутривенного введения рекомбинантного ААВ, кодирующего FVIII-SQ человека, и (ii) определение дозы рекомбинантного ААВ, кодирующего FVIII-SQ, необходимой для достижения экспрессии FVIII на уровне или выше 5% от нормальной активности (> 5 МЕ/дл) через 16 недель после инфузии. Кинетику, продолжительность и величину опосредованной ААВ активности FVIII у индивидов с гемофилией A будут определять и коррелировать с соответствующей дозой.
[00284] Вторичными целями данного исследования являются (i) описание иммунного ответа на трансген FVIII и/или капсидные белки ААВ после системного введения кодирующего рекомбинантный FVIII ААВ-вируса, (ii) оценка вклада введения доз кодирующего FVIII ААВ на частоту заместительной терапии FVIII во время исследования, и (iii) оценка влияния введения доз на количества эпизодов кровотечения, требующих лечения, во время исследования.
[00285] Кодирующий рекомбинантный FVIII-SQ вектор Proto1 (показанный в данной заявке на фигуре 2A и в SEQ ID NO: 1) использовали для получения рекомбинантного вируса ААВ5-FVIII-SQ, применяя систему экспрессии на основе бакуловируса/Sf9. Процесс получения ААВ5-FVIII-SQ состоял из культивирования клеток в одном производственном цикле, их сбора, очистки и получения композиции, что приводило к получению лекарственной формы нерасфасованного лекарственного вещества (FBDS). FBDS фильтровали через каскадные стерилизующие фильтры с диаметром пор 0,2 мкм и собирали в стерильные пакеты для сбора после биопроцесса перед наполнением контейнеров. ААВ5-FVIII-SQ затем асептически расфасовывали путем наполнения криопробирок емкостью 2 мл 1,1 мл стерильного FBDS и запечатывания стерильными крышками. Наполненные пробирки затем проверяли визуально перед маркировкой, упаковкой и замораживанием при ≤ - 65˚C.
Жидкая композиция ААВ5-FVIII-SQ для клинического применения.
[00286] Так как для жидкой композиции ААВ5-FVIII-SQ, описанной выше и используемой для неклинических/доклинических испытаний, наблюдали значительную адсорбцию рекомбинантного ААВ к стеклянным и пластиковым поверхностям, в данном исследовании провели работу по разработке новой композиции ААВ5-FVIII-SQ с полезными свойствами для применения в клинических испытаниях на человеке. Очищенный ААВ5-FVIII-SQ включали в состав композиции для клинических испытаний на человеке, как описано далее.
[00287] Очищенный рекомбинантный вирус ААВ5-FVIII-SQ включали в различных концентрациях в состав жидкой композиции, подходящей для в/в введения пациентам-людям, содержащей 1,38 мг/мл моногидрата одноосновного фосфата натрия, 1,42 мг/мл двухосновного фосфата натрия (безводного), 8,18 мг/мл хлорида натрия, 20 мг/мл маннита и 2,0 мг/мл полоксамера 188 (Pluronic F-68), pH 7,4. В одном варианте реализации концентрация рекомбинантного вируса ААВ5-FVIII-SQ в описанной выше композиции составляла 2E13 вг/мл. Полученная в результате этого жидкая композиция представлял собой стерильный прозрачный/от бесцветного до бледно-желтого раствор, полезный для в/в инфузии, и, по сравнению с составом, применяемым для неклинических/доклинических испытаний, описанной выше, позволяла уменьшить адсорбционные потери вируса на связывание со стеклом и пластиком до приемлемых уровней. Эта композиция была стабильна в течение более длительных периодов времени при хранении при ≤ - 65˚C, и ее применяли в клинических испытаниях на человеке, описанных ниже.
Дизайн клинического испытания на человеке.
[00288] Участников с тяжелой гемофилией A данного впервые проводимого на человеке исследования с увеличением дозы будут включать в исследование последовательно в одну из трех групп в соответствии с уровнем дозы: (i) 6E12 геномов вектора [вг] на килограмм массы тела, которую вводят в виде однократной внутривенной дозы (в/в), (ii) 2E13 вг на килограмм, в/в, или (iii) 6E13 вг на килограмм, в/в, после чего будет следовать период последующего наблюдения в течение 16 недель после инфузии, во время которого будут оценивать безопасность и эффективность. После анализа первичной конечной точки через 16 недель, безопасность и эффективность затем будут оценивать в течение приблизительно 5 лет.
[00289] Пациентов будут включать в исследование последовательно каждые 3 недели или с большими интервалами времени между группами. Увеличение дозы могло происходить после того, как пациенту однократно безопасно вводили дозу, если полученная в результате этого активность FVIII на неделе 3 была < 5 МЕ/дл. Ожидают, что три недели - это момент времени, когда экспрессия будет близка к максимальной. Данная система увеличения дозы предназначена для минимизирования количества пациентов, получивших субтерапевтические дозы.
[00290] Начальную дозу выбирали на основании экспрессии и безопасности FVIII, наблюдаемых в неклинических испытаниях на мышах и обезьянах. У указанной начальной дозы есть значительный предел безопасности (10-кратный) от уровня дозы, не оказывающей явного нежелательного действия (NOAEL), у не относящихся к человеку приматов.
[00291] Приблизительно через три недели после инъекции будут принимать решение об увеличении дозы до следующего уровня на основании анализа параметров безопасности и активности FVIII. Если активность FVIII ≥ 5 МЕ/дл, то других пациентов данной дозовой группы будут включать в исследование, не ожидая прошествия 3 недель между пациентами.
[00292] Пациенту 1 будут вводить дозу путем внутривенной перфузии 6E12 геномов вектора [вг] на килограмм массы тела. Если уровень активности не достигает ≥5 МЕ/дл через 21 день, то для следующего пациента будут использовать более высокую дозу (2E13 вг на килограмм).
[00293] Если уровень активности не достигает ≥5 МЕ/дл после пациента 2, то для следующего пациента будут использовать наиболее высокую дозу (6E13 вг на килограмм).
[00294] Для каждой дозы, если уровень активности достигает 5 МЕ/дл и если не возникает проблема с безопасностью, то до четырех пациентов получат данную дозу. Если в любое время уровни активности достигают 10 МЕ/дл или более высоких уровней, то не будут дополнительно увеличивать дозу, но дополнительным пациентам затем введут дозу на данном уровне, всего до 6 пациентов на дозу.
[00295] Будут проводить частый контроль ферментов печени у всех пациентов в данном испытании. Будут определять исходные (т.е., перед введением кодирующего FVIII вектора) концентрации аланин-аминотрансферазы (АЛТ), и при повышении концентраций АЛТ после введения в 1,5 раза или более будут начинать прием терапевтического кортикостероида. Пациентов также можно лечить кортикостероидами профилактически (т.е., перед введением кодирующего FVIII вектора) для защиты от гепатотоксичности.
Результаты - пациент один.
[00296] Пациенту один вводили путем однократной внутривенной перфузии дозу 6E12 геномов вектора [вг] ААВ5-FVIII-SQ на килограмм массы тела, как описано выше. На момент введения дозы у пациента один уровень циркулирующего в крови фактора VIII составлял ≤ 0,5 МЕ/дл. Через семь дней после введения дозы у пациента один уровень циркулирующего в крови фактора VIII повысился до 5,4 МЕ/дл и дополнительно повысился до 19,2 МЕ/дл через 14 дней после введения дозы. Через 21 день после введения дозы, тем не менее, у пациента один уровень циркулирующего фактора VIII снизился до ≤ 0,5 МЕ/дл и впоследствии держался постоянно на этом уровне.
Результаты - пациент два.
[00297] Так как уровень активности фактора VIII у пациента один не был по меньшей мере 5 МЕ/дл в день 21 после введения дозы, то пациенту два увеличили дозу путем однократной внутривенной перфузии до 2E13 геномов вектора [вг] ААВ5-FVIII-SQ на килограмм массы тела, как описано выше. На момент введения дозы у пациента два уровень циркулирующего в крови фактора VIII составлял ≤ 0,1 МЕ/дл. Через двадцать один день после введения дозы у пациента два уровень циркулирующего в крови фактора VIII повысился до 0,7 МЕ/дл, до 2,1 МЕ/дл через 10 недель после введения дозы, до 2,4 МЕ/дл через 12 недель после введения дозы, до 1,9 МЕ/дл через 16 недель после введения дозы и до 2,4 МЕ/дл через 28 недель после введения дозы, последняя доза представляет собой по меньшей мере 24-кратное повышение уровня по сравнению с уровнями до введения дозы. Уровни АЛТ, измеренные у пациента два, не повышались до 1,5-кратного или большего уровня, чем исходный, в любой момент времени в течение 28-недельного периода наблюдения и, по этой причине, не начинали лечение кортикостероидами.
Результаты - пациент три.
[00298] Пациенту три увеличили дозу путем однократной внутривенной перфузии до 6E13 геномов вектора [вг] ААВ5-FVIII-SQ на килограмм массы тела, как описано выше. На момент введения дозы у пациента три уровень циркулирующего в крови фактора VIII составлял <1,0 МЕ/дл. Через двадцать один день после введения дозы у пациента три уровень циркулирующего в крови фактора VIII повысился до 3,1 МЕ/дл, до 20,8 МЕ/дл через 10 недель после введения дозы, до 34,7 МЕ/дл через 12 недель после введения дозы, до 56,6 МЕ/дл через 16 недель после введения дозы и до 89,3 МЕ/дл через 28 недель после введения дозы, что было гораздо выше концентрации фактора VIII, необходимой для достаточного свертывания крови у людей и уменьшения времени кровотечения во время эпизода кровотечения у пациента.
[00299] Так как наблюдали, что уровни АЛТ у пациента три повысились в 1,5 раза относительно исходного уровня после введения кодирующего FVIII вектора, то данный субъект получал терапевтическое лечение кортикостероидом при концентрации в диапазоне от 5 мг/день до 60 мг/день на протяжении последующего периода наблюдения. Терапевтическое лечение кортикостероидами снижало связанную с гепатотоксичностью концентрацию АЛТ до приемлемых уровней без сопутствующего снижения уровней фактора VIII или каких-либо сопутствующих тяжелых нежелательных явлений.
Результаты - пациент четыре.
[00300] Пациенту четыре вводили путем однократной внутривенной перфузии дозу 6E13 геномов вектора [вг] ААВ5-FVIII-SQ на килограмм массы тела, как описано выше. На момент введения дозы у пациента четыре уровень циркулирующего в крови фактора VIII составлял <1,0 МЕ/дл. Через двадцать один день после введения дозы у пациента четыре уровень циркулирующего в крови фактора VIII повысился до 5,6 МЕ/дл, до 67,8 МЕ/дл через 10 недель после введения дозы, до 89 МЕ/дл через 12 недель после введения дозы, > 170 МЕ/дл через 16 недель после введения дозы и до 219,2 МЕ/дл через 20 недель после введения дозы, что было гораздо выше концентрации фактора VIII, необходимой для достаточного свертывания крови у людей и уменьшения времени кровотечения во время эпизода кровотечения у пациента.
[00301] Пациента четыре профилактически лечили кортикостероидом при концентрации в диапазоне от 5 мг/день до 40 мг/день на протяжении последующего периода наблюдения. Профилактическое лечение кортикостероидами поддерживало связанные с гепатотоксичностью концентрации АЛТ на приемлемых уровнях без сопутствующего снижения уровней фактора VIII или каких-либо сопутствующих тяжелых нежелательных явлений.
Результаты - пациент пять.
[00302] Пациенту пять вводили путем однократной внутривенной перфузии дозу 6E13 геномов вектора [вг] ААВ5-FVIII-SQ на килограмм массы тела, как описано выше. На момент введения дозы у пациента пять уровень циркулирующего в крови фактора VIII составлял < 1,0 МЕ/дл. Через двадцать один день после введения дозы у пациента пять уровень циркулирующего в крови фактора VIII повысился до 2,2 МЕ/дл, до 24,4 МЕ/дл через 10 недель после введения дозы, до 59,4 МЕ/дл через 12 недель после введения дозы, до 126,5 МЕ/дл через 16 недель после введения дозы и до 271,2 МЕ/дл через 19 недель после введения дозы, что было гораздо выше концентрации фактора VIII, необходимой для достаточного свертывания крови у людей и уменьшения времени кровотечения во время эпизода кровотечения у пациента.
[00303] Пациента пять лечили как профилактически, так и терапевтически кортикостероидом при концентрации в диапазоне от 5 мг/день до 40 мг/день на протяжении последующего периода наблюдения. Профилактическое и терапевтическое лечение кортикостероидами поддерживало связанные с гепатотоксичностью концентрации АЛТ на приемлемых уровнях без сопутствующего снижения уровней фактора VIII или каких-либо сопутствующих тяжелых нежелательных явлений.
Результаты - пациент шесть.
[00304] Пациенту шесть вводили путем однократной внутривенной перфузии дозу 6E13 геномов вектора [вг] ААВ5-FVIII-SQ на килограмм массы тела, как описано выше. На момент введения дозы у пациента шесть уровень циркулирующего в крови фактора VIII составлял < 1,0 МЕ/дл. Через двадцать один день после введения дозы у пациента шесть уровень циркулирующего в крови фактора VIII составлял < 1,0 МЕ/дл, 6,2 МЕ/дл через 10 недель после введения дозы, 19,6 МЕ/дл через 12 недель после введения дозы, 13 МЕ/дл через 16 недель после введения дозы и 13 МЕ/дл через 19 недель после введения дозы, что было гораздо выше концентрации фактора VIII, необходимой для достаточного свертывания крови у людей и уменьшения времени кровотечения во время эпизода кровотечения у пациента.
[00305] Пациент шесть получал терапевтическое лечение кортикостероидом при концентрации в диапазоне от 5 мг/день до 60 мг/день на протяжении последующего периода наблюдения. Терапевтическое лечение кортикостероидами поддерживало связанные с гепатотоксичностью концентрации АЛТ на приемлемых уровнях без сопутствующего снижения уровней фактора VIII или каких-либо сопутствующих тяжелых нежелательных явлений.
Результаты - пациент семь.
[00306] Пациенту семь вводили путем однократной внутривенной перфузии дозу 6E13 геномов вектора [вг] ААВ5-FVIII-SQ на килограмм массы тела, как описано выше. На момент введения дозы у пациента семь уровень циркулирующего в крови фактора VIII составлял < 1,0 МЕ/дл. Через двадцать один день после введения дозы у пациента семь уровень циркулирующего в крови фактора VIII повысился до 10,4 МЕ/дл, до 56,4 МЕ/дл через 10 недель после введения дозы, до 58 МЕ/дл через 12 недель после введения дозы, до 93,1 МЕ/дл через 16 недель после введения дозы и до 135,8 МЕ/дл через 18 недель после введения дозы, что было гораздо выше концентрации фактора VIII, необходимой для достаточного свертывания крови у людей и уменьшения времени кровотечения во время эпизода кровотечения у пациента.
[00307] Пациента семь профилактически лечили кортикостероидом при концентрации в диапазоне от 5 мг/день до 40 мг/день на протяжении последующего периода наблюдения. Профилактическое лечение кортикостероидами поддерживало связанные с гепатотоксичностью концентрации АЛТ на приемлемых уровнях без сопутствующего снижения уровней фактора VIII или каких-либо сопутствующих тяжелых нежелательных явлений.
Результаты - пациент восемь.
[00308] Пациенту восемь вводили путем однократной внутривенной перфузии дозу 6E13 геномов вектора [вг] ААВ5-FVIII-SQ на килограмм массы тела, как описано выше. На момент введения дозы у пациента восемь уровень циркулирующего в крови фактора VIII составлял < 1,0 МЕ/дл. Через двадцать один день после введения дозы у пациента восемь уровень циркулирующего в крови фактора VIII повысился до 5,1 МЕ/дл, до 35,2 МЕ/дл через 10 недель после введения дозы, до 42,7 МЕ/дл через 12 недель после введения дозы, до 49,7 МЕ/дл через 16 недель после введения дозы и до 68,8 МЕ/дл через 17 недель после введения дозы, что было гораздо выше концентрации фактора VIII, необходимой для достаточного свертывания крови у людей и уменьшения времени кровотечения во время эпизода кровотечения у пациента.
[00309] Пациента восемь профилактически лечили кортикостероидом при концентрации в диапазоне от 10 мг/день до 40 мг/день на протяжении последующего периода наблюдения. Профилактическое лечение кортикостероидами поддерживало связанные с гепатотоксичностью концентрации АЛТ на приемлемых уровнях без сопутствующего снижения уровней фактора VIII или каких-либо сопутствующих тяжелых нежелательных явлений.
Результаты - пациент девять.
[00310] Пациенту девять вводили путем однократной внутривенной перфузии дозу 6E13 геномов вектора [вг] ААВ5-FVIII-SQ на килограмм массы тела, как описано выше. На момент введения дозы у пациента девять уровень циркулирующего в крови фактора VIII составлял < 1,0 МЕ/дл. Через двенадцать недель после введения дозы уровень циркулирующего в крови фактора VIII у пациента девять повысился до 78,7 МЕ/дл, что было гораздо выше концентрации фактора VIII, необходимой для достаточного свертывания крови у людей и уменьшения времени кровотечения во время эпизода кровотечения у пациента.
[00311] Пациент девять получал терапевтическое лечение кортикостероидом при концентрации в диапазоне от 10 мг/день до 40 мг/день на протяжении последующего периода наблюдения. Терапевтическое лечение кортикостероидами поддерживало связанные с гепатотоксичностью концентрации АЛТ на приемлемых уровнях без сопутствующего снижения уровней фактора VIII или каких-либо сопутствующих тяжелых нежелательных явлений.
Резюме.
[00312] Результаты, представленные в данном примере 8, демонстрируют, что применяя композиции и способы согласно настоящему изобретению можно добиться успешной терапии гемофилии A у пациентов-людей. В частности, в данной заявке продемонстрировано, что лечение людей, страдающих от гемофилии A, по меньшей мере 2E13 геномами вектора [вг] ААВ5-FVIII-SQ на килограмм массы тела приводит к стабильной активности FVIII ≥ 2 МЕ/дл в течение по меньшей мере 26 недель после введения дозы и что лечение людей, страдающих от гемофилии A, по меньшей мере 6E13 геномами вектора [вг] ААВ5-FVIII-SQ на килограмм массы тела приводит к высокой длительной активности FVIII > 10 МЕ/дл у всех лучивших лечение пациентов. Более того, результаты, представленные в данной заявке, продемонстрировали, что лечение ААВ5-FVIII-SQ хорошо переносится и не приводит к клинически значимым продолжительным подъемам уровней АЛТ или других маркеров гепатотоксичности. Профилактическое и/или терапевтическое лечение пациентов кортикостероидами способно поддерживать связанные с гепатотоксичностью концентрации АЛТ на приемлемых уровнях без сопутствующего снижения уровней фактора VIII или каких-либо сопутствующих тяжелых нежелательных явлений. Наконец, первичные результаты продемонстрировали, что у пациентов, которых лечили кортикостероидами либо профилактически, либо терапевтически, можно успешно постепенно убрать лечение стероидами без нежелательного влияния на уровни экспрессии FVIII или концентрации АЛТ.
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> BIOMARIN PHARMACEUTICAL INC.
Bunting, и др.
<120> КОДИРУЮЩИЕ ФАКТОР FVIII ВЕКТОРЫ НА ОСНОВЕ АДЕНОАССОЦИИРОВАННЫХ ВИРУСОВ,
СООТВЕТСТВУЮЩИЕ ВИРУСНЫЕ ЧАСТИЦЫ И СОДЕРЖАЩИЕ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ
<130> 30610/50068
<160> 44
<170> PatentIn версии 3.5
<210> 1
<211> 4970
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус
<400> 1
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgtttg ctgcttgcaa tgtttgccca ttttagggtg 180
gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg gggcgactca gatcccagcc agtggactta 240
gcccctgttt gctcctccga taactggggt gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc 300
cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa tacggacgag gacagggccc tgtctcctca 360
gcttcaggca ccaccactga cctgggacag tgaatcgcca ccatgcagat tgagctgagc 420
acctgcttct tcctgtgcct gctgaggttc tgcttctctg ccaccaggag atactacctg 480
ggggctgtgg agctgagctg ggactacatg cagtctgacc tgggggagct gcctgtggat 540
gccaggttcc cccccagagt gcccaagagc ttccccttca acacctctgt ggtgtacaag 600
aagaccctgt ttgtggagtt cactgaccac ctgttcaaca ttgccaagcc caggcccccc 660
tggatgggcc tgctgggccc caccatccag gctgaggtgt atgacactgt ggtgatcacc 720
ctgaagaaca tggccagcca ccctgtgagc ctgcatgctg tgggggtgag ctactggaag 780
gcctctgagg gggctgagta tgatgaccag accagccaga gggagaagga ggatgacaag 840
gtgttccctg ggggcagcca cacctatgtg tggcaggtgc tgaaggagaa tggccccatg 900
gcctctgacc ccctgtgcct gacctacagc tacctgagcc atgtggacct ggtgaaggac 960
ctgaactctg gcctgattgg ggccctgctg gtgtgcaggg agggcagcct ggccaaggag 1020
aagacccaga ccctgcacaa gttcatcctg ctgtttgctg tgtttgatga gggcaagagc 1080
tggcactctg aaaccaagaa cagcctgatg caggacaggg atgctgcctc tgccagggcc 1140
tggcccaaga tgcacactgt gaatggctat gtgaacagga gcctgcctgg cctgattggc 1200
tgccacagga agtctgtgta ctggcatgtg attggcatgg gcaccacccc tgaggtgcac 1260
agcatcttcc tggagggcca caccttcctg gtcaggaacc acaggcaggc cagcctggag 1320
atcagcccca tcaccttcct gactgcccag accctgctga tggacctggg ccagttcctg 1380
ctgttctgcc acatcagcag ccaccagcat gatggcatgg aggcctatgt gaaggtggac 1440
agctgccctg aggagcccca gctgaggatg aagaacaatg aggaggctga ggactatgat 1500
gatgacctga ctgactctga gatggatgtg gtgaggtttg atgatgacaa cagccccagc 1560
ttcatccaga tcaggtctgt ggccaagaag caccccaaga cctgggtgca ctacattgct 1620
gctgaggagg aggactggga ctatgccccc ctggtgctgg cccctgatga caggagctac 1680
aagagccagt acctgaacaa tggcccccag aggattggca ggaagtacaa gaaggtcagg 1740
ttcatggcct acactgatga aaccttcaag accagggagg ccatccagca tgagtctggc 1800
atcctgggcc ccctgctgta tggggaggtg ggggacaccc tgctgatcat cttcaagaac 1860
caggccagca ggccctacaa catctacccc catggcatca ctgatgtgag gcccctgtac 1920
agcaggaggc tgcccaaggg ggtgaagcac ctgaaggact tccccatcct gcctggggag 1980
atcttcaagt acaagtggac tgtgactgtg gaggatggcc ccaccaagtc tgaccccagg 2040
tgcctgacca gatactacag cagctttgtg aacatggaga gggacctggc ctctggcctg 2100
attggccccc tgctgatctg ctacaaggag tctgtggacc agaggggcaa ccagatcatg 2160
tctgacaaga ggaatgtgat cctgttctct gtgtttgatg agaacaggag ctggtacctg 2220
actgagaaca tccagaggtt cctgcccaac cctgctgggg tgcagctgga ggaccctgag 2280
ttccaggcca gcaacatcat gcacagcatc aatggctatg tgtttgacag cctgcagctg 2340
tctgtgtgcc tgcatgaggt ggcctactgg tacatcctga gcattggggc ccagactgac 2400
ttcctgtctg tgttcttctc tggctacacc ttcaagcaca agatggtgta tgaggacacc 2460
ctgaccctgt tccccttctc tggggagact gtgttcatga gcatggagaa ccctggcctg 2520
tggattctgg gctgccacaa ctctgacttc aggaacaggg gcatgactgc cctgctgaaa 2580
gtctccagct gtgacaagaa cactggggac tactatgagg acagctatga ggacatctct 2640
gcctacctgc tgagcaagaa caatgccatt gagcccagga gcttcagcca gaacccccca 2700
gtgctgaaga ggcaccagag ggagatcacc aggaccaccc tgcagtctga ccaggaggag 2760
attgactatg atgacaccat ctctgtggag atgaagaagg aggactttga catctacgac 2820
gaggacgaga accagagccc caggagcttc cagaagaaga ccaggcacta cttcattgct 2880
gctgtggaga ggctgtggga ctatggcatg agcagcagcc cccatgtgct gaggaacagg 2940
gcccagtctg gctctgtgcc ccagttcaag aaggtggtgt tccaggagtt cactgatggc 3000
agcttcaccc agcccctgta cagaggggag ctgaatgagc acctgggcct gctgggcccc 3060
tacatcaggg ctgaggtgga ggacaacatc atggtgacct tcaggaacca ggccagcagg 3120
ccctacagct tctacagcag cctgatcagc tatgaggagg accagaggca gggggctgag 3180
cccaggaaga actttgtgaa gcccaatgaa accaagacct acttctggaa ggtgcagcac 3240
cacatggccc ccaccaagga tgagtttgac tgcaaggcct gggcctactt ctctgatgtg 3300
gacctggaga aggatgtgca ctctggcctg attggccccc tgctggtgtg ccacaccaac 3360
accctgaacc ctgcccatgg caggcaggtg actgtgcagg agtttgccct gttcttcacc 3420
atctttgatg aaaccaagag ctggtacttc actgagaaca tggagaggaa ctgcagggcc 3480
ccctgcaaca tccagatgga ggaccccacc ttcaaggaga actacaggtt ccatgccatc 3540
aatggctaca tcatggacac cctgcctggc ctggtgatgg cccaggacca gaggatcagg 3600
tggtacctgc tgagcatggg cagcaatgag aacatccaca gcatccactt ctctggccat 3660
gtgttcactg tgaggaagaa ggaggagtac aagatggccc tgtacaacct gtaccctggg 3720
gtgtttgaga ctgtggagat gctgcccagc aaggctggca tctggagggt ggagtgcctg 3780
attggggagc acctgcatgc tggcatgagc accctgttcc tggtgtacag caacaagtgc 3840
cagacccccc tgggcatggc ctctggccac atcagggact tccagatcac tgcctctggc 3900
cagtatggcc agtgggcccc caagctggcc aggctgcact actctggcag catcaatgcc 3960
tggagcacca aggagccctt cagctggatc aaggtggacc tgctggcccc catgatcatc 4020
catggcatca agacccaggg ggccaggcag aagttcagca gcctgtacat cagccagttc 4080
atcatcatgt acagcctgga tggcaagaag tggcagacct acaggggcaa cagcactggc 4140
accctgatgg tgttctttgg caatgtggac agctctggca tcaagcacaa catcttcaac 4200
ccccccatca ttgccagata catcaggctg caccccaccc actacagcat caggagcacc 4260
ctgaggatgg agctgatggg ctgtgacctg aacagctgca gcatgcccct gggcatggag 4320
agcaaggcca tctctgatgc ccagatcact gccagcagct acttcaccaa catgtttgcc 4380
acctggagcc ccagcaaggc caggctgcac ctgcagggca ggagcaatgc ctggaggccc 4440
caggtcaaca accccaagga gtggctgcag gtggacttcc agaagaccat gaaggtgact 4500
ggggtgacca cccagggggt gaagagcctg ctgaccagca tgtatgtgaa ggagttcctg 4560
atcagcagca gccaggatgg ccaccagtgg accctgttct tccagaatgg caaggtgaag 4620
gtgttccagg gcaaccagga cagcttcacc cctgtggtga acagcctgga cccccccctg 4680
ctgaccagat acctgaggat tcacccccag agctgggtgc accagattgc cctgaggatg 4740
gaggtgctgg gctgtgaggc ccaggacctg tactgaaata aaagatcttt attttcatta 4800
gatctgtgtg ttggtttttt gtgtgaggaa cccctagtga tggagttggc cactccctct 4860
ctgcgcgctc gctcgctcac tgaggccggg cgaccaaagg tcgcccgacg cccgggcttt 4920
gcccgggcgg cctcagtgag cgagcgagcg cgcagagagg gagtggccaa 4970
<210> 2
<211> 4950
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус
<400> 2
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactgtttg ctgcttgcaa tgtttgccca ttttagggtg gacacaggac 180
gctgtggttt ctgagccagg gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt 240
gctcctccga taactggggt gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc 300
ctctggatcc actgcttaaa tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca 360
ccaccactga cctgggacag tgaatcgcca ccatgcagat tgagctgagc acctgcttct 420
tcctgtgcct gctgaggttc tgcttctctg ccaccaggag atactacctg ggggctgtgg 480
agctgagctg ggactacatg cagtctgacc tgggggagct gcctgtggat gccaggttcc 540
cccccagagt gcccaagagc ttccccttca acacctctgt ggtgtacaag aagaccctgt 600
ttgtggagtt cactgaccac ctgttcaaca ttgccaagcc caggcccccc tggatgggcc 660
tgctgggccc caccatccag gctgaggtgt atgacactgt ggtgatcacc ctgaagaaca 720
tggccagcca ccctgtgagc ctgcatgctg tgggggtgag ctactggaag gcctctgagg 780
gggctgagta tgatgaccag accagccaga gggagaagga ggatgacaag gtgttccctg 840
ggggcagcca cacctatgtg tggcaggtgc tgaaggagaa tggccccatg gcctctgacc 900
ccctgtgcct gacctacagc tacctgagcc atgtggacct ggtgaaggac ctgaactctg 960
gcctgattgg ggccctgctg gtgtgcaggg agggcagcct ggccaaggag aagacccaga 1020
ccctgcacaa gttcatcctg ctgtttgctg tgtttgatga gggcaagagc tggcactctg 1080
aaaccaagaa cagcctgatg caggacaggg atgctgcctc tgccagggcc tggcccaaga 1140
tgcacactgt gaatggctat gtgaacagga gcctgcctgg cctgattggc tgccacagga 1200
agtctgtgta ctggcatgtg attggcatgg gcaccacccc tgaggtgcac agcatcttcc 1260
tggagggcca caccttcctg gtcaggaacc acaggcaggc cagcctggag atcagcccca 1320
tcaccttcct gactgcccag accctgctga tggacctggg ccagttcctg ctgttctgcc 1380
acatcagcag ccaccagcat gatggcatgg aggcctatgt gaaggtggac agctgccctg 1440
aggagcccca gctgaggatg aagaacaatg aggaggctga ggactatgat gatgacctga 1500
ctgactctga gatggatgtg gtgaggtttg atgatgacaa cagccccagc ttcatccaga 1560
tcaggtctgt ggccaagaag caccccaaga cctgggtgca ctacattgct gctgaggagg 1620
aggactggga ctatgccccc ctggtgctgg cccctgatga caggagctac aagagccagt 1680
acctgaacaa tggcccccag aggattggca ggaagtacaa gaaggtcagg ttcatggcct 1740
acactgatga aaccttcaag accagggagg ccatccagca tgagtctggc atcctgggcc 1800
ccctgctgta tggggaggtg ggggacaccc tgctgatcat cttcaagaac caggccagca 1860
ggccctacaa catctacccc catggcatca ctgatgtgag gcccctgtac agcaggaggc 1920
tgcccaaggg ggtgaagcac ctgaaggact tccccatcct gcctggggag atcttcaagt 1980
acaagtggac tgtgactgtg gaggatggcc ccaccaagtc tgaccccagg tgcctgacca 2040
gatactacag cagctttgtg aacatggaga gggacctggc ctctggcctg attggccccc 2100
tgctgatctg ctacaaggag tctgtggacc agaggggcaa ccagatcatg tctgacaaga 2160
ggaatgtgat cctgttctct gtgtttgatg agaacaggag ctggtacctg actgagaaca 2220
tccagaggtt cctgcccaac cctgctgggg tgcagctgga ggaccctgag ttccaggcca 2280
gcaacatcat gcacagcatc aatggctatg tgtttgacag cctgcagctg tctgtgtgcc 2340
tgcatgaggt ggcctactgg tacatcctga gcattggggc ccagactgac ttcctgtctg 2400
tgttcttctc tggctacacc ttcaagcaca agatggtgta tgaggacacc ctgaccctgt 2460
tccccttctc tggggagact gtgttcatga gcatggagaa ccctggcctg tggattctgg 2520
gctgccacaa ctctgacttc aggaacaggg gcatgactgc cctgctgaaa gtctccagct 2580
gtgacaagaa cactggggac tactatgagg acagctatga ggacatctct gcctacctgc 2640
tgagcaagaa caatgccatt gagcccagga gcttcagcca gaacccccca gtgctgaaga 2700
ggcaccagag ggagatcacc aggaccaccc tgcagtctga ccaggaggag attgactatg 2760
atgacaccat ctctgtggag atgaagaagg aggactttga catctacgac gaggacgaga 2820
accagagccc caggagcttc cagaagaaga ccaggcacta cttcattgct gctgtggaga 2880
ggctgtggga ctatggcatg agcagcagcc cccatgtgct gaggaacagg gcccagtctg 2940
gctctgtgcc ccagttcaag aaggtggtgt tccaggagtt cactgatggc agcttcaccc 3000
agcccctgta cagaggggag ctgaatgagc acctgggcct gctgggcccc tacatcaggg 3060
ctgaggtgga ggacaacatc atggtgacct tcaggaacca ggccagcagg ccctacagct 3120
tctacagcag cctgatcagc tatgaggagg accagaggca gggggctgag cccaggaaga 3180
actttgtgaa gcccaatgaa accaagacct acttctggaa ggtgcagcac cacatggccc 3240
ccaccaagga tgagtttgac tgcaaggcct gggcctactt ctctgatgtg gacctggaga 3300
aggatgtgca ctctggcctg attggccccc tgctggtgtg ccacaccaac accctgaacc 3360
ctgcccatgg caggcaggtg actgtgcagg agtttgccct gttcttcacc atctttgatg 3420
aaaccaagag ctggtacttc actgagaaca tggagaggaa ctgcagggcc ccctgcaaca 3480
tccagatgga ggaccccacc ttcaaggaga actacaggtt ccatgccatc aatggctaca 3540
tcatggacac cctgcctggc ctggtgatgg cccaggacca gaggatcagg tggtacctgc 3600
tgagcatggg cagcaatgag aacatccaca gcatccactt ctctggccat gtgttcactg 3660
tgaggaagaa ggaggagtac aagatggccc tgtacaacct gtaccctggg gtgtttgaga 3720
ctgtggagat gctgcccagc aaggctggca tctggagggt ggagtgcctg attggggagc 3780
acctgcatgc tggcatgagc accctgttcc tggtgtacag caacaagtgc cagacccccc 3840
tgggcatggc ctctggccac atcagggact tccagatcac tgcctctggc cagtatggcc 3900
agtgggcccc caagctggcc aggctgcact actctggcag catcaatgcc tggagcacca 3960
aggagccctt cagctggatc aaggtggacc tgctggcccc catgatcatc catggcatca 4020
agacccaggg ggccaggcag aagttcagca gcctgtacat cagccagttc atcatcatgt 4080
acagcctgga tggcaagaag tggcagacct acaggggcaa cagcactggc accctgatgg 4140
tgttctttgg caatgtggac agctctggca tcaagcacaa catcttcaac ccccccatca 4200
ttgccagata catcaggctg caccccaccc actacagcat caggagcacc ctgaggatgg 4260
agctgatggg ctgtgacctg aacagctgca gcatgcccct gggcatggag agcaaggcca 4320
tctctgatgc ccagatcact gccagcagct acttcaccaa catgtttgcc acctggagcc 4380
ccagcaaggc caggctgcac ctgcagggca ggagcaatgc ctggaggccc caggtcaaca 4440
accccaagga gtggctgcag gtggacttcc agaagaccat gaaggtgact ggggtgacca 4500
cccagggggt gaagagcctg ctgaccagca tgtatgtgaa ggagttcctg atcagcagca 4560
gccaggatgg ccaccagtgg accctgttct tccagaatgg caaggtgaag gtgttccagg 4620
gcaaccagga cagcttcacc cctgtggtga acagcctgga cccccccctg ctgaccagat 4680
acctgaggat tcacccccag agctgggtgc accagattgc cctgaggatg gaggtgctgg 4740
gctgtgaggc ccaggacctg tactgaaata aaagatcttt attttcatta gatctgtgtg 4800
ttggtttttt gtgtgagtga tggagttggc cactccctct ctgcgcgctc gctcgctcac 4860
tgaggccggg cgaccaaagg tcgcccgacg cccgggcttt gcccgggcgg cctcagtgag 4920
cgagcgagcg cgcagagagg gagtggccaa 4950
<210> 3
<211> 4983
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус
<400> 3
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactgggcg actcagatcc cagccagtgg acttagcccc tgtttgctcc 180
tccgataact ggggtgacct tggttaatat tcaccagcag cctcccccgt tgcccctctg 240
gatccactgc ttaaatacgg acgaggacag ggccctgtct cctcagcttc aggcaccacc 300
actgacctgg gacagtgaat cgccaccatg cagattgagc tgagcacctg cttcttcctg 360
tgcctgctga gattctgctt tagtgccacc agaagatact acctgggtgc agtggaactg 420
tcatgggact atatgcaaag tgatctcggt gagctgcctg tggacgcaag gtaaatgccc 480
taaaatgggc aaacattgca agcagcaaac aacctggctc agaaaccaca gcgtcctgtg 540
tccattctaa tttttccttt cttcacgcag atttcctcct agagtgccaa aatcttttcc 600
attcaacacc tcagtcgtgt acaaaaagac tctgtttgta gaattcacgg atcacctttt 660
caacatcgct aagcccaggc ccccctggat gggcctgctg ggccccacca tccaggctga 720
ggtgtatgac actgtggtga tcaccctgaa gaacatggcc agccaccctg tgagcctgca 780
tgctgtgggg gtgagctact ggaaggcctc tgagggggct gagtatgatg accagaccag 840
ccagagggag aaggaggatg acaaggtgtt ccctgggggc agccacacct atgtgtggca 900
ggtgctgaag gagaatggcc ccatggcctc tgaccccctg tgcctgacct acagctacct 960
gagccatgtg gacctggtga aggacctgaa ctctggcctg attggggccc tgctggtgtg 1020
cagggagggc agcctggcca aggagaagac ccagaccctg cacaagttca tcctgctgtt 1080
tgctgtgttt gatgagggca agagctggca ctctgaaacc aagaacagcc tgatgcagga 1140
cagggatgct gcctctgcca gggcctggcc caagatgcac actgtgaatg gctatgtgaa 1200
caggagcctg cctggcctga ttggctgcca caggaagtct gtgtactggc atgtgattgg 1260
catgggcacc acccctgagg tgcacagcat cttcctggag ggccacacct tcctggtcag 1320
gaaccacagg caggccagcc tggagatcag ccccatcacc ttcctgactg cccagaccct 1380
gctgatggac ctgggccagt tcctgctgtt ctgccacatc agcagccacc agcatgatgg 1440
catggaggcc tatgtgaagg tggacagctg ccctgaggag ccccagctga ggatgaagaa 1500
caatgaggag gctgaggact atgatgatga cctgactgac tctgagatgg atgtggtgag 1560
gtttgatgat gacaacagcc ccagcttcat ccagatcagg tctgtggcca agaagcaccc 1620
caagacctgg gtgcactaca ttgctgctga ggaggaggac tgggactatg cccccctggt 1680
gctggcccct gatgacagga gctacaagag ccagtacctg aacaatggcc cccagaggat 1740
tggcaggaag tacaagaagg tcaggttcat ggcctacact gatgaaacct tcaagaccag 1800
ggaggccatc cagcatgagt ctggcatcct gggccccctg ctgtatgggg aggtggggga 1860
caccctgctg atcatcttca agaaccaggc cagcaggccc tacaacatct acccccatgg 1920
catcactgat gtgaggcccc tgtacagcag gaggctgccc aagggggtga agcacctgaa 1980
ggacttcccc atcctgcctg gggagatctt caagtacaag tggactgtga ctgtggagga 2040
tggccccacc aagtctgacc ccaggtgcct gaccagatac tacagcagct ttgtgaacat 2100
ggagagggac ctggcctctg gcctgattgg ccccctgctg atctgctaca aggagtctgt 2160
ggaccagagg ggcaaccaga tcatgtctga caagaggaat gtgatcctgt tctctgtgtt 2220
tgatgagaac aggagctggt acctgactga gaacatccag aggttcctgc ccaaccctgc 2280
tggggtgcag ctggaggacc ctgagttcca ggccagcaac atcatgcaca gcatcaatgg 2340
ctatgtgttt gacagcctgc agctgtctgt gtgcctgcat gaggtggcct actggtacat 2400
cctgagcatt ggggcccaga ctgacttcct gtctgtgttc ttctctggct acaccttcaa 2460
gcacaagatg gtgtatgagg acaccctgac cctgttcccc ttctctgggg agactgtgtt 2520
catgagcatg gagaaccctg gcctgtggat tctgggctgc cacaactctg acttcaggaa 2580
caggggcatg actgccctgc tgaaagtctc cagctgtgac aagaacactg gggactacta 2640
tgaggacagc tatgaggaca tctctgccta cctgctgagc aagaacaatg ccattgagcc 2700
caggagcttc agccagaacc ccccagtgct gaagaggcac cagagggaga tcaccaggac 2760
caccctgcag tctgaccagg aggagattga ctatgatgac accatctctg tggagatgaa 2820
gaaggaggac tttgacatct acgacgagga cgagaaccag agccccagga gcttccagaa 2880
gaagaccagg cactacttca ttgctgctgt ggagaggctg tgggactatg gcatgagcag 2940
cagcccccat gtgctgagga acagggccca gtctggctct gtgccccagt tcaagaaggt 3000
ggtgttccag gagttcactg atggcagctt cacccagccc ctgtacagag gggagctgaa 3060
tgagcacctg ggcctgctgg gcccctacat cagggctgag gtggaggaca acatcatggt 3120
gaccttcagg aaccaggcca gcaggcccta cagcttctac agcagcctga tcagctatga 3180
ggaggaccag aggcaggggg ctgagcccag gaagaacttt gtgaagccca atgaaaccaa 3240
gacctacttc tggaaggtgc agcaccacat ggcccccacc aaggatgagt ttgactgcaa 3300
ggcctgggcc tacttctctg atgtggacct ggagaaggat gtgcactctg gcctgattgg 3360
ccccctgctg gtgtgccaca ccaacaccct gaaccctgcc catggcaggc aggtgactgt 3420
gcaggagttt gccctgttct tcaccatctt tgatgaaacc aagagctggt acttcactga 3480
gaacatggag aggaactgca gggccccctg caacatccag atggaggacc ccaccttcaa 3540
ggagaactac aggttccatg ccatcaatgg ctacatcatg gacaccctgc ctggcctggt 3600
gatggcccag gaccagagga tcaggtggta cctgctgagc atgggcagca atgagaacat 3660
ccacagcatc cacttctctg gccatgtgtt cactgtgagg aagaaggagg agtacaagat 3720
ggccctgtac aacctgtacc ctggggtgtt tgagactgtg gagatgctgc ccagcaaggc 3780
tggcatctgg agggtggagt gcctgattgg ggagcacctg catgctggca tgagcaccct 3840
gttcctggtg tacagcaaca agtgccagac ccccctgggc atggcctctg gccacatcag 3900
ggacttccag atcactgcct ctggccagta tggccagtgg gcccccaagc tggccaggct 3960
gcactactct ggcagcatca atgcctggag caccaaggag cccttcagct ggatcaaggt 4020
ggacctgctg gcccccatga tcatccatgg catcaagacc cagggggcca ggcagaagtt 4080
cagcagcctg tacatcagcc agttcatcat catgtacagc ctggatggca agaagtggca 4140
gacctacagg ggcaacagca ctggcaccct gatggtgttc tttggcaatg tggacagctc 4200
tggcatcaag cacaacatct tcaacccccc catcattgcc agatacatca ggctgcaccc 4260
cacccactac agcatcagga gcaccctgag gatggagctg atgggctgtg acctgaacag 4320
ctgcagcatg cccctgggca tggagagcaa ggccatctct gatgcccaga tcactgccag 4380
cagctacttc accaacatgt ttgccacctg gagccccagc aaggccaggc tgcacctgca 4440
gggcaggagc aatgcctgga ggccccaggt caacaacccc aaggagtggc tgcaggtgga 4500
cttccagaag accatgaagg tgactggggt gaccacccag ggggtgaaga gcctgctgac 4560
cagcatgtat gtgaaggagt tcctgatcag cagcagccag gatggccacc agtggaccct 4620
gttcttccag aatggcaagg tgaaggtgtt ccagggcaac caggacagct tcacccctgt 4680
ggtgaacagc ctggaccccc ccctgctgac cagatacctg aggattcacc cccagagctg 4740
ggtgcaccag attgccctga ggatggaggt gctgggctgt gaggcccagg acctgtacta 4800
ataaaagatc tttattttca ttagatctgt gtgttggttt tttgtgtgag tgatggagtt 4860
ggccactccc tctctgcgcg ctcgctcgct cactgaggcc gggcgaccaa aggtcgcccg 4920
acgcccgggc tttgcccggg cggcctcagt gagcgagcga gcgcgcagag agggagtggc 4980
caa 4983
<210> 4
<211> 4984
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус
<400> 4
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactgggcg actcagatcc cagccagtgg acttagcccc tgtttgctcc 180
tccgataact ggggtgacct tggttaatat tcaccagcag cctcccccgt tgcccctctg 240
gatccactgc ttaaatacgg acgaggacag ggccctgtct cctcagcttc aggcaccacc 300
actgacctgg gacagtgaat cgccaccatg cagattgagc tgagcacctg cttcttcctg 360
tgcctgctga gattctgctt tagtgccacc agaagatact acctgggtgc agtggaactg 420
tcatgggact atatgcaaag tgatctcggt gagctgcctg tggacgcaag gtaaatgccc 480
taaaatgggc aaacattgca agcagcaaac accctaaaat gggcaaacat tgcaagcagc 540
aaacattcta atttttcctt tcttcacgca gatttcctcc tagagtgcca aaatcttttc 600
cattcaacac ctcagtcgtg tacaaaaaga ctctgtttgt agaattcacg gatcaccttt 660
tcaacatcgc taagcccagg cccccctgga tgggcctgct gggccccacc atccaggctg 720
aggtgtatga cactgtggtg atcaccctga agaacatggc cagccaccct gtgagcctgc 780
atgctgtggg ggtgagctac tggaaggcct ctgagggggc tgagtatgat gaccagacca 840
gccagaggga gaaggaggat gacaaggtgt tccctggggg cagccacacc tatgtgtggc 900
aggtgctgaa ggagaatggc cccatggcct ctgaccccct gtgcctgacc tacagctacc 960
tgagccatgt ggacctggtg aaggacctga actctggcct gattggggcc ctgctggtgt 1020
gcagggaggg cagcctggcc aaggagaaga cccagaccct gcacaagttc atcctgctgt 1080
ttgctgtgtt tgatgagggc aagagctggc actctgaaac caagaacagc ctgatgcagg 1140
acagggatgc tgcctctgcc agggcctggc ccaagatgca cactgtgaat ggctatgtga 1200
acaggagcct gcctggcctg attggctgcc acaggaagtc tgtgtactgg catgtgattg 1260
gcatgggcac cacccctgag gtgcacagca tcttcctgga gggccacacc ttcctggtca 1320
ggaaccacag gcaggccagc ctggagatca gccccatcac cttcctgact gcccagaccc 1380
tgctgatgga cctgggccag ttcctgctgt tctgccacat cagcagccac cagcatgatg 1440
gcatggaggc ctatgtgaag gtggacagct gccctgagga gccccagctg aggatgaaga 1500
acaatgagga ggctgaggac tatgatgatg acctgactga ctctgagatg gatgtggtga 1560
ggtttgatga tgacaacagc cccagcttca tccagatcag gtctgtggcc aagaagcacc 1620
ccaagacctg ggtgcactac attgctgctg aggaggagga ctgggactat gcccccctgg 1680
tgctggcccc tgatgacagg agctacaaga gccagtacct gaacaatggc ccccagagga 1740
ttggcaggaa gtacaagaag gtcaggttca tggcctacac tgatgaaacc ttcaagacca 1800
gggaggccat ccagcatgag tctggcatcc tgggccccct gctgtatggg gaggtggggg 1860
acaccctgct gatcatcttc aagaaccagg ccagcaggcc ctacaacatc tacccccatg 1920
gcatcactga tgtgaggccc ctgtacagca ggaggctgcc caagggggtg aagcacctga 1980
aggacttccc catcctgcct ggggagatct tcaagtacaa gtggactgtg actgtggagg 2040
atggccccac caagtctgac cccaggtgcc tgaccagata ctacagcagc tttgtgaaca 2100
tggagaggga cctggcctct ggcctgattg gccccctgct gatctgctac aaggagtctg 2160
tggaccagag gggcaaccag atcatgtctg acaagaggaa tgtgatcctg ttctctgtgt 2220
ttgatgagaa caggagctgg tacctgactg agaacatcca gaggttcctg cccaaccctg 2280
ctggggtgca gctggaggac cctgagttcc aggccagcaa catcatgcac agcatcaatg 2340
gctatgtgtt tgacagcctg cagctgtctg tgtgcctgca tgaggtggcc tactggtaca 2400
tcctgagcat tggggcccag actgacttcc tgtctgtgtt cttctctggc tacaccttca 2460
agcacaagat ggtgtatgag gacaccctga ccctgttccc cttctctggg gagactgtgt 2520
tcatgagcat ggagaaccct ggcctgtgga ttctgggctg ccacaactct gacttcagga 2580
acaggggcat gactgccctg ctgaaagtct ccagctgtga caagaacact ggggactact 2640
atgaggacag ctatgaggac atctctgcct acctgctgag caagaacaat gccattgagc 2700
ccaggagctt cagccagaac cccccagtgc tgaagaggca ccagagggag atcaccagga 2760
ccaccctgca gtctgaccag gaggagattg actatgatga caccatctct gtggagatga 2820
agaaggagga ctttgacatc tacgacgagg acgagaacca gagccccagg agcttccaga 2880
agaagaccag gcactacttc attgctgctg tggagaggct gtgggactat ggcatgagca 2940
gcagccccca tgtgctgagg aacagggccc agtctggctc tgtgccccag ttcaagaagg 3000
tggtgttcca ggagttcact gatggcagct tcacccagcc cctgtacaga ggggagctga 3060
atgagcacct gggcctgctg ggcccctaca tcagggctga ggtggaggac aacatcatgg 3120
tgaccttcag gaaccaggcc agcaggccct acagcttcta cagcagcctg atcagctatg 3180
aggaggacca gaggcagggg gctgagccca ggaagaactt tgtgaagccc aatgaaacca 3240
agacctactt ctggaaggtg cagcaccaca tggcccccac caaggatgag tttgactgca 3300
aggcctgggc ctacttctct gatgtggacc tggagaagga tgtgcactct ggcctgattg 3360
gccccctgct ggtgtgccac accaacaccc tgaaccctgc ccatggcagg caggtgactg 3420
tgcaggagtt tgccctgttc ttcaccatct ttgatgaaac caagagctgg tacttcactg 3480
agaacatgga gaggaactgc agggccccct gcaacatcca gatggaggac cccaccttca 3540
aggagaacta caggttccat gccatcaatg gctacatcat ggacaccctg cctggcctgg 3600
tgatggccca ggaccagagg atcaggtggt acctgctgag catgggcagc aatgagaaca 3660
tccacagcat ccacttctct ggccatgtgt tcactgtgag gaagaaggag gagtacaaga 3720
tggccctgta caacctgtac cctggggtgt ttgagactgt ggagatgctg cccagcaagg 3780
ctggcatctg gagggtggag tgcctgattg gggagcacct gcatgctggc atgagcaccc 3840
tgttcctggt gtacagcaac aagtgccaga cccccctggg catggcctct ggccacatca 3900
gggacttcca gatcactgcc tctggccagt atggccagtg ggcccccaag ctggccaggc 3960
tgcactactc tggcagcatc aatgcctgga gcaccaagga gcccttcagc tggatcaagg 4020
tggacctgct ggcccccatg atcatccatg gcatcaagac ccagggggcc aggcagaagt 4080
tcagcagcct gtacatcagc cagttcatca tcatgtacag cctggatggc aagaagtggc 4140
agacctacag gggcaacagc actggcaccc tgatggtgtt ctttggcaat gtggacagct 4200
ctggcatcaa gcacaacatc ttcaaccccc ccatcattgc cagatacatc aggctgcacc 4260
ccacccacta cagcatcagg agcaccctga ggatggagct gatgggctgt gacctgaaca 4320
gctgcagcat gcccctgggc atggagagca aggccatctc tgatgcccag atcactgcca 4380
gcagctactt caccaacatg tttgccacct ggagccccag caaggccagg ctgcacctgc 4440
agggcaggag caatgcctgg aggccccagg tcaacaaccc caaggagtgg ctgcaggtgg 4500
acttccagaa gaccatgaag gtgactgggg tgaccaccca gggggtgaag agcctgctga 4560
ccagcatgta tgtgaaggag ttcctgatca gcagcagcca ggatggccac cagtggaccc 4620
tgttcttcca gaatggcaag gtgaaggtgt tccagggcaa ccaggacagc ttcacccctg 4680
tggtgaacag cctggacccc cccctgctga ccagatacct gaggattcac ccccagagct 4740
gggtgcacca gattgccctg aggatggagg tgctgggctg tgaggcccag gacctgtact 4800
aataaaagat ctttattttc attagatctg tgtgttggtt ttttgtgtga gtgatggagt 4860
tggccactcc ctctctgcgc gctcgctcgc tcactgaggc cgggcgacca aaggtcgccc 4920
gacgcccggg ctttgcccgg gcggcctcag tgagcgagcg agcgcgcaga gagggagtgg 4980
ccaa 4984
<210> 5
<211> 4805
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус
<400> 5
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgtttg ctgcttgcaa tgtttgccca ttttagggtg 180
gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg gggcgactca gatcccagcc agtggactta 240
gcccctgttt gctcctccga taactggggt gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc 300
cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa tacggacgag gacagggccc tgtctcctca 360
gcttcaggca ccaccactga cctgggacag tgaatcgcca ccatgcagat tgagctgagc 420
acctgcttct tcctgtgcct gctgaggttc tgcttctctg ccaccaggag atactacctg 480
ggggctgtgg agctgagctg ggactacatg cagtctgacc tgggggagct gcctgtggat 540
gccaggttcc cccccagagt gcccaagagc ttccccttca acacctctgt ggtgtacaag 600
aagaccctgt ttgtggagtt cactgaccac ctgttcaaca ttgccaagcc caggcccccc 660
tggatgggcc tgctgggccc caccatccag gctgaggtgt atgacactgt ggtgatcacc 720
ctgaagaaca tggccagcca ccctgtgagc ctgcatgctg tgggggtgag ctactggaag 780
gcctctgagg gggctgagta tgatgaccag accagccaga gggagaagga ggatgacaag 840
gtgttccctg ggggcagcca cacctatgtg tggcaggtgc tgaaggagaa tggccccatg 900
gcctctgacc ccctgtgcct gacctacagc tacctgagcc atgtggacct ggtgaaggac 960
ctgaactctg gcctgattgg ggccctgctg gtgtgcaggg agggcagcct ggccaaggag 1020
aagacccaga ccctgcacaa gttcatcctg ctgtttgctg tgtttgatga gggcaagagc 1080
tggcactctg aaaccaagaa cagcctgatg caggacaggg atgctgcctc tgccagggcc 1140
tggcccaaga tgcacactgt gaatggctat gtgaacagga gcctgcctgg cctgattggc 1200
tgccacagga agtctgtgta ctggcatgtg attggcatgg gcaccacccc tgaggtgcac 1260
agcatcttcc tggagggcca caccttcctg gtcaggaacc acaggcaggc cagcctggag 1320
atcagcccca tcaccttcct gactgcccag accctgctga tggacctggg ccagttcctg 1380
ctgttctgcc acatcagcag ccaccagcat gatggcatgg aggcctatgt gaaggtggac 1440
agctgccctg aggagcccca gctgaggatg aagaacaatg aggaggctga ggactatgat 1500
gatgacctga ctgactctga gatggatgtg gtgaggtttg atgatgacaa cagccccagc 1560
ttcatccaga tcaggtctgt ggccaagaag caccccaaga cctgggtgca ctacattgct 1620
gctgaggagg aggactggga ctatgccccc ctggtgctgg cccctgatga caggagctac 1680
aagagccagt acctgaacaa tggcccccag aggattggca ggaagtacaa gaaggtcagg 1740
ttcatggcct acactgatga aaccttcaag accagggagg ccatccagca tgagtctggc 1800
atcctgggcc ccctgctgta tggggaggtg ggggacaccc tgctgatcat cttcaagaac 1860
caggccagca ggccctacaa catctacccc catggcatca ctgatgtgag gcccctgtac 1920
agcaggaggc tgcccaaggg ggtgaagcac ctgaaggact tccccatcct gcctggggag 1980
atcttcaagt acaagtggac tgtgactgtg gaggatggcc ccaccaagtc tgaccccagg 2040
tgcctgacca gatactacag cagctttgtg aacatggaga gggacctggc ctctggcctg 2100
attggccccc tgctgatctg ctacaaggag tctgtggacc agaggggcaa ccagatcatg 2160
tctgacaaga ggaatgtgat cctgttctct gtgtttgatg agaacaggag ctggtacctg 2220
actgagaaca tccagaggtt cctgcccaac cctgctgggg tgcagctgga ggaccctgag 2280
ttccaggcca gcaacatcat gcacagcatc aatggctatg tgtttgacag cctgcagctg 2340
tctgtgtgcc tgcatgaggt ggcctactgg tacatcctga gcattggggc ccagactgac 2400
ttcctgtctg tgttcttctc tggctacacc ttcaagcaca agatggtgta tgaggacacc 2460
ctgaccctgt tccccttctc tggggagact gtgttcatga gcatggagaa ccctggcctg 2520
tggattctgg gctgccacaa ctctgacttc aggaacaggg gcatgactgc cctgctgaaa 2580
gtctccagct gtgacaagaa cactggggac tactatgagg acagctatga ggacatctct 2640
gcctacctgc tgagcaagaa caatgccatt gagcccagga gcttccagaa gaagaccagg 2700
cactacttca ttgctgctgt ggagaggctg tgggactatg gcatgagcag cagcccccat 2760
gtgctgagga acagggccca gtctggctct gtgccccagt tcaagaaggt ggtgttccag 2820
gagttcactg atggcagctt cacccagccc ctgtacagag gggagctgaa tgagcacctg 2880
ggcctgctgg gcccctacat cagggctgag gtggaggaca acatcatggt gaccttcagg 2940
aaccaggcca gcaggcccta cagcttctac agcagcctga tcagctatga ggaggaccag 3000
aggcaggggg ctgagcccag gaagaacttt gtgaagccca atgaaaccaa gacctacttc 3060
tggaaggtgc agcaccacat ggcccccacc aaggatgagt ttgactgcaa ggcctgggcc 3120
tacttctctg atgtggacct ggagaaggat gtgcactctg gcctgattgg ccccctgctg 3180
gtgtgccaca ccaacaccct gaaccctgcc catggcaggc aggtgactgt gcaggagttt 3240
gccctgttct tcaccatctt tgatgaaacc aagagctggt acttcactga gaacatggag 3300
aggaactgca gggccccctg caacatccag atggaggacc ccaccttcaa ggagaactac 3360
aggttccatg ccatcaatgg ctacatcatg gacaccctgc ctggcctggt gatggcccag 3420
gaccagagga tcaggtggta cctgctgagc atgggcagca atgagaacat ccacagcatc 3480
cacttctctg gccatgtgtt cactgtgagg aagaaggagg agtacaagat ggccctgtac 3540
aacctgtacc ctggggtgtt tgagactgtg gagatgctgc ccagcaaggc tggcatctgg 3600
agggtggagt gcctgattgg ggagcacctg catgctggca tgagcaccct gttcctggtg 3660
tacagcaaca agtgccagac ccccctgggc atggcctctg gccacatcag ggacttccag 3720
atcactgcct ctggccagta tggccagtgg gcccccaagc tggccaggct gcactactct 3780
ggcagcatca atgcctggag caccaaggag cccttcagct ggatcaaggt ggacctgctg 3840
gcccccatga tcatccatgg catcaagacc cagggggcca ggcagaagtt cagcagcctg 3900
tacatcagcc agttcatcat catgtacagc ctggatggca agaagtggca gacctacagg 3960
ggcaacagca ctggcaccct gatggtgttc tttggcaatg tggacagctc tggcatcaag 4020
cacaacatct tcaacccccc catcattgcc agatacatca ggctgcaccc cacccactac 4080
agcatcagga gcaccctgag gatggagctg atgggctgtg acctgaacag ctgcagcatg 4140
cccctgggca tggagagcaa ggccatctct gatgcccaga tcactgccag cagctacttc 4200
accaacatgt ttgccacctg gagccccagc aaggccaggc tgcacctgca gggcaggagc 4260
aatgcctgga ggccccaggt caacaacccc aaggagtggc tgcaggtgga cttccagaag 4320
accatgaagg tgactggggt gaccacccag ggggtgaaga gcctgctgac cagcatgtat 4380
gtgaaggagt tcctgatcag cagcagccag gatggccacc agtggaccct gttcttccag 4440
aatggcaagg tgaaggtgtt ccagggcaac caggacagct tcacccctgt ggtgaacagc 4500
ctggaccccc ccctgctgac cagatacctg aggattcacc cccagagctg ggtgcaccag 4560
attgccctga ggatggaggt gctgggctgt gaggcccagg acctgtactg aaataaaaga 4620
tctttatttt cattagatct gtgtgttggt tttttgtgtg aggaacccct agtgatggag 4680
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgggcgacc aaaggtcgcc 4740
cgacgcccgg gctttgcccg ggcggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 4800
gccaa 4805
<210> 6
<211> 4934
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус
<400> 6
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgtttg ctgcttgcaa tgtttgccca ttttagggtg 180
gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg gggcgactca gatcccagcc agtggactta 240
gcccctgttt gctcctccga taactggggt gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc 300
cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa tacggacgag gacagggccc tgtctcctca 360
gcttcaggca ccaccactga cctgggacag tgaatcgcca ccatgcagat tgagctgagc 420
acctgcttct tcctgtgcct gctgagattc tgctttagtg ccaccagaag atactacctg 480
ggtgcagtgg aactgtcatg ggactatatg caaagtgatc tcggtgagct gcctgtggac 540
gcaaggtaaa ggcatgtcct gtagggtctg atcggggcca ggattgtggg gatgtaagtc 600
tgcttggagg aaggtgcaga catcgggtta ggatggttgt gatgctattc tgactttttc 660
ctttcttcac gcagatttcc tcctagagtg ccaaaatctt ttccattcaa cacctcagtc 720
gtgtacaaaa agactctgtt tgtagaattc acggatcacc ttttcaacat cgctaagccc 780
aggcccccct ggatgggcct gctgggcccc accatccagg ctgaggtgta tgacactgtg 840
gtgatcaccc tgaagaacat ggccagccac cctgtgagcc tgcatgctgt gggggtgagc 900
tactggaagg cctctgaggg ggctgagtat gatgaccaga ccagccagag ggagaaggag 960
gatgacaagg tgttccctgg gggcagccac acctatgtgt ggcaggtgct gaaggagaat 1020
ggccccatgg cctctgaccc cctgtgcctg acctacagct acctgagcca tgtggacctg 1080
gtgaaggacc tgaactctgg cctgattggg gccctgctgg tgtgcaggga gggcagcctg 1140
gccaaggaga agacccagac cctgcacaag ttcatcctgc tgtttgctgt gtttgatgag 1200
ggcaagagct ggcactctga aaccaagaac agcctgatgc aggacaggga tgctgcctct 1260
gccagggcct ggcccaagat gcacactgtg aatggctatg tgaacaggag cctgcctggc 1320
ctgattggct gccacaggaa gtctgtgtac tggcatgtga ttggcatggg caccacccct 1380
gaggtgcaca gcatcttcct ggagggccac accttcctgg tcaggaacca caggcaggcc 1440
agcctggaga tcagccccat caccttcctg actgcccaga ccctgctgat ggacctgggc 1500
cagttcctgc tgttctgcca catcagcagc caccagcatg atggcatgga ggcctatgtg 1560
aaggtggaca gctgccctga ggagccccag ctgaggatga agaacaatga ggaggctgag 1620
gactatgatg atgacctgac tgactctgag atggatgtgg tgaggtttga tgatgacaac 1680
agccccagct tcatccagat caggtctgtg gccaagaagc accccaagac ctgggtgcac 1740
tacattgctg ctgaggagga ggactgggac tatgcccccc tggtgctggc ccctgatgac 1800
aggagctaca agagccagta cctgaacaat ggcccccaga ggattggcag gaagtacaag 1860
aaggtcaggt tcatggccta cactgatgaa accttcaaga ccagggaggc catccagcat 1920
gagtctggca tcctgggccc cctgctgtat ggggaggtgg gggacaccct gctgatcatc 1980
ttcaagaacc aggccagcag gccctacaac atctaccccc atggcatcac tgatgtgagg 2040
cccctgtaca gcaggaggct gcccaagggg gtgaagcacc tgaaggactt ccccatcctg 2100
cctggggaga tcttcaagta caagtggact gtgactgtgg aggatggccc caccaagtct 2160
gaccccaggt gcctgaccag atactacagc agctttgtga acatggagag ggacctggcc 2220
tctggcctga ttggccccct gctgatctgc tacaaggagt ctgtggacca gaggggcaac 2280
cagatcatgt ctgacaagag gaatgtgatc ctgttctctg tgtttgatga gaacaggagc 2340
tggtacctga ctgagaacat ccagaggttc ctgcccaacc ctgctggggt gcagctggag 2400
gaccctgagt tccaggccag caacatcatg cacagcatca atggctatgt gtttgacagc 2460
ctgcagctgt ctgtgtgcct gcatgaggtg gcctactggt acatcctgag cattggggcc 2520
