RU2573906C2 - Полученная из моноцита человека стволовая клетка для терапевтического применения и способ ее индукции - Google Patents
Полученная из моноцита человека стволовая клетка для терапевтического применения и способ ее индукции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2573906C2 RU2573906C2 RU2011126165/10A RU2011126165A RU2573906C2 RU 2573906 C2 RU2573906 C2 RU 2573906C2 RU 2011126165/10 A RU2011126165/10 A RU 2011126165/10A RU 2011126165 A RU2011126165 A RU 2011126165A RU 2573906 C2 RU2573906 C2 RU 2573906C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- stem cells
- ipomoea
- monocytes
- solanum
- water
- Prior art date
Links
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 117
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 84
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 17
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title description 14
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 title description 5
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims abstract description 64
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 claims abstract description 64
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 claims abstract description 63
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 37
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 32
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 30
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 23
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 23
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 23
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 claims abstract description 5
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 3
- 230000008816 organ damage Effects 0.000 claims abstract description 3
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 claims abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 67
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 claims description 55
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 40
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 40
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 26
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims description 22
- 235000021506 Ipomoea Nutrition 0.000 claims description 17
- 241000207783 Ipomoea Species 0.000 claims description 17
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 17
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 17
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 16
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 claims description 15
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 claims description 15
- 101150066398 CXCR4 gene Proteins 0.000 claims description 14
- 235000002678 Ipomoea batatas Nutrition 0.000 claims description 13
- 244000017020 Ipomoea batatas Species 0.000 claims description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 11
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 claims description 10
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 9
- 240000007175 Datura inoxia Species 0.000 claims description 8
- 240000001549 Ipomoea eriocarpa Species 0.000 claims description 8
- 235000005146 Ipomoea eriocarpa Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 claims description 8
- 102000008730 Nestin Human genes 0.000 claims description 7
- 108010088225 Nestin Proteins 0.000 claims description 7
- 102000016971 Proto-Oncogene Proteins c-kit Human genes 0.000 claims description 7
- 108010014608 Proto-Oncogene Proteins c-kit Proteins 0.000 claims description 7
- 101150086694 SLC22A3 gene Proteins 0.000 claims description 7
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 7
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 7
- 210000005055 nestin Anatomy 0.000 claims description 7
- 101000738354 Homo sapiens CD9 antigen Proteins 0.000 claims description 6
- 240000007233 Ipomoea indica Species 0.000 claims description 6
- 240000002307 Solanum ptychanthum Species 0.000 claims description 6
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 6
- 240000004204 Brugmansia arborea Species 0.000 claims description 5
- 240000004160 Capsicum annuum Species 0.000 claims description 5
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 claims description 5
- 244000265736 Nelumbo pentapetala Species 0.000 claims description 5
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 claims description 5
- 235000002597 Solanum melongena Nutrition 0.000 claims description 5
- 244000061458 Solanum melongena Species 0.000 claims description 5
- 235000002594 Solanum nigrum Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000000341 Solanum ptychanthum Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000012264 purified product Substances 0.000 claims description 5
- 241000886543 Brugmansia Species 0.000 claims description 4
- 102100037904 CD9 antigen Human genes 0.000 claims description 4
- 235000002567 Capsicum annuum Nutrition 0.000 claims description 4
- 240000008574 Capsicum frutescens Species 0.000 claims description 4
- 235000002568 Capsicum frutescens Nutrition 0.000 claims description 4
- 241000207782 Convolvulaceae Species 0.000 claims description 4
- 240000008853 Datura stramonium Species 0.000 claims description 4
- 244000062720 Pennisetum compressum Species 0.000 claims description 4
- 240000007377 Petunia x hybrida Species 0.000 claims description 4
- 235000000255 Solanum americanum Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000002560 Solanum lycopersicum Nutrition 0.000 claims description 4
- 244000171202 Solanum mammosum Species 0.000 claims description 4
- 235000013146 Solanum mammosum Nutrition 0.000 claims description 4
- 244000061457 Solanum nigrum Species 0.000 claims description 4
- 239000001511 capsicum annuum Substances 0.000 claims description 4
- 239000001728 capsicum frutescens Substances 0.000 claims description 4
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 claims 2
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 14
- 239000012676 herbal extract Substances 0.000 abstract 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 29
- 230000032459 dedifferentiation Effects 0.000 description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 15
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 13
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 13
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- -1 c- are expressed Kit Proteins 0.000 description 12
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 12
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 11
- 101000922348 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 10
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 9
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 9
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 8
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 8
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 7
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 7
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 6
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 6
- 150000008280 chlorinated hydrocarbons Chemical class 0.000 description 6
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 6
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 6
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 6
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 5
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 5
- 102100031650 C-X-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 description 5
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 5
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 5
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 5
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 5
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 5
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 5
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 5
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 5
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 5
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 5
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 4
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 4
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 4
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 4
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 4
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 4
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 4
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 4
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 4
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 4
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 3
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 3
- 208000006096 Attention Deficit Disorder with Hyperactivity Diseases 0.000 description 3
- 208000036864 Attention deficit/hyperactivity disease Diseases 0.000 description 3
- 206010003805 Autism Diseases 0.000 description 3
- 208000020706 Autistic disease Diseases 0.000 description 3
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 3
- 206010006458 Bronchitis chronic Diseases 0.000 description 3
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 3
- 206010007572 Cardiac hypertrophy Diseases 0.000 description 3
- 208000001148 Cartilage Fractures Diseases 0.000 description 3
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 3
- 102000001187 Collagen Type III Human genes 0.000 description 3
- 108010069502 Collagen Type III Proteins 0.000 description 3
- 208000020406 Creutzfeldt Jacob disease Diseases 0.000 description 3
- 208000003407 Creutzfeldt-Jakob Syndrome Diseases 0.000 description 3
- 208000010859 Creutzfeldt-Jakob disease Diseases 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 241000208296 Datura Species 0.000 description 3
- 208000032131 Diabetic Neuropathies Diseases 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 3
- 206010016228 Fasciitis Diseases 0.000 description 3
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 3
- 206010048858 Ischaemic cardiomyopathy Diseases 0.000 description 3
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 208000002804 Osteochondritis Diseases 0.000 description 3
- 201000009859 Osteochondrosis Diseases 0.000 description 3
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 3
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 3
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 206010063897 Renal ischaemia Diseases 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 3
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 230000003367 anti-collagen effect Effects 0.000 description 3
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 3
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 3
- 208000015802 attention deficit-hyperactivity disease Diseases 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 3
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 3
- 208000007451 chronic bronchitis Diseases 0.000 description 3
- 230000009194 climbing Effects 0.000 description 3
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 description 3
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 208000035231 inattentive type attention deficit hyperactivity disease Diseases 0.000 description 3
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 3
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 3
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 3
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 3
- 210000000944 nerve tissue Anatomy 0.000 description 3
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 description 3
- 208000021722 neuropathic pain Diseases 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 3
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 3
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 3
- 208000005987 polymyositis Diseases 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 208000037803 restenosis Diseases 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 206010056370 Congestive cardiomyopathy Diseases 0.000 description 2
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 201000010046 Dilated cardiomyopathy Diseases 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010058398 Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor Proteins 0.000 description 2
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 101710098398 Probable alanine aminotransferase, mitochondrial Proteins 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 210000002894 multi-fate stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMEKTLLACGGQGP-LKRDHDLWSA-N (2R,4S,5R,6R)-5-acetyl-5-amino-2,4-dihydroxy-6-[(1R,2R)-1,2,3-trihydroxypropyl]oxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)[C@@]1(N)[C@@H](O)C[C@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO CMEKTLLACGGQGP-LKRDHDLWSA-N 0.000 description 1
- YFPWTYBTBPCIQD-RZYRCRQQSA-N (2R,4S,5R,6R)-5-acetyl-5-amino-2,4-dihydroxy-6-[(1R,2S)-1,2,3-trihydroxy-4-oxopentyl]oxane-2-carboxylic acid Chemical compound C(C)(=O)[C@]1([C@H](C[C@@](C(O)=O)(O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)C(O)C(C)=O)O)N YFPWTYBTBPCIQD-RZYRCRQQSA-N 0.000 description 1
- UPLLQJUZZIYKHI-DFWYDOINSA-N (2s)-2-aminopentanedioic acid;2-oxobutanedioic acid Chemical compound OC(=O)CC(=O)C(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O UPLLQJUZZIYKHI-DFWYDOINSA-N 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 description 1
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-Dichloroethane Chemical compound ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGPBVJWCIDNDPN-UHFFFAOYSA-N 2-(dimethylamino)benzaldehyde Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=C1C=O DGPBVJWCIDNDPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-CBPJZXOFSA-N 2-amino-2-deoxy-D-mannopyranose Chemical compound N[C@@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-CBPJZXOFSA-N 0.000 description 1
- ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 2-deoxy-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)CC=O ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- CERZMXAJYMMUDR-QBTAGHCHSA-N 5-amino-3,5-dideoxy-D-glycero-D-galacto-non-2-ulopyranosonic acid Chemical compound N[C@@H]1[C@@H](O)CC(O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO CERZMXAJYMMUDR-QBTAGHCHSA-N 0.000 description 1
- 229920000310 Alpha glucan Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 1
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 description 1
- NWFRTAWIKBCJRH-UHFFFAOYSA-N C1C2=C1CC=C2 Chemical compound C1C2=C1CC=C2 NWFRTAWIKBCJRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010061299 CXCR4 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000012000 CXCR4 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 1
- 235000008534 Capsicum annuum var annuum Nutrition 0.000 description 1
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 description 1
- 241000207892 Convolvulus Species 0.000 description 1
- 235000005956 Cosmos caudatus Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-VANFPWTGSA-N D-mannopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-VANFPWTGSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 229920002271 DEAE-Sepharose Polymers 0.000 description 1
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108090000386 Fibroblast Growth Factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100031706 Fibroblast growth factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 1
- 229920002670 Fructan Polymers 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 1
- 240000008436 Ipomoea aquatica Species 0.000 description 1
- 235000019004 Ipomoea aquatica Nutrition 0.000 description 1
- 240000001244 Ipomoea hederifolia Species 0.000 description 1
- 240000002448 Ipomoea quamoclit Species 0.000 description 1
- 240000007049 Juglans regia Species 0.000 description 1
- 235000009496 Juglans regia Nutrition 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-HNFCZKTMSA-N L-idopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-HNFCZKTMSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108010031801 Lipopolysaccharide Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229920000057 Mannan Polymers 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-OZRXBMAMSA-N N-acetyl-beta-D-mannosamine Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-OZRXBMAMSA-N 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 235000000556 Paullinia cupana Nutrition 0.000 description 1
- 240000003444 Paullinia cupana Species 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 241000871674 Petunia hybrid cultivar Species 0.000 description 1
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 1
- 240000003889 Piper guineense Species 0.000 description 1
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 1
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 1
- 108010050808 Procollagen Proteins 0.000 description 1
- 239000012614 Q-Sepharose Substances 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 235000008406 SarachaNachtschatten Nutrition 0.000 description 1
- 241000207763 Solanum Species 0.000 description 1
- 235000002634 Solanum Nutrition 0.000 description 1
- 235000004790 Solanum aculeatissimum Nutrition 0.000 description 1
- 235000008424 Solanum demissum Nutrition 0.000 description 1
- 235000018253 Solanum ferox Nutrition 0.000 description 1
- 235000000208 Solanum incanum Nutrition 0.000 description 1
- 235000013131 Solanum macrocarpon Nutrition 0.000 description 1
- 235000009869 Solanum phureja Nutrition 0.000 description 1
- 235000017622 Solanum xanthocarpum Nutrition 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-FPRJBGLDSA-N beta-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-FPRJBGLDSA-N 0.000 description 1
- 229960002246 beta-d-glucopyranose Drugs 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N beta-melibiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 1
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 1
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 1
- ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(CO)C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001549 ceramide group Chemical group 0.000 description 1
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022831 chronic renal failure syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000006334 disulfide bridging Effects 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000003974 emollient agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000002662 enteric coated tablet Substances 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 238000007380 fibre production Methods 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000007941 film coated tablet Substances 0.000 description 1
- 244000247968 finger leaf morning glory Species 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229960003082 galactose Drugs 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000003197 gene knockdown Methods 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 238000007489 histopathology method Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- AIHDCSAXVMAMJH-GFBKWZILSA-N levan Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@](CO)(CO[C@@H]2[C@H]([C@H](O)[C@@](O)(CO)O2)O)O1 AIHDCSAXVMAMJH-GFBKWZILSA-N 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000002075 main ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000000311 mannosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 102000035118 modified proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005573 modified proteins Proteins 0.000 description 1
- 210000003003 monocyte-macrophage precursor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000869 mutational effect Effects 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N neuraminic acid Natural products NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N newbouldiamide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)C(CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- YEENEYXBHNNNGV-XEHWZWQGSA-M sodium;3-acetamido-5-[acetyl(methyl)amino]-2,4,6-triiodobenzoate;(2r,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound [Na+].CC(=O)N(C)C1=C(I)C(NC(C)=O)=C(I)C(C([O-])=O)=C1I.O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 YEENEYXBHNNNGV-XEHWZWQGSA-M 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 150000003410 sphingosines Chemical class 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000007940 sugar coated tablet Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 229960001479 tosylchloramide sodium Drugs 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 235000020234 walnut Nutrition 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 229920001221 xylan Polymers 0.000 description 1
- 150000004823 xylans Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/193—Colony stimulating factors [CSF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
- A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/06—Antiarrhythmics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0645—Macrophages, e.g. Kuepfer cells in the liver; Monocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/70—Undefined extracts
- C12N2500/76—Undefined extracts from plants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/22—Colony stimulating factors (G-CSF, GM-CSF)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Neurology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии. Предложены стволовые клетки, полученные культивированием моноцитов человека в присутствии (i) M-CSF с концентрацией от 5 до 100 нг/мл и (ii) по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида с концентрацией от 1 до 100 мкг/мл и растворимого в воде растительного экстракта, экстрагированного методом экстракции Folch, с концентрацией от 0,1 до 100 мкг/мл, посредством этого дедифференцируя моноциты, где экспрессия гена CSCR4 указанных стволовых клеток более чем в три или четыре раза больше по сравнению с экспрессией стволовыми клетками, полученными путем культивирования моноцитов человека в присутствии M-CSF и IL-3, и экспрессия гена CSCR4 указанных стволовых клеток более чем в два или три раза больше по сравнению с экспрессией мезенхимальными стволовыми клетками, полученными из костного мозга, для лечения заболеваний, связанных с клеточными повреждениями, повреждениями тканей или органов. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл., 2 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к способу получения клеток для применения в клеточных лекарственных средствах благодаря быстро дифференцирующимся клеткам, которые должным образом дифференцированы в живом организме. Настоящее изобретение также относится к средству для лечения заболеваний, связанных с клеточными повреждениями, повреждениями тканей или органов. Настоящее изобретение, кроме того, относится к клеточному лекарственному средству, способу получения стволовых клеток, культуральной среде для дифференцирующихся моноцитов, средству, индуцирующему дедифференцирование, набору клеточного лекарственного средства, набору для получения дедифференцированных клеток и фармацевтической композиции, которые эффективно индуцируют клеточную дедифференциацию, и к стволовым клеткам.