cagactgact tcctgtctgt gttcttctct ggctacacct tcaagcacaa gatggtgtat 2580
gaggacaccc tgaccctgtt ccccttctct ggggagactg tgttcatgag catggagaac 2640
cctggcctgt ggattctggg ctgccacaac tctgacttca ggaacagggg catgactgcc 2700
ctgctgaaag tctccagctg tgacaagaac actggggact actatgagga cagctatgag 2760
gacatctctg cctacctgct gagcaagaac aatgccattg agcccaggag cttccagaag 2820
aagaccaggc actacttcat tgctgctgtg gagaggctgt gggactatgg catgagcagc 2880
agcccccatg tgctgaggaa cagggcccag tctggctctg tgccccagtt caagaaggtg 2940
gtgttccagg agttcactga tggcagcttc acccagcccc tgtacagagg ggagctgaat 3000
gagcacctgg gcctgctggg cccctacatc agggctgagg tggaggacaa catcatggtg 3060
accttcagga accaggccag caggccctac agcttctaca gcagcctgat cagctatgag 3120
gaggaccaga ggcagggggc tgagcccagg aagaactttg tgaagcccaa tgaaaccaag 3180
acctacttct ggaaggtgca gcaccacatg gcccccacca aggatgagtt tgactgcaag 3240
gcctgggcct acttctctga tgtggacctg gagaaggatg tgcactctgg cctgattggc 3300
cccctgctgg tgtgccacac caacaccctg aaccctgccc atggcaggca ggtgactgtg 3360
caggagtttg ccctgttctt caccatcttt gatgaaacca agagctggta cttcactgag 3420
aacatggaga ggaactgcag ggccccctgc aacatccaga tggaggaccc caccttcaag 3480
gagaactaca ggttccatgc catcaatggc tacatcatgg acaccctgcc tggcctggtg 3540
atggcccagg accagaggat caggtggtac ctgctgagca tgggcagcaa tgagaacatc 3600
cacagcatcc acttctctgg ccatgtgttc actgtgagga agaaggagga gtacaagatg 3660
gccctgtaca acctgtaccc tggggtgttt gagactgtgg agatgctgcc cagcaaggct 3720
ggcatctgga gggtggagtg cctgattggg gagcacctgc atgctggcat gagcaccctg 3780
ttcctggtgt acagcaacaa gtgccagacc cccctgggca tggcctctgg ccacatcagg 3840
gacttccaga tcactgcctc tggccagtat ggccagtggg cccccaagct ggccaggctg 3900
cactactctg gcagcatcaa tgcctggagc accaaggagc ccttcagctg gatcaaggtg 3960
gacctgctgg cccccatgat catccatggc atcaagaccc agggggccag gcagaagttc 4020
agcagcctgt acatcagcca gttcatcatc atgtacagcc tggatggcaa gaagtggcag 4080
acctacaggg gcaacagcac tggcaccctg atggtgttct ttggcaatgt ggacagctct 4140
ggcatcaagc acaacatctt caaccccccc atcattgcca gatacatcag gctgcacccc 4200
acccactaca gcatcaggag caccctgagg atggagctga tgggctgtga cctgaacagc 4260
tgcagcatgc ccctgggcat ggagagcaag gccatctctg atgcccagat cactgccagc 4320
agctacttca ccaacatgtt tgccacctgg agccccagca aggccaggct gcacctgcag 4380
ggcaggagca atgcctggag gccccaggtc aacaacccca aggagtggct gcaggtggac 4440
ttccagaaga ccatgaaggt gactggggtg accacccagg gggtgaagag cctgctgacc 4500
agcatgtatg tgaaggagtt cctgatcagc agcagccagg atggccacca gtggaccctg 4560
ttcttccaga atggcaaggt gaaggtgttc cagggcaacc aggacagctt cacccctgtg 4620
gtgaacagcc tggacccccc cctgctgacc agatacctga ggattcaccc ccagagctgg 4680
gtgcaccaga ttgccctgag gatggaggtg ctgggctgtg aggcccagga cctgtactga 4740
aataaaagat ctttattttc attagatctg tgtgttggtt ttttgtgtga ggaaccccta 4800
gtgatggagt tggccactcc ctctctgcgc gctcgctcgc tcactgaggc cgggcgacca 4860
aaggtcgccc gacgcccggg ctttgcccgg gcggcctcag tgagcgagcg agcgcgcaga 4920
gagggagtgg ccaa 4934
<210> 7
<211> 4934
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус
<400> 7
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgtttg ctgcttgcaa tgtttgccca ttttagggtg 180
gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg gggcgactca gatcccagcc agtggactta 240
gcccctgttt gctcctccga taactggggt gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc 300
cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa tacggacgag gacagggccc tgtctcctca 360
gcttcaggca ccaccactga cctgggacag tgaatcgcca ccatgcagat tgagctgagc 420
acctgcttct tcctgtgcct gctgagattc tgctttagtg ccaccagaag atactacctg 480
ggtgcagtgg aactgtcatg ggactatatg caaagtgatc tcggtgagct gcctgtggac 540
gcaaggtaaa ggctgtttgc tgcttgcaat gtttgcccat tttagggggg gatgtaagtc 600
tgcttggagg aaggtgcaga catcgggtta ggatggttgt gatgctattc tgactttttc 660
ctttcttcac gcagatttcc tcctagagtg ccaaaatctt ttccattcaa cacctcagtc 720
gtgtacaaaa agactctgtt tgtagaattc acggatcacc ttttcaacat cgctaagccc 780
aggcccccct ggatgggcct gctgggcccc accatccagg ctgaggtgta tgacactgtg 840
gtgatcaccc tgaagaacat ggccagccac cctgtgagcc tgcatgctgt gggggtgagc 900
tactggaagg cctctgaggg ggctgagtat gatgaccaga ccagccagag ggagaaggag 960
gatgacaagg tgttccctgg gggcagccac acctatgtgt ggcaggtgct gaaggagaat 1020
ggccccatgg cctctgaccc cctgtgcctg acctacagct acctgagcca tgtggacctg 1080
gtgaaggacc tgaactctgg cctgattggg gccctgctgg tgtgcaggga gggcagcctg 1140
gccaaggaga agacccagac cctgcacaag ttcatcctgc tgtttgctgt gtttgatgag 1200
ggcaagagct ggcactctga aaccaagaac agcctgatgc aggacaggga tgctgcctct 1260
gccagggcct ggcccaagat gcacactgtg aatggctatg tgaacaggag cctgcctggc 1320
ctgattggct gccacaggaa gtctgtgtac tggcatgtga ttggcatggg caccacccct 1380
gaggtgcaca gcatcttcct ggagggccac accttcctgg tcaggaacca caggcaggcc 1440
agcctggaga tcagccccat caccttcctg actgcccaga ccctgctgat ggacctgggc 1500
cagttcctgc tgttctgcca catcagcagc caccagcatg atggcatgga ggcctatgtg 1560
aaggtggaca gctgccctga ggagccccag ctgaggatga agaacaatga ggaggctgag 1620
gactatgatg atgacctgac tgactctgag atggatgtgg tgaggtttga tgatgacaac 1680
agccccagct tcatccagat caggtctgtg gccaagaagc accccaagac ctgggtgcac 1740
tacattgctg ctgaggagga ggactgggac tatgcccccc tggtgctggc ccctgatgac 1800
aggagctaca agagccagta cctgaacaat ggcccccaga ggattggcag gaagtacaag 1860
aaggtcaggt tcatggccta cactgatgaa accttcaaga ccagggaggc catccagcat 1920
gagtctggca tcctgggccc cctgctgtat ggggaggtgg gggacaccct gctgatcatc 1980
ttcaagaacc aggccagcag gccctacaac atctaccccc atggcatcac tgatgtgagg 2040
cccctgtaca gcaggaggct gcccaagggg gtgaagcacc tgaaggactt ccccatcctg 2100
cctggggaga tcttcaagta caagtggact gtgactgtgg aggatggccc caccaagtct 2160
gaccccaggt gcctgaccag atactacagc agctttgtga acatggagag ggacctggcc 2220
tctggcctga ttggccccct gctgatctgc tacaaggagt ctgtggacca gaggggcaac 2280
cagatcatgt ctgacaagag gaatgtgatc ctgttctctg tgtttgatga gaacaggagc 2340
tggtacctga ctgagaacat ccagaggttc ctgcccaacc ctgctggggt gcagctggag 2400
gaccctgagt tccaggccag caacatcatg cacagcatca atggctatgt gtttgacagc 2460
ctgcagctgt ctgtgtgcct gcatgaggtg gcctactggt acatcctgag cattggggcc 2520
cagactgact tcctgtctgt gttcttctct ggctacacct tcaagcacaa gatggtgtat 2580
gaggacaccc tgaccctgtt ccccttctct ggggagactg tgttcatgag catggagaac 2640
cctggcctgt ggattctggg ctgccacaac tctgacttca ggaacagggg catgactgcc 2700
ctgctgaaag tctccagctg tgacaagaac actggggact actatgagga cagctatgag 2760
gacatctctg cctacctgct gagcaagaac aatgccattg agcccaggag cttccagaag 2820
aagaccaggc actacttcat tgctgctgtg gagaggctgt gggactatgg catgagcagc 2880
agcccccatg tgctgaggaa cagggcccag tctggctctg tgccccagtt caagaaggtg 2940
gtgttccagg agttcactga tggcagcttc acccagcccc tgtacagagg ggagctgaat 3000
gagcacctgg gcctgctggg cccctacatc agggctgagg tggaggacaa catcatggtg 3060
accttcagga accaggccag caggccctac agcttctaca gcagcctgat cagctatgag 3120
gaggaccaga ggcagggggc tgagcccagg aagaactttg tgaagcccaa tgaaaccaag 3180
acctacttct ggaaggtgca gcaccacatg gcccccacca aggatgagtt tgactgcaag 3240
gcctgggcct acttctctga tgtggacctg gagaaggatg tgcactctgg cctgattggc 3300
cccctgctgg tgtgccacac caacaccctg aaccctgccc atggcaggca ggtgactgtg 3360
caggagtttg ccctgttctt caccatcttt gatgaaacca agagctggta cttcactgag 3420
aacatggaga ggaactgcag ggccccctgc aacatccaga tggaggaccc caccttcaag 3480
gagaactaca ggttccatgc catcaatggc tacatcatgg acaccctgcc tggcctggtg 3540
atggcccagg accagaggat caggtggtac ctgctgagca tgggcagcaa tgagaacatc 3600
cacagcatcc acttctctgg ccatgtgttc actgtgagga agaaggagga gtacaagatg 3660
gccctgtaca acctgtaccc tggggtgttt gagactgtgg agatgctgcc cagcaaggct 3720
ggcatctgga gggtggagtg cctgattggg gagcacctgc atgctggcat gagcaccctg 3780
ttcctggtgt acagcaacaa gtgccagacc cccctgggca tggcctctgg ccacatcagg 3840
gacttccaga tcactgcctc tggccagtat ggccagtggg cccccaagct ggccaggctg 3900
cactactctg gcagcatcaa tgcctggagc accaaggagc ccttcagctg gatcaaggtg 3960
gacctgctgg cccccatgat catccatggc atcaagaccc agggggccag gcagaagttc 4020
agcagcctgt acatcagcca gttcatcatc atgtacagcc tggatggcaa gaagtggcag 4080
acctacaggg gcaacagcac tggcaccctg atggtgttct ttggcaatgt ggacagctct 4140
ggcatcaagc acaacatctt caaccccccc atcattgcca gatacatcag gctgcacccc 4200
acccactaca gcatcaggag caccctgagg atggagctga tgggctgtga cctgaacagc 4260
tgcagcatgc ccctgggcat ggagagcaag gccatctctg atgcccagat cactgccagc 4320
agctacttca ccaacatgtt tgccacctgg agccccagca aggccaggct gcacctgcag 4380
ggcaggagca atgcctggag gccccaggtc aacaacccca aggagtggct gcaggtggac 4440
ttccagaaga ccatgaaggt gactggggtg accacccagg gggtgaagag cctgctgacc 4500
agcatgtatg tgaaggagtt cctgatcagc agcagccagg atggccacca gtggaccctg 4560
ttcttccaga atggcaaggt gaaggtgttc cagggcaacc aggacagctt cacccctgtg 4620
gtgaacagcc tggacccccc cctgctgacc agatacctga ggattcaccc ccagagctgg 4680
gtgcaccaga ttgccctgag gatggaggtg ctgggctgtg aggcccagga cctgtactga 4740
aataaaagat ctttattttc attagatctg tgtgttggtt ttttgtgtga ggaaccccta 4800
gtgatggagt tggccactcc ctctctgcgc gctcgctcgc tcactgaggc cgggcgacca 4860
aaggtcgccc gacgcccggg ctttgcccgg gcggcctcag tgagcgagcg agcgcgcaga 4920
gagggagtgg ccaa 4934
<210> 8
<211> 4934
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус
<400> 8
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgtttg ctgcttgcaa tgtttgccca ttttagggtg 180
gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg gggcgactca gatcccagcc agtggactta 240
gcccctgttt gctcctccga taactggggt gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc 300
cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa tacggacgag gacagggccc tgtctcctca 360
gcttcaggca ccaccactga cctgggacag tgaatcgcca ccatgcagat tgagctgagc 420
acctgcttct tcctgtgcct gctgagattc tgctttagtg ccaccagaag atactacctg 480
ggtgcagtgg aactgtcatg ggactatatg caaagtgatc tcggtgagct gcctgtggac 540
gcaaggtaaa ggcatgtcct gtagggtctg atcggggcca ggattgtggg gatgtaagtc 600
tgcttggagg aagccctaaa atgggcaaac attgcaagca gcaaacattc tgactttttc 660
ctttcttcac gcagatttcc tcctagagtg ccaaaatctt ttccattcaa cacctcagtc 720
gtgtacaaaa agactctgtt tgtagaattc acggatcacc ttttcaacat cgctaagccc 780
aggcccccct ggatgggcct gctgggcccc accatccagg ctgaggtgta tgacactgtg 840
gtgatcaccc tgaagaacat ggccagccac cctgtgagcc tgcatgctgt gggggtgagc 900
tactggaagg cctctgaggg ggctgagtat gatgaccaga ccagccagag ggagaaggag 960
gatgacaagg tgttccctgg gggcagccac acctatgtgt ggcaggtgct gaaggagaat 1020
ggccccatgg cctctgaccc cctgtgcctg acctacagct acctgagcca tgtggacctg 1080
gtgaaggacc tgaactctgg cctgattggg gccctgctgg tgtgcaggga gggcagcctg 1140
gccaaggaga agacccagac cctgcacaag ttcatcctgc tgtttgctgt gtttgatgag 1200
ggcaagagct ggcactctga aaccaagaac agcctgatgc aggacaggga tgctgcctct 1260
gccagggcct ggcccaagat gcacactgtg aatggctatg tgaacaggag cctgcctggc 1320
ctgattggct gccacaggaa gtctgtgtac tggcatgtga ttggcatggg caccacccct 1380
gaggtgcaca gcatcttcct ggagggccac accttcctgg tcaggaacca caggcaggcc 1440
agcctggaga tcagccccat caccttcctg actgcccaga ccctgctgat ggacctgggc 1500
cagttcctgc tgttctgcca catcagcagc caccagcatg atggcatgga ggcctatgtg 1560
aaggtggaca gctgccctga ggagccccag ctgaggatga agaacaatga ggaggctgag 1620
gactatgatg atgacctgac tgactctgag atggatgtgg tgaggtttga tgatgacaac 1680
agccccagct tcatccagat caggtctgtg gccaagaagc accccaagac ctgggtgcac 1740
tacattgctg ctgaggagga ggactgggac tatgcccccc tggtgctggc ccctgatgac 1800
aggagctaca agagccagta cctgaacaat ggcccccaga ggattggcag gaagtacaag 1860
aaggtcaggt tcatggccta cactgatgaa accttcaaga ccagggaggc catccagcat 1920
gagtctggca tcctgggccc cctgctgtat ggggaggtgg gggacaccct gctgatcatc 1980
ttcaagaacc aggccagcag gccctacaac atctaccccc atggcatcac tgatgtgagg 2040
cccctgtaca gcaggaggct gcccaagggg gtgaagcacc tgaaggactt ccccatcctg 2100
cctggggaga tcttcaagta caagtggact gtgactgtgg aggatggccc caccaagtct 2160
gaccccaggt gcctgaccag atactacagc agctttgtga acatggagag ggacctggcc 2220
tctggcctga ttggccccct gctgatctgc tacaaggagt ctgtggacca gaggggcaac 2280
cagatcatgt ctgacaagag gaatgtgatc ctgttctctg tgtttgatga gaacaggagc 2340
tggtacctga ctgagaacat ccagaggttc ctgcccaacc ctgctggggt gcagctggag 2400
gaccctgagt tccaggccag caacatcatg cacagcatca atggctatgt gtttgacagc 2460
ctgcagctgt ctgtgtgcct gcatgaggtg gcctactggt acatcctgag cattggggcc 2520
cagactgact tcctgtctgt gttcttctct ggctacacct tcaagcacaa gatggtgtat 2580
gaggacaccc tgaccctgtt ccccttctct ggggagactg tgttcatgag catggagaac 2640
cctggcctgt ggattctggg ctgccacaac tctgacttca ggaacagggg catgactgcc 2700
ctgctgaaag tctccagctg tgacaagaac actggggact actatgagga cagctatgag 2760
gacatctctg cctacctgct gagcaagaac aatgccattg agcccaggag cttccagaag 2820
aagaccaggc actacttcat tgctgctgtg gagaggctgt gggactatgg catgagcagc 2880
agcccccatg tgctgaggaa cagggcccag tctggctctg tgccccagtt caagaaggtg 2940
gtgttccagg agttcactga tggcagcttc acccagcccc tgtacagagg ggagctgaat 3000
gagcacctgg gcctgctggg cccctacatc agggctgagg tggaggacaa catcatggtg 3060
accttcagga accaggccag caggccctac agcttctaca gcagcctgat cagctatgag 3120
gaggaccaga ggcagggggc tgagcccagg aagaactttg tgaagcccaa tgaaaccaag 3180
acctacttct ggaaggtgca gcaccacatg gcccccacca aggatgagtt tgactgcaag 3240
gcctgggcct acttctctga tgtggacctg gagaaggatg tgcactctgg cctgattggc 3300
cccctgctgg tgtgccacac caacaccctg aaccctgccc atggcaggca ggtgactgtg 3360
caggagtttg ccctgttctt caccatcttt gatgaaacca agagctggta cttcactgag 3420
aacatggaga ggaactgcag ggccccctgc aacatccaga tggaggaccc caccttcaag 3480
gagaactaca ggttccatgc catcaatggc tacatcatgg acaccctgcc tggcctggtg 3540
atggcccagg accagaggat caggtggtac ctgctgagca tgggcagcaa tgagaacatc 3600
cacagcatcc acttctctgg ccatgtgttc actgtgagga agaaggagga gtacaagatg 3660
gccctgtaca acctgtaccc tggggtgttt gagactgtgg agatgctgcc cagcaaggct 3720
ggcatctgga gggtggagtg cctgattggg gagcacctgc atgctggcat gagcaccctg 3780
ttcctggtgt acagcaacaa gtgccagacc cccctgggca tggcctctgg ccacatcagg 3840
gacttccaga tcactgcctc tggccagtat ggccagtggg cccccaagct ggccaggctg 3900
cactactctg gcagcatcaa tgcctggagc accaaggagc ccttcagctg gatcaaggtg 3960
gacctgctgg cccccatgat catccatggc atcaagaccc agggggccag gcagaagttc 4020
agcagcctgt acatcagcca gttcatcatc atgtacagcc tggatggcaa gaagtggcag 4080
acctacaggg gcaacagcac tggcaccctg atggtgttct ttggcaatgt ggacagctct 4140
ggcatcaagc acaacatctt caaccccccc atcattgcca gatacatcag gctgcacccc 4200
acccactaca gcatcaggag caccctgagg atggagctga tgggctgtga cctgaacagc 4260
tgcagcatgc ccctgggcat ggagagcaag gccatctctg atgcccagat cactgccagc 4320
agctacttca ccaacatgtt tgccacctgg agccccagca aggccaggct gcacctgcag 4380
ggcaggagca atgcctggag gccccaggtc aacaacccca aggagtggct gcaggtggac 4440
ttccagaaga ccatgaaggt gactggggtg accacccagg gggtgaagag cctgctgacc 4500
agcatgtatg tgaaggagtt cctgatcagc agcagccagg atggccacca gtggaccctg 4560
ttcttccaga atggcaaggt gaaggtgttc cagggcaacc aggacagctt cacccctgtg 4620
gtgaacagcc tggacccccc cctgctgacc agatacctga ggattcaccc ccagagctgg 4680
gtgcaccaga ttgccctgag gatggaggtg ctgggctgtg aggcccagga cctgtactga 4740
aataaaagat ctttattttc attagatctg tgtgttggtt ttttgtgtga ggaaccccta 4800
gtgatggagt tggccactcc ctctctgcgc gctcgctcgc tcactgaggc cgggcgacca 4860
aaggtcgccc gacgcccggg ctttgcccgg gcggcctcag tgagcgagcg agcgcgcaga 4920
gagggagtgg ccaa 4934
<210> 9
<211> 5511
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 9
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgaccc ctctcacact 180
acctaaacca cgccaggaca acctctgctc ctctccaccg aaattccaag gggtcgagtg 240
gatgttggag gtggcatggg cccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 300
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 360
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagctgct 420
ggaggatggg aactgagggg ttggaagggg gcagggtgag cccagaaact cctgtgtgcc 480
tctgagcctg cagacgcgaa acgtcgactg gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg 540
gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga taactggggt 600
gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa 660
tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga cctgggacag 720
tgaatcgtaa gtactagcag ctacaatcca gctaccattc tgcttttatt ttatggttgg 780
gataaggctg gattattctg agtccaagct aggccctttt gctaatcatg ttcatacctc 840
ttatcttcct cccacagctc ctgggcaacg tgctggtctg tgtgctggcc catcactttg 900
gcaaagaatt gcgatcgcca ccatgcagat tgagctgagc acctgcttct tcctgtgcct 960
gctgaggttc tgcttctctg ccaccaggag atactacctg ggggctgtgg agctgagctg 1020
ggactacatg cagtctgacc tgggggagct gcctgtggat gccaggttcc cccccagagt 1080
gcccaagagc ttccccttca acacctctgt ggtgtacaag aagaccctgt ttgtggagtt 1140
cactgaccac ctgttcaaca ttgccaagcc caggcccccc tggatgggcc tgctgggccc 1200
caccatccag gctgaggtgt atgacactgt ggtgatcacc ctgaagaaca tggccagcca 1260
ccctgtgagc ctgcatgctg tgggggtgag ctactggaag gcctctgagg gggctgagta 1320
tgatgaccag accagccaga gggagaagga ggatgacaag gtgttccctg ggggcagcca 1380
cacctatgtg tggcaggtgc tgaaggagaa tggccccatg gcctctgacc ccctgtgcct 1440
gacctacagc tacctgagcc atgtggacct ggtgaaggac ctgaactctg gcctgattgg 1500
ggccctgctg gtgtgcaggg agggcagcct ggccaaggag aagacccaga ccctgcacaa 1560
gttcatcctg ctgtttgctg tgtttgatga gggcaagagc tggcactctg aaaccaagaa 1620
cagcctgatg caggacaggg atgctgcctc tgccagggcc tggcccaaga tgcacactgt 1680
gaatggctat gtgaacagga gcctgcctgg cctgattggc tgccacagga agtctgtgta 1740
ctggcatgtg attggcatgg gcaccacccc tgaggtgcac agcatcttcc tggagggcca 1800
caccttcctg gtcaggaacc acaggcaggc cagcctggag atcagcccca tcaccttcct 1860
gactgcccag accctgctga tggacctggg ccagttcctg ctgttctgcc acatcagcag 1920
ccaccagcat gatggcatgg aggcctatgt gaaggtggac agctgccctg aggagcccca 1980
gctgaggatg aagaacaatg aggaggctga ggactatgat gatgacctga ctgactctga 2040
gatggatgtg gtgaggtttg atgatgacaa cagccccagc ttcatccaga tcaggtctgt 2100
ggccaagaag caccccaaga cctgggtgca ctacattgct gctgaggagg aggactggga 2160
ctatgccccc ctggtgctgg cccctgatga caggagctac aagagccagt acctgaacaa 2220
tggcccccag aggattggca ggaagtacaa gaaggtcagg ttcatggcct acactgatga 2280
aaccttcaag accagggagg ccatccagca tgagtctggc atcctgggcc ccctgctgta 2340
tggggaggtg ggggacaccc tgctgatcat cttcaagaac caggccagca ggccctacaa 2400
catctacccc catggcatca ctgatgtgag gcccctgtac agcaggaggc tgcccaaggg 2460
ggtgaagcac ctgaaggact tccccatcct gcctggggag atcttcaagt acaagtggac 2520
tgtgactgtg gaggatggcc ccaccaagtc tgaccccagg tgcctgacca gatactacag 2580
cagctttgtg aacatggaga gggacctggc ctctggcctg attggccccc tgctgatctg 2640
ctacaaggag tctgtggacc agaggggcaa ccagatcatg tctgacaaga ggaatgtgat 2700
cctgttctct gtgtttgatg agaacaggag ctggtacctg actgagaaca tccagaggtt 2760
cctgcccaac cctgctgggg tgcagctgga ggaccctgag ttccaggcca gcaacatcat 2820
gcacagcatc aatggctatg tgtttgacag cctgcagctg tctgtgtgcc tgcatgaggt 2880
ggcctactgg tacatcctga gcattggggc ccagactgac ttcctgtctg tgttcttctc 2940
tggctacacc ttcaagcaca agatggtgta tgaggacacc ctgaccctgt tccccttctc 3000
tggggagact gtgttcatga gcatggagaa ccctggcctg tggattctgg gctgccacaa 3060
ctctgacttc aggaacaggg gcatgactgc cctgctgaaa gtctccagct gtgacaagaa 3120
cactggggac tactatgagg acagctatga ggacatctct gcctacctgc tgagcaagaa 3180
caatgccatt gagcccagga gcttcagcca gaacccccca gtgctgaaga ggcaccagag 3240
ggagatcacc aggaccaccc tgcagtctga ccaggaggag attgactatg atgacaccat 3300
ctctgtggag atgaagaagg aggactttga catctacgac gaggacgaga accagagccc 3360
caggagcttc cagaagaaga ccaggcacta cttcattgct gctgtggaga ggctgtggga 3420
ctatggcatg agcagcagcc cccatgtgct gaggaacagg gcccagtctg gctctgtgcc 3480
ccagttcaag aaggtggtgt tccaggagtt cactgatggc agcttcaccc agcccctgta 3540
cagaggggag ctgaatgagc acctgggcct gctgggcccc tacatcaggg ctgaggtgga 3600
ggacaacatc atggtgacct tcaggaacca ggccagcagg ccctacagct tctacagcag 3660
cctgatcagc tatgaggagg accagaggca gggggctgag cccaggaaga actttgtgaa 3720
gcccaatgaa accaagacct acttctggaa ggtgcagcac cacatggccc ccaccaagga 3780
tgagtttgac tgcaaggcct gggcctactt ctctgatgtg gacctggaga aggatgtgca 3840
ctctggcctg attggccccc tgctggtgtg ccacaccaac accctgaacc ctgcccatgg 3900
caggcaggtg actgtgcagg agtttgccct gttcttcacc atctttgatg aaaccaagag 3960
ctggtacttc actgagaaca tggagaggaa ctgcagggcc ccctgcaaca tccagatgga 4020
ggaccccacc ttcaaggaga actacaggtt ccatgccatc aatggctaca tcatggacac 4080
cctgcctggc ctggtgatgg cccaggacca gaggatcagg tggtacctgc tgagcatggg 4140
cagcaatgag aacatccaca gcatccactt ctctggccat gtgttcactg tgaggaagaa 4200
ggaggagtac aagatggccc tgtacaacct gtaccctggg gtgtttgaga ctgtggagat 4260
gctgcccagc aaggctggca tctggagggt ggagtgcctg attggggagc acctgcatgc 4320
tggcatgagc accctgttcc tggtgtacag caacaagtgc cagacccccc tgggcatggc 4380
ctctggccac atcagggact tccagatcac tgcctctggc cagtatggcc agtgggcccc 4440
caagctggcc aggctgcact actctggcag catcaatgcc tggagcacca aggagccctt 4500
cagctggatc aaggtggacc tgctggcccc catgatcatc catggcatca agacccaggg 4560
ggccaggcag aagttcagca gcctgtacat cagccagttc atcatcatgt acagcctgga 4620
tggcaagaag tggcagacct acaggggcaa cagcactggc accctgatgg tgttctttgg 4680
caatgtggac agctctggca tcaagcacaa catcttcaac ccccccatca ttgccagata 4740
catcaggctg caccccaccc actacagcat caggagcacc ctgaggatgg agctgatggg 4800
ctgtgacctg aacagctgca gcatgcccct gggcatggag agcaaggcca tctctgatgc 4860
ccagatcact gccagcagct acttcaccaa catgtttgcc acctggagcc ccagcaaggc 4920
caggctgcac ctgcagggca ggagcaatgc ctggaggccc caggtcaaca accccaagga 4980
gtggctgcag gtggacttcc agaagaccat gaaggtgact ggggtgacca cccagggggt 5040
gaagagcctg ctgaccagca tgtatgtgaa ggagttcctg atcagcagca gccaggatgg 5100
ccaccagtgg accctgttct tccagaatgg caaggtgaag gtgttccagg gcaaccagga 5160
cagcttcacc cctgtggtga acagcctgga cccccccctg ctgaccagat acctgaggat 5220
tcacccccag agctgggtgc accagattgc cctgaggatg gaggtgctgg gctgtgaggc 5280
ccaggacctg tactgacctc gaggaataaa ggaaatttat tttcattgca atagtgtgtt 5340
ggttttttgt gtcacgtggc ggccgcagga acccctagtg atggagttgg ccactccctc 5400
tctgcgcgct cgctcgctca ctgaggccgg gcgaccaaag gtcgcccgac gcccgggctt 5460
tgcccgggcg gcctcagtga gcgagcgagc gcgcagagag ggagtggcca a 5511
<210> 10
<211> 5688
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 10
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgaccc ctctcacact 180
acctaaacca cgccaggaca acctctgctc ctctccaccg aaattccaag gggtcgagtg 240
gatgttggag gtggcatggg cccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 300
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 360
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagctgct 420
ggaggatggg aactgagggg ttggaagggg gcagggtgag cccagaaact cctgtgtgcc 480
tctgagcctg cagacgcgaa acgtcgactg gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg 540
gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga taactggggt 600
gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa 660
tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga cctgggacag 720
tgaatcgtaa gtactagcag ctacaatcca gctaccattc tgcttttatt ttatggttgg 780
gataaggctg gattattctg agtccaagct aggccctttt gctaatcatg ttcatacctc 840
ttatcttcct cccacagctc ctgggcaacg tgctggtctg tgtgctggcc catcactttg 900
gcaaagaatt gcgatcgcca ccatgcagat tgagctgagc acctgcttct tcctgtgcct 960
gctgaggttc tgcttctctg ccaccaggag atactacctg ggggctgtgg agctgagctg 1020
ggactacatg cagtctgacc tgggggagct gcctgtggat gccaggttcc cccccagagt 1080
gcccaagagc ttccccttca acacctctgt ggtgtacaag aagaccctgt ttgtggagtt 1140
cactgaccac ctgttcaaca ttgccaagcc caggcccccc tggatgggcc tgctgggccc 1200
caccatccag gctgaggtgt atgacactgt ggtgatcacc ctgaagaaca tggccagcca 1260
ccctgtgagc ctgcatgctg tgggggtgag ctactggaag gcctctgagg gggctgagta 1320
tgatgaccag accagccaga gggagaagga ggatgacaag gtgttccctg ggggcagcca 1380
cacctatgtg tggcaggtgc tgaaggagaa tggccccatg gcctctgacc ccctgtgcct 1440
gacctacagc tacctgagcc atgtggacct ggtgaaggac ctgaactctg gcctgattgg 1500
ggccctgctg gtgtgcaggg agggcagcct ggccaaggag aagacccaga ccctgcacaa 1560
gttcatcctg ctgtttgctg tgtttgatga gggcaagagc tggcactctg aaaccaagaa 1620
cagcctgatg caggacaggg atgctgcctc tgccagggcc tggcccaaga tgcacactgt 1680
gaatggctat gtgaacagga gcctgcctgg cctgattggc tgccacagga agtctgtgta 1740
ctggcatgtg attggcatgg gcaccacccc tgaggtgcac agcatcttcc tggagggcca 1800
caccttcctg gtcaggaacc acaggcaggc cagcctggag atcagcccca tcaccttcct 1860
gactgcccag accctgctga tggacctggg ccagttcctg ctgttctgcc acatcagcag 1920
ccaccagcat gatggcatgg aggcctatgt gaaggtggac agctgccctg aggagcccca 1980
gctgaggatg aagaacaatg aggaggctga ggactatgat gatgacctga ctgactctga 2040
gatggatgtg gtgaggtttg atgatgacaa cagccccagc ttcatccaga tcaggtctgt 2100
ggccaagaag caccccaaga cctgggtgca ctacattgct gctgaggagg aggactggga 2160
ctatgccccc ctggtgctgg cccctgatga caggagctac aagagccagt acctgaacaa 2220
tggcccccag aggattggca ggaagtacaa gaaggtcagg ttcatggcct acactgatga 2280
aaccttcaag accagggagg ccatccagca tgagtctggc atcctgggcc ccctgctgta 2340
tggggaggtg ggggacaccc tgctgatcat cttcaagaac caggccagca ggccctacaa 2400
catctacccc catggcatca ctgatgtgag gcccctgtac agcaggaggc tgcccaaggg 2460
ggtgaagcac ctgaaggact tccccatcct gcctggggag atcttcaagt acaagtggac 2520
tgtgactgtg gaggatggcc ccaccaagtc tgaccccagg tgcctgacca gatactacag 2580
cagctttgtg aacatggaga gggacctggc ctctggcctg attggccccc tgctgatctg 2640
ctacaaggag tctgtggacc agaggggcaa ccagatcatg tctgacaaga ggaatgtgat 2700
cctgttctct gtgtttgatg agaacaggag ctggtacctg actgagaaca tccagaggtt 2760
cctgcccaac cctgctgggg tgcagctgga ggaccctgag ttccaggcca gcaacatcat 2820
gcacagcatc aatggctatg tgtttgacag cctgcagctg tctgtgtgcc tgcatgaggt 2880
ggcctactgg tacatcctga gcattggggc ccagactgac ttcctgtctg tgttcttctc 2940
tggctacacc ttcaagcaca agatggtgta tgaggacacc ctgaccctgt tccccttctc 3000
tggggagact gtgttcatga gcatggagaa ccctggcctg tggattctgg gctgccacaa 3060
ctctgacttc aggaacaggg gcatgactgc cctgctgaaa gtctccagct gtgacaagaa 3120
cactggggac tactatgagg acagctatga ggacatctct gcctacctgc tgagcaagaa 3180
caatgccatt gagcccagga gcttcagcca gaacccccca gtgctgaaga ggcaccagag 3240
ggagatcacc aggaccaccc tgcagtctga ccaggaggag attgactatg atgacaccat 3300
ctctgtggag atgaagaagg aggactttga catctacgac gaggacgaga accagagccc 3360
caggagcttc cagaagaaga ccaggcacta cttcattgct gctgtggaga ggctgtggga 3420
ctatggcatg agcagcagcc cccatgtgct gaggaacagg gcccagtctg gctctgtgcc 3480
ccagttcaag aaggtggtgt tccaggagtt cactgatggc agcttcaccc agcccctgta 3540
cagaggggag ctgaatgagc acctgggcct gctgggcccc tacatcaggg ctgaggtgga 3600
ggacaacatc atggtgacct tcaggaacca ggccagcagg ccctacagct tctacagcag 3660
cctgatcagc tatgaggagg accagaggca gggggctgag cccaggaaga actttgtgaa 3720
gcccaatgaa accaagacct acttctggaa ggtgcagcac cacatggccc ccaccaagga 3780
tgagtttgac tgcaaggcct gggcctactt ctctgatgtg gacctggaga aggatgtgca 3840
ctctggcctg attggccccc tgctggtgtg ccacaccaac accctgaacc ctgcccatgg 3900
caggcaggtg actgtgcagg agtttgccct gttcttcacc atctttgatg aaaccaagag 3960
ctggtacttc actgagaaca tggagaggaa ctgcagggcc ccctgcaaca tccagatgga 4020
ggaccccacc ttcaaggaga actacaggtt ccatgccatc aatggctaca tcatggacac 4080
cctgcctggc ctggtgatgg cccaggacca gaggatcagg tggtacctgc tgagcatggg 4140
cagcaatgag aacatccaca gcatccactt ctctggccat gtgttcactg tgaggaagaa 4200
ggaggagtac aagatggccc tgtacaacct gtaccctggg gtgtttgaga ctgtggagat 4260
gctgcccagc aaggctggca tctggagggt ggagtgcctg attggggagc acctgcatgc 4320
tggcatgagc accctgttcc tggtgtacag caacaagtgc cagacccccc tgggcatggc 4380
ctctggccac atcagggact tccagatcac tgcctctggc cagtatggcc agtgggcccc 4440
caagctggcc aggctgcact actctggcag catcaatgcc tggagcacca aggagccctt 4500
cagctggatc aaggtggacc tgctggcccc catgatcatc catggcatca agacccaggg 4560
ggccaggcag aagttcagca gcctgtacat cagccagttc atcatcatgt acagcctgga 4620
tggcaagaag tggcagacct acaggggcaa cagcactggc accctgatgg tgttctttgg 4680
caatgtggac agctctggca tcaagcacaa catcttcaac ccccccatca ttgccagata 4740
catcaggctg caccccaccc actacagcat caggagcacc ctgaggatgg agctgatggg 4800
ctgtgacctg aacagctgca gcatgcccct gggcatggag agcaaggcca tctctgatgc 4860
ccagatcact gccagcagct acttcaccaa catgtttgcc acctggagcc ccagcaaggc 4920
caggctgcac ctgcagggca ggagcaatgc ctggaggccc caggtcaaca accccaagga 4980
gtggctgcag gtggacttcc agaagaccat gaaggtgact ggggtgacca cccagggggt 5040
gaagagcctg ctgaccagca tgtatgtgaa ggagttcctg atcagcagca gccaggatgg 5100
ccaccagtgg accctgttct tccagaatgg caaggtgaag gtgttccagg gcaaccagga 5160
cagcttcacc cctgtggtga acagcctgga cccccccctg ctgaccagat acctgaggat 5220
tcacccccag agctgggtgc accagattgc cctgaggatg gaggtgctgg gctgtgaggc 5280
ccaggacctg tactgacctc gaggtgtgcc ttctagttgc cagccatctg ttgtttgccc 5340
ctcccccgtg ccttccttga ccctggaagg tgccactccc actgtccttt cctaataaaa 5400
tgaggaaatt gcatcgcatt gtctgagtag gtgtcattct attctggggg gtggggtggg 5460
gcaggacagc aagggggagg attgggaaga caatagcagg catgctgggg atgcggtggg 5520
ctctatgggc acgtggcggc cgcaggaacc cctagtgatg gagttggcca ctccctctct 5580
gcgcgctcgc tcgctcactg aggccgggcg accaaaggtc gcccgacgcc cgggctttgc 5640
ccgggcggcc tcagtgagcg agcgagcgcg cagagaggga gtggccaa 5688
<210> 11
<211> 5613
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 11
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgaccc ctctcacact 180
acctaaacca cgccaggaca acctctgctc ctctccaccg aaattccaag gggtcgagtg 240
gatgttggag gtggcatggg cccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 300
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 360
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagctgct 420
ggaggatggg aactgagggg ttggaagggg gcagggtgag cccagaaact cctgtgtgcc 480
tctgagcctg cagacgcgaa acgtcgactg gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg 540
gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga taactggggt 600
gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa 660
tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga cctgggacag 720
tgaatcgtaa gtactagcag ctacaatcca gctaccattc tgcttttatt ttatggttgg 780
gataaggctg gattattctg agtccaagct aggccctttt gctaatcatg ttcatacctc 840
ttatcttcct cccacagctc ctgggcaacg tgctggtctg tgtgctggcc catcactttg 900
gcaaagaatt gcgatcgcca ccatgcagat tgagctgagc acctgcttct tcctgtgcct 960
gctgaggttc tgcttctctg ccaccaggag atactacctg ggggctgtgg agctgagctg 1020
ggactacatg cagtctgacc tgggggagct gcctgtggat gccaggttcc cccccagagt 1080
gcccaagagc ttccccttca acacctctgt ggtgtacaag aagaccctgt ttgtggagtt 1140
cactgaccac ctgttcaaca ttgccaagcc caggcccccc tggatgggcc tgctgggccc 1200
caccatccag gctgaggtgt atgacactgt ggtgatcacc ctgaagaaca tggccagcca 1260
ccctgtgagc ctgcatgctg tgggggtgag ctactggaag gcctctgagg gggctgagta 1320
tgatgaccag accagccaga gggagaagga ggatgacaag gtgttccctg ggggcagcca 1380
cacctatgtg tggcaggtgc tgaaggagaa tggccccatg gcctctgacc ccctgtgcct 1440
gacctacagc tacctgagcc atgtggacct ggtgaaggac ctgaactctg gcctgattgg 1500
ggccctgctg gtgtgcaggg agggcagcct ggccaaggag aagacccaga ccctgcacaa 1560
gttcatcctg ctgtttgctg tgtttgatga gggcaagagc tggcactctg aaaccaagaa 1620
cagcctgatg caggacaggg atgctgcctc tgccagggcc tggcccaaga tgcacactgt 1680
gaatggctat gtgaacagga gcctgcctgg cctgattggc tgccacagga agtctgtgta 1740
ctggcatgtg attggcatgg gcaccacccc tgaggtgcac agcatcttcc tggagggcca 1800
caccttcctg gtcaggaacc acaggcaggc cagcctggag atcagcccca tcaccttcct 1860
gactgcccag accctgctga tggacctggg ccagttcctg ctgttctgcc acatcagcag 1920
ccaccagcat gatggcatgg aggcctatgt gaaggtggac agctgccctg aggagcccca 1980
gctgaggatg aagaacaatg aggaggctga ggactatgat gatgacctga ctgactctga 2040
gatggatgtg gtgaggtttg atgatgacaa cagccccagc ttcatccaga tcaggtctgt 2100
ggccaagaag caccccaaga cctgggtgca ctacattgct gctgaggagg aggactggga 2160
ctatgccccc ctggtgctgg cccctgatga caggagctac aagagccagt acctgaacaa 2220
tggcccccag aggattggca ggaagtacaa gaaggtcagg ttcatggcct acactgatga 2280
aaccttcaag accagggagg ccatccagca tgagtctggc atcctgggcc ccctgctgta 2340
tggggaggtg ggggacaccc tgctgatcat cttcaagaac caggccagca ggccctacaa 2400
catctacccc catggcatca ctgatgtgag gcccctgtac agcaggaggc tgcccaaggg 2460
ggtgaagcac ctgaaggact tccccatcct gcctggggag atcttcaagt acaagtggac 2520
tgtgactgtg gaggatggcc ccaccaagtc tgaccccagg tgcctgacca gatactacag 2580
cagctttgtg aacatggaga gggacctggc ctctggcctg attggccccc tgctgatctg 2640
ctacaaggag tctgtggacc agaggggcaa ccagatcatg tctgacaaga ggaatgtgat 2700
cctgttctct gtgtttgatg agaacaggag ctggtacctg actgagaaca tccagaggtt 2760
cctgcccaac cctgctgggg tgcagctgga ggaccctgag ttccaggcca gcaacatcat 2820
gcacagcatc aatggctatg tgtttgacag cctgcagctg tctgtgtgcc tgcatgaggt 2880
ggcctactgg tacatcctga gcattggggc ccagactgac ttcctgtctg tgttcttctc 2940
tggctacacc ttcaagcaca agatggtgta tgaggacacc ctgaccctgt tccccttctc 3000
tggggagact gtgttcatga gcatggagaa ccctggcctg tggattctgg gctgccacaa 3060
ctctgacttc aggaacaggg gcatgactgc cctgctgaaa gtctccagct gtgacaagaa 3120
cactggggac tactatgagg acagctatga ggacatctct gcctacctgc tgagcaagaa 3180
caatgccatt gagcccagga gcttcagcca gaacccccca gtgctgaaga ggcaccagag 3240
ggagatcacc aggaccaccc tgcagtctga ccaggaggag attgactatg atgacaccat 3300
ctctgtggag atgaagaagg aggactttga catctacgac gaggacgaga accagagccc 3360
caggagcttc cagaagaaga ccaggcacta cttcattgct gctgtggaga ggctgtggga 3420
ctatggcatg agcagcagcc cccatgtgct gaggaacagg gcccagtctg gctctgtgcc 3480
ccagttcaag aaggtggtgt tccaggagtt cactgatggc agcttcaccc agcccctgta 3540
cagaggggag ctgaatgagc acctgggcct gctgggcccc tacatcaggg ctgaggtgga 3600
ggacaacatc atggtgacct tcaggaacca ggccagcagg ccctacagct tctacagcag 3660
cctgatcagc tatgaggagg accagaggca gggggctgag cccaggaaga actttgtgaa 3720
gcccaatgaa accaagacct acttctggaa ggtgcagcac cacatggccc ccaccaagga 3780
tgagtttgac tgcaaggcct gggcctactt ctctgatgtg gacctggaga aggatgtgca 3840
ctctggcctg attggccccc tgctggtgtg ccacaccaac accctgaacc ctgcccatgg 3900
caggcaggtg actgtgcagg agtttgccct gttcttcacc atctttgatg aaaccaagag 3960
ctggtacttc actgagaaca tggagaggaa ctgcagggcc ccctgcaaca tccagatgga 4020
ggaccccacc ttcaaggaga actacaggtt ccatgccatc aatggctaca tcatggacac 4080
cctgcctggc ctggtgatgg cccaggacca gaggatcagg tggtacctgc tgagcatggg 4140
cagcaatgag aacatccaca gcatccactt ctctggccat gtgttcactg tgaggaagaa 4200
ggaggagtac aagatggccc tgtacaacct gtaccctggg gtgtttgaga ctgtggagat 4260
gctgcccagc aaggctggca tctggagggt ggagtgcctg attggggagc acctgcatgc 4320
tggcatgagc accctgttcc tggtgtacag caacaagtgc cagacccccc tgggcatggc 4380
ctctggccac atcagggact tccagatcac tgcctctggc cagtatggcc agtgggcccc 4440
caagctggcc aggctgcact actctggcag catcaatgcc tggagcacca aggagccctt 4500
cagctggatc aaggtggacc tgctggcccc catgatcatc catggcatca agacccaggg 4560
ggccaggcag aagttcagca gcctgtacat cagccagttc atcatcatgt acagcctgga 4620
tggcaagaag tggcagacct acaggggcaa cagcactggc accctgatgg tgttctttgg 4680
caatgtggac agctctggca tcaagcacaa catcttcaac ccccccatca ttgccagata 4740
catcaggctg caccccaccc actacagcat caggagcacc ctgaggatgg agctgatggg 4800
ctgtgacctg aacagctgca gcatgcccct gggcatggag agcaaggcca tctctgatgc 4860
ccagatcact gccagcagct acttcaccaa catgtttgcc acctggagcc ccagcaaggc 4920
caggctgcac ctgcagggca ggagcaatgc ctggaggccc caggtcaaca accccaagga 4980
gtggctgcag gtggacttcc agaagaccat gaaggtgact ggggtgacca cccagggggt 5040
gaagagcctg ctgaccagca tgtatgtgaa ggagttcctg atcagcagca gccaggatgg 5100
ccaccagtgg accctgttct tccagaatgg caaggtgaag gtgttccagg gcaaccagga 5160
cagcttcacc cctgtggtga acagcctgga cccccccctg ctgaccagat acctgaggat 5220
tcacccccag agctgggtgc accagattgc cctgaggatg gaggtgctgg gctgtgaggc 5280
ccaggacctg tactgacctc gaggcactgt cctttcctaa taaaatgagg aaattgcatc 5340
gcattgtctg agtaggtgtc attctattct ggggggtggg gtggggcagg acagcaaggg 5400
ggaggattgg gaagacaata gcaggcatgc tggggatgcg gtgggctcta tgggcacgtg 5460
gcggccgcag gaacccctag tgatggagtt ggccactccc tctctgcgcg ctcgctcgct 5520
cactgaggcc gggcgaccaa aggtcgcccg acgcccgggc tttgcccggg cggcctcagt 5580
gagcgagcga gcgcgcagag agggagtggc caa 5613
<210> 12
<211> 5362
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 12
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgactg tttgctgttt 180
gctgcttgca atgtttgccc attttaggga catgtttgct gtttgctgct tgcaatgttt 240
gcccatttta gggacatgtt tgctgtttgc tgcttgcaat gtttgcccat tttagggaca 300
tgtttgctgt ttgctgcttg caatgtttgc ccattttagg gacaacgcga aacgtcgact 360
ggacacagga cgctgtggtt tctgagccag ggggcgactc agatcccagc cagtggactt 420
agcccctgtt tgctcctccg ataactgggg tgaccttggt taatattcac cagcagcctc 480
ccccgttgcc cctctggatc cactgcttaa atacggacga ggacagggcc ctgtctcctc 540
agcttcaggc accaccactg acctgggaca gtgaatcgta agtactagca gctacaatcc 600
agctaccatt ctgcttttat tttatggttg ggataaggct ggattattct gagtccaagc 660
taggcccttt tgctaatcat gttcatacct cttatcttcc tcccacagct cctgggcaac 720
gtgctggtct gtgtgctggc ccatcacttt ggcaaagaat tgcgatcgcc accatgcaga 780
ttgagctgag cacctgcttc ttcctgtgcc tgctgaggtt ctgcttctct gccaccagga 840
gatactacct gggggctgtg gagctgagct gggactacat gcagtctgac ctgggggagc 900
tgcctgtgga tgccaggttc ccccccagag tgcccaagag cttccccttc aacacctctg 960
tggtgtacaa gaagaccctg tttgtggagt tcactgacca cctgttcaac attgccaagc 1020
ccaggccccc ctggatgggc ctgctgggcc ccaccatcca ggctgaggtg tatgacactg 1080
tggtgatcac cctgaagaac atggccagcc accctgtgag cctgcatgct gtgggggtga 1140
gctactggaa ggcctctgag ggggctgagt atgatgacca gaccagccag agggagaagg 1200
aggatgacaa ggtgttccct gggggcagcc acacctatgt gtggcaggtg ctgaaggaga 1260
atggccccat ggcctctgac cccctgtgcc tgacctacag ctacctgagc catgtggacc 1320
tggtgaagga cctgaactct ggcctgattg gggccctgct ggtgtgcagg gagggcagcc 1380
tggccaagga gaagacccag accctgcaca agttcatcct gctgtttgct gtgtttgatg 1440
agggcaagag ctggcactct gaaaccaaga acagcctgat gcaggacagg gatgctgcct 1500
ctgccagggc ctggcccaag atgcacactg tgaatggcta tgtgaacagg agcctgcctg 1560
gcctgattgg ctgccacagg aagtctgtgt actggcatgt gattggcatg ggcaccaccc 1620
ctgaggtgca cagcatcttc ctggagggcc acaccttcct ggtcaggaac cacaggcagg 1680
ccagcctgga gatcagcccc atcaccttcc tgactgccca gaccctgctg atggacctgg 1740
gccagttcct gctgttctgc cacatcagca gccaccagca tgatggcatg gaggcctatg 1800
tgaaggtgga cagctgccct gaggagcccc agctgaggat gaagaacaat gaggaggctg 1860
aggactatga tgatgacctg actgactctg agatggatgt ggtgaggttt gatgatgaca 1920
acagccccag cttcatccag atcaggtctg tggccaagaa gcaccccaag acctgggtgc 1980
actacattgc tgctgaggag gaggactggg actatgcccc cctggtgctg gcccctgatg 2040
acaggagcta caagagccag tacctgaaca atggccccca gaggattggc aggaagtaca 2100
agaaggtcag gttcatggcc tacactgatg aaaccttcaa gaccagggag gccatccagc 2160
atgagtctgg catcctgggc cccctgctgt atggggaggt gggggacacc ctgctgatca 2220
tcttcaagaa ccaggccagc aggccctaca acatctaccc ccatggcatc actgatgtga 2280
ggcccctgta cagcaggagg ctgcccaagg gggtgaagca cctgaaggac ttccccatcc 2340
tgcctgggga gatcttcaag tacaagtgga ctgtgactgt ggaggatggc cccaccaagt 2400
ctgaccccag gtgcctgacc agatactaca gcagctttgt gaacatggag agggacctgg 2460
cctctggcct gattggcccc ctgctgatct gctacaagga gtctgtggac cagaggggca 2520
accagatcat gtctgacaag aggaatgtga tcctgttctc tgtgtttgat gagaacagga 2580
gctggtacct gactgagaac atccagaggt tcctgcccaa ccctgctggg gtgcagctgg 2640
aggaccctga gttccaggcc agcaacatca tgcacagcat caatggctat gtgtttgaca 2700
gcctgcagct gtctgtgtgc ctgcatgagg tggcctactg gtacatcctg agcattgggg 2760
cccagactga cttcctgtct gtgttcttct ctggctacac cttcaagcac aagatggtgt 2820
atgaggacac cctgaccctg ttccccttct ctggggagac tgtgttcatg agcatggaga 2880
accctggcct gtggattctg ggctgccaca actctgactt caggaacagg ggcatgactg 2940
ccctgctgaa agtctccagc tgtgacaaga acactgggga ctactatgag gacagctatg 3000
aggacatctc tgcctacctg ctgagcaaga acaatgccat tgagcccagg agcttcagcc 3060
agaacccccc agtgctgaag aggcaccaga gggagatcac caggaccacc ctgcagtctg 3120
accaggagga gattgactat gatgacacca tctctgtgga gatgaagaag gaggactttg 3180
acatctacga cgaggacgag aaccagagcc ccaggagctt ccagaagaag accaggcact 3240
acttcattgc tgctgtggag aggctgtggg actatggcat gagcagcagc ccccatgtgc 3300
tgaggaacag ggcccagtct ggctctgtgc cccagttcaa gaaggtggtg ttccaggagt 3360
tcactgatgg cagcttcacc cagcccctgt acagagggga gctgaatgag cacctgggcc 3420
tgctgggccc ctacatcagg gctgaggtgg aggacaacat catggtgacc ttcaggaacc 3480
aggccagcag gccctacagc ttctacagca gcctgatcag ctatgaggag gaccagaggc 3540
agggggctga gcccaggaag aactttgtga agcccaatga aaccaagacc tacttctgga 3600
aggtgcagca ccacatggcc cccaccaagg atgagtttga ctgcaaggcc tgggcctact 3660
tctctgatgt ggacctggag aaggatgtgc actctggcct gattggcccc ctgctggtgt 3720
gccacaccaa caccctgaac cctgcccatg gcaggcaggt gactgtgcag gagtttgccc 3780
tgttcttcac catctttgat gaaaccaaga gctggtactt cactgagaac atggagagga 3840
actgcagggc cccctgcaac atccagatgg aggaccccac cttcaaggag aactacaggt 3900
tccatgccat caatggctac atcatggaca ccctgcctgg cctggtgatg gcccaggacc 3960
agaggatcag gtggtacctg ctgagcatgg gcagcaatga gaacatccac agcatccact 4020
tctctggcca tgtgttcact gtgaggaaga aggaggagta caagatggcc ctgtacaacc 4080
tgtaccctgg ggtgtttgag actgtggaga tgctgcccag caaggctggc atctggaggg 4140
tggagtgcct gattggggag cacctgcatg ctggcatgag caccctgttc ctggtgtaca 4200
gcaacaagtg ccagaccccc ctgggcatgg cctctggcca catcagggac ttccagatca 4260
ctgcctctgg ccagtatggc cagtgggccc ccaagctggc caggctgcac tactctggca 4320
gcatcaatgc ctggagcacc aaggagccct tcagctggat caaggtggac ctgctggccc 4380
ccatgatcat ccatggcatc aagacccagg gggccaggca gaagttcagc agcctgtaca 4440
tcagccagtt catcatcatg tacagcctgg atggcaagaa gtggcagacc tacaggggca 4500
acagcactgg caccctgatg gtgttctttg gcaatgtgga cagctctggc atcaagcaca 4560
acatcttcaa cccccccatc attgccagat acatcaggct gcaccccacc cactacagca 4620
tcaggagcac cctgaggatg gagctgatgg gctgtgacct gaacagctgc agcatgcccc 4680
tgggcatgga gagcaaggcc atctctgatg cccagatcac tgccagcagc tacttcacca 4740
acatgtttgc cacctggagc cccagcaagg ccaggctgca cctgcagggc aggagcaatg 4800
cctggaggcc ccaggtcaac aaccccaagg agtggctgca ggtggacttc cagaagacca 4860
tgaaggtgac tggggtgacc acccaggggg tgaagagcct gctgaccagc atgtatgtga 4920
aggagttcct gatcagcagc agccaggatg gccaccagtg gaccctgttc ttccagaatg 4980
gcaaggtgaa ggtgttccag ggcaaccagg acagcttcac ccctgtggtg aacagcctgg 5040
acccccccct gctgaccaga tacctgagga ttcaccccca gagctgggtg caccagattg 5100
ccctgaggat ggaggtgctg ggctgtgagg cccaggacct gtactgacct cgaggaataa 5160
aggaaattta ttttcattgc aatagtgtgt tggttttttg tgtcacgtgg cggccgcagg 5220
aacccctagt gatggagttg gccactccct ctctgcgcgc tcgctcgctc actgaggccg 5280
ggcgaccaaa ggtcgcccga cgcccgggct ttgcccgggc ggcctcagtg agcgagcgag 5340
cgcgcagaga gggagtggcc aa 5362
<210> 13
<211> 5464
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 13
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgactg tttgctgttt 180
gctgcttgca atgtttgccc attttaggga catgtttgct gtttgctgct tgcaatgttt 240
gcccatttta gggacatgtt tgctgtttgc tgcttgcaat gtttgcccat tttagggaca 300
tgtttgctgt ttgctgcttg caatgtttgc ccattttagg gacaacgcga aacgtcgact 360
ggacacagga cgctgtggtt tctgagccag ggggcgactc agatcccagc cagtggactt 420
agcccctgtt tgctcctccg ataactgggg tgaccttggt taatattcac cagcagcctc 480
ccccgttgcc cctctggatc cactgcttaa atacggacga ggacagggcc ctgtctcctc 540
agcttcaggc accaccactg acctgggaca gtgaatcgta agtactagca gctacaatcc 600
agctaccatt ctgcttttat tttatggttg ggataaggct ggattattct gagtccaagc 660
taggcccttt tgctaatcat gttcatacct cttatcttcc tcccacagct cctgggcaac 720
gtgctggtct gtgtgctggc ccatcacttt ggcaaagaat tgcgatcgcc accatgcaga 780
ttgagctgag cacctgcttc ttcctgtgcc tgctgaggtt ctgcttctct gccaccagga 840
gatactacct gggggctgtg gagctgagct gggactacat gcagtctgac ctgggggagc 900
tgcctgtgga tgccaggttc ccccccagag tgcccaagag cttccccttc aacacctctg 960
tggtgtacaa gaagaccctg tttgtggagt tcactgacca cctgttcaac attgccaagc 1020
ccaggccccc ctggatgggc ctgctgggcc ccaccatcca ggctgaggtg tatgacactg 1080
tggtgatcac cctgaagaac atggccagcc accctgtgag cctgcatgct gtgggggtga 1140
gctactggaa ggcctctgag ggggctgagt atgatgacca gaccagccag agggagaagg 1200
aggatgacaa ggtgttccct gggggcagcc acacctatgt gtggcaggtg ctgaaggaga 1260
atggccccat ggcctctgac cccctgtgcc tgacctacag ctacctgagc catgtggacc 1320
tggtgaagga cctgaactct ggcctgattg gggccctgct ggtgtgcagg gagggcagcc 1380
tggccaagga gaagacccag accctgcaca agttcatcct gctgtttgct gtgtttgatg 1440
agggcaagag ctggcactct gaaaccaaga acagcctgat gcaggacagg gatgctgcct 1500
ctgccagggc ctggcccaag atgcacactg tgaatggcta tgtgaacagg agcctgcctg 1560
gcctgattgg ctgccacagg aagtctgtgt actggcatgt gattggcatg ggcaccaccc 1620
ctgaggtgca cagcatcttc ctggagggcc acaccttcct ggtcaggaac cacaggcagg 1680
ccagcctgga gatcagcccc atcaccttcc tgactgccca gaccctgctg atggacctgg 1740
gccagttcct gctgttctgc cacatcagca gccaccagca tgatggcatg gaggcctatg 1800
tgaaggtgga cagctgccct gaggagcccc agctgaggat gaagaacaat gaggaggctg 1860
aggactatga tgatgacctg actgactctg agatggatgt ggtgaggttt gatgatgaca 1920
acagccccag cttcatccag atcaggtctg tggccaagaa gcaccccaag acctgggtgc 1980
actacattgc tgctgaggag gaggactggg actatgcccc cctggtgctg gcccctgatg 2040
acaggagcta caagagccag tacctgaaca atggccccca gaggattggc aggaagtaca 2100
agaaggtcag gttcatggcc tacactgatg aaaccttcaa gaccagggag gccatccagc 2160
atgagtctgg catcctgggc cccctgctgt atggggaggt gggggacacc ctgctgatca 2220
tcttcaagaa ccaggccagc aggccctaca acatctaccc ccatggcatc actgatgtga 2280
ggcccctgta cagcaggagg ctgcccaagg gggtgaagca cctgaaggac ttccccatcc 2340
tgcctgggga gatcttcaag tacaagtgga ctgtgactgt ggaggatggc cccaccaagt 2400
ctgaccccag gtgcctgacc agatactaca gcagctttgt gaacatggag agggacctgg 2460
cctctggcct gattggcccc ctgctgatct gctacaagga gtctgtggac cagaggggca 2520
accagatcat gtctgacaag aggaatgtga tcctgttctc tgtgtttgat gagaacagga 2580
gctggtacct gactgagaac atccagaggt tcctgcccaa ccctgctggg gtgcagctgg 2640
aggaccctga gttccaggcc agcaacatca tgcacagcat caatggctat gtgtttgaca 2700
gcctgcagct gtctgtgtgc ctgcatgagg tggcctactg gtacatcctg agcattgggg 2760
cccagactga cttcctgtct gtgttcttct ctggctacac cttcaagcac aagatggtgt 2820
atgaggacac cctgaccctg ttccccttct ctggggagac tgtgttcatg agcatggaga 2880
accctggcct gtggattctg ggctgccaca actctgactt caggaacagg ggcatgactg 2940
ccctgctgaa agtctccagc tgtgacaaga acactgggga ctactatgag gacagctatg 3000
aggacatctc tgcctacctg ctgagcaaga acaatgccat tgagcccagg agcttcagcc 3060
agaacccccc agtgctgaag aggcaccaga gggagatcac caggaccacc ctgcagtctg 3120
accaggagga gattgactat gatgacacca tctctgtgga gatgaagaag gaggactttg 3180
acatctacga cgaggacgag aaccagagcc ccaggagctt ccagaagaag accaggcact 3240
acttcattgc tgctgtggag aggctgtggg actatggcat gagcagcagc ccccatgtgc 3300
tgaggaacag ggcccagtct ggctctgtgc cccagttcaa gaaggtggtg ttccaggagt 3360
tcactgatgg cagcttcacc cagcccctgt acagagggga gctgaatgag cacctgggcc 3420
tgctgggccc ctacatcagg gctgaggtgg aggacaacat catggtgacc ttcaggaacc 3480
aggccagcag gccctacagc ttctacagca gcctgatcag ctatgaggag gaccagaggc 3540
agggggctga gcccaggaag aactttgtga agcccaatga aaccaagacc tacttctgga 3600
aggtgcagca ccacatggcc cccaccaagg atgagtttga ctgcaaggcc tgggcctact 3660
tctctgatgt ggacctggag aaggatgtgc actctggcct gattggcccc ctgctggtgt 3720
gccacaccaa caccctgaac cctgcccatg gcaggcaggt gactgtgcag gagtttgccc 3780
tgttcttcac catctttgat gaaaccaaga gctggtactt cactgagaac atggagagga 3840
actgcagggc cccctgcaac atccagatgg aggaccccac cttcaaggag aactacaggt 3900
tccatgccat caatggctac atcatggaca ccctgcctgg cctggtgatg gcccaggacc 3960
agaggatcag gtggtacctg ctgagcatgg gcagcaatga gaacatccac agcatccact 4020
tctctggcca tgtgttcact gtgaggaaga aggaggagta caagatggcc ctgtacaacc 4080
tgtaccctgg ggtgtttgag actgtggaga tgctgcccag caaggctggc atctggaggg 4140
tggagtgcct gattggggag cacctgcatg ctggcatgag caccctgttc ctggtgtaca 4200
gcaacaagtg ccagaccccc ctgggcatgg cctctggcca catcagggac ttccagatca 4260
ctgcctctgg ccagtatggc cagtgggccc ccaagctggc caggctgcac tactctggca 4320
gcatcaatgc ctggagcacc aaggagccct tcagctggat caaggtggac ctgctggccc 4380
ccatgatcat ccatggcatc aagacccagg gggccaggca gaagttcagc agcctgtaca 4440
tcagccagtt catcatcatg tacagcctgg atggcaagaa gtggcagacc tacaggggca 4500
acagcactgg caccctgatg gtgttctttg gcaatgtgga cagctctggc atcaagcaca 4560
acatcttcaa cccccccatc attgccagat acatcaggct gcaccccacc cactacagca 4620
tcaggagcac cctgaggatg gagctgatgg gctgtgacct gaacagctgc agcatgcccc 4680
tgggcatgga gagcaaggcc atctctgatg cccagatcac tgccagcagc tacttcacca 4740
acatgtttgc cacctggagc cccagcaagg ccaggctgca cctgcagggc aggagcaatg 4800
cctggaggcc ccaggtcaac aaccccaagg agtggctgca ggtggacttc cagaagacca 4860
tgaaggtgac tggggtgacc acccaggggg tgaagagcct gctgaccagc atgtatgtga 4920
aggagttcct gatcagcagc agccaggatg gccaccagtg gaccctgttc ttccagaatg 4980
gcaaggtgaa ggtgttccag ggcaaccagg acagcttcac ccctgtggtg aacagcctgg 5040
acccccccct gctgaccaga tacctgagga ttcaccccca gagctgggtg caccagattg 5100
ccctgaggat ggaggtgctg ggctgtgagg cccaggacct gtactgacct cgaggcactg 5160
tcctttccta ataaaatgag gaaattgcat cgcattgtct gagtaggtgt cattctattc 5220
tggggggtgg ggtggggcag gacagcaagg gggaggattg ggaagacaat agcaggcatg 5280
ctggggatgc ggtgggctct atgggcacgt ggcggccgca ggaaccccta gtgatggagt 5340
tggccactcc ctctctgcgc gctcgctcgc tcactgaggc cgggcgacca aaggtcgccc 5400
gacgcccggg ctttgcccgg gcggcctcag tgagcgagcg agcgcgcaga gagggagtgg 5460
ccaa 5464
<210> 14
<211> 6354
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 14
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg tttaaacgtc gacaggttaa 180
tttttaaaaa gcagtcaaaa gtccaagtgg cccttggcag catttactct ctctgtttgc 240
tctggttaat aatctcagga gcacaaacat tcctggaggc aggagaagaa atcaacatcc 300
tggacttatc ctctgggcct ctccccaccc ccaggagagg ctcaggttaa tttttaaaaa 360
gcagtcaaaa gtccaagtgg cccttggcag catttactct ctctgtttgc tctggttaat 420
aatctcagga gcacaaacat tcctggaggc aggagaagaa atcaacatcc tggacttatc 480
ctctgggcct ctccccaccc ccaggagagg ctgtcgactg gacacaggac gctgtggttt 540
ctgagccagg gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga 600
taactggggt gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc 660
actgcttaaa tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga 720
cctgggacag tgaatcgtaa gtactagcag ctacaatcca gctaccattc tgcttttatt 780
ttatggttgg gataaggctg gattattctg agtccaagct aggccctttt gctaatcatg 840
ttcatacctc ttatcttcct cccacagctc ctgggcaacg tgctggtctg tgtgctggcc 900
catcactttg gcaaagaatt gcgatcgcca ccatgcagat tgagctgagc acctgcttct 960
tcctgtgcct gctgaggttc tgcttctctg ccaccaggag atactacctg ggggctgtgg 1020
agctgagctg ggactacatg cagtctgacc tgggggagct gcctgtggat gccaggttcc 1080
cccccagagt gcccaagagc ttccccttca acacctctgt ggtgtacaag aagaccctgt 1140
ttgtggagtt cactgaccac ctgttcaaca ttgccaagcc caggcccccc tggatgggcc 1200
tgctgggccc caccatccag gctgaggtgt atgacactgt ggtgatcacc ctgaagaaca 1260
tggccagcca ccctgtgagc ctgcatgctg tgggggtgag ctactggaag gcctctgagg 1320
gggctgagta tgatgaccag accagccaga gggagaagga ggatgacaag gtgttccctg 1380
ggggcagcca cacctatgtg tggcaggtgc tgaaggagaa tggccccatg gcctctgacc 1440
ccctgtgcct gacctacagc tacctgagcc atgtggacct ggtgaaggac ctgaactctg 1500
gcctgattgg ggccctgctg gtgtgcaggg agggcagcct ggccaaggag aagacccaga 1560
ccctgcacaa gttcatcctg ctgtttgctg tgtttgatga gggcaagagc tggcactctg 1620
aaaccaagaa cagcctgatg caggacaggg atgctgcctc tgccagggcc tggcccaaga 1680
tgcacactgt gaatggctat gtgaacagga gcctgcctgg cctgattggc tgccacagga 1740
agtctgtgta ctggcatgtg attggcatgg gcaccacccc tgaggtgcac agcatcttcc 1800
tggagggcca caccttcctg gtcaggaacc acaggcaggc cagcctggag atcagcccca 1860
tcaccttcct gactgcccag accctgctga tggacctggg ccagttcctg ctgttctgcc 1920
acatcagcag ccaccagcat gatggcatgg aggcctatgt gaaggtggac agctgccctg 1980
aggagcccca gctgaggatg aagaacaatg aggaggctga ggactatgat gatgacctga 2040
ctgactctga gatggatgtg gtgaggtttg atgatgacaa cagccccagc ttcatccaga 2100
tcaggtctgt ggccaagaag caccccaaga cctgggtgca ctacattgct gctgaggagg 2160
aggactggga ctatgccccc ctggtgctgg cccctgatga caggagctac aagagccagt 2220
acctgaacaa tggcccccag aggattggca ggaagtacaa gaaggtcagg ttcatggcct 2280
acactgatga aaccttcaag accagggagg ccatccagca tgagtctggc atcctgggcc 2340
ccctgctgta tggggaggtg ggggacaccc tgctgatcat cttcaagaac caggccagca 2400
ggccctacaa catctacccc catggcatca ctgatgtgag gcccctgtac agcaggaggc 2460
tgcccaaggg ggtgaagcac ctgaaggact tccccatcct gcctggggag atcttcaagt 2520
acaagtggac tgtgactgtg gaggatggcc ccaccaagtc tgaccccagg tgcctgacca 2580
gatactacag cagctttgtg aacatggaga gggacctggc ctctggcctg attggccccc 2640
tgctgatctg ctacaaggag tctgtggacc agaggggcaa ccagatcatg tctgacaaga 2700
ggaatgtgat cctgttctct gtgtttgatg agaacaggag ctggtacctg actgagaaca 2760
tccagaggtt cctgcccaac cctgctgggg tgcagctgga ggaccctgag ttccaggcca 2820
gcaacatcat gcacagcatc aatggctatg tgtttgacag cctgcagctg tctgtgtgcc 2880
tgcatgaggt ggcctactgg tacatcctga gcattggggc ccagactgac ttcctgtctg 2940
tgttcttctc tggctacacc ttcaagcaca agatggtgta tgaggacacc ctgaccctgt 3000
tccccttctc tggggagact gtgttcatga gcatggagaa ccctggcctg tggattctgg 3060
gctgccacaa ctctgacttc aggaacaggg gcatgactgc cctgctgaaa gtctccagct 3120
gtgacaagaa cactggggac tactatgagg acagctatga ggacatctct gcctacctgc 3180
tgagcaagaa caatgccatt gagcccagga gcttcagcca gaacccccca gtgctgaaga 3240
ggcaccagag ggagatcacc aggaccaccc tgcagtctga ccaggaggag attgactatg 3300
atgacaccat ctctgtggag atgaagaagg aggactttga catctacgac gaggacgaga 3360
accagagccc caggagcttc cagaagaaga ccaggcacta cttcattgct gctgtggaga 3420
ggctgtggga ctatggcatg agcagcagcc cccatgtgct gaggaacagg gcccagtctg 3480
gctctgtgcc ccagttcaag aaggtggtgt tccaggagtt cactgatggc agcttcaccc 3540
agcccctgta cagaggggag ctgaatgagc acctgggcct gctgggcccc tacatcaggg 3600
ctgaggtgga ggacaacatc atggtgacct tcaggaacca ggccagcagg ccctacagct 3660
tctacagcag cctgatcagc tatgaggagg accagaggca gggggctgag cccaggaaga 3720
actttgtgaa gcccaatgaa accaagacct acttctggaa ggtgcagcac cacatggccc 3780
ccaccaagga tgagtttgac tgcaaggcct gggcctactt ctctgatgtg gacctggaga 3840
aggatgtgca ctctggcctg attggccccc tgctggtgtg ccacaccaac accctgaacc 3900
ctgcccatgg caggcaggtg actgtgcagg agtttgccct gttcttcacc atctttgatg 3960
aaaccaagag ctggtacttc actgagaaca tggagaggaa ctgcagggcc ccctgcaaca 4020
tccagatgga ggaccccacc ttcaaggaga actacaggtt ccatgccatc aatggctaca 4080
tcatggacac cctgcctggc ctggtgatgg cccaggacca gaggatcagg tggtacctgc 4140
tgagcatggg cagcaatgag aacatccaca gcatccactt ctctggccat gtgttcactg 4200
tgaggaagaa ggaggagtac aagatggccc tgtacaacct gtaccctggg gtgtttgaga 4260
ctgtggagat gctgcccagc aaggctggca tctggagggt ggagtgcctg attggggagc 4320
acctgcatgc tggcatgagc accctgttcc tggtgtacag caacaagtgc cagacccccc 4380
tgggcatggc ctctggccac atcagggact tccagatcac tgcctctggc cagtatggcc 4440
agtgggcccc caagctggcc aggctgcact actctggcag catcaatgcc tggagcacca 4500
aggagccctt cagctggatc aaggtggacc tgctggcccc catgatcatc catggcatca 4560
agacccaggg ggccaggcag aagttcagca gcctgtacat cagccagttc atcatcatgt 4620
acagcctgga tggcaagaag tggcagacct acaggggcaa cagcactggc accctgatgg 4680
tgttctttgg caatgtggac agctctggca tcaagcacaa catcttcaac ccccccatca 4740
ttgccagata catcaggctg caccccaccc actacagcat caggagcacc ctgaggatgg 4800
agctgatggg ctgtgacctg aacagctgca gcatgcccct gggcatggag agcaaggcca 4860
tctctgatgc ccagatcact gccagcagct acttcaccaa catgtttgcc acctggagcc 4920
ccagcaaggc caggctgcac ctgcagggca ggagcaatgc ctggaggccc caggtcaaca 4980
accccaagga gtggctgcag gtggacttcc agaagaccat gaaggtgact ggggtgacca 5040
cccagggggt gaagagcctg ctgaccagca tgtatgtgaa ggagttcctg atcagcagca 5100
gccaggatgg ccaccagtgg accctgttct tccagaatgg caaggtgaag gtgttccagg 5160
gcaaccagga cagcttcacc cctgtggtga acagcctgga cccccccctg ctgaccagat 5220
acctgaggat tcacccccag agctgggtgc accagattgc cctgaggatg gaggtgctgg 5280
gctgtgaggc ccaggacctg tactgacctc gaggtgtgcc ttctagttgc cagccatctg 5340
ttgtttgccc ctcccccgtg ccttccttga ccctggaagg tgccactccc actgtccttt 5400
cctaataaaa tgaggaaatt gcatcgcatt gtctgagtag gtgtcattct attctggggg 5460
gtggggtggg gcaggacagc aagggggagg attgggaaga caatagcagg catgctgggg 5520
atgcggtggg ctctatgggc acgtgccctc tcacactacc taaaccacgc caggacaacc 5580
tctgctcctc tccaccgaaa ttccaagggg tcgagtggat gttggaggtg gcatgggccc 5640
agagaggtct ctgacctctg ccccagctcc aaggtcagca ggcagggagg gctgtgtgtt 5700
tgctgtttgc tgcttgcaat gtttgcccat tttagggaca tgagtaggct gaagtttgtt 5760
cagtgtggac ttcagaggca gcacacaaac agctgctgga ggatgggaac tgaggggttg 5820
gaagggggca gggtgagccc agaaactcct gtgtgcctct gagcctgcag ccctctcaca 5880
ctacctaaac cacgccagga caacctctgc tcctctccac cgaaattcca aggggtcgag 5940
tggatgttgg aggtggcatg ggcccagaga ggtctctgac ctctgcccca gctccaaggt 6000
cagcaggcag ggagggctgt gtgtttgctg tttgctgctt gcaatgtttg cccattttag 6060
ggacatgagt aggctgaagt ttgttcagtg tggacttcag aggcagcaca caaacagctg 6120
ctggaggatg ggaactgagg ggttggaagg gggcagggtg agcccagaaa ctcctgtgtg 6180
cctctgagcc tgcagcacgt ggcggccgca ggaaccccta gtgatggagt tggccactcc 6240
ctctctgcgc gctcgctcgc tcactgaggc cgggcgacca aaggtcgccc gacgcccggg 6300
ctttgcccgg gcggcctcag tgagcgagcg agcgcgcaga gagggagtgg ccaa 6354
<210> 15
<211> 6308
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 15
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttaattttta aaaagcagtc 180
aaaagtccaa gtggcccttg gcagcattta ctctctctgt ttgctctggt taataatctc 240
aggagcacaa acattcctgg aggcaggaga agaaatcaac atcctggact tatcctctgg 300
gcctgttaat ttttaaaaag cagtcaaaag tccaagtggc ccttggcagc atttactctc 360
tctgtttgct ctggttaata atctcaggag cacaaacatt cctggaggca ggagaagaaa 420
tcaacatcct ggacttatcc tctgggccta ggcctgaggc tggtcaaaat tgaacctcct 480
cctgctctga gcagcctggg gggcagacta agcagagggc tgtgcagacc cacataaaga 540
gcctactgtg tgccaggcac ttcacccgag gcacttcaca agcatgcttg ggaatgaaac 600
ttccaactct ttgggatgca ggtgaaacag ttcctggttc agagaggtga agcggcctgc 660
ctgaggcagc acagctcttc tttacagatg tgcttcccca cctctaccct gtctcacggc 720
cccccatgcc agcctgacgg ttgtgtctgc ctcagtcatg ctccattttt ccatcgggac 780
catcaagagg gtgtttgtgt ctaaggctga ctgggtaact ttggatgagc ggtctctccg 840
ctctgagcct gtttcctcat ctgtcaaatg ggctctaacc cactctgatc tcccagggcg 900
gcagtaagtc ttcagcatca ggcattttgg ggtgactcag taaatggtag atcttgctac 960
cagtggaaca gccactaagg attctgcagt gagagcagag ggccagctaa gtggtactct 1020
cccagagact gtctgactca cgccaccccc tccaccttgg acacaggacg ctgtggtttc 1080
tgagccaggt acaatgactc ctttcggtaa gtgcagtgga agctgtacac tgcccaggca 1140
aagcgtccgg gcagcgtagg cgggcgactc agatcccagc cagtggactt agcccctgtt 1200
tgctcctccg ataactgggg tgaccttggt taatattcac cagcagcctc ccccgttgcc 1260
cctctggatc cactgcttaa atacggacga ggacagggcc ctgtctcctc agcttcaggc 1320
accaccactg acctgggaca gtgaatcgta agtactagca gctacaatcc agctaccatt 1380
ctgcttttat tttatggttg ggataaggct ggattattct gagtccaagc taggcccttt 1440
tgctaatcat gttcatacct cttatcttcc tcccacagct cctgggcaac gtgctggtct 1500
gtgtgctggc ccatcacttt ggcaaagaat tgcgatcgcc accatgcaga ttgagctgag 1560
cacctgcttc ttcctgtgcc tgctgaggtt ctgcttctct gccaccagga gatactacct 1620
gggggctgtg gagctgagct gggactacat gcagtctgac ctgggggagc tgcctgtgga 1680
tgccaggttc ccccccagag tgcccaagag cttccccttc aacacctctg tggtgtacaa 1740
gaagaccctg tttgtggagt tcactgacca cctgttcaac attgccaagc ccaggccccc 1800
ctggatgggc ctgctgggcc ccaccatcca ggctgaggtg tatgacactg tggtgatcac 1860
cctgaagaac atggccagcc accctgtgag cctgcatgct gtgggggtga gctactggaa 1920
ggcctctgag ggggctgagt atgatgacca gaccagccag agggagaagg aggatgacaa 1980
ggtgttccct gggggcagcc acacctatgt gtggcaggtg ctgaaggaga atggccccat 2040
ggcctctgac cccctgtgcc tgacctacag ctacctgagc catgtggacc tggtgaagga 2100
cctgaactct ggcctgattg gggccctgct ggtgtgcagg gagggcagcc tggccaagga 2160
gaagacccag accctgcaca agttcatcct gctgtttgct gtgtttgatg agggcaagag 2220
ctggcactct gaaaccaaga acagcctgat gcaggacagg gatgctgcct ctgccagggc 2280
ctggcccaag atgcacactg tgaatggcta tgtgaacagg agcctgcctg gcctgattgg 2340
ctgccacagg aagtctgtgt actggcatgt gattggcatg ggcaccaccc ctgaggtgca 2400
cagcatcttc ctggagggcc acaccttcct ggtcaggaac cacaggcagg ccagcctgga 2460
gatcagcccc atcaccttcc tgactgccca gaccctgctg atggacctgg gccagttcct 2520
gctgttctgc cacatcagca gccaccagca tgatggcatg gaggcctatg tgaaggtgga 2580
cagctgccct gaggagcccc agctgaggat gaagaacaat gaggaggctg aggactatga 2640
tgatgacctg actgactctg agatggatgt ggtgaggttt gatgatgaca acagccccag 2700
cttcatccag atcaggtctg tggccaagaa gcaccccaag acctgggtgc actacattgc 2760
tgctgaggag gaggactggg actatgcccc cctggtgctg gcccctgatg acaggagcta 2820
caagagccag tacctgaaca atggccccca gaggattggc aggaagtaca agaaggtcag 2880
gttcatggcc tacactgatg aaaccttcaa gaccagggag gccatccagc atgagtctgg 2940
catcctgggc cccctgctgt atggggaggt gggggacacc ctgctgatca tcttcaagaa 3000
ccaggccagc aggccctaca acatctaccc ccatggcatc actgatgtga ggcccctgta 3060
cagcaggagg ctgcccaagg gggtgaagca cctgaaggac ttccccatcc tgcctgggga 3120
gatcttcaag tacaagtgga ctgtgactgt ggaggatggc cccaccaagt ctgaccccag 3180
gtgcctgacc agatactaca gcagctttgt gaacatggag agggacctgg cctctggcct 3240
gattggcccc ctgctgatct gctacaagga gtctgtggac cagaggggca accagatcat 3300
gtctgacaag aggaatgtga tcctgttctc tgtgtttgat gagaacagga gctggtacct 3360
gactgagaac atccagaggt tcctgcccaa ccctgctggg gtgcagctgg aggaccctga 3420
gttccaggcc agcaacatca tgcacagcat caatggctat gtgtttgaca gcctgcagct 3480
gtctgtgtgc ctgcatgagg tggcctactg gtacatcctg agcattgggg cccagactga 3540
cttcctgtct gtgttcttct ctggctacac cttcaagcac aagatggtgt atgaggacac 3600
cctgaccctg ttccccttct ctggggagac tgtgttcatg agcatggaga accctggcct 3660
gtggattctg ggctgccaca actctgactt caggaacagg ggcatgactg ccctgctgaa 3720
agtctccagc tgtgacaaga acactgggga ctactatgag gacagctatg aggacatctc 3780
tgcctacctg ctgagcaaga acaatgccat tgagcccagg agcttcagcc agaacccccc 3840
agtgctgaag aggcaccaga gggagatcac caggaccacc ctgcagtctg accaggagga 3900
gattgactat gatgacacca tctctgtgga gatgaagaag gaggactttg acatctacga 3960
cgaggacgag aaccagagcc ccaggagctt ccagaagaag accaggcact acttcattgc 4020
tgctgtggag aggctgtggg actatggcat gagcagcagc ccccatgtgc tgaggaacag 4080
ggcccagtct ggctctgtgc cccagttcaa gaaggtggtg ttccaggagt tcactgatgg 4140
cagcttcacc cagcccctgt acagagggga gctgaatgag cacctgggcc tgctgggccc 4200
ctacatcagg gctgaggtgg aggacaacat catggtgacc ttcaggaacc aggccagcag 4260
gccctacagc ttctacagca gcctgatcag ctatgaggag gaccagaggc agggggctga 4320
gcccaggaag aactttgtga agcccaatga aaccaagacc tacttctgga aggtgcagca 4380
ccacatggcc cccaccaagg atgagtttga ctgcaaggcc tgggcctact tctctgatgt 4440
ggacctggag aaggatgtgc actctggcct gattggcccc ctgctggtgt gccacaccaa 4500
caccctgaac cctgcccatg gcaggcaggt gactgtgcag gagtttgccc tgttcttcac 4560
catctttgat gaaaccaaga gctggtactt cactgagaac atggagagga actgcagggc 4620
cccctgcaac atccagatgg aggaccccac cttcaaggag aactacaggt tccatgccat 4680
caatggctac atcatggaca ccctgcctgg cctggtgatg gcccaggacc agaggatcag 4740
gtggtacctg ctgagcatgg gcagcaatga gaacatccac agcatccact tctctggcca 4800
tgtgttcact gtgaggaaga aggaggagta caagatggcc ctgtacaacc tgtaccctgg 4860
ggtgtttgag actgtggaga tgctgcccag caaggctggc atctggaggg tggagtgcct 4920
gattggggag cacctgcatg ctggcatgag caccctgttc ctggtgtaca gcaacaagtg 4980
ccagaccccc ctgggcatgg cctctggcca catcagggac ttccagatca ctgcctctgg 5040
ccagtatggc cagtgggccc ccaagctggc caggctgcac tactctggca gcatcaatgc 5100
ctggagcacc aaggagccct tcagctggat caaggtggac ctgctggccc ccatgatcat 5160
ccatggcatc aagacccagg gggccaggca gaagttcagc agcctgtaca tcagccagtt 5220
catcatcatg tacagcctgg atggcaagaa gtggcagacc tacaggggca acagcactgg 5280
caccctgatg gtgttctttg gcaatgtgga cagctctggc atcaagcaca acatcttcaa 5340
cccccccatc attgccagat acatcaggct gcaccccacc cactacagca tcaggagcac 5400
cctgaggatg gagctgatgg gctgtgacct gaacagctgc agcatgcccc tgggcatgga 5460
gagcaaggcc atctctgatg cccagatcac tgccagcagc tacttcacca acatgtttgc 5520
cacctggagc cccagcaagg ccaggctgca cctgcagggc aggagcaatg cctggaggcc 5580
ccaggtcaac aaccccaagg agtggctgca ggtggacttc cagaagacca tgaaggtgac 5640
tggggtgacc acccaggggg tgaagagcct gctgaccagc atgtatgtga aggagttcct 5700
gatcagcagc agccaggatg gccaccagtg gaccctgttc ttccagaatg gcaaggtgaa 5760
ggtgttccag ggcaaccagg acagcttcac ccctgtggtg aacagcctgg acccccccct 5820
gctgaccaga tacctgagga ttcaccccca gagctgggtg caccagattg ccctgaggat 5880
ggaggtgctg ggctgtgagg cccaggacct gtactgacct cgagctgtgc cttctagttg 5940
ccagccatct gttgtttgcc cctcccccgt gccttccttg accctggaag gtgccactcc 6000
cactgtcctt tcctaataaa atgaggaaat tgcatcgcat tgtctgagta ggtgtcattc 6060
tattctgggg ggtggggtgg ggcaggacag caagggggag gattgggaag acaatagcag 6120
gcatgctggg gatgcggtgg gctctatgga ccggtgcggc cgcaggaacc cctagtgatg 6180
gagttggcca ctccctctct gcgcgctcgc tcgctcactg aggccgggcg accaaaggtc 6240
gcccgacgcc cgggctttgc ccgggcggcc tcagtgagcg agcgagcgcg cagagaggga 6300
gtggccaa 6308
<210> 16
<211> 5635
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 16
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttaattttta aaaagcagtc 180
aaaagtccaa gtggcccttg gcagcattta ctctctctgt ttgctctggt taataatctc 240
aggagcacaa acattcctgg aggcaggaga agaaatcaac atcctggact tatcctctgg 300
gcctgttaat ttttaaaaag cagtcaaaag tccaagtggc ccttggcagc atttactctc 360
tctgtttgct ctggttaata atctcaggag cacaaacatt cctggaggca ggagaagaaa 420
tcaacatcct ggacttatcc tctgggccta gtcgactgga cacaggacgc tgtggtttct 480
gagccagggg gcgactcaga tcccagccag tggacttagc ccctgtttgc tcctccgata 540
actggggtga ccttggttaa tattcaccag cagcctcccc cgttgcccct ctggatccac 600
tgcttaaata cggacgagga cagggccctg tctcctcagc ttcaggcacc accactgacc 660
tgggacagtg aatcgtaagt actagcagct acaatccagc taccattctg cttttatttt 720
atggttggga taaggctgga ttattctgag tccaagctag gcccttttgc taatcatgtt 780
catacctctt atcttcctcc cacagctcct gggcaacgtg ctggtctgtg tgctggccca 840
tcactttggc aaagaattgc gatcgccacc atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc 900
ctgtgcctgc tgaggttctg cttctctgcc accaggagat actacctggg ggctgtggag 960
ctgagctggg actacatgca gtctgacctg ggggagctgc ctgtggatgc caggttcccc 1020
cccagagtgc ccaagagctt ccccttcaac acctctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt 1080
gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt gccaagccca ggcccccctg gatgggcctg 1140
ctgggcccca ccatccaggc tgaggtgtat gacactgtgg tgatcaccct gaagaacatg 1200
gccagccacc ctgtgagcct gcatgctgtg ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg 1260
gctgagtatg atgaccagac cagccagagg gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg 1320
ggcagccaca cctatgtgtg gcaggtgctg aaggagaatg gccccatggc ctctgacccc 1380
ctgtgcctga cctacagcta cctgagccat gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc 1440
ctgattgggg ccctgctggt gtgcagggag ggcagcctgg ccaaggagaa gacccagacc 1500
ctgcacaagt tcatcctgct gtttgctgtg tttgatgagg gcaagagctg gcactctgaa 1560
accaagaaca gcctgatgca ggacagggat gctgcctctg ccagggcctg gcccaagatg 1620
cacactgtga atggctatgt gaacaggagc ctgcctggcc tgattggctg ccacaggaag 1680
tctgtgtact ggcatgtgat tggcatgggc accacccctg aggtgcacag catcttcctg 1740
gagggccaca ccttcctggt caggaaccac aggcaggcca gcctggagat cagccccatc 1800
accttcctga ctgcccagac cctgctgatg gacctgggcc agttcctgct gttctgccac 1860
atcagcagcc accagcatga tggcatggag gcctatgtga aggtggacag ctgccctgag 1920
gagccccagc tgaggatgaa gaacaatgag gaggctgagg actatgatga tgacctgact 1980
gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat gatgacaaca gccccagctt catccagatc 2040
aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag 2100
gactgggact atgcccccct ggtgctggcc cctgatgaca ggagctacaa gagccagtac 2160
ctgaacaatg gcccccagag gattggcagg aagtacaaga aggtcaggtt catggcctac 2220
actgatgaaa ccttcaagac cagggaggcc atccagcatg agtctggcat cctgggcccc 2280
ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg ctgatcatct tcaagaacca ggccagcagg 2340
ccctacaaca tctaccccca tggcatcact gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg 2400
cccaaggggg tgaagcacct gaaggacttc cccatcctgc ctggggagat cttcaagtac 2460
aagtggactg tgactgtgga ggatggcccc accaagtctg accccaggtg cctgaccaga 2520
tactacagca gctttgtgaa catggagagg gacctggcct ctggcctgat tggccccctg 2580
ctgatctgct acaaggagtc tgtggaccag aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg 2640
aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag aacaggagct ggtacctgac tgagaacatc 2700
cagaggttcc tgcccaaccc tgctggggtg cagctggagg accctgagtt ccaggccagc 2760
aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtg tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg 2820
catgaggtgg cctactggta catcctgagc attggggccc agactgactt cctgtctgtg 2880
ttcttctctg gctacacctt caagcacaag atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc 2940
cccttctctg gggagactgt gttcatgagc atggagaacc ctggcctgtg gattctgggc 3000
tgccacaact ctgacttcag gaacaggggc atgactgccc tgctgaaagt ctccagctgt 3060
gacaagaaca ctggggacta ctatgaggac agctatgagg acatctctgc ctacctgctg 3120
agcaagaaca atgccattga gcccaggagc ttcagccaga accccccagt gctgaagagg 3180
caccagaggg agatcaccag gaccaccctg cagtctgacc aggaggagat tgactatgat 3240
gacaccatct ctgtggagat gaagaaggag gactttgaca tctacgacga ggacgagaac 3300
cagagcccca ggagcttcca gaagaagacc aggcactact tcattgctgc tgtggagagg 3360
ctgtgggact atggcatgag cagcagcccc catgtgctga ggaacagggc ccagtctggc 3420
tctgtgcccc agttcaagaa ggtggtgttc caggagttca ctgatggcag cttcacccag 3480
cccctgtaca gaggggagct gaatgagcac ctgggcctgc tgggccccta catcagggct 3540
gaggtggagg acaacatcat ggtgaccttc aggaaccagg ccagcaggcc ctacagcttc 3600
tacagcagcc tgatcagcta tgaggaggac cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac 3660
tttgtgaagc ccaatgaaac caagacctac ttctggaagg tgcagcacca catggccccc 3720
accaaggatg agtttgactg caaggcctgg gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag 3780
gatgtgcact ctggcctgat tggccccctg ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct 3840
gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag tttgccctgt tcttcaccat ctttgatgaa 3900
accaagagct ggtacttcac tgagaacatg gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc 3960
cagatggagg accccacctt caaggagaac tacaggttcc atgccatcaa tggctacatc 4020
atggacaccc tgcctggcct ggtgatggcc caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg 4080
agcatgggca gcaatgagaa catccacagc atccacttct ctggccatgt gttcactgtg 4140
aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg tacaacctgt accctggggt gtttgagact 4200
gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatc tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac 4260
ctgcatgctg gcatgagcac cctgttcctg gtgtacagca acaagtgcca gacccccctg 4320
ggcatggcct ctggccacat cagggacttc cagatcactg cctctggcca gtatggccag 4380
tgggccccca agctggccag gctgcactac tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag 4440
gagcccttca gctggatcaa ggtggacctg ctggccccca tgatcatcca tggcatcaag 4500
acccaggggg ccaggcagaa gttcagcagc ctgtacatca gccagttcat catcatgtac 4560
agcctggatg gcaagaagtg gcagacctac aggggcaaca gcactggcac cctgatggtg 4620
ttctttggca atgtggacag ctctggcatc aagcacaaca tcttcaaccc ccccatcatt 4680
gccagataca tcaggctgca ccccacccac tacagcatca ggagcaccct gaggatggag 4740
ctgatgggct gtgacctgaa cagctgcagc atgcccctgg gcatggagag caaggccatc 4800
tctgatgccc agatcactgc cagcagctac ttcaccaaca tgtttgccac ctggagcccc 4860
agcaaggcca ggctgcacct gcagggcagg agcaatgcct ggaggcccca ggtcaacaac 4920
cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag aagaccatga aggtgactgg ggtgaccacc 4980
cagggggtga agagcctgct gaccagcatg tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagc 5040
caggatggcc accagtggac cctgttcttc cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc 5100
aaccaggaca gcttcacccc tgtggtgaac agcctggacc cccccctgct gaccagatac 5160
ctgaggattc acccccagag ctgggtgcac cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggc 5220
tgtgaggccc aggacctgta ctgacctcga gctgtgcctt ctagttgcca gccatctgtt 5280
gtttgcccct cccccgtgcc ttccttgacc ctggaaggtg ccactcccac tgtcctttcc 5340
taataaaatg aggaaattgc atcgcattgt ctgagtaggt gtcattctat tctggggggt 5400
ggggtggggc aggacagcaa gggggaggat tgggaagaca atagcaggca tgctggggat 5460
gcggtgggct ctatggaccg gtgcggccgc aggaacccct agtgatggag ttggccactc 5520
cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgggcgacc aaaggtcgcc cgacgcccgg 5580
gctttgcccg ggcggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg gccaa 5635
<210> 17
<211> 6962
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 17
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgta ggctcagagg cacacaggag 180
tttctgggct caccctgccc ccttccaacc cctcagttcc catcctccag cagctgtttg 240
tgtgctgcct ctgaagtcca cactgaacaa acttcagcct actcatgtcc ctaaaatggg 300
caaacattgc aagcagcaaa cagcaaacac acagccctcc ctgcctgctg accttggagc 360
tggggcagag gtcagagacc tctctgggcc catgccacct ccaacatcca ctcgacccct 420
tggaatttcg gtggagagga gcagaggttg tcctggcgtg gtttaggtag tgtgagaggg 480
gtcgacaggc tcagaggcac acaggagttt ctgggctcac cctgccccct tccaacccct 540
cagttcccat cctccagcag ctgtttgtgt gctgcctctg aagtccacac tgaacaaact 600
tcagcctact catgtcccta aaatgggcaa acattgcaag cagcaaacag caaacacaca 660
gccctccctg cctgctgacc ttggagctgg ggcagaggtc agagacctct ctgggcccat 720
gccacctcca acatccactc gaccccttgg aatttcggtg gagaggagca gaggttgtcc 780
tggcgtggtt taggtagtgt gagaggggtc gacgttaatt tttaaaaagc agtcaaaagt 840
ccaagtggcc cttggcagca tttactctct ctgtttgctc tggttaataa tctcaggagc 900
acaaacattc ctggaggcag gagaagaaat caacatcctg gacttatcct ctgggcctgt 960
taatttttaa aaagcagtca aaagtccaag tggcccttgg cagcatttac tctctctgtt 1020
tgctctggtt aataatctca ggagcacaaa cattcctgga ggcaggagaa gaaatcaaca 1080
tcctggactt atcctctggg cctaggcctg aggctggtca aaattgaacc tcctcctgct 1140
ctgagcagcc tggggggcag actaagcaga gggctgtgca gacccacata aagagcctac 1200
tgtgtgccag gcacttcacc cgaggcactt cacaagcatg cttgggaatg aaacttccaa 1260
ctctttggga tgcaggtgaa acagttcctg gttcagagag gtgaagcggc ctgcctgagg 1320
cagcacagct cttctttaca gatgtgcttc cccacctcta ccctgtctca cggcccccca 1380
tgccagcctg acggttgtgt ctgcctcagt catgctccat ttttccatcg ggaccatcaa 1440
gagggtgttt gtgtctaagg ctgactgggt aactttggat gagcggtctc tccgctctga 1500
gcctgtttcc tcatctgtca aatgggctct aacccactct gatctcccag ggcggcagta 1560
agtcttcagc atcaggcatt ttggggtgac tcagtaaatg gtagatcttg ctaccagtgg 1620
aacagccact aaggattctg cagtgagagc agagggccag ctaagtggta ctctcccaga 1680
gactgtctga ctcacgccac cccctccacc ttggacacag gacgctgtgg tttctgagcc 1740
aggtacaatg actcctttcg gtaagtgcag tggaagctgt acactgccca ggcaaagcgt 1800
ccgggcagcg taggcgggcg actcagatcc cagccagtgg acttagcccc tgtttgctcc 1860
tccgataact ggggtgacct tggttaatat tcaccagcag cctcccccgt tgcccctctg 1920
gatccactgc ttaaatacgg acgaggacag ggccctgtct cctcagcttc aggcaccacc 1980
actgacctgg gacagtgaat cgtaagtact agcagctaca atccagctac cattctgctt 2040
ttattttatg gttgggataa ggctggatta ttctgagtcc aagctaggcc cttttgctaa 2100
tcatgttcat acctcttatc ttcctcccac agctcctggg caacgtgctg gtctgtgtgc 2160
tggcccatca ctttggcaaa gaattgcgat cgccaccatg cagattgagc tgagcacctg 2220
cttcttcctg tgcctgctga ggttctgctt ctctgccacc aggagatact acctgggggc 2280
tgtggagctg agctgggact acatgcagtc tgacctgggg gagctgcctg tggatgccag 2340
gttccccccc agagtgccca agagcttccc cttcaacacc tctgtggtgt acaagaagac 2400
cctgtttgtg gagttcactg accacctgtt caacattgcc aagcccaggc ccccctggat 2460
gggcctgctg ggccccacca tccaggctga ggtgtatgac actgtggtga tcaccctgaa 2520
gaacatggcc agccaccctg tgagcctgca tgctgtgggg gtgagctact ggaaggcctc 2580
tgagggggct gagtatgatg accagaccag ccagagggag aaggaggatg acaaggtgtt 2640
ccctgggggc agccacacct atgtgtggca ggtgctgaag gagaatggcc ccatggcctc 2700
tgaccccctg tgcctgacct acagctacct gagccatgtg gacctggtga aggacctgaa 2760
ctctggcctg attggggccc tgctggtgtg cagggagggc agcctggcca aggagaagac 2820
ccagaccctg cacaagttca tcctgctgtt tgctgtgttt gatgagggca agagctggca 2880
ctctgaaacc aagaacagcc tgatgcagga cagggatgct gcctctgcca gggcctggcc 2940
caagatgcac actgtgaatg gctatgtgaa caggagcctg cctggcctga ttggctgcca 3000
caggaagtct gtgtactggc atgtgattgg catgggcacc acccctgagg tgcacagcat 3060
cttcctggag ggccacacct tcctggtcag gaaccacagg caggccagcc tggagatcag 3120
ccccatcacc ttcctgactg cccagaccct gctgatggac ctgggccagt tcctgctgtt 3180
ctgccacatc agcagccacc agcatgatgg catggaggcc tatgtgaagg tggacagctg 3240
ccctgaggag ccccagctga ggatgaagaa caatgaggag gctgaggact atgatgatga 3300
cctgactgac tctgagatgg atgtggtgag gtttgatgat gacaacagcc ccagcttcat 3360
ccagatcagg tctgtggcca agaagcaccc caagacctgg gtgcactaca ttgctgctga 3420
ggaggaggac tgggactatg cccccctggt gctggcccct gatgacagga gctacaagag 3480
ccagtacctg aacaatggcc cccagaggat tggcaggaag tacaagaagg tcaggttcat 3540
ggcctacact gatgaaacct tcaagaccag ggaggccatc cagcatgagt ctggcatcct 3600
gggccccctg ctgtatgggg aggtggggga caccctgctg atcatcttca agaaccaggc 3660
cagcaggccc tacaacatct acccccatgg catcactgat gtgaggcccc tgtacagcag 3720
gaggctgccc aagggggtga agcacctgaa ggacttcccc atcctgcctg gggagatctt 3780
caagtacaag tggactgtga ctgtggagga tggccccacc aagtctgacc ccaggtgcct 3840
gaccagatac tacagcagct ttgtgaacat ggagagggac ctggcctctg gcctgattgg 3900
ccccctgctg atctgctaca aggagtctgt ggaccagagg ggcaaccaga tcatgtctga 3960
caagaggaat gtgatcctgt tctctgtgtt tgatgagaac aggagctggt acctgactga 4020
gaacatccag aggttcctgc ccaaccctgc tggggtgcag ctggaggacc ctgagttcca 4080
ggccagcaac atcatgcaca gcatcaatgg ctatgtgttt gacagcctgc agctgtctgt 4140
gtgcctgcat gaggtggcct actggtacat cctgagcatt ggggcccaga ctgacttcct 4200
gtctgtgttc ttctctggct acaccttcaa gcacaagatg gtgtatgagg acaccctgac 4260
cctgttcccc ttctctgggg agactgtgtt catgagcatg gagaaccctg gcctgtggat 4320
tctgggctgc cacaactctg acttcaggaa caggggcatg actgccctgc tgaaagtctc 4380
cagctgtgac aagaacactg gggactacta tgaggacagc tatgaggaca tctctgccta 4440
cctgctgagc aagaacaatg ccattgagcc caggagcttc agccagaacc ccccagtgct 4500
gaagaggcac cagagggaga tcaccaggac caccctgcag tctgaccagg aggagattga 4560
ctatgatgac accatctctg tggagatgaa gaaggaggac tttgacatct acgacgagga 4620
cgagaaccag agccccagga gcttccagaa gaagaccagg cactacttca ttgctgctgt 4680
ggagaggctg tgggactatg gcatgagcag cagcccccat gtgctgagga acagggccca 4740
gtctggctct gtgccccagt tcaagaaggt ggtgttccag gagttcactg atggcagctt 4800
cacccagccc ctgtacagag gggagctgaa tgagcacctg ggcctgctgg gcccctacat 4860
cagggctgag gtggaggaca acatcatggt gaccttcagg aaccaggcca gcaggcccta 4920
cagcttctac agcagcctga tcagctatga ggaggaccag aggcaggggg ctgagcccag 4980
gaagaacttt gtgaagccca atgaaaccaa gacctacttc tggaaggtgc agcaccacat 5040
ggcccccacc aaggatgagt ttgactgcaa ggcctgggcc tacttctctg atgtggacct 5100
ggagaaggat gtgcactctg gcctgattgg ccccctgctg gtgtgccaca ccaacaccct 5160
gaaccctgcc catggcaggc aggtgactgt gcaggagttt gccctgttct tcaccatctt 5220
tgatgaaacc aagagctggt acttcactga gaacatggag aggaactgca gggccccctg 5280
caacatccag atggaggacc ccaccttcaa ggagaactac aggttccatg ccatcaatgg 5340
ctacatcatg gacaccctgc ctggcctggt gatggcccag gaccagagga tcaggtggta 5400
cctgctgagc atgggcagca atgagaacat ccacagcatc cacttctctg gccatgtgtt 5460
cactgtgagg aagaaggagg agtacaagat ggccctgtac aacctgtacc ctggggtgtt 5520
tgagactgtg gagatgctgc ccagcaaggc tggcatctgg agggtggagt gcctgattgg 5580
ggagcacctg catgctggca tgagcaccct gttcctggtg tacagcaaca agtgccagac 5640
ccccctgggc atggcctctg gccacatcag ggacttccag atcactgcct ctggccagta 5700
tggccagtgg gcccccaagc tggccaggct gcactactct ggcagcatca atgcctggag 5760
caccaaggag cccttcagct ggatcaaggt ggacctgctg gcccccatga tcatccatgg 5820
catcaagacc cagggggcca ggcagaagtt cagcagcctg tacatcagcc agttcatcat 5880
catgtacagc ctggatggca agaagtggca gacctacagg ggcaacagca ctggcaccct 5940
gatggtgttc tttggcaatg tggacagctc tggcatcaag cacaacatct tcaacccccc 6000
catcattgcc agatacatca ggctgcaccc cacccactac agcatcagga gcaccctgag 6060
gatggagctg atgggctgtg acctgaacag ctgcagcatg cccctgggca tggagagcaa 6120
ggccatctct gatgcccaga tcactgccag cagctacttc accaacatgt ttgccacctg 6180
gagccccagc aaggccaggc tgcacctgca gggcaggagc aatgcctgga ggccccaggt 6240
caacaacccc aaggagtggc tgcaggtgga cttccagaag accatgaagg tgactggggt 6300
gaccacccag ggggtgaaga gcctgctgac cagcatgtat gtgaaggagt tcctgatcag 6360
cagcagccag gatggccacc agtggaccct gttcttccag aatggcaagg tgaaggtgtt 6420
ccagggcaac caggacagct tcacccctgt ggtgaacagc ctggaccccc ccctgctgac 6480
cagatacctg aggattcacc cccagagctg ggtgcaccag attgccctga ggatggaggt 6540
gctgggctgt gaggcccagg acctgtactg acctcgagct gtgccttcta gttgccagcc 6600
atctgttgtt tgcccctccc ccgtgccttc cttgaccctg gaaggtgcca ctcccactgt 6660
cctttcctaa taaaatgagg aaattgcatc gcattgtctg agtaggtgtc attctattct 6720
ggggggtggg gtggggcagg acagcaaggg ggaggattgg gaagacaata gcaggcatgc 6780
tggggatgcg gtgggctcta tggaccggtg cggccgcagg aacccctagt gatggagttg 6840
gccactccct ctctgcgcgc tcgctcgctc actgaggccg ggcgaccaaa ggtcgcccga 6900
cgcccgggct ttgcccgggc ggcctcagtg agcgagcgag cgcgcagaga gggagtggcc 6960
aa 6962
<210> 18
<211> 6289
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 18
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgta ggctcagagg cacacaggag 180
tttctgggct caccctgccc ccttccaacc cctcagttcc catcctccag cagctgtttg 240
tgtgctgcct ctgaagtcca cactgaacaa acttcagcct actcatgtcc ctaaaatggg 300
caaacattgc aagcagcaaa cagcaaacac acagccctcc ctgcctgctg accttggagc 360
tggggcagag gtcagagacc tctctgggcc catgccacct ccaacatcca ctcgacccct 420
tggaatttcg gtggagagga gcagaggttg tcctggcgtg gtttaggtag tgtgagaggg 480
gtcgacaggc tcagaggcac acaggagttt ctgggctcac cctgccccct tccaacccct 540
cagttcccat cctccagcag ctgtttgtgt gctgcctctg aagtccacac tgaacaaact 600
tcagcctact catgtcccta aaatgggcaa acattgcaag cagcaaacag caaacacaca 660
gccctccctg cctgctgacc ttggagctgg ggcagaggtc agagacctct ctgggcccat 720
gccacctcca acatccactc gaccccttgg aatttcggtg gagaggagca gaggttgtcc 780
tggcgtggtt taggtagtgt gagaggggtc gacgttaatt tttaaaaagc agtcaaaagt 840
ccaagtggcc cttggcagca tttactctct ctgtttgctc tggttaataa tctcaggagc 900
acaaacattc ctggaggcag gagaagaaat caacatcctg gacttatcct ctgggcctgt 960
taatttttaa aaagcagtca aaagtccaag tggcccttgg cagcatttac tctctctgtt 1020
tgctctggtt aataatctca ggagcacaaa cattcctgga ggcaggagaa gaaatcaaca 1080
tcctggactt atcctctggg cctagtcgac tggacacagg acgctgtggt ttctgagcca 1140
gggggcgact cagatcccag ccagtggact tagcccctgt ttgctcctcc gataactggg 1200
gtgaccttgg ttaatattca ccagcagcct cccccgttgc ccctctggat ccactgctta 1260
aatacggacg aggacagggc cctgtctcct cagcttcagg caccaccact gacctgggac 1320
agtgaatcgt aagtactagc agctacaatc cagctaccat tctgctttta ttttatggtt 1380
gggataaggc tggattattc tgagtccaag ctaggccctt ttgctaatca tgttcatacc 1440
tcttatcttc ctcccacagc tcctgggcaa cgtgctggtc tgtgtgctgg cccatcactt 1500
tggcaaagaa ttgcgatcgc caccatgcag attgagctga gcacctgctt cttcctgtgc 1560
ctgctgaggt tctgcttctc tgccaccagg agatactacc tgggggctgt ggagctgagc 1620
tgggactaca tgcagtctga cctgggggag ctgcctgtgg atgccaggtt cccccccaga 1680
gtgcccaaga gcttcccctt caacacctct gtggtgtaca agaagaccct gtttgtggag 1740
ttcactgacc acctgttcaa cattgccaag cccaggcccc cctggatggg cctgctgggc 1800
cccaccatcc aggctgaggt gtatgacact gtggtgatca ccctgaagaa catggccagc 1860
caccctgtga gcctgcatgc tgtgggggtg agctactgga aggcctctga gggggctgag 1920
tatgatgacc agaccagcca gagggagaag gaggatgaca aggtgttccc tgggggcagc 1980
cacacctatg tgtggcaggt gctgaaggag aatggcccca tggcctctga ccccctgtgc 2040
ctgacctaca gctacctgag ccatgtggac ctggtgaagg acctgaactc tggcctgatt 2100
ggggccctgc tggtgtgcag ggagggcagc ctggccaagg agaagaccca gaccctgcac 2160
aagttcatcc tgctgtttgc tgtgtttgat gagggcaaga gctggcactc tgaaaccaag 2220
aacagcctga tgcaggacag ggatgctgcc tctgccaggg cctggcccaa gatgcacact 2280
gtgaatggct atgtgaacag gagcctgcct ggcctgattg gctgccacag gaagtctgtg 2340
tactggcatg tgattggcat gggcaccacc cctgaggtgc acagcatctt cctggagggc 2400
cacaccttcc tggtcaggaa ccacaggcag gccagcctgg agatcagccc catcaccttc 2460
ctgactgccc agaccctgct gatggacctg ggccagttcc tgctgttctg ccacatcagc 2520
agccaccagc atgatggcat ggaggcctat gtgaaggtgg acagctgccc tgaggagccc 2580
cagctgagga tgaagaacaa tgaggaggct gaggactatg atgatgacct gactgactct 2640
gagatggatg tggtgaggtt tgatgatgac aacagcccca gcttcatcca gatcaggtct 2700
gtggccaaga agcaccccaa gacctgggtg cactacattg ctgctgagga ggaggactgg 2760
gactatgccc ccctggtgct ggcccctgat gacaggagct acaagagcca gtacctgaac 2820
aatggccccc agaggattgg caggaagtac aagaaggtca ggttcatggc ctacactgat 2880
gaaaccttca agaccaggga ggccatccag catgagtctg gcatcctggg ccccctgctg 2940
tatggggagg tgggggacac cctgctgatc atcttcaaga accaggccag caggccctac 3000
aacatctacc cccatggcat cactgatgtg aggcccctgt acagcaggag gctgcccaag 3060
ggggtgaagc acctgaagga cttccccatc ctgcctgggg agatcttcaa gtacaagtgg 3120
actgtgactg tggaggatgg ccccaccaag tctgacccca ggtgcctgac cagatactac 3180
agcagctttg tgaacatgga gagggacctg gcctctggcc tgattggccc cctgctgatc 3240
tgctacaagg agtctgtgga ccagaggggc aaccagatca tgtctgacaa gaggaatgtg 3300
atcctgttct ctgtgtttga tgagaacagg agctggtacc tgactgagaa catccagagg 3360
ttcctgccca accctgctgg ggtgcagctg gaggaccctg agttccaggc cagcaacatc 3420
atgcacagca tcaatggcta tgtgtttgac agcctgcagc tgtctgtgtg cctgcatgag 3480
gtggcctact ggtacatcct gagcattggg gcccagactg acttcctgtc tgtgttcttc 3540
tctggctaca ccttcaagca caagatggtg tatgaggaca ccctgaccct gttccccttc 3600
tctggggaga ctgtgttcat gagcatggag aaccctggcc tgtggattct gggctgccac 3660
aactctgact tcaggaacag gggcatgact gccctgctga aagtctccag ctgtgacaag 3720
aacactgggg actactatga ggacagctat gaggacatct ctgcctacct gctgagcaag 3780
aacaatgcca ttgagcccag gagcttcagc cagaaccccc cagtgctgaa gaggcaccag 3840
agggagatca ccaggaccac cctgcagtct gaccaggagg agattgacta tgatgacacc 3900
atctctgtgg agatgaagaa ggaggacttt gacatctacg acgaggacga gaaccagagc 3960
cccaggagct tccagaagaa gaccaggcac tacttcattg ctgctgtgga gaggctgtgg 4020
gactatggca tgagcagcag cccccatgtg ctgaggaaca gggcccagtc tggctctgtg 4080
ccccagttca agaaggtggt gttccaggag ttcactgatg gcagcttcac ccagcccctg 4140
tacagagggg agctgaatga gcacctgggc ctgctgggcc cctacatcag ggctgaggtg 4200
gaggacaaca tcatggtgac cttcaggaac caggccagca ggccctacag cttctacagc 4260
agcctgatca gctatgagga ggaccagagg cagggggctg agcccaggaa gaactttgtg 4320
aagcccaatg aaaccaagac ctacttctgg aaggtgcagc accacatggc ccccaccaag 4380
gatgagtttg actgcaaggc ctgggcctac ttctctgatg tggacctgga gaaggatgtg 4440
cactctggcc tgattggccc cctgctggtg tgccacacca acaccctgaa ccctgcccat 4500
ggcaggcagg tgactgtgca ggagtttgcc ctgttcttca ccatctttga tgaaaccaag 4560
agctggtact tcactgagaa catggagagg aactgcaggg ccccctgcaa catccagatg 4620
gaggacccca ccttcaagga gaactacagg ttccatgcca tcaatggcta catcatggac 4680
accctgcctg gcctggtgat ggcccaggac cagaggatca ggtggtacct gctgagcatg 4740
ggcagcaatg agaacatcca cagcatccac ttctctggcc atgtgttcac tgtgaggaag 4800
aaggaggagt acaagatggc cctgtacaac ctgtaccctg gggtgtttga gactgtggag 4860
atgctgccca gcaaggctgg catctggagg gtggagtgcc tgattgggga gcacctgcat 4920
gctggcatga gcaccctgtt cctggtgtac agcaacaagt gccagacccc cctgggcatg 4980
gcctctggcc acatcaggga cttccagatc actgcctctg gccagtatgg ccagtgggcc 5040
cccaagctgg ccaggctgca ctactctggc agcatcaatg cctggagcac caaggagccc 5100
ttcagctgga tcaaggtgga cctgctggcc cccatgatca tccatggcat caagacccag 5160
ggggccaggc agaagttcag cagcctgtac atcagccagt tcatcatcat gtacagcctg 5220
gatggcaaga agtggcagac ctacaggggc aacagcactg gcaccctgat ggtgttcttt 5280
ggcaatgtgg acagctctgg catcaagcac aacatcttca acccccccat cattgccaga 5340
tacatcaggc tgcaccccac ccactacagc atcaggagca ccctgaggat ggagctgatg 5400
ggctgtgacc tgaacagctg cagcatgccc ctgggcatgg agagcaaggc catctctgat 5460
gcccagatca ctgccagcag ctacttcacc aacatgtttg ccacctggag ccccagcaag 5520
gccaggctgc acctgcaggg caggagcaat gcctggaggc cccaggtcaa caaccccaag 5580
gagtggctgc aggtggactt ccagaagacc atgaaggtga ctggggtgac cacccagggg 5640
gtgaagagcc tgctgaccag catgtatgtg aaggagttcc tgatcagcag cagccaggat 5700
ggccaccagt ggaccctgtt cttccagaat ggcaaggtga aggtgttcca gggcaaccag 5760
gacagcttca cccctgtggt gaacagcctg gacccccccc tgctgaccag atacctgagg 5820
attcaccccc agagctgggt gcaccagatt gccctgagga tggaggtgct gggctgtgag 5880
gcccaggacc tgtactgacc tcgagctgtg ccttctagtt gccagccatc tgttgtttgc 5940
ccctcccccg tgccttcctt gaccctggaa ggtgccactc ccactgtcct ttcctaataa 6000
aatgaggaaa ttgcatcgca ttgtctgagt aggtgtcatt ctattctggg gggtggggtg 6060
gggcaggaca gcaaggggga ggattgggaa gacaatagca ggcatgctgg ggatgcggtg 6120
ggctctatgg accggtgcgg ccgcaggaac ccctagtgat ggagttggcc actccctctc 6180
tgcgcgctcg ctcgctcact gaggccgggc gaccaaaggt cgcccgacgc ccgggctttg 6240
cccgggcggc ctcagtgagc gagcgagcgc gcagagaggg agtggccaa 6289
<210> 19
<211> 5430
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 19
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgacgt ggacttagcc 180
cctgtttgct cctccgataa ctggggtgac cttggttaat attcaccagc agcctccccg 240
tggacttagc ccctgtttgc tcctccgata actggggtga ccttggttaa tattcaccag 300
cagcctcccc acgcgaaacg tcgactggac acaggacgct gtggtttctg agccaggggg 360
cgactcagat cccagccagt ggacttagcc cctgtttgct cctccgataa ctggggtgac 420
cttggttaat attcaccagc agcctccccc gttgcccctc tggatccact gcttaaatac 480
ggacgaggac agggccctgt ctcctcagct tcaggcacca ccactgacct gggacagtga 540
atcgtaagta ctagcagcta caatccagct accattctgc ttttatttta tggttgggat 600
aaggctggat tattctgagt ccaagctagg cccttttgct aatcatgttc atacctctta 660
tcttcctccc acagctcctg ggcaacgtgc tggtctgtgt gctggcccat cactttggca 720
aagaattgcg atcgccacca tgcagattga gctgagcacc tgcttcttcc tgtgcctgct 780
gaggttctgc ttctctgcca ccaggagata ctacctgggg gctgtggagc tgagctggga 840
ctacatgcag tctgacctgg gggagctgcc tgtggatgcc aggttccccc ccagagtgcc 900
caagagcttc cccttcaaca cctctgtggt gtacaagaag accctgtttg tggagttcac 960
tgaccacctg ttcaacattg ccaagcccag gcccccctgg atgggcctgc tgggccccac 1020
catccaggct gaggtgtatg acactgtggt gatcaccctg aagaacatgg ccagccaccc 1080
tgtgagcctg catgctgtgg gggtgagcta ctggaaggcc tctgaggggg ctgagtatga 1140
tgaccagacc agccagaggg agaaggagga tgacaaggtg ttccctgggg gcagccacac 1200
ctatgtgtgg caggtgctga aggagaatgg ccccatggcc tctgaccccc tgtgcctgac 1260
ctacagctac ctgagccatg tggacctggt gaaggacctg aactctggcc tgattggggc 1320
cctgctggtg tgcagggagg gcagcctggc caaggagaag acccagaccc tgcacaagtt 1380
catcctgctg tttgctgtgt ttgatgaggg caagagctgg cactctgaaa ccaagaacag 1440
cctgatgcag gacagggatg ctgcctctgc cagggcctgg cccaagatgc acactgtgaa 1500
tggctatgtg aacaggagcc tgcctggcct gattggctgc cacaggaagt ctgtgtactg 1560
gcatgtgatt ggcatgggca ccacccctga ggtgcacagc atcttcctgg agggccacac 1620
cttcctggtc aggaaccaca ggcaggccag cctggagatc agccccatca ccttcctgac 1680
tgcccagacc ctgctgatgg acctgggcca gttcctgctg ttctgccaca tcagcagcca 1740
ccagcatgat ggcatggagg cctatgtgaa ggtggacagc tgccctgagg agccccagct 1800
gaggatgaag aacaatgagg aggctgagga ctatgatgat gacctgactg actctgagat 1860
ggatgtggtg aggtttgatg atgacaacag ccccagcttc atccagatca ggtctgtggc 1920
caagaagcac cccaagacct gggtgcacta cattgctgct gaggaggagg actgggacta 1980
tgcccccctg gtgctggccc ctgatgacag gagctacaag agccagtacc tgaacaatgg 2040
cccccagagg attggcagga agtacaagaa ggtcaggttc atggcctaca ctgatgaaac 2100
cttcaagacc agggaggcca tccagcatga gtctggcatc ctgggccccc tgctgtatgg 2160
ggaggtgggg gacaccctgc tgatcatctt caagaaccag gccagcaggc cctacaacat 2220
ctacccccat ggcatcactg atgtgaggcc cctgtacagc aggaggctgc ccaagggggt 2280
gaagcacctg aaggacttcc ccatcctgcc tggggagatc ttcaagtaca agtggactgt 2340
gactgtggag gatggcccca ccaagtctga ccccaggtgc ctgaccagat actacagcag 2400
ctttgtgaac atggagaggg acctggcctc tggcctgatt ggccccctgc tgatctgcta 2460
caaggagtct gtggaccaga ggggcaacca gatcatgtct gacaagagga atgtgatcct 2520
gttctctgtg tttgatgaga acaggagctg gtacctgact gagaacatcc agaggttcct 2580
gcccaaccct gctggggtgc agctggagga ccctgagttc caggccagca acatcatgca 2640
cagcatcaat ggctatgtgt ttgacagcct gcagctgtct gtgtgcctgc atgaggtggc 2700
ctactggtac atcctgagca ttggggccca gactgacttc ctgtctgtgt tcttctctgg 2760
ctacaccttc aagcacaaga tggtgtatga ggacaccctg accctgttcc ccttctctgg 2820
ggagactgtg ttcatgagca tggagaaccc tggcctgtgg attctgggct gccacaactc 2880
tgacttcagg aacaggggca tgactgccct gctgaaagtc tccagctgtg acaagaacac 2940
tggggactac tatgaggaca gctatgagga catctctgcc tacctgctga gcaagaacaa 3000
tgccattgag cccaggagct tcagccagaa ccccccagtg ctgaagaggc accagaggga 3060
gatcaccagg accaccctgc agtctgacca ggaggagatt gactatgatg acaccatctc 3120
tgtggagatg aagaaggagg actttgacat ctacgacgag gacgagaacc agagccccag 3180
gagcttccag aagaagacca ggcactactt cattgctgct gtggagaggc tgtgggacta 3240
tggcatgagc agcagccccc atgtgctgag gaacagggcc cagtctggct ctgtgcccca 3300
gttcaagaag gtggtgttcc aggagttcac tgatggcagc ttcacccagc ccctgtacag 3360
aggggagctg aatgagcacc tgggcctgct gggcccctac atcagggctg aggtggagga 3420
caacatcatg gtgaccttca ggaaccaggc cagcaggccc tacagcttct acagcagcct 3480
gatcagctat gaggaggacc agaggcaggg ggctgagccc aggaagaact ttgtgaagcc 3540
caatgaaacc aagacctact tctggaaggt gcagcaccac atggccccca ccaaggatga 3600
gtttgactgc aaggcctggg cctacttctc tgatgtggac ctggagaagg atgtgcactc 3660
tggcctgatt ggccccctgc tggtgtgcca caccaacacc ctgaaccctg cccatggcag 3720
gcaggtgact gtgcaggagt ttgccctgtt cttcaccatc tttgatgaaa ccaagagctg 3780
gtacttcact gagaacatgg agaggaactg cagggccccc tgcaacatcc agatggagga 3840
ccccaccttc aaggagaact acaggttcca tgccatcaat ggctacatca tggacaccct 3900
gcctggcctg gtgatggccc aggaccagag gatcaggtgg tacctgctga gcatgggcag 3960
caatgagaac atccacagca tccacttctc tggccatgtg ttcactgtga ggaagaagga 4020
ggagtacaag atggccctgt acaacctgta ccctggggtg tttgagactg tggagatgct 4080
gcccagcaag gctggcatct ggagggtgga gtgcctgatt ggggagcacc tgcatgctgg 4140
catgagcacc ctgttcctgg tgtacagcaa caagtgccag acccccctgg gcatggcctc 4200
tggccacatc agggacttcc agatcactgc ctctggccag tatggccagt gggcccccaa 4260
gctggccagg ctgcactact ctggcagcat caatgcctgg agcaccaagg agcccttcag 4320
ctggatcaag gtggacctgc tggcccccat gatcatccat ggcatcaaga cccagggggc 4380
caggcagaag ttcagcagcc tgtacatcag ccagttcatc atcatgtaca gcctggatgg 4440
caagaagtgg cagacctaca ggggcaacag cactggcacc ctgatggtgt tctttggcaa 4500
tgtggacagc tctggcatca agcacaacat cttcaacccc cccatcattg ccagatacat 4560
caggctgcac cccacccact acagcatcag gagcaccctg aggatggagc tgatgggctg 4620
tgacctgaac agctgcagca tgcccctggg catggagagc aaggccatct ctgatgccca 4680
gatcactgcc agcagctact tcaccaacat gtttgccacc tggagcccca gcaaggccag 4740
gctgcacctg cagggcagga gcaatgcctg gaggccccag gtcaacaacc ccaaggagtg 4800
gctgcaggtg gacttccaga agaccatgaa ggtgactggg gtgaccaccc agggggtgaa 4860
gagcctgctg accagcatgt atgtgaagga gttcctgatc agcagcagcc aggatggcca 4920
ccagtggacc ctgttcttcc agaatggcaa ggtgaaggtg ttccagggca accaggacag 4980
cttcacccct gtggtgaaca gcctggaccc ccccctgctg accagatacc tgaggattca 5040
cccccagagc tgggtgcacc agattgccct gaggatggag gtgctgggct gtgaggccca 5100
ggacctgtac tgacctcgag gcactgtcct ttcctaataa aatgaggaaa ttgcatcgca 5160
ttgtctgagt aggtgtcatt ctattctggg gggtggggtg gggcaggaca gcaaggggga 5220
ggattgggaa gacaatagca ggcatgctgg ggatgcggtg ggctctatgg gcacgtggcg 5280
gccgcaggaa cccctagtga tggagttggc cactccctct ctgcgcgctc gctcgctcac 5340
tgaggccggg cgaccaaagg tcgcccgacg cccgggcttt gcccgggcgg cctcagtgag 5400
cgagcgagcg cgcagagagg gagtggccaa 5430
<210> 20
<211> 5779
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 20
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgacgt ggacttagcc 180
cctgtttgct cctccgataa ctggggtgac cttggttaat attcaccagc agcctccccg 240
tggacttagc ccctgtttgc tcctccgata actggggtga ccttggttaa tattcaccag 300
cagcctcccc acgcgaaacg tcgactggac acaggacgct gtggtttctg agccaggggg 360
cgactcagat cccagccagt ggacttagcc cctgtttgct cctccgataa ctggggtgac 420
cttggttaat attcaccagc agcctccccc gttgcccctc tggatccact gcttaaatac 480
ggacgaggac agggccctgt ctcctcagct tcaggcacca ccactgacct gggacagtga 540
atcgtaagta ctagcagcta caatccagct accattctgc ttttatttta tggttgggat 600
aaggctggat tattctgagt ccaagctagg cccttttgct aatcatgttc atacctctta 660
tcttcctccc acagctcctg ggcaacgtgc tggtctgtgt gctggcccat cactttggca 720
aagaattgcg atcgccacca tgcagattga gctgagcacc tgcttcttcc tgtgcctgct 780
gaggttctgc ttctctgcca ccaggagata ctacctgggg gctgtggagc tgagctggga 840
ctacatgcag tctgacctgg gggagctgcc tgtggatgcc aggttccccc ccagagtgcc 900
caagagcttc cccttcaaca cctctgtggt gtacaagaag accctgtttg tggagttcac 960
tgaccacctg ttcaacattg ccaagcccag gcccccctgg atgggcctgc tgggccccac 1020
catccaggct gaggtgtatg acactgtggt gatcaccctg aagaacatgg ccagccaccc 1080
tgtgagcctg catgctgtgg gggtgagcta ctggaaggcc tctgaggggg ctgagtatga 1140
tgaccagacc agccagaggg agaaggagga tgacaaggtg ttccctgggg gcagccacac 1200
ctatgtgtgg caggtgctga aggagaatgg ccccatggcc tctgaccccc tgtgcctgac 1260
ctacagctac ctgagccatg tggacctggt gaaggacctg aactctggcc tgattggggc 1320
cctgctggtg tgcagggagg gcagcctggc caaggagaag acccagaccc tgcacaagtt 1380
catcctgctg tttgctgtgt ttgatgaggg caagagctgg cactctgaaa ccaagaacag 1440
cctgatgcag gacagggatg ctgcctctgc cagggcctgg cccaagatgc acactgtgaa 1500
tggctatgtg aacaggagcc tgcctggcct gattggctgc cacaggaagt ctgtgtactg 1560
gcatgtgatt ggcatgggca ccacccctga ggtgcacagc atcttcctgg agggccacac 1620
cttcctggtc aggaaccaca ggcaggccag cctggagatc agccccatca ccttcctgac 1680
tgcccagacc ctgctgatgg acctgggcca gttcctgctg ttctgccaca tcagcagcca 1740
ccagcatgat ggcatggagg cctatgtgaa ggtggacagc tgccctgagg agccccagct 1800
gaggatgaag aacaatgagg aggctgagga ctatgatgat gacctgactg actctgagat 1860
ggatgtggtg aggtttgatg atgacaacag ccccagcttc atccagatca ggtctgtggc 1920
caagaagcac cccaagacct gggtgcacta cattgctgct gaggaggagg actgggacta 1980
tgcccccctg gtgctggccc ctgatgacag gagctacaag agccagtacc tgaacaatgg 2040
cccccagagg attggcagga agtacaagaa ggtcaggttc atggcctaca ctgatgaaac 2100
cttcaagacc agggaggcca tccagcatga gtctggcatc ctgggccccc tgctgtatgg 2160
ggaggtgggg gacaccctgc tgatcatctt caagaaccag gccagcaggc cctacaacat 2220
ctacccccat ggcatcactg atgtgaggcc cctgtacagc aggaggctgc ccaagggggt 2280
gaagcacctg aaggacttcc ccatcctgcc tggggagatc ttcaagtaca agtggactgt 2340
gactgtggag gatggcccca ccaagtctga ccccaggtgc ctgaccagat actacagcag 2400
ctttgtgaac atggagaggg acctggcctc tggcctgatt ggccccctgc tgatctgcta 2460
caaggagtct gtggaccaga ggggcaacca gatcatgtct gacaagagga atgtgatcct 2520
gttctctgtg tttgatgaga acaggagctg gtacctgact gagaacatcc agaggttcct 2580
gcccaaccct gctggggtgc agctggagga ccctgagttc caggccagca acatcatgca 2640
cagcatcaat ggctatgtgt ttgacagcct gcagctgtct gtgtgcctgc atgaggtggc 2700
ctactggtac atcctgagca ttggggccca gactgacttc ctgtctgtgt tcttctctgg 2760
ctacaccttc aagcacaaga tggtgtatga ggacaccctg accctgttcc ccttctctgg 2820
ggagactgtg ttcatgagca tggagaaccc tggcctgtgg attctgggct gccacaactc 2880
tgacttcagg aacaggggca tgactgccct gctgaaagtc tccagctgtg acaagaacac 2940
tggggactac tatgaggaca gctatgagga catctctgcc tacctgctga gcaagaacaa 3000
tgccattgag cccaggagct tcagccagaa ccccccagtg ctgaagaggc accagaggga 3060
gatcaccagg accaccctgc agtctgacca ggaggagatt gactatgatg acaccatctc 3120
tgtggagatg aagaaggagg actttgacat ctacgacgag gacgagaacc agagccccag 3180
gagcttccag aagaagacca ggcactactt cattgctgct gtggagaggc tgtgggacta 3240
tggcatgagc agcagccccc atgtgctgag gaacagggcc cagtctggct ctgtgcccca 3300
gttcaagaag gtggtgttcc aggagttcac tgatggcagc ttcacccagc ccctgtacag 3360
aggggagctg aatgagcacc tgggcctgct gggcccctac atcagggctg aggtggagga 3420
caacatcatg gtgaccttca ggaaccaggc cagcaggccc tacagcttct acagcagcct 3480
gatcagctat gaggaggacc agaggcaggg ggctgagccc aggaagaact ttgtgaagcc 3540
caatgaaacc aagacctact tctggaaggt gcagcaccac atggccccca ccaaggatga 3600
gtttgactgc aaggcctggg cctacttctc tgatgtggac ctggagaagg atgtgcactc 3660
tggcctgatt ggccccctgc tggtgtgcca caccaacacc ctgaaccctg cccatggcag 3720
gcaggtgact gtgcaggagt ttgccctgtt cttcaccatc tttgatgaaa ccaagagctg 3780
gtacttcact gagaacatgg agaggaactg cagggccccc tgcaacatcc agatggagga 3840
ccccaccttc aaggagaact acaggttcca tgccatcaat ggctacatca tggacaccct 3900
gcctggcctg gtgatggccc aggaccagag gatcaggtgg tacctgctga gcatgggcag 3960
caatgagaac atccacagca tccacttctc tggccatgtg ttcactgtga ggaagaagga 4020
ggagtacaag atggccctgt acaacctgta ccctggggtg tttgagactg tggagatgct 4080
gcccagcaag gctggcatct ggagggtgga gtgcctgatt ggggagcacc tgcatgctgg 4140
catgagcacc ctgttcctgg tgtacagcaa caagtgccag acccccctgg gcatggcctc 4200
tggccacatc agggacttcc agatcactgc ctctggccag tatggccagt gggcccccaa 4260
gctggccagg ctgcactact ctggcagcat caatgcctgg agcaccaagg agcccttcag 4320
ctggatcaag gtggacctgc tggcccccat gatcatccat ggcatcaaga cccagggggc 4380
caggcagaag ttcagcagcc tgtacatcag ccagttcatc atcatgtaca gcctggatgg 4440
caagaagtgg cagacctaca ggggcaacag cactggcacc ctgatggtgt tctttggcaa 4500
tgtggacagc tctggcatca agcacaacat cttcaacccc cccatcattg ccagatacat 4560
caggctgcac cccacccact acagcatcag gagcaccctg aggatggagc tgatgggctg 4620
tgacctgaac agctgcagca tgcccctggg catggagagc aaggccatct ctgatgccca 4680
gatcactgcc agcagctact tcaccaacat gtttgccacc tggagcccca gcaaggccag 4740
gctgcacctg cagggcagga gcaatgcctg gaggccccag gtcaacaacc ccaaggagtg 4800
gctgcaggtg gacttccaga agaccatgaa ggtgactggg gtgaccaccc agggggtgaa 4860
gagcctgctg accagcatgt atgtgaagga gttcctgatc agcagcagcc aggatggcca 4920
ccagtggacc ctgttcttcc agaatggcaa ggtgaaggtg ttccagggca accaggacag 4980
cttcacccct gtggtgaaca gcctggaccc ccccctgctg accagatacc tgaggattca 5040
cccccagagc tgggtgcacc agattgccct gaggatggag gtgctgggct gtgaggccca 5100
ggacctgtac tgacctcgag gcactgtcct ttcctaataa aatgaggaaa ttgcatcgca 5160
ttgtctgagt aggtgtcatt ctattctggg gggtggggtg gggcaggaca gcaaggggga 5220
ggattgggaa gacaatagca ggcatgctgg ggatgcggtg ggctctatgg gcactcgaca 5280
ggttaatttt taaaaagcag tcaaaagtcc aagtggccct tggcagcatt tactctctct 5340
gtttgctctg gttaataatc tcaggagcac aaacattcct ggaggcagga gaagaaatca 5400
acatcctgga cttatcctct gggcctctcc ccacccccag gagaggctca ggttaatttt 5460
taaaaagcag tcaaaagtcc aagtggccct tggcagcatt tactctctct gtttgctctg 5520
gttaataatc tcaggagcac aaacattcct ggaggcagga gaagaaatca acatcctgga 5580
cttatcctct gggcctctcc ccacccccag gagaggctgt cgagtggcgg ccgcaggaac 5640
ccctagtgat ggagttggcc actccctctc tgcgcgctcg ctcgctcact gaggccgggc 5700
gaccaaaggt cgcccgacgc ccgggctttg cccgggcggc ctcagtgagc gagcgagcgc 5760
gcagagaggg agtggccaa 5779
<210> 21
<211> 5962
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 21
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgaccc ctctcacact 180
acctaaacca cgccaggaca acctctgctc ctctccaccg aaattccaag gggtcgagtg 240
gatgttggag gtggcatggg cccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 300
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 360
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagctgct 420
ggaggatggg aactgagggg ttggaagggg gcagggtgag cccagaaact cctgtgtgcc 480
tctgagcctg cagacgcgaa acgtcgactg gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg 540
gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga taactggggt 600
gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa 660
tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga cctgggacag 720
tgaatcgtaa gtactagcag ctacaatcca gctaccattc tgcttttatt ttatggttgg 780
gataaggctg gattattctg agtccaagct aggccctttt gctaatcatg ttcatacctc 840
ttatcttcct cccacagctc ctgggcaacg tgctggtctg tgtgctggcc catcactttg 900
gcaaagaatt gcgatcgcca ccatgcagat tgagctgagc acctgcttct tcctgtgcct 960
gctgaggttc tgcttctctg ccaccaggag atactacctg ggggctgtgg agctgagctg 1020
ggactacatg cagtctgacc tgggggagct gcctgtggat gccaggttcc cccccagagt 1080
gcccaagagc ttccccttca acacctctgt ggtgtacaag aagaccctgt ttgtggagtt 1140
cactgaccac ctgttcaaca ttgccaagcc caggcccccc tggatgggcc tgctgggccc 1200
caccatccag gctgaggtgt atgacactgt ggtgatcacc ctgaagaaca tggccagcca 1260
ccctgtgagc ctgcatgctg tgggggtgag ctactggaag gcctctgagg gggctgagta 1320
tgatgaccag accagccaga gggagaagga ggatgacaag gtgttccctg ggggcagcca 1380
cacctatgtg tggcaggtgc tgaaggagaa tggccccatg gcctctgacc ccctgtgcct 1440
gacctacagc tacctgagcc atgtggacct ggtgaaggac ctgaactctg gcctgattgg 1500
ggccctgctg gtgtgcaggg agggcagcct ggccaaggag aagacccaga ccctgcacaa 1560
gttcatcctg ctgtttgctg tgtttgatga gggcaagagc tggcactctg aaaccaagaa 1620
cagcctgatg caggacaggg atgctgcctc tgccagggcc tggcccaaga tgcacactgt 1680
gaatggctat gtgaacagga gcctgcctgg cctgattggc tgccacagga agtctgtgta 1740
ctggcatgtg attggcatgg gcaccacccc tgaggtgcac agcatcttcc tggagggcca 1800
caccttcctg gtcaggaacc acaggcaggc cagcctggag atcagcccca tcaccttcct 1860
gactgcccag accctgctga tggacctggg ccagttcctg ctgttctgcc acatcagcag 1920
ccaccagcat gatggcatgg aggcctatgt gaaggtggac agctgccctg aggagcccca 1980
gctgaggatg aagaacaatg aggaggctga ggactatgat gatgacctga ctgactctga 2040
gatggatgtg gtgaggtttg atgatgacaa cagccccagc ttcatccaga tcaggtctgt 2100
ggccaagaag caccccaaga cctgggtgca ctacattgct gctgaggagg aggactggga 2160
ctatgccccc ctggtgctgg cccctgatga caggagctac aagagccagt acctgaacaa 2220
tggcccccag aggattggca ggaagtacaa gaaggtcagg ttcatggcct acactgatga 2280
aaccttcaag accagggagg ccatccagca tgagtctggc atcctgggcc ccctgctgta 2340
tggggaggtg ggggacaccc tgctgatcat cttcaagaac caggccagca ggccctacaa 2400
catctacccc catggcatca ctgatgtgag gcccctgtac agcaggaggc tgcccaaggg 2460
ggtgaagcac ctgaaggact tccccatcct gcctggggag atcttcaagt acaagtggac 2520
tgtgactgtg gaggatggcc ccaccaagtc tgaccccagg tgcctgacca gatactacag 2580
cagctttgtg aacatggaga gggacctggc ctctggcctg attggccccc tgctgatctg 2640
ctacaaggag tctgtggacc agaggggcaa ccagatcatg tctgacaaga ggaatgtgat 2700
cctgttctct gtgtttgatg agaacaggag ctggtacctg actgagaaca tccagaggtt 2760
cctgcccaac cctgctgggg tgcagctgga ggaccctgag ttccaggcca gcaacatcat 2820
gcacagcatc aatggctatg tgtttgacag cctgcagctg tctgtgtgcc tgcatgaggt 2880
ggcctactgg tacatcctga gcattggggc ccagactgac ttcctgtctg tgttcttctc 2940
tggctacacc ttcaagcaca agatggtgta tgaggacacc ctgaccctgt tccccttctc 3000
tggggagact gtgttcatga gcatggagaa ccctggcctg tggattctgg gctgccacaa 3060
ctctgacttc aggaacaggg gcatgactgc cctgctgaaa gtctccagct gtgacaagaa 3120
cactggggac tactatgagg acagctatga ggacatctct gcctacctgc tgagcaagaa 3180
caatgccatt gagcccagga gcttcagcca gaacccccca gtgctgaaga ggcaccagag 3240
ggagatcacc aggaccaccc tgcagtctga ccaggaggag attgactatg atgacaccat 3300
ctctgtggag atgaagaagg aggactttga catctacgac gaggacgaga accagagccc 3360