Предшествующий уровень техники
Некоторое время тому назад внимание исследователей было привлечено к медицинским процедурам, направленным на содействие регенерации тканей для замещения клеток, утраченных по какой-либо причине, в качестве основного лечения заболеваний. В последние годы дальнейшее развитие получила концепция клеточных лекарственных средств, которые предназначены для регенерации и восстановления тканей в патологическом участке посредством взаимодействия межклеточных биологически активных веществ путем инъекции стволовых клеток или клеток-предшественников клеток ткани.
В связи с этим, было много сообщений о том, что дифференцированные клетки в ткани, например моноциты, происходящие из периферической крови, дифференцируются в стволовые клетки при культивировании в присутствии специфических цитокинов.
Однако, когда стволовые клетки или тканевые клетки-предшественники вводят в живой организм в виде клеточного лекарственного средства, то процентная доля клеток, поступающих в мишеневую поврежденную область, не всегда высока и непостоянна. Для решения этой проблемы требуется получение большого количества клеток. Кроме того, поведение клеток, которые распределяются в областях, отличных от области-мишени, еще не было детально исследовано, и остается вопрос побочных эффектов. Кроме того, хотя для усиленного терапевтического эффекта необходимо введение большого количества клеток, получение аутологичных клеток за короткий период времени представляется затруднительным.
Недавно стало ясно, что происходит феномен, называемый «хомингом». При этом феномене происходит экспрессия SDF1 (происходящий из клеток стромы фактор 1) или VEGF (сосудистый эндотелиальный клеточный фактор роста) поврежденной области в условиях ишемии; как части системы биологической репарации эти факторы служат в качестве индуцируемых молекул; и клетки, экспрессирующие рецепторы, соответствующие этим индуцируемым молекулам, принудительно направляются в поврежденную область. Рецепторами этих факторов являются CXCR4 для SDF1 и VEGFR для VEGF. Например, в непатентном документе 1 сообщается, что рана не заживает, если SDF1 блокируется в ишемической области, или когда клетки, экспрессирующие CXCR4, удаляются из крови.
Fändrich (непатентный документ 2), Huberman (непатентный документ 3) и т.д. сообщают о способах получения плюрипотентных стволовых клеток из моноцитов человека путем индукции дедифференциации. В этих способах для инкубации используются различные цитокины, включая M-CSF (фактор, стимулирующий колонии макрофагов). Каждый способ культивирования показал, что некоторые недифференцированные маркеры становились положительными. Кроме того, Kuwana et al. (непатентный документ 4) сообщают, что мультипотентные стволовые клетки (MOMC) могут быть индуцированы из мононуклеарных клеток человека с использованием культурального планшета, на который наносится фибронектин.
Список ссылок
Непатентный документ 1: Nat. Med. 2004 Aug; 10 (8): 858-64
Непатентный документ 2: Ruhnke M, Fändrich F, "Differentiation of in vitro-modified human peripheral blood monocytes into hepatocyte-like and pancreatic islet-like cells", Gastroenterology, 128 (2005) 1774
Непатентный документ 3: Yong Zhao, Eliezer Huberman, "A human peripheral blood monocyte-derived subset acts as pluripotent stem cells", PNAS 100 (2003) 2426
Непатентный документ 4: Kuwana M. et al., "Human circulating CD14+ monocytes as a source of progenitors that exhibit mesenchymal cell differentiation", J. Leukoc. Biol., 74 (2003) 833
Непатентный документ 5: Folch J., Lees M., Sloane-Stanley G. H., "A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues", J. Biol. Chem., 226, 497-509 (1957)
Краткое описание сущности изобретения
Техническая задача
Получение стволовых клеток, которые эффективно поступают в область-мишень, считалось проблематичным в области клеточных лекарственных средств. Целью настоящего изобретения является получение таких стволовых клеток, способ массового получения стволовых клеток за короткий срок и фармацевтическая композиция для индукции стволовых клеток.
Другой целью изобретения является получение средства для лечения заболеваний, связанных с поврежденными клетками, тканями или органами.
Еще одной целью изобретения является получение культуральной среды, индуцирующей дедифференциацию, средства, индуцирующего дедифференциацию, набора клеточного лекарственного средства, набора для получения дедифференцированных клеток и стволовых клеток.
Решение задачи
В качестве решения указанных выше задач, заявители обнаружили, что культивирование моноцитов периферической крови в течение короткого периода времени в присутствии индуцирующего дедифференциацию средства по настоящему изобретению продуцирует большое количество дедифференцированных клеток. Заявители также обнаружили, что непосредственное введение фармацевтической композиции по настоящему изобретению в живой организм значительно эффективно для лечения связанных с повреждением заболеваний. Заявители, кроме того, обнаружили, что введение по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта, вызывает дедифференциацию моноцитов в клетки, способные восстанавливать поврежденные ткани или органы, такие как стволовые клетки, возможно, в кооперации с интравитальным M-CSF. Таким образом, настоящее изобретение относится к терапевтическому средству для лечения заболеваний, связанных с поврежденными клетками, тканями или органами.
В частности, настоящее изобретение относится к следующим аспектам.
Пункт 1. Стволовые клетки, полученные культивированием моноцитов в присутствии (i) M-CSF и (ii) по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта, посредством этого дедифференцируя моноциты.
Пункт 2. Стволовые клетки по п.1, где активный ингредиент растворимого в воде растительного экстракта представляет собой сахар или содержащий сахар комплекс, причем активный ингредиент дедифференцирует моноциты.
Пункт 3. Стволовые клетки по п.1, где активный ингредиент растворимого в воде растительного экстракта имеет молекулярную массу от 1000 до 500000, причем активный ингредиент дедифференцирует моноциты.
Пункт 4. Стволовые клетки по п.1, где активный ингредиент растворимого в воде растительного экстракта адсорбирован на колонке Con A, причем активный ингредиент дедифференцирует моноциты.
Пункт 5. Стволовые клетки по п.1, где активный ингредиент растворимого в воде растительного экстракта адсорбирован на анионообменной смоле, причем активный ингредиент дедифференцирует моноциты.
Пункт 6. Стволовые клетки по п.1, где активный ингредиент растворимого в воде растительного экстракта представляет собой фракцию водной фазы растительного происхождения, экстрагированную методом Folch, или ее очищенный продукт.
Пункт 7. Стволовые клетки по п.1, где моноциты представляют собой моноциты человека.
Пункт 8. Стволовые клетки по любому из пп.1-7, где экспрессирован по меньшей мере один представитель недифференциированных маркеров Nanog, Nestin, c-Kit, CD9 и Oct3/4, и экспрессия гена CXCR4 является значимой, по сравнению со стволовыми клетками, полученными культивированием моноцитов в присутствии только M-CSF.
Пункт 9. Стволовые клетки, в которых экспрессирован по меньшей мере один представитель недифференцированных маркеров Nanog, Nestin, c-Kit, CD9 и Oct3/4, и экспрессия гена CXCR4 является значимой.
Пункт 10. Способ получения стволовых клеток, включающий культивирование моноцитов в присутствии (i) M-CSF и (ii) по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта.
Пункт 11. Способ по п.10, где культивирование выполняется в течение от 7 до 14 дней.
Пункт 12. Культуральная среда для дедифференциации моноцитов, содержащая (i) M-CSF и (ii) по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта.
Пункт 13. Фармацевтическая композиция, содержащая стволовые клетки по любому из пп.1-9 в качестве активного ингредиента.
Пункт 14. Клеточное лекарственное средство, содержащее стволовые клетки по любому из пп.1-9 в качестве активного ингредиента.
Пункт 15. Вызывающее дедифференциацию средство, содержащее (i) M-CSF и (ii) по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта, в качестве активных ингредиентов.
Пункт 16. Средство для лечения заболеваний, связанных с поврежденными клетками, тканями или органами, содержащее по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта, в качестве активного ингредиента.
Пункт 17. Средство для лечения заболеваний, связанных с поврежденными клетками, тканями или органами, по п.16, где заболевания выбраны из группы, состоящей из наружных травм, воспалительных заболеваний, повреждением костей или хрящей, сердечно-сосудистых заболеваний, неврологических расстройств, заболеваний печени, почечных заболеваний, диабета, атопического дерматита и GVHD (болезни трансплантат против хозяина).
Пункт 18. Средство для лечения заболеваний, связанных с поврежденными клетками, тканями или органами, по п.16, где заболевания выбраны из группы, состоящей из наружных травм, панкреатита, лучевого повреждения, дерматомиозита, множественного миозита, некротического фасциита, хронического бронхита, перелома костей, остеопороза, костно-хрящевых переломов, остеохондрита, дилятационной кардиомиопатии, инфаркта миокарда, ишемической кардиомиопатии, сердечной недостаточности, гипертрофии миокарда, застойной сердечной недостаточности, рестеноза, аритмии, атеросклероза, васкулита, периферической нейропатии, нейропатической боли, инсульта, энцефалита, менингита, диабетической нейропатии, расстройства с дефицитом внимания, аутизма, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Крейцфелдта-Якоба, внешних повреждений или ишемии мозга или позвоночника, цирроза печени, хронического гепатита, хронической почечной недостаточности, гломерулонефрита, почечной ишемии, диабета, атопического дерматита и GVHD.