caggagcttc cagaagaaga ccaggcacta cttcattgct gctgtggaga ggctgtggga 3420
ctatggcatg agcagcagcc cccatgtgct gaggaacagg gcccagtctg gctctgtgcc 3480
ccagttcaag aaggtggtgt tccaggagtt cactgatggc agcttcaccc agcccctgta 3540
cagaggggag ctgaatgagc acctgggcct gctgggcccc tacatcaggg ctgaggtgga 3600
ggacaacatc atggtgacct tcaggaacca ggccagcagg ccctacagct tctacagcag 3660
cctgatcagc tatgaggagg accagaggca gggggctgag cccaggaaga actttgtgaa 3720
gcccaatgaa accaagacct acttctggaa ggtgcagcac cacatggccc ccaccaagga 3780
tgagtttgac tgcaaggcct gggcctactt ctctgatgtg gacctggaga aggatgtgca 3840
ctctggcctg attggccccc tgctggtgtg ccacaccaac accctgaacc ctgcccatgg 3900
caggcaggtg actgtgcagg agtttgccct gttcttcacc atctttgatg aaaccaagag 3960
ctggtacttc actgagaaca tggagaggaa ctgcagggcc ccctgcaaca tccagatgga 4020
ggaccccacc ttcaaggaga actacaggtt ccatgccatc aatggctaca tcatggacac 4080
cctgcctggc ctggtgatgg cccaggacca gaggatcagg tggtacctgc tgagcatggg 4140
cagcaatgag aacatccaca gcatccactt ctctggccat gtgttcactg tgaggaagaa 4200
ggaggagtac aagatggccc tgtacaacct gtaccctggg gtgtttgaga ctgtggagat 4260
gctgcccagc aaggctggca tctggagggt ggagtgcctg attggggagc acctgcatgc 4320
tggcatgagc accctgttcc tggtgtacag caacaagtgc cagacccccc tgggcatggc 4380
ctctggccac atcagggact tccagatcac tgcctctggc cagtatggcc agtgggcccc 4440
caagctggcc aggctgcact actctggcag catcaatgcc tggagcacca aggagccctt 4500
cagctggatc aaggtggacc tgctggcccc catgatcatc catggcatca agacccaggg 4560
ggccaggcag aagttcagca gcctgtacat cagccagttc atcatcatgt acagcctgga 4620
tggcaagaag tggcagacct acaggggcaa cagcactggc accctgatgg tgttctttgg 4680
caatgtggac agctctggca tcaagcacaa catcttcaac ccccccatca ttgccagata 4740
catcaggctg caccccaccc actacagcat caggagcacc ctgaggatgg agctgatggg 4800
ctgtgacctg aacagctgca gcatgcccct gggcatggag agcaaggcca tctctgatgc 4860
ccagatcact gccagcagct acttcaccaa catgtttgcc acctggagcc ccagcaaggc 4920
caggctgcac ctgcagggca ggagcaatgc ctggaggccc caggtcaaca accccaagga 4980
gtggctgcag gtggacttcc agaagaccat gaaggtgact ggggtgacca cccagggggt 5040
gaagagcctg ctgaccagca tgtatgtgaa ggagttcctg atcagcagca gccaggatgg 5100
ccaccagtgg accctgttct tccagaatgg caaggtgaag gtgttccagg gcaaccagga 5160
cagcttcacc cctgtggtga acagcctgga cccccccctg ctgaccagat acctgaggat 5220
tcacccccag agctgggtgc accagattgc cctgaggatg gaggtgctgg gctgtgaggc 5280
ccaggacctg tactgacctc gaggcactgt cctttcctaa taaaatgagg aaattgcatc 5340
gcattgtctg agtaggtgtc attctattct ggggggtggg gtggggcagg acagcaaggg 5400
ggaggattgg gaagacaata gcaggcatgc tggggatgcg gtgggctcta tgggcactcg 5460
acaggttaat ttttaaaaag cagtcaaaag tccaagtggc ccttggcagc atttactctc 5520
tctgtttgct ctggttaata atctcaggag cacaaacatt cctggaggca ggagaagaaa 5580
tcaacatcct ggacttatcc tctgggcctc tccccacccc caggagaggc tcaggttaat 5640
ttttaaaaag cagtcaaaag tccaagtggc ccttggcagc atttactctc tctgtttgct 5700
ctggttaata atctcaggag cacaaacatt cctggaggca ggagaagaaa tcaacatcct 5760
ggacttatcc tctgggcctc tccccacccc caggagaggc tgtcgagtgg cggccgcagg 5820
aacccctagt gatggagttg gccactccct ctctgcgcgc tcgctcgctc actgaggccg 5880
ggcgaccaaa ggtcgcccga cgcccgggct ttgcccgggc ggcctcagtg agcgagcgag 5940
cgcgcagaga gggagtggcc aa 5962
<210> 22
<211> 5919
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 22
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgta ggctcagagg cacacaggag 180
tttctgggct caccctgccc ccttccaacc cctcagttcc catcctccag cagctgtttg 240
tgtgctgcct ctgaagtcca cactgaacaa acttcagcct actcatgtcc ctaaaatggg 300
caaacattgc aagcagcaaa cagcaaacac acagccctcc ctgcctgctg accttggagc 360
tggggcagag gtcagagacc tctctgggcc catgccacct ccaacatcca ctcgacccct 420
tggaatttcg gtggagagga gcagaggttg tcctggcgtg gtttaggtag tgtgagaggg 480
gtcgacgatc ttgctaccag tggaacagcc actaaggatt ctgcagtgag agcagagggc 540
cagctaagtg gtactctccc agagactgtc tgactcacgc caccccctcc accttggaca 600
caggacgctg tggtttctga gccaggtaca atgactcctt tcggtaagtg cagtggaagc 660
tgtacactgc ccaggcaaag cgtccgggca gcgtaggcgg gcgactcaga tcccagccag 720
tggacttagc ccctgtttgc tcctccgata actggggtga ccttggttaa tattcaccag 780
cagcctcccc cgttgcccct ctggatccac tgcttaaata cggacgagga cagggccctg 840
tctcctcagc ttcaggcacc accactgacc tgggacagtg aatcgtaagt atgcctttca 900
ctgcgagagg ttctggagag gcttctgagc tccccatggc ccaggcaggc agcaggtctg 960
gggcaggagg ggggttgtgg agtgggtatc cgcctgctga ggtgcagggc agatcatcat 1020
gtgccttgac tcggggcctg gcccccccat ctctgtcttg caggacaatt gccgtcttct 1080
gtctcgtggg gcatcctcct gctggcaggc ctgtgctgcc tggtccctgt ctccctggct 1140
gaggaccggc caccatgcag attgagctga gcacctgctt cttcctgtgc ctgctgaggt 1200
tctgcttctc tgccaccagg agatactacc tgggggctgt ggagctgagc tgggactaca 1260
tgcagtctga cctgggggag ctgcctgtgg atgccaggtt cccccccaga gtgcccaaga 1320
gcttcccctt caacacctct gtggtgtaca agaagaccct gtttgtggag ttcactgacc 1380
acctgttcaa cattgccaag cccaggcccc cctggatggg cctgctgggc cccaccatcc 1440
aggctgaggt gtatgacact gtggtgatca ccctgaagaa catggccagc caccctgtga 1500
gcctgcatgc tgtgggggtg agctactgga aggcctctga gggggctgag tatgatgacc 1560
agaccagcca gagggagaag gaggatgaca aggtgttccc tgggggcagc cacacctatg 1620
tgtggcaggt gctgaaggag aatggcccca tggcctctga ccccctgtgc ctgacctaca 1680
gctacctgag ccatgtggac ctggtgaagg acctgaactc tggcctgatt ggggccctgc 1740
tggtgtgcag ggagggcagc ctggccaagg agaagaccca gaccctgcac aagttcatcc 1800
tgctgtttgc tgtgtttgat gagggcaaga gctggcactc tgaaaccaag aacagcctga 1860
tgcaggacag ggatgctgcc tctgccaggg cctggcccaa gatgcacact gtgaatggct 1920
atgtgaacag gagcctgcct ggcctgattg gctgccacag gaagtctgtg tactggcatg 1980
tgattggcat gggcaccacc cctgaggtgc acagcatctt cctggagggc cacaccttcc 2040
tggtcaggaa ccacaggcag gccagcctgg agatcagccc catcaccttc ctgactgccc 2100
agaccctgct gatggacctg ggccagttcc tgctgttctg ccacatcagc agccaccagc 2160
atgatggcat ggaggcctat gtgaaggtgg acagctgccc tgaggagccc cagctgagga 2220
tgaagaacaa tgaggaggct gaggactatg atgatgacct gactgactct gagatggatg 2280
tggtgaggtt tgatgatgac aacagcccca gcttcatcca gatcaggtct gtggccaaga 2340
agcaccccaa gacctgggtg cactacattg ctgctgagga ggaggactgg gactatgccc 2400
ccctggtgct ggcccctgat gacaggagct acaagagcca gtacctgaac aatggccccc 2460
agaggattgg caggaagtac aagaaggtca ggttcatggc ctacactgat gaaaccttca 2520
agaccaggga ggccatccag catgagtctg gcatcctggg ccccctgctg tatggggagg 2580
tgggggacac cctgctgatc atcttcaaga accaggccag caggccctac aacatctacc 2640
cccatggcat cactgatgtg aggcccctgt acagcaggag gctgcccaag ggggtgaagc 2700
acctgaagga cttccccatc ctgcctgggg agatcttcaa gtacaagtgg actgtgactg 2760
tggaggatgg ccccaccaag tctgacccca ggtgcctgac cagatactac agcagctttg 2820
tgaacatgga gagggacctg gcctctggcc tgattggccc cctgctgatc tgctacaagg 2880
agtctgtgga ccagaggggc aaccagatca tgtctgacaa gaggaatgtg atcctgttct 2940
ctgtgtttga tgagaacagg agctggtacc tgactgagaa catccagagg ttcctgccca 3000
accctgctgg ggtgcagctg gaggaccctg agttccaggc cagcaacatc atgcacagca 3060
tcaatggcta tgtgtttgac agcctgcagc tgtctgtgtg cctgcatgag gtggcctact 3120
ggtacatcct gagcattggg gcccagactg acttcctgtc tgtgttcttc tctggctaca 3180
ccttcaagca caagatggtg tatgaggaca ccctgaccct gttccccttc tctggggaga 3240
ctgtgttcat gagcatggag aaccctggcc tgtggattct gggctgccac aactctgact 3300
tcaggaacag gggcatgact gccctgctga aagtctccag ctgtgacaag aacactgggg 3360
actactatga ggacagctat gaggacatct ctgcctacct gctgagcaag aacaatgcca 3420
ttgagcccag gagcttcagc cagaaccccc cagtgctgaa gaggcaccag agggagatca 3480
ccaggaccac cctgcagtct gaccaggagg agattgacta tgatgacacc atctctgtgg 3540
agatgaagaa ggaggacttt gacatctacg acgaggacga gaaccagagc cccaggagct 3600
tccagaagaa gaccaggcac tacttcattg ctgctgtgga gaggctgtgg gactatggca 3660
tgagcagcag cccccatgtg ctgaggaaca gggcccagtc tggctctgtg ccccagttca 3720
agaaggtggt gttccaggag ttcactgatg gcagcttcac ccagcccctg tacagagggg 3780
agctgaatga gcacctgggc ctgctgggcc cctacatcag ggctgaggtg gaggacaaca 3840
tcatggtgac cttcaggaac caggccagca ggccctacag cttctacagc agcctgatca 3900
gctatgagga ggaccagagg cagggggctg agcccaggaa gaactttgtg aagcccaatg 3960
aaaccaagac ctacttctgg aaggtgcagc accacatggc ccccaccaag gatgagtttg 4020
actgcaaggc ctgggcctac ttctctgatg tggacctgga gaaggatgtg cactctggcc 4080
tgattggccc cctgctggtg tgccacacca acaccctgaa ccctgcccat ggcaggcagg 4140
tgactgtgca ggagtttgcc ctgttcttca ccatctttga tgaaaccaag agctggtact 4200
tcactgagaa catggagagg aactgcaggg ccccctgcaa catccagatg gaggacccca 4260
ccttcaagga gaactacagg ttccatgcca tcaatggcta catcatggac accctgcctg 4320
gcctggtgat ggcccaggac cagaggatca ggtggtacct gctgagcatg ggcagcaatg 4380
agaacatcca cagcatccac ttctctggcc atgtgttcac tgtgaggaag aaggaggagt 4440
acaagatggc cctgtacaac ctgtaccctg gggtgtttga gactgtggag atgctgccca 4500
gcaaggctgg catctggagg gtggagtgcc tgattgggga gcacctgcat gctggcatga 4560
gcaccctgtt cctggtgtac agcaacaagt gccagacccc cctgggcatg gcctctggcc 4620
acatcaggga cttccagatc actgcctctg gccagtatgg ccagtgggcc cccaagctgg 4680
ccaggctgca ctactctggc agcatcaatg cctggagcac caaggagccc ttcagctgga 4740
tcaaggtgga cctgctggcc cccatgatca tccatggcat caagacccag ggggccaggc 4800
agaagttcag cagcctgtac atcagccagt tcatcatcat gtacagcctg gatggcaaga 4860
agtggcagac ctacaggggc aacagcactg gcaccctgat ggtgttcttt ggcaatgtgg 4920
acagctctgg catcaagcac aacatcttca acccccccat cattgccaga tacatcaggc 4980
tgcaccccac ccactacagc atcaggagca ccctgaggat ggagctgatg ggctgtgacc 5040
tgaacagctg cagcatgccc ctgggcatgg agagcaaggc catctctgat gcccagatca 5100
ctgccagcag ctacttcacc aacatgtttg ccacctggag ccccagcaag gccaggctgc 5160
acctgcaggg caggagcaat gcctggaggc cccaggtcaa caaccccaag gagtggctgc 5220
aggtggactt ccagaagacc atgaaggtga ctggggtgac cacccagggg gtgaagagcc 5280
tgctgaccag catgtatgtg aaggagttcc tgatcagcag cagccaggat ggccaccagt 5340
ggaccctgtt cttccagaat ggcaaggtga aggtgttcca gggcaaccag gacagcttca 5400
cccctgtggt gaacagcctg gacccccccc tgctgaccag atacctgagg attcaccccc 5460
agagctgggt gcaccagatt gccctgagga tggaggtgct gggctgtgag gcccaggacc 5520
tgtactgagc tcgagctgtg ccttctagtt gccagccatc tgttgtttgc ccctcccccg 5580
tgccttcctt gaccctggaa ggtgccactc ccactgtcct ttcctaataa aatgaggaaa 5640
ttgcatcgca ttgtctgagt aggtgtcatt ctattctggg gggtggggtg gggcaggaca 5700
gcaaggggga ggattgggaa gacaatagca ggcatgctgg ggatgcggtg ggctctatgg 5760
accggtgcgg ccgcaggaac ccctagtgat ggagttggcc actccctctc tgcgcgctcg 5820
ctcgctcact gaggccgggc gaccaaaggt cgcccgacgc ccgggctttg cccgggcggc 5880
ctcagtgagc gagcgagcgc gcagagaggg agtggccaa 5919
<210> 23
<211> 5306
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 23
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttaaacgt cgaccctaaa 180
atgggcaaac attgcaagca gcaaacagca aactgacctt ggagctgggg cagaggtcag 240
agacctctct gggcactcga ccccttggaa tttcggtgga gaggagcaga ggtacacagc 300
cctccctgcc tgccccatgc cacctccaac atctgtcctg gcgtggttta ggtagtgtga 360
gaggggaatg actcctttcg gtaagtgcag tggaagctgt acactgccca ggcaaagcgt 420
ccgggcagcg taggcgggcg actcagatcc cagccagtgg acttagcccc tgtttgctcc 480
tccgataact ggggtgacct tggttaatat tcaccagcag cctcccccgt tgcccctctg 540
gatccactgc ttaaatacgg acgaggacag ggccctgtct cctcagcttc aggcaccacc 600
actgacctgg gacagtgaat cgcgatcgca ctgcttaaat acggacgagg acagggccct 660
gtctcctcag cttcaggcac caccactgac ctgggacagt gaatcgcgat cgccaccatg 720
cagattgagc tgagcacctg cttcttcctg tgcctgctga ggttctgctt ctctgccacc 780
aggagatact acctgggggc tgtggagctg agctgggact acatgcagtc tgacctgggg 840
gagctgcctg tggatgccag gttccccccc agagtgccca agagcttccc cttcaacacc 900
tctgtggtgt acaagaagac cctgtttgtg gagttcactg accacctgtt caacattgcc 960
aagcccaggc ccccctggat gggcctgctg ggccccacca tccaggctga ggtgtatgac 1020
actgtggtga tcaccctgaa gaacatggcc agccaccctg tgagcctgca tgctgtgggg 1080
gtgagctact ggaaggcctc tgagggggct gagtatgatg accagaccag ccagagggag 1140
aaggaggatg acaaggtgtt ccctgggggc agccacacct atgtgtggca ggtgctgaag 1200
gagaatggcc ccatggcctc tgaccccctg tgcctgacct acagctacct gagccatgtg 1260
gacctggtga aggacctgaa ctctggcctg attggggccc tgctggtgtg cagggagggc 1320
agcctggcca aggagaagac ccagaccctg cacaagttca tcctgctgtt tgctgtgttt 1380
gatgagggca agagctggca ctctgaaacc aagaacagcc tgatgcagga cagggatgct 1440
gcctctgcca gggcctggcc caagatgcac actgtgaatg gctatgtgaa caggagcctg 1500
cctggcctga ttggctgcca caggaagtct gtgtactggc atgtgattgg catgggcacc 1560
acccctgagg tgcacagcat cttcctggag ggccacacct tcctggtcag gaaccacagg 1620
caggccagcc tggagatcag ccccatcacc ttcctgactg cccagaccct gctgatggac 1680
ctgggccagt tcctgctgtt ctgccacatc agcagccacc agcatgatgg catggaggcc 1740
tatgtgaagg tggacagctg ccctgaggag ccccagctga ggatgaagaa caatgaggag 1800
gctgaggact atgatgatga cctgactgac tctgagatgg atgtggtgag gtttgatgat 1860
gacaacagcc ccagcttcat ccagatcagg tctgtggcca agaagcaccc caagacctgg 1920
gtgcactaca ttgctgctga ggaggaggac tgggactatg cccccctggt gctggcccct 1980
gatgacagga gctacaagag ccagtacctg aacaatggcc cccagaggat tggcaggaag 2040
tacaagaagg tcaggttcat ggcctacact gatgaaacct tcaagaccag ggaggccatc 2100
cagcatgagt ctggcatcct gggccccctg ctgtatgggg aggtggggga caccctgctg 2160
atcatcttca agaaccaggc cagcaggccc tacaacatct acccccatgg catcactgat 2220
gtgaggcccc tgtacagcag gaggctgccc aagggggtga agcacctgaa ggacttcccc 2280
atcctgcctg gggagatctt caagtacaag tggactgtga ctgtggagga tggccccacc 2340
aagtctgacc ccaggtgcct gaccagatac tacagcagct ttgtgaacat ggagagggac 2400
ctggcctctg gcctgattgg ccccctgctg atctgctaca aggagtctgt ggaccagagg 2460
ggcaaccaga tcatgtctga caagaggaat gtgatcctgt tctctgtgtt tgatgagaac 2520
aggagctggt acctgactga gaacatccag aggttcctgc ccaaccctgc tggggtgcag 2580
ctggaggacc ctgagttcca ggccagcaac atcatgcaca gcatcaatgg ctatgtgttt 2640
gacagcctgc agctgtctgt gtgcctgcat gaggtggcct actggtacat cctgagcatt 2700
ggggcccaga ctgacttcct gtctgtgttc ttctctggct acaccttcaa gcacaagatg 2760
gtgtatgagg acaccctgac cctgttcccc ttctctgggg agactgtgtt catgagcatg 2820
gagaaccctg gcctgtggat tctgggctgc cacaactctg acttcaggaa caggggcatg 2880
actgccctgc tgaaagtctc cagctgtgac aagaacactg gggactacta tgaggacagc 2940
tatgaggaca tctctgccta cctgctgagc aagaacaatg ccattgagcc caggagcttc 3000
agccagaacc ccccagtgct gaagaggcac cagagggaga tcaccaggac caccctgcag 3060
tctgaccagg aggagattga ctatgatgac accatctctg tggagatgaa gaaggaggac 3120
tttgacatct acgacgagga cgagaaccag agccccagga gcttccagaa gaagaccagg 3180
cactacttca ttgctgctgt ggagaggctg tgggactatg gcatgagcag cagcccccat 3240
gtgctgagga acagggccca gtctggctct gtgccccagt tcaagaaggt ggtgttccag 3300
gagttcactg atggcagctt cacccagccc ctgtacagag gggagctgaa tgagcacctg 3360
ggcctgctgg gcccctacat cagggctgag gtggaggaca acatcatggt gaccttcagg 3420
aaccaggcca gcaggcccta cagcttctac agcagcctga tcagctatga ggaggaccag 3480
aggcaggggg ctgagcccag gaagaacttt gtgaagccca atgaaaccaa gacctacttc 3540
tggaaggtgc agcaccacat ggcccccacc aaggatgagt ttgactgcaa ggcctgggcc 3600
tacttctctg atgtggacct ggagaaggat gtgcactctg gcctgattgg ccccctgctg 3660
gtgtgccaca ccaacaccct gaaccctgcc catggcaggc aggtgactgt gcaggagttt 3720
gccctgttct tcaccatctt tgatgaaacc aagagctggt acttcactga gaacatggag 3780
aggaactgca gggccccctg caacatccag atggaggacc ccaccttcaa ggagaactac 3840
aggttccatg ccatcaatgg ctacatcatg gacaccctgc ctggcctggt gatggcccag 3900
gaccagagga tcaggtggta cctgctgagc atgggcagca atgagaacat ccacagcatc 3960
cacttctctg gccatgtgtt cactgtgagg aagaaggagg agtacaagat ggccctgtac 4020
aacctgtacc ctggggtgtt tgagactgtg gagatgctgc ccagcaaggc tggcatctgg 4080
agggtggagt gcctgattgg ggagcacctg catgctggca tgagcaccct gttcctggtg 4140
tacagcaaca agtgccagac ccccctgggc atggcctctg gccacatcag ggacttccag 4200
atcactgcct ctggccagta tggccagtgg gcccccaagc tggccaggct gcactactct 4260
ggcagcatca atgcctggag caccaaggag cccttcagct ggatcaaggt ggacctgctg 4320
gcccccatga tcatccatgg catcaagacc cagggggcca ggcagaagtt cagcagcctg 4380
tacatcagcc agttcatcat catgtacagc ctggatggca agaagtggca gacctacagg 4440
ggcaacagca ctggcaccct gatggtgttc tttggcaatg tggacagctc tggcatcaag 4500
cacaacatct tcaacccccc catcattgcc agatacatca ggctgcaccc cacccactac 4560
agcatcagga gcaccctgag gatggagctg atgggctgtg acctgaacag ctgcagcatg 4620
cccctgggca tggagagcaa ggccatctct gatgcccaga tcactgccag cagctacttc 4680
accaacatgt ttgccacctg gagccccagc aaggccaggc tgcacctgca gggcaggagc 4740
aatgcctgga ggccccaggt caacaacccc aaggagtggc tgcaggtgga cttccagaag 4800
accatgaagg tgactggggt gaccacccag ggggtgaaga gcctgctgac cagcatgtat 4860
gtgaaggagt tcctgatcag cagcagccag gatggccacc agtggaccct gttcttccag 4920
aatggcaagg tgaaggtgtt ccagggcaac caggacagct tcacccctgt ggtgaacagc 4980
ctggaccccc ccctgctgac cagatacctg aggattcacc cccagagctg ggtgcaccag 5040
attgccctga ggatggaggt gctgggctgt gaggcccagg acctgtactg acctcgagga 5100
ataaaggaaa tttattttca ttgcaatagt gtgttggttt tttgtgtcac gtggcggccg 5160
caggaacccc tagtgatgga gttggccact ccctctctgc gcgctcgctc gctcactgag 5220
gccgggcgac caaaggtcgc ccgacgcccg ggctttgccc gggcggcctc agtgagcgag 5280
cgagcgcgca gagagggagt ggccaa 5306
<210> 24
<211> 5461
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 24
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgactt tatttgccac 180
aaaaacccta tcagatgggc gtctttatca tttccattgt acagatgggg aaacaggctt 240
cggggtcggg gcatagccac ttactgacga ctccccaccc agcaagtggt tttgaacccg 300
gaccctctca cactacctaa accacgccag gacaacctct gctcctctcc accgaaattc 360
caaggggtcg agtggatgtt ggaggtggca tgggcccaga gaggtctctg acctctgccc 420
cagctccaag gtcagcaggc agggagggct gtgtgtttgc tgtttgctgc ttgcaatgtt 480
tgcccatttt agggacatga gtaggctgaa gtttgttcag tgtggacttc agaggcagca 540
cacaaacagc tgctggagga tgggaactga ggggttggaa gggggcaggg tgagcccaga 600
aactcctgtg tgcctctgag cctgcagacg cgaaacgtcg actggacaca ggacgctgtg 660
gtttctgagc cagggggcga ctcagatccc agccagtgga cttagcccct gtttgctcct 720
ccgataactg gggtgacctt ggttaatatt caccagcagc ctcccccgtt gcccctctgg 780
atccactgct taaatacgga cgaggacagg gccctgtctc ctcagcttca ggcaccacca 840
ctgacctggg acagtgaatc gcgatcgcca ccatgcagat tgagctgagc acctgcttct 900
tcctgtgcct gctgaggttc tgcttctctg ccaccaggag atactacctg ggggctgtgg 960
agctgagctg ggactacatg cagtctgacc tgggggagct gcctgtggat gccaggttcc 1020
cccccagagt gcccaagagc ttccccttca acacctctgt ggtgtacaag aagaccctgt 1080
ttgtggagtt cactgaccac ctgttcaaca ttgccaagcc caggcccccc tggatgggcc 1140
tgctgggccc caccatccag gctgaggtgt atgacactgt ggtgatcacc ctgaagaaca 1200
tggccagcca ccctgtgagc ctgcatgctg tgggggtgag ctactggaag gcctctgagg 1260
gggctgagta tgatgaccag accagccaga gggagaagga ggatgacaag gtgttccctg 1320
ggggcagcca cacctatgtg tggcaggtgc tgaaggagaa tggccccatg gcctctgacc 1380
ccctgtgcct gacctacagc tacctgagcc atgtggacct ggtgaaggac ctgaactctg 1440
gcctgattgg ggccctgctg gtgtgcaggg agggcagcct ggccaaggag aagacccaga 1500
ccctgcacaa gttcatcctg ctgtttgctg tgtttgatga gggcaagagc tggcactctg 1560
aaaccaagaa cagcctgatg caggacaggg atgctgcctc tgccagggcc tggcccaaga 1620
tgcacactgt gaatggctat gtgaacagga gcctgcctgg cctgattggc tgccacagga 1680
agtctgtgta ctggcatgtg attggcatgg gcaccacccc tgaggtgcac agcatcttcc 1740
tggagggcca caccttcctg gtcaggaacc acaggcaggc cagcctggag atcagcccca 1800
tcaccttcct gactgcccag accctgctga tggacctggg ccagttcctg ctgttctgcc 1860
acatcagcag ccaccagcat gatggcatgg aggcctatgt gaaggtggac agctgccctg 1920
aggagcccca gctgaggatg aagaacaatg aggaggctga ggactatgat gatgacctga 1980
ctgactctga gatggatgtg gtgaggtttg atgatgacaa cagccccagc ttcatccaga 2040
tcaggtctgt ggccaagaag caccccaaga cctgggtgca ctacattgct gctgaggagg 2100
aggactggga ctatgccccc ctggtgctgg cccctgatga caggagctac aagagccagt 2160
acctgaacaa tggcccccag aggattggca ggaagtacaa gaaggtcagg ttcatggcct 2220
acactgatga aaccttcaag accagggagg ccatccagca tgagtctggc atcctgggcc 2280
ccctgctgta tggggaggtg ggggacaccc tgctgatcat cttcaagaac caggccagca 2340
ggccctacaa catctacccc catggcatca ctgatgtgag gcccctgtac agcaggaggc 2400
tgcccaaggg ggtgaagcac ctgaaggact tccccatcct gcctggggag atcttcaagt 2460
acaagtggac tgtgactgtg gaggatggcc ccaccaagtc tgaccccagg tgcctgacca 2520
gatactacag cagctttgtg aacatggaga gggacctggc ctctggcctg attggccccc 2580
tgctgatctg ctacaaggag tctgtggacc agaggggcaa ccagatcatg tctgacaaga 2640
ggaatgtgat cctgttctct gtgtttgatg agaacaggag ctggtacctg actgagaaca 2700
tccagaggtt cctgcccaac cctgctgggg tgcagctgga ggaccctgag ttccaggcca 2760
gcaacatcat gcacagcatc aatggctatg tgtttgacag cctgcagctg tctgtgtgcc 2820
tgcatgaggt ggcctactgg tacatcctga gcattggggc ccagactgac ttcctgtctg 2880
tgttcttctc tggctacacc ttcaagcaca agatggtgta tgaggacacc ctgaccctgt 2940
tccccttctc tggggagact gtgttcatga gcatggagaa ccctggcctg tggattctgg 3000
gctgccacaa ctctgacttc aggaacaggg gcatgactgc cctgctgaaa gtctccagct 3060
gtgacaagaa cactggggac tactatgagg acagctatga ggacatctct gcctacctgc 3120
tgagcaagaa caatgccatt gagcccagga gcttcagcca gaacccccca gtgctgaaga 3180
ggcaccagag ggagatcacc aggaccaccc tgcagtctga ccaggaggag attgactatg 3240
atgacaccat ctctgtggag atgaagaagg aggactttga catctacgac gaggacgaga 3300
accagagccc caggagcttc cagaagaaga ccaggcacta cttcattgct gctgtggaga 3360
ggctgtggga ctatggcatg agcagcagcc cccatgtgct gaggaacagg gcccagtctg 3420
gctctgtgcc ccagttcaag aaggtggtgt tccaggagtt cactgatggc agcttcaccc 3480
agcccctgta cagaggggag ctgaatgagc acctgggcct gctgggcccc tacatcaggg 3540
ctgaggtgga ggacaacatc atggtgacct tcaggaacca ggccagcagg ccctacagct 3600
tctacagcag cctgatcagc tatgaggagg accagaggca gggggctgag cccaggaaga 3660
actttgtgaa gcccaatgaa accaagacct acttctggaa ggtgcagcac cacatggccc 3720
ccaccaagga tgagtttgac tgcaaggcct gggcctactt ctctgatgtg gacctggaga 3780
aggatgtgca ctctggcctg attggccccc tgctggtgtg ccacaccaac accctgaacc 3840
ctgcccatgg caggcaggtg actgtgcagg agtttgccct gttcttcacc atctttgatg 3900
aaaccaagag ctggtacttc actgagaaca tggagaggaa ctgcagggcc ccctgcaaca 3960
tccagatgga ggaccccacc ttcaaggaga actacaggtt ccatgccatc aatggctaca 4020
tcatggacac cctgcctggc ctggtgatgg cccaggacca gaggatcagg tggtacctgc 4080
tgagcatggg cagcaatgag aacatccaca gcatccactt ctctggccat gtgttcactg 4140
tgaggaagaa ggaggagtac aagatggccc tgtacaacct gtaccctggg gtgtttgaga 4200
ctgtggagat gctgcccagc aaggctggca tctggagggt ggagtgcctg attggggagc 4260
acctgcatgc tggcatgagc accctgttcc tggtgtacag caacaagtgc cagacccccc 4320
tgggcatggc ctctggccac atcagggact tccagatcac tgcctctggc cagtatggcc 4380
agtgggcccc caagctggcc aggctgcact actctggcag catcaatgcc tggagcacca 4440
aggagccctt cagctggatc aaggtggacc tgctggcccc catgatcatc catggcatca 4500
agacccaggg ggccaggcag aagttcagca gcctgtacat cagccagttc atcatcatgt 4560
acagcctgga tggcaagaag tggcagacct acaggggcaa cagcactggc accctgatgg 4620
tgttctttgg caatgtggac agctctggca tcaagcacaa catcttcaac ccccccatca 4680
ttgccagata catcaggctg caccccaccc actacagcat caggagcacc ctgaggatgg 4740
agctgatggg ctgtgacctg aacagctgca gcatgcccct gggcatggag agcaaggcca 4800
tctctgatgc ccagatcact gccagcagct acttcaccaa catgtttgcc acctggagcc 4860
ccagcaaggc caggctgcac ctgcagggca ggagcaatgc ctggaggccc caggtcaaca 4920
accccaagga gtggctgcag gtggacttcc agaagaccat gaaggtgact ggggtgacca 4980
cccagggggt gaagagcctg ctgaccagca tgtatgtgaa ggagttcctg atcagcagca 5040
gccaggatgg ccaccagtgg accctgttct tccagaatgg caaggtgaag gtgttccagg 5100
gcaaccagga cagcttcacc cctgtggtga acagcctgga cccccccctg ctgaccagat 5160
acctgaggat tcacccccag agctgggtgc accagattgc cctgaggatg gaggtgctgg 5220
gctgtgaggc ccaggacctg tactgacctc gaggaataaa ggaaatttat tttcattgca 5280
atagtgtgtt ggttttttgt gtcacgtggc ggccgcagga acccctagtg atggagttgg 5340
ccactccctc tctgcgcgct cgctcgctca ctgaggccgg gcgaccaaag gtcgcccgac 5400
gcccgggctt tgcccgggcg gcctcagtga gcgagcgagc gcgcagagag ggagtggcca 5460
a 5461
<210> 25
<211> 5327
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 25
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgaccc ctctcacact 180
acctaaacca cgccaggaca acctctgctc ctctccaccg aaattccaag gggtcgagtg 240
gatgttggag gtggcatggg cccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 300
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 360
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagctgct 420
ggaggatggg aactgagggg ttggaagggg gcagggtgag cccagaaact cctgtgtgcc 480
tctgagcctg cagacgcgaa acgtcgactg gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg 540
gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga taactggggt 600
gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa 660
tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga cctgggacag 720
tgaatcgcga tcgccaccat gcagattgag ctgagcacct gcttcttcct gtgcctgctg 780
aggttctgct tctctgccac caggagatac tacctggggg ctgtggagct gagctgggac 840
tacatgcagt ctgacctggg ggagctgcct gtggatgcca ggttcccccc cagagtgccc 900
aagagcttcc ccttcaacac ctctgtggtg tacaagaaga ccctgtttgt ggagttcact 960
gaccacctgt tcaacattgc caagcccagg cccccctgga tgggcctgct gggccccacc 1020
atccaggctg aggtgtatga cactgtggtg atcaccctga agaacatggc cagccaccct 1080
gtgagcctgc atgctgtggg ggtgagctac tggaaggcct ctgagggggc tgagtatgat 1140
gaccagacca gccagaggga gaaggaggat gacaaggtgt tccctggggg cagccacacc 1200
tatgtgtggc aggtgctgaa ggagaatggc cccatggcct ctgaccccct gtgcctgacc 1260
tacagctacc tgagccatgt ggacctggtg aaggacctga actctggcct gattggggcc 1320
ctgctggtgt gcagggaggg cagcctggcc aaggagaaga cccagaccct gcacaagttc 1380
atcctgctgt ttgctgtgtt tgatgagggc aagagctggc actctgaaac caagaacagc 1440
ctgatgcagg acagggatgc tgcctctgcc agggcctggc ccaagatgca cactgtgaat 1500
ggctatgtga acaggagcct gcctggcctg attggctgcc acaggaagtc tgtgtactgg 1560
catgtgattg gcatgggcac cacccctgag gtgcacagca tcttcctgga gggccacacc 1620
ttcctggtca ggaaccacag gcaggccagc ctggagatca gccccatcac cttcctgact 1680
gcccagaccc tgctgatgga cctgggccag ttcctgctgt tctgccacat cagcagccac 1740
cagcatgatg gcatggaggc ctatgtgaag gtggacagct gccctgagga gccccagctg 1800
aggatgaaga acaatgagga ggctgaggac tatgatgatg acctgactga ctctgagatg 1860
gatgtggtga ggtttgatga tgacaacagc cccagcttca tccagatcag gtctgtggcc 1920
aagaagcacc ccaagacctg ggtgcactac attgctgctg aggaggagga ctgggactat 1980
gcccccctgg tgctggcccc tgatgacagg agctacaaga gccagtacct gaacaatggc 2040
ccccagagga ttggcaggaa gtacaagaag gtcaggttca tggcctacac tgatgaaacc 2100
ttcaagacca gggaggccat ccagcatgag tctggcatcc tgggccccct gctgtatggg 2160
gaggtggggg acaccctgct gatcatcttc aagaaccagg ccagcaggcc ctacaacatc 2220
tacccccatg gcatcactga tgtgaggccc ctgtacagca ggaggctgcc caagggggtg 2280
aagcacctga aggacttccc catcctgcct ggggagatct tcaagtacaa gtggactgtg 2340
actgtggagg atggccccac caagtctgac cccaggtgcc tgaccagata ctacagcagc 2400
tttgtgaaca tggagaggga cctggcctct ggcctgattg gccccctgct gatctgctac 2460
aaggagtctg tggaccagag gggcaaccag atcatgtctg acaagaggaa tgtgatcctg 2520
ttctctgtgt ttgatgagaa caggagctgg tacctgactg agaacatcca gaggttcctg 2580
cccaaccctg ctggggtgca gctggaggac cctgagttcc aggccagcaa catcatgcac 2640
agcatcaatg gctatgtgtt tgacagcctg cagctgtctg tgtgcctgca tgaggtggcc 2700
tactggtaca tcctgagcat tggggcccag actgacttcc tgtctgtgtt cttctctggc 2760
tacaccttca agcacaagat ggtgtatgag gacaccctga ccctgttccc cttctctggg 2820
gagactgtgt tcatgagcat ggagaaccct ggcctgtgga ttctgggctg ccacaactct 2880
gacttcagga acaggggcat gactgccctg ctgaaagtct ccagctgtga caagaacact 2940
ggggactact atgaggacag ctatgaggac atctctgcct acctgctgag caagaacaat 3000
gccattgagc ccaggagctt cagccagaac cccccagtgc tgaagaggca ccagagggag 3060
atcaccagga ccaccctgca gtctgaccag gaggagattg actatgatga caccatctct 3120
gtggagatga agaaggagga ctttgacatc tacgacgagg acgagaacca gagccccagg 3180
agcttccaga agaagaccag gcactacttc attgctgctg tggagaggct gtgggactat 3240
ggcatgagca gcagccccca tgtgctgagg aacagggccc agtctggctc tgtgccccag 3300
ttcaagaagg tggtgttcca ggagttcact gatggcagct tcacccagcc cctgtacaga 3360
ggggagctga atgagcacct gggcctgctg ggcccctaca tcagggctga ggtggaggac 3420
aacatcatgg tgaccttcag gaaccaggcc agcaggccct acagcttcta cagcagcctg 3480
atcagctatg aggaggacca gaggcagggg gctgagccca ggaagaactt tgtgaagccc 3540
aatgaaacca agacctactt ctggaaggtg cagcaccaca tggcccccac caaggatgag 3600
tttgactgca aggcctgggc ctacttctct gatgtggacc tggagaagga tgtgcactct 3660
ggcctgattg gccccctgct ggtgtgccac accaacaccc tgaaccctgc ccatggcagg 3720
caggtgactg tgcaggagtt tgccctgttc ttcaccatct ttgatgaaac caagagctgg 3780
tacttcactg agaacatgga gaggaactgc agggccccct gcaacatcca gatggaggac 3840
cccaccttca aggagaacta caggttccat gccatcaatg gctacatcat ggacaccctg 3900
cctggcctgg tgatggccca ggaccagagg atcaggtggt acctgctgag catgggcagc 3960
aatgagaaca tccacagcat ccacttctct ggccatgtgt tcactgtgag gaagaaggag 4020
gagtacaaga tggccctgta caacctgtac cctggggtgt ttgagactgt ggagatgctg 4080
cccagcaagg ctggcatctg gagggtggag tgcctgattg gggagcacct gcatgctggc 4140
atgagcaccc tgttcctggt gtacagcaac aagtgccaga cccccctggg catggcctct 4200
ggccacatca gggacttcca gatcactgcc tctggccagt atggccagtg ggcccccaag 4260
ctggccaggc tgcactactc tggcagcatc aatgcctgga gcaccaagga gcccttcagc 4320
tggatcaagg tggacctgct ggcccccatg atcatccatg gcatcaagac ccagggggcc 4380
aggcagaagt tcagcagcct gtacatcagc cagttcatca tcatgtacag cctggatggc 4440
aagaagtggc agacctacag gggcaacagc actggcaccc tgatggtgtt ctttggcaat 4500
gtggacagct ctggcatcaa gcacaacatc ttcaaccccc ccatcattgc cagatacatc 4560
aggctgcacc ccacccacta cagcatcagg agcaccctga ggatggagct gatgggctgt 4620
gacctgaaca gctgcagcat gcccctgggc atggagagca aggccatctc tgatgcccag 4680
atcactgcca gcagctactt caccaacatg tttgccacct ggagccccag caaggccagg 4740
ctgcacctgc agggcaggag caatgcctgg aggccccagg tcaacaaccc caaggagtgg 4800
ctgcaggtgg acttccagaa gaccatgaag gtgactgggg tgaccaccca gggggtgaag 4860
agcctgctga ccagcatgta tgtgaaggag ttcctgatca gcagcagcca ggatggccac 4920
cagtggaccc tgttcttcca gaatggcaag gtgaaggtgt tccagggcaa ccaggacagc 4980
ttcacccctg tggtgaacag cctggacccc cccctgctga ccagatacct gaggattcac 5040
ccccagagct gggtgcacca gattgccctg aggatggagg tgctgggctg tgaggcccag 5100
gacctgtact gacctcgagg aataaaggaa atttattttc attgcaatag tgtgttggtt 5160
ttttgtgtca cgtggcggcc gcaggaaccc ctagtgatgg agttggccac tccctctctg 5220
cgcgctcgct cgctcactga ggccgggcga ccaaaggtcg cccgacgccc gggctttgcc 5280
cgggcggcct cagtgagcga gcgagcgcgc agagagggag tggccaa 5327
<210> 26
<211> 5309
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 26
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtc tgcaggctca gaggcacaca 180
ggagtttctg ggctcaccct gcccccttcc aacccctcag ttcccatcct ccagcagctg 240
tttgtgtgct gcctctgaag tccacactga acaaacttca gcctactcat gtccctaaaa 300
tgggcaaaca ttgcaagcag caaacagcaa acacacagcc ctccctgcct gctgaccttg 360
gagctggggc agaggtcaga gacctctctg ggcccatgcc acctccaaca tccactcgac 420
cccttggaat ttcggtggag aggagcagag gttgtcctgg cgtggtttag gtagtgtgag 480
aggggtcgac tggacacagg acgctgtggt ttctgagcca gggggcgact cagatcccag 540
ccagtggact tagcccctgt ttgctcctcc gataactggg gtgaccttgg ttaatattca 600
ccagcagcct cccccgttgc ccctctggat ccactgctta aatacggacg aggacagggc 660
cctgtctcct cagcttcagg caccaccact gacctgggac agtgaatcgc gatcgccacc 720
atgcagattg agctgagcac ctgcttcttc ctgtgcctgc tgaggttctg cttctctgcc 780
accaggagat actacctggg ggctgtggag ctgagctggg actacatgca gtctgacctg 840
ggggagctgc ctgtggatgc caggttcccc cccagagtgc ccaagagctt ccccttcaac 900
acctctgtgg tgtacaagaa gaccctgttt gtggagttca ctgaccacct gttcaacatt 960
gccaagccca ggcccccctg gatgggcctg ctgggcccca ccatccaggc tgaggtgtat 1020
gacactgtgg tgatcaccct gaagaacatg gccagccacc ctgtgagcct gcatgctgtg 1080
ggggtgagct actggaaggc ctctgagggg gctgagtatg atgaccagac cagccagagg 1140
gagaaggagg atgacaaggt gttccctggg ggcagccaca cctatgtgtg gcaggtgctg 1200
aaggagaatg gccccatggc ctctgacccc ctgtgcctga cctacagcta cctgagccat 1260
gtggacctgg tgaaggacct gaactctggc ctgattgggg ccctgctggt gtgcagggag 1320
ggcagcctgg ccaaggagaa gacccagacc ctgcacaagt tcatcctgct gtttgctgtg 1380
tttgatgagg gcaagagctg gcactctgaa accaagaaca gcctgatgca ggacagggat 1440
gctgcctctg ccagggcctg gcccaagatg cacactgtga atggctatgt gaacaggagc 1500
ctgcctggcc tgattggctg ccacaggaag tctgtgtact ggcatgtgat tggcatgggc 1560
accacccctg aggtgcacag catcttcctg gagggccaca ccttcctggt caggaaccac 1620
aggcaggcca gcctggagat cagccccatc accttcctga ctgcccagac cctgctgatg 1680
gacctgggcc agttcctgct gttctgccac atcagcagcc accagcatga tggcatggag 1740
gcctatgtga aggtggacag ctgccctgag gagccccagc tgaggatgaa gaacaatgag 1800
gaggctgagg actatgatga tgacctgact gactctgaga tggatgtggt gaggtttgat 1860
gatgacaaca gccccagctt catccagatc aggtctgtgg ccaagaagca ccccaagacc 1920
tgggtgcact acattgctgc tgaggaggag gactgggact atgcccccct ggtgctggcc 1980
cctgatgaca ggagctacaa gagccagtac ctgaacaatg gcccccagag gattggcagg 2040
aagtacaaga aggtcaggtt catggcctac actgatgaaa ccttcaagac cagggaggcc 2100
atccagcatg agtctggcat cctgggcccc ctgctgtatg gggaggtggg ggacaccctg 2160
ctgatcatct tcaagaacca ggccagcagg ccctacaaca tctaccccca tggcatcact 2220
gatgtgaggc ccctgtacag caggaggctg cccaaggggg tgaagcacct gaaggacttc 2280
cccatcctgc ctggggagat cttcaagtac aagtggactg tgactgtgga ggatggcccc 2340
accaagtctg accccaggtg cctgaccaga tactacagca gctttgtgaa catggagagg 2400
gacctggcct ctggcctgat tggccccctg ctgatctgct acaaggagtc tgtggaccag 2460
aggggcaacc agatcatgtc tgacaagagg aatgtgatcc tgttctctgt gtttgatgag 2520
aacaggagct ggtacctgac tgagaacatc cagaggttcc tgcccaaccc tgctggggtg 2580
cagctggagg accctgagtt ccaggccagc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtg 2640
tttgacagcc tgcagctgtc tgtgtgcctg catgaggtgg cctactggta catcctgagc 2700
attggggccc agactgactt cctgtctgtg ttcttctctg gctacacctt caagcacaag 2760
atggtgtatg aggacaccct gaccctgttc cccttctctg gggagactgt gttcatgagc 2820
atggagaacc ctggcctgtg gattctgggc tgccacaact ctgacttcag gaacaggggc 2880
atgactgccc tgctgaaagt ctccagctgt gacaagaaca ctggggacta ctatgaggac 2940
agctatgagg acatctctgc ctacctgctg agcaagaaca atgccattga gcccaggagc 3000
ttcagccaga accccccagt gctgaagagg caccagaggg agatcaccag gaccaccctg 3060
cagtctgacc aggaggagat tgactatgat gacaccatct ctgtggagat gaagaaggag 3120
gactttgaca tctacgacga ggacgagaac cagagcccca ggagcttcca gaagaagacc 3180
aggcactact tcattgctgc tgtggagagg ctgtgggact atggcatgag cagcagcccc 3240
catgtgctga ggaacagggc ccagtctggc tctgtgcccc agttcaagaa ggtggtgttc 3300
caggagttca ctgatggcag cttcacccag cccctgtaca gaggggagct gaatgagcac 3360
ctgggcctgc tgggccccta catcagggct gaggtggagg acaacatcat ggtgaccttc 3420
aggaaccagg ccagcaggcc ctacagcttc tacagcagcc tgatcagcta tgaggaggac 3480
cagaggcagg gggctgagcc caggaagaac tttgtgaagc ccaatgaaac caagacctac 3540
ttctggaagg tgcagcacca catggccccc accaaggatg agtttgactg caaggcctgg 3600
gcctacttct ctgatgtgga cctggagaag gatgtgcact ctggcctgat tggccccctg 3660
ctggtgtgcc acaccaacac cctgaaccct gcccatggca ggcaggtgac tgtgcaggag 3720
tttgccctgt tcttcaccat ctttgatgaa accaagagct ggtacttcac tgagaacatg 3780
gagaggaact gcagggcccc ctgcaacatc cagatggagg accccacctt caaggagaac 3840
tacaggttcc atgccatcaa tggctacatc atggacaccc tgcctggcct ggtgatggcc 3900
caggaccaga ggatcaggtg gtacctgctg agcatgggca gcaatgagaa catccacagc 3960
atccacttct ctggccatgt gttcactgtg aggaagaagg aggagtacaa gatggccctg 4020
tacaacctgt accctggggt gtttgagact gtggagatgc tgcccagcaa ggctggcatc 4080
tggagggtgg agtgcctgat tggggagcac ctgcatgctg gcatgagcac cctgttcctg 4140
gtgtacagca acaagtgcca gacccccctg ggcatggcct ctggccacat cagggacttc 4200
cagatcactg cctctggcca gtatggccag tgggccccca agctggccag gctgcactac 4260
tctggcagca tcaatgcctg gagcaccaag gagcccttca gctggatcaa ggtggacctg 4320
ctggccccca tgatcatcca tggcatcaag acccaggggg ccaggcagaa gttcagcagc 4380
ctgtacatca gccagttcat catcatgtac agcctggatg gcaagaagtg gcagacctac 4440
aggggcaaca gcactggcac cctgatggtg ttctttggca atgtggacag ctctggcatc 4500
aagcacaaca tcttcaaccc ccccatcatt gccagataca tcaggctgca ccccacccac 4560
tacagcatca ggagcaccct gaggatggag ctgatgggct gtgacctgaa cagctgcagc 4620
atgcccctgg gcatggagag caaggccatc tctgatgccc agatcactgc cagcagctac 4680
ttcaccaaca tgtttgccac ctggagcccc agcaaggcca ggctgcacct gcagggcagg 4740
agcaatgcct ggaggcccca ggtcaacaac cccaaggagt ggctgcaggt ggacttccag 4800
aagaccatga aggtgactgg ggtgaccacc cagggggtga agagcctgct gaccagcatg 4860
tatgtgaagg agttcctgat cagcagcagc caggatggcc accagtggac cctgttcttc 4920
cagaatggca aggtgaaggt gttccagggc aaccaggaca gcttcacccc tgtggtgaac 4980
agcctggacc cccccctgct gaccagatac ctgaggattc acccccagag ctgggtgcac 5040
cagattgccc tgaggatgga ggtgctgggc tgtgaggccc aggacctgta ctgacctcga 5100
ggaataaagg aaatttattt tcattgcaat agtgtgttgg ttttttgtgt cacgtggcgg 5160
ccgcaggaac ccctagtgat ggagttggcc actccctctc tgcgcgctcg ctcgctcact 5220
gaggccgggc gaccaaaggt cgcccgacgc ccgggctttg cccgggcggc ctcagtgagc 5280
gagcgagcgc gcagagaggg agtggccaa 5309
<210> 27
<211> 5532
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 27
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgaccc ctctcacact 180
acctaaacca cgccaggaca acctctgctc ctctccaccg aaattccaag gggtcgagtg 240
gatgttggag gtggcatggg cccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 300
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 360
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagctgct 420
ggaggatggg aactgagggg ttggaagggg gcagggtgag cccagaaact cctgtgtgcc 480
tctgagcctg cagacgcgaa acgtcgactg gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg 540
gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga taactggggt 600
gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa 660
tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga cctgggacag 720
tgaatcgtaa gtatgccttt cactgcgaga ggttctggag aggcttctga gctccccatg 780
gcccaggcag gcagcaggtc tggggcagga ggggggttgt ggagtgcctt gactcggggc 840
ctggcccccc catctctgtc ttgcaggaca attgccgtct tctgtctcgt ggggcatcct 900
cctgctggca ggcctgtgct gcctggtccc tgcgatcgcc accatgcaga ttgagctgag 960
cacctgcttc ttcctgtgcc tgctgaggtt ctgcttctct gccaccagga gatactacct 1020
gggggctgtg gagctgagct gggactacat gcagtctgac ctgggggagc tgcctgtgga 1080
tgccaggttc ccccccagag tgcccaagag cttccccttc aacacctctg tggtgtacaa 1140
gaagaccctg tttgtggagt tcactgacca cctgttcaac attgccaagc ccaggccccc 1200
ctggatgggc ctgctgggcc ccaccatcca ggctgaggtg tatgacactg tggtgatcac 1260
cctgaagaac atggccagcc accctgtgag cctgcatgct gtgggggtga gctactggaa 1320
ggcctctgag ggggctgagt atgatgacca gaccagccag agggagaagg aggatgacaa 1380
ggtgttccct gggggcagcc acacctatgt gtggcaggtg ctgaaggaga atggccccat 1440
ggcctctgac cccctgtgcc tgacctacag ctacctgagc catgtggacc tggtgaagga 1500
cctgaactct ggcctgattg gggccctgct ggtgtgcagg gagggcagcc tggccaagga 1560
gaagacccag accctgcaca agttcatcct gctgtttgct gtgtttgatg agggcaagag 1620
ctggcactct gaaaccaaga acagcctgat gcaggacagg gatgctgcct ctgccagggc 1680
ctggcccaag atgcacactg tgaatggcta tgtgaacagg agcctgcctg gcctgattgg 1740
ctgccacagg aagtctgtgt actggcatgt gattggcatg ggcaccaccc ctgaggtgca 1800
cagcatcttc ctggagggcc acaccttcct ggtcaggaac cacaggcagg ccagcctgga 1860
gatcagcccc atcaccttcc tgactgccca gaccctgctg atggacctgg gccagttcct 1920
gctgttctgc cacatcagca gccaccagca tgatggcatg gaggcctatg tgaaggtgga 1980
cagctgccct gaggagcccc agctgaggat gaagaacaat gaggaggctg aggactatga 2040
tgatgacctg actgactctg agatggatgt ggtgaggttt gatgatgaca acagccccag 2100
cttcatccag atcaggtctg tggccaagaa gcaccccaag acctgggtgc actacattgc 2160
tgctgaggag gaggactggg actatgcccc cctggtgctg gcccctgatg acaggagcta 2220
caagagccag tacctgaaca atggccccca gaggattggc aggaagtaca agaaggtcag 2280
gttcatggcc tacactgatg aaaccttcaa gaccagggag gccatccagc atgagtctgg 2340
catcctgggc cccctgctgt atggggaggt gggggacacc ctgctgatca tcttcaagaa 2400
ccaggccagc aggccctaca acatctaccc ccatggcatc actgatgtga ggcccctgta 2460
cagcaggagg ctgcccaagg gggtgaagca cctgaaggac ttccccatcc tgcctgggga 2520
gatcttcaag tacaagtgga ctgtgactgt ggaggatggc cccaccaagt ctgaccccag 2580
gtgcctgacc agatactaca gcagctttgt gaacatggag agggacctgg cctctggcct 2640
gattggcccc ctgctgatct gctacaagga gtctgtggac cagaggggca accagatcat 2700
gtctgacaag aggaatgtga tcctgttctc tgtgtttgat gagaacagga gctggtacct 2760
gactgagaac atccagaggt tcctgcccaa ccctgctggg gtgcagctgg aggaccctga 2820
gttccaggcc agcaacatca tgcacagcat caatggctat gtgtttgaca gcctgcagct 2880
gtctgtgtgc ctgcatgagg tggcctactg gtacatcctg agcattgggg cccagactga 2940
cttcctgtct gtgttcttct ctggctacac cttcaagcac aagatggtgt atgaggacac 3000
cctgaccctg ttccccttct ctggggagac tgtgttcatg agcatggaga accctggcct 3060
gtggattctg ggctgccaca actctgactt caggaacagg ggcatgactg ccctgctgaa 3120
agtctccagc tgtgacaaga acactgggga ctactatgag gacagctatg aggacatctc 3180
tgcctacctg ctgagcaaga acaatgccat tgagcccagg agcttcagcc agaacccccc 3240
agtgctgaag aggcaccaga gggagatcac caggaccacc ctgcagtctg accaggagga 3300
gattgactat gatgacacca tctctgtgga gatgaagaag gaggactttg acatctacga 3360
cgaggacgag aaccagagcc ccaggagctt ccagaagaag accaggcact acttcattgc 3420
tgctgtggag aggctgtggg actatggcat gagcagcagc ccccatgtgc tgaggaacag 3480
ggcccagtct ggctctgtgc cccagttcaa gaaggtggtg ttccaggagt tcactgatgg 3540
cagcttcacc cagcccctgt acagagggga gctgaatgag cacctgggcc tgctgggccc 3600
ctacatcagg gctgaggtgg aggacaacat catggtgacc ttcaggaacc aggccagcag 3660
gccctacagc ttctacagca gcctgatcag ctatgaggag gaccagaggc agggggctga 3720
gcccaggaag aactttgtga agcccaatga aaccaagacc tacttctgga aggtgcagca 3780
ccacatggcc cccaccaagg atgagtttga ctgcaaggcc tgggcctact tctctgatgt 3840
ggacctggag aaggatgtgc actctggcct gattggcccc ctgctggtgt gccacaccaa 3900
caccctgaac cctgcccatg gcaggcaggt gactgtgcag gagtttgccc tgttcttcac 3960
catctttgat gaaaccaaga gctggtactt cactgagaac atggagagga actgcagggc 4020
cccctgcaac atccagatgg aggaccccac cttcaaggag aactacaggt tccatgccat 4080
caatggctac atcatggaca ccctgcctgg cctggtgatg gcccaggacc agaggatcag 4140
gtggtacctg ctgagcatgg gcagcaatga gaacatccac agcatccact tctctggcca 4200
tgtgttcact gtgaggaaga aggaggagta caagatggcc ctgtacaacc tgtaccctgg 4260
ggtgtttgag actgtggaga tgctgcccag caaggctggc atctggaggg tggagtgcct 4320
gattggggag cacctgcatg ctggcatgag caccctgttc ctggtgtaca gcaacaagtg 4380
ccagaccccc ctgggcatgg cctctggcca catcagggac ttccagatca ctgcctctgg 4440
ccagtatggc cagtgggccc ccaagctggc caggctgcac tactctggca gcatcaatgc 4500
ctggagcacc aaggagccct tcagctggat caaggtggac ctgctggccc ccatgatcat 4560
ccatggcatc aagacccagg gggccaggca gaagttcagc agcctgtaca tcagccagtt 4620
catcatcatg tacagcctgg atggcaagaa gtggcagacc tacaggggca acagcactgg 4680
caccctgatg gtgttctttg gcaatgtgga cagctctggc atcaagcaca acatcttcaa 4740
cccccccatc attgccagat acatcaggct gcaccccacc cactacagca tcaggagcac 4800
cctgaggatg gagctgatgg gctgtgacct gaacagctgc agcatgcccc tgggcatgga 4860
gagcaaggcc atctctgatg cccagatcac tgccagcagc tacttcacca acatgtttgc 4920
cacctggagc cccagcaagg ccaggctgca cctgcagggc aggagcaatg cctggaggcc 4980
ccaggtcaac aaccccaagg agtggctgca ggtggacttc cagaagacca tgaaggtgac 5040
tggggtgacc acccaggggg tgaagagcct gctgaccagc atgtatgtga aggagttcct 5100
gatcagcagc agccaggatg gccaccagtg gaccctgttc ttccagaatg gcaaggtgaa 5160
ggtgttccag ggcaaccagg acagcttcac ccctgtggtg aacagcctgg acccccccct 5220
gctgaccaga tacctgagga ttcaccccca gagctgggtg caccagattg ccctgaggat 5280
ggaggtgctg ggctgtgagg cccaggacct gtactgacct cgaggaataa aggaaattta 5340
ttttcattgc aatagtgtgt tggttttttg tgtcacgtgg cggccgcagg aacccctagt 5400
gatggagttg gccactccct ctctgcgcgc tcgctcgctc actgaggccg ggcgaccaaa 5460
ggtcgcccga cgcccgggct ttgcccgggc ggcctcagtg agcgagcgag cgcgcagaga 5520
gggagtggcc aa 5532
<210> 28
<211> 5877
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 28
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgaccc ctctcacact 180
acctaaacca cgccaggaca acctctgctc ctctccaccg aaattccaag gggtcgagtg 240
gatgttggag gtggcatggg cccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 300
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 360
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagctgct 420
ggaggatggg aactgagggg ttggaagggg gcagggtgag cccagaaact cctgtgtgcc 480
tctgagcctg cagacgcgaa acgtcgacag gttaattttt aaaaagcagt caaaagtcca 540
agtggccctt ggcagcattt actctctctg tttgctctgg ttaataatct caggagcaca 600
aacattcctg gaggcaggag aagaaatcaa catcctggac ttatcctctg ggcctctccc 660
cacccccagg agaggctcag gttaattttt aaaaagcagt caaaagtcca agtggccctt 720
ggcagcattt actctctctg tttgctctgg ttaataatct caggagcaca aacattcctg 780
gaggcaggag aagaaatcaa catcctggac ttatcctctg ggcctctccc cacccccagg 840
agaggctgtc gactggacac aggacgctgt ggtttctgag ccagggggcg actcagatcc 900
cagccagtgg acttagcccc tgtttgctcc tccgataact ggggtgacct tggttaatat 960
tcaccagcag cctcccccgt tgcccctctg gatccactgc ttaaatacgg acgaggacag 1020
ggccctgtct cctcagcttc aggcaccacc actgacctgg gacagtgaat cgtaagtatg 1080
cctttcactg cgagaggttc tggagaggct tctgagctcc ccatggccca ggcaggcagc 1140
aggtctgggg caggaggggg gttgtggagt gccttgactc ggggcctggc ccccccatct 1200
ctgtcttgca ggacaattgc cgtcttctgt ctcgtggggc atcctcctgc tggcaggcct 1260
gtgctgcctg gtccctgcga tcgccaccat gcagattgag ctgagcacct gcttcttcct 1320
gtgcctgctg aggttctgct tctctgccac caggagatac tacctggggg ctgtggagct 1380
gagctgggac tacatgcagt ctgacctggg ggagctgcct gtggatgcca ggttcccccc 1440
cagagtgccc aagagcttcc ccttcaacac ctctgtggtg tacaagaaga ccctgtttgt 1500
ggagttcact gaccacctgt tcaacattgc caagcccagg cccccctgga tgggcctgct 1560
gggccccacc atccaggctg aggtgtatga cactgtggtg atcaccctga agaacatggc 1620
cagccaccct gtgagcctgc atgctgtggg ggtgagctac tggaaggcct ctgagggggc 1680
tgagtatgat gaccagacca gccagaggga gaaggaggat gacaaggtgt tccctggggg 1740
cagccacacc tatgtgtggc aggtgctgaa ggagaatggc cccatggcct ctgaccccct 1800
gtgcctgacc tacagctacc tgagccatgt ggacctggtg aaggacctga actctggcct 1860
gattggggcc ctgctggtgt gcagggaggg cagcctggcc aaggagaaga cccagaccct 1920
gcacaagttc atcctgctgt ttgctgtgtt tgatgagggc aagagctggc actctgaaac 1980
caagaacagc ctgatgcagg acagggatgc tgcctctgcc agggcctggc ccaagatgca 2040
cactgtgaat ggctatgtga acaggagcct gcctggcctg attggctgcc acaggaagtc 2100
tgtgtactgg catgtgattg gcatgggcac cacccctgag gtgcacagca tcttcctgga 2160
gggccacacc ttcctggtca ggaaccacag gcaggccagc ctggagatca gccccatcac 2220
cttcctgact gcccagaccc tgctgatgga cctgggccag ttcctgctgt tctgccacat 2280
cagcagccac cagcatgatg gcatggaggc ctatgtgaag gtggacagct gccctgagga 2340
gccccagctg aggatgaaga acaatgagga ggctgaggac tatgatgatg acctgactga 2400
ctctgagatg gatgtggtga ggtttgatga tgacaacagc cccagcttca tccagatcag 2460
gtctgtggcc aagaagcacc ccaagacctg ggtgcactac attgctgctg aggaggagga 2520
ctgggactat gcccccctgg tgctggcccc tgatgacagg agctacaaga gccagtacct 2580
gaacaatggc ccccagagga ttggcaggaa gtacaagaag gtcaggttca tggcctacac 2640
tgatgaaacc ttcaagacca gggaggccat ccagcatgag tctggcatcc tgggccccct 2700
gctgtatggg gaggtggggg acaccctgct gatcatcttc aagaaccagg ccagcaggcc 2760
ctacaacatc tacccccatg gcatcactga tgtgaggccc ctgtacagca ggaggctgcc 2820
caagggggtg aagcacctga aggacttccc catcctgcct ggggagatct tcaagtacaa 2880
gtggactgtg actgtggagg atggccccac caagtctgac cccaggtgcc tgaccagata 2940
ctacagcagc tttgtgaaca tggagaggga cctggcctct ggcctgattg gccccctgct 3000
gatctgctac aaggagtctg tggaccagag gggcaaccag atcatgtctg acaagaggaa 3060
tgtgatcctg ttctctgtgt ttgatgagaa caggagctgg tacctgactg agaacatcca 3120
gaggttcctg cccaaccctg ctggggtgca gctggaggac cctgagttcc aggccagcaa 3180
catcatgcac agcatcaatg gctatgtgtt tgacagcctg cagctgtctg tgtgcctgca 3240
tgaggtggcc tactggtaca tcctgagcat tggggcccag actgacttcc tgtctgtgtt 3300
cttctctggc tacaccttca agcacaagat ggtgtatgag gacaccctga ccctgttccc 3360
cttctctggg gagactgtgt tcatgagcat ggagaaccct ggcctgtgga ttctgggctg 3420
ccacaactct gacttcagga acaggggcat gactgccctg ctgaaagtct ccagctgtga 3480
caagaacact ggggactact atgaggacag ctatgaggac atctctgcct acctgctgag 3540
caagaacaat gccattgagc ccaggagctt cagccagaac cccccagtgc tgaagaggca 3600
ccagagggag atcaccagga ccaccctgca gtctgaccag gaggagattg actatgatga 3660
caccatctct gtggagatga agaaggagga ctttgacatc tacgacgagg acgagaacca 3720
gagccccagg agcttccaga agaagaccag gcactacttc attgctgctg tggagaggct 3780
gtgggactat ggcatgagca gcagccccca tgtgctgagg aacagggccc agtctggctc 3840
tgtgccccag ttcaagaagg tggtgttcca ggagttcact gatggcagct tcacccagcc 3900
cctgtacaga ggggagctga atgagcacct gggcctgctg ggcccctaca tcagggctga 3960
ggtggaggac aacatcatgg tgaccttcag gaaccaggcc agcaggccct acagcttcta 4020
cagcagcctg atcagctatg aggaggacca gaggcagggg gctgagccca ggaagaactt 4080
tgtgaagccc aatgaaacca agacctactt ctggaaggtg cagcaccaca tggcccccac 4140
caaggatgag tttgactgca aggcctgggc ctacttctct gatgtggacc tggagaagga 4200
tgtgcactct ggcctgattg gccccctgct ggtgtgccac accaacaccc tgaaccctgc 4260
ccatggcagg caggtgactg tgcaggagtt tgccctgttc ttcaccatct ttgatgaaac 4320
caagagctgg tacttcactg agaacatgga gaggaactgc agggccccct gcaacatcca 4380
gatggaggac cccaccttca aggagaacta caggttccat gccatcaatg gctacatcat 4440
ggacaccctg cctggcctgg tgatggccca ggaccagagg atcaggtggt acctgctgag 4500
catgggcagc aatgagaaca tccacagcat ccacttctct ggccatgtgt tcactgtgag 4560
gaagaaggag gagtacaaga tggccctgta caacctgtac cctggggtgt ttgagactgt 4620
ggagatgctg cccagcaagg ctggcatctg gagggtggag tgcctgattg gggagcacct 4680
gcatgctggc atgagcaccc tgttcctggt gtacagcaac aagtgccaga cccccctggg 4740
catggcctct ggccacatca gggacttcca gatcactgcc tctggccagt atggccagtg 4800
ggcccccaag ctggccaggc tgcactactc tggcagcatc aatgcctgga gcaccaagga 4860
gcccttcagc tggatcaagg tggacctgct ggcccccatg atcatccatg gcatcaagac 4920
ccagggggcc aggcagaagt tcagcagcct gtacatcagc cagttcatca tcatgtacag 4980
cctggatggc aagaagtggc agacctacag gggcaacagc actggcaccc tgatggtgtt 5040
ctttggcaat gtggacagct ctggcatcaa gcacaacatc ttcaaccccc ccatcattgc 5100
cagatacatc aggctgcacc ccacccacta cagcatcagg agcaccctga ggatggagct 5160
gatgggctgt gacctgaaca gctgcagcat gcccctgggc atggagagca aggccatctc 5220
tgatgcccag atcactgcca gcagctactt caccaacatg tttgccacct ggagccccag 5280
caaggccagg ctgcacctgc agggcaggag caatgcctgg aggccccagg tcaacaaccc 5340
caaggagtgg ctgcaggtgg acttccagaa gaccatgaag gtgactgggg tgaccaccca 5400
gggggtgaag agcctgctga ccagcatgta tgtgaaggag ttcctgatca gcagcagcca 5460
ggatggccac cagtggaccc tgttcttcca gaatggcaag gtgaaggtgt tccagggcaa 5520
ccaggacagc ttcacccctg tggtgaacag cctggacccc cccctgctga ccagatacct 5580
gaggattcac ccccagagct gggtgcacca gattgccctg aggatggagg tgctgggctg 5640
tgaggcccag gacctgtact gacctcgagg aataaaggaa atttattttc attgcaatag 5700
tgtgttggtt ttttgtgtca cgtggcggcc gcaggaaccc ctagtgatgg agttggccac 5760
tccctctctg cgcgctcgct cgctcactga ggccgggcga ccaaaggtcg cccgacgccc 5820
gggctttgcc cgggcggcct cagtgagcga gcgagcgcgc agagagggag tggccaa 5877
<210> 29
<211> 6054
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 29
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgaccc ctctcacact 180
acctaaacca cgccaggaca acctctgctc ctctccaccg aaattccaag gggtcgagtg 240
gatgttggag gtggcatggg cccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 300
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 360
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagctgct 420
ggaggatggg aactgagggg ttggaagggg gcagggtgag cccagaaact cctgtgtgcc 480
tctgagcctg cagacgcgaa acgtcgacag gttaattttt aaaaagcagt caaaagtcca 540
agtggccctt ggcagcattt actctctctg tttgctctgg ttaataatct caggagcaca 600
aacattcctg gaggcaggag aagaaatcaa catcctggac ttatcctctg ggcctctccc 660
cacccccagg agaggctcag gttaattttt aaaaagcagt caaaagtcca agtggccctt 720
ggcagcattt actctctctg tttgctctgg ttaataatct caggagcaca aacattcctg 780
gaggcaggag aagaaatcaa catcctggac ttatcctctg ggcctctccc cacccccagg 840
agaggctgtc gactggacac aggacgctgt ggtttctgag ccagggggcg actcagatcc 900
cagccagtgg acttagcccc tgtttgctcc tccgataact ggggtgacct tggttaatat 960
tcaccagcag cctcccccgt tgcccctctg gatccactgc ttaaatacgg acgaggacag 1020
ggccctgtct cctcagcttc aggcaccacc actgacctgg gacagtgaat cgtaagtatg 1080
cctttcactg cgagaggttc tggagaggct tctgagctcc ccatggccca ggcaggcagc 1140
aggtctgggg caggaggggg gttgtggagt gccttgactc ggggcctggc ccccccatct 1200
ctgtcttgca ggacaattgc cgtcttctgt ctcgtggggc atcctcctgc tggcaggcct 1260
gtgctgcctg gtccctgcga tcgccaccat gcagattgag ctgagcacct gcttcttcct 1320
gtgcctgctg aggttctgct tctctgccac caggagatac tacctggggg ctgtggagct 1380
gagctgggac tacatgcagt ctgacctggg ggagctgcct gtggatgcca ggttcccccc 1440
cagagtgccc aagagcttcc ccttcaacac ctctgtggtg tacaagaaga ccctgtttgt 1500
ggagttcact gaccacctgt tcaacattgc caagcccagg cccccctgga tgggcctgct 1560
gggccccacc atccaggctg aggtgtatga cactgtggtg atcaccctga agaacatggc 1620
cagccaccct gtgagcctgc atgctgtggg ggtgagctac tggaaggcct ctgagggggc 1680
tgagtatgat gaccagacca gccagaggga gaaggaggat gacaaggtgt tccctggggg 1740
cagccacacc tatgtgtggc aggtgctgaa ggagaatggc cccatggcct ctgaccccct 1800
gtgcctgacc tacagctacc tgagccatgt ggacctggtg aaggacctga actctggcct 1860
gattggggcc ctgctggtgt gcagggaggg cagcctggcc aaggagaaga cccagaccct 1920
gcacaagttc atcctgctgt ttgctgtgtt tgatgagggc aagagctggc actctgaaac 1980
caagaacagc ctgatgcagg acagggatgc tgcctctgcc agggcctggc ccaagatgca 2040
cactgtgaat ggctatgtga acaggagcct gcctggcctg attggctgcc acaggaagtc 2100
tgtgtactgg catgtgattg gcatgggcac cacccctgag gtgcacagca tcttcctgga 2160
gggccacacc ttcctggtca ggaaccacag gcaggccagc ctggagatca gccccatcac 2220
cttcctgact gcccagaccc tgctgatgga cctgggccag ttcctgctgt tctgccacat 2280
cagcagccac cagcatgatg gcatggaggc ctatgtgaag gtggacagct gccctgagga 2340
gccccagctg aggatgaaga acaatgagga ggctgaggac tatgatgatg acctgactga 2400
ctctgagatg gatgtggtga ggtttgatga tgacaacagc cccagcttca tccagatcag 2460
gtctgtggcc aagaagcacc ccaagacctg ggtgcactac attgctgctg aggaggagga 2520
ctgggactat gcccccctgg tgctggcccc tgatgacagg agctacaaga gccagtacct 2580
gaacaatggc ccccagagga ttggcaggaa gtacaagaag gtcaggttca tggcctacac 2640
tgatgaaacc ttcaagacca gggaggccat ccagcatgag tctggcatcc tgggccccct 2700
gctgtatggg gaggtggggg acaccctgct gatcatcttc aagaaccagg ccagcaggcc 2760
ctacaacatc tacccccatg gcatcactga tgtgaggccc ctgtacagca ggaggctgcc 2820
caagggggtg aagcacctga aggacttccc catcctgcct ggggagatct tcaagtacaa 2880
gtggactgtg actgtggagg atggccccac caagtctgac cccaggtgcc tgaccagata 2940
ctacagcagc tttgtgaaca tggagaggga cctggcctct ggcctgattg gccccctgct 3000
gatctgctac aaggagtctg tggaccagag gggcaaccag atcatgtctg acaagaggaa 3060
tgtgatcctg ttctctgtgt ttgatgagaa caggagctgg tacctgactg agaacatcca 3120
gaggttcctg cccaaccctg ctggggtgca gctggaggac cctgagttcc aggccagcaa 3180
catcatgcac agcatcaatg gctatgtgtt tgacagcctg cagctgtctg tgtgcctgca 3240
tgaggtggcc tactggtaca tcctgagcat tggggcccag actgacttcc tgtctgtgtt 3300
cttctctggc tacaccttca agcacaagat ggtgtatgag gacaccctga ccctgttccc 3360
cttctctggg gagactgtgt tcatgagcat ggagaaccct ggcctgtgga ttctgggctg 3420
ccacaactct gacttcagga acaggggcat gactgccctg ctgaaagtct ccagctgtga 3480
caagaacact ggggactact atgaggacag ctatgaggac atctctgcct acctgctgag 3540
caagaacaat gccattgagc ccaggagctt cagccagaac cccccagtgc tgaagaggca 3600
ccagagggag atcaccagga ccaccctgca gtctgaccag gaggagattg actatgatga 3660
caccatctct gtggagatga agaaggagga ctttgacatc tacgacgagg acgagaacca 3720
gagccccagg agcttccaga agaagaccag gcactacttc attgctgctg tggagaggct 3780
gtgggactat ggcatgagca gcagccccca tgtgctgagg aacagggccc agtctggctc 3840
tgtgccccag ttcaagaagg tggtgttcca ggagttcact gatggcagct tcacccagcc 3900
cctgtacaga ggggagctga atgagcacct gggcctgctg ggcccctaca tcagggctga 3960
ggtggaggac aacatcatgg tgaccttcag gaaccaggcc agcaggccct acagcttcta 4020
cagcagcctg atcagctatg aggaggacca gaggcagggg gctgagccca ggaagaactt 4080
tgtgaagccc aatgaaacca agacctactt ctggaaggtg cagcaccaca tggcccccac 4140
caaggatgag tttgactgca aggcctgggc ctacttctct gatgtggacc tggagaagga 4200
tgtgcactct ggcctgattg gccccctgct ggtgtgccac accaacaccc tgaaccctgc 4260
ccatggcagg caggtgactg tgcaggagtt tgccctgttc ttcaccatct ttgatgaaac 4320
caagagctgg tacttcactg agaacatgga gaggaactgc agggccccct gcaacatcca 4380
gatggaggac cccaccttca aggagaacta caggttccat gccatcaatg gctacatcat 4440
ggacaccctg cctggcctgg tgatggccca ggaccagagg atcaggtggt acctgctgag 4500
catgggcagc aatgagaaca tccacagcat ccacttctct ggccatgtgt tcactgtgag 4560
gaagaaggag gagtacaaga tggccctgta caacctgtac cctggggtgt ttgagactgt 4620
ggagatgctg cccagcaagg ctggcatctg gagggtggag tgcctgattg gggagcacct 4680
gcatgctggc atgagcaccc tgttcctggt gtacagcaac aagtgccaga cccccctggg 4740
catggcctct ggccacatca gggacttcca gatcactgcc tctggccagt atggccagtg 4800
ggcccccaag ctggccaggc tgcactactc tggcagcatc aatgcctgga gcaccaagga 4860
gcccttcagc tggatcaagg tggacctgct ggcccccatg atcatccatg gcatcaagac 4920
ccagggggcc aggcagaagt tcagcagcct gtacatcagc cagttcatca tcatgtacag 4980
cctggatggc aagaagtggc agacctacag gggcaacagc actggcaccc tgatggtgtt 5040
ctttggcaat gtggacagct ctggcatcaa gcacaacatc ttcaaccccc ccatcattgc 5100
cagatacatc aggctgcacc ccacccacta cagcatcagg agcaccctga ggatggagct 5160
gatgggctgt gacctgaaca gctgcagcat gcccctgggc atggagagca aggccatctc 5220
tgatgcccag atcactgcca gcagctactt caccaacatg tttgccacct ggagccccag 5280
caaggccagg ctgcacctgc agggcaggag caatgcctgg aggccccagg tcaacaaccc 5340
caaggagtgg ctgcaggtgg acttccagaa gaccatgaag gtgactgggg tgaccaccca 5400
gggggtgaag agcctgctga ccagcatgta tgtgaaggag ttcctgatca gcagcagcca 5460
ggatggccac cagtggaccc tgttcttcca gaatggcaag gtgaaggtgt tccagggcaa 5520
ccaggacagc ttcacccctg tggtgaacag cctggacccc cccctgctga ccagatacct 5580
gaggattcac ccccagagct gggtgcacca gattgccctg aggatggagg tgctgggctg 5640
tgaggcccag gacctgtact gacctcgagg tgtgccttct agttgccagc catctgttgt 5700
ttgcccctcc cccgtgcctt ccttgaccct ggaaggtgcc actcccactg tcctttccta 5760
ataaaatgag gaaattgcat cgcattgtct gagtaggtgt cattctattc tggggggtgg 5820
ggtggggcag gacagcaagg gggaggattg ggaagacaat agcaggcatg ctggggatgc 5880
ggtgggctct atgggcacgt ggcggccgca ggaaccccta gtgatggagt tggccactcc 5940
ctctctgcgc gctcgctcgc tcactgaggc cgggcgacca aaggtcgccc gacgcccggg 6000
ctttgcccgg gcggcctcag tgagcgagcg agcgcgcaga gagggagtgg ccaa 6054
<210> 30
<211> 6054
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 30
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgaccc ctctcacact 180
acctaaacca cgccaggaca acctctgctc ctctccaccg aaattccaag gggtcgagtg 240
gatgttggag gtggcatggg cccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 300
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 360
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagctgct 420
ggaggatggg aactgagggg ttggaagggg gcagggtgag cccagaaact cctgtgtgcc 480
tctgagcctg cagacgcgaa acgtcgaagc ctctcctggg ggtggggaga ggcccagagg 540
ataagtccag gatgttgatt tcttctcctg cctccaggaa tgtttgtgct cctgagatta 600
ttaaccagag caaacagaga gagtaaatgc tgccaagggc cacttggact tttgactgct 660
ttttaaaaat taacctgagc ctctcctggg ggtggggaga ggcccagagg ataagtccag 720
gatgttgatt tcttctcctg cctccaggaa tgtttgtgct cctgagatta ttaaccagag 780
caaacagaga gagtaaatgc tgccaagggc cacttggact tttgactgct ttttaaaaat 840
taacctggtc gactggacac aggacgctgt ggtttctgag ccagggggcg actcagatcc 900
cagccagtgg acttagcccc tgtttgctcc tccgataact ggggtgacct tggttaatat 960
tcaccagcag cctcccccgt tgcccctctg gatccactgc ttaaatacgg acgaggacag 1020
ggccctgtct cctcagcttc aggcaccacc actgacctgg gacagtgaat cgtaagtatg 1080
cctttcactg cgagaggttc tggagaggct tctgagctcc ccatggccca ggcaggcagc 1140
aggtctgggg caggaggggg gttgtggagt gccttgactc ggggcctggc ccccccatct 1200
ctgtcttgca ggacaattgc cgtcttctgt ctcgtggggc atcctcctgc tggcaggcct 1260
gtgctgcctg gtccctgcga tcgccaccat gcagattgag ctgagcacct gcttcttcct 1320
gtgcctgctg aggttctgct tctctgccac caggagatac tacctggggg ctgtggagct 1380
gagctgggac tacatgcagt ctgacctggg ggagctgcct gtggatgcca ggttcccccc 1440
cagagtgccc aagagcttcc ccttcaacac ctctgtggtg tacaagaaga ccctgtttgt 1500
ggagttcact gaccacctgt tcaacattgc caagcccagg cccccctgga tgggcctgct 1560
gggccccacc atccaggctg aggtgtatga cactgtggtg atcaccctga agaacatggc 1620
cagccaccct gtgagcctgc atgctgtggg ggtgagctac tggaaggcct ctgagggggc 1680
tgagtatgat gaccagacca gccagaggga gaaggaggat gacaaggtgt tccctggggg 1740
cagccacacc tatgtgtggc aggtgctgaa ggagaatggc cccatggcct ctgaccccct 1800
gtgcctgacc tacagctacc tgagccatgt ggacctggtg aaggacctga actctggcct 1860
gattggggcc ctgctggtgt gcagggaggg cagcctggcc aaggagaaga cccagaccct 1920
gcacaagttc atcctgctgt ttgctgtgtt tgatgagggc aagagctggc actctgaaac 1980
caagaacagc ctgatgcagg acagggatgc tgcctctgcc agggcctggc ccaagatgca 2040
cactgtgaat ggctatgtga acaggagcct gcctggcctg attggctgcc acaggaagtc 2100
tgtgtactgg catgtgattg gcatgggcac cacccctgag gtgcacagca tcttcctgga 2160
gggccacacc ttcctggtca ggaaccacag gcaggccagc ctggagatca gccccatcac 2220
cttcctgact gcccagaccc tgctgatgga cctgggccag ttcctgctgt tctgccacat 2280
cagcagccac cagcatgatg gcatggaggc ctatgtgaag gtggacagct gccctgagga 2340
gccccagctg aggatgaaga acaatgagga ggctgaggac tatgatgatg acctgactga 2400
ctctgagatg gatgtggtga ggtttgatga tgacaacagc cccagcttca tccagatcag 2460
gtctgtggcc aagaagcacc ccaagacctg ggtgcactac attgctgctg aggaggagga 2520
ctgggactat gcccccctgg tgctggcccc tgatgacagg agctacaaga gccagtacct 2580
gaacaatggc ccccagagga ttggcaggaa gtacaagaag gtcaggttca tggcctacac 2640
tgatgaaacc ttcaagacca gggaggccat ccagcatgag tctggcatcc tgggccccct 2700
gctgtatggg gaggtggggg acaccctgct gatcatcttc aagaaccagg ccagcaggcc 2760
ctacaacatc tacccccatg gcatcactga tgtgaggccc ctgtacagca ggaggctgcc 2820
caagggggtg aagcacctga aggacttccc catcctgcct ggggagatct tcaagtacaa 2880
gtggactgtg actgtggagg atggccccac caagtctgac cccaggtgcc tgaccagata 2940
ctacagcagc tttgtgaaca tggagaggga cctggcctct ggcctgattg gccccctgct 3000
gatctgctac aaggagtctg tggaccagag gggcaaccag atcatgtctg acaagaggaa 3060
tgtgatcctg ttctctgtgt ttgatgagaa caggagctgg tacctgactg agaacatcca 3120
gaggttcctg cccaaccctg ctggggtgca gctggaggac cctgagttcc aggccagcaa 3180
catcatgcac agcatcaatg gctatgtgtt tgacagcctg cagctgtctg tgtgcctgca 3240
tgaggtggcc tactggtaca tcctgagcat tggggcccag actgacttcc tgtctgtgtt 3300
cttctctggc tacaccttca agcacaagat ggtgtatgag gacaccctga ccctgttccc 3360
cttctctggg gagactgtgt tcatgagcat ggagaaccct ggcctgtgga ttctgggctg 3420
ccacaactct gacttcagga acaggggcat gactgccctg ctgaaagtct ccagctgtga 3480
caagaacact ggggactact atgaggacag ctatgaggac atctctgcct acctgctgag 3540
caagaacaat gccattgagc ccaggagctt cagccagaac cccccagtgc tgaagaggca 3600
ccagagggag atcaccagga ccaccctgca gtctgaccag gaggagattg actatgatga 3660
caccatctct gtggagatga agaaggagga ctttgacatc tacgacgagg acgagaacca 3720
gagccccagg agcttccaga agaagaccag gcactacttc attgctgctg tggagaggct 3780
gtgggactat ggcatgagca gcagccccca tgtgctgagg aacagggccc agtctggctc 3840
tgtgccccag ttcaagaagg tggtgttcca ggagttcact gatggcagct tcacccagcc 3900
cctgtacaga ggggagctga atgagcacct gggcctgctg ggcccctaca tcagggctga 3960
ggtggaggac aacatcatgg tgaccttcag gaaccaggcc agcaggccct acagcttcta 4020
cagcagcctg atcagctatg aggaggacca gaggcagggg gctgagccca ggaagaactt 4080
tgtgaagccc aatgaaacca agacctactt ctggaaggtg cagcaccaca tggcccccac 4140
caaggatgag tttgactgca aggcctgggc ctacttctct gatgtggacc tggagaagga 4200
tgtgcactct ggcctgattg gccccctgct ggtgtgccac accaacaccc tgaaccctgc 4260
ccatggcagg caggtgactg tgcaggagtt tgccctgttc ttcaccatct ttgatgaaac 4320
caagagctgg tacttcactg agaacatgga gaggaactgc agggccccct gcaacatcca 4380
gatggaggac cccaccttca aggagaacta caggttccat gccatcaatg gctacatcat 4440
ggacaccctg cctggcctgg tgatggccca ggaccagagg atcaggtggt acctgctgag 4500
catgggcagc aatgagaaca tccacagcat ccacttctct ggccatgtgt tcactgtgag 4560
gaagaaggag gagtacaaga tggccctgta caacctgtac cctggggtgt ttgagactgt 4620
ggagatgctg cccagcaagg ctggcatctg gagggtggag tgcctgattg gggagcacct 4680
gcatgctggc atgagcaccc tgttcctggt gtacagcaac aagtgccaga cccccctggg 4740
catggcctct ggccacatca gggacttcca gatcactgcc tctggccagt atggccagtg 4800
ggcccccaag ctggccaggc tgcactactc tggcagcatc aatgcctgga gcaccaagga 4860
gcccttcagc tggatcaagg tggacctgct ggcccccatg atcatccatg gcatcaagac 4920
ccagggggcc aggcagaagt tcagcagcct gtacatcagc cagttcatca tcatgtacag 4980
cctggatggc aagaagtggc agacctacag gggcaacagc actggcaccc tgatggtgtt 5040
ctttggcaat gtggacagct ctggcatcaa gcacaacatc ttcaaccccc ccatcattgc 5100
cagatacatc aggctgcacc ccacccacta cagcatcagg agcaccctga ggatggagct 5160
gatgggctgt gacctgaaca gctgcagcat gcccctgggc atggagagca aggccatctc 5220
tgatgcccag atcactgcca gcagctactt caccaacatg tttgccacct ggagccccag 5280
caaggccagg ctgcacctgc agggcaggag caatgcctgg aggccccagg tcaacaaccc 5340
caaggagtgg ctgcaggtgg acttccagaa gaccatgaag gtgactgggg tgaccaccca 5400
gggggtgaag agcctgctga ccagcatgta tgtgaaggag ttcctgatca gcagcagcca 5460
ggatggccac cagtggaccc tgttcttcca gaatggcaag gtgaaggtgt tccagggcaa 5520
ccaggacagc ttcacccctg tggtgaacag cctggacccc cccctgctga ccagatacct 5580
gaggattcac ccccagagct gggtgcacca gattgccctg aggatggagg tgctgggctg 5640
tgaggcccag gacctgtact gacctcgagg tgtgccttct agttgccagc catctgttgt 5700
ttgcccctcc cccgtgcctt ccttgaccct ggaaggtgcc actcccactg tcctttccta 5760
ataaaatgag gaaattgcat cgcattgtct gagtaggtgt cattctattc tggggggtgg 5820
ggtggggcag gacagcaagg gggaggattg ggaagacaat agcaggcatg ctggggatgc 5880
ggtgggctct atgggcacgt ggcggccgca ggaaccccta gtgatggagt tggccactcc 5940
ctctctgcgc gctcgctcgc tcactgaggc cgggcgacca aaggtcgccc gacgcccggg 6000
ctttgcccgg gcggcctcag tgagcgagcg agcgcgcaga gagggagtgg ccaa 6054
<210> 31
<211> 5504
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 31
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgaccc ctctcacact 180
acctaaacca cgccaggaca acctctgctc ctctccaccg aaattccaag gggtcgagtg 240
gatgttggag gtggcatggg cccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 300
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 360
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagctgct 420
ggaggatggg aactgagggg ttggaagggg gcagggtgag cccagaaact cctgtgtgcc 480
tctgagcctg cagacgcgaa acgtcgactg gacacaggac gctgtggttt ctgagccagg 540
gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga taactggggt 600
gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa 660
tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga cctgggacag 720
tgaatcgcga tcgccaccat gcagattgag ctgagcacct gcttcttcct gtgcctgctg 780
aggttctgct tctctgccac caggagatac tacctggggg ctgtggagct gagctgggac 840
tacatgcagt ctgacctggg ggagctgcct gtggatgcca ggttcccccc cagagtgccc 900
aagagcttcc ccttcaacac ctctgtggtg tacaagaaga ccctgtttgt ggagttcact 960
gaccacctgt tcaacattgc caagcccagg cccccctgga tgggcctgct gggccccacc 1020
atccaggctg aggtgtatga cactgtggtg atcaccctga agaacatggc cagccaccct 1080
gtgagcctgc atgctgtggg ggtgagctac tggaaggcct ctgagggggc tgagtatgat 1140
gaccagacca gccagaggga gaaggaggat gacaaggtgt tccctggggg cagccacacc 1200
tatgtgtggc aggtgctgaa ggagaatggc cccatggcct ctgaccccct gtgcctgacc 1260
tacagctacc tgagccatgt ggacctggtg aaggacctga actctggcct gattggggcc 1320
ctgctggtgt gcagggaggg cagcctggcc aaggagaaga cccagaccct gcacaagttc 1380
atcctgctgt ttgctgtgtt tgatgagggc aagagctggc actctgaaac caagaacagc 1440
ctgatgcagg acagggatgc tgcctctgcc agggcctggc ccaagatgca cactgtgaat 1500
ggctatgtga acaggagcct gcctggcctg attggctgcc acaggaagtc tgtgtactgg 1560
catgtgattg gcatgggcac cacccctgag gtgcacagca tcttcctgga gggccacacc 1620
ttcctggtca ggaaccacag gcaggccagc ctggagatca gccccatcac cttcctgact 1680
gcccagaccc tgctgatgga cctgggccag ttcctgctgt tctgccacat cagcagccac 1740
cagcatgatg gcatggaggc ctatgtgaag gtggacagct gccctgagga gccccagctg 1800
aggatgaaga acaatgagga ggctgaggac tatgatgatg acctgactga ctctgagatg 1860
gatgtggtga ggtttgatga tgacaacagc cccagcttca tccagatcag gtctgtggcc 1920
aagaagcacc ccaagacctg ggtgcactac attgctgctg aggaggagga ctgggactat 1980
gcccccctgg tgctggcccc tgatgacagg agctacaaga gccagtacct gaacaatggc 2040
ccccagagga ttggcaggaa gtacaagaag gtcaggttca tggcctacac tgatgaaacc 2100
ttcaagacca gggaggccat ccagcatgag tctggcatcc tgggccccct gctgtatggg 2160
gaggtggggg acaccctgct gatcatcttc aagaaccagg ccagcaggcc ctacaacatc 2220
tacccccatg gcatcactga tgtgaggccc ctgtacagca ggaggctgcc caagggggtg 2280
aagcacctga aggacttccc catcctgcct ggggagatct tcaagtacaa gtggactgtg 2340
actgtggagg atggccccac caagtctgac cccaggtgcc tgaccagata ctacagcagc 2400
tttgtgaaca tggagaggga cctggcctct ggcctgattg gccccctgct gatctgctac 2460
aaggagtctg tggaccagag gggcaaccag atcatgtctg acaagaggaa tgtgatcctg 2520
ttctctgtgt ttgatgagaa caggagctgg tacctgactg agaacatcca gaggttcctg 2580
cccaaccctg ctggggtgca gctggaggac cctgagttcc aggccagcaa catcatgcac 2640
agcatcaatg gctatgtgtt tgacagcctg cagctgtctg tgtgcctgca tgaggtggcc 2700
tactggtaca tcctgagcat tggggcccag actgacttcc tgtctgtgtt cttctctggc 2760
tacaccttca agcacaagat ggtgtatgag gacaccctga ccctgttccc cttctctggg 2820
gagactgtgt tcatgagcat ggagaaccct ggcctgtgga ttctgggctg ccacaactct 2880
gacttcagga acaggggcat gactgccctg ctgaaagtct ccagctgtga caagaacact 2940
ggggactact atgaggacag ctatgaggac atctctgcct acctgctgag caagaacaat 3000
gccattgagc ccaggagctt cagccagaac cccccagtgc tgaagaggca ccagagggag 3060
atcaccagga ccaccctgca gtctgaccag gaggagattg actatgatga caccatctct 3120
gtggagatga agaaggagga ctttgacatc tacgacgagg acgagaacca gagccccagg 3180
agcttccaga agaagaccag gcactacttc attgctgctg tggagaggct gtgggactat 3240
ggcatgagca gcagccccca tgtgctgagg aacagggccc agtctggctc tgtgccccag 3300
ttcaagaagg tggtgttcca ggagttcact gatggcagct tcacccagcc cctgtacaga 3360
ggggagctga atgagcacct gggcctgctg ggcccctaca tcagggctga ggtggaggac 3420
aacatcatgg tgaccttcag gaaccaggcc agcaggccct acagcttcta cagcagcctg 3480
atcagctatg aggaggacca gaggcagggg gctgagccca ggaagaactt tgtgaagccc 3540
aatgaaacca agacctactt ctggaaggtg cagcaccaca tggcccccac caaggatgag 3600
tttgactgca aggcctgggc ctacttctct gatgtggacc tggagaagga tgtgcactct 3660
ggcctgattg gccccctgct ggtgtgccac accaacaccc tgaaccctgc ccatggcagg 3720
caggtgactg tgcaggagtt tgccctgttc ttcaccatct ttgatgaaac caagagctgg 3780
tacttcactg agaacatgga gaggaactgc agggccccct gcaacatcca gatggaggac 3840
cccaccttca aggagaacta caggttccat gccatcaatg gctacatcat ggacaccctg 3900
cctggcctgg tgatggccca ggaccagagg atcaggtggt acctgctgag catgggcagc 3960
aatgagaaca tccacagcat ccacttctct ggccatgtgt tcactgtgag gaagaaggag 4020
gagtacaaga tggccctgta caacctgtac cctggggtgt ttgagactgt ggagatgctg 4080
cccagcaagg ctggcatctg gagggtggag tgcctgattg gggagcacct gcatgctggc 4140
atgagcaccc tgttcctggt gtacagcaac aagtgccaga cccccctggg catggcctct 4200
ggccacatca gggacttcca gatcactgcc tctggccagt atggccagtg ggcccccaag 4260
ctggccaggc tgcactactc tggcagcatc aatgcctgga gcaccaagga gcccttcagc 4320
tggatcaagg tggacctgct ggcccccatg atcatccatg gcatcaagac ccagggggcc 4380
aggcagaagt tcagcagcct gtacatcagc cagttcatca tcatgtacag cctggatggc 4440
aagaagtggc agacctacag gggcaacagc actggcaccc tgatggtgtt ctttggcaat 4500
gtggacagct ctggcatcaa gcacaacatc ttcaaccccc ccatcattgc cagatacatc 4560
aggctgcacc ccacccacta cagcatcagg agcaccctga ggatggagct gatgggctgt 4620
gacctgaaca gctgcagcat gcccctgggc atggagagca aggccatctc tgatgcccag 4680
atcactgcca gcagctactt caccaacatg tttgccacct ggagccccag caaggccagg 4740
ctgcacctgc agggcaggag caatgcctgg aggccccagg tcaacaaccc caaggagtgg 4800
ctgcaggtgg acttccagaa gaccatgaag gtgactgggg tgaccaccca gggggtgaag 4860
agcctgctga ccagcatgta tgtgaaggag ttcctgatca gcagcagcca ggatggccac 4920
cagtggaccc tgttcttcca gaatggcaag gtgaaggtgt tccagggcaa ccaggacagc 4980
ttcacccctg tggtgaacag cctggacccc cccctgctga ccagatacct gaggattcac 5040
ccccagagct gggtgcacca gattgccctg aggatggagg tgctgggctg tgaggcccag 5100
gacctgtact gacctcgagg tgtgccttct agttgccagc catctgttgt ttgcccctcc 5160
cccgtgcctt ccttgaccct ggaaggtgcc actcccactg tcctttccta ataaaatgag 5220
gaaattgcat cgcattgtct gagtaggtgt cattctattc tggggggtgg ggtggggcag 5280
gacagcaagg gggaggattg ggaagacaat agcaggcatg ctggggatgc ggtgggctct 5340
atgggcacgt ggcggccgca ggaaccccta gtgatggagt tggccactcc ctctctgcgc 5400
gctcgctcgc tcactgaggc cgggcgacca aaggtcgccc gacgcccggg ctttgcccgg 5460
gcggcctcag tgagcgagcg agcgcgcaga gagggagtgg ccaa 5504
<210> 32
<211> 5507
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 32
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgaccc ctctcacact 180
acctaaacca cgccaggaca acctctgctc ctctccaccg aaattccaag gggtcgagtg 240
gatgttggag gtggcatggg cccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 300
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 360
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagctgct 420
ggaggatggg aactgagggg ttggaagggg gcagggtgag cccagaaact cctgtgtgcc 480
tctgagcctg cagacgcgaa acgtcgacga tcttgctacc agtggaacag ccactaagga 540
ttctgcagtg agagcagagg gccagctaag tggtactctc ccagagactg tctgactcac 600
gccaccccct ccaccttgga cacaggacgc tgtggtttct gagccaggta caatgactcc 660
tttcggtaag tgcagtggaa gctgtacact gcccaggcaa agcgtccggg cagcgtaggc 720
gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga taactggggt 780
gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc actgcttaaa 840
tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga cctgggacag 900
tgaatcgcga tcgccaccat gcagattgag ctgagcacct gcttcttcct gtgcctgctg 960
aggttctgct tctctgccac caggagatac tacctggggg ctgtggagct gagctgggac 1020
tacatgcagt ctgacctggg ggagctgcct gtggatgcca ggttcccccc cagagtgccc 1080
aagagcttcc ccttcaacac ctctgtggtg tacaagaaga ccctgtttgt ggagttcact 1140
gaccacctgt tcaacattgc caagcccagg cccccctgga tgggcctgct gggccccacc 1200
atccaggctg aggtgtatga cactgtggtg atcaccctga agaacatggc cagccaccct 1260
gtgagcctgc atgctgtggg ggtgagctac tggaaggcct ctgagggggc tgagtatgat 1320
gaccagacca gccagaggga gaaggaggat gacaaggtgt tccctggggg cagccacacc 1380
tatgtgtggc aggtgctgaa ggagaatggc cccatggcct ctgaccccct gtgcctgacc 1440
tacagctacc tgagccatgt ggacctggtg aaggacctga actctggcct gattggggcc 1500
ctgctggtgt gcagggaggg cagcctggcc aaggagaaga cccagaccct gcacaagttc 1560
atcctgctgt ttgctgtgtt tgatgagggc aagagctggc actctgaaac caagaacagc 1620
ctgatgcagg acagggatgc tgcctctgcc agggcctggc ccaagatgca cactgtgaat 1680
ggctatgtga acaggagcct gcctggcctg attggctgcc acaggaagtc tgtgtactgg 1740
catgtgattg gcatgggcac cacccctgag gtgcacagca tcttcctgga gggccacacc 1800
ttcctggtca ggaaccacag gcaggccagc ctggagatca gccccatcac cttcctgact 1860
gcccagaccc tgctgatgga cctgggccag ttcctgctgt tctgccacat cagcagccac 1920
cagcatgatg gcatggaggc ctatgtgaag gtggacagct gccctgagga gccccagctg 1980
aggatgaaga acaatgagga ggctgaggac tatgatgatg acctgactga ctctgagatg 2040
gatgtggtga ggtttgatga tgacaacagc cccagcttca tccagatcag gtctgtggcc 2100
aagaagcacc ccaagacctg ggtgcactac attgctgctg aggaggagga ctgggactat 2160
gcccccctgg tgctggcccc tgatgacagg agctacaaga gccagtacct gaacaatggc 2220
ccccagagga ttggcaggaa gtacaagaag gtcaggttca tggcctacac tgatgaaacc 2280
ttcaagacca gggaggccat ccagcatgag tctggcatcc tgggccccct gctgtatggg 2340
gaggtggggg acaccctgct gatcatcttc aagaaccagg ccagcaggcc ctacaacatc 2400
tacccccatg gcatcactga tgtgaggccc ctgtacagca ggaggctgcc caagggggtg 2460
aagcacctga aggacttccc catcctgcct ggggagatct tcaagtacaa gtggactgtg 2520
actgtggagg atggccccac caagtctgac cccaggtgcc tgaccagata ctacagcagc 2580
tttgtgaaca tggagaggga cctggcctct ggcctgattg gccccctgct gatctgctac 2640
aaggagtctg tggaccagag gggcaaccag atcatgtctg acaagaggaa tgtgatcctg 2700
ttctctgtgt ttgatgagaa caggagctgg tacctgactg agaacatcca gaggttcctg 2760
cccaaccctg ctggggtgca gctggaggac cctgagttcc aggccagcaa catcatgcac 2820
agcatcaatg gctatgtgtt tgacagcctg cagctgtctg tgtgcctgca tgaggtggcc 2880
tactggtaca tcctgagcat tggggcccag actgacttcc tgtctgtgtt cttctctggc 2940
tacaccttca agcacaagat ggtgtatgag gacaccctga ccctgttccc cttctctggg 3000
gagactgtgt tcatgagcat ggagaaccct ggcctgtgga ttctgggctg ccacaactct 3060
gacttcagga acaggggcat gactgccctg ctgaaagtct ccagctgtga caagaacact 3120
ggggactact atgaggacag ctatgaggac atctctgcct acctgctgag caagaacaat 3180
gccattgagc ccaggagctt cagccagaac cccccagtgc tgaagaggca ccagagggag 3240
atcaccagga ccaccctgca gtctgaccag gaggagattg actatgatga caccatctct 3300
gtggagatga agaaggagga ctttgacatc tacgacgagg acgagaacca gagccccagg 3360
agcttccaga agaagaccag gcactacttc attgctgctg tggagaggct gtgggactat 3420
ggcatgagca gcagccccca tgtgctgagg aacagggccc agtctggctc tgtgccccag 3480
ttcaagaagg tggtgttcca ggagttcact gatggcagct tcacccagcc cctgtacaga 3540
ggggagctga atgagcacct gggcctgctg ggcccctaca tcagggctga ggtggaggac 3600
aacatcatgg tgaccttcag gaaccaggcc agcaggccct acagcttcta cagcagcctg 3660
atcagctatg aggaggacca gaggcagggg gctgagccca ggaagaactt tgtgaagccc 3720
aatgaaacca agacctactt ctggaaggtg cagcaccaca tggcccccac caaggatgag 3780
tttgactgca aggcctgggc ctacttctct gatgtggacc tggagaagga tgtgcactct 3840
ggcctgattg gccccctgct ggtgtgccac accaacaccc tgaaccctgc ccatggcagg 3900
caggtgactg tgcaggagtt tgccctgttc ttcaccatct ttgatgaaac caagagctgg 3960
tacttcactg agaacatgga gaggaactgc agggccccct gcaacatcca gatggaggac 4020
cccaccttca aggagaacta caggttccat gccatcaatg gctacatcat ggacaccctg 4080
cctggcctgg tgatggccca ggaccagagg atcaggtggt acctgctgag catgggcagc 4140
aatgagaaca tccacagcat ccacttctct ggccatgtgt tcactgtgag gaagaaggag 4200
gagtacaaga tggccctgta caacctgtac cctggggtgt ttgagactgt ggagatgctg 4260
cccagcaagg ctggcatctg gagggtggag tgcctgattg gggagcacct gcatgctggc 4320
atgagcaccc tgttcctggt gtacagcaac aagtgccaga cccccctggg catggcctct 4380
ggccacatca gggacttcca gatcactgcc tctggccagt atggccagtg ggcccccaag 4440
ctggccaggc tgcactactc tggcagcatc aatgcctgga gcaccaagga gcccttcagc 4500
tggatcaagg tggacctgct ggcccccatg atcatccatg gcatcaagac ccagggggcc 4560
aggcagaagt tcagcagcct gtacatcagc cagttcatca tcatgtacag cctggatggc 4620
aagaagtggc agacctacag gggcaacagc actggcaccc tgatggtgtt ctttggcaat 4680
gtggacagct ctggcatcaa gcacaacatc ttcaaccccc ccatcattgc cagatacatc 4740
aggctgcacc ccacccacta cagcatcagg agcaccctga ggatggagct gatgggctgt 4800
gacctgaaca gctgcagcat gcccctgggc atggagagca aggccatctc tgatgcccag 4860
atcactgcca gcagctactt caccaacatg tttgccacct ggagccccag caaggccagg 4920
ctgcacctgc agggcaggag caatgcctgg aggccccagg tcaacaaccc caaggagtgg 4980
ctgcaggtgg acttccagaa gaccatgaag gtgactgggg tgaccaccca gggggtgaag 5040
agcctgctga ccagcatgta tgtgaaggag ttcctgatca gcagcagcca ggatggccac 5100
cagtggaccc tgttcttcca gaatggcaag gtgaaggtgt tccagggcaa ccaggacagc 5160
ttcacccctg tggtgaacag cctggacccc cccctgctga ccagatacct gaggattcac 5220
ccccagagct gggtgcacca gattgccctg aggatggagg tgctgggctg tgaggcccag 5280
gacctgtact gacctcgagg aataaaggaa atttattttc attgcaatag tgtgttggtt 5340
ttttgtgtca cgtggcggcc gcaggaaccc ctagtgatgg agttggccac tccctctctg 5400
cgcgctcgct cgctcactga ggccgggcga ccaaaggtcg cccgacgccc gggctttgcc 5460
cgggcggcct cagtgagcga gcgagcgcgc agagagggag tggccaa 5507
<210> 33
<211> 5311
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 33
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgacgc agagaggtct 180
ctgacctctg ccccagctcc aaggtcagca ggcagggagg gctgtgtgtt tgctgtttgc 240
tgcttgcaat gtttgcccat tttagggaca tgagtaggct gaagtttgtt cagtgtggac 300
ttcagaggca gcacacaaac agccagagag gtctctgacc tctgccccag ctccaaggtc 360
agcaggcagg gagggctgtg tgtttgctgt ttgctgcttg caatgtttgc ccattttagg 420
gacatgagta ggctgaagtt tgttcagtgt ggacttcaga ggcagcacac aaacagcacg 480
cgaaacgtcg actggacaca ggacgctgtg gtttctgagc cagggggcga ctcagatccc 540
agccagtgga cttagcccct gtttgctcct ccgataactg gggtgacctt ggttaatatt 600
caccagcagc ctcccccgtt gcccctctgg atccactgct taaatacgga cgaggacagg 660
gccctgtctc ctcagcttca ggcaccacca ctgacctggg acagtgaatc gcgatcgcca 720
ccatgcagat tgagctgagc acctgcttct tcctgtgcct gctgaggttc tgcttctctg 780
ccaccaggag atactacctg ggggctgtgg agctgagctg ggactacatg cagtctgacc 840
tgggggagct gcctgtggat gccaggttcc cccccagagt gcccaagagc ttccccttca 900
acacctctgt ggtgtacaag aagaccctgt ttgtggagtt cactgaccac ctgttcaaca 960
ttgccaagcc caggcccccc tggatgggcc tgctgggccc caccatccag gctgaggtgt 1020
atgacactgt ggtgatcacc ctgaagaaca tggccagcca ccctgtgagc ctgcatgctg 1080
tgggggtgag ctactggaag gcctctgagg gggctgagta tgatgaccag accagccaga 1140
gggagaagga ggatgacaag gtgttccctg ggggcagcca cacctatgtg tggcaggtgc 1200
tgaaggagaa tggccccatg gcctctgacc ccctgtgcct gacctacagc tacctgagcc 1260
atgtggacct ggtgaaggac ctgaactctg gcctgattgg ggccctgctg gtgtgcaggg 1320
agggcagcct ggccaaggag aagacccaga ccctgcacaa gttcatcctg ctgtttgctg 1380
tgtttgatga gggcaagagc tggcactctg aaaccaagaa cagcctgatg caggacaggg 1440
atgctgcctc tgccagggcc tggcccaaga tgcacactgt gaatggctat gtgaacagga 1500
gcctgcctgg cctgattggc tgccacagga agtctgtgta ctggcatgtg attggcatgg 1560
gcaccacccc tgaggtgcac agcatcttcc tggagggcca caccttcctg gtcaggaacc 1620
acaggcaggc cagcctggag atcagcccca tcaccttcct gactgcccag accctgctga 1680
tggacctggg ccagttcctg ctgttctgcc acatcagcag ccaccagcat gatggcatgg 1740
aggcctatgt gaaggtggac agctgccctg aggagcccca gctgaggatg aagaacaatg 1800
aggaggctga ggactatgat gatgacctga ctgactctga gatggatgtg gtgaggtttg 1860
atgatgacaa cagccccagc ttcatccaga tcaggtctgt ggccaagaag caccccaaga 1920
cctgggtgca ctacattgct gctgaggagg aggactggga ctatgccccc ctggtgctgg 1980
cccctgatga caggagctac aagagccagt acctgaacaa tggcccccag aggattggca 2040
ggaagtacaa gaaggtcagg ttcatggcct acactgatga aaccttcaag accagggagg 2100
ccatccagca tgagtctggc atcctgggcc ccctgctgta tggggaggtg ggggacaccc 2160
tgctgatcat cttcaagaac caggccagca ggccctacaa catctacccc catggcatca 2220
ctgatgtgag gcccctgtac agcaggaggc tgcccaaggg ggtgaagcac ctgaaggact 2280
tccccatcct gcctggggag atcttcaagt acaagtggac tgtgactgtg gaggatggcc 2340
ccaccaagtc tgaccccagg tgcctgacca gatactacag cagctttgtg aacatggaga 2400
gggacctggc ctctggcctg attggccccc tgctgatctg ctacaaggag tctgtggacc 2460
agaggggcaa ccagatcatg tctgacaaga ggaatgtgat cctgttctct gtgtttgatg 2520
agaacaggag ctggtacctg actgagaaca tccagaggtt cctgcccaac cctgctgggg 2580
tgcagctgga ggaccctgag ttccaggcca gcaacatcat gcacagcatc aatggctatg 2640
tgtttgacag cctgcagctg tctgtgtgcc tgcatgaggt ggcctactgg tacatcctga 2700
gcattggggc ccagactgac ttcctgtctg tgttcttctc tggctacacc ttcaagcaca 2760
agatggtgta tgaggacacc ctgaccctgt tccccttctc tggggagact gtgttcatga 2820
gcatggagaa ccctggcctg tggattctgg gctgccacaa ctctgacttc aggaacaggg 2880
gcatgactgc cctgctgaaa gtctccagct gtgacaagaa cactggggac tactatgagg 2940
acagctatga ggacatctct gcctacctgc tgagcaagaa caatgccatt gagcccagga 3000
gcttcagcca gaacccccca gtgctgaaga ggcaccagag ggagatcacc aggaccaccc 3060
tgcagtctga ccaggaggag attgactatg atgacaccat ctctgtggag atgaagaagg 3120
aggactttga catctacgac gaggacgaga accagagccc caggagcttc cagaagaaga 3180
ccaggcacta cttcattgct gctgtggaga ggctgtggga ctatggcatg agcagcagcc 3240
cccatgtgct gaggaacagg gcccagtctg gctctgtgcc ccagttcaag aaggtggtgt 3300
tccaggagtt cactgatggc agcttcaccc agcccctgta cagaggggag ctgaatgagc 3360
acctgggcct gctgggcccc tacatcaggg ctgaggtgga ggacaacatc atggtgacct 3420
tcaggaacca ggccagcagg ccctacagct tctacagcag cctgatcagc tatgaggagg 3480
accagaggca gggggctgag cccaggaaga actttgtgaa gcccaatgaa accaagacct 3540
acttctggaa ggtgcagcac cacatggccc ccaccaagga tgagtttgac tgcaaggcct 3600
gggcctactt ctctgatgtg gacctggaga aggatgtgca ctctggcctg attggccccc 3660
tgctggtgtg ccacaccaac accctgaacc ctgcccatgg caggcaggtg actgtgcagg 3720
agtttgccct gttcttcacc atctttgatg aaaccaagag ctggtacttc actgagaaca 3780
tggagaggaa ctgcagggcc ccctgcaaca tccagatgga ggaccccacc ttcaaggaga 3840
actacaggtt ccatgccatc aatggctaca tcatggacac cctgcctggc ctggtgatgg 3900
cccaggacca gaggatcagg tggtacctgc tgagcatggg cagcaatgag aacatccaca 3960
gcatccactt ctctggccat gtgttcactg tgaggaagaa ggaggagtac aagatggccc 4020
tgtacaacct gtaccctggg gtgtttgaga ctgtggagat gctgcccagc aaggctggca 4080
tctggagggt ggagtgcctg attggggagc acctgcatgc tggcatgagc accctgttcc 4140
tggtgtacag caacaagtgc cagacccccc tgggcatggc ctctggccac atcagggact 4200
tccagatcac tgcctctggc cagtatggcc agtgggcccc caagctggcc aggctgcact 4260
actctggcag catcaatgcc tggagcacca aggagccctt cagctggatc aaggtggacc 4320
tgctggcccc catgatcatc catggcatca agacccaggg ggccaggcag aagttcagca 4380
gcctgtacat cagccagttc atcatcatgt acagcctgga tggcaagaag tggcagacct 4440
acaggggcaa cagcactggc accctgatgg tgttctttgg caatgtggac agctctggca 4500
tcaagcacaa catcttcaac ccccccatca ttgccagata catcaggctg caccccaccc 4560
actacagcat caggagcacc ctgaggatgg agctgatggg ctgtgacctg aacagctgca 4620
gcatgcccct gggcatggag agcaaggcca tctctgatgc ccagatcact gccagcagct 4680
acttcaccaa catgtttgcc acctggagcc ccagcaaggc caggctgcac ctgcagggca 4740
ggagcaatgc ctggaggccc caggtcaaca accccaagga gtggctgcag gtggacttcc 4800
agaagaccat gaaggtgact ggggtgacca cccagggggt gaagagcctg ctgaccagca 4860
tgtatgtgaa ggagttcctg atcagcagca gccaggatgg ccaccagtgg accctgttct 4920
tccagaatgg caaggtgaag gtgttccagg gcaaccagga cagcttcacc cctgtggtga 4980
acagcctgga cccccccctg ctgaccagat acctgaggat tcacccccag agctgggtgc 5040
accagattgc cctgaggatg gaggtgctgg gctgtgaggc ccaggacctg tactgacctc 5100
gaggaataaa ggaaatttat tttcattgca atagtgtgtt ggttttttgt gtcacgtggc 5160
ggccgcagga acccctagtg atggagttgg ccactccctc tctgcgcgct cgctcgctca 5220
ctgaggccgg gcgaccaaag gtcgcccgac gcccgggctt tgcccgggcg gcctcagtga 5280
gcgagcgagc gcgcagagag ggagtggcca a 5311
<210> 34
<211> 5156
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 34
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgacca gagaggtctc 180
tgacctctgc cccagctcca aggtcagcag gcagggaggg ctgtgtgttt gctgtttgct 240
gcttgcaatg tttgcccatt ttagggacat gagtaggctg aagtttgttc agtgtggact 300
tcagaggcag cacacaaaca gcacgcgaaa cgtcgactgg acacaggacg ctgtggtttc 360
tgagccaggg ggcgactcag atcccagcca gtggacttag cccctgtttg ctcctccgat 420
aactggggtg accttggtta atattcacca gcagcctccc ccgttgcccc tctggatcca 480
ctgcttaaat acggacgagg acagggccct gtctcctcag cttcaggcac caccactgac 540
ctgggacagt gaatcgcgat cgccaccatg cagattgagc tgagcacctg cttcttcctg 600
tgcctgctga ggttctgctt ctctgccacc aggagatact acctgggggc tgtggagctg 660
agctgggact acatgcagtc tgacctgggg gagctgcctg tggatgccag gttccccccc 720
agagtgccca agagcttccc cttcaacacc tctgtggtgt acaagaagac cctgtttgtg 780
gagttcactg accacctgtt caacattgcc aagcccaggc ccccctggat gggcctgctg 840
ggccccacca tccaggctga ggtgtatgac actgtggtga tcaccctgaa gaacatggcc 900
agccaccctg tgagcctgca tgctgtgggg gtgagctact ggaaggcctc tgagggggct 960
gagtatgatg accagaccag ccagagggag aaggaggatg acaaggtgtt ccctgggggc 1020
agccacacct atgtgtggca ggtgctgaag gagaatggcc ccatggcctc tgaccccctg 1080
tgcctgacct acagctacct gagccatgtg gacctggtga aggacctgaa ctctggcctg 1140
attggggccc tgctggtgtg cagggagggc agcctggcca aggagaagac ccagaccctg 1200
cacaagttca tcctgctgtt tgctgtgttt gatgagggca agagctggca ctctgaaacc 1260
aagaacagcc tgatgcagga cagggatgct gcctctgcca gggcctggcc caagatgcac 1320
actgtgaatg gctatgtgaa caggagcctg cctggcctga ttggctgcca caggaagtct 1380
gtgtactggc atgtgattgg catgggcacc acccctgagg tgcacagcat cttcctggag 1440
ggccacacct tcctggtcag gaaccacagg caggccagcc tggagatcag ccccatcacc 1500
ttcctgactg cccagaccct gctgatggac ctgggccagt tcctgctgtt ctgccacatc 1560
agcagccacc agcatgatgg catggaggcc tatgtgaagg tggacagctg ccctgaggag 1620
ccccagctga ggatgaagaa caatgaggag gctgaggact atgatgatga cctgactgac 1680
tctgagatgg atgtggtgag gtttgatgat gacaacagcc ccagcttcat ccagatcagg 1740
tctgtggcca agaagcaccc caagacctgg gtgcactaca ttgctgctga ggaggaggac 1800
tgggactatg cccccctggt gctggcccct gatgacagga gctacaagag ccagtacctg 1860
aacaatggcc cccagaggat tggcaggaag tacaagaagg tcaggttcat ggcctacact 1920
gatgaaacct tcaagaccag ggaggccatc cagcatgagt ctggcatcct gggccccctg 1980
ctgtatgggg aggtggggga caccctgctg atcatcttca agaaccaggc cagcaggccc 2040
tacaacatct acccccatgg catcactgat gtgaggcccc tgtacagcag gaggctgccc 2100
aagggggtga agcacctgaa ggacttcccc atcctgcctg gggagatctt caagtacaag 2160
tggactgtga ctgtggagga tggccccacc aagtctgacc ccaggtgcct gaccagatac 2220
tacagcagct ttgtgaacat ggagagggac ctggcctctg gcctgattgg ccccctgctg 2280
atctgctaca aggagtctgt ggaccagagg ggcaaccaga tcatgtctga caagaggaat 2340
gtgatcctgt tctctgtgtt tgatgagaac aggagctggt acctgactga gaacatccag 2400
aggttcctgc ccaaccctgc tggggtgcag ctggaggacc ctgagttcca ggccagcaac 2460
atcatgcaca gcatcaatgg ctatgtgttt gacagcctgc agctgtctgt gtgcctgcat 2520
gaggtggcct actggtacat cctgagcatt ggggcccaga ctgacttcct gtctgtgttc 2580
ttctctggct acaccttcaa gcacaagatg gtgtatgagg acaccctgac cctgttcccc 2640
ttctctgggg agactgtgtt catgagcatg gagaaccctg gcctgtggat tctgggctgc 2700
cacaactctg acttcaggaa caggggcatg actgccctgc tgaaagtctc cagctgtgac 2760
aagaacactg gggactacta tgaggacagc tatgaggaca tctctgccta cctgctgagc 2820
aagaacaatg ccattgagcc caggagcttc agccagaacc ccccagtgct gaagaggcac 2880
cagagggaga tcaccaggac caccctgcag tctgaccagg aggagattga ctatgatgac 2940
accatctctg tggagatgaa gaaggaggac tttgacatct acgacgagga cgagaaccag 3000
agccccagga gcttccagaa gaagaccagg cactacttca ttgctgctgt ggagaggctg 3060
tgggactatg gcatgagcag cagcccccat gtgctgagga acagggccca gtctggctct 3120
gtgccccagt tcaagaaggt ggtgttccag gagttcactg atggcagctt cacccagccc 3180
ctgtacagag gggagctgaa tgagcacctg ggcctgctgg gcccctacat cagggctgag 3240
gtggaggaca acatcatggt gaccttcagg aaccaggcca gcaggcccta cagcttctac 3300
agcagcctga tcagctatga ggaggaccag aggcaggggg ctgagcccag gaagaacttt 3360
gtgaagccca atgaaaccaa gacctacttc tggaaggtgc agcaccacat ggcccccacc 3420
aaggatgagt ttgactgcaa ggcctgggcc tacttctctg atgtggacct ggagaaggat 3480
gtgcactctg gcctgattgg ccccctgctg gtgtgccaca ccaacaccct gaaccctgcc 3540
catggcaggc aggtgactgt gcaggagttt gccctgttct tcaccatctt tgatgaaacc 3600
aagagctggt acttcactga gaacatggag aggaactgca gggccccctg caacatccag 3660
atggaggacc ccaccttcaa ggagaactac aggttccatg ccatcaatgg ctacatcatg 3720
gacaccctgc ctggcctggt gatggcccag gaccagagga tcaggtggta cctgctgagc 3780
atgggcagca atgagaacat ccacagcatc cacttctctg gccatgtgtt cactgtgagg 3840
aagaaggagg agtacaagat ggccctgtac aacctgtacc ctggggtgtt tgagactgtg 3900
gagatgctgc ccagcaaggc tggcatctgg agggtggagt gcctgattgg ggagcacctg 3960
catgctggca tgagcaccct gttcctggtg tacagcaaca agtgccagac ccccctgggc 4020
atggcctctg gccacatcag ggacttccag atcactgcct ctggccagta tggccagtgg 4080
gcccccaagc tggccaggct gcactactct ggcagcatca atgcctggag caccaaggag 4140
cccttcagct ggatcaaggt ggacctgctg gcccccatga tcatccatgg catcaagacc 4200
cagggggcca ggcagaagtt cagcagcctg tacatcagcc agttcatcat catgtacagc 4260
ctggatggca agaagtggca gacctacagg ggcaacagca ctggcaccct gatggtgttc 4320
tttggcaatg tggacagctc tggcatcaag cacaacatct tcaacccccc catcattgcc 4380
agatacatca ggctgcaccc cacccactac agcatcagga gcaccctgag gatggagctg 4440
atgggctgtg acctgaacag ctgcagcatg cccctgggca tggagagcaa ggccatctct 4500
gatgcccaga tcactgccag cagctacttc accaacatgt ttgccacctg gagccccagc 4560
aaggccaggc tgcacctgca gggcaggagc aatgcctgga ggccccaggt caacaacccc 4620
aaggagtggc tgcaggtgga cttccagaag accatgaagg tgactggggt gaccacccag 4680
ggggtgaaga gcctgctgac cagcatgtat gtgaaggagt tcctgatcag cagcagccag 4740
gatggccacc agtggaccct gttcttccag aatggcaagg tgaaggtgtt ccagggcaac 4800
caggacagct tcacccctgt ggtgaacagc ctggaccccc ccctgctgac cagatacctg 4860
aggattcacc cccagagctg ggtgcaccag attgccctga ggatggaggt gctgggctgt 4920
gaggcccagg acctgtactg acctcgagga ataaaggaaa tttattttca ttgcaatagt 4980
gtgttggttt tttgtgtcac gtggcggccg caggaacccc tagtgatgga gttggccact 5040
ccctctctgc gcgctcgctc gctcactgag gccgggcgac caaaggtcgc ccgacgcccg 5100
ggctttgccc gggcggcctc agtgagcgag cgagcgcgca gagagggagt ggccaa 5156
<210> 35
<211> 5178
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 35
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgactg tttgctgttt 180
gctgcttgca atgtttgccc attttaggga catgtttgct gtttgctgct tgcaatgttt 240
gcccatttta gggacatgtt tgctgtttgc tgcttgcaat gtttgcccat tttagggaca 300
tgtttgctgt ttgctgcttg caatgtttgc ccattttagg gacaacgcga aacgtcgact 360
ggacacagga cgctgtggtt tctgagccag ggggcgactc agatcccagc cagtggactt 420
agcccctgtt tgctcctccg ataactgggg tgaccttggt taatattcac cagcagcctc 480
ccccgttgcc cctctggatc cactgcttaa atacggacga ggacagggcc ctgtctcctc 540
agcttcaggc accaccactg acctgggaca gtgaatcgcg atcgccacca tgcagattga 600
gctgagcacc tgcttcttcc tgtgcctgct gaggttctgc ttctctgcca ccaggagata 660
ctacctgggg gctgtggagc tgagctggga ctacatgcag tctgacctgg gggagctgcc 720
tgtggatgcc aggttccccc ccagagtgcc caagagcttc cccttcaaca cctctgtggt 780
gtacaagaag accctgtttg tggagttcac tgaccacctg ttcaacattg ccaagcccag 840
gcccccctgg atgggcctgc tgggccccac catccaggct gaggtgtatg acactgtggt 900
gatcaccctg aagaacatgg ccagccaccc tgtgagcctg catgctgtgg gggtgagcta 960
ctggaaggcc tctgaggggg ctgagtatga tgaccagacc agccagaggg agaaggagga 1020
tgacaaggtg ttccctgggg gcagccacac ctatgtgtgg caggtgctga aggagaatgg 1080
ccccatggcc tctgaccccc tgtgcctgac ctacagctac ctgagccatg tggacctggt 1140
gaaggacctg aactctggcc tgattggggc cctgctggtg tgcagggagg gcagcctggc 1200
caaggagaag acccagaccc tgcacaagtt catcctgctg tttgctgtgt ttgatgaggg 1260
caagagctgg cactctgaaa ccaagaacag cctgatgcag gacagggatg ctgcctctgc 1320
cagggcctgg cccaagatgc acactgtgaa tggctatgtg aacaggagcc tgcctggcct 1380
gattggctgc cacaggaagt ctgtgtactg gcatgtgatt ggcatgggca ccacccctga 1440
ggtgcacagc atcttcctgg agggccacac cttcctggtc aggaaccaca ggcaggccag 1500
cctggagatc agccccatca ccttcctgac tgcccagacc ctgctgatgg acctgggcca 1560
gttcctgctg ttctgccaca tcagcagcca ccagcatgat ggcatggagg cctatgtgaa 1620
ggtggacagc tgccctgagg agccccagct gaggatgaag aacaatgagg aggctgagga 1680
ctatgatgat gacctgactg actctgagat ggatgtggtg aggtttgatg atgacaacag 1740
ccccagcttc atccagatca ggtctgtggc caagaagcac cccaagacct gggtgcacta 1800
cattgctgct gaggaggagg actgggacta tgcccccctg gtgctggccc ctgatgacag 1860
gagctacaag agccagtacc tgaacaatgg cccccagagg attggcagga agtacaagaa 1920
ggtcaggttc atggcctaca ctgatgaaac cttcaagacc agggaggcca tccagcatga 1980
gtctggcatc ctgggccccc tgctgtatgg ggaggtgggg gacaccctgc tgatcatctt 2040
caagaaccag gccagcaggc cctacaacat ctacccccat ggcatcactg atgtgaggcc 2100
cctgtacagc aggaggctgc ccaagggggt gaagcacctg aaggacttcc ccatcctgcc 2160
tggggagatc ttcaagtaca agtggactgt gactgtggag gatggcccca ccaagtctga 2220
ccccaggtgc ctgaccagat actacagcag ctttgtgaac atggagaggg acctggcctc 2280
tggcctgatt ggccccctgc tgatctgcta caaggagtct gtggaccaga ggggcaacca 2340
gatcatgtct gacaagagga atgtgatcct gttctctgtg tttgatgaga acaggagctg 2400
gtacctgact gagaacatcc agaggttcct gcccaaccct gctggggtgc agctggagga 2460
ccctgagttc caggccagca acatcatgca cagcatcaat ggctatgtgt ttgacagcct 2520
gcagctgtct gtgtgcctgc atgaggtggc ctactggtac atcctgagca ttggggccca 2580
gactgacttc ctgtctgtgt tcttctctgg ctacaccttc aagcacaaga tggtgtatga 2640
ggacaccctg accctgttcc ccttctctgg ggagactgtg ttcatgagca tggagaaccc 2700
tggcctgtgg attctgggct gccacaactc tgacttcagg aacaggggca tgactgccct 2760
gctgaaagtc tccagctgtg acaagaacac tggggactac tatgaggaca gctatgagga 2820
catctctgcc tacctgctga gcaagaacaa tgccattgag cccaggagct tcagccagaa 2880
ccccccagtg ctgaagaggc accagaggga gatcaccagg accaccctgc agtctgacca 2940
ggaggagatt gactatgatg acaccatctc tgtggagatg aagaaggagg actttgacat 3000
ctacgacgag gacgagaacc agagccccag gagcttccag aagaagacca ggcactactt 3060
cattgctgct gtggagaggc tgtgggacta tggcatgagc agcagccccc atgtgctgag 3120
gaacagggcc cagtctggct ctgtgcccca gttcaagaag gtggtgttcc aggagttcac 3180
tgatggcagc ttcacccagc ccctgtacag aggggagctg aatgagcacc tgggcctgct 3240
gggcccctac atcagggctg aggtggagga caacatcatg gtgaccttca ggaaccaggc 3300
cagcaggccc tacagcttct acagcagcct gatcagctat gaggaggacc agaggcaggg 3360
ggctgagccc aggaagaact ttgtgaagcc caatgaaacc aagacctact tctggaaggt 3420
gcagcaccac atggccccca ccaaggatga gtttgactgc aaggcctggg cctacttctc 3480
tgatgtggac ctggagaagg atgtgcactc tggcctgatt ggccccctgc tggtgtgcca 3540
caccaacacc ctgaaccctg cccatggcag gcaggtgact gtgcaggagt ttgccctgtt 3600
cttcaccatc tttgatgaaa ccaagagctg gtacttcact gagaacatgg agaggaactg 3660
cagggccccc tgcaacatcc agatggagga ccccaccttc aaggagaact acaggttcca 3720
tgccatcaat ggctacatca tggacaccct gcctggcctg gtgatggccc aggaccagag 3780
gatcaggtgg tacctgctga gcatgggcag caatgagaac atccacagca tccacttctc 3840
tggccatgtg ttcactgtga ggaagaagga ggagtacaag atggccctgt acaacctgta 3900
ccctggggtg tttgagactg tggagatgct gcccagcaag gctggcatct ggagggtgga 3960
gtgcctgatt ggggagcacc tgcatgctgg catgagcacc ctgttcctgg tgtacagcaa 4020
caagtgccag acccccctgg gcatggcctc tggccacatc agggacttcc agatcactgc 4080
ctctggccag tatggccagt gggcccccaa gctggccagg ctgcactact ctggcagcat 4140
caatgcctgg agcaccaagg agcccttcag ctggatcaag gtggacctgc tggcccccat 4200
gatcatccat ggcatcaaga cccagggggc caggcagaag ttcagcagcc tgtacatcag 4260
ccagttcatc atcatgtaca gcctggatgg caagaagtgg cagacctaca ggggcaacag 4320
cactggcacc ctgatggtgt tctttggcaa tgtggacagc tctggcatca agcacaacat 4380
cttcaacccc cccatcattg ccagatacat caggctgcac cccacccact acagcatcag 4440
gagcaccctg aggatggagc tgatgggctg tgacctgaac agctgcagca tgcccctggg 4500
catggagagc aaggccatct ctgatgccca gatcactgcc agcagctact tcaccaacat 4560
gtttgccacc tggagcccca gcaaggccag gctgcacctg cagggcagga gcaatgcctg 4620
gaggccccag gtcaacaacc ccaaggagtg gctgcaggtg gacttccaga agaccatgaa 4680
ggtgactggg gtgaccaccc agggggtgaa gagcctgctg accagcatgt atgtgaagga 4740
gttcctgatc agcagcagcc aggatggcca ccagtggacc ctgttcttcc agaatggcaa 4800
ggtgaaggtg ttccagggca accaggacag cttcacccct gtggtgaaca gcctggaccc 4860
ccccctgctg accagatacc tgaggattca cccccagagc tgggtgcacc agattgccct 4920
gaggatggag gtgctgggct gtgaggccca ggacctgtac tgacctcgag gaataaagga 4980
aatttatttt cattgcaata gtgtgttggt tttttgtgtc acgtggcggc cgcaggaacc 5040
cctagtgatg gagttggcca ctccctctct gcgcgctcgc tcgctcactg aggccgggcg 5100
accaaaggtc gcccgacgcc cgggctttgc ccgggcggcc tcagtgagcg agcgagcgcg 5160
cagagaggga gtggccaa 5178
<210> 36
<211> 5160
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 36
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtt gtccctaaaa tgggcaaaca 180
ttgcaagcag caaacagcaa acatgtccct aaaatgggca aacattgcaa gcagcaaaca 240
gcaaacatgt ccctaaaatg ggcaaacatt gcaagcagca aacagcaaac atgtccctaa 300
aatgggcaaa cattgcaagc agcaaacagc aaacagtcga ctggacacag gacgctgtgg 360
tttctgagcc agggggcgac tcagatccca gccagtggac ttagcccctg tttgctcctc 420
cgataactgg ggtgaccttg gttaatattc accagcagcc tcccccgttg cccctctgga 480
tccactgctt aaatacggac gaggacaggg ccctgtctcc tcagcttcag gcaccaccac 540
tgacctggga cagtgaatcg cgatcgccac catgcagatt gagctgagca cctgcttctt 600
cctgtgcctg ctgaggttct gcttctctgc caccaggaga tactacctgg gggctgtgga 660
gctgagctgg gactacatgc agtctgacct gggggagctg cctgtggatg ccaggttccc 720
ccccagagtg cccaagagct tccccttcaa cacctctgtg gtgtacaaga agaccctgtt 780
tgtggagttc actgaccacc tgttcaacat tgccaagccc aggcccccct ggatgggcct 840
gctgggcccc accatccagg ctgaggtgta tgacactgtg gtgatcaccc tgaagaacat 900
ggccagccac cctgtgagcc tgcatgctgt gggggtgagc tactggaagg cctctgaggg 960
ggctgagtat gatgaccaga ccagccagag ggagaaggag gatgacaagg tgttccctgg 1020
gggcagccac acctatgtgt ggcaggtgct gaaggagaat ggccccatgg cctctgaccc 1080
cctgtgcctg acctacagct acctgagcca tgtggacctg gtgaaggacc tgaactctgg 1140
cctgattggg gccctgctgg tgtgcaggga gggcagcctg gccaaggaga agacccagac 1200
cctgcacaag ttcatcctgc tgtttgctgt gtttgatgag ggcaagagct ggcactctga 1260
aaccaagaac agcctgatgc aggacaggga tgctgcctct gccagggcct ggcccaagat 1320
gcacactgtg aatggctatg tgaacaggag cctgcctggc ctgattggct gccacaggaa 1380
gtctgtgtac tggcatgtga ttggcatggg caccacccct gaggtgcaca gcatcttcct 1440
ggagggccac accttcctgg tcaggaacca caggcaggcc agcctggaga tcagccccat 1500
caccttcctg actgcccaga ccctgctgat ggacctgggc cagttcctgc tgttctgcca 1560
catcagcagc caccagcatg atggcatgga ggcctatgtg aaggtggaca gctgccctga 1620
ggagccccag ctgaggatga agaacaatga ggaggctgag gactatgatg atgacctgac 1680
tgactctgag atggatgtgg tgaggtttga tgatgacaac agccccagct tcatccagat 1740
caggtctgtg gccaagaagc accccaagac ctgggtgcac tacattgctg ctgaggagga 1800
ggactgggac tatgcccccc tggtgctggc ccctgatgac aggagctaca agagccagta 1860
cctgaacaat ggcccccaga ggattggcag gaagtacaag aaggtcaggt tcatggccta 1920
cactgatgaa accttcaaga ccagggaggc catccagcat gagtctggca tcctgggccc 1980
cctgctgtat ggggaggtgg gggacaccct gctgatcatc ttcaagaacc aggccagcag 2040
gccctacaac atctaccccc atggcatcac tgatgtgagg cccctgtaca gcaggaggct 2100
gcccaagggg gtgaagcacc tgaaggactt ccccatcctg cctggggaga tcttcaagta 2160
caagtggact gtgactgtgg aggatggccc caccaagtct gaccccaggt gcctgaccag 2220
atactacagc agctttgtga acatggagag ggacctggcc tctggcctga ttggccccct 2280
gctgatctgc tacaaggagt ctgtggacca gaggggcaac cagatcatgt ctgacaagag 2340
gaatgtgatc ctgttctctg tgtttgatga gaacaggagc tggtacctga ctgagaacat 2400
ccagaggttc ctgcccaacc ctgctggggt gcagctggag gaccctgagt tccaggccag 2460
caacatcatg cacagcatca atggctatgt gtttgacagc ctgcagctgt ctgtgtgcct 2520
gcatgaggtg gcctactggt acatcctgag cattggggcc cagactgact tcctgtctgt 2580
gttcttctct ggctacacct tcaagcacaa gatggtgtat gaggacaccc tgaccctgtt 2640
ccccttctct ggggagactg tgttcatgag catggagaac cctggcctgt ggattctggg 2700
ctgccacaac tctgacttca ggaacagggg catgactgcc ctgctgaaag tctccagctg 2760
tgacaagaac actggggact actatgagga cagctatgag gacatctctg cctacctgct 2820
gagcaagaac aatgccattg agcccaggag cttcagccag aaccccccag tgctgaagag 2880
gcaccagagg gagatcacca ggaccaccct gcagtctgac caggaggaga ttgactatga 2940
tgacaccatc tctgtggaga tgaagaagga ggactttgac atctacgacg aggacgagaa 3000
ccagagcccc aggagcttcc agaagaagac caggcactac ttcattgctg ctgtggagag 3060
gctgtgggac tatggcatga gcagcagccc ccatgtgctg aggaacaggg cccagtctgg 3120
ctctgtgccc cagttcaaga aggtggtgtt ccaggagttc actgatggca gcttcaccca 3180
gcccctgtac agaggggagc tgaatgagca cctgggcctg ctgggcccct acatcagggc 3240
tgaggtggag gacaacatca tggtgacctt caggaaccag gccagcaggc cctacagctt 3300
ctacagcagc ctgatcagct atgaggagga ccagaggcag ggggctgagc ccaggaagaa 3360
ctttgtgaag cccaatgaaa ccaagaccta cttctggaag gtgcagcacc acatggcccc 3420
caccaaggat gagtttgact gcaaggcctg ggcctacttc tctgatgtgg acctggagaa 3480
ggatgtgcac tctggcctga ttggccccct gctggtgtgc cacaccaaca ccctgaaccc 3540
tgcccatggc aggcaggtga ctgtgcagga gtttgccctg ttcttcacca tctttgatga 3600
aaccaagagc tggtacttca ctgagaacat ggagaggaac tgcagggccc cctgcaacat 3660
ccagatggag gaccccacct tcaaggagaa ctacaggttc catgccatca atggctacat 3720
catggacacc ctgcctggcc tggtgatggc ccaggaccag aggatcaggt ggtacctgct 3780
gagcatgggc agcaatgaga acatccacag catccacttc tctggccatg tgttcactgt 3840
gaggaagaag gaggagtaca agatggccct gtacaacctg taccctgggg tgtttgagac 3900
tgtggagatg ctgcccagca aggctggcat ctggagggtg gagtgcctga ttggggagca 3960
cctgcatgct ggcatgagca ccctgttcct ggtgtacagc aacaagtgcc agacccccct 4020
gggcatggcc tctggccaca tcagggactt ccagatcact gcctctggcc agtatggcca 4080
gtgggccccc aagctggcca ggctgcacta ctctggcagc atcaatgcct ggagcaccaa 4140
ggagcccttc agctggatca aggtggacct gctggccccc atgatcatcc atggcatcaa 4200
gacccagggg gccaggcaga agttcagcag cctgtacatc agccagttca tcatcatgta 4260
cagcctggat ggcaagaagt ggcagaccta caggggcaac agcactggca ccctgatggt 4320
gttctttggc aatgtggaca gctctggcat caagcacaac atcttcaacc cccccatcat 4380
tgccagatac atcaggctgc accccaccca ctacagcatc aggagcaccc tgaggatgga 4440
gctgatgggc tgtgacctga acagctgcag catgcccctg ggcatggaga gcaaggccat 4500
ctctgatgcc cagatcactg ccagcagcta cttcaccaac atgtttgcca cctggagccc 4560
cagcaaggcc aggctgcacc tgcagggcag gagcaatgcc tggaggcccc aggtcaacaa 4620
ccccaaggag tggctgcagg tggacttcca gaagaccatg aaggtgactg gggtgaccac 4680
ccagggggtg aagagcctgc tgaccagcat gtatgtgaag gagttcctga tcagcagcag 4740
ccaggatggc caccagtgga ccctgttctt ccagaatggc aaggtgaagg tgttccaggg 4800
caaccaggac agcttcaccc ctgtggtgaa cagcctggac ccccccctgc tgaccagata 4860
cctgaggatt cacccccaga gctgggtgca ccagattgcc ctgaggatgg aggtgctggg 4920
ctgtgaggcc caggacctgt actgacctcg aggaataaag gaaatttatt ttcattgcaa 4980
tagtgtgttg gttttttgtg tcacgtggcg gccgcaggaa cccctagtga tggagttggc 5040
cactccctct ctgcgcgctc gctcgctcac tgaggccggg cgaccaaagg tcgcccgacg 5100
cccgggcttt gcccgggcgg cctcagtgag cgagcgagcg cgcagagagg gagtggccaa 5160
<210> 37
<211> 5383
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 37
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgactg tttgctgttt 180
gctgcttgca atgtttgccc attttaggga catgtttgct gtttgctgct tgcaatgttt 240
gcccatttta gggacatgtt tgctgtttgc tgcttgcaat gtttgcccat tttagggaca 300
tgtttgctgt ttgctgcttg caatgtttgc ccattttagg gacaacgcga aacgtcgact 360
ggacacagga cgctgtggtt tctgagccag ggggcgactc agatcccagc cagtggactt 420
agcccctgtt tgctcctccg ataactgggg tgaccttggt taatattcac cagcagcctc 480
ccccgttgcc cctctggatc cactgcttaa atacggacga ggacagggcc ctgtctcctc 540
agcttcaggc accaccactg acctgggaca gtgaatcgta agtatgcctt tcactgcgag 600
aggttctgga gaggcttctg agctccccat ggcccaggca ggcagcaggt ctggggcagg 660
aggggggttg tggagtgcct tgactcgggg cctggccccc ccatctctgt cttgcaggac 720
aattgccgtc ttctgtctcg tggggcatcc tcctgctggc aggcctgtgc tgcctggtcc 780
ctgcgatcgc caccatgcag attgagctga gcacctgctt cttcctgtgc ctgctgaggt 840
tctgcttctc tgccaccagg agatactacc tgggggctgt ggagctgagc tgggactaca 900
tgcagtctga cctgggggag ctgcctgtgg atgccaggtt cccccccaga gtgcccaaga 960
gcttcccctt caacacctct gtggtgtaca agaagaccct gtttgtggag ttcactgacc 1020
acctgttcaa cattgccaag cccaggcccc cctggatggg cctgctgggc cccaccatcc 1080
aggctgaggt gtatgacact gtggtgatca ccctgaagaa catggccagc caccctgtga 1140
gcctgcatgc tgtgggggtg agctactgga aggcctctga gggggctgag tatgatgacc 1200
agaccagcca gagggagaag gaggatgaca aggtgttccc tgggggcagc cacacctatg 1260
tgtggcaggt gctgaaggag aatggcccca tggcctctga ccccctgtgc ctgacctaca 1320
gctacctgag ccatgtggac ctggtgaagg acctgaactc tggcctgatt ggggccctgc 1380
tggtgtgcag ggagggcagc ctggccaagg agaagaccca gaccctgcac aagttcatcc 1440
tgctgtttgc tgtgtttgat gagggcaaga gctggcactc tgaaaccaag aacagcctga 1500
tgcaggacag ggatgctgcc tctgccaggg cctggcccaa gatgcacact gtgaatggct 1560
atgtgaacag gagcctgcct ggcctgattg gctgccacag gaagtctgtg tactggcatg 1620