Пункт 19. Набор клеточного лекарственного средства, содержащий, по меньшей мере, стволовые клетки по любому из пп.1-9 в качестве существенного ингредиента.
Пункт 20. Набор для получения дедифференцированных клеток, содержащий (i) M-CSF и (ii) по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта, в качестве существенных ингредиентов.
Пункт 21. Набор по п.20, дополнительно содержащий моноциты в качестве компонента.
Пункт 22. Стволовые клетки, способ получения стволовых клеток, культуральная среда для дедифференциации моноцитов, клеточное лекарственное средство, средство для лечения заболеваний, средство, вызывающее дедифференциацию, набор клеточного лекарственного средства или набор для получения дедифференцированных клеток по пунктам 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или 21, где ганглиозид представляет собой по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из GD1a, GD1b, GD2, GD3, GM1, GM2, GM3, GT1b и GQ1b.
Преимущества изобретения
Используя моноциты, настоящее изобретение обеспечивает массовое получение за короткий период времени стволовых клеток, поступающих в поврежденные ткани. Настоящее изобретение также относится к средству для индукции стволовых клеток. Таким образом, ожидается, что настоящее изобретение вносит вклад в область создания клеточных лекарственных средств.
Кроме того, было доказано, что ганглиозид и растворимый в воде экстракт растительного происхождения, такой как фракция водной фазы растительного происхождения, экстрагированная методом Folch, или ее очищенный продукт, служат в качестве лекарственного средства для лечения заболеваний, связанных с поврежденными клетками, тканями или органами.
Краткое описание чертежей
На фиг.1 показаны кривые роста стволовых клеток, индуцированных из моноцитов, культивированием в средах 1-5.
На фиг.2 показаны результаты генной экспрессии с использованием RT-PCR (полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией).
На фиг.3 представлены эффекты дедифференциации в стволовые клетки добавлением ганглиозидов.
Фиг.4 иллюстрирует формы клеток после добавления ганглиозидов.
На фиг.5 показана индуцирующая дедифференциацию активность каждой экстрагированной из растения фракции.
На фиг.6 показаны результаты активности фракций полученного из экстракта плодоножки сладкого картофеля индуцирующего дедифференциацию компонента, полученного хроматографией.
На фиг.7 представлены изображения окрашенных антиколлагеновых антител в мышиной печеночной ткани.
Наилучший способ осуществления изобретения
В настоящем изобретении используются моноциты, такие как моноциты периферической крови, в качестве клеток, подвергаемых дедифференциации.
В настоящем изобретении используются моноциты млекопитающего, полученные у людей, лошадей, коров, обезьян, таких как шимпанзе, свиней, овец, кроликов, мышей, крыс, собак, кошек и подобных млекопитающих. Среди них предпочтительны люди, обезьяны, включая шимпанзе, и тому подобные приматы. Особенно предпочтительны моноциты человека. Моноциты получают из костного мозга или крови. Предпочтительно использование моноцитов, полученных из крови, в частности, моноцитов, полученных из периферической крови.
Способ выделения моноцитов из образца крови или тому подобного материала хорошо известен. Например, существует способ, предусматривающий сначала выделение мононуклеарных клеток из крови с использованием раствора для сепарации клеток крови «LymphoprepTM» (Cosmo Bio Co. Ltd.), а затем обработку полученных мононуклеарных клеток покрытыми антителами магнитными шариками (Miltenyi Biotec), способными распознавать поверхностный антиген CD14, посредством этого отделяя моноциты-мишени. Мононуклеарные клетки могут также непосредственно использоваться в качестве источника для получения моноцитов по настоящему изобретению.
Моноциты человека могут быть выбраны из продуктов, которые являются коммерчески доступными, таких как PT038 (Lonza).
В соответствии с настоящим изобретением, осуществляется дедифференциация моноцитов в стволовые клетки, и полученные клетки пролиферируют перед введением испытуемому индивиду, такому как человек. В этом случае, моноциты получают у пациента, и поэтому необходимо получение как можно большего количества стволовых клеток из минимального количества моноцитов. Настоящее изобретение имеет преимущество дедифференциации стволовых клеток из моноцитов с высокой эффективностью пролиферации, посредством чего продуцируется большое количество стволовых клеток из небольшого количества моноцитов.
Примеры моноцитов включают клетки типа моноцитов (моноциты, мононуклеарные клетки, монобласты), имеющие рецептор M-CSF (c-fms). Поскольку моноциты пролиферируют только если и моноциты, и мононуклеарные клетки используются в одно и то же время, настоящее изобретение относится к возможности использования мононуклеарных клеток в качестве дедифференцированных клеток, в дополнение к моноцитам.
В настоящем описании термин «стволовая клетка» обозначает клетку, экспрессирующую недифференцированный маркер и имеющую ауторепродуктивное свойство. Путем использования моноцитов может быть получено большое количество стволовых клеток по настоящему изобретению. Стволовые клетки по настоящему изобретению могут вызвать дифференциацию и, предпочтительно, имеют свойство плюрипотентной дифференциации. Стволовые клетки, полученные в настоящем изобретении, являются CD14- и CD45-положительными.
Стволовые клетки по настоящему изобретению характеризуются значительной экспрессией генов CXCR4; они также отличаются тем, что экспрессирован по меньшей мере один представитель, предпочтительно, по меньшей мере два представителя, предпочтительнее, по меньшей мере три представителя, еще предпочтительно, по меньшей мере четыре представителя, особенно предпочтительно, экспрессированы все представители Nanog, Nestin, c-Kit, CD9 и Oct3/4.
В предпочтительной форме стволовой клетки по настоящему изобретению, ген CXCR4 значительно сильнее экспрессирован, чем ген в стволовых клетках, полученных культивированием моноцитов в присутствии только M-CSF, и экспрессирован по меньшей мере один представитель, предпочтительно, по меньшей мере два представителя, предпочтительнее, по меньшей мере три представителя, еще предпочтительнее, по меньшей мере четыре представителя, особенно предпочтительно, экспрессированы все пять представителей из Nanog, Nestin, c-Kit, CD9 и Oct3/4.
Ниже представлены признаки стволовых клеток по настоящему изобретению в более предпочтительном варианте осуществления:
(i) ген CXCR4 значительно сильнее экспрессирован, чем в стволовых клетках, полученных культивированием моноцитов в присутствии только M-CSF;
(ii) экспрессирован c-Kit; и
(iii) экспрессирован по меньшей мере один недифференцированный маркер, выбранный из группы, состоящей из Nanog, Nestin, CD9 и Oct3/4.
Признак, который дифференцирует полученные из моноцитов стволовые клетки по настоящему изобретению от других дифференцированных стволовых клеток, представляет собой значительную экспрессию гена CXCR4, который участвует в хоминге клеток. В стволовых клетках по настоящему изобретению, гены CXCR4 значительно сильнее экспрессированы, чем гены CXCR4 в стволовых клетках, полученных культивацией моноцитов в присутствии только M-CSF. Например, в предпочтительном варианте осуществления стволовых клеток по настоящему изобретению, количество экспрессии гена CXCR4, анализируемое RT-PCR или тому подобным способом, более чем в 3 или 4 раза больше, чем количество экспрессии в результате культивации моноцитов в присутствии только M-CSF, или в присутствии M-CSF+IL-3, M-CSF+IL-6&LIF и т.д. Кроме того, в предпочтительном варианте осуществления стволовых клеток по настоящему изобретению, гены CXCR4 значительно сильнее экспрессированы, чем гены CXCR4 в мезенхимальных стволовых клетках, полученных из костного мозга; конкретнее, количество экспрессии гена CXCR4, анализируемое RT-PCR или тому подобным способом, более чем в 2 или 3 раза больше, чем экспрессия гена CXCR4 в костном мозге.
Моноциты, полученные из стволовых клеток по настоящему изобретению, как и другие дедифференцированные стволовые клетки, характеризуются экспрессией c-Kit, который представляет собой маркер стволовых клеток.
Известно, что SDF1, лиганд рецептора CXCR4, экспрессирован в тканях, которые повреждены в результате перелома костей и циркуляторных заболеваний, в поврежденных частях нервной ткани или тому подобных. Поэтому клетки обеспечивают еще лучший эффект хоминга клеток в отношении поврежденных областей, когда он служит в качестве клеточного лекарственного средства.
Стволовые клетки, полученные по настоящему изобретению, могут использоваться для лечения заболеваний путем введения/инъекции их в пораженные области. Перед инъекцией предпочтительно культивирование стволовых клеток в соответствующей культуральной среде для пролиферации клеток. Затем клетки непосредственно вводят/инъецируют в пораженные области. Стволовые клетки можно культивировать в общей среде для клеточной культуры; однако предпочтительно культивировать стволовые клетки в вызывающей дедифференциацию культуральной среде по настоящему изобретению.
В соответствии с одним вариантом осуществления настоящего изобретения, стволовые клетки по настоящему изобретению могут использоваться для лечения внешних травм, воспалительных заболеваний (панкреатита, лучевого повреждения, дерматомиозита, множественного миозита, некротического фасциита, хронического бронхита), повреждения костей или хрящей (перелома костей, остеопороза, костно-хрящевых переломов, остеохондрита), сердечно-сосудистых заболеваний (например, дилятационной кардиомиопатии, инфаркта миокарда, ишемической кардиомиопатии, сердечной недостаточности, гипертрофии миокарда, застойной сердечной недостаточности, рестеноза, аритмии, атеросклероза, васкулита и т.д.), неврологических расстройств (например, периферической нейропатии, нейропатической боли, инсульта, энцефалита, менингита, диабетической нейропатии, расстройства с дефицитом внимания, аутизма, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Крейтцфельдта-Якоба, внешних повреждений или ишемии мозга или позвоночника и т.д.), заболеваний печени (цирроза печени, хронического гепатита), почечных заболеваний (хронической почечной недостаточности, гломерулонефрита, почечной ишемии и т.д.), диабета, атопического дерматита, GVHD или тому подобных.
Дедифференцированные стволовые клетки по настоящему изобретению были депонированы в Депозитарии Международной Патентной Организации Национального Института Передовой Науки и Технологии (Central 6, 1-1, Higashi 1-chome Tsukuba-shi, Ibaraki-ken 305-8566 Japan) 30 сентября, 2009 г., под номером доступа ABP-11184.
Как указано выше, моноциты преобразуются в стволовые клетки при культивировании моноцитов в присутствии (i) M-CSF и (ii) по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта.
В настоящем описании «растворимый в воде растительный экстракт» обозначает экстракт всего растения или части растения (например, листьев, стеблей/стволов/плодоножек, подземных стеблей, корневищ, клубней, вьющихся растений, корней, цветов, почек, лепестков, завязей, плодов, коробочек, капсул, семян, волокон, семяпочек и т.д.). Примеры экстрагентов включают воду, водный растворитель (например, водный спирт, такой как водный метанол, водный этанол или водный пропанол; водный THF (тетрагидрофуран); водный ацетон) и полярные растворители, такие как DMF (диметилформамид), DMSO (диметилсульфоксид) или диметилацетамид. «Растворимый в воде растительный экстракт» представляет собой вещество, экстрагированное из такого растворителя, т.е. воды, водного растворителя или полярного растворителя, способного растворять полярное вещество в большом количестве. Растворимый в воде растительный экстракт может быть получен следующим образом. Сначала растение экстрагируют с использованием хлорированных углеводородов, таких как хлороформ или метиленхлорид; спиртов, таких как метанол, этанол или пропанол; ароматических углеводородов, таких как бензол или толуол; сложных эфиров, таких как этилацетат; простых эфиров, таких как THF или простой диэтиловый эфир; кетоны, такие как ацетон и метилэтилкетон; алифатические или алициклические углеводороды, такие как гексан или циклогексан. Затем растительный экстракт обрабатывают водой или водным растворителем для получения мишеневого растворимого в воде вещества. Таким образом, растворимое в воде вещество, полученное с использованием воды, водного растворителя или полярного растворителя, может, если требуется, кроме того, быть обработано хлорированными углеводородами, такими как хлороформ или метиленхлорид; ароматическими углеводородами, такими как бензол или толуол; сложными эфирами, такими как этилацетат; простыми эфирами, такими как THF или простой диэтиловый эфир; алифатическими или алициклическими углеводородами, такими как гексан или циклогексан, с тем чтобы отмыть липофильный компонент. Растворимый в воде растительный экстракт представляет собой предпочтительно экстрагированную по Folch из растения фракцию водной фазы или ее очищенный продукт.