tgattggcat gggcaccacc cctgaggtgc acagcatctt cctggagggc cacaccttcc 1680
tggtcaggaa ccacaggcag gccagcctgg agatcagccc catcaccttc ctgactgccc 1740
agaccctgct gatggacctg ggccagttcc tgctgttctg ccacatcagc agccaccagc 1800
atgatggcat ggaggcctat gtgaaggtgg acagctgccc tgaggagccc cagctgagga 1860
tgaagaacaa tgaggaggct gaggactatg atgatgacct gactgactct gagatggatg 1920
tggtgaggtt tgatgatgac aacagcccca gcttcatcca gatcaggtct gtggccaaga 1980
agcaccccaa gacctgggtg cactacattg ctgctgagga ggaggactgg gactatgccc 2040
ccctggtgct ggcccctgat gacaggagct acaagagcca gtacctgaac aatggccccc 2100
agaggattgg caggaagtac aagaaggtca ggttcatggc ctacactgat gaaaccttca 2160
agaccaggga ggccatccag catgagtctg gcatcctggg ccccctgctg tatggggagg 2220
tgggggacac cctgctgatc atcttcaaga accaggccag caggccctac aacatctacc 2280
cccatggcat cactgatgtg aggcccctgt acagcaggag gctgcccaag ggggtgaagc 2340
acctgaagga cttccccatc ctgcctgggg agatcttcaa gtacaagtgg actgtgactg 2400
tggaggatgg ccccaccaag tctgacccca ggtgcctgac cagatactac agcagctttg 2460
tgaacatgga gagggacctg gcctctggcc tgattggccc cctgctgatc tgctacaagg 2520
agtctgtgga ccagaggggc aaccagatca tgtctgacaa gaggaatgtg atcctgttct 2580
ctgtgtttga tgagaacagg agctggtacc tgactgagaa catccagagg ttcctgccca 2640
accctgctgg ggtgcagctg gaggaccctg agttccaggc cagcaacatc atgcacagca 2700
tcaatggcta tgtgtttgac agcctgcagc tgtctgtgtg cctgcatgag gtggcctact 2760
ggtacatcct gagcattggg gcccagactg acttcctgtc tgtgttcttc tctggctaca 2820
ccttcaagca caagatggtg tatgaggaca ccctgaccct gttccccttc tctggggaga 2880
ctgtgttcat gagcatggag aaccctggcc tgtggattct gggctgccac aactctgact 2940
tcaggaacag gggcatgact gccctgctga aagtctccag ctgtgacaag aacactgggg 3000
actactatga ggacagctat gaggacatct ctgcctacct gctgagcaag aacaatgcca 3060
ttgagcccag gagcttcagc cagaaccccc cagtgctgaa gaggcaccag agggagatca 3120
ccaggaccac cctgcagtct gaccaggagg agattgacta tgatgacacc atctctgtgg 3180
agatgaagaa ggaggacttt gacatctacg acgaggacga gaaccagagc cccaggagct 3240
tccagaagaa gaccaggcac tacttcattg ctgctgtgga gaggctgtgg gactatggca 3300
tgagcagcag cccccatgtg ctgaggaaca gggcccagtc tggctctgtg ccccagttca 3360
agaaggtggt gttccaggag ttcactgatg gcagcttcac ccagcccctg tacagagggg 3420
agctgaatga gcacctgggc ctgctgggcc cctacatcag ggctgaggtg gaggacaaca 3480
tcatggtgac cttcaggaac caggccagca ggccctacag cttctacagc agcctgatca 3540
gctatgagga ggaccagagg cagggggctg agcccaggaa gaactttgtg aagcccaatg 3600
aaaccaagac ctacttctgg aaggtgcagc accacatggc ccccaccaag gatgagtttg 3660
actgcaaggc ctgggcctac ttctctgatg tggacctgga gaaggatgtg cactctggcc 3720
tgattggccc cctgctggtg tgccacacca acaccctgaa ccctgcccat ggcaggcagg 3780
tgactgtgca ggagtttgcc ctgttcttca ccatctttga tgaaaccaag agctggtact 3840
tcactgagaa catggagagg aactgcaggg ccccctgcaa catccagatg gaggacccca 3900
ccttcaagga gaactacagg ttccatgcca tcaatggcta catcatggac accctgcctg 3960
gcctggtgat ggcccaggac cagaggatca ggtggtacct gctgagcatg ggcagcaatg 4020
agaacatcca cagcatccac ttctctggcc atgtgttcac tgtgaggaag aaggaggagt 4080
acaagatggc cctgtacaac ctgtaccctg gggtgtttga gactgtggag atgctgccca 4140
gcaaggctgg catctggagg gtggagtgcc tgattgggga gcacctgcat gctggcatga 4200
gcaccctgtt cctggtgtac agcaacaagt gccagacccc cctgggcatg gcctctggcc 4260
acatcaggga cttccagatc actgcctctg gccagtatgg ccagtgggcc cccaagctgg 4320
ccaggctgca ctactctggc agcatcaatg cctggagcac caaggagccc ttcagctgga 4380
tcaaggtgga cctgctggcc cccatgatca tccatggcat caagacccag ggggccaggc 4440
agaagttcag cagcctgtac atcagccagt tcatcatcat gtacagcctg gatggcaaga 4500
agtggcagac ctacaggggc aacagcactg gcaccctgat ggtgttcttt ggcaatgtgg 4560
acagctctgg catcaagcac aacatcttca acccccccat cattgccaga tacatcaggc 4620
tgcaccccac ccactacagc atcaggagca ccctgaggat ggagctgatg ggctgtgacc 4680
tgaacagctg cagcatgccc ctgggcatgg agagcaaggc catctctgat gcccagatca 4740
ctgccagcag ctacttcacc aacatgtttg ccacctggag ccccagcaag gccaggctgc 4800
acctgcaggg caggagcaat gcctggaggc cccaggtcaa caaccccaag gagtggctgc 4860
aggtggactt ccagaagacc atgaaggtga ctggggtgac cacccagggg gtgaagagcc 4920
tgctgaccag catgtatgtg aaggagttcc tgatcagcag cagccaggat ggccaccagt 4980
ggaccctgtt cttccagaat ggcaaggtga aggtgttcca gggcaaccag gacagcttca 5040
cccctgtggt gaacagcctg gacccccccc tgctgaccag atacctgagg attcaccccc 5100
agagctgggt gcaccagatt gccctgagga tggaggtgct gggctgtgag gcccaggacc 5160
tgtactgacc tcgaggaata aaggaaattt attttcattg caatagtgtg ttggtttttt 5220
gtgtcacgtg gcggccgcag gaacccctag tgatggagtt ggccactccc tctctgcgcg 5280
ctcgctcgct cactgaggcc gggcgaccaa aggtcgcccg acgcccgggc tttgcccggg 5340
cggcctcagt gagcgagcga gcgcgcagag agggagtggc caa 5383
<210> 38
<211> 5728
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 38
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgactg tttgctgttt 180
gctgcttgca atgtttgccc attttaggga catgtttgct gtttgctgct tgcaatgttt 240
gcccatttta gggacatgtt tgctgtttgc tgcttgcaat gtttgcccat tttagggaca 300
tgtttgctgt ttgctgcttg caatgtttgc ccattttagg gacaacgcga aacgtcgaca 360
ggttaatttt taaaaagcag tcaaaagtcc aagtggccct tggcagcatt tactctctct 420
gtttgctctg gttaataatc tcaggagcac aaacattcct ggaggcagga gaagaaatca 480
acatcctgga cttatcctct gggcctctcc ccacccccag gagaggctca ggttaatttt 540
taaaaagcag tcaaaagtcc aagtggccct tggcagcatt tactctctct gtttgctctg 600
gttaataatc tcaggagcac aaacattcct ggaggcagga gaagaaatca acatcctgga 660
cttatcctct gggcctctcc ccacccccag gagaggctgt cgactggaca caggacgctg 720
tggtttctga gccagggggc gactcagatc ccagccagtg gacttagccc ctgtttgctc 780
ctccgataac tggggtgacc ttggttaata ttcaccagca gcctcccccg ttgcccctct 840
ggatccactg cttaaatacg gacgaggaca gggccctgtc tcctcagctt caggcaccac 900
cactgacctg ggacagtgaa tcgtaagtat gcctttcact gcgagaggtt ctggagaggc 960
ttctgagctc cccatggccc aggcaggcag caggtctggg gcaggagggg ggttgtggag 1020
tgccttgact cggggcctgg cccccccatc tctgtcttgc aggacaattg ccgtcttctg 1080
tctcgtgggg catcctcctg ctggcaggcc tgtgctgcct ggtccctgcg atcgccacca 1140
tgcagattga gctgagcacc tgcttcttcc tgtgcctgct gaggttctgc ttctctgcca 1200
ccaggagata ctacctgggg gctgtggagc tgagctggga ctacatgcag tctgacctgg 1260
gggagctgcc tgtggatgcc aggttccccc ccagagtgcc caagagcttc cccttcaaca 1320
cctctgtggt gtacaagaag accctgtttg tggagttcac tgaccacctg ttcaacattg 1380
ccaagcccag gcccccctgg atgggcctgc tgggccccac catccaggct gaggtgtatg 1440
acactgtggt gatcaccctg aagaacatgg ccagccaccc tgtgagcctg catgctgtgg 1500
gggtgagcta ctggaaggcc tctgaggggg ctgagtatga tgaccagacc agccagaggg 1560
agaaggagga tgacaaggtg ttccctgggg gcagccacac ctatgtgtgg caggtgctga 1620
aggagaatgg ccccatggcc tctgaccccc tgtgcctgac ctacagctac ctgagccatg 1680
tggacctggt gaaggacctg aactctggcc tgattggggc cctgctggtg tgcagggagg 1740
gcagcctggc caaggagaag acccagaccc tgcacaagtt catcctgctg tttgctgtgt 1800
ttgatgaggg caagagctgg cactctgaaa ccaagaacag cctgatgcag gacagggatg 1860
ctgcctctgc cagggcctgg cccaagatgc acactgtgaa tggctatgtg aacaggagcc 1920
tgcctggcct gattggctgc cacaggaagt ctgtgtactg gcatgtgatt ggcatgggca 1980
ccacccctga ggtgcacagc atcttcctgg agggccacac cttcctggtc aggaaccaca 2040
ggcaggccag cctggagatc agccccatca ccttcctgac tgcccagacc ctgctgatgg 2100
acctgggcca gttcctgctg ttctgccaca tcagcagcca ccagcatgat ggcatggagg 2160
cctatgtgaa ggtggacagc tgccctgagg agccccagct gaggatgaag aacaatgagg 2220
aggctgagga ctatgatgat gacctgactg actctgagat ggatgtggtg aggtttgatg 2280
atgacaacag ccccagcttc atccagatca ggtctgtggc caagaagcac cccaagacct 2340
gggtgcacta cattgctgct gaggaggagg actgggacta tgcccccctg gtgctggccc 2400
ctgatgacag gagctacaag agccagtacc tgaacaatgg cccccagagg attggcagga 2460
agtacaagaa ggtcaggttc atggcctaca ctgatgaaac cttcaagacc agggaggcca 2520
tccagcatga gtctggcatc ctgggccccc tgctgtatgg ggaggtgggg gacaccctgc 2580
tgatcatctt caagaaccag gccagcaggc cctacaacat ctacccccat ggcatcactg 2640
atgtgaggcc cctgtacagc aggaggctgc ccaagggggt gaagcacctg aaggacttcc 2700
ccatcctgcc tggggagatc ttcaagtaca agtggactgt gactgtggag gatggcccca 2760
ccaagtctga ccccaggtgc ctgaccagat actacagcag ctttgtgaac atggagaggg 2820
acctggcctc tggcctgatt ggccccctgc tgatctgcta caaggagtct gtggaccaga 2880
ggggcaacca gatcatgtct gacaagagga atgtgatcct gttctctgtg tttgatgaga 2940
acaggagctg gtacctgact gagaacatcc agaggttcct gcccaaccct gctggggtgc 3000
agctggagga ccctgagttc caggccagca acatcatgca cagcatcaat ggctatgtgt 3060
ttgacagcct gcagctgtct gtgtgcctgc atgaggtggc ctactggtac atcctgagca 3120
ttggggccca gactgacttc ctgtctgtgt tcttctctgg ctacaccttc aagcacaaga 3180
tggtgtatga ggacaccctg accctgttcc ccttctctgg ggagactgtg ttcatgagca 3240
tggagaaccc tggcctgtgg attctgggct gccacaactc tgacttcagg aacaggggca 3300
tgactgccct gctgaaagtc tccagctgtg acaagaacac tggggactac tatgaggaca 3360
gctatgagga catctctgcc tacctgctga gcaagaacaa tgccattgag cccaggagct 3420
tcagccagaa ccccccagtg ctgaagaggc accagaggga gatcaccagg accaccctgc 3480
agtctgacca ggaggagatt gactatgatg acaccatctc tgtggagatg aagaaggagg 3540
actttgacat ctacgacgag gacgagaacc agagccccag gagcttccag aagaagacca 3600
ggcactactt cattgctgct gtggagaggc tgtgggacta tggcatgagc agcagccccc 3660
atgtgctgag gaacagggcc cagtctggct ctgtgcccca gttcaagaag gtggtgttcc 3720
aggagttcac tgatggcagc ttcacccagc ccctgtacag aggggagctg aatgagcacc 3780
tgggcctgct gggcccctac atcagggctg aggtggagga caacatcatg gtgaccttca 3840
ggaaccaggc cagcaggccc tacagcttct acagcagcct gatcagctat gaggaggacc 3900
agaggcaggg ggctgagccc aggaagaact ttgtgaagcc caatgaaacc aagacctact 3960
tctggaaggt gcagcaccac atggccccca ccaaggatga gtttgactgc aaggcctggg 4020
cctacttctc tgatgtggac ctggagaagg atgtgcactc tggcctgatt ggccccctgc 4080
tggtgtgcca caccaacacc ctgaaccctg cccatggcag gcaggtgact gtgcaggagt 4140
ttgccctgtt cttcaccatc tttgatgaaa ccaagagctg gtacttcact gagaacatgg 4200
agaggaactg cagggccccc tgcaacatcc agatggagga ccccaccttc aaggagaact 4260
acaggttcca tgccatcaat ggctacatca tggacaccct gcctggcctg gtgatggccc 4320
aggaccagag gatcaggtgg tacctgctga gcatgggcag caatgagaac atccacagca 4380
tccacttctc tggccatgtg ttcactgtga ggaagaagga ggagtacaag atggccctgt 4440
acaacctgta ccctggggtg tttgagactg tggagatgct gcccagcaag gctggcatct 4500
ggagggtgga gtgcctgatt ggggagcacc tgcatgctgg catgagcacc ctgttcctgg 4560
tgtacagcaa caagtgccag acccccctgg gcatggcctc tggccacatc agggacttcc 4620
agatcactgc ctctggccag tatggccagt gggcccccaa gctggccagg ctgcactact 4680
ctggcagcat caatgcctgg agcaccaagg agcccttcag ctggatcaag gtggacctgc 4740
tggcccccat gatcatccat ggcatcaaga cccagggggc caggcagaag ttcagcagcc 4800
tgtacatcag ccagttcatc atcatgtaca gcctggatgg caagaagtgg cagacctaca 4860
ggggcaacag cactggcacc ctgatggtgt tctttggcaa tgtggacagc tctggcatca 4920
agcacaacat cttcaacccc cccatcattg ccagatacat caggctgcac cccacccact 4980
acagcatcag gagcaccctg aggatggagc tgatgggctg tgacctgaac agctgcagca 5040
tgcccctggg catggagagc aaggccatct ctgatgccca gatcactgcc agcagctact 5100
tcaccaacat gtttgccacc tggagcccca gcaaggccag gctgcacctg cagggcagga 5160
gcaatgcctg gaggccccag gtcaacaacc ccaaggagtg gctgcaggtg gacttccaga 5220
agaccatgaa ggtgactggg gtgaccaccc agggggtgaa gagcctgctg accagcatgt 5280
atgtgaagga gttcctgatc agcagcagcc aggatggcca ccagtggacc ctgttcttcc 5340
agaatggcaa ggtgaaggtg ttccagggca accaggacag cttcacccct gtggtgaaca 5400
gcctggaccc ccccctgctg accagatacc tgaggattca cccccagagc tgggtgcacc 5460
agattgccct gaggatggag gtgctgggct gtgaggccca ggacctgtac tgacctcgag 5520
gaataaagga aatttatttt cattgcaata gtgtgttggt tttttgtgtc acgtggcggc 5580
cgcaggaacc cctagtgatg gagttggcca ctccctctct gcgcgctcgc tcgctcactg 5640
aggccgggcg accaaaggtc gcccgacgcc cgggctttgc ccgggcggcc tcagtgagcg 5700
agcgagcgcg cagagaggga gtggccaa 5728
<210> 39
<211> 5905
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 39
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgactg tttgctgttt 180
gctgcttgca atgtttgccc attttaggga catgtttgct gtttgctgct tgcaatgttt 240
gcccatttta gggacatgtt tgctgtttgc tgcttgcaat gtttgcccat tttagggaca 300
tgtttgctgt ttgctgcttg caatgtttgc ccattttagg gacaacgcga aacgtcgaca 360
ggttaatttt taaaaagcag tcaaaagtcc aagtggccct tggcagcatt tactctctct 420
gtttgctctg gttaataatc tcaggagcac aaacattcct ggaggcagga gaagaaatca 480
acatcctgga cttatcctct gggcctctcc ccacccccag gagaggctca ggttaatttt 540
taaaaagcag tcaaaagtcc aagtggccct tggcagcatt tactctctct gtttgctctg 600
gttaataatc tcaggagcac aaacattcct ggaggcagga gaagaaatca acatcctgga 660
cttatcctct gggcctctcc ccacccccag gagaggctgt cgactggaca caggacgctg 720
tggtttctga gccagggggc gactcagatc ccagccagtg gacttagccc ctgtttgctc 780
ctccgataac tggggtgacc ttggttaata ttcaccagca gcctcccccg ttgcccctct 840
ggatccactg cttaaatacg gacgaggaca gggccctgtc tcctcagctt caggcaccac 900
cactgacctg ggacagtgaa tcgtaagtat gcctttcact gcgagaggtt ctggagaggc 960
ttctgagctc cccatggccc aggcaggcag caggtctggg gcaggagggg ggttgtggag 1020
tgccttgact cggggcctgg cccccccatc tctgtcttgc aggacaattg ccgtcttctg 1080
tctcgtgggg catcctcctg ctggcaggcc tgtgctgcct ggtccctgcg atcgccacca 1140
tgcagattga gctgagcacc tgcttcttcc tgtgcctgct gaggttctgc ttctctgcca 1200
ccaggagata ctacctgggg gctgtggagc tgagctggga ctacatgcag tctgacctgg 1260
gggagctgcc tgtggatgcc aggttccccc ccagagtgcc caagagcttc cccttcaaca 1320
cctctgtggt gtacaagaag accctgtttg tggagttcac tgaccacctg ttcaacattg 1380
ccaagcccag gcccccctgg atgggcctgc tgggccccac catccaggct gaggtgtatg 1440
acactgtggt gatcaccctg aagaacatgg ccagccaccc tgtgagcctg catgctgtgg 1500
gggtgagcta ctggaaggcc tctgaggggg ctgagtatga tgaccagacc agccagaggg 1560
agaaggagga tgacaaggtg ttccctgggg gcagccacac ctatgtgtgg caggtgctga 1620
aggagaatgg ccccatggcc tctgaccccc tgtgcctgac ctacagctac ctgagccatg 1680
tggacctggt gaaggacctg aactctggcc tgattggggc cctgctggtg tgcagggagg 1740
gcagcctggc caaggagaag acccagaccc tgcacaagtt catcctgctg tttgctgtgt 1800
ttgatgaggg caagagctgg cactctgaaa ccaagaacag cctgatgcag gacagggatg 1860
ctgcctctgc cagggcctgg cccaagatgc acactgtgaa tggctatgtg aacaggagcc 1920
tgcctggcct gattggctgc cacaggaagt ctgtgtactg gcatgtgatt ggcatgggca 1980
ccacccctga ggtgcacagc atcttcctgg agggccacac cttcctggtc aggaaccaca 2040
ggcaggccag cctggagatc agccccatca ccttcctgac tgcccagacc ctgctgatgg 2100
acctgggcca gttcctgctg ttctgccaca tcagcagcca ccagcatgat ggcatggagg 2160
cctatgtgaa ggtggacagc tgccctgagg agccccagct gaggatgaag aacaatgagg 2220
aggctgagga ctatgatgat gacctgactg actctgagat ggatgtggtg aggtttgatg 2280
atgacaacag ccccagcttc atccagatca ggtctgtggc caagaagcac cccaagacct 2340
gggtgcacta cattgctgct gaggaggagg actgggacta tgcccccctg gtgctggccc 2400
ctgatgacag gagctacaag agccagtacc tgaacaatgg cccccagagg attggcagga 2460
agtacaagaa ggtcaggttc atggcctaca ctgatgaaac cttcaagacc agggaggcca 2520
tccagcatga gtctggcatc ctgggccccc tgctgtatgg ggaggtgggg gacaccctgc 2580
tgatcatctt caagaaccag gccagcaggc cctacaacat ctacccccat ggcatcactg 2640
atgtgaggcc cctgtacagc aggaggctgc ccaagggggt gaagcacctg aaggacttcc 2700
ccatcctgcc tggggagatc ttcaagtaca agtggactgt gactgtggag gatggcccca 2760
ccaagtctga ccccaggtgc ctgaccagat actacagcag ctttgtgaac atggagaggg 2820
acctggcctc tggcctgatt ggccccctgc tgatctgcta caaggagtct gtggaccaga 2880
ggggcaacca gatcatgtct gacaagagga atgtgatcct gttctctgtg tttgatgaga 2940
acaggagctg gtacctgact gagaacatcc agaggttcct gcccaaccct gctggggtgc 3000
agctggagga ccctgagttc caggccagca acatcatgca cagcatcaat ggctatgtgt 3060
ttgacagcct gcagctgtct gtgtgcctgc atgaggtggc ctactggtac atcctgagca 3120
ttggggccca gactgacttc ctgtctgtgt tcttctctgg ctacaccttc aagcacaaga 3180
tggtgtatga ggacaccctg accctgttcc ccttctctgg ggagactgtg ttcatgagca 3240
tggagaaccc tggcctgtgg attctgggct gccacaactc tgacttcagg aacaggggca 3300
tgactgccct gctgaaagtc tccagctgtg acaagaacac tggggactac tatgaggaca 3360
gctatgagga catctctgcc tacctgctga gcaagaacaa tgccattgag cccaggagct 3420
tcagccagaa ccccccagtg ctgaagaggc accagaggga gatcaccagg accaccctgc 3480
agtctgacca ggaggagatt gactatgatg acaccatctc tgtggagatg aagaaggagg 3540
actttgacat ctacgacgag gacgagaacc agagccccag gagcttccag aagaagacca 3600
ggcactactt cattgctgct gtggagaggc tgtgggacta tggcatgagc agcagccccc 3660
atgtgctgag gaacagggcc cagtctggct ctgtgcccca gttcaagaag gtggtgttcc 3720
aggagttcac tgatggcagc ttcacccagc ccctgtacag aggggagctg aatgagcacc 3780
tgggcctgct gggcccctac atcagggctg aggtggagga caacatcatg gtgaccttca 3840
ggaaccaggc cagcaggccc tacagcttct acagcagcct gatcagctat gaggaggacc 3900
agaggcaggg ggctgagccc aggaagaact ttgtgaagcc caatgaaacc aagacctact 3960
tctggaaggt gcagcaccac atggccccca ccaaggatga gtttgactgc aaggcctggg 4020
cctacttctc tgatgtggac ctggagaagg atgtgcactc tggcctgatt ggccccctgc 4080
tggtgtgcca caccaacacc ctgaaccctg cccatggcag gcaggtgact gtgcaggagt 4140
ttgccctgtt cttcaccatc tttgatgaaa ccaagagctg gtacttcact gagaacatgg 4200
agaggaactg cagggccccc tgcaacatcc agatggagga ccccaccttc aaggagaact 4260
acaggttcca tgccatcaat ggctacatca tggacaccct gcctggcctg gtgatggccc 4320
aggaccagag gatcaggtgg tacctgctga gcatgggcag caatgagaac atccacagca 4380
tccacttctc tggccatgtg ttcactgtga ggaagaagga ggagtacaag atggccctgt 4440
acaacctgta ccctggggtg tttgagactg tggagatgct gcccagcaag gctggcatct 4500
ggagggtgga gtgcctgatt ggggagcacc tgcatgctgg catgagcacc ctgttcctgg 4560
tgtacagcaa caagtgccag acccccctgg gcatggcctc tggccacatc agggacttcc 4620
agatcactgc ctctggccag tatggccagt gggcccccaa gctggccagg ctgcactact 4680
ctggcagcat caatgcctgg agcaccaagg agcccttcag ctggatcaag gtggacctgc 4740
tggcccccat gatcatccat ggcatcaaga cccagggggc caggcagaag ttcagcagcc 4800
tgtacatcag ccagttcatc atcatgtaca gcctggatgg caagaagtgg cagacctaca 4860
ggggcaacag cactggcacc ctgatggtgt tctttggcaa tgtggacagc tctggcatca 4920
agcacaacat cttcaacccc cccatcattg ccagatacat caggctgcac cccacccact 4980
acagcatcag gagcaccctg aggatggagc tgatgggctg tgacctgaac agctgcagca 5040
tgcccctggg catggagagc aaggccatct ctgatgccca gatcactgcc agcagctact 5100
tcaccaacat gtttgccacc tggagcccca gcaaggccag gctgcacctg cagggcagga 5160
gcaatgcctg gaggccccag gtcaacaacc ccaaggagtg gctgcaggtg gacttccaga 5220
agaccatgaa ggtgactggg gtgaccaccc agggggtgaa gagcctgctg accagcatgt 5280
atgtgaagga gttcctgatc agcagcagcc aggatggcca ccagtggacc ctgttcttcc 5340
agaatggcaa ggtgaaggtg ttccagggca accaggacag cttcacccct gtggtgaaca 5400
gcctggaccc ccccctgctg accagatacc tgaggattca cccccagagc tgggtgcacc 5460
agattgccct gaggatggag gtgctgggct gtgaggccca ggacctgtac tgacctcgag 5520
gtgtgccttc tagttgccag ccatctgttg tttgcccctc ccccgtgcct tccttgaccc 5580
tggaaggtgc cactcccact gtcctttcct aataaaatga ggaaattgca tcgcattgtc 5640
tgagtaggtg tcattctatt ctggggggtg gggtggggca ggacagcaag ggggaggatt 5700
gggaagacaa tagcaggcat gctggggatg cggtgggctc tatgggcacg tggcggccgc 5760
aggaacccct agtgatggag ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg 5820
ccgggcgacc aaaggtcgcc cgacgcccgg gctttgcccg ggcggcctca gtgagcgagc 5880
gagcgcgcag agagggagtg gccaa 5905
<210> 40
<211> 5355
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 40
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgactg tttgctgttt 180
gctgcttgca atgtttgccc attttaggga catgtttgct gtttgctgct tgcaatgttt 240
gcccatttta gggacatgtt tgctgtttgc tgcttgcaat gtttgcccat tttagggaca 300
tgtttgctgt ttgctgcttg caatgtttgc ccattttagg gacaacgcga aacgtcgact 360
ggacacagga cgctgtggtt tctgagccag ggggcgactc agatcccagc cagtggactt 420
agcccctgtt tgctcctccg ataactgggg tgaccttggt taatattcac cagcagcctc 480
ccccgttgcc cctctggatc cactgcttaa atacggacga ggacagggcc ctgtctcctc 540
agcttcaggc accaccactg acctgggaca gtgaatcgcg atcgccacca tgcagattga 600
gctgagcacc tgcttcttcc tgtgcctgct gaggttctgc ttctctgcca ccaggagata 660
ctacctgggg gctgtggagc tgagctggga ctacatgcag tctgacctgg gggagctgcc 720
tgtggatgcc aggttccccc ccagagtgcc caagagcttc cccttcaaca cctctgtggt 780
gtacaagaag accctgtttg tggagttcac tgaccacctg ttcaacattg ccaagcccag 840
gcccccctgg atgggcctgc tgggccccac catccaggct gaggtgtatg acactgtggt 900
gatcaccctg aagaacatgg ccagccaccc tgtgagcctg catgctgtgg gggtgagcta 960
ctggaaggcc tctgaggggg ctgagtatga tgaccagacc agccagaggg agaaggagga 1020
tgacaaggtg ttccctgggg gcagccacac ctatgtgtgg caggtgctga aggagaatgg 1080
ccccatggcc tctgaccccc tgtgcctgac ctacagctac ctgagccatg tggacctggt 1140
gaaggacctg aactctggcc tgattggggc cctgctggtg tgcagggagg gcagcctggc 1200
caaggagaag acccagaccc tgcacaagtt catcctgctg tttgctgtgt ttgatgaggg 1260
caagagctgg cactctgaaa ccaagaacag cctgatgcag gacagggatg ctgcctctgc 1320
cagggcctgg cccaagatgc acactgtgaa tggctatgtg aacaggagcc tgcctggcct 1380
gattggctgc cacaggaagt ctgtgtactg gcatgtgatt ggcatgggca ccacccctga 1440
ggtgcacagc atcttcctgg agggccacac cttcctggtc aggaaccaca ggcaggccag 1500
cctggagatc agccccatca ccttcctgac tgcccagacc ctgctgatgg acctgggcca 1560
gttcctgctg ttctgccaca tcagcagcca ccagcatgat ggcatggagg cctatgtgaa 1620
ggtggacagc tgccctgagg agccccagct gaggatgaag aacaatgagg aggctgagga 1680
ctatgatgat gacctgactg actctgagat ggatgtggtg aggtttgatg atgacaacag 1740
ccccagcttc atccagatca ggtctgtggc caagaagcac cccaagacct gggtgcacta 1800
cattgctgct gaggaggagg actgggacta tgcccccctg gtgctggccc ctgatgacag 1860
gagctacaag agccagtacc tgaacaatgg cccccagagg attggcagga agtacaagaa 1920
ggtcaggttc atggcctaca ctgatgaaac cttcaagacc agggaggcca tccagcatga 1980
gtctggcatc ctgggccccc tgctgtatgg ggaggtgggg gacaccctgc tgatcatctt 2040
caagaaccag gccagcaggc cctacaacat ctacccccat ggcatcactg atgtgaggcc 2100
cctgtacagc aggaggctgc ccaagggggt gaagcacctg aaggacttcc ccatcctgcc 2160
tggggagatc ttcaagtaca agtggactgt gactgtggag gatggcccca ccaagtctga 2220
ccccaggtgc ctgaccagat actacagcag ctttgtgaac atggagaggg acctggcctc 2280
tggcctgatt ggccccctgc tgatctgcta caaggagtct gtggaccaga ggggcaacca 2340
gatcatgtct gacaagagga atgtgatcct gttctctgtg tttgatgaga acaggagctg 2400
gtacctgact gagaacatcc agaggttcct gcccaaccct gctggggtgc agctggagga 2460
ccctgagttc caggccagca acatcatgca cagcatcaat ggctatgtgt ttgacagcct 2520
gcagctgtct gtgtgcctgc atgaggtggc ctactggtac atcctgagca ttggggccca 2580
gactgacttc ctgtctgtgt tcttctctgg ctacaccttc aagcacaaga tggtgtatga 2640
ggacaccctg accctgttcc ccttctctgg ggagactgtg ttcatgagca tggagaaccc 2700
tggcctgtgg attctgggct gccacaactc tgacttcagg aacaggggca tgactgccct 2760
gctgaaagtc tccagctgtg acaagaacac tggggactac tatgaggaca gctatgagga 2820
catctctgcc tacctgctga gcaagaacaa tgccattgag cccaggagct tcagccagaa 2880
ccccccagtg ctgaagaggc accagaggga gatcaccagg accaccctgc agtctgacca 2940
ggaggagatt gactatgatg acaccatctc tgtggagatg aagaaggagg actttgacat 3000
ctacgacgag gacgagaacc agagccccag gagcttccag aagaagacca ggcactactt 3060
cattgctgct gtggagaggc tgtgggacta tggcatgagc agcagccccc atgtgctgag 3120
gaacagggcc cagtctggct ctgtgcccca gttcaagaag gtggtgttcc aggagttcac 3180
tgatggcagc ttcacccagc ccctgtacag aggggagctg aatgagcacc tgggcctgct 3240
gggcccctac atcagggctg aggtggagga caacatcatg gtgaccttca ggaaccaggc 3300
cagcaggccc tacagcttct acagcagcct gatcagctat gaggaggacc agaggcaggg 3360
ggctgagccc aggaagaact ttgtgaagcc caatgaaacc aagacctact tctggaaggt 3420
gcagcaccac atggccccca ccaaggatga gtttgactgc aaggcctggg cctacttctc 3480
tgatgtggac ctggagaagg atgtgcactc tggcctgatt ggccccctgc tggtgtgcca 3540
caccaacacc ctgaaccctg cccatggcag gcaggtgact gtgcaggagt ttgccctgtt 3600
cttcaccatc tttgatgaaa ccaagagctg gtacttcact gagaacatgg agaggaactg 3660
cagggccccc tgcaacatcc agatggagga ccccaccttc aaggagaact acaggttcca 3720
tgccatcaat ggctacatca tggacaccct gcctggcctg gtgatggccc aggaccagag 3780
gatcaggtgg tacctgctga gcatgggcag caatgagaac atccacagca tccacttctc 3840
tggccatgtg ttcactgtga ggaagaagga ggagtacaag atggccctgt acaacctgta 3900
ccctggggtg tttgagactg tggagatgct gcccagcaag gctggcatct ggagggtgga 3960
gtgcctgatt ggggagcacc tgcatgctgg catgagcacc ctgttcctgg tgtacagcaa 4020
caagtgccag acccccctgg gcatggcctc tggccacatc agggacttcc agatcactgc 4080
ctctggccag tatggccagt gggcccccaa gctggccagg ctgcactact ctggcagcat 4140
caatgcctgg agcaccaagg agcccttcag ctggatcaag gtggacctgc tggcccccat 4200
gatcatccat ggcatcaaga cccagggggc caggcagaag ttcagcagcc tgtacatcag 4260
ccagttcatc atcatgtaca gcctggatgg caagaagtgg cagacctaca ggggcaacag 4320
cactggcacc ctgatggtgt tctttggcaa tgtggacagc tctggcatca agcacaacat 4380
cttcaacccc cccatcattg ccagatacat caggctgcac cccacccact acagcatcag 4440
gagcaccctg aggatggagc tgatgggctg tgacctgaac agctgcagca tgcccctggg 4500
catggagagc aaggccatct ctgatgccca gatcactgcc agcagctact tcaccaacat 4560
gtttgccacc tggagcccca gcaaggccag gctgcacctg cagggcagga gcaatgcctg 4620
gaggccccag gtcaacaacc ccaaggagtg gctgcaggtg gacttccaga agaccatgaa 4680
ggtgactggg gtgaccaccc agggggtgaa gagcctgctg accagcatgt atgtgaagga 4740
gttcctgatc agcagcagcc aggatggcca ccagtggacc ctgttcttcc agaatggcaa 4800
ggtgaaggtg ttccagggca accaggacag cttcacccct gtggtgaaca gcctggaccc 4860
ccccctgctg accagatacc tgaggattca cccccagagc tgggtgcacc agattgccct 4920
gaggatggag gtgctgggct gtgaggccca ggacctgtac tgacctcgag gtgtgccttc 4980
tagttgccag ccatctgttg tttgcccctc ccccgtgcct tccttgaccc tggaaggtgc 5040
cactcccact gtcctttcct aataaaatga ggaaattgca tcgcattgtc tgagtaggtg 5100
tcattctatt ctggggggtg gggtggggca ggacagcaag ggggaggatt gggaagacaa 5160
tagcaggcat gctggggatg cggtgggctc tatgggcacg tggcggccgc aggaacccct 5220
agtgatggag ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgggcgacc 5280
aaaggtcgcc cgacgcccgg gctttgcccg ggcggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag 5340
agagggagtg gccaa 5355
<210> 41
<211> 5618
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 41
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg ttttcgacca gagaggtctc 180
tgacctctgc cccagctcca aggtcagcag gcagggaggg ctgtgtgttt gctgtttgct 240
gcttgcaatg tttgcccatt ttagggacat gagtaggctg aagtttgttc agtgtggact 300
tcagaggcag cacacaaaca gccagagagg tctctgacct ctgccccagc tccaaggtca 360
gcaggcaggg agggctgtgt gtttgctgtt tgctgcttgc aatgtttgcc cattttaggg 420
acatgagtag gctgaagttt gttcagtgtg gacttcagag gcagcacaca aacagccaga 480
gaggtctctg acctctgccc cagctccaag gtcagcaggc agggagggct gtgtgtttgc 540
tgtttgctgc ttgcaatgtt tgcccatttt agggacatga gtaggctgaa gtttgttcag 600
tgtggacttc agaggcagca cacaaacagc cagagaggtc tctgacctct gccccagctc 660
caaggtcagc aggcagggag ggctgtgtgt ttgctgtttg ctgcttgcaa tgtttgccca 720
ttttagggac atgagtaggc tgaagtttgt tcagtgtgga cttcagaggc agcacacaaa 780
cagcacgcga aacgtcgact ggacacagga cgctgtggtt tctgagccag ggggcgactc 840
agatcccagc cagtggactt agcccctgtt tgctcctccg ataactgggg tgaccttggt 900
taatattcac cagcagcctc ccccgttgcc cctctggatc cactgcttaa atacggacga 960
ggacagggcc ctgtctcctc agcttcaggc accaccactg acctgggaca gtgaatcgcg 1020
atcgccacca tgcagattga gctgagcacc tgcttcttcc tgtgcctgct gaggttctgc 1080
ttctctgcca ccaggagata ctacctgggg gctgtggagc tgagctggga ctacatgcag 1140
tctgacctgg gggagctgcc tgtggatgcc aggttccccc ccagagtgcc caagagcttc 1200
cccttcaaca cctctgtggt gtacaagaag accctgtttg tggagttcac tgaccacctg 1260
ttcaacattg ccaagcccag gcccccctgg atgggcctgc tgggccccac catccaggct 1320
gaggtgtatg acactgtggt gatcaccctg aagaacatgg ccagccaccc tgtgagcctg 1380
catgctgtgg gggtgagcta ctggaaggcc tctgaggggg ctgagtatga tgaccagacc 1440
agccagaggg agaaggagga tgacaaggtg ttccctgggg gcagccacac ctatgtgtgg 1500
caggtgctga aggagaatgg ccccatggcc tctgaccccc tgtgcctgac ctacagctac 1560
ctgagccatg tggacctggt gaaggacctg aactctggcc tgattggggc cctgctggtg 1620
tgcagggagg gcagcctggc caaggagaag acccagaccc tgcacaagtt catcctgctg 1680
tttgctgtgt ttgatgaggg caagagctgg cactctgaaa ccaagaacag cctgatgcag 1740
gacagggatg ctgcctctgc cagggcctgg cccaagatgc acactgtgaa tggctatgtg 1800
aacaggagcc tgcctggcct gattggctgc cacaggaagt ctgtgtactg gcatgtgatt 1860
ggcatgggca ccacccctga ggtgcacagc atcttcctgg agggccacac cttcctggtc 1920
aggaaccaca ggcaggccag cctggagatc agccccatca ccttcctgac tgcccagacc 1980
ctgctgatgg acctgggcca gttcctgctg ttctgccaca tcagcagcca ccagcatgat 2040
ggcatggagg cctatgtgaa ggtggacagc tgccctgagg agccccagct gaggatgaag 2100
aacaatgagg aggctgagga ctatgatgat gacctgactg actctgagat ggatgtggtg 2160
aggtttgatg atgacaacag ccccagcttc atccagatca ggtctgtggc caagaagcac 2220
cccaagacct gggtgcacta cattgctgct gaggaggagg actgggacta tgcccccctg 2280
gtgctggccc ctgatgacag gagctacaag agccagtacc tgaacaatgg cccccagagg 2340
attggcagga agtacaagaa ggtcaggttc atggcctaca ctgatgaaac cttcaagacc 2400
agggaggcca tccagcatga gtctggcatc ctgggccccc tgctgtatgg ggaggtgggg 2460
gacaccctgc tgatcatctt caagaaccag gccagcaggc cctacaacat ctacccccat 2520
ggcatcactg atgtgaggcc cctgtacagc aggaggctgc ccaagggggt gaagcacctg 2580
aaggacttcc ccatcctgcc tggggagatc ttcaagtaca agtggactgt gactgtggag 2640
gatggcccca ccaagtctga ccccaggtgc ctgaccagat actacagcag ctttgtgaac 2700
atggagaggg acctggcctc tggcctgatt ggccccctgc tgatctgcta caaggagtct 2760
gtggaccaga ggggcaacca gatcatgtct gacaagagga atgtgatcct gttctctgtg 2820
tttgatgaga acaggagctg gtacctgact gagaacatcc agaggttcct gcccaaccct 2880
gctggggtgc agctggagga ccctgagttc caggccagca acatcatgca cagcatcaat 2940
ggctatgtgt ttgacagcct gcagctgtct gtgtgcctgc atgaggtggc ctactggtac 3000
atcctgagca ttggggccca gactgacttc ctgtctgtgt tcttctctgg ctacaccttc 3060
aagcacaaga tggtgtatga ggacaccctg accctgttcc ccttctctgg ggagactgtg 3120
ttcatgagca tggagaaccc tggcctgtgg attctgggct gccacaactc tgacttcagg 3180
aacaggggca tgactgccct gctgaaagtc tccagctgtg acaagaacac tggggactac 3240
tatgaggaca gctatgagga catctctgcc tacctgctga gcaagaacaa tgccattgag 3300
cccaggagct tcagccagaa ccccccagtg ctgaagaggc accagaggga gatcaccagg 3360
accaccctgc agtctgacca ggaggagatt gactatgatg acaccatctc tgtggagatg 3420
aagaaggagg actttgacat ctacgacgag gacgagaacc agagccccag gagcttccag 3480
aagaagacca ggcactactt cattgctgct gtggagaggc tgtgggacta tggcatgagc 3540
agcagccccc atgtgctgag gaacagggcc cagtctggct ctgtgcccca gttcaagaag 3600
gtggtgttcc aggagttcac tgatggcagc ttcacccagc ccctgtacag aggggagctg 3660
aatgagcacc tgggcctgct gggcccctac atcagggctg aggtggagga caacatcatg 3720
gtgaccttca ggaaccaggc cagcaggccc tacagcttct acagcagcct gatcagctat 3780
gaggaggacc agaggcaggg ggctgagccc aggaagaact ttgtgaagcc caatgaaacc 3840
aagacctact tctggaaggt gcagcaccac atggccccca ccaaggatga gtttgactgc 3900
aaggcctggg cctacttctc tgatgtggac ctggagaagg atgtgcactc tggcctgatt 3960
ggccccctgc tggtgtgcca caccaacacc ctgaaccctg cccatggcag gcaggtgact 4020
gtgcaggagt ttgccctgtt cttcaccatc tttgatgaaa ccaagagctg gtacttcact 4080
gagaacatgg agaggaactg cagggccccc tgcaacatcc agatggagga ccccaccttc 4140
aaggagaact acaggttcca tgccatcaat ggctacatca tggacaccct gcctggcctg 4200
gtgatggccc aggaccagag gatcaggtgg tacctgctga gcatgggcag caatgagaac 4260
atccacagca tccacttctc tggccatgtg ttcactgtga ggaagaagga ggagtacaag 4320
atggccctgt acaacctgta ccctggggtg tttgagactg tggagatgct gcccagcaag 4380
gctggcatct ggagggtgga gtgcctgatt ggggagcacc tgcatgctgg catgagcacc 4440
ctgttcctgg tgtacagcaa caagtgccag acccccctgg gcatggcctc tggccacatc 4500
agggacttcc agatcactgc ctctggccag tatggccagt gggcccccaa gctggccagg 4560
ctgcactact ctggcagcat caatgcctgg agcaccaagg agcccttcag ctggatcaag 4620
gtggacctgc tggcccccat gatcatccat ggcatcaaga cccagggggc caggcagaag 4680
ttcagcagcc tgtacatcag ccagttcatc atcatgtaca gcctggatgg caagaagtgg 4740
cagacctaca ggggcaacag cactggcacc ctgatggtgt tctttggcaa tgtggacagc 4800
tctggcatca agcacaacat cttcaacccc cccatcattg ccagatacat caggctgcac 4860
cccacccact acagcatcag gagcaccctg aggatggagc tgatgggctg tgacctgaac 4920
agctgcagca tgcccctggg catggagagc aaggccatct ctgatgccca gatcactgcc 4980
agcagctact tcaccaacat gtttgccacc tggagcccca gcaaggccag gctgcacctg 5040
cagggcagga gcaatgcctg gaggccccag gtcaacaacc ccaaggagtg gctgcaggtg 5100
gacttccaga agaccatgaa ggtgactggg gtgaccaccc agggggtgaa gagcctgctg 5160
accagcatgt atgtgaagga gttcctgatc agcagcagcc aggatggcca ccagtggacc 5220
ctgttcttcc agaatggcaa ggtgaaggtg ttccagggca accaggacag cttcacccct 5280
gtggtgaaca gcctggaccc ccccctgctg accagatacc tgaggattca cccccagagc 5340
tgggtgcacc agattgccct gaggatggag gtgctgggct gtgaggccca ggacctgtac 5400
tgacctcgag gaataaagga aatttatttt cattgcaata gtgtgttggt tttttgtgtc 5460
acgtggcggc cgcaggaacc cctagtgatg gagttggcca ctccctctct gcgcgctcgc 5520
tcgctcactg aggccgggcg accaaaggtc gcccgacgcc cgggctttgc ccgggcggcc 5580
tcagtgagcg agcgagcgcg cagagaggga gtggccaa 5618
<210> 42
<211> 5993
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 42
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg tttaaacgtc gacaggttaa 180
tttttaaaaa gcagtcaaaa gtccaagtgg cccttggcag catttactct ctctgtttgc 240
tctggttaat aatctcagga gcacaaacat tcctggaggc aggagaagaa atcaacatcc 300
tggacttatc ctctgggcct ctccccaccc ccaggagagg ctcaggttaa tttttaaaaa 360
gcagtcaaaa gtccaagtgg cccttggcag catttactct ctctgtttgc tctggttaat 420
aatctcagga gcacaaacat tcctggaggc aggagaagaa atcaacatcc tggacttatc 480
ctctgggcct ctccccaccc ccaggagagg ctgtcgactg gacacaggac gctgtggttt 540
ctgagccagg gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga 600
taactggggt gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc 660
actgcttaaa tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga 720
cctgggacag tgaatcgcga tcgccaccat gcagattgag ctgagcacct gcttcttcct 780
gtgcctgctg aggttctgct tctctgccac caggagatac tacctggggg ctgtggagct 840
gagctgggac tacatgcagt ctgacctggg ggagctgcct gtggatgcca ggttcccccc 900
cagagtgccc aagagcttcc ccttcaacac ctctgtggtg tacaagaaga ccctgtttgt 960
ggagttcact gaccacctgt tcaacattgc caagcccagg cccccctgga tgggcctgct 1020
gggccccacc atccaggctg aggtgtatga cactgtggtg atcaccctga agaacatggc 1080
cagccaccct gtgagcctgc atgctgtggg ggtgagctac tggaaggcct ctgagggggc 1140
tgagtatgat gaccagacca gccagaggga gaaggaggat gacaaggtgt tccctggggg 1200
cagccacacc tatgtgtggc aggtgctgaa ggagaatggc cccatggcct ctgaccccct 1260
gtgcctgacc tacagctacc tgagccatgt ggacctggtg aaggacctga actctggcct 1320
gattggggcc ctgctggtgt gcagggaggg cagcctggcc aaggagaaga cccagaccct 1380
gcacaagttc atcctgctgt ttgctgtgtt tgatgagggc aagagctggc actctgaaac 1440
caagaacagc ctgatgcagg acagggatgc tgcctctgcc agggcctggc ccaagatgca 1500
cactgtgaat ggctatgtga acaggagcct gcctggcctg attggctgcc acaggaagtc 1560
tgtgtactgg catgtgattg gcatgggcac cacccctgag gtgcacagca tcttcctgga 1620
gggccacacc ttcctggtca ggaaccacag gcaggccagc ctggagatca gccccatcac 1680
cttcctgact gcccagaccc tgctgatgga cctgggccag ttcctgctgt tctgccacat 1740
cagcagccac cagcatgatg gcatggaggc ctatgtgaag gtggacagct gccctgagga 1800
gccccagctg aggatgaaga acaatgagga ggctgaggac tatgatgatg acctgactga 1860
ctctgagatg gatgtggtga ggtttgatga tgacaacagc cccagcttca tccagatcag 1920
gtctgtggcc aagaagcacc ccaagacctg ggtgcactac attgctgctg aggaggagga 1980
ctgggactat gcccccctgg tgctggcccc tgatgacagg agctacaaga gccagtacct 2040
gaacaatggc ccccagagga ttggcaggaa gtacaagaag gtcaggttca tggcctacac 2100
tgatgaaacc ttcaagacca gggaggccat ccagcatgag tctggcatcc tgggccccct 2160
gctgtatggg gaggtggggg acaccctgct gatcatcttc aagaaccagg ccagcaggcc 2220
ctacaacatc tacccccatg gcatcactga tgtgaggccc ctgtacagca ggaggctgcc 2280
caagggggtg aagcacctga aggacttccc catcctgcct ggggagatct tcaagtacaa 2340
gtggactgtg actgtggagg atggccccac caagtctgac cccaggtgcc tgaccagata 2400
ctacagcagc tttgtgaaca tggagaggga cctggcctct ggcctgattg gccccctgct 2460
gatctgctac aaggagtctg tggaccagag gggcaaccag atcatgtctg acaagaggaa 2520
tgtgatcctg ttctctgtgt ttgatgagaa caggagctgg tacctgactg agaacatcca 2580
gaggttcctg cccaaccctg ctggggtgca gctggaggac cctgagttcc aggccagcaa 2640
catcatgcac agcatcaatg gctatgtgtt tgacagcctg cagctgtctg tgtgcctgca 2700
tgaggtggcc tactggtaca tcctgagcat tggggcccag actgacttcc tgtctgtgtt 2760
cttctctggc tacaccttca agcacaagat ggtgtatgag gacaccctga ccctgttccc 2820
cttctctggg gagactgtgt tcatgagcat ggagaaccct ggcctgtgga ttctgggctg 2880
ccacaactct gacttcagga acaggggcat gactgccctg ctgaaagtct ccagctgtga 2940
caagaacact ggggactact atgaggacag ctatgaggac atctctgcct acctgctgag 3000
caagaacaat gccattgagc ccaggagctt cagccagaac cccccagtgc tgaagaggca 3060
ccagagggag atcaccagga ccaccctgca gtctgaccag gaggagattg actatgatga 3120
caccatctct gtggagatga agaaggagga ctttgacatc tacgacgagg acgagaacca 3180
gagccccagg agcttccaga agaagaccag gcactacttc attgctgctg tggagaggct 3240
gtgggactat ggcatgagca gcagccccca tgtgctgagg aacagggccc agtctggctc 3300
tgtgccccag ttcaagaagg tggtgttcca ggagttcact gatggcagct tcacccagcc 3360
cctgtacaga ggggagctga atgagcacct gggcctgctg ggcccctaca tcagggctga 3420
ggtggaggac aacatcatgg tgaccttcag gaaccaggcc agcaggccct acagcttcta 3480
cagcagcctg atcagctatg aggaggacca gaggcagggg gctgagccca ggaagaactt 3540
tgtgaagccc aatgaaacca agacctactt ctggaaggtg cagcaccaca tggcccccac 3600
caaggatgag tttgactgca aggcctgggc ctacttctct gatgtggacc tggagaagga 3660
tgtgcactct ggcctgattg gccccctgct ggtgtgccac accaacaccc tgaaccctgc 3720
ccatggcagg caggtgactg tgcaggagtt tgccctgttc ttcaccatct ttgatgaaac 3780
caagagctgg tacttcactg agaacatgga gaggaactgc agggccccct gcaacatcca 3840
gatggaggac cccaccttca aggagaacta caggttccat gccatcaatg gctacatcat 3900
ggacaccctg cctggcctgg tgatggccca ggaccagagg atcaggtggt acctgctgag 3960
catgggcagc aatgagaaca tccacagcat ccacttctct ggccatgtgt tcactgtgag 4020
gaagaaggag gagtacaaga tggccctgta caacctgtac cctggggtgt ttgagactgt 4080
ggagatgctg cccagcaagg ctggcatctg gagggtggag tgcctgattg gggagcacct 4140
gcatgctggc atgagcaccc tgttcctggt gtacagcaac aagtgccaga cccccctggg 4200
catggcctct ggccacatca gggacttcca gatcactgcc tctggccagt atggccagtg 4260
ggcccccaag ctggccaggc tgcactactc tggcagcatc aatgcctgga gcaccaagga 4320
gcccttcagc tggatcaagg tggacctgct ggcccccatg atcatccatg gcatcaagac 4380
ccagggggcc aggcagaagt tcagcagcct gtacatcagc cagttcatca tcatgtacag 4440
cctggatggc aagaagtggc agacctacag gggcaacagc actggcaccc tgatggtgtt 4500
ctttggcaat gtggacagct ctggcatcaa gcacaacatc ttcaaccccc ccatcattgc 4560
cagatacatc aggctgcacc ccacccacta cagcatcagg agcaccctga ggatggagct 4620
gatgggctgt gacctgaaca gctgcagcat gcccctgggc atggagagca aggccatctc 4680
tgatgcccag atcactgcca gcagctactt caccaacatg tttgccacct ggagccccag 4740
caaggccagg ctgcacctgc agggcaggag caatgcctgg aggccccagg tcaacaaccc 4800
caaggagtgg ctgcaggtgg acttccagaa gaccatgaag gtgactgggg tgaccaccca 4860
gggggtgaag agcctgctga ccagcatgta tgtgaaggag ttcctgatca gcagcagcca 4920
ggatggccac cagtggaccc tgttcttcca gaatggcaag gtgaaggtgt tccagggcaa 4980
ccaggacagc ttcacccctg tggtgaacag cctggacccc cccctgctga ccagatacct 5040
gaggattcac ccccagagct gggtgcacca gattgccctg aggatggagg tgctgggctg 5100
tgaggcccag gacctgtact gacctcgagg aataaaggaa atttattttc attgcaatag 5160
tgtgttggtt ttttgtgtca cgtgccctct cacactacct aaaccacgcc aggacaacct 5220
ctgctcctct ccaccgaaat tccaaggggt cgagtggatg ttggaggtgg catgggccca 5280
gagaggtctc tgacctctgc cccagctcca aggtcagcag gcagggaggg ctgtgtgttt 5340
gctgtttgct gcttgcaatg tttgcccatt ttagggacat gagtaggctg aagtttgttc 5400
agtgtggact tcagaggcag cacacaaaca gctgctggag gatgggaact gaggggttgg 5460
aagggggcag ggtgagccca gaaactcctg tgtgcctctg agcctgcagc cctctcacac 5520
tacctaaacc acgccaggac aacctctgct cctctccacc gaaattccaa ggggtcgagt 5580
ggatgttgga ggtggcatgg gcccagagag gtctctgacc tctgccccag ctccaaggtc 5640
agcaggcagg gagggctgtg tgtttgctgt ttgctgcttg caatgtttgc ccattttagg 5700
gacatgagta ggctgaagtt tgttcagtgt ggacttcaga ggcagcacac aaacagctgc 5760
tggaggatgg gaactgaggg gttggaaggg ggcagggtga gcccagaaac tcctgtgtgc 5820
ctctgagcct gcagcacgtg gcggccgcag gaacccctag tgatggagtt ggccactccc 5880
tctctgcgcg ctcgctcgct cactgaggcc gggcgaccaa aggtcgcccg acgcccgggc 5940
tttgcccggg cggcctcagt gagcgagcga gcgcgcagag agggagtggc caa 5993
<210> 43
<211> 5337
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 43
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg tttaaacgtc gacaggttaa 180
tttttaaaaa gcagtcaaaa gtccaagtgg cccttggcag catttactct ctctgtttgc 240
tctggttaat aatctcagga gcacaaacat tcctggaggc aggagaagaa atcaacatcc 300
tggacttatc ctctgggcct ctccccaccc ccaggagagg ctcaggttaa tttttaaaaa 360
gcagtcaaaa gtccaagtgg cccttggcag catttactct ctctgtttgc tctggttaat 420
aatctcagga gcacaaacat tcctggaggc aggagaagaa atcaacatcc tggacttatc 480
ctctgggcct ctccccaccc ccaggagagg ctgtcgactg gacacaggac gctgtggttt 540
ctgagccagg gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga 600
taactggggt gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc 660
actgcttaaa tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga 720
cctgggacag tgaatcgcga tcgccaccat gcagattgag ctgagcacct gcttcttcct 780
gtgcctgctg aggttctgct tctctgccac caggagatac tacctggggg ctgtggagct 840
gagctgggac tacatgcagt ctgacctggg ggagctgcct gtggatgcca ggttcccccc 900
cagagtgccc aagagcttcc ccttcaacac ctctgtggtg tacaagaaga ccctgtttgt 960
ggagttcact gaccacctgt tcaacattgc caagcccagg cccccctgga tgggcctgct 1020
gggccccacc atccaggctg aggtgtatga cactgtggtg atcaccctga agaacatggc 1080
cagccaccct gtgagcctgc atgctgtggg ggtgagctac tggaaggcct ctgagggggc 1140
tgagtatgat gaccagacca gccagaggga gaaggaggat gacaaggtgt tccctggggg 1200
cagccacacc tatgtgtggc aggtgctgaa ggagaatggc cccatggcct ctgaccccct 1260
gtgcctgacc tacagctacc tgagccatgt ggacctggtg aaggacctga actctggcct 1320
gattggggcc ctgctggtgt gcagggaggg cagcctggcc aaggagaaga cccagaccct 1380
gcacaagttc atcctgctgt ttgctgtgtt tgatgagggc aagagctggc actctgaaac 1440
caagaacagc ctgatgcagg acagggatgc tgcctctgcc agggcctggc ccaagatgca 1500
cactgtgaat ggctatgtga acaggagcct gcctggcctg attggctgcc acaggaagtc 1560
tgtgtactgg catgtgattg gcatgggcac cacccctgag gtgcacagca tcttcctgga 1620
gggccacacc ttcctggtca ggaaccacag gcaggccagc ctggagatca gccccatcac 1680
cttcctgact gcccagaccc tgctgatgga cctgggccag ttcctgctgt tctgccacat 1740
cagcagccac cagcatgatg gcatggaggc ctatgtgaag gtggacagct gccctgagga 1800
gccccagctg aggatgaaga acaatgagga ggctgaggac tatgatgatg acctgactga 1860
ctctgagatg gatgtggtga ggtttgatga tgacaacagc cccagcttca tccagatcag 1920
gtctgtggcc aagaagcacc ccaagacctg ggtgcactac attgctgctg aggaggagga 1980
ctgggactat gcccccctgg tgctggcccc tgatgacagg agctacaaga gccagtacct 2040
gaacaatggc ccccagagga ttggcaggaa gtacaagaag gtcaggttca tggcctacac 2100
tgatgaaacc ttcaagacca gggaggccat ccagcatgag tctggcatcc tgggccccct 2160
gctgtatggg gaggtggggg acaccctgct gatcatcttc aagaaccagg ccagcaggcc 2220
ctacaacatc tacccccatg gcatcactga tgtgaggccc ctgtacagca ggaggctgcc 2280
caagggggtg aagcacctga aggacttccc catcctgcct ggggagatct tcaagtacaa 2340
gtggactgtg actgtggagg atggccccac caagtctgac cccaggtgcc tgaccagata 2400
ctacagcagc tttgtgaaca tggagaggga cctggcctct ggcctgattg gccccctgct 2460
gatctgctac aaggagtctg tggaccagag gggcaaccag atcatgtctg acaagaggaa 2520
tgtgatcctg ttctctgtgt ttgatgagaa caggagctgg tacctgactg agaacatcca 2580
gaggttcctg cccaaccctg ctggggtgca gctggaggac cctgagttcc aggccagcaa 2640
catcatgcac agcatcaatg gctatgtgtt tgacagcctg cagctgtctg tgtgcctgca 2700
tgaggtggcc tactggtaca tcctgagcat tggggcccag actgacttcc tgtctgtgtt 2760
cttctctggc tacaccttca agcacaagat ggtgtatgag gacaccctga ccctgttccc 2820
cttctctggg gagactgtgt tcatgagcat ggagaaccct ggcctgtgga ttctgggctg 2880
ccacaactct gacttcagga acaggggcat gactgccctg ctgaaagtct ccagctgtga 2940
caagaacact ggggactact atgaggacag ctatgaggac atctctgcct acctgctgag 3000
caagaacaat gccattgagc ccaggagctt cagccagaac cccccagtgc tgaagaggca 3060
ccagagggag atcaccagga ccaccctgca gtctgaccag gaggagattg actatgatga 3120
caccatctct gtggagatga agaaggagga ctttgacatc tacgacgagg acgagaacca 3180
gagccccagg agcttccaga agaagaccag gcactacttc attgctgctg tggagaggct 3240
gtgggactat ggcatgagca gcagccccca tgtgctgagg aacagggccc agtctggctc 3300
tgtgccccag ttcaagaagg tggtgttcca ggagttcact gatggcagct tcacccagcc 3360
cctgtacaga ggggagctga atgagcacct gggcctgctg ggcccctaca tcagggctga 3420
ggtggaggac aacatcatgg tgaccttcag gaaccaggcc agcaggccct acagcttcta 3480
cagcagcctg atcagctatg aggaggacca gaggcagggg gctgagccca ggaagaactt 3540
tgtgaagccc aatgaaacca agacctactt ctggaaggtg cagcaccaca tggcccccac 3600
caaggatgag tttgactgca aggcctgggc ctacttctct gatgtggacc tggagaagga 3660
tgtgcactct ggcctgattg gccccctgct ggtgtgccac accaacaccc tgaaccctgc 3720
ccatggcagg caggtgactg tgcaggagtt tgccctgttc ttcaccatct ttgatgaaac 3780
caagagctgg tacttcactg agaacatgga gaggaactgc agggccccct gcaacatcca 3840
gatggaggac cccaccttca aggagaacta caggttccat gccatcaatg gctacatcat 3900
ggacaccctg cctggcctgg tgatggccca ggaccagagg atcaggtggt acctgctgag 3960
catgggcagc aatgagaaca tccacagcat ccacttctct ggccatgtgt tcactgtgag 4020
gaagaaggag gagtacaaga tggccctgta caacctgtac cctggggtgt ttgagactgt 4080
ggagatgctg cccagcaagg ctggcatctg gagggtggag tgcctgattg gggagcacct 4140
gcatgctggc atgagcaccc tgttcctggt gtacagcaac aagtgccaga cccccctggg 4200
catggcctct ggccacatca gggacttcca gatcactgcc tctggccagt atggccagtg 4260
ggcccccaag ctggccaggc tgcactactc tggcagcatc aatgcctgga gcaccaagga 4320
gcccttcagc tggatcaagg tggacctgct ggcccccatg atcatccatg gcatcaagac 4380
ccagggggcc aggcagaagt tcagcagcct gtacatcagc cagttcatca tcatgtacag 4440
cctggatggc aagaagtggc agacctacag gggcaacagc actggcaccc tgatggtgtt 4500
ctttggcaat gtggacagct ctggcatcaa gcacaacatc ttcaaccccc ccatcattgc 4560
cagatacatc aggctgcacc ccacccacta cagcatcagg agcaccctga ggatggagct 4620
gatgggctgt gacctgaaca gctgcagcat gcccctgggc atggagagca aggccatctc 4680
tgatgcccag atcactgcca gcagctactt caccaacatg tttgccacct ggagccccag 4740
caaggccagg ctgcacctgc agggcaggag caatgcctgg aggccccagg tcaacaaccc 4800
caaggagtgg ctgcaggtgg acttccagaa gaccatgaag gtgactgggg tgaccaccca 4860
gggggtgaag agcctgctga ccagcatgta tgtgaaggag ttcctgatca gcagcagcca 4920
ggatggccac cagtggaccc tgttcttcca gaatggcaag gtgaaggtgt tccagggcaa 4980
ccaggacagc ttcacccctg tggtgaacag cctggacccc cccctgctga ccagatacct 5040
gaggattcac ccccagagct gggtgcacca gattgccctg aggatggagg tgctgggctg 5100
tgaggcccag gacctgtact gacctcgagg aataaaggaa atttattttc attgcaatag 5160
tgtgttggtt ttttgtgtca cgtggcggcc gcaggaaccc ctagtgatgg agttggccac 5220
tccctctctg cgcgctcgct cgctcactga ggccgggcga ccaaaggtcg cccgacgccc 5280
gggctttgcc cgggcggcct cagtgagcga gcgagcgcgc agagagggag tggccaa 5337
<210> 44
<211> 5542
<212> ДНК
<213> Аденоассоциированный вирус 2
<400> 44
ttggccactc cctctctgcg cgctcgctcg ctcactgagg ccgcccgggc aaagcccggg 60
cgtcgggcga cctttggtcg cccggcctca gtgagcgagc gagcgcgcag agagggagtg 120
gccaactcca tcactagggg ttcctgcggc cgcacgcgtg tttaaacgtc gacaggttaa 180
tttttaaaaa gcagtcaaaa gtccaagtgg cccttggcag catttactct ctctgtttgc 240
tctggttaat aatctcagga gcacaaacat tcctggaggc aggagaagaa atcaacatcc 300
tggacttatc ctctgggcct ctccccaccc ccaggagagg ctcaggttaa tttttaaaaa 360
gcagtcaaaa gtccaagtgg cccttggcag catttactct ctctgtttgc tctggttaat 420
aatctcagga gcacaaacat tcctggaggc aggagaagaa atcaacatcc tggacttatc 480
ctctgggcct ctccccaccc ccaggagagg ctgtcgactg gacacaggac gctgtggttt 540
ctgagccagg gggcgactca gatcccagcc agtggactta gcccctgttt gctcctccga 600
taactggggt gaccttggtt aatattcacc agcagcctcc cccgttgccc ctctggatcc 660
actgcttaaa tacggacgag gacagggccc tgtctcctca gcttcaggca ccaccactga 720
cctgggacag tgaatcgtaa gtatgccttt cactgcgaga ggttctggag aggcttctga 780
gctccccatg gcccaggcag gcagcaggtc tggggcagga ggggggttgt ggagtgcctt 840
gactcggggc ctggcccccc catctctgtc ttgcaggaca attgccgtct tctgtctcgt 900
ggggcatcct cctgctggca ggcctgtgct gcctggtccc tgcgatcgcc accatgcaga 960
ttgagctgag cacctgcttc ttcctgtgcc tgctgaggtt ctgcttctct gccaccagga 1020
gatactacct gggggctgtg gagctgagct gggactacat gcagtctgac ctgggggagc 1080
tgcctgtgga tgccaggttc ccccccagag tgcccaagag cttccccttc aacacctctg 1140
tggtgtacaa gaagaccctg tttgtggagt tcactgacca cctgttcaac attgccaagc 1200
ccaggccccc ctggatgggc ctgctgggcc ccaccatcca ggctgaggtg tatgacactg 1260
tggtgatcac cctgaagaac atggccagcc accctgtgag cctgcatgct gtgggggtga 1320
gctactggaa ggcctctgag ggggctgagt atgatgacca gaccagccag agggagaagg 1380
aggatgacaa ggtgttccct gggggcagcc acacctatgt gtggcaggtg ctgaaggaga 1440
atggccccat ggcctctgac cccctgtgcc tgacctacag ctacctgagc catgtggacc 1500
tggtgaagga cctgaactct ggcctgattg gggccctgct ggtgtgcagg gagggcagcc 1560
tggccaagga gaagacccag accctgcaca agttcatcct gctgtttgct gtgtttgatg 1620
agggcaagag ctggcactct gaaaccaaga acagcctgat gcaggacagg gatgctgcct 1680
ctgccagggc ctggcccaag atgcacactg tgaatggcta tgtgaacagg agcctgcctg 1740
gcctgattgg ctgccacagg aagtctgtgt actggcatgt gattggcatg ggcaccaccc 1800
ctgaggtgca cagcatcttc ctggagggcc acaccttcct ggtcaggaac cacaggcagg 1860
ccagcctgga gatcagcccc atcaccttcc tgactgccca gaccctgctg atggacctgg 1920
gccagttcct gctgttctgc cacatcagca gccaccagca tgatggcatg gaggcctatg 1980
tgaaggtgga cagctgccct gaggagcccc agctgaggat gaagaacaat gaggaggctg 2040
aggactatga tgatgacctg actgactctg agatggatgt ggtgaggttt gatgatgaca 2100
acagccccag cttcatccag atcaggtctg tggccaagaa gcaccccaag acctgggtgc 2160
actacattgc tgctgaggag gaggactggg actatgcccc cctggtgctg gcccctgatg 2220
acaggagcta caagagccag tacctgaaca atggccccca gaggattggc aggaagtaca 2280
agaaggtcag gttcatggcc tacactgatg aaaccttcaa gaccagggag gccatccagc 2340
atgagtctgg catcctgggc cccctgctgt atggggaggt gggggacacc ctgctgatca 2400
tcttcaagaa ccaggccagc aggccctaca acatctaccc ccatggcatc actgatgtga 2460
ggcccctgta cagcaggagg ctgcccaagg gggtgaagca cctgaaggac ttccccatcc 2520
tgcctgggga gatcttcaag tacaagtgga ctgtgactgt ggaggatggc cccaccaagt 2580
ctgaccccag gtgcctgacc agatactaca gcagctttgt gaacatggag agggacctgg 2640
cctctggcct gattggcccc ctgctgatct gctacaagga gtctgtggac cagaggggca 2700
accagatcat gtctgacaag aggaatgtga tcctgttctc tgtgtttgat gagaacagga 2760
gctggtacct gactgagaac atccagaggt tcctgcccaa ccctgctggg gtgcagctgg 2820
aggaccctga gttccaggcc agcaacatca tgcacagcat caatggctat gtgtttgaca 2880
gcctgcagct gtctgtgtgc ctgcatgagg tggcctactg gtacatcctg agcattgggg 2940
cccagactga cttcctgtct gtgttcttct ctggctacac cttcaagcac aagatggtgt 3000
atgaggacac cctgaccctg ttccccttct ctggggagac tgtgttcatg agcatggaga 3060
accctggcct gtggattctg ggctgccaca actctgactt caggaacagg ggcatgactg 3120
ccctgctgaa agtctccagc tgtgacaaga acactgggga ctactatgag gacagctatg 3180
aggacatctc tgcctacctg ctgagcaaga acaatgccat tgagcccagg agcttcagcc 3240
agaacccccc agtgctgaag aggcaccaga gggagatcac caggaccacc ctgcagtctg 3300
accaggagga gattgactat gatgacacca tctctgtgga gatgaagaag gaggactttg 3360
acatctacga cgaggacgag aaccagagcc ccaggagctt ccagaagaag accaggcact 3420
acttcattgc tgctgtggag aggctgtggg actatggcat gagcagcagc ccccatgtgc 3480
tgaggaacag ggcccagtct ggctctgtgc cccagttcaa gaaggtggtg ttccaggagt 3540
tcactgatgg cagcttcacc cagcccctgt acagagggga gctgaatgag cacctgggcc 3600
tgctgggccc ctacatcagg gctgaggtgg aggacaacat catggtgacc ttcaggaacc 3660
aggccagcag gccctacagc ttctacagca gcctgatcag ctatgaggag gaccagaggc 3720
agggggctga gcccaggaag aactttgtga agcccaatga aaccaagacc tacttctgga 3780
aggtgcagca ccacatggcc cccaccaagg atgagtttga ctgcaaggcc tgggcctact 3840
tctctgatgt ggacctggag aaggatgtgc actctggcct gattggcccc ctgctggtgt 3900
gccacaccaa caccctgaac cctgcccatg gcaggcaggt gactgtgcag gagtttgccc 3960
tgttcttcac catctttgat gaaaccaaga gctggtactt cactgagaac atggagagga 4020
actgcagggc cccctgcaac atccagatgg aggaccccac cttcaaggag aactacaggt 4080
tccatgccat caatggctac atcatggaca ccctgcctgg cctggtgatg gcccaggacc 4140
agaggatcag gtggtacctg ctgagcatgg gcagcaatga gaacatccac agcatccact 4200
tctctggcca tgtgttcact gtgaggaaga aggaggagta caagatggcc ctgtacaacc 4260
tgtaccctgg ggtgtttgag actgtggaga tgctgcccag caaggctggc atctggaggg 4320
tggagtgcct gattggggag cacctgcatg ctggcatgag caccctgttc ctggtgtaca 4380
gcaacaagtg ccagaccccc ctgggcatgg cctctggcca catcagggac ttccagatca 4440
ctgcctctgg ccagtatggc cagtgggccc ccaagctggc caggctgcac tactctggca 4500
gcatcaatgc ctggagcacc aaggagccct tcagctggat caaggtggac ctgctggccc 4560
ccatgatcat ccatggcatc aagacccagg gggccaggca gaagttcagc agcctgtaca 4620
tcagccagtt catcatcatg tacagcctgg atggcaagaa gtggcagacc tacaggggca 4680
acagcactgg caccctgatg gtgttctttg gcaatgtgga cagctctggc atcaagcaca 4740
acatcttcaa cccccccatc attgccagat acatcaggct gcaccccacc cactacagca 4800
tcaggagcac cctgaggatg gagctgatgg gctgtgacct gaacagctgc agcatgcccc 4860
tgggcatgga gagcaaggcc atctctgatg cccagatcac tgccagcagc tacttcacca 4920
acatgtttgc cacctggagc cccagcaagg ccaggctgca cctgcagggc aggagcaatg 4980
cctggaggcc ccaggtcaac aaccccaagg agtggctgca ggtggacttc cagaagacca 5040
tgaaggtgac tggggtgacc acccaggggg tgaagagcct gctgaccagc atgtatgtga 5100
aggagttcct gatcagcagc agccaggatg gccaccagtg gaccctgttc ttccagaatg 5160
gcaaggtgaa ggtgttccag ggcaaccagg acagcttcac ccctgtggtg aacagcctgg 5220
acccccccct gctgaccaga tacctgagga ttcaccccca gagctgggtg caccagattg 5280
ccctgaggat ggaggtgctg ggctgtgagg cccaggacct gtactgacct cgaggaataa 5340
aggaaattta ttttcattgc aatagtgtgt tggttttttg tgtcacgtgg cggccgcagg 5400
aacccctagt gatggagttg gccactccct ctctgcgcgc tcgctcgctc actgaggccg 5460
ggcgaccaaa ggtcgcccga cgcccgggct ttgcccgggc ggcctcagtg agcgagcgag 5520
cgcgcagaga gggagtggcc aa 5542
<---