Экстракт по Folch обозначает фракцию, остающуюся в водной фазе, в результате процесса экстракции растения с использованием растворителя хлороформ:метанол=2:1 и промывания смешанного растворителя водой. Вместо хлороформа могут использоваться другие хлорированные углеводороды, такие как метиленхлорид, тетрахлорид углерода или 1,2-дихлорэтан. Вместо метанола могут использоваться низшие спирты, такие как этанол, н-пропанол, изопропанол или бутанол. Отношение хлорированного углеводорода к спирту не ограничивается соотношением 2:1. Может использоваться широкий диапазон соотношений. В настоящем описании смешанный растворитель из хлорированного углеводорода и спирта имеет свойство высокого растворения, посредством этого содействуя экстракции. Отношение хлорированного углеводорода к спирту, предпочтительно, устанавливается на величину, которая может обеспечить разделение на водную фазу и органическую фазу при добавлении воды, посредством этого экстрагируя активное вещество в водной фазе. Если фаза не делится добавлением воды, то добавляется органический растворитель для разделения растворителя на два слоя. В настоящем описании, водная фаза, полученная в результате разделения на два слоя добавлением воды, называется «фракций водной фазы, экстрагированной из растения по Folch». Фракция водной фазы, экстрагированная другим способом, также включена в диапазон «фракции водной фазы, экстрагированной из растения по Folch», пока она имеет такое же активное вещество.
Растворимый в воде растительный экстракт по настоящему изобретению содержит подобное гликолипиду вещество (содержащее один или оба из гликолипида и сахара) в качестве активного ингредиента. Поскольку такое подобное гликолипиду вещество имеет низкую растворимость в органическом растворителе, растворимый в воде растительный экстракт предпочтительно выделяют в виде фракции водной фазы. Кроме того, растворимый в воде растительный экстракт может далее быть очищен с использованием различных видов хроматографии, таких как ионообменная хроматография или аффинная хроматография. Очищенный продукт может также использоваться в качестве активного ингредиента.
Активный ингредиент в растворимом в воде растительном экстракте может состоять только из сахара или может содержать и сахар, и другие компоненты (липиды и т.д.). Примеры сахарных компонентов включают глюкозу, арабинозу, ксилозу, рибозу, рамнозу, фукозу, деоксирибозу, маннозу, фруктозу, галактозу, мальтозу, лактозу, целлобиозу, сахарозу, трегалозу, раффинозу, мелибиозу, мальтотриозу, мелезитозу, туранозу, глюкуроновую кислоту, галактуроновую кислоту, маннуроновую кислоту, идуроновую кислоту, глюкозамин, галактозамин, маннозамин, N-ацетилглюкозамин, N-ацетилгалактозамин, N-ацетилманнозамин, нейраминовую кислоту, N-ацетилнейраминовую кислоту и тому подобные. Эти компоненты могут быть сульфатированными. Предпочтительно, они могут присутствовать в форме олигосахаридов, полисахаридов, гликозидов или гликолипидов. Конкретные примеры полисахаридов включают гликозаминогликан, α-глюкан, β-глюкан, леван, фруктан, галактан, маннан, ксилан, арабинан, пектиновую кислоту, альгиновую кислоту, пектиновые вещества, гуаран, сульфатированный полисахарид, полисахарид, в котором один или более видов сахарных остатков связаны, полисахариды, образованные из структурных единиц одного или более членов указанных выше сахарных остатков, и полисахарид, в котором множественные сахарные остатки сложно связаны. Предпочтительно, растворимый в воде растительный экстракт обработан катионообменной смолой после экстрагирования. В одном из вариантов варианте осуществления, растворимый в воде растительный экстракт по настоящему изобретению, предпочтительно, содержит компонент, который адсорбирован на анионообменной смоле (компонент, имеющий анионную группу в воде) в качестве активного ингредиента. В другом варианте осуществления, растворимый в воде растительный экстракт по настоящему изобретению, предпочтительно, содержит компонент, который связывается с агарозой Con A (конкавалин A) в качестве активного ингредиента. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения растворимый в воде растительный экстракт адсорбирован на анионообменной смоле и содержит компонент, который связывается с агарозой конкавалина A в качестве активного ингредиента. В качестве активного ингредиента, связывающегося с агарозой конкавалина A, предпочтительны полисахариды или сахара (включая содержащие сахар комплексы, такие как гликолипиды), содержащие остаток глюкозы и/или маннозы, в частности, остаток маннозы. В предпочтительном варианте осуществления растворимый в воде растительный экстракт содержит компонент, имеющий остаток сахара и растворимый в холодной воде или горячей воде (экстрагируемый). Компонент, предпочтительно, представляет собой полисахарид или содержащий сахар комплекс, в котором нижний предел молекулярной массы составляет примерно 500, 1000, 2000, 3000, 4000 или 5000, и выше примерно 500000, 300000, 200000, 100000, 80000, 60000, 50000, 40000, 30000 или 20000.
Индукция до стволовых клеток может выполняться культивированием моноцитов в присутствии по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта.
Поскольку M-CSF уже существует в живом организме (например, в организме человека), один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта, может служить в качестве индуктора для вызова превращения из моноцитов в стволовые клетки. Стволовые клетки поступают в пораженную область и, посредством этого, служат в качестве терапевтического средства для лечения различных видов заболеваний. Терапевтическое средство, содержащее в качестве активного ингредиента по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта, эффективно для лечения внешних травм, воспалительных заболеваний (панкреатита, лучевого повреждения, дерматомиозита, множественного миозита, некротического фасциита, хронического бронхита), повреждения костей или хрящей (перелома костей, остеопороза, костно-хрящевых переломов, остеохондрита), сердечно-сосудистых заболеваний (например, дилятационной кардиомиопатии, инфаркта миокарда, ишемической кардиомиопатии, сердечной недостаточности, гипертрофии миокарда, застойной сердечной недостаточности, рестеноза, аритмии, атеросклероза, васкулита и т.д.), неврологических расстройств (например, периферической нейропатии, нейропатической боли, инсульта, энцефалита, менингита, диабетической нейропатии, расстройства с дефицитом внимания, аутизма, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Крейтцфельдта-Якоба, внешних повреждений или ишемии мозга или позвоночника и т.д.), заболеваний печени (цирроза печени, хронического гепатита), почечных заболеваний (хронической почечной недостаточности, гломерулонефрита, почечной ишемии и т.д.), диабета, атопического дерматита, GVHD или тому подобных.
Эффективная доза терапевтического средства, содержащего по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта в качестве активного ингредиента, зависит, например, от применения, возраста и пола пациента, тяжести заболевания или тому подобных состояний. Обычно, количество используемого активного ингредиента составляет для взрослого примерно от 0,0001 до 100 мг, предпочтительно, примерно от 0,001 до 10 мг, а предпочтительнее, примерно от 0,01 до 5 мг на 1 кг массы тела. Суточная доза терапевтического средства может делиться на 1-4 приема.
«Фракция водной фазы, экстрагированной из растения по Folch» включает широкий диапазон растительных экстрактов, полученных аналогичными способами. Кроме того, активный ингредиент растворимого в воде растительного экстракта, содержащего фракцию водной фазы, экстрагированной из растения по Folch, может комбинироваться с анионообменными смолами и агарозой конкавалина A; и его активность может увеличиваться пропусканием через катионообменную смолу.
При применении в качестве лекарственного препарата терапевтическое средство или фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может формироваться в обычную лекарственную форму путем использования фармацевтического носителя вместе с активным ингредиентом, который содержит по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта и, если требуется, M-CSF. Терапевтический носитель выбирается в зависимости от желательной лекарственной формы, дозировки и способа введения. Примеры терапевтических носителей включают различные разбавители и эксципиенты, такие как наполнители, агенты для увеличения объема, связывающие агенты, смачивающие агенты, разрыхлители, поверхностно-активные вещества, смазывающие вещества и т.д.
Лекарственная форма по настоящему изобретению может быть выбрана из различных форм, в зависимости от цели лечения. Характерные примеры лекарственных форм включают таблетки, пилюли, порошки, жидкости, растворы, суспензии, эмульсии, гранулы, капсулы, суппозитории, инъекционные лекарственные формы (жидкости, суспензии и т.д.), мази и т.д. Лекарственное средство получают в виде соответствующей лекарственной формы обычным способом с использованием подходящего носителя. Таблетка может представлять собой таблетку, имеющую обычное покрытие, такую как таблетки с сахарным покрытием, таблетки, покрытые желатином, таблетки с энтеросолюбильным покрытием, таблетки с пленочным покрытием, двухслойные таблетки или многослойные таблетки и т.д. Когда лекарственные средства по настоящему изобретению получают в виде инъекционных препаратов в форме жидкости, эмульсии или суспензии, то лекарственное средство предпочтительно стерилизуется и является, предпочтительно, изотоничным относительно крови. Поэтому, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может содержать соль, глюкозу или глицерин в количестве, достаточном для получения изотонического раствора. Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может также содержать обычный солюбилизирующий агент, буфер, смягчающий агент и т.д. Кроме того, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может также содержать красящий агент, консервант, ароматизатор, отдушку, подсластитель и т.д., или другие лекарственные средства. При введении и M-CSF, и по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта, они могут вводиться одновременно или отдельно.
По меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта, может приниматься внутрь в виде пищевого продукта, например напитков, батончиков (батончиков с пищевой добавкой) и т.д. Такая пищевая композиция может быть получена в соответствии с обычным способом с использованием других целесообразных общеизвестных пищевых материалов (сырьевых материалов), эксципиентов, разбавителей и т.д.
Дедифференцированные стволовые клетки могут быть получены путем индуцирования дедифференциации путем культивирования указанного выше клеточного материала в комбинации (i) M-CSF и (ii) по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде растительного экстракта, в течение заданного периода.
Существуют связанные с мембраной M-CSF, молекулярная масса которых составляет приблизительно 22000, и секреторные M-CSF, молекулярная масса которых составляет приблизительно 42000. С дисульфидной мостиковой связью их молекулярная масса становится приблизительно 45000 (димер M-CSF с молекулярной массой 22000) и приблизительно 85000 (димер M-CSF с молекулярной массой 42000) соответственно. Существует также тип M-CSF с высокой молекулярной массой, в котором протеогликан, кроме того, связан с M-CSF 85 кДа. Может использоваться любой из этих различных типов M-CSF; однако предпочтительны секреторные M-CSF, молекулярная масса которых составляет приблизительно 42000, и M-CSF, молекулярная масса которых составляет приблизительно 85000 (димер M-CSF с молекулярной массой 42000), тип M-CSF с высокой молекулярной массой, в котором протеогликан, кроме того, связан с M-CSF 85 кДа. M-CSF предпочтительно получен у людей, лошадей, коров, обезьян, в частности шимпанзе, свиней, овец, кроликов, мышей, крыс, собак, кошек и тому подобных млекопитающих. Среди них предпочтительны люди, обезьяны, в частности шимпанзе, и подобные приматы. Особенно предпочтительны человеческие моноциты. M-CSF может быть получен очисткой натурального продукта; однако предпочтителен рекомбинантный M-CSF. Например, предпочтительно использование рекомбинанта, экспрессируемого E. coli, без сахарной цепи, потому что известно, что M-CSF имеет удельную активность, аналогичную натуральному продукту, когда он имеет аминокислоты, по меньшей мере, от N-конца до 153-й аминокислоты.