Claims (28)

1. Фармацевтическая композиция для лечения гемофилии А, содержащая рекомбинантный вирус ААВ5-FVIII-SQ, буферное вещество, изотонический агент, объемообразующий агент и поверхностно-активное вещество, где состав содержит
а) фосфат натрия в концентрации от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 3 мг/мл, хлорид натрия в концентрации от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 20 мг/мл, маннит в концентрации от приблизительно 5 мг/мл до приблизительно 40 мг/мл и полоксамер 188 в концентрации от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 4 мг/мл, или
b) двухосновный фосфат натрия в концентрации приблизительно 3,05 мг/мл, одноосновный фосфат натрия в концентрации приблизительно 0,23 мг/мл, хлорид натрия в концентрации приблизительно 8,18 мг/мл, маннит в концентрации приблизительно 20 мг/мл, и полоксамер 188 в концентрации приблизительно 2 мг/мл.
2. Фармацевтическая композиция по п. 1, которая является жидкой.
3. Фармацевтическая композиция по п. 1 или 2, которая содержит указанный кодирующий FVIII ААВ-вирус в концентрации от приблизительно 1E12 вг/мл до приблизительно 2E14 вг/мл.
4. Фармацевтическая композиция по п. 3, которая содержит указанный кодирующий FVIII ААВ-вирус в концентрации приблизительно 2E13 вг/мл.
5. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-4, которая пригодна для внутривенного введения пациенту, страдающему от гемофилии A.
6. Способ лечения субъекта, страдающего от гемофилии A, включающий введение указанному субъекту фармацевтической композиции по любому из пп. 1-5.
7. Способ уменьшения времени кровотечения при эпизоде кровотечения у субъекта, страдающего от гемофилии A, включающий введение указанному субъекту фармацевтической композиции по любому из пп. 1-5.
8. Способ повышения экспрессии белка фактора VIII у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение указанному субъекту фармацевтической композиции по любому из пп. 1-5.
9. Способ по любому из пп. 6-8, характеризующийся тем, что указанный рекомбинантный кодирующий FVIII ААВ-вирус представляет собой ААВ5-FVIII-SQ.
10. Способ по любому из пп. 6-9, характеризующийся тем, что указанный этап введения осуществляют путем внутривенного введения.
11. Способ по любому из пп. 6-10, характеризующийся тем, что указанный этап введения включает введение указанному субъекту от приблизительно 1E12 вг/кг до приблизительно 1E14 вг/кг рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса.
12. Способ по любому из пп. 6-11, характеризующийся тем, что указанный этап введения включает введение указанному субъекту от приблизительно 6E12 вг/кг до приблизительно 6E13 вг/кг рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса.
13. Способ по любому из пп. 6-12, который приводит к экспрессии у указанного субъекта по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл функционального белка фактора VIII.
14. Способ по любому из пп. 6-13, характеризующийся тем, что указанный субъект экспрессирует по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл функционального белка фактора VIII через 3 или более недель после указанного введения.
15. Способ по любому из пп. 6-14, который приводит к экспрессии у указанного субъекта по меньшей мере приблизительно 1 МЕ/дл функционального белка фактора VIII.
16. Способ по любому из пп. 6-15, характеризующийся тем, что указанный субъект экспрессирует по меньшей мере приблизительно 1 МЕ/дл функционального белка фактора VIII через 3 или более недель после указанного введения.
17. Способ по любому из пп. 6-16, который приводит к повышению функциональной активности FVIII у указанного субъекта на по меньшей мере приблизительно 1 МЕ/дл.
18. Способ по любому из пп. 6-17, характеризующийся тем, что указанного субъекта лечат кортикостероидом в концентрации в диапазоне от 5 мг/день до 60 мг/день.
19. Способ по п. 8, характеризующийся тем, что лечение кортикостероидами осуществляют профилактически.
20. Способ по п. 18 или 19, характеризующийся тем, что лечение кортикостероидами осуществляют терапевтически.
21. Способ по любому из пп. 6-20, характеризующийся тем, что указанного субъекта лечат кортикостероидом в концентрации в диапазоне от 5 мг/день до 60 мг/день в течение длительного периода времени, равного по меньшей мере 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 или более недель.
22. Способ по любому из пп. 6-21, дополнительно включающий этап определения отсутствия или присутствия антител к капсиду ААВ в сыворотке указанного субъекта после введения указанного терапевтически эффективного количества указанного рекомбинантного кодирующего FVIII ААВ-вируса.
23. Способ по п. 22, дополнительно включающий этап введения эффективного количества кортикостероида указанному субъекту после определения присутствия антител к капсиду ААВ в сыворотке указанного субъекта.
24. Способ лечения субъекта, страдающего от гемофилии A, включающий этапы (i) определения отсутствия антител к капсиду ААВ5 в сыворотке указанного субъекта, и (ii) введения указанному субъекту фармацевтической композиции по любому из пп. 1-5.
25. Способ лечения субъекта, страдающего от гемофилии A, включающий этапы (i) введения указанному субъекту фармацевтической композиции по любому из пп. 1-5 и, (ii) после введения указанной фармацевтической композиции, определения отсутствия или присутствия антител к капсиду ААВ5 в сыворотке указанного субъекта.
26. Способ по п. 25, который дополнительно включает этап введения указанному субъекту эффективного количества кортикостероида после определения присутствия антител к капсиду ААВ в сыворотке указанного субъекта.
RU2018114888A 2015-09-24 2016-09-23 Векторы фактора fviii на основе аденоассоциированных вирусов, соответствующие вирусные частицы и содержащие их терапевтические композиции RU2742352C2 (ru)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562232242P 2015-09-24 2015-09-24
US62/232,242 2015-09-24
US201662323182P 2016-04-15 2016-04-15
US62/323,182 2016-04-15
US201662365544P 2016-07-22 2016-07-22
US62/365,544 2016-07-22
PCT/US2016/053269 WO2017053677A1 (en) 2015-09-24 2016-09-23 Adeno-associated virus factor viii vectors, associated viral particles and therapeutic formulations comprising the same