Ганглиозид конкретно не ограничивается, пока он выбран из следующего списка, включающего GM1, GD1a, GT1b и т.д. Множество из этих ганглиозидов могут комбинироваться. Кроме того, растительный экстракт (подобное гликолипиду вещество растительного происхождения) может также вызывать значительную дедифференциацию. Может также использоваться экстракт, полученный из ткани животного (подобное гликолипиду вещество животного происхождения). Экстракт может быть получен в условиях, обычных для экстрагирования подобного гликолипиду вещества. Активный ингредиент лекарственного средства по настоящему изобретению представляет собой ганглиозид или растворимый в воде экстракт растительного происхождения. Могут использоваться любые экстракты растительного происхождения или экстракты, полученные из ткани животных, содержащие ганглиозид или растворимый в воде экстракт растительного происхождения. Например, ганглиозид в большом количестве содержится в мозге/нервной ткани животного, и экстракты, полученные из мозга и нервных тканей животного, могут использоваться в качестве ганглиозида. Экстрагированный ганглиозид может быть очищен. Поскольку фракция содержит ганглиозид, то степень очистки может варьироваться. Как правило, в качестве компонента экстракции можно использовать фракцию, полученную в условиях, при которых возможна экстракция гликолипид-подобных веществ. Примеры фракций натуральных экстрактов включают экстрагированную по Folch (непатентная литература 5) фракцию водной фазы. Предпочтительные примеры животных включают млекопитающих (коров, свиней, кроликов, овец, лошадей и т.д.), и ганглиозид из мозга или нервных тканей свиней особенно предпочтителен. Может также использоваться ганглиозид, полученный из молока млекопитающих, такого как коровье молоко.
Предпочтительные примеры ганглиозидов или растворимых в воде экстрактов растительного происхождения, подлежащих использованию в качестве материала подобного гликолипиду вещества, включают сладкий картофель вида Ipomea Batatas, ипомею (morning glory), болотную ипомею (swamp morning glory), ипомею плющевидную (Ivy-leaved morning glory), ипомею острозубчатую (fingerleaf morning glory), кардинал вьющийся (cardinal climber), синюю ипомею (blue morning glory), индийскую ипомею, (Ipomoea congesta) и тому подобные вьюнковые (Convolvulaceaes); лотус орехоносный (Nelumbo nucifera) (корень лотоса), лотос желтый (Nelumbo lutea) и подобные лотосы; соланум американский (Solanum americanum), помидорки зубчатики (Solanum lycopersicum), паслен сосочковый (Solanum mammosum), баклажан (Solanum melongena), паслен черный (Solanum nigrum), клубень картофеля (Solanum tuberosum), перец сладкий (Capsicum annuum), перец кайенский (Capsicum frutescens), дурман индийский (Datura metel), дурман метелевидный (Datura meteloides), дурман обыкновенный (Datura stramonium), бругмансию древовидную (Brugmansia arborea), бругмансию с пестрыми лентами (Brugmansia suaveolens), физалис обыкновенный (Physalis alkekengi var. franchetii), подбел широкий (P. japonicum), петунию гибридную (Petunia x hybrida) и подобные Solanaceouses. Кроме приведенных выше примеров, может использоваться широкий диапазон ганглиозидов или растворимых в воде экстрактов растительного происхождения, содержащих гликолипид. Растение может представлять собой листья, стебли, стволы, плодоножки, подземные стебли, корневища, клубни, вьющиеся растения, корни, цветы, почки, лепестки, завязи, плоды, коробочки, капсулы, семена, волокна, семяпочки, травы и т.д. Экстракт может быть получен из любой из этих частей.
Например, может использоваться клубнелуковичная часть картофеля или сладкого картофеля, в дополнение к другим частям картофеля или сладкого картофеля, таким как листья, стебли, стволы, плодоножки, подземные стебли, корневища, клубни, вьющиеся растения, корни, цветы, почки, лепестки, завязи, плоды, коробочки, капсулы, семена, волокна, семяпочки, травы и т.д.
Например, возможно использование трансгенного растения, которое перерабатывается или для введения необходимых генов, или для нокдауна ненужных генов, с тем чтобы увеличить продукцию ганглиозида или подобных гликолипидам веществ.
«Ганглиозид» представляет собой общее название гликофинголипида, имеющего сиаловую кислоту, такого как GD1a, GD1b, GD2, GD3, GM1, GM2, GM3, GT1b или GQ1b.
Ганглиозиды имеют следующие структуры.
GD1a=aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-3)bDGalNAc(1-4)[aNeu5Ac(2-3)]bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer
GD1b=bDGalp(1-3)bDGalNAc(1-4)[aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)]bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer
GD2=bDGalpNAc(1-4)[aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)]bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer
GD3=aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer
GM1=bDGalp(1-3)bDGalNAc[aNeu5Ac(2-3)]bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer
GM2=bDGalpNAc(1-4)[aNeu5Ac(2-3)]bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer
GM3=aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer
GT1b=aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-3)bDGalNAc(1-4)[aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)]bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer
GQ1b=aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-3)bDGalNAc(1-4)[aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)]bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer
aNeu5Ac = 5-ацетил-α-нейраминовая кислота
aNeu5Ac9Ac = 5,9-диацетил-α-нейраминовая кислота
bDGalp = β-D-галактопираноза
bDGalpNAc = N-ацетил-β-D-галактопираноза
bDGlcp = β-D-глюкопираноза
Cer = церамид (общий N-ацилированный сфингоид)
Может использоваться любая культуральная среда для млекопитающих. Например, культивирование может выполняться с использованием среды, такой как RPMI 1640, DMEM, Eagle MEM, αMEM, IMEM или M199, содержащей, например, приблизительно от 1 до 20% сывороточного компонента, такого как FBS, FCS, CS или HS. Культивирование предпочтительно выполняется, без ограничения, в среде DMEM, содержащей приблизительно 10% FBS. Может также использоваться бессывороточная культура, такая как Ultra CULTURETM (среда для типов клеток млекопитающих). Бессывороточная культуральная среда конкретно не ограничивается.
Дедифференцированные стволовые клетки могут быть получены культивированием моноцитов в среде, содержащей (i) M-CSF и (ii) по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде экстракта растительного происхождения, при 37°C в течение примерно от 7 до 14 дней в присутствии 5% CO2. В течение этого периода культивирования происходит дедифференциация и получаются специфические стволовые клетки по настоящему изобретению, экспрессирующие недифференцированный маркер. Кроме того, во время данного периода культивирования, значительно увеличивается экспрессия гена CXCR4, который является признаком стволовых клеток по настоящему изобретению. Даже если период культивирования продлевается, стволовые клетки по настоящему изобретению могут быть получены, пока имеется значимый уровень экспрессии гена CXCR4.
Когда клеточный материал культивируется в таких условиях, конечное число полученных стволовых клеток приблизительно в 5 раз больше их числа, полученного культивированием с использованием только M-CSF или комбинации с другими цитокинами.
Возможно использование комплекса ковалентной связи или нековалентной связи M-CSF и по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде экстракта растительного происхождения в качестве средства, вызывающего дедифференциацию.
До настоящего времени в некоторых сообщениях было показано получение стволовых клеток путем культивирования моноцитов с использованием только M-CSF. Напротив, настоящее изобретение комбинирует (i) M-CSF и (ii) по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде экстракта растительного происхождения, для получения стволовых клеток, имеющих особенно значительную экспрессию гена CXCR4. Культивирование выполняют с использованием M-CSF в концентрации 5-100 нг/мл, предпочтительнее 25 нг/мл. Ганглиозид может представлять собой смесь экстрактов, полученных из растений или животных, материал, полученный очисткой натурального продукта, содержащего ганглиозид, или химическую композицию.
Гаглиозид может содержаться в культуральной среде в конечной концентрации примерно 1-100 мкг/мл. Растворимый в воде экстракт растительного происхождения может содержаться в культуральной среде в конечной концентрации примерно 0,1-100 мкг/мл.
Конечная концентрация по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде экстракта растительного происхождения, составляет примерно 1-100 мкг/мл. В настоящем описании, «ганглиозид» обозначает отдельный ганглиозид, такой как GD1a, GD1b, GD2, GD3, GM1, GM2, GM3, GT1b или GQ1b, или смесь этих ганглиозидов. «Содержание ганглиозидов» означает их общее содержание при использовании множественных ганглиозидов.
Набор
Настоящее изобретение также относится к набору клеточного лекарственного средства, который содержит стволовые клетки по настоящему изобретению в качестве существенного ингредиента; и к набору для получения дедифференцированных клеток, который содержит (i) M-CSF и (ii) ганглиозид растворимого в воде экстракта растительного происхождения в качестве основных ингредиентов.
Набор клеточного лекарственного средства содержит стволовые клетки моноцитарного происхождения по настоящему изобретению и, если требуется, культуральную среду, содержащую (i) M-CSF и (ii) по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде экстракта растительного происхождения, контейнер для культуры и т.д. Набор может представлять собой шприц для инъекции, заполненный стволовыми клетками моноцитарного происхождения.
Количество стволовых клеток моноцитарного происхождения в наборе клеточного лекарственного средства составляет, например, примерно от 1×104 до 1×107 на набор.
Набор для получения дедифференцированных клеток по настоящему изобретению содержит (i) M-CSF и (ii) по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде экстракта растительного происхождения; культуральную среду, контейнер для культуры, моноциты и т.д.
Промышленная применимость
Область техники, в которой может применяться изобретение
Настоящее изобретение может применяться во всех областях, в которых применяются стволовые клетки, в частности в области клеточных лекарственных средств, которая привлекает внимание в последние годы. При применении в данной области клетки должны быть получены и предоставлены в пределах кроткого периода времени. Кроме того, с учетом иммунологического отторжения важно получение дедифференцированных стволовых клеток из клеток, взятых из организма пациента, и введение полученных стволовых клеток в организм того же пациента в целях безопасности. Поэтому важно получить определенное количество стволовых клеток в пределах короткого периода времени, после того как клеточный материал взят из организма пациента. Настоящее изобретение значимо в этом отношении.
Один из вариантов осуществления настоящего изобретения представляет собой внутривенное введение дедифференцированных клеток.
Клетки могут быть введены пациенту обычным способом после получения мишеневых клеток путем культивирования. Например, после обработки трипсином клетки собирают центрифугированием и диспергируют в соответствующем изотоническом растворе перед внутривенным введением. Кроме того, возможно добавление соответствующего фармацевтически приемлемого носителя для стабилизации клеток. Когда имеется интервал времени между выделением клеток из культурального раствора и введением культивированных клеток, то клетки могут быть консервированы обычным способом при -80°C или в присутствии жидкого азота. Предпочтительнее клетки собирают для использования с целью лечения через 7-14 дней после начала культивирования для дедифференнциации моноцитов, а затем сразу используют для целевого лечения, потому что в течение этого периода существует вероятность самого высокого уровня экспрессии гена CXCR4. Соответственно, период использования клеток может определяться в зависимости от уровня экспрессии маркерного гена, а не ограничиваться периодом культивирования.
Область техники, в которой может применяться терапевтическое средство/лекарственный компонент
В соответствии с настоящим изобретением производится введение по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде экстракта растительного происхождения, и, если требуется, M-CSF, млекопитающим, таким как люди, для лечения посредством этого различных заболеваний, таких как внешние травмы, воспалительные заболевания, повреждение костей или хрящей, сердечно-сосудистые заболевания, неврологические расстройства, печеночные заболевания и почечные заболевания, диабет, атопический дерматит или GVHD. По меньшей мере один представитель выбирают из группы, состоящей из ганглиозида и растворимого в воде экстракта растительного происхождения, для дедифференциации моноцитов тестируемого индивида в стволовые клетки, способные излечить заболевания. Стволовые клетки перемещаются в пораженную область и функционируют в качестве терапевтического средства. В другом варианте по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из ганглиозида и экстрагированной по Folch фракции водной фазы растительного происхождения, может непосредственно или косвенно действовать на клетки, отличные от моноцитов.
Использование набора
Дедифференцированные стволовые клетки, полученные с использованием вызывающего дедифференциацию средства, могут использоваться в виде набора, после того как они подвергаются соответствующей консервирующей обработке.
Аналогичным образом, вызывающее дедифференциацию средство может использоваться в виде набора, который содержит средство в качестве существенного ингредиента.
Ниже описаны примеры настоящего изобретения для более конкретного описания изобретения. Однако настоящее изобретение не ограничивается приведенными примерами.
Примеры
Настоящее изобретение более подробно объяснено ниже на основании примеров. Однако настоящее изобретение не ограничивается данными примерами.
Пример 1
В соответствии с настоящим изобретением, человеческие моноциты (PT038; LONZA) культивировали с добавлением следующих добавок 1-5 к основной культуральной среде (концентрации выражены в виде конечной концентрации, далее именуемой в настоящем описании «FC»). На фиг.1 показаны результаты. По вертикальной оси на фиг.1 указано число жизнеспособных клеток, а по горизонтальной оси показано число дней культивирования. Результаты демонстрируют, что стволовые клетки моноцитарного происхождения по настоящему изобретению имеют очень высокую пролиферативную активность, по сравнению с клетками, полученными способами, описанными Fändrich, Huberman и т.д.
Добавка 1: M-CSF (FC: 25 нг/мл) + ганглиозиды (GD1a коровьего мозга; SIGMA) (FC: 100 мкг/мл)
Добавка 2: M-CSF (FC: 5 нг/мл) + IL-3 (FC: 0,5 нг/мл) (непатентный документ 2)
Добавка 3: M-CSF (FC: 25 нг/мл) + IL-6 (FC: 20 нг/мл) & LIF (FC: 1000 единиц/мл) (не патентный документ 3)
Добавка 4: M-CSF (FC: 25 нг/мл)
Добавка 5: M-CSF (FC: 25 нг/мл) + гликолипид (полученный растворением экстрагированной по Folch фракция водной фазы, полученной из 1 г растения (сладкого картофеля) на основе сухой массы в 500 мл культуральной среды)
Экстрагированную по Folch фракцию водной фазы, использованную в добавке 5, получали следующим образом. Сублимированные клетки (из ткани сладкого картофеля) тщательно гомогенизировали в подходящем количестве физиологического солевого раствора и затем энергично смешивали с эквивалентным количеством раствора хлороформа-метанола (2:1). После разделения смеси центрифугированием на фазу органического растворителя, фазу модифицированного белка и водную фазу, использовали экстракт в растворимой в воде фракции верхнего слоя.
Добавление всех добавок к среде DMEM (20% фетальная телячья сыворотка), культивирование моноцитов человека начинали в концентрации 1,5×105 клеток/мл (200 мкл/лунку, 96-луночный планшет). Количество жизнеспособных клеток определяли с использованием люминесцентного анализа жизнеспособности клеток Promega's CellTiter-GloTM. Конкретнее, лунки промывали физиологическим солевым раствором 3 раза в каждый день культивирования для удаления неприкрепленных клеток, и затем определяли количество прикрепленных и выращенных клеток.
Между тем, уровни генной экспрессии стволовых клеток, полученных способами культивирования в соответствии с настоящим изобретением и предшествующего уровня техники, анализировали RT-PCR. Культивирование моноцитов человека начинали в указанных выше условиях и в концентрации 1,5×105 клеток/мл (6 мл/чашку диаметром 6 см). На 14-й день мРНК собирали с использованием набора Micro Fast Track 2.0 Kit (Invitrogen). В последующем анализ уровня экспрессии выполняли RT-PCR. Ниже следуют параметры и информация о последовательности праймеров:
Nanog | F 5'-GCTTGCCTTGCTTTGAAGCA-3' (SEQ ID NO:1) |
R 5'-TTCTTGACTGGGACCTTGTC-3' (SEQ ID NO:2) | |
Nestin | F 5'-CTCTGACCTGTCAGAAGAAT-3' (SEQ ID NO:3) |
R 5'-GACGCTGACACTTACAGAAT-3' (SEQ ID NO:4) | |
Oct3/4 | F 5'-GAGCAAAACCCGGAGGAGT-3' (SEQ ID NO:5) |
R 5'-TTCTCTTTCGGGCCTGCAC-3' (SEQ ID NO:6) | |
c-Kit | F 5'-CCAAGTCATTGTTGGATAAG-3' (SEQ ID NO:7) |
R 5'-CTTAGATGAGTTTTCTTTCAC-3' (SEQ ID NO:8) |
CXCR4 | F 5'-ATCTTCCTGCCCACCATCTACTCCATCATC-3' (SEQ ID NO:9) |
R 5'-ATCCAGACGCCAACATAGACCACCTTTTCA-3' (SEQ ID NO: 10) |
Структура полосы (величины концентрации выражены в виде конечной концентрации, далее именуемой «FC»)
1: M-CSF (FC: 25 нг/мл) + ганглиозиды (GD1a коровьего мозга; SIGMA) (FC: 100 мкг/мл)
2: M-CSF (FC: 5 нг/мл) + IL-3 (FC: 0,5 нг/мл) (непатентный документ 2)
3: M-CSF (FC: 25 нг/мл) + IL-6 (FC: 20 нг/мл) + LIF (FC: 1000 единиц/мл) (непатентный документ 3)
4: M-CSF (FC: 25 нг/мл)
5: M-CSF (FC: 25 нг/мл) + экстрагированная по Folch фракция водной фазы растительного происхождения
6: Без культуры
7: Без культуры
1-6: Моноциты человека, 7: кДНК костного мозга человека (Human Bone Marrow Marathon-Ready cDNA; Clontech)
Фиг.2 демонстрирует, что стволовые клетки, полученные по настоящему изобретению (полоса 1 или 5), имели очень высокий уровень экспрессии CXCR4.
В последующем проводили сравнение величин индуцирующей стволовые клетки активности различных ганглиозидов.
Конкретнее, ганглиозиды добавляли к культуральной среде в конечной концентрации 100 мкг/мл и культивировали моноциты периферической крови.
К ней добавляли rhM-CSF в конечной концентрации 25 нг/мл. Затем количество жизнеспособных клеток определяли на второй неделе культивирования в виде активности люциферазы с использованием набора CellTiter-Glo (Promega). В результате, все культуры с использованием GM1, GD1a, GT1b и смеси проявили одинаково сильную индуцирующую стволовые клетки активность (фиг.3). Кроме того, не наблюдали различия морфологии клеток (фиг.4; фотографии иллюстрируют клеточную морфологию на второй неделе культивирования).
Ниже на фиг.3 представлены структуры полос (величины концентрации выражены в виде конечной концентрации, далее именуемой «FC»):
1: GM1 (FC: 25 нг/мл)
2: GD1a (FC: 25 нг/мл)
3: GT1b (FC: 25 нг/мл)
4: Смесь равных количеств GM1, GD1a и GT1b (FC: 25 нг/мл (общая концентрация))
5: Только M-CSF
6: Только плазма
Величины индуцирующей стволовые клетки активности различных экстрактов растительного происхождения
Экстракты из стволов корня лотоса и ипомеи плющевидной получали в таких же условиях, как и из плодоножки указанного выше сладкого картофеля. Сравнение величин активности стандартизировали на основании величин сухой массы растений, использованных для экстракции. Удельная активность была основана на активности в отношении пролиферации клеток экстракта плодоножки сладкого картофеля, принятой за 100. Как ясно из фиг.5, аналогичные величины индуцирующей стволовые клетки активности наблюдались у экстрактов из стволов корня лотоса и ипомеи плющевидной.
Одним признаком активного ингредиента растворимого в воде экстракта растительного происхождения является экстракция главным образом в водную фазу способом экстракции по Folch. Растворимый в воде растительный экстракт может быть фракционирован, отделен или очищен пропусканием через различные колонки. Активный ингредиент характеризуется связыванием с анионообменными смолами (Q-Сефарозой, DEAE-Сефарозой и т.д.) и связывающими лектин смолами (Конкавалином A и т.д.) в широком диапазоне pH.
На фиг.6 показаны результаты оценки активности проточной фракции после нанесения экстрактов на смолы, имеющие сродство связывания с активным ингредиентом. Результаты выявили, что проточные фракции утратили активность ввиду связывания активного ингредиента с анионообменной смолой и Con A агарозой. Результаты также свидетельствуют о том, что ингибитор удалялся посредством катионообменной смолы, таким образом, повышая активность.
Расчет был основан на активности экстракта плодоножки сладкого картофеля, принятой за 100. Повышенная активность в проточной фракции в катионообменной смоле указывает на удаление ингибитора. Проточные фракции анионообменной смолы и связывающей лектин Con A смолы утратили активность, свидетельствуя об удерживании активного фактора.
Пример 2
Заживляющий эффект на экспериментальной модели с введением стволовых клеток (пример терапевтического испытания с использованием мышиной модели цирроза печени)
Тетрахлорид углерода (1 мл/кг (массы тела)) вводили лабораторным мышам дважды в неделю в течение 12 последовательных недель для искусственной индукции цирроза печени. Человеческие дедифференцированные стволовые клетки моноцитарного происхождения (hMDDSC) по настоящему изобретению вводили дважды мышам с моделью цирроза печени через хвостовую вену (второе введение проводили через одну неделю после первого введения; 1×105 клеток на индивида). Через одну неделю после второго введения (через 2 недели после первого введения) у всех мышей извлекали печень и выполняли патоморфологический и биохимический анализ срезов ткани. При гепатите, вызванном тетрахлоридом углерода, сообщают о высокой экспрессии SDF1 (фактора-1, происходящего из стромальных клеток) в воспаленной области, как при вирусном гепатите (Jung et al., 2006). Поскольку hMDDSC по настоящему изобретению проявляет высокую экспрессию CXCR4, который является рецептором для SDF1, ожидается, что hMDDSC накапливается в воспаленной области посредством связи между hMDDSC и CXCR4 для оказания заживляющего эффекта на окружающие ткани (Kollet et al., 2003; Nervi et al., 2006).
В отношении функции печени, выявляемой маркерами крови, величины GOT (глутамат-оксалацетат трансаминазы) и GPT (глутамат-пируват трансаминазы) сразу снижались и возвращались к нормальным уровням после завершения введения тетрахлорида углерода. Соответственно, эти величины проявили почти нормальные уровни после двухнедельного курса лечения, и не наблюдались большие различия измеряемых величин среди тестируемых групп. Однако, как показано ниже, 12-недельное медикаментозное лечение вызывало тяжелый фиброз в ткани печени, приводящий к циррозу печени. hMDDSC по настоящему изобретению оказывал выраженный эффект на снижение и удаление фиброзной ткани, разросшейся в печени.
1. Гистопатологический анализ
Залитые в парафин срезы получали из извлеченной и иммобилизованной печени мышей и выявляли коллагеновые волокна, которые представляют собой антитело против коллагена I и основной компонент фиброзной структуры (фиг.7, темно-коричневая окраска). В то же время ядро окрашивалось в синий цвет (окрашивание гематоксилином).
На верхних изображениях показаны три примера контрольной группы, в которой вводили солевой раствор, а hMDDSC не вводился, после индукции цирроза печени, а на нижних изображениях показаны три примера, в которых дважды внутривенно вводили hMDDSC. Введение hMDDSC привело к очевидному удалению толстых пучков волокон (указанных стрелками на верхних изображениях), выявленному антиколлагеновыми антителами.
Кроме того, окрашивание по Azan-Mallory выполняли на тех же срезах печени, и площадь окрашенной в синий цвет фиброзной тканевой части рассчитывали с использованием анализирующего изображение микроскопа (Keyence BZ-9000) (таблица 1).
Таблица 1 Результаты анализа изображений фиброзных частей окрашиванием по Azan-Mallory |
|||
Солевой раствор | hMDDSC | Нормальная | |
SE | 16131,3 | 1813,4 | 1351,31 |
Синие пиксели | 40006,1 | 30676,7 | 5718 |
n=7, 1400000 пикселей/полную рамку |
У группы, получавшей hMDDSC (hMDDSC), проявилась величина, более чем в 5 раз превышающая величину в нормальной контрольной группе (Нормальная), которой не вводили тетрахлорид углерода; однако уменьшение количества фиброзной ткани в группе, которой вводили hMDDSC, достигало 23%, по сравнению с таковым в группе, которой вводили физиологический солевой раствор (Солевой раствор).
2. Биохимический анализ
A) Пептид проколлагена III типа
Уровень пептида проколлагена III типа в крови измеряли в эксперименте по лечению цирроза печени с использованием алогичной мышиной модели. Пептид проколлагена III типа (PIIIP) представляет собой концевой пептид, присутствующий в предшественнике коллагена, и находится в свободной форме в крови и ткани в виде пептида после расщепления во время получения коллагена. Поэтому, PIIIP используется в качестве маркера, отражающего продукцию коллагена (Giannini et al., 2001). Кровь брали из хвостовой вены мышей сразу после эксперимента двухнедельного лечения, и уровень PIIIP в плазме измеряли способом ELISA (CUSABIO CSB-E08095) (таблица 2).