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020126034A Division RU2020126034A (ru) 2015-09-24 2016-09-23 Векторы фактора fviii на основе аденоассоциированных вирусов, соответствующие вирусные частицы и содержащие их терапевтические композиции

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2018114888A3 RU2018114888A3 (ru) 2019-10-24
RU2018114888A RU2018114888A (ru) 2019-10-24
RU2742352C2 true RU2742352C2 (ru) 2021-02-05

Family

ID=57113749

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018114888A RU2742352C2 (ru) 2015-09-24 2016-09-23 Векторы фактора fviii на основе аденоассоциированных вирусов, соответствующие вирусные частицы и содержащие их терапевтические композиции
RU2020126034A RU2020126034A (ru) 2015-09-24 2016-09-23 Векторы фактора fviii на основе аденоассоциированных вирусов, соответствующие вирусные частицы и содержащие их терапевтические композиции

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020126034A RU2020126034A (ru) 2015-09-24 2016-09-23 Векторы фактора fviii на основе аденоассоциированных вирусов, соответствующие вирусные частицы и содержащие их терапевтические композиции

Country Status (19)

Country Link
US (3) US10512675B2 (ru)
EP (1) EP3352787A1 (ru)
JP (2) JP2018535929A (ru)
KR (1) KR20180053335A (ru)
CN (1) CN108778323A (ru)
AU (2) AU2016326602A1 (ru)
BR (1) BR112018006074A2 (ru)
CA (1) CA2999297A1 (ru)
CL (1) CL2018000740A1 (ru)
IL (2) IL257939B2 (ru)
MA (1) MA42934A (ru)
MX (1) MX2018003702A (ru)
NZ (1) NZ780570A (ru)
PE (2) PE20181338A1 (ru)
PH (1) PH12018500594A1 (ru)
RU (2) RU2742352C2 (ru)
TW (2) TWI756185B (ru)
WO (1) WO2017053677A1 (ru)
ZA (1) ZA201801657B (ru)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112017009497A2 (pt) 2014-11-05 2018-02-06 Voyager Therapeutics, Inc. polinucleotídeos de aadc para o tratamento da doença de parkinson
IL257939B2 (en) * 2015-09-24 2023-03-01 Biomarin Pharm Inc Adeno-associated virus factor 8 vectors, associated virus particles, and medicinal formulations comprising the same
BR112018008519A2 (pt) 2015-10-28 2018-11-06 Sangamo Therapeutics Inc construtos específicos de fígado, cassetes de expressão de fator viii e métodos de uso dos mesmos
JP6994018B2 (ja) 2016-07-26 2022-01-14 バイオマリン ファーマシューティカル インコーポレイテッド 新規アデノ随伴ウイルスキャプシドタンパク質
JOP20190269A1 (ar) 2017-06-15 2019-11-20 Voyager Therapeutics Inc بولي نوكليوتيدات aadc لعلاج مرض باركنسون
CN111344412A (zh) * 2017-07-10 2020-06-26 优尼科Ip有限公司 人类中aav基因疗法的手段和方法
CN111163796A (zh) * 2017-08-01 2020-05-15 星火治疗有限公司 因子viii(fviii)基因治疗方法
US20210093735A1 (en) * 2018-04-26 2021-04-01 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for treatment of hemophilia
CN113164762A (zh) 2018-05-09 2021-07-23 生物马林药物股份有限公司 苯丙酮尿症的治疗方法
TW202016298A (zh) * 2018-05-14 2020-05-01 美商拜奧馬林製藥公司 Aav 載體於幼年受試者中之穩定表現
TW202005978A (zh) 2018-05-14 2020-02-01 美商拜奧馬林製藥公司 新穎肝靶向腺相關病毒載體
CA3106590A1 (en) * 2018-07-16 2020-01-23 Baxalta Incorporated Gene therapy of hemophilia a using viral vectors encoding recombinant fviii variants with increased expression
KR20210039428A (ko) * 2018-08-03 2021-04-09 상가모 테라퓨틱스, 인코포레이티드 인자 viii의 발현에 의한 개선된 임상 파라미터
WO2020041773A1 (en) * 2018-08-24 2020-02-27 Spark Therapeutics, Inc. Optimized promoter sequences, intron-free expression constructs and methods of use
AU2020221340A1 (en) 2019-02-15 2021-09-16 Bayer Healthcare Llc Gene editing for hemophilia A with improved Factor VIII expression
CN114450412A (zh) * 2019-06-05 2022-05-06 奥查德疗法(欧洲)有限公司 用于修饰真核细胞的组合物和方法
JP2023501263A (ja) 2019-11-01 2023-01-18 フリーライン セラピューティクス リミテッド 第ｖｉｉｉ因子ポリペプチド
CN114981299A (zh) * 2019-12-12 2022-08-30 武田药品工业株式会社 使用编码具有增加的表达的重组fviii变体的病毒载体的a型血友病的基因疗法
KR102167829B1 (ko) * 2020-02-10 2020-10-20 주식회사 이노테라피 아데노연관바이러스용 안정화제 및 이를 이용한 아데노연관바이러스의 안정화 방법
TW202208632A (zh) 2020-05-27 2022-03-01 美商同源醫藥公司 用於恢復ｐａｈ基因功能的腺相關病毒組成物及其使用方法
WO2022094461A1 (en) 2020-11-02 2022-05-05 Biomarin Pharmaceutical Inc. Process for enriching adeno-associated virus
CN115554418B (zh) * 2022-11-22 2023-04-14 四川至善唯新生物科技有限公司 一种重组腺相关病毒载体的药物组合物及其用途

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011005968A1 (en) * 2009-07-08 2011-01-13 Ucl Business Plc Codon-optimized factor vi i i variants and synthetic liver-specific promoter
RU2531493C2 (ru) * 2007-11-01 2014-10-20 Юниверсити Оф Рочестер Рекомбинантный фактор viii, обладающий повышенной стабильностью
US20150071883A1 (en) * 2013-09-12 2015-03-12 Biomarin Pharmaceutical Inc. Adeno-Associated Virus Factor VIII Vectors

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3485810T2 (de) 1983-05-27 1992-12-10 Texas A & M University Syst Verfahren zur herstellung eines rekombinanten baculovirus-expressionsvektors.
US4745051A (en) 1983-05-27 1988-05-17 The Texas A&M University System Method for producing a recombinant baculovirus expression vector
DK518384A (da) 1984-01-31 1985-07-01 Idaho Res Found Vektor til fremstilling af et gen-produkt i insektceller, fremgangsmaade til dens fremstilling samt dens anvendelse
US6204059B1 (en) 1994-06-30 2001-03-20 University Of Pittsburgh AAV capsid vehicles for molecular transfer
WO1998009524A1 (en) 1996-09-06 1998-03-12 Chiron Corporation Methods and compositions for liver specific delivery of therapeutic molecules using recombinant aav vectors
JP2002516345A (ja) * 1998-05-27 2002-06-04 セル ジェネシス インコーポレイテッド 第ｖｉｉｉ因子活性のアデノ随伴ウイルスベクター媒介性発現
US6200560B1 (en) 1998-10-20 2001-03-13 Avigen, Inc. Adeno-associated virus vectors for expression of factor VIII by target cells
US6221349B1 (en) 1998-10-20 2001-04-24 Avigen, Inc. Adeno-associated vectors for expression of factor VIII by target cells
US6723551B2 (en) 2001-11-09 2004-04-20 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Production of adeno-associated virus in insect cells
WO2003074714A1 (en) 2002-03-05 2003-09-12 Stichting Voor De Technische Wetenschappen Baculovirus expression system
ATE549037T1 (de) 2004-09-22 2012-03-15 St Jude Childrens Res Hospital Verbesserte expression von faktor-ix in gentherapie-vektoren
US7943374B2 (en) * 2005-08-21 2011-05-17 Markus Hildinger Super-size adeno-associated viral vector harboring a recombinant genome larger than 5.7 kb
US7943379B2 (en) 2008-04-30 2011-05-17 Nationwide Children's Hospital, Inc. Production of rAAV in vero cells using particular adenovirus helpers
KR101337797B1 (ko) * 2010-07-14 2013-12-06 한미사이언스 주식회사 지속형 인간 성장 호르몬 결합체 액상 제제
KR102057540B1 (ko) 2012-02-17 2019-12-19 더 칠드런스 호스피탈 오브 필라델피아 세포, 기관 및 조직으로의 유전자 전이를 위한 ａａｖ 벡터 조성물 및 방법
GB201210357D0 (en) 2012-06-12 2012-07-25 Ucl Business Plc Factor VIII sequences
US20140003880A1 (en) * 2012-06-30 2014-01-02 General Electric Company Ceramic matrix composite and metal attachment configurations
CA2888931C (en) * 2012-10-26 2023-09-05 Vrije Universiteit Brussel Vector for liver-directed gene therapy of hemophilia and methods and use thereof
RS62811B1 (sr) 2015-02-10 2022-02-28 Genzyme Corp Poboljšana isporuka virusnih čestica u strijatum i moždanu koru
TWI707951B (zh) 2015-04-08 2020-10-21 美商健臻公司 過大腺相關載體之製造
IL257939B2 (en) * 2015-09-24 2023-03-01 Biomarin Pharm Inc Adeno-associated virus factor 8 vectors, associated virus particles, and medicinal formulations comprising the same

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2531493C2 (ru) * 2007-11-01 2014-10-20 Юниверсити Оф Рочестер Рекомбинантный фактор viii, обладающий повышенной стабильностью
WO2011005968A1 (en) * 2009-07-08 2011-01-13 Ucl Business Plc Codon-optimized factor vi i i variants and synthetic liver-specific promoter
US20150071883A1 (en) * 2013-09-12 2015-03-12 Biomarin Pharmaceutical Inc. Adeno-Associated Virus Factor VIII Vectors

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
/S0022-3476(67)80017-9. *
Virginia C. Canale, Margaret W. Hilgartner, Carl H. Smith, Philip Lanzowsky "Effect of corticosteroids on factor VIII level", 1967, The Journal of Pediatrics, v. 71(6), p. 878-880, *
Virginia C. Canale, Margaret W. Hilgartner, Carl H. Smith, Philip Lanzowsky "Effect of corticosteroids on factor VIII level", 1967, The Journal of Pediatrics, v. 71(6), p. 878-880, DOI 10.1016/S0022-3476(67)80017-9. *

Also Published As

Publication number Publication date
TW202220690A (zh) 2022-06-01
BR112018006074A2 (pt) 2018-10-09
TWI841908B (zh) 2024-05-11
CL2018000740A1 (es) 2018-06-08
CA2999297A1 (en) 2017-03-30
CN108778323A (zh) 2018-11-09
US10512675B2 (en) 2019-12-24
IL257939B2 (en) 2023-03-01
RU2018114888A3 (ru) 2019-10-24
NZ780570A (en) 2024-08-30
EP3352787A1 (en) 2018-08-01
IL297353A (en) 2022-12-01
NZ740521A (en) 2023-11-24
AU2016326602A1 (en) 2018-03-29
PE20241346A1 (es) 2024-07-03
MX2018003702A (es) 2018-04-30
US11690898B2 (en) 2023-07-04
US20240058423A1 (en) 2024-02-22
PH12018500594A1 (en) 2018-09-24
TW201717999A (zh) 2017-06-01
KR20180053335A (ko) 2018-05-21
IL257939B (en) 2022-11-01
AU2021261832A1 (en) 2021-12-02
JP2022010141A (ja) 2022-01-14
TWI756185B (zh) 2022-03-01
RU2020126034A (ru) 2020-09-02
US20170087219A1 (en) 2017-03-30
RU2018114888A (ru) 2019-10-24
MA42934A (fr) 2018-08-01
PE20181338A1 (es) 2018-08-21
IL257939A (en) 2018-05-31
US20200061161A1 (en) 2020-02-27
ZA201801657B (en) 2021-07-28
WO2017053677A1 (en) 2017-03-30
JP2018535929A (ja) 2018-12-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2742352C2 (ru) Векторы фактора fviii на основе аденоассоциированных вирусов, соответствующие вирусные частицы и содержащие их терапевтические композиции
KR102484396B1 (ko) 아데노-관련된 바이러스 인자 viii 벡터
KR20210008491A (ko) 청소년 대상체에서 aav 벡터의 안정한 발현
JP6473416B2 (ja) 第ｖｉｉｉ因子配列
KR20190100318A (ko) 페닐케톤뇨증을 치료하기 위한 유전자 치료
CN109843930B (zh) 酸性α-葡萄糖苷酶变体及其用途
KR20210092755A (ko) 신경원성 세로이드 리포푸신증에 대한 유전자 요법
US20100137211A1 (en) Methods and compositions for intra-articular coagulation proteins
TW202144575A (zh) 使用ａａｖ及治療調配物之苯酮尿症治療
KR20220098210A (ko) 간-특이적 유전자 요법 벡터를 이용한 유전성 혈관 부종의 치료
KR20220112262A (ko) Nadh 탈수소효소 단백질을 이용한 레버 유전성 시신경병증 치료용 조성물 및 방법
KR20210053902A (ko) 글리코겐 저장 질환 iii 의 치료를 위한 미니-gde
CN114929735A (zh) 因子viii构建体
KR20210148273A (ko) 근육 발현을 위한 하이브리드 프로모터
CN111936172A (zh) 用于治疗视网膜病症的组合物和方法
KR102627561B1 (ko) 레버 유전성 시신경병증의 치료를 위한 조성물 및 방법
US10391144B2 (en) Atherosclerosis inhibition via modulation of monocyte-macrophage phenotype using Apo A-I Milano gene transfer
RU2792432C2 (ru) Стабильная экспрессия векторов на основе аденоассоциированного вируса у несовершеннолетних пациентов
RU2777372C2 (ru) Векторы экспрессии фактора viii на основе аденоассоциированного вируса
KR20230003557A (ko) 스펙트린 융합 도메인을 갖는 소형화 디스트로핀 및 그의 용도
CN112533645A (zh) 通过因子viii的表达改善临床参数
JP2021513871A (ja) Ｆ８遺伝子機能を回復させるためのアデノ随伴ウイルス組成物及びその使用の方法
RU2799048C2 (ru) Улучшение клинических параметров посредством экспрессии фактора viii
RU2788484C2 (ru) Способы лечения фенилкетонурии
WO2024151568A1 (en) Epigenetic modifiers improve aav gene therapy durability