Таблица 2 Количество пептида проколлагена III типа в крови |
|||
Солевой раствор | hMDDSC | Нормальная | |
нг/мл (плазма) | 283,5 | 64,2 | 57,45 |
SE | 144 | 24,15 | 29,1 |
n=7 |
В контрольной группе (Солевой раствор), которой вводили физиологический солевой раствор после индукции цирроза печени, проявилась величина примерно в 5 раз выше, чем в здоровой контрольной группе (Нормальная), хотя количество проколлагена в крови указывало на резкое уменьшение вследствие введения hMDDSC; была получена величина, близкая к величине у здоровой мыши. Ввиду того, что у группы, получавшей физиологический солевой раствор, была получена высокая величина, необычно высокая продукция молекул коллагена, вероятно, продолжалась в течение длительного времени индукции цирроза печени после прекращения стимуляции тетрахлоридом углерода. Однако обнаружено, что необычно высокая продукция коллагена немедленно подавлялась введением hMDDSC, и количество проколлагена в крови снизилось почти до нормальных уровней.
B) Гидроксипролин
С целью определения общего количества волокон в ткани печени непосредственно по ткани измеряли содержание в печеночной ткани гидроксипролина, который является ингредиентом коллагена. Ткань печени, извлеченной у мыши после двухнедельного курса лечения, разрушали и гомогенизировали, и содержащийся белок разрушали обработкой гидроксидом натрия. Концентрацию гидроксипролина измеряли специфичной для гидроксипролина цветной реакцией Хлорамина-T и диметиламинобензальдегида (таблица 3, Reddy et al., 1996).
Таблица 3 Количество гидроксипролина в ткани печени |
|||
Солевой раствор | hMDDSC | Нормальная | |
мкг/(г) печени | 884,4 | 684 | 222 |
SE | 90,2 | 67,0 | 8,4 |
n=7 |
Хотя в группе, получавшей hMDDSC (hMDDSC), еще проявлялось крайне высокая величина, которая была в 3 раза выше, чем величина в нормальной контрольной группе (Нормальная), она проявляла уменьшение, достигающее 22,6%, по сравнению с группой, которой вводили физиологический раствор (Солевой раствор). Другими словами, уменьшение фиброза печени было выявлено в группе, которой вводили hMDDSC.
После введения экстрагированной по Folch фракции водной фазы плодоножки сладкого картофеля указанным выше мышам с циррозом печени через хвостовую вену в количестве 6,6 мг/кг, заявители подтвердили уменьшение цирроза печени.
3. Заключение
Таким образом, модели лечения цирроза печени у мышей с использованием hMDDSC по настоящему изобретению отличаются тем, что продукция волокон значительно подавляется, и фиброзная ткань удаляется или ее количество уменьшается простым и кратковременным лечением (лишь двумя введениями за две недели). В результате, это лечение эффективно для быстрого облегчения течения цирроза печени и для восстановления печеночной ткани до нормального состояния. Таким образом, данное лечение является инновационной терапевтической системой, которая содействует регенерации печеночной ткани.
4. Ссылки
Jung YJ, Ryu KH, Cho SJ, Woo SY, Seoh JY, Chun CH, Yoo K, Moon IH, and Han HS. “Syngenic bone marrow cells restore hepatic function in carbon tetrachloride-induced mouse liver injury”, Stem Cells Dev., 2006, 15, 687-695.
Kollet O, Shivtiel S, Chen YQ, Suriawinata J, Thung SN, Dabeva MD, Kahn J, Spiegel A, Dar A, Samira S, Goichberg P, Kalinkovich A, Arenzana-Seisdedos F, NaglerA, Hardan I, Revel M, Shafritz DA, Lapidot T. “HGF, SDF-1, and MMP-9 are involved in stress-induced human CD34+ stem cell recruitment to the liver”, J Clin Invest. 2003, 112, 160-169.
Nervi B, Link DC, DiPersio JF. “Cytokines and hematopoietic stem cell mobilization. J Cell Biochem”, 2006, 99, 690-705.
Giannini E, Caglieris S, Ceppa P, Risso D, Lantieri PB, Testa R. “Serum pro-collagen III peptide levels are related to lobular necrosis in untreated patients with chronic hepatitis C”, Eur J Gastroenterol Hepatol. 2001, 13, 137-141.
Reddy GK, Enwemeka CS. “A simplified method for the analysis of hydroxyproline in biological tissues”, Clin Biochem. 1996, 29, 225-229.
Claims (15)
1. Стволовые клетки, полученные культивированием моноцитов человека в присутствии (i) M-CSF с концентрацией от 5 до 100 нг/мл и (ii) по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида с концентрацией от 1 до 100 мкг/мл и растворимого в воде растительного экстракта, экстрагированного методом экстракции Folch, с концентрацией от 0,1 до 100 мкг/мл, посредством этого дедифференцируя моноциты, где экспрессия гена CSCR4 указанных стволовых клеток более чем в три или четыре раза больше по сравнению с экспрессией стволовыми клетками, полученными путем культивирования моноцитов человека в присутствии M-CSF и IL-3, и экспрессия гена CSCR4 указанных стволовых клеток более чем в два или три раза больше по сравнению с экспрессией мезенхимальными стволовыми клетками, полученными из костного мозга,
где растительный экстракт получен по меньшей мере из одного растения, выбранного из группы, состоящей из сладкого картофеля Ipomea Batatas, ипомеи, болотной ипомеи, ипомеи плющевидной, ипомеи острозубчатой, кардинала вьющегося, синей ипомеи, Ipomoea congesta и Convolvulaceaes; Nelumbo nucifera (корень лотоса), Nelumbo lutea и лотосов; Solanum americanum, Solanum lycopersicum, Solanum mammosum, Solanum melongena, Solanum nigrum, Solanum tuberosum, Capsicum annuum, Capsicum frutescens, Datura metel, Datura meteloides, Datura stramonium, Brugmansia arborea, Brugmansia suaveolens, Physalis alkekengi var. franchetii, P. japonicum, Petunia x hybrida и Solanaceouses,
где стволовые клетки предназначены для лечения заболеваний, связанных с клеточными повреждениями, повреждениями тканей или органов.
где растительный экстракт получен по меньшей мере из одного растения, выбранного из группы, состоящей из сладкого картофеля Ipomea Batatas, ипомеи, болотной ипомеи, ипомеи плющевидной, ипомеи острозубчатой, кардинала вьющегося, синей ипомеи, Ipomoea congesta и Convolvulaceaes; Nelumbo nucifera (корень лотоса), Nelumbo lutea и лотосов; Solanum americanum, Solanum lycopersicum, Solanum mammosum, Solanum melongena, Solanum nigrum, Solanum tuberosum, Capsicum annuum, Capsicum frutescens, Datura metel, Datura meteloides, Datura stramonium, Brugmansia arborea, Brugmansia suaveolens, Physalis alkekengi var. franchetii, P. japonicum, Petunia x hybrida и Solanaceouses,
где стволовые клетки предназначены для лечения заболеваний, связанных с клеточными повреждениями, повреждениями тканей или органов.
2. Стволовые клетки по п. 1, где активный ингредиент растворимого в воде растительного экстракта представляет собой сахар или содержащий сахар комплекс, причем активный ингредиент дедифференцирует моноциты.
3. Стволовые клетки по п. 1, где активный ингредиент растворимого в воде растительного экстракта имеет молекулярную массу от 1000 до 500000, причем активный ингредиент дедифференцирует моноциты.
4. Стволовые клетки по п. 1, где активный ингредиент растворимого в воде растительного экстракта адсорбирован на колонке Con А, причем активный ингредиент дедифференцирует моноциты.
5. Стволовые клетки по п. 1, где активный ингредиент растворимого в воде растительного экстракта адсорбирован на анионообменной смоле, причем активный ингредиент дедифференцирует моноциты.
6. Стволовые клетки по п. 1, где активный ингредиент растворимого в воде растительного экстракта представляет собой фракцию водной фазы растительного происхождения, экстрагированную методом Folch, или ее очищенный продукт.
7. Стволовые клетки по п. 1, где моноциты представляют собой моноциты человека.
8. Стволовые клетки по любому из пп. 1-7, где экспрессирован по меньшей мере один представитель недифференцированных маркеров Nanog, Nestin, c-Kit, CD9 и Oct3/4, и экспрессия гена CXCR4 является значимой по сравнению со стволовыми клетками, полученными культивированием моноцитов в присутствии только М-CSF.
9. Способ получения стволовых клеток, включающий культивирование моноцитов человека в присутствии (i) M-CSF с концентрацией от 5 до 100 нг/мл и (ii) по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида с концентрацией от 1 до 100 мкг/мл и растворимого в воде растительного экстракта, экстрагированного методом экстракции Folch, с концентрацией от 0,1 до 100 мкг/мл,
где растительный экстракт получен по меньшей мере из одного растения, выбранного из группы, состоящей из сладкого картофеля Ipomea Batatas, ипомеи, болотной ипомеи, ипомеи плющевидной, ипомеи острозубчатой, кардинала вьющегося, синей ипомеи, Ipomoea congesta и Convolvulaceaes; Nelumbo nucifera (корень лотоса), Nelumbo lutea и лотосов; Solanum americanum, Solanum lycopersicum, Solanum mammosum, Solanum melongena, Solanum nigrum, Solanum tuberosum, Capsicum annuum, Capsicum frutescens, Datura metel, Datura meteloides, Datura stramonium, Brugmansia arborea, Brugmansia suaveolens, Physalis alkekengi var. franchetii, P. japonicum, Petunia x hybrida и Solanaceouses.
где растительный экстракт получен по меньшей мере из одного растения, выбранного из группы, состоящей из сладкого картофеля Ipomea Batatas, ипомеи, болотной ипомеи, ипомеи плющевидной, ипомеи острозубчатой, кардинала вьющегося, синей ипомеи, Ipomoea congesta и Convolvulaceaes; Nelumbo nucifera (корень лотоса), Nelumbo lutea и лотосов; Solanum americanum, Solanum lycopersicum, Solanum mammosum, Solanum melongena, Solanum nigrum, Solanum tuberosum, Capsicum annuum, Capsicum frutescens, Datura metel, Datura meteloides, Datura stramonium, Brugmansia arborea, Brugmansia suaveolens, Physalis alkekengi var. franchetii, P. japonicum, Petunia x hybrida и Solanaceouses.
10. Способ по п. 9, где культивирование выполняется в течение от 7 до 14 дней.
11. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний, связанных с клеточными повреждениями, повреждениями тканей или органов, содержащая стволовые клетки по любому из пп. 1-8 в качестве активного ингредиента.
12. Набор клеточного лекарственного средства для лечения заболеваний, связанных с клеточными повреждениями, повреждениями тканей или органов, содержащий в качестве существенного ингредиента, по меньшей мере, стволовые клетки по любому из пп. 1-8 и (i) M-CSF с концентрацией от 5 до 100 нг/мл и (ii) ганглиозид с концентрацией от 1 до 100 мкг/мл или водорастворимый растительный экстракт с концентрацией от 0,1 до 100 мкг/мл,
где растительный экстракт получен по меньшей мере из одного растения, выбранного из группы, состоящей из сладкого картофеля Ipomea Batatas, ипомеи, болотной ипомеи, ипомеи плющевидной, ипомеи острозубчатой, кардинала вьющегося, синей ипомеи, Ipomoea congesta и Convolvulaceaes; Nelumbo nucifera (корень лотоса), Nelumbo lutea и лотосов; Solanum americanum, Solanum lycopersicum, Solanum mammosum, Solanum melongena, Solanum nigrum, Solanum tuberosum, Capsicum annuum, Capsicum frutescens, Datura metel, Datura meteloides, Datura stramonium, Brugmansia arborea, Brugmansia suaveolens, Physalis alkekengi var. franchetii, P. japonicum, Petunia x hybrida и Solanaceouses.
где растительный экстракт получен по меньшей мере из одного растения, выбранного из группы, состоящей из сладкого картофеля Ipomea Batatas, ипомеи, болотной ипомеи, ипомеи плющевидной, ипомеи острозубчатой, кардинала вьющегося, синей ипомеи, Ipomoea congesta и Convolvulaceaes; Nelumbo nucifera (корень лотоса), Nelumbo lutea и лотосов; Solanum americanum, Solanum lycopersicum, Solanum mammosum, Solanum melongena, Solanum nigrum, Solanum tuberosum, Capsicum annuum, Capsicum frutescens, Datura metel, Datura meteloides, Datura stramonium, Brugmansia arborea, Brugmansia suaveolens, Physalis alkekengi var. franchetii, P. japonicum, Petunia x hybrida и Solanaceouses.
13. Стволовые клетки по любому из пп. 1-8, где ганглиозидом является по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из GD1a, GD1b, GD2, GD3, GM1, GM2, GM3, GT1b и GQ1b.
14. Способ получения стволовых клеток по п. 9, где ганглиозидом является по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из GD1a, GD1b, GD2, GD3, GM1, GM2, GM3, GT1b и GQ1b.
15. Набор клеточного лекарственного средства по п. 12, где ганглиозидом является по меньшей мере один представитель, выбранный из группы, состоящей из GD1a, GD1b, GD2, GD3, GM1, GM2, GM3, GT1b и GQ1b.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2008299359 | 2008-11-25 | ||
JP2008-299359 | 2008-11-25 | ||
PCT/JP2009/069648 WO2010061781A1 (ja) | 2008-11-25 | 2009-11-19 | ヒト単球由来治療用幹細胞およびその誘導方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2011126165A RU2011126165A (ru) | 2013-01-10 |
RU2573906C2 true RU2573906C2 (ru) | 2016-01-27 |
Family
ID=42225657
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011126165/10A RU2573906C2 (ru) | 2008-11-25 | 2009-11-19 | Полученная из моноцита человека стволовая клетка для терапевтического применения и способ ее индукции |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US9169463B2 (ru) |
EP (1) | EP2365061A4 (ru) |
JP (1) | JP5800505B2 (ru) |
KR (1) | KR101682731B1 (ru) |
CN (1) | CN102245757B (ru) |
AR (1) | AR074406A1 (ru) |
AU (1) | AU2009320881B2 (ru) |
BR (1) | BRPI0921371A2 (ru) |
CA (3) | CA2977823A1 (ru) |
CO (1) | CO6341484A2 (ru) |
IL (1) | IL212638A (ru) |
MX (1) | MX336067B (ru) |
RU (1) | RU2573906C2 (ru) |
TW (1) | TWI539000B (ru) |
UA (1) | UA110691C2 (ru) |
WO (1) | WO2010061781A1 (ru) |
ZA (1) | ZA201103268B (ru) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102399741A (zh) * | 2010-09-19 | 2012-04-04 | 林雄斌 | 逆向分化体细胞产生造血干细胞的培养液、方法及用途 |
JPWO2018052082A1 (ja) * | 2016-09-14 | 2019-06-24 | 株式会社Tesホールディングス | Lin28a活性化剤及びその使用 |
CN107904202B (zh) * | 2017-11-22 | 2018-11-20 | 北京恩诺生物科技有限公司 | 一种制备多能干细胞样细胞的方法、组合物和应用 |
JP6375076B1 (ja) * | 2018-02-19 | 2018-08-15 | 株式会社 バイオミメティクスシンパシーズ | 間葉系幹細胞を用いたアトピー性皮膚炎治療における治療効果予測判定法 |
JP6574292B2 (ja) * | 2018-07-21 | 2019-09-11 | 株式会社 バイオミメティクスシンパシーズ | 間葉系幹細胞を用いたアトピー性皮膚炎治療における治療効果予測判定法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2197993C2 (ru) * | 1996-12-11 | 2003-02-10 | Авентис Фарма Дойчланд Гмбх | Самоусиливающиеся фармакологически контролируемые экспрессионные системы |
RU2205029C2 (ru) * | 1997-07-21 | 2003-05-27 | Авентис Фарма Дойчланд Гмбх | Генетически измененные клетки и их применение для профилактики или лечения заболеваний |
US20030157113A1 (en) * | 1999-12-28 | 2003-08-21 | Terman David S. | Compositions and methods for treatment of neoplastic disease |
US20040101962A1 (en) * | 2002-03-28 | 2004-05-27 | Kremer Bernd Karl Friedrich | Dedifferentiated, programmable stem cells of monocytic origin, and their production and use |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4778787A (en) * | 1985-12-20 | 1988-10-18 | Trustees Of Boston University | Method for treatment of angina and myocardial infarctions with omental lipids |
US5272138A (en) * | 1988-02-12 | 1993-12-21 | The Biomembrane Institute | Naturally occurring gangliosides containing de-N-acetyl-sialic acid and their applications as modifiers of cell physiology |
US6084060A (en) * | 1996-12-09 | 2000-07-04 | Imclone Systems Incorporated | Composition and method for preserving progenitor cells |
TWI288779B (en) * | 2002-03-28 | 2007-10-21 | Blasticon Biotech Forschung | Dedifferentiated, programmable stem cells of monocytic origin, and their production and use |
CA2519803A1 (en) * | 2003-03-27 | 2004-10-14 | Janssen Pharmaceutica N.V. | Use of erythropoietin in stroke recovery |
CA2547570A1 (en) * | 2003-12-02 | 2005-06-23 | Celgene Corporation | 4-(amino)-2-(2,6-dioxo(3-piperidyl))-isoindoline-1,3-dione for induction of fetal hemoglobin in individuals having anemia |
US20050260748A1 (en) * | 2004-02-27 | 2005-11-24 | Michigan State University | Adult stem cells and uses thereof |
BRPI0720596B1 (pt) | 2006-12-29 | 2017-10-24 | Dow Agrosciences Llc | Methods for producing and transforming a single plant cell |
-
2009
- 2009-11-19 KR KR1020117014559A patent/KR101682731B1/ko active IP Right Grant
- 2009-11-19 UA UAA201107956A patent/UA110691C2/uk unknown
- 2009-11-19 BR BRPI0921371-6A2A patent/BRPI0921371A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2009-11-19 CA CA2977823A patent/CA2977823A1/en not_active Abandoned
- 2009-11-19 JP JP2010540461A patent/JP5800505B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2009-11-19 CA CA2744289A patent/CA2744289A1/en not_active Abandoned
- 2009-11-19 US US13/130,099 patent/US9169463B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-11-19 AU AU2009320881A patent/AU2009320881B2/en not_active Ceased
- 2009-11-19 MX MX2011005480A patent/MX336067B/es unknown
- 2009-11-19 CN CN200980146977.1A patent/CN102245757B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2009-11-19 RU RU2011126165/10A patent/RU2573906C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2009-11-19 WO PCT/JP2009/069648 patent/WO2010061781A1/ja active Application Filing
- 2009-11-19 EP EP09829029A patent/EP2365061A4/en not_active Withdrawn
- 2009-11-19 CA CA2977820A patent/CA2977820A1/en not_active Abandoned
- 2009-11-24 TW TW098139923A patent/TWI539000B/zh not_active IP Right Cessation
- 2009-11-25 AR ARP090104560A patent/AR074406A1/es unknown
-
2011
- 2011-05-03 IL IL212638A patent/IL212638A/en not_active IP Right Cessation
- 2011-05-05 ZA ZA2011/03268A patent/ZA201103268B/en unknown
- 2011-06-15 CO CO11074347A patent/CO6341484A2/es unknown
-
2015
- 2015-09-24 US US14/864,712 patent/US20160008434A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2197993C2 (ru) * | 1996-12-11 | 2003-02-10 | Авентис Фарма Дойчланд Гмбх | Самоусиливающиеся фармакологически контролируемые экспрессионные системы |
RU2205029C2 (ru) * | 1997-07-21 | 2003-05-27 | Авентис Фарма Дойчланд Гмбх | Генетически измененные клетки и их применение для профилактики или лечения заболеваний |
US20030157113A1 (en) * | 1999-12-28 | 2003-08-21 | Terman David S. | Compositions and methods for treatment of neoplastic disease |
US20040101962A1 (en) * | 2002-03-28 | 2004-05-27 | Kremer Bernd Karl Friedrich | Dedifferentiated, programmable stem cells of monocytic origin, and their production and use |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2977820A1 (en) | 2010-06-03 |
TW201024415A (en) | 2010-07-01 |
JP5800505B2 (ja) | 2015-10-28 |
US20110223143A1 (en) | 2011-09-15 |
BRPI0921371A2 (pt) | 2014-11-18 |
CA2744289A1 (en) | 2010-06-03 |
RU2011126165A (ru) | 2013-01-10 |
IL212638A (en) | 2017-08-31 |
CO6341484A2 (es) | 2011-11-21 |
MX336067B (es) | 2016-01-06 |
EP2365061A1 (en) | 2011-09-14 |
KR20110094084A (ko) | 2011-08-19 |
AU2009320881B2 (en) | 2015-01-22 |
ZA201103268B (en) | 2012-07-25 |
KR101682731B1 (ko) | 2016-12-05 |
WO2010061781A1 (ja) | 2010-06-03 |
JPWO2010061781A1 (ja) | 2012-04-26 |
AR074406A1 (es) | 2011-01-12 |
US9169463B2 (en) | 2015-10-27 |
CA2977823A1 (en) | 2010-06-03 |
TWI539000B (zh) | 2016-06-21 |
CN102245757B (zh) | 2014-11-26 |
MX2011005480A (es) | 2011-06-20 |
AU2009320881A1 (en) | 2010-06-03 |
EP2365061A4 (en) | 2013-03-13 |
CN102245757A (zh) | 2011-11-16 |
IL212638A0 (en) | 2011-07-31 |
US20160008434A1 (en) | 2016-01-14 |
UA110691C2 (uk) | 2016-02-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Nakao et al. | Adipose tissue-derived mesenchymal stem cells facilitate hematopoiesis in vitro and in vivo: advantages over bone marrow-derived mesenchymal stem cells | |
Haider et al. | Bone marrow stem cell transplantation for cardiac repair | |
KR101489728B1 (ko) | 남조류의 정제된 성분 및 이용 방법 | |
KR101405437B1 (ko) | 줄기세포 유래 미세소포를 포함하는 신경 생성 촉진용 조성물 | |
US20160008434A1 (en) | Stem cell for therapeutic use which is derived from human monocyte, and method for inducing same | |
JP2016153430A (ja) | 幹細胞の移動を増強するための方法および組成物 | |
JP7246569B2 (ja) | 幹細胞由来エクソソーム生成促進及び幹細胞能増強用組成物 | |
KR101980453B1 (ko) | 줄기세포 유래 엑소좀 생성 촉진용 조성물 | |
Amos et al. | Hypoxic culture and in vivo inflammatory environments affect the assumption of pericyte characteristics by human adipose and bone marrow progenitor cells | |
JPH08511935A (ja) | 選択的細胞増殖 | |
Aizman et al. | Cell injury-induced release of fibroblast growth factor 2: relevance to intracerebral mesenchymal stromal cell transplantations | |
KR20190063453A (ko) | 줄기세포 유래 엑소좀 생성 촉진용 조성물 | |
JP2018511599A (ja) | 細胞増殖の刺激のための方法及び組成物、ならびにfgf2アイソフォームの生物学的に活性な混合物の提供 | |
KR20190015336A (ko) | E-셀렉틴 리간드의 당조작 | |
CN115197905B (zh) | 活化血小板在制备促进间充质干细胞迁移产品中的应用 | |
Drapeau et al. | The therapeutic potential of stimulating endogenous stem cell mobilization | |
Drapeau | ENDOGENOUS STEM CELL MOBILIZATION A NEW PARADIGM | |
TW201828956A (zh) | 體幹細胞用於增加血基質氧化酶位準的用途 | |
Mulvey et al. | Hypoxic Culture and In Vivo Inflammatory Environments Affect the Assumption of Pericyte 1 Characteristics by Human Adipose and Bone Marrow Progenitor Cells 2 3 Peter J. Amos1 4 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20181120 |